JPH05506014A

JPH05506014A - オリゴヌクレオチド類似体

Info

Publication number: JPH05506014A
Application number: JP91505430A
Authority: JP
Inventors: ヒユーエ，エドワード・マクドナルド; トレイナー，ジヨージ・レナード
Original assignee: デュポン・ファーマシュウティカルズ・カンパニー
Priority date: 1990-04-10
Filing date: 1991-02-25
Publication date: 1993-09-02
Anticipated expiration: 2015-06-12
Also published as: CA2079777C; IL97804A; ES2071989T3; HK109495A; EP0517796A1; ZA912660B; NZ237723A; MY107440A; IE73244B1; IL97804A0; AU7458191A; IE911176A1; AU639770B2; JP3050595B2; DE69109100T2; CA2079777A1; DK0517796T3; US5470967A; DE69109100D1; WO1991015500A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】オリゴヌクレオチド類似体技術分野本発明は、オリゴヌクレオチド類似体における１個またはそれ以上のヌクレオチド間リン酸ジエステル結合が硫黄をベースとした結合（ｓｕｌｆｕｒ　ｂａｓｅｄ　ｌｉｎｋａｇｅ）に置換されている新規な化合物に関する。

背景技術治療手段のために有効な物質のレパートリ−としては主に比較的低分子量の有機化合物が挙げられる。最近、そのレパートリ−も拡大され、効能、特性および安定性を備えた蛋白質化合物を含むようになった。今や、例えば核酸のような他の種類の生物高分子の治療上の潜在能力が注目されている。

核酸はペンダントのアデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、シトシン（Ｃ）およびチミン（Ｔ）〔または同族のウラシル（Ｕ）〕塩基グループを有する線状のホスホペントースポリマーである。ペントースはリボース（ＲＮＡ）または２′−デオキシリポース（ＤＮＡ）でありうる。これらは選択性に関して高い潜在能力を有するため治療上魅力的な候補である。この高い選択性は核酸の良（知られたアンチパラレルで２本鎖のらせん構造（または二重型）を形成する能力に基づくものであり、そしてその構造的相補性は相対する鎖の塩基の間の水素結合の形成（ワトソンークリック塩基対）によるものである。相補性は相対する鎖に関してＧとＣとの、およびＡとＴ（またはＵ）とのベアリングとして定義される。完全な相補性を有する二重らせん構造は熱力学的に好ましい。短鎖〔２０未満の残基またはヌクレオチド（ｎｔ）　）のオリゴヌクレオチドの場合、たった一つの不適当なベアリングまたはミスマツチが有意に二重らせん構造を不安定化させることができる。したがって、原則として３　Ｘ　１０’ｎｔのヒトゲノム（ヒトの遺伝物質の全体）における単一の部位を１６〜２０ｎｔのオリゴヌクレオチドで選択的にアドレスすることができる。これは一般に従来の低分子量の薬剤で達成しうるものより実質的に大きな選択性である。この程度の潜在的な選択性があるならば、形質発現のレベルにおいて治療効果を発揮するというアプローチを考慮することができる。遺伝物質の宿主系への組込みにより作用するウィルス剤の場合、組込みおよび複製に含まれる多くの段階の１つを阻止することを考えることができる。

核酸を相補的にアドレスされた治療剤として使用する試みの多くは一重鎖ターゲットを含んでいた。このようなターゲットにはメツセンジャーＲＮＡ（■ＲＮＡ）および−重鎖ウィルスゲツムがある。このような場合、試薬の核酸はターゲットに対し相補的であり、「アンチセンス試剤（ａｎｔｉ−ｓｅｎｓｅ　ｒｅａｇｅｎｔｓ）Ｊと呼ばれる。このような薬剤を使用して特異的な効果を発揮させる方法を本明細書では「アンチセンスターゲツティング（ａｎｔｉ−ｓｅｎｓｅｔａｒｇｅｔｉｎｇ）Ｊ　（参考文献１〜３．３２）と称する。

ごく最近では、第２の高特異的モードの核酸結合が研究されている。二重鎖ＤＮＡの特定配列が第３の鎖と結合して三重らせんまたは二重鎖を形成することが見い出された（参考文献４）。二重鎖形成にはいわゆるフーグスティーン型の水素結合を形成する追加の塩基との三重の塩基対の形成が含まれる。本明細書では、このようなモードで結合するよう企画された試薬を「二重鎖試薬」と称し、そしてこのような試薬を使用して特異的な効果を発揮させる方法を「二重鎖ターゲツティング（ｔｒｉｐｌｅｘｔａｒｇｅｔｉｎｇ）　Ｊと称する。二重鎖ターゲツティングアプローチの利点は二重鎖ゲノムＤＮＡを直接アドレスすることができることである。不利な点は、少な（ともこの時点で、すべての配列がこの様にして処理することができるわけではないということである。単一の不変性オリゴデオキシヌクレオチドの合成の容易さおよび化学的安定性のため、アンチセンス試剤としてのこれらの使用の広汎な研究がなされている。このアプローチはとりわけヒト免疫不全ウィルス（＋１１７）　、ラウス肉腫ウィルスおよびｃ−Ｉｌｙｃ腫瘍遺伝子発現に対してインビトロにおいて様々な成功を伴なって使用されている（参考文献２８）。

単オリゴデオキシヌクレオチドアンチセンス試剤は２つの方法のうち一方または両方においてその効果を発揮することができる。これらは二重鎖形成によりそのターゲットと単純に結合することができ、そのため機能的な一重鎖ターゲットの有効濃度を減少させる。別法として、ターゲットが一重鎖ＲＮ＾の場合、Ｉ？Ｎ＾／ＤＮＡハイブリッドは内在リボヌクレアーゼＨ（ＲＮアーゼＨ）の基質として作用することができる。ＲＮアーゼＨはリン酸ジエステル結合の加水分解によりＲＮ＾／ＤＮＡハイブリッドのＲＮＡ鎖を切断する酵素である。ＲＮアーゼＨの媒介により、薬剤それ自体は切断されないためすべてのターゲットがノーイブリッドに作用するのに必要なものより低い濃度でアンチセンス試剤を取り扱うことができ、そして各分子はターゲットの多くの分子の切断を導くことができる。

オリゴデオキシヌクレオチドのアンチセンス試剤としての機能を改良するべく、多くの構造変形のアプローチが研究されている。ある種の変形には薬剤／ターゲット二重鎖を安定化するために、または付着部位でターゲットを切断するために化学的付加物の付着が含まれる。フレキシブルなつなぎ鎖により付着されたアクリジン誘導体がインターカレーションによる二重鎖の熱力学的安定性を改良することがわかっている（参考文献５）。同様に、つなぎ鎖でつながれたソラレン（ｐｓｏｒａｌｅｎｓ）を有するオリゴデオキシヌクレオチドは共有結合的にターゲットと架橋結合し、次いで二重鎖の照射を行なうことができる（参考文献６）。架橋結合はまた、つなぎ鎖でつながれたアルキル化剤の使用により達成することができる（参考文献７）。つなぎ鎖でつながれたエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）　／鉄（参考文献８）または１，１０−フェナントロリン／銅（参考文献９）を有するオリゴデオキシヌクレオチドの使用によるターゲットの切断がインビトロで証明されている。これらの目的のための他の付着が数多く記載されている。輸送を改良するためにポリ（Ｌ−リシン）を用いての機能化が採用されている（参考文献３１）。

しかしながら、インビボでのオリゴデオキシヌクレオチドのアンチセンス試剤としての使用は２つの根本的な問題により制限される。第一の問題は小さな一重鎖オリゴデオキシヌクレオチドはエンドヌクレアーゼにより急速に消化されるということである。結果として、インビボで高濃度を維持するのが困難となる。第２の問題はオリゴデオキシヌクレオチドがヌクレオチド残基あたり大よそ１個の完全な負の電荷を有して高く帯電していることである。このことは一般に膜を通しての輸送率の減少をもたらし、ある場合には作用の最終部位への接近が制限される。これらの２つの効果が結合して比較的低い生体利用率（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を与える。

オリゴデオキシヌクレオチドの末端への（上述したような）化学的機能性の取りつけは幾つかの場合においてヌクレアーゼ耐性を高めることができる。リボフラノシル環への塩基の取りつけによりβ一体からα一体に変化されたα−オリゴデオキシヌクレオチドは平行鎖の二重鎖を形成し、ヌクレアーゼ耐性の増加を示す（参考文献１０）。

安定性および輸送の問題を解決するためのアプローチの幾つかにおいて、結合の中心のリン原子はそのままであるが付着原子が置換または修飾されている。Ｏ− アルキルリン酸トリエステルは電荷がないがもとの結合よりもかさ高く、幾らか化学的安定性の減少を示す（参考文献１１．１２）。ホスホロチオエートジエステルはもとの結合上同型構造であり、ヌクレアーゼ耐性の増加を示すが、また帯電している（参考文献１３）。メチルホスホネートは電荷がなく相当親油性であるが、完全に置換されたハイブリッドはＲＮアーゼＨの基質ではない（参考文献１４）。

これらの類似体に伴なう根本的な困難性の１つは、すべてリン酸ジエステル結合における非架橋酸素原子の１つのシングル置換から由来するという事実である。

リン原子が結合内でプロキラルなので、１個の酸素の非特異的置換はキラル中心を形成し、これによりジアステレオマ一対の生成をもたらす。各々の追加的な非特異的置換は存在するジアステレオマーの数を倍にする。これらのジアステレオマーは分析を複雑にする異なった物理特性を有し、そしである場合には幅広く異なったハイブリッド形成能力を有することがわかっている（参考文献３４）。

したがって、多数の結合置換を有するオリゴデオキシヌクレオチド類似体は一般に幅広く異なった生物学的効能を有することのできる種の複合混合物である。

ジアステレオマー混合物の問題は、リン酸ジエステル結合中の両方の架橋酸素が同じ化学グループと置換することにより回避することができる。この方針に沿ってホスホロジチオエートジエステルが研究されている（参考文献１５）。しかしながら、ホスホロチオエート結合のようにこの部分はまだ帯電している。

より広範囲にわたる変形を含むアプローチもまた報告されている。リン酸ジエステル結合と炭素中心の、中性カルバメートとの置換が研究されている（参考文献１６．１７）。カルバメート結合は平面性であるためその導入はジアステレオマーを生成しないが、しかし完全に調査されていない結果ではあるが、リン酸ジエステルの四面体形態からの逸脱を示すことは確かである。少なくとも１つの誘導体が相補性ターゲットを用いて二重鎖を形成することができることがわかっている。カルバメートのヌクレアーゼ感受性およびＲＮアーゼＨを活性化する能力はまだ報告されていない。

最近の研究の幾つかは部分的なリン酸ジエステル結合置換を有するオリゴデオキシヌクレオチドに興味が向けられている。その根本理由は所望の特性（例えばヌクレアーゼ耐性、ハイブリッド安定性、ＲＮアーゼＨ活性など）のバランスのとれたプロフィールを工学的に作り出すことができつるかもしれないということである。これらの研究は有用ではあるが上記したような問題の一般的な解決はもたらしそうもない。

幾つかの類似体では、生物学的効果が非連続特異的方法において発揮するという観察により状況はさらに複雑になる（参考文献１８．１９）。これらの効果の原因は不明のままである。

アンチセンス試剤としてのオリゴデオキシヌクレオチドの機能を高めるための試みにおいて調査された変形の上記記載は代表的なものであって決して網羅しているわけではない。この主題の分野を取り扱っている２つの最近のレビュー（参考文献１．２）および１つのモノグラフ（参考文献３２）が包括的である。

一連の天然由来のスルファモイルモノヌクレオシド抗生物質および幾つかの合成的類似体が開示されている（参考文献２１〜２４）。さらに、天然オリゴヌクレオチドとの結合を形成することのできるサブユニット間の結合グループとしてスルフィド、スルホキシドおよびスルホンを含むＤＮＡの類似体が開示されている（参考文献３３）。

ｐ３１１オリゴヌクレオチドのβ−崩壊はスルフェートが結合したオリゴヌクレオチドを与えることが予想されるが、しかしこのようなサルフェートが結合したオリゴヌクレオチドは報告されていない。

本発明者らはオリゴヌクレオチド類似体における１個以上のヌクレオチド間リン酸ジエステル結合が硫黄をベースとした結合に置換されている一連の新規な化合物を開発した。この結合はリン酸ジエステルと同型の構造であり、そして同数の電子を持っている。本発明者らは合成的に容易であり、化学的耐性、ヌクレアーゼ耐性があり、そして二重鎖形成をサポートすることのできる結合を見い出した。

本発明の化合物は核酸機能の治療コントロールのためのアンチセンス試剤および三重鎮剤として優れた潜在能力を有する。さらに、このような化合物は抗ウィルス剤としての潜在能力およびハイブリッド形成プローブとしての実用性を有する。

発明の開示本発明によれば、式（式中、ＡはＨ，０■、ＯＲ，、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲ，ＮまたはＯであり、Ｍは５（＝０）＝０、ｐ（−ｏ）−ｏ−１Ｐ（＝０）−Ｓ−１Ｐ（＝Ｓ）−Ｓ− １Ｐ（＝０）−ＯＲ，、Ｐ（＝Ｏ）−１？、、Ｐ（−０）−ＳＲ４またはＰ（＝０）−ＮＲ８Ｒ，（ただし、少なくとも１個のＭは５（−Ｏ）−Ｏであり、そしてＭが５（＝０）−０である時、ＹおよびＺのうち１個だけが０である）であり、ｎは１またはそれより大きいものであり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ４はＨ，ＰＯ，，１１，Ｒ２０，、■４Ｐ３０７およびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ２はＨ２ＰＯ３、＋１．Ｒ２０，、Ｈ４Ｐ３０．およびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ３はアルキルまたはシアノエチルであり、Ｒ４はＨまたはアルキルであり、Ｒ６はＨまたはアルキルであり、Ｒ６はＨまたはアルキルであり、Ｒ７はＨまたはアルキルであり、Ｒ８はアルキルであり、Ｒｏはアルキルまたはシアノエチルであり、そしてＱは保護基である）を有する化合物が提供される。

本発明の別の見地によれば、式（式中、ＡはＨ，０Ｒ１０１？ｔ、　ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲ，ＮまたはＯであり、Ｘは適当な脱離基であり、Ｑは保護基であり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ，はＨまたはアルキルであり、そしてＲ２はアルキルまたは ■ である）を有する中間体化合物が提供される。

さらに、本発明によればアンチセンス試剤、三重鎮剤および抗ウィルス剤が提供される。

本発明の別の現地によれば、ハイブリッド形成プローブが提供される。

図面の簡単な説明図１：修飾オリゴデオキシヌクレオチド９ａ　：　９ｃ　（丸）および各々の鎖にスルファメート結合のみを含む２つのオリゴデオキシヌクレオチド９ｂ　：　９ｄ　（四角）の融解曲線を示す。緩衝剤はｐＨ７，０で２０ロー麓のナトリウムを含んだ。

図２：図２ａにｄＣＳＴ％ｄＧおよびｄＡからなる標準的な混合物のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。ＩＩＵ２ｂにオリゴデオキシヌクレオチド９Ｃの長期の消化から得られた生成物混合物のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。使用したＥＩＰＬＣ条件は以下の様である：ガード付Ｃ１８Ｒａｌｎｉｎ分析用カラム（４，６ｍ＋ｉＸ　２５ｃｍ）　、流速１．０８１７分、５０ｍＭのＫｎ、ＰＯ，／水（溶媒Ａ）中における１０％水／メタノール（溶媒Ｂ）のグラジェント〔０〜２０分（３，０％溶媒Ｂ／溶媒Ａ）、２０〜４０分（３〜４０％溶媒Ｂ／溶媒Ａ：直線）、４０〜４５分（４０％溶媒Ｂ／溶媒Ａ）３゜図３＝この図はＮ５ｉＩによるスルファメートまたはホスフェートの結合されたオリゴヌクレオチドの切断を図解する２０％変性ポリアクリルアミドゲルのオートラジオグラフ写真である。

図４：ｐＨ７，５で１０ｍ１ｌのマグネシウムＨの緩衝剤中におけるα（＾Ｓ＾）対ポリウリジンの融解曲線を示す。

発明の詳細な説明アンチセンス試剤としての機能を高めるためオリゴデオキシヌクレオチド類似体中におけるリン酸ジエステル結合を置換する従来の試みはすべて部分的な解決にすぎない。完全に満足ゆくプロフィールの特性を有するリン酸ジエステル置換は１つもない。本発明者らはある化合物が満たすかどうかの、アンチセンス、抗ウィルスおよび二重鎖機能のような優れた機能をもたらすような化学的、生化学的および構造的基準のリストを作成した。結合は、１）リン酸ジエステルと同型の構造（同数の電子をもち、電子配置が同じ）；２）ヌクレアーゼ耐性：３）生理学的ｐ■において帯電していない；４）アキラル：５）生理学的条件下で化学的に安定；６）合成的に容易である：そして７）分析可能であるべきである。

本発明者らはこれらの基準をすべて満たす少な（とも１つの新規な硫黄中心の結合を有する化合物を開発した。

これらの結合はスルファメートエステルである。概念上、これらはリン酸ジエステルと等電子配置であり、そして同数の電子をもつスルフェートジエステルから由来するものである。架橋酸素の何れかを窒素と置換することによりスルファメートエステルが得られる。本発明者らは合成的に容易であり、化学的耐性、ヌクレアーゼ耐性があり、そして二重鎖形成をサポートすることのできるヌクレオチド間スルファメート結合を見い出した。

本発明の新規な化合物は式（式中、ＡはＨ１０■、０１？、、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、Ｙは［ｌＮまたはＯであり、２は！？、ＮまたはＯであり、Ｍは５（−０）＝０、ｐ（＝ｏ）−ｏ−１ｐ（＝ｏ）−ｓ−１Ｐ（＝Ｓ）−３− １ｐ（＝ｏ）−ｏｇ、、ｐ（＝ｏ）−Ｒ，、Ｐ（＝０）〜ＳＲ４またはＰ　（０）−ＮＲｓＲｓ（ただし、少なくとも１個のＭは５（＝Ｏ）＝Ｏであり、そしてＭが５（＝Ｏ）＝Ｏである時、ＹおよびＺのうち１個だけがＯである）であり、ｎは１またはそれより大きいものであり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ５はＨ，ＰＯ，、ＩＩ、Ｒ２０，、Ｈ４Ｐ２Ｏ７およびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ１はＨ，ＰＯ，、ＨｓＰ２０ｓ、■４ｐ３ｏフおよびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ５はアルキルまたはシアノエチルであり、Ｒ４はＨまたはアルキルであり、Ｒ６はＨまたはアルキルであり、Ｒ６はＨまたはアルキルであり、Ｒ７はＨまたはアルキルであり、Ｒ８はアルキルであり、Ｒｏはアルキルまたはシアノエチルであり、モしてＱは保護基である）により表わされる。

塩基（Ｂ）に関する限り、根本的な制限は考えられない。天然由来のヌクレオチド塩基だけでなく合成的に修飾された核酸塩基例えばイノシン、デアザアデノシンなども含まれる。好ましくはＢは天然由来のヌクレオチド塩基のアデニン、グアニン、シトシン、チミンまたはウラシルである（参考文献３Ｇ、３３）。

糖に関しては、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチドおよびジデオキシリボヌクレオチドはすべて可能である。ハロゲン置換（Ａはハロゲンである）を有し、糖装置の変化した糖（例えばアラビノシトおよびα−リボシド）もまた企画されつる（参考文献３０）。

上記化合物において、ｎは少なくとも１であるが、ｎが２００までのものは標準的な方法により入手しつる。ｎが２００より大きい化合物は連結技術により製造されうる。

ヌクレオチド間結合（Ｍ）に関しては、本発明者らはたった１つの硫黄ベース結合を有する化合物の製造および完全置換化合物の製造を証明した。本発明の少な（とも１つの硫黄ベース結合が実質的に化合物の少なくとも１つの末端の近（である化合物は特に有用であることが予想される。このような化合物は実質的にエキソヌクレアーゼ活性から保護されるであろう。硫黄ベース結合で完全に置換されていない化合物はＭで定義づけられるような結合（ＤＮＡ、　ＲＮＡおよび当業者に公知の合成的に修飾されたヌクレオチドにおいて見い出されるようなもの）を含有する。リンベース結合の部分的な置換をある程度有する物質が本発明者らが開発した方法により入手しうることは理解されよう。その上、混合リポース構造（例えばリボヌクレオチドとデオキシリボヌクレオチドの両方を含有する一重鎖）を有する化合物を製造することができる。

Ｒ置換基がアルキルの場合、５以下の炭素原子からなるアルキルが有用であると予想される。

さらに、二重鎖の安定化、架橋またはターゲット配列の切断のために、あるいは輸送を容易にするために本発明の化合物に化学的付加物を付着させてもよい（上文参照。参考文献５〜９．３１）。

リン酸ジエステル結合とは違って、スルファメートは方向性を有する。この結合は化合物末端に関して２方向のうち１方向に配向されつる。この２つの形態は窒素が結合している硫黄の３′側または５′側にあるかどうかで３′−ＮＳＯまたは５’　−ＮＳＯと称される。

３’　−ＮＳＯスルファメート結合５’　−ＮＳＯスルファメート結合（合成）概念上、２個の置換基をもつスルファメートはヒドロキシ化合物とスルファモイル−Ｘ（ここでＸは適当な脱離基である）の反応（スキーム１）またはアミノ化合物とアルコキシスルホニル−Ｘの反応（スキーム２）により製造することができる。一般に、脱離基（Ｘ）は容易に置換されるような基（例えばハライド、アジド、スルホネートなど）である。還元硫黄試薬（例えばスルフィニル基）との等量反応次いで酸化という方法もまた企画これらのルートの何れも、本出願の主題であるスルファメートの結合したオリゴヌクレオチド誘導体の製造のためには実行可能なものである。本発明者らは特に有効なスキーム１の一態様を見い出した。この方法において、５’−Ｎ−（Ｘ−スルホニル）−５′−アミノ−５′− デオキシヌクレオシド中間体をヒドロキシ含有のヌクレオシドまたはヒドロキシ含有のオリゴヌクレオチドと反応させると３’　−ＮＳＯスルファメート結合誘導体が得られる。

この方法において、Ｘは適当な脱離基例えばハライド、スルホネートまたはアジド基であり、好ましくはアジド基である。同様にして、５’−ＮＳＯスルファメート結合誘導体は３’−Ｎ−（Ｘ−スルホニル）−３′−アミノ−３′−デオキシヌクレオシドをヒドロキシ含有のヌクレオシドまたはヒドロキシ含有のオリゴヌクレオチドと反応させることによって製造することができる。

るが、金属イオンで容易にすることもまたできる。

これらの方法において鍵となる中間体であるＮ−（Ｘ−スルホニル）−アミノ− デオキシヌクレオシドは好都合には適当なアミノ−デオキシヌクレオシドと二官能性スルホン化剤Ｘ−５Ｏ２−Ｘ’の反応によって製造することができる。例えば、Ｘ＝アジドの場合、Ｎ−（アジドスルホニル）−アミノ−デオキシヌクレオシドはアミノ−デオキシヌクレオシドをアジドスルホニルクロライドと反応させることにより製造される。

これらのＮ−（Ｘ−スルホニル）−アミノーデオキシヌクレオシド中間体はまたアミノ含有ヌクレオシドまたはアミノ含有オリゴヌクレオチドと反応して本出願の主題でもあるスルファミドの結合したオリゴヌクレオチド誘導体を与えることができる。

本発明の中間体は式（式中、ＡはＨ，０Ｈ１ＯＲ，、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、Ｙは［ｌＮまたはＯであり、ＺはＲ，Ｎまたは０であり、Ｘは適当な脱離基であり、Ｑは保護基であり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ１はＨまたはアルキルであり、そしてＲ２はアルキルまたはである）を有する化合物である。

本発明のスルファメート結合をより大きな化合物に挿入するための計画は所望する置換の程度に依存する。単一の部位またはほんの少しの部位における導入の場合、ブロック−ダイマー（ｂｌｏｃｋ−ｄｉｍｅｒ）アプローチが好ましい。このアプローチにおいては、ヌクレオシドホスホラミジット（ｐｈｏｓｐｈｏｒａａ＋１ｄｉｔｅｓ）による単ヌクレオチＦ（７）段階的な添加（３′から５′へ成長）に基づく自動オリゴヌクレオチド合成の標準的な化学技術が採用される（参考文献３９）。合成の所定の点において、通常の試薬のかわりに、本発明のブロック−ダイマーのホスホラミジット、５′−ジメチトキシトリチルで保護されたスルファメート結合ジヌクレオシド３′−ホスホラミジットが使用される。

このことはスルファメートの結合した２種のヌクレオチドの、成長鎖の５′−末端への付加をもたらす。本発明のブ０−／クマルチｖ　−（ｂｌｏｃｋ　ｍｕｌｔｉ−厘ｅｒ）により１回連続したスルファメート結合が導入される。

本発明のブロックマルチマーのホスホラミジット化合物は式（式中、ＡはＨ，０１１，０１？イ、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ｎは少なくとも１であり、Ｒ１はアルキルであり、Ｒ１はジアルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノまたはピロリトノであり、Ｒ８はアルキルであり、Ｒ４はアルキルであり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲＮまたはＯであり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｑは保護基であり、そしてＶは保護基である）で表わされる。

５以下の炭素原子からなるアルキルを有するＲ、Ｒ，、Ｒ３およびＲ４置換基が有用であると予想される。

■は塩基性条件下で開裂することのできる保護基例えばシアノエチルおよびメチルである。

本発明のすべての化合物において、Ｑはアルキルあるいはアシル、トリアルキルシリル、シアノエチルまたはテトラヒドロピランから選択される保護基である。

Ａ置換基が酸素を含む場合、３つのレベルの保護を想到することができる。第１のケースとして、保護基Ｑは■に関するものと同じような条件下で切断を受けやすいであろう。第２の可能性は安定性の理由からＶを除去するために使用される脱保護条件に対してＱを安定にすることである。最後のケースはＱはまったく除去されない、例えばアルキル基であろう。

スルファメート結合の安定性の問題は本アプローチにおいて重要なものである。

第１に、この結合は以下のサイクリング条件すなわち、１）適当な強酸を用いての５′−トリチル基の除去、２）テトラゾール活性化ホスホラミジットとのカップリングおよび３）塩基性条件下におけるヨウ素を用いての酸化の繰り返しの処理に耐えうるちのでな）すればならない。本発明者らはこれらの条件下の繰り返しの処理に完全に安定なヌクレオチド結合を見い出した。第２に、この結合は樹脂から新生オリゴヌクレオチドを切断するのに、そしてヌクレオチド塩基がら保護基を除去するのに要求される条件に耐えうるものでなければならない。塩基の保護は一般にアシル化（Ｃ，Ａにっいてはベンゾイル化、Ｇについてはイソブチリル化）により環の外にあるアミノ基をブロックすることを含む。

樹脂からの切断および塩基−脱保護は両方とも一般に濃アンモニア水で処理することにより行なわれる。樹脂からの切断は室温で急速に起こるが、完全な塩基の脱保護には高められた温度におけるより長期の処理が必要とされる。スルファメート結合はこの濃アンモニア水を用いての長期の処理に対して完全に耐性がある。

ブロックダイマーアプローチを使用して、１〜多数のスルファメート結合を有する化合物のオリゴヌクレオチド類似体を製造することができる。（３′−末端における）最初の結合がスルファメートではなく、そして連続のスルファメートを導入することができないということが唯一の制限である（これらの制限はそれぞれ、樹脂の結合したスルファメートブロックダイマーを出発物質として使用することにより、またはブロックマルチマーの使用により克服しつる）。

すべてのヌクレオチド間結合がスルファメートで置換されつる化合物の合成のため、異なった計画が採用される。ここでは段階的な合成が好ましい。合成は５’ 　−３’方向に単一のヌクレオチドユニットを一度に加えることにより行なわれる。３′−位の保護された５′−アジドスルホンアミドモノマーはその場で活性化され、成長オリゴヌクレオチドの３′−ヒドロキシルに加えられる。

鎖合成のこの方向は通常の自動オリゴデオキシヌクレオチド合成において採用されるものの逆である。したがってこの２つの方法はわずかに両立できない。しかしながら、所望によりスルファメートまたはリン酸ジエステルの何れかを加えることのできるサイクルを考えることは可能である。例えば、５′−位の保護された３′−アジドスルホンアミドモノマーを用いてスルファメート結合を所望の点に取り入れることが可能である。これは伸長方向が３′から５′であることの結果であり、同じ方向がホスホラミジット伸長において使用される。

一般に、活性化モノマーアプローチは、ａ）すべての可能な配列をアドレスすることができること：およびｂ）１６の試薬と対照して必要なのはわずか４つである、という点でブロックダイマーアプローチより優れている。

（実用性）本発明の化合物はこれらの化合物が他の系におけるアンチセンス機能と相互関係があることがわかっている物理的特性を実質的に示しているようにアンチセンス試剤としての用途（すなわち治療上の）を見い出せる。同様に、本発明者らは、これらの試薬が二重鎖ターゲツティング用途において機能することができると予想している。

他の可能な治療用途がある。例えば、２’　、　５’−オリゴアデノシンのスルファメート類似体は抗ウイルス特性を示すことが予想されつる（参考文献２６）。

スルファメートの置換されたオリゴデオキシヌクレオチドが他の類似体で観察されるものと同じ非連続の特異的抗ウイルス効能を幾らか示すことが予想されつる（参考文献１８．１９）。

研究分野においても多くの潜在的な用途がある。スルファメート結合系はハイブリッド形成プローブとして、突然変異誘発のための試薬として、そして蛋白質／核酸相互作用の研究のための構造類似体として有用でありうる。スルファメート結合置換は触媒ＲＮＡ系に取り込まれる場合に有用な特性を与えることができる（参考文献３５）。

Ｍが５（＝０）＝０であり、モしてＹおよびＺの両方がＯであるオリゴヌクレオチド類似体化合物についても同様の実用性が予想される。

（二重鎖形成）アンチセンス試剤として機能するために、本発明の化合物は相補的配列を認識する（ハイブリッド形成、アニーリング、二重鎖形成）能力を維持しなければならない。

短鎖のオリゴヌクレオチドに関しては、これは二重鎖形成を伴なうＵｖ吸収の変化を観察することにより容易にアッセイされつる。一般に、２６０ｎｍにおける吸収は温度の関数として測定される。

二重鎖形成における単一のリン酸ジエステル結合をスルファメートと置換する効果を研究するために、それぞれ単一のスルファメート結合を有する一対の修飾された相補的１８−マーをその対応する対の非修飾の１８−マーと比較した。この２つの対はわずかに同一の融解曲線（滑らかなＳ−曲線）を示し、修飾対の曲線がほんの少し低温側に移動している。吸収変化の程度が同一で、曲線の形が殆んど同一であることは二重鎖がスルファメート結合により殆んど動じず、そして単一のドメイン融解が起こることを示唆している。転移温度がわずかに低いことは、これらの条件下で修飾された二重鎖がその非修飾のものよりわずかに安定性が低いことを示している。

すべてのスルファメート結合を有するＴ−ホモポリマーの短鎖のｄＡホモポリマー（リン酸ジエステルを有する）へのアニーリングを明らかにするための試みは不成功であった。このことは幾分困惑させるが、同じ現象がカルバメートおよびメチルホスホネートで観察された：オリゴＴｓ（およびＵｓ）はあまり、またはまった（ポリＡにアニーリングしないが、他の塩基を有する配列はよくアニーリングする（参考文献１７．２０）。このことは結合が帯電していない場合のオリゴＴｓの特有性かもしれない。

スルファメートの結合したアデノシンダイマーのポリＵへのアニーリングが明らかにされている。ここで、その相互作用は非常に強く、転移温度はその対応する非修飾のアデノシンダイマーより数ｌθ″高かった。

（ヌクレアーゼ耐性）インビボでの安定性のためには、アンチセンス試剤は段階的な様式で何れかの末端から消化するエキソヌクレアーゼと鎖の真ん中で開裂するエンドヌクレアーゼに対して耐性があることが望ましい。

エキソヌクレアーゼ耐性を試験するために、単一のスルファメート結合を有する本発明の化合物を幾つかエキソヌクレアーゼ、ヘビ毒ホスホジェステラーゼおよびアルカリ性ホスファターゼ（分析を容易にするため）の混合物での長期の処置に付した。それぞれの場合において、スルファメート結合は完全にその構成要素のヌクレオシドに消化された化合物の残りと一緒に（二量体として）そのまま再生した。

エンドヌクレアーゼ耐性はＮｓｉ　１制限工ンドヌクレアーゼ認識配列を含む短鎖の二重鎖オリゴマーの切断を調べることによって試験した。このエンドヌクレアーゼは通常、互い違いの様式でその認識配列内で両方の鎖を切断する。何れかの、または両方の鎖中の切断部位におけるリン酸ジエステル結合の置換は変化した鎖中の切断に対する耐性を付与した。

実施例実施例ＩＮ、−ベンゾイル−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアジド−２’　、　５’−ジデオキシアデノシンの製造１００諺ｌの無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中における８、９９（２４ミリモル）の５′−アジド−Ｎ６−ベンゾイル−２’　、　５’−ジデオキシアデノシン（参考文献３６の記載に従って製造することができる）　、５．４ｇ（３５ミリモル）のｔ−ブチルジメチルシリルクロライドおよび３．３ｇ（４８ミリモル）のイミダゾールの混合物を室温（ＲＴ）で２０時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、その残留物を半飽和ブラインおよびＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　２００冨ｌ）に分配した。合一した有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして蒸発させた。２０〜４０％のＥｔＯ＾ｃ／　ＤＣＭを用いるシリカ［ＥＭサイエンス社製シリカゲル（２４０〜４００メツシユ）〕上におけるクロマトグラフィーによる精製により１１．１９の５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー３ ’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−２’、５’−ジデオキシアデノシンを白色の泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００１１ｔｌｚ、　ｄ、−ＤＩＩＳＯ）６１１．２５（ｂｒ、１［１）、　８．７８（ｓ、ＩＨ）。

８．７１（ｓ、ＩＨ）、　８．０５（＋１．２Ｈ）、　７．５−７．７（ｍ、３ ■）、　６．５２（ｔ、ＩＨ。

Ｊ＝７Ｈｚ）、４．７２（ｍ、ＬＨ）、４．０２（ｍ、１■）、３．６７（ｄｄ、１■、Ｊ＝１３．７Ｈｚ）、　３．５６（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ）、　３．０９（ｍ、Ｈｆ）、　２．４３Ｃａ。

ＩＮ）、　０．９２（ｓ、９Ｈ）、　０．１４（ｓ、６１１）。

６９ｍＡ’のエタノールおよび３．　（ｈｌの酢酸中における５、　０８ｇ（１０，４ミリモル）の５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー３′−〇−１−ブチルジメチルシリルー２’　、　５’−ジデオキシアデノシンおよび２．１ｇの■０％Ｐｄ／Ｃの混合物を１気圧の水素下で４時間撹拌した。スラリーをメタノールで洗浄しながらセライトを通して濾過した。ｐ−トルエンスルホン酸−水和物（１，９７９，１０，４ミリモル）を加え、混合物を撹拌して溶解した。溶液を蒸発させ、得られた固形物をシリカ上でクロマトグラフィー処理（１〜１２％メタノール／ＤＣＭ）　Ｉ、て４．６３ｇの５′−アミノ−Ｎ６−ペンゾイルー３′− ０−１−ブチルジメチルシリル−２’、５’−ジデオキシアテノシン、ｐ−トルエンスルホネート塩を得た。

ＮＩＩＲ（３００Ｍ［Ｉｚ、　ｄｓ−ＤＩＩＳＯ）δ８．７６（ｓ、１ｆｌ）、８．７４（ｓ、ＬＨ）。

８．０５（ｄ、２ｔｌ、Ｊ＝８ｆｌｚ）、　７．６７（ｔ、１■、Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．５７（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．４８（ｄ、２１１．Ｊ＝８１１ｚ）、　７．１１（ｄ、２１１．Ｊ＝８Ｈｚ）、　６．５３（ｔ。

ＩＨ，Ｊ＝７１１１ｚ）、４．６８（ｍ、１１１）、４．０１（ｍ、１）１）、　３．０６（ｍ、２［）。

２．５６（ｍ、１ｆｌ）、　２．３９（ｍ、１１１）、　２．２９（ｓ、３ｆｌ）、０．９３（ｓ、９Ｈ）。

０、１５（ｓ、　６１ｉ）。

１０Ｉ１１の無水アセトニトリルおよび２０１１／の無水ＤＣＭ中における４、　２４９（６，６８ミリモル）の５′−アミノ−Ｎ６−ペンゾイルー３’−０− ｔ−ブチルジメチルシリル−２’、５’−ジデオキシアデノシンおよび４人のモレキュラーシーブス（〜５ｇ）の混合物を窒素下で２時間撹拌した。０．９３Ｎｌ（６，６８ミリモル）のトリエチルアミンを加えた後、混合物を５分間撹拌し、そして０．４２ｍ１のクロロスルホニルアジド（ＩＭ／アセトニトリル）を加えた。反応混合物を１時間撹拌した後、スラリーを濾過し、濾液を水およびＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　１０（ｂｊ’）に分配した。合一した有機相をブラインで洗浄し、乾燥しそして蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜３％１ｌｅＯＨ／ＤＣＭ）による精製により０．８９ｇのＮ６−ペンゾイルー３’− ０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアジド−２’　、　５’ −ジデオキシアデノシンを白色の泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１１．２２（ｂｒ、ＩＦＩ）、　９．２８（ｂｒ、１■）。

８．７５（ｓ、ＩＨ）、８．７１（ｓ、１Ｂ）、８．０５（ｄ、２■、Ｊ＝８Ｈｚ）、７．６６（ｔ。

１１Ｔ、Ｊ＝８１１ｚ）、７．５６（ｔ、２Ｈ，Ｉ＝８Ｈｚ）、６．５２（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）。

４．６７（＋、ＩＨ）、４゜００（＋、１ｔｌ）、３．０７（ｍ、ｌ１ｌ）、２．３４（ａ＋、ＬＨ）。

０．９３（ｓ、９１１）、０．１５（ｓ、６Ｈ）。ＩＲ（ＫＢｒ）３４００，３０８０．２９５０゜２９３０、　２８８０．　２８６０．　２１３０．　１７００．　１６１０．　１５８５．　１５１０゜１３７０、　１１７０ｃｍ−’。

実施例２Ｎ６−ペンゾイルー３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′〜スルファモイルアジド−２’　、　５’−ジデオキシシチジンの製造１２、０９９　（３５，１ミリモル）の５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー２’ 、５’−ジデオキシシチジン（参考文献３６の記載に従って製造することができる）　、７．９４ｖ（５２，７ミリモル）のｔ−ブチルジメチルシリルクロライドおよび４．７８ｇ（７０，３ミリモル）のイミダゾールの混合物を７０寓ｌの無水ＤＩＩＦ中において窒素下、室温で２０時間撹拌した。ＤＭＦを真空下で除去し、得られた混合物をＤＣＭ中に溶解し、そして直接シリカカラムにかけた。

２５％ＥｔＯＡｃ／　ＤＣＭ溶液を用いて、生成物をカラムから溶離した。生成物を含有するフラクションを蒸発させて１３．３５９の５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−２’、５’−ジデオキシシチジンを白色の泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００１１Ｔｌｚ、　δ６−ＤＩＩＳＯ）δ１１．３１（ｂｒ、ＩＨ）、　８．１８（ｄ、　ＬＬ　Ｉ＝８Ｈｚ）、　８．０１（１，２１’り、　７．６３（ｍ、１１１）、　７．５６（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）。

７．３９（ｄ、ＩＨｊ＝８Ｈｚ）、　６．２０（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．３８（ｍ、ＩＨ）。

３．９６（ｍ、ＩＨ）、３−６８（ｄｄ、ＩＢ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ）、３−６１（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ）、２．３０（ｍ、１ｔｌ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．１０（ｓ、６１１）。

１３０ｍ１のエタノールおよび５＠ｌの酢酸中における６、８８ｇ（１５ミリモル）の５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー３′−〇−ｔ−ブチルジメチルシリルー２’　、　５’−ジデオキシシチジンおよび３．０ｇの１０％Ｐｄ／　Ｃの混合物を１気圧の水素下で４時間撹拌した。スラリーをメタノールで洗浄しながらセライトを通して濾過した。ｐ−）ルエンスルホン酸−水和物（２，８５９，１５ミリモル）を加え、混合物を撹拌して溶解した。溶液を蒸発させ、得られた固形物をシリカ上でクロマトグラフィー処理（１〜１２％メタノール／　ＤＣＭ）して６．３２９の純粋な５′−アミノ−Ｎ６−ペンゾイルー３′−〇−１−ブチルジメチルシリルー２’　、　５’−ジデオキシシチジン　ｐ−トルエンスルホネート塩を黄かっ色の固形物として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄａ−ＤＭＳＯ）δ８．３１（ｄ、ＩＥｌ、Ｊ＝８Ｈｚ）、　８．０２（ｄ。

２Ｈｊ＝８Ｈｚ）、７．６４（ｍ、ＩＨ）、７．５２（ｍ、４ｔｌ）、７．３８（ｄ、Ｈｌ、Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．１２（ｄ、２１１．Ｊ＝８Ｈｚ）、　６．１９（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）、　４．４３（＋ａ、１１）、３．９７（ａ＋、ＬＨ）、　３．０２（ｍ、２Ｆｌ）、　２．３０（ｍ、５Ｈ）、　０．８９（ｓ、９Ｉ（）、　０．１１（ｓ、６Ｈ）。

３０ｘｌの５０％無水ＤＣＭ／アセトニトリル中における３４０ｇ（５，６３ミリモル）の５′−アミノ−Ｎ、−ベンゾイル−３′−〇−１−ブチルジメチルシリルー２’、５’−ジデオキシシチジン　ｐ−トルエンスルホネート塩および４人のモレキュラーシーブス（〜５９）の混合物を窒素下で１時間撹拌した。０℃ まで冷却した後、０．１８ｍ１　（５，６３ミリモル）のトリエチルアミンを加え、撹拌を１０分間継続した。最後に、３．９＠ｌ　（３，９ミリモル）のクロロスルホニルアジド（ＩＭ／アセトニトリル）を加え、冷浴を取り外し、そして反応混合物を２．５時間撹拌した。スラリーを濾過し、濾液を半飽和ブラインおよび３００ｍ１のＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、蒸発させた。

シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜４％メタノール／　ＤＣＩＩ）による精製により２種の不純物を含む０．９９９の生成物を得た。さらにクロマトグラフィー処理することにより純粋なＮ、−ベンゾイル−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアジド−２’　、　５’−ジデオキシシチジンを白色の泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１ｌ−２７（ｂｒ、１１１）、　９．３０（ｂｒ、１［１）。

８．２１（ｄ、１１１．Ｊ＝８＋１ｚ）、　８．０１（ｉ＋、２ｔｌ）、　７．６２（ｍ、Ｉｎ）、　７．５０（ｔ。

２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．３７（ｄ、１ＬＪ＝８１１ｚ）、　６．１７（ｔ、ＩＴｌ、Ｊ＝６．５＋Ｔｚ）。

４．３９（ｍ、ＨＩ）、　３．９５（■、１１１）、　３．３５（■、２■）、　２．２７（ｍ、２Ｈ）。

０．８９（ｓ、９Ｈ）、　０．１０（ｓ、６Ｂ）。

実施例３３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ４−ｉ−ブチリル−０ｓ−（４−ニトロフェネチル）−５’−スルファモイルアジド−２’　、　５’−ジデオキシグアノシンの製造参考文献３７に記載の方法により、５．００９（１７，５ミリモル）の２′−デオキシグアノシン（Ｓｉｇｍａ社製）　、５３ｘｌの無水ＤＣＭ、　１３＋＋１の無水ピリジンおよび９．３＠ｌ　（８８ミリモル）のイソブチリルクロライドを用いて１０．３４９の粗製Ｎ、、（３’、５’　−０）−トリー１−ブチリル−２′−デオキシグアノシンを得た。

１０、．３４９（〜１７ミリモル）の粗製Ｎ４．（３’、５’　−０）　−）リーｉ−ブチリルー２′−デオキシグアノシンを７０ｘｌの無水ＤＣＭ中に窒素下で溶解した後、８．９１９　（３４ミリモル）のトリフェニルホスフィンおよび５．６８９（３４ミリモル）の４−二トロフエネチルアルコールを加え、撹拌しながら溶解した。０℃まで冷却した後、５．３＠１（３４ミリモル）のジエチルジアゾジカルボキシレートを５分間にわたって加えた。冷浴を取り外し、反応混合物を１８時間撹拌した。反応混合物のＴＬＣ（１０％メタノール／　ＤＣＭ）はまだ出発物質が幾らか存在していることを示した。トリフェニルホスフィン（４，４５ｇ）　、４−ニトロフェネチルアルコール（５，３０ｇ）およびジエチルジアゾジカルボキシレー）　（２，６５ｍＡ’）を逐次的に加え、混合物をさらに１時間撹拌した。

溶媒を蒸発させ、その残留物を次の反応に直接使用した。

サンプルをシリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜５％メタノール／　ＤＣＭ）により精製してり、　（３’、５’　−０）　−トリーミーブチリル−ｏ、 −（４−ニトロフェネチル）−２′−デオキシグアノシンを白色の泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００１１Ｈ２，ＣＤＣ１３）δ８．１？（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　８．０７（ｂｒ。

ＩＨ）、　７．９７（ｓ、ＩＨ）＝　７．５３（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　６．３６（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．６ｔｌｚ）、　５．４３（＋ｓ、ＩＨ）、　４．８４（ｔ、２１１．Ｊ＝７［１ｚ）、　４．５４（ｄｄ、ＬＨ。

Ｊｌ＝１２．５Ｈｚ）、　４．３９（ｍ、２Ｈ）、　３．３３（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　２．５−３．１（国、５■）、１．３９（ｄ、６Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、１．３２（ｄ、６Ｂ、Ｊ＝７Ｈｚ）、１．２６（ｄ。

３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、１．２４（ｄ、３Ｈ，Ｊ＝７１１ｚ）。

粗製Ｎ、、　（３’、５’　−０）　−）リーｉ−ブチリル−ｏ、−（４−ニトロフェネチル）−２′−デオキシグアノシン（〜１７ミリモル）を４０（ｈｌのメタノール中に溶解し、４０（ｈｌの２７％水酸化アンモニウムを加えた。混合物がくもったのでメタノール（１００＋＋／）を加えて反応を均一にした。室温で２０時間撹拌した後、溶媒を蒸発させ、その残留物を１００■ｌのＤＣＭに取った。ヘキサンを十分に加えたところ溶液がくもった。−晩装置した後、明るい黄色の結晶を集めて５．８３９のＮ４−ｉ−ブチリル−０ｓ−（４−ニトロフェネチル）−２′−デオキシグアノシンを得た。二度目の結晶化により追加の物質が得られ、全部で８．６０ｇのＮ４−ｉ−ブチリル−ｏ、−（４−ニトロフェネチル）−２′−デオキシＮｉｌＲＮ１１Ｒ（３００，２０％ｄ４−メタノール／ＣＤＣ４’ｓ）δ８．１８（ｄ。

２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）、　８．１７（ｓ、ＩＨ）、　７．５７（ｃ！、２Ｈｊ＝９Ｈｚ）、　６．３８（ｔ、ＩＨ。

Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．８４（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．７２（ｍ、ＬＨ）、　４．０７（ｑ、ｉｌｌ、Ｊ＝４Ｈｚ）、　３．８３（ｄｄｄ、２Ｈ，Ｊ＝３３．１２．４Ｈｚ）、　３．３３（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）。

２．７５−２．９（＊、２Ｈ）、　２．４４（ｄｄｄ、ＩＨＪ−１４，７，４Ｈｚ）、　１．３７（ｄ、６Ｈ。

Ｊ＝８Ｈｚ）。

７５ｍ１の無水ピリジン中における７、　２８９　（１４，９ミリモル）のＮ４ −ｉ−ブチリル−ｏｓ−（４−ニトロフェネチル）−２′−デオキシグアノシンの溶液を窒素下で０℃まで冷却した。２．８４９（１４，９ミリモル）のｐ−トルエンスルホニルクロライドを加えた後、反応混合物を０℃で２時間、次いで５ ℃で１８時間撹拌した。ピリジンを蒸発させ、残留物を水およびＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させて６．２２ｇを得た。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜５％メタノール／ＤＣＩＩ）による精製により４．０８９のＮ４−ｉ−ブチリル−Ｏｇ−（４−ニトロフェネチル）−５’−０−ｐ−）ルエンスルホニルー２′−デオキシグアノシンを白色の泡状物として得た。

（３００１１Ｈｚ、　２０％ｄａ−ＤＩＩＳＯ）６１０．３４（ｂｒ、ＩＨ）、８．２４（ｓ。

ＬＨ）、　８．１９（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８＋１ｚ）、　７．６７（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．６１（ｄ、２Ｈ。

Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．２２（ｄ、２ＨＪ＝８Ｈｚ）、　６Ｊ８（ｔ、ＩＩＩ、Ｊ＝７Ｈｚ）、　５．４６（ｄ。

１１１１、　Ｊ＝５■ｚ）、４．８２（ｔ、２１１４＝７Ｈｚ）、　４．６４（ｍ、１■）、　４．３３（ｄｄｄ。

２■、Ｊ＝２６．１２．Ｈｚ）、３．９７（＋、ｌ■）、３．３５（ｔ、２１１．Ｊ＝７Ｈｚ）。

２．８２（１，２１１）、　２．２７（ｓ、３Ｈ）、１．１２（ｄ、３■、Ｊ＝７■Ｚ）、１．１０（ｄ。

３Ｂ、　Ｊ＝７Ｈｚ）。

２１ｍ１の無水り訂中における４、　０８９　（６，３５ミリモル）のＮ。

−１−ブチリル−ｏｓ−（４−ニトロフェネチル）−５’−０−ｐ−）ルエンスルホニルー２′−デオキシグアノシンおよび４６７■９（９，５２ミリモル）のリチウムアジド（Ｋｏｄａｋ社製）の溶液を１００℃まで３時間加熱した。溶媒を真空下で除去した。残留物を水およびＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥しそして蒸発させて３．９５９の粗生成物を得た。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜１０％メタノール／ＤＣＭ）による精製により、極性の少ない物質が１．４７９と極性の多い物質が４１９■得られた。極性の少ない物質の方は白色の泡状物で５′−アジド−Ｎ４−ｉ−ブチリル−Ｏじ（４ −ニトロフェネチル）−２’　、　５’−ジデオキシグアノシンであることがわかった。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄ、−ＤＩＩＳＯ）６１０．４０（ｂｒ、１１１）、　８．４１（ｓ、１１１）。

８．１８（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．６４（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８１１ｚ）、　６．３７（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７＋１ｚ）、　５．４６（ｄ、ＩＦＩ、Ｊ＝４Ｈｚ）、　４．７９（ｔ、２Ｂ、Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．６３（ｍ。

ＬＨ）、　３．９７（ｍ、ＬＨ）、　３．８６（ｄｄ、１１１．Ｊ＝１３．８■ ｚ）、３．５３（ｄｄ、　Ｈｌ。

Ｊ＝１３．５ｔｌｚ）、　３．３６（ｔ、２ｔｌ、Ｊ＝７Ｈｚ）、　３．０５（ｍ、ＩＨ）、　２．８４（ｍ。

ＩＨ）、　２．２８（ｄｄｄ、ＩＢｊ＝１４．６．３１１ｚ）、　１−１２（ｄ、６ＨＪ＝８Ｈｚ）。

５′−アジド−Ｎ６−ペンゾイルー３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−２’ 、５’−ジデオキシシチジンと同様にして、１．４７ｇ（２，８７ミリモル）の５′−アジド−Ｎ４−ｉ−ブチリル−０６−（４−ニトロフェネチル）　−２’ 、５’−ジデオキシグアノシン、０．６５１（４，３ミリモル）のｔ−ブチルジメチルシリルクロライド、０．３９９　（５，７ミリモル）のイミダゾールおよびｌＱｗｌの無水ＤＩＩＦを使用して、シリカ上におけるクロマトグラフィー処理（１０％ＥｔＯ＾ｃ／ＤＣＭ）の後１、４９９の５′−アジド−３’−ｏ−ｔ −ブチルジメチルシリル−Ｎ、−ｉ−ブチリル−ｏ、−（４−ニトロフェネチル）−２’、５’−ジデオキシグアノシンを白色の泡状物として得た。

Ｎ１１Ｒ（３００１！Ｉ’ｌｚ、　ｄａ−ＤＭＳＯ）δ１０．４０（ｂｒ、ＩＨ）、８．４０（ｓ、１１１）。

８、１８（ｄ、　２■、Ｊ＝９Ｈｚ）、７．６５（ｄ、２Ｂ、Ｊ＝９Ｈｚ）、６．３５（ｔ、１！Ｉ、Ｊ＝７Ｈｚ）、４．７８（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、４．７３（ｍ、ＬＨ）、３．９４（ｍ、ＬＨ）。

３．８４（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝１３．８［１）、３−５６（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ）、３．３１（ｔ。

２■、Ｊ＝７Ｈｚ）、３．１０（ｍ、ＬＨ）、２．８２（＋ａ、ＬＨ）、２．２９（ｍ、１■）。

１．１０（ｄ、６Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、０．８９（ｓ、９Ｈ）、０．１４（ｓ、３Ｂ）、０．１２（ｓ。

３Ｈ）。

１０ｆｂｇ（０，１５９ミリモル）の５′−アジド−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ４−ｉ−ブチリル−ｏ、−（４−二トロフェネチル）　−２’、５’−ジデオキシグアノシン、０、０６４調Ｊ（０，６４ミリモル）の１．３− プロパンジチオール、０、０８９ｍ／（０，６４ミリモル）のトリエチルアミンおよび１寓ｌのメタノールの混合物を窒素下、室温で４日間撹拌した。

０、５ｍｌの酢酸を加えた後、反応混合物を真空下で濃縮した。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜１５％メタノール／ＤＣＩｇ）による精製により１２１ｍ＋９の酢酸塩の生成物を得た。この物質を飽和炭酸カリウムおよびＥｔＯＡｃに分配した。有機相を乾燥し、蒸発させて９１諺すの５′−アミノ−３’− ０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ４−ｉ−ブチリル−ｏｓ−（４−ニトロフェネチル）　−２’、５’−ジデオキシグアノシンを得た。

ＮＭＲ（３００１１ｔｌｚ、　ＣＤＣＡｓ）δ８．１７（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８［Ｔｚ）、　７．９８（ｓ、１Ｂ）。

７．９０（ｂｒ、１ｆｌ）、　７．５２（ｄ、２■、Ｊ＝８■ｚ）、　６．２８（ｔ、ＩＨＪ＝７Ｈｚ）。

４．８０（ｔ、２ｆ１．Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．７１（ｉ、ＩＨ）、　３．９３（ｑ、１１．Ｊ＝４Ｈｚ）。

３．３２（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　３．［１４（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝１４．ｉｚ）、　２．９３（ｄｄ、ＩＨ。

Ｊ＝１４．６［１ｚ）、　２．８４（ｍ、１■）、　２．３９（ｍ、ｌ１１）、１．２８（ｄ、６Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　０．９３（ｓ、９Ｈ）、　０．１３（ｓ、３Ｈ）、　０．１１（ｓ、３Ｈ）。

２翼ｌの集水ＤＣ１ｉ中における９０厘ｇ（０，１５ミリモル）の５′−アミノ −３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ４−ｉ−ブチリル−ｏ、−（４−ニトロフェネチル）　−２’、５’−ジデオキシグアノシンの溶液を窒素下、室温で０．１１ｍＪのクロロスルホニルアジド（ＩＭ／アセトニトリル）を加えながら撹拌した。１時間撹拌した後、溶液を半飽和ブラインおよびＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。残留物をシリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜３％メタノール／ＤＣＭ）により精製して１８ｍｇの３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ４−ｉ−ブチリル−０ｓ− （４−ニトロフェネチル）−５′−スルファモイルアジド−２’、５’−ジデオキシグアノシンを得た。

ＮＭＲ（３００１１Ｈｚ、　ＣＤ（Ｊｓ）δ８．６７（ｂｒ、ＬＨ）、　８．４６（ｔ、ｉｌｌ、Ｊ＝６Ｈｚ）、８．１６（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．８１（ｓ、ＩＨ）、７．５４（ｄ、２ＬＪ＝８ｆｌｚ）、６．１７（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）、４．８７（ｍ、３Ｈ）、４．１７（ａ＋。

ＩＥ［）、３．５７（ｍ、１［１）、３．３４（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．９８（１，ｌ１ｌ）。

２．６５（ｍ、１［１）、　２．２５（ｍ、ＩＨ）、　１．２７（ｄ、３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　１．２６（ｄ。

３１１、　Ｊ＝７Ｈｚ）、　０．９３（ｓ、９１）、　０．１６（ｓ、３ｔｌ）、　０．１４（ｓ、３Ｈ）。

実施例４３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアジド−５′−デオキシチミジンの製造１９（１＋１の無水ＤＭＦ中における２５．０９（９３，６ミリモル）の５′−アジド−５′−デオキシチミジン（参考文献３６の記載に従って製造することができる）　、２１．１９　（１４０ミリモル）のｔ−ブチルジメチルシリルクロライドおよび１：１７ｇ（１８７ミリモル）のイミダゾールの溶液を窒素下、室温で１８時間撹拌した。ＤＭＦを真空下で除去した。油状物をエーテル（５００富Ｊ）およびｌＮＮａ０■（２Ｘ　３００ｍＪ）に分配した。水相を氷で冷却し、６５０ｍ１のｌＮＨＣｌ！を加えた。生成物をＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　７５０ｍ／）で抽出し、そして有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、蒸発させた。高真空下に２４時間放置すると、油状物が結晶化して２７．９ｑの５′−アジド−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−デオキシチミジンを白色の固形物を得た。

ＮＩＩＲ（３００ＭＨｚ、　ｄｓ−ＤＩＩＳＯ）６１１．３４（ｂｒ、１ｔｌ）、　７．５０（ｓ、ＩＨ）。

６．１６（ｔ、１１１．Ｊ−７＋１ｚ）、４．３６（ｍ、１■）、３．８４（ｍ、１■）、３．５５（ｍ。

２Ｈ）、　２．３４（ｍ、１Ｂ）、　２．０５（■、１１１）、　１．７９（ｓ、３Ｈ）、　０．８６（ｓ。

９Ｈ）、　０．０８（ｓ、６［１）。

２００冨！のＥｔＯＡｃ中における１５．０９（３９，３ミリモル）の５′−アジド−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−デオキシチミジンおよび４．０ｇの１０％Ｐｄ／Ｃの混合物を１気圧の水素下で４．５時間激しく撹拌した。スラリーをメタノールで洗浄しながらセライトを通して濾過した。濾液を蒸発させて１５５ｇの濃厚な油状物（溶媒を幾らか含む）を得た。サンプルをシリカ上におけるクロマトグラフィー（２〜１０％メタノール／ＤＣ）ｌ）により精製して純粋な５′−アミノ−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−デオキシチミジンを白色の固形物として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　δ６−ＤＭＳＯ）δ７．６４（ｓ、１１１）、　６．１３（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）、　４．３７（１，ＬＨ）、　３．６５（１，１８）、　２．７８（ｉ、２Ｈ）、　２．２１（ａ＋。

１ｆｌ）、２．０１（ｄｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝１２．６．４Ｈｚ）、１．７９（ｓ、３Ｈ）、０．８９（ｓ。

９Ｈ）、０．０８（ｓ、６Ｈ）。

１５０冨ｌのヘキサメチルジキシラザン（ＩＩＩＩＤＳ）中における５、　５２９の５′−アミノ−３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−デオキシチミジンおよび１６８ｍｖの硫酸アンモニウムの混合物を窒素下で加熱して溶解した。室温で１８時間撹拌した後、スラリーを２時間８０℃まで加熱した。

ＨＭＤＳを真空下で除去して濃厚な油状物を得、これを窒素下で４５ｍ１の無水アセトニトリル中に溶解した。この溶液を滴下ロートに加え、前もって０℃まで冷却された１０ｗｒｌのクロロスルホニルアジド（ＩＭ／アセトニトリル）に２５分間かけて滴下した。添加後、冷浴を取り外し、混合物を１時間撹拌した。反応混合物を２００ｍ１の半飽和ブラインに注ぎ込み、ＥｔＯ＾Ｃ（２Ｘ　２００ｍ１）で抽出した。合一した有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させて５．２９ｇの固形物を得た。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜５％メタノール／ＤＣＩＩ）による精製により３．７０９のかなり純粋な３’−０ −ｔ−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアジド−５′−デオキシチミジンを黄かっ色の泡状物として得た。

ＮＩＩＲ（３００１１Ｈｚ、　ＣＤＣ４’ｓ）δ８．５７（ｂｒ、ＬＨ）、　７．０２（ｓ、ＩＨ）、　６．８８（ｂｒ、ＬＨ）、　５．７５（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　４．４９（ｍ、ＩＨ）、４．０４（＋ｗ。

ｌ１ｌ）、　３．４８（ｍ、２Ｈ）、　２．７２（ｍ、１ｔｌ）、　２．１８（ｉ＋、ＬＨ）、　１．９２（ｓ。

３１）、　、８９（ｓ、９Ｈ）、　、１１（履、６■）。

実施例５３’−０−アセチル−５′−スルファモイルアジド−５′−デオキシチミジンの製造１、０Ｏｖ（３，５３ミリモル）の５′−アミノ−３′−〇−アセチルー５′− デオキシチミジン（参考文献３８の記載に従って製造することができる）および９４Ｍｇの硫酸アンモニウムの混合物を２０翼！のｔ１ＭＤｓ中において、窒素下、室温で１８時間撹拌した。スラリーを２４時間ゆるやかに加熱（６０℃）した。ＨＭＤＳを一７８℃でトラップ中に真空除去した。アセトニトリル（４（１＋＋Ａ’）を窒素下で加えて均一な溶液を得た。

５、　Ｏｗｌのクロロスルホニルアジド（１，０Ｍ／アセトニトリル）を反応に加え、混合物を１．５時間撹拌した。水（５（１＋ｊりを加え、生成物をＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　１５０＋＋／）で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、蒸発させて０．８９９の固形物を得た。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜５％メタノール／ＤＣＭ）による精製により０．６４ｆ２の純粋な３′− 〇−アセチルー５′−スルファモイルアジド−５′−デオキシチミジンを泡状物として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＩｌｌｚ、　ｄｏ−ＤＩＩＳＯ）δＬ１．４０（Ｂｒ、１１Ｔ）、　９．３１（Ｂｒ、ＩＨ）。

７．５９（ｓ、ＩＨ）、　６．１７（ｄｄ、ｌＨ，Ｊ＝７．５．６．５＋１ｚ）、　５．１４（ｍ、ＬＨ）。

４．０３（ｍ、ＩＨ）、　３．４４（１１，２Ｈ）、　２．４７（＋、１■）、　２．２５（ｏ＋、ＬＨ）。

２．０７（ｓ、：３０）、　１．８０（ｓ、３Ｈ）；　ＩＲ（ｆｉｌｍ）３２００．２９２０．２８４０゜２１３５、　１７３０．　１６８５．１３６５．１２４０．　１１７０ｃｍ−’　；マススペクトル（ＦＡＢ）実測値３８８．９８ａ＋／ｚ、計算値（Ｃ１Ｊ＋　ｅＮ＊ｏ□Ｓとして）　３８９．０８　（Ｍ＋Ｈ）実施例６５′−ジメトキシトリチル−３′−スルファモイルアジド−３′−デオキシチミジンの製造２５翼！のエタノール中における２、　１７ｇの３′−アジド−３′−デオキシチミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）および０．９１９のｌＯ％Ｐｄ／Ｃのスラリーを１気圧の水素下で４時間激しく撹拌した。混合物をセライトを通して濾過し、メタノールで洗浄し、そして濾液を蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（２〜４０％メタノール／　ＤＣＭ）による精製により１．７２　ｑの３ ′−アミノ−３′−デオキシチミジンを明るい黄色の固形物として得た。

ＮＩＩＲ（３００１１Ｈｚ、　ｄ、−ＤＩＩＳＯ）６７．７６（ｓ、ＩＨ）、　６．０７（ｔ、Ｉｌｌ、Ｊ＝６Ｈｚ）、　４．９７（ｍ、１［１）、３．５−３．７（ｍ、　３■）、３．３９（ｑ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、３．３３（ｂｒ、２Ｈ）、１．９−２．１５（鳳、２Ｈ）、１．７７（ｓ、３［１）。

１０＠ｌのメタノール中における１、　０４ｇの３′−アミノ−３′−デオキシチミジン、０．９０ｓ＋１のトリエチルアミンおよび１．５ｉのエチルトリフルオロアセテートの溶液を窒素下、室温で２０時間撹拌した。蒸発させることにより生成物を得、これは精製することなしに使用した。サンプルをシリカ上におけるカラムクロマトグラフィー（１〜２０％メタノール／ＤＣＭ）に付して純粋な３′−トリフルオロアセアミド−３′−デオキシチミジンを得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄａ−ＤＭＳＯ）δ１１．３３（ｂｒｌＨ）、　９．８４（ｂｒ、ＬＨ）。

７．７６（ｓ、ＩＨ）、６．２６（ｔ、ｔＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　５．１５（ｔ、ＩＨｊ＝５Ｈｚ）。

４．４７（ｍ、ＩＨ）、３．８９（ｍ、ＩＨ）、３．６（ｓ、２１１）、２２− ２７（，２Ｈ）。

１、７８（ｓ、　３Ｈ）。

ピリジン中における粗製３′−トリフルオロアセアミド−３′−デオキシチミジンの溶液に１．２■ｌのトリエチルアミン、０．１０ｇのＮ、Ｎ−ジメチルアミノピリジンおよび２．２ｇのジメトキシトリチルクロライドを窒素下で加えた。

１８時間撹拌した後、溶媒を蒸発させた。暗色の油状物を半飽和重炭酸塩およびＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜７％メタノール／　ＤＣＭ）による精製により２．１８　ｑの純粋な５′−ジメトキシトリチル−３’−トリフルオロアセトアミド−３′−デオキシチミジンを黄色の固形物として得た。

ＮＭＲ（３０θＭＨｚ、　ＣＤＣら）６８．８９（ｂｒ、ＬＨ）、　８．３１（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、７．６５（ｓ、１［１）、　７．２−７．４５（ｍ、９Ｂ）、６．８４（ｄ、４１１．Ｊ＝９Ｈｚ）、　６．５１（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７＋１ｚ）、　４．７２（ｍ、ＦＨ）、　４．０９（ｍ、ＩＨ）。

３．７８（ｓ、６Ｂ）、　３．５３（■、２Ｈ）、　２．４５（ｓ、２ｆｌ）、　１．６４（ｓ、３ｔｌ）。

メタノール中における１、　５４９の５′−ジメトキシトリチル−３′−トリフルオロアセトアミド−３′−デオキシチミジンの溶液を室温でアンモニアガスで飽和した。反応容器を４日間密閉した。溶媒を蒸発させた後、残留物をシリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜１０％メタノール／　ＤＣＭ）により精製して１．１７９の３′−アミノ−５’　−０−ジメトキシトリチル−３′−デオキシチミジンを得た。

ＮＭＲ（３００１１Ｈｚ、　ｄ、−ＤＭＳＯ）δ７．５１（ｓ、ＬＨ）、７．２ −７．４５（ｍ。

９０）、　６．８８（ｄ、４Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　６．１４（ｔ、ＩＯ，Ｊ＝６Ｈｚ）、　３．７４（ｓ。

６１）、３．６８（ｍ、ＩＨ）、３．５０（ｑ、１■、Ｊ＝７Ｈｚ）、３．３３（ｂｒ、２Ｈ）。

３．２１（ｍ、２１］）、２．２１（ｍ、ＩＨ）、２．０３（ｍ、ＩＨ）、１．４７（ｓ、３１１）。

実施例４と同様にして、６０５重りの３′−アミノ−５′−〇−ジメトキシトリチル−３′−デオキシチミジン、２０冨ｌのＨＩＩＤＳ、　０．７８ｍＡ’のクロロスルホニルアジド（ＩＭ／アセトニトリル）および６ｔｌの無水アセトニトリルを使用して（１〜５％メタノール／ＤＣＭを用いるシリカ上での精製後）、２１７ｇｖの５′−ジメトキシトリチル−３′−スルファモイルアジド−３′− デオキシチミジンを明るいオレンジ色の固形物として得た。

！ＦＩＲ（３００）ＩＨｚ、ＣＤ（Ｊｓ）６７．５８（ｓ、ＩＨ）、７．２−７．４（ｍ、９ｇ）。

６．８５（ｄ、４Ｂ、Ｊ＝９Ｈｚ）、　６．５５（ｔ、１■、Ｊ−７Ｈｚ）、　４．３１（ｍ、１ｆｌ）。

４．２３（ｍ、ＩＥＩ）、　３．７８（ｓ、６Ｈ）、　３．５０（ｄｄ、１Ｂ、Ｊ−１１，３Ｈｚ）、　３．３９（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、　２．４６（ｓ、２Ｈ）、　１．４７（ｓ、３Ｈ）。

実施例７スルファメートの結合したダイマーｄ（ＡｓＴ）の製造７ｓ＋ｊ’の乾燥アセトニトリル中における４８０ｍｖの実施例４で得られた化合物および４９３すのＮ＠−ベンゾイル−５′−ジメトキシトリチル−２′−デオキシアデノシン（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）の混合物を幾らかの４人モレキュラーシーブスと一緒に２時間撹拌した。０．１７！のトリエチルアミンを反応に加え、そして１８時間撹拌した。混合物を濾過し、蒸発させた。シリカ上におｔするクロマトグラフィー（１〜７％メタノール／　ＤＣＭ）による精製により６２１ｍｇの（ＤＭＴＯ）＾” ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）を白色の固体として得た。

ＮＭＲ（３００ＭＩＨｚ、ｄａ−ＤＭＳＯ）δ１１．３３（ｓ、ＬＨ）、１１．２３（ｂｒ、ＬＨ）。

８．５８（ｓ、ＩＨ）、８．５７（ｓ、ＩＨ）、８．５１（ｂｒ、ＩＨ）、８．０５（＋、２Ｈ）。

７、５−７．７（ｍ、　４■）、７．３４（１１，２Ｈ）、７．２１（！１．７［１）、６．８０（ｄｄ、４１１゜Ｊ＝８．５Ｈｚ）、６．５２（ｔ、１１．Ｊ＝７Ｈｚ）、６．１４（ｔ、Ｉｎ、Ｊ＝７Ｈｚ）、５．２８（＠、１１）、４．３７（ｍ、２Ｈ）、３．８１（＋＊、１■）、３．７１（ｓ、６Ｈ）、３．２９（ｍ。

４１）、３．１４（ｄｄ、１１１．ＪＪ７．５Ｈｚ）、２．７８（＋、ＩＨ）、２．２６（ｌｉ。

ＩＨ）、２．０４（ｍ、１］１）、１．７７（ｓ、３１１Ｉ）、０．８７（ｓ、９１）、０．０９（Ｓ。

６ｔｌ）。マススペクトル（ＦＡＢ）　１０７５．４７ｍ／ｚ（Ｍ　＋　Ｈ）　、計算値（Ｃａ２Ｏｇ□Ｎ、０．　、ＳＳｉ　＋　Ｈとして）　１０７５．４０゜ＩＲ（Ｃ１ｌｚＣ１ｚ）３３ｇ０．　３１８０．　３０６０．　２９６０．　２９３０．　２８６０．　１６９５．　１６１０゜１５８５、　１５１０．　１３６０．　１１８０．１２５０ｃｍ−一完全に保護されたダイマーの（ＤｉｌＴＯ）　Ａ”ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）を１時間間隔での４つの等しいアリコートで全部で５ｔｌの１Ｍフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム／ＴＨＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）で処理した（ここで小さなＳはスルファメート結合を意味する）。最後の添加が終了した後、反応混合物を１時間撹拌した。溶液を１Ｍリン酸二水素ナトリウムおよび酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）に分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。粗生成物をシリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜７％メタノール／　ＤＣＭ）処理して４２０すの（ＤｉｌＴＯ）　Ａ ”５Ｔ（ＯＨ）を固形物として得た。

ＮＩＩＲ（３００Ｍｌｌｌｚ、　ｄｓ−ＤＭＳＯ）　Ｘ　１１．３１（ｂｒ、　１Ｂ）、１１．２２（ｂｒ。

ＬＨ）、　８．５８（ｓ、２Ｈ）、　８．４７（ｂｒ、ＩＨ）、　８．０３（ｍ、２Ｈ）、　７．４５−７．７（ｔ４Ｈ）、７．３４（ｍ、２１）、７．２０（蕩、７１１）、６．８１（ｄｄ、４１１．Ｊ＝８．５Ｈｚ）、６．５２（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、６．１４（ｔ、月１．Ｊ−７Ｈｚ）、５．３９（ｄ。

Ｉｎ、Ｊ＝５Ｈｚ）、５．２９（１，ＩＨ）、４．３８（ｍ、２ｆｌ）、４．１７（ｍ、１ｆｉ）。

３．８０（ｍ、１１１）、３．７２（ｓ、６Ｈ）、３．３（＊、４Ｈ）、３．１４（ｍ、１１１１）。

２．７９（ｍ、ＩＨ）、２．４（ｍ、１■）、２．１５ＣＩ１．ＩＨ）、１．７６（ｓ、３■）。ＩＲ（ＫＢｒ）３４００．　３１８０．　３０５５．　２９５５．　２９３０．　２８３０．　１６９０゜１６１０、１５８０．１５１０．１３６０．１２５０．１１８０ｃｍ−’０？ススベクトル（ＦＡＢ）　９６１．６６ＣＭ＋Ｈ）　、計算値（Ｃ４８Ｈ４８Ｎ１０１　ｚｓ＋Ｈとして）９６１．０？。

５ｔｌのアセトニトリル中１こおける１０２冨９の（Ｄ）ＩＴＯ）＾”５Ｔ（０１１）の溶液に０．２２ｓｊ！のジクロロ酢酸を加えた。オレンジ色の溶液を室温で１５分間撹拌した。反応溶液を半飽和重炭酸塩中に注いだ後、生成物をＥｔＯＡｃ　（２ｘ　４０ｍｊ７）で抽出した。合一した有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜１０％メタノール／ＤＣＭ）による精製により６８りの（■０）＾”ｓＴ　（ＯＨ）を得た。

ＮＩＩＲ（３００１１Ｈｚ、　δ６−ＤＭＳＯ）δ１１．３３（ｂｒ、ＩＨ）、１１．２６（ｂｒ。

Ｉｎ）、　８．７７（ｓ、１１１）、　８．７０（ｓ、１ｆｌ）、　８．４７（ｂｒ、１１１）、　８．０６（ｄ。

２■、Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．６６（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．５９（ｓ、１ｔｌ）、　７．５５（ｄ。

２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．５２（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、６．１８（ｔ、１１１．Ｊ＝７Ｈｚ）。

５．４１（ｄ、ＩＢ、Ｊ＝５Ｈｚ）、　５．３２（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝５Ｈｚ）、　５．２３（＋＊、ＨＩ）。

４．２５（ｍ、Ｈｌ）、　４．１９（ｍ、１■）、　３．８２（ｍ、１ｆｌ）、　３．６５（ｍ、２Ｈ）。

３．０−３．３（＋＊、３Ｈ）、２．７８（論、ＩＨ）、２．０−２．３（ｍ、２Ｈ）、１．７９（ｓ。

３■）ｏ　ＩＲ（ＫＢｒ）３４２０．１６９０．１６２０．１５８５．１３６０．１１７５ｃｓＩ−’。

マススペクトル（ＦＡＢ）測定値６５９．２３（Ｍ　＋　Ｈ）　、計算値（Ｃｚ７■ｓ。ＮｓＯ＋ｏＳ＋Ｈとして）　６５９．１９゜３慮ｌのメタノール中における３１冨すの（ＨＯ）Ａ”５Ｔ（０■）のスラリーを室温においてアンモニアガスで飽和した。反応を密閉し、４時間５５℃まで加熱した。溶媒を蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（メタノール／　ＤＣＭグリシエンド）による精製により１９冨すのｄ（ＡｓＴ）を得た。

ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、　ｄ、−ＤＭＳＯ）δ〔部分スペクトル１８．３４（ｓ。

ＩＨ）、　８．１４（ｓ、ＬＨ）、　７．３５（ｓ、ＬＨ）、　７．４１（ｂｒ、２Ｈ）、　６．３７（ｄｄ。

ＩＩｌ、　Ｊ＝９．６■ｚ）、　６．１７（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、　５．６７（ｂｒ、ＩＨ）、　５．３９（ｄ。

ＩＨ，Ｊ−５Ｈｚ）、　５．１８（ｍ、１Ｂ）、４．２（ｍ、２Ｈ）、　３．８１（ｇ＋、ＩＨ）、　３．６３（ｉ、２１１）、　３．１９（ｍ、ＩＨ）、　３．０１（ｍ、１１１）、　２．６６（ｍ、ｌ１ｌ）、　２．１８（ｍ。

１１１）、　１．７８（ｓ、３Ｂ）。

実施例８スルファメートエステルの結合したｄＡ−ヌクレオシドダイマーｄ（ＡｓＴ）の製造０、５＊ｌのアセトニトリル中における５７ｍｐ（０，１０ミリモル）の実施例１で得られた化合物および６５ｍｇ（０，１０ミリモル）のＮｓ−ベンゾイル− ５′−ジメトキシトリチル−２′−デオキシアデノシン（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）の混合物を窒素下、室温で撹拌した。０．０２８ｓ＋１！（０，２ミリモル）を加え、反応混合物を２０時間撹拌した。混合物を蒸発させ、シリカ上において精製（１〜３％メタノール／ＤＣＩＩ）　シた後、８７りの完全に保護されたダイマーの（ＤＩＴＯ）＾”ｓＡ”（ＯＴＢＤＩＩＳ）を得た。

ＮＭＲ（部分スペクトル）　（３００ＭＨｚ、　ｄｉ−ＤＭＳＯ）δ１１．２３（ｂｒ。

２Ｈ）、８．６６（ｓ、ＩＨ）、８．６５（ｓ、ＬＨ）、８．５８（ｓ、ＬＨ）、８．５６（ｓ。

１１１）、８．５６（ｂｒ、ＩＨ）、８．０４（ｄ、４１１．Ｊ＝８Ｈｚ）、７．５−７．７（＋ｓ。

６Ｈ）、７．１５−７．３５（ｍ、９Ｈ）、６．７７（ｄｄ、４１．Ｊ＝８．６Ｈｚ）、６．５３（ｔ。

１［１，Ｊ＝７Ｈｚ）、６．４７（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、５５−２７（、ＩＨ）、４．６４（ｍ。

ｌ■）、４．３４（ｍ、ｌ■）、４．０１（ｉ、ＬＨ）、３．６８（ｓ、６Ｈ）、３．０２（＋ｗ。

１Ｂ）、２．７８（ｍ、ＬＨ）、２．３６（ｍ、ＩＨ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、Ｏ，Ｌ５（ｓ。

６Ｈ）。

５１ｍａ（７）　（ＤＭＴＯ）　Ａ”ｓＡ”（ＯＴＢＤＩＩＳ）ヲＭ　素工、１　時間間隔での３つのアリコートで全部で１．５黛１の１Ｍフッ化テトラ−ｎ− ブチルアンモニウム／ＴＨＦを加えて処理した。

フッ化物試薬の最後の添加の終了後、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応溶液を１Ｍリン酸二水素ナトリウムおよびＥｔＯＡｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。シリカ上におけるカラムクロマトグラフィー（１〜６％メタノール／ＤＣＭ）による精製により３６膳９の純粋な（ＤＩＴＯ）　ｄ（Ａｌ　ｘ　ＳＡ　ｌ　ｇ　）　（□Ｈ）を得た。

ＮＭＲ（３００ＭＩｌｚ、　ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１１．２２（ｂｒ、２Ｈ）、　８．６７（ｓ、ＩＨ）。

８、６５（ｓ、　１■）、　８．５８（ｂｒ、２■）、　８．５４（ｂｒ、１■ ）、　８．０５（ｄ、４１１．Ｊ−７Ｈｚ、　７．５−７．７（ｍ、６Ｈ）、　７．３３（ｍ、２Ｂ）、　７．２（ｍ、７Ｈ）、　６．７９（ｄｄ。

４１１、Ｊ＝７Ｈｚ）、６．５２（ｔ、ＩＨ，Ｊ−７Ｈｚ）、　６．４７（ｔ、１■、　Ｊ＝７Ｈｚ）。

５．５３（ｄ、ＬＨ，Ｊ＝５Ｈｚ）、　５．３７（ｍ、ＩＨ）、　４．４５（Ｉｌ、ＩＨ）、　４．３４（ａ＋。

ＩＦり、　４．０１（ｍ、ＩＨ）、　３．６９（ｓ、６Ｈ）、　３．１−３．５（＋ｓ、５Ｈ（ｅｓｔ、））。

２、７−２．９５（ｓ、　２［１）；　２．３８（ｍ、　１■）。

２１１１９の（ＤＭＴＯ）　（＾”ｓＡ”）（ＯＨ）を密閉容器中、室温で３日間、３富！の飽和ＮＯｘ／Ｎｅｏ■で処理した。溶媒を蒸発させ、その残留物を１＊ｌの８０％ｔｌＯＡｃ／水と一緒に室温で４５分間撹拌した。室温で真空ポンプ／回転蒸発器および水浴を用いて溶媒を蒸発した。ＨＰＬＣ［Ｃ８Ｒａ１ｎｉｎ　ｌＱｍｍＸ　２５ｃｍカラム（ガード付）、グラジェント＝１０〜６０％ＭｅＯｔｌ／水（直線）、流速＝　３．５Ｎｌ／分、試料を２０％ＭｅＯＨ／水に溶解した。６ｃは２１．２分で溶離した］により純粋なｄ（Ａｓ＾）が得られた。

ＮＩＲ［部分スペクトル］（３００麗ｆｉｚ、　δ４−Ｍｅａｎ、すべての化学シフトは３．３０のＭｅＯＥＩと相対的）δ８．２３（ｓ、ｌ１１）、８．２０（ｓ。

ＩＩ）、　８．１９（ｓ、ＬＨ）、　８．１１（ｓ、ＬＨ）、　６゜３７（ｍ、２Ｈ）、　５．２２（ｄ、ＩＨ。

Ｊ＝６Ｈｚ）、４．５９（ｍ、１１１）、４Ｊ３（ｇ＋、１ｔ［）、４．１６（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ＝７．４ｔｌｚ）、　３．７４（ｄｑ、２Ｈ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ）、　３．４７（ｍ、２１１）、　２．８５−３．０（ｍ、２１１）、　２．６９（ｄｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝１３．６．１．５■Ｚ）、　２．３７（ｄｄｄ、ＩＨ。

Ｊ＝１３．６．３Ｈｚ）。

実施例９リポヌクレオシドの２′−または３′−位に結合されたスルファメートを有するオリゴヌクレオチドＩ：（（Ｐｈ）３ＣＯ）　［ｒＵ］ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）：ｌの製造２、５＊ｌの無水アセトニトリル中における２０１］＋ｇの５′−トリチルウリジン（ＳｉｇＩＩａ社製）および１８９ｇｗの３’−０−を−ブチルジメチルシリル−５′−スルファモイルアンド−５′−デオキシチミジン（実施例４で得られたもの）の溶液に窒素下で０．　ｌｌ＋＋ｊ’のトリエチルアミンを加えた。

室温で２０時間撹拌した後、溶媒を蒸発させ、そして残留物をシリカ上におけるクロマトグラフィー（１〜７％メタノール／　ＤＣｌｌ）により精製して８１ｍｆの主生成物をＴＬＣ上で１点として得た。分析用ＨＰＬＣは５０：５０混合物の生成物を示した。分取用１１１ＰＬＣ［ガード付Ｃ８１０ｘ　２５ｍｍカラム（Ｒａｉｎｉｎ）グラジェント：２５分間にわたって８０〜９０％のメタノール１０．１Ｍ重炭酸トリエチルアンモニウム、流速＝４ｍｌ／分、サンプル：１０〜１５ｍｇ／注入〕により純粋な（（Ｐｈ）３ＣＯ）［ｒＵ）ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）　（２’−位結合）および純粋な（（Ｐｈ）３ＣＯ）（ｒＵ）ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）　（３’−位結合）が得られた。

２′−位結合：保持時間＝１６．６１分；　ＮＭＲ（３００Ｍｔｌｚ。

ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１１．４７（ｂｒ、　１■）、　１１．３４（ｂｒ、ＩＨ）、　８．３９（ｂｒ。

ＩＨ）、　７．６９（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．２５−７．４（ｍ、１５Ｈ）、　６．１５（ｄｄ、１１１゜Ｊ＝７．６Ｈｚ）、　５．９３（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝４Ｈｚ）、　５．７１（ｍ、１ｆｌ）、　５．４９（ｄ、ＬＨ。

Ｊ＝８Ｈｚ）、　５．０１（ｍ、ＬＨ）、　４．４２（ｔｌＨ）、　４．３６（ｍ、ｌ１ｌ）、　３．９９（ｍ。

ＬＨ）、　３．７８（ｍ、１ｔｌ）、　３．２３（ｍ、２Ｈ）、　２．２５（ｍ、ＩＨ）、　２．０３（ｍ。

ＩＨ）、　１７７（ｓ、３Ｈ）、　０．８７（ｓ、９１Ｔ）、　０．０９（ｓ、６Ｈ）。

３′−位結合：保持時間＝１８．１５分；　ＮＭＲ（３００ＭＩｌｚ。

ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１１．４６（ｂｒ、ＩＨ）、　１１．３３（ｂｒ、ＩＨ）、　８．３７（ｂｒ。

ｌ■）、　７．６５（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝９■ｚ）、　７．３５−７．５（ｗ、１６Ｈ）、　６．１３（ｄｄ、ＩＨ。

Ｊ＝８．６Ｈｚ）、　６．０７（ｂｒ、１１１）、　５．７９（ｄ、１ｔ１．Ｊ＝６Ｈｚ）、　４．８７（ｍ。

ｌ１ｌ）、４．４７（＋ｓ、ＬＨ）、４．３４（ｉ、ＩＨ）、４．２９（ｍ、ＩＨ）、３．８０（ｍ。

ＬＨ）、　３．１−３．４（ｍ、７Ｈ）、　２．２４（Ｉｌ、ＩＨ）、　２．０３（ｍ、Ｌｌｌ）、　１．７６（ｓ、１■）、　０．８７（ｓ、９Ｈ）、　０．０８（ｓ、６Ｈ）。

実施例１０スルファメートエステルの結合したブロックダイマーホスホラミジット［（ＤｌｌＴＯ）＾”５Ｔ（ＯＰ（ＯＣ１ｌ１２ＣＨ２ＣＮ）Ｎ（ｉＰｒｚ））］の製造２９４冨９の（ＤＩＩＴＯ）Ａ”５Ｔ（Ｏｌｌ）を３璽ｌの乾燥ＤＣ旧こ溶解した後、１１６ｊＡ’の２−シアノエチルＮ、　Ｎ、　Ｎ’　、　Ｎ’−テトライソブロピルホスホロジアミジット（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）および３１＊９のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド塩（等量のテトラゾールとジイソプロピルアミンを混合することにより製造した）を加え、混合物を１時間撹拌した。ＴＬＣ（１０％メタノール／　ＤＣＭ）によれば反応は完了していなかった。さらに６０ｐｌの４ｄおよび１５すのテトラゾール塩を加え、撹拌をさらに１時間継続した。反応溶液を半飽和重炭酸塩およびＥｔＯ＾Ｃに分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させた。生成物をシリカ上におけるクロマトグラフィー（０，５％ピリジンとともに１〜５％メタノール／ＤＣＭ）処理して４５２ｍ＋９の準純粋な（ＤＭＴＯ）＾’　”５Ｔ（ＯＰ（ＯＣＩＩＩｚＣＨｔＣＮ）Ｎ（ｉＰｒｚ））を得た。この物質を３ｍＭのＤＣ旧こ溶解し、これを１５０ｍ１のペンタンに一７８℃で撹拌しながら加えた。沈殿物を濾過し、集めた。

この操作を１回繰り返した。乾燥ピリジン（２Ｘ）、次いで乾燥トルエンから白色の固形物を蒸発させた。（ＤＭＴＯ）＾”　５Ｔ（ＯＰ（ＯＣｔｈＣｌｈＣＮ）Ｎ（ｉＰｒｚ））を白色の固形物として得た（さらに精製することなしに用いた）。

”Ｐ　Ｎ１１Ｒ（３００１１Ｈｚ、ｄｓ−ＤＭＳＯ）δ１５１．１３３（ｓ）、　１５０．５９６（ｓ）（１５−２１ｐｐａ＋における少量の不純物）　：　’ ＨＮＭＲ（３００１１ｔｌｚ。

ｄ、−ＤＭＳＯ）δ１１．３３（ｂｒ、ＬＨ）、　１１．２１（ｂｒ、ＩＨ）、　８．５８（ｓ、２■）。

８．５２（ｂｒ、ＩＨ）、８．０３（ｍ、２Ｈ）、７．１−７．７（ｍ）、６．８０（ｍ、４１１）。

６．５２（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）、６．１５（ｔ、ＬＨ１Ｊ＝７Ｈｚ）、５．１８（ｍ、ＩＨ）。

４．４６（ｍ、ＩＨ）、４．３７（ｍ、ＬＨ）、３．９−４．１（鳳）、２−８８（ｔ、２１１．Ｊ−６Ｈｚ）、２．７７（ｑ、２ｔｌ、Ｊ＝６［１ｚ）、２．２（ｍ、ＩＨ）、１．７６（ｓ、３Ｈ）。

１、１７（１１）。マススペクトル（ＦＡＢ）測定値１１６１．７６（Ｍ　＋　Ｈ）。

計算値（Ｃ５７Ｈ８５Ｎｌ。０．３ＰＳ＋Ｈとして）　１１６１．４３゜実施例１１単一のスルファメート結合を有するオリゴデオキシリボヌクレオチドの製造オリゴデオキシヌクレオチド”　ｄ（ＧＣＧＴＧＣＡＴＧＣ［ＡｓＴ）ＣＧＴＡＣＧ）”　（９ｃ）はＣ０ＤＥＲ自動ＤＮＡ合成器で１ミクロモルスケールでＸの入口に置いた０、１Ｍアセトニトリル溶液中における（実施例１０で得られた）ブロックダイマーホスホラミジット（（ＤＩＩＴＯ）Ａ”５Ｔ（ＯＰ（００ｂＧＨｚＣＮ）Ｎ（ｉＰｒｚ）））を用いての標準的なプロトコルにより合成した。２７％水酸化アンモニウムを用いて１時間かけてゆつ（りと溶離しながらオリゴマーを固体の支持体から切断した。この溶液を密閉した容器に入れ、４時間５５℃まで加熱した。回転蒸発器で蒸発させた後、粗生成物を直線状グラジェントの５〜１５％アセトニトリル１０．１Ｍ酢酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＡ）を用いる■ＰＬＣ（Ｃ８カラム、　ｌＱｍｍＸ２５ｃ＋ｓ）により精製した。

油状の生成物を５０％エタノール／水から蒸発させて、白色の粉末を得た。精製した生成物は９．００分の保持時間（Ｃ８分析用１０Ｃｍカラム、　１．０ｗ１１分。

１５分間にわたる５〜２０％ＣＨ，ＣＮ１０．１Ｍ　ＴＥＡＡ）を有した。

５、０００ｓ　９ｃ／　ａｒｔの水（滅菌）を含むストック溶液を調製し、フリーザーに保存した。

実施例Ｉ２単一のスルファメート結合を有する１対のオリゴデオキシリボヌクレオチドのアニーリング使用した緩衝剤はｐＨ１７，００で、２００＋＊ＩＩの塩化ナトリウムおよびＱ、　１ｍＭのＥＤＴＡを含む１ｂＭのリン酸ナトリウム水溶液である。参照用細胞はこの緩衝剤を含んだ。相補的鎖（それぞれ１．５μＭ）を１５℃でアニールし、次に２６０ｎｍにおけるＵｖ吸収を温度が７５℃まで上昇（０，４℃／分）するにしたがって測定した。得られた融解曲線を図１に示す。ダイヤモンド形の印はオリゴヌクレオチド対９ａ　：　９ｃ　（Ｔｏｌ＝６８℃と推定した）のデータであり、そして正方形の印はオリゴヌクレオチド対９ｂ　：　９ｄ　（Ｔｓ＋＝　７２℃と推定した）のデータである〔オリゴヌクレオチド配列９ａ、　９ｂおよび９ｄについては下記を参照〕。

実施例１３単一のスルファメート結合を有するオリゴデオキシリボヌクレオチドのエキソヌクレアーゼ耐性の証明使用した酵素ストック溶液は１．８ユニツト／諺ｌの５ｖＰ（ホスホジェステラーゼＩ、５１ｇ１ａ社製）および１４７ユニツト／ａｌｌのＡＰ（アルカリ性ホスファターゼ、　Ｓｉｇｍａ社製）である。使用した緩衝剤溶液はトリス（１００ｍ１１．　ｐＨ９）およびＭｇＣｈ　（５０１Ｍ）である。消化はｌ、　５ｍＭのエツペンドルフ管中において０．１絶対ユニツトの実施例１４で得られた化合物を２５．６＋＋Ｊのトリス緩衡剤、　２７ｊｌのＭｇ（Ｊ、緩衝剤。

１０μｌのＳｖＰストック溶液および１３．６μｌのＡＰスト・ツク溶液とともに３７℃で１８時間インキュベートすること薯こより行なった。次に、１０μ！の２．５Ｍ酢酸ナトリウム、次０で２５０μｌのエタノールを加えた。３０分間、−７８°まで冷却し、遠心分離（１２Ｋ　ｒｐｍ、　ＩＱ分）した後、上澄み液をエタノールでｌ＋＋１に希釈して、再び遠心分離した。上澄み液を集め、高速真空で蒸発させた。残留物をｌ、　Ｑｍｌの滅菌水に再溶解し、分析するまでに４°で保存した。図２ａｉ：ｄＣ。

Ｔ、　ｄＧおよびｄＡの標準混合物をＨＰＬＣクロマトグラムを示す。図２ｂにオリゴデオキシヌクレオチド９Ｃの長期の消化から得られた生成物混合物ＨＰＬＣクロマトグラムを示す。

スルファメートエステル結合を有するＯＤＮが長時間消化される場合、ブロックダイマーがそのまま現われることがわかる。別に合成した全体的に脱保護されたブロックダイマーｄ（ＡｓＴ）　（実施例１９参照）のサンプルのＨＰＬＣクロマトグラムにより、〔八ｓＴ）とラベルしたピークが合成物質と同じ保持時間を有することが確認された。このことはスルファメートエステル結合がエキソヌクレアーゼに対して非常に耐性があることを示している。

実施例１４単一のスルファメート結合を有するオリゴデオキシ１ノボヌクレオチドの二重鎖のエンドヌクレアーゼ耐性の証明オリゴヌクレオチド９ａは実施例Ｈ（９ｃ）の記載のようにして合成した。オリゴヌクレオチド９ｂおよび９ｄは当業者によく知られている標準方法により合成した。追加の配列は次のようである：９ａ　”ｄ（ＣＧＴＡＣＧＡＴＧＣ（ＡｓＴ）ＧＣＡＣＧＣ）”９ｂ　ｓ′ｄ（ＣＧＴＡＣＧＡＴＧＣＡＴＧＣＡＣＧＣ）”９ｄ　”ｄ（ＧＣＧＴＧＣＡＴＧＣＡＴＣＧＴＡＣＧ）”４つのオリゴマー鎖９ａ〜９ｄ（１０〜１００ピコモル末端）のそれぞれを、Ｔ４ポリヌクレオチドキナーゼ（１０ユニツト）を用いてγ −”Ｐ　ＡＴＰ　（３０００ＣＬ／ミリモル）で５′−末端を標識した。鎖をフェノール：クロロホルム抽出、クロ０　ホ／Ｌ／ム抽出、エーテル抽出および２回連続のエタノール沈殿により精製した。過剰のＡＴＰを標準プロトコルに従ってＮＡＣ３Ｐｒｅｐａｃカラム（ＢＲＬ社製）を用いて除去した。

５′−末端が標識された一重鎖オリゴマー（１２，ＯＯＯｃｐｍ、〜１ピコモル）を５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ　（ｐＨ８，０）　、１ｈｌｌのＭｇＣ１，および１００ｍＭのＮａＣ１を含む１１＋ｉ’の緩衝剤中においてその未標識補体（１０ピコモル）にアニールした。混合物を１５分間、８０℃まで加熱し、次いで６０分間ゆっくりと室温まで冷却した。制限エンドヌクレアーゼＮｓｉ　Ｉ　（１０ユニツト／ｌｘ／）および７ａｌの酵素反応緩衝剤をそれぞれのアニールしたサンプルに加えた。二重鎖ＤＮＡおよびＮ５ｉ１混合物を３７℃で６０分間放置した。１０μｌの７．５Ｍ酢酸アンモニウム、１μｌのｔＲＮ＾および９０ｇ１の１００％エタノールを添加して、サンプルをエタノール沈殿した。サンプルを室温下、１４．００Ｏｒｐｍで１５分間遠心分離し、上澄み液を除去し、そしてＤＮＡベレットを真空乾燥した。サンプルを８０％脱イオン化ホルムアミド、０．１％キシレンシアツールおよび０．１％ブロモフェノールブルーを含む３μ ！のホルムアミド色素中で再び懸濁し、そして２０％変性ポリアクリルアミドゲル上にのせた。サンプルを２時間、２０００Ｖの電気泳動にかけた。釣５ルを一７０℃で８〜２４時間、Ｋｏｄａｋ　ＸＡＲフィルムにさらした。その結果を図３に示す。

レーン１および２はそれぞれ鎖９Ｃおよび９ｄにアニールされた鎖９ａを含み：レーン３および４はそれぞれ鎖９Ｃおよび９ｄにアニールされた鎖９ｂを含み：レーン５および６はそれぞれ鎖９ｂおよび９ａにアニールされた鎖９Ｃを含み、レーン７および８はそれぞれ鎖９ｂおよび９ａにアニールされた鎖９ｄを含む。

−８−はスルファメート結合を示し、そして−Ｐ−はリン酸ジエステル結合を示す。

実施例１５ポリＵを用いたスルファメートの結合のＡ−ヌクレオシドダイマーのアニーリング使用した緩衝剤は塩化マグネシウムおよびトリス（塩基）の１０ｍＭ溶液で、そして０．１Ｍ　ＨＣＩでｐｔ１７．５に調整した。

参照用細胞はこの緩衝剤を含んだ。サンプル細胞は１．００ｍ１の緩衝剤中、０．６６０００ユニツトのポリＵ　（ＳｉｇＩＩｌａ社製）および０．３３００Ｄユニツトのｄ−ＡｓＡを含んだ。細胞を０．６℃で１時間平衡化し温度を１℃／分で傾斜させた。融解曲線を図４に示す。３５％の淡色効果を伴ないＴ１１は１５〜１８℃と推定した。その対応する天然のリン酸ジエステルダイマー、ｄ−ＡｐＡの報告された文献値は７．６℃である（参考文献２５）。本実施例により、スルファメート結合（複数回）だけを含むオリゴデオキシヌクレオチドがハイブリッド形成されてその相補的未修飾体となりうることおよびそのハイブリッドがより大きな安定性を有しうることが証明される。

実施例１６リボヌクレオチドの２′−位または３′−位に結合された場合におけるスルファメートの安定性の証明３ｍｌの２７％水酸化アンモニウム中における１諺すの３ ′−位に結合された（（Ｐｈ）３ＣＯ）　［ｒＵ］５Ｔ（ＯＴＢＤＩＩＳ）（実施例９で得た）の溶液を密閉した容器中、室温で２４時間インキュベートした。

溶媒を蒸発させた。残留物をＨＰＬＣ［ガード付Ｃ１８Ｒａｌｎｉｎ分析用カラム（４，６＋＋＋ｍＸ２５ｃｍ）　、流速１．５ｍｌ／分および１５分間にわたる直線状グラジェントの８０〜９０％メタノール／水〕により分析した結果、１２−３７５分におけるピークの何れも２′−位に結合された（（Ｐｈ）３ＣＯ）　（ｒＵ］５Ｔ（ＯＴＢＤＮＳ）　（保持時間１１．１１０分）に変換されたものではない。２′−位に結合された（（Ｐｈ）３ＣＯ）　［ｒＵ）ｓＴ（ＯＴＢＤＭＳ）の１りのサンプルを同様に処理した場合もまた、平衡化はまったく見られなかった。このことはスルファメートの結合したオリゴリボヌクレオチド誘導体が切断および移動に関して塩基安定性であることを証明している。

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Ｍ、Ｂｕｃｋ、Ｎｕｃｌ、Ａｃ１ｄｓ　Ｒｅｓ、、１７．　４７６９−４７８２　（１９８９年）。

１３、Ｍ、Ｍａｔｓｕｋｕｒａ、Ｋ、５ｈｉｎｏｚｕｋａ、Ｇ、Ｚｏｎ、Ｈ，１ｌｉｔｓｕｙａ。

Ｍ、　Ｒｅ１ｔｚ、　Ｊ、　Ｓ、　Ｃｏｈｅｎ、およびＳ、　Ｂｒｏｄｅｒ、　Ｐｒｏｃ。

Ｎａ　ｔ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、ＵＳＡ、　８４．７７０６−７７１０　（１９８７年）。

１４、　Ｐ、Ｊ、Ｆｕｒｄｏｎ、Ｚ、Ｄｏｓ＋１ｎｓｋｉ、およびＲ，ＫａＬｅ。

Ｎｕｃｌ、　Ａｃ１ｄｓ、　Ｒｅｓ、、１７．９１９３−９２０４　（１９８９年）。

１５、　Ｗ、　Ｋ、−Ｄ、　Ｂｒ１ｌＬ、　Ｊ、　−Ｙ、　Ｔａｎｇ、　Ｙ、　 −Ｘ、　Ｈａ、およびＭ、Ｂ、Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ、Ｊ、Ａｍｅｒ、ＣｈｅＩｌ、Ｓａｃ、、１１１゜２３２１−２３２２　（１９８９年）。

１６、Ｊ、　Ｍ、　Ｃｏｕｌｌ、　Ｄ、　’ｉ、　Ｃａｒｌｓｏｎ、およびＨ，Ｌ、　Ｗｅｉｔｈ。

Ｔｅｔ、　Ｌｅｔｔ、、２８．　７４５−７４８　（１９８７年）。

１７、　Ｅ、　Ｐ、　５ｔｉｒｃｈａｋ、　Ｊ、　Ｅ、　Ｓｕｓｍｅｒｔｏｎ、およびり、　Ｄ。

冒ｅｌｌｅｒ、　Ｊ、　Ｏｒｇ、Ｃｈｅｗ、、５２．　４２０２−４２０６（１９８７年）。

１８、Ｓ、＾ｇｒａｗａ１．　１．　Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ、Ｍ、Ｐ、Ｃ１ｖｅｉｒａ、＾、ｉｌｌ。

Ｔｈｒｏｎｔｏｎ、　Ｐ、　Ｓ、　５ａｒｉｎ、およびＰ、Ｃ，Ｚａｍｅｃｎｉｋ。

Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ、Ａｃａｄ、Ｓｃｆ、ＵＳＡ、８５．　７０７９−７０８３　（１９８８年）。

１９、Ｍ、＋１．　Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ、Ｗ、Ｋ　−Ｄ、Ｂｒ１ｌｌ、Ｙ、−Ｘ、Ｈａ、ｊＳ、　Ｍａｒｓｈａｌｌ、　Ｊ、　Ｎ１ｅｌｓｅｎ、　Ｈ，Ｓａｓｍｏｒ、およびＪ。

−Ｙ、Ｔａｎｇ、Ｊ、Ｃｅ１１．　Ｂｉｏｃｈｅｍ、、５ｕｐｐ、１３０．　１７（１９８９年）。

２０、１９８９年４月１６〜２１日に英国シェフイールドで開かれた’Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　５ｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃ１ｄｓ”の会議においてＣ，Ｂｌｏｎｓｋｉにより提示されたポスター。

２１、　Ｄ、　Ａ、　Ｓｈｕｍａｎ、　Ｒ，に、　Ｒｏｂｉｎｓ、およびＭ、　Ｊ、　Ｒｏｂｉｎｓ。

Ｊ、　Ａｍｅｒ、　ＣｈｅＩｌ、　Ｓｏｃ、、　９１．３３９１−３３９２　（１９６９年）。

２２、　Ｇ、　Ｒ，Ｇｏｕｇｈ、　Ｄ、　Ｎ、　Ｎｏｂｂｓ、　Ｊ、　Ｃ，Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ、　Ｆ。

Ｐｅｎｇｌｉｓ−Ｃａｒｅｄｅｓ、および菖、Ｈ，Ｍａｇｕｉｒｅ、　１．　Ｗｅｄ。

Ｃｈｅｔａ、、２１．　５２０−５２５　（１９７８年）。

２３、　Ｋ、　ｌ５ｏｎｏ、　Ｍ、　Ｕｒａｍｏｔｏ、　Ｉｌ、　Ｋｕｓａｋａｂｅ、　Ｎ、　Ｍｉｙａｔａ。

Ｔ、　Ｋｏｙａｔａａ、　Ｍ、　ｔｌｂｕｋａｔａ、　Ｓ、　Ｋ−５ｅｔｈｉ、およびＪ。

＾９ＭｃＣ１ｏｓｋｅｙ、　Ｊ、＾ｎｔｉｂｉｏｔ、、　３７．６７０−６７２　（１９８４年）ａ２４、菫、Ｕｂｕｋａｔａ　およびに、ｌ５ｏｎｏ、Ｔｅｔ−Ｌｅｔｔ、、２７゜３９０７−３９０８　（１９８６年）。

２５、　Ｐ、　Ｓ、　１ｌｉｌｌｅｒ、　Ｋ、　Ｎ、　Ｆａｎｇ、　Ｎ、　Ｓ、　Ｋｏｎｄｏ、およびＰ、　Ｏ，Ｐ、　Ｔｓ’ｏ、　Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓａｃ、、　９３．６６５７−６６６５　（１９７１年）。

２６、Ｃｈａｒａｃｈｏｎ、Ｇ、、５ｏｂｏｌ、Ｒ，盲、Ｂ１５ｂａｌ、Ｃ，。

５ａｌｅｈｚａｄａ、Ｔ、、５ｉｌｈｏｌ、　Ｍ、、　Ｃｈａｒｕｂｕｌａ、Ｒ，。

Ｐｆｌｅｉｄｅｒｅｒ、　Ｗ、、　Ｌｅｂｌｅｕ、　Ｂ、および５ｕｈａｄｏｌｎｉｋ。

Ｂｉｏｃｈｅｔａｉｓｔｒｙ、　２９．２５５０−２５５５　（１９９０年）。

２７、　Ｚａａ＋ｅｃｎｉｋ、　Ｐ、　Ｒ−、Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ、　Ｊ、、　Ｔａｇｕｃｈｆ、　Ｙ、および５ａｒｉｎ、　Ｐ、Ｓ、、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、、　ＵＳＡ。

８３、　（１９８６年）　ｐｐ、　１０２８−１０３２゜２８、　ＩＴａｒｅｌ −Ｂｅｌｌａｎ、＾、　Ｆｅｒｒｆｓ、　Ｄ、　Ｋ、、　Ｖｉｎｏｃｏｕｒ、　Ｍ、。

Ｍｏ１ｔ、　Ｊ、Ｔ、、およびＦａｒｒａｒ、　１．Ｌ、、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、。

１４０、（１９８８年）　２４３１−２４３５゜、２９．　Ｗａｌｄｅｒ、　Ｒ，Ｙ、、およびＷａｌｄｅｒ、　Ｊ、　Ａ、、　（１９８８年）Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＩＪｓ＾、　８５．　（１９８８年）、　５０１１−５０１５゜３０、　Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃ１ｄ　５ｔｒｕｃｔｕｒｅｓ、　（１９８４年）　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　ｐｐ、　５１−１０４．１５９−２００゜３１、　Ｌａｍａｉｔｒｅ、Ｍ、、Ｂａｙａｒｄ、Ｂ、およびＬｅｂｌｅｗ、Ｂ。

（１９８７年）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、ＵＳＡ、８４．　６４８−６５２゜３２、”Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ：＾ｎｔｉｓｅｎｓｅ　ｒｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆ　Ｇｅｎｅ　Ｅｘｐｅｒｓｓｉｏｎ”、　Ｔｏｐｉｃｓ　ｉｎ　１ｌｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄＳｔｒｕｃｔｕｒａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　５ｅｒｉｅｓ、　ＣＲＣＰｒｅｓｓ　Ｉｎｃ、。

Ｂｏｃａ　Ｒａｔｏｎ、　Ｆｌｏｒｉｄａ　（１９８９年）。

３３、Ｓ、Ｂｅｎｎｅｒ、１０８９／１２０６０゜３４、　Ｐ、Ｓ、　Ｍｉｌ工ｅｒ、　Ｊ、　Ｙａｎｏ、　Ｅ、Ｙａｎｏ、　Ｃ，Ｃａｒｒｏｌｌ、　Ｋ。

Ｊｏｙａｒａｍａｎ、およびＰ、Ｔｓｏ、Ｂｉｏｃｈｅ＋ｓ、、１８．　５１３４−５１４３　（１９７９年）。

３５、　Ｒ，Ｂ、　ｆａｒｉｎｇ、　Ｎｕｃｌ、＾ｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、、１７．　１０２８１−１０２９３　（１９８９年）。

３６、Ｉ、Ｙａｍａｍｏｔｏ、Ｍ、５ｅｋｉｎｅ、およびＴ、Ｈａｔａ、Ｊ。

Ｃｈｅｗ、　５ａｃ−、Ｐｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ、！、　３０６−３１０（１９８０年）。

３７、　Ｃｈａｒｕｂａｌａ、　Ｕｈｌｍａｎｎ、　Ｂｅｔｅｒ、およびＰｆｌｅｉｄｅｒｅｒ。

５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　９６５　（１９８４年）。

３８、Ｔ、−３，Ｌｉｎ、Ｊ、Ｐｈａｒｍ、Ｓｃｉ、、７３．　１５６８−１５７０　（１９８４年）。

３９、　Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ：　Ａ　ＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ、Ｅｄ、ｂｙ　Ｍ、Ｊ、Ｇａ１ｔ、ＩＲＬ　Ｐｒｅｓｓ　Ｌｔｄ、。

ｆａｓｈｉｎｇｔｏｎ、　ＤＣ（１９８４年）。

図１融解曲線−１８マー　（ＮＳＩ　ｌ）図２ａ図３図４ｄ　（ＡｓＡ）対ポリＵ温度℃ 要　約　書本発明は治療的潜在能力において興味のもたれる１またはそれ以上のヌクレオチド間リン酸ジエステル結合が硫黄をベースとする結合により置換された新規なオリゴヌクレオチド類似体に関する。

閏１ｇ謹審謡専ｌヤ１１＋１１１１＋ｌｌ　Ａ１１ｍ＋４Ｊ１４１１　Ｎ。ＰＣＴ／ＵＳ　９１１０１０６６国際調査報告ＵＳ　９１０１０６６Ｓ＾　４５２２６

Claims

【特許請求の範囲】

１．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＨ、ＯＨ、ＯＲ８、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲ７ＮまたはＯであり、ＭはＳ（＝Ｏ）＝Ｏ、Ｐ（＝Ｏ）−Ｏ−、Ｐ（＝Ｏ）−Ｓ−、Ｐ（＝Ｓ）−Ｓ− 、Ｐ（＝Ｏ）−ＯＲ３、Ｐ（＝Ｏ）−Ｒ９、Ｐ（＝０）−ＳＲ４またはＰ（＝Ｏ）−ＮＲ５Ｒ６（ただし、少なくとも１個のＭはＳ（＝Ｏ）＝Ｏであり、そしてＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏである時、ＹおよびＺのうち１個だけがＯである）であり、ｎは１またはそれより大きいものであり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ１はＨ２ＰＯ３、Ｈ３Ｐ２Ｏ５、Ｈ４Ｐ３Ｏ７およびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ２はＨ２ＰＯ３、Ｈ３Ｐ２Ｏ５、Ｈ４Ｐ３Ｏ７およびこれらの適当な塩、Ｈまたは保護基であり、Ｒ３はアルキルまたはシアノエチルであり、Ｒ４はＨまたはアルキルであり、Ｒ５はＨまたはアルキルであり、Ｒ６はＨまたはアルキルであり、Ｒ７はＨまたはアルキルであり、Ｒ８はアルキルであり、Ｒ９はアルキルまたはシアノエチルであり、そしてＱは保護基である）を有する化合物。
２．ＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏであり、ＹまたはＺのうち１つがＲＮまたはＲ７Ｎであり、そしてＲまたはＲ７がＨである請求項１記載の化合物。
３．Ｒが５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
４．Ｒ３が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
５．Ｒ４が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
６．Ｒ５が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
７．Ｒ６が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
８．Ｒ７が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
９．Ｒ８が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
１０．Ｒ９が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１記載の化合物。
１１．Ａ置換基が２′−位にある請求項１記載の化合物。
１２．ＡがＨまたはＯＨからなる群より選ばれる請求項１記載の化合物。
１３．Ｂがアデニン、グアニン、シトシン、チミンまたはウラシルである請求項１記載の化合物。
１４．少なくとも１つのＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏであり、そして実質的に化合物の少なくとも１つの末端の近くである請求項１記載の化合物。
１５．ＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏである請求項１記載の化合物。
１６．ＭがＳ（＝Ｏ）＝ＯまたはＰ（＝Ｏ）−Ｏ−である請求項１記載の化合物。
１７．ＹまたはＺのうち１つがＲＮまたはＲ７Ｎであり、そしてＲまたはＲ７がＨである請求項１６記載の化合物。
１８．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＨ、ＯＨ、ＯＲ２、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲ１ＮまたはＯであり、Ｘは適当な脱離基であり、Ｑは保護基であり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ１はＨまたはアルキルであり、そしてＲ２はアルキルである）を有する化合物。
１９．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＨ、ＯＨ、ＯＲ２、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲ１ＮまたはＯであり、Ｘは適当な脱離基であり、Ｑは保護基であり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｒ１はＨまたはアルキルであり、そしてＲ２はアルキルである）を有する化合物。
２０．Ｘがハライド、アジドおよびスルホネートからなる群より選択される請求項１８または１９記載の化合物。
２１．Ｒが５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１８または１９記載の化合物。
２２．Ｒ１が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１７または１８記載の化合物。
２３．Ｒ２が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項１７または１８記載の化合物。
２４．請求項１８または１９記載の化合物をヒドロキシまたはアミノを含有するヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと接触させることを含む、ＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏである請求項１記載の化合物の製造法。
２５．金属触媒が使用される請求項２４記載の方法。
２６．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＨ、ＯＨ、ＯＲ４、ＯＱまたはハロゲンであり、Ｂは天然由来の核酸塩基または合成的に修飾された核酸塩基であり、ｎは少なくとも１であり、Ｒ１はアルキルであり、Ｒ２はジアルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノまたはピロリドノであり、Ｒ３はアルキルであり、Ｒ４はアルキルであり、ＹはＲＮまたはＯであり、ＺはＲＮまたはＯであり、ＲはＨまたはアルキルであり、Ｑは保護基であり、そしてＶは保護基である）を有する化合物。
２７．Ｖがジアノエチルまたはメチルである請求項２６記載の化合物。
２８．ＱがＣ１〜Ｃ５−トリアルキルシリル、Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、アシル、シアノエチルまたはテトラヒドロピランからなる群より選択される請求項１、１８、１９または２６記載の化合物。
２９．Ｒが５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項２６記載の化合物。
３０．Ｒ１が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項２６記載の化合物。
３１．Ｒ３が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項２６記載の化合物。
３２．Ｒ４が５以下の炭素原子を有するアルキルである請求項２６記載の化合物。
３３．請求項１記載の化合物を含有するアンチセンス試剤。
３４．請求項１記載の化合物を含有する抗ウイルス剤。
３５．請求項１記載の化合物を含有するハイブリッド形成プローブ。
３６．請求項１記載の化合物を含有する三重鎖剤。
３７．ＭがＳ（＝Ｏ）＝Ｏである場合にＹおよびＺの両方がＯである請求項１記載の化合物を含有するアンチセンス試剤。
３８．請求項３７記載の化合物を含有する抗ウイルス剤。
３９．請求項３７記載の化合物を含有する三重鎖剤。