WO2018084236A1 - プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途 - Google Patents

プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途 Download PDF

Info

Publication number
WO2018084236A1
WO2018084236A1 PCT/JP2017/039702 JP2017039702W WO2018084236A1 WO 2018084236 A1 WO2018084236 A1 WO 2018084236A1 JP 2017039702 W JP2017039702 W JP 2017039702W WO 2018084236 A1 WO2018084236 A1 WO 2018084236A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
amino acid
acid sequence
seq
antibody
heavy chain
Prior art date
Application number
PCT/JP2017/039702
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
成 西山
松山　誠
章郎 海老原
Original Assignee
国立大学法人香川大学
国立大学法人岐阜大学
医療法人創和会
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 国立大学法人香川大学, 国立大学法人岐阜大学, 医療法人創和会 filed Critical 国立大学法人香川大学
Publication of WO2018084236A1 publication Critical patent/WO2018084236A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology

Definitions

  • the present invention relates to an antibody against a novel prorenin receptor or an antigen-binding fragment thereof, and use thereof.
  • the prorenin receptor is a component of the renin-angiotensin system that plays an important role in maintaining blood pressure, and is known to be essential for maintaining the function of cells (Non-patent Document 1).
  • Non-patent Document 2 the expression of prorenin receptor is enhanced in cancer tissues and that the prorenin receptor is involved in the growth of cancer cells.
  • an object of the present invention is to provide an antibody against a novel prorenin receptor or an antigen-binding fragment thereof.
  • the antibody against the prorenin receptor of the present invention or an antigen-binding fragment thereof includes a heavy chain variable region and a light chain variable region, and the heavy chain variable region and the light chain variable region are represented by the following (A) to (D): Any combination of the above and characterized by binding to the prorenin receptor.
  • the heavy chain variable region comprises heavy chain CDR1, heavy chain CDR2 and heavy chain CDR3;
  • the heavy chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-a1) to (H1-a3);
  • the heavy chain CDR2 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H2-a1) to (H2-a3);
  • the heavy chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H3-a1) to (H3-a3);
  • the light chain variable region comprises a light chain CDR1, a light chain CDR2 and a light chain CDR3;
  • the light chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L1-a1) to (L1-a3);
  • the light chain CDR2 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L2-a1) to (L2-a3);
  • the light chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L3-a
  • the heavy chain variable region comprises heavy chain CDR1, heavy chain CDR2 and heavy chain CDR3;
  • the heavy chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-b1) to (H1-b3);
  • the heavy chain CDR2 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H2-b1) to (H2-b3);
  • the heavy chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H3-b1) to (H3-b3);
  • the light chain variable region comprises a light chain CDR1, a light chain CDR2 and a light chain CDR3;
  • the light chain CDR1 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L1-b1) to (L1-b3);
  • the light chain CDR2 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L2-b1) to (L2-b3);
  • the light chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L
  • (H1-b1) Amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 (GFTFSNYY) (H1-b2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 (H1-b3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 Alternatively, the amino acid sequence (H2-b1) of SEQ ID NO: 9 (ISTSGSRT) in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added, and 80% or more of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 Amino acid sequence having the same amino acid sequence (H2-b3) SEQ ID NO: 9, wherein one or several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added (H3-b1) SEQ ID NO: 10 (ARHEFGAFDY ) Amino acid sequence (H3-b2) of amino acid sequence 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10 (H3-b3) one or several amino acids deleted or substituted in the amino acid sequence of SEQ ID
  • the heavy chain variable region comprises heavy chain CDR1, heavy chain CDR2 and heavy chain CDR3;
  • the heavy chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-c1) to (H1-c3);
  • the heavy chain CDR2 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H2-c1) to (H2-c3);
  • the heavy chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H3-c1) to (H3-c3);
  • the light chain variable region comprises a light chain CDR1, a light chain CDR2 and a light chain CDR3;
  • the light chain CDR1 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L1-c1) to (L1-c3);
  • the light chain CDR2 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L2-c1) to (L2-c3);
  • the light chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L
  • amino acid sequence (H1-c1) Amino acid sequence of SEQ ID NO: 13 (GFTFSNAA) (H1-c2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13 (H1-c3)
  • amino acid sequence (H2-c1) of amino acid sequence (H2-c1) SEQ ID NO: 14 IRTKPNNYAT) in which several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added, and 80% or more of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 Identical amino acid sequence (H2-c3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 one or several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H3-c2) amino acid sequence 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15 (H3-c3) in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, one
  • an amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added (L3- c1) Amino acid sequence of SEQ ID NO: 17 (VQSTHAPYT) (L3-c2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 17 (L3-c3)
  • One or several amino acids in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 17 Ami Acid are deleted, substituted, inserted and / or added in the amino acid sequence
  • the heavy chain variable region comprises heavy chain CDR1, heavy chain CDR2 and heavy chain CDR3;
  • the heavy chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-d1) to (H1-d3);
  • the heavy chain CDR2 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H2-d1) to (H2-d3);
  • the heavy chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H3-d1) to (H3-d3);
  • the light chain variable region comprises a light chain CDR1, a light chain CDR2 and a light chain CDR3;
  • the light chain CDR1 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L1-d1) to (L1-d3);
  • the light chain CDR2 is a polypeptide comprising any one of the amino acid sequences (L2-d1) to (L2-d3);
  • the light chain CDR3 is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (L3-d
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 18 (GFSLTSYH) or 19 (GFSPSTSGIC) (H1-d2) amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 18 or 19 (H1-d3) SEQ ID NO: 18
  • amino acid sequence (H2-d1) in which one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added (SEQ ID NO: 20 (IWTGGST) or 21 (ICREDSK)) -d2) Amino acid sequence of 80% identity or more with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 20 or 21 (H2-d3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 20 or 21 one or several amino acids are deleted, substituted or inserted And / or added amino acid sequence (H3-d1) SEQ ID NO: 22 (ARAPYNNSDY) or 23 (ARRPHTMGITGGYFDY) amino acid sequence (H3-d2) amino acid sequence of SEQ ID NO: 22
  • the antibody against the prorenin receptor of the present invention or an antigen-binding fragment thereof comprises a heavy chain variable region and a light chain variable region, and the heavy chain variable region and the light chain variable region are represented by the following (A) to (D): Any combination of the above and characterized by binding to the prorenin receptor.
  • the heavy chain variable region is a polypeptide consisting of any amino acid sequence of (H-A1) to (H-A3), and the light chain variable region is any of (L-A1) to (L-A3)
  • H-A1 which is a polypeptide consisting of the amino acid sequences of SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 26: ESGGGLVQPGSPLKLSCAASGFTFSSNWLNWIRQAPGKGLEWVATINPDGSSTYYPDTVKGRFVISKDNAKNTGYLQMNNLRSEDTAMYYCARTGTYYGYNSFFDYWGQGV (H-A2) Amino acid sequence of 80% identity or more with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 26 (H-A3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 26 one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence (L-A1) SEQ ID NO: 27 or 28 amino acid sequence SEQ ID NO: 27: DIVLTQSPALAVS
  • the heavy chain variable region is a polypeptide consisting of any amino acid sequence of (H-B1) to (H-B3), and the light chain variable region is any of (L-B1) to (L-B3)
  • Combination (H-B1) which is a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 29: VQLVESGGGLVQPGRSLKLSCAASGFTFSNYYMAWVRHAPKKGLEWVATISTSGSRTYYPDSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLKSEDTATYYCARHEFGAFDYWGQGVTV
  • H-B2 Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 29 (H-B3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 29 one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence (L-B1) amino acid sequence number 30 of SEQ ID NO: 30: DIVMTQSPSSLAVSAGETVTINCKSSQ
  • the heavy chain variable region is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H-C1) to (H-C3), and the light chain variable region is any of (L-C1) to (L-C3) Combination (H-C1) which is a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31.
  • SEQ ID NO: 31 ESLKISCAASGFTFSNAAMYWVRQAPGKGLEWIARIRTKPNNYATYYAESVKGRFTISRDDSKSMVYLQMDNLKTEDTAMYYCTALGLPHWFSYWGQGTPV (H-C2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31 (H-C3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 31 one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence (L-C1) amino acid sequence of SEQ ID NO: 32
  • SEQ ID NO: 32 TQTPPTLSATIGQSVSISCRSSQSLLYSNGNTYLNWLLQRPGQPPQLLIYLVSRLESGVPNRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDLGVYYCVQSTHAPYTFGAGTKQELK (L-C2) Amino acid sequence of 80% identity or more with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32 (L-C3) In the
  • the heavy chain variable region is a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H-D1) to (H-D3), and the light chain variable region is any of (L-D1) to (L-D3) Combination (H-D1) which is a polypeptide comprising the amino acid sequences of SEQ ID NO: 33 or 34.
  • SEQ ID NO: 33 VQLKESGPGLVQPSQTLSLTCTVSGFSLTSYHVSWVRQPPGKGLEWMGVIWTGGSTAYNSLLKSRLSISRDTSKSQVFLKMNSLQTEDTATYYCARAPYNNSDYWGQGV Sequence number 34: KESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSPSTSGICVSWIRQPSGKGLEWLATICREDSKGYNPSLKNRLTISKDTSNNQAFLKITSVDTADTAIYYCARRPHTMGITGGYFDYWGQGV (H-D2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34 (H-D3) One or several amino acids are deleted or substituted in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34 , Inserted and / or added amino acid sequence (L-D1) amino acid sequence of SEQ ID NO: 35 SEQ ID NO: 35: TQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYS
  • the method for testing the cancer risk of the present invention comprises a step of measuring the expression level of a prorenin receptor in a biological sample of a subject by binding a prorenin receptor and an antibody or an antigen-binding fragment thereof.
  • the antibody or antigen-binding fragment thereof is the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof.
  • the test reagent of the present invention is a test reagent used in the method for testing the risk of morbidity of cancer according to the present invention, and comprises the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof.
  • the cancer therapeutic agent of the present invention comprises a binding substance that binds to a prorenin receptor,
  • the binding substance contains the antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of the present invention.
  • the prorenin receptor can be detected.
  • FIG. 1 shows the results of WST-1 assay using antibody 48_8 in Example 2.
  • FIG. 2 shows the results of WST-1 assay using antibody 67_3 and antibody 51_1 in Example 2.
  • FIG. 3 shows the results of WST-1 assay using antibody 8_6 in Example 2.
  • FIG. 4 shows the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 51_1, and antibody 67_3 in Example 3.
  • FIG. 5 is a graph showing the tumor volume in Example 4, on days 0, 6, 12, 18, 24, and 30 after tumor implantation.
  • FIG. 6 is a photograph of a tumor removed on Day 36 after tumor implantation in Example 4.
  • FIG. 7 is a graph showing the volume of a tumor excised on the 36th day after tumor implantation in Example 4.
  • FIG. 8 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6 in Example 5.
  • FIG. 9 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6 in Example 5.
  • FIG. 10 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1, and antibody 8_6 in Example 5.
  • FIG. 11 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6 in Example 5.
  • FIG. 12 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6 in Example 6.
  • FIG. 13 is a summary of the results of the WST-1 assay shown in a paper (Kanaji et al., Respiratory Research, 2017, 18 and 118).
  • FIG. 14 is a graph showing the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6 in Example 7.
  • the antibody or antigen-binding fragment thereof for the prorenin receptor of the present invention includes, for example, a human constant region.
  • the cancer is digestive organ cancer.
  • the digestive organ cancer is at least one selected from the group consisting of pancreatic cancer, stomach cancer, colon cancer and liver cancer.
  • the test method of the present invention further includes, for example, a step of testing the subject's cancer risk by comparing the expression level of the prorenin receptor in the subject's biological sample with a reference value.
  • the reference value is the expression level of prorenin receptor in a biological sample of a healthy person or the expression level of prorenin receptor in a biological sample of a cancer patient.
  • the test method of the present invention for example, in the test step, when the expression level of the prorenin receptor in the biological sample of the subject is higher than the expression level of the prorenin receptor in the biological sample of the healthy subject, If the expression level of prorenin receptor in the biological sample of a cancer patient is the same as or higher than the expression level of prorenin receptor in the biological sample of the cancer patient, the subject is at risk of suffering from cancer. Suppose there is.
  • the biological sample is blood.
  • the biological sample is a sample derived from a digestive organ.
  • the digestive organ is at least one selected from the group consisting of pancreas, stomach, large intestine and liver.
  • the antibody to the prorenin receptor of the present invention or an antigen-binding fragment thereof includes a heavy chain variable region and a light chain variable region, and the heavy chain variable region and the light chain variable region are the (A ) To (D) and is characterized by binding to a prorenin receptor.
  • the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof is hereinafter collectively referred to as “the antibody of the present invention”.
  • the prorenin receptor to which the antibody of the present invention binds is a protein, and its origin is not particularly limited, and examples thereof include humans, non-human animals other than humans, and the non-human animals include, for example, mice. Mammals such as rats, dogs, monkeys, rabbits, sheep and horses.
  • amino acid sequence of the prorenin receptor for example, information registered in an existing database can be referred to.
  • the human-derived prorenin receptor includes, for example, the following amino acid sequence (SEQ ID NO: 36) registered under NCBI accession number NP_005756.
  • Human prorenin receptor protein (SEQ ID NO: 36) MAVFVVLLALVAGVLGNEFSILKSPGSVVFRNGNWPIPGERIPDVAALSMGFSVKEDLSWPGLAVGNLFHRPRATVMVMVKGVNKLALPPGSVISYPLENAVPFSLDSVANSIHSLFSEETPVVLQLAPSEERVYMVGKANSVFEDLSVTLRQLRKRLFQENSVLSSLPLNSHSRNNEVDLLFLSELQVLHDISSLLSRHKHLAKDHSPDLYSLELAGLDEIGKRYGEDSEQFRDASKILVDALQKFADDMYSLYGGNAVVELVTVKSFDTSLIRKTRTILEAKQAKNPASPYNLAYKYNFEYSVVFNMVLWIMIALALAVIITSYNIWNMDPGYDSIIYRMTNQKIRMDPGYDSIIYRMTNQKIRMDPGYDSIIYRMTNQKIRMDPGYDSIIYRMTNQKIRMDPGYDSIIY
  • the antibody of the present invention includes, for example, the meaning of an antibody that binds to a peptide fragment of the prorenin receptor in addition to an antibody that binds to a protein consisting of the full-length amino acid sequence of the prorenin receptor.
  • the prorenin receptor includes, for example, the meaning of the peptide fragment in addition to the protein consisting of the full-length amino acid sequence.
  • the present invention may be, for example, a so-called “antibody” whose molecular structure is immunoglobulin, or an antigen-binding fragment thereof.
  • the antibody of the present invention only needs to have the aforementioned heavy chain variable region and light chain variable region.
  • the present invention is an antibody, for example, its immunoglobulin class and isotype are not limited at all. Examples of the immunoglobulin class include IgG, IgM, IgA, IgD, IgE and the like.
  • the “antigen-binding fragment” in the present invention means a part of the antibody, for example, a partial fragment and recognizing the prorenin receptor.
  • the antigen-binding fragment include Fab, Fab ′, F (ab ′) 2 , variable region fragment (Fv), disulfide bond Fv, single-chain Fv (scFv), and polymers thereof.
  • the antibody or the like of the present invention may have, for example, a constant region in addition to the heavy chain variable region and the light chain variable region described above, and the constant region is, for example, a human constant region.
  • the heavy chain constant region includes, for example, the CH1, CH2, and CH3 regions
  • the light chain constant region includes, for example, the CL region.
  • a heavy chain and a light chain of an antibody molecule each have three complementarity determining regions (CDRs).
  • CDR is also referred to as a hypervariable domain.
  • the CDR is a region having a particularly high primary structure variability even in the variable region of the heavy chain and light chain, and is usually separated into three locations on the primary structure.
  • the three CDRs in the heavy chain are represented as heavy chain CDR1, heavy chain CDR2, and heavy chain CDR3 from the amino terminal side in the heavy chain amino acid sequence
  • the three CDRs in the light chain are From the amino terminal side in the amino acid sequence of the chain, they are represented as light chain CDR1, light chain CDR2, and light chain CDR3.
  • the antibody or the like of the combination (A) is also referred to as an antibody 48_8 group, for example.
  • the heavy chain variable region includes the following heavy chain CDR1, the following heavy chain CDR2, and the following heavy chain CDR3, and the light chain variable region includes the following light chain CDR1, the following light chain CDR2, and the following light chain CDR3.
  • the heavy chain CDR1 a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-a1) to (H1-a3)
  • the heavy chain CDR2 comprising any amino acid sequence of (H2-a1) to (H2-a3)
  • Polypeptide comprising the amino acid sequence of any one of the heavy chain CDR3: (H3-a1) to (H3-a3), and the amino acid sequence of any one of the light chain CDR1: (L1-a1) to (L1-a3)
  • the polypeptide comprising the light chain CDR2 any one of the amino acid sequences of (L2-a1) to (L2-a3)
  • the light chain CDR3 any one of (L3-a1) to (L3-a3) Polypeptide containing amino acid sequence
  • H1-a1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 (GFTFSSNW)
  • H1-a2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 (H1-a3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H3-a1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 (ARTGTYYGYNSFFDY)
  • H3-a2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 (H3-a3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • L1-a1 SEQ ID NO: 4 (QSVSISRYNL) or 5 (KSVSTSGYSY) amino acid sequence (L1-a2) SEQ ID NO: 4 or 5 amino acid sequence of 80% or more identity (L1-a3) SEQ ID NO: 4 Or an amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added in the amino acid sequence of 5
  • L3-a1 SEQ ID NO: 6 (QQSRESPPT) or 7 (QHIRELTRS) amino acid sequence
  • L3-a2 SEQ ID NO: 6 or 7 amino acid sequence that is 80% or more identical
  • L3-a3 SEQ ID NO: 6 Or an amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added in the amino acid sequence of 7
  • identity is, for example, the degree of identity when the sequences to be compared are appropriately aligned, and means the appearance rate (%) of an exact match of amino acids between the sequences.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, or 99% or more.
  • the identity can be calculated with default parameters using analysis software such as BLAST and FASTA (hereinafter the same).
  • “one or several” related to substitution or the like is, for example, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, or 1.
  • the amino acid substitution may be, for example, a conservative substitution.
  • Said conservative substitution means substitution of one or several amino acids with other amino acids and / or amino acid derivatives so as not to substantially alter the function of the protein.
  • the “substituted amino acid” and the “substituted amino acid” have, for example, similar properties and / or functions.
  • chemical properties such as hydrophobicity and hydrophilicity index (hydropathy), polarity, charge, etc., or physical properties such as secondary structure are similar.
  • Amino acids or amino acid derivatives having similar properties and / or functions are known in the art, for example.
  • nonpolar amino acids such as alanine, valine, isoleucine, leucine, proline, tryptophan, phenylalanine, and methionine.
  • Polar amino acids neutral amino acids
  • neutral amino acids include glycine, serine, and threonine.
  • positively charged amino acids basic amino
  • negatively charged amino acids include aspartic acid, And glutamic acid.
  • the heavy chain variable region is a polypeptide comprising any one of the following amino acid sequences (H-A1) to (H-A3)
  • the light chain variable region is: A polypeptide comprising the amino acid sequence of any one of L-A1) to (L-A3).
  • H-A1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 26 SEQ ID NO: 26: ESGGGLVQPGSPLKLSCAASGFTFSSNWLNWIRQAPGKGLEWVATINPDGSSTYYPDTVKGRFVISKDNAKNTGYLQMNNLRSEDTAMYYCARTGTYYGYNSFFDYWGQGV (H-A2) Amino acid sequence of 80% identity or more with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 26 (H-A3) In the amino acid sequence of SEQ ID NO: 26, one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence
  • the amino acid sequence of (H-A1) is, for example, a sequence including the heavy chain CDR1 (H1-a1), the heavy chain CDR2 (H2-a1), and the heavy chain CDR3 (H3-a1).
  • the amino acid sequence of (H-A2) has, for example, the amino acid sequences of heavy chain CDR1 (H1-a1), heavy chain CDR2 (H2-a1), and heavy chain CDR3 (H3-a1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 26.
  • the amino acid sequence of (L-A1) is, for example, a sequence including the light chain CDR1 (L1-a1), the light chain CDR2 (L2-a1), and the light chain CDR3 (L3-a1).
  • the amino acid sequence of (L-A2) has, for example, the amino acid sequences of the light chain CDR1 (L1-a1), the light chain CDR2 (L2-a1), and the light chain CDR3 (L3-a1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 27 or 28.
  • the heavy chain variable region is (H-A1) and the light chain variable region is (L-A1). Also called “48_8”.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97%, respectively. These are 98% or more and 99% or more.
  • “one or several” relating to substitution and the like is, for example, 1 to 10, 1 to 9, 1 to 8, respectively. 1 to 7, 1 to 6, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, and 1.
  • Combination (B) The antibody or the like of the combination (B) is also referred to as antibody 8_6 group, for example.
  • the heavy chain variable region includes the following heavy chain CDR1, the following heavy chain CDR2, and the following heavy chain CDR3, and the light chain variable region includes the following light chain CDR1, the following light chain CDR2, and the following light chain CDR3.
  • the heavy chain CDR1 a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-b1) to (H1-b3)
  • the heavy chain CDR2 comprising any amino acid sequence of (H2-b1) to (H2-b3)
  • Polypeptide comprising the amino acid sequence of any of the heavy chain CDR3: (H3-b1) to (H3-b3)
  • Polypeptide The light chain CDR1: any of the amino acid sequences of (L1-b1) to (L1-b3)
  • the polypeptide comprising the light chain CDR2 any one of the amino acid sequences of (L2-b1) to (L2-b3)
  • the light chain CDR3 any one of (L3-b1) to (L3-b3) Polypeptide containing amino acid sequence
  • H1-b1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 (GFTFSNYY)
  • H1-b2 Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 (H1-b3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 8 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H2-b1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 (ISTSGSRT)
  • H2-b2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 (H2-b3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H3-b1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 10 (ARHEFGAFDY)
  • H3-b2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10 (H3-b3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 10 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more.
  • “one or several” related to substitution or the like is, for example, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, or 1.
  • the heavy chain variable region is a polypeptide consisting of any of the following amino acid sequences (H-B1) to (H-B3), and the light chain variable region is: A polypeptide comprising the amino acid sequence of any one of L-B1) to (L-B3).
  • H-B2 Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 29 (H-B3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 29 one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence
  • the amino acid sequence of (H-B1) is, for example, a sequence including the heavy chain CDR1 (H1-b1), the heavy chain CDR2 (H2-b1), and the heavy chain CDR3 (H3-b1).
  • the amino acid sequence of (H-B2) has, for example, the amino acid sequences of the heavy chain CDR1 (H1-b1), the heavy chain CDR2 (H2-b1), and the heavy chain CDR3 (H3-b1), respectively.
  • it may be an amino acid sequence having 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 29.
  • the amino acid sequence of (L-B1) is, for example, a sequence including the light chain CDR1 (L1-b1), the light chain CDR2 (L2-b1), and the light chain CDR3 (L3-b1).
  • the amino acid sequence of (L-B2) has, for example, the amino acid sequences of the light chain CDR1 (L1-b1), the light chain CDR2 (L2-b1), and the light chain CDR3 (L3-b1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 30.
  • the heavy chain variable region is (H-B1) and the light chain variable region is (L-B1). Also called 8_6.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97%, respectively. These are 98% or more and 99% or more.
  • “one or several” relating to substitution and the like is, for example, 1 to 10, 1 to 9, 1 to 8, respectively. 1 to 7, 1 to 6, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, and 1.
  • the antibody of the combination (C) is also referred to as, for example, the antibody 51_1 group.
  • the heavy chain variable region includes the following heavy chain CDR1, the following heavy chain CDR2, and the following heavy chain CDR3.
  • the light chain variable region includes the following light chain CDR1, the following light chain CDR2, and the following light chain CDR3. Contains chain CDR3.
  • the heavy chain CDR1 a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-c1) to (H1-c3)
  • the heavy chain CDR2 comprising any amino acid sequence of (H2-c1) to (H2-c3)
  • Polypeptide comprising the amino acid sequence of any one of the heavy chain CDR3: (H3-c1) to (H3-c3)
  • Polypeptide The light chain CDR1: any one amino acid sequence of (L1-c1) to (L1-c3)
  • the polypeptide comprising the light chain CDR2 any one of the amino acid sequences of (L2-c1) to (L2-c3)
  • the light chain CDR3 any one of (L3-c1) to (L3-c3) Polypeptide containing amino acid sequence
  • H1-c1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 13 (GFTFSNAA)
  • H1-c2 Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13 (H1-c3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 13 one Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H2-c1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 (IRTKPNNYAT)
  • H2-c2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 (H2-c3)
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 one Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • H3-c1 Amino acid sequence of SEQ ID NO: 15 (TALGLPHWFSY)
  • H3-c2 Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15 (H3-c3)
  • One amino acid sequence of SEQ ID NO: 15 Or an amino acid sequence in which several amino acids have been deleted, substituted, inserted and / or added
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more.
  • “one or several” related to substitution or the like is, for example, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, or 1.
  • the heavy chain variable region is a polypeptide having any one of the following amino acid sequences (H-C1) to (H-C3)
  • the light chain variable region is: A polypeptide having the amino acid sequence of any one of L-C1) to (L-C3).
  • H-C1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 31 SEQ ID NO: 31: ESLKISCAASGFTFSNAAMYWVRQAPGKGLEWIARIRTKPNNYATYYAESVKGRFTISRDDSKSMVYLQMDNLKTEDTAMYYCTALGLPHWFSYWGQGTPV (H-C2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31 (H-C3) In the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31, one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence
  • (L-C1) amino acid sequence of SEQ ID NO: 32 SEQ ID NO: 32: TQTPPTLSATIGQSVSISCRSSQSLLYSNGNTYLNWLLQRPGQPPQLLIYLVSRLESGVPNRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDLGVYYCVQSTHAPYTFGAGTKQELK (L-C2) Amino acid sequence of 80% identity or more with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32 (L-C3) In the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32, one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Or added amino acid sequence
  • the amino acid sequence of (H-C1) is, for example, a sequence including the heavy chain CDR1 (H1-c1), the heavy chain CDR2 (H2-c1), and the heavy chain CDR3 (H3-c1).
  • the amino acid sequence of (H-C2) has, for example, the amino acid sequences of heavy chain CDR1 (H1-c1), heavy chain CDR2 (H2-c1), and heavy chain CDR3 (H3-c1), respectively.
  • it may be an amino acid sequence having 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31.
  • the amino acid sequence of (L-C1) is, for example, a sequence including the light chain CDR1 (L1-c1), the light chain CDR2 (L2-c1), and the light chain CDR3 (L3-c1).
  • the amino acid sequence of the (L-C2) has, for example, the amino acid sequences of the light chain CDR1 (L1-c1), the light chain CDR2 (L2-c1), and the light chain CDR3 (L3-c1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32.
  • the heavy chain variable region is (H-C1) and the light chain variable region is (L-C1). 51_1 ".
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97%, respectively. These are 98% or more and 99% or more.
  • “one or several” relating to substitution and the like is, for example, 1 to 10, 1 to 9, 1 to 8, respectively. 1 to 7, 1 to 6, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, and 1.
  • Combination (D) The antibody or the like of the combination (D) is also referred to as, for example, antibody 67_3 group.
  • the heavy chain variable region includes the following heavy chain CDR1, the following heavy chain CDR2, and the following heavy chain CDR3, and the light chain variable region includes the following light chain CDR1, the following light chain CDR2, and the following light chain CDR3.
  • the heavy chain CDR1 a polypeptide comprising any amino acid sequence of (H1-d1) to (H1-d3)
  • the heavy chain CDR2 comprising any amino acid sequence of (H2-d1) to (H2-d3)
  • Polypeptide comprising the amino acid sequence of any one of the heavy chain CDR3: (H3-d1) to (H3-d3)
  • the amino acid sequence of any one of the light chain CDR1 (L1-d1) to (L1-d3)
  • the polypeptide comprising the light chain CDR2 any one of the amino acid sequences of (L2-d1) to (L2-d3)
  • the light chain CDR3 any one of (L3-d1) to (L3-d3) Polypeptide containing amino acid sequence
  • H1-d1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 18 (GFSLTSYH) or 19 (GFSPSTSGIC)
  • H1-d2 amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 18 or 19 (H1-d3) SEQ ID NO: 18 Or an amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or added in 19 amino acid sequences;
  • H3-d1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 22 (ARAPYNNSDY) or 23 (ARRPHTMGITGGYFDY)
  • H3-d2 amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 22 or 23 (H3-d3) SEQ ID NO: 22
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more.
  • “one or several” related to substitution or the like is, for example, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, or 1.
  • the heavy chain variable region is a polypeptide having any one of the following amino acid sequences (H-D1) to (H-D3), and the light chain variable region is: A polypeptide having the amino acid sequence of any one of L-D1) to (L-D3).
  • (H-D1) amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34 SEQ ID NO: 33: VQLKESGPGLVQPSQTLSLTCTVSGFSLTSYHVSWVRQPPGKGLEWMGVIWTGGSTAYNSLLKSRLSISRDTSKSQVFLKMNSLQTEDTATYYCARAPYNNSDYWGQGV Sequence number 34: KESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSPSTSGICVSWIRQPSGKGLEWLATICREDSKGYNPSLKNRLTISKDTSNNQAFLKITSVDTADTAIYYCARRPHTMGITGGYFDYWGQGV (H-D2) Amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34 (H-D3) One or several amino acids are deleted or substituted in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34 , Inserted and / or added amino acid sequences
  • L-D1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 35 SEQ ID NO: 35: TQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP (L-D2) an amino acid sequence of 80% or more identity with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 35 (L-D3) SEQ ID NO: 35 amino acid sequence, wherein one or several amino acids are deleted, substituted, inserted and / or Added amino acid sequence
  • the amino acid sequence of (H-D1) is, for example, a sequence including the heavy chain CDR1 (H1-d1), the heavy chain CDR2 (H2-d1), and the heavy chain CDR3 (H3-d1).
  • the amino acid sequence of the (H-D2) has, for example, the amino acid sequences of the heavy chain CDR1 (H1-d1), the heavy chain CDR2 (H2-d1), and the heavy chain CDR3 (H3-d1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 or 34.
  • the amino acid sequence of (L-D1) is, for example, a sequence including the light chain CDR1 (L1-d1), the light chain CDR2 (L2-d1), and the light chain CDR3 (L3-d1).
  • the amino acid sequence of the (L-D2) has, for example, the amino acid sequences of the light chain CDR1 (L1-d1), the light chain CDR2 (L2-d1), and the light chain CDR3 (L3-d1), respectively.
  • the amino acid sequence may be 80% or more identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 35.
  • the heavy chain variable region is (H-D1) and the light chain variable region is (L-D1). It is also called “67_3”.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97%, respectively. These are 98% or more and 99% or more.
  • “one or several” relating to substitution and the like is, for example, 1 to 10, 1 to 9, 1 to 8, respectively. 1 to 7, 1 to 6, 1 to 5, 1 to 4, 1 to 3, 1 and 2, and 1.
  • the method for producing the antibody of the present invention is not particularly limited, and for example, it can be produced by genetic engineering based on the amino acid sequence information described above. Specifically, for example, it can be performed as follows. In addition, this invention is not limited to this illustration.
  • a vector containing a nucleic acid sequence encoding the amino acid sequence of each region in the antibody of the present invention is introduced into a host to obtain a transformant. Then, the transformant is cultured, a fraction containing an antibody that binds to the prorenin receptor is recovered, and the antibody is isolated or purified from the obtained recovered fraction.
  • the vector examples include a vector containing a nucleic acid sequence encoding the heavy chain variable region, a vector containing a nucleic acid sequence encoding the light chain variable region, and the like.
  • the host is not particularly limited as long as it can introduce the vector and express the nucleic acid sequence in the vector.
  • examples of the host include mammalian cells such as HEK cells, CHO cells, NSO cells, and SP2 / 0 cells.
  • the method for introducing the vector into the host is not particularly limited, and a known method can be adopted.
  • the culture method of the transformant is not particularly limited, and can be appropriately determined according to the type of the host.
  • the fraction containing the antibody can be collected, for example, by crushing the cultured transformant and collecting it as a liquid fraction.
  • the isolation or purification of the antibody is not particularly limited, and a known method can be adopted.
  • the antibody is, for example, a monoclonal antibody.
  • the monoclonal antibody include monoclonal antibodies obtained by immunization of animals, chimeric antibodies, humanized antibodies, human antibodies (also referred to as fully human antibodies), and the like.
  • the chimeric antibody is an antibody in which a variable region of an antibody derived from an animal other than a human and a constant region of a human antibody are linked.
  • the chimeric antibody can be produced, for example, as follows. First, for a monoclonal antibody derived from a non-human animal, a variable region (V region) gene that binds to a prorenin receptor is prepared, and the variable region gene and a human antibody constant region (C region) gene are prepared. Ligated and this is further linked to an expression vector. Then, the cells transfected with the expression vector are cultured, and the target chimeric antibody secreted into the culture medium is recovered. Thereby, a chimeric antibody can be prepared.
  • V region variable region
  • C region human antibody constant region
  • the animal from which the variable region gene is derived is not particularly limited, and examples thereof include rats and mice.
  • the method for producing the chimeric antibody is not limited thereto, and can be produced by referring to a known method such as the method described in Japanese Patent Publication No. 3-73280.
  • the humanized antibody is an antibody in which only the CDR is derived from a non-human animal and the other region is derived from a human.
  • the humanized antibody can be produced, for example, as follows. First, the CDR gene of a monoclonal antibody derived from a non-human animal is prepared, transplanted to a human antibody gene, for example, a constant region (CDR grafting), and further linked to an expression vector. Then, by culturing the cells transfected with the expression vector, the humanized antibody in which the target CDR is transplanted is secreted into the culture medium. It can be prepared by recovering the secreted humanized antibody.
  • the CDR-derived animal is not particularly limited, and examples thereof include rats and mice.
  • the method for producing a humanized antibody is not limited to this, and for example, it is produced by referring to known methods such as those described in JP-T-4-506458 and JP-A-62-2296890. it can.
  • the human antibody is a human-derived antibody in all regions.
  • the human antibody can be prepared, for example, by introducing a human antibody gene into a non-human animal.
  • a transgenic animal for human antibody production can be used as the animal into which the human antibody gene is introduced.
  • the kind of the animal is not particularly limited, and examples thereof include mice.
  • the method for producing the human antibody is, for example, Nature Genetics, Vol. 7, p. 13-21, 1994; Nature Genetics, Vol. 15, p. 146-156, 1997; Manufactured by referring to known methods described in Table 7-7509137; WO 94/25585; Nature, Vol. 368, p. 856-859, 1994; it can.
  • the human antibody can also be produced, for example, using a phage display method.
  • a phage display method For example, Marks, J. D. et al .: J. Mol. Biol., Vol. 222, p.581-597, It can be produced with reference to known methods described in 1991 and the like.
  • the antibody of the present invention can also be prepared, for example, by immunizing an animal with an antigen.
  • the antigen include a protein consisting of a full-length amino acid sequence of a prorenin receptor or a peptide fragment thereof.
  • the peptide fragment may be, for example, a peptide fragment consisting only of an antigenic determinant (epitope) or a peptide fragment containing the antigenic determinant.
  • the number of amino acid residues of the peptide fragment is not particularly limited, and is preferably, for example, 6 amino acid residues or more, 8 amino acid residues or more, 10 amino acid residues or more, or 15 amino acid residues or more.
  • the peptide fragment include a polypeptide comprising the 200-213th amino acid sequence (HKHLAKDHSPDLYS: SEQ ID NO: 37) in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 36 described above.
  • Monoclonal antibodies obtained by immunizing animals include, for example, “Current Protocols in Molecular Biology” (John Wiley & Sons (1987)), Antibodies: A Laboratory Manual, Ed. Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory (1988). )) Etc., and can be produced with reference to known methods. Specifically, for example, an animal is immunized with an antigen, and antibody-producing cells collected from the immunized animal are fused with myeloma cells (myeloma cells) lacking autoantibody-producing ability to produce hybridomas. Subsequently, antibody-producing cells are screened from the hybridoma, and a single hybridoma clone is prepared by cloning.
  • this hybridoma clone is administered to an animal, and the monoclonal antibody is purified from the obtained abdominal cavity.
  • the hybridoma is cultured, and the monoclonal antibody is purified from the culture solution.
  • the myeloma cell is preferably derived from, for example, mouse, rat, human or the like.
  • the myeloma cell and the antibody-producing cell may be derived from the same or different species, but are preferably the same species.
  • the coding gene of the present invention is a coding gene of an antibody against a prorenin receptor or an antigen-binding fragment thereof, and includes a polynucleotide encoding the amino acid sequence of the antibody or antigen-binding fragment of the present invention.
  • the above-described antibody of the present invention can be obtained by expressing the coding gene of the present invention.
  • the sequence of the coding gene of the present invention is not particularly limited as long as it is a sequence encoding an amino acid sequence of the antibody of the present invention, and may be a sense sequence or an antisense sequence.
  • the expression vector of the present invention is an expression vector for an antibody against a prorenin receptor or an antigen-binding fragment thereof, and is characterized in that it contains the coding gene of the present invention.
  • the coding gene is linked to the linking vector so that the antibody of the present invention or the antigen-binding fragment thereof can be expressed, for example.
  • the expression vector of the present invention is not particularly limited as long as it can express the antibody of the present invention.
  • the expression vector of the present invention may be, for example, an expression vector comprising a nucleic acid sequence encoding the heavy chain variable region and a nucleic acid sequence encoding the light chain variable region, or a nucleic acid sequence encoding the heavy chain variable region. It may be a set of an expression vector containing and an expression vector containing a nucleic acid sequence encoding the light chain variable region.
  • the expression vector of the present invention can be prepared, for example, by linking the coding gene of the present invention to a linking vector.
  • the type of the linking vector for linking the coding gene is not particularly limited, and examples thereof include pUC.
  • the linking vector can be appropriately set according to, for example, the host into which the expression vector is introduced.
  • the host is not particularly limited, and examples thereof include mammalian cells.
  • the transformant of the present invention is a transformant that expresses the antibody of the present invention and is characterized by comprising a host and the encoding gene of the present invention.
  • the transformant of the present invention only needs to be capable of expressing the coding gene of the present invention.
  • the transformant preferably has, for example, the expression vector of the present invention.
  • the method for introducing the expression vector into the host is not particularly limited, and a known method can be adopted.
  • the method for testing cancer risk measures the expression level of prorenin receptor in a biological sample of a subject by binding the prorenin receptor and an antibody or an antigen-binding fragment thereof.
  • the antibody or antigen-binding fragment thereof is the antibody or antigen-binding fragment thereof of the present invention.
  • test method of the present invention is characterized by using the antibody of the present invention, and other processes and conditions are not particularly limited.
  • the possibility of onset of cancer, the presence / absence of onset of cancer (whether or not it has become cancerous), the degree of progression of cancer, the state of prognosis, and the like can be evaluated.
  • target cancer include digestive organ cancer and brain tumor as described above.
  • Examples of the gastrointestinal cancer include gastrointestinal cancer and gastrointestinal cancer.
  • Examples of the gastrointestinal cancer include stomach cancer and colorectal cancer.
  • Examples of the gastrointestinal cancer include pancreas.
  • liver cancer examples of the brain tumor include glioma, astrocytoma, central nervous system primary malignant lymphoma, and supraspontaneous hemangioma.
  • peritoneal cancer can also be evaluated.
  • any of primary cancer and metastatic cancer can be tested.
  • examples of the subject include humans, non-human animals other than humans, etc.
  • the non-human animals include, for example, mice, rats, dogs, monkeys, rabbits as described above.
  • Mammals such as sheep and horses.
  • the kind of the biological sample is not particularly limited, and examples thereof include body fluids, body fluid-derived cells, organs, tissues or cells separated from the living body.
  • the body fluid include blood, and specific examples include whole blood, serum, and plasma.
  • the body fluid-derived cells include blood-derived cells, and specifically, blood cells such as blood cells, leukocytes, and lymphocytes.
  • the biological sample can be appropriately determined according to, for example, the type of cancer to be tested.
  • the biological sample is derived from, for example, an organ that can cause cancer to be tested.
  • the organ is, for example, the digestive organs such as the stomach, pancreas, large intestine, and liver, the brain, or the peritoneum.
  • the brain examples include cerebrum, temporal lobe, occipital lobe, cerebellum, basal ganglia, and mesenchymal tissue.
  • tissue or cells derived from the pancreas are preferable.
  • brain-derived tissue or cells are preferred.
  • cancer in the digestive organs such as the pancreas and the brain such as the cerebrum can be tested by the expression level of the prorenin receptor in the blood.
  • the biological sample is preferably whole blood, serum, or plasma, more preferably serum or plasma.
  • the expression of the prorenin receptor to be measured is the expression of the prorenin receptor protein.
  • the measurement method is not particularly limited, and a known method using binding between an antibody or an antigen-binding fragment and an antigen can be employed. Specific examples of the measurement method include an immune antibody method, an ELISA method, a flow cytometry, and a Western blot method.
  • the test method of the present invention further includes, for example, comparing the expression level of the prorenin receptor in the biological sample of the subject (hereinafter also referred to as the test biological sample) with a reference value. Including the step of testing the risk of developing cancer.
  • the reference value is not particularly limited, and examples thereof include the expression level of prorenin receptor in healthy subjects, cancer patients, and cancer patients for each advanced stage. In the case of prognosis evaluation, the reference value may be, for example, the expression level of a prorenin receptor after treatment (for example, immediately after treatment) of the same subject.
  • the reference value can be obtained using, for example, a biological sample isolated from a healthy person and / or a cancer patient (hereinafter also referred to as a reference biological sample) as described above.
  • a reference biological sample isolated from the same subject after treatment may be used.
  • the reference value may be measured at the same time as the biological sample of the subject or may be measured in advance. The latter case is preferable because, for example, it is not necessary to obtain a reference value every time the subject biological sample of the subject is measured.
  • the subject biological sample and the reference biological sample of the subject are preferably collected, for example, under the same conditions, and the prorenin receptor is measured under the same conditions.
  • the method for evaluating the risk of cancer of a subject is not particularly limited, and can be determined as appropriate according to the type of the reference value.
  • the expression level of the prorenin receptor in the subject biological sample of the subject is significantly higher than the expression level of the prorenin receptor in the reference biological sample of the healthy subject, the reference biological body of the cancer patient
  • the expression level of the prorenin receptor in the sample is the same (when there is no significant difference), and / or when the expression level of the prorenin receptor is significantly higher than the expression level of the prorenin receptor in the reference biological sample of the cancer patient, It can be evaluated that there is a high risk or risk of getting cancer.
  • the expression level of the prorenin receptor in the subject biological sample of the subject is the same as the expression level of the prorenin receptor in the reference biological sample of the healthy person (when there is no significant difference), the reference of the healthy person If the expression level of prorenin receptor in the biological sample is significantly lower and / or significantly lower than the expression level of prorenin receptor in the reference biological sample of the cancer patient, the subject is It can be evaluated that there is no risk of suffering from or low risk. Further, in the comparison step, the expression level of the prorenin receptor in the subject biological sample of the subject is compared with the expression level of the prorenin receptor in the reference biological sample of the cancer patient for each progression stage, Can assess the degree of cancer progression. Specifically, when the test biological sample of the subject has, for example, the same level of expression as the reference biological sample of any progression stage (when there is no significant difference), the subject is: It can be evaluated that there is a possibility of the progress stage.
  • the evaluation may be made in the same manner as described above, and the expression level of the prorenin receptor in the reference biological sample after treatment of the same subject is used as the reference value. It can also be used and evaluated. As a specific example, when the expression level of the prorenin receptor in the subject biological sample is significantly higher than the reference value, the subject is at risk of recurrence or worsening after the treatment. Can be evaluated.
  • the subject biological sample of the subject when the expression level of the prorenin receptor in the subject biological sample of the subject is the same as the reference value (when there is no significant difference) and / or when the expression level is significantly lower than the reference value, the subject The examiner can evaluate that there is no risk of recurrence or low risk after the treatment.
  • a biological sample of the same subject may be collected over time, and the expression level of prorenin receptor in the biological sample may be compared.
  • the expression level increases with time, it is possible to determine that the possibility of morbidity has increased, and if the expression level decreases with time, the possibility of morbidity has decreased. Judgment such as having healed is possible.
  • the test reagent of the present invention is a test reagent used in the method for testing the risk of morbidity of cancer of the present invention, and comprises the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof. According to the test reagent of the present invention, the cancer morbidity risk test method of the present invention can be easily performed.
  • the test reagent of the present invention is characterized in that it contains the antibody of the present invention, and other configurations are not particularly limited.
  • the test reagent of the present invention may further contain, for example, a detection substance that detects the binding between the prorenin receptor protein and the antibody of the present invention.
  • a detection substance that detects the binding between the prorenin receptor protein and the antibody of the present invention.
  • the detection substance include a combination of a labeled antibody that can be detected with respect to the antibody or the like and a substrate with respect to the label.
  • the method for diagnosing cancer of the present invention comprises a step of measuring the expression level of a prorenin receptor in a biological sample of a subject by binding a prorenin receptor and an antibody or an antigen-binding fragment thereof,
  • the antigen-binding fragment is the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof.
  • the cancer diagnostic reagent of the present invention comprises the antibody of the present invention or an antigen-binding fragment thereof.
  • description of the test method and test reagent of the said invention can be used for this invention.
  • the therapeutic agent for cancer of the present invention comprises the antibody or antigen-binding fragment of the present invention.
  • the treatment method of the present invention is a cancer treatment method, comprising the step of administering the cancer treatment agent of the present invention to a patient.
  • the present invention can treat cancer by, for example, targeting a prorenin receptor as a cancer target and inhibiting or neutralizing the function of the prorenin receptor protein with the antibody of the present invention.
  • the administration conditions of the cancer therapeutic agent of the present invention are not particularly limited. For example, depending on the type of cancer disease to be treated, the degree of progression, the age of the patient, etc., the dosage form, administration timing, dosage, etc. are appropriately determined. Can be set. Examples of administration subjects include humans, non-human animals other than humans, and the like. Examples of the non-human animals include mammals such as mice, rats, dogs, monkeys, rabbits, sheep, and horses as described above. It is done.
  • Example 1 Production of monoclonal antibody
  • the anti-prorenin receptor antibody of the present invention was produced. General methods were employed unless otherwise indicated.
  • a 200-213th polypeptide (SEQ ID NO: 37) was prepared as a peptide fragment of the human prorenin receptor protein (SEQ ID NO: 36), and a shellfish protein (keyhole limbet hemocyanin) was used as a carrier protein at the amino terminus. : KLH) were linked by a known method. This was used as an antigen.
  • lymph nodes were removed. Using the lymph node B cells and mouse myeloma cells (SP2 / 0 cells), cell fusion was performed by the rat lymph node method and cultured. The 70 hybridoma colonies formed by the culture were each divided into new media and further cultured. The medium used was GIT (Kohjin Bio) containing 10% FBS and 10% BM (Roche).
  • each of the 70 colony cultures was screened for anti-prorenin receptor antibody-producing hybridomas by WST-1 assay.
  • a human pancreatic cancer cell line PK-1 was seeded in a medium of a 24-well plate at 1 ⁇ 10 4 cells / well.
  • 50 ⁇ L or 10 ⁇ L of the culture solution was added, and cultured for 48 hours.
  • 100 ⁇ L of water-soluble tetrazolium salt (WST-1) reagent was further added to each well and incubated for 2 hours.
  • WST-1 water-soluble tetrazolium salt
  • the culture solution of the 18 colonies was screened for anti-prorenin receptor antibody-producing hybridomas by the BLI method (Bio-Layer Interferometry). Specifically, BLItz (trademark, manufactured by Pall ForteBio) was used to measure the degree of binding between the antibody and the peptide fragment of the prorenin receptor in each culture solution. And 4 colonies with high degree of binding were selected.
  • BLItz trademark, manufactured by Pall ForteBio
  • hybridomas 48_8, 67_3, 51_1 and 8_6 were isolated.
  • anti-prorenin receptor antibodies produced from these hybridomas four types of monoclonal antibodies (48_8, 67_3, 51_1 and 8_6) were obtained.
  • the isotypes of antibodies 48_8, 67_3, 51_1, and 8_6 were IgM, IgG2b, IgG2b, and IgM, respectively.
  • the culture solution of the hybridoma was centrifuged, and the resulting supernatant was used as an antibody sample.
  • the concentration of each antibody (antibodies 48_8, 67_3, 51_1, and 8_6) in the supernatant was 7, 4.5, 4, 10 ⁇ g / ⁇ L, respectively.
  • Example 2 Measurement of anticancer activity It was confirmed that the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to suppress pancreatic cancer cells.
  • a human pancreatic cancer cell line PK-1 was seeded in a medium of a 24-well plate at 1 ⁇ 10 4 cells / well. Next, 50 ⁇ L or 10 ⁇ L of each antibody sample prepared in Example 1 was added to the wells and cultured for 48 hours. After the incubation, 100 ⁇ L of a water-soluble tetrazolium salt (WST-1) reagent was further added to the well and incubated for 2 hours. And about each well, the light absorbency in 450 nm was measured using the plate reader, and the growth ability was measured. For the control, measurement was performed in the same manner except that human IgG1 antibody (manufactured by WAKO) was administered at the same concentration instead of the antibody sample of the anti-prorenin receptor antibody.
  • WST-1 water-soluble tetrazolium salt
  • the WST-1 assay was performed using PreMix WST-1 Cell proliferation Assay System (Catalog No. MK400, TakaraBio) according to the instruction manual.
  • FIG. 1 shows the results of WST-1 assay using antibody 48_8.
  • (A) shows the result of the antibody sample 50 ⁇ L
  • (B) shows the result of the antibody sample 10 ⁇ L.
  • the vertical axis indicates the relative value of cell proliferation ability. As shown in FIG. 1, cell proliferation of pancreatic cancer cells was suppressed by antibody 48_8.
  • FIG. 2 shows the results of WST-1 assay using antibody 67_3 and antibody 51_1.
  • 2A shows the result of the antibody sample 50 ⁇ L
  • FIG. 2B shows the result of the antibody sample 10 ⁇ L.
  • the vertical axis indicates the relative value of cell proliferation ability. As shown in FIG. 2, cell proliferation of pancreatic cancer cells was suppressed by antibody 67_3 and antibody 51_1.
  • FIG. 3 shows the results of WST-1 assay using 10 ⁇ L of antibody sample of antibody 8_6.
  • the vertical axis represents the relative value of cell proliferation ability. As shown in FIG. 3, cell growth of pancreatic cancer cells was suppressed by antibody 8_6.
  • the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to suppress pancreatic cancer cells.
  • the concentrations of antibody 48_8, antibody 51_1, and antibody 67_3 were quantified. Specifically, the supernatant was subjected to SDS-PAGE and CBB staining, and quantified using IgG heavy and light chains as loading controls. Then, the proliferation ability of pancreatic cancer cells was measured in the same manner as in Example 2 using the supernatant (the amount of antibody 100 ⁇ g).
  • FIG. 4 shows the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 51_1 or antibody 67_3.
  • FIG. 4A shows the results of human IgG1, antibody 48_8, antibody 51_1, or antibody 67_3 from the left.
  • the vertical axis indicates the relative value (Fold) of the cell growth ability.
  • FIG. 4B shows the results of WST-1 assay using antibody 48_8, antibody 51_1, or antibody 67_3.
  • FIG. 4B shows the result of addition of Wnt3a, the first human IgG from the left is the result of human IgG1 without Wnt3a, and the second human IgG from the left is the result of human IgG1 with addition of Wnt3a.
  • the third and fourth are the results of the antibody 48_8, the antibody 51_1, and the antibody 67_3 added with Wnt3a, respectively.
  • the vertical axis indicates the relative value (Fold) of the cell proliferation ability.
  • human IgG had increased cell proliferation ability of pancreatic cancer cells when Wnt3a was added, compared to when Wnt3 was not added.
  • antibody 48_8, antibody 51_1, and antibody 67_3 show a relative value sufficiently lower than that of human IgG without addition of Wnt3 even when Wnt3a is added, and the cell proliferation ability of pancreatic cancer cells is sufficiently suppressed. I found out. This suggests that antibody 48_8, antibody 51_1, and antibody 67_3 inhibit the Wnt signal pathway and suppress cell proliferation of pancreatic cancer cells.
  • mice Six-week-old male Nude mice were transplanted with 5 ⁇ 10 6 cells of human pancreatic cancer cell line PK-1. Thereafter, from 3 days after transplantation to 33 days after transplantation, 100 ⁇ L of PBS containing 200 ⁇ g of antibody was intravenously administered every 3 days.
  • FIG. 5 is a graph showing the tumor volume at 0, 6, 12, 18, 24, and 30 days after transplantation, (A) shows the results of antibody 48_8 and antibody 67_3, and (B) shows the antibody The result of 51_1 is shown.
  • the vertical axis represents tumor volume (mm 3 ), and the horizontal axis represents the number of days after transplantation.
  • a circle indicates a control group
  • a square indicates an antibody 48_8 administration group
  • a triangle indicates an antibody 67_3 administration group.
  • circles indicate the control group
  • squares indicate the antibody 51_1 administration group.
  • the volume of the tumor increased as the number of days after transplantation passed.
  • the antibody 48_8 administration group the antibody 67_3 administration group, and the antibody 51_1 administration group
  • the tumor size was smaller than the control group in the number of days after transplantation. From this, it was confirmed that administration of antibody 48_8, antibody 67_3 and antibody 51_1 suppresses the growth of pancreatic cancer cells.
  • FIG. 6 is a photograph of a tumor excised 36 days after transplantation, (A) shows the results of antibody 48_8 and antibody 67_3, and (B) shows the results of antibody 51_1.
  • the upper row shows the tumor in the control group
  • the middle row shows the antibody 48_8 administration group
  • the lower row shows the antibody 67_3 administration group.
  • the upper row shows the tumor in the control group
  • the lower row shows the antibody 51_1 administration group.
  • the size of the tumor was smaller in the antibody 48_8 administration group, the antibody 67_3 administration group and the antibody 51_1 administration group than in the control group. From this, it was confirmed that administration of antibody 48_8, antibody 67_3 and antibody 51_1 suppresses the growth of pancreatic cancer cells.
  • FIG. 7 is a graph showing the volume of a tumor excised on the 36th day after transplantation, (A) shows the results of antibody 48_8 and antibody 67_3, and (B) shows the results of antibody 51_1.
  • the vertical axis represents the tumor volume (mm 3 ), and the horizontal axis represents each group.
  • the size of the tumor was smaller in the antibody 48_8 administration group, the antibody 67_3 administration group and the antibody 51_1 administration group than in the control group. From this, it was confirmed that administration of antibody 48_8, antibody 67_3 and antibody 51_1 suppresses the growth of pancreatic cancer cells.
  • the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to suppress pancreatic cancer cells even in vivo.
  • the cancer cells mouse colon cancer CT26 cells, human colon cancer DLD-1 cells, human colon cancer HCT116 cells, and human glioblastoma U251MG cells were used, and the amount of the antibody sample added was 1 well.
  • the relative value of the proliferation ability with respect to each cell was determined for the four types of antibody samples (antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1, and antibody 8_6) in the same manner as in Example 2 except that the amount was 100 ⁇ g / 500 ⁇ L per unit. .
  • Control 2 was used.
  • the amount of CM added was the same as the amount of the antibody sample per well
  • the amount of human IgG1 antibody added was the same as that of the antibody sample per well.
  • FIG. 10 shows human colon cancer.
  • the P value was the value for the control 2.
  • each antibody sample significantly suppressed the proliferation of each of the cancer cells as compared with the control.
  • the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to suppress the growth of colorectal cancer cells and brain tumor (glioblastoma) cancer cells.
  • Example 2 About the four types of antibody samples (antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1 and antibody 8_6) in the same manner as in Example 2 except that the amount of the antibody sample added was 100 ⁇ g / mL per well culture medium. Then, the relative value of the proliferation ability for pancreatic cancer cell PK-1 was determined.
  • the reference example used the polyclonal antibody Ab obtained using the same antigen of the anti-prorenin receptor as the antibody of Example 1, and the addition amount thereof was the same as that of the antibody sample.
  • a vehicle control 1 and a control 2 to which the human IgG1 antibody (manufactured by WAKO) was added were used. In Control 2, the amount of human IgG1 antibody added was the same as that of the antibody sample.
  • FIG. 12 shows the results of the WST-1 assay using the above four types of antibody samples against pancreatic cancer cells.
  • the four types of antibody samples (monoclonal antibodies) showed growth inhibition against pancreatic cancer cells and showed a significant difference with respect to the control.
  • the relative value of the proliferation ability is 0.95
  • the relative value of the proliferation ability is 0.8 to 0.9. Therefore, according to the example, it can be said that the suppression ability is about 10-15% stronger than the reference example.
  • arrows indicate differences from the reference example. Therefore, it was estimated how much the difference in the suppressive capacity of 10-15% in the WST-1 assay is reflected in the difference in the size of the cancer whose growth was suppressed.
  • FIG. 13 shows the results of the WST-1 assay for cultured lung cancer cells (LCC cells) and the size of the subcutaneously transplanted cancer. An outline of the results is shown in FIG. In FIG. 13, (A) shows the results of the WST-1 assay, and (B) shows the results of FIG. 1 is the result of tumor size in 1.
  • A is A (EBC1) used alone, A + B is used together with A (EBC1) and B (HFL1), and A + C is used together with A (EBC1) and C (MRC5). It is.
  • FIG. 13 (A) A alone has a lower WST-1 value by about 15% than the combined use of A and C (proliferation is suppressed).
  • the arrows indicate the difference (15%) between A alone and A + C. Accordingly, when the graph of FIG. 13B is confirmed, on the eighth day from the start of the treatment, the combined use of A and C has a tumor size of 1200 mm 3 , whereas A alone has a tumor size of 400 mm 3. The size of the tumor is suppressed to about one third of the former.
  • the size of the pancreatic cancer was also suppressed to the same level as that in the above-mentioned paper, as compared with the case where the monoclonal antibody of this example was used as the polyclonal antibody of the reference example. I can guess.
  • Example 7 Inhibition of anticancer activity It was confirmed that the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to inhibit breast cancer cells.
  • the addition amount of the antibody sample was 200 ⁇ g / 500 ⁇ L per well.
  • the four types of antibody samples (antibody 48_8, antibody 67_3, antibody 51_1, and antibody 8_6), the relative value of the proliferation ability with respect to the cells was determined.
  • a control 1 to which only the CM was added and a control 2 to which the CM and a human IgG1 antibody (manufactured by WAKO) were added were used.
  • the amount of CM added was the same as the amount of the antibody sample per well, and the amount of human IgG1 antibody added was the same as that of the antibody sample per well.
  • FIG. Each figure shows the results of WST-1 assay using the four types of antibody samples against the mouse breast cancer cells.
  • the P value was the value for the control 2.
  • the anti-prorenin receptor antibody of the present invention has the ability to suppress the growth of breast cancer cells.
  • an antibody against a novel prorenin receptor or an antigen-binding fragment thereof can be provided. For this reason, it can be said that the present invention is extremely useful in the field of medicine and the like.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

プロレニン受容体を検出可能な新規のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片を提供する。　本発明のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片は、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、下記組合せであり、プロレニン受容体に結合することを特徴とする。 前記重鎖可変領域が、（H1-a1）、（H2-a1）、（H3-a1）のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、（L1-a1）、（L2-a1）、（L3-a1）のアミノ酸配列を含む。

Description

プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途
　本発明は、新規のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途に関する。
　プロレニン受容体は、血圧の維持に重要な役割を果たしているレニン・アンジオテンシン系のコンポーネントであり、細胞の機能維持にも必須であることが知られている（非特許文献１）。
　一方、がん組織において、プロレニン受容体の発現が亢進していること、および、プロレニン受容体が、がん細胞の増殖に関わっていること等が明らかとなっている（非特許文献２）。
　このため、がん治療の研究等において、プロレニン受容体の検出が重要となっている。
Nguyen　G.　J　Renin　Angiotensin　Aldosterone　Syst.　2011;　12(4):　637-8 Shibayama　et　al.,　(Pro)renin　receptor　is　crucial　for　Wnt/β-catenin-dependent　genesis　of　pancreatic　ductal　adenocarcinoma.　Sci.　Rep.,　2015;　5:　8854.
　そこで、本発明は、新規のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片の提供を目的とする。
　本発明のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片は、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、下記（Ａ）から（Ｄ）のいずれかの組合せであり、プロレニン受容体に結合することを特徴とする。
組合せ（Ａ）
前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-a1）～（H1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-a1）～（H2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-a1）～（H3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-a1）～（L1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-a1）～（L2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-a1）～（L3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
（H1-a1）配列番号１（GFTFSSNW）のアミノ酸配列
（H1-a2）配列番号１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-a3）配列番号１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-a1）配列番号２（INPDGSST）のアミノ酸配列
（H2-a2）配列番号２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-a3）配列番号２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-a1）配列番号３（ARTGTYYGYNSFFDY）のアミノ酸配列
（H3-a2）配列番号３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-a3）配列番号３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-a1）配列番号４（QSVSISRYNL）または５（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
（L1-a2）配列番号４または５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-a3）配列番号４または５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-a1）配列番号３８（RAS）または３９（LVS）のアミノ酸配列
（L2-a2）配列番号３８または３９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-a3）配列番号３８または３９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-a1）配列番号６（QQSRESPPT）または７（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
（L3-a2）配列番号６または７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-a3）配列番号６または７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｂ）
前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-b1）～（H1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-b1）～（H2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-b1）～（H3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-b1）～（L1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-b1）～（L2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-b1）～（L3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
（H1-b1）配列番号８（GFTFSNYY）のアミノ酸配列
（H1-b2）配列番号８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-b3）配列番号８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-b1）配列番号９（ISTSGSRT）のアミノ酸配列
（H2-b2）配列番号９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-b3）配列番号９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-b1）配列番号１０（ARHEFGAFDY）のアミノ酸配列
（H3-b2）配列番号１０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-b3）配列番号１０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-b1）配列番号１１（QSLLYSGNQKNY）のアミノ酸配列
（L1-b2）配列番号１１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-b3）配列番号１１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-b1）配列番号４０（WAS）のアミノ酸配列
（L2-b2）配列番号４０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-b3）配列番号４０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-b1）配列番号１２（QQYYDTPYT）のアミノ酸配列
（L3-b2）配列番号１２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-b3）配列番号１２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｃ）
前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-c1）～（H1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-c1）～（H2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-c1）～（H3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-c1）～（L1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-c1）～（L2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-c1）～（L3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
（H1-c1）配列番号１３（GFTFSNAA）のアミノ酸配列
（H1-c2）配列番号１３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-c3）配列番号１３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-c1）配列番号１４（IRTKPNNYAT）のアミノ酸配列
（H2-c2）配列番号１４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-c3）配列番号１４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-c1）配列番号１５（TALGLPHWFSY）のアミノ酸配列
（H3-c2）配列番号１５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-c3）配列番号１５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-c1）配列番号１６（QSLLYSNGNTY）のアミノ酸配列
（L1-c2）配列番号１６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-c3）配列番号１６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-c1）配列番号４１（LVS）のアミノ酸配列
（L2-c2）配列番号４１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-c3）配列番号４１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-c1）配列番号１７（VQSTHAPYT）のアミノ酸配列
（L3-c2）配列番号１７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-c3）配列番号１７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｄ）
前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-d1）～（H1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-d1）～（H2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-d1）～（H3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-d1）～（L1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-d1）～（L2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-d1）～（L3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
（H1-d1）配列番号１８（GFSLTSYH）または１９（GFSPSTSGIC）のアミノ酸配列
（H1-d2）配列番号１８または１９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-d3）配列番号１８または１９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-d1）配列番号２０（IWTGGST）または２１（ICREDSK）のアミノ酸配列
（H2-d2）配列番号２０または２１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-d3）配列番号２０または２１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-d1）配列番号２２（ARAPYNNSDY）または２３（ARRPHTMGITGGYFDY）のアミノ酸配列
（H3-d2）配列番号２２または２３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-d3）配列番号２２または２３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-d1）配列番号２４（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
（L1-d2）配列番号２４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-d3）配列番号２４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-d1）配列番号４２（LVS）のアミノ酸配列
（L2-d2）配列番号４２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-d3）配列番号４２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-d1）配列番号２５（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
（L3-d2）配列番号２５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-d3）配列番号２５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　本発明のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片は、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、下記（Ａ）～（Ｄ）のいずれかの組合せであり、プロレニン受容体に結合することを特徴とする。
組合せ（Ａ）
重鎖可変領域が、（H-A1）～（H-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-A1）～（L-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
（H-A1）配列番号２６のアミノ酸配列
配列番号２６：ESGGGLVQPGSPLKLSCAASGFTFSSNWLNWIRQAPGKGLEWVATINPDGSSTYYPDTVKGRFVISKDNAKNTGYLQMNNLRSEDTAMYYCARTGTYYGYNSFFDYWGQGV
（H-A2）配列番号２６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-A3）配列番号２６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-A1）配列番号２７または２８のアミノ酸配列
配列番号２７：DIVLTQSPALAVSLGQRATISCRASQSVSISRYNLMHWYQQKPGQQPKLLIYRASNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTINPVQADDIATYYCQQSRESPPTFGGGTK
配列番号２８：DIVLIQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
（L-A2）配列番号２７または２８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-A3）配列番号２７または２８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｂ）
重鎖可変領域が、（H-B1）～（H-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-B1）～（L-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
（H-B1）配列番号２９のアミノ酸配列
配列番号２９：VQLVESGGGLVQPGRSLKLSCAASGFTFSNYYMAWVRHAPKKGLEWVATISTSGSRTYYPDSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLKSEDTATYYCARHEFGAFDYWGQGVTV
（H-B2）配列番号２９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-B3）配列番号２９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-B1）配列番号３０のアミノ酸配列
配列番号３０：DIVMTQSPSSLAVSAGETVTINCKSSQSLLYSGNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRQSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQQYYDTPYTFGAGTK
（L-B2）配列番号３０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-B3）配列番号３０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｃ）
重鎖可変領域が、（H-C1）～（H-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-C1）～（L-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
（H-C1）配列番号３１のアミノ酸配列
配列番号３１：ESLKISCAASGFTFSNAAMYWVRQAPGKGLEWIARIRTKPNNYATYYAESVKGRFTISRDDSKSMVYLQMDNLKTEDTAMYYCTALGLPHWFSYWGQGTPV
（H-C2）配列番号３１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-C3）配列番号３１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-C1）配列番号３２のアミノ酸配列
配列番号３２：TQTPPTLSATIGQSVSISCRSSQSLLYSNGNTYLNWLLQRPGQPPQLLIYLVSRLESGVPNRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDLGVYYCVQSTHAPYTFGAGTKQELK
（L-C2）配列番号３２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-C3）配列番号３２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
組合せ（Ｄ）
重鎖可変領域が、（H-D1）～（H-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-D1）～（L-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
（H-D1）配列番号３３または３４のアミノ酸配列
配列番号３３：VQLKESGPGLVQPSQTLSLTCTVSGFSLTSYHVSWVRQPPGKGLEWMGVIWTGGSTAYNSLLKSRLSISRDTSKSQVFLKMNSLQTEDTATYYCARAPYNNSDYWGQGV
配列番号３４：KESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSPSTSGICVSWIRQPSGKGLEWLATICREDSKGYNPSLKNRLTISKDTSNNQAFLKITSVDTADTAIYYCARRPHTMGITGGYFDYWGQGV
（H-D2）配列番号３３または３４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-D3）配列番号３３または３４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-D1）配列番号３５のアミノ酸配列
配列番号３５：TQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
（L-D2）配列番号３５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-D3）配列番号３５アミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　本発明のがんの罹患危険度を試験する方法は、プロレニン受容体と、抗体またはその抗原結合断片との結合により、被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を測定する工程を含み、
前記抗体またはその抗原結合断片が、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片であることを特徴とする。
　本発明の試験試薬は、前記本発明のがんの罹患危険度の試験方法に使用する試験試薬であって、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とする。
　本発明のがん治療薬は、プロレニン受容体に結合する結合物質を含み、
前記結合物質が、前記本発明のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とする。
　本発明の新規のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片によれば、プロレニン受容体を検出することができる。
図１は、実施例２における、抗体４８＿８を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。 図２は、実施例２における、抗体６７＿３および抗体５１＿１を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。 図３は、実施例２における、抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。 図４は、実施例３における、抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。 図５は、実施例４における、腫瘍移植後０、６、１２、１８、２４、３０日目における腫瘍の体積を示すグラフである。 図６は、実施例４における、腫瘍移植後３６日目に摘出した腫瘍の写真である。 図７は、実施例４における、腫瘍移植後３６日目に摘出した腫瘍の体積を示すグラフである。 図８は、実施例５における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。 図９は、実施例５における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。 図１０は、実施例５における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。 図１１は、実施例５における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。 図１２は、実施例６における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。 図１３は、論文（Kanaji et al., Respiratory Research, 2017, 18, page118）に示されている、ＷＳＴ－１アッセイの結果の概要である。 図１４は、実施例７における、抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示すグラフである。
　本発明のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片は、例えば、ヒト定常領域を含む。
　本発明の試験方法は、例えば、前記がんが、消化器がんである。
　本発明の試験方法は、例えば、前記消化器がんが、膵臓がん、胃がん、大腸がんおよび肝臓がんからなる群から選択された少なくとも１つである。
　本発明の試験方法は、例えば、さらに、前記被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を、基準値と比較することにより、前記被検者のがんの罹患危険度を試験する工程を含み、前記基準値が、健常者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量またはがん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量である。
　本発明の試験方法は、例えば、前記試験工程において、前記被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記健常者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも高い場合、前記がん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量と同じ場合または、前記がん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも高い場合に、前記被検者は、がんに罹患する危険性があるとする。
　本発明の試験方法は、例えば、前記生体試料が、血液である。
　本発明の試験方法は、例えば、前記生体試料が、消化器由来の試料である。
　本発明の試験方法は、例えば、前記消化器が、膵臓、胃、大腸および肝臓からなる群から選択された少なくとも１つである。
＜抗体またはその抗原結合断片＞
　本発明のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片は、前述のように、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、前記（Ａ）から（Ｄ）のいずれかの組合せであり、プロレニン受容体に結合することを特徴とする。本発明の抗体またはその抗原結合断片を、以下、あわせて「本発明の抗体等」という。
　本発明の抗体等が結合するプロレニン受容体は、タンパク質であり、その由来は、特に制限されず、例えば、ヒト、ヒトを除く非ヒト動物等があげられ、前記非ヒト動物は、例えば、マウス、ラット、イヌ、サル、ウサギ、ヒツジ、ウマ等の哺乳類があげられる。前記プロレニン受容体のアミノ酸配列は、例えば、既存のデータベースに登録されている情報を参照できる。具体例として、ヒト由来プロレニン受容体は、例えば、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００５７５６で登録されている下記のアミノ酸配列（配列番号３６）があげられる。
ヒトプロレニン受容体タンパク質（配列番号３６）
MAVFVVLLALVAGVLGNEFSILKSPGSVVFRNGNWPIPGERIPDVAALSMGFSVKEDLSWPGLAVGNLFHRPRATVMVMVKGVNKLALPPGSVISYPLENAVPFSLDSVANSIHSLFSEETPVVLQLAPSEERVYMVGKANSVFEDLSVTLRQLRKRLFQENSVLSSLPLNSHSRNNEVDLLFLSELQVLHDISSLLSRHKHLAKDHSPDLYSLELAGLDEIGKRYGEDSEQFRDASKILVDALQKFADDMYSLYGGNAVVELVTVKSFDTSLIRKTRTILEAKQAKNPASPYNLAYKYNFEYSVVFNMVLWIMIALALAVIITSYNIWNMDPGYDSIIYRMTNQKIRMD
　本発明の抗体等は、前記プロレニン受容体の全長アミノ酸配列からなるタンパク質に結合する抗体の他に、例えば、前記プロレニン受容体のペプチド断片に結合する抗体の意味も含む。以下、前記プロレニン受容体は、特に示さない限り、例えば、全長アミノ酸配列からなるタンパク質の他に、前記ペプチド断片の意味も含む。
　本発明は、例えば、分子構造がイムノグロブリンである、いわゆる「抗体」でもよいし、その抗原結合断片でもよい。本発明の抗体等は、前述の前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域を有していればよい。本発明が抗体の場合、例えば、そのイムノグロブリンクラスおよびアイソタイプは、何ら制限されない。前記イムノグロブリンクラスは、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ等があげられる。
　本発明における「抗原結合断片」は、前記抗体の一部分、例えば、部分断片であり、且つ、前記プロレニン受容体を認識するものを意味する。前記抗原結合断片は、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、可変領域断片（Ｆｖ）、ジスルフィド結合Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）およびこれらの重合体等があげられる。
　本発明の抗体等は、前述の前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域の他に、例えば、定常領域を有してもよく、前記定常領域は、例えば、ヒト定常領域である。抗体（イムノグロブリン）の場合、重鎖の定常領域は、例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３という領域を含み、軽鎖の定常領域は、例えば、ＣＬという領域を含む。本発明の抗体等が前記定常領域を有する場合、例えば、前記重鎖可変領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３の少なくとも１つと結合し、前記軽鎖可変領域は、前記ＣＬと結合しており、前記重鎖可変領域は、例えば、ＣＨ１と直接結合している。
　一般に、抗体分子の重鎖および軽鎖は、それぞれ、３箇所の相補性決定領域（ＣＤＲ：Complemetarity　determining　region）を有している。ＣＤＲは、超可変領域（hypervariable　domain）ともいう。ＣＤＲは、前記重鎖および軽鎖の可変領域でも、特に一次構造の変異性が高い領域であり、一次構造上において、通常、３箇所に分離している。本発明においては、重鎖における３ヶ所のＣＤＲを、重鎖のアミノ酸配列におけるアミノ末端側から、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、および重鎖ＣＤＲ３と表し、軽鎖における３ヶ所のＣＤＲを、軽鎖のアミノ酸配列におけるアミノ末端側から、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、および軽鎖ＣＤＲ３と表す。これらの部位は、立体構造の上で相互に近接し、結合する抗原に対する特異性を決定している。
　以下に、本発明の抗体等について、前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域の組合せを説明する。
組合せ（Ａ）
　組合せ（Ａ）の抗体等は、例えば、抗体48_8群ともいう。前記組合せ（Ａ）において、前記重鎖可変領域は、下記重鎖ＣＤＲ１、下記重鎖ＣＤＲ２および下記重鎖ＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、下記軽鎖ＣＤＲ１、下記軽鎖ＣＤＲ２および下記軽鎖ＣＤＲ３を含む。
前記重鎖ＣＤＲ１：（H1-a1）～（H1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ２：（H2-a1）～（H2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ３：（H3-a1）～（H3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ１：（L1-a1）～（L1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ２：（L2-a1）～（L2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ３：（L3-a1）～（L3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
（H1-a1）配列番号１（GFTFSSNW）のアミノ酸配列
（H1-a2）配列番号１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-a3）配列番号１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-a1）配列番号２（INPDGSST）のアミノ酸配列
（H2-a2）配列番号２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-a3）配列番号２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-a1）配列番号３（ARTGTYYGYNSFFDY）のアミノ酸配列
（H3-a2）配列番号３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-a3）配列番号３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-a1）配列番号４（QSVSISRYNL）または５（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
（L1-a2）配列番号４または５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-a3）配列番号４または５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-a1）配列番号３８（RAS）または３９（LVS）のアミノ酸配列
（L2-a2）配列番号３８または３９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-a3）配列番号３８または３９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-a1）配列番号６（QQSRESPPT）または７（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
（L3-a2）配列番号６または７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-a3）配列番号６または７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記各ＣＤＲにおいて、「同一性」は、例えば、比較する配列同士を適切にアライメントしたときの同一性の程度であり、前記配列間のアミノ酸の正確な一致の出現率（％）を意味する。前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。前記同一性は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡ等の解析ソフトウェアを用いて、デフォルトのパラメータにより算出できる（以下、同様）。
　前記各ＣＤＲにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
　前記アミノ酸の置換は、例えば、保存的置換であってもよい。前記保存的置換は、タンパク質の機能を実質的に改変しないように、１個または数個のアミノ酸を、他のアミノ酸および／またはアミノ酸誘導体に置換することを意味する。「置換するアミノ酸」と「置換されるアミノ酸」とは、例えば、性質および／または機能が類似していることが好ましい。具体的には、例えば、疎水性および親水性の指標（ハイドロパシー）、極性、電荷等の化学的性質、または、二次構造等の物理的性質等が類似していることが好ましい。前記性質および／または機能が類似するアミノ酸またはアミノ酸誘導体は、例えば、当該技術分野において公知である。具体例として、非極性アミノ酸（疎水性アミノ酸）は、例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、トリプトファン、フェニルアラニン、メチオニン等があげられ、極性アミノ酸（中性アミノ酸）は、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、グルタミン、アスパラギン、システイン等があげられ、陽電荷を有するアミノ酸（塩基性アミノ）酸は、アルギニン、ヒスチジン、リジン等があげられ、負電荷を有するアミノ酸（酸性アミノ酸）は、アスパラギン酸、グルタミン酸等があげられる。
　前記組合せ（Ａ）において、例えば、前記重鎖可変領域は、下記（H-A1）～（H-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、前記軽鎖可変領域は、下記（L-A1）～（L-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
（H-A1）配列番号２６のアミノ酸配列
配列番号２６：ESGGGLVQPGSPLKLSCAASGFTFSSNWLNWIRQAPGKGLEWVATINPDGSSTYYPDTVKGRFVISKDNAKNTGYLQMNNLRSEDTAMYYCARTGTYYGYNSFFDYWGQGV
（H-A2）配列番号２６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-A3）配列番号２６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-A1）配列番号２７または２８のアミノ酸配列
配列番号２７：DIVLTQSPALAVSLGQRATISCRASQSVSISRYNLMHWYQQKPGQQPKLLIYRASNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTINPVQADDIATYYCQQSRESPPTFGGGTK
配列番号２８：DIVLIQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
（L-A2）配列番号２７または２８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-A3）配列番号２７または２８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記（H-A1）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-a1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-a1）、前記重鎖ＣＤＲ３（H3-a1）を含む配列である。前記（H-A2）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-a1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-a1）、および前記重鎖ＣＤＲ３（H3-a1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号２６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　前記（L-A1）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-a1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-a1）、前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-a1）を含む配列である。前記（L-A2）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-a1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-a1）、および前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-a1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号２７または２８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　本発明の抗体は、例えば、前記重鎖可変領域が、前記（H-A1）であり、前記軽鎖可変領域が、前記（L-A1）であり、この組合せの抗体を、以下、「抗体48_8」ともいう。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～１０個、１～９個、１～８個、１～７個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
組合せ（Ｂ）
　組合せ（Ｂ）の抗体等は、例えば、抗体8_6群ともいう。前記組合せ（Ｂ）において、前記重鎖可変領域は、下記重鎖ＣＤＲ１、下記重鎖ＣＤＲ２および下記重鎖ＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、下記軽鎖ＣＤＲ１、下記軽鎖ＣＤＲ２および下記軽鎖ＣＤＲ３を含む。
前記重鎖ＣＤＲ１：（H1-b1）～（H1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ２：（H2-b1）～（H2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ３：（H3-b1）～（H3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ１：（L1-b1）～（L1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ２：（L2-b1）～（L2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ３：（L3-b1）～（L3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
（H1-b1）配列番号８（GFTFSNYY）のアミノ酸配列
（H1-b2）配列番号８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-b3）配列番号８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-b1）配列番号９（ISTSGSRT）のアミノ酸配列
（H2-b2）配列番号９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-b3）配列番号９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-b1）配列番号１０（ARHEFGAFDY）のアミノ酸配列
（H3-b2）配列番号１０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-b3）配列番号１０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-b1）配列番号１１（QSLLYSGNQKNY）のアミノ酸配列
（L1-b2）配列番号１１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-b3）配列番号１１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-b1）配列番号４０（WAS）のアミノ酸配列
（L2-b2）配列番号４０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-b3）配列番号４０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-b1）配列番号１２（QQYYDTPYT）のアミノ酸配列
（L3-b2）配列番号１２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-b3）配列番号１２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記各ＣＤＲにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記各ＣＤＲにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
　前記組合せ（Ｂ）において、例えば、前記重鎖可変領域は、下記（H-B1）～（H-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、前記軽鎖可変領域は、下記（L-B1）～（L-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
（H-B1）配列番号２９のアミノ酸配列
配列番号２９：VQLVESGGGLVQPGRSLKLSCAASGFTFSNYYMAWVRHAPKKGLEWVATISTSGSRTYYPDSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLKSEDTATYYCARHEFGAFDYWGQGVTV
（H-B2）配列番号２９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-B3）配列番号２９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-B1）配列番号３０のアミノ酸配列
配列番号３０：DIVMTQSPSSLAVSAGETVTINCKSSQSLLYSGNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRQSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQQYYDTPYTFGAGTK
（L-B2）配列番号３０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-B3）配列番号３０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記（H-B1）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-b1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-b1）、前記重鎖ＣＤＲ３（H3-b1）を含む配列である。前記（H-B2）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-b1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-b1）、および前記重鎖ＣＤＲ３（H3-b1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号２９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　前記（L-B1）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-b1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-b1）、前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-b1）を含む配列である。前記（L-B2）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-b1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-b1）、および前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-b1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号３０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　本発明の抗体は、例えば、前記重鎖可変領域が、前記（H-B1）であり、前記軽鎖可変領域が、前記（L-B1）であり、この組合せの抗体を、以下、「抗体8_6」ともいう。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～１０個、１～９個、１～８個、１～７個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
組合せ（Ｃ）
　組合せ（Ｃ）の抗体等は、例えば、抗体51_1群ともいう。前記組合せ（Ｃ）において、前記重鎖可変領域は、下記重鎖ＣＤＲ１、下記重鎖ＣＤＲ２および下記重鎖ＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、下記軽鎖ＣＤＲ１、下記軽鎖ＣＤＲ２および下記軽鎖ＣＤＲ３を含む。
前記重鎖ＣＤＲ１：（H1-c1）～（H1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ２：（H2-c1）～（H2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ３：（H3-c1）～（H3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ１：（L1-c1）～（L1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ２：（L2-c1）～（L2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ３：（L3-c1）～（L3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
（H1-c1）配列番号１３（GFTFSNAA）のアミノ酸配列
（H1-c2）配列番号１３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-c3）配列番号１３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H2-c1）配列番号１４（IRTKPNNYAT）のアミノ酸配列
（H2-c2）配列番号１４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-c3）配列番号１４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-c1）配列番号１５（TALGLPHWFSY）のアミノ酸配列
（H3-c2）配列番号１５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-c3）配列番号１５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-c1）配列番号１６（QSLLYSNGNTY）のアミノ酸配列
（L1-c2）配列番号１６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-c3）配列番号１６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-c1）配列番号４１（LVS）のアミノ酸配列
（L2-c2）配列番号４１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-c3）配列番号４１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-c1）配列番号１７（VQSTHAPYT）のアミノ酸配列
（L3-c2）配列番号１７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-c3）配列番号１７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記各ＣＤＲにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記各ＣＤＲにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
　前記組合せ（Ｃ）において、例えば、前記重鎖可変領域は、下記（H-C1）～（H-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、前記軽鎖可変領域は、下記（L-C1）～（L-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
（H-C1）配列番号３１のアミノ酸配列
配列番号３１：ESLKISCAASGFTFSNAAMYWVRQAPGKGLEWIARIRTKPNNYATYYAESVKGRFTISRDDSKSMVYLQMDNLKTEDTAMYYCTALGLPHWFSYWGQGTPV
（H-C2）配列番号３１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-C3）配列番号３１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-C1）配列番号３２のアミノ酸配列
配列番号３２：TQTPPTLSATIGQSVSISCRSSQSLLYSNGNTYLNWLLQRPGQPPQLLIYLVSRLESGVPNRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDLGVYYCVQSTHAPYTFGAGTKQELK
（L-C2）配列番号３２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-C3）配列番号３２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記（H-C1）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-c1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-c1）、前記重鎖ＣＤＲ３（H3-c1）を含む配列である。前記（H-C2）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-c1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-c1）、および前記重鎖ＣＤＲ３（H3-c1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号３１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　前記（L-C1）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-c1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-c1）、前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-c1）を含む配列である。前記（L-C2）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-c1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-c1）、および前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-c1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号３２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　本発明の抗体は、例えば、前記重鎖可変領域が、前記（H-C1）であり、前記軽鎖可変領域が、前記（L-C1）であり、この組合せの抗体を、以下、「抗体51_1」ともいう。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～１０個、１～９個、１～８個、１～７個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
組合せ（Ｄ）
　組合せ（Ｄ）の抗体等は、例えば、抗体67_3群ともいう。前記組合せ（Ｄ）において、前記重鎖可変領域は、下記重鎖ＣＤＲ１、下記重鎖ＣＤＲ２および下記重鎖ＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、下記軽鎖ＣＤＲ１、下記軽鎖ＣＤＲ２および下記軽鎖ＣＤＲ３を含む。
前記重鎖ＣＤＲ１：（H1-d1）～（H1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ２：（H2-d1）～（H2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記重鎖ＣＤＲ３：（H3-d1）～（H3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ１：（L1-d1）～（L1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ２：（L2-d1）～（L2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
前記軽鎖ＣＤＲ３：（L3-d1）～（L3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチド
（H1-d1）配列番号１８（GFSLTSYH）または１９（GFSPSTSGIC）のアミノ酸配列
（H1-d2）配列番号１８または１９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H1-d3）配列番号１８または１９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列；
（H2-d1）配列番号２０（IWTGGST）または２１（ICREDSK）のアミノ酸配列
（H2-d2）配列番号２０または２１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H2-d3）配列番号２０または２１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（H3-d1）配列番号２２（ARAPYNNSDY）または２３（ARRPHTMGITGGYFDY）のアミノ酸配列
（H3-d2）配列番号２２または２３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H3-d3）配列番号２２または２３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L1-d1）配列番号２４（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
（L1-d2）配列番号２４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L1-d3）配列番号２４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L2-d1）配列番号４２（LVS）のアミノ酸配列
（L2-d2）配列番号４２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L2-d3）配列番号４２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L3-d1）配列番号２５（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
（L3-d2）配列番号２５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L3-d3）配列番号２５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記各ＣＤＲにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記各ＣＤＲにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
　前記組合せ（Ｄ）において、例えば、前記重鎖可変領域は、下記（H-D1）～（H-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、前記軽鎖可変領域は、下記（L-D1）～（L-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
（H-D1）配列番号３３または３４のアミノ酸配列
配列番号３３：VQLKESGPGLVQPSQTLSLTCTVSGFSLTSYHVSWVRQPPGKGLEWMGVIWTGGSTAYNSLLKSRLSISRDTSKSQVFLKMNSLQTEDTATYYCARAPYNNSDYWGQGV
配列番号３４：KESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSPSTSGICVSWIRQPSGKGLEWLATICREDSKGYNPSLKNRLTISKDTSNNQAFLKITSVDTADTAIYYCARRPHTMGITGGYFDYWGQGV
（H-D2）配列番号３３または３４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（H-D3）配列番号３３または３４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
（L-D1）配列番号３５のアミノ酸配列
配列番号３５：TQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
（L-D2）配列番号３５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
（L-D3）配列番号３５アミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
　前記（H-D1）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-d1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-d1）、前記重鎖ＣＤＲ３（H3-d1）を含む配列である。前記（H-D2）のアミノ酸配列は、例えば、前記重鎖ＣＤＲ１（H1-d1）、前記重鎖ＣＤＲ２（H2-d1）、および前記重鎖ＣＤＲ３（H3-d1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号３３または３４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　前記（L-D1）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-d1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-d1）、前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-d1）を含む配列である。前記（L-D2）のアミノ酸配列は、例えば、前記軽鎖ＣＤＲ１（L1-d1）、前記軽鎖ＣＤＲ２（L2-d1）、および前記軽鎖ＣＤＲ３（L3-d1）のアミノ酸配列をそれぞれ有し、且つ、配列番号３５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列であってもよい。
　本発明の抗体は、例えば、前記重鎖可変領域が、前記（H-D1）であり、前記軽鎖可変領域が、前記（L-D1）であり、この組合せの抗体を、以下、「抗体67_3」ともいう。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、前記同一性は、それぞれ、例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記重鎖可変領域のポリペプチドおよび前記軽鎖可変領域のポリペプチドにおいて、置換等に関する「１個または数個」は、それぞれ、例えば、１～１０個、１～９個、１～８個、１～７個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１および２個、１個である。
　本発明の抗体等の製造方法は、特に制限されず、例えば、前述のアミノ酸配列情報に基づいて、遺伝子工学的に製造することができる。具体的には、例えば、以下のようにして行うことができる。なお、本発明は、この例示には限定されない。
　まず、本発明の抗体等における、前記各領域のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含むベクターを宿主に導入し、形質転換体を得る。そして、前記形質転換体を培養し、前記プロレニン受容体に結合する抗体を含む画分を回収し、得られた回収画分から、前記抗体を単離または精製する。
　前記ベクターとしては、例えば、前記重鎖可変領域をコードする核酸配列を含むベクター、前記軽鎖可変領域をコードする核酸配列を含むベクター等があげられる。前記宿主は、特に制限されず、前記ベクターを導入でき、前記ベクター内の前記核酸配列を発現できるものであればよい。前記宿主としては、例えば、ＨＥＫ細胞、ＣＨＯ細胞、ＮＳＯ細胞、ＳＰ２／０細胞等の哺乳類細胞等があげられる。前記ベクターを宿主に導入する方法は、特に制限されず、公知の方法が採用できる。
　前記形質転換体の培養方法は、特に制限されず、前記宿主の種類に応じて、適宜決定できる。前記抗体を含む画分は、例えば、培養した前記形質転換体を破砕し、液体画分として回収できる。前記抗体の単離または精製は、特に制限されず、公知の方法が採用できる。
　本発明において、前記抗体は、例えば、モノクローナル抗体である。前記モノクローナル抗体は、例えば、動物への免疫により得られるモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体（完全ヒト抗体ともいう）等があげられる。
　前記キメラ抗体は、ヒト以外の動物由来抗体の可変領域と、ヒト抗体の定常領域とを連結した抗体である。前記キメラ抗体は、例えば、以下のようにして作製できる。まず、ヒト以外の動物由来のモノクローナル抗体について、プロレニン受容体と結合する可変領域（Ｖ領域）の遺伝子を調製し、前記可変領域の遺伝子と、ヒト抗体の定常領域（Ｃ領域）の遺伝子とを連結し、これを、さらに発現ベクターに連結する。そして、前記発現ベクターをトランスフェクトした細胞を培養し、培養液中に分泌される目的のキメラ抗体を回収する。これによりキメラ抗体を調製できる。前記可変領域の遺伝子の由来動物は、特に制限されず、例えば、ラット、マウス等があげられる。前記キメラ抗体の製造方法は、これには制限されず、例えば、特公平３－７３２８０号公報に記載の方法等の、公知の方法を参照して製造できる。
　前記ヒト化抗体は、前記ＣＤＲのみをヒト以外の動物由来とし、他の領域をヒト由来とする抗体である。前記ヒト化抗体は、例えば、以下のようにして製造できる。まず、ヒト以外の動物由来のモノクローナル抗体について、前記ＣＤＲの遺伝子を調製し、ヒト抗体の遺伝子、例えば、定常領域に移植（ＣＤＲグラフティング）し、これを、さらに発現ベクターに連結する。そして、前記発現ベクターをトランスフェクトした細胞を培養することによって、培養液中に、目的のＣＤＲを移植したヒト化抗体が分泌される。分泌されるヒト化抗体を回収することによって、調製できる。前記ＣＤＲの由来動物は、特に制限されず、例えば、ラット、マウス等があげられる。ヒト化抗体の製造方法は、これには限定されず、例えば、特表平４－５０６４５８号公報および特開昭６２－２９６８９０号公報等に記載の方法等の、公知の方法を参照して製造できる。
　前記ヒト抗体は、全ての領域がヒト由来の抗体である。前記ヒト抗体は、例えば、ヒト以外の動物への、ヒト抗体遺伝子の導入によって作製できる。前記ヒト抗体遺伝子を導入する動物は、例えば、ヒト抗体産生用のトランスジェニック動物が使用できる。前記動物の種類は、特に制限されず、マウス等があげられる。前記ヒト抗体の製造方法は、例えば、Nature　Genetics,　Vol.7,　p.13-21,　1994；　Nature　Genetics,　Vol.15,　p.146-156,　1997；　特表平４－５０４３６５号公報；　特表平７－５０９１３７号公報；　ＷＯ９４／２５５８５号公報；　Nature,　Vol.368,　p.856-859,　1994；および特表平６－５００２３３号公報等に記載の、公知の方法を参照して製造できる。また、前記ヒト抗体は、例えば、ファージディスプレイ法を用いて製造することもでき、例えば、Marks,　J.　D.　et　al.:　J.　Mol.　Biol.,　Vol.222,　p.581-597,　1991等に記載の、公知の方法を参照して製造できる。
　本発明の抗体等は、例えば、抗原を動物に免疫することによっても調製できる。前記抗原は、例えば、プロレニン受容体の全長アミノ酸配列からなるタンパク質またはそのペプチド断片があげられる。前記ペプチド断片は、例えば、抗原決定基（エピトープ）のみからなるペプチド断片でもよいし、前記抗原決定基を含むペプチド断片でもよい。前記ペプチド断片のアミノ酸残基数は、特に制限されず、例えば、６アミノ酸残基以上、８アミノ酸残基以上、１０アミノ酸残基以上、１５アミノ酸残基以上が好ましい。前記ペプチド断片としては、例えば、前述の配列番号３６のアミノ酸配列における２００－２１３番目のアミノ酸配列（HKHLAKDHSPDLYS：配列番号３７）からなるポリペプチドがあげられる。
　前記動物への免疫により得られるモノクローナル抗体は、例えば、『Current　Protocols　in　Molecular　Biology』(John　Wiley　&　Sons　(1987))、Antibodies:　A　Laboratory　Manual,　Ed.　Harlow　and　David　Lane,　Cold　Spring　Harbor　Laboratory(1988)）等に記載の方法等の、公知の方法を参照して製造できる。具体的には、例えば、抗原で動物を免疫し、前記免疫動物から採取した抗体産生細胞と、自己抗体産生能を欠く骨髄腫細胞（ミエローマ細胞）とを融合させ、ハイブリドーマを作製する。続いて、前記ハイブリドーマから抗体産生細胞をスクリーニングして、クローニングによりハイブリドーマの単一クローンを作製する。そして、このハイブリドーマクローンを動物に投与し、得られた腹腔からモノクローナル抗体を精製する。または、前記ハイブリドーマを培養して、その培養液からモノクローナル抗体を精製する。このように、前記ハイブリドーマクローンを作製することで、特異性が均一なモノクローナル抗体を安定に供給できる。
　前記骨髄腫細胞は、例えば、マウス、ラット、ヒト等の由来であることが好ましい。前記骨髄腫細胞と前記抗体産生細胞とは、例えば、それぞれの由来が同一種でも異種でもよいが、同一種であることが好ましい。
＜遺伝子、発現ベクターおよび形質転換体＞
　本発明のコード遺伝子は、プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片のコード遺伝子であり、前記本発明の抗体または抗原結合断片のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドを含むことを特徴とする。
　本発明のコード遺伝子を発現させることによって、前述した本発明の抗体等を得ることができる。本発明のコード遺伝子の配列は、特に制限されず、前記本発明の抗体等のアミノ酸配列をコードする配列であればよく、センス配列でもアンチセンス配列でもよい。
　本発明の発現ベクターは、プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片の発現ベクターであり、前記本発明のコード遺伝子を含むことを特徴とする。前記発現ベクターにおいて、前記コード遺伝子は、例えば、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片を発現可能に、前記連結用ベクターに連結されている。本発明の発現ベクターは、前記本発明の抗体等を発現できればよく、その他の構成は特に制限されない。
　本発明の発現ベクターは、例えば、前記重鎖可変領域をコードする核酸配列と前記軽鎖可変領域をコードする核酸配列とを含む発現ベクターでもよいし、前記重鎖可変領域をコードする核酸配列を含む発現ベクターと、前記軽鎖可変領域をコードする核酸配列を含む発現ベクターとのセットでもよい。本発明の発現ベクターは、例えば、前記本発明のコード遺伝子を、連結用ベクターに連結することで調製できる。前記コード遺伝子を連結する前記連結用ベクターの種類は、特に制限されず、例えば、ｐＵＣ等があげられる。前記連結用ベクターは、例えば、前記発現ベクターを導入する宿主に応じて、適宜設定することもできる。前記宿主は、特に制限されず、例えば、哺乳類細胞等があげられる。
　本発明の形質転換体は、本発明の抗体等を発現する形質転換体であり、宿主と、前記本発明のコード遺伝子を含むことを特徴とする。本発明の形質転換体は、前記本発明のコード遺伝子を発現可能に有していればよい。前記形質転換体は、例えば、前記本発明の発現ベクターを有することが好ましい。前記発現ベクターを前記宿主に導入する方法は、特に制限されず、公知の方法が採用できる。
＜がんの罹患危険度の試験方法＞
　本発明のがんの罹患危険度の試験方法は、前述のように、プロレニン受容体と、抗体またはその抗原結合断片との結合により、被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を測定する工程を含み、前記抗体またはその抗原結合断片が、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片であることを特徴とする。
　本発明の試験方法は、前記本発明の抗体等を使用することが特徴であって、その他の工程および条件は、特に制限がない。
　本発明の試験方法によれば、例えば、がんの発症の可能性、がんの発症の有無（がん化しているか否か）、がんの進行度および予後の状態等を評価できる。対象となるがんは、前述のように、例えば、消化器がんおよび脳腫瘍があげられる。前記消化器がんは、例えば、消化管がんおよび消化腺がんがあげられ、消化管がんは、例えば、胃がんおよび大腸がん等があげられ、消化腺がんは、例えば、膵臓がんおよび肝臓がんがあげられる。前記脳腫瘍は、例えば、グリオーマ、アストロサイトーマ、中枢神経系原発悪性リンパ腫および海綿上血管腫があげられる。本発明の試験方法によれば、この他に、例えば、腹膜がん等も評価できる。また、本発明によれば、例えば、原発巣のがん、転移がんのいずれであっても試験できる。
　本発明の試験方法において、前記被検者は、例えば、ヒト、ヒトを除く非ヒト動物等があげられ、前記非ヒト動物は、前述のように、例えば、マウス、ラット、イヌ、サル、ウサギ、ヒツジ、ウマ等の哺乳類があげられる。
　本発明の試験方法において、前記生体試料の種類は、特に制限はされず、例えば、生体から分離した、体液、体液由来細胞、器官、組織または細胞等があげられる。前記体液は、例えば、血液があげられ、具体例として、例えば、全血、血清、血漿等があげられる。前記体液由来細胞は、例えば、血液由来細胞があげられ、具体的には、血球、白血球、リンパ球等の血球細胞があげられる。前記生体試料は、例えば、試験対象のがんの種類に応じて、適宜決定できる。前記生体試料は、例えば、試験対象のがんが発生しうる器官由来である。前記器官は、例えば、胃、膵臓、大腸、肝臓等の前記消化器、脳または、腹膜等である。前記脳は、例えば、大脳、側頭葉、後頭葉、小脳、大脳基底核および間葉組織等である。具体例として、前記試験対象が膵臓がんの場合、膵臓由来の組織または細胞が好ましい。前記試験対象が脳腫瘍の場合、脳由来の組織または細胞が好ましい。また、本発明の試験方法によれば、例えば、膵臓等の前記消化器および大脳等の前記脳におけるがんを、血液中のプロレニン受容体の発現量によって試験できる。このため、例えば、患者や医師の負担を軽減できることから、前記生体試料は、全血、血清、または血漿が好ましく、より好ましくは、血清または血漿である。
　測定対象であるプロレニン受容体の発現は、プロレニン受容体タンパク質の発現である。前記測定方法は、特に制限されず、抗体または抗原結合断片と抗原との結合を利用する、公知の方法が採用できる。具体例として、測定方法は、例えば、免疫抗体法、ＥＬＩＳＡ法、フローサイトメトリーおよびウエスタンブロット法等があげられる。
　本発明の試験方法は、例えば、さらに、前記被検者の生体試料（以下、被検生体試料ともいう）におけるプロレニン受容体の発現量を、基準値と比較することにより、前記被検者のがんの罹患危険度を試験する工程を含む。前記基準値は、特に制限されず、例えば、健常者、がん患者および進行ステージごとのがん患者のプロレニン受容体の発現量があげられる。予後の評価の場合、前記基準値は、例えば、同じ被検者の治療後（例えば、治療直後）のプロレニン受容体の発現量であってもよい。
　前記基準値は、例えば、前述のような、健常者および／またはがん患者から単離した生体試料（以下、基準生体試料ともいう）を用いて、得ることができる。また、予後の評価の場合、例えば、同じ被検者から治療後に単離した基準生体試料を用いてもよい。前記基準値は、例えば、前記被検者の被検生体試料と同時に測定してもよいし、予め測定してもよい。後者の場合、例えば、前記被検者の被検生体試料を測定する度に、基準値を得ることが不要となるため、好ましい。前記被検者の被検生体試料と前記基準生体試料は、例えば、同じ条件で採取し、同じ条件でプロレニン受容体の測定を行うことが好ましい。
　前記比較工程において、被検者のがんの罹患危険度の評価方法は、特に制限されず、前記基準値の種類によって適宜決定できる。具体例として、前記被検者の被検生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記健常者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも有意に高い場合、前記がん患者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量と同じ場合（有意差がない場合）、および／または、前記がん患者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも有意に高い場合、前記被検者は、がんに罹患する危険性があるまたは危険性が高いと評価できる。また、前記被検者の被検生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記健常者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量と同じ場合（有意差が無い場合）、前記健常者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも有意に低い場合、および／または、前記がん患者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも有意に低い場合、前記被検者は、がんに罹患する危険性が無いまたは危険性が低いと評価できる。また、前記比較工程において、前記被検者の被検生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を、前記進行ステージごとのがん患者の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量と比較することで、がんの進行度を評価できる。具体的には、前記被検者の被検生体試料が、例えば、いずれかの進行ステージの前記基準生体試料と同程度の発現量の場合（有意差がない場合）、前記被検者は、前記進行ステージの可能性があると評価できる。
　前記比較工程において、予後の状態を評価する場合、例えば、前述と同様に評価判断してもよいし、基準値として、同じ被検者の治療後の基準生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を使用して評価することもできる。具体例として、前記被検者の被検生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記基準値よりも有意に高い場合、前記被検者は、前記治療後、再発または悪化の危険性があると評価できる。また、前記被検者の被検生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記基準値と同じ場合（有意差がない場合）、および／または、前記基準値よりも有意に低い場合、前記被検者は、前記治療後、再発の危険性が無いもしくは危険性が低いと評価できる。
　本発明においては、例えば、同じ被検者の生体試料を経時的に採取し、前記生体試料におけるプロレニン受容体発現量を比較してもよい。これによって、例えば、経時的に発現量が増加すれば、罹患の可能性が高くなった等の判断が可能であり、経時的に発現量が低下すれば、罹患の可能性が低くなったまたは治癒してきた等の判断が可能である。
＜試験試薬＞
　本発明の試験試薬は、前記本発明のがんの罹患危険度の試験方法に使用する試験試薬であって、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とする。本発明の試験試薬によれば、前記本発明のがんの罹患危険度の試験方法を簡便に行える。本発明の試験試薬は、前記本発明の抗体等を含むことが特徴であり、その他の構成は、特に制限されない。
　本発明の試験試薬は、例えば、さらに、プロレニン受容体タンパク質と前記本発明の抗体等との結合を検出する検出物質を含んでもよい。前記検出物質は、例えば、前記抗体等に対する検出可能な標識化抗体と、前記標識に対する基質等の組合せがあげられる。
＜がんの診断方法および診断試薬＞
　本発明のがんの診断方法は、プロレニン受容体と、抗体またはその抗原結合断片との結合により、被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を測定する工程を含み、前記抗体またはその抗原結合断片が、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片であることを特徴とする。また、本発明のがんの診断試薬は、前記本発明の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とする。なお、本発明は、前記本発明の試験方法および試験試薬の説明を援用できる。
＜がん治療方法およびがん治療薬＞
　本発明のがん治療薬は、前述のように、前記本発明の抗体または抗原結合断片を含むことを特徴とする。本発明の治療方法は、がんの治療方法であって、患者に前記本発明のがん治療薬を投与する工程を含むことを特徴とする。本発明は、例えば、プロレニン受容体をがんターゲットとし、前記本発明の抗体等により、プロレニン受容体タンパク質の機能を阻害もしくは中和すること等で、がんを治療できる。
　本発明のがん治療薬の投与条件は、特に制限されず、例えば、対象となるがん疾患の種類、進行度、患者の年齢等に応じて、投与形態、投与時期、投与量等を適宜設定できる。投与対象は、例えば、ヒト、ヒトを除く非ヒト動物等があげられ、前記非ヒト動物は、前述のように、例えば、マウス、ラット、イヌ、サル、ウサギ、ヒツジ、ウマ等の哺乳類があげられる。
　次に、本発明の実施例について説明する。ただし、本発明は、下記実施例により制限されない。市販の試薬は、特に示さない限り、それらのプロトコルに基づいて使用した。
［実施例１］モノクローナル抗体の作製
　本発明の抗プロレニン受容体抗体を作製した。特に示さない限り、一般的な方法を採用した。
（抗原の作製）
　前記ヒトプロレニン受容体タンパク質（配列番号３６）のペプチド断片として、２００－２１３番目のポリペプチド（配列番号３７）を調製し、そのアミノ末端に、キャリアタンパクとして、ホラ貝タンパク質（キーホールリンベットヘモシアニン：ＫＬＨ）を、公知の方法により連結した。これを抗原とした。
（ハイブリドーマの作製）
　前記抗原をラットに免疫した後、リンパ節を摘出した。前記リンパ節のＢ細胞と、マウスミエローマ細胞（ＳＰ２／０細胞）とを用いて、ラットリンパ節法により細胞融合を行い、培養した。前記培養により形成された７０のハイブリドーマコロニーを、それぞれ新たな培地に分け、さらに培養した。培地は、１０％ＦＢＳおよび１０％ＢＭ(Roche)を含むＧＩＴ(コージンバイオ)を使用した。
（スクリーニング）
　前記培養後、各培地における培養液について、ＷＳＴ－１アッセイおよびＢＬＩ法により、抗プロレニン受容体抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングを行った。
　まず、前記７０コロニーの培養液について、それぞれ、ＷＳＴ－１アッセイにより、抗プロレニン受容体抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングを行った。２４ウェルプレートの培地に、1×１０４細胞／ウェルとなるようにヒト膵臓がん細胞株ＰＫ－１を播種した。つぎに、５０μＬまたは１０μＬの前記培養液を加え、４８時間培養した。前記培養後、さらに、１００μＬの水溶性テトラゾリウム塩（ＷＳＴ－１）試薬を各ウェルに添加し、２時間インキュベートした。そして、各ウェルについて、プレートリーダーを用いて、４５０ｎｍにおける吸光度を測定し、増殖能力を測定した。この結果、７０コロニーのうち高い増殖能力を示した１８コロニーを選択した。
　続いて、前記１８コロニーの培養液について、ＢＬＩ法（Bio-Layer　Interferometry；バイオレイヤー干渉法）により、抗プロレニン受容体抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングを行った。具体的には、ＢＬＩｔｚ（商標、Pall　ForteBio社製）を用い、各培養液中の抗体と前記プロレニン受容体のペプチド断片との結合度を測定した。そして、結合度の高かった４コロニーを選択した。
（純化）
　つぎに、選択した前記４コロニーについて、さらに純化を行い、結果として、４種類のハイブリドーマ（４８＿８、６７＿３、５１＿１および８＿６）を単離した。これらのハイブリドーマから生成される抗プロレニン受容体抗体として、４種類のモノクローナル抗体（４８＿８、６７＿３、５１＿１および８＿６）を得た。抗体４８＿８、６７＿３、５１＿１および８＿６のアイソタイプは、それぞれ、ＩｇＭ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＭであった。
（配列の決定）
　抗プロレニン受容体抗体４８＿８、８＿６、５１＿１および６７＿３、について、アミノ酸配列を決定した。これらの結果を以下に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　なお、以下の実施例においては、前記ハイブリドーマの培養液を遠心分離して、得られた上清を、抗体サンプルとして使用した。前記上清における各抗体（抗体４８＿８、６７＿３、５１＿１および８＿６）の濃度は、それぞれ、７、４．５、４、１０μｇ／μＬであった。
[実施例２]抗がん活性の測定
　本発明の抗プロレニン受容体抗体が膵がん細胞の抑制能を有することを確認した。
　２４ウェルプレートの培地に、1×１０４細胞／ウェルとなるようにヒト膵臓がん細胞株ＰＫ－１を播種した。つぎに、前記ウェルに、前記実施例１で調製した各抗体サンプル５０μＬまたは１０μＬを加え、４８時間培養した。前記培養後、前記ウェルに、さらに、１００μＬの水溶性テトラゾリウム塩（ＷＳＴ－１）試薬を添加し、２時間インキュベートした。そして、各ウェルについて、プレートリーダーを用いて、４５０ｎｍにおける吸光度を測定し、増殖能力を測定した。コントロールは、前記抗プロレニン受容体抗体の抗体サンプルに代えて、ヒトＩｇＧ１抗体（ＷＡＫＯ社製）を同濃度となるように投与した以外は、同様にして、測定を行った。そして、前記コントロールの増殖能力を１として、各抗体サンプルについて、増殖能力の相対値を求めた。ＷＳＴ－１アッセイは、PreMix　WST-1　Cell　proliferation　Assay　System　(Catalog　No.MK400,　TakaraBio)を使用し、その使用説明書にしたがって行った。
　これらの結果を図１～図３に示す。図１は、抗体４８＿８を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。図１において、（Ａ）は、抗体サンプル５０μＬの結果を示し、（Ｂ）は、抗体サンプル１０μＬの結果を示す。図１において、縦軸は、細胞増殖能の相対値を示す。図１に示すように、抗体４８＿８により、膵がん細胞の細胞増殖が抑制された。
　図２は、抗体６７＿３および抗体５１＿１を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果である。図２において、（Ａ）は、抗体サンプル５０μＬの結果を示し、（Ｂ）は、抗体サンプル１０μＬの結果を示す。図２において、縦軸は、細胞増殖能の相対値を示す。図２に示すように、抗体６７＿３および抗体５１＿１により、膵がん細胞の細胞増殖が抑制された。
　図３は、抗体８＿６の抗体サンプル１０μＬを用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示す。図３において、縦軸は、細胞増殖能の相対値を示す。図３に示すように、抗体８＿６により、膵がん細胞の細胞増殖が抑制された。
　これらの結果から、本発明の抗プロレニン受容体抗体が、膵がん細胞の抑制能を有することが確認できた。
[実施例３]Ｗｎｔシグナル経路の関与
　本発明の抗プロレニン受容体抗体による膵がん細胞の抑制において、Ｗｎｔシグナル経路の関与を確認した。
　前記実施例１で調製した上清について、抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３の濃度を定量した。具体的には、前記上清について、SDS－PAGEとCBB染色を行い、ＩｇＧの重鎖と軽鎖とをローディングコントロールとして定量した。そして、前記上清（前記抗体量１００μｇ）を用いて、実施例２と同様にして、膵がん細胞の増殖能力を測定した。
　これらの結果を、図４（Ａ）に示す。図４は、抗体４８＿８、抗体５１＿１または抗体６７＿３を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示す。図４（Ａ）において、左から、ヒトＩｇＧ１、抗体４８＿８、抗体５１＿１または抗体６７＿３の結果である。図４（Ａ）において、縦軸は、細胞増殖能の相対値（Ｆｏｌｄ）を示す。
　図４（Ａ）に示すように、ヒトＩｇＧと比較して、抗体４８＿８、抗体５１＿１または抗体６７＿３は、いずれも、膵がん細胞の細胞増殖能は十分に抑制されていることがわかった。
　つぎに、抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３の上清（抗体量１００μｇ）に、７５ｎｇのＷｎｔ３ａ(Catalog　No.　5036-WNP-010,　R&D　systems)を添加した以外は、実施例２と同様にして、膵がん細胞の増殖能力を測定した。
　これらの結果を、図４（Ｂ）に示す。図４（Ｂ）は、抗体４８＿８、抗体５１＿１または抗体６７＿３を用いたＷＳＴ－１アッセイの結果を示す。図４（Ｂ）は、Ｗｎｔ３ａ添加の結果であり、左から１番目のヒトＩｇＧは、Ｗｎｔ３ａ無添加のヒトＩｇＧ１の結果であり、左から２番目のヒトＩｇＧは、Ｗｎｔ３ａ添加のヒトＩｇＧ１の結果であり、３番目および４番目は、それぞれ、Ｗｎｔ３ａ添加の抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３の結果である。図４（Ｂ）において、縦軸は、細胞増殖能の相対値（Ｆｏｌｄ）を示す。
　図４（Ｂ）に示すように、ヒトＩｇＧは、Ｗｎｔ３無添加と比べて、Ｗｎｔ３ａ添加では、膵がん細胞の細胞増殖能が増加していた。これに対し、抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３は、Ｗｎｔ３ａを添加しても、ヒトＩｇＧのＷｎｔ３無添加よりも十分に低い相対値を示し、膵がん細胞の細胞増殖能が十分に抑制されていることがわかった。このことから、抗体４８＿８、抗体５１＿１および抗体６７＿３が、Ｗｎｔシグナル経路を阻害し、膵がん細胞の細胞増殖を抑制していることが示唆された。
　これらの結果から、本発明の抗プロレニン受容体抗体による膵がん細胞の抑制において、Ｗｎｔシグナル経路が関与していることが示された。
[実施例４]がんの成長抑制
　本発明の抗プロレニン受容体抗体をマウスに投与することにより、膵がん細胞の成長が抑制されることを確認した。
　６週齢のオスのＮｕｄｅマウスに、５×１０６細胞のヒト膵臓がん細胞株ＰＫ－１を移植した。その後、移植後３日から移植後３３日の間、３日おきに、２００μｇの抗体を含む１００μＬのＰＢＳを、眼窩静脈内投与した。抗体は、前記実施例１で調製した、抗体４８＿８、抗体６７＿３または抗体５１＿１の抗体サンプルを使用した。そして、移植後０、６、１２、１８、２４、３０および３６日目に、腫瘍の体積を測定した。移植後３６日目に、マウスを安楽死させ、腫瘍を摘出し、腫瘍の重量を測定した。コントロールは、前記抗プロレニン受容体抗体に代えて、ヒトＩｇＧ１抗体（ＷＡＫＯ社製）を投与した以外は同様にして、測定を行った。各群につき、ｎ＝１０とした。
　図５は、移植後０、６、１２、１８、２４、３０日目における腫瘍の体積を示すグラフであり、（Ａ）は、抗体４８＿８および抗体６７＿３の結果を示し、（Ｂ）は、抗体５１＿１の結果を示す。図５において、縦軸は、腫瘍の体積（ｍｍ３）を示し、横軸は、移植後の日数を示す。図５（Ａ）のグラフにおいて、丸はコントロール群、四角は抗体４８＿８投与群、三角は抗体６７＿３投与群を示す。図５（Ｂ）のグラフにおいて、丸はコントロール群、四角は抗体５１＿１投与群を示す。
　図５（Ａ）および（Ｂ）に示すように、コントロール群は、移植後の日数が経過するにつれて、腫瘍の体積が増加した。一方、抗体４８＿８投与群、抗体６７＿３投与群および抗体５１＿１投与群は、いずれの移植後の日数においても、コントロール群と比較して、腫瘍の大きさが小さかった。このことから、抗体４８＿８、抗体６７＿３および抗体５１＿１の投与により、膵がん細胞の成長が抑制されることが確認できた。
　図６は、移植後３６日目に摘出した腫瘍の写真であり、（Ａ）は、抗体４８＿８および抗体６７＿３の結果を示し、（Ｂ）は、抗体５１＿１の結果を示す。図６（Ａ）において、上段はコントロール群、中段は抗体４８＿８投与群、下段は抗体６７＿３投与群における腫瘍を示す。図６（Ｂ）において、上段はコントロール群、下段は抗体５１＿１投与群における腫瘍を示す。
　図６（Ａ）および（Ｂ）に示すように、コントロール群と比較して、抗体４８＿８投与群、抗体６７＿３投与群および抗体５１＿１投与群において、いずれも、腫瘍の大きさが小さくなっていた。このことから、抗体４８＿８、抗体６７＿３および抗体５１＿１の投与により、膵がん細胞の成長が抑制されることが確認できた。
　図７は、移植後３６日目に摘出した腫瘍の体積を示すグラフであり、（Ａ）は、抗体４８＿８および抗体６７＿３の結果を示し、（Ｂ）は、抗体５１＿１の結果を示す。図７において、縦軸は腫瘍の体積（ｍｍ３）を示し、横軸は各群を示す。
　図７（Ａ）および（Ｂ）に示すように、コントロール群と比較して、抗体４８＿８投与群、抗体６７＿３投与群および抗体５１＿１投与群において、いずれも、腫瘍の大きさが小さかった。このことから、抗体４８＿８、抗体６７＿３および抗体５１＿１の投与により、膵がん細胞の成長が抑制されることが確認できた。
　これらの結果から、本発明の抗プロレニン受容体抗体が、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいても、膵がん細胞の抑制能を有することが確認できた。
[実施例５]抗がん活性の抑制
　本発明の抗プロレニン受容体抗体が、各種がん細胞の抑制能を有することを確認した。
　前記がん細胞として、マウス大腸がんＣＴ２６細胞、ヒト大腸がんＤＬＤ－１細胞、ヒト大腸がんＨＣＴ１１６細胞、およびヒトグリオブラストーマＵ２５１ＭＧ細胞を使用し、前記抗体サンプルの添加量を、１ウェルあたり１００μｇ／５００μＬとした以外は、前記実施例２と同様にして、前記４種類の抗体サンプル（抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６）について、各細胞に対する増殖能力の相対値を求めた。コントロールは、前記抗プロレニン受容体抗体の抗体サンプルに代えて、コントロールメディウム（ＣＭ、前記実施例２の培地）のみを添加したコントロール１と、前記ＣＭおよびヒトＩｇＧ１抗体（ＷＡＫＯ社製）を添加したコントロール２とを用いた。コントロールにおいて、ＣＭの添加量は、ウェルあたり、前記抗体サンプルの液量と同量とし、ヒトＩｇＧ１抗体の添加量は、ウェルあたり、前記抗体サンプルと同様とした。
　これらの結果を図８～図１１に示す。各図は、前記各がん細胞に対して前記４種類の抗体サンプルを使用した、ＷＳＴ－１アッセイの結果である。図８は、マウス大腸がんＣＴ２６細胞の結果（ｎ＝４）であり、図９は、ヒト大腸がんＤＬＤ－１細胞（ｎ＝４）の結果であり、図１０は、ヒト大腸がんＨＣＴ１１６細胞（ｎ＝４）の結果であり、図１１は、ヒトグリオブラストーマＵ２５１ＭＧ細胞（ｎ＝４）の結果である。Ｐ値は、前記コントロール２に対する値とした。
　図８～図１１に示すように、コントロールと比較して、いずれの抗体サンプルも、前記各がん細胞それぞれに対し、有意に増殖抑制を示した。
　これらの結果から、本発明の抗プロレニン受容体抗体が、大腸がん細胞および脳腫瘍（グリオブラストーマ）のがん細胞に対する増殖抑制能を有することが確認できた。
[実施例６]抗がん活性の測定
　本発明の抗プロレニン受容体抗体が膵がん細胞の抑制能を有することを確認した。
　前記抗体サンプルの添加量を、ウェルの培養液あたり１００μｇ／ｍＬとした以外は、前記実施例２と同様にして、前記４種類の抗体サンプル（抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６）について、膵がん細胞ＰＫ－１に対する増殖能力の相対値を求めた。参照例は、前記実施例１の抗体と同じ前記抗プロレニン受容体の抗原を用いて得られたポリクローナル抗体Ａｂを使用し、その添加量は、前記抗体サンプルと同様とした。コントロールは、前記抗プロレニン受容体抗体の抗体サンプルに代えて、ビークルのコントロール１と、前記ヒトＩｇＧ１抗体（ＷＡＫＯ社製）を添加したコントロール２とを用いた。コントロール２において、ヒトＩｇＧ１抗体の添加量は、前記抗体サンプルと同様とした。
　これらの結果を図１２に示す。図１２は、膵がん細胞に対して前記４種類の抗体サンプルを使用した、ＷＳＴ－１アッセイの結果である。図１２に示すように、前記４種類の抗体サンプル（モノクローナル抗体）は、膵がん細胞に対して、増殖抑制を示し、コントロールに対して有意差を示した。
　図１２において、参照例のポリクローナル抗体を使用した場合、増殖能力の相対値は０．９５であり、実施例のモノクローナル抗体を使用した場合、増殖能力の相対値は、０．８～０．９であるため、実施例によれば、参照例よりも、１０－１５％程度の強い抑制能を示すといえる。図１２において、矢印は、参照例との差を示す。そこで、ＷＳＴ－１アッセイにおける１０－１５％の抑制能の違いが、増殖が抑制されたがんについて、どの程度の大きさの違いに反映されるかを推定した。
　論文（Kanaji et al., Respiratory Research, 2017, 18, page118）において、培養肺がん細胞（ＬＣＣ細胞）に関するＷＳＴ－１アッセイの結果と、皮下移植したがんのサイズの結果とが示されている。この結果の概要を、図１３に示す。図１３において、（Ａ）は、ＷＳＴ－１アッセイの結果であり、（Ｂ）は、前記論文のＦｉｇ．１における腫瘍サイズの結果である。図１３において、Ａは、Ａ（ＥＢＣ１）の単独使用、Ａ+Ｂは、Ａ（ＥＢＣ１）とＢ（ＨＦＬ１）との併用、Ａ+Ｃは、Ａ（ＥＢＣ１）とＣ（ＭＲＣ５）との併用である。
　図１３（Ａ）において、ＡとＣとの併用に対して、Ａ単独は、ＷＳＴ－１値が１５％程度低い結果である（増殖が抑制されている）。図１３（Ａ）において、矢印は、Ａ単独とＡ＋Ｃとの差（１５％）を示す。そこで、図１３（Ｂ）のグラフを確認すると、処理開始から８日目において、ＡとＣとの併用は、腫瘍サイズが１２００ｍｍ３であるのに対して、Ａ単独は、腫瘍サイズが４００ｍｍ３であり、前者の３分の１程度にまで、腫瘍の大きさが抑制されている。
　つまり、この結果に基づけば、本実施例におけるモノクローナル抗体も、参照例のポリクローナル抗体を使用した場合と比較して、膵がんの大きさは、前記論文と同程度の大きさにまで抑制されると推測できる。
[実施例７]抗がん活性の抑制
　本発明の抗プロレニン受容体抗体が、乳がん細胞の抑制能を有することを確認した。
　前記がん細胞として、マウス大腸がんＣＴ２６細胞、ヒト大腸がんＤＬＤ－１細胞、マウス乳がん４Ｔ１細胞を使用し、前記抗体サンプルの添加量を、１ウェルあたり２００μｇ／５００μＬとした以外は、前記実施例２と同様にして、前記４種類の抗体サンプル（抗体４８＿８、抗体６７＿３、抗体５１＿１および抗体８＿６）について、前記細胞に対する増殖能力の相対値を求めた。コントロールは、前記抗プロレニン受容体抗体の抗体サンプルに代えて、前記ＣＭのみを添加したコントロール１と、前記ＣＭおよびヒトＩｇＧ１抗体（ＷＡＫＯ社製）を添加したコントロール２とを用いた。コントロールにおいて、ＣＭの添加量は、ウェルあたり、前記抗体サンプルの液量と同量とし、ヒトＩｇＧ１抗体の添加量は、ウェルあたり前記抗体サンプルと同様とした。
　これらの結果を図１４に示す。各図は、前記マウス乳がん細胞に対して前記４種類の抗体サンプルを使用した、ＷＳＴ－１アッセイの結果である。Ｐ値は、前記コントロール２に対する値とした。
　図１４に示すように、コントロールと比較して、いずれの抗体サンプルも、前記がん細胞それぞれに対し、有意に増殖抑制を示した。
　これらの結果から、本発明の抗プロレニン受容体抗体が、乳がん細胞に対する増殖抑制能を有することが確認できた。
　以上、実施形態を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本発明のスコープ内で当業者が理解しうる様々な変更をすることができる。
　この出願は、２０１６年１１月２日に出願された日本出願特願２０１６－２１５３８５を基礎とする優先権を主張し、その開示の全てをここに取り込む。
　本発明によれば、新規のプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片を提供できる。このため、本発明は、医薬の分野等において、極めて有用といえる。

Claims (13)

  1. 重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、
    前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、下記（Ａ）から（Ｄ）のいずれかの組合せであり、
    プロレニン受容体に結合することを特徴とするプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片。
    組合せ（Ａ）
    前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記重鎖ＣＤＲ１が、下記（H1-a1）～（H1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-a1）～（H2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-a1）～（H3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-a1）～（L1-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-a1）～（L2-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-a1）～（L3-a3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
    （H1-a1）配列番号１（GFTFSSNW）のアミノ酸配列
    （H1-a2）配列番号１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H1-a3）配列番号１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H2-a1）配列番号２（INPDGSST）のアミノ酸配列
    （H2-a2）配列番号２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H2-a3）配列番号２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H3-a1）配列番号３（ARTGTYYGYNSFFDY）のアミノ酸配列
    （H3-a2）配列番号３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H3-a3）配列番号３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L1-a1）配列番号４（QSVSISRYNL）または５（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
    （L1-a2）配列番号４または５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L1-a3）配列番号４または５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L2-a1）配列番号３８（RAS）または３９（LVS）のアミノ酸配列
    （L2-a2）配列番号３８または３９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L2-a3）配列番号３８または３９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L3-a1）配列番号６（QQSRESPPT）または７（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
    （L3-a2）配列番号６または７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L3-a3）配列番号６または７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｂ）
    前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-b1）～（H1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-b1）～（H2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-b1）～（H3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-b1）～（L1-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-b1）～（L2-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-b1）～（L3-b3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
    （H1-b1）配列番号８（GFTFSNYY）のアミノ酸配列
    （H1-b2）配列番号８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H1-b3）配列番号８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H2-b1）配列番号９（ISTSGSRT）のアミノ酸配列
    （H2-b2）配列番号９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H2-b3）配列番号９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H3-b1）配列番号１０（ARHEFGAFDY）のアミノ酸配列
    （H3-b2）配列番号１０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H3-b3）配列番号１０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L1-b1）配列番号１１（QSLLYSGNQKNY）のアミノ酸配列
    （L1-b2）配列番号１１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L1-b3）配列番号１１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L2-b1）配列番号４０（WAS）のアミノ酸配列
    （L2-b2）配列番号４０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L2-b3）配列番号４０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L3-b1）配列番号１２（QQYYDTPYT）のアミノ酸配列
    （L3-b2）配列番号１２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L3-b3）配列番号１２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｃ）
    前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
    前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-c1）～（H1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-c1）～（H2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-c1）～（H3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-c1）～（L1-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-c1）～（L2-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-c1）～（L3-c3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
    （H1-c1）配列番号１３（GFTFSNAA）のアミノ酸配列
    （H1-c2）配列番号１３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H1-c3）配列番号１３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H2-c1）配列番号１４（IRTKPNNYAT）のアミノ酸配列
    （H2-c2）配列番号１４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H2-c3）配列番号１４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H3-c1）配列番号１５（TALGLPHWFSY）のアミノ酸配列
    （H3-c2）配列番号１５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H3-c3）配列番号１５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L1-c1）配列番号１６（QSLLYSNGNTY）のアミノ酸配列
    （L1-c2）配列番号１６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L1-c3）配列番号１６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L2-c1）配列番号４１（LVS）のアミノ酸配列
    （L2-c2）配列番号４１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L2-c3）配列番号４１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L3-c1）配列番号１７（VQSTHAPYT）のアミノ酸配列
    （L3-c2）配列番号１７のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L3-c3）配列番号１７のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｄ）
    前記重鎖可変領域が、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記重鎖ＣＤＲ１が、（H1-d1）～（H1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ２が、（H2-d1）～（H2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記重鎖ＣＤＲ３が、（H3-d1）～（H3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    前記軽鎖可変領域が、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を含み、
    　前記軽鎖ＣＤＲ１が、（L1-d1）～（L1-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ２が、（L2-d1）～（L2-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、
    　前記軽鎖ＣＤＲ３が、（L3-d1）～（L3-d3）のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
    （H1-d1）配列番号１８（GFSLTSYH）または１９（GFSPSTSGIC）のアミノ酸配列
    （H1-d2）配列番号１８または１９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H1-d3）配列番号１８または１９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H2-d1）配列番号２０（IWTGGST）または２１（ICREDSK）のアミノ酸配列
    （H2-d2）配列番号２０または２１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H2-d3）配列番号２０または２１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （H3-d1）配列番号２２（ARAPYNNSDY）または２３（ARRPHTMGITGGYFDY）のアミノ酸配列
    （H3-d2）配列番号２２または２３のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H3-d3）配列番号２２または２３のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L1-d1）配列番号２４（KSVSTSGYSY）のアミノ酸配列
    （L1-d2）配列番号２４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L1-d3）配列番号２４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L2-d1）配列番号４２（LVS）のアミノ酸配列
    （L2-d2）配列番号４２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L2-d3）配列番号４２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L3-d1）配列番号２５（QHIRELTRS）のアミノ酸配列
    （L3-d2）配列番号２５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L3-d3）配列番号２５のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
  2. 重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、
    前記重鎖可変領域および前記軽鎖可変領域が、下記（Ａ）～（Ｄ）のいずれかの組合せであり、
    プロレニン受容体に結合することを特徴とするプロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片。
    組合せ（Ａ）
    重鎖可変領域が、（H-A1）～（H-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-A1）～（L-A3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
    （H-A1）配列番号２６のアミノ酸配列
    配列番号２６：ESGGGLVQPGSPLKLSCAASGFTFSSNWLNWIRQAPGKGLEWVATINPDGSSTYYPDTVKGRFVISKDNAKNTGYLQMNNLRSEDTAMYYCARTGTYYGYNSFFDYWGQGV
    （H-A2）配列番号２６のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H-A3）配列番号２６のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L-A1）配列番号２７または２８のアミノ酸配列
    配列番号２７：DIVLTQSPALAVSLGQRATISCRASQSVSISRYNLMHWYQQKPGQQPKLLIYRASNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTINPVQADDIATYYCQQSRESPPTFGGGTK
    配列番号２８：DIVLIQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
    （L-A2）配列番号２７または２８のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L-A3）配列番号２７または２８のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｂ）
    重鎖可変領域が、（H-B1）～（H-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-B1）～（L-B3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
    （H-B1）配列番号２９のアミノ酸配列
    配列番号２９：VQLVESGGGLVQPGRSLKLSCAASGFTFSNYYMAWVRHAPKKGLEWVATISTSGSRTYYPDSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLKSEDTATYYCARHEFGAFDYWGQGVTV
    （H-B2）配列番号２９のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H-B3）配列番号２９のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L-B1）配列番号３０のアミノ酸配列
    配列番号３０：DIVMTQSPSSLAVSAGETVTINCKSSQSLLYSGNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRQSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQQYYDTPYTFGAGTK
    （L-B2）配列番号３０のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L-B3）配列番号３０のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｃ）
    重鎖可変領域が、（H-C1）～（H-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-C1）～（L-C3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
    （H-C1）配列番号３１のアミノ酸配列
    配列番号３１：ESLKISCAASGFTFSNAAMYWVRQAPGKGLEWIARIRTKPNNYATYYAESVKGRFTISRDDSKSMVYLQMDNLKTEDTAMYYCTALGLPHWFSYWGQGTPV
    （H-C2）配列番号３１のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H-C3）配列番号３１のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L-C1）配列番号３２のアミノ酸配列
    配列番号３２：TQTPPTLSATIGQSVSISCRSSQSLLYSNGNTYLNWLLQRPGQPPQLLIYLVSRLESGVPNRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDLGVYYCVQSTHAPYTFGAGTKQELK
    （L-C2）配列番号３２のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L-C3）配列番号３２のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    組合せ（Ｄ）
    重鎖可変領域が、（H-D1）～（H-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、軽鎖可変領域が、（L-D1）～（L-D3）のいずれかのアミノ酸配列からなるポリペプチドである組合せ
    （H-D1）配列番号３３または３４のアミノ酸配列
    配列番号３３：VQLKESGPGLVQPSQTLSLTCTVSGFSLTSYHVSWVRQPPGKGLEWMGVIWTGGSTAYNSLLKSRLSISRDTSKSQVFLKMNSLQTEDTATYYCARAPYNNSDYWGQGV
    配列番号３４：KESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSPSTSGICVSWIRQPSGKGLEWLATICREDSKGYNPSLKNRLTISKDTSNNQAFLKITSVDTADTAIYYCARRPHTMGITGGYFDYWGQGV
    （H-D2）配列番号３３または３４のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （H-D3）配列番号３３または３４のアミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
    （L-D1）配列番号３５のアミノ酸配列
    配列番号３５：TQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGP
    （L-D2）配列番号３５のアミノ酸配列と８０％以上の同一性のアミノ酸配列
    （L-D3）配列番号３５アミノ酸配列において、１個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列
  3. ヒト定常領域を含む、請求項１または２記載の抗体またはその抗原結合断片。
  4. プロレニン受容体と、抗体またはその抗原結合断片との結合により、被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を測定する工程を含み、
    前記抗体またはその抗原結合断片が、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片であることを特徴とする、がんの罹患危険度を試験する方法。
  5. 前記がんが、消化器がんである、請求項４記載の試験方法。
  6. 前記消化器がんが、膵臓がん、胃がん、大腸がんおよび肝臓がんからなる群から選択された少なくとも１つである、請求項５記載の試験方法。
  7. さらに、前記被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量を、基準値と比較することにより、前記被検者のがんの罹患危険度を試験する工程を含み、前記基準値が、健常者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量またはがん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量である、請求項４から６のいずれか一項に記載の試験方法。
  8. 前記試験工程において、前記被検者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量が、前記健常者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも高い場合、前記がん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量と同じ場合または、前記がん患者の生体試料におけるプロレニン受容体の発現量よりも高い場合に、前記被検者は、がんに罹患する危険性があるとする、請求項７記載の試験方法。
  9. 前記生体試料が、血液である、請求項４から８のいずれか一項に記載の試験方法。
  10. 前記生体試料が、消化器由来の試料である、請求項４から８のいずれか一項に記載の試験方法。
  11. 前記消化器が、膵臓、胃、大腸および肝臓からなる群から選択された少なくとも１つである、請求項１０記載の試験方法。
  12. 請求項４から１１のいずれか一項に記載のがんの罹患危険度の試験方法に使用する試験試薬であって、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とする試験試薬。
  13. プロレニン受容体に結合する結合物質を含み、
    前記結合物質が、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片を含むことを特徴とするがん治療薬。
PCT/JP2017/039702 2016-11-02 2017-11-02 プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途 WO2018084236A1 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2016215385 2016-11-02
JP2016-215385 2016-11-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2018084236A1 true WO2018084236A1 (ja) 2018-05-11

Family

ID=62076750

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2017/039702 WO2018084236A1 (ja) 2016-11-02 2017-11-02 プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2018084236A1 (ja)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014042148A1 (ja) * 2012-09-11 2014-03-20 国立大学法人香川大学 がんマーカーおよびその用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014042148A1 (ja) * 2012-09-11 2014-03-20 国立大学法人香川大学 がんマーカーおよびその用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NISHIYAMA, AKIRA, ANTIBODIES FOR (PRO) RENIN RECEPTORS CONTROL PANCREATIC CANCER WNT / BETA-CATENIN ACTIVATION AND GROWTH, vol. 90, no. 2, 2014, pages 754 08 - 2 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2018138058A (ja) 間葉及び上皮間葉形質転換循環腫瘍細胞のための特異的検出ツール
JP5788384B2 (ja) 形質転換増殖因子アルファに結合し、Ｒａｓ遺伝子変異癌に対して増殖抑制活性を有する抗体
HUE030578T2 (en) Use of Human Leukemia Inhibitor Antibody (LIF) and Antibodies to LIF to Treat Diseases Related to Unwanted Cell Proliferation
KR102197478B1 (ko) 식도암을 검출 및 치료하기 위한 조성물 및 방법
WO2020168555A1 (zh) Cd3抗原结合片段及其应用
CN109988240B (zh) 抗gpc-3抗体及其用途
KR102428255B1 (ko) 위암의 검출 및 치료를 위한 조성물 및 방법
JP6977105B2 (ja) Ｉｇｆ−１ｒ抗体および癌の診断のためのその使用
US20220127374A1 (en) ANTIBODIES AGAINST hEPCR
KR102507685B1 (ko) 난소암의 검출 및 치료를 위한 조성물 및 방법
WO2019045086A1 (ja) 活性型もしくは潜在型ＴＧＦ−β１特異的抗体の用途
CN115298216A (zh) 抗体或其抗原结合片段、其制备方法及医药用途
WO2022237647A1 (zh) 针对dll3的结合分子及其应用
US20220289843A1 (en) Anti-cd19 antibodies and uses thereof
WO2018084236A1 (ja) プロレニン受容体に対する抗体またはその抗原結合断片、およびその用途
CN103130896B (zh) 抗细胞表面异位表达的单克隆抗体及其制备方法和用途
AU2021209740A1 (en) SEMG2 antibody and use thereof
TW201840588A (zh) 抗ｇｐｒ２０抗體
KR20240004375A (ko) Il-38-특이적 항체

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 17866651

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 17866651

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP