TW202245774A - 嘧啶或吡啶並雜環類腺苷受體抑制劑及其製備方法和用途 - Google Patents
嘧啶或吡啶並雜環類腺苷受體抑制劑及其製備方法和用途 Download PDFInfo
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Abstract
本發明公開了一種新型嘧啶/吡啶並雜環類腺苷受體抑制劑及其製備方法和用途，其為如式II所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物。藥物活性數據表明，該類化合物對A2a或/和A2b具有較好的抑制作用，且部分本發明化合物表現出較好的選擇性，可以用於治療與A2a或/和A2b受體相關疾病。
Description
本發明屬於藥物化學技術領域，具體涉及一類新型嘧啶/吡啶並雜環類化合物，其可以作為A2a或/和A2b腺苷受體抑制劑，用於治療與A2a或/和A2b受體相關疾病。
本申請要求申請日為2021/2/5的中國專利申請202110162277.4、申請日為2021/2/9的中國專利申請202110175181.1的優先權、申請日為2021/6/18的中國專利申請202110675861.X的優先權、申請日為2021/6/22的中國專利申請202110694192.0的優先權、申請日為2021/11/3的中國專利申請202111292681.X的優先權、申請日為2021/11/3的中國專利申請202111293263.2的優先權、申請日為2022/1/21的中國專利申請202210071111.6的優先權。本申請引用上述中國專利申請的全文。
腺苷(Adenosine，ADO)作為一種神經遞質和調質，廣泛分佈於神經系統、心血管系統、腎臟、胃腸道等組織，調節著各種重要的生理功能。ADO通過與其特異的受體A1R、A2aR、A2bR和A3R結合，參與了多種疾病的病理生理過程。在ADO的四種受體中，A1R和A2aR在腦內的分佈及數量明顯多於另外兩種受體，且與ADO的親和力也更強。
腺苷受體是存在於機體大多數組織細胞表面，A1受體主要存在於腦組織、脊髓和心臟中。心臟中的A1受體分佈於心房肌、心室肌、竇房結和房室結細胞表面。腺苷及其類似物通過興奮A1受體而抑制腺苷酸環化酶（AC）、G蛋白和兒茶酚胺，促進外向鉀離子流而產生負性變時、變力和負性傳導作用；通過受體後信號轉導機制，即激活G蛋白，進而激活磷脂酶C（PLC），PLC激活磷脂醯肌醇系統生成三磷酸肌醇（IP3）和甘油二酯（DG），DG激活相應蛋白激酶C（PKC），進而激活ATP敏感性鉀通道（KATP）離子流，使心肌產生缺血型預處理（PC）作用；激活竇房結和房室結細胞一氧化氮合成酶，使一氧化氮合成增加，抑制慢反應自律性細胞的內向鈣離子流而產生負性變時、負性傳導作用於擴血管作用。A2a受體主要分佈於腦組織中的多巴胺富集區，其次是腎乳頭部、血管（主動脈和冠狀動脈等）內皮細胞、血小板及多形核白細胞膜。A2b受體主要分佈於消化系統。腺苷及其類似物與A2受體結合後，可激活AC，使環磷酸腺苷（cAMP）形成增加，進而擴張血管平滑肌和抑制中性粒細胞的毒性作用。腺苷A3受體廣泛分佈於大鼠、兔、狗、羊及人體的脾、心、腎等臟器以及大腦的不同區域和炎性細胞的表面。A3受體與其放射性配基結合後具有抑制AC增加cAMP，產生PC的作用；同時通過百日咳毒素敏感的G蛋白而激活PLC，生成IP3和DG，進而激活PKC，亦產生PC作用；腺苷興奮A3受體後可促進肥大細胞脫顆粒，增加肥大細胞過敏介質的釋放。
根據已經公開文獻，A2a拮抗劑已被建議用於管理和治療例如帕金森氏症以及癌症；A2b的調節已被建議用於管理和治療例如包括哮喘在內的慢性肺病；A3的調節被建議用於管理和治療例如哮喘和慢性阻塞性肺病、青光眼、癌症和中風。
目前，腺苷受體抑制劑越來越多地受到關注。一些有潛力的A2a或/和A2b抑制劑被陸續發現。但是獲得抑制作用更強、選擇性更好的A2a和/或A2b抑制劑，特別是A2a/A2b雙抑制劑，仍具有重要的意義和開發價值。
第一方面，本發明提供了一種如式II所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、以及其藥學上可接受的鹽的溶劑合物：
式II
其中，R
2為H、CN、鹵原子、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar；優選地，R
2為NH
2或Ar；
Re和Rf獨立地為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷基-CO-、C
1-4鹵代烷基-CO-、3-6元環烷基或3-6元雜環烷基；或者Re和Rf與連接的N原子一起形成4-6元環，所述4-6元環任選地被一個或多個選自CN、OH、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基和鹵原子的取代基取代；優選地，所述4-6元環為4-6元雜環烷基；優選地，N(Re)(Rf)為NH
2、四氫吡咯基、哌啶基、哌𠯤基或嗎福林基；
Ar為芳基或雜芳基；所述芳基優選為苯基或萘基，更優選為苯基；所述雜芳基優選為5-6元雜芳環，更優選為吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑、噻唑基，更優選為吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基，更優選吡啶基；所述芳基和所述雜芳基任選獨立地被一個或多個Rc取代；優選地，Ar被1、2、3或4個Rc取代；Rc獨立地為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、CN或鹵原子；優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具體地，Ar可選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
；更具體地，Ar為
；
在本發明式II的一些實施方案中，R
2為NH
2；在另一些實施方案中，R
2為Ar，優選為
；
X
1為N或C-Ra；優選地，X
1為N或CH；更優選地，X
1為CH；
X
2、X
3、X
4獨立地為O、S、N、N-Ra、CH
2、C-Ra或C=O；優選地，X
2、X
3、X
4、以及與X
2、X
4直接相連的原子共同形成被1、2或3個Ra取代的五元雜芳環，所述五元雜芳環優選為吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、異㗁唑基、異噻唑基、吡唑基、㗁唑基、噻唑基；
Z
1為N或CH；
當Z
1為N時，Z
1所在6元雜環的頂點原子之間的單雙建可根據各頂點原子的化合價和所連基團進行重新確定；
Y
1、Y
2、Y
3獨立地為N和C-Rb；優選地，Y
1為C-Rb，Y
2為N，Y
3為N；更優選地，Y
1為CH，Y
2為N，Y
3為N；
Ra獨立地為H、CN、NH
2CO-、鹵原子、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、3-6元環烷基、3-6元雜環烷基、芳基或5-6元雜芳基；優選地，Ra獨立地為H、CN、鹵原子、甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、環丙基、環丁基、環己基、氮雜環丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任選地被一個或多個選自鹵原子、CN、C
1-4烷基和C
1-4鹵代烷基的取代基取代；更優選地，Ra獨立地為H、Br、Cl、F、CN、CHF
2、CF
3、NH
2CO-、甲基、吡唑基、苯基、環丙基或5-甲基-呋喃-2-基；
Rb獨立地為H、CN、C
1-4烷基、C1-4鹵代烷基或鹵原子；優選地，Rb獨立地為H、Cl、F、CN、甲基、乙基、異丙基或三氟甲基；更優選地，Rb獨立地為H、Cl、甲基或三氟甲基；
L為-(CH
2)n-、-(CD
2)n-、-NH-(CH
2)n-、-O-(CH
2)n-或-S-(CH
2)n-；優選地，L為CH
2或CD
2；更優選地，L為CH
2；所述D是指氘；
為芳基或5-6元雜芳基，優選為苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、
、
，更優選為苯基、吡啶基；
R
1獨立地為H、CN、鹵原子、NH
2、氨基羰基-C
1-4烷基、C
1-4烷基磺醯基、C
1-4烷基磺醯基氨基、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、C
1-4烷基-O-C
1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C
1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C
1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C
1-4烷基和苯氧基-C
1-4烷基；優選地，R
1獨立地為F、CN、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；R
1任選地被一個或多個選自甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子、COOH和2-羥基-丙-2-基的取代基取代；
具體地，R
1為F、-OCH
3、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、CN或
；優選地，R
1為
或
；
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
為
、
、
、
、
、
、
、
或
；
或者，兩個相鄰R
1可以連同連接它們的原子一起環化形為飽和5-6元環或者不飽和5-6元環，所述飽和5-6元環和不飽和5-6元環任選地被一個或多個選自C
1-4烷基、C
1-4烷氧基和鹵原子的取代基取代；優選地，所述飽和5-6元環和不飽和5-6元環為吡唑環、㗁唑環、噻唑環、異噻唑環、異㗁唑環、吡啶環、吡咯環、噻吩環、呋喃環、咪唑環、苯環、嘧啶環、吡𠯤環、嗒𠯤環或1,3-二氧環戊環；更優選地，兩個R
1與
共同環化為如下基團：
、
、
、
、
、
；
m為0、1、2或3；優選為1或2；更優選為1；
n為0、1、2或3，優選為1或2；更優選為1；
表示單鍵或雙鍵。
在本發明式II的一些實施方案中，Ar為苯基，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，Ar為吡啶基，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，Z
1為C，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為S，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為S，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為S，X
3為CH，X
4為C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為S，X
3為CH，X
4為C-Br，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為S，X
3為N，X
4為C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
4為S，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
4為S，X
2和X
3獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
4為S，X
2為C-Ra，X
3為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為O，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為N-Ra，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2、X
3和X
4獨立地為C-Ra、N或N-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2為N，X
3為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2與X
3以雙鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2與X
3以雙鍵相連，X
2和X
3獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2與X
3以單鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，X
2與X
3以單鍵相連，X
2和X
3獨立地選自NH、CH
2和C=O；優選地，X
2和X
3獨立地選自CH
2和C=O，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
；優選為
、
、
、
、
、
、
；更優選為
。
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
；優選為
。
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
為
。
在本發明式II的一些實施方案中，Y
1、Y
2、Y
3均為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，Y
1為CH、Y
2為CH，Y
3為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，Y
1為CH，Y
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，Y
3為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，L為CH
2，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，L為CD
2，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，R
2為NH
2，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，
為吡啶基，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，R
1為
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，
選自
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，
選自
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式II的一些實施方案中，
選自
、
、
和
。
在本發明式II的一些實施方案中，R
2為Ar；X
3與X
4之間以單鍵或雙鍵相連接；當X
2與X
3以單鍵相連時，X
2和X
3獨立地為NH、CH
2或C=O；優選地，X
2和X
3獨立地為CH
2或C=O；當X
2與X
3以雙鍵相連時，X
2和X
3獨立地為N和C-Ra。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式II-a所示結構：
式II-a
其中，X
2、X
3、X
4、Y
1、Y
2、L、R
1、m、
如本發明中的任一方案所定義；
X
5為N、CH或C=O，優選為N或CH。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，Y
1為CH，Y
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
5為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
5為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，L為CH
2，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，L為CD
2，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，R
1為
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為S，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為S，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為S，X
3為CH，X
4為C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為S，X
3為CH，X
4為C-Br，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為S，X
3為N，X
4為C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
4為S，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
4為S，X
2和X
3獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
4為S，X
2為C-Ra，X
3為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為O，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2為N-Ra，X
3和X
4獨立地為N或C-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-a中，X
2、X
3和X
4獨立地為C-Ra、N或N-Ra，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式II-b所示結構：
式II-b
其中，X
2、X
3、X
4、Y
1、Y
2、L、R
1、m、
如本發明中的任一方案所定義；
X
6和X
7選自N、O、S、NH、CH和CH
2。
在本發明的一些實施方案中，式II-b中，X
6為NH，X
7為N。
在本發明的一些實施方案中，式II-b中，結構單元
為
，例如
。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式II-c所示結構：
式II-c
其中，Ra、R
1如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II-c中，R
1為
。
在本發明的一些實施方案中，式II-c中，Ra選自甲基、Br、Cl、CN、CHF
2、CF
3和環丙基。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式I’所示結構，
，
式I’
其中，各基團如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式I’-a所示結構，
式I’-a
X
4-1和X
5-1獨立地為N或CH；
p為0、1、2、3或4；
X
1、X
2、X
3、Y
1、Y
2、R
1、Rc、
如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
1為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
2和X
3以雙鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
2和X
3以單鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
3為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
4-1為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，X
5-1為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-a中，Y
1為CH，Y
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式II所示化合物具有式I’-b所示結構，
式I’-b
其中，R
3、R
4和R
5獨立地為Rc；
R
6為Rb；
R
1、Rb、Rc、X
1、X
2、X
3、
如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
2和X
3以雙鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
2和X
3以單鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
3為H，CH
3、CH
3O或Cl，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
4為H、CH
3、Cl、CH
3O、F或CN，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
5為H或鹵原子；優選為H或F，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
6為H、C
1-4烷基或C
1-4鹵代烷基；優選為H或CH
3，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
3為CH
3，R
4為CN，R
5為H，R
6為H，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
1為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
1為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，X
3為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I’-b中，R
1為
、
或
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式I的一些實施方案中，式II所示化合物具有式I-c、式I-d或式I-e所示的結構，
式I-c 式I-d 式I-e
其中，X
1、X
2、X
3、R
1、R
3、R
5、R
6如本發明中的任一方案所定義。
另一方面，本發明提供了一種如式II所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、以及其藥學上可接受的鹽的溶劑合物：
式II
其中，R
2為H、CN、鹵原子、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar；優選地，R
2為NH
2或Ar；
Re和Rf獨立地為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷基-CO-、C
1-4鹵代烷基-CO-、3-6元環烷基或3-6元雜環烷基；或者Re和Rf與連接的N原子一起形成4-6元環，所述4-6元環任選地被一個或多個選自CN、OH、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基和鹵原子的取代基取代；優選地，所述4-6元環為4-6元雜環烷基；優選地，N(Re)(Rf) 為NH
2、四氫吡咯基、哌啶基、哌𠯤基或嗎福林基；
Ar為芳基或雜芳基；所述芳基優選為苯基或萘基，更優選為苯基；所述雜芳基優選為5-6元雜芳環，更優選為吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑、噻唑基，更優選為吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基，更優選吡啶基；所述芳基和所述雜芳基任選獨立地被一個或多個Rc取代；優選地，Ar被1、2、3或4個Rc取代；Rc獨立地為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、CN或鹵原子；優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具體地，Ar可選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
；更具體地，Ar為
。
Ra獨立地為H、CN、NH
2CO-、鹵原子、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、3-6元環烷基、3-6元雜環烷基、芳基或5-6元雜芳基；優選地，Ra獨立地為H、CN、鹵原子、甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、環丙基、環丁基、環己基、氮雜環丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任選地被一個或多個選自鹵原子、CN、C
1-4烷基和C
1-4鹵代烷基的取代基取代；更優選地，Ra獨立地為H、Br、Cl、F、CN、CHF
2、CF
3、NH
2CO-、甲基、吡唑基、苯基、環丙基或5-甲基-呋喃-2-基；
在本發明的一些實施方案中，R
2為NH
2；在另一些實施方案中，R
2為Ar，優選
；
X
1為N或C-Ra；優選地，X
1為N或CH；更優選地，X
1為CH；
X
2、X
3、X
4獨立地為O、S、N、N-Ra、CH
2、C-Ra或C=O；優選地，X
2、X
3、X
4、以及與X
2、X
4直接相連的原子共同形成被1-3個Ra取代的五元雜芳環，所述五元雜芳環優選為吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、異㗁唑基、異噻唑基、吡唑基、㗁唑基、噻唑基；
Z
1為N或CH；
當Z
1為N時，Z
1所在6元雜環的頂點原子之間的單雙建可根據各頂點原子的化合價和所連基團進行重新確定；
Y
1、Y
2、Y
3獨立地為N或C-Rb；優選地，Y
1為C-Rb，Y
2為N，Y
3為N；更優選地，Y
1為CH，Y
2為N，Y
3為N；
Rb獨立地為H、CN、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基或鹵原子；優選地，Rb獨立地為H、Cl、F、CN、甲基、乙基、異丙基或三氟甲基；更優選地，Rb獨立地為H、Cl、甲基或三氟甲基；
L為-(CH
2)n-、-(CD
2)n-、-NH-(CH
2)n-、-O-(CH
2)n-或-S-(CH
2)n-；優選地，L為CH
2或CD
2；更優選地，L為CH
2；所述D是指氘；
為芳基或5-6元雜芳基；優選苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、
、
，更優選苯基、吡啶基；
R
1獨立地為H、鹵原子、NH
2、氨基羰基-C
1-4烷基、C
1-4烷基磺醯基、C
1-4烷基磺醯基氨基、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、C
1-4烷基-O-C
1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C
1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C
1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C
1-4烷基或苯氧基-C
1-4烷基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；R
1任選地被一個或多個選自甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子、COOH和2-羥基-丙-2-基的取代基取代；
具體地，R
1為F、-OCH
3、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
；優選地，R
1為
或
；
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
為
、
、
、
、
、
、
、
或
；
在本發明式II的一些實施方案中，m=2，兩個相鄰R
1可以環化形為飽和5-6元環或者不飽和5-6元環，且這些環可以任選地被一個或多個選自C
1-4烷基、C
1-4烷氧基和鹵原子的取代基取代；優選地，兩個相鄰R
1可以環化形為吡唑環、㗁唑環、噻唑環、異噻唑環、異㗁唑環、吡啶環、吡咯環、噻吩環、呋喃環、咪唑環、苯環、嘧啶環、吡𠯤環、嗒𠯤環、1,3-二氧環戊環；優選地，兩個R
1與
共同環化為如下基團：
、
、
、
、
、
；
m為0、1、2或3；優選為1或2；更優選為1；
n為0、1、2或3；優選為1或2；更優選為1。
在本發明式II的一些實施方案中，R
1獨立地為H、NH
2、氨基羰基-C
1-4烷基、C
1-4烷基磺醯基、C
1-4烷基磺醯基氨基、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、C
1-4烷基-O-C
1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C
1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C
1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C
1-4烷基或苯氧基-C
1-4烷基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；R
1任選地被一個或多個選自甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子、COOH和2-羥基-丙-2-基的取代基取代；
具體地，R
1為
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
為
、
、
、
或
。
在本發明式II的一些實施方案中，結構單元
選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
；優選為
、
、
、
、
、
、
；更優選為
。
在本發明式II的一些實施方案中，R
1獨立地為H、NH
2、氨基羰基-C
1-4烷基、C
1-4烷基磺醯基、C
1-4烷基磺醯基氨基、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、C
1-4烷基-O-C
1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C
1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C
1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C
1-4烷基或苯氧基-C
1-4烷基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；優選地，R
1獨立地選自C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；且R
1任選地被一個或多個下述基團取代：甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子、COOH；
具體地，R
1為
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
。
另一方面，本發明提供了一種式I所示的化合物、其藥學上可接受的鹽：
，
式I
其中，X
1為N或C-Ra；Ra獨立地為H、CN、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基或鹵原子；優選地，Ra獨立地為H、Cl、F、CN、甲基、乙基、異丙基或三氟甲基；更優選地，Ra獨立地為H、Cl、甲基或三氟甲基；優選地，X
1為CH；
X
2與X
3之間可以單鍵或雙鍵相連接；當X
2與X
3以單鍵相連時，X
2、X
3獨立地為NH、CH
2或C=O，優選X
2、X
3獨立地選自CH
2或C=O；當X
2與X
3以雙鍵相連時，X
2、X
3獨立地為N或C-Ra；
Y
1、Y
2、Y
3獨立地為N和C-Rb；Rb獨立地為H、CN、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基或鹵原子；優選地，Rb獨立地為H、Cl、F、CN、甲基、乙基、異丙基或三氟甲基；更優選地，Rb獨立地為H、Cl、甲基或三氟甲基；
L為-(CH
2)n-、-(CD
2)n-、-NH-(CH
2)n-、-O-(CH
2)n-或-S-(CH
2)n-；優選地，L為CH
2或CD
2；更優選地，L為CH
2；所述D是指氘；
Ar為芳基或雜芳基；所述芳基優選苯基和萘基，更優選苯基；所述雜芳基優選5-6元雜芳環，更優選吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑、噻唑基，更優選吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基，更優選吡啶基；所述芳基和所述雜芳基任選獨立地被一個或多個Rc取代；Rc獨立地為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、CN和鹵原子；優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更優選地，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具體地，Ar可選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
；更具體地，Ar為
。
在本發明式I的一些實施方案中，結構單元
選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
。
在本發明式I的一些實施方案中，結構單元
為
。
在本發明式I的一些實施方案中，所述化合物由式I-a所示，
式I-a
其中，X
1、X
2、X
3、Y
1、Y
2、R
1、Rc如本發明中的任一方案所定義；
X
4和X
5獨立地為N或CH；
p為0、1、2、3或4。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
1為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
2和X
3以雙鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
2和X
3以單鍵相連，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
3為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
4為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，X
5為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-a中，Y
1為CH，Y
2為N，其他變量如上所述定義。
在本發明式I的一些實施方案中，所述化合物由式I-b所示，
式I-b
其中，R
1、X
1、X
2、X
3如式I-a所定義；
X
2和X
3之間以雙鍵相連；或者X
2與X
3之間以單鍵連接；
R
3為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、鹵原子或CN；優選地，R
3選自H，CH
3、CH
3O或Cl；
R
4為H、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、鹵原子或CN；優選地，R
4選自H、CH
3、Cl、CH
3O、F或CN；
R
5為H或鹵原子；優選地，R
5為H或F；
R
6為H、C
1-4烷基或C
1-4鹵代烷基；優選地，R
6為H，或者R
6為CH
3。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，R
3為CH
3，R
4為CN，R
5為H，R
6為H，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，X
1為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，X
1為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，X
2為N，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，X
3為CH，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明的一些實施方案中，式I-b中，R
1為
、
或
，其他變量如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式I的一些實施方案中，所述化合物由式I-c、式I-d或式I-e所示，
式I-c 式I-d 式I-e
其中，X
1、X
2、X
3、R
1、R
3、R
5、R
6如本發明中的任一方案所定義。
在本發明式I的一些實施方案中，Ar可選自以下任一結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
。
在本發明式I的一些實施方案中，R
1獨立地為H、NH
2、氨基羰基-C
1-4烷基、C
1-4烷基磺醯基、C
1-4烷基磺醯基氨基、C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、C
1-4烷基-O-C
1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C
1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C
1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C
1-4烷基或苯氧基-C
1-4烷基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；優選地，R
1獨立地為C
1-4烷氧基、C
1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基；且R
1任選地被一個或多個下述基團取代：甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子和COOH；
具體地，R
1為
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
在本發明式I的一些實施方案中，R
1為
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
本發明中，不同實施方案中的取代基可以相互組合，其組合獲得的實施方案仍屬於本發明記載的實施方案。
在本發明的一些實施方案中，所述化合物選自：
。
另一方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包含有效預防或治療量的如上所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、以及其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，以及任選的一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
另一方面，本發明提供了一種如上所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、以及其藥學上可接受的鹽的溶劑合物在用於製備治療或/和預防哺乳動物(包括人)與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症的藥物中的用途。
另一方面，本發明提供了一種如上所述的藥物組合物在用於製備治療或/和預防哺乳動物(包括人)與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症的藥物中的用途。
另一方面，本發明提供了一種用於在有需要的哺乳動物(包括人)中治療和/或預防與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症的方法，該方法包括給有需要的哺乳動物施用（優選為治療有效量的）如上所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、以及其藥學上可接受的鹽的溶劑合物。
另一方面，本發明提供了一種用於在有需要的哺乳動物(包括人)中治療和/或預防與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症的方法，該方法包括給有需要的哺乳動物施用（優選為治療有效量的）如上所述的藥物組合物。
在本發明的一些實施方案中，所述與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症為癌症，所述癌症可以為實體瘤或非實體瘤。
說明和定義
在本發明中，所選或可選取代基能夠以取代基的任意可連接位置與被修飾基團進行連接。
在本發明中，所述磺醯基是指-S(=O)
2-；所述二C
1-4烷基磷氧基是指有兩個C
1-4烷基直接與磷原子相連接的P(=O)，例如二甲基磷氧基。
在本發明，特別是第一方面中，所述鹵原子是指氟、氯、溴、碘；所述“鹵代”是指取代基中的一個或多個氫原子被鹵原子取代後所形成的基團。
術語“烷基”是指碳原子之間、以及碳原子與氫原子之間均以單鍵相連的直鏈或支鏈烴基。烷基優選C
1-4或者C
1-6的烷基；C
1-4烷基”表示具有1-4個碳原子的烷基，“C
1-6烷基”表示具有1-6個碳原子的烷基。烷基的實施例包括但限於：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、正己基。
術語“環烷基”是指原子之間以單鍵相連形成環的飽和烴基。C
3-7環烷基是指含有3-7個碳原子的環烷基。環烷基的實施例包括但不限於環丙基、環丁烷、環戊烷、環己烷、環庚烷等。
術語“螺環”是指單環之間共用一個碳原子的多環烴基；螺環烷基優選C
5-13、C
6-12、或者C
7-
11螺環烷基；螺環烷基的實施例包括但不限於螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[3.3]庚烷、螺[3.4]辛烷、螺[4.4]壬烷、螺[4.5]癸烷、螺[5.5]十一烷、螺[5.6]十二烷、螺[6.6]十三烷、螺[6.7]十四烷。
術語“橋環”是指共用兩個或兩個以上碳原子的多環烴基。橋環基優選4-13元橋環、5-12元橋環基、6-12元橋環基、6-11元橋環基、7-11元橋環基。橋環基的實施例包括但不限於二環[3.1.0]己基、二環[3.2.0]庚基、二環[3.3.0]辛基、二環[4.1.0]庚基、二環[4.2.0]辛基、二環[4.3.0]壬基、二環[4.4.0]癸基、二環[3.2.1]辛基。術語“烷氧基”是指通過氧橋連接的烷基，也即是烷基將羥基中的氫原子取代所得到的基團。烷氧基優選C1-4或C1-6烷氧基；烷氧基的實施例包括但不限於甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、新戊氧基、正己基氧基。
術語“鹵代烷基”是指一個或多個氫原子被鹵原子取代的烷基。鹵代烷基優選C
1-6或者C
1-4鹵代烷基。鹵代烷基的實施例包括但不限於一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基。
術語“鹵代烷氧基”是指一個或多個氫原子被鹵原子取代的烷氧基。鹵代烷氧基的實施例包括但不限於三氟甲氧基、三氯甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2,2,2-三氯乙氧基。
術語“雜環烷基”是指環狀骨架結構中的一個或多個碳原子被雜原子取代的環烷基；所述雜原子一般選自N、O、S。雜環烷基優選3-6元、3-7元、4-6元、4-7元、5-6元、5-7元的雜環烷基。雜環烷基的實施例包括但不限於氮雜環丁基、氧雜環丁基、四氫噻吩基、四氫呋喃基、四氫吡咯基、四氫吡唑基、四氫吡喃基、哌啶基、哌𠯤基、嗎福林基。
術語“雜螺環基”是指螺環骨架結構中的一個或多個碳原子被雜原子取代的螺環基，所述雜原子選自N、O、S。優選地，雜螺環基選自螺環骨架碳原子被1-3個選自N、O、S的雜原子取代的如下螺環基：螺[2.2]戊基、螺[2.3]己基、螺[2.4]庚基、螺[2.5]辛基、螺[2.6]壬基、螺[3.3]庚基、螺[3.4]辛基、螺[3.5]壬基、螺[3.6]癸基、螺[4.4]壬基、螺[4.5]癸基、螺[4.6]十一烷基、螺[5.5]十一烷基、螺[5.6]十二烷基、螺[6.6]十三烷基、螺[6.7]十四烷基。雜螺環基的實施例還包括2-氧雜-7-氮雜螺[5.3]壬烷-7-基、2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-基、2,7-二氮雜螺[5.3]壬基、2,7-二氧雜螺[5.3]壬基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基、1-氧雜-4,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基、1-氧雜-4,8-二氮雜螺[5.4] 癸烷-8-基、3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基、7-氮雜螺[3.5]癸烷-7-基、1-氧雜-4,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-4-基、6-氧雜-2,9-二氮雜螺[4.5]癸烷-9-基、9-氧雜-2,6-二氮雜螺[4.5]癸烷-6-基、3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基、4-氧雜-1,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基。
術語“含氮雜螺環基”是指至少含一個N原子的雜螺環基，其還可以含有其他雜原子，如N、O、S；優選地，所述含氮雜螺環基為含有1個N和1個O的雜螺環；更優選地，所述含氮雜螺環通過其N原子與被取代基結構相連。
術語“雜橋環基”是指構成橋環骨架的一個或多個碳原子被雜原子取代的橋環基，所述雜原子選自N、O、S。優選地，雜橋環基選自橋環骨架碳原子被1-3個選自N、O、S的雜原子取代的如下橋環基：二環[3.1.0]己基、二環[3.2.0]庚基、二環[3.3.0]辛基、二環[4.1.0]庚基、二環[4.2.0]辛基、二環[4.3.0]壬基、二環[4.4.0]癸基、二環[3.2.1]辛基。雜橋環基的實施例包括但限於1,4-二氮雜二環[4.4.0]癸烷-4-基、1,4-二氮雜二環[4.3.0]-壬烷-4-基、8-氧雜-1,4-二氮雜二環[4.4.0]癸烷-4-基、1,4-二氮雜二環[4.4.0]癸烷-4-基、4,7-二氮雜二環[4.3.0]壬烷-4-基、2-氧雜-5-氮雜二環[2.2.1]庚烷-5-基、3,7-二氮雜二環[4.3.0]壬烷-3-基、3,7-二氮雜二環[3.3.0]辛烷-3-基、3,7-二氮雜二環[4.4.0]癸烷-3-基、3,6-二氮雜二環[4.3.0]壬烷-3-基、3,6-二氮雜二環[4.4.0]癸烷-3-基、3,6,9-三氮雜二環[4.4.0]癸烷-3-基。
術語“芳基”是指不飽和的、通常為芳族的烴基，其可為單環或稠合在一起的多個環。芳基的實例包括但不限於苯基、萘基。
術語“雜芳基”是指穩定的單環或多環的芳族烴，其包含至少1個雜原子環成員，所述雜原子選自N、O、S，當所述雜芳基含N原子時，還包括其氮氧化物。雜芳基包括5-6元雜芳基、8-14元稠雜芳基。雜芳基的實例包括但不限於吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、吡𠯤基、嗒𠯤基、三𠯤基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、異塞唑基、吡啶基、嘧啶基、吲唑基、吲哚基、異喹啉基、喹喔啉基、苯並㗁唑基、苯並呋喃基、苯並噻吩基、苯並噻唑基、苯並咪唑基、喹啉基、喹唑啉基。
術語“被取代的”是指特定基團上的一個或多個氫原子被取代基取代，可以包括重氫和氫的變體，只要特定基團的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。
本發明所用的術語“組合物”意指包括包含指定量的各指定成分的產品，以及直接或間接從指定量的各指定成分的組合產生的任何產品。本發明所屬技術領域具通常知識者可以通過改變本發明藥物組合物中各活性成分的實際劑量水平，以便所得的活性化合物量能有效針對具體患者、組合物和給藥方式得到所需的治療反應。劑量水平需根據具體化合物的活性、給藥途徑、所治療病況的嚴重程度以及待治療患者的病況和既往病史來選定。但是，本領域的做法是，化合物的劑量從低於為得到所需治療效果而要求的水平開始，逐漸增加劑量，直到得到所需的效果。在本發明中，所述藥物組合物可特別專門配製成以固體或液體形式供口服給藥、供胃腸外注射或供直腸給藥。
術語“溶劑合物”是指由溶質和溶劑形成的可變化學計量的複合物。用於本發明的目的的這類溶劑可能不干擾溶質的生物活性。適合溶劑的實例包括但不限於水。
術語“藥學上可接受的載體”是指本領域通常可接受的用於將生物活性藥劑遞送給動物、特別是哺乳動物的介質，根據給藥方式和劑型的性質包括例如佐劑、賦形劑或賦形物，例如稀釋劑、防腐劑、填充劑、流動調節劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、助懸劑、甜味劑、調味劑、芳香劑、抗菌劑、抗真菌劑、潤滑劑和分散劑。藥學上可接受的載體在本領域普通技術人員的眼界範圍內根據大量因素配製。其包括但不限於：配製的活性藥劑的類型和性質，要將含有該藥劑的組合物給藥的對象，組合物的預期給藥途徑，和目標治療適應症。藥學上可接受的載體包括含水介質和非水介質這兩者以及多種固體和半固體劑型。除了活性藥劑以外，這樣的載體包括許多不同的成分和添加劑，因多種原因(例如穩定活性藥劑、粘合劑等)在處方中包括的這樣的另外的成分對於本領域普通技術人員是眾所周知的。
術語“賦形劑”通常是指配製有效的藥物組合物所需要載體、稀釋劑和/或介質。
術語“有效預防或治療量”是指本發明化合物或其藥學上可接受的鹽指以適用於任何醫學治療和/或預防的合理效果/風險比治療障礙的足夠量的化合物。但應認識到，本發明所示化合物或其藥學上可接受的鹽、組合物的總日用量須由主診醫師在可靠的醫學判斷範圍內作出決定。對於任何具體的患者，具體的治療有效劑量水平鬚根據多種因素而定，所述因素包括所治療的障礙和該障礙的嚴重程度；所採用的具體化合物的活性；所採用的具體組合物；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；所採用的具體化合物的給藥時間、給藥途徑和排泄率；治療持續時間；與所採用的具體化合物組合使用或同時使用的藥物；及醫療領域公知的類似因素。例如，本領域的做法是，化合物的劑量從低於為得到所需治療效果而要求的水平開始，逐漸增加劑量，直到得到所需的效果。
本發明化合物可以與其它藥物活性成分組合使用，只要它不產生其他不利作用，例如過敏反應。
本發明化合物可以單獨作為抗癌藥物使用，或者可以與一種或多種其他抗腫瘤藥物聯合使用。聯合治療通過將各個治療組分同時、順序或隔開給藥來實現。
術語“藥學上可接受的鹽”指在可靠的醫學判斷範圍內，適合用於與人類和低等動物的組織接觸而不出現過度的毒性、刺激、過敏反應等，且與合理的效果/風險比相稱的鹽。藥學上可接受的鹽是本領域公知的。所述鹽可通過使本發明化合物的酸性官能團與合適的有機鹼或無機鹼反應。在本發明化合物的最終分離和純化過程中原位製備或者單獨製備。所述的鹼可以為藥學上可接受的金屬陽離子的氫氧化物、有機伯胺、仲胺或叔胺等。
本發明中所用的藥學上可接受的鹽具體地可列舉本發明化合物與酸形成的鹽，或與鹼形成的鹽。
本發明中，取代基中的“
”表示該取代基與母體結構或其他片段的連接位置。
本發明實施例中，洗脫劑的組成比例為體積比，例如“洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1”表示該洗脫劑由石油醚與乙酸乙酯，且體積比為石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1組成。所述比例“10/1 ~ 2/1”也可表示為（10~2）：1。
在本發明中使用的化學縮寫形式及其指代的化學名稱如下：
| 化學縮寫 | 化學名稱 |
| DPPA | 疊氮磷酸二苯酯 |
| DBU | 1,8-二氮雜二環十一碳-7-烯 |
| TBAF | 四丁基氟化銨 |
| DHP | 二氫吡喃 |
| THF | 四氫呋喃 |
| TEA | 三乙胺 |
| m-CPBA | 間氯過氧苯甲酸 |
| Pd(OAc) 2 | 醋酸鈀 |
| Pd(PPh 3) 2Cl 2 | 雙(三苯基膦)氯化鈀 |
| Pd(dppf)Cl 2 | [1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀 |
| DMF | N,N-二甲基甲醯胺 |
| PMB | 對甲氧基苄基 |
| TIPS | 三異丙基矽基 |
| Me | 甲基 |
| TBSCl | 第三丁基二甲基氯矽烷 |
| -OTBS | 第三丁基二甲基矽氧基 |
| DAST | 二乙胺基三氟化硫 |
下面通過具體的製備實施例和生物學實驗進一步詳細說明本發明，但是，應當理解，這些實施例和生物學實驗僅僅是用於具體地說明之用，而不應將其理解為用於以任何形式限制本發明。本發明所屬技術領域具通常知識者清楚，在下文中，如果未特別說明，所用的材料是本領域公知的，可以通過市場購買得到或者本發明所屬技術領域具通常知識者根據已經公開文獻或常規方法即可獲得。除非另外說明，本發明的所有反應均在連續的磁力攪拌下，在乾燥氮氣或氬氣氣氛下進行，溶劑為乾燥溶劑，其中：(i)溫度以攝氏度(℃)表示，操作在室溫下進行，所述室溫一般指15-35℃，優選20-30℃，更優選20-25℃；(ii)溶劑的去除採用旋轉蒸發儀減壓蒸發，浴溫不高於60℃；(iii)反應過程用薄層色譜(TLC)跟蹤；(iv)終產物具有滿意的氫核磁共振光譜(
1H-NMR)和/或質譜(MS)數據。
測試儀器：
本發明的化合物結構是通過核磁共振（NMR）或/和液質聯用色譜（LC-MS）來確定的。NMR化學位移（δ）以百萬分之一（ppm）的單位給出。NMR的測定使用Bruker Neo 400M或者Bruker Ascend 400核磁儀器，測定溶劑為氘代二甲基亞碸（DMSO-
d 6）、氘代甲醇（CD
3OD）和/或氘代氯仿（CDCl
3），內標為四甲基矽烷（TMS）。
液質聯用色譜LC-MS的測定用Agilent 1260-6125B single quadrupole質譜儀或者Waters H-Class SQD2質譜儀（離子源為電噴霧離子化）。HPLC的測定使用Waters e2695-2998或Waters ARC和Agilent 1260或 Agilent Poroshell HPH高效液相色譜。
製備高效液相色譜使用Waters 2555-2489 (10 µm，ODS 250cm ×5cm）或GILSON Trilution LC，色譜柱為Welch XB-C18 柱 (5um， 21.2*150 mm)。
薄層層析矽膠板使用煙臺江友矽膠開發有限公司GF254矽膠板或乳山市上邦新材料有限公司GF254矽膠板，TLC採用的規格是0.15 mm~0.20 mm，製備型20 x 20 cm，柱層析一般使用於成化工200~300目矽膠為載體。
實施例a-1:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-1)的製備
化合物a-1
反應步驟：
步驟1：將6-(羥甲基)吡啶甲酸甲酯（4.5g，26.9mmol）溶於四氫呋喃（70mL），冷卻至0℃，滴加甲基溴化鎂的四氫呋喃溶液（3 mol/L，54mL，162.0mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌4小時。TLC監測顯示反應結束，向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（50mL）淬滅。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1）得到2-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.3g，收率29%）。MS (ESI) M/Z: 168.6 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.75 (t,
J= 8.0Hz, 1H), 7.49 (d,
J= 7.6Hz, 1H), 7.29 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.36 (t,
J= 5.6 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.54 (d,
J= 5.6Hz, 2H), 1.41 (s, 6H).
步驟2：將2-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.0g，6.0mmol）溶於甲苯（30mL），冷卻至0℃，加入DPPA（2.0g，7.2mmol）和DBU（1.1g，7.2mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.0g，收率87%）。MS (ESI) M/Z: 193.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.75 (t,
J= 8.0Hz, 1H), 7.34 (d,
J= 8.0Hz, 1H), 7.25 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 4.95 (br s, 1H), 4.47 (s, 2H), 1.55 (s, 6H).
步驟3：將2,4-二氯噻吩並[3,2-d]嘧啶（500mg，2.4mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
四氫呋喃/V
三乙胺= 1/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（232mg，1.2mmol）、Pd(PPh
3)
4（277mg，0.24mmol）和三異丙基矽乙炔（1.3g，7.2mmol）。反應體系升溫至60℃攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫，加入5%檸檬酸水溶液（40mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 40/1）得到2-氯-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶（0.8g，收率93 %）。MS (ESI) M/Z: 351.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.09 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 7.51 (d,
J=5 .6 Hz, 1H), 1.24-1.22 (m, 3H), 1.21-1.14 (m, 18H).
步驟4：將2-氯-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶（500mg，1.4mmol）溶於四氫呋喃（5mL），室溫下加入(4-甲氧基苯基)甲胺（3mL，23mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。然後用5%檸檬酸水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 40/1）得到N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（334mg，黃色油狀物，收率52%）。MS (ESI) M/Z: 452.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 9.89 (s, 1H), 7.85 (dd,
J
1 = 6.8 Hz,
J
2 = 2.0 Hz, 2H), 7.31 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 7.01 (d,
J= 8.8 Hz, 2H), 6.86 (d,
J= 8.8 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.81 (s, 2H), 1.21-1.17 (m, 21H).
步驟5：將N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（334mg，0.74mmol）溶於二氯甲烷（2mL），加入三氟乙酸（15mL）。反應體系在室溫下攪拌過夜，減壓濃縮，加入乙酸乙酯（50mL），用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物溶於四氫呋喃（20mL），加入TBAF.3H
2O（392mg，1.2mmol），室溫攪拌過夜。往反應液加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，然後用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（65mg，收率50%）。MS (ESI) M/Z: 176.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.90 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 7.21 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 5.14 (br s, 2H), 3.57 (s, 1H).
步驟6：將4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（65mg，0.37mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V/V= 2/1，9mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（71mg，0.37mmol）、五水硫酸銅（5mg，0.02mmol）和抗壞血酸鈉（15mg，0.074mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，先用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 10/1）得到終產物2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（15.6mg，收率11 %）。MS (ESI) M/Z: 368.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.99 (s, 1H), 8.50 (dd,
J
1 = 5.6 Hz,
J
2 = 1.2 Hz, 1H), 7.85 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.64 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.39-7.31 (m, 2H), 5.90 (s, 2H), 1.49 (s, 6H).
實施例a-2:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-2）的製備
化合物a-2
反應步驟：
步驟1：將1H-吡唑-4-頻哪醇硼酸酯（500mg，2.6mmol）和6-(溴甲基)吡啶甲酸甲酯（460mg，2.0mmol）溶於乙腈（30mL），加入碳酸銫（1.1g，3.4mmol）。反應體系在室溫下攪拌3小時，用乙酸乙酯（100mL）稀釋，過濾，濾液用飽和食鹽水（30mL×2次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 4/1）得到6-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧代硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯（550mg，收率80 %）。MS (ESI) M/Z: 344.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.12 (s, 1H), 7.98-7.96 (m, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.19 (dd,
J
1 = 6.4 Hz,
J
2 = 2.4 Hz, 1H), 5.55 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 1.25 (s, 12H).
步驟2：將6-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧代硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯（500mg，1.5mmol）和2,4-二氯噻吩並[3,2-d]嘧啶（837mg，4.1mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
1,4- 二氧六環/V
水= 4/1，25mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鉀（673mg，4.9mmol）和Pd(dppf)Cl
2（89mg，0.12mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。冷卻至室溫，向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（40mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到6-((4-(2-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯（370mg，收率66%）。MS (ESI) M/Z: 386.2 [M+H]
+.
步驟3：將甲基溴化鎂的四氫呋喃溶液（3 M，1.3mL，3.9mmol）冷卻至-10℃，氮氣保護下，滴加6-((4-(2-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯（370mg，0.96mmol）的四氫呋喃溶液（5mL）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜，向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（40mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 2/1）得到2-(6-((4-(2-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（40mg，淺黃色油狀物，收率11%）。MS (ESI) M/Z: 386.2 [M+H]
+.
步驟4： 將2-(6-((4-(2-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（40mg，0.10mmol）溶於四氫呋喃（2mL），室溫下加入(4-甲氧基苯基)甲胺（0.5mL，3.8mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。然後用5%檸檬酸水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得2-(6-((4-(2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇粗品直接用於下步反應（黃色油狀物）。MS (ESI) M/Z: 487.2 [M+H]
+.
步驟5：將2-(6-((4-(2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（粗品）溶於二氯甲烷（0.5mL），加入三氟乙酸（1.0mL）。反應體系在室溫下攪拌過夜，減壓濃縮，加入乙酸乙酯（50mL），依次用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）和飽和食鹽水（20mL）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 10/1）得到終產物2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（25mg，二步收率66%）。MS (ESI) M/Z: 367.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.62 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.07 (d,
J= 5.2 Hz, 1H), 7.76 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.19 (d,
J= 5.2 Hz, 1H), 7.08 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.57 (s, 2H), 1.51 (s, 6H).
實施例a-3:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-3）的製備
化合物a-3
反應步驟：
步驟1： 將2,4-二氯噻吩並[2,3-d]嘧啶（500mg，2.4mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
四氫呋喃/V
三乙胺= 1/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（232mg，1.2mmol）、Pd(PPh
3)
4（277mg，0.24mmol）和三異丙基矽乙炔（0.88g，4.8mmol）。反應體系升溫至60℃攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入5%檸檬酸水溶液（40mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 50/1）得到2-氯-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[2,3-d]嘧啶（0.8g，收率93 %）。MS (ESI) M/Z: 351.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.61 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 7.45 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 1.26-1.15 (m, 21H).
步驟2：將2-氯-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[2,3-d]嘧啶（1.0g，2.8mmol）溶於四氫呋喃（2mL），室溫下加入(4-甲氧基苯基)甲胺（5mL，38mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。然後用5%檸檬酸水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 40/1）得到N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[2,3-d]嘧啶-2-胺（483mg，黃色油狀物，收率37%）。MS (ESI) M/Z: 452.1 [M+H]
+.
步驟3：將N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[2,3-d]嘧啶-2-胺（480mg，1.1mmol）溶於二氯甲烷（2mL），加入三氟乙酸（5mL）。反應體系在室溫下攪拌過夜，減壓濃縮，加入乙酸乙酯（50mL），用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物溶於四氫呋喃（20mL），加入TBAF·3H
2O（392mg，1.2mmol），室溫攪拌過夜。往反應液加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，然後用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到4-乙炔基噻吩並[2,3-d]嘧啶-2-胺（65mg，收率35%）。MS (ESI) M/Z: 176.1 [M+H]
+.
步驟4：將4-乙炔基噻吩並[2,3-d]嘧啶-2-胺（60mg，0.34mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，3mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（66mg，0.34mmol）、五水硫酸銅（14mg，0.06mmol）和抗壞血酸鈉（15mg，0.074mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，先用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 20/1）得到終產物2-(6-((4-(2-氨基噻吩並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（20mg，收率16 %）。MS (ESI) M/Z: 368.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.46 (s, 1H), 8.28 (d,
J= 6.0 Hz, 1H), 7.73 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.16-7.13 (m, 2H), 5.77 (s, 2H), 5.08 (br s, 2H), 4.72 (br s, 1H), 1.55 (s, 6H).
實施例a-4:
2-(6-((4-(6-氨基-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-4）的製備
化合物a-4
反應步驟：
步驟1： 將4,6-二氯-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶（490mg，2.4mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
四氫呋喃/V
三乙胺= 1/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（228mg，1.2mmol）、Pd(dppf)Cl
2（175mg，0.24mmol）和三異丙基矽乙炔（0.66g，3.6mmol）。反應體系在室溫下攪拌6小時，加入5%檸檬酸水溶液（40mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 50/1）得到6-氯-1-甲基-4-((三異丙基矽)乙炔)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶（200mg，收率24 %）。MS (ESI) M/Z: 349.2 [M+H]
+.
步驟2：將6-氯-1-甲基-4-((三異丙基矽)乙炔)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶（200mg，0.57mmol）溶於四氫呋喃（5mL），室溫下加入(4-甲氧基苯基)甲胺（3mL，23mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。然後用5%檸檬酸水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-4-((三異丙基矽)乙炔)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-6-胺（180mg，黃色油狀物，收率70%）。MS (ESI) M/Z: 450.3 [M+H]
+.
步驟3：將N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-4-((三異丙基矽)乙炔)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-6-胺（180mg，0.4mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（156mg，0.5mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌1小時，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。混合液用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 2/1）得到4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-6-胺（110mg，收率94%）。MS (ESI) M/Z: 294.2 [M+H]
+.
步驟4：將4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-6-胺（110mg，0.38mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（72mg，0.38mmol）、五水硫酸銅（5mg，0.02mmol）和抗壞血酸鈉（15mg，0.074mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 20/1）得到2-(6-((4-(6-((4-甲氧基苄基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（130mg，收率71%）。MS (ESI) M/Z: 486.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.71 (br s, 1H), 7.74 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.35-7.26 (m, 4H), 7.15 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.88 (dd,
J
1 = 6.8 Hz,
J
2 = 2.0 Hz, 2H), 5.80 (s, 2H), 4.67 (d,
J= 6.0 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.55 (s, 6H).
步驟5：將2-(6-((4-(6-((4-甲氧基苄基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（100mg，0.21mmol）溶於二氯甲烷（3mL），加入三氟乙酸（5mL）。反應體系在室溫下攪拌過夜，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，依次用水（50mL）、飽和碳酸氫鈉水溶液（50mL×2次）和飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物溶於四氫呋喃（20mL），加入TBAF·3H
2O（392mg，1.2mmol），室溫攪拌過夜。往反應液加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，然後用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 40/1）得到終產物2-(6-((4-(6-氨基-1-甲基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（31mg，收率41%）。MS (ESI) M/Z: 366.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.80 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.14 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.91 (br s, 2H), 5.85 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 1.34 (s, 6H).
實施例a-5:
2-(6-((4-(6-氨基-3-甲基異噻唑並[5,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-5）的製備
化合物a-5
反應步驟：
以4,6-二氯-3-甲基異噻唑並[5,4-d]嘧啶為原料，參照實施例a-4的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(6-氨基-3-甲基異噻唑並[5,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（135mg）。MS (ESI) M/Z: 382.8 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.73 (s, 1H), 7.83 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.63 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.47 (br s, 2H), 7.15 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.87 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.38 (s, 6H).
實施例a-6:
2-(6-((4-(2-氨基-6-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-6）的製備
化合物a-6
反應步驟：
以2,4-二氯-6-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-4的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-6-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（56mg）。MS (ESI) M/Z: 382.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.46 (s, 1H), 7.73 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.14 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 5.78 (s, 2H), 5.22 (br s, 2H), 3.77 (br s, 1H), 2.66 (s, 3H), 1.55 (s, 6H).
實施例a-7:
2-(6-((4-(2-氨基-6-(三氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-7）的製備方法
化合物a-7
反應步驟：
以2,4-二氯-6-三氟甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-4的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-6-(三氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（50mg）。MS (ESI) M/Z: 436.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.91 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.82 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.62 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.18 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.98 (br s, 2H), 5.90 (s, 2H), 1.37 (s, 6H).
實施例a-8:
2-(6-((4-(2-氨基-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-8）的製備
化合物a-8
反應步驟：
以2,4-二氯-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-4的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（32mg）。MS (ESI) M/Z: 382.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.48 (s, 1H), 7.73 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.38 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.15 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.79 (s, 2H), 5.23 (br s, 2H), 4.70 (br s, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.55 (s, 6H).
實施例a-9:
2-(6-((4-(2-氨基-5-甲基噻吩並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-9）的製備
化合物a-9
反應步驟：
以2,4-二氯-5-甲基噻吩並[2,3-d]嘧啶為原料，參照實施例a-4的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-5-甲基噻吩並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（63mg）。MS (ESI) M/Z: 382.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.50 (s, 1H), 7.84 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.64 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.27 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.87 (d,
J= 1.2 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 2.09 (d,
J= 1.2 Hz, 3H), 1.52 (s, 6H).
實施例a-10:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-10）的製備
化合物a-10
反應步驟：
步驟1：將噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（5.0g，29.8mmol）溶於冰乙酸（200mL），加入液溴（4.5mL，82.9mmol）。反應體系升溫至120℃攪拌24小時，冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分溶劑，加入冰水（600mL）和乙酸乙酯（600mL），攪拌0.5小時，過濾，濾餅乾燥後得到7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（6.0g，收率82%），直接用於下一步反應。MS (ESI) M/Z: 247.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.57 (s, 1H), 11.45 (s, 1H), 8.24 (s, 1H).
步驟2：將7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（12.0g，48.8mmol）溶於三氯氧磷（70mL），加入N,N-二異丙基乙胺（12.5g，96.9mmol）。反應體系升溫至100℃攪拌16小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯和四氫呋喃的混合溶劑（V
乙酸乙酯/V
四氫呋喃= 1/1，200mL）稀釋後，慢慢倒入到冷水（300mL）中，攪拌0.5小時後分液，有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液（100mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 200/1）得到7-溴-2,4-二氯噻吩並[3,2-d]嘧啶（7.6g，收率55%）。MS (ESI) M/Z: 283.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.87 (s, 1H).
步驟3： 將7-溴-2,4-二氯噻吩並[3,2-d]嘧啶（2.0g，7.1mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
四氫呋喃/V
三乙胺= 3/2，15mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（230mg，1.2mmol）、Pd(dppf)Cl
2（307mg，0.42mmol）和三異丙基矽乙炔（1.4g，7.5mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，TLC監測顯示反應結束，向反應液中加入5%檸檬酸水溶液（40mL）。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 200/1）得到7-溴-2-氯-4-((三異丙基矽基)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶（1.8g，收率59%）。MS (ESI) M/Z: 429.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.06 (s, 1H), 1.26-1.16 (m, 21H).
步驟4：將7-溴-2-氯-4-((三異丙基矽基)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶（900mg，2.1mmol）溶於1,4-二氧六環（10mL），室溫下加入(4-甲氧基苯基)甲胺（3.2 g，23.4mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌4小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋。然後用5%檸檬酸水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 40/1）得到7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（1.1g，收率98%）。MS (ESI) M/Z: 530.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.83 (s, 1H), 7.36 (d,
J= 8.0 Hz, 2H), 6.86 (d,
J= 8.0 Hz, 2H), 4.67 (d,
J= 5.6 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.26-1.17 (m, 21H).
步驟5：將7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-((三異丙基矽)乙炔)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（370mg，0.7mmol）溶於四氫呋喃（26mL），冷卻至-10℃，加入TBAF·3H
2O（298mg，0.95mmol）。反應體系在-10℃下攪拌1小時，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，混合液用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（248mg，收率95%），直接用於下一步反應。MS (ESI) M/Z: 374.0 [M+H]
+.
步驟6：將7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（70mg，0.19mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（36mg，0.19mmol）、五水硫酸銅（12mg，0.05mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1~3/1）得到2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（60mg，收率56%）。MS (ESI) M/Z: 566.1 [M+H]
+.
步驟7：將2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（60mg，0.11mmol）溶於二氯甲烷（3mL），加入三氟乙酸（5mL）。反應體系在40℃下攪拌5小時，減壓濃縮，加入二氯甲烷（50mL）稀釋，然後用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 10/1/1）得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（35mg，收率74%）。MS (ESI) M/Z: 446.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.79 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.16 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (br s, 2H), 5.87 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 1.36 (s, 6H).
實施例a-11:
2-(6-((4-(2-氨基-7-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-11）的製備
化合物a-11
反應步驟：
步驟1：將噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（8.0g，47.6mmol）溶於6mol/L鹽酸/冰乙酸混合溶劑（V
鹽酸/V
冰乙酸= 1/1，480mL），氮氣保護下升溫至100℃，加入NCS（6.4g，47.6mmol）。反應體系在100℃攪拌3小時，冷卻至室溫，加入冰水（2000mL）和乙酸乙酯（200mL），有固體析出，攪拌0.5小時，過濾，濾餅乾燥後得到7-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（4.3g，收率45%）。MS (ESI) M/Z: 203.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 11.67 (s, 1H), 11.38 (s, 1H), 6.98 (s, 1H).
以7-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮為原料，參照實施例a-10的操作經六步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（90mg）。MS (ESI) M/Z: 402.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.83 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.15 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.75 (br s, 2H), 5.87 (s, 2H), 5.23 (br s, 1H), 1.37 (s, 6H).
實施例a-12:
2-氨基-4-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲腈（化合物a-12）的製備
化合物a-12
反應步驟：
步驟1：將2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（200mg，0.35mmol）溶於NMP（18mL），加入CuCN（127mg，1.4mmol）。反應體系升溫至180℃攪拌4小時，冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（100mL）稀釋，過濾，濾液用水（200mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯 = 15/15/1~5/5/1）得到4-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲腈（65mg，收率36%）。MS (ESI) M/Z: 513.2 [M+H]
+.
步驟2：將4-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲腈（60mg，0.12mmol）溶於三氟乙酸（5mL）。反應體系在40℃下攪拌5小時，減壓濃縮，加入二氯甲烷（50mL）稀釋，然後用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 10/1/1）得到終產物2-氨基-4-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲腈（16mg，收率35%）。MS (ESI) M/Z: 392.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.23 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.16 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.11 (br s, 2H), 5.88 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 1.36 (s, 6H).
實施例a-13:
4-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-13）的製備
化合物a-13
反應步驟：
步驟1：將6-溴-2-吡啶甲酸乙酯（0.5g，2.2mmol）和2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（0.22g，2.2mmol）溶於DMF（20mL），加入碳酸鉀（1.5g，10.9mmol）。反應體系升溫至90℃並攪拌過夜。TLC監測顯示反應結束，反應液冷卻至室溫，加水（60mL）稀釋。混合液用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 5/1）得到6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯（0.42g，收率78%）。MS (ESI) M/Z: 249.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.58-7.54 (m, 1H), 7.44 (dd,
J
1 = 7.2 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 6.46 (dd,
J
1 = 8.4 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 4.85 (s, 4H), 4.40 (q,
J= 7.2 Hz, 2H), 4.25 (s, 4H), 1.42 (t,
J= 7.2 Hz, 3H).
步驟2：將6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯（750mg，3.0mmol）溶於四氫呋喃（35mL），冷卻至0℃，氮氣保護下，滴加紅鋁甲苯溶液（3.6 M，1.0mL，3.6mmol）。反應體系在0℃攪拌2小時，加入10%碳酸鈉水溶液（70mL）淬滅反應。混合液用矽藻土過濾除去鋁鹽，分液，水相用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇（560mg，收率90%）。MS (ESI) M/Z: 207.1 [M+H]
+.
步驟3：將(6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇（540mg，2.6mmol）溶於甲苯（15mL），冷卻至0℃，加入DPPA（860mg，3.1mmol）和DBU（480mg，3.1mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到6-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（450mg，收率74%）。MS (ESI) M/Z: 232.1 [M+H]
+.
以2,4-二氯-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-1的操作經四步製備得到終產物4-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（67mg）。MS (ESI) M/Z: 421.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.72 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.52 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.63 (br s, 2H), 6.54 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.34 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.69 (br s, 4H), 4.04 (br s, 4H), 2.30 (s, 3H).
實施例a-14:
2-(6-((4-(2-氨基-7-(三氟甲基) 噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-14）的製備
化合物a-14
反應步驟：
步驟1：將2,4-二甲氧基-7-(三氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶（2.0g，7.6mmol）溶於冰乙酸（10mL），分批加入碘化鈉（5.6g，37.3mmol）。反應體系升溫至100℃攪拌2小時，冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分溶劑，加入乙酸乙酯（20mL）稀釋，用飽和硫代硫酸鈉（15mL）洗滌，分出有機層，水相用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 20/1）得到7-三氟甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（1.0g，收率56%）。MS (ESI) M/Z: 237.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.73 (s, 1H), 11.55 (s, 1H), 8.72 (s, 1H).
步驟2：將7-三氟甲基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（294mg，1.2mmol）溶於重蒸三氯氧磷（5mL），室溫下加入N,N-二異丙基乙胺（0.11mL，0.9mmol）。反應體系升溫至80℃攪拌16小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯（20mL）稀釋後，慢慢倒入到飽和碳酸氫鈉水溶液（30mL）中，攪拌至無氣泡產生，分出有機層，水相用乙酸乙酯（10mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到2,4-二氯-7-(三氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶（195mg，收率58%）。MS (ESI) M/Z: 273.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.53 (s, 1H).
以2,4-二氯-7-(三氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-10的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-(三氟甲基) 噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（16mg）。MS (ESI) M/Z: 436.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.47 (s, 1H), 8.35 (d,
J= 1.1 Hz, 1H), 7.74 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.39 (dd,
J
1 = 8.0 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 7.17 (dd,
J
1 = 7.6 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 5.78 (s, 2H), 5.24 (s, 1H), 1.55 (s, 6H).
實施例a-15:
2-(6-((4-(2-氨基-7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-15)的製備
化合物a-15
反應步驟：
步驟1：將7-碘-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（400mg，1.2mmol）和環丙基硼酸（154mg，1.8mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 10/1，2.2mL）。氮氣保護下，加入磷酸鉀（763mg，3.6mmol）和Pd(dppf)Cl
2（175mg，0.24mmol）。反應體系升溫至120℃並攪拌4小時。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（10mL），分液，水相用乙酸乙酯（5mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1）得到7-環丙基-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（161mg，收率56 %）。MS (ESI) M/Z: 237.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.16 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 2.32-2.25 (m, 1H), 1.01-0.90 (m, 4H).
步驟2：將7-環丙基-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（161mg，0.68mmol）溶於冰乙酸（5mL），分批加入碘化鈉（510mg，3.4mmol）。反應體系升溫至110℃攪拌2小時，冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分溶劑，加入乙酸乙酯（10mL）稀釋，用飽和硫代硫酸鈉（10mL）洗滌，分出有機相，先用飽和食鹽水（10mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 20/1）得到7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（117mg，收率82%）。MS (ESI) M/Z: 209.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.53 (s, 1H), 11.23 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 2.00-1.96 (m, 1H), 0.94-0.85 (m, 2H), 0.69-0.61 (m, 2H).
步驟3：將7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（117mg，0.56mmol）溶於重蒸三氯氧磷（2mL），室溫下加入N,N-二異丙基乙胺（0.053mL，0.42mmol）。反應體系升溫至80℃攪拌過夜。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯（10mL）稀釋後，慢慢倒入到飽和碳酸氫鈉水溶液（15mL）中，攪拌至無氣泡產生，分出有機層，水相用乙酸乙酯（10mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到2,4-二氯-7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶（106mg，收率77%）。MS (ESI) M/Z: 245.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.45 (d,
J= 0.8 Hz, 1H), 2.39-2.32 (m, 1H), 1.16-1.02 (m, 2H), 0.97-0.85 (m, 2H).
以2,4-二氯-7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-10的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-環丙基噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（18mg）。MS (ESI) M/Z: 408.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.43 (s, 1H), 7.70 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.36 (dd,
J
1 = 8.0 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 7.32 (d,
J= 0.8 Hz, 1H), 7.11 (dd,
J
1 = 7.6 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 5.76 (s, 2H), 2.28-2.21 (m, 1H), 1.53 (s, 6H), 1.05-0.98 (m, 2H), 0.84-0.78 (m, 2H).
實施例a-16:
2-(6-((4-(2-氨基-7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-16）的製備
化合物a-16
反應步驟：
步驟1： 將7-溴-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（1.0g，3.6mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 10/1，22mL）。氮氣保護下，加入乙烯基硼酸頻哪醇酯（1.1g，7.2 mmol），PdCl
2(dppf)（531 mg，0.72 mmol）和磷酸鉀（2.3g，10.8 mmol）。反應體系升溫至120℃攪拌2小時，冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（10 mL），分出有機層，水層用乙酸乙酯萃取（5 mL×3次），合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑；石油醚/乙酸乙酯=20/1）得到2,4-二甲氧基-7-乙烯基噻吩並[3,2-d]嘧啶（300 mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 223.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.68 (s, 1H), 7.04-6.93 (m, 1H), 6.41 (dd,
J= 17.6, 1.6 Hz, 1H), 5.44 (dd,
J= 11.2, 1.6 Hz, 1H), 4.15 (s, 3H), 4.08 (s, 3H).
步驟2： 將N-甲基嗎福林氧化物（CAS號：7529-22-8，632 mg，5.4 mmol）和二水合鋨酸鉀（50 mg，0.14mmol）溶於四氫呋喃和水的混合溶劑（V
四氫呋喃/V
水= 2/1，6mL），攪拌15分鐘後，加入2,4-二甲氧基-7-乙烯基噻吩並[3,2-d]嘧啶（300 mg，1.4 mmol），室溫反應？小時。加入飽和Na
2SO
3溶液（10mL）淬滅反應，攪拌30分鐘後，加入乙酸乙酯（10 mL），分出有機層，水層用乙酸乙酯（5 mL×3次）萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，剩餘物溶於四氫呋喃（4 mL）。高碘酸鈉（577 mg，2.7 mmol）溶於水（2mL）中，冰浴條件下滴加至上述溶液中，室溫反應1小時。加入乙酸乙酯（10 mL），分出有機層，水層用乙酸乙酯（5 mL×3次）萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1）得到2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲醛（99 mg，收率33%）。MS (ESI) M/Z: 225.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 10.39 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 4.18 (s, 3H), 4.11 (s, 3H).
步驟3： 將2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶-7-甲醛（362mg，1.6mmol）溶於乾燥二氯甲烷（5mL），降溫至-20℃，滴加DAST（519mg，3.2mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌3小時，反應結束後緩慢加入飽和碳酸氫鈉水溶液至無氣泡產生，分出有機層，水相用二氯甲烷（5mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到7-(二氟甲基)-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（330mg，收率83%）。MS (ESI) M/Z: 247.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.12 (td,
J= 2.0, 1.2 Hz, 1H), 7.02 (td, J = 55.2, 0.8 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.07 (s, 3H).
19F NMR (376 MHz, CDCl
3) δ -113.28.
步驟4：將7-(二氟甲基)-2,4-二甲氧基噻吩並[3,2-d]嘧啶（330mg，1.3mmol）溶於冰乙酸（6mL），分批加入碘化鈉（602mg，4.0mmol）。反應體系升溫至110℃攪拌2小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分溶劑，加入乙酸乙酯（10mL）稀釋，用飽和硫代硫酸鈉（20mL）洗滌，分出有機相。水相用乙酸乙酯（5 mL×3次）萃取，合併有機層，先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（192mg，粗品），直接用於下步反應。MS (ESI) M/Z: 219.0 [M+H]
+.
步驟5：將7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮（100mg，粗品）溶於重蒸三氯氧磷（1mL），室溫下加入N,N-二甲基苯胺（44mg，0.36mmol）。反應體系升溫至80℃攪拌過夜。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯（10mL）稀釋後，冰浴下緩慢滴加飽和碳酸氫鈉溶液直至無氣泡放出，分出有機層，水相用乙酸乙酯（5mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到2,4-二氯-7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶（70mg，二步總收率41%）。MS (ESI) M/Z: 255.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.44 (s, 1H), 7.08 (td,
J= 54.4, 0.8 Hz, 1H).
19F NMR (376 MHz, CDCl
3) δ -113.65.
以2,4-二氯-7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶為原料，參照實施例a-10的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-(二氟甲基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（14mg）。MS (ESI) M/Z: 418.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 8.46 (s, 1H), 8.26 (t,
J= 1.6 Hz, 1H), 7.73 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.38 (dd,
J= 8.0, 0.8 Hz, 1H), 7.16 (dd,
J= 7.6, 0.8 Hz, 1H), 7.00 (t,
J= 55.2 Hz, 1H), 5.78 (s, 2H), 5.15 (s, 2H), 4.66 (s, 1H), 1.54 (s, 6H).
19F NMR (376 MHz, CDCl
3) δ -113.52.
實施例a-17:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（化合物a-17）的製備
化合物a-17
反應步驟：
步驟1： 將(6-溴吡啶-2-基)甲醇（17.6g，94.1mmol）溶於二氯甲烷（200mL）。氮氣保護下，冷卻至0℃，依次加入咪唑（7.7g，113mmol）和TBSCl（15.7g，113mmol）。反應體系升溫至25℃並攪拌2小時，加入水（100mL），分液，水相用二氯甲烷（100mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（200mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 19/1~9/1）得到2-溴-6-(((第三丁基二甲基矽)氧基)甲基)吡啶（25.0g，收率88%）。MS (ESI) M/Z: 302.0 [M+H]
+.
步驟2： 將2-溴-6-(((第三丁基二甲基矽)氧基)甲基)吡啶（6.0g，19.9mmol）溶於乾燥四氫呋喃（60mL），氮氣保護下，降溫至-78℃，滴加正丁基鋰（8.1mL，20.3mmol），攪拌0.5小時後，加入環丁基酮（1.54g，22.0mmol）。然後反應體系自然升溫至室溫，攪拌2小時後再冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（6.3g，20.0mmol），室溫繼續攪拌20小時。緩慢加入飽和氯化銨水溶液（50mL），分出有機層，水相用乙酸乙酯（100mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1~2/1）得到1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（2.0g，收率56%）。MS (ESI) M/Z: 180.1 [M+H]
+.
步驟3：將1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（1.0g，5.6mmol）溶於甲苯（20mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.9g，6.8mmol）和DBU（1.0g，6.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（700mg，收率61%）。MS (ESI) M/Z: 204.7 [M+H]
+.
步驟4：將7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（150mg，0.40mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（87mg，0.43mmol）、五水硫酸銅（26mg，0.08mmol）和抗壞血酸鈉（16mg，0.07mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1~3/1）得到1-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（80mg，收率19%）。MS (ESI) M/Z: 578.2 [M+H]
+.
步驟5：將1-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（80mg，0.14mmol）溶於二氯甲烷（3mL），加入三氟乙酸（5mL）。反應體系在40℃下攪拌5小時，減壓濃縮，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，然後用飽和碳酸鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用第三丁基甲醚打漿得到終產物1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環丁基-1-醇（20mg，收率30%）。MS (ESI) M/Z: 457.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.87 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.52 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.23 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (br s, 2H), 5.93 (s, 2H), 5.75 (s, 1H), 2.43-2.37 (m, 2H), 2.19-2.11 (m, 2H), 1.79-1.64 (m, 2H).
實施例a-18:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環戊基-1-醇（化合物a-18）的製備
化合物a-18
反應步驟：
以環戊酮替換環丁酮，參照實施例a-17的操作經五步製備得到終產物1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)環戊基-1-醇（36mg）。MS (ESI) M/Z: 471.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.84 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.80 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.63 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.16 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (br s, 2H), 5.87 (s, 2H), 5.08 (s, 1H), 2.00-1.97 (m, 2H), 1.80-1.66 (m, 6H).
實施例a-19:
(S)-7-溴-4-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-19）的製備
化合物a-19
反應步驟：
以(S)-2-(疊氮甲基)-6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶為原料，參照實施例a-17的操作經二步製備得到終產物(S)-7-溴-4-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（45mg）。MS (ESI) M/Z: 488.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.86 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.40 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.29 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (brs, 2H), 5.88 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.24 (brs, 1H), 3.76-3.60 (m, 4H), 1.96-1.93 (m, 2H).
實施例a-20:
(R)-7-溴-4-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-20）的製備
化合物a-20
反應步驟：
以(R)-2-(疊氮甲基)-6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶為原料，參照實施例a-17的操作經二步製備得到終產物(R)-7-溴-4-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（55mg）。MS (ESI) M/Z: 488.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.86 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.40 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.29 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (brs, 2H), 5.88 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.24 (brs, 1H), 3.76-3.59 (m, 4H), 1.96-1.91 (m, 2H).
實施例a-21:
7-溴-4-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-21）的製備
化合物a-21
反應步驟：
以2-(疊氮甲基)-6-(甲氧基甲基)吡啶為原料，參照實施例a-17的操作經二步製備得到終產物7-溴-4-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（40mg）。MS (ESI) M/Z: 432.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.86 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.39 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.27 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (brs, 2H), 5.88 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 3.35 (s, 3H).
實施例a-22:
2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-1-氧化物（化合物a-22）的製備
化合物a-22
反應步驟：
步驟1：將7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（1.6g，4.3mmol）溶於三氟乙酸（20mL）。反應體系升溫至50℃攪拌12小時，減壓濃縮除去大部分三氟乙酸，加入30%碳酸鈉水溶液（30mL）。混合液用二氯甲烷（30mL×3次）萃取。合併有機相，先用飽和食鹽水（20毫升）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（1.0g，收率92%）。MS (ESI) M/Z: 254.6 [M+H]
+.
步驟2：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（100mg，0.40mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入2-(疊氮甲基)-6-(2-羥丙-2-基)吡啶-1-氧化物（92mg，0.40mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.08mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃攪拌2小時後，冷卻至室溫，加入水（10mL）稀釋，用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠製備色譜純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~1/1/1）得到終產物2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-1-氧化物（70mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 462.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.94 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.73 (d,
J= 6.8 Hz, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.16 (d,
J= 6.8 Hz, 1H), 6.96 (brs, 2H), 6.63 (s, 1H), 5.98 (s, 2H), 1.60 (s, 6H).
參照實施例a-22的合成方法製備得到如下目標產物：
| 實施例 | 結構式 | 1HNMR | MS (ESI) M/Z [M+H] + |
| a-23 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.74 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.35 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (brs, 2H), 6.34 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.26 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 2H), 3.75-3.51 (m, 3H), 2.03-1.95 (m, 4H). | 500.8 |
| a-24 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.74 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.34 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (brs, 2H), 6.33 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 2H), 3.75-3.59 (m, 3H), 2.05-1.85 (m, 4H). | 500.8 |
| a-25 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.78 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.53 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.94 (brs, 2H), 6.55 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.35 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.69 (brs, 4H), 4.06 (brs, 4H). | 485.0 |
| a-26 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.77 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.52 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (brs, 2H), 6.50 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.34 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 3.75-3.67 (m, 4H), 3.52 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 1.70 (t, J= 4.8 Hz, 4H). | 512.8 |
| a-27 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.70 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.16 (dd, J= 5.2, 1.6 Hz, 1H), 7.67-7.65 (m, 1H), 7.00 (dd, J= 7.2, 4.8 Hz, 1H), 6.91 (brs, 2H), 5.67 (s, 2H), 5.27-5.23 (m, 1H), 1.21 (d, J= 6.0 Hz, 6H). | 445.9 |
實施例a-28:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)苯基)丙-2-醇（化合物a-28）的製備
化合物a-28
反應步驟：
步驟1：將2-(3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇（750mg，4.5mmol）溶於甲苯（30mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.2g，4.3mmol）和DBU（653mg，4.3mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-(3-(疊氮甲基)苯基)丙-2-醇（492mg，收率57%）。MS (ESI) M/Z: 174.0 [M-H
2O+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.47-7.43 (m, 2H), 7.33 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 1.44 (s, 6H).
步驟2：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（40mg，0.16mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入2-(3-(疊氮甲基)苯基)丙-2-醇（38mg，0.20mmol）、五水硫酸銅（13mg，0.04mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1~3/1）得到2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)苯基)丙-2-醇（30mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 445.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.81 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.43 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.33 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.23 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.91 (s, 2H), 5.75 (s, 2H), 5.07 (s, 1H), 1.45 (s, 6H).
實施例a-29:
3-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（化合物a-29）的製備
化合物a-29
反應步驟：
步驟1：將3-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（1.0g，5.5mmol）溶於甲苯（20ml），冷卻至0℃，加入DPPA（1.9g，6.8mmol）和DBU（1.0g，6.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20ml）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（30ml×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到3-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（200mg，收率18%）。MS (ESI) M/Z: 207.1 [M+H
+].
步驟2：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（50mg，0.20mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入3-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（46mg，0.22mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~3/1/1）得到3-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（50mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 459.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.89 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.88 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.57 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (s, 2H), 6.56 (s, 1H), 5.95 (s, 2H), 4.84 (d,
J= 6.0 Hz, 2H), 4.60 (d,
J= 6.0 Hz, 2H).
實施例a-30:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（化合物a-30）的製備
化合物a-30
反應步驟：
步驟1：將2-甲基-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙腈（800mg，5.0mmol）溶於四氯化碳（6mL），室溫下依次加入N-溴代丁二醯亞胺（976mg，5.5mmol）和過氧化苯二甲醯（120mg，0.5mmol）。反應體系氮氣保護下升溫至78℃攪拌16小時，冷卻至室溫，向反應液中慢慢加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL）淬滅反應。混合液用二氯甲烷（40mL×2次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：正己烷/乙酸乙酯= 49/1）得到2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（400mg，收率34%）。MS (ESI) M/Z: 239.1 [M+H
+].
步驟2：將2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（200mg，0.84mmol）溶於二甲亞碸（6mL），室溫下加入疊氮化鈉（82mg，1.3mmol）。反應體系升溫至50℃攪拌16小時。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（100mL×2次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：正己烷/乙酸乙酯= 9/1）得到2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（80mg，收率47%）。MS (ESI) M/Z: 201.8 [M+H
+].
步驟3：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（56mg，0.22mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（44mg，0.22mmol）、五水硫酸銅（17mg，0.067mmol）和抗壞血酸鈉（10mg，0.05mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（20mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（100mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。殘餘物用無水乙醚攪拌結晶純化得到2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（20mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 455.6 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.89 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.94 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.59 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.30 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 5.94 (s, 2H), 1.64 (s, 6H).
實施例a-31:
7-溴-4-(1-((6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-31）的製備
化合物a-31
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶（1.0g，3.3mmol）溶於DMF（15mL），室溫下依次加入
cis-2,6-二甲基嗎福林（460mg，4.0mmol），碘化亞銅（63mg，0.33mmol）和碳酸鉀（2.3g，16.7mmol）。反應體系在氮氣保護下升溫至95℃攪拌16小時，冷卻至室溫，向反應液中慢慢加入水（30mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 20/1/1 ~ 3/1/1）得到
cis-4-(6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（600mg，收率52%）。MS (ESI) M/Z: 337.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.52-7.48 (m, 1H), 6.84 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.48 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 3.75-3.71 (m, 2H), 2.50-2.44 (m, 2H), 1.27 (d,
J= 6.4 Hz, 6H), 0.96 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
步驟2：將
cis-4-(6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（600mg，1.8mmol）溶於四氫呋喃（6ml），加入TBAF.3H
2O（560mg，2.1mmol）。反應體系在室溫下攪拌16小時後，加入水（3mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲醇（350mg，收率88%）。MS (ESI) M/Z: 222.9 [M+H
+].
步驟3：將(6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲醇（350mg，1.6mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1 ~ 3/1/1）得到
cis-4-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（150mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 248.1 [M+H
+].
步驟4：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（51mg，0.20mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入
cis-4-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（49mg，0.20mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~3/1/1）得到7-溴-4-(1-((6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（30mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 500.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.80 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.58-7.54 (m, 1H), 6.90 (brs, 2H), 6.78 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 6.57 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.04 (d,
J= 11.2 Hz, 2H), 3.51-3.47 (m, 2H), 2.34-2.28 (m, 2H), 1.05 (d,
J= 6.0 Hz, 6H).
實施例a-32:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（化合物a-32）的製備
化合物a-32
反應步驟：
步驟1：將1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（397mg，1.8mmol）溶於甲苯（6mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1 ~ 3/1/1）得到1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（230mg，收率52%）。MS (ESI) M/Z: 248.2 [M+H
+].
步驟2：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（51mg，0.20mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（49mg，0.20mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~3/1/1）得到1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（32mg，收率32%）。MS (ESI) M/Z: 500.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.78 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.50 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.91 (brs, 2H), 6.77 (d,
J= 8.8 Hz, 1H), 6.48 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.30 (s, 1H), 3.76-3.73 (m, 2H), 3.33-3.25 (m, 2H), 1.40-1.35 (m, 4H), 1.08 (s, 3H).
實施例a-33:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-33）的製備
化合物a-33
反應步驟：
步驟1：將6-(2-羥丙-2-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，5.1mmol）溶於無水四氫呋喃（20mL），冷卻至0℃，加入氘代四氫鋁鋰（430mg，10.2mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌2小時。向反應液中慢慢加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(6-(羥甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（650mg，收率75%）。MS (ESI) M/Z: 169.9 [M+H
+].
步驟2：將2-(6-(羥甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（650mg，3.8mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.0g，3.9mmol）和DBU（591mg，3.9mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 3/1）得到2-(6-(疊氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（350mg，收率47%）。MS (ESI) M/Z: 195.1 [M+H
+].
步驟3：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（51mg，0.20mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（39mg，0.20mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~1/1/1）得到2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（22mg，收率32%）。MS (ESI) M/Z: 448.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.17 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 1.36 (s, 6H).
實施例a-34:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（化合物a-34）的製備
化合物a-34
反應步驟：
步驟1：將1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（350mg，1.8mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 1/1）得到1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（150mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 242.3 [M+Na
+].
步驟2：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（51mg，0.20mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，4mL）。氮氣保護下，依次加入1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（44mg，0.20mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（8mg，0.04mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1~2/1/1）得到1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（60mg，收率64%）。MS (ESI) M/Z: 472.8 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.77 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.52 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.52 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.35 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 5.53 (s, 1H), 3.78-3.70 (m, 4H), 1.41 (s, 3H).
實施例a-35:
2-(1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（化合物a-35）的製備
化合物a-35
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶（1.4g，4.7mmol），2-(氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇鹽酸鹽（850mg，5.6mmol），碳酸銫（3.0g，9.3mmol），醋酸鈀（105mg，0.47mmol）和1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦 （290mg，0.47mmol）溶於甲苯（30mL）中，氮氣置換三次，升溫至120℃回流攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，加入水（20mL）。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 1/5）得到2-(1-(6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（600mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 337.3 [M+H
+].
步驟2：將2-(1-(6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（600mg，1.8mmol）溶於四氫呋喃（5mL），冰浴冷卻下加入四丁基氟化銨（560mg，2.1mmol），升至室溫攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（350mg，收率88%）。MS (ESI) M/Z: 222.8 [M+H
+].
步驟3：將2-(1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（350mg，1.6mmol）溶於甲苯和四氫呋喃的混合溶液（V
甲苯/V
四氫呋喃= 5/1，6mL），冷卻至0~5℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 1/10）得到2-(1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（120mg，收率31%）。MS (ESI) M/Z: 248.1 [M+H
+].
步驟4：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（110mg，0.43mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（109mg，0.44mmol）、五水硫酸銅（20mg，0.07mmol）和抗壞血酸鈉（18mg，0.08mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用乙醚結晶純化得到2-(1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（40mg，收率18%）。MS (ESI) M/Z: 500.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.77 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (s, 2H), 6.45 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.30 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.44 (s, 1H), 3.81-3.75 (m, 4H), 2.70-2.60 (m, 1H), 1.03 (s, 6H).
實施例a-36:
7-溴-4-(1-((6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-36）的製備
化合物a-36
反應步驟：
步驟1：將2-(溴甲基)-6-(((第三丁基二甲基矽)氧)甲基)吡啶（800mg，2.5mmol）和2-氟苯酚（341mg，3.0mmol）溶於乾燥DMF（10mL）中，加入碳酸鉀（525mg，3.8mmol），反應體系在25℃攪拌20小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（20mL），混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取。合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 9/1）得到2-(((第三丁基二甲基矽)氧)甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶（800mg，收率91%）。MS (ESI) M/Z: 347.9 [M+H
+].
步驟2：將2-(((第三丁基二甲基矽)氧)甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶（800mg，2.3mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冰浴冷卻下加入三水合四丁基氟化銨（728mg，2.3mmol），保持0℃攪拌1小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1~2/1）得到(6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇（500mg，收率93%）。MS (ESI) M/Z: 234.7 [M+H
+].
步驟3：將(6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇（300mg，1.3mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0~5℃，加入DPPA（425mg，1.5mmol）和DBU（235mg，1.5mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 50/1~20/1）得到2-(疊氮甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶（300mg，收率90%）。MS (ESI) M/Z: 259.2 [M+H
+].
步驟4：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（30mg，0.12mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(疊氮甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶（30mg，0.12mmol）、五水硫酸銅（7mg，0.03mmol）和抗壞血酸鈉（5mg，0.02mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用乙醚打漿純化得到7-溴-4-(1-((6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（40mg，收率65%）。MS (ESI) M/Z: 512.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.86 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.92 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.52 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.35 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 7.07 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.94-6.85 (m, 3H), 5.92 (s, 2H), 5.21 (s, 2H).
實施例a-37:
(R)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇（化合物a-37）的製備
化合物a-37
反應步驟：
步驟1：將6-氟吡啶甲酸甲酯（1.0g，6.5mmol）和(R)-吡咯啉-3-醇（562mg，6.5mmol）溶於乾燥DMF（100mL）中，加入碳酸鉀（4.5g，32.2mmol）和碘化亞銅（124mg，0.65mmol），氮氣置換3次，反應體系升溫至98℃攪拌過夜。TLC監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，過濾，濾餅用乙酸乙酯（20mL×2次）洗滌，混合液減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 1/1）得到(R)-6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（850mg，收率59%）。MS (ESI) M/Z: 222.7 [M+H
+].
步驟2：將(R)-6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（850mg，3.8mmol）和咪唑（785mg，11.5mmol）溶於二氯甲烷（30mL），冰浴冷卻下加入TBSCl（1160mg，7.7mmol），室溫攪拌過夜。TLC監測顯示原料反應完畢，加入水（50mL），分液，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，收率78%）。MS (ESI) M/Z: 336.9 [M+H
+].
步驟3：將(R)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，3.0mmol）溶於無水四氫呋喃（30mL），冷卻至0℃，滴加硼氫化鋰的四氫呋喃溶液（1M, 6.6mL，6.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫攪拌2小時。緩慢向反應液中加入冷飽和氯化銨溶液（50mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-(6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 309.3 [M+H
+].
步驟4：將(R)-(6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，1.3mmol）溶於無水四氫呋喃（50mL），冷卻至0~5℃，加入DPPA（430mg，1.6mmol）和DBU（240mg，1.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（50mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-2-(疊氮甲基)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶（60mg，收率14%）。MS (ESI) M/Z: 334.3 [M+H
+].
步驟5：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（30mg，0.12mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入(R)-2-(疊氮甲基)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶（40mg，0.12mmol）、五水硫酸銅（5mg，0.02mmol）和抗壞血酸鈉（10mg，0.03mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(R)-7-溴-4-(1-((6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑- 4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（51mg，收率73%）。MS (ESI) M/Z: 587.2 [M+H]
+.
步驟6：將(R)-7-溴-4-(1-((6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑- 4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（50mg，0.085mmol）溶於四氫呋喃（5mL），冰浴冷卻下加入三水合四丁基氟化銨（54mg，0.17mmol），室溫攪拌12小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用乙醚結晶純化得到(R)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇（30mg，收率74%）。MS (ESI) M/Z: 473.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.77 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.47 (d,
J= 6.8 Hz, 1H), 6.38 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (brs, 1H), 3.43-3.24 (m, 4H), 1.96-1.86 (m, 2H).
實施例a-38:
(S)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇（化合物a-38）的製備
化合物a-38
反應步驟：
以(S)-吡咯啉-3-醇為原料，參照實施例a-37的操作經六步製備得到終產物(S)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇（50mg）。MS (ESI) M/Z: 473.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.77 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.47 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.38 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (brs, 1H), 3.42-3.22 (m, 4H), 1.98-1.86 (m, 2H).
實施例a-39:
7-溴-4-(1-((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-39）的製備
化合物a-39
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶（2.0g，6.6mmol），3,3-二氟氮雜環丁烷鹽酸鹽（2.1g，16.3mmol），碳酸銫（3.0g，9.3mmol），醋酸鈀（149mg，0.66mmol）和1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦 （414mg，0.66mmol）溶於甲苯（30mL）中，氮氣置換三次，升溫至120℃回流攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，加入水（20mL）。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 50/1）得到2-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶（700mg，收率34%）。MS (ESI) M/Z: 315.3 [M+H
+].
步驟2：將2-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶（700mg，2.2mmol）溶於四氫呋喃（5mL），冰浴冷卻下加入三水合四丁基氟化銨（696mg，2.2mmol），室溫攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，收率90%）。MS (ESI) M/Z: 200.6 [M+H
+].
步驟3：將(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，2.0mmol）溶於二氯甲烷（5mL），冷卻至0~5℃，依次加入三乙胺（606mg，6.0mmol）和甲烷磺醯氯（344mg，3.0mmol）。反應體系自然升溫至室溫攪拌2小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用二氯甲烷（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲磺酸甲酯（500mg，收率90%）。MS (ESI) M/Z: 278.8 [M+H
+].
步驟4：將7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（3.0g，8.0mmol）溶於DMF和無水乙醇的混合溶劑（V
DMF/ V
無水乙醇= 1/1，60mL），加入疊氮基三甲基矽烷（1.4g，12.0mmol）和碘化亞銅（7.6mg，0.04mmol）。反應體系升溫至90℃並攪拌12小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（200mL）稀釋，混合液用乙酸乙酯（200mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（2.5g，收率75%）。MS (ESI) M/Z: 417.2 [M+H]
+.
步驟5：將7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（800mg，1.9mmol）和(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲磺酸甲酯（500mg，1.8mmol）溶於乾燥DMF（3mL）中，加入碳酸鉀（730mg，5.3mmol）和碘化鈉（264mg，1.8mmol），反應體系在30℃攪拌3小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經高效製備液相色譜純化得到7-溴-4-(1-(((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N- (4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（100mg，收率10%）。MS (ESI) M/Z: 599.1 [M+H
+].
步驟6：將7-溴-4-(1-(((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N- (4-甲氧基苄基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（100mg，0.17mmol）溶於三氟乙酸（5mL），反應體系升溫至50℃攪拌12小時。TLC監測顯示原料反應完畢，減壓濃縮除去大部分三氟乙酸，加入30%碳酸鈉水溶液（10mL），混合液用二氯甲烷（20mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用乙醚結晶純化得到7-溴-4-(1-((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（45mg，收率56%）。MS (ESI) M/Z: 478.9 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.81 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.64 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.67 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.55 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.35 (t,
J= 12.4 Hz, 4H).
實施例a-40:
7-溴-4-(1-((6-(2-氟丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-40）的製備
化合物a-40
反應步驟：
將2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基）丙-2-醇（300mg，0.67mmol）溶於二氯甲烷（8mL），冷卻至0-5℃，滴加二乙胺基三氟化硫（161mg，1.0mmol），室溫下攪拌12小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入飽和氯化銨溶液（10mL），混合液用二氯甲烷（50mL×2次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（10mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用乙醚打漿純化得到7-溴-4-(1-((6-(2-氟丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（40 mg，收率13%）。MS (ESI) M/Z: 448.0 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.88 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.90 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.51 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.26 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 5.91 (s, 2H), 1.62 (s, 3H), 1.56 (s, 3H).
實施例a-41:
4-(1-(苯並呋喃-6-基甲基)-1
H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（化合物a-41）的製備
化合物a-41
反應步驟：
以苯並呋喃-6-基甲醇為原料，參照實施例a-37的操作經二步製備得到終產物4-(1-(苯並呋喃-6-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（34.4mg）。MS (ESI) M/Z: 426.9 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.81 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.03 (d,
J= 2.0 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.64 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.90 (brs, 2H), 5.84 (s, 2H).
實施例a-42:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙-1-醇（化合物a-42）的製備
化合物a-42
反應步驟：
以6-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)吡啶甲酸甲酯（製備可參考WO2020/264499A1）為原料，參照實施例a-37的操作經五步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙-1-醇（29mg）。MS (ESI) M/Z: 460.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.85 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.75 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.37 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.13 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.93 (brs, 2H), 5.87 (s, 2H), 4.59 (t,
J= 5.6 Hz, 1H), 3.47 (d,
J= 5.6 Hz, 1H), 1.18 (s, 6H).
實施例a-43:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（化合物a-43）的製備
化合物a-43
反應步驟：
步驟1：將((3-溴-2-氟苄基)氧)(第三丁基)二甲基矽烷（1.2g，3.8mmol）溶於甲醇和二甲亞碸的混合溶液（V
甲醇/V
二甲亞碸=1/1, 120mL），依次加入三乙胺（0.9g，8.9mmol），醋酸鈀（80mg，0.36mmol）和1.3-雙二苯基膦丙烷（160mg，0.39mmol），在一氧化碳8公斤壓力氛圍下，升溫至80℃回流攪拌16小時。TLC監測顯示原料消失，冷卻至室溫，過濾除去催化劑，濾液減壓濃縮。殘留物溶於乙酸乙酯（60mL），用水洗滌2-3次，飽和食鹽水洗滌1次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯（800mg，收率34%）。MS (ESI) M/Z: 299.1 [M+H
+].
步驟2：在氮氣氛圍下往燒瓶中加入甲基溴化鎂（6.0mL，18.2mmol，3M在2-甲基四氫呋喃中），冷卻至0℃，滴加3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯（800mg，2.7mmol）的乾燥四氫呋喃（5mL）溶液，約20分鐘滴完，滴完後升至室溫攪拌3小時。TLC監測顯示原料消失，將反應液在冰浴下用飽和氯化銨溶液（30mL）淬滅，乙酸乙酯（50mL×2次）萃取。合併有機層，飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（300mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 299.2 [M+H]
+.
步驟3：將2-(3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（300mg，1.0mmol）溶於四氫呋喃（10mL），加入四丁基氟化銨（316mg，1.2mmol），室溫攪拌12小時。TLC監測顯示原料消失，往反應液中加入乙酸乙酯（20mL）稀釋，用水（100mL×3次）洗滌，再用飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到2-(2-氟-3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇（190mg，粗品）。MS (ESI) M/Z: 185.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.49 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.34 (t,
J= 6.8 Hz, 1H), 7.13 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 1.64 (s, 6H).
步驟4：將2-(2-氟-3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇（190 mg，約1.0mmol）溶於乾燥甲苯（7mL升），冷卻至0-5℃，依次加入疊氮磷酸二苯酯（282mg，1.0mmol）和1,8-二氮雜環[5,4,0]十一烯-7（157mg，1.0mmol），升至室溫攪拌2小時。TLC監測顯示原料消失，減壓濃縮得到2-(3-(疊氮甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（200mg，粗品），直接用於下步反應。MS (ESI) M/Z: 210.1 [M+H]
+.
步驟5：將7-溴-4-乙炔基噻吩並[3,2-d]嘧啶-2-胺（100mg，0.40mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 2/1/1，6mL）。氮氣保護下，依次加入2-(3-(疊氮甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（100mg，0.44mmol）、五水硫酸銅（26mg，0.05mmol）和抗壞血酸鈉（18mg，0.06mmol）。反應體系升溫至50℃並攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫，加入水（10mL）淬滅，混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮，無水乙醚結晶純化得到終產物2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（41.5mg）。MS (ESI) M/Z: 463.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.80 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.66-7.62 (m, 1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 7.21-7.17 (m, 1H), 6.93 (brs, 2H), 5.81 (s, 2H), 5.34 (s, 1H), 1.48 (s, 6H).
實施例a-44:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)丙-2-醇（化合物a-44）的製備
化合物a-44
反應步驟：
以3-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯為原料，參照實施例a-43的操作經四步製備得到終產物2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)丙-2-醇（4.8mg）。MS (ESI) M/Z: 475.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.80 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.01-6.98 (m, 1H), 6.91 (brs, 2H), 6.86-6.84 (m, 1H), 5.69 (s, 2H), 5.07 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
實施例a-45:
2-(2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-4-基)丙-2-醇（化合物a-45）的製備
化合物a-45
反應步驟：
以2-(羥甲基)異煙酸甲酯為原料，參照實施例a-43的操作經三步製備得到終產物2-(2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-4-基)丙-2-醇（50mg）。MS (ESI) M/Z: 445.9 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.84 (s, 1H), 8.46 (s, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.42-7.40 (m, 1H), 6.94 (brs, 2H), 5.88 (s, 2H), 5.33 (s, 1H), 1.41 (s, 6H).
實施例a-46:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-氟吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物a-46）的製備
化合物a-46
反應步驟：
步驟1：將6-氯-5-氟吡啶甲酸甲酯（500mg，2.6mmol）溶於二氧六環/水（V
二氧六環/V
水=3:1，24mL），加入苯乙烯基硼酸 (781mg，5.3mmol）和碳酸銫（2.5g，7.9mmol）。氮氣置換3次，加入Pd(dppf)Cl
2（95mg，0.13mmol），再氮氣置換3次，室溫攪拌16小時。TLC監測顯示原料消失，反應液用乙酸乙酯（20 mL×2次）萃取。合併有機相，用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物通過矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1）得到5-氟-6-苯乙烯基吡啶甲酸甲酯（600mg，收率88%）。MS (ESI) M/Z: 258.1 [M+H
+].
步驟2：將5-氟-6-苯乙烯基吡啶甲酸甲酯（800mg，3.1mmol）溶於四氫呋喃/水（18/9mL），依次加入2,6-二甲基吡啶（670mg，6.2mmol）、高碘酸鈉（4g，18.6mmol）和二水合鋨酸鉀（52mg，0.16mmol），室溫攪拌20小時。TLC監測顯示原料消失，反應液用乙酸乙酯 （30 mL×2次）萃取，合併有機層，用飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。所得殘餘物通過矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1）得到5-氟-6-甲醯甲基吡啶甲酸甲酯（400mg，收率70%）。MS (ESI) M/Z: 184.2 [M+H
+].
步驟3：將5-氟-6-甲醯甲基吡啶甲酸甲酯（300mg，1.6mmol）溶於甲醇（10mL），冷卻至0℃，加入硼氫化鈉（100mg，2.6mmol），加完升至室溫攪拌3小時。TLC監測顯示原料消失，反應液在冰浴下用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，再用乙酸乙酯（30 mL×2次）萃取。合併有機層，用飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。所得殘餘物通過矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1）得到5-氟-6-(羥甲基)吡啶甲酸甲酯（100mg，收率33%）。MS (ESI) M/Z: 185.8 [M+H
+].
以5-氟-6-(羥甲基)吡啶甲酸甲酯為原料，參照實施例a-43的操作經三步製備得到終產物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩並[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-氟吡啶-2-基)丙-2-醇（7mg）。MS (ESI) M/Z: 464.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.79 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.71-7.60 (m, 2H), 5.93 (d,
J= 1.6 Hz, 2H), 1.44 (s, 6H).
實施例b-1:
3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-1）的製備
化合物b-1
反應步驟：
步驟1：將6-(羥甲基)吡啶甲酸甲酯（4.5g，26.9mmol）溶於四氫呋喃（70mL），冷卻至0℃，滴加甲基溴化鎂的四氫呋喃溶液（3mol/L，54mL，162.0mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌4小時。TLC監測顯示反應結束，向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（50mL）淬滅。乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮；所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1）得到2-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.3g，收率29%）。
MS (ESI) M/Z: 168.6 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.75 (t,
J= 8.0Hz, 1H), 7.49 (d,
J= 7.6Hz, 1H), 7.29 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.36 (t,
J= 5.6 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.54 (d,
J= 5.6Hz, 2H), 1.41 (s, 6H).
步驟2：將2-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.0g，6.0mmol）溶於甲苯（30mL），冷卻至0℃，加入DPPA（2.0g，7.2mmol）和DBU（1.1g，7.2mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（1.0g，收率87%）。MS (ESI) M/Z: 193.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.75 (t,
J= 8.0Hz, 1H), 7.34 (d,
J= 8.0Hz, 1H), 7.25 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 4.95 (br s, 1H), 4.47 (s, 2H), 1.55 (s, 6H).
步驟3： 將4-溴-6-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶（554mg，2.4mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（45mg，0.24mmol）、三苯基膦（63mg，0.24mmol）、Pd(PPh
3)
2Cl
2（84mg，0.12mmol）和三甲基矽乙炔（282mg，2.9mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到6-氯-4-((三甲基矽)乙炔)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶（0.5g，收率84 %）。MS (ESI) M/Z: 249.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.68-7.64 (m, 2H), 7.57-7.53 (m, 1H), 7.49-7.45 (m, 2H)，0.00 (s, 9H).
步驟4：將6-氯-4-((三甲基矽)乙炔)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶（124mg，0.5mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（189mg，0.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（10mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶粗品（88mg）直接用於下一步反應。MS (ESI) M/Z: 177.1 [M+H]
+.
步驟5：將6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶（88mg，粗品）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，9mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（84mg，0.44mmol）、五水硫酸銅（2.4mg，0.01mmol）和抗壞血酸鈉（5mg，0.025mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（10mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 3/1）得到2-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（120mg，收率65 %）。MS (ESI) M/Z: 369.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 9.17 (br s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.81 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.44-7.38 (m, 2H), 7.25-7.20 (m, 1H), 7.02-7.00 (m, 1H), 5.86 (s, 2H), 1.58 (s, 6H).
步驟6： 將2-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（90mg，0.24mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（78mg，0.48mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，24mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（76mg，0.72mmol）和Pd(dppf)Cl
2（17mg，0.024mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 1/1）得到終產物3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（30mg，收率27 %）。MS (ESI) M/Z: 450.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.94 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.87-7.75 (m, 4H), 7.67-7.59 (m, 2H), 7.54-7.50 (m, 1H), 7.14 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.07-7.06 (m, 1H), 5.82 (s, 2H), 5.24 (s, 1H), 2.56 (s, 3H), 1.38 (s, 6H).
實施例b-2:
3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-2）的製備
化合物b-2
反應步驟：
步驟1：將5，7-二氯-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（600mg，3.2mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（565mg，3.5mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（1.0g，9.5mmol）和Pd(dppf)Cl
2（117mg，0.16mmol）。反應體系升溫至95℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 1/1）得到3-(7-氯-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（200mg，收率23 %）。
MS (ESI) M/Z: 269.1 [M+H]
+.
步驟2：將3-(7-氯-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（110mg，0.41mmol）溶於乙腈（10mL），加入乙醯氯（161mg，2.1mmol）和碘化鈉（369mg，2.5mmol）。反應體系升溫至90℃並攪拌20小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（10mL），用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1）得到3-(7-碘-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（147mg，收率99 %）。
MS (ESI) M/Z: 361.1 [M+H]
+.
步驟3：將3-(7-碘-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（147mg，0.41mmol）溶於二氯甲烷（10mL），加入一水合對甲苯磺酸（8mg，0.04mmol）和DHP（53mg，0.63mmol）。反應體系室溫下攪拌4小時，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液（15mL）和飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到3-(7-碘-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（110mg，收率60 %）。
MS (ESI) M/Z: 445.1 [M+H]
+.
步驟4： 將3-(7-碘-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4，5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（110mg，0.25mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，10mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（5mg，0.03mmol）、Pd(PPh
3)
2Cl
2（9mg，0.01mmol）和三異丙基矽乙炔（273mg，1.5mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到2-甲基-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-((三異丙基矽基)乙炔)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（103mg，收率83%）。
MS (ESI) M/Z: 499.4 [M+H]
+.
步驟5：將2-甲基-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-((三異丙基矽基)乙炔)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（103mg，0.21mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（78mg，0.25mmol）。反應體系在0℃攪拌20分鐘。向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得3-(7-乙炔基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈粗品直接用於下一步反應（100mg）。
MS (ESI) M/Z: 259.0 [M+H]
+.
步驟6：將3-(7-乙炔基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（100mg，粗品）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 1/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（75mg，0.39mmol）、五水硫酸銅（1mg，0.004mmol）和抗壞血酸鈉（4mg，0.02mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（40mg，收率42 %）。
MS (ESI) M/Z: 451.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.96 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.73-7.67 (m, 3H), 7.51 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.40 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.17 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.77 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
實施例b-3:
3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-3）的製備
化合物b-3
反應步驟：
步驟1：將2,4-二氯-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶（500mg，2.7mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，100mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（101mg，0.53mmol）、Pd(PPh
3)
4（307mg，0.27mmol）和三異丙基矽乙炔（581mg，3.2mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：V石油醚/V乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-氯-4-((三異丙基矽基)乙炔)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶（650mg，收率71%）。
MS (ESI) M/Z: 334.1 [M+H]
+.
步驟2：將2-氯-4-((三異丙基矽基)乙炔)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶（334mg，1.0mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（379mg，1.2mmol）。反應體系在0℃攪拌30分鐘。向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（10mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得2-氯-4-乙炔基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶粗品直接用於下一步反應（177mg）。
MS (ESI) M/Z: 178.0 [M+H]
+.
步驟3：將2-氯-4-乙炔基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶（177mg，粗品）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，9mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（192mg，1.0mmol）、五水硫酸銅（2.5mg，0.01mmol）和抗壞血酸鈉（10mg，0.05mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（10mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1）得到2-(6-((4-(2-氯-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（260mg，收率70%）。MS (ESI) M/Z: 370.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 10.83 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.75 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.46 (s, 2H), 7.40 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.14 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.82 (s, 2H), 1.56 (s, 6H).
步驟4： 將2-(6-((4-(2-氯-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（120mg，0.33mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（105mg，0.66mmol）溶於1，4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，24mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（106mg，1.0mmol）和Pd(dppf)Cl
2（24mg，0.033mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 1/1）得到終產物3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-甲基苯甲腈（50mg，收率34 %）。
MS (ESI) M/Z: 451.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.35 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.16-8.14 (m, 1H), 7.91-7.89 (m, 1H), 7.82-7.78 (m, 1H), 7.71(m, 1H), 7.60 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.54 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.22 (d,
J= 3.6 Hz, 1H), 7.19-7.16 (m, 1H), 5.84 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 2.77 (s, 3H), 1.38 (s, 6H).
實施例b-4:
3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-4）的製備
化合物b-4
反應步驟：
步驟1：將4-溴-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（1.0g，4.8mmol）溶於乙醚（20mL）。氮氣保護下，加入m-CPBA（1.2g，7.0mmol）。反應體系室溫攪拌過夜。TLC監測顯示反應結束，反應液過濾，濾餅經乙醚（20mL）洗滌，乾燥得到4-溴-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-7-氧化物（870mg，收率81%）。
MS (ESI) M/Z: 226.7.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 13.33 (br s, 1H), 7.95 (d,
J= 6.4 Hz, 1H), 7.18 (d,
J= 6.4 Hz, 1H), 6.27 (s, 1H), 2.53 (s, 3H).
步驟2：將4-溴-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-7-氧化物（340mg，1.5mmol）溶於三氯氧磷（10mL），升溫至110℃攪拌24小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，往剩餘物加入冷水（20mL），用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到4-溴-6-氯-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（321mg，收率87%）。
MS (ESI) M/Z: 244.9.
1H NMR (400 MHz， CDCl
3): δ 9.02 (br s， 1H)， 7.30 (s， 1H)， 6.24 (s， 1H)， 2.50 (s， 3H).
步驟3： 將4-溴-6-氯-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（260mg，1.1mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，15mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（40mg，0.21mmol）、三苯基膦（28mg，0.11mmol）、Pd(PPh
3)
2Cl
2（74mg，0.11mmol）和三異丙基矽乙炔（212mg，1.2mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到6-氯-2-甲基-4-((三異丙基矽基)乙炔)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（290mg，收率79 %）。
MS (ESI) M/Z: 347.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.98 (br s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.01-1.99 (m, 3H), 1.13 (s, 18H).
步驟4：將6-氯-2-甲基-4-((三異丙基矽基)乙炔)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（290mg，0.84mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至0℃，加入TBAF·3H
2O（315mg，1.0mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌20分鐘。向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（15mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮，得到6-氯-4-乙炔基-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶粗品（133mg），直接用於下一步反應。
MS (ESI) M/Z: 190.8 [M+H]
+.
步驟5：將6-氯-4-乙炔基-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（133mg，粗品）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 1/1，24mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（110mg，0.57mmol）、五水硫酸銅（1.2mg，0.005mmol）和抗壞血酸鈉（6mg，0.03mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：二氯甲烷/甲醇= 100/1 ~ 50/1）得到2-(6-((4-(6-氯-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（79mg，收率36 %）。
MS (ESI) M/Z: 383.0 [M+H]
+.
步驟6： 將2-(6-((4-(6-氯-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（79mg，0.21mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（100mg，0.62mmol）溶於1，4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，12mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（66mg，0.62mmol）和Pd(dppf)Cl
2（30mg，0.04mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌48小時。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（15mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（12.4mg，收率13 %）。
MS (ESI) M/Z: 464.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.85 (s, 1H), 7.77-7.68 (m, 4H), 7.53 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.43 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.18 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.78 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.40 (s, 6H).
實施例b-5:
3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-5）的製備
化合物b-5
反應步驟：
步驟1：將4，6-二氯-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶（400mg，2.1mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（410mg，2.5mmol）溶於1，4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸銫（1.7g，5.3mmol）和Pd(OAc)
2（47.6mg，0.21mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 1/1）得到3-(4-氯-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（183mg，收率32 %）。
MS (ESI) M/Z: 269.1 [M+H]
+.
步驟2：將3-(4-氯-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（183mg，0.68mmol）溶於乙腈（10mL），加入乙醯氯（267mg，3.4mmol）和碘化鈉（613mg，4.1mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌過夜。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 2/1）得到3-(4-碘-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（195mg，收率79 %）。
MS (ESI) M/Z: 360.9 [M+H]
+.
步驟3： 將3-(4-碘-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（180mg，0.5mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，10mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（15mg，0.08mmol）、三苯基膦（20mg，0.08mmol）、Pd(PPh
3)
2Cl
2（27mg，0.04mmol）和三甲基矽乙炔（76mg，0.78mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-甲基-3-(4-((三甲基矽)乙炔基)-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)苯甲腈（140mg，收率85%）。
MS (ESI) M/Z: 331.1 [M+H]
+.
步驟4：將2-甲基-3-(4-((三甲基矽)乙炔基)-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)苯甲腈（140mg，0.42mmol）溶於四氫呋喃和水的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 1/1，10mL），加入碳酸鈉（135mg，1.3mmol）。反應體系在室溫攪拌2小時。向反應液中加入乙酸乙酯（10mL）稀釋，分液，有機相用飽和食鹽水（5mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到3-(4-乙炔基-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（70mg，收率64%）。
MS (ESI) M/Z: 259.0 [M+H]
+.
步驟5：將3-(4-乙炔基-1H-吡唑並[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（70mg，0.27mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，9mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（104mg，0.54mmol）、五水硫酸銅（1.4mg，0.005mmol）和抗壞血酸鈉（3mg，0.014mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（15mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(4-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（27mg，收率22 %）。
MS (ESI) M/Z: 451.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.90 (br s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 7.92 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.85-7.80 (m, 3H), 7.62-7.54 (m, 2H), 7.19 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.84 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 2.55 (t, 3H), 1.37 (s, 6H).
實施例b-6:
3-(4-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-6）的製備
化合物b-6
反應步驟：
步驟1：將6-溴-2-吡啶甲酸乙酯（0.5g，2.2mmol）和2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（0.22g，2.2mmol）溶於DMF（20mL），加入碳酸鉀（1.5g，10.9mmol）。反應體系升溫至90℃並攪拌過夜。TLC監測顯示反應結束，反應液冷卻至室溫，加水（60mL）稀釋。混合液用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 5/1）得到6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯（0.42g，收率78%）。
MS (ESI) M/Z: 249.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.58-7.54 (m, 1H), 7.44 (dd,
J
1 = 7.2 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 6.46 (dd,
J
1 = 8.4 Hz,
J
2 = 0.8 Hz, 1H), 4.85 (s, 4H), 4.40 (q,
J= 7.2 Hz, 2H), 4.25 (s, 4H), 1.42 (t,
J= 7.2 Hz, 3H).
步驟2：將6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯（750mg，3.0mmol）溶於四氫呋喃（35mL），冷卻至0℃，氮氣保護下，滴加紅鋁甲苯溶液（3.6 M，1.0mL，3.6mmol）。反應體系在0℃攪拌2小時，加入10%碳酸鈉水溶液（70mL）淬滅反應。混合液用矽藻土過濾除去鋁鹽，分液，水相用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇（560mg，收率90%）。
MS (ESI) M/Z: 207.1 [M+H]
+.
步驟3：將(6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇（540mg，2.6mmol）溶於甲苯（15mL），冷卻至0℃，加入DPPA（860mg，3.1mmol）和DBU（480mg，3.1mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（15mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到6-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（450mg，收率74%）。
MS (ESI) M/Z: 232.1 [M+H]
+.
步驟4：將6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶（88mg，0.5mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V/V= 2/1，9mL）。氮氣保護下，依次加入6-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（102mg，0.44mmol）、五水硫酸銅（2.4mg，0.01mmol）和抗壞血酸鈉（5mg，0.025mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（10mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（10mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1 ~ 3/1）得到6-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（80mg，收率65 %）。MS (ESI) M/Z: 408.2 [M+H]
+.
步驟5： 將6-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷（80mg，0.2mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（65mg，0.4mmol）溶於1，4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（32mg，0.3mmol）和Pd(dppf)Cl
2（15mg，0.02mmol）。反應體系升溫至98℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(4-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（13.5mg，收率14 %）。
MS (ESI) M/Z: 489.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 9.91 (br s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.75-7.70 (m, 3H), 7.47-7.37 (m, 3H), 7.01 (s, 1H), 6.59 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.26 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 2H), 4.83 (s, 4H), 4.17 (s, 4H), 2.60 (s, 3H).
實施例b-7:
3-(4-(1-((6-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-7）的製備
化合物b-7
反應步驟：
參照實施例b-6的製備步驟，以7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷替代2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷，得到終產物3-(4-(1-((6-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯並[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈（15mg，收率14 %）。
MS (ESI) M/Z: 517.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.53 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 3H), 7.52-7.45 (m, 3H), 6.96 (d,
J= 3.2 Hz, 1H), 6.59 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.32 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.62 (s, 2H), 3.81 (s, 4H), 3.68 (t,
J= 5.2 Hz, 4H), 2.58 (s, 3H), 1.85 (t,
J= 5.2 Hz, 4H).
實施例b-8:
3-(6-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-8）的製備
化合物b-8
反應步驟：
步驟1：將2，6-二氯-9H-嘌呤（500mg，2.7mmol）溶於二氯甲烷（50mL），加入一水合對甲苯磺酸（50mg，0.25mmol）和DHP（400mg，4.8mmol）。反應體系室溫下攪拌過夜，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液（30mL）和飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2，6-二氯-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤（500mg，收率69%），直接用於下一步反應。
MS (ESI) M/Z: 273.1 [M+H]
+.
步驟2： 將2，6-二氯-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤（500mg，1.8mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 1/1，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（175mg，0.9mmol）、Pd(dppf)Cl
2（131mg，0.18mmol）和三異丙基矽乙炔（335mg，1.8mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，TLC監測顯示反應結束，向反應液中加入5%檸檬酸水溶液（40mL）。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-氯-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-6-((三異丙基矽基)乙炔)-9H-嘌呤（490mg，收率64%）。
MS (ESI) M/Z: 419.2 [M+H]
+.
步驟3：將2-氯-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-6-((三異丙基矽基)乙炔)-9H-嘌呤（420mg，1.0mmol）和3-氰基-2-甲基苯硼酸（161mg，1.0mmol）溶於1，4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 4/1，25mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鉀（277mg，2.0mmol）和Pd(dppf)Cl
2（73mg，0.1mmol）。反應體系升溫至80℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，混合液用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-甲基-3-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-6-((三異丙基矽基)乙炔)-9H-嘌呤-2-基)苯甲腈（560mg，粗品）。
MS (ESI) M/Z: 500.4 [M+H]
+.
步驟4：將2-甲基-3-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-6-((三異丙基矽基)乙炔)-9H-嘌呤-2-基)苯甲腈（200mg，粗品）溶於四氫呋喃（10mL），加入TBAF·3H
2O（125mg，0.4mmol）。反應體系在室溫下攪拌2小時，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，混合液用飽和食鹽水（20mL×2次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到3-(6-乙炔基-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈（65mg，收率53 %），直接用於下一步反應。
MS (ESI) M/Z: 344.3 [M+H]
+.
步驟5：將3-(6-乙炔基-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈（65mg，0.2mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 2/1，15mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（65mg，0.34mmol）、五水硫酸銅（7mg，0.03mmol）和抗壞血酸鈉（22mg，0.1mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯（50mL）稀釋，混合液用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL×3次）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(6-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈（21mg，收率25 %）。MS (ESI) M/Z: 452.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz， DMSO-d6): δ 9.24 (br s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.15 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.92 (d,
J= 6.8 Hz, 1H), 7.81 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.56 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.20 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.24 (s, 1H), 2.73 (s, 3H), 1.37 (s, 6H).
實施例b-9:
3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-9）的製備
化合物b-9
反應步驟：
參照實施例b-2的製備步驟，以5,7-二氯-2-甲基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶替代5,7-二氯-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶，得到70mg終產物3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈。
MS (ESI) M/Z: 464.6 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.04 (s, 1H), 7.83-7.74 (m, 4H), 7.61 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.48 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.26 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.85 (s, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.50 (s, 6H).
實施例b-10:
2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（化合物b-10）的製備
化合物b-10
反應步驟：
步驟1：將5,7-二氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（1.15g，4.2mmol）和3-氰基-2-氟苯硼酸（700mg，4.2mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，90mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸鈉（1.4g，13.0mmol）和Pd(dppf)Cl
2（155mg，0.21mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（100mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（100mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯= 20/10/3 ~ 2/1/2）得到3-(7-氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-氟苯甲腈（300mg，收率20 %）。
MS (ESI) M/Z: 356.8 [M+H
+].
步驟2：將3-(7-氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-氟苯甲腈（300mg，0.84mmol）溶於二氯甲烷（5mL），加入氯化氫的乙酸乙酯溶液（3.7 M，1mL，3.7mmol）。反應體系在室溫下攪拌2小時，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL），用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。剩餘物溶於乙腈（10mL），加入乙醯氯（328mg，4.2mmol）和碘化鈉（756mg，5.0mmol）。反應體系升溫至90℃並攪拌20小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL），用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 1/4）得到2-氟-3-(7-碘-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（160mg，收率52%）。
MS (ESI) M/Z: 365.0 [M+H
+].
步驟3：將2-氟-3-(7-碘-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（160mg，0.44mmol）溶於二氯甲烷（15mL），加入一水合對甲苯磺酸（8mg，0.04mmol）和DHP（370mg，4.4mmol）。反應體系在30℃下攪拌4小時，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL）和飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 3/1）得到2-氟-3-(7-碘-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（196mg，收率99%）。
MS (ESI) M/Z: 449.1 [M+H
+].
步驟4： 將2-氟-3-(7-碘-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（196mg，0.44mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，20mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（8mg，0.04mmol）、Pd(PPh
3)
2Cl
2（16mg，0.02mmol）和三異丙基矽乙炔（480mg，2.6mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫並減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-氟-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-((三異丙基矽基)乙炔)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（90mg，收率41%）。
MS (ESI) M/Z: 503.3 [M+H
+].
步驟5：將2-氟-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-((三異丙基矽基)乙炔)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（90mg，0.18mmol）溶於四氫呋喃（10mL），冷卻至-10℃，加入TBAF·3H
2O（68mg，0.22mmol）。反應體系在0℃攪拌20分鐘。向反應液中加入飽和氯化銨水溶液（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得2-氟-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-(7-乙炔基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈粗品直接用於下一步反應（62mg）。
MS (ESI) M/Z: 347.1 [M+H
+].
步驟6：將2-氟-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-(7-乙炔基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（62mg，粗品）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 1/1，24mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（35mg，0.18mmol）、五水硫酸銅（1mg，0.004mmol）和抗壞血酸鈉（4mg，0.02mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（50mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1 ~ 1/4）得到2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（40mg，兩步收率41%）。
MS (ESI) M/Z: 538.7 [M+H
+].
步驟7：將2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（40mg，0.074mmol）溶於二氯甲烷（2mL）。氮氣保護下，加入氯化氫的乙酸乙酯溶液（3.7 M，0.03mL，0.10mmol）。反應體系在室溫下攪拌2小時，將反應液倒入到飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL）中，用乙酸乙酯（50mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（25mg，收率74%）。
MS (ESI) M/Z: 455.3 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.05 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.30 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.86-7.79 (m, 3H), 7.60 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.51 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.27 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 5.87 (s, 2H), 1.50 (s, 6H).
實施例b-11:
2-(6-((4-(5-(3-氟-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物b-11）的製備
化合物b-11
反應步驟：
參照實施例b-10的製備步驟，以3-氟-2-甲基苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到終產物2-(6-((4-(5-(3-氟-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（20mg）。
MS (ESI) M/Z: 444.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.38 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.86-7.79 (m, 1H), 7.62 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.36-7.26 (m, 3H), 7.18 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 2.28 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
實施例b-12:
3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（化合物b-12）的製備
化合物b-12
反應步驟：
參照實施例b-10的製備步驟，以3-氰基苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到終產物3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（10mg, 白色固體）。
MS (ESI) M/Z: 437.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.43 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.65-8.45 (m, 4H), 7.93-7.62 (m, 4H), 7.18 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 1.39 (s, 6H).
實施例b-13:
2-(6-((4-(5-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（化合物b-13）的製備
化合物b-13
反應步驟：
參照實施例b-10的製備步驟，以3,5-二氟苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到終產物2-(6-((4-(5-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（22mg）。
MS (ESI) M/Z: 448.0 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.68 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.83-7.79 (m, 3H), 7.61 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.25 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 1.50 (s, 6H).
實施例b-14:
(S)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（化合物b-14）的製備
化合物b-14
反應步驟：
參照實施例b-10的製備步驟，以(S)-2-(疊氮甲基)-6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物(S)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（80mg）。
MS (ESI) M/Z: 493.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.42 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.90-7.80 (m, 3H), 7.53 (t,
J= 7.6 Hz,1H), 7.40 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.26 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 4.24 (br s, 1H), 3.74-3.61 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 1.94-1.93 (m, 2H).
實施例b-15:
(R)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（化合物b-15）的製備
化合物b-15
反應步驟：
參照實施例b-10的製備步驟，以(R)-2-(疊氮甲基)-6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物(R)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（30mg）。
MS (ESI) M/Z: 493.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.42 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.90-7.81 (m, 3H), 7.53 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.40 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.25 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.91(s, 2H), 4.52 (s, 2H), 4.25 (br s, 1H), 3.72-3.64 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 1.95-1.92 (m, 2H).
實施例b-16:
3-(7-(1-((6-(1-羥環戊基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-16）的製備
化合物b-16
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)環戊-1-醇替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((6-(1-羥環戊基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（8mg）。
MS (ESI) M/Z: 476.9 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.12 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.85-7.74 (m, 3H), 7.62 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.25 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.20-2.10 (m, 2H), 1.95-1.75 (m, 6H).
實施例b-17:
3-(7-(1-((6-(1-羥環丁基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-17）的製備
化合物b-17
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)環丁-1-醇替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((6-(1-羥環丁基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（20mg）。
MS (ESI) M/Z: 463.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.10 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.80-7.74 (m, 3H), 7.54 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.47 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.88 (s, 2H), 2.60-2.50 (m, 5H), 2.27-2.19 (m, 2H), 1.90-1.75 (m, 2H).
實施例b-18:
3-(7-(1-((6-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-18）的製備
化合物b-18
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((6-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（15mg）。
MS (ESI) M/Z: 518.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.13 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.77 (d,
J= 7.6 Hz, 2H), 7.53-7.47 (m, 2H), 6.60 (d,
J= 6.8 Hz, 1H), 6.36 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 3.75 (br s, 4H), 3.62 (t,
J= 5.2 Hz, 4H), 2.57 (s, 3H), 1.79 (t,
J= 5.2 Hz, 4H).
實施例b-19:
3-(7-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-19）的製備
化合物b-19
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以2-(疊氮甲基)-6-(甲氧基甲基)吡啶替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（100mg）。
MS (ESI) M/Z: 437.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.41 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.90-7.80 (m, 3H), 7.54 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.38 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.23 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.54 (s, 3H).
實施例b-20:
3-(7-(1-((1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-20）的製備
化合物b-20
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以1-(3-(疊氮甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（10mg）。
MS (ESI) M/Z: 454.0 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.96 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.7-7.75 (m, 2H), 7.64 (d,
J= 2.0 Hz, 1H), 7.48 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.10 (s, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.16 (s, 6H).
實施例b-21:
3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基-d2)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-21）的製備
化合物b-21
反應步驟：
步驟1：將6-(2-羥丙-2-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，5.1mmol）溶於無水四氫呋喃（20mL），冷卻至0℃，加入氘代四氫鋁鋰（430mg，10.2mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌2小時。向反應液中慢慢加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(6-(羥甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（650mg，收率75%）。
MS (ESI) M/Z: 169.9 [M+H
+].
步驟2：將2-(6-(羥甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（650mg，3.8mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.0g，3.9mmol）和DBU（591mg，3.9mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 3/1）得到2-(6-(疊氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇（350mg，收率47%）。
MS (ESI) M/Z: 195.1 [M+H
+].
步驟3：參照實施例b-10的相關製備步驟，以2-(6-(疊氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(2-羥丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基-d2)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（40mg）。
MS (ESI) M/Z: 453.3 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.06 (s, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.85-7.79 (m, 3H), 7.62 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.51 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.29 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 2.58 (s, 3H), 1.48 (s, 6H).
實施例b-22:
2-((4-(5-(3-氰基-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羥丙-2-基)吡啶-1-氧化物（化合物b-22）的製備
化合物b-22
反應步驟：
參照實施例b-10的類似製備步驟，以2-(疊氮甲基)-6-(2-羥丙-2-基)吡啶-1-氧化物替代2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到終產物2-((4-(5-(3-氰基-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羥丙-2-基)吡啶-1-氧化物（40mg）。
MS (ESI) M/Z: 467.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.16 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.77 (d,
J= 7.6 Hz, 2H), 7.69 (d,
J= 8.0 Hz,1H), 7.56-7.49 (m, 2H), 7.31 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.02 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.68 (s, 6H).
實施例b-23:
3-(7-(1-((6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-23）的製備
化合物b-23
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶（1.0g，3.3mmol）溶於DMF（15mL），室溫下依次加入
cis-2,6-二甲基嗎福林（460mg，4.0mmol），碘化亞銅（63mg，0.33mmol）和碳酸鉀（2.3g，16.7mmol）。反應體系氮氣保護下升溫至95℃攪拌16小時，冷卻至室溫，向反應液中慢慢加入水（30mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 20/1/1 ~ 3/1/1）得到
cis-4-(6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（600mg，收率52%）。
MS (ESI) M/Z: 337.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.52-7.48 (m, 1H), 6.84 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.48 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 3.75-3.71 (m, 2H), 2.50-2.44 (m, 2H), 1.27 (d,
J= 6.4 Hz, 6H), 0.96 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
步驟2：將
cis-4-(6-(((第三丁基二甲基矽基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（600mg，1.8mmol）溶於四氫呋喃（6mL），加入TBAF.3H
2O（560mg，2.1mmol）。反應體系在室溫下攪拌16小時後，加入水（3mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲醇（350mg，收率88%）。
MS (ESI) M/Z: 222.9 [M+H
+].
步驟3：將(6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲醇（350mg，1.6mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1 ~ 3/1/1）得到
cis-4-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林（150mg，收率38%）。
MS (ESI) M/Z: 248.1 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以
cis-4-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基嗎福林為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(
cis-2,6-二甲基嗎福林)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（24mg）。
MS (ESI) M/Z: 506.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.03 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.79-7.76 (m, 2H), 7.57-7.48 (m, 2H), 6.74-6.68 (m, 2H), 5.69 (s, 2H), 4.07 (d,
J= 11.6 Hz, 2H), 3.60-3.56 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.40-2.34 (m, 2H), 1.09 (d,
J= 6.4 Hz, 6H).
實施例b-24:
3-(7-(1-((6-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-24）的製備
化合物b-24
反應步驟：
步驟1：將1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（397mg，1.8mmol）溶於甲苯（6mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷= 5/1/1 ~ 3/1/1）得到1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇（230mg，收率52%）。
MS (ESI) M/Z: 248.2 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（22mg）。
MS (ESI) M/Z: 506.3 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.29 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.88 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 7.55-7.48 (m, 2H), 6.77 (d,
J= 8.8 Hz, 1H), 6.51 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.29 (s, 1H), 3.80-3.77 (m, 2H), 3.33-3.27 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.48-1.30 (m, 4H), 1.06 (s, 3H).
實施例b-25:
3-(7-(1-((6-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-25）的製備
化合物b-25
反應步驟：
步驟1：將1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（350mg，1.8mmol）溶於甲苯（10mL），冷卻至0℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 1/1）得到1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇（150mg，收率38%）。
MS (ESI) M/Z: 242.3 [M+Na
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-醇為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（34mg）。
MS (ESI) M/Z: 478.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 8.99 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.77 (d,
J= 8.0 Hz, 2H), 7.54-7.47 (m, 2H), 6.62 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.37 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 3.91-3.82 (m, 4H), 2.57 (s, 3H), 1.50 (s, 3H).
實施例b-26:
3-(7-(1-((6-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-26）的製備
化合物b-26
反應步驟：
步驟1：將3-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（1.0 g，5.5mmol）溶於甲苯（20mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.9g，6.8mmol）和DBU（1.0g，6.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 10/1）得到3-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇（200mg，收率18%）。
MS (ESI) M/Z: 206.9 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以3-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-醇為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（8mg）。
MS (ESI) M/Z: 465.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.15 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.86 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.77 (d,
J= 7.6 Hz, 2H), 7.66 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.49 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.93 (s, 2H), 5.01 (br s, 2H), 4.77 (d,
J= 6.4 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H).
實施例b-27:
3-(7-(1-((6-(2-氰基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-27）的製備
化合物b-27
反應步驟：
步驟1：將2-甲基-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙腈（800mg，5.0mmol）溶於四氯化碳（6mL），室溫下依次加入N-溴代丁二醯亞胺（976mg，5.5mmol）和過氧化苯二甲醯（120mg，0.5mmol）。反應體系氮氣保護下升溫至78℃攪拌16小時，冷卻至室溫，向反應液中慢慢加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL）淬滅反應。混合液用二氯甲烷（40mL×2次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：正己烷/乙酸乙酯= 49/1）得到2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（400mg，收率34%）。
MS (ESI) M/Z: 239.1 [M+H
+].
步驟2：將2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（200mg，0.84mmol）溶於二甲亞碸（6mL），室溫下加入疊氮化鈉（82mg，1.3mmol）。反應體系升溫至50℃攪拌16小時。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（100mL×2次）萃取，合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：正己烷/乙酸乙酯= 9/1）得到2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈（80mg，收率47%）。
MS (ESI) M/Z: 201.8 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(2-氰基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（12mg）。
MS (ESI) M/Z: 460.0 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.07 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.89 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.77 (d,
J= 7.6 Hz, 2H), 7.59 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.49 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.39 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.70 (s, 6H).
實施例b-28:
3-(7-(1-((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-28）的製備
化合物b-28
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶（2.0g，6.6mmol），3,3-二氟氮雜環丁烷鹽酸鹽（2.1g，16.3mmol）、碳酸銫（3.0g，9.3mmol）、醋酸鈀（149mg，0.66mmol）和1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦 （414mg，0.66mmol）溶於甲苯（30mL）中，氮氣置換三次，升溫至120℃回流攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，加入水（20mL）。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 50/1）得到2-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶（700mg，收率34%）。
MS (ESI) M/Z: 315.3 [M+H
+].
步驟2：將2-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶（700mg，2.2mmol）溶於四氫呋喃（5mL），冰浴冷卻下加入三水合四丁基氟化銨（696mg，2.2mmol），室溫攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，收率90%）。
MS (ESI) M/Z: 200.6 [M+H
+].
步驟3：將(6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇（100mg，0.5mmol）溶於四氫呋喃（7mL），冷卻至0℃，加入DPPA（165mg，0.6mmol）和DBU（91mg，0.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌20小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 40/1）得到2-(疊氮甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶（39mg，收率29%）。
MS (ESI) M/Z: 226.2 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-10的類似製備步驟，以2-(疊氮甲基)-6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶為原料，得到終產物3-(7-(1-((6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（23mg）。
MS (ESI) M/Z: 484.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.42 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.88 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.82 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 7.63 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.54 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.70-6.68 (m, 1H), 6.55 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.75 (s, 2H), 4.41-4.34 (m, 4H), 2.54 (s, 3H).
實施例b-29:
3-(7-(1-(3-(2-羥丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-29）的製備
化合物b-29
反應步驟：
步驟1：將2-(3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇（750mg，4.5mmol）溶於甲苯（30mL），冷卻至0℃，加入DPPA（1.2g，4.3mmol）和DBU（653mg，4.3mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（20mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（20mL×2次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（30mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1）得到2-(3-(疊氮甲基)苯基)丙-2-醇（492mg，收率57%）。MS (ESI) M/Z: 174.0 [M-H
2O+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.47-7.43 (m, 2H), 7.33 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 1.44 (s, 6H).
步驟2：將3-(7-乙炔基-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（70mg，0.27mmol）溶於第三丁醇和水的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水= 1/1，10mL）。氮氣保護下，依次加入2-(3-(疊氮甲基)苯基)丙-2-醇（62mg，0.33mmol）、五水硫酸銅（1mg，0.004mmol）和抗壞血酸鈉（4mg，0.02mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經製備型高效液相色譜純化得到終產物3-(7-(1-(3-(2-羥丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（81mg，收率66 %）。
MS (ESI) M/Z: 450.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.41 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.88 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.58-7.51 (m, 2H), 7.42 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.32 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.21 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 5.78-5.76 (m, 2H), 5.06 (br s, 1H), 2.53 (s, 3H), 1.41 (s, 6H).
實施例b-30:
3-(7-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-30）的製備
化合物b-30
反應步驟：
參照實施例b-29的製備步驟，以(6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇替代2-(3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-((6-(2-氧-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（4mg）。
MS (ESI) M/Z: 490.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): δ 9.00 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.79-7.76 (m, 2H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.50 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 6.67-6.44 (m, 2H), 5.70 (s, 2H), 4.81 (br s, 4H), 4.21 (br s, 4H), 2.57 (s, 3H).
實施例b-31:
(R)-3-(7-(1-((6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-31）的製備
化合物b-31
反應步驟：
步驟1：將6-氟吡啶甲酸甲酯（1.0g，6.5mmol）和(R)-吡咯啉-3-醇（562mg，6.5mmol）溶於乾燥DMF（100mL）中，加入碳酸鉀（4.5g，32.2mmol）和碘化亞銅（124mg，0.65mmol），氮氣置換3次，反應體系升溫至98℃攪拌過夜。TLC監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，過濾，濾餅用乙酸乙酯（20mL×2次）洗滌，混合液減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 1/1）得到(R)-6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（850mg，收率59%）。MS (ESI) M/Z: 222.7 [M+H
+].
步驟2：將(R)-6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（850mg，3.8mmol）和咪唑（785mg，11.5mmol）溶於二氯甲烷（30mL），冰浴冷卻下加入TBSCl（1160mg，7.7mmol），室溫攪拌過夜。TLC監測顯示原料反應完畢，加入水（50mL），分液，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，收率78%）。MS (ESI) M/Z: 336.9 [M+H
+].
步驟3：將(R)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯（1.0g，3.0mmol）溶於無水四氫呋喃（30mL），冷卻至0℃，滴加硼氫化鋰的四氫呋喃溶液（1M, 6.6mL，6.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫攪拌2小時。緩慢向反應液中加入冷飽和氯化銨溶液（50mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-(6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，收率43%）。MS (ESI) M/Z: 309.3 [M+H
+].
步驟4：將(R)-(6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇（400mg，1.3mmol）溶於無水四氫呋喃（50mL），冷卻至0~5℃，加入DPPA（430mg，1.6mmol）和DBU（240mg，1.6mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌過夜。向反應液中加入水（50mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到(R)-2-(疊氮甲基)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶（60mg，收率14%）。MS (ESI) M/Z: 334.3 [M+H
+].
步驟5：將3-(7-乙炔基-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（61mg，0.18mmol）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 5/5/2，12mL）。氮氣保護下，依次加入(R)-2-(疊氮甲基)-6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶（60mg，0.18mmol）、五水硫酸銅（0.5mg，0.002mmol）和抗壞血酸鈉（2mg，0.01mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入水（50m1）淬滅，混合液用乙酸乙酯（50mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 1/1）得到3-(7-(1-((6-((R)-3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（40mg，收率33%）。MS (ESI) M/Z: 676.8 [M+H]
+.
步驟6：將3-(7-(1-((6-((R)-3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（40mg，0.06mmol）溶於四氫呋喃（10m1），冰浴冷卻下加入四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液（1.0M, 0.06mL，0.06mmol），室溫攪拌過夜。TLC監測顯示原料反應完畢，加入碳酸氫鈉水溶（20mL），混合液用乙酸乙酯（30mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（50mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經高效液相製備色譜純化得到3-(7-(1-((6-((R)-3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（20mg，收率59%）。MS (ESI) M/Z: 584.3 [M+Na
+].
步驟7：將3-(7-(1-((6-((R)-3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（20mg，0.035mmol）溶於二氯甲烷（2m1），冰浴冷卻下加入氯化氫的乙酸乙酯溶液（3.7 M，0.1mL，0.37mmol）。反應體系在室溫下攪拌過夜，有固體析出，過濾，將濾餅加到飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL）中，用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到(R)-3-(7-(1-((6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（20mg，收率59%）。
MS (ESI) M/Z: 478.4 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.41 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.90-7.81 (m, 2H), 7.55-7.43 (m, 2H), 6.48 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.38 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.45-3.25 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 1.99-1.86 (m, 2H).
實施例b-32:
(S)-3-(7-(1-((6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-32）的製備
化合物b-32
反應步驟：
參照實施例b-31的製備步驟，以(S)-吡咯啉-3-醇替代(R)-吡咯啉-3-醇，得到終產物(S)-3-(7-(1-((6-(3-羥基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（25mg）。
MS (ESI) M/Z: 478.2 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.41 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.90-7.81 (m, 2H), 7.56-7.47 (m, 2H), 6.49 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.38 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.44-3.25 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 1.99-1.86 (m, 2H).
實施例b-33:
3-(7-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（化合物b-33）的製備
化合物b-33
反應步驟：
步驟1：將7-溴-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（4.6g，23.0mmol）溶於二氯甲烷（50mL），加入二氫吡喃 (19.5g，230mmol）和對甲苯磺酸一水合物（0.44g，2.3mmol），30℃下攪拌20小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL），分液，水相用二氯甲烷（40mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到7-溴-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（6.0g，收率92%）。
MS (ESI) M/Z: 282.1 [M+H
+].
步驟2： 將7-溴-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（6.0g，21.3mmol）溶於四氫呋喃和三乙胺的混合溶劑（V
THF/V
TEA= 2/3，175mL）。氮氣保護下，依次加入CuI（0.39g，0.23mmol）、Pd(dppf)Cl
2（1.6g，2.1mmol）和三異丙基矽烷乙炔（13.5g，63.9mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌20小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 10/1）得到3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（6.8g，收率83%）。
MS (ESI) M/Z: 384.0 [M+H
+].
步驟3：將3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（6.8g，17.8mmol）溶於二氯甲烷（70mL），降溫至0℃，加入氯化氫的乙酸乙酯溶液（4 M，14mL，56mmol），室溫攪拌2小時。TLC監測顯示原料反應完畢，慢慢加入飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH = 8~9，分液，水相用乙酸乙酯（40 mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1）得到7-((三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（4.0g，收率75%）。
MS (ESI) M/Z: 300.1 [M+H
+].
步驟4：將7-((三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（1.0g，3.3mmol）溶於二氯甲烷（10mL），冰浴冷卻下加入m-CPBA（864mg，5.0mmol），反應體系自然升溫至30℃攪拌20小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL），分液，水相用乙酸乙酯（40 mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1）得到7-((三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-4-氧化物（700mg，收率67%）。
MS (ESI) M/Z: 316.3 [M+H
+].
步驟5：將7-((三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-4-氧化物（700mg，2.2mmol）溶於DMF（20 mL），降溫至0℃，滴加入甲磺醯氯（380mg，3.3mmol），反應體系升溫至80℃攪拌5小時。TLC監測顯示原料反應完畢，反應液降至室溫，加入飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH = 8~9，混合液用乙酸乙酯（40 mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（30mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1）得到5-氯-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（400mg，收率54%）。
MS (ESI) M/Z: 333.9 [M+H
+].
步驟6：將5-氯-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（400mg，1.2mmol）溶於二氯甲烷（10mL），加入二氫吡喃 (1.0g，12.0mmol）和對甲苯磺酸一水合物（22mg，0.12mmol），30℃下攪拌20小時。TLC監測顯示原料反應完畢，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20mL），分液，水相用二氯甲烷（20mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 20/1）得到5-氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（450mg，收率90%）。
MS (ESI) M/Z: 418.3 [M+H
+].
步驟7：將5-氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶（126mg，0.3mmol）和2-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊環-2-基)苯甲腈（156mg，0.6mmol）溶於1,4-二氧六環和水的混合溶劑（V
二氧六環/V
水= 3/1，12mL）。氮氣保護下，依次加入碳酸銫（300mg，0.9mmol）和Pd(dppf)Cl
2（22mg，0.03mmol）。反應體系升溫至98℃攪拌20小時。將反應液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 5/1）得到2-甲氧基-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（140mg，收率91 %）。
MS (ESI) M/Z: 515.4 [M+H
+].
步驟8：將2-甲氧基-3-(3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-(三異丙基矽烷)乙炔基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（140mg，0.27mmol）溶於THF（10mL），降溫至-10℃，加入TBAF.3H
2O (103mg，0.32mmol）, 反應體系升溫至0℃下攪拌0.5小時。TLC監測顯示原料反應完畢，往反應液中加入飽和氯化銨溶液（10mL），用乙酸乙酯（20 mL×3次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到3-(7-乙炔基-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（80mg，粗品）直接用於下一步反應。
MS (ESI) M/Z: 359.1 [M+H
+].
步驟9：將3-(7-乙炔基-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（80mg，粗品）溶於第三丁醇、水和四氫呋喃的混合溶劑（V
第三丁醇/V
水/V
四氫呋喃= 5/5/2，12mL）。氮氣保護下，依次加入2-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（52mg，0.27mmol）、五水硫酸銅（1mg，0.004mmol）和抗壞血酸鈉（4mg，0.02mmol）。反應體系升溫至60℃並攪拌過夜。將反應液冷卻至室溫，加入水（30m1），混合液用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物經高效液相製備色譜純化得到3-(7-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（40mg，二步收率27%）。
MS (ESI) M/Z: 551.4 [M+H]
+.
步驟10：將3-(7-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（40mg，0.07mmol）溶於二氯甲烷（5m1），冰浴冷卻下加入氯化氫的乙酸乙酯溶液（3.7 M，0.1mL，0.37mmol）。反應體系在室溫下攪拌2小時，加入異丙醚（5m1），有固體析出，過濾，將濾餅加到飽和碳酸氫鈉水溶液（10mL）中，用乙酸乙酯（30mL×3次）萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到3-(7-(1-((6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑並[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈（28mg，收率83%）。
MS (ESI) M/Z: 467.5 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.44 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.09 (dd,
J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.90 (dd,
J= 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.81 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.46 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.23 (s, 1H) 3.74 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
參照實施例b-33的合成方法製備得到如下目標產物：
| 實施例 | 結構式 | 1HNMR | MS (ESI) M/Z [M+H] + |
| b-34 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.35 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.23-8.13 (m, 2H), 7.82 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63-7.43 (m, 4H), 7.18 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 1.39 (s, 6H). | 412.0 |
| b-35 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.38 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.84-7.78 (m, 1H), 7.61 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.43 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.35 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.17 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.22 (s, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.39 (s, 6H). | 460.4 |
| b-36 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.48 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.62-8.33 (m, 4H), 7.94 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.82 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 1.38 (s, 6H). | 455.0 |
| b-37 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.38 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.58-8.46 (m, 2H), 8.19-8.11 (m, 2H), 7.82-7.80 (m, 1H), 7.63-7.51 (m, 3H), 7.18 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 1.37 (s, 6H). | 446.2 |
| b-38 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.45 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 8.60-8.52 (m, 4H), 7.92 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.77-7.72 (m, 2H), 7.50 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.16 (brs, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.01 (s, 2H), 1.61 (s, 6H). | 453.2 |
| b-39 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.17 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.81 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.16 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 1.39 (s, 6H). | 416.2 |
| b-40 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.44 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.81 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.84 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 4.20 (s, 3H), 1.38 (s, 6H). | 416.2 |
| b-41 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.26 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.81 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 6.30 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.38 (s, 6H). | 416.3 |
| b-42 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.33 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.90-7.80 (m, 2H), 7.81 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J= 7.6, 3.6 Hz, 1H), 7.42 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.25 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 2.50 (s, 3H), 1.39 (s, 6H). | 426.4 |
| b-43 |  | 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.53 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.12 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.72-7.61 (m, 2H), 7.55-7.46 (m, 3H), 6.06 (s, 2H), 1.56 (s, 6H). | 446.0 |
| b-44 |  | 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.51 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.04-7.96 (m, 2H), 7.83 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.63-7.54 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 2H), 5.89 (s, 2H), 1.49 (s, 6H). | 430.0 |
| b-45 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.50 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.11-8.00 (m, 2H), 7.81 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.70 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 1.39 (s, 6H). | 471.2 |
| b-46 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.38 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.38-8.32 (m, 2H), 7.81 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.68-7.60 (m, 4H), 7.34-7.06 (m, 2H), 5.91 (s, 2H), 5.24 (s, 1H), 1.39 (s, 6H). | 462.0 |
| b-47 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.52 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.71 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.24 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.23 (s, 1H), 1.39 (s, 6H). | 438.4 |
| b-48 |  | 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 9.15 (s, 1H), 8.81 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.70 (s, 2H), 8.53-8.46 (m, 2H), 7.82 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 1.50 (s, 6H). | 438.4 |
| b-49 |  | 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.43 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.01-7.71 (m, 5H), 7.54 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 5.97 (s, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.67 (s, 3H). | 505.2 |
實施例b-50:
3-(7-(1-(苯並[d][1,3]二㗁英-4-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-50）的製備
化合物b-50
反應步驟：
參照實施例b-31的製備步驟，以苯並[d][1,3]二㗁英-4-基甲醇替代(R)-(6-(3-(第三丁基二甲基甲矽烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇，得到終產物3-(7-(1-(苯並[d][1,3]二㗁英-4-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（140mg）。
MS (ESI) M/Z: 436.3 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.42 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.90-7.80 (m, 2H), 7.53 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.96 -6.87 (m, 3H), 6.07 (s, 2H), 5.76 (s, 2H), 2.51 (s, 3H).
實施例b-51:
3-(7-(1-(2-氟-3-(2-羥丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（化合物b-51）的製備
化合物b-51
反應步驟：
步驟1：將((3-溴-2-氟苄基)氧)(第三丁基)二甲基矽烷（1.2g，3.8mmol）溶於甲醇和二甲亞碸的混合溶液（V
甲醇/V
二甲亞碸=1/1, 120mL），依次加入三乙胺（0.9g，8.9mmol），醋酸鈀（80mg，0.36mmol）和1.3-雙二苯基膦丙烷（160mg，0.39mmol），在一氧化碳8公斤壓力氛圍下，升溫至80℃回流攪拌16小時。TLC監測顯示原料消失，冷卻至室溫，過濾除去催化劑，濾液減壓濃縮。殘留物溶於乙酸乙酯（60mL），用水洗滌2-3次，飽和食鹽水洗滌1次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯（800mg，收率34%）。MS (ESI) M/Z: 299.1 [M+H
+].
步驟2：在氮氣氛圍下往燒瓶中加入甲基溴化鎂（6.0mL，18.2mmol，3M的2-甲基四氫呋喃中），冷卻至0℃，滴加3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯（800mg，2.7mmol）的乾燥四氫呋喃（5mL）溶液，約20分鐘滴完，滴完後升至室溫攪拌3小時。TLC監測顯示原料消失，將反應液在冰浴下用飽和氯化銨溶液（30mL）淬滅，乙酸乙酯（50mL×2次）萃取。合併有機層，飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（300mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 299.2 [M+H]
+.
步驟3：將2-(3-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇（300mg，1.0mmol）溶於四氫呋喃（10mL），加入四丁基氟化銨（316mg，1.2mmol），室溫攪拌12小時。TLC監測顯示原料消失，往反應液中加入乙酸乙酯（20mL）稀釋，用水（100mL×3次）洗滌，再用飽和食鹽水（30 mL×2次）洗滌。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到2-(2-氟-3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇（190mg，粗品）。MS (ESI) M/Z: 185.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ 7.49 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.34 (t,
J= 6.8 Hz, 1H), 7.13 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 1.64 (s, 6H).
後續步驟參照實施例b-29的製備步驟，以2-(2-氟-3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇替代2-(3-(羥甲基)苯基)丙-2-醇，得到終產物3-(7-(1-(2-氟-3-(2-羥丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈（160mg）。
MS (ESI) M/Z: 468.1 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.45 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.87 (d,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d,
J= 7.6, Hz, 1H), 7.64 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.53 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.26 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 7.19 (t,
J= 7.6 Hz, 1H), 5.84 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 2.53 (s, 3H), 1.48 (s, 6H).
實施例b-52:
3-(7-(1-((6-(3-(2-羥丙-2-基)氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（化合物b-52）的製備
化合物b-52
反應步驟：
步驟1：將2-溴-6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶（1.4g，4.7mmol）、2-(氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇鹽酸鹽（850mg，5.6mmol）、碳酸銫（3.0g，9.3mmol）、醋酸鈀（105mg，0.47mmol）和1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦 （290mg，0.47mmol）溶於甲苯（30mL）中，氮氣置換三次，升溫至120℃回流攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，反應液冷卻至室溫，加入水（20mL）。混合液用乙酸乙酯（20mL×3次）萃取，合併有機相，有機相先用飽和食鹽水（20mL）洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯 = 1/5）得到2-(1-(6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（600mg，收率38%）。MS (ESI) M/Z: 337.3 [M+H
+].
步驟2：將2-(1-(6-((第三丁基二甲基甲矽烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（600mg，1.8mmol）溶於四氫呋喃（5mL），冰浴冷卻下加入四丁基氟化銨（560mg，2.1mmol），升至室溫攪拌2小時。LCMS監測顯示原料反應完畢，加入水（10mL），混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取。合併有機相，有機相用飽和食鹽水（20mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮得到2-(1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（350mg，收率88%）。MS (ESI) M/Z: 222.8 [M+H
+].
步驟3：將2-(1-(6-(羥甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（350mg，1.6mmol）溶於甲苯和四氫呋喃的混合溶液（V
甲苯/V
四氫呋喃= 5/1，6mL），冷卻至0~5℃，加入DPPA（492mg，1.8mmol）和DBU（273mg，1.8mmol）。反應體系自然升溫至室溫並攪拌5小時。向反應液中加入水（10mL）淬滅反應。混合液用乙酸乙酯（40mL×2次）萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，最後減壓濃縮。所得殘餘物用矽膠柱層析純化（洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯= 1/10）得到2-(1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇（120mg，收率31%）。MS (ESI) M/Z: 248.1 [M+H
+].
後續步驟參照實施例b-33的製備步驟，以2-(1-(6-(疊氮甲基)吡啶-2-基)氮雜環丁烷-3-基)丙-2-醇和5-氯-3-(四氫-2H-吡喃-2-基)-7-((三異丙基矽基)乙炔基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶為原料，經四步反應得到終產物3-(7-(1-((6-(3-(2-羥丙-2-基)氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈（14mg）。
MS (ESI) M/Z: 492.3 [M+H
+].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.23 (s, 1H), 8.65-8.43 (m, 4H), 7.92 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.75 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 7.50 (t,
J= 8.0 Hz, 1H), 6.48 (d,
J= 7.2 Hz, 1H), 6.31 (d,
J= 8.0 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 3.84-3.82 (m, 4H), 1.27-1.23 (m, 1H), 1.01 (s, 6H).
生物活性試驗
測試例1：本發明化合物對人腺苷A2a/A2b受體的拮抗作用的評價
本實驗採用螢光共振能量轉移 (TR-FRET)檢測cAMP水平的方法測試化合物對人腺苷A2a/A2b的拮抗作用，並得出化合物對拮抗人腺苷A2a/A2b後降低cAMP水平的半數抑制濃度 IC
50。
1. 實驗材料
培養基，FBS，100X Pen/Strep購自Gibico公司；cAMP試劑盒購自Perkin Elmer公司；
Rolipram，Forskolin，NECA購自Sigma公司；ZM241385購自MCE公司。
2.實驗方法
1) 準備cAMP 緩衝液如下
2) 準備 Eu-cAMP tracer 工作液 and Ulight-anti-cAMP 工作液如下
3) 消化穩定轉染ADORA2A/ADORA2B受體的HEK293細胞，用細胞計數儀計數（85%以上活細胞才可用於後續實驗）後分別用cAMP緩衝液稀釋成2x10
4細胞/ml、5x10
4細胞/ml。
4) 在384孔板中每孔舖不同密度的細胞（HEK293-ADORA2A為200/孔，HEK293-ADORA2B為500/孔）。
5) 確定NECA的EC50和EC90濃度：
a) 配製1000X NECA濃度梯度儲存液（12梯度，起始濃度0.1mmol/L，1:3稀釋）。
b) 配製1000X ZM241385濃度梯度儲存液（10梯度，起始濃度0.3mmol/L，1:3稀釋）。
c) 配製1000X 目的化合物濃度梯度儲存液（10梯度，起始濃度1mmol/L 或 10mmol/L，1:3稀釋）。
d) 於已舖細胞的384孔板中加入10nl濃度梯度NECA儲存液（1000X），然後25℃孵育 10分鐘
e) Eu-cAMP tracer 工作液和Ulight-anti-cAMP 工作液各5ul每孔.1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
f) EnVision讀板(λex=320 nm, λem=615 nm and 665 nm), 對比 665 nm /615 nm 的比值並根據不同的化合物濃度為X軸作圖，計算得出NECA的EC50和EC90濃度。
6) 根據計算得到的濃度，準備1000X EC90濃度的NECA儲存液（100%v/v於DMSO中）。
7) 用Echo轉移10nl每孔配好的ZM241385梯度儲存液和待測化合物梯度儲存液於舖好細胞的384孔板中。
8) 1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘，將384孔板孵育於37度孵箱。
9) 每孔加入10nl 1000X EC90濃度的NECA，1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘，將384孔板孵育於25度。
10) Eu-cAMP tracer 工作液和Ulight-anti-cAMP 工作液各5ul每孔.1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
11) EnVision讀板(λex=320 nm, λem=615 nm and 665 nm), 對比 665 nm /615 nm 的比值並根據不同的化合物濃度為X軸作圖，計算得出待測化合物的IC50濃度。
經測定，本發明化合物對A2a和/或A2b受體具有較好的抑制效果，其IC
50值一般低於1000nmol/L；部分本發明化合物的對A2a和/或A2b受體的IC
50值低於100nmmol/L，更為優異的本發明化合物的IC
50值低於10 nmol/L，甚至小於1nmol/L。部分本發明化合物對人腺苷A2a/A2b受體抑制結果見表1a和表1b。
表1a：對人腺苷A2a/A2b受體cAMP信號通路的抑制結果
表1b：本發明部分實施例化合物對人腺苷A2a/A2b受體cAMP信號通路的抑制結果
注：A表示IC
50＜1 nmol/L；B表示IC
50在1-10 nmol/L；C表示IC
50在10-50 nmol/L；D表示50-100nmol/L；E表示IC
50在100-500 nmol/L；F表示IC
50＞500 nmol/L;
從表1a和表1b中可以看出，本發明化合物對人腺苷A2a、A2b受體均具有較好的抑制作用。
| Reagent | Vol |
| 1x HBSS with Ca 2+and Mg 2+ | 14 ml |
| 1 M HEPES | 75 μl |
| 7.5% (w/v) BSA stabilizer (pH 7.4) | 200 μl |
| 20 mM Rolipram | 7.5 μl |
| Eu-cAMP tracer 工作液 | Ulight-anti-cAMP 工作液 | ||
| Reagent | Vol. | Reagent | Vol. |
| Eu-cAMP tracer 儲存液 | 20 μl | Ulight-anti-cAMP儲存液 | 10 μl |
| cAMP 檢測緩衝液 | 2 ml | cAMP 檢測緩衝液 | 2 ml |
| 實施例 | A2a IC 50 | A2b IC 50 | |
| a-1 | B | C | |
| a-2 | C | F | |
| a-3 | B | C | |
| a-4 | B | E | |
| a-5 | D | F | |
| a-6 | B | E | |
| a-7 | D | F | |
| a-8 | A | C | |
| a-9 | D | F | |
| a-10 | A | B | |
| a-11 | B | B | |
| a-12 | B | C | |
| a-13 | A | B | |
| a-14 | A | C | |
| a-15 | A | C | |
| a-16 | A | C | |
| a-17 | A | B | |
| a-18 | A | B | |
| a-19 | B | C | |
| a-20 | B | B | |
| a-21 | A | B | |
| a-22 | A | B | |
| a-23 | C | E | |
| a-24 | B | D | |
| a-25 | A | B | |
| a-26 | B | B | |
| a-27 | C | E | |
| a-28 | A | B | |
| a-29 | A | B | |
| a-30 | B | B | |
| a-31 | C | E | |
| a-32 | A | B | |
| a-33 | A | B | |
| a-34 | A | B | |
| a-35 | A | B | |
| a-36 | B | C | |
| a-37 | A | B | |
| a-38 | A | B | |
| a-39 | A | B | |
| a-40 | A | B | |
| a-41 | B | D | |
| a-42 | A | B | |
| a-43 | A | B | |
| a-44 | B | B | |
| a-45 | B | B | |
| a-46 | A | B | |
| 實施例 | A2a IC 50(nM) | A2b IC 50(nM) |
| b-1 | B | B |
| b-2 | B | B |
| b-3 | B | B |
| b-4 | B | B |
| b-5 | B | B |
| b-6 | B | C |
| b-7 | C | D |
| b-8 | B | B |
| b-9 | B | B |
| b-10 | A | B |
| b-11 | C | B |
| b-12 | A | B |
| b-13 | B | C |
| b-14 | C | B |
| b-15 | C | B |
| b-16 | C | C |
| b-17 | B | B |
| b-18 | C | C |
| b-19 | B | B |
| b-20 | C | B |
| b-21 | B | B |
| b-22 | C | B |
| b-23 | C | C |
| b-24 | C | C |
| b-25 | B | B |
| b-26 | B | B |
| b-27 | B | B |
| b-28 | C | B |
| b-29 | B | B |
| b-30 | C | C |
| b-31 | B | B |
| b-32 | B | B |
| b-33 | B | B |
| b-34 | A | B |
| b-35 | C | C |
| b-36 | A | B |
| b-37 | B | B |
| b-38 | B | B |
| b-39 | A | B |
| b-40 | A | B |
| b-41 | A | B |
| b-42 | B | B |
| b-43 | B | B |
| b-44 | A | A |
| b-45 | B | B |
| b-46 | B | B |
| b-47 | B | B |
| b-48 | B | B |
| b-49 | B | B |
| b-50 | C | B |
| b-51 | B | B |
| b-52 | B | B |
測試例2：本發明化合物對人腺苷A1/A3受體的拮抗作用的評價
本實驗採用螢光共振能量轉移 (TR-FRET)檢測cAMP水平的方法測試化合物對人腺苷A1/A3的拮抗作用，並得出化合物對拮抗人腺苷A1/A3後降低cAMP水平的半數抑制濃度 IC
50。
1. 實驗材料
培養基，FBS，100X Pen/Strep購自Gibico公司，cAMP試劑盒購自Perkin Elmer公司。Rolipram，Forskolin，NECA，DPCPX購自Sigma公司。MRS 1220購自Tocris公司。
2.實驗方法
1) 準備cAMP 緩衝液如下
2）準備 Eu-cAMP tracer 工作液和 Ulight-anti-cAMP 工作液如下
3） 消化穩定轉染ADORA1受體的CHO細胞/穩轉ADORA3的CHO-K1細胞，用細胞計數儀計數（85%以上活細胞才可用於後續實驗）後分別用cAMP緩衝液稀釋成2x10
5細胞/ml。
4） 在384孔板中每孔舖2000個細胞。
5） 確定Forskolin的EC50和EC90濃度：
a) 配製1000X Forskolin/NECA濃度梯度儲存液（12梯度，起始濃度100mmol/L或1mmol/L，1:3稀釋）。
b) 配製1000X DPCPX / MRS 1220濃度梯度儲存液（10梯度，起始濃度0.3mmol/L，1:3稀釋）。
c) 配製1000X 目的化合物濃度梯度儲存液（10梯度，起始濃度10mmol/L，1:3稀釋）。
d) 於已舖細胞的384孔板中加入10nl濃度梯度Forskolin儲存液（1000X），然後25℃孵育 10分鐘
e) Eu-cAMP tracer 工作液和Ulight-anti-cAMP 工作液各5ul每孔.1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
f) EnVision讀板(λex=320 nm, λem=615 nm and 665 nm), 對比 665 nm /615 nm 的比值並根據不同的化合物濃度為X軸作圖，計算得出NECA的EC50和EC90濃度。
6） 根據計算得到的濃度，準備1000X EC90濃度的Forskolin儲存液（100%v/v於DMSO中）。
7） 確定NECA的EC50和EC90濃度：
a) 於已舖細胞的384孔板中加入10nl濃度梯度NECA和EC90濃度的Forskolin儲存液（1000X），然後25℃孵育 10分鐘
b) Eu-cAMP tracer 工作液和Ulight-anti-cAMP 工作液各5ul每孔.1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
c) EnVision讀板(λex=320 nm, λem=615 nm and 665 nm), 對比 665 nm /615 nm 的比值並根據不同的化合物濃度為X軸作圖，計算得出NECA的EC50和EC90濃度。
8） 將10nl不同濃度梯度的DPCPX/MRS1220，待測化合物加入384孔板，37℃孵育。1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
9） 將10 nl 1000X Forskolin和NECA 的EC90濃度儲存液加入384孔板，1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。25度孵育。
10） Eu-cAMP tracer 工作液和Ulight-anti-cAMP 工作液各5ul每孔.1000rpm離心1分鐘，600rpm震盪2分鐘。
11） EnVision讀板(λex=320 nm, λem=615 nm and 665 nm), 對比 665 nm /615 nm 的比值並根據不同的化合物濃度為X軸作圖，計算得出待測化合物的EC50。
.
通過測定本發明化合物,本發明部分化合物對A1/A3腺苷受體的抑制作用相對較弱，部分本發明化合物對人腺苷A1/A3受體抑制結果見表2a和表2b。
表2a：對人腺苷A1/A3受體cAMP信號通路的抑制結果
表2b：對人腺苷A1/A3受體cAMP信號通路的抑制結果
注：A表示IC
50＜1 nmol/L；B表示IC
50在1-10 nmol/L；C表示IC
50在10-50 nmol/L；D表示50-100nmol/L；E表示IC
50在100-500 nmol/L；F表示IC
50＞500 nmol/L;
從表2a和表2b中可以看出，本發明部分化合物其對A1或/和A3的抑制作用相對較弱，展現出對A2a/A2b的選擇性。
| Reagent | Vol |
| 1x HBSS with Ca 2+and Mg 2+ | 14 ml |
| 1 M HEPES | 75 μl |
| 7.5% (w/v) BSA stabilizer (pH 7.4) | 200 μl |
| 20 mM Rolipram | 7.6 μl |
| Eu-cAMP tracer 工作液 | Ulight-anti-cAMP 工作液 | ||
| Reagent | Vol. | Reagent | Vol. |
| Eu-cAMP tracer 儲存液 | 20 μl | Ulight-anti-cAMP儲存液 | 10 μl |
| cAMP 檢測緩衝液 | 2 ml | cAMP 檢測緩衝液 | 2 ml |
| 實施例 | A1 IC 50 | A3 IC 50 |
| a-1 | D | F |
| a-3 | B | E |
| a-8 | C | E |
| a-10 | B | D |
| a-11 | B | D |
| a-12 | D | E |
| a-13 | B | E |
| a-14 | B | E |
| a-15 | B | E |
| a-17 | B | D |
| a-18 | B | D |
| a-19 | C | F |
| a-20 | B | E |
| a-21 | B | E |
| a-22 | C | F |
| a-25 | A | D |
| a-26 | B | E |
| a-28 | B | E |
| a-29 | B | E |
| a-30 | C | E |
| a-32 | B | E |
| a-33 | B | D |
| a-34 | B | E |
| a-35 | A | E |
| a-37 | A | E |
| a-38 | A | E |
| a-39 | B | E |
| a-40 | B | E |
| a-42 | B | E |
| a-43 | C | F |
| 實施例 | A1 IC 50 | A3 IC 50 |
| b-1 | B | B |
| b-2 | D | C |
| b-3 | C | B |
| b-4 | C | B |
| b-5 | D | B |
| b-6 | C | C |
| b-8 | E | C |
| b-9 | C | B |
| b-10 | B | B |
| b-12 | B | B |
| b-17 | C | C |
| b-19 | C | C |
| b-21 | C | C |
| b-25 | B | C |
| b-26 | D | C |
| b-29 | B | C |
| b-33 | D | C |
| b-34 | A | A |
| b-36 | B | A |
| b-38 | C | C |
| b-39 | C | B |
| b-40 | B | B |
| b-44 | A | B |
| b-45 | C | C |
雖然本發明已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作些許之更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
無
無
Claims (22)
- 一種如式II所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物：式II 其中，R 2為H、CN、鹵原子、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4鹵代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar； Re和Rf獨立地為H、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、C 1-4烷基-CO-、C 1-4鹵代烷基-CO-、3-6元環烷基或3-6元雜環烷基；或者Re和Rf與連接的N原子一起形成4-6元環，所述4-6元環任選地被一個或多個選自CN、OH、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基和鹵原子的取代基取代； Ar為芳基或雜芳基；所述芳基優選為苯基或萘基；所述雜芳基優選為5-6元雜芳環；所述芳基或雜芳基任選獨立地被一個或多個Rc取代； Ra獨立地為H、CN、NH 2CO-、鹵原子、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、3-6元環烷基、3-6元雜環烷基、芳基或5-6元雜芳基；Ra任選地被一個或多個選自鹵原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4鹵代烷基的取代基取代； Rb獨立地為H、CN、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基或鹵原子； Rc獨立地為H、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4鹵代烷氧基、CN和鹵原子； X 1為N或C-Ra； X 2、X 3、X 4獨立地為O、S、N、N-Ra、CH 2、C-Ra或C=O； Z 1為選自N或CH； Y 1、Y 2、Y 3獨立地為N和C-Rb； L為-(CH 2)n-、-(CD 2)n-、-NH-(CH 2)n-、-O-(CH 2)n-或-S-(CH 2)n-；
選自芳基和5-6元雜芳基； R 1獨立地為H、CN、鹵原子、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺醯基、C 1-4烷基磺醯基氨基、C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4鹵代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元環烷基、3-7元雜環烷基、5-13元螺環基、5-13元雜螺環基、6-12元橋環基、6-12元雜橋環基、苯基、5-6元雜芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元環烷基-O-C 1-4烷基、3-7元雜環烷基-O-C 1-4烷基和苯氧基-C 1-4烷基；R 1任選地被一個或多個選自甲基、甲氧基、乙基、異丙基、OH、CN、鹵原子、COOH和2-羥基-丙-2-基的取代基取代； 或者，兩個相鄰R 1連同連接它們的原子一起環化形為飽和5-6元環或者不飽和5-6元環，所述飽和5-6元環和不飽和5-6元環任選地被一個或多個選自C 1-4烷基、C 1-4烷氧基和鹵原子的取代基取代； m為0、1、2或3； n為0、1、2或3；
表示單鍵或雙鍵。
- 根據請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，N(Re)(Rf)選自NH 2、四氫吡咯基、哌啶基、哌𠯤基和嗎福林基； 和/或，Ar中，所述雜芳基選自如下基團：吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑和噻唑基，優選為吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基； 和/或，Ar中，所述芳基和雜芳基任選獨立地被被1、2、3或4個Rc取代； 和/或，Rc獨立地為H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基和三氟甲基，優選為H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基。
- 根據請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，Ar為被一個或多個Rc取代的吡啶基，或者，Ar為被一個或多個Rc取代的苯基。
- 根據請求項1或2所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，Ar選自以下任一結構：、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，Ra獨立地為H、CN、NH 2CO-、鹵原子、甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、環丙基、環丁基、環己基、氮雜環丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任選地被一個或多個選自鹵原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4鹵代烷基的取代基取代；更優選地，Ra選自H、Br、Cl、F、CN、CHF 2、CF 3、NH 2CO-、甲基、吡唑基、苯基、環丙基和5-甲基-呋喃-2-基； 和/或，Rb獨立地為H、Cl、F、CN、甲基、乙基、異丙基或三氟甲基，優選為H、Cl、甲基或三氟甲基。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，R 2為N(Re)(Rf)；優選地，R 2為NH 2。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，R 2為Ar，優選為。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，L為CH 2或CD 2，優選為CH 2。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，為苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、或
；優選為吡啶。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，R 1獨立地為鹵原子、C 1-4烷氧基、C 1-4鹵代烷氧基、3-6元環烷基、4-6元雜環烷基、7-9元含氮雜螺環基、苯基或5-6元雜芳基； 或者，兩個相鄰R 1連同連接它們的原子一起環化形為飽和5-6元環或者不飽和5-6元環，所述飽和5-6元環和不飽和5-6元環為吡唑環、㗁唑環、噻唑環、異噻唑環、異㗁唑環、吡啶環、吡咯環、噻吩環、呋喃環、咪唑環、苯環、嘧啶環、吡𠯤環、嗒𠯤環或1,3-二氧環戊環。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，R 1獨立地為F、-OCH 3、、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、CN或
； 或者，兩個相鄰R 1與
共同環化為如下基團：、
、
、
、
、
； 優選地，R 1為
。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，結構單元為
、
、
、
、
、
、
、
或
，優選為
，更優選為。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，X 1、X 2、X 3或X 4滿足以下任一種情況： （1）X 1為N或CH；優選地，X 1為CH； （2）X 2、X 3、X 4獨立地為C-Ra、N或N-Ra； （3）X 2與X 3以雙鍵相連；優選地，X 2和X 3獨立地為N和C-Ra； （4）X 2與X 3以單鍵相連；優選地，X 2和X 3獨立地選自NH、CH 2和C=O； （5）X 2為S； （6）X 2為S，X 3和X 4獨立地為N和C-Ra； （7）X 2為S，X 3為CH，X 4為C-Ra； （8）X 2為S，X 3為CH，X 4為C-Br； （9）X 2為S，X 3為N，X 4為C-Ra； （10）X 4為S； （11）X 4為S，X 2和X 3獨立地為N或C-Ra； （12）X 4為S，X 2為C-Ra，X 3為N； （13）X 2為O，X 3和X 4獨立地為N或C-Ra； （14）X 2為N-Ra，X 3和X 4獨立地為N或C-Ra； （15）X 2為N； （16）X 2為N，X 3為CH。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，式II中的結構單元選自如下結構：
、
、
、
、
、
、
、
、
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、
、
、
、
、
、
，優選
、、、、、、或，更優選
或。 - 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，Y 1、Y 2或Y 3滿足以下任一種情況： （1）Y 1、Y 2、Y 3均為N； （2）Y 1為C-Rb，Y 2為N，Y 3為N； （3）Y 1為CH，Y 2為N，Y 3為N； （4）Y 1為CH，Y 2為CH，Y 3為N； （5）Y 1為CH，Y 2為N； （6）Y 3為N。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，Z 1為C； 和/或，m為1或2； 和/或，n為1或2。
- 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，所述化合物由式II-a、式II-b或式II-c所示：
其中， X 5為N、CH或C=O；優選地，X 5為N或CH； X 6和X 7獨立地為N、O、S、NH、CH或CH 2；優選地，X 6為NH，X 7為N；
表示單鍵或雙鍵； Ra如請求項1或5所定義；優選地，Ra獨立地為甲基、Br、Cl、CN、CHF 2、CF 3或環丙基； L如請求項1或8所定義；R 1如請求項1和10-11中任一項所定義；m如請求項1或16所定義；X 2、X 3、X 4如請求項1或13所定義；Y 1、Y 2如請求項1或15所定義。 - 根據請求項1-3中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，所述化合物由式I’、式I’-a、式I’-b、式I-c、式I-d或式I-e所示：
其中， X 4-1和X 5-1獨立地為N或CH； R 3、R 4和R 5獨立地為Rc； R 6為Rb； p為0、1、2、3或4；
表示單鍵或雙鍵； Rb如請求項1或5所定義；Rc如請求項1或2所定義；R 1如請求項1或11所定義；m如請求項1或16所定義；X 1、X 2、X 3如請求項1或13所定義；Y 1、Y 2如請求項1或15所定義。 - 根據請求項18所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，X 4-1為N； 和/或，X 5-1為CH； 和/或，R 3為H，CH 3、CH 3O或Cl； 和/或，R 4為H、CH 3、Cl、CH 3O、F或CN； 和/或，R 5為H或鹵原子；優選為H或F； 和/或，R 6為H、C 1-4烷基或C 1-4鹵代烷基；優選為H或CH 3。
- 根據請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，其特徵在於，所述化合物選自：
。
- 一種藥物組合物，其包含有效預防或治療量的如請求項1-20中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物，以及任選的一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
- 如請求項1-20中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其溶劑合物、或其藥學上可接受的鹽的溶劑合物在用於製備藥物中的用途；所述藥物優選為治療或/和預防哺乳動物與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症的藥物；所述與A2a和/或A2b受體相關的疾病或病症優選為癌症，例如實體瘤或非實體瘤。
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