RS58113B1 - Derivati pirolo[2,3-d]pirimidina kao inhibitori janus kinaze - Google Patents

Derivati pirolo[2,3-d]pirimidina kao inhibitori janus kinaze

Info

Publication number
RS58113B1
RS58113B1 RS20181405A RSP20181405A RS58113B1 RS 58113 B1 RS58113 B1 RS 58113B1 RS 20181405 A RS20181405 A RS 20181405A RS P20181405 A RSP20181405 A RS P20181405A RS 58113 B1 RS58113 B1 RS 58113B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
pyrrolo
mol
methyl
pyrazol
ethoxy
Prior art date
Application number
RS20181405A
Other languages
English (en)
Inventor
James D Rodgers
Stacey Shepard
Thomas P Maduskuie
Haisheng Wang
Nikoo Falahatpisheh
Maria Rafalski
Argyrios G Arvanitis
Louis Storace
Ravi Kumar Jalluri
Jordan S Fridman
Krishna Vaddi
Original Assignee
Incyte Holdings Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37903501&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS58113(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Incyte Holdings Corp filed Critical Incyte Holdings Corp
Publication of RS58113B1 publication Critical patent/RS58113B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/002—Heterocyclic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja definisana u patentnim zahtevima, koja modulišu aktivnost Janus kianaza i korisna u lečenju bolesti uvezi sa aktivnošću Janus kinaza uključujući na primer bolesti u vezi sa imunim sistemom, poremećaje na koži, mijeloidne proliferativne poremećaje, kancer i ostale bolesti
STANJE TEHNIKE PRONALASKA
[0002] Protein kinaze (PK) su grupa enzima koja među ostalima reguliše različite, važne biološke procese koji uključuju rast ćelija, preživljavanje i diferencijaciju, formiranje organa i morfogenezu, neovaskularizaciju, obnavljanje tkiva i regeneraciju. Protein kinaze vrše njihove fiziološke funkcije kroz kataliziranje fosforilacije proteina (ili supstrata) i na taj način moduliraju ćelijske aktivnosti supstrata u različitim biološkim kontekstima. Osim funkcije u normalnim tkivima/organima, mnoge protein kinaze takođe imaju više specijalizovanih uloga u nizu ljudskih bolesti, uključujući rak. Podskup protein kinaze (takođe se spominje kao onkogena protein kinaza), kada je disregulisan, može uzrokovati formiranje i rast tumora, pa dalje doprinositi održavanju i napredovanju tumora (Blume-Jensen P et al, Nature 2001, 411(6835):355-365). Sve do sada, onkogene protein kinaze predstavljaju jednu od najvećih i najatraktivnijih grupa proteinskih meta za delovanje na rak i razvoj lekova.
[0003] Protein kinaze se mogu kategorizovati kao receptorski tip i ne-receptorski tip. Receptorske tirozin kinaze (RTK) imaju ekstraćelijski deo, transmembranski domen, i intraćelijski deo, dok su nereceptorske tirozin kinaze u potpunosti intraćelijske. RTK posredovana transdukcija signala je tipično inicirana da ekstraćelijsku interakciju sa specifičnim faktorom rasta (ligandom), tipično sledi receptorska dimerizacija, stimulacija unutrašnje aktivnosti proteina tirozin kinaze, i receptorska transfosforilacija. Vezna mesta su stvorena za molekule intraćelijske transdukcije signala i dovode do stvaranja kompleksa sa spektrom citoplazmatskih signalnih molekula koji olakšavaju odgovarajuće ćelijske reakcije, kao što su ćelijska deoba, diferencijacija, metabolički efekti, i promene u ekstraćelijskoj mikrookolini.
[0004] Trenutno je identifikovano najmanje devetnaest (19) različitih RTK podfamilija. Jedna RTK podfamilija, označena kao HER podfamilija, uključuje EGFR, HER2, HER3 i HER4, i veže takve ligande kao što je epitelni faktor rasta (EGF), TGF-α, amfiregulin, HB-EGF, betacelulin i heregulin. Druga RTK familija, označena kao insulinska podfamilija, uključuje INS-R, IGF-IR i IR-R. Treća familija, "PDGF" podfamilija, uključuje PDGF alfa i beta receptore, CSFIR, c-kit i FLK-ii. Druga RTK podfamilija, označena kao FLK podfamilija, obuhvata umetak Kinaze Domenskog-Receptora Fetalnu Jetrenu Kinazu-1 (KDR/FLK-1), Fetalnu Jetrenu Kinazu 4 (FLK-4) i fms-sličnu tirozin kinazu 1 (flt-1). Dve druge RTK podfamilije su označene kao FGF receptorska familija (FGFR1, FGFR2, FGFR3 i FGFR4) i Met podfamilija (c-Met, Ron i Sea). Za detaljnu raspravu o protein kinazama, videti na primer, Blume-Jensen, P. et al., Nature. 2001, 411(6835):355-365, & Manning, G. et al., Science. 2002, 298(5600):1912-1934.
[0005] Ne-receptorski tip tirozin kinaza je takođe sastavljen od brojnih podfamilija, uključujući Src, Btk, Abl, Fak, te Jak. Svaka od tih podfamilija može dalje biti podeljena u višestruke članove koji su često vezani na onkogenezu. Na primer Src familija je najveća i među ostalim uključuje Src, Fin, Lck i Fgr. Za detaljnu raspravu o ovim kinazama, videti Bolen JB. Nonreceptor tirozin protein kinases. Oncogene.1993, 8(8):2025-31.
[0006] Značajan broj tirozin kinaza (receptorskih i ne-receptorskih) je povezan sa rakom (videti Madhusudan S, Ganesan TS. Tirozin kinase inhibitors in cancer therapy. Clin Biochem. 2004, 37(7):618-35.). Klinička ispitivanja ukazuju na to da prekomerna ekspresija ili disregulacija tirozin kinaza takođe može imati prognostičku vrednost. Na primer, članovi HER familije RTK su povezani sa lošom prognozom kod raka dojke, raka debelog creva, raka glave i vrata, i raka pluća. Mutacija c-Kit tirozin kinaze povezana je sa smanjenim preživljavanjem u slučaju gastrointestinalnog stromalnog tumora. Kod akutne mijelogene leukemije, Flt-3 mutacija predviđa kraće preživljavanje. VEGFR ekspresija, koja je važna kod angiogeneze tumora, je povezana sa nižom stopom preživljavanja kod raka pluća. Ekspresija Tie-1 kinaze inverzno korelira sa preživljavanjem kod raka želuca. Ekspresija BCR-Abl je važan pokazatelj odgovora kod hronične mijelogene leukemije i Src tirozin kinaza je indikator za lošu prognozu u svim fazama raka debelog creva.
[0007] Imunološki sistem reaguje na ozlede i opasnosti od patogena. Citokini su polipeptidi malemolekularne težine ili glikoproteini koji stimulišu biološke odgovore u gotovo svim tipovima ćelija. Na primer, citokini regulišu razne puteve uključene kod zapaljenskog odgovora domaćina na sepsu. Citokini imaju uticaj na diferencijaciju ćelija, proliferaciju i aktivaciju, pa oni mogu modulirati i prozapaljenske i anti-zapaljenske odgovore kako bi omogućili da domaćin odgovarajuće reaguje na patogene.
[0008] Vezanje citokina na njegove receptore na površini čelije pokreće intraćelijske signalne kaskade koji vrše transdukciju ekstraćelijskog signala u jezgru, što na kraju dovodi do promene u ekspresiji gena. Put koji uključuje Janus kinaze porodice protein tirozin kinaza (JAK) i Signalnih Transduktora i Aktivatora Transkripcije (STATS) uključen je u signalizaciju širokog raspona citokina.Uopšteno, receptori citokina nemaju unutrašnju aktivnost tirozin kinaze, pa zbog toga trebaju receptorskipovezane kinaze za širenje fosforilacijske kaskade. JAK ispunjavaju tu funkciju. Citokini se vežu na njihove receptore, uzrokujući dimerizaciju receptora, pa to omogućava da JAK fosforiliraju jedni druge kao i specifične pobude tirozina unutar receptora citokina. STAT-ovi koji prepoznaju ove pobude fosfotirozina su privučeni na receptor, pa se zatim sami aktiviraju pomoću JAK-ovisnog tirozin fosforilacijskog događaja. Nakon aktivacije, STAT-ovi disociraju od receptora, dimeriziraju, pa translociraju u jezgru radi vezanja na specifične pozicije DNA i menjaju transkripciju (Scott, M. J., C. J. Godshall, et al. (2002). "Jaks, STATs, Cytokines, and Sepsis." Clin Diagn Lab Immunol 9(6): 1153-9).
[0009] JAK famlija ima ulogu u citokin-zavisnoj regulaciji proliferacije i funkciji ćelija uključenih u imunološki odgovor. Trenutno, postoje četiri poznata člana JAK familije kod sisara: JAK1 (takođe poznata kao Janus kinaza-1), JAK2 (takođe poznata kao Janus kinaza-2), JAK3 (takođe poznata kao Janus kinaza, leukocita; JAKL; L-JAK i Janus kinaza-3) i TYK2 (takođe poznata kao protein-tirozin kinaza 2). JAK proteini variraju po veličini od 120 do 140 kDa i sadrže sedam očuvanih JAK homolognih (JH) domena; jedna od tih je funkcionalna domena katalitičke kinaze, a druga je domena pseudokinaze koja potencijalno ima regulacijsku funkciju i/ili služi kao mesto spajanja za STAT (Scott, Godshall et al.
2002, supra).
[0010] Dok su JAK1, JAK2 i TYK2 izraženi svuda, za JAK3 je prijavljeno da se poželjno eksprimira u prirodnim ubilačkim (NK) ćelijama i ne mirujućim Tćelijama, što sugeriše ulogu kod limfoidne aktivacije (Kawamura, M., D. W. McVicar, et al. (1994). "Molecular cloning of L-JAK, a Janus family protein-tirozine kinase expressed in natural killer cells and activated leukocytes." Proc Natl Acad Sci U S A 91(14): 6374-8).
[0011] Ne samo da citokinom-stimulisani imuni i zapaljenski odgovori doprinose normalnoj odbrani domaćina, oni takođe imaju ulogu u patogenezi bolesti: patološka stanja kao što su teška kombinovana imunodeficijencija (SCID) proizlaze iz hipoaktivnosti i suzbijanja imunološkog sistema, pa hiperaktivni ili neprimeren imunološki/zapaljenski odgovor pridonosi patologiji autoimunih bolesti kao što su reumatoidni i psorijazni artritis, astma i sistemski eritemski lupus, zapaljenska bolest creva, multipla skleroza, dijabetes melitus tipa I, Miastenia gravis, tireoiditis, imunoglobulinske nefropatije, miokarditis kao i bolesti kao što su skleroderma i osteoartritis (Ortmann, R. A., T. Cheng, et al. (2000). "Janus kinase and signal transducers and activators of transcription: their roles in cytokine signaling, development and immunoregulation." Arthritis Res 2(1): 16-32). Osim toga, prilično su česti sindromi sa mešovitom pojavom autoimunih bolesti i bolesti nedostatka imuniteta (Candotti, F., L. Notarangelo, et al. (2002). "Molecular aspects of primary immunodeficiencies: lessons from cytokine and other signaling pathways." J Clin Invest 109(10): 1261-9). Zbog toga terapeutska sredstva tipično ciljaju na odgovarajuće povećanje ili supresiju imunoloških i zapaljenskih puteva.
[0012] Nedostatci u ekspresiji članova JAK familije su povezani sa bolesnim stanjima. Jak1-/- miševi su manji kod okota, ne uzimaju hranu, pa uginu perinatalno (Rodig, S. J., M. A. Meraz, et al. (1998). "Disruption of the Jak1 gene demonstrates obligatory and nonredundant roles of the Jaks in cytokineinduced biologic responses." Cell 93(3): 373-83). Jak2-/- embrioni miševa su anemični i uginu oko 12.5 dana postcoitum zbog nedostatka definitivne eritropoeze. JAK2-nedostatak fibroblasta ne odgovara na IFN gama, iako odgovori na IFNalfa/beta i IL-6 nisu zahvaćeni. JAK2 funkcije kod transdukcije signala specifičnih receptora citokina traže definitivnu eritropoezu (Neubauer, H., A. Cumano, et al. (1998). Cell 93(3): 397-409; Parganas, E., D. Wang, et al. (1998). Cell 93(3): 385-95.). Čini se da JAK3 ima ulogu kod normalnog razvoja i funkcije B i T limfocita. Mutacije JAK3 su prijavljene kao odgovorne za autozomnu recesivnu tešku kombinovanu imunodeficijenciju (SCID) kod ljudi (Candotti, F., S. A. Oakes, et al. (1997). "Structural and functional basis for JAK3-deficient severe combined immunodeficiency." Blood 90(10): 3996-4003).
[0013] Za JAK/STAT put, i naročito za sva četiri člana JAK familije, veruje se da imaju ulogu u patogenezi astmatičnog odgovora, hroničnoj opstruktivnoj plućnoj bolesti, bronhitisu, i drugim srodnim zapaljenskim bolestima donjeg respiratornog trakta. Na primer, neodgovarajući imunološki odgovori koji karakterišu astmu su orkestrirani sa podskupom CD4+ T pomagačke ćelije nazvane T pomagačke 2 (Th2) ćelije. Signalizacija kroz citokinski receptor IL-4 stimulše JAK1 i JAK3 za aktiviranje STAT6, a signalizacija kroz IL-12 stimuliše aktivaciju JAK2 i TYK2, i naknadnu fosforilaciju STAT4. STAT4 i STAT6 kontrolišu višestruke aspekte diferencijacije CD4+ T pomagačkih ćelija (Pernis, A. B. and P. B. Rothman (2002). "JAK-STAT signaling in asthma." J Clin Invest 109(10): 1279-83). Osim toga, za miševe sa nedostatkom TYK2 pronađeno je da imaju poboljšano alergijsko zapaljenje disajnih puteva posredovano Th2 ćelijama (Seto, Y., H. Nakajima, et al. (2003). "Enhanced Th2 cell-mediated allergy inflammation in Tyk2-deficient mice." J Immunol 170(2): 1077-83). Povrh toga, višestruki citokini koji signaliziraju kroz JAK kinaze povezani su sa zapaljenskim bolestima ili stanjima gornjeg respiratornog trakta poput onih koji utiču na nos i sinuse (npr. rinitis, sinusitis) bez obzira da li se radi o klasičnim alergijskim reakcijama ili ne.
[0014] JAK/STAT put je takođe naveden da ima ulogu kod zapaljenskih bolesti/stanja oka uključujući ali nije ograničeno na, iritis, uveitis, skleritis, konjuktivitis, kao i hronične alergijske odgovore. Zbog toga, inhibicija JAK kinaza može imati važnu ulogu u terapijskom lečenju ovih bolesti.
[0015] JAK/STAT put, i posebno JAK3, takođe ima ulogu kod raka imunološkog sistema. Kod odraslih osoba sa T-ćelijskom leukemijom/limfomom (ATLL), humane CD4+ T ćelije dobijaju transformisani fenotip, događaj koji korelira sa sticanjem konstitutivne fosforilacije JAK-ova i STAT-ova. Osim toga, povezanost između aktivacije JAK3 i STAT-1, STAT-3, i STAT-5 i progresija ćelijskog ciklusa pokazana je i pomoću bojenja propidij jodidom i inkorporacijom bromodeoksuridina u ćelije kod četiri testirana ATLL pacijenta. Ovi rezultati pokazuju da je JAK/STAT aktivacija povezana sa replikacijom leukemijskih ćelija i da se može smatrati da terapijski pristupi koji su usmereni na inhibiciju JAK/STAT zaustavljaju neoplastični rast (Takemoto, S., J. C. Mulloy, et al. (1997). "Proliferation of adult T cell leukemia/limfom cells is associated with the constitutive activation of JAK/STAT proteins." Proc Natl Acad Sci U S A 94(25): 13897-902).
[0016] Blokiranje signala na nivou JAK kinaze obećavajuće je za razvoj lečenja raka kod ljudi. Citokini familije interleukin 6 (IL-6), koji aktiviraju transduktorski signal gp130, su glavni faktor opstanka i faktor rasta za humane ćelije multiplog mijeloma (MM). Za transdukciju signala gp130 se veruje da uključuje JAK1, JAK2 i Tyk2 i sporedne faktore STAT3 i puteve mitogeno-aktivirane protein kinaze (MAPK). Kod IL-6-zavisnih MM ćelijskih linija tretiranih sa JAK2 inhibitorom tirfostinom AG490, inhibirane su aktivnost JAK2 kinaze i ERK2 i STAT3 fosforilacija. Osim toga, potisnuta je proliferacija ćelija i izazvana je apoptoza (De Vos, J., M. Jourdan, et al. (2000). "JAK2 tirozin kinase inhibitor tyrphostin AG490 downregulates the mitogen-activated protein kinase (MAPK) and signal transducer and activator of transcription (STAT) pathways and induces apoptosis in myeloma cells." Br J Haematol 109(4): 823-8). Međutim, u nekim slučajevima, AG490 može izazvati mirovanje tumorskih ćelija i zapravo ih zaštititi od smrti.
[0017] Aktivacija JAK/STAT kod raka može se dogoditi pomoću više mehanizama, uključujući stimulaciju citokina (npr. IL-6 ili GM-CSF) ili pomoću redukcije u endogenim supresorima JAK signalizacije kao što je SOCS (supresor citokinske signalizacije) ili PIAS (proteinski inhibitor aktiviranog STAT) (Boudny, V., and Kovarik, J., Neoplasm. 49:349-355, 2002). Važno je da su aktivacija STAT signalizacije, kao i drugi putevi nizvodno od JAK-ova (npr. Akt), u korelaciji s lošom prognozom kod mnogih vrsta raka (Bowman, T., et al. Oncogene 19:2474-2488, 2000). Povrh toga, povišeni nivoi cirkulišućih citokina koji signaliziraju kroz JAK/STAT mogu negativno uticati na zdravlje pacijenta jer se misli da oni imaju uzročnu ulogu u kaheksiji i/ili hroničnom umoru. Kao takva, JAK inhibicija može biti terapija za lečenje pacijenata obolelih od raka iz razloga koji dosežu izvan potencijalne antitumorske aktivnosti. Indikacija kaheksije može dalje dati podršku saznanju da leptin kao faktor sitosti signalizira kroz JAK-ove.
[0018] Farmakološko usmeravanje na Janus kinazu 3 (JAK3) je uspešno korišćeno za kontrolisanje odbacivanja alografta i reakcije transplantata protiv domaćina (GVHD). Osim sudelovanja u signalizaciji receptora citokina, JAK3 takođe učestvuje u CD40 signalnom putu monocita periferne krvi. Tokom CD40-indukovanog sazrevanja mijeloičnih dendritičkih ćelija (DC-a), indukovana je JAK3 aktivnost, pa se uočavaju povećanja kod ekspresije ko-stimulirajućih molekula, IL-12 produkcije, i snažnog alogenog stimulatornog kapaciteta. Racionalno osmišljen JAK3 inhibitor WHI-P-154 sprečio je ove efekte zaustavljanja DC-a na nezrelom nivou, sugerišući da imunosupresivne terapije koje ciljaju tirozin kinazu JAK3 takođe mogu uticati na funkciju mijeloidnih ćelija (Saemann, M. D., C. Diakos, et al. (2003). "Prevention of CD40-triggered dendritic cell maturation and induction of T-cell hyporeactivity by targeting of Janus kinase 3." Am J Transplant 3(11): 1341-9). U sistemu baziranom na mišjem modelu, JAK3 je takođe pokazan kao važna molekularna meta za lečenje autoimunog dijabetes mellitusa zavisnog od insulina (tip 1). Racionalno osmišljen JAK3 inhibitor JANEX-1 pokazao je snažnu imunomodulacijsku aktivnost i odložen početak dijabetesa kod NOD modela sa miševima sa autoimunim dijabetesom tipa 1 (Cetkovic-Cvrlje, M., A. L. Dragt, et al. (2003). "Targeting JAK3 with JANEX-1 for prevention of autoimmune type 1 diabetes in NOD mice." Clin Immunol 106(3): 213-25).
[0019] Sugerisano ja da inhibicija JAK2 tirozin kinaze može biti korisna za pacijente sa mijeloproliferativnim poremećajem (Levin, et al., Cancer Cell, vol. 7, 2005: 387-397). Mijeloproliferativni poremećaj (MPD) uključuje policitemiju vera (PV), esencijalnu trombocitemiju (ET), mijeloidnu metaplaziju sa mijelofibrozom (MMM), hroničnu mijelogenu leukemiju (CML), hroničnu mijelomonocitnu leukemiju (CMML), hipereozinofilni sindrom (HES) i sistemsku mastocitnu bolest (SMCD). Iako se mijeloproliferativni poremećaji (kao PV, ET i MMM) smatraju da su uzrokovani sa stečenim somatskim mutacijama u hematopoetskim progenitorima, genetska osnova za ove bolesti nije poznata. Međutim, uočeno je da hematopoetske ćelije kod većine bolesnika sa PV i značajan broj bolesnika sa ET i MMM poseduju povratne somatske aktivirajuće mutacije kod JAK2 tirozin kinaze. Takođe je uočeno da inhibicija JAK2V617F kinaze s inhibitorom malih molekula dovodi do inhibicije proliferacije hematopoetskih ćelija, što sugeriše da je JAK2 tirozin kinaza potencijalna meta za farmakološku inhibiciju kod bolesnika sa PV, ET i MMM.
[0020] Inhibicija JAK kinaza je takođe predviđena da ima terapeutske prednosti kod pacijenata koji pate od poremećaja imuniteta kože kao što je psorijaza, i preosetljivost kože. Kod psorijaze vulgaris, najčešćeg oblika psorijaze, uopšteno je prihvaćeno da su aktivirani T limfociti važni za održavanje bolesti i povezanih psorijatičnih plakova (Gottlieb, A.B., et al, Nat Rev Drug Disc., 4:19-34). Psorijatični plakovi sadrže značajne imunološke infiltrate, uključujući i leukocite i monocite, kao i višestruke epidermalne slojeve s povećanom proliferacijom keratinocita. Iako početna aktivacija imunoloških ćelija kod psorijaze nastaje pomoću neprijateljski definisanog mehanizma, veruje se da održavanje zavisi od broja zapaljenskih citokina, pored raznih hemokina i faktora rasta (JCI, 113:1664-1675). Mnogi od njih, uključujući interleukine -2, -4, -6, -7, -12, -15, -18, i -23 kao i GM-CSF i IFNg, signaliziraju kroz Janus (JAK) kinaze (Adv Pharmacol. 2000;47:113-74). Kao kakva, transdukcija blokirajućeg signala na nivou JAK kinaza može rezultirati sa terapeutskim poboljšanjem kod pacijenata koji pate od psorijaze ili drugih imunoloških poremećaja kože.
[0021] Poznato je da određeni lekovi mogu izazvati imunološke reakcije kao što su kožni osip ili proliv kod nekih pacijenata. Na primer, davanje nekih novih ciljanih sredstava protiv raka kao što su Iressa, Erbitux, zatim Tarceva izazvalo je osip u obliku akni kod nekih pacijenata. Drugi primer je da neki lekovi koji se koriste topikalno izazivaju iritaciju kože, kožni osip, kontaktni dermatitis ili alergijsku kontaktnu osetljivost. Za neke pacijente, te imunološke reakcije mogu biti neprijatne, dok za druge, imunološke reakcije kao što su osip ili proliv mogu rezultirati u nemogućnosti nastavka lečenja. Iako pokretačka snaga iza tih imunoloških reakcija do sada nije potpuno razjašnjena, te imunološke reakcije su verovatno povezane s imunim infiltratom.
[0022] Inhibitori Janus kinaza ili srodnih kinaza su široko istraživani, i nekoliko dokumenata izveštava o efikasnosti te klase jedinjenja. Na primer, određeni inhibitori su navedeni u dokumentima WO 99/65909, US 2004/0198737; WO 2004/099204; WO 2004/099205; i WO 01/42246. Heteroaril supstituisani piroli i druga jedinjenja su navedeni u WO 2004/72063 i WO 99/62908.
[0023] Zbog toga su stalno potrebna nova ili poboljšana sredstva koja inhibiraju kinaze kao Janus kinazu, koja deluju kao imunosupresivna sredstva kod transplantacije organa, kao i sredstva za prevenciju i lečenje autoimunih bolesti (npr., multipla skleroza, reumatoidni artritis, astma, dijabetes tipa I, zapaljenska bolest creva, Kronova bolest, autoimuni poremećaj štitnjače, Alchajmerova bolest), bolesti koje uključuju hiperaktivni zapaljenski odgovor (npr., ekcem), alergije, rak (npr. prostate, leukemiju, multipli mijelom), i neke imune reakcije (npr., kožni osip ili kontaktni dermatitis ili proliv) uzrokovane drugim lekovima. Jedinjenja, pripravci i postupci koji su ovde opisani usmereni su prema tim i drugim potrebama.
SUŠTINA PRONALASKA
[0024] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje, koje je 3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo [2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril, gde je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom ili njegova farmaceutski prihvatljiva so .
[0025] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na kompozicije koje sadrže 3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo [2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril, gde je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so.
DETALJAN OPIS
[0026] Predmetni pronalazak pruža, među ostalim, jedinjenja koja moduliraju jednu ili više JAK i koja su korisna, na primer, kod lečenja bolesti povezanih sa ekspresijom ili aktivnosti JAK. Jedinjenje prema pronalasku je 3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo [2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril gde je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom uključujći njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0027] Takođe su ovde opisana jedinjenja koja imaju formulu I:
uključujući njegove farmaceutski prihvatljive oblike soli, gde:
A<1>i A<2>su nezavisno izabrani između C i N;
T, U, i V su nezavisno izabrani između O, S, N, CR<5>, i NR<6>;
gde 5-člani prsten obrazovan sa A<1>, A<2>, U, T, i V je aromatičan;
X je N ili CR<4>;
Y je C1-8alkilen, C2-8alkenilen, C2-8alkinilen, (CR<11>R<12>)p-(C3-10cikloalkilen)-(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)p-(arilen)-(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)p-(C1-10heterocikloalkilen)-(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)p-(heteroarilen)-(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pO(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pS(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pC(O)(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pC(O)NR<c>(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pC(O)O(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pOC(O)(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pOC(O)NR<c>(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pNR<c>(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pNR<c>C(O)NR<d>(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pS(O)(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pS(O)NR<c>(CR<11>R<12>)q, (CR<11>R<12>)pS(O)2(CR<11>R<12>)q, ili (CR<11>R<12>)pS(O)2NR<c>(CR<11>R<12>)q, gde pomenuti C1-8alkilen, C2-8alkenilen, C2-8alkinilen, cikloalkilen, arilen, heterocikloalkilen, ili heteroarilen, je opciono supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana između -D<1>-D<2>-D<3>-D<4>;
Z je H, halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, =C-R<i>, =N-R<i>, Cy<1>, CN, NO2, OR<a>, SR<a>, C(O)R<b>, C(O)NR<c>R<d>, C(O)OR<a>, OC(O)R<b>, OC(O)NR<c>R<d>, NR<c>R<d>, NR<c>C(O)R<b>, NR<c>C(O)NR<c>R<d>, NR<c>C(O)OR<a>, C(=NR<i>)NR<c>R<d>, NR<c>C(=NR<i>)NR<c>R<d>, S(O)R<b>, S(O)NR<c>R<d>, S(O)2R<b>, NR<c>S(O)2R<b>, C(=NOH)R<b>, C(=NO(C1-6alkil)R<b>, i S(O)2NR<c>R<d>, gde pomenuti C1-8alkil, C2-8alkenil, ili C2-8alkinil, je opciono supstituisan sa 1, 2, 3, 4, 5, ili 6 supstituenata nezavisno izabranih između halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, Cy<1>, CN, NO2, OR<a>, SR<a>, C(O)R<b>, C(O)NR<c>R<d>, C(O)OR<a>, OC(O)R<b>, OC(O)NR<c>R<d>, NR<c>R<d>, NR<c>C(O)R<b>, NR<c>C(O)NR<c>R<d>, NR<c>C(O)OR<a>, C(=NR<i>)NR<c>R<d>, NR<c>C(=NR<i>)NR<c>R<d>, S(O)R<b>, S(O)NR<c>R<d>, S(O)2R<b>, NR<c>S(O)2R<b>, C(=NOH)R<b>, C(=NO(C1-6alkil))R<b>, and S(O)2NR<c>R<d>;
gde kad Z je H, n je 1;
ili -(Y)n-Z deo uzet zajedno sa i) A<2>za koji je deo vezan, ii) R<5>ili R<6>od bilo kog T ili V, i iii) C ili N atom za koji R<5>ili R<6>bilo kog od T ili V je vezan da obrazuje 4-do 20-člani aril, cikloalkil, heteroaril, ili heterocikloalkilni prsten spojen za 5-članim prstenom obrazovanim od A<1>, A<2>, U, T, i V, gde pomenuti 4-do 20-člani aril, cikloalkil, heteroaril, ili heterocikloalkilni prsten je opciono susptituisan sa 1, 2, 3, 4, ili 5 supstituenata nezavisno izabranih između -(W)m-Q; W je C1-8alkilenil, C2-8alkenilenil, C2-8alkinilenil, O, S, C(O), C(O)NR<c’>, C(O)O, OC(O), OC(O)NR<c’>, NR<c’>, NR<c’>C(O)NR<d’>, S(O), S(O)NR<c’>, S(O)2, ili S(O)2NR<c’>;
Q je H, halo, CN, NO2, C1-8alkil, C2-8alkenil, C2-8alkinil, C1-8haloalkil, halosulfanil, aril, cikloalkil, heteroaril, ili heterocikloalkil, gde pomenuti C1-8alkil, C2-8alkenil, C2-8alkinil, C1-8haloalkil, aril, cikloalkil, heteroaril, ili heterocikloalkil je opciono supstituisan sa 1, 2, 3 ili 4 supstituenta nezavisno izabrana između halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, Cy<2>, CN, NO2, OR<a’>, SR<a’>, C(O)R<b’>, C(O)NR<c’>R<d’>, C(O)OR<a’>, OC(O)R<b’>, OC(O)NR<c’>R<d’>, NR<c’>R<d’>, NR<c’>C(O)R<b’>, NR<c’>C(O)NR<c’>R<d’>, NR<c’>C(O)OR<a’>, S(O)R<b’>, S(O)NR<c’>R<d>, S(O)2R<b’>, NR<c’>S(O)2R<b’>, i S(O)2NR<c’>R<d’>;
Cy<1>i Cy<2>su nezavisno izabrani između aril, heteroaril, cikloalkil, i heterocikloalkil, svaki opciono supstituisan sa 1, 2, 3, 4 ili 5 supstituenata nezavisno izabranih između halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, CN, NO2, OR<a">, SR<a">, C(O)R<b">, C(O)NR<c">R<d">, C(O)OR<a">, OC(O)R<b">, OC(O)NR<c">R<d">, NR<c">R<d">, NR<c">C(O)R<b">, NR<c">C(O)OR<a">, NR<c">S(O)R<b">, NR<c">S(O)2R<b">, S(O)R<b">, S(O)NR<c">R<d">, S(O)2R<b">, i S(O)2NR<c">R<d">;
R<1>, R<2>, R<3>, i R<4>su nezavisno izabrani između H, halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, CN, NO2, OR<7>, SR<7>, C(O)R<8>, C(O)NR<9>R<10>, C(O)OR<7>OC(O)R<8>, OC(O)NR<9>R<10>, NR<9>R<10>, NR<9>C(O)R<8>, NR<c>C(O)OR<7>, S(O)R<8>, S(O)NR<9>R<10>, S(O)2R<8>, NR<9>S(O)2R<8>, i S(O)2NR<9>R<10>;
R<5>je H, halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, CN, NO2, OR<7>, SR<7>, C(O)R<8>, C(O)NR<9>R<10>, C(O)OR<7>, OC(O)R<8>, OC(O)NR<9>R<10>, NR<9>R<10>, NR<9>C(O)R<8>, NR<9>C(O)OR<7>, S(O)R<8>, S(O)NR<9>R<10>, S(O)2R<8>, NR<9>S(O)2R<8>, ili S(O)2NR<9>R<10>;
R<6>je H, C1-4alkil, C24alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, OR<7>, C(O)R<8>, C(O)NR<9>R<10>, C(O)OR<7>, S(O)R<8>, S(O)NR<9>R<10>, S(O)2R<8>, ili S(O)2NR<9>R<10>;
R<7>je H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil;
R<8>je H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil;
R<9>i R<10>su nezavisno izabrani između H, C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, C1-6alkilkarbonil, arilkarbonil, C1-6alkilsulfonil, arilsulfonil, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil i heterocikloalkilalkil;
ili R<9>i R<10>zajedno sa N atom za koji su vezani obrazuju 4-, 5-, 6-ili 7-članu heterocikloalkil grupu;
R<11>i R<12>su nezavisno izabrani između H i -E<1>-E<2>-E<3>-E<4>;
D<1>i E<1>su nezavisno odsutni ili nezavisno izabrani između C1-6alkilen, C2-6alkenilen, C2-6alkinilen, arilen, cikloalkilen, heteroarilen, i heterocikloalkilen, gde svaki od C1-6alkilen, C2-6alkenilen, C2-6alkinilen, arilen, cikloalkilen, heteroarilen, i heterocikloalkilen je opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nazavisno izabranih između halo, CN, NO2, N3, SCN, OH, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-8alkoksialkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, amino, C1-6alkilamino, i C2-8dialkilamino;
D<2>i E<2>su nezavisno odsutni ili nezavisno izabrani između C1-6alkilen, C2-6alkenilen, C2-6alkinilen, (C1-6alkilen)r-O-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-S-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-NR<e>-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-CO-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-COO-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-CONR<e>-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-SO-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-SO2-(C1-6alkilen)s, (C1-6alkilen)r-SONR<e>-(C1-6alkilen)s, i (C1-6alkilen)-NR<e>CONR<f>-(C1-6alkilene), gde svaki od C1-6alkilen, C2-6alkenilen, i C2-6alkinilen je opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno izabrana između halo, CN, NO2, N3, SCN, OH, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-8alkoksialkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, amino, C1-6alkilamino, i C2-8dialkilamino;
D<3>i E<3>su nezavisno odsutni ili nezavisno izabrani između C1-6alkilen, C2-6alkenilen, C2-6alkinilen, arilen, cikloalkilen, heteroarilen, i heterocikloalkilen, gde svaki od C1-6alkilen, C2-6alkenilen, C2-6alkinilen, arilen, cikloalkilen, heteroarilen, i heterocikloalkilen je opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno izabrana između halo, CN, NO2, N3, SCN, OH, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-8alkoksialkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, amino, C1-6alkilamino, i C2-8dialkilamino;
D<4>i E<4>su nezavisno izabrani između H, halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, Cy<1>, CN, NO2, OR<a>, SR<a>, C(O)R<b>, C(O)NR<c>R<d>, C(O)OR<a>, OC(O)R<b>, OC(O)NR<c>R<d>, NR<c>R<d>, NR<c>C(O)R<b>, NR<c>C(O)NR<c>R<d>, NR<c>C(O)OR<a>, C(=NR<i>)NR<c>R<d>, NR<c>C(=NR<i>)NR<c>R<d>, S(O)R<b>, S(O)NR<c>R<d>, S(O)2R<b>, NR<c>S(O)2R<b>, C(=NOH)R<b>, C(=NO(C1-6alkil)R<b>, i S(O)2NR<c>R<d>, gde pomenuti C1-8alkil, C2-8alkenil, ili C2-8alkinil, je opciono supstituisan sa 1, 2, 3, 4, 5, ili 6 supstituenta nezavisno izabranih između halo, C1-4alkil, C2-4alkenil, C2-4alkinil, C1-4haloalkil, halosulfanil, C1-4hidroksialkil, C1-4cijanoalkil, Cy<1>, CN, NO2, OR<a>, SR<a>, C(O)R<b>, C(O)NR<c>R<d>, C(O)OR<a>, OC(O)R<b>, OC(O)NR<c>R<d>, NR<c>R<d>, NR<c>C(O)R<b>, NR<c>C(O)NR<c>R<d>, NR<c>C(O)OR<a>, C(=NR<i>)NR<c>R<d>, NR<c>C(=NR<i>)NR<c>R<d>, S(O)R<b>, S(O)NR<c>R<d>, S(O)2R<b>, NR<c>S(O)2R<b>, C(=NOH)R<b>, C(=NO(C1-6alkil))R<b>, i S(O)2NR<c>R<d>;
R<a>je H, Cy<1>, -(C1-6alkil)-Cy<1>, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, gde pomenuti C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, ili C2-6alkinil je opciono supstitusian sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranih između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<b>je H, Cy<1>, -(C1-6alkil)-Cy<1>, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, gde pomenuti C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, ili C2-6alkinil je opciono supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranih između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<a’>i R<a">su nezavisno izabrani između H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil and heterocikloalkilalkil, gde pomenuti C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil je opcion supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranih između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<b’>i R<b">su nezavisno izabrani između H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil i heterocikloalkilalkil, gde pomenuti C1-6alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, cikloalkil, heteroaril, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil je opciono supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<c>i R<d>su nezavisno izabrani između H, Cy<1>, -(C1-6alkil)-Cy<1>, C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, gde pomenuti C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, ili C2-6alkinil, je opciono supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranih između Cy<1>, -(C1-6alkil)-Cy<1>, OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, i halosulfanil;
ili R<c>i R<d>zajedno sa N atom za koji su vezani obrazuju 4-, 5-, 6-ili 7-članu heterocikloalkil grupu opciono supstituisanu sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno ozabranih između Cy<1>, -(C1-6alkil)-Cy<1>, OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, i halosulfanil;
R<c’>i R<d’>su nezavisno izabrani između H, C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil i heterocikloalkilalkil, gde pomenuti C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil je opciono supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranih između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
ili R<c’>i R<d’>zajedno sa N atomom za koji su vezani obrazuju 4-, 5-, 6-ili 7-članu heterocikloalkil grupu opciono supstitusianu sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<c">i R<d>su nezavisno izabrani između H, C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil i heterocikloalkilalkil, gde pomenuti C1-10alkil, C1-6haloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkilalkil ili heterocikloalkilalkil je opciono supstitusian sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabranim između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, C1-6haloalkil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
ili R<c">i R<d">zajedno sa N atomom za koji su vezani obrazuju 4-, 5-, 6-ili 7-članu heterocikloalkil grupu opciono supstituisanu sa 1, 2, ili 3 supstituenata nezavisno izabranih između OH, CN, amino, halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkil, halosulfanil, aril, arilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, cikloalkil i heterocikloalkil;
R<i>je H, CN, NO2, ili C1-6alkil;
R<e>i R<f>su nezavisno izabrani između H i C1-6alkil;
R<i>je H, CN, ili NO2;
m je 0 ili 1;
n je 0 ili 1;
p je 0, 1, 2, 3, 4, 5,ili 6;
q je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ii 6;
r je 0 ili 1; i
s je 0 ili 1.
[0028] Na različitim mestima u ovom opisu, supstituenti jedinjenja prikazani su u grupama ili u opsezima. Posebno je nameravano da pronalazak uključuje svaki, i svaku pojedinačnu podkombinaciju članova tih grupa i obima. Na primer, izraz "C1-6alkil" je posebno namenjen da se pojedinačno prikaže metil, etil, C3alkil, C4alkil, C5alkil, i C6alkil.
[0029] Dodatno se smatra vrednim da se određene funkcije pronalaska, koje su, radi jasnoće, opisane u kontekstu zasebnih ostvarenja, mogu izvesti u kombinaciji u jednom ostvarenju. Isto tako, različite funkcije pronalaska koje su, radi sažetosti, opisane u kontekstu jednog ostvarenja, mogu se izvesti odvojeno ili u bilo kojoj prikladnoj podkombinaciji.
[0030] Na raznim mestima u ovoj specifikaciji, opisano je povezivanje supstituenata. Posebno je nameravano da svako povezivanje supstituenta uključuje oba oblika povezivanja supstituenta napred i nazad. Na primer, -NR(CR'R")n- uključuje oboje NR(CR'R")ni -(CR'R")nNR-. Gde struktura jasno zahteva povezivanje grupe, Markush promenljive navedene za tu grupu se shvataju da su vezivne grupe. Na primer, ako struktura zahteva vezivnu grupu i definicija Markush grupe za tu promenljivu navodi "alkil" ili "aril" tada se shvata da "alkil" ili "aril" predstavlja odgovarajuću vezivnu alkilensku grupu ili arilensku grupu, respektivno.
[0031] Izraz "n-člani" gde je n celi broj tipično opisuje broj atoma koji formiraju prsten u grupi gde je n broj atoma koji formiraju prsten. Na primer, piperidinil je primer 6-članog heterocikloalkilnog prstena i 1,2,3,4-tetrahidro-naftalen je primer 10-člane cikloalkilne grupe.
[0032] Kako se ovde koristi, izraz "alkil" je nameravan da se odnosi na zasićenu grupu ugljovodonika koja je ravnog-lanca ili razgranata. Primeri alkilnih grupa uključuju metil (Me), etil (Et), propil (npr., npropil i izopropil), butil (npr., n-butil, izobutil, t-butil), pentil (npr., n-pentil, izopentil, neopentil) i slične. Alkilna grupa može sadržavati od 1 do oko 20, od 2 do oko 20, od 1 do oko 10, od 1 do oko 8, od 1 do oko 6, od 1 do oko 4, ili od 1 do oko 3 atoma ugljenika. Vezivna alkilna grupa se ovde spominje kao "alkilen".
[0033] Kako se ovde koristi, "alkenil" se odnosi na alkilnu grupu koja ima jednu ili više dvostrukih ugljenik-ugljenik veza. Primeri alkenilnih grupa uključuju etenil, propenil, cikloheksenil i slične. Vezivna alkenilna grupa se ovde spominje kao "alkenilen".
[0034] Kako se ovde koristi, "alkinil" se odnosi na alkilnu grupu koja ima jednu ili više trostrukih ugljenik-ugljenik veza. Primeri alkinilnih grupa uključuju etinil, propinil, i slične. Vezivna alkinilna grupa se ovde spominje kao "alkinilen".
[0035] Kako se ovde koristi, "haloalkil" se odnosi na alkil grupu koja ima jedan ili više halogenih supstituenata. Primeri haloalkil grupa uključuju CF3, C2F5, CHF2, CCl3, CHCl2, C2Cl5, i slične.
[0036] Kako se ovde koristi, "halosulfanil" se odnosi na sumpornu grupu koja ima jedan ili više halogenih supstituenata. Primeri halosulfanilnih grupa uključuju pentahalosulfanilne grupe kao SF5.
[0037] Kako se ovde koristi, "aril" se odnosi na monociklične ili policiklične (npr., koji imaju 2, 3 ili 4 kondenzovana prstena) aromatske ugljovodonike kao, na primer, fenil, naftil, antracenil, fenantrenil, indanil, indenil i slične. U nekim ostvarenjima, arilne grupe imaju od 6 do oko 20 atoma ugljenika. Vezivna arilna grupa se ovde spominje kao "arilen".
[0038] Kako se ovde koristi, "cikloalkil" se odnosi na ne-aromatske ciklične ugljovodonike koji uključuju ciklizirane alkilne, alkenilne, i alkinilne grupe. Cikloalkilne grupe mogu uključivati mono- ili policiklične (npr., koje imaju 2, 3 ili 4 kondenzovana prstena) grupe i spirocikle. Atomi ugljenika koji formiraju prsten cikloalkilne grupe mogu biti proizvoljno supstituisani sa okso ili sulfido. Cikloalkilne grupe takođe uključuju cikloalkilidene. Primeri cikloalkilnih grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklopentenil, cikloheksenil, cikloheksadienil, cikloheptatrienil, norbornil, norpinil, norkarnil, adamantil i slične. U definiciju cikloalkila su takođe uključene grupe koje imaju jedan ili više kondenzovanih aromatskih prstena (tj., koje imaju zajedničku vezu) sa cikloalkilnim prstenom, na primer, benzo ili tienil derivati pentana, pentena, heksana, i slično. Cikloalkilna grupa koja sadrži kondenzovani aromatski prsten može biti povezana pomoću bilo kog atoma koji formira prsten uključujući atom koji formira prsten kondenzovanog aromatskog prstena. Vezivna cikloalkilna grupa se ovde spominje kao "cikloalkilen".
[0039] Kako se ovde koristi, "heteroaril" se odnosi na aromatski heterocikal koji ima barem jedan član heteroatomskog prstena kao što su sumpor, kiseonik ili azot. Heteroarilne grupe uključuju mono- ili policiklične sisteme (npr., koji imaju 2, 3 ili 4 kondenzovana prstena). Primeri heteroarilnih grupa uključuju bez ograničenja, piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, triazinil, furil, kinolil, izokinolil, tienil, imidazolil, tiazolil, indolil, piril, oksazolil, benzofuril, benzotienil, benztiazolil, izoksazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, indazolil, 1,2,4-tiadiazolil, izotiazolil, benzotienil, purinil, karbazolil, benzimidazolil, indolinil i slične. U nekim ostvarenjima, heteroarilna grupa ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, i u daljim ostvarenjima od oko 3 do oko 20 atoma ugljenika. U nekim ostvarenjima, heteroarilna grupa sadrži 3 do oko 14, 4 do oko 14, 3 do oko 7 ili 5 do 6 atoma koji formiraju prsten. U nekim ostvarenjima, heteroarilna grupa ima 1 do oko 4, 1 do oko 3 ili 1 do 2 heteroatoma. Vezivna heteroarilna grupa se ovde pominje kao "heteroarilen".
[0040] Kako se ovde koristi, "heterocikloalkil" se odnosi na ne-aromatske heterocikle koji uključuju ciklizirane alkilne, alkenilne, i alkinilne grupe gde je jedan ili više atoma ugljenika koji formiraju prsten zamenjeno sa heteroatomom kao što je O, N, ili S atom. Heterocikloalkilne grupe uključuju monociklične i policiklične sisteme (npr., koji imaju 2, 3 ili 4 kondenzovana prstena) kao i spirocikle. Primeri "heterocikloalkilnih" grupa uključuju morfolin, tiomorfolin, piperazinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, 2,3-dihidrobenzofuril, 1,3-benzodioksol, benzo-1,4-dioksan, piperidinil, pirolidinil, izoksazolidinil, izotiazolidinil, pirazolidinil, oksazolidinil, tiazolidinil, imidazolidinil i slične. Atomi ugljenika koji formiraju prsten i heteroatomi heterocikloalkilne grupe mogu biti proizvoljno supstituisani sa okso ili sulfido. U definiciju heterocikloalkila su takođe uključene grupe koje imaju jedan ili više kondenzovanih aromatskih prstena (tj., koje imaju zajedničku vezu) sa nearomatskim heterocikličnim prstenom, na primer ftalimidil, naftalimidil, pa benzo derivati heterocikala. Heterocikloalkilna grupa može biti spojena na atom ugljenika koji formira prsten ili na heteroatom koji formira prsten. Heterocikloalkilna grupa koja sadrži kondenzovani aromatski prsten može biti spojena na bilo koji atom koji formira prsten uključujući atom koji formira prsten kondenzovanog aromatskog prstena. U nekim ostvarenjima, heterocikloalkilna grupa ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, i u daljim ostvarenjima od oko 3 do oko 20 atoma ugljenika. U nekim ostvarenjima, heterocikloalkilna grupa sadrži 3 do oko 14, 4 do oko 14, 3 do oko 7, ili 5 do 6 atoma koji formiraju atome prstena. U nekim ostvarenjima, heterocikloalkilna grupa ima 1 do oko 4, 1 do oko 3, ili 1 do 2 heteroatoma. U nekim ostvarenjima, heterocikloalkilna grupa sadrži 0 do 3 dvostruke ili trostruke veze. U nekim ostvarenjima, heterocikloalkilna grupa sadrži 0 do 2 dvostruke ili trostruke veze. Vezivna heterocikloalkilna grupa se ovde pominje kao "heterocikloalkilen".
[0041] Kako se ovde koriste, izrazi "halo" ili "halogen" uključuju fluoro, hloro, bromo, i jodo.
[0042] Kako se ovde koristi, "arilalkil" se odnosi na alkil supstituisan sa arilom i "cikloalkilalkil" se odnosi na alkil supstituisan sa cikloalkilom. Primer arilalkilne grupe je benzil.
[0043] Kako se ovde koristi, "heteroarilalkil" se odnosi na alkil supstituisan sa heteroarilom i "heterocikloalkilalkil" se odnosi na alkil supstituisan sa heterocikloalkilom.
[0044] Kako se ovde koristi, "amino" se odnosi na NH2.
[0045] Kako se ovde koristi, "alkilamino" se odnosi na amino grupu supstituisanu sa alkilnom grupom.
[0046] Kako se ovde koristi, "dialkilamino" se odnosi na amino grupu supstituisanu sa dve alkilne grupe.
[0047] Kako se ovde koristi, "hidroksilalkil" se odnosi na alkilnu grupu supstituisanu sa hidroksilom.
[0048] Kako se ovde koristi, "cijanoalkil" se odnosi na alkilnu grupu supstituisanu sa cijano. Ugljenik iz cijano grupe se uobičajeno ne broji ako broj ugljenika prethodi izrazu. Na primer, za cijanometil se smatra da je ovde C1cijanoalkilna grupa.
[0049] Ovde opisana jedinjenja mogu biti asimetrična (npr., koja imaju jedan ili više stereocentara). Svi stereoizomeri, kao enantiomeri i diastereomeri su nameravani, osim ako nije drugačije naznačeno.Jedinjenja prema predmetnom pronalasku koja sadrže asimetrično supstituisane atome ugljenika mogu biti izolovana u optički aktivnim ili racemičnim oblicima. Postupci za dobijanje optički aktivnih oblika iz optički aktivnih početnih materijala su poznati u stanju tehnike, kao što je rastvaranje racemičnih mešavina ili stereoselektivna sinteza. Mnogi geometrijski izomeri olefina, C=N dvostrukih veza i slični mogu takođe biti prisutni u ovde opisanim jedinjenjima, pa se svi takvi stabilni izomeri razmatraju u predmetnom pronalasku. Opisani su cis i trans geometrijski izomeri jedinjenja prema predmetnom pronalasku i mogu biti izolovani kao mešavina izomera ili kao odvojene izomerne forme.
[0050] Rastvaranje racemičnih mešavina jedinjenja može se sprovoditi bilo kojim od brojnih postupaka poznatih u stanju tehnike. Primer postupka uključuje frakcijsku rekristalizaciju pomoću kiralne kiseline za rastvaranje koja je optički aktivna organska kiselina koja formira so. Pogodna sredstva za postupke frakcijske rekristalizacije su, na primer, optički aktivne kiseline, kao što su D i L forme vinske kiseline, diacetilvinska kiselina, dibenzoilvinska kiselina, bademska kiselina, jabučna kiselina, mlečna kiselina ili različite optički aktivne kamforsulfonske kiseline kao što je βkamforsulfonska kiselina. Ostala sredstva za rastvaranje koja su pogodna za postupke frakcijske rekristalizacije uključuju stereoizomerno čiste forme α-metilbenzilamina (npr., S i R oblike, ili diastereomerno čiste forme), 2-fenilglicinol, norefedrin, efedrin, N-metilefedrin, cikloheksiletilamin, 1,2-diaminocikloheksan i slične.
[0051] Rastvaranje racemičnih mešavina jedinjenja može se takođe sprovoditi pomoću eluiranja na koloni ispunjenoj sa optički aktivnim sredstvom za rastvaranje (npr., dinitrobenzoilfenilglicinom). Pogodan sastav rastvarača za eluiranje može odrediti stručnjak na ovom području.
[0052] Jedinjenja prema pronalasku takođe uključuju tautomerne oblike. Tautomerni oblici rezultiraju iz zamene jednostruke veze sa susednom dvostrukom vezom zajedno sa pratećom migracijom protona. Tautomerni oblici uključuju prototropne tautomere koji su izomerna protonirajuća stanja koja imaju istu empirijsku formulu i ukupan naboj. Primer prototropnih tautomera uključuje parove keton-enol, parove amid-imidna kiselina, parove laktam-laktim, parove amid-imidna kiselina, parove enamin-imin, zatim prstenaste forme gde proton može zauzeti dva ili više položaja heterocikličnog sistema, na primer, 1H- i 3H-imidazol, 1H-, 2H- i 4H- 1,2,4-triazol, 1H- i 2H-izoindol, te 1H i 2H-pirazol. Tautomerni oblici mogu biti u ravnoteži ili sterično zaključani u jednu formu pomoću odgovarajuće supstitucije.
[0053] Jedinjenja prema pronalasku dalje uključuju hidrate i solvate, kao i bezvodne i ne-rastvorene oblike.
[0054] Jedinjenja prema pronalasku mogu takođe uključivati sve izotope atoma koji se javljaju u intermedijarima ili konačnim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj ali različite masene brojeve. Na primer, izotopi vodonika uključuju tricijum i deuterijum.
[0055] U nekim ostvarenjima, jedinjenja prema pronalasku i njihove soli, su u osnovi izolovani. Izraz "u osnovi izolovani " znači da je jedinjenje barem delimično ili znatno separirano iz okoline u kojoj je formirano ili detektirano. Delimična separacija može uključivati, na primer, pripravak obogaćen sa jedinjenjem prema pronalasku. Znatna separacija može uključivati pripravke koji sadrže barem oko 50%, barem oko 60%, barem oko 70%, barem oko 80%, barem oko 90%, barem oko 95%, barem oko 97%, ili barem oko 99% težinskih jedinjenja prema pronalasku ili njihove soli. Postupci za izolaciju jedinjenja i njihovih soli su rutinski poznati u stanju tehnike.
[0056] Izrazi, "okolišna temperatura" i "sobna temperatura," kako se ovde koriste, su poznati u ovom području i uopšteno se odnose na temperaturu, t.j. na reakcijsku temperaturu, koja je oko temperature prostorije u kojoj se sprovodi reakcija, na primer, temperatura od oko 20°C do oko 30°C.
[0057] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde odnosi na ona jedinjenja, materijale, pripravke, i/ili oblike doziranja koji su, u obimu razumne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez preterane toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnoj razmeri korist/rizik.
[0058] Predmetni pronalazak takođe uključuje farmaceutski prihvatljive soli ovde opisanih jedinjenja. ako se ovde koristi, izraz "farmaceutski prihvatljive soli" se odnosi na derivate izloženih jedinjenja pri čemu je matično jedinjenje modifikovano konverzijom postojeće kiselinske ili bazne grupe u njen oblik soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralne ili organske kisele soli bazičnih ostataka kao amina; alkalne ili organske soli kiselinskih ostataka kao karboksilnih kiselina; i slično. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom pronalasku uključuju uobičajene ne-toksične soli formiranog matičnog jedinjenja, na primer, od ne-toksičnih anorganskih ili organskih kiselina. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom pronalasku mogu biti sintetizovane od matičnog jedinjenja koje sadrži baznu ili kiselu grupu pomoću uobičajenih hemijskih postupaka. Uopšteno, takve se soli mogu pripremiti pomoću reakcije slobodnog oblika kiseline ili baze tih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u njihovoj mešavini; uopšteno, su poželjni ne-vodeni mediji kao etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril (MeCN). Popis odgovarajućih soli se nalazi u Remington Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977).
Sinteza
[0059] Jedinjenja se prema pronalasku, uključujući njihove soli, mogu pripremiti korišćenjem poznatih postupaka organske sinteze i mogu biti sintetizovana prema bilo kom od brojnih mogućih postupaka sinteze.
[0060] Reakcije za pripremanje jedinjenja prema pronalasku se mogu sprovesti u odgovarajućim rastvaračima koji se mogu lako odabrati od strane osobe stručne na području organske sinteze. Pogodni rastvarači mogu biti u biti nereaktivni sa početnim materijalima (reaktantima), intermedijarima ili produktima na temperaturama na kojima se sprovode reakcije, npr., na temperaturama koje su u rasponu od temperature smrzavanja rastvarača do temperature ključanja rastvarača. Data reakcija se može sprovoditi u jednom rastvaraču ili mešavini više od jednog rastvarača. Zavisno od pojedinog reakcijskog koraka, pogodni rastvarači za određeni reakcijski korak mogu biti odabrani od strane veštog stručnjaka.
[0061] Dobijanje jedinjenja prema pronalasku može uključivati zaštitu i deprotektiranje različitih hemijskih grupa. Potrebu za zaštitom i deprotektiranjem, i izbor odgovarajućih zaštitnih grupa, može utvrditi stručnjak na ovom području. Hemija zaštitnih grupa može se pronaći, na primer, u T.W. Green and P.G.M. Wuts, Protective Skupine in Organic Synthesis, 3rd. Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999).
[0062] Reakcije se mogu pratiti pomoću bilo kog prikladnog postupka poznatog u tehnici. Na primer, formiranje produkta se može pratiti pomoću sredstava za spektroskopiju, kao što su nuklearna magnetska rezonantna spektroskopija (npr.,<1>H ili<13>C) infracrvena spektroskopija, spektrometrija (npr., UV-vidljivom), ili spektrometrija masa, ili pomoću hromatografije kao što je tečna hromatografija visokog efekta(HPLC) ili tankoslojna hromatografija.
[0063] Jedinjenja prema pronalasku mogu se pripremiti prema brojnim putevima pripreme poznatim u literaturi. Primeri postupaka sinteze za dobijanje jedinjenja izneti su u dole navedenim Shemama.
[0064] Kako je prikazano u Shemi 1, jezgra koja sadrže pirazol 1-9 i 1-6 mogu biti sintetizovana počevši sa pirolo[2,3-b]piridinom ili pirolo[2,3-b]pirimidinom 1-1. Jedinjenje 1-1 može biti konvertirano u aktivne vrste kao što je N-oksidni analog (1-2) korišćenjem oksidansa kao što je m-CPBA. N-oksid 1-2 može biti halogeniran sa sredstvom za halogeniranje kao što je kombinacija tetrametilamonijumovog bromida i metansulfonskog anhidrida da se formira 4-halo jedinjenje 1-3 kao što je 4-bromo jedinjenje dok je N-oksid istovremeno redukovan. Aminska grupa jedinjenja 1-3 može biti zaštićena pomoću pogodne aminske zaštitne grupe da se dobije zaštićeno jedinjenje 1-7, koje se naknadno podvrgava Suzuki reakciji sa bornom kiselinom 1-8 da se dobiju jezgra koja sadrže pirazol 1-9a koja dalje mogu reagovati sa reagensom L-(Y)n-Z (gde je L odlazna grupa) do dobijanja jedinjenja 1-9b. Alternativno, N-oksid 1-2 može biti halogeniran sa sredstvom za halogeniranje kao što je MeSO2Cl da se formira 4-halo jedinjenje 1-4 kao što je 4-hloro jedinjenje dok je N-oksid istovremeno redukovanan. 4-halo jedinjenje 1-4 može biti spareno sa bromo-supstituisanim pirazolom jedinjenjem 1-5 pod povoljnim uslovima kao što je grejanje da se dobije jezgro koje sadrži pirazol 1-6, koje može sadržavati neke funkcionalne grupe kao što su bromo ili cijano pogodne za dalju hemijsku modifikaciju.
[0065] Slično, imidazol jezgro 1-11 može biti sintetizovano sparivanjem 4-halo jedinjenja 1-4 sa derivatom imidazola 1-10 pod povoljnim uslovima kao što je grejanje da se dobije jezgro koje sadrži imidazol 1-11, koje može sadržavati neke funkcionalne grupe kao što su bromo ili cijano pogodne za dalju hemijsku modifikaciju.
[0066] Kako je prikazano u Shemi 2, jezgra koje sadrže pirazol 2-3, 2-5 i 2-6 mogu biti sintetizovana počevši sa bromo-supstituisanim derivatom pirazola 2-1 (jedinjenje 1-6 u Shemi 1 pri čemu je jedan od R<5>
[0067] Br). Bromo-supstituisani derivat pirazola 2-1 može reagovati sa aromatskim specijama koje sadrže bor kao što je aromatska borna kiselina 2-2 uz korišćenje Suzuki reakcije pri čemu je Ar aril ili heteroaril, svaki od kojih može biti proizvoljno supstituisan sa jednim ili više supstituenata kao što su alkil, aril, CN, nitro, alkoksi, itd. Alternativno, jedinjenje koji sadrži alken- ili alkin- kao što je jedinjenje koje sadrži alken 2-5 može biti dobijeno reakcijom bromo-supstituisanog derivata pirazola 2-1 sa nezasićenim jedinjenjem kao što je alken 2-4 u prisustvu metalnog katalizatora kao što je bis(trifenilfosfin)paladijum (II hlorid pri čemu t može biti 0, 1, 2, i slično; R može biti supstituent kao što je alkil, aril, CN, nitro, alkoksi, itd. Alkenska grupa jedinjenja 2-5 može biti redukovana hidrogenacijom da se dobije odgovarajućie jedinjenje 2-6.
[0068] Kako je prikazano u Shemi 3, jezgra koja sadrže imidazol 3-7 mogu biti sintetizovana počevši sa N-zaštićenim 4-bromo-pirolo[2,3-b]piridinom ili N-zaštićenim 4-bromo-pirolo[2,3-b]pirimidinom 3-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je {[2-(trimetilsilil)etoksi]metil} (SEM). Jedinjenje 3-1 može reagovati sa Grignardovim reagensom kao što je izopropil magnezijum hlorid da se dobije aromatski anjon pomoću jonske izmene. Naknadna adicija jedinjenja koje sadrži hloroacetil kao što je 2-hloro-N-metoksi-N-metilacetamid 3-2 sa anjonom će tipično dati derivat hloroacetila 3-3.
Derivat 3-3 može reagovati sa soli organske kiseline kao što je cezijumova so R<5>CO2Cs da se dobije jedinjenje 3-4. U prisustvu pogodnog izvora amonijaka kao što je amonijum acetat, jedinjenje 3-4 može reagovati sa amonijakom pod povoljnim uslovima kao što je to kod visoke temperature da se formira imidazolni prsten jedinjenja 3-5. Slobodni azotov amin derivata imidazola 3-5 može biti dalje podvrgnut modifikaciji kao što je reakcija sa jedinjenjem X-(Y)n-Z gde je X odlazna grupa kao što je hloro, bromo ili jodo tako da se dobije jedinjenje 3-6. Zaštitna grupa jedinjenja 3-6 može biti uklonjena pomoću odgovarajućeg postupka u skladu sa prirodom zaštitne grupe da se dobije jedinjenje 3-7. Valja napomenuti da, ako postoje funkcionalne grupe prisutne unutar R, R<5>, i -(Y)n-Z grupe, može se sprovoditi dalja modifikacija. Na primer, CN grupa može biti hidrolizovana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat može biti dalje redukovan u alkohol, koji zauzvrat može biti dalje modifikovan. Stručnjak na ovom području će prepoznati odgovarajuće dalje modifikacije.
[0069] Kako je prikazano u Shemi 4, jezgra koja sadrže tiazol 4-3 mogu biti sintetizovana počevši sa N-zaštićenim derivatom hloroacetila 4-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM. Jedinjenje 4-1 može reagovati sa tioamidom 4-2 da se formira tiazolni prsten, nakon čega sledi deprotekcija azotovog amina pirol prstena pomoću uklanjanja P grupe da se dobije jedinjenje 4-3.
Razne tiouree 4-5 (ekvivalentne sa jedinjenjem 4-2 pri čemu -(Y)n-Z je NR'R"; i R' i R" su H, alkil, aril ili slično; ili R' i R" zajedno sa atomom azota na koji su spojeni formiraju heterocikloalkil) korisne u dobijanju jedinjenja tiazola 4-3 mogu biti dobijene od sekundarnih amina 4-4. Sekundarni amin 4-4 može reagovati sa 1,1'-tiokarbonildiimidazolom; i nastali intermedijer može dalje reagovati sa amonijakom da se dobije tiourea 4-5.
[0070] Kako je prikazano u Shemi 5, jezgra koja sadrže tiazol 5-5 mogu biti sintetizovana počevši sa tiazolom, jedinjenjem 5-1. Jedinjenje 5-1 može reagovati sa alkilnim metalom kao što je n-butilitijum preko jonske izmene da se dobije aromatski anjon in situ. Naknadna adicija trimetil estra borne kiseline nakon koje sledi hidroliza će obično dati bornu kiselinu 5-2. Borna kiselina 5-2 može biti podvrgnuta Suzuki reakciji sa N-zaštićenim 4-bromo-pirolo[2,3-b]piridinom ili N-zaštićenim 4-bromopirolo[2,3-b]pirimidinom 5-3 pri čemu je P pogodna amin zaštitna grupa kao što je SEM. Zaštitna grupa P reakcijskog produkta 5-4 može biti uklonjena pomoću odgovarajućeg postupka u skladu sa prirodom zaštitne grupe da se dobije jedinjenje 5-5.
[0071] Kako je prikazano u Shemi 6, jedinjenja koja sadrže pirazol 6-1 mogu dalje biti modifikovana sa supstitucijom na pirazol NH grupi sa odgovarajućim reagensima. Na primer, jedinjenje 6-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM može reagovati sa L-(Y)n-Z gde L predstavlja odlaznu grupu kao što je halo, triflat ili sličnu da se dobije jedinjenje 6-2 kod osnovnih uslova. Ako su neke funkcionalne grupe prisutne unutar Y i/ili Z grupa, može biti sprovedena dalja modifikacija. Na primer, CN grupa može biti hidrolizovana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat može biti dalje redukovan u alkohol. Stručnjak na ovom području će prepoznati dalje modifikacije ako je to prikladno.
[0072] Dodatno, jedinjenje 6-1 može reagovati sa alkenom 6-3 (pri čemu R' i R" mogu biti H, alkil, cikloalkil i slično; pa Z' može biti grupa koja povlači elektron kao što je estar ili CN) da se dobije jedinjenje 6-4. Dalje, supstitucija može biti sprovedena na alkenu 6-3 na alfa poziciji (alfa u Z') da se generišu supstituisani derivati produkta, 6-4 (videti npr., Primer 68).
[0073] Jedinjenja 6-2 i 6-4 mogu biti deprotektirana pomoću odgovarajućih postupaka u skladu sa prirodom zaštitne grupe koja se koristi da se dobije njihov odgovarajući deprotektirani duplikat.
[0074] Kako je prikazano u Shemi 7, jedinjenja koja sadrže bromo pirazol 7-1 mogu biti dalje modifikovana pomoću metalacije sa reagensima kao butilitijum i reakcije sa elektrofilima kao aldehidima do dobijanja jedinjenja koja sadrže alkohol 7-2 koja mogu biti deprotektirana da se dobiju jedinjenja koji imaju formulu 7-3. Stručnjak na ovom području će prepoznati dalje modifikacije gde je to prikladno.
[0075] Kako je prikazano na Shemi 8, jedinjenja koja sadrže pirazol 8-4 i 8-5 se mogu pripremiti pomoću reakcije N-zaštićenog bromo jedinjenja 8-1 sa hidrazinom u odgovarajućem rastvaraču kao što je N,N-dimetilformamid (DMF) do dobijanja hidrazinskog intermedijera 8-2. Hidrazinski intermedijer 8-2 reaguje sa odgovarajućim supstituisanim 1,3 bis-aldehidom 8-3 do dobijanja jedinjenja koje sadrži pirazol 8-4. Ako ima nekih funkcionalnih grupa prisutnih unutar Y i/ili Z grupa, može se sprovoditi dalja modifikacija. Na primer, CN grupa može biti hidrolizovana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat može biti dalje redukovan u alkohol. Stručnjak na ovom području će prepoznati dalje potencijalne modifikacije.
[0076] Kako je prikazano u Shemi 9, 1,2,4-oksadiazol jedinjenje 9-6 može biti dobijeno iz N-zaštićenog bromo jedinjenja 9-1 obradom sa cinkovim cijanidom u DMF u prisustvu katalizatora kao bis (tributil) paladijum do dobijanja N-zaštićenog cijano jedinjenja 9-2. Jedinjenje 9-3 N-hidroksi karboksimidamid može se pripremiti pomoću zagrejavanja N-zaštićenog cijano jedinjenja 9-2 sa hidroksilamin hidrohloridom u odgovarajućem rastvaraču kao što je etanol i bazom kao što je kalijum karbonat kod temperature ispod tačke ključanja rastvarača. Jedinjenje N-zaštićenog 1,2,4-oksadiazola se može pripremiti obradom jedinjenja 9-3 N-hidroksi karboksimidamida sa odgovarajućim supstituisanim kiselim hloridom jedinjenjem 9-4, u rastvaraču kao što je piridin na dovoljnoj temperaturi za završetak zatvaranja prstena. Ako ima nekih funkcionalnih grupa prisutnih unutar Y i/ili Z grupa, može se sprovoditi dalja modifikacija. Na primer, CN grupa može biti hidrolizovana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat dalje može biti redukovan u alkohol. Stručnjak na ovom području će prepoznati dalje modifikacije gde je to prikladno.
[0077] Kako je prikazano u Shemi 10, 3- i 4-arilpirazolo jedinjenja se 10-9 mogu pripremiti pomoću reakcije odgovarajućeg 3-arilpirazolojedinjenja 10-4 ili 4-arilpirazolo jedinjenja 10-7 sa odgovarajućim supstituisanim bromo jedinjenjem 10-8 kako je ranije opisano.3-aril pirazolo jedinjenje 10-4 može se pripremiti reakcijom odgovarajuće supstituisane arilne grupe koja sadrži halogen kao bromo ili triflat sa N-zaštićenom bornom kiselinom ili estrom borne kiseline, jedinjenjem 10-2 pod uslovima sličnim Suzukijevim koji su poznati iz literature. N-zaštitna grupa 10-3 može biti uklonjena pri prethodno opisanim uslovima poznatim iz literature za uklanjanje grupe kao što je SEM.
[0078] 4-arilpirazolo jedinjenja 10-7 se mogu pripremiti pomoću reakcije odgovarajuće supstituisanog jedinjenja 10-5 acetofenona sa DMF acetatom u DMF kod povišene temperature do dobijanja dimetilamino jedinjenja 10-6. 4-arilpirazolo jedinjenja 10-7 se mogu pripremiti obradom dimetilamino jedinjenja 10-6 sa hidrazinom u rastvaraču kao što je etanol.
[0079] Kako je prikazano u Shemi 11 supstituisano pirazol jedinjenje 11-5 se može pripremiti pomoću niza postupaka, kao što su uklanjanje zaštitne grupe npr., SEM iz jedinjenja 11-4 kod prethodno opisanih uslova. Na primer, supstituisano N-zaštićeno pirazol jedinjenje 11-4 se može pripremiti pomoću reakcije intermedijera N-zaštićenog pirazola jedinjenja 11-3 sa odgovarajuće supstituisanim alkil halidom, benzil halidom, alkil sulfonatima, npr., mesilatom ili tosilatom, ili drugom pogodnom odlaznom grupom L, u odgovarajućem rastvaraču kao što je MeCN, DMF ili tetrahidrofuran (THF), u prisustvu baze kao što je natrijum hidrid ili cezijum karbonat. N-aril pirazol 11-4 (pri čemu Y je aromatski) može biti pripremljen pomoću reakcije intermedijera pirazola 11-3 sa odgovarajuće supstituisanom aril bornom kiselinom u rastvaraču kao što je dihlorometan (DCM) sa bakarnim acetatom i piridinom. Alternativno, N-aril pirazol 11-4 (pri čemu Y je aromatski) se može pripremiti pomoću reakcije intermedijera pirazola 11-3 sa odgovarajuće supstituisanim aril-fluoridom u rastvaraču kao što je DMF kod povišene temperature. Ili, pirazol supstituisana jedinjenja 11-4 (pri čemu je Z grupa kao što je nitril ili estar i Y je barem dva ugljenika) se mogu pripremiti pomoću reakcije intermedijera pirazola 11-3 sa odgovarajuće supstituisanim akrilatom, akrilonitrilom ili drugim akceptorima sličnim Michaelovim akceptorima u rastvaraču kao što je DMF u prisustvu baze kao što je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (DBU) ili trietilamin (TEA) i na temperaturi ispod tačke ključanja rastvarača. Ako ima nekih funkcionalnih grupa prisutnih unutar Y i/ili Z grupa, može se sprovoditi dalja modifikacija. Na primer, CN grupa može biti hidrolizovana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat može biti dalje redukovan u alkohol. Stručnjak na ovom području će prepoznati dalje modifikacije ako je svrsishodno.
[0080] Kako je prikazano u Shemi 12, pirazol 12-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM može reagovati sa konjugacijskim akceptorom koji sadrži alkin kao što je 12-2, pri čemu je Z grupa koja privlači elektron (na primer, -CN) proizvoljno u prisustvu baze (DBU ili K2CO3i slično) u rastvaraču kao što je DMF ili MeCN tokom promenljive dužine vremena da se dobiju adukti koji sadrže olefin 12-3. Jedinjenja predstavljena sa formulom 12-3 mogu biti deprotektirana pomoću odgovarajućih postupaka u skladu sa prirodom zaštitne grupe koja se koristi da se dobiju jedinjenja 12-4.
[0081] Kako je prikazano u Shemi 13, jedinjenja koja sadrže oksazol ili tiazol 13-6 se mogu pripremiti počevši sa N-zaštićenim 4-hloro-pirolo[2,3-b]pirimidinom 13-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM. Produkti formule 13-2 koji sadrže oksazol ili tiazol mogu se pripremiti pomoću reakcije sa paladijumovim-katalizatorom jedinjenja 13-1 sa oksazolom ili tiazolom. Jedinjenje 13-2 može reagovati sa metalnim alkilom kao što je n-butilitijum da se generiše aromatski anjon in situ na koji mogu na niskim temperaturama (poželjno između -78°C i 0°C) biti dodati derivati karboksilnih kiselina 13-3 (pri čemu W = N(Me)(OMe) kada X<1>=S; i W = Cl kada X<1>=O), u prisustvu drugih aditiva kao što su cink hlorid i bakar(I) jodid kada X<1>=O, u pogodnom rastvaraču kao što je THF za generisanje raznih ketona 13-4. Ketoni 13-4 mogu prouzrokovati reakciju sa raznim reagensima kao što su dietil (cijanometil)fosfonat ili trietilfosfonoacetat u prisustvu baze kao kalijum tertbutoksida nakon čega sledi redukcija (uključujući hidrogeniranje ili redukciju kataliziranog konjugata bakar-hidrida) ili sa reagensima kao što je tosilmetil izocijanid da se dobiju produkti formule 13-5 pri čemu je Z grupa koja privlači elektron kao što je estar ili -CN. Ako ima nekih funkcionalnih grupa prisutnih unutar R grupe ili obuhvaćenih sa Z grupom, može se sprovoditi dalja modifikacija, takve odgovarajuće dalje modifikacije će prepoznati stručnjak na ovom području. Jedinjenja 13-5 mogu biti deprotektirana pomoću odgovarajućih postupaka u skladu sa prirodom zaštitne grupe koja se koristi da se dobije njihov odgovarajući deprotektirani duplikat 13-6.
[0082] Kako je prikazano u Shemi 14, jezgra koja sadrže aminotiazol 14-5 mogu biti sintetizovana počevši sa jezgrom koje sadrži tiazol 14-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM. Jedinjenje 14-1 može biti obrađeno sa metalnim alkilom kao što je n-butilitijum da se generiše aromatski anjon in situ na koji može biti dodat pogodni izvor elektrofilnog halogena kao što je ugljenikov tetrabromid da se dobije halogenovani derivat 14-2. Zaštitna grupa P jedinjenja 14-2 može biti uklonjena pomoću odgovarajućeg postupka u skladu sa prirodom zaštitne grupe koja se koristi da se dobije produkt 14-3. Jedinjenje 14-3 može reagovati sa aminima 14-4 kod povišene temperature u pogodnom rastvaraču kao što je DMF da se dobije jedinjenje, 14-5.
[0083] Kako je prikazano u Shemi 15, jezgra koja sadrže pirol 15-4 mogu biti sintetizovana počevši sa N-zaštićenim 4-hloro-pirolo[2,3-b]pirimidinom 15-1 pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je DEM (dietoksimetil). Jedinjenje 15-1 može reagovati sa 1-(triizopropilsilil)pirol-3-bornom kiselinom kod Suzukijevih reakcijskih uslova da se dobije istovremeno deprotektovano jezgro pirola 15-2. Jedinjenja koja sadrže pirol 15-2 mogu reagovati sa alkenima 15-3 koji sadrže grupu Z koja privlači elektron (kao što je -CN) u prisustvu odgovarajuće baze (kao što je DBU) na različitim temperaturama (npr., između sobne temperature i 40° C) nakon čega sledi in situ ili odvojen korak deprotektovanja koji je pogodan za odabranu zaštitnu grupu da se dobiju jedinjenja 15-4.
[0084] Kako je prikazano u Shemi 16, supstituisano jedinjenje pirazola koje sadrži sulfonsku ili sulfoksidnu funkcionalnost kao u 16-6 se može pripremiti na različite načine, kao što je počevši sa odgovarajućim supstituisanim bromo tiofenil etrom 16-2. Tioetar 16-2 može lako biti pripremljen pomoću alkilacije tiofenola 16-1 sa alkil halidom, mesilatom ili slično korišćenjem baze kao DBU, kalijumovog karbonata ili natrijumovog hidrida. Cinamil nitril 16-3 može biti pripremljen pomoću Heckovog hemizma i slično, korišćenjem paladijumovog acetata i trifenilfosfina u DMF kod odgovarajuće temperature sa akrilonitrilom. SEM zaštićeni intermedijer 16-4 može biti pripremljen prethodno opisanim postupcima za sprovođenje adicije jezgra pirazola sličnog Michaelovoj u odgovarajuće supstituisanog α-β nezasićenog jednjenja sličnog nitrilu 16-3. Sulfoksid 16-5, gde n=1, i sulfon 16-5, gde n=2, može biti pripremljen pomoću postupaka za oksidaciju tio etra 16-4 koji su dobro poznati u literaturi, kao što je m-hloroperbenzojeva kiselina (MCPBA) u DCM. Konačna jedinjenja 16-6, gde n= 0, 1 ili 2, mogu biti pripremljena pomoću prethodno opisanih postupaka za uklanjanje SEM zaštitne grupe. Alternativno može biti sprovedena, oksidacija sumpora na jedinjenjima 16-2 ili 16-3 zavisno od kompatibilnosti supstitucija u shemi sinteze.
[0085] Takođe, kako je prikazano u Shemi 17, supstituisana jedinjenja pirazola koja sadrže sulfonamidnu funkcionalnost, kao što su 17-6 se mogu pripremiti na različite načine. Na primer, jedan može početi sa odgovarajućim supstituisanim bromo fenil sulfonamidom 17-2, gde su R<c>i R<d>pogodni supstituenti. Jedinjenje 17-2 može jednostavno biti pripremljeno pomoću reakcije bromo fenil sulfonil hlorida 17-1 i odgovarajuće supstituisanog amina kao što je anilin, ili primarni ili sekundarni amin u pogodnom rastvaraču kao što je DCM, THF ili piridin. Cinamil nitril 17-3 može biti pripremljen pomoću Heckovog hemizma ili slično, korišćenjem paladijumovog acetata i trifenilfosfina u DMF kod odgovarajuće temperature sa akrilonitrilom. Konačna jedinjenja 17-6 gde su R<c>i R<d>deo sulfonamidne funkcionalne grupe mogu biti pripremljeni pomoću postupaka koji su analogni onima opisanim u Shemi 16 počevši sa cinamil nitrilom 17-3.
[0086] Takođe, kako je prikazano u Shemi 18, supstituisana jedinjenja pirazola koja sadrže funkcionalnost alfa-alil ciklopentilmetilena, kao što je 18-8, mogu se pripremiti pomoću, na primer, reakcije pirazola 18-3, pri čemu je P pogodna aminska zaštitna grupa kao što je SEM i X je N ili C, sa estrom ciklopentilakrilata 18-4 da se dobije estar 18-5. Estar 18-5 može zatim biti redukovan u odgovarajući aldehid, 18-6, na primer, postupkom u dva koraka sa redukcijom alkohola i selektivnom oksidacijom intermedijera alkohola u aldehid, npr., preko Swernove oksidacije. Aldehid 18-6, može zatim biti konvertiran u odgovarajući olefin, 18-7, na primer pomoću reakcije sa Wittigovim reagensom. Olefin 18-7, može zatim biti deprotektiran, kako je ranije opisano, da se proizvede formula jedinjenja 18-7. Intermedijer 18-4, može biti pripremljen, na primer kako je prikazano u Shemi 18, počevši sa ciklopentilaldehidom.
[0087] Takođe, kako je prikazano u Shemi 19, derivat cijanogvanidina 19-6 se može pripremiti počevši od supstituisanih jedinjenja pirazola kao što je pirazol 18-3, pri čemu je P pogodna zaštitna grupa kao što je SEM i X je N ili C. Jedinjenje 18-3 može, na primer, reagovati sa olefinom 19-1, dobijenim pomoću Horner-Wadsworth Emmonsove reakcije i odgovarajućeg Boc-zaštićenog piperidona, u prisustvu pogodnog osnovnog katalizatora, u pogodnom rastvaraču, da se dobije intermedijer 19-2. Intermedijer 19-2 je deprotektiran korišćenjem pogodne reakcije deprotekcije, da se dobije jedinjenje amina 19-3, koje zatim selektivno reaguje sa cijanoimidokarbonatnim reagensom kao što je 19-4, u polarnom rastvaraču kod pogodne temperature, na primer, oko 20 °C do dobijanja cijanoimidokarbamata kao što je 19-5, koji može reagovati s bilo kojim od raznih amina kod povišene temperature do dobijanja produkta 19-6.
[0088] Intermedijerna jedinjenja 20-5 i 20-6 mogu biti pripremljena različitim postupcima iz literature, na primer, postupcima koji su navedeni u Shemi 20. Intermedijerno jedinjenje 20-3 može biti pripremljeno pomoću reakcije aldehidnog jedinjenja 20-1 sa odgovarajućim supstituisanim Wittigovim reagensom ili Horner Emmonsovim reagensima do dobijanja α-β nesupstituisanog estra 20-3. Alternativno, estar 20-3 može biti pripremljen pomoću Heck-slične reakcije sa odgovarajućim supstituisanim aril bromidom 20-2 i akrilnim estrom u prisustvu paladijumovog reagensa kod povišene temperature. Jedinjenje 20-4 može biti pripremljeno prethodno opisanim postupcima adicije koja je slična Michaelovoj adiciji odgovarajuće supstituisanog pirola 18-3 na α-β nezasićenom jedinjenju estra 20-3. Aldehidno jedinjenje 20-5 može biti pripremljeno pomoću redukcije jedinjenja estra 20-4 sa reagensima kao što je diizobutil aluminijum hidrid kod niskih temperatura kao što je oko -78 °C u odgovarajućem rastvaraču. Aldehidno jedinjenje 20-5 može biti dalje redukovano u odgovarajući alkohol, jedinjenje 20-6 sa reagensom kao što je natrijum borohidrid u metanolu.
Alternativno alkohol 20-6 može biti pripremljen direktno pomoću redukcije estra 20-4 sa reagensom kao što je litijum aluminijum hidrid u odgovarajućem rastvaraču na odgovarajućim temperaturama.
[0089] Jedinjenja 21-2 i 21-3 mogu biti pripremljena korišćenjem različitih postupaka iz literature, kao što su, na primer, postupci navedeni u Shemi 21. Olefin, jedinjenje 21-1 može biti pripremljeno pomoću reakcije aldehida jedinjenja 20-5 sa odgovarajuće supstituisanim Wittigovim reagensom ili Homer Emmonsovim reagensima korišćenjem baze kao što je natrijumov hidrid ili kalijumov tbutoksid u odgovarajućem rastvaraču i sprovođenjem na temperaturi. Olefinska jedinjenja 21-1 mogu biti redukovana u zasićeno jedinjenje 21-2, na primer, korišćenjem uslova hidrogenizacije koji su dobro poznati u literaturi, npr., vodonik u prisustvu paladijuma na ugljeniku u rastvaraču kao što je metanol. Acetilensko jedinjenje 21-3 može biti pripremljeno prethodno opisanim postupcima, ili pomoću reakcije aldehida 20-5 sa Bestmann-Ohira reagensom (E. Quesada et al, Tetrahedron, 62 (2006) 6673-6680) kako je opisno u literaturi. Alternativno jedinjenje alkohola 20-6 sa Sheme 20 može biti oksidisano u aldehid 20-5 pomoću postupaka koji su dobro poznati u literaturi, npr., Swernovi oksidacijski uslovi, zatim reakcijom sa Bestmann-Ohira reagensom, pri čemu ovaj niz reakcija može biti sproveden bilo kao reakcija u jednom stepenu u dva koraka ili u dva odvojena reakcijska koraka.
[0090] Jedinjenja 22-1 i 22-3 mogu biti pripremljena korišćenjem različitih postupaka iz literature, na primer, putem postupaka koji su navedeni u Shemi 22. Kiseonik-supstituisano jedinjenje 22-1 može biti pripremljeno, na primer, putem reakcije odgovarajuće supstituisanog alkohola 20-6 (u Shemi 20), pri čemu X je N ili C, i P je zaštitna grupa, sa bazom kao što je natrijumov hidrid i odgovarajućim sredstvom kao što je alkil jodid, karbonat ili izocijanat, sprovođenjem u pogodnom rastvaraču i kod pogodne temperature. Alternativno, alkoholna grupa na jedinjenju 20-6 može biti konvertovana u odlaznu grupu LG, kao u jedinjenju 22-2, gde odlazna grupa može biti, na primer, bromid ili mesilat. Jedinjenje 22-2 služi kao supstrat za naknadnu reakciju sa nukleofilom, kao što je, na primer, natrijumov etoksid (Nuc = etoksi).
[0091] Valja napomenuti da u svim ovde opisanim Shemama, ako postoje funkcionalne grupe prisutne na supstituirajućoj grupi kao što je Y, Z, R, R<1>, R<2>, R<5>, itd., može se sprovoditi dalja modifikacija, ako je ista prikladna i poželjna. Na primer, CN grupa može biti hidrolizirana da se dobije amidna grupa; karboksilna kiselina može biti konvertovana u estar, koji zauzvrat može biti redukovan u alkohol, koji zauzvrat dalje može biti modifikovan. U drugom primeru, OH grupa može biti konvertovana u bolju odlaznu grupu kao što je mesilat, koji je dalje pogodan za nukleofilnu supstituciju, kao što je sa CN. Stručnjak na ovom području će prepoznati takve dalje modifikacije.
Postupci
[0092] Jedinjenja prema pronalasku mogu modulirati aktivnost jedne ili više Janus kinaza (JAK). Izraz "modulirati" namenjen je da se odnosi na mogućnost smanjivanja ili povećavanja aktivnosti jednog ili više članova JAK familije kinaza. Prema tome, jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena u postupcima JAK modulacije pomoću kontaktiranja JAK-ova sa bilo kojim ili više ovde opisanih jedinjenja ili pripravaka. U nekim ostvarenjima, jedinjenja i prema predmetnom pronalasku mogu delovati kao inhibitori jedne ili više JAK. U nekim ostvarenjima, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu delovati na stimulisanje aktivnosti jedne ili više JAK. U daljnim ostvarenjima, jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena za moduliranje JAK aktivnosti kod pojedinca kome je potrebna modulacija receptora pomoću davanja modulirajuće količine jedinjenja formule Ia, Ib, ili Ic.
[0093] JAK-ovi na koje se vežu predmetna jedinjenja i/ili moduliraju uključuju bilo kog člana JAK familije. U nekim ostvarenjima, JAK je JAK1, JAK2, JAK3 ili TYK2. U nekim ostvarenjima, JAK je JAK1 ili JAK2. U nekim ostvarenjima, JAK je JAK2. U nekim ostvarenjima, JAK je JAK3.
[0094] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti selektivna. Izraz "selektivna" znači da se jedinjenje veže na ili inhibira JAK sa većim afinitetom ili potencijalom, u poređenju sa barem jednom drugom odgovarajućom JAK. U nekim ostvarenjima, jedinjena prema pronalasku su selektivni inhibitori JAK1 ili JAK2 preko JAK3 i/ili TYK2. U nekim ostvarenjima, jedinjenja prema pronalasku su selektivni inhibitori JAK2 (npr., preko JAK1, JAK3 i TYK2). Bez želje da se bude vezan teorijom, jer inhibitori JAK3 mogu dovesti do imunosupresivnih efekata, jedinjenje koje je selektivno za JAK2 preko JAK3 i koje je korisno kod lečenja raka (kao što je na primer multipli mijelom) može pružiti dodatnu prednost da ima manje neželjenih imunosupresivnih efekata. Selektivnost može biti barem oko 5-struka, 10-struka, barem oko 20-struka, barem oko 50-struka, barem oko 100-struka, barem oko 200-struka, barem oko 500-struka ili barem oko 1000-struka. Selektivnost može biti merena pomoću uobičajenih postupaka na ovom području. U nekim ostvarenjima, selektivnost može biti testirana na Km svakog enzima. U nekim ostvarenjima, selektivnost jedinjenja prema pronalasku za JAK2 preko JAK3 može biti utvrđena pomoću ćeljske ATP koncentracije.
[0095] Jedinjenja prema prikazanom pronalasku mogu biti korišćena u postupcima lečenja JAK-povezane bolesti ili poremećaja kod osobe (npr. pacijenta) pomoću davanja pojedincu, kome treba takvo lečenje, terapeutski efikasne količine ili doze jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili farmaceutskog pripravka. JAK-povezana bolest može uključivati bilo koju bolest, poremećaj ili stanje koje je direktno ili neindirektno povezano sa ekspresijom ili aktivnosti JAK, uključujući prekomernu ekspresiju i/ili abnormalne nivoe aktivnosti. JAK-povezana bolest može takođe uključivati bilo koju bolest, poremećaj ili stanje koje može biti sprečeno, ublaženo ili izlečeno moduliranjem JAK aktivnosti.
[0096] Primeri JAK-povezanih bolesti uključuju bolesti koje uključuju imunološki sistem uključujući, na primer, odbacivanje transplantacije organa (npr., odbacivanje alografta i reakcija transplantata protiv domaćina).
[0097] Dalje primeri JAK-povezanih bolesti uključuju autoimune bolesti kao što su multipla skleroza, reumatoidni artritis, juvenilni artritis, dijabetes tipa I, lupus, psorijaza, zapaljenska bolest creva, ulcerativni kolitis, Kronova bolest, Miastenija gravis, imunoglobulinske nefropatije, autoimuni poremećaj štitnjače, i slične. U nekim ostvarenjima, autoimuna bolest je autoimuni bulozni kožni poremećaj kao što je pemfigus vulgaris (PV) ili bulozni pemfigoid (BP).
[0098] Dalje primeri JAK-povezanih bolesti uključuju alergijska stanja kao što je astma, alergije na hranu, atopijski dermatitis i rinitis. Dalje primeri JAK-povezanih bolesti uključuju virusne bolesti kao što su Epštajn- Barov Virus (EBV), Hepatitis B, Hepatitis C, HN, HTLV 1, Varičela-Zoster Virus (VZV) i Humani Papiloma Virus (HPV).
[0099] Dalje primeri JAK-povezanih bolesti ili stanja uključuju kožne poremećaje kao što je psorijaza (na primer, psorijaza vulgaris), atopijski dermatitis, kožni osip, iritacija kože, osetljivost kože (npr., kontaktni dermatitis ili alergijski kontaktni dermatitis).Na primer, određene materije uključujući određene lekove kada se primenjuju topikalno mogu uzrokovati preosetljivost kože. U nekim ostvarenjima, ko-administracija ili sekvencijalno davanje barem jednog JAK inhibitora prema pronalasku zajedno sa sredstvom koji uzrokuje neželjenu preosetljivost može biti od pomoći kod lečenja takve neželjene preosetljivosti ili dermatitisa. U nekim ostvarenjima, kožni poremećaj je lečen topikalnom primenom barem jednog JAK inhibitora prema pronalasku.
[0100] U daljim ostvarenjima, JAK-povezana bolest je rak uključujući onaj koji se odlikuje solidnim tumorima (npr., rak prostate, rak bubrega, rak jetre, rak gušterače, rak želuca, rak dojke, rak pluća, rak glave i vrata, rak štitnjače, glioblastom, Kapošijev sarkom, Castlemanova bolest, melanom itd.), hematološki tumori (npr., limfom, leukemija kao što je akutna limfoblastna leukemija, ili multipli mijelom), i rak kože kao što je kožni limfom T-ćelija (CTCL) i kožni limfom B-ćelija. Primer kožnog limfoma T-ćelija uključuje Sezarijev sindrom i mikozne fungoide.
[0101] JAK-povezane bolesti mogu dalje uključivati one koje se odlikuju sa ekspresijom mutirane JAK2 kao što su one koje imaju barem jednu mutaciju u domenu pseudo-kinaze (npr., JAK2V617F).
[0102] JAK-povezane bolesti mogu dalje uključivati mijeloproliferativne poremećaje (MPD) kao što su policitemija vera (PV), esencijalna trombocitemija (ET), mijeloidna metaplazija sa mijelofibrozom (MMM), hronična mijelogena leukemija (CML), hronična mijelomonocitna leukemija (CMML), hipereozinofilni sindrom (HES), sistemska mastocitna bolest (SMCD) i slične.
[0103] Dalje JAK-povezane bolesti uključuju zapaljenja i zapaljenske bolesti. Primer zapaljenskih bolesti uključuje zapaljenske bolesti oka (npr., iritis, uveitis, skleritis, konjunktivitis, ili srodne bolesti), zapaljenske bolesti disajnih puteva (npr., gornjih disajnih puteva uključujući nos i sinuse kao što su rinitis ili sinuzitis ili donjih disajnih puteva uključujući bronhitis, hroničnu opstruktivnu plućnu bolest, i slične), zapaljenske miopatije kao miokarditis, i druge zapaljenske bolesti.
[0104] Ovde opisani JAK inhibitori mogu dalje biti korišćeni za lečenje ozleda ishemijske reperfuzije ili bolesti ili stanja povezanih sa zapaljenskim ishemijskim događajem kao što je srčani udar ili srčani zastoj. Ovde opisani JAK inhibitori mogu dalje biti korišćeni za lečenje anoreksije, kaheksije ili umora kao što je umor koji proizlazi ili je povezan s rakom. Ovde opisani JAK inhibitori mogu dalje biti korišćeni za lečenje restenoze, sklerodermitisa ili fibroze. Ovde opisani JAK inhibitori mogu dalje biti korišćeni za lečenje stanja povezanih sa hipoksijom ili astrogliozom, kao na primer, dijabetičke retinopatije, rak ili neurodegeneracije. Videti, npr., Dudley, A.C. et al. Biochem. J.2005, 390(Pt 2):427-36 and Sriram, K. et al. J. Biol. Chem.2004, 279(19):19936-47. Epub 2004 Mar 2).
[0105] Kako se ovde koristi, izraz "kontaktiranje" se odnosi na objedinjavanje navedenih struktura u in vitro sastavu ili in vivo sastavu. Na primer, "kontaktiranje" JAK sa jedinjenjem prema pronalasku uključuje davanje jedinjenja prema predmetnom pronalasku pojedincu ili pacijentu, kao što je čovek, koji ima JAK, kao i na primer, uvođenje jedinjenja prema pronalasku u uzorak koji sadrži ćelijski ili prečišćeni pripravak koji sadrži JAK.
[0106] Kako se ovde koristi, izraz "osoba" ili "pacijent," kako se naizmenično koristi, se odnosi na bilo koju životinju, uključujući sisare, poželjno miševe, pacove, druge glodare, zečeve, pse, mačke, svinje, stoku, ovce, konje ili primate, i najpoželjnije ljude.
[0107] Kako se ovde koristi, izraz "terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu aktivnog jedinjenja ili farmaceutskog sredstva koji izaziva biološki ili medicinski odgovor u tkivu, sistemu, životinji, pojedincu ili čoveku koji se traži od strane istraživača, veterinara, lekara ili drugog kliničara, što uključuje jedno ili više od sledećeg:
(1) sprečavanje bolesti, na primer, sprečavanje bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koji može biti predisponiran za bolest, stanje ili poremećaj, ali ne oseća ili ne prikazuje patologiju ili simptome bolesti;
(2) inhibiciju bolesti, na primer, inhibiciju bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koji je doživljava ili prikazuje patologiju ili simptome bolesti, stanja ili poremećaja (tj., zaustavlja dalji razvoj patologije i/ili simptoma), zatim
(3) poboljšanje bolesti, na primer, poboljšanje bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koji je doživljava ili prikazuje patologiju ili simptome bolesti, stanja ili poremećaja (tj., vraća u suprotnom smeru patologiju i/ili simptome).
Kombinacijske terapije
[0108] Jedno ili više dodatnih farmaceutskih sredstava kao, na primer, sredstva za hemoterapiju, anti-zapaljenska sredstva, steroidi, imunosupresijska sredstva, kao i Bcr-Abl, Flt-3, RAF i FAK inhibitori kinaza kao što su, na primer, oni opisani u dokumentu WO 2006/056399, ili druga sredstva se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima predmetnog pronalaska za lečenje JAK-povezanih bolesti, poremećaja ili stanja. Jedno ili više dodatnih farmaceutskih sredstava može biti dato pacijentu istovremeno ili sekvencijalno.
[0109] Primer sredstva za hemoterapiju uključuje inhibitore proteozoma (npr., bortezomib), talidomid, revlimid, i sredstva koja oštećuju DNA kao što su melfalan, doksorubicin, ciklofosfamid, vinkristin, etopozid, karmustin i slična.
[0110] Primer steroida uključuje koritikosteroide kao što su deksametazon ili prednizon.
[0111] Primer Bcr-Abl inhibitora uključuje jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, iz rodova i vrsta koje su izložene u US patentu br.5,521,184, WO 04/005281, EP2005/009967, E2005/010408, i US prijavi br.60/578,491.
[0112] Primer pogodnih Flt-3 inhibitora uključuje jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, kako je izloženo u WO 03/037347, WO 03/099771, i WO 04/046120.
[0113] Primer pogodnih RAF inhibitora uključuje jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, kako je izloženo u WO 00/09495 i WO 05/028444.
[0114] Primer pogodnih FAK inhibitora uključuje jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, kako je izloženo u WO 04/080980, WO 04/056786, WO 03/024967, WO 01/064655, WO 00/053595, i WO 01/014402.
[0115] U nekim ostvarenjima, jedan ili više JAK inhibitora prema pronalasku može biti korišćen u kombinaciji sa sredstvom za hemoterapiju kod lečenja raka, kao što je multipli mijelom, pa može poboljšati odgovor na lečenje u poređenju sa odgovorom samo na sredstvom za hemoterapiju, bez pogoršanja njegovih toksičnih efekata. Primeri dodatnih farmaceutskih sredstava koja se koriste kod lečenja multiplog mijeloma, na primer, mogu uključivati, bez ograničenja, melfalan, melfalan plus prednizon [MP], doksorubicin, deksametazon, i Velcade (bortezomib). Dalje, dodatna sredstva koja se koriste kod lečenja multiplog mijeloma uključuju Bcr-Abl, Flt-3, RAF i FAK inhibitore kinaze. Dodatni ili sinergijski efekti su poželjni ishodi kombinovanja JAK inhibitora iz predmetnog pronalaska sa dodatnim sredstvom. Osim toga, otpor ćelija multiplog mijeloma na sredstvo kao što je deksametazon može biti reverzibilan nakon tretmana JAK inhibitorom iz predmetnog pronalaska.
Sredstva mogu biti kombinovana sa predmetnim jedinjenjima u jednostrukom ili kontinuiranom obliku doziranja ili sredstva mogu biti davana istovremeno ili sekvencijalno kao odvojeni oblici doziranja.
[0116] U nekim ostvarenjima, kortikosteroid kao što je deksametazon se daje pacijentu u kombinaciji sa barem jednim JAK inhibitorom gde se deksametazon daje povremeno, za razliku od stalno.
[0117] U nekim daljim ostvarenjima, kombinacije jednog ili više JAK inhibitora prema pronalasku sa drugim terapeutskim sredstvima mogu biti date pacijentu pre, za vreme i/ili nakon transplantacije koštane srži ili presađivanja matičnih ćelija.
Farmaceutske formulacije i oblici doziranja
[0118] Kada se koriste kao lekovi, jedinjenja prema pronalasku se mogu davati u obliku farmaceutskih pripravaka. Ovi pripravci mogu se pripremiti na način poznat u farmaceutskoj industriji, pa se mogu davati različitim pravcima, zavisno od toga da li se želi lokalno ili sistemsko lečenje, i od područja koje se želi tretirati. Davanje može biti topikalno (uključujući transdermalno, epidermalno, oftalmičko i u membrane sluzokože uključujući intranazalno, vaginalno i rektalno davanje), pulmonalno (npr., inhalacijom ili insuflacijom ili aerosolima, uključujući pomoć raspršivača, intratrahealno ili intranazalno), oralno ili parenteralno. Parenteralno davanje uključuje intravensko, intraarterijsko, potkožno, intraperitonalno, intramuskularno ili injekcije ili infuziju ili intrakranijalno, npr., intratekalno ili intraventrikularno davanje. Parenteralno davanje može biti u obliku jedne „bolus“ doze, ili može biti, na primer, pomoću kontinuirane perfuzijske pumpe. Farmaceutski pripravci i formulacije za topikalnu primenu mogu uključivati transdermalne flastere, masti, losione, kreme, gelove, kape, supozitorije, sprejeve, tečnosti i praškove. Mogu se koristiti konvencionalni farmaceutski nosači, vodeni, prašak ili uljne baze, zgušnjivači i slično, koji su potrebni ili poželjni. Obloženi kondomi, rukavice i slično takođe mogu biti korisni.
[0119] Ovaj pronalazak takođe obuhvata farmaceutske priprake koji sadrže, kao aktivnu supstancu, jedan ili više jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (pomoćnih materija). Kod dobijanja pripravaka prema pronalasku, aktivna supstanca je uobičajeno pomešana sa pomoćnom materijom, razređena sa pomoćnom materijom ili sadržana unutar takvog nosača u obliku, na primer, kapsule, vrećice, papira ili drugog rezervoara. Kada pomoćna materija služi kao razređivač, ona može biti čvrsta, polu-švrsta ili tečni materijal, koji deluje kao vehikul, nosač ili medij za aktivnu supstancu. Zbog toga, pripravci mogu biti u obliku tableta, pilula, praškova, pastile, vrećica, eliksira, suspenzija, emulzija, rastvora, sirupa, aerosola (kao čvrstih materija ili u tečnom mediju), masti koje sadrže, na primer, do 10% težinski aktivnog jedinjenja, mekane i tvrde želatinske kapsule, supozitoriji, sterilne injektibilne rastvore, i sterilne pakovane praškove.
[0120] Kod dobijanja formulacije, aktivno jedinjenje može biti samleveno da se osigura odgovarajuća veličina čestica pre kombinovanja sa drugim sastojcima. Ako je aktivno jedinjenje u osnovi nerasvorljivo, ono može biti samleveno na veličinu čestica od manje od 200 mesh. Ako je aktivno jedinjenje u osnovi rastvorljivo u vodi, veličina čestica može biti podešena usitnjavanjem da se osigura u osnovi jednoobrazna raspodela u formulaciji, npr. oko 40 mesh.
[0121] Neki primeri pogodnih pomoćnih materija uključuju laktozu, dekstrozu, saharozu, sorbitol, manitol, skrob, bagremovu gumu, kalcijim fosfat, alginate, tragakant gumu, želatin, kalcijum silikat, mikrokristalnu celulozu, polivinilpirolidon, celulozu, vodu, sirup, i metil celulozu. Formulacije dodatno mogu uključivati: sredstva za podmazivanje kao što su talk, magnezijum stearat, pa mineralno ulje; sredstva za vlaženje, emulzije i sredstva za suspenziju; konzervanse kao što su metil- i propilhidroksibenzoati; zaslađivače; i sredstva za davanje ukusa. Pripravci prema pronalasku mogu biti formulisani kako bi pružili brzo, zadržano ili odloženo otpuštanje aktivne supstance nakon davanja pacijentu korišćenjem postupaka koji su poznati na ovom području.
[0122] Pripravci mogu biti formulisani u jediničnom obliku doziranja, svako doziranje sadrži od oko 5 do oko 1000 mg (1 g), još uobičajenije oko 100 do oko 500 mg, aktivne supstance. Izraz "jedinični oblici doziranja" odnosi se na fizikalno odvojene jedinice pogodne kao jedinstvene doze za ljudske subjekte i druge sisare, svaka jedinica sadrži predodređenu količinu aktivnih materijala izračunatu za dobijanje željenog terapijskog efekta, u kombinaciji s farmaceutski pogodnom pomoćnom materijom.
[0123] Aktivno jedinjenje može biti efikasno u širokom rasponu doza, te se uopšteno daje u farmaceutski efikasnoj količini. Međutim, biće shvaćeno, da će količina jedinjenja koja se zapravo daje, uobičajeno biti određena od strane lekara, u skladu sa odgovarajućim okolnostima, uključujući stanje koje se leči, odabranim načinom davanja, stvarnim jedinjenjem koje se daje, starosti, težinom, i individualnim odgovorom pacijenta, ozbiljnosti pacijentovih simptoma, i slično.
[0124] Za dobijanje čvrstih pripravaka kao što su tablete, glavni aktivni sastojak je pomešan sa farmaceutskom pomoćnom materijom da se dobije čvrsti predformulacijski pripravak koji sadrži homogenu mešavinu jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Kada se govori od tim predformulacijskim pripravcima kao homogenim, aktivna supstanca je uobičajeno disperzirana ravnomerno u pripravku tako da pripravak može biti jednostavno podeljen u jednako efikasne jedinične oblike doziranja kao što su tablete, pilule i kapsule. Ova čvrsta preformulacija je zatim podeljena u jedinične oblike doziranja gore opisane vrste koji sadrže, na primer, oko 0.1 do oko 1000 mg aktivne supstance prema predmetnom pronalasku.
[0125] Tablete ili pilule prema predmetnom pronalasku mogu biti obložene ili na drugi način složene da se dobije oblik doziranja koji pruža prednost produženog delovanja. Na primer, tableta ili pilula može sadržavati komponentu unutrašnjeg doziranja i komponentu spoljašnjeg doziranja, pa je ova druga u obliku omotača oko prethodne. Dve komponente mogu biti razdvojene pomoću želudačnootpornog sloja koji služi da spreči raspadanje u želudcu, pa da dozvoli unutrašnjoj komponenti da netaknuta prođe u dvanaestopalačno crevo ili da ima odloženo otpuštanje. Različiti materijali se mogu koristiti za takve želudačanootporne slojeve ili omotače, takvi materijali uključuju brojne polimerne kiseline i mešavine polimernih kiselina sa materijalima kao što je šelak, cetil alkohol i celulozni acetat.
[0126] Tečni oblici u koje se mogu uključiti jedinjenja i pripravci prema predmetnom pronalasku za oralno davanje ili davanje putem injekcije uključuju vodene rastvore, sirupe pogodnog ukusa, vodene ili uljne suspenzije, pa emulzije sa ukusom sa jestivim uljima kao što je pamučno ulje, sezamovo ulje, kokosovo ulje ili kikirikijevo ulje, kao i eliksiri i slični farmaceutski nosači.
[0127] Pripravci za inhalaciju ili uduvavanje uključuju rastvore i suspenzije u farmaceutski prihvatljivim, vodenim ili organskim rastvorima, ili njihove mešavine, i praškove. Tečni ili čvrsti pripravci mogu sadržavati pogodne farmaceutski prihvatljive pomoćne materije kako je gore opisano. U nekim ostvarenjima, pripravci se daju oralnim ili nazalnim respiratornim putem za lokalno ili sistemsko delovanje. Pripravci mogu biti raspršeni upotrebom inertnih gasova. Raspršeni rastvori mogu biti udahnuti direktno iz uređaja za raspršivanje ili uređaj za raspršivanje može biti spojen na masku za lice ili na aparat za disanje sa pozitivnim pritiskom. Rastvori, suspenzije, ili praškasti pripravci mogu biti davani oralno ili nazalno iz uređaja koji isporučuju formulaciju na odgovarajući način.
[0128] Količina jedinjenja ili pripravka koja se daje pacijentu će zavisiti od toga šta se daje, svrsi davanja, kao što je profilaksa ili lečenje, stanja pacijenta, načina davanja, i sličnom. Kod terapijskih primena, pripravci mogu biti davani pacijentu koji već pati od bolesti u količini koja je dovoljna za lečenje ili barem za delimično zaustavljanje simptoma bolesti i njenih komplikacija. Efikasne doze će zavisiti od stanja bolesti koja se leči kao i od procene lekara, u zavisnosti od faktora kao što su težina bolesti, godine, težina i opšte stanje pacijenta i slično.
[0129] Pripravci koji se daju pacijentu mogu biti u obliku gore opisanih farmaceutskih pripravaka. Ovi pripravci mogu biti sterilisani pomoću uobičajenih postupaka sterilizacije ili mogu biti sterilno filtrirani. Vodeni rastvori mogu biti pakovani za direktnu upotrebu ili liofilizirani, a liofilizirani pripravak je u kombinaciji sterilnog vodenog nosača pre davanja. pH jednjenja za pripravke će obično biti između 3 i 11, poželjnije od 5 do 9 i najpoželjnije od 7 do 8. Shvatiće se da će korišćenje nekih navedenih pomoćnih materija, nosača ili stabilizatora rezultirati sa formiranjem farmaceutskih soli.
[0130] Terapijsko doziranje jedinjenja prema predmetnom pronalasku može varirati prema, na primer, posebnoj upotrebi za koju je tretman predviđen, načinu primene jedinjenja, zdravlju i stanju pacijenta, i proceni lekara koji propisuje terapiju. Udeo ili koncentracija jedinjenja prema pronalasku u farmaceutskom pripravku može varirati zavisno od brojnih faktora uključujući doziranje, hemijska svojstva (npr., hidrofobnost), i putu primene. Na primer, jedinjenja prema pronalasku mogu biti pripremljena u vodenom fiziološkom puferskom rastvoru koji sadrži oko 0,1 do oko 10% tež./vol. jedinjenja za parenteralno davanje. Neke tipične doze su u rasponu od oko 1 µg/kg do oko 1 g/kg telesne težine dnevno. U nekim ostvarenjima, raspon doza je od oko 0,01 mg/kg do oko 100 mg/kg telesne težine dnevno. Za doziranje je verovatno da će zavisiti od takvih parametra kao što su tip i stepen napretka bolesti ili poremećaja, celokupno zdravstveno stanje pojedinog pacijenta, relativna biološka efikasnost odabranog jedinjenja, formulacije pomoćne materije, i njen put primene. Efikasne doze mogu biti ekstrapolirane iz krivulja doza-odgovora koji su dobijeni in vitro ili iz testnih sistema na životinjskom modelu.
[0131] Pripravci prema pronalasku mogu dalje uključivati jedan ili više dodatnih farmaceutskih sredstava kao što su hemoterapijska sredstva, steroid, anti-zapaljensko jedinjenje ili imunosupresijska sredstva, primeri koji su gore navedeni.
Označena jedinjenja i postupci ispitivanja
[0132] Još jedan aspekt prikazanog pronalaska odnosi se na jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti označena jedinjenja (radio-označena, fluorescentno-označena, itd.) koja mogu biti korisna ne samo u postupcima snimanja nego takođe i u testovima, in vitro i in vivo, za lokalizovanje i kvantifikaciju JAK u uzorcima tkiva, uključujući čoveka, i za identifikaciju JAK liganada pomoću inhibicije vezanja označenog jedinjenja. Prema tome, predmetni pronalazak uključuje JAK testove koji sadrže takva označena jedinjenja.
[0133] Prikazani pronalazak takođe obuhvata izotopno obeležena jedinjenja predmetnog pronalaska. "Izotopno" ili "radio-označeno" jedinjenje je jedinjenje prema pronalasku gde je jedan ili više atoma zamenjeno ili supstituisano sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se normalno nalazi u prirodi (tj., prirodno se javlja). Pogodni radionuklidi koji mogu biti uključeni u jedinjenja prema predmetnom pronalasku uključuju ali nisu ograničeni na<2>H (takođe se piše kao D za deuterijum),<3>H (takođe se piše kao T za tricijum),<11>C,<13>C,<14>C,<13>N,<15>N,<15>O,<17>O,<18>O,<18>F,<35>S,<36>Cl,<82>Br,<75>Br,<76>Br,<77>Br,<123>I,<124>I,<125>I i<131>I. Radionuklid koji je uključen u predmetna radio-označena jedinjenja će zavisiti od specifične primene tog radio-označenog jedinjenja. Na primer, za in vitro označavanje metaloproteaze i uporedne testove, uopšteno će najkorisnija biti jedinjenja koja uključuju<3>H,<14>C,<92>Br,<125>I,<131>I,<35>S. Za primenu kod radio-označavanja uopšteno će najkorisniji biti<11>C,<18>F,<12>I,<123>I,<124>I,<131>I,<75>Br,<76>Br ili<77>Br.
[0134] Podrazumeva se da je "radiološki-označen" ili "označeno jedinjenje" jedinjenje koje ima uključen barem jedan radionuklid. U nekim ostvarenjima radionuklid je odabran iz grupe koja sadrži<3>H,<14>C,<125>I,<35>S i<82>Br.
[0135] Prikazani pronalazaj može dalje obuhvatati sintetske postupke za ugrađivanje radioakivnih izotopa u jedinjenja prema pronalasku. Postupci sinteze za uključivanje radio-izotopa u organska jedinjenja su dobro poznati u tehnici, pa će osoba upoznata sa stanjem tehnike jednostavno prepoznati postupke primenjive kod jedinjenja prema pronalasku.
[0136] Označeno jedinjenje prema pronalasku može biti korišćeno u analizama pregledanja za identifikovanje/procenu jedinjenja. Na primer, novo sintetizovano ili identifikovano jedinjenje (tj., testno jedinjenje) koje je označeno može biti procenjeno na mogućnost JAK vezivanja praćenjem promene njegove koncentracije kada kontaktira sa JAK, pomoću praćenja označavanja. Na primer, testno jedinjenje (označeno) može biti procenjeno na mogućnost da redukuje vezanje drugog jedinjenja za koje je poznato da se veže na JAK (tj., standardno jedinjenje). Prema tome, mogućnost testnog jedinjenja da konkuriše standardnom jedinjenju kod vezanja na JAK direktno korelira sa njegovim afinitetom vezivanja. Suprotno, u nekim drugim testovima proveravanja, standardno jedinjenje je označeno, a testna jedinjenja su neoznačena. Prema tome, koncentracija označenog standardnog jedinjenja se posmatra kako bi se procenila konkurentnost između standardnog jedinjenja i testnog jedinjenja, pa je tako utvrđen relativni afinitet vezanja testnog jedinjenja.
Pribori
[0137] Jedinjenja prema prikazanom pronalasku mogu biti uključena u farmaceutske pribore korisne, na primer, kod lečenja ili prevencije JAK-povezanih bolesti ili poremećaja, kao što je rak, što uključuje jedan ili više rezervoara koji sadrže farmaceutski pripravak koji sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema pronalasku. Takvi pribori mogu dalje uključivati, ako je poželjno, jednu ili više različitih konvencionalnih komponenti farmaceutskog pribora, kao što su, na primer, rezervoari sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, dodatni rezervoari, itd., kao što će odmah biti jasno stručnjacima na području. U kit takođe mogu biti uključena uputstva, bilo kao umetci ili kao nalepnice, koje označavaju količine komponenata koje se daju, smernice za davanje, i/ili smernice za mešanje komponenata.
[0138] Jedinjenje iz primera 67 je 3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril. Drugi primeri su dati u referentne svrhe. Osobe vešte na ovom području lako će prepoznati razne nekritične parametre koji mogu biti promenjeni ili modifikovani da daju u suštini iste rezultate. Za jedinjenja prema primerima pronađeno je da su JAK inhibitori prema barem jednom testu koji je opisan u ovom dokumentu.
PRIMERI
Primer 1: 3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]benzonitril
[0139]
Korak 1.1H-Pirolo[2,3-b]piridin 7-oksid
[0140] U rastvor 1H-pirolo[2,3-b]piridina (4.90 g, 0.0415 mol) u etil acetatu (41 mL, 0.42 mol) dodat je rastvor meta-hloroperbenzojeve kiseline (MCPBA; 9.3 g, 0.054 mol) u etil acetatu (27 mL, 0.28 mol) kod 0 °C. Reakcijska mešavina je očvrsnula kada je dodato ∼20 mL rastvora MCPBA. Dodatnih ∼10 mL etil acetata je dodato tako da je nastao rastvor. Reakcijska mešavina je puštena da se zagreje do sobne temperature (rt) i mešana je preko noći, zatim je ohlađena kod 0 °C, profiltrirana i isprana sa etil acetatom tri puta do dobijanja 10.94 g vlažne čvrste materije. Vlažna čvrsta materija (8.45 g) je zatim suspendovana u vodi (35 mL), i u suspenziju je ukapavanjem dodato 13 mL zasićenog Na2CO3, pa je dobijena mešavina mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je mešavina ohlađena na 0° C, filtrirana i isprana sa vodom (x4) do dobijanja 3.55 g svetlo ljubičaste čvrste materije koja je osušena na 40° C preko noći do dobijanja željenog produkta (2.47 g, 44.4% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.2 (1H, d); 7.95 (1H, d); 7.5 (1H, d); 7.2 (1H, m); 6.65 (1H, d). MS (M+H)<+>: 136.
Korak 2.4-Hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0141] U ružičasti rastvor 1H-pirolo[2,3-b]piridin 7-oksida (2.47 g, 0.0184 mol) u dimetilformamidu (DMF) (13.3 mL, 0.172 mol) dodat je metansulfonil hlorid (4.0 mL, 0.052 mol) na 50 °C, pa se ružičasta boja promenila u narandžastu. Reakcijska mešavina zagrejavana je na 73 °C tokom 2 sata, zatim je ohlađena na 40 °C. Dodata je voda (35 mL), pa je rezultujuća mešavina ohlađena kod 0 °C. Dodat je NaOH za podešavanje pH mešavine do oko 7. Mešavina je filtrirana i isprana sa vodom (x3) do dobijanja 3.8 g vlažne svetlo narandžaste čvrste materije koja je osušena kod 40 °C preko noći da se dobije produkt (2.35 g, 82.2% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.8 (1H, br); 8.21 (1H, d); 7.41(1H, d); 7.18 (1H, d); 6.61 (1H, d). MS (M+H)<+>: 153.
Korak 3.4-(4-Bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0142]
[0143] Mešavina 4-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.050 g, 0.00033 mol) i 4-bromo-3-metil-1H-pirazola (0.10 g, 0.00066 mol) zagrejana je na 130 °C preko noći. Reakcijska mešavina je zatim podvrgnuta kolonskoj hromatografiji (eluiranje sa 5% MeOH/DCM, 0.5% NH4OH, na silikagelu) do dobijanja 80 mg svetlo žute čvrste materije koja je triturirana sa MeOH (1.5 mL) da se dobije produkt kao svetlo žuta čvrsta materija (44 mg, 44% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.32 (1H, s); 8.25 (1H, d); 7.6 (1H, s); 7.45 (1H, d); 7.37 (1H, d); 6.96 (1H, d); 2.4 (3H, s). MS (M+H)<+>: 276.
Korak 4.3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]benzonitril
[0144] Mešavina 4-(4-bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.032 g, 0.00012 mol), (3-cijanofenil)borne kiseline (0.027 g, 0.00018 mol), natrijum karbonata (0.032 g, 0.00030 mol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (7.0 mg, 0.0000060 mol) u 1,2-dimetoksietanu (0.3 mL, 0.003 mol) i vodi (0.3 mL, 0.02 mol) zagrejana je na 130 °C (nastala je tečnost, ali sa dva sloja) tokom 4 sata. Reakcijska mešavina je zatim ohlađena do sobne temperature (rt), profiltrirana i isprana sa vodom (x2) i dimetil etrom (DME) (x2) da se dobije produkt kao svetlo narandžasta čvrsta materija (15 mg, 44% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.57 (1H, s); 8.31 (1H, d); 7.8 (2H, m); 7.75 (2H, m); 7.55 (1H, s); 7.45 (2H, m); 7.01 (1H, d); 2.6 (3H, s). MS (M+H)<+>: 299.
Primer 2: Trifluoroacetatna so (2E)-3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]akrilonitrila
[0145]
Korak 1.4-Bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0146] U rastvor 1H-pirolo[2,3-b]piridin 7-oksida (8.0 g, 0.060 mol), dobijenog procedurom navedenom u Primeru 1, Korak 1 u DMF (100 mL, 1 mol) dodat je metansulfonski anhidrid (20.8 g, 0.119 mol, u četiri dela) kod 0 °C. Smesa je mešana kod 0 °C tokom dodatnih 20 minuta zatim je sledilo dodavanje tetrametilamonijumovog bromida (23.0 g, 0.149 mol). Dobijena mešavina je mešana preko noći. Dodata je voda (0.1 L), pa je uočeno blago odavanje toplote. Dodat je rastvor natrijum hidroksida u vodi (12.5 M, 12 mL) radi podešavanja pH mešavine do oko 8, zatim je sledilo dodavanje ∼0.25 L vode. Dobijena smesa je mešana tokom dodatna 2 sata i zatim je profiltrirana. Dobijena čvrsta materija je zatim isprana sa vodom x3 do dobijanja 6.72 g crvenkaste čvrste materije koja je osušena na 50 °C preko vikenda da se dobije produkt (5.75 g, 49% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ10.8 (1H, br); 8.2 (1H, d); 7.41 (1H, d); 7.19 (1H, d); 6.61 (1H, d). MS (M+H)<+>: 196.
Korak 2.4-Bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0147] U rastvor 4-bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridina (6.2 g, 0.031 mol) i [β-(trimetilsilil)etoksi]metil hlorida (6.7 mL, 0.038 mol) u DMF (62 mL, 0.80 mol) dodat je natrijum hidrid (1.5 g, 0.038 mol) kod 0 °C, i dobijen rastvor se zamutio. Mešavina je mešana tokom dodatna 4 sata, zatim je razređena sa metil tert-butil etrom (MTBE). Organski sloj je separiran i sukcesivno ispran sa vodom (x2) i vodenim rastvorom rasolina. Organska faza je osušena i koncentrisana in vacuo do dobijanja 14.1 g produkta kao svetlo narandžastog ulja. Ulje je prečišćeno pomoću kolonske hromatografije eluiranjem sa 5-20% etil acetatom/heksanima do dobijanja prečišćenog produkta kao bezbojnog ulja (9.66 g , 94% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3); δ 8.2 (1H, d); 7.49 (1H, d); 7.19 (1H, d); 6.62 (1H, d); 5.78 (2H, s); 3.6 (2H, t); 0.98 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 326.
Korak 3. (2E)-3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]akrilonitril
[0148] Rastvor 2-propenonitrila (0.043 mL, 0.00065 mol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorida (0.0091 g, 0.000013 mol), 4-(4-bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.036 g, 0.00013 mol) i tetraetilamina (TEA) (0.15 mL, 0.0011 mol) u DMF (0.15 mL, 0.0019 mol) je mikrotalasno zagrejan na 120 °C tokom 2 sata. Rastvor je zatim razređen sa etil acetatom i sukcesivno ispran sa vodom (x2) i rasolinom. Organska faza je osušena i koncentrisana in vacuo do dobijanja 62 mg produkta kao narandžaste čvrste materije. Narandžasta čvrsta materija je zatim prečišćena sa preparativnom-LCMS do dobijanja 12 mg beličaste čvrste materije kao soli trifluorosirćetne kiseline (TFA) koja je triturirana sa MTBE (1 mL) da se dođe do prečišćenog produkta kao bledo zelene čvrste materije. (osušena pri 60 °C tokom 4 sata, 9 mg , 28% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 2 :1 trans:cis izomera. Za trans: δ 8.95 (NH,1H, s); 7.75 (olefin, 1H, d); 6.1 (olefin, 1H, d); 2.45 (Me, 3H, s). MS (M+H)<+>: 249.
Primer 3: 3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-il)-1H-pirazol-4-il]propanonitril, trifluoroacetatna so
[0149]
[0150] Mešavina (2E)-3-[3-metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]akrilonitrila, soli TFA, (0.0050 g, 0.000020 mol, dobijena prema Primeru 2) i paladijuma (5.8 mg, 0.0000054 mol) u metanolu (1 mL, 0.02 mol) i 1,2-dihloroetanu (1 mL, 0.01 mol) je oslobođena gasa i zatim je mešana u atmosferi vodonika tokom 3 sata. Reakcijska mešavina zatim je profiltrirana i filtrat je koncentrisan in vacuo do dobijanja 8 mg produkta kao beličaste čvrste materije. Sirovi materijal prečišćen je sa preparativnom-LCMS do dobijanja 5.1 mg bele čvrste materije kao soli TFA koja je triturirana sa MTB (1 mL) da se dobije produkt kao bela čvrsta materija (1.7 mg, 34% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.52 (1H, s); 8.35 (1H, d); 7.72(1H, d); 7.6 (1H, s); 7.38 (1H, d); 6.96 (1H, d); 2.7-2.9 (4H, m); 2.4 (3H, s). MS (M+H)<+>: 251.
Primer 13: 4-(4-Fenil-1H-imidazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0151]
[0152] Taljevina 4-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.050 g, 0.00033 mol) u 4-fenil-1H-imidazolu (0.24 g, 0.0016 mol) zagrejana je na 200 °C preko noći. Reakcija je podeljena između etil acetata i zasićenog NaHCO3, separirana i organska faza je isprana sa rasolinom. Organski sloj je zatim osušen i isparen do dobijanja 250 mg narandžastog ulja. Ulje je zatim hromatografisano sa 7% uzorkom u sistemu rastvarača MeOH/DCM, 0.7% NH4OH. Prikupljeno je 74 mg produkta kao narandžaste staklaste materije. Staklasta materija je triturirana sa vrućom DCE (1.5 mL) do dobijanja 51 mg smeđe čvrste materije koja je osušena na 60 °C tokom 4 sata da se dobije željeni produkt (50 mg, 59% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, dimetilsulfoksid (DMSO)): δ 12.5 (1H, s); 8.5 (1H, s); 8.4 (1H, s); 8.38 (1H, d); 7.8 (2H, m); 7.62 (1H, d); 7.4 (3H, m); 7.3 (1H, m); 6.81 (1H, d). MS (M+H)<+>: 260
Primer 14: [3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-il]-piperidin-1-il-metanon
[0153]
Korak 1. 3-Metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina
[0154] U rastvor 4-(4-bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina na -70 °C (0.107 g, 0.000263 mol) u THF (1 mL, 0.01 mol) i n-butilitijuma u heksanu (0.23 mL, 1.6M), dodato je 0.5g čvrstog CO2. Nakon 15 min, reakcija je ugašena sa NH4Cl. Dodati su etil acetat i voda. Organska faza je isprana sa rasolinom, pa je isparena do dobijanja 84 mg beličastog stakla/ čvrste materije. Čvrsta materija je hromatografisana sa 50% etil acetata/heksana, 0.5% AcOH, uzorak na silikagelu do dobijanja 40 mg prečišćenog produkta kao bele čvrste materije (37% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.5 (1H, d); 7.45 (1H, d); 7.25 (1H, d); 7.02 (1H, s); 6.6 (1H, d); 5.75 (2H, s); 3.6 (2H, t); 2.48 (3H, s); 0.98 (3H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 372.
Korak 2. 4-[3-Metil-4-(piperidin-1-ilkarbonil)-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0155] Rastvor 3-metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (0.040 g, 0.00011 mol) (1:1 AcOH) i N,N-karbonildiimidazola (0.035 g, 0.00021 mol) u THF (1 mL, 0.01 mol) mešan je tokom 1.2 sata, nakon toga je dodat piperidin (32 µL, 0.00032 mol). Nakon naredna 2 sata, dodat je drugi deo piperidina (15 µL) i dobijena smesa je mešana preko noći. Reakcijska mešavina je zatim podeljena između etil acetata i vode, pa je sekvencijalno isprana sa zasićenim NaHCO3i rasolinom. Organska faza je osušena i isparena do dobijanja 49 mg sirovog produkta kao narandžastog ulja/stakla. Sirovi produkt je hromatografisan sa 75-100% uzorkom etil acetata/heksana u DCM. Prikupljeno je 25 mg prečišćenog produkta kao bezbojnog stakla/ulja (50% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.45 (1H, d); 8.23 (1H, s); 7.5 (1H, d); 7.4 (1H, d); 7.05 (1H, d); 5.8 (2H, s); 3.7 (4H, br); 3.6 (2H, t); 2.55 (3H, s); 1.7 (6H, br); 1.0 (3H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 439.
Korak 3.3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-piperidin-1-il-metanon
[0156] Rastvor 4-[3-metil-4-(piperidin-1-ilkarbonil)-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.025 g, 0.000057 mol) u TFA (1 mL, 0.01 mol) mešan je tokom 1.5 sata. Reakcijska mešavina je zatim koncentrisana i podeljena između DCM i zasićenog NaHCO3x2, i rasoline. Organski sloj je zatim osušen i koncentrisan do dobijanja 28 mg produkta kao bele pene. Pena je razređena u metanolu (1 mL, 0.02 mol) i obrađena sa amonijum hidroksidom u vodi (8.0M, 1 mL) tokom 1.5 sata. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 24 mg bledo žutog stakla. Staklo je triturirano sa metil t-butil etrom (MTBE) do dobijanja 13 mg bele čvrste materije koja je osušena na sobnoj temperaturi preko vikenda. Ukupno je nakon sušenja dobijeno 8 mg produkta (45% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.7 (1H, s); 8.4 (1H, d); 8.2 (1H, s); 7.42 (1H, d); 7.4 (1H, d); 6.99 (1H, d); 3.4-3.8 (4H, br); 2.47 (3H, s); 1.5-1.8 (6H, br). MS (M+H)<+>: 309.
Primer 15: [3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-ilmetil]-fenil-amin
[0157]
Korak 1. 3-Metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-karbaldehid
[0158] Rastvor 4-(4-bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.25 g, 0.00061 mol) u THF (2 mL, 0.03 mol), 1.6 M n-butilitijuma u heksanu (0.54 mL) na -70 °C nakon 10 min dodat je u DMF (120 µL, 0.0015 mol). Reakcija je puštena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakcija je zatim ugašena sa NH4Cl. Dodat je etil acetat/voda. Organska faza je separirana i isprana sa rasolinom, zatim je osušena i koncentrisana do dobijanja 180 mg narandžastog ulja. Sirovi produkt je hromatografiran sa 25% uzorkom etil acetata/heksana u DCM. Prikupljeno je 40 mg bledo žutog ulja (18% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.15 (1H, s); 8.7 (1H, s); 8.47 (1H, d); 7.58 (1H, d); 7.5 (1H, d); 7.05 (1H, d); 5.8 (2H, s); 3.63 (2H, t); 2.7 (3H, s); 0.98 (3H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 356.
Korak 2. N-[3-Metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]metilanilin
[0159] Rastvor 3-metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-karbaldehida (0.025 g, 0.000070 mol) i anilina (1M u DCM, 0.070 mL) u DCM (1 mL, 0.02 mol) mešan je tokom 1 min. Dodati su sirćetna kiselina (20 µL, 0.0004 mol), anilin (1M u DCM, 140 µL) i natrijum triacetooksiborohidrid (0.022 g, 0.00010 mol). Reakcija je mešana preko noći i podeljena između DCM i zasićenog NaHCO3, i isprana sa rasolinom. Organska faza je osušena i isparena do dobijanja 21 mg produkta kao bledo narandžaste staklaste materije (70% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.4 (1H, d); 8.15 (1H, s); 7.65 (1H, d); 7.35 (3H, m); 7.09 (1H, d); 6.82 (1H, m); 6.89 (2H, m); 5.8 (2H, s); 4.35 (2H, s); 3.6 (2H, t); 2.5 (3H, s); 0.99 (3H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+M)<+>: 433.
Korak 3. [3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-ilmetil]-fenil-amin
[0160] Sprovedena je deprotekcija N-[3-metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]metilanilina u skladu sa procedurama iz Primera 14, Korak 3 do dobijanja željenog produkta (58% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.9 (1H, s); 8.38 (1H, d); 8.1 (1H, s); 7.4 (1H, d); 7.35 (1H, d); 7.3 (2H, m); 7.0 (1H, d); 6.79 (1H, m); 6.77 (2H, m); 4.25 (2H, s); 3.81 (1H, s); 2.41 (3H, s). MS (M+H)<+>: 303.
Primer 25: 3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-cikloheksanol
[0161]
Korak 1. 3-Etoksi-1-[3-metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheks-2-en-1-ol
[0162]
[0163] U rastvor na -75°C 4-(4-bromo-3-metil-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksimetil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.11 g, 0.00027 mol) u THF (1.5 mL, 0.018 mol) dodato je 1.6 M n-butilitijuma u heksanu (0.22 mL). Reakcijska mešavina je postala tamno narandžasta. Nakon ∼10 min, dodato je 1.0 M magnezijumovog dibromida u etru (0.35 mL). Nakon narednih 50 min, dodat je rastvor 3-etoksi-2-cikloheksen-1-ona (41.5 µL, 0.000308 mol) u THF (∼0.3 mL). Dobijena mešavina je zagrejana do -40 °C kroz ∼1h i ugašena sa NH4Cl. Zatim je dodat etil acetat/voda. Organska faza je isprana sa rasolinom, pa je koncentrisana do dobijanja 145 mg narandžastog ulja. Sirovi produkt je hromatografiran sa 0-50% gradijentom etil acetata/heksana, uzorak u DCM. Prikupljeno je 35 mg produkta kao ulja (30% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.49 (1H, d); 8.38 (1H, s); 7.55 (1H, d); 7.4 (1H, d); 7.1 (1H, d); 6.0 (2H, s); 3.6 (2H, t); 2.81 (2H, m); 2.62 (3H, s); 2.58 (2H, m); 2.27 (2H, m); 1.0 (3H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 422.
Korak 2. 3-[3-Metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheksanol
[0164] Mešavina 3-[3-metil-l-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin4-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheks-2-en-1-ona (0.019 g, 0.000045 mol) i paladijuma na ugljeniku (Pd/C) (0.018 g, 0.000017 mol) u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je oslobođena gasa i mešana je u atmosferi vodonika preko noći. Dodato je dodatnih 48 mg 10% Pd/C i mešano je u atmosferi vodonika tokom 8 sati. Paladijum je profiltriran i filtrat je mešan sa natrijumovim tetrahidroboratom (0.032 g, 0.00084 mol) tokom 5 sati. Reakcija je prečišćena sa preparativnom-HPLC do dobijanja 5 mg željenog produkta. MS (M+H)<+>: 426.
Korak 3.3-[3-Metil-1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-cikloheksanol
[0165] Sprovedena je deprotekcija 3-[3-metil-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheksanola prema postupcima iz Primera 14, Korak 3 do dobijanja željenog produkta (40% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.72 (1H, s); 8.35 (1H, d); 7.95 (1H, s); 7.41 (1H, d); 7.35 (1H, d); 7.02 (1H, d); 3.78 (1H, m); 2.6 (1H, m); 2.4 (3H, s); 1.2-2.4 (8H, m). MS (M+H)<+>: 296.
Primer 40: 4-[1-(3-Metoksi-1-metil-propil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0166]
Korak 1. 4-[1-(3-Metoksi-1-metilpropil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0167] U rastvor 3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola (alkohol je dobijen DIBAL redukcijom estra u Primeru 58) (0.056 g, 0.00014 mol)) u DMF (1 mL, 0.01 mol) na 0 °C, dodat je natrijumov hidrid (0.0107 g, 0.000268 mol). Nakon 5 min, dodat je metil jodid (18 µL, 0.00029 mol) i dobijena smesa je mešana preko vikenda. Mešavina je zatim podeljena između etil acetata i vode, separirana i organska faza je isprana sa rasolinom. Organska faza je koncentrisana do dobijanja bledo narandžastog ulja.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.4 (1H, d); 8.3 (1H, s); 8.0 (1H, s); 7.65 (1H, d); 7.27 (1H, d); 6.8 (1H, d); 5.8 (2H, s); 4.7 (1H, m); 3.63 (2H, t); 3.2-3.4 (2H, m); 3.38 (3H, s); 2.1-2.3 (2H, m); 1.7 (3H, d); 1.0 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 400.
Korak 2.4-[1-(3-Metoksi-1-metil-propil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0168] Deprotekcija 4-[1-(3-metoksi-1-metilpropil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina sprovedena je prema postupcima iz Primera 14, Korak 3 do dobijanja željenog produkta (25% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.0 (1H, s); 8.35 (1H, d); 8.18 (1H, s); 7.95 (1H, s); 7.41 (1H, d); 7.21 (1H, d); 6.75 (1H, d); 4.63 (1H, m); 3.15-3.4 (2H, m); 3.35 (3H, s); 2.21-2.05 (2H, m); 1.6 (3H, d). MS (M+H)<+>: 270.
Primer 42: 4-[1-(1-Metil-3-pirazol-1-il-propil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0169]
Korak 1. 4-1-[1-Metil-3-(1H-pirazol-1-il)propil]-1H-pirazol-4-il-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0170] U rastvor na 0 °C 3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butil metansulfonata (dobijenog mesilacijom alkohola kao u Primeru 59, Korak 1) (0.055 g, 0.00012 mol) i 1H-pirazola (0.025 g, 0.00036 mol) u DMF (1 mL, 0.01 mol) dodat je natrijumov hidrid (0.014 g, 0.00036 mol). Dobijen rastvor mešan je preko noći i zatim podeljen između etil acetata i 0.1 N HCl, vode. Organska faza je separirana i isprana sa rasolinom. Organski sloj je zatim koncentriran do dobijanja 49 mg bledo narandžastog stakla (87% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.4 (1H, d); 8.18 (1H, s); 7.99 (1H, s); 7.6 (1H, t); 7.5 (1H, d); 7.4 (1H, t); 7.27 (1H, d); 6.8 (1H, d); 6.3 (1H, m); 5.8 (2H, s); 4.2 (1H, m); 4.0-4.2 (2H, m); 3.61 (2H, t); 2.58 (2H, m); 1.65 (3H, d); 1.0 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H)<+>: 436.
Korak 2.4-[1-(1-Metil-3-pirazol-1-il-propil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0171] Deprotekcija 4-1-[1-metil-3-(1H-pirazol-1-il)propil]-1H-pirazol-4-il-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina sprovedena je u skladu s postupcima iz Primera 14, Korak 3 do dobijanja željenog produkta (38% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.7 (1H, s); 8.38 (1H, d); 8.1 (1H, s); 7.7(1H, s); 7.59 (1H, t); 7.4 (1H, d); 7.35 (1H, t); 7.21 (1H, d); 6.75 (1H, d); 6.25 (1H, m); 4.4 (1H, m); 3.9-4.15 (2H, m); 2.55 (2H, m); 1.63 (3H, d). MS (M+H)<+>: 306.
[0172] Sledeća jedinjenja u Tablici 1 su dobijena postupcima koji su analogni postupcima kao što je gore navedeno. "Prečišćavanje A" označava da je produkt nakon deprotekcije prečišćen sa preparativnom-HPLC pod sledećim uslovima: C18 eluiranje sa gradijentom MeCN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH.
Tablica 1
Primer 46: Trifluoroacetatna so 4-(2-tert-Butil-1-metil-1H-imidaxol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina
[0173]
Korak 1.4-(2-tert-butil-1H-imidazol-5-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0174] U rastvor trimetilsirćetne kiseline (0.169 mL, 0.00147 mol) u etanolu (6 mL, 0.1 mol) dodat je cezijum karbonat (0.24 g, 0.00073 mol) i dobijena smesa je mešana tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije cezijum pivalat.
[0175] U rastvor 2-hloro-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)etanona (pripremljenog, npr., kao u Pr.50, Korak 1) (0.054 g, 0.00017 mol) u DMF (1.8 mL, 0.023 mol) dodat je cezijum pivalat (0.0389 g, 0.000166 mol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Dodat je amonijumov acetat (0.45 g, 0.0058 mol) i reakcija je grejana mikrotalasno na 170 °C tokom 5 minuta. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa MTBE. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata, zatim profiltrirani i koncentrirani. Sirovi talog je bio prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (2.5% MeOH/DCM) da se dobije 4-(2-tert-butil-1H-imidaxol-5-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (32 mg, 52%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.31 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.37 (d, 1H), 6.94 (d, 1H), 5.69 (s, 2H), 3.52 (dd, 2H), 1.46 (s, 9H), 0.90 (dd, 2H), -0.08 (s, 9H); MS(ES):371(M+1).
Korak 2. 4-(2-tert-butil-1-metil-1H-imidazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo-[2,3-b]piridin
[0176] U mešavinu 4-(2-tert-butil-1H-imidazol-5-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.019 g, 0.000051 mol) i kalijumovog karbonata (0.15 g, 0.0011 mol) u DMF (3 mL, 0.04 mol) dodat je metil jodid (0.01 mL, 0.00015 mol) u dva dela kroz 48 sati. Zatim je dodata voda i produkt je ekstrahovan sa MTBE. Kombinovani ekstrakti su osušeni sa natrijumovim sulfatom, filtrirani, te koncentrirani in vacuo, zatim su prečišćeni pomoću hromatografije na silikagelu (20% etil acetat/heksani) da se dobije 4-(2-tert-butil-1-metil-1H-imidazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (10 mg, 51%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.37 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.44-7.22 (m, 2H), 7.19 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.60 (dd, 2H), 1.61 (s, 9H), 0.98 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):385(M+1).
Korak 3.
[0177] Rastvor 4-(2-tert-butil-1-metil-1H-imidazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.010 g, 0.000026 mol) u TFA (3 mL, 0.04 mol) mešan je tokom 2 sata. Zatim je višak TFA isparen i ostatak je mešan u metanolu (3 mL, 0.07 mol) i NH4OH (1 mL) tokom 16 sati. Rastvarači su uklonjeni i produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije trifluoroacetatna so 4-(2-tert-butil-1-metil-1H-imidazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina, (9 mg, 90%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.24 (s, 1H), 8.38 (br s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.70-7.63 (m, 2H), 7.08 (br s, 1H), 2.55 (s, 3H), 1.51 (s, 9H); MS(ES):255(M+1).
[0178] Dodatni analozi su pripremljeni kako je prikazano u Tablici 2 korišćenjem istovetnih postupaka onima opisanim u Primeru 46 sa različitim početnim materijalima kao što su alternativne karboksilne kiseline u Koraku 1. Kada su analozi dobijeni kao slobodne baze, produkt je dobijen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH). Rezultati su sažeti u Tablici 2 prema sledećoj strukturi:
Tablica 2
Primer 50: Trifluoroacetatna so 4-(2-Fenil-1,3-tiazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina
[0179]
Korak 1.2-Hloro-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)etanon
[0180] U rastvor 4-bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (2.05 g, 0.00626 mol) u THF (10 mL, 0.123 mol) kod 0 °C ukapavanjem je dodat rastvor izopropilmagnezijumovog hlorida u etru (2.0 M, 9.4 mL). Mešavina je tada ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi i mešana je tokom 4 sata. Ova mešavina je zatim prevedena pomoću kanile u rastvor 2-hloro-N-metoksi-N-metilacetamida (2.84 g, 0.0207 mol) u THF (10 ml). Nakon 30 minuta reakcijskog vremena, rastvor je ugašen dodavanjem zasićenog vodenog rastvora amonijumovog hlorida. Produkt je ekstrahovan sa etil acetatom, kombinovani organski ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušen je preko Na2SO4, filtriran i koncentriran. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (0-20% etil acetat/heksani) da se dobije 2-hloro-1-(1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)etanon (711 mg, 35%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.56 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 5.80 (s, 2H), 4.91 (s, 2H), 3.60 (dd, 2H), 0.98 (dd, 2H), 0.01 (s, 9H); MS(ES):325(M+1).
Korak 2. Trifluoroacetatna so 4-(2-Fenil-1,3-tiazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina
[0181] Rastvor 2-hloro-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-etanona (0.050 g, 0.00015 mol) i benzenkarbotioamida (0.031 g, 0.00022 mol) u etanolu (2 mL, 0.03 mol) je grejan do refluksa tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dodat je etil acetat, a dobijena čvrsta materija je izolovana sa filtriranjem. Sirova čvrsta materija mešana je sa TFA tokom 1 sata, višak TFA je uklonjen in vacuo. Sirovi talog je zatim mešan sa vodenim NH4OH i MeOH tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen i produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije 4-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin kao trifluoroacetatna so (11 mg, 18%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.01 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.39 (br s, 1H), 8.13-8.07 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.67.7.64 (m, 1H), 7.62-7.52 (m, 3H), 7.22 (d, 1H); MS(ES):278(M+1).
Primer 51: N-Metil-N-propil-4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,3-tiazol-2-amin, trifluoroacetatna so
[0182]
Korak 1. N-Metil-N-propiltiourea
[0183] N-Metil-N-propilamin (0.501 mL, 0.00488 mol) je dodat u rastvor 1,1'-tiokarbonildiimidazola (0.957 g, 0.00537 mol) u THF (9 mL, 0.1 mol), a dobijen rastvor je mešan tokom 16 sati. Intermedijer iz reakcijske mešavine je izolovan pomoću hromatografije na silikagelu (5% MeOH u DCM) i taj intermedijer je mešan sa amonijakom (7M rastvor u MeOH) (6 mL) tokom 48 sati. Rastvarač je uklonjen in vacuo. N-metil-N-propiltiourea dobijena je nakon kolonske flash hromatografije (4% MeOH u DCM).
Korak 2.
[0184] Rastvor 2-hloro-1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-etanona (0.050 g, 0.00015 mol) i N-metil-N-propiltiouree (0.030 g, 0.00022 mol) u etanolu (2 mL, 0.03 mol) je grejan do refluksa tokom 2 sata. Zatim je etanol uklonjen in vacuo i ostatak je rastvoren u 2 mL TFA i mešan tokom 40 minuta. Višak TFA uklonjen je in vacuo i ostatak je rastvoren u 3 mL MeOH. U to je dodato 0.5 mL NH4OH i 100 µL etilendiamina, a rezultujući rastvor je mešan tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen, zatim je dodata voda do dobijanja belog taloga koji je zatim prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije N-metil-N-propil-4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,3-tiazol-2-amin kao trifluoroacetatna so (39 mg, 67%).
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.46-8.12 (br s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.45 (br s, 1H), 3.56 (t, 2H), 3.20 (s, 3H), 1.78 (dq, 2H), 1.00 (t, 3H); MS(ES):273(M+1).
[0185] Dodatni analozi aminotiazola su dobijeni postupcima koji su analogni onim opisanim u Primeru 51, korišćenjem različitih početnih materijala kao što su alternativne tiouree u Koraku 2. U primerima 52 i 53, beli talog koji je dobijen postupkom iz Primera 51 izolovan je pomoću filtracije, ispran sa vodom i osušen u visokom vakumu da se dobiju analozi kao slobodni amin. Rezultati su sažeti u Tablici 3 prema sledećoj strukturi:
Tablica 3
Primer 54: Trifluoroacetatna so 4-(2-Fenil-1,3-tiazol-5-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina
[0186]
Korak 1. (2-Fenil-1,3-tiazol-5-il)borna kiselina
[0187] U rastvor n-butilitijuma u heksanu (1.6 M, 2.1 mL) u etru (20 mL) kod -78 °C, je dodat rastvor 2-fenil-1,3-tiazola (449 mg, 0.00278 mol) u etru (5 mL) ukapavanjem. Smesa je mešana tokom jednog sata na -78 °C zatim je dodat trimetil estar borne kiseline (0.949 mL, 0.00835 mol). Smesa je mešana na -78°C tokom 15 minuta, zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom dodatnih 40 minuta. Dodat je zasićen vodeni rastvor NH4Cl, i zatim 1.0 N vodenog rastvora HCl. Zakiseljena smesa je mešana tokom 15 minuta, a željeni produkt je ekstrahovan sa četiri dela DCM koji sadrže 15% izopropanola. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata i koncentrisani do dobijanja 566 mg bele čvrste materije koja sadrži željenu (2-fenil-1,3-tiazol-5-il) bornu kiselinu kao mešavinu sa 2-fenil-1,3-tiazolom. Ova mešavina korišćena je u koraku 2 bez daljeg prečišćavanja. MS(ES):206(M+1).
Korak 2.
[0188] U mešavinu (2-fenil-1,3-tiazol-5-il) borne kiseline (75.0 mg, 0.000366 mol) i 4-bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (80 mg, 0.000244 mol) u DMF (4 mL, 0.0516 mol) dodat je rastvor kalijumovog karbonata (101 mg, 0.000732 mol) u vodi (1 mL, 0.0555 mol). Mešavina je očišćena sa neprekidnom strujom azota tokom 15 minuta.
[0189] Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (20 mg, 0.000018 mol) i dobijena mešavina je grejana na 125°C tokom 30 minuta. Produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije 12 mg žute čvrste materije koja kao glavnu komponentu sadrži željeni produkt. Smesa je mešana u TFA (1 mL) tokom 1 sata. Zatim je višak TFA uklonjen in vacuo, a dobijeni ostatak je mešan sa 2 mL MeOH, 0.5 mL NH4OH i 100 µL etilendiamina tokom 16 sati. Produkt je izolovan pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije 4-(2-fenil-1,3-tiazol-5-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin kao trifluoroacetatna so (5 mg, 5%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.64 (s, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.10-8.04 (m, 2H), 7.73 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.56-7.51 (m, 3H), 7.14 (d, 1H); MS(ES):278(M+1).
Primer 55: Trifluoroacetatna so etil 2-metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoata (55a) i 2-Metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanska kiselina (55b)
[0190]
[0191] 4-(1H-Pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (60 mg, 0.00019 mol) je rastvoren u DMF (1.5 mL), i rastvor je ohlađen na 0°C u hladnoj kupki. Dodat je natrijumov hidrid (15 mg, 0.00038 mol). Nakon mešanja tokom 10 min, dodat je etil estar 2-bromo-2-metil-propanske kiseline (42 µL, 0.00028 mol). Hladna kupka je zatim uklonjena i reakcijska mešavina je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom 1 sata. Reakcijska mešavina je ugašena sa zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Dodata je voda, a produkt je ekstrahovan sa MTBE. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrirani. Ostatak je rastvoren u 2 mL TFA i mešan tokom 1 h. Zatim je višak TFA uklonjen in vacuo i dobijeni ostatak je mešan u 2 mL EtOH koji je sadržavao 0.6 mL rastvora NH4OH tokom 16 sati. Uklonjene su isparljive komponente, a prečišćavanje mešavine sprovedeno je putem preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) te je dobijena trifluoroacetatna so etil 2-metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoata (13 mg, 17% prinos):<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.03 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.31-8.19 (m, 2H), 7.59 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.98 (br s, 1H), 4.10 (q, 2H), 1.84 (s, 6H), 1.12 (t, 3H); MS(ES):299(M+1) i 2-metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanska kiselina (27 mg, 53%):<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.04 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 7.59 (br s, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.99 (br s, 1H), 1.83 (s, 6H); MS(ES):271(M+H).
Primer 56: 2-Metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanamid
[0192]
[0193] Mešavina 2-metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanske kiseline (23 mg, 0.000085 mol) i N,N-karbonildiimidazola (CDI) (21 mg, 0.00013 mol) u 2 mL DMF mešana je tokom 3 sata. Višak čvrstog NH4Cl i TEA dodat je u mešavinu i to je mešano tokom 3 sata. Većina rastvora je uklonjena in vacuo, a sirovi ostatak je bio prečišćen sa preparativnom-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) zatim je usledilo ponovno prečišćavanje putem preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije 2-metil-2-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanamid (6 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 11.63 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.80 (dd, 1H), 1.77 (s, 6H); MS(ES):270(M+1).
Primer 57: Trifluoroacetatna so etil 3-metil-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanoata
[0194]
Korak 1. Etil 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H pirazol-1-il]butanoat
[0195] 4-(1H-Pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (220 mg, 0.0006996 mol) i etil estar 3-metil-2-butenske kiseline (292 µL, 0.00210 mol) su rastvoreni u DMF (10 mL). Dodat je cezijumov karbonat (912 mg, 0.00280 mol) i dobijena smesa je mešana kod sobne temperature tokom 3 sata. Reakcijska mešavina je razređena sa vodom, a produkt je ekstrahovan sa MTBE nekoliko puta. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata i koncentrisani. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (0-60% EtOAc/heksani) da se dobije etil 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanoat (244 mg, 79%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.37 (d, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.79 (d, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.10 (q, 2H), 3.62 (dd, 2H), 3.04 (s, 2H), 1.88 (s, 6H), 1.20 (t, 3H), 0.98 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):443(M+1).
Korak 2.
[0196] Etil 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanoat (20 mg, 0.0000452 mol) je mešan u 1 mL TFA tokom 1 sata. Zatim je višak TFA uklonjen in vacuo. Ostatak je mešan tokom 16 sati u 2 mL MeOH koji je sadržavao 0.5 mL NH4OH. Nakon isparavanja isparljivih komponenti usledilo je prečišćavanje putem preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije trifluoroacetatna so etil 3-metil-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]-piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanoata (5 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.19 (s, 1H), 8.61 (br s, 1H), 8.34-8.22 (br m, 2H), 7.62 (br s, 1H), 7.51 (br d, 1H), 7.02 (br s, 1H), 3.91 (q, 2H), 2.96 (s, 2H), 1.70 (s, 6H), 1.02 (t, 3H); MS(ES):313(M+1).
Primer 58: Trifluoroacetatna so 3-Metil-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola
[0197]
[0198] U rastvor etil 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanoata (213 mg, 0.000481 mol) u THF (5 mL, 0.0616 mol) na -78°C je dodat ukapavanjem diizobutilaluminijum hidrid u DCM (1.00 M, 1.1 mL). Reakcijska smesa je mešana tokom 3 sata za koje vreme je reakcija polagano zagrejavana do -10°C. U mešavinu na -10°C pažljivo je dodat K/Na tartrat tetrahidrat u vodi. Smesa je mešana tokom 2 sata, zatim je ekstrahovana sa tri dela etil acetata. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa dva dela vode i jednim delom rasolina, zatim su osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrirani da se dobije 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ol (185 mg, 96%), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. Deo tako dobijenog alkohola (15 mg, 0.000037 mol) mešan je u TFA (1 mL) tokom 2 sata. TFA je uklonjena in vacuo i ostatak je mešan sa 2 mL MeOH koji sadrži 0.5 mL NH4OH tokom 16 sati. Isparljive materije su uklonjene, a produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije trifluoroacetatna so 3-metil-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola (8.0 mg, 57%).<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.17 (s, 1H), 8.58 (br s, 1H), 8.32-8.22 (br m, 2H), 7.62 (br s, 1H), 7.53 (br d, 1H), 7.03 (br s, 1H), 3.25 (t, 2H), 2.07 (t, 2H), 1.62 (s, 6H); MS(ES):271(M+1).
Primer 59: Trifluoroacetatna so 4-Metil-4-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitrila
[0199]
Korak 1. 4-Metil-4-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril
[0200] TEA (38.0 µL, 0.000273 mol) i metansulfonil hlorid (21.1 µL, 0.000273 mol) su dodati sekvencijalno u rastvor 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola (dobijenog kao u Primeru 58) (81 mg, 0.00020 mol) u DCM (4 mL, 0.05 mol) kod 0° C. Reakcijska mešavina je držana na toj temperaturi tokom 1.5 sata, zatim je ugašena sa dodavanjem vode. Reakcijska mešavina je ekstrahovana sa DCM četiri puta. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani da se dobije sirovi 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butil metansulfonat (87 mg). MS(ES):479(M+1).
[0201] Mešavina 3-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butil metansulfonata (42 mg, 0.000088 mol) i kalijumovog cijanida (46 mg, 0.000702 mol) u DMF (1 mL) grejana je u mikrotalasnom reaktoru tokom 30 min na 125°C i zatim dodatnih 30 min na 135°C. Mešavina je zatim razređena sa vodom, a produkt je ekstrahovan sa tri dela MTBE. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrirani do dobijanja 61 mg sirovog 4-metil-4-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo-[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitrila, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. MS(ES):410(M+1).
Korak 2.
[0202] 4-Metil-4-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril (57 mg, 0.00014 mol) je mešan u DCM (4 ml) i TFA (1 mL) tokom 2 sata. Rastvarači su uklonjeni in vacuo i ostatak je mešan u 2 mL MeOH koji sadrži 0.2 mL etilendiamina tokom 16 sati. Isparljive materije su isparene i produkt je izolovan iz reakcijske mešavine putem preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) dalo je trifluoroacetatnu so 4-metil-4-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitrila (10 mg, 18%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.09 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.60 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.00 (br s, 1H), 2.33-2.21 (m, 4H), 1.61 (s, 6H); MS(ES):280(M+1).
Primer 60: Trifluoroacetatna so 4-Metil-4-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanamida
[0203]
[0204] Sirovi 4-metil-4-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril (36 mg, 0.000088 mol, videti dobijanje iz Primera 59) je mešan u TFA (2 mL) tokom 1 sata. Mešavina je koncentrirana da se ukloni višak TFA, a dobijeni ostatak je mešan u 2 mL metanola koji sadrži 0.5 mL NH4OH tokom 16 sati. Produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije trifluoroacetatna so 4-metil-4-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanamida (21 mg, 58%).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.18 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.33-8.21 (m, 2H), 7.62 (br s, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.22 (br s, 1H), 7.04 (br s, 1H), 6.71 (br s, 1H), 2.14-2.07 (m, 2H), 1.86-1.79 (m, 2H), 1.58 (s, 6H); MS(ES):298(M+1).
Primer 61: Trifluoroacetatna so (3S)-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitrila i trifluoroacetatna so (3R)-3-[4-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitrila
[0205]
[0206] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.050 g, 0.00016 mol) u ACN su dodati 2-butenonitril (0.014 mL, 0.00017 mol) i DBU (0.029 mL, 0.00020 mol). Dobijena smesa je mešana tokom 16 sati. Zatim su isparene isparljive materije i ostatak je razređen u etil acetatu. Dobijen rastvor je ispran sukcesivno sa 1.0 N HCl, vodom, pa rasolinom, a zatim je osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran i koncentrisan. Kako bi se dobili enantiomeri u suštini u čistom obliku, korišćen je Postupak A (videti dole).
[0207] Sirovi talog je rastvoren u TFA (7 mL, 0.09 mol) i rastvor je mešan tokom 1 sata. Zatim je višak TFA isparen i ostatak je zatim mešan sa etilendiaminom (0.1 mL, 0.001 mol) u metanolu (4 mL, 0.09 mol) tokom 16 sati. Mešavina je koncentrisana, a produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije trifluoroacetatna so 3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitrila (35 mg, 61%).<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.16 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.65-7.61 (m, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 4.86 (q, 1H), 3.17 (d, 2H), 1.57 (d, 3H); MS(ES):252(M+1).
[0208] Dodatni analozi dobijeni su postupcima koji su istovetni onima opisanim u Primeru 61 korišćenjem različitih početnih materijala za alkilaciju pirazol prstena. Na primer, α,β-nezasićeni nitrili dobijeni su postupcima koji su analogni sledećem, ilustrovano za (2E)- i (2Z)-heksen-nitril: U rastvor 1.00 M kalcijumovog tert-butoksida u THF na 0°C (24.2 mL) ukapavanjem je dodat rastvor dietil cijanometilfosfonata (4.10 mL, 0.025 mol) u THF (30 mL). Kupka je uklonjena i rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature. Nakon dostizanja sobne temperature, rastvor je ponovo ohlađen na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor butanala (2.00 mL, 0.023 mol) u THF (7 mL). Reakcijska mešavina je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Mešavina je razređena sa etil acetatom i vodom. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa tri dela etil acetata. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrirani. Dobijeno je 1.6 g sirove mešavine koja je sadržavala oboje, (2E)- i (2Z)-heksen-nitril, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja u naknadnom koraku alkilacije.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.72 (dt, 1H trans olefin), 6.48 (dt, 1H cis olefin), 5.34 (dt, 1H trans olefin), 5.31-5.30 (m, 1H cis olefin).
[0209] Gde je poželjno dobiti enantiomere u bitno čistom obliku, sprovedena je hiralna separacija pomoću jednog od sledećih postupaka:
A) Separacija je sprovedena na SEM-zaštićenom intermedijeru nakon hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) sa preparativnom kiralnom HPLC (OD-H kolona, eluiranje sa 15% etanolom u heksanima);
B) Separacija je sprovedena na deprotektiranoj slobodnoj bazi sa preparativnom kiralnom HPLC (OD-H kolona, eluiranje sa 15% etanolom u heksanima);
C) Separacija je sprovedena na SEM-zaštićenom intermedijeru nakon hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) sa preparativnom kiralnom HPLC (AD-H kolona, eluiranje sa 10% etanolom u heksanima);
D) Separacija je sprovedena na SEM-zaštićenom intermedijeru nakon hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) sa preparativnom kiralnom HPLC (AD-H kolona, eluiranje sa 15% etanolom u heksanima);
E) Separacija je sprovedena na SEM-zaštićenom intermedijeru nakon hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) sa preparativnom kiralnom HPLC (OD-H kolona, eluiranje sa 20% etanolom u heksanima; ili
F) Separacija je sprovedena na SEM-zaštićenom intermedijeru nakon hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) sa preparativnom kiralnom HPLC (OD-H kolona, eluiranje sa 30% etanolom u heksanima. OD-H kolona odnosi se na Chiralcel OD-H od kompanije Chiral Technologies, Inc, 3x25 cm, 5 µm. AD-H kolona odnosi se na Chiral Pak AD-H od tvrtke Chiral Technologies, Inc. 2x25 cm, 5 µm. Rezultati su sažeti u Tablici 4 ispod.
Tablica 4
Primer 65: Trifluoroacetatna so (3R)-3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heksanonitrila i trifluoroacetatna so (3S)-3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heksanonitrila
[0210]
Korak 1.4-Hloro-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0211] U rastvoru 4-hloropirolo[2,3-d]pirimidina (0.86 g, 0.0056 mol) u DMF (20 mL, 0.2 mol) kod 0°C je dodat natrijumov hidrid (0.27 g, 0.0067 mol) u nekoliko delova. Reakcijska smesa je mešana tokom dodatnih 45 minuta, a zatim je sledilo dodavanje ukapavanjem β-(trimetilsilil)etoksi]-metil hlorida (1.2 mL, 0.0067 mol). Dobijena reakcijska mešavina mešana je na 0°C tokom 45 min, zatim je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Organski ekstrakt je ispran sa vodom, rasolinom, zatim osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran i koncentriran do dobijanja ulja. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (0-15% etil acetat/heksani) da se dobije 4-hloro-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (1.40 g, 88%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.72 (d, 1H), 5.71 (s, 2H), 3.59 (dd, 2H), 0.97 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):284(M+1).
Korak 2.4-(1H-Pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0212] U mešavinu 4-hloro-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (1.4 g, 0.0049 mol) i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (1.4 g, 0.0074 mol) u DMF (40 mL, 0.5 mol) je dodat kalijumov karbonat (2.0 g, 0.015 mol) u 15 mL vode. Mešavina je očišćena sa neprekidnom strujom azota tokom 15 minuta. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.41 g, 0.00036 mol) i reakcija je zagrejana do 125°C tokom 30 min. Mešavina je ostavljena da se ohladi i zatim je razređena sa etil acetatom. Razređena reakcijska mešavina je isprana sa vodom, pa rasolinom, zatim osušena preko Na2SO4i koncentrirana do dobijanja rastvora u malom volumenu DMF (oko 2-3 mL). Dodata je voda, koja je uzrokovala da materijal formira gumu na zidovima posude. Voda je zatim pretočena, a čvrste materije su otopljene u etil acetatu. Rastvor je osušen preko Na2SO4, pa koncentriran in vacuo da se dobije žuta čvrsta materija. Produkt je trituriran sa etil etrom da se dobije 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin kao beli prašak koji je osušen u vakumu (1g, 60%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.80 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.46 (s, 2H), 7.46 (d, 1H), 6.88 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 3.61 (dd, 2H), 0.98 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):316(M+1).
Korak 3.
[0213] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.050 g, 0.00016 mol) u ACN (1 mL, 0.02 mol) je dodat heks-2-enenitril (0.100 g, 0.00105 mol) (kao mešavina cis i trans izomera), a zatim DBU (60 µL, 0.0004 mol). Dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. ACN je uklonjen in vacuo. Sirovi ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 1.0 N HCl, rasolinom, pa osušen preko Na2SO4i koncentriran. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (0-70% EtOAc/heksani) da se dobije 56 mg produkta, koji je mešan sa 1:1 TFA/DCM tokom 1 sata, a rastvarači su ispareni. Dobijeni produkt je mešan sa metanolom, (4 mL, 0.1 mol) koji je sadržavao etilendiamin (0.1 mL, 0.001 mol) preko noći. Rastvarač je isparen i produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije 3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heksanonitril kao so trifluoroacetata. Gde se to želi, enantiomeri mogu biti izolovani u znatno prečišćenom obliku pomoću gore opisanog Postupka A za Primer 61.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.93 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 4.87-4.77 (m, 1H), 3.26-3.05 (m, 2H), 2.20-2.05 (m, 1H), 2.00-1.86 (m, 1H), 1.40-1.10 (m, 2H), 0.95 (t, 3H); MS(ES):281(M+1).
Primer 67: (3R)- i (3S)-3-Ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0214]
Korak 1. (2E)- i (2Z)-3-Ciklopentilakrilonitril
[0215] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (235 mL) na 0 °C ukapavanjem je dodat rastvor dietil cijanometilfosfonata (39.9 mL, 0.246 mol) u THF (300 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature i zatim je ponovo ohlađena na 0°C, kada je ukapavanjem dodat rastvor ciklopentankarbaldehida (22.0 g, 0.224 mol) u THF (60 mL). Kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do temperature okoline i mešana tokom 64 sata. Mešavina je podeljena između dietil etra i vode, vodena komponenta je ekstrahovana sa tri dela etra, zatim sa dva dela etil acetata. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, pa zatim osušena preko natrijumovog sulfata, filtrirana i koncentrirana in vacuo da se dobije mešavina koja sadrži 24.4 g izomera olefina koji su korišćeni bez daljeg prečišćavanja (89%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.69 (dd, 1H, trans olefin), 6.37 (t, 1H, cis olefin), 5.29 (dd, 1H, trans olefin), 5.20 (d, 1H, cis olefin), 3.07-2.95 (m, 1H, cis produkt), 2.64-2.52 (m, 1H, trans produkt), 1.98-1.26 (m, 16H).
Korak 2. (3R)-i (3S)-3-Ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0216] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (15.0 g, 0.0476 mol) u ACN (300 mL) je dodat 3-ciklopentilakrilonitril (15 g, 0.12 mol) (kao mešavina cis i trans izomera), a zatim DBU (15 mL, 0.10 mol). Dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. ACN je isparen. Mešavina je razređena sa etil acetatom, a rastvor je ispran sa 1.0 N HCl. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa tri dela etil acetata. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrirani. Sirovi produkt je prečišćen pomoću hromatografije na silikagelu (gradijent etil acetat/heksani) da se dobije viskozni čisti sirup, koji je razređen u etanolu i isparen nekoliko puta da se ukloni etil acetat, te da se dobije 19.4 g racemičnog adukta (93%). Enantiomeri su separirani pomoću preparativne-HPLC, (OD-H, 15% etanol/heksani) i korišćeni su odvojeno u sledećem koraku da se dobije njihov odgovarajući konačni produkt. Za konačne produkte (videti Korak 3) koji proizlaze iz svakog od separiranih enantiomera uočeno je da su aktivni JAK inhibitori; međutim, konačni produkt koji proizlazi iz drugog vrška za eluiranje sa preparativnom-HPLC bio je aktivniji od njegovog enantiomera.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 7.39 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.26 (dt, 1H), 3.54 (t, 2H), 3.14 (dd, 1H), 2.95 (dd, 1H), 2.67-2.50 (m, 1H), 2.03-1.88 (m, 1H), 1.80-1.15 (m, 7H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):437 (M+1).
Korak 3.
[0217] U rastvor 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (6.5 g, 0.015 mol, R ili S enantiomer kako je gore izolovan) u DCM (40 mL) je dodat TFA (16 mL), pa je mešan tokom 6 sati. Rastvarač i TFA su uklonjeni in vacuo. Ostatak je razređen u DCM i koncentriran korišćenjem rotacijskog isparivača dva dodatna puta da se ukloni TFA koliko god je to moguće. Nakon toga, ostatak je preko noći mešan sa etilendiaminom (4 mL, 0.06 mol) u metanolu (30 mL). Rastvarač je uklonjen in vacuo, dodata je voda i produkt je ekstrahovan u tri dela etil acetata. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, osušena preko natrijumovog sulfata, pretočena i koncentrirana da se dobije sirovi produkt koji je zatim prečišćen kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom metanol/DCM). Dobijena mešavina je dalje prečišćena pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije produkt (2.68 g, 58%).<1>H NMR (400 MHz, D6-dmso): δ 12.11 (br s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.53 (dt, 1H), 3.27 (dd, 1H), 3.19 (dd, 1H), 2.48-2.36 (m, 1H), 1.86-1.76 (m, 1H), 1.68-1.13 (m, 7H); MS(ES):307(M+1).
[0218] Dodatni analozi koji su dati u sledećim Tablicama dobijeni su postupcima koji su istovetni onim opisanim, na primer, u Primerima 61 i 65, korišćenjem različitih početnih materijala kao što su različiti α,β-nezasićeni nitrili iz Koraka 3. Izolacija enantiomera u bitno čistom obliku postignuta je pomoću iznesenih i gore opisanih postupaka kiralne separacije (A-F) koji prethode Tablici 4. Gde je produkt izolovan kao slobodni amin, produkt je nakon postupka deprotekcije bio prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) umesto sa preparativnom-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA). To se naziva "modifikacija G". Rezultati su sažeti u Tablici 5 prema sledećoj strukturi:
Tablica 5
Primer 69: Trifluoroacetatna so 4-{1-[(1S)-1-Metilbutil]-1H-pirazol-4-il}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina i
trifluoroacetatna so 4-{1-[(1R)-1-Metilbutil]-1H-pirazol-4-il}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0219]
[0220] Rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (0.050 g, 0.00016 mol) u DMF (2 mL, 0.02 mol) je ohlađen u ledenoj kupki i u to je dodat natrijumov hidrid (0.013 g, 0.00032 mol). Dobijena smesa je mešana tokom 10 minuta, nakon čega je dodat 2-bromopentan (0.030 mL, 0.00024 mol). Hladna kupka je zatim uklonjena i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata, u kojem vremenu je dodat dodatni deo 2-bromopentana (0.015 mL, 0.00012 mol). Nakon 45 minuta, dodata je voda i reakcijska mešavina je ekstrahovana sa tri dela etil acetata. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, osušena preko natrijumovog sulfata, filtrirana, te koncentrirana. Ostatak je mešan sa TFA (3 mL, 0.04 mol) i DCM (3 mL, 0.05 mol) tokom 3.5 sata, rastvarač je zatim uklonjen in vacuo. Talog je zatim mešan sa NH4OH (1.5 mL) u MeOH (4 mL) tokom 16 sati. Rastvarač je isparen i produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC (C 18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije 4-[1-(1-metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin kao trifluoroacetatna so (25 mg, 44%).<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.83 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.24 (d, 1H), 4.63-4.50 (m, 1H), 2.07-1.91 (m, 1H), 1.88-1.74 (m, 1H), 1.58 (d, 3H), 1.38-1.09 (m, 2H), 0.93 (t, 3H); MS(ES):256(M+1).
[0221] Izolacija enantiomera u bitno čistom obliku postignuta je pomoću separacije racemične slobodne baze (izolovane pomoću kolonske flash hromatografije nakon deprotekcije, eluiranje sa MeOH/DCM gradijentom) korišćenjem HPLC (OD-H, eluiranje sa 5% izopropanol/heksani).
Primer 69a: 4-Metil-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril
[0222]
Korak 1. Etil 3-metil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H pirazol-1-il]butanoat
[0223] Rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin (12.1 g, 0.0384 mol), 2-butenske kiseline, 3-metil-, etil estra (16.0 mL, 0.115 mol) i DBU (14.3 mL, 0.0959 mol) u ACN (100 mL) je zagrevan do refluksa tokom 3.5 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je razređen sa vodom, ekstrahovan sa etil acetatom, a kombinovani organski ekstrakti su isprani sa zasićenim amonijumovim hloridom, osušeni preko natrijum sulfata, pa koncentrirani. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (15.5 g, 91 %).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.83 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.37 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.03 (q, 2H), 3.54 (dd, 2H), 2.98 (s, 2H), 1.80 (s, 6H), 1.13 (t, 3H), 0.91 (dd, 2H), -0.07 (s, 9H); MS(ES):444(M+1).
Korak 2. 3-Metil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ol
[0224] U rastvor etil 3-metil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]liutanoata (15.4 g, 0.0347 mol) u THF (151 mL) na -78°C ukapavanjem je dodato 1.00 M diizobutilaluminijumovog hidrida u DCM (84.5 mL). Reakcija je mešana kroz 2 sata uz polako grejanje do -10°C. Mešavina je ugašena sa vodom, zatim je obrađena sa kalijum-natrijum-tartarattetrahidratom i vodom. Smesa je mešana tokom 1 sata, zatim je ekstrahovana sa etil acetatom. Ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, pa su zatim osušeni sa natrijumovim sulfatom, filtrirani i koncentrirani in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom da se dobije željeni produkt (13.8 g, 99%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.83 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.38 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 3.65 (dd, 2H), 3.54 (dd, 2H), 2.21 (t, 2H), 1.72 (s, 6H), 0.91 (dd, 2H), -0.07 (s, 9H); MS(ES):402(M+1).
Korak 3.3-Metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]butan-1-ol
[0225] Rastvor 3-metil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola (13.8 g, 0.0344 mol) u TFA (20 mL) je mešan tokom 1 sata. Mešavina je zatim koncentrirana in vacuo i ostatak je mešan tokom 2 sata u mešavini metanola (30 mL), amonijum hidroksida (30 mL) i etilendiamina (8 mL). Mešavina je zatim koncentrirana, a ostatak je razređen sa vodom i ekstrahovan sa nekoliko delova 15% IPA/CH2Cl2. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrisani in vacuo do dobijanja 20 g bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je triturirana sa etrom i produkt je izolovan pomoću filtracije da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca (7.75 g, 83%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.99 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.38 (dd, 1H), 6.80 (dd, 1H), 3.66 (t, 2H), 2.72 (br s, 1H), 2.22 (t, 2H), 1.74 (s, 6H); MS(ES):272(M+1).
Korak 4.3-Metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]butil metansulfonat
[0226] Rastvor 3-metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butan-1-ola (6.61 g, 0.0244 mol) u DCM (300 mL) na 0°C obrađen je sa TEA (3.74 mL, 0.0268 mol) i zatim sa metansulfonil hloridom (2.07 mL, 0.0268 mol). Reakcija je mešana 1 sat, pa je zatim koncentrirana in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom da se dobije željeni produkt (4.9 g, 57%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-dmso): δ 12.45 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 7.79 (dd, 1H), 7.11 (dd, 1H), 4.75 (t, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.85 (t, 1H), 1.75 (s, 6H); MS(ES):254(M-CH3SO3H+1).
Korak 5.4-Metil-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril
[0227] 3-metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butil metansulfonat (2.97 g, 8.50 mmol), DMF (120 mL) i natrijum cijanid (6.21 g, 0.127 mol) su ravnomerno raspoređeni u šest 20 mL posuda za mikrotalasni reaktor, svaka od njih je zagrejana u mikrotalasnom reaktoru u trajanju od 4000 sekundi na 125°C. Sadržaji posuda su pomešani i razređeni sa 400 mL vode, pa ekstrahovani sa pet 150 mL delova etil acetata. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom da se dobije željeni produkt (1.40 g, 59%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.52 (br s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.39 (dd, 1H), 6.81 (dd, 1H), 2.38 (dd, 2H), 2.16 (dd, 2H), 1.73 (s, 6H); MS(ES):281(M+1).
[0228] Analozi iz Tablice 5a pripremljeni su prema gornjem postupku opisanom za Primer 69a. U primeru 69b, korišćen je konjugovani akceptor, pa je pripremljen kako je opisano u Perkin Trans. 1, 2000, (17), 2968-2976, a koraci 4 i 5 su sprovedeni pre koraka 3.
Tablica 5a
Primer 69d: 3-Metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitril
[0229]
Korak 1. Senecionitril
[0230] U rastvor 1.0 M kalijum tert-butoksida u THF (2.0 mL) na 0°C je dodat ukapavanjem rastvor dietil cijanometilfosfonata (0.33 mL, 2.06 mmol) u THF (4 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature. Reakcija je zatim ponovo ohlađena na 0 °C i ukapavanjem je dodat aceton (0.20 mL, 2.81 mmol). Ledena kupka je zatim uklonjena i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakcija je razređena sa vodom, slojevi su separirani, a vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom. Ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani. Produkt je korišćen bez daljeg prečišćavanja (339 mg, 67%).
[0231]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.10 (br s, 1H), 2.05 (s, 3H), 1.92 (s, 3H).
Korak 2.3-Metil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitril
[0232] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (0.216 g, 0.684 mmol) u ACN (4 mL, 0.08 mol) dodat je sirovi senecionitril (0.111 g, 1.37 mmol), pa zatim DBU (200 µL, 0.002 mol) i dobijena mešavina je zagrejavana na 60°C tokom 23 sata. Mešavina je ohlađena do sobne temperature i isparen je ACN. Mešavina je razređena sa etil acetatom i isprana sa razređenom HCl i rasolinom. Organski rastvor je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentriran. Prečišćavanje pomoću hromatografije na silikagelu (etil acetat/heksani) dovelo je do željenog produkta.
<1>H NMR (300 MHz, d6-dmso): δ.8.83 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 3.54 (dd, 2H), 3.08 (s, 2H), 1.84 (s, 6H), 0.91 (dd, 2H), -0.07 (s, 9H); MS(ES):397(M+1).
[0233] U rastvor ovog produkta u DCM na 0°C je dodato dovoljno TFA da sačinjava 20% ukupnog volumena. Rastvor je mešan kod ove temperature tokom 30 min, zatim kod temperature okoline tokom 2 sata i 15 minuta. Rastvarači su uklonjeni in vacuo i ostatak je preko noći mešan sa metanolom (10 mL) i etilendiaminom (0.4 mL, 0.006 mol). Rastvarač je isparen i produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije produkt (25 mg, 14%).
<1>H NMR (300 MHz, d6-dmso): δ.12.08 (s, 1H), 8.68 (s, 2H), 8.39 (s, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 3.32 (s, 2H), 1.73 (s, 6H); MS(ES):267(M+1).
[0234] Primeri 69e i 69f u Tablici 5b su dobijeni pomoću postupka koji je analogan onima opisanim gore za Primer 69d, sa nezasićenim nitrilima dobijenim bilo prema postupcima objavljenim u literaturi ili prema postupku u Koraku 1.
Tablica 5b
[0235] Dodatni analozi su dobijeni pomoću postupaka koji su analogni onima opisanim u Primeru 69, korišćenjem za korak nukleofilne supstitucije različitih početnih materijala kao što su alternativna jedinjenja bromida ili mesilata. Kada je kao produkt dobijen slobodni amin, produkt je prečišćen nakon deprotekcije bilo pomoću hromatografije na silikagelu (eluiranje sa 5% metanolom u DCM) ili pomoću preparativne-HPLC (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH). Rezultati su sažeti za jedinjenja navedena u Tablici 6.
Tablica 6
Primer 74: (2Z)-3-Ciklopentil-3- [4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-akrilonitril
[0236]
Korak 1.3-Ciklopentilprop-2-inenitril
[0237] U rastvor ciklopentilacetilena (0.50 g, 5.3 mmol) u THF (5 mL) na -78°C je dodat 2.5 M nbutilitijum u heksanu (2.23 mL). Smesa je mešana tokom 15 min zatim je ukapavanjem dodat fenil cijanat (0.70 g, 5.8 mmol) u THF (3 mL). Reakcija je zagrejana do sobne temperature. U reakcijsku mešavinu uliveno je 6 N NaOH, a smesa je mešana tokom 5 minuta. Produkt je ekstrahovan sa dietil etrom. Ekstrakti su isprani sa 6 N NaOH i sa rasolinom, zatim osušeni preko natrijum sulfata, pretočeni i rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (600 mg, 95%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 2.81-2.68 (m, 1H), 2.07-1.54 (m, 8H).
Korak 2. (2Z)-3-Ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]akrilonilril
[0238] U mešavinu 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (0.40 g, 1.2 mmol) i 3-ciklopentilprop-2-inenitrila (0.30 g, 2.5 mmol) u DMF (8 mL) je dodat kalijum karbonat (0.09 g, 0.6 mmol). Smesa je mešana tokom 35 min. Reakcija je razređena sa etil acetatom i rasolinom, a vodena faza je ekstrahovana sa tri volumenska dela etil acetata. Kombinovani organski ekstrakti su ponovo isprani sa rasolinom, zatim su osušeni preko natrijum sulfata, pretočeni i koncentrisani in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (290 mg, 53%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.98 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.84 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 5.21 (s, 1H), 3.64-3.55 (m, 1H), 3.53 (t, 2H), 2.13-2.01 (m, 2H), 1.83-1.66 (m, 4H), 1.57-1.46 (m, 2H), 0.91 (t, 2H), -0.07 (s, 9H); MS(ES):435(M+1).
Korak 3. (2Z)-3-Ciklopentil-3-[4-(7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]akrilonitril
[0239]
Rastvor (2Z)-3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]akrilonitrila (0.030 g, 0.069 mol) u DCM (3 mL) i TFA (2 mL) je mešan tokom 1 sata. Rastvarači su uklonjeni in vacuo i produkt je bio mešan sa THF (1.5 mL), 50% vodenim rastvorom natrijum hidroksida (0.75 mL) i vodom (0.75 mL) tokom 2 sata. Reakcijska mešavina je neutralizovana pomoću dodavanja ukapavanjem koncentrisane HCl. Produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski delovi osušeni su preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrirani in vacuo. Sirovi talog je bio prečišćen sa preparativnom-HPLC/MS (C18 kolona uz eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (16 mg, 76%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-dmso): δ 9.08 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 5.82 (d, 1H), 3.62-3.54 (m, 1H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.76-1.48 (m, 6H); MS(ES):305(M+1).
Primer 75 : 3-Ciklopentiliden-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanonitril
[0240]
Korak 1. 3-Ciklopentiliden-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0241] U suspenziju 3-ciklopentilprop-2-inenitrila (0.4 g, 0.003 mol) u ACN (10 mL) dodat je 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (0.53 g, 1.7 mmol) i DBU (0.33 mL, 2.2 mmol). Ova smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 50 minuta. Reakcijska mešavina je podeljena između etil acetata i razređene HCl. Vodeni deo je separiran i ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa razređenom HCl i rasolinom, pa su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (540 mg, 74%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 3.70 (s, 2H), 3.54 (dd, 2H), 2.55 (t, 2H), 2.45 (t, 2h), 1.85 (dddd, 2H), 1.73 (dddd, 2H), 0.91 (dd, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):435(M+1).
Korak 2.3-Ciklopentiliden-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]propanonitril
[0242] Rastvor 3-ciklopentiliden-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (0.030 g, 0.069 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (2 mL) je mešan tokom 1 sata. Rastvarači su ispareni in vacuo i produkt je mešan sa 50% vodenim rastvorom natrijum hidroksida (0.75 mL), vodom (0.75 mL) i THF (1.5 mL) tokom 2 sata. Reakcijska mešavina je neutralizovana sa dodavanjem koncentrirane HCl ukapavanjem. Produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (7 mg, 33%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-dmso): δ 12.23-12.01 (br s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.53 (t, 2H), 2.42 (t, 2H), 1.76 (dddd, 2H), 1.65 (dddd, 2H); MS(ES):305(M+1).
Primer 76: Trifluoroacetatna so 3-Metil[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]aminopropan-nitrila
[0243]
Korak 1.4-(1,3-Tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7Hpirolo[2,3-d]pirimidin
[0244] 4-Hloro-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (3.00 g, 0.0106 mol) i 1,3-tiazol (7.50 mL, 0.106 mol) su rastvoreni u N,N-dimetilacetamidu (40.0 mL). Rastvor je podeljen na jednake delove u četiri 20 mL posude za mikrotalasni reaktor. U svaku reakcijsku posudu zatim je dodat kalijum acetat (0.777 g, 7.93 mmol) i zatim tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.60 g, 2.1 mmol). Svaka reakcijska posuda zagrejavana je na 200°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 30 minuta. Reakcije su kombinovane i veći deo rastvarača je uklonjen in vacuo. Ostatak je razređen sa DCM, filtriran i koncentrisan. Prečišćavanje sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) je dovelo do željenog produkta (2.25 g, 64%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.99 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 5.70 (s, 2H), 3.56 (dd, 2H), 0.93 (dd, 2H), -0.05 (s, 9H); MS(ES):333(M+1).
Korak 2.4-(2-Bromo-1,3-tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0245] 2.5 M n-Butilitijum u heksanu (0.860 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor 4-(1,3-tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina na -78 °C (550 mg, 0.0016 mol) u THF (20 mL). Smesa je mešana tokom 30 minuta na -78 °C, zatim je sporo dodavan ugljenikov tetrabromid (658 mg, 0.00198 mol) kao rastvor u THF (10 mL). Nakon 30 minuta, mešavina je ugašena sa malom količinom zasićenog amonijum hlorida, razređena sa etrom, pa osušena preko natrijum sulfata. Talog preostao nakon filtracije i koncentrisanja prečišćen je sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (387 mg, 57%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.83 (d, 1H), 5.69 (s, 2H), 3.55 (dd, 2H), 0.92 (dd, 2H), -0.05 (s, 9H); MS(ES):411, 413(M+1).
Korak 3.4-(2-Bromo-1,3-tiazol-5-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0246] Rastvor 4-(2-bromo-1,3-tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidina (370 mg, 0.90 mmol) u DCM (5.0 mL) i TFA (1.0 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 7 sati. Smesa je zatim koncentrirana, ponovo razređena u metanolu (2 mL) i dodat je etilendiamin (0.5 mL). Smesa je mešana tokom 6 sati na sobnoj temperaturi. Mešavina je razređena sa DCM (10 mL) i talog je izolovan pomoću filtracije i ispran sa malom količinom DCM da se dobije željeni produkt (182 mg, 72%).
<1>H NMR (300 MHz, d6-dmso): δ 8.74 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.15 (d, 1H); MS(ES):281,283(M+1).
Korak 4.3-Metil[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]aminopropanonitril
[0247] Rastvor 4-(2-bromo-1,3-tiazol-5-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (31 mg, 0.11 mmol) i 3-(metilamino)propionitrila (103 µL, 0.00110 mol) u DMF (1.0 mL, 0.013 mol) je mešan na 90°C tokom 2 sata. Sirova reakcijska mešavina prečišćena je pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) i ponovo pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije željeni produkt kao trifluoroacetatna so (30 mg, 68%).
<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.25 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.60 (dd, 1H), 7.00 (dd, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.94 (t, 2H); MS(ES):285(M+1).
Primer 77: (3S)- i (3R)3-[5-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksanonitril
[0248]
Korak 1. N-Metoksi-N-metilbutanamid
[0249] U mešavinu butanske kiseline (1.01 g, 0.0115 mol) i N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorida (1.12 g, 0.0115 mol) u DCM (50 mL) je dodat benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)-fosfonijum heksafluorofosfat (5.6 g, 0.013 mol) i TEA (3.2 mL, 0.023 mol). Smesa je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim ispran sa vodom i rasolinom, osušen preko natrijumovog sulfata, pa koncentriran in vacuo. Sirovi produkt je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (etar/heksani). Rastvarač je uklonjen (235 mbar/40 °C) da se dobije produkt (1.33g, 88%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.68 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 2.40 (t, 2H), 1.74-1.59 (m, 2H), 0.96 (t, 3H).
Korak 2. 1-[5-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]-butan-1-on
[0250] 2.5 M n-Butilitijuma u heksanu (878 µL) je dodato polako ukapavanjem u rastvor 4-(1,3-tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (501 mg, 1.37 mmol) u THF (20 mL) na -78°C. Nakon 45 minuta, dodat je N-metoksi-N-metilbutanamid (0.360 g, 2.74 mmol). Reakcija je nastavljena na -78 °C tokom 30 minuta, a zatim je ostavljena da dođe do sobne temperature. Reakcija je ugašena sa zasićenim amonijum hloridom, pa je ekstrahovana sa etil acetatom. Ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata i koncentrirani in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) dobijen je produkt (235 mg, 42%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.93 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 5.71 (s, 2H), 3.56 (dd, 2H), 3.19 (t, 2H), 1.92-1.77 (m, 2H), 1.05 (t, 3H), 0.93 (dd, 2H), -0.05 (s, 9H); MS(ES):403(M+1).
Korak 3. (2E)- i (2Z)-3-[5-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heks-1-enenitril
[0251] U rastvor 1.0 M kalijum tert-butoksida u THF (0.605 mL) u THF (4.0 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat dietil cijanometilfosfonat (0.102 mL, 0.634 mmol). Ledena kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature. Nakon 30 minuta, dodat je ukapavanjem rastvor 1-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butan-1-ona (232 mg, 0.576 mmol) u THF (3.0 mL). Reakcija je mešana tokom 2 sata, a sirova mešavina je zatim absorbovana na silikagel i prečišćena sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije produkt kao mešavina izomera olefina (225 mg, 92%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3), glavni izomer: δ 8.89 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 6.89 (d, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.70 (s, 2H), 3.56 (dd, 2H), 2.96 (t, 2H), 1.88-1.72 (m, 2H), 1.08 (t, 3H), 0.93 (dd, 2H), - 0.07 (s, 9H); MS(ES):426(M+1).
Korak 4. (3S)- i (3R)-3-[5-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksanonitril
[0252] Bakarni acetat, monohidrat (0.7mg, 0.004mmol) i (oksidi-2,1-fenilen)bis(difenilfosfin) (2 mg, 0.004 mol) je pomešan u toluenu (0.24 mL). Dodat je PMHS (30 µL). Smeša je mešana tokom 25 minuta kod sobne temperature, zatim je dodat (2E)-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heks-2-enenitril (51 mg, 0.12 mol) u toluenu (0.24 mL), i konačno tertbutil alkohol (0.043 mL). Dobijena smesa je mešana preko noći. Sirova mešavina je direktno prečišćena sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (39 mg, 76%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.69 (s, 2H), 3.60-3.46 (m, 3H), 2.99-2.82 (m, 2H), 2.05-1.89 (m, 2H), 1.50-1.34 (m, 2H), 0.97 (t, 3H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):428(M+1).
Korak 5. (3S)- i (3R)-3-[5-(7H Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksanonitril
[0253] TFA (1.0 mL) je dodat u rastvor 3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksanonitrila (36 mg, 0.084 mmol) u DCM (4.0 mL) i smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Mešavina je koncentrisana, pa ponovo otopljena u metanolu (3 mL), u koji je dodat etilendiamin (0.1 mL). Nakon 2 sata reakcije, mešavina je koncentrisana i direktno prečišćena putem preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (10 mg, 40%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.96 (br s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.51-7.45 (m, 1H), 6.90-6.86 (m, 1H), 3.59-3.44 (m, 1H), 3.01-2.82 (m, 2H), 2.06-1.87 (m, 2H), 1.51-1.34 (m, 2H), 0.98 (t, 3H); MS(ES):298(M+1).
Primer 78: (3R)- i (3S)-3-Ciklopentil-3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]propionitril
[0254]
[0255] U rastvor (2E)- i (2Z)-3-ciklopentil-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksilmetil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]akrilonitrila (199 mg, 0.440 mmol) (pripremljen, na primer, kao u Primeru 77, koraci 1 do 3) u mešavini etanola (10 mL) i etil acetata (10 mL) dodata je katalitička količina 10% paladijuma na ugljeniku. Smesa je mešana na sobnoj temperaturi pod jednom atmosferom vodonika preko noći. Zatim podvrgnuta pritisku 50 PSI H2dok reakcija nije okončana. Filtracija i uklanjanje rastvarača dalo je ulje koje je razređeno u DCM (4 mL) i TFA (1 mL). Rastvor je mešan sve dok se početni materijal nije potrošio i mešavina je zatim koncentrisana, pa ponovno rastvorena u metanolu (3 mL), u koji je dodat etilendiamin (0.4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom jednog sata, pa je koncentrisan in vacuo. Sirova mešavina prečišćena je pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (36 mg, 25%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.44 (br s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.50 (dd, 1H), 6.89 (dd, 1H), 3.34 (dt, 1H), 2.98 (dd, 1H), 2.89 (dd, 1H), 2.44-2.31 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 1H), 1.80-1.52 (m, 5H), 1.40-1.24 (m, 2H); MS(ES):324(M+1).
[0256] Sledeća jedinjenja iz Tablice 5c su pripremljena (kao mešavine racemata) kako je opisano u Primeru 77, 78 ili 86, kako je naznačeno u sledećoj tablici, uz korišćenje različitih Veinrebovih amida (kako je dobijeno u Primeru 77, Korak 1):
Tablica 5c
Primer 84: (2S)- i (2R)-2-[5-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentanonitril
[0257]
Korak 1. (2S)- i (2R)-2-[5-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentanonitril
[0258] U mešavinu 1-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butan-1-ona (pripremljenu kao u Primeru 77) (101 mg, 0.251 mmol) i p-tolilsulfonil-metil izocijanida (147 mg, 0.753 mmol) u mešavini DMSO (5.0 mL) i etanola (61 µL) je dodato 1.0 M kalijum tertbutoksida u THF (753 µL). Mešavina je zatim zagrejana na 45°C tokom 2 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, mešavina je ugašena dodavanjem zasićenog amonijum hlorida, pa zatim sa vodom. Produkt je ekstrahovan sa etrom, a ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) došlo se do produkta (39 mg, 25%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.32 (dd, 1H), 3.55 (dd, 2H), 2.20-2.11 (m, 2H), 1.71-1.57 (m, 2H), 1.03 (t, 3H), 0.93 (dd, 2H); MS(ES):414(M+1).
Korak 2. (2S)- i (2R)-2-[5-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentanonitril
[0259] Rastvor 2-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentanonitrila (59 mg, 0.093 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (0.5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Mešavina je zatim koncentrisana, a ostatak je zatim rastvoren u metanolu (3 mL) u koji je tada dodat etilendiamin (0.3 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a sirova mešavina je prečišćena pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (20 mg, 76%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.66 (br s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.49 (dd, 1H), 6.88 (dd, 1H), 4.33 (dd, 1H), 2.23-2.12 (m, 2H), 1.75-1.60 (m, 2H), 1.04 (t, 3H); MS(ES):284(M+1).
Primer 85: (4S)- i (4R)-4-[5-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-tiazol-2-il]heptan-nitril
[0260]
[0261] U rastvor trietil fosfonoacetata (188 mg, 0.838 mmol) u THF (6.0 mL) na 0°C je dodat 1.0 M kalijum tert-butoksida u THF (840 µL). Mešavina je zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i zatim je ponovno ohlađena na 0°C, kada je dodat 1-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butan-1-on (pripremljen kao u Primeru 77) (225 mg, 0.559 mmol) u THF (4.0 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sata, kada je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata i koncentrisani in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom dobijen je produkt kao mešavina izomera olefina (222 mg, 84%). MS(ES):473(M+1).
[0262] Etil 3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heks-2-enoat kao mešavina (2E)- i (2Z)- izomera (222 mg, 0.470 mmol) je razređen u etanolu (10 mL), pa je dodata katalitička količina 10% Pd-C. Smeša je mešana u atmosferi vodonika, dovođenoj iz balona, tokom 16 sati. Filtriranjem i koncentrisanjem in vacuo došlo se do željenog produkta (201 mg, 90%). MS(ES):475(M+1).
[0263] U rastvor etil 3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksanoata (201 mg, 0.423 mmol) u THF (5.0 mL) na -78°C je dodat 1.00 M diizobutilaluminijum hidrida u DCM (1.06 mL). Mešavina je tada ostavljena da se polako zagreje do -10 °C tokom 1.5 sata, zatim je sledilo dodavanje kalijum-natrijum-tartrat-tetrahidrata, vode i etra. Smeša je mešana tokom 1 sata, slojevi su zatim separirani, a vodeni sloj je dalje ekstrahovan sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijum sulfata i koncentrisani in vacuo da se dobije željeni produkt (176 mg, 96%). MS(ES):433(M+1).
[0264] Rastvor 3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksan-1-ola (88 mg, 0.20 mmol) u TFA (2 mL) mešan je tokom 30 minuta. TFA je zatim isparen i ostatak je mešan u metanolu (2 mL) koji sadrži etilendiamin (0.2 mL) i kap vode tokom 30 minuta. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) dovelo je do željenog produkta (36 mg, 58%). MS(ES):303(M+1).
[0265] U mešavinu 3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]heksan-1-ola (36 mg, 0.12 mmol) i TEA (19.9 µL, 0.143 mmol) u DCM (5 mL) na 0°C je dodat metansulfonil hlorid (11.0 µL, 0.143 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, rastvor je koncentrisan i rastvoren u DMSO (1.6 mL) i dodat je natrijum cijanid (23 mg, 0.48 mmol). Mešavina je zatim grejana na 125°C u mikrotalasnom reaktoru 30 minuta. Mešavina je zatim direktno prečišćena pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (10 mg, 27%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.37 (br s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 6.88 (dd, 1H), 3.34-3.25 (m, 1H), 2.47-2.30 (m, 2H), 2.22-2.12 (m, 2H), 1.95-1.71 (m, 2H), 1.44-1.31 (m, 2H), 0.94 (t, 3H); MS(ES):312(M+1).
Primer 86: 3-[5-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentandinitril
[0266]
Korak 1. N-Metoksi-2-[(4-metoksibenzil)oksi]-N-metilacetamid
[0267] U mešavinu [(4-metoksibenzil)oksi]sirćetne kiseline (Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2001, pp. 2837-2841) (6.86 g, 0.0350 mol) i N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorida (3.41 g, 0.0350 mol) u DCM (100 mL) je dodat benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)-fosfonijum heksafluorofosfat (17 g, 0.038 mol) i zatim TEA (9.7 mL, 0.070 mol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim ispran sa vodom, 0.5 M HCl, zasićenim NaHCO3, pa rasolinom, zatim je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrisan in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (etar/heksani) dobijen je željeni produkt (5.75 g, 69%).
Korak 2. 2-[(4-Metoksibenzil)oksi]-1-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]etanon
[0268] U rastvor 4-(1,3-tiazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (2.12 g, 6.38 mmol) u THF (70 mL) na -78°C je dodato polaganim ukapavanjem 2.5 M n-butilitijuma u heksanu (3.06 mL). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je N-metoksi-2-[(4-metoksibenzil)oksi]-N-metilacetamid (2.29 g, 9.56 mmol). Reakcija je nastavljena tokom 30 minuta nakon dodavanja, na -78°C, zatim je ledena kupka uklonjena i reakcija je ugašena sa zasićenim amonijum hloridom i ekstrahovana sa etrom. Ekstrakti su osušeni sa natrijum sulfatom i koncentrisani in vacuo. Sirova mešavina prečišćena je pomoću kolonske flash hromatografije (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (2.16 g, 66%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.93 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.37 (d, 2H), 6.91 (d, 2H), 6.89 (d, 1H), 5.70 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.70 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (dd, 2h), 0.93 (dd, 2H), -0.05 (s, 9H); MS(ES):511(M+1).
Korak 3. (2E)- i (2Z)-4-[(4-Metoksibenzil)oksi]-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]but-2-enenitril
[0269] U rastvor 1 M kalijum tert-butoksida u THF (4.44 mL) u THF (30 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat dietil cijanometilfosfonat (820 mg, 0.0046 mol). Kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, ukapavanjem je dodat rastvor 2-[(4-metoksibenzil)-oksi]-1-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]-etanona (2.16 g, 0.00423 mol) u THF (20 mL). Reakcija je mešana kroz 1 sat, a zatim je ugašena sa malom količinom zasićenog amonijum hlorida, razređena sa etrom, osušena preko natrijum sulfata i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa kolonskom flash hromatografijom, eluiranje sa gradijentom 0-35% etil acetat/heksani dovelo je do željenog produkta kao mešavine izomera olefina u gotovo jednakim količinama (1.76 g, 78%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.35 (dd, 2H), 7.31 (dd, 2H), 6.92 (dd, 2H), 6.90 (dd, 2H), 6.86 (d, 2H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (t, 1H), 5.70 (s, 4H), 4.75 (s; 2H), 4.72 (d, 2H), 4.64 (s, 4H), 3.82 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (dd, 2H), 3.55 (dd, 2H), 0.96-0.90 (m, 4H), -0.05 (s, 9H), -0.054 (s, 9H); MS(ES):534(M+1).
Korak 4. 4-[(4-Metoksibenzil)oksi]-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butanonitril
[0270] (2E)- i (2Z)-4-[(4-Metoksibenzil)oksi]-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]but-2-enenitril (880 mg, 1.6 mmol) rastvoren je u mešavini etanola (20 mL) i etil acetata (20 mL). Dodata je katalitička količina 10% Pd-C. Mešavina je protresena pod pritiskom vodonika od 50 PSI. Mešavina je filtrirana i koncentrisana in vacuo da se dobije željeni produkt (0.85 g, 99%). MS(ES):536(M+1).
Korak 5.3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentandinitril
[0271] 4-[(4-Metoksibenzil)oksi]-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butanonitril (251 mg, 0.468 mmol) u DCM (10 mL) je obrađen sa dihlorodicijanokinonom (DDQ) (434 mg, 1.87 mmol) i zatim sa vodom (376 µL). Nakon 1.5 sata, dodati su zasićeni natrijum bikarbonat i voda, pa je reakcija ekstrahovana sa etil acetatom tri puta. Ekstrakti su isprani sa vodom, rasolinom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo da se dobije sirovi produkt koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0272] Rastvor gore pripremljenog 4-hidroksi-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]butanonitrila u DCM (12 mL) na 0°C obrađen je sekvencijalno sa TEA (130 µL, 0.94 mmol) i metansulfonil hloridom (73 µL, 0.94 mmol). Nakon 1 sata reakcije, mešavina je razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom tri puta. Ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo. Ostatak je zatim rastvoren u DMSO (5 mL) i dodat je natrijum cijanid (110 mg, 2.3 mmol). Nakon 30 minuta, mešavina je razređena sa vodom, ekstrahovana sa etrom, isprana sa vodom, rasolinom i osušena preko natrijum sulfata. Koncentrisanje i prečišćavanje sa kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) dovelo je do željenog produkta (14 mg, 7%). MS(ES):425(M+1).
[0273] Rastvor 3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]pentandinitrila (14 mg, 0.033 mmol) u DCM (3 mL) sadrži TFA (0.6 mL) pa je mešan tokom 4 sata. Mešavina je zatim koncentrisana i ostatak je ponovo rastvoren u metanolu (2 mL) u koji je zatim dodat etilendiamin (0.4 mL). Nakon vremena reakcije od 1 sata, produkt je prečišćen pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije željeni produkt (6 mg, 62%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-dmso): δ 12.27 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.17 (d, 4H); MS(ES):295(M+1).
Primer 87: (3R)-3-Ciklopentil-3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]-propanonitril, i (3S)-3-Ciklopentil-3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]propanonitril
[0274]
Korak 1.4-(1,3-Oksazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0275] Mešavina 4-hloro-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.440 g, 1.55 mmol), 1,3-oksazola (0.306 mL, 4.65 mmol), kalijumovog acetata (0.456 g, 4.65 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (0.179 g, 0.155 mmol) u N,N-dimetilacetamidu (8.0 mL) zagrejavana je na 200°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 30 minuta. Veći deo rastvarača je uklonjen in vacuo. Dobijeni talog je razređen sa DCM, pa je filtriran i koncentrisan. Kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) došlo se do produkta (330 mg, 67%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.96 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.08 (d, 1H), 5.76 (s, 2H), 3.60 (t, 2H), 0.98 (t, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):317(M+1).
Korak 2. Ciklopentil[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]metanon
[0276] n-Butilitijum u heksanu (1.6 M, 0.30 mL) je polako dodat ukapavanjem u rastvor 4-(1,3-oksazol-5-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (140.0 mg, 0.44 mmol) u THF (10.0 mL) na -78°C. Nakon 20 minuta, dodato je 1.0 M cinkovog dihlorida u etru (0.53 mL). Reakcijska mešavina je zatim mešana tokom 60 min na 0°C. Nakon toga, dodat je bakar (I) jodid (84 mg, 0.44 mmol) i ova smesa je mešana tokom 10 minuta. Zatim je dodat ciklopentankarbonil hlorid (108 µL, 0.885 mmol). Reakcija je mešana na 0°C tokom narednog 1 sata, kada je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora NH4Cl, pa je ekstrahovana sa etil acetatom. Ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) dobijen je produkt (97 mg, 53%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.96 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 5.76 (s, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.56 (t, 1H), 2.23-1.56 (m, 8H), 0.98 (t, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):413(M+1).
Korak 3. (3R)- i (3S)-3-Ciklopentil-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2.3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]propanonitril
[0277] U rastvor 1.0 M kalijum tert-butoksida u THF (0.355 mL) i THF (3 mL) na 0° C ukapavanjem je dodat dietil cijanometilfosfonat (66 mg, 0.37 mmol). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature. Nakon 30 minuta, dodat je ukapavanjem rastvor ciklopentil[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]metanona (1.40E2 mg, 0.338 mmol) u THF (2.0 mL). Nakon 3 sata vremena reakcije, mešavina je absorbovana na silikagel, pa je kolonskom flash hromatografijom (etil acetat/heksani) dobijen željeni produkt kao mešavina izomera olefina (89 mg, 60%). MS(ES):436(M+1).
[0278] U mešavinu bakarnog acetata, monohidrata (4.0 mg, 0.020 mmol) i (oksidi-2,1-fenilen)bis(difenilfosfina) (11 mg, 0.020 mmol) u toluenu (0.40 mL, 0.0038 mol) dodato je PMHS (50 µL). Dobijena smesa je mešana tokom 25 minuta na sobnoj temperaturi, zatim je dodat (2E)- i (2Z)-3-ciklopentil-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]akrilonitril (88 mg, 0.20 mmol) u toluenu (0.40 mL), pa potom tert-butil alkohol (0.072 mL). Nakon neuspešne reakcije na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, dodati su bakarni acetat, monohidrat i (oksidi-2,1-fenilen)bis(difenilfosfin) (0.10 mol, svaki jednako) i reakcijska mešavina je zagrejavana na 60°C tokom 16 sati. Sirova mešavina je podvrgnuta kolonskoj flash hromatografiji (etil acetat/heksani) da se dobije željeni produkt (21 mg, 23%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.96 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.10 (d, 1H), 5.76 (s, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.38-3.30 (m, 1H), 3.03 (dd, 1H), 2.95 (dd, 1H), 2.60-2.40 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 1H), 1.85-1.15 (m, 7H), 0.98 (t, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):438(M+1).
Korak 4. (3R)- i (3S)-3-Ciklopentil-3-[5-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]-propanonitril
[0279] Rastvor 3-ciklopentil-3-[5-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1,3-oksazol-2-il]propanonitrila (20.0 mg, 0.0457 mmol) je mešan sa TFA (0.1 mL) u DCM (0.2 mL) 6 sati. Rastvarač je uklonjen, a dobijeni ostatak je mešan preko noći sa etilendiaminom (0.1 mL) u metanolu (0.2 mL). Rastvarač je uklonjen in vacuo. Željeni produkt je dobijen putem preparativne-HPLC/MS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) (5.3 mg, 38%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.25 (br s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 3.36-3.28 (m, 1H), 2.98 (dd, 1H), 2.90 (dd, 1H), 2.51-2.38 (m, 1H), 2.08-1.96 (m, 1H), 1.80-1.51 (m, 5H), 1.44-1.30 (m, 2H); MS(ES):308(M+1).
[0280] Sledeće jedinjenje iz Tablice 5d takođe je pripremljeno kao racemična mešavina, prema postupku iz Primera 87.
Tablica 5d
Primer 90: 5-(Metiltio)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitril
[0281]
Korak 1. (2E)-5-(Metiltio)pent-2-en-nitril
[0282] U mešavinu na 0°C [hloro(trifenil)fosforanil]ACN (2.5 g, 0.0073 mol) u THF (10 mL, 0.1 mol) dodat je TEA (2.0 mL, 0.014 mol), a dobijena smeša je mešana tokom 30 min. Ledena kupka je uklonjena nakon 30 min, zatim je mešavina ponovo ohlađena na 0°C, dodat je rastvor 3-(metiltio)-propanola (0.68 mL, 0.0072 mol) u THF (1 mL, 0.02 mol) i smesa je mešana je preko noći. Dodata je voda i mešavina je profiltrirana. Filtrat je ispran sa vodom x3 i rasolinom. Organska faza je osušena i rastvarač je uklonjen rotacijskim isparivačem do dobijanja 2.1 g beličaste čvste supstance. Čvrsta supstanca je triturirana sa MTBE, pa je profiltrirana. Filtrat je ispran sa 1N HCl, vodom, zasićenim NaHCO3i rasolinom. Organska faza je osušena i koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 0.62 g narandžastog ulja (44% prinos, trans:cis - 2:1).
<1>H NMR za trans (400 MHz, CDCl3): δ 6.68 (1H, m); 5.14 (1H, d); 2.6 (2H, m); 2.55 (2H, t); 2.1 (3H, s).
Korak 2. 5-(Metiltio)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H -pirazol-1-il]pentanonitril
[0283] Mešavina 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (0.30 g, 0.00095 mol), (2E)-5-(metiltio)pent-2-enenitrila (0.28 g, 0.0016 mol) i DBU (45 µL, 0.00030 mol) u ACN (3 mL, 0.06 mol) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 dana. Rastvarač je uklonjen sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja narandžastog ulja. Sirovo ulje je hromatografisano sa 30-70 etil acetat/heksan, do dobijanja 0.35 g bezbojnog ulja (83% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.95 (1H, s); 8.41 (1H, s); 8.4 (1H, s); 7.48 (1H, d); 6.84 (1H, d); 5.75 (2H, s); 4.95 (1H, br); 3.6 (2H, t); 3.1 (2H, m); 2.58 (2H, m); 2.28 (2H, m); 2.1 (3H, s); 1.99 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H): 443.
Korak 3.5-(Metiltio)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]pentanonitril
[0284] Rastvor 5-(metiltio)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil,7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanonitrila (0.35 g, 0.00079 mol) u THF (4 mL, 0.05 mol) i 3.0 M HCl (HCl) u vodi (4 mL) je grejan do refluksa preko noći. Rastvarač je uklonjen sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja svetlo narandžastog ulja. Ulje je mešano u etanolu (3 mL, 0.05 mol) i 8.0 M amonijum hidroksida u vodi (1 mL) preko noći. Reakcija je koncentrisana i prečišćena sa preparativnom LCMS (C18 kolona i eluiranje sa gradijentom ACN/H2O koji sadrži 0.15% NH4OH) do dobijanja 125 mg bele pene. Bela pena je triturirana sa MTBE (~ 1.5 mL). Dobijena čvrsta supstanca je profiltrirana, isprana i osušena do dobijanja 80 mg produkta (32% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.38 (1H, s); 8.88 (1H, s); 8.39 (1H, s); 8.38 (1H, s); 7.44 (1H, d); 6.8 (1H, d); 5.75 (2H, s); 4.9 (1H, br); 3.05 (2H, m); 2.5 (2H, m); 2.23 (2H, d); 2.1 (3H, s). MS (M+H): 313.
Primer 91: 5-(Metilsulfinil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentanonitril
[0285]
[0286] Rastvor 5-(metiltio)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentanonitrila (0.065 g, 0.00021 mol) i vodonikovog peroksida (0.022 mL, 0.00023 mol) u ACN (1 mL, 0.02 mol) je mešan preko noći. Reakcija je koncentrisana i prečišćena pomoću HPLC do dobijanja 21 mg čvrste supstance. Čvrsta supstanca je triturirana sa MTBE (1 mL)/DCM (10 kapi). Čvrsta supstanca je profiltrirana i isprana do dobijanja 13 mg bele čvrste supstance (20% prinos) koja je osušena na sobnoj temperaturi do 50°C tokom 2 sata.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.95 (1H, s); 8.85 (1H, s); 8.4 (2H, m); 7.4 (1H, d); 6.8 (1H, s); 4.9 (1H, br); 3.15 (2H, m); 3.0 (2H, m); 2.8-2.5 (2H, m); 2.6 (3H, s). MS (M+H): 329.
Primer 92: 5-(Metilsulfonil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentanonitril
[0287]
[0288] Rastvor 5-(metiltio)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentanonitrila (0.040 g, 0.00013 mol) i vodonikovog peroksida (0.5 mL, 0.005 mol) u ACN (1 mL, 0.02 mol) refluksiran je preko noći. Reakcija je prečišćena sa HPLC do dobijanja 16 mg belog stakla/čvrste materije što je triturirano sa EtOH (~0.8 mL) do dobijanja 13 mg bele čvrste materije (30% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.75 (1H, s); 8.48 (1H, d); 8.4 (1H, d); 7.43 (1H, d); 6.8 (1H, s); 5.0 (1H, br); 3.4 (2H, m); 3.2-3.0 (2H, m); 2.8-2.5 (2H, m); 2.95 (3H, s). MS (M+H): 345.
Primer 93: 4,4,4-Trifluoro-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirazol-1-il]-butironitril
[0289]
Korak 1. 4,4,4-Trifluoro-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitril
[0290] Mešavina 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (6.9 g, 0.022 mol), (2E)-4,4,4-trifluorobut-2-enenitrila (2.8 g, 0.023 mol) i DBU (0.18 mL, 0.0012 mol) u ACN (70 mL, 1 mol) mešana je tokom 20 min. Reakcija je profiltrirana i filtrat je uklonjen sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja narandžastog ulja. Sirovo ulje je hromatografisano sa 20-50% etil acetata/heksana do dobijanja 9.1 g čvrste supstance/ulja (96% prinos). Jednostruki enantiomer (vršak 2) je separiran sa kiralnom kolonskom hromatografijom (OD-H kolona, 30%EtOH/heksan) kao zelenkasta čvrsta materija/staklo (3.3 g, 32% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.93 (1H, s); 8.46 (1H, s); 8.45 (1H, s); 7.5 (1H, d); 6.85 (1H, d); 5.75 (2H, s); 5.2 (1H, m); 3.6 (2H, t); 3.7-3.3 (2H, m); 1.99 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H): 438.
Korak 2.4,4,4-Trifluoro-3-[4-(7H pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirazol-1-il]-butironitril
[0291] Rastvor 4,4,4-trifluoro-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitrila (3.1 g, 0.0071 mol) iz koraka 1 u THF (35 mL, 0.43 mol) i 3.0 M HCl u vodi (35 mL) je grejan do refluksa preko noći. Rastvarač je uklonjen sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja zelenkasto narandžastog ulja/stakla. Ulje je mešano sa etil acetatom i zasićenim NaHCO3(50 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom. Organski slojevi su isprani sa rasolinom i redukovani sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja taloga ulje/staklo. Talog je mešan u etanolu (20 mL, 0.3 mol) i 8.0 M amonijumovog hidroksida u vodi (10 mL) preko vikenda. Rastvarač je uklonjen sa rotacijskim isparavanjem do dobijanja svetlo narandžaste pene/čvrste supstance. Sirovina je hromatografisana sa 0-7% MeOH/DCM, 0-0.7% NH4OH do dobijanja 3 g svetlo narandžaste paste/čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rekristalizovana od EtOH do dobijanja 1.6 g beličastih kristala (74% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 12.2 (1H, s); 8.95 (1H, s); 8.7 (1H, s); 8.5 (1H, s); 7.63 (1H, d); 6.96 (1H, d); 6.01 (1H, m); 3.7 (2H, m). MS (M+H): 306.
[0292] Sledeća jedinjenja iz Tablice 5e su pripremljena kako je naznačeno u koloni označenoj "Priprema pr.br."
Tablica 5e
Primer 97: 3-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-ciklo-pentankarbonitril trifluoroacetat
[0293]
Korak 1: 3-(Dimetoksimetil)ciklopentankarbaldehid
[0294] U bočici sa 3-grla okruglog dna razređen je 2-norbornen (5.500 g, 0.05841 mol) u DCM (198.0 mL,) i metanolu (38.5 mL), pa je ohlađen na -78°C. Kroz reakciju je propušten ozon sve dok nije postala plave boje, pa je mešana na -78°C tokom 30 minuta. Zatim je pušten azot tokom 20 minuta i dodata je p-toluensulfonska kiselina (0.95 g, 0.0055 mol). Reakcija je ostavljena da se zagreje na 20°C i mešana je tokom 90 minuta. U reakciju je dodat natrijumov bikarbonat (1.67 g, 0.0199 mol) i dobijena smesa je mešana na 20°C tokom 30 minuta kada je dodat dimetil sulfid (9.4 mL, 0.13 mol). Reakcija je mešana 16 sati i redukovana sa rotacijskim isparavanjem na ∼50 mL. Reakcija je ekstrahovana sa DCM i organski ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni (MgSO4), i rastavljeni in vacuo. Reakcija je destilovana kod 135°C (temperatura kupke) u visokom vakumu da se dobije produkt (7.5 g) kao ∼2:1 mešavina diastereomera.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 9.64 & 9.62 (d, 1H), 4.15 & 4.12 (s, 1H), 3.35 & 3.34 (s, 6H), 2.77 m, 1H), 2.34 (m, 1H), 1.35-2.00 (m, 6H).
Korak 2. (2E,Z)-3-[3-(Dimetoksimetil)ciklopentil]akrilonitril
[0295] U bočicu koja sadrži rastvor t-BuOK u THF (1.0 M, 6,10 mL) na 0°C je dodat rastvor dietil cijanometilfosfonata (1.1 g, 6.4 mmol) u THF (8 mL). Ledena kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do temperature okoline, zatim je ukapavanjem dodat rastvor 3(dimetoksimetil)ciklopentankarbaldehida (1.00 g, 5.81 mmol) u THF (2 mL). Ubrzo nakon završetka dodavanja počele su se formirati narandžaste gelu-slične čestice, nakon približno 1 sata reakcija je postala želatinozna. Reakcija je uz mešanje držana na temperaturi okoline tokom 16 sati kada je sa tlc naznačen završetak reakcije. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc i vodena faza je isprana sa dodatnom EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, zatim sa zasićenim NaCl, pa je tada osušena preko MgSO4i redukovana in vacuo, a dobijeni ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije sa 6:1 heksani:EtOAc 1% TEA da se dobije produkt kao 1:1 mešavina E/Z izomera (760 mg, 61%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ vinilni protoni na 6.69 (m, 0.5H), 6.37 (m, 0.5H), 5.32 (m, 0.5H), 5.23 (m, 0.5H), proton acetal metina na 4.14 (m, 1H), protoni metila na 3.34 (s, 6H).
Korak 3. 3-[3-(Dimetoksimetil)ciklopentil] -3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0296] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (230 mg, 0.74 mmol) u ACN (5 mL) dodat je (2E,Z)-3-[3-(dimetoksimetil)ciklopentil]akrilonitril (289 mg, 1.48 mmol), pa zatim DBU (300 µL, 2.0 mmol). Smesa je mešana na temperaturi okoline tokom 16 sati, kada su LCMS i TLC naznačili da je reakcija okončana. Reakcija je redukovana do suvoga in vacuo, a talog je prečišćen pomoću kolonske hromatografije da se dobije produkt kao mešavina diastereomera (293 mg, 77%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.31 (s, 2H), 7.40 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.54 (t, 2H), 3.36 (s, 1.5H), 3.34 (s, 1.5H), 3.30 (s, 1.5H), 3.26 (s, 1.5H), 3.12 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.0-1.0 (m, 6H), 0.92 (t, 2H), -0.56 (s, 9H). MS (EI) m/z = 511.3 (M+H).
Korak 4. 3-(3-Formilciklopentil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0297] U rastvor 3-[3-(dimetoksimetil)ciklopentil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (293 mg, 0.574 mmol) u THF (4.5 mL) je dodat vodeni rastvor HCl (1.0 M, 1.5 mL). Reakcija je držana na temperaturi okoline tokom 2.5 sata kada je sa TLC i LCMS naznačeno da je završena deprotekcija u odgovarajući aldehid. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc, a vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, zatim sa zasićenom NaHCO3, pa sa zasićenim NaCl, i zatim je osušena preko MgSO4, te profiltrirana i razdvojena do suvoga da se dobije sirovi produkt kao mešavina diastereomera.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.69 (d, 0.5H), 9.64 (d, 0.5H), 8.85 (s, 0.5H), 8.84 (s, 0.5H), 8.35 (s, 0.5H), 8.34 (s, 0.5H), 8.32 (s, 0.5H), 8.30 (s, 0.5H), 7.41 (d, 0.5H), 7.40 (d, 0.5H), 6.80 (d, 0.5H), 6.79 (d, 0.5H), 5.68 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.32 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.14 (m, 1H), 2.96 (m, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.1-1.1 (m, 6H), 0.92 (m, 2H), -0.058 (s, 9H). MS (EI) m/z= 465.1 (M+H).
Korak 5. 3-3-[(E,Z)-(Hidroksiimino)metil]ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0298] U rastvor 3-(3-formilciklopentil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (336 mg, 0.000723 mol) u CH3OH (5.0 mL, 0.12 mol) dodat je hidroksilamin hidrohlorid (60 mg, 0.00087 mol) i KHCO3(110 mg, 0.0011 mol) i reakcija je držana na temperaturi okoline tokom 16 sati, kada je sa LCMS naznačeno da je reakcija završena. Reakcija je redukovana do suvoga in vacuo, talog je podeljen između vode i EtOAc, a vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, potom sa zasićenim NaCl, zatim je osušena preko MgSO4i koncentrisana da preostane sirovi produkt, koja je prenesen u naknadnu reakciju bez prečišćavanja. NMR je naznačio nestanak aldehidnih protona. MS (EI) m/z = 480.2 (M+H).
Korak 6. 3-(2-Cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H pirazol-1-il]etil)ciklopentankarbonitril
[0299] U rastvor 3-3-[(E,Z)-(hidroksiimino)metil]ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)propanonitrila (324 mg, 0.67 mmol) u piridinu (1.2 mL), ukapavanjem je dodat metansulfonil hlorid (210 µL, 2.7 mmol). Reakcija je zagrejavana na 60 °C tokom 2.5 sata, u kojem trenutku je sa LCMS naznačeno da je reakcija završena. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc, a vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, zatim 0.1N HCl, zatim zasićenim NaCl, pa je onda osušena preko MgSO4. Sirovi produkt je prečišćen pomoću kolonske hromatografije da se dobije produkt kao mešavina diastereomera (164 mg, 52%). Diastereomeri su zatim separirani pomoću kiralne HPLC da se dobiju četiri zasebna diastereomera, koji su direktno uzeti u korak deprotekcije. MS (EI) m/z = 462.1 (M+H).
Korak 7. 3-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-ciklopentan-karbonitril trifluoroacetat
[0300] Četiri diastereomera su zatim odvojeno deprotektirana na prikazani način. U 3-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopentankarbonitrilu (35 mg, 0.076 mmol) rastvorenom u CH2Cl2(2.0 mL) dodat je TFA (1.0 mL) i reakcija je mešana tokom 2 sata na temperaturi okoline kada je sa LCMS naznačeno potpuno cepanje na N-hidroksimetil intermedijer. Rastvarač je uklonjen i u ostatak je dodat metanol (1.0 mL) i zatim etilendiamin (40 µL, 0.61 mmol), reakcija je mešana tokom 16 sati kada je sa LCMS naznačen završetak reakcije. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen sa preparativnom LCMS da se dobije produkt kao so TFA. NOE eksperimenti potvrđuju da svi izomeri imaju cis geometriju na ciklopentil prstenu. Izomeri 1 i 2:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.95 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 4.72 (m, 1H), 3.27 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.72 (m, 1H), 2.2-1.9 (m, 4H), 1.67 (m, 2H). Izomeri 3 i 4:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.95 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 4.72 (m, 1H), 3.27 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.72 (m, 1H), 1.58 (m, 2H). MS (EI) m/z = 332.2 (M+H).
Primer 98: 3-[3-(Hidroksimetil)ciklopentil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0301]
Korak 1: 3-[3-(Hidroksimetil)ciklopentil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2.3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0302] Rastvor 3-(3-formilciklopentil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (50.0 mg, 0.108 mmol) u metanolu (280 µL) je ohlađen je na 0°C, zatim je dodat natrijumov tetrahidroborat (14 mg, 0.37 mmol). Reakcija je držana na 0°C tokom 10 minuta, kada su LCMS i TLC naznačili završetak reakcije. Reakcija je ugašena sa pažljivim dodavanjem 1N HCl (3 kapi) i metanola (1 mL), pa zatim sa dodavanjem vodenog rastvora NaHCO3i CHCl3. Faze su separirane i vodena faza je isprana sa dodatnom CHCl3. Kombinovana organska faza isprana je sa zasićenim NaCl, osušena preko MgSO4i redukovana do suvoga. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije da se dobije produkt kao mešavina diastereomera (37.4 mg, 74%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 1H), 8.31 (s, 2H), 7.40 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.29 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.53 (t, 2H), 3.14 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.2-1.0 (m, 9H), 0.92 (t, 2H), -0.059 (s, 9H). MS (EI) m/z = 467.2 (M+H).
Korak 2. 3-[3-(Hidroksimetil)ciklopentil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0303] U 3-[3-(hidroksimetil)ciklopentil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (60.4 mg, 0.129 mmol) rastvoren u CH2Cl2(2.0 mL) je dodata TFA (1.0 mL) i reakcija je mešana kroz 1 sat kada je sa LCMS označeno potpuno cepanje na N-hidroksimetil intermedijer (m/z=367). Takođe je posmatran trifluoroacetatni estar hidroksimetila ciklopentil prstena (m/z = 463). Rastvarač je uklonjen i u ostatak je dodat metanol (1.0 mL) i potom etilendiamin (80 µL, 1.19 mmol). Dobijena smesa je mešana tokom 16 sati kada je sa LCMS naznačen završetak reakcije i nastanak željenog produkta. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen pomoću kiralne HPLC da se dobiju četiri zasebna diastereomera (ukupno 20.2 mg za četiri izomera, 46%). NOE eksperimenti pokazuju da svi izomeri imaju cis geometriju na ciklopentil prstenu. Izomeri 1 i 2:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.51 (m, 1H), 3.40 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.94 (m, 1H), 1.82 (m, 1H), 1.6-1.4 (m, 3H), 1.03 (m, 1H).
Izomeri 3 i 4:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.66 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.51 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.21 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.71 (m; 1H), 1.55-1.25 (m, 3H), 1.04 (m, 1H). MS (EI) m/z = 337.1 (M+H).
Primer 100: 1-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin4-il)-1H-indazol (100a) i 2-(1H-pirolo[2,3-b]-piridin-4-il)-2H-indazol (100b)
[0304]
[0305] 4-Bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.078 g, 0.00040 mol) i 1H-indazol (0.283 g, 0.00240 mol) su polako grejani preko noći u zatvorenoj epruveti na 200°C (uljna kupka) uz mešanje. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne LC-MS na C-18 koloni eluiranjem sa gradijentom voda/ACN koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja naslovnog jedinjenja (0.015 g, 15%), kao amorfne bele supstance , LC /MS (M+H)<+>235,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.01 (bs, 1H), 9.17(s, 1H), 8.31(s, 1H), 7.73(d, 1H, J=9.0), 7.67(m, 2H), 7.58(m, 1H), 7.28(m, 1H), 7.07(m, 2H).
Primer 106: 3-[3-(1H-Pirolo(2,3-b]piridin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]benzonitril
[0306]
Korak 1.1-[2-Tirimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-karbonitril
[0307]
[0308] 4-Bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.300 g, 0.000917 mol) razređen je u DMF (6.5 mL, 0.084 mol) i zatim je dodat cinkov cijanid (0.30 g, 0.0026 mol). Rastvor je oslobođen gasa sa azotom i zatim je dodat bis(tri-t-butilfosfin)paladijum (0.1 g, 0.0002 mol). Reakcija je zatvorena i grejana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C tokom 30 minuta. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi, uzeta u etil acetat i isprana sa vodom, zasićenim natrijumovim karbonatom, rasolinom, pa je osušena preko magnezijumovog sulfata i koncentrisana do dobijanja ulja. Sirovi produkt je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (FCC) na silikagelu, eluiranje sa gradijentom heksan:etil acetat da se dobije produkt (0.25 g) kao bezbojno ulje. LC/M S (M+H)<+>274,<1>H NMR (CDCl3) δ 8.22 (d, 1H), 7.53(d, 1H), 7.40(d, 1H), 6.73(d, 1H), 5.65(s, 2H), 3.50(m, 2H), 0.90(m, 2H), 0.0(s, 9H).
Korak 2. N-Hidroksi-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-karboksimidamid
[0309]
[0310] 1-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-karbonitril (0.05 g, 0.0002 mol) je razređen u etanolu (2.0 mL, 0.034 mol) i zatim su dodati hidroksilamin hidrohlorid (0.023 g, 0.00033 mol) i kalijumov karbonat (0.10 g, 0.00073 mol). Reakcija je grejana do refluksa tokom 5 sati, pa je reakcija zatim ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i filtrirana da se uklone čvrste supstance. Filtrat je koncentrisan da se dobije 0.06 g produkta kao žuti uljasti ostatak, LC/MS (M+H)<+>307.
Korak 3. 3-[3-(1-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]benzonitril
[0311]
[0312] Sirovi produkt N-hidroksi-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-karboksimidamid (0.06 g, 0.0002 mol) je rastvoren u piridinu (1.0 mL, 0.012 mol) i zatim je dodat 3cijanobenzoil hlorid (0.040 g, 0.00024 mol) na sobnoj temperaturi. Ova smesa je mešana tokom 1 sata i zagrejana na 80°C u uljnoj kupki. Nakon grejanja tokom 18 sati reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i zatim je razređena sa ACN i koncentrisana in vacuo do dobijanja 3-[3-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]benzonitrila 0.08 g kao beličastog ostatka, LC/M S (M+H)<+>418.
Korak 4.3-[3-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]benzonitril
[0313] Sirovi 3-[3-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1,2,4-oksa-diazol-5-il]benzonitril (0.08 g, 0.0002 mol) je razređen u TFA (3.0 mL, 0.039 mol) pod azotom i zatim grejan na 60°C. Nakon grejanja tokom 2 sata reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i koncentrisana je in vacuo. Dobijeni ostatak je stavljen u metanol i koncentrisan da se ukloni koliko god je to moguće TFA. Ostatak je uzet u metanol (2.0 mL, 0.049 mol) i amonijumov hidroksid (1 mL). Ova smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i reakcija je zatim završena. Reakcija je koncentrisana in vacuo do dobijanja sirovog produkta koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC na C-18 koloni eluiranjem sa gradijentom ACN:voda sa 0.2% TFA do dobijanja naslovnog jedinjenja (0.025 g, 43%) (M+H)<+>288.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.1 (bs, 1H), 8.65(s, 1H), 8.48(d, 1H,J=6.4), 8.39(d, 1H, J=4.8), 8.16(d, 1H, J=6.4), 7.84(t, 1H, J=6.4), 7.75(d, 1H, J=4.8), 7.68(m, 1H), 6.99 (m, 1H).
Primer 107: 4-(1-Benzotien-2-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0314]
Korak 1.4-(1-Benzotien-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0315]
[0316] 1-Benzotien-2-il borna kiselina (0.05 g, 0.0003 mol) i 4-bromo-1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.10 g, 0.00031 mol) su pomešani u toluenu (3.0 mL, 0.028 mol) i etanolu (1.0 mL, 0.017 mol). Zatim je dodat kalijumov karbonat (0.085 g, 0.00062 mol) rastvoren u vodi (1.0 mL) i reakcija je oslobođena gasa sa azotom. Nakon toga je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.05 g, 0.00004 mol) i reakcija je zagrejavana na 120°C u zatvorenoj epruveti u mikrotalasnom reaktoru tokom 60 minuta. Tada je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi, uzeta je u etil acetat i isprana sa vodom 2X, rasolinom, osušena preko magnezijumovog sulfata i koncentrisana do dobijanja 4-(1-benzotien-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridina (0.10 g) kao ulja, LC /MS (M+H)<+>381.
Korak 2.4-(1-Benzotien-2-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0317] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, Korak 4, ali upotrebom 4-(1-benzotien-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, dobijeno je naslovno jedinjenje kao žuti prašak (0.015 g, 18%), LC /MS (M+H)<+>: 251,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.95 (bs, 1H), 8.28(d, 1H, J=5.4), 8.15(s, 1H), 8.03(m, 1H), 7.96(m, 1H), 7.64(m, 1H), 7.42(m, 2H), 7.39(d, 1H, J=5.4), 6.95(m, 1H).
Primer 120: 4-Fluoro-2-[1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-3-il]fenol
[0318]
[0319] 4-Bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.050 g, 0.00025 mol) i 4-fluoro-2-(1H-pirazol-3-il)fenol (0.150 g, 0.000842 mol) su jednostavno grejani na 160°C tokom 5 sati. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i ostatak je prečišćen sa preparativnom LC-MS na C-18 koloni eluiranje sa voda/ACN gradijentom koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja naslovnog jedinjenja, (0.052 g, 20%), kao amorfne bele čvrste supstance, LC /MS (M+H)<+>295,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.01 (bs, 1H), 10.25(bs, 1H), 8.81(s,1H), 8.35(d, 1H, J= 5.5), 7.77(d, 1H, J=9.5), 7.64(m, 1H), 7.59(d, 1H, J=5.5), 7.32(s, 1H), 7.09(m, 1H), 7.05(m, 1H), 7.01(m, 1H).
Primer 127: 4-3-[3-(Trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-1-il-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0320]
Korak 1. (2E)-3-(Dimetilamino)-1-[3-(trifluorometil)fenil]prop-2-en-1-on
[0321]
[0322] 1-[5-(Trifluorometil)fenil]etanon (0.20 mL, 0.0013 mol) i 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamin (0.17 mL, 0.0013 mol) su kombinovani u zatvorenoj epruveti i grejani u mikrotalasnom reaktoru na 120°C tokom 15 minuta, reakcija je ostavljena da se ohladi i koncentrisana je da se ukloni ostatak DMF acetala, do dobijanja (2E)-3-(dimetilamino)-1-[3-(trifluorometil)fenil]prop-2-en-1-on, 0.32 g, kao crvenog ulja, LC /MS (M+H)<+>: 244.
Korak 2: 3-[3-(Trifluorometil)fenil]-1H-pirazol
[0323]
[0324] (2E)-3-(dimetilamino)-1-[3-(trifluorometil)fenil]prop-2-en-1-on (0.32 g, 0.0013 mol) je razređen u etanolu (10.0 mL, 0.171 mol) i hidrazinu (0.24 mL, 0.0078 mol) pod azotom i grejan do refluksa. Reakcija je posmatrana sa HPLC i završena je gotovo odmah. Mešavina je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i koncentrisana je do dobijanja sirovog produkta kao ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu, eluiran sa gradijentom heksan:etil acetat do dobijanja 3-[3-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazola kao ulja (0.25 g, 89% ), LC /MS (M+H)<+>: 213,<1>H NMR (CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 7.99(d, 1H, J=7.5), 7.66(d, 1H, J= 2.4), 7.57(m, 1H), 7.55(d, 1H, J=7.5), 6.69(d, 1H, J= 2.4).
Korak 3.4-3-[3-(Trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-1-il-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0325] 4-Bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.028 g, 0.00014 mol) i 3-[3-(trifluorometil)-fenil]-1H-pirazol (0.03 g, 0.0001 mol) su jednostavno pomešani. Reakcija je grejana u zatvorenoj epruveti u uljanoj kupki na 175°C tokom 20 sati da se proizvede sirovi produkt koji je crna viskozna guma. Sirovi produkt je prečišćen pomoću HPLC na C-18 koloni i eluiran sa voda:ACN gradijentom sa 0.2% TFA do dobijanja naslovnog produkta (0.025 g, 50%) kao bele amorfne čvrste supstance, LC /MS (M+H)<+>: 329,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.95 (bs, 1H), 8.83(d, 1H, J=2.7), 8.31(m, 3H), 7.75(m, 2H), 7.60(m, 2H), 7.35(d, 1H, J=2.7), 7.14(m, 1H).
Primer 128: 3-[1-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-3-il]benzonitril
[0326]
Korak 1.3-[(2E)-3-(Dimetilamino)prop-2-enoil]benzonitril
[0327] 3-Acetilbenzonitril (0.435 g, 0.00300 mol) i 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamin (0.400 mL, 0.00301 mol) su pomešani i grejani u zatvorenoj epruveti na 120°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 15 minuta. Reakcija je zatim ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi dajući 3-[(2E)-3-(dimetilamino)prop-2-enoil]-benzonitril kao crveno-narandžastu kristalnu supstancu, LC /MS (M+H)<+>: 201.
Korak 2.3-(1H-Pirazol-3-il)benzonitril
[0328] 3-[(2E)-3-(dimetilamino)prop-2-enoil]benzonitril (0.600 g, 0.00300 mol) razređen u etanolu (20.0 mL, 0.342 mol) i hidrazinu (0.56 mL, 0.018 mol) bio je mešan u atmosferi azota na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Reakcija je koncentrisana in vacuo do dobijanja tamnog produkta koji je zatim prečišćen pomoću FCC na silikagelu, eluiranje sa etil acetat-heksanom 1:1 do dobijanja 3-(1H-pirazol-3-il)benzonitrila kao ulja (0.430g, 84%), LC /MS (M+H)<+>: 170.
Korak 3.3-[1-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-3-il]benzonitril
[0329] 4-Bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.075 g, 0.00038 mol) i 3-(1H-pirazol-3-il)benzonitril (0.161 g, 0.000952 mol) su grejani u zatvorenoj epruveti na 160°C tokom 18 sati. Dobijeni produkt, tamna viskozna guma, prečišćen je sa HPLC na C-18 koloni i eluiran sa voda:ACN gradijentom sa 0.2% TFA do dobijanja naslovnog produkta (0.030 g, 27%) kao bele amorfne čvrste supstance, LC /MS (M+H)<+>: 286,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.95 (bs, 1H), 8.76(s, 1H), 8.36(s, 1H), 8.29(d, 1H, J=7.5), 8.25(d, 1H, J=5.0), 7.79(d, 1H, J= 7.5), 7.62(t, 1H, J= 7.5), 7.53(m, 2H), 7.25(s, 1H), 7.11(m, 1H).
Primer 153: 3-[1-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]benzonitril
[0330]
Korak 1.4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3.2-dioksaborolan-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirazol
[0331] Rastvor 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (2.0 g, 0.010 mol) i DMF (30.0 mL, 0.387 mol) je ohlađen na 0°C. Dodat je natrijumov hidrid (320 mg, 0.013 mol) (60% u ulju) i smeša je mešana tokom 10 min. Dodat je [β-(Trimetilsilil)etoksi]metil hlorid (2.4 mL, 0.013 mol) i dobijena smeša je mešana tokom 20 minuta na 0°C i 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko MgSO4i koncentrisan do dobijanja 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirazola kao sirovog materijala. LC/MS (M+H)<+>: 325,<1>H NMR (CDCl3) δ 7.85 (s, 1H), 7.80(s, 1H), 5.45(s, 2H), 3.55(t, 2H), 1.35(s, 12H), 0.95(t, 2H), 0.0(s, 9H).
Korak 2.3-(1-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirazol-4-il)benzonitril
[0332] Mešavina 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirazola (150.0 mg, 0.0004625 mol) i 3-bromobenzonitrila (0.10 g, 0.00056 mol) u toluenu (2.0 mL, 0.019 mol) i etanolu (0.3 mL, 0.005 mol) je obrađena sa natrijumovim karbonatom (98 mg, 0.00092 mol) u vodi (0.5 mL, 0.03 mol). Mešavina je oslobođena gasa sa azotom u mehurićima. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (53 mg, 0.000046 mol), pa azot u mehurićima tokom 3 min. Reakcija je grejana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 30 min, zatim je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i stavljena u vodu i etil acetat. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog produkta, koji je zatim prečišćen pomoću FCC na silikagelu, eluiranje sa EtOAc/heksanima (1:5) do dobijanja 3-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirazol-4-il)benzonitrila, kao ulja, LC /MS (M+H)<+>: 300.
Korak 3.3-(1H-Pirazol-4-il)benzonitril trifluoroacetat
[0333]
[0334] Rastvor 3-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirazol-4-il)benzonitrila (110.0 mg, 0.0003673 mol) je stavljen u TFA (3.0 mL, 0.039 mol) i mešavina je grejana u mikrotalasnom reaktoru na 120°C tokom 3 min. Reakcijska mešavina je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi, i potom je koncentrisana do dobijanja sirovog ostatka. Produkt je prečišćen pomoću HPLC na C-18 koloni i eluiran sa gradijentom voda/ACN koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja 3-(1H-pirazol-4-il)benzonitril trifluoroacetata kao amorfne bele čvrste supstance, LC /MS (M+H)<+>: 170.
Korak 4.3-[1-(1H-Pirolo[2.3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]benzonitril
[0335] Mešavina 4-bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridina (25.0 mg, 0.000127 mol) i 3-(1H-pirazol-4-il)benzonitril trifluoroacetata (23.6 mg, 0.0000833 mol) jednostavno je zagrejavana na 180°C, preko noći. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa HPLC na C-18 koloni i eluiran sa gradijentom voda/ACN koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja naslovnog jedinjenja kao amorfne bele čvrste supstance, LC/MS (M+H)<+>: 286,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.85 (bs, 1H), 9.18(s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.28(s, 1H), 8.25(d, 1H, J=5.0), 8.07(d, 1H, J=7.0), 7.64(d, 1H, J=7.0), 7.56(t, 1H, J= 7.0), 7.51(m, 1H), 7.47(d, 1H, J=5.0), 7.03(m,1H).
Primer 170: 2-[1-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-1,3-benzoksazol
[0336]
Korak 1.4-Hidrazino-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0337]
[0338] U 4-bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (1.98 g, 0.00605 mol) je dodat hidrazin (11.0 mL, 0.350 mol) pa je zatim dodat metanol (1.0 mL, 0.025 mol) (za poboljšanje rastvorljivosti). Reakcijska mešavina je grejana u zatvorenoj epruveti na 97°C (uljana kupka) tokom 18 sati. Reakcijska mešavina je ohlađena na sobnoj temperaturi i stvorila je beličasti čvrsti talog. Čvrsta supstanca je profiltrirana i isprana sa hladnom vodom, pa osušena do dobijanja 4-hidrazino-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (1.55gm) kao svetlo žute čvrste supstance, LC/MS (M+H)<+>:279,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 7.98(d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.28(d, 1H), 6.69(s, 1H), 6.61 (d, 1H), 5.58(s, 2H), 4.37(s, 2H), 3.56(t, 2H), 0.90(t, 2H), 0.0(s, 9H).
Korak 2. 2-[1-(1-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-1,3-benzoksazol
[0339]
[0340] U 4-hidrazino-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.083 g, 0.00030 mol) 3782-117-1 i 1,3-benzoksazol-2-ilmalonaldehid (0.056 g, 0.00030 mol) u toluenu (1.5 mL, 0.014 mol) dodato je molekularno sito. Mešavina je grejana u zatvorenoj epruveti na 70°C (uljana kupka) uz mešanje tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo i sirovi produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu korišćenjem etil acetata:heksana 3:7 do dobijanja 2-[1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-1,3-benzoksazola (0.090gm) kao ulja, LC/MS (M+H)<+>: 432.
Korak 3.
[0341] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, uz upotrebu 2-[1-(1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]-1,3-benzoksazola, naslovno jedinjenje je dobijeno kao beli amorfni prašak (0.015 g, 18%), LC /MS (M+H)<+>:302,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.85 (bs, 1H), 9.45(s,1H), 8.53(s, 1H), 8.36(bs, 1H), 7.7-7.6(m, 2H), 7.65(d, 1H), 7.56(bs, 1H), 7.38-7.34(m, 2H),7.01(d,1H).
Primer 172: Cikloheksil[1-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-4-il]metanol
[0342]
Korak 1.4-(4-Bromo-1H-pirazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0343]
[0344] Mešavina 4-bromo-1H-pirolo[2,3-b]piridina (1.10 g, 0.00558 mol) i 4-bromo-1H-pirazola (1.2 g, 0.0084 mol) je grejana na 150°C tokom 2 sata. Dodat je DMF radi rastvaranja sirovog ostatka. Ovaj talog je uzet u EtOAc i ispran sa 1N NaOH. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog taloga 4-(4-bromo-1H-pirazol-1-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina, LC /MS (M+H)<+>: 263,265.
Korak 2.4-(4-Bromo-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0345]
[0346] Rastvor 4-(4-bromo-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil hlorida (1.4 mL, 0.0079 mol) je dodat i mešan tokom 20 min kod 0°C. Reakcija je razdeljena između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko MgSO4i koncentrisan do dobijanja sirovog materijala. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu (EtOAc/heksani, 1/10) do dobijanja 4-(4-bromo-1Hpirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo(2,3-b]piridina kao čvrstog produkta, LC /MS (M+H)<+>: 393, 394,<1>H NMR (CDCl3) δ 8.47(d, 1H, J=7.0), 8.27(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.52(d, 1H, J=4.5), 7.39(d, 1H, J=7.0), 7.069(d, 1H, J=4.5), 5.80(s, 2H), 3.6(t, 2H), 1.95(t, 2H), 0.0(s, 9H).
Korak 3. Cikloheksil[1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[1,3-b]piridin-4-il)-1Hpirazol-4-il]metanol
[0347]
[0348] Mešavina 4-(4-bromo-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (50.0 mg, 0.000127 mol) u THF (2.0 mL, 0.025 mol) i 1.6 M n-butilitijuma u vodi (1.00 mL, 0.0555 mol) je ohlađena u atmosferi azota na -78°C. Smesa je mešana tokom 3 min. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja cikloheksil[1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[1,3-b]piridin-4-il)-1Hpirazol-4-il]metanola kao sirovog taloga, LC /MS (M+H)<+>: 417.
Korak 4. Cikloheksil[1-fenilvinil)-1H-pirazol-4-il]metanol
[0349] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali uz korišćenje cikloheksil[1-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, dobijeno je naslovno jedinjenje kao beli amorfni prašak (0.015 g, 18%), LC /MS (M+H)<+>: 297.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.85 (bs, 1H), 8.44(s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.50(m, 1H), 7.44(d, 1H, J=6.5.70(s, 1H), 5.37(s, 1H).
Primer 173: 4-[4-(1-Fenilvinil)-1H-pirazol-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0350]
Korak 1.4-[4-(1-Fenilvinil)-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0351]
[0352] Mešavina (1-fenilvinil)borne kiseline (24.0 mg, 0.000162 mol) i 4-(4-bromo-1H-pirazol-1-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (50.0 mg, 0.000127 mol) u toluenu (2.00 mL, 0.0188 mol) i etanolu (0.50 mL, 0.0086 mol) je obrađena sa kalijumovim karbonatom (35 mg, 0.00025 mol) u vodi (1.00 mL, 0.0555 mol). Mešavini je odstranjen gas sa azotom u vidu mehurića. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (10 mg, 0.00001 mol) i azot u mehurićima je puštan tokom 3 min. Reakcija je grejana u zatvorenoj epruveti u mikrotlasnom reaktoru na 100 °C tokom 30 min. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i podeljena je između etil acetata i vode. Kombinovani organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog materijala. Sirovi produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa EtOAc/Heksanima (1:5) do dobijanja 4-[4-(1-fenilvinil)-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridina kao čvrstog taloga, LC /MS (M+H)<+>: 417.
Korak 2.
[0353] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali uz korišćenje 4-[4-(1-fenilvinil)-1H-pirazol-1-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prah (0.015 g, 31%), LC /MS (M+14)<+>: 287,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.85 (bs, 1H), 8.63(s, 1H), 7.99(s, 1H), 7.55(bs, 1H), 7.48(m, 2H), 7.43-7.37(m, 5H), 7.01 (m,1H), 5.70(s, 1H), 5.37(s, 1H).
Primer 200: 4-(1-Benzil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0354]
Korak 1.4-(1-Benzil-1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0355]
[0356] 4-Bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.100 g, 0.000306 mol) je pomešan sa 1-benzil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazolom (0.113 g, 0.000398 mol) u toluenu (3.0 mL, 0.028 mol) i etanolu (0.5 mL, 0.008 mol). Dodat je kalijumov karbonat (0.084 g, 0.00061 mol) rastvoren u vodi (1.0 mL, 0.056 mol) i reakcijskoj mešavini je odstranjen gas sa azotom. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.080 g, 0.000069 mol), pa je mešavini ponovo odstranjen gas sa azotom tokom 5 min. Reakcija je grejana u zatvorenoj epruveti na 100°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 30 minuta. Reakcija je podeljena između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa vodom, rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja sirovog ostatka. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu korišćenjem etil acetat:heksana 3:7, do dobijanja 4-(1-benzil-1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina 0.092g kao polučvrstog ostatka, LC /MS (M+H)<+>: 405.
Korak 2.4-(1-Benzil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0357] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali uz upotrebu 4-(1-benzil-1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prašak (0.054 g), LC /MS (M+H)<+>: 275,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.21 (bs, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.25(vbs, 1H), 8.23(s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.49(bs, 1H), 7.4-7.2(m, 5H), 6.99(s, 1H), 5.42(s, 2H).
Primer 201 : 4-[1-(2-Naftilmetil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0358]
Korak 1.1-(2-Naftilmetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol
[0359] 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (0.10 g, 0.00052 mol) je pomešan sa naftalen, 2-(bromometilom)- (0.12 g, 0.00057 mol) u ACN (3.0 mL, 0.057 mol) pod azotom na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat cezijumov karbonat (0.50 g, 0.0015 mol) i reakcija je završena nakon mešanja tokom 1 sata. Zatim je podeljena je između etil acetata i rasoline. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja 1-(2-naftilmetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola 0.17 g, kao ulja, LC/MS (M+H)<+>: 335,<1>H NMR (CDCl3) δ 7.89 (s, 1H), 7.79-7.84(m, 3H), 7.69(bs, 2H), 7.49-7.4(m, 2H), 7.46-7.33(m, 1H), 5.47(s, 2H), 1.31(s, 12H).
Korak 2.4-[1-(2-Naftilmetil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0360]
[0361] 4-Bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.06 g, 0.0002 mol) i 1-(2-naftilmetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (0.074 g, 0.00022 mol) su pomešani u toluenu (2.0 mL, 0.019 mol) i etanolu (1.0 mL, 0.017 mol) i zatim je dodat kalijumov karbonat (0.063 g, 0.00046 mol, u 1 mL vode). Reakcijskoj mešavini je odstranjen gas sa azotom, zatim je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.02 g, 0.00002 mol), epruveta je začepljena i grejana na 120°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 30 minuta. Ovo je ostavljeno da se ohladi i zatim je podeljeno između etil acetata i rasoline. Organski sloj je osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja 4-[1-(2-naftilmetil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina 0.08 g, kao uljastog taloga, LC /MS (M+H)<+>: 455.
Korak 3
[0362] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali uz korišćenje 4-[1-(2-naftilmetil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, je pripremljeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prašak (0.053 g, 88%), LC /MS (M+H)<+>: 325,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.0(bs, 1H), 8.79(s, 1H), 8.24(s, 1H), 8.19(d, 1H, J=5.7), 7.82(m, 4H), 7.56(m, 1H), 7.43(m, 4H), 6.92(m, 1H), 5.54(s, 2H).
Primer 219: 4-(1-Fenil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0363]
Korak 1.1-fenil-4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol
[0364] 4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (0.07 g, 0.0003 mol) i fenilborna kiselina (0.083 g, 0.00068 mol) su pomešani u DMF (1.50 mL, 0.0194 mol). Zatim su dodati bakarni(II)diacetat (0.010 g, 0.000055 mol) i piridin (0.069 mL, 0.00085 mol). Reakcija je grejana u otvorenoj epruveti na 80°C tokom 40 minuta. Reakcija je završena sa HPLC, ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi, prebačena u etil acetat, pa isprana sa vodom zasićenom sa natrijumovim karbonatom. Organski sloj ispran je sa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja 1-fenil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola, 0.09 g kao uljastog ostatka, LC/MS (M+H)<+>: 271.
Korak 2.4-(1-Fenil-1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0365] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 201, koraci B i C, ali korišćenjem 1-fenil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prah (0.015 g, 18%), LC/MS (M+H)<+>: 261,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.05 (bs, 1H), 9.23(s, 1H), 8.53(s, 1H), 8.31(m, 1H), 8.01(m, 2H), 7.63(m, 1H), 7.57-7.52 (m, 3H), 7.36(m, 1H), 7.13(m, 1H).
Primer 231: 3-[4-(1H-Pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitril
[0366]
Korak 1.4-(1H-Pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0367]
[0368] 4-Bromo-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.20 g, 0.00061 mol) i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (0.15 g, 0.00079 mol) su pomešani u DMF (5.0 mL, 0.064 mol) i zatim je dodat kalijumov karbonat (0.25 g, 0.0018 mol) u 1 mL vode. Reakciji je odstranjen gas sa azotom, zatim je dodat tetrakis(trifenilfosfin)-paladijum(0) (0.08 g, 0.00007 mol) i reakcija je u začepljenoj epruveti zagrejavana na 120°C u uljanoj kupki. Reakcija je grejana tokom 30 minuta, ostavljena da se ohladi i zatim prebačena u etil acetat. Reakcijska mešavina isprana je sa rasolinom, osušena preko magnezijumovog sulfata i koncentrisana do dobijanja ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiranjem sa gradijentom heksan:etil acetat do dobijanja 4-(1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0.13 g, 70%) kao kristalnog belog praška, LC /MS (M+H)<+>: 315,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 13.35 (bs, 1H), 8.59(bs, 1H), 8.32(d, 1H, J=8.5), 8.26(bs, 1H), 7.76(d, 1H, J=6.0), 7.45(d, 1H, J=8.5), 7.01(d, 1H, J=6.0), 5.73(s, 2H), 3.61(t, 2H), 0.92(t, 2H), 0.0(s, 9H).
Korak 2.3-[4-(1-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitril
[0369]
[0370] 4-(1H-Pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (0.025 g, 0.000080 mol) i (3-cijanofenil)borna kiselina (0.023 g, 0.00016 mol) su pomešani u DMF (1.50 mL, 0.0194 mol). Zatim su dodati bakrov(II) diacetat (0.002 g, 0.00001 mol) i piridin (0.019 mL, 0.00024 mol). Reakcija je grejana u otvorenoj epruveti na 125°C tokom 40 minuta, ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi, prebačena u etil acetat, pa isprana sa vodom zasićenom sa natrijumovim karbonatom. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja 3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-benzonitrila (0.025 g, 92%) kao uljastog taloga, LC /MS (M+H)<+>: 316.
Korak 3
[0371] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, koraka 4, ali upotrebom 3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitrila, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli kristalni prah (0.012 g, 60%), LC/MS (M+H)<+>: 286,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.05 (bs, 1H), 9.32(s, 1H), 8.59(m, 1H), 8.55(m, 1H), 8.36(m, 1H), 8.30(d, 1H, J=5.2), 7.83(m, 1H), 7.75(m, 1H), 7.63(m, 1H), 7.51 (d, 1H, J=5.2), 7.12(m, 1H).
Primer 250: 4-{1-[(1R)-1-Metilbutil]-1H-pirazol-4-il}-1H-pirolo[2,3-b]piridin (250a) i 4-{1-[(1S)-1-Metilbutil]-1H-pirazol-4-il}-1H-pirolo[2,3-b]piridin (250b)
[0372]
Korak 1.4-[1-(1-Metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0373] 4-(1H-Pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin (50 mg, 0.0002 mol) (videti, Primer 231, korak 1) je razređen je u DMF (2 mL, 0.02 mol) i ohlađen na 0°C. Ovaj rastvor je obrađe sa natrijumovim hidridom (7.0 mg, 0.00029 mol) (60% u ulju) i mešan tokom 15 min. Mešavina je zatim obrađena sa 2-bromopentanom (40 mg, 0.0002 mol) i mešana je tokom 5 sati. Reakcija je podeljena između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog produkta 4-[1-(1-metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina kao ulja, LC/MS (M+H)<+>: 286.
Korak.2.4-[1-(1-Metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin
[0374] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali upotrebom 4-[1-(1-metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridina, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prah (0.025 g, 60%), LC /MS (M+H)<+>: 255,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.21 (bs, 1H), 8.66(s, 1H), 8.27(bs, 1H), 8.25(s, 1H), 7.62(m, 1H), 7.49(m, 1H), 7.02(m, 1H), 4.46(m, 1H), 1.9-1.8(m, 1H), 1.7-1.6(m, 1H), 1.47(d, 3H), 1.2-1.0(m, 2H), 0.83(t, 3H).
Korak 3. Separacija enantiomera
[0375] Separacija enantiomera 4-[1-(1-metilbutil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridina iz koraka 2 je sprovedena pomoću preparativne hiralne kolonske HPLC separacije upotrebom OD-H kolone i eluiranjem sa izopropanol:heksan gradijentom do dobijanja naslovnih jedinjenja kao amorfnih belih taloga, LC /MS (M+H)<+>: 255,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.21 (bs, 1H), 8.66(s, 1H), 8.27(bs, 1H), 8.25(s, 1H), 7.62(m, 1H), 7.49(m, 1H), 7.02(m, 1H), 4.46(m, 1H), 1.9-1.8(m, 1H), 1.7-1.6(m, 1H), 1.47(d, 3H), 1.2-1.0(m, 2H), 0.83(t, 3H).
Primer 286: 4-Metil-3-[4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitril
[0376]
Korak 1. 4-Metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitril
[0377]
[0378] U mešavinu 4-(1H-pirazol-4-il)-1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]-piridina (0.050 g, 0.00016 mol) (videti, Primer 231, korak 1) i cezijumovog karbonata (0.10 g, 0.00032 mol) u suvom DMF (1.0 mL, 0.013 mol) je dodat 3-fluoro-4-metilbenzonitril (0.043 g, 0.00032 mol). Reakcijska mešavina grejana je u zatvorenoj epruveti na 120°C tokom 5.5 sati. Reakcija je ostavljena da se ohladi i podeljena je između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa vodom, pa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata, filtriran, pa koncentrisan do dobijanja 4-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitrila kao sirovog produkta, LC /MS (M+H)<+>: 430.
Korak 2.4-Metil-3-(4-(1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitril
[0379] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 106, korak 4, ali upotrebom 4-metil-3-[4-(1-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-4-il)-1H-pirazol-1-il]benzonitrila, je dobijeno naslovno jedinjenje kao beli amorfni prašak (0.037 g, 88%), LC /MS (M+H)<+>: 300,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.19 (bs, 1H), 8.98(s, 1H), 8.57(s, 1H), 8.31(d, 1H, J=7.0), 8.08(s, 1H), 7.89(d, 1H, J=10), 7.66(d, 1H, J=10), 7.63(m, 1H), 7.55(d, 1H), 7.07(m, 1H), 2.4(s, 3H).
[0380] Dalji primeri jedinjenja prema pronalasku su dati u Tablicama 7, 8, 9, 10, i 11 ispod. Jedinjenja navedena u Tablicama 7, 8, 9, 10 i 11 su racemati osim ako su enantiomeri odvojeno naznačeni. Tablica 7
Tablica 8
Tablica 9
Tablica 10
Tablica 11
Primer 407: 3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandinitril
[0381]
Korak 1: Dimetil 3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-i]pentanodioat
[0382] 4-(1H-Pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (31.0 g, 0.0983 mol) je suspendovan u ACN (620 mL, 12 mol) i dodat je DBU (9.3 mL, 0.062 mol) pod azotom. Reakcija je zagrejavana na 65°C i dodat je dimetil (2E)-pent-2-endioat (16 mL, 0.12 mol) u delovima od 5 mL tokom 2 sata. Nakon mešanja preko noći, reakcija je završena. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i koncentrovana je in vacuo do dobijanja tamnog ulja. Ulje je podeljeno između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa 1.0 N HCl, rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata, pa zatim koncentrisan do dobijanja tamnog ulja. Viskozno ulje je triturirano sa etil etrom 3X 500 mL do dobijanja tamnog taloga. Ulje je prebačeno u etil acetat da se formira čvrsta supstanca. Čvrste supstance su prikupljene, isprane sa etil etrom i osušene do dobijanja dimetil 3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanodioata kao belog praška (29.5 g, 64%), LC /MS (M+H)<+>: 474,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 9.1 (s,1H), 9.02 (s,1H), 8.65 (s, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.42(d, 1H), 5.78(s, 2H), 5.27(m, 1H), 3.65(m, 8H), 3.15(m, 4H), 0.95(t, 2H), 0.1 (s, 9H).
Korak 2: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentandionska kiselina
[0383] Dimetil 3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanodioat (43.0 g, 0.0908 mol) je rastvoren u metanolu (271.2 mL, 6.695 mol) i dodat je litijumov monohidrat hidroksid (15 g, 0.36 mol) rastvoren u vodi (125 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Metanol je uklonjen in vacuo i dobijeni vodeni sloj je ohlađen u ledenoj kupki. Rastvor je zakiseljen pH∼4 sa 1N HCl do dobijanja belog taloga. Čvrsti talog je prikupljen, ispran sa vodom, pa osušen do dobijanja 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandionske kiseline kao belog kristalnog praška (31.8 g, 80%), LC /MS (M+H)<+>: 446,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 8.85s 1H), 8.75 (s, 1H), 8.42(s, 1H), 7.85(d, 1H), 7.17(d, 1H), 5.71(s, 2H), 5.18 (m,1H), 3.65(t, 2H), 3.05(m,4H), 0.92(t, 2H), 0.1 (s, 9H).
Korak 3: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-dipirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentandiamid
[0384] 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandionska kiselina (31.80 g, 0.07137 mol) je razređena u DMF (636 mL, 8.21 mol) ohlađena u ledenoj kupki pod azotom i dodat je CDI (34.7 g, 0.214 mol). Ova mešavina je ostavljena i mešana tokom 30 minuta, pa je zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Nakon mešanja tokom 2 sata amonijak (12.2 g, 0.714 mol) u mehurićima je strujao kroz rastvor tokom 30 minuta što je dalo mutnu suspenziju. Reakcijska mešavina je koncentrisana da se ukloni nešto DMF (~200 mL) i zatim je polako dodata voda do dobijanja belog taloga. Ova mešavina je ohlađena u ledenoj kupki i prikupljen je čvrsti talog, ispran sa vodom i osušen in vacuo do dobijanja 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandiamida kao belog praška (29.0 g, 91%), LC /MS (M+H)<+>: 444,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 8.85(s, 1H), 8.59(s, 1H), 8.40(s, 1H), 7.87(d,1H), 7.75(s,2H), 7.15(d, 1H), 6.95(s, 2H), 5.73(s, 2H), 5.29 (m,1H), 3.63(t, 2H), 2.82(m, 2H), 2.73(m, 2H), 0.90(t, 2H), 0.1 (s, 9H).
Korak 4: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentandinitril
[0385] 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandiamid (29.0 g, 0.0654 mol) je delimično rastvoren u DMF (200 mL, 2 mol), DCM (200 mL, 3 mol) i TEA (36 mL, 0.26 mol) i ohlađen u ledenoj kupki pod atmosferom azota. Trihloroacetil hlorid (15 mL, 0.14 mol) je dodat ukapavanjem, pretvarajući reakciju u tamni rastvor. Rastvor je mešan kod 0 °C tokom 1/2 sata. Reakcija je zatim koncentrisana da se ukloni DCM i dobijen DMF rastvor razređen je sa vodom da se istaloži produkt. Čvrsti talog je prikupljen i ispran sa vodom do dobijanja tamne čvrste supstance. Čvrsta supstanca je zatim rastvorena u DCM i isprana sa rasolinom, osušena preko magnezijumovog sulfata i koncentrisana do dobijanja vrlo tamnog uljastog taloga. Talog je prebačen u DCM, i dodat je heksan dok rastvor nije postao neznatno mutan. Ovo je mešano na sobnoj temperaturi da se istaloži 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandinitril kao beli igličasti kristali (22.7 g, 85%), LC /MS (M+H)<+>: 408,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 9.07(s, 1H), 8.87(s, 1H), 8.59(s, 1H), 7.88(d, 1H), 7.19(d, 1H), 5.75(s, 2H), 5.30(m,1H), 3.62(t, 2H), 3.40(m, 4H), 0.91(t, 2H), 0.10(s, 9H).
Korak 5: 3-[4-(7H Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandinitril
[0386] 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentandinitril (10.0 g, 0.0245 mol) je rastvoren u ACN (200 mL, 3.83 mol) i vodi (20 g, 1.1 mol) na sobnoj temperaturi. U to je dodat litijumov tetrafluoroborat (23.0 g, 0.245 mol) što je dalo mutni rastvor. Reakcija je grejana do refluksa i posmatrana sa HPLC. Nakon grejanja tokom 24 sata reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i zatim je ohlađena u ledenoj kupki. U to je polako dodat amonijumov hidroksid (23 mL, 0.59 mol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Nakon mešanja tokom 18 sati reakcija je razređena sa vodom i koncentrisana in vacuo da se ukloni ACN, što je dalo talog.Čvrsta materija je prikupljena, isprana sa vodom i osušena do dobijanja naslovnog jedinjenja kao beličaste čvrste supstance(6. 2 g, 91%), LC /MS (M+H)<8>: 278,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 8.9(s, 1H), 8.72(s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.59(d, 1H), 6.92(d, 1H), 5.21 (m,1H), 3.25(m, 4H).
Primer 421: 5-{2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil}-piridin-2-karbonitril trifluoroacetat
[0387]
Korak 1: 3-(6-Hloropiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0388] 3-(6-Hloropiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (pripremljen postupcima analognim onima opisanim za Primer 61) (0.070 g, 0.00014 mol) u TFA (3.0 mL, 0.039 mol) i DCM (3.0 mL, 0.047 mol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Rastvarč je uklonjen in vacuo, a ostatak je rastvoren u metanolu (4.0 mL, 0.099 mol) i etilendiaminu (0.07 mL, 0.001 mol). Reakcijska smesa je mešana na sobnoj temperatur preko noći. Rastvarč je uklonjen in vacuo, sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne HPLC eluiranje sa ACN/voda sa gradijentom u puferu od amonijumovog hidroksida sa pH=10, do dobijanja 3-(6-hloropiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao belog praška (35mg, 69%), LCMS (M+1)<+>:350,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.21 (b,1H), 9.00 (s,1H), 8.78 (s,1H), 8.62 (s,1H), 8.58 (s,1H), 8.00(m,1H), 7.70(m,2H), 7.00(s,1H), 6.22(m,1H), 3.90(m,1H), 3.78(m,1H).
Korak 2: 5-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilpiridin-2-karbonitril trifluoroacetat
[0389] Mešavina 3-(6hloropiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (0.025 g, 0.000071 mol) i cinkovog cijanida (0.08 g, 0.0007 mol) u DMF (1.0 mL, 0.013 mol) je oslobođena gasa sa azotom. U tu smesu dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.04 g, 0.00004 mol) i dobijena mešavina je ponovo oslobođena gasa sa azotom. Reakcijska mešavina je grejana u zatvorenoj epruveti na 170°C tokom 15 minuta u mikrotalasnom reaktoru (Personal Chemistry). Nakon hlađenja na sobnoj temperaturi, čvrste materije su profiltrirane, isprane sa DMF i pomešan rastvarač je koncentrisan in vacuo. Ostatak je trituriran sa heksanima (3x), a heksani su nakon ispiranja odbačeni. Sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne HPLC eluiranje sa ACN/voda gradijentom koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja naslovnog jedinjenja kao belog praška (16 mg, 49.27%), LCMS (M+1)+: 341, 1H NMR (DMSO-d6) δ 12.50(b,1H), 9.05(s,1H), 8,89(s,1H), 8,80(s,1H), 8.58(s,1H), 8.18(m,2H), 7.78(s,1H), 7.05(s,1H), 6.20(m,1H), 3.90(m,1H), 3.77(m,1H).
Primer 428: 4-[4-(7H-Pirolo [2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heptandinitril
[0390]
Korak 1: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diol
[0391] Dietil 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanodioat, dobijen u osnovi kao u Primeru 407 (0.80 g, 0.0016 mol) je razređen u THF (40 mL, 0.49 mol) i ohlađen u ledenoj kupki u atmosferi azota. U ovu smesu polako je dodato 1.0 M litijumovog tetrahidroaluminata u THF (3.2 mL). Reakcija je mešana tokom 1h, ugašena sa ledom i podeljena između etil acetata i 1 N HCl. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan do dobijanja jantarnog ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa gradijentom etil acetat: metanol do dobijanja 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diola kao bistrog viskoznog ulja (0.51 g, 76%), LC /MS (M+H)<+>: 418,<1>H NMR (DMSO-d6) δ, 8.85(s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.37(s, 1H), 7.45(d, 1H), 6.83(d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.91 (m, 1H), 3.75 (m, 2H), 3.59(m, 2H), 3.45(m,2H), 2.18(m, 4H), 0.95(m,2H), 0.1 (s, 9H).
Korak 2: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diil dimetansulfonat
[0392] Mešavina 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diola (50 mg, 0.0001 mol) u DCM (2 mL, 0.03 mol) je ohlađena na 0°C. U ovu smešu je dodat TEA (50 µL, 0.0004 mol). Reakcija je mešana kroz 15 minuta. Dodat je metansulfonil hlorid (23 µL, 0.00030 mol) i dobijena smesa je mešana tokom 1 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentan-1,5-diil dimetansulfonata (57 mg, 80 %) kao ulja. MS(ES): 574 (M+1).
Korak 3: 4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heptandinitril
[0393] U mešavinu 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diil dimetansulfonata (57 mg, 0.000099 mol) u DMSO (1 mL, 0.01 mol), je dodat natrijumov cijanid (10 mg, 0.0003 mol) i smeša je mešana tokom 2 sata. Mešavina je grejana na 60°C tokom 1 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heptandinitrila (40 mg, 90 %) kao ulja. MS(ES): 436 (M+1).
Korak 4: 4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]heptandinitril
[0394] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, je dobijeno naslovno jedinjenje kao bela amorfna čvrsta supstanca (17 mg, 60%)<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.8.75 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.0 (d, 1H), 4.5 (m, 1H), 2.35 (m, 4 H), 2.2 (m, 4H). MS(ES): 306 (M+1).
Primer 429: 3-(5-Bromopiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0395]
Korak 1: (2Z&E)-3-(5-Bromopiridin-3-il)akrilonitril
[0396]
[0397] U mešavinu 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (2.7 mL) na 0°C (kupka voda-led, u atmosferi azota) je dodat ukapavanjem dietil cijanometilfosfonat (0.48 mL, 0.0030 mol) u THF (4.0 mL, 0.049 mol). Reakcijska mešavina zagrejana je do sobne temperature, i zatim je ohlađena na 0°C, potom je ukapavanjem dodat 5-bromonikotinaldehid (0.5 g, 0.003 mol) u THF (1.0 mL, 0.012 mol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 20 sati, reakcijska mešavina je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko bezvodnog magnezijumovog sulfata, filtriran, pa koncentrisan do dobijanja sirovog produkta kao tamnog ulja. Sirovi produkt je prečišćen pomoću flash hromatografije na silikagelu korišćenjem etil acetat-heksana 3:7 kao eluensa do dobijanja mešavine cis i trans izomera (2)-3-(5-bromopiridin-3-il)akrilonitrila kao beličaste čvrste supstance (268 mg, 47.69%). LCMS (M+1)<+>: 209,211,<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ.
8.75 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.00 (d, 1H).
Korak 2: 3-(5-Bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0398] U 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (0.200 g, 0.000634 mol) u 1.0 mL suvog ACN je dodat DBU (0.10 mL, 0.00067 mol), zatim je dodat (2Z&E)-3-(5-bromopiridin-3-il)akrilonitril (0.234 g, 0.00112 mol) u 1.0 mL ACN. Reakcijska smesa je mešana na 67°C tokom 4 sata. Nakon hlađenja, mešavina je podeljena između razređene hlorovodonične kiseline i etil acetata. Organski sloj je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko bezvodnog natrijumovog sulfata, pa je koncentrisan. Sirovi produkt prečišćen je pomoću flash hromatografije na silikagelu korišćenjem etil acetat:heksana (7:3) do dobijanja 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao beličaste čvrste supstance (225 mg, 67.66%). LCMS (M+1)<+>:524,526:<1>H NMR (400 MHz, CDC13): δ 8.90(s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.70(s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.40(s, IN), 8.00(s, 1H), 7.50(d, 1H), 6.82(d, 1H), 5.81 (m, 1H), 5.75 (s, 2H), 3.70 (m, 1H), 3.60(m, 2H), 3.42(m, 1H), 1.00(m, 2H), 0.08(s, 9H).
Korak 3: 3-(5-Bromopiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0399] 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-H-pirazol-1-il]propanonitril (0.220 g, 0.000419 mol) u DCM (9.0 mL, 0.14 mol) i TFA (9.0 mL, 0.12 mol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakcija je koncentrisana in vacuo do dobijanja ostatka. Ovaj sirovi intermedijer je rastvoren u metanolu (12 mL, 0.30 mol) i etilendiaminu (0.2 mL, 0.003 mol), pa je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrisana in vacuo do dobijanja sirovog produkta koji je zatim prečišćen pomoću preparativne HPLC eluiranje sa voda:ACN gradijentom u puferu sa amonijumovim hidroksidom (pH=10) do dobijanja 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao amorfnog belog praška (118 mg, 71.36%). LCMS (M+1)<+>:394,396,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ, 12.05 (bs, 1H), 8.98(s, 1H), 7.0(s, 1H), 6.50(m, 2H), 8.50(s, 1H), 8.10(s, 1H), 7.80(s, 1H), 6.98(s, 1H), 6.21 (m, 1H), 3.90(m, 1H), 3.70(m, 1H).
Primer 430: 3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1,5-diol
[0400]
[0401] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe ali upotrebom 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-pentan-1,5-diola iz Primera 428, je dobijeno naslovno jedinjenje kao bela amorfna čvrsta supstanca, (25 mg, 70%)<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ. 8.65 (s, 1H), 8.6 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.6 (d, 1H), 6.0 (d, 1H), 4.6 (m, 1H), 3.3 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 2.1 (m, 2H), 1.9 (m, 2H). MS(ES): 288 (M+1).
Primer 431: 5-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-nikotinonitril bis(trifluoroacetat)
[0402]
[0403] Kašasti 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (0.050 g, 0.00013 mol) (iz Primera 429), DMF (2.0 mL, 0.026 mol) i cinkov cijanid (0.1 g, 0.001 mol) su oslobođeni gasa prečišćavanjem sa azotom. Zatim je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.07 g, 0.00006 mol) i dobijena kaša je ponovo oslobođena gasa sa azotom. Reakcija je začepljena i grejana na 170°C tokom 15 minuta u mikrotalasnom reaktoru (Personal Chemistry). Reakcija je ostavljena da se ohladi i čvrste supstance su profiltrirane. Kombinovane DMF frakcije su koncentrisane in vacuo. Ostatak je trituriran sa etil acetatom/heksanima 2:8, pa zatim sa etil etrom da se uklone nusprodukti. Sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne HPLC eluiranje sa voda:acetonitril gradijentom koji sadrži 0.2% TFA do dobijanja racemata naslovnog jedinjenja (43 mg, 59.65%). LCMS (M+1)<+>:341,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ.12.60(bs, 1H), 9.10(s, 1H), 8.90(s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.50(s, 1H), 8.42(s, 1H), 7.78(s, 1H), 7.10(s, 1H), 6.30(m, 1H), 3.90(m, 1H), 3.70(m, 1H).
Primer 431R i Primer 431S
[0404] Enantiomeri R-5-(2-cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-etil)nikotinonitrila i S-5-(2-cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-etil)nikotinonitrila su separirani pomoću hiralne kolonske HPLC.
Primer 467: 3-(3-Aminofenil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanonitril bis(trifluoroacetat)
[0405]
Korak 1: 3-(3-Nitrofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0406] U 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (0.500 g, 0.00158 mol) u 8.0 mL suvog ACN je dodat DBU (0.24 mL, 0.0016 mol) i zatim je dodat (2Z)-3-(3-nitrofenil)akrilonitril (0.36 g, 0.0021 mol) u 2.0 mL ACN. Reakcijska smesa je zagrevana na 67°C tokom 18 sati. Smesa je ohlađena na sobnoj temperaturi, pa je podeljena je između razređene hlorovodične kiseline i etil acetata. Organski sloj je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko bezvodnog magnezijumovog sulfata, pa je koncentrisan. Sirovi produkt je prečišćen pomoću flash hromatografije na silikagelu korišćenjem etil acetat-heksana 6:4, do dobijanja 3-(3-nitrofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao tamno narandžastog ulja, (688 mg, 88.65%). LCMS (M+1)<+>:490
Korak 2. 3-(3-Aminofenil)-3-(4-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il-1H-pirazol-1-il)propanonitril
[0407] 3-(3-nitrofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (0.630 g, 0.00129 mol) je razređen u etanolu (65 mL, 1.1 mol), oslobođen gasa sa azotom, i zatim je dodat paladijum (0.55 g, 0.0052 mol) (10% na ugljeniku). Reakcijska mešavina je ponovo prečišćena sa azotom, pa je zatim punjena na pritisku vodonika od 50 psi u Parrovoj mućkalici tokom 60 minuta. Reakcijska mešavina je filtrirana i koncentrisana do dobijanja 3-(3-aminofenil)-3-(4-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il-1H-pirazol-1-il)propanonitrila kao bezbojnog ulja (550 mg, 95.92%), LCMS (M+1)<+>=460.
Korak 3. 3-(3-Aminofenil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril bis(trifluoroacetat)
[0408] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, dobijno je naslovno jedinjenje kao bela amorfna čvrsta materija (18 mg, 38%), LCMS (M+1)<+>=329:<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.61 (b,1H), 9.00 (s,1H), 8.80 (s,1H), 8.50 (s,1H), 7.78 (m,1H), 7.25(m,1H), 7.18(m,1H), 6.85(m,2H), 6.02 (m.1H), 3.78(m,1H), 3.60 (m,1H).
Primer 468: N-(3-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-fenil)acetamid trifluoroacetat
[0409]
Korak 1 -(3-2-Cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilfenil)acetamid
[0410] U 3-(3-aminofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (0.070 g, 0.00015 mol) (iz Primera 467) u suvom DCM (1.0 mL, 0.016 mol) je dodat TEA (0.042 mL, 0.00030 mol). Reakcija je ohlađena u ledenoj kupki i dodat je acetil hlorid (0.016 mL, 0.00023 mol). Reakcijska smesa mešana je tokom 30 minuta, pa je razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko bezvodnog magnezijumovog sulfata, filtrirani, pa koncentrisani in vacuo do dobijanja N-(3-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilfenil)acetamida kao bezbojnog ulja, (65 mg, 85.08%), LCMS(M+1)<+>= 502.
Korak 2 N-(3-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilfenil)acetamid trifluoroacetat
[0411] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, dobijeno je naslovno jedinjenje kao bela amorfna čvrsta supstanca (40 mg, 68.9%), LCMS(M+1)<+>=372,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 12.61 (b,1H), 9.05 (s,1H), 8.79 (s,1H), 8.44 (s,1H), 7.85 (s,1H), 7.55 (s,1H), 7.48 (d,1H), 7.24 (m,1H), 7.10 (m,2H)), 6.05 (m,1H), 3.70 (m,1H), 3.48 (m,1H), 1.98 (s,3H).
Primer 470: 4-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-tiofen-2-karbonitril trifluoroacetat
[0412]
Korak 14-Bromo-2-(dietoksimetil)tiofen
[0413] Mešavina 4-bromotiofen-2-karbaldehida (1.2 g, 0.0063 mol) u etanolu (10 mL, 0.2 mol) je obrađena sa amonijumovim hloridom (0.42 g, 0.0078 mol) i etil ortoformijatom (1.2 g, 0.0078 mol). Smesa je mešana na 60°C tokom 2 sata. Reakcija je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski sloj ispran je sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko magnezijumovog sulfata, filtriran i koncentrisan do dobijanja 4-bromo-2-(dietoksimetil)tiofena kao ulja (1.3 g, 81%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.22 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 3.63 (q, 4H) 1.24 (t, 6H).
Korak 25-(Dietoksimetil)tiofen-3-karbaldehid
[0414] Rastvor 4-bromo-2-(dietoksimetil)tiofena (500 mg, 0.002 mol) u etru (5 mL, 0.05 mol) je ohlađen na -78°C. U ovaj rastvor ukapavanjem je dodato 2.5 M n-butilitijuma u heksanu (0.83 mL). Reakcija je mešana kod -78°C tokom 1 sata. U reakciju je dodat DMF (0.4 g, 0.006 mol) na -78°C i smesa je mešana tokom 30 minuta. Reakcija je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom da se dobije 5-(dietoksimetil)tiofen-3-karbaldehid kao ulje (170 mg, 42.0%). Pomoću<1>H NMR formirana su dva različita regioizomera aldehida i nisu separirani; (napomena: NMR pomaci su samo za glavni izomer)<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.85 (s, 1H), 8.05, 7.7 (s, 1H), 7.45, 7.15 (s, 1H), 5.7 (s, 1H), 3.65 (m, 2H), 1.25 (m, 2H).
Korak 3 (2E)-3-[5-(Dietoksimetil)-3-tienil]akrilonitril
[0415] U rastvor dietil cijanometilfosfonata (100 mg, 0.0008 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol) ohlađenog na 0°C ukapavanjem je dodato 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (0.8 mL). Kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature tokom 30 minuta. Reakcija je ohlađena na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor 5-(dietoksimetil)tiofen-3-karbaldehida (170 mg, 0.00079 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol). Reakcija je mešana preko noći do sobne temperature. Reakcija je podeljena između vode i etil acetata. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom na silikagelu eluiranjem (etil acetat:heksan, 1:5) do dobijanja (2E)-3-[5-(dietoksimetil)-3-tienil]akrilonitrila kao ulja (160 mg, 84.9%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.4-7.0 (m, 3H), 5.65 (m 1H), 4.2 (m, 1H), 3.65 (m, 4H), 1.25 (m, 6H).
Korak 4 3-[5-(Dietoksimetil)-3-tienil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0416] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (200 mg, 0.0007 mol) u ACN (2 mL, 0.04 mol) i (2E)-3-[5-(dietoksimetil)-3-tienil]akrilonitrila (160 mg, 0.00067 mol) (smesa regioizomera) je dodat DBU (80 µL, 0.0005 mol). Reakcija je mešana preko noći, zatim je dodata voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinirani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijevim kloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom na silikagelu eluiranjem (50% EtOAc/heksan) do dobijanja 3-[5-(dietoksimetil)-3-tienil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (160 mg, 43%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ. 8.92 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.29 (b, 1H), 7.45(d, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.82 (m, 1H), 5.74 (d, 2H), 3.74 (m, 2H), 3.71 (m, 8H), 3.59 (m, 1H), 1.32 (m, 4H), 0.95 (m, 2H), -0.08 (s, 9H); MS(ES):553 (M+1).
Korak 5 3-(5-Formil-3-tienil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0417] Rastvor 3-[5-(dietoksimetil)-3-tienil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (70 mg, 0.0001 mol) u THF (1 mL, 0.01 mol) je obrađen sa 1 M HCl u vodi (400 µL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-(5-formil-3-tienil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao polučvrstog taloga (60 mg, 98%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ.9.96 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.44 (m, 2H), 7.46 (1H), 5.73 (s, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.73-3.43 (m, 3H), 1.35 (m, 1H), 1.01 (m, 2H), 0.03 (s, 9H); MS(ES): 479 (M+1).
Korak 6: 5-[(E)-(Hidroksiimino)metil]-3-tienil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0418] Rastvor 3-(5-formil-3-tienil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (65 mg, 0.00014 mol) u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je obrađen sa hidroksilamin hidrohloridom (11 mg, 0.00016 mol) i natrijumovim bikarbonatom (23 mg, 0.00023 mol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-5-[(E)-(hidroksiimino)metil]-3-tienil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao polučvrstog ulja (60 mg, 89.5%). (Sirovi produkt sadržavao je i oksim izomere i takođe oba regioizomera tiofena). MS (ES): 494 (M+1).
Korak 7: 4-(2-Cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)tiofen-2-karbonitril
[0419] U mešavinu 3-5-[(E)-(hidroksiimino)metil]-3-tienil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (70 mg, 0.0001 mol) u piridinu (1 mL, 0.01 mol), je dodat metansulfonil hlorid (100 µL, 0.001 mol). Smesa je mešana na 60°C tokom 2 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa 0.1 N HCl, rasolinom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 4-(2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)tiofen-2-karbonitrila kao sirovog produkta (30 mg, 44%). MS (ES): 476 (M+1).
Korak 8: 4-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)tiofen-2-karbonitril trifluoroacetat
[0420] Mešavina 4-(2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)tiofen-2-karbonitrila (50 mg, 0.0001 mol) u DCM (2 mL, 0.03 mol) i TFA (1 mL, 0.01 mol) mešana je tokom 1 sata. Početni materijal je konzumiran i formirano je željeno jedinjenje hidroksi metila. Mešavina je koncentrisana in vacuo da se ukloni TFA. Sirovi intermedijer je rastvoren u metanolu (3 mL, 0.07 mol) i obrađen je sa etilendiaminom (1 mL, 0.01 mol). Smesa je mešana preko noći i koncentrisana in vacuo. Produkti su prečišćeni sa preparativnom HPLC eluiranje sa ACN: vodom sa 0.2% TFA do dobijanja dva regioizomera naslovnog jedinjenja kao amorfne bele čvrste supstance (30 mg, 60 %).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ.8.95 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.25 (m, 1H), 3.80-3.60 (m, 2H); MS (ES): 346 (M+1).
Primer 471 : 5-(2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)-tiofen-2-karbonitril trifluoroacetat
[0421]
[0422] Izolovan kao drugi regioizomer iz Primera 470, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (4 mg, 8%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ.9.0 (s, 1H0, 8.75 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.0 (d, 1H), 6.45 (m, 1H), 3.8 (dd, 2 H); MS (ES): 346 (M+1).
Primer 472 : 3-[3-(Morfolin-4-ilkarbonil)fenil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0423]
Korak 1: 3-(2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)benzojeva kiselina
[0424] U rastvor metil 3-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilbenzoata (50 mg, 0.0001 mol) (pripremljenu kao u Primeru 61) u metanolu (2 mL, 0.05 mol), je dodat polako litijumov hidroksid (1 mg, 0.0001 mol) u vodi (1 mL, 0.06 mol). Dodata je voda i takođe je dodato nešto 1N HCl dok rastvor nije postao blago kiseo. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-(2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)benzojeve kiseline kao čvrstog ostatka (35 mg, 72.0%). MS (ES): 489 (M+1).
Korak 2: 3-[3-(Morfolin-1-ilkarbonil)fenil]-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0425] U rastvor 3-(2-cijano-1-[4-(7-[2-trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etil)benzojeve kiseline (40 mg, 0.00008 mol) u DMF (1 mL, 0.01 mol), dodati su N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijumov heksafluorofosfat (36 mg, 0.000095 mol) i DIPEA (30 µL, 0.0002 mol). Reakcija je mešana kroz 10 minuta i zatim je dodat morfolin (10 mg, 0.00012 mol) i dobijena smesa je mešana tokom 3 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa 1N HCl, rasolinom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-[3-(morfolin-1-ilkarbonil)fenil]-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao sirovog produkta (40 mg, 88%). MS (ES): 558 (M+1).
Korak 3: 3-[3-(Morfolin-4-ilkarbonil)fenil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0426] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, izolovano je naslovno jedinjenje kao amorfna bela čvrsta supstanca(18 mg, 50 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.9.05 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.85 (b, 1H), 7.665 (s, 1H), 7.55- 7.35 (m, 3H), 7.15 (s, 1H), 6.15 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.65-3.4 (m, 6H), 3.25 (m, 2H), 3.05 (m, 1H); MS(ES): 428 (M+1).
Primer 482: 3-(5-Fenilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0427]
Korak 1: 3-(5-Fenilpiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0428] U rastvor 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (iz Primera 429) (60 mg, 0.0001 mol) u 1,4-dioksanu (2 mL, 0.02 mol), su dodati fenilborna kiselina (15 mg, 0.00012 mol) i natrijumov bikarbonat (30 mg, 0.0003 mol) u vodi (0.5 mL, 0.03 mol). Dobijena mešavina je oslobođena gasa pomoću azota. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (10 mg, 0.00001 mol) i azot u mehurićima je ponovno pušten kroz reakciju. Reakcija je zagrejavana na 80°C u uljanoj kupki tokom 1 sata. Dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-(5-fenilpiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (50 mg, 80%) kao sirovog produkta. MS (ES): 522 (M+1).
Korak 2: 3-(5-Fenilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0429] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (20 mg, 40 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ. 9.15 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.22 (s,1H), 7.85 (b, 1H), 7.67 (m, 2H), 7.45(m 2 H), 7.43 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.25 (m 1H), 3.95 (dd, 1H), 3.80 (dd, 1H), 3.0 (m, 1H); MS (ES): 392.1 (M+1)
Primer 486: 3-(5-Etinilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0430]
Korak 1: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-3-5-[(trimetilsilil)etinil]piridin-3-ilpropanonitril
[0431] Rastvor 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (iz Primjera 429) (0.080 g, 0.00015 mol) u TEA (0.300 mL, 0.00215 mol) je oslobođen gasa sa azotom, a potom su dodati bakarni(I) jodid (0.005 g, 0.00003 mol), (trimetilsilil)acetilen i bis(trifenilfosfin)paladijumov(II)hlorid. Reakcijska mešavina začepljena je u epruveti i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijen crni rastvor podeljen je između vode (10 mL) i etil etra. Organski sloj je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan in vacuo do dobijanja 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-3-5-[(trimetilsilil)etinil]piridin-3-ilpropanonitrila kao žutog ulja (60 mg,72.6), LCMS (M+1<)+>:542).
Korak 2: 3-(5-Etinilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0432] 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-3-5-[(trimetilsilil)etinil]piridin-3-ilpropanonitril (0.050 g, 0.000092 mol) je razređen u DCM (5.0 mL, 0.078 mol) i TFA (2.0 mL, 0.026 mol). Reakcijska mešavina je mešana na sobnoj temperaturi, tokom 90 minuta i koncentrisana je in vacuo. Suvi talog je rastvoren u metanolu, ohlađen u ledenoj kupki i dodat je u rastvor kalijumovog hidroksida (0.482 g, 0.00859 mol) u metanolu (10 mL, 0.2 mol). Reakcijski rastvor mešan je tokom 30 min, pa je koncentrisan, a sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne HPLC eluiranjem sa voda: ACN gradijentom sa 0.2% TFA, do dobijanja naslovnog jedinjenja kao bele amorfne čvrste supstance (15 mg, 35.85%). LCMS (M+1)<+>:340,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ.12.1(bs, 1H), 9.02(s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.70(m, 2H), 8.48(s, 1H), 8.00(s, 1H), 7.80(d, 1H), 7.15(d, 1H), 6.20(m, 1H), 4.82(s, 1H), 3.90(m, 1H), 3.70(m, 1H).
Primer 488: 3-[5-(Feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetat
[0433]
Korak 1: 3-[5-(Feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0434] U 3-(5-bromopiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (0.130 g, 0.000248 mol) iz Primera 429 korak 2, u suvom 1,4-dioksanu (1.60 mL, 0.0205 mol) je dodat DIPEA (0.085 mL, 0.00049 mol). Rastvor je oslobođen gasa sa azotom, zatim su dodati (9,9-dimetil-9H-ksanten-4,5-diil)bis(difenilfosfin) (0.007 g, 0.00001 mol), bis(dibenzilidenaceton)paladijum(0) (0.0036 g, 0.0000062 mol) i benzentiol (0.025 mL, 0.00025 mol). Rastvor je ponovo prečišćen sa azotom. Reakcijska mešavina u začepljenoj epruveti je grejana do refluksa tokom 3 sata. Reakcijska mešavina je razređena sa etil acetatom, isprana sa vodom (2X), rasolinom (1X), osušena preko magnezijumovog sulfata, filtrirana, a rastvarač je isparen in vacuo. Sirovi produkt je trituriran sa heksanom-etil acetatom 9:1 da se dobije 3-[5-(feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (110 mg, 80%). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 554.2.
Korak 2: 3-[5-(Feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanonitril trifluoroacetat
[0435] 3-[5-(feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (0.110 g, 0.000199 mol) je razređen u DCM (5.0 mL, 0.078 mol) i TFA (2.0 mL, 0.026 mol), i smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a dobijeni talog je rastvoren u metanolu (5.0 mL, 0.12 mol) i dodat je etilendiamin (0.1 mL, 0.002 mol). Ova reakcijska smesa je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je koncentrisana in vacuo, a sirovi produkt je prečišćen pomoću LCMS (pH=2) da se dobije naslovno jedinjenje kao amorfna čvrsta masa (62 mg, 58.07%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.12.80 (s), 9.10 (s) 8.87(d), 8.60 (s), 8.50 (s), 8.43 (s), 7.82 (s), 7.78 (m), 7.39 (m), 7.25 (m), 7.18 (d), 6.20 (m), 3.84 (m), 3.70 (m). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 424.15
Primer 491: 3-(5-Morfolin-4-ilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0436]
Korak 1: 4-(5-Bromopiridin-3-il)morfolin
[0437] U rastvor [3,5-dibromopiridina (1000 mg, 0.004 mol) u 1,4-dioksanu (8 mL, 0.1 mol) su dodati morfolin (400 mg, 0.004 mol) i natrijumov tert-butoksid (400 mg, 0.004 mol). Reakcija je obrađena sa azotom u mehurićima. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (200 mg, 0.0002 mol) i azot u mehurićima je pušten tokom nekoliko minuta. Mešavina je zagrejavana na 80 °C preko noći. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i zatim je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko magnezijumovog sulfata, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog taloga. Sirovi produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa 1:1, EtOAC:heksanom do dobijanja 4-(5-bromopiridin-3-il)morfolina kao viskoznog ulja (400 mg, 40 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ.8.2 (s, 1H), 8.1 (s, 1H), 7.2 (s, 1H), 3.8 (m, 4H), 3.2 (m, 4H).
Korak 2: 5-Morfolin-4-ilnikotinaldehid
[0438] Rastvor 4-(5-bromopiridin-3-il)morfolina (100 mg, 0.0004 mol) u etru (2 mL, 0.02 mol) ohlađen na -78°C je obrađen sa 2.5 M n-butilitijumom u heksanu (0.2 mL) i mešan tokom 1 sata. U ovu mešavinu ukapavanjem je dodat DMF (0.5 mL, 0.006 mol). Reakcija je ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 5-morfolin-4-ilnikotinaldehida (70 mg, 90%) kao sirovog produkta.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ.10.1 (s, 1H), 8.0 (s, 2H), 7.6 (s, 1H), 3.8 (m, 4H), 3.2 (m, 4H).
Korak 3: (2E)-3-(5-Morfolin-4-ilpiridin-3-il)akrilonitril
[0439] U rastvor dietil cijanometilfosfonata (70 mg, 0.0004 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol) ohlađen na 0°C je dodat je ukapavanjem 1.0 M kalijumov tert-butoksid u THF (0.50 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature kroz 30 minuta. Reakcija je ohlađena na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor 5-morfolin-4-ilnikotinaldehida (70 mg, 0.0004 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, ugašena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja (2E)-3-(5-morfolin-4-ilpiridin-3-il)akrilonitrila (75 mg, 100%) kao mešavine izomera; LC/MS: 216 (M+1).
Korak 4: 3-(5-Morfolin-4-ilpiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0440] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (120 mg, 0.00038 mol) u ACN (10 mL, 0.2 mol) i (2E)-3-(5-morfolin-4-ilpiridin-3-il)akrilonitrila (70 mg, 0.0003 mol) (mešavina izomera), je dodat DBU (50 µL, 0.0003 mol) i dobijena smesa je mešana preko noći. Mešavina je podeljena između vode i etil acetata. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja 3-(5-morfolin-4-ilpiridin-3-il)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (200 mg, 100%) kao sirovog produkta; L/MS = 531 (M+1).
Korak 5: 3-(5-Morfolin-4-ilpiridin-3-il)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanonitril
[0441] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta materija (18 mg, 50 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.8.8 (s, 1H), 8.6 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 8.2 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.4 (m, 1H), 6.9 (d, 1H), 6 (m, 1H), 3.8 (dd, 1H), 3.7(m, 4H), 3.6 (dd, 1H), 3.1 (m, 4 H); LC/MS: 401(M+1).
Primer 496: 3-[5-(Fenilsulfinil)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril, i
Primer 497: 3-[5-(Fenilsulfonil)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0442]
[0443] U rastvor 3-[5-(feniltio)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril trifluoroacetata (0.050 g, 0.000093 mol) iz Primera 488, korak 2, u THF (1.0 mL, 0.012 mol) je dodat MCPBA (0.022 g, 0.00013 mol) (0.031g, 77% u vodi), u kupku od vode i leda. Reakcijska smesa je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Sirovi produkti su prečišćeni sa LCMS (pH=10). Prikupljena su dva vrška:
# 1 - da se dobije 3-[5-(fenilsulfinil)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (8 mg, 19.57%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.12.1 (s), 8.89 (d), 8.80 (d), 8.70 (s), 8.62 (s), 8.40 (s), 8.19 (s), 7.70 (m), 7.58 (s), 7.42 (m), 6.90 (s), 6.20 (m), 3.82 (m), 3.65 (m). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 440.0
# 2 - da se dobije 3-[5-(fenilsulfonil)piridin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril (21 mg, 50%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ. 12.1 (s), 9.10 (s), 8.86 (m), 8.61(s), 8.40 (m), 7.98 (m), 7.62 (m), 7.58 (m), 6.90 (s), 6.20 (m), 3.82 (m), 3.65 (m). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 456.0
Primer 498: 3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1-ol
[0444]
Korak 1: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H pirazol-1-il]pentanal
[0445] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (100 mg, 0.0003 mol) u ACN (2 mL, 0.04 mol) i DBU (50 µL, 0.0003 mol), ukapavanjem je dodat (2E)-pent-2-enal (4.0E1 mg, 0.00048 mol) u 1 ml ACN. Reakcija je mešana kroz 1 sat, izatim je dodata voda i dobijena mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja sirovine u obliku hidratiziranog produkta. LC/MS (M+H)<+>: m/z = 400.
Korak 2: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1-ol
[0446] Mešavina [3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanala (50 mg, 0.0001 mol) u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je obrađena sa natrijumovim tetrahidroboratom (8 mg, 0.0002 mol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, zatim je dodata voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja željenog produkta kao ulja. LC/MS (M+H)<+>: m/z = 402.
Korak 3:
[0447] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (6 mg, 20 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.
8.65 (d, 1H), 8.60 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.50 (b, 1H), 4.4 (m, 1H), 3.4 (m, 1H), 3.2 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 1.8-2.0 (m, 3H), 0.7(t, 3H); LC/MS (M+H)<+>: m/z= 272.
Primer 499: Metil 3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentil karbonat
[0448]
Korak 1: Metil 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentil karbonat
[0449] U rastvor [3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentan-1-ola (50 mg, 0.0001 mol) iz Primera 498 koraka 2 u piridinu (1 mL, 0.01 mol), je dodat metil hloroformat (30 µL, 0.0003 mol). Reakcija je mešana tokom 3 sata, dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa 1N HCl, rasolinom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja metil 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentil karbonata kao polučvrstog taloga (30 mg, 50%). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 460.
Korak 2:
[0450] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (8 mg, 20 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.
12.0 (b, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.65 (b, 1H), 7.600 (s, 1H), 7.0 (s, 1H), 4.4 (m, 1H), 4.0 (m, 1H), 3.8 (m, 1H), 3.6 (s, 3H), 2.1 (m, 1H), 2.2 (m, 1H), 1.95 (m, 2H), 0.75 (t, 3H); LC/MS (M+H)<+>: m/z = 330.
Primer 500(a): (1E)-3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal oksim
[0451]
Korak 1: (1E)-3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal oksim
[0452] U rastvor 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanala (60 mg, 0.0002 mol) iz Primera 498, korak 2 u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je dodat hidroksilamin hidrohlorid (16 mg, 0.00022 mol) i kalijumov bikarbonat (22 mg, 0.00022 mol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja (1E)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal oksima kao polučvrstog taloga (50 mg, 80%). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 415.
Korak 2:
[0453] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.12.0 (b, 1H), 8.6 (m, 2H), 8.2 (m, 1H), 7.5 (d, 1H), 7.1 i 6.5 (t, 1H), 4.6 (m, 1H), 4.4 (m, 1H), 2.6-2.8 (m, 2H), 1.8 (m, 2H), 0.65 (t, 3H); LC/MS (M+H)<+>: m/z = 285.
Primer 501(a): (1E)-3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal O-metiloksim, i Primer 502(a): (1Z)-3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal O-metiloksim
[0454]
Korak 1: (1E)-3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal-O-metiloksim i (1Z)-3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal O-metiloksim
[0455] U rastvor 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanala (70 mg, 0.0002 mol) u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je dodat metoksilamin hidrohlorid (19 mg, 0.00022 mol) i kalijumov bikarbonat (22 mg, 0.00022 mol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, dodata je voda i produkt je ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani do dobijanja sirovog produkta 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanal O-metiloksima kao mešavine izomera (70 mg, 90%). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 429.
Korak 2:
[0456] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta materija (4 mg, 25 %). Izomer 1,<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ. 8.7 (s, 2H), 8.3 (s, 1H), 7.6 (s, 1H), 7.3 (t, 1H), 7.0 (s, 1H), 4.6(m, 1H), 3.3 (s, 3H), 2.8 (m, 2H), 1.9 (m, 2H), 0.8 (t, 3H); LC/S (M+H)<+>: m/z = 299. Izomer 2 (3 mg, 22%),<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.8.7 (s, 2H), 8.3 (s, 1H), 7.6 (s, 1H), 7.0 (s, 1H), 6.7 (t, 1H), 4.5(m, 1H), 3.3 (s, 3H), 2.8-3.0 (m, 2H), 1.9 (m, 2H), 0.8 (t, 3H); LC/MS (M+H)<+>: m/z = 299.
Primer 503: 4-[1-(4,4-Dibromo-1-etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin trifluoroacetat
[0457]
Korak 1: 4-[1-(4,4-Dibromo-1-etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0458] U rastvor 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanala (300 mg, 0.0008 mol) u DCM (4 mL, 0.06 mol) ohlađen na 0°C, su dodati trifenilfosfin (800 mg, 0.003 mol) i ugljenikov tetrabromid (500 mg, 0.002 mol). Reakcija je mešana kod 0°C tokom 10 minuta, dodata je voda i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušeni preko magnezijumovog sulfata, filtrirani i koncentrisani. Sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne LC-MS (ACN, voda, NH4OH) do dobijanja 4-[1-(4,4-dibromo-1-etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina kao amorfne čvrste materije (50 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ.8.9 (s, 2H), 8.4 (s, 1H), 8.3 (s, 1H), 7.4 (m, 1H), 7.3 (s, 1H), 6.9 (m, 1H), 6.4 (m, 1H), 5.7 (s, 2H), 4.2 (m, 1H), 3.6 (m, 2H), 2.8 (m, 2H), 2.1 (m, 1H), 2.0 (m, 1H), 1.0 (m, 5H), LC/MS (M+H)<+>: m/z = 556
Korak 2:
[0459] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (8 mg, 40 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.
8.8 (s, 2H), 8.4 (s, 1H), 7.7 (b, 1H), 7.2 (b, 1H), 6.5 (t, 1H), 4.4 (m, 1H), 2.6 (m, 2H), 1.8 (m, 2H), 0.8 (t, 3H); LC/MS (M+H)<+>: m/z =: 426.
Primer 506: 4-[1-(1-Etilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin trifluoroacetat
[0460]
Korak 1: 4-[1-(1-Etilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0461] Rastvor 4-[1-(4,4-dibromo-1-etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (20 mg, 0.00004 mol) (iz Primera 503, korak 1) u THF (1 mL, 0.01 mol) na -78°C je obrađen sa 2.5 M n-butilitijumom u heksanu (0.032 mL). Smesa je mešana na -78°C tokom 1 sata i zatim na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakcija je ugašena sa vodom (1 mL, 0.06 mol) i 1N HCl. Reakcija je razdeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko magnezijumovog sulfata, filtriran i koncentrisan do dobijanja 4-[1-(1-etilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina kao polučvrste materije (12 mg, 80%). LC/MS (M+H)<+>: m/z = 396.
Korak 2:
[0462] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (4 mg, 30 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.
12.2 (b, 1H), 8.8 (s, 2H), 8.4 (s, 1H), 7.6 (s, 1H), 7.1 (s, 1H), 4.4 (m, 1H), 2.8 (m, 3H), 1.9 (m, 2H), 0.8 (t, 3H); LC/MS(M+H)<+>: m/z = 266.
Primer 516: (R)-3-[3-(Etilsulfonil)fenil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril, i (S)-3-[3-(Etilsulfonil)fenil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanonitril
[0463]
Korak 1: 1-Bromo-3-(etiltio)benzen
[0464] Jodoetan (0.46 mL, 0.0058 mol) je dodat u suspenziju 3-bromotiofenola (0.50 mL, 0.0048 mol), ACN (7.11 mL, 0.136 mol) i kalijumovog karbonata (2.0 g, 0.014 mol). Reakcija je mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, pa je razređena sa etil acetatom i filtrirana da se uklone čvrste supstance. Reakcija je koncentrisana in vacuo do dobijanja 1-bromo-3-(etiltio)benzena kao bezbojnog ulja 1.0 g, 100%
Korak 2: 1-Bromo-3-(etilsulfonil)benzen
[0465] MCPBA (2.37 g, 10.6 mmol) je dodat u rastvor 1-bromo-3-(etiltio)benzena (1.00 g, 4.80 mmol) u DCM (10 ml, 156 mmol) i ohlađen na 0°C. Reakcija je mešana 1 sat i zatim je razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom tri puta. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa magnezijumovim sulfatom, filtrirani, pa koncentrirani in vacuo. Dobijeni čvrsti talog prečišćen je sa kolonskom flash hromatografijom gradijentom heksan:etil acetat do dobijanja 1-bromo-3-(etilsulfonil)benzena kao bezbojnog ulja 1.1 g 92%,<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ. 8.09(m, 1H), 7.85(d,1H), 7.78(d, 1H) 7.45(t,1H), 3.14(q, 2H), 1.25(t, 3H).
Korak 3: (2E & Z)-3-[3-(Etilsulfonil)fenil]akrilonitril
[0466] 1-Bromo-3-(etilsulfonil)benzen (1.3 g, 0.0052 mol) je rastvoren u DMF (15.0 mL, 0.194 mol) i 2-propennitrilu (0.68 mL, 0.010 mol), dodati su TEA (1.4 mL, 0.010 mol) i trifenilfosfin (0.23 g, 0.00089 mol). Dobijen rastvor je oslobođen gasa sa azotom i dodat je paladijumov acetat (0.07 g, 0.0003 mol). Reakcija je ponovo oslobođena gasa sa azotom i zatim grejana na 110 °C u zatvorenoj epruveti tokom 8 sati. Reakcija je završena HPLC, pa je zatim ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i podeljena između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko magnezijumovog sulfata i koncentrisan. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa gradijentom heksan: etil acetat do dobijanja (2E&Z)-3-[3-(etilsulfonil)fenil]akrilonitrila kao jantarnog ulja (1.1 g, 92%) LC/MS (M+H)<+>: m/z = 222.
Korak 4: 3-[3-(Etilsulfonil)fenil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0467] (2E&Z)-3-[3-(etilsulfonil)fenil]akrilonitril (1.0 g, 0.0045 mol) je pomešan sa 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidinom (1.3 g, 0.0041 mol) i DBU (0.61 mL, 0.0041 mol) u ACN (10.0 mL, 0.191 mol) pod azotom na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Podeljena je između etil acetata i vode, pa je dodato 0.1N HCl za podešavanje pH na 7. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušeni preko magnezijumovog sulfata i koncentrisani do dobijanja sirovog ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa gradijentom heksan:etil acetat do dobijanja 3-[3-(etilsulfonil)fenil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao ulja (1.5 g, 68%). LC/MS (M+H)<+>; m/z = 537. Ulje je bilo racemat, koji je separiran pomoću kiralne kolonske hromatografije (Chiracel OD-H, eluiranje sa etanolom: metanolom: heksanom 30:30:40, Rt 13.2 i 17.1 minuta) do dobijanja dva enantiomera, svakog kao stakla (0.51 g) LC/MS (M+H)<+>: m/z = 537,<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.89(s, 1H), 8.45(s, 1H), 8.35(s,1H), 8.09(s, 1h), 8.05(d, 1H), 7.75(d, 1H), 7.71(t, 1H), 7.45(d, 1H), 6.83(d, 1H), 5.85(t, 1H), 5.75(s, 2H), 3.78-3.42(m, 4H), 3.18(m, 2H), 1.35(t, 3H), 0.97(t, 2H), 0.05(s, 9H).
Korak 5:
[0468] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovna jedinjenja su pripremljena do dobijanja izomera #1 kao amorfne bele čvrste supstance (300 mg, 80 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.9.1 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.5 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.6-7.9 (m, 4H), 7.1 (s, 1H), 6.3 (m, 1H), 3.9 (m, 1H), 3.7 (m, 1H) 3.2 (q, 2H), 1.0 (t, 3H); MS(ES) (M+H)<+>: m/z= 407.
[0469] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovna jedinjenja su pripremljena do dobijanja izomera #2 kao amorfne bele čvrste supstance (300 mg, 80 %).<1>H NMP (400 MHz, DMSO): δ.9.1 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.5 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.6-7.9 (m, 4H), 7.1 (s, 1H), 6.3 (m, 1H), 3.9 (m, 1H), 3.7 (m, 1H) 3.2 (q, 2H), 1.0 (t, 3H); MS(ES) (M+H)<+>: m/z= 407.
Primer 526: 4-[1-(1-Etilbut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0470]
Korak 1: 4-[1-(1-Etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin
[0471] U ledom ohlađen rastvor metil trifenilfosfonijumovog bromida (100 mg, 0.0004 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol) je dodato 0.5 M kalijumovog bis(trimetilsilil)amida u toluenu (0.8 mL). Smesa je mešana tokom 1 sata u ledenoj kupki na 0 °C i zatim je ohlađena na -78°C i obrađena sa 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]pentanalom (80 mg, 0.0002 mol) (iz Primera 498). Reakcija je mešana na -78°C i postupno je zagrejana do sobne temperature preko noći. Reakcija je razdeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je ispran zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko magnezijumovog sulfata, filtriran i koncentrisan do dobijanja 4-[1-(1-etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina 150 mg kao sirovog produkta. LC/MS = 398 (M+1).
Korak 2: 4-[1-(1-Etilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0472] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta supstanca (25 mg, 1%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ.
8.6 (s, 2H), 8.2 (s, 1H), 7.4 (s, 1H), 6.9 (s, 1H), 5.8 (m, 1H), 5.0 (dd, 2H), 4.2 (m, 1H), 2.4-2.6 (m, 2H), 1.7-1.9 (m, 2H), 0.6 (t, 3H); LC/MS: 268 (M+1).
Primer 500: (3R)- i (3S)-4,4,4-Trifluoro-3-[3-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirol-1-il]butanonitril
[0473]
Korak 1.4-Hloro-7-(dietoksimetil)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0474] Mešavina 4-hloropirolo[2,3-d]pirimidina (2.00 g, 0.0130 mol) i etil ortoformijata (25 mL, 0.15 mol) je grejana do refluksa tokom 2 sata. Rastvarač je isparen, a talog je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa etil acetatom/heksanima) da se dobije željeni produkt (1.13 g, 34%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.63 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.65 (d, 1H), 3.77-3.67 (m, 2H), 3.58-3.49 (m, 2H), 1.23 (t, 3H), 1.23 (t, 3H).
Korak 2.7-(Dietoksimetil)-4-(1H-pirol-3-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0475] U rastvor oslobođen gasom 4-hloro-7-(dietoksimetil)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (1.13 g, 0.00442 mol) i 1-(triizopropilsilil)-3-borne kiseline (1.00 g, 0.00374 mol) i natrijumovog karbonata (0.396 g, 0.00374 mol) u 1,2-dimetoksietanu (15 mL) i vodi (3 mL) je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.22 g, 0.00019 mol). Ova mešavina je mešana na temperaturi okoline tokom 2 sata, i potom je grejana je do refluksa tokom 4 sata. Mešavina je zatim ohlađena, koncentrisana, pa prečišćena sa kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa etil acetatom/heksanima) da se dobije talog kao ulje. U talog je dodat ACN, a produkt koji se istaložio je profiltriran i ispran sa malom količinom ACN (165 mg, 13%).
<1>H NMR (400 MHz, D6-dmso): δ 11.44 (br s, 1H), 8.66 (s, 1H), 7.80-7.78 (m, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.94 (dd, 1H), 6.90 (dd, 1H), 6.75 (s, 1H), 3.74-3.65 (m, 2H), 3.59-3.50 (m, 2H), 1.15 (t, 6H); MS(ES): M+H = 287.
Korak 3.
[0476] U rastvor 7-(dietoksimetil)-4-(1H-pirol-3-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.125 g, 0.436 mmol) i 4,4,4-trifluorobut-2-enenitrila (0.0476 mL, 0.480 mmol) u ACN (1 mL) je dodat DBU (0.0653 mL, 0.436 mmol). Dodata je TFA (0.5 mL) i smesa je mešana tokom 1 sata. TFA i rastvarač su uklonjeni in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne-HPLC/MS (C-18 eluiranje sa gradijentom H2O/ACN koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije produkt (102 mg, 76%). Gde se želi, enantiomeri su separirani u bitno čistom obliku pomoću kiralne HPLC (AD-H, 20% EtOH/heksan).
<1>H NMR (300 MHz, D6-dmso): δ 12.05 (br s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.21 (t, 1H), 7.02 (dd, 1H), 6.93 (dd, 1H), 5.89-5.74 (m, 1H), 3.95 (dd, 1H), 3.66 (dd, 1H); MS(ES): M+H= 306.
[0477] Analog iz tablice 12 je pripremljen u obliku racemata prema istom postupku, upotrebom različitog konjugatnog akceptora, uz izuzetak da se kod dodavanja konjugata u koraku 3, reakcija sprovodi na 40°C tokom 3 dana.
Tablica 12
[0478] Sledeća jedinjenja u Tablici 13 su dobijena kako je naznačeno u koloni označenoj "Postupak dobijanja", a detalji određenih primera postupaka sinteze su dati u sledećoj Tablici 13.
Tablica 13
Primer 649: 3-[3-(Morfolin-4-ilsulfonil)fenil]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0479]
Korak 1: 4-[(3-Bromofenil)sulfonil]morfolin
[0480] Morfolin (0.19 mL, 0.0022 mol) u 1.0 ml THF ukapavanjem je dodat u rastvor 3-bromobenzensulfonil hlorida (0.3 mL, 0.002 mol) i TEA (0.30 mL, 0.0022 mol) u suvom 4.0 mL THF ohlađenom u ledenoj kupki. Reakcijska smesa je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim podeljena između 0.05N HCl i etil acetata. Organski sloj je ispran sa vodom (2X), pa rasolinom (1X) i zatim je osušen preko bezvodnog magnezijumovog sulfata, filtriran i zatim je koncentrisan in vacuo do dobijanja 4-[(3-bromofenil)sulfonil]morfolina kao belog kristalnog produkta (470 mg, 78%). LCMS (M+H)<+>: m/z = 306, 308.
Korak 2: (2E&Z)-3-[3-(Morfolin-4-il-sulfonil)fenil]akrilonitril
[0481] 4-[(3-bromofenil)sulfonil]morfolin (0.250 g, 0.000816 mol) je rastvoren u suvom DMF (2.5 mL, 0.032 mol) i mešavina je oslobođena gasa pomoću struje azota. U ovu mešavinu su dodati TEA (0.23 mL, 0.0016 mol), 2-propennitril (0.11 mL, 0.0016 mol), paladijumov acetat (0.011 g, 0.000049 mol) i trifenilfosfin (0.0364 g, 0.000139 mol) i mešavina je ponovo oslobođena gasa sa azotom. Reakcijska mešavina je zagrejavana u zatvorenoj epruveti na 110°C tokom 16 sati. Reakcijska mešavina je, nakon hlađenja do sobne temperature, podeljena između 0.05N HCl i etil acetata. Organski sloj je ispran sa vodom (2X), zatim rasolinom (1X), osušen je preko bezvodnog magnezijumovog sulfata, filtriran, pa koncentrisan in vacuo, do dobijanja (2E&Z)-3-[3-(morfolin-4-il-sulfonil)fenil]akrilonitrila kao ulja (0.240gm, 85%) koje je bilo mešavina cis i trans izomera. LCMS (M+H)<+>: m/z = 279.
Korak 3: 3-[3-(Morfolin-4-il-sulfonil)fenil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0482] U mešavinu 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (0.100 g, 0.000317 mol) i (2E&Z)-3-[3-(morfolin-4-ilsulfonil)fenil]akrilonitrila (0.097 g, 0.00035 mol) u suvom ACN (2.0 mL, 0.038 mol) je dodat DBU (0.095 mL, 0.00063 mol) i dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcijska mešavina je zatim razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom (2X), pa rasolinom (1X), osušena preko magnezijumovog sulfata, filtrirana i zatim koncentrisana in vacuo do dobijanja sirovog produkta. Sirovi produkt je prečišćen pomoću kolonske flash hromatografije na silikagelu sa etil acetatom/heksanima (6:4) kako eluensom do dobijanja 3-[3-(morfolin-4-ilsulfonil)fenil]-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila kao viskoznog ulja (62 mg, 32.94%). LCMS (M+H)<+>: m/z = 594.
Korak 4:
[0483] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 61 za uklanjanje SEM zaštitne grupe, naslovno jedinjenje je izolovano kao amorfna bela čvrsta materija (30 mg, 63.84%. LCMS (M+H)<+>: m/z = 464.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.88 (s), 8.62 (s), 8.1(s), 7.78(m), 7.70(m), 7.58(m), 6.95(m), 6.20(m), 3.84(m), 3.70(m),3.45(m), 2.78(m).
Primer 679: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil-acetonitril
[0484]
Korak 1: 4-(Hidroksimetil)cikloheksanol
[0485] Etil 4-oksocikloheksankarboksilat (2.0 g, 0.012 mol) je rastvoren u etru (20.0 mL) i zatim je ohlađen na 0°C. U mešavinu je dodat 1 M litijumov tetrahidroaluminat u etru (20 mL) i dobijena smesa je mešana na 0 °C tokom 2 sata. Reakcija je ugašena sa vodom (2 mL) i 1 N NaOH (2 mL) i dodat je etar (100 mL). Istaložene čvrste supstance su profiltrirane i ostatak je korišćen u sledećoj reakciji.<1>H NMR(CDCl3):δ 4.02 i 3.75 (m, 1H), 3.45-3.61 (m, 2H), 2.02 (m, 2H), 1.84 (m, 1H), 1.52-1.80 (m, 2H), 1.44 (m, 1H), 1,32 (m, 2H), 1.03 (m, 1H).
Korak 2: 4-[(Tritiloksi)metil]cikloheksanol
[0486] 4-(Hidroksimetil) cikloheksanol (2.0 g, 0.015 mol) je rastvoren u piridinu (15.0 mL) i mešavina je ohlađena na 0 °C. U reakciju je dodat trifenilmetil hlorid (4.7 g, 0.017 mol) i dobijena smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata i na 25°C tokom 16 sati. Reakcija je zatim koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača, a koncentrat je ekstrahovan sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i zatim koncentrisani in vacuo. Reakcija je hromatografisana na silikagelu korišćenjem 30% EtOAc/heksana do dobijanja cis izomera (0.74 g)<1>H NMR(CDCl3):δ 7.52 (m, 6H), 7.27 (m, 9H), 3.98 (m, 1H), 2.93 (m, 2H), 1.21-1.68 (m, 9H); i trans izomera (2.72 g)<1>H NMR(CDCl3):δ 7.44 (m, 6H), 7.20-7.31 (m, 9H), 3.54 (m, 1H), 2.88 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 1.88 (m, 2H), 1.60 (m, 1H), 0.99-1.37 (m, 4H).
Korak 3: trans-4-[(Tritiloksi)metil]cikloheksil metansulfonat
[0487] Trans-4-[(Tritiloksi)metil]cikloheksanol (2.72 g, 0.00730 mol) je rastvoren u hloroformu (30.0 mL) i mešavina je ohlađena na 0°C. U ovu mešavinu je dodat TEA (1.4 mL, 0.010 mol) i metansulfonil hlorid (0.68 mL, 0.0088 mol) i dobijena smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata. Reakcija je zatim ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo.<1>H NMR (CDCl3):δ 7.43 (m, 6H), 7.20-7.31 (m, 9H), 4.57 (m, 1H), 3.00 (m, 3H), 2.90 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.09-1.60 (m, 5H).
Korak 4: 7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-4-(1-cis-4-[(tritiloksi)metil]cikloheksil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0488] 4-(1H-Pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (1.5 g, 0.0048 mol) je pomešan sa natrijumovim hidridom (0.34 g, 0.0086 mol) i trans-4-[(tritiloksi)metil]cikloheksil metansulfonatom (3.00 g, 0.00666 mol) i mešavina je ohlađena na -78°C. U ovu smesu je dodat DMF (8.3 mL) i mešavina je tada ostavljena da se zagreje na 25°C, pa je mešana tokom 20 minuta. Ugrejana smesa je mešana na 55°C tokom 48 sati. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i zatim koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem 40% EtOAc/heksana da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 670,<1>H NMR(CDCl3):δ 8.89 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.84-7.51 (m, 10H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 1.76-2.11 (m, 9H), 0.96 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 5: cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetanol
[0489] 7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-4-(1-cis-4-[(tritiloksi)metil]cikloheksil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (0.3 g, 0.0004 mol) je rastvoren u metanolu (7.0 mL) i THF (2.0 mL, 0.025 mol) i dodato je 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (0.5 mL). Reakcija je zatim mešana na 25 °C tokom 2 sata i TLC analiza je pokazala da nema prisutnog početnog materijala, a LCMS analiza je pokazala postojanje produkta. Reakcija je dodata u zasićen rastvor NaHCO3i ekstrahovana je sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem EtOAc kao eluensa da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 428
<1>H NMR (CDCl3):δ 8.89 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (d, 2H), 4.41 (m, 1H), 3.51-3.71 (m, 4H), 2.31 (m, 2H), 2.08 (m, 3H), 1.70-1.93 (m, 4H), 0.98 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 6: cis-4-[4-(7-2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil metansulfonat
[0490] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetanol je rastvoren u hloroformu (3.00 mL) i ohlađen na 0°C. U reakciju je dodat TEA (0.10 mL, 0.00072 mol) i metansulfonil hlorid (0.05 mL, 0.0006 mol) i ova smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata kada je LCMS analiza pokazala da se u mešavini uglavnom nalazi produkt. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. LC/MS (M+H)<+>: 506
Korak 7: cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilacetonitril
[0491] Pomešani su cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil metansulfonat (0.10 g, 0.00020 mol) i natrijumov cijanid (0.050 g, 0.0010 mol) i DMSO (1.0 mL). Smesa je mešana na 60°C tokom 24 sata, kada je LCMS analiza pokazala da je većina početnog materijala potrošena. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem EtOAc kao eluensa da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 437,<1>H NMR(CDCl3):δ 8.90 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (S, 2H), 4.43 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 2.45(d, 2H, J = 7.6 Hz), 2.37 (m, 2H), 2.10 (m, 4H), 1.70-1.93 (m, 3H), 0.98 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 8: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-cikloheksilacelonitril.
[0492] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilacetonitril (0.080 g, 0.00018 mol) i TFA (0.50 mL, 0.0065 mol) su dodati u DCM (3.00 mL, 0.0468 mol) i smesa je mešana kod 25°C tokom 16 sati. Reakcija je koncentrisana sa rotacijskim isparavanjem i koncentrat je rastvoren u metanolu (3.0 mL, 0.074 mol) i dodat je amonijumov hidroksid (0.5 mL, 0.01 mol). Ova reakcija je mešana na 25°C tokom 6 sati kada je LCMS analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je hromatografirsna na silikagelu korišćenjem 5% MeOH/EtOAc da se dobije produkt.
LC/MS (M+H)<+>:307,<1>H NMR(CD3OD):δ 8.64 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.42 (m, 1H), 2.61 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 2.27 (m, 2H), 1.70-2.15 (m, 7H).
Primer 680: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil tiocijanat
[0493]
Korak 1: cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirinzidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil tiocijanat
[0494] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil metansulfonat (0.10 g, 0.00020 mol) je rastvoren u DMSO (1.00 mL) sa kalijumovim tiocijanatom (0.082 g, 0.00084 mol). Reakcija je zagrejavana na 68°C tokom 4 dana kada je LCMS analiza pokazala odnos ∼4:1 produkt/početni materijal. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem 1:1 EtOAc/heksana da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 469,<1>H NMR(CDCl3):δ 8.89 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (S, 2H), 4.45 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.37 (m, 2H), 2.10 (m, 4H), 1.70-1.93 (m, 3H), 0.98 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 2: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil tiocijanat)
[0495] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil tiocijanat je rastvoren u metanolu (2.0 mL, 0.049 mol) i DCM (2.0 mL, 0.031 mol) i dodata je TFA (0.5 mL, 0.006 mol). Dobijena smesa je mešana na 25°C tokom 16 sati. TLC analiza pokazala je da nema početnog materijala, a LCMS analiza je pokazala prisustvo produkta. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem 2% MeOH/EtOAc da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>:339,<1>H NMR(CD3OD) δ 8.65 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.43 (m, 1H), 3.20 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 2.24 (m, 2H), 1.80-2.17 (m, 7H).
Primer 681: N-5-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil-metil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilpirimidin-2-amin trifluoroacetat
[0496]
Korak 1: 5-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin
[0497] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil metansulfonat (124.56 mg, 0.00024 mol) i 5-amino-4H-1,2,4-triazol-3-tiol (43.00 mg, 0.0003702 mol) su rastvoreni u DMF (1.20 mL) i dodat je kalijumov karbonat (0.122 g, 0.000887 mol). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 18 sati, u kojem je vremenu LCMS pokazao gotovo završetak reakcije, i prisustvo produkta. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim NaCl, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem EtOAc kao eluensa da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 526,<1>H NMR(CDCl3):δ 8.90 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (S, 2H), 4.45 (brs, 2H), 4.41 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.22 (d, 2H, J=7.2 Hz), 2.29 (m, 2H), 1.70-2.10 (m, 7H), 0.98 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 2: 5-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin
[0498] 5-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin (9a) je razređen u TFA (1 mL) i mešan je tokom 2 sata. Rastvor je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se ukloni TFA. Ostatak je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je amonijumov hidroksid (1 mL). Rastvor je mešan preko noći. LCMS je pokazao celokupnu deprotekciju. Rastvor je koncentrisan pomoću rotacijskog isparivača. Produkt je izolovan sa preparativnom LCMS korišćenjem 30mm x 100mm C18 kolone; 11%CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1.5 min, 33% na 6 min; 60 mL/min; detektor postavljen na m/z 396; vreme retencije, 5.5min (2 prolaza). Eluat je osušen smrzavanjem. Prinos je bio 21 mg (di-TFA sol). LC/MS (M+H)<+>:396,<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.9 (br s, 1H, NH); 8.9 (2 singleta, 2H); 8.5 (s, 1H); 7.9 (m, 1H); 7.3 (m, 1H); 4.4 (m, 1H, NCH); 3.1 (d, 2H); 2.2 (m, 2H); 1.9 (m, 3H); 1.7 (m, 2H); 1.6 (m, 2H). MS(ES) 396 (M+1).
Primer 682: N-5-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil-metil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilpirimidin-2-amin trifluoroacetat
[0499]
Korak 1: N-5-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilpirimidin-2-amin
[0500] U bočici je u mikrotalasnom reaktoru grejan [A] 5-[(cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin (0.047 g, 0.000089 mol) sa 2-hloropirimidinom (0.011 g, 0.000096 mol) u 1,4-dioksanu (1.00 mL, 0.0128 mol) na 150°C tokom 40 minuta. LCMS analiza je pokazala da reakcija nije nastupila. U reakciju je dodat 2-hloropirimidin (0.020 g, 0.00017 mol) sa cezijumovim karbonatom (0.033 g, 0.00010 mol) i bakarnim(I) jodidom (4.00 mg, 0.0000210 mol) i ta smesa je zagrejavana na 115°C tokom 3 sata, kada je LCMS analiza pokazala da početni materijal nije prisutan i da je uglavnom prisutan produkt. Reakcija je hromatografisana na silikagelu korišćenjem 2% MeOH/EtOAc da se dobije produkt. LC/MS (M+1)<+>:604,<1>NMR(CDCl3): 8.89 (s, 1H), 8.82 m, 2H), 8.43 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.03 (br s, 2H), 6.88 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.40 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.35 (d, 2H), 2.34 (m, 2H), 1.80-2.15 (m, 7H), 0.98 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 2: N-5-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilpirimidin-2-amin
[0501] N-5-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilpirimidin-2-amin (0.024 g, 0.000040 mol) je razređen u DCM (4.00 mL) i dodata je TFA (0.50 mL, 0.0065 mol). Reakcija je mešana kod 25°C tokom 16 sati i koncentrisana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu (3.00 mL) i dodat je koncentrisani amonijumov hidroksid (0.50 mL). Ova reakcija je mešana na 25°C tokom 2 sata kada je LCMS analiza većinom pokazala prisustvo produkta. Reakcija je koncentrisana upotrebom rotacijskog isparivača i koncentrat je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije da se dobije produkt kao trifluoroacetatna so. LC/MS (M+H)<+>:474,<1>H NMR(CD3OD) δ 8.87 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.34 (m, 2H), 4.43 (m, 1H), 3.20 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 2.24 (m, 2H), 1.80-2.17 (m, 7H).
Primer 683: 3-cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilpropano-nitril trifluoroacetat
[0502]
Korak 1: 2-(1,4-Dioksaspiro[4.5]dec-8-il)etanol.
[0503] Etil 1,4-dioksaspiro[4.5]dec-8-ilacetat (3.40 g, 0.0149 mol) dobijen prema postupku Itagaki, Noriaki; Kimura, Mari; Sugahara, Tsutomu; Iwabuchi, Yoshiharu (Organic Letters 2005; 7(19); 4181-4183.) je rastvoren u etru (30.00 mL) i mešavina je ohlađena na 0°C. U reakciju je dodato 1.00 M litijumovog tetrahidroaluminata u etru (15.0 mL) i dobijena smesa je mešana na 0°C tokom 60 minuta i na 25°C tokom 2 sata. Reakcija je ohlađena i dodata je voda (0.40 mL, 0.022 mol), i zatim 1.00 M natrijumov hidroksid (0.40 mL). U reakciju je zatim dodat etar (100.00 mL) i čvrsta supstanca koja se istaložila je profiltrirana. Filtrat je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se dobije produkt.<1>H NMR(CDCl3): 3.94 (s, 4H), 3.67 (t, 2H), 1.20-1.80 (m, 11H).
Korak 2: 4-(2-Hidroksietil)cikloheksanon
[0504] 2-(1,4-Dioksaspiro[4.5]dec-8-il)etanol (2.70 g, 0.0145 mol) rastvoren je u acetonu (10.00 mL) i THF (10.00 mL) i dodato je 6.00 M HCl (6.00 mL). Reakcija je mešana kod 25°C tokom 16 sati, neutralizovana sa rastvorom NaHCO3i zatim je ekstrahovana sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom i sa zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Sirovi produkt je korišćen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR(CDCl3): 3.75 (m, 2H), 2.36 (m, 4H), 1.20-2.13 (m, 7H).
Korak 3: 4-(2-Hidroksietil)cikloheksanol
[0505] 4-(2-Hidroksietil)cikloheksanon (2.00 g, 0.0141 mol) je rastvoren u etru (30.00 mL) i ohlađen na 0°C. U reakciju je dodato 1.0 M litijumovg tetrahidroaluminata u etru (14.1 mL) i dobijena smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata i na 25°C tokom 16 sati. U reakciju je dodat THF (20.00 mL), ova mešavina je ohlađena na 0°C i zatim je dodata voda (0.40 mL, 0.022 mol), pa zatim 1.00 M natrijumovog hidroksida (0.40 mL). U reakciju je zatim dodat etar (100.00 mL) i dobijena smesa je mešana tokom 10 minuta, zatim je filtrirana i filtrat je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se dobije sirovi produkt. Sirovi produkt je korišćen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR(CDCl3): 3.96 i 3.57 (m, 1H) sporedni i glavni CHOH (∼1:5 omjer) 3.70(m, 2H), 0.94-2.02 (m, 11H).
Korak 4: 4-[2-(Tritiloksi)etil]cikloheksanol
[0506] 4-(2-Hidroksietil)cikloheksanol (sirovina iz prethodne reakcije) (1.88 g, 0.0130 mol) je rastvorena u piridinu (20.00 mL) i ohlađena na 0°C. U reakciju je dodat trifenilmetil hlorid (4.0 g, 0.014 mol) i ova mešavina je mešana na 0°C tokom 2 sata i na 25°C tokom 16 sati. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i koncentrat je ekstrahovan sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom, i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu (30% EtOAc/heksani) do dobijanja trans izomera (1.98 g)<1>H NMR(CDCl3): 7.42-7.45 (m, 6H), 7.20-7.30 (m, 9H), 3.50 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.66 (m, 2H), 1.17-1.60 (m, 5H), 0.89 (m, 2H).
Korak 5: trans-4-[2-(Tritiloksi)etil]cikloheksil metansulfonat
[0507] Trans-4-[2-(Tritiloksi)etil]cikloheksanol (1.95 g, 0.00504 mol) je rastvoren u hloroformu (40.00 mL) i mešavina je ohlađena na 0°C. U reakciju je dodat TEA (0.98 mL, 0.0071 mol) i metansulfonil hlorid (0.47 mL, 0.0060 mol) i ova mešavina je mešana kod 0°C tokom 2 sata. Reakcija je zatim ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, pa zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo.
<1>H NMR(CDCl3): 7.41-7.45 (m, 6H), 7.20-7.32 (m, 9H), 4.55 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.20-1.60 (m, 5H), 0.95 (m, 2H).
Korak 6: 7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-4-(1-cis-4-[2-(tritiloksi)etil]cikloheksil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0508] 4-(1H-Pirazol-4-il)-7-[2-trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (1.0 g, 0.0032 mol) je pomešan sa natrijumovim hidridom (0.23 g, 0.0058 mol) i trans-4-[2-(tritiloksi)etil]cikloheksil metansulfonatom (2.10 g, 0.00452 mol) i ova mešavina je ohlađena na -78°C. U reakciju je dodat DMF (6.00 mL) i ova mešavina je ostavljena da se zagreje do 25°C i zatim je mešana tokom 20 minuta. Reakcija je mešana na 55°C tokom 48 sati kada je LCMS analiza većinom pokazala produkt. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem 40% EtOAc/heksana da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>:684,<1>H NMR(CDCl3): 8.89 (s, 1H), 8.35 (br s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.50 (m, 6H), 7.44 (d, 1H), 7.27-7.32 (m, 9H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.33 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.17 (t, 2H), 1.50-2.25 (m, 11H).0.98 (m, 2H), 0.00(s, 9H).
Korak 7: 2-cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiletanol (7b)
[0509] 7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-4-(1-cis-4-[2-(tritiloksi)etil]cikloheksil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (1.45 g, 0.00212 mol) je rastvoren u metanolu (30.00 mL) i THF (10.00 mL) i dodato je 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (2.00 mL). Smesa je mešana na 25°C tokom 2 sata, kada je TLC analiza pokazala da početni materijal nije prisutan, a LCMS analiza je pokazala prisustvo produkta. Reakcija je dodata u zasićeni rastvor NaHCO3, pa je zatim ekstrahovana sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem EtOAc kao eluensa da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>: 442
Korak 8: 2-cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiletil metansulfonat (8b)
[0510] 2-cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiletanol (0.89 g, 0.0020 mol) je razređen u DCM (12.00 mL, 0.1872 mol) i ohlađen je na 0°C. U reakciju je dodat TEA (0.43 mL, 0.0031 mol) i metansulfonil hlorid (0.19 mL, 0.0024 mol) i ova mešavina je mešana na 0°C tokom 2 sata kada je LCMS analiza uglavnom pokazala prisustvo produkta. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom, a organski ekstrakti su isprani sa vodom i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4i koncentrisani in vacuo. LC/MS (M+H)<+>:520,<1>H NMR(CDCl3): 8.90 (s, 1H), 8.38 (br s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.88 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.27 (t, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 1.60-2.40 (m, 11H).0.98 (m, 2H), 0.00(s, 9H)
Korak 9: 3-cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilpropanonitril trifluoroacetat (9b)
[0511] 2-cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiletil metansulfonat (0.075 g, 0.00014 mol) je rastvoren u DMSO (1.50 mL) i dodat je natrijumov cijanid (0.035 g, 0.00072 mol). Reakcija je mešana na 40°C tokom 16 sati kada je LCMS analiza pokazala da nema početnog materijala. Reakcija je zatim ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Ostatak je razređen u DCM (3.00 mL) i dodata je TFA (0.50 mL, 0.0065 mol). Ova mešavina je mešana na 25°C tokom 16 sati kada je LCMS analiza pokazala uglavnom intermedijer hidroksimetil. Mešavina je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača, koncentrat je rastvoren u metanolu (3.00 mL) i dodat je koncentrisani amonijumov hidroksid (0.50 mL). Reakcija je mešana na 25°C tokom 3 sata kada je LCMS analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je zatim koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i koncentrat je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije da se dobije produkt kao so TFA (47.8 mg). LCMS (M+H)<+>:321,<1>H NMR(CD3OD): 8.86 (s, 1H), 8.81(s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 4.48 (m, 1H), 2.51 (m, 2H), 2.28 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 1.80 (m, 5H), 1.67 (m, 2H).
Primer 684: 5-[(2-cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil-etil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin trifluoroacetat
[0512]
[0513] 2-cis-4-[4-(7-[2-(Trimetlilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiletil metansulfonat (0.060 g, 0.00012 mol) je razređen u DMF (1.31 mL) sa 5-amino-4H-1,2,4-triazol-3-tiolom (0.020 g, 0.00017 mol) i kalijumovim karbonatom (0.024 g, 0.00017 mol). Ova smesa je zagrejavana na 40°C tokom 18 sati kada je LCMS analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je razređena sa EtOAc, filtrirana i zatim je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača. Ostatak je razređen u DCM (3.60 mL) i dodata je TFA (0.60 mL, 0.0078 mol). Ova mešavina je mešana na 25°C tokom 5 sati i zatim je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača. Ostatak je rastvoren u metanolu (3.60 mL) i dodat je koncentrovani amonijumov hidroksid (0.60 mL) i ta smesa je mešana na 25°C tokom 2 sata. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i koncentrat je prečišćen sa preparativnom LC da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>:410,<1>H NMR(CD3OD): 8.85 (s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 4.46 (m, 1H), 3.17 (m, 2H), 2.27 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 1.62-1.90 (m, 7H).
Primer 685: 4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenaceto-nitril trifluoroacetat
[0514]
Korak 1: 1,4-Dioksaspiro[4.5]dekan-8-ol
[0515] 1,4-Dioksa-spiro[4.5]dekan-8-on (2.00 g, 0.0128 mol) je rastvoren u etru (50 mL) i mešavina je ohlađena na 0°C. U reakciju je dodato 1 M litijumovog tetrahidroaluminata u etru (7.0 mL) i ova smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata kada je TLC analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je zatim ugašena sa vodom i 1 N NaOH (0.5 mL svake) i zatim filtrirana. Filtrirana čvrsta materija je isprana sa etrom i kombinovani filtrat etra je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se dobije produkt. NMR (CDCl3): 3.94 (m, 4H), 3.81 (m, 1H), 1.79-1.92 (m, 4H), 1.54-1.70 (m, 4H).
Korak 2: 1,4-Dioksaspiro[4.5]dek-8-il metansulfonat.
[0516] 1,4-Dioksaspiro[4.5]dekan-8-ol (0.40 g, 0.0025 mol) je rastvoren u hloroformu (10.0 mL) i dobijena mešavina je ohlađena na 0°C. U mešavinu je dodat TEA (0.49 mL, 0.0035 mol) i metansulfonil hlorid (0.23 mL, 0.0030 mol) i ova smesa je mešana na 0°C tokom 2 sata. Reakcija je ekstrahovana sa etil acetatom i organski ekstrakti su isprani sa vodom, pa zasićenim NaCl, zatim su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Sirovi produkt je korišćen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR(CDCl3): 4.85 (m, 1H), 3.95 (m, 4H), 3.02 (s, 3H), 1.98-2.05 (m, 4H), 1.82-1.89 (m, 2H), 1.61-1.70 (m, 2H).
Korak 3: 4-[1-(1,4-Dioksaspiro[4.5]dec-8-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin.
[0517] Mešavina 1,4-dioksaspiro[4.5]dec-8-il metansulfonata (0.50 g, 0.0015 mol) sa 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidinom (0.36 g, 0.0011 mol) i natrijumovim hidridom (0.082 g, 0.0020 mol) je ohlađena na -78°C i dodat je DMF (2.0 mL). Reakcija je ostavljena da se zagreje do 25°C i zatim je mešana tokom 20 minuta, pa je potom grejana na 55°C tokom 24 sata. Reakcija je zatim ekstrahovana sa etil acetatom. Organski ekstrakti su isprani sa vodom i zasićenim NaCl, zatim osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Koncentrat je hromatografisan na silikagelu korišćenjem 1:1 EtOAc/heksana da se dobije produkt. LC/MS (M+H)<+>:456,<1>H NMR(CDCl3): 8.89 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.06 (s, 4H), 3.60 (m, 2H), 2.22-2.31 (m, 4H), 2.00 (m, 2H), 1.86 (m, 2H), 0.98 (m, 2H), 0.00(s, 9H)
Korak 4: 4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanon
[0518] U 4-[1-(1,4-dioksaspiro[4.5]dec-8-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (2.13 g, 0.00467 mol) je dodat aceton (85 mL) i zatim 12 M HCl u vodi (4.0 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1 sata, LCMS analiza je pokazala 66% reakcije. Nakon 4 sata, HPLC analiza je pokazala 80% reakcije. Nakon 20 sati, HPLC nije pokazala promenu (i nikakav gubitak SEM). Reakcijska mešavina je ugašena sa zasićenim NaHCO3. Aceton je uklonjen sa rotacijskim isparivačem. Dobijena mešavina vodenog bikarbonata i bele čvrste materije je zatim ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakt je mućkan sa zasićenim NaCl, osušen preko Na2SO4, zatim je koncentrisan do suvoga da ostane 2.0 g sirovog produkta. TLC (5% iPrOH-40% EtOAc-heksan): produkt Rf 0.12 (ketal 0.22). Sirovi produkt je prečišćen pomoću automatske flash hromatografije na silikagelu. Korišćena je 40g kolona; protok 40 mL/min; [A=2% iPrOH-heksan] [B=6% iPrOH-50% EtOAc/heksan]; A, 2 min; gradijent do B u 25 min, zatim B tokom 10 minuta. Eluens je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 1.3 g bele čvrste supstance. HPLC Postupak: Zorbax SB C18, 5 µm, 15 cm, 35 °C, protok 1.2 mL/min, 10% CH3CN-H2O (0.05% TFA), do 100% CH3CN kroz 9.0 min; vreme zaustavljanja 12.3 min; detektor 268 nm; vreme zadržavanja početnog materijala, 7.4 min; produkt, 6.9 min (UV max. 220, 268, 300, 322 nm).<1>H NMR (CDCl3) δ 8.8 (s, 1H); 8.3 (m, 2H); 7.4 (d, 1H); 7.3 (s, 1H); 6.8 (d, 1H); 5.7 (s, 2H); 4.7 (m, 1H, NCH); 3.6 (t, 2H); 2.3-2.5 (m, 8H); 0.9 (t, 2H); -0.1 (s, 9H). MS(ES) 412 (M+1).
Korak 5: 4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenacetonitril
[0519] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (1.90 mL) na 0°C je dodat ukapavanjem rastvor dietil cijanometilfosfonata (321 µL, 0.00198 mol) u THF (4 mL). Reakcija je zadržana tokom 10 minuta, zatim je dodata u rastvor 4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanona (743 mg, 0.00180 mol) u THF (5 mL) mešanog na 0°C u atmosferi azota. Reakcija je mešana 1.5 sat na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazala je čistu konverziju do željenog produkta. U reakcijsku mešavinu je zatim dodata voda i EtOAc. Faze su separirane i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakt je ispran sa vodom, zatim sa zasićenim NaCl, pa osušen preko Na2SO4, pa koncentrisan do suvoga uz prinos od 0.76 g bele kristalne čvrste supstance (TLC (EtOAc) Rf 0.33). Produkt je prečišćen pomoću automatske flash hromatografije na silikagelu. Korišćena je 40g kolona; protok 40 mL/min; [A= heksan] [B= EtOAc]; A, 2 min; gradijent do B u 20 min. Rotacijskim isparavanjem dobijen je prinos od 0.70 g bele kristalne čvrste materije (89% prinos).<1>H NMR (CDCl3) δ 8.9 (s, 1H); 8.3 (s, 2H); 7.4 (d, 1H); 7.3 (s, 1H); 6.9 (d, 1H); 5.7 (s, 2H); 5.3 (s, 1H, olefin); 4.5 (m, 1H, NCH); 3.6 (m, 2H); 3.2 (m, 1H); 2.7 (m, 1H); 2.5 (m, 4H); 2.1 (m, 2H); 1.0 (m, 2H); -0.1 (s, 9H). MS(ES) 435 (M+1).
Korak 6: 4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenacetonitril
[0520] Rastvor TFA (0.5 mL, 0.006 mol) i 4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenacetonitrila (22.7 mg, 0.0000522 mol), je mešan tokom 1.5 sata. Rastvor je zatim koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se ukloni TFA. LCMS analiza pokazala je konverziju u intermedijer hidroksimetil, M+H 335. Dodat je metanol i smesa metanola je ponovo koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača. Dobijeni ostatak rastvoren je u metanolu (1 mL) i dodat je amonijumov hidroksid (0.25 mL, 0.0064 mol). Dobijen rastvor mešan je tokom 16 h. LCMS analiza pokazala je celokupnu deprotekciju. Rastvor je zatim koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLC korišćenjem 30 mm x 100 mm C18 kolone; 18% CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1 min, do 35% u 6 min; 60 mL/min; detektor postavljen na 254nm; vreme zadržavanja, 4.4min. Eluat je osušen zamrzavanjem. Dobijen je prinos 7.6 mg bele čvrste supstance (sol TFA; racemat; 34.6%).<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.9 (br s, 1H, NH); 8.9 (s, 2H); 8.5 (s, 1H); 7.8 (m, 1H); 7.3 (m, 1H); 5.6 (s, 1H, olefin); 4.6 (m, 1H, NCH); 2.8 (m, 1H); 2.6 (m, 1H); 2.5 (m, 2H); 2.3 (m, 2H) 2.0 (m, 2H). MS(ES) 305 (M+1).
Primer 686: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksankarbonitril trifluoroacetat
[0521]
Korak 1: cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksankarbaldehid oksim
[0522] Rastvor kompleksa sumpor trioksid-piridin (53.4 mg, 0.000336 mol) u DMSO (0.3 mL, 0.004 mol) je doda u rastvor cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetanola (57.4 mg, 0.000134 mol) i TEA (56.1 µL, 0.000403 mol) u DCM (0.3 mL, 0.004 mol) na -10°C. Mešavina je energično mešana na 10-20°C tokom jednog sata. LCMS analiza je pokazala konverziju u aldehid. Mešavina je zatim sipana u ledenu vodu, pa je ekstrahovana sa DCM. Ekstrakti su isprani sa 10 % limunskom kiselinom, vodom, zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom, vodom, pa rasolinom, i zatim su osušeni preko natrijumovog sulfata. Koncentrisanje je dalo 57 mg taloga.
[0523] U dobijeni talog je dodat hidroksilamin-HCl (50 mg), 1 mL 20% K2CO3, i 3 mL MeOH i ova smesa je mešana na sobnoj temperaturi sve dok LCMS nije pokazala konverziju u odgovarajući oksim, M+H 441. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS korišćenjem 30 mm x 10,0 mm, C18 kolone; 30% CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1 min, do 60% u 6 min; 60 mL/min; detektor postavljen na m/z 441; vreme zadržavanja, 6.0 min. Sušenje zamrzavanjem je dalo prinos 17.4 mg bele čvrste supstance.
Korak 2: cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksankarbonitril
[0524] [A] cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksankarbaldehid oksim (11.0 mg, 0.0000250 mol) je rastvoren u piridinu (0.25 mL, 0.0031 mol) i dodat je benzensulfonil hlorid (10.0 µL, 0.0000784 mol) i dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja 15 sati, LCMS analiza pokazala je formiranje produkta, M+H 423. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS korišćenjem 19 mm x 100 mm C18 kolone; 45% CH3CN-H2O (0.1 % NH4OH), 1min, do 75% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 423; vreme zadržavanja, 4.8 min. Eluent je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 8 mg željenog produkta.
[0525] Produkt je razređen u TFA (0.25 mL) i mešan tokom 2 sata. Rastvor je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se ukloni TFA. Dodat je metanol i mešavina je ponovo koncentrisana. LCMS je pokazala čistu konverziju u intermedijer hidroksimetil (M+H 323). Ostatak je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je amonijumov hidroksid (0.25 mL). Rastvor je mešan 0.5 sata, kada je LCMS pokazala celokupnu deprotekciju do željenog produkta M+H 293. Mešavina je zatim koncentrisana sa rotacijskim isparivanjem, a produkt je izolovan pomoću preparativne HPLC-MS upotrebom 19 mm x 100 mm C18 kolone; 15% CH3CN-H2O (0.1 % TFA), 1.5 min, do 30% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 293; vreme zadržavanja, 5.2 min. Eluat je osušen smrzavanjem da se dobije prinos od 5.5 mg produkta kao so TFA.<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.82 (br s, 1H, NH); 8.87 (s, 1H); 8.85 (s, 1H); 8.48 (s, 1H); 7.82 (m, 1H); 7.24 (m, 1H); 4.40 (m, 1H, NCH); 3.22 (m, 1H); 2.05 (m, 6H); 1.79 (m, 2H). MS(ES) 293 (M+1).
Primer 687: 2-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)sulfinil]benzonitril trifluoroacetat
[0526]
Korak 1: 4-[1-(cis-4-[(2-Bromofenil)tio]metilcikloheksil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0527] Ovo jedinjenje je dobijeno od (cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil metansulfonata kao u Primeru 686[A]. Prinos 73%. Produkt je prečišćen pomoću sledećeg HPLC postupka: Zorbax SB C18, 5 µm, 15cm, 35 C, protok 1.2 mL/min, 10% CH3CN-H2O (0.05% TFA), do 100% CH3CN u 9.0 min; vreme zaustavljanja 12.3 min; detektor 254 nm; vreme zadržavanja početnog mesilata, 7.5 min; produkt, 9.9 min (UV max. 215, 258, 300 i 326 nm). TLC: Rf 0.3 upotreba 35% EtOAc/5% iPrOH/heksana. Produkt je prečišćen pomoću automatizovane flash hromatografije na silikagelu upotrebom 30% EtOAc/5% i PrOH/heksan.<1>H NMR (CDCl3) δ 8.84 (s, 1H); 8.31 (s, 1H); 8.26 (s, 1H); 7.55 (m, 1H); 7.39 (d, 1H); 7-27 (m, 2H); 7.03 (m, 1H); 6.82 (d, 1H); 5.67 (s, 2H); 4.34 (m, 1H, NCH); 3.55 (m, 2H); 2.98 (d, 2H); 2.28 (m, 2H); 2.02 (m, 3H); 1.83 (m, 4H); 0.92 (m, 2H); -0.06 (s, 9H). MS(ES) 598/6001:1 (M+1).
Korak 2: 2-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]benzonitril
[0528] 4-[1-(cis-4-[(2-Bromofenil)tio]metilcikloheksil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (62.7 mg, 0.000105 mol), cinkov cijanid (123 mg, 0.00105 mol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (30.2 mg, 0.0000262 mol) su mešani u DMF (3 mL) i rastvor je ispran sa azotom. Rastvor je zatim grejan na 100°C tokom 25 min u mikrotalasnom reaktoru. LCMS i HPLC analize su pokazale > 90% dovršene reakcije. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 30 mm x 100 mm C18 kolone; 52%CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1.5 min, do 75% u 6 min; 60 mL/min; detektor postavljen na 545 nm. Eluent je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača do prinosa od 37 mg 2-cijanofenilsulfidne soli TFA. HPLC Postupak: Zorbax SB C18, 5 µm, 15 cm, 35 C, protok 1.2 mL/min, 10% CH3CN-H2O (0.05% TFA), do 100% CH3CN u 9.0 min; vreme zaustavljanja 12.3 min; detektor 265 nm; vreme zadržavanja početnog materijala, 9.9 min; produkt, 8.9 min. MS(ES) 545 (M+1).
Korak 3: 2-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)sulfinil]-benzonitril
[0529] Rastvor 2-[(cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]benzonitrila (30.6 mg, 0.0000562 mol) u TFA (1 mL) je mešan tokom 2 sata. Rastvor je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača da se ukloni TFA. Dodat je metanol, a mešavina je ponovno koncentrisana. Dobijeni ostatak je dobijen rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je amonijumov hidroksid (1 mL). Rastvor je mešan preko noći, kada je HPLC pokazala završetak deprotekcije. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 19 mm x 100 mm C18 kolone; 30% CH3CN-H2O (0.1% TFA), 1.5 min, do 59% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 415 nm; vreme zadržavanja, 4.7 min. Eluat je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 36 mg sulfidne soli TFA, bezbojnog staklastog materijala. NMR (d6-DMSO) δ 12.82 (br s, 1H, NH); 8.84 (2 singleta, 2H); 8.45 (s, 1H); 7.8 (m, 2H); 7.64 (m, 2H); 7.34 (td, 1H); 7.24 (s, 1H); 4.39 (m, 1H, NCH); 3.23 (d, 2H); 2.19 (m, 2H); 1.89 (m, 3H); 1.72 (m, 4H). MS(ES) 415 (M+1). Ovaj materijal je zatim rastvoren CH2Cl2i ohlađen na 0°C. U ohlađenu smesu dodata je MCPBA(12.9 mg, 0.0000562 mol) i dobijena smesa je mešana tokom 1 sata. LCMS je pokazala konverziju u produkt, bez preostalog sulfida. Reakcijska mešavina je koncentrisana sa rotacijskim isparivačem, a produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 19 mm x 100 mm C18 kolone; 18% CH3CN-H2O (0.1 % TFA), 1.0 min, do 35% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 431 nm; vreme zadržavanja, 5.6 min. Produkt je izolovan iz eluensa pomoću sušenja smrzavanjem. Dobijen je prinos od 27.6 mg soli TFA. HPLC postupak je bio: Zorbax SB C18, 5 µm, 15 cm, 35 °C, protok 1.2 mL/min, 10% CH3CN-H20 (0.05% TFA), do 100% CH3CN u 9.0 min; vreme zaustavljanja 12.3 min; detektor 268 nm; vreme zadržavanja početnog materijala, 5.6 min; sulfoksid, 4.8 min; sulfon, 5.2 min; MCPBA, 6.0 min.<1>H NMR (CDCl3) δ 12.1 (br s, 1H, NH); 9.0 (s, 1H); 8.9 (s, 1H); 8.3 (s, 1H); 8.1 (m, 1H); 7.9 (m, 1H); 7.8 (m, 1H); 7.6 (m, 2H); 7.0 (m, 1H); 4.4 (m, 1H, NCH); 3.1 (dd, 1H); 2.9 (dd, 1H); 2.5 (m, 1H); 2.3 (m, 1H); 2.3-1.7 (m, 7H). MS(ES) 431 (M+1).
Primer 688: 2-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)sulfonil]benzonitril trifluoroacetat
[0530]
[0531] 2-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)sulfinil]-benzonitril (17.2 mg, 0.0000400 mol) (21 mg sol TFA), je razređen u DCM (10 mL) i ohlađen na 0°C. U ovu smesu je dodata MCPBA (18 mg, 0.0000800 mol). Dobijena smesa je mešana tokom 1 sata na 0°C, pa zatim tokom 16 h na sobnoj temperaturi. HPLC i LCMS pokazali su 80 % površine produkta, i 3 % površine sulfoksida. MCPBA je uklonjena sa ispiranjem zasićenim NaHCO3, a dobijena isprana smesa je koncentrisana sa rotacijskim isparavanjem. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 19 mm x 100 mm C18 kolone; 23%CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1.0 min, do 43% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 447 nm; vreme zadržavanja, 5.1 min. Produkt je izolovan od eluensa sa sušenjem smrzavanjem. Prinos je bio 5 mg soli TFA.<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.70 (br s, 1H, NH); 8.83 (s, 1H); 8.82 (s, 1H); 8.41 (s, 1H); 8.21 (dd, 1H); 8.16 (dd, 1H); 8.01 (td, 1H); 7.95 (td, 1H); 7.78 (s, 1H); 7.19 (s, 1H); 4.34 (m, 1H, NCH); 3.62 (d, 2H); 2.28 (m, 1H); 2.10 (m, 2H); 1.90 (m, 2H); 1.72 (m, 4H). MS(ES) 447 (M+1).
Primer 689: 3-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilacetonitril trifluoroacetat
[0532]
Korak 1: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-cikloheksanon
[0533] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (309 mg, 0.980 mmol) u ACN (6 mL) je dodat 2-cikloheksen-1-on (190 µL, 01.96 mmol), pa zatim DBU (40 µL, 0.3 mmol). Dobijena smesa je mešana tokom jednog sata kada je LCMS naznačila završetak adicije. Mešavina je redukovana in vacuo i sirovi produkt je prečišćen pomoću kolonske hromatografije da se dobije produkt (397 mg, 98%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.79 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.61 (m, 1H), 3.55 (m, 2H), 3.05-2.90 (m, 2H), 2.45-2.30 (m, 4H), 2.05 (m, 1H), 1.90 (m, 1H), 0.92 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). MS (EI) m/z = 412.2 (M+H).
Korak 2: (2E, Z)-3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenacetonitril
[0534] U rastvort-BuOK u THF (1.0 M, 0.255 mL, 0.255 mmol) na 0°C ukapavanjem je dodat rastvor dietil cijanometilfosfonata (43 µL, 0.27 mmol) u THF (0.6 mL). Reakcija je održavana tokom 10 minuta, zatim je ukapavanjem dodat rastvor 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanona (100.0 mg, 0.2430 mmol) u THF (0.34 mL). Nakon završetka adicije, ledena kupka je uklonjena i reakcija je držana na temperaturi okoline tokom 16 sati, kada je LCMS naznačila završetak adicije da se dobije željeni produkt kao mešavina E i Z izomera (87.9 mg, 83%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 0.5H), 8.83 (s, 0.5 H), 8.27 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.40 (s, 0.5H), 7.39 (s, 0.5H), 6.81 (d, 0.5H), 6.79 (d, 0.5H), 5.67 (s, 2H), 5.28 (s, 0.5H), 5.24 (s, 0.5H), 4.4 (m, 1H), 3.55 (m, 2H), 3.1-2.8 (m, 2H), 2.5-2.1 (m, 6H), 0.92 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). MS (EI) m/z = 435.2 (M+H).
Korak 3: 3-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-cikloheksilacetonitril
[0535] U (2E, Z)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilidenacetonitril (42.0 mg, 0.0966 mmol) je dodat THF (0.5 mL). Dobijen rastvor je ohlađen na -78 °C, i zatim je ukapavanjem dodat 1.0 M L-Selectride® u THF (120 µL, 0.12 mmol). Reakcija je održavana na -78°C tokom 1 sata u kojem trenutku je LCMS naznačila kompletnu redukciju. Reakcija je ugašena na -78°C sa dodavanjem zasićene vodene NH4Cl i EtOAc, pa je zatim ostavljena da se zagreje do temperature okoline. Faze su separirane i vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, zatim sa zasićenim NaCl, pa je osušena preko MgSO4. Sirovi produkt je prečišćen pomoću kolonske hromatografije da se dobije produkt (26.5 mg, 63%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.53 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 2.6-1.4 (m, 11H), 0.92 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). MS (EI) m/z = 437.2 (M+H).
Korak 4: 3-[4-(7H Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilacetonitril trifluoroacetat
[0536] U 3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilacetonitril (30.1 mg, 0.0689 mmol) je dodat DCM (1.0 mL) i TFA (1.0 mL). Dobijena smesa je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline, u kojem je trenutku sa LCMS naznačeno završetak cepanja na N-hidroksimetil intermedijer. Rastvrač je uklonjen i u ostatak je dodat metanol (1.0 mL), pa zatim etilendiamin (37 µL, 0.55 mmol), nakon čega je reakcija mešana 5 sati, kada je sa LCMS naznačeno okončanje reakcije. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen sa preparativnom LCMS da se dobije produkt kao so TFA (24 mg, 83%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.91 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 2.58 (d, 2H), 2.5-1.5 (m, 9H). MS (EI) m/z = 307.10 (M+H).
Primer 690: 5-({cis-4-[4-(7H-Pirolo(2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil}tio)-1H-1,2,4-triazol-3-amin bis(trifluoroacetat)
[0537]
Korak 1: trans-4-[4-(7-(2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanol
[0538] Rastvor 4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanona (662 mg, 1.61 mmol) u THF (5 mL) je ohlađen na 0°C i polako je dodat litijumov tetrahidroaluminat (2M u THF, 0.804 mL, 1.61 mmol). Mešavina je tada ostavljena da se polako zagreje do temperature okoline dok sa LCMS nije naznačen završetak redukcije. Reakcija je ohlađena na 0°C i ugašena sa dodavanjem vode (0.5 mL) ukapavanjem. Dodat je DCM, a smesa je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline, nakon čega su istaložene čvrste supstance uklonjene pomoću filtracije. Filtrat je redukovan in vacuo da preostane bela čvrsta supstanca (0.63g, 99%). HPLC čvrste supstance je pokazala približno 4:1 odnos trans prema cis produktu. TLC (6:3:1 EtOAc:heksani:izopropanol) je dala Rf od 0.25 za cis produkt, a 0.18 za trans produkt. Produkt je prečišćen pomoću flash hromatografije na silikagelu da se dobije 230 mg čistog trans alkohola i 25 mg čistog cis alkohola, zatim 350 mg mešavine izomera.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.83 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.24 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 2.28 (m, 2H), 2.17 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 1.53 (m, 2H), 0.92 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). MS (EI) m/z = 414 (M+H).
Korak 2: trans-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol- 1-il]cikloheksil metansulfonat
[0539] U trans-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksanol (154 mg, 0.372 mmol) je dodat DCM (1.0 mL) i TEA (73 µL, 0.52 mmol). Dobijen rastvor je zatim ohlađen na 0°C i dodat je metansulfonil hlorid (34 µL, 0.45 mmol). Reakcija je održavana tokom 2 sata, kada su TLC i LCMS naznačili završetak reakcije. Reakcija je podeljena između vode i DCM, faze su separirane i vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim rastvaračem. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, pa sa zasićenim NaCl, zatim je osušena preko MgSO4i redukovana in vacuo do dobijanja sirovog produkta koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja (173 mg, 95%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.83 (s, 1H), 8.24 (s, 2H), 8.24 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.77 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.03 (m, 2H), 1.82 (m, 2H), 1.53 (m, 2H), 0.92 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). MS (EI) m/z = 492.1 (M+H).
Korak 3: 5-({cis-4-[4-(7H-Pirolo[2, 3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil}tio)-1H-1,2,4-triazol-3-amin bis(trifluoroacetat)
[0540] U rastvor trans-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil metansulfonata (42 mg, 0.085 mmol) u DMF (800 µL) je dodat 3-amino-1H-1,2,4-triazol-5-tiol (30 mg, 0.26 mmol) i K2CO3(36 mg, 0.26 mmol). Reakcija je začepljena i održavana na 100 °C tokom 2 sata u kojem je trenutku sa LCMS naznačena konverzija u željeni produkt. Reakcija je razređena sa vodom i sukcesivno ekstrahovana sa etrom, etil acetatom zatim 3:1 hloroformom:izopropil alkoholom. Kombinovana organska faza isprana je sa vodom, zatim sa zasićenim NaCl, osušena preko MgSO4i redukovana in vacuo, a sirovi produkt je prečišćen pomoću kolonske hromatografije do dobijanja 5-({cis-4-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil]tio)-1H-1,2,4-triazol-3-amina (27.3 mg, 63%). U produkt je dodat DCM (0.5 mL) i TFA (0.5 mL), a reakcija je mešana 1 sat na temperaturi okoline u kojem je trenutku sa LCMS naznačeno završetak cepanja na N-hidroksimetil intermedijer. Rastvarač je uklonjen i u ostatak je dodat metanol (1.0 mL) i zatim NH4OH (0.3 mL). Reakcija je mešana tokom 16 sati u kojem je trenutku sa LCMS naznačen završetak deprotekcije. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen sa preparativnom LCMS da se dobije produkt kao so bis-TFA (15.1 mg, 29%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.77 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.21 (d, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 2.25(m, 2H), 2.04 (m, 6H). MS (EI) m/z = 382.2 (M+H).
Primer 691: N-{5-[({cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksil}-metil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-il}metansulfonamid trifluoroacetat
Korak 1. N-5-[(cis-4-[4-(7-[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilmetansulfonamid
[0542] 5-[(cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-amin (30.00 mg, 5.706E-5 mol) je razređen u DCM (2.00 mL, 0.0312 mol) sa TEA (0.024 mL, 0.00017 mol) i ohlađen na 0°C. U reakciju je dodat metansulfonil hlorid (0.0066 mL, 0.000086 mol) i dobijena smesa je mešana na 0°C tokom 60 minuta, kada je LCMS analiza pokazala većinom prisustvo produkta. Reakcija je hromatografisana na silikagelu upotrebom EtOAc kao eluensa da se dobije produkt. LC/MS (M+1)<+>:604
Korak 2. N-5-[(cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilmetansulfonamid
[0543] U bočici okruglog dna sa jednim grlom razređen je [A] N-5-[(cis-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksilmetil)tio]-4H-1,2,4-triazol-3-ilmetan-sulfonamid (0.025 g, 0.000041 mol) u DCM (3.00 mL, 0.0468 mol) i dodata je TFA (mL, 0.006 mol). Reakcija je mešana na 25 °C tokom 16 sati kada je LCMS analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i rastvorena u metanolu (2.00 mL, 0.0494 mol) i dodato je 16 M amonijaka u vodi (0.2 mL). Reakcija je mešana kod 25°C tokom 3 sata kada je LCMS analiza pokazala da nema prisutnog početnog materijala. Reakcija je koncentrisana korišćenjem rotacijskog isparivača i prečišćena je sa preparativnom LC da se dobije produkt kao trifluoroacetatna so. LC/MS (M+1)<+>:474, 1H NMR(CD3OD): 8.87 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 4.48 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.23 (d, 2H), 2.30 (m, 2H), 2.04 (m, 3H), 1.85 (m, 4H).
Primer 692: [cis-4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-1-(1H-1,2,4-triazol-1-il)cikloheksil] acetonitril
[0544]
[0545] 1H-1,2,4-Triazol (91.0 mg, 0.00132 mol), DBU (174 µL, 0.00070 mol), [A] 4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]cikloheksiliden-acetonitril (86.4 mg, 0.000199 mol) i ACN (2.0 mL) su mešani na sobnoj temperaturi. Nakon 4 dana, LCMS je pokazala 58 % produkta (dva vrška, M+H 504, odnos 1:1). DBU u reakciji je neutralizovan sa TFA. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLC upotrebom 30 mm x 100 mm C18 kolone; 32% CH3CN-H2O (0.1%TFA), 1 min, do 47% u 6 min; 60 mL/min; detektor postavljen na 254 nm; vreme zadržavanja, 5.1 (A) & 5.4 (B) min. Eluent je koncentrisan korišćenjem rotacijskog isparivača do dobijanja 22 mg (A) i 36 mg (B).
[0546] Deprotekcija: produkti su odvojeno rastvoreni u TFA (0.5 mL) i mešani tokom 1 sata. LCMS je pokazala konverziju u hidroksimetil derivat (M+H 404). Rastvori su koncentrisani korišćenjem rotacijskog isparivača da se ukloni TFA. Dodat je metanol i dobijene mešavine su ponovo koncentrisane. Dobijeni talog je rastvoren u metanolu (1 mL), i dodat je amonijumov hidroksid (0.25 mL). Rastvor je mešan tokom 0.5h. LCMS je pokazala celokupnu deprotekciju (M+H 374) i mešavina je potom koncentrisana sa rotacijskim isparavanjem. Svaki izomer je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 19 mm x 100 mm C18 kolone; 15% CH3CN-H2O (0.1% TFA), 1.5 min, do 32% u 6 min; 30 mL/min; detektor postavljen na m/z 374; vreme zadržavanja, 4.5 min (A) i 4.7 min (B). Eluati su osušeni smrzavanjem. Prinos je 13 mg izomera A i 24 mg izomera B (TFA soli, kao bele čvrste materije). NMR analiza (uključujući NOE & COSY) je u skladu s očekivanjima za strukture, sa A=cis, i B=trans. NMR (d6-DMSO) δ cis: 12.94 (br s, 1H, NH); 8.95 (s, 1H); 8.87 (s, 1H); 8.81 (s, 1H); 8.42 (s, 1H); 8.14 (s, 1H); 7.85 (m, 1H); 7.22 (m, 1H); 4.48 (m, 1H, NCH); 3.12 (s, 2H); 2.84 (m, 2H); 2.07 (m, 4H); 1.69 (m, 2H). MS(ES) 374 (M+1). trans: 12.85 (br s, 1H, NH); 8.94 (s, 1H); 8.89 (s, 1H); 8.84 (s, 1H); 8.47 (s, 1H); 8.11 (s, 1H); 7.84 (m, 1H); 7.26 (m, 1H); 4.50 (m, 1H, NCH); 3.48 (s, 2H); 2.42-2.10 (m, 8H). MS(ES) 374 (M+1).
Primer 705: 3-1-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-in-1-il-benzonitril trifluoroacetat
[0547]
Korak 1: 3-{1-[4-(7-{[2-(Trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-in-1-il}benzonitril
[0548]
[0549] 1 M Diizobutilaluminijumovog hidrida u heksanu (0.31 mL) ukapavanjem je dodato u rastvor metil 3-(3-cijanofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoata (100 mg, 0.0002 mol) (dobijenog korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 712, Korak 1) u DCM (3 mL, 0.05 mol) i mešavina je ohlađena na -78°C. Reakcijska smesa je mešana na -78 °C tokom 4 sata i nakon toga je ugašena sa hladnim metanolom (3 mL, 0.07 mol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do 0°C i dodati su kalijumov karbonat (60 mg, 0.0004 mol) i Bestmann-Ohira reagens (1.5 eq, 57 mg) (E. Quesada et al, Tetrahedron, 62 (2006) 6673-6680). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, i zatim podeljena između etil acetata i vode. Organski sloj je ispran sa zasićenim NaCl, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja sirovog produkta. Sirovi produkt je prečišćen upotrebom silikagela (EtOAC/heksan 1:3 do 1:1) do dobijanja željenog produkta, 3-{1-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-in-1-il}benzonitrila (40 mg smjese). m/z = 469 (M+1).
Korak 2: 3-1-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-in-1-ilbenzonitril trifluoroacetat
[0550] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 712, korak 4, dobijeno je naslovno jedinjenje (4.5 mg, 46%) kao amorfna bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ. 12.5 (b, 1H), 9 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 8 (s, 1H), 7.8 (m 2H), 7.7 (s, 1H), 7.6 (m, 1H), 7 (m, 1H), 5.9 (m, 1H), 3.4 (dd, 1H), 3.2 (dd, 1H), 2.9 (s, 1H). m/z = 339 (M+1).
Primer 706: 3-{1-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-in-1-il}benzaldehid trifluoroacetat
[0551]
[0552] Korišćenjem postupka kao u Primeru 705, dobijeno je naslovno jedinjenje kao sekundarni produkt (4.5 mg, 46%) kao amorfna bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): S 10 (s, 1H), 9 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 8 (s, 1H), 7.9 (m 1H), 7.8 (m, 1H), 7.7 s, 1H), 7.6 (m, 1H), 7.1 (s, 1H), 5.9 (m, 1H), 3.4 (dd, 1H), 3.2 (dd, 1H), 2.9 (s, 1H). m/z = 342.
Primer 712: 4-[1-(3-Metoksi-1-fenilpropil)-1H-pirazol-4-il]- 7H-pirolo[2,3-d]pirimidin trifluoroacetat
[0553]
Korak 1: Metil 3-fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoat
[0554]
[0555] Rastvor metil (2E)-3-fenilakrilata (500 mg, 0.003 mol) u ACN (2 mL, 0.04 mol) polako je dodat u rastvor 4-(1H-pirazol4-il)-7-[2-(trimetilsflil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.5 g, 0.002 mol) u ACN (2 mL, 0.04 mol) i DBU (500 µL, 0.003 mol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko vikenda. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim natrijumovim hloridom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu upotrebom EtOAc/heksana (1:2 do 1:1) čime je dobijen metil 3-fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoat (500 mg, 70%) kao polučvrsti talog.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.9 (s, 1H), 8.4 (s, 2H), 7.4 (m, 5H), 6.8 (d, 1H), 6 (m, 1H), 5.7 (s, 2H), 3.7-3.8 (m, 3H), 3.6 (m, 2H), 2.2 (m, 1H), 1.4 (m, 2H), 1.1 (m, 2H), 0.02 (s, 9H), m/z = 478 (M+1).
Korak 2: 3-Fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propan-1-ol
[0556]
[0557] Diizobutilaluminijumov hidrid u heksanu (1 M, 0.69 mL) je dodat u rastvor metil 3-fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-propanoata (150 mg, 0.00031 mol) u DCM (3 mL, 0.05 mol) i mešavina je ohlađena na -78°C u atmosferi azota. Reakcija je mešana kroz 1 sat na -78°C i ostavljena je da se zagreje do sobne temperature tokom 4 sata. Reakcija je ugašena sa metanolom (100 µL) i zasićenim amonijumovim hloridom (100 µL), pa je zatim prebačena u etil acetat, osušena preko MgSO4i filtrirana. Filtrat je koncentrisan do dobijanja 3-fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propan-1-ola (130 mg, 92%) kao ulja. m/z= 450 (M+1).
Korak 3: 4-[1-(3-Metoksi-1-fenilpropil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0558]
[0559] Natrijumov hidrid (9.6 mg, 0.00040 mol) je dodat u rastvor 3-fenil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propan-1-ola (120 mg, 0.00027 mol) u DMF (3 mL, 0.04 mol) i mešavina je ohlađena na 0°C. Reakcija je mešana kroz 20 min i dodat je metil jodid (22 µL, 0.00035 mol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakcija je razdeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim NaCl, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja 4-[1-(3-metoksi-1-fenilpropil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (100 mg, 88%) kao polučvrste supstance. m/z = 464 (M+1).
Korak 4: 4-[1-(3-Metoksi-1-fenilpropil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin trifluoroacetat
[0560] Trifluorosirćetna kiselina (2 mL, 0.02 mol) je dodata u mešavinu 4-[1(3-metoksi-1-fenilpropil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (80 mg, 0.0002 mol) u DCM (3 mL, 0.05 mol) na sobnoj temperaturi. Početni materijal je utrošen nakon mešanja tokom 2 sata i reakcijski rastvor je koncentrisan da se ukloni TFA. Sirova reakcija je razređena je metanolom (3 mL, 0.07 mol) i obrađena sa etilendiaminom (0.3 mL, 0.004 mol) na sobnoj temperaturi. Reakcijska smesa je mešana tokom 18 sati i koncentrisana, pa prečišćena upotrebom HPLC na C-18 koloni, eluiranje sa ACN:voda gradijentom koji sadrži 0.2% TFA, do dobijanja naslovnog jedinjenja (43 mg, 60%) kao bele amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ8.9 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 7.8 (s, 1H), 7.4 (m, 1H), 7.3 (m, 5H), 7.2 (b, 1H), 5.7 (m, 1H), 3.3 (m, 1H), 3.2 (s, 3H), 2.7 (m, 1H), 2.4 (m, 1H). m/z = 334 (M+1).
Primer 715: 3-1-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-en-1-ilbenzo-nitril trifluoroacetat
[0561]
[0562] Mešavina [4-1-[1-(3-bromofenil)but-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (20 mg, 0.00005 mol) u DMF (2 mL, 0.02 mol) i cinkovog cijanida (60 mg, 0.0005 mol) je oslobođena gasa sa strujom azota. Mešavina je zatim obrađena sa tetrakis(trifenilfosfin)paladijumom(0) (40 mg, 0.00003 mol), pa ponovo oslobođena gasa azotom, zatim je grejana u mikrotalasnom reaktoru na 170°C tokom 15 min. Reakcija je ostavljena da se ohladi, filtrirana je i prečišćena sa HPLC na C-18 koloni, te eluirana sa ACN/voda/TFA gradijentom do dobijanja naslovnog jedinjenja (10 mg, 40%) kao bele amorfne čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.9 (s, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.8 (m, 3H), 7.6 (m, 1H), 7.1 (b, 1H), 5.6-5.8 (m, 2H), 5.1 (d, 1H), 5 (d, 1H), 3.3 (m, 1H), 3 (m, 1H). m/z = 341 (M+1).
Primer 716: 4-1-[1-(3-Bromofenil)but-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin
[0563]
Korak 1: 3-(3-Bromofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanal
[0564]
[0565] Diizobutilaluminijumov hidrid u heksanu (1 M, 4 mL) je dodat u rastvor etil 3-(3-bromofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoata (600 mg, 0.001 mol) u DCM (6 mL, 0.09 mol) na -78°C. Nakon mešanja tokom 4 sata, reakcija je ugašena sa hladnim metanolom (300 µL), a zatim je dodat zasićeni amonijumov hlorid (500 µL) i dobijeni rastvor je mešan tokom 1 h. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je ispran sa rasolinom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan. Produkt je prečišćen pomoću flash hromatografije na silikagelu eluiran sa heksan:EtOAc, (2:1 do 1:2), da se dobije 3-(3-bromofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanal (400 mg, 70%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.9 (s, 1H), 8.9 (s, 1H), 8.4 (s, 2H), 7.6 (d, 1H), 7. (d, 1H), 7.4 (d, 1H), 7.3-7.4 (m, 2H), 6.8 (d, 1H), 6.1 (m, 1H), 5.7 (s, 2H), 4 (m, 1H), 3.6 (m, 2H), 3.3 (dd, 1H), 1.0 (m, 2H), 0.01 (s, 9H). m/z = 526, 528 (M+1).
Korak 2: 4-1-[1-(3-Bromofenil)but-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7-[2-(trimetillsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0566]
[0567] Kalijumov tert-butoksid u THF (1M, 200 µL) je dodat u rastvor metiltrifenilfosfonijumovog jodida (80 mg, 0.0002 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol) na 0°C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h i zatim ohlađena na -78 °C. Ukapavanjem je dodat 3-(3-bromofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanal (90 mg, 0.0002 mol) u THF (2 mL, 0.02 mol). Reakcija je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim NaCl, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa EtOAc:Heksanom, (1:1) da se dobije 4-1-[1-(3-bromofenil)but-3-en-1H-il]-1H-pirazol-4-il-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (35 mg, 40%) kao ulje. m/z = 524, 526 (M+1).
Korak 3: 4-1-[1-(3-Bromofenil)but-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0568] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 712, koraka 4, ali upotrebom 4-1-[1-(3-bromofenil)but-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina dobijeno je naslovno jedinjenje (10 mg, 30%) kao bela amorfna čvrsta supstance,<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.9(s,1H), 8.8(s,1H), 8.4(s,1H), 7.8(s,1H), 7.7(s,1H), 7.5 (m,2H), 7.3(m,1H), 7.1(s,1H), 5.7(m,2H), 5.2(d,1H), 5.0(d,1H), 3.2(m,1H), 3.0(m,1H). m/z = 394, 396 (M+1).
Primer 717: 3-(4,4-Difluoro)-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-en-1-ilbenzonitril
[0569]
Korak 1: 4-{1-[1-(3-Bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il}-7{[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0570]
[0571] U rastvor 3-(3-bromofenil)-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanala (0.05 g, 0.00009 mol) u N,N-dimetilacetamidu (2 mL, 0.02 mol) je dodat trifenilfosfin (0.1 g, 0.0006 mol), dibromodifluorometan (50 µL, 0.0006 mol) i 0.76 M cinka u THF (0.7 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Reakcija je podeljena između vode i EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim NaCl, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrisan do dobijanja ulja. Produkt je prečišćen pomoću FCC na silikagelu eluiran sa EtOAc, heksan (1:2) do dobijanja 4-{1-[1-(3-bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il}-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (20 mg, 40%) kao bistrog ulja. m/z = 560, 562 (M+1).
Korak 2: 4-1-[1-(3-Bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin
[0572]
[0573] Korišćenjem analognog postupka kao u Primeru 712, koraka 4, ali upotrebom 4-{1-[1-(3-bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il}-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina, je dobijeno jedinjenje 4-1-[1-(3-bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (30 mg, 99%) kao ulje. m/z = 430, 432 (M+1).
Korak 3: 3-4,4-Difluoro-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]but-3-en-1-il-benzonitril
[0574]
[0575] Mešavina 4-1-[1-(3-bromofenil)-4,4-difluorobut-3-en-1-il]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (30 mg, 0.00007 mol) u DMF (2 mL, 0.02 mol) i cinkovog cijanida (80 mg, 0.0007 mol) je oslobođena gasa sa azotom. Mešavina je zatim obrađena sa tetrakis(trifenilfosfin)paladijumom (0) (50 mg, 0.00004 mol) i oslobođena gasa sa azotom, a zatum je grejana u mikrotalasnom reaktoru na 170°C tokom 15 min. Reakcija je zatim ostavljena da se ohladi, filtrirana i prečišćena sa HPLC na C-18 koloni, eluirana sa ACN/voda/TFA gradijentom do dobijanja naslovnog jedinjenja (10 mg, 30%) kao bele amorfne čvrste materije.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ8.9 (s, 1H), 8.7 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.7 -7.8 (m, 3H), 7.5 (m, 1H), 7.1 (m, 1H), 5.7 (m, 1H), 4.3-4.4 (m, 1H), 3.1 (m, 1H), 2.9 (m, 1H). m/z = 377 (M+1).
[0576] Sledeća jedinjenja u Tablici 14 su dobijena kako je naznačeno u koloni "Dobij. Pr.br.", a pojedinosti određenih postupaka sinteze dati su u sledećoj Tablici 14.
Tablica 14
Primer 727: trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0578]
Korak 1: (2E)-3-Ciklopentilakrilna kiselina
[0579] U rastvor malonske kiseline (1.06 g, 10.2 mol) u piridinu (1.25 mL) je dodat piperidin (0.15 mL) i ciklopentankarbaldehid (1.00 g, 10.2 mmol). Mešavina je zagrejavana na 40°C tokom 2 sata, potom je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Mešavina je zatim ohlađena u ledenoj kupki i dodato je 2N HCl da se smesa zakiseli. Produkt je ekstrahovan sa etrom. Ekstrakt etra je ispran sa vodenim rastvorom HCl i rasolinom, osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran, a rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (1.30 g, 77%), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ. 7.06 (dd, 1H), 5.80 (dd, 1H), 2.70-2.54 (m, 1H), 1.93-1.32 (m, 8H); MS(ES):141(M+H).
Korak 2. Metil (2E)-3-ciklopentilakrilat
[0580] U rastvor (2E)-3-ciklopentilakrilne kiseline (1.3 g, 9.3 mmol) u DCM (65 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat oksalil hlorid (3.1 mL, 37 mmol). Dobijen rastvor je mešan na 0°C tokom 40 minuta, potom na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Isparljive materije su isparene da se dobije (2E)-3-ciklopentilakriloil hlorid kao bezbojna tečnost. Deo tog (2E)-3-ciklopentilakriloil hlorida (0.75 g, 4.7 mol) je rastvoren u metanolu (10 mL) i dobijeni rastvor je mešan tokom 2 sata. Rastvarač je isparen da se dobije produkt (700 mg, 96%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ6.94 (dd, 1H), 5.79 (dd, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.66-2.50 (m, 1H), 1.92-1.27 (m, 8H).
Korak 3. Metil 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoat
[0581] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (2.9 g, 9.2 mmol) i metil (2E)-3-ciklopentilakrilata (1.70 g, 11.0 mmol) u ACN (100 mL), je dodat DBU (2.7 mL, 18 mmol). Dobijena smesa je mešana tokom 96 sati. ACN je uklonjen in vacuo, a dobijeni ostatak je razređen u etil acetatu. Ovaj rastvor je ispran sa 1.0 N HCl, zatim sa rasolinom, i pa osušen preko natrijumovg sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-70% etil acetata u heksanima) dovelo je do produkta (2.73 g, 63%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 1H), 8.28 (s, 2H), 7.39 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.46 (dt, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54 (t, 2H), 3.18 (dd, 1H), 2.89 (dd, 1H), 2.59-2.42 (m, 1H), 1.95-1.80 (m, 1H), 1.75-1.10 (m, 7H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):470(M+H).
Korak 4. 3-Ciklopentil-3[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanal
[0582] U rastvor metil 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo-[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanoata (0.501 g, 1.07 mmol) u THF (5.0 mL) na -78°C ukapavanjem je dodato 1.00 M diizobutilaluminijumovog hidrida u DCM (2.35 mL). Reakcija je mešana uz postupno zagrevanje na -10°C kroz period od 2 sata. Kod te temperature, dodat je dodatni deo 1.0 M diizobutilaluminijumov hidrid u DCM (1.50 mL). Kada je pomoću LCMS utvrđeno da je reakcija završena, dodat je zasićen rastvor K/Na tartrata, pa zatim etra. Dobijena smesa mešana je tokom dva sata na sobnoj temperaturi. Organski sloj je separiran i ispran sa vodom, pa rasolinom, zatim je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo do dobijanja viskoznog ulja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. MS(ES):442(M+H).
[0583] U rastvor oksalil hlorida (0.108 mL, 1.28 mmol) u DCM (10.0 mL) na -78 °C je dodat DMSO (151 µL, 2.13 mmol). Nakon mešanja tokom 5 minuta, dodat je 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propan-1-ol (471 mg, 1.07 mmol) u DCM (3.00 mL). Smesa je mešana tokom 30 minuta na -78°C. Zatim je dodat TEA (594 µL, 4.26 mmol). Dobijena mešavina je zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom perioda od 30 minuta. Dodata je voda, a slojevi su separirani. Organski sloj je sukcesivno ispran sa 0.1 N HCl, vodom, zasićenim rastvorom narijumovog bikarbonata, pa rasolinom, i zatim je osušen preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom 0-60% etil acetata u heksanima) dobijen je produkt (384 mg, 82%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.73 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.71 (br s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.47 (br s, 1H), 6.88 (br s, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.66-4.49 (m, 1H), 3.54 (t, 2H), 3.40 (ddd, 1H), 2.95 (ddd, 1H), 2.55-2.44 (m, 1H), 2.01-1.21 (m, 8H), 0.98 (t, 2H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):440(M+H).
Korak 5. 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0584] U rastvor.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (0.207 mL) u THF (2.0 mL) na 0°C je dodat trifenilmetilfosfonijumov bromid (77.8 mg, 0.218 mmol). Dobijena smesa je zagrejana do sobne temperature i mešana je tokom 30 minuta. Dodat je rastvor 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanala (0.100 g, 0.228 mmol) u THF (2.0 mL). Nakon 30 minuta, mešavina je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora amonijumovog hlorida i produkt je zatim ekstrahovan sa etrom. Ekstrakt etra je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom 0-40% etil acetata u heksanima) dobijen je produkt (40 mg, 44%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.84 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.19 (br s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.83 (br s, 1H), 5.67 (s, 2H), 5.60 (ddt, 1H), 5.01 (dq, 1H), 4.97-4.93 (m, 1H), 3.99 (dt, 1H), 3.54 (t, 2H), 2.79-2.60 (m, 2H), 2.60-2.40 (m, 1H), 1.99-1.89 (m, 1H), 1.75-1.41 (m, 5H), 1.37-1.12 (m, 2H), 0.92 (t, 2H), - 0.06 (s, 9H); MS(ES):438(M+H).
Korak 6. Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-en-l-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0585] 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (13 mg, 0.030 mmol) je razređen u DCM (3 mL) i dodata je TFA (0.5 mL). Dobijen rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je razređen u THF (2 mL) i dodato je 6 N NaOH (1 mL). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, i zatim je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) dovelo je do produkta (10 mg, 80%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ12.73 (s, 1H), 8.88 (s, 2H), 8.43 (s, 1H), 7.79 (t, 1H), 7.19 (dd, 1H), 5.60 (ddt, 1H), 5.00-4.93 (m, 1H), 4.91-4.87 (m, 1H), 4.23 (dt, 1H), 2.76-2.59 (m, 2H), 2.47-2.34 (m, 1H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.68-1.22 (m, 6H), 1.21-1.09 (m, 1H); MS(ES):308(M+H).
Primer 729: Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-2-ciklopropiletil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina
[0586]
Korak 1. Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-2-ciklopropiletil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0587] Rastvor 4-[1-(1-ciklopentilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (dobijena u Primeru 727, Korak 5) (54.0 mg, 0.123 mmol) u DCM (1 mL) je dodat u sveže pripremljen rastvor etra sa viškom CH2N2koja je držana na 0 °C. Dodat je paladijumov acetat (10.0 mg, 0.044 mol). Nakon što je odstajala tokom 2 sata, višak CH2N2je ugašen sa dodavanjem sirćetne kiseline. Rastvor je zatim razređen sa dodatnim DCM, sukcesivno ispran sa zasićenim rastvorom natrijumovog bikarbonata, vodom, zatim rasolinom, pa je osušen preko natrijumovog sulfata, rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA) dovelo je do produkta (13 mg, 18%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.05 (s, 1H), 8.81 (d, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.59 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 5.76 (s, 2H), 4.10 (t, 1H), 3.59 (t, 2H), 2.57-2.36 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 1H), 2.00-1.83 (m, 1H), 1.79-1.40 (m, 6H), 1.37-1.09 (m, 2H), 0.97 (t, 2H), 0.55-0.26 (m, 3H), 0.07- -0.15 (m, 11H); MS(ES):452(M+H).
Korak 2. Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-2-ciklopropiletil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0588] Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-2-ciklopropiletil)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (13 mg, 0.023 mol) je mešana na sobnoj temperaturi u rastvoru DCM (2 mL) koji sadrži TFA (1.5 mL) tokom dva sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni ostatak je ponovo rastvoren u THF (3 mL) i dodato je 6N NaOH (2 mL). Nakon mešanja tokom jednog sata, mešavina je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) dovelo je do produkta (9 mg, 90%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.75 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.19 (dt, 1H), 2.43-2.29 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 1H), 1.68-1.37 (m, 5H), 1.35-1.08 (m, 3H), 0.43-0.26 (m, 2H), 0.24-0.13 (m, 1H), 0.07--0.03 (m, 1H), -0.14- -0.24 (m, 1H); MS(ES):322(M+H).
Primer 730: Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d] pirimidina
[0589]
Korak 1. 4-[1-(1-Ciklopenilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0590] U mešavinu kalijumovog karbonata (38.4 mg, 0.278 mmol) u metanolu (2.0 mL) na 0°C je dodat rastvor 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanala (pripremljen kao u Primeru 727, korak 4) (61.0 mg, 0.139 mmol) u metanolu (1.0 mL), pa zatim rastvor dimetil (1-diazo-2-oksopropil)fosfonata (40.0 mg, 0.208 mmol) u metanolu (1.0 mL). Mešavina je polako zagrejavana do temperature okoline i mešana tokom 16 sati. Mešavina je zatim razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa vodom, zasićenim amonijevim hloridom, pa zatim osušeni preko natrijumovog sulfata, a ratvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja (52 mg, 86%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.84 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.14 (ddd, 1H), 3.53 (t, 2H), 2.90 (ddd, 1H), 2.79 (ddd, 1H), 2.66-2.49 (m, 1H), 1.98 (t, 1H), 2.00-1.88 (m, 1H), 1.78-1.44 (m, 5H), 1.39-1.11 (m, 2H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):436(M+H).
Korak 2. Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0591] Rastvor 4-[1-(1-ciklopentilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (52 mg, 0.12 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (1 mL) je mešan tokom 2 sata. Rastvarači su uklonjeni in vacuo. Dobijeni ostatak je razređen u THF (3 mL) i dodato je 6N NaOH (2 mL). Nakon mešanja tokom 1 sata, mešavina je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA) dovelo je do produkta (30 mg, 60%).
<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.72 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.34 (dt, 1H), 2.97-2.69 (m, 3H), 2.50-2.32 (m, 1H), 1.93-1.77 (m, 1H), 1.70-1.09 (m, 7H); MS(ES):306(M+H).
Primer 731: Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbutil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0592]
[0593] Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentilbut-3-in-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (dobijena u Primeru 729) (20 mg, 0.048 mmol) je rastvorena u metanolu (2 mL) i dodata je katalitička količina 5% Pd-C. Smesa je mešana pod pritiskom od 1 atmosfere vodonika iz pričvršćenog balona. Nakon 2 sata, mešavina je filtrirana i prečišćena putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) da se dobije produkt (14 mg, 69%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.73 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.79 (t, 1H), 7.20 (d, 1H), 4.11 (dt, 1H), 2.43-2.26 (m, 1H), 2.02-1.70 (m, 3H), 1.68-1.35 (m, 4H), 1.33-0.89 (m, 5H), 0.83 (t, 3H); MS(ES):310(M+H).
Primer 732: Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-4,4-difluorobut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0594]
Korak 1. 4-[1-(1-Ciklopentil-4,4-difluorobut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0595] U rastvor 3-ciklopentil-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanala (pripremljen kao u Primeru 727, korak 4) (181 mg, 0.41 mmol) u N,N-dimetilacetamida (3.6 mL) je dodat trifenilfosfin (294 mg, 1.12 mmol) i zatim dibromodifluorometan (235 mg, 1.12 mmol). Rieke<®>cink (1.8 mL u suspenziji od 2.5 g u 50 ml THF) je zatim dodat u jednom delu. Dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4.5 sata. Mešavina je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju. Filtrat je podeljen između etra i vode. Sloj etra je ispran sa vodom, pa rasolinom, zatim osušen preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonska flash hromatografija (eluiranje sa gradijentom od 0-30% etil acetata u heksanima) dovela je do produkta (104 mg, 53%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.51 (br s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 6.93 (d, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.05 (ddd, 1H), 4.04-3.96 (m, 1H), 3.60 (t, 2H), 2.78-2.62 (m, 2H), 2.58-2.45 (m, 1H), 2.07-0.87 (m, 10H), 0.00 (s, 9H); MS(ES):474(M+H).
Korak 2. Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-4,4-difluorobut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina
[0596] Rastvor 4-[1-(1-ciklopentil-4,4-difluorobut-3-en-1-il)-1H-pirazol-4-il]-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (41 mg, 0.086 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (1.5 mL) je mešan tokom dva sata na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim koncentrisan in vacuo. Dobijeni talog je rastvoren u THF (3 mL) i dodato je 6N NaOH (2 mL). Nakon mešanja tokom 1 sata, mešavina je podeljena između vode i etil acetata. Organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata i rstvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA) dovelo je do željenog produkta (39 mg, 98%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.72 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.80 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 4.32 (ddt 1H), 4.20 (dt, 1H), 2.72-2.37 (m, 3H), 1.95-1.81 (m, 1H), 1.69-1.06 (m, 7H); MS(ES):344(M+H).
[0597] Kada konjugatni akceptori, kao što su oni korišćeni u Primeru 737, korak 3 nisu komercijalno dostupni, takva jedinjenja su generisana prema dole navedenom postupku za etil (2E)-3-(tetrahidrofuran-3-il)akrilat (prema pripremi za Primer 733).
Dobijanje etil (2E)-3-(tetrahidrofuran-3-il)akrilata:
[0598]
Korak A: Tetrahidrofuran-3-karbaldehid
[0599] U rastvor Dess-Martinovog perjodinana (3.37 g, 7.95 mmol) u DCM (20 mL) je dodat tetrahidrofuran-3-ilmetanol (0.701 mL, 7.23 mmol). Reakcija je mešana na temperaturi okoline tokom 2 sata, a rastvarač je zatim uklonjen in vacuo. Kolonska flash hromatografija (korišćenjem DCM kao eluensa) dovela je do produkta kao bistrog ulja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.65 (d, 1H), 4.12-4.07 (m, 1H), 3.92-3.85 (m, 2H), 3.80-3.73 (m, 1H), 3.10-3.02 (m, 1H), 2.26-2.10 (m, 2H).
Korak B: Etil (2E)-3-(tetrahidrofuran-3-il)akrilat
[0600] U mešavinu na 0°C natrijumovog hidrida (60% u mineralnom ulju) (382 mg, 9.40 mmol) u DMF (15.0 mL) (takođe se može koristiti THF) ukapavanjem je dodat trietil fosfonoacetat (1.72 mL, 8.68 mmol). Dobijena smesa je zagrejana na sobnoj temperaturi i mešana tokom 30 minuta, zatim je ponovo ohlađena na 0°C, kada je ukapavanjem dodat rastvor tetrahidrofuran-3-karbaldehida (724 mg, 7.23 mmol) u DMF (4.0 mL). Dobijena smesa je mešana kod ove temperature tokom 1.5 sata, kada je mešavina razređena sa vodom i produkt je ekstrahovan sa etrom. Kombinovani ekstrakti su isprani sa vodom i rasolinom, osušeni preko natrijmovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo.
Kolonska flash hromatografija (eluiranje sa gradijentom od 0-40% etil acetata u heksanima) dovela je do produkta (640 mg, 52%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.87 (dd, 1H), 5.86 (dd, 1H), 3.96-3.88 (m, 2H), 3.81 (dd, 1H), 3.53 (dd, 1H), 3.04-2.93 (m, 1H), 2.20-2.10 (m, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.79 (dq, 1H).
Primer 736: Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopenlil-4,4-difluorobutil)-1H-pirazol-4-il]-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina
[0601]
[0602] Trifluoroacetatna so 4-[1-(1-Ciklopentil-4,4-difluorobut-3-en-1-il)-1H-pirazol4-il]-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (pripremljena kao u Primeru 731) (20.0 mg, 0.041 mmol) je rastvorena u metanolu (3 mL) i dodata je katalitička količina 5% Pd na ugljeniku. Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, u atmosferi vodonika koji je dodat iz pričvršćenog balona. Mešavina je filtrirana i prečišćena putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA) da se dobije produkt (4 mg, 21 %).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.74 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.80 (t, 1H), 7.20 (dd, 1H), 6.05 (tt, 1H), 4.17 (dt, 1H), 2.47-2.34 (m, 1H), 2.14-1.08 (m, 12H); MS(ES):346(M+H).
Primer 737: Trifluoroacetatna so 3-(1-Metilciklopenlil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila
[0603]
Korak 1.1- Metilciklopentankarbaldehid
[0604] U rastvor ciklopentankarbaldehida (1.00 mL, 9.36 mmol) u DCM (47 mL) na 0°C je dodat čvrsti kalijumov tert-butoksid (1.44 g, 12.2 mmol) u jednom delu i zatim u jednom delu metil jodid (1.7 mL, 28 mmol). Nakon 30 minuta na 0°C, reakcijska mešavina je ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi i mešana je na toj temperaturi tokom 16 sati. Mešavina je ulivena u rasolinu, a slojevi su separirani. Organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata, pretočen i koncentrisan, pa je korišćen bez daljeg prečišćavanja u koraku 2.
Korak 2: (2Z)- i (2E)-3-(1-Metilciklopentil)aciklonitril
[0605] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (9.36 mL) na 0°C je dodat ukapavanjem rastvor dietil cijanometilfosfonata (1.59 mL, 9.81 mmol) u THF (10 mL). Ledena kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature i zatim je ponovo ohlađena na 0°C, kada je ukapavanjem dodat rastvor 1-metilciklopentankarbaldehida (1.0 g, dobijen u koraku 1) u THF (2 mL). Kupka je uklonjena i reakcija je mešana na temperaturi okoline tokom 3 sata. U mešavinu je dodata voda i etil etar. Vodeni sloj je dalje ekstrahovan sa etil etrom. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, osušena preko natrijumovog sulfata, filtrirana i absorbovana na silikagel in vacuo. Kolonska flash hromatografija (eluiranje sa gradijentom od 0-10% etil acetata u heksanima) dovela je do produkta kao mešavine heksana, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja u koraku 3.
Korak 3: Trifluoroacetatna so 3-(1-Metilciklopentil)-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]propanonitrila
[0606] U mešavinu 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.134 g, 0.426 mmol)) u ACN (3 mL) je dodata mešavina (2Z)- i (2E)-3-(1-metilciklopentil)akrilonitrila (0.12 g, 0.9 mmol) i zatim DBU (0.13 mL, 0.90 mmol). Reakcija je zagrejavana na 60°C tokom 6 h. ACN je uklonjen in vacuo. Dodat je etil acetat i zatim 0.1 N HCl. Vodeni sloj je ekstrahovan sa tri dela etil acetata. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa rasolinom, osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani i rastvarač je isparen. Sirovi materijal je deprotektiran mešanjem sa TFA (2 mL) u DCM (8 mL) tokom 2 sata. Rastvarač i TFA su uklonjeni in vacuo. THF (8 mL) je korišćen za rastvaranje taloga, i dodato je 6.0 M natrijumovog hidroksida u vodi (8 mL). Reakcija je mešana u ovoj mešavini tokom 2 sata. Za ekstrahovanje produkta korišćen je etil acetat. Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prčišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA) dovelo je do produkta (44 mg, 24%).
<1>H NMR (400 MHz, d6DMSO): δ 12.71 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.72 (dd, 1H), 3.47 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 1.74-1.51 (m, 6H), 1.44-1.32 (m, 1H), 1.09-1.00 (m, 1H), 0.97 (s, 3H); MS(ES):321(M+H).
Primer 739: Trifluoroacetatna so 1-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklo-propankarbonitrila
[0607]
Korak 1: 1-(Hidroksimetil)ciklopropankarbonitril
[0608] Etil 1-cijanociklopropankarboksilat (801 mg, 5.76 mmol) u THF (12.0 mL) je obrađen sa litijumovim tetrahidroboratom (251 mg, 11.5 mmol). Rastvor je grejan do refluksa tokom 1.5 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je ugašena sa vodom, pa ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrisani da se dobije bistro ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (482 mg, 86%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.61 (s, 2H), 1.27 (dd, 2H), 0.98 (dd, 2H).
Korak2: 1-Formilciklopropankarbonitril
[0609] Des-Martinov perjodinan (1.11 g, 2.62 mmol) je razređen u DCM (12 mL) i dodat je 1-(hidroksimetil)ciklopropankarbonitril (231 mg, 2.38 mmol). Reakcija je mešana na temperaturi okoline tokom jednog sata. Mešavina je zatim prečišćena sa kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-80% etil acetata u heksanima) da se dobije produkt (106 mg, 46%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.35 (s, 1H), 1.79-1.74 (m, 4H).
Korak 3: 1-[(E)-2-Cijanovinil]ciklopropankarbonitril
[0610] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (1.12 mL) na 0°C polako je ukapavanjem dodat rastvor dietil cijanometilfosfonata (210 mg, 1.2 mmol) u THF (2 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do temperature okoline. Rastvor je zatim ponovo ohlađen na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor 1-formilciklopropankarbonitrila (101 mg, 1.06 mmol) u THF (1.0 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je mešana kroz 3 sata na temperaturi okoline. Mešavina je zatim razređena sa etrom i vodom, rastvor etra je separiran, ispran sa rasolinom, osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran i rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-60% etil etra u heksanima) dobijen je produkt (24 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.94 (d, 1H), 5.82 (d, 1H), 1.80 (dd, 2H), 1.39 (dd, 2H).
Korak 4: 1-2-Cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopropankarbonitril
[0611] U rastvor 4-1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (61.4 mg, 0.195 mmol) i 1-[(E)-2-cijanovinil]ciklopropankarbonitrila (23 mg, 0.19 mmol) u ACN (2 mL) je dodat DBU (58 μL, 0.39 mmol) i dobijena smesa je mešana tokom 16 sati. ACN je isparen, a ostatak je razređen u etil acetatu. Ovaj rastvor je isparen sa 1.0 N HCl, vodom, pa rasolinom i osušen je preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-80% etil acetata u heksanima) dobijen je produkt (49 mg, 58%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 3.54 (dd, 1H), 3.51 (dd, 1H), 3.36 (dd, 1H), 1.62 (ddd, 1H), 1.45 (ddd, 1H), 1.34 (ddd, 1H), 1.25 (ddd, 1H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):434(M+H).
Korak 5: Trifluoroacetatna so 1-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopropan-karbonitrila
[0612] 1-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopropankarbonitril (48 mg, 0.11 mmol) je mešan u mešavini DCM (3 mL) i TFA (2 mL) tokom 3 sata. Rastvarači su uklonjeni in vacuo i ostatak je ponovo rastvoren u THF (3 mL). Dodato je 6N NaOH (2 mL) i dobijena smesa je mešana na temperaturi okoline tokom 3 sata. Sirova reakcijska mešavina je podeljena između etil acetata i vode. Slojevi su separirani i organski sloj je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) dalo je produkt (20 mg, 43%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ12.74 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.17 (dd, 1H), 4.55 (dd, 1H), 3.66 (dd, 1H), 3.54 (dd, 1H), 1.55-1.30 (m, 4H); MS(ES):304(M+H).
Primer 740: N-[(1-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopentil)metil]benzamid
[0613]
Korak 1: Metil 1-cijanociklopentankarboksilat
[0614] U rastvor sirćetne kiseline, cijano-metil estra (2.66 mL, 30.3 mmol) i 1,4-dibromobutana (3.62 mL, 30.3 mmol) u acetonu (50 mL) je dodat kalijumov karbonat (8.37 g, 60.6 mmol). Reakcija je mešana kod temperature okoline tokom 16 sati. Reakcija je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i koncentrisana. Dobijeni ostatak je podeljen između etra i zasićenog rastvora NH4Cl, a vodeni sloj je ekstrahovan sa dva dalja dela etra. Kombinovani ekstrakti etra su isprani sa rasolinom, i osušeni preko natrijumovog sulfata, zatim su filtrirani i rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-30% etil acetata u heksanima) dobijen je produkt (2.92 g, 63%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ3.82 (s, 3H), 2.30-2.21 (m, 4H), 1.93-1.82 (m, 4H).
Korak 2: Metil 1-[(tert-butoksikarbonil)amino]metilciklopentankarboksilat
[0615] U rastvor metil 1-cijanociklopentankarboksilata (1.26 g, 8.22 mmol) u metanolu (100 mL) je dodat kobaltov dihlorid (2.1 g, 16.0 mmol). Ljubičasta smesa je ohlađena u kupki sa vodom i ledom. Natrijumov tetrahidroborat (3.11 g, 82.2 mmol) je dodat u nekoliko delova, uz oprez (egzotermno) da se dobije crna smesa. Nakon završetka dodavanja, hlađenje je prekinuto, reakcija je mešana tokom 40 minuta pod azotom i reakcija je ugašena sa pažljivim dodavanjem 1N HCl (700 ml). Metanol je uklonjen in vacuo, a rastvor je zatim pretvoren u bazičnu (pH ~ 9) sa dodavanjem koncentrisane NH4OH(aq). Mešavina je ekstrahovana sa DCM (6 puta), i kombinovani DCM ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata i koncentrisani da se dobije sirovi produkt kao svetlo žuto ulje. U ovaj sirovi amin u DCM (50 ml) dodat je di-tert-butildikarbonat (1.31 g, 6.01 mmol) i reakcija je mešana na 25 °C tokom 30 minuta. Reakcija je razređena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom tri puta. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata, filtrirani, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Sirovi ostatak bio je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom da se dobije željeni produkt (1.5 g, 71 %).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ5.03 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.26 (d, 2H), 2.02-1.33 (m, 17H).
Korak 3: tert-Butil [1-(hidroksimetil)ciklopentil]metilkarbamat
[0616] U rastvor metil 1-[(tert-butoksikarbonil)amino]metilciklopentankarboksilata (1.50 g, 5.83 mmol) u THF (25.0 mL) na -78°C ukapavanjem je dodato 1.0 M diizobutilaluminijumovog hidrida u DCM (17.5 mL). Reakcija je mešana tokom 2 sata uz polako grejanje na -10°C. Dodat je zasićen rastvor K/Na tartrata, te zatim etar. Ova smesa je mešana tokom 30 minuta kod temperature okoline i organski sloj je separiran i ispran sa vodom i rasolinom. Organski sloj je zatim osušen preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (1.03 g, 77%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.90 (br s, 1H), 3.27 (s, 2H), 3.06 (d, 2H), 1.5-1.17 (m, 8H), 1.44 (s, 9H).
Korak 4: tert-Butil [(1-formilciklopentil)metil)karbamat
[0617] U rastvor oksalil hlorida (456 µL, 5.38 mmol) u DCM (30.0 mL) na -78°C je dodat DMSO (637 µL, 8.97 mmol) i dobijena smesa je mešana tokom 5 minuta. Dodat je tert-Butil [1-(hidroksimetil)ciklopentil]metilkarbamat (1.03 g, 4.48 mmol) u DCM (10.0 mL) i dobijena smesa je mešana tokom 30 minuta na -78°C. Dodat je TEA (2.50 mL, 17.9 mmol) i dobijena mešavina je ostavljena da se zagreje do temperature okoline kroz 30 minuta. Dodata je voda. Organska faza je isprana sekvencijalno sa 0.1 N HCl, vodom, zasićenim rastvorom natrijumovog bikarbonata, pa rasolinom, a zatim je osušena preko natrijumovog sulfata, pa je rastvarač uklonjen in vacuo da se dobije produkt (957 mg, 94%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ9.39 (s, 1H), 4.94 (br s, 1H), 3.25 (d, 2H), 1.89-1.46 (m, 8H), 1.41 (s, 9H).
Korak 5: tert-butil (1-[(E)-2-cijanovinil]ciklopentilmetil)karbamat i tert-butil (1-[(Z)-2-cijanovinil]ciklopentilmetil)karbamat
[0618] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (4.4 mL) na 0°C je dodat ukapavanjem rastvor dietilcijanometilfosfonata (820 mg, 4.6 mmol) u THF (6.0 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do temperature okoline. Mešavina je zatim ponovo ohlađena na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor tert-butil [(1-formilciklopentil)metil]karbamata (952 mg, 4.19 mmol) u THF (4.0 mL). Reakcija je ostavljena da se zagreje do temperature okoline i zagrejana smesa je mešana tokom 16 sati. Reakcijska mešavina je zatim razređena sa etrom i vodom. Organski sloj je separiran i sekvencijalno ispran sa vodom i rasolinom, zatim je osušen preko natrijumovog sulfata i potom filtriran, a rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (1.05 g, 99%) kao mešavina (E) i (Z) izomera.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.71 (d, 1H, E), 6.46 (d, 1H, Z), 5.36 (d, 1H, Z, 5.36 (d, 1H, E), 4.70 (br s, 1H, Z), 4.51 (br s, 1H, E), 3.25 (d, 2H, Z), 3.18 (d, 2H, E), 1.88-1.48 (m, 8H (E) i 8H (Z)), 1.43 (s, 9H (E) i 9H (Z)); MS(ES):151(M+H-Boc).
Korak 6: tert-Butil [(1-2-cijano-1-[4-(7-(2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopenil)metil]karbamat
[0619] U rastvor 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidina (355 mg, 1.12 mmol) i tert-butil (1-[(E)-2-cijanovinil]ciklopentilmetil)karbamata i tert-butil (1-[(Z)-2-cijanovinil]ciklopentilmetil)karbamata kao mešavine izomera (329 mg, 1.31 mmol) u ACN (10 mL) dodat je DBU (0.168 mL, 1.12 mmol). Dobijena smesa je mešana na temperaturi okoline tokom 3 sata, zatim je grejana na 60 °C tokom 2.5 sata. ACN je uklonjen in vacuo i dobijeni talog je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa 0-55% etil acetatom u heksanima) da se dobije produkt (350 mg, 55%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.37 (br s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 5.37 (br s, 1H), 4.52 (dd, 1H), 3.54 (t, 2H), 3.40 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.08 (d, 1H), 2.90 (dd, 1H), 1.84-1.47 (m, 8H), 1.45 (s, 9H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):566(M+H).
Korak 7: N-[(1-2-Cijano-1-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopentil)-metil]benzamid
[0620] Rastvor tert-butil [(1-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilciklopentil)metil]karbamata (175 mg, 0.309 mmol) u DCM (5 mL) i TFA (5 mL) je mešan tokom 3 sata i rastvarači su zatim uklonjeni in vacuo. Dobijeni talog je mešan u mešavini THF (3 mL) i 6N NaOH (3 mL) tokom 3 sata. THF je uklonjen in vacuo, pa je dodata voda (10 mL). Mešavina je ekstrahovana sa nekoliko delova DCM koji sadrži 15% izopropanola. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijumovog sulfata i rastvarači su uklonjeni in vacuo da se dobije produkt, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. MS(ES):336(M+H).
[0621] U rastvor 3-[1-(aminometil)ciklopentil]-3-[4-(7H-p)pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (31 mg, 0.060 mmol) i benzoil hlorida (7.0 µL, 0.060 mol) u DCM (1.0 mL), je dodat TEA (17 µL, 0.12 mmol). Nakon 15 minuta, rastvarač je uklonjen in vacuo i mešavina je prečišćena putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje prvo sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1 % TFA, zatim hromatografskim prečišćavanjem, eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije produkt (7 mg, 27%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ12.12 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.92-7.87 (m, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.59-7.48 (m, 3H), 7.02 (d, 1H), 4.83 (dd, 1H), 3.52-3.45 (m, 2H), 3.42 (dd, 1H), 3.27 (dd, 1H), 2.06-1.95 (m, 1H), 1.68-1.12 (m, 7H); MS(ES):440(M+H).
Primer 741: Trifluoroacetatna so 3-1-[(Benziloksi)metil]ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila
[0622]
Korak 1: 1-(Hidroksimetil)ciklopentankarbonitril
[0623] Mešavina metil 1-cijanociklopentankarboksilat (dobijena u Primeru 740, Korak 1) (500 mg, 3.0 mmol) u THF (7 mL) je obrađena sa litijumovim tetrahidroboratom (100 mg, 6.0 mmol). Dobijen rastvor je grejan do refluksa tokom 3 sata, zatim je mešan kod temperature okoline tokom 16 sati. Mešavina je ugašena sa dodavanjem vode, pa je ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko Na2SO4, zatim su filtrirani i rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (387 mg, 95%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ3.62 (s, 2H), 2.39-1.60 (m, 8H).
Korak 2: 1-[(Benziloksi)metil]ciklopentankarbonitril
[0624] U rastvor 1-(hidroksimetil)ciklopentankarbonitrila (0.30 g, 2.0 mmol) u DMF (4 mL) je dodat natrijumov hidrid (60% disperzija u mineralnom ulju, 0.101 g, 2.52 mol). Dobijena smesa je mešana tokom 20 minuta, zatim je dodat benzil bromid (0.28 mL, 2.4 mmol). Reakcija je mešana kod temperature okoline tokom 64 sata. Dodati su dodatni natrijumov hidrid (60% disperzija u mineralnom ulju, 0.060 g, 1.5 mmol) i benzil bromid (0.18 mL, 1.5 mmol), pa je reakcija mešana tokom naknadnih 30 minuta. Zatim je u mešavinu dodata voda, pa rasolina, a vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Ekstrakti su izmešani i osušeni preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je zatim uklonjen in vacuo. U dobijeni talog dodata je voda. Produkt je izolovan ekstrakcijom sa dietil etrom. Ekstrakti etra osušeni su preko natrijumovog sulfata, a rastvarač je isparen. Kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-30% etil acetata u heksanima) dobijen je produkt (330 mg, 64%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 87.40-7.27 (m, 5H), 4.62 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.18-2.03 (m, 2H), 1.90-1.62 (m, 6H).
Korak 3: 1-[(Benziloksi)metil]ciklopentankarbaldehid
[0625] U smesu koja sadrži 1-[(benziloksi)metil]ciklopentankarbonitril (0.16 g, 0.75 mmol) u toluenu (5 mL) na 0°C je dodato 1.0 M diizobutilaluminijumovog hidrida u heksanima (0.8 mL). Reakcija je mešana na 0°C tokom 1.5 sata, kada je utrošen početni nitril. Reakcija je ohlađena na -78°C i suzbijena sa dodavanjem metanola. Mešavina je zagrejana do temperature okoline i dodato je 3 N HCl. Nakon mešanja tokom 45 minuta, dodat je čvrsti NaCl, a mešavina je ekstrahovana sa tri dela etil acetata. Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i filtrirani, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Kolonskom flash hromatografijom dobijenog taloga (eluiranje sa gradijentom od 0-30% etil acetata u heksanima) došlo se do produkta (20 mg, 12%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.60 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 5H), 4.52 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 2.00-1.89 (m, 2H), 1.66-1.46 (m, 6H).
Korak 4: (2E)- i (2Z)-3-1-[(Benziloksi)metil]ciklopentilakrilonitril
[0626] U mešani rastvor dietil cijanometilfosfonata (18 µL, 0.11 mmol) u THF (1 mL) je dodato 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (0.10 mL). Dobijena smesa je mešana 30 minuta, nakon čega je dodat rastvor 1-[(benziloksi)metil]ciklopentankarbaldehida (0.020 g, 0.092 mmol) u THF (1 mL). Dobijena smesa je mešana tokom 16 sati. Zatim je u reakciju dodata voda i dobijena mešavina je ekstrahovana sa tri dela etil etra. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, zatim je osušena preko natrijumovog sulfata, pretočena od natrijumovog sulfata, a rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja u naknadnom koraku dodavanja konjugata.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.37-7.27 (m, 5H), 6.80 (d, 1H (E)), 6.59 (d, 1H (Z)), 5.34 (d, 1H (E)), 5.33 (d, 1H (Z)), 4.53 (s, 2H (Z)), 4.50 (s, 2H (E)), 3.45 (s, 2H (Z)), 3.31 (s, 2H (E)), 1.80-1.55 (m, 8H); MS(ES)=242(M+H).
Korak 5: Trifluoroacetatna so 3-1-[(Benziloksi)metil]ciklopentil-3-[4-(7Hpirolo(2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]propanonitril
[0627] U mešavinu (2E)- i (2Z)-3-1-[(benziloksi)metil]ciklopentilakrilonitrila (dobijenog u koraku 4) i 4-(1H-pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.037 g, 0.12 mmol) u ACN (1.5 mL) je dodat DBU (18 µL, 0.12 mmol). Dobijena smesa je mešana kod temperature okoline tokom 3 sata, i zatim je grejana na 60 °C tokom 28 sati. Reakcijska mešavina je razređena sa dietil etrom i 0.1 N HCl. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Ekstrakt etil acetata je ispran sa rasolinom, osušen preko natrijumovog sulfata, pretočen, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni talog je razređen u DCM (3 mL) i TFA (0.75 mL), pa je ovaj rastvor mešan tokom 3 sata. Rastvori su uklonjeni in vacuo, a dobijeni talog je razređen u THF (5 mL) i 6.0 M natrijumovog hidroksida u vodi (3 mL) i mešan tokom 2 sata. Reakcijska mešavina je ekstrahovana sa tri dela etil acetata. Kombinacija ekstrakata je isprana sa rasolinom, osušena preko natrijumovog sulfata, pretočena, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Sirova mešavina je prečišćena pomoću preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) i liofilizirana da se dobije željeni produkt (10 mg, 20% u dva koraka).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ12.71 (br s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.38-7.23 (m, 5H), 7.19-7.16 (m, 1H), 4.92 (dd, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.44 (d, 1H), 3.49 (dd, 1H), 3.35 (d, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.05 (d, 1H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.66-1.27 (m, 7H); MS(ES):427(M+H).
Primer 742: Trifluoroacetatna so 3-[1-(Metilsulfonil)pirolidin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila
[0628]
Korak 1: Benzil3-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0629] U rastvor 1-[(benziloksi)karbonil]pirolidin-3-karboksilne kiseline (1.0 g, 4.0 mmol) u THF (37 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat rastvor 1.0 M borana u THF (16.4 mL). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 16 sati. Mešavina je ohlađena na 0°C i dodato je 10% HCl (50 mL). Nakon dodavanja, mešavina je ekstrahovana sa DCM, a ekstrakt je sekvencijalno ispran sa zasićenim rastvorom NaHCO3i rasolinom, zatim je osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran i rastvarač je uklonjen in vacuo. Produkt je korišćen bez daljeg prečišćavanja u naknadnom koraku oksidacije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.39-7.26 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 3.61-3.31 (m, 5H), 3.18 (dt, 1H), 2.75 (br s, 0.45H), 2.59 (br s, 0.45H), 2.49-2.31 (m, 1H), 2.19 (br s, 0.1H), 2.05-1.89 (m, IH), 1.77-1.58 (m, 1H); MS(ES):236(M+H).
Korak 2: Benzil 3-formilpirolidin-1-karboksilat
[0630] DMSO (597 µL, 8.42 mmol) je dodat u rastvor oksalil hlorida (427 µL, 5.05 mmol) u DCM (25 mL) na -78°C. Nakon 5 minuta, dodat je benzil 3-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat (dobijen u koraku 1). Reakcija je nastavljena tokom 30 minuta na -78°C. Zatim je dodat TEA (2.3 mL, 17 mmol). Dobijena mešavina je zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom perioda od 30 minuta. Tada je dodata voda. Slojevi su separirani i organska faza je isprana sekvencijalno sa 0.1 N HCl, vodom, zasićenim NaHCO3, pacrasolinom. Organska faza je zatim osušena preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije produkt (0.82 g, 88% u dva koraka).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.68 (d, 1H), 7.38-7.28 (m, 5H), 5.13 (s, 2H), 3.79 (dd, 1H), 3.65-3.35 (m, 3H), 3.11-2.99 (m, 1H), 2.32-2.04 (m, 2H).
Korak 3: Benzil 3-[(E)-2-cijanovinil]pirolidin-1-karboksilat i benzil 3-[(Z)-2-cijanovinil]-pirolidin-1-karboksilat
[0631] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (4.40 mL) na 0°C dodat je ukapavanjem rastvor dietil cijanometilfosfonata (820 mg, 4.6 mmol) u THF (6.0 mL). Hladna kupka je uklonjena i reakcija je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 15 minuta. Mešavina je ohlađena na 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor benzil 3-formilpirolidin-1-karboksilata (0.82 g, 2.3 mmol) u THF (4.00 mL). Hlađenje je prekinuto i reakcija je mešana tokom 16 sati na temperaturi okoline. Mešavina je razređena sa etrom i vodom, slojevi su odvojeni i organski sloj je ispran sa vodom, zatim sa rasolinom i potom osušen preko natrijumovog sulfata, filtriran i rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen sa kolonskom flash hromatografijom (eluiranje sa gradijentom od 0-35% etil acetata u heksanima) da se dobije produkt kao mešavina E i Z izomera (246 mg, 42%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.41-7.27 (m, 5H), 6.70-6.58 (m, 0.3H (E)), 6.38 (dt, 0.7H (Z)), 5.50-5.30 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.79-3.11 (m, 5H), 2.27-2.06 (m, 1H), 1.90-1.70 (m, 1H); MS(ES):279(M+Na).
Korak 4: Benzil3-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]etilpirolidin-1-karboksilat
[0632] U mešavinu benzil 3-[(E)-2-cijanovinil]pirolidin-1-karboksilata i benzil 3-[(Z)-2-cijanovinil]pirolidin-1-karboksilata (241 mg, 0.940 mmol) i DBU (234 µL, 1.57 mmol) u ACN (13 mL) je dodat 4-(1H-pirazol4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (250 mg, 0.78 mmol). Smesa je mešana na temperaturi okoline tokom 3 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni ostatak je razređen u etil acetatu, a organski sloj je ispran sekvencijalno sa 1N HCl, vodom, zasićenim NaHCO3, i rasolinom. Ispran rastvor je osušen preko natrijumovog sulfata i rastvarač je uklonjen in vacuo. Prečišćavanje putem kolonske flash hromatografije (eluiranje sa gradijentom 0-100% [5% MeOH/DCM] u heksanima) dovelo je do produkta kao mešavine diastereomera (400 mg, 89%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3mješavina diastereomera):δ 8.85 (s, 1H), 8.35-8.28 (m, 2H), 7.42-7.25 (m, 6H), 6.80-6.76 (m, 1H), 5.69-5.66 (m, 2H), 5.15-5.04 (m, 2H), 4.46-4.32 (m, 1H), 3.84-3.84 (m, 6H), 3.54 (t, 2H), 2.26-2.13 (m, 1H), 1.84-1.54 (m, 2H), 0.95-0.89 (m, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):572(M+H).
Korak 5.3-Pirolidin-3-il-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitril
[0633] Benzil 3-2-cijano-1-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]etilpirolidin-1-karboksilat (161 mg, 0.282 mmol) je rastvoren u metanolu (5 mL) i dodata je katalitička količina 5% Pd-C. Suspenzija je mešana na temperaturi okoline tokom 1 sata u atmosferi vodonika iz balona. Zatim je dodata katalitička količina 10% Pd-C i reakcija je mešana tokom 2 sata u atmosferi vodonika iz balona. Mešavina je zatim filtrirana i prečišćena putem preparativne-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.15% NH4OH) da se dobije produkt kao mešavina diastereomera (57 mg, 46%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, mešavina diastereomera): δ 8.84 (s, 1H), 8.34-8.32 (m, 2H), 7.40 (d, 1H), 6.81-6.78 (m, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.38 (dt, 1H), 3.54 (t, 2H), 3.30-1.38 (m, 9H), 0.92 (t, 2H), -0.06 (s, 9H); MS(ES):438(M+H).
Korak 6: Trifluoroacetatna so 3-[1-(Metilsulfonil)pirolidin-3-il]-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila
[0634] U rastvor 3-pirolidin-3-il-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidinil)1H-pirazol-1-il]propanonitrila (25 mg, 0.057 mmol) i TEA (10 µL, 0.074 mmol) u DCM (1.0 mL) na 0°C je dodat metansulfonil hlorid (6 µL, 0.074 mmol). Reakcija je puštena da dođe do temperature okoline i mešana je tokom 16 sati. Polovina rastvarača je uklonjena in vacuo i u bočicu je dodata TFA (1 mL). Nakon mešanja tokom 1 sata na sobnoj temperaturi, rastvarači su uklonjeni in vacuo i dobijeni talog je rekonstituisan u THF (0.5 mL). U to je dodato 6 N NaOH (1 mL) i ovaj rastvor je mešan tokom 2 sata. Reakcijska mešavina je ekstrahovana sa pet delova etil acetata. Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4), pretočeni i koncentrisani. Preparativna-HPLC/MS (C18 eluiranje sa gradijentom H2O i ACN koji sadrži 0.1% TFA) korišćena je da se dobije produkt (16 mg, 57%).
<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO, mešavina diastereomera): δ 12.69 (s, 1H), 8.98 (s, 0.5H), 8.95 (s, 0.5H), 8.84 (s, 1H), 8.53-8.51 (m, 1H), 7.80-7.77 (m, 1H), 7.16-7.13 (m, 1H), 4.86-4.75 (m, 1H), 3.55-3.48 (m, 1H), 3.42-3.08 (m, 4H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.90 (s, 1.5H), 2.85 (s, 1.5H), 2.16-2.07 (m, 1H), 1:82-1.70 (m, 1H), 1.64-1.48 (m, 1H); MS(ES):386(M+H).
Primer 743: N'-Cijano-4-(cijanometil)-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-1-karboksimidamid
[0635]
Korak 1: tert-Butil 4-(cijanometilen)piperidin-1-karboksilat
[0636] U rastvor 1.0 M kalijumovog tert-butoksida u THF (10.1 mL) na 0°C je dodat ukapavanjem rastvor dietil cijanometilfosfonata (1.66 mL, 0.0102 mol) u THF (20 mL). Reakcija je održavana tokom 10 minuta, zatim je dodata u rastvor tert-butil 4-okso-1-piperidinkarboksilata (2.00 g, 0.0100 mol) u THF (30 mL) uz mešanje na 0°C u atmosferi azota. Nakon završetka dodavanja, hladna kupka je uklonjena i reakcija je puštena uz mešanje tokom 1 sata na 20°C. LCMS analiza je pokazala nastanak željenog produkta i da nema preostalog početnog materijala. HPLC za produkt je pokazala UVmaxna 200 i 230 nm. U reakcijsku mešavinu dodati su voda i EtOAc. Faze su separirane, a vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa vodom, zatim sa zasićenim NaCl, pa osušena preko Na2SO4i koncentrisana do suvoga da se dobije 2.5 g produkta kao žutog ulja. TLC (25% EtOAc/heksan) Rf0.22. Produkt je prečišćen pomoću automatske flash hromatografije na silikagelu. Korišćena je 40g kolona; protok 40 mL/min; [A= heksan] [B= EtOAc]. A, 4 min; gradijent do 20% B u 30 min. Prikupljeno je 44 mL frakcija. Produkt je eluiran 21-27 min. Frakcije su dale prinos od 0.67 g bele čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3) δ 5.19 (s, 1H); 3.51 (m, 4H); 2.56 (t, 2H); 2.33 (t, 2H); 1.50 (s, 9H). MS(ES) 245 (M+Na, slabo; osnovni vršak M+H-56 = 167).
Korak 2: tert-Butil 4-(cijanometil)-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-1-karboksilat
[0637] 4-(1H-Pirazol-4-il)-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (0.840 g, 2.66 mmol) je emulgovan u mešavini ACN (20 mL) i DBU (398 µL, 2.66 mmol), pa je dodat tert-butil 4-(cijanometilen)piperidin-1-karboksilat (0.651 g, 2.93 mmol). Pirazol se nije rastvorio na 20°C, ali je rastvor formiran kada je mešavina zagrejavana na 40°C tokom 1 sata. LCMS i HPLC analize su pokazale oko 20% konverzije u produktu. Smesa je mešana na 40-45°C preko noći. HPLC je pokazala 60 % površine u vidu produkta. ACN je uklonjen pomoću rotacijskog isparivača na 20 °C. U dobijeni ostatak dodat je zasićeni NaHCO3i EtOAc. Organski sloj je protresen sa još zasićenog vodenog NaHCO3, zatim je osušen (Na2SO4) i uklonjen pomoću rotacijskog isparivača do dobijanja 1.6g smeđeg uljanog taloga. TLC (60% EtOAc/heksan): produkt Rf= 0.25. Produkt je prečišćen pomoću automatske flash hromatografije na silikagelu, upotrebom 40g kolone, uz protok od 40 mL/min; [A= heksan] [B= EtOAc]. A, 3min; gradijent do 100% B u 50 min. Prikupljeno je 44 mL frakcija. Produkt je eluiran za 24-29 min; pirazol za 39-46 min; i olefin za 13-15 min. Rastvarač je uklonjen in vacuo za odgovarajuće frakcije do dobijanja 0.27 g olefina; 0.30 g pirazola; i prinos od 0.67 g produkta, koje su sve izolovane kao bele čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3) δ 8.84 (s, 1H); 8.42 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 7.40 (d, 1H); 6.79 (d, 1H); 5.67 (s, 2H); 3.94 (m, 2H); 3.54 (m, 2H); 3.07 (m, 2H); 2.90 (s, 2H); 2.72 (m, 2H); 2.08 (m, 2H); 1.45 (s, 9H); 0.91 (m, 2H); -0.06 (s, 9H). MS(ES) 538 (M+H).
Korak 3: 4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-4-ilacetonitril
[0638] tert-Butil 4-(cijanometil)-4-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-1-karboksilat (0.670 g, 1.24 mmol) je razređen u TFA (5.0 mL, 65 mmol) i mešan tokom 1.3 h. LCMS je pokazala konverziju u hidroksimetil intermedijer, M+H 338. Rastvor je koncentrisan da se ukloni TFA. U dobijeni talog je dodat metanol, a dobijena mešavina je koncentrisana. Dobijeni talog je rastvoren u metanolu (10 mL) i dodato je 15.0 M amonijumovog hidroksida u vodi (1.66 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 2 sata. LCMS i HPLC analize su pokazale završetak deprotekcije. Mešavina je koncentrisana. U dobijeni talog je dodat toluen i nastala mešavina je koncentrisana da se dobije bela polučvrsta supstanca. Većina tog intermedijera je korišćena u sledećem koraku. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC upotrebom 30 mm x 100 mm C18 kolone; 8% ACN-H2O (0.1% NH4OH), 1.0min, do 27% u 6min; 60 mL/min; detektor postavljen na m/z 308; vreme zadržavanja, 5.4 min. Epruvete sa čistim produktom su izmešane i osušene smrzavanjem do dobijanja 13.6 mg produkta.
[0639]<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.07 (s, 1H); 8.68 (s, 1H); 8.62 (s, 1H); 8.36 (s, 1H); 7.54 (d, 1H); 7.00 (d, 1H); 3.16 (s, 2H); 2.87 (m, 2H); 2.55 (m, 4H); 1.94 (m, 2H). MS(ES) 308 (M+H).
Korak 4: Metil N-cijano-4-(cijanometil)-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-piperidin-1-karbimidotioat
[0640] 4-[4-(7H-Pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-4-ilacetonitril (361 mg, 1.17 mmol) i N-cijano-S,S'-dimetilditioimido karbonat (344 mg, 2.35 mmol) su rastvoreni u izopropil alkoholu (2.5 mL) i DMSO (2.5 mL) na 20 °C. Nakon 16 h vremena reakcije, LCMS analiza je pokazala prisustvo nešto produkta, M+H 406; reagensa, M+H 147; pa piperidina, M+H 308. HPLC analiza je pokazala oko 2% reakcije. HPLC postupak je bio: Zorbax SB C18, 5µm, 15 cm, 35 °C, protok 1.2 mL/min, 5% ACN-H2O (0.05% TFA), 1.5 min, do 100% ACN u 15.0 min; detektor postavljen na 324, 225, i 265 nm. Vreme zadržavanja početnog materijala je bilo 4.9 min (UV) max 224, 262, 292 i 325 nm); produkta, 6.5 min (UV max 226, 262, 290 i 324 nm); pa reagensa, 7.7min (UV max 265nm). U produkt je dodat TEA (327 µL, 2.35 mmol) i dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja tokom 3 sata, HPLC i LCMS pokazale su 60% reakcije. Produkt i nereagovani piperidin su izolovani pomoću preparativne HPLC upotrebom 30 mm x 100 mm C18 kolone; 5%ACN-H2O (0.1%TFA), 1.0min, do 35% u 6min; 60 mL/min; detektor postavljen na 326 nm. Vreme zadržavanja za produkt je 5.9 min; a za početni piperidin 3.5-4.3 min. Produkt je osušen smrzavanjem uz prinos od 301 mg bele čvrste supstance kao soli TFA.<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.85 (s, 1H); 9.01 (s, 1H); 8.90 (s, 1H); 8.59 (s, 1H); 7.85 (m, 1H); 7.30 (m, 1H); 4.23 (m, 2H); 3.35 (m, 2H); 3.30 (s, 2H); 2.78 (m, 2H); 2.68 (s, 3H); 2.16 (m, 2H). MS(ES) 406 (M+H).
Korak 5: N'-Cijano-4-(cijanometil)-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]piperidin-1-karboksimidamid
[0641] Metil N-cijano-4-(cijanometil)-4-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]-piperidin-1-karbimidotioat (41.3 mg, 0.102 mmol) (53 mg sol TFA) rastvoren je u 2.0 M amonijaka u izopropil alkoholu (4.00 mL). Dobijena mešavina je zagrejavana na 100 °C tokom 1 sata u mikrotalasnom reaktoru. Analiza sa HPLC i LCMS pokazala je 60% reakcije do dobijanja očekivanog M+H 375 (50 % površine).U ovu smesu je dodato 2 mL 7 N NH3/MeOH. Dobijena mešavina zagrejavana je na 120 °C tokom jednog sata. HPLC i LCMS analize pokazale sa na nema preostalog početnog materijala. Reakcijska mešavina je koncentrisana sa rotacijskim isparivačem. Produkt je izolovan pomoću preparativne HPLCMS upotrebom 30 mm x 100 mm C18 kolone, eluiranje sa gradijentom rastvarača; 10% ACN-H2O (0.1 %TFA), 1.5min, do 30% u 6min; 60mL/min; detektor postavljen na m/z 375; vreme zadržavanja, 4.7 min. Eluat je osušen zamrzavanjem uz prinos od 11.7 mg produkta soli TFA kao bele čvrste supstance.<1>H NMR (d6-DMSO) δ 12.69 (s, 1H, NH); 8.92 (s, 1H); 8.81 (s, 1H); 8.51 (s, 1H); 7.75 (m, 1H); 7.22 (m, 1H); 7.18 (s, 2H, NH2); 3.84 (m, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.99 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 1.97 (m, 2H). MS(ES) 375 (M+H).
Primer 744: 4-1-[2,2,2-Trifluoro-1-(1H-imidaksol-2-ilmetil)etil]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0642]
Korak 1: (3R)-4,4,4-Trifluoro-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanal
[0643]
[0644] U rastvor (3R)-4,4,4-trifluoro-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanonitrila (1.06 g, 0.00243 mol) na -70°C (videti, Primer 93, korak 1) u DCM (10 mL, 0.2 mol) je dodato 1.0 M diizobutilaluminijumovog hidrida u DCM (4.8 mL). Dobijena smesa je mešana tokom 3 sata i puštena da se zagreje tokom tog vremenskog perioda od -70 do -25°C, nakon toga je reakcija ponovo ohlađena na -70°C. Dodat je metanol (1.5 mL, 0.037 mol), pa zatim 2.0 M HCl u vodi (15 mL). Nerastvorljivi materijal je zatim profiltriran iz reakcijske mešavine. Organski filtrat je ispran sekvencijalno sa: 2.0 M HCl u vodi, vodom i zasićenim vodenim rastvorom NaCl. Isprana organska faza je osušena preko natrijumovog sulfata i koncentrisana pomoću rotacijskog isparivača do dobijanja 0.58 g sirovog produkta kao svetlo žute pene/čvrste supstance. Sirovi produkt je hromatografisan sa 0-80% etil acetata/heksana do dobijanja prečišćenog produkta (0.9 g) kao svetlo narandžastog ulja (47% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.85 (1H, s); 8.95 (1H, s); 8.5 (1H, s); 8.4 (1H, s); 7.5 (1H, d); 6.85 (1H, d); 5.75 (2H, s); 5.5 (1H, m); 4.0 (1H, dd); 3.6 (2H, t); 3.3 (1H, dd); 1.99 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H): 440.
Korak 2: 4-1-[2,2,2-Trifluoro-1-(1H-imidazol-2-ilmetil)etil]-1Hpirazol-4-il-7-[2-(trimetilsilil)-etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0645]
[0646] Rastvor 4,4,4-trifluoro-3-[4-(7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butanala (0.138 g, 0.000314 mol), 7.0 M amonijaka u metanolu (1 mL), etandiala (0.5 mL, 0.004 mol) i sirćetne kiseline (20 μL, 0.0004 mol) u metanolu (2 mL, 0.05 mol) je zagrevan u mikrotalasnom reaktoru na 100 wati, na 80°C tokom 60 minuta. Nakon mikrotalasne reakcije je dodat etil acetat/voda. Organska faza je separirana i isprana sa zasićenim NaHCO3i zasićenim NaCl. Isprana organska faza je osušena i koncentrisana (rotacijski isparivač) do dobijanja 196 mg sirovog produkta kao narandžastog stakla. Sirovi produkt je prečišćen pomoću hromatografije sa 0-100% etil acetata/heksana do dobijanja 57 mg prečišćenog produkta kao beličaste čvrste materije (38% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (1H, s); 8.4 (1H, s); 8.2 (1H, s); 7.5 (1H, d); 7.0 (2H, s); 6.83 (1H, d); 5.75 (2H, s); 5.62 (1H, m); 4.15 (1H, dd); 3.8 (1H, dd); 3.6 (2H, t); 1.99 (2H, t); 0.0 (9H, s). MS (M+H): 478.
Korak 3: 4-1-[2,2,2-Trifluoro-1-(1H-imidazol-2-ilmetil)etil]-1H-pirazol-4-il-7H-pirolo[2,3-d]-pirimidin
[0647] Rastvor 4-1-[2,2,2-trifluoro-1-(1H-imidazol-2-ilmetil)etil]-1H-pirazol-4-il-7-[2-(trimetilsilil)etoksi]metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (0.055 g, 0.12 mmol) u 1,2-dihloroetanu (1 mL, 10 mmol) i TFA (0.5 mL, 6 mmol) je mešan preko noći. Reakcija je koncentrisana da se dobije narandžasto ulje. Ulje je mešano u metanolu (1 mL, 20 mmol) i 8.0 M amonijumovog hidroksida u vodi (1 mL) tokom 4 sata. Ova mešavina je zatim koncentrisana da se dobije sirovi produkt kao narandžasto staklo/čvrsta supstanca. Sirovi produkt je prečišćen pomoću preparativne HPLC (pH10) do dobijanja 28 mg prečišćenog produkta kao bezbojnog stakla, koje je triturirano sa 2-metoksi-2-metilpropanom (1 mL, 8 mmol), i zatim filtrirano i isprano da se dobije 15 mg produkta kao bele čvrste supstance (38% prinos) koji je zatim osušen na sobnoj temperaturi do 50°C tokom 3 sata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 12.13 (1H, s); 11.89 (1H, s); 8.65 (1H, s); 8.37 (1H, s); 7.6 (1H, d); 6.95 (1H, d); 6.92 (1H, d); 5.91 (1H, m); 3.78 (1H, dd); 3.47 (H, dd). MS (M+H): 348.
Primer 745: 4-(1-(1R)-2,2,2-Trifluoro-1-[(4-metil-1,3-tiazol-2-il)metil]etil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin
[0648]
Korak 1: (3R)-4,4,4-Trifuoro-3-[4-(7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butantioamid
[0649]
[0650] Suspenzija fosfornog pentasulfida (0.46 g, 1.0 mmol) u etanolu (0.5 mL, 8 mmol) je mešana tokom 1 sata. Dodat je (3R)-4,4,4-Trifluoro-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butannitril (0.15 g, 0.50 mmol) (videti, Primer 93) i dobijena mešavina je zagrejavana na 80°C u zatvorenoj bočici tokom 0.5 sata, tokom koje reakcije je mešavina postala žuti rastvor. Reakcija je grejana preko noći. Reakcija je zatim ohlađena na sobnoj temperaturi. U mešavinu su dodati voda (1 g, 60 mmol) i etil acetat. Organska faza je separirana i isprana sa zasićenim NaHCO3i zasićenim vodenim rastvorom NaCl. Isprana organska faza je zatim osušena i koncentrisana do dobijanja 387 mg sirovog produkta kao belog stakla/ulja. Sirovi produkt je hromatografisan sa 0-10% MeOH/DCM, 0-1 %NH4OH do dobijanja 0.13 g prečišćenog produkta kao bele čvrste supstance (76% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.7 (1H, s); 8.5 (1H, s); 8.3 (1H, s); 7.4 (1H, d); 7.06.75 (1H, d); 5.82 (1H, m); 3.75 (1H, dd); 3.2 (1H, dd). MS (M+H): 341.
[0651] Suspenzija (3R)-4,4,4-trifluoro-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]butantioamida (0.038 g, 0.00011 mol) i hloroacetona (15 μL, 0.00019 mol) u etanolu (1m mL, 0.02 mol) i 1,2-dihloroetanu (1 mL, 0.01 mol) je grejana do refluksa preko noći. Nakon toga, reakcijska mešavina je filtrirana da se ukloni nerastvorljivi materijal. Filtrat je rastvoren u MeOH (1 mL) i DMF (1 mL) i prečišćen pomoću preparativne HPLC kod pH10 da se dobije 6 mg prečišćenog produkta kao bezbojnog stakla/ulja, koje je zatim triturirano sa MTBE/heksanima i koje je osušeno na 40°C preko noći do dobijanja 5.2 mg prečišćenog produkta kao beličaste čvrste supstance (13% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.11 (1H, s); 8.88 (1H, s); 8.42 (1H, s); 8.38 (1H, s); 7.45 (1H, d); 6.79 (1H, s); 6.65 (1H, d); 5.41 (1H, m); 4.15 (1H, dd); 3.75 (H, dd); 2.18 (3H, s). MS (M+H): 379.
Primer A: In vitro test JAK kinaze
[0652] Ovde opisana jedinjenja su testirana na inhibicijsku JAK aktivnost prema sledećem in vitro testu opisanom u Park et al., Analytical Biochemistry 1999, 269, 94-104. Katalitičke domene ljudskog JAK1 (a.a. 837-1142), Jak2 (a.a. 828-1132) i Jak3 (a.a. 781-1124) sa N-terminalnom His oznakom su eksprimirane upotrebom bakulovirusa u ćelijama insekta i prečišćene. Katalitička aktivnost JAK1, JAK2 ili JAK3 testirana je merenjem fosforilacije biotiniliranog peptida. Fosforilirani peptid je detektiran pomoću homogene vremenski obrađene fluorescencije (HTRF). IC50s jedinjenja je meren za svaku kinazu u reakcijama koje sadrže enzim, ATP i 500 nM peptid u 50 mM Tris (pH 7.8) puferu sa 100 mM NaCl, 5 mM DTT, i 0.1 mg/mL (0.01%) BSA. ATP koncentracija u reakcijama je 90 µM za Jak1, 30 µM za Jak2 i 3 µM za Jak3. Reakcije su sprovođene na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i zatim zaustavljene sa 20 µL 45 mM EDTA, 300 nM SA-APC, 6 nM Eu-Py20 u testnom puferu (Perkin Elmer, Boston, MA). Vezanje na Europium označeno antitelo sprovedeno je kroz 40 minuta i izmeren je HTRF signal na Fusion čitaču mikrotitarskih pločica (Perkin Elmer, Boston, MA). Jedinjenja koja imaju IC50od 10 µM ili manje za bilo koji od gore navedenih JAK ciljeva su smatrana aktivnim.
Primer B: Ćelijski testovi
[0653] Jedno ili više ovde opisanih jedinjenja testirani su na inhibicijsku JAK aktivnost prema ciljevima u skladu sa barem jednim od sledećih ćelijskih testova.
[0654] Tumorske ćelijske linije koje su zavisne od citokinima i zbog toga JAK/STAT transdukcije signala, su zasađene na 6000 ćelija po jažici (mikrotitracijska ploča sa 96 jažica) u RPMI 1640, 10% FBS, i 1 nG/mL odgovarajućeg citokina. Jedinjenja su dodata u ćelije u DMSO/mediju (konačna koncentracija 0.2% DMSO) i inkubirana tokom 72 sata na 37°C, 5% CO2. Efekat jedinjenja na aktivnost ćelija ocenjen je pomoću CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) pa zatim sa TopCount kvantifikacijom (Perkin Elmer, Boston, MA). Potencijalni ne-ciljani efekat jedinjenja izmeren je paralelno upotrebom ne-JAK pokretane ćeliske linije sa istim očitavanjem testa. Jedinjenja koja imaju IC50od 10 µM ili manje sa selektivnošću za JAK pokretanu proliferaciju su smatrana aktivnim. Svi eksperimenti su sprovedeni u duplikatu.
[0655] Gornje ćelijske linije se mogu takođe koristiti za ispitivanje efekta jedinjenja na fosforilaciju JAK kinaza ili potencijalnih nizvodnih supstrata kao što su STAT proteini, Akt, Shp2, ili Erk. Ovi eksperimenti se mogu sprovoditi nakon izgladnjivanja citokina preko noći, zatim kratkom predinkubacijom sa jedinjenjem (2 sata ili manje) i stimulacijom citokina približno 1 sat ili manje. Proteini su zatim ekstrahovani iz ćelija i analizirani pomoću tehnika koje su uobičajene vičnim osobama sa ovoga područja uključujući Western blotting ili ELISA analize korišćenjem antitiela koja mogu diferencirati između fosforiliranog i ukupnog proteina. Ovi eksperimenti mogu koristiti normalne ili tumorske ćelije za istraživanje aktivnosti jedinjenja na biologiju preživljavanja ćelije tumora ili na posrednike zapaljenske bolesti. Na primer, s obzirom na posrednike zapaljenske bolesti, citokini kao što su IL-6, IL-12, IL-23, ili IFN mogu biti korišćni za stimuliranje JAK aktivacije koja dovodi do fosforilacije STAT proteina i potencijalno u transkripcijskim profilima (ocenjeno sa lančanom ili qPCR tehnologijom) ili za produkciju i/ili sekreciju proteina, kao što je IL-17. Sposobnost jedinjenja da inhibiraju ove citokinom posredovane efekte može biti izmerena korišćenjem tehnika koje su uobičajene vičnim osobama sa ovoga područja.
[0656] Ovde opisana jedinjenja mogu biti ispitana u ćelijskim modelima za procenu njihovog potencijala i aktivnosti protiv mutiranih JAK-ova, na primer, JAK2V617F mutacija koja je pronađena kod mijeloidnog proliferativnog poremećaja. Ovi eksperimenti često koriste citokin zavisne ćelije hematološkog porekla (npr. BaF/3) u koje su ektopijski eksprimirane JAK divljeg-tipa ili JAK mutirane kinaze (James, C., et al. Nature 434:1144-1148; Staerk, J., et al. JBC 280:41893-41899). Krajnje tačke uključuju efekte jedinenja na preživljavanje ćelije, proliferaciju i fosforilaciju JAK, STAT, Akt, ili Erk proteina.
[0657] Određena ovde opisana jedinjenja su bila ili mogu biti procenjena na njihovu aktivnost inhibicije proliferacije T-ćelija. Takav test može se smatrati drugim testom upravljane proliferacije citokina (tj. JAK) i takođe jednostavnim testom imunološke supresije ili inhibicije imunološke aktivacije. U nastavku je kratki rezime kako se mogu sprovoditi takvi eksperimenti. Periferne mononuklearne ćelije krvi (PBMC) pripremljene su iz ljudskih uzoraka krvi pomoću Ficoll Hypaque postupka odvajanja i T- ćelije (deo 2000) se mogu dobiti iz PBMC sa elutrijacijom. Sveže izolovane humane T- ćelije mogu biti održavane u kultivacijskom mediju (RPMI 1640 nadopunjen sa 10% fetalnog goveđeg seruma, 100 U/ml penicilina, 100 µg/ml streptomicina) u gustoći od 2 x 10<6>ćelija /ml na 37°C tokom do 2 dana. Za IL-2 stimulisanu analizu proliferacije ćelije, T-ćelije su prvo tretirane sa fitohemaglutininom (PHA) u konačnoj koncentraciji od 10 µg/mL tokom 72 sata. Nakon jednog ispiranja sa PBS, zasađeno je 6000 ćelija/jažici u pločice sa 96-jažica i tretirano sa jedinjenjima u različitim koncentracijama u kultivacijskom mediju u prisustvu 100 U/mL humanog IL-2 (ProSpec-Tany TechnoGene; Rehovot, Israel). Pločice su inkubirane na 37°C tokom 72 sata i indeks proliferacije je određen upotrebom CellTiter-Glo Luminescent reagensa u skladu sa protokolom koji je preporučen od proizvođača (Promega; Madison, WI).
Primer C: In vivo anti-tumorska efikasnost
[0658] Ovde opisana jedinjenja mogu biti procenjena kod humanih ksenograft tumorskih modela kod imunološki kompromitovanih miševa. Na primer, tumorogena varijanta INA-6 ćelijske linije plazmacitoma može biti korišćena za potkožno cepljenje SCID miševa (Burger, R., et al. Hematol J.
2:42-53, 2001). Životinje koje nose tumor mogu zatim biti odokativno raspoređene u grupe za tretiranje sa lekom ili sa nosačem, pa se različite doze jedinjenja mogu davati bilo kojim od uobičajenih načina davanja uključujući oralni, i.p., ili trajnu infuziju upotrebom ugrađenih pumpi. Rast tumora se prati tokom vremena koristeći kalibarski šestar. Dalje, uzorci tumora mogu biti prikupljeni u bilo kom trenutku nakon početka tretmana radi gore opisane analize (Primer B) kako bi se procenili efekti jedinjenja na JAK aktivnost i nizvodne signalizacijske puteve. Dodatno, selektivnost jedinjenja može biti procenjena upotrebom ksenograft tumorskih modela koji su pokretani sa drugim poznatim kinazama (npr. Bcr-Ab1) kao što je K562 tumorski model.
Primer D: Kožni kontaktni test reakcije kasne osetljivosti miševa
[0659] Ovde opisana jedinjenja mogu takođe biti testirana za efikasnost (inhibiranja JAK ciljeva) kod testnog modela T-čelijama uzrokovane reakcije kasne osetljivosti miševa. Odgovor na reakciju kasne osetljivosti (DTH) kožnog kontakta miševa se smatra kao odgovarajući model za klinički kontaktni dermatitis, i za druge imunološke kožne poremećaje posredovane sa T-limfocitima, kao što su psorijaza (Immunol Today. 1998 Jan;19(1):37-44). Mišji DTH ima višestruke sličnosti sa psorijazom, uključujući imunološki infiltrat, prateće povećanje zapaljenskih citokina, zatim hiperproliferaciju keratinocita. Osim toga, mnoge vrste sredstava koja su delotvorna u kliničkom lečenju psorijaze su takođe efikasni inhibitori DTH reakcije kod miševa (Agents Actions.1993 Jan;38(1-2):116-21).
[0660] Na dan 0 i 1, Balb/c miševi su senzitizirani sa antigenom 2,4,dinitro-fluorobenzenom (DNFB), topikalnom primenom, na njihov ogoljeni stomak. Na dan 5, izmerena je debljina uši korišćenjem mašinskog mikrometra. Ovo merenje je zabeleženo, pa je korišćeno kao nulta linija. Oba uha životinje su tada izazvana sa topikalnom primenom DNFB u količini od 20 µL (10 µL na unutrašnju resicu i 10 µL na spoljnu resicu) u koncentraciji od 0.2%. Dvadeset četiri do sedamdeset dva sata nakon faze izazivanja, uši su ponovo izmerene. Tretman sa testnim jedinjenjima dat je kroz faze senzitiziranja i izazivanja (dan -1 do dana 7) ili pre i tokom trajanja faze izazivanja (obično poslepodne od dana 4 do dana 7). Tretman sa testnim jedinjenjima(u različitim koncentracijama) dat je bilo sistematski ili topikalno (topikalna primena tretmana za uši). Efikasnost testnih jedinjenja je označena sa smanjenjem otokline uha u odnosu na situaciju bez tretmana. Jedinjenja koja uzrokuju smanjenje 20% ili više su smatrana kao efikasna. U nekim eksperimentima, miševi su izazvani, ali nisu i senzitizirani (negativna kontrola).
[0661] Inhibicijski efekt (inhibicijska aktivacija JAK-STAT puteva) testnih jedinjenja može biti potvrđen sa imunohistohemijskom analizom. Aktivacija JAK-STAT puteva dovodi do formiranja i translokacije funkcionalnih transkripcijskih faktora. Dalje, priliv imunoloških ćelija i povećana proliferacija keratinocita takođe treba osigurati jedinstvene promene profila ekspresije u uhu koje mogu biti istražene i kvantifikovane. Delovi ušiju fiksirani u formalinu i uklopljeni u parafinu (dobijeni nakon faze izazivanja kod DTH modela) su podvrgnuti imunohistohemijskoj analizi korišćenjem antitela koje specifično stupa u interakciju sa fosforiliranim STAT3 (klon 58E12, Cell Signaling Technologies). Uši miševa su tretirani sa testnim jedinjenjima, nosačem ili deksametazonom (klinički efikasnim tretmanom za psorijazu) ili su bile bez ikakvog tretmana, radi poređenja sa DTH modelom. Testna jedinjenja i deksametazon mogu dati slične transkripcijske promene i kvalitativno i kvantitativno, pa oba i testna jedinjenja i deksametazon mogu smanjiti broj infiltriranih ćelija. Obe primene, i sistemska i topikalna primena testnih jedinjenja mogu proizvesti inhibicijske efekte, tj., smanjenje broja infiltriranih ćelija i inhibiciju transkripcijskih promena.
Primer E: In vivo anti-zapaljenska aktivnost
[0662] Ovde opisana jedinjenja mogu biti ili su bila procenjena na modelu kod glodara ili ne-glodara koji su bili kreirani da repliciraju jednostruki ili kompleksni odgovor na zapaljenje. Na primer, modeli na glodarima za artritis mogu biti korišćeni za procenu terapijskog potencijala jedinjenja koja se doziraju preventivno ili terapeutski. Ovi modeli uključuju ali nisu ograničeni na artritis izazvan kolagenom kod miša ili pacova, adjuvantno-izazvan artritis kod pacova, pa artritis izazvan kolagenskim antitelima. Autoimune bolesti uključuju ali nisu ograničene na, multiplu sklerozu, dijabetes melitus tipa 1, uveoretinitis, tiroditis, Miastenia gravis, imunoglobulinske nefropatije, miokarditis, osetljivost disajnih puteva (astma), lupus, ili kolitis, koje takođe mogu biti korišćene za procenu terapeutskog potencijala ovde opisanih jedinjenja. Ovi modeli su dobro uspostavljeni u istraživačkoj zajednici i poznati su osobama stručnim na ovom području (Current Protocols in Immunology, Vol 3., Coligan, J.E. et al, Wiley Press.; Methods in Molecular Biology: Vol. 225, Inflammation Protocols., Winyard, P.G. i Willoughby, D.A., Humane Press, 2003.).

Claims (6)

Patentni zahtevi
1. Jedinjenje, koje je 3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril, u kome je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema zahtevu 1, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
3. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je (3R)-3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril, u kome je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
4. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema zahtevu, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač.
5. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je (3S)-3-ciklopentil-3-[4-(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propannitril, u kome je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
6. Farmaceutska kompozicija koja sadržij jedinjenje prema zahevu 5, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20181405A 2005-12-13 2006-12-12 Derivati pirolo[2,3-d]pirimidina kao inhibitori janus kinaze RS58113B1 (sr)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US74990505P 2005-12-13 2005-12-13
US81023106P 2006-06-02 2006-06-02
US85062506P 2006-10-10 2006-10-10
US85687206P 2006-11-03 2006-11-03
US85940406P 2006-11-16 2006-11-16
EP16197502.4A EP3184526B1 (en) 2005-12-13 2006-12-12 Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives as janus kinase inhibitor

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58113B1 true RS58113B1 (sr) 2019-02-28

Family

ID=37903501

Family Applications (7)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20110571A RS52101B (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20150513A RS54181B9 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20170081A RS55634B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril substituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20170079A RS55632B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril substituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2-3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20181405A RS58113B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Derivati pirolo[2,3-d]pirimidina kao inhibitori janus kinaze
RS20170047A RS55576B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20160052A RS54683B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze

Family Applications Before (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20110571A RS52101B (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20150513A RS54181B9 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20170081A RS55634B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril substituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20170079A RS55632B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril substituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2-3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170047A RS55576B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze
RS20160052A RS54683B1 (sr) 2005-12-13 2006-12-12 Heteroaril supstituisani pirolo[2,3-b]piridini i pirolo[2,3-b]pirimidini kao inhibitori janus kinaze

Country Status (35)

Country Link
US (16) US7598257B2 (sr)
EP (10) EP2348023B9 (sr)
JP (4) JP5017278B2 (sr)
KR (4) KR101324737B1 (sr)
CN (4) CN103254190B (sr)
AR (1) AR057995A1 (sr)
AT (1) ATE525374T1 (sr)
AU (1) AU2006326548B2 (sr)
BR (1) BRPI0619817B8 (sr)
CA (1) CA2632466C (sr)
CR (2) CR10065A (sr)
CY (8) CY1112762T1 (sr)
DK (7) DK3184526T3 (sr)
EA (3) EA019504B1 (sr)
EC (2) ECSP088540A (sr)
ES (10) ES2543903T3 (sr)
FR (2) FR13C0007I2 (sr)
HR (7) HRP20110903T1 (sr)
HU (7) HUE030418T2 (sr)
IL (3) IL192019A (sr)
LT (6) LT2474545T (sr)
LU (1) LU92137I2 (sr)
ME (1) ME01312B (sr)
MX (1) MX346183B (sr)
MY (2) MY162590A (sr)
NZ (2) NZ569015A (sr)
PL (7) PL3184526T3 (sr)
PT (7) PT3184526T (sr)
RS (7) RS52101B (sr)
SG (3) SG179430A1 (sr)
SI (7) SI2474545T1 (sr)
TW (6) TWI468162B (sr)
UA (2) UA98449C2 (sr)
WO (1) WO2007070514A1 (sr)
ZA (1) ZA200805165B (sr)

Families Citing this family (430)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060106020A1 (en) * 2004-04-28 2006-05-18 Rodgers James D Tetracyclic inhibitors of Janus kinases
AR054416A1 (es) 2004-12-22 2007-06-27 Incyte Corp Pirrolo [2,3-b]piridin-4-il-aminas y pirrolo [2,3-b]pirimidin-4-il-aminas como inhibidores de las quinasas janus. composiciones farmaceuticas.
US20090105263A1 (en) * 2005-09-16 2009-04-23 Peter William Rodney Caulkett Heterobicyclic compounds as glucokinase activators
EP2270014A1 (en) 2005-09-22 2011-01-05 Incyte Corporation Azepine inhibitors of janus kinases
US8604042B2 (en) * 2005-11-01 2013-12-10 Targegen, Inc. Bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
US8133900B2 (en) * 2005-11-01 2012-03-13 Targegen, Inc. Use of bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
DK1951684T3 (en) * 2005-11-01 2016-10-24 Targegen Inc BIARYLMETAPYRIMIDIN kinase inhibitors
DK3184526T3 (en) 2005-12-13 2019-01-14 Incyte Holdings Corp PYRROLO [2,3-D] PYRIMIDINE DERIVATIVES AS A JANUS-KINASE INHIBITOR
KR20080083680A (ko) * 2005-12-23 2008-09-18 스미스클라인 비참 코포레이션 오로라 키나제의 아자인돌 억제제
JP5099005B2 (ja) * 2006-04-03 2012-12-12 アステラス製薬株式会社 ヘテロ化合物
RU2008143361A (ru) * 2006-04-05 2010-05-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Деазапурины в качестве ингибиторов янус-киназ
CA3002443A1 (en) 2006-11-20 2008-05-29 President And Fellows Of Harvard College Methods, compositions, and kits for treating pain and pruritis
US8513270B2 (en) * 2006-12-22 2013-08-20 Incyte Corporation Substituted heterocycles as Janus kinase inhibitors
EP2740731B1 (en) 2007-06-13 2016-03-23 Incyte Holdings Corporation Crystalline salts of the janus kinase inhibitor (r)-3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile
CL2008001709A1 (es) * 2007-06-13 2008-11-03 Incyte Corp Compuestos derivados de pirrolo [2,3-b]pirimidina, moduladores de quinasas jak; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como cancer, psoriasis, artritis reumatoide, entre otras.
EP2176249A2 (en) * 2007-07-02 2010-04-21 Boehringer Ingelheim International GmbH New chemical compounds
WO2009032338A1 (en) * 2007-09-09 2009-03-12 University Of Florida Research Foundation Apratoxin therapeutic agents: mechanism and methods of treatment
WO2009049028A1 (en) * 2007-10-09 2009-04-16 Targegen Inc. Pyrrolopyrimidine compounds and their use as janus kinase modulators
WO2009054941A1 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Merck & Co., Inc. Therapeutic compounds
BRPI0820544A2 (pt) * 2007-11-16 2015-06-16 Incyte Corp 4-pirazolil-n-arilpirimidin-2-aminas e pirazolil-n-heteroarilpirimidin-2-aminas como inibidores de janus cinase
MX2010008719A (es) * 2008-02-06 2010-09-24 Novartis Ag Pirrolo [2,-d] piridinas y usos de las mismas como inhibidores de cinasa de tirosina.
US20110105436A1 (en) * 2008-03-10 2011-05-05 Auckland Uniservices Limited Heteroaryl compounds, compositions, and methods of use in cancer treatment
ES2602577T3 (es) * 2008-03-11 2017-02-21 Incyte Holdings Corporation Derivados de azetidina y ciclobutano como inhibidores de JAK
CA2719847A1 (en) * 2008-04-21 2010-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of janus kinases
EP2274288A2 (en) * 2008-04-24 2011-01-19 Incyte Corporation Macrocyclic compounds and their use as kinase inhibitors
AR071717A1 (es) 2008-05-13 2010-07-07 Array Biopharma Inc Pirrolo[2,3-b]piridinas inhibidoras de quinasas chk1 y chk2,composiciones farmaceuticas que las contienen,proceso para prepararlas y uso de las mismas en el tratamiento y prevencion del cancer.
US8344144B2 (en) * 2008-06-18 2013-01-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Janus kinases
EP2296475A4 (en) * 2008-06-20 2014-03-05 Genentech Inc TRIAZOLOPYRIDINE COMPOUNDS JAK KINASE INHIBITORS AND METHODS
AU2009259853A1 (en) * 2008-06-20 2009-12-23 Genentech, Inc. Triazolopyridine JAK inhibitor compounds and methods
CL2009001884A1 (es) * 2008-10-02 2010-05-14 Incyte Holdings Corp Uso de 3-ciclopentil-3-[4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)propanonitrilo, inhibidor de janus quinasa, y uso de una composición que lo comprende para el tratamiento del ojo seco.
AT507187B1 (de) 2008-10-23 2010-03-15 Helmut Dr Buchberger Inhalator
JOP20190231A1 (ar) * 2009-01-15 2017-06-16 Incyte Corp طرق لاصلاح مثبطات انزيم jak و المركبات الوسيطة المتعلقة به
US8765727B2 (en) * 2009-01-23 2014-07-01 Incyte Corporation Macrocyclic compounds and their use as kinase inhibitors
WO2010135621A1 (en) * 2009-05-22 2010-11-25 Incyte Corporation 3-[4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl]octane- or heptane-nitrile as jak inhibitors
ES2487542T3 (es) * 2009-05-22 2014-08-21 Incyte Corporation Derivados de N-(hetero)aril-pirrolidina de pirazol-4-il-pirrolo[2,3-d]pirimidinas y pirrol-3-il-pirrolo[2,3-d]pirimidinas como inhibidores de cinasas Janus
HRP20150701T1 (hr) 2009-06-08 2015-08-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Spojevi dihidropirolonaftiridinona kao inhibitori jak
PE20120493A1 (es) 2009-06-29 2012-05-20 Incyte Corp Pirimidinonas como inhibidores de pi3k
CN102725401A (zh) 2009-07-10 2012-10-10 哈佛大学校长及研究员协会 作为抗炎药的永久带电荷的钠和钙通道阻断剂
TWI466885B (zh) 2009-07-31 2015-01-01 Japan Tobacco Inc 含氮螺環化合物及其醫藥用途
WO2011028685A1 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Incyte Corporation Heterocyclic derivatives of pyrazol-4-yl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as janus kinase inhibitors
US9029359B2 (en) 2009-09-04 2015-05-12 Biogen Idec Ma, Inc. Heteroaryl Btk inhibitors
RU2538204C2 (ru) 2009-09-10 2015-01-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Ингибиторы jak
KR20190082985A (ko) 2009-10-02 2019-07-10 아벡신 에이에스 소염제 2-옥소티아졸 및 2-옥소옥사졸
CA2777114C (en) * 2009-10-09 2018-10-23 Incyte Corporation Hydroxyl, keto, and glucuronide derivatives of 3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile
US8389728B2 (en) * 2009-11-06 2013-03-05 The Arizona Board Of Regents Pollen tube stimulants from Arabidopsis pistils
AU2011217961B2 (en) * 2010-02-18 2016-05-05 Incyte Holdings Corporation Cyclobutane and methylcyclobutane derivatives as Janus kinase inhibitors
WO2011109217A2 (en) * 2010-03-02 2011-09-09 Immunodiagnostics, Inc. Methods of treating or preventing rna polymerase dependent viral disorders by administration of jak2 kinase inhibitors
SMT201800137T1 (it) 2010-03-10 2018-07-17 Incyte Holdings Corp Derivati di piperidin-4-il azetidina come inibitori di jak1
AU2015205858B2 (en) * 2010-03-10 2017-04-13 Incyte Holdings Corporation Piperidin-4-yl azetidine derivatives as jak1 inhibitors
KR20130094710A (ko) * 2010-04-14 2013-08-26 어레이 바이오파마 인크. Ｊａｋ 키나아제의 억제제로서 5,7-치환된-이미다조［1,2-ｃ］피리미딘
US9133123B2 (en) 2010-04-23 2015-09-15 Cytokinetics, Inc. Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use
AR081331A1 (es) 2010-04-23 2012-08-08 Cytokinetics Inc Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos
AR081626A1 (es) 2010-04-23 2012-10-10 Cytokinetics Inc Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos
PH12012502296B1 (en) 2010-05-21 2017-10-06 Incyte Holdings Corp Topical formulation for a jak inhibitor
JP5749341B2 (ja) 2010-08-20 2015-07-15 ハチソン メディファーマ リミテッド ピロロピリミジン化合物およびその使用
US8809377B2 (en) * 2010-09-24 2014-08-19 The Regents Of The University Of Michigan Deubiquitinase inhibitors and methods for use of the same
CA2816088A1 (en) 2010-10-28 2012-05-03 Viamet Pharmaceuticals, Inc. Metalloenzyme inhibitor compounds
AU2010363329A1 (en) 2010-11-07 2013-05-09 Targegen, Inc. Compositions and methods for treating myelofibrosis
EA036970B1 (ru) * 2010-11-19 2021-01-21 Инсайт Холдингс Корпорейшн Применение {1-{1-[3-фтор-2-(трифтометил)изоникотиноил] пиперидин-4-ил}-3-[4-(7h-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1н-пиразол-1-ил]азетидин-3-ил}ацетонитрила для лечения заболеваний, связанных с активностью jak1
SG190839A1 (en) * 2010-11-19 2013-07-31 Incyte Corp Cyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as jak inhibitors
ES2536415T3 (es) 2010-11-19 2015-05-25 Incyte Corporation Pirrolopiridinas y pirrolopirimidinas sustituidas heterocíclicas como inhibidores de JAK
WO2012082817A1 (en) * 2010-12-16 2012-06-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Biarylamide inhibitors of leukotriene production
ES2764848T3 (es) 2010-12-20 2020-06-04 Incyte Holdings Corp N-(1-(fenilo sustituido)etilo)-9H-purina-6-aminas como inhibidores de PI3K
ES2543312T3 (es) 2011-02-11 2015-08-18 Batmark Limited Componente para inhalador
ES2547916T3 (es) 2011-02-18 2015-10-09 Novartis Pharma Ag Terapia de combinación de inhibidores de mTOR/JAK
TW201309634A (zh) 2011-02-24 2013-03-01 Cephalon Inc 經取代之芳香硫化合物及其使用方法
EP2688890B1 (en) 2011-03-22 2017-08-30 Advinus Therapeutics Limited Substituted fused tricyclic compounds, compositions and medicinal applications thereof
US8759380B2 (en) 2011-04-22 2014-06-24 Cytokinetics, Inc. Certain heterocycles, compositions thereof, and methods for their use
AU2012255792A1 (en) * 2011-05-17 2013-11-07 Principia Biopharma Inc. Azaindole derivatives as tyrosine kinase inhibitors
SG195141A1 (en) 2011-06-14 2013-12-30 Novartis Ag Combination of panobinostat and ruxolitinib in the treatment of cancer suchas a myeloproliferative neoplasm
WO2012177606A1 (en) 2011-06-20 2012-12-27 Incyte Corporation Azetidinyl phenyl, pyridyl or pyrazinyl carboxamide derivatives as jak inhibitors
CA2841111A1 (en) 2011-07-08 2013-01-17 Novartis Ag Novel pyrrolo pyrimidine derivatives
JP2014521725A (ja) 2011-08-10 2014-08-28 ノバルティス・ファルマ・アクチェンゲゼルシャフト ＪＡＫＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ併用療法
TW201313721A (zh) 2011-08-18 2013-04-01 Incyte Corp 作為ｊａｋ抑制劑之環己基氮雜環丁烷衍生物
KR20230038593A (ko) 2011-09-02 2023-03-20 인사이트 홀딩스 코포레이션 Ｐｉ３ｋ 억제제로서 헤테로시클릴아민
UA111854C2 (uk) 2011-09-07 2016-06-24 Інсайт Холдінгс Корпорейшн Способи і проміжні сполуки для отримання інгібіторів jak
ES2640911T3 (es) * 2011-09-22 2017-11-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Cicloalquilnitrilpirazolcarboxamidas como inhibidores de la quinasa Janus
SG11201401342VA (en) * 2011-10-12 2014-09-26 Array Biopharma Inc 5,7-substituted-imidazo[1,2-c]pyrimidines
EP4556010A3 (en) 2011-11-30 2025-07-23 Emory University Jak inhibitors for use in the prevention or treatment of a viral disease caused by a coronaviridae
US10821111B2 (en) 2011-11-30 2020-11-03 Emory University Antiviral JAK inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
US8993756B2 (en) * 2011-12-06 2015-03-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrrolopyrimidines as janus kinase inhibitors
AR090548A1 (es) 2012-04-02 2014-11-19 Incyte Corp Azaheterociclobencilaminas biciclicas como inhibidores de pi3k
WO2013173506A2 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method of treating muscular degradation
WO2013173720A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Incyte Corporation Piperidinylcyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as jak inhibitors
CA2876306C (en) 2012-06-15 2024-02-20 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated derivatives of ruxolitinib
SG11201408679XA (en) 2012-06-26 2015-01-29 Del Mar Pharmaceuticals Methods for treating tyrosine-kinase-inhibitor-resistant malignancies in patients with genetic polymorphisms or ahi1 dysregulations or mutations employing dianhydrogalactitol, diacetyldianhydrogalactitol, dibromodulcitol, or analogs or derivatives thereof
CA2879603A1 (en) * 2012-07-27 2014-01-30 Ratiopharm Gmbh Oral dosage forms for modified release comprising ruxolitinib
JP6276762B2 (ja) * 2012-08-02 2018-02-07 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ キナーゼ阻害剤として活性な置換ピロール類
US9593115B2 (en) 2012-09-21 2017-03-14 Advinus Therapeutics Ltd. Substituted fused tricyclic compounds, compositions, and medicinal applications thereof
CA2881070A1 (en) * 2012-10-26 2014-05-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
US9181271B2 (en) 2012-11-01 2015-11-10 Incyte Holdings Corporation Tricyclic fused thiophene derivatives as JAK inhibitors
PE20151157A1 (es) * 2012-11-15 2015-08-19 Incyte Corp Formas de dosificacion de ruxolitinib de liberacion sostenida
US9310374B2 (en) * 2012-11-16 2016-04-12 Redwood Bioscience, Inc. Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate
WO2014085154A1 (en) 2012-11-27 2014-06-05 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Methods for treating renal disease
KR20150090219A (ko) * 2012-12-06 2015-08-05 바루크 에스. 블럼버그 인스티튜트 Hbv 감염에 대항하여 항바이러스 물질로써 기능화된 벤자미드 유도체들
US9260426B2 (en) 2012-12-14 2016-02-16 Arrien Pharmaceuticals Llc Substituted 1H-pyrrolo [2, 3-b] pyridine and 1H-pyrazolo [3, 4-b] pyridine derivatives as salt inducible kinase 2 (SIK2) inhibitors
AU2014211489A1 (en) 2013-01-29 2015-08-13 Avexxin As Antiinflammatory and antitumor 2-oxothiazoles and 2-oxothiophenes compounds
CA2900529A1 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Institute For Myeloma & Bone Cancer Research Improved diagnostic, prognostic, and monitoring methods for multiple myeloma, chronic lymphocytic leukemia, and b-cell non-hodgkin lymphoma
WO2014126037A1 (ja) * 2013-02-12 2014-08-21 コニカミノルタ株式会社 有機エレクトロルミネッセンス素子及び照明装置
LT3489239T (lt) 2013-03-06 2022-03-10 Incyte Holdings Corporation Jak inhibitoriaus gamybos būdai ir tarpiniai junginiai
US20140343034A1 (en) 2013-04-25 2014-11-20 Japan Tobacco Inc. Skin barrier function improving agent
HRP20231048T1 (hr) 2013-05-17 2023-12-22 Incyte Holdings Corporation Derivati bipirazola kao jak inhibitori
UA120499C2 (uk) 2013-08-07 2019-12-26 Інсайт Корпорейшн Лікування захворювань із застосуванням лікарських форм з уповільненим вивільненням для інгібітора jak1
SG11201601119XA (en) * 2013-08-20 2016-03-30 Incyte Corp Survival benefit in patients with solid tumors with elevated c-reactive protein levels
WO2015048312A1 (en) 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
WO2015054283A1 (en) * 2013-10-08 2015-04-16 Calcimedica, Inc. Compounds that modulate intracellular calcium
WO2015057695A1 (en) * 2013-10-15 2015-04-23 Bohan Jin Novel compositions, uses and methods for their preparation
AU2014354821A1 (en) 2013-11-27 2016-05-26 Novartis Ag Combination therapy comprising an inhibitor of JAK, CDK and PIM
MA39092B1 (fr) 2013-12-05 2018-09-28 Pfizer Pyrrolo[2,3-d]pyrimidinyle, pyrrolo[2,3-b]pyrazinyle et pyrollo[2,3-d]pyridinyle acrylamides
JP6367545B2 (ja) * 2013-12-17 2018-08-01 コンサート ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ルキソリチニブの重水素化誘導体
KR102261733B1 (ko) * 2013-12-18 2021-06-04 콘서트 파마슈티컬즈, 인크. 룩소리티닙의 중수소화된 유도체
CN104725380B (zh) * 2013-12-18 2019-06-28 康塞特医药品有限公司 卢索替尼的氘代衍生物
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CR20160449A (es) * 2014-02-28 2016-12-20 Incyte Corp Inhibidores de la jak1 para el tratamiento de síndromes mielodisplásicos
ES2921874T3 (es) 2014-02-28 2022-09-01 Nimbus Lakshmi Inc Inhibidores de TYK2 y usos de los mismos
KR20240110004A (ko) 2014-03-14 2024-07-12 노파르티스 아게 Lag-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도
MA39984B1 (fr) 2014-04-08 2020-12-31 Incyte Corp Traitement d'affections malignes par lymphocytes b par un inhibiteur jak et pi3k combiné
MA39987A (fr) 2014-04-30 2017-03-08 Incyte Corp Procédés de préparation d'un inhibiteur de jak1 et nouvelles formes associées
RU2564891C1 (ru) * 2014-05-27 2015-10-10 Александр Александрович Кролевец Способ получения нанокапсул цитокининов
EP4233870A3 (en) * 2014-05-28 2024-01-24 Onco Tracker, Inc. Anti-cancer effects of jak2 inhibitors in combination with thalidomide derivatives and glucocorticoids
WO2015184305A1 (en) 2014-05-30 2015-12-03 Incyte Corporation TREATMENT OF CHRONIC NEUTROPHILIC LEUKEMIA (CNL) AND ATYPICAL CHRONIC MYELOID LEUKEMIA (aCML) BY INHIBITORS OF JAK1
CN105218548A (zh) * 2014-06-09 2016-01-06 上海海和药物研究开发有限公司 一种新型杂环化合物及其制备方法和作为激酶抑制剂的用途
WO2015191677A1 (en) 2014-06-11 2015-12-17 Incyte Corporation Bicyclic heteroarylaminoalkyl phenyl derivatives as pi3k inhibitors
NZ629796A (en) * 2014-07-14 2015-12-24 Signal Pharm Llc Amorphous form of 4-((4-(cyclopentyloxy)-5-(2-methylbenzo[d]oxazol-6-yl)-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-yl)amino)-3-methoxy-n-methylbenzamide, compositions thereof and methods of their use
KR20170024120A (ko) * 2014-07-14 2017-03-06 시그날 파마소티칼 엘엘씨 치환된 피롤로피리미딘 화합물을 사용한 암의 치료방법, 이의 조성물
GB201413695D0 (en) 2014-08-01 2014-09-17 Avexxin As Compound
EP3179992B1 (en) 2014-08-11 2022-05-11 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pd-1 inhibitor and/or a pd-l1 inhibitor
US20170224819A1 (en) 2014-08-11 2017-08-10 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor, a PI3K Inhibitor, a JAK-2 Inhibitor, and/or a CDK 4/6 Inhibitor
US20170231986A1 (en) 2014-08-11 2017-08-17 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor, a PI3K Inhibitor, a JAK-2 Inhibitor, and/or a BCL-2 Inhibitor
EP4578865A3 (en) 2014-08-12 2025-07-30 Monash University Lymph directing prodrugs
EP3183252B1 (en) * 2014-08-21 2021-05-12 ratiopharm GmbH Oxalate salt of ruxolitinib
ES2771926T3 (es) 2014-09-13 2020-07-07 Novartis Ag Terapias de combinación
CN105524067A (zh) * 2014-09-28 2016-04-27 江苏柯菲平医药股份有限公司 4-取代吡咯并[2,3-d]嘧啶化合物及其用途
JP2017535528A (ja) 2014-10-03 2017-11-30 ノバルティス アーゲー 組み合わせ治療
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
US9988452B2 (en) 2014-10-14 2018-06-05 Novartis Ag Antibody molecules to PD-L1 and uses thereof
WO2016063294A2 (en) * 2014-10-20 2016-04-28 Msn Laboratories Private Limited Process for the preparation of (r)-3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d], pyrimidin-4-yl)-1 h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile phosphate and its polymorphs thereof
CA3220466A1 (en) 2014-10-29 2016-05-06 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligands specific for mt1-mmp
GB2535427A (en) 2014-11-07 2016-08-24 Nicoventures Holdings Ltd Solution
CZ2014773A3 (cs) 2014-11-10 2016-05-18 Zentiva, K.S. Soli (3R)-3-cyklopentyl-3-[4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)pyrazol-1-yl]propannitrilu
CN105777754B (zh) * 2014-12-16 2019-07-26 北京赛林泰医药技术有限公司 吡咯并嘧啶化合物
PH12017501538B1 (en) 2015-02-27 2024-02-14 Incyte Holdings Corp Salts of p13k inhibitor and processes for their preparation
ES2930585T3 (es) 2015-02-27 2022-12-19 Nimbus Lakshmi Inc Inhibidores de TYK2 y usos de los mismos
JP6692826B2 (ja) 2015-03-10 2020-05-13 アドゥロ バイオテック，インク． 「インターフェロン遺伝子刺激因子」依存性シグナル伝達の活性化のための組成物及び方法
KR101859170B1 (ko) * 2015-04-17 2018-05-17 광주과학기술원 트리아졸 화합물 및 이의 용도
EP3290418B1 (en) * 2015-04-29 2019-05-15 Wuxi Fortune Pharmaceutical Co., Ltd Janus kinase (jak) inhibitors
US9988401B2 (en) 2015-05-11 2018-06-05 Incyte Corporation Crystalline forms of a PI3K inhibitor
US9840503B2 (en) 2015-05-11 2017-12-12 Incyte Corporation Heterocyclic compounds and uses thereof
US9732097B2 (en) 2015-05-11 2017-08-15 Incyte Corporation Process for the synthesis of a phosphoinositide 3-kinase inhibitor
WO2017004134A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Nimbus Iris, Inc. Irak inhibitors and uses thereof
CZ2015496A3 (cs) 2015-07-14 2017-01-25 Zentiva, K.S. Krystalické formy solí (3R)-3-cyklopentyl-3-[4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)pyrazol-1-yl]propannitrilu a jejich příprava
WO2017011720A1 (en) * 2015-07-16 2017-01-19 Signal Pharmaceuticals, Llc Solod forms 4-((4-(cyclopentyloxy)-5-(2-methylbenzo[d] oxazol-6-yl)17h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-yl)amino)-3-methoxy-n-methylbenzamide, compositions thereof and methods of their use
WO2017019894A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
EP3878465A1 (en) 2015-07-29 2021-09-15 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
CN108025051B (zh) 2015-07-29 2021-12-24 诺华股份有限公司 包含抗pd-1抗体分子的联合疗法
CN108348774A (zh) 2015-08-03 2018-07-31 哈佛大学校长及研究员协会 带电离子通道阻断剂及其应用
US9708333B2 (en) 2015-08-12 2017-07-18 Incyte Corporation Fused bicyclic 1,2,4-triazine compounds as TAM inhibitors
WO2017035366A1 (en) 2015-08-26 2017-03-02 Incyte Corporation Pyrrolopyrimidine derivatives as tam inhibitors
US10023571B2 (en) 2015-09-02 2018-07-17 Nimbus Lakshimi, Inc. TYK2 inhibitors and uses thereof
CN108137482B (zh) 2015-09-08 2024-03-15 莫纳什大学 定向淋巴的前药
WO2017044720A1 (en) 2015-09-11 2017-03-16 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Rapamycin analogs and uses thereof
GB2542838B (en) 2015-10-01 2022-01-12 Nicoventures Trading Ltd Aerosol provision system
SI3364958T1 (sl) 2015-10-23 2023-05-31 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Modulatorji interakcije sestrina in gator2 ter njihova uporaba
HRP20220436T1 (hr) 2015-11-03 2022-05-27 Janssen Biotech, Inc. Protutijela koja se specifično vežu na pd-1 i njihove uporabe
SI3371190T1 (sl) 2015-11-06 2022-08-31 Incyte Corporation Heterociklične spojine kot inhibitorji PI3K gama
AU2016354009B2 (en) 2015-11-09 2021-05-20 R.P. Scherer Technologies, Llc Anti-CD22 antibody-maytansine conjugates and methods of use thereof
RU2601410C1 (ru) * 2015-11-13 2016-11-10 ЗАО "Р-Фарм" {3-[(7H-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИН-4-ИЛ)АЗОЛИЛ]АЗЕТИДИН-3-ИЛ}АЦЕТОНИТРИЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ЯНУС КИНАЗ
WO2017106352A1 (en) 2015-12-14 2017-06-22 Raze Therapeutics, Inc. Caffeine inhibitors of mthfd2 and uses thereof
CN108368115B (zh) * 2015-12-15 2020-01-03 正大天晴药业集团股份有限公司 吡咯并嘧啶化合物的盐
CA3007671A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Novartis Ag Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
CA3007421A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Novartis Ag Combination of c-met inhibitor with antibody molecule to pd-1 and uses thereof
US9630968B1 (en) 2015-12-23 2017-04-25 Arqule, Inc. Tetrahydropyranyl amino-pyrrolopyrimidinone and methods of use thereof
CN111763209B (zh) 2015-12-31 2021-12-03 正大天晴药业集团股份有限公司 一种芦可替尼的合成工艺
US11698369B2 (en) 2016-01-12 2023-07-11 Oncotracker, Inc. Methods for monitoring immune status of a subject
CZ201629A3 (cs) 2016-01-22 2017-08-02 Zentiva, K.S. Krystalické modifikace solí (3R)-3-cyklopentyl-3-[4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)pyrazol-1-yl]propannitrilu a způsoby jejich přípravy
US10822339B2 (en) 2016-01-26 2020-11-03 Hangzhou Huadong Medicine Group Biopharmaceutical Co. Ltd Pyrrolopyrimidine five-membered azacyclic derivative and application thereof
CN105541891B (zh) * 2016-02-04 2017-11-28 东南大学 巴瑞替尼的中间体及其制备方法及由该中间体制备巴瑞替尼的方法
PL3426243T3 (pl) 2016-03-09 2021-10-04 Raze Therapeutics, Inc. Inhibitory dehydrogenazy 3-fosfoglicerynianowej i ich zastosowania
EP4234552A3 (en) 2016-03-09 2023-10-18 Raze Therapeutics, Inc. 3-phosphoglycerate dehydrogenase inhibitors and uses thereof
GB201604318D0 (en) 2016-03-14 2016-04-27 Avexxin As Combination therapy
PT3436461T (pt) 2016-03-28 2024-01-23 Incyte Corp Compostos de pirrolotriazina como inibidores de tam
WO2017177230A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
CA3022519A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Concert Pharmaceuticals, Inc. Treatment of hair loss disorders with deuterated jak inhibitors
CN119367364A (zh) 2016-06-01 2025-01-28 拜耳动物保健有限责任公司 用于治疗和预防动物的过敏性和/或炎症性疾病的取代吲唑
CN107513067A (zh) * 2016-06-16 2017-12-26 北京赛林泰医药技术有限公司 含有取代环戊基的吡咯并嘧啶化合物
CN107513069A (zh) * 2016-06-16 2017-12-26 正大天晴药业集团股份有限公司 手性吡咯并嘧啶化合物的制备方法
CN107759600A (zh) * 2016-06-16 2018-03-06 正大天晴药业集团股份有限公司 作为jak抑制剂的吡咯并嘧啶化合物的结晶
CA3027500A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CN109640988A (zh) 2016-06-21 2019-04-16 X4 制药有限公司 Cxcr4抑制剂及其用途
EP3808748A1 (en) 2016-06-21 2021-04-21 X4 Pharmaceuticals, Inc. Substituted piperidines as cxcr4-inhibitors
CN109311896B (zh) 2016-06-30 2021-08-24 株式会社大熊制药 吡唑并嘧啶衍生物作为激酶抑制剂
US11098077B2 (en) 2016-07-05 2021-08-24 Chinook Therapeutics, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
EP3492468B1 (en) * 2016-07-26 2022-02-23 Suzhou Longbiotech Pharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic compound as jak inhibitor, and salts and therapeutic use thereof
BR112019003504A2 (pt) 2016-08-24 2019-05-21 Arqule, Inc. compostos de amino-pirrolopirimidinona e métodos de uso dos mesmos
JOP20190024A1 (ar) 2016-08-26 2019-02-19 Gilead Sciences Inc مركبات بيروليزين بها استبدال واستخداماتها
IT201600092051A1 (it) * 2016-09-13 2018-03-13 Alessandro Antonelli Composto medicale per il trattamento di tumori della tiroide
TWI825663B (zh) 2016-10-14 2023-12-11 美商林伯士拉克許米公司 Tyk2抑制劑及其用途
EP3528816A4 (en) 2016-10-21 2020-04-08 Nimbus Lakshmi, Inc. TYK2 INHIBITORS AND USES THEREOF
WO2018089499A1 (en) 2016-11-08 2018-05-17 Navitor Pharmaceuticals, Inc. PHENYL AMINO PIPERIDINE mTORC INHIBITORS AND USES THEREOF
JP2019535839A (ja) 2016-11-29 2019-12-12 ピュアテック ヘルス エルエルシー 治療剤の送達のためのエクソソーム
WO2018106636A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Raze Therapeutics, Inc. Shmt inhibitors and uses thereof
RU2644155C1 (ru) * 2016-12-12 2018-02-08 Закрытое акционерное общество "Р-Фарм" (ЗАО "Р-Фарм") 2-(3-(4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил)-1-(этилсульфонил)азетидин-3-ил)ацетонитрила геминафтилдисульфонат в качестве ингибитора Янус киназ
US11730819B2 (en) 2016-12-23 2023-08-22 Bicycletx Limited Peptide derivatives having novel linkage structures
EP3565638B8 (en) 2017-01-06 2024-04-10 BicycleRD Limited Bicycle conjugate for treating cancer
EA039352B1 (ru) * 2017-01-19 2022-01-17 Сучжоу Лонгбайотек Фармасьютикалз Ко., Лтд. Соединение в качестве селективного ингибитора jak и его соли и терапевтическое применение
US10336752B2 (en) 2017-03-08 2019-07-02 Nimbus Lakshmi, Inc. TYK2 inhibitors, uses, and methods for production thereof
EP3375784A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aza-dihydro-acridone derivatives
EP3375778A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aryl-piperidine derivatives
WO2018191146A1 (en) 2017-04-10 2018-10-18 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl rheb inhibitors and uses thereof
JOP20180036A1 (ar) 2017-04-18 2019-01-30 Vifor Int Ag أملاح لمثبطات فروبورتين جديدة
WO2018200625A1 (en) 2017-04-26 2018-11-01 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Modulators of sestrin-gator2 interaction and uses thereof
EP3615550A1 (en) 2017-04-27 2020-03-04 BicycleTx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
JP2020520955A (ja) 2017-05-23 2020-07-16 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ヤヌスキナーゼ阻害剤のグルクロニドプロドラッグ
US11635435B2 (en) 2017-06-13 2023-04-25 Oncotracker, Inc. Diagnostic, prognostic, and monitoring methods for solid tumor cancers
EP3641812A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3645549A1 (en) 2017-06-26 2020-05-06 BicycleRD Limited Bicyclic peptide ligands with detectable moieties and uses thereof
CN107298680A (zh) * 2017-07-12 2017-10-27 海门华祥医药科技有限公司 一种4‑氯‑7‑氮杂吲哚的生产工艺
MY205416A (en) 2017-07-28 2024-10-21 Takeda Pharmaceuticals Co Tyk2 inhibitors and uses thereof
US11261214B2 (en) 2017-08-04 2022-03-01 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligand specific for CD137
US20200291096A1 (en) 2017-08-14 2020-09-17 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
EP3668550A1 (en) 2017-08-14 2020-06-24 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand prr-a conjugates and uses thereof
US11883497B2 (en) 2017-08-29 2024-01-30 Puretech Lyt, Inc. Lymphatic system-directing lipid prodrugs
EP4306524A3 (en) 2017-08-29 2024-09-11 PureTech LYT, Inc. Lymphatic system-directing lipid prodrugs
EP3684366A4 (en) 2017-09-22 2021-09-08 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES OF THE LATEST
EP3684365A4 (en) 2017-09-22 2021-09-08 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADATION AGENTS AND USES OF SUCH
US10633387B2 (en) 2017-09-27 2020-04-28 Incyte Corporation Salts of TAM inhibitors
CN109651424B (zh) * 2017-10-11 2021-01-22 新发药业有限公司 一种7-保护基-4-(1-氢-吡唑-4-基)吡咯[2,3-d]嘧啶的合成方法
US10800775B2 (en) 2017-11-03 2020-10-13 Aclaris Therapeutics, Inc. Pyrazolyl pyrrolo[2,3-b]pyrmidine-5-carboxylate analogs and methods of making the same
SG11202002947TA (en) 2017-11-03 2020-04-29 Aclaris Therapeutics Inc Substituted pyrrolopyrimidine jak inhibitors and methods of making and using the same
KR102034538B1 (ko) 2017-11-28 2019-10-21 주식회사한국파마 Jak 저해제 화합물, 및 이의 제조방법
WO2019113487A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
US11608345B1 (en) 2017-12-19 2023-03-21 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of rapamycin and its analogs and uses thereof
TWI825046B (zh) 2017-12-19 2023-12-11 英商拜西可泰克斯有限公司 Epha2特用之雙環胜肽配位基
US11304954B2 (en) 2017-12-19 2022-04-19 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of mycophenolic acid and uses thereof
EP3727362A4 (en) 2017-12-19 2021-10-06 PureTech LYT, Inc. MYCOPHENOLIC ACID LIPID MEDICINAL PRODUCTS AND THEIR USES
GB201721265D0 (en) 2017-12-19 2018-01-31 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for EphA2
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADATION AGENTS AND ASSOCIATED USES
EP3737675A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. Crbn ligands and uses thereof
US12398209B2 (en) 2018-01-22 2025-08-26 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers with antagonistic anti-PD-1 antibodies
US10793563B2 (en) 2018-01-29 2020-10-06 Merck Patent Gmbh GCN2 inhibitors and uses thereof
KR20200116481A (ko) 2018-01-29 2020-10-12 메르크 파텐트 게엠베하 Gcn2 억제제 및 이의 용도
IL276302B2 (en) 2018-01-30 2023-11-01 Incyte Corp Procedures for preparing [1-(3-fluoro-2-(trifluoromethyl(isonicotinyl}piperidine-4-one)
CN118490690A (zh) 2018-02-16 2024-08-16 因赛特公司 用于治疗细胞因子相关的病症的jak1通路抑制剂
MX2020008791A (es) 2018-02-23 2021-01-08 Bicycletx Ltd Ligandos de peptidos biciclicos multimericos.
JP7050165B2 (ja) 2018-02-26 2022-04-07 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｂｖ複製阻害剤としての置換ピロリジン化合物
CN117304157A (zh) 2018-02-27 2023-12-29 阿塔克斯生物制药有限公司 作为tcr-nck相互作用的抑制剂的色烯衍生物
CN118161607A (zh) 2018-03-08 2024-06-11 诺华股份有限公司 抗p-选择素抗体的用途
CN110357887B (zh) * 2018-03-26 2022-09-16 武汉誉祥医药科技有限公司 取代的7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物及其制备方法和用途
SMT202400306T1 (it) 2018-03-30 2024-09-16 Incyte Corp Trattamento dell'idrosadenite suppurativa utilizzando inibitori di jak.
US11584961B2 (en) 2018-03-30 2023-02-21 Incyte Corporation Biomarkers for inflammatory skin disease
AU2019252259A1 (en) 2018-04-13 2020-12-03 Incyte Corporation Biomarkers for graft-versus-host disease
IL301501B2 (en) 2018-04-24 2024-10-01 Vertex Pharma Antiproliferation compounds and uses thereof
ES2969982T3 (es) 2018-04-24 2024-05-23 Vertex Pharma Compuestos de pteridinona y usos de los mismos
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CN112469418A (zh) 2018-06-01 2021-03-09 因赛特公司 治疗pi3k相关病症的给药方案
US12065441B2 (en) 2018-06-06 2024-08-20 Gengle Therapeutics, Inc. Pyrazolopyrimidine derivative, use thereof and pharmaceutical composition
EA202092692A1 (ru) 2018-06-15 2021-04-21 Навитор Фармасьютикалз, Инк. Аналоги рапамицина и их применения
IL279489B2 (en) 2018-06-22 2025-10-01 Bicycletx Ltd Bicyclic peptide ligands specific for nectin-4, a drug conjugate containing the peptide ligands and a pharmaceutical composition containing the drug conjugate
GB201810316D0 (en) 2018-06-22 2018-08-08 Bicyclerd Ltd Peptide ligands for binding to EphA2
SI3813800T1 (sl) 2018-06-29 2025-07-31 Incyte Corporation Formulacije zaviralca axl/mer
JP6830460B2 (ja) * 2018-07-05 2021-02-17 コンサート ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ルキソリチニブの重水素化誘導体
EP3817822A4 (en) 2018-07-06 2022-07-27 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
WO2020010177A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic crbn ligands and uses thereof
CA3224985A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Loxo Oncology, Inc. Spray-dried dispersions, formulations, and polymorphs of (s)-5-amino-3-(4-((5-fluoro-2-methoxybenzamido)methyl)phenyl)-1-(1,1,1-trifluoropropan-2-yl)-1h-pyrazole-4-carboxamide
BR112021002479A2 (pt) 2018-08-10 2021-07-27 Aclaris Therapeutics, Inc. composto, composição farmacêutica, método para inibir a atividade de itk ou jak3 em uma população de células, método para tratar um distúrbio mediado por itk ou jak3 em um indivíduo necessitando do mesmo e uso de um composto
WO2020039401A1 (en) 2018-08-24 2020-02-27 Novartis Ag Treatment comprising il-1βeta binding antibodies and combinations thereof
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
EP3846793B1 (en) 2018-09-07 2024-01-24 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
CN113271940A (zh) 2018-10-15 2021-08-17 林伯士拉克许米公司 Tyk2抑制剂和其用途
WO2020084305A1 (en) 2018-10-23 2020-04-30 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
EP3870158A4 (en) 2018-10-24 2022-08-10 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
CN113490484B (zh) 2018-10-31 2024-08-23 因赛特公司 治疗血液疾病的组合疗法
CN113271938A (zh) 2018-11-30 2021-08-17 林伯士拉克许米公司 Tyk2抑制剂和其用途
SG11202105424PA (en) 2018-11-30 2021-06-29 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
CN109394768B (zh) * 2018-12-10 2019-08-23 牡丹江医学院 一种治疗湿疹的药物及其制备方法
GB201820288D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicycle Tx Ltd Bicycle peptide ligaands specific for MT1-MMP
GB201820325D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for psma
CN111320633B (zh) * 2018-12-14 2022-09-27 中国医药研究开发中心有限公司 吡咯/咪唑并六元杂芳环类化合物及其制备方法和医药用途
CN113490666A (zh) 2018-12-19 2021-10-08 奥瑞生物药品公司 作为fgfr酪氨酸激酶的抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
EP3898615A1 (en) 2018-12-19 2021-10-27 Array Biopharma, Inc. 7-((3,5-dimethoxyphenyl)amino)quinoxaline derivatives as fgfr inhibitors for treating cancer
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
EP3903828A4 (en) 2018-12-21 2022-10-05 Daiichi Sankyo Company, Limited ANTIBODY-DRUG CONJUGATE AND KINAS INHIBITOR COMBINATION
WO2020154474A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Nimbus Lakshmi, Inc. Tyk2 inhibitors and uses thereof
WO2020165600A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
CN111620873B (zh) * 2019-02-28 2021-12-28 沈阳药科大学 一类含哌啶的吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物及其制备和用途
KR20210137087A (ko) 2019-03-05 2021-11-17 인사이트 코포레이션 만성 폐 동종이식 기능장애의 치료를 위한 jak1 경로 억제제
US10780083B1 (en) 2019-03-11 2020-09-22 Nocion Therapeutics, Inc. Charged ion channel blockers and methods for use
US10828287B2 (en) 2019-03-11 2020-11-10 Nocion Therapeutics, Inc. Charged ion channel blockers and methods for use
WO2020185928A1 (en) 2019-03-11 2020-09-17 Nocion Therapeutics, Inc. Charged ion channel blockers and methods for use
KR20210143791A (ko) 2019-03-11 2021-11-29 녹시온 테라퓨틱스 인코포레이티드 하전된 이온 채널 차단제 및 사용 방법
JP7630439B2 (ja) 2019-03-11 2025-02-17 ノシオン セラピューティクス，インコーポレイテッド エステル置換イオンチャンネル遮断薬および使用方法
TW202102222A (zh) 2019-03-19 2021-01-16 美商英塞特公司 白斑病之生物標記物
AU2020242287A1 (en) 2019-03-21 2021-09-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A Dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
US20220184222A1 (en) 2019-04-02 2022-06-16 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
SG11202110829YA (en) 2019-04-05 2021-10-28 Kymera Therapeutics Inc Stat degraders and uses thereof
AU2020262100B2 (en) 2019-04-24 2023-03-16 Elanco Us Inc. A 7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine JAK-inhibitor
CN113727975A (zh) 2019-05-02 2021-11-30 阿克拉瑞斯治疗股份有限公司 作为jak抑制剂的被取代的吡咯并吡啶
KR102286372B1 (ko) 2019-05-27 2021-08-05 주식회사한국파마 Jak 저해제 화합물, 및 이를 포함하는 의약 조성물
CN110028509B (zh) * 2019-05-27 2020-10-09 上海勋和医药科技有限公司 作为选择性jak2抑制剂的吡咯并嘧啶类化合物、其合成方法及用途
CA3141571A1 (en) * 2019-05-28 2020-12-03 Mankind Pharma Ltd. 1h-imidazo[4,5-b]pyridin-2(3h)-one compounds and derivatives for inhibition of janus kinase 1
TW202108559A (zh) 2019-05-31 2021-03-01 美商醫肯納腫瘤學公司 Tead抑制劑及其用途
TW202112377A (zh) 2019-06-10 2021-04-01 美商英塞特公司 藉由jak抑制劑局部治療白斑症
PH12021553254A1 (en) 2019-06-27 2022-09-19 Crispr Therapeutics Ag Use of chimeric antigen receptor t cells and nk cell inhibitors for treating cancer
CN110305140B (zh) 2019-07-30 2020-08-04 上海勋和医药科技有限公司 二氢吡咯并嘧啶类选择性jak2抑制剂
TWI860386B (zh) 2019-07-30 2024-11-01 英商拜西可泰克斯有限公司 異質雙環肽複合物
WO2021022178A1 (en) * 2019-07-31 2021-02-04 Aclaris Therapeutics, Inc. Substituted sulfonamide pyrrolopyridines as jak inhibitors
US20220251097A1 (en) * 2019-08-01 2022-08-11 St. Jude Childrens's Research Hospital Molecules and methods related to treatment of uncontrolled cellular proliferation
AU2020345962A1 (en) 2019-09-11 2022-03-31 Vincere Biosciences, Inc. USP30 inhibitors and uses thereof
EP4027995A4 (en) 2019-09-13 2023-08-23 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 ANTAGONISTS AND THEIR APPLICATIONS
WO2021053490A1 (en) 2019-09-16 2021-03-25 Novartis Ag Use of high-affinity, ligand-blocking, humanized anti-t-cell immunoglobulin domain and mucin domain-3 (tim-3) igg4 antibody for the treatment of myelofibrosis
TW202123941A (zh) 2019-09-16 2021-07-01 瑞士商諾華公司 Ｍｄｍ２抑制劑用於治療骨髓纖維化之用途
EP4031578A1 (en) 2019-09-18 2022-07-27 Novartis AG Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
US20220372135A1 (en) 2019-09-27 2022-11-24 Disc Medicine, Inc. Methods for treating myelofibrosis and related conditions
CN110538183B (zh) * 2019-10-09 2021-05-04 吉林大学 一种预防和治疗小儿湿疹的组合物及其制备方法
US12360120B2 (en) 2019-10-10 2025-07-15 Incyte Corporation Biomarkers for graft-versus-host disease
US12203942B2 (en) 2019-10-10 2025-01-21 Incyte Corporation Biomarkers for graft-versus-host disease
WO2021076124A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Incyte Corporation Use of jak1 inhibitors for the treatment of cutaneous lupus erythematosus and lichen planus (lp)
US11992490B2 (en) 2019-10-16 2024-05-28 Incyte Corporation Use of JAK1 inhibitors for the treatment of cutaneous lupus erythematosus and Lichen planus (LP)
TWI870497B (zh) 2019-11-01 2025-01-21 美商奈維特製藥公司 使用mtorc1調節劑的治療方法
US10842798B1 (en) 2019-11-06 2020-11-24 Nocion Therapeutics, Inc. Charged ion channel blockers and methods for use
JP7513713B2 (ja) 2019-11-06 2024-07-09 ノシオン セラピューティクス，インコーポレイテッド 荷電したイオンチャンネル遮断薬および使用方法
KR20220098759A (ko) 2019-11-08 2022-07-12 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) 키나제 억제제에 대해 내성을 획득한 암의 치료 방법
CR20220280A (es) 2019-11-22 2022-09-02 Incyte Corp Terapia de combinación que comprende un inhibidor de alk2 y un inhibidor de jak2
AU2020397938A1 (en) 2019-12-05 2022-06-23 Janssen Pharmaceutica Nv Rapamycin analogs and uses thereof
EP4076524A4 (en) 2019-12-17 2023-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
MX2022007576A (es) 2019-12-17 2022-09-23 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de cinasas asociadas al receptor de interleucina-1 (irak) y usos de los mismos.
IL294150A (en) 2019-12-23 2022-08-01 Kymera Therapeutics Inc Smarca joints and their uses
CA3166630A1 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Berg Llc Polycyclic amides as ube2k modulators for treating cancer
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
JP2023514147A (ja) 2020-02-05 2023-04-05 ピュアテック・エル・ワイ・ティ・インコーポレイテッド 神経ステロイドの脂質プロドラッグ
CN111728975A (zh) * 2020-02-25 2020-10-02 广东省检迅检测科技有限公司 用于减少运动损伤和促进运动损伤修复的组合物
AU2021230289A1 (en) 2020-03-03 2022-09-29 PIC Therapeutics, Inc. eIF4E inhibitors and uses thereof
JP2023516441A (ja) 2020-03-06 2023-04-19 インサイト・コーポレイション Ａｘｌ／ｍｅｒ阻害剤及びｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤を含む併用療法
US12162851B2 (en) 2020-03-11 2024-12-10 Nocion Therapeutics, Inc. Charged ion channel blockers and methods for use
CN119118953A (zh) 2020-03-11 2024-12-13 诺西恩医疗公司 带电的离子通道阻滞剂及其使用方法
MX2022011602A (es) 2020-03-19 2023-01-04 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la proteína de homólogo de ratón de minuto 2 (mdm2) y usos de los mismos.
US11324750B2 (en) 2020-04-09 2022-05-10 Children's Hospital Medical Center Compositions and methods for the treatment of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) infection
EP3892280A3 (en) 2020-04-09 2022-01-12 Children's Hospital Medical Center Sars-cov-2 infection biomarkers and uses thereof
WO2021206766A1 (en) 2020-04-09 2021-10-14 Children's Hospital Medical Center Sars-cov-2 infection biomarkers and uses thereof
WO2021209563A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
IL297437A (en) 2020-05-13 2022-12-01 Disc Medicine Inc Anti-hemojuvelin (hjv) antibodies for treating myelofibrosis
WO2021236139A1 (en) 2020-05-21 2021-11-25 Concert Pharmaceuticals, Inc. Novel deuterated jak inhibitor and uses thereof
PE20231102A1 (es) 2020-06-02 2023-07-19 Incyte Corp Procesos para preparar un inhibidor de jak1
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
WO2021247064A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Incyte Corporation Combination of ruxolitinib with incb057643 for treatment of myeloproliferative neoplasms
US11833155B2 (en) 2020-06-03 2023-12-05 Incyte Corporation Combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
EP4161521A4 (en) 2020-06-03 2024-07-10 Kymera Therapeutics, Inc. DEUTERED IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
CN116057045A (zh) 2020-06-05 2023-05-02 金耐特生物制药公司 成纤维细胞生长因子受体激酶抑制剂
WO2021260657A1 (en) 2020-06-26 2021-12-30 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
EP3944859A1 (en) 2020-07-30 2022-02-02 Assistance Publique Hôpitaux de Paris Method for treating immune toxicities induced by immune checkpoint inhibitors
US11751108B2 (en) * 2020-08-05 2023-09-05 Qualcomm Incorporated Execution of reduced signaling handover
EP4196481A1 (en) * 2020-08-12 2023-06-21 Concert Pharmaceuticals Inc. Process for preparing enantiomerically enriched jak inhibitors
EP4196792A1 (en) 2020-08-17 2023-06-21 BicycleTX Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
AU2021329301A1 (en) 2020-08-18 2023-04-13 Incyte Corporation Process and intermediates for preparing a JAK1 inhibitor
KR20230096973A (ko) 2020-08-18 2023-06-30 인사이트 코포레이션 Jak 저해제를 제조하기 위한 방법 및 중간체
US20230364095A1 (en) 2020-09-16 2023-11-16 Incyte Corporation Topical treatment of vitiligo
KR102673031B1 (ko) * 2020-09-16 2024-06-07 주식회사 엑세쏘바이오파마 피리미도 피리미디논 화합물 및 그를 포함하는 약제학적 조성물
US20230414620A1 (en) 2020-10-02 2023-12-28 Incyte Corporation Topical ruxolitinib for treating lichen planus
WO2022074599A1 (en) 2020-10-08 2022-04-14 Novartis Ag Use of an erk inhibitor for the treatment of myelofibrosis
WO2022074600A1 (en) 2020-10-08 2022-04-14 Novartis Ag Use of an erk inhibitor for the treatment of myelofibrosis
EP4232425A4 (en) 2020-10-23 2024-07-24 Nimbus Clotho, Inc. Ctps1 inhibitors and uses thereof
CN114437079B (zh) * 2020-10-30 2024-11-01 杭州邦顺制药有限公司 吡咯嘧啶五元氮杂环化合物的晶型
KR102551758B1 (ko) 2020-11-30 2023-07-05 주식회사한국파마 신규한 jak 특이 저해제 화합물, 및 이의 제조방법
CA3200814A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Alfredo C. Castro Tead inhibitors and uses thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
MD4255442T2 (ro) 2020-12-04 2025-08-31 Incyte Corp Inhibitor al JAK cu un analog al vitaminei D pentru tratamentul bolilor de piele
US11957661B2 (en) 2020-12-08 2024-04-16 Incyte Corporation JAK1 pathway inhibitors for the treatment of vitiligo
JP2023554665A (ja) 2020-12-18 2023-12-28 ベーリンガー インゲルハイム アニマル ヘルス ユーエスエイ インコーポレイテッド ホウ素含有ピラゾール化合物、それらを含む組成物、それらの方法及び使用
AU2021413371A1 (en) 2020-12-30 2023-07-13 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
CA3207859A1 (en) 2021-01-11 2022-07-14 Incyte Corporation Combination therapy comprising jak pathway inhibitor and rock inhibitor
US20240174662A1 (en) * 2021-02-01 2024-05-30 Janssen Biotech, Inc. Small molecule inhibitors of salt inducible kinases
CN117098757A (zh) 2021-02-02 2023-11-21 里米诺生物科学有限公司 Gpr84拮抗剂和其用途
AU2022215844A1 (en) 2021-02-02 2023-09-14 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
TW202245774A (zh) * 2021-02-05 2022-12-01 大陸商上海齊魯製藥研究中心有限公司 嘧啶或吡啶並雜環類腺苷受體抑制劑及其製備方法和用途
CN117120090A (zh) 2021-02-12 2023-11-24 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
AU2022220869A1 (en) 2021-02-15 2023-08-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak4 degraders and uses thereof
AU2022220043A1 (en) 2021-02-15 2023-08-31 Kymera Therapeutics, Inc. Irak4 degraders and uses thereof
EP4297750A1 (en) 2021-02-25 2024-01-03 Impact Biomedicines, Inc. Use of a bet inhibitor alone or in combination with fedratinib or ruxolitinib for treating a hematological malignancy such as myelofibrosis
US11926625B2 (en) 2021-03-05 2024-03-12 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
EP4313989A4 (en) 2021-03-29 2025-03-05 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 ANTAGONISTS AND USES THEREOF
EP4319756A4 (en) 2021-04-09 2025-02-26 Nimbus Clio, Inc. CBL-B MODULATORS AND USES THEREOF
JP2024514879A (ja) 2021-04-16 2024-04-03 イケナ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｅｋ阻害剤及びその使用
IL308216A (en) 2021-05-03 2024-01-01 Incyte Corp Jak1 pathway inhibitors for the treatment of prurigo nodularis
US12097261B2 (en) 2021-05-07 2024-09-24 Kymera Therapeutics, Inc. CDK2 degraders and uses thereof
CN118317946A (zh) 2021-07-12 2024-07-09 因赛特公司 用于制备巴瑞替尼的方法和中间体
EP4384175A1 (en) 2021-08-11 2024-06-19 Sun Pharmaceutical Industries, Inc. Treatment of hair loss disorders with deuterated jak inhibitors
CA3229560A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 Christopher L. Vandeusen Eif4e inhibitors and uses thereof
JP2024532276A (ja) 2021-08-25 2024-09-05 ピク セラピューティクス， インコーポレイテッド ｅＩＦ４Ｅ阻害剤及びその使用
KR102718345B1 (ko) * 2021-09-16 2024-10-17 광주과학기술원 신규한 트리아졸릴피롤로피리미딘 유도체 및 이의 용도
CA3231996A1 (en) * 2021-09-18 2023-03-23 Satya Srinivas HANUMARA An improved process for the preparation of ruxolitinib phosphate
CN119013277A (zh) 2021-10-25 2024-11-22 凯麦拉医疗公司 Tyk2降解剂和其用途
CN118302168A (zh) 2021-10-29 2024-07-05 凯麦拉医疗公司 Irak4降解剂和其制备
AU2022394559A1 (en) 2021-11-17 2024-05-09 Altrubio Inc. Methods of using anti-psgl-1 antibodies in combination with jak inhibitors to treat t-cell mediated inflammatory diseases or cancers
WO2023102559A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Incyte Corporation Topical formulations of ruxolitinib with an organic amine ph adjusting agent for treatment of skin diseases
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
CN114044777B (zh) * 2022-01-10 2022-04-19 南京佰麦生物技术有限公司 一种磷酸芦可替尼的制备方法
EP4472967A2 (en) 2022-01-31 2024-12-11 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
CN114456181A (zh) * 2022-02-21 2022-05-10 浙江乐普药业股份有限公司 一种芦可替尼的制备方法
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023230205A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
CN119677746A (zh) * 2022-06-14 2025-03-21 因赛特公司 Jak抑制剂的固体形式和其制备方法
CN117384163A (zh) * 2022-07-05 2024-01-12 盛世泰科生物医药技术(苏州)股份有限公司 一种含偕二氟基的化合物及其制备方法和用途
IL318576A (en) 2022-08-02 2025-03-01 Liminal Biosciences Ltd Pyridoxine-substituted GPR84 antagonists and their uses
KR20250057800A (ko) 2022-08-02 2025-04-29 리미널 바이오사이언시스 리미티드 헤테로아릴 카복스아마이드 및 관련 gpr84 길항제 및 이의 용도
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
EP4565213A1 (en) 2022-08-03 2025-06-11 Medichem, S.A. Stable oral pharmaceutical formulation containing ruxolitinib hemifumarate
US20250215003A1 (en) * 2022-08-22 2025-07-03 Granules India Limited An improved process for the preparation of ruxolitinib
US20240166654A1 (en) * 2022-11-11 2024-05-23 Zhejiang Ausun Pharmaceutical Co., Ltd. Ruxolitinib crystal and pharmaceutical composition thereof
US20240208961A1 (en) 2022-11-22 2024-06-27 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
WO2024184926A1 (en) * 2023-03-08 2024-09-12 Aarti Pharmalabs Limited Process for preparation of chiral ruxolitinib and salts thereof
WO2024187416A1 (en) * 2023-03-15 2024-09-19 Zhejiang Qizheng Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising ruxolitinib
WO2024187415A1 (en) * 2023-03-15 2024-09-19 Zhejiang Qizheng Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising ruxolitinib
WO2024243225A1 (en) 2023-05-21 2024-11-28 Incyte Corporation Topical ruxolitinib foam
WO2024264017A2 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
EP4491175A1 (en) 2023-07-10 2025-01-15 Genepharm S.A. A solid oral composition of ruxolitinib
AU2024335978A1 (en) 2023-09-04 2025-10-30 Granules India Limited Improved process for the preparation of ruxolitinib and novel crystalline form thereof
IT202300018879A1 (it) 2023-09-14 2025-03-14 Chemelectiva S R L Processo enzimatico per la preparazione di (r)-3-(4-bromo-1h-pirazol-1-il)-3- ciclopentilpropanenitrile, quale intermedio nella sintesi di ruxolitinib
TW202529769A (zh) 2023-09-21 2025-08-01 日商武田藥品工業股份有限公司 Ｔｙｋ２抑制劑及其用途
US12364699B2 (en) 2023-10-10 2025-07-22 Sun Pharmaceuticals Industries, Inc. Method of treating hair loss disorders
WO2025117642A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 Incyte Corporation Ruxolitinib for treating hidradenitis suppurativa (hs)
EP4621803A1 (en) 2024-03-22 2025-09-24 Assistance Publique - Hôpitaux de Paris Method for identifying patients in need for ici-induced myotoxicity treatment
WO2025207818A1 (en) * 2024-03-27 2025-10-02 Gilead Sciences, Inc. Small molecule modulators of stat6
WO2025226637A1 (en) 2024-04-22 2025-10-30 Incyte Corporation Combination therapy with an anti-colony stimulating factor 1 receptor antibody and a jak inhibitor

Family Cites Families (311)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2985589A (en) * 1957-05-22 1961-05-23 Universal Oil Prod Co Continuous sorption process employing fixed bed of sorbent and moving inlets and outlets
US3632836A (en) 1968-10-25 1972-01-04 Dow Chemical Co Solid curable polyepoxides modified with hydrolyzed liquid polyepoxides
US3832460A (en) * 1971-03-19 1974-08-27 C Kosti Anesthetic-vasoconstrictor-antihistamine composition for the treatment of hypertrophied oral tissue
US4140755A (en) * 1976-02-13 1979-02-20 Hoffmann-La Roche Inc. Sustained release tablet formulations
DE3036390A1 (de) 1980-09-26 1982-05-13 Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln Neue pyrrolo-pyrimidine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung bei der herstellung von biologischen wirkstoffen
DE3220113A1 (de) * 1982-05-28 1983-12-01 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Difluormethoxiphenylthiophosphorsaeureester
US4402832A (en) * 1982-08-12 1983-09-06 Uop Inc. High efficiency continuous separation process
US4404335A (en) 1982-08-16 1983-09-13 The Dow Chemical Company Hydrolyzing epoxy resins in absence of solvent and in presence of oxalic acid and a phosphonium compound
US4548990A (en) * 1983-08-15 1985-10-22 Ciba-Geigy Corporation Crosslinked, porous polymers for controlled drug delivery
US4498991A (en) * 1984-06-18 1985-02-12 Uop Inc. Serial flow continuous separation process
NL8403224A (nl) * 1984-10-24 1986-05-16 Oce Andeno Bv Dioxafosforinanen, de bereiding ervan en de toepassing voor het splitsen van optisch actieve verbindingen.
CA1306260C (en) 1985-10-18 1992-08-11 Shionogi & Co., Ltd. Condensed imidazopyridine derivatives
US4921947A (en) 1986-03-31 1990-05-01 Eli Lilly And Company Process for preparing macrolide derivatives
JPH0710876Y2 (ja) 1989-08-31 1995-03-15 石垣機工株式会社 スクリュープレスにおける脱水筒の洗浄装置
CA2067221C (en) * 1989-10-11 1997-04-15 Yasuji Sakuma Fused pyrimidine derivative, process for preparation of same and pharmaceutical preparation comprising same as active ingredient
US5403593A (en) 1991-03-04 1995-04-04 Sandoz Ltd. Melt granulated compositions for preparing sustained release dosage forms
IT1258781B (it) * 1992-01-16 1996-02-29 Zambon Spa Composizione farmaceutica oftalmica contenente n-acetilcisteina e polivinilalcol
US5521184A (en) 1992-04-03 1996-05-28 Ciba-Geigy Corporation Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
FR2695126B1 (fr) 1992-08-27 1994-11-10 Sanofi Elf Dérivés d'acide thiényl ou pyrrolyl carboxyliques, leur préparation et médicaments les contenant.
AU671491B2 (en) 1992-12-18 1996-08-29 F. Hoffmann-La Roche Ag N-oxycarbonyl substituted 5'-deoxy-5-fluorcytidines
JPH0710876A (ja) * 1993-06-24 1995-01-13 Teijin Ltd ４位に環状アミノ基を有するピロロ［２，３―ｄ］ピリミジン
USH1439H (en) 1993-10-18 1995-05-02 The Dow Chemical Company Method to increase the level of α-glycol in liquid epoxy resin
EP0727217A3 (en) 1995-02-10 1997-01-15 Suntory Ltd Pharmaceutical and cosmetic compositions containing God-type ellagitannin as an active ingredient
US5856326A (en) * 1995-03-29 1999-01-05 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
IL117580A0 (en) 1995-03-29 1996-07-23 Merck & Co Inc Inhibitors of farnesyl-protein transferase and pharmaceutical compositions containing them
JP4010563B2 (ja) 1995-07-05 2007-11-21 イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 殺菌・殺カビ性のピリミジノン類
ATE212993T1 (de) 1995-07-06 2002-02-15 Novartis Erfind Verwalt Gmbh Pyrolopyrimidine und verfahren zu ihrer herstellung
US5630943A (en) * 1995-11-30 1997-05-20 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Discontinuous countercurrent chromatographic process and apparatus
GB9604361D0 (en) 1996-02-29 1996-05-01 Pharmacia Spa 4-Substituted pyrrolopyrimidine compounds as tyrosine kinase inhibitors
WO1997036587A1 (en) 1996-04-03 1997-10-09 Merck & Co., Inc. A method of treating cancer
CA2251955A1 (en) 1996-04-18 1997-10-23 Nancy E. Kohl A method of treating cancer
US5795909A (en) * 1996-05-22 1998-08-18 Neuromedica, Inc. DHA-pharmaceutical agent conjugates of taxanes
EP0934270A1 (en) 1996-05-30 1999-08-11 Merck & Co., Inc. A method of treating cancer
US6624138B1 (en) * 2001-09-27 2003-09-23 Gp Medical Drug-loaded biological material chemically treated with genipin
JP2001524079A (ja) 1997-04-07 2001-11-27 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド ガンの治療方法
US6060038A (en) * 1997-05-15 2000-05-09 Merck & Co., Inc. Radiolabeled farnesyl-protein transferase inhibitors
US6063284A (en) 1997-05-15 2000-05-16 Em Industries, Inc. Single column closed-loop recycling with periodic intra-profile injection
US5919779A (en) * 1997-08-11 1999-07-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 5,6-Heteroaryl-dipyrido(2,3-B:3', 2'-F) azepines and their use in the prevention or treatment of HIV infection
US7153845B2 (en) 1998-08-25 2006-12-26 Columbia Laboratories, Inc. Bioadhesive progressive hydration tablets
US6075056A (en) 1997-10-03 2000-06-13 Penederm, Inc. Antifungal/steroid topical compositions
SE9800729L (sv) 1998-03-06 1999-09-07 Scotia Lipidteknik Ab Ny topikal formulering I
US6025366A (en) 1998-04-02 2000-02-15 Merck & Co., Inc. Antagonists of gonadotropin releasing hormone
EP1090009A2 (en) 1998-06-04 2001-04-11 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antinflammatory compounds
US6232320B1 (en) 1998-06-04 2001-05-15 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antiinflammatory compounds
PA8474101A1 (es) * 1998-06-19 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Compuestos de pirrolo [2,3-d] pirimidina
CZ20004727A3 (cs) 1998-06-19 2002-03-13 Pfizer Products Inc. Deriváty pyrrolo[2,3-d] pyrimidinu
CN1152031C (zh) 1998-08-11 2004-06-02 诺瓦提斯公司 具有血管生成抑制活性的异喹啉衍生物
JP2000119271A (ja) 1998-08-12 2000-04-25 Hokuriku Seiyaku Co Ltd １ｈ―イミダゾピリジン誘導体
PT1109534E (pt) * 1998-09-10 2003-06-30 Nycomed Danmark As Composicoes farmaceuticas de farmacos de libertacao rapida
FR2785196B1 (fr) * 1998-10-29 2000-12-15 Inst Francais Du Petrole Procede et dispositif de separation avec des zones chromatographiques a longueur variable
US6375839B1 (en) * 1998-10-29 2002-04-23 Institut Francais Du Petrole Process and device for separation with variable-length chromatographic zones
US6413419B1 (en) * 1998-10-29 2002-07-02 Institut Francais Du Petrole Process and device for separation with variable-length chromatographic
US6133031A (en) 1999-08-19 2000-10-17 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of focal adhesion kinase expression
WO2000051614A1 (en) 1999-03-03 2000-09-08 Merck & Co., Inc. Inhibitors of prenyl-protein transferases
GB9905075D0 (en) 1999-03-06 1999-04-28 Zeneca Ltd Chemical compounds
US6217895B1 (en) * 1999-03-22 2001-04-17 Control Delivery Systems Method for treating and/or preventing retinal diseases with sustained release corticosteroids
US6239113B1 (en) * 1999-03-31 2001-05-29 Insite Vision, Incorporated Topical treatment or prevention of ocular infections
WO2000063168A1 (en) 1999-04-16 2000-10-26 Coelacanth Chemical Corporation Synthesis of azetidine derivatives
US6921763B2 (en) 1999-09-17 2005-07-26 Abbott Laboratories Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
EP1221443B1 (en) 1999-10-13 2004-09-01 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Substituted imidazolidinone derivatives
US7235258B1 (en) 1999-10-19 2007-06-26 Nps Pharmaceuticals, Inc. Sustained-release formulations for treating CNS-mediated disorders
AU777911B2 (en) * 1999-12-10 2004-11-04 Pfizer Products Inc. Pyrrolo(2,3-d)pyrimidine compounds
WO2001047922A2 (en) * 1999-12-24 2001-07-05 Aventis Pharma Limited Azaindoles
GB0004890D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
US7235551B2 (en) * 2000-03-02 2007-06-26 Smithkline Beecham Corporation 1,5-disubstituted-3,4-dihydro-1h-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-one compounds and their use in treating csbp/p38 kinase mediated diseases
ATE250924T1 (de) * 2000-04-07 2003-10-15 Medidom Lab Cyklosporin, hyaluronsäure und polysorbate enthaltenes augenarzneimittel
AU4878601A (en) 2000-04-20 2001-11-07 Mitsubishi Corporation Aromatic amide compounds
WO2001081346A2 (en) * 2000-04-25 2001-11-01 Icos Corporation Inhibitors of human phosphatidyl-inositol 3-kinase delta
IL153115A0 (en) 2000-06-16 2003-06-24 Curis Inc Angiogenesis-modulating compositions and uses
US7498304B2 (en) * 2000-06-16 2009-03-03 Curis, Inc. Angiogenesis-modulating compositions and uses
US6335342B1 (en) 2000-06-19 2002-01-01 Pharmacia & Upjohn S.P.A. Azaindole derivatives, process for their preparation, and their use as antitumor agents
EP1295607B9 (en) 2000-06-23 2011-10-05 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Antitumor effect potentiators
UA74370C2 (uk) * 2000-06-26 2005-12-15 Пфайзер Продактс Інк. Піроло(2,3-d)піримідинові сполуки як імуносупресори
PL202623B1 (pl) 2000-06-28 2009-07-31 Smithkline Beecham Plc Sposób wytwarzania drobno zmielonego preparatu substancji leczniczej, drobno zmielona substancja lecznicza wytworzona tym sposobem i zawierająca ją kompozycja farmaceutyczna
AU2001278790A1 (en) 2000-08-22 2002-03-04 Hokuriku Seiyaku Co. Ltd 1h-imidazopyridine derivatives
EP1343781B1 (en) 2000-12-05 2008-09-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of c-jun n-terminal kinases (jnk) and other protein kinases
GB0100622D0 (en) 2001-01-10 2001-02-21 Vernalis Res Ltd Chemical compounds V111
WO2002055496A1 (en) 2001-01-15 2002-07-18 Glaxo Group Limited Aryl piperidine and piperazine derivatives as inducers of ldl-receptor expression
WO2002060492A1 (en) 2001-01-30 2002-08-08 Cytopia Pty Ltd Methods of inhibiting kinases
US6884804B2 (en) * 2001-05-16 2005-04-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of Src and other protein kinases
US7301023B2 (en) 2001-05-31 2007-11-27 Pfizer Inc. Chiral salt resolution
GB0115109D0 (en) * 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
GB0115393D0 (en) 2001-06-23 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
US6852727B2 (en) * 2001-08-01 2005-02-08 Merck & Co., Inc. Benzimisazo[4,5-f]isoquinolinone derivatives
AU2002337142B2 (en) 2001-09-19 2007-10-11 Aventis Pharma S.A. Indolizines as kinase protein inhibitors
US6429231B1 (en) 2001-09-24 2002-08-06 Bradley Pharmaceuticals, Inc. Compositions containing antimicrobials and urea for the treatment of dermatological disorders and methods for their use
TWI302836B (en) 2001-10-30 2008-11-11 Novartis Ag Staurosporine derivatives as inhibitors of flt3 receptor tyrosine kinase activity
JP2003155285A (ja) 2001-11-19 2003-05-27 Toray Ind Inc 環状含窒素誘導体
CN1582272A (zh) * 2001-11-30 2005-02-16 帝人株式会社 制备5－(3－氰基苯基)－3－甲酰基苯甲酸化合物的方法
GT200200234A (es) 2001-12-06 2003-06-27 Compuestos cristalinos novedosos
US6995144B2 (en) * 2002-03-14 2006-02-07 Eisai Co., Ltd. Nitrogen containing heterocyclic compounds and medicines containing the same
EA007156B1 (ru) 2002-04-15 2006-08-25 Адамс Лэборетриз, Инк. Замедленно высвобождающие лекарственные композиции гвайфенезина
TW200403058A (en) 2002-04-19 2004-03-01 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclo inhibitors of potassium channel function
US7304061B2 (en) * 2002-04-26 2007-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heterocyclic inhibitors of ERK2 and uses thereof
US7125888B2 (en) 2002-05-02 2006-10-24 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
KR20100120243A (ko) * 2002-05-07 2010-11-12 피시비다 유에스 인코포레이티드 약물 전달 장치를 형성하는 공정
IL165264A0 (en) * 2002-05-23 2005-12-18 Cytopia Pty Ltd Protein kinase inhibitors
PE20040522A1 (es) 2002-05-29 2004-09-28 Novartis Ag Derivados de diarilurea dependientes de la cinasa de proteina
EP1535934A4 (en) * 2002-06-26 2005-11-02 Idemitsu Kosan Co HYDROGENATED COPOLYMER, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THIS CONTAINING HOTMELT ADHESIVE COMPOSITION
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
GB0215844D0 (en) 2002-07-09 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
JPWO2004007472A1 (ja) 2002-07-10 2005-11-17 小野薬品工業株式会社 Ｃｃｒ４アンタゴニストおよびその医薬用途
JP2006502183A (ja) 2002-09-20 2006-01-19 アルコン，インコーポレイテッド ドライアイ障害の処置のためのサイトカイン合成インヒビターの使用
US20040204404A1 (en) * 2002-09-30 2004-10-14 Robert Zelle Human N-type calcium channel blockers
ATE371656T1 (de) 2002-11-04 2007-09-15 Vertex Pharma Heteroaryl-pyrimidinderivate als jak-inhibitoren
US8034831B2 (en) 2002-11-06 2011-10-11 Celgene Corporation Methods for the treatment and management of myeloproliferative diseases using 4-(amino)-2-(2,6-Dioxo(3-piperidyl)-isoindoline-1,3-dione in combination with other therapies
AR042052A1 (es) 2002-11-15 2005-06-08 Vertex Pharma Diaminotriazoles utiles como inhibidores de proteinquinasas
US20040099204A1 (en) 2002-11-25 2004-05-27 Nestor John J. Sheet, page, line, position marker
BR0316487A (pt) 2002-11-26 2005-10-11 Pfizer Prod Inc Método todo de tratamento da rejeição de transplantes
UA80767C2 (en) 2002-12-20 2007-10-25 Pfizer Prod Inc Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
TWI335819B (en) * 2002-12-24 2011-01-11 Alcon Inc Use of oculosurface selective glucocorticoid in the treatment of dry eye
US7135493B2 (en) 2003-01-13 2006-11-14 Astellas Pharma Inc. HDAC inhibitor
US7444183B2 (en) * 2003-02-03 2008-10-28 Enteromedics, Inc. Intraluminal electrode apparatus and method
WO2004072063A1 (en) 2003-02-07 2004-08-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl substituted pyrolls useful as inhibitors of protein kinases
GB0305929D0 (en) 2003-03-14 2003-04-23 Novartis Ag Organic compounds
JP2006522124A (ja) 2003-04-03 2006-09-28 バーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド プロテインキナーゼのインヒビターとして有用な組成物
SE0301372D0 (sv) * 2003-05-09 2003-05-09 Astrazeneca Ab Novel compounds
SE0301373D0 (sv) 2003-05-09 2003-05-09 Astrazeneca Ab Novel compounds
FR2857454B1 (fr) 2003-07-08 2006-08-11 Aventis Pasteur Dosage des acides techoiques des bacteries gram+
US20050043346A1 (en) * 2003-08-08 2005-02-24 Pharmacia Italia S.P.A. Pyridylpyrrole derivatives active as kinase inhibitors
EP1663204B1 (en) 2003-08-29 2014-05-07 Exelixis, Inc. C-kit modulators and methods of use
EP1678147B1 (en) 2003-09-15 2012-08-08 Lead Discovery Center GmbH Pharmaceutically active 4,6-disubstituted aminopyrimidine derivatives as modulators of protein kinases
PE20050952A1 (es) 2003-09-24 2005-12-19 Novartis Ag Derivados de isoquinolina como inhibidores de b-raf
ES2357801T3 (es) * 2003-10-24 2011-04-29 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Agente terapéutico para trastorno queratoconjuntival.
US7387793B2 (en) 2003-11-14 2008-06-17 Eurand, Inc. Modified release dosage forms of skeletal muscle relaxants
MY141220A (en) 2003-11-17 2010-03-31 Astrazeneca Ab Pyrazole derivatives as inhibitors of receptor tyrosine kinases
BRPI0416909A (pt) 2003-11-25 2007-01-16 Pfizer Prod Inc método de tratamento de aterosclerose
SG133602A1 (en) 2003-12-17 2007-07-30 Pfizer Prod Inc Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine compounds for treating transplant rejection
MY139808A (en) * 2003-12-19 2009-10-30 Schering Corp Thiadiazoles as cxc-and cc-chemokine receptor ligands
CN1925855B (zh) 2003-12-19 2010-06-16 普莱希科公司 开发Ret调节剂的化合物和方法
AU2004303602C1 (en) 2003-12-23 2009-05-28 Astex Therapeutics Limited Pyrazole derivatives as protein kinase modulators
US20050165029A1 (en) * 2004-01-13 2005-07-28 Ambit Biosciences Corporation Pyrrolopyrimidine derivatives and analogs and their use in the treatment and prevention of diseases
WO2005089502A2 (en) 2004-03-18 2005-09-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Methods for the treatment of synucleinopathies
CA2560454C (en) 2004-03-30 2013-05-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindoles useful as inhibitors of jak and other protein kinases
AU2005249380C1 (en) 2004-04-23 2012-09-20 Exelixis, Inc. Kinase modulators and methods of use
US20060106020A1 (en) 2004-04-28 2006-05-18 Rodgers James D Tetracyclic inhibitors of Janus kinases
WO2005105988A2 (en) 2004-04-28 2005-11-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystal structure of human jak3 kinase domain complex and binding pockets thereof
EP2363149A1 (en) 2004-05-03 2011-09-07 Novartis AG Combinations comprising a S1P receptor agonist and a JAK3 kinase inhibitor
CA2566158A1 (en) 2004-05-14 2005-11-24 Abbott Laboratories Kinase inhibitors as therapeutic agents
PE20060426A1 (es) 2004-06-02 2006-06-28 Schering Corp DERIVADOS DE ACIDO TARTARICO COMO INHIBIDORES DE MMPs, ADAMs, TACE Y TNF-alfa
BRPI0511978A (pt) 2004-06-10 2008-01-22 Irm Llc compostos e composições como inibidores de proteìnas quinases
US8039674B2 (en) 2004-06-23 2011-10-18 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Compound having S1P receptor binding potency and use thereof
EP2325184A1 (en) 2004-06-30 2011-05-25 Vertex Pharmceuticals Incorporated Azaindoles useful as inhibitors of protein kinases
US7138423B2 (en) * 2004-07-20 2006-11-21 Bristol-Myers Squibb Company Arylpyrrolidine derivatives as NK-1 /SSRI antagonists
FR2873691B1 (fr) 2004-07-29 2006-10-06 Sanofi Synthelabo Derives d'amino-piperidine, leur preparation et leur application en therapeutique
WO2006013114A1 (en) 2004-08-06 2006-02-09 Develogen Aktiengesellschaft Use of a timp-2 secreted protein product for preventing and treating pancreatic diseases and/or obesity and/or metabolic syndrome
WO2006022459A1 (en) 2004-08-23 2006-03-02 Mogam Biotechnology Institute Primer and probe for detection of sars coronavirus, kit comprising the primer and/or the probe, and detection method thereof
GB0421525D0 (en) 2004-09-28 2004-10-27 Novartis Ag Inhibitors of protein kineses
US20070054916A1 (en) 2004-10-01 2007-03-08 Amgen Inc. Aryl nitrogen-containing bicyclic compounds and methods of use
CA2582985A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-20 Jin-Jun Liu Disubstituted pyrazolobenzodiazepines useful as inhibitors for cdk2 and angiogesis, and for the treatment of breast, colon, lung and prostate cancer
MY179032A (en) 2004-10-25 2020-10-26 Cancer Research Tech Ltd Ortho-condensed pyridine and pyrimidine derivatives (e.g.purines) as protein kinase inhibitors
UY29177A1 (es) 2004-10-25 2006-05-31 Astex Therapeutics Ltd Derivados sustituidos de purina, purinona y deazapurina, composiciones que los contienen métodos para su preparación y sus usos
US7528138B2 (en) * 2004-11-04 2009-05-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolo[1,5-a]pyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
JP2008520612A (ja) 2004-11-24 2008-06-19 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ＪＡＫ阻害剤およびＢｃｒ−Ａｂｌ、Ｆｌｔ−３、ＦＡＫまたはＲＡＦキナーゼ阻害剤のうち少なくとも１個の組合せ
US7517870B2 (en) * 2004-12-03 2009-04-14 Fondazione Telethon Use of compounds that interfere with the hedgehog signaling pathway for the manufacture of a medicament for preventing, inhibiting, and/or reversing ocular diseases related with ocular neovascularization
WO2006065916A1 (en) * 2004-12-14 2006-06-22 Alcon, Inc. Method of treating dry eye disorders using 13(s)-hode and its analogs
WO2006067445A2 (en) 2004-12-22 2006-06-29 Astrazeneca Ab Csf-1r kinase inhibitors
AR054416A1 (es) * 2004-12-22 2007-06-27 Incyte Corp Pirrolo [2,3-b]piridin-4-il-aminas y pirrolo [2,3-b]pirimidin-4-il-aminas como inhibidores de las quinasas janus. composiciones farmaceuticas.
WO2006077499A1 (en) 2005-01-20 2006-07-27 Pfizer Limited Chemical compounds
ES2320487T3 (es) 2005-02-03 2009-05-22 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Pirrolopirimidinas utiles como inhibidores de proteina quinasas.
US7683171B2 (en) 2005-02-04 2010-03-23 Bristol-Myers Squibb Company 1H-imidazo[4,5-d]thieno[3,2-b]pyridine based tricyclic compounds and pharmaceutical compositions comprising same
RU2383545C2 (ru) 2005-03-15 2010-03-10 Айрм Ллк Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназы
AU2006232105A1 (en) 2005-04-05 2006-10-12 Pharmacopeia, Inc. Purine and imidazopyridine derivatives for immunosuppression
GB0510139D0 (en) 2005-05-18 2005-06-22 Addex Pharmaceuticals Sa Novel compounds B1
ES2380795T3 (es) * 2005-05-20 2012-05-18 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Pirrolopiridinas útiles como inhibidores de proteínas quinasas
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
CN105348203B (zh) 2005-06-08 2018-09-18 里格尔药品股份有限公司 抑制jak途径的组合物和方法
WO2006136823A1 (en) 2005-06-21 2006-12-28 Astex Therapeutics Limited Heterocyclic containing amines as kinase b inhibitors
DK2395004T3 (en) 2005-06-22 2016-03-21 Plexxikon Inc Pyrrolo [2,3-b] pyridine derivatives as protein kinase inhibitors
CN102127078A (zh) 2005-07-14 2011-07-20 安斯泰来制药株式会社 Janus激酶3的杂环类抑制剂
FR2889662B1 (fr) 2005-08-11 2011-01-14 Galderma Res & Dev Emulsion de type huile-dans-eau pour application topique en dermatologie
WO2007025090A2 (en) 2005-08-25 2007-03-01 Kalypsys, Inc. Heterobicyclic and - tricyclic inhibitors of mapk/erk kinase
EP2270014A1 (en) * 2005-09-22 2011-01-05 Incyte Corporation Azepine inhibitors of janus kinases
ES2401192T3 (es) 2005-09-30 2013-04-17 Vertex Pharmceuticals Incorporated Deazapurinas útiles como inhibidores de janus cinasas
US20070128633A1 (en) 2005-10-11 2007-06-07 Chembridge Research Laboratories, Inc. Cell-free protein expression systems and methods of use thereof
KR101315574B1 (ko) 2005-10-14 2013-10-08 스미또모 가가꾸 가부시끼가이샤 히드라지드 화합물 및 이의 살충 용도
EP2388259A1 (en) 2005-10-28 2011-11-23 AstraZeneca AB 4- (3-aminopyrazole) pyrimidine derivatives for use as tyrosine kinase inhibitors in the treatment of cancer
DK1951684T3 (en) * 2005-11-01 2016-10-24 Targegen Inc BIARYLMETAPYRIMIDIN kinase inhibitors
WO2007062459A1 (en) 2005-11-29 2007-06-07 Cytopia Research Pty Ltd Selective kinase inhibitors based on pyridine scaffold
DK3184526T3 (en) 2005-12-13 2019-01-14 Incyte Holdings Corp PYRROLO [2,3-D] PYRIMIDINE DERIVATIVES AS A JANUS-KINASE INHIBITOR
US20130137681A1 (en) * 2005-12-13 2013-05-30 Incyte Corporation HETEROARYL SUBSTITUTED PYRROLO[2,3-b]PYRIDINES AND PYRROLO[2,3-b]PYRIMIDINES AS JANUS KINASE INHIBITORS
EP1968568A4 (en) 2005-12-22 2011-04-13 Glaxosmithkline Llc HEMMER OF NUTS ACTIVITY
KR20080083680A (ko) * 2005-12-23 2008-09-18 스미스클라인 비참 코포레이션 오로라 키나제의 아자인돌 억제제
JP4643455B2 (ja) 2006-01-12 2011-03-02 株式会社ユニバーサルエンターテインメント 遊技システム
EP2537849A3 (en) 2006-01-17 2013-04-03 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Azaindoles useful as inhibitors of janus kinases
EP1979353A2 (en) * 2006-01-19 2008-10-15 OSI Pharmaceuticals, Inc. Fused heterobicyclic kinase inhibitors
WO2007090141A2 (en) 2006-02-01 2007-08-09 Smithkline Beecham Corporation Pyrrolo [2, 3, b] pyridine derivatives useful as raf kinase inhibitors
US7745477B2 (en) 2006-02-07 2010-06-29 Hoffman-La Roche Inc. Heteroaryl and benzyl amide compounds
KR20080099334A (ko) 2006-02-24 2008-11-12 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 메토프로롤 숙시네이트 서방정 및 이의 제조 방법
KR20090008217A (ko) * 2006-03-10 2009-01-21 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 질소 함유 복소환 유도체 및 이들을 유효 성분으로 하는 약제
JP5099005B2 (ja) * 2006-04-03 2012-12-12 アステラス製薬株式会社 ヘテロ化合物
RU2008143361A (ru) 2006-04-05 2010-05-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Деазапурины в качестве ингибиторов янус-киназ
EP2059515A2 (en) 2006-04-12 2009-05-20 Pfizer Limited Pyrrolidine derivatives as modulators of chemokine ccr5 receptors
WO2007129195A2 (en) 2006-05-04 2007-11-15 Pfizer Products Inc. 4-pyrimidine-5-amino-pyrazole compounds
WO2007135461A2 (en) 2006-05-18 2007-11-29 Bayer Healthcare Ag Pharmaceutical compositions comprising implitapide and methods of using same
US7691811B2 (en) * 2006-05-25 2010-04-06 Bodor Nicholas S Transporter-enhanced corticosteroid activity and methods and compositions for treating dry eye
TWI398252B (zh) 2006-05-26 2013-06-11 Novartis Ag 吡咯并嘧啶化合物及其用途
NZ573174A (en) 2006-06-01 2012-01-12 Msd Consumer Care Inc Sustained release pharmaceutical dosage form containing phenylephrine
BRPI0713187A2 (pt) * 2006-07-20 2012-10-16 Mehmet Kahraman método de inibir rho-quinase, método de tratamento de doença mediada por rho-quinase, composto e composição farmacêutica
WO2008013622A2 (en) 2006-07-27 2008-01-31 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal azocyclic amides
WO2008016123A1 (en) * 2006-08-03 2008-02-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited GSK-3β INHIBITOR
ATE517868T1 (de) * 2006-08-16 2011-08-15 Boehringer Ingelheim Int Pyrazinverbindungen, ihre verwendung und herstellungsverfahren
EP2081888A1 (en) 2006-09-08 2009-07-29 Novartis AG N-biaryl (hetero) arylsulphonamide derivatives useful in the treatment of diseases mediated by lymphocytes interactions
WO2008035376A2 (en) 2006-09-19 2008-03-27 Council Of Scientific & Industrial Research A novel bio-erodible insert for ophthalmic applications and a process for the preparation thereof
US7915268B2 (en) * 2006-10-04 2011-03-29 Wyeth Llc 8-substituted 2-(benzimidazolyl)purine derivatives for immunosuppression
TW200831104A (en) 2006-10-04 2008-08-01 Pharmacopeia Inc 6-substituted 2-(benzimidazolyl)purine and purinone derivatives for immunosuppression
US20120225057A1 (en) 2006-10-11 2012-09-06 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods and compositions for the treatment of myeloproliferative diseases and other proliferative diseases
US7750007B2 (en) 2006-11-06 2010-07-06 Supergen, Inc. Imidazo[1,2-beta]pyridazine and pyrazolo[1,5-alpha]pyrimidine derivatives and their use as protein kinase inhibitors
US20080119496A1 (en) * 2006-11-16 2008-05-22 Pharmacopeia Drug Discovery, Inc. 7-Substituted Purine Derivatives for Immunosuppression
CA2669991C (en) 2006-11-22 2016-01-26 Incyte Corporation Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors
WO2008067119A2 (en) 2006-11-27 2008-06-05 Smithkline Beecham Corporation Novel compounds
MX2009006304A (es) * 2006-12-15 2009-06-23 Abbott Lab Nuevos compuestos de oxadiazol.
US7687522B2 (en) 2006-12-20 2010-03-30 Amgen Inc. Substituted pyridines and pyrimidines and their use in treatment of cancer
CA2672903C (en) * 2006-12-20 2012-10-23 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their use in treating inflammation, angiogenesis and cancer
US8513270B2 (en) 2006-12-22 2013-08-20 Incyte Corporation Substituted heterocycles as Janus kinase inhibitors
US8389014B2 (en) 2006-12-22 2013-03-05 Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. Gel useful for the delivery of ophthalmic drugs
KR20080062876A (ko) 2006-12-29 2008-07-03 주식회사 대웅제약 신규한 항진균성 트리아졸 유도체
WO2008082840A1 (en) 2006-12-29 2008-07-10 Abbott Laboratories Pim kinase inhibitors as cancer chemotherapeutics
WO2008082839A2 (en) 2006-12-29 2008-07-10 Abbott Laboratories Pim kinase inhibitors as cancer chemotherapeutics
EA019951B1 (ru) 2007-03-01 2014-07-30 Новартис Аг Ингибиторы киназы pim и способы их применения
JP5374492B2 (ja) 2007-04-03 2013-12-25 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド 受容体チロシンキナーゼ阻害薬としてのイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン化合物
US8188178B2 (en) 2007-05-07 2012-05-29 3M Innovative Properties Company Cold shrinkable article including an epichlorohydrin composition
GB0709031D0 (en) 2007-05-10 2007-06-20 Sareum Ltd Pharmaceutical compounds
CA2687931C (en) 2007-05-31 2016-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Ccr2 receptor antagonists and uses thereof
GB0710528D0 (en) 2007-06-01 2007-07-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
CL2008001709A1 (es) 2007-06-13 2008-11-03 Incyte Corp Compuestos derivados de pirrolo [2,3-b]pirimidina, moduladores de quinasas jak; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como cancer, psoriasis, artritis reumatoide, entre otras.
EP2740731B1 (en) 2007-06-13 2016-03-23 Incyte Holdings Corporation Crystalline salts of the janus kinase inhibitor (r)-3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile
KR101258316B1 (ko) 2007-07-11 2013-04-30 화이자 인코포레이티드 안구 건조증 치료용 약학 조성물 및 방법
EA201000113A1 (ru) 2007-08-01 2010-08-30 Пфайзер Инк. Пиразольные соединения
WO2009049028A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Targegen Inc. Pyrrolopyrimidine compounds and their use as janus kinase modulators
EP2217235A4 (en) 2007-11-15 2011-01-12 Musc Found For Res Dev INHIBITORS OF PIM PROTEIN KINASES, COMPOSITIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF CANCER
BRPI0820544A2 (pt) 2007-11-16 2015-06-16 Incyte Corp 4-pirazolil-n-arilpirimidin-2-aminas e pirazolil-n-heteroarilpirimidin-2-aminas como inibidores de janus cinase
GB0723815D0 (en) 2007-12-05 2008-01-16 Glaxo Group Ltd Compounds
PT3133080T (pt) * 2008-01-18 2018-11-16 Inst Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Nucleósidos de 7-deazapurina citostáticos inovadores
NZ587165A (en) 2008-02-04 2012-03-30 Mercury Therapeutics Inc Ampk modulators
AR070531A1 (es) 2008-03-03 2010-04-14 Novartis Ag Inhibidores de cinasa pim y metodos para su uso
ES2602577T3 (es) 2008-03-11 2017-02-21 Incyte Holdings Corporation Derivados de azetidina y ciclobutano como inhibidores de JAK
CN102015686B (zh) 2008-03-21 2014-07-02 诺华股份有限公司 杂环化合物及其用途
US8344144B2 (en) 2008-06-18 2013-01-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Janus kinases
KR102080429B1 (ko) 2008-06-26 2020-02-21 안테리오스, 인코퍼레이티드 경피 운반
UY31952A (es) 2008-07-02 2010-01-29 Astrazeneca Ab 5-metilideno-1,3-tiazolidina-2,4-dionas sustituidas como inhibidores de quinasa pim
FR2933409B1 (fr) 2008-07-03 2010-08-27 Centre Nat Rech Scient NOUVEAUX PYRROLO °2,3-a! CARBAZOLES ET LEUR UTILISATION COMME INHIBITEURS DES KINASES PIM
US8557809B2 (en) 2008-08-19 2013-10-15 Array Biopharma Inc. Triazolopyridine compounds as PIM kinase inhibitors
TWI496779B (zh) 2008-08-19 2015-08-21 Array Biopharma Inc 作為ｐｉｍ激酶抑制劑之三唑吡啶化合物
RU2493157C2 (ru) 2008-08-20 2013-09-20 Пфайзер Инк. ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНА
PT2344474E (pt) 2008-09-02 2015-12-28 Novartis Ag Derivados de picolinamida como inibidores de cinase
CA2735782A1 (en) 2008-09-02 2010-03-11 Novartis Ag Heterocyclic pim-kinase inhibitors
US8735424B2 (en) 2008-09-02 2014-05-27 Novartis Ag Bicyclic kinase inhibitors
CL2009001884A1 (es) 2008-10-02 2010-05-14 Incyte Holdings Corp Uso de 3-ciclopentil-3-[4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)propanonitrilo, inhibidor de janus quinasa, y uso de una composición que lo comprende para el tratamiento del ojo seco.
EP2350054A4 (en) 2008-10-17 2012-03-28 Merck Canada Inc AZETIDINE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF THE STEAROYL COENZYME A DELTA 9 DESATURASE
JOP20190231A1 (ar) * 2009-01-15 2017-06-16 Incyte Corp طرق لاصلاح مثبطات انزيم jak و المركبات الوسيطة المتعلقة به
EP2210890A1 (en) 2009-01-19 2010-07-28 Almirall, S.A. Oxadiazole derivatives as S1P1 receptor agonists
US8263601B2 (en) 2009-02-27 2012-09-11 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterium substituted xanthine derivatives
ES2487542T3 (es) 2009-05-22 2014-08-21 Incyte Corporation Derivados de N-(hetero)aril-pirrolidina de pirazol-4-il-pirrolo[2,3-d]pirimidinas y pirrol-3-il-pirrolo[2,3-d]pirimidinas como inhibidores de cinasas Janus
WO2010135621A1 (en) 2009-05-22 2010-11-25 Incyte Corporation 3-[4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl]octane- or heptane-nitrile as jak inhibitors
UA110324C2 (en) 2009-07-02 2015-12-25 Genentech Inc Jak inhibitory compounds based on pyrazolo pyrimidine
TW201105674A (en) 2009-07-08 2011-02-16 Leo Pharma As Novel JAK receptor and protein tyrosine kinase inhibitors and pharmaceutical use thereof
EP2470534A4 (en) 2009-08-24 2013-02-27 Merck Sharp & Dohme JAK INHIBITION FOR BLOCKING TOXICITY ASSOCIATED WITH RNA INTERFERENCE
TW201111385A (en) 2009-08-27 2011-04-01 Biocryst Pharm Inc Heterocyclic compounds as janus kinase inhibitors
WO2011028685A1 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Incyte Corporation Heterocyclic derivatives of pyrazol-4-yl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as janus kinase inhibitors
EP2475659B1 (en) 2009-09-08 2015-10-28 F.Hoffmann-La Roche Ag 4-substituted pyridin-3-yl-carboxamide compounds and methods of use
EP2305660A1 (en) 2009-09-25 2011-04-06 Almirall, S.A. New thiadiazole derivatives
CA2777114C (en) 2009-10-09 2018-10-23 Incyte Corporation Hydroxyl, keto, and glucuronide derivatives of 3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile
NZ598907A (en) 2009-10-20 2014-03-28 Cellzome Ltd Heterocyclyl pyrazolopyrimidine analogues as jak inhibitors
US8671402B2 (en) 2009-11-09 2014-03-11 Bank Of America Corporation Network-enhanced control of software updates received via removable computer-readable medium
EP2332917B1 (en) 2009-11-11 2012-08-01 Sygnis Bioscience GmbH & Co. KG Compounds for PIM kinase inhibition and for treating malignancy
EP2504031A4 (en) 2009-11-24 2013-06-26 Alderbio Holdings Llc ANTI-IL-6 ANTIBODIES AND THEIR USE
EP2506852A4 (en) 2009-12-04 2013-06-19 Univ Texas INTERFERONTHERAPIES IN COMBINATION WITH BLOCKING OF STAT3 ACTIVATION
CA2782720A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Pfizer Inc. Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds
CN102712640A (zh) 2010-01-12 2012-10-03 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 三环杂环化合物、其组合物和应用方法
CN102822177A (zh) 2010-02-05 2012-12-12 美国辉瑞有限公司 吡咯并[2,3-d]嘧啶脲化合物
SA111320200B1 (ar) 2010-02-17 2014-02-16 ديبيوفارم اس ايه مركبات ثنائية الحلقة واستخداماتها كمثبطات c-src/jak مزدوجة
AU2011217961B2 (en) 2010-02-18 2016-05-05 Incyte Holdings Corporation Cyclobutane and methylcyclobutane derivatives as Janus kinase inhibitors
SMT201800137T1 (it) 2010-03-10 2018-07-17 Incyte Holdings Corp Derivati di piperidin-4-il azetidina come inibitori di jak1
KR20130094710A (ko) 2010-04-14 2013-08-26 어레이 바이오파마 인크. Ｊａｋ 키나아제의 억제제로서 5,7-치환된-이미다조［1,2-ｃ］피리미딘
EP2390252A1 (en) 2010-05-19 2011-11-30 Almirall, S.A. New pyrazole derivatives
PH12012502296B1 (en) 2010-05-21 2017-10-06 Incyte Holdings Corp Topical formulation for a jak inhibitor
US8637529B2 (en) 2010-06-11 2014-01-28 AbbYie Inc. Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds
US9351943B2 (en) 2010-07-01 2016-05-31 Matthew T. McLeay Anti-fibroblastic fluorochemical emulsion therapies
US20130237493A1 (en) 2010-09-30 2013-09-12 Portola Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy of 4-(cyclopropylamino)-2-(4-(4-(ethylsulfonyl)piperazin-1-yl)phenylamino)pyrimidine-5-carboxamide and fludarabine
ES2536415T3 (es) * 2010-11-19 2015-05-25 Incyte Corporation Pirrolopiridinas y pirrolopirimidinas sustituidas heterocíclicas como inhibidores de JAK
SG190839A1 (en) 2010-11-19 2013-07-31 Incyte Corp Cyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as jak inhibitors
SG10201509919UA (en) 2010-12-03 2016-01-28 Ym Biosciences Australia Pty Treatment of jak2-mediated conditions
ES2547916T3 (es) * 2011-02-18 2015-10-09 Novartis Pharma Ag Terapia de combinación de inhibidores de mTOR/JAK
CN102247368B (zh) 2011-05-19 2013-05-29 安徽永生堂药业有限责任公司 一种复方阿伐斯汀缓释片及其制备方法
CN102218042A (zh) 2011-05-26 2011-10-19 青岛黄海制药有限责任公司 富马酸喹硫平组合物的缓释片剂及其制备方法
WO2012177606A1 (en) 2011-06-20 2012-12-27 Incyte Corporation Azetidinyl phenyl, pyridyl or pyrazinyl carboxamide derivatives as jak inhibitors
WO2013007768A1 (en) 2011-07-13 2013-01-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Tricyclic heterocyclic compounds, compositions and methods of use thereof as jak inhibitors
WO2013007765A1 (en) 2011-07-13 2013-01-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Fused tricyclic compounds for use as inhibitors of janus kinases
JP2014521725A (ja) 2011-08-10 2014-08-28 ノバルティス・ファルマ・アクチェンゲゼルシャフト ＪＡＫＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ併用療法
TW201313721A (zh) 2011-08-18 2013-04-01 Incyte Corp 作為ｊａｋ抑制劑之環己基氮雜環丁烷衍生物
UA111854C2 (uk) 2011-09-07 2016-06-24 Інсайт Холдінгс Корпорейшн Способи і проміжні сполуки для отримання інгібіторів jak
WO2013173720A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Incyte Corporation Piperidinylcyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as jak inhibitors
US10155987B2 (en) 2012-06-12 2018-12-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods of predicting resistance to JAK inhibitor therapy
CA2876306C (en) 2012-06-15 2024-02-20 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated derivatives of ruxolitinib
CA2879603A1 (en) 2012-07-27 2014-01-30 Ratiopharm Gmbh Oral dosage forms for modified release comprising ruxolitinib
CN102772384A (zh) 2012-08-07 2012-11-14 四川百利药业有限责任公司 一种盐酸米诺环素缓释片及其制备方法
US9573958B2 (en) 2012-08-31 2017-02-21 Principia Biopharma, Inc. Benzimidazole derivatives as ITK inhibitors
US9181271B2 (en) 2012-11-01 2015-11-10 Incyte Holdings Corporation Tricyclic fused thiophene derivatives as JAK inhibitors
PE20151157A1 (es) 2012-11-15 2015-08-19 Incyte Corp Formas de dosificacion de ruxolitinib de liberacion sostenida
LT3489239T (lt) 2013-03-06 2022-03-10 Incyte Holdings Corporation Jak inhibitoriaus gamybos būdai ir tarpiniai junginiai
HRP20231048T1 (hr) 2013-05-17 2023-12-22 Incyte Holdings Corporation Derivati bipirazola kao jak inhibitori
UA120499C2 (uk) 2013-08-07 2019-12-26 Інсайт Корпорейшн Лікування захворювань із застосуванням лікарських форм з уповільненим вивільненням для інгібітора jak1
SG11201601119XA (en) 2013-08-20 2016-03-30 Incyte Corp Survival benefit in patients with solid tumors with elevated c-reactive protein levels
CR20160449A (es) 2014-02-28 2016-12-20 Incyte Corp Inhibidores de la jak1 para el tratamiento de síndromes mielodisplásicos
MA39984B1 (fr) 2014-04-08 2020-12-31 Incyte Corp Traitement d'affections malignes par lymphocytes b par un inhibiteur jak et pi3k combiné
MA39987A (fr) 2014-04-30 2017-03-08 Incyte Corp Procédés de préparation d'un inhibiteur de jak1 et nouvelles formes associées
EP4233870A3 (en) 2014-05-28 2024-01-24 Onco Tracker, Inc. Anti-cancer effects of jak2 inhibitors in combination with thalidomide derivatives and glucocorticoids
WO2015184305A1 (en) 2014-05-30 2015-12-03 Incyte Corporation TREATMENT OF CHRONIC NEUTROPHILIC LEUKEMIA (CNL) AND ATYPICAL CHRONIC MYELOID LEUKEMIA (aCML) BY INHIBITORS OF JAK1
US10766900B2 (en) 2017-12-29 2020-09-08 Formosa Laboratories, Inc. Baricitinib intermediate, method for forming Baricitinib intermediate, and method for preparing Baricitinib or pharmaceutically acceptable salt thereof
CA3129096A1 (en) 2019-02-06 2020-08-13 Concert Pharmaceuticals, Inc. Process for preparing enantiomerically enriched jak inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CY1118724T1 (el) 2017-07-12
ES2543903T3 (es) 2015-08-25
HUE041382T2 (hu) 2019-05-28
US20110223210A1 (en) 2011-09-15
PT1966202E (pt) 2012-01-03
HK1160115A1 (en) 2012-08-10
HK1171023A1 (en) 2013-03-15
EP2343298B9 (en) 2020-05-06
HUE030235T2 (en) 2017-04-28
KR20080079677A (ko) 2008-09-01
TW201831490A (zh) 2018-09-01
SG179430A1 (en) 2012-04-27
SI1966202T1 (sl) 2012-01-31
PL1966202T3 (pl) 2012-02-29
CY1116574T1 (el) 2018-03-07
US20100022522A1 (en) 2010-01-28
EP2343298B1 (en) 2015-05-06
CY2013006I1 (el) 2015-10-07
US8541425B2 (en) 2013-09-24
US7598257B2 (en) 2009-10-06
HRP20170090T1 (hr) 2017-03-24
AR057995A1 (es) 2008-01-09
RS54181B9 (sr) 2020-01-31
SG10201506912RA (en) 2015-10-29
EP2343299B9 (en) 2017-03-08
CR20130506A (es) 2013-10-30
ES2612196T3 (es) 2017-05-12
IL231992A0 (en) 2014-05-28
DK1966202T3 (da) 2012-01-16
LTPA2017012I1 (lt) 2017-05-10
US20140018374A1 (en) 2014-01-16
MX346183B (es) 2017-03-10
TW201434835A (zh) 2014-09-16
US20200338077A1 (en) 2020-10-29
HRP20181912T1 (hr) 2019-03-22
SI3184526T1 (sl) 2019-03-29
UA116187C2 (uk) 2018-02-26
EA200870048A1 (ru) 2009-02-27
EA036785B1 (ru) 2020-12-21
LT2426129T (lt) 2017-02-10
CY2017015I1 (el) 2017-09-13
HRP20110903T1 (hr) 2012-01-31
FR17C1013I1 (fr) 2017-06-02
EP2343298A1 (en) 2011-07-13
US20140243360A1 (en) 2014-08-28
BRPI0619817A8 (pt) 2018-01-23
EA201200132A8 (ru) 2018-10-31
PL3184526T3 (pl) 2019-04-30
IL231992A (en) 2016-11-30
CN103214484B (zh) 2016-07-06
PT2474545T (pt) 2017-02-14
PT3184526T (pt) 2018-12-19
EP2426129A1 (en) 2012-03-07
PT2426129T (pt) 2017-02-10
HK1160137A1 (en) 2012-08-10
JP5710430B2 (ja) 2015-04-30
EP2474545A1 (en) 2012-07-11
ES2373688T3 (es) 2012-02-07
TW201240663A (en) 2012-10-16
EP2348023B1 (en) 2015-05-06
EP3184526A1 (en) 2017-06-28
RS54683B1 (sr) 2016-08-31
KR101218214B1 (ko) 2013-01-04
KR101391900B1 (ko) 2014-05-02
PT2348023E (pt) 2015-09-15
EA035795B1 (ru) 2020-08-11
US11331320B2 (en) 2022-05-17
CN103254190A (zh) 2013-08-21
US8530485B2 (en) 2013-09-10
KR20120120462A (ko) 2012-11-01
JP5017278B2 (ja) 2012-09-05
EP3838903A1 (en) 2021-06-23
RS55634B1 (sr) 2017-06-30
RS55632B1 (sr) 2017-06-30
EP3466953A1 (en) 2019-04-10
NZ778831A (en) 2022-12-23
US20220395506A1 (en) 2022-12-15
HRP20170162T1 (hr) 2017-03-24
WO2007070514A1 (en) 2007-06-21
PL2455382T3 (pl) 2017-04-28
EP1966202A1 (en) 2008-09-10
AU2006326548A1 (en) 2007-06-21
US20160346286A1 (en) 2016-12-01
HUE030418T2 (en) 2017-05-29
HUS1700017I1 (hu) 2017-05-29
FR17C1013I2 (fr) 2018-05-04
RS52101B (sr) 2012-06-30
EP2348023B9 (en) 2017-03-08
TWI553008B (zh) 2016-10-11
KR101324737B1 (ko) 2013-11-05
SI2348023T1 (sl) 2015-10-30
HK1124840A1 (en) 2009-07-24
HRP20150837T1 (hr) 2015-09-11
UA98449C2 (en) 2012-05-25
US20180338978A1 (en) 2018-11-29
CN103214483B (zh) 2014-12-17
IL248938A0 (en) 2017-01-31
SI2343299T1 (sl) 2016-06-30
DK2474545T3 (en) 2017-01-23
DK3184526T3 (en) 2019-01-14
CY1112762T1 (el) 2015-10-07
PL2343299T3 (pl) 2016-09-30
TW200728275A (en) 2007-08-01
PT2343299E (pt) 2016-02-26
BRPI0619817B1 (pt) 2020-03-17
HK1160111A1 (en) 2012-08-10
ZA200805165B (en) 2012-05-30
US20070135461A1 (en) 2007-06-14
LT2455382T (lt) 2017-02-10
CY2013006I2 (el) 2015-10-07
DK2348023T5 (da) 2017-05-15
BRPI0619817B8 (pt) 2021-05-25
CN103214484A (zh) 2013-07-24
JP2011252024A (ja) 2011-12-15
RS54181B1 (sr) 2015-12-31
EP2426129B1 (en) 2016-11-02
TW201522344A (zh) 2015-06-16
HUE028588T2 (hu) 2016-12-28
TW201704235A (zh) 2017-02-01
CN101448826A (zh) 2009-06-03
US8415362B2 (en) 2013-04-09
EP2455382B1 (en) 2016-10-26
CA2632466C (en) 2013-09-24
JP5876026B2 (ja) 2016-03-02
US8946245B2 (en) 2015-02-03
CN103254190B (zh) 2016-12-07
SI2455382T1 (sl) 2017-03-31
EA201200132A1 (ru) 2017-01-30
TWI468162B (zh) 2015-01-11
US20160272648A1 (en) 2016-09-22
RS55576B1 (sr) 2017-05-31
CY1121202T1 (el) 2020-05-29
EP2474545B1 (en) 2016-11-09
PL2474545T3 (pl) 2017-04-28
AU2006326548B2 (en) 2012-04-05
TWI630207B (zh) 2018-07-21
US10398699B2 (en) 2019-09-03
EP2455382A1 (en) 2012-05-23
US20110224157A1 (en) 2011-09-15
MY159449A (en) 2017-01-13
HRP20170200T1 (hr) 2017-04-07
EP2343299B1 (en) 2015-11-04
EP3184526B1 (en) 2018-10-03
ECSP12008540A (es) 2012-04-30
US9079912B2 (en) 2015-07-14
LU92137I9 (sr) 2019-01-04
US20190125750A1 (en) 2019-05-02
TWI410407B (zh) 2013-10-01
NZ569015A (en) 2011-06-30
HRP20150837T2 (hr) 2017-04-07
US9662335B2 (en) 2017-05-30
DK2343299T3 (en) 2016-01-18
US8933086B2 (en) 2015-01-13
KR20110137406A (ko) 2011-12-22
JP2014051531A (ja) 2014-03-20
ME01312B (me) 2013-12-20
IL192019A0 (en) 2008-12-29
HUE025173T2 (hu) 2016-01-28
JP2009519340A (ja) 2009-05-14
MY162590A (en) 2017-06-30
JP6138865B2 (ja) 2017-05-31
EP3838903B1 (en) 2023-11-22
CY2017015I2 (el) 2017-09-13
HRP20160112T1 (hr) 2016-02-26
CA2632466A1 (en) 2007-06-21
ES2543904T3 (es) 2015-08-25
DK2426129T3 (en) 2017-01-16
LTPA2013002I1 (lt) 2013-02-25
LU92137I2 (fr) 2014-01-18
FR13C0007I2 (fr) 2014-03-07
TWI664182B (zh) 2019-07-01
ES2867505T3 (es) 2021-10-20
US9974790B2 (en) 2018-05-22
US11744832B2 (en) 2023-09-05
EP3466953B1 (en) 2021-02-03
ES2970354T3 (es) 2024-05-28
SG10202003901UA (en) 2020-05-28
PL2426129T3 (pl) 2017-04-28
JP2015193641A (ja) 2015-11-05
ES2561507T3 (es) 2016-02-26
EA019504B1 (ru) 2014-04-30
CN103214483A (zh) 2013-07-24
EA201691294A2 (ru) 2018-11-30
US10639310B2 (en) 2020-05-05
CR10065A (es) 2008-07-10
ES2612489T3 (es) 2017-05-17
ES2700433T3 (es) 2019-02-15
ECSP088540A (es) 2008-07-30
KR20120120463A (ko) 2012-11-01
FR13C0007I1 (fr) 2013-01-03
KR101216055B1 (ko) 2012-12-27
LT3184526T (lt) 2019-02-25
EP1966202B1 (en) 2011-09-21
US9814722B2 (en) 2017-11-14
PL2348023T3 (pl) 2015-11-30
US20150238492A1 (en) 2015-08-27
ES2611588T3 (es) 2017-05-09
US20140005210A1 (en) 2014-01-02
IL192019A (en) 2014-04-30
CY1118607T1 (el) 2017-07-12
SI2474545T1 (sl) 2017-03-31
US9206187B2 (en) 2015-12-08
ES2543904T9 (es) 2017-05-29
US20090181959A1 (en) 2009-07-16
DK2348023T3 (da) 2015-06-22
CY1118506T1 (el) 2017-07-12
EP2348023A1 (en) 2011-07-27
BRPI0619817A2 (pt) 2011-11-22
EP2343299A1 (en) 2011-07-13
LT2474545T (lt) 2017-02-27
PT2455382T (pt) 2017-01-31
US20170071947A1 (en) 2017-03-16
HUE032337T2 (en) 2017-09-28
SI2426129T1 (sl) 2017-02-28
ATE525374T1 (de) 2011-10-15
DK2455382T3 (da) 2017-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10398699B2 (en) Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b]pyridines and pyrrolo[2,3-b]pyrimidines as janus kinase inhibitors
US20130137681A1 (en) HETEROARYL SUBSTITUTED PYRROLO[2,3-b]PYRIDINES AND PYRROLO[2,3-b]PYRIMIDINES AS JANUS KINASE INHIBITORS
HK1124840B (en) Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b]pyridines and pyrrolo[2,3-b]pyrimidines as janus kinase inhibitors
HK1160115B (en) Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b]pyridines and pyrrolo[2,3-b]pyrimidines as janus kinase inhibitors