JP6944375B2 - 発作性夜間血色素尿症（ｐｎｈ）患者の亜集団の同定および処置 - Google Patents

Description

発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）は、赤血球（ＲＢＣ）、血小板および白血球（ＷＢＣ）の表面における補体調節タンパク質（ＣＤ５５およびＣＤ５９）の損失を生じる、骨髄中の造血幹細胞における後天性遺伝子変異に起因する慢性かつ衰弱性の疾患である。ＰＮＨの中心的機構は、慢性血管内溶血および血小板活性化をもたらす、制御不能の補体活性である。溶血の結果の１つは、ＲＢＣ総数の低下であり、溶血の速度がＲＢＣ産生を上回ると、貧血が生じる。溶血したＲＢＣからの無細胞ヘモグロビンの放出は、一酸化窒素（ＮＯ）の消費を直接もたらし、これは、血管平滑筋および他の平滑筋の収縮ならびに血小板活性化を引き起こし、ＰＮＨの患者における血栓症、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、肺高血圧症および終末器官損傷を生じる。溶血を有する患者は、診察時にまたは発作の間に明らかに重度の臨床症状を示さない場合があるが、経時的な罹患率および死亡率増加によって証明される通り、そのＰＮＨ関連の合併症は、慢性溶血の存在下で悪化し続ける。

ＰＮＨ患者の有効な処置は、補体成分Ｃ５の阻害に基づく。市販の抗体療法である、Ｃ５を標的とするエクリズマブはＰＮＨの患者にとって人生を変えるような治療的処置である。早期にＰＮＨ患者を診断および処置することには利益があり、重度症状の非存在下であっても処置の利益を受ける可能性がある患者を同定する必要があるため、処置応答性患者の１または複数の亜集団の同定に有用な材料および方法が必要とされる。

本発明は、少なくとも一部には、従来のＰＮＨ症状（例えば、再生不良性貧血、溶血性貧血、鉄欠乏性貧血）、出血性症状、黄疸、血栓症または塞栓症、感染症、神経学的症状、血色素尿症、溶血性貧血、骨髄不全、血栓性素因、血管運動神経性緊張（vasomotor tone）、呼吸困難、一酸化窒素枯渇、胃腸管症状（例えば、腹痛）、背部痛、慢性腎疾患、呼吸困難、嚥下障害、胸痛、勃起機能不全および疲労）および／または患者の輸血歴の欠如に関係なく、例えば、エクリズマブ等の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片で処置されるべき候補として、ＰＮＨ患者を同定することができるという発見に基づく。本明細書に記載されているデータは、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮ（正常の上限）の乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）濃度を有し、ＰＮＨ症状および／または輸血の病歴がない患者が、疾患の相当な負荷を有し、罹患率および死亡率のリスクが増加していることを示す。エクリズマブで処置した患者の中で、ＬＤＨレベルの正常化によって示される臨床的および統計的に有意な溶血低下、ならびに臨床症状の改善が実証される。これらのデータは、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮの乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）濃度を有し、ＰＮＨ症状の病歴がない患者への抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与に都合よい利益／リスクプロファイルを支持する。

例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号１０および１１に示す配列を有する重鎖および軽鎖を含むエクリズマブ（Ｓｏｌｉｒｉｓ（登録商標））、またはその抗原結合性断片およびバリアントである。他の実施形態では、抗体は、抗体ＢＮＪ４４１の重鎖および軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）または可変領域（ＶＲ）を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号７に示す配列を有する抗体ＢＮＪ４４１の重鎖可変（ＶＨ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号８に示す配列を有する抗体ＢＮＪ４４１の軽鎖可変（ＶＬ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１、２および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号７および配列番号８に表記されるアミノ酸配列を有するＶＨおよびＶＬ領域を含む。

別の例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号１４および１１に示す配列を有する重鎖および軽鎖を含む抗体ＢＮＪ４４１（ＡＬＸＮ１２１０としても公知）、またはその抗原結合性断片およびバリアントである。他の実施形態では、抗体は、抗体ＢＮＪ４４１の重鎖および軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）または可変領域（ＶＲ）を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に示す配列を有する抗体ＢＮＪ４４１の重鎖可変（ＶＨ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号８に示す配列を有する抗体ＢＮＪ４４１の軽鎖可変（ＶＬ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む。

別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２および配列番号８に表記されるアミノ酸配列を有するＶＨおよびＶＬ領域を含む。

別の実施形態では、抗体は、配列番号１３に表記する重鎖定常領域を含む。

別の実施形態では、抗体は、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含み、ここで、バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域は、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む。

別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含み、ここで、バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域は、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む。

一実施形態では、本開示は、発作性夜間血色素尿症を有する患者に有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を投与するステップを含む、血管内溶血を低下させる方法であって、処置に先立ち、患者が、約≧１．５×ＵＬＮの乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、患者が、従来のＰＮＨ症状（例えば、再生不良性貧血、溶血性貧血、鉄欠乏性貧血）、出血性症状、黄疸、血栓症または塞栓症、感染症、神経学的症状、血色素尿症、溶血性貧血、骨髄不全、血栓性素因、血管運動神経性緊張、呼吸困難、一酸化窒素枯渇、胃腸管症状（例えば、腹痛）、背部痛、慢性腎疾患、呼吸困難、嚥下障害、胸痛、勃起機能不全および疲労））を示さない、方法を対象にする。特定の実施形態では、患者は、約１．５×ＵＬＮ〜約３．５×ＵＬＮの乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有すると決定される。特定の実施形態では、患者は、輸血を受けたことがない。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１、２および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者患者に投与するステップを含み、処置に先立ち、患者患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法を対象にする。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者患者に投与するステップを含み、処置に先立ち、患者患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法を対象にする。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、それぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者に投与するステップを含み、バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域が、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含み、処置に先立ち、患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法を対象にする。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１、２および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者に投与するステップと
を含む方法を対象にする。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者に投与するステップと
を含む方法を対象にする。

別の実施形態では、本開示は、ＰＮＨを有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、それぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を患者に投与するステップであって、バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域が、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む、ステップと
を含む方法を対象にする。

特定の実施形態では、患者は、血栓症または疲労の病歴を持たない。患者患者患者。

特定の実施形態では、処置は、６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、４週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる。特定の実施形態では、処置の初期相に続いて、第５週目の間に９００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる。特定の実施形態では、維持相に続いて、１４±２日毎に９００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる。特定の実施形態では、患者は、約３０〜約４０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる。特定の実施形態では、処置の初期相に続いて、第３週目の間に９００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる。特定の実施形態では、維持相に続いて、２週間毎に９００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる。

特定の実施形態では、患者は、約２０〜約３０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる。特定の実施形態では、処置の初期相に続いて、第３週目の間に６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる。特定の実施形態では、維持相に続いて、２週間毎に６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる。特定の実施形態では、患者は、約１０〜約２０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる。特定の実施形態では、処置の初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる。特定の実施形態では、維持相に続いて、２週間毎に３００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる。特定の実施形態では、患者は、約５〜約１０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、３００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる。特定の実施形態では、処置の初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる。特定の実施形態では、維持相に続いて、３週間毎に３００ｍｇの抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる。

本明細書に提供される処置方法の有効性は、任意の適した手段を使用して評価することができる。一実施形態では、処置は、終末補体阻害をもたらす。別の実施形態では、処置は、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルによって評価される溶血の低下をもたらす。一実施形態では、患者は、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片による処置の６ヶ月以内に、正常乳酸デヒドロゲナーゼ濃度への復帰を経験する。別の実施形態では、処置は、遊離ヘモグロビン、ハプトグロビン、網状赤血球数、ＰＮＨ赤血球（ＲＢＣ）クローンおよびＤ−ダイマーからなる群から選択される溶血関連の血液学的バイオマーカーの正常レベルに向かうシフトを生じる。別の実施形態では、処置は、主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）の低下を生じる。別の実施形態では、処置は、推定糸球体濾過率（ｅＧＦＲ）およびスポット尿中（spot urine）：アルブミン：クレアチニンおよび血漿脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）からなる群から選択される慢性疾患関連バイオマーカーの正常レベルに向かうシフトを生じる。別の実施形態では、処置は、慢性疾病治療の機能評価（Functional Assessment of Chronic Illness Therapy）（ＦＡＣＩＴ）−疲労尺度（Fatigue Scale）、バージョン４および欧州がん研究・治療機構（European Organisation for Research and Treatment of Cancer）、クオリティ・オブ・ライフ質問表（Quality of Life Questionnaire）−コア３０尺度（Core 30 Scale）により評価されるクオリティ・オブ・ライフのベースラインからの変化を生じる。

抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片は、任意の適した手段によって患者に投与することができる。一実施形態では、抗体は、静脈内投与のために製剤化される。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１、２および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者患者に投与するステップを含み、処置に先立ち、該患者患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、該患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法。
（項目２）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者患者に投与するステップを含み、処置に先立ち、該患者患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、該患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法。
（項目３）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、それぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含む、有効量の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者に投与するステップを含み、該バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域が、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含み、処置に先立ち、該患者が、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度によって決定される高い疾患活動性を有すると決定され、該患者が、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない、方法。
（項目４）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１、２および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者に投与するステップと
を含む方法。
（項目５）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者に投与するステップと
を含む方法。
（項目６）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させる方法であって、
（ｉ）ＰＮＨ患者の亜集団から、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、処置に先立ちＰＮＨの症状を示さない患者を選択するステップと、
（ｉｉ）それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、それぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含む、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を該患者に投与するステップであって、該バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域が、それぞれＥＵナンバリングでメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む、ステップと
を含む方法。
（項目７）
前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１２に示される重鎖可変領域および配列番号８に示される軽鎖可変領域を含む、項目２〜３および５〜６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１３に示される重鎖定常領域をさらに含む、項目２〜３および５〜６のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドおよび配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む、項目２〜３および５〜６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記患者患者が、約１．５×ＵＬＮ〜約３．５×ＵＬＮの乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有すると決定される、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記患者患者が、輸血を受けたことがない、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記患者患者が、血栓症および／または疲労の病歴を持たない、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。
患者患者
（項目１３）
前記処置された患者患者が、前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片による処置の６ヶ月以内に、正常乳酸デヒドロゲナーゼ濃度への復帰を経験する、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
処置が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、４週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
処置の前記初期相に続いて、第５週目の間に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記維持相に続いて、１４±２日毎に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記患者が、約３０〜約４０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる、項目１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
処置の前記初期相に続いて、第３週目の間に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記維持相に続いて、２週間毎に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記患者が、約２０〜約３０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる、項目１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
処置の前記初期相に続いて、第３週目の間に６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記維持相に続いて、２週間毎に６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記患者が、約１０〜約２０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる、項目１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
処置の前記初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記維持相に続いて、２週間毎に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記患者が、約５〜約１０ｋｇの間の体重を有する小児患者であり、処置が、３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる、項目１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
処置の前記初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記維持相に続いて、３週間毎に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、静脈内注入により投与される、先行する項目のいずれか一項に記載の方法。

本文書を通して様々な定義が使用されている。大部分の単語は、当業者によって用いられる単語に帰せられる意味を有する。本文書の後述または他の箇所のいずれかで特に定義されている単語は、全体として、当業者によって典型的に理解される通りの、本発明との関連において提示される意味を有する。例えば、本明細書において使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、内容がそれ以外を明らかに指示しない限り、複数の参照を含む。他に定義されていなければ、本明細書に使用されているあらゆる技術および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本発明における使用のための方法および材料が本明細書に記載されている；当該技術分野で公知の他の適した方法および材料を使用することもできる。矛盾が生じる場合、定義を含む本明細書が優先される。

例えば、エクリズマブ等の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片による発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）のための処置に対して応答性である患者の集団の同定に有用な材料および方法が、本明細書に提供される。特定の分析物（複数可）、例えば、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の濃度を決定するための方法であって、患者のＬＤＨ濃度が、ＰＮＨおよび／またはＰＮＨ関連の形態（morphology）に関する患者の状態を示し、ＰＮＨ処置レジメンに対する患者の応答可能性も示す方法が、本明細書に記載されている。処置の臨床利益の証拠は、予想外なことに、輸血歴があるＰＮＨの患者に限定されないことが見出されたが、本明細書に示す通り、以前の輸血歴がない、および／または従来のＰＮＨ症状（例えば、再生不良性貧血、溶血性貧血、鉄欠乏性貧血）、出血性症状、黄疸、血栓症または塞栓症、感染症、神経学的症状、血色素尿症、溶血性貧血、骨髄不全、血栓性素因、血管運動神経性緊張、呼吸困難、一酸化窒素枯渇、胃腸管症状（例えば、腹痛）、背部痛、慢性腎疾患、呼吸困難、嚥下障害、胸痛、勃起機能不全および疲労）を欠いた患者においても実証される。後述する態様のいずれかを、任意の組合せにおいて、または当該技術分野で公知の任意の他の要素と共に使用することができる。

本明細書において使用する場合、用語「患者（patient）」または「患者（patient）」は、ヒト患者（例えば、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有する患者）である。

本明細書において使用する場合、「有効な処置」は、有益な効果、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの症状の寛解を生じる処置を指す。有益な効果は、ベースラインを上回る改善、すなわち、本方法に従った治療の開始前に為された測定または観察を上回る改善の形態（form）をとることができる。

用語「有効量」は、所望の生物学的、治療的および／または予防的結果をもたらす薬剤の量を指す。この結果は、疾患の徴候、症状もしくは原因のうち１つもしくは複数の低下、寛解、緩和、低減、遅延および／もしくは軽減、または生物システムの任意の他の所望の変更であり得る。有効量は、１回または複数回の投与で施行することができる。

本明細書において使用する場合、用語「初期相」、「導入」および「導入相」は、互換的に使用され、臨床治験における処置の第一相を指す。

本明細書において使用する場合、用語「維持」および「維持相」は、互換的に使用され、臨床治験における処置の第二相を指す。ある特定の実施形態では、処置は、臨床利益が観察される限り、または管理できない毒性もしくは疾患進行が生じるまで続けられる。

本明細書において使用する場合、用語「固定用量」、「一定（flat）用量」および「一定固定用量」は、互換的に使用され、患者の体重または体表面積（ＢＳＡ）を考慮することなく患者に投与される用量を指す。したがって、固定または一定用量は、ｍｇ／ｋｇ用量として提示されず、むしろ薬剤（例えば、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片）の絶対量として提示される。

用語「抗体」は、少なくとも１個の抗体由来抗原結合部位（例えば、ＶＨ／ＶＬ領域またはＦｖまたはＣＤＲ）を含むポリペプチドについて記載する。抗体は、公知の形態の抗体を含む。例えば、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体またはキメラ抗体であり得る。抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’２、ＳｃＦｖ、ＳＭＩＰ、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）、ナノボディまたはドメイン抗体でもあり得る。抗体は、次のアイソタイプのいずれかの抗体でもあり得る：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＡｓｅｃ、ＩｇＤおよびＩｇＥ。抗体は、天然起源の抗体であっても、タンパク質工学技法（例えば、変異、欠失、置換、非抗体部分へのコンジュゲーションによる）によって変更された抗体であってもよい。例えば、抗体は、抗体の特性（例えば、機能特性）を変化させる１個または複数個のバリアントアミノ酸（天然起源の抗体と比較して）を含むことができる。例えば、多数のかかる変更は、当該技術分野で公知であり、これらは、例えば、患者における半減期、エフェクター機能および／または抗体に対する免疫応答に影響を与える。用語、抗体は、少なくとも１個の抗体由来抗原結合部位を含む人工または操作されたポリペプチド構築物も含む。

本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、補体成分Ｃ５（例えば、ヒトＣ５）に結合し、Ｃ５から断片Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの切断を阻害する。上述の通り、かかる抗体は、例えば、治療目的で使用される他の抗Ｃ５抗体（例えば、エクリズマブ）と比べて改善された薬物動態特性も有する。

本発明における使用に適した抗Ｃ５抗体（またはそれに由来するＶＨ／ＶＬドメイン）は、当該技術分野で周知の方法を使用して作製することができる。あるいは、当該技術分野で認識されている抗Ｃ５抗体を使用することができる。Ｃ５への結合に関してこれらの当該技術分野で認識されている抗体のいずれかと競合する抗体を使用することもできる。

例示的な抗Ｃ５抗体は、エクリズマブ（Ｓｏｌｉｒｉｓ（登録商標）；Ａｌｅｘｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｃｈｅｓｈｉｒｅ、ＣＴ）、またはエクリズマブと同様Ｃ５上の同じエピトープに結合するもしくはＣ５への結合に関してエクリズマブと競合する抗体である（例えば、Kaplan（２００２年）Curr Opin Investig Drugs ３巻（７号）：１０１７〜２３頁；Hill（２００５年）Clin Adv Hematol Oncol ３巻（１１号）：８４９〜５０頁；およびRotherら（２００７年）Nature Biotechnology ２５巻（１１号）：１２５６〜１４８８頁を参照）。Ｓｏｌｉｒｉｓ（登録商標）は、マウス骨髄腫細胞培養によって産生され標準バイオプロセス技術によって精製された組換えヒト化モノクローナルＩｇＧ２／４κ抗体である、エクリズマブの製剤である。エクリズマブは、ヒトＩｇＧ２配列およびヒトＩｇＧ４配列由来のヒト定常領域、ならびにヒトフレームワーク軽鎖および重鎖可変領域にグラフトされたマウス相補性決定領域を含有する。エクリズマブは、２本の４４８アミノ酸重鎖および２本の２１４アミノ酸軽鎖で構成され、およそ１４８ｋＤａの分子量を有する。エクリズマブは、それぞれ配列番号１０および１１に表記される重鎖および軽鎖アミノ酸配列；それぞれ配列番号７および８に表記される重鎖および軽鎖可変領域アミノ酸配列；ならびにそれぞれ配列番号１、２および３ならびに４、５および６に表記される重鎖可変領域ＣＤＲ１〜３および軽鎖可変領域ＣＤＲ１〜３配列を含む。

別の例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号１４および１１に示す配列を有する重鎖および軽鎖を含む抗体ＢＮＪ４４１、またはそれらの抗原結合性断片およびバリアントである。ＢＮＪ４４１（ＡＬＸＮ１２１０としても公知）は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１９２２５および米国特許第９，０７９，９４９号に記載されており、それらの教示（the teachings or which）は参照により本明細書に組み込まれている。ＢＮＪ４４１は、エクリズマブ（Ｓｏｌｉｒｉｓ（登録商標））に構造的に関係するヒト化モノクローナル抗体である。ＢＮＪ４４１は、ヒト補体タンパク質Ｃ５に選択的に結合し、補体活性化の間のＣ５ａおよびＣ５ｂへのその切断を阻害する。この阻害は、微生物のオプソニン化および免疫複合体のクリアランスに必須の補体活性化の近位または初期成分（例えば、Ｃ３およびＣ３ｂ）を保存しつつ、炎症促進性メディエータＣ５ａの放出および細胞溶解ポア形成膜攻撃複合体Ｃ５ｂ−９の形成を防止する。

他の実施形態では、抗体は、ＢＮＪ４４１の重鎖および軽鎖ＣＤＲまたは可変領域を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に表記される配列を有するＢＮＪ４４１のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号８に表記される配列を有するＢＮＪ４４１のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２および配列番号８に表記されるアミノ酸配列を有するＶＨおよびＶＬ領域を含む。

別の例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号２０および１１に示す配列を有する重鎖および軽鎖を含む抗体ＢＮＪ４２１、またはその抗原結合性断片およびバリアントである。ＢＮＪ４２１（ＡＬＸＮ１２１１としても公知）は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１９２２５および米国特許第９，０７９，９４９号に記載されており、それらの教示は参照により本明細書に組み込まれている。

他の実施形態では、抗体は、ＢＮＪ４２１の重鎖および軽鎖ＣＤＲまたは可変領域を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に表記される配列を有するＢＮＪ４２１のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号８に表記される配列を有するＢＮＪ４２１のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２および配列番号８に表記されるアミノ酸配列を有するＶＨおよびＶＬ領域を含む。

ＣＤＲの正確な境界は、異なる方法に従って異なって定義された。一部の実施形態では、軽鎖または重鎖可変ドメイン内のＣＤＲまたはフレームワーク領域の位置は、Kabatら［（１９９１年）「Sequences of Proteins of Immunological Interest.」ＮＩＨ出版番号９１−３２４２、米国保健社会福祉省（U.S. Department of Health and Human Services）、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ］によって定義されたものであってよい。このような場合、ＣＤＲは、「Ｋａｂａｔ ＣＤＲ」（例えば、「Ｋａｂａｔ ＬＣＤＲ２」または「Ｋａｂａｔ ＨＣＤＲ１」）と称することができる。一部の実施形態では、軽鎖または重鎖可変領域のＣＤＲの位置は、Chothiaら（１９８９年）Nature ３４２巻：８７７〜８８３頁によって定義されたものであってよい。したがって、これらの領域は、「Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲ」（例えば、「Ｃｈｏｔｈｉａ ＬＣＤＲ２」または「Ｃｈｏｔｈｉａ ＨＣＤＲ３」）と称することができる。一部の実施形態では、軽鎖および重鎖可変領域のＣＤＲの位置は、Ｋａｂａｔ−Ｃｈｏｔｈｉａの組み合わせた定義によって定義されたものであってよい。かかる実施形態では、これらの領域は、「組み合わせたＫａｂａｔ−Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲ」と称することができる。Thomasら［（１９９６年）Mol Immunol ３３巻（１７／１８号）：１３８９〜１４０１頁］は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ定義に従ったＣＤＲ境界の同定を例証する。

一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、次のアミノ酸配列を含むまたはそれからなる重鎖ＣＤＲ１を含む：

一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、次のアミノ酸配列を含むまたはそれからなる重鎖ＣＤＲ２を含む：

一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、次のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む：

一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、次のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む：

本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、バリアントヒトＦｃ定常領域が由来するネイティブヒトＦｃ定常領域の親和性よりも大きい親和性でヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含むことができる。例えば、Ｆｃ定常領域は、バリアントヒトＦｃ定常領域が由来するネイティブヒトＦｃ定常領域と比べて、１個または複数個の（例えば、２、３、４、５、６、７もしくは８個またはそれを超える）アミノ酸置換を含むことができる。置換は、相互作用のｐＨ依存を維持しつつ、ｐＨ６．０においてＦｃＲｎに対するバリアントＦｃ定常領域を含有するＩｇＧ抗体の結合親和性を増加させることができる。抗体のＦｃ定常領域における１個または複数個の置換が、（相互作用のｐＨ依存を維持しつつ）ｐＨ６．０におけるＦｃＲｎに対するＦｃ定常領域の親和性を増加させるかどうかを検査するための方法は、当該技術分野で公知であり、実施例において例証されている。例えば、それらそれぞれの開示全体を参照により本明細書に組み込む、ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１９２２５および米国特許第９，０７９９４９号を参照されたい。

ＦｃＲｎに対する抗体Ｆｃ定常領域の結合親和性を増強する置換は、当該技術分野で公知であり、例えば、（１）Dall'Acquaら（２００６年）J Biol Chem ２８１巻：２３５１４〜２３５２４頁によって記載されたＭ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ三重置換；（２）Hintonら（２００４年）J Biol Chem ２７９巻：６２１３〜６２１６頁およびHintonら（２００６年）J Immunol １７６巻：３４６〜３５６頁に記載されているＭ４２８ＬまたはＴ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌ置換；ならびに（３）Petkovaら（２００６年）Int Immunol １８巻（１２号）：１７５９〜６９頁に記載されているＮ４３４ＡまたはＴ３０７／Ｅ３８０Ａ／Ｎ４３４Ａ置換を含む。追加の置換ペアリング：Ｐ２５７Ｉ／Ｑ３１１Ｉ、Ｐ２５７Ｉ／Ｎ４３４ＨおよびＤ３７６Ｖ／Ｎ４３４Ｈは、例えば、その開示全体を参照により本明細書に組み込む、Datta-Mannanら（２００７年）J Biol Chem ２８２巻（３号）：１７０９〜１７１７頁に記載されている。

一部の実施形態では、バリアント定常領域は、ＥＵアミノ酸残基２５５におけるバリンに代えての置換を有する。一部の実施形態では、バリアント定常領域は、ＥＵアミノ酸残基３０９におけるアスパラギンに代えての置換を有する。一部の実施形態では、バリアント定常領域は、ＥＵアミノ酸残基３１２におけるイソロイシンに代えての置換を有する。一部の実施形態では、バリアント定常領域は、ＥＵアミノ酸残基３８６における置換を有する。

一部の実施形態では、バリアントＦｃ定常領域は、これが由来するネイティブ定常領域と比べて、３０個以下（例えば、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３または２個以下）のアミノ酸置換、挿入または欠失を含む。一部の実施形態では、バリアントＦｃ定常領域は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｎ４３４Ｓ、Ｍ４２８Ｌ、Ｖ２５９Ｉ、Ｔ２５０ＩおよびＶ３０８Ｆからなる群から選択される１個または複数個のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、バリアントヒトＦｃ定常領域は、それぞれＥＵナンバリングで位置４２８にメチオニンおよび位置４３４にアスパラギンを含む。一部の実施形態では、バリアントＦｃ定常領域は、例えば、米国特許第８．０８８，３７６号に記載されている４２８Ｌ／４３４Ｓ二重置換を含む。

一部の実施形態では、これらの変異の的確な位置は、抗体工学によりネイティブヒトＦｃ定常領域位置からシフトされる場合がある。例えば、ＢＮＪ４４１に見出され、その開示全体を参照により本明細書に組み込む米国特許番号９，０７９，９４９号に記載されているＭ４２９ＬおよびＮ４３５Ｓバリアントにおけるものと同様に、ＩｇＧ２／４キメラＦｃにおいて使用される場合の４２８Ｌ／４３４Ｓ二重置換は、４２９Ｌおよび４３５Ｓに対応し得る。

一部の実施形態では、バリアント定常領域は、ネイティブヒトＦｃ定常領域と比べて、アミノ酸位置２３７、２３８、２３９、２４８、２５０、２５２、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２６５、２７０、２８６、２８９、２９７、２９８、３０３、３０５、３０７、３０８、３０９、３１１、３１２、３１４、３１５、３１７、３２５、３３２、３３４、３６０、３７６、３８０、３８２、３８４、３８５、３８６、３８７、３８９、４２４、４２８、４３３、４３４または４３６（ＥＵナンバリング）に置換を含む。一部の実施形態では、置換は、次のものからなる群から選択される：全てＥＵナンバリングで、位置２３７におけるグリシンに代えてメチオニン；位置２３８におけるプロリンに代えてアラニン；位置２３９におけるセリンに代えてリシン；位置２４８におけるリシンに代えてイソロイシン；位置２５０におけるスレオニンに代えてアラニン、フェニルアラニン、イソロイシン、メチオニン、グルタミン、セリン、バリン、トリプトファンまたはチロシン；位置２５２におけるメチオニンに代えてフェニルアラニン、トリプトファンまたはチロシン；位置２５４におけるセリンに代えてスレオニン；位置２５５におけるアルギニンに代えてグルタミン酸；位置２５６におけるスレオニンに代えてアスパラギン酸、グルタミン酸またはグルタミン；位置２５７におけるプロリンに代えてアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、セリン、スレオニンまたはバリン；位置２５８におけるグルタミン酸に代えてヒスチジン；位置２６５におけるアスパラギン酸に代えてアラニン；位置２７０におけるアスパラギン酸に代えてフェニルアラニン；位置２８６におけるアスパラギンに代えてアラニンまたはグルタミン酸；位置２８９におけるスレオニンに代えてヒスチジン；位置２９７におけるアスパラギンに代えてアラニン；位置２９８におけるセリンに代えてグリシン；位置３０３におけるバリンに代えてアラニン；位置３０５におけるバリンに代えてアラニン；位置３０７におけるスレオニンに代えてアラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、バリン、トリプトファンまたはチロシン；位置３０８におけるバリンに代えてアラニン、フェニルアラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、プロリン、グルタミンまたはスレオニン；位置３０９におけるロイシンまたはバリンに代えてアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリンまたはアルギニン；位置３１１におけるグルタミンに代えてアラニン、ヒスチジンまたはイソロイシン；位置３１２におけるアスパラギン酸に代えてアラニンまたはヒスチジン；位置３１４におけるロイシンに代えてリシンまたはアルギニン；位置３１５におけるアスパラギンに代えてアラニンまたはヒスチジン；位置３１７におけるリシンに代えてアラニン；位置３２５におけるアスパラギンに代えてグリシン；位置３３２におけるイソロイシンに代えてバリン；位置３３４におけるリシンに代えてロイシン；位置３６０におけるリシンに代えてヒスチジン；位置３７６におけるアスパラギン酸に代えてアラニン；位置３８０におけるグルタミン酸に代えてアラニン；位置３８２におけるグルタミン酸に代えてアラニン；位置３８４におけるアスパラギンまたはセリンに代えてアラニン；位置３８５におけるグリシンに代えてアスパラギン酸またはヒスチジン；位置３８６におけるグルタミンに代えてプロリン；位置３８７におけるプロリンに代えてグルタミン酸；位置３８９におけるアスパラギンに代えてアラニンまたはセリン；位置４２４におけるセリンに代えてアラニン；位置４２８におけるメチオニンに代えてアラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファンまたはチロシン；位置４３３におけるヒスチジンに代えてリシン；位置４３４におけるアスパラギンに代えてアラニン、フェニルアラニン、ヒスチジン、セリン、トリプトファンまたはチロシン；および位置４３６におけるチロシンまたはフェニルアラニンに代えてヒスチジン。

本明細書に記載されている方法における使用に適した抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、配列番号１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド、および／または配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。あるいは、本明細書に記載されている方法における使用のための抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド、および／または配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。

本明細書に記載されている方法において使用される、本明細書に記載されている抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片は、種々の当該技術分野で認識されている技法を使用して作製することができる。モノクローナル抗体は、当業者によく知られている様々な技法によって得ることができる。簡潔に説明すると、一般的に、所望の抗原で免疫した動物由来の脾臓細胞を骨髄腫細胞と融合することにより不死化する（Kohler & Milstein、Eur. J. Immunol.６巻：５１１〜５１９頁（１９７６年）を参照）。不死化の代替方法は、エプスタイン・バーウイルス、癌遺伝子もしくはレトロウイルスによる形質転換、または当該技術分野で周知の他の方法を含む。単一の不死化細胞から生じるコロニーを、抗原に対する所望の特異性および親和性の抗体の産生に関してスクリーニングし、かかる細胞によって産生されるモノクローナル抗体の収量を、脊椎動物宿主の腹膜腔への注射を含む様々な技法によって増強することができる。あるいは、Huseら、Science ２４６巻：１２７５〜１２８１頁（１９８９年）に概要が述べられている一般プロトコールに従ってヒトＢ細胞由来のＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより、モノクローナル抗体またはその結合断片をコードするＤＮＡ配列を単離することができる。

抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片は、任意の適した手段によって患者に投与することができる。一実施形態では、抗体は、静脈内投与のために製剤化される。

ＬＤＨは、血管内溶血のマーカーである（Hill, A.ら、Br. J. Haematol.、１４９巻：４１４〜２５頁、２０１０年；Hillmen, P.ら、N. Engl. J. Med.、３５０巻：５５２〜９頁、２００４年；Parker, C.ら、Blood、１０６巻：３６９９〜７０９頁、２００５年）。ＲＢＣは、多量のＬＤＨを含有し、無細胞ヘモグロビンおよびＬＤＨ濃度の間の相関が、ｉｎ ｖｉｔｒｏ（Van Lente, F.ら、Clin. Chem.、２７巻：１４５３〜５頁、１９８１年）およびｉｎ ｖｉｖｏ（Kato, G.ら、Blood、１０７巻：２２７９〜８５頁、２００６年）で報告された。溶血の結果は、貧血に依存しない（Hill, A.ら、Haematologica、９３巻（ｓ１号）：３５９頁、Ａｂｓ．０９０３、２００８年；Kanakura, Y.ら、Int. J. Hematol.、９３巻：３６〜４６頁、２０１１年）。

本明細書に示す通り、無細胞ヘモグロビンおよびＬＤＨ濃度の間の相関は、ＰＮＨ患者のモニタリング、診断および処置に、特に、処置、例えば、エクリズマブに応答するＰＮＨ患者の同定に関して重要である。無細胞ヘモグロビンおよびＬＤＨ濃度は、例えば、処置された患者のその後のモニタリングの間に測定して、例えば、臨床開発プログラム（ＴＲＩＵＭＰＨ（発作性夜間血色素尿症におけるエクリズマブを使用した輸血低減の有効性および安全性臨床研究（Transfusion Reduction Efficacy and Safety Clinical Investigation Using Eculizumab in Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria））およびＳＨＥＰＨＥＲＤ（エクリズマブで処置した溶血性ＰＮＨ患者における安全性（Safety in Hemolytic PNH Patients Treated with Eculizumab）：多施設オープンラベル研究デザイン試験）、Ｅ０５−００１）を含む臨床治験における処置の有効性を決定する。本明細書に記載されている通り、ベースラインにおいておよび続く処置期間を通して連続的に得られるＬＤＨ濃度は、溶血の重要な尺度である。無細胞血漿ヘモグロビンのベースラインレベルは、正常の上限を≧１．５倍上回るＬＤＨ（ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮ）を有するＰＮＨの患者において高度に上昇し、ＬＤＨおよび無細胞血漿ヘモグロビンの間には有意な相関がある（Hillmen, P.ら、N. Engl. J. Med.、３５５巻：１２３３〜４３頁、２００６年）。

本開示は、一部には、ＵＬＮを上回るＬＤＨ濃度を示し、エクリズマブ等の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片で処置されていないＰＮＨ患者の亜集団の同定を対象にする。亜集団は、例えば、約１．５×ＵＬＮ、少なくとも約１．５×ＵＬＮ、１．５×ＵＬＮを超える、約１．５×ＵＬＮ〜約３．５×ＵＬＮ、約１．５×ＵＬＮ〜約５．０×ＵＬＮ、約１．５×ＵＬＮ〜約７．５×ＵＬＮ、約１．５×ＵＬＮ〜約１０．０×ＵＬＮ、約１．５×ＵＬＮ〜約１５．０×ＵＬＮ、約２．５×ＵＬＮ、少なくとも約２．５×ＵＬＮ、２．５×ＵＬＮを超える、約２．５×ＵＬＮ〜約５．０×ＵＬＮ、約２．５×ＵＬＮ〜約７．５×ＵＬＮ、約２．５×ＵＬＮ〜約１０．０×ＵＬＮ、約２．５×ＵＬＮ〜約１５．０×ＵＬＮ、約３．５×ＵＬＮ、少なくとも約３．５×ＵＬＮ、約３．５×ＵＬＮを超える、約３．５×ＵＬＮ〜約５．０×ＵＬＮ、約３．５×ＵＬＮ〜約７．５×ＵＬＮ、約３．５×ＵＬＮ〜約１０．０×ＵＬＮまたは約３．５×ＵＬＮ〜約１５．０×ＵＬＮのＬＤＨ濃度を有することができる。本明細書において使用する場合、用語「約」は、値の±２０％、±１０％または±５％を指す。

ＰＮＨ患者の特定の亜集団が、別の方法では重度ＰＮＨ症状を示さないかかる患者であっても、有効に処置され得ることを示すデータが本明細書に記載されている。例えば、エクリズマブ、修飾されたエクリズマブ、バリアントエクリズマブまたは機能的エクリズマブアナログによるかかる処置は、現れる症状の処置において、また、より重度のＰＮＨ症状および発現に対する患者の予防的な処置において有効である。早期処置は、輸血を必要とするポイントまでの患者の状態の劣化（degradation）を防止する。症状として、例えば、溶血、貧血（例えば、再生不良性貧血、溶血性貧血、鉄欠乏性貧血）、出血性症状、黄疸、血栓症または塞栓症、感染症、神経学的症状、血色素尿症、溶血性貧血、骨髄不全、血栓性素因、血管運動神経性緊張、呼吸困難、一酸化窒素枯渇、胃腸管症状（例えば、腹痛）、背部痛、慢性腎疾患、嚥下障害、勃起機能不全および疲労が挙げられるがこれらに限定されない。ＰＮＨ関連の症状は、例えば、ＰＮＨまたはＰＮＨの処置の結果であり得る。ＰＮＨに関連する症状は、重度、軽度として発現し得るか、または発現し得ない。当業者であれば、本明細書に記載されているデータが提供されると、ＵＬＮよりも高いＬＤＨ濃度を有すると同定されるＰＮＨ患者の亜集団が、ＰＮＨ関連の形態を示す、またはかかる形態を示すリスクがあることを認識する。以前の研究は、例えば、輸血を受けた病歴を有する患者におけるエクリズマブの必要性を示したが、輸血歴がないおよび／または従来のＰＮＨ症状を欠く集団において、その集団がＬＤＨレベルの上昇を示す限り、エクリズマブ処置が有効であることを示すデータが本明細書に記載されている。

患者患者（patientpatient）本明細書に示す通り、例えば、エクリズマブを受けたことがないＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者において、輸血歴に関係なく主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）の実質的なリスクがあり、これが、ＰＮＨに関連する血栓性事象（ＴＥ）のリスク増加の根本的な原因である、疾患（すなわち、補体媒介性血管内溶血）の根底にある病態生理であるという事実と一致した。エクリズマブ等の抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片により補体活性化を遮断することによる、根底にある疾患原因の処置は、有意に低下したＭＡＶＥ率によって明らかな通り、このリスクを直接低下させる。

ＬＤＨ濃度は、例えば、患者から得られる様々な試料、特に、血清試料において測定することができる。本明細書において使用する場合、用語「試料」は、患者由来の生物学的材料を指す。血清ＬＤＨ濃度が目的とされているが、試料は、例えば、単一の細胞、複数の細胞、組織、腫瘍、生体液、生物学的分子または前述のいずれかの上清もしくは抽出物を含む、他の供給源に由来することができる。例として、生検のために除去された組織、切除の間に除去された組織、血液、尿、リンパ組織、リンパ液、脳脊髄液、粘膜および糞便試料が挙げられる。使用される試料は、アッセイフォーマット、検出方法、およびアッセイされる腫瘍、組織、細胞または抽出物の性質に基づき変動する。試料を調製するための方法は、当該技術分野で公知であり、利用される方法と適合性の試料を得るために容易に適応させることができる。

本明細書に記載されているデータは、以前の解釈およびエクリズマブの標示使用（label usage）に反して、ＰＮＨ処置が、患者に輸血歴がない、および／または患者が従来のＰＮＨ症状を示さない場合であっても、ＰＮＨ患者において有効であることを示した。処置応答性および有効性の指標としてＬＤＨ濃度を使用することにより、後述する実施例は、例えば、ＬＤＨ濃度における改善、溶血の低下、ＲＢＣ数改善ならびに疲労および関連するＰＮＨ症状における改善によって実証される通り、≧１．５×ＵＬＮを示すＰＮＨ患者が、例えば、エクリズマブ処置に対して応答性であることを示す。したがって、本明細書に記載されている材料および方法は、以前の輸血歴に依存しないおよび／または古典的ＰＮＨ症状に依存しない、ＰＮＨ患者の処置応答性亜集団の同定に有用である。
患者患者患者（patientpatientpatient）

患者の（患者の）診療歴は、処置有効性に関して有益であり得る。ＰＮＨ患者は、例えば、種々のＰＮＨ関連の効果を示すことができる。患者は、例えば、血栓症の病歴を有し得、これは、患者が、過去に少なくとも１回、おそらくは２回以上の血栓性事象を有したことを意味する。例えば、患者は、例えば、定期的なまたは単事象の輸血を含む、ＰＮＨの処置歴を有する場合があるため、患者の処置歴も、有益であり得る。輸血歴がある患者は、したがって、少なくとも１回、おそらくは２回以上または定期的なスケジュールの輸血を受けた患者である。病歴は、患者の生涯にわたるもの、または定義された期間（例えば、具体的な時点、例えば、予想される処置または診断の日付の約１ヶ月以内、約３ヶ月以内、約６ヶ月以内、約９ヶ月以内、約１年以内、約２年以内または約５年以内）にわたるものであり得る。

本明細書に提供される処置方法の有効性は、任意の適した手段を使用して評価することができる。一実施形態では、処置は、疲労、腹痛、呼吸困難、嚥下障害、胸痛および勃起機能不全の低下または停止からなる群から選択される少なくとも１種の治療効果を生じる。別の実施形態では、処置は、終末補体阻害をもたらす。別の実施形態では、処置は、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルによって評価される溶血の低下をもたらす。別の実施形態では、処置は、遊離ヘモグロビン、ハプトグロビン、網状赤血球数、ＰＮＨ赤血球（ＲＢＣ）クローンおよびＤ−ダイマーからなる群から選択される溶血関連の血液学的バイオマーカーの正常レベルに向かうシフトを生じる。別の実施形態では、処置は、主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）の低下を生じる。別の実施形態では、処置は、推定糸球体濾過率（ｅＧＦＲ）およびスポット尿中：アルブミン：クレアチニンおよび血漿脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）からなる群から選択される慢性疾患関連バイオマーカーの正常レベルに向かうシフトを生じる。別の実施形態では、処置は、慢性疾病治療の機能評価（ＦＡＣＩＴ）−疲労尺度、バージョン４および欧州がん研究・治療機構、クオリティ・オブ・ライフ質問表コア３０尺度により評価される、クオリティ・オブ・ライフのベースラインからの変化を生じる。

次の実施例で本発明についてさらに記載するが、実施例は、特許請求の範囲に記載されている本発明の範囲を限定しない。

（実施例１）
ＰＮＨ：重度結果を有する慢性溶血の疾患
疾患重症度の指標としてのＬＤＨ濃度（ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮ）によって測定される、溶血が高まった、ＰＮＨを有する患者におけるエクリズマブの１つの大規模前向き観察試験および数種の介入臨床治験のデータを評価した。

ベースラインに先立つ輸血歴ありおよびなしの、ベースラインにおいてＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者を具体的に含む、国際ＰＮＨレジストリ（International PNH Registry）（Ｍ０７−００１；以後「ＰＮＨレジストリ」）として公知の進行中の観察前向き試験に登録されたＰＮＨの患者の解析（clinicaltrials.govウェブサイトにおけるＮＣＴ０１３７４３６０の試験基準を参照）。本解析は、輸血歴がないＰＮＨの患者が、輸血を有する患者において観察されるものと同様の程度まで、ＰＮＨ関連の病的状態（morbidity）を患うことを実証する。エクリズマブで処置されたＰＮＨの患者は、エクリズマブを与えず輸血歴がないＰＮＨ患者と比較して（compared with patients with PNH patients）、ＰＮＨ関連の症状における統計的に有意かつ臨床的に有意義な改善を得た。エクリズマブで処置した患者において、注目すべきことに、ＬＤＨレベルは、約６ヶ月で正常またはほぼ正常レベルに復帰した一方、ＬＤＨレベルは、「エクリズマブなし」群において上昇したままであった。

ＰＮＨレジストリは、欧州、日本、米国およびカナダを含む２０ヶ国を超える国々において行われ、患者を登録し続け、縦断追跡調査を蓄積する国際的非介入試験（international non interventional study）である。これは、エクリズマブの長期安全性を含む患者成績も評価する、ＰＮＨの患者における最大規模の前向きデータ収集試験である。これは、輸血歴に関係なく、エクリズマブで処置した患者およびエクリズマブで処置しなかった患者における、罹患率および死亡率を含む疾患の負荷、臨床成績ならびにＰＮＨ進行を実証するための重要な供給源として機能する。臨床データおよび実験室データは、溶血の程度およびクオリティ・オブ・ライフ等の、重要な有効性パラメータの評価のための基礎も提供する。

ＰＮＨレジストリを使用して、ＲＢＣ輸血歴がないＰＮＨ患者におけるエクリズマブの有効性を評価した。これらの患者は、上昇した溶血（ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮ）および次のような関連する臨床症状（複数可）のいずれか１種の存在によって定義される、高い疾患活動性を有した：疲労、血色素尿症、腹痛、息切れ（呼吸困難）、貧血（ヘモグロビン＜１００ｇ／Ｌ）、主要有害血管事象（血栓症を含む）、嚥下障害または勃起機能不全。

ＰＮＨレジストリにおいて、エクリズマブで処置した患者は、溶血および関連症状の低減を有することが観察された。６ヶ月で、ＲＢＣ輸血歴がないエクリズマブで処置した患者は、有意に（ｐ＜０．００１）低下したＬＤＨレベル（ＬＤＨ中央値が３０５Ｕ／Ｌ；表４）を有した。さらに、エクリズマブで処置した患者の７４％は、ＦＡＣＩＴ−疲労スコアにおける臨床的に有意義な改善を経験し（すなわち、４ポイントまたはそれを超える増加）、８４％がＥＯＲＴＣ疲労スコアにおける臨床的に有意義な改善を経験した（すなわち、１０ポイントまたはそれを超える減少）。エクリズマブで処置しなかったコホートにおいて、これらの症状の変化は観察されなかった。

同じ患者集団を使用して、追加の解析を行った。さらに１年間のデータ収集の算入は、結果（例えば、ＬＤＨ、腹痛、背部痛、嚥下障害、勃起機能不全、血色素尿症、溶血等の変化）を得た。

ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮの臨界閾値にさらに近い溶血を有するＰＮＨの患者におけるエクリズマブ処置の臨床的に有意義な利益および安全性をさらに支持するために、輸血歴がない、１．５×ＵＬＮ〜３．５×ＵＬＮの間のＬＤＨを有する患者のサブセットについての事後解析を完了した。この亜集団解析の結果は、完全解析集団の結果に匹敵する。「エクリズマブなし」サブセット（それぞれ７５８．５Ｕ／Ｌ対７１９．５Ｕ／Ｌ、ｎ＝５８）と比較して、エクリズマブ処置群のこのサブセットにおけるＬＤＨ中央値は、ベースラインにおける７４０Ｕ／Ｌから６ヶ月で３３２．５Ｕ／Ｌへと減少した（ｎ＝１４）。エクリズマブ処置サブセットにおいて、疲労における実質的な改善も観察され（ＦＡＣＩＴ−疲労（慢性疾病治療の機能評価）についての＋１０．０およびＥＯＲＴＣ疲労（欧州がん研究・治療機構）についての−２２．２の変化中央値）、これは、両方の尺度における０．０の変化中央値を実証したエクリズマブなしサブセットとは対照的であった。ＰＮＨレジストリ解析において解析した患者の総集団と一致して、１．５×ＵＬＮ〜３．５×ＵＬＮの間のＬＤＨ比を有する患者は、血栓性事象（ＴＥ）の相当なリスクがある（試験登録からエクリズマブ開始までの１００患者年（100 patient years）当たり７．７０ＴＥの率）。エクリズマブによる処置後に、この同じ患者サブセットのＴＥの率は、１００患者年当たり０に減少した。この患者サブセットの安全性プロファイルは、完全解析におけるエクリズマブ処置群全体におけるエクリズマブのプロファイルと一致する。これらの結果は、ＬＤＨ濃度によって測定される溶血の範囲にわたる、ＰＮＨの患者に対する臨床的に有意義な利益および都合よい利益／リスクプロファイルの提供におけるエクリズマブ処置の役割の関連性を支持する。

全体的に、エクリズマブ処置群の患者における更新された安全性解析において、新たな安全性シグナルは観察されなかった。エクリズマブなし群は、実際に、エクリズマブ処置群と比べて、より高い率の感染症、腎機能障害、肺高血圧症、溶血および死亡を有した。

輸血歴がない患者におけるエクリズマブ処置の臨床的に有意義かつ肯定的な利益／リスクプロファイルは、他の臨床治験において実証されるプロファイルに匹敵する。ＴＲＩＵＭＰＨ（Ｃ０４−００１）は、ＰＮＨにおけるエクリズマブについての無作為化二重盲検登録（registrational）前向きプラセボ対照試験（ＴＲＩＵＭＰＨ（Ｃ０４−００１））であり、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者を登録した。これらの患者は、登録に先立つ１２ヶ月において≧４回の輸血の病歴を有している必要があった。エクリズマブ処置は、ＬＤＨレベルの低下によって実証される溶血の統計的に有意かつ持続した低下、ならびに疲労、全般的な健康（global health）、全５種のＥＯＲＴＣ機能尺度、疼痛および呼吸困難における改善をもたらした。エクリズマブは、遊離ヘモグロビンおよび輸血の必要性を統計的に有意に低減することも示された。これらの試験結果は、この重度に輸血された集団における都合よい利益／リスクプロファイルを支持する（Brodsky, R.ら、Blood、１１１巻：１８４０〜７頁、２００８年）。

オープンラベル非比較試験であるＳＨＥＰＨＥＲＤ（Ｃ０４−００２）は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者を登録した。本試験は、登録に先立つ２４ヶ月における≧１回の輸血歴の受入基準により、集中度の低い輸血歴がある患者を許容した。本試験は、登録に先立つ１２ヶ月において０〜１回の輸血を受けた患者を含んだ。ＴＲＩＵＭＰＨに観察される結果と同様に、エクリズマブ処置は、ＬＤＨレベルによって実証される、統計的に有意な溶血低減をもたらした。疲労、全般的な健康、全５種のＥＯＲＴＣ機能尺度、疼痛、呼吸困難、食欲不振、不眠症、悪心、嘔吐および下痢における統計的に有意な改善も観察された。エクリズマブはまた、遊離ヘモグロビンを有意に低下させた。ＴＲＩＵＭＰＨの結果と一致して、これらの試験結果は、登録に先立つ１２ヶ月以内に０〜１回の輸血を受けた２２名の患者を含む、より広範な患者集団における都合よい利益／リスクプロファイルを支持する。

拡大治験（Ｅ０５−００１）は、ＴＲＩＵＭＰＨおよびＳＨＥＰＨＥＲＤ由来の患者を登録し、これらのＰＮＨの患者におけるエクリズマブ処置の利益の縦断解析を可能にした拡大試験であった。ＴＲＩＵＭＰＨ試験のプラセボ治療群（arm）由来の患者は、治験登録後にエクリズマブ処置を開始した。エクリズマブ処置の間の同じ患者における１００患者年当たりの１．０７事象（３総事象）と比較して、エクリズマブ処置は、エクリズマブ処置を受ける前の１００患者年当たり７．３７事象（１２４総事象）からのＴＥ率の統計的に有意な低下をもたらした（ｐ＜０．００１）（Hillmen, P.ら、Blood、１１０巻：４１２３〜８頁、２００７年）。プラセボ群における患者は、２６週間のプラセボ処置期間における１００患者年当たり４．３８事象の事象率を有した。これらの知見の重要性は、ＴＥが、予測不能であり、ＰＮＨの患者における死亡の主因であることを強固にする。エクリズマブ治療の間に腎機能における改善も観察された。これらの試験結果は、ベースラインにおけるＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮおよび混成輸血歴（mixed history of transfusions）がある患者集団の間での、都合よい長期処置利益／リスクプロファイルを支持する。

ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、ＰＮＨの患者における血管内溶血の臨床的に有意義な閾値であり、ＰＮＨに関連する罹患率および死亡率についての独立リスク因子である。

臨床開発プログラムを含む臨床治験（ＴＲＩＵＭＰＨ、ＳＨＥＰＨＥＲＤ、拡大治験）は全て、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有するＰＮＨの患者を登録した。これらの試験は全て、エクリズマブ処置の著明な利益および肯定的な利益／リスクプロファイルを実証する。ＰＮＨレジストリ由来のデータの前向きに定義された解析の結果も、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者のみを含み、エクリズマブ処置による肯定的な利益／リスクプロファイルを実証する。医学文献に発表された追加のデータは、ＰＮＨに関連する罹患率および死亡率の有意なリスク因子としてＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを同定する。これらのデータは、Ｍ０７−００１ ＰＮＨレジストリ（Schrezenmeier, H.ら、Haematologica、９９巻：９２２〜９頁、２０１４年）における輸血歴ありおよびなしの患者の独立解析、ならびに大規模な後向き試験に基づく解析を含む。

歴史的に、また、エクリズマブ治療を利用できるようになる前には、ＰＮＨの患者は、早発死亡に苦しんでいた。死亡率の観点からこのＬＤＨ閾値の関連性を次の通りに要約することができる：
・ ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者と比較した、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者における有意により高い死亡率の有病率（prevalence of mortality）（１４％対４％；ｐ＝０．０４８）（Kim, J.ら、Korean J. Hematol.、４５巻：２６９〜７４頁、２０１０年）。
・ 診断時にＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者は、年齢および性別を一致させた母集団と比較して、４．８倍大きい死亡率を有した（ｐ＜０．００１）。ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者は、年齢および性別を一致させた母集団と同様の死亡率を有した（ｐ＝０．８２４）。
・ ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、死亡率の独立リスク因子であり（多変量オッズ比＝１０．５７、９５％ＣＩ：（１．３６、８１．９３）、ｐ＝０．０２４）、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮと比較して早発死亡と有意に関連した（単変量オッズ比５．０；９５％ＣＩ（１．１５、２１．７０）；ｐ＝０．００９）。
・ 対照的に、感度解析は、それぞれ＜３．０×ＵＬＮまたは＜５．０×ＵＬＮと比較して、≧３．０×ＵＬＮ（オッズ比１．８；９５％ＣＩ（０．７８、４．０９）；ｐ＝０．１６２）および≧５．０×ＵＬＮ（オッズ比２．０；９５％ＣＩ（０．９１、４．３２）；ｐ＝０．０８２）の診断時のより高いＬＤＨ閾値が、早発死亡の有意な予測因子ではなかったことを同定した。
・ 再生不良性貧血または他の骨髄障害の共存は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮおよびＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者の間で有意に異ならなかった。

ＰＮＨの患者は、ＴＥの臨床証拠の非存在にもかかわらず、永続的な血栓性リスクがある。臨床的に診断されたＴＥがないＰＮＨの患者のおよそ６０％は、高感度ＭＲＩによって測定されるＴＥの証拠を有する（Hill, A.ら、Blood、１０７巻：２１３１〜７頁、２００６年）。ＴＥは、ＰＮＨにおける死亡の相対リスクを５〜１０倍増加させ（Nishimura J.ら、Medicine (Baltimore)、８３巻：１９３〜２０７頁、２００４年；Socie, G.ら、Lancet、３４８巻：５７３〜７頁、１９９６年）、血栓症は、ＰＮＨの患者における死亡の主因である。ＴＥのリスク因子としてのＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮの重要性を確立するデータは、次の通りに要約することができる：
・ ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者におけるＴＥのリスクは、ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者よりも７×大きい（Hillmen, P.ら、Br. J. Haematol.、１６２巻：６２〜７３頁、２０１３年；Lee, J.ら、Int. J. Hematol.、９７巻：７４９〜５７頁、２０１３年）。
・ ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者と比較して、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者における血栓症の有意により高い有病率（２２％対４％；ｐ＝０．００３；１５．６％対８．４％；ｐ＜０．００１）。
・ 診断時のＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮの閾値を使用して、ＴＥを有する患者の９６％が検出された。ＬＤＨ≧３．０×ＵＬＮまたは５．０×ＵＬＮを使用して、それぞれＴＥを有する患者の６７％および４７％のみを検出した。
・ ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、例えば、全てＴＥの有意なリスク因子である、腹痛、胸痛および血色素尿症等、症状のより高い有病率と関連する。
・ 年齢、骨髄不全病歴、クローンサイズ、ＷＢＣ数、血小板数およびヘモグロビンレベル等のパラメータは、ＴＥの有意なリスク因子ではなかった（Ｐ値範囲：０．１１１〜０．９８１）。

呼吸困難、嚥下障害および強膜黄疸の有病率は、ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者よりも、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者において有意に大きく、全体的に、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者の９６％が、疲労以外の少なくとも１つの症状を報告した一方で、上昇したＬＤＨレベルを有する患者の０．６％のみが、疲労を報告し、他の症状を報告しなかった。輸血歴が報告されていない患者を含んだ患者集団から収集されたこれらのデータは、疾患の負荷を特徴付けるための重要なパラメータとしての≧１．５×ＵＬＮの閾値ＬＤＨレベルをさらに支持する。

溶血のこれらの効果は、貧血の存在または重症度と無関係である。貧血は、溶血の発現であり得るが、ＰＮＨの補体媒介性血管内溶血に関連する病的状態は、貧血の程度と大部分無関係であることが示された。

臨床試験は、身体障害性となり得るＰＮＨの患者における疲労が、血管内溶血によるものであり、貧血の重症度の変化と無関係であることを実証した。ＳＨＥＰＨＥＲＤおよびＴＲＩＵＭＰＨ試験からの患者の独立解析において、多変量解析は、溶血の低減が、貧血の改善とは無関係に、疲労の改善を予測することを示す（１．０７、ｐ＝０．０２８；（Hill, A.、Clin. Adv. Hematol. Oncol.、６巻：４９９〜５００頁、２００８年））。別々の臨床試験において同様の結果が見出された（Kanakura, Y.ら、Int. J. Hematol.、９３巻：３６〜４６頁、２０１１年）。補体媒介性ＮＯ枯渇および虚血が、止血活性化、炎症、腎不全および肺高血圧症を介して、ＰＮＨにおける重度疲労に寄与することが理解される（Hill, A.ら、Br. J. Haematol.、１４９巻：４１４〜２５頁、２０１０年）。

肺高血圧症の一般的症状である呼吸困難は、ＰＮＨの患者の６６％に影響する。ＰＮＨの患者の呼吸困難における改善は、貧血に関係せず、血管内溶血による肺高血圧症の尺度の変化と有意にかつ正に相関する。ＥＯＲＴＣ ＱＬＱ−Ｃ３０によって評価される呼吸困難も、無関係の試験において貧血とは無関係であることが見出され、ヘモグロビンレベルの観察可能な変化の非存在下で、エクリズマブ処置により有意な（ｐ＝０．００６）改善が生じた。試験した患者が全て、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有したことが注目に値する。

ＰＮＨレジストリ解析からのデータは、輸血歴がない１８９名の患者のうち（受入基準により全てＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有した）、１５．３％が、主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）の病歴を有し、事象の半分超（１６／２９）が、「エクリズマブなし」群において生じたことも実証する。これらのデータは、ＴＥのリスクが、輸血の必要性とは無関係であることを示す。

まとめると、これらのデータは、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者が、ＰＮＨに関連する罹患率および死亡率のリスクがあり、このリスクが、輸血の必要性とは無関係であることを強調する。

ＰＮＨの患者におけるエクリズマブによる処置は、ＬＤＨによって測定される急速かつ持続した溶血制御および疾患に関連する罹患率の低下をもたらす。エクリズマブは、終末補体を阻害することによる補体活性化に起因する血管内溶血を有効に防止し、よって、ＰＮＨに関連する症状（例えば、溶血）の根本的原因に直接取り組むことにより臨床利益を提供する。この利益は、上昇したＬＤＨ（≧１．５×ＵＬＮ）を有するＰＮＨの患者において実証され、輸血の必要性および／または貧血の存在もしくは重症度とは無関係である。ＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する一部のＰＮＨの患者は、ＰＮＨに関連する広範囲の病的状態も経験し得るが、ＰＮＨの患者における死亡の主因であるＴＥを含む疾患に関連する重篤および身体障害性病的状態の多くの閾値および独立リスク因子は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮである。まとめると、臨床治験プログラムおよびＰＮＨレジストリからのデータは、エクリズマブによる処置が、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有するＰＮＨの患者に重要な臨床利益をもたらすことを一貫して実証する。

（実施例２）
ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有するＰＮＨの患者に対する標的患者集団の定義
ＰＮＨの中心的機構が、慢性血管内溶血および血小板活性化をもたらす制御不能の補体活性化であることを考慮すると（Hillmen, P.、N. Engl. J. Med.、３３３巻：１２５３〜８頁、１９９５年）、血管内溶血のレベルは、ＰＮＨの患者における疾患負荷の直接的な尺度を提供する。

臨床開発プログラムを含む臨床治験（ＴＲＩＵＭＰＨ、ＳＨＥＰＨＥＲＤ、拡大治験）は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有するＰＮＨの患者を登録した。これらの試験は、エクリズマブ処置の著明な利益および肯定的な利益／リスクプロファイルを一貫して実証する。正常またはほぼ正常レベルまでの溶血の低下に対応して、エクリズマブ処置の利益は、身体障害性疲労、腹痛、呼吸困難、嚥下障害、勃起機能不全の有意な低下、ならびに改善されたクオリティ・オブ・ライフおよび機能尺度を含んだ。拡大治験由来の縦断結果は、重要なことに、エクリズマブ前および後の時間を一致させた解析におけるＴＥ／ＭＡＶＥの有意に（ｐ＜０．０００５）低下したリスク、ならびに腎臓機能における時間依存的改善を実証する（Hillmen, P.ら、Br. J. Haematol.、１６２巻：６２〜７３頁、２０１３年）。

ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮによって測定される慢性血管内溶血の存在は、ＰＮＨの患者における血栓症のリスクおよび死亡率を含む、罹患率の独立リスク因子であることも実証された。より高いＬＤＨ比は、独立リスク因子ではないことが見出された。ＴＥは、ＰＮＨの患者における死亡の主因であり、ＴＥが、ＰＮＨにおける死亡の相対リスクを５〜１０倍増加させることが公知である（Nishimura, J.ら、Medicine (Baltimore)、８３巻：１９３〜２０７頁、２００４年）。複数の解析は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮが、ＴＥの独立リスク因子であることを実証した。

ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、死亡率の独立リスク因子でもある。ＰＮＨの患者は、貧血を示す場合があるが、貧血は、ＰＮＨの患者における罹患率または死亡率の実証されたリスク因子ではない。ＰＮＨにおける貧血の病因は、多因子性である。これは、慢性血管内溶血から生じることができ、ＰＮＨに関連することが公知の根底にある骨髄障害から生じ（Kawaguchi, T. & Nakakuma, H.、Int. J. Hematol.、８６巻：２７〜３２頁、２００７年）、これは続いて、ＲＢＣ産生の欠損をもたらす。貧血ではなく慢性血管内溶血が、ＰＮＨの罹患率の重要なリスク因子である。再生不良性貧血または他の骨髄障害の共存は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮおよびＬＤＨ＜１．５×ＵＬＮを有する患者の間で有意に異なるとは示されなかった。ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮは、腹痛、胸痛、血色素尿症、呼吸困難、嚥下障害、肺高血圧症および強膜黄疸等の症状のより高い有病率にも関連する（Hill, A.ら、Br. J. Haematol.、１５８巻：４０９〜１４頁、２０１２年）。

エクリズマブ処置患者における改善された生存
エクリズマブで処置しなかったＰＮＨの患者の生存中央値は、５年での３５％死亡率を含む、診断時から１０〜２０年間である（de Latour, R.ら、Blood、１１２巻：３０９９〜１０６頁、２００８年；Socie, G.ら、Lancet、３４８巻：５７３〜７頁、１９９６年）。対照的に、エクリズマブで処置したＰＮＨの患者の生存は、年齢および性別を一致させた正常対照に匹敵する（ｐ＝０．４６；Kelly, R.ら、Blood、１１７巻：６７８９〜９２頁、２０１１年）。疾患の自然経過およびＰＮＨの患者における死亡の主因であるＴＥが予測不能であること（Hill, A.ら、Blood、１２１巻：４９８５〜９６頁、２０１３年）を考慮すると、エクリズマブ処置の利益を最も受ける患者を同定することが重要である。臨床開発プログラムを含む臨床治験およびＰＮＨレジストリ解析からのデータならびに文献中のデータは共に、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮによって測定される臨床的に有意義な血管内溶血を有するＰＮＨの患者における疾患の負荷を実証する。

ＰＮＨレジストリ解析において、登録およびベースラインのエクリズマブ処置群において同定される患者特徴に具体的な差はない
エクリズマブ処置に先立つＰＮＨの患者における疾患の負荷をより良く理解および認定する（qualify）ために、レジストリ登録時からエクリズマブ開始時までのエクリズマブ処置（「エクリズマブ」）群における患者特徴の解析を行った。登録およびエクリズマブ開始の間が最小で６ヶ月である患者に解析を限定した。表１に結果を要約する。

本明細書に提供される主要解析のため、エクリズマブ群における患者は、レジストリにおける登録時にまたは登録後にエクリズマブを開始している必要がある。エクリズマブ処置の開始をベースラインとして設定した。統計解析計画（ＥＳＡＰ）において定義される通り、これらの患者は、ベースラインに先立ち最小で６ヶ月、輸血を受けていなかった。エクリズマブ群における患者の大部分が、登録時にまたはその直後に処置を開始したという事実により、利用できるデータを有する限られた数の患者（ｎ＝１２）が存在する。これらの要件を満たす患者が少数であることを考慮すると、データは限定される。にもかかわらず、利用できるデータの評価は、具体的なパラメータまたは事象を同定せず、エクリズマブ処置を開始するためのパラメータまたは事象における傾向を同定しない。

表２は、経時的なＬＤＨレベルの変化を要約する。６ヶ月でＬＤＨの一次転帰解析に加えられた、エクリズマブ群における１名の患者およびエクリズマブなし群における３名の患者が存在した。エクリズマブ群は、６ヶ月でＬＤＨの著明なかつ高度に有意な（ｐ＜０．００１）低下を示し、これは経時的に持続した。極めて対照的に、エクリズマブなし群におけるＬＤＨ値は、６ヶ月の時点でベースラインからの変化をほとんど示さなかった。表２に示す通り、１８ヶ月および２４ヶ月でエクリズマブなし群においてＬＤＨ値のある程度の低下が観察されるが、これらの上昇したレベルは依然として、ＬＤＨ≧正常の上限の１．５倍、を表す（表３）。ＰＮＨレジストリにおいてより少ない患者が登録されたため、より後の時点で患者数の減少が観察される。

表３に、経時的なＬＤＨ比の変化を要約する。ＬＤＨ比の中央値は、６ヶ月以内にエクリズマブ群において正常またはほぼ正常レベルに復帰し、全ての追跡調査時点において正常のままであった。対照的に、エクリズマブなし群のＬＤＨレベルの中央値は、全時点で１．５×ＵＬＮを上回って上昇したままであり、血管内溶血の継続した存在を示していた。

主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）またはヘモグロビンは、患者集団を緻密化するための信頼できるマーカーではない
表１に要約される通り、登録およびエクリズマブ処置開始の間に新たなＭＡＶＥは生じず、ヘモグロビンレベルおよびＲＢＣ数の中央値は安定していた。登録からエクリズマブ処置開始までにＬＤＨ値の中央値は変化しなかった（それぞれ８５８Ｕ／Ｌ対８５６Ｕ／Ｌ）。ＬＤＨ比の中央値は、登録時に上昇した（２．４×ＵＬＮ）。エクリズマブ開始時に３．０×ＵＬＮへの増加が見られたが、≧３．０×ＵＬＮのＬＤＨ閾値は、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮよりも高感度の死亡率の指標ではない。クローンサイズの中央値の中程度の増加が見られ、変化中央値が２％であった。クローンサイズの中央値は、エクリズマブ処置の開始時に、登録時よりも高かったが、クローンサイズの範囲は同じであった。したがって、ＭＡＶＥ、ヘモグロビンレベルおよび／またはクローンサイズは、疾患負荷の適切な尺度ではない。

まとめると、これらのデータは、エクリズマブ処置開始の具体的なパラメータ、事象または傾向を同定しない。

（実施例３）
発表されたガイドラインは、≧１％のＷＢＣ低下またはＧＰＩタンパク質欠如（ＰＮＨ細胞またはＰＮＨクローンサイズ≧１％）を測定するフローサイトメトリーが、ＰＮＨの診断を確認することを勧める。１％の感度は、溶血性および／または血栓性ＰＮＨに関連するクローンを有する患者の検出に十分である（Borowitzら、２０１０年）。ガイドラインは、クローン＜１％を有するＰＮＨ患者が、臨床徴候および症状の変化またはクローンサイズの変化に関して日常的にモニタリングされることも推奨する。

ＰＮＨレジストリは、ＰＮＨの診断または検出されたＰＮＨクローン（検出された０．０１％ＰＮＨ細胞の最小レベル）を有するいかなる患者受入が登録されることも可能にする。上に参照されるガイドラインと一致するように、顆粒球クローンサイズ≧１％を有する患者の解析の受入基準を選択した。

ＩＩ型変種亜群の間の同様の疾患負荷
ＰＮＨレジストリは、不均一患者集団が登録されることを可能にするが、ＩＩ型変種に含まれる患者集団の解析の結果は、ベースラインにおいて、全患者が、クローンサイズまたは輸血歴に関係なく、高い疾患負荷を有し、これは、＜１０％ＧＰＩ欠損顆粒球を有する処置なしコホートにおける７／１４４名（４．９％）の患者を含むことを示す。

顆粒球クローンの中央値は、輸血歴なしの処置なし患者に関して６６％（１、１００）であり、輸血歴なしの処置した患者に関して７１％（１３、９９）であった。解析に含まれる全患者は、ベースラインにおいて上昇した溶血（ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮ）を有することが必要とされた。輸血歴なしの処置なし患者のＬＤＨ値の中央値は、１４３１Ｕ／Ｌ（範囲３０１、４６６１）であったが、輸血歴なしの処置した患者のＬＤＨ値の中央値は、１０９６Ｕ／Ｌ（範囲３６０、４８９３）であった。その上、輸血歴なしの患者は、重度疲労、クオリティ・オブ・ライフの低下および主要有害血管事象（ＭＡＶＥ）の病歴を含む、ＰＮＨの臨床的に有意義な徴候および症状を呈した。

ベースライン顆粒球クローンサイズおよび他の臨床特徴における類似性に基づき、より小型のクローンを有する患者の算入に基づく非輸血患者の２亜群の共存があることの証拠はない。

発表されたデータは、全クローンサイズにわたる、一般的ＰＮＨ関連の徴候および症状ならびにＴＥの発生を一貫して実証する。疲労、腹痛、胸痛および血色素尿症等の症状ならびにＴＥを経験する、クローンサイズ＜１０％を有する相当な数の患者は、クローンサイズ単独が、疾患負荷の優れた指標ではないことを示す。

表４に、経時的なＦＡＣＩＴ−疲労およびＥＯＲＴＣ疲労スコアの変化を要約する。追跡調査データが存在する患者の数は、エクリズマブ群の以前に報告された結果と同じままであった。データは、エクリズマブなし群における追加の３名の患者に利用することができた。ベースラインから最後の利用可能な評価までの時間の中央値は、エクリズマブ群において０．９から１．５年間に、エクリズマブなし群において１．４から１．７年間に増加した。

エクリズマブ群において、ベースラインから最後の利用可能な評価までに、ＦＡＣＩＴ−疲労手段（instrument）およびＥＯＲＴＣ ＱＬＱ−Ｃ３０質問表の疲労成分の両方によって測定される疲労スコアにおいて実質的な改善があった。この改善は、エクリズマブを与えず、支持療法で維持した患者によって報告される疲労レベルと比較して、臨床的に有意義かつ統計的に有意であった。エクリズマブ群において、患者の７４％は、エクリズマブなし群における２７％のみと比較して、ＦＡＣＩＴ−疲労スコア（少なくとも４ポイント）において臨床的に有意義な改善を有した。ＥＯＲＴＣ疲労スコアにおける同様の臨床的に有意義な改善（少なくとも１０ポイント）が、エクリズマブなし群における３３％のみと比較して、エクリズマブ群の８４％において報告された。

表５に、経時的なヘモグロビンレベルの変化を要約する。輸血歴がない患者は、ベースラインで様々な量の貧血を有した。ヘモグロビンレベルの中央値は、全体的に、支持医療のみで処置した患者（エクリズマブなし）と比較して、エクリズマブを受けた患者の中で幾分低かった。６ヶ月で、エクリズマブ群におけるヘモグロビン中央値の実質的な増加が見られたが、この改善にもかかわらず、一部の患者に残留貧血が持続し、この群に関して１１１ｇ／Ｌのヘモグロビン中央値であった。両群において、ヘモグロビンレベルは、６ヶ月後に安定したままであった。これらのデータは、上に提示するＬＤＨおよび疲労データと併せて、経時的にそのＬＤＨレベルが上昇したままであったエクリズマブなし患者において明らかな通り、ＰＮＨの患者における疲労が、ヘモグロビンレベルにおける改善と無関係であり、ヘモグロビンレベルにおける改善は、根底にある血管内溶血の指標ではないことの証拠を提供する。

表６および表７に、追跡調査の間の血清クレアチニンおよびｅＧＦＲを要約する。追跡調査の間、血清クレアチニンおよびｅＧＦＲによって測定される腎機能は、安定したままであった。ＣＫＤ評価は、限られた数の患者にしか利用することができず、データの解釈を困難なものとしたが、エクリズマブ群においてベースラインと比べて最後の利用可能な評価時にそのＣＫＤステージが悪化した患者がいなかった一方で、エクリズマブなし群における９／２８名（３２％）の患者が悪化したことに注目すべきである。

表８に、ＥＯＲＴＣ ＱＬＱ−Ｃ３０尺度によって評価される、患者報告の成績を要約する。上に記す通り（表４）、データは、エクリズマブなし群における３名の追加の患者に利用できた；エクリズマブ群の患者数には変化がなかった。エクリズマブによる処置は、全般的な健康、全５種の機能尺度および他の成分の３種（財政的困難、下痢および便秘）を除く全てに関して実証される、クオリティ・オブ・ライフ尺度における重要な改善をもたらした。全体的に、より多くのエクリズマブ処置患者が、エクリズマブを与えなかった患者と比較して、臨床的に有意義な改善（１０またはそれを超えるポイントの改善）を有した。

エクリズマブで処置した患者は、ＬＤＨレベルにおける統計的および臨床的に有意な改善である、ＬＤＨのほぼ正常レベルへの復帰および維持を実証し、これは、補体媒介性血管内溶血の持続した低下および制御を示す。これらの結果は、ＬＤＨレベルが、１．５×ＵＬＮを上回るレベルに上昇したままの、したがって、ＰＮＨに関連する、関連した身体障害性病的状態および早発死亡の進行中のリスク増加を示す、エクリズマブを与えなかった患者とは著しく対照的である。

更新されたデータは、輸血歴がない（no history if transfusion）ＰＮＨの患者において、エクリズマブ処置が、ＦＡＣＩＴ−疲労およびＥＯＲＴＣ尺度の両方によって測定される、疲労スコアにおける統計的および臨床的に有意な改善を生じることを確認する。これらのデータは、本出願人らの登録治験（ＴＲＩＵＭＰＨおよびＳＨＥＰＨＥＲＤ）における患者に関して報告されたデータと一致する。臨床的に有意義な改善は、エクリズマブで処置した患者の多数のクオリティ・オブ・ライフ尺度において報告され続けた。注目すべきことに、改善は、エクリズマブなし患者において観察されなかった。これらの追加の縦断データおよび経時的な均一に一貫した結果は、ＰＮＨレジストリからのデータの頑強さのさらなる証拠を提供する。全体的に、結果は、血管内溶血の制御が、ＰＮＨの患者における症状の改善に必須であることを実証し、輸血歴に関係なく、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する患者の処置におけるエクリズマブの利益を確立する。輸血要件は、ＰＮＨの患者における疾患重症度の価値ある尺度を提供しない。代わりに、重症度は、ＬＤＨによって測定される、慢性溶血性貧血（例えば、血管内溶血）のレベルによって評価することができる。

輸血歴がなく、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮを有する１８９名の患者が、ＰＮＨレジストリに含まれた。これらの患者の大部分（９２％）はベースラインにおいて、医師が、腹痛、息切れ、嚥下障害、勃起機能不全、疲労または貧血（ヘモグロビンレベル＜１００ｇ／Ｌ、ＣＴＣＡＥバージョン４．０として定義）の存在を報告したことで定義される症候性慢性溶血性貧血を有していた。具体的には、エクリズマブ群における４３／４５名（９６％）の患者およびエクリズマブなし群における１３０／１４４名（９０％）の患者は、ベースラインにおいて上に収載した症状のうち少なくとも１種を有した。これらの数値は、臨床的に有意義な疾患負荷を有する患者を同定するためのＬＤＨの関連性をさらに支持する。

表９および表１０に、この患者サブセットの解析からの一次および二次転帰を要約する。これらのデータは、輸血歴が、ＰＮＨの患者における疾患負荷の指標ではないことを実証する。さらに、エクリズマブは、血管内溶血（６ヶ月における、ベースラインからのＬＤＨの変化に関してｐ＜０．００１）および疲労（それぞれＦＡＣＩＴ−疲労およびＥＯＲＴＣ疲労に関するベースラインから最後の利用可能な評価時までのスコアの変化に関してｐ＝０．０１４およびｐ＝０．０２８）の統計的に有意な低下をもたらす実質的な利益を提供する。

輸血歴がないＰＮＨレジストリにおける患者の結果と同様に、登録に先立つ１２ヶ月において０〜１回の輸血を受けた２２名のＳＨＥＰＨＥＲＤ患者のうち、２１／２２名（９５％）が、疲労、息切れおよび／または貧血（ヘモグロビン＜１００ｇ／Ｌによって定義される）のいずれかを有した。≧２回の輸血の亜群において、６４／７５名（８５％）の患者が、ベースラインにおいてこれらの症状のうち少なくとも１種を呈した（表１１）。

表１１および表１２に、ＳＨＥＰＨＥＲＤサブ解析からの患者の亜群の一次および二次転帰の要約を提示する。両方の亜群は、輸血歴に関係なく、ベースラインにおいてＬＤＨレベルによって測定される血管内溶血および疲労を実証し、これは、エクリズマブによる処置後に有意に低下した。

全体的に、輸血歴がないＰＮＨレジストリ解析におけるほぼ全ての患者は、上に定義されている症候性慢性溶血性貧血を示した。同様に、登録に先立つ１２ヶ月において０〜１回の輸血を受けたＳＨＥＰＨＥＲＤ亜群における全患者は１名を除いて、疲労、息切れおよび／または貧血のいずれかを経験した。まとめると、これらのデータは、ＬＤＨ≧１．５×ＵＬＮが、ヘモグロビンレベルおよび関連する輸血とは無関係であり、ＰＮＨの患者における症候性慢性溶血性貧血として特徴付けられる疾患負荷を同定するための最も関連性があるマーカーであることを支持する。

ＦＡＣＩＴ−疲労データの応答者解析を行った。測定ツールを重症度カテゴリーに関係づける利用可能な情報を含蓄する理由から、疲労スコア等の連続型変数を重症度のカテゴリーへとまとめる（collapsing）際に、限界が存在することに留意することが重要である。発表されたアプローチは、ＰＲＯＭＩＳ疲労測定基準における正常、軽度、中等度および重度疲労の臨床重症度閾値を提供する（Lai, J.ら、Psychooncology、２３巻：１１３３〜４１頁、２０１４年）。別のアプローチは、ＦＡＣＩＴ−疲労をＰＲＯＭＩＳ疲労測定基準に関連づける。これら２種のアプローチ（Laiらの表５）および（Cella, D.ら、Qual. Life Res.、２３巻：２６５１〜６１頁、２０１４年）の図３に基づき、次のスコア範囲が、各重症度レベルに関連する：
正常：４２〜５２
軽度：３５〜４１
中等度：６〜３４
重度：０〜５

表１３に、ベースラインおよび最後の利用可能な評価における、ＰＮＨを有するエクリズマブ群のＦＡＣＩＴ−疲労結果を表示する（ｎ＝１９）。これらの患者のうち、６８．４％（ｎ＝１３）が、ベースラインにおいて軽度または中等度疲労を報告した。最後の利用可能な評価において、著しくより少ない患者が、軽度または中等度疲労を報告した（３１．６％、ｎ＝６）。ベースラインにおいて軽度または中等度疲労を報告した群における１３名の患者のうち、６１．５％（ｎ＝８）において改善が観察された。

表１４に、ベースラインおよび最後の利用可能な評価における、エクリズマブなし群における患者のＦＡＣＩＴ−疲労結果を示す（ｎ＝６９）。５２．２％（ｎ＝３６）がベースラインにおいて軽度または中等度疲労を報告した。最後の利用可能な評価において、およそ同じ比率の患者が、ベースラインにおいて軽度または中等度疲労を報告した（４９．２％、ｎ＝３４）。ベースラインにおいて軽度または中等度疲労を報告したエクリズマブなし群における３６名の患者のうち、ごく低い比率（２５％、ｎ＝９）が、最後の利用可能な評価において正常疲労に改善した。

ＦＡＣＩＴ−疲労スコアの更新されたＰＮＨレジストリ解析は、エクリズマブ輸血なし患者の間での疲労における臨床的に有意義かつ統計的に有意な改善を実証する。この追加の応答者解析は、輸血歴がない患者のエクリズマブによる処置が、ベースラインから最後の利用可能な評価までに、疲労における臨床的に有意義な改善をもたらすことをさらに実証する。

他の実施形態
本発明について、その詳細な記載と併せて記載してきたが、前述の記載は、本発明の範囲を限定するのではなく例示することを企図しており、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義されることを理解されたい。材料、方法および実施例は、単なる例示であり、限定を企図しない。本明細書に引用および記載されているあらゆる刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリおよび他の参考文献は、それらの全体を参照により本明細書に組み込む。他の態様、利点および修正も、次の特許請求の範囲内にある。

Claims (16)

1. 発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有するヒト患者における血管内溶血を低下させるための、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片を含む組成物であって、該患者は、約≧１．５×正常上限（ＵＬＮ）の乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有し、輸血を受けたことがないと決定されており、該抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、
   それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、ならびにそれぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列
   を含み、該組成物は、該患者における血管内溶血を低下させることを特徴とする、組成物。
2. 前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、それぞれ配列番号１９、１８および３に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３重鎖配列、それぞれ配列番号４、５および６に表記するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３軽鎖配列、ならびにヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するバリアントヒトＦｃ定常領域を含み、該バリアントヒトＦｃ ＣＨ３定常領域が、それぞれＥＵナンバリングで、ネイティブヒトＩｇＧ Ｆｃ定常領域のメチオニン４２８およびアスパラギン４３４に対応する残基にＭｅｔ−４２９−ＬｅｕおよびＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む、請求項１に記載の組成物。
3. 前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１２に示される重鎖可変領域および配列番号８に示される軽鎖可変領域を含む、請求項２に記載の組成物。
4. 前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１３に示される重鎖定常領域をさらに含む、請求項２に記載の組成物。
5. 前記抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドおよび配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む、請求項２に記載の組成物。
6. 前記患者が、約１．５×ＵＬＮ〜約３．５×ＵＬＮの乳酸デヒドロゲナーゼ濃度を有すると決定される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
7. 前記患者が、血栓症および／または疲労の病歴を持たない、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
8. 前記処置された患者が、前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片による処置の６ヶ月以内に、正常乳酸デヒドロゲナーゼ濃度への復帰を経験する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
9. 以下の方法において使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物であって、
   （ｉ）該方法が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、４週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる；
   （ｉｉ）処置の前記初期相に続いて、第５週目の間に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる；および／または
   （ｉｉｉ）前記維持相に続いて、１４±２日毎に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、
   組成物。
10. 前記患者が、約３０〜約４０ｋｇの間の体重を有する小児患者であることを特徴とする、以下の方法において使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物であって、
    （ｉ）該方法が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる；
    （ｉｉ）処置の前記初期相に続いて、第３週目の間に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる；および／または
    （ｉｉｉ）前記維持相に続いて、２週間毎に９００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、
    組成物。
11. 前記患者が、約２０〜約３０ｋｇの間の体重を有する小児患者であることを特徴とする、以下の方法において使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物であって、
    （ｉ）該方法が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、２週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる；
    （ｉｉ）処置の前記初期相に続いて、第３週目の間に６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる；および／または
    （ｉｉｉ）前記維持相に続いて、２週間毎に６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、
    組成物。
12. 前記患者が、約１０〜約２０ｋｇの間の体重を有する小児患者であることを特徴とする、以下の方法において使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物であって、
    （ｉ）該方法が、６００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる；
    （ｉｉ）処置の前記初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる；および／または
    （ｉｉｉ）前記維持相に続いて、２週間毎に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、
    組成物。
13. 前記患者が、約５〜約１０ｋｇの間の体重を有する小児患者であることを特徴とする、以下の方法において使用される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物であって、
    （ｉ）該方法が、３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の、１週間にわたる週１回の投与を含む初期相から始まる；
    （ｉｉ）処置の前記初期相に続いて、第２週の間に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与を含む維持相が行われる；
    （ｉｉｉ）前記維持相に続いて、３週間毎に３００ｍｇの前記抗Ｃ５抗体またはその抗原結合性断片の投与が行われる、
    組成物。
14. 前記組成物が、静脈内注入により投与されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
15. 前記患者が治療前には、出血性症状、黄疸、血栓症または塞栓症、感染症、神経学的症状、血色素尿症、溶血性貧血、骨髄不全、血栓性素因、血管運動神経性緊張、呼吸困難、一酸化窒素枯渇、胃腸管症状、腹痛、背部痛、慢性腎疾患、呼吸困難、嚥下障害、胸痛、勃起機能不全および疲労からなる群より選択されるＰＮＨの１つまたは複数の症状を示さない、請求項１に記載の組成物。
16. 選択された前記患者の治療が、以下：（ａ）ＬＤＨレベルの改善；（ｂ）疲労の改善；（ｃ）ヘモグロビンレベルの増加；（ｄ）血清クレアチニンおよび推定糸球体濾過率（ｅＧＦＲ）によって測定される腎機能の安定化、および／または（ｅ）クオリティ・オブ・ライフ（ＱｏＬ）の改善のうち１つまたは複数を生じる、請求項１に記載の組成物。