ES2538853T3 - Derivado de adenina como inhibidor de la PI3K - Google Patents

Abstract

Un compuesto con la fórmula:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Derivado de adenina como inhibidor de la PI3K

Esta solicitud reivindica las ventajas de la Solicitud de Patente de EE.UU. Nº 12/503.776, depositada el 15 de julio de 2009, que es una continuación en parte de la Solicitud Internacional Nº PCT/US09/00038, depositada el 5 de enero de 2009 y de la Solicitud Internacional Nº PCT/US09/00042, depositada el 5 de enero de 2009, cada una de las cuales reivindica el beneficio de las Solicitudes Provisionales de EE.UU. con los Números de Serie 61/009.971 depositada el 4 de enero de 2008, 61/194.294 depositada el 26 de septiembre de 2008 y 61/201.146 depositada el 5 de diciembre de 2008. Todas las solicitudes de patente referenciadas anteriormente están incorporadas como referencia al presente documento en su totalidad a todos los efectos.

Antecedentes de la invención

La actividad de las células puede regularse mediante señales externas que estimulan o inhiben los acontecimientos intracelulares. En el proceso mediante el cual las señales estimuladoras o inhibidoras son transmitidas hacia y dentro de una célula para desencadenar una respuesta intracelular se denomina transducción de señal. Durante las pasadas décadas se han elucidado cascadas de acontecimientos de transducción de señales y se ha averiguado que juegan un papel clave en una variedad de respuestas biológicas. Se ha averiguado que los defectos en diversos componentes de las rutas de transducción de señales son responsables de un vasto número de enfermedades, incluyendo numerosas formas de cáncer, trastornos inflamatorios, trastornos metabólicos, enfermedades vasculares y neuronales (Gaestel et al. Current Medicinal Chemistry (2007) 14: 2214 -2234).

Las quinasas representan una clase importante de moléculas de señalización. Las quinasas pueden clasificarse de forma general en quinasas de proteínas y quinasas de lípidos, y ciertas quinasas muestran unas especificidades dobles. Las quinasas de proteínas son enzimas que fosforilan otras proteínas y/o a sí mismas (es decir, autofosforilación). Las quinasas de proteínas pueden clasificarse de forma general en tres grupos principales basándose en su utilización del sustrato: quinasas de tirosina, que fosforilan predominantemente sustratos sobre residuos de tirosina (por ejemplo, de erb2, del receptor del PDGF, del receptor del EGF, del receptor del VEGF, de src, de abl), quinasas de serina / treonina, que fosforilan predominantemente sustratos sobre residuos de serina y/o treonina (por ejemplo, mTorC1, mTorC2, ATM, ATR, DNA-PK, Akt) y quinasas de especificidad doble, que fosforilan sustratos sobre residuos de tirosina, serina y/o treonina.

Las quinasas de lípidos son enzimas que catalizan la fosforilación de lípidos. Estas enzimas y los fosfolípidos fosforilados resultantes y las moléculas orgánicas biológicamente activas derivadas de los lípidos, juegan un papel en muchos procesos fisiológicos diferentes, incluyendo la proliferación, la migración, la adhesión y la diferenciación celulares. Ciertas quinasas de lípidos están asociadas a la membrana y catalizan la fosforilación de los lípidos contenidos en, o asociados con, las membranas celulares. Algunos ejemplos de dichas enzimas incluyen quinasas de fosfoinosítido(s) (tales como las PI3-quinasas, las PI4-quinasas), quinasas de diacilglicerol y quinasas de esfingosina.

La ruta de señalización de las quinasas de 3-fosfoinosítido (PI3Ks) es uno de los sistemas con más mutaciones en los cánceres humanos. La señalización de las PI3K también es un factor clave en otras muchas enfermedades de los seres humanos. La señalización de las PI3K está implicada en muchos estados patológicos incluyendo dermatitis alérgica de contacto, artritis reumatoide, artrosis, enfermedad inflamatoria del intestino, trastorno pulmonar obstructivo crónico, psoriasis, esclerosis múltiple, asma, enfermedades relacionadas con complicaciones diabéticas y complicaciones inflamatorias del sistema cardiovascular tales como el síndrome coronario agudo.

Las PI3K son miembros de una familia única y conservada de quinasas de lípidos intracelulares que fosforilan el grupo 3’-OH de fosfatidilinositoles o de fosfoinosítidos. La familia de las PI3K comprende 15 quinasas con distintas especificidades de sustrato, patrones de expresión y modos de regulación (Katso et al., 2001). La clase I de las PI3K (p110α, p110β, p110δ y p110γ) es activada normalmente por las quinasas de tirosina por los receptores acoplados a proteínas G para generar el PIP3, que participa en factores cascada abajo tales como los de la ruta Akt / PDK1, mTOR, las quinasas de la familia Tec y las GTPasas de la familia Rho. Las clases II y III de las PI3-K juegan un papel clave en el tráfico intracelular a través de la síntesis de PI(3)P y de PI(3,4)P2. Las PIKK son quinasas de proteínas que controlan el crecimiento celular (mTORC1) o monitorizan la integridad genómica (ATM, ATR, DNA-PK y hSmg-1).

La isoforma delta (δ) de la clase I de las PI3K ha sido implicada, en particular, en varias enfermedades y procesos biológicos. La PI3K δ es expresada principalmente en células hematopoyéticas, incluyendo leucocitos tales como los linfocitos T, células dendríticas, neutrófilos, mastocitos, linfocitos B y macrófagos. La PI3K δ está implicada íntegramente en las funciones del sistema inmunitario de los mamíferos, tales como la función de los linfocitos T, la activación de los linfocitos B, la activación de los mastocitos, la función de las células dendríticas y la actividad de los neutrófilos. Debido a su papel integral en la función del sistema inmunitario, la PI3K δ también está implicada en una diversidad de enfermedades relacionadas con una respuesta inmunitaria indeseable tales como reacciones alérgicas, enfermedades inflamatorias, angiogénesis mediada por inflamación, artritis reumatoide, enfermedades

autoinmunes tales como lupus, asma, enfisema y otras enfermedades respiratorias. Otra clase I de las PI3K implicada en la función del sistema inmunitario incluye la PI3K γ, que juega un papel en la señalización de los leucocitos y ha sido implicada en la inflamación, la artritis reumatoide y en enfermedades autoinmunes tales como el lupus.

Los mediadores cascada debajo de la vía de transducción de señales de las PI3K incluyen la Akt y el objetivo de los mamíferos de la rapamicina (mTOR). La Akt posee un dominio de homología con la plekstrina (PH) que se une al PIP3, dando lugar a la activación de la quinasa Akt. La Akt fosforila muchos sustratos y es un efector central secuencia debajo de la PI3K en diversas respuestas celulares. Una función importante de la Akt es aumentar la actividad de la mTOR, a través de la fosforilación del TSC2 y de otros mecanismos. La mTOR es una quinasa de serina-treonina relacionada con las quinasas de lípidos de la familia de las PI3K. La mTOR ha sido implicada en una amplia variedad de procesos biológicos que incluyen el crecimiento celular, la proliferación celular, la motilidad y la supervivencia celulares. Se ha notificado una desregulación de la ruta de la mTOR en diversos tipos de cáncer. La mTOR es una quinasa multifuncional que integra factores de crecimiento y señales nutrientes para regular la traducción de proteínas, la captación de nutrientes, la autofagia y la función mitocondrial.

Como tales, las quinasas, particularmente las PI3K, son objetivos primordiales para el desarrollo de fármacos. Sigue existiendo una necesidad de inhibidores de las PI3K adecuados para el desarrollo de fármacos. La presente invención aborda esta necesidad y proporciona las ventajas relacionadas, proporcionando asimismo nuevas clases de inhibidores de quinasas.

Sumario de la invención

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la siguiente Fórmula I o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la siguiente Fórmula Ia o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que

Fórmula

En otro aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y el compuesto de Fórmula I o Ia proporcionado en este documento. En algunas formas de realización, la composición está en forma líquida, sólida, semisólida, de un gel o de un aerosol.

En otro aspecto de la invención, se proporciona un método ex vivo para la inhibición de una quinasa de fosfatidil inositol-3 (la quinasa PI3), que comprende: poner en contacto la quinasa PI3 con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos divulgados en este documento. Por ejemplo, la etapa de poner en contacto implica el uso de uno

o más compuestos de cualquiera de las fórmulas proporcionados en este documento. En algunas formas de realización, la etapa de poner en contacto comprende poner en contacto con una célula que contiene dicha quinasa PI3. En algunas formas de realización de la invención, el compuesto de Fórmula I o Ia es para su uso en el

tratamiento de un sujeto que padece un trastorno asociado con un mal funcionamiento de uno o más tipos de quinasas PI3. Algunos ejemplos de enfermedades que implican un mal funcionamiento de uno o más tipos de quinasas PI3 se eligen de entre el grupo que consiste en enfermedades autoinmunes, artritis reumatoide, enfermedad respiratoria, reacciones alérgicas y diversos tipos de cáncer.

En algunas formas de realización de la invención, el compuesto de Fórmula I o Ia es para su uso en el tratamiento de un sujeto que padece artritis reumatoide o una enfermedad respiratoria.

En algunas formas de realización, el uso comprende la administración de un segundo agente terapéutico al sujeto.

En otro aspecto más de la invención, el compuesto de Fórmula I o Ia es para su uso en el tratamiento de una enfermedad que se manifiesta como una respuesta inmunitaria no deseada. El uso comprende la etapa de administrar al sujeto en necesidad del mismo, el compuesto de Fórmula I o Ia, en una cantidad que es eficaz para mejorar dicha respuesta inmunitaria no deseada. En algunas formas de realización, el uno o más compuestos inhiben la activación de los linfocitos B independiente de los linfocitos T, según se evidencia por una reducción en la producción de IgG3 anti-TNP en al menos aproximadamente cinco veces cuando se administran en una cantidad menor de aproximadamente 30 mg/kg en una dosis de D.V.D. a un animal de ensayo.

En algunas formas de realización, la enfermedad tratada está asociada con edema o dolor de una articulación de un sujeto. El uso puede ser eficaz para mejorar uno o más síntomas de la artritis reumatoide, según se evidencia por la reducción en el diámetro medio de la articulación en al menos aproximadamente un 10 % después de 17 días y/o la reducción en el diámetro del tobillo en al menos un 5 -10 % o más después de entre varios días y semanas de tratamiento, incluyendo, por ejemplo, la reducción en el diámetro del tobillo en al menos un 5 % después de 7 días de tratamiento. En otra forma de realización, la respuesta inmunitaria no deseada está evidenciada por un aumento en la producción de anticuerpos contra el colágeno de tipo II y el uso de uno o más de los compuestos en cuestión reduce el nivel de suero contra el colágeno de tipo II hasta una DE50 de menos de aproximadamente el 10 mg/kg.

Breve descripción de los dibujos

Las nuevas características de la invención se establecen particularmente en las reivindicaciones anexas. Se obtendrá una mejor comprensión de las características y las ventajas de la presente invención mediante la referencia a la siguiente descripción detallada que establece algunas formas de realización ilustrativas, en las que se utilizan los principios de la invención, y los dibujos anexos en los que:

La FIG. 1 representa un ejemplo de protocolo para la medición de la producción independiente de linfocitos T por parte de anticuerpos específicos contra TNP in vivo. La FIG. 2 representa el número de veces de reducción en la respuesta específica de la IgG3 contra TNP a los antígenos proporcionados por los compuestos 7 y 53 de fórmula IV en comparación con un control de vehículo, cuando se administran por vía oral. La FIG. 3 representa el efecto dependiente de la dosis de la administración oral dos veces al día del compuesto 53 de fórmula IV en la reducción del aumento en el diámetro del tobillo con el tiempo en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de las ratas de control no artríticas, de las ratas artríticas de control a las que se les administró un vehículo de control negativo y de ratas artríticas de control tratadas dos veces al día con metotrexato. La FIG. 4 representa el efecto dependiente de la dosis de compuestos 7 y 53 de fórmula IV en la mejora de la histopatología del tobillo cuando se administran en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de las ratas artríticas de control a las que se les administró un vehículo de control negativo o metotrexato. La FIG. 5 representa el efecto dependiente de la dosis de compuestos 7 y 53 de fórmula IV en la mejora de la histopatología de la rodilla cuando se administran en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de las ratas artríticas de control a las que se les administró un vehículo de control negativo o un control positivo de metotrexato. La FIG. 6 representa el efecto dependiente de la dosis de compuestos 7 y 53 de fórmula IV en la reducción del nivel de anticuerpos contra el colágeno de tipo II in vivo cuando se administran en un modelo de rata de desarrollo de artritis inducida por colágeno. También se representan los resultados de ratas artríticas a las que se les administró un vehículo de control negativo o metotrexato. La FIG. 7 representa el efecto dependiente de la dosis de compuesto 7 de fórmula IV en la mejora de la histopatología del tobillo cuando se administran en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de ratas artríticas de control con vehículo y de ratas artríticas tratadas con metotrexato. La FIG. 8 representa el efecto dependiente de la dosis de compuesto 53 de fórmula IV administrado diariamente sobre la histopatología del tobillo en un modelo de artritis establecida inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de ratas artríticas de control con vehículo y de ratas artríticas tratadas con Enbrel. La FIG. 9 representa el efecto dependiente de la dosis de compuesto 53 de fórmula IV administrado dos veces al día en la histopatología del tobillo en un modelo de artritis establecida inducida por colágeno en ratas. También se representan los resultados de ratas artríticas de control con vehículo y de ratas artríticas tratadas con Enbrel.

La FIG. 10 representa el efecto dependiente de la dosis de compuesto 53 de fórmula IV sobre el aumento en el volumen medio de la extremidad en un modelo de artritis inducida por coadyuvante. La FIG. 11 representa el efecto del compuesto 53 de fórmula IV sobre el peso medio con el tiempo de ratas en un modelo de artritis inducida por coadyuvante en ratas. La FIG. 12 representa el efecto del compuesto 292 ("Cpd-A") de fórmula V-A2 sobre la reducción en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. La FIG. 13 representa el efecto del compuesto 292 ("Cpd-A") de fórmula V-A2 la histopatología del tobillo en un modelo de artritis establecida inducida por colágeno en ratas. La FIG. 14 representa el efecto del compuesto 292 ("Cpd-A") de fórmula V-A2 sobre la reducción en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de artritis inducida por coadyuvante en ratas. La FIG. 15 representa el efecto del compuesto 292 ("Cpd-A") de fórmula V-A2 en la inhibición del influjo de neutrófilos leucocitos totales inducido por LPS en un modelo de inflamación pulmonar inducida por LPS en ratas. La FIG. 16 representa el efecto del compuesto 292 ("Cpd-A") de fórmula V-A2 en la inhibición del influjo de eosinófilos en un modelo de inflamación alérgica de pulmón inducida por OVA en ratas. La FIG. 17 representa el efecto del compuesto 200 ("Cpd-B") de fórmula V-A2 sobre la reducción en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. La FIG. 18 representa el efecto del compuesto 270 ("Cpd-C") de fórmula V-A2 sobre la reducción en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas. La FIG. 19 representa el efecto del compuesto 196 ("Cpd-D") de fórmula V-A2 sobre la reducción en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de desarrollo de artritis inducida por colágeno en ratas.

Descripción detallada de la invención

Mientras que en este documento se han mostrado y descrito las formas de realización preferidas de la presente invención, será obvio para los expertos en la materia que dichas formas de realización se proporcionan a modo de ejemplo únicamente. Ahora se les ocurrirán numerosas variaciones, cambios y sustituciones a los expertos en la materia sin desviarse de la invención. Debería entenderse que en la práctica de la invención pueden emplearse las diversas alternativas a las formas de realización de la invención descritas en este documento. Se pretende que las reivindicaciones anexas definan el ámbito de la invención y que los métodos y las estructuras en el ámbito de estas reivindicaciones y sus equivalentes estén cubiertos por las mismas.

Salvo que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en este documento tienen el mismo significado al comprendido habitualmente por el experto en la materia a la que pertenece esta invención. Todas las patentes y publicaciones mencionadas en este documento están incorporadas como referencia.

Según se usa en la memoria descriptiva y de las reivindicaciones, la forma singular "un", "un/a" y "el/la" incluye las referencias en plural salvo que el contexto lo indique claramente de otro modo.

Según se usa en este documento, "agente" o "agente biológicamente activo" se refiere a un compuesto biológico, farmacéutico o químico o a otra fracción. Algunos ejemplos no limitantes son moléculas orgánicas o inorgánicas simples o complejas, un péptido, una proteína, un oligonucleótido, un anticuerpo, un derivado de anticuerpo, un fragmento de anticuerpo, un derivado de vitamina a, un carbohidrato, una toxina o un compuesto quimioterapéutico. Varios de los compuestos pueden ser sintetizados, por ejemplo, moléculas pequeñas y oligómeros (por ejemplo, oligopéptidos y oligonucleótidos) y compuestos orgánicos sintéticos basados en diversas estructuras de núcleo. Además, varias fuentes naturales pueden proporcionar compuestos para cribado, tales como extractos vegetales o animales y similares. Un artesano experto apreciará fácilmente que no existe limitación en lo que respecta a la naturaleza estructural de los agentes de la presente invención.

El término "agonista", según se usa en el presente documento, se refiere a un compuesto con la capacidad de iniciar

o de mejorar una función biológica de una proteína objetivo, mediante la inhibición de la actividad o de la expresión de la proteína objetivo. Consecuentemente, el término "agonista" se define en el contexto del papel biológico del polipéptido objetivo. Aunque los agonistas preferidos de este documento interactúan específicamente con (por ejemplo, se unen a) el objetivo, los compuestos que inician o que mejoran la actividad biológica del polipéptido objetivo mediante la interacción con otros miembros de la ruta de transducción de señales de la que el polipéptido objetivo es miembro también están específicamente incluidos en esta definición.

Los términos "antagonista" e "inhibidor" se usan de forma intercambiable y se refieren a un compuesto con la capacidad de inhibir una función biológica de una proteína objetivo, mediante la inhibición de la actividad o de la expresión de la proteína objetivo. Consecuentemente, los términos "antagonista" e "inhibidores" se definen en el contexto del papel biológico de la proteína objetivo. Aunque los antagonistas preferidos de este documento interactúan específicamente con (por ejemplo, se unen a) el objetivo, los compuestos que inhiben una actividad biológica de la proteína objetivo mediante la interacción con otros miembros de la ruta transducción de señales de la que la proteína objetivo es miembro también están específicamente incluidos en esta definición. Una actividad biológica preferida inhibida por un antagonista está asociada con el desarrollo, el crecimiento o la diseminación de un tumor, o con una respuesta inmunitaria no deseada manifestada en forma de una enfermedad autoinmune.

Un "agente antineoplásico", "agente antitumoral" o "agente quimioterapéutico" se refiere a cualquier agente útil en el tratamiento de una afección neoplásica. Una clase de agentes antineoplásicos comprende los agentes quimioterapéuticos. "Quimioterapia" significa la administración de uno o más fármacos quimioterapéuticos y/o de otros agentes a un paciente oncológico mediante diversos métodos, incluyendo por vía intravenosa, oral, intramuscular, intraperitoneal, intravesical, subcutánea, transdérmica, bucal o mediante inhalación, o en forma de un supositorio.

El término "proliferación celular" se refiere a un fenómeno mediante el cual el número de células se modifica como resultado de una división. Este término también incluye el crecimiento celular mediante el cual se modifica la morfología celular (por ejemplo, un aumento del tamaño) coherente con una señal de proliferación.

Los términos "coadministración," "administrado en combinación con" y sus equivalentes gramaticales, según se usa en el presente documento, engloba la administración de dos o más agentes a un animal de forma que ambos agentes y/o sus metabolitos están presentes en el animal al mismo tiempo. La coadministración incluye la administración simultánea en composiciones por separado, la administración en diferentes momentos en composiciones por separado o la administración en una composición en la que están presentes ambos agentes.

El término "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de un compuesto descrito en este documento que es suficiente para efectuar la aplicación prevista incluyendo, pero no se limita a, el tratamiento de una enfermedad, según se define a continuación. La cantidad terapéuticamente eficaz puede variar dependiendo de la aplicación prevista (in vitro o in vivo) o del sujeto, y de la afección patológica que se va a tratar, por ejemplo, del peso y la edad del sujeto, de la gravedad de la afección patológica, de la forma de administración y similares, que pueden ser fácilmente determinados por el experto habitual en la materia. El término también se aplica a una dosis que inducirá una respuesta en particular en las células objetivo, por ejemplo, una reducción en la adhesión de las plaquetas y/o en la migración celular. La dosis específica variará dependiendo de los compuestos elegidos en particular, del régimen de dosificación a seguir, de si se administra junto con otros compuestos, de la cronología de administración, del tejido en el que se administra y del sistema físico de administración que lo porta.

Según se usa en este documento, "tratamiento" o "tratar" o "paliar" o "mejorar" se usan de forma intercambiable en este documento. Estos términos se refieren a una metodología para la obtención de unos resultados beneficiosos o deseados incluyendo, pero no se limitan a, un beneficio terapéutico y/o un beneficio profiláctico. Por beneficio terapéutico se entiende la erradicación o la mejora del trastorno subyacente que se está tratando. También se consigue un beneficio terapéutico con la erradicación o la mejora de uno o más de los síntomas fisiológicos asociados con el trastorno subyacente, de forma que se observe una mejora en el paciente, independientemente de que el paciente pueda seguir afectado por la enfermedad subyacente. Para un beneficio profiláctico las composiciones pueden ser administradas a un paciente en riesgo de desarrollar la enfermedad en particular, o a un paciente que refiere uno o más de los síntomas fisiológicos de una enfermedad, incluso a pesar de que no se haya realizado un diagnóstico de esta enfermedad.

Un "efecto terapéutico", como se usa ese término en este documento, engloba un beneficio terapéutico y/o un beneficio profiláctico como se ha descrito anteriormente. Un efecto profiláctico incluye el retraso o la eliminación de la aparición de una enfermedad o afección, el retraso o la eliminación de la aparición de los síntomas de una enfermedad o afección, la ralentización, la detención o la reversión de la progresión de la enfermedad o afección, o cualquier combinación de los mismos.

El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales derivadas de diversos contraiones orgánicos e inorgánicos bien conocidos en la materia. Pueden formarse sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables con ácidos inorgánicos y con ácidos orgánicos. Algunos ácidos inorgánicos a partir de los cuales pueden derivarse las sales incluyen, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares. Algunos ácidos orgánicos a partir de los cuales pueden derivarse las sales incluyen, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico y similares. Las sales de adición básica farmacéuticamente aceptables pueden formarse bases con bases inorgánicas y orgánicas. Algunas bases inorgánicas a partir de las cuales pueden derivar las sales incluyen, por ejemplo, sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, hierro, cinc, cobre, manganeso, aluminio y similares. Algunas bases orgánicas a partir de las cuales pueden derivar las sales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas, resinas básicas de intercambio iónico y similares, específicamente tales como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina y etanolamina. En algunas formas de realización, la sal de adición básica farmacéuticamente aceptable se elige entre sales de amonio, de potasio, de sodio, de calcio y de magnesio.

"Portador farmacéuticamente aceptable" o "excipiente farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y similares. El uso de dichos medios y agentes en las sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la materia. Excepto en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea

incompatible con el principio activo, está contemplado su uso en las composiciones terapéuticas de la invención. También pueden incorporarse principios activos complementarios en las composiciones.

"Transducción de señales" es un proceso durante el cual se transmiten señales estimuladoras o inhibidoras hacia y dentro de una célula para desencadenar una respuesta intracelular. Un modulador de una ruta de transducción de señales se refiere a un compuesto que modula la actividad de una o más proteínas celulares asignadas a la misma ruta de transducción de señales específica. Un modulador puede aumentar (agonista) o suprimir (antagonista) la actividad de una molécula de señalización.

El término "inhibición selectiva" o "que inhibe selectivamente", aplicado a un agente biológicamente activo, se refiere a la capacidad del agente para reducir selectivamente la actividad de señalización objetivo en comparación con la actividad de señalización fuera del objetivo, a través de una interacción directa o indirecta con el objetivo.

El término "B-ALL", según se usa en el presente documento, se refiere a la leucemia linfoblástica aguda de los linfocitos B.

"Sujeto" se refiere a un animal, tal como un mamífero, por ejemplo, un ser humano. Los métodos descritos en este documento pueden ser útiles en aplicaciones terapéuticas tanto humanas como veterinarias. En algunas formas de realización, el paciente es un mamífero y en algunas formas de realización, el paciente es un ser humano.

"Terapia de radiación" significa la exposición de un paciente, mediante el uso de los métodos las composiciones habituales conocidas por el profesional clínico, a emisores de radiación tales como radionucleótidos emisores de partículas alfa (por ejemplo, radionúclidos de actinio y de torio), emisores de radiación de baja transferencia de energía lineal (LET) (es decir, emisores), emisores de electrones por conversión (por ejemplo, estroncio-89 y samario-153-EDTMP o radiación de alta energía, incluyendo, sin limitación, rayos X, rayos gamma y neutrones.

Se entiende que un "profármaco" indica un compuesto que puede ser convertido en las condiciones fisiológicas o mediante una solvolisis en un compuesto biológicamente activo descrito en este documento. Por lo tanto, el término "profármaco" se refiere a un precursor de un compuesto biológicamente activo que es farmacéuticamente aceptable. Un profármaco puede ser inactivo cuando es administrado a un sujeto, pero es convertido in vivo en un compuesto activo, por ejemplo, mediante una hidrólisis. El compuesto profármaco a menudo ofrece ventajas de solubilidad, compatibilidad tisular o liberación retardada en un organismo mamífero (véase, por ejemplo, Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), páginas 7 -9, 21 -24 (Elsevier, Ámsterdam). Se proporciona un análisis sobre profármacos en Higuchi, T., et al., "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14 y en Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association y Pergamon Press, 1987, estando ambos incorporados en su totalidad como referencia en este documento. También se entiende que el término "profármaco" incluye cualquier portador unido covalentemente, que libera el compuesto activo in vivo cuando dicho profármaco es administrado a un sujeto mamífero. Los profármacos de un compuesto activo, según se describen en este documento, pueden ser preparados mediante la modificación de los grupos funcionales presentes en un compuesto activo de una forma tal que las modificaciones sean escindidas, tanto durante una manipulación rutinaria como in vivo, en el compuesto parental activo. Los profármacos incluyen compuestos en los que hay unido un grupo hidroxi, amino o mercapto a cualquier grupo que, cuando se administre el profármaco del compuesto activo a un sujeto mamífero, se escinda para formar un grupo hidroxi, amino libre o mercapto libre, respectivamente. Algunos ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a, derivados de acetato, formiato y benzoato de un alcohol o derivados de acetamida, de formamida y de benzamida de un grupo amino funcional en el compuesto activo y similares.

El término "in vivo" se refiere a un acontecimiento que tiene lugar en el cuerpo de un sujeto.

El término "in vitro" se refiere a un acontecimiento que tiene lugar fuera del cuerpo de un sujeto. Por ejemplo, un ensayo in vitro engloba cualquier ensayo realizado fuera del ensayo en un sujeto. Los ensayos in vitro engloban ensayos basados en células en los que se emplean células vivas o muertas. Los ensayos in vitro también engloban un ensayo exento de células en el que no se emplean células intactas.

Salvo que se indique de otro modo, se entiende que las estructuras representadas en este documento también incluyen compuestos que difieren únicamente en la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, compuestos que tienen las presentes estructuras, en las que el hidrógeno es sustituido por deuterio o tritio, o en las que el átomo de carbono está sustituido por un carbono enriquecido en 13C o en 14C, están en el ámbito de esta invención.

Los compuestos de la presente invención también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen dichos compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radiomarcados con isótopos radioactivos, tales como, por ejemplo, tritio (3H) yodo-125 (125I) o carbono-14 (14C). Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, tanto radioactivas como no radioactivas, están incluidas en el ámbito de la presente invención.

Cuando en este documento se usan intervalos para las propiedades físicas, tales como el peso molecular, o para las propiedades químicas, tales como las fórmulas químicas, pretenden estar incluidas en los mismos todas las combinaciones y subcombinaciones de los intervalos y las formas de realización específicas. El término "aproximadamente", cuando se refiere a un número o a un intervalo numérico, significa que el número o el intervalo numérico al que se refiere es una aproximación con una variabilidad experimental (o dentro de un error experimental estadístico) y por lo tanto el número o el intervalo numérico puede variar, por ejemplo, entre el 1 % y el 15 % del número o el intervalo numérico indicado. El término "que comprende" (y los términos relacionados tales como "comprende" o "comprenden" o "que tiene" o "que incluye") incluye aquellas formas de realización, por ejemplo, una forma de realización de cualquier composición en cuestión, composición método o proceso, o similares, que "consisten en" o "consisten esencialmente en" las características descritas.

Las siguientes abreviaturas y términos tienen los significados indicados en todo momento PI3-K = quinasa de 3 fosfoinosítido; PI = fosfatidilinositol; PDK = quinasa dependiente de fosfoinosítido; DNA-PK = quinasa de proteínas dependiente del ácido desoxirribonucleico; PTEN = homólogo de fosfatasa y tensina delecionado en el cromosoma Diez; PIKK = quinasa de fosfoinosítido de tipo quinasa; SIDA = síndrome de inmunodeficiencia adquirida; VIH = virus de la inmunodeficiencia humana; MeI = yoduro de metilo; POCl3 = oxicloruro de fósforo; KCNS = isotiocianato de potasio; TLC = cromatografía en capa fina; MeOH = metanol; y CHCl3 = cloroformo.

Las abreviaturas usadas en este documento tienen su significado convencional en las artes químicas y biológicas.

"Alquilo" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono y de hidrógeno, que no contiene insaturaciones, que tiene entre uno y diez átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C1-C10). Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 1 y 10" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 1 y 10 átomos de carbono" significa que el grupo alquilo puede consistir en 1 átomo de carbono, en 2 átomos de carbono, en 3 átomos de carbono, etc., hasta, e incluyendo, 10 átomos de carbono, aunque la presente definición también cubre la aparición del término "alquilo" en el que no se indica ningún intervalo numérico. En algunas formas de realización, es un grupo alquilo C1-C4. Algunos grupos alquilo típicos incluyen, pero no se limitan en modo alguno a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, secbutilo isobutilo, butilo terciario, pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, septilo, octilo, nonilo, decilo y similares. El alquilo está unido al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, por ejemplo, metilo (Me), etilo (Et), n-propilo, 1-metiletilo (isopropilo), n-butilo, n-pentilo, 1,1-dimetiletilo (t-butilo), 3-metilhexilo, 2-metilhexilo y similares. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo alquilo está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa,-SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2 en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Alquilarilo" se refiere a un radical -(alquil)arilo en el que el arilo y el alquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para arilo y alquilo respectivamente.

"Alquilhetarilo" se refiere a un radical -(alquil)hetarilo en el que el hetarilo y el alquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos por uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para arilo y alquilo respectivamente.

"Alquilheterocicloalquilo" se refiere a un radical -(alquil) heterociclilo en el que el alquilo y el heterocicloalquilo son según se divulgan en este documento and que están opcionalmente sustituidos por uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heterocicloalquilo y alquilo respectivamente.

Una fracción de "alqueno" se refiere a un grupo que consiste en al menos dos átomos de carbono y al menos un doble enlace carbono -carbono, y una fracción de "alquino" se refiere a un grupo que consiste en al menos dos átomos de carbono y al menos un triple enlace carbono -carbono. La fracción alquilo, tanto saturada como insaturada, puede ser de cadena ramificada, lineal o cíclica.

"Alquenilo" se refiere a un grupo radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono y de hidrógeno, que contiene al menos un doble enlace y que tiene entre dos y diez átomos de carbono (es decir, alquenilo C2-C10). Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 2 y 10" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 2 y 10 átomos de carbono" significa que el grupo alquenilo puede consistir en 2 átomos de carbono, en 3 átomos de carbono, etc., hasta, e incluyendo, 10 átomos de carbono. En ciertas formas de realización, un alquenilo comprende entre dos y ocho átomos de carbono. En otras formas de realización, un alquenilo comprende entre dos y cinco átomos de carbono (por ejemplo, alquenilo C2-C5). El alquenilo está unido al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, por ejemplo, etenilo (es decir, vinilo), prop-1-enilo (es decir, alilo), but-1-enilo, pent-1-enilo, penta-1,4-dienilo y similares.

Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo alquenilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Alquenil-cicloalquilo" se refiere a un radical -(alquenil)cicloalquilo en el que el alquenilo y el cicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para alquenilo y cicloalquilo respectivamente.

"Alquinilo" se refiere a un grupo radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono y de hidrógeno, que contiene al menos un triple enlace, que tiene entre dos y diez átomos de carbono (es decir, alquinilo C2-C10). Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 2 y 10" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 2 y 10 átomos de carbono" significa que el grupo alquinilo puede consistir en 2 átomos de carbono, en 3 átomos de carbono, etc., hasta, e incluyendo, 10 átomos de carbono. En ciertas formas de realización, un alquinilo comprende entre dos y ocho átomos de carbono. En otras formas de realización, un alquinilo tiene entre dos y cinco átomos de carbono (por ejemplo, alquinilo C2-C5). El alquinilo está unido al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, por ejemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo y similares. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo alquinilo está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(Q)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Alquinil-cicloalquilo" se refiere a un radical -(alquinil)cicloalquilo en el que el alquinilo y el cicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para alquinilo y cicloalquilo respectivamente.

"Carboxaldehído" se refiere a un radical -(C=O)H.

"Carboxilo" se refiere a un radical -(C=O)OH.

"Ciano" se refiere a un radical -CN.

"Cicloalquilo" se refiere a un radical monocíclico o policíclico que sólo contiene carbono e hidrógeno y que puede estar saturado o parcialmente insaturado. Algunos grupos cicloalquilo incluyen los grupos que tienen entre 3 y 10 átomos en el anillo (es decir, cicloalquilo C2-C10). Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 3 y 10" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 3 y 10 átomos de carbono" significa que el grupo cicloalquilo puede consistir en 3 átomos de carbono, etc., hasta, e incluyendo, 10 átomos de carbono. En algunas formas de realización, es un radical cicloalquilo C3-C8. En algunas formas de realización, es un radical cicloalquilo C3-C5. Algunos ejemplos ilustrativos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, las siguientes fracciones: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloseptilo, ciclooctilo, ciclononilo, ciclodecilo, norbornilo y similares. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo cicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Cicloalquil-alquenilo" se refiere a un radical -(cicloalquil) alquenilo en el que el cicloalquilo y el heterocicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heterocicloalquilo y cicloalquilo respectivamente.

"Cicloalquil-heterocicloalquilo" se refiere a un radical -(cicloalquil) heterocicilo en el que el cicloalquilo y el heterocicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heterocicloalquilo y cicloalquilo respectivamente.

"Cicloalquil-heteroarilo" se refiere a un radical -(cicloalquil) heteroarilo en el que el cicloalquilo y el heterocicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heterocicloalquilo y cicloalquilo respectivamente.

El término "alcoxi" se refiere al grupo -O-alquilo, incluyendo entre 1 y 8 átomos de carbono de una configuración lineal, ramificada, cíclica y combinaciones de las mismas, unido a la estructura parental a través de un oxígeno. Algunos ejemplos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, ciclopropiloxi, ciclohexiloxi y similares. "Alcoxi inferior" se refiere a grupos alcoxi que contienen entre uno y seis carbonos. En algunas formas de realización, alquilo C1-C4, es un grupo alquilo que engloba cadenas alquílicas tanto lineales como ramificadas de entre 1 y 4 átomos de carbono.

El término "alcoxi sustituido" se refiere a alcoxi en el que el constituyente alquilo está sustituido (es decir, -O-(alquilo sustituido)). Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, la fracción alquilo de un grupo alcoxi está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, N(Ra)S(O),Ra (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El término "alcoxicarbonilo" se refiere a un grupo de la fórmula (alcoxi) (C=O)-unido a través del carbono del carbonilo en el que el grupo alcoxi tiene el número indicado de átomos de carbono. Por lo tanto, un grupo alcoxicarbonilo C1-C6 es un grupo alcoxi que tiene entre 1 y 6 átomos de carbono unidos a través de su oxígeno a un conector de carbonilo. "Alcoxicarbonilo inferior" se refiere a un grupo alcoxicarbonilo en el que el grupo alcoxi es un grupo alcoxi inferior. En algunas formas de realización, alcoxi C1-C4 es un grupo alcoxi que engloba ambos grupos alcoxi de cadena lineal y ramificada de entre 1 y 4 átomos de carbono.

El término "alcoxicarbonilo sustituido" se refiere al grupo (alquil sustituido)-O-C(O)-en el que el grupo está unido a la estructura parental a través de la funcionalidad carbonilo. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, la fracción alquilo de un grupo alcoxicarbonilo está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tOR8 (en la que t es 1 o 2), S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Acilo" se refiere a los grupos (alquil)-C(O)-, (aril)-C(O)-, (heteroaril)-C(O)-, (heteroalquil)-C(O)-y (heterocicloalquil)-C(O)-, en los que el grupo está unido a la estructura parental a través de la funcionalidad carbonilo. En algunas formas de realización, es un radical acilo C1-C10 que se refiere al número total de átomos en la cadena o en el anillo de la porción alquilo, arilo, heteroarilo o heterocicloalquilo del grupo aciloxi más el carbono del carbonilo del acilo, es decir, otros tres átomos en el anillo o la cadena más el carbonilo. Si el radical R radical es heteroarilo o heterocicloalquilo, los heteroátomos del anillo o de la cadena contribuyen al número total de átomos de la cadena o del anillo. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, el "R" de un grupo aciloxi está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Aciloxi" se refiere a un radical R(C=O)O-en el que "R" es alquilo, arilo, heteroarilo, heteroalquilo o heterocicloalquilo, que son según se describe en este documento. En algunas formas de realización, es un radical aciloxi C1-C4 que se refiere al número total de átomos en la cadena o en el anillo de la porción alquilo, arilo, heteroarilo o heterocicloalquilo del grupo aciloxi más el carbono del carbonilo del acilo, es decir, otros tres átomos en el anillo o la cadena más el carbonilo. Si el radical R radical es heteroarilo o heterocicloalquilo, los heteroátomos del anillo o de la cadena contribuyen al número total de átomos de la cadena o del anillo. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, el "R" de un grupo aciloxi está opcionalmente sustituido por uno

o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2-S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente

hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Amino" o "amina" se refiere a un grupo radical-N(Ra)2, en el que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo, salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva. Cuando un grupo-N(Ra)2 tiene dos Ra distintos al hidrógeno pueden estar combinados con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. Por ejemplo, se entiende que -N(Ra)2 incluye, pero no se limita a, 1-pirrolidinilo y 4morfolinilo. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo amino está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa,

OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo y cada una de estas fracciones puede estar opcionalmente sustituida según se define en este documento.

El término "sustituido por amino" también se refiere a N-óxidos de los grupos -NHRd y NRdRd cada uno como se ha descrito anteriormente. Los N-óxidos pueden ser preparados mediante el tratamiento del correspondiente grupo amino con, por ejemplo, peróxido de hidrógeno o ácido m-cloroperoxibenzoico. La persona experta en la materia está familiarizada con las condiciones de reacción para llevar a cabo la N-oxidación.

"Amida" o "amido" se refiere a una fracción química con la fórmula -C(O)N(R)2 o -NHC(O)R, en la que R se elige de entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a través de un carbono del anillo) y heteroalicíclico (unido a través de un carbono del anillo), cada una de las fracciones puede estar opcionalmente sustituida. En algunas formas de realización es un radical amido o amida C1-C4, que incluye el carbonilo de la amida en el número total de carbonos del radical. El R2 del -N(R)2 de la amida puede tomarse opcionalmente junto con el nitrógeno al que está unido para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo amido está opcionalmente sustituido independientemente por uno o más de los sustituyentes según se describe en este documento para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterocicloalquilo. Una amida puede ser una molécula de un aminoácido o de un péptido unida a un compuesto de Fórmula (I), formando así un profármaco. Cualquier cadena lateral de amina, hidroxi o carboxilo de los compuestos descritos en este documento puede ser amidada. Los procedimientos y los grupos específicos para crear dichas amidas son conocidos por los expertos en la materia y pueden encontrarse fácilmente en fuentes de referencia tales como Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3.sup.rd Ed., John Wiley & Sons, Nueva York, N. Y., 1999, que se incorpora al presente documento como referencia en su totalidad.

"Aromático" o "arilo" se refiere a un radical aromático con entre seis y diez átomos en el anillo (por ejemplo, aromático C6-C10 o arilo C6-C10) que tiene al menos un anillo que tiene un sistema de electrones pi conjugado que es carbocíclico (por ejemplo, fenilo, fluorenilo y naftilo). Los radicales bivalentes formados a partir de derivados de benceno sustituidos y con valencias libres en los átomos en el anillo se denominan radicales de fenileno sustituido. Los radicales bivalentes derivados de radicales hidrocarbonados policíclicos univalentes cuyos nombres terminan en "-ilo" mediante la eliminación de un átomo de hidrógeno del átomo de carbono con la valencia libres se nombran mediante la adición de "-ideno" al nombre del correspondiente radical univalente, por ejemplo, un grupo naftilo con dos puntos de unión se denomina naftilideno. Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 6 y 10" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 6 y 10 átomos en el anillo" significa que el grupo arilo puede consistir en 6 átomos en el anillo, en 7 átomos en el anillo, etc., hasta, e incluyendo, 10 átomos en el anillo. El término incluye grupos monocíclicos o policíclicos de anillo condensado (es decir, anillos que comparten pares adyacentes de átomos en el anillo). Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, una fracción arilo está opcionalmente sustituida por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Aralquilo" o "arilalquilo" se refiere a un radical (aril)alquil-en el que el arilo y el alquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para arilo y alquilo respectivamente.

"Éster" se refiere a un radical químico de fórmula -COOR, en la que R se elige de entre el grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a través de un carbono del anillo) y heteroalicíclico (unido a través de un

carbono del anillo). Cualquier cadena lateral de amina, hidroxi o carboxilo de los compuestos descritos en este documento puede estar esterificada. Los procedimientos y los grupos específicos para la elaboración de dichos ésteres son conocidos por los expertos en la materia y pueden encontrarse fácilmente en fuentes de referencia tales como Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3.sup.rd Ed., John Wiley & Sons, Nueva York, N. Y., 1999, que se incorpora al presente documento como referencia en su totalidad. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, un grupo éster está opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Fluoroalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se ha definido anteriormente, que está sustituido con uno o más radicales flúor, como se han definido anteriormente, por ejemplo, trifluorometilo, difluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1fluorometil-2-fluoroetilo y similares. La parte alquilo del radical fluoroalquilo puede estar opcionalmente sustituida como se ha definido anteriormente por un grupo alquilo.

"Halo", "haluro", o, como alternativa, "halógeno", significa flúor, cloro, bromo o yodo. Los términos "haloalquilo," "haloalquenilo," "haloalquinilo" y "haloalcoxi" incluyen estructuras de alquilo, alquenilo, alquinilo y alcoxi que están sustituidas con uno o más grupos halo o con combinaciones de los mismos. Por ejemplo, los términos "fluoroalquilo" y "fluoroalcoxi" incluyen grupos haloalquilo y haloalcoxi, respectivamente, en los que el halo es flúor.

"Heteroalquilo", "heteroalquenilo" y "heteroalquinilo" incluyen radicales alquilo, alquenilo y alquinilo opcionalmente sustituidos y que tienen uno o más átomos en la cadena del esqueleto elegidos de entre un átomo distinto al carbono, por ejemplo, oxígeno, nitrógeno, azufre, fósforo o combinaciones de los mismos. Puede proporcionarse un intervalo numérico, por ejemplo, heteroalquilo C1-C4 que se refiere a la longitud de la cadena en total, que en este ejemplo es de 4 átomos. Por ejemplo, un radical -CH2OCH2CH3 se denomina heteroalquilo "C4", que incluye el centro de heteroátomo en la descripción de la longitud de la cadena de átomo. La conexión con el resto de la molécula puede ser a través de un heteroátomo o de un carbono de la cadena de heteroalquilo. Un grupo heteroalquilo puede estar sustituido sustituido con uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloallcilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Heteroalquilarilo" se refiere a un radical -(heteroalquil)arilo en el que el heteroalquilo y el arilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heteroalquilo y arilo respectivamente.

"Heteroalquilheteroarilo" se refiere a un radical -(heteroalquil)heteroarilo en el que el heteroalquilo y el heteroarilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heteroalquilo y heteroarilo respectivamente.

"Heteroalquilheterocicloalquilo" se refiere a un radical -(heteroalquil)heterocicloalquilo en el que el heteroalquilo y el heteroarilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heteroalquilo y heterocicloalquilo respectivamente.

"Heteroalquilcicloalquilo" se refiere a un radical -(heteroalquil) cicloalquilo en el que el heteroalquilo y cicloalquilo son según se divulgan en este documento y que están opcionalmente sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos como sustituyentes adecuados para heteroalquilo y cicloalquilo respectivamente.

"Heteroarilo" o, como alternativa, "heteroaromático" se refiere a un radical aromático de entre 5 y 18 miembros (por ejemplo, heteroarilo C5-C13) que incluye uno o más heteroátomos en el anillo elegidos de entre nitrógeno, oxígeno y azufre y que puede ser un sistema anular monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico. Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 5 y 18" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 5 y 18 átomos en el anillo" significa que el grupo heteroarilo puede consistir en 5 átomos en el anillo, en 6 átomos en el anillo, etc., hasta, e incluyendo, 18 átomos en el anillo. Los radicales bivalentes derivados a partir de radicales heteroarilo univalentes cuyos nombres terminal en "-ilo" mediante la eliminación de un átomo de hidrógeno del átomo con la valencia libres se nombran añadiendo "-ideno" al nombre del correspondiente radical univalente, por ejemplo, un grupo piridilo con dos puntos de unión es un piridilideno. Una fracción "heteroaromática"

o "de heteroarilo" que contiene N se refiere a un grupo aromático en el que al menos uno de los átomos del esqueleto del anillo es un átomo de nitrógeno. El grupo heteroarilo policíclico puede estar condensado o no

condensado. El (los) heteroátomo(s) del radical heteroarilo está(n) opcionalmente oxidado(s). Uno o más átomos de nitrógeno, si estuvieran presentes, están opcionalmente cuaternizados. El heteroarilo está unido al resto de la molécula a través de cualquier átomo del (los) anillo(s). Algunos ejemplos de heteroarilos incluyen, pero no se limitan a, azepinilo, acridinilo, bencimidazolilo, benzindolilo, 1,3-benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzo[d]tiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[6][1,4]dioxepinilo, benzo[b][1,4]oxazinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzonaftofuranilo, benzoxazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzoxazolilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzofurazanilo, benzotiazolilo, benzotienil (benzotiofenilo), benzotieno[3,2d]pirimidinilo, benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinolinilo, ciclopenta[d]pirimidinilo, 6,7dihidro-5H-ciclopenta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 5,6-dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5,6-dihidrobenzo[h]cinolinilo, 6,7dihidro-5H-benzo[6,7]ciclohepta[1,2-c]piridazinilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furazanilo, furanonilo, furo[3,2-c]piridinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]pirimidinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]piridazinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]piridinilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, 5,8-metan-5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, naftiridinilo, 1,6naftiridinonilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 5,6,6a,7,8,9,10,10a-octahidrobenzo[h]quinazolinilo, 1fenil-1H-pirrolilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazolo[3,4-d] pirimidinilo, piridinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, pirido[3,4-d]pirimidinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 5,6,7,8tetrahidroquinazolinilo, 5,6,7,8-tetrahidrobenzo[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 6,7,8,9-tetrahidro-5Hciclohepta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 5,6,7,8-tetrahidropirido[4,5-c]piridazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiapiranilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo, tieno[3,2-d]pirimidinilo, tieno[2,3-c]pridinilo y tiofenilo (es decir tienilo). Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, una fracción heterarilo está opcionalmente sustituida por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2)

o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

Un heteroarilo sustituido también incluye sistemas anulares sustituidos con uno o más sustituyentes óxido (-O-), tales como N-óxidos de piridinilo.

"Heteroarilalquilo" se refiere a una fracción que tiene una fracción arilo, según se describe en este documento, conectada a una fracción alquileno, según se describe en este documento, en la que la conexión con el resto de la molécula es a través del grupo alquileno.

"Heterocicloalquilo" se refiere a un radical anular no aromático estable con entre 3 y 18 miembros que comprende entre dos y doce átomos de carbono y entre uno y seis heteroátomos elegidos de entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Siempre que aparezca en este documento, un intervalo numérico tal como "entre 3 y 18" se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, "entre 3 y 18 átomos en el anillo" significa que el grupo heterocicloalquilo puede consistir en 3 átomos en el anillo, en 4 átomos en el anillo, etc., hasta, e incluyendo, 18 átomos en el anillo. En algunas formas de realización, es un heterocicloalquilo C5-C10. En algunas formas de realización, es un heterocicloalquilo C4-C10. En algunas formas de realización, es un heterocicloalquilo C3-C10. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, el radical heterocicloalquilo es un sistema anular monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que pueden incluir sistemas anulares condensados o con puentes. Los heteroátomos del radical heterocicloalquilo pueden estar opcionalmente oxidados. Uno o más átomos de nitrógeno, si estuvieran presentes, están opcionalmente cuaternizados. El radical heterocicloalquilo está parcialmente o completamente saturado. El heterocicloalquilo puede estar unido al resto de la molécula a través de cualquier átomo del (los) anillo(s). Algunos ejemplos de dichos radicales heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, dioicolanilo, tienil[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofurilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo y 1,1-dioxotiomorfolinilo. Salvo que específicamente se establezca de otro modo en la memoria descriptiva, una fracción heterocicloalquilo está opcionalmente sustituida por uno o más sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tORa (en la que t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (en la que t es 1 o 2) o PO3(Ra)2, en los que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Heterocicloalquilo" también incluye sistemas anulares bicíclicos en los que un anillo no aromático, habitualmente de entre 3 y 7 átomos en el anillo, contiene al menos 2 átomos de carbono además de 1 -3 heteroátomos elegidos independientemente de entre oxígeno, azufre y nitrógeno, así como combinaciones que comprenden al menos uno de los anteriores heteroátomos; y el otro anillo, habitualmente con entre 3 y 7 átomos en el anillo, opcionalmente contiene 1 -3 heteroátomos elegidos independientemente de entre oxígeno, azufre y nitrógeno y no es aromático.

Los "isómeros" son compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Los "estereoisómeros" son isómeros que sólo difieren en la forma en la que los átomos están dispuestos en el espacio, es decir, que tienen una configuración estereoquímica diferente. Los "enantiómeros" son un par de estereoisómeros que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla "racémica". El término "(.±.)" se usa para indicar una mezcla racémica cuando sea apropiado. Los "diastereoisómeros" son estereoisómeros que tienen al menos dos carbonos asimétricos, pero que no son imágenes especulares entre sí. La estereoquímica absoluta se especifica de acuerdo con el sistema R-S de Cahn-Ingold-Prelog. Cuando un compuesto es un enantiómero puro, la estereoquímica en cada carbono quiral puede indicarse mediante R o S. Los compuestos resueltos cuya configuración absoluta sea desconocida pueden indicarse como (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextro o levorrotatorio) hacia la que rotan el plano de luz polarizada en la longitud de onda de la línea D del sodio. Algunos de los compuestos descritos en este documento contienen uno o más centros asimétricos y pueden por lo tanto dar lugar a enantiómeros, diastereómeros y a otras formas estereoisómeras que pueden definirse, en términos de estereoquímica absoluta, como (R)-o (S)-. Se entiende que las presentes entidades químicas, composiciones farmacéuticas y métodos incluyen todos de dichos posibles isómeros, incluyendo las mezclas racémicas, opcionalmente las formas puras y las mezclas intermedias. Los isómeros ópticamente activos (R) y (S) pueden ser preparados mediante el uso de sintones quirales o reactivos quirales, o resolverlos mediante el uso de técnicas convencionales. Cuando los compuestos descritos en este documento contienen dobles enlaces olefínicos u otros centros de asimetría geométrica y salvo que se indique de otro modo, se entiende que los compuestos incluyen los isómeros geométricos E y Z.

La "pureza enantiomérica", según se usa en el presente documento, se refiere a las cantidades relativas, expresadas en forma de un porcentaje, de la presencia de un enantiómero específico con respecto al otro enantiómero. Por ejemplo, si un compuesto, que puede tener potencialmente una configuración isómera (R) o (S), está presente en forma de una mezcla racémica, la pureza enantiomérica es aproximadamente el 50 % con respecto a cualquiera de los isómeros (R) o (S). Si ese compuesto tiene una forma isómera predominante sobre la otra, por ejemplo, un 80 % de (S) y un 20 % de (R), la pureza enantiomérica del compuesto con respecto a la forma isómera

(S) es del 80 %. La pureza enantiomérica de un compuesto puede ser determinada mediante diversas formas conocidas en la materia, que incluyen, pero no se limitan a, una cromatografía mediante el uso de un soporte quiral, la medición polarimétrica de la rotación de la luz polarizada, una espectroscopía de resonancia magnética nuclear mediante el uso de reactivos de desplazamiento quirales que incluyen, pero no se limitan a, complejos quirales que contienen lantánidos o alcohol de Pirkle, o una derivatización de los compuestos mediante el uso de un compuesto quiral compuesto tal como ácido de Mosher, seguida de cromatografía o una espectroscopía de resonancia magnética nuclear.

"Fracción" se refiere a un segmento específico o grupo funcional de una molécula. Las fracciones químicas son a menudo entidades químicas reconocidas incluidas en, o anexas a, una molécula.

"Nitro" se refiere al radical NO2.

"Oxa" se refiere al radical -O-.

"Oxo" se refiere al radical =O.

Los "tautómeros" son isómeros estructuralmente distintos que se interconvierten mediante una tautomería. La "tautomería" es una forma de isomería e incluye la tautomería prototrópica o de desplazamiento de protón, que es considerada como un subconjunto de la química ácido-base. La "tautomería prototrópica" o "tautomería de desplazamiento de protón" implica la migración de un protón acompañada por cambios en el orden de los enlaces, a menudo el intercambio de un enlace sencillo por el doble enlace adyacente. Cuando es posible una tautomería (por ejemplo, en solución), puede alcanzarse un equilibrio químico de los tautómeros. Un ejemplo de tautomería es la tautomería cetoenólica. Un ejemplo específico de tautomería cetoenólica es la interconversión de los tautómeros pentano-2,4-diona y 4-hidroxipent-3-en-2-ona. Otro ejemplo de tautomería es la tautomería cetofenólica. Un ejemplo específico de tautomería cetofenólica es la interconversión de los tautómeros piridin-4-ol y piridin-4(IH)-ona.

Los términos "enriquecido enantioméricamente", "enantioméricamente puro" y "no racémico", según se usan de forma intercambiable en este documento, se refieren a composiciones en las que el porcentaje en peso de un enantiómero es mayor que la cantidad de ese enantiómero en una mezcla de control de la composición racémica de (por ejemplo, mayor de 1:1 en peso). Por ejemplo, una preparación enriquecida enantioméricamente en el enantiómero (S) significa una preparación del compuesto que tiene más del 50 % en peso del enantiómero (S) con respecto al enantiómero (R), más preferiblemente al menos el 75 % en peso, e incluso más preferiblemente al menos el 80 % en peso. En algunas formas de realización, el enriquecimiento puede ser mucho mayor del 80 % en peso, proporcionando una preparación "sustancialmente enriquecida enantioméricamente", "sustancialmente enantioméricamente pura" o "sustancialmente no racémica", que se refiere a preparaciones de composiciones que tienen al menos un 85 % en peso de un enantiómero con respecto al otro enantiómero, más preferiblemente al menos un 90 % en peso, e incluso más preferiblemente al menos un 95 % en peso.

En las formas de realización preferidas, la composición enriquecida enantioméricamente tiene una potencia mayor con respecto a la utilidad terapéutica por unidad de masa de lo que la tiene la mezcla racémica de esa composición. Los enantiómeros pueden ser aislados a partir de mezclas mediante métodos conocidos por los expertos en la materia, que incluyen una cromatografía líquida quiral a alta presión (HPLC) y la formación y la cristalización de sales quirales; o los enantiómeros preferidos pueden prepararse mediante síntesis asimétricas. Véase, por ejemplo, Jacques, et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, Nueva York, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33: 2725 (1977); Eliel, E. L. Stereochemistry of Carbon Compuestos (McGraw-Hill, NY, 1962); y Wilen, S. H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions pág. 268 (E. L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972).

Los compuestos de la presente invención también pueden contener unas proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen dichos compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radiomarcados con isótopos radioactivos, tales como, por ejemplo, tritio (3H) yodo-125 (125I) o carbono-14 (14C). Todas las variantes isotópicas de los compuestos de la presente invención, tanto radioactivas como no radioactivas, están incluídas en el ámbito de la presente invención.

Un "grupo o átomo saliente" es cualquier grupo o átomo que se escindirá, en las condiciones de reacción, del material de partida, promoviendo así la reacción en un sitio específico. Algunos ejemplos adecuados de dichos grupos, salvo que se especifique de otro modo, son átomos de halógeno, grupos mesiloxi, p-nitrobenzensulfoniloxi y tosiloxi.

Un "grupo protector" tiene el significado asociado convencionalmente al mismo en la síntesis orgánica, es decir, un grupo que bloquea selectivamente uno o más sitios reactivos de un compuesto multifuncional, de forma que una reacción química puede realizarse de forma selectiva sobre otro sitio reactivo sin proteger y de forma que el grupo pueda ser fácilmente eliminado después de que se haya completado la reacción selectiva. Se divulgan diversos grupos protectores, por ejemplo, en T. H. Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, John Wiley & Sons, Nueva York (1999). Por ejemplo, una forma hidroxi protegida es cuando al menos uno de los grupos hidroxi presentes en un compuesto está protegido con un grupo protector hidroxi. Asimismo, de forma similar pueden protegerse las aminas y otros grupos reactivos.

Un "solvato" se refiere a un compuesto (por ejemplo, un compuesto elegido de entre la Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en asociación física con una o más moléculas de un disolvente farmacéuticamente aceptable. Se entenderá que "un compuesto de Fórmula I" engloba el compuesto de Fórmula I y los solvatos del compuesto, así como las mezclas de los mismos.

"Sustituido" significa que el grupo indicado puede estar sustituido con uno o más grupo(s) adicional(es) y se elige independientemente de entre acilo, alquilo, alquilarilo, cicloalquilo, aralquilo, arilo, carbohidrato, carbonato, heteroarilo, heterocicloalquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, mercapto, alquiltio, ariltio, ciano, halo, carbonilo, éster, tiocarbonilo, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, oxo, perhaloalquilo, perfluoroalquilo, fosfato, sililo, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamidilo, sulfoxilo, sulfonato, urea y amino, incluyendo grupos amino mono y disustituidos y los derivados protegidos de los mismos. Los grupos amino disustituidos engloban aquellos que forman un anillo junto con el nitrógeno del grupo amino, tales como, por ejemplo, morfolino. Los propios sustituyentes pueden estar sustituidos, por ejemplo, un sustituyente cicloalquilo puede tener un haluro sustituido en uno o más de los carbonos del anillo y similares. Los grupos protectores que pueden formar los derivados protectores de los sustituyentes anteriores son conocidos por los expertos en la materia y pueden encontrarse en referencias tales como Greene y Wuts, más arriba.

"Sulfanilo" se refiere a los grupos: -S-(alquilo opcionalmente sustituido), -S-(arilo opcionalmente sustituido), -S(heteroarilo opcionalmente sustituido) y -S-(heterocicloalquilo opcionalmente sustituido).

"Sulfinilo" se refiere a los grupos: -S(O)-H, -S(O)-(alquilo opcionalmente sustituido), -S(O)-(amino opcionalmente sustituido), -S(O)-(arilo opcionalmente sustituido), -S(O)-(heteroarilo opcionalmente sustituido) y -S(O)(heterocicloalquilo opcionalmente sustituido).

"Sulfonilo" se refiere a los grupos: -S(O2)-H, S(O2)-(alquilo opcionalmente sustituido), -S(O2)-(amino opcionalmente sustituido), -S(O2)-(arilo opcionalmente sustituido), -S(O2)-(heteroarilo opcionalmente sustituido) y -S(O2)(heterocicloalquilo opcionalmente sustituido).

"Sulfonamidilo" o "sulfonamido" se refiere a un radical -S(=O)2-NRR, en el que cada R se elige independientemente de entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a través de un carbono del anillo) y heteroalicíclico (unido a través de un carbono del anillo). Los grupos R de -NRR del radical -S(=O)2-NRR pueden tomarse junto con el nitrógeno al que están unidos para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. En algunas formas de realización, es un sulfonamido C1-C10, en el que cada R del sulfonamido contiene 1 carbono, 2 carbonos, 3 carbonos o 4 carbonos en total. Un grupo sulfonamido está opcionalmente sustituido por uno o más de los sustituyentes descritos para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, respectivamente

"Sulfoxilo" se refiere a un radical -S(=O)2OH.

"Sulfonato" se refiere a un radical -S(=O)2-OR, en el que R se elige de entre el grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a través de un carbono del anillo) y heteroalicíclico (unido a través de un carbono del anillo). Un grupo sulfonato está opcionalmente sustituido en R por uno o más de los sustituyentes descritos para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, respectivamente.

Cuando los grupos sustituyentes están indicados por sus fórmulas químicas convencionales, escritas de izquierda a derecha, igualmente engloban los sustituyentes químicamente idénticos que serían el resultado de escribir la estructura de derecha a izquierda, por ejemplo, -CH2O-es equivalente a -OCH2-.

Los compuestos de la presente invención también incluyen las formas cristalinas y amorfas de estos compuestos, incluyendo, por ejemplo, polimorfos, pseudopolimorfos, solvatos, hidratos, polimorfos no solvatados (incluyendo anhidratos), polimorfos conformacionales y formas amorfas de los compuestos, así como mezclas de los mismos. "Forma cristalina", "polimorfo" y "forma nueva" pueden usarse de forma intercambiable en este documento y se entiende que incluyen todas las formas cristalinas y amorfas del compuesto, incluyendo, por ejemplo, polimorfos, pseudopolimorfos, solvatos, hidratos, polimorfos no solvatados (incluyendo anhidratos), polimorfos conformacionales y formas amorfas, así como mezclas de los mismos, salvo que se mencione una forma cristalina o amorfa en particular.

Las formas farmacéuticamente aceptables de los compuestos citados en este documento incluyen las sales farmacéuticamente aceptables, los quelatos, los complejos no covalentes y las mezclas de los mismos. En ciertas formas de realización, los compuestos descritos en este documento están en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Por lo tanto, los términos "cantidad química" y "entidades químicas" también engloban las sales farmacéuticamente aceptables, los quelatos, los complejos no covalentes y las mezclas.

Además, si el compuesto de Fórmula I o 1a se obtiene en forma de una sal de adición ácida, la base libre puede obtenerse basificando una solución de la sal ácida. Por el contrario, si el producto es una base libre, puede producirse una sal de adición, particularmente una sal de adición farmacéuticamente aceptable, disolviendo la base libre en un disolvente orgánico adecuado y tratando la solución con un ácido, de acuerdo con los procedimientos convencionales para la preparación de sales de adición ácida a partir de compuestos básicos. Los expertos en la materia reconocerán diversas metodologías sintéticas que pueden usarse para la preparación de sales de adición ácida no tóxicas farmacéuticamente aceptables. En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I, a continuación, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que

Fórmula I

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula Ia, a continuación, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que

Fórmula Ia 15

En algunas formas de realización, el compuesto es una mezcla racémica de isómeros (S) y (R) con respecto al carbono X, en el que el carbono X es el carbono quiral del compuesto de Fórmula I. En otras formas de realización, la presente invención proporciona una mezcla de compuestos de Fórmula I en la que los compuestos individuales de la mezcla existen predominantemente en una configuración isómera (S) o (R). Por ejemplo, la mezcla del compuesto tiene una pureza enantiomérica en (S) de más de aproximadamente el 55 %, de aproximadamente el 60 %, de aproximadamente el 65 %, de aproximadamente el 70 %, de aproximadamente el 75 %, de aproximadamente el 80 %, de aproximadamente el 85 %, de aproximadamente el 90 %, de aproximadamente el 95 %, de aproximadamente el 96 %, de aproximadamente el 97 %, de aproximadamente el 98 %, de aproximadamente el 99 %, de aproximadamente el 99.5 %, o más en el carbono X. En otras formas de realización, la mezcla del compuesto tiene una pureza enantiomérica en (S) de desde más de aproximadamente el 55 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de aproximadamente el aproximadamente el 60 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 65 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 70 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 75 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 80 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 85 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 90 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 95 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 96 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 97 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 98 % hasta más de aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 99 % hasta aproximadamente el 99,5 %, o más.

En otras formas de realización, la mezcla del compuesto tiene una pureza enantiomérica en (R) de más de aproximadamente el 55 %, de aproximadamente el 60 %, de aproximadamente el 65 %, de aproximadamente el 70 %, de aproximadamente el 75 %, de aproximadamente el 80 %, de aproximadamente el 85 %, de aproximadamente el 90 %, de aproximadamente el 95 %, de aproximadamente el 96 %, de aproximadamente el 97 %, de aproximadamente el 98 %, de aproximadamente el 99 %, de aproximadamente el 99,5 %, o más en el carbono X, en algunas otras formas de realización, la mezcla del compuesto tiene una pureza enantiomérica en (R) de más de desde aproximadamente el 55 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el aproximadamente el 60 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 65 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 70 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 75 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 80 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 85 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 90 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 95 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 96 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 97 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 98 % hasta más de aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 99 % hasta aproximadamente el 99,5 %, o más.

En otras formas de realización, la mezcla del compuesto contiene entidades químicas idénticas excepto por sus orientaciones estereoquímicas, a saber, los isómeros (S) o (R). En otra forma de realización, la mezcla de las entidades químicas idénticas (excepto por sus orientaciones estereoquímicas) contiene predominantemente isómeros (S) o predominantemente isómeros (R). Por ejemplo, los isómeros (S) de la mezcla de entidades químicas idénticas están presentes en aproximadamente el 55 %, en aproximadamente el 60 %, en aproximadamente el 65 %, en aproximadamente el 70 %, en aproximadamente el 75 %, en aproximadamente el 80 %, en aproximadamente el 85 %, en aproximadamente el 90 %, en aproximadamente el 95 %, en aproximadamente el 96 %, en aproximadamente el 97 %, en aproximadamente el 98 %, en aproximadamente el 99 %, en aproximadamente el 99,5 %, o más, con respecto a los isómeros (R). En algunas formas de realización, los isómeros (S) de la mezcla de entidades químicas idénticas están presentes en una pureza enantiomérica de (S) de más de desde aproximadamente el 55 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente aproximadamente el 60 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente 65 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 70 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 75 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 80 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 85 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 90 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 95 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 96 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 97 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 98 % hasta más de aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 99 % hasta aproximadamente el 99,5 %, o más.

En otra forma de realización, los isómeros (R) de la mezcla de entidades químicas idénticas (excepto por sus orientaciones estereoquímicas) están presentes en aproximadamente el 55 %, en aproximadamente el 60 %, en aproximadamente el 65 %, en aproximadamente el 70 %, en aproximadamente el 75 %, en aproximadamente el 80 %, en aproximadamente el 85 %, en aproximadamente el 90 %, en aproximadamente el 95 %, en aproximadamente el 96 %, en aproximadamente el 97 %, en aproximadamente el 98 %, en aproximadamente el 99 %, en aproximadamente el 99,5 %, o más, con respecto a los isómeros (S). En algunas formas de realización, los isómeros

(R) en la mezcla de entidades químicas idénticas (excepto por sus orientaciones estereoquímicas), están presentes en una pureza enantiomérica de (R) de más de desde aproximadamente el 55 % hasta aproximadamente el 99,5 %,

de más de desde aproximadamente el aproximadamente el 60 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 65 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 70 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 75 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 80 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 85 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 90 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 95 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 96 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 97 % hasta aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 98 % hasta más de aproximadamente el 99,5 %, de más de desde aproximadamente el 99 % hasta aproximadamente el 99,5 %, o más.

Las entidades químicas descritas en este documento pueden ser sintetizados de acuerdo con uno o más de los esquemas ilustrativos de este documento y / o con las técnicas bien conocidas en la materia.

Salvo que se especifique lo contrario, las reacciones descritas en este documento tiene lugar a la presión atmosférica, generalmente en un intervalo de temperatura de desde -10 ºC hasta 200 ºC. Además, excepto que se especifique de otro modo, los tiempos y las condiciones de reacción pretenden ser aproximados, por ejemplo, teniendo lugar a aproximadamente la presión atmosférica en un intervalo de temperatura de desde aproximadamente -10 ºC hasta aproximadamente el 110 ºC durante un periodo de desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 24 horas; las reacciones que se dejan durante una noche promedian un período de aproximadamente 16 horas.

Los términos "disolvente", "disolvente orgánico" y "disolvente inerte" significan cada uno un disolvente inerte en las condiciones de la reacción que se están escribiendo junto con el mismo, incluyendo, por ejemplo, benceno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano ("THF"), dimetilformamida ("DMF"), cloroformo, cloruro de metileno (o diclorometano), éter dietílico, metanol, N-metilpirrolidona ("NMP"), piridina y similares. Salvo que se especifique lo contrario, los disolventes usados en las reacciones descritas en este documento son disolventes orgánicos inertes. Salvo que se especifique lo contrario, por cada gramo de reactivo limitante, un cc (o ml) de disolvente constituye un equivalente en volumen.

El aislamiento y la purificación de las entidades químicas y los intermedios descritos en este documento puede efectuarse, si se desea, mediante cualquier procedimiento adecuado de separación o de purificación, tal como, por ejemplo, filtración, extracción, cristalización, cromatografía en columna, cromatografía en capa fina o cromatografía en capa gruesa, o una combinación de estos procedimientos. Algunas ilustraciones específicas de los procedimientos adecuados de separación y aislamiento pueden tenerse como referencia en los ejemplos en este documento, más abajo. Sin embargo, también pueden usarse otros procedimientos equivalentes de separación o de aislamiento.

Cuando se desee, los isómeros (R) y (S) de los compuestos de la presente invención, si estuvieran presentes, pueden resolverse mediante los métodos conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo, mediante la formación de sales o de complejos diastereoisómeros que pueden separarse, por ejemplo, mediante cristalización; a través de la formación de derivados diastereoisómeros que pueden separarse, por ejemplo, mediante una cristalización, una cromatografía de gas-líquido o una cromatografía líquida; la reacción selectiva de un enantiómero con un reactivo específico del enantiómero, por ejemplo, una oxidación o una reducción enzimática, seguida de la separación de los enantiómeros modificados y sin modificar; o una cromatografía de gas-líquido o líquida en un entorno quiral, por ejemplo, sobre un soporte quiral, tal como sílice con un ligando quiral unido, o en presencia de un disolvente quiral. Alternativamente, puede sintetizarse un enantiómero específico mediante una síntesis asimétrica mediante el uso de reactivos, sustratos, catalizadores o disolventes ópticamente activos, o mediante la conversión de un enantiómero en el otro mediante una transformación asimétrica.

Los compuestos descritos en este documento pueden ponerse opcionalmente en contacto con un ácido farmacéuticamente aceptable para formar las correspondientes sales de adición ácida.

Muchos de los compuestos de partida opcionalmente sustituidos y otros reactivos están disponibles en el mercado, por ejemplo, en Aldrich Chemical Company (Milwaukee, WI) o pueden ser fácilmente preparados por los expertos en la materia mediante el uso de la metodología sintética empleada habitualmente.

Los compuestos de la invención pueden ser sintetizados de forma general mediante una combinación apropiada de métodos sintéticos generalmente bien conocidos. Las técnicas útiles en la síntesis de estas entidades químicas son tanto fácilmente apreciables como accesibles para los expertos en la materia pertinente, basándose en la actual divulgación.

Los compuestos de la invención pueden ser sintetizados mediante una combinación apropiada de métodos sintéticos conocidos en la materia. El siguiente análisis se ofrece para ilustrar algunos de los diversos métodos disponibles para su uso en la elaboración de los compuestos de la invención, y no pretende limitar el ámbito de las reacciones o las secuencias de reacción que pueden usarse en la preparación de los compuestos de la presente invención. Los Esquemas de Reacción proporcionados en este documento no pretenden extender la protección

requerida más allá de los compuestos específicamente reivindicados.

Esquema de Reacción 1

Con respecto al Esquema 1, Etapa 1, un compuesto de Fórmula 101, en la que X es N o CR7, se convierte en un

compuesto de Fórmula 103, por ejemplo, a través de un proceso en dos etapas de acoplamiento de Heck con un

compuesto de Fórmula 102, seguido de una ciclación catalizada por ácido en metanol. El producto, un compuesto de 10 Fórmula 103, se aísla. Con respecto al Esquema 1, Etapa 2, un compuesto de Fórmula 103 se convierte en un

compuesto de Fórmula 404, por ejemplo, a través de la reacción con una amiga sustituida apropiadamente. El

producto, un compuesto de Fórmula 104, se aísla. Con respecto al Esquema 1, Etapa 3, un compuesto de Fórmula

104 se convierte en un compuesto de Fórmula 105, por ejemplo, a través de una reducción con hidruro de litio y

aluminio. El producto, un compuesto de Fórmula 105, se aísla. Con respecto al Esquema 1, Etapa 4, un compuesto 15 de Fórmula 105 se convierte en un compuesto de Fórmula 106, por ejemplo, a través de una reacción con cloruro de

tionilo. El producto, un compuesto de Fórmula 106, se aísla. Con respecto al Esquema 1, Etapa 5, un compuesto de

Fórmula 106 se convierte en un compuesto de Fórmula 107, por ejemplo, a través de una alquilación con una

pirrazolopirimidina mediante el uso de una base tal como carbonato de potasio. El producto, un compuesto de

Fórmula 107, se aísla. Con respecto al Esquema 1, Etapa 6, un compuesto de Fórmula 107 se convierte en un 20 compuesto de Fórmula 108, por ejemplo, a través de una reacción de Suzuki. El producto, un compuesto de Fórmula

108, se aísla y opcionalmente se purifica.

Esquema de Reacción 2:

5 Con respecto al Esquema 2, Etapa 1, un compuesto de Fórmula 201, en la que X es N o CR7, se convierte en un compuesto de Fórmula 202, por ejemplo, con un reactivo adecuado para la introducción de un cloruro de ácido, por ejemplo, cloruro de oxalilo. El producto, un compuesto de Fórmula 202, opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 2, un compuesto de Fórmula 202 se convierte en un compuesto de Fórmula 503 por ejemplo, mediante la reacción con, por ejemplo, una arilamina. El producto, un compuesto de Fórmula 203, se aísla. Con

10 respecto al Esquema 2, Etapa 3, un compuesto de Fórmula 203 se convierte en un compuesto de Fórmula 204, por ejemplo, a través de un acoplamiento de Stille mediante el uso de un vinil-estanano apropiado. El producto, un compuesto de Fórmula 204, se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 4, un compuesto de Fórmula 204 se convierte en una amida terciaria, un compuesto de Fórmula 205, a través de una reacción con cloroacetato de etilo y una base de hidruro de sodio. El compuesto de Fórmula 205 se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 5, un

15 compuesto de Fórmula 205 es oxidado a un aldehído, mediante el uso de, por ejemplo, tetraóxido de osmonio y peryodinato de sodio. El producto, un compuesto de Fórmula 206, se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 6, un compuesto de Fórmula 206 se convierte en un compuesto de Fórmula 104, por ejemplo, a través de una reacción aldólica en etanol con una base, tal como carbonato de cesio. El producto, un compuesto de Fórmula 104, se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 7, un compuesto de Fórmula 104 se reduce a un alcohol primario a través de una

20 reducción con, por ejemplo, hidruro de litio y aluminio, para producir un compuesto de Fórmula 105, que se aísla. Con respecto al Esquema 2, Etapa 8, un compuesto de Fórmula 105 se convierte en un compuesto de Fórmula 207 a través de una reacción con tetrabromuro de carbono y trifenilfosfina. El compuesto de Fórmula 207 se aísla. Este compuesto puede ser un intermedio central intermedio en la síntesis de los compuestos de la invención.

Esquema de Reacción 3:

Con respecto al Esquema 3, Etapa 9, un compuesto de Fórmula 207, en la que X es N o CR7, es sintetizado según

5 se describe en el Esquema de Reacción 2 y se convierte en un compuesto de Fórmula 107 a través de un acoplamiento con el compuesto de Fórmula 208 en presencia de una base, por ejemplo, t-butóxido de potasio. El compuesto de Fórmula 107 se aísla. Con respecto al Esquema 3, Etapa 10, un compuesto de Fórmula 107 se convierte en un compuesto de Fórmula 108 a través de un acoplamiento con, por ejemplo, un ácido arilborónico, en presencia de catalizadores de acoplamiento y una base, por ejemplo, acetato de paladio, trifenilfosfina y carbonato

10 de sodio, por ejemplo. El compuesto de Fórmula 108 se aísla.

Esquema de Reacción 4A:

Esquema de Reacción 4B:

Con respecto al Esquema de Reacción 4A, que ilustra la síntesis de una clase general de isoquinolonas sustituidas

5 con purinilo, Etapa 1, el éster de yodo 401, se hace reaccionar con un alquino de Fórmula 400-A en presencia de un catalizador de paladio yoduro de cobre y trietilamina (TEA) para acoplar el alquino al núcleo de arilo del compuesto 401 para producir un compuesto de Fórmula 402. El compuesto de Fórmula 402 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 4, Etapa 2, un compuesto de Fórmula 402 se trata con una base de hidróxido de potasio para obtener el ácido carboxílico, un compuesto de Fórmula 403, si el producto de la reacción se acidifica, o

10 su sal. El compuesto de Fórmula 403 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 4, Etapa 3, un compuesto de Fórmula 403 se trata con bis (acetonitrilo) dicloropaladio (II) y TEA para efectuar un cierre del anillo intramolecular para producir un compuesto de Fórmula 404. El compuesto de Fórmula 404 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 4, Etapa 4, un compuesto de Fórmula 404 se hace reaccionar con una amina primaria para producir un compuesto de Fórmula 405. El compuesto de Fórmula 405 opcionalmente se aísla. Con respecto al

15 Esquema de Reacción 4, Etapa 5, un compuesto de Fórmula 405 se trata con ácido clorhídrico, eliminando el grupo protector del nitrógeno y para obtener un compuesto de Fórmula 406. El compuesto de Fórmula 406 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 4, Etapa 6, un compuesto de Fórmula 406 se hace reaccionar con un compuesto de Fórmula 407, para producir un compuesto de Fórmula 408. El compuesto de Fórmula 408 se aísla.

20 En el Esquema de Reacción 4B, se ilustra la síntesis de un subconjunto de isoquinolonas sustituidas con purinilo, en las que R9 es metilo y Ra es hidrógeno, mediante el uso de las transformaciones sintéticas descritas en el Esquema de Reacción 4A.

Esquema de Reacción 5:

Con respecto al Esquema de Reacción 5, Etapa 1, se hace reaccionar el éster de yodo 401 con el alquino 501 en

5 presencia de un catalizador de acoplamiento de paladio yoduro de cobre y TEA, para obtener un compuesto de Fórmula 502. El compuesto de Fórmula 502 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 5, Etapa 2, el compuesto de Fórmula 502 se trata con hidróxido de potasio base para obtener el carboxilato o el ácido libre de un compuesto de Fórmula 503. Con respecto al Esquema de Reacción 5, Etapa 3, el compuesto de Fórmula 503 se trata con bis (acetonitrilo) dicloropaladio (II) y TEA para efectuar el cierre del anillo intramolecular para producir un

10 compuesto de Fórmula 504. El compuesto de Fórmula 504 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 5, Etapa 4, el compuesto de Fórmula 504 se trata con una amina primaria para producir un compuesto de Fórmula 505. El compuesto de Fórmula 505 se aísla.

Esquema de Reacción 6A:

Esquema de Reacción 6B:

Con respecto al Esquema de Reacción 6A, que ilustra la síntesis de una clase general de isoquinolonas sustituidas

5 con purinilo, Etapa 1, se hace reaccionar el éster de yodo 401 con el alquino 601 en presencia de un catalizador de acoplamiento de paladio yoduro de cobre y TEA, para obtener un compuesto de Fórmula 602. El compuesto de Fórmula 602 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 6, Etapa 2, el compuesto de Fórmula 602 se trata con hidróxido de potasio base para obtener el carboxilato o el ácido libre de un compuesto de Fórmula

603. Con respecto al Esquema de Reacción 6, Etapa 3, el compuesto de Fórmula 603 se trata con bis (acetonitrilo)

10 dicloropaladio (II) y TEA para efectuar el cierre del anillo intramolecular para producir un compuesto de Fórmula 604. El compuesto de Fórmula 604 opcionalmente se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 6, Etapa 4, el compuesto de Fórmula 604 se trata con una amina primaria para producir un compuesto de Fórmula 605. El compuesto de Fórmula 605 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 6, Etapa 5, el compuesto de Fórmula 605 se trata con ácido para eliminar el grupo protector de THP para obtener un compuesto de Fórmula 606. El

15 compuesto de Fórmula 606 se aísla.

En el Esquema de Reacción 6B, se ilustra la síntesis de isoquinolonas sustituidas con purinilo, en las que R9 es metilo y Ra es hidrógeno, mediante el uso de las transformaciones sintéticas descritas en el Esquema de Reacción 6A.

Esquema de Reacción 7A:

Esquema de Reacción 7B:

5 Con respecto al Esquema de Reacción 7A, que ilustra la síntesis de isoquinolionas sustituidas con purinilo o pirazolopirimidinilo que comprende un sustituyente de alquilamina en la posición representada por B en la Fórmula I, Etapa 1 el compuesto de Fórmula 701 es sintetizado mediante diversas rutas sintéticas, incluyendo variaciones de los Esquemas 1 o 2 en los que se usa, por ejemplo, una bencilamina en la etapa de conversión de un compuesto de

10 Fórmula 103 en un compuesto de Fórmula 104. El grupo protector de bencilo de la amina puede ser eliminado mediante una química de desprotección estándar para un compuesto de 701. Otro ejemplo de una conversión de un compuesto de Fórmula 103 en un compuesto de Fórmula 701, el tratamiento del compuesto de Fórmula 103 con amoníaco produces el compuesto de Fórmula 701. El compuesto de Fórmula 701 se convierte en un compuesto de Fórmula 702 mediante una alquilación del nitrógeno de la amida con varios sintones que contienen 2-carbonos que

15 pueden ser desprotegidos, oxidados y protegidos de nuevo en forma del respectivo cetal, el compuesto de Fórmula

702. Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 2-1, el compuesto de Fórmula 702 es transformado mediante, por ejemplo, una aminación reductora de la fracción éster para introducir la fracción de purinilo de un compuesto de Fórmula 703, o como alternativa, es alquilado para introducir así una fracción de purinilo y obtener un compuesto de Fórmula 703. Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 3-1, el compuesto de Fórmula 703 se trata con ácido

20 para eliminar el grupo protector de cetal para producir un compuesto de Fórmula 704. El compuesto de Fórmula 704 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 4-1, el compuesto de Fórmula 704 es aminado reductoramente con una amina para producir un compuesto de Fórmula 705. El compuesto de Fórmula 705 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 2-2, el compuesto de Fórmula 702 es transformado mediante las

etapas 7 y 8 del Esquema 2 y la etapa 9 del Esquema 3 para introducir la fracción de pirazolopirimidina de un compuesto de Fórmula 706. El compuesto de Fórmula 706 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 3-2, el compuesto de Fórmula 706 se trata con un ácido para eliminar el grupo protector de cetal para producir un compuesto de Fórmula 707. El compuesto de Fórmula 707 se aísla.

5 Con respecto al Esquema de Reacción 7, Etapa 4-2, el compuesto de Fórmula 707 es aminado reductoramente con una amina para producir un compuesto de Fórmula 708. El compuesto de Fórmula 708 se aísla.

En el Esquema de Reacción 7B, se ilustra la síntesis de compuestos en los que R9 es metilo y Ra es hidrógeno, 10 mediante el uso de las etapas descritas en el Esquema 7A.

Esquema de Reacción 8:

15 Con respecto al Esquema de Reacción 8, Etapa 1, el compuesto de Fórmula 701 es sintetizado según se describe en el Esquema 7 o en cualquier otra química generalmente conocida. El compuesto de Fórmula 701 es transformado mediante una alquilación del nitrógeno de la amida con varios sintones que contienen 2-carbonos que pueden ser desprotegidos y convertidos en la especie protegida de alcoxi según se muestra en el compuesto de Fórmula 801, que puede aislarse. Con respecto al Esquema de Reacción 8, Etapa 2, el compuesto de Fórmula 801 se convierte a

20 través de la química descrita en la Etapa 2-1 del Esquema 7 para introducir una fracción de purinilo y que el compuesto resultante es transformado mediante una desprotección, una activación y una aminación con una amina para producir un compuesto de Fórmula 802, que se aísla.

Con respecto al Esquema de Reacción 8, Etapa 3, el compuesto de Fórmula 801 se convierte a través de la química

25 descrita en la Etapa 2-2 del Esquema 7 para introducir una fracción de pirazolopirimidina, y el compuesto resultante es transformado mediante una desprotección, una activación y una aminación con una amina para producir un compuesto de Fórmula 803, que se aísla.

Esquema de Reacción 9:

Con respecto al Esquema de Reacción 9, Etapa 1, el compuesto de Fórmula 901 se trata con una amina para producir un compuesto de Fórmula 902. El compuesto de Fórmula 902 se aísla. Con respecto al Esquema de 5 Reacción 9, Etapa 2, el compuesto de Fórmula 902 se trata con oxicloruro de fósforo para generar un compuesto de Fórmula 903. El compuesto de Fórmula 903 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 9, Etapa 3, el compuesto de Fórmula 903 se hace reaccionar con una aminopurina de Fórmula 904 para obtener un compuesto de Fórmula 905. El compuesto de Fórmula 905 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 9, Etapa 4, el compuesto de Fórmula 905 se trata con ácido clorhídrico para eliminar el grupo protector del nitrógeno de la fracción

10 de purina para producir un compuesto de Fórmula 906. El compuesto de 906 se aísla.

Esquema de Reacción 10:

15 Con respecto al Esquema de Reacción 10, Etapa 1, el compuesto de Fórmula 1001 se trata con un éster vinílogo 1002 mediante el uso de, por ejemplo, una reacción de Heck con una posterior ciclación, para producir un compuesto de Fórmula 1003. El compuesto de Fórmula 1003 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 10, Etapa 2, el compuesto de Fórmula 1003 se hace reaccionar con 4-amino N-Boc piperidina para producir un compuesto de Fórmula 1004. El compuesto de Fórmula 1004 se aísla. El compuesto de Fórmula 1004 puede usarse

20 como un intermedio en la síntesis de los compuestos de la invención.

Esquema de Reacción 11:

25 Con respecto al Esquema de Reacción 11, Etapa 1, el compuesto de Fórmula 1101 se trata con un alcohol alquinílico, por ejemplo, de Fórmula 1102, en presencia de yoduro de cobre y paladio sobre un catalizador de carbono, para producir un compuesto de Fórmula 1103. El compuesto de Fórmula 1103 se aísla. Con respecto al Esquema de Reacción 11, Etapa 1, el compuesto de Fórmula 1102 se hace reaccionar con 4-amino N-Boc piperidina para producir un compuesto de Fórmula 1103. El compuesto de Fórmula 1103 se aísla. El compuesto de

30 Fórmula 1103 puede usarse como un intermedio en la síntesis de los compuestos de la invención.

Esquema de Reacción 12:

Otra metodología para la síntesis de los compuestos de Fórmula I se ilustra en el Esquema 12. Con respecto a la

5 Etapa 1, el compuesto de Fórmula 1201 se trata con un agente de cloración tal como cloruro de oxalilo para producir un cloruro de ácido de Fórmula 1202. En la Etapa 2, el compuesto de Fórmula 1202 se hace reaccionar con un compuesto de Fórmula R’NH2 en presencia de una base tal como trietilamina, para producir un compuesto de Fórmula 1203. En algunas formas de realización, el agente de clonación usado para la conversión de compuesto 1201 es el cloruro de tionilo, por ejemplo, cloruro de tionilo en tolueno. Cuando se usa cloruro de tionilo, las etapas 1

10 y 2 pueden combinarse para formar una reacción en un único recipiente. En la Etapa 3, el compuesto de Fórmula 1203 se trata con n-butil-litio y después se hace reaccionar con un oxalato de dialquilo tal como oxalato de dietilo para producir un compuesto de Fórmula 1204. En la Etapa 4, el compuesto de Fórmula 1204 se calienta a reflujo en una solución ácida, por ejemplo, ácido clorhídrico en metanol como para producir un compuesto de Fórmula 1205. En la Etapa 5, el compuesto de Fórmula 1205 se trata con un agente reductor tal como hidruro de litio y aluminio

15 para producir un compuesto de Fórmula 1206. En la Etapa 6, el compuesto de Fórmula 1206 se hace reaccionar con un agente de bromación tal como tribromuro de fósforo, en presencia de dimetilformamida en acetonitrilo para producir un compuesto de bromo de Fórmula 1207. En la Etapa 7, el compuesto de Fórmula 1207 se hace reaccionar con un compuesto de heteroarilo, por ejemplo, 3-yodo 1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina, en presencia de una base tal como terc-butóxido de potasio en dimetilformamida para producir un compuesto de Fórmula 1208.

Esquema de Reacción 13:

En el Esquema 13 se describe una metodología para la síntesis de los compuestos de Fórmula I con un conector XY en la que X es predominantemente o únicamente (S)-C(CH3)H-e Y es -NH-. Wd es un heteroarilo monocíclico o bicíclico, incluyendo, pero no se limita a, purinilo, pirimidinilo, pirrolopirimidinilo o pirazolopirimidinilo. Con respecto a la Etapa 1 del Esquema 13, el compuesto de Fórmula 1301, (el isómero S) se acopla a N, O-dimetilhidroxilamina mediante el uso de hidroxibenzotriazol (HOBt) y 1-etil-3-(3’-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDCI) en presencia de trietilamina para producir un compuesto de Fórmula 1302. En la Etapa 2, un compuesto de Fórmula 1203, que puede ser sintetizado según se describe en el Esquema 12, es desprotonado con n-butil-litio en THF y hexametilfosforamida a -78 ºC en una atmósfera de argón. Se añade el compuesto de Fórmula 1302 y la mezcla de reacción se deja calentar hasta -50 ºC, se inactiva mediante la adición de agua y se aísla un compuesto de Fórmula 1303. En algunas formas de realización, puede usarse una especie de organomagnesio débilmente nucleófila tal como iPrMgCl para generar el anión de magnesio del compuesto 1302 antes de su adición al dianión. En la Etapa 3, el compuesto de Fórmula 1303 se trata con ácido clorhídrico en metanol a reflujo y después la mezcla de reacción se basifica mediante la adición de una solución de carbonato de sodio a un pH de entre aproximadamente 7 y aproximadamente 8, para producir un compuesto de Fórmula 1304. El compuesto de fórmula 1304 puede ser parcialmente epimerizado como resultado de las etapas de reacción precedentes. El 1304 altamente enantiopuro puede aislarse mediante la preparación de la sal del ácido tartárico ácido disolviendo el compuesto de Fórmula 1304 en metanol y añadiendo ácido D-tartárico. La mezcla de reacción resultante se calienta a reflujo durante una hora, después se agita a la temperatura ambiente durante 16 horas y permite el aislamiento de la sal del compuesto de Fórmula 1304 en la que la pureza enantiomérica es mayor del 90 % para el isómero (S). Se regenera la amina libre del compuesto de Fórmula 1304 antes de su uso en la siguiente etapa de síntesis. El compuesto de Fórmula 1304, que es sustancialmente el enantiómero (S), se acopla a un heteroarilo Wd sustituido con cloro, un compuesto de Fórmula 1305, que incluye, pero no se limita a, 6-cloro-9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina, 2,4,5,-tricloropirimidina, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]primidina y 4-cloro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidina en presencia de base tal como diisopropiletilamina o amoniaco, para producir un compuesto de Fórmula 1306 y en el que el compuesto de Fórmula 1306 es el isómero (S).

Síntesis de haloanálogos de R3, por ejemplo, análogos de isoquinolona sustituidos con cloro. El mismo esquema de reacción 13 se aplica a la generación de un compuesto que tiene la fórmula:

en la que R3 es cloro.

Los compuestos divulgados en este documento pueden ser sintetizados mediante el uso de los esquemas de reacción según se han divulgado en este documento, variantes de los mismos u otros métodos sintéticos conocidos en la materia.

En algunas formas de realización, los compuestos de la presente invención muestran una o más de las características funcionales divulgadas en este documento. Por ejemplo, uno o más compuestos en cuestión se unen específicamente a una PI3 quinasa. En algunas formas de realización, la CI50 de un compuesto en cuestión para p110α, p110β, p110γ o p110δ es de menos de aproximadamente 1 µM, de menos de aproximadamente 100 nM, de menos de aproximadamente 50 nM, de menos de aproximadamente 10 nM, de menos de aproximadamente 1 nM, de menos de aproximadamente 0,5 nM, de menos de aproximadamente 100 pM o de menos de aproximadamente 50 pM.

En algunas formas de realización, uno o más de los compuestos en cuestión pueden inhibir selectivamente uno o más miembros del tipo I o de la clase I de las quinasas de 3-fosfatidilinositol (PI3-quinasa) con un valor de la CI50 de aproximadamente 100 nM, 50 nM, 10 nM, 5 nM, 100 pM, 10 pM o 1 pM, o menor, medido en un ensayo de quinasa

in vitro.

Adicionalmente, un compuesto de Fórmula que tiene una configuración enantiomérica (S) con respecto al carbono X puede mostrar una potencia mayor frente a una o más PI3-quinasas objetivo que el correspondiente compuesto que tenga una configuración enantiomérica (R) con respecto al carbono X. Por ejemplo, el compuesto de la invención que tiene una configuración enantiomérica (S) con respecto al carbono X puede tener un valor de la CI50 para la PI3-quinasa que es 1, 2, 3 o 4 órdenes de magnitud menor que el valor de la CI50 para la PI3-quinasa del correspondiente compuesto que tiene una configuración (R).

En algunas formas de realización, uno o más de los compuestos en cuestión pueden inhibir selectivamente uno o dos miembros del tipo I o de la clase I de las quinasas de 3-fosfatidilinositol (PI3-quinasa) que consiste en la PI3quinasa α, la PI3-quinasa β, la PI3-quinasa γ y la PI3-quinasa δ. En algunos aspectos, algunos de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3-quinasa δ en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I. En otros aspectos, algunos de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3-quinasa 8 y la PI3-quinasa γ en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I. En otros aspectos más, algunos de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3-quinasa α y la PI3-quinasa β en comparación con todas las demás PI3quinasas de tipo I. En otros aspectos más, algunos de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3quinasa δ y la PI3-quinasa en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I. Todavía en otros aspectos más, algunos de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3-quinasa δ y la PI3-quinasa P en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I, o inhiben selectivamente la PI3-quinasa δ y la PI3-quinasa α en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I, o inhiben selectivamente la PI3-quinasa α y la PI3quinasa γ en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I, o inhiben selectivamente la PI3-quinasa γ y la PI3-quinasa β en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I.

En algunas formas de realización, uno o más de los compuestos en cuestión inhiben selectivamente la PI3-quinasa δ y la PI3-quinasa γ en comparación con todas las demás PI3-quinasas de tipo I. En algunos aspectos, un compuesto de la invención muestra una CI50 para la PI3-quinasa δ que es menor de 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 o 5 veces más baja que la CI50 para la PI3-quinasa γ. En otros aspectos, un compuesto de la invención muestra una CI50 para la PI3-quinasa δ que es menor de 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 o 5 veces más alta que la CI50 para la PI3-quinasa γ. En algunas formas de realización, el compuesto de la invención muestra una CI50 para la PI3quinasa δ que es menor de 10 veces más baja que la CI50 para la PI3-quinasa γ. En otras formas de realización, el compuesto de la invención muestra una CI50 para la PI3-quinasa 8 que es menor de 10 veces más alta que la CI50 para la PI3-quinasa γ. Por ejemplo, el compuesto de la invención muestra una CI50 para la PI3-quinasa δ que es menor de 5 cinco veces más alta o más baja que la CI50 para la PI3-quinasa γ. En algunos aspectos, un compuesto en cuestión tiene una CI50 para la PI3-quinasa δ que es menor que la CI50 para la PI3-quinasa γ en un factor de menos de 20, 10, 5 o 2. Por ejemplo, un compuesto en cuestión tiene una CI50 para la PI3-quinasa δ que es menor que la CI50 para la PI3-quinasa γ en un factor de menos de 5.

En otro aspecto más, puede entenderse alternativamente que un inhibidor que inhibe selectivamente uno o más miembros de las PI3-quinasas de tipo I, o un inhibidor que inhibe selectivamente uno o más de las vías de señalización mediadas por las PI3-quinasas de tipo I, se refiere a un compuesto que muestra una concentración inhibidora al 50 % (CI50) con respecto a una PI3-quinasa de tipo I dada, que es al menos al menos 10 veces, al menos 20 veces, al menos 50 veces, al menos 100 veces, al menos 1.000 veces, al menos 10, 100 veces, o más baja, que la CI50 del inhibidor con respecto al resto de las demás PI3-quinasas de tipo I.

En algunas formas de realización, uno o más de los compuestos en cuestión inhiben la p110α, la p110β, la DNAPK

o la mTor con un valor de la CI50 de más de 30 nM, e inhiben la p110δ y/o la p110γ con un valor de la CI50 de menos de 1 µM. En algunas formas de realización, el compuesto muestra adicionalmente una inhibición selectiva de la p110δ y/o de la p110γ con respecto a las p110α, p110β, DNAPK y/o mTor en un factor de al menos 3, 10, 100,

1.000 o mayor. Por ejemplo, un compuesto en cuestión muestra una inhibición selectiva de la p110δ o de la p110γ con respecto a las p110α, p110β, DNAPK y/o mTor en un factor de al menos 3.

Composiciones farmacéuticas

La invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos de la presente invención.

En algunas formas de realización, la invención proporciona composiciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades o afecciones relacionadas con una respuesta inmunitaria indeseable, hiperactiva, perjudicial o dañina en un mamífero. Dicha respuesta inmunitaria indeseable puede estar asociada con, o dar como resultado, por ejemplo, asma, enfisema, bronquitis, psoriasis, alergia, anafilaxia, enfermedades autoinmunes, artritis reumatoide, enfermedad del injerto contra el hospedador y lupus eritematoso. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de otras enfermedades respiratorias que incluyen, pero no se limitan a, enfermedades que afectan a los lóbulos pulmonares, la cavidad pleural, los bronquios, la tráquea, el tracto

respiratorio superior por los nervios y los músculos respiratorios.

En algunas formas de realización, la invención proporciona composiciones farmacéuticas para el tratamiento de trastornos tales como un trastorno hiperproliferativo que incluyen, pero no se limita a, cáncer, tal como leucemia mieloide aguda, de timo, de cerebro, de pulmón, espinocelular, de piel, de ojo, retinoblastoma, melanoma intraocular, de la cavidad oral y orofaríngeo, de vejiga, gástrico, de estómago, de páncreas, de vejiga, de mama, cervical, de cabeza, de cuello, renal, de riñón, de hígado, de ovario, de próstata, colorrectal, de esófago, de testículo, ginecológico, de tiroides, del SNC, del SNP, relacionado con el SIDA relacionado con el SIDA (por ejemplo, linfoma y sarcoma de Kaposi) o cáncer inducido por virus. En algunas formas de realización, dicha composición farmacéutica es para el tratamiento de un trastorno hiperproliferativo no canceroso tal como la hiperplasia benigna de la piel (por ejemplo, psoriasis), la reestenosis o de próstata (por ejemplo, la hipertrofia prostática benigna (BPH)).

La invención también proporciona composiciones para el tratamiento de enfermedades hepáticas (incluyendo diabetes), pancreatitis o enfermedades renales (incluyendo glomerulonefritis proliferativa y enfermedad renal inducida por la diabetes) o el dolor en un mamífero.

La invención también proporciona una composición para la prevención de la implantación del blastocito en un mamífero.

La invención también se refiere a una composición para el tratamiento de una enfermedad relacionada con la vasculogénesis o la angiogénesis en un mamífero que puede manifestarse como una angiogénesis tumoral, una enfermedad inflamatoria crónica tal como artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, aterosclerosis, enfermedades de la piel tales como psoriasis, eccema y esclerodermia, diabetes, retinopatía diabética, retinopatía del prematuro, degeneración macular relacionada con la edad, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi y cáncer de ovario, de mama, de pulmón, de páncreas, de próstata, de colon y epidermoide.

Las composiciones farmacéuticas en cuestión se formulan normalmente para proporcionar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención como principio activo, o una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable. Cuando se desee, las composiciones farmacéuticas contienen una sal farmacéuticamente aceptable y/o un complejo de coordinación de la misma y uno o más excipientes, portadores excipientes, portadores, incluyendo o diluyente sólidos inertes y agentes de relleno, diluyentes, incluyendo una solución acuosa estéril y diversos disolventes orgánicos, potenciadores de la penetración, solubilizantes y coadyuvantes farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones farmacéuticas en cuestión pueden ser administradas solas o junto con uno o más de otros agentes, que también se administran normalmente en forma de composiciones farmacéuticas. Cuando se desee, los compuestos en cuestión y los otros agentes pueden mezclarse en una preparación, o ambos componentes pueden formularse en preparaciones individuales para usarlos en combinación por separado o al mismo tiempo.

En algunas formas de realización, la concentración de uno o más de los compuestos proporcionados en las composiciones farmacéuticas de la presente invención es menor del 100 %, del 90 %, del 80 %, del 70 %, del 60 %, del 50 %, del 40 %, del 30 %, del 20 %, del 19 %, del 18 %, del 17 %, del 16 %, del 15 %,14 %, del 13 %, del 12 %, del 11 %, del 10 %, del 9 %, del 8 %, del 7 %, del 6 %, del 5%, del 4 %, del 3 %, del 2 %, del 1 %, del 0,5 %, del 0,4 %, del 0,3 %, del 0,2 %, del 0,1 %, del 0,09 %, del 0,08 %, del 0,07 %, del 0,06 %, del 0,05 %, del 0,04 %, del 0,03 %, del 0,02 %, del 0,01 %, del 0,009 %, del 0,008 %, del 0,007 %, del 0,006 %, del 0,005 %, del 0,004 %, del 0,003 %, del 0,002 %, del 0,001 %, del 0,0009 %, del 0,0008 %, del 0,0007 %, del 0,0006 %, del 0,0005 %, del 0,0004 %, del 0,0003 %, del 0,0002 %, o del 0,0001 % p/p, p/v o v/v.

En algunas formas de realización, la concentración de uno o más de los compuestos de la presente invención es mayor del 90 %, del 80 %, del 70 %, del 60 %, del 50 %, del 40 %, del 30 %, del 20 %, del 19,75 %, del 19,50 %, del 19,25 % 19 %, del 18,75 %, del 18,50 %, del 18,25 % 18 %, del 17,75 %, del 17,50 %, del 17,25 % 17 %, del 16,75 %, del 16,50 %, del 16,25 % 16 %, del 15,75 %, del 15,50 %, del 15,25 % 15 %, del 14,75 %, del 14,50 %, del 14,25 % 14 %, del 13,75 %, del 13,50 %, del 13,25 % 13 %, del 12,75 %, del 12,50 %, del 12,25 % 12 %, del 11,75 %, del 11,50 %, del 11,25 % 11 %, del 10,75 %, del 10,50 %, del 10,25 % 10 %, del 9,75 %, del 9,50 %, del 9,25 % 9 %, del 8,75 %, del 8,50 %, del 8,25 % 8 %, del 7,75 %, del 7,50 %, del 7,25 % 7 %, del 6,75 %, del 6,50 %, del 6,25 % 6 %, del 5,75 %, del 5,50 %, del 5,25 % 5 %, del 4,75 %, del 4,50 %, del 4,25 %, del 4 %, del 3,75 %, del 3,50 %, del 3,25 %, del 3 %, del 2,75 %, del 2,50 %, del 2,25 %, del 2 %, del 1,75 %, del 1,50 %, del 125 %, del 1 %, del 0,5 %, del 0,4 %, del 0,3 %, del 0,2 %, del 0,1 %, del 0,09 %, del 0,08 %, del 0,07 %, del 0,06 %, del 0,05 %, del 0,04 %, del 0,03 %, del 0,02 %, del 0,01 %, del 0,009 %, del 0,008 %, del 0,007 %, del 0,006 %, del 0,005 %, del 0,004 %, del 0,003 %, del 0,002 %, del 0,001 %, del 0,0009 %, del 0,0008 %, del 0,0007 %, del 0,0006 %, del 0,0005 %, del 0,0004 %, del 0,0003 %, del 0,0002 %, o del 0,0001 % p/p, p/v o v/v.

En algunas formas de realización, la concentración de uno o más de los compuestos de la presente invención está en el intervalo de desde aproximadamente el 0,0001 % hasta aproximadamente el 50 %, desde aproximadamente el 0,001 % hasta aproximadamente el 40 %, desde aproximadamente el 0,01 % hasta aproximadamente el 30 %, desde aproximadamente el 0,02 % hasta aproximadamente el 29 %, desde aproximadamente el 0,03 % hasta

aproximadamente el 28 %, desde aproximadamente el 0,04 % hasta aproximadamente el 27 %, desde aproximadamente el 0,05 % hasta aproximadamente el 26 %, desde aproximadamente el 0,06 % hasta aproximadamente el 25 %, desde aproximadamente el 0,07 % hasta aproximadamente el 24 %, desde aproximadamente el 0,08 % hasta aproximadamente el 23 %, desde aproximadamente el 0,09 % hasta aproximadamente el 22 %, desde aproximadamente el 0,1 % hasta aproximadamente el 21 %, desde aproximadamente el 0,2 % hasta aproximadamente el 20 %, desde aproximadamente el 0,3 % hasta aproximadamente el 19 %, desde aproximadamente el 0,4 % hasta aproximadamente el 18 %, desde aproximadamente el 0,5 % hasta aproximadamente el 17 %, desde aproximadamente el 0,6 % hasta aproximadamente el 16 %, desde aproximadamente el 0,7 % hasta aproximadamente el 15 %, desde aproximadamente el 0,8 % hasta aproximadamente el 14 %, desde aproximadamente el 0,9 % hasta aproximadamente el 12 %, desde aproximadamente el 1 % hasta aproximadamente el 10 % p/p, p/v o v/v, v/v.

En algunas formas de realización, la concentración de uno o más de los compuestos de la presente invención está en el intervalo de desde aproximadamente el 0,001 % hasta aproximadamente el 10 %, desde aproximadamente el 0,01 % hasta aproximadamente el 5 %, desde aproximadamente el 0,02 % hasta aproximadamente el 4,5 %, desde aproximadamente el 0,03 % hasta aproximadamente el 4 %, desde aproximadamente el 0,04 % hasta aproximadamente el 3,5 %, desde aproximadamente el 0,05 % hasta aproximadamente el 3 %, desde aproximadamente el 0,06 % hasta aproximadamente el 2,5 %, desde aproximadamente el 0,07 % hasta aproximadamente el 2 %, desde aproximadamente el 0,08 % hasta aproximadamente el 1,5 %, desde aproximadamente el 0,09 % hasta aproximadamente el 1 %, desde aproximadamente el 0,1 % hasta aproximadamente el 0,9 % p/p, p/v o v/v.

En algunas formas de realización, la cantidad de uno o más de los compuestos de la presente invención es igual o inferior a 10 g, a 9,5 g, a 9,0 g, a 8,5 g, a 8,0 g, a 7,5 g, a 7,0 g, a 6,5 g, a 6,0,g, a 5,5 g, a 5,0 g, a 4,5 g, a 4,0 g, a 3,5 g, a 3,0 g, a 2,5 g, a 2,0 g,a 1,5 g, a 1,0 g, a 0,95 g, a 0,9 g, a 0,85 g, a 0,8 g, a 0,75 g, a 0,7 g, a 0,65 g, a 0,6 g, a 0,55 g, a 0,5 g, a 0,45 g, a 0,4 g, a 0,35 g, a 0,3 g, a 0,25 g, a 0,2 g, a 0,15 g, a 0,1 g, a 0,09 g, a 0,08 g, a 0,07 g, a 0,06 g, a 0,05 g, a 0,04 g, a 0,03 g, a 0,02 g, a 0,01 g, a 0,009 g, a 0,008 g, a 0,007 g, a 0,006 g, a 0,005 g, a 0,004 g, a 0,003 g, a 0,002 g, a 0,001 g, a 0,0009 g, a 0,0008 g, a 0,0007 g, a 0,0006 g, a 0,0005 g, a 0,0004 g, a 0,0003 g, a 0,0002 g o a 0,0001 g.

En algunas formas de realización, la cantidad de uno o más de los compuestos de la presente invención es mayor de 0,0001 g, de 0,0002 g, de 0,0003 g, de 0,0004 g, de 0,0005 g, de 0,0006 g, de 0,0007 g, de 0,0008 g, de 0,0009 g, de 0,001 g, de 0,0015 g, de 0,002 g, de 0,0025 g, de 0,003 g, de 0,0035 g, de 0,004 g, de 0,0045 g, de 0,005 g, de 0,0055 g, de 0,006 g, de 0,0065 g, de 0,007 g, de 0,0075 g, de 0,008 g, de 0,0085 g, de 0,009 g, de 0,0095 g, de 0,01 g, de 0,015 g, de 0,02 g, de 0,025 g, de 0,03 g, de 0,035 g, de 0,04 g, de 0,045 g, de 0,05 g, de 0,055 g, de 0,06 g, de 0,065 g, de 0,07 g, de 0,075 g, de 0,08 g, de 0,085 g, de 0,09 g, de 0,095 g, de 0,1 g, de 0,15 g, de 0,2 g, de 0,25 g, de 0,3 g, de 0,35 g, de 0,4 g, de 0,45 g, de 0,5 g, de 0,55 g, de 0,6 g, de 0,65 g, de 0,7 g, de 0,75 g, de 0,8 g, de 0,85 g, de 0,9 g, de 0,95 g, de 1 g, de 1,5 g, de 2 g, de 2,5, 3 g, de 3,5, 4 g, de 4,5 g, de 5 g, de 5,5 g, de6 g, de6,5g, de7 g,de7,5g, de 8 g,de8,5 g, de9 g,de9,5g o de10g.

En algunas formas de realización, la cantidad de uno o más de los compuestos de la presente invención is en el intervalo de 0,0001 -10 g, de0,0005 -9 g, de 0,001 -8 g, de 0,005 -7 g, de 0,01 -6 g, de 0,05 -5 g, de 0,1 -4 g, de 0,5 -4g ode 1-3g.

Los compuestos de acuerdo con la invención son eficaces en un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, en el tratamiento de seres humanos adultos, unas dosis de entre 0,01 y 1.000 mg, de entre 0,5 y 100 mg, de entre 1 y 50 mg al día y de entre 5 y 40 mg al día, son ejemplos de dosis que pueden usarse. Un ejemplo de dosis es de entre 10 y 30 mg al día. La dosis exacta dependerá de la vía de administración, de la forma en la que se administra el compuesto, del sujeto que se va a tratar, del peso corporal del sujeto que se va a tratar y de las preferencias y la experiencia del profesional clínico a cargo.

A continuación se describen algunos ejemplos no limitantes de composiciones farmacéuticas y de métodos para la preparación de las mismas.

Composiciones farmacéuticas para su administración oral En algunas formas de realización, la invención proporciona una composición farmacéutica para su administración oral que contiene un compuesto de la presente invención y un excipiente farmacéutico adecuado para su administración oral.

En algunas formas de realización, la invención proporciona una composición farmacéutica sólida para su administración oral que contiene: (i) una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención; opcionalmente

(ii) una cantidad eficaz de un segundo agente; y (iii) un excipiente farmacéutico para su administración oral. En algunas formas de realización, la composición contiene adicionalmente: (iv) una cantidad eficaz de un tercer agente.

En algunas formas de realización, la composición farmacéutica puede ser una composición farmacéutica líquida adecuada para su consumo oral. Las composiciones farmacéuticas de la invención adecuadas para su administración oral pueden presentarse en formas de formas de dosificación individuales, tales como cápsulas,

obleas, o comprimidos, o líquidos o pulverizadores de aerosol que contienen cada uno una cantidad predeterminada de un principio activo en forma de un polvo o en gránulos, en solución o en suspensión en un líquido acuoso o no acuoso, en una emulsión de aceite en agua o en una emulsión líquida de agua en aceite. Dichas formas de dosificación pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos de la Farmacia, pero todos los métodos incluyen la etapa de poner en asociación el principio activo con el portador, que constituye uno o más ingredientes necesarios. En general, las composiciones se preparan mezclando uniforme e íntimamente el principio activo con portadores líquidos o con portadores sólidos finamente divididos, o ambos y después, si fuera necesario, moldear el producto en la presentación deseada. Por ejemplo, puede prepararse un comprimido mediante compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos preparados por compresión pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el principio activo en una forma que fluya libremente, tal como en polvo o en gránulos, opcionalmente mezclado con un excipiente tal como, pero no se limita a, un aglutinante, un lubricante, un diluyente inerte y/o un tensioactivo o un agente dispersante. Los comprimidos moldeados pueden elaborarse moldeando en una máquina adecuada una mezcla del compuesto pulverulento humedecido con un diluyente líquido inerte.

Esta invención engloba adicionalmente composiciones y formas de dosificación farmacéuticas anhidras que comprenden un principio activo, dado que el agua puede facilitar la degradación de algunos compuestos. Por ejemplo, puede añadirse agua (por ejemplo, un 5 %) en la técnica farmacéutica como un medio para simular el almacenamiento a largo plazo con objeto de determinar las características tales como la vida de almacenamiento o la estabilidad de las formulaciones con el tiempo. Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación anhidras de la invención pueden prepararse mediante el uso de ingredientes anhidros o que contengan poca humedad y en unas condiciones de baja humedad. Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación de la invención que contengan lactosa pueden elaborarse anhidras si se espera un contacto sustancial con humedad durante la elaboración, el envasado y/o el almacenamiento. Una composición farmacéutica anhidra puede prepararse almacenarse de forma que se conserve su naturaleza anhidra. Consecuentemente, las composiciones anhidras pueden envasarse mediante el uso de materiales conocidos por evitar la exposición al agua de forma que puedan ser incluidas en kits recetarios adecuados. Algunos ejemplos de envases adecuados incluyen, pero no se limitan a, aluminios, plástico o similares precintados herméticamente, recipientes unidosis, envases alveolados y envases de tiras.

Un principio activo puede combinarse en una mezcla íntima con un portador farmacéutico de acuerdo con las técnicas de combinación farmacéuticas convencionales. El portador puede tomar una gran diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. En la preparación de las composiciones para una forma de dosificación oral pueden emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos habituales como portadores, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservantes, agentes colorantes y similares en el caso de preparaciones líquidas orales (tales como suspensiones, soluciones y elixires) o aerosoles; o en el caso de preparaciones sólidas orales pueden usarse portadores tales como almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de regulación, lubricantes, aglutinantes y agentes disgregantes, en algunas formas de realización sin el empleo de lactosa. Por ejemplo, algunos portadores adecuados incluyen polvos, cápsulas y comprimidos, con las preparaciones orales sólidas. Si se desea, los comprimidos pueden ser recubiertos mediante las técnicas acuosas o no acuosas habituales.

Algunos aglutinantes adecuados para su uso en las composiciones y en las formas de dosificación farmacéuticas incluyen, pero no se limitan a, almidón de maíz, almidón de patata u otros almidones, gelatina, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, alginato de sodio, ácido algínico, otros alginatos, tragacanto en polvo, goma guar, celulosa y sus derivados (por ejemplo, etil celulosa, acetato de celulosa, carboximetil celulosa de calcio, carboximetil celulosa de sodio), polivinilpirrolidona, metil celulosa, almidón pregelatinizado, hidroxipropil metil celulosa, celulosa microcristalina y mezclas de los mismos de los mismos.

Algunos ejemplos de agentes de relleno adecuados para su uso en las composiciones y en las formas de dosificación farmacéuticas divulgadas en este documento incluyen, pero no se limitan a, talco, carbonato de calcio (por ejemplo, en gránulos o en polvo), celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, caolín, manitol, ácido silícico, sorbitol, almidón, almidón pregelatinizado y mezclas de los mismos.

Pueden usarse disgregantes en las composiciones de la invención para proporcionar comprimidos que se desintegren al ser expuestos a un entorno acuoso. Un exceso de disgregante puede producir comprimidos que pueden desintegrarse en el frasco. Demasiado poco puede ser insuficiente para que se produzca la desintegración y por lo tanto puede alterar la velocidad y el grado de liberación del (los) principio(s) activo(s) desde la forma de dosificación. Por lo tanto, puede usarse una cantidad suficiente del disgregante que no sea ni demasiado poca ni excesiva para que altere perjudicialmente la liberación del (los) principio(s) activo(s) para formar las formas de dosificación de los compuestos divulgados en este documento. La cantidad de disgregante usada puede variar dependiendo del tipo de formulación y del modo de administración y puede ser fácilmente discernible por los expertos habituales en la materia. Puede usarse desde aproximadamente el 0,5 hasta aproximadamente el 15 por ciento en peso de disgregante, o desde aproximadamente el 1 hasta aproximadamente el 5 por ciento en peso de disgregante, en la composición farmacéutica. Los disgregantes que pueden usarse para formar las composiciones y las formas de dosificación farmacéuticas de la invención incluyen, pero no se limitan a, agar-agar, ácido algínico,

carbonato de calcio, celulosa microcristalina, croscarmelosa de sodio, crospovidona, polacrilin potasio, glucolato sódico de almidón, almidón de patata o de tapioca, otros almidones, almidón pregelatinizado, otros almidones, arcillas, otras alginas, otras celulosas, gomas o mezclas de los mismos.

Los lubricantes que pueden usarse para formar las composiciones y las formas de dosificación farmacéuticas de la invención incluyen, pero no se limitan a, estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, aceite mineral volátil, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenglicol, otros glicoles, ácido esteárico, lauril sulfato de sodio, talco, aceite vegetal hidrogenado (por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja), estearato de cinc, oleato de etilo, laureato de etilo, goma de agar, o mezclas de los mismos. Algunos lubricantes adicionales incluyen, por ejemplo, un gel de sílice siloide, un aerosol coagulado de sílice sintética, o mezclas de los mismos. Opcionalmente puede añadirse un lubricante, en una cantidad de menos de aproximadamente el 1 por ciento en peso de la composición farmacéutica.

Cuando se desean suspensiones acuosas y/o elixires para su administración oral, el principio activo esencial de las mismas puede combinarse con diversos agentes edulcorantes o saborizantes, sustancias colorantes o pigmentos y, si se desea, agentes emulsionantes y/o suspensores, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol, glicerina y diversas combinaciones de los mismos.

Los comprimidos pueden ser no recubiertos o estar recubiertos mediante técnicas conocidas para retrasar la desintegración y la absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar así una acción sostenida durante un periodo más prolongado. Por ejemplo, puede emplearse un material retardador tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral también pueden presentarse en forma de cápsulas de gelatina dura en las que el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o en forma de cápsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con un medio acuoso u oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Los tensioactivos que pueden usarse para formar las composiciones y las formas de dosificación farmacéuticas de la invención incluyen, pero no se limitan a, tensioactivos hidrófilos, tensioactivos lipófilos y mezclas de los mismos. Esto es, puede emplearse una mezcla de tensioactivos hidrófilos, puede emplearse una mezcla de tensioactivos lipófilos, o puede emplearse una mezcla de al menos un tensioactivo hidrófilo y al menos tensioactivo lipófilo.

Un tensioactivo hidrófilo adecuado puede tener generalmente un valor del HLB de al menos 10, mientras que los tensioactivos hidrófilos adecuados pueden tener generalmente un valor del HLB de, o menor de, aproximadamente

10. Un parámetro empírico usado para la caracterización de la hidrofilia y la hidrofobia relativas de compuestos anfifílicos no iónicos es el equilibrio hidrófilo-lipófilo (valor de "HLB"). Los tensioactivos con menores valores del HLB son más lipófilos o hidrófobos y tienen una mayor solubilidad en aceites, mientras que los tensioactivos con mayores valores del HLB son más hidrófilos y tienen una mayor solubilidad en soluciones acuosas. Como tensioactivos hidrófilos se consideran generalmente aquellos compuestos que tienen un valor del HLB de más de aproximadamente 10, así como los compuestos aniónicos, catiónicos o bipolares para los que la escala de HLB generalmente no es aplicable. De forma análoga, los tensioactivos lipófilos (es decir, hidrófobos) son compuestos que tienen un valor del HLB igual o inferior a aproximadamente 10. Sin embargo, el valor del HLB de un tensioactivo es meramente una guía tosca usada generalmente para permitir la formulación de emulsiones industriales, farmacéuticas y cosméticas.

Los tensioactivos hidrófilos pueden ser iónicos o no iónicos. Algunos tensioactivos iónicos adecuados pueden incluir, pero no se limitan a, sales de alquilamonio; sales del ácido fusídico; derivados de ácidos grasos de aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos; derivados de glicérido de aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos; lecitinas y lecitinas hidrogenadas; lisolecitinas y lisolecitinas hidrogenadas; fosfolípidos y derivados de los mismos; lisofosfolípidos y derivados de los mismos; sales de ésteres de ácidos grasos de carnitina; sales de alquilsulfatos; sales de ácidos grasos; docusato de sodio; acilactilatos; ésteres del ácido tartárico de mono y diglicéridos mono y diacetilados; mono y diglicéridos succinilados; ésteres del ácido cítrico de mono y diglicéridos; y mezclas de los mismos.

Dentro del grupo mencionado anteriormente, algunos tensioactivos iónicos incluyen, a modo de ejemplo: lecitinas, lisolecitina, fosfolípidos, lisofosfolípidos y derivados de los mismos; sales de ésteres de ácidos grasos de carnitina; sales de alquilsulfatos; sales de ácidos grasos; docusato de sodio; acilactilatos; ésteres del ácido tartárico de mono y diglicéridos mono y diacetilados; mono y diglicéridos succinilados; ésteres del ácido cítrico de mono y diglicéridos; y mezclas de los mismos.

Los tensioactivos iónicos pueden estar en las formas ionizadas de lecitina, lisolecitina, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilglicerol, ácido fosfatídico, fosfatidilserina, lisofosfatidilcolina, lisofosfatidiletanolamina, lisofosfatidilglicerol, ácido lisofosfatídico, lisofosfatidilserina, PEG-fosfatidiletanolamina, PVP-fosfatidiletanolamina, ésteres lactílicos de ácidos grasos, estearoil-2-lactilato, lactilato de estearoílo, monoglicéridos succinilados, ésteres del ácido tartárico mono / diacetilados de mono / diglicéridos, ésteres del ácido cítrico de mono / diglicéridos, colilsarcosina, caproato, caprilato, caprato, laurato, miristato, palmitato, oleato, ricinoleato, linoleato, linolenato, estearato, sulfato de laurilo, sulfato de teracecilo, docusato, lauroil carnitinas, palmitoil carnitinas, miristoil carnitinas y sales y mezclas de los mismos.

Algunos tensioactivos hidrófilos no iónicos pueden incluir, pero no se limitan a, alquilglucósidos; alquilmaltósidos; alquiltioglucósidos; lauril macrogolglicéridos; polioxialquilen alquil éteres tales como polietilenglicol alquil éteres; polioxialquilen alquil fenoles tales como polietilenglicol alquil fenoles; polioxialquilen alquil fenol ésteres de ácidos grasos tales como monoésteres de ácidos grasos de polietilenglicol y diésteres de ácidos grasos de polietilenglicol; ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol glicerol; ésteres de ácidos grasos de poliglicerol; ésteres de ácidos de grasos polioxialquilen sorbitano tales como ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol sorbitano; productos hidrófilos de la transesterificación de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en glicéridos, aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados, ácidos grasos y esteroles; esteroles de polioxietileno, derivados y análogos de los mismos; vitaminas polioxietiladas y derivados de las mismas; copolímeros en bloque de polioxietileno-polioxipropileno; y mezclas de los mismos; ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol sorbitano y productos hidrófilos de la transesterificación de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en triglicéridos, aceites vegetales y aceites vegetales hidrogenados. El poliol puede ser glicerol, etilenglicol, polietilenglicol, sorbitol, propilenglicol, pentaeritritol o un sacárido.

Otros tensioactivos hidrófilos no iónicos incluyen, sin limitación, laurato de PEG-10, laurato de PEG-12, laurato de PEG-20, laurato de PEG-32, dilaurato de PEG-32, oleato de PEG-12, oleato de PEG-15, oleato de PEG-20, dioleato de PEG-20, oleato de PEG-32, oleato de PEG-200, oleato de PEG-400, estearato de PEG-15, diestearato de PEG32, estearato de PEG-40, estearato de PEG-100, dilaurato de PEG-20, gliceril trioleato de de PEG-25, dioleato de PEG-32, gliceril laurato de PEG-20, gliceril laurato de PEG-30, gliceril estearato de PEG-20, gliceril oleato de PEG20, gliceril oleato de PEG-30, gliceril laurato de PEG-30, gliceril laurato de PEG-40, aceite de palma de PEG-40, aceite de ricino hidrogenado de PEG-50, aceite de ricino de PEG-40, aceite de ricino de PEG-35, aceite de ricino de PEG-60, aceite de ricino hidrogenado de PEG-40, aceite de ricino hidrogenado de PEG-60, aceite de maíz de PEG60, glicéridos de caprato / caprilato de PEG-6, glicéridos de caprato / caprilato de PEG-8, laurato de poligliceril-10, colesterol de PEG-30, fitoesterol de PEG-25, esterol hoja de PEG-30, trioleato de PEG-20, sorbitan oleato de PEG40, sorbitan laurato de PEG-80, polisorbato 20, polisorbato 80, lauril éter de POE-9, lauril éter de POE-23, oleil éter de POE-10, oleil éter de POE-20, estearil éter de POE-20, tocoferil succinato de PEG-100, colesterol de PEG-24, oleato de poligliceril-10, Tween 40, Tween 60, monoestearato de sacarosa, monolaurato de sacarosa, monopalmitato de sacarosa, serie de nonil fenol de PEG 10-100, serie de octil fenol de PEG 15-100 y poloxámeros.

Algunos tensioactivos lipófilos incluyen, únicamente a modo de ejemplo: alcoholes grasos; ésteres de ácidos grasos de glicerol; ésteres de ácidos grasos de glicerol acetilados; ésteres de ácidos grasos de un alcohol inferior; ésteres de ácidos grasos de propilenglicol; ésteres de ácidos grasos de sorbitano; ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol sorbitano; derivados de esteroles y esterol; derivados de esteroles y esterol polioxietilados; alquil éteres de polietilenglicol; ésteres de azúcar; éteres de azúcar; derivados del ácido láctico de mono y diglicéridos; productos hidrófobos de la transesterificación de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en glicéridos, aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados, ácidos grasos y esteroles; vitaminas liposolubles / derivados de vitaminas; y mezclas de los mismos. Dentro de este grupo, algunos tensioactivos lipófilos preferidos incluyen ésteres de ácidos grasos de glicerol, ésteres de ácidos grasos de propilenglicol y mezclas de los mismos, o son los productos hidrófobos de la transesterificación de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados y triglicéridos.

En una forma de realización, la composición puede incluir un solubilizante para asegurar una buena solubilización y/o disolución del compuesto de la presente invención y para minimizar la precipitación del compuesto de la presente invención. Esto puede ser especialmente importante en las composiciones para un uso no oral, por ejemplo, en las composiciones para inyección. También puede añadirse un solubilizante para aumentar la solubilidad del fármaco hidrófilo y/o de otros componentes, tales como tensioactivos, o para mantener la composición en forma de una solución o una dispersión estable u homogénea.

Algunos ejemplos de solubilizantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: alcoholes y polioles, tales como etanol, isopropanol, butanol, alcohol bencílico, etilenglicol, propilenglicol, butanodioles y isómeros de los mismos, glicerol, pentaeritritol, sorbitol, manitol, transcutol, dimetil isosorbida, polietilenglicol, polipropilenglicol, alcohol polivinílico, hidroxipropil metil celulosa y otros derivados de celulosa, ciclodextrinas y derivados de ciclodextrina; éteres de polietilenglicoles con un peso molecular medio de desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 6000, tales como éter de PEG de alcohol tetrahidrofurfurílico (glicofurol) o metoxi PEG; amidas y otros compuestos que contienen nitrógeno tales como 2-pirrolidona, 2-piperidona, .epsilon.-caprolactama, Nalquilpirrolidona, N-hidroxialquilpirrolidona, N-alquilpiperidona, N-alquilcaprolactama, dimetilacetamida y polivinilpirrolidona; ésteres tales como propionato de etilo, citrato de tributilo, trietilcitrato de acetilo, tributilcitrato de acetilo, citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, butirato de etilo, triacetina, monoacetato de propilenglicol, diacetato de propilenglicol, ε-caprolactona e isómeros de la misma, δ-valerolactona e isómeros de la misma, βbutirolactona e isómeros de la misma; y otros solubilizantes conocidos en la materia, tales como dimetil acetamida, dimetil isosorbida, N-metil pirrolidonas, monooctanoina, monoetil éter de dietilenglicol y agua.

También pueden usarse mezclas de solubilizantes. Algunos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, triacetina, citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, N-hidroxietilpirrolidona, polivinilpirrolidona, hidroxipropil metil celulosa, hidroxipropil ciclodextrinas, etanol, polietilenglicol 200 -100, glicofurol, transcutol, propilenglicol y dimetil isosorbida. Algunos solubilizantes particularmente preferidos incluyen sorbitol,

glicerol, triacetina, alcohol etílico, PEG-400, glicofurol y propilenglicol.

La cantidad de solubilizante que puede incluirse no está particularmente limitada. La cantidad de un solubilizante dado puede estar limitada a una cantidad bioaceptable, que puede ser fácilmente determinada por un experto en la materia. En algunas circunstancias puede ser ventajosa la inclusión de cantidades de solubilizantes en un amplio exceso sobre las cantidades bioaceptables, por ejemplo, para maximizar la concentración del fármaco, eliminándose el exceso de solubilizante antes de proporcionar la composición a un paciente mediante el uso de técnicas convencionales, tales como destilación o evaporación. Por lo tanto, si está presente, el solubilizante puede estar en una proporción ponderal del 10 %, del 25 %, del 50 %, del 100 % o de hasta aproximadamente el 200 % en peso, basado en el peso combinado del fármaco y los demás excipientes. Si se desea, también pueden usarse unas cantidades muy pequeñas del solubilizante, tales como del 5 %, del 2 %, del 1 % o incluso menos. Normalmente, el solubilizante puede estar presente en una cantidad de desde aproximadamente el 1 % hasta aproximadamente el 100 %, más normalmente desde aproximadamente el 5 % hasta aproximadamente el 25 % en peso.

La composición puede incluir adicionalmente uno o más aditivos y excipientes farmacéuticamente aceptables. Dichos aditivos y excipientes incluyen, sin limitación, antiadherentes, agentes antiespumantes, agente tamponantes, polímeros, antioxidantes, conservantes, agentes que lances, moduladores de la viscosidad, tonificantes, saborizantes, colorantes, odorizantes, opacificantes, agentes suspensores, aglutinantes, agentes de relleno, plastificantes, lubricantes y mezclas de los mismos.

Además, pueden incorporarse un ácido o una base en la composición para facilitar su procesado, para mejorar la estabilidad o por otras razones. Algunos ejemplos de bases farmacéuticamente aceptables incluyen aminoácidos, ésteres de aminoácidos, hidróxido de amonio, hidróxido de potasio, hidróxido de sodio, hidrogenocarbonato de sodio, hidróxido de aluminio, carbonato de calcio, hidróxido de magnesio, silicato de magnesio y aluminio, silicato de aluminio sintético, hidrocalcita sintética, hidróxido de magnesio y aluminio, diisopropiletilamina, etanolamina, etilendiamina, trietanolamina, trietilamina, triisopropanolamina, trimetilamina, tris(hidroximetil)aminometano (TRIS) y similares. También son adecuadas las bases que son sales de un ácido farmacéuticamente aceptable, tales como ácido acético, ácido acrílico, ácido adípico, ácido algínico, ácido alcansulfónico, aminoácidos, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido bórico, ácido butírico, ácido carbónico, ácido cítrico, ácidos grasos, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido hidroquinosulfónico, ácido isoascórbico, ácido láctico, ácido maleico, ácido oxálico, ácido para-bromofenilsulfónico, ácido propiónico, ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tánico, ácido tartárico, ácido tioglicólico, ácido toluensulfónico, ácido úrico y similares. También pueden usarse sales de ácidos polipróticos, tales como fosfato de sodio, hidrogenofosfato de disodio y dihidrogenofosfato de sodio. Cuando la base es una sal, el catión puede ser cualquier catión conveniente y farmacéuticamente aceptable, tales como amonio, metales alcalinos, metales alcalinotérreos y similares. Algunos ejemplos pueden incluir, pero no se limita a, sodio, potasio, litio, magnesio, calcio y amonio.

Los ácidos adecuados son ácidos orgánicos o inorgánicos farmacéuticamente aceptables. Algunos ejemplos de ácidos inorgánicos adecuados incluyen ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido bórico, ácido fosfórico, y similares. Algunos ejemplos de ácidos orgánicos adecuados incluyen ácido acético, ácido acrílico, ácido adípico, ácido algínico, ácido alcansulfónico, aminoácidos, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido bórico, ácido butírico, ácido carbónico, ácido cítrico, ácidos grasos, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido hidroquinosulfónico, ácido isoascórbico, ácido láctico, ácido maleico, ácido metansulfónico, ácido oxálico, ácido para-bromofenilsulfónico, ácido propiónico, ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tánico, ácido tartárico, ácido tioglicólico, ácido toluensulfónico, ácido úrico y similares.

Composiciones farmacéuticas para inyección. En algunas formas de realización, la invención proporciona una composición farmacéutica para inyección que contiene un compuesto de la presente invención y un excipiente farmacéutico adecuado para inyección. Los componentes y las cantidades de los agentes en las composiciones son según se describe en este documento.

Las formas en las que las nuevas composiciones de la presente invención pueden ser incorporadas para su administración mediante inyección incluyen suspensiones o emulsiones acuosas u oleosas, con aceite de sésamo, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón o aceite de cacahuete, así como elixires, manitol, dextrosa o una solución acuosa estéril y vehículos farmacéuticos similares.

Las soluciones acuosas en suero salino también se usan convencionalmente para inyección. También puede emplearse etanol, glicerol, propilenglicol, polietilenglicol líquido y similares (y las adecuadas mezclas de los mismos), derivados de ciclodextrina y aceites vegetales. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento, tal como lecitina, para el mantenimiento del tamaño de partícula necesario en el caso de una dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de los microorganismos puede conseguirse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal y similares.

Las soluciones inyectables estériles se preparan mediante la incorporación del compuesto de la presente invención en la cantidad necesaria del disolvente con otros diversos ingredientes según se han enumerado anteriormente, seguido de una esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan mediante la incorporación de los diversos principios activos esterilizados en un vehículo estéril que contiene el medio de dispersión básico y los demás ingredientes necesarios de entre los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, algunos métodos de preparación deseables son técnicas de secado a vacío y de liofilización, que producen un polvo del principio activo junto con cualquier ingrediente adicional deseado a partir de una solución previamente filtrada estéril de los mismos.

Composiciones farmacéuticas para su administración tópica (por ejemplo, transdérmica). En algunas formas de realización, la invención proporciona una composición farmacéutica para su administración transdérmica que contiene un compuesto de la presente invención y un excipiente farmacéutico adecuado para su administración transdérmica.

Las composiciones de la presente invención pueden formularse en preparaciones en formas sólidas, semisólidas o líquidas adecuadas para la administración local o tópica, tales como geles, gelatinas solubles en agua, cremas, lociones, suspensiones, espumas, polvos, suspensiones, ungüentos, soluciones, aceites, pastas, supositorios, aerosoles, emulsiones, soluciones salinas, soluciones basadas en dimetilsulfóxido (DMSO). En general, los portadores con unas densidades mayores son capaces de proporcionar un área con una exposición prolongada a los principios activos. Por el contrario, una formulación en solución puede proporcionar una exposición más inmediata del principio activo al área elegida.

Las composiciones farmacéuticas también pueden comprender portadores o excipientes sólidos o en fase de gel adecuados, que son compuestos que permiten un aumento en la penetración, o ayudan en la administración, de moléculas terapéuticas a través de la barrera de permeabilidad del estrato córneo de la piel. Existen muchas de estas moléculas potenciadoras de la penetración conocidas por los expertos en la materia de la formulación tópica. Algunos ejemplos de dichos portadores y excipientes incluyen, pero no se limitan a, humectantes (por ejemplo, urea), glicoles (por ejemplo, propilenglicol), alcoholes (por ejemplo, etanol), ácidos grasos (por ejemplo, ácido oleico), tensioactivos (por ejemplo, miristato de isopropilo y lauril sulfato de sodio), pirrolidonas, monolaurato de glicerol, sulfóxidos, terpenos (por ejemplo, mentol), aminas, amidas, alcanos, alcanoles, agua, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles.

Otro ejemplo de formulación para su uso en los métodos de la presente invención emplea dispositivos de administración transdérmica ("parches"). Dichos parches transdérmicos pueden usarse para proporcionar una infusión continua o discontinua de un compuesto de la presente invención en unas cantidades controladas, tanto con como sin otro agente.

La elaboración y el uso de los pases transdérmicos para la administración de agentes farmacéuticos es bien conocida en la materia. Véanse, por ejemplo, las Patentes de EE.UU. Nº 5.023.252, 4.992.445 y 5.001.139. Dichos parches pueden elaborarse para la administración continua, pulsátil o a demanda de los agentes farmacéuticos.

Composiciones farmacéuticas para inhalación. Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en disolventes acuosos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, o mezclas de los mismos y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables según se ha descrito supra. Preferiblemente, las composiciones son administradas por la vía oral o respiratoria nasal para un efecto local o sistémico. Las composiciones, preferiblemente en disolventes farmacéuticamente aceptables, pueden ser nebulizadas mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas puede ser inhaladas directamente desde el dispositivo de nebulización, o puede conectarse el dispositivo de nebulización a una máscara facial, o una máquina de respiración con una presión positiva intermitente. La solución, la suspensión o las composiciones en polvo pueden administrarse, preferiblemente por vía oral o nasal, desde dispositivos que suministren la formulación de una forma apropiada.

Otras composiciones farmacéuticas. Las composiciones farmacéuticas también pueden prepararse a partir de las composiciones descritas en este documento y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados para su administración sublingual, bucal, rectal, intraósea, intraocular, intranasal, epidural, o intraespinal. Las preparaciones de dichas composiciones farmacéuticas son bien conocidas en la materia. Véase, por ejemplo, Véase, por ejemplo, Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, décima edición, McGraw-Hill, 2002; Pratt y Taylor, eds., Principles of Drug Action, tercera edición, Churchill Livingston, Nueva York, 1990; Katzung, ed., Basic and Clinical Pharmacology, novena edición, McGraw Hill, 20037ybg; Goodman y Gilman, eds., The Pharmacological Basis of Therapeutics, décima edición, McGraw Hill, 2001; Remingtons Pharmaceutical Sciences, 20ª Ed., Lippincott Williams & Wilkins., 2000; Martindale, The Extra Pharmacopoeia, trigésimo segunda edición (The Pharmaceutical Press, Londres, 1999); todos los cuales se incorporan como referencia en este documento en su totalidad.

La administración de los compuestos o de la composición farmacéutica de la presente invención puede efectuarse mediante cualquier método que permita la administración de los compuestos en el sitio de acción. Estos métodos incluyen vías orales, vías intraduodenales, inyección parenteral (incluyendo intravenosa, intraarterial, subcutánea, intramuscular, intravascular, intraperitoneal o infusión), administración tópica (por ejemplo, aplicación transdérmica), rectal, a través de la administración local mediante un catéter o una endoprótesis, o mediante inhalación. Los compuestos también pueden ser administrados por vía intraadiposa o intratecal.

La cantidad administrada del compuesto dependerá del mamífero que se va a tratar, de la gravedad del trastorno o de la afección, de la velocidad de administración, de la disposición del compuesto y del criterio del médico prescriptor. Sin embargo, una dosis eficaz está en el intervalo de desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal al día, preferiblemente desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 35 mg/kg/día, en dosis individuales o divididas. Para un ser humano de 70 kg, esto supondría desde aproximadamente 0,05 hasta 7 g/día, preferiblemente desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 2,5 g/día. En algunos casos pueden ser más adecuados unos niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente, mientras que en otros casos pueden emplearse dosis aún mayores sin provocar ningún efecto secundario perjudicial, por ejemplo, subdividiendo dichas dosis mayores en varias dosis menores para su administración a lo largo del día.

En algunas formas de realización, un compuesto de la invención se administra en una dosis individual. Normalmente, dicha administración será mediante una inyección, por ejemplo, una inyección intravenosa, con objeto de introducir rápidamente el agente. Sin embargo, pueden usarse otras vías según sea apropiado. Una dosis individual de un compuesto de la invención también puede usarse para el tratamiento de una afección aguda.

En algunas formas de realización, un compuesto de la invención se administra en dosis múltiples. La dosificación puede ser de aproximadamente una vez, dos veces, tres veces, cuatro veces, cinco veces, seis veces o más de seis veces al día. La dosificación puede ser de aproximadamente una vez al mes, una vez cada dos semanas, una vez a la semana o una vez cada dos días. En otra forma de realización se administran conjuntamente un compuesto de la invención y otro agente aproximadamente una vez al día hasta aproximadamente 6 veces al día. En otra forma de realización, la administración de un compuesto de la invención y de un agente se continúa durante menos aproximadamente 7 días. En otra forma de realización más, la administración se continúa durante más de aproximadamente 6, 10, 14, 28 días, dos meses, seis meses o un año. En algunos casos, la dosificación continua se consigue y se mantiene el tiempo que sea necesario.

La administración de los agentes de la invención puede continuar el tiempo que sea necesario. En algunas formas de realización, se administra un agente de la invención durante más de 1, de 2, de 3, de 4, de 5, de 6, de 7, de 14 o de 28 días. En algunas formas de realización, se administra un agente de la invención durante menos de 28, de 14, de 7, de 6, de 5, de 4, de 3, de 2 o de 1 día. En algunas formas de realización, se administra un agente de la invención durante de forma crónica sobre una base continua, por ejemplo, para el tratamiento de efectos crónicos.

Puede administrarse una cantidad eficaz de un compuesto de la invención en dosis individuales o múltiples mediante cualquiera de los modos de administración aceptados de agentes que tengan utilidades similares, que incluyen las vías, rectal, bucal, intranasal y tras térmica, mediante inyección intraarterial, intravenosa, intraperitoneal, parenteral, intramuscular, subcutánea, por vía oral, tópica o en forma de un inhalador.

Las composiciones de la invención también pueden administrarse a través de un dispositivo impregnado o recubierto tal como una endoprótesis, por ejemplo, o un polímero cilíndrico insertado en una arteria. Dicho método de administración puede ayudar, por ejemplo, en la prevención o en la mejora de la reestenosis después de procedimientos tales como una angioplastia con globo. Sin estar ceñidos a ninguna teoría, los compuestos de la invención pueden ralentizar o inhibir la migración y la proliferación de las células musculares lisas en la pared arterial que contribuyen a la reestenosis. Un compuesto de la invención puede administrarse, por ejemplo, mediante una administración local desde la estructura de una endoprótesis, desde una endoprótesis injertada, desde injertos o desde el recubrimiento o la vaina de una endoprótesis. En algunas formas de realización, se mezcla un compuesto de la invención con una matriz. Dicha matriz puede ser una matriz polimérica y puede servir para unir el compuesto a la endoprótesis. Algunas matrices poliméricas adecuadas para dicho uso incluyen, por ejemplo, poliésteres o copoliésteres basados en lactona tales como polilactida, policaprolactonglicólido, poliortoésteres, polianhídridos, poliaminoácidos, polisacáridos, polifosfazenos, copolímeros de poli(éter-éster) (por ejemplo, PEO-PLLA); polidimetilsiloxano, poli(etileno-acetato de vinilo), polímeros o copolímeros basados en acrilato (por ejemplo, metilmetacrilato de polihidroxietilo, polivinilpirrolidinona), polímeros fluorados tales como politetrafluoroetileno y ésteres de celulosa. Algunas matrices adecuadas pueden ser no degradables o puede degradarse con el tiempo liberando el compuesto o los compuestos. Los compuestos de la invención pueden aplicarse en la superficie de la endoprótesis mediante diversos métodos tales como recubrimiento por inmersión / hilado, recubrimiento por pulverización, recubrimiento por inmersión y/o recubrimiento por cepillado. Los compuestos pueden aplicarse en un disolvente y el disolvente puede dejarse evaporar, formando así una capa del compuesto sobre la endoprótesis. Alternativamente, el compuesto puede estar ubicado en el cuerpo de la endoprótesis o en el injerto, por ejemplo, en microcanales o en microporos. Cuando se implanta, el compuesto difundirá fuera del cuerpo de la endoprótesis para entrar en contacto con la parece arterial. Dichas endoprótesis pueden prepararse sumergiendo un endoprótesis

elaborada para contener dichos en una solución del compuesto de la invención en un disolvente adecuado, seguido de la evaporación del disolvente. El exceso de fármaco de la superficie de la endoprótesis puede eliminarse mediante un breve lavado adicional con disolvente. En otras formas de realización más, los compuestos de la invención pueden unirse de covalentemente a una endoprótesis o a un injerto. Puede usarse un conector covalente que se degrade in vivo, dando lugar a la liberación del compuesto de la invención. Puede usarse cualquier enlace biolábil para dicho propósito, tal como un enlace éster, amida o anhídrido. Los compuestos de la invención pueden administrarse adicionalmente por vía intravascular desde un globo usado durante una angioplastia. También puede llevarse a cabo la administración extravascular de los compuestos a través del pericardio o a través de una aplicación adventicia de las formulaciones de la invención para disminuir la reestenosis.

En las siguientes referencias, por ejemplo, se divulgan varios dispositivos de endoprótesis que pueden usarse, todas las cuales se incorporan al presente documento como referencia: la Patente de EE.UU. Nº 5451233; la Patente de EE.UU. Nº 5040548; la Patente de EE.UU. Nº 5061273; la Patente de EE.UU. Nº 5496346; la Patente de EE.UU. Nº 5292331; la Patente de EE.UU. Nº 5674278; la Patente de EE.UU. Nº 3657744; la Patente de EE.UU. Nº 4739762; la Patente de EE.UU. Nº 5195984; la Patente de EE.UU. Nº 5292331; la Patente de EE.UU. Nº 5674278; la Patente de EE.UU. Nº 5879382; la Patente de EE.UU. Nº 6344053.

Los compuestos de la invención pueden administrarse en dosis. En la materia se sabe que debido a la variabilidad entre sujetos en la farmacocinética de un compuesto, es necesaria la individualización del régimen de dosificación para una terapia óptima. La dosificación de un compuesto de la invención puede averiguarse mediante una experimentación rutinaria a la luz de la actual divulgación.

Cuando un compuesto de la invención es administrado en una composición que comprende uno o más agentes y el agente tiene una semivida más corta que el compuesto de la invención, las formas de dosificación unitaria del agente y del compuesto de la invención pueden ajustarse consecuentemente.

La composición farmacéutica en cuestión puede estar, por ejemplo, en una forma adecuada para su administración oral en forma de un comprimido, una cápsula, una píldora, un polvo, formulaciones de liberación sostenida, una solución, una suspensión, para su inyección parenteral en forma de una solución, una suspensión o una emulsión estéril, para su administración tópica en forma de un ungüento o de una crema, o para su administración rectal en forma de un supositorio. La composición farmacéutica puede estar en formas de dosificación unitarias adecuadas para la administración individual de dosis precisas. La composición farmacéutica incluirá un portador o un excipiente farmacéutico convencional y un compuesto de acuerdo con la invención como un principio activo. Además, pueden incluirse otros agentes medicinales o farmacéuticos, portadores, coadyuvantes, etc.

Algunos ejemplos de formas de administración parenteral incluyen soluciones o suspensiones del compuesto activo en soluciones acuosas estériles, por ejemplo, soluciones acuosas de propilenglicol o de dextrosa. Dichas formas de dosificación pueden tamponarse adecuadamente si se desea.

La actividad de los compuestos de la presente invención puede ser determinada mediante el siguiente procedimiento, así como mediante los procedimientos descritos en los ejemplos, más abajo. La actividad de la quinasa se evalúa midiendo la incorporación de γ-33P-fosfato a partir de γ-33P-ATP en un sustrato marcado en una His N-terminal, que es expresado en E. coli y se purifica mediante métodos convencionales, en presencia de la quinasa. El ensayo se realiza en una placa de polipropileno de 96 pocillos. La mezcla de incubación (100, µl) comprende Hepes 25 mM, a pH 7,4, MgCl2 10 mM, β-glicerolfosfato 5 mM, Na-ortovanadato 100 µM, DTT 5 mM, quinasa 5 nM sustrato 1 µM. Los inhibidores se suspenden en DMSO y todas las reacciones, incluyendo los controles, se llevan a cabo a una concentración final de un 1 % de DMSO. Las reacciones se inician mediante la adición de ATP 10 µM (con 0,5 µCi de γ-33P-ATP/pocillo) y se incuban a la temperatura ambiente durante 45 minutos. Se añade un volumen igual de TCA al 25 % para detener la reacción y precipitar las proteínas. Las proteínas precipitadas son atrapadas en placas de filtro B de fibra de vidrio y el exceso marcado con ATP se elimina mediante un lavado mediante el uso de un cosechador Tomtec MACH III. Las placas se dejan secar al aire antes de añadir 30 µl/pocillo de Packard Microscint 20 y las placas se cuentan mediante el uso de un Packard TopCount.

La invención también proporciona kits. Los kits incluyen un compuesto o compuestos de la presente invención según se describe en este documento, en un envase adecuado, y un material escrito que puede incluir instrucciones para su uso, un análisis de los estudios clínicos, una lista de efectos secundarios y similares. Dichos kits también pueden incluir información, tal como referencias de bibliografía científica, materiales del prospecto, resultados de los ensayos clínicos y/o resúmenes de éstos y similares, que indican o establecen las actividades y/o las ventajas de la composición y/o que describen la dosificación, la administración, los efectos secundarios, las interacciones farmacológicas u otra información útil para el cuidador sanitario de la salud. Dicha información puede basarse en los resultados de diversos estudios, por ejemplo, en estudios mediante el uso de animales de experimentación que implican modelos in vivo, y en estudios basados en ensayos clínicos con seres humanos. El kit puede contener adicionalmente otro agente. En algunas formas de realización, el compuesto de la presente invención y el agente se proporciona como composiciones individuales en recipientes por separado dentro del kit. En algunas formas de realización, el compuesto de la presente invención y el agente se proporcionan en forma de una única composición

dentro de un recipiente del kit. El envase adecuado y los artículos adicionales para su uso (por ejemplo, un vaso medidor para las preparaciones líquidas, una envoltura de aluminio para minimizar la exposición al aire y similares) son conocidos en la materia y pueden ser incluidos en el kit. Los kits descritos en este documento pueden ser proporcionados, comercializados y/o promocionados a cuidadores sanitarios, incluyendo médicos, enfermeras, farmacéuticos, farmacéuticos hospitalarios y similares. Los kits también pueden comercializarse, en algunas formas de realización, directamente al consumidor.

Métodos

La invención también proporciona compuestos o composiciones farmacéuticas de la presente invención para su uso en el tratamiento de afecciones patológicas que incluyen, pero no se limitan a, enfermedades asociadas con un mal funcionamiento de uno o más tipos de una quinasa PI3. Una descripción detallada de las condiciones y los trastornos mediados por la actividad de la quinasa p110δ se establecen en Sadu et al., documento WO01/81346.

Los métodos de tratamiento proporcionados en este documento comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención. En una forma de realización, la presente invención proporciona un compuesto para su uso en el tratamiento de un trastorno inflamatorio, que incluye enfermedades autoinmunes en un mamífero. Algunos ejemplos de enfermedades autoinmunes incluyen, pero no se limitan a, encefalomielitis diseminada aguda (ADEM), enfermedad de Addison, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos (APS), anemia aplásica, hepatitis autoinmune, enfermedad celíaca, enfermedad de Crohn, diabetes sacarina (de tipo 1), síndrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, síndrome de Guillain-Barré (GBS), enfermedad de Hashimoto, lupus eritematoso, esclerosis múltiple, miastenia gravis, síndrome opsoclono-mioclono (OMS), neuritis óptica, tiroiditis de Ord, pénfigo, poliartritis, cirrosis biliar primaria, psoriasis, artritis reumatoide, síndrome de Reiter, arteritis de Takayasu, arteritis temporal (también conocida como "arteritis de células gigantes"), anemia hemolítica autoinmune cálida, granulomatosis de Wegener, alopecia universal, enfermedad de Chagas, síndrome de fatiga crónica, disautonomía, endometriosis, hidradenitis supurativa, cistitis intersticial, neuromiotonía, sarcoidosis, esclerodermia, colitis ulcerosa, vitíligo y vulvodinia. Otros trastornos incluyen trastornos de resorción ósea y trombosis.

En algunas formas de realización, el uso para el tratamiento de enfermedades inflamatorias o autoinmunes comprende la administración a un sujeto (por ejemplo, un mamífero) de una cantidad terapéuticamente eficaz de uno

o más compuestos de la presente invención que inhibe selectivamente la PI3K-δ y/o la PI3K-γ en comparación con todos los demás tipos de quinasas PI3 de tipo I. Dicha inhibición selectiva de la PI3K-δ y/o de la PI3K-γ puede ser ventajosa para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades o afecciones descritas en este documento. Por ejemplo, la inhibición selectiva de la PI3K-δ puede inhibir las respuestas inflamatorias asociadas con enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes o enfermedades relacionadas con una respuesta inmunitaria indeseable que incluyen, pero no se limitan a, asma, enfisema, alergia, dermatitis, artritis reumatoide, psoriasis, lupus eritematoso o enfermedad del injerto contra el hospedador. La inhibición selectiva de la PI3K-δ puede proporcionar adicionalmente una reducción en la respuesta inflamatoria o inmunitaria indeseable sin una reducción concomitante en la capacidad para reducir una infección bacteriana, vírica y/o fúngica. La inhibición selectiva de ambas PI3K-δ y PI3K-γ puede ser ventajosa para la inhibición de la respuesta inflamatoria en el sujeto hasta un grado mayor que el que sería proporcionado por los inhibidores que inhiben selectivamente la PI3K -8 o la PI3K-γ sola. En un aspecto, uno o más de los métodos en cuestión son eficaces para la reducción de la producción de anticuerpos contra antígenos específicos in vivo en aproximadamente 2 veces, 3 veces, 4 veces, 5 veces, 7,5 veces, 10 veces, 25 veces, 50 veces, 100 veces, 250 veces, 500 veces, 750 veces, o en aproximadamente 1.000 veces o más. En otro aspecto, uno o más de los métodos en cuestión son eficaces para la reducción de la producción de IgG3 y/o IgGM contra antígenos específicos in vivo en aproximadamente 2 veces, 3 veces, 4 veces, 5 veces, 7,5 veces, 10 veces, 25 veces, 50 veces, 100 veces, 250 veces, 500 veces, 750 veces, o en aproximadamente 1.000 veces o más.

En un aspecto, uno o más de los usos en cuestión son eficaces para la mejora de los síntomas asociados con artritis reumatoide, incluyendo pero no se limitan a, una reducción en el edema de las articulaciones, una reducción en los niveles séricos de anti-colágeno y/o una reducción en la patología articular tal como la resorción ósea, el daño al cartílago, el pannus y/o la inflamación. En otro aspecto, los usos en cuestión son eficaces en la reducción de la inflamación del tobillo en al menos aproximadamente el 2 %, el 5 %, el 10 %, el 15 %, el 20 %, el 25 %, el 30 %, el 50 %, el 60 %, o entre aproximadamente el 75 % y el 90 %. En otro aspecto, los usos en cuestión son eficaces en la reducción de la inflamación en la rodilla en al menos aproximadamente el 2 %, el 5 %, el 10 %, el 15 %, el 20 %, el 25 %, el 30 %, el 50 %, el 60 %, o entre aproximadamente el 75 % y el 90 % o más. En otro aspecto más, los usos en cuestión son eficaces en la reducción de los niveles séricos de anti-colágeno de tipo II en al menos aproximadamente el 10 %, el12 %, el 15 %,el 20%, el24%, el 25 %, el30 %,el 35%,el 50 %, el 60 %, el 75 %,el 80 %, el 86 %, el 87 %, o en aproximadamente el 90 % o más. En otro aspecto, los usos en cuestión son eficaces en la reducción de la puntuación de histopatología del tobillo en aproximadamente el 5 %, el 10 %, el 15 %, el 20 %, el 25 %, el 30 %, el 40 %, el 50 %, el 60 %, el 75 %, el 80 %, el 90 % o más. En otro aspecto más, los usos en cuestión son eficaces en la reducción de la puntuación de histopatología de la rodilla en aproximadamente el 5 %, el 10 %, el 15 %,el 20 %,el25 %,el30%, el40 %, el50%, el 60%,el 75%, el 80%,el 90 %o más.

En otras formas de realización, la presente invención proporciona los compuestos o las composiciones farmacéuticas para su uso en el tratamiento de enfermedades respiratorias que incluyen, pero no se limitan a, enfermedades que afectan a los lóbulos del pulmón, la cavidad pleural, los bronquios, la tráquea, el tracto respiratorio superior o los nervios y los músculos respiratorios. Por ejemplo, se proporcionan métodos para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva. La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) es un término de paraguas para un grupo de enfermedades del tracto respiratorio que están caracterizadas por una obstrucción o una limitación al flujo de aire. Algunas afecciones incluidas en este término de paraguas son: bronquitis crónica, enfisema y bronquiectasia.

En otra forma de realización, los compuestos descritos en este documento se usan para el tratamiento del asma. También, los compuestos o las composiciones farmacéuticas según se describen en este documento pueden usarse para el tratamiento de la endotoxemia y de la septicemia. En una forma de realización, los compuestos o las composiciones farmacéuticas según se describen en este documento se usan para el tratamiento de la artritis reumatoide (RA). En otra forma de realización más, los compuestos o las composiciones farmacéuticas según se describe en este documento se usan para el tratamiento de la dermatitis de contacto o atópica. La dermatitis de contacto incluye la dermatitis irritante, la dermatitis fototóxica, la dermatitis alérgica, la dermatitis fotoalérgica, la urticaria de contacto, la dermatitis sistémica de tipo contacto y similares. La dermatitis irritante puede aparecer cuando se usan demasiadas sustancias sobre la piel o cuando la piel es sensible a ciertas sustancias. La dermatitis atópica, a veces denominada eccema, es un tipo de dermatitis, una enfermedad de la piel atópica.

La invención también se refiere al compuesto para su uso en el tratamiento de un trastorno hiperproliferativo en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o de una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable. En algunas formas de realización, dicho uso se refiere al tratamiento de cánceres tales como leucemia mieloide aguda, de timo, de cerebro, de pulmón, espinocelular, de piel, de ojo, retinoblastoma, melanoma intraocular, de la cavidad oral y orofaríngeo, de vejiga, gástrico, de estómago, de páncreas, de vejiga, de mama, cervical, de cabeza, de cuello, renal, de riñón, de hígado, de ovario, de próstata, colorrectal, de esófago, de testículo, ginecológico, de tiroides, del SNC, del SNP, relacionado con el SIDA (por ejemplo, linfoma y sarcoma de Kaposi) o cáncer inducido por virus. En algunas formas de realización, dicho uso se refiere al tratamiento de un trastorno hiperproliferativo no canceroso tal como la hiperplasia benigna de la piel (por ejemplo, psoriasis), la reestenosis o de próstata (por ejemplo, la hipertrofia prostática benigna (BPH)).

La invención también se refiere al compuesto para su uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con la vasculogénesis o la angiogénesis en un mamífero en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, dicho uso es para el tratamiento de una enfermedad elegida de entre el grupo que consiste en una angiogénesis tumoral, una enfermedad inflamatoria crónica tal como artritis reumatoide, aterosclerosis, enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedades de la piel tales como psoriasis, eccema y esclerodermia, diabetes, retinopatía diabética, retinopatía del prematuro, degeneración macular relacionada con la edad, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi y cáncer de ovario, de mama, de pulmón, de páncreas, de próstata, de colon y epidermoide.

Los pacientes que pueden ser tratados con los compuestos de la presente invención, o con una sal farmacéuticamente aceptable de dichos compuestos, según el uso de esta invención incluyen, por ejemplo, pacientes que han sido diagnosticados de psoriasis; reestenosis; aterosclerosis; BPH; cáncer de mama tal como un carcinoma ductal en el tejido de un conducto de una glándula mamaria, carcinomas medulares, carcinomas coloideos, carcinomas tubulares y cáncer de mama inflamatorio; cáncer de ovario, incluyendo tumores epiteliales ováricos tales como un adenocarcinoma en el ovario y un adenocarcinoma que ha migrado desde el ovario a la cavidad abdominal; cáncer de útero; cáncer de cérvix, tal como un adenocarcinoma en el epitelio de la cérvix, incluyendo carcinoma espinocelular y adenocarcinomas; cáncer de próstata, tal como un cáncer de próstata elegido de entre los siguientes: un adenocarcinoma o un adenocarcinoma que ha migrado al hueso; cáncer de páncreas, tal como un carcinoma epiteliode en el tejido del conducto pancreático y un adenocarcinoma en un conducto pancreático; cáncer de vejiga, tal como un carcinoma de células de transición en la vejiga urinaria, carcinomas uroteliales (carcinomas de células de transición), tumores en las células uroteliales que revisten la vejiga células, carcinomas espinocelulares, adenocarcinomas y cánceres microcíticos; leucemia, tal como leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mieloide crónica, tricoleucemia, mielodisplasia, trastornos mieloproliferativos, leucemia mielógena aguda (AML), leucemia mielógena crónica (CML), mastocitosis, leucemia linfocítica crónica (CLL), mieloma múltiple (MM) y síndrome mielodisplásico (MDS); cáncer de hueso; cáncer de pulmón tal como un cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC), que se divide en carcinomas espinocelulares, adenocarcinomas y carcinomas macrocíticos no diferenciados y cáncer de pulmón microcítico; cáncer de piel tal como carcinoma de células basales, melanoma, carcinoma espinocelular y queratosis actínica, que es una afección de la piel que a menudo evolucionado un carcinoma espinocelular; retinoblastoma ocular; melanoma cutáneo o intraocular (del ojo); cáncer de hígado primario (un cáncer que comienza en el hígado); cáncer de riñón; cáncer de tiroides tal como papilar, folicular, medular y anaplásico; linfoma relacionado con el SIDA tal como linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma inmunoblástico y linfoma microcítico de linfocitos B hendidos; sarcoma de Kaposi; cánceres inducidos por virus que incluyen el virus de la hepatitis B (HBV), el virus de la hepatitis C (HCV) y

el carcinoma hepatocelular; leucemia / linfoma por el virus linfótropo humano de tipo 1 (HTLV-1) y de linfocitos T adultos; y virus del papiloma humano (HPV) y cáncer cervical; cáncer el sistema nervioso central (SNC) tales como un tumor cerebral primario, que incluye gliomas (astrocitoma, astrocitoma anaplásico o glioblastoma multiforme), oligodendroglioma, ependimoma, meningioma, linfoma, schwannoma y meduloblastoma; cánceres del sistema nervioso periférico (PNS) tales como neurinomas del acústico y tumor maligno de la vaina del nervio periférico (MPNST) incluyendo neurofibromas y schwannomas, citoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, meningioma maligno, mesotelioma maligno y tumor maligno mixto de Müllerian; cánceres de la cavidad oral y orofaríngeos tales como, cáncer de hipofaringe, cáncer de laringe, cáncer de nasofaringe y cáncer de orofaringe; cáncer de estómago tales como linfomas, tumores estromales gástricos y tumores carcinoides; cáncer de testículo tales como tumores de las células reproductoras (GCT), que incluyen seminomas y no seminomas y tumores estromales gonadales, que incluyen tumores de las células de Leydig y tumores de las células de Sertoli; cáncer de timo tales como timomas, carcinomas tímicos, enfermedad de Hodgkin, linfomas carcinoides no Hodgkin o tumores carcinoides; cáncer rectal; y cáncer de colon.

Los pacientes que pueden ser tratados con los compuestos de la presente invención, o con una sal farmacéuticamente aceptable de dichos compuestos, según el uso de esta invención incluyen, por ejemplo, pacientes que han sido diagnosticados de padecer unas afecciones que incluyen, pero no se limitan a, neurinoma del acústico, adenocarcinoma, cáncer de las glándulas arenales, cáncer anal, angiosarcoma (por ejemplo, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, hemangiosarcoma), gammopatía monoclonal benigna, cáncer biliar (por ejemplo, colangiocarcinoma), cáncer de vejiga, cáncer de mama (por ejemplo, adenocarcinoma de la mama, carcinoma papilar de la mama, cáncer de mama, carcinoma medular de la mama), cáncer de cerebro (por ejemplo, meningioma; glioma, por ejemplo, astrocitoma, oligodendroglioma; meduloblastoma), cáncer de bronquios, cáncer cervical (por ejemplo, adenocarcinoma cervical), coriocarcinoma, cordoma, craniofaringioma, cáncer colorrectal (por ejemplo, cáncer de colon, cáncer rectal, adenocarcinoma colorrectal), carcinoma epitelial, ependimoma, endoteliosarcoma (por ejemplo, Sarcoma de Kaposi, sarcoma hemorrágico idiopático múltiple), cáncer de endometrio, cáncer de esófago (por ejemplo, adenocarcinoma del esófago, adenocarinoma de Barrett), sarcoma de Ewing, hipereosinofilia familiar, cáncer gástrico (por ejemplo, adenocarcinoma de estómago), tumor estromal gastrointestinal (GIST), cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, carcinoma espinocelular de cabeza y cuello, cáncer oral (por ejemplo, carcinoma espinocelular oral (OSCC)), enfermedad de la cadena pesada (por ejemplo, enfermedad de la cadena alfa, enfermedad de la cadena gamma, enfermedad de la cadena mu), hemangioblastoma, tumores miofibroblásticos inflamatorios, amiloidosis inmunocítica, cáncer de riñón (por ejemplo, nefroblastoma, también conocido como tumor de Wilms, carcinoma de las células renales), cáncer de hígado (por ejemplo, cáncer hepatocelular (HCC), hepatoma maligno), cáncer de pulmón (por ejemplo, carcinoma broncogénico, cáncer pulmonar microcítico (SCLC), cáncer pulmonar no microcítico (NSCLC), adenocarcinoma de pulmón), leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica aguda (ALL), que incluye ALL de la línea B y ALL de la línea T, leucemia linfocítica crónica (CLL), proleucemia linfocítica (PLL), tricoleucemia (HLL) y macroglobulinemia de Waldenstrom (WM); linfomas de los linfocitos T periféricos (PTCL), leucemia / linfoma de los linfocitos T adultos (ATL), linfoma de los linfocitos T cutáneos (CTCL), leucemia linfocítica granular grande (LGF), enfermedad de Hodgkin y enfermedad de Reed-Stemberg; leucemia mielocítica aguda (AML), leucemia mielocítica crónica (CML), leucemia linfocítica crónica (CLL)), linfoma (por ejemplo, linfoma de Hodgkin (HL), linfoma no Hodgkin (NHL), linfoma folicular, linfoma difuso de linfocitos B grandes (DLBCL), linfoma de las células de la corteza cerebral (MCL)), leiomiosarcoma (LMS), mastocitosis (por ejemplo, mastocitosis sistémica), mieloma múltiple (MM), síndrome mielodisplásico (MDS), mesotelioma, trastorno mieloproliferativo (MPD) (por ejemplo, policitemia Vera (PV), trombocitosis esencial (ET), metaplasia mieloide agnogénica (AMM) también conocida como mielofibrosis (MF), mielofibrosis idiopática crónica, leucemia mielocítica crónica (CML), leucemia neutrofílica crónica (CNL), síndrome hipereosinofílico (HES)), neuroblastoma, neurofibroma (por ejemplo, neurofibromatosis (NF) de tipo 1 o de tipo 2, schwannomatosis), cáncer neuroendocrino (por ejemplo, tumor neuroendoctrino gastroenteropancreático (GEP-NET), tumor carcinoide), osteosarcoma, cáncer de ovario (por ejemplo, cistadenocarcinoma, carcinoma embrionario ovárico, adenocarcinoma de ovario), enfermedad de Paget de la vulva, enfermedad de Paget del pene, adenocarcinoma papilar, cáncer de páncreas (por ejemplo, andenocarcinoma pancreático, neoplasma mucinoso papilar intraductal (IPMN)), pinealoma, tumor neuroectodérmico primitivo (PNT), cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata), rabdomiosarcoma, retinoblastoma, cáncer de las glándulas animales, cáncer de piel (por ejemplo, carcinoma espinocelular (SCC), queratoacantoma (KA), melanoma, carcinoma de las células basales (BCC)), cáncer del intestino delgado (por ejemplo, cáncer de apéndice), sarcoma de los tejidos blandos (por ejemplo, histiocitoma fibroso maligno (MFH), liposarcoma, tumor maligno de la vaina del nervio periférico (MPNST), condrosarcoma, fibrosarcoma, mixosarcoma), carcinoma de las glándulas sebáceas, carcinoma de las glándulas sudoríparas, sinovioma, cáncer de testículo (por ejemplo, seminoma, carcinoma embrionario testicular), cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma papilar del tiroides, carcinoma papilar tiroideo (PTC), cáncer medular del tiroides) y macroglobulinemia de Waldenström.

La invención también se refiere al compuesto para su uso en el tratamiento de la diabetes en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o de una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable.

Además, los compuestos descritos en este documento también pueden usarse para el tratamiento del acné.

Además, los compuestos descritos en este documento pueden usarse para el tratamiento de la arteriosclerosis, incluyendo la aterosclerosis. La arteriosclerosis es un término general que describe cualquier endurecimiento de las arterias medias o grandes. La aterosclerosis es un endurecimiento de una arteria debido específicamente a una placa de ateroma.

Adicionalmente, los compuestos descritos en este documento pueden usarse para el tratamiento de la glomerulonefritis. La glomerulonefritis es una enfermedad renal autoinmune primaria o secundaria caracterizada por una inflamación de los glomérulos. Puede ser asintomática o presentarse con hematuria y/o proteinuria. Existen muchos tipos reconocidos, divididos en glomerulonefritis aguda, subaguda o crónica. Las causas son infecciosas (patógenos bacterianos, víricos o parásitos), autoinmunes o paraneoplásicas.

Adicionalmente, los compuestos descritos en este documento pueden usarse para el tratamiento de bursitis, lupus, encefalomielitis diseminada aguda (ADEM), enfermedad de Addison, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos (APS), anemia aplásica, hepatitis autoinmune, enfermedad celíaca, enfermedad de Crohn, diabetes sacarina (de tipo 1), síndrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, síndrome de Guillain-Barré (GBS), enfermedad de Hashimoto, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso, miastenia gravis, síndrome opsoclono-mioclono (OMS), neuritis óptica, tiroiditis de Ord, artrosis, uveorretinitis, pénfigo, periartritis, cirrosis biliar primaria, síndrome de Reiter, arteritis de Takayasu, arteritis temporal, anemia hemolítica autoinmune cálida, granulomatosis de Wegener, alopecia universal, enfermedad de Chagas, síndrome de fatiga crónica, disautonomía, endometriosis, hidradenitis supurativa, cistitis intersticial, neuromiotonía, sarcoidosis, esclerodermia, colitis ulcerosa, vitíligo, vulvodinia, apendicitis, arteritis, artritis, blefaritis, bronquiolitis, bronquitis, cervicitis, colangitis, colecistitis, corioamnionitis, colitis, conjuntivitis, cistitis, dacrioadenitis, dermatomiositis, endocarditis, endometritis, enteritis, enterocolitis, epicondilitis, epididimitis, fasciitis, fibrositis, gastritis, gastroenteritis, gingivitis, hepatitis, hidradenitis, ileítis, iritis, laringitis, mastitis, meningitis, mielitis, miocarditis, miositis, nefritis, omfalitis, ooforitis, orquitis, osteítis, otitis, pancreatitis, parotitis, pericarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, flebitis, neumonitis, proctitis, prostatitis, pielonefritis, rinitis, salpingitis, sinusitis, estomatitis, sinovitis, tendinitis, amigdalitis, uveítis, vaginitis, vasculitis o vulvitis.

Además, los compuestos de la invención pueden usarse para el tratamiento de la rinitis alérgica perenne, mesenteritis, peritonitis, acrodermatitis, angiodermatitis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, eczema, eritema multiforme, intertrigo, síndrome de Stevens Johnson, necrolisis epidérmica tóxica, alergia cutánea, reacción alérgica grave / anafilaxia, granulomatosis alérgica, granulomatosis de Wegener, conjuntivitis alérgica, coriorretinitis, conjuntivitis, queratoconjuntivitis infecciosa, queratoconjuntivitis, oftalmía del neonato, tracoma, uveítis, inflamación ocular, blefaroconjuntivitis, mastitis, gingivitis, pericoronitis, faringitis, rinofaringitis, sialadenitis, inflamación del sistema musculoesquelético, enfermedad de Still de aparición adulta, enfermedad de Behcet, bursitis, condrocalcinosis, dactilitis, síndrome de Felty, gota, artritis infecciosa, enfermedad de Lyme, artrosis inflamatoria, periartritis, síndrome de Reiter, infección por el virus de Ross River, síndrome de distrés respiratorio agudo, bronquitis aguda, sinusitis aguda, rinitis alérgica, asma, asma resistente grave, faringitis, pleuritis, rinofaringitis, rinitis alérgica primaveral, sinusitis, estados asmáticos, traqueobronquitis, rinitis, serositis, meningitis, neuromielitis óptica, infección por poliovirus, síndrome de Alport, balanitis, epididimitis, orquitis del epidídimo, glomeruloesclerosis segmental focal, glomerulonefritis, nefropatía por IgA (enfermedad de Berger), orquitis, parametritis, enfermedad inflamatoria pélvica, prostatitis, pielitis, pielocistitis, pielonefritis, granulomatosis de Wegener, hiperuricemia, aortitis, arteritis, quilopericarditis, síndrome de Dressler, endarteritis, endocarditis, arteritis temporal extracraneal, arteritis asociada al VIH, arteritis temporal intracraneal, enfermedad de Kawasaki, linfangioflebitis, enfermedad de Mondor, periarteritis o pericarditis.

En otros aspectos, los compuestos de la invención se usan para el tratamiento de hepatitis autoinmune yeyunitis, mesenteritis, mucositis, esteatohepatitis no alcohólica, hepatitis no vírica, pancreatitis autoinmune, perihepatitis, peritonitis, reservoritis, proctitis, colitis pseudomembranosa, rectosigmoiditis, salpingoperitonitis, sigmoiditis, esteatohepatitis, colitis ulcerosa, síndrome de Churg Strauss, proctitis ulcerosa, síndrome de intestino irritable, inflamación gastrointestinal, enterocolitis aguda, anusitis, necrosis de Balser, colecistitis, colitis, enfermedad de Crohn, diverticulitis, enteritis, enterocolitis, enterohepatitis, esofagitis eosinofílica, esofagitis, gastritis, enteritis hemorrágica, hepatitis, infección por virus de hepatitis, hepatocolangitis, gastritis hipertrófica, ileítis, ileocecitis, sarcoidosis, enfermedad inflamatoria del intestino, espondilitis anquilosante, artritis reumatoide, artritis reumatoide juvenil, psoriasis, artritis psoriásica, lupus (cutáneo / sistémico / nefritis), SIDA, agammaglobulinemia, complejo relacionado con el SIDA, enfermedad de Brutons, síndrome de Chediak Higashi, inmunodeficiencia variable común, síndrome de DiGeorge, disgammaglobulinemia, inmunoglobulinodeficiencia, síndrome de Job, síndrome de Nezelof, trastorno bactericida fagocítico, síndrome de Wiskott Aldrich, asplenia, elefantiasis, esplenomegalia, enfermedad de Kawasaki, linfadenopatía, linfedema, linfocele, síndrome de Nonne Milroy Meige, enfermedad del bazo, esplenomegalia, timoma, enfermedad del timo, perivasculitis, flebitis, pleuropericarditis, poliarteritis nodosa, vasculitis, arteritis de Takayasu, arteritis temporal, tromboangitis, tromboangitis obliterante, tromboendocarditis, tromboflebitis o EPOC.

La invención también se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de una enfermedad cardiovascular en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero de una cantidad terapéuticamente eficaz de un

compuesto de la presente invención, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Algunos ejemplos de afecciones cardiovasculares incluyen, pero no se limitan a, aterosclerosis, reestenosis, oclusión vascular y enfermedad obstructiva carotidea.

En otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos para su uso en la alteración de la función de un leucocito o en la alteración de la función de un osteoclasto. El uso incluye poner en contacto el leucocito o el osteoclasto con una cantidad alteradora de la función de un compuesto de la invención.

En otro aspecto de la presente invención, los compuestos para su uso en el tratamiento de una enfermedad oftálmica mediante la administración de uno o más de los compuestos o las composiciones farmacéuticas en cuestión en el ojo de un sujeto.

Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados a través de una gota ocular, una inyección intraocular, una inyección intravítrea, tópicamente o mediante el uso de un dispositivo de elución del fármaco, una microcápsula, un implante o un dispositivo microfluido. En algunos casos, los compuestos de la presente invención son administrados con un portador o un excipiente que aumenta la penetración intraocular del compuesto, tal como en forma de una emulsión de aceite y agua con partículas coloidales que tienen un núcleo oleoso rodeado por una película interfacial.

En algunos casos, las partículas coloidales incluyen al menos un agente catiónico y al menos un tensioactivo no iónico tal como un poloxámero, tiloxapol, un polisorbato, un derivado de polioxietileno de aceite de ricino, un éster de sorbitano o un estearato de polioxilo. En algunos casos, el agente catiónico es una alquilamina, una alquilamina terciaria, un compuesto de amonio cuaternario, un lípido catiónico, un aminoalcohol, una sal de biguanidina, un compuesto catiónico o una mezcla de los mismos. En algunos casos, el agente catiónico es una sal de biguanidina tal como clorhexidina, poliaminopropil biguanidina, fenformina, alquilbiguanidina, o una mezcla de las mismas. En algunos casos, el compuesto de amonio cuaternario es un haluro de benzalconio, un haluro de lauralconio, cetrimida, un haluro de hexadeciltrimetilamonio, un haluro de tetradeciltrimetilamonio, un haluro de dodeciltrimetilamonio, un haluro de cetrimonio, un haluro de benzetonio, un haluro de behenalconio, un haluro de cetalconio, un haluro de cetetildimonio, un haluro de cetilpiridinio, un haluro de benzododecinio, un haluro de cloralil metenamina, un haluro de miristilalconio, un haluro de estearalconio o una mezcla de dos o más de los mismos. En algunos casos, el agente catiónico es cloruro de benzalconio, cloruro de lauralconio, bromuro de benzododecinio, cloruro de benzetenio, bromuro de hexadeciltrimetilamonio, bromuro de tetradeciltrimetilamonio, bromuro de dodeciltrimetilamonio o una mezcla de dos o más de los mismos. En algunos casos, la fase oleosa es aceite mineral y aceite mineral volátil, triglicéridos de cadena media (MCT), aceite de coco; aceites hidrogenados que comprenden aceite de semilla de algodón hidrogenado, aceite de palma hidrogenado, aceite de ricino hidrogenado o aceite de soja hidrogenado; derivados de polioxietileno de aceite de ricino hidrogenado que comprenden poluoxil-40 aceite de ricino hidrogenado, polioxil-60 aceite de ricino hidrogenado o poli-oxil-100 aceite de ricino hidrogenado.

La invención también proporciona métodos para la modulación de la actividad de una quinasa poniendo en contacto una quinasa con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para modular la actividad de la quinasa. La modulación puede ser una inhibición o una activación de la actividad de la quinasa. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa poniendo en contacto una quinasa con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en una solución poniendo en contacto dicha solución con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicha solución. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en una célula poniendo en contacto dicha célula con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicha célula. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en un tejido poniendo en contacto dicho tejido con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicho tejido. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en un organismo poniendo en contacto dicho organismo con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicho organismo. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en un animal poniendo en contacto dicho animal con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicho animal. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en un mamífero poniendo en contacto dicho mamífero con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicho mamífero. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa en un ser humano poniendo en contacto dicho ser humano con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa en dicho ser humano. En algunas formas de realización, el % de actividad de la quinasa después de poner en contacto una quinasa con un compuesto de la invención es menor del 1, del 5, del 10, del 20, del 30, del 40, del 50, del 60, del 70, del 80 90, del 95, o del 99 % de la actividad de la quinasa en ausencia de dicha etapa de contacto.

En algunas formas de realización, la quinasa es una quinasa de lípidos o una quinasa de proteínas. En algunas formas de realización, la quinasa se elige de entre el grupo que consiste en quinasa PI3 incluyendo las diferentes isoformas, tales como quinasa PI3 α, quinasa PI3 β, quinasa PI3 γ, quinasa PI3 δ; DNA-PK; mTor; Abl, VEGFR, receptor B4 de efrinas (EphB4); receptor TEK de quinasa de tirosina (TIE2); quinasa de tirosina 3 relacionada con FMS (FLT-3); receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR); RET; ATM; ATR; hSmg-1; Hck; Src; receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR); KIT; receptor de inulsina (IR) e IGFR.

La invención también proporciona métodos para la modulación de la actividad de la quinasa PI3 poniendo en contacto una quinasa PI3 con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para modular la actividad de la quinasa PI3. La modulación puede ser una inhibición o una activación de la actividad de la quinasa PI3. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa PI3 poniendo en contacto una quinasa PI3 con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa PI3. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa PI3. Dicha inhibición puede tener lugar en disolución, en una célula que expresa una o más quinasas PI3, en un tejido que comprende una célula que expresa una o más quinasas PI3, o en un organismo que expresa una o más quinasas PI3. En algunas formas de realización, la invención proporciona métodos para la inhibición de la actividad de la quinasa PI3 en un animal (incluyendo un mamífero, tal como los seres humanos) poniendo en contacto dicho animal con una cantidad de un compuesto de la invención suficiente para inhibir la actividad de la quinasa PI3 en dicho animal.

Tratamiento de combinación

La presente invención también proporciona terapias de combinación en las que se usa un agente conocido por modular otras rutas, u otros componentes de la misma ruta, o incluso conjuntos solapantes de enzimas objetivo junto con un compuesto de la presente invención, o una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable. En un aspecto, dicha terapia incluye, pero no se limita a, la combinación del compuesto en cuestión con agentes quimioterapéuticos, anticuerpos terapéuticos y un tratamiento de radiación, para proporcionar un efecto terapéutico sinérgico o aditivo.

En un aspecto, los compuestos o las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden presentar una eficacia sinérgica o aditiva cuando se administran junto con agentes que inhiben la producción o la actividad de la IgE. Dicha combinación puede reducir el efecto indeseado de un elevado nivel de IgE asociado al uso de uno o más inhibidores de la PI3Kδ, si se produjera dicho efecto. Esto puede ser particularmente útil en el tratamiento de trastornos autoinmunes e inflamatorios (AIID) tales como la artritis reumatoide. Adicionalmente, la administración de los inhibidores de la PI3Kδ o de la PI3Kδ/γ de la presente invención junto con inhibidores de la mTOR también puede mostrar sinergia a través de un aumento en la inhibición de la ruta de la PI3K.

En un aspecto aparte pero relacionado, la presente invención proporciona un tratamiento de combinación de una enfermedad asociada con la PI3Kδ que comprende la administración de un inhibidor de la PI3Kδ y de un agente que inhibe la producción o la actividad de la IgE. Otros ejemplos de inhibidores de la PI3Kδ son aplicables y se describen, por ejemplo, en la Patente de EE.UU. Nº 6.800.620. Dicho tratamiento de combinación es particularmente útil para el tratamiento de enfermedades autoinmunes e inflamatorias (AIID) incluyendo, pero no se limitan a, la artritis reumatoide.

Los agentes que inhiben la producción de la IgE son conocidos en la materia e incluyen, pero no se limitan a, uno o más de TEI-9874, ácido 2-(4-(6-ciclohexiloxi-2-naftiloxi)fenilacetamida) benzoico, rapamicina, análogos de rapamicina (es decir, rapálogos), inhibidores de la TORC1, inhibidores de la TORC2 y cualquier otro compuesto que inhiba la mTORC1 y la mTORC2. Los agentes que inhiben la actividad de la IgE incluyen, por ejemplo, anticuerpos anti-IgE tales como, por ejemplo, Omalizumab y TNX-901.

Para el tratamiento de las enfermedades autoinmunes, los compuestos o las composiciones farmacéuticas en cuestión pueden usarse junto con los fármacos prescritos habitualmente que incluyen, pero no se limitan a, Enbrel®, Remicade®, Humira®, Avonex® y Rebif®. Para el tratamiento de enfermedades respiratorias, los compuestos o las composiciones farmacéuticas en cuestión pueden administrarse junto con los fármacos prescritos habitualmente que incluyen, pero no se limitan a, Xolair®, Advair®, Singular® y Spiriva®.

Los compuestos de la invención pueden formularse o administrarse junto con otros agentes que actúan para aliviar los síntomas de afecciones inflamatorias tales como encefalomielitis, asma y las demás enfermedades descritas en este documento. Estos agentes incluyen fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINEs), por ejemplo, ácido acetilsalicílico; ibuprofeno; naproxeno; indometacina; nabumetona; tolmetina; etc. Los corticosteroides se usan para reducir la inflamación y suprimir la actividad del sistema inmunitario. El fármaco prescrito más habitualmente de este tipo es la prednisona. La cloroquina (Aralen) o la hidroxicloroquina (Plaquenil) también pueden ser muy útiles en algunos individuos con lupus. Lo más a menudo se prescriben para los síntomas cutáneos y articulares del lupus. La azatioprina (Imuran) y la ciclofosfamida (Cytoxan) suprimen la inflamación y tienden a suprimir el sistema inmunitario. Otros agentes, por ejemplo, el metotrexato y la ciclosporina se usan para controlar los síntomas del lupus. Los anticoagulantes se emplean para impedir que la sangre coagule rápidamente. Varian desde el ácido

acetilsalicílico a una dosis muy baja, que impide la agregación de las plaquetas, hasta la heparina / cumadina. Otros compuestos usados en el tratamiento de lupus incluyen belimumab (Benlysta®).

En otro aspecto, esta invención también se refiere a una composición farmacéutica para la inhibición del crecimiento celular anormal en un mamífero que comprende una cantidad de un compuesto de la presente invención, o una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable, junto con una cantidad de un agente antineoplásico (por ejemplo, un agente quimioterapéutico bioterapéutico). Actualmente se conocen muchos quimioterapéuticos en la materia y pueden ser usados junto con los compuestos de la invención. También pueden usarse otras terapias oncológicas junto con los compuestos de la invención e incluyen, pero no se limitan a, cirugía y tratamientos quirúrgicos y terapia de radiación.

En algunas formas de realización, el quimioterapéutico se elige de entre el grupo que consiste en inhibidores de la mitosis, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos intercalantes, inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores del ciclo celular, enzimas, inhibidores de la topoisomerasa, modificadores de la respuesta biológica, antihormonas, inhibidores de la angiogénesis y antiandrógenos. Algunos ejemplos no limitantes son agentes quimioterapéuticos, agentes citotóxicos y moléculas pequeñas no peptídicas tales como Gleevec (Imatinib Mesilato), Velcade (bortezomib), Casodex (bicalutamida), Iressa (gefitinib) y adriamicina, así como una serie de agentes quimioterapéuticos. Algunos ejemplos no limitantes de agentes quimioterapéuticos incluyen agentes alquilantes tales como tiotepa y ciclosfosfamida (CYTOXAN™); sulfonatos de alquilo tales como busulfano, improsulfano y piposulfano; aziridinas tales como benzodopa, carboquona, meturedopa y uredopa; etileniminas y metilamelaminas incluyendo altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosfaoramida y trimetilolomelamina; mostazas nitrogenadas tales como clorambucilo, clornafazina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, clorhidrato del óxido de mecloretamina, melfalano, novembichina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostaza de uracilo; nitrosureas tales como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; antibióticos tales como aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, caliceamicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, Casodex™, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina, rubicina, epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina; antimetabolitos tales como metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); análogos del ácido fólico tales como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina tales como fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina tales como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didesoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, andrógenos tales como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antiadrenales tales como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; reponedores de ácido fólico tales como ácido frolínico; aceglatona; glucósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; amsacrina; bestrabucilo; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diaziquona; elfomitina; acetato de eliptinio; etoglucida; nitrato de galio; hidroxiurea; lentinano; lonidamina; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarrubicina; ácido podofilínico; 2-etilhidrazida; procarbazina; PSK.R™; razoxano; sizofiran; espirogermanio; ácido tenuazónico; triazicuona; 2,2’,2"-triclorotrietilamina; uretano; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobromano; gacitosina; arabinósido ("Ara-C"); ciclofosfamida; tiotepa; taxanos, por ejemplo, paclitaxel (TAXOL™, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N. J.) y docetaxel (TAXOTERE™, Rhona-Poulenc Rorer, Antony, Francia); ácido retinoico; esperamicinas; capecitabina; y sales, ácidos

o derivados de cualquiera de los anteriores farmacéuticamente aceptables. También están incluidos como acondicionadores celulares quimioterapéuticos adecuados los agentes antihormonales que actúan regulando o inhibiendo la acción hormonal sobre los tumores tales como antiestrógenos, incluyendo, por ejemplo, tamoxifeno (Nolvadex™), raloxifeno, 4(5)-imidazoles inhibidores de la aromatasa, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY 117018, onapristona y toremifeno (Fareston); y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolida y goserrelina; clorambucilo; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platino tales como cisplatino y carboplatino; vinblastina; platino; etopósido (VP-16); ifosfamida; mitomicina C; mitoxantrona; vincristina; vinorelbina; navelbina; novantrona; tenipósido; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; camptotecina-11 (CPT-11); inhibidor de la topoisomerasa RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO). Cuando se desee, los compuestos o la composición farmacéutica de la presente invención puede usarse junto con los fármacos antineoplásicos prescritos habitualmente tales como Herceptin®, Avastin®, Erbitux®, Rituxan®, Taxol®, Arimidex®, Taxotere® y Velcade®.

Otros agentes quimioterapéuticos incluyen, pero no se limitan a, antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, raloxifeno y megestrol), agonistas de la LHRH (por ejemplo, goscrclin y leuprolida), antiandrógenos (por ejemplo, flutamida y bicalutamida), terapias fotodinámicas (por ejemplo, vertoporfina (BPD-MA), ftalocianina, fotosensibilizante Pc4 y desmetoxihipocrelina A (2BA-2-DMHA)), mostazas nitrogenadas (por ejemplo, ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida, clorambucilo, estramustina y melfalano), nitrosoureas (por ejemplo, carmustina (BCNU) y lomustina (CCNU)), sulfonatos de alquilo (por ejemplo, busulfano y treosulfano), triazenos (por ejemplo, dacarbazina, temozolomida), compuestos que contienen platino (por ejemplo, cisplatino, carboplatino, oxaliplatino), alcaloides de la vinca (por ejemplo, vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina), taxoides (por ejemplo, paclitaxel o un equivalente de paclitaxel tal como nanopartículas de paclitaxel unido a albúmina (Abraxano), paclitaxel unido al ácido docosahexaenoico (DHA-paclitaxel, Taxoprexina), paclitaxel unido a poliglutamato (PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, XYOTAX), el profármaco activado por tumor (TAP) ANG 1005 (Angiopep-2 unido a tres

moléculas de paclitaxel), paclitaxel-EC-1 (paclitaxel unido al péptido de reconocimiento de erbB2 EC-1) y paclitaxel conjugado con glucosa, por ejemplo, 2-glucopiranosil succinato de 2’-paclitaxel metilo; docetaxel, taxol), epipodophyllins (por ejemplo, etopósido, etopósido fosfato, tenipósido, topotecan, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecan, irinotecan, crisnatol, mitomicina C), antimetabolitos, inhibidores de la DHFR (por ejemplo, metotrexato, diclorometotrexato, trimetrexato, edatrexato), inhibidores de la deshidrogenasa de IMP (por ejemplo, ácido micofenólico, tiazofurina, ribavirina y EICAR), inhibidores de la reductasa de ribonucleótido (por ejemplo, hidroxiurea y deferoxamina), análogos de uracilo (por ejemplo, 5-fluorouracilo (5-FU), floxuridina, doxifluridina, ratitrexed, tegafururacilo, capecitabina), análogos de citosina (por ejemplo, citarabina (ara C), arabinósido de citosina y fludarabina), análogos de purina (por ejemplo, mercaptopurina y tioguanina), análogos de la vitamina D3 (por ejemplo, EB 1089, CB 1093 y KH 1060), inhibidores de la isoprenilación (por ejemplo, lovastatina), neurotoxinas dopaminérgicas (por ejemplo, el ion 1-metil-4-fenilpiridinio), inhibidores del ciclo celular (por ejemplo, estaurosporina), actinomicina (por ejemplo, actinomicina D, dactinomicina), bleomicina (por ejemplo, bleomicina A2, bleomicina B2, peplomicina), antraciclina (por ejemplo, daunorrubicina, doxorrubicina, doxorrubicina liposómica pegilada, idarrubicina, epirrubicina, pirarrubicina, zorrubicina, mitoxantrona), inhibidores de la MDR (por ejemplo, verapamilo), inhibidores de la ATPasa de Ca2+ (por ejemplo, tapsigargina), imatinib, talidomida, lenalidomida, inhibidores de la quinasa de tirosina (por ejemplo, axitinib (AG013736), bosutinib (SKI-606), cediranib (RECENTINTM, AZD2171), dasatinib (SPRYCEL®, BMS-354825), erlotinib (TARCEVA®), gefitinib (IRESSA®), imatinib (Gleevec®, CGP57148B, STI-571), lapatinib (TYKERB®, TY-VERB®), lestaurtinib (CEP-701), neratinib (HKI-272), nilotinib (TASIGNA®), semaxanib (semaxinib, SU5416), sunitinib (SUTENT®, SU11248), toceranib (PALLADIA®), vandetanib (ZACTIMA®, ZD6474), vatalanib (PTK787, PTK/ZK), trastuzumab (HERCEPTIN®), bevacizumab (AVASTIN®), rituximab (RITUXAN®), cetuximab (ERBITUX®), panitumumab (VECTIBIX®), ranibizumab (Lucentis®), nilotinib (TASIGNA®), sorafenib (NEXAVAR®), everolimus (AFINITOR®), alemtuzumab (CAMPATH®), gemtuzumab ozogamicina (MYLOTARG®), temsirolimus (TORISEL®), ENMD-2076, PCI-32765, AC220, lactato de dovitinib (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOKTM), SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120 (VARGATEF®), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (AV-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647 y/o XL228), inhibidores del proteasome (por ejemplo, bortezomib (Velcade)), inhibidores de la mTOR (por ejemplo, rapamicina, temsirolimus (CCI-779), everolimus (RAD-001), ridaforolimus, AP23573 (Ariad), AZD8055 (AstraZeneca), BEZ235 (Novartis), BGT226 (Norvartis), XL765 (Sanofi Aventis), PF-4691502 (Pfizer), GDC0980 (Genetech), SF1126 (Semafoe) y OSI-027 (OSI)), oblimersen, gemcitabina, carminomicina, leucovorina, pemetrexed, ciclofosfamida, dacarbazina, procarbizina, prednisolona, dexametasona, campatocina, plicamicina, asparraginasa, aminopterina, metopterina, porfiromicina, melfalano, lewosidina, leurosina, clorambucilo, trabectedina, procarbazina, discodermolida, carminomicina" aminopterina y hexametil melamina.

Algunos ejemplos de agentes bioterapéuticos incluyen, pero no se limitan a, interferones, citocinas (por ejemplo, factor de necrosis tumoral, interferón α, interferón γ), vacunas, factores de crecimiento hematopoyéticos, seroterapia monoclonal, agentes inmunoestimulantes y/o inmunoduladores (por ejemplo, IL-1, 2, 4, 6, o 12), factores de crecimiento de células inmunitarias (por ejemplo, GM-CSF) y anticuerpos (por ejemplo, Herceptin (trastuzumab), T-DM1, AVASTIN (bevacizumab), ERBITUX (cetuximab), Vectibix (panitumumab), Ritux-an (rituximab), Bexxar (tositumomab)).

Esta invención también se refiere a un método para el uso de los compuestos o de la composición farmacéutica junto con terapia de radiación para la inhibición del crecimiento celular anormal o el tratamiento de un trastorno hiperproliferativo en el mamífero. Las técnicas para la administración de la terapia de radiación son conocidas en la materia, y estas técnicas pueden ser usadas en la terapia de combinación descrita en este documento. La administración del compuesto de la invención en esta terapia de combinación puede ser determinada según se describe en este documento.

La terapia de radiación puede ser administrada a través de uno de los diversos métodos, o una combinación de los métodos, incluyendo, sin limitación, terapia con haz externo, terapia de radiación interna, radiación con implantes, radiocirugía estereotáctica, terapia de radiación sistémica, radioterapia y braquiterapia intersticial permanente o temporal. El término "braquiterapia", según se usa en este documento, se refiere una terapia de radiación administrada mediante un material radioactivo confinado espacialmente insertado en el cuerpo, en o cerca de un tumor o de otro sitio de tejido proliferativo patológico. El término pretende incluir sin limitación la exposición a isótopos radioactivos (por ejemplo, At-211, I-131, I-125 Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32 y los isótopos radioactivos del Lu). Algunas fuentes de radiación adecuadas para su uso como un acondicionador celular de la presente invención incluyen tanto sólidos como líquidos. A modo de un ejemplo no limitante, la fuente de radiación puede ser un radionúclido, tal como I-125, I-131 Yb-169, Ir-192 en forma de una fuente sólida, I-125 en forma de una fuente sólida, u otros radionúclidos que emitan fotones, partículas beta, radiación gamma u otros rayos terapéuticos. El material radioactivo también puede ser un fluido elaborado a partir de cualquier solución de radionúclido(s), por ejemplo, una solución de I-125 o de I-131, o puede producirse un fluido radioactivo mediante el uso de una suspensión de un fluido adecuado que contiene partículas pequeñas de radionúclidos sólidos, tales como Au-198, Y

90. Además, el (los) radionúclido(s) puede(n) estar incluido(s) en un gel o en microesferas radioactivas radioactivas.

Sin estar limitados por ninguna teoría, los compuestos de la presente invención pueden hacer que las células anormales sean más sensibles al tratamiento con radiación con el fin de destruir y/o de inhibir el crecimiento de

dichas células. Consecuentemente, esta invención se refiere adicionalmente a un método para la sensibilización de las células anormales en un mamífero para el tratamiento con radiación que comprende la administración al mamífero de una cantidad de un compuesto de la presente invención o de una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable, cantidad que es eficaz en la sensibilización de las células anormales frente el tratamiento con radiación. La cantidad del compuesto, de la sal o del solvato en este método puede ser determinada de acuerdo con los medios para la determinación de las cantidades eficaces de dichos compuestos descritos en este documento.

Los compuestos o las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden usarse junto con una cantidad de una o más sustancias elegidas de entre agentes antiangiogénicos, inhibidores de la transducción de señales y agentes antiproliferativos.

Los agentes antiangiogénicos, tales como los inhibidores de la MMP-2 (metaloproteinasa de la matriz 2), los inhibidores de la MMP-9 (metaloproteinasa de la matriz 9) y los inhibidores de la COX-11 (ciclooxigenasa 11), pueden usarse junto con un compuesto de la presente invención y a las composiciones farmacéuticas según se describen en este documento. Algunos ejemplos de inhibidores útiles de la COX-II incluyen CELEBREX™ (alecoxib), valdecoxib y rofecoxib. Algunos ejemplos de inhibidores útiles de las metaloproteinasas de la matriz se describen en el documento WO 96/33172 (publicado el 24 de octubre de 1996) en el documento WO 96/27583 (publicado el 7 de marzo de 1996), en la Solicitud de Patente Europea Nº 97304971.1 (depositada el 8 de julio de 1997), en la Solicitud de Patente Europea Nº 99308617.2 (depositada el 29 de octubre de 1999) en el documento WO 98/07697 (publicado el 26 de febrero de 1998) en el documento WO 98/03516 (publicado el 29 de enero de 1998) en el documento WO 98/34918 (publicado el 13 de agosto de 1998) en el documento WO 98/34915 (publicado el 13 de agosto de 1998) en el documento WO 98/33768 (publicado el 6 de agosto de 1998) en el documento WO 98/30566 (publicado el 16 de julio de 1998), en la Publicación de Patente Europea 606.046 (publicada el 13 de julio de 1994), en la Publicación de Patente Europea 931, 788 (publicada el 28 de julio de 1999) en el documento WO 90/05719 (publicado el 31 de mayo de 1990) en el documento WO 99/52910 (publicado el 21 de octubre de 1999) en el documento WO 99/52889 (publicado el 21 de octubre de 1999) en el documento WO 99/29667 (publicado el 17 de junio de 1999), en la Solicitud Internacional PCT Nº PCT/IB98/01113 (depositada el 21 de julio de 1998), en la Solicitud de Patente Europea Nº 99302232.1 (depositada el 25 de marzo de 1999), en la Solicitud de Patente de Gran Bretaña Nº 9912961.1 (depositada el 3 de junio de 1999), en la Solicitud de Provisional de EE.UU. Nº 60/148.464 (depositada el 12 de agosto de 1999), en la Patente de EE.UU. 5.863.949 (concedida el 26 de enero de 1999), en la Patente de EE.UU. 5.861.510 (concedida el 19 de enero de 1999) y en la Publicación de Patente Europea 780.386 (publicada el 25 de junio de 1997), todos los cuales se incorporan en este documento como referencia en su totalidad. Los inhibidores preferidos de la MMP-2 y de la MMP-9 son aquellos que tengan poca o ninguna actividad en la inhibición de la MMP-1. Son más preferidos aquellos que inhiban selectivamente la MMP-2 y/o la AMP-9 con respecto a las demás metaloproteinasas de la matriz (es decir, la MAP-1, la MMP-3, la MMP-4, la MMP-5, la MMP-6, la MMP-7, la MMP-8, la MMP-10, la MMP-11, la MMP-12 y la MMP-13). Algunos ejemplos específicos de inhibidores de las MMP útiles en la presente invención son AG-3340, RO 32-3555 y RS 13-0830.

La invención también se refiere a un método y a una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad cardiovascular en un mamífero que comprende una cantidad de un compuesto de la presente invención,

o una sal, un éster, un profármaco, un solvato, un hidrato o un derivado de los mismos farmacéuticamente aceptable, o a un derivado marcado isotópicamente de los mismos, y a una cantidad de uno o más agentes terapéuticos para su uso en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares.

Algunos ejemplos de aplicaciones para su uso en enfermedades cardiovasculares son agentes antitrombóticos, por ejemplo, prostaciclina y salicilatos, agentes trombolíticos, por ejemplo, estreptoquinasa, uroquinasa, activador del plasminógeno tisular (TPA) y complejo activador de plasminógeno-estreptoquinasa anisoilado (APSAC), agentes antiagregantes plaquetares, por ejemplo, ácido acetilsalicílico (ASA) y clopidrogel, agentes vasodilatadores, por ejemplo, nitratos, fármacos bloqueantes de los canales de calcio, agentes antiproliferativos, por ejemplo, colchicina y agentes alquilantes, agentes intercalantes, factores moduladores del crecimiento tales como interleucinas, factor de crecimiento transformante beta y congéneres del factor de crecimiento derivado de plaquetas, anticuerpos monoclonales dirigidos contra los factores de crecimiento, agentes antiinflamatorios tanto esteroideos como no esteroideos, y otros agentes que puedan modular el tono y la función vasales, la arteriosclerosis y la respuesta curativa del vaso o del órgano lesionado después de la intervención. También pueden incluirse antivíricos en las combinaciones con los recubrimientos comprendidos por la invención. Además, puede usarse un recubrimiento para efectuar la administración terapéutica focalizada en la pared de un vaso. Mediante la incorporación del agente activo en un polímero hinchable, el agente activo será liberado tras el hinchamiento del polímero.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser formulados o administrados junto con barreras tisulares líquidas o sólidas también conocidas como lubricantes. Algunos ejemplos de barreras tisulares incluyen, pero no se limitan a, polisacáridos, poliglucanos, seprafilm, interceed y ácido hialurónico.

Los medicamentos que pueden ser administrados junto con los compuestos descritos en este documento incluyen cualquier fármaco adecuado útilmente administrado mediante inhalación, por ejemplo, analgésicos, por ejemplo, codeína, dihidromorfina, ergotamina, fentanilo o morfina; preparaciones anginosas, por ejemplo, diltiazem;

antialérgicos, por ejemplo, cromoglicato, ketotifeno o nedocromilo; antiinfecciosos, por ejemplo, cefalosporinas, penicilinas, estreptomicina, sulfonamidas, tetraciclinas o pentamidina; antihistamínicos, por ejemplo, metapirileno; antiinflamatorios, por ejemplo, beclometasona, flunisolida, budesonida, tipredano, acetónido de triamcinolona o fluticasona; antitusivos, por ejemplo, noscapina; broncodilatadores, por ejemplo, efedrina, adrenalina, fenoterol, formoterol, isoprenalina, metaproterenol, fenilefrina, fenilpropanolamina, pirbuterol, reproterol, rimiterol, salbutamol, salmeterol, terbutalina, isoetarina, tulobuterol, orciprenalina o (-)-4-amino-3,5-dicloro-α-[[[6-[2-(2-piridinil)etoxi]hexil] amino]metil] bencenometanol; diuréticos, por ejemplo, amilorida; anticolinérgicos por ejemplo, ipratropio, atropina u oxitropio; hormonas, por ejemplo, cortisona, hidrocortisona o prednisolona; xantinas, por ejemplo, aminofillina, teofilinato de colina, teofilinato de lisina o teofillina; y proteínas y péptidos terapéuticos, por ejemplo, insulina o glucagón. Será evidente para una persona experta en la materia que, cuando sea apropiado, los medicamentos pueden usarse en forma de sales (por ejemplo, en forma de sales de metales alcalinos o de aminas, o en forma de sales de adición ácida) o en forma de ésteres (por ejemplo, ésteres de alquilo inferior) o en forma de solvatos (por ejemplo, hidratos) para optimizar la actividad y/o la estabilidad del medicamento.

Otros ejemplos de agentes terapéuticos útiles para una terapia de combinación incluyen, pero no se limitan a, los agentes según se han descrito anteriormente, terapia de radiación, antagonistas hormonales, hormonas y sus factores de liberación, fármacos tiroideos y antitiroideos, estrógenos y progestinas, andrógenos, hormona adrenocorticotropa; esteroides adrenocorticales y sus análogos sintéticos; inhibidores de la síntesis y de las acciones de las hormonas adrenocorticales, insulina, agentes hipoglucemiantes orales y la farmacología del páncreas endocrino, agentes que afectan a la calcificación y al recambio óseo: calcio, fosfato, hormona paratiroidea, vitamina D, calcitonina, vitaminas tales como vitaminas hidrosolubles, complejo vitamínico B, ácido ascórbico, vitaminas liposolubles, vitaminas A, K y E, factores de crecimiento, citocinas, quimiocinas, agonistas y antagonistas del receptor muscarinico; agentes anticolinasterasa; agentes que actúan en la unión neuromuscular y/o en los ganglios autónomos; catecolaminas, fármacos simpaticomiméticos y agonistas y antagonistas del receptor adrenérgico; y agonistas y antagonistas del receptor de la 5-hidroxitriptamina (5-HT, serotonina).

Los agentes terapéuticos también pueden incluir agentes para el dolor y la inflamación, tales como histamina y antagonistas de la histamina, bradicinina y antagonistas de la bradicinina, 5-hidroxitriptamina (serotonina), sustancias lipídicas que son generadas mediante la biotransformación de los productos de la hidrólisis selectiva de los fosfolípidos de membrana, eicosanoides, prostaglandinas, tromboxanos, leucotrienos, ácido acetilsalicílico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, agentes analgésicos antipiréticos, agentes que inhiben la síntesis de prostaglandinas y tromboxanos, inhibidores selectivos de la ciclooxigenasa inducible, inhibidores selectivos de la ciclooxigenasa-2 inducible, autacoides, hormonas paracrinas, somatostatina, gastrina, citocinas que median en las interacciones implicadas en las respuestas inmunitarias humorales y celulares, autacoides derivados de lípidos, eicosanoides, agonistas β-adrenérgicos, ipratropio, glucocorticoides, metilxantinas, bloqueantes de los canales de sodio, agonistas del receptor opioide, bloqueantes de los canales de calcio, estabilizantes de membrana e inhibidores de leucotrienos.

Algunos agentes terapéuticos adicionales contemplados en este documento incluyen diuréticos, vasopresina, agentes que afectan a la conservación renal de agua, renina, angiotensina, agente útiles en el tratamiento de la isquemia miocárdica, agentes antihipertensores, inhibidores de la enzima conversora de la angiotensina, antagonistas del receptor β-adrenérgico, agentes para el tratamiento de la hipercolesterolemia y agentes para el tratamiento de dislipidemia.

Otros agentes terapéuticos contemplados incluyen fármacos usados para el control de la acidez gástrica, agentes para el tratamiento de úlceras pépticas, agentes para el tratamiento de la enfermedad por reflujo gastroesofágico, agentes procinéticos, antieméticos, agentes usados en el síndrome de intestino irritable, agentes usados en la diarrea, agentes usados en el estreñimiento, agentes usados en la enfermedad inflamatoria del intestino, agentes usados en la enfermedad biliar, agentes usados en la enfermedad pancreática. Algunos agentes terapéuticos usados para el tratamiento de infecciones protozoarias, fármacos usados para el tratamiento de malaria, amebiasis, giardiasis, tricomoniasis, tripanosomiasis y/o leishmaniosis, y/o fármacos usados en la quimioterapia de la helmintiasis. Otros agentes terapéuticos incluyen agentes antimicrobianos sulfonamidas, trimetoprim-sulfametoxazol quinolonas y agentes para las infecciones del tracto urinario, penicilinas, cefalosporinas y otros antibióticos betalactámicos, un agente que comprende un aminoglucósido, inhibidores de la síntesis de proteínas, fármacos usados en la terapia de la tuberculosis, enfermedad por el complejo de mycobacterium avium y lepra, agentes antifúngicos agentes antivíricos incluyendo agentes no retrovíricos y agentes antirretrovíricos.

Algunos ejemplos de anticuerpos terapéuticos que pueden combinarse con un compuesto en cuestión incluyen, pero no se limitan a, anticuerpos antirreceptor de la quinasa de tirosina (cetuximab, panitumumab, trastuzumab), anticuerpos anti CD20 (rituximab tositumomab) y otros tales como anticuerpos alemtuzumab, bevacizumab y gemtuzumab.

Además, los métodos de este documento contemplan los agentes terapéuticos usados para la inmunomodulación, tales como inmunomoduladores, agentes inmunosupresores, tolerógenos e inmunoestimulantes. Además, agentes terapéuticos que actúan en la sangre y en los órganos hematopoyéticos, agentes hematopoyéticos, factores de crecimiento, minerales y vitaminas, anticoagulantes, trombolíticos y fármacos antiagregantes plaquetarios.

Algunos agentes terapéuticos adicionales que pueden combinarse con un compuesto en cuestión pueden encontrarse en Goodman y Gilman, "The Pharmacological Basis of Therapeutics", décima edición, editada por Hardman, Limbird y Gilman o la Physician’s Desk Reference, estando ambos incorporados en este documento como referencia en su totalidad.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser usados junto con los agentes divulgados en este documento o con otros agentes adecuados, dependiendo de la afección que se va a tratar. Así, en algunas formas de realización los compuestos de la invención se administrarán conjuntamente con otros agentes como se ha descrito anteriormente. Cuando se usan en una terapia de combinación, los compuestos descritos en este documento pueden ser administrados con un segundo agente simultáneamente o por separado. Esta administración en combinación puede incluir la administración simultánea de los dos agentes en la misma forma de dosificación, la administración simultánea en formas de dosificación individuales y la administración por separado. Esto es, un compuesto descrito en este documento y cualquiera de los agentes descritos anteriormente pueden formularse conjuntamente en la misma forma de dosificación y administrarse simultáneamente. Alternativamente, un compuesto de la presente invención y cualquiera de los agentes descritos anteriormente pueden administrarse simultáneamente, donde ambos de los agentes están presentes en formulaciones individuales. En otra alternativa, un compuesto de la presente invención puede ser administrado justo después de cualquiera de los agentes descritos anteriormente, o viceversa. En el protocolo de administración individual puede administrarse un compuesto de la presente invención y cualquiera de los agentes descritos anteriormente con unos pocos minutos o unas pocas horas de diferencia, o con unos pocos días de diferencia.

Los ejemplos y las preparaciones proporcionados a continuación ilustran y ejemplifican adicionalmente los compuestos de la presente invención y los métodos de preparación de dichos compuestos. Debe apreciarse que el ámbito de la presente invención no está limitado en modo alguno por el ámbito de los siguientes ejemplos y preparaciones. En los siguientes ejemplos, una molécula con un único centro quiral, salvo que se indique de otro modo, existe en forma de una mezcla racémica. Aquellas moléculas que tengan dos o más centros quirales, salvo que se indique de otro modo, existen en forma de una mezcla racémica de diastereómeros. Los enantiómeros / diastereómeros individuales pueden obtenerse mediante los métodos conocidos por los expertos en la materia.

Ejemplos

Ejemplo 1: síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1613) (método A).

Esquema 14. Síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1613).

Una solución ácido de 2-amino-6-metilbenzoico (1601) (106,5 g, 705 mmol) en H2O (200 ml) se enfrió hasta 0 -5 ºC, se añadió lentamente HCl concentrado (250 ml). La solución se agitó durante 15 min a 0 -5 ºC. Se añadió gota a 5 gota una solución de nitrito de sodio (58,4 g, 6,85 mol) en H2O (120 ml) a 0 -5 ºC, y la mezcla resultante se agitó durante 30 min. Entonces a la solución anterior se añadió a una solución de KI (351 g, 2,11 mol) en H2O (200 ml), y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 16 h. La solución se vertió en agua enfriada con hielo (2.000 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaOH acuoso (al 15 %, 3 x 200 ml). La capa acuosa se acidificó hasta pH = 1, y se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica

10 combinada se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el ácido 2-yodo-6-metilbenzoico (1602) (145 g, 79 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo

A una mezcla agitada de ácido 2-yodo-6-metilbenzoico (1602) (105 g, 400 mmol), Pd(OAc)2 (27 g, 120 mmol) y PPh3 (63 g 240 mol) en THF (1.000 ml) a la TA, se añadió tributil(vinil) estaño (152 g, 480 mmol). La mezcla resultante se 15 calentó a reflujo durante una noche. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g), y después se concentró a vacío. El residuo se vertió en agua enfriada con hielo (1.000 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaOH acuoso (15 %, 5 x 200 ml). La capa acuosa combinada se acidificó hasta pH = 1, se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el ácido 2

20 metil-6-vinilbenzoico (1603) (61 g, 95 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

Una mezcla de ácido 2-metil-6-vinilbenzoico (1603) (56 g, 350 mmol) y cloruro de tionilo (208 g, 1750 mmol) en tolueno (400 ml) se agitó a la temperatura de reflujo durante 2 h. La mezcla se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el cloruro de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 95 % de rendimiento) en forma de un aceite

25 de color amarillo. El producto obtenido se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.

Una mezcla de o-toluidina (45 g, 420 mmol) y trietilamina (71 g, 70 mmol) en CH2Cl2 (300 ml) se agitó durante 10 min a la TA. A esta mezcla se añadió cloruro de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 35 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. La solución se vertió en agua (300 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 200 ml), se secó 30 sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto

se suspendió en IPE (isopropil éter) (300 ml), se agitó a reflujo durante 30 min, y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 2-metil-N-o-tolil-6-vinilbenzamida (1605) (81 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución de 2-metil-N-o-tolil-6-vinilbenzamida (1605) (80 g, 320 mmol) en DMF (250 ml) a la TA, se añadió lentamente NaH (al 60 % en aceite mineral, 25,6 g, 640 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. A esta mezcla, se añadió cloroacetato de etilo (78 g, 640 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 2 h. La solución se vertió en agua (500 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en MeOH (160 ml), se agitó a reflujo durante 10 min, y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 2-(2-metil-N-o-tolil-6-vinilbenzamido) acetato de etilo (1606) (67 g, 62 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una mezcla agitada de 2-(2-metil-N-o-tolil-6-vinilbenzamido) acetato de etilo (1606) (67 g, 200 mmol) en 1,4dioxano (300 ml) y H2O (100 ml) a la TA, se añadió tetraóxido de osmio (20 mg) y se agitó a la TA durante 30 min. A esta mezcla se añadió peryodato de sodio (86 g, 400 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de gel de sílice (10 g), el filtrado se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron sobre Na2SO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 2-(2-formil6-metil-N-o-tolil-benzamido) acetato de etilo (1607) (38 g, 57 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución agitada de 2-(2-formil-6-metil-N-o-tolilbenzamido) acetato de etilo (1607) (38 g, 112 mmol) en EtOH (200 ml) y acetato de etilo (100 ml) a la TA, se añadió carbonato de cesio (22 g, 112 mmol). La mezcla resultante se desgasificó y se rellenó de nuevo con argón tres veces y después se agitó a 50 ºC durante 5 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g), y el filtrado se concentró a vacío. El residuo se vertió en H2O (200 ml), se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en IPE (120 ml), se calentó a reflujo durante 10 min, y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2dihidroisoquinolin-3-carboxilato de etilo (1608) (28 g, 77 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada de hidruro de litio y aluminio (8.28 g, 218 mol) en THF anhidro (500 ml) a -78° C en una atmósfera de nitrógeno, se añadió lentamente 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-carboxilato de etilo (1608) (28 g, 87 mmol) durante un periodo de tiempo de 10 min. La mezcla resultante se dejó calentar hasta -30°C, se agitó durante 30 min y la TLC mostró que se había completado la reacción. A continuación, la mezcla se enfrió hasta -78°C y se añadió lentamente agua (50 ml). La mezcla se dejó calentar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y el filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se vertió en H2O (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en acetato de etilo (30 ml) y se agitó durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1609) (22 g, 92 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se añadió lentamente PBr3 (25,6 g, 95 mmol) a una solución agitada de DMF (11,5 g, 158 mol) en acetonitrilo (200 ml) a 0° C y la mezcla resultante se agitó a 0 ºC durante 30 min. Se añadió lentamente 3-(hidroximetil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1-(2H)-ona (1609) (22 g, 78,8 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta la TA y se agitó durante 30 min. Se añadió lentamente una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en IPE (50 ml) y después se agitó durante 10 min. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(bromometil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (21 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvieron 3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d)pirimidin-4-amina (108) (10,8 g, 41,4 mmol) y terc-butóxido de potasio (4,4 g, 40 mmol) en DMF anhidra (150 ml) y se agitó a la TA durante 30 min. Se añadió 3-(bromometil)-8-metil-2-otoliliso-quinolin-1(2H)-ona (1610) (13,7 g, 40 mmol). La mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min, se vertió en agua enfriada con hielo (300 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró hasta aproximadamente 100 ml a vacío, el precipitado se recogió mediante filtración para proporcionar el primer lote del producto deseado, la 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1611) (12 g, 60 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el segundo lote del producto deseado, la 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)8-metil-2-o-toliliso-quinolin-1(2H)-ona (1611) (6 g, 30 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvieron 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1611) (13 g, 24,9 mmol) y 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenol (1612) (6,6 g, 30 mmol) en DMF-EtOH-H2O (120 ml, 40 ml, 40 ml). Se añadieron secuencialmente Pd(OAc)2 (1,684 g, 7,5 mmol), PPh3 (3,935 g 15 mmol) y Na2CO3 (13,25 g 125 mmol). La mezcla resultante se desgasificó y se rellenó de nuevo con argón tres veces y después se agitó a 100 ºC durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto (1613, el compuesto 13 de la Tabla 4) (9 g, 76 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo claro. Después el producto anterior se suspendió en EtOH (100 ml) y se calentó a reflujo durante 30 min. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, y el sólido se recogió mediante filtración. Después se suspendió el sólido en EA (100 ml) y se agitó durante una noche. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-(3hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1613) (8,4 g, 69 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 2: síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1613) (método B).

Esquema 15. Se describe la síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2otolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1613) a través del método B.

Esquema 15. Se describe la síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1613) a través del método B.

Se disolvieron 3-(3-metoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (1701) (964 mg, 4 mmol) y terc-butóxido de potasio (0,44 g, 4 mmol) en DMF anhidra (150 ml) y se agitaron a la TA durante 30 min. Se añadió 3-(bromometil)-8metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (1,37 g, 4,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min, se vertió en agua enfriada con hielo (30 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-(3-metoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1702) (1,4 g, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución de 3-((4-amino-3-(3-metoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolil-isoquinolin1(2H)-ona (1702) (100 mg, 0,2 mmol) en CH2Cl2 (20 ml) a -78 ºC en una atmósfera de nitrógeno, se añadió BBr3 (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a -78 ºC durante 3 h. La mezcla se dejó calentar hasta la TA, se vertió en agua helada (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (10 -50 % de MeOH / CH2Cl2) para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-(3-hidroxi-fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1613) (87 mg, 91 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 3: síntesis de (R)-3-((4-amino-3-(3-hidroxibut-1-inil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1802).

Esquema 16. Se describe la síntesis de (R)-3-((4-amino-3-(3-hidroxibut-1-inil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1802).

Se disolvieron 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1611)

10 (522 mg, 1 mmol) y (R)-but-3-in-2-ol (84 mg, 1,2 mmol) en THF anhidro (40 ml). La mezcla se desgasificó y se rellenó de nuevo con nitrógeno tres veces. Se añadieron secuencialmente Pd(PPh3)2Cl2 (12 mg, 0,1 mmol), CuI (47 mg 0,25 mmol) y (i-Pr)2NH (505 mg, 5 mmol). La mezcla resultante se desgasificó y se rellenó de nuevo con argón tres veces y después se agitó a la temperatura de reflujo durante 4 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna

15 ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto, la 3 (R)-3-((4-amino-3-(3hidroxibut-1-inil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1802 el compuesto 37 de la Tabla 4) (324 mg, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color ligeramente amarillo.

Ejemplo 4: síntesis de 3-((6-amino-9H-purin-9-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 20 1902).

Esquema 17. Se describe la síntesis de 3-((6-amino-9H-purin-9-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 1902).

Se disolvió 9H-purin-6-amina (1901) (540 mg, 4,0 mmol) en DMF anhidra (20 ml). Se añadió NaH (al 60 % en aceite mineral, 160 mg, 4,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. Se añadió 3-(bromometil)-8-metil2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (1,37 g, 4,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la TA durante 30 min, se

30 vertió en agua helada (30 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la 3-((6-amino-9H-purin-9-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1902, el compuesto 5 de la Tabla 4) (1,1 g, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 5: síntesis de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-2-isopropil-8metilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 2009).

A una mezcla agitada de ácido 2-yodo-6-metilbenzoico (1602) (105 g, 400 mmol), Pd(OAc)2 (27 g, 120 mmol) y PPh3

10 (63 g 240 mol) en THF (1.000 ml) a la TA, se añadió tributil(vinil) estaño (152 g, 480 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante una noche. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y después se concentró a vacío. El residuo se vertió en agua enfriada con hielo (1.000 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaOH acuoso (15 %, 5 x 200 ml). La capa acuosa combinada se acidificó hasta pH = 1, se extrajo con acetato de etilo (3 x 1.000 ml). La capa orgánica combinada se

15 secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el ácido 2metil-6-vinilbenzoico (1603) (61 g, 95 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

Una mezcla de ácido 2-metil-6-vinilbenzoico (1603) (56 g, 350 mmol) y cloruro de tionilo (208 g, 1.750 mmol) en tolueno (400 ml) se agitó a la temperatura de reflujo durante 2 h. La mezcla se concentró a vacío para proporcionar

20 el producto deseado, cloruro de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 95 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo. El producto obtenido se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.

Se disolvieron propan-2-amina (2001) (59 g, 1,0 mol) y cloroacetato de etilo (122 g, 1,0 mol) en tolueno (200 ml) y la mezcla se agitó a la temperatura de reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta la TA, se vertió 25 en agua helada (500 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 250 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (10 -50 % de EA / PE) para proporcionar el producto, el

2-(isopropilamino) acetato de etilo (2002) (70 g, 51 % de rendimiento) en forma de un aceite.

Se disolvieron 2-(isopropilamino) acetato de etilo (2002) (14,5 g, 100 mmol) y trietilamina (200 g, 200 mmol) en CH2Cl2 (300 ml) y la mezcla se agitó durante 10 min a la TA. Se añadió cloruro de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (18 g, 100 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. La mezcla de reacción se vertió en agua (300 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se suspendió en IPE (isopropil éter) (300 ml), se agitó a reflujo durante 30 min y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 2-(N-isopropil-2-metil-6-vinilben-zamido) acetato de etilo (2003) (14,5 g, 50 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución agitada de 2-(N-isopropil-2-metil-6-vinilbenzamido) acetato de etilo (2003) (14,0 g, 48,0 mmol) en 1,4dioxano (100 ml) y H2O (30 ml), se añadió tetraóxido de osmio (20 mg) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. A esta mezcla se añadió peryodato de sodio (22 g, 100 mmol) y después se agitó a la TA durante 16h. La mezcla de reacción se filtró a través de gel de sílice (10 g), el filtrado se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 2-(2-formilN-isopropil-6-metilbenzamido) acetato de etilo (2004) (8,33 g, 57 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución agitada de 2-(2-formil-N-isopropil-6-metilbenzamido) acetato de etilo (2004) (8,3 g, 28,0 mmol) en EtOH (100 ml) y acetato de etilo (50 ml) a la TA, se añadió carbonato de cesio (5,9 g, 30 mmol). La mezcla resultante se desgasificó y se rellenó de nuevo con argón tres veces y después se agitó a 50 ºC durante 5 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g), y el filtrado se concentró a vacío. El residuo se vertió en H2O (200 ml), se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en IPE (120 ml), se agitó a reflujo durante 10 min y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 2-isopropil-8metil-1-oxo-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (2005) (5,35 g, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada de hidruro de litio y aluminio (2,88 g, 76 mol) en THF anhidro (200 ml) a -78° C en una atmósfera de nitrógeno, se añadió lentamente 2-isopropil-8-metil-1-oxo-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (2005) (5,2 g, 19 mmol) durante un periodo de tiempo de 10 min. La mezcla resultante se dejó calentar hasta -30°C, se agitó durante 30 min y la TLC mostró que se había completado la reacción. A continuación, la mezcla se enfrió hasta -78°C, y se añadió agua lentamente (50 ml). La mezcla se dejó calentar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y el filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se vertió en H2O (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en acetato de etilo (30 ml) y se agitó durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(hidroximetil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2006) (3,51 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución de 3-(hidroximetil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2006) (1,61 g, 7,0 mmol) en CH2Cl2, se añadió PPh3 (3,67 g, 14,0 mmol) y la mezcla se agitó a la TA durante 30 min. La mezcla se enfrió hasta 0 ºC, y se añadió CBr4 (4.64 g, 14.0 mmol) en porciones. La mezcla resultante se agitó desde 0 ºC hasta la TA durante 30 min, y después se concentró a vacío. El producto en bruto se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (30 -50 % de EA / PE) para proporcionar el producto deseado, la 3-(bromometil)-2isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2007) (1,65 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Una mezcla de 3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (108) (1,3 g, 5 mmol) y terc-butóxido de potasio (0,55 g, 5 mmol) en DMF anhidra (20 ml) se agitó a la TA durante 30 min y después se añadió 3-(bromometil)-2-isopropil-8metilisoquinolin-1(2H)-ona (2007) (1,47 g, 5 mmol). La mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min, se vertió en agua helada (30 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío, y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)ona (2008) (1,66 g, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una mezcla agitada de 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-2-isopropil-8-metiliso-quinolin1(2H)-ona (2008) (95 mg, 0,2 mmol) y 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenol (66 mg, 0,3 mmol) en DNTEtOH-H2O (3:1:1, 20 ml), se añadieron secuencialmente Pd(OAc)2 (16 mg, 0,075 mmol), PPh3 (39,3 mg 0,15 mmol) y Na2CO3 (132 mg, 1,25 mmol). La mezcla resultante se desgasificó y se rellenó de nuevo con argón tres veces y después se agitó a 100 ºC durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2

-

20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto, la 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1il)metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2009, el compuesto 62 de la Tabla 4) (53 mg, 61 % de rendimiento) en forma de un sólido de color ligeramente amarillo.

Ejemplo 6: síntesis de 8-metil-3-((metil(9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona.

Esquema 19. Se describe la síntesis de 8-metil-3-((metil(9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-tolilisoquinoliii-1(2H)-ona (Compuesto 4004).

Se disolvió 3-(bromometil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (342 mg, 1,0 mmol) 1610 en una solución de metilamina (100 ml) y se agitó durante 2 h. La mezcla se vertió en agua helada (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El

15 filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, la 8-metil-3-((metilamino)metil)-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (4001) (250 mg, 86 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. El producto obtenido se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.

Se disolvieron 8-metil-3-((metilamino)metil)-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (233 mg, 0,8 mmol) (4001) y 6-cloro-9

20 (tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (4002) (238 mg, 1,0 mmol) en EtOH (50 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 2 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la TA y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto, la 8-metil-3-((metil(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-tolilisoquinolin1(2H)-ona (4003) (200 mg, 51 % de rendimiento) en forma de un sólido de color ligeramente amarillo.

25 Se disolvió 8-metil-3-((metil(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (4003) (180 mg 0,36 mmol) en MeOH (HCl) (50 ml) y la mezcla se agitó a la TA durante 2 h. Se añadió una solución acuosa de NaHCO3 a la mezcla de reacción, y el valor del pH se ajustó a 9. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, la 8-metil-3-((metil(9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o

30 tolilisoquinolin-1(2H)-ona (4004, el compuesto 184 de la Tabla 4) (80 mg, 54 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

Ejemplo 7: síntesis de 3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona.

Esquema 20. Se describe la síntesis de 3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto 4106).

A una solución agitada de 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona 1609 (2,79 g, 10 mmol) en CH2Cl2 (200 ml), se añadió MnO2 (5 g) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 3 h. La mezcla se

10 dejó enfriar hasta la TA y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (10 -50 % de EA / PE) para proporcionar el producto, el 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2dihidroisoquinolin-3-carbaldehído 4101 (2,5 g, 90 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolina-3-carbaldehído 4101 (2,4 g, 8,6 mmol) en THF anhidro (280

15 ml) y se enfrió hasta -78 ºC en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió lentamente bromuro de metilmagnesio (2 M, 5 ml, 10 mmol) y la mezcla resultante se agitó a -78 ºC durante 2 h. Se añadió H2O (5 ml) y después la solución se vertió en agua helada (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío, y el producto residual se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (10 -50 % de EA / PE) para proporcionar el

20 producto, la 3-(1-hidroxietil)-8-metil-2-o-tolil-isoquinolin-1(2H)-ona 4102 (1,8 g, 71 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución de 3-(1-hidroxietil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona 4102 (1,6 g, 5,5 mmol) en CH2Cl2, se añadió PPh3 (2,88 g, 11,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. Entonces se añadió CBr4 (3,64 g,

25 11,0 mmol) en porciones a la mezcla a 0 ºC. La mezcla resultante se dejó calentar hasta la TA, se agitó durante 30 min y se concentró a vacío. El producto en bruto se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (30 -50 % de EA / PE) para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-bromoetil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona 4103 (1,8 g, 91 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

30 A una solución agitada de 9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina 4103 (436 mg 2 mmol) en DMF anhidra (10 ml), se añadió NaH (al 60 % en aceite mineral, 77 mg, 2 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. Se añadió 3-(1bromoetil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona 4104 (700 mg, 2 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h, se vertió en agua helada (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una

35 cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (10 -50 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto, la 8-metil-3-(1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona 4105 (500 mg, 51 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 8-metil-3-(1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona 4105 (180

40 mg, 0,36 mmol) en MeOH (HCl) (50 ml) y se agitó durante 2 h. Se añadió una solución acuosa de NaHCO3 a la mezcla de reacción y el valor del pH se ajustó a 9. Después, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (4106, el compuesto 191 de la Tabla 4) (80 mg, 54 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

Ejemplo 8: síntesis de 3-(4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo dihidrogenofosfato.

Se disolvió 3-((4-amino-3-(3-fluoro-5-hidroxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin

10 1(2H)-ona 4301 (250 mg, 0,5 mmol) en THF anhidro (15 ml) en un matraz de fondo redondo en la oscuridad (cubierto por una lámina de aluminio) y se enfrió hasta 0 ºC en una atmósfera de argón. Se añadió CBr4 (498 mg, 1,5 mmol) seguido de fosfito de dietilo (129 µl, 1,0 mmol) y trietilamina (417 µl, 1,5 mmol). La mezcla resultante se agitó en la oscuridad desde 0 ºC hasta la TA durante 16 h. Después la mezcla se particionó entre acetato de etilo y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante

15 una cromatografía en columna en gel de sílice eluyendo con metanol y diclorometano para proporcionar el producto deseado, el dietil fosfato de 3-(4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo 4302 (200 mg, 62 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino.

Se disolvió dietil fosfato de 3-(4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4

20 d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo 4302 (170 mg, 0,26 mmol) en CH3CN anhidro (5 ml) y se enfrió hasta 0 ºC en una atmósfera de argón. Se añadió lentamente TMSBr (0,34 ml, 2,64 mmol) mediante una jeringa y la mezcla resultante se agitó desde 0 ºC hasta la TA durante 16 h. La CL-EM mostró una pequeña cantidad restante del material de partida, se añadió una cantidad adicional de TMSBr (0,1 ml) y se agitó a la TA durante 5 h. La CL-EM mostró una conversión completa. La mezcla se concentró a vacío y el residuo se disolvió en Et2O (10 ml) y en H2O (0,5 ml) y se

25 agitó durante 30 min. La mezcla se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el dihidrogenofosfato de 3-(4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo 4303 (140 mg, 91 % de rendimiento).

Ejemplo 9: síntesis de 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin1(2H)-ona (compuesto 1611).

Esquema 22. Se describe la síntesis de 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 1611).

Una mezcla de ácido 2,6-dimetilbenzoico (compuesto 4401) (60 g, 400 mmol) y cloruro de oxalilo (101 g, 800 mmol) en CH2Cl2 (400 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el cloruro de 2,6-dimetilbenzoílo (compuesto 4402) (64 g, 95 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo. El material obtenido se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.

Una mezcla de o-toluidina (45 g, 420 mmol) y trietilamina (71 g, 700 mmol) en CH2Cl2 (300 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 10 min. A esta mezcla se añadió gota a gota cloruro de 2,6-dimetilbenzoílo (compuesto 4402) (64 g, 400 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se vertió en agua (300 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3 x 200 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se suspendió en isopropil éter (300 ml), se agitó a reflujo durante 30 min y después se enfrió hasta 0 -5 ºC. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 2,6-dimetil-N-otolilbenzamida (compuesto 4403) (81 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución agitada de 2,6-dimetil-N-o-tolilbenzamida (compuesto 4403) (23,9 g, 0,1 mol, 1 eq) y HMPA (17,9 g, 0,1 mol, 1 eq) en THF anhidro (250 ml) a -78 ºC en una atmósfera de argón, se añadió cuidadosamente n-butil-litio (100 ml, 2,5 M, 0,25 mol, 2,5 eq) durante 1 h y la temperatura de la reacción se mantuvo por debajo de -60 ºC durante la adición. La mezcla resultante se agitó a -78 ºC durante 1 h, y después se añadió rápidamente oxalato de dietilo (17,6 g, 0,12 mol, 1,2 eq) (la temperatura de la reacción aumentó hasta -20 ºC tras la adición). La mezcla se agitó a -50 ºC durante 10 min y después se inactivó con agua (100 ml). La sal inorgánica se eliminó mediante filtración y el filtrado se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (100 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto en forma de un aceite semisólido. El producto en bruto se suspendió en isopropil éter (100 ml) a la temperatura ambiente durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 3-(3-metil-2-(o-tolilcarbamoil)fenil)-2-oxopropanoato de etilo (compuesto 4404) (16,1 g, 47,4 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 3-(3-metil-2-(o-tolilcarbamoil)fenil)-2-oxopropanoato (compuesto 4404) (11,0 g, 32,4 mmol, 1 eq) en HCl / MeOH (10 M, 100 ml, 10 ml / 1 g de 4404) y se agitó a la temperatura de reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo (10 ml) a la temperatura ambiente durante 30 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (compuesto 4405) (7,52 g, 72,5 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada de hidruro de litio y aluminio (8,28 g, 218 mol) en THF anhidro (500 ml) a -78 ºC en una atmósfera de nitrógeno, se añadió lentamente 8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (compuesto 4405) (28 g, 87 mmol) durante un periodo de tiempo de 10 min. La mezcla resultante se dejó calentar hasta -30 ºC, se agitó durante 30 min y un análisis mediante una cromatografía en capa fina demostró que se había completado la reacción. A continuación, la mezcla se enfrió hasta -78 ºC, y se añadió lentamente agua (50 ml). La mezcla se dejó calentar hasta la temperatura ambiente, se filtró a través de gel de sílice (10 g) y el filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se vertió en H2O (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en acetato de etilo (30 ml) y se agitó durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(hidroximetil)-8metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4406) (22 g, 92 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se añadió lentamente tribromuro de fósforo (25,6 g, 95 mmol) a una solución agitada de DMF (11,5 g, 158 mol) en acetonitrilo (200 ml ) a 0 ºC, y la mezcla resultante se agitó a 0 ºC durante 30 min. Se añadió lentamente 3(hidroximetil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1-(2H)-ona (compuesto 4406) (22 g, 78,8 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 30 min. Se añadió lentamente una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en isopropil éter (50 ml) y después se agitó durante 10 min. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(bromometil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4407) (21 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvieron 3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (10,8 g, 41,4 mmol) y terc-butóxido de potasio (4,4 g, 40 mmol) en DMF anhidra (150 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió 3-(bromometil)-8metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4407) (13,7 g, 40 mmol). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min, se vertió en agua enfriada con hielo (300 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró hasta aproximadamente 100 ml a vacío, el precipitado se recogió mediante filtración para proporcionar el primer lote del producto deseado, la 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 1611) (12 g, 60 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (2 -20 % de MeOH / DCM) para proporcionar el segundo lote del producto deseado, la 3-((4-amino3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (1611, el compuesto 6 de la Tabla 4) (6 g, 30 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 10: síntesis de 3-((4-amino-3-(fluorometil)-1H-pirazolop,4-dipirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4504).

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Esquema 23. Se describe la síntesis de 3-((4-amino-3-(fluorometil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4504).

A una mezcla agitada de 3-((4-amino-3-yodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)ona (compuesto 1611) (1,50 g, 2,87 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina) paladio (166 mg, 0,14 mmol) en DMF anhidra (15 ml) en una atmósfera de argón, se añadió tributil vinil estaño (1,26 ml, 4,31 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 80 ºC durante 3 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y después se particionó entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se trituró con una cantidad mínima de etil éter anhidro y se filtró para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-vinil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4501) (853 mg, 70 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino.

A una solución agitada de 3-((4-amino-3-vinil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquin-olin-1(2H)ona (compuesto 4501) (853 mg, 2,0 mmol) en 1,4-dioxano-H2O (3:1, 30 ml) en una atmósfera de argón, se añadió tetraóxido de osmio (2,5 % en peso en t-BuOH, 252 µl, 0,020 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min. A esta mezcla se añadió peryodato de sodio (863 mg, 4,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se particionó entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4-amino-1-((8metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-carbaldehído en forma un sólido de color castaño / marrón (compuesto 4502) (716 mg, 84 % de rendimiento).

A una mezcla agitada de 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazo-lo[3,4d]pirimidin-3-carbaldehído en forma un sólido de color castaño / marrón (compuesto 4502) (841 mg, 1,98 mmol) en MeOH anhidro (35 ml) a 0 ºC en una atmósfera de argón, se añadió en porciones NaBH4 (89 mg, 2,38 mmol). La mezcla se agitó desde 0 ºC hasta la TA durante 2 h, y después se particionó entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-(hidroximetil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin1(2H)-ona (compuesto 4503) (626 mg, 74 % de rendimiento) en forma de un sólido de color marrón oscuro.

A una suspensión agitada de 3-((4-amino-3-(hidroximetil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-otolilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4503) (50 mg, 0,12 mmol) en DCM anhidro (2 ml) a 0 ºC en una atmósfera de argón, se añadió lentamente trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST, 77 µl, 0,59 mmol) y la mezcla resultante se agitó desde 0 ºC hasta la temperatura ambiente durante 5 h. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo. El residuo se purificó mediante una placa de prep-TLC (7 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la 3-((4-amino-3-(fluor-ometil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-8-metil-2-o-tolilisoquinolin-1(2H)-ona (4504, el compuesto 310 de la Tabla 4) (10,3 mg, 20 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 11: síntesis de 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4d]pirimidin-3-carboxamida (compuesto 4602).

Esquema 24. Se describe la síntesis de 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1Hpirazolo[3,4-d]pirimidin-3-carboxamida (compuesto 4602).

A una solución agitada de 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4d]pirimidin-3-carbaldehído (compuesto 4502) (400 mg, 0,94 mmol) en t-BuOH (1,8 ml), se añadieron secuencialmente una solución de NaH2PO4 (3,90 g, 28,27 mmol) en agua (4,8 ml), metil-2-buteno (1,0 ml) y (gota a gota) una solución de NaClO2 (767 mg, 6,78 mmol) en agua (4,8 ml). La mezcla se agitó a la TA durante 3 h en una atmósfera de argón. La solución de color amarillo pálido se acidificó con una solución acuosa de HCl (2 M, 4 ml) hasta pH = 2 y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío, y el residuo se trituró con etil éter anhidro y acetato de etilo. El sólido se recogió mediante filtración para proporcionar el producto deseado, el ácido 4-amino-1-((8-metil-1oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-carboxílico (compuesto 4601) (200 mg, 47 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

A una solución agitada de ácido 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4d]pirimidin-3-carboxílico (compuesto 4601) (150 mg, 0,34 mmol) en DCM anhidro (10 ml), se añadió lentamente cloruro de oxalilo (2,0 M en DCM, 0,22 ml) seguido de una cantidad catalítica de DMF anhidra (1 gota). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min y después se concentró a vacío. El residuo se redisolvió en DCM (6 ml) y se añadió una cantidad en exceso de hidróxido de amonio (0,35 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 2 h y después se particionó entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con un 5 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la 4-amino-1-((8-metil-1-oxo-2-o-tolil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1Hpirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carboxamida (4602, el compuesto 298 de la Tabla 4) (22 mg, 15 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 12: síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (Método A)

Esquema 25. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) a través del Método A.

A una mezcla agitada de ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino) propanoico (compuesto 4701) (189,1 g, 1 mol, 1 eq), trietilamina (404,8 g, 4 mol, 4 eq) y HOBt (135 g, 1,0 mol, 1 eq) en diclorometano anhidro (1,8 l) a 0 ºC, se añadió en porciones EDCI (384,3 g, 2 mol, 2 eq) durante 30 min. La mezcla resultante se agitó a la TA durante 30 min, y después se añadió clorhidrato de N,O-dimetilhidroxilamina (107,3 g, 1,1 mol, 1,1 eq). La mezcla de reacción se agitó a la TA durante 20 h y después se inactivó con agua (1 l). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 1 l) y salmuera (500 ml), se secó sobre MgSO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El producto en bruto se suspendió en éter de petróleo (1 l) y se agitó a la TA durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 1-(metoxi(metil)amino)-1-oxopropan-2ilcarbamato de (S)-terc-butilo (compuesto 4702) (218 g, 93,9 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una mezcla agitada de 2,6-dimetil-N-fenilbenzamida (compuesto 4403, que puede ser sintetizado según se describe en el Ejemplo 9) (30 g, 0,13 mol, 1 eq) y HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq) en THF anhidro (300 ml) a -78 ºC en una atmósfera de argón, se añadió cuidadosamente (gota a gota) n-butil-litio (2,5 M, 100 ml, 0,25 mol, 2,5 eq) durante 1 h y la temperatura de la reacción se mantuvo por debajo de -60 ºC durante la adición. La mezcla resultante se agitó a -78 ºC durante 1 h. A esta mezcla se añadió rápidamente 1-(metoxi(metil)amino)-1-oxopropan-2-il carbamato de terc-butilo (compuesto 4702) (40 g, 0,173 mol, 1,3 eq) (la temperatura de la reacción aumentó hasta 50 ºC tras la adición). La mezcla se agitó a -50 ºC durante 10 min, se inactivó con agua (300 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (500 ml x 2) y salmuera (50 ml), se secó sobre MgSO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para dar el producto en bruto en forma de un aceite semisólido. El producto en bruto se suspendió en EA y se agitó durante 10 min. El sólido de color blanco se eliminó mediante filtración. El filtrado se concentró a vacío, y el residuo se agitó en una mezcla de acetato de etilo (30 ml) y alcohol isopropílico (200 ml) a la TA durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoil)fenil)-3-oxobutan-2-il carbamato de terc-butilo (compuesto 4703) (9,23 g, 17,5 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoil)fenil)-3-oxobutan-2-il carbamato de terc-butilo (compuesto 4703) (9,23 g, 23 mmol) en HCl / MeOH (100 ml) y se agitó a la temperatura de reflujo durante 30 min. La mezcla se dejó enfriar hasta

la TA, se concentró a vacío y después se añadió una solución saturada de Na2CO3 para ajustar el pH a 7 -8. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (5,8 g, 90 % de rendimiento, isómeros S:R = 7:1) en forma de un sólido de color blanco.

Resolución de isómeros para aumentar la pureza enantiomérica: se disolvió 3-(1-aminoetil)-8-metil-2fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (en la que la proporción de isómeros es S:R = 7:1) (5 g, 18 mmol) en MeOH (100 ml), se añadió ácido (D)-tartárico (2,7 g, 18 mmol). La mezcla se agitó a la TA durante 30 min y el sólido precipitó. La mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 1 h, y después se agitó a la TA durante 16 h. El sólido se recogió mediante filtración y se aclaró con metanol (10 ml). El sólido se disolvió después en H2O (15 ml) y se añadió NaHCO3 saturado (5 ml) para ajustar el pH a 8. El sólido se recogió mediante filtración, se aclaró con agua (5 ml) y después se secó a vacío para proporcionar el producto enriquecido enantioméricamente (compuesto 4704) (2,7 g, 58 % de rendimiento,) en el que la proporción de isómeros, S:R > 41:1. Esto es una pureza enantiomérica de más de aproximadamente el 97,6 % del enantiómero (S). La proporción entre los dos enantiómeros se confirmó mediante el acoplamiento con ácido (R)-(-)-alfa-metoxifenilacético y la detección de los diastereómeros resultantes mediante una espectroscopía de resonancia magnética nuclear.

Ejemplo 13: síntesis de (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (Método B) (compuesto 4704.

Esquema 26. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) a través del Método B.

Se añadió gota a gota cloruro de tionilo (320,8 g, 2,7 mol, 1,2 eq) a MeOH anhidro agitado (2 l) a 0 ºC durante 50 min y la temperatura de la reacción se mantuvo por debajo de 25 ºC durante la adición. La mezcla se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y después se añadió ácido (S)-2-aminopropanoico (compuesto 4801) (200 g, 2,24 mol, 1 eq). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 20 h y se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el clorhidrato de (S)-2-aminopropanoato de metilo (compuesto 4802) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada del anteriormente obtenido clorhidrato de (S)-2-aminopropanoato de metilo (compuesto 4802) en agua (1,6 l) a la temperatura ambiente, se añadieron secuencialmente NaHCO3 (566,2 g, 6,741 mol, 3 eq) y una solución de dicarbonato de di-terc-butilo (490,4 g, 2,247 g, 1 eq) en THF (1,6 l). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 20 h. La sal inorgánica se eliminó mediante filtración y el filtrado se extrajo con acetato de etilo (2 x 500 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (500 ml), se secó sobre MgSO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el (S)-2-(tercbutoxicarbonilamino) propanoato de metilo (compuesto 4803) (448 g, 98,2 % de rendimiento) en forma de un cristal incoloro.

A una solución agitada de 2,6-dimetil-N-fenilbenzamida (compuesto 4403), que puede ser sintetizada según se describió en el Ejemplo 9) (30 g, 0,13 mol, 1 eq) y HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq) en THF anhidro (300 ml) a -78 ºC en una atmósfera de argón, se añadió cuidadosamente durante 1 h n-butil-litio (100 ml, 2,5 M, 0,25 mol, 2,5 eq) y la temperatura de la reacción se mantuvo por debajo de -60 ºC durante la adición. La mezcla resultante se agitó a 78 ºC durante 1 h y después se añadió rápidamente (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-propanoato de metilo (compuesto 4803) (35 g, 0,173 mol, 1,3 eq) (la temperatura de la reacción aumentó hasta -50 ºC durante la adición). La mezcla se agitó a -50 ºC durante 10 min, se inactivó con agua (300 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa orgánica se lavó con agua (500 ml x 2), se secó sobre MgSO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto en forma de un aceite semisólido. El producto en bruto se suspendió en acetato de etilo (500 ml) y se agitó durante 10 min. El sólido se eliminó mediante filtración y el filtrado se concentró a vacío. El residuo oleoso se agitó en una mezcla de acetato de etilo (30 ml) y alcohol isopropílico (200 ml) a la temperatura ambiente durante 10 min. El sólido se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoil)fenil)-3-oxobutan-2-ilcarbamato de tercbutilo (compuesto 4703) (4,61 g, 9 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoil)fenil)-3-oxobutan-2-ilcarbamato de terc-butilo (compuesto 4703) (4,61 g, 0,012 mol) en HCl / MeOH (50 ml) y se agitó a la temperatura de reflujo durante 30 min. La mezcla se concentró a vacío y después se añadió una solución saturada de Na2CO3 para ajustar el pH hasta aproximadamente 7 -8. El sólido resultante se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (2,9 g, 90 % de rendimiento, en el que la proporción de isómeros es S:R = 5:1) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 14a: síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (9) (compuesto 4902)

Esquema 27a. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (9) (compuesto 4902).

Se disolvieron 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (200 mg, 0,72 mmol), 6-cloro9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (344 mg, 1,44 mmol) y DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) en n-BuOH (20 ml), y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con desde un 30 % hasta un 50 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 8-metil-2-fenil-3-((1S)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4901) (207 mg, 60 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 8-metil-2-fenil-3-((1S)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-isoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4901) (200 mg, 0,42 mmol) en HCl / EtOH (3 M, 5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se inactivó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y el pH se ajustó hasta aproximadamente 7 -8. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (50 ml X 3), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío, y el residuo se recristalizó en acetato de etilo y hexanos (1:1). El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino) etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4902) (150 mg, 90 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 14b: síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-cloro-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (9) (compuesto 4904)

Esquema 27b. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-cloro-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (9) (compuesto4904).

El compuesto de Fórmula 4904 (compuesto 292 de la Tabla 4) se sintetizó mediante el uso de las transformaciones sintéticas según se han descrito en los Ejemplos 12 y 14a, pero se usó el ácido 2-cloro-6-metil benzoico

10 (compuesto 4903) en lugar del ácido 2,6,dimetil benzoico (compuesto 4403). Mediante un método similar se sintetizó el compuesto 328 de la Tabla 4 mediante el uso de las transformaciones sintéticas según se han descrito partiendo del ácido 2-cloro-6-metil m-fluorobenzoico.

Ejemplo 15a: síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona 15 (compuesto 5005).

Esquema 28a. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona.

20 Se agitó una mezcla de ciclopropanamina (24 g, 420 mmol) y trietilamina (71 g, 700 mmol) en CH2Cl2 (300 ml) a la TA durante 10 min. A esta mezcla se añadió gota a gota cloruro de 2,6-dimetilbenzoílo (compuesto 4402) (64 g, 400 mmol), y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se vertió en agua (300 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se

25 filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se suspendió en isopropil éter (IPE) (300 ml), se agitó a reflujo durante 30 min y después se dejó enfriar hasta 0 -5 ºC. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la Nciclopropil-2,6-dimetilbenzamida (compuesto 5001) (61 g, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.

30 A una solución agitada de N-ciclopropil-2,6-dimetilbenzamida (compuesto 5001) (25 g, 0,13 mol, 1 eq) y HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq) en THF anhidro (300 ml) a -78 ºC en una atmósfera de argón, se añadió n-butil-litio (2,5 M, 100 ml, 0,25 mol, 2,5 eq) cuidadosamente durante 1 h y la temperatura se mantuvo por debajo de -60 ºC durante la adición. La mezcla resultante se agitó a -78 ºC durante 1 h, y después se añadió rápidamente 1

35 (metoxi(metil)amino)-1-oxopropan-2-ilcarbamato de terc-butilo (40 g, 0,173 mol, 1,3 eq) (la temperatura de la reacción aumentó hasta -50 ºC durante la adición). La mezcla se agitó a -50 ºC durante 10 min, se inactivó con agua (300 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (500 ml x 2) y

salmuera (100 ml), se secó sobre MgSO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4-(2-(ciclopropilcarbamoil)-3-metilfenil)-3-oxobutan-2-ilcarbamato de terc-butilo (compuesto 5002) (32 g, 70 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo.

Se disolvió 4-(2-(ciclopropilcarbamoil)-3-metilfenil)-3-oxobutan-2-ilcarbamato de terc-butilo (compuesto 5002) (32 g, 88 mmol) en HCl / MeOH (300 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se concentró a vacío, y después se añadió una solución acuosa saturada de Na2CO3 para ajustar el pH hasta aproximadamente 7

8. El sólido resultante se recogió mediante filtración y se secó adicionalmente a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenil-isoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5003) (17 g, 80 % de rendimiento, S:R = 7:1) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada de 3-(1-aminoetil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (S:R = 7:1) (4,84 g, 20 mmol) (compuesto 5003) en MeOH (96,8 ml), (L) se añadió ácido tartárico (3,0 g, 20 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h. El precipitado se recogió mediante filtración y se aclaró con MeOH (10 ml). El sólido se disolvió en H2O (15 ml) y se añadió NaHCO3 saturado (5 ml) para ajustar el pH hasta aproximadamente

8. El sólido resultante se recogió mediante filtración, se aclaró con agua (5 ml) y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado (compuesto 5003) (1,94 g. 40 % de rendimiento) en forma de un enantiómero individual (configuración S). La pureza enantiomérica se confirmó mediante el acoplamiento con ácido (R)-(-)-alfametoxifenilacético y la realización de una espectroscopía de resonancia magnética nuclear sobre la mezcla diastereomérica resultante.

Se disolvieron (S)-3-(1-aminoetil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (242 mg, 1 mmol ) (compuesto 5003), 6cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (344 mg, 1,44 mmol) y DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) en n-BuOH (20 ml), y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con desde un 30 % hasta un 50 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 2-ciclopropil-8-metil-3-((1S)-1-(9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)isoquin-olin-1(2H)-ona (compuesto 5004) (288 mg, 65 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 2-ciclopropil-8-metil-3-((1S)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5004) (222 mg, 0,5 mmol) en HCl / EtOH (3 M, 5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se neutralizó con una solución saturada de NaHCO3 a pH = 7 -8, y después se extrajo con CH2Cl2 (50 ml x 3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se recristalizó en acetato de etilo y hexanos (1:1). El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la (S)-3-(1(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (5005, el compuesto 200 de la Tabla 4) (150 mg, 83 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 15b. Síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-cloro-isoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5011).

Esquema 28b. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-cloro-isoquinolin-1(2H)5 ona:

El compuesto de Fórmula 5011 (compuesto 270 en la Tabla 4) se sintetizó mediante el uso de las transformaciones 10 sintéticas según se han descrito en el Ejemplo 15a, pero se usó cloruro de 2-cloro-6-metil benzoílo (compuesto 5006) lugar de 2, 6,dimetil benzoílo (compuesto 4402).

Ejemplo 16: síntesis de (S)-3-(1-(2-amino-5-cloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5102).

15 Esquema 29. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(2-amino-5-cloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin1(2H)-ona (compuesto 5102).

20 Una mezcla de 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (150 mg, 0,54 mmol), 2,4,5tricloropirimidina (119 mg, 0,65 mmol) y trietilamina (137 mg,1,35 mmol) en n-BuOH (10 ml) se agitó a la temperatura de reflujo durante 2 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y después se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (MeOH:CH2Cl2 = 1:100) para

25 proporcionar el producto deseado, la (S)-3-(1-(2,5-dicloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (2H)-ona (compuesto 5101) (170 mg, 74 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Una mezcla de (S)-3-(1-(2,5-dicloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5101) (85 mg, 0,20 mmol) en agua amoniacal (15 ml) en un tubo cerrado herméticamente se agitó a 150 ºC durante 16 h.

30 La solución se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y después se particionó entre agua (30 ml) y acetato de etilo (3 x 30 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (2 x 20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el producto deseado, la (S)-3-(1-(2-amino-5-cloropirimidin-4ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5102, el compuesto 249 de la Tabla 4) (40 mg, 49,6 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 17: síntesis de (S)-3-(1-(2-fluoro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5204).

Esquema 30. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(2-fluoro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)ona (compuesto 5204).

A una mezcla agitada de 6-cloro-2-fluoro-9H-purina (compuesto 5201) (2,07 g, 12,0 mmol) y ácido p-toluensulfónico monohidratado (34 mg, 0,18 mmol) en acetato de etilo (50 ml) en una atmósfera de argón, se añadió 3,4dihidropirano (3,03 g, 36,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con un 10 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 6-cloro-2-fluoro-9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (compuesto 5202) (1,82 g, 59 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvieron 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (200 mg, 0,72 mol), 6-cloro-2-fluoro-9-(tetrahidro2H-piran-2-il)-9H-purina (compuesto 5202) (369 mg, 1,44 mmol) y DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) en n-BuOH (20 ml) en un tubo precintado, y la mezcla resultante se agitó a 120 ºC durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con desde un 30 % hasta un 50 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-(2-fluoro-9-(tetrahidro2H-piran-2-il)-9H-purin-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5203) (167 mg, 47 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 3-(1-(2-fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5203) (160 mg, 0,32 mmol) en HCl / EtOH (3 M, 5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se neutralizó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 a pH = 7 -8, y se extrajo con CH2Cl2 (50 ml x 3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y el residuo se recristalizó en acetato de etilo y hexanos. El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-(2-fluoro-9H-purin-6-ilamino)etil)8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5204, el compuesto 245 de la Tabla 4) (125 mg, 94 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 18: síntesis de (S)-3-(1-(2-cloro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5304).

Esquema 31. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(2-cloro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5304).

A una mezcla agitada de 2,6-dicloro-9H-purina (compuesta 5301) (2,27 g, 12,0 mmol) y ácido p-toluensulfónico monohidratado (34 mg, 0,18 mmol) en acetato de etilo (50 ml) en una atmósfera de argón, se añadió 3,410

dihidropirano (3,03 g, 36,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con un 10 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 2,6-dicloro-9-(tetrahidro-2Hpiran-2-il)-9H-purina (compuesto 5302) (2,04 g, 62 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvieron 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1 (2H)-ona (compuesto 4704) (200 mg, 0,72 mol), 2,6-dicloro 9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (compuesto 5302) (393 mg, 1,44 mmol) y DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) en n-BuOH (20 ml) en un tubo precintado y la mezcla resultante se agitó a 120 ºC durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con desde un 30 % hasta un 50 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-(2-cloro-9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilami no)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5303) (172 mg, 46 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Se disolvió 3-(1-(2-cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5303) (172 mg, 0,33 mmol) en HCl / EtOH (3 M, 5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se neutralizó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 a pH 7 -8, y después se extrajo con CH2Cl2 (50 ml x 3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO y se filtró. El filtrado se concentró a vacío y se recristalizó en acetato de etilo y hexanos. El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la 3-(1-(2-cloro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil 2fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5304, el compuesto 244 de la Tabla 4) (128 mg, 90 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 19: síntesis de (S)-3-(1-(2-amino-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 5402).

Esquema 32. Se describe la síntesis de (S)-3-(1-(2-amino-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)ona (compuesto 5402).

Se suspendieron (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (100 mg, 0,36 mmol), 2amino-6-cloropurina (compuesto 5401) (60,9 mg, 0,36 mmol) y N,N-diisopropiletil amina (69 µl, 0,40 mmol) en n-BuOH (4 ml) en un tubo precintado, y la mezcla resultante se agitó a 100 ºC durante 48 h, y después a 12 ºC durante 24 h. La mezcla se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y se concentró a vacío para eliminar el n-BuOH. El residuo se particionó entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO y se filtró. El filtrado se concentró a vacío. El residuo se trituró con etil éter anhidro y se purificó adicionalmente mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con un 0 -8 % de MeOH / DCM) para proporcionar el producto deseado, la (S) 3-(1-(2-amino-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona en forma de un sólido de color blanquecino / amarillo (5402, el compuesto 323 de la Tabla 4), (28 mg, 20 %).

Ejemplo 20: síntesis de (S)-4-(1-(8-metil-1-oxo-2-fenil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)etilamino)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-5-carbonitrilo (compuesto 5506).

Esquema 33. Se describe la síntesis de (S)-4-(1-(8-metil-1-oxo-2-fenil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)etilamino)-7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbonitrilo (compuesto 5506).

A una mezcla agitada de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (compuesto 5501) (3,99 g, 26,0 mmol) en CH2Cl2 seco (150 ml) en una atmósfera de argón, se añadió N-bromosuccinimida (6,02 g, 33,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 3 h, se diluyó con MeOH (30 ml) y después se concentró a vacío para producir un sólido de color marrón claro. El residuo se trituró con H2O (150 ml) y después se recristalizó en MeOH (120 ml). El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la 5bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (compuesto 5502) (4,0 g, 66 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una solución agitada de 5-bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (compuesto 5502) (2,33 g, 10,0 mmol) en THF anhidro (100 ml) a -78 ºC en una atmósfera de argón, se añadió gota a gota una solución de n-BuLi (8,8 ml, 22,0 mmol) en THF (50 ml) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a -78 ºC durante 1 h y después se añadió gota a gota DMF (2,00 g, 11,0 mmol) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a -78 ºC durante 30 min, y después se dejó calentar lentamente hasta la temperatura ambiente y se agitó a la temperatura ambiente durante 16

h. La mezcla se diluyó con H2O (50 ml) y después se concentró a vacío para eliminar el THF. La suspensión resultante se trató con una solución acuosa saturada de NH4Cl (50 ml), se filtró, se lavó con acetato de etilo (100 ml), y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldehído (compuesto 5503) (1,17 g, 65 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

A una mezcla agitada de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldehído (compuesto 5503) (1,17 g, 6,47 mmol) en EtOH (25 ml), se añadieron secuencialmente clorhidrato de hidroxilamina sólido (0,54 g, 7,77 mmol) y una solución de NaOH (0,311 g, 7,77 mmol) en H2O (4 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min y se diluyó con una cantidad suficiente de EtOH (30 ml) y la agitación se continuó durante 30 min. El sólido se recogió mediante filtración, se aclaró con H2O (100 ml) y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, la 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldehído oxima (compuesto 5504) (0,89 g, 70 % de rendimiento) en forma de una mezcla de isómeros.

A una mezcla agitada de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbaldehído oxima (compuesto 5504) (865 mg, 4,40 mmol) en CH2Cl2 (20 ml), se añadió SOCl2 (3,1 ml, 43,7 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío. El residuo se trató con acetato de etilo (20 ml), H2O (20 ml) y después una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml) para ajustar el pH hasta aproximadamente 3 -4. La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 15 min y el sólido se recogió mediante filtración. El filtrado se extrajo con acetato de etilo (80 ml x 3), se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a vacío para proporcionar el segundo lote de producto. El sólido combinado se recristalizó en acetato de etilo y hexanos (1:1, 20 ml). El sólido se recogió mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el producto deseado, el 4cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbonitrilo (compuesto 5505) (763 mg, 97 % de rendimiento).

Se disolvieron (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (compuesto 4704) (208 mg, 0,75 mol), 4cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbonitrilo (compuesto 5505) (160 mg, 0,90 mmol) y Et3N (228 mg, 2,25 mmol) en n-BuOH (20 ml) en un tubo precintado, y la mezcla resultante se agitó a 150 ºC durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con un 50 % de Hex / EA) para proporcionar el producto deseado, el (S)-4-(1-(8-metil-1-oxo-2-fenil-1,2dihidroisoquinolin-3-il)etilamino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbonitrilo (5506, el compuesto 264 de la Tabla 4) (90 mg, 28 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco.

Ejemplo 21: valores de la CI50 de compuestos seleccionados.

Tabla 4. Estructuras de los compuestos para los resultados de la CI50 descritos en la Tabla 3.

5 Las PI3-K de la clase I pueden ser adquiridas (las p110α / p85α, p110β / p85α, p110δ / p85α en Upstate, y la p110γ en Sigma) o expresadas según se ha descrito previamente (Knight et al., 2004). Los valores de las CI50 se miden mediante el uso de un ensayo estándar de TLC de la actividad de la quinasa de lípidos (descrito a continuación) o mediante un ensayo de captura de membrana de alto rendimiento. Las reacciones de la quinasa se llevan a cabo preparando una mezcla de reacción que contiene la quinasa, el inhibidor (concentración final de un 2 % de DMSO),

10 tampón (HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM) y fosfatidilinositol recién sometido a ultrasonidos (100 µg/ml). Las reacciones se inician mediante la adición de ATP que contiene 10 µCi de γ-32P-ATP hasta una concentración final de 10 o de 100 µM, y se dejan transcurrir durante 5 minutos a la temperatura ambiente. Para el análisis mediante TLC, las reacciones son terminadas después mediante la adición de 105 µl de HCl 1 N seguido de 160 µl de CHCl3:MeOH (1:1). La mezcla bifásica se agita vorticialmente, se centrifuga brevemente y la fase orgánica se transfiere a un nuevo tubo mediante el uso de una punta de pipeta de carga de gel previamente recubierta con CHCl3. Este extracto se coloca en manchas en placas de TLC y se desarrolla durante 3 -4 horas en una solución al

65:35 de n-propanol:ácido acético 1 M. Después las placas de TLC se secan, se exponen a una pantalla de un fosforimager (láser de barrido) (Storm, Amersham) y se cuantifican. Se mide la actividad de quinasa para cada compuesto a 10 -12 concentraciones inhibidoras que representan diluciones dobles desde la mayor concentración ensayada (normalmente, 200 µM). Para los compuestos que muestran una actividad significativa se repiten las determinaciones de la CI50 entre dos y cuatro veces, y el valor comunicado es el promedio de estas mediciones independientes.

Hay disponibles comercialmente otros kits o sistemas comerciales para el ensayo de las actividades de las PI3-K. Los kits o los sistemas disponibles comercialmente pueden usarse para el cribado de inhibidores y/o de agonistas de las PI3-K, incluyendo, pero no se limitan a, las quinasas PI 3 α, β, δ y γ. Un ejemplo de sistema es el Ensayo PI 3-Kinase (humana) HTRF™ de Upstate. El ensayo puede realizarse de acuerdo con los procedimientos sugeridos por el fabricante. En resumen, el ensayo es un ensayo FRET resuelto en el tiempo que mide indirectamente el producto PIP3 formado por la actividad de una PI3-K. La reacción de la quinasa se lleva a cabo en una placa de microtitulación (por ejemplo, en una placa de microtitulación de 384 pocillos). El volumen de reacción total es de aproximadamente 20 µl por pocillo. En la primera etapa, cada pocillo recibe 2 µl del compuesto de ensayo en dimetilsulfóxido al 20 %, dando como resultado una concentración final de un 2 % de DMSO. Después se añaden aproximadamente 14,5 µl de una mezcla de quinasa / PIP2 (diluida en 1X de tampón de reacción) a cada pocillo para una concentración final de 0,25 -0,3 µg/ml de quinasa y 10 µM de PIP2. La placa se cierra herméticamente y se incuba durante 15 minutos a la temperatura ambiente. Para iniciar la reacción se añaden 3,5 µl de ATP (diluido en 1X de tampón de reacción) a cada pocillo para una concentración final de ATP de 10 µM. La placa se cierra herméticamente y se incuba durante 1 hora a la temperatura ambiente. La reacción se detiene mediante la adición de 5 µl de una solución de detención por pocillo, y después se añaden a cada pocillo 5 µl de mezcla de detección. La placa se cierra herméticamente, se incuba durante 1 hora a la temperatura ambiente, y después se lee con un lector de placas apropiado. Se analizan los datos y se generan las CI50 mediante el uso de GraphPad Prism 5.

Ejemplo 23: ensayos de expresión y de inhibición de la Abl

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa Abl pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Por ejemplo, los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse por triplicado frente a Abl o Abl (T315I) (Upstate) completa recombinante en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, ATP 200 µM (2,5 µCi de γ-32P-ATP) y 0,5 mg/ml de BSA. Se usa el sustrato peptídico de Abl optimizado EAIYAAPFAKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 24: ensayos de expresión y de inhibición de la Hck

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa Hck pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse por triplicado frente a la Hck completa recombinante en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, ATP 200 µM (22,5 µCi de γ-32P-ATP) y 0,5 mg/ml de BSA. Se usa el sustrato peptídico optimizado de la familia de quinasas Src EIYGEFKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 25: ensayos de expresión y de inhibición del receptor de inulsina (IR)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa del receptor IR pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse por triplicado frente al dominio de la quinasa del receptor de insulina recombinante (Upstate) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, MnCl2 10 mM, ATP 200 µM (2,5 µCi de γ-32P-ATP) y 0,5 mg/ml de BSA. Como sustrato se usa poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml). Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 26: ensayos de expresión y de inhibición de la Src

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa Src pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse por triplicado frente a Src o Src (T338I) completa recombinante en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, ATP 200 µM (2,5 µCi de γ-32P-ATP) y 0,5 mg/ml de BSA. Se usa el sustrato peptídico optimizado de la familia de quinasas Src EIYGEFKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secaron y la radioactividad transferida se cuantificó mediante fosforimaging.

Ejemplo 27: ensayos de expresión y de inhibición de la DNA-PK (DNAK)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa DNAK pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia. La DNA-PK puede adquirirse en Promega y ensayarse mediante el uso del Sistema de Ensayo de DNA-PK (Promega) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Ejemplo 28: ensayos de expresión y de inhibición de la mTOR

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la mTor pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente a la mTOR recombinante (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 50 mM, pH 7,5, EGTA 1 mM, MgCl2 10 mM, 2,5 mM, Tween al 0,01 %, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usó PHAS-1/4EBP1 recombinante de rata (Calbiochem; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Hay disponibles comercialmente otros kits o sistemas comerciales para el ensayo de la actividad de la mTOR. Por ejemplo, se puede usar el ensayo LanthaScreen™ Kinase de Invitrogen para ensayar los inhibidores de la mTOR divulgados en este documento. Este ensayo es una plataforma de FRET resuelto en el tiempo que mide la fosforilación de 4EBP1 marcado con GFP por parte de la quinasa mTOR. La reacción de la quinasa se realiza en una placa de microtitulación de 384 pocillos blanca. El volumen de reacción total es de 20 µl por pocillo y la composición del tampón de reacción es HEPES 50 mM a pH 7,5, polisorbato 20 al 0,01 %, EGTA 1 mM, MnCl2 10 mM y DTT 2 mM. En la primera etapa, cada pocillo recibe 2 µl del compuesto de ensayo en dimetilsulfóxido al 20 % dando como resultado una concentración final del 2 % de DMSO. Después se añaden 8 µl de mTOR diluida en tampón de reacción a cada pocillo para una concentración final de 60 ng/ml. Para iniciar la reacción se añaden a cada pocillo 10 µl de una mezcla de ATP / GFP-4EBP1 (diluida en tampón de reacción) para una concentración final de ATP de 10 µM y GFP-4EBP1 0,5 µM. La placa se cierra herméticamente y se incuba durante 1 hora a la temperatura ambiente. La reacción se detiene mediante la adición de 10 µl a cada pocillo de una mezcla de anticuerpo 4EBP1 Tb-anti-pT46 / EDTA (diluida en tampón de TR-FRET) para una concentración final de 1,3 nM de anticuerpo y 6,7 mM de EDTA. La placa se cierra herméticamente, se incuba durante 1 hora a la temperatura ambiente y después se lee con un lector de placas configurado para LanthaScreen™ TR-FRET. Se analizan los datos y se generan las CI50 mediante el uso de GraphPad Prism 5.

Ejemplo 29: ensayos de expresión y de inhibición del receptor de crecimiento endotelial vascular

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente al receptor del VEGF pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa del receptor del KDR (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, BME al 0,1 %, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usa poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 30: ensayos de expresión y de inhibición del receptor de efrina B4 (EphB4)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente al EphB4 pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa del receptor de la efrina B4 (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, BME al 0,1 %, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usó poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 31: ensayos de expresión y de inhibición del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa del EGFR pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa del receptor del EGF (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, BME al 0,1 %, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usó poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 32: ensayos de expresión y de inhibición del ensayo KIT

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa KIT pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa KIT (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, DTT 1 mM, MnCl2 10 mM, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usó poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 33: ensayos de expresión y de inhibición de la RET

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa RET pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa RET (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, DTT 2,5 mM, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usa el sustrato peptídico optimizado de Abl EAIYAAPFAKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 34: ensayos de expresión y de inhibición del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa del PDGFR pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa del receptor PDG (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, DTT 2,5 mM, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usa el sustrato peptídico optimizado de Abl EAIYAAPFAKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 35: ensayos de expresión y de inhibición de la quinasa de tirosina 3 relacionada con FMS (FLT-3)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa FLT-3 pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa FLT-3 (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, DTT 2,5 mM, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usa el peptídico optimizado de Abl EAIYAAPFAKKK como fosfoaceptor (200 µM). Las reacciones se terminan con unas gotas en láminas de fosfocelulosa, que se lavan con ácido fosfórico al 0,5 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 36: ensayos de expresión y de inhibición de la quinasa de tirosina del receptor TEK (TIE2)

La actividad cruzada o la ausencia de la misma de uno o más compuestos de la presente invención frente a la quinasa TIE2 pueden medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la materia o según los métodos divulgados a continuación. Los compuestos descritos en este documento pueden ensayarse frente al dominio recombinante de la quinasa TIE2 (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 25 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, DTT 2 mM, MnCl2 10 mM, ATP 10 µM (2,5 µCi de µ-32P-ATP) y 3 µg/ml de BSA. Se usa poli E-Y (Sigma; 2 mg/ml) como sustrato. Las reacciones se terminan con unas gotas en nitrocelulosa, que se lava con NaCl 1 M / ácido fosfórico al 1 % (aproximadamente 6 veces, de 5 -10 minutos cada una). Las láminas se secan y la radioactividad transferida se cuantifica mediante fosforimaging.

Ejemplo 37: ensayo de activación y proliferación de linfocitos B

La capacidad de uno o más de los compuestos en cuestión para inhibir la activación y la proliferación de los linfocitos B se determina de acuerdo con los procedimientos habituales conocidos en la materia. Por ejemplo, se establece un ensayo de proliferación celular in vitro que mide la actividad metabólica de las células vivas. El ensayo se realiza en una placa de microtitulación de 96 pocillos mediante el uso de una reducción con azul de Alamar. Se purifican linfocitos B esplénicos Balb/c en un gradiente de Ficoll-Paque™ PLUS seguido de la separación magnética de las células mediante el uso de un kit de aislamiento celular MACS B (Miletenyi). Las células se colocan en placas en 90 µl a 50.000 células/pocillo en medio de linfocitos B (RPMI + FBS al 10 % + Pen / Estrep + bME 50 µM+ HEPES 5 mM). Se diluye un compuesto divulgado en este documento en medio de linfocitos B y se añade a un volumen de 10 µl. Las placas se incuban durante 30 min a 37 ºC y con un 5 % de CO2 (concentración final de DMSO del 0,2 %). Después se añaden 50 µl de un cóctel de estimulación de linfocitos B que contiene bien 10 µg/ml de LPS

o bien 5 µg/ml de F(ab’)2 de burro anti-IgM de ratón más 2 ng/ml de IL4 recombinante de ratón en medio de linfocitos B. Las placas se incuban durante 72 horas a 37 ºC y con un 5 % CO2. Se añade un volumen de 15 µl de reactivo azul de Alamar a cada pocillo y las placas se incuban durante 5 horas a 37 ºC y con un 5 % de CO2. La fluorescencia del azul de Alamar se lee a 560Ex / 590Em, y los valores de la CI50 o de la EC50 se calculan mediante el uso de GraphPad Prism 5.

Ejemplo 38: ensayo de proliferación de la línea celular tumoral

La capacidad de uno o más de los compuestos en cuestión para inhibir la proliferación de la línea celular tumoral se determina de acuerdo con los procedimientos habituales conocidos en la materia. Por ejemplo, puede llevarse a cabo un ensayo de proliferación celular in vitro para medir la actividad metabólica de las células vivas. El ensayo se realiza en una placa de microtitulación de 96 pocillos mediante el uso de una reducción con azul de Alamar. Las líneas celulares tumorales humanas se obtienen del ATCC (por ejemplo, MCF7, U-87 MG, MDA-MB-468, PC-3), se hacen crecer hasta confluencia en matraces T75, se tripsinizan con tripsina al 0,25 %, se lavan una vez con medio celular tumoral (DMEM + FBS al 10 %), y se colocan en placas en 90 µl a 5.000 células/pocillo en medio celular tumoral. Se diluye un compuesto divulgado en este documento en medio celular tumoral y se añade a un volumen de 10 µl. Las placas se incuban durante 72 horas a 37 ºC y con un 5 % de CO2. Se añade un volumen de 10 µl de reactivo azul de Alamar a cada pocillo y las placas se incuban durante 3 horas a 37 ºC y con un 5 % de CO2. La fluorescencia del azul de Alamar se lee a 560Ex / 590Em, y los valores de la CI50 se calculan mediante el uso de GraphPad Prism 5.

Ejemplo 39: actividad antitumoral in vivo

Los compuestos descritos en este documento pueden ser evaluados en un conjunto de modelos tumorales humanos y murinos.

Modelos tumorales resistentes al paclitaxel

1. Modelo de carcinoma de ovario derivado clínicamente.

Este modelo de tumor establece a partir de una biopsia tumoral de un paciente con cáncer de ovario. La biopsia tumoral se toma del paciente.

Los compuestos descritos en este documento se administran a ratones lampiños portadores de tumores estadificados mediante el uso de un programa de x 5 cada 2 días.

2. Xenoinjerto de carcinoma de ovario humano A2780Tax (tubulina mutatada).

El A2780Tax es un modelo de carcinoma ovárico humano resistente al paclitaxel. Deriva de la línea parental sensible A2780 mediante una incubación conjunta de las células con paclitaxel y verapamilo, un agente de reversión de la MDR. Se ha demostrado que su mecanismo de resistencia no está relacionado con la MDR y es atribuido a una mutación en el gen que codifica para la proteína beta-tubulina.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser administrados a ratones portadores de tumores estadificados en un programa de x 5 cada 2 días.

3. Xenoinjerto de carcinoma de colon humano HCT116/VM46 (de resistencia multifarmacológica).

El HCT116/VM46 es un carcinoma de colon de resistencia MDR desarrollado a partir de la línea parental sensible HCT116. In vivo, crecido en ratones lampiños, el HCT116/VM46 ha demostrado coherentemente una elevada resistencia al paclitaxel.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser administrados a ratones portadores de tumores estadificados en un programa de x 5 cada 2 días.

5. Modelo de sarcoma murino M5076

El M5076 es un fibrosarcoma de ratón que es inherentemente resistente al paclitaxel in vivo.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser administrados a ratones portadores de tumores estadificados en un programa de x 5 cada 2 días.

Puede usarse uno o más compuestos de la invención en combinación con otros agentes terapéuticos in vivo en los xenoinjertos de carcinoma de colon humano con resistencia multifarmacológica HCT/VM46 o cualquier otro modelo conocido en la materia, incluyendo los descritos en este documento.

Ejemplo 40: ensayo de estabilidad microsomal

La estabilidad de uno o más de los compuestos en cuestión se determina de acuerdo con los procedimientos habituales conocidos en la materia. Por ejemplo, la estabilidad de uno o más de los compuestos en cuestión se establece mediante un ensayo in vitro. En particular, se establece un ensayo de estabilidad microsomal in vitro que mide la estabilidad de uno o más de los compuestos en cuestión cuando reaccionan con microsomas hepáticos de ratón, de ratas o humanos. La reacción de los microsomas con los compuestos se lleva a cabo en un tubo de Eppendorf de 1,5 ml. Cada tubo contiene 0,1 µl de NADPH a 10,0 mg/ml; 75 µl de 20,0 mg/ml de microsomas hepáticos de ratón, de ratas o humanos; 0,4 µl de tampón de fosfato 0,2 M y 425 µl de ddH2O. El tubo de control negativo (sin NADPH) contiene 75 µl de 20,0 mg/ml de microsomas hepáticos de ratón, de ratas o humanos; 0,4 µl de tampón de fosfato 0,2 M y 525 µl de ddH2O. La reacción se inicia mediante la adición de 1,0 µl de compuesto de ensayo 10,0 mM. Los tubos de reacción se incuban a 37 ºC. Se recogen 100 µl de muestra en un nuevo tubo de Eppendorf que contiene 300 µl de metanol frío a los 0, 5, 10, 15, 30 y 60 minutos de la reacción. Las muestras se centrifugan a 15.000 rpm para eliminar las proteínas. El sobrenadante de la muestra centrifugada se transfiere a un tubo nuevo. La concentración del compuesto estable después de la reacción con el microsoma del sobrenadante se mide mediante una cromatografía líquida / espectrometría de masas (CL-EM).

Ejemplo 41: ensayo de estabilidad plasmática

La estabilidad de uno o más de los compuestos en cuestión se determina de acuerdo con los procedimientos habituales conocidos en la materia. Véase, por ejemplo, Rapid Commun. Mass Spectrom., 10: 1019 -1026. El siguiente procedimiento es un ensayo de HPLC-EM/EM que usa plasma humano; también hay disponibles otras especies que incluyen mono, perro, rata y ratón. Se descongela plasma humano congelado heparinizado en un baño de agua fría y se rota durante 10 minutos a 2.000 rpm a 4 ºC antes de su uso. Se añade un compuesto en cuestión desde una solución madre 400 µM a una alícuota calentada previamente de plasma para dar un volumen final de ensayo de 400 µl (o de 800 µl para la determinación de la semivida), que contiene compuesto de ensayo 5 µM y un 0,5 % de DMSO. Las reacciones se incuban con agitación durante 0 minutos, y 60 minutos a 37 ºC, o durante 0, 15, 30, 45 y 60 minutos a 37 ºC para la determinación de la semivida. Las reacciones se detienen mediante la transferencia de 50 µl de la mezcla de centrifugación a 200 µl de acetonitrilo enfriado en hielo y se mezclan con agitación durante 5 minutos. Las muestras se centrifugan a 6.000 x g durante 15 minutos a 4 ºC y se retiran 120 µl de sobrenadante a tubos limpios. Después las muestras se evaporan a sequedad y se someten a un análisis mediante una HPLC-EM/EM.

Cuando se desee, se ensayan simultáneamente uno o más compuestos de control o de referencia (5 mM) junto con los compuestos de ensayo: un compuesto, la propoxicaína, con una baja estabilidad plasmática y otro compuesto, la propantelina, con una estabilidad plasmática intermedia.

Las muestras se reconstituyen en acetonitrilo / metanol / agua (1/1/2, v/v/v) y se analizan a través de una (RP)HPLC-EM/EM mediante el uso de la monitorización de la reacción seleccionada (SRM). Las condiciones de la HPLC consisten en una bomba binaria de CL con automuestreador, un modo mixto, C12, una columna de 2 x 20 mm y un programa en gradiente. Las áreas de pico correspondientes a los analitos son registradas mediante una HPLC-EM/EM. La proporción de compuesto parental remanente después de 60 minutos con respecto a la cantidad remanente en el momento cero, expresada como un porcentaje, se indica como la estabilidad plasmática. En el caso de la determinación de la semivida, la semivida es estimada a partir de la pendiente del intervalo lineal inicial de la curva logarítmica del remanente de compuesto (%) frente al tiempo, asumiendo una cinética de primer orden.

Ejemplo 42: estabilidad química

La estabilidad química de uno o más de los compuestos en cuestión se determina de acuerdo con los procedimientos habituales conocidos en la materia. A continuación se detalla un ejemplo de procedimiento para la determinación de la estabilidad química de un compuesto en cuestión. El tampón usado por defecto para el ensayo de estabilidad química es solución salina tamponada con fosfato (PBS) a pH 7,4; pueden usarse otros tampones adecuados. Se añade un compuesto en cuestión desde una solución madre 100 µM a una alícuota de PBS (por duplicado) para dar un volumen final de ensayo de 400 µl, que contiene el compuesto de ensayo 5 µM y DMSO al 1 % (para la determinación de la semivida se prepara un volumen total de muestra de 700 µl). Las reacciones se incuban con agitación durante 0 minutos y 24 horas a 37 ºC; para la determinación de la semivida las muestras se incuban durante 0, 2, 4, 6 y 24 horas. Las reacciones se detienen añadiendo inmediatamente 100 µl de la mezcla de incubación a 100 µl de acetonitrilo y agitando vorticialmente durante 5 minutos. Después las muestras se almacenan a -20 ºC hasta su análisis mediante una HPLC-EM/EM. Cuando se desee, se ensaya simultáneamente un compuesto de control o un compuesto de referencia tal como clorambucilo (5 µM) con un compuesto en cuestión de interés, ya que este compuesto es muy hidrolizado en el transcurso de 24 horas. Las muestras se analizan a través de una (RP)HPLC-EM/EM mediante el uso de la monitorización de la reacción seleccionada (SRM). Las condiciones de la HPLC consisten en una bomba binaria de CL con automuestreador, un modo mixto, C12, una columna de 2 x 20 mm y un programa en gradiente. Las áreas de pico correspondientes a los analitos son registradas mediante una HPLC-EM/EM. La proporción de compuesto parental remanente después de 24 horas con respecto a la cantidad remanente en el momento cero, expresada como un porcentaje, se indica como la estabilidad química. En el caso de la determinación de la semivida, la semivida es estimada a partir de la pendiente del intervalo lineal inicial de la curva logarítmica del remanente de compuesto (%) frente al tiempo, asumiendo una cinética de primer orden.

Ejemplo 43: ensayo de la quinasa Akt

Las células que comprenden los componentes de la ruta Akt / mTOR, incluyendo, pero no se limitan a, mioblastos L6, linfocitos B-ALL, linfocitos B, linfocitos T, células de leucemia, células de médula ósea, células transducidas p190, células positivas para el cromosoma de Filadelfia (Ph+) y fibroblastos embrionarios de ratón, se hacen crecer normalmente en medio de crecimiento celular tal como DMEM complementado con suero bovino fetal y/o antibióticos, y se hacen crecer hasta confluencia.

Con objeto de comparar el efecto de uno o más de los compuestos divulgados en este documento sobre la activación de la Akt, dichas células se dejan sin suero durante una noche y se incuban con uno o más de los compuestos divulgados en este documento, o con aproximadamente un 0,1 de % DMSO durante entre aproximadamente 1 minuto y aproximadamente 1 hora antes de la estimulación con insulina (por ejemplo, 100 nM) durante aproximadamente 1 minuto hasta aproximadamente 1 hora. Las células se lisan raspando con tampón de lisis enfriado en hielo que contiene detergentes tales como dodecil sulfato de sodio e inhibidores de la proteasa (por ejemplo, PMSF). Después de poner en contacto las células con el tampón de lisis, la solución se somete a ultrasonidos brevemente, se aclara mediante centrifugación, se resuelve mediante una SDS-PAGE, se transfiere a nitrocelulosa o a PVDF y se inmunotransfiere mediante el uso de anticuerpos contra fosfo-Akt S473, fosfo-Akt T308, Akt y β-actina (Cell Signaling Technologies).

Los resultados demuestran que uno o más compuestos de la presente divulgación inhiben la fosforilación estimulada por la insulina de la Akt en la S473. Alternativamente, algunos de los compuestos divulgados en este documento inhiben adicionalmente la fosforilación estimulada por la insulina de la Akt en la T308. Dicha clase de compuestos puede inhibir la Akt más eficazmente que la rapamicina y puede ser indicativo de inhibidores de la mTORC2 o de inhibidores de las quinasas cascada arriba, tales como la PI3K o la Akt.

Ejemplo 44: señalización de la quinasa en la sangre

La señalización PI3K / Akt / mTor se mide en células sanguíneas mediante el uso del método phosflow (Methods Enzymol. 2007; 434: 131 -54). La ventaja de este método es que es por naturaleza un ensayo de células individuales, por lo que puede detectarse la heterogeneidad celular más que los promedios de población. Esto permite la detección simultánea de estados de señalización en diferentes poblaciones definidos por otros marcadores. El phosflow también es muy cuantitativo. Para ensayar los efectos de uno o más de los compuestos divulgados en este documento, se estimulan esplenocitos no fraccionados, o células mononucleares de sangre periférica, con anti-CD3 para iniciar la señalización de los receptores de los linfocitos T. Después las células se fijan y se tiñen para comprobar los marcadores superficiales y las fosfoproteínas intracelulares. Se espera que los inhibidores divulgados en este documento inhiban la fosforilación mediada por anti-CD3 de las S473 y S6 de la Akt, mientras que la rapamicina inhibe la fosforilación de la S6 y promueve la fosforilación de la Akt en las condiciones ensayadas.

De forma análoga, se incuban alícuotas de sangre completa durante 15 minutos con vehículo (por ejemplo, un 0,1 % de DMSO) o inhibidores de la quinasa a varias concentraciones, antes de la adición de los estímulos para reticular el receptor de los linfocitos T (TCR) (anti-CD3 con anticuerpo secundario) o el receptor de los linfocitos B (BCR) mediante el uso de anticuerpo anti-cadena ligera kappa (fragmentos Fab’2). Después de aproximadamente 5 y 15 minutos, las muestras se fijan (por ejemplo, con paraformaldehído frío al 4 %) y se usan para el phosflow. Se usa una tinción superficial para distinguir los linfocitos T y B mediante el uso de anticuerpos dirigidos a los marcadores de la superficie celular que son conocidos en la materia. El nivel de fosforilación de los sustratos de las tiras tales como Akt y S6 se miden entonces mediante la incubación de las células fijadas con anticuerpos marcados específicos para las isoformas fosforiladas de estas proteínas. Después se analiza la población de células mediante una citometría de flujo.

Ejemplo 45: ensayo de formación de colonias

Se colocan en placas células de médula ósea murinas recién transformadas con un retrovirus BCR-Abl p190 (denominadas en este documento células transducidas p190) en presencia de varias combinaciones farmacológicas en medio de metilcelulosa M3630 durante aproximadamente 7 días con IL-7 recombinante humana en aproximadamente un 30 % de suero, y se cuenta el número de colonias formadas mediante un examen visual con un microscopio.

Alternativamente, se obtienen células mononucleares de sangre periférica humana a partir de pacientes positivos (Ph+) y negativos (Ph-) para el cromosoma Filadelfia tras un diagnóstico inicial o una recaída. Las células vivas se aíslan y se enriquecen en linfocitos B madre CD19+ CD34+. Después de un cultivo líquido durante una noche, las células se colocan en placas en methocult GF+ H4435, Stem Cell Tehcnologies) complementado con citocinas (IL-3, IL-6, IL-7, G-CSF, GM-CSF, CF, ligando Flt3 y eritropoyetina) y varias concentraciones de agentes quimioterapéuticos conocidos, junto con algunos compuestos de la presente divulgación. Las colonias se cuentan con un microscopio 12 -14 días después. Este método puede usarse para ensayar evidencias de una actividad aditiva o sinérgica.

Ejemplo 46: efecto in vivo de los inhibidores de la quinasa sobre células leucémicas

Los ratones receptores hembras son irradiados letalmente con una fuente de γ en dos dosis con aproximadamente 4 h de diferencia con aproximadamente 5 Gy cada una. Aproximadamente 1 h después de la segunda dosis de radiación, a los ratones se les inyecta por vía i.v. aproximadamente 1 x 106 células de leucémicas (por ejemplo, humanas o murinas Ph+, o células de médula ósea transducidas p190). Estas células son administradas junto con una dosis radioprotectora de aproximadamente 5 x 106 de células de médula ósea normales de ratones donantes de 3 -5 semanas de edad. A los receptores se les administran antibióticos en el agua y se les monitoriza diariamente. Los ratones que cayeron enfermos después de aproximadamente 14 días son sacrificados y se recogen los órganos linfoides para su análisis. El tratamiento con el inhibidor de la quinasa comienza aproximadamente 10 días después de la inyección de las células leucémicas, y continúa diariamente hasta que el ratón se pone enfermo o durante un máximo de aproximadamente 35 días después del transplante. Los inhibidores son administrados mediante una sonda oral.

Se recogen células de sangre periférica aproximadamente en el día 10 (previo al tratamiento) y después del sacrificio (después del tratamiento), se ponen en contacto con anticuerpos marcados anti-hCD4 y se cuentan mediante citometría de flujo. Este método puede usarse para demostrar que el efecto sinérgico de uno o más de los compuestos divulgados en este documento junto con los agentes quimioterapéuticos conocidos reduce significativamente el recuento de células sanguíneas leucémicas en comparación con el tratamiento únicamente con los agentes quimioterapéuticos conocidos (por ejemplo, Gleevec) en las condiciones ensayadas.

Ejemplo 47: tratamiento del modelo de ratón de enfermedad de lupus

Los ratones que carecen del receptor inhibidor FcγRIIb que se opone a la señalización de la PI3K en los linfocitos B desarrollan un lupus con una elevada penetración. Los ratones inactivados para FcγRIIb (R2KO, Jackson Labs) son considerados un modelo válido de la enfermedad humana, ya que algunos pacientes de lupus muestran una expresión o una función disminuida del FcγRIIb (S. Bolland y J. V. Ravtech 2000. Immunity 12: 277 -285).

Los ratones R2KO desarrollan una enfermedad similar al lupus con anticuerpos anti-nucleares, glomerulonefritis y proteinuria aproximadamente a los 4 -6 meses de edad. Para estos experimentos se usó el análogo de rapamicina RAD001 (disponible en LC Laboratories) como compuesto de referencia y se administró por vía oral. Se ha demostrado que este compuesto mejora los síntomas del lupus en el modelo B6.Sle1z.Sle3z (T. Wu et al. J. Clin Invest. 117: 2186 -2196).

Los ratones del modelo de enfermedad de lupus tales como R2KO, BXSB o MLR / lpr se tratan aproximadamente a los 2 meses de edad, aproximadamente durante aproximadamente dos meses. A los ratones se les administran unas dosis de: vehículo, RAD001 aproximadamente a 10 mg/kg, o los compuestos divulgados en este documento desde aproximadamente 1 mg/kg hasta aproximadamente 500 mg/kg. Se obtienen muestras de sangre y orina aproximadamente a lo largo del período de ensayo, y se ensayan para comprobar los anticuerpos antinucleares (en diluciones de suero) o la concentración de proteínas (en orina). También se ensayan sólo para comprobar los anticuerpos anti-ADNmc y los anticuerpos anti-ADNbc mediante un ELISA. Los animales son sacrificados el día 60 y se recogen los tejidos para medir el peso del bazo y la patología renal. La glomerulonefritis se evalúa en secciones renales teñidas con H & E. Se estudian otros animales durante aproximadamente dos meses después del cese del tratamiento, mediante el uso de los mismos criterios de valoración.

Este modelo establecido en la materia puede emplearse para demostrar que los inhibidores de la quinasa divulgados en este documento pueden suprimir o retrasar la aparición de los síntomas del lupus en el modelo de enfermedad de lupus en ratón.

Ejemplo 48: ensayo de trasplante de médula ósea murina

Los ratones receptores hembras son irradiados letalmente con una fuente de rayos γ. Aproximadamente 1 h después de la dosis de radiación se les inyectan a los ratones aproximadamente 1 x 106 células leucémicas de cultivos transducidos p190 de pase temprano (por ejemplo, según se describe en Cancer Genet Cytogenet. Agosto de 2005; 161 (1): 51 -6). Estas células son administradas junto con una dosis radioprotectora de aproximadamente 5 x 106 de células de médula ósea normal de ratones donantes de 3 -5 semanas de edad. A los receptores se les administran antibióticos en el agua y se monitorizan diariamente. Los ratones que cayeron enfermos después de aproximadamente 14 días son sacrificados y se recogen los órganos linfoides para una citometría de flujo y/o un enriquecimiento magnético. El tratamiento comienza aproximadamente el día 10 y continúa diariamente hasta que el ratón cae enfermo, o después de un máximo de aproximadamente 35 días después del transplante. Los fármacos son administrados mediante una sonda oral (p.o.). En un experimento preliminar se identifica una dosis de quimioterapéutico que no es curativa pero retrasa la aparición de la leucemia aproximadamente una semana o menos; los controles son tratados con vehículo o tratados con agente quimioterapéutico, que previamente se ha demostrado que retrasa pero que no cura la leucemiogénesis en este modelo (por ejemplo, imatinib a aproximadamente 70 mg/kg dos veces al día). Para la primera fase se usan células p190 que expresan eGFP, y el análisis postmortem se limita al recuento del porcentaje de células leucémicas en la médula ósea, el bazo y los nódulos linfáticos (LN) mediante una citometría de flujo. En la segunda fase se usan células p190 que expresan una forma anura del CD4 humano y el análisis postmortem incluye la clasificación magnética de las células hCD4+ del bazo seguida de un análisis por inmunotransferencia de los criterios de valoración de señalización clave: p Akt -T308 y S473; pS6 y p4EBP-1. Como controles para la detección por inmunotransferencia se incuban las células clasificadas en presencia o en ausencia de los inhibidores de la quinasa de la presente divulgación antes de la lisis. Opcionalmente, se usa un "phosflow" para detectar las p Akt -S473 y pS6-S235/236 en las células operadas por hCD4 sin una clasificación previa. Estos estudios de señalización son particularmente útiles si, por ejemplo, los ratones tratados farmacológicamente no han desarrollado una leucemia clínica en el punto temporal del día 35. Se generan las representaciones gráficas de Kaplan-Meier de supervivencia y se realiza el análisis estadístico de acuerdo con los métodos conocidos en la materia. Los resultados de las células p 190 son analizados individualmente, así como de forma acumulada.

Se obtienen semanalmente muestras de sangre periférica (100 -200 µl) de todos los ratones, comenzando el día 10 inmediatamente antes de comenzar el tratamiento. Se usa el plasma para la medición de las concentraciones farmacológicas, y las células son analizadas para comprobar los marcadores de leucemia (eGFP o hCD4) y los biomarcadores de señalización según se describe en este documento.

Este ensayo general conocido en la materia puede usarse para demostrar que pueden usarse dosis terapéuticas eficaces de los compuestos divulgados en este documento para la inhibición de la proliferación de las células leucémicas.

Ejemplo 49: ensayo de TNP-Ficoll de activación de linfocitos B independientes de linfocitos T

Para ensayar los efectos de los compuestos de la presente invención en la supresión de la producción de anticuerpos independiente de los linfocitos T, se usó el ensayo de activación de los linfocitos B de TNP-Ficoll según se describe en este documento. Los compuestos de la presente invención se disolvieron en un vehículo apropiado (por ejemplo, 1-metil-2-pirrolidinona al 5 %, polietilenglicol 400 al 85 %, Solutor al 10 %). Los compuestos se administraron por vía oral aproximadamente 1 h antes del tratamiento con TNP-Ficoll a ratones de 4 -10 semanas de edad. Para estudiar los efectos de los compuestos sobre la activación de los linfocitos B, se agrupó un conjunto de ratones de acuerdo con la siguiente tabla:

Grupo nº

Ratones / grupo Compuesto utilizado Grupo Inyección de antígeno el día 1 Administración del compuesto desde el día 1 hasta el día 7

TNP-F

Vía (mg/kg) Vía Régimen

1

4 Vehículo Sólo antígeno 200 µl (0,5 mg/ml) ip 0 Po D.V.D. durante 7 días

2

8 - Sólo antígeno 0

3

8 Compuesto N7 referencia 30

4

8 Compuesto N53 Antígeno + cmp 1

5

8 3

6

8 10

7

8 30

8

8

60

Para los animales del grupo 1, y ocho animales de los grupos 2 a 7, fueron sacrificados con CO2 2 horas después de la última administración de compuesto el día 7. Inmediatamente se recogió sangre mediante cardiopunción y se mantuvo a 37 ºC durante 1 h para que coagulara, seguido de una incubación durante una noche a 4 ºC para permitir la contracción del coágulo. Al día siguiente se recogió el suero por decantación y centrifugación a 3.000 rpm durante 10 min. Después el suero recogido se congeló a -80 ºC para futuros análisis.

Las muestras de suero fueron analizadas para comprobar los títulos de anticuerpo anti-TNP mediante un ELISA según se describe en este documento. Se recubrió el TNP-BSA en una placa de micr titulación Nunc Maxisorb a 100 µl/pocillo una concentración de 10 µg/ml en solución salina tamponada con fosfato (PBS). La placa de Maxisorb se incubó durante 1,5 horas a la temperatura ambiente y la solución se eliminó. Se añadieron a cada pocillo 200 µl/pocillo de tampón de bloqueo (por ejemplo, BSA al 1 % en PBS) y se incubó 1 h a la temperatura ambiente. La placa se lavó una vez con 200 µl/pocillo de Tween-20 al 0,05 % en PBS (tampón de lavado). Se añadió una dilución

1:2 de suero de cada ratón en tampón de bloqueo a cada pocillo de la primera columna (1) de la placa de microtitulación. El suero de cada pocillo de la columna 1 se diluyó después 3 veces con tampón de bloqueo y se añadió a la columna 2. El suero de cada pocillo de la columna 2 se diluyó después 3 veces con tampón de bloqueo y se añadió a la columna 3. El procedimiento se repitió lo largo de las doce columnas de la placa de microtitulación. La placa de microtitulación se incubó 1 h a la temperatura ambiente. Se eliminó el suero de la placa y la placa se lavó tres veces con tampón de lavado. En cada pocillo se añadieron 100 µl/pocillo de IgG3-HRP de cabra anti-ratón diluida a 1:250 en tampón de bloqueo y se incubó 1 h a la temperatura ambiente. La IgG3-HRP anti-ratón se eliminó de la placa de microtitulación y la placa se lavó seis veces con tampón de lavado. En cada pocillo se añadió el sustrato de la HRP (200 µl de solución de ABTS + 30 % de H2O2 + 10 ml de tampón de citrato) a 100 µl/pocillo, se incubó 2 -20 minutos en la oscuridad y se determinó la cantidad de IgG3 anti-TNP espectrofotométricamente a 405 nm. De forma análoga, se determinaron la IgM anti-TNP y los Ab anti-TNP totales mediante el uso de IgM-HRP antiratón y de Ig-HRP anti-ratón, respectivamente.

Los resultados mostrados en la Figura 2 muestran adicionalmente que en las condiciones ensayadas, los compuestos Nº 7 y Nº 53 muestran unas reducciones de 3,4 y de 6,5 veces, respectivamente, en los niveles de IgG3 con respecto a los ratones con control de vehículo a un nivel de dosis de 30 mg/kg. La Figura 2 muestra adicionalmente que el compuesto Nº 53 muestra una reducción de 29,9 veces en los niveles de IgG3 con respecto a los ratones con control de vehículo al nivel de dosis de 60 mg/kg en las condiciones ensayadas.

Ejemplo 50: ensayo de desarrollo de artritis inducida por colágeno de tipo II en rata

Con objeto de estudiar los efectos de los compuestos de la presente invención sobre la enfermedad de artritis autoinmune se usó un modelo de artritis de desarrollo inducido por colágeno. A ratas Lewis hembras se les administraron inyecciones de colágeno el día 0. El colágeno bovino de tipo II se preparó en forma de una solución de 4 mg/ml en ácido acético 0,01 N. Se emulsionaron volúmenes iguales de colágeno y de coadyuvante incompleto de Freund mediante una mezcla manual hasta que una microesfera del material emulsionado mantiene su forma en agua. Cada roedor recibió una inyección de 300 µl de la mezcla en cada momento de inyección repartida en tres puntos subcutáneos de la espalda.

La administración oral del compuesto comenzó el día 0 y continuó hasta el día 16 con vehículo (5 % de NMP, 85 % de PEG 400, 10 % de Solutol) o los compuestos de la presente invención en vehículo o en control (por ejemplo, metotrexato) a unos intervalos diarios de 12 horas. Las ratas se pesaron los días 0, 3, 6, 9 -17 y se tomaron mediciones con calibre de los tobillos los días 9 -17. Se registraron los pesos corporales finales y después los animales fueron sacrificados el día 17. Después de sacrificarlos se extrajo sangre y se extirparon las extremidades posteriores y las rodillas. La sangre fue tratada adicionalmente para experimentos de farmacocinética así como en un ensayo de ELISA de anticuerpos anti-colágeno de tipo II. Las extremidades posteriores se pesaron y después las rodillas se conservaron en formalina al 10 %. Las patas y las rodillas fueron posteriormente procesadas para microscopía. Los hígados, bazos y timos también se pesaron. Los nervios ciáticos se prepararon para histopatología.

Las articulaciones de la rodilla y del tobillo se fijaron durante 1 -2 días y se descalificaron durante 4 -5 días. Las articulaciones del tobillo se cortaron longitudinalmente por la mitad, las rodillas se cortaron por la mitad de lo largo del plano frontal. Después las articulaciones se procesaron, se incluyeron, se seccionaron y se tiñeron con azul de toluidina. La calificación de las articulaciones se realizó de acuerdo con los siguientes criterios:

Inflamación de rodilla y tobillo

0 = normal

1 = infiltración mínima de células inflamatorias en el sinovio / tejido periarticular

2 = infiltración leve

3 = infiltración moderada con edema moderado

4 = infiltración notable con edema notable

5 = infiltración grave con edema grave

Pannus del tobillo

0 = normal

1 = infiltración mínima del pannus en el cartílago y el hueso subcondrial 2 = infiltración leve (< 1/4 de la tibia o los tarsales en zonas marginales) 3 = infiltración moderada (entre 1/4 y 1/3 de la tibia o los tarsales pequeños afectados en zonas marginales) 4 = infiltración notable (1/2 -3/4 de la tibia o los tarsales en zonas marginales) 5 = infiltración grave (> 3/4 de la tibia o los tarsales en zonas marginales, grave distorsión de la arquitectura global)

Pannus de la rodilla

0 = normal 1 = infiltración mínima del pannus en el cartílago y el hueso subcondrial 2 = infiltración leve (se extiende hasta más de 1/4 de la superficie o del área subcondrial de la tibia o del fémur) 3 = infiltración moderada (se extiende hasta > 1/4 pero < 1/2 de la superficie o del área subcondrial de la tibia o del fémur) 4 = infiltración notable (se extiende desde 1/2 hasta 3/4 de la superficie tibial o femoral) 5 = infiltración grave (cubre > 3/4 de la superficie)

Daños en el cartílago (tobillo, énfasis en los tarsales pequeños)

0 = normal 1 = mínimo = pérdida entre mínima y leve de la tinción con azul de toluidina sin ninguna pérdida obvia de condrocitos ni alteraciones en el colágeno 2 = leve = pérdida leve de la tinción con azul de toluidina con leves pérdidas localizadas (superficiales) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno 3 = moderada = pérdida moderada de la tinción con azul de toluidina unas pérdidas moderadas multifocales (profundas hasta la zona intermedia) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno, los tarsales más pequeños afectados hasta una profundidad de 1/2 -3/4 4 = notable = pérdida notable de la tinción con azul de toluidina con una notable pérdida multifocal (profundidad hasta la zona profunda) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno, 1 o más tarsales pequeños tienen una pérdida completa del grosor del cartílago 5 = grave = grave pérdida difusa de la tinción con azul de toluidina una pérdida multifocal grave (profundidad hasta la línea de calcificación) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno

Daños en el cartílago (rodilla, énfasis en los cóndilos femorales)

0 = normal 1 = mínima = pérdida entre mínima y leve de la tinción con azul de toluidina sin ninguna pérdida obvia de condrocitos ni alteraciones en el colágeno 2 = leve = pérdida leve de la tinción con azul de toluidina con leves pérdidas localizadas (superficiales) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno 3 = moderada = pérdida moderada de la tinción con azul de toluidina con unas pérdidas moderadas entre multifocales y difusas (profundas hasta la zona intermedia) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno 4 = notable = pérdida notable de la tinción con azul de toluidina con unas pérdidas notables entre multifocales y difusas (profundidad hasta la zona profunda) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno o en la superficie femoral individual con una pérdida total o prácticamente total 5 = grave = grave pérdida difusa de la tinción con azul de toluidina con una pérdida multifocal grave (profundidad hasta la línea de calcificación) de condrocitos y/o alteraciones en el colágeno de ambos fémures y/o tibias

Resorción ósea (tobillo)

0 = normal 1 = mínima = pequeñas áreas de resorción, no fácilmente apreciables como pocos aumentos, raros osteoclastos 2 = leve = áreas de resorción más numerosas, no fácilmente apreciables como pocos aumentos, osteoclastos más numerosos, < 1/4 de la tibia o los tarsales resorbidos en las zonas marginales 3 = moderada = obvia resorción del trabecular medular y del hueso cortical sin defectos en el espesor total de la corteza, pérdida de algunas trabéculas medulares, lesiones apreciables con pocos aumentos, osteoclastos más numerosos, desde 1/4 hasta 1/3 de la tibia o de los tarsales en zonas marginales 4 = notable = defectos en todo el espesor del hueso cortical, a menudo con distorsión del perfil del resto de la superficie cortical, notable pérdida del hueso medular, numerosos osteoclastos, 1/2 -3/4 de la tibia o de los tarsales en zonas marginales 5 = grave = defectos en todo el espesor del hueso cortical, a menudo con distorsión del perfil del resto de la superficie cortical, notable pérdida del hueso medular, numerosos osteoclastos, > 3/4 de la tibia o de los tarsales en zonas marginales, grave distorsión de la arquitectura global

Resorción ósea (rodilla)

0 = normal 1 = mínima = pequeñas áreas de resorción, no fácilmente apreciables con pocos aumentos, raros osteoclastos 2 = leve = áreas de resorción más numerosas, pérdida definitiva del hueso subcondrial que implica 1/4 de la superficie tibial o femoral (medial o lateral) 3 = moderada = obvia resorción del hueso subcondrial que implica > 1/4 pero < 1/2 de la superficie tibial o femoral (medial o lateral) 4 = notable = obvia resorción del hueso subcondrial que implica > 1/2 pero < 3/4 de la superficie tibial o femoral (medial o lateral) 5 = grave = distorsión de toda la articulación debido a una destrucción que implica > 3/4 de la superficie tibial o femoral (medial o lateral) Los análisis estadísticos de los pesos del cuerpo / extremidad, de los parámetros del AUC de la extremidad y de los parámetros histopatológicos fueron evaluados mediante el uso de una prueba de la t de Student u otro apropiado (ANOVA con post-test) con una significación establecida a un nivel de significación del 5 %. El porcentaje de inhibición del peso de la extremidad y el AUC se calcularon mediante el uso de la siguiente fórmula:

%de inhibición = A-B / AX 100

A = media de la enfermedad de control -media normal B = media tratada -media normal

Los resultados mostrados en la Figura 3 muestran el efecto del compuesto Nº 53 a unas dosis de 10, 30 y 60 mg/kg a intervalos de 12 horas sobre el diámetro medio del tobillo con el tiempo en un modelo de rata que desarrolla una artritis inducida por colágeno de tipo II en las condiciones ensayadas. Con respecto al control sólo con vehículo o al control con metotrexato, los compuestos de la presente invención mostraron una reducción significativa en el aumento del diámetro del tobillo inducido por la artritis con el tiempo.

Los resultados mostrados en la Figura 4 muestran el efecto de los compuestos Nº 7 y Nº 53 sobre la histopatología del tobillo en las categorías de inflamación, pannus, daño en el cartílago y resorción ósea según se ha descrito previamente en las condiciones ensayadas. Los resultados muestran una reducción significativa en una o más de las categorías por parte de uno de los compuestos de la presente invención (es decir, el compuesto Nº 53) en las condiciones ensayadas. La Figura 4 muestra adicionalmente que a 60 mg/kg existe una reducción estadísticamente significativa en todas las categorías de histopatología del tobillo para uno de los compuestos de la presente invención (es decir, el compuesto Nº 53) en las condiciones ensayadas. Esto sugiere que uno o más compuestos de la presente invención pueden ser útiles el tratamiento y la reducción de los síntomas de la enfermedad de la artritis.

Los resultados mostrados en la Figura 5 muestran el efecto de los compuestos Nº 7 y Nº 53 sobre la histopatología de la rodilla en las condiciones ensayadas. Los resultados demuestran una reducción dependiente de la dosis en la histopatología de la rodilla. Esto sugiere que uno o más compuestos de la presente invención pueden ser útiles el tratamiento y la reducción de los síntomas de la enfermedad de la artritis.

Los resultados mostrados en la Figura 6 muestran el efecto de los compuestos Nº 7 y Nº 53 son los niveles séricos de anti-colágeno de tipo II en las condiciones ensayadas. Los resultados muestran adicionalmente una reducción significativa a los niveles de dosis de 10, 20 y 60 mg/kg en los niveles séricos de anti-colágeno de tipo II para el compuesto Nº 53, lo que sugiere que uno o más compuestos de la presente invención pueden no ser útiles únicamente en el tratamiento y la reducción de los síntomas de la enfermedad del artritis, sino también puede ser útiles en la inhibición de la propia reacción autoinmune.

Los resultados mostrados en la Figura 7 muestran el efecto del compuesto Nº 7 a unas dosis de 10, 30 y 60 mg/kg a intervalos de 12 horas sobre el diámetro medio del tobillo con el tiempo en las condiciones ensayadas. Con respecto al control sólo con vehículo o al control con metotrexato, el compuesto muestra una reducción en el aumento del diámetro del tobillo inducido por la artritis con el tiempo en las condiciones ensayadas. Cuando se ensayaron en el mismo modelo, al menos otros cinco compuestos de la presente invención mostraron una eficacia comparable o incluso mayor.

Ejemplo 51: ensayo de artritis establecida en rata inducida por colágeno de tipo II

Con objeto de examinar la eficacia de respuesta a la dosis de los compuestos de la presente invención en la inhibición de la inflamación, la destrucción del cartílago y la resorción ósea de una artritis inducida por colágeno de tipo II establecida en 10 días en ratas, los compuestos se administraron por vía oral diariamente o dos veces al día durante 6 días.

Se anestesiaron ratas Lewis hembras y se les administraron inyecciones de colágeno preparadas y administradas según se describió previamente, el día 0. El día 6, los animales fueron anestesiados y se les administró una segunda inyección de colágeno. Se realizaron mediciones con calibre de las articulaciones del tobillo derecho e izquierdo normales (previas a la enfermedad) el día 9. Los días 10 -11, la artritis apareció de forma normal y las ratas se distribuyeron aleatoriamente en grupos de tratamiento. La distribución aleatoria se realizó después de que el edema de la articulación del tobillo estaba obviamente establecido y existían pruebas claras de una enfermedad bilateral.

Después de seleccionar un animal para su inclusión en el estudio, se inició el tratamiento por vía oral. A los animales se les administraron dosis de vehículo, de control (Enbrel) o de compuesto, dos veces al día o una vez al día (D.V.D.

o U.V.D. respectivamente). Las dosis se administraron los días 1 -6 mediante el uso de un volumen de 2,5 ml/kg (D.V.D.) o de 5 ml/kg (U.V.D.) para las soluciones orales. Las ratas se pesaron los días 1 -7 una vez establecida la artritis y las mediciones con calibre de los tobillos se realizaron diariamente. Los pesos corporales finales se registraron el día 7 y los animales se sacrificaron.

Los resultados mostrados en la Figura 8 muestran una reducción significativa en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo para el compuesto Nº 53 con una dosificación de una vez al día en las condiciones ensayadas. Los resultados de la Figura 9 muestran adicionalmente una reducción significativa en el aumento del diámetro medio del tobillo con el tiempo para el compuesto Nº 53 con una dosificación de dos veces al día en las condiciones

5 ensayadas. Esto sugiere que los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades autoinmunes tales como la artritis. Cuando se ensayaban en el mismo modelo, al menos otros cinco compuestos de la presente invención mostraban una eficacia comparable o incluso mayor en comparación con el compuesto Nº 53.

10 Ejemplo 52: ensayo de artritis inducida por coadyuvante

Cateterización intratecal de ratas

A ratas Lewis anestesiadas con isoflurano (de 200 -250 g) se les implantó un catéter intratecal (IT). Después de un

15 periodo de recuperación de 6 d, se usaron para los experimentos todos los animales excepto aquellos que parecían tener anomalías sensoriales o motoras (menos del 5 % de la cifra total). Para la administración IT, se inyectaron a través del catéter 10 µl del fármaco o de suero salino seguido de 10 µl de solución salina isotónica.

Artritis por coadyuvante y tratamiento farmacológico

20 Se inmunizaron ratas Lewis en la base de la cola con 0,1 ml de coadyuvante completo de Freund (CFA) el día 0 varios días después de la implantación del catéter (n = 6 / grupo). El tratamiento farmacológico (por ejemplo, uno o más compuestos de la presente invención o vehículo) se inició generalmente el día 8 y continuó diariamente hasta el día 20. Los signos clínicos de la artritis comenzaron generalmente el día 10, y el edema de la pata se determinó

25 cada dos días mediante una pletismometría por desplazamiento de agua.

Los resultados representados en la Figura 10 según el cambio medio en el volumen de la pata bajo los regímenes de dosificación indicados demuestran que en las condiciones ensayadas, el compuesto Nº 53 muestra una reducción dependiente de la dosis en el aumento del volumen medio de la pata medida en este sistema de modelo de artritis

30 inducida por coadyuvante. Estos resultados sugieren que uno o más de los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento de una o más de las enfermedades o afecciones descritas en este documento.

Los resultados representados en la Figura 11 demuestran que el compuesto Nº 53 no muestra toxicidad ni otras reacciones adversas en las condiciones ensayadas, medido por una ausencia de pérdida de peso.

35 Ejemplo 53: ensayo farmacocinético con roedores

Con objeto de estudiar la farmacocinética de los compuestos de la presente invención se agruparon un conjunto de ratones de 4 -10 semanas de edad de acuerdo con la siguiente tabla:

Grupo nº

Ratones / grupo Administración del compuesto desde el día 1 hasta el día 7

(mg/kg)

Vía Régimen

1

3 1 Po D.V.D. durante 7 días

2

3 3

3

3

10

4

3 30

5

3 60

Los compuestos de la presente invención se disuelven en un vehículo apropiado (por ejemplo, 5 % de 1-metil-2pirrolidinona, 85 % de polietilenglicol 400, 10 % de Solutor) y se administran por vía oral a intervalos de 12 horas diariamente. Todos los animales fueron sacrificados con CO2 2 horas después de la administración del compuesto

45 final. Inmediatamente se extrae sangre y se mantiene en hielo para el aislamiento del plasma. El plasma se aísla mediante centrifugación a 5.000 rpm durante 10 minutos. El plasma recogido se congela para la detección farmacocinética.

Se espera que los resultados muestren los parámetros farmacocinéticos tales como la absorción, la distribución, el 50 metabolismo, la excreción y la toxicidad de los compuestos de la presente invención.

Ejemplo 54: ensayo de activación de basófilos (Basotest)

El ensayo de baseotest se lleva a cabo mediante el uso del kit de reactivos Orpegen Pharma Basotest. Se preincuba 55 sangre completa heparinizada con el compuesto de ensayo o con disolvente a 37 ºC durante 20 min. Después la sangre se incuba con el tampón de estimulación del kit de ensayo (para cebar las células para la respuesta) seguido del alergeno (extracto de ácaros del polvo o extracto de césped) durante 20 min. El proceso de desgranulación se detiene incubando las muestras de sangre en hielo. Después las células se marcan con anti-IgE-PE para detectar los granulocitos basófilos, y con anti-gp53-FITC para detectar la gp53 (una glucoproteína expresada en los basófilos activados). Después de teñir las células sanguíneas de rojo, se lisan mediante la adición de una solución de lisis. Las células se lavan y se analizan mediante una citometría de flujo. Cuando se ensayaron los compuestos 7 y 53 en este ensayo, inhibieron la activación inducida por alérgenos de los granulocitos basófilos en el intervalo submicromolar.

Ejemplo 55: uso combinado de inhibidores de la PI3Kδ y de agentes que inhiben la producción o la actividad de la IgE

Los compuestos de la presente invención pueden presentar una eficacia sinérgica o aditiva cuando se administran junto con agentes que inhiben la producción o la actividad de la IgE. Algunos agentes que inhiben la producción de la IgE incluyen, por ejemplo, uno o más del ácido TEI-9874,2-(4-(6-ciclohexiloxi-2-naftiloxi)fenilacetamida) benzoico, rapamicina, análogos de rapamicina (es decir, rapálogos), inhibidores de la TORC1, inhibidores de la TORC2 y otros muchos compuestos que inhiben la mTORC1 y la mTORC2. Algunos agentes que inhiben la actividad de la IgE incluyen, por ejemplo, anticuerpos anti-IgE tales como Omalizumab y TNX-901.

Uno o más de los compuestos en cuestión capaces de inhibir la PI3Kδ son eficaces en el tratamiento de trastornos autoinmunes e inflamatorios (AIID), por ejemplo, de la artritis reumatoide. Si cualquiera de los compuestos provoca un nivel indeseado de producción de la IgE, se puede elegir administrarlo junto con un agente que inhiba la producción de la IgE o la actividad de la IgE. Adicionalmente, la administración de los inhibidores de PI3Kδ o de la PI3Kδ/γ de la presente invención junto con inhibidores de la mTOR también puede mostrar sinergia a través de un aumento en la inhibición de la ruta de la PI3K. Pueden usarse varios modelos in vivo e in vitro para establecer el efecto de dicho tratamiento de combinación sobre los AIID incluyendo, pero no se limitan a, (a) un ensayo de producción in vitro de anticuerpos contra los linfocitos B, (b) un ensayo de TNP in vivo, y (c) un modelo de artritis inducida por colágeno en roedores.

(a) ensayo de linfocitos B

Los ratones se sacrifican y se extraen los bazos y se dispersan en una malla de nailon para generar una suspensión de células individuales. Los esplenocitos se lavan (después de eliminar los eritrocitos por choque osmótico) y se incuban con microesferas conjugadas con anticuerpos anti-CD43 y anti-Mac-1 (Miltenyi Biotec). Las células unidas a las microesferas se separan de las células no unidas mediante el uso de un clasificador magnético celular. Las columnas magnetizadas conservan las células no deseadas y el resto de los linfocitos B se recogen del flujo continuo. Los linfocitos B purificados son estimulados con lipopolisacárido o con un anticuerpo anti-CD40 e interleucina 4. Los linfocitos B estimulados se tratan sólo con vehículo o con los inhibidores de la PI3Kδ de la presente invención, tales como el compuesto 53, con y sin inhibidores de la mTOR tales como rapamicina, rapálogos

o inhibidores de la mTORC1/C2. Se espera que los resultados demuestren que, en presencia únicamente de inhibidores de la mTOR (por ejemplo, rapamicina), existe poco o ningún efecto sustancial sobre la respuesta de la IgG y de la IgE. Sin embargo, en presencia de inhibidores de la PI3Kδ y de la mTOR, se espera que los linfocitos B muestren una disminución en la respuesta de la IgG en comparación con los linfocitos tratados sólo con vehículo, y se espera que los linfocitos B muestren una disminución en la respuesta de la IgE en comparación con la respuesta de los linfocitos tratados sólo con los inhibidores de la PI3Kδ.

(b)

ensayo de TNP

Se inmunizan ratones con TNP-Ficoll o con TNP-KHL y se tratan con: vehículo, un inhibidor de la PI3Kδ, por ejemplo, el compuesto 53 de la presente invención, un inhibidor de la mTOR, por ejemplo rapamicina, o un inhibidor de la PI3Kδ junto con un inhibidor de la mTOR tal como rapamicina. La IgE sérica específica para el antígeno se mide mediante un ELISA mediante el uso de placas recubiertas con TNP-BSA y anticuerpos marcados específicos de isotipo. Se espera que los ratones tratados únicamente con un inhibidor de la mTOR muestren poco o ningún efecto sustancial sobre la respuesta específica al antígeno de la IgG3 y no haya una elevación estadísticamente significativa en la respuesta de la IgE en comparación con el control de vehículo. También se espera que los ratones tratados tanto con el inhibidor de la PI3Kδ como con el inhibidor de la mTOR muestren una reducción en la respuesta específica al antígeno de la IgG3 en comparación con los ratones tratados únicamente con vehículo. Adicionalmente, los ratones tratados tanto con el inhibidor de la PI3Kδ como con el inhibidor de la mTOR muestran una disminución en la respuesta de la IgE en comparación con los ratones tratados únicamente con el inhibidor de la PI3Kδ.

(c) Modelo de artritis inducida por colágeno en ratas

Se anestesian ratas Lewis hembras y se les administran inyecciones de colágeno, preparadas y administradas según se describió previamente, el día 0. En el día 6, los animales son anestesiados y se les administra una segunda inyección de colágeno. Las mediciones con calibre de las articulaciones del tobillo derecho e izquierdo normales (previas a la enfermedad) se realizan el día 9. Los días 10 -11, la artritis apareció de forma normal y las ratas se distribuyeron aleatoriamente en grupos de tratamiento. La distribución aleatoria se realizó después de que el edema de la articulación del tobillo estaba obviamente establecido y existían pruebas claras de una enfermedad bilateral.

Después de haber seleccionado un animal para su inclusión en el estudio se inició el tratamiento. A los animales se les administra vehículo, inhibidor de la PI3Kδ, o inhibidor de la PI3Kδ junto con rapamicina. Las dosis se administran los días 1 -6. Las ratas se pesan los días 1 -7 después del establecimiento de la artritis, y las mediciones con calibre de los tobillos se realizan cada día. Los pesos corporales finales se registran el día 7 y los animales son sacrificados.

Se espera que el tratamiento de combinación que usa el inhibidor de la PI3Kδ y la rapamicina proporcione una eficacia mayor que el tratamiento únicamente con el inhibidor de la PI3Kδ.

Ejemplo 54: ensayo de inflamación pulmonar

Los compuestos de la invención fueron ensayados mediante el uso de uno o ambos de los ensayos de inflamación pulmonar inducida por LPS y el ensayo de inflamación pulmonar inducida por ovoalbúmina.

Para llevar a cabo el ensayo de inflamación pulmonar inducida por LPS los compuestos se administraron por vía oral. A un grupo se le administró únicamente vehículo y se usó dexametasona (5 mg/kg) en otro grupo como control positivo. La inflamación pulmonar se determinó 6 h después de la instilación intranasal del LPS (10 mg). Se evaluaron los siguientes parámetros: el número total de leucocitos y el número de neutrófilos en el lavado broncoalveolar (BAL).

El ensayo de inflamación pulmonar inducida por los compuestos, se administraron por vía oral. A un grupo se le administró únicamente vehículo, y se usó dexametasona (5 mg/kg) en otro grupo como control positivo. La inflamación pulmonar se determinó 4 días después de 4 días consecutivos de instilaciones intranasales de ovoalbúmina. Los compuestos fueron administrados mediante una sonda 30 min antes de cada exposición (4 exposiciones) a las dosis indicadas. Se evaluaron los siguientes parámetros: el número total de leucocitos y el número de neutrófilos en el lavado broncoalveolar (BAL).

Algunos ejemplos de resultados se muestran en la FIG. 15 (ensayo inducido por LPS) y en la FIG. 16 (ensayo inducido por OVA).

Aunque en este documento se han mostrado y descrito las formas de realización preferidas de la presente invención, resultará obvio para los expertos en la materia que dichas formas de realización se proporcionan únicamente a modo de ejemplo. A los expertos en la materia se les ocurrirán ahora numerosas variaciones, cambios y sustituciones sin desviarse de la invención. Debería entenderse que pueden emplearse varias alternativas a las formas de realización de la invención descritas en este documento en la práctica de la invención. Se pretende que las siguientes reivindicaciones definan el ámbito de la invención y los métodos y las estructuras en el ámbito de estas reivindicaciones y sus equivalentes estén cubiertos por las mismas.

LISTADO DE SECUENCIAS

<110> INTELLIKINE, INC.

<120> CIERTAS ENTIDADES QUÍMICAS, COMPOSICIONES Y MÉTODOS

<130> T3580 EP S3

<140> PCT/US2010/002020

<141>

<150> 12/503.776

<151>

<150> PCT/US09/00038

<151>

<150> PCT/US09/00042

<151>

<150> 61/201.146

<151>

<150> 61/194.294

<151>

<150> 61/009.971 5 <151>

<160> 2

<170> PatentIn versión 3.5 10

<210> 1

<211> 12

<212> PRT

<213> Secuencia artificial 15

<220>

<223> Descripción de la secuencia artificial: péptido sintético

<400> 1 20

<210> 2

<211> 9

<212> PRT 25 <213> Secuencia artificial

<220>

<223> Descripción de la secuencia artificial: péptido sintético

30 <400> 2

Claims (28)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto con la fórmula:

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto es:

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 10
3. 3. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto es el enantiómero S que tiene una pureza enantiomérica de más del 55 %, de más del 80 %, de más del 90 % o de más del 95 %.
4. 4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una 15 sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
5. 5. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento de un trastorno elegido de entre cáncer, trastornos óseos, enfermedad inflamatoria, enfermedad autoinmune, enfermedad del sistema nervioso,

   20 enfermedad metabólica, enfermedad respiratoria, trombosis y enfermedad cardíaca.
6. 6. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento de un trastorno elegido de entre asma, enfisema, alergia, dermatitis, artritis reumatoide, artrosis inflamatoria, enfermedades inflamatorias del

   25 intestino, trastorno pulmonar obstructivo crónico, psoriasis, esclerosis múltiple, trastornos relacionados con complicaciones diabéticas, lupus eritematoso, esclerodermia, enfermedad del injerto contra el hospedador, reestenosis, aterosclerosis y mastocitosis.
7. 7. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la 30 composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento del cáncer.
8. 8. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el cáncer se elige de entre cáncer de timo, de cerebro, de pulmón, espinocelular, de piel, de ojo, retinoblastoma, melanoma

   35 intraocular, de la cavidad oral y orofaríngea, de vejiga, gástrico, de estómago, de páncreas, de vejiga, de mama, cervical, de cabeza, de cuello, renal, de riñón, de hígado, de ovario, de próstata, colorrectal, de esófago, testicular, ginecológico, de tiroides, del SNC, del SNP, cáncer relacionado con el SIDA, sarcoma de Kaposi y cáncer inducido por virus.

   40 9. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el cáncer es una leucemia o un linfoma.

9. 10.

   El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que la leucemia se elige de entre leucemia mielógena aguda (AML), leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica de linfocitos T adultos, leucemia linfocítica crónica (CLL), tricoleucemia, mielodisplasia, trastornos mieloproliferativos, leucemia mielógena crónica (CML), mieloma múltiple (MM), síndrome mielodisplásico (MDS), leucemia por el virus linfótropo humano de tipo 1 (HTLV-1), mastocitosis y leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B.

10. 11.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el linfoma se elige de entre linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma inmunoblástico de linfocitos B, linfoma microcítico de linfocitos B hendidos, leucemia / linfoma por el virus linfótropo humano de tipo 1 (HTLV-1), linfoma de linfocitos T adultos, linfoma de las células de la corteza cerebral (MCL), enfermedad de Hodgkin, linfomas no Hodgkin, linfoma relacionado con el SIDA, linfoma de linfocitos T periféricos, linfoma de linfocitos T cutáneos, mieloma múltiple y linfoma folicular.

11. 12.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que la leucemia es la leucemia linfocítica crónica.

12. 13.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el linfoma es el linfoma no Hodgkin.

13. 14.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el linfoma es el linfoma difuso de linfocitos B grandes.

14. 15.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el linfoma es el linfoma de las células de la corteza cerebral.

15. 16.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el linfoma es el linfoma de linfocitos T adultos.

16. 17.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el trastorno es una enfermedad inflamatoria o una enfermedad autoinmune elegida de entre:

    (i)

    bursitis, lupus, encefalomielitis diseminada aguda (ADEM), enfermedad de Addison, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos (APS), anemia aplásica, hepatitis autoinmune, enfermedad celíaca, enfermedad de Crohn, diabetes sacarina (de tipo 1), síndrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, síndrome de Guillain-Barré (GBS), enfermedad de Hashimoto, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso, miastenia gravis, síndrome opsoclono-mioclono (OMS), neuritis óptica, tiroiditis de Ord, artrosis, uveorretinitis, pénfigo, periartritis, cirrosis biliar primaria, síndrome de Reiter, arteritis de Takayasu, arteritis temporal, anemia hemolítica autoinmune cálida, granulomatosis de Wegener, alopecia universal, enfermedad de Chagas, síndrome de fatiga crónica, disautonomía, endometriosis, hidradenitis supurativa, cistitis intersticial, neuromiotonía, sarcoidosis, esclerodermia, colitis ulcerosa, vitíligo, vulvodinia, apendicitis, arteritis, artritis, blefaritis, bronquiolitis, bronquitis, cervicitis, colangitis, colecistitis, corioamnionitis, colitis, conjuntivitis, cistitis, dacrioadenitis, dermatomiositis, endocarditis, endometritis, enteritis, enterocolitis, epicondilitis, epididimitis, fasciitis, fibrositis, gastritis, gastroenteritis, gingivitis, hepatitis, hidradenitis, ileítis, iritis, laringitis, mastitis, meningitis, mielitis, miocarditis, miositis, nefritis, omfalitis, ooforitis, orquitis, osteítis, otitis, pancreatitis, parotitis, pericarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, flebitis, neumonitis, proctitis, prostatitis, pielonefritis, rinitis, salpingitis, sinusitis, estomatitis, sinovitis, tendinitis, amigdalitis, uveítis, vaginitis, vasculitis y vulvitis;

    (ii)

    rinitis alérgica perenne, mesenteritis, peritonitis, acrodermatitis, angiodermatitis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, eczema, eritema multiforme, intertrigo, síndrome de Stevens Johnson, necrolisis epidérmica tóxica, alergia cutánea, reacción alérgica grave / anafilaxia, granulomatosis alérgica, conjuntivitis alérgica, coriorretinitis, queratoconjuntivitis infecciosa, queratoconjuntivitis, oftalmía del neonato, tracoma, inflamación ocular, blefaroconjuntivitis, pericoronitis, rinofaringitis, sialadenitis, inflamación del sistema musculoesquelético, enfermedad de Still de aparición adulta, enfermedad de Behcet, condrocalcinosis, dactilitis, síndrome de Felty, gota, artritis infecciosa, enfermedad de Lyme, artrosis inflamatoria, periartritis, infección por el virus de Ross River, síndrome de distrés respiratorio agudo, bronquitis aguda, sinusitis aguda, rinitis alérgica, asma, asma resistente grave, pleuritis, rinitis alérgica primaveral, estados asmáticos, traqueobronquitis, serositis, neuromielitis óptica, infección por poliovirus, síndrome de Alport, balanitis, orquitis del epidídimo, glomeruloesclerosis segmental focal, glomerulonefritis, nefropatía por IgA (enfermedad de Berger), orquitis, parametritis, enfermedad inflamatoria pélvica, pielitis, pielocistitis, hiperuricemia, aortitis, quilopericarditis, síndrome de Dressler,

    endarteritis, arteritis temporal extracraneal, arteritis asociada al VIH, arteritis temporal intracraneal, enfermedad de Kawasaki, linfangioflebitis, enfermedad de Mondor y periarteritis; y

    (iii) yeyunitis, mucositis, esteatohepatitis no alcohólica, hepatitis no vírica, pancreatitis autoinmune, perihepatitis, reservoritis, colitis pseudomembranosa, rectosigmoiditis, salpingoperitonitis, sigmoiditis, esteatohepatitis, síndrome de Churg Strauss, proctitis ulcerosa, síndrome de intestino irritable, inflamación gastrointestinal, enterocolitis aguda, anusitis, necrosis de Balser, diverticulitis, enterohepatitis, esofagitis eosinofílica, esofagitis, enteritis hemorrágica, infección por virus de hepatitis, hepatocolangitis, gastritis hipertrófica, ileocecitis, espondilitis anquilosante, artritis reumatoide, artritis reumatoide juvenil, psoriasis, artritis psoriática, lupus (cutáneo / sistémico / nefritis), SIDA, agammaglobulinemia, complejo relacionado con el SIDA, enfermedad de Brutons, síndrome de Chediak Higashi, inmunodeficiencia variable común, síndrome de DiGeorge, disgammaglobulinemia, inmunoglobulinodeficiencia, síndrome de Job, síndrome de Nezelof, trastorno bactericida fagocítico, síndrome de Wiskott Aldrich, asplenia, elefantiasis, esplenomegalia, linfadenopatía, linfedema, linfocele, síndrome de Nonne Milroy Meige, enfermedad del bazo, esplenomegalia, timoma, enfermedad del timo, perivasculitis, pleuropericarditis, poliarteritis nodosa, tromboangitis, tromboangitis obliterante, tromboendocarditis, tromboflebitis y EPOC.

17. 18.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en el que la enfermedad inflamatoria o autoinmune es el asma.

18. 19.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en el que la enfermedad inflamatoria o autoinmune es la artritis reumatoide.

19. 20.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso en la mejora de los síntomas asociados con la artritis reumatoide eligido de entre uno más de una reducción en el edema de las articulaciones, una reducción en los niveles séricos anti-colágeno, una reducción en la resorción ósea, una reducción en el daño al cartílago, una reducción en el pannus y una reducción en la inflamación.

20. 21.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento de una enfermedad respiratoria.

21. 22.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 21, en el que la enfermedad respiratoria se elige de entre asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), bronquitis crónica, enfisema y bronquiectasia.

22. 23.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 5 a 22, en el que se va a administrar un segundo agente terapéutico en el tratamiento.

23. 24.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 23, en el que el segundo agente terapéutico que se va a administrar en el tratamiento es un agente quimioterapéutico.

24. 25.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 24, en el que el agente quimioterapéutico se elige de entre inhibidores de la mitosis, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos intercalantes, inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores del ciclo celular, enzimas, inhibidores de la topoisomerasa, modificadores de la respuesta biológica, antihormonas, inhibidores de la angiogénesis, antiandrógenos, agentes alquilantes, sulfonatos de alquilo, aziridinas, etileniminas, metilamelaminas, mostazas nitrogenadas, nitrosureas, antimetabolitos, análogos del ácido fólico, análogos de purina, reponedores de ácido fólico, taxanos, agentes antihormonales que actúan regulando o inhibiendo la acción hormonal sobre los tumores, antiestrógenos, antiandrógenos, agonistas de la LHRH, terapias fotodinámicas, nitrosureas, sulfonatos de alquilo, triazenos, compuestos que contienen platino, alcaloides de la vinca, taxoides, epipodofilinas, inhibidores de la DHFR, inhibidores de la deshidrogenasa de IMP, inhibidores de la reductasa de ribonucleótidos, análogos de uracilo, análogos de citocina, análogos de purina, análogos de la vitamina D, inhibidores de la isoprenilación, neurotoxinas dopaminérgicas, inhibidores de ciclo celular, inhibidores del MDR, inhibidores de la ATPasa de Ca2+, inhibidores de la quinasa de tirosina, inhibidores del proteasoma e inhibidores de la mTOR.

25. 26.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 24, en el que el agente quimioterapéutico se elige de entre el grupo que consiste en imatinib, bortezomib, bicalutamida, adriamicina, tiotepa, ciclofosfamida, busulfano, improsulfano, piposulfano, benzodopa, carbocuona, meturedopa, uredopa, altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosfaoramida trimetilolomelamina, clorambucilo,

    clornafazina, ifosfamida, mecloretamina, óxido de clorhidrato de mecloretamina, melfalano, novembicina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostaza de uracilo, clorozotocina, fotemustina, nimustina, ranimustina, antibióticos tales como aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, caliqueamicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, cromomicinas, daunorubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxoL-norleucina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina, 5-fluorouracilo (5-FU), pteropterina, trimetrexato, denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato, ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didaoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona, aminoglutetimida, mitotano, trilostano, ácido frolínico, aceglatona, aldofosfamida, glicosida, ácido aminolevulínico, amsacrina, bestrabucilo, bisantreno, edatraxato, defofamina, demecolcina, diazicuona, elfomitina, acetato de eliptinio, etoglucida, nitrato de galio, lentinano, lonidamina, mitoguazona, mitoxantrona, mopidamol, nitracrina, pentostatina, fenamet, pirarrubicina, ácido podofilínico, 2-etilhidrazida, procarbazina, polisacárido K, razoxano, sizofiran, espirogermanio, ácido tenuazónico, triazicuona, 2,2’,2"-triclorotrietilamina, uretano, manomustina, mitobronitol, mitolactol, pipobromano, gacitosina, arabinósido ("Ara-C"), paclitaxel, docetaxel, ácido retinoico, esperamicinas, raloxifeno, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY 117018, onapristona, toremifeno, flutamida, nilutamida, leuprolida, goserrelina, 6-tioguanina, mercaptopurina, cisplatino, carboplatino, vinblastina, platino, mitomicina C, vinaristina, vinorrelbina, navelbina, novantrona, tenipósido, daunomicina, aminopterina, xeloda, ibandronato, camptotecina-11 (CPT-11), inhibidor de la topoisomerasa RFS 2000, difluorometilornitina (DMFO), tamoxifeno, megestrol, leuprolida, flutamida, vertoporfina (BPD-MA), ftalocianina, fotosensibilizante Pc4, demetoxihipocrelina A (2BA-2-DMHA), estramustina, carmustina (BCNU), lomustina (CCNU), treosulfano, dacarbazina, temozolomida, oxaliplatino, vindesina, DHA-paclitaxel, taxoprexina, PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, xiotax, ANG1005, paclitaxel-EC-1, paclitaxel conjugado con glucosa, etopósido, fosfato de etopósido, topotecan, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecan, irinotecan, crisnatol, mitomicina C, diclorometotrexato, edatrexato, tiazofurina, ribavirina, EICAR, hidroxiurea, deferoxamina, 5-fluorouracilo (5-FU), ratitrexed, tegafururacilo, capecitabina, arabinósido de citosina, fludarabina, mercaptopurina tioguanina, EB 1089, CB 1093, KH 1060, lovastatina, ión 1-metil-4-fenilpiridinio, estaurosporina, actinomicina D, dactinomicina, bleomicina A2, bleomicina B2, peplomicina, doxorrubicina, doxorrubicina liposómica pegilada, epirrubicina, pirarrubicina, verapamilo, tapsigargina, talidomida, lenalidomida, axitinib (AG013736), bosutinib (SKI-606), cediranib (AZD2171), dasatinib (BMS-354825), erlotinib, gefitinib, lapatinib, lestaurtinib (CEP-701), neratinib (HKI-272), nilotinib, semaxanib, sunitinib SU11248, toceranib, vandetanib (ZD6474), vatalanib (PTK787, PTK/ZK), trastuzumab, bevacizumab, rituximab, cetuximab, panitumumab, ranibizumab, sorafenib, everolimus, alemtuzumab, gemtuzumab, ozogamicin, temsirolimus, ENMD-2076, PCI-32765, AC220, dovitinib lactato (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992, SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120, AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (A-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647, XL228, rapamicina, ridaforolimus, AP23573, AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, oblimersen, gemcitabina, leucovorina, pemetrexed, prednisolona, dexametasona, campatecina, plicamicina, asparraginasa, metopterina, porfiromicina, leurosidina, leurosina, trabectedina, procarbazina, discodermolida y hexametil melamina, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

26. 27.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 23, en el que el segundo agente terapéutico se elige de entre

    (i)

    un agente que inhibe la producción o la actividad de la IgE, o

    (ii)

    un fármaco antiinflamatorio, o

    (iii) anticoagulantes, o

    (iv)

    un agente bioterapéutico, o

    (v)

    un broncodilatador, o

    (vi)

    un agente antiangiogénico, o

    (vii) un agente diurético, o

    (viii) una hormona o un péptido o una proteína terapéutica, o

    (ix)

    terapia de radiación, o

    (x)

    un anticuerpo terapéutico.

27. 28.

    El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 27, en el que

    (i)

    el agente que inhibe la producción o la actividad de la IgE se elige de entre TEI-9874, ácido 2-(4-(6ciclohexiloxi-2-naftiloxi)fenilacetamida) benzoico, rapamicina, análogos de la rapamicina, inhibidores de la TORC1, inhibidores de la TORC2, anticuerpos anti-IgE, omalizumab y TNX-901; o

    (ii)

    el fármaco antiinflamatorio no esteroideo se elige de entre ácido acetilsalicílico, ibuprofeno, naproxeno, indometacina, nabumetona, tolmetina, un corticosteroide, prednisona, cloroquina e hidroxicloroquina; o

    (iii) el anticoagulante se elige de entre ácido acetilsalicílico, heparina y cumadina; o

    (iv)

    el agente bioterapéutico se elige de entre factor de necrosis tumoral, interferón α, interferón γ, IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, GM-CSF, Herceptina (trastuzumab), T-DM1, bevacizumab, cetuximab, panitumumab, rituximab y

    tositumomab; o

    (v)

    el broncodilatador se elige de entre efedrina, adrenalina, fenoterol, formoterol, isoprenalina, metaproterenol, fenilefrina, fenilpropanolamina, pirbuterol, reproterol, rimiterol, salbutamol, salmeterol, terbutalin, isoetarina, tulobuterol, orciprenalina o (-)-4-amino-3,5-dicloro-a-[[[6-[2-(2-piridinil)etoxi]hexil]-amino]metil] bencenometanol; o

    5 (vi) el agente antiangiogénico se elige de entre inhibidores de la MMP-2 (metaloproteinasa de la matriz 2), inhibidores de la MMP-9 (metaloproteinasa de la matriz 9) e inhibidores de la COX-II (ciclooxigenasa II); o

    (vii) el agente diurético se elige de entre amilorida, anticolinérgicos, ipratropio, atropina y oxitropio; o

    (viii) la hormona o el péptido o la proteína terapéutica se elige de entre cortisona, hidrocortisona, prednisolona, xantinas, aminofilina, teofilinato de colina, teofilinato de lisina, teofilina, insulina y glucagón; o

    10 (ix) la terapia de radiación se elige de entre terapia con haz externo, terapia de radiación interna, radiación con implantes, radiocirugía estereotáctica, terapia de radiación sistémica, radioterapia o braquiterapia intersticial permanente o temporal.
28. 29. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la

    15 composición farmacéutica de la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 27, en el que el segundo agente terapéutico es un anticuerpo terapéutico elegido de entre cetuximab, panitumumab, trastuzumab, rituximab, tositumomab, alemtuzumab, bevacizumab, gemtuzumab, un anticuerpo anti-CD20 y un anticuerpo antireceptor de la quinasa de tirosina.