JP2020100631A - 多発性硬化症の併用治療 - Google Patents

Abstract

【課題】自己免疫性疾患を治療又は予防するための組成物の提供。【解決手段】多発性硬化症を有するまたはその危険がある対象を治療するための、アルファ−４インテグリンのＶＣＡＭ−１への結合に拮抗する抗体との組み合わせで用いられる、ＭＣＡＭのラミニン−アルファ−４への結合に拮抗する抗体を含む、医薬組成物。前記アルファ−４インテグリンのＶＣＡＭ−１への結合に拮抗する抗体が、アルファ−４インテグリンに特異的に結合する、前記医薬組成物。【選択図】図９Ａ

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年３月１３日出願の米国仮出願番号第６１／９５２，８３５号及び２０１４年７月１１日出願の米国仮出願番号第６２／０２３，５７７号の優先権を主張するものであり、当該各出願は、その全体が全ての目的のために本明細書に組み込まれる。

配列表、表又はコンピュータプログラムリストの参照
「多発性硬化症の併用治療」に関し、２０１５年３月４日に作成されたファイル ４５５７１９ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ に書き込まれた配列表は、１５３キロバイトである。このファイルに含まれる情報は、参照により本明細書に組み込まれる。

多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系疾患（脳、脊髄及び視神経）への免疫系攻撃が関与する疾患である。この疾患は、１つ以上の環境因子の組み合わせにより、遺伝的に罹患しやすい個人に誘発されると考えられる。中枢神経系疾患への免疫攻撃の一部として、ミエリン（中枢神経系内で神経繊維を包囲及び保護する脂肪物質）が損傷し、神経繊維自体も損傷する。ミエリンが損傷して、瘢痕組織（硬化症）を形成し、これが上記の疾患の名称の由来である。髄鞘又は神経繊維の一部が損傷または破壊された場合、脳及び脊髄へ及び脳及び脊髄から伝わるする神経インパルスが、歪められまたは中断され、様々な症状を引き起こす。

多発性硬化症を治癒させる方法はないが、症状、発症の頻度、及び／または疾患の進行を低減するための、約１０個のＦＤＡ認可の薬剤が、現在存在する。これらの薬剤は、オーバジオ（テリフルノミド）、アボネックス（インターフェロンβ−１ａ）、ベータセロン（インターフェロンβ−１ｂ）、コパキソン（酢酸ガラティラメル）、エクスタビア（インターフェロンβ−１ｂ）、ジレニア（フィンゴリモド）、ノバントロン（ミトキサントロン）、レビフ（インターフェロンβ−１ａ）、テクフィデラ（フマル酸ジメチル）、及びタイサブリ（ナタリズマブ）を含む。ナタリズマブは、利用可能な薬剤のうちで有効性の高いものの１つである。ナタリズマブは、炎症ならびに、再発及び病変負荷などのその効果を、有意に低減するものの、進行に対するその効果は、あまり顕著ではない（Ｐｏｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５４：８９９−９１０（２００６））。大多数の対象がナタリズマブ処置に有利に反応しているものの、まれな症例では進行性多病巣性白質脳症（ＰＭＬ）が発生した（Ｂｌｏｏｍｇｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６６（２０）：１８７０−１８８０（２０１２）；Ｓｃｈｗａｂ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ７８（７）：４５８−４６７（２０１２）；Ｓｃｈｗａｂ ｅｔ ａｌ．，Ｍｕｌｔ．Ｓｃｌｅｒ．１８（３）：３３５−３４４（２０１２））。

本発明は、自己免疫性疾患を治療する、またはその予防を達成する方法を提供するものであり、その方法は、アルファ−４インテグリン拮抗薬も受容する、多発性硬化症を有するまたはその危険がある対象に対して、ＭＣＡＭ拮抗薬を投与することを含み、ここで、ＭＣＡＭ拮抗薬及びアルファ−４インテグリン拮抗薬は、自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される。また、本発明は、自己免疫性疾患を治療する、またはその予防を達成する方法を提供するものであり、その方法は、ＭＣＡＭ−拮抗薬も受容する、多発性硬化症を有するまたはその危険がある対象に対して、アルファ−４インテグリン拮抗薬を投与することを含み、ここで、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は、自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される。

いくつかの方法では、自己免疫性疾患は、多発性硬化症である。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬は、ＶＣＡＭ−１に結合するアルファ−４インテグリンに拮抗する。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬は、アルファ−４インテグリンに特異的に結合する。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬は、モノクローナル抗体である。いくつかの方法では、モノクローナル抗体はナタリズマブである。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬は、ラミニン−アルファ−４に結合するＭＣＡＭに拮抗する。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬は、ＭＣＡＭに特異的に結合するモノクローナル抗体である。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬は、ラミニン−アルファ−４に特異的に結合するモノクローナル抗体である。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ抗薬は、１７４９または２１２０、若しくは、そのキメラ型、単板型またはヒト化バージョンである。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬は、ナタリズマブであり、ＭＣＡＭ拮抗薬は、１７４９または２１２０、若しくは、そのキメラ型、単板型またはヒト化バージョンである。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は、これらが同時に対象の血清内で検出可能になるように、同時に提供される。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は、同時注入により提供される。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は、順番に提供される。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬が最初に提供され、対象がアルファ−４インテグリン拮抗薬に対する耐性を発症し、その後、ＭＣＡＭ拮抗薬が提供される。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬が最初に提供され、対象がＭＣＡＭ拮抗薬に対する耐性を発症し、その後、アルファ−４インテグリン拮抗薬が提供される。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬による一連の治療が最初に投与され、対象は、その一連の治療の開始時において再発寛解型多発性硬化症を有するかまたはその危険があり、対象は、ＭＣＡＭ拮抗薬での一連の治療の開始時に二次進行型多発性硬化症に進んでいる。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は各々、週毎から四半期毎の間隔で、提供される。いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は各々、４毎週の間隔で提供される。いくつかの方法では、各抗体の投与量は、対象当たり５０〜５００ｍｇである。いくつかの方法では、各抗体の投与量は、対象当たり１００〜２００ｍｇである。いくつかの方法では、各抗体の投与量は、対象当たり５０〜１５０ｍｇである。

いくつかの方法では、ＭＣＡＭ抗体は、配列番号９３または１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域、配列番号８６または９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域、配列番号１０４または１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域、及び／または、配列番号１０１または１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含む。

さらに、本発明は、Ｔ細胞浸潤が関与する自己免疫性疾患を治療する、またはその予防を達成する方法をさらに提供するものであり、この方法は、炎症性疾患を有するまたはその危険がある対象に対して、アルファ−４拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬を投与することを含み、ここで、アルファ−４インテグリン拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬は、自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される。いくつかの方法では、自己免疫性疾患は、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、クローン病、炎症性腸疾患、サルコイドーシスまたは乾癬性関節炎である。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬及びアルファ−４インテグリン拮抗薬が順番に投与され、アルファ−４インテグリン拮抗薬が最初に投与される。いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬及びアルファ−４拮抗薬が、同時に投与される。

いくつかの方法では、ＭＣＡＭ拮抗薬は、配列番号９３または１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域、配列番号８６または９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域、配列番号１０４または１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域、及び／または、配列番号１０１または１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含むモノクローナル抗体である。

図１Ａ〜Ｃは、ナタリズマブによる長期の処理下での脳脊髄液の変化が、ＭＳ対象における中枢性免疫応答の正常化を反映する図である。

図２Ａ〜Ｃは、長期のナタリズマブ治療下における末梢性及び中枢性Ｔ細胞区画のＣＤ４９ｄ発現の図である。

図３Ａ及びＢは、ナタリズマブ処理が、ＰＳＧＬ−１のアップレギュレーションを誘発する図である。

図４Ａ〜Ｋは、ＣＤ４^＋Ｔ細胞上でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の分子分布を示す図である。

図５Ａ及びＢは、多発性硬化症対象及び対照組織内の、可能性のある侵入経路上でのＶＣＡＭ−１及びＰ−セレクチンの発現を示す図である。

図６Ａ〜Ｇは、ＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１（即ちＶＣＡＭ−１／Ｐ−セレクチン）のリガンドに対するＣＤ４＋Ｔ細胞のローリング及び密着へのナタリズマブ処理の影響を示す図である。

図７Ａ〜Ｇは、ＴＨ１７細胞が、内皮に対する安定した接着のためにＭＣＡＭを用いることが出来ることを示す図である。

図８Ａ〜Ｉは、活性ＭＳ病変内のＭＣＡＭ＋リンパ球を示す図である。

ＭＳまたは長期ナタリズマブ治療における中枢性及びエフェクタメモリＴ細胞の血液−ＣＳＦ移動の概要的な概要を示す図である。

配列の簡単な説明
配列番号１は、抗体クローン１７の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号２は、抗体クローン１７のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号３は、抗体クローン１７のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号４は、抗体クローン１７のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号５は、抗体クローン１７の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６は、抗体クローン１７のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号７は、抗体クローン１７のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号８は、抗体クローン１７のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号９は、抗体１１７４．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号１０は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号１１は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号１２は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号１３は、抗体１１７４．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号１４は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号１５は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号１６は、抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号１７は、抗体１４１４．１．２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号１８は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号１９は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号２０は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号２１は、抗体１４１４．１．２の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号２２は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号２３は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号２４は、抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号２５は、抗体１４１５．１．１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号２６は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号２７は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号２８は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号２９は、抗体１４１５．１．１の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号３０は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号３１は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号３２は、抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号３３は、抗体１７４９．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号３４は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号３５は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号３６は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号３７は、抗体１７４９．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号３８は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号３９は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号４０は、抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号４１は、抗体２１２０．４．１９バージョン１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号４２は、抗体２１２０．４．１９バージョン２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号４３は、抗体２１２０．４．１９バージョン３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号４４は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号４５は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号４６は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号４７は、抗体２１２０．４．１９の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号４８は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号４９は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号５０は、抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号５１は、抗体２１０７．４．１０バージョン１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号５２は、抗体２１０７．４．１０バージョン２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号５３は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列である。

配列番号５４は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列である。

配列番号５５は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列である。

配列番号５６は、抗体２１０７．４．１０の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号５７は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号５８は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列である。

配列番号５９は、抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号６０は、抗体１７４９．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６１は、ヒト化抗体１７４９バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６２は、ヒト化抗体１７４９バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６３は、抗体１７４９．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６４は、ヒト化抗体１７４９バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６５は、ヒト化抗体１７４９バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６６は、抗体２１０７．４．１０．１８の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６７は、ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６８は、ヒト化抗体２１０７バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号６９は、ヒト化抗体２１０７バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７０は、ヒト化抗体２１０７バージョン４Ａ（ＶＨ４Ａ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７１は、ヒト化抗体２１０７バージョン５Ａ（ＶＨ５Ａ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７２は、ヒト化抗体２１０７バージョン６（ＶＨ６）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７３は、抗体２１０７．４．１０．１８の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７４は、ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７５は、ヒト化抗体２１０７バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７６は、ヒト化抗体２１０７バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７７は、抗体２１２０．４．１９．６の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７８は、ヒト化抗体２１２０バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号７９は、ヒト化抗体２１２０バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８０は、ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８１は、ヒト化抗体２１２０バージョン４（ＶＨ４）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８２は、ヒト化抗体２１２０バージョン５（ＶＨ５）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８３は、抗体２１２０．４．１９．６の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８４は、ヒト化抗体２１２０バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８５は、ヒト化抗体２１２０バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８６は、ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号８７は、ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＨ３）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号８８は、ヒト化抗体２１２０バージョン４（ＶＨ４）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号８９は、ヒト化抗体２１２０バージョン５（ＶＨ５）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号９０は、ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＨ１）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号９１は、ヒト化抗体２１０７バージョン４（ＶＨ４）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列である。

配列番号９２は、ヒト化抗体２１２０バージョン１〜５（ＶＨ１〜ＶＨ５）のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列である。

配列番号９３は、ヒト化抗体１７４９バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号９４は、ヒト化抗体１７４９バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号９５は、抗体２１２０．４．１９．Ｑ１Ｅの成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）はＥに占有される。

配列番号９６は、ヒト化抗体２１２０バージョン１Ｑ１Ｅ（ＶＨ１．Ｑ１Ｅ）、の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。

配列番号９７は、ヒト化抗体２１２０バージョン２Ｑ１Ｅ（ＶＨ２．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。

配列番号９８は、ヒト化抗体２１２０バージョン３Ｑ１Ｅ（ＶＨ３．Ｑ１Ｅ）、の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）はＥが占有する。

配列番号９９は、ヒト化抗体２１２０バージョン４Ｑ１Ｅ（ＶＨ４．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）はＥが占有する。

配列番号１００は、ヒト化抗体２１２０バージョン５Ｑ１Ｅ（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であり、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）はＥが占有する。

配列番号１０１は、ヒト化１７４９または２１２０の軽鎖定常領域のアミノ酸配列であり、Ｎ末端にアルギニンがある。

配列番号１０２は、ヒト化１７４９または２１２０の軽鎖定常領域のアミノ酸配列であり、Ｎ末端にアルギニンはない。

配列番号１０３は、ヒト化１７４９または２１２０の重鎖定常領域のアミノ酸配列である。

配列番号１０４は、ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域のアミノ酸配列である。

配列番号１０５は、ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域のアミノ酸配列である。

配列番号１０６は、ヒト化抗体２１２０バージョン３の成熟軽鎖領域（ＶＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１０７は、ヒト化抗体２１２０バージョン５の成熟重鎖領域（ＶＨ５＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１０８は、ヒト化抗体２１２０バージョン５の成熟重鎖領域（ＶＨ５＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１０９は、ヒト化抗体２１２０バージョン５Ｑ１Ｅの成熟重鎖領域（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１１０は、ヒト化抗体２１２０バージョン５Ｑ１Ｅの成熟重鎖領域（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１１１は、ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟軽鎖領域（ＶＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１１２は、ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟重鎖領域（ＶＨ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１１３は、ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟重鎖領域（ＶＨ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１１４は、ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン１（Ｈ１）のアミノ酸配列である。

配列番号１１５は、ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン２（Ｈ２）のアミノ酸配列である。

配列番号１１６は、ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン３（Ｈ３）のアミノ酸配列である。

配列番号１１７は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン１（Ｌ１）のアミノ酸配列である。

配列番号１１８は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン２（Ｌ２）のアミノ酸配列である。

配列番号１１９は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン３（Ｌ３）のアミノ酸配列である。

配列番号１２０は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン４（Ｌ４）のアミノ酸配列である。

配列番号１２１は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン５（Ｌ５）のアミノ酸配列である。

配列番号１２２は、ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン６（Ｌ６）のアミノ酸配列である。

配列番号１２３は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ１＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２４は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ１＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２５は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ２＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２６は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ２＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２７は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２８は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１２９は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ１＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３０は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ１＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３１は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ２＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３２は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ２＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３３は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３４は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３５は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ４＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３６は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ４＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３７は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ５＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３８は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ５＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１３９は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ６＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１４０は、１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ６＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列である。

配列番号１４１は、ヒト化抗体２１０７バージョン４Ｂ（ＶＨ４Ｂ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。

配列番号１４２は、ヒト化抗体２１０７バージョン５Ｂ（ＶＨ５Ｂ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
定義

モノクローナル抗体等の治療用拮抗薬は、典型的には単離形態で提供される。これが意味することは、モノクローナル抗体または他の拮抗薬は、タンパク質及びその生成または精製から生じる他の巨大分子における純度が典型的に少なくとも５０％ｗ／ｗであるが、モノクローナル抗体または他の拮抗薬は、その使用を促進することを目的とする過剰な製薬上の許容可能な担体または他のビヒクルと併用する可能性を除外しない、ということである。ときにモノクローナル抗体または他の拮抗薬は、タンパク質及びその生成または精製から生じる他の巨大分子における純度が、少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５または９９％ｗ／ｗである。

モノクローナル抗体のその標的抗原への特異結合は、少なくとも１０^６、１０^７、１０^８、１０^９または１０^１０のＭ^−１の親和性を意味する。特異結合は、検出可能により大きく、少なくとも１つの無関係な標的に発生する非特異結合と区別可能である。特異結合は、特定の官能基間または特定の空間適合間の結合生成の結果で（例えば、ロック及びキータイプ）であっても良く、それに対して、非特異結合は、通常ファンデルワールス力の結果である。しかしながら、特異結合は、モノクローナル抗体が、それ１つと標的１つのみとを結合することを、必然的に意味しない。

塩基性抗体構造単位は、サブユニットの四量体である。各四量体は、ポリペプチド鎖の２本の同一鎖を含み、各鎖は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）及び１つの「重」鎖（約５０〜７０ｋＤａ）を有している。各鎖のアミノ末端部分は、主に抗原認識に寄与する約１００〜１１０またはそれ以上アミノ酸の可変領域を含む。この可変領域は、当初は、切断可能シグナルペプチドに結合されるように発現される。シグナルペプチドのない可変領域は、時として成熟可変領域と呼ばれる。したがって、例えば、軽鎖成熟可変領域は、軽鎖シグナルペプチドの無い軽鎖可変領域を意味する。各鎖のカルボキシ末端部分は、主に、エフェクタ機能に寄与する定常領域を定義する。

軽鎖は、カッパまたはラムダに分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンと分類され、それぞれ、抗体のアイソタイプを、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥと定義する。軽鎖及び重鎖内では、可変及び一定領域は、約１２以上のアミノ酸の「Ｊ」領域により結合され、重鎖はまた、約１０以上のアミノ酸の「Ｄ」領域を含んでいる。（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ，Ｗ．，Ｅｄ．，２ｎｄ Ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９８９，Ｃｈ．７を一般に参照，全ての目的のため、参照によりその全体が組み込まれる）。

各軽／重鎖対の成熟可変領域は、抗体結合部を形成する。したがって、インタクト抗体は、２つの結合部を有している。二官能基性または二重特異性抗体を除いて、２つの結合部は、同じである。鎖はすべて、３つの高変異性領域が結合される比較的に保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）の同じ一般構造を示すものであり、この高変異性領域は、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる。各対の２本の鎖からのＣＤＲは、フレームワーク領域により整列され、特異的エピトープとの結合が可能になる。Ｎ末端からＣ末端まで、軽鎖及び重鎖は共に、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４ドメインを備えている。各ドメインへのアミノ酸の帰属は、Ｋａｂａｔ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（免疫学的に興味のあるタンパク質の配列）（アメリカ国立衛生研究所，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９８７及び１９９１）、または、Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７（１９８７）；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４２：８７８〜８８３（１９８９）、の定義に従っている。また、Ｋａｂａｔは、広く用いられる付番規則（Ｋａｂａｔ付番）を提供し、そこでは、別々の重鎖間または別々の軽鎖間に対応する残基は、同じ数が割り当てられる（例えば、Ｈ８３は、成熟重鎖可変領域におけるＫａｂａｔ付番での位置８３を意味し；同様に、位置Ｌ３６は、成熟軽鎖可変領域におけるＫａｂａｔ付番での位置３６を意味する）。別様に明示的に述べられていない限り、Ｋａｂａｔ付番が、抗体の可変領域内での位置に言及する場合に、本明細書全体で用いられる。

「抗体」という用語は、インタクト抗体及びその結合フラグメントを含む。典型的には、フラグメントは、それが誘導されたインタクト抗体と、標的への特異結合について競合し、別々の重鎖、軽鎖Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆ（ａｂ）ｃ、二重特異性抗体、Ｄａｂ、ナノ本体及びＦｖを含む。フラグメントは、組換えＤＮＡ技術により、またはインタクト免疫グロブリンの酵素分離または化学分離により生成可能である。また、「抗体」という用語は、二重特異性抗体及び／またはヒト化抗体も含む。二重特異性または二官能基性抗体は、２本の異なる重鎖／軽鎖対及び２つの異なる結合部を有する人工ハイブリッド抗体である（例えば、Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ ａｎｄ Ｌａｃｈｍａｎｎ，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５−３２１（１９９０）；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−５３（１９９２）を参照。

「エピトープ」という用語は、抗体が結合する抗原上の部位のことを指す。エピトープは、隣接アミノ酸、または１つ以上のタンパク質の三次折り畳みにより並置される非隣接アミノ酸より形成可能である。隣接アミノ酸から形成されるエピトープは典型的には、変性溶媒に暴露される際に保持され、一方、三次折畳みにより形成されるエピトープは典型的には、変性溶媒を用いた処理により失われる。エピトープは典型的には、少なくとも３個、およびそれより多く、通例では少なくとも５個または８〜１０個のアミノ酸を、特有の立体構造に含む。エピトープの立体構造を決定する方法は、例えば、Ｘ線結晶学及び二次元核磁気共鳴を含む。例えば、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（分子生物学における方法）、第６６巻、Ｇｌｅｎｎ Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ監修（１９９６）のエピトープマッピングプロトコルを参照されたい。

ヒト化抗体は、非ヒト「供与体」抗体からのＣＤＲがヒト「受容体」抗体配列に移植されるよう遺伝的に操作される抗体である（例えば、Ｑｕｅｎｎの米国特許第５，５３０，１０１号及び５，５８５，０８９号；Ｗｉｎｔｅｒの米国特許第５，２２５，５３９号；Ｃａｒｔｅｒの米国特許第６，４０７，２１３号；Ａｄａｉｒの米国特許第５，８５９，２０５号及び６，８８１，５５７号；Ｆｏｏｔｅの米国特許第６，８８１，５５７号、を参照のこと）。受容体抗体配列は、例えば、成熟ヒト抗体配列、そのような配列群の複合体、ヒト抗体配列のコンセンサス配列、または生殖細胞系領域配列であっても良い。したがって、ヒト化抗体は、好ましくはＫａｂａｔにより定義されたものとして、完全にまたは実質的にドナー抗体及び可変領域基質配列及び一定領域から、若しくは存在するならば完全にまたは実質的にヒト抗体配列から、そのＣＤＲを有している抗体である。ナノ本体及びｄＡｂ以外では、ヒト化抗体は、ヒト化重鎖及びヒト化軽鎖を含む。ヒト化抗体内のＣＤＲは、対応する残基（Ｋａｂａｔにより定義される）の少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％が、各ＣＤＲの間で同一である場合に、実質的に非ヒト抗体内に対応するＣＤＲからである。Ｋａｂａｔにより定義される対応する残基の少なくとも８５、９０、９５または１００％が同一である場合に、抗体鎖の可変領域基質配列または抗体鎖の定常領域は、それぞれ実質的にヒト可変領域基質配列またはヒト定常領域からである。

キメラ型抗体は、非ヒト抗体（例えば、マウス）の軽鎖成熟可変領域及び重鎖成熟可変領域が、ヒト軽鎖定常領域及び重鎖定常領域と組み合わされる抗体である。そのような抗体は、マウス抗体の結合特異性を実質的にまたは完全に保持するものであり、かつ約２／３がヒト配列である。

単板型抗体は、非ヒト抗体のＣＤＲの一部、通常全て、及び非ヒト可変領域基質残基の一部を、保持するが、例えば露出した残基（Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９、１９９１）等のＢ細胞またはＴ細胞エピトープに寄与し得る他の可変領域基質残基が、ヒト抗体配列の対応する位置からの残基で置換される、一種のヒト化抗体である。結果は、ＣＤＲが、完全にまたは実質的に非ヒト抗体からであり、かつ、非ヒト抗体の可変領域基質が、置換によりヒト類似性が高くなるよう作製される、抗体である。

同一または重複するエピトープを認識する抗体は、他の抗体の標的抗原との結合と競合する１つの抗体の能力を示す単純なイムノアッセイにおいて特定可能である。また、抗体のエピトープは、接触残基を同定するための抗原に結合される抗体のＸ線結晶解析により定義することも可能である。代替的に、１つの抗体の結合を低減または排除する抗原内の全てのアミノ酸変異が他の結合を低減または排除する場合に、２つの抗体は、同じエピトープを有する。１つの抗体の結合を低減または排除するいくつかのアミノ酸変異が、他方の結合を低減または排除する場合に、２つの抗体は、重なるエピトープを有する。

抗体間の競合は、試験抗体が、参照抗体の共通の抗原に対する特異結合を阻害するアッセイにより決定される（Ｊｕｎｇｈａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５０：１４９５、１９９０）。過剰の試験抗体（例えば、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍または１００倍）が、参照抗体の結合を、競合結合アッセイ測定で少なくとも５０％、例えば７５％、９０％または９９％で、阻害する場合に、試験抗体は、参照抗体と競合する。競合アッセイ（競合する抗体）により特定される抗体は、参照抗体と同じエピトープに結合する抗体、及び立体障害が生じるほど参照抗体によって結合されるエピトープに十分に近位の隣接エピトープに結合する抗体とを含む。

「対象」は、予防または治療処置の何れかを受けるヒトまたは他の哺乳類の対象を含む。

パーセンテージ配列同一性は、Ｋａｂａｔ付番規則により最大限にアラインされた抗体配列により決定される。アラインメントの後、対象抗体領域（例えば、重鎖又は軽鎖の全体の成熟可変領域）が参照抗体の同じ領域と比較される場合、対象及び参照抗体領域の間のパーセンテージ配列同一性は、被検及び参照抗体領域内の同じアミノ酸により占有される位置の数を、ギャップ数を含めない２つの領域のアラインメンとされた位置の全数により除し、１００により乗算してパーセンテージに変換する。

１つ以上の列挙された要素を「含む」組成物または方法は、具体的に列挙されない他の要素を含み得る。例えば、抗体を含む組成物は、抗体のみを含んでいても良く、または他の含有物と組み合わせても良い。

数値の範囲の指定は、範囲内または範囲を定義する全ての整数と、範囲内の整数で定義される全ての部分範囲とを含む。

文脈から明らかでない限り、「約」という用語は、明示された値の測定における標準誤差（ＳＥＭ）内での値を包含する。

対象が少なくとも１つの既知の危険因子（例えば、遺伝子的、生化学的、家族歴、環境への暴露）を有するならば、個人は疾患の危険が高く、この危険因子を有する個人は、危険因子のない個人に比べて、疾患を発症する危険度が統計的に有意により高くなる。

「症状」という用語は、対象が認める、疾患の主観的な所見、例えば異常進行、をいう。「徴候」は、医者により観測される疾患の客観的な所見をいう。

複数の薬理学的拮抗薬の同時投与は、検出可能な量の拮抗薬が同時に細胞質内に存在するように、及び／または、複数の拮抗薬が、同じ疾患発症に対して治療効果を及ぼす、若しくは、複数の拮抗薬が、同じ疾患発症を治療する際に、協力的にまたは相乗作用的に作用するように、時間的に十分に近くに投与されることを意味する。

統計学的に有意とは、０．０５未満、好ましくは０．０１未満、最も好ましくは０．００１未満であるｐ値を指す。

「小分子」は、約６００より低い、好ましくは約１０００ダルトンより低い分子量を有するよう、ここに定義される。一般に、小分子は非ペプチド小有機分子である。

詳細説明
Ｉ．一般
ナタリズマブは、そのインテグリンアルファ−４インテグリンへの結合を介して、ＣＮＳ内へのＴ細胞、特にＴＨ１細胞の血管外遊走を実質的に阻害するが、一部のＴ細胞（Ｔ_Ｈ１７）は、ＭＣＡＭの、そのリガンドであるラミン−アルファ−４との相互作用を介してＣＮＳへ侵入する。本出願は、アルファ−４インテグリン及びＭＣＡＭに対する併用遮断が、これらの細胞による血管外遊走に対し、これらいずれかの分子単独でよりも効果的であることを証明する。この結果に部分的に基づき、本発明は、アルファ−４インテグリンの拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬が多発性硬化症を有するかその危険を有する対象に投与される、併用治療方法を提供する。薬剤の併用は、協力または相乗効果の可能性、ならびに、結果として、個々の拮抗薬の使用と比較して高い効力、低減した副作用、及び／または、より高い処理ウィンドウを提供することができる。

ＩＩ．標的分子及びそれらのリガンド
アルファ−４インテグリンは、ヘテロ二量体インテグリンであるアルファ４ベータ１（ＶＬＡ−４）及びアルファ４ベータ７の構成要素である。そのリガンドは、ＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチンを含む。ヒトタンパク質の典型的な形態のスイスプロット（Ｓｗｉｓｓ Ｐｒｏｔ）受入番号は、以下の通りである：アルファ−４、Ｐ１３６１２、ｖｃａｍ−１、Ｐ１９３２０。

ＭＣＡＭ（Ｍｅｌａｎｏｍａ Ｃｅｌｌ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ：メラノーマ細胞接着分子、ＣＤ１４６及びＭＵＣ１８としても知られる）は、細胞接着と、維管束組織の細胞間結合における内皮単層の粘着とに関与する、免疫グロブリン超分子群に属する細胞表面グリコプロテインのことを指す。これはまた、メラノーマ及び前立腺ガンを含む多くの癌の腫瘍進行も促進する。これは、ホモタイプな／ホモフィリックな方法で相互作用することが知られており、そして、他のリガンドに結合し得る。ヒトＭＣＡＭは、５つの免疫グロブリンドメインを含む（１：アミノ酸残基１９〜１２９；２：アミノ酸残基１３９〜２４２；３：アミノ酸残基２４４〜３２１；４：アミノ酸残基３３５〜４２４；及び５：アミノ酸残基４３０〜５１０）。

ラミニンα４は、ラミニン分子内に見出されるポリペプチド鎖の１つを指し、これは大部分の細胞及び器官の蛋白質ネットワーク基礎である、（基底膜の）基底層内において発現される。ラミニンは、細胞質膜分子を介して細胞膜に結合し、細胞結合に寄与することが知られている。ラミニンα４鎖は典型的には、ラミニンβ鎖及びラミニンγ鎖と複合体を形成する。ラミニンα４鎖は、ラミニン４１１（ラミニン８またはα４β１γ１）；ラミニン４２１（ラミニン９またはα４β２γ１）及びラミニン４２３（ラミニン１４またはα４β２γ３）を含む、多数のラミニン分子内に見出される。ヒトラミニンα４−鎖の２つの主なアイソフォーム：ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＰ００１０９８６７６及びＮＰ００１０９８６７７が存在する。「ラミニン４１１」は、３つのポリペチドサブユニットまたは鎖、すなわちα４鎖、β１鎖及びγ１鎖で構成される三量体ポリペチド複合体を指す。

アルファ−４インテグリンによる文脈参照から明らかでない限り、ＶＣＡＭ−１、フィブロネクチン、ＭＣＡＭ及びラミニン−アルファ−４は、そのような蛋白質の天然ヒト配列を指し、存在する場合は、通常シグナルペプチドを除外する。スイスプロット（Ｓｗｉｓｓ Ｐｒｏｔ）は、ＭＣＡＭの典型的なヒト配列を参照し、そのリガンドラミニン−アルファ−４は、それぞれ、Ｐ４３１２１及びＱ１６３６３である。

ＩＩＩ．典型的な拮抗薬
アルファ−４インテグリンまたはＭＣＡＭに対する拮抗薬は、抗体、レセプタまたはリガンドのＩｇＧ定常領域への融合タンパク質、他の生物結合分子、及び小分子を含む。抗体は、モノクローナルまたはポリクローナルであっても良い。抗体は非ヒト、例えばマウスまたはラット、ヒト以外の霊長類であっても良く、又は、ヒトであっても良い。抗体は、キメラ型、単板型、ヒト化、霊長類化型等であっても良い。

非抗体結合分子は、例えば、リポカリン骨格に基づくアンチカリンを含み、これは、リガンド結合部位を形成する４つの超可変ループをサポートする硬質ベータ−バレルにより特徴付けられる蛋白質構造である。機能的ディスプレイ及び誘導的選択と組み合わせて、ループ領域内のランダムな突然変異誘発をターゲットにすることにより、新規な結合特異性が操作される（Ｓｋｅｒｒａ（２００８）：ＦＥＢＳ Ｊ．２７５：２６７７−２６８３）。他の適切な骨格は、例えば、ヒトフィブロネクチンＩＩＩの１０番めの細胞外ドメインに基づくアドネクチンまたはモノボディ（Ｋｏｉｄｅ ａｎｄ Ｋｏｉｄｅ（２００７） Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３５２：９５−１０９）；ブドウ球菌タンパク質ＡのＺ領域に基づくアフィボディ（Ｎｙｇｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，（２００８），ＦＥＢＳ Ｊ．２７５：２６６８−２６７６）；アンキリン反複蛋白質に基づくＤＡＲＰｉｎｓ（Ｓｔｕｍｐｐ ｅｔ ａｌ．，（２００８），Ｄｒｕｇ．Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ１３：６９５−７０１）；ヒトＦｙｎプロテインキナーゼのＳＨ３領域に基づくフィノマー（Ｇｒａｂｕｌｏｖｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，（２００７），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８２：３１９６−３２０４）；スルフォロブス属アシドラリウスからのＳａｃ７ｄに基づくアフィティン（Ｋｒｅｈｅｎｂｒｉｎｋ ｅｔ ａｌ．，（２００８），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８３：１０５８−１０６８）；ヒトｙ−Ｂ−クリスタリンに基づくアフィリン（Ｅｂｅｒｓｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．，（２００７），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３７２：１７２−１８５）；膜受容蛋白質のＡ領域に基づくアビマー（Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，（２００５），Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１５５６−１５６１）；システインリッチノッチンペプチド（Ｋｏｌｍｅｒ（２００８），ＦＥＢＳ Ｊ．２７５：２６８４−２６９０）；及び、操作されたクーニッツ型阻害剤（Ｎｉｘｏｎ ａｎｄ Ｗｏｏｄ（２００６），Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ．Ｄｉｓｃｏｖ．Ｄｅｖ．９：２６１−２６８）、を含んでいても良い。レビューのために、Ｇｅｂａｕｅｒ ａｎｄ Ｓｋｅｒｒａ（２００９）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３：２４５−２５５を参照のこと。

アルファ−４拮抗薬またはアルファ−４インテグリン拮抗薬への参照は、抗体等の拮抗薬のことを指し、これは、アルファ−４インテグリンに結合し、アルファ−４ベータ−１若しくはアルファ−４ベータ−７の成分としての、ＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチン等のリガンドとの相互作用を阻害し、または、ＶＣＡＭ−１若しくはフィブロネクチンに結合し、そのような分子のアルファ−４インテグリンとの相互作用を阻害する。いくつかのアルファ−４インテグリン拮抗薬は、アルファ−４に、単離されているか、またはアルファ−４ベータ１またはアルファ−４ベータ−７等のヘテロ二量体インテグリンの構成要素であるかどうかにかかわらず特異的に結合する。他のアルファ−４インテグリン拮抗薬は、アルファ−４ベータ−１またはアルファ−４ベータ−７等のヘテロ二量体インテグリンの構成要素としてのみ、アルファ−４インテグリンと特異的に結合する。

好ましいアルファ−４インテグリン拮抗薬は、ナタリズマブであり、これは、アルファ−４インテグリンと特異的に結合し、アルファ−４ベータ１及びアルファ−４ベータ７のＶＣＡＭ−１及び／またはフィブロネクチンへの結合を阻害する、ＩｇＧ４ヒト化抗体である。抗体は、ＦＤＡ認可であり、かつ、市販である。ＨＰ１／２等、数種類のマウス抗ＶＬＡ−４モノクローナル抗体、及び、他の抗ＶＬＡ−４抗体（例えば、ｍＡｂ ＨＰ２／１、ＨＰ２／４、Ｌ２５、Ｐ４Ｃ２、Ｐ４Ｇ９）が、以前は記載されている（例えば、Ｐｕｌｉｄｏ ｅｔ ａｌ．，（１９９１），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６（１６）：１０２４１−５及びＦｒｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，（１９９７），Ｊ．ＣＬＩＮ．ＩＮＶＥＳＴ．９９：２０３６−２０４４、を参照）。この抗体のヒト化、キメラ型または単板型バージョンを用いることが可能である。アルファ−４インテグリンとの結合についてナタリズマブと競合する抗体も使用することができ、同様にナタリズマブと同じＫａｂａｔＣＤＲを組み入れる他のヒト化抗体を使用することもできる。また、拮抗薬は、ＶＣＡＭ−１融合タンパク質、ＶＣＡＭ−１／Ｉｇ融合タンパク質、抗ＶＬＡ−４抗体、及び、好ましくはアミノ酸配列ＥＩＬＤＶを含むフィブロネクチンペプチドを含む。数種類の小分子が、ＶＬＡ−４及び／またはＬＰＡＭ−１拮抗薬としてすでに提案されている。これらは、ＷＯ９６／２２９６６号、ＷＯ９８／５３８１７号、ＷＯ０１／１４３２８号、ＷＯ９９／０６４３１号、ＷＯ９９／０６４３２号、ＷＯ９９／０６４３６号、ＷＯ９９／１０３１２号、ＷＯ９９／４８８７９号、ＷＯ００／１８７５９号、ＷＯ００／２０３９６号、ＷＯ９９／３６３９３号、ＷＯ９９／５２８９８号、ＷＯ９９／６２９０１号、ＷＯ００／６７７４６号、及びＷＯ０２／０８２０６号、ならびに米国特許第７，３６１，６７９号に記載されている。これらの化合物は、尿素構造若しくはフェニルアラニン構造、または２−フェニル−３−ヘテロアリールプロピオン酸構造を有している。

拮抗薬の活性を、ＶＬＡ−４−発現細胞またはＶＬＡ−７−発現細胞（例えば、ラモス細胞、ジャーカット細胞、Ａ３７５メラノーマ細胞、ならびにヒト末梢血液リンパ球（ＰＢＬ））のフィブロネクチンまたはＶＣＡＭ−１コートプレートとの結合を遮断するのに必要な拮抗薬の濃度を決定するいくつかのアッセイにより評価することができる。例えば、マイクロタイタープレートのウェルがフィブロネクチンまたは可溶性ＶＣＡＭ−１でコーティングされると、様々な濃度の試験拮抗薬が、適切な標識化ＶＬＡ−４発現細胞と共に次いで加えられる。代替的に、試験拮抗薬を最初に加え、標識化ＶＬＡ−４発現細胞の添加への前に、被覆ウェルで培養させることができる。細胞は、少なくとも３０分間、ウェル内で培養される。培養の後、ウェルは空にされ、洗浄される。結合の阻害は、試験化合物の様々な濃度の各々に対し、及び試験化合物を含まない対照に対し、プレートに結合されている蛍光または放射活性を定量することにより測定される。

ＭＣＡＭ拮抗薬は、ＭＣＡＭの（ｉ）特異的にそのリガンドであるラミニンα４鎖、例えばラミニン４１１のα４鎖と結合する；及び／または、（ｉｉ）ＭＣＡＭ発現細胞、例えばＴ_Ｈ１７細胞が対象の組織に浸入するまたはそれに移動すること促進させる能力を完全にまたは部分的に阻害する拮抗薬を指す。ＭＣＡＭ拮抗薬は、ＭＣＡＭに、またはそのリガンドであるラミニンアルファ−４に結合する抗体または他の拮抗薬を含む。

ＭＣＡＭに対する好ましい拮抗薬は、ＷＯ２０１２／１７００７１号及び２０１３年９月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０５８７７３号に記載される抗体であり、特にＷＯ２０１２／１７００７１号におけるクローン１７と指定される抗体、ならびに、１１７４．１．３、１４１４．１．２、１４１５．１．１、及び１７４９．１．３と指定されるマウス抗ヒトＭＣＡＭモノクローナルクローン、及び、ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０５８７７３号に記載される、２１２０．４．１９及び２１０７．４．１０と指定されるラット抗ヒトＭＣＡＭモノクローナル抗体クローンである。モノクローナル抗体クローン２１２０．４．１９の変異株は、２０１４年３月１２日に出願の米国特許出願番号第６１／９５２，１１６号に記載される。それらの抗体の任意のＫａｂａｔＣＤＲを含む、または、それ以外では、ＷＯ２０１２／１７００７１号、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０５８７７３号、２０１４年３月１２日に出願の米国特許出願番号第６１／９５２，１２３号、又は２０１４年３月１２日に出願の米国特許出願番号第６１／９５２，１１６号に開示される、これらの抗体のキメラ型、単板型またはヒト化形態を用いることも可能である。ヒトＭＣＡＭへの結合に対して、これらの抗体の何れにも競合する抗体を用いることも可能である。好ましい抗体は、残基１４１または残基３１８を含むＭＣＡＭ上のエピトープに結合する。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体はクローン１７と指定され、配列番号１と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域及び配列番号５と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域を含む。

抗体クローン１７の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＭＲＶＱＩＱＦＬＧＬＬＬＬＷＴＳＶＶＱＣＤＶＱＭＴＱＳＰＳＹＬＡＴＳＰＧＥＳＶＳＩＳＣＫＡＳＫＮＩＤＴＹＬＡＷＹＱＥＫＰＧＫＴＮＫＬＬＩＹＳＧＳＴＬＱＳＧＴＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＲＮＬＥＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＮＥＹＰＬＴＦＧＳ ＧＴＫＬＥＩＫＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳ（配列番号１）。

抗体クローン１７のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＫＡＳＫＮＩＤＴＹＬＡ（配列番号２）。

抗体クローン１７のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＳＧＳＴＬ（配列番号３）。

抗体クローン１７のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号４）。

抗体クローン１７の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＭＤＴＲＬＣＬＶＦＬＶＬＦＩＫＧＶＱＣＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＹＭＡＷＶＲＱＡＰＴＫＧＬＥＷＶＡＳＩＳＦＥＧＮＲＮＨＹＧＤＳＶＫＧＲＩＴＩＳＲＤＮＡＫＳＴＬＹＬＱＭＴＳＬＲＰＥＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＧＹＳＴＮＦＹＨＤＶＬＤＡＷＧＱＧＡＬＶＴＶＳＳＡＥＴＴＡＰＳＶＹＰＬＡＰＧＴＡＬＫ（配列番号５）。

抗体クローン１７のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＴＦＳＮＹＹＭＡ（配列番号６）。

抗体クローン１７のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＳＩＳＦＥＧＮＲＮＨＹＧＤＳＶＫ（配列番号７）。

抗体クローン１７のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＨＲＧＹＳＴＮＦＹＨＤＶＬＤＡＷＧＱＧ（配列番号８）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、１１７４．１．３と指定され、配列番号９と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域及び配列番号１３と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域を含むマウス抗ヒトＭＣＡＭモノクローナルクローンである。

抗体１１７４．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＹＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＬＡＳＮＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＡＡＴＹＹＣＱＨＳＲＥＬＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号９）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＹ（配列番号１０）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＱＨＳＲＥＬＰＦＴ（配列番号１２）。

抗体１１７４．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＩＱＬＶＱＳＧＰＥＬＫＫＰＧＥＴＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＫＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＤＤＦＫＧＲＦＡＬＳＬＥＴＳＡＳＴＡＹＬＱＩＮＮＬＫＮＥＤＭＡＴＹＦＣＡＲＹＲＹＮＫＹＥＲＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳ Ｓ（配列番号１３）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮ（配列番号１４）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＤＤＦＫＧ（配列番号１５）。

抗体１１７４．１．３のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＹＲＹＮＫＹＥＲＡＭＤＹ（配列番号１６）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、１４１４．１．２と指定され、配列番号１７と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域及び配列番号２１と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域を含むマウス抗ヒトＭＣＡＭモノクローナルクローンである。

抗体１４１４．１．２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＳＱＳＰＳＳＬＡＶＳＡＧＥＫＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＳＴＲＫＮＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＲＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１７）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＳＴＲＫＮＦＬＡ（配列番号１８）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号１９）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＫＱＳＹＮＲＹＴ（配列番号２０）。

抗体１４１４．１．２の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＥＩＱＬＱＱＴＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＤＹＩＭＬＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＮＩＮＰＹＳＧＳＳＧＹＮＬＫＦＫＧＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＱＬＮＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＧＫＤＦＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ（配列番号２１）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＹＳＦＴＤＹＩＭＬ（配列番号２２）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＮＩＮＰＹＳＧＳＳＧＹＮＬＫＦＫＧ（配列番号２３）。

抗体１４１４．１．２のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＧＫＤＦＡＭＤ（配列番号２４）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、１４１５．１．１と指定され、配列番号２５と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域及び配列番号２９と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域を含むマウス抗ヒトＭＣＡＭモノクローナルクローンである。

抗体１４１５．１．１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＴＰＧＤＲＶＳＬＳＣＲＡＳＱＳＩＳＤＹＬＨＷＹＱＱＫＳＨＥＳＰＲＬＬＩＫＹＡＳＱＳＩＳＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＳＤＦＴＬＳＩＮＳＶＥＰＥＤＶＧＶＹＹＣＱＮＧＨＮＦＰＲＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２５）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＲＡＳＱＳＩＳＤＹＬＨ（配列番号２６）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２７）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＱＮＧＨＮＦＰＲＴ（配列番号２８）。

抗体１４１５．１．１の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＰＧＡＥＬＶＱＰＧＡＰＶＫＬＳＣＫＡＳＧＹＩＦＴＳＹＷＭＮＷＶＫＱＲＰＧＲＧＬＥＷＩＧＲＩＤＰＳＤＳＫＩＨＹＮＱＫＦＫＤＫＡＴＬＴＶＤＲＳＳＳＴＡＹＩＱＬＧＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＫＥＧＧＬＲＲＧＤＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ（配列番号２９）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＹＩＦＴＳＹＷＭＮ（配列番号３０）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＲＩＤＰＳＤＳＫＩＨＹＮＱＫＦＫＤ（配列番号３１）。

抗体１４１５．１．１のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＥＧＧＬＲＲＧＤＹＡＭＤＹ（配列番号３２）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、１７４９．１．３と指定され、配列番号３３と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域及び配列番号３７と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域を含むマウス抗ヒトＭＣＡＭモノクローナルクローンである。

抗体１７４９．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＳＱＳＰＳＳＬＡＶＳＡＧＥＫＶＴＭＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号３３）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡ（配列番号３４）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号３５）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＫＱＳＹＮＬＬＴ（配列番号３６）。

抗体１７４９．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＶＫＬＶＥＳＧＧＤＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号３７）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＳＹＩＭＳ（配列番号３８）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号３９）。

抗体１７４９．１．３のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹ（配列番号４０）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、２１２０．４．１９と指定されるラット抗ヒトＭＣＡＭモノクローナル抗体である。

抗体２１２０．４．１９バージョン１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＲＭＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＬＧＥＧＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号４１）。

抗体２１２０．４．１９バージョン２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＶＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＬＧＥＧＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号４２）。

抗体２１２０．４．１９バージョン３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＬＧＥＧＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号４３）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡ（配列番号４４）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＮＡＮＳＬＱＴ（配列番号４５）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＱＱＦＹＳＧＹＴ（配列番号４６）。

抗体２１２０．４．１９の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＮＴＳＫＳＱＶＬＬＫＭＮＳＬＱＴＥＤＴＡＭＹＦＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＰＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号４７）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳ（配列番号４８）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳ（配列番号４９）。

抗体２１２０．４．１９のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦ（配列番号５０）。

好ましい抗ＭＣＡＭ抗体は、２１０７．４．１０と指定されるラット抗ヒトＭＣＡＭモノクローナル抗体である。

抗体２１０７．４．１０バージョン１の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＲＶＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＲＬＫＲＧＥＡＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＴＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号５１）．

抗体２１０７．４．１０バージョン２の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＶＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＲＬＫＲＧＥＡＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＴＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号５２）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ１のアミノ酸配列。
ＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡ（配列番号５３）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ２のアミノ酸配列。
ＤＡＮＳＬＱＴ（配列番号５４）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＬ３のアミノ酸配列。
ＱＱＹＹＳＧＹＴ（配列番号５５）。

抗体２１０７．４．１０の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＱＳＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＮＴＳＫＳＱＶＬＬＫＭＮＳＬＱＴＥＤＴＧＭＹＦＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＶＭＶＴＶＳＳ（配列番号５６）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳ（配列番号５７）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ２のアミノ酸配列。
ＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳ（配列番号５８）。

抗体２１０７．４．１０のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＨＲＰＦＹＦＤＹ（配列番号５９）。

ヒト化１７４９の抗体の好ましいバージョンは、配列番号６２と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域及び配列番号６５と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域を含むバージョンＶＨ２／ＶＬ２である。

抗体１７４９．１．３の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＶＫＬＶＥＳＧＧＤＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号６０）。

ヒト化抗体１７４９バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号６１）。

ヒト化抗体１７４９バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号６２）。

抗体１７４９．１．３の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＳＱＳＰＳＳＬＡＶＳＡＧＥＫＶＴＭＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号６３）。

ヒト化抗体１７４９バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６４）。

ヒト化抗体１７４９バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６５）。

抗体２１０７．４．１０．１８の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＱＳＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＰＮＴＳＫＳＱＶＬＬＫＭＮＳＬＱＴＥＤＴＧＭＹＦＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＶＭＶＴＶＳＳ（配列番号６６）。

ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６７）。

ヒト化抗体２１０７バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６８）。

ヒト化抗体２１０７バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＮＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６９）。

ヒト化抗体２１０７バージョン４Ａ（ＶＨ４Ａ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＳＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＰＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７０）。

ヒト化抗体２１０７バージョン４Ｂ（ＶＨ４Ｂ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＳＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１４１）。

ヒト化抗体２１０７バージョン５Ａ（ＶＨ５Ａ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＰＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７１）。

ヒト化抗体２１０７バージョン５Ｂ（ＶＨ５Ｂ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１４２）。

ヒト化抗体２１０７バージョン６（ＶＨ６）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＳＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＨＲＰＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７２）。

抗体２１０７．４．１０．１８の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＶＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＲＬＫＲＧＥＡＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＴＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号７３）。

ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号７４）。

ヒト化抗体２１０７バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＱＬＫＰＧＫＶＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号７５）。

ヒト化抗体２１０７バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＮＣＫＧＳＱＮＩＹＫＳＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＬＬＩＹＤＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＹＹＳＧＹＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号７６）。

抗体２１２０．４．１９．６の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＮＴＳＫＳＱＶＬＬＫＭＮＳＬＱＴＥＤＴＡＭＹＦＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＰＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号７７）。

ヒト化抗体２１２０バージョン１（ＶＨ１）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７８）。

ヒト化抗体２１２０バージョン２（ＶＨ２）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７９）。

ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＳＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号８０）。

ヒト化抗体２１２０バージョン４（ＶＨ４）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号８１）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５（ＶＨ５）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号８２）。

抗体２１２０．４．１９．６の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＲＭＴＱＳＰＳＬＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＬＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＬＧＥＧＰＫＶＬＩＰＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号８３）。

ヒト化抗体２１２０バージョン１（ＶＬ１）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号８４）。

ヒト化抗体２１２０バージョン２（ＶＬ２）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＶＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号８５）。

ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号８６）。

ヒト化抗体２１２０バージョン３（ＶＨ３）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳ（配列番号８７）。

ヒト化抗体２１２０バージョン４（ＶＨ４）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳ（配列番号８８）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５（ＶＨ５）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳ（配列番号８９）。

ヒト化２１２０の抗体の好ましいバージョンは、配列番号８２と指定されるアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域及び配列番号８６と指定されるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域を含むバージョンＶＨ５／ＶＬ３である。

ヒト化抗体２１０７バージョン１（ＶＨ１）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＳＮＧＶＳ（配列番号９０）。

ヒト化抗体２１０７バージョン４（ＶＨ４）のＣＤＲＨ１のアミノ酸配列。
ＳＳＧＶＳ（配列番号９１）。

ヒト化抗体２１２０バージョン１〜５（ＶＨ１〜ＶＨ５）のＣＤＲＨ３のアミノ酸配列。
ＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦ（配列番号９２）。

ヒト化１７４９の抗体の好ましいバージョンは、配列番号９３と指定されるアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号９４と指定されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含むバージョンＶＨ３／ＶＬ３である。

ヒト化抗体１７４９バージョン３（ＶＨ３）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９３）。

ヒト化抗体１７４９バージョン３（ＶＬ３）の成熟軽鎖可変領域のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＡＶＳＬＧＥＲＶＴＩＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号９４）。

ヒト化２１２０の抗体の好ましいバージョンは、配列番号１００と指定されるアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号８６と指定されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含むバージョンＶＨ５ Ｑ１Ｅ／ＶＬ３である。

抗体２１２０．４．１９．Ｑ１Ｅの成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＮＴＳＫＳＱＶＬＬＫＭＮＳＬＱＴＥＤＴＡＭＹＦＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＰＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号９５）。

ヒト化抗体２１２０バージョン１ Ｑ１Ｅ（ＶＨ１．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９６）。

ヒト化抗体２１２０バージョン２ Ｑ１Ｅ（ＶＨ２．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＳＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９７）。

ヒト化抗体２１２０バージョン３ Ｑ１Ｅ（ＶＨ３．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＳＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９８）。

ヒト化抗体２１２０バージョン４ Ｑ１Ｅ（ＶＨ４．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＱＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９９）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５ Ｑ１Ｅ（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ）の成熟重鎖可変領域のアミノ酸配列であって、ここで、位置１（Ｋａｂａｔ付番）は、Ｅが占有する。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１００）。

Ｎ末端にアルギニンがある、ヒト化２１２０の軽鎖定常領域のアミノ酸配列。
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１０１）。

Ｎ末端にアルギニンがない、ヒト化２１２０の軽鎖定常領域のアミノ酸配列。
ＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１０２）。

ヒト化２１２０の重鎖定常領域のアミノ酸配列。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＶＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０３）。

ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域のアミノ酸配列。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０４）。

ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域のアミノ酸配列。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０５）。

ヒト化抗体２１２０バージョン３の成熟軽鎖領域（ＶＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＮＣＫＡＳＱＮＩＹＮＳＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＶＬＩＦＮＡＮＳＬＱＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＹＳＧＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１０６）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５の成熟重鎖領域（ＶＨ５＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０７）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５の成熟重鎖領域（ＶＨ５＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０８）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５ Ｑ１Ｅの成熟重鎖領域（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１０９）。

ヒト化抗体２１２０バージョン５ Ｑ１Ｅの成熟重鎖領域（ＶＨ５．Ｑ１Ｅ＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＴＬＫＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＥＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＮＡＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＩＡＡＩＳＳＧＧＴＴＹＹＮＳＡＦＫＳＲＬＴＩＳＲＤＴＳＫＳＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＲＹＧＹＧＷＹＦＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１１０）。

ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟軽鎖領域（ＶＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＡＶＳＬＧＥＲＶＴＩＮＣＫＳＳＲＳＬＬＮＳＲＩＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＫＱＳＹＮＬＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１１１）。

ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟重鎖領域（ＶＨ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１１２）。

ヒト化抗体１７４９バージョン３の成熟重鎖領域（ＶＨ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＴＲＤＤＤＹＤＶＫＶＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１１３）。

ラミニンアルファ−４に結合し、そのＭＣＡＭとの相互作用を阻害するいくつかの典型的な抗体は、以下の配列により特徴づけられる。

ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン１（Ｈ１）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＫＱＡＰＧＥＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１１４）。

ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン２（Ｈ２）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１１５）。

ヒト化１９Ｃ１２重鎖可変領域バージョン３（Ｈ３）のアミノ酸配列。
ＥＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１１６）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン１（Ｌ１）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１１７）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン２（Ｌ２）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１１８）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン３（Ｌ３）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＤＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１１９）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン４（Ｌ４）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１２０）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン５（Ｌ５）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１２１）。

ヒト化１９Ｃ１２軽鎖可変領域バージョン６（Ｌ６）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号１２２）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ１＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＫＱＡＰＧＥＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２３）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ１＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＫＱＡＰＧＥＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２４）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ２＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２５）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ２＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２６）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２７）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟重鎖（Ｈ３＋ＢＩＰバージョン重鎖Ｇ１ｍ３アロタイプ定常領域）のアミノ酸配列。
ＥＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＡＦＳＴＹＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＳＤＧＹＹＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１２８）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ１＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１２９）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ１＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３０）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ２＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３１）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ２＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３２）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＤＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３３）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ３＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＣＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＤＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３４）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ４＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３５）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ４＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３６）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ５＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３７）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ５＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＬＱＡＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３８）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にあるＬ６＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１３９）。

１９Ｃ１２ヒト化抗体の典型的な成熟軽鎖（アルギニンがＮ末端にないＬ６＋軽鎖定常領域）のアミノ酸配列。
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＴＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＳＬＡＳＳＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＰＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１４０）。

ラミニンアルファ−４と結合し、そのＭＣＡＭとの相互作用を阻害する典型的な抗体は、例示のヒト化１９Ｃ１２成熟重鎖及び軽鎖可変領域（例えば、Ｈ１Ｌ１、Ｈ１Ｌ２、Ｈ１Ｌ３、Ｈ１Ｌ４、Ｈ１Ｌ５、Ｈ１Ｌ６、Ｈ２Ｌ１、Ｈ２Ｌ２、Ｈ２Ｌ３、Ｈ２Ｌ４、Ｈ２Ｌ５、Ｈ２Ｌ６、Ｈ３Ｌ１、Ｈ３Ｌ２、Ｈ３Ｌ３、Ｈ３Ｌ４、Ｈ３Ｌ５及びＨ３Ｌ６）のいずれかの順列または組み合わせを含む。ヒト化１９Ｃ１２抗体の好ましいバージョンは、Ｈ２若しくはＨ３及び／またはＬ３若しくはＬ６を含むバージョン、例えばＨ３及びＬ６の組み合わせまたはＨ２及びＬ３の組み合わせ、である。

キメラ型、単板型またはヒト化抗体の重鎖及び軽鎖可変領域は、少なくともヒト定常領域の一部分に結合可能である。定常領域の選択は、抗体依存性細胞傷害、抗体依存性細胞食作用、及び／または、補体依存性細胞傷害が望ましいか否かに、部分的に依存する。例えば、ヒトアイソトープＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、補体依存性細胞傷害を有するが、ヒトアイソタイプＩｇＧ２及びＩｇＧ４は、そうではない。また、ヒトＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ２及びＩｇＧ４より強力なセル媒介エフェクタ機能を誘発する。軽鎖定常領域は、ラムダまたはカッパであり得る。

軽鎖及び／または重鎖のアミノまたはカルボキシ末端の一個または数個のアミノ酸、例えば重鎖のＣ末端リシン等が、その分子の一部または全てで、消失または誘導体化されても良い。一定領域内で置換を行い、補完体媒介細胞毒性またはＡＤＣＣ等のエフェクタ機能を低減または増大する（例えば、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，米国特許第５，６２４，８２１号；Ｔｓｏ ｅｔ ａｌ．，米国特許第５，８３４，５９７号；及び、Ｌａｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０３：４００５、２００６を参照）、または、ヒト内での半減期を延長する（Ｈｉｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．２７９：６２１３、２００４を参照）ことが、可能である。抗体の半減期を増大するため、典型的な置換は、位置２５０でＧｌｎ、及び／または、位置４２８でＬｅｕ（ＥＵ付番が定常領域のためにこのパラグラフで用いられる）を含む。位置２３４、２３５、２３６及び／または２３７のいずれかまたは全部の置換は、Ｆｃγレセプタ、特にＦｃγＲＩレセプタに対する親和性を低減する（例えば米国特許第６，６２４，８２１号を参照）。エフェクタ機能を低減するためにヒトＩｇＧ１の位置２３４、２３５及び２３７でのアラニン置換を用いることができる。いくつかの抗体は、ヒトＩｇＧ１の位置２３４、２３５及び２３７において、エフェクタ機能を低減するためにアラニン置換を有している。任意に、ヒトＩｇＧ２の位置２３４、２３６及び／または２３７がアラニンで置換され、位置２３５がグルタミンで置換される（例えば米国特許第５，６２４，８２１号を参照）。いくつかの抗体では、ヒトＩｇＧ１のＥＵ付番位置２４１、２６４、２６５、２７０、２９６、２９７、３２２、３２９及び３３１の１つ以上における変異が用いられる。いくつかの抗体では、ヒトＩｇＧ１のＥＵ付番位置３１８、３２０及び３２２の１つ以上における変異が用いられる。いくつかの抗体では、位置２３４及び／または２３５がアラニンで置換され、及び／または、位置３２９がグリシンで置換される。いくつかの抗体では、配列番号１０５におけるように、位置２３４及び２３５がアラニンで置換される。いくつかの抗体では、アイソタイプは、ヒトＩｇＧ２またはＩｇＧ４である。典型的なヒト軽鎖カッパ定常領域は、アミノ酸配列配列番号１０１を有している。配列番号１０１のＮ末端アルギニンを除外することができ、その場合、ケース軽鎖カッパ定常領域は、配列番号１０２のアミノ酸配列を有している。典型的なヒトＩｇＧ１重鎖定常領域は、配列番号１０３のアミノ酸配列（Ｃ末端リシンを有する又は有しない）を有している。抗体は、２つの軽鎖及び２つの重鎖を含んだ四量体として、別々の重鎖、軽鎖として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖとして、または重鎖及び軽鎖成熟可変領域がスペーサーを通して結合される単一の鎖抗体として表すことができる。

ヒト一定領域は、異なる個人の間でアロタイプ変化とイソアロタイプ変化とを示すものであり、すなわち、個人が異なれば、１つ以上の多形位置で一定領域が異なり得る。イソアロタイプは、イソアロタイプを認識する血清が１つ以上の他のアイソタイプの非多様な領域に結合するという点でアロタイプと異なる。したがって、例えば、他の重鎖定常領域は、ＩｇＧ１ Ｇ１ｍ３アロタイプであり、配列番号１０４のアミノ酸配列を有している。他の重鎖定常領域は、配列番号１０４のアミノ酸配列を有しているが、Ｃ末端リシンが欠如している点が異なっている。他の重鎖定常領域は、配列番号１０５のアミノ酸配列を有している。さらに別の重鎖定常領域は、配列番号１０５のアミノ酸配列を有しているが、Ｃ末端リシンが欠如している点が異なっている。

本発明は、上記一定領域のいずれかをコードする核酸をさらに提供する。任意に、かかる核酸は、シグナルペプチドをさらにコードするものであり、定常領域に結合されるシグナルペプチドとともに表されることができる。

ＭＣＡＭ拮抗薬は、以下の通りにスクリーニングすることができる。ＭＣＡＭ発現細胞は、以下のステップ、すなわち（ａ）候補分子の存在下又は不存在下で、ラミニンα４鎖、例えばラミニン４１１ α４鎖、を発現する細胞の個体群をＭＣＡＭとともに培養すること；（ｂ）細胞へのＭＣＡＭの結合のレベルを監視すること；及び（ｃ）ＭＣＡＭ結合の量の存在が前記候補分子の非存在の場合よりも低い場合に、ＭＣＡＭ発現細胞によるＣＮＳ浸潤の阻害剤として前記候補分子を特定すること、を含む。代替スクリーニングプロトコルは、ラミニンα４鎖、例えばラミニン４１１のα４鎖を発現する細胞の個体群の使用が関与するものであり、これは、試験化合物の存在及び非存在下でＭＣＡＭとともに培養でき、例えば蛍光顕微鏡検査法によるＭＣＡＭの細胞集団への結合が監視される。

ＩＶ．
多発性硬化症及び他の自己免疫性疾患
本方法は、多発性硬化症を、その亜型のいずれかまたは全部で治療するために用いることができる。少なくとも４つの亜型が存在する。再発寛解型ＭＳ（ＲＲ−ＭＳ）は、ＭＳで最も一般的な形態であり、はっきりと定義された悪化／再発（急性発作）と、それに続く部分的または完全な回復により特徴づけられる。再発期間には、疾患進行はない。最初に（診断の時には）、ＲＲ−ＭＳは、全ての新しく診断される対象の約８５％を占める。高い体温が無言のまたは古い病変を暴露可能であるため、再発の定義は、熱または併発する病気（例えば「風邪」または尿路感染症）を伴わない新病徴または徴候が少なくとも２４時間存在していることを必要とする。

一次進行型（ＰＰ−ＭＳ）は、最初から継続し、明らかな再発はない。安定状態（安定化の期間）が、あっても良い。全てのＭＳ対象の１０〜１５％はこのグループの中におり、それは高齢の個人で生じる傾向がある。女性対男性の比は、このグループでは等しく、女性が約２：１と支配的である他の形態と異なっている。また、ＰＰ−ＭＳは、脳ＭＲＩ病変が小さくなり、ミエロパシー／脊髄関連病変が大きくなることを示す傾向がある。

二次進行型形態（ＳＰ−ＭＳ）はＲＲ−ＭＳとして開始し、その後安定した進行が、再発を有し又は有しないで、発生する。再発寛解型の対象の約５０％が二次進行型形態に進行する。

進行型再発性形態（ＰＲ−ＭＳ）は、約５％の個人で生じ、（回復を有し又は有せずに）重畳された再発で発症から進行する。

ＭＳの診断は通常、病歴、神経学的検査、ならびに、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）、誘発電位（ＥＰ）及び脊髄液分析を含む様々な試験に基づく。ＭＳの明確な診断は、脳、脊髄及び視神経を含む中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも２つの別々の領域での損害の証拠、ならびに、損傷が個々に少なくとも１ヵ月離れて生じたという証拠、及び全ての他の可能な診断の除外を必要とする。当該技術分野で認識されている基準によりＭＳの診断を有する対象を治療的処置するだけではなく、本方法を予防的に用いて、健康な個人の一般集団と比較して増大したＭＳへの進行リスクの状態に置くような、ＭＳの少なくとも１つの徴候または病徴を有する個々に対して処置を行うことも可能である。例えば、この方法は、臨床的分離型症候群（ＣＩＳ）と呼ばれる、ＭＳ類似病徴の１つの発作（再発または悪化も呼ばれる）を経験しており、ＭＳ発症するかもしれないが発症しないかもしれない個人を処置するために、用いることが可能である。ＭＳ発症の危険がある個人は、他の方法の中でも、個人の血清における蛋白質ＫＩＲ４．１に対する抗体の存在により、特定も可能である。

また、併用治療方法を、他の自己免疫性疾患、具体的には、ナタリズマブが別個に有効である証拠が実証されている、例えばクローン病または慢性関節リウマチ等、ならびに、ナタリズマブが現在まで別個に満足できる有効性の証拠を示していないが、ＭＣＡＭ拮抗薬と併用して有効性を示す他の自己免疫性疾患に対して用いることもできる。自己免疫性疾患は、全身性自己免疫性疾患、器官または組織特異自己免疫性疾患、及び、自己免疫型発現を示す疾患を含む。これらの疾患では、身体は、それ自身の抗原の１つに対して、細胞及び／または体液性免疫応答を発現し、その抗原の破壊をもたらし、重大な有害結果及び／または致命的結果をもたらす可能性がある。細胞応答がもし存在するならば、Ｂ細胞若しくはＴ細胞または両方であり得る。本方法は特に、少なくともＴ細胞に部分的に媒介される自己免疫疾患を治療することに適しており、Ｔ細胞の少なくともいくつかはＴ_Ｈ１またはＴ_Ｈ１７細胞であり、好ましくはＴ_Ｈ１及びＴ_Ｈ１７細胞の両方である。Ｔ_Ｈ１７細胞、すなわちインターロイキン（ＩＬ）−１７及びＩＬ−２２の生成により特徴づけられる系統ヘルパーＴ細胞は、組織に侵入して、ヒトにおける多発性硬化症及びマウスにおける実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）を含む、病原性自己免疫応答を促進することが報告されている。例えば、Ｃｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ４２１：７４４−７４８（２００３）；Ｉｖｏｎｏｖ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ １２６：１１２１−１１３３（２００６）を参照のこと。Ｔ_Ｈ１７細胞は、組織への特異的動員及びその浸潤により、炎症応答を開始または伝播し得る。治療に適するＴ細胞媒介自己免疫性疾患の例には、多発性硬化症、クローン病、慢性関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎及びサルコイドーシスが含まれる。

治療に適する追加の自己免疫性疾患の例は、グレーブス病、橋本甲状腺炎、自己免疫多腺性症候群、インシュリン依存性真正糖尿病（１型糖尿病）、インシュリン耐性真正糖尿病（２型糖尿病）、免疫介在性不妊性、自己免疫性アジソン病、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、疱疹状皮膚炎、自己免疫性脱毛症、白斑、自己免疫性溶血性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性血小板減少性紫斑病、悪性貧血、重症筋無力症、ギラン‐バレー症候群、全身強直症候群、急性リウマチ熱、交感性眼炎、グッドパスチャー症候群、自己免疫性ブドウ膜炎、側頭動脈炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、原発性胆管萎縮症、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎、線維筋痛、多発性筋炎、皮膚筋炎、強直性脊椎炎、高安動脈炎、脂肪織炎、類天疱瘡、原因不明の脈管炎、ＡＮＣＡ陰性脈管炎、ＡＮＣＡ陽性脈管炎、全身性エリテマトーデス、強皮症、全身性壊死性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、ＣＲＥＳＴ症候群、抗リン脂質症候群、シェーグレン症候群、好酸性胃腸炎、非定型的局所皮膚炎、心筋症、感染後症候群、感染後心内膜心筋炎及びセリアック病を含む。

Ｖ．併用治療
本発明は、指示されたアルファ−４インテグリン及びＭＣＡＭ拮抗薬を、多発性硬化症またはそのリスクが増大する対象に、または本明細書に開示される他の疾患を有する対象に投与する、治療法を提供する。さらに下に記載するように、拮抗薬は、同時にまたは順番に投与することができ、順番に投与する場合は、いずれかの順序であっても良い。この方法は、特にヒト対象の治療に適している。

いずれの適切なルートにより対象に拮抗薬を投与することもでき、特に、生物学的製剤の場合、親として、静脈（ＩＶ）注入または迅速投与により非経口で（ｐａｒｅｎｔａｌｌｙ）、筋内にまたは皮下にまたは腹膜内に投与することができる。静注注入は、例えば、１５分から３時間までの期間、より典型的には３０〜９０分または４５〜７５分で、与えることができる。

拮抗薬は、投与計画（投与量、投与の頻度、投与経路、投与の相対的な順序）において投与され、これは、疾患の徴候または病徴を低減する、又は、治療処置の場合に少なくとも症状の進行または悪化を遅らせる、及び、予防処置の場合に病徴の発現を遅らせまたは阻害するのに有効である。

アルファ−４インテグリン拮抗薬がＭＣＡＭ拮抗薬と併用されて用いられる場合に、この併用は、いずれかの便利な時間枠上で行われ得る。例えば、各拮抗薬を、同じ日に対象に投与することができ、そして、同じ静脈注入で拮抗薬を投与することさえ可能である。しかしながら、拮抗薬は、日を交互し、または週を交互し、二週間または月、及びその他で、投与しても良い。いくつかの方法では、治療されている対象内（例えば血清内で）で各拮抗薬が検出可能な量で同時に存在するように、各拮抗薬が十分な時間近接度で投与される。いくつかの方法では、いくつかの投与量からなる１つの拮抗薬のある期間（上記参照）にわたる一連の治療の後、同様にいくつかの投与量からなる他の拮抗薬の一連の治療が続く。いくつかの方法では、対象が当初に投与される拮抗薬に対して耐性を有するまたは耐性を発現する場合に、２番目に投与される拮抗薬による治療が開始される。いくつかの方法では、患者における自己免疫性反応の性質がＴ_Ｈ１細胞により主に媒介されるものからＴ_Ｈ１７細胞により媒介されるものに変わる場合に、２番目に投与される拮抗薬の処置が開始される。

いくつかの方法では、アルファ−４インテグリン拮抗薬の一連の治療が最初に投与され、ＭＣＡＭ拮抗薬の一連の治療がこれに続く。そのようないくつかの方法では、対象は、第１のアルファ−４インテグリン拮抗薬の一連の治療の開始時に、再発寛解型多発性硬化症を有するかまたはその増加したリスクを有し、ＭＣＡＭ拮抗薬での一連の治療の開始時には、二次進行型形態に移行している。

対象は、各拮抗薬で単一の一連の治療のみを受けるか、または一方または両方の拮抗薬での複数の一連の治療を受けても良い。１、２若しくは数日または週の回復期間が、主治医の判断で対象に有益であるならば、２つの拮抗薬の投与間に認められる場合がある。拮抗薬の一つに対して適切な治療投与計画がすでに確立されているとき（例えば、４週間おきにナタリズマブをｉｖ注入により３００ｍｇ）、その拮抗薬を他の拮抗薬と併用して拮抗薬を使用する場合、その投与計画を用いることが可能であるが、拮抗薬間の協同または共働効果に起因して、投与量をより低くして投与することもできる。拮抗薬は、終身、または拮抗薬による明らかな阻害なしに疾患が進行するまで、投与することができる。

併用治療の有効性は、ＣＮＳの病変の全数、ガドリニウム強化型（すなわち新病変）、再発頻度、第１再発までの時間、及び例えば総合障害度評価尺度または機能別障害度等の様々な障害指数を含む、多発性硬化症に対する従来の評価項目により、判定することができる。２つの拮抗薬での治療を投与する場合、各拮抗薬を投与する投与計画が、その各拮抗薬が治療に貢献することができるような方法で、併用される。好ましくは、第１の拮抗薬及び第２の拮抗薬による本発明に従った治療は、併用の場合と同じモル投与量で別々に用いられる第１の拮抗薬及び第２の拮抗薬の各々と比較して、好ましい応答の客観的測定値の増加をもたらす（拮抗薬が協働する）。より好ましくは、第１の拮抗薬及び第２の拮抗薬との治療は、併用での合わせたモル投与量と同じモル投与量で別々に用いられる第１の拮抗薬及び第２の拮抗薬の各々と比較して、好ましい応答の客観的な測定値の増加をもたらす（すなわち拮抗薬は相乗作用で作用する）。好ましくは、併用拮抗薬に対する応答の客観的測定値の増加は、併用における同じ拮抗薬による等モル投与量で、又は、併用における併用拮抗薬のモル投与量による等モル投与量で、個々の拮抗薬の治療と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、若しくは４０％、好ましくは５０％、６０％〜７０％、またはさらに、８０％、９０％若しくは１００％より有効である。

典型的に、客観的応答率は、個々の処理または偽薬を受ける対象の対照グループと比較して、併用治療を受ける対象から、臨床試験（例えば、第二相、第二／第三相または第三相試験）で評価される。

各抗体または他の生物学的拮抗薬の投与量は、時として体重当たり０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、例えば０．５〜１０または３〜７ｍｇ／ｋｇである。時として、投与量は１、２、３、４、５または６ｍｇ／ｋｇであるが、１０ｍｇ／ｋｇ、または１５または２０または３０ｍｇ／ｋｇという高さにすることができる。固定ユニット投与量も、例えば、５０、１００、２００、５００または１０００ｍｇで与えられても良く、または、投与量は対象の表面積に基づいても良い（例えば、１００ｍｇ／ｍ．ｓｕｐ．２）。各薬剤の典型的な固定投与量は、ｓ５０〜５００ｍｇ／対象、１００〜２００ｍｇ／対象または５０〜１５０ｍｇ／対象である。投与量は毎日、週２回、毎週、一週おき、４週おき、または他の間隔で投与することができる。有効投与量は、投与手段、標的部位、多発性硬化症の型を含む対象の生理的状態、対象の遺伝学状態、対象がヒトまたは動物であるか、投与される他の薬剤、及び処置が予防的または治療的であるかを含む、多くの異なる要因によって変動する。

小分子拮抗薬は、典型的にはより頻繁に、好ましくは１日につき１回、投与されるが、１日につき２、３、４またはそれより多くの頻度が可能であり、２日おき、毎週、または別の間隔も同様に可能である。小分子薬はしばしば経口で服用されるが、例えば、静脈注入または迅速投与により、または皮下にまたは筋内に対して非経口投与も可能である。小分子薬剤の投与量は、典型的に１または１０〜１０００ｍｇであり、非常に典型的には、臨床試験で最適な投与量を確立して、１００、１５０、２００または２５０ｍｇである。

また、アルファ−４インテグリンとＭＣＡＭ拮抗薬の併用は、多発性硬化症に対して有効な他の任意の薬剤、例えば背景技術の節に開示されるものと共に投与もできる。

任意に、アルファ−４インテグリン拮抗薬とＭＣＡＭ拮抗薬は、例えば、同じパッケージの別々の小びんまたはホルダーのような併用製品またはキットで組み合わせ可能である。また、これらの拮抗薬のいくつかの組み合わせは、同じ組成物に加えることもできる。そのような組成物及びキットは、製造者によりまたは医療提供者により形成することができる。キット及び組成物を、本発明の方法の何らかにより使用するために、説明書とともに提供することができる。

ＶＩ．製薬組成物、投与量、投与経路
経静脈投与のための製薬組成物は、無菌とすることができ、実質的に等張性（２３０〜３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ）とすることができ、ＧＭＰ条件下で製造できる。製薬組成物は、単位剤形（すなわち単一の投与用の投与量）で提供することができる。１つ以上の生理的に許容可能な担体、希釈剤、賦形剤または助剤を用いて、製薬組成物を調製することができる。処方は、選択される投与経路に依存する。注入のためには、抗体を（注入の場所で不便を低減するために）好ましくは生理的に適合性のあるバッファ、例えばハンクス液、リンガー液若しくは生理食塩液またはアセテートバッファ等、水溶液で調製することができる。溶液は、例えば懸濁、安定化、及び／または分散拮抗薬等の、医薬品化拮抗薬を含むことができる。代替的に、抗体は、例えば使用前に滅菌発熱原非含有水等の適切な媒体による構成のための凍結乾燥された形態であっても良い。

上または下に引用される全ての特許出願、ウェブサイト、他の刊行物、受け入れ番号等は、その全体が全ての目的のために、個々の各項目が特定的かつ個別的に示され参照により組み込まれるのと同じ程度に、参照により組み込まれる。異なる配列のバージョンが、異なる時点で１つの受入れ番号と関連づけられている場合、本出願の有効出願日における受入れ番号に関連するバージョンを意味である。有効出願日は、実際の出願日、または適用できる場合は受入れ番号に関する優先権出願の出願日よりも、前の日を意味する。同様に、刊行物、ウェブサイトその他の異なるバージョンが異なる時点で公開される場合、特に明記しない限り、出願の有効出願日の時点で最も最近に公開されるバージョンを意味する。本発明のいずれの特長、ステップ、要素、実施形態または態様を、別様に特定的に示されない限り、他のものと組み合わせて用いることができる。明快さ及び理解のために、本発明は例示説明及び実施例により、ある程度詳細で記載されたが、添付の特許請求の範囲内で、ある特定の変更及び修正が実行されてもよいことは明らかであろう。

ナタリズマブの飽和率が、（Ｔ）リンパ球の侵入を完全に遮断するはずであるが、ナタリズマブ治療下の対象は、ＣＳＦ内及び推定的にＣＮＳ内で、検出可能な数の免疫細胞をなお有しており、ＣＮＳに侵入する免疫細胞集団の代替メカニズムが存在することが示唆される。したがって、本発明者らは、初期の移動現象、ならびに、非常に遅い抗原−４（ＶＬＡ−４、α４β１＝ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９インテグリン）及びＰ−セレクチングリコプロテインリガンド−１（ＰＳＧＬ−１＝ＣＤ１６２）の主な分子のメカニズムを調べた。これらの分子及びこれらのリガンドまたはカウンターレセプタ（ＶＬＡ−４の場合ＶＣＡＭ−１、及び、ＰＳＧＬ−１の場合Ｐ−セレクチン）により、Ｔ細胞の連結、ローリング及び密着を生じて、内皮バリア及びＣＮＳへの良好な血管外遊走を実現する。

材料及び方法：
対象及び健常対照
２００５年の改正されたマクドナルド診断基準（Ｐｏｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．５８（６）：８４０−８４６（２００５））に従い、臨床的に確実な活性ＲＲＭＳの診断を有するつ３８１名の対象が、この研究に登録された。これらのＭＳ対象は、最長８０ヵ月間連続的にナタリズマブで治療され、臨床及びＭＲＩパラメータの評価により、安定であった。この集団の２１名の対象が、末梢血液の評価と並列して、ＣＳＦの分析を経た。３９名の年齢歳及び性別をマッチングさせた神経または免疫介在疾患履歴のない健康なドナー（ＨＤ）を対照とした。さらに、４９名のナタリズマブを投与されていないＭＳ対象、３２名の非炎症性神経疾患（ＮＩＮＤ）を有する対象、及び、１４名の神経疾患のない対象を対照とした。

生体材料及びフローサイトメトリー
以前に記載されている（Ｓｃｈｗａｂ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８４（９）：５３６８−５３７４（２０１０））ように、リンパ球分離媒体（ＰＡＡ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｐａｓｃｈｉｎｇ、オーストリア）を用いた密度勾配遠心分離により、末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離した。ＣＳＦのフローサイトメトリー分析を、以前に記載されているように実施した（Ｓｃｈｗａｂ ｅｔ ａｌ．，Ｍｕｌｔ．Ｓｃｌｅｒ．１８（３）：３３５−３４４（２０１２））。生体外で単離しまたは培養した細胞を、０．１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を補充したリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、蛍光標識化モノクローナル抗体（Ｍａｂ）での染色を、３０分間４℃でマウスＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ハンブルグ、ドイツ）を遮断すると共に行った。その後、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社、ハイデルベルク、ドイツ）及びＧａｌｌｉｏｓ（商標）ならびにＮａｖｉｏｓ（商標）フローサイトメーター（Ｂｅｃｈｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｋｒｅｆｅｌｄ，ドイツ）により細胞を測定し、ＦｌｏｗＪｏ（Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ，アシュランド，オレゴン州，米国）及びＫａｌｕｚａ（Ｂｅｃｈｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）ソフトウェアを用いて、分析した。研究で用いたＭＡｂを、表１に示す。フローサイトメトリー抗ＣＤ４９ｄ ｍＡｂ（クローン９Ｆ１０）により、ＣＤ４９ｄ及び結合したナタリズマブ（ＩｇＧに二次的に標識される、データは示さない）の同時標識化が可能となる。ヒト脳微小血管血管内皮細胞（ＨＢＭＥＣ）を密集度に成長させ、トリプシン処理した。細胞を、０．１％のアジ化ナトリウム及び１％のウシ血清アルブミン（ＦＡＣＳバッファ）含むＰＢＳで一回洗浄し、抗ヒトモノクローナル抗体とともに１５分間培養した。培養後、再び細胞をＦＡＣＳバッファで一回洗浄し、２００μｌのＦＡＣＳバッファに再懸濁した。ＨＢＭＥＣ染色に用いた抗ヒトモノクローナル抗体を、表２に示す。各アイソタイプ対照（マウスＩｇＧ１及びマウスＩｇＧ２ａ）を、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ／Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓまたはＥｘｂｉｏから購入した。データを、Ｇａｌｌｉｏｓ（商標）フローサイトメーター（Ｂｅｃｈｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）上で取得し、Ｋａｌｕｚａソフトウェア、バージョン１．２（Ｂｅｃｈｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて分析した。

免疫組織化学
組織化学的研究のため、厚さ４μｍのホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）組織薄片を、ミエリン保全及び炎症浸潤のためのＨ＆Ｅの目的でルクソールファストブルーで染色した。免疫組織化学的な研究のために用いた抗体は、抗ＣＤ６８、ＣＤ１０６（ＶＣＡＭ１、マウス−ＩｇＧ１、１．４Ｃ３、アクリス）及びＣＤ６２Ｐ（Ｐ−セレクチン、マウスＩｇＧ２ａ、１Ｅ３、サンタクルーズ）であった。二次抗体（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（商標）＋デュアルリンクシステム−ＨＲＰ、ダコ）をＨＲＰと複合体化し、ジアミノベンジジン（ダコ）を発色性基質として用いた。ＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）ＦＬＥＸターゲット回収溶液、低ｐＨ（ダコ）、を用いて抗原回収を行い、そして、内因性ペルオキシダーゼ活性を、メタノール中３％の過酸化水素で、遮断した。合計で３名のＭＳ対象及び３名の対照を染色に用いた。

毛細管流チャンバ
白血球接着を調べるために、本発明者らはヒトフローチャンバシステムを用いた。簡潔にいうと、Ｐ−セレクチン（２０μｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄシステム、ミネアポリス、ミネソタ州）、ＶＣＡＭ−１（２０μｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄシステム）で、又は、Ｐ−セレクチン（２０μｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄシステム）、ＶＣＡＭ−１（２０μｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄシステム）及びＳＤＦ１（２０μｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄシステム）で、２時間、ガラス毛管をコーティングした。チャンバを、１％のカゼイン（フィッシャーサイエンティフィック、ウォルサム、マサチューセッツ州）で１時間遮断し、その後、１ダイン／ｃｍ^２の一定剪断応力で、分離型ＣＤ４細胞にかん流させた。ＣＤ４細胞の捕捉を調べるため、フローチャンバを、Ｐ−セレクチン（２０μｇ／ｍｌ）のみでコーティングし、そして、１ダイン／ｃｍ^２の一定剪断応力で２分間、単離されたＣＤ４細胞でかん流させ、続いて、視界につきローリング細胞の数を決定した。１０ｘ／０．２５の対物レンズを備えた倒立ＴＳ１０００透過型光学顕微鏡（ニコン）及びデジタルカメラ（ピクセルフライ、クックコーポレーション、ロムルス、ミシガン州）で、ビデオを得た。

平行プレートフローチャンバ
一次ヒト脳微小血管血管内皮細胞（ＨＢＭＥＣ）を、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（サンディエゴ、カリフォルニア州、米国）から購入し、３５ｍｍのペトリ皿上で密集状態に成長させた。細胞を、１６時間、ＴＮＦα（１０ｎｍ）で刺激した。ヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞を計数し、かん流バッファ（ＦＣＳ及びＨＥＰＥＳを補充した培地１９９）に再懸濁した。平行板フローチャンバ（Ｇｌｙｋｏｔｅｃｈ、ゲイザースバーグ、メリーランド州、米国）を通して、０．２５ダイン／ｃｍ^２の一定剪断応力で８分間、細胞をかん流させた。１０ｘ／０．２５ｎＡの対物レンズを装備した倒立顕微鏡（ニコンＴＳ−１０００）及びデジタルカメラを用いて細胞を観測した。ＣａｍＷａｒｅソフトウェア（ＰＣＯ Ａｇ、ケールハイム、ドイツ）を用いてビデオを録画し、視界当たりのローリング及び付着細胞を分析した。
統計分析

対応スチューデントのｔ検定を用いた同じ対象の末梢血液とＣＳＦとの間の比較を除いて、不対のスチューデントのｔ検定を用いて、２つの群間の差異の統計学上の有意性を決定した。ｐ＊値＜０．０５、ｐ＊＊＜０．０１、及びｐ＊＊＊＜０．００１の場合に、差が統計的に有意であるとみなされた。統計及び相関関係評価のためのソフトウェアは、プリズム５（ＧｒａｐｈＰａｄ、ラホーヤ、カリフォルニア州、米国）であった。

実施例１
ナタリズマブによる長期の治療下のＭＳ対象から単離された脳脊髄液は、中枢性免疫応答の正常化を反映する。
図１（Ａ〜Ｃ）は、ナタリズマブによる長期治療下での脳脊髄液における変化を示し、ＭＳ対象中での中枢性免疫応答の正常化を反映する。図１Ａは、対応する末梢血液試料（黒丸）、及び未治療ＲＲＭＳ対象からのＣＳＦ値（白丸；ｎ＝４）又は対照の対象からのＣＳＦ値（白四角；ｎ＝１４）と比較した長期治療のナタリズマブ対象のＣＳＦ（脳脊髄液）組成（黒三角形；ｎ＝１８）、を表す。図１Ｂは、長期治療のナタリズマブ対象（ｎ＝１８）のＣＳＦにおける、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞のエフェクタ／メモリ区画を表す。ナイーブ（ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋）、中枢性メモリ（ＣＤ４５ＲＡ−ＣＣＲ７＋）、ならびに、エフェクタメモリ（ＣＤ４５ＲＡ−ＣＣＲ７−）ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞を示す。さらに、ＣＤ８＋Ｔ細胞の場合、ＴＥＭＲＡ（ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７−）を示す。図１Ｃは、非炎症性神経疾患（ＮＩＮＤ；ｎ＝３３）、ＲＲＭＳ対象（ｎ＝１２）、及び、長期ナタリズマブ治療下のＭＳ対象（ｎ＝１８）におけるエフェクタメモリＣＤ４＋Ｔ細胞（ＥＭ）及び中枢性メモリＣＤ４＋Ｔ細胞（ＣＭ）に関するＣＳＦ組成を示す。

長期ナタリズマブ処理（ＬＴＮＴ、≧１８ヵ月の連続治療）ＲＲＭＳ対象からの、ＰＢＭＣのフローサイトメトリー解析は、全ての主要免疫細胞サブセットの相対的な量が正常範囲内であったことを明らかにした。しかしながら、臨床的に安定したＬＴＮＴ対象の脳脊髄液に得た免疫細胞の評価は、未治療の安定なＲＲＭＳ対象と比較した、サブセットのはっきりした差を明らかにし、ＣＤ１４^＋単核細胞の割合（％）が、ナタリズマブ治療した対象で上昇し（１８．９％対１．４％）、いずれの神経疾患も有さない対照の対象の割合に類似していた（１３．２％）。ＣＤ４^＋Ｔ細胞のパーセンテージは低減した（１１．８％対６６．５％）が、ＣＤ８^＋Ｔ細胞は不変であり、非治療のＭＳ対象と比較すると、ＣＤ４：ＣＤ８比が逆転していた（０．５４対３．２４）（図１Ａ）。ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋のＴ細胞エフェクタメモリ区画を観察すると、末梢エフェクタメモリ区画と比較して、記憶細胞の方へ予想される転移がＣＳＦ内にあった（図１Ｂ）。重要なことに、ここで、ＬＴＮＴ対象におけるＣＤ４エフェクタメモリ（ＥＭ）と中枢性メモリ（ＣＭ）細胞との間の比（ＥＭ：ＣＭ ８１：７）は、非炎症性神経疾患に類似しており（６２：３２）、そして、未治療の安定なＲＲＭＳ対象と比較すると逆転していた（２７：６８）（図１Ｃ）。これらの結果は、エフェクタ記憶細胞が、ナタリズマブの存在下で中枢性記憶細胞より良好なＣＮＳへのアクセスを可能にするメカニズムを有していることを示唆するものである。

実施例２
長期ナタリズマブ治療下における末梢及び中枢性Ｔ細胞区画のＣＤ４９ｄ発現
図２（Ａ〜Ｃ）は、長期ナタリズマブ治療における末梢及び中枢性Ｔ細胞区画内でのＣＤ４９ｄ発現を示す。図２Ａは、健常対照（ｎ＝２６）若しくはナタリズマブ処理開始前のＭＳ対象（ＭＳナイーブ；ｎ＝３３）のいずれかの、又は、ナタリズマブ治療中（ｎ＝４８６）の、末梢ＣＤ４＋及びＴ細胞上のＣＤ４９ｄの発現を示す。図２Ｂは、健常対照（ｎ＝１０）、ナタリズマブによる治療前（ｎ＝１５）及び治療中（ｎ＝４９）のＭＳ対象の血清中の可溶性ＶＣＡＭ−１を表す。図２Ｃは、長期処理のナタリズマブ対象（ｎ＝１８）の末梢上でのＣＤ４９ｄの発現と、ＣＳＦ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋のＴ細胞との比較を表す。

細胞集団の変化の次に、本発明者らは、ナタリズマブが標的とする分子であるＣＤ４９ｄ、及びそのリガンドＶＣＡＭ−１発現を決定した。ナタリズマブ治療は、末梢血液ＣＤ４^＋Ｔ細胞上ではＣＤ４９ｄ表面発現の急速な減少を誘発したが、これは遺伝子形質発現内でのダウンレギュレーションを伴わなかった（図２Ａ）。さらに、ナタリズマブ治療は、第１の注入による血清内でのＣＤ４９ｄリガンドであるＶＣＡＭ−１の可溶性形態を大幅に低減した（図２Ｂ）。驚くべきことに、末梢Ｔ細胞上での下方制御／低ＣＤ４９ｄ量と比較した場合であっても、ＣＤ４９ｄ発現は、ＬＴＮＴ対象のＣＳＦ Ｔ細胞上で検出可能でなかった（図２Ｃ）。

実施例３
ナタリズマブ治療は、ＰＳＧＬ−１のアップレギュレーションを誘発する
図３（Ａ及びＢ）は、ナタリズマブ治療がＰＳＧＬ−１のアップレギュレーションを誘発することを示す。図３Ａは、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞上での、健常対照（白；ｎ＝１５）、長期ナタリズマブ治療前の対象（黒；ｎ＝１５）、又は、長期ナタリズマブ処理後の対象（灰色；ｎ＝４７）のいずれかでの、ＰＳＧＬ−１の表面発現量を示す。図３Ｂは、ＣＤ４＋Ｔ細胞に対して示される、ナタリズマブ処理の前（ＭＳナイーブ；ｎ＝２６）及びナタリズマブ処理の間（ｎ＝３３０）のＰＳＧＬ−１発現の時間経過を、健常対照（ｎ＝１５）と比較して示す。

接着分子Ｐ−セレクチングリコプロテインリガンド−１（ＰＳＧＬ−１）は、治療前の対象（ＣＤ４ＭＦＩ：４３．９７±５．１０；ＣＤ８ＭＦＩ：６４．５３±１０．８５）と比較して、ＬＴＮＴの後、ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞上で、強く上方制御された（ＣＤ４ＭＦＩ ５８．１２±７．３５；ＣＤ８ＭＦＩ ８６．７９±９．２３）（図３Ａ）。処理の４年後にピークに達する、ＰＳＧＬ−１アップレギュレーションへの明白かつ再現可能な時間動態が、存在した（図３Ｂ）。

実施例４
ＣＤ４^＋Ｔ細胞上でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の分子局在化
図４（Ａ〜Ｋ）は、ＣＤ４＋Ｔ細胞上でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の分子分布を示す。１つの代表的なナイーブ（図４Ａ）、中枢性メモリ（図４Ｂ）、及び、エフェクタメモリ（図４Ｃ）ＣＤ４＋Ｔ細胞が示され、ＣＤ４９ｄ緑で標識され、ＰＳＧＬ−１は赤色で標識される（共局在性は黄色）。各３Ｄ挿入画像は、分子の典型的なクラスタを示す。ＣＤ４９ｄ（図４Ｄ）、ＰＳＧＬ−１（図４Ｅ）及びそれらの組み合わせ（図４Ｆ）の最近傍分析が示され、ナイーブ（図４Ｇ）、ＣＭ（図４Ｈ）及びＥＭ（図４Ｉ）上でのＣＤ４９ｄ（黒）及びＰＳＧＬ−１（赤色）のクラスタサイズが示される。図４Ｊは、ナイーブ（１）、ＥＭ（２）及びＣＭ（３）上でのＣＤ４９ｄの中間平均クラスタサイズを示し、図４Ｋは、同様のＰＳＧＬ−１クラスタサイズを示す。

ＣＤ４^＋Ｔ細胞上でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の発現においてナタリズマブが誘導した非常に顕著な変化を、本発明者らが観察した後、ナタリズマブのＣＤ４９ｄへの結合が相互局在化が可能なＰＳＧＬ−１等他の分子に影響し得る可能性を除外してもよいか否かを調べた。本発明者らは、単一細胞上での直接確率的光再構築顕微鏡（ｄＳＴＯＲＭ）を用いて、ナイーブ、中枢性及びエフェクタメモリＣＤ４^＋Ｔ細胞上で、これらの２つの分子の分布を測定した（図４Ａ〜Ｃ）。ナイーブ上ではＣＤ４９ｄとＰＳＧＬ−１との間の共局在性は見出されず、ＣＭ上では極小の共局在性が、及びＥＭ細胞上のみで強力な共局在性が存在した。最短近傍分析は、ナイーブＣＤ４^＋Ｔ細胞と比較して、メモリＣＤ４^＋Ｔ細胞上のＣＤ４９ｄ（図４Ｄ）ならびにＰＳＧＬ−１（図４Ｅ）の分子間が短い距離を分子間で示し（ＥＭ細胞上での特に強力な発現）、フローサイトメトリー染色にフィットし、これらの分子のより高い発現を示す。したがって、ＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の分子は、特にＥＭ細胞上で、相互に近接していた（図４Ｆ）。分子クラスタの外観に関し、ＣＤ４９ｄは、ナイーブ細胞上では稀なクラスタを示し記憶細胞上では全くクラスタを示さなかったが、ＰＳＧＬ−１は、３つの部分母集団全ての上で強くクラスタ化した（図４Ｇ〜Ｋ）。結果として、ＰＳＧＬ−１の平均クラスタサイズは、ＣＤ４９ｄのクラスタサイズより大きかった（図４Ｊ〜Ｋ）。ナイーブ上及びＣＭ細胞上でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の共局在性の欠如は、ＰＳＧＬ−１発現の変化がナタリズマブ結合により人為結果ではないように思われることを、示唆する。

実施例５
多発性硬化症対象及び対照組織における可能な侵入経路上でのＶＣＡＭ−１及びＰ−セレクチンの発現
図５（Ａ及びＢ）は、多発性硬化症対象及び対照組織における可能な侵入経路上でのＶＣＡＭ−１及びＰ−セレクチンの発現を示す。柔組織（病変領域）、脈絡叢、及び髄膜血管内のＶＣＡＭ−１及びＰ−セレクチン発現をそれぞれ、図５Ａ及びＢに示す。挿入画像は、１００倍拡大画像を示す。発色性基質としてＤＡＢを用い、対比染色のためにヘマトキシリンを用いた。表３は、Ｐ−セレクチン及びＶＣＡＭ−１の発現量の免疫組織学的評価を提供する。

生体内での異なる血液−ＣＮＳバリアに対するＴ細胞移動のための本発明者らの知見の関連を判断するため、ＭＳ対象及び対照の組織内でのＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１の一次リガンド（すなわちＶＣＡＭ−１及びＰ−セレクチン）を染色した。対象領域は、血液−小髄膜バリアを評価する髄膜、血管からＣＮＳ組織／従来の血液‐脳関門までの直接の移動を評価するする（正常外見／損傷）白質、及び、血液脳脊髄液関門を判断する脈絡叢であった。本発明者らは、全ての内皮バリア上で変動する程度のＶＣＡＭ−１が存在したが、Ｐ−セレクチンの発現は大幅により制限されていることを示した。白質（病変）血管上のＰ−セレクチンの発現はなく、髄膜血管内皮上の発現は非常に低く、また、脈絡叢内皮上の発現は顕著であった。注目すべきは、ＭＳ対象の組織内での脈絡叢内皮上の発現が一般に、制御組織内よりもより顕著であったことである（図５）。

実施例６
ＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１のリガンド（すなわちＶＣＡＭ−１／Ｐ−セレクチン）へのＣＤ４^＋Ｔ細胞のローリング及び密着に対するナタリズマブの影響
図６（Ａ〜Ｇ）は、ＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１のリガンド（すなわちＶＣＡＭ−１／Ｐ−セレクチン）へのＣＤ４＋Ｔ細胞のローリング及び密着に対するナタリズマブ処理の影響を示す。

図６Ａは、ＳＤＦ−１有り及び無しならびにナタリズマブ有り及び無しでの、ＶＣＡＭ−１コーティング毛細管流チャンバの密着性ＣＤ４＋Ｔ細胞／視界を示す（ｎ＝４）。図６は、ＳＤＦ−１有り及び無しでの、ＶＣＡＭ−１コーティング毛細管流チャンバ上での、ナタリズマブ治療した対象及び対照の密着性ＣＤ４＋Ｔ細胞／視界を示す（ｎ＝４）。図６Ｃは、Ｐ−セレクチンコーティング毛細管流チャンバ上での、健常対照及びナタリズマブ治療した対象の捕捉ＣＤ４＋Ｔ細胞／視界を示す（ｎ＝４）。ナタリズマブ（ｎ＝４）の添加有り及び無しでの、非炎症またはＴＮＦ−アルファ炎症一次血管内皮細胞でコーティングされた平行板フローチャンバ上の、密着性またはローリングＣＤ４＋Ｔ細胞／視界を、それぞれ、図６Ｄ及びＥに示す。ＰＳＧＬ−１を遮断する抗体有り及び無しでの、非炎症またはＴＮＦ−アルファ炎症一次血管内皮細胞でコーティングした、ナタリズマブ処理した対象及び対照の密着性ローリングＣＤ４＋Ｔ細胞／平行板フローチャンバ上の視界を、それぞれ、図６Ｆ及びＧで示す（ｎ＝４）。

ＣＤ４９ｄ及びＰＳＧＬ−１は、リンパ球血管外遊走の第１のステップ、すなわち結合、ローリング及び接着に著しく関係する分子である（Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔ ａｎｄ Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２（９）：６２３−６３５（２０１２）；Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔ ａｎｄ Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３（１２）：５７９−５８９（２０１２）に概説）。したがって、ＣＤ４９ｄのナタリズマブ介在遮断及びそれに続くＰＳＧＬ−１の二次的なアップレギュレーションが、剪断流条件の下で機能的に関連するか否かを評価した。生体外では、健常対照のＣＤ４^＋Ｔ細胞のナタリズマブによる処理は、ガラス毛管ベースの系においてＶＣＡＭ−１とのＣＤ４９ｄの相互作用を阻害し、確立した図と一致して、ＶＣＡＭ−１への接着は、ケモカイン刺激（ＳＤＦ−１／ＣＸＣＬ１２）によるＶＬＡ−４の構造変化を必要とした（図６Ａ）。本発明者らは、ＬＴＮＴ下での対象の血液から新鮮に単離されたＣＤ４^＋Ｔ細胞内で、この低下した接着が明白であることを続けて示し（図６Ｂ）、生体外での処理有効性を実証した。Ｐ−セレクチン（ＰＳＧＬ−１レセプタ）でコーティングしたガラス毛管の分析により、対象細胞の捕捉能力が、健康な対照細胞と比較して、大きく向上したことを明らかにした（図６Ｃ）。密集度に成長した一次ヒト脳由来微小血管血管内皮細胞（ＨＢＭＥＣ）を次のステップで用いて、ＣＤ４９ｄ結合パートナー及びＰＳＧＬ−１結合パートナーの自然の発現に再現した。ナタリズマブで前培養された場合は、健常対照のＣＤ４^＋Ｔ細胞は内皮に接着することができず、本発明者らの系でのＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１相互作用の関連を証明したことを、本発明者らは示した（図６Ｄ）。ＣＤ４９ｄの遮断は、内皮上でのＣＤ４^＋Ｔ細胞のローリング能力に対する影響を有しなかった（図６Ｅ）。内皮層への堅固な密着は低減されたものの、ナタリズマブ処理した対象では完全に排除されず、対象細胞及び対照細胞の両方は、ＰＳＧＬ−１遮断抗体の存在下で残留密着を示さなかった（図６Ｆ）。最終的なステップとして、キャピラリ系において（図６Ｅ）ＣＤ４９ｄに非依存であると示された内皮上のＣＤ４^＋Ｔ細胞のローリングは、ナタリズマブ処理した対象内でより顕著になり、このローリングは、ＰＳＧＬ−１遮断抗体（図６Ｇ）の添加により、再び防止されうることを、本発明者らは示した。
実施例７

Ｔ_Ｈ１７細胞は、ＶＣＡＭ１／ＶＬＡ−４相互作用と独立して内皮に接着するため、ＭＣＡＭを用いることができる
図７（Ａ〜Ｇ）は、Ｔ_Ｈ１７細胞は、内皮への安定した接着にＭＣＡＭを用いることができることを示す。ＴＮＦ−アルファ炎症一次血管内皮細胞でコーティングされた平行板フローチャンバ上のＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋ＭＣＡＭ＋／−Ｔ細胞：ナタリズマブの添加の有り及び無しの付着細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ａ）；ナタリズマブの添加の有り及び無しのローリング細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｂ）；ＰＳＧＬ−１の阻止の有り及び無しのローリング細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｃ）；ナタリズマブの添加及びＣＤ１１ａの阻止の有り及び無しの付着細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｄ）；ＭＣＡＭの阻止の有り及び無しのローリング細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｅ）；ＭＣＡＭの遮断の有り及び無しの付着細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｆ）、及び、ナタリズマブの添加及びＭＣＡＭの遮断の有り及び無しの付着細胞／視界（ｎ＝３）（図７Ｇ）を示す。

ＬＴＮＴ対象の内皮に対する残留の密着がなお存在したため（図６Ｄ）、それらの対象内のＣＳＦ細胞はＣＤ４９ｄを発現せず（図２Ｃ）、近年の研究では、Ｔ_Ｈ１細胞とは対照的に、Ｔ_Ｈ１７分極された細胞は、ＣＤ４９ｄ欠損マウス内でＥＡＥを誘発することができること（Ｒｏｔｈｈａｍｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ｅｘｐ．ｍｅｄ．２０８（１２）：２４６５−２４７６（２０１１））と、メラノーマ細胞接着分子（＝ＭＣＡＭ、ＣＤ１４６）はヒトのＴ_Ｈ１７細胞に対する特異的マーカーであること（Ｌａｒｏｃｈｅｌｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒａｉｎ １３５（Ｐｔ１０）：２９０６−２８２４（２０１２）；Ｆｌａｎａｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ７（７）：ｅ４０４４３（２０１２））を示し、本発明者らはその後、Ｔ_Ｈ１７／ＭＣＡＭ^＋細胞に焦点を当てた。本発明者らは、Ｔ_Ｈ１７細胞がヒト系内でＬＴＮＴ下、ＣＳＦに依然として侵入できるとういう仮説を、生体外のアッセイを用いて試験し、ナタリズマブによるＣＤ４９ｄの遮断が、ＭＣＡＭ⁻記憶細胞（ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＯ^＋ＭＣＡＭ）の密着を排除するが、ＭＣＡＭ^＋記憶細胞の接着に干渉しなかったことを示すことができた（図７Ａ）。また、本発明者らは、２人の概念実証対象ににおいて、のこの仮説を生体外で追加的にさらに検証し、そこでは本発明者らはＣＳＦ材料へのアクセスを有し、ナタリズマブ治療なしの安定なＭＳ対象と比較した場合に、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＡ⁻細胞のＭＣＡＭ^＋細胞のパーセンテージは、ＬＴＮＴ対象内で非常に高かった（１９．８対３．２％）ことを示し、ＬＴＮＴ対象のＣＳＦ内でのＴ_Ｈ１７細胞の多さを示唆した。また、これらのＴ_Ｈ１７細胞は、図２Ｃでの全ＣＤ４^＋Ｔ細胞に対して上で示したように、ＬＴＮＴ対象においてＣＤ４９ｄを発現しなかった。ＭＣＡＭ^＋細胞の生体外のローリングは増強されず、ここでも、ＣＤ４９ｄの遮断は、捕捉に影響しなかった（図７Ｂ）。ＰＳＧＬ−１遮断は、両方の母集団でローリングを排除した（図７Ｃ）。本発明者らは、ＣＤ４９ｄに加えてＣＤ１１ａをブロックすることにより、ＭＣＡＭ^＋細胞の接着を低減することができた（図７Ｄ）。最後に、本発明者らは、抗体を潜在的な臨床応用（すなわち、生体内でのＴ_Ｈ１７細胞の自己免疫性プロセスに干渉する機能を遮断する）のために開発し、それらのシグネチャ分子（ＭＣＡＭ）を生体外で遮断した。ＭＣＡＭ遮断単独では、血管内皮細胞に対するローリング（図７Ｅ）または密着（図７Ｆ）に影響しなかった。しかしながら、ＣＤ４９ｄ及びＭＣＡＭをともに遮断することにより、ＭＣＡＭ^＋細胞の内皮への密着を排除した（図７Ｇ）。

実施例８
ＭＳの病因におけるＴ_Ｈ１７細胞の役割を示唆する、ＭＳ病変のＭＣＡＭ^＋Ｔ細胞の原位置検出
図８（Ａ〜Ｉ）は、活性ＭＳ病変内でのＭＣＡＭ^＋リンパ球を示す。図８Ａ〜Ｅは、３名のＭＳ対象の剖検からの活性白質病変の実例を示し、ＭＣＡＭを緑で示し、ＤＡＰＩを青で示す。ＭＣＡＭ＋ＣＤ８＋リンパ球の可能性を除外するため、図８Ｅは、ＤＡＰＩ対比染色法によるＭＣＡＭ（緑）およびＣＤ８（赤）に対する二重染色を示し、血管内皮細胞の顕著なＭＣＡＭ発現及び血管近傍での２つのＭＣＡＭ＋ＣＤ８−リンパ球を示す。図８Ｆ〜Ｉは、３名のＭＳ対象の剖検からの灰白質におけるＭＣＡＭ＋細胞の実例を示す。ＭＣＡＭ＋リンパ球を、星印で示す。

ＭＳ病因におけるＴ_Ｈ１７の本発明者らの観察を立証するため、ＭＳ白質病変をＭＣＡＭ^＋リンパ球の存在について評価した（図８Ａ〜Ｄ）。ＭＣＡＭ^＋細胞は、Ｉｂａ１⁻、ＣＤ６８⁻、ＧＦＡＰ⁻、ＮｅｕＮ⁻、及び、ＣＤ８⁻であるように示された（図８Ｅ）。また、ＭＣＡＭ^＋細胞をＭＳ対象の灰白質で検出し得（図８Ｆ〜Ｉ）、いくつかの細胞が血管壁への直接並置にあった（図８Ｈ〜Ｉ）。

ＶＬＡ−４及びＭＣＡＭの両方の阻止は、ＭＣＡＭ^＋細胞の接着を低減することに成功し、Ｔ_Ｈ１７細胞が、ＶＬＡ−４またはそれらのシグネチャ分子ＭＣＡＭの両方を使用して、内皮に安定した接着を媒介し、特特異的にＴ_Ｈ１７細胞のために、ターゲット組織への移動性のカスケードの一部としてＭＣＡＭを導入することができる証拠を提供する。ＭＣＡＭは、血管内皮細胞（ラミニンα４）により特異的に生成されるラミニンの形態に結合し、内皮マトリックスの一部分である。しかしながら、ラミニンα４はまた、血管内皮細胞の管腔表面上に表され得、粘着性カスケード内の初期現象に寄与し得、その後、血管壁を越える移動を促進し得る。ラミニン結合を遮断する、ＭＣＡＭに対する抗体の存在下で、本発明者らの系には残留の密着がないという事実は、この仮説に一致している。本発明者らの結果は、ナタリズマブの存在下でさえＣＮＳ侵入を促進し得る追加の接着機構を、Ｔ_Ｈ１７細胞が有していることを示している。ＬＦＡ−１は、条件付きα４インテグリンノックアウトマウス及びＭＣＡＭ／ラミニンを用いて、ＥＡＥにおけるＲｏｔｈｈａｍｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ｅｘｐ．ｍｅｄ．２０８（１２）：２４６５−２４７６（２０１１）の知見と調和する重要な役割、及び同じく、Ｆｌａｎａｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ １ ７（７）：ｅ４０４４３（２０１２）及びＬａｒｏｃｈｅｌｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒａｉｎ １３５３（Ｐｔ １０）：２９０６−２９２４（２０１２）からの結果と調和する重要な役割を、担っている可能性が高い。これらの結果は、ナタリズマブ治療対象内のＣＳＦもなおも侵入できるほとんどの細胞がＴ_Ｈ１７細胞である可能性が高く、病理学のみでなくＣＮＳ免疫監視機構でもこの母集団の役割を示唆するか、または、Ｔ_Ｈ１７細胞がＥＡＥ症状を誘発すると示されたＥＡＥにおける場合と異なり、Ｔ_Ｈ１細胞の存在なしにＴ_Ｈ１７細胞のみの存在が、ＭＳでの病理学を実現しないことを単を示唆するという証拠を提供する（Ｒｏｔｈｈａｍｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ｅｘｐ．ｍｅｄ．２０８（１２）：２４６５−２４７６（２０１１））。この結果は、一部の対象がナタリズマブ治療停止後により強力な再発を示す（Ｍｅｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ．ｓｃｉ．３５（３）：４０１−４０８（２０１４））理由の説明を、Ｔ_Ｈ１細胞は、ＣＮＳへの侵入を得ることができ、すでに原位置にあるＴ_Ｈ１７は細胞組織損害及び臨床病徴を悪化させるという点で提供する。この一連のデータは、ＶＬＡ−４及びＭＣＡＭをともに遮断することにより、ＶＬＡ−４単独の遮断よりさらに強力な治療となることができる、またはＴ_Ｈ１移動の遮断が臨床症状を緩和するには不十分な場合の効果的な治療選択肢とすることができ得るという証拠を提供する（例えば視神経脊髄炎等の強いＴ_Ｈ１７に偏った症状によるケース（Ｖａｒｒｉｎ−Ｄｏｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．７２（１）：５３−６４（２０１２））。本発明者らの研究の知見を、概要的な概要にまとめる（図９）。ＭＳにおける進行及び灰白質萎縮に関し、我々のデータは、Ｔ_Ｈ１７細胞が、ナタリズマブ下で残留の進行を媒介する証拠を提供し、これは本発明者らがこれらの細胞をまた灰白質内に見出し、これらの侵入はその治療では遮断されないからである。この結果は、ＳＰＭＳ及びＰＰＭＳの進行も、Ｔ_Ｈ１７要素を有すること、及びＶＬＡ−４及びＭＣＡＭの組み合わせ遮断が、これらの疾患の有効な治療選択肢となることができる証拠を提供する。

Claims (37)

1. 自己免疫性疾患を治療する、または自己免疫性疾患の予防をもたらす方法であって、アルファ−４インテグリン拮抗薬も受ける、多発性硬化症を有するまたはその危険がある対象に、ＭＣＡＭ拮抗薬を投与することを含み、前記ＭＣＡＭ拮抗薬及び前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が、前記自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される、前記方法。
2. 自己免疫性疾患を治療する、または自己免疫性疾患の予防をもたらす方法であって、ＭＣＡＭ拮抗薬も受ける、多発性硬化症を有するまたはその危険がある対象に、アルファ−４インテグリン拮抗薬を投与することを含み、前記アルファ−４インテグリン拮抗薬及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、前記自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される、前記方法。
3. 前記自己免疫性疾患が多発性硬化症である、請求項１又は２に記載の方法。
4. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が、前記アルファ−４インテグリンのＶＣＡＭ−１への結合に拮抗する、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
5. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が、アルファ−４インテグリンに特異的に結合する、請求項４に記載の方法。
6. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が、モノクローナル抗体である、請求項５に記載の方法。
7. 前記モノクローナル抗体が、ナタリズマブである、請求項６に記載の方法。
8. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、ＭＣＡＭのラミニン−アルファ−４への結合に拮抗する、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
9. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、ＭＣＡＭに特異的に結合するモノクローナル抗体である、請求項８に記載の方法。
10. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、前記ラミニン−アルファ−４に特異的に結合するモノクローナル抗体である、請求項９に記載の方法。
11. 前記ＭＣＡＭ抗体が、１７４９若しくは２１２０、またはそのキメラ型、単板型若しくはヒト化バージョンである、請求項１０に記載の方法。
12. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が、ナタリズマブであり、前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、１７４９若しくは２１２０、またはそのキメラ型、単板型若しくはヒト化バージョンである、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
13. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、その両方が同時に前記対象の血清内で検出可能であるように、同時に提供される、請求項１〜１２、２８〜２９または３２〜３４のいずれか１つに記載の方法。
14. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、同時注入により提供される、請求項１３に記載の方法。
15. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、順番に提供される、請求項１〜１２、２８〜２９または３２〜３４のいずれか１つに記載の方法。
16. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が最初に提供され、前記対象がアルファ−４インテグリン拮抗薬への耐性を発症し、前記ＭＣＡＭ拮抗薬がその後提供される、請求項１５に記載の方法。
17. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が最初に提供され、前記対象がＭＣＡＭ拮抗薬への耐性を発症し、前記アルファ−４インテグリン拮抗薬がその後提供される、請求項１５に記載の方法。
18. 前記アルファ−４インテグリン拮抗薬による一連の治療が最初に投与され、前記一連の治療を開始する際、前記対象が再発寛解型多発性硬化症を有するかその危険を有し、前記ＭＣＡＭ拮抗薬による一連の治療経過を開始する際、前記対象は二次進行型多発性硬化症へ進行している、請求項１５に記載の方法。
19. 前記アルファ−４インテグリン及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、毎週から四半期毎までの間隔で各々提供される、請求項１〜１８、２８〜２９または３２〜３４のいずれか１つに記載の方法。
20. 前記アルファ−４インテグリン及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、四週の間隔で各々提供される、請求項１９に記載の方法。
21. 各抗体の投与量が、５０〜５００ｍｇ／対象である、請求項１〜２０、２８〜２９または３２〜３４のいずれか１つに記載の方法。
22. 各抗体の投与量が、１００〜２００ｍｇ／対象である、請求項２１に記載の方法。
23. 各抗体の投与量が、５０〜１５０ｍｇ／対象である、請求項２１に記載の方法。
24. Ｔ細胞浸潤が関与する自己免疫性疾患を治療する、または前記自己免疫性疾患の予防をもたらす方法であって、炎症性疾患を有するまたはその危険がある対象に、アルファ−４拮抗薬及びＭＣＡＭ拮抗薬を投与することを含み、前記アルファ−４インテグリン拮抗薬及び前記ＭＣＡＭ拮抗薬は、前記自己免疫性疾患の治療または予防に有効な投与計画で提供される、前記方法。
25. 前記自己免疫性疾患が、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、クローン病、炎症性腸疾患、サルコイドーシスまたは乾癬性関節炎である、請求項２４に記載の方法。
26. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬及び前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が順番に投与され、前記アルファ−４インテグリン拮抗薬が最初に投与される、請求項２４又は２５に記載の方法。
27. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬及び前記アルファ−４拮抗薬が、同時に投与される、請求項２４又は２５に記載の方法。
28. 前記ＭＣＡＭ抗体が、配列番号１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号８６のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備える、請求項１２に記載の方法。
29. 前記ＭＣＡＭ抗体が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備える、請求項１２に記載の方法。
30. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、配列番号１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号８６のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備えるモノクローナル抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の方法。
31. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備えるモノクローナル抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の方法。
32. 前記ＭＣＡＭ抗体が、配列番号１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号８６のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備える、請求項１２に記載の方法。
33. 前記ＭＣＡＭ抗体が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備える、請求項１２に記載の方法。
34. 前記ＭＣＡＭ抗体が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備える、請求項１２に記載の方法。
35. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、配列番号１００のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号８６のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備えるモノクローナル抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の方法。
36. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０４のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備えるモノクローナル抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の方法。
37. 前記ＭＣＡＭ拮抗薬が、配列番号９３のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、配列番号９４のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域と、配列番号１０５のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域と、配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域と、を備えるモノクローナル抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の方法。