PT2456444E - Derivado de adenina como inibidor de pi3k - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADO DE ADENINA COMO INIBIDOR DE PI3K"

Este pedido reivindica o beneficio do Pedido de Patente U.S. N2 12/503.776, entrado a 15 de Julho de 2009, que é uma continuação em parte do Pedido Internacional N2 PCT/US09/00038, entrado a 5 de Janeiro de 2009, e do Pedido Internacional N2 PCT/US09/00042, entrado a 5 de Janeiro de 2009, ambos reivindicando o beneficio dos Pedidos Provisórios com os Nos de Série 61/009.971 entrado a 4 de Janeiro de 2008, 61/194.294 entrado e 26 de Setembro de 2008, e 61/201.146 entrado a 5 de Dezembro de 2008. Incorporam-se integralmente e para todos os objectivos por citação, todos os pedidos de patente referidos acima.

ESTADO DA TÉCNICA ANTERIOR À INVENÇÃO A actividade das células pode ser regulada por sinais externos que estimulem ou inibam acontecimentos intracelulares. Os processos pelos quais os sinais estimulantes ou inibitórios são transmitidos até às e dentro das células para originar uma reacção intracelular é referido como transdução dos sinais. Ao longo das últimas décadas, têm sido elucidadas cascatas de acontecimentos de transdução de sinais, verificando-se que desempenham um papel central numa série de respostas biológicas.

Verificou-se que os defeitos em diversas componentes dos caminhos de transdução de sinal explicam um grande número de doenças, incluindo numerosas formas de cancro, patologias inflamatórias, patologias metabólicas, doenças vasculares e neuronais (Gaestel et al. , Current Medicinal Chemistry (2007) 14: 2214-2234).

As quinases representam uma classe importante de moléculas sinalizadoras. As quinases podem ser classificadas, em geral, como proteína quinases e lípido quinases, e algumas quinases exibem especificidades duais. As proteína quinases são enzimas que fosforilam outras proteínas e/ou elas próprias (isto é, autofosforilação) . Podem classificar-se em geral as proteína quinases em três grupos principais com base na sua utilização de substratos: tirosina quinases que fosforilam predominantemente os substratos nos resíduos tirosina (por exemplo, erb2, receptor PDGF, receptor EGF, receptor VEGF, src, abl) , serina/treonina quinases que fosforialm predominantemente os substratos em resíduos serina e/ou treonina (por exemplo, mTorCl, mTorC2, ATM, ATR, DNA-PK, Akt), e quinases com especificidade dual que fosforilam substratos em resíduos tirosina, serina e/ou treonina.

As lípido quinases são enzimas que catalizam a fosforilação de lípidos. Estes enzimas, e os lípidos fosforilados resultantes bem como as moléculas orgânicas biologicamente activas derivadas de lípidos desempenham papéis em muitos processos fisiológicos diferentes, incluindo a proliferação celular, a migração, a adesão, e a diferenciação. Algumas lipido quinases estão associadas a membranas e elas catalisam a fosforilação dos lípidos contidos nas membranas celulares ou a elas associados. Incluem-se nos exemplos destes enzimas as fosfoinositido(s) quinases (tais como as Pl3-quinases, PI4-quinases), diacilglicerol quinases, e esfingosina quinases. 0 caminho de sinalização das fosfoinositido 3-quinases (PI3K) é um dos sistemas mais fortemente mutado nos cancros humanos. A sinalização de PI3K é também um factor chave em muitas outras doenças nos seres humanos. A sinalização de PI3K está envolvida em muitos estados de doença incluindo a dermatite de contacto alérgica, a artrite reumatóide, a osteoartrite, as doenças inflamatórias dos intestinos, a patologia obstrutiva crónica pulmonar, a psoriase, a esclerose múltipla, a asma, patologias relacionadas com complicações diabéticas, e complicações inflamatórias do sistema cardiovascular tal como a sindrome coronária aguda.

As PI3K são membros de uma família única e conservada de lipido quinases intracelulares, que fosforilam o grupo 3'-OH de fosfatidilinositóis ou de fosfoinositidos. A família PI3K inclui 15 quinases com diferentes especificidades para substratos, perfis de expressão, e modos de regulação (Katso et al.r 2001) . A classe I de PI3K (pllOa, ρΙΙΟβ, ρΙΙΟδ, e ρΙΙΟγ) são tipicamente activadas pelas tirosina quinases ou por receptores acoplados a proteína G para gerarem PIP3, que recruta efectivadores a jusante tais como os do caminho Akt/PDKl, mTOR, as quinases da família Tec, e as GTPases da família Rho. As PI3-K das classes II e III desempenham um papel chave na mobilidade de moléculas intracelular através da síntese de PI(3)P e de PI(3,4)P2. As PIKK são as proteína quinases que controlam o crescimento celular (mTORCl) ou que monitorizam a integridade genómica (ATM, ATR, DNA-PK, e hSmg-1). A isoforma delta (δ) da PI3K da class I tem sido implicada, em especial, numa série de doenças e de processos biológicos. A PI3K δ é expressa sobretudo em células hematopoiéticas incluindo leucócytos tais como células T, células dendrítica, neutrófilos, células mastro, células B, e macrófagos. A PI3K δ está integralmente envolvida em funções do sistema imunológico dos mamíferos, tais como a função das células T, a activação das células B, a activação das células mastro, a função das células dendriticas, e a actividade dos neutrófilos. Devido ao seu papel integral na função do sistema imunológico, a PI3K δ também está envolvida em diversas doenças relacionadas com reacções imunológicas indesejáveis, tais como reacções alérgicas, doenças inflamatórias, angiogénese mediada por inflamação, artrite reumatóide, doenças auto-imunes tais como lúpus, asma, enfisema e outras doenças respiratórias. Outras PI3K da classe I envolvidas na função do sistema imunológico incluem a PI3K γ, que desempenha um papel na sinalização de leucócitos e tem sido implicada na inflamação, na artrite reumatóide, e em doenças auto-imunes tais como o lúpus.

Incluem-se nos mediadores a jusante do caminho de transdução do sinal de PI3K a Akt e o alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR). A Akt possui um domínio com homologia com a plecstrina (PH) que se liga a PIP3, levando à activação da Akt quinase. A Akt fosforila muitos substratos e é um efectivador central a jusante da PI3K para várias respostas celulares. Uma função importante da Akt é aumentar a actividade de mTOR, por fosforilação de TSC2 e por outros mecanismos. A mTOR é uma serina-treonina quinase relacionada com as lípido quinases da família PI3K. A mTOR tem sido implicada numa larga gama de processos biológicos, incluindo o crescimento celular, a proliferação celular, a mobilidade celular e a sobrevivência. Uma desregulação do caminho de mTOR tem sido reportada em diversos tipos de cancro. A mTOR é uma quinase multifuncional que integra sinais para factores de crescimento e para nutrientes para regular a tradução de proteínas, a absorção de nutrientes, a autofagia, e a função das mitocôndrias.

Pela sua natureza, as quinases, em especial as PI3K, são alvos preferenciais para o desenvolvimento de fármacos. Continua a existir uma necessidade de inibidores de PI3K adequados para o desenvolvimento de fármacos. A invenção presente diz respeito a esta necessidade e também proporciona vantagens relacionadas por proporcionar novas classes de inibidores de quinase.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

Num aspecto, a invenção presente proporciona um composto com a Fórmula I adiante ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, em que

Num aspecto, a invenção presente proporciona um composto com a Fórmula Ia adiante ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, em que

Noutro aspecto da invenção, proporciona-se uma composição farmacêutica que inclua um excipiente aceitável do ponto de vista farmacêutico e o composto com a Fórmula I oru Ia proporcionado neste documento. Em algumas concreizações, a composição assume a forma de um liquido, de um sólido, de um semi-sólido, de um gel, ou de um aerossol.

Noutro aspecto da invenção, proporciona-se um método ex vivo de inibir uma fosfatidilinositol-3 quinase (PI3 kquinase), que inclui: proporcionar-se um contacto da PI3 quinase com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos descritos neste documento. Por exemplo, o passo de proporcionar o contacto envolve a utilização de um ou mais compostos com qualquer uma das fórmulas proporcionadas neste documento. Em algumas concretizações, o passo de proporcionar o contacto inclui proporcionar-se o contacto com uma célula que contenha a referida PI3 quinase. Em algumas concretizações da invenção, o composto com a Fórmula I ou Ia destina-se a ser utilizado no tratamento de um sujeito que sofra de uma patologia associada a um mau funcionamento de um ou mais tipos de PI3 quinase. Alguns dos tipos de exemplo das doenças que envolvem um mau funcionamento de um ou mais tipos de PI3 quinases são seleccionados de entre o conjunto constituído por doenças auto-imunes, artite reumatóide, doença respiratória, reacções alérgicas, e diversos tipos de cancro.

Em algumas concretizações da invenção, o composto com a Fórmula I ou Ia destina-se a ser utilizado no tratamento de um sujeito que sofra de artrite reumatóide ou de uma doença respiratória.

Em algumas concretizações, a utilização inclui administrar-se ao sujeito um segundo agente terapêutico.

Noutro aspecto ainda da invenção, o composto com a Fórmula I ou Ia destina-se a ser utilizado no tratamento de uma doença que manifeste uma resposta imunológica indesejável. A utilização inclui o passo de se administrar a um sujeito que dele necessite o composto com a Fórmula I ou Ia, numa quantidade que seja eficaz para melhorar a referida resposta imnológica indesejável. Em algumas concretizações, o um ou mais compostos inibem a activação de células B independente das células T, tal como o demonstra uma diminuição da produção do IgG3 anti-TNP em mais do que cinco vezes, quando se administra a um animal em teste uma quantidade inferior a cerca de 30 mg/kg a título de dose duas vezes ao dia.

Em algumas concretizações, a doença tratada está associada a um inchaço ou a dor de uma articulação de um sujeito. A utilização pode ser eficaz para melhorar um ou mais dos sintomas da artrite reumatóide tal como o demonstra uma diminuição do diâmetro médio da articulação em pelo menos cerca de 10 % ao fim de 17 dias e/ou uma diminuição do diâmetro do tornozelo em pelo menos 5-10 % ou mais ao fim de diversos dias a semanas de tratamento, incluindo por exemplo uma diminuição do diâmetro do tornozelo de pelo menos 5 % ao fim de 7 dias de tratamento. Noutra concretização, a resposta imunológica indesejável é demonstrada por um aumento da produção de anticorpos anti-colagéneo do tipo II, e a utilização de um ou mais compostos destes diminui o teor em anticorpos anti-colagéneo do tipo II no soro com um de ED50 menor do que cerca de 10 mg/kg.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

As novas caracteristicas da invenção estão descritas especificamente nas reivindicações apensas. Conseguirá obter-se uma melhor compreensão das caracteristicas e das vantagens da invenção através da descrição pormenorizada que se segue que inclui concretizações ilustrativas, nas quais se utilizam os princípios da invenção, e dos desenhos que a acompanham, nos quais: A FIG. 1 representa um exemplo de protocolo para medir a produção de anticorpos específicos para TNP independente das células T in vivo. A FIG. 2 representa o número de vezes da diminuição da resposta a antigénios específica para TNP com IgG3, proporcionada pelos compostos 7 e 53 com a fórmula IV, em comparação com um controlo contendo veículo, aquando de uma administração oral. FIG. 3 representa o efeito dependente da dose de uma administração oral duas vezes ao dia do composto 53 com a fórmula IV, na diminuição do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo de desenvolvimento da artrite induzido por colagénio em ratos. Também estão representados os resultados dos ratos de controlo não artríticos, dos ratos de controlo artríticos aos quais se administrava um veículo para controlo negativo, e ratos artríticos de controlo tratadas duas vezes ao dia com metotrexato. A FIG. 4 representa o efeito dependente da dose dos compostos 7 e 53 com a fórmula IV ma melhoria da histopatologia do tornozelo, quando administrados num modelo de desenvolvimento da artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos de controlo artríticos a que se administrou veículo para controlo negativo, ou metotrexato. A FIG. 5 representa o efeito dependente da dose dos compostos 7 e 53 com a fórmula IV no melhoramento da histopatologia do joelho quando administrados num modelo de desenvolvimento de artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos artríticos de controlo a que se administrou veículo como controlo negativo ou metotrexato como controlo positivo. A FIG. 6 representa o efeito dependente da dose dos compostos 7 e 53 com a fórmula IV, na diminuição do teor em anticorpos anti-colagénio de tipo II in vivo, quando administrados num modelo de desenvolvimento de artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos artríticos a que se administrou veículo a título de controlo negativo, ou metotrexato. A FIG. 7 representa o efeito dependente da dose do composto 7 com a fórmula IV na melhoria da histopatologia do tornozelo quando é administrado num modelo de desenvolvimento de artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos artríticos de controlo a veículo e de ratos artríticos de controlo tratados com metotrexato. A FIG. 8 representa o efeito dependente da dose do composto 53 com a fórmula IV na melhoria da histopatologia do tornozelo quando é administrado diariamente num modelo de desenvolvimento de artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos artríticos de controlo a veículo e de ratos artríticos de controlo tratados com metotrexato. FIG. 9 representa o efeito dependente da dose do composto 53 com a fórmula IV na melhoria da histopatologia do tornozelo quando é administrado duas vezes ao dia num modelo de desenvolvimento de artrite induzida por colagénio em ratos. Também se representam os resultados de ratos artríticos de controlo a veículo e de ratos artríticos de controlo tratados com Enbrel. A FIG. 10 representa o efeito dependente da dose do composto 53 com a fórmula IV sobre a massa média ao longo do tempo de artrite induzida por adjuvante. A FIG. 11 representa o efeito dependente da dose do composto 53 com a fórmula IV sobre o aumento do volume médio da pata num modelo de artrite induzida por adjuvante. A FIG. 12 representa o efeito do composto 292 ("Cpd-A") com a fórmula V-A2 na diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo de desenvolvimento da artrite induzida por colagénio em ratos. A FIG. 13 representa o efeito do composto 292 ("Cpd-A") com a fórmula V-A2 sobre a histopatologia do tornozelo num modelo de desenvolvimento da artrite induzida por colagénio em ratos. A FIG. 14 representa o efeito do composto 292 ("Cpd-A") com a fórmula V-A2 na diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo de desenvolvimento da artrite induzida por colagénio em ratos. A FIG. 15 representa o efeito do composto 292 ("Cpd-A") com a fórmula V-A2 na inibição do influxo total de leucócitos neutrófilos induzido por LPS num modelo de inflamação pulmonar induzida por LPS em ratos. A FIG. 16 representa o efeito do composto 292 ("Cpd-A") com a fórmula V-A2 na inibição do

influxo total de eosinófilos induzido por OVA LPS num modelo alérgico da inflamação pulmonar em ratos. A FIG. 17 representa o efeito do composto 200 ("Cpd-B") com a fórmula V-A2 na diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo do desenvolvimento da artrite induzido por colagénio em ratos. A FIG. 18 representa o efeito do composto 270 ("Cpd-C") com a fórmula V-A2 na diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo do desenvolvimento da artrite induzido por colagénio em ratos. A FIG. 19 representa o efeito do composto 196 ("Cpd-D") com a fórmula V-A2 na diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo ao longo do tempo num modelo do desenvolvimento da artrite induzido por colagénio em ratos.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

Embora se tenham mostrado e descrito concretizações preferidas da invenção presente neste documento, será óbvio para os entendidos na técnica que as referidas concretizações são apresentadas meramente a titulo de exemplo. Numerosas variações, alterações, e substituições poderão agora ocorrer aos entendidos na técnica, que não se afastam da invenção. Deve ser entendido que se podem empregar diversas alternativas ''as concretizações da invenção descritas neste documento na prática da invenção. Pretende-se que as reivindicações apensas definam o âmbito da invenção e que os métodos e estruturas no âmbito destas reivindicações e os seus equivalentes se encontrem adentro do seu âmbito. A não ser aonde se definam de outro modo, todos os termos técnicos e científicos utilizados neste documento têm os mesmos significados que são habitualmente entendidos pêlos indivíduos com conhecimentos da técnica à qual esta invenção pertence. Todas as patentes e publicações a que se faz referência neste documento são incorporadas por citação.

Tal como se utiliza na especificação e nas reivindicações, a forma singular "o", "a", "um" e "uma" inclui referências plurais a não ser que o contexto claramente dite o contrário.

Tal como se utiliza neste documento, "agente" ou "agente biologicamente activo" refere-se a uma espécie biológica, farmacêutica, ou a um composto químico ou a outra espécie. Incluem-se nos exemplos não limitativos uma molécula inorgânica ou orgânica simples ou complexa, um péptido, uma proteína, um oligonucleótido, um anticorpo, um derivado de anticorpo, um fragmento de anticorpo, um derivado de vitamina, um hidrato de carbono, uma toxina, ou um composto quimioterapêutico. Podem sintetizar-se diversos compostos, por exemplo, moléculas e oligómeros (por exemplo, oligopéptidos e oligonucleótidos) , e compostos orgânicos sintéticos com base em diversas estruturas nucleares. Além disto, diversas fontes naturais podem proporcionar compostos para despiste, tais como extractos de plantas ou de animais, e outros semelhantes. Um indivíduo com conhecimentos técnicos suficientes poderá facilmente entender que não há limite em relação à estrutura dos agentes da invenção presente. 0 termo "agonista", tal como se utiliza neste documento, refere-se a um composto com a capacidade de iniciar ou de aumentar uma função biológica de uma proteína alvo, quer pela inibição da actividade, quer da expressão da proteína alvo. Deste modo, o termo "agonista" é definido no contexto do papel biológico do polipéptido alvejado. Embora os agonistas preferidos neste documento interactuem preferivelmente com (por exemplo se liguem a) o alvo, os compostos que iniciam ou que aumentam uma actividade biológica do polipéptido alvo por interactuarem com outros membros do caminho de transdução do sinal do qual o polipéptido alvo é um membro também estão incluídos especificamente nesta definição.

Os termos "antagonista" e "inibidor" são utilizados a título intercambiável, e eles referem-se a um composto com a capacidade de inibir uma função biológica de uma proteína alvo, quer pela inibição da actividade, quer da expressão da proteína alvo. Portanto, os termos "antagonistas" e "inibidores" são definidos no contexto do papel biológico da proteína alvo. Se por um lado os antagonistas preferidos neste documento interactuam em particular com (por exemplo ligam-se a) o alvo, também se incluem em particular nesta definição os compostos que inibem uma actividade biológica da proteína alvo por interactuarem com outros membros do caminho de transdução do sinal do qual a proteína alvo é um membro. Uma actividade biológica preferida inibida por um antagonista está associada ao desenvolvimento, ao crescimento, ou à disseminação de um tumor, ou a uma reacção imunológica indesejável tal como se manifesta numa doença auto-imune.

Um "agente anti cancro", "agente anti tumoral" ou "agente quimioterapêutico" refere-se a qualquer agente que seja útil no tratamento de um estado neoplásico. Uma classe de agentes anti cancro inclui os agentes quimioterapêuticos. "Quimioterapia" significa a administração de m ou mais fármacos quimioterapêuticos e/ou de outros agentes, a um doente canceroso, por diversos métodos, incluindo endovenoso, oral, intramuscular, intraperitoneal, intravesical, subcutâneo, transdérmico, bucal, ou por inalação ou sob a forma de um supositório. 0 termo "proliferação celular" refere-se a um fenómeno devido ao qual o número de células mudou em resultado da sua divisão. Este termo também inclui o crescimento celular através do qual a morfologia das células mudou (por exemplo, aumentando o tamanho) consistente com um sinal proliferativo.

Os termos "co-administração", "administrado em combinação com", e os seus equivalentes gramaticais, tal como se utilizam neste documento, incluem a administração de dois ou mais agentes a um animal de tal modo que ambos os agentes e/ou os seus metabolitos estejam presentes no animal ao mesmo tempo. Inclui-se na co-administração a administração em simultâneo de composições em separado, a administração de composições em separado em alturas diferentes, ou a administração duma composição na qual estejam presentes ambos os agentes. 0 termo "quantidade eficaz" ou "quantidade eficaz em terapia" referem-se àquela quantidade de um composto descrito neste documento que é suficiente para conseguir a aplicação pretendida, incluindo mas não se limitando ao tratamento de uma doença, tal como se define adiante. A quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico pode variar dependendo da aplicação pretendida (in vitro ou in vivo), ou do sujeito e do estado de doença que se esteja a tratar, por exemplo, do peso e da idade do sujeito, da severidade do estado de doença, do modo de administração e de outros semelhantes, que pode ser facilmente determinada pelos indivíduos com conhecimentos na técnica. 0 termo também se aplica a uma dose que induza uma resposta específica nas células alvo, por exemplo diminuição da adesão de plaquetas e/ou da migração celular. A dose específica variará dependendo dos compostos específicos seleccionados, do regime de doseamento que se vai seguir, de se contemplar a administração em combinação com outros compostos, da altura da administração, do tecido ao qual se faz a administração, e do sistema físico que se utilizará para a entrega.

Tal como se utilizam neste documento, "tratamento" ou "tratar", ou "produzir um efeito paliativo" ou "melhorar" são utilizados neste documento a título intercambiável. Estes termos referem-se a uma via para se obterem os resultados benéficos ou pretendidos, incluindo mas não se limitando a benefício terapêutico e/ou a benefício profiláctico. Por benefício terapêutico significa-se a eliminação ou a melhoria da patologia subjacente que se esteja a tratar. Além disto, consegue-se um benefício terapêutico com a eliminação ou a melhora de um ou mais dos sintomas fisiológicos associados à patologia subjacente, de tal modo que se observe no doente uma melhoria, apesar de o doente ainda poder continuar a sofrer da patologia subjacente. Para benefício profiláctico, podem administrar-se as composições a um doente em risco de desenvolver uma doença específica, ou a um doente que se queixe de um ou mais dos sintomas fisiológicos de uma doença, mesmo quando não tenha ainda sido feito um diagnóstico desta doença.

Um "efeito terapêutico", tal como se utiliza este termo neste documento, inclui um benefício terapêutico e/ou um benefício profilático tal como se descreveram acima. Um efeito profiláctico inclui atrasar-se ou eliminar-se o aparecimento de uma doença ou estado, atrasar-se ou eliminar-se o início de sintomas de uma doença ou estado, travar, parar, ou inverter a progressão de uma doença ou estado, ou qualquer combinação destes. 0 termo "sal aceitável do ponto de vista farmacêutico" refere-se a sais derivados de uma série de contra-iões orgânicos e inorgânicos bem conhecidos na técnica. Podem formar-se sais de adição a ácido aceitáveis do ponto de vista farmacêutico com ácidos inorgânicos e com ácidos orgânicos. Incluem-se nos ácidos inorgânicos a partir dos quais se podem derivar sais, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e outros semelhantes. Incluem-se nos ácidos orgânicos dos quais se podem derivar sais, por exemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido salicílico e outros semelhantes. Podem formar-se sais de adição aceitáveis do ponto de vista farmacêutico a base a partir de bases inorgânicas e orgânicas. Incluem-se nas bases inorgânicas a partir das quais se podem derivar sais, por exemplo, sódio, potássio, lítio, amónio, cálcio, magnésio, ferro, zinco, cobre, manganês, alumínio, e outros semelhantes. Incluem-se nas bases orgânicas a partir das quais se podem derivar sais, por exemplo, aminas primárias, secundárias, e terciárias, aminas substituídas incluindo as aminas substituídas que ocorram na natureza, aminas cíclicas, resinas básicas de permuta iónica, e outros semelhantes, em particular tais como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, e etanolamina. Em algumas concretizações, o sal de adição a base aceitável do ponto de vista farmacêutico é seleccionado de entre sais de amónio, potássio, sódio, cálcio, e magnésio. "Veiculo aceitável do ponto de vista farmacêutico" ou "excipiente aceitável do ponto de vista farmacêutico" inclui todos e quaisquer solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotónicos e de atraso de absorção, e outros semelhantes. A utilização destes meios e agentes para substâncias activas do ponto de vista farmacêutico é bem conhecida na técnica. Excepto tanto quanto qualquer meio ou agente convencional seja incompatível com o ingrediente activo, a sua utilização nas composições terapêuticas da invenção está contemplada. Também se podem incorporar nas composições ingredientes activos suplementares. "Transdução do sinal" é um processo durante o qual os sinais estimuladores ou inibidores são transmitidos para dentro e no interior de uma célula para originarem respostas intracelulares. Um modulador de um caminho de transdução do sinal refere-se a um composto que modula a actividade de uma ou mais proteínas celulares mapeadas no mesmo caminho de transdução do sinal. Um modulador pode aumentar (agonista) ou suprimir (antagonista) a actividade de uma molécula de sinalização. 0 termo "inibição selectiva" ou "inibindo selectivamente", tal como se aplica a um agente biologicamente activo, refere-se à capacidade do agente para diminuir selectivamente a actividade de sinalização do alvo, em comparação com a actividade de sinalização fora do alvo, por interacção directa ou indirecta com o alvo. 0 termo "B-ALL", tal como se utiliza neste documento, refere-se a Leucemia Linfoblástica Aguda de células B. "Sujeito" refere-se a um animal, tal como um mamífero, por exemplo um ser humano. Os métodos descritos neste documento podem ser úteis tanto na terapêutica de seres humanos como em aplicações veterinárias. Em algumas concretizações, o doente é um mamífero, e em algumas concretizações, o doente é humano. "Terapia de radiação" significa expor um doente, utilizando métodos de rotina e composições conhecidas do praticante, a emissores de radiação tais como radionucleótidos que emitam partículas alfa (por exemplo, radionuclidos de tório e de actínio), emissores de transferência linear de radiação de baixa energia (LET) (isto é, emissores beta), emissores de conversão do electrão (por exemplo estrôncio 89 e samário 153 EDTMP, ou a radiação de energia elevada, incluindo sem limitação raios-x, raios gama, e neutrões. "Precursor" pretende indicar um composto que pode ser transformado em condições fisiológicas ou por solvólise num composto biologicamente activo descrito neste documento. Deste modo, o termo "precursor de fármaco" refere-se a um precursor de um composto biologicamente activo que seja aceitável do ponto de vista farmacêutico. Um precursor de fármaco pode ser inactivo quando é administrado a um sujeito, mas é transformado in vivo num composto activo, por exemplo, por hidrólise. 0 composto precursor de fármaco tem amiúde vantagens na sua solubilidade, compatibilidade com tecidos ou libertação diferida no organismo de um mamífero (veja-se, por exemplo, Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), págs. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdão). Pode encontrar-se uma descrição dos precursores de fármacos em Higuchi, T., et ai., "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14, e em Bioreversible Carriers in Drug Design, editado por Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association e Pergamon Press, 1987, ambos os quais são incorporados por completo neste documento por citação. 0 termo "precursor de fármaco" também pretende incluir quaisquer veículos covalentemente ligados, que libertem o composto activo in vivo quando esse precursor de fármaco for administrado a um sujeito mamífero. Os precursores de fármacos, que são compostos activo, tal como se descrevem neste documento, podem ser preparados modificando grupos funcionais presentes no composto activo de um tal modo que as modificações sejam clivadas, quer por uma manipulação de rotina, quer in vivo, para se obter o composto activo de origem. Incluem-se nos precursores de fármacos compostos nos quais um grupo hidroxilo, amino ou mercapto tenha sido ligado a um grupo qualquer que, quando o precursor de fármaco for administrado a um sujeito mamífero, se cliva para dar respectivamente um grupo hidroxilo livre, amino livre ou mercapto livre. Incluem-se nos exemplos de precursores de fármacos, mas não se limitam a estes, os derivados acetato, formato e benzoato de um álcool, ou os derivados acetamida, formamida e benzamida de um grupo funcional amina, do composto activo, e outros semelhantes. 0 termo "in vivo" refere-se a um acontecimento que ocorre no corpo de um sujeito. 0 termo "in vitro" refere-se a um acontecimento que ocorre fora do corpo de um sujeito. Por exemplo, um ensaio in vitro inclui qualquer ensaio que se leve a cabo e não seja um ensaio num sujeito. Os ensaios in vitro incluem ensaios baseados em células nos quais se empregam células, vivas ou mortas. Os ensaios in vitro também incluem ensaios isentos de células nos quais não se empregam nenhumas células intactas. A não ser aonde se afirmar alho em contrário, as estruturas representadas neste documento também significam que estão incluídos compostos que apenas difiram na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, os compostos com as estruturas presentes nas quais o hidrogénio esteja substituído por deutério ou por trítio, ou em que átomo de carbono esteja substituído por carbono enriquecido em 13C ou em 14C, estão incluídos no âmbito desta invenção.

Os compostos da invenção presente também podem conter proporções não naturais de isótopos atómicos num ou mais dos átomos que constituem estes compostos. Por exemplo, os compostos podem ser radiologicamente marcados com isótopos radioactivos, tal como por exemplo tritio (3H) , iodo 125 (1251) ou carbono 14 (14C) . Todas as variações isotópicas dos compostos da invenção presente, quer radioactivas, quer não, estão incluídas no âmbito da invenção presente.

Quando se utilizam neste documento gamas para os valores de propriedades físicas, tais como a massa molecular, ou propriedades químicas, tais como fórmulas químicas, todas as combinações e subcombinações das gamas e as suas concretizações específicas neste documento são consideradas como estando incluídas. 0 termo "cerca de", quando se refere a um número ou a uma gama numérica, significa que o número ou a gama numérica referidos são uma aproximação adentro da variabilidade experimental (ou adentro do erro experimental estatístico), e portanto o número ou a gama numérica podem variar entre, por exemplo, de 1 % a 15 % em relação ao número ou à gama numérica descritos. 0 termo "possuindo" (e termos relacionados tais como "contendo" ou "inclui" ou "tendo" ou "incluindo") inclui aquelas concretizações, por exemplo, uma concretização de qualquer composição material, de uma composição, um método, ou um processo, ou outros semelhantes, que "consista em" ou "seja essencialmente constituído/a por" as características descritas.

As seguintes abreviaturas e termos têm os significados indicados ao longo de todo este documento: PI3-K = Fosfoinositido 3-Quinase; PI = Fosfatidilinositol; PDK = Quinase Dependente de Fosfoinositido; DNA-PK = Quinase Proteica Dependente de Ácido Nucleico Desoxi-ribose; PTEN = Fosfatase e homólogo de Tensina eliminados no coromossoma Dez; PIKK = Quinase Semelhante a Fosfoinositido Quinase; SIDA = síndrome de ImunoDeficiênia Adquirida; VIH = Vírus de Imunodeficiência Humano; Mel = Iodeto de Metilo; P0C13 = Oxicloreto de Fósforo; KCNS = IsoTiocianato de Potássio; CCF = Cromatografia em Camada Fina; MeOH = Metanol; e CHC13 = Clorofórmio.

Aa abreviatura utilizadas neste documento têm os seus significados convencionais adentro das técnicas químicas e biológicas. "Alquilo" refere-se a um grupo hidrocarboneto com uma cadeia linear ou ramificada constituído apenas por átomos de carbono e de hidrogénio, não contendo nenhuma insaturação, contendo entre um e dez átomos de carbono (por exemplo, alquilo C1-C10). Sempre que apareça neste documento uma gama numérica tal como "1 a 10", refere-se a qualquer um dos inteiros na gama referida; por exemplo, "1 a 10 átomos de carbono" significa que o grupo alquilo pode ser constituído por 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., até e incluindo 10 átomos de carbono, embora a definição presente também diga respeito à ocorrência do termo "alquilo" quando não seja designada nenhuma gama numérica. Em algumas concretizações, tratar-se de um grupo alquilo C1-C4. Incluem-se nos grupos alquilo típicos embira não se limitem de modo nenhum a estes, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo isobutilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, e outros semelhantes. O alquilo liga-se ao resto da molécula por uma ligação simples, por exemplo, metilo (Me), etilo (Et) , n-propilo, 1-metiletilo (iso-propilo), n-butilo, n-pentilo, 1, 1-dimetiletilo (t-butilo), 3-metil-hexilo, 2-metil-hexilo, e outros semelhantes. A não ser aonde se declarar algo em contrário na especificação, um grupo alquilo está opcionalmente substituído com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -0C(0)-Ra, —N (Ra) 2, -C(0)Ra, -C (O) ORa, -OC (O) N (Ra) 2, -C (O) N (Ra) 2, -N (Ra) C (O) ORa, -N (Ra) C (O) Ra, - N (Ra) C (O) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (O) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tORa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03 (Ra) 2 em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Alquilarilo" refere-se a um grupo -(alquil)arilo no qual arilo e alquilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam opcionalmente substituídos com um ou mais dos substituintes descritos como substituintes adequados respectivamente para arilo e para alquilo. "Alquil-hetarilo" refere-se a um grupo -(alquil)hetarilo, em que hetarilo e alquilo sejam tal como descrotos neste documento e que sejam opcionalmente substituídos com um ou mais dos substituintes descritos como substituintes respectivamente para arilo e para alquilo. "Alquil-heterocicloalquilo" refere-se a um grupo -(alquil)heterociclilo em que o alquilo e o heterocicloalquilo sejam tal como se definiram neste documento e que sejam opcionalmente substituídos com um ou mais dos substituintes descritos respectivamente como sendo substituintes adequados para heterocicloalquilo e para alquilo.

Uma espécie "alceno" refere-se a um grupo constituído por pelo menos dois átomos de carbono e com pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono, e uma espécie "alcino" refere-se a um grupo constituído por pelo menos dois átomos de carbono e com pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono. A espécie alquilo, quer saturada quer insaturada, pode ser ramificada, ter cadeia linear, ou ser cíclica. "Alcenilo" refere-se a um grupo com uma cadeia hidrocarboneto, linear ou ramificada, constituído apenas por átomos de carbono e de hidrogénio, contendo pelo menos uma ligação dupla, e contendo dois a dez átomos de carbono (i.e. alcenilo C2-Ci0) . Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "2 a 10" refere-se ao conjunto dos inteiros dentro da gama referida; por exemplo, "2 a 10 átomos de carbono" significa que o grupo alcenilo pode ser constituído por 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., até e incluindo 10 átomos de carbono. Em determinadas concretizações, um alcenilo inclui dois a oito átomos de carbono. Noutras concretizações, um alcenilo inclui dois a cinco átomos de carbono (por exemplo, alcenilo C2-C5) . O alcenilo liga-se ao resto da molécula por uma ligação simples, por exemplo, etenilo (i.e., vinilo), prop-l-enilo (i.e., alilo), but-l-enilo, pent-l-enilo, penta-1,4-dienilo, e outros semelhantes. A não ser aonde se afirmar algo em contrário em particular nesta especificação, um grupo alcenilo é substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -0C(0)-Ra, —N (Ra) 2, -C(0)Ra, -C (O) ORa, -OC (O) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2r -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Alcenil-cicloalquilo" refere-se a um grupo -(alcenil)cicloalquilo no qual alcenilo e cicloalquilo sejam tal como se descreve neste documento e que seja opcionalmente substituído com um ou mais dos substituintes descritos como aceitáveis respectivamente para alcenilo e para cicloalquilo. "Alcinilo" refere-se a um grupo com uma cadeia hidrocarboneto linear ou ramificada constituído apenas por átomos de carbono e de hidrogénio, contendo pelo menos uma ligação tripla, contendo dois a dez átomos de carbono (i.e. alcinilo C2-Cio)· Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "2 a 10" refere-se ao conjunto dos inteiros dentro da gama referida; por exemplo, "2 a 10 átomos de carbono" significa que o grupo alcinilo pode ser constituído por 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., até e incluindo 10 átomos de carbono. Em determinadas concretizações, um alcinilo inclui dois a oito átomos de carbono. Noutras concretizações, um alcinilo tem dois a cinco átomos de carbono (por exemplo, alcinilo C2-Cs) . 0 alcinilo liga-se ao resto da molécula por uma ligação simples, por exemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, e outros semelhantes. A não ser aonde se afirme algo em contrário em particular na especificação, um grupo alcinilo será substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que serão independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, -SRa, -OC(Q)-Ra, —N (Ra) 2, -C (0) Ra, -C (0) 0Ra, -0C (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Alcinil-cicloalquilo" refere-se a um grupo - (alcinil)cicloalquilo em que alcinilo e cicloalquilo sejam tal como se descrevem neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos respectivamente como apropriados para alcinilo e para cicloalquilo. "Carboxaldeído" refere-se a um grupo -(C=0)H. "Carboxilo" refere-se a um grupo -(C=0)0H. "Ciano" refere-se a um grupo -CN. "Cicloalquilo" refere-se a um grupo monocíclico ou policíclico contendo apenas carbono e hidrogénio, e que pode ser saturado ou parcialmente insaturado. Incluem-se nos grupos cicloalquilo os grupos contendo entre 3 e 10 átomos anelares (i.e., cicloalquilo C3-C10) . Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "3 a 10" refere-se ao conjunto dos inteiros dentro da gama referida; por exemplo, "3 a 10 átomos de carbono" significa que o grupo cicloalquilo pode ser constituído por 3 átomos de carbono, etc., até e incluindo 10 átomos de carbono. Em algumas concretizações, será um grupo cicloalquilo C3-C8. Em algumas concretizações, será um grupo cicloalquilo C3-C5. Incluem-se nos exemplos ilustrativos de cicloalquilo, embora não se limitem a estas, as seguintes espécies: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo, ciclo-octilo, ciclononilo, ciclodecilo, norbornilo, e outros semelhantes. A não ser aonde for especificamente afirmado algo em contrário, um grupo cicloalquilo é substituído opcionalmente com um ou mais subst ituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, - SRa, -OC (O) -Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C(0)0R\ -OC (0) N (Ra) 2, -C (Ο) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03 (Ra) 2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Cicloalquil-alcenilo" refere-se a um grupo -(cicloalquil)alcenilo em que o cicloalquilo e o alcenilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como sendo apropriados, respectivamente, para cicloalquilo e para alcenilo. "Cicloalquil-heterocicloalquilo" refere-se a um grupo - (heterocicloalquil)alcenilo em que o heterocicloalquilo e o alcenilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos subst ituintes descritos como sendo apropriados, respectivamente, para heterocicloalquilo e para alcenilo. "Cicloalquil-heteroarilo" refere-se a um grupo -(cicloalquil)heteroarilo em que o cicloalquilo e o heteroarilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como sendo apropriados, respectivamente, para cicloalquilo e para heteroarilo. 0 termo "alcoxilo" refere-se ao grupo -O-alquilo, incluindo entre 1 e 8 átomos de carbono com uma configuração linear, ramificada, ou cíclica, e combinações destas ligadas à estrutura de origem por um oxigénio. Incluem-se nos exemplos metoxilo, etoxilo, propoxilo, isopropoxilo, ciclopropiloxilo, ciclohexiloxilo e outros semelhantes. "Alcoxilo inferior" refere-se a grupos alcoxilo contendo um a seis carbonos. Em algumas concretizações, alquilo C1-C4 é um grupo alquilo incluindo uma cadeia linear ou ramificada, e contenha entre 1 e 4 átomos de carbono. 0 termo "alcoxilo substituído" refere-se a grupos alcoxilo nos quais o constituinte alquilo seja substituído (i.e., -0-(alquilo substituído)). A não ser aonde se aformar especificamente algo em contrário na especificação, a espécie alquilo de um grupo alcoxilo é substituída opcionalmente com um ou mais subst ituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, SRa, -0C(0)-Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (0) 0Ra, -oc (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, -N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) , Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03 (Ra) 2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. 0 termo "alcoxicarbonilo" refere-se a um grupo com a fórmula (alcoxi) (C=0)- ligado através do carbono do carbonilo, em que o grupo alcoxilo tenha o número indicado de átomos de carbono. Deste modo um grupo alcoxicarbonilo Ci-C6 é um grupo alcoxilo tendo 1 a 6 átomos de carbono ligado através do seu oxigénio a um grupo carbonilo de ligação. "Alcoxicarbonilo inferior" refere-se a um grupo alcoxicarbonilo em que o grupo alcoxilo seja um grupo alcoxilo inferior. Em algumas concretizações, alcoxilo Ci-C4 é um grupo alcoxilo que inclui grupos alcoxilo tanto com cadeia linear como ramificada e com 1 a 4 átomos de carbono. 0 termo "alcoxicarbonilo substituído" refere-se ao grupo (alquilo substituído)-0-C(0)-, em que o grupo esteja ligado à estrutura restante através da funcionalidade carxonilo. A não ser aonde se afirmar algo em contrário especificamente na especificação, a espécie alquilo de um grupo alcoxicarbonilo é substituída opcionalmente com um ou mais subst ituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimet ilsilanilo, -0Ra, SRa, -0C(0)-Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (0) 0Ra, -0C (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0R8 (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03 (Ra) 2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Acilo" refere-se aos grupos (alquil)-C(0)-, (aril)-C(0)-, (heteroaril)-C(0)-, (heteroalquil)-C(0)-, e (heterocicloalquil)-C(0)-, em que o grupo s eligue à parte restante da molécula pela funcionalidade carbonilo. Em algumas concretizações, trata-se de um grupo acilo Ci-Ci0 que se refere ao número total de átomos da cadeia ou do anel da porção alquilo, arilo, heteroarilo ou heterocicloalquilo do grupo aciloxilo mais o átomo de carbono do carbonilo no acilo, i.e. três outros átomos do anel ou da cadeia, além do de carbonilo. Quando o grupo R for um heteroarilo ou heterocicloalquilo, o anel hetero ou os átomos da cadeia contribuem para o número total de átomos do anel ou da cadeia. A não ser aonde se afirmar algo em contrário especificamente na especificação, o "R" de um grupo aciloxilo é substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, SRa, -0C (0) -Ra, —N (Ra) 2, -C (0) Ra, -C (0) 0Ra, -0C (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2( -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2, cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Aciloxilo" refere-se a um grupo R(C=0)0- no qual "R" seja alquilo, arilo, heteroarilo, heteroalquilo, ou heterocicloalquilo, que sejam tal como descritos neste documento. Em algumas concretizações, trata-se de um grupo aciloxilo C1-C4 que se refere ao número total de átomos da cadeia ou do anel da parte alquilo, arilo, heteroarilo ou heterocicloalquilo do grupo aciloxilo mais o átomo de carbono do carbonilo do acilo, isto é, três outros carbonos cadeia ou do anel mais o carbonilo. Quando o grupo R for heteroarilo ou heterocicloalquilo, os átomos do anel hetero ou da cadeia contribuem paar o número total de átomos da cadeia ou do anel. A não ser aonde se afirmar especificamente algo em contrário na especificação, o "R" de um grupo aciloxilo é substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, - SRa, -0C (O) -Ra, —N (Ra) 2r -C (0) Ra, -C (0) 0Ra, -OC (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N(Ra)S(0)tR (em que t seja 1 ou 2- S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou PC>3(Ra)2/· cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Amino" ou "amina" refere-se a um grupo —N(Ra) 2, cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo, a não ser aonde se afirmar especificamente algo em contrário na especificação. Quando um grupo -N(Ra) 2 tiver dois Ra diferentes de hidrogénio, eles podem ser combinados com o átomo de azoto para formar um anel com 4, 5, 6, ou 7 membros. Por exemplo, -N(Ra) 2 pretende incluir, mas não ser limitado a, 1-pirrolidinilo e 4-morfolinilo. A não ser aonde se afirmar algo em contrário nesta especificação, um grupo amino está substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, - SRa, -0C(0)-Ra, —N (Ra) 2, -C (0) Ra, -C (0) 0Ra, -OC (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2r -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2, em que os Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo e todas estas espécies possam ser substituídas opcionalmente tal como se define neste documento. 0 termo "amino substituído" também se refere a N-óxidos dos grupos -NHRd, e NRdRd, tal como se descreveram acima. Podem preparar-se os N-óxidos por tratamento do grupo amino correspondente com, por exemplo, peróxido de hidrogénio ou ácido m-cloroperoxibenzóico. 0 especialista na técnica está familiarizado com as condições reaccionais para se levar a cabo a N-oxidação. "Amida" ou "amido" refere-se uma espécie química com a fórmula -C(0)N(R)2 ou -NHC(0)R, em que R seja seleccionado de entre o conjunto constituído por hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (ligado por um carbono do anel) e heteroalicíclico (ligado por um carbono do anel), espécies estas que podem todas ser substituídas opcionalmente. Em algumas concretizações trata-se de um grupo amida C1-C4, que inclui o carbonilo da amida no número total de carbonos no grupo. 0 R2 no -N(R)2 da amida pode ser opcionalmente tomado em conjunto com o azoto ao qual se liga para formar um anel com 4, 5, 6 ou 7 membros. A não ser aonde se afirmar algo em contrário na especificação, um grupo amida é substituído opcionalmente e independentemente com um ou mais dos substituintes tais como se descreveram neste documento para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, ou heterocicloalquilo. Uma amida pode ser uma molécula de aminoácido ou de péptido ligada a um composto com a Fórmula (I), formando deste modo um precursor de fármaco. Qualquer amina, hidroxilo, ou cadeia lateral com carboxilo dos compostos descritos neste documento pode ser transformado em amida. Os processos e os grupos específicos para produzir as amidas referidas são do conhecimento dos entendidos na técnica, e podem ser facilmente encontrados nas fontes de referência tais como em Greene & Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque, N.Y., 1999, que se incorporara inteiramente neste documento por citação. "Aromático" ou "arilo" referem-se a um grupo aromático com seis a dez átomos anelares (por exemplo, aromático C6-Ci0 ou arilo C6-Ci0) que tenha pelo menos um anel com um sistema de electrões pi conjugados que seja carbocíclico (por exemplo, fenilo, fluorenilo, e naftilo). Os grupos bivalentes formados a partir de derivados substituídos de benzeno e que apresentam as valências livres em átomos anelares são designados como grupos fenileno substituídos. Os grupos bivalentes derivados de hidrocarbonetos policíclicos univalentes cujos nomes terminam em "-ilo", por remoção de um átomo de hidrogénio do átomo de carbono com a valência livre, são designados adicionando o sufixo "-ideno" ao nome do grupo univalente correspondente, por exemplo, um grupo naftilo com dois pontos de ligação é denominado um naftilideno. Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "6 a 10" refere-se a todos os inteiros adentro da gama referida; por exemplo, "6 a 10 átomos anelares" significa que o grupo arilo pode ser constituído por 6 átomos anelares, 7 átomos anelares, etc., até e incluindo 10 átomos anelares. O termo inclui grupos monocíclicos ou grupos policíclicos de anéis fundidos (i.e., anéis que partilhem pares adjacentes de átomos anelares) . Excepto aonde se afirmar algo em contrário nesta especificação, uma espécie arilo é substituída opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, - SRa, -OC (O) -Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (O) ORa, -OC (O) N (Ra) 2, -C (O) N (Ra) 2, -N (Ra) C (O) ORa, -N (Ra) C (O) Ra, - N (Ra) C (O) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (O) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tORa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2f cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Aralquilo" ou "arilalquilo" referem-se a um grupo (aril)alquilo- em que arilo e alquilo sejam tal como descritos neste documento e que seja substituído opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como substituintes adequados respectivamente para arilo e para alquilo. "Éster" refere-se um grupo químico com a fórmula -COOR, em que R seja seleccionado de entre o conjunto constituído por alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (ligado através de um carbono anelar) e heteroalicíclico (ligado através de um carbono anelar). Qualquer grupo amina, hidroxilo, ou cadeia lateral carboxilo dos compostos descritos neste documento, pode ser esterifiçado. Os procedimentos e os grupos específicos necessários para produzir estes ésteres são do conhecimento dos especialistas na técnica e podem ser facilmente encontrados em fontes de referência tais como Greene & Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque, N.Y., 1999, que se incorpora integralmente neste documento por citação. A não ser aonde seja afirmado algo em contrário nesta especificação, um grupo éster é substituído opcionalmente com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, - SRa, -0C (0)-Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (0) 0Ra, -oc (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou PC>3(Ra)2, cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Fluoroalquilo" refere-se a um grupo alquilo, tal como se definiu acima, que seja substituído com um ou mais grupos fluoro, tal como se definiram acima, por exemplo, trifluorometilo, difluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1-fluorometil-2-fluoroetilo, e outros semelhantes. A parte alquilo do grupo fluoroalquilo pode ser substituída opcionalmente tal como se definiu acima para um grupo alquilo. "Halo", "halogeneto", ou, em alternativa, "halogéneo" significa fluoro, cloro, bromo ou iodo. Os termos "haloalquilo", "haloalcenilo", "haloalcinilo" e "haloalcoxilo" incluem estruturas alquilo, alcenilo, alcinilo e alcoxilo que sejam substituídas com um ou mais grupos halo ou com as suas combinações. Por exemplo, os termos "fluoroalquilo" e "fluoroalcoxilo" incluem grupos haloalquilo e haloalcoxilo, respectivamente, nos quais halo seja flúor. "Heteroalquilo", "heteroalcenilo" e "heteroalcinilo" incluem grupos alquilo, alcenilo e alcinilo opcionalmente substituídos que tenham um ou mais dos seus átomos da cadeia do seu esqueleto seleccionados de entre átomos diferentes de carbono, por exemplo, oxigénio, azoto, enxofre, fósforo ou as combinações destes. Pode ser conferida uma gama numérica, por exemplo heteroalquilo Ci-C4 que se refere ao comprimento total da cadeia, que neste exemplo tem o comprimento de 4 átomos. Por exemplo, um grupo -CH2OCH2CH3 é referido como um heteroalquilo "C4", que inclui o centro heteroatómico na descrição do comprimentos atómico da cadeia. A ligação ao resto da molécula pode ser quer através de um heteroátomo, quer através de um carbono na cadeia do heteroalquilo. Um grupo heteroalquilo pode ser substituído com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, - SRa, -0C (0) -Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (0) 0Ra, -0C (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03(Ra)2/· cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Heteroalquilarilo" refere-se a um grupo -(heteroalquil)arilo em que heteroalquilo e arilo sejam tal como descritos neste documento e que seja substituído opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como substituintes aceitáveis respectivamente para heteroalquilo e para arilo. "Heteroalquil-heteroarilo" refere-se a um grupo -(heteroalquil)heteroarilo em que heteroalquilo e heteroarilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como sendo substituintes adequados respectivamente para heteroalquilo e para heteroarilo. "Heteroalquil-heterocicloalquilo" refere-se a um grupo -(heteroalquil)heterocicloalquilo no qual heteroalquilo e heteroarilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como substituintes adequados respectivamente para heteroalquilo e para heterocicloalquilo. "Heteroalquilcicloalquilo" refere-se a um grupo -(heteroalquil)cicloalquilo em que heteroalquilo e cicloalquilo sejam tal como descritos neste documento e que sejam substituídos opcionalmente com um ou mais dos substituintes descritos como sendo substituintes adequados respectivamente para heteroalquilo e para cicloalquilo. "Heteroarilo" ou, em alternativa, "heteroaromático", refere-se a um grupo aromático com 5 a 18 membros (por exemplo, heteroarilo C5-C13) que inclui um ou mias heteroátomos anelares seleccionados de entre azoto, oxigénio e enxofre, e que pode ser um sistema anelar monocilico, biciclico, triciclico ou tetraciclico. Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "5 a 18" refere-se a todos os inteiros adentro dessa gama; por exemplo, "5 a 18 átomos anelares" significa que o grupo heteroarilo pode ser constituído por 5 átomos anelares, 6 átomos anelares, etc., até e incluindo 18 átomos anelares. Os grupos bivalentes derivados de grupos heteroarilo univalentes cujos nomes terminam em "-ilo" por remoção de um átomo de hidrogénio do átomo com valência livre são nomeados adicionando o sufixo "-ideno" ao nome do grupo univalente correspondente, por exemplo um grupo piridilo com dois pontos de ligação é um piridilideno. Uma espécie "heteroaromática" ou um "heteroarilo" contendo N refere-se a um grupo aromático no qual pelo menos um dos átomos do esqueleto do anel seja um átomo de azoto. 0 grupo heteroarilo policíclico pode ser fundido ou não fundido. 0 ou os heteroátomos no grupo heteroarilo está opcionalmente oxidado. Um ou mais átomos de azoto, quando presentes, são opcionalmente quaternizados. 0 heteroarilo está ligado ao resto da molécula através de qualquer átomo do ou dos anéis. Incluem-se nos exemplos de heteroarilos, mas não se limitam a estes, azepinilo, acridinilo, benzimidazolilo, benzindolilo, 1,3-benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzo[d]tiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[b] [1,4]dioxepinilo, benzo[b] [ 1,4]oxazinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzonaftofuranilo, benzoxazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzoxazolilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzofurazanilo, benzotiazolilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzotieno[3,2-d]pirimidinilo, benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinolinilo, ciclopenta[d]pirimidinilo, 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 5,6-dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5, 6-dihidrobenzo[h]cinolinilo, 6,7-dihidro-5H-benzo[6,7]ciclohepta[l,2-c]piridazinilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furazanilo, furanonilo, furo[3,2-c]piridinilo, 5,6,7,8,9,1O-hexahidrociclo-octa[d]pirimidinilo, 5,6,7,8,9,1O-hexahidrociclo-octa[d]piridazinilo, 5,6,7,8,9,1O-hexahidrociclo-octa[d]piridinilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, 5,8-metano-5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, naftiridinilo, 1,6-naftiridinonilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 5,6,6a,7,8,9,10,10a-octahidrobenzo[h]quinazolinilo, 1-fenilo-lH-pirrolilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazolo[3,4-d]pirimidinilo, piridinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, pirido[3,4-d]pirimidinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, 5.6.7.8- tetrahidrobenzo[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 6.7.8.9- tetrahidro-5H-ciclohepta[4,5]tieno[2,3- d]pirimidinilo, 5,6,7,8-tetrahidropirido[4,5- c] piridazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiapiranilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo, tieno[2,3- d] pirimidinilo, tieno[3,2-d]pirimidinilo, tieno[2,3- cjpridinilo, e tiofenilo (i.e., tienilo) . A não ser aonde se afirmar algo em contrário nesta especificação, uma espécie heteroarilo é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxilo, nitro, trimetilsilanilo, -0Ra, - SRa, - OC (0) -Ra, —N (Ra) 2, -C (0) Ra, -C (0) 0Ra, -OC (0) N (Ra) 2, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, - N (Ra) C (0) N (Ra) 2, N (Ra) C (NRa) N (Ra) 2, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou P03 (Ra) 2, cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo.

Heteroarilo substituído também inclui sistemas anelares substituídos com um ou mais substituintes óxido (-0-), tal como o N-óxido de piridinilo. "Heteroarilalquilo" refere-se a uma espécie que tenha um grupo arilo, tal como descrito neste documento, ligado a uma espécie alquileno, tal como descrito neste documento, em que a ligação ao resto da molécula é através do grupo alquileno. "Heterocicloalquilo" refere-se a um grupo anelar não aromático estável com 3 a 18 membros que inclua dois a doze átomos de carbono e entre um e seis heteroátomos seleccionados de entre azoto, oxigénio e enxofre. Sempre que apareça neste documento, uma gama numérica tal como "3 a 18" refere-se a todos os inteiros adentro da gama referida; por exemplo, "3 a 18 átomos anelares" significa que o grupo heterocicloalquilo pode ser constituído por 3 átomos anelares, 4 átomos anelares, etc., até e incluindo 18 átomos anelares. Em algumas concretizações, trata-se de um heterocicloalquilo C5-C10. Em algumas concretizações, trata-se de um heterocicloalquilo C4-Ci0. Em algumas concretizações, trata-se de um heterocicloalquilo C3-C10. A não ser aonde se afirmar algo em contrário nesta especificação, o grupo heterocicloalquilo é um sistema anelar monocíclico, bicíclico, tricíclico ou tetracíclico, que pode incluir sistemas fundidos ou em ponte. Os heteroátomos no grupo heterocicloalquilo podem opcionalmente ser oxidados. Um ou mais dos átomos de azoto, quando presentes, são opcionalmente quaternizados. 0 grupo heterocicloalquilo é parcial ou completamente saturado. 0 heterocicloalquilo pode ligar-se ao resto da molécula através de qualquer átomo do ou dois anéis. Incluem-se nos exemplos destes grupos heterocicloalquilo, mas não se limitam a eles, dioicolanilo, tienil[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofurilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo, e 1,1-dioxo-tiomorfolinilo. A não ser aonde seja afirmado algo em contrário nesta especificação, uma espécie heterocicloalquilo é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes que são independentemente: alquilo, heteroalquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxilo, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -0Ra, -SRa, -0C (0)-Ra, -N(Ra)2, -C(0)Ra, -C (0) 0Ra, -C (0) N (Ra) 2, -N (Ra) C (0) 0Ra, -N (Ra) C (0) Ra, -N (Ra) S (0) tRa (em que t seja 1 ou 2), -S(0)t0Ra (em que t seja 1 ou 2), -S(0)tN(Ra)2 (em que t seja 1 ou 2), ou PC>3(Ra)2, cujos Ra sejam independentemente hidrogénio, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo. "Heterocicloalquilo" também inclui sistemas anelares bicíclicos em que um anel não aromático, em geral com 3 a 7 átomos anelares, contenha pelo menos 2 átomos de carbono para além de 1-3 heteroátomos independentemente seleccionados de entre oxigénio, enxofre, e azoto, bem como as combinações que incluam pelo menos um dos heteroátomos acima; e o outro anel, em geral com 3 a 7 átomos anelares, contenha opcionalmente 1-3 heteroátomos independentemente seleccionados de entre oxigénio, enxofre, e azoto e seja não aromático. "Isómeros" são compostos diferentes que têm a mesma fórmula molecular. "Estereoisómeros" são isómeros que apenas diferem na disposição espacial dos átomos, i.e. apresentam configurações estereoquímicas diferentes. "Enantiómeros" são um par de estereoisómeros que são imagens não sobreponíveis num espelho uma da outra. Uma mistura a 1:1 de um par de enantiómeros é uma mistura "racémica". 0 termo " (±)" é utilizado para designar uma mistura racémica, quando for apropriado. "Diastereoisómeros" são estereoisómeros que possuam pelo menos dois átomos assimétricos, mas que não sejam imagens um do outro num espelho plano. A estereoquímica absoluta é especificada consoante o sistema R-S de Cahn-Ingold-Prelog. Quando um composto é um enantiómero puro pode especificar-se a estereoquímica em cada carbono quiral usando quer R, quer S. Os compostos resolvidos cuja configuração absoluta seja desconhecida podem ser designados como ( + ) ou (-) dependendo da direcção de rotação que imprimem a um feixe de luz polarizada plana (dextro-rotatório ou levo-rotatório), ao comprimento de onda da linha D do sódio. Alguns dos compostos descritos neste documento contêm um ou mais centros assimétricos e podem portanto dar origem a enantiómeros, diastereómeros, e outras formas estereoisoméricas que se podem definir, em termos da sua estereoquimica absoluta, como sendo (R) ou (S) . As entidades químicas presentes, as composições farmacêuticas e os métodos pretendem incluir todos estes isómeros possíveis, incluindo misturas racémicas, formas opticamente puras e misturas intermediárias. Podem preparar-se isómeros opticamente activos (R) e (S) utilizando sintões quirais ou reagentes quirais, ou por resolução recorrendo a técnicas convencionais. Quando os compostos descritos neste documento contêm ligações olefínicas ou outros centros de assimetria geométrica, e a não ser aonde se especificar algo em contrário, pretende-se que nos compostos se incluam tanto os isómeros geométricos E como os Z. "Pureza enantiomérica", tal como se utiliza neste documento, refere-se às quantidades relativas, expressas como percentagens, da presença de um determinado enantiómero em relação ao outro enantiómero. Por exemplo, se um composto, que pode potencialmente ter uma configuração isomérica (R) ou uma (S) , está presente sob a forma de uma mistura racémica, a pureza enantiomérica é de cerca de 50 % em relação quer ao isómero (R), quer ao (S). Caso predomine uma das formas isoméricas desse composto em relação à outra, por exemplo, 80 % de (S) e 20 % de (R), a pureza enantiomérica do composto em relação ao isómero (S) será de 80 %. Pode determinar-se a pureza enantiomérica de um composto de diversos modos conhecidos na técnica, incluindo mas não se limitando a uma cromatografia sobre um suporte quiral, uma medição polarimétrica da rotação da luz polarizada, a espectroscopia de ressonância magnética nuclear utilizando agentes de desvio quirais que incluem mas não se limitam a complexos quirais de lantanideos ou o álcool de Pirkle, ou uma derivatização de um composto utilizando um composto quiral tal como ácido de Mosher, seguindo-se uma cromatografia ou uma espectroscopia de ressonância magnética nuclear. "Espécie" refere-se a um segmento especifico ou a um grupo funcional de uma molécula. As espécies químicas são muitas vezes entidades químicas reconhecidas insertas numa ou apensas a uma molécula. "Nitro" refere-se ao grupo N02. "Oxa" refere-se ao grupo -0-. "Oxo" refere-se ao grupo =0. "Tautómeros" são isómeros estruturalmente distintos que se interconvertem por tautomerização. "Tautomerização" é uma forma de isomerização e inclui a tautomerização prototrópica ou de migração de protão, que é considerada como um subconjunto da química de ácido-base. "Tautomerização prototrópica" ou "tautomerização por migração de protão" envolve a migração de um protão acompanhada por alterações nas multiplicidades de ligações, amiúde através do intercâmbio de uma ligação simples e de uma ligação dupla adjacente. Quando é possível a tautomerização (por exemplo em solução), pode atingir-se um equilíbrio de tautómeros. Um exemplo de tautomerização é a tautomerização ceto-enólica. Um exemplo específico de tautomerização ceto-enólica é a interconversão dos tautómeros pentano-2,4-diona e da 4-hidroxipent-3-en-2-ona. Outro exemplo de tautomerização é a tautomerização fenol-cetónica. Um exemplo específico de tautomerização fenol-cetónica é a interconversão dos tautómeros piridin-4-ol e piridin-4(1H)-ona.

Os termos "enantiomericamente enriquecido" "enantiomericamente puro" e "não racémico", tal como se utilizam intercambiavelmente neste documento, referem-se a composições nas quais a percentagem ponderai de um enantiómero seja maior do que a quantidade desse enantiómero seja maior do que a existente numa mistura de controlo da composição racémica (por exemplo, maior do que 1:1 em peso). Por exemplo, uma preparação enantiomericamente enriquecida do enantiómero (S) significa uma preparação do composto com mais do que 50 % em peso do enantiómero (S), em relação ao enantiómero (R), mais preferivelmente pelo menos 75 % em peso, e ainda mais preferivelmente pelo menos 80 %, em peso. Em algumas concretizações, o enriquecimento pode ser muito maior do que 80 % em peso, proporcionando uma preparação "substancialmente enriquecida enantiomericamente", "substancialmente pura enantiomericamente" ou "substancialmente não racémica", que se refere a preparações de composições contendo pelo menos 85 % em peso de um enantiómero, em relação ao outro enantiómero, mais preferivelmente pelo menos 90 % em peso, e ainda mais preferivelmente pelo menos 95 % em peso.

Em concretizações preferidas, a composição enantiomericamente enriquecida apresenta uma potência maior em relação à sua utilização terapêutica, por unidade de massa, do que a apresentada pela mistura racémica dessa composição. Podem isolar-se enantiómeros a partir de misturas por métodos conhecidos dos especialistas da técnica, incluindo cromatografia liquida de elevado desempenho quiral (HPLC) e pela formação e cristalização de sais quirais; ou podem preparar-se os enantiómeros preferidos por sínteses assimétricas. Veja-se, por exemplo, Jacques, et al. , Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, Nova Iorque, 1981); Wilen, S.H., et al., Tetrahedron 33: 2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); e Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions pág. 268 (E.L. Eliel, Editor, Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972) .

Os compostos da invenção presente também podem conter proporções não naturais de isótopos atómicos num ou mais dos átomos que constituem esses compostos. Por exemplo, os compostos podem ser radiologicamente marcados com isótopos radioactivos, tais como por exemplo trítio (3H) , iodo 125 (1251) ou carbono 14 (14C) . Todas as variantes isotópicas dos compostos da invenção presente, radioactivas ou não, estão incluídas no âmbito da invenção presente.

Um "grupo ou átomo de saída" é qualquer grupo ou átomo que se clivará, nas condições reaccionais, a partir da matéria-prima, promovendo deste modo uma reacção num local específico. São exemplos adequados destes grupos a não ser aonde se afirmar algo em contrário, os átomos de halogéneo, os grupos mesiloxilo, p-nitrobenzenossulfoniloxilo e tosiloxilo. "Grupo protector" tem o significado que lhe é convencionalmente associado em síntese orgânica, i.e. um grupo que bloqueia selectivamente um ou mais locais reactivos num composto multifuncional, de tal modo que uma reacção química possa ser levada a cabo de um modo selectivo noutro local não protegido e de tal modo que o grupo possa ser removido facilmente depois de se completar a reacção referida. Estão descritos diversos grupos protectores, por exemplo, em T.H. Greene e P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Terceira Edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque (1999) . Por exemplo, uma forma de hidroxilo protegido é aquela em que pelo menos um dos grupos hidroxilo presentes num composto esteja protegido com um grupo protector de hidroxilo. De igual modo, podem proteger-se de modos semelhantes as aminas e outros grupos reactivos. "Solvato" refere-se a um composto (por exemplo, um composto seleccionado de entre a Fórmula I ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico) fisicamente associado com uma ou mais moléculas de um solvente aceitável do ponto de vista farmacêutico. Deve entender-se que "um composto com a Fórmula I" inclui composto com a Fórmula I e os solvatos do composto, bem como as misturas de todos estes. "Substituído" significa que o grupo a que diz respeito pode ser substituído com um ou mais grupos adicionais, individual e independentemente seleccionados de entre acilo, alquilo, alquilarilo, cicloalquilo, aralquilo, arilo, hidrato de carbono, carbonato, heteroarilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, ariloxilo, mercapto, alquiltio, ariltio, ciano, halo, carbonilo, éster, tiocarbonilo, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, oxo, perhaloalquilo, perfluoroalquilo, fosfato, sililo, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamidilo, sulfoxilo, sulfonato, ureia, e amino, incluindo grupos amina monossubstitidos e dissubstituídos, e os seus derivados protegidos. Incluem-se nos grupos amina dissubstituídos aqueles que formam um anel em conjunto com o azoto do grupo amino, tais como por exemplo, morfolino. Os substituintes podem eles próprios ser substituídos, por exemplo, um substituinte cicloalquilo pode ter um substituinte halogeneto como substituinte em um ou mais carbonos anelares, e outros semelhantes. Os grupos protectores que podem formar os derivados protegidos dos substituintes acima são conhecidos dos especialistas da técnica e podem encontrar-se em trabalhos de referência tais como o de Greene & Wuts, acima. "Sulfanilo" refere-se aos grupos: -S-( alquilo opcionalmente substituído), -S-(arilo opcionalmente substituído), -S- ( heteroarilo opcionalmente substituído), e -S-( heterocicloalquilo opcionalmente substituído). "Sulfinilo" refere-se aos grupos: -S(0)-H, -S (0)-( alquilo opcionalmente substituído), -S (0)- (amino opcionalmente substituído), -S (0)- (arilo opcionalmente substituído), -S (0)- (heteroarilo opcionalmente substituído), e -S (0)- (heterocicloalquilo opcionalmente substituído). "Sulfonilo" refere-se aos grupos: -S (Cg) -H, S (02)-(alquilo opcionalmente substituído), -S (02) -(amino opcionalmente substituído), -S(02) -(arilo opcionalmente substituído), -S (02)-(heteroarilo opcionalmente substituído), e -S (02)-(heterocicloalquilo opcionalmente substituído).

"Sulfonamidilo" ou "sulfonamido" referem-se ao grupo -S(=0)2-NRR, em que os R sejam seleccionados independentemente de entre o conjunto constituído por hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (ligado através de um carbono anelar) e heteroalicíclico (ligado através de um carbono anelar). Os grupos R em -NRR do grupo -S(=0)2-NRR podem ser tomados em conjunto com o azoto ao qual ambos se ligam para formar um anel com 4, 5, 6, ou 7 membros. Em algumas concretizações, trata-se de um sulfonamido Ci-Cio, em que os R do sulfonamido contenham 1 carbono, 2 carbonos, 3 carbonos, ou 4 carbonos no total. Um grupo sulfonamido é substituído opcional e respectivamente com um ou mais dos subst ituintes descritos para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo "Sulfoxilo" refere-se ao grupo -S(=0)20H. "Sulfonato" refere-se ao grupo -S (=0)2-0R, no qual R seja seleccionado de entre o conjunto constituído por alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (ligado através de um carbono anelar) e heteroalicíclico (ligado através de um carbono anelar). Um grupo sulfonato é substituído opcionalmente no R com um ou mais dos substituintes descritos respectivamente para alquilo, cicloalquilo, arilo, e heteroarilo.

Quando se especificarem grupos substituinte através das suas fórmulas químicas convencionais, escritas da esquerda para a direita, eles englobam de igual modo os substituintes quimicamente idênticos que resultariam de se escreverem as fórmulas da direita para a esquerda, por exemplo, -CH20- é equivalente a -0CH2-.

Também se incluem nos compostos da invenção formas cristalinas e amorfas desses compostos, incluindo, por exemplo, polimorfos, pseudopolimorfos, solvatos, hidratos, polimorfos não solvatados (incluindo anidratos), polimorfos não conformacionais, e formas amorfas dos compostos, bem como as suas misturas. "Forma cristalina", "polimorfo", e "nova forma" podem ser utilizados a título intercambiável neste documento, e pretende-se que incluam todas as formas cristalinas e amorfas do composto, incluindo, por exemplo, polimorfos, pseudopolimorfos, solvatos, hidratos, polimorfos não solvatados (incluindo anidratos), polimorfos conformacionais, e formas amorfas, bem como as suas misturas, a não quando se faça referência a uma determinada forma cristalina ou amorfa.

As formas aceitáveis do ponto de vista farmacêutico os compostos enumerados neste documento incluem os sais, os quelatos e os complexos não covalentes aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, bem como as suas misturas. Em algumas concretizações, os compostos descritos neste documento assumem a forma de sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Portanto, os termos "entidade química" e "entidades químicas" também incluem os sais, quelatos e complexos não covalentes aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, bem como as suas misturas.

Para além disto, quando o composto com a Fórmula I oi Ia for obtido como um sal de adição a um ácido, pode obter-se a base livre tratando uma solução do ácido referido com uma base. De forma inversa, quando o produto for uma base livre, pode preparar-se um seu sal, em especial um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, dissolvendo a base livre num solvente orgânico adequado, e tratar-se a solução com um ácido, seguindo as práticas convencionais adequadas para a preparação de sais de adição a um ácido a partir de compostos básicos. Os especialistas da técnica conhecerão diversas metodologias sintéticas que se podem utilizar para preparar sais de adição não tóxicos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Num aspecto, a invenção presente proporciona um composto com a Fórmula I adiante ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, em que

Num aspecto, a invenção presente proporciona um composto com a Fórmula Ia adiante ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, em que

Em algumas concretizações, o composto é uma mistura racémica dos isómeros (S) e (R) o que toca ao carbono X, em que o carbono X é o carbono quiral no composto com a Fórmula I. Noutras concretizações, a invenção presente proporciona uma mistura dos compostos com a fórmula I, na qual compostos individuais da mistura existem predominantemente numa configuração isomérica (S) ou (R) . Por exemplo, a mistura de compostos apresenta uma pureza enantiomérica (S) maior do que cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 %, cerca de 96 %, cerca de 97 %, cerca de 98 %, cerca de 99 %, cerca de 99,5 %, ou mais, no carbono X. Noutras concretizações, a mistura de compostos apresenta uma pureza enantiomérica (S) maior do que cerca de 55 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 60 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 65 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 70 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 75 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 80 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 85 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 90 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 95 % e de até cerca de 99.5 %, maior do que cerca de 96 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 97 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 98 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 99 % e de até cerca de 99,5 %, ou maior.

Noutras concretizações, o composto é uma mistura racémica dos isómeros (S) e (R) o que toca ao carbono X, em que o carbono X é o carbono quiral no composto com a Fórmula I. Noutras concretizações, a invenção presente proporciona uma mistura dos compostos com a fórmula I, na qual compostos individuais da mistura existem predominantemente numa configuração isomérica (S) ou (R) . Por exemplo, a mistura de compostos apresenta uma pureza enantiomérica (R) maior do que cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 %, cerca de 96 %, cerca de 97 %, cerca de 98 %, cerca de 99 %, cerca de 99.5 %, ou mais, no carbono X. Noutras concretizações, a mistura de compostos apresenta uma pureza enantiomérica (R) maior do que cerca de 55 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 60 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 65 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 70 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 75 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 80 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 85 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 90 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 95 % e de até cerca de 99.5 %, maior do que cerca de 96 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 97 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 98 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 99 % e de até cerca de 99,5 %, ou maior.

Noutras concretizações, a mistura de compostos contém entidades químicas idênticas excepto no que toca às suas orientações estereoquímicas, nomeadamente isómeros (S) ou (R). Noutra concretização, a mistura de entidades químicas idênticas (excepto quanto às suas orientações estereoquímicas), contém predominantemente isómeros (S) ou predominantemente isómeros (R) . Por exemplo, os isómeros (S) na mistura de entidades quimicamente idênticas estão presente a cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 %, cerca de 96 %, cerca de 97 %, cerca de 98 %, cerca de 99 %, cerca de 99,5 %, ou mais, em relação aos isómeros (R) . Em algumas concretizações, os isómeros (S) na mistura de entidades químicas idênticas estão presentes com uma pureza enantiomérica (S) maior do que cerca de 55 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 60 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 65 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 70 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 75 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 80 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 85 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 90 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 95 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 96 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 97 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 98 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 99 % e de até cerca de 99,5 %, ou maior.

Noutras concretizações, a mistura de compostos contém entidades químicas idênticas excepto no que toca às suas orientações estereoquímicas, nomeadamente isómeros (S) ou (R). Noutra concretização, a mistura de entidades químicas idênticas (excepto quanto às suas orientações estereoquímicas), contém predominantemente isómeros (S) ou predominantemente isómeros (R) . Por exemplo, os isómeros (R) na mistura de entidades quimicamente idênticas estão presente a cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 %, cerca de 96 %, cerca de 97 %, cerca de 98 %, cerca de 99 %, cerca de 99,5 %, ou mais, em relação aos isómeros (R) . Em algumas concretizações, os isómeros (R) na mistura de entidades químicas idênticas estão presentes com uma pureza enantiomérica (R) maior do que cerca de 55 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 60 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 65 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 70 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 75 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 80 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 85 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 90 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 95 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 96 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 97 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 98 % e de até cerca de 99,5 %, maior do que cerca de 99 % e de até cerca de 99,5 %, ou maior.

Podem sintetizar-se as entidades químicas descritas neste documento seguindo um ou mais dos esquemas ilustrativos neste documento e/ou metodologias bem conhecidas na técnica. A não ser aonde se especifique algo em contrário, as reacções descritas neste documento ocorrem à pressão atmosférica, em geral adentro de uma gama de temperaturas de —100 C a 200°C. Além disto, excepto aonde se especificar algo em contrário, os períodos e as condições reaccionais tendem a ser aproximados, por exemplo, ocorrerem a uma pressão próxima da ambiente a uma temperatura na gama de entre cerca de -10°C e cerca de 110°C ao longo de um período de entre cerca de 1 e cerca de 24 horas; as reacções que se deixam ocorrer de um dia para o outro levam em média um período de cerca de 16 horas.

Os termos "solvente", "solvente orgânico", e "solvente inerte" significam todos eles um solvente inerte nas condições da reacção que se estiver a descrever em conjunto com ele, incluindo, por exemplo, benzeno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano ("THF"), dimetilformamida ("DMF"), clorofórmio, cloreto de metileno (ou diclorometano), éter dietílico, metanol, N-metilpirrolidona ("NMP"), piridina, e outros semelhantes. A não ser aonde se especifique algo em contrário, os solventes utilizados nas reacções descritas neste documento são solventes orgânicos inertes. A não ser aonde se especifique algo em contrário, por cada grama do reagente limitativo, um cm3 (ou mL) de solvente constitui um equivalente em volume. 0 isolamento e a purificação das entidades e dos intermediários químicos descritos neste documento pode ser levada a cabo, caso tal se pretenda, por qualquer processo de separação ou purificação tal como, por exemplo, filtração, extracção, cristalização, cromatografia em coluna, cromatografia em camada fina ou cromatografia em camada espessa, ou uma combinação destes processos. Encontram-se exemplos específicos mostrando processos de separação e purificação adequados nos exemplos adiante neste documento. No entanto, também se podem utilizar outros processos de separação ou isolamento equivalentes.

Quando tal se pretenda, podem resolver-se os isómeros (R) e (S) dos compostos da invenção presente, quando estiverem presentes, por métodos conhecidos dos especialistas da técnica, por exemplo por formação de sais ou de complexos diastereoméricos que se podem separar, por exemplo, por cristalização; por formação de derivados diastereoméricos que se podem separar, por exemplo, por cristalização, por cromatografia em fase gasosa ou por cromatografia líquida; por reacção selectiva de um enantiómero com um reagente específico para ele, por exemplo por oxidação ou redução enzimáticas, seguindo-se a separação dos ex-enantiómeros, um modificado e o outro não; ou por cromatografia gás-líquido ou em fase líquida num um meio quiral, por exemplo sobre um suporte quiral, tal como sílica com um ligando quiral ligado a ela, ou na presença de um solvente quiral. Em alternativa, pode sintetizar-se um enantiómero especifico por síntese assimétrica utilizando reagentes, substratos, catalisadores ou solventes opticamente activos, ou transformando um enantiómero no outro por uma transformação assimétrica.

Os compostos descritos neste documento podem opcionalmente ser levados ao contacto com um ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico para se formarem os correspondentes sais de adição ao ácido.

Muitas das matérias-primas opcionalmente substituídas e outros reagentes encontram-se comercialmente disponíveis, por exemplo junto da Aldrich Chemical Company (Milwaukee, WI), ou podem ser facilmente preparados pêlos especialistas na técnica recorrendo a metodologias sintéticas habituais.

Podem em geral sintetizar-se os compostos da invenção por uma combinação de métodos sintéticos que são em geral bem conhecidos. As técnicas úteis para sintetizar estas entidades químicas são tanto facilmente aparentes como acessíveis aos entendidos na especialidade, com base nesta descrição.

Podem sintetizar-se os compostos da invenção por uma combinação apropriada de métodos sintéticos conhecidos na técnica. A descrição que se segue é incluída para ilustrar alguns dos métodos diversos disponíveis para produzir os compostos da invenção e não se pretende limitar o âmbito das reacções ou das sequências reaccionais que se podem utilizar para preparar os compostos da invenção presente. Os Esquemas Reaccionais proporcionados neste documento não pretendem delimitar a protecção que é pretendida para além dos compostos especificamente reivindicados.

No que toca ao Passo 1 do Esquema 1, transforma-se um composto com a Fórmula 101, na qual X é N ou CR7, num composto com a Fórmula 103, por exemplo, via um processo em dois passos com um acoplamento de Heck com um composto com a Fórmula 102, seguindo-se uma ciclização catalisada por ácido em metanol. 0 produto, um composto com a Fórmula 103, é isolado. No que toca ao Passo 2 do Esquema 1, transforma- se um composto com a Fórmula 103 num composto com a Fórmula 404, por exemplo, via uma reacção com uma anilina adequadamente substituída. 0 produto, um composto com a Fórmula 104, é isolado. No que toca ao passo 3 do Esquema 1, transforma-se um composto com a Fórmula 104 num composto com a Fórmula 105, por exemplo por redução com hidreto de alumínio e lítio. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 105. No que toca ao Passo 4 do Esquema 1, transforma-se um composto com a Fórmula 105 num composto com a Fórmula 106, por exemplo, via uma reacção com cloreto de tionilo. O produto, um composto com a Fórmula 106, é isolado. No que toca ao Passo 5 do Esquema 1, transforma-se um composto com a Fórmula 106 num composto com a Fórmula 107, por exemplo, por alquilação com uma pirazolopirimidina utilizando uma base tal como carbonato de potássio. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 107. No que toca ao Passo 6 do Esquema 1, transforma-se um composto com a Fórmula 107 num composto com a Fórmula 108, por exemplo por uma reacção de Suzuki. Isola-se o procuto, um composto com a Fórmula 108, e opcionalmente purifica-se.

Em relação ao Passo 1 do Esquema 2, transforma-se um composto com a Fórmula 201, em que X seja N ou CR7, num composto com a Fórmula 202, por exemplo com um reagente adequado para a introdução de um cloreto de acilo, por exemplo cloreto de oxalilo. 0 produto, um composto com a Fórmula 202 é opcionalmente isolado. Em relação ao Passo 2 do Esquema 2, transforma-se um composto com a Fórmula 202 num composto com a Fórmula 503, por exemplo por reacção com uma arilamina. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 203. Em relação ao Passo 3 do Esquema 2, transforma-se um composto com a Fórmula 203 num composto com a Fórmula 204, por exemplo por um acoplamento de Stille utilizando um vinil-estanano apropriado. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 204. Em relação ao Passo 4 do Esquema 2, transforma-se um composto com a Fórmula 204 numa amida terciária, um composto com a fórmula 205, por reacção com acetato de cloroetilo e hidreto de sódio como base. Isola-se o composto com a Fórmula 205. Em relação ao Passo 5 do Esquema 2, oxida-se um composto com a Fórmula 205 a um aldeído, utilizando por exemplo, tetróxido de ósmio e periodato de sódio. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 206. Em relação ao Passo 6 do Esquema 2, transforma-se o composto com a Fórmula 206 num composto com a Fórmula 104, por exemplo por uma reacção aldólica em etanol com uma base, tal como carbonato de césio. Isola-se o produto, um composto com a Fórmula 104. Em relação ao Passo 7 do Esquema 2, reduz-se um composto com a Fórmula 104 a um álcool primário por exemplo por redução com hidreto de alumínio e lítio, para se obter um composto com a Fórmula 105, que se isola. Em relação ao Pass8 do Esquema 2, transforma-se um composto com a Fórmula 105 num composto com a Fórmula 207 por reacção com tetrabrometo de carbono e trifenilfosfina. Isola-se o composto com a Fórmula 207. Este composto pode ser um intermediário central na síntese dos compostos da invenção.

Em relação ao Passo 9 do Esquema 3, sintetiza-se um composto com a Fórmula 207, em que X é N ou CR7, tal como se descreve no Esquema Reaccional 2 e transforma-se num composto com a Fórmula 107 por um acoplamento com o composto com a Fórmula 208 na presença de uma base, por exemplo, t-butóxido de potássio. Isola-se o composto com a Fórmula 107. Em relação ao Passo 10 do Esquema 3, transforma-se um composto com a Fórmula 107 num composto com a Fórmula 108 por acoplamento com, por exemplo, um ácido arilborónico, na presença de catalisadores do acoplamento e de uma base, por exemplo, acetato de paládio, trifenilfosfina e carbonato de sódio. Isola-se o composto com a Fórmula 108.

Relativamente ao Esquema Reaccional 4A, que ilustra a síntese de uma classe geral de isoquinolonas substituídas com purinilo, no Passo 1, faz-se reagir o iodo-éster 401 com um alcino com a fórmula 400-A na presença de um catalisador de paládio, de iodeto de cobre e de trietilamina (TEA) para se acoplar o alcino com o núcleo arílico do composto 401, para se produzir um composto com a Fórmula 402. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 402. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 4, trata-se um composto com a Fórmula 402 com a base hidróxido de potássio para se obter o ácido carboxílico, um composto com a Fórmula 403, caso o produto reaccional seja acidificado, ou o seu sal. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 403. Relativamente ao Passo 3 do Esquema Reaccional 4, trata-se um composto com a Fórmula 403 com bis (acetonitrilo)dicloropaládio(II) e TEA para se conduzir um fecho de anel intramolecular obtendo-se um composto com a Fórmula 404. Isola-se o composto com a Fórmula 404. Relativamente ao Passo 4 do Esquema Reaccional 4, faz-se reagir um composto com a Fórmula 404 com uma amina primária para se produzir um composto com a Fórmula 405. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 405. Relativamente ao Passo 5 do Esquema Reaccional 4, trata-se um composto com a Fórmula 405 com ácido clorídrico, removendo-se o grupo protector do azoto, para se obter um composto com a Fórmula 406. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 406. Relativamente ao Passo 6 do Esquema Reaccional 4, faz-se reagir um composto com a Fórmula 406 com um composto com a Fórmula 407, para se obter um composto com a Fórmula 408. Isola-se o composto com a Fórmula 408.

No Esquema Reaccional 4B, ilustra-se a síntese de um subconjunto de isoquinolonas substituídas com purinilo, nas quais R9 seja metilo e Ra seja hidrogénio, utilizando as transformações sintéticas descritas no Esquema Reaccional 4A.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 5, faz-se reagir o iodo éster 401 com o alcino 501 na presença de um catalisador de acoplamento de paládio, iodeto de cobre, e TEA, para se obter um composto com a Fórmula 502. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 502. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 5, trata-se o composto com a Fórmula 502 com hidróxido de potássio como base para se obter o carboxilato ou a forma de ácido livre de um composto com a Fórmula 503. Relativamente ao Passo 3 do Esquema Reaccional 5, trata-se o composto com a Fórmula 503 com bis(acetonitrilo)dicloropaládio(II) e com TEA para se levar a cabo o fecho de anel intramolecular e se obter um composto com a Fórmula 504. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 504. Relativamente ao Passo 4 do Esquema Reaccional 5, trata-se o composto com a Fórmula 504 com uma amina primária para se obter um composto com a Fórmula 505. Isola-se o composto com a Fórmula 505.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 6A, no qual se ilustra a síntese de uma classe geral de isoquinolonas substituídas com purinilo, faz-se reagir o iodo éster 401 com o alcino 601 na presença de um catalisador de acoplamento de paládio, iodeto de cobre, e TEA, para se obter um composto com a Fórmula 602. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 602. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 6, trata-se o composto com a Fórmula 602 com hidróxido de potássio como base para se obter a forma de carboxilato ou a de ácido livre de um composto com a Fórmula 603. Relativamente ao Passo 3 do Esquema Reaccional 6, trata-se o composto com a Fórmula 603 com bis (acetonitrilo)dicloropaládio(II) e com TEA para se levar a cabo o fecho intramolecular de anel produzindo-se um composto com a Fórmula 604. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 604. Relativamente ao Passo 4 do Esquema Reaccional 6, trata-se o composto com a Fórmula 604 com uma amina primária para se produzir um composto com a Fórmula 605. Isola-se opcionalmente o composto com a Fórmula 605. Relativamente ao Passo 5 do Esquema Reaccional 6, trata-se o composto com a Fórmula 605 com ácido para se remover o grupo protector THP e se obter um composto com a Fórmula 606. Isola-se o composto com a Fórmula 606.

No Esquema reaccional 6B, ilustra-se a síntese de isoquinolonas substituídas com purinilo, nas quais R9 seja metilo e Ra seja hidrogénio, utilizando as transformações sintéticas descritas para o Esquema Reaccional 6A.

Relativamente ao Esquema Reaccional 7A, que ilustra a síntese de isoquinolonas substituídas com purinilo ou com pirazolopirimidinilo incluindo um substituinte alquilamino na posição representada com um B na Fórmula I, no Passo 1 sintetiza-se o composto com a Fórmula 701 por uma de entre uma série de vias sintéticas, incluindo variantes dos Esquemas 1 ou 2 nas quais, por exemplo, se utiliza uma benzilamina no passo em que se transforma um composto com a Fórmula 103 num composto com a Fórmula 104. Pode remover-se o grupo protector benzilo da amina por química de desprotecção habitual para se produzir um composto de 701. Outro exemplo de uma transformação de um composto com a Fórmula 103 num composto com a fórmula 701, o tratamento do composto com a Fórmula 103 com amoníaco proporciona o composto com a Fórmula 701. Transforma-se o composto com a Fórmula 701 num composto com a Fórmula 702 por alquilação do azoto da amida com um de entre vários sintões contendo 2 carbonos que podem ser retirados por desprotecção, oxida-se e volta a proteger-se sob a forma do cetal respectivo, o composto com a Fórmula 702. Relativamente ao Passo 2-1 do Esquema Reaccional 7, transforma-se o composto com a Fórmula 702, por exemplo, por aminação redutora da espécie éster de modo a se introduzir a espécie purinilo de um composto com a Fórmula 703, ou em alternativa, alquila-se para se introduzir uma espécie purinilo obtendo-se um composto com a Fórmula 703. Relativamente ao Passo 3-1 do Esquema Reaccional 7, trata-se o composto com a Fórmula 703 com ácido para se remover o grupo protector cetal e se obter um composto com a Fórmula 704. Isola-se o composto com a Fórmula 704. Relativamente ao Passo 4-1 do Esquema Reaccional 7, faz-se a aminação redutora do composto com a Fórmula 704 com uma amina para se obter um composto com a Fórmula 705. Isola-se o composto com a Fórmula 705. Relativamente ao Passo 2-2 do Esquema Reaccional 7, transforma-se o composto com a Fórmula 702, por exemplo conforme os Passos 7 e 8 do Esquema 2 e o Passo 9 do Esquema 3 para se introduzir a espécie pirazolopirimidina de um composto com a Fórmula 706. Isola-se o composto com a Fórmula 706. Relativamente ao Passo 3-2 do Esquema Reaccional 7, trata-se o composto com a Fórmula 706 com ácido para se remover o grupo protector cetal obtendo-se um composto com a Fórmula 707. Isola-se o composto com a Fórmula 707.

Relativamente ao Passo 4-2 do Esquema Reaccional 7, uma aminação redutora do composto com a Fórmula 707 com uma amina proporciona um composto com a Fórmula 708. Isola-se o composto com a Fórmula 708.

No Esquema Reaccional 7B, ilustra-se a síntese dos compostos nos quias R9 é metilo e Ra é hidrogénio, utilizando os passos descritos no Esquema 7A.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 8, sintetiza-se o composto com a Fórmula 701 tal como se descreveu no Esquema 7 ou utilizando qualquer outra química geralmente bem conhecida. Transforma-se o composto com a Fórmula 701 por alquilação do azoto da amida com um de entre diversos sintões contendo 2 carbonos, que depois podem ser desprotegidos, e transforma-se na espécie alcoxilada protegida tal como se ilustra no composto com a fórmula 801, que se pode isolar. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 8, transforma-se o composto com a Fórmula 801 recorrendo à química descrita no Passo 2-1 do Esquema 7 para se introduzir uma espécie purinilo, e transforma-se o composto que resulta por desprotecção, activação e aminação com uma amina para se obter um composto com a Fórmula 802, que se isola.

Relativamente ao Passo 3 do Esquema Reaccional 8, transforma-se o composto com a Fórmula 801 recorrendo à química descrita no Passo 2-2 do Esquema 7 para se introduzir uma espécie pirazolopirimidina, e transforma-se o composto resultante por desprotecção, activação e aminação com uma amina para se produzir um composto com a Fórmula 803, que se isola.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 9, trata-se o composto com a Fórmula 901 com uma amina para se produzir um composto com a Fórmula 902. Isola-se o composto com a Fórmula 902. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 9, trata-se o composto com a Fórmula 902 com oxicloreto de fósforo para se gerar um composto com a Fórmula 903. Isola-se o composto com a Fórmula 903. Relativamente ao Passo 3 do Esquema Reaccional 9, faz-se reagir o composto com a Fórmula 903 com uma aminopurina com a fórmula 904 para se obter um composto com a Fórmula 905. Isola-se o composto com a Fórmula 905. Relativamente ao Passo 4 do Esquema Reaccional 9, trata-se o composto com a Fórmula 905 com ácido clorídrico para se remover o grupo protector do azoto na espécie purina e se produzir um composto com a Fórmula 906. Isola-se o composto com a Fórmula 906.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 10, trata-se o composto com a Fórmula 1001 com o éster vinilogoso 1002 utilizando por exemplo uma reacção de Heck com uma ciclização subsequente, para se produzir um composto com a Fórmula 1003. Isola-se o composto com a Fórmula 1003. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 10, faz-se reagir o composto com a Fórmula 1003 com 4-amino-N-Boc-piperidina para se produzir um composto com a Fórmula 1004. Isola-se o composto com a Fórmula 1004. Pode utilizar-se o composto com a Fórmula 1004 como um intermediário na síntese dos compostos da invenção.

Relativamente ao Passo 1 do Esquema Reaccional 11, trata-se o composto com a Fórmula 1101 com um álcool alcinílico, por exemplo, com a fórmula 1102, na presença de iodeto de cobre e de um catalisador de paládio sobre carbono, para se produzir um composto com a Fórmula 1103. Isola-se o composto com a Fórmula 1103. Relativamente ao Passo 2 do Esquema Reaccional 11, faz-se reagir o composto com a Fórmula 1102 com 4-amino-N-Boc-piperidina para se produzir um composto com a Fórmula 1103. Isola-se o composto com a Fórmula 1103. Pode utilizar-se o composto com a Fórmula 1103 como um intermediário na síntese dos compostos da invenção.

Outra via de síntese dos compostos com a fórmula I está ilustrada no Esquema 12. Em relação ao Passo 1, trata-se o composto com a Fórmula 1201 com um agente clorante tal como cloreto de oxalilo para se produzir um cloreto de acilo com a fórmula 1202. No passo 2, faz-se reagir o composto com a Fórmula 1202 com um composto com a Fórmula R'NH2 na presença de uma base tal como a trietilamina, para se produzir um composto com a Fórmula 1203. Em algumas concretizações, o agente clorante utilizado para a transformação do composto 1201 é o cloreto de tionilo, por exemplo cloreto de tionilo em tolueno. Quando se utiliza cloreto de tionilo, podem combinar-se os passos 1 e 2 para constituir uma reacção num único reactor. No Passo 3, trata-se o composto com a Fórmula 1203 com n-butil-lítio e depois faz-se reagir com um oxalato de dialquilo tal como oxalato de dietilo, para se produzir um composto com a Fórmula 1204. No Passo 4, aquece-se o composto com a Fórmula 1204 ao refluxo numa solução ácida, por exemplo, de ácido clorídrico em metanol, para se produzir um composto com a Fórmula 1205. No Passo 5, trata-se o composto com a Fórmula 1205 com um agente redutor tal como hidreto de alumínio e litio para se produzir um composto com a Fórmula 1206. No Passo 6, faz-se reagir o composto com a Fórmula 1206 com um agente bromante tal como tribrometo de fósforo, na presença de dimetilformamida em acetonitrilo, para se produzir um bromocomposto com a Fórmula 1207. No Passo 7, faz-se reagir o composto com a Fórmula 1207 com um composto heteroarílico, por exemplo 3- iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina, na presença de uma base tal como terc-butóxido de potássio, em dimetilformamida, para se produzir um composto com a Fórmula 1208.

No Esquema 13, descreve-se uma via de sintese de compostos com a fórmula I que contenham um agente de ligação XY em que X seja predominantemente ou apenas (S)-C(CH3)H- e Y seja -NH-. Wd é urn heteroarilo monociclico ou biciclico, incluindo mas não se limitando a purinilo, pirimidinilo, pirrolopirimidinilo, ou pirazolopirimidinilo. Em relação ao Passo 1 do Esquema 13, acopla-se o composto com a Fórmula 1301, (o isómero S) com a N,0-dimetil-hidroxilamina utilizando hidroxibenzotriazole (HOBt) e 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)carbodi-imida (EDCI) na presença de trietilamina para se produzir um composto com a Fórmula 1302. No Passo 2, desprotona-se um composto com a Fórmula 1203, que se pode sintetizar tal como se descreveu no Esquema 12, com n-but il-lítio em THF e hexametilfosforamida a -78°C sob uma atmosfera de árgon. Adiciona-se o composto com a Formula 1302 e deixa-se a mistura reaccional aquecer até -50°C, termina-se a reacção por adição de água e isola-se um composto com a Fórmula 1303. Em algumas concretizações, pode utilizar-se uma espécie de organomagnésio fracamente nucleófila tal como iPrMgCl para gerar o anião do composto 1302 com magnésio antes de o adicionar ao dianião. No Passo 3 trata-se o composto com a Fórmula 1303 com ácido clorídrico em metanol ao refluxo, e depois leva-se o pH da mistura reaccional, por adição de uma solução de carbonato de sódio, a um valor de entre cerca de 7 e cerca de 8, para se produzir um composto com a Fórmula 1304. Em resultado dos passos reaccionais descritos, o composto com a Fórmula 1304 pode epimerizar-se parcialmente. Pode isolar-se 1304 altamente enantiopuro preparando o sal com ácido tartárico por dissolução do composto com a Fórmula 1304 em metanol e adição de ácido D-tartárico. Aquece-se a mistura reaccional resultante ao refluxo durante uma hora, e depois agita-se à temperatura ambiente durante 16 horas, permitindo isolar-se o sal do composto com a Fórmula 1304 com uma pureza enantiomérica superior a 90 % do isómero (S). Regenera-se a amina livre do composto com a Fórmula 1304 antes de se utilizar no passo seguinte da síntese. Acopla-se o composto com a Fórmula 1304, que é substancialmente o enantiómero (S), com um heteroarilo com substituinte cloro Wd, um composto com a Fórmula 1305, incluindo mas não se limitando a 6-cloro-9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina, 2,4,5,- tricloropirimidina, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina, e 4-cloro-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina, na presença de uma base tal como di-isopropilet ilamina ou amoníaco, para se produzir um composto com a Fórmula 1306, e em que o composto com a Fórmula 1306 é o isómero (S). Síntese dos análogos R3-halo, por exemplo análogos de isoquinolona substituída com cloro. Aplica-se o mesmo Esquema Reaccional 13 para se gerar um composto com a Fórmula:

na qual R3 seja cloro.

Podem sintetizar-se os compostos descritos neste documento utilizando os esquemas reaccionais tal como se descrevem neste documento, as suas variantes, ou outros métodos sintéticos conhecidos na técnica.

Em algumas concretizações, os compostos da invenção presente exibem uma ou mais características funcionais descritas neste documento. Por exemplo, um ou mais dos compostos referidos ligam-se especificamente a uma PI3 quinase. Em algumas concretizações, o valor de IC50 de um destes compostos para ρΙΙΟα, ρΙΙΟβ, ρΙΙΟγ, ou ρΙΙΟδ é inferior a cerca de 1 μΜ, inferior a cerca de 100 nM, inferior a cerca de 50 nM, inferior a cerca de 10 nM, inferior a cerca de 1 nM, inferior a cerca de 0,5 nM, inferior a cerca de 100 pM, ou inferior a cerca de 50 pM.

Em algumas concretizações, um dos compostos referidos pode inibir selectivamente um ou mais membros das fosfatidilinositol 3-quinases (Pl3-quinases) de tipo I ou classe 1 com um valor de IC50 de cerca de 100 nM, 50 nM, 10 nM, 5 nM, 100 pM, 10 pM ou 1 pM, ou menos, tal como determinado num ensaio de quinase in vitro.

Além disto, um composto com a Fórmula apresentando uma configuração enantiomérica (S) no que toca ao carbono X, pode exibir uma maior potência em relação a uma ou mais Pl3-quinases alvo do que o composto correspondente com uma configuração enantiomérica (R) no carbono X. Por exemplo, o composto da invenção com uma configuração enantiomérica (S) no carbono X pode apresentar um valor de IC50 para a Pl3-quinase que seja 1, 2, 3, ou 4 ordens de grandeza menor do que o valor de IC50 para a PI3-quinase do composto correspondente apresentando uma configuração (R).

Em algumas concretizações, um ou mais dos compostos de interesse podem inibir selectivamente um ou dois membros do tipo I ou da classe I das fosfatidilinositol 3-quinases (Pl3-quinases), constituídos por Pl3-quinase a, Pl3-quinase β, Pl3-quinase γ, e PI3-quinase δ. Em alguns aspectos, alguns dos compostos em apreço inibem selectivamente a Pl3-quinase δ em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase. Noutros aspectos, alguns dos compostos em apreço inibem selectivamente a Pl3-quinase β e a Pl3-quinase γ em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase. Noutros aspectos ainda, alguns dos compostos em apreço inibem selectivamente a Pl3-quinase α e a Pl3-quinase β em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase. Noutros aspectos ainda, alguns dos compostos em apreço inibem selectivamente a Pl3-quinase δ e a Pl3-quinase P em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase, ou inibem selectivamente a Pl3-quinase δ e a Pl3-quinase α em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase, ou inibem selectivamente a Pl3-quinase α e a Pl3-quinase γ em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase, ou inibem selectivamente a Pl3-quinase γ e a Pl3-quinase β em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase.

Em algumas concretizações, um ou mais dos compostos em apreço inibem selectivamente a Pl3-quinase δ e a Pl3-quinase γ em comparação com qualquer outro dos tipos de Pl3-quinase. Em alguns aspectos, um composto da invenção exibe um valor de IC50 para a Pl3-quinase δ que é 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou 5 vezes menor que o seu valor de IC50 para a Pl3-quinase γ. Noutros aspectos, um composto da invenção exibe um valor de IC50 para a PI3-quinase δ que é 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou 5 vezes maior do que o valor de IC50 para a Pl3-quinase γ. Em algumas concretizações, o composto da invenção exibe um valor de IC50 para a Pl3-quinase δ que é menos do que 10 vezes inferior ao da IC50 para a Pl3-quinase γ. Noutras concretizações, o composto da invenção exibe um IC50 para a Pl3-quinase δ que é menos do que 10 vezes maior do que o valor de IC50 para a Pl3-quinase γ. Por exemplo, o composto da invenção exibe um IC50 para a Pl3-quinase δ que é menos do que 5 vezes maior ou menor do que o IC50 para a PI3-quinase γ. Em alguns aspectos, um composto em apreço apresenta um valor de IC50 para a Pl3-quinase δ que é inferior ao IC50 para a Pl3-quinase γ, por um factor inferior a 20, 10, 5, ou 2. Por exemplo, um composto em apreço apresenta um valor de IC50 para a Pl3-quinase δ que é menor do que o IC50 para a Pl3-quinase γ por um factor inferior a 5.

Noutro aspecto ainda, um inibidor que inibe selectivamente um ou mais membros das Pl3-quinases de tipo I, ou um inibidor que inibe select ivamente um ou mais caminhos de sinalização mediados por uma Pl3-quinase de tipo I, pode em alternativa entender-se que se refere a um composto que exibe uma concentração para 50 % de inibição (IC50) em relação a uma determinada Pl3-quinase de tipo I, que é pelo menos 10 vezes, pelo menos 20 vezes, pelo menos 50 vezes, pelo menos 100 vezes, pelo menos 1.000 vezes, pelo menos 10.000 vezes, ou inferior, em relação ao valor de IC50 em relação ao resto das outras Pl3-quinases de tipo I.

Em algumas concretizações, um ou mais dos compostos em apreço inibem ρΙΙΟα, ρΙΙΟβ, DNAPK ou mTor com um valor de IC50 superior a 30 nM, e inibem ρΙΙΟδ e/ou ρΙΙΟγ com um valor de IC50 inferior a 1 μΜ. Em algumas concretizações, o composto também denota uma inibição selectiva de ρΙΙΟδ e/ou ρΙΙΟγ em relação a ρΙΙΟα, ρΙΙΟβ, DNAPK e/ou mTor, por um factor de pelo menos 3, 10, 100, 1.000 ou mais. Por exemplo, um composto em apreço denota uma inibição selectiva de ρΙΙΟδ ou de ρΙΙΟγ em relação a ρΙΙΟα, ρΙΙΟβ, DNAPK e/ou mTor por um factor de pelo menos 3.

Composições Farmacêuticas A invenção proporciona composições farmacêuticas que incluam um ou mais compostos da invenção presente.

Em algumas concretizações, a invenção proporciona composições farmacêuticas para tratar doenças ou estados relacionados com uma resposta imunológica indesejável, superactiva, lesiva ou nociva de um mamífero. Uma tal resposta imunológica indesejável pode estar associada a ou resultar em, por exemplo, asma, enfisema, bronquite, psoríase, alergia, anafilaxia, doenças auto-imunes, artrite reumatóide, doença do enxerto contra ao hospedeiro, e lúpus eritematoso. As composições farmacêuticas da invenção presente podem ser utilizadas para tratar outras doenças respiratórias, incluindo mas não se limitando a doenças que afectam os lobos dos pulmões, a cavidade pleural, os tubos brônquicos, a traqueia, o tracto respiratório superior, ou os nervos e músculos utilizados para respirar.

Em algumas concretizações, a invenção proporciona composições farmacêuticas para o tratamento de patologias tais como uma patologia hiperproliferativa, incluindo mas não se limitando a cancro tal como leucemia mielóide aguda, do timo, cérebro, pulmão, de células escamosas, da pele, dos olhos, retinoblastoma, melanoma intraocular, da cavidade oral e orofaringea, da bexiga, gástrico, do estômago, pancreático, da bexiga, da mama, cervical, da cabeça, do pescoço, renal, do rim, do figado, do ovário, da próstata, colo-rectal, esofágica, testicular, ginecológico, da tiróide, do SNC, do SNP, relacionada com a SIDA (por exemplo Linfoma e Sarcoma de Kaposi) ou cancro induzido por Virus. Em algumas concretizações, a composição farmacêutica referida destina-se ao tratamento de uma patologia hiperproliferativa não cancerosa, tal como uma hiperplasia benigna da pele (por exemplo, psoriase), restenose, ou da próstata (por exemplo hiperplasia benigna da próstata (BPH) ) . A invenção também proporciona composições para o tratamento de doenças hepáticas (incluindo diabetes), da pancreatite ou de doenças dos rins (incluindo glomerulonefrite proliferativa e doença renal induzida pela diabetes), ou a dor num mamífero. A invenção proporciona além disto uma composição para a prevenção da implantação de blastócitos num mamífero. A invenção também diz respeito a uma composição para tratar uma doença relacionada com a vasculogénese ou a angiogénese num mamífero, que se pode manifestar como angiogénese tumorais, uma doença inflamatória crónica tal como artrite reumatóide, doença inflamatória dos intestinos, aterosclerose, doenças da pele tais como psoríase, eczema, e escleroderma, diabetes, retinopatia diabética, retinopatia da prematuridade, degeneração macular relacionada com a idade, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi e cancro do ovário, da mama, do pulmão, pancreático, da próstata, do cólon e epidermóide.

As composições farmacêuticas em questão são tipicamente formuladas para proporcionar uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção presente a título de ingrediente activo, ou um seu sal, éster, precursor de fármaco, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico. Quando tal se pretenda, as composições farmacêuticas contêm um seu sal e/ou complexo de coordenação aceitável do ponto de vista farmacêutico, e um ou mais excipientes, veículos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, incluindo diluentes sólidos e cargas, diluentes, incluindo solução aquosa estéril e diversos solventes orgânicos, incrementadores da permeação, solubilizantes e adjuvantes.

As composições farmacêuticas em apreço podem ser administradas por si sós ou em combinação com um ou mais outros agentes, que também são tipicamente administrados sob a forma de composições farmacêuticas. Quando tal se pretenda, os compostos em apreço e outros agentes podem ser misturados entrando numa preparação, ou ambas as componentes podem ser formulados em composições separadas para serem utilizadas em combinação, em separado ou ao mesmo tempo.

Em algumas concretizações, a concentração de um ou mais dos compostos proporcionados nas composições farmacêuticas da invenção é inferior a 100 %, 90 %, 80 %, 70 %, 60 %, 50 %, 40 %, 30 %, 20 %, 19 %, 18 %, 17 %, 16 %, 15 %, 14 %, 13 %, 12 %, 11 %, 10 %, 9 %, 8 %, 7 %, 6 %, 5 %, 4 %, 3 %, 2 %, 1 %, 0,5 %, 0,4 %, 0,3 %, 0,2 %, 0,1 %, 0,09 %, 0,08 %, 0,07 %, 0,06 %, 0,05 %, 0,04 %, 0,03 %, 0,02 %, 0,01 %, 0,009 %, 0,008 %, 0,007 %, 0,006 %, 0,005 %, 0,004 %, 0,003 %, 0,002 %, 0,001 %, 0,0009 %, 0,0008 %, 0,0007 %, 0,0006 %, 0,0005 %, 0,0004 %, 0,0003 %, 0,0002 %, ou 0,0001 %, em peso, em peso por volume ou em volume.

Em algumas concretizações, a concentração em um ou mais dos compostos da invenção presente é maior do que 90 %, 80 %, 70 %, 60 %, 50 %, 40 %, 30 %, 20 %, 19,75 %, 19,50 %, 19,25 % 19 %, 18,75 %, 18,50 %, 18,25 % 18 %, 17,75 %, 17,50 %, 17,25 % 17 %, 16,75 %, 16,50 %, 16,25 % 16 %, 15,75 %, 15,50 %, 15,25 % 15 %, 14,75 %, 14,50 %, 14,25 % 14 %, 13,75 %, 13,50 %, 13,25 % 13 %, 12,75 %, 12,50 %, 12,25 % 12 %, 11,75 %, 11,50 %, 11,25 % 11 %, 10.75 %, 10,50 %, 10,25 % 10 %, 9,75 %, 9,50 %, 9,25 % 9 %, 8.75 %, 8,50 %, 8,25 % 8 %, 7,75 %, 7,50 %, 7,25 % 7 %, 6.75 %, 6,50 %, 6,25 % 6 %, 5,75 %, 5,50 %, 5,25 % 5 %, 4.75 %, 4,50 %, 4,25 %, 4 %, 3,75 %, 3,50 %, 3,25 %, 3 %, 2.75 %, 2,50 %, 2,25 %, 2 %, 1,75 %, 1,50 %, 125 %, 1 %, 0,5 %, 0,4 %, 0,3 %, 0,2 %, 0,1 %, 0,09 %, 0,08 %, 0,07 %, 0,06 %, 0,05 %, 0,04 %, 0,03 %, 0,02 %, 0,01 %, 0, 009 %, 0,008 %, 0,007 %, 0,006 %, 0,005 %, 0,004 %, 0,003 %, 0,002 %, 0,001 %, 0,0009 %, 0,0008 %, 0,0007 %, 0,0006 %, 0,0005 %, 0,0004 %, 0,0003 %, 0,0002 %, ou 0,0001 %, em peso, em peso por volume, ou em volume.

Em algumas concretizações, a concentração de um ou mais dos compostos da invenção presente estará compreendida entre cerca de 0,0001 % e cerca de 50 %, cerca de 0,001 % a cerca de 40 %, cerca de 0,01 % a cerca de 30 %, cerca de 0,02 % a cerca de 29 %, cerca de 0,03 % a cerca de 28 %, cerca de 0,04 % a cerca de 27 %, cerca de 0,05 % a cerca de 26 %, cerca de 0,06 % a cerca de 25 %, cerca de 0,07 % a cerca de 24 %, cerca de 0,08 % a cerca de 23 %, cerca de 0,09 % a cerca de 22 %, cerca de 0,1 % a cerca de 21 %, cerca de 0,2 % a cerca de 20 %, cerca de 0,3 % a cerca de 19 %, cerca de 0,4 % a cerca de 18 %, cerca de 0,5 % a cerca de 17 %, cerca de 0,6 % a cerca de 16 %, cerca de 0,7 % a cerca de 15 %, cerca de 0,8 % a cerca de 14 %, cerca de 0,9 % a cerca de 12 %, cerca de 1 % a cerca de 10 %, em peso, em peso por volume, ou em volume.

Em algumas concretizações, a concentração de um ou mais dos compostos da invenção presente é de entre cerca de 0,001 % e cerca de 10 %, cerca de 0,01 % a cerca de 5 %, cerca de 0,02 % a cerca de 4,5 %, cerca de 0,03 % a cerca de 4 %, cerca de 0,04 % a cerca de 3,5 %, cerca de 0,05 % a cerca de 3 %, cerca de 0,06 % a cerca de 2,5 %, cerca de 0,07 % a cerca de 2 %, cerca de 0,08 % a cerca de 1,5 %, cerca de 0,09 % a cerca de 1 %, cerca de 0,1 % a cerca de 0,9 %, em peso, em peso por volume, ou em volume.

Em algumas concretizações, a quantidade do um ou mais compostos da invenção presente é menor ou igual a 10 g, 9,5 g, 9,0 g, 8,5 g, 8,0 g, 7,5 g, 7,0 g, 6,5 g, 6,0,g, 5,5 g, 5,0 g, 4,5 g, 4,0 g, 3,5 g, 3,0 g, 2,5 g, 2,0 g, 1,5 g, 1,0 g, 0,95 g, 0,9 g, 0,85 g, 0,8 g, 0,75 g, 0,7 g, 0,65 g, 0,6 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,45 g, 0,4 g, 0,35 g, 0,3 g, 0,25 g, 0,2 g, 0,15 g, 0,1 g, 0,09 g, 0,08 g, 0,07 g, 0,06 g, 0,05 g, 0,04 g, 0,03 g, 0,02 g, 0,01 g, 0, 009 g, 0, 008 g, 0,007 g, 0,006 g, 0,005 g, 0,004 g, 0,003 g, 0,002 g, 0,001 g, 0,0009 g, 0,0008 g, 0,0007 g, 0,0006 g, 0,0005 g, 0,0004 g, 0,0003 g, 0,0002 g, ou 0,0001 g.

Em algumas concretizações, a quantidade do um ou mais compostos da invenção presente é maior do que 0,0001 g, 0,0002 g, 0,0003 g, 0,0004 g, 0,0005 g, 0,0006 g, 0,0007 g, 0,0008 g, 0,0009 g, 0,001 g, 0,0015 g, 0,002 g, 0,0025 g, 0,003 g, 0,0035 g, 0,004 g, 0,0045 g, 0,005 g, 0,0055 g, 0, 006 g, 0,0065 g, 0, 007 g, 0,0075 g, 0, 008 g, 0,0085 g, 0, 009 g, 0,0095 g, 0,01 g, 0,015 g, 0,02 g, 0,025 g, 0,03 g, 0,035 g, 0,04 g, 0,045 g, 0,05 g, 0,055 g, 0,06 g, 0,065 g, 0,07 g, 0,075 g, 0,08 g, 0,085 g, 0,09 g, 0,095 g, 0,1 g, 0,15 g, 0,2 g, 0,25 g, 0,3 g, 0,35 g, 0,4 g, 0,45 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,6 g, 0,65 g, 0,7 g, 0,75 g, 0,8 g, 0,85 g, 0,9 g, 0,95 g, 1 g, 1,5 g, 2 g, 2,5, 3 g, 3,5, 4 g, 4,5 g, 5 g, 5,5 g, 6 g, 6,5g, 7 g, 7,5g, 8 g, 8,5 g, 9 g, 9,5 g, ou 10 g.

Em algumas concretizações, a quantidade do urn ou mais compostos da invenção presente está compreendida entre 0,0001-10 g, 0,0005-9 g, 0,001-8 g, 0,005-7 g, 0,01-6 g, 0,05-5 g, 0,1-4 g, 0,5-4 g, ou 1-3 g.

Os compostos consoante a invenção são eficazes numa larga gama de dosagem. Por exemplo, no tratamento de seres humanos adultos, são exemplos das dosagens que se podem utilizar entre 0,01 e 1.000 mg, entre 0,5 e 100 mg, entre 1 e 50 mg por dia, e entre 5 e 40 mg por dia. Uma dosagem exemplar é de 10 a 30 mg por dia. A dosagem exacta dependerá da via de administração, da forma sob a qual se administre o composto, do sujeito que se vai tratar, da massa corporal do sujeito a tratar, e da preferência e experiência do médico assistente.

Estão descritos adiante composições farmacêuticas exemplares e não limitativas bem como métodos para as preparar.

Composições farmacêuticas para administração oral Em algumas concretizações, a invenção proporciona uma composição farmacêutica para administração oral contendo um composto da invenção presente, e um excipiente farmacêutico adequado para administração por via oral.

Em algumas concretizações, a invenção proporciona uma composição farmacêutica sólida para administração oral contendo: (i) uma quantidade eficaz de um composto da invenção presente; opcionalmente (ii) uma quantidade eficaz de um segundo agente; e (iii) um excipiente adequado para administração oral. Em algumas concretizações, a composição também contém: (iv) uma quantidade eficaz de um terceiro agente.

Em algumas concretizações, a composição farmacêutica pode ser uma composição farmacêutica liquida adequada para consumo oral. As composições farmacêuticas da invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como formas de dosagem discretas, tais como cápsulas, hóstias, ou tabletes, ou como líquidos ou aspersões em aerossol contendo cada uma delas uma quantidade predeterminada de um ingrediente activo sob a forma de um pó ou em grânulos, uma solução, ou uma suspensão, num líquido aquoso ou não aquoso, uma emulsão de água em óleo, ou uma emulsão líquida de óleo em água. Estas formas de dosagem podem ser preparadas por qualquer um dos métodos de farmácia, mas todos os métodos incluem o passo de se associar o ingrediente activo com o veículo, que constitui um ou mais dos ingredientes necessários. Em geral, preparam-se as composições misturando uniforme e intimamente o ingrediente activo com os veículos líquidos ou com veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e em seguida, se necessário, enformar-se o produto sob a apresentação pretendida. Por exemplo, pode preparar-se um comprimido por compressão ou por moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Podem preparar-se comprimidos de compressão comprimindo numa máquina adequada o ingrediente activo sob uma forma que flui livremente, tal como um pó ou em grânulos, opcionalmente misturado com um excipiente tal como, mas não se limitando a, um aglomerante, um lubrificante, um diluente inerte, e/ou um agente tensioactivo ou um agente dispersante. Podem fabricar-se comprimidos moldados moldando numa máquina adequada uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente líquido inerte.

Esta invenção também inclui composições farmacêuticas anidras e formas de dosagem incluindo um ingrediente activo, uma vez que a água pode facilitar a degradação de alguns compostos. Por exemplo, pode adicionar-se água (por exemplo, 5 %) nas técnicas farmacêuticas como meio de simular uma armazenagem de longa duração, para se determinarem características tais como o tempo de vida útil ou a estabilidade das formulações ao longo do tempo. Podem preparar-se composições farmacêuticas e formas de dosagem anidras da invenção utilizando ingredientes anidros ou contendo pouca humidade e condições de baixa humidade. Podem tornar-se anidras as composições farmacêuticas e formas de dosagem da invenção que contêm lactose caso seja de esperar que durante o fabrico, a embalagem e a armazenagem ocorra um contacto substancial com humidade. Pode preparar-se uma composição farmacêutica anidra e armazenar-se de modo a manter a sua natureza anidra. Deste modo, podem embalar-se as composições anidras utilizando materiais que se sabe evitarem a exposição à água de tal modo que se podem incluir em estojos adequados para as formulações. Incluem-se nos exemplos de embalagens adequadas, sem que elas a estas se limitem, películas hermeticamente seladas, plásticas ou semelhantes, contentores de unidades de dose, embalagens em blister, e embalagens de tiras.

Pode combinar-se um ingrediente activo numa mistura íntima com um veículo farmacêutico consoante as técnicas farmacêuticas convencionais de preparação galénica. 0 veículo pode assumir uma grande variedade de formas consoante a forma de preparação que se pretender administrar. Na preparação das composições para uma forma de dosagem oral, pode empregar-se qualquer um dos meios farmacêuticos habituais como veículo, tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois, agentes de sabor, conservantes, agentes corantes, e outros semelhantes no caso de preparações líquidas para administração oral (tais como suspensões, soluções, e elixires) ou aerossóis; ou podem utilizar-se no caso de preparações sólidas veículos tais como amidos, açúcares, celulose microcristalina, diluentes, agentes granulantes, lubrificantes, aglomerantes, e agentes desintegrantes, em algumas concretizações sem o emprego de lactose. Por exemplo, incluem-se nos veículos apropriados pós, cápsulas, e comprimidos, para as preparações sólidas orais. Quando tal se pretenda, podem revestir-se os comprimidos utilizando as técnicas habituais, aquosas ou não aquosas.

Incluem-se nos aglomerantes adequados para utilização nas composições farmacêuticas e nas formas de dosagem, mas não se limitam a, amido de milho, amido de batata, ou outros amidos, gelatina, gomas naturais e sintéticas tais como goma-arábica, alginato de sódio, ácido algínico, outros alginatos, tragacanto em pó, goma de guar, celulose e os seus derivados (por exemplo, etilcelulose, acetato de celulose, carboximetilcelulose cálcica, carboximetilcelulose sódica), polivinilpirrolidona, metilcelulose, amido previamente gelatinizado, hidroxipropilmetilcelulose, celulose microcristalina, e misturas destes.

Incluem-se nos exemplos de dargas adequadas para utilização nas composições farmacêuticas e formas de dosagem descritas neste documento, mas não se limitam a, talco, carbonato de cálcio (por exemplo, em grânulos ou em pó) , celulose microcristalina, celulose em pó, dextratos, caulino, manitol, ácido silícico, sorbitol, amido, amido previamente gelatinizado, e as misturas destes.

Podem utilizar-se desintegrantes nas composições da invenção para proporcionar comprimidos que se desintegrem quando expostos a um ambiente aquoso. Utilizando desintegrante demais pode originar comprimidos que se desintegrem no frasco. Utilizar desintegrante a menos pode ser insuficiente para que ocorra a desintegração, e pode portanto alterar a velocidade e a quantidade do ou dos ingredientes activos a partir da forma de dosagem. Portanto, pode utilizar-se uma quantidade suficiente do desintegrante, que não seja nem de menos nem demais para alterar prejudicialmente a libertação do ou dos ingredientes activos, para integrar as formas de dosagem dos compostos descritos neste documento. A quantidade de desintegrante utilizado pode variar com base no tipo de formulação e no modo de administração, o que pode ser facilmente discernivel para quem tenha conhecimentos médios na técnica. Pode utilizar-se na composição farmacêutica entre cerca de 0,5 e cerca de 15 por cento, em peso, de desintegrante, ou entre cerca de 1 e cerca de 5 por cento, em peso, de desintegrante. Incluem-se nos desintegrantes que se podem utilizar para formar composições farmacêuticas e formas de dosagem da invenção, mas não se limitam a, agar-agar, ácido alginico, carbonato de cálcio, celulose microcristalina, croscarmelose sódica, crospovidona, poliacrilina potássica, amidoglicolato de sódio, amido de batata ou tapioca, outros amidos, amido previamente gelatinizado, outros amidos, argilas, outros alginicos, outras celuloses, gomas ou misturas destes.

Incluem-se nos lubrificantes que se podem utilizar para formar composições farmacêuticas e formas de dosagem da invenção, mas não se limitam a, estearato de cálcio, estearato de magnésio, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenoglicol, outros glicóis, ácido esteárico, laurilsulfato de sódio, talco, óleo vegetal hidrogenado (por exemplo, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girassol, óleo de gergelim, azeite, óleo de milho, e óleo de soja) , estearato de zinco, oleato de etilo, laureato de etilo, agar, ou misturas destes. Incluem-se nos lubrificantes adicionais, por exemplo, um gel de sílica silóide, um aerossol coagulado de sílica sintética, ou misturas destes. Pode adicionar-se opcionalmente um lubrificante, numa quantidade inferior a cerca de 1 por cento em peso da composição farmacêutica.

Quando se pretendam suspensões aquosas e/ou elixires para administração oral, o ingrediente activo essencial nelas contido pode ser combinado com diversos agentes de sabor ou edulcorantes, materiais corantes ou pigmentos e, caso tal se pretenda, agentes emulsionantes e/ou de suspensão, em conjunto com diluentes tais como água, etanol, propilenoglicol, glicerina e diversas combinações destes.

Os comprimidos podem ser revestidos ou não, por técnicas conhecidas para atrasar a desintegração e a absorção no tracto gastrointestinal e deste modo proporcionar uma actuação prolongada ao longo de um período de tempo mais longo. Por exemplo, pode incluir-se um material para incluir um intervalo de tempo tal como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo. Também se podem apresentar as formulações para utilização oral como cápsulas de gelatina dura nas quais o ingrediente activo esteja misturado com um diluente inerte sólido, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulino, ou como cápsulas de gelatina moles nas quais o ingrediente activo é misturado com água ou um meio oleoso, por exemplo, óleo de amendoim, parafina liquida ou azeite.

Os tensioactivos que se podem utilizar para formar composições farmacêuticas e formas de dosagem da invenção incluem, mas não se limitam a, tensioactivos hidrofilicos, tensioactivos lipofilicos, e misturas de ambos. Isto é, pode empregar-se uma mistura de tensioactivos hidrofilicos, pode empregar-se uma mistura de tensioactivos lipofilicos, ou pode empregar-se uma mistura de pelo menos um tensioactivo hidrofílico com pelo menos um tensioactivo lipofílico.

Um tensioactivo lipofílico pode em geral ter um valor de HLB de pelo menos 10, enquanto os tensioact ivos lipofilicos adequados podem em geral ter um valor de HLB menor ou igual a cerca de 10. Um parâmetro empírico utilizado para caracterizar a hidrofilicidade e a lipofilicidade relativas de compostos anfifílicos não iónicos é o valor do equilíbrio hidrofílico-lipofílico (valor de "HLB") . Os tensioactivos com valores de HLB menores são mais lipofílicos ou hidrofdbicos, e apresentam maior solubilidade em óleos, enquanto os tensioactivos com valores de HLB mais elevados são mais hidrofilicos, e apresentam uma maior solubilidade em soluções aquosas. Em geral consideram-se os tensioactivos hidrofílicos como sendo aqueles compostos que apresentam valores de HLB maiores do que cerca de 10, bem como os compostos aniónicos, catiónicos, ou zwiteriónicos para os quais a escala de HLB não é em geral aplicável. De uma forma semelhante, ao tensioactivos lipofílicos (isto é, hidrofóbicos) são compostos que têm um valor de HLB menor ou igual a cerca de 10. No entanto, o valor de HLB te um tensioactivo é apenas um indicador aproximado utilizado em geral para permitir a formulação de emulsões industriais, farmacêuticas e cosméticas.

Os tensioactivos hidrofílicos podem ser quer iónicos, quer não iónicos. Incluem-se nos tensioactivos iónicos, mas não se limitam a estes, sais de alquilamónio; sais do ácido fusídico; derivados de aminoácidos com ácidos gordos, oligopéptidos, e polipéptidos; derivados de aminoácidos com acilglicerol, oligopéptidos, e polipéptidos; lecitinas e lecitinas hidrogenadas; lisolecitinas e lisolecitinas hidrogenadas; fosfolípidos e os seus derivados; lisofosfolípidos e os seus derivados; sais de ésteres de carnitina com ácidos gordos; sais dos alquilsulfatos; sais dos ácidos gordos; docusato de sódio; acilactilatos; ésteres de mono e diacilgliceróis com ácido tartárico mono e diacetilados; mono e diacilgliceróis succinilados; ésteres de ácido cítrico com mono e diacilgliceróis; e misturas de todos estes.

Adentro do conjunto mencionado acima, os tensioactivos iónicos incluem, a título de exemplo: lecitinas, lisolecitina, fosfolípidos, lisofosfolípidos e seus derivados; sais de ésteres de ácidos gordos com carnitina; sais de alquilsulfatos; sais de ácidos gordos; docusato de sódio; acilactilatos; ésteres de mono e diacilgliceróis com ácido tartárico mono e diacetilados; mono e diacilgliceróis succinilados; ésteres de ácido cítrico com mono e diacilgliceróis; e misturas de todos estes.

Os tensioactivos iónicos podem ser as formas ionizadas de lecitina, lisolecitina, fosfatidilcolina, fosfatidilletanolamina, fosfatidilglicerol, ácido fosfatídico, fosfatidilserina, lisofosfatidilcolina, lisofosfatidiletanolamina, lisofosfatidilglicerol, ácido lisofosfatídico, lisofosfatidilserina, PEG-fosfatidiletanolamina, PVP-fosfatidiletanolamina, ésteres lactílicos de ácidos gordos, 2-lactilato de estearoílo, lactilato de estearoílo, monoacilgligeróis succinilados, ésteres de mono e diacilgliceróis com ácido tartárico mono e diacetilados; ésteres de ácido cítrico com mono e diacilgliceróis; colilsarcosina, caproato, caprilato, caprato, laurato, miristato, palmitato, oleato, ricinoleato, linoleato, linolenato, estearato, laurilsulfato, teradecilsulfato, docusato, lauroíl carnitinas, palmitoílcarnitinas, miristoilcarnitinas, e sais e misturas de todos estes.

Os tensioactivos hidrofílicos não iónicos podem incluir, mas não se limitam a, alquilglucósidos; alquilmaltósidos; alquiltioglucósidos; laurilmacrogolacilgliceróis; éteres polioxialquilenoalquilicos tais como éteres alquilicos de polietilenoglicol; polioxialquilenoalquilfenóis tais como polietilenoglicolalquolfenóis; ésteres de ácidos gordos com polioxialquilenoalquilfenóis tais como monoésteres de ácidos gordos com polietilenoglicol e diésteres de ácidos gordos com polietilenoglicol; ésteres de ácidos gordos com polietilenoglicolglicerol; ésteres de ácidos gordos com poliglicerol; ésteres de ácidos gordos com polioxialquileno-sorbitan tais como ésteres de ácidos gordos com polietilenoglicol-sorbitan; produtos hidrofílicos de transesterificação de um poliol com pelo menos um membro do conjunto constituído por acilgliceróis, óleos vegetais, óleos vegetais hidrogenados, ácidos gordos, e esteróis; polioxietilenoesteróis, seus derivados, e análogos; vitaminas polioxietiladas e seus derivados; copolímeros em blocos de polioxietileno-polioxipropileno; e as suas misturas; ésteres de ácidos gordos com polietilenoglicol-sorbitan e os produtos hidrofílicos da transesterificação de um poliol com pelo menos um membro do conjunto constituído por triacilgliceróis, óleos vegetais, e óleos vegetais hidrogenados. 0 poliol pode ser glicerol, etilenoglicol, polietilenoglicol, sorbitol, propilenoglicol, pentaeritritol, ou um sacárido.

Incluem-se noutros tensioactivos hidrofílicos não iónicos, sem qualquer limitação, laurato de PEG-10, laurato de PEG-12, laurato de PEG-20, laurato de PEG-32, dilaurato de PEG-32, oleato de PEG-12, oleato de PEG-15, oleato de PEG-20, dioleato de PEG-20, oleato de PEG-32, oleato de PEG-200, oleato de PEG-400, estearato de PEG-15, diestearato de PEG-32, estearato de PEG-40, estearato de PEG-100, dilaurato de PEG-20, trioleatogliceril-PEG-25, dioleato de PEG-32, gliceril-laurato de PEG-20, gliceril-laurato de PEG-30, glicerilestearato de PEG-20, gliceriloleato de PEG-20, gliceriloleato de PEG-30, gliceril-laurato de PEG-30, gliceril-laurato de PEG-40, óleo de palmiste-PEG-40, óleo de rícinos hidrogenado-PEG-50, óleo de rícinos-PEG-40, óleo de ricinos-PEG-35, óleo de rícinos-PEG-60, óleo de rícinos hidrogenado-PEG-40, óleo de rícinos hidrogenado-PEG-60, óleo de milho-PEG-60, caprato/caprilato glicerilos de PEG-6, caprato/caprilato glicerilos de PEG-8, laurato de poligliceril-10, PEG-30 colesterol, PEG-25 fitoesterol, PEG-30 esterol de soja, trioleato de PEG-20, sorbitan-oleato de PEG-40, sorbitan-laurato de PEG-80, polissorbato 20, polissorbato 80, éter ΡΟΕ-9-laurílico, éter ΡΟΕ-23-laurílico, éter POE-10- oleílico, éter ΡΟΕ-20-oleílico, éter ΡΟΕ-20-estearílico, sucinato de tocoferil-PEG-100, PEG-24 colesterol, oleato de poliglicerilo-10, Tween 40, Tween 60, monoestearato de sacarose, monolaurato de sacarose, monopalmitato de sacarose, a série dos nonilfenol-PEG 10 a 100, a série de octilfenol-PEG 15 a 100, e poloxâmeros.

Incluem-se nos tensioactivos lipofilicos adequados, apenas a titulo de exemplo: álcoois gordos; ésteres de glicerol com ácidos gordos; ésteres de glicerol com ácidos gordos acetilados; ésteres de ácidos gordos com álcoois inferiores; ésteres de ácidos gordos com propilenoglicol; ésteres de ácidos gordos com sorbitan; ésteres de ácidos gordos com polietilenoglicol-sorbitan; esteróis e derivados de esteróis; esteróis polioxietilados e derivados de esteróis; éteres alquílicos de polietilenoglicol; ésteres de açúcar; éteres de açúcar; derivados de ácido láctico de monoacilgliceróis e diacilgliceróis; produtos hidrofóbicos da transesterificação de um poliol com pelo menos um membro do conjunto constituído por acilgliceróis, óleos vegetais, óleos vegetais hidrogenados, ácidos gordos e esteróis; vitaminas solúveis em óleo e seus derivados; e misturas de todos estes. Neste conjunto, incluem-se nos tensioactivos lipofilicos preferidos os ésteres de ácidos gordos com glicerol, ésteres de ácidos gordos com propilenoglicol, e as suas misturas, ou os produtos hidrofóbicos de transesterificação de um poliol com pelo menos um membro do conjunto constituído por óleos vegetais, óleos vegetais hidrogenados, e triacilgliceróis.

Numa concretização, a composição pode incluir um solubilizante para assegurar uma boa dissolução e/ou solubilização do composto da invenção presente e para minimizar a precipitação do composto da invenção presente. Isto pode ser particularmente importante para composições para utilização não oral, por exemplo, composições para injecção. Também se pode adicionar um solubilizante para aumentar a solubilidade do fármaco hidrofílico e/ou de outras componentes, tais como os tensioactivos, ou para manter a composição sob a forma de uma solução ou uma dispersão que seja estável ou homogénea.

Incluem-se nos exemplos de solubilizantes adequados, mas não se limitam a, os seguintes: álcoois e polióis, tais como etanol, isopropanol, butanol, álcool benzilico, etilenoglicol, propilenoglicol, butanodióis e os seus isómeros, glicerol, pentaeritritol, sorbitol, manitol, transcutol, isossorbido de dimetilo, polietilenoglicol, polipropilenoglicol, poli (álcool vinilico), hidroxipropilmetilcelulose e outros derivados de celulose, ciclodextrinas e derivados de ciclodextrina; éteres de polietilenoglicóis com uma massa molecular média de cerca de 200 a cerca de 6.000, tais como éter de álcool tetrahidrofurfurílico com PEG (glicofurol) ou metoxi-PEG; amidas e outros compostos contendo azoto tais como 2-pirrolidona, 2-piperidona, ε-caprolactama, N-alquilpirrolidona, N-hidroxialquilpirrolidona, N-alquilpiperidona, N-alquilcaprolactama, dimetilacetamida e polivinilpirrolidona; ésteres tais como propionato de etilo, citrato de tributilo, citrato de acetiltrietilo, citrato de acetiltributilo citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, butirato de etilo, triacetina, monoacetato de propilenoglicol, diacetato de propilenoglicol, ε-caprolactona e os seus isdmeros, δ-valerolactona e os seus isdmeros, β-butirolactona e os seus isdmeros; e outros solubilizantes conhecidos na técnica, tais como dimetilacetamida, isossorbido de dimetilo, N-metilpirrolidonas, mono-octanoina, éter monoetilico do dietilenoglicol, e água.

Também se podem utilizar misturas de solubilizantes. Incluem-se nos exemplos, mas não se limitando a estes, triacetina, citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, N-hidroxietilpirrolidona, polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose, hidroxipropilciclodextrinas, etanol, polietilenoglicol 200-100, glicofurol, transcutol, propilenoglcol, e issossorbido de dimetilo. Incluem-se nos solubilizantes especialmente preferidos sorbitol, glicerol, triacetina, álcool etílico, PEG-400, glicofurol e propilenoglicol. Não há nenhuma limitação especial quanto à quantidade de solubilizante que se pode incluir. A quantidade de um determinado solubilizante pode ser limitada à quantidade biologicamente aceitável, que pode ser facilmente determinada por um indivíduo especializado. Em algumas circunstâncias, pode ser vantajoso incluir quantidades de solubilizantes muito maiores do que as quantidades biologicamente aceitáveis, por exemplo para maximizar a concentração em fármaco, removendo-se o excesso do solubilizante antes de se proporcionar a composição a um doente, utilizando técnicas convencionais, tais como a destilação ou a evaporação. Deste modo, quanto está presente, o solubilizante pode corresponder a uma razão ponderai de 10 %, 25 %, 50 %, 100 %, ou até cerca de 200 %, em peso, com base no conjunto dos pesos do fármaco e dos outros excipientes. Caso tal se pretenda, também se podem utilizar quantidades muito pequenas de solubilizante, tais como 5 %, 2 %, 1 % ou mesmo menos. Tipicamente, o solubilizante pode estar presente numa quantidade de cerca de 1 % a cerca de 100 %, mais tipicamente entre cerca de 5 % e cerca de 25 %, em peso. A composição pode além disto incluir um ou mais aditivos e excipientes aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Incluem-se nestes aditivos e excipientes, sem qualquer limitação, descolantes, agentes anti-espuma, agentes tamponizantes, polímeros, antioxidantes, conservantes, agentes quelantes, moduladores da viscosidade, agentes de tonicifidade, sabores, corantes, aromas, opacificantes, agentes de suspensão, aglomerantes, cargas, plastificantes, lubrificantes, e misturas de todos estes.

Além disto, pode incorporar-se um ácido ou uma base na composição para facilitar o processamento, para aumentar a estabilidade, ou por outras razões. Incluem-se nos exemplos de bases aceitáveis do ponto de vista farmacêutico os aminoácidos, ésteres de aminoácido, hidróxido de amónio, hidróxido de potássio, hidróxido de sódio, hidrogenocarbonato de sódio, hidróxido de alumínio, carbonato de cálcio, hidróxido de magnésio, silicato de alumínio e magnésio, silicato de alumínio sintético, hidrocalcite sintética, hidróxido de alumínio e magnésio, di-isopropiletilamina, etanolamina, etilenodiamina, trietanolamina, trietilamina, tri-isopropanolamina, trimetilamina, tris(hidroximetil)aminometano (TRIS) e outros semelhantes. Também são adequadas as bases que são sais de um ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico, tal como ácido acético, ácido acrílico, ácido adípico, ácido algínico, ácido alcanossulfónico, aminoácidos, ácido ascórbico, ácido benzóico, ácido bórico, ácido butírico, ácido carbónico, ácido cítrico, ácidos gordos, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido hidroquinossulfónico, ácido isoascórbico, ácido láctico, ácido maleico, ácido oxálico, ácido para-bromofenilsulfónico, ácido propiónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tânico, ácido tartárico, ácido tioglicólico, ácido toluenossulfónico, ácido úrico, e outros semelhantes. Os sais de ácidos polipróticos, tais como fosfato de sódio, hidrogenofosfato dissódico, e dihidrogenofosfato de sódio também podem ser utilizados. Quando a base é um sal, o catião pode ser qualquer um que seja conveniente e aceitável do ponto de vista farmacêutico, tal como amónio, metais alcalinos, metais alcalino-terrosos, e outros semelhantes. Podem inclui-se nos exemplo, mas não se limitando a estes, sódio, potássio, lítio, magnésio, cálcio e amónio. São ácidos adequados os ácidos orgânicos ou inorgânicos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Incluem-se nos exemplos de ácidos inorgânicos adequados ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido bórico, ácido fosfórico, e outros semelhantes. Incluem-se nos exemplos de ácidos orgânicos adequados ácido acético, ácido acrílico, ácido adípico, ácido algínico, ácidos alcanossulfónicos, ácidos aminados, ácido ascórbico, ácido benzóico, ácido bórico, ácido butírico, ácido carbónico, ácido cítrico, ácidos gordos, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido hidroquinossulfónico, ácido isoascórbico, ácido láctico, ácido maleico, ácido metanossulfónico, ácido oxálico, ácido p-bromofenilsulfónico, ácido propiónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tânico, ácido tartárico, ácido tioglicólico, ácido toluenossulfónico, ácido úrico e outros semelhantes.

Composições farmacêuticas para injecção. Em algumas concretizações, a invenção proporciona uma composição farmacêutica para injecção contendo um composto da invenção presente e um excipiente farmacêutico adequado para injecção. As componentes e as quantidades dos agentes nas composições são tal como descritas neste documento.

As formas nas quais as novas composições da invenção presente podem ser incorporadas para administração por injecção incluem suspensões aquosas ou oleosas, ou emulsões, com óleo de gergelim, óleo de milho, óleo de semente de algodão, ou óleo de amendoim, assim como elixires, manitol, dextrose, ou uma solução aquosa estéril, e veículos farmacêuticos semelhantes.

As soluções aquosas em soro salino também são utilizadas convencionalmente para injecção. Também se podem utilizar etanol, glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol líquido, e outros semelhantes (e as suas misturas adequadas), derivados de ciclodextrina, e óleos vegetais. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pela utilização de um revestimento, tal como lecitina, para manter o tamanho de partícula pretendido no caso de uma dispersão e pela utilização de tensioactivos. A prevenção da acção de micro-organismos pode ser conseguida por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal, e outros semelhantes.

As soluções injectáveis estéreis são preparadas por incorporação do composto da invenção presente, na quantidade pretendida, no solvente apropriado, com vários outros ingredientes tal como os enumerados acima, consoante se pretenda, seguindo-se uma esterilização por filtração. Geralmente, as dispersões são preparadas por incorporação dos vários ingredientes activos esterilizados num veículo estéril que contém o meio de dispersão de base e os outros ingredientes necessários, seleccionados a partir daqueles que se enumeraram acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injectáveis estéreis, certos métodos desejáveis de preparação são secagem em vazio e técnicas de liofilização que produzem um pó do ingrediente activo, mais qualquer ingrediente adicional pretendido, a partir de uma sua solução previamente esterilizada por filtração.

Composições farmacêuticas para administração tópica_(por_exemplo,_transdérmica) . Em algumas concretizações, a invenção proporciona uma composição farmacêutica para veiculação transdérmica contendo um composto da invenção presente e um excipiente farmacêutico adequado para o transporte transdérmico.

As composições da invenção presente podem ser formuladas para se obterem preparações sob a forma sólida, semi-sólida, ou liquida, adequadas para administração local ou tópica, tais como geles, geleias solúveis em água, cremes, loções, suspensões, espumas, pós, suspensões, pomadas, soluções, óleos, pastas, supositórios, pulverizações, emulsões, soluções salinas, soluções baseadas em sulfóxido de dimetilo (DMSO). Em geral, os transportadores com densidades mais elevadas são capazes de proporcionar numa área, uma exposição prolongada dos ingredientes activos. Em contraste, uma formulação em solução pode proporcionar uma exposição mais imediata ao ingrediente activo na área escolhida.

As composições farmacêuticas também podem incluir veículos ou excipientes adequados sólidos ou em fase de gel, que são compostos que permitem uma maior penetração de, ou que adjuvam a entrega de, moléculas terapêuticas, através da barreira de permeabilidade do stratum corneum da pele. Existem muitas destas moléculas para aumento de penetração que são conhecidas pelos especialistas na técnica da formulação tópica. Incluem-se nos exemplos desses transportadores e excipientes, embora não se limitem a, humectantes (por exemplo, ureia), glicóis (por exemplo, propilenoglicol), álcoois (por exemplo, etanol), ácidos gordos (por exemplo, o ácido oleico), tensioactivos (por exemplo, miristato de isopropilo e laurilsulfato de sódio), pirrolidonas, monolaurato de glicerol, sulfóxidos, terpenos (por exemplo, mentol), aminas, amidas, alcanos, alcanóis, água, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares, amidos, derivados de celulose, gelatina, e polímeros tais como polietilenoglicóis.

Outra formulação exemplificativa para utilização nos métodos da invenção presente recorre a dispositivos de transporte transdérmico ("pachos"). Podem utilizar-se estes pachos transdérmicos para proporcionar infusão contínua ou descontínua de um composto da invenção presente em quantidades controladas, com ou sem outro agente. A construção e utilização de pachos transdérmicos para veicular agentes farmacêuticos é bem conhecida na técnica. Vejam-se, por exemplo, as Pat. U.S. Nos. 5.023.252, 4.992:445 e 5.001,139. Podem construir-se pachos destes para entrega continuada, pulsada, ou a rogo, dos agentes farmacêuticos.

Composições farmacêuticas para inalação. Incluem-se nas composições para inalação ou insuflação ,soluções e suspensões em solventes aquosos ou orgânicos, ou suas misturas, e em pós, aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. As composições sólidas ou liquidas podem conter excipientes adequados aceitáveis do ponto de vista farmacêutico tal como se descreveram acima. Administram-se preferivelmente as composições pela via respiratória oral ou nasal, para um efeito local ou sistémico. Podem nebulizar-se as composições em solventes preferivelmente aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, por utilização de gases inertes. As soluções nebulizadas podem ser inaladas directamente do dispositivo nebulizador, ou o dispositivo nebulizador pode estar ligado a uma máscara facial, ou a uma máquina de respirar com pressão positiva intermitente. Podem administrar-se composições em solução, suspensão, ou em pó, preferivelmente por via oral ou nasal, recorrendo a dispositivos que transportem e entreguem a formulação do modo devido.

Outras composições farmacêuticas. Também se podem preparar composições farmacêuticas a partir das composições descritas neste documento e de um ou mais excipientes aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, adequados para administração sublingual, bucal, rectal, intra-óssea, intraocular, intranasal, epidural, ou intraespinal. As preparações para estas composições farmacêuticas são bem conhecidas na técnica. Veja-se, por exemplo, Anderson, Philip 0.; Knoben, James E.; Troutman, William G, editores, Handbook of Clinical Drug Data, Décima Edição, McGraw-Hill, 2002; Pratt e Taylor, editores, Principles of Drug Action, Terceira Edição, Churchill Livingston, Nova Iorque, 1990; Katzung, editor, Basic and Clinical Pharmacology, Nona Edição, McGraw Hill, 2003; Goodman e Gilman, editores, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Décima Edição, McGraw Hill, 2001; Remington's Pharmaceutical Sciences, 20a Edição, Lippincott Williams & Wilkins, 2000; Martindale, The Extra Pharmacopoeia, Trigésima Segunda Edição (The Pharmaceutical Press, Londres, 1999); todos os quais se incorporam integralmente neste documento por citação. A administração dos compostos ou das composições farmacêuticas da invenção presente pode ser efectuada por qualquer método que permita a entrega dos compostos no local de actuação. Estes métodos incluem vias orais, vias intraduodenais, injecção parentérica (incluindo endovenosa, intra-arterial, subcutânea, intramuscular, intravascular, intraperitoneal ou infusão), tópica (aplicação transdérmica por exemplo), administração rectal, uma via de entrega local por cateter ou stent ou por inalação. Os compostos podem também ser administrados por via intra-adiposa ou intratecal. A quantidade administrada de composto será dependente do mamífero a ser tratado, da severidade da patologia ou estado, da taxa de administração, da disposição do composto e do critério do médico assistente. No entanto, uma dosagem eficaz será na gama de entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg por kg de peso corporal por dia, de preferência cerca de 1 a cerca de 35 mg/kg/dia, em dose única ou dose dividida. Para um humano de 70 kg, isto significaria cerca de 0,05 a 7 g/dia, de preferência cerca de 0,05 a cerca de 2,5 g/dia. Em alguns casos, podem ser mais do que adequados teores de dosagem inferiores ao limite inferior da gama anteriormente mencionada, enquanto em outros casos podem ser empregues doses ainda maiores sem causar qualquer efeito secundário prejudicial, por exemplo dividindo essas doses maiores em diversas doses pequenas para administração ao longo do dia.

Em algumas concretizações, administra-se uma única dose de um composto da invenção. Tipicamente, essa administração ocorrerá por injecção, por exemplo, injecção endovenosa, para se introduzir rapidamente o agente. No entanto, podem utilizar-se outras vias, consoante seja apropriado. Também se ode utilizar uma dose única de um composto da invenção para o tratamento de um estado agudo.

Em algumas concretizações, administra-se um composto da invenção em múltiplas doses. A dosagem pode ser de cerca de uma, duas, três vezes, quatro vezes, cinco vezes, seis vezes, ou mais de seis vezes ao dia. A dosagem pode ser de cerca de uma vez por mês, uma vez em cada duas semanas, uma vez por semana, ou uma vez dia sim, dia não. Noutra forma de concretização, um composto da invenção e outro agente são administrados em conjunto cerca de uma vez ao dia ou até cerca de 6 vezes ao dia. Numa outra forma de concretização, a administração de um composto da invenção e um agente continua durante menos do que cerca de 7 dias. Noutra forma ainda de concretização, a administração continua durante mais do que cerca de 6, 10, 14, 28 dias, dois meses, seis meses ou um ano. Em alguns casos, a dosagem continua é conseguida e mantida enquanto for necessário. A administração dos agentes da invenção pode continuar enquanto for necessário. Em algumas concretizações, um agente da invenção é administrado durante mais de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14 ou 28 dias. Em algumas concretizações, um agente da invenção é administrado durante menos de 28, 14, 7, 6, 5, 4, 3, 2 ou 1 dia. Em algumas concretizações, um agente da invenção é administrado cronicamente numa base continua, por exemplo, para o tratamento de estados crónicos.

Pode administrar-se uma quantidade eficaz de um composto da invenção pode ser administrado em dose única ou doses múltiplas por qualquer dos modos de administração aceites para agentes que possuem utilidades similares, incluindo rectal, bucal, intranasal e transdérmica, por injecção intra-arterial, endovenosa, intraperitoneal, parentérica, intramuscular, subcutânea, por via oral, tópica, ou como um inalante.

As composições da invenção podem também ser aplicadas por meio de um dispositivo impregnado ou revestido tal como um stent, por exemplo, ou um dispositivo cilíndrico em polímero inserto nas artérias. Um tal método de administração pode, por exemplo, ajudar na prevenção ou na melhoria da restenose após procedimentos tais como os de angioplastia de balão. Sem qualquer limitação por teorias, os compostos da Invenção podem retardar ou inibir a migração e a proliferação de células de músculo liso da parede arterial, que contribuem para a restenose. Pode administrar-se um composto da invenção, por exemplo, por encaminhamento ao local a partir da estrutura de um stent, de um enxerto de um stent, de enxertos, ou a partir da cobertura ou bainha de um stent. Em algumas concretizações, um composto da invenção é misturado com uma matriz. Essa matriz pode ser uma matriz polimérica, e pode servir para ligar o composto ao stent. Incluem-se nas matrizes poliméricas adequados para tal utilização, por exemplo, poliésteres à base de lactonas ou copoliésteres, tais como polilactido, poli(glicólido de caprolactona), poliortoésteres, polianidridos, poliaminoácidos, polissacáridos, polifosfazenos, poli(éter-éster), copoliméricos (por exemplo PEO-PLLA); polidimetilsiloxano, poli(etileno-acetato de vinilo), polímeros à base de acrilato ou copolímeros (por exemplo polihidroxietilmetacrilato de metilo,

polivinilpirrolidona), polímeros fluorados, tais como politetrafluoroetileno e ésteres de celulose. As matrizes adequadas podem ser não degradáveis ou podem degradar-se com o tempo, libertando o composto ou compostos. Podem aplicar-se compostos da invenção à superfície do stent por vários métodos tais como revestimento por imersão/rotação, revestimento por pulverização, revestimento por imersão, e/ou com escova de revestimento. Os compostos podem ser aplicados num solvente e pode deixar-se evaporar o solvente, formando assim uma camada de composto sobre o stent. Em alternativa, o composto pode estar localizado no corpo do stent ou no enxerto, por exemplo, em microcanais ou microporos. Quando implantado, o composto difunde-se para fora do material da prótese endovascular para contactar a parede arterial. Podem preparar-se estes stents por imersão de um stent fabricado de forma a conter microcanais tais microporos ou numa solução do composto da invenção, num solvente adequado, seguido de evaporação do solvente. Pode remover-se o excesso de fármaco sobre a superfície da prótese endovascular por meio de uma breve lavagem com solvente adicional. Noutras concretizações ainda, os compostos da invenção podem ser covalentemente ligados a um stent ou a um enxerto. Pode utilizar-se um ligando covalente que se degrada in vivo, levando à libertação do composto da invenção. Qualquer ligação bio-lábil pode ser utilizada para tal fim, tal como ligações éster, amida ou anidrido. Podem administrar-se os compostos da invenção por via intravascular, adicionalmente, a partir de um balão utilizado durante a angioplastia. A administração extravascular dos compostos através do pericárdio ou através da aplicação eventual de formulações da invenção, também pode ser utilizada para diminuir a restenose.

Diversos dispositivos com stent que se podem utilizar como se descreveu estão mencionados, por exemplo, nas seguintes referências, todas as quais se incorporam integralmente por citação: Pat. U.S. N2 5.451.233; Pat. U.S. N2 5.040.548; Pat. U.S. N2 5.061.273; Pat. U.S. N2 5.496.346; Pat. U.S. N2 5.292.331; Pat. U.S. N2 5.674.278; Pat. U.S. N2 3.657.744; Pat. U.S. N2 4.739.762; Pat. U.S. N2 5.195.984; Pat. U.S. N2 5.292.331; Pat. U.S. N2 5.674.278; Pat. U.S. N2 5.879.382; Pat. U.S. N2 6.344.053.

Podem administrar-se os compostos da invenção em dosagens. Sabe-se na técnica que devido à variabilidade entre sujeitos nas farmacocinéticas dos compostos, a individualização do regime de dosagem é necessária para uma terapia óptima. O doseamento apropriado com um composto da invenção pode ser encontrado por experimentação de rotina, atenta a especificação presente.

Quando se administra um composto da invenção numa composição que inclua um ou mais agentes, e um agente tiver uma vida média mais curta do que o composto da invenção, podem ajustar-se as formas de unidade de dose do agente e do composto em função das vidas médias. A composição farmacêutica em apreço pode, por exemplo, assumir uma forma adequada para administração por via oral como um comprimido, cápsula, pilula, pó, formulações de libertação sustentada, solução, suspensão, para injecção parenteral como uma solução estéril, suspensão ou emulsão, para administração tópica como um unguento ou creme, ou para administração rectal como um supositório. A composição farmacêutica pode ser em formas de dosagem unitária adequadas para administração única de dosagens precisas. A composição farmacêutica incluirá um veiculo farmacêutico convencional ou excipiente e um composto de acordo com a invenção a titulo de ingrediente activo. Além disso, pode incluir outros agentes medicinais ou farmacêuticos, veículos, adjuvantes, etc.

Incluem-se nas formas exemplificativas para administração parenteral as soluções ou a suspensões do composto activo em soluções aquosas estéreis, por exemplo, soluções em propilenoglicol aquoso, ou em solução aquosa de dextrose. Estas formas de dosagem podem ser adequadamente tamponizadas, caso tal se pretenda.

Pode determinar-se a actividade dos compostos da invenção presente recorrendo ao processo seguinte, bem como ao processo descrito nos exemplos adiante. Avalia-se a actividade da quinase medindo a incorporação de γ-33ρ-fosfato de γ-33 P-ATP no substrato marcado com His do terminal N, que é expresso em E. coli e se purifica por métodos convencionais, na presença da quinase. Leva-se a cabo o ensaio numa placa de polipropileno com 96 poços. A mistura para incubação (100 pL) inclui Hepes 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 5 mM em β-glicerolf osf ato, 100 μΜ em ortovanadato de sódio, 5 mM em DTT, 5 nM em quinase, e 1 μΜ em substrato. Suspendem-se os inibidores em DMSO, e levam-se a cabo todas as reacções, incluindo os controlos a uma concentração final de 1 % em DMSO. Iniciam-se as reacções por adição de 10 μΜ de ATP (com 0,5 pCi de y-33P-ATP/poço) e incuba-se à temperatura ambiente durante 45 minutos. Para terminar a reacção adiciona-se igual volume de TCA a 25 %, precipitando as proteínas. Armadilham-se as proteínas precipitadas em placas filtrantes em vidro sinterizado B, e enxagua-se o excesso de ATP marcado utilizando um dispositivo de colheita Tomtec MACH III. Deixam-se secar ao ar as placas antes de se adicionar 30 pL/poço de Microscint 20 da Packard, e contam-se as placas utilizando um TopCount da Packard. A invenção também proporciona estojos. Os estojos incluem um composto ou compostos da invenção presente tal como descritos neste documento, em embalagem apropriada, e material escrito que pode incluir instruções de utilização, descrição de estudos clínicos, listagem de efeitos colaterais, e outros semelhantes. Estes estojos também podem incluir informação, tal como referências da literatura científica, materiais insertos na embalagem, resultados de estudos clínicos, e/ou resumos destes trabalhos e outros semelhantes, que indicam ou estabelecem as actividades e/ou as vantagens da composição, e/ou que descrevem o doseamento, a administração, os efeitos colaterais, as interacções com outros medicamentos, ou outra informação útil para quem proporcionar o tratamento. Estas informações podem basear-se nos resultados de vários estudos, por exemplo, estudos em animais experimentais envolvendo modelos in vivo e estudos com base em ensaios clínicos humanos. 0 estojo pode ainda conter um outro agente. Em algumas concretizações, o composto da invenção presente e o agente são fornecidos como composições separadas em recipientes separados dentro do estojo. Em algumas concretizações, o composto da invenção presente e o agente são fornecidos como uma composição única dentro de um recipiente no estojo. A embalagem adequada e outros artigos de uso (por exemplo, o copo de medição para as preparações líquidas, a folha de embrulhar para se minimizar a exposição ao ar, e outros semelhantes) são conhecidos na técnica e podem ser incluídos no estojo. Podem ser fornecidos os estojos descritos neste documento, comercializados e/ou promovidos junto de profissionais de saúde, incluindo médicos, enfermeiros, farmacêuticos, funcionários fiscalizadores do formulário, e outros semelhantes. Os estojos podem também, em algumas concretizações, ser comercializados directamente ao consumidor.

MÉTODOS A invenção também proporciona compostos ou composições Farmacêuticas da invenção presente para utilização no tratamento de doenças, incluindo mas não se limitando a doenças associadas ao mau funcionamento de um ou mais tipos de PI3 quinase. Uma descrição detalhada dos estados e patologias mediados pela actividade de quinase pllOõ é apresentada na Sadu et ai., em WO 01/81.346.

Os métodos de tratamento proporcionados neste documento incluem a administração ao sujeito de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção. Numa forma de concretização, a invenção presente proporciona um composto para utilização no tratamento de uma patologia inflamatória, incluindo doenças auto-imunes, num mamífero. Incluem-se nos exemplos de doenças auto-imunes, mas não se limitam a, encefalomielite disseminada aguda (ADEM), doença de Addison, síndrome de anticorpo antifosfolípido (APS), anemia aplásica, hepatite auto-imune, doença celíaca, doença de Crohn, diabetes mellitus (de tipo I), síndrome de Goodpasture, doença de Graves, síndrome de Guillain-Barré (GBS), doença de Hashimoto, lúpus eritematoso, esclerose múltipla, miastenia grave, síndrome opsoclonus myoclonus (OMS), neurite óptica, tiroidite de Ord, pênfigo, poliartrite, cirrose biliar primária, psoríase, artrite reumatóide, síndrome de Reiter, arterite de Takayasu, arterite temporal (também conhecida como "arterite de células gigantes"), anemia hemolítica auto-imune morna, granulomatose de Wegener, alopecia universalis, doença de Chagas, síndrome da fadiga crónica, disautonomia, endometriose, hidradenite supurativa, cistite intersticial, neuromiotonia, sarcoidose, escleroderma, colite ulcerosa, vitiligo, e vulvodinia. Incluem-se noutras patologias as perturbações da reabsorção óssea e a trombose.

Em algumas concretizações, a utilização para ο tratamento de doenças inflamatórias ou auto-imunes que inclui a administração a um sujeito (por exemplo a um mamífero) de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um ou mais compostos da invenção presente que inibem selectivamente a PI3K-5 e/ou a Ρΐ3Κ-γ, em comparação com todas as outras PI3 quinases de tipo I. Essa inibição selectiva de PI3K-5 e/ou Ρΐ3Κ-γ pode ser vantajosa para o tratamento de qualquer das doenças ou estados descritos neste documento. Por exemplo, a inibição selectiva de PI3K-5 pode inibir reacções inflamatórias associadas a doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, ou doenças relacionadas com uma reacção imunitária indesejável incluindo mas não se limitando a asma, enfisema, alergia, dermatite, artrite reumatóide, psoríase, lúpus eritematoso, ou doença de enxerto contra hospedeiro. A inibição selectiva de PI3K-5 pode ainda evitar uma redução na reacção imunológica inflamatória indesejável sem uma diminuição concomitante da capacidade para combater uma infecção bacteriana, virai, e/ou uma infecção fúngica. A inibição selectiva de ambas as PI3K-5 e Ρΐ3Κ-γ pode ser vantajosa para inibir a reacção inflamatória no sujeito de um grau maior do que seria previsto para inibidores que inibem selectivamente apenas a via PI3K ou a Ρΐ3Κ-8-γ. Num aspecto, um ou mais dos métodos em questão são eficazes na redução da produção de anticorpos específicos contra o antigénio in vivo, em cerca de 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 7,5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes, 250 vezes, 500 vezes, 750 vezes, ou cerca de 1.000 vezes ou mais. Noutro aspecto, um ou mais dos métodos em questão são eficazes na diminuição da produção do IgG3 e/ou de IgGM específicos para o antigénio in vivo em cerca de 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 7,5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes, 250 vezes, 500 vezes, 750 vezes, ou cerca de 1.000 vezes ou mais.

Num aspecto, uma ou mais das utilizações em questão são eficazes em melhorar sintomas associados à artrite reumatóide incluindo mas não se limitando à diminuição do inchaço das articulações, à diminuição dos teores em anti-colagénio no soro, e/ou uma diminuição das patologias articulares tais como a reabsorção óssea, lesão da cartilagem, pano (pannus), e/ou inflamação. Noutro aspecto, as utilizações em questão são eficazes na diminuição da inflamação do tornozelo em pelo menos de cerca de 2 %, 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 50 %, 60 %, ou cerca de 75 % a 90 %. Noutro aspecto, as utilizações em questão são eficazes na diminuição da inflamação do joelho em pelo menos cerca de 2 %, 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 50 %, 60 %, ou cerca de 75 % a 90 %, ou mais. Noutro aspecto ainda, as utilizações em questão são eficazes na diminuição dos teores em anti-colagénio do tipo II em pelo menos cerca de 10 %, 12 %, 15 %, 20 %, 24 %, 25 %, 30 %, 35 %, 50 %, 60 %, 75 %, 80 %, 86 %, 87 %, ou cerca de 90 % ou mais. Noutro aspecto, as utilizações em questão são eficazes na diminuição da pontuação histopatológica do tornozelo em cerca de 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 75 %, 80 %, 90 % ou mais. Noutro aspecto ainda, as utilizações em questão são eficazes na diminuição da pontuação histopatológica do joelho em cerca de 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 75 %, 80 %, 90 % ou mais.

Noutras concretizações, a invenção presente proporciona os compostos ou composições farmacêuticas para utilização no tratamento de doenças respiratórias incluindo mas não se limitando a doenças que afectam os lóbulos do pulmão, cavidade pleural, brônquios, traqueia, o tracto respiratório superior, ou os nervos e músculos para a respiração. Por exemplo, são proporcionados métodos para tratar a doença pulmonar obstrutiva. Doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) é um termo genérico para um grupo de doenças do tracto respiratório que são caracterizadas por obstrução ou limitação do caudal de ar. Incluem-se nos estados que este termo geral refere: bronquite crónica, enfisema e bronquiectasias.

Numa outra concretização, os compostos descritos neste documento são utilizados para o tratamento da asma. Além disso, os compostos ou composições farmacêuticas descritos neste documento podem ser utilizados para o tratamento da endotoxemia e da sepsia. Numa concretização, os compostos ou composições farmacêuticas descritos neste documento são utilizados para o tratamento da artrite reumatóide (AR). Em ainda uma outra concretização, os compostos ou composições farmacêuticas descritos neste documento são utilizados para o tratamento dermatite atópica ou de contacto. A dermatite de contacto inclui dermatite irritante, dermatite fototóxica, dermatite alérgica, dermatite fotoalérgica, urticária de contacto, doenças sistémicas do tipo dermatite de contacto e outras semelhantes. Pode ocorrer dermatite irritativa quando é utilizada sobre a pele uma quantidade muito elevada de uma substância sobre a pele ou quando a pele é sensível a uma substância. A dermatite atópica, por vezes chamada eczema, é um tipo de dermatite, doença atópica da pele. A invenção também dia respeito ao composto para utilização no tratamento de uma patologia hiperproliferativa num mamífero, que inclui a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção presente, ou um seu sal, éster, pró-fármaco, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico. Em algumas concretizações, a referida utilização refere-se ao tratamento de cancro tal como leucemia mielóide aguda, do timo, do cérebro, do pulmão, de células escamosas, da pele, dos olhos, ao retinoblastoma, ao melanoma intraocular, da cavidade oral e orofaríngea, da bexiga, gástrico, do estômago, do pâncreas, da bexiga, da mama, do colo do útero, da cabeça, do pescoço, renal, do rim, do fígado, do ovário, da próstata, colorrectal, do esófago, testicular, ginecológico, da tiróide, do SNC, do SNP, relacionado com a SIDA, (por exemplo linfoma e sarcoma de Kaposi) ou cancro por infecção virai. Em algumas concretizações, a referida utilização diz respeito ao tratamento de uma patologia hiperproliferativa não cancerosa tal como uma hiperplasia benigna da pele (por exemplo, psoríase), uma restenose, ou da próstata (por exemplo, hipertrofia prostática benigna (BPH)) . A invenção refere-se também ao composto para utilização no tratamento de doenças relacionadas com vasculogénese ou angiogénese num mamífero, que inclua a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção presente, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. Em algumas concretizações, a referida utilização é para o tratamento de uma doença seleccionada a partir do conjunto constituído por angiogénese tumoral, doença inflamatória crónica tal como artrite reumatóide, aterosclerose, doença inflamatória do intestino, doenças da pele tais como psoríase, eczema, e escleroderma, diabetes, retinopatia diabética, retinopatia da prematuridade, degeneração macular relacionada com a idade, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi e cancro do ovário, da mama, do pulmão, do pâncreas, da próstata, do cólon e epidermóide.

Incluem-se nos doentes que se podem tratar com compostos da invenção presente, ou com um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico dos compostos referidos, consoante a utilização desta invenção, por exemplo, doentes a quem tenha sido diagnosticada a psoríase; a restenose; a aterosclerose; a BPH; um cancro da mama tal como um carcinoma ductal nos canais de uma glândula mamária, carcinomas medulares, carcinomas colóides, carcinomas tubulares, e cancro da mama inflamatório; cancro do ovário, incluindo tumores eptiteliais do ovário tais como o adenocarcinoma do ovário e um adenocarcinoma que tenha migrado do ovário para a cavidade abdominal; cancro uterino; cancro do colo do útero, como adenocarcinoma do colo do útero epiteliais de carcinoma espinocelular e celular incluindo adenocarcinomas; cancro da próstata, tais como cancro da próstata seleccionado a partir do seguinte: um adenocarcinoma ou um adenocarcinoma que tenha migrado para o osso; cancro do pâncreas tal como carcinomas epitelióides no tecido do dueto pancreático e adenocarcinoma num dueto pancreático; cancro da bexiga, como um carcinoma de células de transição na bexiga, carcinomas uroteliais (carcinomas de células transicionais), tumores nas células uroteliais que revestem a bexiga, carcinomas de células escamosas, adenocarcinomas, e cancros de pequenas células; leucemia tal como leucemia mielóide aguda (LMA), leucemia linfocitica aguda, leucemia linfocitica crónica, leucemia mielóide crónica, leucemia de células pilosas, mielodisplasia, patologias mieloproliferativas, leucemia mielóide aguda (AML), leucemia mielogénica crónica (CML), mastocitose, leucemia linfocitica crónica (CLL), mieloma múltiplo (MM), e síndrome mielodisplásica (SMD); cancro ósseo; cancro do pulmão tal como cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC), cancro do pulmão que é dividido em carcinomas de células escamosas, adenocarcinomas, carcinomas indiferenciados e de grandes células, e cancro do pulmão de células pequenas; cancro da pele, tal como carcinoma de células basais, melanoma, carcinoma de células escamosas e queratose actínica, que é um estado da pele, por vezes, que se desenvolve a um carcinoma de células escamosas; retinoblastoma ocular; melanoma cutâneo ou intraocular (no olho); cancro primário do fígado (cancro que começa no fígado); cancro do rim; cancro da tiróide, tal como papilar, folicular, medular e anaplásico; linfoma relacionado com a SIDA, tal como linfoma difuso de grandes células B, linfoma imunoblástico de células B e linfoma de células pequenas não-clivadas; Sarcoma de Kaposi; cancros virais incluindo os induzidos pelo vírus da hepatite B (HBV), vírus da hepatite C (HCV), e o carcinoma hepatocelular; leucemia/linforna linfotrópico humano de vírus do tipo 1 (HTLV-1) e de células T do adulto; e vírus do papiloma humano (HPV) e cancro cervical; cancros do sistema nervoso central (SNC) tais como tumor primário do cérebro, o que inclui os gliomas (astrocitoma, astrocitoma anaplásico, ou glioblastoma multiforme), oligodendroglioma, ependimoma, meningioma, linfoma, Schwannoma, e meduloblastoma; cancros do sistema nervoso periférico (SNP), tais como neuromas acústicos e tumor maligno da bainha do nervo periférico (MPNST) incluindo neurofibromas e Schwannomas, citoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, meningioma maligno, mesotelioma maligno, e tumor maligno Mulleriano misto; cancro da cavidade oral e cancro de orofaringe, tal como, da hipofaringe, cancro da laringe, cancro da nasofaringe, e cancro da orofaringe; cancro de estômago, tal como linfomas, tumores do estroma gástrico, e tumor carcinóide; cancro testicular, tal como tumores de células germinativas (TCG) , que incluem seminomas e não-seminomas e tumores estromais gonadais, que incluem tumores de células de Leydig e tumores de células de Sertoli; cancro do timo, tal como timomas, carcinomas do timo, doença de Hodgkin, linfoma não-Hodgkin, linfomas carcinóides e tumores carcinóides; cancro rectal; e cancro do cólon.

Incluem-se nos doentes que se podem tratar com compostos da invenção presente, ou com sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico destes compostos, consoante a utilização desta invenção, por exemplo, os de doentes a quem hajam sido diagnosticados estados incluindo, mas não se limitando a, neuroma acústico, adenocarcinoma, cancro da glândula supra-renal, cancro anal, angiossarcoma (por exemplo linfangiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, hemangiossarcoma), gamopatia monoclonal benigna, cancro biliar (por exemplo, colangiocarcinoma), cancro da bexiga, cancro da mama (por exemplo, adenocarcinoma de mama, carcinoma papilar da mama, cancro da mama, carcinoma medular da mama), cancro no cérebro (por exemplo, meningioma; glioma, por exemplo, astrocitoma, oligodendroglioma; meduloblastoma), cancro dos brônquios, cancro cervical (por exemplo, adenocarcinoma do colo do útero), coriocarcinoma, cordoma, craniofaringioma, cancro colorrectal (por exemplo, cancro do cólon, cancro rectal, adenocarcinoma colorrectal), carcinoma epitelial, ependimoma, endoteliossarcoma (por exemplo, sarcoma de Kaposi, sarcoma múltiplo hemorrágico idiopático), cancro do endométrio, cancro do endométrio, cancro do esófago (por exemplo, adenocarcinoma do esófago, adenocarcinoma de Barrett), sarcoma de Ewing, hipereosinofilia familiar, cancro gástrico (por exemplo, adenocarcinoma gástrico), tumor estromal gastrointestinal (GIST), cancro de cabeça e pescoço (por exemplo, carcinoma da cabeça e pescoço de células escamosas, cancro oral (por exemplo, carcinoma oral de células escamosas (CCEO)), doença de cadeia pesada (por exemplo, doença de cadeia alfa, doença de cadeia gama, doença de cadeia mu) , hemangioblastoma, tumores inflamatórios miofibroblásticas, amiloidose imunocitica, cancro do rim (por exemplo, nefroblastoma também denominado tumor de Wilms, carcinoma de células renais), cancro de figado (por exemplo, cancro hepatocelular (HCC) , hepatoma maligno), cancro do pulmão (por exemplo, carcinoma broncogénico, cancro de pulmão de células pequenas (CPPC), cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC), adenocarcinoma do pulmão), leucemia (por exemplo, leucemia linfocitica aguda (ALL), que inclui a ALL de linhagem B e a ALL de linhagem T, leucemia linfocitica crónica (CLL), leucemia prolinfocitica ( PLL), leucemia de células pilosas (HLL) e macroglobulinemia de Waldenstrom (WM); os linfomas de células T periféricas (LPCT), leucemia de células T do adulto/linfoma (ATL), linfoma cutâneo das células T (LCCT), leucemia linfocltica grande granular (LGF), doença de Hodgkin e doença de Reed-Stemberg; leucemia mielóide aguda (LMA), leucemia mielóide crónica (LMC), leucemia linfocltica crónica (LLC)), linfoma (por exemplo, linfoma de Hodgkin (LH), linfoma não-Hodgkin (NHL), linfoma folicular, linfoma difuso de grandes células B (DLBCL), linfoma de células do manto (MCL)), leiomiossarcoma (LMS), mastocitose (por exemplo, mastocitose sistémica), mieloma múltiplo (MM), síndrome mielodisplásica (SMD), mesotelioma, doença mieloproliferativa (MPD) (por exemplo, policitemia vera (PV), trombocitose essencial (TE), metaplasia mielóide angiogénica (AMM) também denominada mielofibrose (MF), mielofibrose idiopática crónica, leucemia mielóide crónica (LMC), leucemia neutrofílica crónica (CNL), síndrome hipereosinofílica (HES)), neuroblastoma, neurofibroma (por exemplo, neurof ibromatose (NF) de tipo 1 ou de tipo 2, schwannomatose), cancro neuroendócrino (por exemplo, tumor neuroendócrino gastroenteropancreático (GEP-NET), tumor carcinóide), osteossarcoma, cancro do ovário (por exemplo, cistadenocarcinoma, carcinoma embrionário do ovário, adenocarcinoma de ovário), doença de Paget da vulva, doença de Paget do pénis, adenocarcinoma papilar, cancro do pâncreas (por exemplo, andenocarcinoma do pâncreas, neoplasia mucinosa intraductal papilar (IPMN)), pinealoma, tumor neuroectodérmico primitivo (PNT), cancro da próstata (por exemplo, adenocarcinoma da próstata), rabdomiossarcoma, retinoblastoma, cancro da glândula salivar, cancro de pele (por exemplo, carcinoma espinocelular (CEC), queratoacantoma (KA), melanoma, carcinoma basocelular (CBC)), cancro do intestino delgado (por exemplo, cancro do apêndice), sarcoma de tecidos moles (por exemplo, histiocitoma fibroso maligno (MFH), lipossarcoma, tumor maligno da bainha do nervo periférico (MPNST), condrossarcoma, fibrossarcoma, mixossarcoma), carcinoma da glândula sebácea, carcinoma da glândula de suor, sinovioma, cancro testicular (por exemplo, seminoma, carcinoma embrionário testicular), cancro da tiróide (por exemplo, carcinoma papilar da tiróide, carcinoma papilífero da tiróide (PTC) , cancro medular da tiróide) e macroglobulinemia de Waldenstrom. A invenção também diz respeito ao composto para utilização no tratamento da diabetes num mamífero, que inclua administrar-se ao referido mamífero uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção presente, ou de um seu sal, éster, precursor de fármaco, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Além disto, podem utilizar-se os compostos descritos neste documento para tratar a acne.

Além disto, podem utilizar-se os compostos descritos neste documento para o tratamento da arteriosclerose, incluindo a aterosclerose. A arteriosclerose é um termo geral que descreve qualquer endurecimento de artérias médias ou grandes. A aterosclerose é um endurecimento de uma artéria devido especificamente a uma placa ateromatosa.

Além disto, os compostos descritos neste documento podem ser utilizados para o tratamento da glomerulonefrite. A glomerulonefrite é uma doença imunológica renal primária ou secundária caracterizada pela inflamação dos glomérulos. Ela pode ser assintomática, ou estar presente com hematúria e/ou proteinúria. Existem muitos tipos reconhecidos de glomerulonefrite, divididos em agudas, subagudas ou crónicas. As causas são infecciosas (patogénicos bacterianos, virais ou parasiticos), auto-imunes ou paraneoplásicas.

Além disto, os compostos descritos neste documento podem ser utilizados para o tratamento da bursite, do lúpus, da encefalomielite aguda disseminada (ADEM), da doença de Addison, sindrome de anticorpo antifosfolipidos (APS), da anemia aplásica, da hepatite auto-imune, da doença celíaca, da doença de Crohn, da diabetes mellitus (de tipo 1), da sindrome de Goodpasture, da doença de Graves, da sindrome de Guillain-Barré (GBS), da doença de Hashimoto, de doença inflamatória do intestino, do lúpus eritematoso sistémico, da miastenia grave, da sindrome de opsoclonus mioclonus (OMS), da neurite óptica, da tiroidite de Ord, da osteoartrite, da uveoretinite, do pênfigo, da poliartrite, da cirrose biliar primária, da sindrome de Reiter, da artrite de Takayasu, da arterite temporal, da anemia hemolítica auto-imune quente, da granulomatose de Wegener, da alopecia universalis, da doença de Chagas, da síndrome de fadiga crónica, da disautonomia, da endometriose, da hidradenite supurativa, da cistite intersticial, da neuromiotonia, da sarcoidose, do escleroderma, da colite ulcerosa, do vitiligo, da vulvodinia, da apendicite, da artrite reumatóide, da blefarite, da bronquiolite, da bronquite, da cervicite, da colangite, da colecistite, da corioamnionite, da colite, da conjuntivite, da cistite, da dacrioadenite, da dermatomiosite, da endocardite, da endometrite, da enterite, da enterocolite, da epicondilite, da epididimite, da fasceite, da fibrosite, da gastrite, da gastroenterite, da gengivite, da hepatite, da hidradenite, da ileite, da irite, da laringite, da mastite, da meningite, da mielite, da miocardite, da miosite, da nefrite, da onfalite, da ooforite, da orquite, da osteite, da otite, da pancreatite, da parotidite, da pericardite, da peritonite, da faringite, da pleurite, da flebite, da pneumonite, da proctite, da prostatite, da pielonefrite, da rinite, da salpingite, da sinusite, da estomatite, da sinovite, da tendinite, da amigdalite, da uveite, da vaginite, da vasculite, ou da vulvite.

Além disto, podem utilizar-se os compostos da invenção para o tratamento de rinite alérgica perene, mesenterite, peritonite, acrodermatite, angiodermatite, dermatite atópica, dermatite de contacto, eczema, eritema multiforme, intertrigo, sindrome de Stevens Johnson, necrólise epidérmica tóxica, alergia de pele, reacção alérgica grave/anafilaxia, granulomatose alérgica, granulomatose de Wegener, conjuntivite alérgica, coriorretinite, conjuntivite, queratoconjuntivite infecciosa, queratoconjuntivite, oftalmia neonatal, tracoma, uveíte, inflamação ocular, blefaroconjuntivite, mastite, gengivite, pericoronite, faringite, rinofaringite, sialadenite, inflamação do sistema músculo-esquelético, início da doença Stille do adulto, doença de Behcet, bursite, condrocalcinose, dactilite, síndrome de Felty, gota, artrite infecciosa, doença de Lyme, osteoartrite inflamatória, periartrite, síndrome de Reiter, infecção pelo vírus Ross River, síndrome de insuficiência respiratória aguda, bronquite aguda, sinusite aguda, rinite alérgica, asma, asma refractária grave, faringite, pleurisia, rinofaringite, rinite alérgica sazonal, sinusite, estados asmáticos, traqueobronquite, rinite, serosite, meningite, neuromielite óptica, infecção com o vírus da poliomielite, síndrome de Alport, balanite, epididimite, orquite do epidídimo, segmentar e focal, glomeruloesclerose, glomerulonefrite, nefropatia por IgA (doença de Berger), orquite, parametrite, doença inflamatória pélvica, prostatite, pielite, pielocistite, pielonefrite, granulomatose de Wegener, hiperuricemia, aortite, arterite, quilopericardite, síndrome de Dressier, endarterite, endocardite, arterite temporal extracraniana, arterite associada ao VIH, arterite temporal intracraniana, doença de Kawasaki, linfangioflebite, doença de Mondor, periarterite, ou pericardite.

Noutros aspectos, utilizam-se os da invenção para o tratamento de hepatite auto-imune, jejunite, mesenterite, mucosite, hepatite não alcoólica, hepatite virai, pancreatite não auto-imune, perihepatite, peritonite, bolsite, proctite, colite pseudomembranosa, rectossigmoidite, salpingoperitonite, sigmoidite, esteatohepatite, colite ulcerosa, sindrome de Churg Strauss, proctite ulcerosa, sindrome de intestino irritável, inflamação gastrointestinal, enterocolite aguda, anusite, necrose de Balser, colecistite, colite, doença de Crohn, diverticulite, enterite, enterocolite, enterohepatite, esofagite eosinofilica, esofagite, gastrite, enterite hemorrágica, hepatite, infecção pelo virus da hepatite, hepatocolangite hipertrófica, gastrite, ileite, ileocecite, sarcoidose, doença inflamatória intestinal, espondilite anquilosante, artrite reumatóide, artrite reumatóide juvenil, psoriase, artrite psoriática, lúpus (cutâneo/sistémico/nefrite), SIDA, complexo relacionado com agamaglobulinemia, SIDA, doença de Bruton, sindrome de Chédiak Higashi, imunodeficiência comum variável, sindrome de DiGeorge, Dis-gamaglobulinemia, deficiência de imunoglobulina, sindrome de Job, sindrome e Nezelof, patologia bactericida fagocitária, sindrome de Wiskott Aldrich, Asplenia, elefantíase, hiperesplenia, doença de Kawasaki, linfadenopatia, linfoedema, linfocele, sindrome de Nonne Milroy Meige, doença do baço, esplenomegalia, timoma, doença do timo, perivasculite, flebite, pleuropericardite, poliarterite nodosa, vasculite, arterite de Takayasu, arterite temporal, tromboangeite, tromboangeíte obliterante, tromboendocardite, tromboflebite, ou DPOC. A invenção também diz respeito a compostos para utilização no tratamento de uma doença cardiovascular num mamífero, que inclua administrar-se ao mamífero referido uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto da invenção presente, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. Incluem-se nos exemplos de estados cardiovasculares, mas não se limitam a estes, aterosclerose, restenose, oclusão vascular e doença obstrutiva das carótidas.

Noutro aspecto, a invenção presente proporciona compostos para utilização na desregulação da função de um leucócito ou na desregulação da função de um osteoclasto. A utilização inclui proporcionar-se o contacto do leucócito ou do osteoclasto com uma quantidade de um composto da invenção capaz de desregular a sua função.

Noutro aspecto da invenção presente, proporcionam-se compostos para utilização no tratamento de doenças oftálmicas pela administração de um ou mais dos compostos ou das composições farmacêuticas em apreço nos olhos de um sujeito.

Podem administrar-se os compostos da invenção presente em gotas oculares, por injecção intraocular, por injecção intravitreal, topicamente, ou através da utilização de um dispositivo que elua o fármaco, uma microcápsula, um enxerto, ou um dispositivo microfluidico. Em alguns casos, administram-se os compostos da invenção presente com um veiculo ou excipiente que aumente a penetração intraocular do composto, tal como uma emulsão com óleo e água contendo partículas colóides com um núveo oleoso envolvido por uma película interfacial.

Em alguns casos, as partículas colóides incluem pelo menos um agente catiónico e pelo um tensioactivo não iónico tal como um poloxâmero, tiloxapol, um polissorbato, um derivado de polioxietileno do óleo de rícinos, um éster de sorbitan, ou um estearato de polioxilo. Em alguns casos, o agente catiónico é uma alquilamina, uma alquilamina terciária, um composto de amónio quaternário, um lípido catiónico, um aminoálcool, um sal de biguanidina, um composto catiónico ou uma mistura dos mesmos. Em alguns casos, o agente catiónico é um sal de biguanidina tal como cloro-hexidina, poliaminopropilbiguanidina, fenformina, alquilbiguanidina, ou uma mistura dos mesmos. Em alguns casos, o composto de amónio quaternário é um halogeneto de benzalcónio, halogeneto de lauralcónio, cetrimida, halogeneto de hexadeciltrimetilamónio, halogeneto de tetradeciltrimetilamónio, halogeneto de dodeciltrimetilamónio, halogeneto de cetrimónio, halogeneto de benzetónio, halogeneto de behenalcónio, halogeneto de cetalcónio, halogeneto de cetetildimónio, halogeneto de cetilpirídio, halogeneto de benzododecínio, halogeneto de cloralilmetenamina, halogeneto de miristilalcónio, halogeneto de estearalcónio ou uma mistura de dois ou mais destes. Em alguns casos, o agente catiónico é um cloreto de benzalcónio, cloreto de lauralcónio, brometo de benzododecinio, cloreto de benzeténio, brometo de hexadeciltrimetilamónio, brometo de tetradeciltrimetilamónio, brometo de dodeciltrimetilamónio, ou uma mistura de dois ou mais destes. Em alguns casos, a fase oleosa é óleo mineral e óleo mineral leve, triacilgliceróis com cadeias médias (TCM), óleo de coco; óleos hidrogenados que incluem óleo de algodão hidrogenado, óleo de palma hidrogenado, óleo de rícinos hidrogenado ou óleo de soja hidrogenado; derivados de óleo de rícino polioxietilenado hidrogenados incluindo poluoxil-40 óleo de rícino hidrogenado, e polioxil-60-óleo de rícino hidrogenado ou polioxil-100 óleo de rícino hidrogenado. A invenção também proporciona métodos de modulação da actividade da quinase por contacto de uma quinase com uma quantidade de composto da invenção suficiente para modular a actividade da quinase. Modular pode ser inibir ou activar a actividade de quinase. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase por contacto de uma quinase com uma quantidade de um composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade de quinase numa solução por contacto da referida solução com uma quantidade de composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase na referida solução. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade de quinase de uma célula por contacto da referida célula com uma quantidade de um composto da invenção hum suficiente para inibir a actividade da quinase na referida célula. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase num tecido, levando o referido tecido ao contacto com uma quantidade de um composto da Invenção suficiente para inibir a actividade da quinase no referido tecido.

Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase num organismo por contacto do referido organismo com uma quantidade de um composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase no referido organismo. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase num animal, por contacto do referido animal com uma quantidade de um composto da Invenção suficiente para inibir a actividade da quinase no referido animal. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase num mamífero por contacto do referido mamífero com uma quantidade de um composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase no referido mamífero. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade da quinase num ser humano fazendo contactar o referido ser humano com uma quantidade de um composto da Invenção suficiente para inibir a actividade da quinase no referido humano. Em algumas concretizações, a % de actividade da quinase, após o contacto de uma quinase com um composto da invenção é inferior a 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 90, 95, ou 99 % da actividade dessa quinase na ausência do referido passo de contacto.

Em algumas concretizações, a quinase é uma esfingosina-quinase ou uma proteína-quinase. Em algumas concretizações, a quinase é seleccionada de entre o conjunto constituído por Pl3-quinase incluindo diferentes suas isoformas tais como Pl3-quinase a, Pl3-quinase β, PI3-quinase γ, Pl3-quinase δ; ADN-PK; mTOR; Abl, VEGFR, B4 receptor de Efrina (EphB4); tirosina-quinase do receptor TEK (TIE2); tirosina quinase 3 relacionada com FMS (FLT-3); receptor do factor de crescimento derivado de plaquetas (PDGFR); RET; ATM; ATR; HSMG-1; Hck; src; receptor do factor de crescimento epidérmico (EGFR); KIT; receptor de inulsina (RI) e IGFR. A invenção ainda proporciona métodos de modulação da actividade de quinase PI3 por contacto de uma quinase PI3 com uma quantidade de um composto da Invenção suficiente para modular a actividade da quinase PI3. Modular pode ser a inibição ou activação de actividade de quinase PI3. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade de quinase PI3 por contacto de uma quinase PI3 com uma quantidade de um composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase PI3. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade de quinase PI3. Tal inibição pode ocorrer em solução, numa célula que expresse uma ou mais quinases PI3, num tecido que inclua células que expressem uma ou mais quinases PI3, ou num organismo expressando uma ou mais quinases PI3. Em algumas concretizações, a invenção proporciona métodos de inibição da actividade de quinase PI3 num animal (incluindo um mamífero, tal como seres humanos) por contacto do referido animal com uma quantidade de um composto da invenção suficiente para inibir a actividade da quinase PI3 no referido animal.

TRATAMENTO DE COMBINAÇÃO A invenção presente também proporciona terapias de combinação em que se utiliza um agente conhecido para modular outras vias, ou outros componentes da mesma via, ou mesmo conjuntos sobrepostos de enzimas alvo em combinação com um composto da invenção presente, ou com um seu sal éster, pró-fármaco, solvato, hidrato ou seu derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico. Num aspecto, tal terapia inclui, mas não está limitada à combinação do composto desta invenção com agentes quimioterapêuticos, anticorpos terapêuticos e tratamentos com radiação, para proporcionar um efeito terapêutico sinergístico ou aditivo.

Num aspecto, os compostos ou as composições farmacêuticas da invenção presente podem apresentar eficiência sinergística ou aditiva quando são administrados em combinação com agentes que inibem a produção de IgE ou a sua actividade. Esta combinação pode diminuir o efeito indesejável de valores elevados de IgE associados com a utilização de um ou mais inibidores de PI3K5, caso tal efeito ocorra. Isto pode ser especialmente útil no tratamento de patologias auto-imunes e inflamatórias (AIID) tais como a artrite reumatóide. Além disto, a administração de inibidores de PI3K5 ou de Ρΐ3Κδ/γ da invenção presente em combinação com inibidores de mTOR também pode exibir sinergia através da maior inibição do caminho de PI3K.

Num aspecto relacionado mas em separado, a invenção presente proporciona um tratamento de combinação de uma doença associada a PI3KÕ que inclui administrar-se um inibidor de Ρΐ3Κδ e um agente que iniba a produção de IgE ou a sua actividade. São aplicáveis outros exemplos de inibidores de Ρΐ3Κδ e eles estão descritos, por exemplo, na Patente US N2 6.800.620. Um tal tratamento de combinação é especialmente útil para tratar doenças auto-imune e inflamatórias (AIID) incluindo mas não se limitando a artrite reumatóide. São conhecidos na técnica agentes que inibem a produção de IgE e neles se incluem, mas não se limitam a um ou mais de entre TEI-9874, ácido 2-(4-(6-ciclohexiloxi-2-naftiloxi)fenilacetamida)benzóico, rapamicina, análogos da rapamicina (isto é rapálogos), inibidores de TORCI, inibidores de TORC2, e quaisquer outros compostos que inibam mTORCl e mTORC2. Incluem-se nos agentes que inibem a actividade de IgE, por exemplo, anticorpos anti-IgE tais como por exemplo Omalizumab e TNX-901.

Para o tratamento de doenças auto-imunes, podem utilizar-se os compostos ou as composições farmacêuticas em apreço em combinação com fármacos habitualmente receitados, incluindo mas não se limitando a Enbrel®, Remicade®, Humira®, Avonex®, e Rebif®. Para o tratamento de doenças respiratórias, podem administrar-se os compostos ou as composições farmacêuticas em combinação com fármacos habitualmente receitados, incluindo mas não se limitando a Xolair®, Advair®, Singular®, e Spiriva®.

Podem formular-se os compostos da invenção ou administrar-se, em conjunto com outros agentes que actuam aliviando os sintomas dos estados inflamatórios tais como a encefalomielite, asma as outras doenças descritas neste documento. Incluem-se nestes agentes os fármacos anti-inflamatórios não esteróides (NSAID), por exemplo ácido acetilsalicílico; ibuprofene; naproxene; indometacina; nabumetona; tolmetina; etc. Os corticosteróides são utilizados para diminuir a inflamação e suprimir a actividade do sistema imunológico. 0 fármaco deste tipo mais habitualmente receitado é a Prednisona. Também podem ser muito úteis a cloroquina (Aralen) ou a hidroxicloroquina (Plaquenil) em alguns indivíduos com lúpus. Eles são receitados a maior parte das vezes para sintomas epidérmicos e das articulações no lúpus. A azatioprina (Imuran) e a ciclofosfamida (Cytoxan) suprimem a inflamação e tendem a suprimir o sistema imunológico. Outros agentes, por exemplo metotrexato e ciclosporina são utilizados para controlar os sintomas do lúpus. Empregam-se anticoagulantes para evitar que o sangue coagule rapidamente. Eles vão desde a aspirina a dose muito pequena que evita que as plaquetas se agreguem, a heparina/coumadina. Inclui-se nos outros compostos utilizados no tratamento do lúpus o belimumab (Benlysta®).

Num outro aspecto, esta invenção também diz respeito a uma composição farmacêutica para inibir o crescimento anormal de células num mamífero, que inclua uma quantidade de um composto da invenção presente, ou de um seu sal, éster, precursor, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico, em combinação com uma quantidade de um agente contra o cancro (por exemplo um agente bioterapêutico quimioterapêutico). São conhecidos na técnica hoje em dia muitos quimioterapêuticos e eles podem ser utilizados em combinação com os compostos da invenção. Também se podem utilizar outras terapias do cancro em combinação com os compostos da invenção e nelas se incluem, mas não se limitam a, cirurgia e tratamentos cirúrgicos, e terapia com radiação.

Em algumas concretizações, selecciona-se o quimioterapêutico de entre o conjunto constituído por inibidores da mitose, agentes alquilantes, anti-metabolitos, antibióticos intercalantes, inibidores do factor de crescimento, inibidores do ciclo celular, enzimas, inibidores de topoisomerase, modificantes da resposta biológica, anti-hormonas, inibidores da angiogénese, e anti-androgénicos. São exemplos não limitativos os agentes quimioterapêuticos, os agentes citotóxicos, e pequenas moléculas não peptidicas tais como Gleevec (Mesilato de Imatinib), Velcade (bortezomib), Casodex (bicalutamida), Iressa (gefitinib), e Adriamicina bem como uma série de agentes quimioterapêuticos. Incluem-se nos exemplos não limitativos de agentes quimioterapêuticos agentes alquilantes tais como tiotepa e ciclofosfamida (CYTOXAN™) ; sulfonatos de alquilo tais como busulfan, improsulfan e piposulfan; aziridinas tais como benzodopa, carboquona, meturedopa, e uredopa; etilenoiminas e metilamelaminas incluindo altretamina, trietilenomelamina, trietilenofosforamida, trietilenotiofosforamida e trimetilolmelamina; mostardas azotadas tais como clorambucil, clornafazina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, cloridrato do óxido de mecloretamina, melfalan, novembicina, fenesterina, prednimustina, trifosfamida, mostada de uracilo; nitrosoureias tais como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; antibióticos tais como aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azasserina, bleomicinas, cactinomicina, caliqueamicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, Casodex™, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina, epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplominicina, potfirominicina, purominicina, quelaminicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina; anti-metabolitos tais como metotrexato e 5-fluorouracilo (5-FU); análogos de ácido fólico tais como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina tais como fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina tais como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didesoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, androgénicos tais como calusterona, proprionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; anti-adrenalinas tais como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; agentes proporcionando ácido fólico tais como ácido frolínico; aceglatona; glicósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; amsacrina; bestrabucil; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diaziquona; elfomitina; acetato de eliptínio; etoglucido; nitrato de gálio; hidroxiureia; lentinano; lonidamina; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarrubicina; ácido podofilínico; 2-etil-hidrazida; TM , , , λ . procarbazma; PSK.R ; razoxano; sizofiran; espirogermamo; ácido tenuazónico; triaziquona; 2,2',2"- triclorotrietilamina; uretano; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobroman; gacitosina; arabinosido ("Ara-C"); ciclofosfamida; tiotepa; taxanos, por exemplo paclitaxel (TAXOL™, Bristol-Myers

TM

Squibb Oncology, Princeton, N.J.) e docetaxel (TAXOTERE ,

Rhone-Poulenc Rorer, Antony, França); ácido retinóico; esperamicinas; capecitabina; e os sais, ácidos ou derivados aceitáveis do ponto de vista farmacêutico de qualquer dos acima. Também se incluem na qualidade de acondicionadores adequados quimioterapêuticos de células os agentes anti-hormonais que acuam regulando ou inibindo a acção de hormonas sobre tumores, tais como os anti-estrogénicos incluindo por exemplo tamoxifene (Nolvadex™) , raloxifene, inibidores de aromatase como 4 (5)-imidazoles, 4-hidroxitamoxifene, trioxifene, queoxifene, LY 117018, onapristona, e toremifene (Fareston); bem coo anti-androgénicos tais como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolido, e goserelina; clorambucil; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platina tais como cisplatina e carboplatina; vinblastina; platina; etoposido (VP-16); ifosfamida; mitominicina C; mitoxantrona; vincristina; vinorrelbina; navelbina; novantrona; teniposido; daunominicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; camptotecina-11 (CPT-11); o inibidor de topoisomerase RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO). Quando tal se pretenda, podem utilizar-se os compostos ou a composição farmacêutica da invenção presente em combinação com fármacos contra o cancro que são habitualmente receitadostais como Herceptin®, Avastin®, Erbitux®, Rituxan®, Taxol®, Arimidex®, Taxotere®, e Velcade®.

Incluem-se noutros agentes quimioterapêuticos, mas não se limitam a estes, anti-estrogénicos (por exemplo tamoxifene, raloxifene, e megestrol) , agonistas de LHRH (por exemplo goserclina e leuprolido), anti-androgénicos (por exemplo flutamida e bicalutamida), terpia fotodinâmicas (por exemplo vertoporfina (BPD-MA), ftalocianina, fotossensibilizador Pc4, e desmetoxi-hipocrelina A (2BA-2-DMHA)), mostardas azotadas (por exemplo ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida, clorambucil, estramustina, e melfalan), nitrosoureias (por exemplo carmustina (BCNU) e lomustina (CCNU)), sulfonatos de alquilo (por exemplo busulfan e treosulfan), triazenos (por exemplo dacarbazina, temozolomida), compostos contendo platina (por exemplo cisplatina, carboplatina, oxaliplatina), alcaloides da vinca (por exemplo vincristina, vinblastina, vindesina, e vinorrelbina), taxóides (por exemplo paclitaxel ou um equivalente a paclitaxel tal como paclitaxel ligado albumina em nanopartícuias (Abraxane), paclitaxel ligado a ácido docosahexaenóico (DHA-paclitaxel, Taxoprexin), paclitaxel ligado a poliglutamato (PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, XYOTAX), o precursor de fármaco activado pelo tumor (TAP) ANG 1005 (Angiopep-2 ligado a três moléculas de paclitaxel) , paclitaxel-EC-1 (paclitaxel ligado ao péptido que reconhece erbB2, EC-1), e paclitaxel conjugado com glucose, por exemplo, sucinato de 2-glucopiranosil 2,-metil paclitaxel; docetaxel, taxol), epipodofilinas (por exemplo etoposido, fosfato de etoposido, teniposido, topotecan, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecan, irinotecan, crisnatol, mitomicina C), anti-metabolitos, inibidores de DHFR (por exemplo metotrexato, diclorometotrexato, trimetrexato, edatrexato), inibidores de IMP desiydrogenase (por exemplo ácido micofenólico, tiazofurina, ribavirina, e EICAR), inibidores de ribonucleótido reductase (por exemplo hidroxiureia e deferoxamina), análogos de uracilo (por exemplo 5-fluoro-uracilo (5-FU), floxuridina, doxifluridina, ratitrexed, tegafur-uracilo, capecitabina), análogos de citosina (por exemplo citarabina (ara C) , arabinósido de citosina, e fludarabina), análogos de purina (por exemplo mercaptopurina e tioguanina) , análogos de vitamina D3 (por exemplo EB 1089, CB 1093, e KH 1060), inibidores de isoprenilação (por exemplo lovastatina), neurotoxinas dopaminérgicas (por exemplo o ião l-metil-4-fenilpiridínio), inibidores do ciclo celular (por exemplo estaurosporina), actinomicina (por exemplo actinomicina D, dactinomicina), bleomicina (por exemplo bleomicina A2, bleomicina B2, peplomicina), antraciclinas (por exemplo daunorrubicina, doxorrubicina, doxorrubicina peguilada lipossomal, idarrubicina, epirrubicina, pirarrubicina, zorrubicina, mitoxantrona) , inibidores de MDR (por exemplo verapamil), inibidores de Ca2+ ATPase (por exemplo tapsigargina), imatinib, talidomida, lenalidomida, inibidores de tirosina quinase (por exemplo, axitinib (AGO 13736), bosutinib (SKI-606), cediranib (RECENTINTM, AZD2171), dasatinib (SPRYCEL®, BMS-354825), erlotinib (TARCEVA®), gefitinib (IRESSA®) , imatinib (Gleevec®, CGP57148B, STI-571), lapatinib (TYKERB®, TYVERB®) , lestaurtinib (CEP-701), neratinib (HKI-272), nilotinib (TASIGNA®), semaxanib (semaxinib, SU5416), sunitinib (SUTENT®, SU112 4 8), toceranib (PALLADIA®), vandetanib (ZACTIMA®, ZD 64 7 4), vatalanib (PTK787, PTK/ZK), trastuzumab (HERCEPTIN®), bevacizumab (AVASTIN®), rituximab (RITUXAN®), cetuximab (ERBITUX®), panitumumab (VECTIBIX®), ranibizumab (Lucentis®), nilotinib (TASIGNA®), sorafenib (NEXAVAR®), everolimus (AFINITOR®), alemtuzumab (CAMPATH®), gemtuzumab ozogamicina (MYLOTARG®), temsirolimus (TORISEL®), ENMD-2076, PCI-32765, AC220, lactato de dovitinib (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOKTM) , SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120 (VARGATEF®), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (AV-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647, e/ou XL228), inibidores do proteassoma (por exemplo, bortezomib (Velcade)), inibidores de mTOR (por exemplo, rapamicina, temsirolimus (CCI-779), everolimus (RAD-001), ridaforolimus, AP23573 (Ariad) , AZD8055 (AstraZeneca), BEZ235 (Novartis), BGT226 (Norvartis), XL765 (Sanofi Aventis), PF-4691502 (Pfizer), GDC0980 (Genetech), SF1126 (Semafoe) e OSI-027 (OSI)), oblimersen, gemcitabina, carminomicina, leucovorina, pemetrexed, ciclofosfamida, dacarbazina, procarbizina, prednisolona, dexametasona, campatecina, plicamicina, asparaginase, aminopterina, metopterina, porfiromicina, melfalan, levosidina, leurosina, clorambucil, trabectedina, procarbazina, discodermolido, carminomicina, aminopterina, e hexametilmelamina.

Incluem-se nos exemplos de agentes bioterapêuticos, mas não se limitam a, interferões, citoquinas (por exemplo, factor de necrose tumoral, interferão α, interferão γ), vacinas, factores de crescimento hematopoiéticos, soroterapia monoclonal, agentes imunoestimulantes e/ou imunoduladores (por exemplo, IL-1, 2, 4, 6, ou 12), factores imunológicos de crescimento celular (por exemplo, GM-CSF) e anticorpos (por exemplo Herceptina (trastuzumab), T-DM1, AVASTIN (bevacizumab), ERBITUX (cetuximab), Vectibix (panitumumab), Rituxan (rituximab), Bexxar (tositumomab)).

Esta invenção também diz respeito a um método de utilizar os compostos ou a composição em combinação com terapia por irradiação para inibir o crescimento anormal de células ou para tratar patologias hiperproliferativas no mamífero. São conhecidas na técnica as metodologias de aplicação da terapia por irradiação, e podem utilizar-se estas metodologias nas terapias de combinação descritas neste documento. A administração do composto da invenção nesta terapia de combinação pode ser determinada tal como descrito neste documento.

Pode aplicar-se terapia co radiação por um de diversos métodos, ou por uma combinação de métodos, incluindo sem limitação terapia com feixe externo, terapia com radiação interna, radiação de implante, radiocirurgia estereotáctica, terapia de radiação sistémica, radioterapia e braquiterapia intersticial permanente ou temporária. 0 termo "braquiterapia", tal como se utiliza neste documento, refere-se a terapia com radiação veiculada por um material radioactivo espacialmente contido mas inserido no corpo num ou perto de um tumor ou do local de outra doença tecidular proliferativa. 0 termo pretende incluir sem imitação a exposição a isótopos radioactivos (por exemplo At-211, I-131, 1-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32, e isótopos radioactivos de Lu) . As fontes de radiação adequadas para utilização como um acondicionador de uma célula na invenção presente incluem tanto sólidos como líquidos. A título de exemplo não limitativo, a fonte de radiação pode ser um radioisótopo, tal como 1-125, 1-131, Yb-169, Ir-192 numa fonte sólida, 1-125 numa fonte sólida, ou outros radionuclidos que emitam fotões, partículas beta, radiação gama, ou outros raios terapêuticos. 0 material radioactivo pode também ser feito a partir de uma qualquer solução de um ou mais radionuclidos, por exemplo, uma solução de 1-125 ou 1-131, ou um pode produzir-se um fluido radioactivo utilizando uma pasta de um fluido adequado que contém pequenas partículas de radionuclidos sólidos, tais como Au-198, Y-90. Além disso, o ou os radionuclidos podem ser incorporados sob a forma de gel ou de microesferas radioactivas.

Sem nenhuma limitação teórica, os compostos da invenção presente podem tornar as células anormais mais sensíveis a um tratamento com radiação com os objectivos de matar e/ou inibir o crescimento dessas células. Portanto, esta invenção também diz respeito a um métodos para tornar mais sensíveis as células anormais de um mamífero ao tratamento com radiação, o qual inclui administrar-se ao mamífero uma quantidade de um composto da invenção presente ou de um seu sal, éster, precursor, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico, quantidade esta que seja eficaz na sensibilização de células anormais ao tratamento com radiação. Pode determinar-se a quantidade do composto, sal, ou solvato neste método recorrendo aos meios para avaliar as quantidades eficazes destes compostos descritos neste documento.

Podem utilizar-se os compostos ou as composições farmacêuticas da invenção presente em combinação com uma quantidade de uma ou mais substâncias seleccionadas entre agentes anti-angiogénese, inibidores de transdução do sinal, e agentes antiproliferativos.

Podem utilizar-se agentes anti-angiogénese, tais como inibidores de MMP-2 (metaloproteinase da matriz 2), inibidores de MMP-9 (metaloproteinase da matriz 9) , e inibidores de COX-II (ciclo-oxigenase II), em conjunto com um composto da invenção presente e das composições farmacêuticas, descritos neste documento. Incluem-se nos exemplos de inibidores úteis de COX-II CELEBREX™ (alecoxib), valdecoxib, e rofecoxib. Estão descritos exemplos de inibidores de metaloproteinase da matriz úteis no WO 96/33.172 (publicado a 24 de Outubro de 1996), WO 96/27.583 (publicado a 7 de Março de 1996), no Pedido de Patente Europeia N2 97304971.1 (entrado a 8 de Julho de 1997), no Pedido de Patente Europeia N2 99308617.2 (entrado a 29 de Outubro de 1999), no WO 98/07.697 (publicado a 26 de Fevereiro de 1998), no WO 98/03.516 (publicado a 29 de Janeiro de 1998), no WO 98/34.918 (publicado a 13 de Agosto de 1998), no WO 98/34.915 (publicado a 13 de Agosto de 1998) , no WO 98/33,768 (publicado a 6 de Agosto de 1998), no WO 98/30.566 (publicado a 16 de Julho de 1998), na

Publicação de Patente Europeia 606.046 (publicada a 13 de Julho de 1994), na Publicação de Patente Europeia 931,788 (publicada a 28 de Julho de 1999), no WO 90/05.719 (publicado a 31 de Maio de 1990), no WO 99/52.910 (publicado a 21 de Outubro de 1999), no WO 99/52.889 (publicado a 21 de Outubro de 1999), no WO 99/29.667 (publicado a 17 de Junho de 1999), No Pedido Internacional de PCT PCT/IB98/01113 (entrado a 21 de Julho de 1998), no Pedido de Patente Europeia N- 99302232.1 (entrado a 25 de Março de 1999), no Pedido do Reino Unido N2 9912961.1 (entrado a 3 de Junho de 1999), no Pedido Provisório dos Estados Unidos N2 60/148.464 (entrado a 12 de Agosto de 1999) , na Patente dos Estados Unidos 5.863.949 (emitida a 26 de Janeiro de 1999), na Patente dos Estados Unidos 5.861.510 (emitida a 19 de Janeiro de 1999), e na

Publicação de Patente Europeia 780.386 (publicada a 25 de Junho de 1997), todas as quais se incorporam integralmente neste documento por citação. Os inibidores preferidos de MMP-2 e de MMP-9 são aqueles que tenham pouca ou nenhuma actividade de inibição de MMP-1. Mis preferidos são aqueles que inibam selectivamente MMP-2 e/ou AMP-9 em relação às outras metaloproteinases da matriz (isto é, MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12, e MMP-13). Alguns exemplos particulares de inibidores de MMP úteis na invenção presente são AG-3340, RO 32-3555, e RS 13-0830. A invenção também diz respeito a um método e a uma composição farmacêutica para tratar uma doença cardiovascular num mamífero, que inclua uma quantidade de um composto da invenção presente, ou de um seu sal, éster, precursor, solvato, hidrato ou derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou um seu derivado isotopicamente marcado, e uma quantidade de um ou mais agentes terapêuticos, para o tratamento de doenças cardiovasculares.

Incluem-se nos exemplos para utilização nas aplicações a doenças cardiovasculares os agentes anti-trombóticos, por exemplo, prostaciclina e salicilatos, agentes trombolíticos, por exemplo estreptoquinase, uroquinase, activador do plasminogénio tecidular (TPA) e complexo activador do plasminogénio anisoilado-estreptoquinase (APSAC), agentes anti-plaquetas, por exemplo, ácido acetilsalicílico (ASA) e clopidrogel, agentes vasodilatadores, por exemplo nitratos, fármacos bloqueadores dos canais de cálcio, agentes anti-proliferativos, por exemplo, colchicina e agentes alquilantes, agentes intercalantes, factores moduladores do crescimento, tais como interleuquinas, factor de transformação de crescimento-beta e congéneres do factor de crescimento derivado de plaquetas, anticorpos monoclonais dirigidos contra factores de crescimento, agentes anti- inflamatórios, tanto esteróides como não-esteróides, e outros agentes que possam modular o tónus dos vasos, a sua função, arteriosclerose, e a resposta de cura da lesão do vaso ou do órgão após intervenção. Os antibióticos também podem ser incluídos nas combinações ou revestimentos incluídos na invenção. Além disso, um revestimento pode ser utilizado para efectuar a administração terapêutica de um modo focal dentro da parede do vaso. Por incorporação do agente activo num polímero que inche, o agente activo será libertado quando o polímero incha.

Podem formular-se ou administrar-se os compostos descritos neste documento em conjunto com barreiras tecidulares líquidas ou sólidas também denominadas lubrificantes. Incluem-se nos exemplos de barreiras tecidulares, mas não se limitam a estes, polissacáridos, poliglicanas, seprafilm™, interceed™ e ácido hialurónico.

Os medicamentos que podem ser administrados em conjunto com os compostos descritos neste documento incluem quaisquer medicamentos adequados utilmente administrados por inalação, por exemplo analgésicos, por exemplo codeína, di-hidromorfina, ergotamina, fentanil ou morfina; preparações para a angina, por exemplo diltiazem; antialérgicos, por exemplo cromoglicato, cetotifeno ou nedocromil; anti-infecciosos, cefalosporinas e penicilinas por exemplo estreptomicina, sulfonamidas, tetraciclinas ou pentamidina; anti-histamínicos, por exemplo metapirileno; anti-inflamatórios, por exemplo beclometasona, flunisolida, budesonida, tipredano, triancinolona ou fluticasona; antitússicos, por exemplo noscapina; broncodilatadores, por exemplo efedrina, adrenalina, fenoterol, formoterol, isoprenalina, metaproterenol, fenilefrina, fenilpropanolamina, pirbuterol, reproterol, rimiterol, salbutamol, salmeterol, terbutalina, isoetarina, tulobuterol, orciprenalina, ou (-)-4-amino-3,5-dicloro-a-[[[6-[2-(2-piridinil)etoxi]hexil]- amino]metil]benzenometanol; diuréticos, por exemplo amilorida; anticolinérgicos, por exemplo ipratrópio, atropina ou oxitrópio; hormonas, por exemplo cortisona, hidrocortisona ou prednisolona; xantinas, por exemplo aminofilina, teofilinato colina, teofilinato lisina ou teofilina; e proteínas e péptidos terapêuticos, por exemplo insulina ou glucagona. Será evidente para um perito na técnica que, quando apropriado, os medicamentos podem ser utilizados na forma de sais (por exemplo sais de metais alcalinos ou de aminas, ou como sais de adição a ácidos) ou como ésteres (por exemplo ésteres alquílicos inferiores) ou como solvatos (por exemplo hidratos) para optimizar a estabilidade e/ou a actividade do medicamento.

Outros exemplos de agentes terapêuticos úteis para uma terapia de combinação incluem mas não se limitam a agentes, tais como os descritos acima, a terapia de radiação, antagonistas de hormonas, hormonas e os seus factores, fármacos da tiróide e antitiroidianos, estrogénicos e progestinas, androgénicos, hormona adrenocorticotrópica; esteróides adrenocortiçais sintéticos e os seus análogos; os inibidores da síntese e acções das hormonas adrenocorticais, insulina, hipoglicemiantes orais, e a farmacologia do pâncreas endócrino, agentes que afectam calcificação e remodelação óssea: cálcio, fósforo, hormona da paratiróide, vitamina D, calcitonina, vitaminas, tais como as vitaminas solúveis em água, complexo de vitamina B, ácido ascórbico, vitaminas solúveis em óleo, vitaminas A, K, e E, factores de crescimento, citoquinas, quimioquinas, agonistas e antagonistas de receptores muscarínicos; agentes anticolinesterásicos; agentes que actuam nas junções neuromusculares, e/ou nos gânglios autónomos; catecolaminas, drogas simpaticomiméticas, e os agonistas ou antagonistas de receptor adrenérgico; e agonistas e antagonistas de receptores 5-hidroxitriptamina (5-HT, serotonina).

Também se podem incluir nos agentes terapêuticos agentes para a dor e a inflamação, tais como a histamina e antagonistas da histamina, bradiquinina e antagonistas de bradiquinina, 5-hidroxitriptamina (serotonina), substâncias lipídicas que são gerados por biotransformação dos produtos da hidrólise selectiva de fosfolípidos da membrana, os eicosanóides, prostaglandinas, tromboxanos, leucotrienos, aspirina, agentes não esteróides anti-inflamatórios, agentes analgésicos-antipiréticos, agentes que inibem a síntese de prostaglandinas e de tromboxanos, os inibidores selectivos de ciclo-oxigenase induzíveis, inibidores selectivos da ciclooxigenase-2 induzível, autacóides, hormonas parácrinos, somatostatina, gastrina, citoquinas que medeiam as interacções envolvidas em respostas imunitárias humorais e celulares, autacóides derivados de lipidos, os eicosanóides, agonistas β-adrenérgicos, ipratrópio, glucocorticóides, metilxantinas, bloqueadores dos canais de sódio, os agonistas dos receptores opióides, bloqueadores do canal de cálcio, estabilizadores de membrana e inibidores de leucotrieno.

Incluem-se nos agentes terapêuticos adicionais contempladas neste documento os diuréticos, vasopressina, agentes que afectam a conservação renal de água, renina, angiotensina, agentes úteis no tratamento de isquemia do miocárdio, agentes anti-hipertensores, inibidores do enzima de conversão da angiotensina, antagonistas dos receptores β-adrenérgicos, agentes para o tratamento da hipercolesterolemia, e agentes para o tratamento de dislipidemia.

Incluem-se nos outros agentes terapêuticos contemplados os fármacos utilizados para o controlo da acidez gástrica, agentes para o tratamento de úlceras pépticas, agentes para o tratamento da doença do refluxo gastroesofágico, agentes procinéticos, antieméticos, os agentes utilizados na sindrome do intestino irritável, os agentes utilizados para a diarreia, agentes utilizados para prisão de ventre, os agentes utilizados para a doença inflamatória do intestino, agentes utilizados para a doença biliar, os agentes utilizados para a doença pancreática. Os agentes terapêuticos usados para tratar infecções por protozoários, drogas usadas para tratar malária, amebiase, giardiase, tricomoniase, tripanossomiase, e/ou Leishmaniose e/ou fármacos utilizados na quimioterapia de helmintiases. Outros agentes terapêuticos incluem agentes anti-microbianos, suitonamidas, quinolonas trimetoprim-sulfametoxazol, e agentes para infecções do tracto urinário, penicilinas, cefalosporinas e outros antibióticos de β-lactama, um agente incluindo um aminoglicósido, inibidores da síntese de proteínas, fármacos utilizados na quimioterapia de tuberculose, doença complexa por mycobacterium avium, e lepra, antifúngicos, antivirais incluindo agentes não retrovirais e agentes antiretrovirals .

Incluem-se nos exemplos de anticorpos terapêuticos que se podem combinar com um dos compostos em apreço, mas não se limitam a estes, anticorpos anti receptores de tirosina quinase (cetuximab, panitumumab, trastuzumab), anticorpos anti CD20 (rituximab, tositumomab), e outros anticorpos tias como alemtuzumab, bevacizumab, e gemtuzumab.

Além disto, estão contemplados nos métodos neste documento os agentes terapêuticos utilizados para a imunomodulação, tais como imunomoduladores, agentes imunossupressivos, tolerogénicos, e imunoestimulantes. Além disto, estão incluídos agentes terapêuticos agindo sobre o sangue e os órgãos em que se forma o sangue, agentes hematopoiéticos, factores de crescimento, minerais, e vitaminas, anticoagulantes, tromboliticos, e fármacos antiplaquetas.

Podem encontrar-se mais agentes terapêuticos que se podem combinar com um composto em apreço em Goodman e Gilman, "The Pharmacological Basis of Therapeutics" Décima Edição editada por Hardman, Limbird e Gilman, ou no Physician's Desk Reference, ambos os quais se incorporam integralmente neste documento por citação.

Podem utilizar-se os compostos descritos neste documento em combinação com os agentes divulgados neste documento ou com outros agentes adequados, dependendo do estado que se esteja a tratar. Deste modo, em algumas concretizações os compostos da invenção serão co-administrados com outros agentes tais como os descritos acima. Quando utilizados em terapia de combinação, os compostos descritos neste documento podem ser administrados com o segundo agente simultaneamente ou separadamente. Esta administração em combinação pode incluir a administração simultânea dos dois agentes na mesma forma de dosagem, uma administração simultânea em formas de dosagem separadas, e uma administração em separado. Ou seja, um composto descrito neste documento e qualquer dos agentes descritos acima podem ser formulados em conjunto na mesma forma de dosagem e administrados simultaneamente. Em alternativa, um composto da invenção presente e qualquer dos agentes descritos acima podem ser administrados simultaneamente, estando ambos os agentes presentes em formulações separadas. Numa outra alternativa, um composto da invenção presente pode ser administrado imediatamente, seguido por qualquer dos agentes descritos acima, ou vice-versa. No protocolo de administração em separado, um composto da invenção presente e qualquer dos agentes descritos acima pode ser administrada a poucos minutos um do outro, ou com algumas horas de intervalo, ou a poucos dias de intervalo.

Os exemplos e preparações constantes adiante ilustram ainda mais e exemplificam os compostos da invenção presente e os métodos de preparação de tais compostos. Deve ser entendido que o âmbito da invenção presente não é limitado de qualquer maneira pelo âmbito dos Exemplos e Preparações seguintes. Nos exemplos seguintes, as moléculas com um único centro quiral, excepto quando se indicar algo em contrário, existem como uma mistura racémica. As moléculas com dois ou mais centros quirais, excepto quando indicado de outra forma, existem como uma mistura racémica de diastereómeros. Podem obter-se por métodos conhecidos dos peritos na técnica os enantiómeros individuais e diastereómeros.

EXEMPLOS

Exemplo 1: Síntese de 3-((4-amino-3-(3- hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 1613) (método A).

Arrefeceu-se uma solução de ácido 2-amino-6-metilbenzóico (1601) (106,5 g, 705 mmol) em H20 (200 mL) a 0-5°C, adicionou-se-lhe lentamente HC1 concentrado (250 mL). Agitou-se a solução durante 15 minutos a 0-5°C. Adicionou-se-lhe gota a gota uma solução de nitrito de sódio (58,4 g, 6,85 mol) em H20 (120 mL) a 0-5°C, e agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos. Adicionou-se a solução obtida a uma solução de Kl (351 g, 2,11 mol) em H20 (200 mL) , e agitou-se a solução resultante à TA durante 16 h. Verteu-se a solução sobre água gelada (2000 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 1000 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com NaOH aquoso (a 15 %, 3 x 200 mL). Acidificou-se a fase aguosa a pH = 1, e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 1.000 mL) . Secou-se o conjunto das fases orgânicas sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, ácido 2-iodo-6-metilbenzóico (1602) (145 g, 79 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo

Adicionou-se a uma mistura agitada de ácido 2-iodo-6-metilbenzóico (1602) (105 g, 400 mmol), Pd(OAc)2 (27 g, 120 mmol) e PPh3 (63 g, 240 mol) em THF (1.000 mL) à TA, tributil(vinil)estanho (152 g, 480 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante, extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 1.000 mL) . Secou-se o conjunto das fases orgânicas sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 2-metil-6-vinilbenzóico (1603) (61 g, 95 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Agitou-se uma mistura de ácido 2-metil-6- vinilbenzóico (1603) (56 g, 350 mmol) com cloreto de tionilo (208 g, 1.750 mmol) em tolueno (400 mL) ao refluxo durante 2 h. Concentrou-se a mistura em vazio para se obter o produto pretendido, cloreto de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 95 % de rendimento) sob a forma de um óleo amarelo. Utilizou-se o produto tal como se obteve directamente no passo seguinte sem purificação.

Agitou-se uma mistura de o-toluidina (45 g, 420 mmol) com trietilamina (71 g, 70 mmol) em CH2CI2 (300 mL) durante 10 minutos à TA. Adicionou-se a esta mistura cloreto de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 35 mmol), e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Verteu-se a solução sobre água (300 mL) e extraiu-se com CH2C12 (3 x 200 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se.

Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto. Suspendeu-se o produto em bruto em IPE (éter isopropílico) (300 mL) , agitou-se ao refluxo durante 30 minutos, e depois arrefeceu-se a 0-5°C. Recolheu-se o precipitado por filtração e depois secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 2-metil-N-o-toluí1-6-vinilbenzamida (1605) (81 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se lentamente a uma solução de 2-metil-N-o-toluí 1-6-vinilbenzamida (1605) (80 g, 320 mmol) em DMF

(250 mL) à TA, NaH (a 60 % em óleo mineral, 25, 6 g, 640 mmol) e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Adicionou-se a esta mistura cloroacetato de etilo (78 g, 640 mmol) e agitou-se a mistura resultante à TA durante 2 h. Verteu-se a solução sobre água (500 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em MeOH (160 mL), ao refluxo durante 10 minutos, e depois arrefeceu-se a 0-5°C. Recolheu-se o por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 2- (2-metil-N-o-toluí1-6-vinilbenzamido) acetato de etilo (1606) (67 g, 62 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma mistura agitada de 2-(2-metil-N-o-toluí 1-6-vinilbenzamido) acetato de etilo (1606) (67 g, 200 mmol) em 1,4-dioxano (300 mL) e H20 (100 mL) à TA, tetróxido de ósmio (20 mg) e agitou-se à TA durante 30 minutos. Adicionou-se a esta mistura periodato de sódio (86 g, 400 mmol) e agitou-se a mistura resultante à TA durante 16 h. Filtrou-se a mistura reaccional através de gel de sílica (10 g) , extraiu-se o filtrado com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (100 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e secou-se melhor o resíduo em vazio para se obter o produto pretendido, 2- (2-formil-6-metil-N-o-toluílbenzamido)acetato de etilo (1607) (38 g, 57 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se a uma solução agitada de 2-(2-formil-6-metil-N-o-toluílbenzamido)acetato de etilo (1607) (38 g, 112 mmol) em EtOH (200 mL) e acetato de etilo (100 mL) à TA, carbonato de césio (22 g, 112 mmol) . Desgaseificou-se a mistura resultante e voltou a encher-se com árgon por três vezes e depois agitou-se a 50°C durante 5 h. Deixou-se a mistura arrefecer até à TA, filtrou-se através de gel de sílica (10 g), e concentrou-se o filtrado em vazio. Verteu-se o resíduo sobre H20 (200 mL), extraiu- se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em IPE (120 mL), aqueceu-se ao refluxo durante 10 minutos, e depois arrefeceu-se a 0-5°C. Recolheu-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 8-meti1-1-oxo-2-o-toluí1-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (1608) (28 g, 77 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se lentamente, ao longo de um período de tempo de 10 minutos, a uma solução agitada de hidreto de alumínio e lítio (8,28 g, 218 mol) em THF anidro (500 mL) a -78° C sob uma atmosfera de azoto, 8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (1608) (28 g, 87 mmol). Deixou-se a mistura resultante aquecer até -30°C, agitou-se durante 30 minutos e uma CCF demonstrava que a reacção se completara. Arrefeceu-se então a mistura até -78° C, e adicionou-se-lhe lentamente água (50 mL) . Deixou-se aquecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de sílica (10 g), e concentrou-se o filtrado em vazio. Verteu-se o produto em bruto sobre H20 (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em acetato de etilo (30 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1609) (22 g, 92 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se lentamente PBr3 (25,6 g, 95 mmol) a uma solução agitada de DMF (11,5 g, 158 mol) em acetonitrilo (200 mL) a 0°C, e agitou-se a mistura resultante a 02C durante 30 minutos. Adicionou-se lentamente 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1-(2H)-ona (1609) (22 g, 78,8 mmol). Deixou-se a mistura reaccional aquecer até à TA e agitou-se durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe lentamente uma solução aquosa saturada de NaHC03 (50 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em IPE (50 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (21 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveram-se 3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d)pirimidin-4-amina (108) (10,8 g, 41,4 mmol) e terc-butóxido de potássio (4,4 g, 40 mmol) em DMF anidra (150 mL) e agitou-se à TA durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe 3-(bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (13,7 g, 40 mmol). Agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos, verteu-se sobre água gelada (300 mL) e depois extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado até cerca de 100 mL em vazio, separou-se o precipitado por filtração para se obter uma primeira colheita do produto pretendido, 3-( (4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H) -ona (1611) (12 g, 60 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % MeOH/DCM) para se obter a segunda colheita do produto pretendido, 3- ( (4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d] pirimidin-l-il) metil)-8-meti1-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1611) (6 g, 30 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveram-se 3-((4-amino-3-iodo-lH- pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1611) (13 g, 24,9 mmol) e 3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenol (1612)(6,6 g, 30 mmol) em DMF-Et0H-H20 (120 mL, 40 mL, 40 mL). Adicionaram-se-lhe sequencialmente Pd(OAc)2 (1,684 g, 7,5 mmol), PPh3 (3, 935 g 15 mmol) e Na2C03 (13,25 g 125 mmol) . Desgaseificou-se a mistura resultante e voltou a encher-se com árgon por três vezes e depois agitou-se a 100°C durante 1 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de sílica (10 g) e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % MeOH/DCM) para se obter o produto (1613, composto 13 da Tabela 4) (9 g, 76 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelado. Suspendeu-se este produto em EtOH (100 mL) e aqueceu-se ao refluxo durante 30 minutos. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, e separou-se o sólido por filtração. Suspendeu-se então o sólido em álcool (100 mL) e agitou-se de um dia para o outro. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3- ( (4-amino-3-(3-hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1613) (8,4 g, 69 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 2: Síntese de 3-((4-amino-3-(3- hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 1613) (método B).

Esquema 15. Descreve a síntese de 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-otoluílisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 1613) pelo método B.

Dissolveram-se 3-(3-metoxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (1701) (964 mg, 4 mmol) e terc-butóxido de potássio (0,44 g, 4 mmol) em DMF anidra (150 mL) e agitou-se à TA durante 30 minutos. Adicionou-se 3-(bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (1,37 g, 4,0 mmol) . Agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos, verteu-se sobre água gelada (30 mL) e depois extraiu-se com acetato de etilo (3 x 50 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (25 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, 3-((4-amino-3-(3-metoxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1702) (1,4 g, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma solução de 3-( (4-amino-3-(3-metoxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1702) (100 mg, 0,2 mmol) em CH2C12 (20 mL) a -78°C, sob uma atmosfera de azoto, BBr3 (1 mL) , e agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 3 h. Deixou-se aquecer a mistura até à TA, verteu-se sobre água gelada (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 50 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (20 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (10-50 % de MeOH/CH2Cl2) para se obter o produto pretendido, 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H)-ona (1613) (87 mg, 91 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 3: Síntese de (R)-3-((4-amino-3-(3- hydroxibut-l-inil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 1802).

Dissolveram-se 3-((4-amino-3-iodo-lH- pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1611) (522 mg, 1 mmol) e (R)- but-3-in-2-ol (84 mg, 1,2 mmol) em THF anidro (40 mL) . Desgaseificou-se a mistura e voltou a enxer-se com azoto por três vezes. Adicionaram-se sequencialmente Pd(PPh3)2Cl2 (12 mg, 0,1 mmol), Cul (47 mg 0,25 mmol) e (i-Pr)2NH (505 mg, 5 mmol). Desgaseificou-se a mistura resultante e voltou a encher-se com árgon por três vezes e depois aqueceu-se ao refluxo durante 4 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de silica (10 g) e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter o produto, (R)-3-((4-amino-3-(3-hidroxibut-l-inil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H) -ona (1802 composto 37 da Tabela 4) (324 mg, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelado.

Exemplo 4: Síntese de 3-((6-amino-9H-purin-9-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 1902).

Dissolveu-se 9H-purin-6-amina (1901) (540 mg, 4,0 mmol) em DMF anidra (20 mL) . Adicionou-se-lhe NaH (a 60 % em óleo mineral, 160 mg, 4,0 mmol) e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe 3-(bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (1610) (1,37 g, 4,0 mmol) . Agitou-se a mistura reaccional à ΤΑ durante 30 minutos, verteu-se sobre água gelada (30 mL) e depois extraiu-se com acetato de etilo (3 x 50 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (25 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, 3-((6-amino-9H-purin-9-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (1902, composto 5 da Tabela 4) (1,1 g, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 5: Síntese de 3-((4-amino-3-(3- hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-l(2H)-ona (Composto 2009).

Adicionou-se a uma mistura agitada de ácido 2-iodo-6-metilbenzóico (1602) (105 g, 400 mmol), Pd(OAc)2 (27 g, 120 mmol) e PPh3 (63 g 240 mol) em THF (1.000 mL) à TA, tributil(vinil)estanho (152 g, 480 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante ao refluxo sob N2 de um dia para o outro. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de silica (10 g) , e depois concentrou-se em vazio. Verteu-se o resíduo sobre água gelada (1.000 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 1000 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com solução aquosa de NaOH (a 15 %, 5 x 200 mL) . Acidificou-se o conjunto das fases aquosas até pH = 1, extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 1.000 mL) . Secou-se o conjunto das fases orgânicas sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, ácido 2-metil-6-vinilbenzóico (1603) (61 g, 95 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Agitou-se uma mistura de ácido 2-metil-6-vinilbenzóico (1603) (56 g, 350 mmol) com cloreto de tionilo (208 g, 1.750 mmol) em tolueno (400 mL) ao refluxo durante 2 h. Concentrou-se a mistura em vazio para se obter o produto pretendido, cloreto de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (63 g, 95 % de rendimento) sob a forma de um óleo amarelo. Utilizou-se o produto obtido tal e qual no passo seguinte, sem purificação.

Dissolveram-se propan-2-amina (2001)(59 g, 1,0 mol) e cloroacetato de etilo (122 g, 1,0 mol) em tolueno (200 mL) e agitou-se a mistura ao refluxo durante 2 h. Deixou-se a mistura reaccional arrefecer até à TA, verteu-se sobre água gelada (500 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 250 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (10-50 % de álcool/éter de petróleo) para se obter o produto, 2-(isopropilamino) acetato de etilo (2002) (70 g, 51 % de rendimento) sob a forma de um óleo.

Dissolveram-se 2-(isopropilamino)acetato de etilo (2002) (14,5 g, 100 mmol) e trietilamina (200 g, 200 mmol) em CH2C12 (300 mL) e agitou-se a mistura durante 10 minutos à TA. Adicionou-se-lhe cloreto de 2-metil-6-vinilbenzoílo (1604) (18 g, 100 mmol), e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Verteu-se a mistura reaccional sobre água (300 mL) e extraiu-se com CH2C12 (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL) , secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto. Suspendeu-se o produto em bruto em IPE (éter isopropilico) (300 mL), agitou-se ao refluxo durante 30 minutos, e depois arrefeceu-se até 0-5°C. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 2-(N-isopropil-2-metil-6- vinilbenzamido)acetato de etilo (2003) (14,5 g, 50 % de rendimento), sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se a uma solução agitada de 2-(N-isopropil-2-metil-6-vinilbenzamido)acetato de etilo (2003) (14,0 g, 48,0 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) e H20 (30 mL), tetróxido de ósmio (20 mg) , e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Adicionou-se a esta mistura periodato de sódio (22 g, 100 mmol) e agitou-se à TA durante 16 h. Filtrou-se a mistura reaccional was através de gel de silica (10 g) , extraiu-se o filtrado com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e secou-se melhor o resíduo obtido em vazio para se obter o produto pretendido, 2-(2-formil-N-isopropil-6- metilbenzamido)acetato de etilo (2004) (8,33 g, 57 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se a uma solução agitada de 2-(2-formil-N-isopropil-6-metilbenzamido)acetato de etilo (2004) (8,3 g, 28,0 mmol) em EtOH (100 mL) e acetato de etilo (50 mL) à TA, carbonato de césio (5, 9 g, 30 mmol) . Desgaseificou-se a mistura resultante e voltou a encher-se com árgon por três vezes, e depois agitou-se a 50°C durante 5 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de sílica (10 g), e concentrou-se o filtrado em vazio. Verteu-se o resíduo sobre H20 (200 mL), extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL) , secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em IPE (120 mL), agitou-se ao refluxo durante 10 minutos, e depois arrefeceu-se até 0-5°C. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 2-isopropi1-8-meti1-1-oxo-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (2005) (5,35 g, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se lentamente ao longo de um período de tempo de 10 minutos, a uma solução agitada de hidreto de alumínio e lítio (2,88 g, 76 mol) em THF anidro (200 mL) a -78°C sob uma atmosfera de azoto, 2-isopropil-8-metil-l- oxo-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (2005) (5,2 g, 19 mmol). Deixou-se aquecer a mistura resultante até -30°C, agitou-se durante 30 minutos e verificou-se por CCF que se completara a reacção. Arrefeceu-se então a mistura até -78°C, e adicionou-se-lhe lentamente água (50 mL) . Deixou-se aquecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de silica (10 g), e concentrou-se o filtrado em vazio. Verteu-se o produto em bruto sobre H20 (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em acetato de etilo (30 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(hidroximetil)-2-isopropil-8- metilisoquinolin-1(2H)-ona (2006) (3,51 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma solução de 3-(hidroximetil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H) -ona (2006) (1, 61 g, 7,0 mmol) em CH2C12, PPh3 (3,67 g, 14,0 mmol) e agitou-se a mistura à TA durante 30 minutos. Arrefeceu-se a mistura a 0°C, e adicionou-se-lhe em porções CBr4 (4,64 g, 14,0 mmol) . Agitou-se a mistura resultante de 0°C até à TA durante 30 minutos, e depois concentrou-se em vazio. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida em coluna sobre gel de silica (30-50 % de EtOH/éter de petróleo) para se obter o produto pretendido, 3- (bromometil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2007) (1, 65 g, 80 % de rendimento) sob a forma de urn sólido branco.

Agitou-se uma mistura de 3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (108) (1,3 g, 5 mmol) com terc-butóxido de potássio (0,55 g, 5 mmol) em DMF anidra (20 mL) , à TA durante 30 minutos, e adicionou-se-lhe 3-(bromometil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2007) (1,47 g, 5 mmol) . Agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos, verteu-se sobre água gelada (30 mL) e depois extraiu-se com acetato de etilo (3 x 50 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (25 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio, e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, 3-( (4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2008) (1,66 g, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionaram-se sequencialmente a uma mistura agitada de 3-((4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin- l-il) metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (2008) (95 mg, 0,2 mmol) com 3-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il)fenol (66 mg, 0,3 mmol) em DNT-Et0H-H20 (a 3:1:1, 20 mL), Pd(OAc)2 (16 mg, 0,075 mmol), PPh3 (39,3 mg 0,15 mmol) e Na2C03 (132 mg, 1,25 mmol). Desgaseificou-se a mistura resultante e voltou a encher-se com árgon por três vezes e depois agitou-se a 100°C durante 1 h. Deixou- se arrefecer a mistura até à TA, filtrou-se através de gel de silica (10 g) e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter o produto, 3-((4-amino-3-(3-hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)metil)-2-isopropil-8-metilisoquinolin-l(2H)-ona (2009, composto 62 na Tabela 4) (53 mg, 61 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelado.

Exemplo 6: Síntese de 8-metil-3-((metil(9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona.

Dissolveu-se 3-(bromometil)-8-metil-2-o- toluílisoquinolin-1(2H)-ona (342 mg, 1,0 mmol) 1610 numa solução de metilamina (100 mL) e agitou-se durante 2 h. Verteu-se a mistura sobre água gelada (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 50 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (20 mL) , secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 8-metil-3-((metilamino)metil)- 2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (4001) (250 mg, 86 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo. Utilizou-se directamente no passo seguinte o produto tal como se obteve, sem purificação.

Dissolveram-se 8-meti1-3-((metilamino)metil)-2-o-toluílisoquinolin-1(2H) -ona (233 mg, 0,8 mmol) (4001) e 6-cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (4002) (238 mg, 1,0 mmol) em EtOH (50 mL) e agitou-se a mistura resultante ao refluxo durante 2 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter o produto, 8- metil-3-((metil(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (4003) (200 mg, 51 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelado.

Dissolveu-se 8-metil-3-((metil(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)amino)metil)-2-o- toluílisoquinolin-1(2H)-ona (4003) (180 mg 0,36 mmol) em

MeOH (HC1) (50 mL) e agitou-se a mistura à TA durante 2 h.

Adicionou-se uma solução aquosa de NaHC03 à mistura reaccional e ajustou-se o valor de pH a 9. Filtrou-se a mistura e concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 8-metil-3-((metil(9H-purin-6- il)amino)metil)-2-o-toluilisoquinolin-l(2H)-ona (4004, composto 184 na Tabela 4) (80 mg, 54 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Exemplo 7: Síntese de 3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona.

Adicionou-se a uma solução agitada de 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona 1609 (2,79 g, 10 mmol) em CH2C12 (200 mL) , Mn02 (5 g) e agitou-se ao refluxo durante 3 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (10-50 % de EtOH/éter de petróleo) para se obter o produto, 8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2-dihidroisoquinolina-3-carbaldeído 4101 (2,5 g, 90 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2- dihidroisoquinolina-3-carbaldeído 4101 (2,4 g, 8,6 mmol) em THF anidro (280 mL) e arrefeceu-se a -78°C sob uma atmosfera de azoto. Adicionou-se lentamente MetilMgBr (2 M, 5 mL, 10 mmol), e agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 2 h. Adicionou-se H20 (5 mL) e depois verteu-se a solução sobre água gelada (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 50 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio, e purificou-se o produto residual por cromatografia rápida em coluna sobre gel de silica (10-50 % de EtOH/éter de petróleo) para se obter o produto, 3-(1-hidroxietil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H)-ona 4102 (1,8 g, 71 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma solução de 3-(1-hidroxietil) -8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona 4102 (1,6 g, 5,5 mmol) em CH2C12, PPh3 (2,88 g, 11,0 mmol), e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Em seguida adicionou-se CBr4 (3,64 g, 11,0 mmol) em porções, a esta mistura, a 0°C. Deixou-se a mistura resultante aquecer até à TA, agitou-se durante 30 minutos, e concentrou-se em vazio. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida em coluna sobre gel de silica (30-50 % de EtOH/éter de petróleo) para se obter o produto pretendido, 3 —(1 — bromoetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona 4103 branco. (1,8 g, 91 % de rendimento) sob a forma de um sólido

Adicionou-se a uma solução agitada de 9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina 4103 (436 mg 2 mmol) em DMF anidra (10 mL) , NaH (a 60 % em óleo mineral, 77 mg, 2 mmol) e agitou-se a mistura durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe 3-(1-bromoetil)-8-metil-2-o- toluílisoquinolin-1(2H)-ona 4104 (700 mg, 2 mmol). Agitou- se a mistura durante 2 h, verteu-se sobre água gelada (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 χ 50 mL). Lavou-se 0 conjunto das fases orgânicas com salmoura (20 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (10-50 % de MeOH/DCM) para se obter o produto, 8-metil-3-(1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ylamino)etil)-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona 4105 (500 mg, 51 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 8-metil-3-(1-(9-(tetrahidro-2H- piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-2-o-toluílisoquinolin- 1 (2H)-ona 4105 (180 mg, 0,36 mmol) em MeOH (com HC1) (50 mL) e agitou-se durante 2 h. Adicionou-se solução aquosa de NaHC03 à mistura reaccional e ajustou-se o valor do pH a 9. Filtrou-se então a mistura e concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (4106, composto 191 na Tabela 4) (80 mg, 54 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Exemplo 8: Síntese de dihidrogenofosfato de 3—(4— amino-1-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-l,2-dihidroisoquinolin- 3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo.

Dissolveu-se 3-((4-amino-3-(3-fluoro-5- hidroxifenil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona 4301 (250 mg, 0,5 mmol) em THF anidro (15 mL) num balão de fundo redondo e às escuras (tapado com folha de alumínio) e arrefeceu-se até 0°C sob uma atmosfera de árgon. Adicionou-se-lhe CBr4 (498 mg, 1,5 mmol) e em seguida fosfito de dietilo (129 pL, 1,0 mmol) e trietilamina (417 pL, 1.5 mmol). Agitou-se a mistura resultante ao abrigo da luz deste 0°C até à TA durante 16 h. Retomou-se a mistura em acetato de etilo e salmoura. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre gel de sílica, eluindo com metanol e diclorometano para se obter o produto pretendido, fosfato de 3-(4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-l,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin- 3-il) -5-fluorofenilo e dietilo 4302 (200 mg, 62 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco sujo.

Dissolveu-se fosfato de 3-(4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluil-l,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo e dietilo 4302 (170 mg, 0,26 mmol) em CH3CN anidro (5 mL) e arrefeceu-se até 0°C sob uma atmosfera de árgon. Adicionou-se-lhe lentamente TMSBr (0,34 mL, 2,64 mmol) por intermédio de uma seringa e agitou-se a mistura resultante desde 0°C até à TA durante 16 h. Uma LC-MS denotava sobrar uma pequena quantidade da matéria-prima, por isso adicionou-se mais uma quantidade de TMSBr (0,1 mL) e agitou-se à TA durante 5 h. Uma LC-MS denotava haver-se completado a transformação. Concentrou-se a mistura em vazio, e dissolveu-se o resíduo em Et20 (10 mL) e H20 (0,5 mL) e agitou-se durante 30 minutos. Concentrou-se a mistura em vazio para se obter o produto pretendido, dihidrogenofosfato de 3-(4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o- toluíl-l,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-5-fluorofenilo 4303 (140 mg, 91 % de rendimento).

Exemplo 9: Síntese de 3-((4-amino-3-iodo-lH- pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 1611).

Agitou-se uma mistura de ácido 2,6- dimetilbenzóico (composto 4401) (60 g, 400 mmol) com cloreto de oxalilo (101 g, 800 mmol) em CH2C12 (400 mL) à temperatura ambiente durante 2 h. Concentrou-se a mistura em vazio para se obter o produto pretendido, cloreto de 2, 6-dimetilbenzoílo (composto 4402) (64 g, 95 % de rendimento) sob a forma de um óleo amarelo. O material obtido foi utilizado no passo seguinte tal e qual, sem purificação.

Agitou-se uma mistura de o-toluidina (45 g, 420 mmol) com trietilamina (71 g, 700 mmol) em CH2C12 (300 mL) à temperatura ambiente durante 10 minutos. Adicionou-se a esta mistura gota a gota cloreto de 2,6-dimetilbenzoílo (composto 4402) (64 g, 400 mmol) e agitou-se mistura resultante à temperatura ambiente durante 30 minutos.

Verteu-se a mistura reaccional sobre água (300 mL), extraiu-se com CH2CI2 (3 x 200 mL) , secou-se sobre Na2SC>4 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto. Suspendeu-se o produto em bruto em éter isopropilico (300 mL) , agitou-se ao refluxo durante 30 minutos e depois arrefeceu-se a 0-5°C. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 2,6-dimetil-N-o-toluílbenzamida (composto 4403) (81 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se a uma solução agitada de 2,6-dimetil-N-o-toluílbenzamida (composto 4403) (23,9 g, 0,1 mol, 1 eq.) e HMPA (17,9 g, 0,1 mol, 1 eq.) em THF anidro (250 mL) a -78°C, sob uma atmosfera de árgon, n-butil-lítio (100 mL, 2,5 M, 0,25 mol, 2,5 eq) , cuidadosamente a longo de 1 h, mantendo-se a temperatura reaccional a menos de -60°C durante a adição. Agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 1 h, e depois adicionou-se rapidamente oxalato de dietilo (17,6 g, 0,12 mol, 1,2 eq.) (a temperatura reaccional aumentou até -20°C durante a adição). Agitou-se a mistura a -50°C durante 10 minutos, e depois terminou-se adicionando-lhe água (100 mL). Separou-se o sal inorgânico por filtração, e extraiu-se o filtrado com acetato de etilo (2 x 100 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (100 mL), secou-se sobre MgS04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo semi-sólido. Suspendeu-se o produto em bruto em éter isopropilico (100 mL) à temperatura ambiente, durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(3-metil-2-(o- toluílcarbamoil)fenil)-2-oxopropanoato de etilo (composto 4404) (16, 1 g, 47,4 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 3- (3-metil-2-(o- toluílcarbamoil)fenil)-2-oxopropanoato de etilo (composto 4404) (11,0 g, 32,4 mmol, 1 eg.) em HCl/MeOH (10 M, 100 mL, 10 mL por g de 4404) e agitou-se ao refluxo durante 1 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio, e suspendeu-se o resíduo em acetato de etilo (10 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2- dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (composto 4405) (7,52 g, 72,5 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se lentamente ao longo de um período de tempo de 10 minutos, a uma solução agitada de hidreto de alumínio e lítio (8,28 g, 218 mol) em THF anidro (500 mL) a -78°C sob uma atmosfera de azoto, 8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2-dihidroisoquinolina-3-carboxilato de etilo (composto 4405) (28 g, 87 mmol). Deixou-se a mistura resultante aquecer até -30°C, agitou-se durante 30 minutos e verificou-se por uma análise de cromatografia em camada fina que a reacção se havia completado. Em seguida arrefeceu-se a mistura a -78°C, e adicionou-se-lhe lentamente água (50 mL). Deixou-se aquecer a mistura até à temperatura ambiente, filtrou-se através de gel de silica (10 g), e concentrou-se o filtrado em vazio. Verteu-se o produto em bruto sobre H20 (200 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em acetato de etilo (30 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3- (hidroximetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H)-ona (composto 4406) (22 g, 92 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se lentamente tribrometo de fósforo (25,6 g, 95 mmol) a uma solução agitada de DMF (11,5 g, 158 mol) em acetonitrilo (200 mL) a 0°C, e agitou-se a mistura resultante a 0°C durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe lentamente 3-(hidroximetil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin -1-(2H)-ona (composto 4406) (22 g, 78,8 mmol). Deixou-se a mistura reaccional aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se durante 30 minutos. Adicionou-se-lhe lentamente uma solução aquosa saturada de NaHCCh (50 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em éter isopropilico (50 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3- (bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H)-ona (composto 4407) (21 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveram-se 3-iodo-lH-pirazolo[3,4- d]pirimidin-4-amina (10,8 g, 41,4 mmol) e terc-butóxido de potássio (4,4 g, 40 mmol) em DMF anidra (150 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 30 minutos. Adicionou-se 3-(bromometil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4407) (13,7 g, 40 mmol). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 30 minutos, verteu-se sobre água gelada (300 mL) e depois extraiu-se com acetato de etilo (3 x 200 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (50 mL), secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado até cerca de 100 mL em vazio, separou-se o precipitado por filtração para se obter uma primeira colheita do produto pretendido, 3-((4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 1611) (12 g, 60 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Concentrou-se o filtrado em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (2-20 % de MeOH/DCM) para se obter a segunda colheita do produto pretendido, 3-((4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (1611, composto 6 na Tabela 4) (6 g, 30 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 10: Síntese de 3-((4-amino-3- (fluorometil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-l(2H)-ona (composto 4504).

Esquema 23: Descreve-se a síntese da 3-((4-amino-3-(fluorometil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4504).

Adicionou-se a uma mistura agitada de 3-((4-amino-3-iodo-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 1611) (1,50 g, 2,87 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (166 mg, 0,14 mmol) em DMF anidra (15 mL) , sob uma atmosfera de árgon, tributilvinilestanho (1,26 mL, 4,31 mmol) e agitou-se a mistura resultante a 80°C durante 3 h. Deixou-se a mistura reaccional arrefecer até à temperatura ambiente, e retomou-se em água e acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e triturou-se o resíduo com uma pequena quantidade de éter etílico anidro, e filtrou-se para se obter o produto pretendido, 3-((4-amino- 3- vinil-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-meti1-2- o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4501) (853 mg, 70 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco sujo.

Adicionou-se a uma solução agitada de 3-((4-amino-3-vinil-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4501) (853 mg, 2,0 mmol) em 1,4-dioxano-H20 (a 3:1, 30 mL) sob uma atmosfera de árgon, tetróxido de ósmio (a 2,5 %, em peso, em t-BuOH, 252 pL, 0,020 mmol), e agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos. Adicionou-se a esta mistura periodato de sódio (863 mg, 4,0 mmol) e agitou-se a mistura resultante durante 3 h. Retomou-se a mistura reaccional e água e acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2- dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carbaldeído, sob a forma de um sólido acastanhado (composto 4502) (716 mg, 84 % de rendimento).

Adicionou-se em porções, a uma mistura agitada de 4- amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-

d]pirimidina-3-carbaldeído sob a forma de um sólido acastanhado (composto 4502) (841 mg, 1,98 mmol) em MeOH anidro (35 mL), a 0°C sob uma atmosfera de árgon, NaBH4 (89 mg, 2,38 mmol) . Agitou-se a mistura desde 0°C e até à ΤΑ durante 2 h, e depois retomou-se em acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 3-((4-amino-3- (hidroximetil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4503) (626 mg, 74 % de rendimento) sob a forma de um sólido castanho-escuro .

Adicionou-se lentamente, a uma suspensão agitada de 3-((4-amino-3-(hidroximetil)-lH-pirazolo[3,4- d]pirimidin-l-il) metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1 (2H)-ona (composto 4503) (50 mg, 0,12 mmol) em DCM anidro (2 mL) a 0°C sob uma atmosfera de árgon, trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST, 77 pL, 0,59 mmol) e agitou-se a mistura resultante de 0°C até à temperatura ambiente durante 5 h. Terminou-se a reacção adicionando água à mistura e extraiu-se com acetato de etilo. Purificou-se o resíduo em placas de CCF preparativa (com 7 % de MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, 3-((4-amino-3-(fluorometil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin-l-il)metil)-8-metil-2-o-toluílisoquinolin-1(2H)-ona (4504, composto 310 na Tabela 4) (10,3 mg, 20 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 11: Síntese de 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-l,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carboxamida (composto 4602).

Adicionaram-se sequencialmente, a uma solução agitada de 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-l, 2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carbaldeído (composto 4502) (400 mg, 0,94 mmol) em t-BuOH (1,8 mL) , uma solução de NaH2PC>4 (3,90 g, 28,27 mmol) em água (4,8 mL) , metil-2-buteno (1.0 mL) , e (gota a gota) uma solução de NaClCç (767 mg, 6,78 mmol) em água (4,8 mL). Agitou-se a mistura à TA durante 3 h sob uma atmosfera de árgon. Acidificou-se a solução amarelo pálido com uma solução aquosa de HC1 (2 M, 4 mL) até pH = 2, e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2S04 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio, e triturou-se o resíduo com éter etílico anidro e acetato de etilo. Recolheu-se o sólido por filtração para se obter o produto pretendido, ácido 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-l,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carboxílico (composto 4601) (200 mg, 47 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se lentamente a uma solução agitada de ácido 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluí1-1,2- dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carboxílico (composto 4601) (150 mg, 0,34 mmol) em DCM anidro (10 mL), cloreto de oxalilo (2,0 M em DCM, 0,22 mL) , e em seguida uma quantidade catalítica de DMF anidra (1 gota). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois concentrou-se em vazio. Dissolveu-se o resíduo de novo em DCM (6 mL) e adicionou-se um excesso de amónia (0,35 mL) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 h, e depois retomou-se em acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre Na2S04 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio, e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 5 % de MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, 4-amino-l-((8-metil-l-oxo-2-o-toluíl-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)metil)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidina-3-carboxamida (4602, composto 298 na Tabela 4) (22 mg, 15 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 12: Sintese de (S)-3-(1-(9H-purin-6- ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 4704) (Método A)

Esquema 25. Descreve-se a síntese de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) pelo Método A

Adicionou-se em porções, a uma mistura agitada de ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)propanóico (composto 4701 ) (189,1 g, 1 mol, 1 eq.), trietilamina (404, 8 g, 4 mol, 4 eq) e HOBt (135 g, 1,0 mol, 1 eq.) em diclorometano anidro (1,8 L) a 0°C, EDCI (384,3 g, 2 mol, 2 eq.) ao longo de 30 minutos. Agitou-se a mistura resultante à TA durante 30 minutos, e depois adicionou-se-lhe cloridrato de N, O-dimetil-hidroxilamina (107,3 g, 1,1 mol, 1,1 eq) . Agitou-se a mistura reaccional à TA durante 20 h, e depois terminou-se a reacção adicionando água à mistura (1 L) . Lavou-se a fase orgânica com água (2 x 1 L) e com salmoura (500 mL) , secou-se sobre MgSCq anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Suspendeu-se o produto em bruto em éter de petróleo (1 L) e agitou-se à TA durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, (S)—1 — (metoxi(metil)amino)-l-oxopropan-2-ilcarbamato de terc-butilo (composto 4702) (218 g, 93,9 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se cuidadosamente (gota a gota) ao longo de 1 h, a uma mistura agitada de 2,6-dimetil-N-fenilbenzamida (composto 4403, que se pode sintetizar tal como se descreveu no Exemplo 9) (30 g, 0,13 mol, 1 eq.) e HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq.) em THF anidro (300 mL) a -78°C sob uma atmosfera de árgon, n-butil-lítio (2,5 M, 100 mL, 0,25 mol, 2,5 eq.), mas manteve-se a temperatura reaccional inferior a -60°C durante a adição. Agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 1 h. Adicionou-se rapidamente a esta mistura (S)-1-(metoxi(metil)amino)-1-oxopropan-2-ilcarbamato de terc-butilo (composto 4702) (40 g, 0,173 mol, 1,3 eq) (a temperatura reaccional subiu até -50°C durante a adição) . Agitou-se a mistura a -50°C durante 10 minutos, terminou-se adicionando água à mistura (300 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (2 x 100 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água (500 mL x 2) e com salmoura (50 mL) , secou-se sobre MgSCq anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo semi-sólido. Suspendeu-se o produto em bruto em EtOH e agitou-se durante 10 minutos. Separou-se o sólido branco por filtração. Concentrou-se o filtrado em vazio, e agitou-se o resíduo numa mistura de acetato de etilo (30 mL) e álcool isopropílico (200 mL) à TA durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 4-(3-metil-2- (fenilcarbamoíl)fenil-3-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butilo (composto 4703) (9,23 g, 17,5 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoí1)fenil-3-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butilo (composto 4703) (9,23 g, 23 mmol) em HCl/MeOH (100 mL) e agitou-se ao refluxo durante 30 minutos. Deixou-se arrefecer a mistura até à TA, concentrou-se em vazio, e depois adicionou-se-lhe uma solução saturada de Na2CC>3 para ajustar o pH a 7-8. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (5,8 g, 90 % de rendimento, isómeros S:R = 7:1) sob a forma de um sólido branco.

Resolução dos isómeros para aumentar a pureza enantiomérica: Dissolveu-se 3-(1-aminoetil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (na qual a razão isomérica é de S:R = 7:1) (5 g, 18 mmol) em MeOH (100 mL), e adiciona-se-lhe ácido (D)-tartárico (2,7 g, 18 mmol). Agitou-se a mistura à TA durante 30 minutos e precipita um sólido. Agitou-se a mistura resultante ao refluxo durante 1 h, e depois agitou-se à TA durante 16 h. Separou-se o sólido por filtração e lavou-se com metanol (10 mL). Dissolveu-se então o sólido em H20 (15 mL) e adicionou-se

uma solução saturada de NaHCCh (5 mL) para se ajustar o pH a 8. Separou-se o sólido por filtração, lavou-se com água (5 mL) , e depois secou-se em vazio para se obter o produto enantiomericamente enriquecido (composto 4704) (2,7 g, 58 % de rendimento), cuja razão isomérica é de S:R > 41:1.

Trata-se de uma pureza enantiomérica superior a cerca 97,6 % no enantiómero (S) . Confirmou-se a razão entre os dois enantiómeros acoplando com ácido (R)-(-)-alfa- metoxifenilacético e detecção dos diastereómeros resultantes por Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear.

Exemplo 13: Síntese de (S)-3-(1-aminoetil)-8- metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (Método B) (composto 4704).

Adicionou-se gota a gota cloreto de tionilo (320,8 g, 2,7 mol, 1,2 eq.) a MeOH anidro agitado (2 L) a 0°C, ao longo de 50 minutos, mantendo a temperatura reaccional inferior a 25°C durante a adição. Deixou-se aquecer a mistura até à temperatura ambiente e depois adicionou-se ácido (S)-2-aminopropanóico (composto 4801) (200 g, 2,24 mol, 1 eq.). Agitou-se a mistura resultante se à temperatura ambiente durante 20 h, e concentrou-se em vazio para se obter o produto pretendido, o cloridrato de (S)-2-aminopropanoato de metilo (composto 4802), sob a forma de um sólido branco.

Adicionaram-se sequencialmente, a uma solução agitada do cloridrato de (S)-2-aminopropanoato de metilo obtido acima (composto 4802) em água (1,6 L), à temperatura ambiente, NaHC03 (566,2 g, 6,741 mol, 3 eq.) e uma solução de dicarbonato de di-terc-butilo (490,4 g, 2,247 g, 1 eq.) em THF (1,6 L) . Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 20 h. Removeu-se o sal inorgânico por filtração, e extraiu-se o filtrado com acetato de etilo (2 x 500 mL) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (500 mL), secou-se sobre MgSCq anidro, e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, (S)-2-(terc- butoxicarbonilamino)propanoato de metilo (composto 4803) (448 g, 98,2 % de rendimento) sob a forma de cristais incolores.

Adicionou-se cuidadosamente ao longo de 1 h, a uma solução agitada de 2,6-dimetil-N-fenilbenzamida (composto 4403), que se pode sintetizar tal como se descreveu no Exemplo 9) (30 g, 0,13 mol, 1 eq.) e HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq) em THF anidro (300 mL) a -78°C sob uma atmosfera de árgon, n-butil-lítio (100 mL, 2,5 M, 0,25 mol, 2,5 eq) , mantendo-se a temperatura reaccional inferior a -60°C durante a adição. Agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 1 h, e depois adicionou-se-lhe rapidamente (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-propanoato de metilo (composto 4803) (35 g, 0,173 mol, 1,3 eq) (a temperatura reaccional aumentou até -50°C durante a adição). Agitou-se a mistura a -50°C durante 10 minutos, terminou-se adicionando água (300 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (2 x 100 mL) . Lavou-se a fase orgânica com água (500 mL x 2), secou-se sobre MgSCt anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo semi-sólido. Suspendeu-se o produto em bruto em acetato de etilo (500 mL) e agitou-se durante 10 minutos. Removeu-se o sólido por filtração, e concentrou-se o filtrado em vazio. Agitou-se o óleo residual numa mistura de acetato de etilo (30 mL) e álcool isopropílico (200 mL) à temperatura ambiente durante 10 minutos. Separou-se o sólido por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoí1)fenil-3-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butilo (composto 4703) (4,61 g, 9 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 4-(3-metil-2-(fenilcarbamoí1)fenil-3-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butilo (composto 4703) (4,61 g, 0,012 mol) em HCl/MeOH (50 mL) e agitou-se ao refluxo durante 30 minutos. Concentrou-se a mistura em vazio e depois adicionou-se uma solução saturada de Na2C03 para ajustar o pH a cerca de 7-8. Separou-se o sólido resultante por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3- (1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (2,9 g, 90 % de rendimento, cuja razão isomérica é de S:R = 5:1) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 14a: Síntese de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (9) (composto 4902)

Dissolveram-se 3-(1-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (200 mg, 0,72 mmol), 6-cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (344 mg, 1,44 mmol) e DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) em n-BuOH (20 mL), e agitou-se a mistura resultante se ao refluxo durante 16 h. Concentrou-se mistura reaccional em vazio e purificou-se por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 30 % a 50 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 8-metil-2-fenil-3-((IS)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6- ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (composto 4901) (207 mg, 60 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 8-metil-2-fenil-3-((IS) -1-(9- (tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6- ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (composto 4901) (200 mg, 0,42 mmol) em HCl/EtOH (3 M, 5 mL) e agitou-se a mistura resultante se à temperatura ambiente durante 1 h. Terminou-se a reacção adicionando à mistura reaccional solução aquosa saturada de NaHCCq e ajustou-se o pH a cerca de 7-8. Extraiu-se a mistura com CH2CI2 (50 mL x 3) , secou-se sobre Na2SC>4 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio, e recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo e hexanos (a 1:1). Separou-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, (S)-3- (1- (9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4902) (150 mg, 90 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 14b: Síntese de (S)-3-(1-(9H-purin-6- ilamino)etil)-8-cloro-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (9) (composto 4904)

Sintetizou-se o composto com a Fórmula 4904 (composto 292 na Tabela 4) utilizando transformações sintéticas tais como as descritas nos Exemplos 12 e 14a, mas utilizou-se o ácido 2-cloro-6-metilbenzóico (composto 4903) tal como se obteve em vez de ácido 2,6-dimetilbenzóico (composto 4403) . Por um método semelhante, sintetizou-se o composto 328 na Tabela 4 utilizando as transformações sintéticas tais como as descritas mas partindo do ácido 2-cloro-6-metil-m-fluorobenzóico.

Exemplo 15a: Síntese de (S)-3-(1-(9H-purin-6- ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 5005).

Agitou-se uma mistura de ciclopropanamina (24 g, 420 mmol) com trietilamina (71 g, 700 mmol) em CH2C12 (300 mL) à TA durante 10 minutos. Adiciono9u-se gota a gota a esta mistura cloreto de 2,6-dimetilbenzoílo (composto 4402) (64 g, 400 mmol), e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 30 minutos. Verteu-se a mistura reaccional sobre água (300 mL) e extraiu-se com CH2C12 (3 x 200 mL). Secou-se o conjunto das fases orgânicas sobre Na2SC>4 anidro e filtrou-se. Concentrou-se ο filtrado em vazio para se obter o produto em bruto. Suspendeu-se o produto em bruto em éter isopropilico (IPE) (300 mL) , agitou-se ao refluxo durante 30 minutos e deixou-se arrefecer até 0-5°C. Separou-se o precipitado por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, N-ciclopropil-2,6-dimetilbenzamida (composto 5001) (61 g, 80 % de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo.

Adicionou-se cuidadosamente ao longo de 1 h, a uma solução agitada de N-ciclopropil-2,6-dimetilbenzamida (composto 5001) (25 g, 0,13 mol, 1 eq.) e HMPA (26 g, 0,16 mol, 1,2 eq) em THF anidro (300 mL) a -78°C e sob uma atmosfera de árgon, n-butil-litio (2,5 M, 100 mL, 0,25 mol, 2,5 eq.) mantendo-se a temperatura inferior a -60°C durante a adição. Agitou-se a mistura resultante a -78°C durante 1 h, e depois adicionou-se-lhe rapidamente 1-(metoxi(metil)amino)-l-oxopropan-2-ilcarbamato de terc-butilo (40 g, 0,173 mol, 1,3 eq.) (a temperatura reaccional aumentou até -50°C durante a adição). Agitou-se a mistura a -50°C durante 10 minutos, terminou-se a reacção adicionando-lhe água (300 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (2 x 100 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água (500mL x 2) e com salmoura (100 mL) , secou-se sobre MgS04 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, 4-(2-(ciclopropilcarbamoí1)-3-metilfenil)-3-oxobutan-2- ilcarbamato de terc-butilo (composto 5002) (32 g, 70 % de rendimento) sob a forma de um óleo amarelo.

Dissolveu-se 4- (2-(ciclopropilcarbamoil)-3- metilfenil)-3-oxobutan-2-ilcarbamato de terc-butilo (composto 5002) (32 g, 88 mmol) em HCl/MeOH (300 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 h. Concentrou-se a mistura em vazio, e depois adicionou-se-lhe solução aquosa saturada de Na2CC>3 para ajustar o pH a cerca de 7-8. Separou-se o sólido resultante por filtração e secou-se melhor em vazio para se obter o produto pretendido, 3 —(1 — aminoetil)-2-ciclopropil-8-metil-isoquinolin-1(2H)-ona (composto 5003) (17 g, 80 % de rendimento, S:R = 7:1) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma solução agitada de 3-(l-aminoetil)-2-ciclopropi1-8-metil-isoquinolin-1(2H)-ona (S:R = 7:1) (4,84 g, 20 mmol) (composto 5003) em MeOH (96,8 mL), ácido (L)-tartárico (3,0 g, 20 mmol) e agitou-se a mistura resultante se à temperatura ambiente durante 16 h. Separou-se o precipitado por filtração e lavou-se com MeOH (10 mL). Dissolveu-se o sólido em H20 (15 mL) e adicionou-se-lhe solução saturada de NaHC03 (5 mL) para ajustar o pH a cerca de 8. Separou-se o sólido resultante por filtração, lavou-se com água (5 mL) , e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido (composto 5003) (1,94 g. 40 % de rendimento) sob a forma de um único enantiómero (configuração S) . Confirmou-se a pureza enantiomérica por acoplamento com ácido (R)-(-)-alfa-metoxifenilacético e obtendo um espectro de Ressonância Magnética Nuclear da mistura diastereomérica resultante.

Dissolveram-se (S)-3- (1-aminoetil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (242 mg, 1 mmol ) (composto 5003), 6-cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (344 mg, 1,44 mmol) e DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) em n-BuOH (20 mL), e agitou-se a mistura resultante ao refluxo durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 30 % a 50 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 2-ciclopropil-8-metil-3-((IS)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6- ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (composto 5004) (288 mg, 65 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 2-ciclopropil-8-metil-3-((IS)-1-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6- ilamino)etil)isoquinolin-1(2H)-ona (composto 5004) (222 mg, 0,5 mmol) em HCl/EtOH (3 M, 5 mL) e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h. Neutralizou-se a mistura reaccional com solução saturada de NaHC03 até pH = 7-8, e depois extraiu-se com CH2C12 (50 mL χ 3) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo e hexanos (a 1:1). Separou-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, (S)-3- (1- (9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-metilisoquinolin-1(2H)-ona (5005, composto 200 na Tabela 4) (150 mg, 83 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 15b. Síntese de (S)-3-(1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-ciclopropil-8-cloro-isoquinolin-l(2H)-ona ( composto 5011).

Sintetizou-se o composto com a Fórmula 5011 (composto 270 na Tabela 4) utilizando as transformações sintéticas tais como descritas no Exemplo 15a, mas partindo de cloreto de 2-cloro-6-metilbenzoílo (composto 5006) em vez de cloreto de 2,6-dimetilbenzoílo (composto 4402).

Exemplo 16: Síntese de (S)-3-(1-(2-amino-5- cloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 5102).

Agitou-se ao refluxo uma mistura de 3-(l-aminoetil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (150 mg, 0,54 mmol), 2,4,5-tricloropirimidina (119 mg, 0,65 mmol) e trietilamina (137 mg,1.35 mmol) em n-BuOH (10 mL) durante 2 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à temperatura ambiente e depois concentrou-se em vazio. Purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (MeOH: CH2C12= 1:100) para se obter o produto pretendido, (S)-3-(1-(2,5-dicloropirimidin-4- ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H) -ona (composto 5101) (170 mg, 74 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Agitou-se uma mistura de (S)—3— (1— (2,5 — dicloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 5101) (85 mg, 0,20 mmol) em amónia (15 mL) , num tubo selado, a 150°C durante 16 h. Deixou-se arrefecer a solução até à temperatura ambiente e depois retomou-se em água (30 mL) e acetato de etilo (3 x 30 mL). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura (2 χ 20 mL), secou-se sobre Na2S04 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter o produto pretendido, (S)-3-(1-(2-amino-5-cloropirimidin-4-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5102 composto 249 na Tabela 4) (40 mg, 49,6 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 17: Síntese de (S)-3-(1-(2-fluoro-9H- purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 5204).

Adicionou-se a uma mistura agitada de 6-cloro-2-fluoro-9H-purina (composto 5201) (2,07 g, 12,0 mmol) e monohidrato de ácido p-toluenossulfónico (34 mg, 0,18 mmol) em acetato de etilo (50 mL) sob uma atmosfera de árgon, 3,4-dihidropirano (3,03 g, 36,0 mmol) e agitou-se a mistura resultante ao refluxo durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 10 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 6-cloro-2-fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (composto 5202) (1,82 g, 59 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveram-se 3-(1-aminoetil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona (200 mg, 0,72 mol), 6-cloro-2-fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (composto 5202) (369 mg, 1,44 mmol) e DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) em n-BuOH (20 mL) num tubo selado, e agitou-se a mistura resultante a 120°C durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 30 % a 50 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 3- (1- (2-fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 5203) (167 mg, 47 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 3- (1- (2-fluoro-9-(tetrahydro-2H- piran-2-il)-9H-purin-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 5203) (160 mg, 0,32 mmol) em HCl/EtOH (3 M, 5 mL) e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h. Neutralizou-se a mistura com solução aquosa saturada de NaHC03 até pH = 7-8, e extraiu-se com CH2CI2 (50 mL χ 3) . Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2S04 anidro e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo e hexanos. Recolheu-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 3 — (1 — (2-fluoro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5204, composto 245 na Tabela 4) (125 mg, 94 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco .

Exemplo 18: Síntese de (S)-3-(1-(2-cloro-9H- purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 5304).

Esquema 31: Descreve-se a síntese de (S)-3-(1-(2-cloro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1 (2H)-ona (composto 5304).

Adicionou-se a uma mistura agitada de 2,6-dicloro-9H-purina (composto 5301) (2,27 g, 12,0 mmol) e monohidrato de ácido p-toluenossulfónico (34 mg, 0,18 mmol) em acetato de etilo (50 mL) sob uma atmosfera de árgon, 3,4-dihidropirano (3,03 g, 36,0 mmol), e agitou-se a mistura resultante ao refluxo durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 10 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 2, 6-dicloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-yl)-9H-purina (composto 5302) (2,04 g, 62 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveram-se 3-(1-aminoetil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (200 mg, 0,72 mol), 2,6-dicloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-yl)-9H-purina (composto 5302) (393 mg, 1,44 mmol) e DIPEA (279 mg, 2,16 mmol) em n-BuOH (20 mL) num tubo selado, e agitou-se a mistura resultante a 120°C durante 16 h. Concentrou-se a mistura resultante em vazio e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de silica (eluindo com 30 % a 50 % de Hex/EtOH) para se obter o produto pretendido, 3- (1- (2-cloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 5303) (172 mg, 46 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Dissolveu-se 3- (1- (2-cloro-9-(tetrahidro-2H- piran-2-il)-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 5303) (172 mg, 0,33 mmol) em HCl/EtOH (3 M, 5 mL) e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h. Neutralizou-se a mistura com solução aquosa saturada de NaHCCq até pH = 7-8, e depois extraiu-se com CH2CI2 (50 mL χ 3). Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio e recristalizou-se a partir de acetato de etilo e hexanos. Recolheu-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 3-(1-(2-cloro-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-1(2H)-ona (5304, composto 244 na Tabela 4) (128 mg, 90 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 19: Síntese de (S)-3-(1-(2-amino-9H- purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2-fenilisoquinolin-l(2H)-ona (composto 5402).

Suspenderam-se (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (100 mg, 0,36 mmol), 2-amino-6-cloropurina (composto 5401) (60,9 mg, 0,36 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (69 pL, 0,40 mmol) em n-BuOH (4 mL) num tubo selado, e agitou-se a mistura resultante a 100°C durante 48 h e depois a 120°C durante 24 h. Deixou-se arrefecer a mistura até à temperatura ambiente e concentrou-se em vazio para se remover o n-BuOH. Retomou-se o resíduo em acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio. Triturou-se o resíduo com éter etílico anidro e purificou-se melhor por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 0-8 % de MeOH/DCM) para se obter o produto pretendido, (S)-3- (1- (2-amino-9H-purin-6-ilamino)etil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona sob a forma de um sólido branco sujo/amarelo (5402, composto 323 na Tabela 4), (28 mg, 20 %) ·

Exemplo 20: Síntese de (S)-4-(1-(8-metil-l-oxo-2-fenil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)etilamino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbonitrilo (composto 5506).

Adicionou-se a uma mistura agitada de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (composto 5501) (3,99 g, 26,0 mmol) em CH2C12 seco (150 mL) sob uma atmosfera de árgon, N-bromossuccinimida (6,02 g, 33,8 mmol). Agitou-se a mistura reaccional se à temperatura ambiente durante 3 h, diluiu-se com MeOH (30 mL), e depois concentrou-se em vazio para se obter um sólido castanho claro. Triturou-se o resíduo com H20 (150 mL) e depois recristalizou-se a partir de MeOH (120 mL) . Recolheu-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 5- bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (composto 5502) (4,0 g, 66 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco .

Adicionou-se gota a gota ao longo de 10 minutos, a uma solução agitada de 5-bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (composto 5502) (2,33 g, 10,0 mmol) em THF anidro (100 mL) a -78°C sob uma atmosfera de árgon, uma solução de n-BuLi (8,8 mL, 22,0 mmol) em THF (50 mL) . Agitou-se a mistura reaccional a -78°C durante lhe depois adicionou-se gota a gota ao longo de 10 minutos DMF (2,00 g, 11,0 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a -78°C durante 30 minutos, e depois deixou-se aquecer lentamente até à temperatura ambiente e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 h. Diluiu-se a mistura reaccional com H20 (50 mL) e depois concentrou-se em vazio para remover o THF. Tratou-se a suspensão resultante com uma solução aquosa saturada de NH4C1 (50 mL) , filtrou-se, lavou-se com acetato de etilo (100 mL) , e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldeído (composto 5503) (1,17 g, 65 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se a uma mistura agitada de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldeído (composto 5503) (1,17 g, 6,47 mmol) em EtOH (25 mL), cloridrato de hidroxilamina sólido (0,54 g, 7,77 mmol) e adicionou-se uma solução de NaOH (0,311 g, 7,77 mmol) em H20 (4 mL). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 30 minutos e diluiu-se com uma quantidade suficiente de EtOH (30 mL), continuando a agitar-se durante 30 minutos. Separou-se o sólido por filtração, lavou-se com H20 (100 mL) e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, a oxima do 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldeído (composto 5504) (0,89 g, 70 % de rendimento) sob a forma de uma mistura de isómeros.

Adicionou-se a uma mistura agitada de oxima do 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbaldeído (composto 5504) (865 mg, 4,40 mmol) em CH2C12 (20 mL) , S0C12 (3,1 mL, 43,7 mmol), e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio. Tratou-se o resíduo com acetato de etilo (20 mL), H20 (20 mL) e depois com uma solução aquosa saturada de

NaHC03 (50 mL) , para se ajustar o pH a cerca de 3-4. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 15 minutos e separou-se o sólido por filtração. Extraiu-se o filtrado com acetato de etilo (80 mL χ 3) , secou-se sobre Na2SC>4 e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado em vazio para se obter uma segunda colheita do produto. Recristalizou-se o conjunto dos sólidos a partir de acetato de etilo e hexanos (a 1:1, 20 mL). Separou-se o sólido por filtração e secou-se em vazio para se obter o produto pretendido, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbonitrilo (composto 5505) (763 mg, 97 % de rendimento).

Dissolveram-se (S)-3-(1-aminoetil)-8-metil-2- fenilisoquinolin-1(2H)-ona (composto 4704) (208 mg, 0,75 mol), 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carbonitrilo (composto 5505) (160 mg, 0,90 mmol) e Et3N (228 mg, 2,25 mmol) em n-BuOH (20 mL) num tubo selado, e agitou-se a 150°C durante 16 h. Concentrou-se a mistura reaccional em vazio, e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em coluna sobre gel de sílica (eluindo com 50 % de Hex/EA) para se obter o produto pretendido, (S)-4-(1-(8-metil-l-oxo-2-fenil-1,2-dihidroisoquinolin-3-il)etilamino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-5-carbonitrilo (5506, composto 264 na Tabela 4) (90 mg, 2 8 % de rendimento) sob a forma de um sólido branco.

Exemplo 21: Valores de IC5o para Compostos

Seleccionados.

Tabela 4. Estruturas de Compostos para os resultados de IC50 descritos na Tabela 3

Exemplo 22: Ensaios de Expressão e Inibição de ρ110α/ρ85α, ρ110β/ρ85α, ρ110δ/ρ85α, e ρΙΙΟγ:

Os PI3-K de Classe I podem ser quer adquiridos (ρ110α/ρ85α, ρ110β/ρ85α, ρ110δ/ρ85α da Upstate, e ρΙΙΟγ da Sigma) ou expressos tal como se descreveu anteriormente (Knight et al., 2004). Medem-se os valores de IC50 utilizando quer um ensaio padrão por CCF da actividade da lipido quinase (descrito adiante) ou por um ensaio de captura com membrana, com elevado rendimento. Levam-se a cabo as reacções das quinases preparando uma mistura reaccional contendo a quinase, inibidor (a 2 % em DMSO de concentração final), tampão (HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCÍ2) , e fosfatidilinositol recentemente sonicado (a 100 pg/mL). Iniciam-se as reacções por adição de ATP contendo 10 pCi de γ-32Ρ-ΑΤΡ a uma concentração final de 10 ou de 100 μΜ, e deixam-se prosseguir durante 5 minutos à temperatura ambiente. Para a análise por CCF, terminam-se então as reacções adicionando às misturas 105 pL de HC1 1 N e em seguida 160 pL de CHCl3:MeOH (a 1:1) . Sujeita-se a mistura bifásica a uma agitação com um vórtex, centrifuga-se durante um período de tempo curto, e transfere-se a fase orgânica para um novo tubo utilizando uma pipeta para manipulação de geles que se revestiu previamente com CHCI3. Colocam-se pontos deste extracto sobre placas de CCF, e desenvolvem-se durante 3-4 horas com uma solução a 65:35 de n-propanol:ácido acético 1 M. Secam-se então as placas de CCF, expõem-se a uma tela para imagens fosforescentes (Storm, Amersham), e quantificam-se. Para cada composto, mede-se a actividade da quinase a 10 - 12 concentrações de inibidor representando diluições a ^ a partir da concentração mais elevada que se testa (tipicamente, 200 μΜ). Para os compostos que exibem actividade significativa, repetem-se as determinações de IC50 duas a quatro vezes, e o valor apresentado é a média destas medições independentes

Encontram-se disponíveis outros sistemas ou estojos para a avaliação das actividades das PI3-K. Podem utilizar-se os outros sistemas ou estojos disponíveis no comércio para despistar inibidores e/ou agonistas de PI3-K incluindo mas não se limitando a PI 3-quinase α, β, δ, e γ. Um sistema exemplificativo é o Ensaio de PI 3-Quinase (humana) HTRF™ da Upstate. Pode levar-se a cabo o ensaio pêlos processo sugeridos pelo fabricante. Em suma, o ensaio é um ensaio FRET resolvido em relação ao tempo que mede indirectamente o produto PIP3 formado pela actividade de uma PI3-K. Leva-se a cabo a reacção da quinase numa placa de microtitulação (por exemplo, uma placa de microtitulação com 384 poços) . 0 volume total da mistura reaccional é de cerca de 20 μΕ por poço. No primeiro passo, cada poço recebe 2 μ]Ι de composto em teste em sulfóxido de dimetilo a 20 % originando uma concentração final de 2 % em DMSO. Em seguida, adiciona-se a cada poço cerca de 14,5 μ]1 de uma mistura de quinase/PIP2 (diluída 1 X em tampão reaccional) para proporcionar uma concentração final de 0,25-0,3 μρ/ιτΛ de quinase e de 10 μΜ em PIP2. Sela-se a placa e incuba-se durante 15 minutos à temperatura ambiente. Para iniciar a reacção, adiciona-se a cada poço 3,5 μ]1 de ATP (diluído 1 X em tampão reaccional) assegurando uma concentração final para ATP de 10 μΜ. Sela-se a placa e incuba-se durante 1 hora à temperatura ambiente. Termina-se a reacção adicionando a cada poço 5 μ]1 de Solução Stop e depois adiciona-se a cada poço 5 μ]1 de Mistura para Detecção. Sela-se a placa e incuba-se durante 1 hora à temperatura ambiente, e depois lê-se com um leitor de placas apropriado. Analisam-se os dados e geram-se os valores de IC50 utilizando o GraphPad Prism 5.

Exemplo 23: Ensaios e Expressão e de Inibição de

Abl

Pode medir-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra a Abl quinase ou a sua ausência, seguindo quaisquer dos processos conhecidos na técnica ou os métodos descritos adiante. Por exemplo, podem ensaiar-se os compostos descritos neste documento em triplicado contra Abl recombinante de comprimento inteiro ou contra Abl (T315I) (Upstate) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 200 μΜ em ATP (2,5 yCi de γ-32P-ATP), e 0,5 mg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptidico optimizado para Abl, EAIYAAPFAKKK, a titulo de fosfoaceitante (200 μΜ) . Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 24: Ensaios de Expressão e de Inibição de

Hck

Pode medir-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra a Hck quinase ou a sua ausência, seguindo quaisquer dos processos conhecidos na técnica ou os métodos descritos adiante. Podem ensaiar-se os compostos descritos neste documento em triplicado contra Hck recombinante de comprimento inteiro num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCÍ2, 200 μΜ em ATP (2,5 pCi de γ-32Ρ-ΑΤΡ) , e 0,5 mg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptidico optimizado para a família de quinases Src, EIYGEFKKK, a título de fosfoaceitante (200 μΜ). Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 25: Ensaios de Expressão e de Inibição de Receptor de Insulina (IR)

Pode medir-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra a quinase de receptor de insulina ou a sua ausência, seguindo quaisquer dos processos conhecidos na técnica ou os métodos descritos adiante. Por exemplo, podem ensaiar-se os compostos descritos neste documento em triplicado contra o domínio da IR quinase recombinante de comprimento inteiro (Upstate) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCÍ2, 200 μΜ em ATP (2,5 μΟί de γ-32Ρ-ΑΤΡ) , e 0,5 mg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptidico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 26: Ensaios de Expressão e Inibição de

Src

Pode medir-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra a Src quinase ou a sua ausência, seguindo quaisquer dos processos conhecidos na técnica ou os métodos descritos adiante. Por exemplo, podem ensaiar-se os compostos descritos neste documento em triplicado contra Src recombinante de comprimento inteiro ou contra Src (T338I) (Upstate) num ensaio contendo HEPES 2 5 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 2 00 μΜ em ATP (2,5 yCi de γ-32P-ATP), e 0,5 mg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico optimizado para a família Src, EIYGEFKKK, a título de fosfoaceitante (200 μΜ) . Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 27: Ensaios de Expressão e de Inibição de DNA-PK (DNAK)

Pode determinar-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra a DNAK quinase, ou a sua ausência, por qualquer um dos processos conhecidos na técnica. Pode adquirir-se a DNA-PK junto da Promega e ensaiar-se utilizando o Sistema De Ensaio de DNA-PK (Promega) seguindo as instruções do fabricante.

Exemplo 28: Ensaios de Expressão e de Inibição de

mTOR

Pode medir-se a actividade cruzada de um ou mais compostos da invenção presente contra mTor ou a sua ausência, seguindo quaisquer dos processos conhecidos na técnica ou os métodos descritos adiante. Por exemplo, podem ensaiar-se os compostos descritos neste documento contra mTOR recombinante (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 50 mM, pH 7.5, 1 mM em EGTA, 10 mM em MgCl2, 2,5 mM, com 0,01 % de Tween, 10 μΜ em ATP (2,5 pCi de μ-32Ρ-ΑΤΡ) , e com 3 pg/mL BSA. Utiliza-se a titulo de substrato PHAS-1/4EBP1 recombinante de rato (Calbiochem; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções transferindo manchas para nitrocelulose, que se lava com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos cada uma). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Encontram-se comercialmente disponíveis outros sistemas e estojos para determinar a actividade de mTOR. Por exemplo, pode utilizar-se o estojo LanthaScreen™ Quinase da Invitrogen para testar os inibidores de mTOR descritos neste documento. Esta determinação é uma plataforma FRET resolvida em relação ao tempo que mede a fosforilação de GFP marcado com 4EBP1 pela mTOR quinase. Leva-se a cabo a reacção com quinase numa placa de microtitulação branca com 384 poços. 0 volume total da reacção é de 20 pL por poço e a composição do tampão reaccional é HEPES 50 mM de pH 7,5, com 0,01 % de polissorbato 20, 1 mM em EGTA, 10 mM em MnCl2, e 2 mM em DTT. No primeiro passo, coloca-se em cada poço 2 pL de composto em teste em sulfóxido de dimetilo a 20 % de que resulta uma concentração final em DMSO de 2 %. Em seguida, adiciona-se a cada poço 8 pL de mTOR diluído em tampão reaccional para proporcionar uma concentração final de 60 ng/mL. Para iniciar a reacção, adiciona-se a cada poço 10 pL de uma mistura de ATP/GFP-4EBP1 (diluída em tampão reaccional) para proporcionar uma concentração final de ATP 10 e de GFP-4EBP1 de 0,5 pM. Sela-se a placa e incuba-se durante 1 hora à temperatura ambiente. Termina-se a reacção adicionando a cada poço 10 pL de uma mistura de anticorpo Tb-anti-pT46 4EBP1/EDTA (diluída em tampão de TR-FRET) para proporcionar uma concentração final de 1,3 nM em anticorpo e de 6,7 mM em EDTA. Sela-se a placa, incuba-se durante 1 hora à temperatura ambiente, e depois lê-se num leitor de placas ajustado para o TR-FRET LanthaScreen™. Analisam-se os dados e geram-se os valores de IC50 utilizando o GraphPad Prism 5.

Exemplo 29: Ensaios de Expressão e de Inibição de receptor de factor de crescimento endotelial vascular

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra o receptor VEGF recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor recombinante KDR (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, com 0,1 % de BME, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32P-ATP) , e com 3 μμ/ΐΓΛ de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 30: Ensaios de Expressão e de Inibição do receptor B4 de Efrina (EphB4)

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra EphB4 recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor recombinante B4 de Efrina (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, com 0,1 % de BME, 10 μΜ em ATP (com 2,5 μ(3ί de μ-32Ρ-ΑΤΡ) , e com 3 μμ/ΐΓΛ de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Utiliza-se o substrato peptídico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 31: Ensaios de Expressão e de Inibição do receptor do factor de crescimento Epidérmico (EGFR)

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra EGFR recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de EGF (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, com 0,1 % de BME, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32Ρ-ΑΤΡ) , e com 3 pg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 32: Ensaios de Expressão e de Inibição de KIT quinase

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra EGFR recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de KIT (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCÍ2, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32Ρ-ΑΤΡ), e com 3 pg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 33: Ensaios de Expressão e de Inibição de

RET

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra EGFR recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de RET (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 2,55 mM em DTT, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32Ρ-ΑΤΡ) , e com 3 pg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico optimizado para Abl, EAIYAAPFAKKK, a título de fosfoaceitante (200 μΜ). Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 34: Ensaios de Expressão e de Inibição de receptor de factor de crescimento derivado de Plaquetas (PDGFR)

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra PDGFR quinase recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de PDG (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 2,55 mM em DTT, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32Ρ-ΑΤΡ) , e com 3 pg/mL de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico optimizado para Abl, EAIYAAPFAKKK, a título de fosfoaceitante (200 μΜ) . Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 35: Ensaios de Expressão e de Inibição de tirosina quinase 3 relacionada com FMS

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra FLT-3 quinase recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de FLT-3 (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 2,55 mM em DTT, 10 μΜ em ATP (com 2,5 pCi de μ-32P-ATP) , e com 3 μμ/ΐΐΛ de BSA. Utiliza-se o substrato peptídico optimizado para Abl, EAIYAAPFAKKK, a título de fosfoaceitante (200 μΜ) . Terminam-se as reacções depositando manchas em folhas de fosfocelulose, que se lavam com ácido fosfórico a 0,5 % (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez). Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 36: Ensaios de Expressão e de Inibição de tirosina quinase do receptor de TEK (TIE2)

Pode determinar-se a actividade cruzada ou a sua ausência, de um ou mais compostos da invenção presente contra TIE2 quinase recorrendo a quaisquer processos conhecidos na técnica ou aos métodos descritos adiante. Podem testar-se os compostos descritos neste documento contra o domínio de quinase do receptor de TIE2 (Invitrogen) num ensaio contendo HEPES 25 mM, pH 7,4, 10 mM em MgCl2, 2 mM em DTT, 10 μΜ em ATP (com 2,5 μ(3ί de μ-32Ρ-ATP) , e com 3 μμ/ιτΛ de BSA. Utiliza-se o substrato peptidico Poly E-Y (Sigma; 2 mg/mL). Terminam-se as reacções depositando manchas sobre nitrocelulose, que se lavam com NaCl 1 M/ácido fosfórico a 1 %, (cerca de 6 vezes, 5-10 minutos de cada vez) . Secam-se as folhas e quantifica-se a radioactividade transferida por imagiologia da fosforescência.

Exemplo 37: Ensaio de Activação e Proliferação de

Células B

Determina-se a capacidade de um ou mais dos compostos em apreço para inibir a activação e a proliferação de células B seguindo procedimentos padrão conhecidos na técnica. Por exemplo, estabelece-se um ensaio de proliferação celular in vitro no qual se mede a actividade metabólica de células vivas. Leva-se a cabo o ensaio numa placa de 96 poços utilizando uma redução de Azul de Alamar. Purificam-se células B de baço de Balb/c com um gradiente de Ficoll-Paque™ PLUS seguindo-se uma separação magnética das células utilizando um estojo MACS B de Isolamento de células (Miletenyi). Plaqueiam-se as células em 90 pL a 50.000 células/poço em Meio para Células B (RPMI + 10 % de FBS + Pen/Estrept + bME 50 μΜ + HEPES 5 mM). Dilui-se um composto descrito neste documento em Meio para Células B e adiciona-se num volume de 10pL. Incubam-se as placas durante 30 minutos a 372C sob 5 % de C02 (0,2 % de concentração final em DMSO). Adiciona-se então 50 pL de uma mistura para estimulação de células B contendo quer 10 pg/mL de LPS, quer 5 pg/mL de F(ab')2 de IgM de burro anti- murganho mais 2 ng/mL de IL4 recombinante de murganho em Meio para Células B. Incubam-se as placas durante 72 horas a 37 °C sob 5 % de C02. Adiciona-se um volume de 15 pL de reagente de Azul de Alamar por poço, e incubam-se as placas durante 5 horas a 37 2C sob 5 % de C02. Lê-se a fluorescência do Azul de Alamar a 560Ex/590Em, e calculam-se os valores de IC50 ou de EC50 utilizando o GraphPad Prism 5.

Exemplo 38: Ensaio de Proliferação de Linha de Células Tumorais

Determina-se a capacidade de um ou mais dos compostos em apreço para inibir a proliferação de uma linha de células tumorais seguindo procedimentos padrão conhecidos na técnica. Por exemplo, estabelece-se um ensaio de proliferação celular in vitro no qual se mede a actividade metabólica de células vivas. Leva-se a cabo o ensaio numa placa de 96 poços utilizando uma redução de Azul de Alamar. Podem obter-se linhas de células de tumores humanos junto da ATCC (por exemplo, MCF7, U-87 MG, MDA-MB-468, PC-3), cultivam-se até à confluência em frascos T75, tripsinizam-se com 0,25 % de tripsina, lavam-se uma vez com Meio para Células Tumorais (DMEM + 10 % de FBS), e plaqueiam-se em 90 pL a 5.000 células/poço em Meio para Células Tumorais. Dilui-se um composto descrito neste documento em Meio para Células Tumorais e adiciona-se perfazendo um volume de 10 pL. Incubam-se as placas durante 72 horas a 372C e sob 5 % de C02. Adiciona-se um volume de 10 pL de reagente de Azul de Alamar por poço e incubam-se as placas durante 3 horas a 371C sob 5 % de CO2. Lê-se a fluorescência do Azul de Alamar a 560Ex/590Em, e calculam-se os valores de IC50 recorrendo ao GraphPad Prism 5.

Exemplo 39: Actividade Antitumoral in vivo

Podem avaliar-se os compostos descritos neste documento através de um painel de modelos de tumores humanos e de murinos.

Modelos Tumorais refractários ao Paclitaxel 1. Modelo de Carcinoma do Ovário Clinicamente derivado.

Estabelece-se este modelo de tumor a partir de uma biópsia de um tumor de uma doente com cancro do ovário. Obtém-se a biópsia tumoral da doente.

Podem administrar-se os compostos descritos neste documento a murganhos nus portadores de tumores colocados, administrando-os 5 vezes, dia sim, dia não. O A2780Tax é um modelo de carcinoma do ovário humano resistente ao paclitaxel. Ele é derivado da linha 1

Xenotranspante de Carcinoma do Ovário Humano A2780Tax (Tubulina Mutada). original sensível A2780 por co-incubação de células com paclitaxel e verapamil, um agente de reversão de MDR. Demonstrou-se que o seu mecanismo de resistência não é relacionado com MDR e ele é atribuído a uma mutação do gene que codifica para a proteína beta-tubulina.

Podem administrar-se os compostos descritos neste documento a murganhos nus portadores de tumores colocados, administrando-os 5 vezes, dia sim, dia não. 3. Xenotransplante de Carcinoma do Cólon Humano HCT116/VM46 (Resistente a Múltiplos Fármacos). 0 HCT116/VM46 é um carcinoma do cólon resistente a MDR derivado da linha original sensível HCT116. In vivo, cultivado em murganhos nus, o HCT116/VM46 tem demonstrado consistentemente uma resistência elevada ao paclitaxel.

Podem administrar-se os compostos descritos neste documento a murganhos nus portadores de tumores colocados, administrando-os 5 vezes, dia sim, dia não. 5. Modelo de Sarcoma Murino M5076 0 M5076 é um fibrossarcoma murino que é inerentemente refractário ao paclitaxel in vivo.

Podem administrar-se os compostos descritos neste documento a murganhos nus portadores de tumores colocados, administrando-os 5 vezes, dia sim, dia não.

Podem utilizar-se um ou mais compostos da invenção em combinação com outros agentes terapêuticos in vivo no xenotransplante de carcinoma do cólon humano resistente a múltiplos fármacos HCT/VM46 ou noutro qualquer modelo conhecido na técnica incluindo os descritos neste documento.

Exemplo 40: Ensaio de estabilidade de Microssomas

Determina-se a estabilidade de um ou mais dos compostos em apreço seguindo procedimentos padrão conhecidos na técnica. Por exemplo, estabelece-se a estabilidade de um ou mais compostos em apreço recorrendo a um ensaio in vitro. Em especial, estabelece-se um ensaio in vitro em microssomas que mede a estabilidade de um ou mais compostos em apreço quando reage com microssomas do figado de murganho, rato ou humano. Leva-se a cabo a reacção do microssoma com os compostos num tubo de Eppendorf de 1,5 mL. Cada tubo contém 0,1 pL de NADPH a 10,0 mg/mL; 75 pL de microssoma de murganho, de rato ou humano a 20,0 mg/mL; 0,4 pL de tampão fosfato 0,2 M, e 425 pL de ddH20. O tubo de controlo negativo (sem NADPH) contém microssoma de murganho, de rato ou humano a 20,0 mg/mL; 0,4 pL de tampão fosfato 0,2 M, e 525 pL de ddH20. Inicia-se a reacção adicionando 1,0 pL de composto em teste 10,0 mM. Incubam-se os tubos reaccionais a 37°C. Recolhe-se uma amostra de 100 pL num novo tubo de Eppendorf contendo 300 pL de Metanol frio aos 0, 5, 10, 15, 30 e 60 minutos de reacção. Centrifugam-se as amostras a 15.000 rpm para remover a proteína. Transfere-se o sobrenadante da amostra centrifugada para um tubo novo. Determina-se a concentração de composto estável após a reacção com o microssoma, no sobrenadante, por Cromatografia Líquida/Espectrometria de Massa (LC-MS).

Exemplo 41: Ensaio de estabilidade no Plasma

Determina-se a estabilidade de um ou mais compostos em pareço em plasma seguindo os procedimentos habituais conhecidos na técnica. Veja-se, por exemplo, Rapid Commun. Mass Spectrom., 10: 1019-1026. O procedimento que se segue é um ensaio por HPLC-MS/MS utilizando plasma humano; também estão disponíveis plasmas de outras espécies incluindo macaco, cão, rato, e murganho. Descongela-se plasma congelado heparinizado com um banho de água fria e centrifuga-se durante 10 minutos a 2.000 rpm e a 4°C antes de se utilizar. Adiciona-se um composto em apreço de uma solução de reserva a 400 μΜ para uma alíquota de plasma previamente aquecido para se obter um volume final do ensaio de 400 pL (ou 800 pL para a determinação da vida média), contendo 5 μΜ do composto em teste e 0,5 % de DMSO. Incubam-se as reacções sob agitação durante 0 minutos e 60 minutos a 37 °C, ou durante 0, 15, 30, 45 e 60 minutos a 372C para a determinação da vida média. Param-se as reacções transferindo 50 pL da mistura de incubação para 200 pL of de acetonitrilo gelado e mistura-se por agitação durante 5 minutos. Centrifugam-se as amostras a 6.000 x g durante 15 minutos a 4°C e retiram-se 120 pL de sobrenadante para tubos limpos. Evaporam-se então estas amostras à secura e submetem-se a uma análise por HPLC-MS/MS.

Quando tal se pretenda, testam-se em simultâneo um ou mais compostos de controlo ou de referência (5 pM) com os compostos em teste: um composto, a propoxicaína, com uma pequena estabilidade no plasma e outro composto, a propantelina, com uma estabilidade intermediária no plasma.

Reconstituem-se as amostras em acetonitrilo/metanol/água (a 1/1/2 em volume) e analisam-se por (RP)HPLC-MS/MS utilizando monitorização de uma reacção seleccionada (SRM). As condições do HPLC consistem numa bomba binária para a LC com um autoamostrador, uma coluna de modo misto, C12, com 2 x 20 mm, e um programa em gradiente. Registam-se as áreas dos picos correspondendo aos analitos por HPLC-MS/MS. A razão entre o composto de origem que resta após 60 minutos e a quantidade que restava no instante zero, expressa em percentagem, é reportada como estabilidade no plasma. No caso da determinação da vida média, estima-se a vida média a partir do coeficiente angular na parte inicial linear da gama da curva logarítmica do composto remanescente (em %) em relação ao tempo, assumindo uma cinética de primeira ordem.

Exemplo 42: Estabilidade Quimica

Determina-se a estabilidade quimica de um ou mais dos compostos em apreço recorrendo aos procedimentos habituais conhecidos na técnica. Pormenoriza-se em seguida um processo exemplar para avaliar a estabilidade quimica de um composto em preço. 0 tampão que se usa por defeito na determinação da estabilidade quimica é soro salino tamponizado com fosfato (PBS) a pH 7,4; podem utilizar-se outros tampões adequados. Adiciona-se um composto em apreço a partir de uma sua solução de reserva 100 μΜ, para uma aliquota de PBS (em duplicado) para se obter um volume final para o ensaio de 400 pL, contendo 5 μΜ de composto em teste e 1 % de DMSO (para determinar a vida média prepara-se um volume total da amostra de 700 pL) . Incubam-se as reacções, com agitação, durante 0 minutos e 24 horas a 37 °C; para a determinação da vida média incubam-se as amostras durante 0, 2, 4, 6, e 24 horas. Param-se as reacções adicionando imediatamente 100 pL da mistura de incubação a 100 pL e acetonitrilo e agitando num vórtex durante 5 minutos. Armazenam-se então as a mostras a -20 °C até se analisarem por HPLC-MS/MS. Quando tal se pretenda, pode testar-se um composto de controlo ou um composto de referência tal como o clorambucil (5 pM) em simultâneo com um composto de interesse em apreço, uma vez que este composto é fortemente hidrolisado no decurso das 24 horas. Analisam-se as amostras por (RP) HPLC-MS/MS utilizando um modo de monitorização de uma reacção seleccionada (SRM). As condições de HPLC consistem em uma bomba binária de LC com um autoamostrador, uma coluna de modo misto, C12, com 2 x 20 mm, e um programa de gradiente. Registam-se as áreas dos picos correspondendo aos analitos por HPLC-MS/MS. A razão entre o composto de origem que resta após 60 minutos e a quantidade que restava no instante zero, expressa em percentagem, é reportada como estabilidade química. No caso da determinação da vida média, estima-se a vida média a partir do coeficiente angular na parte inicial linear da gama da curva logarítmica do composto remanescente (em %) em relação ao tempo, assumindo uma cinética de primeira ordem.

Exemplo 43: Ensaio de Akt Quinase

Cultivam-se tipicamente as células que incluem componentes do caminho Akt/mTOR, incluindo mas não se limitando a mioblastos L6, células B-ALL, células B, células T, células de leucemia, células de medula óssea, células transduzidas com pl90, células positivas para o cromossoma de Filadélfia (Ph+), e fibroblastos embriónicos de murganho, em meios de crescimento de células tais como DMEM com um suplemento de soro fetal de bovino e/ou antibióticos, até à sua confluência.

Para se comparar o efeito de um ou mais compostos descritos neste documento sobre a activação de Akt, jejuam-se as referidas células de soro de um dia para o outro e incubam-se com um ou mais compostos descritos neste documento ou com cerca de 0,1 % de DMSO durante entre cerca de 1 minuto e cerca de 1 hora antes da estimulação com insulina (por exemplo 100 nM) durante entre cerca de 1 minuto e cerca de 1 hora. Lisam-se as células por raspagem em tampão de lise gelado contendo detergentes tais como dodecilsulfato de sódio e inibidores de proteases (por exemplo, PMSF). Depois de se proporcionar o contacto entre as células e o tampão de lise, sonica-se brevemente a solução, clarifica-se por centrifugação, resolve-se por SDS-PAGE, transfere-se para nitrocelulose ou para PVDF faz-se uma imunotransferência utilizando anticorpos contra fosfo-Akt S473, fosfo-Akt T308, Akt, e β-actina (Cell Signaling Technologies).

Os resultados demonstram que um ou mais compostos da descrição presente inibem a fosforilação da Akt na S473 estimulada pela insulina. Em alternativa, alguns dos compostos descritos neste documento também inibem a fosforilação estimulada pela insulina, da Akt na T308. Esta classe dos compostos consegue inibir Akt mais eficazmente que a rapamicina e pode ser indicativa de inibidores de mTORC2 ou de inibidores de quinases a montante, tais como PI3K ou Akt.

Exemplo 44: Sinalização de Quinase no Sangue

Mede-se a sinalização Pl3K/Akt/mTor em células do sangue utilizando o método do fosfocaudal (Methods Enzymol. 2007; 434: 131-54). A vantagem deste método é que ela é por natureza um ensaio em célula única pelo que permite detectar a heterogeneidade celular em vez de médias para populações. Isto permite a distinção em simultâneo de estados de sinalização em diferentes populações definidas ou outros marcadores. 0 fosfocaudal é também altamente quantitativo. Para testar os efeitos de um ou mais compostos descritos neste documento, estimulam-se esplenócitos não fraccionados, ou células mononucleares periféricas com anti-CD3 para iniciar a sinalização do receptor de células T. Fixam-se então as células e contrastam-se os seus marcadores superficiais e as suas fosfoproteinas intracelulares. Espera-se que os inibidores descritos neste documento inibam a fosforilação mediada por anti-CD3 da Akt em S473 e S6, enquanto a rapamicina inibe a fosforilação em S6 e aumenta a fosforilação da Akt nas condições testadas.

De um modo semelhante, incubam-se alíquotas de sangue inteiro durante 15 minutos com veiculo (por exemplo 0,1 % de DMSO) ou inibidores de quinase a diversas concentrações, antes de se adicionarem os estímulos para se produzir a ligação cruzada entre o receptor de células T (TCR) (anti-CD3 com o anticorpo secundário) ou o receptor de células B (BCR) utilizando anticorpo anti cadeia leve kapa (fragmentos Fab'2). Passados cerca de 5 e 15 minutos, fixam-se as amostras (por exemplo com paraformaldeído a 4 % frio) e utilizam-se para o fosfocaudal. A contrastação superficial também é utilizada para distinguir as células T e as B utilizando anticorpos dirigidos contra os marcadores da superfície das células que são conhecidos na técnica. 0 teor de fosforilação dos substratos de quinase tais como Akt e S6 são então medidos incubando as células fixadas com os anticorpos marcados específicos para as isoformas fosforiladas destas proteínas. Analisa-se então por citometria de fluxo a população de células.

Exemplo 45: Ensaio de Formação de Colónias

Plaquearam-se células de medula óssea de murino transformadas de fresco com um retrovirus pl90 BCR-Abl (referidas neste documento como células transduzidas com pl90) na presença de diversas combinações de fármacos em meios M3630 com metilcelulose durante cerca de 7 dias, com IL-7 recombinante humano em cerca de 30 % de soro, e contaram-se as colónias formadas por inspecção visual ao microscópio.

Em alternativa, obtêm-se células mononucleares de sanque periférico humano de doentes positivos para o cromossoma Filadélfia (Ph+) e negativos para ele (Ph-), aquando do diagnóstico inicial ou de uma recaída. Isolam-se as células vivas e enriquece-se em progenitores de células B CD19+ CD34+. Depois de se manterem em cultura líquida de um dia para o outro, plaqueiam-se as células em metocult GF+ H4435, Stem Cell Tehcnologies) com suplemento de citoquinas (IL-3, IL-6, IL-7, G-CSF, GM-CSF, CF, ligando de Flt3, e eritropoietina) e com diversas concentrações de agentes quimioterapêuticos conhecidos em combinação com qualquer um dos compostos da descrição presente. Contaram-se as colónias ao microscópio 12-14 dias mais tarde. Pode utilizar-se este método para testar dados de actividades aditivas ou sinergísticas.

Exemplo 46: Efeito In Vivo de Inibidores de Quinase sobre Células de Leucemia

Irradiam-se letalmente murganhos fêmea receptores a partir de uma fonte γ, em duas doses separadas por cerca de 4 h, de cerca de 5 Gy cada uma. Cerca de 1 h depois da segunda dose, injectam-se os murganhos por via endovenosa com cerca de lxlO6 células de leucemia (por exemplo células humanas ou murinas Ph+, ou células de medula óssea transduzidas com pl90). Administram-se estas células em conjunto com uma dose radioprotectora de cerca de 5xl06 células de medula óssea normais provenientes de murganhos com 3-5 semanas de idade. Administram-se aos receptores antibióticos na água e monitorizam-se diariamente. Sacrificam-se os murganhos que mostram sinais de doença passados cerca de 14 dias e recolhem-se os seus órgãos linfóides para análise. 0 tratamento com inibidores de quinase inicia-se passados cerca de 10 dias depois da injecção de células leucémicas, e continua diariamente até os murganhos ficarem doentes ou durante um período máximo de cerca de 35 dias após o transplante. Os inibidores são administrados por via oral forçada.

Recolhem-se células do sangue periférico por volta do dia 10 (antes do tratamento) e aquando do sacrifício dos animais (após o tratamento), levadas a um contacto com anticorpos marcados anti-hCD4 e contadas por citometria de fluxo. Pode utilizar-se este método para demonstrar que o efeito sinergístico de um ou mais compostos descritos neste documento em combinação com agentes quimioterapêuticos conhecidos diminui significativamente as contagens de células leucémicas no sangue quando comparado com o tratamento apenas com os agentes quimioterapêuticos conhecidos (por exemplo Gleevec) nas condições do teste.

Exemplo 47: Tratamento de Murganhos Modelo de Doença Lúpus

Os murganhos que não têm o inibidor do receptor FcYRIIb que se opõe à sinalização de PI3K em células B desenvolvem lúpus com uma penetração elevada. Consideram-se os murganhos que não têm FcYRIIb (R2KO, Jackson Labs) como um modelo válido para a doença humana uma vez que diversos doentes denotam uma expressão e função de FcYRIIb diminuída (S. Bolland e J.V. Ravtech 2000. Immunity 12: 277-285).

Os murganhos R2KO desenvolvem uma doença semelhante ao lúpus com anticorpos antinucleares, glomerulonefrite e proteinúria adentro de cerca de 4-6 meses de idade. Para estas experiências, utiliza-se o análogo de rapamicina RAD001 (disponível junto dos LC

Laboratories) como composto a comparar, e administra-se por via oral. Demonstrou-se que este composto melhora os sintomas de lúpus no modelo B6.Slelz.Sle3z (T. Wu et al., J. Clin. Invest. 117: 2186-2196).

Tratam-se murganhos modelo de lúpus tais como os R2K0, BXSB ou MLR/lpr com cerca de 2 meses de idade, durante cerca de dois meses. Administram-se aos murganhos doses de: veiculo, RAD001 a cerca de 10 mg/kg, ou compostos descritos neste documento a cerca de entre 1 mg/kg e cerca de 500 mg/kg. Obtêm-se amostras de sangue e de urina durante aproximadamente toda a duração do período do teste, e testam-se quanto à presença de anticorpos antinucleares (em diluições de soro) ou quanto à concentração proteica (na urina). Também se testam no soro anticorpos anti-ssADN e anti-dsADN, por ELISA. Sacrificam-se os animais no dia 60 e recolhem-se os tecidos para se medir o peso do baço e detectar a doença nos rins. Avalia-se a glomerulonefrite em secções de rim contrastadas com H&E. Estudam-se outros animais durante cerca de dois meses depois de cessar o tratamento, utilizando os mesmos pontos finais.

Este modelo estabelecido na técnica pode ser empregue para demonstrar que os inibidores de quinase descritos neste documento podem suprimir ou atrasar o início dos sintomas de lúpus em murganhos modelo para lúpus.

Exemplo 48: Ensaio de Transplante de Medula Óssea em Murinos

Irradiam-se letalmente murganhos fêmea receptores a partir de uma fonte γ, em duas doses separadas por cerca de 4 h, de cerca de 5 Gy cada uma. Cerca de 1 h depois da segunda dose, injectam-se os murganhos por via endovenosa com cerca de lxlO5 células de leucemia (por exemplo células humanas ou murinas Ph+, ou células de medula óssea transduzidas com pl90). Administram-se estas células em conjunto com uma dose radioprotectora de cerca de 5xl06 células de medula óssea normais provenientes de murganhos com 3-5 semanas de idade. Administram-se aos receptores antibióticos na água e monitorizam-se diariamente. Sacrificam-se os murganhos que mostram sinais de doença passados cerca de 14 dias e recolhem-se os seus órgãos linfóides para análise. 0 tratamento com inibidores de quinase inicia-se passados cerca de 10 dias depois da injecção de células leucémicas, e continua diariamente até os murganhos ficarem doentes ou durante um período máximo de cerca de 35 dias após o transplante. Os inibidores são administrados por via oral forçada. Numa experiência piloto identifica-se uma dose de quimioterapêut ico que não cura mas atrasa o despoletar da leucemia em cerca de uma semana ou menos; tratam-se os controlos com veículo ou com agente quimioterapêutico, que se mostrou previamente não curar mas atrasar a génese da leucemia neste modelo (por exemplo imatinib a cerca de 70 mg/kg duas vezes ao dia) . Para a primeira fase utilizam-se células pl90 que expressam eGFP, e a análise postmortem é limitada à enumeração da percentagem de células leucémicas na medula óssea, no baço e no nodo linfático (LN) por citometria de fluxo. Na segunda fase, utilizam-se células pl90 que expressam uma forma isenta de cauda de CD4 humanas e a análise postmortem inclui a classificação magnética de células hCD4+ do baço, seguida por uma análise da imunotransferência de pontos-chave finais de sinalização: p Akt -T308 e S473; pS6 e p4EBP-l. A título de controlos para a detecção por imunotransferência, incubam-se as células classificadas na presença ou na ausência de inibidores de quinase da descrição presente, antes da lise. Opcionalmente, utiliza-se o "fosfocaudal" para detectar p Akt -S473 e pS6-S235/236 em células com aberturas hCD4 sem classificação anterior. Estes estudos da sinalização são especialmente úteis quando, por exemplo, os murganhos tratados com os fármacos não desenvolveram leucemia clínica no ponto do tempo correspondente aos 35 dias. Geram-se representações gráficas de Kaplan-Meier da sobrevivência e recorre-se à análise estatística consoante os métodos conhecidos na técnica. Analisam-se os resultados das células p 190 em separado, bem como cumulativamente.

Obtêm-se semanalmente amostras d sangue periférico (100-200 pL) de todos os murganhos, a partir do dia 10 imediatamente antes de se iniciar o tratamento. Utiliza-se plasma para medir as concentrações dos fármacos, e analisam-se as células quanto à presença de marcadores de leucemia (eGFP ou hCD4) e biomarcadores de sinalização tais como os descritos neste documento.

Este ensaio geral conhecido na técnica pode ser utilizado para demonstrar a dose terapêutica eficaz para os compostos descritos neste documento, que se pode utilizar para inibir a proliferação de células leucémicas.

Exemplo 49: Ensaio da Activação de células B independente de células T por TNP-Ficoll

Para testar os efeitos dos compostos da invenção presente na supressão da produção independente de anticorpos por células T, utiliza-se o ensaio de activação de células B por TNP-Ficoll tal como descrito neste documento. Dissolveram-se os compostos da invenção presente num veículo apropriado (por exemplo 5 % de l-metil-2- pirrolidinona, 85 % de polietilenoglcol 400, 10 % de

Solutor). Administraram-se os compostos por via oral cerca de 1 h antes do tratamento com TNP-Ficoll de murganhos com 4-10 semanas de idade. Para estudar os efeitos dos compostos sobre a activação das células B, agrupou-se um conjunto de murganhos consoante a tabela que se segue:

Sacrificaram-se quatro animais do grupo 1, e oito animais dos grupos 2 a 7 em C02 2 horas depois da última administração de composto no dia 7. Recolheu-se imediatamente sangue por punção cardíaca e manteve-se a 37°C durante 1 h para coagular seguindo-se uma incubação de um dia para o outro a 4°C para permitir a contracção do coagulado. No dia seguinte, recolheu-se o soro por decantação e centrifugação a 3.000 rpm durante 10 minutos. Congelou-se então o sangue recolhido a -80°C para análise no futuro.

Analisaram-se nas amostras de soro os títulos em anticorpos anti-TNP por ELISA tal como descrito neste documento. Revestiu-se uma placa de microtitulação Nunc Maxisorb com TNP-BSA a 100 pL/poço, com uma concentração de 10 pg/mL em soro salino tamponizado com fosfato (PBS).

Incubou-se a placa Maxisorb durante 1,5 horas à temperatura ambiente e removeu-se a solução. Adicionou-se a cada poço 200 pL/poço de tampão de bloqueio (por exemplo 1 % de BSA em PBS) e incubou-se durante 1 h à temperatura ambiente. Lavou-se a placa uma vez com 200 pL/poço de PBS contendo 0,05 % de Tween-20 (tampão de lavagem) . Adicionou-se uma diluição do soro de cada um dos murganhos a 1:2 em tampão de bloqueio, a cada poço da primeira coluna (1) da placa de microtitulação. Diluiu-se então o soro de cada um dos poços da coluna 1 a 1/3 em tampão de bloqueio e adicionou-se à coluna 2. Diluiu-se o soro de cada um dos poços da segunda coluna a 1/3 em tampão de bloqueio e adicionou-se à coluna 3. Repetiu-se o processo através das doze colunas da placa de microtitulação. Incubou-se a placa de microtitulação durante 1 h à temperatura ambiente. Removeu-se o soro da placa e lavou-se a placa por três vezes com tampão de lavagem. Adicionou-se a cada um dos poços 100 pL/poço de IgG3-HRP de cabra anti murganho diluído a 1:250 em tampão de bloqueio e incubou-se durante 1 h à temperatura ambiente. Removeu-se o IgG3-HRP anti murganho da placa de microtitulação e lavou-se a placa por seis vezes com tampão de lavagem. Adicionou-se a cada poço substrato HRP (200 pL de uma solução em ABTS + 30 % de H202 + 10 mL de tampão de citrato), a 100 pL/poço, incubou-se durante 2-20 minutos às escuras e determinou-se espectrofotometricamente a quantidade de IgG3 anti-TNP a 405 nm. De um modo semelhante, determinaram-se IgM anti-TNP e o total de anticorpos anti-TNP utilizando respectivamente IgM-HRP anti murganho e Ig-HRP anti murganho.

Os resultados tais como se ilustram na Figura 2 mostram que nas condições do teste os compostos n2 7 e n2 53 exibem respectivamente diminuições de 3,4 e de 6,5 vezes dos teores em IgG3, em relação aos murganhos do veículo de controlo, a um teor de dose de 30 mg/kg. A Figura 2 também mostra que o composto n2 53 exibe uma diminuição de 29,9 vezes dos teores em IgG3, em relação aos teores dos murganhos de controlo a veículo, quando se utiliza um teor de dose de 60 mg/kg nas condições testadas.

Exemplo 50: Ensaio de Rato Desenvolvendo Artrite Induzida por Colagénio de Tipo II

Para estudar os efeitos dos compostos da invenção presente sobre a doença auto-imune artrite, utilizou-se um modelo de desenvolvimento de artrite induzido por colagénio. Administraram-se a ratos Lewis fêmea injecções de colagénio no dia 0. Preparou-se o colagénio bovino de tipo II sob a forma de uma solução a 4 mg/mL em ácido acético 0,01 N. Emulsionaram-se à mão volumes iguais de colagénio e de adjuvante de Freund incompleto, misturando até que uma pérola do material emulsionado aguentasse a sua forma em água. Cada roedor recebeu uma injecção de 300 pL da mistura em cada altura de injecção, repartidos por três locais subcutâneos nas costas.

Iniciou-se a administração oral de composto no dia 0 e continuou-se até ao dia 16 com veículo (5 % de NMP, 85 % de PEG 400, 10 % de Solutol) ou com compostos da invenção presente em veículo, ou controlo (por exemplo metotrexato) a intervalos de 12 horas diariamente. Pesaram-se os ratos nos dias 0, 3, 6, 9-17 e fizeram-se medições dos tornozelos com um nónio nos dias 9-17. Determinou-se o peso final dos animais e sacrificaram-se, no dia 17. Depois da eutanásia, retirou-se o sangue e removeram-se as patas e os joelhos traseiros. Processou-se o sangue para experiências de farmacocinética bem como para um ensaio ELISA de anticorpos anti-colagénio de tipo II. Pesaram-se as patas traseiras e depois conservaram-se com os joelhos em formalina a 10 %. Subsequentemente processaram-se as patas e os joelhos para exames por microscopia. Também se pesaram os fígados, os baços e os timos. Prepararam-se os nervos ciáticos para histopatologia.

Fixaram-se as articulações dos joelhos e as dos tornozelos durante 1-2 dias e descalcificaram-se durante 4-5 dias. Cortaram-se as articulações dos tornozelos ao meio longitudinalmente, cortaram-se os joelhos ao meio ao longo do plano frontal. Processaram-se então as articulações, imergiram-se, seccionaram-se e contrastaram-se com azul de toluidina. Fez-se a classificação das articulações consoante o seguinte conjunto de critérios:

Inflamação do Joelho e do lornozelo 0=Normal l=Infiltração mínima de células inflamatórias na sinóvia/tecido periarticular 2=Infiltração ligeira 3=Infiltração moderada com edema moderado 4=Infiltração notável com edema notável 5=Infiltração severa com edema severo

Pano do Tornozelo 0=Normal l=Infiltração mínima de pano na cartilagem e no osso subcondral 2 = Infiltração ligeira (<1/4 da tíbia ou dos tarsais em zonas marginais) 3 = Inf iltração moderada (1/4 a 1/3 da tíbia ou dos tarsais pequenos, afectados em zonas marginais) 4=Infiltração notável (1/2-3/4 da tíbia ou dos tarsais afectados em zonas marginais) 5 = Infiltração severa (> 3/4 da tíbia ou dos tarsais afectados em zonas marginais, distorção severa da arquitectura global)

Pano do Joelho 0=Normal l=Infiltração mínima de pano na cartilagem e no osso subcondral 2=Infiltração ligeira (estendendo-se até 1/4 da superfície ou da área subcondral da tíbia ou do fémur) 3=Infiltração moderada (estendendo-se a > 1/4 mas < 1/2 da superfície ou da área subcondral da tíbia ou do fémur) 4=Infiltração notável (estendendo-se a mais de 1/2 e até 3/4 da superfície da tíbia ou do fémur) 5=Infiltração severa (em > 3/4 da superfície)

Lesões da Cartilagem (Tornozelo, com ênfase nos tarsais pequenos) 0=Normal l=Mínima=perda mínima a ligeira da contrastação azul da toluidina sem perda óbvia de condrócito ou ruptura do colagénio 2=Ligeira=perda ligeira da contrastação azul da toluidina com perda ligeira de condrócito em focos (superficial) e/ou ruptura do colagénio 3=Moderada=perda moderada da contrastação azul da toluidina com perda de condrócito moderada multifocal (profundidade até à zona média) e/ou ruptura do colagénio, tarsais mais pequenos afectados a 1/2-3/4 da sua profundidade 4=Notável=perda notável da contrastação azula da toluidina com perda de condrócitos multifocal notável (até à profundidade da zona profunda) e/ou rotura do colagénio, 1 ou mais dos tarsais pequenos apresentam perda da cartilagem em toda a sua profundidade 5=Severa =perda severa difusa de contrastação azula da toluidina com perda multifocal severa de condrócitos (profundidade até à marca da maré) e/ou rotura do colagénio

Lesões na Cartilagem (Joelho, ênfase nos côndilos femorais) 0=Normal l=Mínima=perda minima a ligeira da contrastação azul da toluidina sem perda óbvia de condrócito ou ruptura do colagénio 2=Ligeira=perda ligeira da contrastação azul da toluidina com perda ligeira de condrócito em focos (superficial) e/ou ruptura do colagénio 3=Moderada=perda moderada da contrastação azul da toluidina com perda de condrócito moderada multifocal difusa (profundidade até à zona média) e/ou ruptura do colagénio, 4=Notável=perda notável da contrastação azul da toluidina com perda de condrócitos notável multifocal a difusa (profundidade até à zona profunda) e/ou rotura do colagénio ou superfície femoral singela com perda total ou quase total 5=Severa =perda severa difusa da contrastação azul da toluidina com perda multifocal severa (profundidade até à marca da maré) de condrócitos e/ou ruptura do colagénio de ambos os fémures e/ou tibias

Resorção Óssea (Tornozelo) 0=Normal l=Minimal=pequenas áreas de resorção, não facilmente aparentes a pequena ampliação, osteoclastos raros 2=Ligeira=áreas de ressorção mais numerosas, não facilmente aparentes a pequena ampliação, osteoclastos mais numerosos, <1/4 da tibia ou tarsais com resorção nas zonas marginais 3=Moderada=ressorção óbvia do osso medular trabecular e cortical sem defeitos a toda a profundidade no córtex, perda de algumas trabéculas medulares, leão aparente a pequena magnificação, osteoclastos mais numerosos, 1/4 a 1/3 da tibia ou dos tarsais afectados em zonas marginais 4=notável=Defeitos a toda a profundidade no osso cortical, amiúde com distorção do perfil da restante superfície cortical, perda notável de osso medular, numerosos osteoclastos, 1/2-3/4 da tíbia ou dos tarsais afectados em zonas marginais 5=Severa=Defeitos a toda a profundidade no osso cortical, amiúde com distorção do perfil da restante superfície cortical, perda notável de osso medular, numerosos osteoclastos, >3/4 da tíbia ou dos tarsais afectados em zonas marginais, distorção severa da arquitectura global

Ressorção Óssea (Joelho) 0=Normal l=Minimal=pequenas áreas de ressorção, não facilmente aparentes a pequena ampliação, osteoclastos raros 2=Ligeira=áreas de ressorção mais numerosas, perda definida de osso subcondral envolvendo 1/4 da superfície da tíbia ou do fémur (mediana ou lateral) 3=Moderada=ressorção óbvia do osso subcondral envolvendo > 1/4 mas <1/2 da superfície da tibia ou do fémur (mediana ou lateral) 4=Notável= ressorção óbvia do osso subcondral envolvendo >1/2 mas <3/4 da superfície da tibia ou do fémur (mediana ou lateral) 5=Severa= distorção de toda a articulação devido a destruição envolvendo >3/4 da superfície da tíbia ou do fémur (mediana ou lateral)

Avaliaram-se estatisticamente os pesos corporais/das patas, os parâmetros da ASC da pata e os parâmetros histopatológicos, utilizando o teste t de Student ou outros apropriados (ANOVA com teste posterior) optando-se por considerar uma significância a 5 % de nível de significância. A percentagem de inibição para o peso da pata e a sua ASC foi calculada através da seguinte fórmula: % de inibição = A - B/A X100 A=Média do Controlo da Doença - Média Normal B=Média dos Tratados - Média Normal

Os resultados tais como ilustrados na Figura 3 demonstram o efeito do composto n2 53 às dosagens de 10, 30, e 60 mg/kg a intervalos de 12 horas sobre o diâmetro médio do tornozelo ao longo do tempo, num rato que desenvolve um modelo de artrite induzida por colagénio de tipo II nas condições testadas. Em relação ao controlo apenas com veículo ou ao controlo com metotrexato, os compostos da invenção presente exibiam uma diminuição significativa do diâmetro do tornozelo induzido por artrite ao longo do tempo.

Os resultados tal como se ilustram na Figura 4 demonstram o efeito dos compostos n27 e n253 na histopatologia do tornozelo nas categorias de inflamação, pano, lesões na cartilagem, e ressorção óssea, tal como se descreveram acima, nas condições testadas. Os resultados mostram uma diminuição significativa de uma ou mais das categorias por um dos compostos da invenção presente (isso é, o composto n253) nas condições testadas. A Figura 4 mostra também que a 60 mg/kg, existe uma diminuição estatisticamente significativa de todas as categorias de histopatologia do tornozelo para um dos compostos da invenção presente (isto é, o composto n253) nas condições testadas. Isto sugere que um ou mais compostos da invenção presente podem ser úteis para o tratamento e a diminuição dos sintomas da doença artrite.

Os resultados tal como se ilustram na Figura 5 demonstram os efeito dos compostos n27 e n253 na histopatologia do joelho, nas condições testadas. Os resultados demonstram uma diminuição da histopatologia do joelho dependente da dose. Isto sugere que um ou mais compostos da invenção presente podem ser úteis para o tratamento e a diminuição dos sintomas da doença artrite.

Os resultados tal como se ilustram na Figura 6 demonstram o efeito dos compostos n27 e n253 sobre o teor no soro de anti-colagénio do tipo II nas condições testadas. Os resultados também ilustram uma diminuição significativa a dosagens de 10, 20, e 60 mg/kg para o composto n2 53, quanto aos teores no soro de anti-colagénio do tipo II, sugerindo que um ou mais compostos da invenção presente podem não só ser úteis para o tratamento e a diminuição dos sintomas da doença artrite, mas que também podem ser úteis para inibir a reacção auto-imune ela própria.

Os resultados tal como se ilustram na Figura 7 demonstram o efeito do composto n27 a dosagens de 10, 30, e 60 mg/kg dosagens a intervalos de 12 horas, sobre o diâmetro médio do tornozelo ao longo do tempo, nas condições testadas. Em relação ao controlo de veiculo por si só, ou ao controlo a metotrexato, o composto exibia uma diminuição do aumento do diâmetro do tornozelo induzido pela artrite ao longo do tempo, nas condições testadas. Quando testados no mesmo modelo, pelo menos mais cinco outros compostos da invenção presente exibem eficiências comparáveis ou mesmo superiores.

Exemplo 51: Ensaio de Artrite Induzida por Colagénio do Tipo II Estabelecida em Ratos

Para se examinar a eficácia em termos de resposta à dose dos compostos da invenção presente n inibição da inflamação, da destruição da cartilagem e da ressorção óssea da artrite induzida por colagénio de Tipo II em ratos no dia 10, administraram-se os compostos por via oral duas vezes ao dia durante 6 dias.

Anestesiaram-se ratos Lewis fêmeas e administraram-se-lhes injecções de colagénio preparadas e administradas tal como se descreveu acima no dia 0. No dia 6, anestesiaram-se os animais e administrou-se-lhes uma segunda injecção de colagénio. Levaram-se a cabo as medições das articulações dos tornozelos normais esquerdo e direito (antes da doença) no dia 9. Nos dias 10-11, ocorria tipicamente a artrite e distribuíram-se aleatoriamente os ratos por grupos de tratamento. A distribuição aleatória foi levada a cabo depois de terem inchado obviamente as articulações dos tornozelos com dados óbvios de estabelecimento da doença bilateral.

Depois de se haver seleccionado para inclusão no estudo, o tratamento dos ratos foi iniciado por via oral. Administrou-se aos animais veiculo, controlo (Enbrel) ou doses do composto, duas vezes ao dia ou diariamente (respectivamente BID ou QD) . 0 doseamento foi administrado nos dias 1-6 utilizando um volume de 2,5 mL/kg (BID) ou de 5 mL/kg (QD) para as soluções orais. Pesaram-se os ratos nos dias 1-7 depois do estabelecimento da artrite e fizeram-se diariamente medições dos tornozelos com um nónio. No dia 7 obtiveram-se os pesos finais dos animais, que em seguida foram sujeitos a eutanásia.

Os resultados tal como ilustrados na Figura 8 mostram uma diminuição significativa no diâmetro médio do tornozelo ao longo do tempo para o composto n253 com uma dosagem diária nas condições testadas. Os resultados na Figura 9 também demonstram uma diminuição significativa do aumento e diâmetro médio do tornozelo ao longo do tempo com uma administração do composto n253 duas vezes ao dia nas condições testadas. Isto sugere que os compostos da invenção presente podem ser úteis para o tratamento de doenças auto-imunes tais como a artrite. Quando testados no mesmo modelo, pelo menos cinco outros compostos da invenção presente exibem eficácias comparáveis ou mesmo superiores à do composto n253.

Exemplo 52: Ensaio de Artrite Induzida por

Adjuvante

Cateterização Intratecal de Ratos

Implantou-se em ratos Lewis anestesiados com isoflurano (200-250 g) um cateter intratecal (IT). Passado um período de recuperação de 6 d, todos os animais excepto aqueles pareciam padecer de anormalidades sensoriais ou motrizes (menos do que 5 % do número total) foram utilizados na experiências. Para administração IT, in jectaram-se pelo cateter 10 pL do fármaco ou de soro salino, seguidos por 10 pL de soro salino isotónico.

Artrite por Adjuvante e Tratamento com Fármaco

Imunizaram-se os ratos Lewis na base da cauda com 0,1 mL de adjuvante completo de Freund (CFA) no dia 0 diversos dias após a implantação do cateter (n=6/grupo). O tratamento com fármaco (por exemplo um ou mais compostos da invenção presente ou veículo) foi em geral iniciado no dia 8 e continuado todos os dias até ao dia 20. Os sinais clínicos da artrite iniciam-se em geral no dia 10, e determinou-se o inchaço das patas em dias alternados por pletismometria de deslocação de água.

Os resultados tal como representados na Figura 10 através da alteração média do volume da pata em cada regime de dosagem indicam que nas condições testadas, o composto n253 mostra uma diminuição dependente da dose do aumento médio do volume da pata tal como medido neste sistema modelo de artrite induzida por adjuvante. Estes resultados sugerem que um ou mais dos compostos da invenção presente podem ser úteis para o tratamento de uma ou mais das doenças ou dos estados descritos neste documento.

Os resultados tais como apresentados na Figura 11 mostram que o composto n253 não exibe toxicidade nem outras reacções adversas nas condições testadas, tal como se pode medir pela diminuição da massa corporal.

Exemplo 53: Ensaio Farmacocinético em Roedores

Para se estudar a farmacocinética dos compostos da invenção presente agrupa-se um conjunto de murganhos com 4-10 semanas de idade consoante a tabela que se segue:

Dissolvem-se os compostos da invenção presente num veiculo apropriado (por exemplo 5 % de l-metil-2-pirrolidinona, 85 % de polietilenoglicol 400, 10 % de Solutor) e administram-se por via oral a intervalos de 12 horas ao dia. Sacrificam-se todos os animais em CO2 2 horas depois da administração final de composto. Recolhe-se imediatamente sangue que se mantém sobre gelo para se isolar o plasma. Isola-se o plasma por centrifugação a 5.000 rpm durante 10 minutos. Congela-se o plasma colhido para detecção farmacocinética.

Espera-se que os resultados demonstrem os parâmetros farmacocinéticos tais como absorção, distribuição, metabolismo, excreção, e toxicidade para os compostos da invenção presente.

Exemplo 54: Ensaio Basotest

Leva-se a cabo o ensaio basotest utilizando o estojo de reagentes Orpegen Pharma Basotest. Incuba-se previamente sangue inteiro heparinizado com o composto em teste ou com solvente a 372C durante 20 minutos. Em seguida incuba-se o sangue com tampão de estimulação do estojo de ensaio (para preparar as células para a resposta) e em seguida com alergénio (extracto de pó de ácaros ou extracto de relva) durante 20 minutos. Termina-se o processo de desgranulação incubando as amostras de sangue em gelo. Marcam-se então as células com anti-IgE-PE para se detectarem granulócitos basófilos, e com anti-gp53-FITC para se detectar gp53 (uma glicoproteina expressa em basófilos activados). Depois de uma contrastação, lisam-se as células vermelhas do sangue por adição de Solução de Lise. Lavam-se as células, e analisam-se por citometria de fluxo. Quando testados neste ensaio, os compostos 7 e 53 inibem, a uma escala submicromolar, a activação de granulócitos basófilos induzida por alergénios.

Exemplo 55: Utilização de combinação de inibidores de PI3KÕ com agentes que inibem a produção de IgE ou a sua actividade

Os compostos da invenção presente podem apresentar eficácia sinergistica ou aditiva quando são administrados em combinação com agentes que inibem a produção ou a actividade de IgE. Incluem-se nos agentes que inibem a produção de IgE, por exemplo, um ou mais de entre TEI-9874, ácido 2-(4-( 6-ciclohexiloxi-2-naftiloxi)fenilacetamida)benzóico, rapamicina, análogos da rapamicina (isto é, rapálogos), inibidores de TORCI, inibidores de T0RC2, e quaisquer outros compostos que inibam mTORCl e mT0RC2. Incluem-se nos agentes que inibem a actividade de IgE, por exemplo, anticorpos anti-IgE tais como o Omalizumab e o TNX-901.

Um ou mais dos compostos em apreço capazes de inibir PI3K5 são eficazes no tratamento de patologias auto-imune e inflamatórias (AIID) por exemplo a artrite reumatóide. Caso algum dos compostos provoque um teor indesejado de produção de IgE, é possível administra-lo em combinação com um agente que iniba a produção de IgE ou a actividade de IgE. Além disto, a administração de inibidores de PI3K5 ou de Ρΐ3Κδ/γ da invenção presente em combinação com inibidores de mTOR também pode exibir sinergia devido a um aumento da inibição do caminho PI3K. Podem utilizar-se diversos modelos in vivo e in vitro para estabelecer o efeito dos tratamentos com estas combinações sobre as AIID, incluindo mas não se limitando a (a) ensaio de produção in vitro de anticorpos contra células B, (b) ensaio in vivo de TNP, e (c) modelo de artrite induzida por colagénio em roedores.

(a) Ensaio com células B

Sacrificam-se murganhos, e removem-se os baços que se dispersam através de uma malha de nylon para se gerar uma suspensão de células únicas. Lavam-se estes esplenócitos (depois da remoção dos eritrócitos por choque osmótico) e incuba-se com micropérolas conjugadas com anticorpos anti-CD43 e anti-Mac-1 (Miltenyi Biotec) . Separam-se as células ligadas às pérolas das células que não se ligaram utilizando um classificador de células magnético. A coluna magnetizada retém as células que não se pretendem e as restantes células B são recolhidas no eluído. Estimulam-se células B purificadas com lipopolissacárido ou com um anticorpo anti-CD40 e com interleuquina 4. Tratam-se as células estimuladas apenas com veículo ou com inibidores de PI3K5 da invenção presente tais como o composto 53, com ou sem inibidores de mTOR tais como rapamicina, rapálogos, ou inibidores de mT0RCl/C2. Espera-se que os resultados mostrem que na presença de inibidores de mTOR (por exemplo, rapamicina) apenas, não exista ou exista um pequeno efeito sobre a resposta a IgG e a IgE. No entanto, na presença de inibidores de PI3KÕ e de mTOR, espera-se que as células B exibam uma menor resposta a IgG em comparação com a de células B tratadas apenas com veículo, e espera-se que as células B exibam uma menor resposta a IgE em comparação com a resposta de células B tratadas apenas com inibidores de PI3KÕ.

(b) Ensaio TNP

Imunizam-se os murganhos com TNP-Ficoll ou com TNP-KHL e tratam-se com: veículo, um inibidor de PI3K5, por exemplo, o composto 53 da invenção presente, um inibidor de mTOR, por exemplo rapamicina, ou com um inibidor de Ρΐ3Κδ em combinação com um inibidor de mTOR tal como rapamicina. Determina-se o IgE do soro específico para o antigénio por ELISA utilizando placas revestidas com TNP-BSA e anticorpos marcados específicos para isotipos. Espera-se que os murganhos tratados com um inibidor de mTOR apenas exibam um efeito pequeno ou não substancial sobre a resposta específica de antigénio a IgG3 e uma ausência de um aumento significativo de resposta a IgE em comparação com os do controlo tratados com veículo. Também se espera que os murganhos tratados tanto com inibidor de Ρΐ3Κδ como com inibidor de mTOR exibam uma diminuição da resposta antigénica específica a IgG3 em comparação com a dos murganhos tratados apenas com veículo. Adicionalmente, os murganhos tratados tanto com inibidor de PI3KÕ como com inibidor de mTOR exibem um decréscimo da resposta a IgE em comparação com a dos tratados apenas com inibidor de Ρΐ3Κδ. (c) Modelo de Artrite Induzida por Colagénio em

Ratos

Anestesiam-se ratos Lewis fêmeas e administram-se-lhes injecções de colagénio preparadas e administradas tal como se descreveu anteriormente no dia 0. No dia 6, anestesiam-se os animais e administra-se-lhes uma segunda injecção de colagénio. Levam-se a cabo as medições com um nónio dos tornozelos direito e esquerdo normais (antes da doença) no dia 9. Nos dias 10-11, a artrite tipicamente ocorreu e distribuem-se os ratos aleatoriamente por grupos de tratamento. Leva-se a cabo a distribuição aleatória depois de estar obviamente estabelecido o inchaço das articulações existindo bons dados acerca de se manifestar a doença bilateral.

Depois de se seleccionar um animal para entrada no estudo, inicia-se o tratamento. Tratam-se os animais com veiculo, inibidor de PI3K5 ou inibidor de PI3K5 em combinação com rapamicina. Administram-se as doses nos dias 1-6. Pesam-se os ratos nos dias 1-7 depois de estabelecida a artrite e medem-se diariamente os tornozelos com um nónio. Determinam-se os pesos corporais finais no dia 7 e sacrificam-se os animais.

Espera-se que o tratamento de combinação utilizando inibidor de PI3K5 e rapamicina proporcione maior eficácia quando comparado com um tratamento apenas com inibidor de PI3K5.

Exemplo 54:Ensaio de inflamação do Pulmão

Testaram-se os compostos da invenção utilizando um ou ambos os ensaios de inflamação do pulmão induzida por LPS e inflamação do pulmão induzida por ovalbumina.

Para se levar a cabo o ensaio de inflamação do pulmão induzida por LPS, doseiam-se os compostos por via oral. Doseou-se um grupo com veiculo apenas e outro com dexametasona (a 5 mg/kg) a titulo de controlo positivo. Determinou-se a inflamação pulmonar 6 h após a instilação intranasal do LPS (10 pg). Avaliaram-se os seguintes parâmetros: número total de leucócitos e número de neutrófilos numa lavagem broncoalveolar (BAL).

No ensaio de inflamação do pulmão induzida por ovalbumina, dosearam-se os compostos por via oral. Doseou-se um grupo apenas com veiculo e outro com dexametasona (a 5 mg/kg) a titulo de controlo positivo. Determina-se a inflamação pulmonar 4 dias após 4 instilações diárias consecutivas intranasais de ovalbumina. Administraram-se os compostos por alimentação forçada 30 minutos antes de cada provocação (4 provocações), às doses indicadas. Avaliaram-se os seguintes parâmetros: Número total de leucócitos e número de eosinófilos numa lavagem broncoalveolar (BAL).

Mostram-se resultados exemplificativos na FIG. 15 (ensaio induzido por LPS) e na FIG. 16 (ensaio induzido por OVA) .

Embora as concretizações preferidas da invenção presente tenham sido mostradas e descritas neste documento, será óbvio para os entendidos na técnica que estas concretizações são proporcionadas apenas a titulo de exemplo. Ocorrerão agora aos entendidos na técnica numerosas variações, alterações, e substituições, as quais não se afastam do âmbito da invenção. Deve ser entendido que se podem utilizar diversas alternativas às das concretizações da invenção descritas neste documento quando se pratica a invenção. Pretende-se que as reivindicações que se seguem definam o âmbito da invenção e que os métodos e estruturas adentro do âmbito destas reivindicações e os seus equivalentes estejam contempladas por elas.

LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS <110> INTELLIKINE, INC.

<12 0> DETERMINADAS ENTIDADES QUÍMICAS, COMPOSIÇÕES E

MÉTODOS <130> T3580 EP S3 <140> PCT/US2010/002020 <141> 2010-07-15 <150> 12/503.776 <151> 2009-07-15 <150> PCT/US09/00038 <151> 2009-01-05 <150> PCT/US09/00042 <151> 2009-01-05 <150> 61/201.146 <151> 2008-12-05 <150> 61/194.294 <151> 2008-09-26 <150> 61/009.971 <151> 2008-01-04 <160> 2 <170> Patente na versão 3.5

<210> 1 <211> 12 <212> PRT <213> Sequência Artificial <22 0> <223> Descrição da Sequência Artificial: Péptido

Sintético <4 0 0> 1

Glu Ala lie Tyr Ala Ala Pro Phe Ala Lys Lys Lys 15 10 <210> 2

<211> 9 <212> PRT <213> Sequência Artificial <22 0> <223> Descrição da Sequência Artificial: Péptido sintético <400> 2

Glu lie Tyr Gly Glu Phe Lys Lys Lys 1 5

Lisboa, 13 de Maio de 2015.

Claims (29)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Um composto com a fórmula:

   ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
2. 2. 0 composto da reivindicação 1, em que o composto seja:

   ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
3. 3. 0 composto da reivindicação 1, em que o composto seja o enantiómero S com uma pureza enantiomérica maior do que 55 %, maior do que 80 %, maior do que 90 %, ou maior do 95 %.
4. 4. Uma composição farmacêutica incluindo um composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, e um excipiente aceitável do ponto de vista farmacêutico.
5. 5. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização no tratamento de uma patologia seleccionada de entre o cancro, as patologias ósseas, uma doença inflamatória, uma doença auto-imune, uma doença do sistema nervoso, uma doença metabólica, uma doença respiratória, trombose, e uma doença cardíaca.
6. 6. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização no tratamento de uma patologia seleccionada de entre asma, enfisema, alergia, dermatite, artrite reumatóide, osteoartrite inflamatória, doença inflamatória dos intestinos, doença obstrutiva crónica pulmonar, psoríase, esclerose múltipla, patologias relacionadas com complicações diabéticas, lúpus eritematoso, escleroderma, doença do enxerto contra o hospedeiro, restenose, aterosclerose, e mastocitose.
7. 7. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização no tratamento do cancro.
8. 8. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 7, em que o cancro seja seleccionado de entre cancros do timo, cerebral, pulmonar, de células escamosas, da pele, do olho, retinoblastoma, melanoma intraocular, da cavidade oral e orofaringea, da bexiga, gástrico, do estômago, pancreático, da bexiga, da mama, cervical, da cabeça, do pescoço, renal, do rim, do figado, do ovário, da próstata, colorrectal, esofágico, testicular, ginecológico, da tiróide, do SNC, do SNP, cancro relacionado com a SIDA, Sarcoma de Kaposi, e cancro induzido viral.
9. 9. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 7, em que o cancro seja uma leucemia ou um linfoma.
10. 10. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que a leucemia seja seleccionada de entre leucemia mielóide aguda (LMA), leucemia linfocitica aguda, leucemia de células T do adulto, leucemia linfocitica crónica (CLL), leucemia de células pilosas, mielodisplasia, patologias mieloproliferativas, leucemia mielóide crónica (CML), mieloma múltiplo (MM), sindrome mielodisplásica (SMD), leucemia de vírus linfotrópico humano do tipo-1 (HTLV-1), mastocitose, e da leucemia linfoblástica aguda de células-B.
11. 11. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que o linfoma seja seleccionado de entre linfoma difuso de células B grandes, linfoma imunoblástico de células B, linfoma de células pequenas não clivadas, leucemia/linfoma de vírus linfotrópico humano de tipo-1 (HTLV-1), linfoma de células T do adulto, linfoma das células do manto (MCL) , linfoma de Hodgkin, linfomas não Hodgkin, linfoma relacionado com a SIDA, linfoma de células T periféricas, linfoma de células T cutâneas, mieloma múltiplo, e linfoma folicular.
12. 12. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que a leucemia seja leucemia linfocitica crónica.
13. 13. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que o linfoma seja linfoma não de Hodgkin.
14. 14. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que o linfoma seja linfoma difuso de células B grandes.
15. 15. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que o linfoma seja linfoma de células do manto.
16. 16. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 9, em que o linfoma seja linfoma de células T do adulto.
17. 17. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 5, em que a patologia seja uma doença inflamatória ou uma doença auto-imune seleccionada de entre: (i) bursite, lúpus, encefalomielite disseminada aguda (ADEM) , doença de Addison, sindrome de anticorpo antifosfolipido (APS), anemia aplásica, hepatite auto-imune, doença celíaca, doença de Crohn, diabetes mellitus (de tipo 1), sindrome de Goodpasture, doença de Graves, sindrome de Guillain-Barré (GBS), doença de Hashimoto, doença inflamatória do intestino, lúpus eritematoso, miastenia grave, sindrome de opsoclonus myoclonus (OMS), neurite óptica, tiroidite de Ord, osteoartrite, uveorretinite, pênfigo, poliartrite, cirrose biliar primária, sindrome de Reiter, artrite de Takayasu, arterite temporal, anemia hemolítica auto-imune morna, granulomatose de Wegener, alopecia universalis, doença de Chagas, sindrome da fadiga crónica, disautonomia, endometriose, hidradenite supurativa, cistite intersticial, neuromiotonia, sarcoidose, escleroderma, colite ulcerosa, vitiligo, vulvodinia, apendicite, artrite reumatóide, blefarite, bronquiolite, bronquite, cervicite, colangite, colecistite, corioamnionite, colite, conjuntivite, cistite, dacrioadenite, dermatomiosite, endocardite, endometrite, enterite, enterocolite, epicondilite, epididimite, fasceíte, fibrosite, gastrite, gastroenterite, gengivite, hepatite, hidradenite, ileíte, irite, laringite, mastite, meningite, mielite, miocardite, miosite, nefrite, onfalite, ooforite, orquite, osteite, otite, pancreatite, parotidite, pericardite, peritonite, faringite, pleurite, flebite, pneumonite, proctite, prostatite, pielonefrite, rinite, salpingite, sinusite, estomatite, sinovite, tendinite, tonsilite, uveite, vaginite, vasculite, e vulvite; (II) rinite alérgica perene, mesenterite, acrodermatite, angiodermatite, dermatite atópica, dermatite de contacto, eczema, eritema multiforme, intertrigo, sindrome de Stevens Johnson, necrólise epidérmica tóxica, alergia na pele, reacção alérgica grave/anafilaxia, granulomatose alérgica, conjuntivite alérgica, coriorretinite, queratoconjuntivite infecciosa, queratoconjuntivite, oftalmia neonatal, tracoma, inflamação ocular, blefaroconjuntivite, pericoronite, rinofaringite, sialadenite, inflamação do sistema músculo-esquelético, doença de Still com inicio no adulto, doença de Behcet, condrocalcinose, dactilite, sindrome de Felty, gota, artrite infecciosa, doença de Lyme, osteoartrite inflamatória, periartrite, infecção por virus de Ross River, sindrome da insuficiência respiratória aguda, bronquite aguda, sinusite aguda, rinite alérgica, asma, asma grave refractária, pleurisia, rinite alérgica sazonal, estado asmático, traqueobronquite, serosite, neuromielite óptica, infecção pelo virus da poliomielite, sindrome de Alport, balanite, orquite do epididimo, segmentar e focal, glomeruloesclerose, glomerulonefrite, nefropatia por IgA (doença de Berger), orquite, parametrite, doença inflamatória pélvica, pielite, pielocistite, hiperuricemia, aortite, quilopericardite, sindrome de Dressier, endarterite, artrite temporal extracraniana, arterite associada ao VIH, arterite temporal intracraniana, doença de Kawasaki, linfangioflebite, doença de Mondor, e periarterite; e (iii) jejunite, mucosite, esteatohepatite não alcoólica, hepatite não virai, pancreatite auto-imune, perihepatite, pouquite, colite pseudomembranosa, rectossigmoidite, salpingoperitonite, sigmoidite, esteato- hepatite, síndrome de Churg Strauss, proctite ulcerosa, síndrome do intestino irritável, inflamação gastrointestinal, enterocolite aguda, anusite, necrose de Balser, diverticulite, enterohepatite, esofagite eosinofilica, esofagite, enterite hemorrágica, infecção por vírus da hepatite, hepatocolangite, gastrite hipertrófica, ileocecite, espondilite anquilosante, artrite reumatóide, artrite reumatóide juvenil, psoríase, artrite psoriática, lúpus (cutâneo/sistémico/nefrite), SIDA, agamaglobulinemia, complexo relacionado com SIDA, doença de Bruton, síndrome de Chédiak Higashi, imunodeficiência comum variável, síndrome de DiGeorge, disgamaglobulinemia, deficiência em imunoglobulina, síndrome de Job, síndrome de Nezelof, patologia bactericida de fagócitos, síndrome de Wiskott Aldrich, asplenia, elefantíase, hiperesplenia, linfadenopatia, linfoedema, linfocele, síndrome de Nonne Milroy Meige, doença do baço, esplenomegalia, timoma, doença do timo, perivasculite, pleuro-pericardite, poliartrite nodosa, tromboangeíte, tromboangeíte obliterante, tromboendocardite, tromboflebite, e DPOC.
18. 18. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 5 ou a 6, em que a doença inflamatória ou auto-imune seja a asma.
19. 19. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 5 ou a 6, em que a doença inflamatória ou auto-imune seja a artrite reumatóide.
20. 20. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização na melhoria dos sintomas associados com a artrite reumatóide, seleccionados de entre um ou mais de uma diminuição do inchaço das articulações, uma diminuição dos teores anti-colagénio no soro, uma diminuição da ressorção óssea, uma diminuição das lesões da cartilagem, uma diminuição do pano (pannus) , e uma diminuição da inflamação.
21. 21. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização no tratamento de uma doença respiratória.
22. 22. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 21, em que a doença respiratória seja seleccionada de entre asma, doença obstrutiva pulmonar crónica (DOPC), bronquite crónica, enfisema, e bronquiectasia.
23. 23. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante as reivindicações 5 a 22, em que no tratamento tenha que se administrar um segundo agente terapêutico.
24. 24. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 23, em que o segundo agente terapêutico que seja administrado no tratamento seja um agente quimioterapêutico.
25. 25. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 24, em que o agente quimioterapêutico seja seleccionado de entre inibidores da mitose, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos de intercalação, inibidores do factor de crescimento, inibidores do ciclo celular, enzimas, inibidores da topoisomerase, modificadores da resposta biológica, anti-hormonas, inibidores da angiogénese, anti-androgénicos, agentes alquilantes, sulfonatos de alquilo, aziridinas, etilenoiminas, metilamelaminas, mostardas de azoto, nitroso-ureias, anti-metabolitos, análogos de ácido fólico, análogos de purina, reabastecedores de ácido fólico, taxanos, agentes anti-hormonais que actuam para regular ou inibir a acção hormonal em tumores, anti-estrogénicos, anti-androgénicos, agonistas de LHRH, terapia fotodinâmica, nitroso-ureias, sulfonatos de alquilo, triazenos, compostos contendo platina, alcaloides da vinca, taxóides, epipodofilinas, inibidores da DHFR, inibidores de IMP desidrogenase, inibidores de ribonucleótido reductase, análogos de uracilo, análogos de citoquinas, análogos de purina, análogos da vitamina D, inibidores da isoprenilação, neurotoxinas dopaminérgicas, inibidores do ciclo celular, MDR, inibidores de Ca2+ ATPase, inibidores da tirosina quinase, inibidores do proteassoma, e inibidores de mTOR.
26. 26. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 24, em que o agente quimioterapêutico seja seleccionado de entre o conjunto constituído por imatinib, bortezomib, bicalutamida, adriamicina, tiotepa, ciclofosfamida, bussulfano, improssulfano, pipossulfano, benzodopa, carboquona, meturedopa, uredopa, altretamina, trietilenomelamina, trietilenofosforamida, trietilenotiofosforamida trimetilolmelamina, clorambucil, clornafazina, ifosfamida, mecloretamina, cloridrato de óxido de mecloretamina, melfalano, novembiquina, fenesterina, prednimustina, trifosfamida, mostarda de uracilo, clorozotocina, fotemustina, nimustina, ranimustina, antibióticos tais como aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azasserina, bleomicinas, cactinomicina, caliqueamicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, cromomicinas, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina, 5-fluorouracilo (5-FU), pteropterina, trimetrexato, denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato, ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didesoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona, aminoglutetimida, mitotano, trilostano, ácido frolinico, aceglatona, aldofosfamida, glicósidos, ácido aminolevulinico, amsacrina, bestrabucil, bisantreno, edatraxato, defofamina, demecolcina, diaziquona, elfomitina, acetato de eliptinio, etoglúcido, nitrato de gálio, lentinan, lonidamina, mitoguazona, mitoxantrona, mopidamol, nitracrina, pentostatina, fenamet, pirarrubicina, ácido podofilinico, 2-etil-hidrazida, procarbazina, polissacárido K, razoxano, sizofirano, espirogermânio, ácido tenuazónico, triaziquona, 2,2',2"-triclorotrietilamina, uretano, manomustina, mitobronitol, mitolactol, pipobromano, gacitosina, arabinbsido ("Ara-C"), paclitaxel, docetaxel, ácido retinóico, esperamicinas, raloxifene, 4-hidroxitamoxifene, trioxifene, queoxifene, LY 117018, onapristona, toremifene, flutamida, nilutamida, leuprolida, goserelina, 6-tioguanina, mercaptopurina, cisplatina, carboplatina, vinblastina, platina, mitomicina C, vineristina, vinorrelbina, navelbina, novantrona, teniposido, daunomicina, aminopterina, xeloda, ibandronato, camptotecina-11 (CPT-11), inibidor de topoisomerase RFS 2000, difluorometilornitina (DMFO), tamoxifene, megestrol, leuprolide, flutamida, vertoporfina (DBP-MA), ftalocianina, fotossensibilizador PC4, desmetoxi-hipocrelina A (2BA-2-DMHA), estramustina, carmustina (BCNU), lomustina (CCNU), treossulfan, dacarbazina, temozolomida, oxaliplatina, vindesina, DHA-paclitaxel, Taxoprexina, PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, XYOTAX, ANG1005, paclitaxel-CE-1, paclitaxel conjugado com glucose, etoposido, fosfato de etoposido, topotecano, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecano, irinotecano, crisnatol, mitomicina C, diclorometotrexato, edatrexato, tiazofurina, ribavirina, EICAR, hidroxiureia, deferoxamina, 5-fluoro-uracilo (5-FU), ratitrexed, tegafur-uracilo, a capecitabina, arabinbsido de citosina, fludarabina, mercaptopurina tioguanina, EB 1089, CB 1093, KH 1060, ião lovastatina, 1-metil-4-fenilpiridínio, estaurosporina, actinomicina D, dactinomicina, bleomicina A2, bleomicina B2, peplomicina, doxorrubicina, doxorrubicina lipossomal peguilada, epirrubicina, pirarrubicina, verapamil, tapsigargina, talidomida, lenalidomida, axitinib (AG013736), bosutinibe (SKI-606), cediranib (AZD2171), dasatinib (BMS-354825), erlotinib, gefitinib, lapatinib, lestaurtinib (CEP-701), neratinib (HKI-272), o nilotinib, semaxanib, sunitinib SU11248, toceranib, vandetanib (ZD6474), vatalanib (PTK787, PTK / ZK) , trastuzumab, bevacizumab, rituximab, cetuximab, panitumumab, ranibizumab, sorafenib, everolimus, alemtuzumab, gemtuzumab, ozogamicina, temsirolimus, ENMD-2076, PCI-32765, AC220, lactato de dovitinib (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992, SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120, AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (A-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647, XL228, rapamicina, ridaforolimus, AP23573, AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, oblimersen, gemcitabina, leucovorina, pemetrexed, prednisolona, dexametasona, campatecina, plicamicina, asparaginase, metopterina, portiromicina, leurosidina, leurosina, trabectedina, procarbazina, discodermolido, e hexametilmelamina, um um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
27. 27. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 23, em que se seleccione o segundo agente terapêutico de entre (i) um agente que iniba a produção de IgE ou a sua actividade, ou (ii) um fármaco anti-inflammatório, ou (iii) anticoagulantes, ou (iv) um agente bioterapêutico, ou (v) um broncodilatador, ou (vi) um agente anti-angiogénese, ou (vii) um agente diurético, ou (viii) uma hormona ou um péptido ou uma proteína terapêuticos, ou (ix) terapia com radiação, ou (x) um anticorpo terapêutico.
28. 28. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 27, em que (i) o agente inibidor da produção ou da actividade de IgE seja seleccionado de entre TEI-9874, ácido 2-(4-(6-ciclohexiloxi-2- naftiloxi) fenilacetamida)benzóico, rapamicina, análogos de rapamicina, inibidores de TORCI, inibidores de T0RC2, anticorpos anti-IgE, omalizumab, e TNX-901; ou (ii) o fármaco anti-inflamatório não esteróide seja seleccionado de entre ácido acetilsalicilico, ibuprofene, naproxene, indometacina, nabumetona, tolmetina, um corticosteróide, prednisona, cloroquina, e hidroxicloroquina; ou (iii) o anticoagulante seja seleccionado de entre aspirina, heparina, e coumadina; ou (iv) o agente bioterapêutico seja seleccionado de entre factor de necrose tumoral, interferão a, interferão γ, IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, GM-CSF, Herceptina (trastuzumab), T-DM1, bevacizumab, cetuximab, panitumumab, rituximab, e tositumomab; ou (v) o broncodilatador seja seleccionado de entre efedrina, adrenalina, fenoterol, formoterol, isoprenalina, metaproterenol, fenilefrina, fenilpropanolamina, pirbuterol, reproterol, rimiterol, salbutamol, salmeterol, terbutalina, isoetarina, tulobuterol, orciprenalina ou (-)-4-amino-3,5-dicloro-a-[ [ [6-[2-(2-piridinil)etoxi]hexil]- amino]metil]benzenometanol; ou (vi) o agente anti-angiogénico seja seleccionado de entre inibidores de MMP-2 (metaloproteinase da matriz 2), inibidores de MMP-9 (metaloproteinase da matriz 9) , e inibidores de COX-II (ciclo-oxigenase II); ou (vii) o agente diurético seja seleccionado de entre amilorido, anticolinérgicos, ipratrópio, atropina e oxitrópio; ou (viii) a hormona ou péptido ou proteína terapêuticos sejam seleccionados de entre cortisona, hidrocortisona, prednisolona, xantinas, aminofilina, teofilinato de colina, teofilinato de lisina, teofilina, insulina e glucagona; ou (ix) a terapia com radiação seja seleccionada de entre terapia com feixe externo, terapia com radiação interna, radiação de implante, cirurgia estereotáctica, terapia sistémica com radiação, radioterapia e braquiterapia intersticial permanente ou temporária.
29. 29. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou a composição farmacêutica da reivindicação 4, para utilização consoante a reivindicação 27, em que o segundo agente terapêutico seja um anticorpo terapêutico seleccionado de entre cetuximab, panitumumab, trastuzumab, rituximab, tositumomab, alemtuzumab, bevacizumab, gemtuzumab, um anticorpo anti-CD20 e um anticorpo anti receptor de tirosina quinase. Lisboa, 13 de Maio de 2015.