JP2008532526A - サンプル内の検体を検出または定量化するためのアッセイを実施するためのシステムおよび方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、米国仮出願第60/659,874号(2005年3月10日出願)の利益を主張し、当該出願の内容は、本明細書において参考により援用される。
本発明は、一般的に、同時に複数の核酸アッセイを実施するための自動分析器に関し、より具体的には、リアルタイムおよびエンドポイント増幅アッセイ双方を含む、複数の核酸増幅アッセイを実施するためのシステムと方法に関する。本発明は、リアルタイム増幅手順に続き、複数の反応容器の内容物を継続的に処理するための機器と方法にも関する。本発明はさらに、核酸増幅反応を実施する前に、反応容器中の増幅阻害物質の存在を減少させる方法にも関する。
本発明による自動診断用分析器は、図1および2における参照番号50により広く指示される。内部フレーム構造62を覆って設けられるハウジング60を含む分析器50は、スチールで作られることが好ましい。分析器50は、分析器を移動可能とするようフレーム構造62に構造的に取り付けられたキャスタ輪64上に支持されることが好ましい。
分析器50の操作、また上述のステーション、構成要素、およびモジュールの構成、連携、および相互作用は、分析器50によって実施されてよい1つのタイプのアッセイ実施における、単一の試験サンプルに対する分析器50の操作を記述することにより、説明される。ここに記載されるステーション、構成要素、およびモジュールのうち1つ以上の使用を必要とするその他の診断アッセイも、分析器50によって実施してよい。ここに記載される特定のアッセイ手順は、分析器50のさまざまなステーション、構成要素、およびモジュールの操作および相互作用の例示を目的とするに過ぎず、限定するものではない。診断試験技術分野の専門家には、本発明の分析器50によって、さまざまな化学的および生物学的アッセイが、自動化された手段により実施可能であることは明らかである。
好ましいMTUは、Homerらによる、米国特許第6,086,827の「Reaction Receptacle Apparatus」により開示される多槽反応容器の実施例である。図58に示すように、MTU160は、好ましくは5本である複数の個別の反応管162を備える。上端が開口し、下端が閉鎖した円筒管の形状であることが好ましい反応管162は、MTU160のいずれかの側にそって縦方向に延びる下向きの段部を画定する接続リブ構造164により、互いに接続される。1つの実施例では、MTU160の各反応管162の寸法は12×75mmであるが、分析器50は、独立してまたは多槽反応容器の一部として提供される、異なる寸法の反応容器を収容するよう容易に適合することが可能である。
本発明による下方シャーシの実施例は、図52〜54に示される。下方シャーシ1100は、黒のポリウレタン粉体塗装を施したスチールフレーム1101、シャーシ下方に配置される引出し式水滴トレイ1102、右側引出し1104、および左側引出し1106を含む。左側引出し1106は、下方シャーシ1100内の事実上中央に配置される。下方シャーシ1100の左側は、さまざまな電源システム構成要素、および例えば取り付けプラットフォーム1154に取り付けられる7つのシリンジポンプ1152、下方シャーシ1100床面の振動絶縁装置(図示せず)上に取り付けられることが好ましい真空ポンプ1162、電源ユニット1156、パワーフィルタ1158、およびファン1160など、その他の分析器機構を収納する。
サンプル管320に含まれるサンプル、および管320は、分析器50外の管トレイ300に装填される。サンプル管320を運搬するトレイ300は、跳ね上げ式回転台ドア80を開けることにより提供される到達開口部を通して、サンプルリング250上に設置される。
主に図5および6に示されるように、好ましい実施例の第二のリングアセンブリは、ピペットチップホイール350であり、底部には円形リング352、円形内周および5つの円周的に間隔があいた半径方向に突出した区域370を画定する上パネル374、および上パネル374をリング352から隔て、また上パネル374およびリング352を通ってライザー354内に延びる機械的留め具356によって正しい位置に把持されることが好ましい、複数の略長方形ライザー354を備える。5つの長方形開口部358は、上パネル374の区域370それぞれの近接に形成され、長方形箱376は、パネル374の下に、各開口部358につき1つが配置される。上パネル374、リング352、およびライザー354は、切削アルミニウムから作られることが好ましく、箱376は、ステンレス鋼板素材から形成されることが好ましい。
図7〜12を参照すると、多軸撹拌器400は、固定台402の外周辺に形成される開口419を通して延びる機械的留め具(図示せず)を用いて、治具プレート130に取り付けられる固定台402のセンターベアリング430に支持される、中心シャフト428に回転自在に取り付けられる、回転盤構造414(図10参照)を含む。カバー部材404は、回転盤414に取り付けられ、共に回転する。
サンプル調製を開始するために、ピペットユニット456は、磁気オリゴ試薬であることが好ましい対象捕獲試薬を移動するために、多軸撹拌器400に運搬される容器440から、MTU160の各反応管162内へと移動させる。対象捕獲試薬は、対象検体に結合し、固定することができる支持材料を含む。支持材料は、磁気反応性粒子を備えることが好ましい。サンプル調製手順の最初に、右側ピペットアセンブリ450のピペットユニット456は、プローブ457がトレイ372のうち1つ中のピペットチップ上に動作可能に位置付けられる位置まで、横方向および縦方向に移動する。
ここで右側および左側移送機構500および502の詳細を説明する。図13〜16を参照すると、右側移送機構500(左側移送機構502と同様に)は、図解される実施例では、プレート512上のスロット510の半径方向におよび摺動自在に変位可能なフック取り付け構造508から延びる、延長可能な分配フック506を含む、操作フック部材を有する。プレート512最上部のハウジング504は、MTU160の上部を収納するよう構成される開口部505を有する。プレート512に取り付けられるステッピングモーター514は、ねじ式シャフト516を回転させるが、これは親ねじ機構と連携して、好ましいフック部材駆動アセンブリのモーター514およびねじ式シャフト516構成要素である、分配フック506を図13および15に示す伸展位置から、図14に示す収縮位置へと移動させる。ステッピングモーター514は、改造したHISシリーズ46000であることが好ましい。HISステッピングモーターは、Haydon Switch and Instrument,Inc.(コネチカット州ウォーターベリー)から市販されている。HISモーターは、ねじ式シャフト516の一端からねじ山を切削して改造し、シャフト516がフック取り付け構造508を収納できるようにする。
1つ以上温度勾配ステーション700は、治具プレート130およびサンプルリング250下方に配置されることが好ましい(図では、サンプルリング250下方に配置される温度勾配ステーションは示されない)。回転撹拌器550内のMTU160の内容物を混合したあと、右側移送機構500は、アッセイプロトコルにより、MTU160を右側回転撹拌器550から温度勾配ステーション700に移動してよい。
勾配ステーション700における十分な温度上昇に続き、アッセイ手順の概説を続けると、右側移送機構500は、勾配ステーション700からMTUを回収し、MTU160をTCインキュベータ600内に設置する。分析器50の好ましい動作モードでは、TCインキュベータ600は、約60℃でMTU160の内容物をインキュベートする。一部の試験では、アニールインキュベーション温度が±0.5℃を超えて変動せず、増幅インキュベーション(後述)温度が±0.1℃を超えて変動しないことが重要である。そのため、インキュベータは一貫した均一温度を提供するよう設計される。
図24〜25を参照すると、各磁性分離ステーション800は、上部801および下部803を有するモジュールハウジング802を含む。取り付けフランジ805および806は、適切な機械的留め具によって、磁性分離ステーションを基準プレート82に取り付けるための下部803から延びる。ロケータピン807および811は、ハウジング802の下部803の底部から延びる。ピン807および811は、基準プレート82に形成される開口(図示せず)と合い、ハウジング802が留め具により固定される前に、基準プレート82上の磁性分離ステーションを位置付ける援助をする。
図32〜34に示すように、左回転攪拌器522(および右回転攪拌器550)は、上述した磁性分離ステーション800の下方ハウジングステーション803および回転攪拌器アセンブリ828と同じように構成され、同じように動作する。具体的には、回転攪拌器550(552)は、正面プレート551と、裏面プレート559と、回転攪拌器550(552)を基準プレート82に取り付けるための取り付けフランジ555、556とを含む、ハウジング554を含む。挿入開口部557は、ハウジング554のフロントエッジ内に形成される。MTU運搬装置558は、その底部に付着された分岐プレート560と、MTUを収容する運搬装置558の内部キャビティ内へ延びるクリップ562の対向する突起物とともに運搬装置558の後部に付着されたMTU留めクリップ562とを有する。回転攪拌器アセンブリ564は、モーター取り付けプレート567に取り付けられた駆動モーター566と、偏心ピン570を有する駆動輪568と、偏心ピン573を有する遊動輪572と、ベルト574とを含む。駆動モーター566は、好ましくはステッピングモーターであり、最も好ましくは、Oriental Motors Ltd.(日本、東京)から市販されている、型番PK245‐02AのVEXTAである。ベルト574は、好ましくは、SDP/SI(ニューヨーク州、ニューハイドパーク)から市販されている、型番A6G16‐170012のタイミングベルトである。回転攪拌器アセンブリ564は、回転経路においてMTU運搬装置558を移動させてMTUの内容物を攪拌するために、偏心ピン570、573を介してMTU運搬装置558と連結される。駆動輪568は、センサー取り付けブラケット579に付着されたセンサー578と連動して、MTU160を回転撹拌器552(550)へ挿入し、MTU160を当該回転攪拌器から取り出すためのMTU運搬装置558の適切な位置決めを検証する、ロケータプレート576を含む。センサー578は、好ましくは、Optek Technology,Inc.(テキサス州、カロルトン)から市販されている、Optek Technology,Inc.型番OPB980T11のセンサーである。
ここで、試薬冷却ベイ900について説明する。
図40〜42Cを参照すると、照度計950の第1の実施形態は、ハウジング950内に電子ユニット(図示せず)を含む。電子ユニットに繋がれた光電子増倍管(PhotoMultiplier Tube;PMT)956は、PMTプレート955を通ってハウジング954内に延び、PMT956の正面端部は開口953と並んでいる。好ましいPMTは、型番HC135としてHamamatsu Corp.(ニュージャージー州、ブリッジウォーター)から市販されている。好ましいPMTを使用した信号測定は、既知の光子計数システムに基づくものである。
アンプリコン失活ステーション750において、専用滴下線(図示せず)により、緩衝化漂白剤等の失活溶液をMTU160の反応管162に添加し、MTU160の残留流体中の核酸を失活させる。核酸失活溶液の例は、例えば、Dattaguptaら、米国特許第5,612,200号、および、Nelsonら、米国特許出願第2005‐0202491 A1号公報に開示されている。反応管の流体内容物は、専用吸引線に接続された管状部材(図示せず)によって吸引され、下方シャーシ1100内の専用液状廃棄物容器に収集される。管状部材は、好ましくは、4.7インチの長さと、0.041インチの内径とを有する。
リアルタイム増幅アッセイを使用して、例えば、病原体またはウイルス由来のサンプル内における対象核酸の存在および量を決定することができる。サンプル内の対象核酸の分量を決定することにより、実務家はサンプル内の有機体またはウイルスの量または投入量を概算することができる。一用途において、リアルタイム増幅アッセイは、C型肝炎ウイルス(Hepatitis C Virus;HCV)およびヒト免疫不全ウイルス(Human Immunodeficiency Virus;HIV)等、血液感染性の病原体のための輸血を目的とする血液もしくは血液製剤を選別するため、または、病原体もしくはウイルスに感染した患者における治療法の効能を監視するために使用してよい。リアルタイム増幅アッセイは、遺伝子発現判定だけでなく、診断目的のために使用してもよい。上述した本発明の好ましい用途において、所望の有機体またはウイルスの存在は、特定の使用条件下で、当該所望の有機体またはウイルス由来の対象核酸配列の(すなわち、有機体もしくはウイルスから得られた対象核酸、またはその増幅産物内に含有される)サンプル中における特異性を示すプローブを使用して決定される。特異性を示すために、プローブは、選択的アッセイ条件下において、プローブが、サンプル内に存在し得るいずれの非対象核酸でもなく標的配列またはその補体と検出可能なようにハイブリダイズするよう、標的またはその補体に対して実質的に相補的なヌクレオチド塩基配列を有していなくてはならない。
RFU1(t)=k1RFUA(t)+k2RFUB(t)+k3RFUC(t)+k4RFUD(t)
RFU2(t)=k5RFUA(t)+k6RFUB(t)+k7RFUC(t)+k8RFUD(t)
RFU3(t)=k9RFUA(t)+k10RFUB(t)+k11RFUC(t)+k12RFUD(t)
RFU4(t)=k13RFUA(t)+k14RFUB(t)+k15RFUC(t)+k16RFUD(t)
ここで、
RFU1(t)=光検出モジュール#1において測定された信号
RFU2(t)=光検出モジュール#2において測定された信号
RFU3(t)=光検出モジュール#3において測定された信号
RFU4(t)=光検出モジュール#4において測定された信号
RFUA(t)、RFUB(t)、RFUC(t)、RFUD(t)=各色素A、B、C、Dのそれぞれによる放出信号の部分
k1〜k16=定数
である。
RFUA(t)=f1(RFU1(t),RFU2(t),RFU3(t),RFU4(t))
RFUB(t)=f2(RFU1(t),RFU2(t),RFU3(t),RFU4(t))
RFUC(t)=f3(RFU1(t),RFU2(t),RFU3(t),RFU4(t))
RFUD(t)=f4(RFU1(t),RFU2(t),RFU3(t),RFU4(t))。
RFU(t)=Y0+ala2[ea2(t−a3)/(1+ea2(t−a3))]ln(1+ea2(t−a3)) (3)
後述するような変数Y0、a1、a2、およびa3の初期概算は、曲線当てはめ方程式への入力であり、最終方程式ならびにY0、a1、a2、およびa3の最終値を産出するために、例えばMicrosoft EXCELのSOLVER関数を使用して、方程式をRFUデータに当てはめる反復解法が行われる。
Y0=基線;初期値はRFU(1)であってよい。
a1=RFU(t)データの急傾斜の部分(成長期)に関する;0.05がa1の適切な初期概算となり得る。
a2=RFU(t)データの急傾斜の部分(成長期)に関する;1.0がa2の適切な初期概算となり得る。
a3=基線と傾斜特徴との間の遷移に関する;RFUmaxの25%の直前にくる値に達する時間またはサイクルがa3の適切な初期概算である。
RFU(t)=Y0+b(1−exp(−(t−d*ln(1−2^(−1/e))−c)/d))^e (4)
結果として生じるさらに別の典型的な方程式は、方程式(5)によって与えられる。
RFU(t)=Y0+b/(1+exp(−(t−d*ln(2^(1/e)−1)−c)/d))^e (5)
いずれの場合も、上述したように、最終方程式およびY0の最終値ならびにその他のパラメータを産出するために、例えばMicrosoft EXCELのSOLVER関数を使用して方程式を解くことができ、当該解は、RFU(t)データから減じられるバックグラウンドであるY0を産出する。
Claims (178)
- 複数の反応容器のそれぞれに存在する対象核酸の量を定量的に決定するために、前記反応容器の内容物を処理するための方法であって、該方法は、
a)加熱器に複数の反応容器を連続的に提供する自動ステップであって、各反応容器には、対象核酸内に含有される標的配列またはその補体の存在を、前記加熱器の温度条件下で増幅および検出するのに十分な試薬が提供されているステップと、
b)ステップa)に従って前記加熱器に提供された反応容器のそれぞれの中で、前記標的配列およびその補体を含有する、増幅産物の存在と関連付けられた信号の量を周期的に測定する自動ステップと、
c)ステップb)において得られた前記測定結果に基づいて、それぞれの反応容器中に存在する前記対象核酸の量を定量化する自動ステップと、
を包含し、
前記反応容器の少なくとも一部は、前記反応容器の少なくとも一部の内容物がステップb)〜ステップc)に従って処理される際に、ステップa)に従って前記加熱器に連続的に提供される、
方法。 - 前記反応容器は、自動反応容器移送システムを使用して前記加熱器に提供される、請求項1に記載の方法。
- ステップa)〜ステップc)に従って処理された内容物を有する反応容器は、ステップa)〜ステップc)に従って処理するための内容物を有する反応容器が前記加熱器に連続的に提供される際に、前記自動反応容器移送システムを使用して、前記加熱器から連続的に除去される、請求項2に記載の方法。
- 前記自動反応容器移送システムは、前記反応容器を前記加熱器に提供するための第1の回転可能な移送機構を含む、請求項2から3までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記自動反応容器移送システムは、前記反応容器を前記加熱器から除去するための第2の回転可能な移送機構を含む、請求項4に記載の方法。
- 前記加熱器は、回転軸の周囲を回転可能な反応容器運搬装置を含む、請求項1から5までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記加熱器は、密閉型インキュベータであって、該密閉型インキュベータは、前記反応容器を収納したり、前記インキュベータから除去したりするための1つ以上のドアを有する、請求項1から6までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記インキュベータは、前記インキュベータ内で反応容器を収納および移動させるための、固定ハウジング内に含有された回転可能な反応容器運搬装置を含む、請求項7に記載の方法。
- 前記増幅および検出試薬は、前記反応容器が前記加熱器に提供された後に、前記反応容器に提供される、請求項1から8までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記増幅試薬は、プライマーまたはプロモータープライマー、ヌクレオシド三リン酸、および、前記加熱器の温度条件下で前記対象核酸にハイブリダイズされた前記プライマーまたはプロモータープライマーの3´端を延長することができる核酸ポリメラーゼを含む、請求項1から9までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記温度条件は等温である、請求項1から10までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記検出試薬は、前記加熱器の温度条件下で前記標的配列またはその補体に結合し、それによって前記信号を放出することができる、自己ハイブリタイズする、検出可能なように標識されたプローブを含む、請求項1から11までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記プローブは分子ビーコンまたは分子トーチであり、かつ相互に作用するラベル対を含む、請求項12に記載の方法。
- 前記ラベル対は、蛍光プローブと消光剤とを含む、請求項13に記載の方法。
- 複数の前記反応容器のそれぞれからの前記信号を同時に測定するステップをさらに包含する、請求項1から13までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記信号は、前記加熱器と動作可能なように関連付けられた、複数の相隔たる蛍光信号検出装置で測定される、請求項15に記載の方法。
- 複数の前記反応容器それぞれの中の異なる信号を同時に測定するステップをさらに包含する、請求項1から16までのいずれか一項に記載の方法であって、前記異なる信号のそれぞれは異なる増幅産物と関連付けられる、方法。
- 前記異なる信号は、前記加熱器と動作可能なように関連付けられ、かつそれと相対的に移動可能な、複数の相隔たる蛍光信号検出装置で測定される、請求項17に記載の方法。
- ステップa)の前に、前記反応容器から増幅阻害物質を除去するのに十分な試薬および条件に、前記反応容器のぞれぞれの中に存在するサンプル物質を曝露する自動ステップをさらに包含する、請求項1から18までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記曝露するステップは、
各反応容器に固体支持材料を提供するステップであって、前記固体支持材料は前記対象核酸を結合することができる、提供するステップと、
各反応容器内の前記固体支持材料を単離するステップと、
各反応容器から前記サンプル物質の少なくとも一部を除去するステップと、
前記固体支持材料を洗浄液で洗浄するステップと、
を含む、
請求項19に記載の方法。 - 前記固体支持材料は磁気反応性粒子であり、前記単離するステップは前記反応容器に隣接して置かれた磁石によって実行される、請求項20に記載の方法。
- 前記曝露するステップの後に、自動反応容器移送システムを使用して前記反応容器を前記加熱器に移送するステップをさらに包含する、請求項19から21までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記自動反応容器移送システムは、回転可能な移送機構を備える、請求項22に記載の方法。
- 各反応容器は、一体的に形成された複数の反応容器の1つである、請求項1から23までのいずれか一項に記載の方法。
- 本方法のステップは、内蔵型分析器ユニットのハウジング内ですべて実行される、請求項1から24までのいずれか一項に記載の方法。
- 複数の反応容器のそれぞれに存在する対象核酸の量を定量的に決定するために、前記反応容器の内容物を処理するためのシステムであって、
(A)温度調節されたインキュベータであって、
(1)その中にインキュベーションチャンバを画定するハウジングであって、反応容器到達開口部を介して前記インキュベーションチャンバへの、またはそこからの反応容器の移動を可能にするための、1つ以上の前記反応容器到達開口部を有するハウジングと、
(2)前記インキュベーションチャンバと熱連通する熱源と、
(3)前記インキュベーションチャンバ内に配置され複数の反応容器ステーションを含む反応容器運搬装置であって、前記反応容器ステーションのそれぞれは少なくとも1つの反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、任意の前記複数の反応容器ステーションを、前記反応容器到達開口部に対する反応容器伝送位置に提示するように構成および配置される、反応容器運搬装置と、
を備えるインキュベータと、
(B)前記反応容器到達開口部を介して、前記反応容器運搬装置へ、またはそこから、反応容器を移送するように構成および配置される、少なくとも1つの移送機構を含む、反応容器移送システムと、
(C)信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号の量を測定するように構成および配置される前記信号測定装置であって、前記信号測定装置は、前記反応容器運搬装置が前記インキュベーションチャンバ内の反応容器を移動させる際に、前記反応容器運搬装置で運搬される該反応容器が前記信号測定装置に近接して動作可能なように連続的に移動されるように、前記反応容器運搬装置に対して置かれ、
前記反応容器運搬装置は、前記インキュベーションチャンバ内の反応容器を移動して、それによって運搬される反応容器を、前記信号測定装置に近接して動作可能なように連続的および周期的に置くように制御され、前記信号測定装置は、前記信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出される信号の量の周期的な測定結果を作成するように制御される、
信号測定装置と、
(D)前記信号測定装置によって作成される周期的な測定結果に基づいて、該反応容器内の該対象核酸の量を定量化するように適合されるマイクロプロセッサと、
を備えるシステム。 - 前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された、信号測定装置移送機構をさらに備える、請求項26に記載のシステムであって、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは、1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、前記反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように制御され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように制御される、
システム。 - 前記ハウジングは信号測定開口部を含み、前記信号測定装置は、前記インキュベーションチャンバの外側において、前記信号測定開口部を介して、前記インキュベーションチャンバ内の反応容器の内容物によって放出される信号の量を測定するための位置に置かれる、請求項26から27までのいずれか一項に記載のシステム。
- 1つを超える信号測定装置を備える、請求項26からまで28のいずれか一項に記載のシステムであって、
各信号測定装置は、反応容器の内容物によって放出される異なる信号を測定するように構成および配置される、
システム。 - 前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構をさらに備える、請求項29に記載のシステムであって、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは、1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置のそれぞれを前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定装置に対応する該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 各信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備え、各蛍光光度計は異なる波長を有する蛍光放出を測定する、請求項29から30までのいずれか一項に記載のシステム。
- 各蛍光光度計は、
該反応容器に励起エネルギーを向けるように構成および配置される励起構成要素であって、各蛍光光度計の該励起構成要素は該反応容器に異なる波長の励起エネルギーを向ける、励起構成要素と、
該反応容器の内容物からの放出エネルギーの量を検出するように構成および配置される検出構成要素であって、各蛍光光度計の該検出構成要素は異なる波長の放出エネルギーを検出する、検出構成要素と、
を備える、
請求項31に記載のシステム。 - 反応容器運搬装置は、回転軸の周囲を回転可能となるように、前記インキュベーションチャンバ内に取り付けられた略円形の回転台を備え、前記反応容器ステーションは、該回転台の周辺部の周囲に置かれる、請求項26から32までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構をさらに備える、請求項33に記載のシステムであって、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは、前記回転台の該回転軸に対して半径方向に配置された1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、前記反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記回転台の該回転軸に対して略半径方向に移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 各反応容器ステーションは、前記回転台内に形成された、半径方向に配向された端部開放スロットを備える、請求項34に記載のシステム。
- 前記信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備える、請求項26から28までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記蛍光光度計は、
該反応容器に励起エネルギーを向けるように構成および配置された励起構成要素と、
該反応容器の内容物からの放出エネルギーの量を検出するように構成および配置された検出構成要素と、
を備える、
請求項36に記載のシステム。 - 前記励起構成要素は励起光ハウジングと励起レンズハウジングとを含み、前記検出構成要素は検出レンズハウジングを含み、前記励起光ハウジングおよび前記検出レンズハウジングは相隔たる相対位置にあり、前記励起レンズハウジングは前記励起光ハウジングと前記検出レンズハウジングとの間に延びる、請求項32または37のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記蛍光光度計は、
励起光を放出するように適合された光放出部と、
第1の光路、第2の光路、および第3の光路を画定する光学素子と、
ビームスプリッタと、
光検出部とを備え、
前記光放出部は、前記第1の光路に対して動作可能なように置かれ、該光路は前記光放出部によって放出される該励起光の少なくとも一部を送るように構成および配置され、
前記ビームスプリッタは、前記第1の光路および前記第2の光路に対して動作可能なように置かれ、かつ、前記第1の光路によって送られた該励起光を受光し、望ましい励起スペクトル成分を有する該受光した励起光の少なくとも一部を前記第2の光路へ向けるように構成および配置され、
前記第2の光路は、前記第2の光路が望ましい励起スペクトル成分を有する該光を反応容器に向けるように、該蛍光光度計に近接して動作可能なように該反応容器に対して置かれ、前記第2の光路は、該反応容器の内容物によって放出される任意の蛍光光の少なくとも一部を受光して、該受光した部分を前記ビームスプリッタに向け、
前記ビームスプリッタは、前記第3の光路に対して動作可能なように置かれ、かつ、前記第2の光路によって送られた該蛍光光を受光し、望ましい励起スペクトル成分を有する該受光した光の少なくとも一部を前記第3の光路に向けるように構成および配置され、
前記光検出部は、前記第3の光路に対して動作可能なように置かれ、該光路は望ましい放出スペクトル成分を有する該光の少なくとも一部を前記光検出部に向けて送るように構成および配置される、
請求項31から38までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記第1の光路の該光学素子は、該光放出部から送られる光のあらゆる望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するようにさらに構成および配置される、請求項39に記載のシステム。
- 前記第1の光路の該光学素子は、前記ビームスプリッタによって前記第1の光路から受光した光が、前記第1の光路の光軸に対して実質的に規定の励起角度範囲内にあるように、前記光放出部から送られた該光を調整するようにさらに構成および配置される、請求項39から40までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第1の光路の該光学素子は、
前記光放出部によって放出された該励起光の少なくとも一部を受光し、受光端から受光した前記励起光を光パイプの反対端に送るために、前記光放出部に対して動作可能なように置かれた、前記受光端を有する前記光パイプと、
前記光パイプの該反対端によって放出された光の方向を変えるように配置および配向された鏡と、
前記鏡によって方向を変えられた光を受光するように置かれ、受光した該光を実質的に規定の励起角度範囲内にコリメートするように構成および配置された、1つ以上のレンズと、
前記1つ以上のレンズによってコリメートされた光を受光するように置かれ、該規定の励起角度範囲内にない実質的にすべての光をブロックするように構成および配置された励起バッフルと、
前記バッフルを通過する光を受光するように置かれ、前記光放出部から送られた該励起光の該望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するように構成および配置された励起フィルタと、
を備える、
請求項39から41までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記第3の光路の該光学素子は、該光検出部に向けて送られた光の任意の望ましくないスペクトル成分の少なくとも一部を排除するように構成および配置される、請求項39から42までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第3の光路の該光学素子は、前記光検出部によって前記第3の光路から受光した該光が、前記第3の光路の光軸に対して実質的に規定の検出角度範囲内にあるように、前記ビームスプリッタから送られた該光を調整するようにさらに構成および配置される、請求項39から43までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第3の光路の該光学素子は、
前記ビームスプリッタから送られた光を受光するように置かれ、該規定の検出角度範囲内にない実質的にすべての光をブロックするように構成および配置された放出バッフルと、
前記放出バッフルを通過する光を受光するように置かれ、前記光検出部に向けて送られた該光の該望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するように構成および配置された放出フィルタと、
前記放出フィルタを通過する光の焦点を、前記光検出部に向けて合わせるように構成および配置された少なくとも1つのレンズと、
を備える、
請求項39から44までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記光放出部および前記光検出部は回路基板に接続される、請求項39から45までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記ビームスプリッタはダイクロイックビームスプリッタを備える、請求項39から46までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第1、第2、および第3の光路は、それぞれ第1、第2、および第3の光軸を含み、かつ(a)前記光軸は前記第2の光軸に対して略垂直であり、(b)前記第2および第3の光軸は略同軸であり、(c)前記ダイクロイックビームスプリッタは前記第1、第2、および第3の光軸に対して約45度の角度で配向される、請求項47に記載のシステム。
- 信号検出装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号を検出するように構成および配置される信号検出装置をさらに備える、請求項26から48までのいずれか一項に記載のシステムであって、
前記信号検出装置は前記インキュベーションチャンバの外に置かれ、
前記反応容器移送システムは、前記インキュベータ内の反応容器のインキュベーションに続いて、該反応容器を前記信号検出装置へ連続的に移送するようにさらに構成および配置される、システム。 - 前記信号検出装置は、反応容器の内容物からの化学発光放出を検出するように構成および配置された照度計を備える、請求項49に記載のシステム。
- 前記反応容器運搬装置は、それぞれ該反応容器ステーションの1つに隣接して配置された磁性仕切りをさらに備え、前記磁性仕切りはそれぞれ、該隣接する反応容器ステーションに運搬された反応容器を磁場に曝露するための1つ以上の磁性素子を含む、請求項26から50までのいずれか一項に記載のシステム。
- 1つ以上の反応容器に存在する対象核酸の量を決定するために、または、1つ以上の該反応容器内における対象核酸の有無を確認するために、複数の反応容器の内容物を処理するためのシステムであって、
(A)その中に反応容器を収納し、該反応容器をインキュベーションチャンバ内で制御された温度条件に曝露するための前記インキュベーションチャンバを含む、少なくとも1つの温度調節されたインキュベータと、
(B)核酸定量システムであって、
(1)各反応容器の内容物によって放出された信号の量を周期的に測定することと、
(2)該周期的測定結果に基づいて、それぞれの反応容器内に存在する対象核酸の量を定量化することと、
によって、該反応容器内の該対象核酸の量を決定するように構成され配置された核酸定量システムと、
(C)核酸検出システムであって、
(1)各反応容器の内容物によって放出された信号を検出することと、
(2)閾値レベルを超える信号が検出されるか否かに基づいて、該反応容器内の該対象核酸の有無を確認することと、
によって、該反応容器内の該対象核酸の存在を確認するように構成および配置された核酸検出システムと、
を備えるシステム。 - 反応容器を前記核酸定量システムへ、またはそこから自動的に移送し、かつ反応容器を前記核酸検出システムへ自動的に移送するように構成および配置された、自動移送システムをさらに備える、請求項52に記載のシステム。
- 前記移送システムは、回転軸の周囲を回転可能な移送機構を備える、請求項53に記載のシステム。
- 前記核酸定量システムは、前記インキュベーションチャンバ内に配置され前記信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の、内容物によって放出される信号の量を測定するように構成および配置された、信号測定装置を備え、
前記核酸検出システムは、前記インキュベーションチャンバとは異なる検出チャンバ内に配置され前記信号検出装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の、内容物によって放出される信号を検出するように構成および配置された、信号検出装置を備える、
請求項52から54までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記信号測定装置を、前記インキュベーションチャンバ内に配置された反応容器に対して近接して動作可能に移動させるように構成および配置された、信号測定装置移送機構をさらに備える、請求項55に記載のシステム。
- 前記信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備える、請求項56に記載のシステム。
- 前記信号検出装置は、反応容器の内容物からの化学発光放出を検出するように構成および配置された照度計を備える、請求項55から57までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記核酸定量システムおよび前記核酸検出システムは、ハウジング内に含有される、請求項55から58までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記信号測定装置および前記信号検出装置は、前記ハウジング内の処理デスク上にある、請求項55から59までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記ハウジングは、内蔵型スタンドアロン分析器ユニットを画定する、請求項60に記載のシステム。
- 該分析器ユニットは移動可能である、請求項61に記載のシステム。
- 前記温度調節されたインキュベータは、前記インキュベーションチャンバ内に配置され複数の反応容器ステーションを含む反応容器運搬装置を含み、前記反応容器ステーションのそれぞれは、少なくとも1つの反応容器を運搬するように構成および配置され、
前記核酸定量システムは、前記信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出される信号の量を測定するように構成および配置された信号測定装置を備え、前記信号測定装置は、前記反応容器運搬装置が前記インキュベーションチャンバ内の反応容器を移動させる際に、前記反応容器運搬装置に運搬された該反応容器が前記信号測定装置に近接して動作可能なように連続的に移動されるように、前記反応容器運搬装置に対して置かれ、
前記反応容器運搬装置は、前記インキュベーションチャンバ内の反応容器を移動して、それによって運搬される反応容器を前記信号測定装置に近接して動作可能なように連続的および周期的に置くように制御され、前記信号測定装置は、前記信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出さる信号の量の周期的な測定結果を作るように制御される、
請求項52に記載のシステム。 - 前記核酸定量システムは、前記信号測定装置によって作られた周期的な測定結果に基づいて、該反応容器内の該対象核酸の量を定量化するように適合されたマイクロプロセッサをさらに備える、請求項63に記載のシステム。
- 前記核酸定量システムは、
前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構をさらに備え、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、前記反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように制御され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように制御される、
請求項63または64に記載のシステム。 - 前記核酸定量システムは、1つを超える信号測定装置を備え、各信号測定装置は、反応容器の内容物によって放出される異なる信号を測定するように構成および配置される、請求項63または64に記載のシステム。
- 前記核酸定量システムは、
前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構をさらに備え、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは、1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、前記反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置のそれぞれを前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定装置に対応する該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
請求項66に記載のシステム。 - 前記反応容器運搬装置は、回転軸の周囲を回転可能となるように、前記インキュベーションチャンバ内に取り付けられた略円形の回転台を備え、前記反応容器ステーションは、該回転台の周辺部の周囲に置かれる、請求項63から67までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記核酸定量システムは、
前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構をさらに備え、
前記反応容器運搬装置の各反応容器ステーションは、前記回転台の該回転軸に対して半径方向に配列された1つを超える反応容器を運搬するように構成および配置され、前記反応容器運搬装置は、前記反応容器ステーションを前記信号測定装置に対する信号測定位置に連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記回転台の該回転軸に対して略半径方向に移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
請求項68に記載のシステム。 - 前記信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備える、請求項63から69までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記蛍光光度計は、
励起光を放出するように適合された光放出部と、
第1の光路、第2の光路、および第3の光路を画定する光学素子と、
ビームスプリッタと、
光検出部と、
を備え、
前記光放出部は、前記第1の光路に対して動作可能なように置かれ、該光路は前記光放出部によって放出された該励起光の少なくとも一部を送るように構成および配置され、
前記ビームスプリッタは、前記第1の光路および前記第2の光路に対して動作可能なように置かれ、かつ、前記第1の光路によって送られた該励起光を受光し、望ましい励起スペクトル成分を有する該受光した励起光の少なくとも一部を前記第2の光路へ向けるように構成および配置され、
前記第2の光路は、前記第2の光路が望ましい励起スペクトル成分を有する該光を前記反応容器に向けるように、該蛍光光度計に近接して動作可能なように反応容器に対して置かれ、前記第2の光路は、該反応容器の内容物によって放出された任意の蛍光光の少なくとも一部を受光して、該受光した部分を前記ビームスプリッタに向け、
前記ビームスプリッタは、前記第3の光路に対して動作可能なように置かれ、かつ、前記第2の光路によって送られた該蛍光光を受光し、望ましい放出スペクトル成分を有する該受光した光の少なくとも一部を前記第3の光路に向けるように構成および配置され、
前記光検出部は、前記第3の光路に対して動作可能なように置かれ、該光路は望ましい放出スペクトル成分を有する該光の少なくとも一部を前記光検出部に向けて送るように構成および配置される、
請求項70に記載のシステム。 - 前記第1の光路の該光学素子は、該光放出部から送られた光の任意の望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するようにさらに構成および配置される、請求項71に記載のシステム。
- 前記第1の光路の該光学素子は、前記ビームスプリッタによって前記第1の光路から受光した光が、前記第1の光路の光軸に対して実質的に規定の励起角度範囲内にあるように、前記光放出部から送られた該光を調整するようにさらに構成および配置される、請求項72に記載のシステム。
- 前記第1の光路の該光学素子は、
前記光放出部によって放出された該励起光の少なくとも一部を受光し、受光端から受光した前記励起光を光パイプの反対端に送るように、前記光放出部に対して動作可能なように置かれた前記受光端を有する、前記光パイプと、
前記光パイプの該反対端によって放出された光の方向を変えるように配置および配向された鏡と、
前記鏡によって方向を変えられた光を受光するように置かれ、受光した該光を実質的に規定の励起角度範囲内にコリメートするように構成および配置された1つ以上のレンズと、
前記1つ以上のレンズによってコリメートされた光を受光するように置かれ、該規定の励起角度範囲内にない実質的にすべての光をブロックするように構成および配置された励起バッフルと、
前記バッフルを通過する光を受光するように置かれ、前記光放出部から送られた該励起光の該望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するように構成および配置された励起フィルタと、
を備える、
請求項73に記載のシステム。 - 前記第3の光路の該光学素子は、該光検出部に向けて送られた光の任意の望ましくないスペクトル成分の少なくとも一部を排除するように構成および配置される、請求項71から74までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第3の光路の該光学素子は、前記光検出部によって前記第3の光路から受光した該光が、前記第3の光路の光軸に対して実質的に規定の検出角度範囲内にあるように、前記ビームスプリッタから送られた該光を調整するようにさらに構成および配置される、請求項75に記載のシステム。
- 前記第3の光路の該光学素子は、
前記ビームスプリッタから送られた光を受光するように置かれ、該規定の検出角度範囲内にない実質的にすべての光をブロックするように構成および配置された放出バッフルと、
前記放出バッフルを通過する光を受光するように置かれ、前記光検出部に向けて送られた該光の該望ましくないスペクトル成分を実質的に除去するように構成および配置された放出フィルタと、
前記放出フィルタを通過する光の焦点を、前記光検出部に向けて合わせるように構成および配置された少なくとも1つのレンズと、
を備える、
請求項76に記載のシステム。 - 前記光放出部および前記光検出部は回路基板に接続される、請求項71から77までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記ビームスプリッタはダイクロイックビームスプリッタを備える、請求項71から78までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記第1、第2、および第3の光路は、それぞれ第1、第2、および第3の光軸を含み、(a)前記第1の光軸は前記第2の光軸に対して略垂直であり、(b)前記第2および第3の光軸は略同軸であり、(c)前記ダイクロイックビームスプリッタは前記第1、第2、および第3の光軸に対して約45度の角度で配向される、請求項79に記載のシステム。
- 前記蛍光光度計は、
励起エネルギーを該反応容器に向けるように構成および配置された励起構成要素と、
該反応容器の内容物からのエネルギー放出の量を検出するように構成および配置された検出構成要素と、
を備える、
請求項70から80までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記核酸検出システムは、
信号検出装置であって、前記信号検出装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号を検出するように構成および配置され、前記インキュベーションチャンバの外側に置かれた信号検出装置を、
備える、
請求項52から54までの、または請求項63から81までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記信号検出装置は、反応容器の内容物からの化学発光放出を検出するように構成および配置された照度計を備える、請求項82に記載のシステム。
- 前記インキュベータ内に設けられた前記反応容器到達開口部を介して、反応容器を前記反応容器運搬装置へ、またはそこから移送するように、および、前記インキュベータ内の反応容器のインキュベーションに続いて、該反応容器を前記信号検出装置へ連続的に移送するように構成および配置された少なくとも1つの移送機構を含む、反応容器移送システムをさらに備える、
請求項70から83までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記反応容器運搬装置は、それぞれ該反応容器ステーションの1つに隣接して配置された磁性仕切りをさらに備え、前記磁性仕切りはそれぞれ、該隣接する反応容器ステーションに運搬された反応容器を磁場に曝露するための1つ以上の磁性素子を含む、請求項63から84までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記信号検出装置は、
隣接して配置された複数の反応容器が該装置によって移動される移送経路を画定する構造と、
前記移送経路に沿って配置され、感光装置に対して動作可能なように置かれた反応容器の内容物から放出された光を検出するように構成および配置された前記感光装置と、
前記移送経路に隣接して置かれ、(1)隣接して配置された反応容器を前記移送経路に沿って移動できるようにする第1の位置と、(2)前記移送経路上に配置され、前記感光装置に対して動作可能なように置かれた前記反応容器の1つと動作可能なように係合する第2の位置と、の間で旋回するように構成および配置された反応容器単離装置であって、前記反応容器単離装置は、前記反応容器単離装置によって係合された、前記動作可能に置かれた反応容器以外のソースからの光が前記感光装置によって検出されるのを実質的に防止するように構成および配置され、前記反応容器単離装置は、前記第1の位置と第2の位置の間を旋回回転するように構成および配置され、前記容器槽単離装置が前記第2の位置にあるときには、前記反応容器単離装置によって係合された反応容器を少なくとも部分的に包囲する構造を含む、反応容器単離装置と、
を備える、
請求項82から85までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記信号検出装置は、該動作可能なように置かれた反応容器の内容物から放出された光の量を前記感光装置が検出するのに十分な時間の間、該隣接して配置された反応容器のそれぞれを前記感光装置に対して動作可能なように置くような方法で、該隣接して配置された複数の反応容器を前記移送経路に沿って移動させるように構成および配置された移送機構をさらに備える、請求項86に記載のシステム。
- 前記信号検出装置は、前記移送経路に隣接して配置された、そこに形成された開口を有する開口パネルをさらに備え、
前記感光装置は、
光電子増倍管であって、前記光電子増倍管の一端の光取り入れ開口部の前に置かれた物体から放出された光を検出するように、および、前記光電子増倍管によって検出された光を示す電子信号を生成するように適合され、前記開口の前の前記移送経路上に配置された反応容器の内容物から放出された光を受光するために、前記開口に対して置かれたその前記光取り入れ開口部を持つ前記移送経路と反対側の前記開口パネルの側の上に置かれた光電子増倍管と、
シャッターアセンブリであって、前記開口パネル上に取り付けられ、光が前記開口を通過するのを可能にする開位置と光が前記開口を通過するのを防止する閉位置との間における前記シャッターアセンブリの移動によって、光を前記開口パネルに形成された前記開口を介して前記光電子増倍管へ選択的に取り入れるように構成および配置されたシャッターアセンブリと、
を備え、
前記シャッターアセンブリは、
それぞれ前記シャッターアセンブリの開位置と閉位置とに対応する開位置と閉位置との間における回転移動のために構成および配置されたシャッターであって、前記シャッターが前記閉位置にあるときには前記開口をブロックし、前記シャッターが前記開位置にあるときには前記開口をブロックしないシャッターと、
前記開位置と閉位置との間の前記シャッターの動力回転をもたらすための、前記シャッターと動作可能なように連結されたモーターと、
を備える、
請求項86または87に記載のシステム。 - 反応容器内に存在する対象核酸を結合するための固体支持材料を単離するように構成および配置された分離装置をさらに備える、請求項52から88までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記分離装置は、該反応容器から流体物質を吸引するように構成および配置された流体吸引機構を含む、請求項89に記載のシステム。
- 前記分離装置は、
該反応容器から該流体サンプルを除去した後に、該反応容器に洗浄液を提供するように構成および配置された流体分注機構と、
該流体分注機構によって該洗浄液が提供された後に、該固体支持材料を再懸濁するために該反応容器を攪拌するように構成および配置された混合装置と、
をさらに備える、
請求項90に記載のシステム。 - 該分離装置は、流体物質を磁場に置くための磁性素子を備える、請求項89から9までのいずれか一項に記載のシステム。
- 各反応容器は、一体的に形成された複数の反応容器の1つである、請求項52から92までのいずれか一項に記載のシステム。
- 複数の反応容器のそれぞれの内容物によって放出された信号を測定するためのシステムであって、該システムは、
複数の反応容器ステーションを含む可動反応容器運搬装置であって、前記反応容器ステーションのそれぞれは2つ以上の反応容器を運搬する、可動反応容器運搬装置と、
信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号の量を測定するように構成および配置された前記信号測定装置であって、前記反応容器運搬装置が反応容器を移動させる際に、前記反応容器運搬装置に運搬された該反応容器が前記信号測定装置に近接して動作可能なように連続的に移動されるように、前記信号測定装置が前記反応容器運搬装置に対して置かれる、信号測定装置と、
前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させるように構成および配置された信号測定装置移送機構と、
を備え、
前記反応容器運搬装置は、各反応容器ステーションを信号測定位置に連続的に提示して、該信号測定位置において該反応容器ステーションに運搬された該反応容器の1つが前記信号測定装置に近接して動作可能であるように制御され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定位置に移動された該反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように制御される、
システム。 - 前記信号測定装置は、前記反応容器運搬装置の下に置かれる、請求項94に記載のシステム。
- 1つを超える信号測定装置を備える、請求項94から95までのいずれか一項に記載のシステムであって、
各信号測定装置は、反応容器の内容物によって放出された異なる信号を測定するように構成および配置され、
前記反応容器運搬装置は、前記信号測定装置に対する信号測定位置に前記反応容器ステーションを連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置のそれぞれを前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定装置に対応する該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 4つの信号測定装置を備える、請求項96に記載のシステム。
- 前記信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備える、請求項94から97までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記蛍光光度計は、
該反応容器に励起エネルギーを向けるように構成および配置された励起構成要素と、
該反応容器の内容物からのエネルギー放出の量を検出するように構成および配置された検出構成要素と、
を備える、
請求項98に記載のシステム。 - 請求項94から99までのいずれか一項に記載のシステムであって、
(a)前記反応容器運搬装置は、回転台の周辺部の周囲に置かれた前記反応容器ステーションと共に回転軸の周囲を回転可能となるように取り付けられた、略円形の回転台を備え、各反応容器ステーションは、前記回転台の該回転軸に対して半径方向に配置された2つ以上の反応容器を備え、
(b)前記回転台の回転は、前記各反応容器ステーションを信号測定位置に連続的に提示し、該信号測定位置において、前記反応容器ステーションに運搬された放射状に配置された反応容器の1つが、前記信号測定装置に近接して動作可能であり、
(c)前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記回転台に対して略半径方向に移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された放射状に配置された反応容器のそれぞれに隣接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 前記信号測定装置移送機構は、
前記回転台の該回転軸に対して略垂直に配向された固定プレートと、
前記信号測定装置と動作可能に関連付けられ、前記回転台の該回転軸に対して略半径方向に前記固定プレートに取り付けられたトラックを含む平行移動アセンブリであって、前記信号測定装置は前記平行移動アセンブリに取り付けられ、前記トラックに沿って移動可能である、平行移動アセンブリと、
を備える、
請求項100に記載のシステム。 - 前記信号測定装置を前記平行移動アセンブリに取り付けるための取り付けブラケットをさらに備える、請求項101に記載のシステムであって、
前記平行移動アセンブリは前記取り付けブラケットが付着される軸受要素をさらに含み、前記軸受要素は前記トラックに沿って平行移動するように構成および配置される、
システム。 - 前記トラックに沿った所定位置に位置し、前記トラックに沿った前記所定位置において前記信号測定装置の存在を検出するように構成および配置されるセンサーをさらに備える、請求項101から102までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記信号測定装置移送機構は、
前記固定プレートに隣接して回転可能に取り付けられたカムディスクであって、前記平行移動アセンブリの前記トラックは前記カムディスクの回転軸に対して略放射状に配置され、前記カムディスクはカムスロットを含み、前記カムスロットは、該カムスロットと該カムディスクの回転軸との間の半径方向の距離が前記カムスロットの一端から前記カムスロットの反対端までで変動するように前記カムディスク上に配置された、カムディスクと、
前記カムディスクの動力回転をもたらすために、前記カムディスクと動作可能なように連結されたモーターと、
係合ピンであって、前記信号測定装置と関連付けられ、かつ前記カムディスクの動力回転が前記係合ピンを前記カムスロットに沿って横断させるように、前記カムスロットと係合され、それによって、前記カムディスクの該回転軸と前記係合ピンが係合された該カムスロットの部分との間の半径方向の距離の変化に従って、前記信号測定装置の半径方向の位置を変化させる、係合ピンと、
をさらに備える、
請求項101から103までのいずれか一項に記載のシステム。 - 前記カムスロットは前記スロットに沿った位置決め点を含み、前記位置決め点は前記スロットの各端部および前記スロットの曲率が変化する前記スロットに沿った1つ以上の点によって画定され、前記係合ピンが位置決め点において前記スロットに係合されているときには、前記信号測定装置は該反応容器ステーションに運搬された該反応容器の1つに近接して動作可能なように置かれる、請求項104に記載のシステム。
- 1つを超える信号測定装置を備える、請求項100から105までのいずれか一項に記載のシステムであって、
各信号測定装置は、反応容器の内容物によって放出された異なる信号を測定するように構成および配置され、
前記反応容器運搬装置は、前記信号測定装置に対する信号測定位置に前記反応容器ステーションを連続的に提示するように構成および配置され、前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置のそれぞれを前記反応容器運搬装置に対して移動させて、該信号測定装置に対応する該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された該反応容器のそれぞれに近接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 各信号測定装置は、反応容器の内容物からの蛍光放出を測定するように構成および配置された蛍光光度計を備え、各蛍光光度計は、異なる波長を有する蛍光放出を測定する、請求項106に記載のシステム。
- 各蛍光光度計は、
該反応容器に励起エネルギーを向けるように構成および配置された励起構成要素であって、各蛍光光度計の該励起構成要素は該反応容器に異なる波長の励起エネルギーを向ける、励起構成要素と、
該反応容器の内容物からの放出エネルギーの量を検出するように構成および配置された検出構成要素であって、各蛍光光度計の該検出構成要素は異なる波長の放出エネルギーを検出する、検出構成要素と、
を備える、
請求項107に記載のシステム。 - 請求項106から108までのいずれか一項に記載のシステムであって、
(a)前記反応容器運搬装置は、回転台の周辺部の周囲に置かれた前記反応容器ステーションと共に回転軸の周囲を回転可能となるように取り付けられた、略円形の回転台を備え、各反応容器ステーションは、前記回転台の該回転軸に対して半径方向に配置された2つ以上の反応容器を備え、
(b)前記回転台の回転は、前記各反応容器ステーションを該信号測定位置に連続的に提示し、該信号測定位置において、前記反応容器ステーションに運搬された放射状に配置された反応容器の1つが、当該信号測定位置に対応する前記信号測定装置に近接して動作可能であり、
(c)前記信号測定装置移送機構は、前記信号測定装置を前記回転台の該回転軸に対して略半径方向に移動させて、該信号測定位置に移動された前記反応容器ステーションに運搬された放射状に配置された反応容器のそれぞれに隣接して動作可能なように、前記信号測定装置を連続的に置くように構成および配置される、
システム。 - 前記信号測定装置移送機構は、
前記回転台の該回転軸に対して略垂直に配向された固定プレートと、
各信号測定装置と動作可能に関連付けられた平行移動アセンブリであって、各平行移動アセンブリは前記回転台の該回転軸に対して略半径方向に前記固定プレートに取り付けられたトラックを含み、各信号測定装置は前記関連付けられた平行移動アセンブリに取り付けられ前記トラックに沿って移動可能である、平行移動アセンブリと、
を備える、
請求項109に記載のシステム。 - 各信号測定装置を前記平行移動アセンブリに取り付けるための取り付けブラケットをさらに備える、請求項110に記載のシステムであって、
各平行移動アセンブリは前記取り付けブラケットが付着される軸受要素をさらに含み、前記軸受要素は前記平行移動アセンブリの前記トラックに沿って平行移動するように構成および配置される、
システム。 - 各トラックに沿った所定位置に位置し、前記トラックに沿った前記所定位置において前記信号測定装置の存在を検出するように構成および配置されるセンサーをさらに備える、請求項110から111までのいずれか一項に記載のシステム。
- 前記信号測定装置移送機構は、
前記固定プレートに隣接して回転可能に取り付けられたカムディスクであって、前記平行移動アセンブリの各トラックは前記カムディスクの回転軸に対して略放射状に配置され、前記カムディスクは各平行移動アセンブリと関連付けられたカムスロットを含み、各カムスロットは、該カムスロットと該カムディスクの該回転軸との間の半径方向の距離が前記カムスロットの一端から前記カムスロットの反対端までで変動するように前記カムディスク上に配置された、カムディスクと、
前記カムディスクの動力回転をもたらすために、前記カムディスクと動作可能なように連結されたモーターと、
係合ピンであって、各信号測定装置と動作可能なように関連付けられ、前記カムディスクの動力回転が前記係合ピンを前記カムスロットに沿って横断させるように、関連付けられたカムスロットと係合され、それによって、前記カムディスクの該回転軸と前記係合ピンが係合された該関連付けられたカムスロットの部分との間の半径方向の距離の変化に従って、前記関連付けられた信号測定装置の半径方向の位置を変化させる、係合ピンと、
をさらに備える、
請求項110から112までのいずれか一項に記載のシステム。 - 各カムスロットは前記スロットに沿った位置決め点を含み、前記位置決め点は前記スロットの各端部によって、および前記スロットの曲率が変化する前記スロットに沿った1つ以上の点によって画定され、前記係合ピンが位置決め点において前記スロットに係合されているときには、前記信号測定装置は該反応容器ステーションに運搬された該反応容器の1つに近接して動作可能なように置かれる、請求項113に記載のシステム。
- 4つの信号測定装置と、4つの平行移動アセンブリと、4つのカムスロットとを備える、請求項113から114までのいずれか一項に記載のシステム。
- 反応容器の第1の部分に存在する第1の対象核酸の量を定量的に決定するため、および、該反応容器の第2の部分に存在する第2の対象核酸の有無を定性的に決定するために、複数の該反応容器の内容物を処理するための方法であって、
a)第1の加熱器に複数の反応容器を連続的に提供する自動ステップであって、各反応容器には、対応する第1または第2の対象核酸内に含有される第1または第2の標的配列を、前記第1の加熱器の温度条件下で増幅するのに十分な増幅および酵素試薬が提供される、ステップと、
b)前記第1の標的配列またはその補体を含有する第1の増幅産物を検出するのに十分な検出試薬が提供された前記反応容器の第1の部分の反応容器を、信号測定装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号の量を測定するように構成および配置された前記信号測定装置に近接して動作可能なように、連続的および周期的に移動させる自動ステップ、および前記信号測定装置に近接して動作可能なように移動された反応容器の前記第1の部分の各反応容器内における前記第1の増幅産物の存在と関連付けられた信号の量を測定する自動ステップと、
c)ステップb)において得られた該測定結果に基づいて、反応容器の前記第1の部分の各反応容器内に存在する前記第1の対象核酸の量を定量化するためにマイクロプロセッサを使用する自動ステップと、
d)前記第2の標的配列またはその補体を含有する第2の増幅産物を検出するのに十分な検出試薬が提供された前記反応容器の第2の部分の反応容器を、信号検出装置に近接して動作可能なように置かれた反応容器の内容物によって放出された信号の存在を検出するように構成および配置された前記信号検出装置に近接して動作可能なように、連続的に移動させる自動ステップ、および前記信号検出装置に近接して動作可能なように移動された反応容器の前記第2の部分の各反応容器内における前記第2の増幅産物の存在と関連付けられた信号を検出する自動ステップと、
f)ステップd)において得られた該測定結果に基づいて、反応容器の前記第2の部分の各反応容器内における前記第2の対象核酸の有無を決定するためにマイクロプロセッサを使用する自動ステップと、
を包含する、方法。 - 前記反応容器は、自動反応容器移送システムを使用して前記第1の加熱器に提供される、請求項116に記載の方法。
- 前記移送システムは、反応容器を前記第1の加熱器に提供するための、第1の回転可能な移送機構を含む、請求項116から117までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記移送システムは、前記第1の加熱器から反応容器を除去するための、第2の回転可能な移送機構を含む、請求項118に記載の方法。
- 前記移送システムは、ステップd)において、前記信号検出装置に近接して動作可能なように、反応容器の前記第2の部分の反応容器を前記第1の加熱器から移動させる、請求項117から119までのいずれか一項に記載の方法。
- 反応容器の前記第2の部分の反応容器を前記第1の加熱器から第2の加熱器へ移動させる自動ステップをさらに包含する、請求項120に記載の方法であって、
前記検出試薬は、前記検出試薬中に存在するプローブを前記第2の標的配列またはその補体と検出可能なようにハイブリダイズさせることができる温度条件下で、反応容器の前記第2の部分の反応容器に提供される、
方法。 - 前記第2の加熱器は密閉型インキュベータであり、該インキュベータは反応容器を収納したり、前記インキュベータから除去したりするための1つ以上のドアを有する、請求項121に記載の方法。
- 前記インキュベータは、前記インキュベータ内で反応容器を収納および移動させるための回転可能な反応容器運搬装置を含む、請求項122に記載の方法。
- 反応容器の前記第2の部分の反応容器を、前記第2の加熱器から前記信号検出装置に近接して動作可能なように移動させる自動ステップをさらに包含する、請求項121から123までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記信号検出装置は蛍光光度計であり、前記プローブは化学発光ラベルで標識されている、請求項121から124までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記第1の加熱器は密閉型インキュベータであり、該インキュベータは前記反応容器を収納したり、前記インキュベータから除去したりするための1つ以上のドアを有する、請求項116から125までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記インキュベータは、前記インキュベータ内で反応容器を収納および移動させるための回転可能な反応容器運搬装置を含む、を含む、請求項126に記載の方法。
- 前記増幅および酵素試薬は、前記反応容器が前記第1の加熱器に提供された後に前記反応容器に提供される、請求項116から127までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記検出試薬は、反応容器の前記第1の部分の反応容器が前記第1の加熱器に提供された後に、反応容器の前記第1の部分の反応容器に提供され、反応容器の前記第1の部分の反応容器は、前記第1の加熱器から除去される前に、ステップb)において、前記信号測定装置に近接して動作可能なように移動される、請求項128に記載の方法。
- 反応容器の前記第2の部分の反応容器は、ステップd)において前記信号検出装置に近接して動作可能なように移動される前に前記第1の加熱器から除去され、前記検出試薬は、前記第1の加熱器から除去された後に、反応容器の前記第2の部分の反応容器に提供される、請求項129に記載の方法。
- ステップa)において反応容器の前記第1の部分の反応容器に提供される前記増幅および酵素試薬は、プライマーまたはプロモータープライマー、ヌクレオシド三リン酸、および、前記第1の加熱器の温度条件下で前記第1の対象核酸にハイブリダイズされた前記プライマーまたはプロモータープライマーの3´端を延長することができる核酸ポリメラーゼを含み、ステップa)において反応容器の前記第2の部分の反応容器に提供される前記増幅および酵素試薬は、プライマーまたはプロモータープライマー、ヌクレオシド三リン酸、および、前記第1の加熱器の温度条件下で前記第2の対象核酸にハイブリダイズされた前記プライマーまたはプロモータープライマーの3´端を延長することができる核酸ポリメラーゼを含む、請求項116から130までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記温度条件は等温である、請求項131に記載の方法。
- 前記第1の増幅産物を検出するための前記検出試薬は、前記第1の加熱器の温度条件下で前記第1の標的配列またはその補体と検出可能なようにハイブリダイズする、自己ハイブリダイズプローブを含む、請求項116から132までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記プローブは分子ビーコンまたは分子トーチであり、相互に作用するラベル対を含む、請求項133に記載の方法。
- 前記ラベル対は、蛍光プローブと消光剤とを含む、請求項134に記載の方法。
- 反応容器の前記第1の部分の複数の反応容器のそれぞれからの前記信号を、同時に測定するステップをさらに包含する、請求項116から135までのいずれか一項に記載の方法。
- ステップb)において、反応容器の前記第1の部分の反応容器は、相隔たる複数の信号測定装置に近接して動作可能なように連続的および周期的に移動され、各信号測定装置は前記加熱器と動作可能なように関連付けられた蛍光信号検出装置である、請求項136に記載の方法。
- 前記蛍光信号検出装置は、前記加熱器に対して移動可能である、請求項137に記載の方法。
- 反応容器の前記第1の部分の反応容器の中の複数の信号を同時に測定するステップをさらに包含する、請求項116から138までのいずれか一項に記載の方法であって、前記複数の信号のそれぞれは異なる増幅産物と関連付けられる、方法。
- ステップa)の前に、前記反応容器から増幅阻害物質を除去するのに十分な試薬および条件に、前記反応容器のぞれぞれの中に存在するサンプル物質を曝露する自動ステップをさらに包含する、請求項116から139までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記曝露するステップは、
前記各反応容器に固体支持材料を提供するステップであって、前記固体支持材料は前記第1および第2の対象核酸を結合することができる、ステップと、
前記各反応容器内の前記固体支持材料を単離するステップと、
前記各反応容器から前記サンプル物質の少なくとも一部を除去するステップと、
前記固体支持材料を洗浄液で洗浄するステップと、
をさらに包含する、
請求項140に記載の方法。 - 前記固体支持材料は磁気反応性粒子であり、前記単離するステップは前記各反応容器に隣接して置かれた1つ以上の磁石によって実行される、請求項141に記載の方法。
- 前記曝露するステップの後に、自動反応容器移送システムを使用して前記反応容器を前記第1の加熱器に移送するステップをさらに包含する、請求項140から142までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記移送システムは回転可能な移送機構を備える、請求項143に記載の方法。
- 前記各反応容器は、一体的に形成された複数の反応容器の1つである、請求項116から144までのいずれか一項に記載の方法。
- 本方法のステップはすべて、内蔵型分析器ユニットのハウジング内で実行される、請求項116から145までのいずれか一項に記載の方法。
- サンプル中の問題の検体の量を決定する方法であって、
(a)該サンプルによって放出された信号のレベルの周期的測定結果を備えるデータを収集するステップであって、該信号の該レベルは該サンプル中の問題の該検体の存在と関連付けられる、ステップと、
(b)問題の該検体の存在以外のソースと関連付けられる、該測定されたレベルへのバックグラウンド影響率を除去するために、ステップ(a)において収集された該データを調整するステップと、
(c)該調整されたデータを、測定されバックグラウンド影響率を除去するように調整された最大レベルで割ることによって、ステップ(b)において調整された該データを正規化するステップと、
(d)所定の下限値と所定の上限値との間の該調整され正規化されたデータの一部によって、曲線を近似するステップと、
(e)ステップ(d)において近似された該曲線が所定の閾値データレベルと交差する出現時を決定するステップと、
(f)ステップ(e)において決定された該出現時を、問題の該検体の既知の量に対して決定されている閾値時と比較することによって、問題の該検体の量を決定するステップと、
を包含する、方法。 - 該近似するステップは、該所定の下限値と該所定の上限値との間の該調整され正規化されたデータ点に対して、曲線当てはめ手順を適用するステップを包含する、請求項147に記載の方法。
- 該曲線当てはめ手順は、線形最小二乗法による当てはめである、請求項148に記載の方法。
- 該収集されたデータは、少なくとも30秒ごとに1回取得された該放出された信号のレベルの測定結果を備える、請求項147から149までのいずれか一項に記載の方法。
- 該所定の下限値は約0.04であり、該所定の上限値は約0.36である、請求項147から150までのいずれか一項に記載の方法。
- 該正規化された所定の閾値データレベルは約0.11である、請求項147から151までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記調整するステップは、バックグラウンド影響率のレベルを決定するステップ、および、次いでステップ(a)において収集された該データから該決定されたバックグラウンド影響率のレベルを減じるステップを包含する、請求項147から152までのいずれか一項に記載の方法。
- バックグラウンド影響率の該レベルを決定するステップは、バックグラウンド影響率の量を決定するためのステップを包含する、請求項157に記載の方法。
- 反応槽内における核酸増幅阻害物質の存在を減らすための方法であって、該方法は、
(a)反応槽に表面処理剤および核酸含有材料を提供するステップと、
(b)前記反応槽の内容物を混合するために、前記反応槽を攪拌するステップと、
(c)前記核酸含有材料中に存在する場合には、前記反応槽の内容物を、前記反応槽内の対象核酸を単離するのに十分な試薬および条件に曝露するステップと、
(d)ステップ(c)の間に、前記反応槽の内容物の少なくとも一部を除去するステップと、
(e)前記反応槽に洗浄液を提供するステップと、
(f)前記核酸含有材料中に存在する場合には、前記反応槽の内容物を、前記反応槽内の前記対象核酸を単離するのに十分な試薬および条件に曝露するステップと、
(g)ステップ(f)の間に、前記反応槽の内容物の少なくとも一部を除去するステップと、
(h)前記対象核酸中に存在する標的配列を増幅するのに十分な試薬および条件に、前記反応槽の内容物を曝露するステップと、を包含し、
前記表面処理剤は、ステップ(d)およびステップ(g)の間に核酸増幅阻害物質の存在を減らすのに十分な量で前記反応槽に提供され、
前記表面処理剤は核酸増幅反応の阻害物質でない、
方法。 - 前記表面処理剤は、前記核酸含有材料が前記反応槽に提供される前に、前記反応槽に提供される、請求項155に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、前記核酸含有材料が前記反応槽に提供された後に、前記反応槽に提供される、請求項155に記載の方法。
- 前記対象核酸を固定化するために固体支持材料を前記反応槽に提供するステップをさらに包含する、請求項155に記載の方法。
- 前記固体支持材料は、磁気反応性粒子を備える、請求項158に記載の方法。
- 前記反応槽の内容物は、ステップ(c)およびステップ(f)の間に磁場に曝露される、請求項159に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、前記固体支持材料が前記反応槽に提供された後に、前記反応槽に提供される、請求項158に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、前記固体支持材料が前記反応槽に提供される前に、前記反応槽に提供される、請求項158に記載の方法。
- 反応槽内における核酸増幅阻害物質の存在を減らすための方法であって、該方法は、
(a)反応槽から核酸含有材料の少なくとも一部を除去するステップと、
(b)ステップ(a)の後に、前記反応槽に洗浄液および表面処理剤を提供するステップと、
(c)前記反応槽の内容物を混合するために、前記反応槽を攪拌するステップと、
(d)前記核酸含有材料中に存在する場合には、前記反応槽の内容物を、前記反応槽内の対象核酸を単離するのに十分な試薬および条件に曝露するステップと、
(e)ステップ(d)の間に、前記反応槽の内容物の少なくとも一部を除去するステップと、
(f)前記対象核酸中に存在する標的配列を増幅するのに十分な試薬および条件に、前記反応槽の内容物を曝露するステップと、
を包含し、
前記表面処理剤は、ステップ(e)の間に核酸増幅阻害物質の存在を減らすのに十分な量で前記反応槽に提供され、
前記表面処理剤は、核酸増幅反応の阻害物質でない、
方法。 - 前記洗浄液および前記表面処理剤は、前記反応槽に同時に提供される、請求項163に記載の方法。
- 前記洗浄液および前記表面処理剤は、前記反応槽に別々に提供される、請求項163に記載の方法。
- ステップ(a)の前に、前記対象核酸を固定化するための固体支持材料を前記反応槽に提供するステップをさらに包含する、請求項163に記載の方法。
- 前記固体支持材料は、磁気反応性粒子を含む、請求項166に記載の方法。
- 前記反応槽の内容物は、ステップ(d)の間に磁場に曝露される、請求項167に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、前記阻害物質が前記反応槽の内面に接着することを防止する、請求項155から168までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、洗剤を含まない、請求項155から169までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記表面処理剤は、シリコンオイルを備える、請求項155から170までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記反応槽は、疎水性材料を備える、請求項155から171までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記反応槽は、ポリプロピレンを備える、請求項172に記載の方法。
- 前記阻害物質は、前記核酸含有材料によって提供される、請求項155から173までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記阻害物質は、ヘモグロビンである、請求項174に記載の方法。
- 前記阻害物質は、前記洗浄液によって提供される、請求項155から173までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記阻害物質は、アニオン洗剤である、請求項176に記載の方法。
- 前記標的配列を増幅するための前記試薬は、プライマーまたはプロモータープライマー、ヌクレオシド三リン酸、および、前記対象核酸にハイブリダイズされた前記プライマーの3´端を延長することができる核酸ポリメラーゼを含む、請求項155から177までのいずれか一項に記載の方法。
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