CN101479381B - 调控抗体血液动力学的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明发现,在含有FcRn结合区的多肽——IgG抗体的可变区残基中,使暴露在表面的残基变异、控制表面电荷,则可以调控IgG抗体的血液半衰期。通过本发明的方法,确认了血液半衰期得到调控的抗体可实际保有活性。本发明的方法与目标抗原的种类无关,广泛适用于IgG抗体等的可通过FcRn的补救途径回收的含有FcRn结合区的多肽。
Description
技术领域
本发明涉及用于调控抗体的血液动力学(血中動態)的抗体变异方法、含有在血液中动力学得到调控的抗体作为有效成分的药物组合物,及其制备方法等。
背景技术
抗体在血液中的稳定性高,副作用也少,因此作为药物受到人们的关注。其中,IgG型的抗体药物有很多已经上市,目前也有很多抗体药物正在开发(非专利文献1、非专利文献2)。人们开发了使效应子功能等增强的技术作为第二代抗体药物。例如已知有通过IgG抗体Fc区的氨基酸置换使抗体依赖性细胞毒活性(ADCC)或补体依赖性细胞毒活性(CDC)增强的技术(非专利文献3)。还有人报道了不仅使上述效应子功能增强,还使抗体的血液半衰期提高的Fc的氨基酸置换(非专利文献4、非专利文献5)。通过提高血液半衰期,有望降低给药量和延长给药间隔,可以提供低成本且便利性高的抗体药物。具体来说,通过在Fc区实施氨基酸置换,可以延长血液半衰期,所述的氨基酸置换可提高对于已知作为IgG的补救受体(Salvage receptor)的新生儿Fc受体的亲和性。另外,通过将CH1、CH2、CH3的恒定区进行改组(shuffling),可以提高血液半衰期(非专利文献6)。但是,IgG抗体恒定区的氨基酸序列在人中较为保守,从免疫原性的角度考虑,导入到恒定区的人工氨基酸置换较少为好。
对于IgG抗体的可变区实施氨基酸置换的技术,有以下报道:以人源化(非专利文献7),以及通过用于增强结合活性的互补决定区(CDR)的氨基酸置换形成亲和力成熟(非专利文献8);通过框架区(FR)的氨基酸置换来提高物理化学稳定性(非专利文献9)。因此,与恒定区的氨基酸置换不同,可变区的氨基酸置换是用于增强抗体的功能或提高特性通常采用的方法。由于人源化抗体的CDR的氨基酸序列是人以外的动物种的氨基酸序列,因此无需关注免疫原性的风险问题。另外,在FR序列中,只要与Kabat数据库(http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/kabat/)和IMGT数据库(http://imgt.cines.fr/)中公开的人抗体的FR序列相同,则可以认为免疫原性的风险小。但是,目前只有通过上述恒定区的Fc的氨基酸置换作为提高IgG抗体血液半衰期的方法,而对于通过免疫原性风险小的可变区氨基酸置换提高IgG抗体的血液半衰期的方法目前尚未有报道。其原因可能是:IgG的血液半衰期与IgG的补救受体——新生儿Fc受体的结合以及其抗原依赖性的消除有很大的相关性(非专利文献10),而可变区对于血液半衰期没有很大的影响。另外,通过使IgG琥珀酰化可以进行阴离子化,可以使IgG的等电点(pI)降低(非专利文献11),或者通过多元胺修饰实现阳离子化,使IgG的pI升高(非专利文献12),但在上述两种情况下血液半衰期没有提高,相反地缩短了,由此通过变异来改变pI无法提高血液半衰期。
另一方面,相对于全长抗体IgG,低分子量的低分子化抗体Fab或scFv的半衰期短,因此通过聚乙二醇等高分子进行修饰可以降低肾脏排泄,可以使血液半衰期提高(非专利文献13)。有报道称:除高分子修饰之外,改变低分子化抗体的等电点(pI)也可使其血液动力学发生变化。例如非专利文献14中公开了,用有机酸修饰抗-Tac Fab可使pI降低,AUC(曲线下面积)提高。而非专利文献15和非专利文献16中公开了,用有机酸修饰抗-Tac dsFv可使pI降低,同时AUC也降低。非专利文献17中公开了,通过氨基酸置换对抗Tac-scFv毒素的可变区施加变异使pI降低,半衰期(t1/2)和AUC也降低。非专利文献18中公开了,在scFv的C末端附加了使pI降低的氨基酸,但是AUC几乎未发生变化。如上所述,在低分子化抗体中,通过修饰以及氨基酸置换使pI降低时,AUC可能提高也可能降低,因此无法通过改变pI使血液半衰期按照目标进行调控。
非专利文献1:Monoclonal antibody successes in the clinic,JaniceM Reichert,Clark J Rosensweig,Laura B Faden和Matthew C Dewitz,Nature Biotechnology 2005;23:1073-1078
非专利文献2:Pavlou AK,Belsey MJ.,The therapeutic antibodiesmarket to 2008.,Eur J Pharm Biopharm.2005 Apr;59(3):389-96.
非专利文献3:Kim SJ,Park Y,Hong HJ.,Antibody engineering forthe development of therapeutic antibodies.,Mol Cells.2005 Aug31;20(1):17-29.Review.
非专利文献4:Hinton PR,Xiong JM,Johlfs MG,Tang MT,Keller S,Tsurushita N.,An engineered human IgG1 antibody with longer serumhalf-life.,J Immunol.2006 Jan 1;176(1):346-56.
非专利文献5:Ghetie V,Popov S,Borvak J,Radu C,Matesoi D,Medesan C,Ober RJ,Ward ES.,Increasing the serum persistence of anIgG fragment by random mutagenesis.,Nat Biotechnol.1997Jul;15(7):637-40.
非专利文献6:Zuckier LS,Chang CJ,Scharff MD,Morrison SL.,Chimeric human-mouse IgG antibodies with shuffled constant regionexons demonstrate that multiple domains contribute to in vivo half-life.,Cancer Res.1998 Sep 1;58(17):3905-8.
非专利文献7:Tsurushita N,Hinton PR,Kumar S.,Design ofhumanized antibodies:fron anti-Tac to Zenapax.,Methods.2005May;36(1):69-83.
非专利文献8:Rajpal A,Beyaz N,Haber L,Cappuccilli G,Yee H,Bhatt RR,Takeuchi T,Lerner RA,Crea R.,A general method for greatlyimproving the affinity of antibodies by using combinatorial libraries.,Proc Natl Acad Sci U S A.2005 Jun 14;102(24):8466-71.
非专利文献9:Ewert S,Honegger A,Pluckthun A.,Stabilityimprovenent of antibodies for extracellular and intracellular applications:CDR grafting to stable frameworks and structure-based frameworkengineering.,Methods.2004 Oct;34(2):184-99.Review
非专利文献10:Lobo ED,Hansen RJ,Balthasar JP.,Antibodypharmacokinetics and pharmacodynamics.,J Pharm Sci.2004Nov;93(11):2645-68.Review.
非专利文献11:Yamasaki Y,Sumimoto K,Nishikawa M,YamashitaF,Yamaoka K,Hashida M,Takakura Y.,harmacokinetic analysis of invivo disposition of succinylated proteins targeted to livernonparenchymal cells via scavenger receptors:importance of molecularsize and negative charge density for in vivo recognition by receptors.,Pharmacol Exp Ther.2002 May;301(2):467-77.
非专利文献12:Poduslo JF,Curran GL.,olyamine modificationincreases the permeability of proteins at the blood-nerve and blood-brainbarriers.,Neurochem.1996Apr;66(4):1599-609.
非专利文献13:Yang K,Basu A,Wang M,Chintala R,Hsieh MC,Liu S,Hua J,Zhang Z,Zhou J,Li M,Phyu H,Petti G,Mendez M,JanjuaH,Peng P,Longley C,Borowski V,Mehlig M,Filpula D.,Tailoringstructure-function and pharmacokinetic properties of single-chain Fvproteins by site-specific PEGylation.,Protein Eng.2003Oct;16(10):761-70.
非专利文献14:Kobayashi H,Le N,Kim IS,Kim MK,Pie JE,Drumm D,Paik DS,Waldmann TA,Paik CH,Carrasquillo JA.,Thepharmacokinetic characteristics of glycolated humanized anti-Tac Fabsare determined by their isoelectric points.,Cancer Res.1999 Jan15;59(2):422-30.
非专利文献15:Kim I,Kobayashi H,Yoo TM,Kim MK,Le N,HanES,Wang QC,Pastan I,Carrasquillo JA,Paik CH.,Lowering of pI byacylation improves the renal uptake of 99mTc-labeled anti-Tac dsFv:effect of different acylating reagents.,Nucl Med Biol.2002Nov;29(8):795-801
非专利文献16:Kim IS,Yoo TM,Kobayashi H,Kim MK,Le N,Wang QC,Pastan I,Carrasquillo JA,Paik CH.,Chemical modification toreduce renal uptake of disulfide-bonded variable region fragment ofanti-Tac monoclonal antibody labeled with 99mTc.,Bioconjug Chem.1999 May-Jun;10(3):447-53.
非专利文献17:Onda M,Nagata S,Tsutsumi Y,Vincent JJ,Wang Q,Kreitman RJ,Lee B,Pastan I.,Lowering the isoelectric point of the Fvportion of recombinant immunotoxins leads to decreased nonspecificanimal toxicity without affecting antitumor activity.,Cancer Res.2001Jul 1;61(13):5070-7.
非专利文献18:Pavlinkova G,Beresford G,Booth BJ,Batra SK,Colcher D.,Charge-modified single chain antibody constructs ofmonoclonal antibody CC49:generation,characterization,pharmacokinetics,and biodistribution analysis.,Nucl Med Biol.1999Jan;26(1):27-34.
非专利文献19:Deen WM,Lazzara MJ,Myers BD.,Structuraldeterminants of glomerular permeability.,Am J Physiol Renal Physiol.2001 Oct;281(4):F579-96.
非专利文献20:Schaeffer RC Jr,Gratrix ML,Mucha DR,C arbajalJM.,The rat glomerular filtration barrier does not show negative chargeselectivity.,Microcircu1ation.2002 Oct;9(5):329-42.
非专利文献21:Goode NP,Shires M,Davison AM.,The glomerularbasement membrane charge-selectivity barrier:an oversimplifiedconcept?,Nephrol Dial Transplant.1996 Sep;11(9):1714-6.
非专利文献22:Comper WD,Glasgow EF.,Charge selectivity inkidney ultrafiltration.,Kidney Int.1995 May;47(5):1242-51.
非专利文献23:Ghetie V,Ward ES.FcRn:the MHC class I-relatedreceptor that is more than an IgG transporter.Immunol Today.1997Dec;18(12):592-8.
非专利文献24:He XY,Xu Z,Melrose J,Mullowney A,Vasquez M,Queen C,Vexler V,Klingbeil C,Co MS,Berg EL.Humanization andpharmacokinetics of a monoclonal antibody with specificity for both E-and P-selectin.J Immunol.1998 Jan 15;160(2):1029-35.
非专利文献25:Gobburu JV,Tenhoor C,Rogge MC,Frazier DE Jr,Thomas D,Benjamin C,Hess DM,Jusko WJ.Pharmacokinetics/dynamicsof 5c8,a monoclonal antibody to CD 154(CD40 ligand)suppression of animmune response in monkeys.J Pharmacol Exp Ther.1998Aug;286(2):925-30.
非专利文献26:Kashmiri SV,Shu L,Padlan EA,Milenic DE,Schlom J,Hand PH.,Generation,characterization,and in vivo studies ofhumanized anticarcinoma antibody CC49.,Hybridoma.1995Oct;14(5):461-73.
非专利文献27:Graves SS,Goshorn SC,Stone DM,Axworthy DB,Reno JM,Bottino B,Searle S,Henry A,Pedersen J,Rees AR,Libby RT.,Molecular modeling and preclinical evaluation of the humanizedN R-LU-13 antibody.,Clin Cancer Res.1999 Apr;5(4):899-908.
非专利文献28:Couto JR,Blank EW,Peterson JA,Ceriani RL.,Anti-BA46 monoclonal antibody Mc3:humanization using a novelpositional consensus and in vivo and in vitro characterization.,CancerRes.1995 Apr 15;55(8):1717-22.
非专利文献29:Adams CW,Allison DE,Flagella K,Presta L,Clarke J,Dybdal N,McKeever K,Sliwkowski MX.Humanization of arecombinant monoclonal antibody to produce a therapeutic HERdimerization inhibitor,pertuzumab.,Cancer Immunol Immunother.2005Sep 3;:1-11
非专利文献30:Binz HK,Amstutz P,Pluckthun A.,Engineeringnovel binding proteins from nonimmunoglobulin domains.,NatBiotechnol.2005 Oct;23(10):1257-68.
发明内容
针对上述状况,本发明的目的在于提供通过下述变异来调控含有FcRn结合区的多肽的血液半衰期的方法,其中所述的变异是通过对暴露于IgG抗体等含有FcRn结合区的多肽表面的氨基酸残基进行置换;本发明还提供包含下述多肽的药物组合物,以及这些药物组合物的制备方法,所述的多肽是通过氨基酸置换使其血液半衰期得到调控的、含有FcRn结合区的多肽。
本发明人对于通过氨基酸置换来调控含有FcRn结合区的多肽的血液半衰期的方法进行了深入的研究。结果,本发明人开发了在含有FcRn结合区的多肽——IgG抗体的可变区残基中,对暴露在表面的残基进行变异、控制表面电荷,由此调控IgG抗体在血液中的半衰期的方法。具体来说,发现了不会对抗体的功能、结构产生影响、可控制表面电荷、调控IgG抗体的血液半衰期的、可变区的变异位置。并且根据本发明确认了血液半衰期得到调控的抗体实际上保持有活性。
与目标抗原的种类无关、本发明的方法可广泛应用于IgG等含有FcRn结合区的多肽,所述的多肽通过FcRn补救途径再循环、其主代谢途径非肾脏排泄。
本发明涉及通过下述变异来调控含有FcRn结合区的多肽的血液半衰期的方法,其中所述的变异是通过对暴露于含有FcRn结合区的多肽表面的氨基酸残基进行置换;本发明还涉及包含下述多肽的药物组合物以及该药物组合物的制备方法,所述的多肽是通过氨基酸置换使其血液半衰期得到调控的、含有FcRn结合区的多肽,更具体地说,提供以下内容:
血液动力学得到控制的、含有FcRn结合区的多肽的制备方法,该方法包含以下步骤:
(a)为了使可暴露于含有FcRn结合区的多肽表面的至少一个氨基酸残基的电荷发生改变,对编码含有该氨基酸残基的多肽的核酸进行变异;(b)培养宿主细胞,以使该核酸表达;(c)从宿主细胞培养物中回收含有FcRn结合区的多肽。
[1]所述的方法,其中,上述可暴露在含有FcRn结合区的多肽表面的氨基酸残基位于含有FcRn结合区的多肽中FcRn结合区以外的区域。
[2]所述的方法,其中,上述FcRn结合区包含Fc区或Fc样区。
[1]所述的方法,其中,含有FcRn结合区的多肽是IgG抗体。
[4]所述的方法,其中,步骤(a)中电荷得到改变的氨基酸残基是IgG抗体的重链可变区或轻链可变区的氨基酸残基。
[1]所述的方法,其中,上述血液动力学的调控是对血液半衰期、平均血液停留时间、血液清除中任一项参数的调控。
[1]所述的方法,其中,步骤(a)中氨基酸残基电荷的改变通过氨基酸置换进行。
含有FcRn结合区的多肽,该多肽由[1]所述的方法制备。
调控含有FcRn结合区的多肽的血液动力学的方法,该方法包括使可暴露于含有FcRn结合区的多肽表面的至少一个氨基酸残基的电荷发生改变。
[9]所述的方法,其中,上述可暴露在含有FcRn结合区的多肽表面的氨基酸残基位于含有FcRn结合区的多肽中FcRn结合区以外的区域。
[10]所述的方法,其中,上述FcRn结合区含有Fc区或Fc样区。
[9]所述的方法,其中,含有FcRn结合区的多肽是IgG抗体。
[12]所述的方法,其中,电荷发生改变的氨基酸残基是IgG抗体的重链可变区或轻链可变区的氨基酸残基。
[9]所述的方法,其中,上述血液动力学的调控是对血液半衰期、平均血液停留时间、血液清除中任一项参数的调控。
[9]所述的方法,其中,氨基酸残基电荷的改变通过氨基酸置换进行。
通过[9]的方法使血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽。
人源化抗体,该人源化抗体含有来自人以外的动物的互补决定区(CDR)、来自人的框架区(FR)和人恒定区,其中,在CDR或FR中,可暴露在抗体表面的至少一个氨基酸残基是与野生型CDR或FR的相应位置上的氨基酸残基相比具有不同电荷的氨基酸残基,与可变区来自所述人以外的动物的抗体、且具有相同恒定区的嵌合抗体相比,该人源化抗体的血液动力学得到调控。
[17]所述的人源化抗体,其中,上述人恒定区含有野生型人Fc区。
组合物,其含有[17]或[18]中所述的人源化抗体和可药用载体。
核酸,其编码构成[17]或[18]所述的人源化抗体的多肽。
宿主细胞,该宿主细胞具有[20]所述的核酸。
[17]或[18]所述的人源化抗体的制备方法,该方法包含培养[21]所述的宿主细胞的步骤;由细胞培养物回收多肽的步骤。
IgG抗体,该抗体的重链可变区中选自Kabat编号的10号、12号、23号、39号、43号和105号的氨基酸残基的至少一个氨基酸残基电荷发生改变,与该氨基酸残基发生改变前相比,该抗体的血液动力学得到调控。
[23]所述的IgG抗体,其中,上述变异的氨基酸残基选自以下(a)或(b)任一组中的氨基酸残基:
(a)谷氨酸(E)、天冬氨酸(D);
(b)赖氨酸(K)、精氨酸(R)、组氨酸(H)。
组合物,其含有[23]或[24]所述的IgG抗体和可药用载体。
核酸,其编码构成[23]或[24]所述的IgG抗体的多肽。
宿主细胞,该宿主细胞具有[26]所述的核酸。
[23]或[24]所述的抗体的制备方法,该制备方法包含培养[27]所述的宿主细胞的步骤;由细胞培养物回收多肽的步骤。
附图简述
图1是表示对人源化双特异性抗体(人源化A69(hA69a)/人源化B26(hB26-F123e4)/人源化BBA(hAL-F123j4))的凝固活性进行评价的结果的图。评价结果显示了与嵌合双特异性抗体具有同等以上的凝固活性。
图2是表示使用人源化A69-H链可变区(hA69a)和人源化BBA(hAL-F123j4)、以及人源化hB26-H链可变区(hB26-F123e4)和人源化BBA(hAL-F123j4)实施抗体建模(モデリング)的结果的图。强调显示了可以使表面电荷变化的氨基酸的支链。编号采用Kabat数据库的序列编号(Kabat EA等人.1991.Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest.NIH)。
图3是表示ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF、hA69-N97R、hA69-p18、hB26-F123e4、hB26-p15的等电聚焦电泳分析的结果的照片。
图4是表示ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF、hA69-N97R、hA69-p18、hB26-F123e4、hB26-p15的等电聚焦电泳中的pI标记的校正曲线、以及由校正曲线计算的各样品的pI的图。可观察到:可变区氨基酸的不同导致表面电荷变化,以及氨基酸变异导致表面电荷变化,由此pI变化。
图5是表示使用未变异的、或可变区变异的人源化A69抗体(hA69a、hA69-N97R和hA69-N97R、hA69-p18、hA69-PF)分析与作为抗原的因子IXa的结合活性的结果的图。分析结果显示,等电点变化了的变异体与未经变异的抗体具有等同的结合活性。
图6是表示使用未变异的、或可变区变异的人源化B26抗体(hB26-F123e4、hB26-p15)分析与作为抗原的因子X的结合活性的结果的图。分析结果显示,等电点变化了的经变异的抗体与未经变异的抗体具有等同的结合活性。
图7是表示ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF在小鼠血浆中的浓度变化的图。
图8是表示作为ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF、hA69-N97R、hA69-p18、hB26-F123e4、hB26-p15的药物动力学参数的、清除(CL)和半衰期(T1/2)的相关性。
实施发明的最佳方式
本发明提供调控含有FcRn结合区的多肽的血液动力学的方法。作为本发明的方法的优选方案,提供了包含将可暴露于含有FcRn结合区的多肽表面的至少一个氨基酸残基的电荷进行改变的方法。即,通过改变氨基酸残基的电荷,使含有FcRn结合区的多肽的等电点(pI)变化,由此可以调控该蛋白质的血液动力学。
如上所述,scFv或Fab等低分子抗体不一定能通过pI的改变来调控其血液动力学。已知scFv或Fab等低分子抗体的主要代谢途径是肾脏排泄。但是,非专利文献19-22中所示的肾脏排泄中,蛋白质的电荷的阴性越强则肾脏过滤效果越受到抑制,另一方面,也有蛋白质的电荷没有影响的报道。实际上,如非专利文献14-18所示,有使低分子化抗体的pI降低则可以使血液半衰期延长的报告,也有使血液半衰期缩短的报告。蛋白质的电荷为阴性,则肾脏过滤后的蛋白质被近端肾小管重新吸收的情形受到抑制,通过pI无法自由地调控低分子化抗体的血液半衰期。
另一方面,IgG抗体的分子量非常大,因此主要代谢途径不是肾脏排泄。已知具有Fc的IgG抗体通过在血管等内皮细胞中表达的FcRn的补救途径再循环,由此具有较长的半衰期,这可能是由于IgG主要在内皮细胞中代谢(非专利文献23)。即,被内皮细胞非特异性摄入的IgG与FcRn结合,IgG再循环,无法结合的分子被代谢。与FcRn的结合性降低的IgG,其血液半衰期缩短,相反提高与FcRn的结合性则可以使血液半衰期延长(非专利文献23)。如上所述,目前的IgG的血液动力学的调控方法是通过使Fc变异改变其与FcRn的结合性来进行,但本发明的实施例8中,无关乎目标抗原的种类,具有相同Fc的IgG的血液半衰期与pI具有高相关系数的相关性,实际上,对于针对不同的抗原的两种抗体,通过改变其可变区的pI,无需使Fc变异也可以调控血液半衰期。被内皮细胞非特异性摄入的速度可能与带有负电荷的细胞表面与IgG之间物理化学性的库仑相互作用有关,因此,通过降低(提高)IgG的pI,库仑相互作用降低(增大),被内皮细胞的非特异性摄入减少(增多),结果,通过使内皮细胞中代谢减少(增大),可以调控血液动力学。内皮细胞的细胞表面负电荷的库仑相互作用是物理化学性相互作用,因此可以认为该相互作用不依赖于目标抗原。因此,本发明中发现的血液动力学的调控方法可广泛应用于不依赖于目标抗原种类的、任意的IgG等含有FcRn结合区的多肽,此类多肽通过FcRn的补救途径再循环、主要代谢途径不是肾脏排泄。
因此,本发明的含有FcRn结合区的多肽不限定于IgG抗体,只要是可以与Fc受体(FcRn)结合(具有结合活性或亲和性)的蛋白质即可,本发明的含有FcRn结合区的多肽没有特别限定,优选可以是含有抗体的Fc区或Fc样区的蛋白质。本发明的含有FcRn结合区的多肽,例如IgG抗体。这些抗体(蛋白质)的变异体只要是可与FcRn结合的蛋白质即包含在本发明的含有FcRn结合区的多肽之中。本发明中,含有FcRn结合区的多肽的最优选例子为IgG抗体。
使用IgG抗体作为本发明的含有FcRn结合区的多肽时,只要是IgG型的抗体分子即可,可以是任何亚型,也可以是双特异性IgG抗体。双特异性抗体是针对两种不同的表位具有特异性的抗体,除识别不同抗原的抗体之外,也包含识别同一抗原上的不同表位的抗体。另外,如上所述,当抗体分子如scFv或Fab,是以肾脏排泄作为主要代谢途径的低分子化抗体时无法通过pI调控血液动力学,但本发明中,只要是不以肾脏排泄作为主要的代谢途径的Fc结合蛋白即可,可以采用任何抗体分子形式,例如,scFv-Fc、bAb-Fc、Fc融合蛋白等。这些分子不以肾脏排泄作为主要的代谢途径,因此,采用本发明的方法来改变pI,则可调控血液动力学。可适用于本发明的抗体分子可以是抗体样分子。抗体样分子是通过与靶分子结合而发挥功能的分子(非专利文献30),例如有DARPins、Affibody、Avimer等。
本发明中,“血液动力学得到调控”是指含有FcRn结合区的多肽在变异前和变异后的血液动力学进行比较,血液动力学朝目标方向变化。即,当目标是为了延长血液半衰期时,血液动力学的调控是指延长血液半衰期;当目的为缩短血液半衰期时,血液动力学的调控意味着使血液半衰期缩短。
本发明中,含有FcRn结合区的多肽的血液动力学是否朝目标方向变化、即血液动力学是否按照目标调控,可通过例如使用小鼠、大鼠、兔、狗、猴等的动力实验来适当评价。本发明的“血液动力学的调控”更具体地说,包含对血液半衰期、平均血液停留时间、或血液清除等任何参数(ファ一マコキネティクス演習にょる理解(南山堂))的调控。例如,使用体内动力分析软件WinNonlin(Pharsight),按照所附说明书,通过Noncompartmental分析可适当评价。
本发明中,“可暴露于表面的氨基酸”通常是指构成FcRn结合区的多肽的、位于多肽的表面的氨基酸。位于多肽的表面的氨基酸是其支链可与溶剂分子(通常为水分子)相接触的氨基酸,不一定是整个支链都与溶剂分子接触,支链的一部分与溶剂分子接触时,该氨基酸也是位于表面的氨基酸。本领域技术人员通过使用市售的软件进行的同源性建模等,可以制备多肽或抗体的同源模型,由此可以选择使适当的残基位于表面的氨基酸。
本发明中,“可暴露于表面的氨基酸”没有特别限定,优选位于含有FcRn结合区的多肽中FcRn结合区以外。该FcRn结合区例如Fc区或Fc样区。
本发明的含有FcRn结合区的多肽为IgG时,本发明中的改变电荷的氨基酸残基优选为IgG抗体的重链可变区或轻链可变区的氨基酸残基。该可变区具体有:互补决定区(CDR)、框架区(FR)等。
本领域技术人员可以通过由同源性建模等制备的同源性模型来适当选择抗体可变区中的表面氨基酸,例如在H链FR区,可例举H1,H3,H5,H8,H10,H12,H13,H15,H16,H19,H23,H25,H26,H39,H42,H43,H44,H46,H68,H71,H72,H73,H75,H76,H81,H82b,H83,H85,H86,H105,H108,H110,H112为表面氨基酸,但本发明并不限于此。
H链的CDR区同样可通过同源性模型选择表面氨基酸,例如H97几乎整个抗体暴露在表面。在L链的FR区例如L1,L3,L7,L8,L9,L11,L12,L16,L17,L18,L20,L22,L38,L39,L41,L42,L43,L45,L46,L49,L57,L60,L63,L65,L66,L68,L69,L70,L74,L76,L77,L79,L80,L81,L85,L100,L103,L105,L106,L107,L108作为表面氨基酸,但本发明并不限于此。L链的CDR区同样可通过同源模型选择表面氨基酸。
本发明的方法中,氨基酸残基的“变异”具体指将原有的氨基酸残基置换为其它的氨基酸残基、使原有的氨基酸残基缺失、附加新的氨基酸残基等,优选指将原有的氨基酸残基置换为其它的氨基酸残基。即,本发明的“氨基酸残基电荷的改变”优选包括氨基酸置换。
本发明中,含有FeRn结合区的多肽为IgG抗体时,为了实现上述“使氨基酸残基的电荷改变”的目的,例如使选自该IgG抗体的重链可变区中的Kabat编号中10号、12号、23号、39号、43号和105号氨基酸残基的至少一个氨基酸残基的电荷发生改变的方案。上述编号中所示的氨基酸残基中,该电荷被改变的氨基酸残基以外的氨基酸残基只要可实现目标血液动力学的调控即可,无需对其进行变异,也可以适当变异为具有与变异的氨基酸残基同种电荷,或者不具有电荷。
氨基酸中已知有带有电荷的氨基酸。通常带有正电荷的氨基酸(正电荷氨基酸)有赖氨酸(K)、精氨酸(R)、组氨酸(H)。带有负电荷的氨基酸(负电荷氨基酸)已知有天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)等。已知除此以外的氨基酸不带有电荷。
上述“变异的氨基酸残基”优选从以下的(a)或(b)的任意一组所含的氨基酸残基中适当选择,没有特别限定。
(a)谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)
(b)赖氨酸(K)、精氨酸(R)、组氨酸(H)
原有的(变异前的)氨基酸残基已经具有电荷时,将其变异成不具有电荷的氨基酸残基,这也是本发明的优选方案之一。即,本发明的变异有:(1)由具有电荷的氨基酸置换为不具有电荷的氨基酸,(2)由具有电荷的氨基酸置换为具有与原有电荷相反的电荷的氨基酸,(3)由不具有电荷的氨基酸置换为具有电荷的氨基酸。
本发明的方法中,优选使氨基酸残基变异,使含有FeRn结合区的多肽的等电点(pI)变化。通过变异导入多个氨基酸残基时,这些氨基酸残基中,可以含有少量的不带电荷的氨基酸残基。
本发明的方法中,可进行变异的氨基酸残基的数目没有特别限定,例如,使抗体的可变区变异时,优选在不使所述抗体与抗原的结合活性降低、不提高其免疫原性、可实现调控血液动力学目标所需的、最低限度的氨基酸残基变异。
为了不提高免疫原性,优选变异后的氨基酸序列为人序列,但本发明并不限于此。还可以向为了使等电点变化所导入的变异以外的位置引入突变,使变异后的FR(FR1、FR2、FR3、FR4)均为人序列。如上所述,将各FR置换为人序列的方法在非专利文献(Ono K.等人.,Mol.Immunol.1999 Apr;36(6):387-395)中有报道。为了使各FR的等电点变化,也可以将其变异为等电点不同的其它人FR(例如将FR3与等电点低的其它的人FR交换)。上述人源化方法在非专利文献(Dall’AcquaWF.,Methods.2005 May;36(1):43-60)中有报道。
在对少量的表面电荷进行变异未实现调控血液动力学的目标时,通过反复进行表面电荷的改变和血液动力学评价,可以获得所需要的血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽。
非专利文献24中,将抗E,P-Selectin抗体的嵌合抗体(IgG4)——嵌合EP5C7.g4和人源化抗体(IgG4)HuEP5C7.g4在猕猴中的血液动力学进行比较,结果显示两者血液动力学同等。另外,非专利文献25中,将抗CD154抗体的嵌合型抗体——ch5d8与人源化抗体Hu5c8在食蟹猴中血液动力学进行比较,结果显示两者血液动力学同等。非专利文献26中显示:嵌合抗体cCC49与人源化抗体HuCC49在小鼠中血液动力学同等。另外,在非专利文献27和非专利文献28中,对于在小鼠中的评价,小鼠抗体与人源化抗体的血液动力学、分布显示为同等,小鼠Fc和人Fc均可与小鼠FcRn交叉反应,因此可以认为该嵌合抗体与该人源化抗体的血液动力学、分布同等。如这些例子所示,嵌合抗体与人源化抗体之间的血液动力学同等。即,按照非专利文献7等中公开的公知方法进行人源化时,与嵌合抗体比较,血液动力学同等,按照公知的方法是无法制备血液动力学得到调控的人源化抗体的。
根据本发明的方法,在将嵌合抗体人源化时,通过使表面氨基酸变异,可以使抗体的pI变化,由此与嵌合抗体比较,可以制成血液动力学得到调控(即,血液半衰期延长,或血液动力学降低)的人源化抗体。用于调控血液动力学的表面氨基酸的变异可以与人源化同时进行,或者进一步使人源化抗体变异。
非专利文献29中记载,使用相同人抗体的FR序列进行人源化得到的三种人源化抗体曲妥单抗、贝伐单抗、帕妥单抗(pertuzumab)的血液动力学大致相等。即,使用相同FR序列进行人源化时,血液动力学大致同等。为了调控血药浓度,除上述人源化步骤之外,根据本发明中发明的方法,通过对表面氨基酸施加变异,使抗体的pI变化,由此使血药浓度调控首次成为可能。
对于由人抗体文库或生成人抗体的小鼠等制备的人抗体的表面氨基酸进行变异,使抗体的pI改变,则与最初制备的人抗体相比,可以制备血液动力学得到调控的(即血液半衰期延长或血液动力学将低)的人抗体。
如上所述,本发明中的“抗体”包含对上述使氨基酸残基的电荷改变的抗体进一步通过氨基酸的置换、缺失、附加和/或插入等使氨基酸序列发生变异的抗体。还包含对于通过氨基酸的置换、缺失、附加和/或插入,或者嵌合化或人源化等使氨基酸序列发生变异的抗体进一步使氨基酸残基的电荷改变的抗体。
氨基酸的置换、缺失、附加和/或插入,以及人源化、嵌合化等氨基酸序列的变异可按照本领域所公知的方法进行。同样,以重组抗体的形式制备本发明的抗体时所利用的抗体的可变区和恒定区也可通过氨基酸的置换、缺失、附加和/或插入,或嵌合化或人源化等来使其氨基酸序列变异。
本发明的抗体可以是小鼠抗体、人抗体、大鼠抗体、兔抗体、山羊抗体、骆驼抗体等来自任何动物的抗体。并且,可以是经变异的抗体,例如将嵌合抗体、氨基酸序列进行置换得到的人源化抗体等。还可以是结合有各种分子的抗体修饰物。
“嵌合抗体”是指将来自不同的动物的序列组合制备的抗体。例如,可以是含有小鼠抗体的重链、轻链的可变(V)区和人抗体的重链、轻链的恒定(C)区的抗体。嵌合抗体的制备是公知的,例如可以将编码抗体V区的DNA与编码人抗体C区的DNA连接,将其整合到表达载体中,导入宿主由此可获得嵌合抗体。
“人源化抗体”也称为重构人抗体,是将来自人以外的哺乳动物的抗体、例如小鼠抗体的互补决定区(CDR)置换到人抗体的CDR所得。鉴定CDR的方法是公知的(Kabat等人.,Sequence of Proteins ofImmunological Interest(1987),National Institute of Health,Bethesda,Md.;Chothia等人.,Nature(1989)342:877)。另外,其常规的基因重组方法也是公知的(参照欧洲专利申请公开编号EP125023号公报、WO96/02576号公报)。因此,通过公知的方法,例如可以确定小鼠抗体的CDR,获得编码该CDR与人抗体的框架区(FR)连接而得的抗体的DNA,通过使用通常的表达载体所得的系统生产人源化抗体。上述DNA可以使用在CDR和FR两者的末端区具有重叠部分的多个寡核苷酸作为引物,通过PCR法合成(参照WO98/13388号公报所述方法)。对经CDR连接的人抗体的FR进行选择,以使CDR形成良好的抗原结合部位。还可根据需要使抗体可变区中的FR的氨基酸变异,以使重构人抗体的CDR形成适当的抗原结合部位(Sato,K.等人.,CancerRes.(1993)53:851-6)。FR中可变异的氨基酸残基包含与抗原直接结合、或通过非共价键结合的部分(Amit等人.,Science(1986)233:747-53)、对于CDR的结构有影响或与之作用的部分(Chothia等人.,J.Mol.Biol.(1987)196:901-17)以及与VH-VL相互作用相关的部分(EP239400号专利公报)。
本发明的抗体为嵌合抗体或人源化抗体时,这些抗体的C区优选使用来自人抗体的区。例如,H链可以使用Cγ1、Cγ2、Cγ3、Cγ4、L链可以使用Cκ、Cλ。为了改善抗体或其生产的稳定性,可以根据需要修饰人抗体C区。本发明中的嵌合抗体优选含有来自人以外的哺乳动物的抗体的可变区和来自人抗体的恒定区。人源化抗体优选含有来自人以外的哺乳动物的抗体的CDR、以及来自人抗体的FR和C区。来自人抗体的恒定区是IgG(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgM、IgA、IgD和IgE等的同种型具有固有氨基酸序列。本发明的人源化抗体中使用的恒定区可以是属于任意同种型的抗体的恒定区。优选使用人IgG的恒定区,但并不限于此。另外,在人源化抗体中所利用的来自人抗体的FR也没有特别限定,可以是属于任意同种型的抗体。
本发明的嵌合抗体和人源化抗体的可变区和恒定区在保证可显示原有抗体的结合特异性的条件下,可以通过缺失、置换、插入和/或附加等进行变异。
利用来自人的序列得到的嵌合抗体和人源化抗体中,在人体内的免疫原性降低,因此可根据治疗目的等给予人。
本发明的方法中,编码导入突变前的抗体(本说明书中可简称为“本发明的抗体”)的H链或L链的基因可使用已知的序列,还可以按照本领域公知的方法获得。例如可以从抗体文库中获得,还可以从生产单克隆抗体的杂交瘤中克隆编码抗体的基因来获得。
关于抗体文库,已公知很多抗体文库,抗体文库的制备方法也是公知的,因此,本领域人员可以获得适当的抗体文库。例如对于抗体噬菌体文库可以参照Clackson等人.,Nature 1991,352:624-8;Marks等人.,J.Mol.Biol.1991,222:581-97;Waterhouses等人.,Nucleic AcidsRes.1993,21:2265-6;Griffiths等人.,EMBO J.1994,13:3245-60;Vaughan等人.,Nature Biotechnology 1996,14:309-14;以及日本特表平10-504970号公报等文献。其它还可以使用将真核细胞制成文库的方法(WO95/15393号说明书)或核糖体展示法等公知的方法。并且还已知由使用人抗体文库、通过淘选获得人抗体的技术。例如,可以将人抗体的可变区制成单链抗体(scFv),通过噬菌体展示法在噬菌体的表面表达,选择与抗原结合的噬菌体。对所选择的噬菌体的基因进行分析,则可以确定编码与抗原结合的人抗体的可变区的DNA序列。如果了解了与抗原结合的scFv的DNA序列,则可以以该序列为基础制备适当的表达载体,获得人抗体。这些方法是已知的,可以参考WO92/01047、WO92/20791、WO93/06213、WO93/11236、WO93/19172、WO95/01438、WO95/15388。
由杂交瘤获得编码抗体的基因的方法基本上可以使用公知技术,可如下获得:使用所需抗原或表达所需抗原的细胞作为致敏抗原,将其按照常规的免疫方法进行免疫,将所得免疫细胞通过通常的细胞融合与公知的亲代细胞融合,通过通常的筛选法筛选单克隆的抗体生成细胞(杂交瘤),使用反转录酶,从所得杂交瘤的mRNA中合成抗体的可变区(V区)的cDNA,将其与编码抗体恒定区(C区)的DNA连接。
更具体地说,用于获得编码上述H链和L链的抗体基因的致敏抗原包含具有免疫原性的完全抗原和譬如含有不显示免疫原性的半抗原等的不完全抗原,但并不限于此。例如可以使用目标蛋白质的全长蛋白或部分肽等。除此之外还已知由多糖类、核酸、脂质等构成的物质可以作为抗原,本发明的抗体的抗原没有特别限定。抗原的制备可按照本领域公知的方法进行,例如可按照使用杆状病毒的方法(例如WO98/46777等)进行。杂交瘤的制备例如可按照Milstein等人.(G.Kohler和C.Milstein,Methods Enzymol.1981,73:3-46)的方法等进行。抗原的免疫原性低时,可以与白蛋白等具有免疫原性的巨大分子结合,进行免疫。还可根据需要使抗原与其它分子结合,制成可溶性抗原。使用受体等的跨膜分子作为抗原时,可以使用受体胞外区部分作为片段,或使用在细胞表面上表达跨膜分子的细胞作为免疫原。
抗体生成细胞可使用上述的适当致敏抗原免疫动物获得。或者将可生成抗体的淋巴细胞进行体外免疫,制成抗体生成细胞。被免疫的动物可使用各种哺乳动物,通常使用啮齿目、兔目、灵长目动物。例如,小鼠、大鼠、仓鼠等啮齿目动物。兔等兔目动物。食蟹猴、猕猴、狒狒、黑猩猩等的灵长目动物。除此之外,还包括具有人抗体基因的所有组成成分的转基因动物,使用上述动物也可以获得人抗体(参照WO96/34096;Mendez等人.,Nat.Genet.1997,15:146-56)。例如在体外用所需抗原或表达所需抗原的细胞致敏人淋巴细胞,将致敏淋巴细胞与人骨髓瘤细胞,例如U266融合,以此作为使用上述转基因动物的替代方式,也可以获得与抗原具有结合活性的所需的人抗体(参照日本特公平1-59878号)。另外,具有人抗体基因的所有组成成分的转基因动物用所需抗原免疫,则可以获得所需的人抗体(参照WO93/1227、WO92/03918、WO94/02602、WO96/34096和WO96/33735)。
动物的免疫例如可如下进行:用磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐水等将致敏抗原稀释并悬浮,根据需要混合佐剂进行乳化,然后注射到动物的腹腔内或皮下。然后优选每隔4-21天给予数次与氟氏不完全佐剂混合的致敏抗原。抗体生成的确认可通过常用的方法测定动物血清中的目标抗体效价来进行。
杂交瘤可以用常用的融合剂(例如聚乙二醇),将从用所需抗原免疫了的动物或由淋巴细胞中得到的抗体生成细胞与骨髓瘤细胞融合制备(Goding,Monoclonal Antibodies:Principles and Practice,AcademicPress,1986,59-103)。还可根据需要培养杂交瘤细胞,使其增殖,通过免疫沉淀、放射免疫分析(RIA)、酶联免疫吸附分析(ELISA)等公知的分析方法测定由该杂交瘤生成的抗体的结合特异性。然后根据需要将生产测定了目标特异性、亲和性或活性的生成抗体的杂交瘤通过有限稀释法等方法进行亚克隆。
接着,使用可与抗体特异性结合的探针(例如与编码抗体恒定区的序列互补的寡核苷酸等),从杂交瘤或抗体生成细胞(致敏淋巴细胞等)中克隆编码被选择的抗体的基因。还可以通过RT-PCR从mRNA中克隆。免疫球蛋白分为IgA、IgD、IgE、IgG和IgM五个不同的类。并且这些类又分为几种亚类(同种型)(例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4;IgA-1和IgA-2等)。本发明中,在抗体的制备中使用的H链和L链可以来自属于上述任意的类和亚类的抗体,没有特别限定,特别优选IgG。
这里,可以通过基因工程的方法将使编码H链和L链的基因变异。例如对于小鼠抗体、大鼠抗体、兔抗体、仓鼠抗体、绵羊抗体、骆驼抗体等抗体,为了降低其与人的异种免疫原性等,可以适当制备人工变异的基因重组型抗体、例如嵌合抗体、人源化抗体等。嵌合抗体是含有人以外的哺乳动物例如小鼠抗体的H链、L链的可变区和人抗体的H链、L链的恒定区的抗体,可如下获得:将编码小鼠抗体可变区的DNA与编码人抗体恒定区的DNA连接,将其整合到表达载体中,导入宿主并生产。人源化抗体也称为重构人抗体,如下合成:设计成其末端部与下述DNA序列具有重叠部分的多个寡核苷酸,通过PCR法合成与小鼠之类的、人以外的哺乳动物的抗体的互补决定区(CDR)相连的DNA序列。将所得DNA与编码人抗体恒定区的DNA连接,接着整合到表达载体中,将其导入宿主并生成抗体(参照EP239400,WO96/02576)。选择经由CDR连接的人抗体的FR,以使得互补决定区形成良好的抗原结合部位。还可以根据需要,置换抗体的可变区的框架区的氨基酸,使重构人抗体的互补决定区形成适当的抗原结合部位(K.Sato等人.,Cancer Res.1993,53:851-856)。
除上述人源化之外,还可以为了改善与抗原的结合性等抗体的生物学特性对抗体实施变异。本发明的变异可通过位点定向诱变(例如参照Kunkel(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82:488)、PCR突变、盒突变法等方法进行。通常,生物学特性得到改善的抗体突变体与原有的抗体的可变区的氨基酸序列具有70%或以上、更优选80%以上、进一步优选90%以上(例如95%以上、97%、98%、99%等)的氨基酸序列同源性和/或相似性。本说明书中,序列的同源性和/或相似性是通过序列比对以及根据需要导入缺口使序列同源性值获得最大化后,与原有的抗体残基相同(相同残基)或相似(通常根据氨基酸支链的特性被分类为同一组的氨基酸残基)的氨基酸残基的比例定义的。通常,天然的氨基酸残基根据其支链的性质被分类为(1)疏水性:丙氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸和亮氨酸;(2)中性亲水性:天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、苏氨酸和丝氨酸;(3)酸性:天冬氨酸和谷氨酸;(4)碱性:精氨酸、组氨酸和赖氨酸;(5)对链的取向有影响的残基:甘氨酸和脯氨酸;以及(6)芳族性:酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸。
通常,存在于H链和L链可变区中的全部中,6个互补决定区(超可变部;CDR)相互作用,形成抗体的抗原结合部位。已知与含有全部结合部位的情况相比,仅一个可变区的亲和性较低,但是其仍具有识别抗原并结合的能力。因此,对于本发明的编码H链和L链的抗体基因,只要该基因所编码的多肽可以保持与所需抗原的结合性即可,可以编码含有H链和L链各抗原结合部位的片段部分。
重链可变区如上所述,通常由3个CDR区和4个FR区构成。本发明的优选方案中,进行“变异”的氨基酸残基可以在位于CDR区或FR区的氨基酸残基中适当选择。通常CDR区的氨基酸残基的变异可以使其与抗原的结合能力降低。因此,本发明中,进行“变异”的氨基酸残基虽然没有特别限定,但优选从位于FR区的氨基酸残基中适当选择。对于CDR,如果确认即使进行了变异,其结合能力也不降低,则可以选择该位置。
在人或小鼠等生物中,本领域技术人员可以利用公共数据库等适当获得可用作抗体的可变区的FR的序列。
本发明进一步涉及通过本发明的方法使血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽。
本发明的优选方案中,提供通过本发明的方法使血液动力学得到调控的人源化抗体。该人源化抗体例如是该人源化抗体含有来自人以外的动物的互补决定区(CDR)、来自人的框架区(FR)和人恒定区,其中,在CDR或FR中,可暴露在抗体表面的至少一个氨基酸残基是与野生型CDR或FR的相应位置上的氨基酸残基相比具有不同电荷的氨基酸残基,与可变区来自所述人以外的动物的抗体、且具有相同恒定区的嵌合抗体相比,该人源化抗体的血液动力学得到调控。
上述人恒定区优选指含有野生型人Fc区的区域,可以是变异的Fc。
本发明还涉及含有FcRn结合区的多肽的制备方法,其中,所述的多肽血液动力学已通过本发明的方法得到调控。即,本发明提供血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽的制备方法。并且,由本发明的方法制备的含有FcRn结合区的多肽也包含在本发明中。
本发明的制备方法的优选方案是血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽的制备方法,该方法包含以下步骤:(a)为了使可暴露于含有FcRn结合区的多肽表面的至少一个氨基酸残基的电荷发生改变,对编码含有该氨基酸残基的多肽的核酸进行变异;(b)培养宿主细胞,以使该核酸表达;(c)从宿主细胞培养物中回收含有FcRn结合区的多肽。
本发明的上述方法中,“使核酸变异”是指使核酸变异,以使其对应于通过本发明的“变异”而导入的氨基酸残基。更具体地说,对于编码原有的(变异前)氨基酸残基的核酸,变异为编码通过变异导入的氨基酸残基的核酸。通常是指对于原有的核酸进行至少一个碱基的插入、缺失或置换等基因操作或突变处理,形成编码目标氨基酸残基的密码子。即,编码原有氨基酸残基的密码子置换为编码通过变异导入的氨基酸残基的密码子。上述核酸的变异可使用本领域公知的技术、例如位点定向诱变法、PCR突变导入法等适当实施。
本发明的核酸通常是担载(插入)于适当的载体上,导入到宿主细胞中。该载体只要可稳定保有插入的核酸即可,没有特别限定,例如,宿主如果使用大肠杆菌,则克隆用的载体优选pBluescript载体(Stratagene制备)等,还可利用市场销售的各种载体。为了生产本发明的多肽而使用载体时,优选使用表达载体。表达载体只要是在试管内、大肠杆菌内、培养细胞内、生物个体内表达多肽的载体即可,没有特别限定,例如,如果在试管内表达则优选pBEST载体(プロメガ制备),如果在大肠杆菌中表达则优选pEP载体(Invitrogen制备),如果在培养细胞中表达则优选pME18S-SL3载体(GenBank登录号No.AB009864),如果在生物个体中表达则优选pME18S载体(Mol Cell Biol.8:466-472(1988))等。本发明的DNA向载体中的插入可通过常规方法,例如可通过使用限制酶切位点的连接酶反应进行(Current protocols inMolecular Biology edit.Ausubel等人.(1987)Publish.John Wiley &Sons.Section 11.4-11.11)。
上述宿主细胞没有特别限定,可以根据目的使用各种宿主细胞。用于表达多肽的细胞,例如有细菌细胞(例如链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、链霉菌、枯草杆菌)、真菌细胞(例如酵母、曲霉)、昆虫细胞(例如黑腹果蝇S2、夜蛾SF9)、动物细胞(例如CHO、COS、HeLa、C127、3T3、BHK、HEK293、Bowes黑素瘤细胞)和植物细胞。将载体导入宿主细胞,例如可通过磷酸钙沉淀法、电脉冲穿孔法(Current protocolsin Molecular Biology edit.Ausubel等人.(1987)Publish.John Wiley &Sons.Section 9.1-9.9)、脂转染法、显微注射法等公知的方法进行。
为了使在宿主细胞中表达的多肽在内质网的内腔中、周质中、或者细胞外的环境中分泌,可以将适当的分泌信号整合到目标多肽中。这些信号对于目标多肽可以是内源性,也可以是外源的信号。
上述制备方法中,对于多肽的回收,当本发明的多肽分泌到培养基中时则回收培养基。本发明的多肽在细胞内产生时,首先溶解该细胞,然后回收多肽。
从重组细胞培养物中回收本发明的多肽并纯化时,可以采用包含磷酸铵或乙醇沉淀、酸提取、阴离子或阳离子交换层析、磷酸纤维素层析、疏水性相互作用层析、亲和层析、羟基磷灰石层析和凝集素层析等公知的方法。
本发明还涉及含有通过本发明的方法使血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽(例如IgG抗体)以及可药用载体的组合物(药物)。
本发明中,药物组合物通常是指用于疾病的治疗或预防、或者检查、诊断的药物。
本发明的药物组合物可以按照本领域所公知的方法制成制剂。例如,可以以与水或其它的药学可接受的液体形成的无菌性溶液或混悬剂的注射剂形式非口服使用。例如,可以与药理学可接受的载体或介质、具体来说灭菌水或生理盐水、植物油、乳化剂、悬浮剂、表面活性剂、稳定剂、香味剂、赋形剂、载体、防腐剂、粘结剂等适当组合,以公认的制药中所要求的单位用量形式混合,制成制剂。这些制剂中的有效成分量设定为可获得所指示的范围的适当的容量。
用于注射的灭菌组合物可使用注射用蒸馏水之类的载体,按照通常的制剂实施进行配制。
注射用的水溶液例如有:含有生理盐水、葡萄糖或含有其它辅助试剂(例如D-山梨醇、D-甘露糖、D-甘露糖醇、氯化钠)的等渗液。也可以结合使用适当的溶解助剂例如醇(乙醇等)、多元醇(丙二醇、聚乙二醇等)、非离子性表面活性剂(聚山梨醇80(TM)、HCO-50等)。
油性液体有芝麻油、大豆油,溶解助剂可以结合使用苯甲酸苄酯和/或苄醇。还可以配合缓冲剂(例如磷酸盐缓冲液和乙酸钠缓冲液)、止痛剂(例如盐酸普鲁卡因)、稳定剂(例如苄醇和苯酚)、抗氧化剂。制备的注射液通常填充在适当的安瓿瓶中。
本发明的药物组合物优选非口服给予。例如可以制成注射剂型、经鼻给予剂型、经肺给予剂型、透皮给予型的组合物。例如通过静脉内注射、肌内注射、腹腔内注射、皮下注射等可以全身或局部给予。
给予方法可根据患者的年龄、症状适当选择。含有抗体或编码抗体的多核苷酸的药物组合物的给予量例如可设定为每次按照1公斤体重为0.0001mg-1000mg的范围。或者例如每位患者可以是0.001-100000mg的给予量,本发明并不限于这些数值。给予量和给予方法根据患者的体重、年龄、症状等变化,本领域技术人员可考虑这些条件适当设定给予量和给予方法。
本发明还提供编码下述多肽的核酸,其中,所述多肽为通过本发明的方法使血液动力学得到调控的、含有FcRn结合区的多肽(例如人源化抗体等)。并且带有该核酸的载体也包含在本发明中。
本发明进一步提供具有上述核酸的宿主细胞。该宿主细胞没有特别限定,例如有大肠杆菌或各种动物细胞等。宿主细胞例如可以以用于本发明的抗体或多肽的制备或表达的生产体系的形式使用。用于制备多肽的生产体系中有体外和体内的生产体系。体外的生产体系有使用真核细胞的生产体系和使用原核细胞的生产体系。
可作为宿主细胞使用的真核细胞例如有动物细胞、植物细胞、真菌细胞。动物细胞例如有哺乳类细胞,例如CHO(J.Exp.Med.(1995)108,945)、COS、HEK293、3T3、骨髓瘤、BHK(幼仓鼠肾细胞)、HeLa、Vero等,两栖类细胞例如非洲爪蟾卵细胞(Valle,等人.,Nature(1981)291:338-340)、以及昆虫细胞例如Sf9、Sf21、Tn5。本发明的抗体的表达中,优选采用CHO-DG44、CHO-DX11B、COS7细胞、HEK293细胞、BHK细胞。动物细胞中,为了大量表达,特别优选CHO细胞。载体对宿主细胞的导入例如可通过磷酸钙法、DEAE葡聚糖法、使用阳离子性脂质体DOTAP(Boehringer Mannheim制备)的方法、电穿孔法、脂转染等方法进行。
植物细胞例如已知有来自烟草(Nicotiana tabacum)的细胞和浮萍(Lemna minor)作为蛋白质生产体系,通过将该细胞进行愈伤组织培养可以生产本发明的抗体。真菌细胞公知有使用酵母例如酵母属(Saccharomyces)的细胞(酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Saccharomyces pombe)等);和丝状菌例如曲霉属(Aspergillus)的细胞(黑曲霉(Aspergillus niger)等)的蛋白质表达体系,可用作本发明的抗体生成的宿主。
使用原核细胞时,有使用细菌细胞的生产体系。细菌细胞除上述大肠杆菌之外,还已知使用枯草杆菌的生产体系,也可用于本发明的抗体生成。
使用本发明的宿主细胞生产抗体时,可以对用含有编码本发明抗体的多核苷酸的表达载体转化的宿主细胞进行培养,使多核苷酸表达。培养可按照公知的方法进行。例如以动物细胞为宿主时,培养液例如可使用DMEM、MEM、RPMI1640、IMDM。此时,可以结合使用FBS、胎牛血清(FCS)等血清补液,通过无血清培养进行细胞培养。培养时的pH优选约6-8。培养通常在约30-40℃下进行约15-200小时,可以根据需要进行培养基的更换、通气、搅拌。
体内生产多肽的体系,例如有使用动物的生产系统或使用植物的生产系统。向这些动物或植物中导入目标多核苷酸,在动物或植物的体内生成多肽并回收。本发明的“宿主”包含这些动物、植物。
使用动物时,有使用哺乳类动物、昆虫的生产体系。哺乳类动物可以使用山羊、猪、绵羊、小鼠、牛等(Vicki Glaser,SPECTRUMBiotechnology Applications(1993))。使用哺乳类动物时,可以使用转基因动物。
例如将编码本发明的抗体的多核苷酸和编码如山羊β酪蛋白等,生产乳汁中特有的多肽的基因以融合基因的形式制备。接着,将含有该融合基因的多核苷酸片段注入到山羊的胚胎中,将该胚胎移植到雌山羊体内。从接受了胚胎的山羊所生产的转基因山羊、或其子代所生产的乳汁中可以获得目标抗体。为了使含有由转基因山羊生产的抗体的乳汁量增加,可以对转基因山羊适当给予激素(Ebert等人.,Bio/Technology(1994)12:699-702)。
生产本发明的抗体的昆虫例如可以使用蚕。使用蚕时,使插入了编码目标抗体的多核苷酸的杆状病毒感染蚕,由此可从蚕的体液中获得目标抗体(Susumu等人.,Nature(1985)315:592-594)。
将植物用于本发明的抗体生产时,例如可以使用烟草。使用烟草时,将编码目标抗体的多核苷酸插入到植物表达用的载体例如pMON530中,将该载体导入到根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)等的细菌中。将该细菌感染烟草、例如烟草(Nicotiana tabacum),可由该烟叶获得所需抗体(Ma等人.,Eur.J.Immunol.(1994)24:131-8)。将同样的细菌感染浮萍,进行克隆后可由浮萍的细胞中获得所需抗体(CoxK.M.等人.,Nat.Biotechnol.2006 Dec;24(12):1591-1597)。
上述得到的抗体可从宿主细胞内或细胞外(培养基、乳汁等)中分离,纯化为基本上纯的、均匀的抗体。抗体的分离、纯化可以使用通常在多肽的纯化中使用的分离、纯化方法,并没有特别的限定。例如可以将层析柱、过滤、超滤、盐析、溶剂沉淀、溶剂提取、蒸馏、免疫沉淀、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳法、透析、重结晶等适当选择、组合,分离并纯化抗体。
层析例如有:亲和层析、离子交换层析、疏水性层析、凝胶过滤、反相层析、吸附层析等(Strategies for Protein Purification andCharacterization:A Laboratory Course Manual.Ed Daniel R.Marshak等人.,(1996)Cold Spring Harbor Laboratory Press)。这些层析可以使用液相层析例如HPLC、FPLC等液相层析进行。亲和层析中使用的柱有蛋白A柱、蛋白G柱。例如使用蛋白A的柱有:Hyper D、POROS、Sepharose F.F.(Pharmacia)等。
还可以根据需要,在抗体的纯化前或纯化后使适当的蛋白质修饰酶作用,由此可以施加任意的修饰,或可部分地除去肽。蛋白质修饰酶例如可使用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、赖氨酰肽链内切酶、蛋白激酶、葡糖苷酶等。
如上所述,包含培养本发明的宿主细胞、由该培养物中回收下述多肽的步骤的多肽的制备方法也是本发明的优选方案之一,所述多肽的血液动力学得到调控、且含有FcRn结合区。
本说明书中引用的所有现有技术文献均作为参照援引到本说明书中。
实施例
以下通过实施例具体说明本发明,但本发明并不受这些实施例的限制。
[实施例1]双特异性抗体的人源化
在日本特愿2005-112514中,对于缩短凝血时间最为有效的、含有抗FactorIXa抗体A69-VH、抗FactorX抗体B26-VH、杂合L链(BBA)的组合的双特异性抗体如下进行人源化。
1-1人抗体的同源性检索
由一般公开的Kabat数据库(ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/kabat/)和IMGT数据库(http://imgt.cines.fr/)获得人抗体氨基酸序列数据,使用构建的数据库,对小鼠A69-H链可变区(氨基酸序列:SEQ IDNO.15)、小鼠B26-H链可变区(氨基酸序列:SEQ ID NO.16)、小鼠BBA-L链可变区(氨基酸序列:SEQ ID NO.17)分别进行同源性检索。结果可以确认与以下所示人抗体序列具有高同源性,可用作人源化抗体的框架区(以下称为FR)。
(1)A69-H链可变区:KABATID-000064(Kabat数据库)
(Kipps等人.,J.Clin.Invest.1991;87:2087-2096)
(2)B26-H链可变区:EMBL登录号AB063872(IMGT数据库)
(未公开数据)
(3)BBA-L链可变区:KABATID-024300(Kabat数据库)
(Welschof等人.,J.Immunol.Method.1995;179:203-214)
将各小鼠抗体的互补决定区(以下称为CDR)移植到(1)-(3)的人抗体的FR,制备人源化抗体。
使用NCBI中一般公开的同源性检索网站(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/),检索与(4)-(6)的人抗体同源性高的人抗体分泌信号序列。使用检索得到的、以下所示的分泌信号序列。
(4)A69-H链可变区:Genbank登录号AF062257。
(5)B26-H链可变区:Genbank登录号AAC18248。
(6)BBA-L链可变区:Genbank登录号AAA59100。
1-2人源化抗体基因表达载体的构建
相应于编码由分泌信号序列至抗体可变区的氨基酸序列的碱基序列中,相互交叠地制备12条50个碱基左右的合成寡DNA,使其3′末端一侧有约20个碱基左右可退火。合成寡DNA设计成在5′末端一侧编码人序列,在3′末端一侧编码小鼠序列,或者全部碱基编码人序列。并且,在抗体可变区基因的5′末端退火且具有XhoI切割序列的引物,和在抗体可变区基因的3′末端退火且具有SfiI切割序列、并编码内含子序列的5′末端序列的引物。
将各1μL制备成2.5μM的合成寡DNA混合,加入1×TakaRa ExTaq缓冲液、0.4mM dNTPs、0.5单位TaKaRa Ex Taq(均为宝酒造制备),制备成48μL反应液。在94℃下保温5分钟后,将含有94℃2分钟、55℃2分钟、72℃2分钟的反应进行2个循环,实施各合成寡DNA的装配和链延伸反应。接着,添加1μL在抗体基因的5′末端和3′末端退火的引物(各10μM),将含有94℃30秒、50℃30秒、72℃1分钟的反应进行35个循环,在72℃反应5分钟,扩增抗体可变区基因。PCR后,将全部反应液用于1%琼脂糖凝胶电泳。使用QIA quick凝胶纯化试剂盒(QIAGEN),按照所附说明书的方法纯化目标大小(约400bp)的扩增片段,用30μL灭菌水洗脱。使用pGEM-T Easy载体系统(Promega),按照所附说明书的方法对该片段进行克隆。各DNA片段的碱基序列是使用BigDye终止子循环测序试剂盒(AppliedBiosystems),通过DNA测序仪ABI PRISM 3730xL DNA测序仪或ABIPRISM 3700 DNA测序仪(Applied Biosystems),按照所附说明书的方法确定。
将确认插入了正确的人源化抗体可变区基因序列的H链可变区片段的质粒用XhoI和SfiI消化、将确认插入了正确的人源化抗体可变区基因序列的L链可变区片段的质粒用EcoRI消化,然后将反应液用于1%琼脂糖凝胶电泳。使用QIAquick凝胶纯化试剂盒(QIAGEN),按照所附说明书的方法纯化目标大小(约400bp)的DNA片段,用30μL灭菌水洗脱。然后如下制备动物细胞用表达载体。为了使H链为异源重组的IgG4优先表达,参考IgG1的knobs-into-hole技术(MerchantAM等人.,Nature Biotechnology,1998年,Vol.16,p.677-681),使用其CH3部分的氨基酸置换的IgG4。并为了促进H链的二聚体形成,向铰链导入氨基酸置换(-ppcpScp-→-ppcpPcp-)。在具有鸡β肌动蛋白启动子的pCAGGS(Niwa等人.,Gene,1991年,Vol.108,193-199页)中整合了经Y39C、T366W置换的恒定区基因,再向由此所得表达载体中插入人源化A69H链可变区抗体基因片段,制备人源化A69H链表达载体。另外,在pCAGGS中整合经E356C、T366S、L368A、Y407V置换的恒定区基因,再向由此所得表达载体中插入人源化B26H链可变区抗体基因片段,制备人源化B26H链表达载体。另外,在pCAGGS中插入了野生型抗体L链恒定区得到的质粒(pCAG-gκDNA)用EcoRI消化,制备插入了人源化BBA L链可变区抗体基因片段的表达载体。连接反应使用Rapid DNA连接试剂盒(Roche Diagnostics),转化大肠杆菌DH5α株(东洋纺绩制备)。
1-3人源化双特异性抗体的表达
采用以下方法进行人源化双特异性抗体的表达。将来自人胎儿肾癌细胞的HEK293H株(Invitrogen)悬浮于含有10%胎牛血清的DMEM培养基(Invitrogen)中,以5-6×105个/mL的细胞密度、以10mL接种于粘着细胞用培养皿(直径10cm,CORNING)的各皿中,在CO2培养箱(37℃、5%CO2)内培养一昼夜,然后吸除培养基,添加6.9mL含有1%胎牛血清(Invitrogen)的CHO-S-SFM-II(Invitrogen)培养基。将在1-2中制备的质粒DNA混合液(合计13.8μg)与20.7μL 1μg/mL聚氮丙啶(Polysciences Inc.)和690μL CHO-S-SFM-II培养基混合,在室温下静置10分钟,将其加入到各培养皿的细胞中,在CO2培养箱(37℃,5%CO2)内培养4-5小时。然后添加6.9mL含有1%胎牛血清(Invitrogen)的CHO-S-SFM-II(Invitrogen)培养基,在CO2培养箱内培养3天。回收培养上清,然后离心(约2000g,5分钟,室温)除去细胞,进一步过0.22μm滤器MILLEX(R)-GV(Millipore)进行灭菌,该样品在使用之前在4℃下保存。
1-4人源化双特异性抗体的纯化
向按照实施例1-2所述方法得到的培养上清中添加100μL的rProtein A SepharoseTM Fast Flow(Amersham Biosciences),在4℃下颠倒混合4小时以上。将该溶液转移至0.22μm的滤器杯Ultrafree(R)-MC(Millipore),用500μL含有0.01%吐温(R)20的TBS洗涤3次,将100μL含有0.01%吐温(R)20的50mM乙酸钠溶液悬浮于rrProtein ASepharoseTM树脂中,使pH为3.3,静置2分钟,然后使抗体溶出。立即加入6.7μL的1.5M Tris-HCl pH 7.8进行中和。
1-5人源化双特异性抗体的浓度定量
如下所示按照两种方法进行测定。
用包被缓冲液将山羊抗人IgG(Biosource International)制备成1μg/mL,固定于Nunc-Immuno板上(Nunc)。用稀释缓冲液(D.B.)进行封闭,然后添加用D.B.适当稀释的培养上清样品。同样地添加由2000ng/mL以3倍系列、用D.B.稀释为11个梯度的人IgG4(人源化抗TF抗体,参照WO 99/51743),作为计算抗体浓度的标准品。洗涤3次后,使其与山羊抗人IgG、碱性磷酸酶反应(Biosource International)。洗涤5次后,以Sigma 104(R)磷酸酶底物(Sigma-Aldrich)作为底物进行显色,通过吸光度读数仪型号3550(Bio-Rad Laboratories))、以665nm作为参照波长测定405nm的吸光度。使用微量板ManagerIII(Bio-RadLaboratories)软件,由标准品的校正曲线计算培养上清中人IgG的浓度。
还使用Biacore 1000或Biacorell(BIACORE),使用固定有蛋白A的传感芯片CM5(BIACORE)进行定量。具体来说,按照生产商的说明书,将用10mM乙酸钠水溶液(pH 4.0,BIACORE)稀释为50μg/mL的蛋白A(SIGMA)溶液以5μL/分钟在活化的传感芯片反应30分钟,然后实施封闭操作,制备固定有蛋白A的传感芯片。使用该传感芯片、用Biacore 1000(BIACORE),测定培养上清和纯化品的浓度。传感芯片的固定和浓度测定是使用HBS-EP缓冲液(BIACORE)。浓度测定时的标准品使用由4000ng/mL按照2倍系列用HBS-EP缓冲液稀释为6个梯度的人源化IgG4抗体(人源化抗组织因子抗体,参照WO99/51743)。
1-6人源化双特异性抗体的凝血活性评价
为了明确双特异性抗体对血友病A血液的凝固能力是否有改变,研究该抗体对于使用缺少因子VIII血浆的活化部分促凝血酶原激酶时间(APTT)的影响。将50μL各种浓度的抗体溶液、50μL缺少因子VIII血浆(Biomerieux)和50μL APTT试剂(Dade Behring)的混合液在37℃下加温3分钟。凝固反应是通过将50μL 20mM的CaCl2(DadeBehring)加入到该混合液中引发。通过连接有CR-A(Amelung)的KC10A(Amelung)测定至凝固所需时间。
以缺少因子VIII血浆的凝固时间为0%,以正常血浆的凝固时间为100%,制作校正曲线,使用该校正曲线,由添加了双特异性抗体时的凝固时间计算双特异性抗体的因子VIII样活性(%)。
1-7保持凝血活性的人源化双特异性抗体的获得
在上述凝血活性评价中,对于凝血能力低的人源化双特异性抗体,为了使其活性升高而使人源化抗体FR的氨基酸变异。具体来说,使用QuikChange位点定向诱变试剂盒(Stratagene),按照所附说明书记载的方法向人源化抗体可变区导入突变。将确认插入了正确的人源化抗体可变区基因序列的H链可变区片段的质粒用XhoI和SfiI消化、将确认插入了正确的人源化抗体可变区基因序列的L链可变区片段的质粒用EcoRI消化,然后将反应液供给1%琼脂糖凝胶电泳。使用QIAquick凝胶纯化试剂盒(QIAGEN),按照所附说明书记载的方法纯化目标大小(约400bp)的DNA片段,用30μL灭菌水洗脱。然后按照实施例1-2所示方法制备动物细胞用表达质粒。按照实施例1-3、1-4、1-5所示方法制备人源化双特异性抗体,按照实施例1-6所示方法评价凝血活性。
反复进行FR序列的氨基酸变异和凝血能力的评价,获得与嵌合双特异性抗体(A69/B26/BBA)具有同等活性的人源化双特异性抗体(人源化A69(hA69a)/人源化B26(hB26-F123e4)/人源化BBA(hAL-F123j4))(图1)。将各抗体可变区序列表示为以下的序列号(SEQ ID NO)。
(1)人源化A69抗体VH(hA69a)SEQ ID NO.1(碱基序列)、SEQID NO.2(氨基酸序列)
(2)人源化B26抗体VH(hB26-F123e4)SEQ ID NO.3(碱基序列)、SEQ ID NO.4(氨基酸序列)
(3)人源化BBA抗体VL(hAL-F123j4)SEQ ID NO.5(碱基序列)、SEQ ID NO.6(氨基酸序列)
[实施例2]为了双特异性抗体的分离选择可变区氨基酸变异位置
首先,为了确认暴露在人源化A69抗体和人源化B26抗体的可变区表面的氨基酸残基,使用MOE软件(Chemical Computing GroupInc.),通过同源性建模制备人源化A69抗体和人源化B26抗体的抗体Fv区模型。模型如图2所示,通过该模型的详细分析,在CDR以外的FR序列中,在暴露于表面的氨基酸中,H10、H12、H23、H39、H43、H105(Kabat编号,Kabat EA等人.1991.Sequences of Proteins ofImmunologicalInterest.NIH)是不会使活性降低、而可以使等电点变化的候选氨基酸。CDR中,暴露于表面的氨基酸选择H97.
[实施例3]人源化A69抗体及其变异体和人源化B26抗体的可变区氨基酸的变异
为了使人源化A69抗体和人源化B26抗体的等电点变化,进行人源化A69H链可变区和人源化B26H链可变区的氨基酸变异。具体来说,使用QuikChange位点定向诱变试剂盒(Stratagene),向按照所附说明书记载的方法制备的人源化A69抗体H链可变区(hA69a,SEQ IDNO.1)和人源化B26抗体H链可变区(hB26-F123e4,SEQ ID NO.3)中导入突变。将确认插入了正确的人源化抗体可变区基因序列的H链可变区片段的质粒用XhoI和SfiI消化,然后将反应液用于1%琼脂糖凝胶电泳。使用QIAquick凝胶纯化试剂盒(QIAGEN),按照所附说明书记载的方法纯化目标大小(约400bp)的DNA片段,用30μL灭菌水洗脱。按照实施例1-2所示的方法,将DNA片段插入到具有野生型恒定区的表达质粒中,制备H链表达载体。各抗体的变异的氨基酸残基和序列号如表1所示。制备了(hA69-N97R、hA69-p18)、人源化B26抗体(hB26-F123e4)及其变异体(hB26-p15)。人源化A69抗体(hA69a)及其变异体(hA69-N97R、hA69-p18)是将H链表达载体(可变区为hA69-N97R、hA69-p18)和L链表达载体(可变区为hAL-F123j4,SEQ IDNO.6)组合,根据实施例1-3进行表达。人源化B26抗体(hB26-F123e4)及其变异体(hB26-p15)是将H链表达载体(可变区为hB26-F123e4、hB26-p15)L链表达载体(可变区为B26-VL,氨基酸序列为WO2005/035756,SEQ ID NO.18)组合,根据实施例1-3进行表达。按照实施例1-4所示方法纯化培养上清中的抗体。
[表1]
[实施例4]含有人源化A69抗体和人源化B26抗体的双特异性抗体表达细胞株的构建
为了制备人源化双特异性抗体,如下构建抗体表达细胞株。
以人IgG4的野生型H链恒定区基因为模板,使用设计为编码H链恒定区的N末端一侧的两个氨基酸(Ala-Ser)的碱基序列成为NheI识别序列(GCTAGC)的5′末端侧引物,和设计成与3′末端一侧退火、且具有NotI识别位点的引物,PCR扩增H链恒定区,与将pBluescriptKS+载体(东洋纺)用NheI、NotI(均为宝酒造制备)消化所得的载体连接,制备pBCH4(包含IgG4恒定区基因)。使用与人源化A69-H链抗体(hA69-PFL,SEQ ID NO.11)和人源化B26-H链抗体(hB26-PF,SEQ ID NO.12)的H链可变区5′末端一侧碱基序列互补、具有Kozak序列(CCACC)和EcoRI识别序列的引物,以及具有NheI识别序列的3′末端一侧碱基序列的引物进行PCR,将所得PCR产物用EcoRI、NheI(均为宝酒造制备)消化,插入到同样用EcoRI、NheI消化的pBCH4中,连接可变区和恒定区。将制备的人源化A69-H链抗体载体用EcoRI、NotI(均为宝酒造制备)消化,克隆到同样用EcoRI、NotI消化的动物细胞用表达载体pCXND3中。该载体pCXND3的构建流程如下所示。
为了将DHFR-ΔE-γVH-PM1-f(参照WO92/19759)的抗体H链基因与载体分割,用限制酶EcoRI、SmaI进行消化,只回收载体一侧,然后克隆EcoRI-NotI-BamHI适体(宝酒造制备)。将该载体命名为pCHOI。将pCHOI的DHFR基因表达位点克隆到pCXN(Niwa等人,Gene 1991,108:193-200)的限制酶HindIII位点上,将所得载体命名为pCXND3。将制备的人源化B26-H链抗体载体用EcoRI、NotI(均为宝酒造制备)消化,克隆到同样用EcoRI、NotI消化的动物细胞用表达载体pCXZD1中。pCXZD1载体是将pCXND3载体的新霉素抗性基因置换为零霉素抗性基因得到的表达载体。按照实施例1-2,将人源化BBA-L链抗体(hAL-s8,SEQ ID NO.8)的L链可变区克隆到插入有L链恒定区的质粒(pCAG-gκDNA)上,制备L链表达载体。将制备的三种表达载体通过限制酶制成直链连接,然后基因导入CHO-DG44细胞中,建立抗体表达细胞株。
稳定表达细胞株的制备如下进行。通过使用GenePulserXcellII(Bio-Rad)的电穿孔法导入基因。将各抗体表达载体与0.75mL悬浮于PBS中的CHO细胞(1×107细胞/mL)混合,将混合物在冰上冷却10分钟,转移到样品杯中,然后以1.5kV、25μFD的容量给予脉冲。在室温下恢复10分钟后,将电穿孔处理过的细胞悬浮于40mL以1倍浓度含有添加了HT(Invitrogen)的CHO-S-SFMII培养基(Invitrogen)中。用同样的培养基制备10倍稀释液,以100μL/孔分注到96孔培养板中。在CO2培养箱(5%CO2)中培养24小时,然后添加0.5mg/mL遗传霉素(Invitrogen)、0.6mg/mL零霉素(Invitrogen),培养2周。将显示抗药性的转化细胞的集落依次放大培养,使用建立的高生产细胞株进行大量的培养,得到培养上清。
[实施例5]人源化抗体同源二聚体和人源化双特异性抗体的分离纯化
按照以下方法,从实施例4得到的培养上清中纯化双特异性抗体。将培养上清添加到用平衡缓冲液(20mmol/L磷酸钠缓冲液、150mol/LNaCl,pH 7.0)平衡的rProtein A Sepharose Fast Flow柱(AmershamBiosciences,50mmI.D.×9.9cmH.=194.3mL-树脂)中,用洗涤缓冲液1(20mmol/L磷酸钠缓冲液,150mol/L NaCl,pH 7.0)、洗涤缓冲液2(50mmol/L乙酸钠缓冲液,pH 6.0)洗涤,然后用50mmol/L乙酸洗脱。洗脱后立即加入1.5mol/L的Tris-HCl、pH 7.8,调节至pH 6.3。
将所得纯化溶液添加到用Solvent A(10mmol/L磷酸钠缓冲液,pH 6.3)平衡的SP TOYOPERL 650M柱(東ソ一、26mmI.D.×22.3cmH.=118.3mL-树脂)中。在以下所示的溶液和梯度中通过抗体表面电荷差进行分离。
溶剂A:20mmol/L乙酸钠缓冲液,pH6.0
溶剂B:20mmol/L乙酸钠缓冲液,1mol/L NaCl,pH6.0
流速:10mL/分钟(113cm/小时)只在洗脱时为5.3mL/分钟(60cm/小时)
梯度:0→15%B 台阶梯度 3柱容积(CV)冲洗液体
15→35%B 梯度 6CV
35→50%B 梯度 10CV
50→100%B 梯度 3CV
100%B 台阶梯度 4CV冲洗液体
洗脱的结果显示,获得了检测出的三个峰,回收了两种同源二聚体(hA69-PF、hB26-PF)和一种杂合二聚体——双特异性抗体BiAb。
[实施例6]制备抗体的等电聚焦电泳分析
ATF是作为组织因子的单克隆抗体获得、具有人IgG4恒定区的人源化抗体。对于ATF的由来,在WO99/051743中有详细记载,H链可变区和L链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.13、SEQ IDNO.14所示。对于ATF、以及实施例5中制备的hA69-PF、BiAb、hB26-PF、实施例3中制备的hA69-N97R、hA69-p18、hB26-e、hB26-p15,为了对由于可变区氨基酸序列不同而导致的表面电荷变化、以及氨基酸变异导致的表面电荷的变化进行评价,实施等电聚焦电泳分析。
ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF、以及人源化A69抗体hA69-N97R及其变异体hA69-p18、以及人源化B26抗体hB26-F123e4及其变异体hB26-p15的等电聚焦电泳如下进行。使用Phastsystem Cassette(Amercham Bioscience制备),用以下的溶胀液使Phast-Gel Dry IEF(Amercham Bioscience制备)凝胶溶胀约30分钟。
MilliQ水 1.5mL
Pharmalyte 5-8用于IEF(Amercham Bioscience制备) 50μL
Pharmalyte 8-10.5用于IEF(Amercham Bioscience制备) 50μL
使用溶胀的凝胶,通过Phastsystem(Amercham Bioscience制备),按照以下程序进行电泳。样品是在步骤2添加到凝胶中。pI标记使用pl校正曲线试剂盒(Amersham Biosciences)。
步骤1:2000V 2.5mA 3.5W 15℃ 75Vh
步骤2:200V 2.5mA 3.5W 15℃ 15Vh
步骤3:2000V 2.5mA 3.5W 15℃ 410Vh
电泳后的凝胶用20%TCA固定,然后用银染试剂盒、蛋白质(Amersham Biosciences),按照试剂盒所附的说明书进行银染。染色后,由pI标记的已知等电点计算样品的等电点。等电聚焦电泳的分析结果如图3所示。由pI标记制备的pI和移动率的校正曲线以及由此计算的等电点如图4所示。由于存在来自抗体的电荷异质性,因此各样品基于主条带的移动率来计算等电点。
由此,根据可变区氨基酸序列不同导致的表面电荷的变化、以及氨基酸变异导致的表面电荷的变化,观察到pI的变化。hB26-PF约为9.2,BiAb约为8.7,hA69-PF约为8.0,ATF约为7.2,hA69-N97R约为8.9,hA69-p18约为8.5,hB26-F123e4约为8.7,hB26-p15约为9.0。hA69-N97R和hA69-p18、hA69-PF同样是人源化抗体可变区变异,与hA69-N97R比较,hA69-PF中获得了约0.9pI的变化,与hB26-F123e4比较,hB26-p15带来了约0.3pI的变化。本研究中,由于可变区氨基酸序列的不同而使等电点发生变化,进一步通过选择的可变区的H10、H12、H23、H39、H43、H97、H105的表面氨基酸的电荷性改变,可以使等电点变化。
[实施例7]人源化A69抗体及其变异体以及人源化B26抗体及其变异体的结合活性评价
为了评价人源化A69抗体及其变异体的功能,按照以下方法评价与作为抗原的因子IXa的结合活性。人源化A69抗体(hA69a)及其变异体(hA69-N97R)的评价如下进行。将用包被缓冲液(100mM碳酸氢钠,pH 9.6,0.02%叠氮化钠)稀释为1μg/mL的因子Ixaβ(EnzymeResearch Labratories)以100μL/孔分注到Nunc-Immuno板(Nunc-ImmunoTM 96MicroWellTM MaxiSorpTM(Nalge NuncInterantional)),在4℃下温育过夜。用含有吐温(R)20的PBS(-)洗涤3次,然后用稀释缓冲液(50mM Tris-HCl、pH 8.1,1%牛血清白蛋白,1mM MgCl2,0.15M NaCl,0.05%吐温(R)20,0.02%叠氮化钠)将板在室温下封闭2小时。除去缓冲液,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释的纯化抗体,在室温下温育1小时。将板洗涤3次,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释为1/4000的碱性磷酸酶标记山羊抗小鼠IgG(BIOSOURCE),在室温下温育1小时。将板洗涤5次,添加100μL/孔显色底物(Sigma),在室温下温育30分钟。用微量板读板仪型号3550(Bio-Rad Laboratories)测定405nm(对照655nm)的吸光度。
实施例8中使用的变异抗体(hA69-N97R、hA69-p18、hA69-PF)如下进行评价。将用包被缓冲液(0.05M碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液,pH9.6)稀释为1μg/mL的因子Ixa(Enzyme Research Labratories)以100μL/孔分注到Nunc-Immuno板(Nunc-ImmunoTM 96MicroWellTMMaxiSorpTM(Nalge Nunc Interantional)),在4℃下温育过夜。用含有0.05%吐温(R)20的PBS(-)洗涤3次,然后以200μL/孔将稀释缓冲液(Tris盐缓冲液、吐温20,pH 8.0(SIGMA),1%牛血清白蛋白、0.02%叠氮化钠)添加到板中,在室温下封闭2小时。除去缓冲液,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释的纯化抗体,在4℃下温育过夜。将板洗涤3次,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释为1/500的碱性磷酸酶标记小鼠抗人IgG4(Southern Biotechnology),在室温下温育2小时。将板洗涤5次,添加100μL/孔BluePhos Microwell磷酸酶底物系统(Kirkegaard & Perry Laboratories)作为底物,在室温下温育约30分钟。用微量板读板仪型Vmax(Molecular Devices)于650nm测定。结果如图5所示,由于改变表面电荷而使可变区变异的抗体与变异前的抗体显示同等的结合活性。
为了评价人源化B26抗体(hB26-F123e4)及其变异体(hB26-p15)的功能,按照以下方法评价与作为抗原的因子X的结合活性。将用包被缓冲液(100mM碳酸氢钠,pH 9.6,0.02%叠氮化钠)稀释为1μg/mL的因子X(Enzyme Research Labratories)以100μL/孔分注到Nunc-Immuno板(Nunc-ImmunoTM 96MicroWellTM MaxiSorpTM(NalgeNunc Interantional)),在4℃下温育过夜。用含有吐温(R)20的PBS(-)洗涤3次,然后用稀释缓冲液(50mM Tris-HCl、pH 8.1,1%牛血清白蛋白,1mM MgCl2,0.15M NaCl,0.05%吐温(R)20,0.02%叠氮化钠)将板在室温下封闭2小时。除去缓冲液,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释的纯化抗体,在室温下温育1小时。将板洗涤3次,然后添加100μL/孔用稀释缓冲液稀释为1/4000的碱性磷酸酶标记山羊抗小鼠IgG(BIOSOURCE),在室温下温育1小时。将板洗涤5次,添加100μL/孔显色底物(Sigma),在室温下温育30分钟。用微量板读板仪型号3550(Bio-Rad Laboratories)测定405nm(对照655nm)的吸光度。结果如图6所示,由于改变表面电荷而使可变区变异的抗体与变异前的抗体显示同等的结合活性。
以上显示,本实施例的可变区的变异对于抗体与抗原的结合没有影响。
[实施例8]制备抗体的体内动力学评价
8-1使用小鼠的动力学实验
ATF是作为人组织因子的单克隆抗体而获得、具有人IgG4的恒定区的人源化抗体。关于ATF的由来在WO99/051743中有详细记述,分别以SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14表示H链可变区和L链可变区的氨基酸序列。对于ATF、以及实施例5中制备的hA69-PF、BiAb、hB26-PF、实施例3中制备的hA69-N97R、hA69-p18、hB26-e、hB26-p15,评价其在小鼠(C57BL/6J,Charles River,Japan)体内的动力学。将ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF以5mg/kg静脉内单次给予小鼠(C57BL/6J,Charles River,Japan),在给予前和给予后15分钟、2小时、8小时、1天、2天、4天、7天、11天、14天、21天、28天进行采血。采集的血液立即以4℃、15,000rpm离心15分钟,获得血浆。分离的血浆在实施测定之前一直保存在设定为-20℃以下的冰箱中。同样,以1mg/kg将hA69-N97R、、hA69-p18、hB26-F123e4、hB26-p15静脉内单次给予小鼠(C57BL/6J,日本チャ一ルズリバ一),在给予前和给予后15分钟、2小时、8小时、1天、2天、5天、7天、9天、14天、21天、28天进行采血。采集的血液立即以4℃、15,000rpm离心15分钟,获得血浆。分离的血浆在实施测定之前一直保存在设定为-20℃以下的冰箱中。
8-2通过ELISA法测定血浆中浓度
小鼠血浆中浓度测定通过ELISA法测定。血浆中的浓度是制备6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/mL的校正曲线试样。校正曲线试样和小鼠血浆测定试样分注到用抗人IgG(γ链特异性)F(ab′)2(Sigma制备)固定的免疫板(Nunc-Immuno板,MaxiSorp(Nalge nuncInternational制备))中,在室温下静置1小时,然后依次与山羊抗人IgG-BIOT(Southern Biotechnology Associates制备)和链霉抗生物素-碱性磷酸酶偶联剂(Roche Diagnostics制备)依次反应,使用BluePhosMicrowell磷酸酶底物系统(Kirkegaard & Perry Laboratories制备)作为底物进行显色反应,通过微量板读板仪测定650nm的吸光度。小鼠血浆中浓度是使用分析软件SOFTmax PRO(Molecular devices制备),由校正曲线的吸光度计算。ATF、hA69-PF、BiAb、hB26-PF的血浆中浓度的变化如图7所示。
8-3药物动力数据的计算方法
通过药物动力分析软件WinNonlin(Pharsight制备),对所得血浆中浓度变化数据进行非模型依赖性分析,计算药物动力学的参数(清除率(CL)、半衰期(T1/2))。T1/2是由最终三点或WinNonlin自动设定的最终相血浆中浓度计算。所得药物动力学参数如表2所示。
[表2]
对于pI,对各抗体的清除率(CL)、半衰期(T1/2)进行制图,如图8所示。发现:使用的各抗体中,不管是否具有相同恒定区序列,pI与清除率(CL)和半衰期(T1/2)显示高的相关关系,pI越低则清除率降低,具有较长的血液半衰期。如上所述,即使为同一恒定区序列,根据pI值的不同也可以调控血液半衰期,即,使pI降低则可以使血液半衰期延长,使pI升高则可以使半衰期缩短。实际上,在本实施例中,可以使hA69-N97R可变区的表面氨基酸变异(变异的位置如表3所示)、使pI降低,由此可以延长血液半衰期;使hB26-F123e4可变区的表面氨基酸变异(变异位置如表4所示)、使pI升高,由此可以缩短血液半衰期。由此,通过使可变区的表面氨基酸(具体例子有H10、H12、H23、H39、H43、H97、H105)进行电荷改变,可以调控IgG的血液动力学。
[表3]
[表4]
上述表3和表4中,Pyr(Q)是被焦谷氨酰化的N末端的谷氨酰胺残基,N末端的氨基被保护,因此,在Pyr(Q)和E中电荷没有大的差异。另外,表3和表4中,通过氨基酸置换而使pI发生变化的位置用*表示。
本发明发现,通过置换可变区的表面氨基酸、使IgG的pI降低,可以延长IgG的血液半衰期,相反,通过置换可变区的表面氨基酸、使IgG的pI升高,可以缩短IgG的血液半衰期。
在使用小鼠的血液动力学研究中,非专利文献(Nat Biotechnol.1997;15:637-640)中公开:使存在于恒定区的Fc的氨基酸变异、提高与FcRn的亲和性,可以使血液半衰期(T1/2)延长约1.5倍;本发明中,hA69-PF与hA69-N97R比较时,在相同的恒定区序列中,通过使可变区的表面氨基酸变异、使pI降低,可以使血液半衰期(T1/2)延长约1.5倍。并且,hA69-PF、ATF与hA69-N97R比较,pI最低的ATF的T1/2比hA69-N97R延长约2.1倍,由此,通过使存在于hA69-N97R的可变区的表面氨基酸进一步变异、使pI降低,可以进一步延长hA69-N97R的血液半衰期。将本实施例中使用的抗体进行比较,则pI最高的hB26-PF和最低的ATF的血液半衰期约有2.4倍的差异,通过可变区氨基酸变异来调控血液动力学,这与现有的调控技术比较,有望获得高的效果。另外,从免疫原性的角度考虑,向恒定区导入的人工氨基酸置换越少越好,通过使可变区的表面氨基酸变异来调控血液半衰期的本发明在药物的开发中有用。
产业实用性
本发明的方法的优选方案中,氨基酸的置换在可变区进行,因此与使恒定区变异的以往的方法相比,免疫原性的风险小。另外,在使血液半衰期延长的调控中,比以往的使恒定区变异的方法显示更大的效果。另外,在可变区,无需使结构、功能(活性)发生改变,通过控制表面电荷即可以调控IgG抗体等含有FcRn结合区的多肽的血液半衰期。通过采用本发明的方法,可以实际保有活性地获得血液半衰期得到控制的含有FcRn结合区的多肽。
序列表
<110>CHUGAI SEIYAKU KABUSHIKI KAISHA
<120>调节抗体在血液中的动力学的方法
<130>C1-A0605P
<150>JP 2006-097796
<151>2006-03-31
<160>18
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>354
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的核苷酸序列
<400>1
caggtccagc ttgtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg cctctggagg caccttcagt gactactata tgcactgggt gcgccaggcc 120
cccggacaag ggcttgagtg gatgggatac attaatccta gcagtggtta tactaagtac 180
aatcggaagt tcagggacag agtcaccatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggctgtgt attactgtgc gagagggggt 300
aacggttact accttgacta ctggggccag ggcaccacgg tcaccgtctc ctca 354
<210>2
<211>118
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>2
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys Phe
50 55 60
Arg Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Asn Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210>3
<211>357
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的核苷酸序列
<400>3
caggtgcagc tggtgcagtc tggacctgac gtgaagaagc cgggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cctctggcta catgttttcc gacaacaaca tggactgggc gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggagat attaatacta aaagtggtgg ttctatctac 180
aaccagaagt tcaagggcag agtcatcatg accatagaca aatccacggg cacagcctac 240
atggaattga ggagcctgag atcagacgac acggccatat attactgtgc gaggaggagg 300
agctacggct actactttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357
<210>4
<211>119
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>4
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Met Phe Ser Asp Asn
20 25 30
Asn Met Asp Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Ile Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>5
<211>318
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的核苷酸序列
<400>5
gacatcgtga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgca aggccagtca gaatgtgggg actgctgtag cctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattcg gcatcctacc ggtacagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtcgata tgggacagat ttcactctca ccatctcaag cttgcaacct 240
gaagatttag caacttacta ctgtcagcaa tatagcaact atatcacgtt cggcggaggg 300
accaaggtgg agatcaaa 318
<210>6
<211>106
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>6
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Tyr Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210>7
<211>118
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>7
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys Phe
50 55 60
Arg Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Asn Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Glu Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210>8
<211>106
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>8
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Tyr Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210>9
<211>118
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>9
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys Phe
50 55 60
Arg Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Arg Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210>10
<211>119
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>10
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Met Phe Ser Asp Asn
20 25 30
Asn Met Asp Trp Ala Arg Lys Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Ile Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>11
<211>118
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>11
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Thr Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys Phe
50 55 60
Arg Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Glu Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210>12
<211>119
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>人工合成的肽序列
<400>12
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Gln Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Asn
20 25 30
Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Ile Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>13
<211>463
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>13
Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val Gln Ser Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Val Leu Ala Arg
20 25 30
Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Tyr Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Gly Asn Asp Pro Ala Asn Gly His Ser Met Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Val Phe Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Ser Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
130 135 140
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
145 150 155 160
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
165 170 175
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
180 185 190
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
195 200 205
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
210 215 220
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
225 230 235 240
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
245 250 255
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
260 265 270
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
275 280 285
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
290 295 300
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
305 310 315 320
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
325 330 335
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
340 345 350
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
355 360 365
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
370 375 380
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
385 390 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
405 410 415
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
420 425 430
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
435 440 445
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
450 455 460
<210>14
<211>236
<212>PRT
<213>智人
<400>14
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser
35 40 45
Gln Asp Ile Lys Ser Phe Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Ser Leu Ile Tyr Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Asp Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Gly Glu Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
180 185 190
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
210 215 220
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210>15
<211>119
<212>PRT
<213>小鼠(Mus musculus)
<400>15
Met Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly
1 5 10 15
Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp
20 25 30
Tyr Tyr Met His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Leu Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys
50 55 60
Phe Arg Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Met Gln Leu Thr Ser Leu Thr Tyr Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gly Gly Asn Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210>16
<211>120
<212>PRT
<213>小鼠
<400>16
Met Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly
1 5 10 15
Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp
20 25 30
Asn Asn Met Asp Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Lys
50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ile Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210>17
<211>107
<212>PRT
<213>智人
<400>17
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Leu Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Tyr Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
100 105
<210>18
<211>108
<212>PRT
<213>小鼠
<400>18
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105
Claims (3)
1.一种血液药代动力学得到调控的IgG抗体的制备方法,其中该方法包含以下步骤:
(a)对编码抗体的核酸进行变异以改变至少一个选自下列氨基酸的氨基酸残基的电荷:位于所述抗体重链可变区的H10,H12,H23,H39,H43和H105;
(b)培养宿主细胞,以使该核酸表达;以及
(c)从宿主细胞培养物中回收所述抗体;
其中所述变异的氨基酸残基选自以下(a)或(b)任一组中的氨基酸残基:
(a)谷氨酸(E)和天冬氨酸(D);以及
(b)赖氨酸(K)、精氨酸(R)和组氨酸(H)。
2.权利要求1所述的方法,其中,上述血液药代动力学的调控是对血液半衰期、平均血液停留时间、血液清除中任一项参数的调控。
3.权利要求1-2中任一项所述的方法,其中,步骤(a)中氨基酸残基电荷的改变通过氨基酸置换进行。
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US11053316B2 (en) | 2013-01-14 | 2021-07-06 | Xencor, Inc. | Optimized antibody variable regions |
US10487155B2 (en) | 2013-01-14 | 2019-11-26 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
US10131710B2 (en) | 2013-01-14 | 2018-11-20 | Xencor, Inc. | Optimized antibody variable regions |
US9605084B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-28 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
US10968276B2 (en) | 2013-03-12 | 2021-04-06 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD3 variable regions |
CA2897987A1 (en) | 2013-01-15 | 2014-07-24 | Xencor, Inc. | Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies |
US10858417B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-12-08 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
EP2970486B1 (en) | 2013-03-15 | 2018-05-16 | Xencor, Inc. | Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions |
US10106624B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-10-23 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
US10519242B2 (en) | 2013-03-15 | 2019-12-31 | Xencor, Inc. | Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins |
SG11201508170TA (en) | 2013-04-02 | 2015-11-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fc REGION VARIANT |
WO2014200018A1 (ja) | 2013-06-11 | 2014-12-18 | 独立行政法人 国立精神・神経医療研究センター | 再発寛解型多発性硬化症(rrms)患者の治療予後予測方法、及び新規治療適応判断方法 |
KR20160022354A (ko) | 2013-06-24 | 2016-02-29 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 인간화 항에피레귤린 항체를 유효성분으로서 포함하는 선암 이외의 비소세포폐암의 치료제 |
KR102441231B1 (ko) | 2013-09-27 | 2022-09-06 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 폴리펩티드 이종 다량체의 제조방법 |
EP3940065A1 (en) | 2013-09-30 | 2022-01-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing antigen-binding molecule using modified helper phage |
EP3074772A2 (en) * | 2013-11-29 | 2016-10-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Antibody selection apparatus and methods |
AU2014370873B2 (en) | 2013-12-27 | 2020-06-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for purifying antibody having low isoelectric point |
NZ631007A (en) | 2014-03-07 | 2015-10-30 | Alexion Pharma Inc | Anti-c5 antibodies having improved pharmacokinetics |
HUE048734T2 (hu) | 2014-03-28 | 2020-08-28 | Xencor Inc | CD38-hoz és CD3-hoz kötõdõ bispecifikus ellenanyagok |
PL3130606T3 (pl) | 2014-04-07 | 2022-02-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Przeciwciała dwuswoiste aktywujące układ odpornościowy |
WO2015174439A1 (ja) | 2014-05-13 | 2015-11-19 | 中外製薬株式会社 | 免疫抑制機能を有する細胞に対するt細胞リダイレクト抗原結合分子 |
KR101644078B1 (ko) | 2014-09-25 | 2016-07-29 | 린노알미늄 주식회사 | 케이블 트레이의 타격 결합형 조립방법 |
TWI700300B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第viii凝血因子(fviii)機能替代活性的物質之抗體 |
MA40764A (fr) | 2014-09-26 | 2017-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité |
TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定fviii的反應性之方法 |
MA41019A (fr) | 2014-11-26 | 2021-05-05 | Xencor Inc | Anticorps hétérodimériques se liant aux antigènes cd3 et cd38 |
US10259887B2 (en) | 2014-11-26 | 2019-04-16 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
JP6696982B2 (ja) | 2014-11-26 | 2020-05-20 | ゼンコー・インコーポレイテッドXencor、 Inc. | Cd3および腫瘍抗原に結合するヘテロ二量体抗体 |
AR103161A1 (es) | 2014-12-19 | 2017-04-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos antimiostatina y regiones fc variantes así como métodos de uso |
SI3233921T1 (sl) | 2014-12-19 | 2022-01-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Protitelesa proti C5 in postopki za uporabo |
WO2016105450A2 (en) | 2014-12-22 | 2016-06-30 | Xencor, Inc. | Trispecific antibodies |
KR20170110129A (ko) | 2015-02-05 | 2017-10-10 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용 |
AU2016224409B2 (en) | 2015-02-27 | 2021-01-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Composition for treating IL-6-related diseases |
US10227411B2 (en) | 2015-03-05 | 2019-03-12 | Xencor, Inc. | Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions |
US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
PL3299810T3 (pl) | 2015-05-19 | 2021-12-13 | National Center Of Neurology And Psychiatry | Sposób określania zastosowania nowej terapii u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym (sm) |
WO2017021294A1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-02-09 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Antibody variants |
CN108271372B (zh) | 2015-09-18 | 2021-07-09 | 中外制药株式会社 | Il-8-结合抗体及其应用 |
WO2017053469A2 (en) | 2015-09-21 | 2017-03-30 | Aptevo Research And Development Llc | Cd3 binding polypeptides |
EP3378487B1 (en) | 2015-11-18 | 2022-03-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Combination therapy using t cell redirection antigen binding molecule against cell having immunosuppressing function |
JP6925278B2 (ja) | 2015-11-18 | 2021-08-25 | 中外製薬株式会社 | 液性免疫応答の増強方法 |
JP7058219B2 (ja) | 2015-12-07 | 2022-04-21 | ゼンコア インコーポレイテッド | Cd3及びpsmaに結合するヘテロ二量体抗体 |
EP3394098A4 (en) | 2015-12-25 | 2019-11-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTI-MYOSTATIN ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
US20200270363A1 (en) * | 2015-12-25 | 2020-08-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody having enhanced activity, and method for modifying same |
EP3398965A4 (en) | 2015-12-28 | 2019-09-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD FOR PROMOTING THE EFFICACY OF PURIFYING A POLYPEPTIDE CONTAINING AN FC REGION |
TW202214700A (zh) | 2016-03-14 | 2022-04-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 用於癌之治療的細胞傷害誘導治療劑 |
WO2017201731A1 (en) | 2016-05-27 | 2017-11-30 | Beijing Vdjbio Co., Ltd. | Antibodies, composition and kits comprising same, and methods of use thereof |
EP4257613A3 (en) | 2016-06-14 | 2023-12-13 | Xencor, Inc. | Bispecific checkpoint inhibitor antibodies |
MX2018014375A (es) | 2016-06-17 | 2019-04-22 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos antimiostatina y metodos de uso. |
RU2019102008A (ru) | 2016-06-28 | 2020-07-28 | Ксенкор, Инк. | Гетеродимерные антитела, которые связывают рецептор соматостатина 2-го типа |
EP3494991A4 (en) | 2016-08-05 | 2020-07-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING DISEASES RELATING TO IL-8 |
US10793632B2 (en) | 2016-08-30 | 2020-10-06 | Xencor, Inc. | Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors |
MA46200A (fr) | 2016-09-06 | 2019-07-17 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Procédés d'utilisation d'un anticorps bispécifique qui reconnaît le facteur de coagulation ix et/ou le facteur de coagulation ix activé et le facteur de coagulation x et/ou le facteur de coagulation x activé |
SG10201607778XA (en) | 2016-09-16 | 2018-04-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use |
PE20191033A1 (es) | 2016-10-14 | 2019-08-05 | Xencor Inc | PROTEINAS DE FUSION FC HETERODIMERICAS IL 15/IL 15R(alfa) |
JP7191833B2 (ja) | 2017-01-30 | 2022-12-19 | 中外製薬株式会社 | 抗スクレロスチン抗体およびその使用 |
CA3059133A1 (en) | 2017-04-21 | 2018-10-25 | Staten Biotechnology B.V. | Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof |
EP3620531A4 (en) | 2017-05-02 | 2021-03-17 | National Center of Neurology and Psychiatry | METHOD OF PREDICTION AND EVALUATION OF THERAPEUTIC EFFECT IN DISEASES RELATING TO IL-6 AND NEUTROPHILS |
WO2019006472A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Xencor, Inc. | TARGETED HETETRODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15 / IL-15RA AND ANTIGEN-BINDING DOMAINS |
KR20200029469A (ko) | 2017-07-18 | 2020-03-18 | 쿄와 기린 가부시키가이샤 | 항인간 ccr1 모노클로날 항체 |
AU2018306612C1 (en) | 2017-07-27 | 2023-11-09 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | High concentration anti-C5 antibody formulations |
AR113142A1 (es) | 2017-09-29 | 2020-01-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Moléculas de unión al antígeno multiespecíficas que tienen actividad de sustitución de la función de cofactor del factor viii de coagulación de sangre (fviii), y formulaciones farmacéuticas que contienen dicha molécula como ingrediente activo |
US11692037B2 (en) | 2017-10-20 | 2023-07-04 | Hyogo College Of Medicine | Anti-IL-6 receptor antibody-containing medicinal composition for preventing post-surgical adhesion |
AU2018361957B2 (en) | 2017-10-31 | 2023-05-25 | Staten Biotechnology B.V. | Anti-ApoC3 antibodies and methods of use thereof |
US10538583B2 (en) | 2017-10-31 | 2020-01-21 | Staten Biotechnology B.V. | Anti-APOC3 antibodies and compositions thereof |
KR20200085828A (ko) | 2017-11-08 | 2020-07-15 | 젠코어 인코포레이티드 | 신규의 항-pd-1 서열을 사용한 이중특이적 및 단일특이적 항체 |
US10981992B2 (en) | 2017-11-08 | 2021-04-20 | Xencor, Inc. | Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors |
MX2020006322A (es) | 2017-12-19 | 2020-09-18 | Xencor Inc | Proteinas de fusion il-2 fc modificadas. |
CA3093729A1 (en) | 2018-03-15 | 2019-09-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies having cross-reactivity to zika virus and methods of use |
CA3096052A1 (en) | 2018-04-04 | 2019-10-10 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein |
CA3097593A1 (en) | 2018-04-18 | 2019-10-24 | Xencor, Inc. | Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof |
CA3097741A1 (en) | 2018-04-18 | 2019-10-24 | Xencor, Inc. | Tim-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and tim-3 antigen binding domains |
KR20210027295A (ko) | 2018-06-26 | 2021-03-10 | 쿄와 기린 가부시키가이샤 | 세포 부착 분자3에 결합하는 항체 |
EP3816291A4 (en) | 2018-06-26 | 2022-03-16 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | CHONDROITIN SULFATE PROTEOGLYCAN-5 BINDING ANTIBODIES |
AU2019355971A1 (en) | 2018-10-03 | 2021-05-06 | Xencor, Inc. | IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins |
MX2021010390A (es) | 2019-03-01 | 2021-11-17 | Xencor Inc | Anticuerpos heterodimericos que se unen a enpp3 y cd3. |
JPWO2020209318A1 (zh) | 2019-04-10 | 2020-10-15 | ||
US11919956B2 (en) | 2020-05-14 | 2024-03-05 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3 |
MX2023001962A (es) | 2020-08-19 | 2023-04-26 | Xencor Inc | Composiciones anti-cd28. |
CA3212665A1 (en) | 2021-03-09 | 2022-09-15 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6 |
US11859012B2 (en) | 2021-03-10 | 2024-01-02 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and GPC3 |
WO2023057871A1 (en) | 2021-10-04 | 2023-04-13 | Novartis Ag | Surfactant stabilizers |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998003546A1 (en) * | 1996-07-19 | 1998-01-29 | Amgen Inc. | Analogs of cationic proteins |
Family Cites Families (570)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1073811A (en) | 1913-04-24 | 1913-09-23 | Carl G Miller | Fly-trap. |
JPS5144499B1 (zh) | 1970-08-29 | 1976-11-29 | ||
JPS5334319B2 (zh) | 1971-12-28 | 1978-09-20 | ||
JPS5717624B2 (zh) | 1974-04-17 | 1982-04-12 | ||
US4208479A (en) | 1977-07-14 | 1980-06-17 | Syva Company | Label modified immunoassays |
US4474893A (en) | 1981-07-01 | 1984-10-02 | The University of Texas System Cancer Center | Recombinant monoclonal antibodies |
US4444878A (en) | 1981-12-21 | 1984-04-24 | Boston Biomedical Research Institute, Inc. | Bispecific antibody determinants |
JPS58201994A (ja) | 1982-05-21 | 1983-11-25 | Hideaki Hagiwara | 抗原特異的ヒト免疫グロブリンの生産方法 |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
JPH0234615Y2 (zh) | 1986-08-08 | 1990-09-18 | ||
US5260203A (en) * | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
JPS63149900A (ja) | 1986-12-15 | 1988-06-22 | Toshiba Corp | 半導体メモリ |
US4851341A (en) | 1986-12-19 | 1989-07-25 | Immunex Corporation | Immunoaffinity purification system |
US5004697A (en) | 1987-08-17 | 1991-04-02 | Univ. Of Ca | Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier |
JPH01144991A (ja) | 1987-12-02 | 1989-06-07 | Kagaku Oyobi Ketsusei Riyouhou Kenkyusho | 血液凝固第8因子の精製方法 |
US5670373A (en) * | 1988-01-22 | 1997-09-23 | Kishimoto; Tadamitsu | Antibody to human interleukin-6 receptor |
US5322678A (en) * | 1988-02-17 | 1994-06-21 | Neorx Corporation | Alteration of pharmacokinetics of proteins by charge modification |
US6010902A (en) | 1988-04-04 | 2000-01-04 | Bristol-Meyers Squibb Company | Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity |
JPH0250497A (ja) | 1988-08-12 | 1990-02-20 | Tokin Corp | 電波吸収体とその製造方法 |
NZ230786A (en) | 1988-09-28 | 1991-11-26 | Lilly Co Eli | A method of reducing the heterogeneity of secreted monoclonal antibodies |
US5126250A (en) * | 1988-09-28 | 1992-06-30 | Eli Lilly And Company | Method for the reduction of heterogeneity of monoclonal antibodies |
IL89491A0 (en) | 1988-11-17 | 1989-09-10 | Hybritech Inc | Bifunctional chimeric antibodies |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
GB8916400D0 (en) | 1989-07-18 | 1989-09-06 | Dynal As | Modified igg3 |
JPH0636741B2 (ja) | 1989-11-08 | 1994-05-18 | 帝人株式会社 | ヒト・プロテインcの分離方法 |
EP0505357B1 (en) | 1989-12-11 | 1999-03-10 | Immunomedics, Inc. | Method for antibody targeting of diagnostic or therapeutic agents |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US5130129A (en) | 1990-03-06 | 1992-07-14 | The Regents Of The University Of California | Method for enhancing antibody transport through capillary barriers |
TW212184B (zh) | 1990-04-02 | 1993-09-01 | Takeda Pharm Industry Co Ltd | |
JPH05184383A (ja) | 1990-06-19 | 1993-07-27 | Dainabotsuto Kk | 二重特異性抗体 |
EP0585287B1 (en) | 1990-07-10 | 1999-10-13 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
JPH05199894A (ja) | 1990-08-20 | 1993-08-10 | Takeda Chem Ind Ltd | 二重特異性抗体および抗体含有薬剤 |
EP0546073B1 (en) | 1990-08-29 | 1997-09-10 | GenPharm International, Inc. | production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
WO1993012227A1 (en) | 1991-12-17 | 1993-06-24 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
ES2134212T3 (es) | 1991-04-25 | 1999-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo humano reconstituido contra el receptor de la interleuquina 6 humano. |
JPH05304992A (ja) | 1991-06-20 | 1993-11-19 | Takeda Chem Ind Ltd | ハイブリッド・モノクローナル抗体および抗体含有薬剤 |
US5468634A (en) * | 1991-06-24 | 1995-11-21 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Axl oncogene |
US6136310A (en) | 1991-07-25 | 2000-10-24 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Recombinant anti-CD4 antibodies for human therapy |
WO1993006213A1 (en) | 1991-09-23 | 1993-04-01 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
DE69233528T2 (de) | 1991-11-25 | 2006-03-16 | Enzon, Inc. | Verfahren zur Herstellung von multivalenten antigenbindenden Proteinen |
ATE408012T1 (de) | 1991-12-02 | 2008-09-15 | Medical Res Council | Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken |
US5667988A (en) | 1992-01-27 | 1997-09-16 | The Scripps Research Institute | Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains |
JPH05203652A (ja) | 1992-01-28 | 1993-08-10 | Fuji Photo Film Co Ltd | 抗体酵素免疫分析法 |
JPH05213775A (ja) | 1992-02-05 | 1993-08-24 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | Bfa抗体 |
US6749853B1 (en) | 1992-03-05 | 2004-06-15 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment |
EP0656941B1 (en) | 1992-03-24 | 2005-06-01 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
US6129914A (en) | 1992-03-27 | 2000-10-10 | Protein Design Labs, Inc. | Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line |
US5744446A (en) | 1992-04-07 | 1998-04-28 | Emory University | Hybrid human/animal factor VIII |
EP0640094A1 (en) | 1992-04-24 | 1995-03-01 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells |
NZ255101A (en) | 1992-07-24 | 1997-08-22 | Cell Genesys Inc | A yeast artificial chromosome (yac) vector containing an hprt minigene expressible in murine stem cells and genetically modified rodent therefor |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
ZA936260B (en) | 1992-09-09 | 1994-03-18 | Smithkline Beecham Corp | Novel antibodies for conferring passive immunity against infection by a pathogen in man |
BR9204244A (pt) | 1992-10-26 | 1994-05-03 | Cofap | Ferro fundido cinzento |
EP0671951A4 (en) | 1992-12-01 | 1997-05-21 | Protein Design Labs Inc | HUMANIZED ANTIBODIES REACTING WITH L-SELECTIN. |
ATE199392T1 (de) | 1992-12-04 | 2001-03-15 | Medical Res Council | Multivalente und multispezifische bindungsproteine, deren herstellung und verwendung |
US7393682B1 (en) | 1993-03-19 | 2008-07-01 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Polynucleotides encoding promyostatin polypeptides |
JPH09507829A (ja) | 1993-03-19 | 1997-08-12 | ジョーンズ ホプキンス ユニバーシティー スクール オブ メディシン | 増殖分化因子−8 |
GB9313509D0 (en) | 1993-06-30 | 1993-08-11 | Medical Res Council | Chemisynthetic libraries |
EP0660937A1 (en) | 1993-07-01 | 1995-07-05 | Dade International Inc. | Process for the preparation of factor x depleted plasma |
GB9314271D0 (en) | 1993-07-09 | 1993-08-18 | Inst Of Cancer The Research | Cell growth factor receptors |
UA40577C2 (uk) | 1993-08-02 | 2001-08-15 | Мерк Патент Гмбх | Біспецифічна молекула, що використовується для лізису пухлинних клітин, спосіб її одержання, моноклональне антитіло (варіанти), фармацевтичний препарат, фармацевтичний набір (варіанти), спосіб видалення пухлинних клітин |
IL107742A0 (en) | 1993-11-24 | 1994-02-27 | Yeda Res & Dev | Chemically-modified binding proteins |
EP0732404A4 (en) | 1993-12-03 | 1997-07-30 | Asahi Chemical Ind | NEW EXPRESSION DETECTION VECTOR |
EP0731842A1 (en) | 1993-12-03 | 1996-09-18 | Medical Research Council | Recombinant binding proteins and peptides |
US6074642A (en) | 1994-05-02 | 2000-06-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis |
US5945311A (en) * | 1994-06-03 | 1999-08-31 | GSF--Forschungszentrumfur Umweltund Gesundheit | Method for producing heterologous bi-specific antibodies |
DE4419399C1 (de) | 1994-06-03 | 1995-03-09 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von heterologen bispezifischen Antikörpern |
US8017121B2 (en) * | 1994-06-30 | 2011-09-13 | Chugai Seiyaku Kabushika Kaisha | Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component |
BR9508402A (pt) | 1994-07-11 | 1997-10-21 | Univ Texas | Ligante de união construção de fator de tecido composição farmacêutica kit e uso de um ligante de união |
JP3865418B2 (ja) | 1994-07-13 | 2007-01-10 | 中外製薬株式会社 | ヒトインターロイキン−8に対する再構成ヒト抗体 |
EP0770628B9 (en) | 1994-07-13 | 2007-02-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Reconstituted human antibody against human interleukin-8 |
US6048972A (en) | 1994-07-13 | 2000-04-11 | Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. | Recombinant materials for producing humanized anti-IL-8 antibodies |
TW416960B (en) | 1994-07-13 | 2001-01-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Reshaped human antibody to human interleukin-8 |
US6309636B1 (en) | 1995-09-14 | 2001-10-30 | Cancer Research Institute Of Contra Costa | Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides |
RU2147443C1 (ru) | 1994-10-07 | 2000-04-20 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Лечебные средства против хронического ревматоидного артрита, содержащие антагонист il-6 в качестве эффективного компонента |
EP2319535A3 (en) | 1994-10-21 | 2011-08-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical composition for treatment of diseases caused by IL-6 production |
EP0794792A1 (en) | 1994-12-02 | 1997-09-17 | Chiron Corporation | Method of promoting an immune response with a bispecific antibody |
US6485943B2 (en) | 1995-01-17 | 2002-11-26 | The University Of Chicago | Method for altering antibody light chain interactions |
US5876950A (en) | 1995-01-26 | 1999-03-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Monoclonal antibodies specific for different epitopes of human GP39 and methods for their use in diagnosis and therapy |
JP3590070B2 (ja) | 1995-02-28 | 2004-11-17 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー | 優れた微生物安定性を有する無炭酸飲料製品の製造 |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
ATE390933T1 (de) | 1995-04-27 | 2008-04-15 | Amgen Fremont Inc | Aus immunisierten xenomäusen stammende menschliche antikörper gegen il-8 |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
ATE283926T1 (de) | 1995-09-11 | 2004-12-15 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Antikörper gegen die alpha-kette von humanem interleukin 5 rezeptor |
MA24512A1 (fr) | 1996-01-17 | 1998-12-31 | Univ Vermont And State Agrienl | Procede pour la preparation d'agents anticoagulants utiles dans le traitement de la thrombose |
DE69731289D1 (de) | 1996-03-18 | 2004-11-25 | Univ Texas | Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten |
JP3032287U (ja) | 1996-06-10 | 1996-12-17 | 幸喜 高橋 | 人 形 |
US20020147326A1 (en) | 1996-06-14 | 2002-10-10 | Smithkline Beecham Corporation | Hexameric fusion proteins and uses therefor |
US7247302B1 (en) | 1996-08-02 | 2007-07-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis |
ES2300113T3 (es) | 1996-08-02 | 2008-06-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Un procedimiento para inhibir toxicidad inducida por inmunoglobulinas que resulta del uso de inmunoglobulinas en terapia y diagnostico in vivo. |
EP0962467A4 (en) | 1996-09-26 | 2002-10-30 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | ANTIBODIES AGAINST HUMAN PARATHORMON RELATED PEPTIDES |
JPH10165184A (ja) | 1996-12-16 | 1998-06-23 | Tosoh Corp | 抗体、遺伝子及びキメラ抗体の製法 |
US5990286A (en) | 1996-12-18 | 1999-11-23 | Techniclone, Inc. | Antibodies with reduced net positive charge |
US6277375B1 (en) | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
DK2011514T3 (da) | 1997-03-21 | 2012-03-26 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Forebyggende eller terapeutisk middel til sensibiliserede-T-celle-medierede sygdomme omfattende IL-6-antagonist som en aktiv bestanddel |
US6884879B1 (en) * | 1997-04-07 | 2005-04-26 | Genentech, Inc. | Anti-VEGF antibodies |
US20070059302A1 (en) * | 1997-04-07 | 2007-03-15 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
FR2761994B1 (fr) | 1997-04-11 | 1999-06-18 | Centre Nat Rech Scient | Preparation de recepteurs membranaires a partir de baculovirus extracellulaires |
US20030207346A1 (en) | 1997-05-02 | 2003-11-06 | William R. Arathoon | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
US20020062010A1 (en) | 1997-05-02 | 2002-05-23 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
JP4213224B2 (ja) | 1997-05-02 | 2009-01-21 | ジェネンテック,インコーポレーテッド | ヘテロマルチマー及び共通成分を有する多重特異性抗体の製造方法 |
DE19725586C2 (de) | 1997-06-17 | 1999-06-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
US5980893A (en) | 1997-07-17 | 1999-11-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Agonist murine monoclonal antibody as a stimulant for megakaryocytopoiesis |
US6207805B1 (en) | 1997-07-18 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Prostate cell surface antigen-specific antibodies |
EP1004315B1 (en) | 1997-08-15 | 2008-05-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preventives and/or remedies containing anti-il-6 receptor neutralizing antibodies for reducing the excretion of urinary protein in systemic lupus erythematosus |
US20020187150A1 (en) * | 1997-08-15 | 2002-12-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preventive and/or therapeutic agent for systemic lupus erythematosus comprising anti-IL-6 receptor antibody as an active ingredient |
US6342220B1 (en) | 1997-08-25 | 2002-01-29 | Genentech, Inc. | Agonist antibodies |
EP1020522B1 (en) | 1997-10-03 | 2007-09-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Natural human antibody |
WO1999047170A1 (fr) * | 1998-03-17 | 1999-09-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agents prophylactiques ou therapeutiques pour affections intestinales inflammatoires renfermant, comme ingredient actif, des antagonistes de il-6 |
EP1068241B1 (en) | 1998-04-02 | 2007-10-10 | Genentech, Inc. | Antibody variants and fragments thereof |
DK1069185T3 (da) | 1998-04-03 | 2011-06-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Humaniseret antistof mod human vævsfaktor (TF) og fremgangsmåde til at konstruere humaniseret antistof |
GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
WO2000009560A2 (en) * | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Abgenix, Inc. | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
CA2352572C (en) * | 1998-12-01 | 2010-04-20 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized antibodies to gamma-interferon |
JP2002534959A (ja) | 1998-12-08 | 2002-10-22 | バイオベーション リミテッド | 免疫原性タンパク質の改変方法 |
HU230769B1 (hu) | 1999-01-15 | 2018-03-28 | Genentech Inc. | Módosított effektor-funkciójú polipeptid-változatok |
US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
US7183387B1 (en) | 1999-01-15 | 2007-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
US6972125B2 (en) * | 1999-02-12 | 2005-12-06 | Genetics Institute, Llc | Humanized immunoglobulin reactive with B7-2 and methods of treatment therewith |
DE60043728D1 (de) | 1999-06-02 | 2010-03-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Neues hämopoietin rezeptorprotein nr10 |
SK782002A3 (en) * | 1999-07-21 | 2003-08-05 | Lexigen Pharm Corp | FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens |
AT411997B (de) | 1999-09-14 | 2004-08-26 | Baxter Ag | Faktor ix/faktor ixa aktivierende antikörper und antikörper-derivate |
SE9903895D0 (sv) | 1999-10-28 | 1999-10-28 | Active Biotech Ab | Novel compounds |
US20020164668A1 (en) * | 2000-04-03 | 2002-11-07 | Durham L. Kathryn | Nucleic acid molecules, polypeptides and uses therefor, including diagnosis and treatment of alzheimer's disease |
US7001768B2 (en) | 2000-04-28 | 2006-02-21 | Sangamo Biosciences, Inc. | Targeted modification of chromatin structure |
MXPA02010801A (es) | 2000-05-03 | 2004-09-06 | Munich Biotech Ag | Agentes diagnosticos, de representacion y terapeuticos cationicos asociados con sitios vasculares activados. |
WO2001090192A2 (en) | 2000-05-24 | 2001-11-29 | Imclone Systems Incorporated | Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production |
AU2001271066A1 (en) | 2000-07-17 | 2002-01-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for screening ligand having biological activity |
AU2011244851A1 (en) | 2000-07-27 | 2011-11-24 | The John Hopkins University School Of Medicine | Promyostatin peptides and methods of using same |
EP1325033B1 (en) | 2000-10-10 | 2009-11-25 | Genentech, Inc. | Inhibition of complement c5 activation for the treatment and prevention of delayed xenograft or acute vascular rejection |
JP4340062B2 (ja) | 2000-10-12 | 2009-10-07 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 粘度の減少した濃縮タンパク質製剤 |
WO2002033073A1 (fr) | 2000-10-20 | 2002-04-25 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anticorps agoniste degrade |
US7320792B2 (en) | 2000-10-25 | 2008-01-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preventives or remedies for psoriasis containing as the active ingredient IL-6 antagonist |
JP4889187B2 (ja) * | 2000-10-27 | 2012-03-07 | 中外製薬株式会社 | Il−6アンタゴニストを有効成分として含有する血中mmp−3濃度低下剤 |
DK1355919T3 (da) | 2000-12-12 | 2011-03-14 | Medimmune Llc | Molekyler med længere halveringstider, sammensætninger og anvendelser deraf |
KR20090010127A (ko) | 2001-03-07 | 2009-01-28 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 하이브리드 이소타입 항체 부분구조를 포함하는 단백질을 위한 발현 기술 |
UA80091C2 (en) | 2001-04-02 | 2007-08-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Remedies for infant chronic arthritis-relating diseases and still's disease which contain an interleukin-6 (il-6) antagonist |
MXPA03009390A (es) * | 2001-04-13 | 2004-01-29 | Biogen Inc | Anticuerpos para integrina vla-1. |
AU2002315857B2 (en) | 2001-06-22 | 2007-07-26 | Kaisha, Chugai Seiyaku Kabushiki | Cell proliferation inhibitors containing anti-glypican 3 antibody |
CA2457461C (en) | 2001-08-17 | 2013-12-24 | Tanox, Inc. | Complement pathway inhibitors binding to c5 and c5a without preventing the formation of c5b |
US20030049203A1 (en) | 2001-08-31 | 2003-03-13 | Elmaleh David R. | Targeted nucleic acid constructs and uses related thereto |
US7320789B2 (en) | 2001-09-26 | 2008-01-22 | Wyeth | Antibody inhibitors of GDF-8 and uses thereof |
MXPA04003798A (es) | 2001-10-25 | 2004-07-30 | Genentech Inc | Composiciones de glicoproteina. |
US20030190705A1 (en) | 2001-10-29 | 2003-10-09 | Sunol Molecular Corporation | Method of humanizing immune system molecules |
DE10156482A1 (de) | 2001-11-12 | 2003-05-28 | Gundram Jung | Bispezifisches Antikörper-Molekül |
AU2002357060A1 (en) | 2001-12-03 | 2003-06-17 | Abgenix, Inc. | Antibody categorization based on binding characteristics |
WO2003057881A1 (fr) | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Procede de stabilisation d'une proteine |
DK1576112T3 (da) * | 2002-01-18 | 2012-06-25 | Zymogenetics Inc | Cytokin-receptor zcytor17-multimerer |
RU2490276C2 (ru) * | 2002-01-18 | 2013-08-20 | Займоджинетикс, Инк. | Новый лиганд рецептора цитокина zcytor17 |
EP1573002A4 (en) * | 2002-02-11 | 2008-07-16 | Genentech Inc | ANTIBODY VARIANTS WITH ACCELERATED ANTIGEN ASSOCIATED SPEEDS |
US7662925B2 (en) | 2002-03-01 | 2010-02-16 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US8188231B2 (en) * | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
WO2003074679A2 (en) | 2002-03-01 | 2003-09-12 | Xencor | Antibody optimization |
AU2003227504A1 (en) | 2002-04-15 | 2003-10-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD OF CONSTRUCTING scDb LIBRARY |
US7732149B2 (en) | 2002-04-26 | 2010-06-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of screening agonistic antibodies |
JP2004086862A (ja) | 2002-05-31 | 2004-03-18 | Celestar Lexico-Sciences Inc | タンパク質相互作用情報処理装置、タンパク質相互作用情報処理方法、プログラム、および、記録媒体 |
WO2003102580A1 (en) | 2002-05-31 | 2003-12-11 | Biacore Ab | Method of coupling binding agents to a substrate surface |
WO2003107218A1 (ja) | 2002-05-31 | 2003-12-24 | セレスター・レキシコ・サイエンシズ株式会社 | 相互作用予測装置 |
AU2003256266A1 (en) * | 2002-06-12 | 2003-12-31 | Genencor International, Inc. | Methods and compositions for milieu-dependent binding of a targeted agent to a target |
ITMI20021527A1 (it) | 2002-07-11 | 2004-01-12 | Consiglio Nazionale Ricerche | Anticorpi anti componente c5 del complemento e loro uso |
EP1382969A1 (en) | 2002-07-17 | 2004-01-21 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Diagnosis and prevention of cancer cell invasion |
PT1523496E (pt) | 2002-07-18 | 2011-09-29 | Merus B V | Produção de misturas de anticorpos de forma recombinante |
TW200407335A (en) * | 2002-07-22 | 2004-05-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Non-neutralizing antibody to inhibit the inactivation of activated protein C |
WO2004016740A2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Epitomics, Inc. | Humanized rabbit antibodies |
CA2498044A1 (en) | 2002-09-16 | 2004-03-25 | Wyeth | Metalloprotease activation of myostatin, and methods of modulating myostatin activity |
CA2499816C (en) | 2002-09-27 | 2013-07-30 | Xencor, Inc. | Optimized fc variants and methods for their generation |
US7217798B2 (en) | 2003-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of Fc-fusion protein serum half-lives by mutagenesis |
AU2003286467B2 (en) | 2002-10-15 | 2009-10-01 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7217797B2 (en) | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
GB0224082D0 (en) | 2002-10-16 | 2002-11-27 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
AR047392A1 (es) | 2002-10-22 | 2006-01-18 | Wyeth Corp | Neutralizacion de anticuerpos contra gdf 8 y su uso para tales fines |
EP1590364B1 (en) | 2002-12-16 | 2011-10-05 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies against interleukin 8 (il-8) |
DK1575517T3 (da) | 2002-12-24 | 2012-05-14 | Rinat Neuroscience Corp | Anti-ngf-antistoffer og fremgangsmåder til anvendelse af samme |
AU2003303543A1 (en) | 2002-12-26 | 2004-07-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agonist antibody against heteroreceptor |
DE602004021095D1 (de) | 2003-01-21 | 2009-06-25 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Verfahren zum screening der leichten kette eines antikörpers |
WO2004068931A2 (en) | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Protein Design Labs Inc. | Amphiregulin antibodies and their use to treat cancer and psoriasis |
US20040258705A1 (en) | 2003-02-28 | 2004-12-23 | Antigenics Inc. | Use of lectins to promote oligomerization of glycoproteins and antigenic molecules |
US20040223970A1 (en) * | 2003-02-28 | 2004-11-11 | Daniel Afar | Antibodies against SLC15A2 and uses thereof |
US8388955B2 (en) | 2003-03-03 | 2013-03-05 | Xencor, Inc. | Fc variants |
NZ577166A (en) | 2003-03-04 | 2010-10-29 | Alexion Pharma Inc | Method of treating autoimmune disease by inducing antigen presentation by tolerance inducing antigen presenting cells |
GB0306098D0 (en) * | 2003-03-18 | 2003-04-23 | Platform Diagnostics Group Ltd | Sample testing device |
DE602004028347D1 (de) | 2003-03-24 | 2010-09-09 | Zymogenetics Inc | Anti-il-22ra antikörper und bindungspartner und verwendungsmethoden bei entzündung |
GB2400851B (en) | 2003-04-25 | 2004-12-15 | Bioinvent Int Ab | Identifying binding of a polypeptide to a polypeptide target |
GB2401040A (en) | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for treating interleukin-6 related diseases |
US9051373B2 (en) | 2003-05-02 | 2015-06-09 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
MXPA05012723A (es) | 2003-05-30 | 2006-02-08 | Genentech Inc | Tratamiento con anticuerpos anti-vgf. |
ES2408582T3 (es) * | 2003-05-30 | 2013-06-21 | Merus B.V. | Biblioteca de Fab para la preparación de una mezcla de anticuerpos |
AU2004245025A1 (en) | 2003-06-02 | 2004-12-16 | Wyeth | Use of myostatin (GDF8) inhibitors in conjunction with corticosteroids for treating neuromuscular disorders |
NZ543712A (en) | 2003-06-05 | 2008-06-30 | Genentech Inc | Combination therapy for B cell disorders |
US8597911B2 (en) | 2003-06-11 | 2013-12-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Process for producing antibodies |
WO2004113387A2 (en) | 2003-06-24 | 2004-12-29 | Merck Patent Gmbh | Tumour necrosis factor receptor molecules with reduced immunogenicity |
US20050033029A1 (en) | 2003-06-30 | 2005-02-10 | Jin Lu | Engineered anti-target immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses |
WO2005023193A2 (en) | 2003-09-04 | 2005-03-17 | Interleukin Genetics, Inc. | Methods of treating endometriosis |
US7297336B2 (en) | 2003-09-12 | 2007-11-20 | Baxter International Inc. | Factor IXa specific antibodies displaying factor VIIIa like activity |
JP2005101105A (ja) | 2003-09-22 | 2005-04-14 | Canon Inc | 位置決め装置、露光装置、デバイス製造方法 |
US8101720B2 (en) | 2004-10-21 | 2012-01-24 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions |
JP2005112514A (ja) | 2003-10-06 | 2005-04-28 | Tadano Ltd | 伸縮ブーム |
AU2003271174A1 (en) * | 2003-10-10 | 2005-04-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Double specific antibodies substituting for functional protein |
WO2005035754A1 (ja) | 2003-10-14 | 2005-04-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体 |
MY149856A (en) | 2003-10-17 | 2013-10-31 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Therapeutic agent for mesothelioma |
AU2004290070A1 (en) | 2003-11-12 | 2005-05-26 | Biogen Idec Ma Inc. | Neonatal Fc receptor (FcRn)-binding polypeptide variants, dimeric Fc binding proteins and methods related thereto |
US20050100965A1 (en) | 2003-11-12 | 2005-05-12 | Tariq Ghayur | IL-18 binding proteins |
US20050142133A1 (en) * | 2003-12-03 | 2005-06-30 | Xencor, Inc. | Optimized proteins that target the epidermal growth factor receptor |
AU2004297616B2 (en) | 2003-12-04 | 2008-12-18 | Xencor, Inc. | Methods of generating variant proteins with increased host string content and compositions thereof |
PL2383295T3 (pl) * | 2003-12-10 | 2015-08-31 | Squibb & Sons Llc | IP-10 przeciwciała i ich zastosowanie |
CN102344491B (zh) | 2003-12-10 | 2015-03-11 | 梅达雷克斯有限责任公司 | 干扰素α抗体及其用途 |
AR048210A1 (es) | 2003-12-19 | 2006-04-12 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Un agente preventivo para la vasculitis. |
CA2550996A1 (en) | 2003-12-22 | 2005-07-14 | Centocor, Inc. | Methods for generating multimeric molecules |
US20050249723A1 (en) | 2003-12-22 | 2005-11-10 | Xencor, Inc. | Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites |
SI1707627T1 (sl) | 2003-12-25 | 2013-02-28 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Antagonistiäśen mutant anti-cd40 protitelesa |
JP2007535912A (ja) | 2003-12-31 | 2007-12-13 | シェーリング−プラウ・リミテッド | 中和エピトープベースの増殖増強性ワクチン |
US20050266425A1 (en) * | 2003-12-31 | 2005-12-01 | Vaccinex, Inc. | Methods for producing and identifying multispecific antibodies |
ITMI20040003A1 (it) | 2004-01-07 | 2004-04-07 | Zambon Spa | Processo per la preparazione di 6-fluoro-2-metil-1-indanone |
PT2177537E (pt) | 2004-01-09 | 2011-12-13 | Pfizer | Anticorpos contra madcam |
CN1918178B (zh) | 2004-01-12 | 2012-08-22 | 应用分子进化公司 | Fc区变体 |
US20070116710A1 (en) | 2004-02-03 | 2007-05-24 | Leonard Bell | Methods of treating hemolytic anemia |
US20050169921A1 (en) | 2004-02-03 | 2005-08-04 | Leonard Bell | Method of treating hemolytic disease |
WO2005080429A2 (en) | 2004-02-11 | 2005-09-01 | Warner-Lambert Company Llc | Methods of treating osteoarthritis with anti-il-6 or anti-il6 receptor antibodies |
EA014112B1 (ru) | 2004-03-23 | 2010-10-29 | Эли Лилли Энд Компани | Моноклональное антитело к миостатину и способы его применения |
AU2005227326B2 (en) | 2004-03-24 | 2009-12-03 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the Fc region |
KR20070035482A (ko) | 2004-03-24 | 2007-03-30 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 인터로킨-6 안타고니스트를 활성성분으로 함유하는내이장해 치료제 |
EP3269738A1 (en) | 2004-03-24 | 2018-01-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Subtypes of humanized antibody against interleukin-6 receptor |
AR048335A1 (es) | 2004-03-24 | 2006-04-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agentes terapeuticos para trastornos del oido interno que contienen un antagonista de il- 6 como un ingrediente activo |
WO2005123780A2 (en) | 2004-04-09 | 2005-12-29 | Protein Design Labs, Inc. | Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
WO2005112564A2 (en) | 2004-04-15 | 2005-12-01 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Germline and sequence variants of humanized antibodies and methods of making and using them |
JP5367982B2 (ja) | 2004-04-16 | 2013-12-11 | マクロジェニクス,インコーポレーテッド | FcγRIIB特異的抗体とその利用法 |
KR100620554B1 (ko) | 2004-06-05 | 2006-09-06 | 한국생명공학연구원 | Tag-72에 대한 인간화 항체 |
AR049390A1 (es) | 2004-06-09 | 2006-07-26 | Wyeth Corp | Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos |
AU2005259992A1 (en) | 2004-06-25 | 2006-01-12 | Medimmune, Llc | Increasing the production of recombinant antibodies in mammalian cells by site-directed mutagenesis |
JP4939410B2 (ja) | 2004-07-06 | 2012-05-23 | バイオレン,インク. | 強化された特性を持つ変性ポリペプチドを発生させるためのルックスルー変異誘発 |
WO2006085967A2 (en) | 2004-07-09 | 2006-08-17 | Xencor, Inc. | OPTIMIZED ANTI-CD20 MONOCONAL ANTIBODIES HAVING Fc VARIANTS |
KR101413402B1 (ko) | 2004-07-09 | 2014-06-27 | 츄가이 세이야꾸 가부시키가이샤 | 항 글리피칸 3 항체 |
DK2471813T3 (en) | 2004-07-15 | 2015-03-02 | Xencor Inc | Optimized Fc variants |
AU2005274905B2 (en) | 2004-08-04 | 2010-12-23 | Mentrik Biotech, Llc | Variant Fc regions |
AU2005277641A1 (en) | 2004-08-16 | 2006-03-02 | Medimmune, Llc | Eph receptor Fc variants with enhanced antibody dependent cell-mediated cytotoxicity activity |
CN101052654A (zh) | 2004-08-19 | 2007-10-10 | 健泰科生物技术公司 | 具有改变的效应子功能的多肽变体 |
MX2007002856A (es) * | 2004-09-02 | 2007-09-25 | Genentech Inc | Metodos para el uso de ligandos receptores de muerte y anticuerpos c20. |
CA2579142A1 (en) | 2004-09-13 | 2006-03-23 | Macrogenics, Inc. | Humanized antibodies against west nile virus and therapeutic and prophylactic uses thereof |
AU2005284006A1 (en) | 2004-09-14 | 2006-03-23 | Health Protection Agency | Vaccine |
US20060074225A1 (en) | 2004-09-14 | 2006-04-06 | Xencor, Inc. | Monomeric immunoglobulin Fc domains |
TWI380996B (zh) | 2004-09-17 | 2013-01-01 | Hoffmann La Roche | 抗ox40l抗體 |
US7563443B2 (en) | 2004-09-17 | 2009-07-21 | Domantis Limited | Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof |
US8911726B2 (en) | 2004-09-22 | 2014-12-16 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Stabilized human Igg4 antibodies |
WO2006047350A2 (en) | 2004-10-21 | 2006-05-04 | Xencor, Inc. | IgG IMMUNOGLOBULIN VARIANTS WITH OPTIMIZED EFFECTOR FUNCTION |
CN102731654A (zh) | 2004-10-22 | 2012-10-17 | 米迪缪尼有限公司 | 抗hmgb1的高亲和力抗体及其用法 |
EA012162B1 (ru) * | 2004-10-22 | 2009-08-28 | Эмджен Инк. | Способ рефолдинга рекомбинантных антител |
WO2006050166A2 (en) | 2004-10-29 | 2006-05-11 | Medimmune, Inc. | Methods of preventing and treating rsv infections and related conditions |
US7462697B2 (en) | 2004-11-08 | 2008-12-09 | Epitomics, Inc. | Methods for antibody engineering |
US7632497B2 (en) * | 2004-11-10 | 2009-12-15 | Macrogenics, Inc. | Engineering Fc Antibody regions to confer effector function |
US8802820B2 (en) | 2004-11-12 | 2014-08-12 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8367805B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
RU2412200C2 (ru) | 2004-11-12 | 2011-02-20 | Ксенкор, Инк. | Fc-ВАРИАНТЫ С ИЗМЕНЕННЫМ СВЯЗЫВАНИЕМ С FcRn |
DK1817340T3 (da) | 2004-11-12 | 2012-08-13 | Xencor Inc | Fc-varianter med ændret binding til fcrn |
EP1830947A4 (en) | 2004-12-14 | 2012-04-18 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | CLEANING OF IMMUNOGLOBULINS |
US8329186B2 (en) | 2004-12-20 | 2012-12-11 | Isu Abxis Co., Ltd | Treatment of inflammation using BST2 inhibitor |
US20090061485A1 (en) | 2004-12-22 | 2009-03-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of Producing an Antibody Using a Cell in Which the Function of Fucose Transporter Is Inhibited |
US8728828B2 (en) | 2004-12-22 | 2014-05-20 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Purification of immunoglobulins |
CA2592015A1 (en) | 2004-12-27 | 2006-07-06 | Progenics Pharmaceuticals (Nevada), Inc. | Orally deliverable and anti-toxin antibodies and methods for making and using them |
WO2006070286A2 (en) | 2004-12-28 | 2006-07-06 | Innate Pharma S.A. | Monoclonal antibodies against nkg2a |
WO2006075668A1 (ja) | 2005-01-12 | 2006-07-20 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | 安定化されたヒトIgG2およびIgG3抗体 |
EP1858925A2 (en) * | 2005-01-12 | 2007-11-28 | Xencor, Inc. | Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity |
NZ538097A (en) | 2005-02-07 | 2006-07-28 | Ovita Ltd | Method and compositions for improving wound healing |
CA2594490A1 (en) | 2005-02-14 | 2006-08-24 | Zymogenetics Inc. | Methods of treating skin disorders using an il-31ra antagonist |
JP5153613B2 (ja) | 2005-03-18 | 2013-02-27 | メディミューン,エルエルシー | 抗体のフレームワーク・シャッフル |
CN101198698B (zh) | 2005-03-31 | 2014-03-19 | 中外制药株式会社 | 通过调节多肽缔合制备多肽的方法 |
EP1871808A2 (en) | 2005-03-31 | 2008-01-02 | Xencor, Inc. | Fc VARIANTS WITH OPTIMIZED PROPERTIES |
JP5057967B2 (ja) | 2005-03-31 | 2012-10-24 | 中外製薬株式会社 | sc(Fv)2構造異性体 |
US20100003254A1 (en) | 2005-04-08 | 2010-01-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody Substituting for Function of Blood Coagulation Factor VIII |
EP1869070B1 (en) | 2005-04-15 | 2013-11-27 | Genentech, Inc. | Hgf beta chain variants |
US8604174B2 (en) | 2005-04-20 | 2013-12-10 | Amgen Inc. | High affinity fully human monoclonal antibodies to interleukin-8 |
US7807159B2 (en) | 2005-04-25 | 2010-10-05 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies to myostatin |
CA2606102C (en) | 2005-04-26 | 2014-09-30 | Medimmune, Inc. | Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering |
PE20061324A1 (es) | 2005-04-29 | 2007-01-15 | Centocor Inc | Anticuerpos anti-il-6, composiciones, metodos y usos |
MY148086A (en) | 2005-04-29 | 2013-02-28 | Rinat Neuroscience Corp | Antibodies directed against amyloid-beta peptide and methods using same |
US8003108B2 (en) | 2005-05-03 | 2011-08-23 | Amgen Inc. | Sclerostin epitopes |
WO2006121852A2 (en) | 2005-05-05 | 2006-11-16 | Duke University | Anti-cd19 antibody therapy for autoimmune disease |
EP1896503B1 (en) | 2005-05-31 | 2014-10-29 | Board of Regents, The University of Texas System | IgG1 ANTIBODIES WITH MUTATED Fc PORTION FOR INCREASED BINDING TO FcRn RECEPTOR AND USES TEHEREOF |
JP5224580B2 (ja) | 2005-06-10 | 2013-07-03 | 中外製薬株式会社 | sc(Fv)2部位特異的変異体 |
US8945543B2 (en) * | 2005-06-10 | 2015-02-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stabilizer for protein preparation comprising meglumine and use thereof |
AU2006261920A1 (en) | 2005-06-23 | 2007-01-04 | Medimmune, Llc | Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles |
US7557190B2 (en) | 2005-07-08 | 2009-07-07 | Xencor, Inc. | Optimized proteins that target Ep-CAM |
BRPI0612814A2 (pt) | 2005-07-11 | 2017-06-20 | Macrogenics Inc | anticorpo, métodos para redução e para tratamento de uma resposta imune prejudicial em um mamífero, proteína de ligação ao cd16a, e, método para redução dos efeitos colaterais de primeira dose em um paciente |
PT2573114T (pt) | 2005-08-10 | 2016-07-13 | Macrogenics Inc | Identificação e manipulação de anticorpos com regiões fc variantes e métodos de utilização dos mesmos |
PT1915397E (pt) | 2005-08-19 | 2015-04-30 | Univ Pennsylvania | Anticorpos antagonistas contra gdf-8 e utilizações no tratamento de ela e outros distúrbios associados a gdf-8 |
EP1789435B1 (en) | 2005-09-12 | 2010-02-24 | Industry Foundation of Chonnam National University | A method for production of mature natural killer cell |
US20070134234A1 (en) | 2005-09-29 | 2007-06-14 | Viral Logic Systems Technology Corp. | Immunomodulatory compositions and uses therefor |
CA2624189A1 (en) | 2005-10-03 | 2007-04-12 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized fc receptor binding properties |
JP4860703B2 (ja) | 2005-10-06 | 2012-01-25 | ゼンコー・インコーポレイテッド | 最適化された抗cd30抗体 |
KR101135220B1 (ko) | 2005-10-06 | 2012-04-24 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | 항-마이오스타틴 항체 |
UA92504C2 (en) | 2005-10-12 | 2010-11-10 | Эли Лилли Энд Компани | Anti-myostatin monoclonal antibody |
CA2625773C (en) | 2005-10-14 | 2015-05-12 | Fukuoka University | Inhibition of interleukin-6 (il-6) receptor promotes pancreatic islet transplantation |
AR058135A1 (es) | 2005-10-21 | 2008-01-23 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agentes para el tratamiento de cardiopatias |
AR057582A1 (es) | 2005-11-15 | 2007-12-05 | Nat Hospital Organization | Agentes para suprimir la induccion de linfocitos t citotoxicos |
WO2007060411A1 (en) | 2005-11-24 | 2007-05-31 | Ucb Pharma S.A. | Anti-tnf alpha antibodies which selectively inhibit tnf alpha signalling through the p55r |
EP1967209B1 (en) | 2005-11-25 | 2012-06-06 | Keio University | Therapeutic agent for prostate cancer |
EP1959997A4 (en) | 2005-11-28 | 2009-12-23 | Medimmune Llc | ANTAGONISTS OF HMGB1 AND / OR RAGE AND METHOD OF USE THEREOF |
AU2006326283B2 (en) | 2005-12-12 | 2012-01-19 | Ac Immune S.A. | Therapeutic vaccine |
US9084777B2 (en) | 2005-12-28 | 2015-07-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stabilized antibody-containing formulations |
US7638126B2 (en) | 2006-01-10 | 2009-12-29 | Zymogenetics, Inc. | Methods of treating pain and inflammation in neuronal tissue using antagonists of IL-31, IL31Ra and/or OSMRb |
ES2709672T3 (es) * | 2006-01-12 | 2019-04-17 | Alexion Pharma Inc | Anticuerpos para OX-2/CD200 y usos de los mismos |
US8771686B2 (en) | 2006-01-27 | 2014-07-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for treating a disease involving choroidal neovascularization by administering an IL-6 receptor antibody |
JP2009525986A (ja) | 2006-02-03 | 2009-07-16 | メディミューン,エルエルシー | タンパク質製剤 |
US20070190056A1 (en) | 2006-02-07 | 2007-08-16 | Ravi Kambadur | Muscle regeneration compositions and uses therefor |
NZ570802A (en) | 2006-03-02 | 2012-03-30 | Alexion Pharma Inc | Prolongation of survival of an allograft by inhibiting complement activity |
KR20150017388A (ko) | 2006-03-08 | 2015-02-16 | 아케믹스 엘엘씨 | 안질환의 치료에 유용한 보체 결합 앱타머 및 항-c5 제제 |
WO2007106585A1 (en) | 2006-03-15 | 2007-09-20 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria patients by an inhibitor of complement |
CA2630344C (en) | 2006-03-23 | 2015-04-28 | Bioarctic Neuroscience Ab | Improved protofibril selective antibodies and the use thereof |
JP4294082B2 (ja) * | 2006-03-23 | 2009-07-08 | 協和発酵キリン株式会社 | ヒトトロンボポエチン受容体に対するアゴニスト抗体 |
AU2007245164A1 (en) | 2006-03-28 | 2007-11-08 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-IGF-IR antibodies and uses thereof |
EP3345616A1 (en) | 2006-03-31 | 2018-07-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody modification method for purifying bispecific antibody |
CA2647846C (en) | 2006-03-31 | 2016-06-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
CA2648644C (en) | 2006-04-07 | 2016-01-05 | Osaka University | Muscle regeneration promoter |
TWI395754B (zh) | 2006-04-24 | 2013-05-11 | Amgen Inc | 人類化之c-kit抗體 |
TWI422387B (zh) | 2006-05-25 | 2014-01-11 | Glaxo Group Ltd | 免疫球蛋白 |
US8080248B2 (en) | 2006-06-02 | 2011-12-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating rheumatoid arthritis with an IL-6R antibody |
RS52176B (en) | 2006-06-02 | 2012-08-31 | Regeneron Pharmaceuticals Inc. | HIGH AFINITY ANTIBODIES TO THE HUMAN IL-6 RECEPTOR |
WO2007142325A1 (ja) | 2006-06-08 | 2007-12-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 炎症性疾患の予防または治療剤 |
EP2032602B1 (en) * | 2006-06-15 | 2013-03-27 | The Board of Trustees of the University of Arkansas | Monoclonal antibodies that selectively recognize methamphetamine and methamphetamine like compounds |
JP2009541275A (ja) | 2006-06-22 | 2009-11-26 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 二重特異性抗体の生産 |
TW200817006A (en) | 2006-06-23 | 2008-04-16 | Smithkline Beecham Corp | IL-8 receptor antagonist |
PL2383297T3 (pl) | 2006-08-14 | 2013-06-28 | Xencor Inc | Zoptymalizowane przeciwciała ukierunkowane na CD19 |
WO2008030706A2 (en) | 2006-09-05 | 2008-03-13 | Eli Lilly And Company | Anti-myostatin antibodies |
CA2662340C (en) | 2006-09-08 | 2016-08-02 | Medimmune, Llc | Humanized anti-cd19 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
WO2008036688A2 (en) | 2006-09-18 | 2008-03-27 | Xencor, Inc. | Optimized antibodies that target hm1.24 |
US20100034194A1 (en) | 2006-10-11 | 2010-02-11 | Siemens Communications Inc. | Eliminating unreachable subscribers in voice-over-ip networks |
WO2008121160A2 (en) | 2006-11-21 | 2008-10-09 | Xencor, Inc. | Optimized antibodies that target cd5 |
WO2008091798A2 (en) | 2007-01-22 | 2008-07-31 | Xencor, Inc. | Optimized ca9 antibodies and methods of using the same |
WO2008091954A2 (en) | 2007-01-23 | 2008-07-31 | Xencor, Inc. | Optimized cd40 antibodies and methods of using the same |
US9725514B2 (en) | 2007-01-23 | 2017-08-08 | Shinshu University | Chronic rejection inhibitor |
EP2107115A1 (en) | 2007-01-24 | 2009-10-07 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Genetically recombinant antibody composition capable of binding specifically to ganglioside gm2 |
WO2008092117A2 (en) | 2007-01-25 | 2008-07-31 | Xencor, Inc. | Immunoglobulins with modifications in the fcr binding region |
WO2008098115A2 (en) | 2007-02-07 | 2008-08-14 | Xencor, Inc. | Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same |
EP2069404B1 (en) * | 2007-02-14 | 2011-01-05 | Vaccinex, Inc. | Humanized anti-cd100 antibodies |
HUE042172T2 (hu) | 2007-02-23 | 2019-06-28 | Merck Sharp & Dohme | Genetikailag elõállított anti-il-23P19 antitestek |
JPWO2008114733A1 (ja) | 2007-03-16 | 2010-07-01 | 協和発酵キリン株式会社 | 抗Claudin−4抗体 |
JP2010521194A (ja) | 2007-03-22 | 2010-06-24 | ノバルティス アーゲー | C5抗原およびその使用 |
CN101679974B (zh) | 2007-03-27 | 2015-09-30 | 航道生物技术有限责任公司 | 包含抗体替代轻链序列的构建体和文库 |
NZ614857A (en) | 2007-03-29 | 2015-04-24 | Genmab As | Bispecific antibodies and methods for production thereof |
CL2008001071A1 (es) | 2007-04-17 | 2009-05-22 | Smithkline Beecham Corp | Metodo para obtener anticuerpo penta-especifico contra il-8/cxcl8, gro-alfa/cxcl1, gro-beta/cxcl2), gro-gama/cxcl3 y ena-78/cxcl5 humanas; anticuerpo penta-especifico; proceso de produccion del mismo; vector, hbridoma o celela que lo comprende; composicion farmceutica; uso para tratar copd, otras enfermedades. |
GB0708002D0 (en) | 2007-04-25 | 2007-06-06 | Univ Sheffield | Antibodies |
KR20100021601A (ko) | 2007-05-14 | 2010-02-25 | 바이오겐 아이덱 엠에이 인코포레이티드 | 단일-쇄 Fc(ScFc) 부분, 이를 포함하는 결합 폴리펩타이드, 및 이에 관련된 방법 |
DK2176298T3 (en) * | 2007-05-30 | 2018-02-12 | Xencor Inc | Methods and compositions for inhibiting CD32B-expressing cells |
WO2008145141A1 (en) | 2007-05-31 | 2008-12-04 | Genmab A/S | Method for extending the half-life of exogenous or endogenous soluble molecules |
WO2008145142A1 (en) | 2007-05-31 | 2008-12-04 | Genmab A/S | Stable igg4 antibodies |
RU2540150C2 (ru) | 2007-06-25 | 2015-02-10 | Эсбатек, Эн Элкон Биомедикал Рисёрч Юнит Ллк | Способы модификации антител и модифицированные антитела с улучшенными функциональными свойствами |
CA2689064C (en) | 2007-06-25 | 2018-04-24 | Esbatech Ag | Sequence based engineering and optimization of single chain antibodies |
PL2178921T3 (pl) | 2007-07-17 | 2016-06-30 | Squibb & Sons Llc | Monoklonalne przeciwciała przeciwko glipikanowi-3 |
WO2009014263A1 (ja) | 2007-07-26 | 2009-01-29 | Osaka University | インターロイキン6受容体阻害剤を有効成分とする眼炎症疾患治療剤 |
US20110105724A1 (en) | 2007-08-16 | 2011-05-05 | Stephanie Jane Clegg | Novel compounds |
JP2010538012A (ja) | 2007-08-28 | 2010-12-09 | バイオジェン アイデック マサチューセッツ インコーポレイテッド | Igf−1rの複数のエピトープに結合する組成物 |
US20090092614A1 (en) | 2007-08-28 | 2009-04-09 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-IGF-1R Antibodies and Uses Thereof |
EP2031064A1 (de) | 2007-08-29 | 2009-03-04 | Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG | Verfahren zur Steigerung von Proteintitern |
CA2698809C (en) | 2007-09-14 | 2023-10-17 | Amgen Inc. | Homogeneous antibody populations |
WO2009041734A1 (ja) | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | ヒトトロンボポエチン受容体に対するアゴニスト抗体 |
KR101922788B1 (ko) | 2007-09-26 | 2018-11-27 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 항체 정상영역 개변체 |
CN106519025B (zh) | 2007-09-26 | 2021-04-23 | 中外制药株式会社 | 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法 |
JP5566108B2 (ja) | 2007-09-26 | 2014-08-06 | 中外製薬株式会社 | 抗il−6レセプター抗体 |
KR20100085067A (ko) | 2007-09-28 | 2010-07-28 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 혈장 중 반응속도가 개선된 항-글리피칸-3 항체 |
CN101815532B (zh) | 2007-10-02 | 2012-08-15 | 中外制药株式会社 | 以白细胞介素6受体抑制剂为有效成分的移植物抗宿主病治疗剂 |
JO3076B1 (ar) | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
AU2008314687A1 (en) | 2007-10-22 | 2009-04-30 | Merck Serono S.A. | Method for purifying Fc-fusion proteins |
ES2400107T3 (es) | 2007-10-22 | 2013-04-05 | Merck Serono S.A. | IFN-beta sencillo fusionado a un fragmento Fc de lgG mutado |
WO2009086320A1 (en) | 2007-12-26 | 2009-07-09 | Xencor, Inc | Fc variants with altered binding to fcrn |
PE20091163A1 (es) | 2007-11-01 | 2009-08-09 | Wyeth Corp | Anticuerpos para gdf8 |
BRPI0820543A2 (pt) * | 2007-11-15 | 2015-06-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticorpo monoclonal capaz de ligar a anexelekto, e uso do mesmo |
US8431127B2 (en) | 2007-12-05 | 2013-04-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for treating pruritus comprising administering an NR10 antagonist |
ES2585480T3 (es) | 2007-12-05 | 2016-10-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anticuerpo anti-NR10 y uso del mismo |
ES2550757T3 (es) | 2007-12-18 | 2015-11-12 | Bioalliance C.V. | Anticuerpos que reconocen un epítopo que contiene carbohidratos en CD43 y ACE expresados en células cancerosas y métodos de uso de los mismos |
PE20091174A1 (es) | 2007-12-27 | 2009-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo |
US8592562B2 (en) | 2008-01-07 | 2013-11-26 | Amgen Inc. | Method for making antibody Fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects |
EP2229409B1 (en) | 2008-01-18 | 2012-09-26 | Stichting Sanquin Bloedvoorziening | Methods for increasing the therapeutic efficacy of immunoglobulin g class 3 (igg3) antibodies |
JP5373823B2 (ja) | 2008-01-29 | 2013-12-18 | アブリンクス エン.ヴェー. | タンパク質及びポリペプチドを安定化する方法 |
BR122020023189B1 (pt) | 2008-02-08 | 2022-02-01 | Astrazeneca Ab | Uso de uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo específico para ifnar1 |
EP2275443B1 (en) | 2008-04-11 | 2015-12-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly |
AU2015227424A1 (en) | 2008-04-11 | 2015-10-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly |
EP2620448A1 (en) | 2008-05-01 | 2013-07-31 | Amgen Inc. | Anti-hepcidin antibodies and methods of use |
NZ589308A (en) | 2008-05-14 | 2012-11-30 | Agriculture Victoria Serv Pty | Use of angiogenin or angiogenin agonists for treating diseases and disorders |
TWI528973B (zh) | 2008-06-05 | 2016-04-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Nerve infiltration inhibitor |
EP2837388A1 (en) | 2008-08-05 | 2015-02-18 | Novartis AG | Compositions and methods for antibodies targeting complement protein C5 |
WO2010033736A1 (en) | 2008-09-17 | 2010-03-25 | Xencor, Inc. | Novel compositons and methods for treating ige-mediated disorders |
JP5028372B2 (ja) | 2008-09-26 | 2012-09-19 | 京セラドキュメントソリューションズ株式会社 | 画像処理装置、画像処理方法及び画像処理プログラム |
TWI440469B (zh) | 2008-09-26 | 2014-06-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Improved antibody molecules |
MX2011003763A (es) | 2008-10-10 | 2011-04-27 | Emergent Product Dev Seattle | Inmunoterapeuticos de completo tcr. |
SG10201605250SA (en) | 2008-10-14 | 2016-08-30 | Genentech Inc | Immunoglobulin variants and uses thereof |
EP3101031A1 (en) | 2008-11-10 | 2016-12-07 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating complement-associated disorders |
JP5807300B2 (ja) | 2008-11-18 | 2015-11-10 | 株式会社シノテスト | 試料中のc反応性蛋白質の測定方法及び測定試薬 |
EP2361095B1 (en) | 2008-11-25 | 2017-12-20 | AlderBio Holdings LLC | Antagonists of il-6 to raise albumin and/or lower crp |
AR074438A1 (es) | 2008-12-02 | 2011-01-19 | Pf Medicament | Proceso para la modulacion de la actividad antagonista de un anticuerpo monoclonal |
WO2010064090A1 (en) | 2008-12-02 | 2010-06-10 | Pierre Fabre Medicament | Process for the modulation of the antagonistic activity of a monoclonal antibody |
KR20160062207A (ko) | 2008-12-05 | 2016-06-01 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 항nr10 항체 및 그의 이용 |
AR074777A1 (es) | 2008-12-19 | 2011-02-09 | Glaxo Group Ltd | Proteinas de union a antigeno |
JP5851842B2 (ja) | 2009-01-12 | 2016-02-03 | サイトムエックス セラピューティクス, インク.CytomX Therapeutics, Inc. | 改変した抗体組成物、それを作製および使用する方法 |
JP2012515556A (ja) | 2009-01-23 | 2012-07-12 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 低下したエフェクタ機能を有する安定化Fcポリペプチドおよび使用方法 |
JP2010210772A (ja) | 2009-03-13 | 2010-09-24 | Dainippon Screen Mfg Co Ltd | 液晶表示装置の製造方法 |
WO2010107109A1 (ja) | 2009-03-19 | 2010-09-23 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
EP2409991B1 (en) | 2009-03-19 | 2017-05-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody constant region variant |
AU2010225951B2 (en) | 2009-03-19 | 2014-03-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical formulation containing improved antibody molecules |
EP2233500A1 (en) | 2009-03-20 | 2010-09-29 | LFB Biotechnologies | Optimized Fc variants |
PT2417156E (pt) | 2009-04-07 | 2015-04-29 | Roche Glycart Ag | Anticorpos trivalentes, biespecíficos |
AU2010201495B2 (en) | 2009-04-16 | 2012-04-12 | Accenture Global Services Limited | Touchpoint customization system |
ES2708124T3 (es) | 2009-04-27 | 2019-04-08 | Oncomed Pharm Inc | Procedimiento para preparar moléculas heteromultiméricas |
MX2011012136A (es) * | 2009-05-15 | 2012-04-10 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-axl. |
US8609097B2 (en) | 2009-06-10 | 2013-12-17 | Hoffmann-La Roche Inc. | Use of an anti-Tau pS422 antibody for the treatment of brain diseases |
RU2012102021A (ru) | 2009-06-23 | 2013-07-27 | Алексион Фармасьютикалз, Инк. | Биспецифические антитела, которые связываются с белками комплемента |
US8945511B2 (en) | 2009-06-25 | 2015-02-03 | Paul Weinberger | Sensitive methods for detecting the presence of cancer associated with the over-expression of galectin-3 using biomarkers derived from galectin-3 |
KR101904065B1 (ko) | 2009-06-26 | 2018-10-04 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 천연 면역글로불린 포맷을 가지는 용이하게 분리된 이중특이성 항체 |
GB0914691D0 (en) | 2009-08-21 | 2009-09-30 | Lonza Biologics Plc | Immunoglobulin variants |
AU2010286518C1 (en) | 2009-08-29 | 2015-08-27 | Abbvie Inc. | Therapeutic DLL4 binding proteins |
IN2015DN02826A (zh) | 2009-09-03 | 2015-09-11 | Merck Sharp & Dohme | |
JP5837821B2 (ja) | 2009-09-24 | 2015-12-24 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
MX338063B (es) | 2009-10-06 | 2016-04-01 | Medimmune Ltd | Molecula de union especifica al rsv. |
US8568726B2 (en) | 2009-10-06 | 2013-10-29 | Medimmune Limited | RSV specific binding molecule |
JP5898082B2 (ja) | 2009-10-07 | 2016-04-06 | マクロジェニクス,インコーポレーテッド | フコシル化程度の変更により改良されたエフェクター機能を示すFc領域含有ポリペプチドおよびその使用法 |
WO2011051350A1 (en) | 2009-10-27 | 2011-05-05 | Ucb Pharma S.A. | Function modifying nav 1.7 antibodies |
CN101875696B (zh) | 2009-11-11 | 2012-02-08 | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 | 一种抗体及其制备方法与应用 |
JP6087054B2 (ja) | 2009-12-25 | 2017-03-01 | 中外製薬株式会社 | ポリペプチド多量体を精製するためのポリペプチドの改変方法 |
AU2010343056A1 (en) | 2009-12-29 | 2012-08-02 | Emergent Product Development Seattle, Llc | Ron binding constructs and methods of use thereof |
EP2525813B1 (en) | 2010-01-20 | 2017-01-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Anti-ilt5 antibodies and ilt5-binding antibody fragments |
WO2011091181A1 (en) | 2010-01-20 | 2011-07-28 | Tolerx, Inc. | Immunoregulation by anti-ilt5 antibodies and ilt5-binding antibody fragments |
TWI505838B (zh) | 2010-01-20 | 2015-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Stabilized antibody solution containing |
CN102971342B (zh) | 2010-01-28 | 2016-08-03 | Ab生物科学公司 | 亲和力降低的新抗体和制备所述抗体的方法 |
US20120315267A1 (en) | 2010-02-09 | 2012-12-13 | Glaxosmithkline Llc | Novel uses |
PL3053932T3 (pl) | 2010-02-19 | 2021-03-08 | Xencor, Inc. | Nowe immunoadhezyny CTLA4-IG |
RU2015145543A (ru) | 2010-03-01 | 2019-01-11 | Алексион Фармасьютикалз Инк. | Способы и композиции для лечения болезни дего |
CN102782131B (zh) | 2010-03-02 | 2015-08-05 | 协和发酵麒麟株式会社 | 修饰抗体组合物 |
JP5889181B2 (ja) | 2010-03-04 | 2016-03-22 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
TW201206466A (en) | 2010-03-11 | 2012-02-16 | Rinat Neuroscience Corp | Antibodies with pH dependent antigen binding |
MX2012010481A (es) | 2010-03-11 | 2012-10-09 | Rinat Neuroscience Corp | Anticuerpos con union de antigenos dependiente del ph. |
JP2011184418A (ja) | 2010-03-11 | 2011-09-22 | Tokyo Institute Of Technology | 親和性可変抗体 |
TWI667346B (zh) * | 2010-03-30 | 2019-08-01 | 中外製藥股份有限公司 | 促進抗原消失之具有經修飾的FcRn親和力之抗體 |
KR20130018256A (ko) | 2010-03-31 | 2013-02-20 | 제이에스알 가부시끼가이샤 | 친화성 크로마토그래피용 충전제 |
SG10201800757TA (en) | 2010-04-20 | 2018-02-27 | Genmab As | Heterodimeric antibody fc-containing proteins and methods for production thereof |
CN102946906B (zh) | 2010-04-23 | 2015-07-15 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 生产异源多聚体蛋白质 |
BR112012027917A2 (pt) | 2010-04-30 | 2017-11-28 | Alexion Pharma Inc | anticorpos que apresentam reduzida imunogenicidade em um indivíduo humano |
US9527926B2 (en) | 2010-05-14 | 2016-12-27 | Rinat Neuroscience Corp. | Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them |
JO3340B1 (ar) | 2010-05-26 | 2019-03-13 | Regeneron Pharma | مضادات حيوية لـعامل تمايز النمو 8 البشري |
JP5904552B2 (ja) | 2010-05-28 | 2016-04-13 | 国立研究開発法人国立がん研究センター | 膵癌治療剤 |
AR081556A1 (es) | 2010-06-03 | 2012-10-03 | Glaxo Group Ltd | Proteinas de union al antigeno humanizadas |
AU2011283694B2 (en) | 2010-07-29 | 2017-04-13 | Xencor, Inc. | Antibodies with modified isoelectric points |
US20130177555A1 (en) | 2010-08-13 | 2013-07-11 | Medimmune Limited | Monomeric Polypeptides Comprising Variant FC Regions And Methods Of Use |
EP2606066A1 (en) | 2010-08-16 | 2013-06-26 | Amgen Inc. | Antibodies that bind myostatin, compositions and methods |
WO2012033953A1 (en) | 2010-09-08 | 2012-03-15 | Halozyme, Inc. | Methods for assessing and identifying or evolving conditionally active therapeutic proteins |
EP2640745B1 (en) | 2010-09-10 | 2018-11-07 | MedImmune Limited | Bivalent and bispecific anti-il6/anti-il23 antibodies |
WO2012058768A1 (en) | 2010-11-05 | 2012-05-10 | Zymeworks Inc. | Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain |
JP2013541594A (ja) | 2010-11-08 | 2013-11-14 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 皮下投与される抗il−6受容体抗体 |
WO2012067176A1 (ja) | 2010-11-17 | 2012-05-24 | 中外製薬株式会社 | 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子 |
CN108715614A (zh) | 2010-11-30 | 2018-10-30 | 中外制药株式会社 | 与多分子的抗原重复结合的抗原结合分子 |
CA2819530C (en) | 2010-11-30 | 2023-01-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing therapeutic agent |
WO2012088247A2 (en) | 2010-12-22 | 2012-06-28 | Medimmune, Llc | Anti-c5/c5a/c5adesr antibodies and fragments |
EP3539991A1 (en) | 2011-01-07 | 2019-09-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for improving physical properties of antibody |
CA2827923C (en) | 2011-02-25 | 2021-11-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Fc.gamma.riib-specific fc antibody |
WO2012132067A1 (ja) | 2011-03-30 | 2012-10-04 | 中外製薬株式会社 | 抗原結合分子の血漿中滞留性と免疫原性を改変する方法 |
EP3825325A3 (en) | 2011-03-30 | 2021-10-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Retention of antigen-binding molecules in blood plasma and method for modifying immunogenicity |
WO2012145238A2 (en) | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Tolerx, Inc. | Methods for reducing an adverse immune response to a foreign antigen in a human subject with anti-cd4 antibodies or cd4-binding fragments thereof or cd4-binding molecules |
EP2702078B1 (en) | 2011-04-29 | 2018-11-07 | Apexigen, Inc. | Anti-cd40 antibodies and methods of use |
CN103826659A (zh) | 2011-06-20 | 2014-05-28 | 圣路易斯大学 | 用于治疗的靶向神经肌肉接头 |
UA117901C2 (uk) | 2011-07-06 | 2018-10-25 | Ґенмаб Б.В. | Спосіб посилення ефекторної функції вихідного поліпептиду, його варіанти та їх застосування |
US9738707B2 (en) | 2011-07-15 | 2017-08-22 | Biogen Ma Inc. | Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto |
CA2850322C (en) | 2011-09-30 | 2023-10-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule inducing immune response to target antigen |
TW201817745A (zh) | 2011-09-30 | 2018-05-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 具有促進抗原清除之FcRn結合域的治療性抗原結合分子 |
RU2732151C2 (ru) | 2011-09-30 | 2020-09-11 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Библиотека зависимых от концентрации ионов связывающих молекул |
JP6322411B2 (ja) | 2011-09-30 | 2018-05-09 | 中外製薬株式会社 | 複数の生理活性を有する抗原の消失を促進する抗原結合分子 |
CA2850194C (en) | 2011-09-30 | 2023-03-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule for promoting elimination of antigens |
EP3674320A3 (en) | 2011-10-27 | 2020-08-12 | Genmab A/S | Production of heterodimeric proteins |
KR102398736B1 (ko) | 2011-10-31 | 2022-05-16 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 중쇄와 경쇄의 회합이 제어된 항원 결합 분자 |
BR112014010580B1 (pt) | 2011-11-04 | 2021-01-12 | Zymeworks, Inc. | constructo de fc heteromultimérico isolado, composição, uso de um constructo de fc heteromultimérico isolado, composição de ácido nucléico e método para expressar o constructo de fc heteromultimérico isolado |
WO2013081143A1 (ja) | 2011-11-30 | 2013-06-06 | 中外製薬株式会社 | 免疫複合体を形成する細胞内への運搬体(キャリア)を含む医薬 |
GB201203051D0 (en) | 2012-02-22 | 2012-04-04 | Ucb Pharma Sa | Biological products |
AU2013223087B2 (en) | 2012-02-24 | 2018-02-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule for promoting disappearance of antigen via FcgammaRIIb |
HUE028440T2 (en) | 2012-03-08 | 2016-12-28 | Hoffmann La Roche | Abeta antibody preparation |
JP6273219B2 (ja) | 2012-03-13 | 2018-01-31 | ノビミューン エスアー | 天然の免疫グロブリン形式を有する容易に単離される二重特異性抗体 |
NZ629077A (en) | 2012-03-16 | 2015-12-24 | Regeneron Pharma | Non-human animals expressing ph-sensitive immunoglobulin sequences |
SI2883449T1 (en) | 2012-03-16 | 2018-05-31 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Light-chain modified antibodies with histidine and genetically modified rodents for their production |
EP2832856A4 (en) | 2012-03-29 | 2016-01-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | ANTI-LAMP5 ANTIBODIES AND USE THEREOF |
HUE037613T2 (hu) | 2012-03-29 | 2018-09-28 | Novimmune Sa | Anti-TLR4 antitestek és azok felhasználása |
TWI619729B (zh) | 2012-04-02 | 2018-04-01 | 再生元醫藥公司 | 抗-hla-b*27抗體及其用途 |
JP6393255B2 (ja) | 2012-04-20 | 2018-09-19 | メルス ナムローゼ フェンノートシャップ | ヘテロ二量体のIgG様分子を生産する方法、ヘテロ二量体のIgG様分子、ヘテロ二量体の抗体、組み換え宿主細胞、医薬組成物、宿主細胞を作成する方法、および培養物 |
UA119227C2 (uk) | 2012-04-20 | 2019-05-27 | Аптево Рісьорч Енд Девелопмент Ллс | Поліпептид, що зв'язується з cd3 |
JP6211597B2 (ja) | 2012-05-01 | 2017-10-11 | グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーGlaxoSmithKline LLC | 新規抗体 |
US9255154B2 (en) | 2012-05-08 | 2016-02-09 | Alderbio Holdings, Llc | Anti-PCSK9 antibodies and use thereof |
ES2856272T3 (es) | 2012-05-30 | 2021-09-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molécula de unión a antígenos para eliminar antígenos agregados |
TWI617578B (zh) | 2012-05-30 | 2018-03-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 標的組織專一的抗原結合分子 |
WO2013181543A1 (en) | 2012-06-01 | 2013-12-05 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services | High-affinity monoclonal antibodies to glypican-3 and use thereof |
KR101704893B1 (ko) | 2012-06-15 | 2017-02-08 | 화이자 인코포레이티드 | Gdf-8에 대한 개선된 길항물질 항체 및 그의 용도 |
US11180572B2 (en) | 2012-07-06 | 2021-11-23 | Genmab B.V. | Dimeric protein with triple mutations |
JP6309521B2 (ja) | 2012-08-13 | 2018-04-11 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | pH依存性結合特性を有する抗PCSK9抗体 |
US9133269B2 (en) | 2012-08-24 | 2015-09-15 | Anaptysbio, Inc. | Humanized antibodies directed against complement protein C5 |
TWI717591B (zh) | 2012-08-24 | 2021-02-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | FcγRIIb特異性Fc區域變異體 |
TWI595007B (zh) | 2012-09-10 | 2017-08-11 | Neotope Biosciences Ltd | 抗mcam抗體及相關使用方法 |
MY172863A (en) | 2012-09-13 | 2019-12-13 | Bristol Myers Squibb Co | Fibronectin based scaffold domain proteins that bind to myostatin |
TW201418707A (zh) | 2012-09-21 | 2014-05-16 | Alexion Pharma Inc | 補體組分c5拮抗劑之篩選分析 |
WO2014051433A1 (en) | 2012-09-27 | 2014-04-03 | Merus B.V. | BISPECIFIC IgG ANTIBODIES AS T CELL ENGAGERS |
EP2905290B1 (en) | 2012-10-05 | 2019-12-04 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | Heterodimeric protein composition |
EP2914634B1 (en) | 2012-11-02 | 2017-12-06 | Zymeworks Inc. | Crystal structures of heterodimeric fc domains |
CA2890733A1 (en) | 2012-11-06 | 2014-05-15 | Scholar Rock, Inc. | Compositions and methods for modulating cell signaling |
CN103833852A (zh) | 2012-11-23 | 2014-06-04 | 上海市肿瘤研究所 | 针对磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和t细胞抗原的双特异性抗体 |
EA038645B1 (ru) | 2012-12-21 | 2021-09-28 | Авео Фармасьютикалз, Инк. | Антитела к gdf15 |
US9701759B2 (en) | 2013-01-14 | 2017-07-11 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
CA2898262A1 (en) | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Tnf-alpha antigen-binding proteins |
KR101638931B1 (ko) | 2013-01-31 | 2016-07-12 | 서울대학교산학협력단 | 보체 관련 질환의 예방 및 치료를 위한 c5 항체 및 방법 |
US9481725B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-01 | Alderbio Holdings, Llc | Antibodies to HGF and compositions containing |
EP2970508A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-12-14 | Permeon Biologics Inc | GENETICALLY MODIFIED LOADING ANTIBODIES OR ENHANCED ENHANCEMENT ENHANCEMENT TARGETING PROTEIN COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
KR102561553B1 (ko) | 2013-03-15 | 2023-07-31 | 젠코어 인코포레이티드 | 이형이량체 단백질 |
WO2014144903A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Amgen Inc. | Myostatin antagonism in human subjects |
MX368665B (es) | 2013-03-15 | 2019-10-10 | Abbvie Biotherapeutics Inc | Variantes de fc. |
US10858417B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-12-08 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
JP6505079B2 (ja) | 2013-03-29 | 2019-04-24 | アレクシオン ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 補体c5を標的とする治療薬の血清半減期を増加させるための組成物及び方法 |
SG11201508170TA (en) | 2013-04-02 | 2015-11-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fc REGION VARIANT |
EP2981822B1 (en) | 2013-05-06 | 2020-09-02 | Scholar Rock, Inc. | Compositions and methods for growth factor modulation |
AU2014267171A1 (en) | 2013-05-17 | 2015-12-10 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Anti-CXCL1, CXCL7 and CXCL8 antibodies and their applications |
DK3004174T3 (da) | 2013-05-31 | 2019-07-22 | Zymeworks Inc | Heteromultimerer med reduceret eller nedreguleret effektorfunktion |
PT3406633T (pt) | 2013-07-25 | 2022-05-04 | Cytomx Therapeutics Inc | Anticorpos multi-específicos, anticorpos ativáveis multi-específicos e métodos de utilização dos mesmos |
BR112016002198A2 (pt) | 2013-08-14 | 2017-09-12 | Novartis Ag | métodos de tratamento de miosite por corpos de inclusão esporádica |
WO2015023972A1 (en) | 2013-08-16 | 2015-02-19 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of graft rejection by administering a complement inhibitor to an organ prior to transplant |
EP2853898B1 (en) | 2013-09-27 | 2017-01-04 | Medizinische Hochschule Hannover | Analysis of myostatin in serum |
KR102441231B1 (ko) | 2013-09-27 | 2022-09-06 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 폴리펩티드 이종 다량체의 제조방법 |
EP3940065A1 (en) | 2013-09-30 | 2022-01-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing antigen-binding molecule using modified helper phage |
WO2015063339A1 (en) | 2013-11-04 | 2015-05-07 | Glenmark Pharmaceuticals S.A. | Production of t cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins |
EP3100056A2 (en) | 2014-01-27 | 2016-12-07 | Novartis AG | Biomarkers predictive of muscle atrophy, method and use |
RU2019119862A (ru) | 2014-02-20 | 2019-07-15 | Аллерган, Инк. | Антитела к компоненту комплемента c5 |
NZ631007A (en) | 2014-03-07 | 2015-10-30 | Alexion Pharma Inc | Anti-c5 antibodies having improved pharmacokinetics |
PL3130606T3 (pl) | 2014-04-07 | 2022-02-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Przeciwciała dwuswoiste aktywujące układ odpornościowy |
TW201622746A (zh) | 2014-04-24 | 2016-07-01 | 諾華公司 | 改善或加速髖部骨折術後身體復原之方法 |
WO2015174439A1 (ja) | 2014-05-13 | 2015-11-19 | 中外製薬株式会社 | 免疫抑制機能を有する細胞に対するt細胞リダイレクト抗原結合分子 |
TW201625299A (zh) | 2014-06-20 | 2016-07-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物 |
CA2953714C (en) | 2014-06-30 | 2021-05-18 | Ralf Guenther | Anti-tnfa antibodies with ph-dependent antigen binding |
MA40764A (fr) | 2014-09-26 | 2017-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité |
JP6630036B2 (ja) | 2014-09-30 | 2020-01-15 | Jsr株式会社 | 標的物の精製方法、及び、ミックスモード用担体 |
WO2016073853A1 (en) | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Scholar Rock, Inc. | Anti-pro/latent-myostatin antibodies and uses thereof |
WO2016073906A2 (en) | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Scholar Rock, Inc. | Transforming growth factor-related immunoassays |
KR20170094292A (ko) | 2014-12-08 | 2017-08-17 | 노파르티스 아게 | 근육감소증의 치료를 위한 미오스타틴 또는 액티빈 길항제 |
SI3233921T1 (sl) | 2014-12-19 | 2022-01-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Protitelesa proti C5 in postopki za uporabo |
AR103161A1 (es) | 2014-12-19 | 2017-04-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos antimiostatina y regiones fc variantes así como métodos de uso |
CN113956354A (zh) | 2015-01-22 | 2022-01-21 | 中外制药株式会社 | 两种以上抗-c5抗体的组合与使用方法 |
KR20170110129A (ko) | 2015-02-05 | 2017-10-10 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용 |
AU2016224409B2 (en) | 2015-02-27 | 2021-01-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Composition for treating IL-6-related diseases |
JP6944375B2 (ja) | 2015-03-31 | 2021-10-06 | アレクシオン ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 発作性夜間血色素尿症(pnh)患者の亜集団の同定および処置 |
US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
AU2016249015B2 (en) | 2015-04-15 | 2022-03-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of increasing strength and functionality with GDF8 inhibitors |
MX2017010734A (es) | 2015-04-17 | 2017-12-04 | Hoffmann La Roche | Terapia de combinacion con factores de coagulacion y anticuepos multiespecificos. |
JP2018123055A (ja) | 2015-04-24 | 2018-08-09 | 公立大学法人奈良県立医科大学 | 血液凝固第viii因子(fviii)の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第xi因子(fxi)異常症の予防および/または治療に用いられる医薬組成物 |
WO2016178980A1 (en) | 2015-05-01 | 2016-11-10 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Efficacy of an anti-c5 antibody in the prevention of antibody mediated rejection in sensitized recipients of kindney thansplant |
WO2016209956A1 (en) | 2015-06-26 | 2016-12-29 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | A method for treating a patient in compliance with vaccination with eculizumab or an eculizumab variant |
US10940126B2 (en) | 2015-07-03 | 2021-03-09 | Camilla Svensson | Inhibition of IL-8 in the treatment of pain and/or bone loss |
MX2018003196A (es) | 2015-09-15 | 2019-05-16 | Scholar Rock Inc | Anticuerpos anti-promiostatina o miostatina latente y usos de los mismos. |
CN108271372B (zh) | 2015-09-18 | 2021-07-09 | 中外制药株式会社 | Il-8-结合抗体及其应用 |
TW201718014A (zh) | 2015-10-12 | 2017-06-01 | 諾華公司 | C5抑制劑於移植相關微血管病之用途 |
MY189425A (en) | 2015-12-18 | 2022-02-10 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use |
AU2016372930B2 (en) | 2015-12-18 | 2020-10-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-C5 antibodies and methods of use |
EP3394098A4 (en) | 2015-12-25 | 2019-11-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTI-MYOSTATIN ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
EP3398965A4 (en) | 2015-12-28 | 2019-09-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD FOR PROMOTING THE EFFICACY OF PURIFYING A POLYPEPTIDE CONTAINING AN FC REGION |
US10287345B2 (en) | 2016-01-08 | 2019-05-14 | Scholar Rock, Inc. | Methods for inhibiting myostatin activation by administering anti-pro/latent myostatin antibodies |
EP3402816A1 (en) | 2016-01-11 | 2018-11-21 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment |
TWI797073B (zh) | 2016-01-25 | 2023-04-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | 包含雙特異性抗體建構物之醫藥組合物 |
JP6175590B1 (ja) | 2016-03-14 | 2017-08-02 | 中外製薬株式会社 | 癌の治療に用いるための細胞傷害誘導治療剤 |
TW202214700A (zh) | 2016-03-14 | 2022-04-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 用於癌之治療的細胞傷害誘導治療劑 |
CN108883178B (zh) | 2016-04-28 | 2023-03-14 | 中外制药株式会社 | 含抗体制剂 |
HUE051480T2 (hu) | 2016-06-13 | 2021-03-01 | Scholar Rock Inc | Miosztatin-inhibitorok alkalmazása és kombinációs terápiák |
MX2018014375A (es) | 2016-06-17 | 2019-04-22 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos antimiostatina y metodos de uso. |
CR20190013A (es) | 2016-06-17 | 2019-03-05 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos anti-c5 y métodos de uso |
EP3494991A4 (en) | 2016-08-05 | 2020-07-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING DISEASES RELATING TO IL-8 |
JP6383122B2 (ja) | 2017-01-31 | 2018-08-29 | 中外製薬株式会社 | C5関連疾患の治療または予防用の医薬組成物およびc5関連疾患を治療または予防するための方法 |
AU2018236218A1 (en) | 2017-03-14 | 2019-09-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies binding to vista at acidic pH |
JP7209298B2 (ja) | 2017-03-31 | 2023-01-20 | 公立大学法人奈良県立医科大学 | 血液凝固第viii因子の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第ix因子異常症の予防および/または治療に用いられる医薬組成物 |
CA3080187A1 (en) | 2017-10-26 | 2019-05-02 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (pnh) and atypical hemolytic uremic syndrome (ahus) |
EP3720463A1 (en) | 2017-12-04 | 2020-10-14 | RA Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of complement activity |
WO2020027279A1 (en) | 2018-08-01 | 2020-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | A pharmaceutical composition for use in the treatment or prevention of a c5-related disease and a method for treating or preventing a c5-related disease |
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Patent Citations (1)
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WO1998003546A1 (en) * | 1996-07-19 | 1998-01-29 | Amgen Inc. | Analogs of cationic proteins |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
DEL RIO G. ET AL.An engineered penicillin acylase with altered surface charge is more stable in alkaline pH.《ANN. N. Y. ACAD. SCI.》.1996,第799卷61-64. * |
GHETIE V ET AL.Multiple roles for the major histocompatibility complex class I-related receptor FcRn.《ANNUAL REVIEW OF IMMUNOLOGY》.2000,739-766. * |
KHAWLI L.A. ET AL.Improved tumor localization and radioimaging with chemically modified monoclonal antibodies.《CANCER BIOTHR. RADIOPHARM》.1996,第11卷(第3期),203-215. * |
LANCE W L ET AL.Crystal Structure at 2.8 A° of an FcRn/Heterodimeric Fc Complex: Mechanism of pH-Dependent Binding.《MOLECULAR CELL》.2001,第7卷867-877. * |
ONDA M. ET AL.Lowering the Isoelectric Point of the Fv Portion of Recombinant Immunotoxins Leas to Decreased Nonspecific Animal Toxicity Without Affecting Antitumor Activity.《CANCER RES》.2001,第61卷(第13期),5070-5077. * |
SHIELDS R L ET AL.High resolution mapping of the binding site on human IgG1 for FcgammaRI, FcgammaRII, FcgammaRIII, and FcRn and design of IgG1 variants with improved binding to the FcgammaR.《JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》.2001,第276卷(第9期),6591-6604. * |
YAMASAKI Y. ET AL.Pharmacokinetic analysis of in vivo disposition of succinylated proteins targeted to liver nonparenchymal cells via scavenger receptors: importance of molecular size and negative charge density for in vivo recognition by receptors.《J. PHARMACOL. EXP. THER》.2002,第301卷(第2期),467-477. * |
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