JP2002543214A - Ｌ−リボ−ｌｎａ類縁体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】本発明は、新規なＬＮＡヌクレオシド類縁体類（Ｌ−リボ−ＬＮＡ類）及びＬ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド類縁体を含むオリゴヌクレオチド類を提供する。 【解決手段】一般式Ｉの少なくとも１つのヌクレオシド類縁体を含むオリゴマー、並びに、その塩基性塩及び酸付加塩： 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の属する技術分野】 本発明は、Ｌ−リボ配位をした二環式のヌクレオシド類縁体の分野に関し、そ
して、相補性の一本鎖及び二本鎖の核酸と共に、核酸塩基に特異的な二重らせん
を形成する能力がある、合成オリゴヌクレオチドの生成に有用なヌクレオシド類
縁体の合成に関するものである。本発明は、さらに、治療薬に使用したり、オリ
ゴヌクレオチドに組み込むことができる、Ｌ−リボ配位をした二環式のヌクレオ
シド類縁体の分野にも関する。 【０００２】 【従来技術】 合成オリゴヌクレオチドは、分子生物学、及び、ＤＮＡに基づいた診断や治療
のような、全く異質の分野で広く使われている化合物である。 【０００３】 （１）一般的な考察 オリゴヌクレオチドが、上述のような広い範囲の種々の応用分野で役立つため
には、多くの異なった要求を満たす必要がある。例えば、治療薬として、オリゴ
ヌクレオチドが有用であるためには細胞膜を浸透することができ、細胞内外のヌ
クレアーゼに対する抵抗力を有し、好ましくはＲＮＡｓｅＨのような内因性の酵
素を補充する能力を有する必要がある。また、ＤＮＡに基づいた診断法や分子生
物学では、例えば、ポリメラーゼ、キナーゼ、リガーゼ及びホスファターゼのよ
うな、天然の核酸に活発に作用する広い範囲にわたる種々の酵素に対する効果的
な基質として働くオリゴヌクレオチドの能力のような、他の性質も重要である。
しかし、これらすべての用途に共通するオリゴヌクレオチドの基本的な性質は、
Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ水素結合（Ａ−Ｔ及びＧ−Ｃ）、またはＨｏｏｇｓｔ
ｅｅｎ型のような他の水素結合機構に従って、相補性の一本鎖の核酸に特異的な
配列を認識して、ハイブリッドを形成する能力である。 オリゴヌクレオチドの
ハイブリッド形成の性質を特徴づけるのに通常使われる２つの重要な項目に、親
和性及び特異性がある。親和性は、オリゴヌクレオチドの相補性のある標的配列
との結合力を表わす尺度である（二重らせんの熱安定性（Ｔｍ）で表わされる）
。この二重らせんの個々の核酸塩基対が熱安定性を増加させ、このためオリゴヌ
クレオチドのサイズ（核酸塩基の数）が増大するに従って親和性は増加する。特
異性は、完全に相補性のある標的配列とミスマッチの標的配列とを識別する能力
の尺度である。換言すれば、特異性は、標的中のミスマッチの核酸塩基対と関連
する親和性の喪失を表わす尺度である。 【０００４】 一定のサイズのオリゴヌクレオチドの場合は、オリゴヌクレオチドとその標的
間のミスマッチの数が増える（即ち、ミスマッチのパーセンテージが増大する）
と共に、この特異性は増加する。逆に、ミスマッチの数が一定で、オリゴヌクレ
オチドのサイズが増大する（ 即ち、ミスマッチのパーセンテージが減少する）
と共に、特異性は減少する。換言すれば、オリゴヌクレオチドの親和性は、特異
性の犠牲の上に増大し、その逆も同様である。 【０００５】 天然のオリゴヌクレオチドの欠点を考えると、特異性と親和性を高める新たな
研究は、ＤＮＡに基づく治療法、診断法及び分子生物学の技術全般にとって、極
めて望ましいことである。 【０００６】 「立体配座上の制限を受けるヌクレオシド」 オリゴヌクレオチドは、ある標的配列とハイブリッドを形成する過程で、一本
鎖の比較的乱れたコイル構造から二重らせんの整然とした構造へ、立体配座上の
転移をすることがわかっている。 【０００７】 従って、最近は、非修飾の（２’−デオキシ）オリゴヌクレオチドに比べて改
善されたハイブリッド形成性を示す類縁体を探求する過程で、オリゴヌクレオチ
ドに立体配座上の制限を加えるようになってきている。例えば、Ｃ−３’、Ｃ−
５’位にエタノ架橋を付加した二環式の［３．３．０］ヌクレオシド（Ｍ．Ｔａ
ｒｋｙ，Ｍ．Ｂｏｌｌｉ，Ｂ．Ｓｃｈｗｅｉｚｅｒ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ
，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ，１９９３，７６，４８１；Ｔａｒｋｙ ａｎ
ｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．
，１９９３，３２，１４３２；Ｍ．Ｅｇｌｉ，Ｐ．Ｌｕｂｉｎｉ，Ｍ．Ｄｏｂｌ
ｅｒ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９３，
１１５，５８５５；Ｍ．Ｔａｒｋｙ，Ｍ．Ｂｏｌｌｉ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎ
ｎ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ，１９９４，７７，７１６；Ｍ．Ｂｏｌｌｉ
ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇ
ｌ．，１９９５，３４，６９４；Ｍ．Ｂｏｌｌｉ，Ｐ．Ｌｕｂｉｎｉ ａｎｄ Ｃ
．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ，１９９５，７８，２０７７
；Ｊ．Ｃ．Ｌｉｔｔｅｎ，Ｃ．Ｅｐｐｌｅ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ｂｉｏ
ｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ． Ｊｅｔｔ．，１９９５，５，１２３１；Ｊ．Ｃ．Ｌｉｔｔｅｎ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅ
ｕｍａｎｎ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ，１９９６，７９，１１２９；Ｍ．
Ｂｏｌｌｉ，Ｊ．Ｃ．Ｌｉｔｔｅｎ，Ｒ．Ｓｃｈｌｔｚ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａ
ｎｎ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１９９６，３，１９７；Ｍ．Ｂｏｌｌｉ，Ｈ．Ｕ
．Ｔｒａｆｅｌｅｔ ａｎｄ Ｃ．Ｌｅｕｍａｎｎ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ
Ｒｅｓ．，１９９６，２４，４６６０）、Ｃ−１’及びＣ−６’位またはＣ−６
’及びＣ−４’位にメタノブリッジを付加した二炭素環［３．１．０］ヌクレオ
シド（Ｋ．-Ｈ．Ａｌｔｍａｎｎ，Ｒ．Ｋｅｓｓｅｌｒｉｎｇ，Ｅ．Ｆｒａｎｃ
ｏｔｔｅ ａｎｄ Ｇ．Ｒｉｈｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９９
４，３５，２３３１；Ｋ．Ｈ．Ａｌｔｍａｎｎ，Ｒ．Ｉｍｗｉｎｋｅｌｒｉｅｄ
，Ｒ．Ｋｅｓｓｅｌｒｉｎｇ ａｎｄ Ｇ．Ｒｉｈｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ．，１９９４，３５，７６２５；Ｖ．Ｅ．Ｍａｒｑｕｅｚ，Ｍ．Ａ．Ｓ
ｉｄｄｉｑｕｉ，Ａ．Ｅｚｚｉｔｏｕｎｉ，Ｐ．Ｒｕｓｓ，Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｒ．
Ｗ．Ｗａｇｎｅｒ ａｎｄ Ｍ．Ｄ．Ｍａｔｔｅｕｃｃｉ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ
．，１９９６，３９，３７３９；Ａ．Ｅｚｚｉｔｏｕｎｉ ａｎｄ Ｖ．Ｅ．Ｍａ
ｒｑｕｅｚ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．１，１９９
７，１０７３）、付加した環が、天然のリン酸ジエステル結合に代わってヌクレ
オシド間の結合の一部をなしているような、非修飾のヌクレオシドを持つ二量体
として合成され、Ｃ−２’及びＣ−３’位にジオキサレン環を含む二環式の［３
．３．０］及び［４．３．０］ヌクレオシド（Ｒ．Ｊ．Ｊｏｎｅｓ，Ｓ．Ｓｗａ
ｍｉｎａｔｈａｎ，Ｊ．Ｆ．Ｍｉｌｌａｇａｎ，Ｓ．Ｗａｄｗａｎｉ，Ｂ．Ｓ．
Ｆｒｏｅｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍ．Ｍａｔｔｅｕｃｃｉ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．，１９９３，１１５，９８１６；Ｊ．Ｗａｎｇ ａｎｄ Ｍ．Ｄ．Ｍａｔｔｅ
ｕｃｃｉ，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９７，７，２２
９）、アミド及びスルフォアミド型のヌクレオシド間結合の一部として、Ｃ−２
’及びＣ−３’位にメタノ架橋を持つ二環式の［３．１．０］ヌクレオシドを含
むダイマー類（Ｃ．Ｇ．Ｙａｎｎｏｐｏｕｌｕｓ，Ｗ．Ｑ．Ｚｈｏｕ，Ｐ．Ｎｏ
ｗｅｒ，Ｄ．Ｐｅｏｃｈ，Ｙ．Ｓ．Ｓａｎｇｈｖｉ ａｎｄ Ｇ．Ｊｕｓｔ，Ｓｙ
ｎｌｅｔｔ，１９９７，３７８）、ホルムアセタールのヌクレオシド間結合によ
り、トリマーの中央に組み込まれた二環式の［３．３．０］グルコース由来のヌ
クレオシド類縁体（Ｃ．Ｇ．Ｙａｎｎｏｐｏｕｌｕｓ，Ｗ．Ｑ．Ｚｈｏｕ，Ｐ．
Ｎｏｗｅｒ，Ｄ．Ｐｅｏｃｈ，Ｙ．Ｓ．Ｓａｎｇｈｖｉ ａｎｄ Ｇ．Ｊｕｓｔ，
Ｓｙｎｌｅｔｔ，１９９７，３７８）、Ｃ−２’及びＣ−３’位に結合した６員
環及び５員環を有する、二環式の［４．３．０］及び［３．３．０］ヌクレオシ
ド類（Ｐ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｈ．Ｍ．Ｐｆｕｎｄｈｅｌｌｅｒ，Ｊ．Ｗｅｎｇｅ
ｌ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９７，８２６；Ｐ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｈ．
Ｍ．Ｐｆｕｎｄｈｅｌｌｅｒ，Ｊ．Ｗｅｎｇｅｌ，ＸＩＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ Ｒｏｕｎｄｔａｂｌｅ：「ヌクレオシド、ヌクレオチド及びその生物
学的応用（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ，Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉ
ｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）」；Ｌａ Ｊｏｌｌａ，
Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ １５−１９，１９９６；Ｐｏｓｔ
ｅｒ ＰＰＩ ４３）が合成され、オリゴデオキシヌクレオチドに組み込まれてい
る。しかし不幸にして、これらの類縁体を含むオリゴヌクレオチドは、大抵の場
合、相補性核酸との間で、非修飾のオリゴヌクレオチドに比べて安定性の乏しい
二重らせんを形成する。二重らせんの安定性にわずかな改善が見られる場合でも
、それは標的のＤＮＡまたはＲＮＡのみによるか、または、部分的ではなく完全
修飾されたオリゴヌクレオチド、またはその逆に、部分修飾されたオリゴヌクレ
オチドによるにすぎない。 【０００８】 報告されているほとんどの類縁体類に対する評価は、Ｇ、Ａ及びＣの核酸塩基
をもつ類縁体に関するデータや、特異性及びハイブリッド形成の型を示唆するデ
ータが不足しているために、さらに複雑なものになる。多くの場合、報告された
単量体類縁体を合成することは非常に複雑であり、また、他の場合には、完全に
修飾したオリゴヌクレオチドの合成は、広く使われているホスホルアミダイト化
学の標準と両立しない。 【０００９】 最近、固定した核酸［Ｌｏｃｋｅｄ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ（ＬＮＡ）］
を含むオリゴマーが報告されている(Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｐｆｕｎｄｈｅｌ
ｌｅｒ，Ｈ．Ｍ．，Ｏｌｓｅｎ，Ｃ．Ｅ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｊ．Ｃ
ｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．１，１９９７，３４２３；Ｎｉ
ｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｐｆｕｎｄｈｅｌｌｅｒ，Ｈ．Ｍ．，Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，
Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９７，９，８２５；Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，
Ｎ．Ｋ．，Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｍ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｊａｃｏｂｓｅｎ
，Ｊ．Ｐ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９
９８，１２０，５４５８；Ｋｏｓｈｋｉｎ Ａ．Ａ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．
，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，２７７８；Ｏｂｉｋａ，Ｓ．，Ｍ
ｏｒｉｏ，Ｋ． -Ｉ．，Ｈａｒｉ，Ｙ．ａｎｄ Ｉｍａｎｉｓｈｉ，Ｔ．，Ｂｉ
ｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９９，５１５)。興味あること
に、２’−Ｏ及び４’−Ｃメチレン架橋を含むＬＮＡ単量体を、オリゴヌクレオ
チドの配列に組み込むことにより、修飾したオリゴヌクレオチドのハイブリッド
形成能力に、前例がない程の改善が得られた（Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｌ
ｓｅｎ，Ｐ．，Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｏｌｓｅｎ，Ｃ．Ｅ．ａｎｄ Ｗｅ
ｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，４５５；Ｋｏｓｈｋｉ
ｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｒａｊｗａｎｓ
ｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｍｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ．，Ｏｌｓｅｎ，
Ｃ．Ｅ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５
４，３６０７；Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｒａｊｗａｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．ａｎ
ｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９９８，３９
，４３８１；Ｓｉｎｇｈ，ＳａｎｊａｙＫ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｃｈ
ｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，１２４７；Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｓｉｎｇｈ，
Ｓ．Ｋ．，Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｒａｊｗａｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｍｅｌ
ｄｇａａｒｄ，Ｍ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，８，２２１９；Ｏｂｉｋａ，Ｓ．ら、 Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９９７，３８，８７３５；Ｏｂｉｋａ，Ｓ．ら
、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９９８，３９，５４０１；Ｓｉｎｇ
ｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃ
ｈｅｍ．，１９９８，６３，６０７８；Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｎｉｅｌｓ
ｅｎ，Ｐ．，Ｍｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ．，Ｒａｊｗａｎｓｋｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｓｉ
ｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．ａｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．
，１９９８，１２０，１３２５２；Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．ａ
ｎｄ Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，１００
３５）。これらのＬＮＡ単量体及びそれらに対応する２’−チオ−ＬＮＡ類縁体
を含むオリゴヌクレオチドは、相補性ＤＮＡ及びＲＮＡと共に、これまでの２ま
たは３環のヌクレオシドで修飾したオリゴヌクレオチドには見られなかった熱安
定性を持つ二重らせんを形成し（ΔＴｍ／修飾＝＋３〜＋１１℃）、より高い選
択性を示す。 【００１０】 一連の論文で、Ｓｅｅｌａらは、１つまたはそれ以上の２’−デオキシ−β−
Ｄ−キシロフラノシルヌクレオチド単量体を含むキシロ−ＤＮＡ（図１、塩基＝
アデニン−９−イル、シトシン−１−イル、グアニン−９−イル、またはチミン
−１−イル）を研究している（Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，
Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９１，７４，７４８；Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ
，Ｈ．，Ｋｒｅｃｍｅｒｏｖａ，Ｍ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ
．Ａｃｔａ １９９１，７４，２０５４；Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｗｒｎｅｒ，Ｒｏ
ｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９４，７７，８８
３；Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｈｅｃｋｅｌ，Ｍ．，Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｈｅ
ｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９６，７９，１４５１；Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，
Ｈ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，
１９９５，１４，１０４１；Ｓｃｈｏｅｐｐｅ，Ａ．，Ｈｉｎｚ，Ｈ．-Ｊ．，
Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．
１９９６，２３９，３３）。キシロ−ＤＮＡは、対応する天然の２’−デオキシ
−β−Ｄ−リボフラノシルオリゴヌクレオチドに比べて、一般に鏡像のような二
次構造を示し、エントロピー的に好ましい二重らせんを形成し、エキソヌクレア
ーゼに対する安定性も増す。そして少数の２’−デオキシ−β−Ｄ−キシロフラ
ノシル単量体を含むオリゴヌクレオチドの場合は、相補性ＤＮＡに対する熱親和
性が低減する（Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈ
ｅｍ．Ａｃｔａ １９９１，７４，７４８；Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｋｒｅ
ｃｍｅｒｏｖａ，Ｍ．，Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １
９９１，７４，２０５４；Ｓｅｅｌａ，Ｆ．，Ｗｒｎｅｒ，Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ
，Ｈ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９４，７７，８８３；Ｓｅｅｌａ
，Ｆ．，Ｈｅｃｋｅｌ，Ｍ．，Ｒｏｓｅｍｅｙｅｒ，Ｈ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ
．Ａｃｔａ １９９６，７９，１４５１）。 【００１１】 【発明が解決しようとする課題】 上記したこと及び２’−Ｏ及び４’−Ｃ−メチレン架橋ＬＮＡ単量体の顕著な
性質に基づき、１つまたはそれ以上の２’−Ｏ及び４’−Ｃ−メチレン−α−Ｌ
−リボフラノシルヌクレオチド単量体を含む、オリゴヌクレオチドを合成するこ
とを決定した。コンピュータによるα−Ｌ−リボ−ＬＮＡのモデル作成でも、同
様にフラノース環のＳ型立体配座を示す。このように、本研究の目的は２’−Ｏ
及び４’−Ｃ−メチレン−α−Ｌ−リボフラノシルヌクレオチド単量体を合成し
、この単量体を含むオリゴヌクレオチドの熱安定性を検討することである。結果
は、修飾したＬ−リボ−ＬＮＡが、相補性核酸を高い親和性で標的とするのに有
用であることを示す。Ｃ−３’及びＣ−４’位の立体構造が逆の場合を考慮する
と、これは驚くべき事実である。 【００１２】 このように、本発明者らは、新規なＬＮＡヌクレオシド類縁体類（Ｌ−リボ−
ＬＮＡ類）及びＬ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド類縁体を含むオリゴヌクレオチド
類を提供する。この新規なＬ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド類縁体類は、核酸塩基
としてチミンを用いて合成したが、他の４種の核酸塩基を用いても容易に合成で
き、これによりオリゴヌクレオチドへの組み込みとして、一揃いのヌクレオシド
類縁体類を提供することができる。 【００１３】 【課題を解決する手段】 本発明は、一般式Ｉの少なくとも１つのヌクレオシド類縁体（以下、「Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡ」と呼ぶ。） 【００１４】 【化５】 【００１５】 並びに、その塩基性塩及び酸付加塩を含む： ここで、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−、−Ｃ（Ｒ^６Ｒ^６＊）−で
あり； Ｂは、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−４アルコキシ、任意に置換
されたＣ_１−４アルキル、任意に置換されたＣ_１−４アシルオキシ、核酸塩基、
ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレー
ト基、レポーター基、及びリガンドであり； Ｐは、次の単量体へのヌクレオシド間の結合への基の位置、または５’末端基
を表し、そのようなヌクレオシド間結合または５’末端基は、所望により置換基
Ｒ^５を包含していてもよく、または置換基Ｒ^５＊を等しく有していてもよく； Ｐ^＊は、前の単量体へのヌクレオシド間の結合、または３’末端基を表し； Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、−Ｃ（Ｒ^ａＲ^ｂ）−、−Ｃ（Ｒ^ａ）＝Ｃ（Ｒ^ａ）−、−
Ｃ（Ｒ^ａ）＝Ｎ−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ^ａ）_２−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−Ｎ（
Ｒ^ａ）−及び＞Ｃ＝Ｚから選択された１〜４基／原子からなるビラジカルを表し
；ここでＺは、−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^ａ）−から選択され、そしてＲ^ａ及び
Ｒ^ｂの各々は、独立に、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に
置換されたＣ_２−１２−アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル
、ヒドロキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カル
ボキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル
、ホルミル、アリール、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリー
ルカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロア
リールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６ア
ルキル）−アミノ、カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ
−カルボニル、アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（
Ｃ_１−６アルキル）アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６ア
ルキル−カルボニルアミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホ
ノ、Ｃ_１−６アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_{１ −６} アルキルチオ、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基
、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから選択され、
ここで、アル−ル及びヘテロアリールは所望により置換され、そして、ここで、
２つのジェミナル置換基Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、共に、任意に置換されたメチレンオレ
フィン（＝ＣＨ_２）を表すこともでき； 存在する、置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ６及びＲ^６＊の各
々は、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に置換されたＣ_{２− １２} −アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル、ヒドロキシ、Ｃ _１−１２ −アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_{１−１ ２} −アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル、ホルミル、アリ
ール、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘ
テロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘ
テロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ
、カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボニル、ア
ミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル
）アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニ
ルアミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６アル
キルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_１−６アルキルチオ
、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性
な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、ここにおい
て、アリール及びヘテロアリールは置換されていてもよく、そして、ここにおい
て、２つのジェミナル置換基は、共に、オキソ、チオキソ、イミノ、または任意
に置換されたメチレンを表し、または共に、１〜５炭素原子のアルキレン鎖から
なるスピロビラジカルを形成することもでき、このアルキレン鎖は、−Ｏ−、−
Ｓ−及び（ＮＲ^Ｎ）−から選択された１またはそれ以上のヘテロ原子／基によっ
て中断及び／または停止していてもよく、ここで、Ｒ^Ｎは水素及びＣ_１−４アル
キルから選択され、そして、ここで、２つの隣接した（非ジェミナル）置換基は
、二重結合となる付加的結合を表し；そして、Ｒ^Ｎは、存在するときは、水素及
びＣ_１−４アルキルから選択される。 【００１６】 本発明は、さらに一般式ＩＩのヌクレオシド類縁体類（Ｌ−リボ−ＬＮＡ類）
、並びにそれらの塩基性塩及び酸付加塩に関するものである： 【００１７】 【化６】 【００１８】 式中、置換基Ｂは、核酸塩基、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な
基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選択され
； Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ）−、−Ｃ（Ｒ^６Ｒ^６＊）−から選択され
； Ｑ及びＱ^＊の各々は、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ
、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、Ａｃｔ−Ｏ−、メルカプト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ａｃｔ−Ｓ−
、Ｃ_１−６アルキルチオ、アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ ）−、単量体またはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６ アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、任意に置換されたＣ_２−６ア
ルケニル、任意に置換されたＣ_２−６アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_{２ −６} アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６アルキニルオキシ、一リン酸、ニリ
ン酸、三リン酸、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に
活性な基、キレ−ト基、レポーター基、リガンド、カルボキシ、スルホノ、ヒド
ロキシメチル、Ｐｒｏｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチル
、Ｐｒｏｔ−Ｎ（ＲＨ）−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、カルボキ
シメチル、スルホノメチル、［ここで、Ｐｒｏｔは各々、−ＯＨ、−ＳＨ及びＮ
Ｈ（Ｒ^Ｈ）の保護基であり、Ａｃｔは各々、−ＯＨ、−ＳＨ及びＮＨ（Ｒ^Ｈ）の
活性基であり、そして、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６アルキルから選択される］から
独立に選択され；そして、 Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−Ｏ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_{ｒ＋ｓ＋１}−、−（Ｃ
Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ ^＊ ）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−Ｏ−（Ｃ
Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊ Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ”）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（Ｃ
Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（
Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊） _ｒ＋ｓ −Ｓ−及びＳ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−から選択されたビラ
ジカルを表し； ここで、各Ｒ^＊は、水素、ハロゲン、アジド、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、
メルカプト、アミノ、単量体またはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、任意に置換
されたＣ_１−６アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、ＤＮＡインタ
ーカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポー
ター基及びリガンドから独立に選択され、及び／または２つの隣接した（非ジェ
ミナル）Ｒ^＊は、共に二重結合を表すことができ、そしてｒ及びｓの各々は０〜
３であり、ただし、ｒ+ｓの合計は１〜４であり； 存在する置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊の各々
は、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に置換されたＣ_{２−１ ２} −アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル、ヒドロキシ、Ｃ_{１ −１２} −アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_１−１２ −アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル、ホルミル、アリー
ル、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテ
ロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテ
ロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ、
カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボニル、アミ
ノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）
アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル
アミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６アルキ
ルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_１−６アルキルチオ、
ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な
基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、ここにおいて
、アル−ル及びヘテロアリールは置換されていてもよく、そして、ここにおいて
、２つのジェミナル置換基は、共に、オキソ、チオキソ、イミノ、または任意に
置換されたメチレンを表し、または共に、１〜５炭素原子のアルキレン鎖からな
るスピロビラジカルを形成することもでき、このアルキレン鎖は、−Ｏ−、−Ｓ
−、及び（ＮＲ^Ｎ）−から選択された１またはそれ以上のヘテロ原子／基によっ
て中断及び／または停止していてもよく、ここで、Ｒ^Ｎは水素及びＣ_１−４アル
キルから選択され、そして、２つの隣接した（非ジェミナル）置換基は、二重結
合となる付加的結合を表し；そして、Ｒ^Ｎは、存在するときは、水素及びＣ_{１− ４} アルキルから選択される； ただし、オリゴヌクレオチド合成において一般的に広く行われる条件下で、反
応性のある全ての化学基（どのような核酸塩基も包含する）は、任意に活性基が
保護されていてもよい。 【００１９】 本発明は、また、ヌクレオシド類縁体類（Ｌ−リボ−ＬＮＡ類）のオリゴマー
の調製への使用、及びこのオリゴマー並びにヌクレオシド類縁体類（Ｌ−リボ−
ＬＮＡ類）の、診断、分子生物学の研究及び治療への使用に関する。 【００２０】 【発明の実施の形態】 本明細書では、「Ｌ−リボ−ＬＮＡ」（Ｌ−リボ配位した固定したヌクレオシ
ド類縁体）という用語は、本発明のオリゴマーに取り込まれた（一般式Ｉ）、ま
たは独立の化学種（一般式ＩＩ）としてのＬ−リボ配位の二環式ヌクレオシド類
縁体類を表わす。「単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ」という用語は、特異的に後者を
指す。 【００２１】 「オリゴマー及びヌクレオシド類縁体」 上述のように、本発明は、１つまたはそれ以上のＬ−リボ配位した二環式ヌク
レオシド類縁体（以下、「Ｌ−リボ−ＬＮＡ」と呼ぶ）を含む、新規のオリゴマ
ー（オリゴヌクレオチド）に関する。 【００２２】 オリゴマー（オリゴヌクレオチド）に取り込まれ得る個々のＬ−リボ−ＬＮＡ
類は、一般式Ｉの構造を有する。 【００２３】 【化７】 【００２４】 ここで、Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−及び−Ｃ（Ｒ^６Ｒ^６＊）−か
ら選択され、ここで、Ｒ^６、Ｒ^６＊及びＲ^Ｎ＊は、さらに以下に定義するもので
ある。このように、オリゴマーに取り込まれるＬ−リボ−ＬＮＡ類は、二環構造
の本質的な部分としての５員環を含む。 【００２５】 可能な５員環の中で、Ｘが−Ｏ−、−Ｓ−及び−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−を表わす場合
は注目に値するように思われ、そしてＸが−Ｏ−である場合は、特に注目に値す
るように見える。 【００２６】 置換基Ｂは、オリゴマーがＤＮＡまたはＲＮＡと錯体を形成する場合は、ＤＮ
ＡまたはＲＮＡ、特にＤＮＡまたはＲＮＡの核酸塩基に（例えば、水素結合、共
有結合または電子相互作用により）相互作用し得る基を表わしてもよい。これと
は別に、置換基Ｂは、標識またはレポーターとして作用する基であってもよく、
または置換基Ｂは、ＤＮＡまたはＲＮＡとほとんどまたは全く相互作用を有しな
い期待される基（例えば、水素）であってもよい。このように置換基Ｂは、好ま
しくは水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−４−アルコキシ、任意に置換
されたＣ_１−４−アルキル、任意に置換されたＣ_１−４−アシロキシ、核酸塩基
、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ
ート基、レポーター基及びリガンドから選択される。 【００２７】 本明細書では、「核酸塩基」という用語は、天然由来の核酸塩基並びに非天然由
来の核酸塩基を包含する。これまでに天然には存在しないと考えられてきた種々
の核酸塩基が、その後自然界で見つかることは、当業者には周知のことである。
このように、「核酸塩基」には既知のプリンやピリミジンの複素環だけでなく、
複素環類縁体やその互変異性体も含まれる。これら核酸塩基を例示すると、アデ
ニン、グアニン、チミン、シトシン、ウラシル、プリン、キサンチン、ジアミノ
プリン、８−オキソ−Ｎ^６−メチルアデニン、７−デアザキサンチン、７−デア
ザグアニン、Ｎ^４，Ｎ^４−エタノシトシン、Ｎ^６，Ｎ^６−エタノ−２，６−ジア
ミノプリン、５−メチルシトシン、５−（Ｃ^３−Ｃ^６）−アルキニルシトシン、
５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、プソイドイソシトシン、２−ヒド
ロキシ−５−メチル−４−トリアゾロピリジン、イソシトシン、イソグアニン、
イノシン及びＢｅｎｎｅｒらの米国特許第５，４３２，２７２号に記載の「非天
然由来」の核酸塩基が挙げられる。「核酸塩基」という用語は、これらの例並び
にその類縁体及び互変異性体のすべてを包含することを意図している。特に注目
に値する核酸塩基は、アデニン、グアニン、チミン、シトシン及びウラシルであ
り、これらは、ヒトの治療や診断への利用に関連する、天然由来の核酸塩基と考
えられる。 【００２８】 本明細書において、「ＤＮＡインターカレーター」という用語は、ＤＮＡまた
はＲＮＡのらせん、二重らせんまたは三重らせんの中に挿入することができる基
を意味する。ＤＮＡインターカレーターの官能部分の例として、アクリジン、ア
ントラセン、アントラキノンのようなキノン類、インドール、キノリン、イソキ
ノリン、ジヒドロキノン、アントラサイクリン、テトラサイクリン、メチレンブ
ルー、アントラサイクリノン、プソラレン、クマリン、ハロゲン化エチジウム、
ダインミシン、１，１０−フェナントロリン−銅のような金属錯体、カルケアミ
シンのようなトリス（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテ
ニウム−コバルト−エネディン、ポルフィリン、ディスタマイシン、ネトロプシ
ン、ビオローゲン、ダウノマイシンが挙げられる。特に注目される例は、アクリ
ジン、アントラキノンのようなキノン類、メチレンブルー、プソラレン、クマリ
ン及びハロゲン化エチジウムである。 【００２９】 本明細書で、「光化学的に活性な基」という用語は、光の照射を受けて化学反
応を起こすことができる化合物を意味する。この官能基の実例としては、キノン
類、特に６−メチル−１，４−ナフトキノン、アントラキノン、ナフトキノン及
び１，４−ジメチル−アントラキノンがあり、さらにジアジリン、芳香族アジド
化合物、ベンゾフェノン、プソラレン、ジアゾ化合物及びジアジリノ化合物が挙
げられる。 【００３０】 本明細書で、「熱化学的に活性な基」は、他の基との共有結合の形成を熱化学
的に行うことができる官能基として定義される。この熱化学的に活性な基の官能
部分の例示としては、カルボン酸、活性化エステルのようなカルボン酸エステル
、酸フッ化物、酸塩化物、酸臭化物及び酸ヨウ化物のようなカルボン酸ハロゲン
化物、カルボン酸アジド、カルボン酸ヒドラジド、スルホン酸、スルホン酸エス
テル、スルホン酸ハロゲン化物、セミカルバジド、チオセミカルバジド、アルデ
ヒド、ケトン、第一級アルコール、第二級アルコール、第三級アルコール、フェ
ノール、ハロゲン化アルキル、チオール、二硫化物、第一級アミン、第二級アミ
ン、第三級アミン、ヒドラジン、エポキシド、マレイミド及びホウ酸誘導体が挙
げられる。 【００３１】 本明細書で、「キレート基」という用語は、一つ以上の結合サイトを含み
、かつ同時に、一つ以上の結合サイトを通じて、他の分子、原子またはイオンと
結合することがしばしばある分子を意味する。キレート基の官能部分の例として
、イミノ二酢酸、ニトリロ三酢酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、アミ
ノホスホン酸などが挙げられる。 【００３２】 本明細書で、「レポーター基」という用語は、それ自身により、または一
連の検出シリーズの一部として検出し得る基を意味する。レポーター基の官能部
分の例としては、ビオチン、ジゴキシゲニン、蛍光を発する基（ある波長の電磁
波、例えば光またはＸ線を吸収することができ、かつ、引き続いて吸収したエネ
ルギーをより長い波長の放射線の形で再発光する基；実例としては、ダンシル（
５−ジメチルアミノ−１−ナフタレンスルホニル）、ＤＯＸＹＬ（Ｎ−オキシル
−４，４−ジメチルオキサゾリジン）、ＰＲＯＸＹＬ（Ｎ−オキシル−２，２，
５，５−テトラメチルピロリジン）、ＴＥＭＰＯ（Ｎ−オキシル−２，２，６，
６−テトラメチルピペリジン）、ジニトロフェニル、アクリジン、クマリン、Ｃ
ｙ３及びＣｙ５（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ
社の商標）、エリトロシン、クマリン酸、ウンベリフェロン、テキサスレッド（
Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ）、ローダミン、テトラメチルローダミン、ロックス（Ｒｏ
ｘ）、７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１−ジアゾール（ＮＢＤ）、ピレン、フ
ルオレセイン、ユウロピウム、ルテニウム、サマリウム及びその他の希土類金属
がある）、放射性同位体標識、化学発光標識（化学反応中に発光することで検出
し得る標識）、スピン標識（フリーラジカル（例えば、置換有機ニトロ酸化物）
、または電子スピン共鳴分光法を使って検出し得る、生物分子に結合したその他
の常磁性プローブ（例えば、Ｃｕ^２＋，Ｍｇ^２＋）、酵素類（ペルオキシダーゼ
、アルカリ性ホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ及びグルコースオキシダー
ゼ）、抗原、抗体、付着体（単独では免疫応答を開始することはできないが、抗
体と結合することができる基、ペプチドやステロイドホルモンがある）、細胞膜
浸透のための次のような担体系：即ち、脂肪酸残基、ステロイド半体（コレステ
ロール）、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、特定の受容体にたいする葉酸
ペプチド、細胞の飲食作用を仲介する基、表皮成長因子（ＥＧＦ）、ブラディキ
ニン及び血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）が挙げられる。この中で特に注目に
値する例は、ビオチン、フルオレセイン、テキサスレッド、ローダミン、ジニト
ロフェニル、ジゴキシゲニン、ルテニウム、ユーロピウム、Ｃｙ３及びＣｙ５で
ある。 【００３３】 本明細書で、「リガンド」は結合するものを意味する。リガンドには次のよう
な官能基が含まれ得る：即ち、芳香族基（ベンゼン、ピリジン、ナフタレン、ア
ントラセン及びフェナントレン）、複素環基（チオフェン、フラン、テトラヒド
ロフラン、ピリジン、ジオキサン、ピリミジン）、カルボン酸、カルボン酸エス
テル、カルボン酸ハロゲン化物、カルボン酸アジド、カルボン酸ヒドラジド、ス
ルホン酸、スルホン酸エステル、スルホン酸ハロゲン化物、セミカルバジド、チ
オセミカルバジド、アルデヒド、ケトン、第一アルコール、第二アルコール、第
三アルコール、フェノール、ハロゲン化アルキル、チオール、二硫化物、第一ア
ミン、第二アミン、第三アミン、ヒドラジン、エポキシド、マレイミド、１つま
たはそれ以上の、酸素原子、窒素原子、及び／または、硫黄原子のようなヘテロ
原子を、所望により分子内部または末端に有し、所望により芳香族炭化水素また
はモノ／ポリ不飽和炭化水素を含むＣ１−Ｃ２０アルキル基、ポリエチレングリ
コールのようなポリオキシエチレン、ポリ−β−アラニンのようなオリゴ／ポリ
アミド、ポリグリシン、ポリリシン、ペプチド、オリゴ／ポリサッカライド、オ
リゴ／ポリリン酸塩、毒素、抗生物質、細胞毒及びステロイドであり、そしてさ
らに「親和リガンド」、即ち、特定の蛋白質、抗体、ポリ及びオリゴサッカライ
ド及び他の生体分子上のサイトに特異的な親和性を有する、官能基または生体分
子である。 【００３４】 ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ
ート基、レポーター基及びリガンドについての上記の特異的な例は、当該の基の
「活性な／官能的な」部分に相当することは、当業者には明白であろう。さらに
当業者には、次のことも明らかである。即ち、ＤＮＡインターカレーター、光化
学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンド
は、一般にＭ−Ｋ−という形で表わされ、ここで、Ｍは、当該の基の「活性な／
官能的な」部分であり、Ｋはこの「活性な／官能的な」部分が５員環に結びつく
際の、スぺーサーである。このように、ＢがＤＮＡインターカレーター、光化学
的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドか
ら選択される場合には、基Ｂは、Ｍ−Ｋ−の形をとると理解すべきである。ここ
で、ＭはＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基
、キレート基、レポーター基及びリガンドの各々の「活性な／官能的な」部分で
あり、Ｋは５員環と「活性な／官能的な」部分の間の所望によりスぺーサーであ
り、１〜５０の原子、好ましくは１〜３０の原子、さらに好ましくは１〜１５の
原子を含む。 【００３５】 本明細書で、この「スぺーサー」という用語は、熱化学的にも光化学的に
も不活性で、いわゆる隔たりを作り出す基を意味しており、上で定義された型の
二つ以上の半体を結合するのに使われる。スぺーサーは、その疎水性、親水性、
分子の柔軟性及び長さなどの種々の特性に基づいて選択される（例えば、Ｈｅｒ
ｍａｎｓｏｎらの、「固定化した親和性リガンドの技術（Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅ
ｄ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｌｅｇａｎｄ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）」、 Ａｃａｄｅｍ
ｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ（１９９２），
ｐ．１３７を参照）。スぺーサーの長さは、一般に約４００オングストロームま
たはそれ以下であり、用途によっては１００オングストローム以下が好ましい。
このようにスぺーサーは、一つ以上の、酸素原子、窒素原子及び／または硫黄原
子のようなヘテロ原子を、所望により内部または末端に有する炭素原子の鎖を含
む。このようにして、スぺーサーＫは、１つまたはそれ以上のアミド、エステル
、アミノ、エーテル及び／またはチオエーテルの官能性を含んでよく、そして所
望により芳香族炭化水素またはモノ／ポリ不飽和炭化水素、ポリエチレングリコ
ールのようなポリオキシエチレン、ポリ−β−アラニンのようなオリゴ／ポリア
ミド、ポリグリシン、ポリリシン及びペプチド類全般、オリゴサッカライド、オ
リゴ／ポリリン酸塩を含んでもよい。さらに、スぺーサーは、それらが結合した
ものでもよい。スぺーサーは、当該の基の「活性な／官能的な」部分が５員環に
対してとる、望ましいまたは必要な位置及び空間的な配向を考慮して、その長さ
を変えてもよい。特に注目に値する実施態様では、スぺーサーは、化学的に開裂
し得る基を含む。このような化学的に開裂し得る基の例としては、還元条件下で
開裂するジスルフィドや、ペプチド分解酵素により切断されるペプチド断片など
がある。 【００３６】 本発明の１つの実施態様として、Ｋが単結合を表わすこともあり、この場合は
、当該の基の「活性な／官能的な」部分は、直接５員環に結合することになる。 【００３７】 好ましい実施態様において、一般式Ｉ及びＩＩの置換基Ｂは、好ましくは核酸
塩基から選択され、特に好ましくは、アデニン、グアニン、チミン、シトシン及
びウラシルから選択される。 【００３８】 本発明のオリゴマー（一般式Ｉ）において、Ｐは次の単量体とのヌクレオシド
間結合のためのラジカルの位置、即ち５’−末端基を表わす。当該のＬ−リボ−
ＬＮＡが ５’−末端「単量体」でない可能性が先ずあり、さらに当該のＬ−リ
ボ−ＬＮＡが ５’−末端「単量体」である場合も次の可能性としてある。この
ようなヌクレオシド間結合、または５’−末端基は、置換基Ｒ^５（またはＲ^５＊ にも同様に当てはまる）を含んでもよく、この場合は、これによりＰ基と二重結
合を形成する（５’−末端とは、ヌクレオシドのリボース部の５’−炭素原子に
相当する位置のことをいう）と理解すべきである（このことは、以下に記載する
ヌクレオシド間結合及び５’−末端基の定義からも明らかである）。 【００３９】 これに対して、Ｐ^＊は、前の単量体とのヌクレオシド間結合のための基の位置
、即ち３’−末端基を表わす。前記と同様に、当該のＬ−リボ−ＬＮＡが ３’
−末端「単量体」でない可能性が先ずあり、さらに当該のＬ−リボ−ＬＮＡが
３’−末端「単量体」である場合も次の可能性としてある（３’−末端とは、ヌ
クレオシドのリボース部の３’−炭素原子に相当する位置のことをいう）。 【００４０】 本明細書で、「単量体」という用語は、Ｌ−リボ−ＬＮＡ類の他に、天然由来
のヌクレオシド、非天然由来のヌクレオシド、ＰＮＡ類及びＬＮＡ類なども意味
する。このように、「次の単量体」という用語は、５’−末端方向に隣接する単
量体を意味し、「前の単量体」という用語は、３’−末端方向に隣接する単量体
を意味する。Ｌ−リボ−ＬＮＡの位置から見ての、このような次の単量体及び前
の単量体は、天然由来のヌクレオシドであっても、非天然由来のヌクレオシドで
あってもよく、さらにＬ−リボ−ＬＮＡであってもよい。 【００４１】 従って、 本明細書では、（上記の定義から導かれ得るように）、「オリゴマー
」という用語は、１つまたはそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡを組み込むことによっ
て修飾されたオリゴヌクレオチドを意味する。 【００４２】 本発明の重要な部分は、Ｒ^２＊及びＲ^４＊が、共に５員環上で縮合環を形成す
るビラジカルを表わすという条件と組み合わされた、５員環のＬ−リボ配位であ
る。 【００４３】 ビラジカルを構成する基の中で、Ｚは−Ｏ−，−Ｓ−，及びＮ（Ｒ^ａ）−から
選択され、Ｒ^ａ 及びＲ^ｂは、各々独立に、水素、任意に置換されたＣ_１−１２ −アルキル、所望によりに置換されたＣ_２−１２−アルケニル、任意に置換され
たＣ_２−１２−アルキニル、ヒドロキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシ、Ｃ_２−１２ −アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシカルボニル、Ｃ_{１− １２} −アルキルカルボニル、ホルミル、アリール、アリールオキシカルボニル、
アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ
カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ
及びジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ、カルバモイル、モノ及びジ（Ｃ_１−６−
アルキル）アミノカルボニル、アミノ−Ｃ_１−６−アルキルアミノカルボニル、
モノ及びジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ−Ｃ_１−６−アルキルアミノカルボニ
ル、Ｃ_１−６−アルキルカルボニルアミノ、カルバミド、Ｃ_１−６−アルカノイ
ルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６−アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジゾ、
スルファニル、Ｃ_１−６−アルキルチオ、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター
、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリ
ガンドから選択され（ここで、最後の基は、置換基Ｂに対して定義されたスぺー
サーを含んでよい）、ここで、アリール及びヘテロアリールは、所望により置換
されてよい。さらに、１つの炭素原子に対でついているＲ^ａ及び Ｒ^ｂの２つの
置換基は、共に、所望により置換されるメチレンオレフィン（アリールに対して
所望により用いられる置換基として定義されたような置換基で、一度または二度
任意に置換された＝ＣＨ_２）を表わすことができる。 【００４４】 本明細書及び特許請求範囲において、ビラジカルの位置付けは左側が最小の数
をもつ置換基、右側が最大の数を持つ置換基を表わすようになっている。従って
、Ｒ^２＊及びＲ^４＊が共にビラジカル−Ｏ−ＣＨ_２−を表わす場合は、酸素原子
はＲ^２＊を表わし、つまり酸素原子がＲ^２＊の位置についており、メチレン基は
Ｒ^４＊を表わすことがわかる。 【００４５】 本発明に従ってオリゴマー中に組み込まれた、Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）のビラ
ジカル（類）が取り得る注目すべき構造を考えると、同一炭素原子上についてい
ない置換基の対から構成されるビラジカル（類）は、好ましくは、−（ＣＲ^＊Ｒ ^＊ ）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ −Ｙ−、−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｙ−、−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（
ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−、−Ｙ−、−Ｙ−Ｙ−から選択さ
れる。ここで、各々のＹは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓｉ（Ｒ^＊）_２−、−Ｎ（Ｒ^＊ ）−、＞Ｃ＝Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ^＊）−及びＮ（Ｒ^＊）−Ｃ（＝Ｏ）−か
ら独立に選択され、各々のＲ^＊は、水素、ハロゲン、アジド、シアノ、ニトロ、
ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、モノまたはジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ
、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキ
ル、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キ
レート基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、隣り合った２つの（
同一炭素原子につかない）Ｒ＊は、共に二重結合を表わしてもよく、ｒ及びｓは
、各々、ｒ＋ｓの合計が１〜４であるという条件で０〜４である。特に注目に値
するのは、各々のビラジカルが、−Ｙ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−、−（ＣＲ ^＊ Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−及びＹ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｙ−から
各々独立に選択されるという状況であり、また、ｒ＋ｓの合計が１〜４であると
いう条件で、ｒ及びｓが各々０〜３であるという状況である。 【００４６】 特に注目に値するオリゴマーは、そのオリゴマーの中のＬ−リボ−ＬＮＡ（類
）に対して、以下の基準があてはまるオリゴマーである。即ち、Ｒ^２＊及びＲ^{４ ＊} は、共に、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_{ｒ＋ｓ＋１}−
、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｓ−（
ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−
Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−
（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−
Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−
、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ ^＊ Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−及び−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−から選択
されるビラジカルを表し、ここで、ｒ＋ｓの合計が１−４であるという条件で、
ｒ及びｓが各々０〜３であり、Ｒ^＊は、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ _１−６ −アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、ＤＮＡインターカ
レーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター
基及びリガンドから選択され、残りの置換基Ｒ^＊はいずれも水素である。 【００４７】 １つの好ましい実施態様においては、少なくとも１つのＬＮＡのビラジカル中
の１つの基Ｒ^＊が、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的
に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選択される（ここで、
最後の基には置換基Ｂに対して定義されたスペーサーを含んでよい）。 【００４８】 他の好ましい実施態様においては、少なくとも１つのＬＮＡのビラジカル中の
１つの基Ｒ^＊が、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、
任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に
活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選
択され、残りの置換基Ｒ^＊は、いずれも水素である。 【００４９】 存在する置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊に関し
ては、各々独立に、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に置換
されたＣ_２−１２−アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル、ヒ
ドロキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カルボキ
シ、Ｃ_１−１２−アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル、ホ
ルミル、アリール、アリールオキシカルボニル、アリールオキシ、アリールカル
ボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシカルボニル、ヘテロアリールオ
キシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ及びジ（Ｃ_１−６−アルキル）
アミノ、カルバモイル、モノ及びジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノカルボニル、
アミノＣ_１−６−アルキルアミノカルボニル、モノ及びジ（Ｃ_１−６−アルキル
）アミノＣ_１−６−アルキルアミノカルボニル、Ｃ_１−６−アルキルカルボニル
アミノ、カルバミド、Ｃ_１−６−アルカノイルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６−ア
ルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_１−６−アルキル
チオ、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に
活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンド（ここで、最後の基は置換基
Ｂに対して定義されたスペーサーを含んでよい）から選択される。ここで、アリ
ール及びヘテロアリールは所望により置換されてもよく、１つの炭素原子に対で
ついている置換基は、共に、オキソ、チオキソ、イミノまたは任意に置換された
メチレンを表わしてもよく、または、共に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ^Ｎ）−か
ら選択される１つ以上のヘテロ原子／基を所望により内部及び／または末端に含
む、炭素原子数１〜５個のアルキレン鎖からなるスピロビラジカルを形成しても
よい。ここで、Ｒ^Ｎは、水素、Ｃ_１−４−アルキル基から選択され、隣り合った
２つの（同一炭素原子につかない）置換基は、二重結合を形成する追加の結合を
表わし；そして、Ｒ^Ｎ＊が存在している場合は、それは水素及びＣ_１−４−アル
キル基から選択される。 【００５０】 好ましくは、存在するＬ−リボ−ＬＮＡ（類）の置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊ 、Ｒ５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊は、各々独立に、水素、任意に置換されたＣ_{１ −６} −アルキル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニル、ヒドロキシ、Ｃ_{１− ６} −アルコキシ、Ｃ_２−６−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_１−６−アルコ
キシカルボニル、Ｃ_１−６−アルキルカルボニル、ホルミル、アミノ、モノ及び
ジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ、カルバモイル、モノ及びジ（Ｃ_１−６−アル
キル）アミノカルボニル、Ｃ_１−６−アルキルカルボニルアミノ、カルバミド、
アジド、Ｃ_１−６−アルカノイルオキシ、スルホノ、スルファニル、Ｃ_１−６−
アルキルチオ、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活
性な基、キレート基、レポーター基、リガンド及びハロゲンから選択される。こ
こで、同一の炭素原子につく２つの置換基はオキソを表わしてもよく、Ｒ^Ｎ＊が
存在している場合は、それは水素及びＣ_１−４−アルキル基から選択される。 【００５１】 本発明の好ましい実施態様において、Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−及び−ＮＲ^Ｎ＊−か
ら、特に−Ｏ−から選択され、Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）の置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、
Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊は、各々水素を表す。 【００５２】 本発明のさらに好ましい実施態様においては、ＸはＯであり、置換基Ｒ^１＊、
Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５及びＲ^５＊は水素を表わす。そしてオリゴマーに組み込まれた
Ｌ−リボ−ＬＮＡのＲ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_０−１−
Ｏ−（ＣＨ_２）_１−３−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｓ−（ＣＨ_２）_１−３−、−（
ＣＨ_２）_０−１−Ｎ（Ｒ^Ｎ）−（ＣＨ_２）_１−３−及び−（ＣＨ_２）_２−４−か
ら、特に−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ_２−及び−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−から選択され
たビラジカルを表す。一般に、これまでに得られた結果に必然的に関係して、Ｒ ^２＊ 及びＲ^４＊を構成する ビラジカルが二原子の架橋を形成する、即ちビラジ
カルが、フラノース環（Ｘ＝Ｏ）と共に５員環を形成することが好ましい。 【００５３】 本発明の１つの実施態様では、ビラジカルが−（ＣＨ_２）_２−４−である。 【００５４】 これらの注目すべき実施態様では、Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）が、次の一般式Ｉ
ａを持つことが好ましい。 【００５５】 【化８】 【００５６】 また、本発明の別の態様として注目に値することは、一般式ＩａのＢが「β−
配位置」にある変異体である。 【００５７】 本発明によるオリゴマーは、典型的には、一般式Ｉ（またはより詳細な一般式
Ｉａ）の１〜１００００個のＬ−リボ−ＬＮＡ（類）、及び、天然由来のヌクレ
オシド及びヌクレオシド類縁体から選択された０〜１００００個のヌクレオシド
を含む。ヌクレオシドの数とＬ−リボ−ＬＮＡ（類）の数の合計（ｎ）は少なく
とも２であり、好ましくは少なくとも３であり、さらに好ましくは少なくとも５
であり、特に好ましくは少なくとも７である。その範囲としては２〜１５０００
であり、好ましくは３〜１００のように２〜１００であり、特に好ましくは３〜
５０または５〜５０または７〜５０のように、２〜５０である。 【００５８】 部分的にＬ−リボ−ＬＮＡで修飾されたオリゴマーは（親和性の増加とともに
）ＤＮＡ及びＲＮＡと強くハイブリッドを形成することが見出されている。Ｌ−
リボ−ＬＮＡで完全に修飾されたオリゴマー及びＬ−リボ−ＬＮＡ単量体からな
るオリゴマーは、他のＬ−リボ配位のヌクレオチド類縁体と共に、よく似たハイ
ブリッド形成の性質を呈するものと現在考えられている。 【００５９】 本明細書においては、「ヌクレオシド」という用語は、複素環塩基のグリコシ
ドを意味している。「ヌクレオシド」という用語は、非天然由来のヌクレオシド
、天然由来のヌクレオシド、それに他のヌクレオシド類縁体も含めて広く使われ
ている。 【００６０】 ヌクレオシドの例としては、リボースの半体を含むリボヌクレオシドやデオキ
シリボースの半体を含むデオキシリボヌクレオシドがある。これらのヌクレオシ
ドの塩基については、アデニン、グアニン、シトシン、チミン及びウラシルのよ
うな天然由来の塩基のいずれでもよく、これらの変異体またはいかなる可能な非
天然由来の塩基でも良いと解すべきである。 【００６１】 定義を考え、既知のヌクレオシド（天然由来及び非天然由来）やヌクレオシド
類縁体（既知の二環、三環類縁体を含む）を考えると、オリゴマーは、１つまた
はそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡ（類）（これは置換基及びビラジカルの両者の選
択に関して、同一のものでも異なったものでよい）及び１つまたはそれ以上のヌ
クレオシド及び／またはヌクレオシド類縁体を含むということが明らかである。
本明細書では、「オリゴヌクレオチド」は、ヌクレオシド間結合を介して結合し
た、ヌクレオシドの連続した鎖を意味する。しかし、オリゴマー（オリゴヌクレ
オチド）の中の１つまたはそれ以上のヌクレオチド単位（単量体）内の核酸塩基
は、上記で定義した置換基Ｂですでに修飾されたものであってもよいと理解すべ
きである。 【００６２】 オリゴマーは直鎖であっても分岐鎖であっても、また、環状でもよい。分岐鎖
のあるオリゴマーの場合、分岐の位置はヌクレオシドの中やヌクレオシド間結合
の中、または、興味を引く実施態様においては、Ｌ−リボ−ＬＮＡの中でもよい
。後者の場合、置換基Ｒ^２及びＲ^３＊は、前の単量体とのヌクレオシド結合を表
わす置換基Ｐ^＊を表わしてもよい。特にＲ^２は、更なるＰ^＊を表わしてもよい。 【００６３】 上記のように、オリゴマーのＬ−リボ−ＬＮＡ（類）は、ヌクレオシド間結合
を介して他の単量体と結合している。本明細書においては、「ヌクレオシド間結
合」という用語は、以下から選択される２個から４個、好ましくは３個の基／原
子からなる結合を意味する。即ち、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^Ｈ−、
＞Ｃ＝Ｏ、＞Ｃ＝ＮＲ^Ｈ、＞Ｃ＝Ｓ、−Ｓｉ（Ｒ”）_２ −、− ＳＯ−、−Ｓ
（Ｏ）_２ −、−Ｐ（Ｏ）_２−、−ＰＯ（ＢＨ_３）−、−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−、−Ｐ
（Ｓ）_２−、−ＰＯ（Ｒ”）−、−ＰＯ（ＯＣＨ_３）−及び−ＰＯ（ＮＨＲ^Ｈ）
−であり、ここで、Ｒ^Ｈは、水素及びＣ_１−４−アルキル基から選択され、Ｒ”
はＣ_１−６−アルキル基及びフェニル基から選択される。そのようなヌクレオシ
ド間結合の例は、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＣＨ_２−、−
ＣＨ_２−ＣＨＯＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、
−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ＝（次の単量体との結合に使われる場合はＲ^５を含む）、−
ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ ^Ｈ −、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ ^Ｈ −ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＳ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｎ
Ｒ^Ｈ−Ｃ（＝ＮＲ^Ｈ）−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−
ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＨ_２ −ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−Ｏ−
ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−
、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｎ＝（次の単量体との結合に使われ
る場合はＲ^５を含む）、−ＣＨ_２−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−、−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２ −
、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−、−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２ −、−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｓ−、−Ｓ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｃ
Ｈ_２−Ｓ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−、−Ｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝（次の単量体
との結合に使われる場合はＲ^５を含む）、−Ｓ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ _２ −ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｓ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２−、−
ＣＨ_２−ＳＯ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＳＯ２−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＳＯ−Ｏ−、−
Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２ −ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２ −
ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−Ｓ（Ｏ）_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−ＣＨ_２−、−
Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｓ）_２ −Ｏ−
、−Ｓ−Ｐ（ Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｓ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−Ｐ（Ｓ）_２−
Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｓ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｓ−、−Ｏ−Ｐ（Ｓ）_２ −Ｓ−、−Ｓ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｓ−、−Ｓ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｐ（Ｓ） _２ −Ｓ−、−Ｏ−ＰＯ（Ｒ”）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（ＯＣＨ_３）−Ｏ−、−Ｏ−
ＰＯ（ＯＣＨ_２ＣＨ_３）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−Ｒ）−Ｏ−、
−Ｏ−ＰＯ（ＢＨ_３）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（ＮＨＲ^Ｎ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ） _２ −ＮＲＨ−、−ＮＲＨ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ，ＮＲ^Ｈ）−Ｏ−、
−ＣＨ_２−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−、Ｐ（Ｏ）_２−ＣＨ_２−及び−Ｏ−Ｓｉ（
Ｒ”）_２−Ｏ−が挙げられ、これらの中で、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−ＣＨ _２ −ＮＲ^Ｈ−Ｏ−、−Ｓ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（
Ｏ，Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｓ）_２−Ｏ−、−ＮＲ^Ｈ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ
−Ｐ（Ｏ，ＮＲ^Ｈ）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（Ｒ”）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（ＣＨ_３）
−Ｏ−及び−Ｏ−ＰＯ（ＮＨＲ^Ｎ）−Ｏ−が特に好ましい。ここで、Ｒ^Ｈは水素
及びＣ_１−４−アルキル基から選択され、Ｒ”はＣ_１−６−アルキル基及びフェ
ニル基から選択される。更なる例は、Ｍｅｓｍａｅｋｅｒらにより「構造生物学
における最近の見解」（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｓｔｒｕｃｔ
ｕａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ）１９９５，５，３４３−３５５に与えられている。こ
れらヌクレオシド間結合の左側は置換基Ｐ^＊として５員環に結合しているのに対
し、右側は前の単量体の５’の位置に結合している。 【００６４】 また、このことから当該のＬ−リボ−ＬＮＡが５’−末端単量体である場合に
は、基Ｐもまた５’−末端基を表わしてもよいことが明白である。このような５
’−末端基の例としては、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アル
キル、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−ア
ルキルカルボニルオキシ、任意に置換されたアリールオキシ、リン酸基、二リン
酸基、三リン酸基及び−Ｗ−Ａ’であり、ここで、Ｗは−Ｏ−、−Ｓ−及び−Ｎ
（Ｒ^Ｈ）−から選択され、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６−アルキルから選択される。
また、Ａ’はＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性
な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選択される（ここで、最後の
基は置換基Ｂに対して定義されたスペーサーを含んでよい）。 【００６５】 本明細書及び特許請求範囲においては、「リン酸基」、「二リン酸基」それに
「三リン酸基」という用語は、それぞれ、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２ −Ｏ− ，−Ｏ−
Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２ −Ｏ− それに−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−Ｐ（Ｏ） _２ −Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ− の式で表わされる基を意味する。 【００６６】 特に注目に値する実施態様においては、基Ｐは、リン酸基、二リン酸基及び三
リン酸基から選択された５’末端基を表わす。中でも一般式ＩＩの三リン酸基に
よる変異体は、酵素、特に核酸に活性をもつ酵素の作用を受ける基質として注目
に値する。 【００６７】 同様に、置換基Ｐ^＊は、当該のＬ−リボ−ＬＮＡが３’末端単量体である場合
には、基Ｐもまた３’末端基を表わしてもよいことは明白である。このような３
’末端基の例は、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、
任意に置換されたＣ_１−６−アルキルカルボニルオキシ、任意に置換されたアリ
ールオキシ及び−Ｗ−Ａ’であり、ここで、Ｗは−Ｏ−，−Ｓ−及び−Ｎ（Ｒ^Ｈ ）−から選択され、このＲ^Ｈは、水素及びＣ_１−６−アルキルから選択される。
また、Ａ’は、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活
性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選択される（ここで、最後
の基は置換基Ｂに対して定義されたスペーサーを含んでよい）。 【００６８】 本発明の好ましい具体例ではオリゴマーは次式ＩＩＩで表わされる。 【００６９】 【化９】 【００７０】 ここで、ｑは１−５０； ｎ（０），．．，ｎ（ｑ）は各々独立に０〜１００００であり； ｍ（１），．．，ｍ（ｑ）は各々独立に１〜１００００であり； 但し、ｎ（０），．．，ｎ（ｑ）とｍ（１），．．，ｍ（ｑ）の合計は２〜１
５０００であり； Ｇは５’末端基を表わす。Ｎｕは各々独立に天然ヌクレオシドとヌクレオシド
類縁体から選択されたヌクレオシドを表わす。Ｌ−リボ−ＬＮＡは各々独立にヌ
クレオシド類縁体を表わす。Ｌは各々独立にＮｕとＬ−リボ−ＬＮＡから選択さ
れた二つの基の間のヌクレオシド間結合を表わす。または、このＬはＧ^＊と相ま
って３’−末端基を表わす。（Ｌ−リボ−ＬＮＡ）−Ｌは各々独立に上に定義さ
れた一般式１のヌクレオシド類縁体を表わす。または好ましくは上に定義された
一般式Ｉａのヌクレオシド類縁体を表わす。 【００７１】 この実施態様の範囲内で、そして一般的に、本発明は、異なった核酸塩基、特
に、チミン、シトシン及びウラシルから選択された核酸塩基と、アデニン及びグ
アニンから選択された核酸塩基の両者を有するＬ−リボ−ＬＮＡ類を含むという
興味深い可能性を提供する。１つの実施態様においては、オリゴマーは、Ｂ（式
ＩまたはＩａの）がアデニン及びグアニンを含むグループから選択された、少な
くとも１つのＬ−リボ−ＬＮＡと、Ｂがチミン、シトシン及びウラシルを含むグ
ループから選択された、少なくとも１つのＬ−リボ−ＬＮＡとを含んでよい。 【００７２】 上に定義されたオリゴマーとは別に、本発明は、例えばオリゴマーを調製する際
に、核酸ポリメラーゼ、ポリヌクレオチドキナーゼ、ターミナルトランスフェラ
ーゼのための基質として、さらに治療剤として有用な単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ
類も提供する。これについては後述する。単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類は、全体
の構造においては（特に可能なビラジカルに関しては）、オリゴマーの構成要素
として定義されたＬ−リボ−ＬＮＡ類に対応する。しかし基ＰとＰ^＊に関しては
、単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類は、下に説明するように少し異なったものとなる
。さらに単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類は、特にそれが化学合成によってオリゴマ
ーに組み込まれる場合は、官能基を保護する基を含んでもよい。 【００７３】 本発明は、さらに一般式ＩＩの単量体のＬ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド（Ｌ−
リボ−ＬＮＡ）に関する。 【００７４】 【化１０】 【００７５】 ここで、置換基Ｂは、核酸塩基、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性
な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドから選択さ
れ；Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−及び−Ｃ（Ｒ^６ Ｒ^６＊）−から、
好ましくは−Ｏ−、−Ｓ−及び−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−から選択され； Ｑ及びＱ^＊は、各々独立に、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒド
ロキシ、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、Ａｃｔ−Ｏ−、メルカプト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ａｃｔ
−Ｓ−、Ｃ_１−６−アルキルチオ、アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、Ａｃｔ−
Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、単量体またはジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ、任意に置換され
たＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、任意に置換さ
れたＣ_２−６−アルケニル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニルオキシ、任
意に置換されたＣ_２−６−アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６−アルキニル
オキシ、リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、ＤＮＡインターカレーター、光化
学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基、リガンド、
カルボキシ、スルホノ、ヒドロキシメチル、Ｐｒｏｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−
Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチル、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｎ（
Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、カルボキシメチル、スルホノメチルから選択され、ここで、
Ｐｒｏｔはそれぞれ、−ＯＨ、−ＳＨ及び−ＮＨ（Ｒ^Ｈ）に対する保護基であり
、Ａｃｔはそれぞれ、ＯＨ、−ＳＨ及び−ＮＨ（Ｒ^Ｈ）に対する活性化基であり
、Ｒ^Ｈは、水素及びＣ_１−６−アルキル基から選択され； Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊ ）_{ｒ＋ｓ＋１}−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ ^＊ ）_ｒ−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊ Ｒ^＊）_ｓ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ −Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_{ｒ ＋ｓ} −Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊ ）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｎ（
Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−及び−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ ^＊ ）−から選択されるビラジカルを表わし；ここで、Ｒ^＊は、上記でオリゴマー
に対して定義されたものであり；ＱまたはＱ^＊に含まれない各々の置換基Ｒ^１＊ 、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ５及びＲ５^＊は、上記でオリゴマーに対して定義されたもの
である。 【００７６】 単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類も、また、それらの塩基性塩及びその酸付加塩を
含む。 【００７７】 さらに、化学的にオリゴヌクレオチドを合成する際の通常の条件で、活性があ
る全ての化学基（全ての核酸塩基を含む）は、この分野で公知のように、所望に
より官能基が保護されることを理解すべきである。このことは、単量体のＬ−リ
ボ−ＬＮＡのヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、スルホノ及びメルカプトのよう
な基は、核酸塩基と同様に、所望により官能基が保護されるということを意味す
る。保護（及び脱保護）は、当業者に周知の方法で行われる（例えば、Ｇｒｅｅ
ｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．、「有機合成における保護基（
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎ−ｔｈｅ
ｓｉｓ）」、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ、Ｎ．Ｙ．（１９９１）及びＭ．Ｊ
．Ｇａｉｔ、「オリゴヌクレオチド合成（Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓ
ｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、ＩＲＳ Ｐｒｅｓｓ、（１９８４）を参照）。 【００７８】 ヒドロキシ基に対する保護基の例示として、４，４’−ジメトキシトリチル（
ＤＭＴ）、４−モノメトキシトリチル、（ＭＭＴ）のような任意に置換されたト
リチル（Ｔｒ）、トリチル、任意に置換された９−（９−フェニル）キサンテニ
ル（ｐｉｘｙｌ）、任意に置換されたエトキシカルボニルオキシ、ｐ−フェニル
アゾフェニルオキシカルボニルオキシ、テトラヒドロピラニル（ｔｈｐ）、９−
フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、メトキシテトラヒドロピラニル
（ｍｔｈｐ）及びトリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩ
ＰＳ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ
）それにフェニルジメチルシリルのようなシリルオキシ、ベンジルオキシカルボ
ニル、即ち２−ブロモベンジルオキシカルボニルのような置換されたベンジルオ
キシカルボニルエーテル、ｔ−ブチルエーテル、メチルエーテルのようなアルキ
ルエーテル、アセタール（２つのヒドロキシ基を含む）、アセチル、または、例
えば、クロロアセチルまたはフルオロアセチルのようなハロゲン置換アセチルの
ようなアシロキシ、イソブチリル、ピバロイル、ベンゾイル及び置換されたベン
ゾイル、メトキシメチル（ＭＯＭ）、ベンジルエーテル、または、例えば、２，
６−ジクロロベンジル（２，６−Ｃｌ2Ｂｚｌ）のような置換されたベンジルエ
ーテルが挙げられる。 あるいは、ヒドロキシ基は、所望によりリンカーを介し
て固体支持体に付着することによって、保護されてもよい。 【００７９】 アミノ基に対する保護基の例示として、Ｆｍｏｃ（フルオレニルメトキシカル
ボニル）、ＢＯＣ（ｔ−ブチルオキシカルボニル）、トリフルオロアセチル、ア
リルオキシカルボニル（ａｌｌｏｃ，ＡＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ
，Ｃｂｚ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−ＣｌＺ）のような置換
されたベンジルオキシカルボニル、モノメトキシトリチル（ＭＭＴ）、ジメトキ
シトリチル（ＤＭＴ）、フタロイル及び９−（９−フェニル）キサンテニル（Ｐ
ｉｘｙｌ）が挙げられる。 【００８０】 カルボキシル基に対する保護基の例示として、アリルエステル、メチルエステ
ル、エチルエステル、２−シアノエチルエステル、トリメチルシリルエチルエス
テル、ベンジルエステル（Ｏｂｚｌ）、２−アダマンチルエステル（Ｏ−２−Ａ
ｄａ）、シクロヘキシルエステル（ＯｃＨｅｘ）、１，３−オキサゾリン、オキ
サゾ−ラ−、１，３−オキサゾリジン、アミド及びヒドラジドが挙げられる。 【００８１】 メルカプト基に対する保護基の例示として、トリチル（Ｔｒ）、アセトアミド
メチル（ａｃｍ）、トリメチルアセトアミドメチル（Ｔａｃｍ）、２，４，６−
トリメトキシベンジル（Ｔｍｏｂ）、ｔ−ブチルスルフェニル（ＳｔＢｕ）、９
−フルオレニルメチル（Ｆｍ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐ
ｙｓ）及び４−メチルベンジル（Ｍｅｂ）が挙げられる。 【００８２】 さらに、特に、本発明に従って単量体のＬ−リボ−ＬＮＡをオリゴマ−に組み
込む場合は、単量体のＬ−リボ−ＬＮＡに含まれる全ての核酸塩基を保護するこ
とが必要または望ましいと思われる。本明細書においては、「保護された核酸塩
基」という用語は、当該の核酸塩基が、当業者にはよく知られた基から選択され
た保護基を有していることを意味する（例えば、「オリゴヌクレオチド及び類縁
体の実験計画（Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ
ａｎｄＡｎａｌｏｇｓ）」、２０巻、（Ｓｕｄｈｉｒ Ａｇｒａｗａｌ 編）、
Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，１９９３，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ；Ｓ．Ｌ．Ｂｅａｕ
ｃａｇｅ ａｎｄ Ｒ．Ｐ．Ｉｙｅｒ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９３，４９
，６１２３；Ｓ．Ｌ．Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ Ｒ．Ｐ．Ｉｙｅｒ，Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ，１９９２，４８，２２２３；Ｅ．Ｕｈｌｍａｎｎ ａｎｄ Ａ．
Ｐｅｙｍａｎ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，９０，５４３を参照）。これらの例示とし
て、ベンゾイル、イソブチリル、ｔ−ブチル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、４
−クロロベンジルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチル、９−フルオレニ
ルメチルオキシカルボニル、４−メトキシベンゾイル、４−メトキシトリフェニ
ルメチル、任意に置換されたトリアゾロ、Ｐ−トルエンスルホニル、任意に置換
されたスルホニル、イソプロピル、任意に置換されたアミジン、任意に置換され
たトリチル、フェノキシアセチル、任意に置換されたアシル、ピクシル（ｐｉｘ
ｙｌ）、テトラヒドロピラニル、任意に置換されたシリルエ−テル及び４−メト
キシベンジルオキシカルボニルが挙げられる。「オリゴヌクレオチド共役体の実
験計画（Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｏｒｉｇｏ−ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｃｏ
ｎｊｕｇａｔｅｓ）、分子生物学の方法（Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、２６巻、（Ｓｕｄｈｉｒ Ａｇｒａｗａｌ 編）、Ｈｕ
ｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、１９９３、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ．の第１章」、及び、「
Ｓ．Ｌ．Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ Ｒ．Ｐ．Ｉｙｅｒ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
，１９９２，４８，２２２３」が、更なる好適な例を開示している。 【００８３】 好ましい実施態様においては、単量体のＬ−リボ−ＬＮＡの基Ｂは、好ましく
は核酸塩基及び保護された核酸塩基から選択される。 【００８４】 本発明に従った単量体のＬ−リボ−ＬＮＡの実施態様においては、Ｑ及びＱ^＊ の内の１つ、好ましくはＱ^＊は、Ａｃｔ−Ｏ−、Ａｃｔ−Ｓ−、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ ^Ｈ ）−、Ａｃｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｓ−ＣＨ_２−及びＡｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）
−ＣＨ_２−から選択される基を表わし、Ｑ及びＱ^＊の他方、好ましくはＱは、水
素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、メルカ
プト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ｃ_１−６−アルキルチオ、アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ ）−、モノまたはジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６ −アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、任意に置換されたＣ_{２− ６} −アルケニル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニルオキシ、任意に置換さ
れたＣ_２−６−アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６−アルキニルオキシ、リ
ン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性
な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基、リガンド、カルボキシ
、スルホノ、ヒドロキシメチル、Ｐｒｏｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチル、Ｐｒ
ｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、カルボキシメチル及びスルホノメチルから選択さ
れる基を表わし、そしてＲ^Ｈは、水素及びＣ_１−６−アルキル基から選択される
。 【００８５】 上記の場合において、Ｐｒｏｔ基は、それぞれ、−ＯＨ、−ＳＨ及び−ＮＨ（
Ｒ^Ｈ）に対する保護基を表わす。安定で可逆的な保護基が必要であることを考慮
しながらも、これらの保護基は、それぞれ、前記のヒドロシル基、メルカプト基
及びアミノ基に対する保護基として定義されたものと同一のものから選択される
。しかしながら、−ＯＨに対する保護基は、全て、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ
）及びモノメトキシトリチル（ＭＭＴ）のような任意に置換されたトリチル、ト
リチル、９−（９−フェニル）キサンテニル（ｐｉｘｙｌ）、任意に置換された
テトラヒドロピラニル（ｔｈｐ）（ホスホルアミダイトによるオリゴヌクレオチ
ド合成のための、ヒドロキシ基に対する更なる好適な保護基は、Ａｇｒａｗａｌ
編「オリゴヌクレオチド共役体の実験計画（Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｏｒ
ｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｃｏｎ−ｊｕｇａｔｅｓ）、分子生物学の方法（
Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、２６巻、Ｈｕｍａ
ｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（１９９４）」及び「オリゴヌクレオチ
ドと類縁体の実験計画（Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔ
ｉｄｅｓ ａｎｄ Ａｎａｌｏｇｓ）、２０巻、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、１９
９３、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ」に記載されている）から選択されるか、またはアセ
タールとして保護されるのが好ましく；−ＳＨに対する保護基は、全て、ジメト
キシトリチル（ＤＭＴ）及びモノメトキシトリチル（ＭＭＴ）のような任意に置
換されたトリチル、トリチル、９−（９−フェニル）キサンテニル（ｐｉｘｙｌ
）、任意に置換されたテトラヒドロピラニル（ｔｈｐ）（ホスホルアミダイトに
よるオリゴヌクレオチド合成のための、メルカプト基に対する更なる好適な保護
基も、上記のＡｇｒａｗａｌに記載されている）から選択されるのが好まく；そ
して、ＮＨ（Ｒ^Ｈ）に対する保護基は、全て、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）及
びモノメトキシトリチル（ＭＭＴ）のような任意に置換されたトリチル、トリチ
ル、９−（９−フェニル）キサンテニル（ｐｉｘｙｌ）、任意に置換されたテト
ラヒドロピラニル（ｔｈｐ）（ホスホルアミダイトによるオリゴヌクレオチド合
成のための、アミノ基に対する更なる好適な保護基も、上記のＡｇｒａｗａｌ
によって記載されている）から選択されるのが好ましい。 【００８６】 上記の実施態様において、並びに、本明細書に定義された全ての単量体のＬ−
リボ−ＬＮＡ類に対しても、Ａｃｔは、それぞれ、−ＯＨ、−ＳＨ及び−ＮＨ（
Ｒ^Ｈ）に対する活性基を表わす。このような活性基は、例えば、任意に置換され
たＯ−ホスホルアミダイト、任意に置換されたＯ−ホスホルトリエステル、任意
に置換されたＯ−ホスホルジエステル、任意に置換されたＨ−ホスホネート及び
任意に置換されたＯ−ホスホネートから選択される。 【００８７】 本明細書において、「ホスホルアミダイト」という用語は、式−Ｐ（ＯＲ^Ｘ）
−Ｎ（Ｒ^Ｙ）_２で表わされる基を表わし、ここで、Ｒ^Ｘは、例えば、メチル、２
−シアノエチルのような任意に置換されたアルキル基、またはベンジルを表わし
、各々のＲＹは、例えば、エチルまたはイソプロピルのような任意に置換された
アルキル基を表わし、または基−Ｎ（Ｒ^Ｙ）_２は、モノホリノ基（−Ｎ（ＣＨ_２ ＣＨ_２）_２Ｏ）を形成する。Ｒ^Ｘは、好ましくは２−シアノエチルを表わし、２
つのＲ^Ｙは、好ましくは同一のものであって、イソプロピルを表わす。このよう
に、特に適切なホスホルアミダイトは、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｏ−（２−シ
アノエチル）ホスホルアミダイトである。 【００８８】 単一の単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ、または、いくつかの単量体のＬ−リボ−Ｌ
ＮＡ類のために、本明細書で用いられる保護基は、本発明に従ってこの／これら
のオリゴマー（類）に組み込まれる場合に、官能基の脱保護を同時にまたは逐次
に行うことが可能なように選択されてよいと理解すべきである。この後者の状況
は、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キ
レ−ト基、レポーター基及びリガンドのような、１つまたはいくつかの「活性な
／官能的な」基（これらの基は、上記のようにスペーサーを介して結合してもよ
い）を、位置選択的に導入する可能性を開くものである。 【００８９】 好ましい実施態様において、Ｑは、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ
、ヒドロキシ、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、メルカプト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ｃ_１−６−アル
キルチオ、アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、モノまたはジ（Ｃ_１−６−アルキ
ル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_{１− ６} −アルキル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニル、任意に置換されたＣ_{２ −６} −アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_２−６−アルキニル、任意に置換
されたＣ_２−６−アルキニルオキシ、リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、ＤＮ
Ａインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基
、レポーター基、リガンド、カルボキシ、スルホノ、ヒドロキシメチル、Ｐｒｏ
ｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチル、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、カルボキ
シメチル及びスルホノメチルから選択され、ここで、Ｐｒｏｔは、それぞれ、−
ＯＨ、−ＳＨ及び−ＮＨ（Ｒ^Ｈ）に対する保護基であり、ＲＨは水素及びＣ_{１− ６} −アルキル基から選択され；そして、Ｑ^＊は、水素、アジド、ハロゲン、シア
ノ、ニトロ、ヒドロキシ、Ａｃｔ−Ｏ−、メルカプト、Ａｃｔ−Ｓ−、Ｃ_１−６ −アルキルチオ、アミノ、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、単量体またはジ（Ｃ_１−６−
アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換された
Ｃ_１−６−アルキル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニル、任意に置換され
たＣ_２−６−アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_２−６−アルキニル、任意
に置換されたＣ_２−６−アルキニルオキシ、ＤＮＡインターカレーター、光化学
的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基、リガンド、カ
ルボキシ及びスルホノから選択され、ここで、Ａｃｔは、それぞれ、−ＯＨ、−
ＳＨ及び−ＮＨ（Ｒ^Ｈ）に対する活性化基であり、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６−ア
ルキル基から選択される。 【００９０】 オリゴマーに組み込まれたＬ−リボ−ＬＮＡ類として、一般式ＩＩの単量体の
Ｌ−リボ−ＬＮＡ類は、種々の立体異性体をも表現してよい。従って、オリゴマ
ーに組み込まれたＬ−リボ−ＬＮＡ類に対して、上記の立体化学的な変異体は、
単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類の場合にも等しく適用できると考えられる（しかし
、この場合は、ＰをＱに置き換えるべきであることに注意すべきである）。 【００９１】 本発明の好ましい実施態様において、単量体のＬＮＡは、一般式ＩＩａを有す
る。 【００９２】 【化１１】 【００９３】 ここで、置換基は、これまでに定義した通りである。 【００９４】 さらに、置換基、ビラジカル、Ｒ^＊などの定義に関しては、本発明に従ってオ
リゴマーに対して上記で定義されたものと同じ好ましい実施態様が、単量体のＬ
−リボ−ＬＮＡの場合にも当てはまる。 【００９５】 本発明の単量体のＬ−リボ−ＬＮＡの、特に注目に値する実施態様において、
Ｂは、核酸塩基、好ましくはチミン、シトシン、ウラシル、アデニン及びグアニ
ン（特にアデニン及びグアニン）から選択される核酸塩基を表わし、Ｘは−Ｏ−
であり、Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｏ−（ＣＨ_２）_{１− ３} −、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｓ−（ＣＨ_２）_１−３−及び−（ＣＨ_２）_０−１−
Ｎ（Ｒ^Ｎ）−（ＣＨ_２）_１−３−、特に−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ_２−及び−
Ｒ^Ｎ−ＣＨ_２−から選択されるビラジカルを表わし、ここで、Ｒ^Ｎは、水素及び
Ｃ_１−４−アルキル基から選択される。ＱはＰｒｏｔ−Ｏ−を表し、Ｑ^＊はＡｃ
ｔ−ＯＨを表わし、各々のＲ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５及びＲ^５＊は水素を表わ
す。この実施態様において、Ｒ^Ｎは、また、ＤＮＡインターカレーター、光化学
的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート基、レポーター基及びリガンドか
ら選択されてもよい。 【００９６】 本発明の単量体のＬ−リボ−ＬＮＡ類の、さらに特別に注目に値する実施態様
において、Ｂは、核酸塩基、好ましくはチミン、シトシン、ウラシル、アデニン
及びグアニン（特にアデニン及びグアニン）から選択される核酸塩基を表わし、
Ｘは−Ｏ−であり、Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｏ−（Ｃ
Ｈ_２）_１−３−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｓ−（ＣＨ_２）_１−３−及び−（ＣＨ_２ ）_０−１−Ｎ（Ｒ^Ｎ）−（ＣＨ_２）_１−３−、特に−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ _２ −及び−Ｒ^Ｎ−ＣＨ_２−から選択されるビラジカルを表わし、ここで、ＲＮは
、水素及びＣ_１−４−アルキル基から選択される。Ｑは、ヒドロキシ、メルカプ
ト、Ｃ_１−６−アルキルチオ、アミノ、モノまたはジ（Ｃ_１−６−アルキル）ア
ミノ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_２−６−ア
ルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_２−６−アルキニルオキシ、リン酸塩、二
リン酸塩及び三リン酸塩から選択され、Ｑ^＊は、水素、アジド、ハロゲン、シア
ノ、ニトロ、ヒドロキシ、メルカプト、Ｃ_１−６−アルキルチオ、アミノ、単量
体またはジ（Ｃ_１−６−アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６−アルコ
キシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、任意に置換されたＣ_２−６−アル
ケニル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_{２ −６} −アルキニル及び任意に置換されたＣ_２−６−アルキニルオキシから選択さ
れる。Ｒ^３＊は、水素、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、任意に置換され
たＣ_２−６−アルケニルそれに任意に置換されたＣ_２−６−アルキニルから選択
され、各々のＲ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^５及びＲ^５＊は水素を表わす。またここで、Ｒ^Ｎ は、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キ
レート基、レポーター基及びリガンドから選択されてもよい。 【００９７】 本発明の目的の一つは、固相及び／または溶液相でオリゴマーに組み込むため
の、種々のＬ−リボ−ＬＮＡ類誘導体を供給することである。例示として、（１
Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−３−（チミ
ン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン、（１Ｒ，
３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−３−（シトシン
−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン、（１Ｒ，３
Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−３−（ウラシル−
１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン、（１Ｒ，３Ｒ
，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−３−（グアニン−１
−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン及び（１Ｒ，３Ｒ
，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−３−（アデニン−１
−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタンを、ホスホルアミ
ダイト法、ホスホルトリエステル法及びＨ−ホスホネート法を用いてそれぞれ組
み込むのに好適な単量体は、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−（２−シアノエ
トキシ（ジイソプロピル−アミノ）ホスフィノキシ）−１−（４，４’−ジメト
キシトリチルオキシメチル）−３−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビ
シクロ［２．２．１］ヘプタン、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ
−１−（４，４’−ジメトキシトリチルオキシメチル）−３−（チミン−１−イ
ル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−Ｏ−（２−クロ
ロフェニルホスフェート）及び（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−
１−（４−４’−ジメトキシトリチルオキシメチル）−３−（チミン−１−イル
）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−Ｏ−（Ｈ−ホスホ
ネート）、及び、それらの、３−（シトシン−１−イル）、３−（ウラシル−１
−イル）、３−（グアニン−１−イル）及び３−（アデニン−１−イル）類縁体
である。さらに、これらの単量体のメチレンオキシビラジカルを、メチレンチオ
、メチレンアミノまたは１，２−エチレンビラジカルで置換した類縁体も、また
、本発明の範囲内での特に注目に値する変異体を構成すると期待される。メチレ
ンチオ及びメチレンアミノ類縁体は、メチレンオキシ類縁体と同様に適用し得る
と考えられ、従って、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒド
ロキシメチル−３−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２
．１］ヘプタン、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキ
シメチル−３−（シトシン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．
１］ヘプタン、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシ
メチル−３−（ウラシル−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１
］ヘプタン、（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメ
チル−３−（グアニン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］
ヘプタン及び（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメ
チル−３−（アデニン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］
ヘプタンを組み込むために記載されたものに対応する特異的な試薬も、また、本
発明の範囲内の、特に注目に値する活性な単量体と考えるべきである。メチレン
アミン類縁体については、第二級アミンが、メチル及びベンジルのような基で任
意に置換されたＣ_１−６−アルキル、トリフルオロアセチルのような任意に置換
されたＣ_１−６−アルキルカルボニル、任意に置換されたアリールカルボニル及
び任意に置換されたヘテロアリールカルボニルから選択される置換基を有しても
よいということに注意すべきである。 【００９８】 また、本発明の別の目的として注目に値するのは、式ＩＩまたはＩＩａにおい
て、Ｂが「β−配位」している変異体である。 【００９９】 「単量体の調製」 好ましい実施態様において、２’−Ｏ及び４’−Ｃメチレン架橋を持つα−Ｌ
−リボ−ＬＮＡは、以下の方法で合成された。即ち、４−Ｃ−ヒドロキシメチル
−α−Ｄ−キシロフラノーズ１のベンゾイル化（Ｔ．Ｆ．Ｔａｍ ａｎｄ Ｂ．
Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｉｅｄ，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，１９７９，５７，２８１８
）により、ジ−Ｏ−ベンゾイル誘導体２を得た。次いでこれを８０％酢酸を用い
て加酢酸分解した後アセチル化して、１，２−ジ−Ｏ−アセチル化 フラノース
３とした。修正Ｖｏｒｂｒｕｅｇｇｅｎ法（Ｈ．Ｖｏｒｂｒｕｅｇｇｅｎ，Ｋ．
Ｋｒｏｌｉｋｉｅｗｉｃｚ ａｎｄ Ｂ．Ｂｅｎｎｕａ，Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，
１９８１，１１４，１２３４；Ｈ．Ｖｏｒｂｒｕｅｇｇｅｎ ａｎｄ Ｇ．Ｈｏ
ｅｆｌｅ，Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，１９８１，１１４，１２５６）を用いて、チミ
ンの原位置シリル化及びトリメチルシリルトリフレートを媒介にしたカップリン
グにより、チミンがβ−配位したヌクレオシド４を立体選択的に得た。この化合
物４をナトリウムメトキシドで処理することにより、脱アシル化してヌクレオシ
ドトリオール５を得た。４，４’−ジメトキシトリチル保護をした後、トシル化
して５’−Ｏ−４，４’−ジメトキシトリチル保護されたヌクレオシド誘導体７
を得た。塩基で閉環を誘導することにより二環式のヌクレオシド誘導体８を得た
。脱ベンジル化で二環式のヌクレオシド類縁体９を得、これをオリゴヌクレオチ
ドを合成するためのホスホルアミダイト誘導体１０に変換した。この例に用いら
れたカップリング法は、当業者によく知られているいくつかの可能な方法の中の
１つに過ぎない。 【０１００】 別のルートとして、図３（例１２〜１４）に示す順序の合成法を用いることが
できる。このようにして、ヌクレオシド５をトリメシル化してヌクレオシド１１
とし、これをＮａＯＨ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏを使って環化することができた。用い
た実験条件の下では、残っているメシルオキシ基のヒドロキシ基への変換が付随
して起こることが観察され、ヌクレオシド１２が生成した。実施例１４で概説す
るように標準ＤＭＴ保護により、ヌクレオシド８が生成することが期待される。
これは、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシドホスホルアミダイト誘導体１０を合
成する際の、便利な中間体である（図２）。 【０１０１】 記載した例は、本発明の手順や例を示すことを意図したものである。合成した
化合物の構造を、１Ｄ−ＮＭＲを使って検証した。 【０１０２】 スキーム１、２及び３に描かれた方法は、チミン以外のピリミジン塩基、例え
ば、ウラシル、シトシン、５−置換ウラシル、５−置換シトシン、並びにこれら
とは異なった置換をしたピリミジン類のα−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド誘導
体の合成にも、同様に使うことができる。これとは別に、公知の方法（Ｋｏｓｈ
ｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｒａｊｗａ
ｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｍｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ．，Ｏｌｓｅ
ｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９８，５４
，３６０７；Ｏｂｉｋａ，Ｓ．，Ｎａｎｂｕ，Ｄ．，Ｈａｒｉ，Ｙ．，Ａｎｄｏ
ｈ，Ｊ．，Ｍｏｒｉｏ，Ｋ．，Ｄｏｉ，Ｔ．，Ｉｍａｎｉｓｈｉ，Ｔ．Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９９８，３９，５４０１）を使って、ウラシル誘導
体を対応するシトシン誘導体に変換することができ、チミン誘導体を対応する５
−メチルシトシン誘導体に変換することができる。 【０１０３】 プリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド誘導体の合成については、数多く
の好適な合成法を考案することができる。以下に述べる「α面」という用語は、
天然ＲＮＡヌクレオシド単量体のα面のことであり、以下に述べる「β面」とい
う用語は、天然ＲＮＡヌクレオシド単量体のβ面のことであり、そして「β−プ
リンヌクレオシド」または「β−ピリミジンヌクレオシド」という用語は、核酸
塩基が、天然ＲＮＡヌクレオシド単量体中と同じように位置していることを意味
していることに注意すべきである。プリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド
誘導体に至る可能な合成ルートの例として、アラビノ配位した類縁体（２’−Ｏ
Ｈ基が、フラノース環のβ面に位置している）の環化を利用することができる。
これらのヌクレオシドは、対応するアラビノ配位の親ヌクレオシドから、５’酸
化、アルドール縮合及び還元を経て調製することができる。 【０１０４】 上記したような希望する環化のためには、保護基の操作及び５’−ＯＨ基（フ
ラノース環のβ面に位置している）の活性化をしておく必要がある。別の方法と
して、β−プリンリボフラノシルヌクレオシド（２’−ＯＨ基及び３’−ＯＨ基
がフラノース環のα面にあり、Ｃ３’位で附随した反転を持つフラノース環では
、そのβ面（または代わりにフラノース環のα面）に３’−ＯＨ基がある）の４
’−Ｃ−ヒドロキシメチル誘導体の２’−ＯＨ基を２’酸化し、続いて立体選択
的に還元（例えば、ＮａＢＨ４を使って）することによって、２’炭素原子に反
転した配位を持つ、希望するヌクレオシドが得られるはずである。上記の希望す
る環化のためには、保護基の操作及び５’−ＯＨ基（フラノース環のβ面に位置
している）の活性化をしておく必要がある。β−プリンリボフラノシルヌクレオ
シド（２’−ＯＨ基及び３’−ＯＨ基がフラノース環のα面にあり、Ｃ３’位で
付随した反転を持つフラノース環では、そのβ面（またはフラノース環のα面）
に３’−ＯＨ基がある）の４’−Ｃ−ヒドロキシメチル誘導体の２’炭素原子で
の配位の反転には、他の方法も有用に関与し得る。この方法の例として、Ｍｉｔ
ｓｕｎｏｂｕ反応、即ち２’−Ｏを活性化した誘導体（例えば、２’−Ｏ−メシ
ル、２’−Ｏ−トシル、または２’−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル誘導体
）と酢酸エステル、安息香酸エステル、アルコキシドなどのような Ｏ−求核基
との求核基置換反応がある。引き続いて、５’−ヒドロキシ−４’−ヒドロキシ
メチル誘導体を得るための脱保護、環化準備としての活性化（例えば、モノまた
はジメシル化、単量体またはジトシル化、または、単量体またはジトリフルオロ
メタンスルホン化による）、環化（必要に応じて、２’−ＯＨ基の脱保護の後に
）、及び脱保護の各操作で希望するプリン系α−Ｌ−リボヌクレオシドが得られ
る筈である。プリン系塩基は、好ましくは標的単量体の中で保護されるべきであ
り、しかもこの保護は、最良の合成ルートの間で達成し得るか、さもなければ、
最後の手段として、トリメチルシリル化、プリン系塩基の遊離アミノ基の保護、
及び脱シリル化によって達成し得ることに注目すべきである。出発物質のβ−プ
リンヌクレオシドの４’−Ｃ−ヒドロキシメチル誘導体は、１つの実施態様にお
いては、既知のＶｏｒｂｒｕｅｇｇｅｎ型カップリング法に従って、フラノース
誘導体３（図１）と適切に保護されたアデニンまたはグアニン誘導体とのカップ
リングによって調製されてもよい（例えば、図１のヌクレオシド４の合成を参照
）（Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．
，Ｒａｊｗａｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｍｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ
．，Ｏｌｓｅｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １
９９８，５４，３６０７）。 【０１０５】 天然のβ−プリンリボフラノシルヌクレオシド（フラノース環のα面に２’−
ＯＨ基があり、そしてβ面、またはＣ３’位に附随した反転を持つフラノース環
のα面に３’−ＯＨ基がある）についても、４’−Ｃ−ヒドロキシメチル基を追
加導入して、その後既知の方法、例えば、上記の方法を用いて上記のような配位
の反転が達成できると期待される。適切に誘導、保護されたピリミジン系ヌクレ
オシド、それがアラビノ配位したβ−ピリミジンフラノシルヌクレオシド、アラ
ビノ配位した４’−Ｃ−ヒドロキシメチル−β−ピリミジンフラノシルヌクレオ
シドであれ、または既に環化したピリミジン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ ヌクレオ
シドであれ、これらに対する酵素または化学的なグリコシル転移反応は、プリン
系のα−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド誘導体に至る可能性のある合成法である
。別法として、フラノースまたはヘキソースから出発して、４’−Ｃ−ヒドロメ
チル化、２−炭素原子での配位の反転及び環化、またはこれらの手順の内１つか
２つの手順（使用した出発物質によって何が必要になるとしても）が実行できる
。これに続いて、環化の前か後に、異なった塩基（プリン系またはピリミジン系
―必要に応じて保護されている）とカップリングすれば、必要な保護基の操作及
び／またはＯＨ基の活性化をした後に、ピリミジン系及びプリン系のα−Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡ ヌクレオシドの合成に有用な、ヌクレオシド誘導体を得ることがで
きると思われる。ピリミジン系またはプリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ ヌクレオ
シドを合成するさらに別の方法として、適切に誘導されたフラノースの誘導体、
例えば、フラノースアミンから希望する核酸塩基を、２つ以上の化学的工程で、
直接組み立てることも可能であろう。 【０１０６】 好ましい実施態様においては、例１５、１６及び１７（図４）に示した方法が
プリン系α−Ｌ−ＬＮＡ単量体、例えば、アデニンまたはグアニン誘導体を調製
するのに使うことができる。即ち、糖３がＮ−６−ベンゾイルアデニンと結合し
てヌクレオシド１３となり、これを選択的に脱アセチル化し、続いて２’−Ｏ−
トリフルオロメタンスルホニル誘導体に変換した。附随して行った酢酸ナトリウ
ムとの反応で、Ｃ２’位で反転した２’−Ｏ−アセチル誘導体１４が生成した。
完全に脱アシル化した後、アデニン部を再保護し、２つの第一級ヒドロキシ基を
選択的にメシル化し、水中で水酸化ナトリウムで処理した。一連の操作でジオキ
サンからα−Ｌ−ＬＮＡアデニンヌクレオシド１５が生成した。ヌクレオシド１
５のＤＭＴ保護に続いて、脱ベンジル化、３’−Ｏ−ホスフィチル化（Ｋｏｓｈ
ｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．，Ｒａｊｗａ
ｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｍｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ．，Ｏｌｓｅ
ｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９８，５４
，３６０７）がホスホルアミダイト誘導体１６を得る１つの可能なルートである
。１５を先に脱ベンジル化した後、第一級ヒドロキシ基の選択的なＤＭＴ保護を
し、３’−Ｏ−ホスフィチル化をするのは、ホスホルアミダイト誘導体１６を得
る別のルートである。 【０１０７】 プリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ ヌクレオシドの合成のための、上記の全ての
方法や手順は、また、ピリミジン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシドの別の合
成法として応用出来る。 【０１０８】 α−Ｌ−リボ−ＬＮＡのピリミジン系及びプリン系ヌクレオシドの上記の合成
法は、当然α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシドの２’−アミノ及び２’−チオ誘
導体の有用な合成法に導く。一例として、適切に活性化された５’−ＯＨ基に、
フラノ−ス環のβ面にある２’−アミノ基または２’−チオ基を作用さて環化す
れば、２’−アミノまたは２’−チオのピリミジン系またはプリン系α−Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡ ヌクレオシドを得ることができるはずである。また代わりに、フラ
ノ−ス環のα面にある適切に活性化された２’−ＯＨ基に、フラノ−ス環のβ面
にある５’−アミノまたは５’−チオ基を作用させて環化すれば、２’−アミノ
または２’−チオのピリミジン系またはプリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオ
シドを得ることができるはずである。さらに別の方法としては、アミノまたはチ
オ求核基（例えば、それぞれ、ベンジルアミン、チオ酢酸カリウム）を使って、
適切に活性化され、保護され、配位した誘導体、例えば、２’−Ｏ，５’−Ｏ−
ジメシル、２’−Ｏ，５’−Ｏ−ジトシル、または２’−Ｏ，５’−Ｏ−ジトリ
フルオロメタンスルホニルの各ヌクレオシドを環化させれば、α−Ｌ−リボ−Ｌ
ＮＡヌクレオシドの２’−アミノ及び２’−チオ誘導体を得ることができるはず
である。同様に、フラノース環のα面にある適切に活性化された２’−ＯＨ基に
、フラノース環のβ面にある５’−ＯＨ基を作用させれば、ピリミジン系または
プリン系の親α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシドを得ることができるはずである
。 【０１０９】 ピリミジン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシドのオリゴマー化に使われる方
法は、プリン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ ヌクレオシドにも成功裡に使えるだろう
と期待される。他の方法として、オリゴヌクレオチド及び類縁体の既知の自動化
された合成、または溶液相合成のいずれの方法、例えば、ホスホルトリエステル
法、Ｈ−ホスホネート法またはピリミジン系α−Ｌ−リボ−ＬＮＡヌクレオシド
の、オリゴマー化に使われるホスホルアミダイト法の、どの変形法も使うことが
できるはずである。 【０１１０】 「オリゴマーの調製」 本発明の、直鎖状、分岐鎖状（Ｍ．Ｇｒｏｔｌｉ ａｎｄ Ｂ．Ｓ．Ｓｐｒｏ
ａｔ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９５，４９５
；Ｒ．Ｈ．Ｅ．Ｈｕｄｓｏｎ ａｎｄ Ｍ．Ｊ．Ｄａｍｈａ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅ
ｍ．Ｓｏｃ．，１９９３，１１５，２１１９；Ｍ．Ｖｏｎ Ｂuｒｅｎ，Ｇ．Ｖ
．Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｋ．Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ，Ｇ．Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ，
Ｊ．Ｗｅｎｇｅｌ ａｎｄ Ｆ．Ｋｉｒｐｅｋａｒ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，
１９９５，５１，８４９１）、及び環状（Ｇ．Ｐｒａｋａｓｈ ａｎｄ Ｅ．Ｔ
．Ｋｏｏｌ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９２，１１４，３５２３）の
オリゴ及びポリヌクレオチドは、有機化学の分野ではよく知られた、普通の核酸
化学の重合技術を使って製造される。ホスホルアミダイト化学（Ｓ．Ｌ．Ｂｅａ
ｕｃａｇｅ ａｎｄ Ｒ．Ｐ．Ｉｙｅｒ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９３，
４９，６１２３；Ｓ．Ｌ．Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ Ｒ．Ｐ．Ｉｙｅｒ，Ｔｅ
ｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９２，４８，２２２３）が使われたが、例えば、Ｈ−
ホスホネート化学、ホスホルトリエステル化学、または酵素合成も使うことがで
きるであろう。ホスホルアミダイト法の標準カップリング条件は、オリゴヌクレ
オチド合成中に、ヌクレオシドホスホルアミダイトを活性化するための非常に効
率のよい試薬として、１Ｈ−テトラゾールの代わりにピリジン塩酸塩を用い、カ
ップリング時間を１０分ないし３０分に延長することで、若干修正された。 【０１１１】 希望する配列を合成した後、脱保護及び固体支持体からの切断（室温で１２時
間、メタノール中で濃アンモニアを使っての固体支持体からの切断と保護基の除
去）、及び、引き続いて、市販の使い捨てのカートリッジを使って逆相精製（脱
トリチル化を含む）を行うと、最終生成物のオリゴマーが得られる。またはＬ−
リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドの精製は、使い捨ての逆相ＨＰＬＣ及び／また
はエタノール及び／またはブタノールからの沈殿を使って行うことができる。合
成したオリゴヌクレオチド類縁体の純度及び組成を検証するために、キャピラリ
ーゲル電気泳動を使ったが、純度や組成は、逆相ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−ＭＳ
を使っても検証できる。 【０１１２】 一般に、本発明は、Ｌ−リボ−ＬＮＡで修飾されたオリゴヌクレオチドの調製
への、本明細書で定義されたＬ−リボ−ＬＮＡの使用を提供する。Ｌ−リボ−Ｌ
ＮＡで修飾されたオリゴヌクレオチドは、一般式ＩＩで定義されたものとは異な
った、修飾されたヌクレオシドを含むばかりでなく、通常のヌクレオシド（即ち
、リボヌクレオシド及びデオキシリボヌクレオシドのような天然由来のヌクレオ
シド）も含むと理解するべきである。 【０１１３】 さらに、所望により核酸塩基が保護され、及び所望により５’−ＯＨ基を保護
されたＬＮＡを固定している固体支持体は、ＬＮＡ単量体を３’末端に含み、Ｌ
ＮＡで修飾されたオリゴヌクレオチドの合成には、特に注目に値する物質である
。ここでの例としては、ＣＰＧが好ましい固体支持体である。これは容易に（商
業的に）入手可能な物質であり、３’位が官能基化され、所望により核酸塩基が
保護され、所望により５’−ＯＨ基が保護されたＬＮＡを、この物質の供給者が
指定する条件で、この上に結合する。例えば、ＢｉｏＧｅｎｅｘ Ｕｎｉｖｅｒ
ｓｉａｌ ＣＰＧ Ｓｕｐｐｏｒｔ（ＢｉｏＧｅｎｅｘ社，Ｕ．Ｓ．Ａ．）が使
うことができる。ここで、５’−ＯＨ基の保護基は、例えば、ＤＭＴ基であって
よく、３’官能基は、当該ＣＰＧ物質に合う条件を十分考慮して選択すべきであ
る。 【０１１４】 「応用」 本発明は、Ｌ−リボ−ＬＮＡ類の誘導体は、部分的に修飾されたオリゴヌクレ
オチドに組み込まれるとき、非修飾オリゴヌクレオチドに比較して、相補的ＤＮ
Ａ及びＲＮＡの両者に対し、これら修飾されたオリゴヌクレオチドの親和性が減
少するという驚くべき発見を開示する。しかしながら、完全にＬ−リボ−ＬＮＡ
で修飾されたオリゴヌクレオチドに組み込まれるとき、相補的ｓｓＤＮＡ及びｓ
ｓＲＮＡの、両者に対するハイブリダイゼーション性質の劇的な増加が観察され
る。記載された性質に加えて、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ（特定のＬ−リボ−ＬＮＡ
類の変異体）は、ハイブリダイゼーションするときに、ＲＮＡ及びＤＮＡ標的間
を識別する能力を有している。応用に応じて、完全に修飾されたＬ−リボ−ＬＮ
Ａオリゴヌクレオチドの使用は、かくして、特異性（オリゴヌクレオチドの一定
のサイズ）を損なうことなく標準オリゴヌクレオチドの親和性を大きく増加させ
、親和性（オリゴヌクレオチドのサイズの減少）を損なうことなく特異性を著し
く増加させるか、あるいはＲＮＡ標的に特異的にハイブリダイズするかの、いず
れかの、おもしろい可能性を与える。 【０１１５】 大きく増強されたハイブリダイゼーション性質に加えて、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修
飾オリゴヌクレオチドは、正常ＤＮＡ及びＲＮＡオリゴヌクレオチドの有用な多
くの物理化学的性質を提示する。ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの、非修飾オリ
ゴヌクレオチドの応答性を模倣する、塩化ナトリウム及び塩化テトラメチルアン
モニウムのような塩に対する応答性である優れた溶解性、種々のポリメラーゼに
対しプライマーとして作用するＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの性能、熱安定性
ＤＮＡポリメラーゼを使用する標的増幅反応において、プライマーとして作用す
るＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの性能、Ｔ４ポリヌクレオチドキナーゼに対す
る基質として作用する、ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの性能、ストレプトアビ
ジン被覆固体表面に特異的に捕捉された、ＰＣＲアンプリコンの配列を決めるビ
オチン化ＬＮＡｓの性能、特異的に補足されたアンプリコンの配列を決める、固
定化ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの性能、及び、非常に重要である、ストラン
ド侵入による特異的な標的二本鎖ＤＮＡの配列を決める、ＬＮＡ修飾オリゴヌク
レオチドの性能が期待には含まれる。それゆえ、これら新規ヌクレオシド類縁体
が、治療学、診断学及び分子生物学における、一般的に、オリゴヌクレオチドに
基づく技術の実施を改善する、非常に有用な道具であることは、当業者にとって
明らかである。 【０１１６】 本発明の目的は、オリゴヌクレオチド合成の当業者にはよく知られた操作及び
装置を用いてオリゴヌクレオチドに取り入れることができる、本発明に記載の単
量体Ｌ−リボ−ＬＮＡ類を提供することである。 【０１１７】 本発明の別の目的は、非修飾オリゴヌクレオチドによって形成される相当する
複合体よりも、実質的により高い親和性の二重体または三重体のいずれかを形成
する相補的オリゴヌクレオチドに対し、配列特異的方法でハイブリダイズするこ
とができる、完全または部分的Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリ
ゴマー）を提供することである。 【０１１８】 本発明の別の目的は、親和性を損なうことなくオリゴヌクレオチドの増強され
た特異性を得るための、完全Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの使用を
提供することである。 【０１１９】 本発明の別の目的は、Ｌ−リボ−ＬＮＡ類、正常ヌクレオシド及び他のヌクレ
オシド類縁体の両者を含む、完全または部分的修飾オリゴヌクレオチドを提供す
ることである。 【０１２０】 本発明の更なる目的は、「鎖置換」によって、ｄｓＤＮＡ分子における標的配
列に結合することのできる、非常に親和性のある完全修飾オリゴヌクレオチドを
創製するための、Ｌ−リボ−ＬＮＡｓの高親和性を開拓することである。 【０１２１】 本発明の更なる目的は、オリゴヌクレオチドに組み込まれたとき、相補性ヌク
レオシドに対する親和性が異なるＬ−リボ−ＬＮＡ類の異なったクラスを提供す
ることである。これは、例えば、正常な核酸塩基Ｇ、Ａ、Ｔ、Ｃ及びＵを、例え
ば、水素結合を変える可能性を有する誘導体と置換することによって達成するこ
とができる。 【０１２２】 本発明の別の目的は、ヌクレアーゼに対して、非修飾の対よりも、より抵抗性
があるＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドを提供することである。 【０１２３】 本発明の別の目的は、ハイブリダイズするときＤＮＡ及びＲＮＡ標的の間を識
別することのできる、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドを提供すること
である。相補性ＲＮＡオリゴヌクレオチドに対するα−Ｌ−リボ−ＬＮＡのＴｍ
は、相補性ＤＮＡに対して、たった２．７℃／修飾であったのに比べて、５．７
℃／修飾に増加されることが、驚くべきことに、Ｔｍ測定によって示された（実
施例１１、表３に示すように）。α−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴは、それゆえ、Ｄ
ＮＡに比べてＲＮＡに対する親和性が増加し、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡは、特異的
に、与えられたＲＮＡに対してハイブリダイズするが、同じ塩基配列を有するＤ
ＮＡに対してはしないという条件の創製が許容されることになる。このＲＮＡと
ＤＮＡの間を識別する性能は、以下に記載される多くの状態で開拓される。 【０１２４】 本発明の別の目的は、ＲＮＡｓｅＨを採用することができる、Ｌ−リボ−ＬＮ
Ａ修飾オリゴヌクレオチドを提供することである。 【０１２５】 本発明の付加的な目的は、ＤＮＡ及びＲＮＡポリメラーゼに対する基質として
作用することができ、それによって増殖しつつある核酸鎖に取り込まれるか、あ
るいは鎖終結因子として作用するかのいずれかである類縁体となり得る、Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡ類を提供することである。 【０１２６】 本発明の更なる目的は、治療薬として作用することのできるＬ−リボ−ＬＮＡ
類を提供することである。治療用ヌクレオシド類縁体の多くの例が知られており
、ここに開示されるヌクレオシド類縁体に類似した誘導体は、文献で公知の方法
を使って合成することができる（Ｅ．ＤｅＣｌｅｒｃｑ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ
．１９９５，３８，２４９１；Ｐ．Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ ａｎｄ Ｅ．ＤｅＣｌ
ｅｒｃｑ：Ｃｌａｓｓｉｃａｌ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ
Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｎｅｗ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ａｇｅｎｔｓ．Ａ Ｔｅｘ
ｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
；Ｅｄｓ．Ｐ．Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ，Ｔ．Ｌｉｌｊｅｆｏｒｓ
ａｎｄ Ｕ．Ｍａｄｓｅｎ；Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉ
ｓｈｅｒｓ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９９６，ｐ．４２５；Ｉ．Ｋ．Ｌａｒｓｅ
ｎ：Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ．Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒ
ｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；Ｅｄｓ．Ｐ．Ｋｒｏｇ
ｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ，Ｔ．Ｌｉｌｊｅｆｏｒｓ ａｎｄ Ｕ．Ｍａｄｓ
ｅｎ；Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ａｍｓｔｅ
ｒｄａｍ，１９９６，ｐ．４６０）。 【０１２７】 二本鎖ＲＮＡは、抗ウイルス活性及び腫瘍抑制作用を有することが明らかにな
っている（Ｓｈａｒｐ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２３０（１
）：９７−１０３，１９９５，Ｌｅｎｇｙｅｌ−Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０（１３）：５８９３−５，１９９
３，Ｌａｕｒｅｎｔ−Ｃｒａｗｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．ＡＩＤＳ Ｒｅｓ． Ｈ
ｕｍ． Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ，８（２）：２８０−９０，１９９２）。二
本鎖ＬＮＡ類は、治療活性二本鎖ＲＮＡ類の効果を模倣しており、従って、その
ような二本鎖ＬＮＡ類は、治療薬としての可能性を有しているようである。 【０１２８】 本明細書の中で使用されるとき、用語「天然の核酸」は、広い意味での核酸を
いい、例えば、全ての起源のそのままの細胞に存在する核酸、あるいは化学的ま
たは物理的手段によって、そのような起源から遊離されたウイルスまたは核酸、
あるいは増幅によってそのような元々の起源から誘導された核酸のようなものを
いう。天然の核酸は、一本鎖、二本鎖あるいは部分的に二本鎖であることができ
、そして相対的に純粋種であり、あるいは異なった核酸の混合物でもあり得る。
他の核酸及び他の細胞成分を含む粗生物試料の成分でもあり得る。一方、用語「
合成核酸」は、化学合成によって製造されたあらゆる核酸をいう。 【０１２９】 本発明は、また、核酸に基づいた治療学、診断学及び分子生物学におけるＬ−
リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの使用を提供する。Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾
オリゴヌクレオチドは、天然あるいは合成核酸の検出、捕捉、確認、定量及びフ
ラグメント化において、及びイン・ビボ及びイン・ビトロでの翻訳及び転写用の
阻害剤として使用することができる。多くの場合において、種々の分子が、Ｌ−
リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドに結合することは興味のあることである。
そのような分子は、オリゴヌクレオチドの末端に結合し、あるいは１またはそれ
以上の中間の位置に結合する。換言すれば、５’−あるいは３’−末端に結合し
たスペーサーを経て、オリゴヌクレオチドに結合する。そのような分子の代表的
な基は、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基
、キレート基、レポーター基及びリガンドである。一般的に、これらの分子で非
修飾ＤＮＡ及びＲＮＡオリゴヌクレオチドを標識する全ての方法は、Ｌ−リボ−
ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドを標識するのに使用することができる。同様に、
標識オリゴヌクレオチドの検出に使用される全ての方法は、一般的に、相当する
標識Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドに応用される。 【０１３０】 このように、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの使用は、細胞の標識
に使用することができ、標識は、細胞を非標識細胞から識別あるいは分離するこ
とを可能とする。 【０１３１】 「治療」 用語「鎖置換」は、オリゴヌクレオチドが、二本鎖ＤＮＡあるいはＲＮＡの相
補的標的配列に結合し、それで該標的鎖から他の鎖を置換するプロセスに関する
。 【０１３２】 本発明の態様において、「鎖置換」を実行することができるＬ−リボ−ＬＮＡ
修飾オリゴヌクレオチドは、「抗原」で近づくことを基礎とする新規医薬品の開
発において利用される。三重ラセンを造ることのできるオリゴヌクレオチドと対
照的に、そのような「鎖置換」オリゴヌクレオチドは、標的となるｄｓＤＮＡに
おいて、及び生理的イオン強度とｐＨで、どんな配列も許容される。 【０１３３】 「鎖置換」オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ標的配列が分子内水素結合のために
近づくことができないような場合における、アンチセンス利用に都合よく使用す
ることができる。そのような分子内構造は、ｍＲＮＡ類に生じ、アンチセンス利
用によるｍＲＮＡの翻訳を「停止」する試みのときに、著しい問題を引き起こす
。 【０１３４】 細胞ＲＮＡ類の他のクラスは、例えば、ｔＲＮＡ類、ｒＲＮＡ類、ｓｎＲＮＡ
類及びｓｃＲＮＡ類のような、それらの機能に重要な分子内構造を含んでいる。
これら高度に構造化されたＲＮＡ類のクラスは、タンパク質をコードしないが、
むしろ（ＲＮＡ／タンパク質粒子の形で）ｍＲＮＡスプライシング、ポリアデニ
ル化、翻訳、修正、染色体末端の完全性などの保持のような細胞機能範囲内で寄
与している。正常なオリゴヌクレオチドを効率的にハイブリダイズするのを阻害
しあるいは防止している、それらの構造の高次性のゆえに、ＲＮＡ類のこれらク
ラスは、アンチセンス標的として使用するのはこれまでは困難であった。しかし
ながら、本明細書に示したα−Ｌ−リボ−ＬＮＡの新しい驚くべき結果を得て、
α−Ｌ−リボ−ＬＮＡでこれらＲＮＡ類を標的にすることは、以下に記載するよ
うな可能性がある。 【０１３５】 多くの抗生物質が細菌のリボソームと作用し、翻訳を阻害することが知られて
いる。ある種の抗生物質（例えば、ストレプトマイシン、テトラサイクリン、ス
ペクチノマイシン、エデイン、ヒグロマイシン及びネオマイシン）は、細菌の１
６Ｓ−ｒＲＮＡの特異的領域に結合することが知られている［Ｍｏａｚｅｄ，Ｄ
．ａｎｄ Ｎｏｌｌｅｒ，Ｈ．Ｆ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８７，３２７（６１２１
），３８９］。同様に、他の抗生物質（例えば、クロラムフェニコール、エリス
ロマイシン、カルボマイシン及びベルナマイシンＢ）は、細菌の２３Ｓ−ｒＲＮ
Ａの特異的領域と反応する［Ｍｏａｚｅｄ，Ｄ．ａｎｄ Ｎｏｌｌｅｒ，Ｈ．Ｆ
．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，１９８７，６９（８），８７９］。同様のアプローチが
、また、高等生物でも可能である［Ｓｐａｎｇｌｅｒ，Ｅ．Ａ．ａｎｄ Ｂｌａ
ｃｋｂｕｒｎ，Ｅ．Ｈ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８５，２６０（１０），
６３３４］。 【０１３６】 更に、リボソームＲＮＡの、機能的及び近づくことのできる部位を標的とする
ＰＮＡ類［ＰＮＡ類（ペプチド核酸類）は、Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ塩基対様
式でＤＮＡと特異的に相互作用する分子であり、幾分熱安定性（Ｔｍ）が増加す
る］は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉにおいて翻訳を阻害することができ
［Ｇｏｏｄ，Ｌ．ａｎｄ Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．Ｅ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃ
ａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９８，９５（５），２０７３］、このことは、ｒＲ
ＮＡのいくつかの部位に結合する高親和性オリゴヌクレオチドが、ｒＲＮＡ結合
性抗生物質の効果を模倣するであろうことを示唆している。ＬＮＡは、ＰＮＡ類
よりもより高いＴｍでＲＮＡに結合するので、ＬＮＡ類は、細菌ｒＲＮＡに特異
的に結合し、細菌における翻訳を阻害するように設計され得るようである。この
アプローチの延長として、高等生物間のｒＲＮＡ配列において、一方では翻訳を
阻害するが、他方では阻害しないＬＮＡ−オリゴを設計するように、小さいがし
かし顕著な相異を開拓することが可能であろう。このアプローチの１つの明らか
な応用は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．（マラリア寄生虫）、Ｓｃｈｉｓｔ
ｏｓｏｍａ ｓｐｐ．（充血吸虫の原因となる）、種々のフィラリア（象皮病及
びオンコセルカ症の原因となる）、鉤虫（貧血症の原因となる）及びその他の病
原寄生虫における翻訳を阻害するＬＮＡ類を、特異的に開発することである。 【０１３７】 高親和性Ｌ−リボ−ＬＮＡ単量体の使用は、そのような標的ＲＮＡ類に対し効
果的にハイブリダイズするよう、充分な熱安定性を有するアンチセンスプローブ
の構築を容易にすることである。それゆえ、好ましい実施態様において、Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡは、ＲＮＡ類が見出される粒子の定性的及び／または定量的機能を調
節するように、それらＲＮＡとハイブリダイズできるよう、オリゴヌクレオチド
に対し充分な親和性を付与するように使用される。 【０１３８】 アンチセンス治療法において使用されるＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオ
チドは、ＲＮＡｓｅＨを採用するように高親和性及び性能という二重目的で設計
される。このことは、例えば、非修飾中心ＤＮＡセグメントの側面に、Ｌ−リボ
−ＬＮＡを有することによって達成することができる。更に、ＲＮＡとＤＮＡの
間を識別するα−Ｌ−リボ−ＬＮＡの特別な性能は、ＲＮＡに対するα−Ｌ−リ
ボ−ＬＮＡの優先があるので、種々の一般的な治療のアンチセンス応用において
開拓することができる。関心のあるＲＮＡに特異的なα−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリ
ゴヌクレオチドを設計することによって、標的ＲＮＡとして類似のヌクレオチド
配列のＤＮＡ断片に非特異的結合することが避けられ、それによってＤＮＡの構
造を変化することができ、そして、問題の遺伝子における突然変異を誘導する染
色体ＤＮＡに対する、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドの安定した会合
が防止される。ＤＮＡにおけるこの変化及び関連する突然変異は、好ましくない
毒性副作用をもたらす。 【０１３９】 本発明の更なる別の実施態様は、増加した特異性を有するリボザイムを設計す
ることである。リボザイムは、ＲＮＡｓｅ触媒活性を相補的ＲＮＡ標的と配列特
異的相互作用の性能を結合する、そのオリゴヌクレオチド及び類縁体である。こ
れらは、治療分子として多くの関心を引いており、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴ
ヌクレオチドの興味を引く特徴は、特異的ＲＮＡｓに対して向けられたリボザイ
ムのデザインを改善するために使用することができる。 【０１４０】 本発明の更なる別の実施態様は、活性タンパク質の、組み込まれた、そして、
必須の成分として、この２つの例はリボソームとテロメラーゼであるが、ＲＮＡ
を含有する細胞核タンパク質と特異的に反応するα−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌ
クレオチドである。テロメラーゼを阻害するα−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレ
オチドの能力は、重要な実用性に適用することができる。 【０１４１】 高等真核生物（ヒトを含む）の染色体は線状である。染色体末端の一次構造（
ＤＮＡ配列）は解明されており、全ての染色体末端のＤＮＡ配列は、特定の生物
において、突き出た一本鎖末端の単純な繰り返し単位からなることが判明してい
る。染色体末端はテロメアと呼ばれている。ヒトのテロメアにおいては、配列５
’−ＴＴＡＧＧＧ−３’（一本鎖の配列、セントロメアから染色体末端に向かう
方向）の二本鎖多重繰返しの長い伸張を含んでいる。全てのＤＮＡポリメラーゼ
は、相補性ＤＮＡ鎖の合成を開始するには、鋳型鎖とオリゴヌクレオチドプライ
マーの両者を必要とするので、ＤＮＡポリメラーゼそれ自身においては、染色体
の最末端を複製することはできない。このことは、染色体が複製されるとき、染
色体の漸進的な短縮を導くことになる。正常体細胞においてテロメアの長さを見
ると、テロメア長は、テロメアがほんの５〜１５ｋｂの長さになるまで、複製の
各サイクルの間に実際短くなっているようである。テロメアがその短さになると
、細胞は通常分裂を止め、そして徐々に老化の相に入る。これに対する唯一の例
外は幹細胞である。幹細胞は、生体の一生の間分裂を継続することのできる専門
の細胞である。興味あることに、幹細胞のテロメアは、長くなり続けている（１
０〜１５ｋｂ）。それらは、特定の酵素、テロメラーゼ、の活性でそのようにし
ている。テロメラーゼは、テロメアの突き出した一本鎖末端を特異的に延長する
ことができるユニークな酵素であり、それで、テロメアを安定的に延長すること
ができる。テロメアーゼは、リボ核タンパク酵素（即ち、ＲＮＡを含んだタンパ
ク質で、その酵素活性についてはＲＮＡに依存している）である。テロメラーゼ
の構造は、幾分、逆転写酵素（鋳型としてＲＮＡを使用し、ＤＮＡを合成するこ
とができるウイルスタンパク質）に類似している。 【０１４２】 テロメラーゼの酵素能力は、テロメアを延長するＲＮＡ分子の遊離テロメア３
’末端の正確な位置に依存している。テロメアの極末端あるいは多分テロメラー
ゼのＲＮＡ成分と特異的に反応することができる分子が、酵素を阻害するであろ
う。α−Ｌ−リボ−ＬＮＡは、これらの要件を満たすように設計することができ
る。このことは、大部分は容易に検出し得るテロメラーゼ活性を含んでいるガン
細胞とは大きく対照的に、正常体細胞は検出され得るテロメラーゼ活性を含んで
いないので、幹細胞は例外として、例えば、ガンの治療において興味あることで
あろう。ガン細胞は不死である、即ち、彼らは老化せず増殖を続け、そして生体
が死ぬまで、腫瘍塊を形成する。今日までのところ全ての証拠は、テロメラーゼ
活性はガン細胞の不死化に必須であることを示唆している。興味あることに、ガ
ン細胞のテロメラーゼは、幹細胞のテロメラーゼよりも実質的に短く、このこと
は、幹細胞が当たるよりも、早く「テロメア長バリヤー」に当たることを示して
おり、そしてテロメラーゼ活性を特異的に阻害する薬は抗癌薬として有用である
ことを示唆している。 【０１４３】 この観点において、ヒトガン細胞のテロメラーゼ活性を阻害する目的で、テロ
メラーゼＲＮＡ成分の特異的な部分を目指した、短いα−Ｌ−リボ−ＬＮＡ−オ
リゴマーを設計するため、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡの例外の性質を開拓することは
、重要な論点であろう。 【０１４４】 本発明の別の実施態様は、Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチド、特にアプタ
マ−としてのα−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドの使用である。この有望
な治療オリゴヌクレオチドの新しいクラスは、例えばリガンドレセプターのよう
な、与えられた高親和性の標的に特異的に結合するようイン・ビトロで選択され
る。それらの結合特性は、分子内核酸塩基の対合によって同時に保持された、３
次元構造を形成するオリゴヌクレオチドの能力の反映のようである。特に、α−
Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドを含むアプタマーは、治療目的のために開
拓することができる進歩的な性質を表示しているようである。 【０１４５】 ある場合には、遺伝子の発現をダウンレギュレーションするに有利であろうし
、また、別の場合には、それを活性化するのに有利であろう。Ｍｏｅｌｌｅｇａ
ａｒｄらによって示されたごとく（Ｍｏｅｌｌｅｇａａｒｄ，Ｎ．Ｅ．，Ｂｕｃ
ｈａｒｄｔ，Ｏ．，Ｅｇｈｏｌｍ，ｍ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｐ．Ｅ．Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９４，９１，３８９２）、「鎖置換
」を行い得るオリゴマーは、ＲＮＡ転写活性化因子として機能することができる
。本発明の態様において、「鎖置換」を行い得るＬＮＡ類は、治療的に興味のあ
る遺伝子を活性化するのに使用される。 【０１４６】 多くのウイルス感染及びガンの化学療法において、ヌクレオシド及びヌクレオ
シド類縁体の種々の形が効果的であることが証明された。Ｌ−リボ−ＬＮＡヌク
レオシドは、そのようなヌクレオシドを基礎とする薬として潜在的に有用である
。 【０１４７】 多くの場合において、二本鎖ＲＮＡ（ＤＳ−ＲＮＡ）は、特異的な医薬品活性
を有することが報告された。完全Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドを含
む二重ラセンは、そのような二本鎖薬剤として潜在的に有用であり、更に、二本
鎖α−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドは、生理活性二本鎖ＲＮＡ様分子の
レパートリーに重要な分子を加えるであろう高度な可能性がある。 【０１４８】 二本鎖ＬＮＡ（ＤＳ−ＬＮＡ）の治療的な可能性は、それゆえ、以下に例示す
るように、ガンまたはウイルス感染の治療である。 【０１４９】 ＤＳ−ＲＮＡ類の種々の型は、単独またはγ−インターフェロンとの相乗にお
いて、幾種類かのガン細胞の増殖を阻害することが報告されている［Ｂｏｒｅｃ
ｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｔｅｘ．Ｒｅｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１９８１，４１，５７
５；Ｓｈａｒｐ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９５，２３０
（１），９７］。ＤＳ−ＲＮＡ類は、培養でのガン細胞及び実験動物における腫
瘍の増殖を阻害する。少なくとも２つの二本鎖ＲＮＡ活性化酵素［二本鎖ＲＮＡ
活性化プロテインキナーゼ（ＰＫＲ）及びリボルクレアーゼＬ］が、ＤＳ−ＲＮ
Ａの腫瘍抑制活性に関係しているようにみえる［Ｌｅｎｇｙｅ−Ｐ，Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９３，９０（１３），５８９３］。
ＰＫＲは、ＤＳ−ＲＮＡによって直接活性化されるのに対して、ＲＮａｓｅＬは
、ＤＳ−ＲＮＡによって活性化されなければ潜在性である（２’−５’）オリゴ
アデニル酸シンテターゼを経由してＤＳ−ＲＮＡにより活性化される。ＤＳ−Ｒ
ＮＡは、また、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性を誘導し、そして、この活性
は、多分、ＤＳ−ＲＮＡの抗腫瘍活性に寄与している。 【０１５０】 天然に生じるＤＳ−ＲＮＡは、典型的には、ウイルス感染に関係しているが、
ＤＳ−ＲＮＡは、また、抗ウイルス活性を有することが明らかにされた。ＤＳ−
ＲＮＡは、ヒト免疫不全ウイルスＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２に対する抗ウイルス
活性を有することが明らかにされた［Ｈａｉｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｃｅｌｌ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９１，４６（１），９］。ＤＳ−ＲＮＡ、及び、従って
、ＤＳ−ＬＮＡは、それゆえに、ＡＩＤＳを治療する治療薬として可能性のある
候補である。 【０１５１】 ＤＳ−ＲＮＡは、更に、実際にその臨床効果が証明された。しかしながら、哺
乳類細胞は、多くのＤＳ−ＲＮＡ特異的ヌクレアーゼを含有しており、そして、
多分、それらの活性のせいで、ＤＳ−ＲＮＡは患者から急速に除去される。ＬＮ
Ａは、むしろＲＮＡに類似しており、ＲＮＡの化学的性状の大部分を占めており
（Ｋｏｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５４，３
６０７）、ＬＮＡは安定な二重鎖を形成し、ＲＮＡからＬＮＡへの構造変化は、
むしろ微妙である。それゆえ、適当な二本鎖ＬＮＡ類は、ある種のＤＳ−ＲＮＡ
類の効果を模倣し、従って、ＰＫＲ及び／または（２’−５’）オリゴアデニル
酸シンテターゼを活性化するようであり、ＬＮＡはそれ自体、ヌクレオチド鎖分
解性を表すことが証明されたので（Ｓｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍ
ｍｕｎ．１９９８，４５５）、ＤＳ−ＬＮＡ分子は、ＤＳ−ＲＮＡに関して改善
された治療効果を表す可能性がある。 【０１５２】 本発明は、また、上記に定義された医薬として活性なＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オ
リゴヌクレオチド、または医薬として活性なＬ−リボ−ＬＮＡ単量体を医薬とし
て許容される担体との組合せを含む医薬組成物に関する。 【０１５３】 そのような組成物は、経口、非経口（静脈内、腹腔内）、筋肉内、直腸内、鼻
内、皮内、膣内、口内、あるいは経肺投与に適応した型、好ましくは経口投与に
適した型であることができ、そしてそのような組成は、当業者によく知られた方
法、例えば「レミントンの薬事科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ Ｐｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、１７版、Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎ
ａｒｏ編、Ｍａｒｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，
ＰＡ，ＵＳＡ，１９８５」、更にその「最新版」、及び「医薬及び薬事科学（Ｄ
ｒｕｇｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
）シリーズ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ」におけるモノグラフで調製すること
ができる。 【０１５４】 「診断」 いくつかの診断学及び分子生物学手順が、起こり得る突然変異の多血症の存在
を示す標的核酸を同時に分析するために、異なったオリゴヌクレオチドのパネル
を利用して開発された。典型的には、オリゴヌクレオチドパネルが、標的核酸中
の特定の突然変異の存在が、それをハイブリダイズするところの固体支持体上の
位置により発現されるように、固体支持体上に前以て決められたパターンに固定
化される。核酸の分析において、異なったオリゴヌクレオチドのパネルを成功裏
に使用するための一つの重要な前提条件は、単一の適用されたハイブリダイゼー
ション条件下で、特定の標的配列に全て特異的であることである。相補的な標的
配列に対する標準オリゴヌクレオチドの親和性及び特異性は、その配列及びサイ
ズに強く依存しているので、この判断基準は、従来実現することは困難であった
。 【０１５５】 更に、細胞が含有しているであろうＲＮＡの種々の型を特徴付けるために、多
くの技術が開発された。評価の普通のアプローチは、核酸ハイブリダイゼーショ
ンであり、そのような技術の例は：ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、ド
ットブロットハイブリダイゼーション、逆ドットブロットハイブリダイゼーショ
ン、ノーザンハイブリダイゼーション、及び逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ｒｔ
ＰＣＲ）である。しばしば、これらの技術は、ＤＮＡ及びＲＮＡの両者を含有す
る試料で調製され、そして、しばしば、この事実は、ＤＮＡとＲＮＡの間が適切
に識別されるようにプローブが存在していたならば、容易に避け得るアッセイに
おいて、問題を創り出している。このことは、種々の組織試料で行われるｉｎ
ｓｉｔｕハイブリダイゼーションにおいて、特に問題である。ＲＮＡに対して高
度に識別的なハイブリダイゼーションの性質では、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴ
は、試料中でＲＮＡと特異的にハイブリダイズするように設計することができ、
それによって、同じヌクレオチド配列で不適当なＤＮＡ類とのハイブリダイゼー
ションから得られる、誤った可能性のある結果が除かれる。 【０１５６】 好ましい実施態様において、それゆえ、Ｌ−リボ−ＬＮＡ類は、プローブの親
和性及び／または特異性を増加する手段として、及び、相補配列に対する異なっ
たオリゴヌクレオチドの親和性を等しくする手段として、使用することができる
。本明細書中において開示したように、そのような親和性調節は、例えば、オリ
ゴヌクレオチド中で選択されたヌクレオシドを、類似の核酸塩基を担持するＬ−
リボ−ＬＮＡと置換することによって達成することができる。特に、これはα−
Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドに応用される。 【０１５７】 別の好ましい実施態様において、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの
高親和性及び特異性は、天然または合成核酸の配列特異的捕捉及び精製である。
一つの態様において、天然または合成核酸は、固体表面に固定化したＬ−リボ−
ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドと接触される。この場合、ハイブリダイゼーショ
ンと捕捉が同時に起こる。捕捉された核酸は、例えば、種々の周知技術の方法に
よって、表面において検出され、特徴付けられ、定量され、あるいは直接増幅さ
れ、または、それは、固定化された、修飾されたオリゴヌクレオチド及び捕捉さ
れた核酸を、例えば加熱あるいは低イオン強度のバッファーを用いて、脱ハイブ
リダイゼーション条件に付すことによって、そのような特徴づけ、あるいは増幅
が起こる前に、表面から遊離される。 【０１５８】 固体支持体は、広い範囲のポリマー材料、例えば、ＣＰＧ（制御された多孔性
ガラス）、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリカーボネートまたはポリエチレ
ンから選択され、そして種々の形、例えば、チューブ、マイクロタイタープレー
ト、スティック、ビーズ、フィルターなどをとり得る。Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オ
リゴヌクレオチドは、その５’または３’末端を経由して（あるいは、５’また
は３’末端につながったリンカーの末端を経由して）、通常オリゴヌクレオチド
の固定化に採用されている種々の化学的あるいは光化学的方法によって、または
、例えば、固定化ストレプトアビジンに対するビオチン化Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾
オリゴヌクレオチドの結合を経由する非共有結合によって、固体支持体に固定化
される。異なった個体支持体上での、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド
を固定化する１つの好ましい方法は、（ＷＯ９６／３１５５７）に記載されてい
るような、修飾オリゴヌクレオチドの５’−または３’−末端（リンカーを経由
していてもよい）に共有結合している光化学活性アントラキノンを用いた光化学
である。それゆえ、本発明は、また、ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドを担持する
表面を提供する。 【０１５９】 別の態様において、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドは、５’−また
は３’−末端のいずれかに共有結合でつながったリガンドを担持している。この
場合、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドは、溶液中で天然または合成核
酸に接触し、その後形成したハイブリッドは、リガンドに特異的に結合すること
のできる分子を担持する固体支持体上に捕捉される。 【０１６０】 更なる別の態様において、「鎖置換」を実行することのできるＬ−リボ−ＬＮ
Ａ修飾オリゴヌクレオチドが、前以て変性することなしに、天然及び合成核酸の
捕捉において使用される。そのような修飾オリゴヌクレオチドは、安定な分子内
構造を急速に生成するために、正常オリゴヌクレオチドによるアクセスが困難ま
たは不可能な標的配列の場合において、特に有用である。そのような構造を含む
核酸の例は、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｓｎＲＮＡ及びｓｃＲＮＡである。 【０１６１】 別の好ましい態様において、高特異性を目的として設計されたＬ−リボ−ＬＮ
Ａ修飾オリゴヌクレオチドは、核酸の配列におけるプライマーとして、及び、い
くつかのよく知られた増幅反応、例えばＲＣＲ反応、のいずれかにおけるプライ
マーとして使用される。ここに示すように、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレ
オチドの設計は、指数関数的または直線的な標的増幅を維持するかどうかを決定
する。増幅反応の産物は、正常ＤＮＡプライマーと共に生成した増幅産物の分析
に適用される、種々の方法によって分析することができる。Ｌ−リボ−ＬＮＡ修
飾オリゴヌクレオチドプライマーが直線的増幅を維持するように設計されている
、特定の場合において、得られたアンプリコンは、変成することなく相補的プロ
ーブによって標的とされることのできる一本鎖末端を担持している。そのような
末端は、例えば、固体表面に結合した他の相補的Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌ
クレオチドによるアンプリコンを捕捉するのに使用することができる。 【０１６２】 別の態様において、「鎖置換」を行うことのできるＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリ
ゴは、直線的または指数関数的増幅反応のいずれかにおけるプライマーとして使
用される。そのようなオリゴの使用は、増幅反応の後の段階におけるアンプリコ
ン再ハイブリダイゼーションと効果的に競合することによって、全体のアンプリ
コン収率を増強することが期待される。Ｄｅｍｅｒｓら（Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ
Ｒｅｓ．１９９５，２３，３０５０−３０５５）は、ＰＣＲ反応の総収率を増加
する手段として、高親和性、非伸張性オリゴの使用を開示している。オリゴマー
は、ＰＣＲ反応の後段におけるアンプリコン再ハイブリダイゼーションを阻害す
ることによって、これらの効果をもたらすと信じられている。３’末端をブロッ
クされたＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴは、同じ利点を提供するであろうことが期
待される。３’末端のブロックは、例えば、３’ヒドロキシル基を水素またはリ
ン酸と交換するような、多くの方法で達成することができる。そのような３’ブ
ロックＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴは、また、Ｙｕら（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕ
ｅｓ，１９９７，２３，７１４−７１６）により記載されたのと類似の方法にお
いて、密接に関連した核酸配列を選択的に増幅するのに使用することができる。 【０１６３】 近年、例えば、標的増幅反応によって生成したアンプリコンのリアルタイム検
出において使用することのできる、新しいクラスのプローブが発明された。その
ような新しいクラスのプローブの１つは、「分子ビーコン」と命名された。これ
らのプローブは、１つの末端には蛍光体（ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒ）を、他の末端
には消去剤（ｑｕｅｎｃｈｅｒ）分子を含む部分的自己相補性オリゴヌクレオチ
ドとして、合成される。溶液中で遊離しているとき、プローブは、蛍光シグナル
を消去するために蛍光体に充分に接近して消去剤が位置している、ヘアピン構造
内に（自己相補領域によってガイドされることによって）たたみ込まれている。
標的核酸にハイブリダイゼーションすると、ヘアピンが開いて、それによって、
蛍光体及び消去剤を分離し、そして蛍光シグナルを放出する。 【０１６４】 別のクラスのプローブは、「Ｔａｑｍａｎプローブ」と命名された。これらの
プローブは、また、蛍光体と消去剤分子を含んでいる。しかしながら、分子ビー
コンとは違って、蛍光体から蛍光シグナルを消去する消去剤の能力は、プローブ
のハイブリダイゼーション後もその標的配列に維持されている。その代わり、５
’に位置するプライマーからＴａｑｍａｎプローブの結合部位に合成を開始した
ポリメラーゼの５’エキソヌクレアーゼ活性の作用によって、プローブから、蛍
光シグナルが、消去剤または蛍光体のいずれかの物理的脱離により、ハイブリダ
イゼーション後に発生される。 【０１６５】 標的部位に対する高親和性は、プローブの両タイプにおいて重要な特徴であり
、従って、そのようなブローブは、かなり大きい（典型的には、３０ないし４０
ｍｅｒ）傾向がある。その結果、高品質のプローブの生産において、顕著な問題
に遭遇する。それゆえ、好ましい実施態様において、Ｔａｑｍａｎプローブ及び
分子ビーコンのサイズを減らすものの必要な親和性を保持することによって、そ
れらの生産及びそれに続く実施を改善するのに、ＬＮＡが使われる。 【０１６６】 更なる態様において、Ｌ−リボ−ＬＮＡ類は、新しい親和性対（全部または部
分的のいずれかに修飾されたオリゴヌクレオチド）を構成するのに使われる。親
和定数は、広い範囲にわたって、容易に調節することができ、非常に多くの親和
対が、設計され合成することができる。親和対の一部は、標準方法により関心の
ある分子（例えば、タンパク質、アンプリコン、酵素、多糖類、抗体、ハプテン
、ペプチド、ＰＮＡなど）に結合することができ、親和対の他の部分は、例えば
、ビーズ、膜、マイクロタイタープレート、スティック、チューブなどのような
固体支持体に結合することができる。固体支持体は、広い範囲のポリマー材料、
例えば、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリカーボネ−トあるいはポリエチレ
ンから選ぶことができる。親和対は、上記した多様な標的分子の選択的単離、精
製、捕捉及び検出において使用することができる。 【０１６７】 別の相補的Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチド（全部または一部修飾のいず
れか）との反応によって、Ｌ−リボ−ＬＮＡ標識分子を捕捉する原理は、新規な
親和対の無限の数を創製するために使用することができる。 【０１６８】 別の好ましい実施態様において、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドの
高親和性及び特異性は、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションに有用なプロー
ブの構築において利用される。例えば、Ｌ−リボ−ＬＮＡは、従来のＤＮＡプロ
ーブのサイズを減らすものの、必要な親和性は維持して、それによってプローブ
の反応速度及び試料標本の透過性能を増加するのに使用することができる。 【０１６９】 「精製」 本発明の別の実施態様は、Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチド、特に、α−
Ｌ−リボ−ＬＮＡオリゴヌクレオチドのＲＮＡに特異的な精製操作における使用
である。原核細胞、真核細胞または複雑な生物試料から核酸を単離するのに従来
から採用されている方法は、フェノールやクロロホルムのような有機溶媒を使用
している。典型的には、これらの核酸の単離は、プロテアーゼで行われる試料の
酵素的消化に始まり、次いでイオン界面活性剤を用いた細胞溶解、そしてフェノ
ールまたはフェノール／クロロホルムの組合せ抽出である。有機及び水層を分離
し、水層に分配された核酸をアルコール沈殿により回収する。しかしながら、フ
ェノール／クロロホルム混合物は、ヒトの皮膚に腐食性であり、有害な廃棄物と
考えられ、注意深く取り扱い、適切に廃棄されなければならない。加えて、フェ
ノール／クロロホルム法を用いた標準的な抽出は、ＲＮＡとＤＮＡの混合物とな
る。それゆえに、ＲＮＡとＤＮＡの間を識別し、それによって純粋なＲＮＡの試
料を得る、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡの性能を利用して単離した核酸を調製すること
は優れている。 【０１７０】 「キット」 本発明は、また、天然または合成核酸の単離、精製、増幅、検出、同定、定量
、あるいは捕捉用のキットであって、反応体、及び、ここに定義した、１つまた
はそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）を含むキ
ットを提供する。Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドは、好ましくは、該
反応体上に固定化されている。 【０１７１】 本発明は、また、天然または合成核酸の単離、精製、増幅、検出、同定、定量
、あるいは捕捉用のキットであって、反応体、及び、ここに定義した、１つまた
はそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡ類を含むキットを提供する。Ｌ−リボ−ＬＮＡ類
は、好ましくは、該反応体上に（例えば、上記した固定化技術を使用することに
よって）固定化されている。 【０１７２】 本発明に記載のキットに対して、反応体は、好ましくは、固体支持物質、例え
ば、ホウケイ酸塩ガラス、ソーダ石灰ガラス、ポリスチレン、ポリカーボネート
、ポリプロピレン、ポリエチレン、テレフタル酸ポリエチレングリコール、ポリ
酢酸ビニル、ポリビニルピロリジノン、ポリメタクリル酸メチル及びポリ塩化ビ
ニルから選択され、好ましくはポリスチレン及びポリカーボネートである。反応
体は、標本チューブ、バイアル、スライド、シート、フィルム、ビーズ、ペレッ
ト、ディスク、プレート、リング、ロッド、ネット、フィルター、トレイ、マイ
クロタイタープレート、スティック、または多葉片スティックの型である。 【０１７３】 キットは、典型的には、キットの使用につき最適条件を記述した使用説明書が
付随している。 【０１７４】 【実施例】 「概要」 反応は、無水溶媒を用いる場合は窒素雰囲気下で実施した。カラムクロマトグ
ラフィーは、シリカゲル６０（０．０４０〜０．０６３ｍｍ）を充填したガラス
カラムを用いて行った。カラムクロマトグラフィーの後、生成物を含んだ画分を
集め、減圧下で蒸発乾固し、更に真空乾燥して生成物を得た。有機相をＮａ２Ｓ
Ｏ４で乾燥した後、濾過を行った。蒸留範囲が６０〜８０℃の石油エーテルを用
いた。１Ｈ及び１３ＣのＮＭＲにおける化学シフト値δは、内部標準物質テトラ
メチルシランと比較して、同様に３１ＰのＮＭＲでは８５％Ｈ３ＰＯ４と比較し
て、ｐｐｍで示した。微量分析は、「Ｔｈｅ Ｍｉｃｒｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
， Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ」で実施した。 【０１７５】 以下の具体的な記載に加えて、図１〜４及び表１〜３を示す。 【０１７６】 「Ｌ−リボ−ＬＮＡモノマーの合成」 実施例１ ５−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｃ−ベンゾイルオキシメチル−３−Ｏ−ベンジル−１
，２−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ-グルコフラノース（２） ３−Ｏ−ベンジル−４−Ｃ−ヒドロキシメチル−１，２−イソプロピリデン
−α−Ｄ−グルコフラノース（１）（５．００ｇ、０．０３５ｍｏｌ）の無水ピ
リジン（６０ｃｍ３）溶液中に、氷冷、撹拌下で塩化ベンゾイル（４．１ｃｍ３
、０．０３５ｍｏｌ）を加えた。室温で４時間撹拌した後、反応混合物を０℃に
冷却し、Ｈ２Ｏ（５０ｃｍ３）を加え、その混合物をジクロルメタン（１００ｃ
ｍ３ｘ３）で抽出した。有機相を集め炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３０ｃ
ｍ３ｘ３）及びブライン（２０ｃｍ３ｘ３）で洗浄し、乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)し、
減圧下で蒸発乾固した。残留物を、溶離液として最初は石油エーテル／ジクロル
メタン（容量比１：１）、次いでジクロルメタン／メタノール（容量比９９：１
）を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、溶媒を減圧
下で蒸発させて、黄色油状物としてフラノース２（７．５０ｇ，９０％）を得た
。 δＨ （ＣＤＣｌ３）８．０２−７．２３(１５Ｈ，ｍ)、６．０８（１Ｈ，ｄ，
Ｊ４．２）、４．８１−４．５０（７Ｈ，ｍ）、４．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１．０
）、１．５９（３Ｈ，ｓ）、１．３７（３Ｈ，ｓ）。 δＣ （ＣＤＣｌ３）１６６．１、１６５．８、１３６．７、１３３．１、１３
３．０、１２９．９、１２９．７、１２９．６、１２９．５、１２８．５、１２
８．４、１２８．３、１２８．０、１２７．９、１１３．３、１０５．４、８６
．４、８５．１、８３．８、７２．３、６４．３、６３．８、２７．０、２６．
４。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ５２１［Ｍ＋Ｈ］＋。 実測値（％）Ｃ：６９．１；Ｈ：５．９；Ｃ３０Ｈ３２Ｏ８ 計算値Ｃ：６９．２；Ｈ：６．２。 【０１７７】 実施例２ ５−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｃ−ベンゾイルオキシメチル−３−Ｏ−ベンジル−１
，２−ジ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グルコフラノース（３） フラノース２（７．４０ｇ、０．０１４ｍｏｌ）の８０％酢酸溶液（６０ｃｍ３
）を、９０℃で９時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発乾固し、残留物をトルエ
ン（１０ｃｍ３ｘ３）で共蒸発させ、無水ピリジン（８０ｃｍ３）に溶解した。
無水酢酸（５．５ｃｍ３）を加え、その溶液を室温で４６時間撹拌した。混合物
を減圧下で蒸発乾固し、残留物をトルエン（１０ｃｍ３ｘ３）で共蒸発させ、ジ
クロルメタン（１５０ｃｍ３）に溶解した。その溶液を炭酸水素ナトリウムの飽
和水溶液（３０ｃｍ３ｘ３）及びブライン（３０ｃｍ３ｘ３）で洗浄した。次い
で乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)し、減圧下で濃縮した。残留物を、溶離液として最初は石
油エーテル／ジクロルメタン（容量１：１）、次にジクロルメタン／メタノール
（容量９９：１）を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製
し、減圧下で溶媒を蒸発して、透明の油状物としてアノマー混合物３（α:β＝
３：１、７．３３ｇ、９２％）を得た。この油状物は更なる精製を行わずに次工
程にて使用した。 δＣ （ＣＤＣｌ３）１６９．４、１６９．０、１６５．８、１６５．６、１３
７．０、１３３．２、１３３．１、１３３．０、１２９．６、１２９．５、１２
９．２、１２８．３、１２７．８、１２７．７、１２７．４、９９．４、９２．
３、８７．０、８３．２、８２．２、８０．７、７７．４、７６．９、７６．３
、７３．２、７２．４、２０．９、２０．８、２０．６、２０．３。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ５６２［Ｍ］＋。 【０１７８】 実施例３ １−（２−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｃ−ベンゾイルオキシメチ
ル−３−Ｏ−β−Ｄ−キシロフラノシル）チミン（４） アノマー混合物３（７．２６ｇ，０．０１３ｍｏｌ）及びチミン（３．２５ｇ
，０．０２８ｍｏｌ）の無水アセトニトリル（８０ｃｍ３）懸濁液に、撹拌下で
Ｎ，Ｏ−ビス(トリメチルシリル)アセトアミド（１９．１ｃｍ３，０．０７７ｍ
ｏｌ）を加えた。その反応混合物を６０℃で１時間撹拌し、次いで０℃に冷却し
た。その溶液にトリメチルシリルトリフラート（４．１ｃｍ３，０．０２３ｍｏ
ｌ） を１０分かけて滴下しながら加え、次に、その混合物を環流下で２２時間
加熱した。室温に冷却後、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３０ｃｍ３）を加
え、ジクロルメタン（１００ｃｍ３ｘ３）で抽出を行った。有機相を集め炭酸水
素ナトリウムの飽和水溶液（３０ｃｍ３ｘ３）及びブライン（５０ｃｍ３ｘ３）
で洗浄し、乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)し、そして減圧下で濃縮した。残留物を、溶離液
として、ジクロルメタン／メタノール（メタノール０．５〜２．０％、容量比）
を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、減圧下で溶媒
を蒸発させて、白色の固形物として、ヌクレオシド４（６．８８ｇ，８５％）を
得た。 δＨ （ＣＤＣｌ３）８．９７（１Ｈ，ｂｒ ｓ）、８．０４−７．２３(１６Ｈ
，ｍ)、６．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ３．６）、５．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ３．１）、
４．８９−４．５６（６Ｈ，ｍ）、４．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ２．６）、２．１３
（３Ｈ，ｓ）、１．７４（１Ｈ，ｄ、Ｊ０．８）。 δＣ （ＣＤＣｌ３）１６６．９、１６６．０、１６５．７、１６３．４、１５
０．４、１３６．２、１３５．２、１３３．５、１３３．４、１２９．８、１２
９．７、１２９．６、１２９．５、１２９．０、１２８．６、１２８．４、１２
８．２、１１２．０、８７．４、８６．０、８１．３、８０．３、７２．６、６
３．１、６２．９、２０．８、１２．３。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ６２９［Ｍ＋Ｈ］＋。 実測値（％）Ｃ：６４．４％；Ｈ：４．９％；Ｎ：４．４％、 Ｃ３４Ｈ３２Ｎ２Ｏ１００．２５Ｈ２Ｏ 計算値Ｃ：６４．５％；Ｈ：５．１％；Ｎ：４．４％。 【０１７９】 実施例４ １−（３−Ｏ-ベンジル−４−Ｃ−ヒドロキシメチル−β−Ｄ−キシロフラノシ
ル）チミン（５） ヌクレオシド４（９．００ｇ、０．０１４ｍｏｌ）のメタノール（１３０ｃ
ｍ３）溶液に、撹拌下ナトリウムメトキシド（３．８７ｇ、０．０７１６ｍｏｌ
）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで希釈塩酸で中和した。そ
の混合物を減圧下で蒸発乾固し、その後トルエン（１５ｃｍ３ｘ３）を用いて共
蒸発を行った。残留物を、溶離液としてジクロルメタン／メタノール（メタノー
ル４〜１５％、容量比）を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー
で精製し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、白色の固形物として、ヌクレオシドト
リオール５（４．８２ｇ、８９％）を得た。 δＨ （ＣＤ３ＯＤ）７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１．２）、７．４０−７．２４(５
Ｈ，ｍ)、５．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ６．２）、４．８３−４．６５（２Ｈ，ｍ）
、４．５３（１Ｈ，ｔ，Ｊ６．２）、４．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ６．２）、３．８
４（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２．０）、３．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２．０）、３．５９（
２Ｈ，ｄ，Ｊ２．６）、１．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１．１）。 δＣ （ＣＤ３ＯＤ）１６４．４、１５０．９、１３７．５、１３６．６、１２
７．５、１２７．０、１２６．９、１０９．８、８６．７、８６．４、８２．８
、７８．０、７２．１、６２．３、６１．１、１０．５（ＣＨ_３）。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ３７９［Ｍ＋Ｈ］＋。 実測値Ｃ：５６．２％；Ｈ：６．０％；Ｎ：７．０％、 Ｃ１８Ｈ２２Ｎ２Ｏ７０．２５Ｈ２Ｏ 計算値：Ｃ：５６．５％；Ｈ：５．９％，Ｎ：７．３％。 【０１８０】 実施例５ １−（３−Ｏ−ベンジル−４−Ｃ−（４，４’−ジメトキシトリチロキシメチル
）−β−Ｄ−キシロフラノシル）チミン（６） ヌクレオシド、１−（３−Ｏ−ベンジル−４−Ｃ−ヒドロキシメチル−β−
Ｄ−キシロフラノシル）チミン５（５．３８ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）の無水テト
ラヒドロフラン（４００ｃｍ３）溶液に、ＡｇＮＯ３（２．６６ｇ、１５．７ｍ
ｍｏｌ）、続いて無水ピリジン（５．７ｃｍ３）及び４，４’−ジメトキシトリ
チルクロリド（５．３０ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を窒素雰
囲気下、暗所、室温にて１８時間撹拌した。反応を炭酸水素ナトリウムの飽和水
溶液（１０ｃｍ３）を加えて停止し、得られた混合物をジクロルメタンで抽出し
た。有機相を集め、減圧下で蒸発乾固し、残留物をトルエンで共蒸発させ、溶離
液として、ジクロルメタン／メタノール／ピリジン（メタノール０．５％；ピリ
ジン０．５％、容量比）を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー
で精製し、溶媒を蒸発させた後、白色泡状体としてヌクレオシド６（３．１３ｇ
、３１％）を得た。 δＣ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）１６４．１（Ｃ−４）、１５８．４、１４５．１
、１３８．５、１３７．０、１３５．９、１３５．７、１３０．１、１３０．１
、１２９．２、１２８．５、１２８．５、１２８．２、１２８．１、１２７．７
、１２７．６、１２７．０、１２５．７、１１３．５（ＤＭＴ，ベンジル，Ｃ−
６）、１５１．４（Ｃ−２）、１１０．１（Ｃ−５）、８５．８、８５．２、８
４．６、８３．５(Ｃ−１’，Ｃ−３’，Ｃ−４’，ＤＭＴ)、７６．８（Ｃ−２
’）、７２．３（ＣＨ_２Ｐｈ）、６５．２（Ｃ−５”）、６２．１（Ｃ−５’）
、５５．４（２ｘＣＨ_３Ｏ）、１２．６（５−ＣＨ_３）。 【０１８１】 実施例６ １−（３−Ｏ−ベンジル−４−Ｃ−（４，４’−ジメトキシトリチロキシメチル
）−２，５−ジ−Ｏ−（ｐ−トルエンスルホニル）−β−Ｄ−キシロフラノシル
）チミン（７） ヌクレオシド６（２．７９ｇ、３．９ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（５０ｃｍ
３）溶液に、触媒量の４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン及びｐ−トルエ
ンスルホニルクロリド（６．５０ｇ、３４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を窒
素雰囲気下、暗所、室温で２４時間撹拌した。反応を炭酸水素ナトリウムの飽和
水溶液（１００ｃｍ３）を加えて停止し、得られた混合物をジクロルメタンで抽
出した。有機相を集め炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３ｘ７５ｃｍ３）及び
塩化ナトリウム（２ｘ７５ｃｍ３）溶液で洗浄した。分離した有機相を乾燥(Ｎ
ａ２ＳＯ４)し、減圧下で蒸発乾固した。残留物を、溶離液としてジクロルメタ
ン／メタノール／ピリジン（メタノール０．５％；ピリジン０．５％、容量比）
を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、溶剤を蒸発さ
せた後、黄色の泡状体としてヌクレオシド７（２．４０ｇ、６２％）を得た。 δＣ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）１６３．２（Ｃ−４）、１５８．２、１４５．９、１
４５．１、１４４．３、１３６．８、１３５．０、１３４．９、１３４．８、１
３１．８、１３１．６、１３０．２、１３０．０、１２９．７、１２８．２、１
２７．９、１２７．８、１２７．６、１２７．５、１２７．５、１２７．４、１
２６．８、１１３．３（ＤＭＴ，Ｃ−６，２ｘＴｓ，ベンジル）、１５０．２（
Ｃ−２）、１１０．８（Ｃ−５）、９５．０、８６．２（ＤＭＴ，Ｃ−４’）、
８２．２、８１．９(Ｃ−１’，Ｃ−２’)、８１．２（Ｃ−３’）、７２．９（
ＣＨ_２Ｐｈ）、７９（Ｃ−５”），６４（Ｃ−５’）、５５．１（２ｘＣＨ_３Ｏ
）、２１．２、２１．２（２ｘＣＨ_３）、１２．０（５−ＣＨ_３）。 【０１８２】 実施例７ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ベンジルオキシ−１−（４，４’−ジメトキ
シトリチロキシメチル）−３−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビシク
ロ［２．２．１］ヘプタン（８） ヌクレオシド７（３．８７ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）を含むエタノールとＨ２
Ｏの混合溶液（容量比１：１）に、ＮａＯＨ（２Ｍ，８ｃｍ３）水溶液を加えた
。次いでその混合物を環流下で２４時間加熱した。冷却後、ジクロルメタンで抽
出した。有機相を集め炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２ｘ７５ｃｍ３）で洗
浄し、減圧下で蒸発乾固した。残留物を、溶離液としてジクロルメタン／メタノ
ール／ピリジン（メタノール０．５％；ピリジン０．５％、容量比）を使用して
、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、溶媒を蒸発させた後、白
色の泡状体としてヌクレオシド８（２．１０ｇ、８１％）を得た。δＣ（ＣＤ３
）_２ＳＯ）１６３．８（Ｃ−４）、１５８．２、１５８．１、１４４．７、１３
７．７、１３５．９、１３５．２、１３５．１、１２９．８、１２９．７、１２
８．３、１２７．９、１２７．７、１２７．７、１２７．４、１２６．７、１１
３．３５（ＤＭＴ，ベンジル，Ｃ−６）、１５０．３（Ｃ−２）、１０８．１（
Ｃ−５）、８８．４、８５．５（Ｃ−４’，ＤＭＴ）、８６．４(Ｃ−１’)、７
９．５（Ｃ−２’）、７６．３（Ｃ−３’）、７２．６（Ｃ−５’）、７１．２
（ＣＨ_２Ｐｈ）、５８．９（Ｃ−５”）、５５．１（２ｘＣＨ_３Ｏ）、１２．４
（５−ＣＨ_３）。 【０１８３】 実施例８ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−１−（４，４’−ジメトキシトリチロキシメチル
）−７−ヒドロキシ−３−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［
２．２．１］ヘプタン（９） ヌクレオシド８（１．０９ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｃｍ
３）溶液に蟻酸アンモニウム（０．３３ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）を加えた。その
溶液に触媒量のＰｄ／Ｃを分散したメタノール（１０ｃｍ３）を加え、その混合
物を環流下で２時間加熱した。室温に冷却後、その混合物を減圧下で蒸発乾固し
た。残留物を、溶離液として、容量比で２％メタノールと０．５％ピリジンを含
有するジクロルメタン／メタノール／ピリジン（メタノール２％；ピリジン０．
５％、容量比）を使用して、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し
、溶媒を蒸発させた後、白色固形物としてヌクレオシド９（０．７６ｇ、８０％
）を得た。 δＣ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）１６３．９（Ｃ−４）、１５８．２、１４４．８、１
３５．８、１３５．４、１３５．３、１２９．８、１２７．９、１２７．７、１
２６．８、１１３．３（ＤＭＴ、Ｃ−６）、１５０．４（Ｃ−２）、１０８．０
（Ｃ−５）、８９．２、８５．４（Ｃ−４’，ＤＭＴ）、８６．４(Ｃ−１’)、
７８．９（Ｃ−２’）、７２．９（Ｃ−３’）、７２．３（Ｃ−５’）、５９．
９（Ｃ−５”）、５５．１（２ｘＣＨ_３Ｏ）、１２．５（５−ＣＨ_３）。 【０１８４】 実施例９ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−（２−シアノエトキシ（ジイソプロピルアミ
ノ）ホスフィノキシ）−１−（４，４’−ジメトキシトリチロキシメチル）−３
−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン（
１０） ヌクレオシド９（４２０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の無水ジクロルメタン（４
ｃｍ３） 溶液中にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４ｃｍ３）及び
２−シアノエチルＮ，Ｎ’−ジイソプロピルホスホルアミドクロリダイト（０．
４ｃｍ３）を加えた。その混合物を窒素雰囲気下、暗所、室温にて１８時間撹拌
した。反応をメタノールを添加して停止し、その混合物を酢酸エチル（１０ｃｍ
３）で希釈し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３ｘ１０ｃｍ３）及び塩化ナ
トリウム（２ｘ１０ｃｍ３）溶液で洗浄し、減圧下で蒸発乾固した。残留物を無
水アセトニトリルで共蒸発させ、溶離液として石油エーテル／酢酸エチル／ピリ
ジン（酢酸エチル３０〜４０％；ピリジン０．２％、容量比）を使用して、シリ
カゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、油状物を得た。この油状物をジ
クロルメタン（１ｃｍ３）に溶解し、−４０℃で激しく撹拌して石油エーテル（
２０ｃｍ３）から生成物を沈殿した。沈殿物を濾過して採取し、無水アセトニト
リルで共蒸発して、白色の泡状体として、ヌクレオシド１０ （１１７ｍｇ、２
１％）を得た。 δＰ（ＣＨ_３ＣＮ）１４９．９、１４９．３。 【０１８５】 「ＬＮＡオリゴヌクレオチドの調製」 実施例１０ 未修飾のオリゴヌクレオチド及びホスホロアミダイト１０（式Ｘ）から誘導され
たＬ−リボ−ＬＮＡを含むオリゴヌクレオチドの合成 Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ ８７５０ ＤＮＡ合成装置を使用してＬ−リボ−ＬＮＡ及
び標準のオリゴヌクレオチドを調製した。アミダイト１０のカップリングを 「
ハンドカップリング（ｈａｎｄ ｃｏｕｐｌｉｎｇ）」（シリンジ中でアセトニ
トリル中のアミダイト及び活性剤を予備混合し、次いで、適用するカップリング
時間を通じて、約１分間に２回づつカラム反応器をフラッシングする；ＣＰＧ固
形担体）により実施した。Ｌ−リボ−ＬＮＡ類の合成は、活性剤としてピリジン
塩酸塩を使用して行われた（カップリング時間１０〜３０分；逐次カップリング
でのアミダイト１０の収率は９６〜９９％であった）。未修飾の２’−デオキシ
ヌクレオシド２−シアノエチルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミダイトを、
合成装置の標準ＤＮＡプログラムを使用してカップリングした。ただし、カップ
リングは、合成装置のＲＮＡプログラムに従って行われるＸモノマーの直後に行
った。一連の操作の完了後、５’−Ｏ−ＤＭＴ−ＯＮオリゴ体を濃アンモニアメ
タノール溶液中 (３２％（重量比）、室温、１２時間)で脱保護し、続いて，逆
相クロマトグラフィー（商業的に入手可能な使い捨て式のカートリッジ（Ｃｒｕ
ａｃｈｅｍ）；脱トリチル化を含む方法）を用いて精製し、最終的なオリゴマー
生成物を得た。しかしながら、未修飾のオリゴヌクレオチド及びただひとつのＸ
モノマ−を１個のみ含むＬ−リボ−ＬＮＡについては、一連の操作の完了後直ち
に、合成装置で５’−Ｏ−ＤＭＴ基を取り外した。続いて、濃アンモニアメタノ
ール (３２％（重量比）、５５℃、１２時間)で処理し、エタノールで沈殿して
オリゴマー生成物を得た。合成したＬ−リボ−ＬＮＡ類の純度分析は、キャピラ
リーゲル電気泳動を用いて行った。 【０１８６】 「ハイブリダイゼーション・データ」 実施例１１ モノマーＸを含むオリゴヌクレオチドの熱安定性 Ｌ−リボ−ＬＮＡで修飾されたオリゴヌクレオチドの熱安定性は、温度制御さ
れたペルチエ素子を備えた分光器を用いて、分光分析で定量した。１ｍｌのハイ
ブリダイゼーション混合物を、中性塩のバッファー溶液（１０ｍＭ−Ｎａ２ＨＰ
Ｏ４、ｐＨ７．０、１００ｍＭ−ＮａＣｌ、０．１ｍ−ＭＥＤＴＡ）及び等モル
量（１μＭまたは１．５μＭ）の異なるＬ−リボ−ＬＮＡで修飾されたオリゴヌ
クレオチドとそれらの相補ＤＮＡまたはＲＮＡオリゴヌクレオチドを使って調製
した。未修飾のオリゴヌクレオチドを使用した同一のハイブリダイゼーション混
合物を参照として調整した。温度を１０℃から９０℃まで直線的に昇温（１℃／
ｍｉｎ）しながら、２６０ｎｍにおける吸光度を記録した。溶融温度（Ｔｍ値）
を溶融曲線の１次微分の最大値（±１℃）として得た。結果をまとめて表１〜３
に示す(Ｌ−リボ−ＬＮＡ類は太文字)。図２に、使用した単体のＬ−リボーＬＮ
Ａを示す。 【０１８７】 表１から、一つまたはそれ以上の連続したα−Ｌ−リボ−ＬＮＡモノマーＸの
、オリゴヌクレオチドの配列（Ａ）及び（Ｂ）への取り込みは、α−Ｌ−リボ−
ＬＮＡ類の相補ＤＮＡに対する結合親和性を変えず、一方で、相補ＲＮＡに対す
る結合親和性を大きく増加させていることが分かる。 【０１８８】 表２は、ＲＮＡ（γＡ１４）、一つだけミスマッチのＲＮＡ（５’γ（Ａ６Ｃ
Ａ７））、鏡像異性体ＲＮＡ（ｅｎｔ−γＡ１４）及び一つだけミスマッチの鏡
像異性体ＲＮＡ（ｅｎｔ−５’−γ（Ａ６ＣＡ７））に対する、ホモチミンの光
学異性体であるＬＮＡ類の結合に関する検討結果を示す。 【０１８９】 表３は、混合配列の９量体ＤＮＡ、ＬＮＡ及びα−リボ−ＬＮＡの結合に関す
る検討結果を示す。 【０１９０】 「代替方法」 実施例１２ １−（３−Ｏ−ベンジル−２，５−ジ−Ｏ−メタンスルホニル−４−Ｃ−メタン
スルホニルオキシメチル−β−Ｄ−シクロフラノシル）チミン（１１） ヌクレオシド５（１１００ｍｇ、２．９１ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラ
ン（２０ｃｍ３）溶液に、無水ピリジン(５ｃｍ３)、次いでメタンスルホニルク
ロリド（１．２ｍｌ、１５．５ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を、窒素雰囲気
下、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発乾固し、酢酸エチルに
溶解した。有機相を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３ｘ１０ｃｍ３）で洗浄
し、次いで乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。有機相を減圧下で蒸発乾固した。残留物
を、溶離液としてジクロルメタン／メタノール（メタノール２％、容量比）を用
いて、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、ヌクレオシド１１(
９０８ｍｇ、５１％)を得た。 δＣ（ＣＤＣｌ３）１６３．３、１５０．６、１３５．６、 １３４．６、１２
８．７、１２８．３、１１２．２、８７．９、８５．０、８３．１、８０．９、
７７．２、７６．９、７６．６、７３．３、６６．６、６６．２、 ３８．６、
３７．６、３７．６、１２．２。 【０１９１】 実施例１３ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−１−（ヒドロキシメチル）−７−ベンゾイル−３
−（チミン−１−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．２．１］ヘプタン（
１２） ヌクレオシド１１（３２９ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）のエタノール／水（１０
ｃｍ３、容量比１：１）溶液に６ＭのＮａＯＨ水溶液（０．９ｍｌ、５．４ｍｍ
ｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で４３時間還流し、次いで、減圧下で蒸発乾固
した。残留物を、溶離液としてジクロルメタン／メタノール（メタノール２．４
％、容量比）を用いて、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィーで精製し、ヌ
クレオシド１２（８５ｍｇ、４４％）を得た。 δＣ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）１６３．８、１５０．３、１３８．０、１３５．８、
１２８．３、１２７．７、１２７．５、１０８．０、９０．２、８６．５、８６
．４、７９．３、７６．５、７２．５、７１．２、５７．２、４０．２、４０．
０、３９．８、３９．６、３９．４、３９．２、３９．０、１２．３。 【０１９２】 実施例１４ ヌクレオシド１２からヌクレオシド８の合成 ヌクレオシド１２の第１級水酸基を標準ＤＭＴで保護することにより（例えば
、ヌクレオシド５の第１級水酸基をＤＭＴで保護して、ヌクレオシド６を調製す
るのと同じ手順を用いて）ヌクレオシド８を得た。ヌクレオシド８は、α−Ｌ−
リボ−ＬＮＡヌクレオシドのホスホルアミダイト誘導体１０の合成に用いること
が可能である（図２及び関連した実施例を参照）。 【０１９３】 実施例１５ ９−（２−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｃ−（ベンゾイルオキシメ
チル）−３−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−リボフラノシル）−６−Ｎ−ベンゾイルア
デニン（１４） 無水アセトニトリル（３０ｍｌ）に糖３（２．０５ｇ）を溶解した。Ｎ−６−
ベンゾルアデニン(１．８６ｇ)、次いでＳｎＣｌ４（１．３ｍｌ）を加えた。そ
の混合物を室温で３．７時間撹拌し、そこに中性になるまでＮａＨＣＯ３の飽和
水溶液を加えた。セライトで濾過した後、濾液をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（３
ｘ１５０ｍｌ）続いて水（２ｘ１５０ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、
減圧下で蒸発乾固した。残留物を、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（
４０〜６０％のＮａＯＡｃを含む石油エーテル）で精製し、完全に保護されたヌ
クレオシド中間体(１．４０ｇ、収率５２％)を得た。この中間体（１．２９ｇ）
をメタノール（３５ｍｌ）に溶解し、ＮＨ３の飽和メタノール溶液（３５ｍｌ）
を加えた。０℃で２．３時間撹拌した後、混合物を減圧下で蒸発乾固した。残留
物を、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１％のメタノールを含むジク
ロルメタン）で精製し、無水ジクロルメタン（４０ｍｌ）に溶解した中間体を得
た。−５０℃に冷却後、無水ピリジン(３ｍｌ)をトリフルオロメタンスルホン酸
無水物（０．６５ｍｌ）と共に加えた。５０分撹拌後、トリフルオロメタンスル
ホン酸無水物（０．６５ｍｌ）を追加し、更に−１０℃で１時間撹拌を続けた。
ジクロルメタン(１００ｍｌ)を加え、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（３ｘ１００ｍ
ｌ）で洗浄を行った。分離した有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、減圧下で蒸発
乾固して中間体を得た。この中間体をトルエンに（２０ｍｌ）に溶解し、ＫＯＡ
ｃ（０．８５ｇ）及び１８−クラウン−６（０．９２ｇ）を加えた。得られた混
合物を８０℃で７時間撹拌し、次いで、減圧下で蒸発乾固して残留物を得た。そ
の残留物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（０〜１．５％のメタノー
ルを含むジクロルメタン）で精製し、ヌクレオシド１４（１．１ｇ、３ステップ
通算で８４％）を得た。 δＣ（ＣＤＣｌ３）１６８．８、１６５．８、１４２．７、１３６．０、１３３
．５、１３３．３、１３２．７、１２９．６、１２９．６、１２８．８、１２８
．６、１２８．５、１２８．４、１２８．４、１２８．１、１２７．８、８３．
８、８２．２、７８．４、７４．３、７０．８、６４．８、６３．４、 ２０．
５。 ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）７４２．０［Ｍ＋Ｈ］＋。 【０１９４】 実施例１６ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−ベンゾイルオキシ−１−ヒドロキシメチル−
３−（Ｎ−６−ベンゾイルアデニン−９−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［
２．２．１］ヘプタン（１５） ＮＨ３の飽和メタノール溶液（２００ｍｌ）にヌクレオシド１４(３．０５ｇ
)を溶解し、室温で４日間撹拌し、次いで３３％ＮＨ３水溶液(６０ｍｌ)を加え
て、更に４時間撹拌を続けた。その混合物を減圧下で蒸発乾固して中間体を得、
それを無水ピリジン（１００ｍｌ）に溶解した。ＴＭＳＣｌ(７．８ｍｌ)を加え
、室温で５時間撹拌を続けた。０℃に冷却後、塩化ベンゾイル（２．４ｍｌ）を
加え、室温で、１６時間撹拌を続けた。Ｈ２Ｏ（５０ｍｌ）を加え、続いて５分
後に、ＮＨ３の２５％水溶液（２５ｍｌ）を加えた。室温で２０分撹拌後、混合
物を減圧下で蒸発乾固した。残留物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー
（メタノールを２〜５％含有するジクロルメタン）で精製し、中間体（１．７６
ｇ、２ステップ通算で８７％）を得た。この中間体（３２６ｍｇ）を無水ピリジ
ン（５０ｍｌ）に溶解し、メシルクロリド（０．１１ｍｌ）を０℃で撹拌しなが
ら加えた。２時間撹拌後、Ｈ２Ｏ（５ｍｌ）を加え、減圧蒸留を行って混合物の
容量を約５０％まで減少させた。ジクロルメタン（１００ｍｌ）を加え、洗浄を
ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（３ｘ２０ｍｌ）で行った。有機相を乾燥（Ｎａ２Ｓ
Ｏ４）し、減圧下で蒸発乾固した。その残留物を、シリカゲル・カラム・クロマ
トグラフィー（２〜４％のメタノールを含むジクロルメタン）で精製し、中間体
（２８４ｍｇ）を得た。この中間体(３５４ｍｇ)を、ジオキサン（１５ｍｌ）、
Ｈ２Ｏ（１５ｍｌ）及び２ＭのＮａＯＨ(５．５ｍｌ)の混合液に溶解した。環流
下に７２時間撹拌した後、ＨＣｌの７％（重量比）ジオキサン溶液を中性になる
まで加えた。洗浄をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２ｘ1００ｍｌ）で行い、有機
相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、減圧下で蒸発乾固した。その残留物をシリカゲル
・カラム・クロマトグラフィー（０〜４％のメタノールを含むジクロルメタン）
で精製し、二環式のヌクレオシド１５（２４ｍｇ）を得た。 δＣ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）１５６．０、 １５２．６、１４９．４、１３８．８
、１３８．０、１２８．３、１２７．７、 １２７．５、１１８．３、８９．７
、８３．９、７９．７、７７．０、７３．０、 ７１．２、５７．２。 δＨ（（ＣＤ３）_２ＳＯ）８．３８（１Ｈ，ｓ）、８．１４（１Ｈ，ｓ）、７．
４０−７．３０（７Ｈ，ｍ）、６．３７（１Ｈ，ｓ）、５．０６（１Ｈ，ｔ，Ｊ
５．８Ｈｚ）、４．７３−４．６６（３Ｈ，ｍ）、４．４６（１Ｈ，ｓ）、４．
１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ８．４Ｈｚ）、４．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ８．２Ｈｚ）、３．
７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ５．７Ｈｚ）。 【０１９５】 実施例１７ （１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，７Ｒ）−７−（２−シアノエチル（ジイソプロピルアミノ
）ホスフィノキシ）−１−（４，４’−ジメトキシトリチルオキシメチル−３−
（６−Ｎ−ベンゾイルアデニン−９−イル）−２，５−ジオキサビシクロ［２．
２．１］ヘプタン（１６） されたヌクレオシド１５をＤＭＴで保護した後、脱ベンジル化および３’−Ｏ
−亜リン酸エステル化することで、ホスホルアミダイト誘導体１６が得られると
期待される。ヌクレオシド１５から１６を得る他の可能なルートは、１５の脱ベ
ンジル化と、それに続く第１級水酸基の選択的なＤＭＴ保護及び偶発的な３’−
Ｏ−亜リン酸エステル化である。この実施例に概説する反応は、標準の手順で行
われる（例えば、Ｋｏｓｈｋｉｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．Ｋ．，Ｎｉｅｉ
ｓｅｎ，Ｐ．，Ｒａｊｗａｎｓｈｉ，Ｖ．Ｋ．，Ｋｕｍａｒ，Ｒ．，Ｍｅｌｄｇ
ａａｒｄ，Ｍ．，Ｏｌｓｅｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｗｅｎｇｅｌ，Ｊ．Ｔｅｔｒａｈｅｄ
ｒｏｎ １９９８，５４，３６０７を参照）。 【０１９６】 【表１】 【０１９７】 【表２】 【０１９８】 【表３】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｈ 19/06 Ｃ０７Ｈ 19/06 19/16 19/16 Ｃ１２Ｎ 15/09 Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｍ Ｇ０１Ｎ 33/53 33/566 33/566 33/58 Ａ 33/58 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ (31)優先権主張番号 ＰＡ ２０００ ０００３２ (32)優先日 平成12年１月11日(2000．1．11) (33)優先権主張国 デンマーク（ＤＫ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ， ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ， ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，Ｋ Ｐ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ， ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，Ｓ Ｇ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 2G045 AA35 DA12 DA13 DA14 FB02 FB07 FB12 GC10 4B024 AA01 AA11 AA20 CA01 CA09 CA11 CA20 HA11 HA13 HA14 HA17 HA20 4C057 BB02 DD03 JJ23 LL10 LL28 MM01 MM09 4C084 AA13 NA14 ZB26 ZB33 4C086 AA01 AA02 AA03 EA06 EA17 EA18 MA01 MA04 NA14 ZB26 ZB33

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】 一般式Ｉの少なくとも１つのヌクレオシド類縁体を含むオリ
   ゴマー、並びに、その塩基性塩及び酸付加塩： 【化１】 （式中、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ＊）−、−Ｃ（Ｒ^６Ｒ^６＊）−で
   あり； Ｂは、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−４アルコキシ、任意に置換
   されたＣ_１−４アルキル、任意に置換されたＣ_１−４アシルオキシ、核酸塩基、
   ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレー
   ト基、レポーター基、及びリガンドであり； Ｐは、次の単量体へのヌクレオシド間の結合のためのラジカルな位置、または
   ５’末端基を表し、そのようなヌクレオシド間結合または５’末端基は、所望に
   より置換基Ｒ^５を包含していてもよく、または置換基Ｒ^５＊を等しく有していて
   もよく； Ｐ^＊は、前の単量体へのヌクレオシド間の結合、または３’末端基を表し； Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、−Ｃ（Ｒ^ａＲ^ｂ）−、−Ｃ（Ｒ^ａ）＝Ｃ（Ｒ^ａ）−、−
   Ｃ（Ｒ^ａ）＝Ｎ−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ^ａ）_２−、−Ｓ−、−ＳＯ_２−、−Ｎ（
   Ｒ^ａ）−及び＞Ｃ＝Ｚから選択された１〜４基／原子からなるビラジカルを表し
   ；ここでＺは、−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^ａ）−から選択され、そしてＲ^ａ及び
   Ｒ^ｂの各々は、独立に、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に
   置換されたＣ_２−１２−アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル
   、ヒドロキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カル
   ボキシ、Ｃ_１−１２−アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル
   、ホルミル、アリール、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリー
   ルカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロア
   リールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６ア
   ルキル）−アミノ、カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ
   −カルボニル、アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（
   Ｃ_１−６アルキル）アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６ア
   ルキル−カルボニルアミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホ
   ノ、Ｃ_１−６アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_{１ −６} アルキルチオ、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基
   、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから選択され、
   ここで、アル−ル及びヘテロアリールは所望により置換され、そして、ここで、
   ２つのジェミナル置換基Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、共に、任意に置換されたメチレンオレ
   フィン（＝ＣＨ_２）を表すこともでき； 存在する、置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊の各
   々は、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に置換されたＣ_{２− １２} −アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル、ヒドロキシ、Ｃ _１−１２ −アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_{１−１ ２} −アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル、ホルミル、アリ
   ール、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘ
   テロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘ
   テロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ
   、カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボニル、ア
   ミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル
   ）アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニ
   ルアミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６アル
   キルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_１−６アルキルチオ
   、ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性
   な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、ここにおい
   て、アリール及びヘテロアリールは置換されていてもよく、そして、ここにおい
   て、２つのジェミナル置換基は、共に、オキソ、チオキソ、イミノ、または任意
   に置換されたメチレンを表し、または共に、１〜５炭素原子のアルキレン鎖から
   なるスピロビラジカルを形成することもでき、このアルキレン鎖は、−Ｏ−、−
   Ｓ−及び（ＮＲ^Ｎ）−から選択された１またはそれ以上のヘテロ原子／基によっ
   て中断及び／または停止していてもよく、ここで、Ｒ^Ｎは水素及びＣ_１−４アル
   キルから選択され、そして、ここで、２つの隣接した（非ジェミナル）置換基は
   、二重結合となる付加的結合を表し；そして、Ｒ^Ｎは、存在するときは、水素及
   びＣ_１−４アルキルから選択される。） 【請求項２】 一般式ＩのＬ−リボ−ＬＮＡ（類）の１〜１００００、及び
   天然由来のヌクレオシド及びヌクレオシド類縁体から選択された０〜１００００
   のヌクレオシドを含み、但し、ヌクレオシドの数、及びＬ−リボ−ＬＮＡ（類）
   の数の和は、例えば２〜１５０００の範囲内で、少なくとも２、好ましくは少な
   くとも３である、請求項１に記載のオリゴマー。 【請求項３】 少なくとも１つのＬ−リボ−ＬＮＡが、置換基Ｂとして核酸
   塩基を含む請求項２に記載のオリゴマー。 【請求項４】 オリゴヌクレオチドが、少なくとも７、好ましくは少なくと
   も９、特に少なくとも１１、特別には少なくとも１３の連続的なＬ−リボ−ＬＮ
   Ａ単量体を含む、請求項２に記載のオリゴマー。 【請求項５】 オリゴマーの全てのヌクレオシド単量体がＬ−リボ−ＬＮＡ
   である、請求項２に記載のオリゴマー。 【請求項６】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）が、下記の式Ｉａを有する請求項１
   〜５のいずれかに記載のオリゴマー。 【化２】 （式中、Ｐ、Ｐ^＊、Ｂ、Ｘ、Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^２＊、Ｒ^３＊、Ｒ^４＊、Ｒ^５及
   びＲ^５＊は請求項１において定義された通りである。） 【請求項７】 Ｘが−（ＣＲ^６Ｒ^６＊）−、−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^Ｎ＊ ）−、好ましくは−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^Ｎ＊）−、特に好ましくは−Ｏ−で
   ある、請求項１〜６のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項８】 Ｒ^２＊及びＲ^４＊によって構成されているビラジカルが、−
   （ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ ^＊ Ｒ^＊）_ｓ−Ｙ−、−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｙ−、−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊） _ｒ −Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−、−Ｙ−、−Ｙ−Ｙ−
   、から選択され、ここにおいて、各々のＹは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓｉ（Ｒ^＊） _２ −、−Ｎ（Ｒ^＊）−、＞Ｃ＝Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ^＊）−、及びＮ（Ｒ^＊ ）−Ｃ（＝Ｏ）−、から独立に選択され、各々のＲ^＊は、水素、ハロゲン、アジ
   ド、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、モノまたはジ（Ｃ_{１− ６} ）アルキルアミノ、任意に置換されたＣ_１−６アルコキシ、任意に置換された
   Ｃ_１−６アルキル、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的
   に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、及び
   ／または２つの隣接する（非ジェミナル）Ｒ^＊は、共に二重結合を指し、そして
   ｒ及びｓの各々は、０〜４であり、ただしｒ+ｓの合計は１〜４である、請求項
   １〜７のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項９】 ビラジカルが、−Ｙ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−、−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｙ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−及びＹ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｙ−か
   ら選択され、ここにおいて、ｒ及びｓの各々は０〜３であり、ただしｒ+ｓの合
   計は１〜４である、請求項８に記載のオリゴマー。 【請求項１０】 ビラジカルが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−、−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_{ｒ＋ｓ＋１}−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（
   ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｎ（Ｒ^＊）−
   （ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊ ）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊ Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｓ−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−
   、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−及びＳ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−
   Ｎ（Ｒ^＊）−から選択されたものであり、ここで、ｒ及びｓの各々は０〜３であ
   り、ただしｒ+ｓの合計は１〜４であり、そしてＸは−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ
   ^Ｈ）−から選択され、Ｒ^Ｈは水素またはＣ_１−４アルキルである、請求項９に記
   載のオリゴマー。 【請求項１１】 ＸがＯであり、Ｒ^２が水素、ヒドロキシ及び任意に置換さ
   れたＣ_１−６アルコキシから選択され、そしてＲ^１＊、Ｒ^３＊、Ｒ^５及びＲ^５＊ が水素を表す、請求項１０に記載のオリゴマー。 【請求項１２】 ビラジカルが、−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｏ−（ＣＨ _２ ）_１−３−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｓ−（ＣＨ_２）_１−３−、−（ＣＨ_２）_{０ −１} −Ｎ（Ｒ^Ｎ）−（ＣＨ_２）_１−３−、例えば、−Ｏ−ＣＨ_２−及び−Ｓ−Ｃ
   Ｈ_２−及びＮ（Ｒ^Ｎ）−ＣＨ_２−から選択されたものである、請求項１１に記載
   のオリゴマー。 【請求項１３】 Ｂが核酸塩基から選択されたものである、請求項１１〜１
   ２のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項１４】 ビラジカルが−（ＣＨ_２）２〜４−である、請求項８に記
   載のオリゴマー。 【請求項１５】 Ｒ^＊が、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６ア
   ルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、ＤＮＡインターカレーター、光
   化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガン
   ドから選択されたものであり、残りの置換基Ｒ^＊のいずれかが水素である、請求
   項８〜１０のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項１６】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）のヌクレオシド間結合のいずれか
   が、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^Ｈ−、＞Ｃ＝Ｏ、＞Ｃ＝ＮＲ^Ｈ、＞Ｃ
   ＝Ｓ、−Ｓｉ（Ｒ”）_２−、−ＳＯ−、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｐ（Ｏ）_２−、−Ｐ
   （Ｏ，Ｓ）−、−Ｐ（Ｓ）_２−、−ＰＯ（Ｒ”）−、−ＰＯ（ＯＣＨ_３）−及び
   ＰＯ（ＮＨＲ^Ｈ）−（ここで、Ｒ^Ｈは、水素及びＣ_１−４ アルキル、及びＲ”はＣ_１−６アルキル及びフェニルから選択される）から選択
   された２ないし４、好ましくは３個の基／原子からなる結合から選択される、請
   求項１〜１５のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項１７】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）のヌクレオシド間結合のいずれか
   が、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ
   ＯＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２ −ＣＨ＝、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ‐−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｎ
   Ｒ^Ｈ−、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−Ｎ
   Ｒ^Ｈ−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＳ−ＮＲ^Ｈ−、−
   ＮＲ^Ｈ−Ｃ（＝ＮＲ^Ｈ）−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ
   −ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ‐ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＨ _２ −ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−Ｏ
   −ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ‐ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−、−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ
   −、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｎ＝、−ＣＨ_２−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−、
   −ＣＯ−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｈ−ＣＯ
   −、−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＮＲ^Ｈ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ
   Ｈ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ
   Ｈ_２−ＣＨ＝、−Ｓ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｓ−
   ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＳＯ−ＣＨ_２−、
   −ＣＨ_２−ＳＯ２−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＳＯ−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−Ｏ−、−
   Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−Ｓ（Ｏ） _２ −ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｏ−
   Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｓ）_２−Ｏ−、−Ｓ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ−、−Ｓ
   −Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−Ｐ（Ｓ）_２−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｓ−、−
   Ｏ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｓ−、−Ｏ−Ｐ（Ｓ）_２−Ｓ−、−Ｓ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｓ−、
   −Ｓ−Ｐ（Ｏ，Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｐ（Ｓ）_２−Ｓ−、−Ｏ−ＰＯ（Ｒ”）−Ｏ
   −、−Ｏ−ＰＯ（ＯＣＨ_３）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ（ＢＨ_３）−Ｏ−、−Ｏ−ＰＯ
   （ＮＨＲ^Ｎ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｈ−、−ＮＲ^Ｈ−Ｐ（Ｏ）_２−Ｏ
   −、−Ｏ−Ｐ（Ｏ，ＮＲ^Ｈ）−Ｏ−及びＯ−Ｓｉ（Ｒ”）_２−Ｏ−から選択され
   る、請求項１６に記載のオリゴマー。 【請求項１８】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ（類）が存在するとき、その置換基Ｒ^{１ ＊} 、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊の各々が、水素、任意に置換
   されたＣ_１−６−アルキル、任意に置換されたＣ_２−６−アルケニル、ヒドロキ
   シ、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_{１− ６} −アルコキシカルボニル、Ｃ_１−６−アルキルカルボニル、ホルミル、アミノ
   、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ、カルバモイル、モノ−及びジ（
   Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニルアミ
   ノ、カルバミド、アジド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホノ、スルファニ
   ル、Ｃ_１−６アルキルチオ、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、
   熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基、リガンド及びハロゲン（ここ
   で２つのジェミナル置換基は、共にオキソを表すこともでき、そして、ここでＲ ^Ｎ は、存在するがビラジカルに関係しないとき、水素及びＣ_１−４アルキルから
   選択される）から独立に選択される、請求項１〜１７のいずれかに記載のオリゴ
   マー。 【請求項１９】 Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−及びＮＲ^Ｎ−から選択され、存在す
   るＬ−リボ−ＬＮＡ（類）の置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６ 及びＲ^６＊の各々が水素を表す、請求項１〜１８のいずれかに記載のオリゴマー
   。 【請求項２０】 Ｐが、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６−ア
   ルキル、任意に置換されたＣ_１−６−アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−
   アルキルカルボニルオキシ、任意に置換されたアリールオキシ、一リン酸、ニリ
   ン酸、三リン酸及びＷ−Ａ’−、［ここで、Ｗは−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^Ｈ）
   −（ここで、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６アルキルから選択される）から選択され、
   そしてＡ’はＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性
   な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから選択される］から選択される
   ５’末端基である、請求項１〜１９のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項２１】 Ｐ^＊が、水素、ヒドロキシ、任意に置換されたＣ_１−６−
   アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６−アルキルカルボニルオキシ、任意に置
   換されたアリールオキシ及びＷ−Ａ’−［ここで、Ｗは−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（
   Ｒ^Ｈ）−（ここで、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６アルキルから選択される）から選択
   され、そしてＡ’は、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学
   的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから選択される］から選
   択される３’末端基である、請求項１〜２０のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項２２】 下記の式ＩＩＩ： 【化３】 （式中、ｑは、１−５０であり； ｎ（０），・・・，ｎ（ｑ）は、独立に、０〜１００００であり； ｍ（１），・・・，ｍ（ｑ）は、独立に、１〜１００００であり； ただし、ｎ（０），・・・，ｎ（ｑ）及びｍ（１），・・・，ｍ（ｑ）の合計
   は、２〜１５０００であり； Ｇは、５’末端基を表し； 各Ｎｕは、天然由来のヌクレオシド及びヌクレオシド類縁体から選択されたヌ
   クレオシドを独立に表し； 各々のＬ−リボ−ＬＮＡは、ヌクレオシド類縁体を独立に表し； 各々のＬは、Ｎｕ及びＬ−リボ−ＬＮＡから選択された２つの基の間のヌクレ
   オシド間結合を表すか、ＬはＧ^＊と共に３’末端基を表し；そして、 各々のＬ−リボ−ＬＮＡは、一般式Ｉのヌクレオシド類縁体を独立に表す；）
   を有する、請求項１〜２１のいずれかに記載のオリゴマー。 【請求項２３】 一般式ＩＩのヌクレオシド類縁体（Ｌ−リボ−ＬＮＡ）、
   並びにそれらの塩基性塩及び酸付加塩： 【化４】 （式中、置換基Ｂは、核酸塩基、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な
   基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから選択され
   ； Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ^Ｎ）−、−Ｃ（Ｒ^６Ｒ^６＊）−から選択され
   ； Ｑ及びＱ^＊の各々は、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ
   、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、Ａｃｔ−Ｏ−、メルカプト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ａｃｔ−Ｓ−
   、Ｃ_１−６アルキルチオ、アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ ）−、モノまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６ア
   ルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、任意に置換されたＣ_２−６アル
   ケニル、任意に置換されたＣ_２−６アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_{２− ６} アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６アルキニルオキシ、一リン酸、ニリン
   酸、三リン酸、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活
   性な基、キレ−ト基、レポーター基、リガンド、カルボキシ、スルホノ、ヒドロ
   キシメチル、Ｐｒｏｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチル、
   Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−ＣＨ_２−、カルボキシ
   メチル、スルホノメチル、［ここで、Ｐｒｏｔは各々、−ＯＨ、−ＳＨ及びＮＨ
   （Ｒ^Ｈ）の保護基であり、Ａｃｔは各々、−ＯＨ、−ＳＨ及びＮＨ（Ｒ^Ｈ）の活
   性基であり、そして、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６アルキルから選択される］から独
   立に選択され；そして、 Ｒ^２＊及びＲ^４＊は、共に、−Ｏ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_{ｒ＋ｓ＋１}−、−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｏ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ ^＊ ）_ｓ−、−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｓ−、−Ｏ−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＲ^＊ Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ”）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｏ−、−Ｏ−（Ｃ
   Ｒ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｓ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｓ−、−Ｎ（
   Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−、−Ｎ（Ｒ^＊）−（ＣＲ^＊Ｒ^＊） _ｒ＋ｓ −Ｓ−及びＳ−（ＣＲ^＊Ｒ^＊）_ｒ＋ｓ−Ｎ（Ｒ^＊）−から選択されたビラ
   ジカルを表し； ここで、各Ｒ^＊は、水素、ハロゲン、アジド、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、
   メルカプト、アミノ、単量体またはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、任意に置換
   されたＣ_１−６アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、ＤＮＡインタ
   ーカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポー
   ター基及びリガンドから独立に選択され、及び／または２つの隣接した（非ジェ
   ミナル）Ｒ^＊は、共に二重結合を表すことができ、そしてｒ及びｓの各々は０〜
   ３であり、ただし、ｒ+ｓの合計は１〜４であり； 存在する置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ^６及びＲ^６＊の各々
   は、水素、任意に置換されたＣ_１−１２−アルキル、任意に置換されたＣ_{２−１ ２} −アルケニル、任意に置換されたＣ_２−１２−アルキニル、ヒドロキシ、Ｃ_{１ −１２} −アルコキシ、Ｃ_２−１２−アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_１−１２ −アルコキシカルボニル、Ｃ_１−１２−アルキルカルボニル、ホルミル、アリー
   ル、アリールオキシ−カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテ
   ロアリール、ヘテロアリールオキシ−カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテ
   ロアリールカルボニル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ、
   カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボニル、アミ
   ノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）
   アミノ−Ｃ_１−６アルキル−アミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル
   アミノ、カルバミド、Ｃ_１−６アルカノイルオキシ、スルホノ、Ｃ_１−６アルキ
   ルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、Ｃ_１−６アルキルチオ、
   ハロゲン、ＤＮＡインターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な
   基、キレ−ト基、レポーター基及びリガンドから独立に選択され、ここにおいて
   、アル−ル及びヘテロアリールは置換されていてもよく、そして、ここにおいて
   、２つのジェミナル置換基は、共に、オキソ、チオキソ、イミノ、または任意に
   置換されたメチレンを表し、または共に、１〜５炭素原子のアルキレン鎖からな
   るスピロビラジカルを形成することもでき、このアルキレン鎖は、−Ｏ−、−Ｓ
   −、及び（ＮＲ^Ｎ）−から選択された１またはそれ以上のヘテロ原子／基によっ
   て中断及び／または停止していてもよく、ここで、Ｒ^Ｎは水素及びＣ_１−４アル
   キルから選択され、そして、２つの隣接した（非ジェミナル）置換基は、二重結
   合となる付加的結合を表し；そして、Ｒ^Ｎは、存在するときは、水素及びＣ_{１− ４} アルキルから選択される； ただし、オリゴヌクレオチド合成において一般的に広く行われる条件下で、反
   応性のある全ての化学基（どのような核酸塩基も包含する）は、任意に活性基が
   保護されていてもよい。） 【請求項２４】 基Ｂが、核酸塩基及び活性基が保護された核酸塩基から選
   択される、請求項２３記載のヌクレオシド類縁体。 【請求項２５】 Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−及びＮ（Ｒ^Ｎ＊）−から選択される
   、請求項２３〜２４のいずれかに記載のヌクレオシド類縁体。 【請求項２６】 存在する置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ ^６ 及びＲ^６＊の各々が、水素、任意に置換されたＣ_１−６−アルキル、任意に置
   換されたＣ_２−６−アルケニル、ヒドロキシ、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６ −アルケニルオキシ、カルボキシ、Ｃ_１−６−アルコキシカルボニル、Ｃ_１−６ −アルキルカルボニル、ホルミル、アミノ、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）
   −アミノ、カルバモイル、モノ−及びジ（Ｃ_１−６アルキル）−アミノ−カルボ
   ニル、Ｃ_１−６アルキル−カルボニルアミノ、カルバミド、アジド、Ｃ_１−６ア
   ルカノイルオキシ、スルホノ、スルファニル、Ｃ_１−６アルキルチオ、ＤＮＡイ
   ンターカレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レ
   ポーター基、リガンド及びハロゲン（ここで、２つのジェミナル置換基は共にオ
   キソを表すこともでき、そして、ここでＲ^Ｎは、存在するがビラジカルに関係し
   ないとき、水素及びＣ_１−４アルキルから選択される）から独立に選択されるが
   、ただし、ヒドロキシ、アミノ、モノ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、スルファニ
   ル及びカルボキシは、保護されていてもよい、請求項２３〜２５のいずれかに記
   載のヌクレオシド類縁体。 【請求項２７】 存在する置換基Ｒ^１＊、Ｒ^２、Ｒ^３＊、Ｒ^５、Ｒ^５＊、Ｒ ^６ 及びＲ^６＊の各々が水素を表す、請求項２３〜２６のいずれかに記載のヌクレ
   オシド類縁体。 【請求項２８】 Ｑが、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロ
   キシ、Ｐｒｏｔ−Ｏ−、メルカプト、Ｐｒｏｔ−Ｓ−、Ｃ_１−６アルキルチオ、
   アミノ、Ｐｒｏｔ−Ｎ（Ｒ^Ｈ）−、モノまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、
   任意に置換されたＣ_１−６アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、任
   意に置換されたＣ_２−６アルケニル、任意に置換されたＣ_２−６アルケニルオキ
   シ、任意に置換されたＣ_２−６アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６アルキニ
   ルオキシ、一リン酸、ニリン酸、三リン酸、ＤＮＡインターカレーター、光化学
   的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基、リガンド、カ
   ルボキシ、スルホノ、ヒドロキシメチル、Ｐｒｏｔ−Ｏ−ＣＨ_２−、アミノメチ
   ル、Ｐｒｏｔ−Ｎ（ＲＨ）−ＣＨ_２−、カルボキシメチル、スルホノメチル［こ
   こで、Ｐｒｏｔは、各々、−ＯＨ、−ＳＨ及びＮＨ（Ｒ^Ｈ）の保護基であり、そ
   して、Ｒ^Ｈは水素及びＣ_１−６アルキルから選択される］から独立に選択され；
   そして、 Ｑ^＊は、水素、アジド、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、Ａｃｔ−Ｏ−
   、メルカプト、Ａｃｔ−Ｓ−、Ｃ_１−６アルキルチオ、アミノ、Ａｃｔ−Ｎ（Ｒ ^Ｈ ）−、モノまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノ、任意に置換されたＣ_１−６ アルコキシ、任意に置換されたＣ_１−６アルキル、任意に置換されたＣ_２−６ア
   ルケニル、任意に置換されたＣ_２−６アルケニルオキシ、任意に置換されたＣ_{２ −６} アルキニル、任意に置換されたＣ_２−６アルキニルオキシ、ＤＮＡインター
   カレーター、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポータ
   ー基、リガンド、カルボキシ、スルホノ［ここで、Ａｃｔは、各々、−ＯＨ、−
   ＳＨ及びＮＨ（Ｒ^Ｈ）の活性基であり、そして、ＲＨは水素及びＣ_１−６アルキ
   ルから選択される］から独立に選択される、請求項２３〜２７のいずれかに記載
   のヌクレオシド類縁体。 【請求項２９】 ＸがＯを、Ｒ２が水素、ヒドロキシ及び任意に置換された
   Ｃ_１−６アルコキシを、及びＲ^１＊、Ｒ^３、Ｒ^５及びＲ^５＊が水素を表す、請求
   項２３〜２８のいずれかに記載のヌクレオシド類縁体。 【請求項３０】 ビラジカルが、−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｏ−（ＣＨ _２ ）_１−３−、−（ＣＨ_２）_０−１−Ｓ−（ＣＨ_２）_１−３−、及び、−（ＣＨ _２ ）_０−１−Ｎ（Ｒ^Ｎ）−（ＣＨ_２）_１−３−から選択される、請求項２３〜２
   ９のいずれかに記載のヌクレオシド類縁体。 【請求項３１】 ビラジカルが、−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｓ−ＣＨ_２−及びＮ（
   Ｒ^Ｎ）−ＣＨ_２−から選択される、請求項３０に記載のヌクレオシド類縁体。 【請求項３２】 ビラジカルが、−（ＣＨ_２）_２−４−、好ましくは、−（
   ＣＨ_２）_２−である、請求項２３〜３１のいずれかに記載のヌクレオシド類縁体
   。 【請求項３３】 請求項１〜２６のいずれかにおいて定義したＬ−リボ−Ｌ
   ＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）と、タンパク質、アンプリコン、酵
   素、多糖類、抗体、ハプテン、ペプチド及びＰＮＡから選択された化合物との共
   役体。 【請求項３４】 請求項１〜３４のいずれかに記載のＬ−リボ−ＬＮＡ修飾
   オリゴヌクレオチド（オリゴマー）を調製するための、請求項２３〜３２のいず
   れかにおいて定義したＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項３５】 Ｌ−リボ−ＬＮＡの組み込みが、核酸活性酵素用の基質と
   して作用するオリゴヌクレオチドの性能を調節する、請求項３３に記載の使用。 【請求項３６】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドと、タンパク質
   、アンプリコン、酵素、多糖類、抗体、ハプテン、ペプチド及びＰＮＡから選択
   された化合物との共役体を調製するための、請求項２３〜３２のいずれかにおい
   て定義したＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項３７】 核酸に活性な酵素の基質としての、請求項２３〜３２のい
   ずれかにおいて定義したＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項３８】 Ｌ−リボ−ＬＮＡが、ＤＮＡ及びＲＮＡポリメラーゼの基
   質として使用される、請求項３７に記載の使用。 【請求項３９】 治療剤としての、請求項２３〜３２のいずれかにおいて定
   義したＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項４９】 診断目的のための、請求項２３〜３２のいずれかにおいて
   定義したＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項４０】 異なった配列のＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドが付着した
   固体表面の構築において、請求項２３−３２のいずれかにおいて定義した、１つ
   またはそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡの使用。 【請求項４１】 標的核酸の配列に特異的な開裂における、請求項１〜２２
   のいずれかにおいて定義したＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴマー（リボザイム）の
   使用。 【請求項４２】 アンチセンス、抗原または遺伝子活性化治療法のような治
   療における、請求項１〜２２のいずれかにおいて定義したＬ−リボ−ＬＮＡ修飾
   オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項４３】 ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドがＲＮＡｓｅＨを採用する
   、請求項４２の使用。 【請求項４４】 アンチセンス、抗原または遺伝子活性化治療法のような治
   療において、オリゴヌクレオチドが請求項１〜２２のいずれかに定義されたよう
   な、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の１つ以上の複合
   体の使用。 【請求項４５】 α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドが、ｔＲＮ
   Ａ類、ｒＲＮＡ類、ｓｎＲＮＡ類及びｓｃＲＮＡ類からなる群より選択されたＲ
   ＮＡと特異的に反応し、翻訳、ＲＮＡスプライシング、ＲＮＡプロセシング、及
   び他の必須の細胞プロセシングからなる群より選択された、以下の細胞プロセス
   のいずれかを阻害する治療法である、治療における請求項６〜２２のいずれかで
   定義される、α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使
   用。 【請求項４６】 天然または合成核酸の、単離、精製、増幅、検出、同定、
   定量、または捕捉のような診断法における、請求項６〜２２のいずれかで定義さ
   れる、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項４７】 α−Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチドが、ＲＮＡ
   とＤＮＡの間を識別することができ、それにより標的ＲＮＡを選択的にハイブリ
   ダイズする、天然または合成核酸の、単離、精製、増幅、検出、同定、定量また
   は捕捉のような診断法における、請求項６〜２２のいずれかで定義される、Ｌ−
   リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項４８】 オリゴヌクレオチドが、オリゴヌクレオチドの直接的また
   は間接的検出、あるいは固体支持体上にオリゴヌクレオチドの固定化を促進する
   、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、レポーター基または
   リガンドを含んでいる、請求項４６または４７に記載の使用。 【請求項４９】 光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、
   レポーター基またはリガンドが、スペーサー（Ｋ）を含み、該スペーサーは化学
   的に開裂し得る基である、請求項４８に記載の使用。 【請求項５０】 光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレ−ト基、
   レポーター基またはリガンドが、オリゴヌクレオチドのＬＮＡ（類）の少なくと
   も１つのビラジカル（即ち、Ｒ”として）を経由して連結している、請求項４９
   に記載の使用。 【請求項５１】 天然に存在する、または、合成の二本鎖または一本鎖核酸
   、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡの捕捉及び検出のための、請求項５０に記載の使
   用。 【請求項５２】 天然に存在する二本鎖または一本鎖核酸、例えば、ＲＮＡ
   またはＤＮＡの精製のための、請求項４７に記載の使用。 【請求項５３】 分子診断法におけるアプタマーとしての、請求項１〜２２
   のいずれかで定義される、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマ
   ー）の使用。 【請求項５４】 ＲＮＡ媒介触媒プロセスにおけるアプタマーとしての、請
   求項１〜２２のいずれかで定義される、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチ
   ド（オリゴマー）の使用。 【請求項５５】 抗生物質、薬物、アミノ酸、ペプチド、構造タンパク質、
   タンパク質レセプター、タンパク質酵素、糖類、多糖類、生物補助因子、核酸、
   または三リン酸の特異的結合におけるアプタマーとしての、請求項１〜２２のい
   ずれかで定義される、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）
   の使用。 【請求項５６】 立体特異的結合によって、ラセミ混合物からのエナンチオ
   マーの分離におけるアプタマーとしての、請求項１〜２２のいずれかで定義され
   る、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項５７】 細胞の標識のための、請求項１〜２２のいずれかで定義さ
   れる、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項５８】 非タンパク質コード細胞ＲＮＡ類、例えば、ｔＲＮＡ、ｒ
   ＲＮＡ、ｓｎＲＮＡ及びｓｃＲＮＡをイン・ビボまたはイン・ビトロでハイブリ
   ダイズするための、請求項１〜２２のいずれかで定義される、Ｌ−リボ−ＬＮＡ
   修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項５９】 オリゴヌクレオチドのハイブリッド形成した状態が、プロ
   ーブからの蛍光シグナルの増加によってオリゴヌクレオチドの非結合状態から区
   別できるように位置した蛍光団及び消光剤を含む、オリゴヌクレオチドの構築に
   おける、請求項１〜２２のいずれかで定義される、Ｌ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴ
   ヌクレオチド（オリゴマー）の使用。 【請求項６０】 天然または合成核酸の単離、精製、増幅、検出、同定、定
   量または捕捉用のキットで、反応体及び請求項１〜２２のいずれかで定義される
   １つまたはそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド（オリゴマー）
   を含むキット。 【請求項６１】 天然または合成核酸の単離、精製、増幅、検出、同定、定
   量または捕捉用のキットで、反応体及び請求項２３〜３２のいずれかで定義され
   る１つまたはそれ以上のＬ−リボ−ＬＮＡ類を含むキット。 【請求項６２】 Ｌ−リボ−ＬＮＡ類が該反応体に固定化されている、請求
   項６０または６１記載のキット。