JP2010150280A - 免疫刺激核酸分子 - Google Patents

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Abstract

【課題】 非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸配列であって、Ｔｈ１型免疫活性化、サイトカイン産生、ＮＫ溶解活性、およびＢ細胞増殖を刺激することを含む、免疫反応を調節する核酸配列を提供すること。
【解決手段】 少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含み、そして式：５’Ｎ１Ｘ１ＣＧＸ２Ｎ２３’（式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１はアデニン、グアニンまたはチミンであり；Ｘ２はシトシンまたはチミンであり；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である）を有する、単離核酸配列。
【選択図】 なし

Description

（免疫刺激性核酸分子）
本発明に帰着する研究は、一部、米国国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）の補助金第Ｒ２９−ＡＲ４２５５６−０１号により補助されている。米国政府が、本発明のある権利に対し権利を有する可能性がある。
本発明は、一般的にオリゴヌクレオチド、そしてより詳細には、免疫刺激性である、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む配列を有するオリゴヌクレオチドに関する。
１９７０年代、数人の研究者が、細胞膜に高分子量のＤＮＡが結合することを報告した（Ｌｅｒｎｅｒ，Ｒ．Ａ．ら，１９７１．”Ｍｅｍｂｒａｎｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ＤＮＡ ｉｎ ｔｈｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ｏｆ ｄｉｐｌｏｉｄ ｈｕｍａｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ”．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ６８：１２１２；Ａｇｒａｗａｌ，Ｓ．Ｋ．，Ｒ．Ｗ．Ｗａｇｎｅｒ，Ｐ．Ｋ．ＭｃＡｌｌｉｓｔｅｒ，およびＢ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ．１９７５．”Ｃｅｌｌ−ｓｕｒｆａｃｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｍａｄｅ ｖｉｓｉｂｌｅ ｗｉｔｈ ｐｌａｔｉｎｕｍ−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｂｙ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７２：９２８）。１９８５年、ＢｅｎｎｅｔｔらはＤＮＡがリンパ球に結合するのはリガンドと受容体の相互作用に似ているという最初の証拠を示した：結合は、飽和性で、競合し、そしてＤＮＡエンドサイトーシスおよびオリゴヌクレオチドへの分解につながるというものである（Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｒ．Ｍ．，Ｇ．Ｔ．Ｇａｂｏｒ，およびＭ．Ｍ．Ｍｅｒｒｉｔｔ．１９８５．”ＤＮＡ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ”．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７６：２１８２）。ＤＮＡ同様、オリゴデオキシリボヌクレオチド（ＯＤＮ）は、飽和性、配列独立性、そして温度およびエネルギー依存性に、細胞中に進入することが可能である（Ｊａｒｏｓｚｅｗｓｋｉ，Ｊ．Ｗ．，およびＪ．Ｓ．Ｃｏｈｅｎ．１９９１．”Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｕｐｔａｋｅ ｏｆ
ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ”．Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ ６：２３５に総論；Ａｋｈｔａｒ，Ｓ．，Ｙ．Ｓｈｏｊｉ，およびＲ．Ｌ．Ｊｕｌｉａｎｏ．１９９２．”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｃｈａｒａｃ ｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ”．Ｇｅｎｅ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ：Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡ ａｎｄ ＤＮＡ．Ｒ．Ｐ．Ｅｒｉｃｋｓｏｎ，およびＪ．Ｇ．Ｉｚａｎｔ，監修，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｔｄ．ニューヨーク中，ｐｐ．１３３；およびＺｈａｏ，Ｑ．，Ｔ．Ｗａｌｄｓｃｈｍｉｄｔ，Ｅ．Ｆｉｓｈｅｒ，Ｃ．Ｊ．Ｈｅｒｒｅｒａ，およびＡ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ．，１９９４．”Ｓｔａｇｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ
Ｂ ｃｅｌｌ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ”．Ｂｌｏｏｄ．８４：３６６０）。ＤＮＡまたはＯＤＮ取りこみに対する受容体はまだクローンされていないし、そしてＯＤＮ結合および細胞取りこみが、高分子量ＤＮＡのものと同じまたは異なる機構を通じて起こるのかはまだ明確でない。
リンパ球のＯＤＮ取りこみは、細胞活性化により制御されることが示されてきた。Ｂ細胞分裂促進剤（ｍｉｔｏｇｅｎ）ＬＰＳにより刺激された脾臓細胞はＢ細胞集団中で劇的にＯＤＮ取りこみを亢進する一方、Ｔ細胞分裂促進剤Ｃｏｎ Ａで処理した脾臓細胞はＴ細胞によるＯＤＮ取りこみ亢進を示したがＢ細胞では示さなかった（Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．，Ｆ．Ｇｍｅｌｉｇ−Ｍｅｙｌｉｎｇ，Ｍ．Ｆ．Ｇｏｕｒｌｅｙ，Ｗ．Ｊ．Ｋｉｓｃｈ，Ｌ．Ａ．Ｃｈｒｉｓｅｙ，およびＡ．Ｄ．Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ．１９９１．”Ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｂｙ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ”．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １：１６１）。
いくつかのポリヌクレオチドは、生物学的反応修飾因子として広く評価されてきた。おそらく最適な例は、ＩＦＮ産生の強力な誘発剤であると共に、マクロファージ活性化剤およびＮＫ活性誘発剤である、ポリ（Ｉ，Ｃ）である（Ｔａｌｍａｄｇｅ，Ｊ．Ｅ．，Ｊ．Ａｄａｍｓ，Ｈ．Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｍ．Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｂ．Ｌｅｎｚ，Ｍ．Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｅ．Ｓｃｈｌｉｃｋ，Ｒ．Ｒｕｆｆｍａｎｎ，Ｒ．Ｈ．Ｗｉｌｔｒｏｕｔ，およびＭ．Ａ．Ｃｈｉｒｉｇｏｓ．１９８５．”Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｏｆ ｐｏｌｙｉｎｏｓｉｎｉｃ−ｐｏｌｙｃｙｔｉｄｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ ａｎｄ ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ”．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４５：１０５８；Ｗｉｌｔｒｏｕｔ，Ｒ．Ｈ．，Ｒ．Ｒ．Ｓａｌｕｐ，Ｔ．Ａ．Ｔｗｉｌｌｅｙ，およびＪ．Ｅ．Ｔａｌｍａｄｇｅ．１９８５．”Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｐｏｌｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ”．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐ．Ｍｏｄ．４：５１２；Ｋｒｏｗｎ，Ｓ．Ｅ．１９８６．”Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎｄｕｃｅｒｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ”．Ｓｅｍ．Ｏｎｃｏｌ．１３：２０７；およびＥｗｅｌ，Ｃ．Ｈ．，Ｓ．Ｊ．Ｕｒｂａ，Ｗ．Ｃ．Ｋｏｐｐ，Ｊ．Ｗ．Ｓｍｉｔｈ ＩＩ，Ｒ．Ｇ．Ｓｔｅｉｓ，Ｊ．Ｌ．Ｒｏｓｓｉｏ，Ｄ．Ｌ．Ｌｏｎｇｏ，Ｍ．Ｊ．Ｊｏｎｅｓ．Ｗ．Ｇ．Ａｌｖｏｒｄ，Ｃ．Ｍ．Ｐｉｎｓｋｙ，Ｊ．Ｍ．Ｂｅｖｅｒｉｄｇｅ，Ｋ．Ｌ．ＭｃＮｉｔｔ，およびＳ．Ｐ．Ｃｒｅｅｋｍｏｒｅ．１９９２．”Ｐｏｌｙｉｎｏｓｉｎｉｃ−ｐｏｌｙｃｙｔｉｄｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ ａｎｄ ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｎｃｅｒ：ｃｌｉｎｌｃａｌ ａｎｄ ｌｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ”．Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．５２：３００５）。このネズミＮＫ活性化は、もっぱらＩＦＮ−β分泌の誘発によるものであるらしい（Ｉｓｈｉｋａｗａ，Ｒ．，およびＣ．Ａ．Ｂｉｒｏｎ．１９９３．”ＩＦＮ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｓｐｌｅｎｉｃ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｒｉｏｎ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：３７１３）。この活性化は、デオキシリボースが効果を持たないため、リボース糖に特異的なものである。強力なｉｎ ｖｉｔｒｏ抗腫瘍活性があることから、ポリＬ−リジンおよびカルボキシメチルセルロース（ＲＮＡｓｅによる分解を減少させるため）と複合体を形成したポリ（Ｉ，Ｃ）を用いたいくつかの臨床試験が行われた（Ｔａｌｍａｄｇｅ，Ｊ．Ｅ．，ら，１９８５．上に引用；Ｗｉｌｔｒｏｕｔ，Ｒ．Ｈ．，ら，１９８５．上に引用；Ｋｒｏｗｎ，Ｓ．Ｅ．，１９８６．上に引用；およびＥｗｅｌ，Ｃ．Ｈ．，ら，１９９２．上に引用）。不運なことに、これまで、ポリ（Ｉ，Ｃ）が有用な治療剤となるのを毒性副作用が阻んできた。
Ｃ８位において、臭素またはチオール基により置換されたグアニンリボヌクレオチドは、Ｂ細胞分裂促進剤であり、そして「Ｂ細胞分化因子」と置き換えてもよい（Ｆｅｌｄｂｕｓｈ，Ｔ．Ｌ．，およびＺ．Ｋ．Ｂａｌｌａｓ．１９８５．”Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ−ｌｉｋｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ８−ｍｅｒｃａｐｔｏｇｕａｎｏｓｉｎｅ：ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ａｎｄ Ｂ ｃｅｌｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３４：３２０４；およびＧｏｏｄｍａｎ，Ｍ．Ｇ．１９８６．”Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ
ｓｙｎｅｒｇｙ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｓ ａｎｄ Ｃ８−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ｇｕａｎｉｎｅ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｉｎ ｈｕｍｏｒａｌ ｉｍｍｕｎｉｔｙ：Ｂ ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｄｕｃｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ８−ｍｅｒｃａｐｔｏｇｕａｎｏｓｉｎｅ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３６：３３３５）。８−メルカプトグアノシンおよび８−ブロモグアノシンもまた、ＭＨＣ制限ＣＴＬの生成に対するサイトカイン要求と置き換えてもよく（Ｆｅｌｄｂｕｓｈ，Ｔ．Ｌ．，１９８５．上に引用）、ネズミＮＫ活性を増大させ（Ｋｏｏ，Ｇ．Ｃ．，Ｍ．Ｅ．Ｊｅｗｅｌｌ，Ｃ．Ｌ．Ｍａｎｙａｋ，Ｎ．Ｈ．Ｓｉｇａｌ，およびＬ．Ｓ．Ｗｉｃｋｅｒ．１９８８”Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｂｙ ８−ｂｒｏｍｏｇｕａｎｏｓｉｎｅ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４０：３２４９）、そしてネズミＬＡＫ生成を誘発する際、ＩＬ−２と相乗作用を示す（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｒ．Ａ．，およびＺ．Ｋ．Ｂａｌｌａｓ．１９９０．”Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｌｌｅｒ（ＬＡＫ）ｃｅｌｌｓ．Ｖ．８−Ｍｅｒｃａｐｔｏｇｕａｎｏｓｉｎｅ ａｓ ａｎ ＩＬ−２−ｓｐａｒｉｎｇ ａｇｅｎｔｉｎ ＬＡＫｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４５：３５２４）。これらＣ８置換グアノシンがＮＫおよびＬＡＫ活性を増大させるのは、これらがＩＦＮを誘導することによるらしい（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｒ．Ａ．，ら．１９９０．上に引用）。最近、ミコバクテリウム（ｍｉｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）により産生される５’三リン酸化チミジンが、ヒトγδＴ細胞サブセットに対し分裂促進作用を持つことが見出された（Ｃｏｎｓｔａｎｔ，Ｐ．，Ｆ．Ｄａｖｏｄｅａｕ，Ｍ．−Ａ．Ｐｅｙｒａｔ，Ｙ．Ｐｏｑｕｅｔ，Ｇ．Ｐｕｚｏ，Ｍ．Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ，およびＪ．−Ｊ．Ｆｏｕｒｎｉｅ．１９９４”Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ γδ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｇａｎｄｓ”Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６４：２６７）。この報告は、免疫系が細菌核酸に対し優先して反応する方法を発展させてきた可能性があることを示している。
いくつかの観察により、ある種のＤＮＡ構造もまた、リンパ球を活性化させる能力がある可能性が示唆された。例えば、Ｂｅｌｌらは、脾臓細胞上清中の、ヌクレオソームタンパク質ＤＮＡ複合体がＢ細胞増殖および免疫グロブリン分泌を引き起こす（露出した（ｎａｋｅｄ）ＤＮＡはしない）ことを報告した（Ｂｅｌｌ，Ｄ．Ａ．，Ｂ．Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，およびＰ．ＶａｎｄｅｎＢｙｇａａｒｔ．１９９０．”Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ ＤＮＡ−ｒｅｌａｔｅｄ ｆａｃｔｏｒｓ”．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８５：１４８７）。他の場合では、露出したＤＮＡが免疫作用を有することが報告されている。例えば、Ｍｅｓｓｉｎａらは最近、２６０から８００ｂｐのポリ（ｄＧ）・（ｄＣ）およびポリ（ｄＧ・ｄＣ）断片はＢ細胞に対し分裂促進作用があることを報告している（Ｍｅｓｓｉｎａ，Ｊ．Ｐ．，Ｇ．Ｓ．Ｇｉｌｋｅｓｏｎ，およびＤ．Ｓ．Ｐｉｓｅｔｓｋｙ．１９９３．”Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ＤＮＡｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
ｏｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ｎａｔｕｒａｌ ａｎｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｏｌｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ”．Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：１４８）。Ｔｏｋｕｎａｇａらは、ｄＧ・ｄＣは、γ−ＩＦＮおよびＮＫ活性を誘導することを報告している（Ｔｏｋｕｎａｇａ，Ｓ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，およびＫ．Ｎａｍｂａ．１９８８．”Ａ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
ｓｉｎｇｌｅ−ｓｔｒａｎｄｅｄ ＤＮＡ，ｐｏｌｙ（ｄＧ，ｄＣ），ｉｎｄｕｃｅｓ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α／ｂ ａｎｄ−ｇ，ａｕｇｍｅｎｔｓ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ”Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７９：６８２）。こうした人工的ホモポリマー配列のほかに、Ｐｉｓｅｔｓｋｙらは純粋な哺乳動物ＤＮＡは検出可能な免疫作用を持たないが、ある種の細菌由来のＤＮＡは、Ｂ細胞活性化および免疫グロブリン分泌を誘導することを報告した（Ｍｅｓｓｉｎａ，Ｊ．Ｐ．，Ｇ．Ｓ．Ｇｉｌｋｅｓｏｎ，およびＤ．Ｓ．Ｐｉｓｅｔｓｋｙ．１９９１．”Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｒｉｎｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ＤＮＡ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：１７５９）。これらのデータがある異常な混入物質に起因するものでないと仮定すると、これらの研究により、細菌ＤＮＡの特定の構造または他の特性がＢ細胞活性化を誘発することを可能にしていることが示唆される。ミコバクテリウムＤＮＡ配列の研究により、ある種のパリンドローム配列を含むＯＤＮがＮＫ細胞を活性化することが可能であることが立証されている（Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｓ．，Ｔ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．Ｋａｔａｏｋａ，Ｅ．Ｋｕｒａｍｏｔｏ，Ｏ．Ｙａｎｏ，およびＴ．Ｔｏｋｕｎａｇａ．１９９２．”Ｕｎｉｑｕｅ ｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｉｎ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｒｅ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｔｏ ｉｎｄｕｃｅ ＩＮＦ ａｎｄ ａｕｇｍｅｎｔ ＩＮＦ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ”．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：４０７２；Ｋｕｒａｍｏｔｏ，Ｅ．，Ｏ．Ｙａｎｏ，Ｙ．Ｋｉｍｕｒａ，Ｍ．Ｂａｂａ，Ｔ．Ｍａｋｉｎｏ，Ｓ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．Ｋａｔａｏｋａ，およびＴ．Ｔｏｋｕｎａｇａ．１９９２．”Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ”．Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．８３：１１２８）。
いくつかのホスホロチオエート修飾ＯＤＮは、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏでＢ細胞刺激を誘導することが報告されている（Ｔａｎａｋａ，Ｔ．，Ｃ．Ｃ．Ｃｈｕ，およびＷ．Ｅ．Ｐａｕｌ．１９９２．”Ａｎ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｔｏ ａ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｎ Ｉｇ２ｂ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｇ２ｂ ｇｅｒｍｌｉｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ，ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ Ｂ ｃｅｌｌ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｌｉｎ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ”．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：５９７；Ｂｒｅｎｄａ，Ｒ．Ｆ．，Ａ．Ｌ．Ｍｏｏｒｅ，Ｌ．Ｍａｔｈｅｗｓ，Ｊ．Ｊ．ＭｃＣｏｒｍａｃｋ，およびＧ．Ｚｏｎ．１９９３．”Ｉｍｍｕｎｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｂｙ ａｎ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｏｌｉｇｏｍｅｒ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｖ ｇｅｎｅ ｏｆ ＨＩＶ−１”．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４５：２０３７；Ｍｃｌｎｔｙｒｅ，Ｋ．Ｗ．，Ｋ．Ｌｏｍｂａｒｄ−Ｇｉｌｌｏｏｌｙ，Ｊ．Ｒ．Ｐｅｒｅｚ，Ｃ．Ｋｕｎｓｃｈ，Ｕ．Ｍ．Ｓａｒｍｉｅｎｔｏ，Ｊ．Ｄ．Ｌａｒｉｇａｎ，Ｋ．Ｔ．Ｌａｎｄｒｅｔｈ，およびＲ．Ｎａｒａｙａｎａｎ．１９９３．”Ａ ｓｅｎｓｅ
ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｃｏｄｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＮＦ−κＢ Ｔ６５ ｃａｕｓｅｓｓｅ ｑｕｅｎｃｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ”．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ．Ｄｅｖｅｌｏｐ．３：３０９；およびＰｉｓｅｔｓｋｙ，Ｄ．Ｓ．，およびＣ．Ｆ．Ｒｅｉｃｈ．１９９３．”Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｉｏｎ ｂｙ ａ ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｆｏｒ ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ”Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５４：１０１）。これらの報告は、これらのＯＤＮの作用を説明するかもしれない共通する構造モチーフまたは配列要素を示唆していない。
ｃＡＭＰ反応要素結合タンパク質（ＣＲＥＢ）および活性化転写因子（ＡＴＦ）または転写因子のＣＲＥＢ／ＡＴＦファミリーは、普遍的に発現される種類の転写因子であり、これまでに１１のメンバーがクローンされている（ｄｅ Ｇｒｏｏｔ，Ｒ．Ｔ．，およびＰ．Ｓａｓｓｏｎｅ−Ｃｏｒｓｉ：”Ｈｏｒｍｏｎａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：Ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｖｅｒｓａｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｃｙｃｌｉｃ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ３’，５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ
ｎｕｃｌｅａｒ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ”．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．７：１４５，１９９３；Ｌｅｅ，Ｋ．Ａ．Ｗ．，およびＮ．Ｍａｓｓｏｎ：”Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｂｙ ＣＲＥＢ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｉｖｅｓ”．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ １１７４：２２１，１９９３に総論）。これらはすべて塩基性領域／ロイシンジッパー（ｂＺｉｐ）クラスのタンパク質に属する。すべての細胞は、１つまたはそれ以上のＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質を発現しているようであるが、発現されるメンバーおよびｍＲＮＡスプライシング制御は組織特異的であるようである。活性化ドメインの差別的スプライシングにより、特定のＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質が転写阻害剤となるか活性化剤となるかが決定される可能性がある。多くのＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質はウイルス転写を活性化するが、活性化ドメインを欠失したスプライシング多様体のいくつかは、阻害作用を持つ。ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質はｃＡＭＰ反応要素であるＣＲＥを通じてホモまたはヘテロ二量体としてＤＮＡに結合することが可能である。ＣＲＥのコンセンサス型は、非メチル化配列ＴＧＡＣＧＴＣである（ＣｐＧがメチル化されていると結合はなくなる）（Ｉｇｕｃｈｉ−Ａｒｌｇａ，Ｓ．Ｍ．Ｍ．，およびＷ．Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ：”ＣｐＧ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃＡＭＰ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ／ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ＴＧＡＣＧＴＣＡ ａｂｏｌｉｓｈｅｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ”．Ｇｅｎｅｓ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐ．３：６１２，１９８９）。
ＣＲＥの転写活性はＢ細胞活性化中に増加する（Ｘｌｅ，Ｈ．Ｔ．Ｃ．Ｃｈｉｌｅｓ，およびＴ．Ｌ．Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ：”Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＲＥＢ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｖｉａ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ Ｉｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｏｆ Ｂ ｃｅｌｌｓ”．Ｊ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：８８０，１９９３．）。ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質は、ＣＲＥを通じ、ｆｏｓ、ｊｕｎ Ｂ、Ｒｂ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−１（Ｔｓｕｋａｄａ，Ｊ．，Ｋ．Ｓａｉｔｏ，Ｗ．Ｒ．Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａ．Ｃ．Ｗｅｂｂ，およびＰ．Ｅ．Ａｕｒｏｎ：”Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ ＮＦ−ＩＬ６ ａｎｄ ＣＲＥＢ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ ａ ｃｏｍｍｏｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｓｉｔｅ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｐｒｏｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １ ｇｅｎｅ”．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４：７２８５，１９９４；Ｇｒａｙ，Ｇ．Ｄ．，Ｏ．Ｍ．Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｄ．Ｈｅｂｅｌ，Ｍ．Ｒｏｏｔ，Ｊ．Ｍ．Ｐｏｗ−Ｓａｎｇ，およびＥ．Ｗｉｃｋｓｔｒｏｍ：”Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ＤＮＡ
ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃ−Ｈａ−ｒａｓ ｏｎｃｏｇｅｎｅ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ”．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５３：５７７，１９９３）、ＩＦＮ−（Ｄｕ，Ｗ，およびＴ．Ｍａｎｉａｔｉｓ：”Ａｎ ＡＴＦ／ＣＲＥＢ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｖｉｒｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｂ ｇｅｎｅ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：２１５０，１９９２）、ＴＧＦ−１（Ａｓｉｅｄｕ，Ｃ．Ｋ．，Ｌ．Ｓｃｏｔｔ，Ｒ．Ｋ．Ａｓｓｏｉａｎ，Ｍ．Ｅｈｒｌｉｃｈ：”Ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ＡＰ−１／ＣＲＥＢ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ｏｆ ＭＤＢＰ ｔｏ ｃｏｎｔｉｇｕｏｕｓ ｓｉｔｅｓ ｄｏｗｎ ｓｔｒｅａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＴＧＦ−Ｂ１
ｇｅｎｅ”．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ １２１９：５５，１９９４．）、ＴＧＦ−２、ＭＨＣクラスＩＩ（Ｃｏｘ，Ｐ．Ｍ．，およびＣ．Ｒ．Ｇｏｄｉｎｇ：”Ａｎ ＡＴＦ／ＣＲＥＢ ｂｉｎｄｉｎｇ ｍｏｔｉｆ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ａｂｅｒｒａｎｔ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ ＤＲａｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｂｙ ＳＶ４０ Ｔ−ａｎｔｉｇｅｎ”．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０：４８８１，１９９２．）、Ｅ−セレクチン、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＤ−８、生殖系列Ｉｇ定常領域遺伝子、ＴＣＲのＶ遺伝子、および増殖細胞核抗原（Ｈｕａｎｇ，Ｄ．，Ｐ．Ｍ．Ｓｈｉｐｍａｎ−Ａｐｐａｓａｍｙ，Ｄ．Ｊ．Ｏｒｔｅｎ．Ｓ．Ｈ．Ｈｉｎｒｉｃｈｓ，およびＭ．Ｂ．Ｐｒｙｓｔｏｗｓｋｙ：”Ｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ−ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ ｇｅｎｅ ｉｓ ａｓ ｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ＣＲＥ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２−ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ”．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４：４２３３，１９９４．）などの免疫学的に重要な遺伝子を含む、複数の遺伝子発現を制御するようである。ｃＡＭＰ経路を通じた活性化に加え、ＣＲＥＢはまた、転写反応を仲介し、細胞内Ｃａ濃度を変化させることが可能である（Ｓｈｅｎｇ，Ｍ．，Ｇ．ＭｃＦａｄｄｅｎ，およびＭ．Ｅ．Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ：”Ｍｅｍｂｒａｎｅ ｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｃａｌｃｉｕｍ ｉｎｄｕｃｅ ｃ−ｆｏｓｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｖｉａ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＣＲＥＢ”．Ｎｅｕｒｏｎ ４：５７１，１９９０）。
ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質による転写活性化において、タンパク質−タンパク質相互作用の役割は、非常に重要であるらしい。ＮＦκＢタンパク質およびＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質の間の直接または間接的相互作用を報告する、いくつかの公表された研究がある（Ｗｈｉｔｌｅｙ，ら，（１９９４）Ｍｏｌ．＆ Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４：６４６４；Ｃｏｇｓｗｅｌｌ，ら，（１９９４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．１５３：７１２；Ｈｉｎｅｓ，ら，（１９９３）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ
８：３１８９；およびＤｕ，ら，（１９９３）Ｃｅｌｌ ７４：８８７．）。環状ＡＭＰ経路を通じたＣＲＥＢの活性化は、ＣＲＥＢのＳｅｒをリン酸化し、そして最近クローンされたタンパク質ＣＢＰとの結合を可能にする、プロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）を必要とする（Ｋｗｏｋ，Ｒ．Ｐ．Ｓ．，Ｊ．Ｒ．Ｌｕｎｄｂｌａｄ，Ｊ．Ｃ．Ｃｈｒｉｖｉａ，Ｊ．Ｐ．Ｒｉｃｈａｒｄｓ，Ｈ．Ｐ．Ｂａｃｈｉｎｇｅｒ，Ｒ．Ｇ．Ｂｒｅｎｎａｎ，Ｓ．Ｇ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｍ．Ｒ．Ｇｒｅｅｎ，およびＲ．Ｈ．Ｇｏｏｄｍａｎ：”Ｎｕｃｌｅａｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ＣＢＰ ｉｓ ａ ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＣＲＥＢ”．Ｎａｔｕｒｅ ３７０：２２３，１９９４；Ａｒｉａｓ，Ｊ．，Ａ．Ｓ．Ａｌｂｅｒｔｓ，Ｐ．Ｂｒｉｎｄｌｅ，Ｆ．Ｘ．Ｃｌａｒｅｔ，Ｔ．Ｓｍｅａ，Ｍ．Ｋａｒｉｎ，Ｊ．Ｆｅｒａｍｉｓｃｏ，およびＭ．Ｍｏｎｔｍｉｎｙ：”Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃＡＭＰ ａｎｄ ｍｉｔｏｇｅｎ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｇｅｎｅｓ ｒｅｌｉｅｓ ｏｎ ａ ｃｏｍｍｏｎ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ”．Ｎａｔｕｒｅ ３７０：２２６，１９９４．）。ＣＢＰはその後、転写を増加させる基本的な転写因子ＴＦＩＩＢと相互作用する。ＣＲＥＢはまた、ＴＡＴＡ結合タンパク質関連因子であり、その結合により転写を制御する可能性がある、ｄＴＡＦＩＩ１１０と相互作用することも報告されている（Ｆｅｒｒｅｒｌ，Ｋ．，Ｇ．Ｇｉｌｌ，およびＭ．Ｍｏｎｔｍｉｎｙ：”Ｔｈｅ ｃＡＭＰ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＣＲＥＢ ｉｎｔｅｒａｃｔｓ ｗｉｔｈ ａ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ＴＦＩＩＤ ｃｏｍｐｌｅｘ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１２１０，１９９４．）。これらの相互作用に加え、ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質は、複数の他の核因子に特異的に結合することが可能である（Ｈｏｅｍｅｒ，Ｊ．Ｐ．，Ｊ．Ｗ．Ｌｕｓｔｂａｄｅｒ，およびＣ．−Ｙ．Ｃｈｅｎ：”Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒｓ ｔｈａｔ ｉｎｔｅｒａｃｔ ｗｉｔｈ ｃｙｃｌｉｃ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ３’，５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｅｍｅｎｔ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ−２ ｂｙ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ
ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ”．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．５：２５６，１９９１）が、これらの相互作用のほとんどに関し、生物学的重要性は未知である。ＣＲＥＢは通常、ホモ二量体またはいくつかの他のタンパク質と共にヘテロ二量体として、ＤＮＡと結合すると考えられている。驚くべきことに、ＣＲＥＢ単量体は、常に転写を活性化する（Ｋｒａｊｅｗｓｋｉ，Ｗ．，およびＫ．Ａ．Ｗ．Ｌｅｅ：”Ａ ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅ
ｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＣＲＥＢ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｓ ａ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ａｃｔｉｖａｔｏｒ”．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４：７２０４，１９９４．）。
細胞転写を制御する重要な役割とは別に、ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質が、ウイルス複製に該タンパク質を必要とする、いくつかの感染性ウイルスおよびレトロウイルスにより機能を損なわれる（ｓｕｂｖｅｒｔｅｄ）ことが、最近示されている。例えば、サイトメガロウイルス極初期プロモーターは、最も強い既知の哺乳動物プロモーターの１つであるが、プロモーター機能に必須である１１コピーのＣＲＥを含む（Ｃｈａｎｇ，Ｙ．−Ｎ．，Ｓ．Ｃｒａｗｆｏｒｄ，Ｊ．Ｓｔａｌｌ，Ｄ．Ｒ．Ｒａｗｌｉｎｓ，Ｋ．−Ｔ．Ｊｅａｎｇ，およびＧ．Ｓ． Ｈａｙｗａｒｄ：”Ｔｈｅ ｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ ｓｅｒｉｅｓ Ｉ ｒｅｐｅａｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｍｉａｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ｍａｊｏｒ ｉｍｍｅｄｉａｔｅ−ｅａｒｌｙ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｂｅｈａｖｅ
ａｓ ｂｏｔｈ ｓｔｒｏｎｇ ｂａｓａｌ ｅｎｈａｎｃｅｒｓ ａｎｄ ｃｙｃｌｉｃ ＡＭＰ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｅｍｅｎｔｓ”．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６４：２６４，１９９０）。多くのプロモーターを誘導するアデノウイルスＥＩＡタンパク質の、少なくともいくつかの転写活性化作用は、ＥＩＡ誘導可能転写活性化を仲介するＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質であるＡＴＦ−２のＤＮＡ結合ドメインにＥＩＡタンパク質が結合することによる（Ｌｉｕ，Ｆ．，およびＭ．Ｒ．Ｇｒｅｅｎ：”Ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ Ｅ１ａ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌｕｌａｒ ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｄｏｍａｉｎｓ”．Ｎａｔｕｒｅ ３６８：５２０，１９９４）。また、ＥＩＡがＣＲＥＢ結合タンパク質であるＣＢＰと結合することも示唆されている（Ａｒａｎｙ，Ｚ．，Ｗ．Ｒ．Ｓｅｌｌｅｒｓ，Ｄ．Ｍ．Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，およびＲ．Ｅｃｋｎｅｒ：”Ｅ１Ａ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐ３００ ａｎｄ ＣＲＥＢ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ＣＢＰ ｂｅｌｏｎｇ ｔｏ ａ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｆａｍｉｌｙ ｏｆ ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒｓ”．Ｃｅｌｌ ７７：７７９，１９９４）。ヒトＴ細胞白血病および熱帯性痙攣麻痺（ｔｒｏｐｉｃａｌ ｓｐａｓｔｉｃ ｐａｒｅｓｉｓ）を引き起こすレトロウイルスである、ヒトＴリンパ指向性ウイルスＩ（ＨＴＬＶ−Ｉ）もまた、複製にＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質を必要とする。この場合、該レトロウイルスはＴａｘというタンパク質を産生し、これがＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質に結合し、そしてこれらをその正常細胞結合部位とは異なる、ＨＴＬＶ転写エンハンサー内に存在するＤＮＡ配列（ＧおよびＣリッチ配列が隣接する）へと結合部位を変えさせる（Ｐａｃａ−Ｕｃｃａｒａｌｅｒｔｋｕｎ，Ｓ．，Ｌ．−Ｊ．Ｚｈａｏ，Ｎ．Ａｄｙａ，Ｊ．Ｖ．Ｃｒｏｓｓ，Ｂ．Ｒ．Ｃｕｌｌｅｎ，Ｉ．Ｍ．Ｂｏｒｏｓ，およびＣ．−Ｚ．Ｇｉａｍ：”Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｈｉｇｈ ｌｙｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｔｏ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ Ｔ−ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ Ｉ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｏｒ，Ｔａｘ”．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４：４５６，１９９４；Ａｄｙａ，Ｎ．，Ｌ．−Ｊ．Ｚｈａｏ，Ｗ．Ｈｕａｎｇ，Ｉ．Ｂｏｒｏｓ，およびＣ．−Ｚ．Ｇｉａｍ：
”Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ ｏｆ ＣＲＥＢ’ｓＤＮＡ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｂｙ Ｔａｘ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ ａｔ ｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ２８２−２８４ ｎｅａｒ ｔｈｅ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｄｏｍａｉｎ ｏｆ ＣＲＥＢ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：５６４２，１９９４）。
ＷＯ ９５／２６２０４
Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｓ．ら、１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：４０７２
Ｋｕｒａｍｏｔｏ，Ｅら、１９９２，Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．８３：１１２８
Ｔａｎａｋａ，Ｔ．ら、１９９２，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：５９７
Ｂｒｅｎｄａ，Ｒ．Ｆ．ら、１９９３，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４５：２０３７
Ｍｃｌｎｔｙｒｅ，Ｋ．Ｗ．ら、１９９３，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ．Ｄｅｖｅｌｏｐ．３：３０９
Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．ら、１９８９，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４３：２４４８
Ｋｒｉｅｇ，Ａ．ら、１９９５，Ｎａｔｕｒｅ ３７４：５４６
本発明は、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸配列であって、Ｔｈ１型免疫活性化、サイトカイン産生、ＮＫ溶解活性、およびＢ細胞増殖を刺激することを含む、免疫反応を調節する核酸配列を提供することを目的とする。
本発明は、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含み、そして式：
５’Ｎ１Ｘ１ＣＧＸ２Ｎ２３’
（式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１はアデニン、グアニンまたはチミンであり；Ｘ２はシトシンまたはチミンであり；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である）を有する、単離核酸配列である。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＸ１がチミンである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＸ２がチミンである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＧＴＣＧ（Ｔ／Ｃ）ＴまたはＴＧＡＣＧＴＴである。
好適な実施形態では、上記核酸配列の配列がＴＧＴＣＧ（Ｔ／Ｃ）Ｔである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＴＣＣＡＴＧＴＣＧＴＴＣＣＴＧＴＣＧＴＴである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＴＣＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴである。
本発明はまた、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含み、そして式：
５’Ｎ１Ｘ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４Ｎ２３’
（式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１Ｘ２はＧｐＴ、ＧｐＧ、ＧｐＡ、ＡｐＴおよびＡｐＡからなる群より選択され；Ｘ３Ｘ４はＴｐＴまたはＣｐＴからなる群より選択され；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約Ｏ−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である）を有する、単離核酸配列である。
好適な実施形態では、上記核酸配列の少なくとも２つの連続するＣｐＧを分離するヌクレオチドがチミンである。
好適な実施形態では、上記核酸配列のＸ３およびＸ４がチミンである。
好適な実施形態では、上記核酸配列の少なくとも１つのヌクレオチドがリン酸バックボーン修飾を有する。
好適な実施形態では、上記核酸配列のリン酸バックボーン修飾がホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート修飾である。
好適な実施形態では、上記核酸配列のリン酸バックボーン修飾が核酸の５’端で起こる。
好適な実施形態では、上記核酸配列の前記修飾が核酸の５’端の最初の２つのヌクレオチド間結合で起こる。
好適な実施形態では、上記核酸配列のリン酸バックボーン修飾が核酸の３’端で起こる。
好適な実施形態では、上記核酸配列の前記修飾が核酸の３’端の最後の５つのヌクレオチド間結合で起こる。
本発明はまた、患者における免疫活性化を刺激する方法であって、該刺激が主にＴｈ１型免疫活性化であり、上記の式を有する核酸配列を該患者に投与することを含む。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、患者におけるサイトカイン産生を刺激する方法であって、上記の式を有する核酸配列を該患者に投与することを含む。
好適な実施形態では、分泌されるサイトカインが：ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−αおよびＧＭ−ＣＳＦからなる群より選択される。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、核酸配列が：
からなる群より選択される。
好適な実施形態では、患者におけるＮＫ溶解活性を刺激する方法であって、上記の式を有する核酸配列を該患者に投与することを含む。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、核酸配列が：
からなる群より選択される。
好適な実施形態では、患者におけるＢ細胞増殖を刺激する方法であって、上記の式を有する核酸配列を該患者に投与することを含む。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、核酸配列が：
からなる群より選択される。
好適な実施形態では、患者における免疫活性化を刺激する方法であって、上記の式を有する核酸配列を該患者に投与することを含み、該核酸が
アジュバントとして作用する。
好適な実施形態では、患者が哺乳動物である。
好適な実施形態では、核酸配列が：
からなる群より選択される。
好適な実施形態では、喘息性障害を有する患者を治療する方法であって、薬学的に許容されるキャリアー内の、上記の式を有する核酸配列を、該患者に投与することによる。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、核酸配列がＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴである。
好適な実施形態では、ＣｐＧが仲介する白血球活性化を阻害することにより、自己免疫または他のＣｐＧ関連障害を有する患者を治療する方法であって、薬学的に許容されるキャリアー内のエンドソーム酸性化の阻害剤を該患者に投与することを含む。
好適な実施形態では、患者がヒトである。
好適な実施形態では、阻害剤が：バフィロマイシンＡ、クロロキン、およびモネンシンからなる群より選択される。
好適な実施形態では、阻害剤が約１０μＭ未満の用量で投与される。
好適な実施形態では、障害が、全身性エリテマトーデス、敗血症、炎症性腸疾患、乾癬、歯肉炎、関節炎、クローン病、グレーブズ病および喘息からなる群より選択される。
好適な実施形態では、障害が全身性エリテマトーデスである。
本発明によって、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸配列であって、Ｔｈ１型免疫活性化、サイトカイン産生、ＮＫ溶解活性、およびＢ細胞増殖を刺激することを含む、免疫反応を調節する核酸配列が得られる。
図１Ａは、Ｔ細胞除去脾臓細胞培養物の、さまざまなＤＮＡ配列に反応する用量依存性ＩＬ−６産生をプロットしたグラフである。図１Ａは、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＤＮＡ（ｌ）および子ウシ胸腺ＤＮＡ（ｎ）配列およびＬＰＳ（大腸菌および子ウシ胸腺ＤＮＡの１０倍濃度）（ｕ）である。 図１Ｂは、Ｔ細胞除去脾臓細胞培養物の、さまざまなＤＮＡ配列に反応する用量依存性ＩＬ−６産生をプロットしたグラフである。図１Ｂは、コントロールホスホジエステルオリゴヌクレオチド（ＯＤＮ）、５’ＡＴＧＧＡＡＧＧＴＣＣＡＧＴＧＴＴＣＴＣ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１）（ｎ）および２つのホスホジエステルＣｐＧ ＯＤＮ、５’ＡＴＣＧＡＣＣＴＡＣＧＴＧＣＧＴＴＣＴＣ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：２）（ｕ）および５’ＴＣＣＡＴＡＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：３）（ｌ）である。 図１Ｃは、Ｔ細胞除去脾臓細胞培養物の、さまざまなＤＮＡ配列に反応する用量依存性ＩＬ−６産生をプロットしたグラフである。図１Ｃは、コントロールホスホロチオエートＯＤＮ、５’ＧＣＴＡＧＡＴＧＴＴＡＧＣＧＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：４）（ｎ）および２つのホスホロチオエートＣｐＧ ＯＤＮ、５’ＧＡＧＡＡＣＧＴＣＧＡＣＣＴＴＣＧＡＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：５）（ｕ）および５’ＧＣＡＴＧＡＣＧＴＴＧＡＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：６）（ｌ）である。データは３つ組の平均±標準偏差で表している。 図２は、ｉｎ ｖｉｖｏにおいてＣｐＧ ＤＮＡに誘導されるＩＬ−６産生を、注射後１−８時間で測定し、プロットしたグラフである。データは、２匹のマウスから得た血清の二重解析の平均を示している。ＢＡＬＢ／ｃマウス（２匹／群）に１００μｌのＰＢＳ（ｏ）または２００μｇのＣｐＧホスホロチオエートＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：７）（ｎ）またはＣｐＧを含まないホスホロチオエートＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：８）（ｕ）を静脈内注射した。 図３は、ＢＡＬＢ／ｃマウス（２匹／群）に１００μｌのＰＢＳ、２００μｇのＣｐＧホスホロチオエートＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：７）またはＣｐＧを含まないホスホロチオエートＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：８）を静脈内注射し、ｉｎ ｖｉｖｏ刺激した後、さまざまな時点で、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応により測定した、肝臓、脾臓、および胸腺中のＩＬ−６ ｍＲＮＡ発現を示すオートラジオグラフである。 図４Ａは、ＣｐＧ誘導ＩｇＭ産生の抗ＩＬ−６による用量依存性阻害をプロットしたグラフである。ＤＢＡ／２マウス由来の牌臓Ｂ細胞を、示した濃度の中和抗ＩＬ−６（ｕ）またはアイソタイプコントロール抗体（ｌ）の存在下で、ＣｐＧ ＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＡＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：９）で刺激し、そして培養上清中のＩｇＭレベルをＥＬＩＳＡにより測定した。ＣｐＧ ＯＤＮの非存在下では、抗ＩＬ−６ＡｂはＩｇＭ分泌に影響を及ぼさなかった（ｎ）。 図４Ｂは、抗ＩＬ−６およびＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ、５’ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：７）（ｕ）、または抗ＩＬ−６抗体のみ（ｎ）と共に培養した、ＣｐＧ誘導脾臓Ｂ細胞の刺激指数をプロットしたグラフである。データは３つ組の平均±標準偏差を表している。
図５は、プロモーター欠損ＣＡＴ構築物（ｐＣＡＴ）、陽性コントロールプラスミド（ＲＳＶ）、またはＩＬ−６プロモーター−ＣＡＴ構築物のみをトランスフェクションした、または示した濃度のＣｐＧを含む、５’ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：７）またはＣｐＧを含まない、５’ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：８）ホスホロチオエートＯＤＮと培養したものＷＥＨＩ−２３１細胞におけるクロラムフェニコール・アセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）活性をプロットした棒グラフである。データは３つ組の平均を表している。 図６は、免疫刺激性の非メチル化ＣｐＧを含む核酸の免疫作用の概観図である。示されるように、該核酸は、Ｂ細胞および単球性細胞（マクロファージおよび樹状細胞を含む）の両方を直接活性化することが可能である。該免疫刺激性オリゴヌクレオチドは、精製ＮＫ細胞を直接活性化しないが、ＮＫ細胞にＩＬ−１２に対する反応性を与え、ＩＦＮ−γ産生を顕著に増加させる。ＩＬ−１２産生を誘導し、そして続いてＮＫ細胞によるＩＦＮ−γ分泌を増加させることにより、該免疫刺激性核酸は、Ｔｈ１型免疫反応を促進する。非常に精製されたＴ細胞によるサイトカイン分泌急増の直接活性化は見出されていない。しかし、該免疫刺激性オリゴヌクレオチドによるＴｈ１サイトカイン分泌の誘導は、細胞障害性リンパ球反応の発展を促進する。 図７は、大腸菌（ＥＣ）ＤＮＡ（非メチル化ＣｐＧモチーフを含む）、コントロール（ＣＴ）ＤＮＡ（非メチル化ＣｐＧモチーフを含まない）およびリポ多糖（ＬＰＳ）で処理した単球の、異なる測定時間、接触後１５および３０分後におけるＮＦκＢ ｍＲＮＡ誘導を、示したオートラジオグラフである。 図８Ａは、反応性酸素種のレベルを測定するため、ジヒドロローダミン１２３染色剤と共にマウスＢ細胞を用いたフローサイトメトリーの結果を示している。図のパネルＡ中の、染色剤のみの試料は、染色剤に対し陽性の細胞が２８．６％であるバックグラウンドレベルを示している。反応性酸素種のこのレベルは、陽性コントロールであるＰＭＡおよびイオノマイシンにより２０分処理された細胞で、非常に上昇し８０％になった（パネルＢ）。ＣｐＧオリゴ（ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）もまた、５０％を超える細胞が陽性となるような反応性酸素種のレベルの増加を示した（パネルＤ）。しかし、ＣｐＧが入れ替わった以外は同一の配列を持つオリゴヌクレオチド（ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＧＣＴ ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１１）で処理した細胞は、反応性酸素種のレベルにこの有意な増加を示さなかった（パネルＥ）。 図８Ｂは、クロロキン存在下で、反応性酸素種のレベルを測定するため、ジヒドロローダミン１２３染色剤と共にマウスＢ細胞を用いたフローサイトメトリーの結果を示している。クロロキンは、細胞における反応性酸素種のバックグラウンドレベルをわずかに低下させ、パネルＡの未処理細胞は、陽性であるものがわずか４．３％であるようにする。クロロキンはＣｐＧ ＤＮＡ（パネルＢ）で処理した細胞における反応性酸素種誘導を完全に抑えるが、ＰＭＡおよびイオノマイシンで処理した細胞における反応性酸素種レベルは減少させない（パネルＥ）。 図９は、時間経過に対し肺洗浄細胞数をプロットしたグラフである。マウスにまずマンソン住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａｍａｎｓｏｎｉ）「卵」を注射し、これによりＴｈ２免疫反応を誘導し、そして引き続きマンソン住血吸虫卵抗原”ＳＥＡ”（白丸）を吸入させた際、肺中に多くの免疫細胞が存在することを示す。しかし、マウスに最初に卵と共にＣｐＧオリゴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）を与えた場合、肺中の免疫細胞は、続くＳＥＡ吸入によって増加しなかった（白三角）。 図１０は、時間経過に対し肺洗浄好酸球数をプロットしたグラフである。再び、マウスにまず卵を注射し、そして引き続きＳＥＡ（白丸）を吸入させた際、肺中に多くの好酸球が存在することを示す。しかし、マウスに最初に卵と共にＣｐＧオリゴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）を与えた場合、肺中の炎症性細胞は、続くＳＥＡ吸入によって増加しなかった（白三角）。
図１１は、生理食塩水のみ；卵、その後ＳＥＡ；卵およびＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１１、その後ＳＥＡ；および卵およびコントロールオリゴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１１）、その後ＳＥＡへの曝露により誘導した、マクロファージ、リンパ球、好中球および好酸球細胞の比率への影響をプロットした棒グラフである。卵への最初の曝露時に、マウスをコントロールオリゴで処理した際、ＳＥＡ吸入後に続く好酸球の肺への流入にはほとんど影響がなかった。したがって、マウスに第１４日または第２１日に卵を吸入させた際、肺において急性炎症反応が発展した。しかし、最初の抗原曝露時である第０日および第７日に卵と共にＣｐＧオリゴを与えると、第１４日に卵抗原を吸入させた際の好酸球の増加が完全に抑えられた。 図１２は、保護作用を持つＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０のオリゴのさまざまな量の注射に対する好酸球数をプロットした棒グラフである。 図１３は、卵、その後ＳＥＡ（白ひし形）；卵およびＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０、その後ＳＥＡ（白丸）；または生理食塩水、その後生理食塩水（白四角）の注射に反応するマウスのインターロイキン４（ＩＬ−４）産生（ｐｇ／ｍｌ）を、時間経過に対しプロットしたグラフである。このグラフは、肺において、生じる炎症性反応が、Ｔｈ２サイトカインであるＩＬ−４のレベルと相関することを示す。 図１４は、生理食塩水；卵、その後ＳＥＡ；またはＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０および卵、その後ＳＥＡの注射に反応するマウスのインターロイキン１２（ＩＬ−１２）産生（ｐｇ／ｍｌ）を、時間経過に対しプロットした棒グラフである。このグラフは、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドの投与により、実際に肺のサイトカイン反応が、Ｔｈ１型免疫反応を示すＩＬ−１２産生へと変化することを示す。 図１５は、生理食塩水；卵、その後生理食塩水；またはＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０および卵、その後ＳＥＡの注射に反応するマウスのインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）産生（ｐｇ／ｍｌ）を、時間経過に対しプロットした棒グラフである。このグラフは、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドの投与により、肺のサイトカイン反応が、Ｔｈ１型免疫反応を示すＩＦＮ−ｇ産生にも変化することを示す。
本発明は、非メチル化シトシン−グアニン（ＣｐＧ）ジヌクレオチドを含むある種の核酸が、患者におけるリンパ球を活性化し、そして患者の免疫反応をＴｈ２からＴｈ１に変化させる（例えば、単球性細胞および他の細胞を誘導し、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−γおよびＧＭ−ＣＳＦを含むＴｈ１サイトカインを産生させることなどによる）という知見に基づく。この知見に基づき、本発明は１つの側面において、新規の免疫刺激性核酸組成物を特徴とする。
１つの態様において、本発明は、以下の式により表されるＣｐＧモチーフを含む単離免疫刺激性核酸配列を提供する：
５’Ｎ１Ｘ１ＣＧＸ２Ｎ２３’
式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１はアデニン、グアニンまたはチミンであり；Ｘ２はシトシンまたはチミンであり；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である。
別の態様において、本発明は、以下の式により表されるＣｐＧモチーフを含む単離免疫刺激性核酸配列を提供する：
５’Ｎ１Ｘ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４Ｎ２３’
式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１Ｘ２はＧｐＴ、ＧｐＧ、ＧｐＡ、ＡｐＴおよびＡｐＡからなる群より選択され；Ｘ３Ｘ４はＴｐＴまたはＣｐＴからなる群より選択され；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧの四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である。
別の態様において、本発明は、本発明の核酸配列を患者、好ましくはヒトに投与することにより、免疫活性化を刺激する方法を提供する。好ましい態様において、免疫活性化は主に、免疫活性化のＴｈ１型をもたらす。
別の態様において、本発明の核酸配列はサイトカイン産生を刺激する。特に、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−αおよびＧＭ−ＣＳＦなどのサイトカインが、本明細書に記載される核酸配列を用いた免疫系の刺激を介して産生される。他の側面において、本発明の核酸配列は、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）の溶解活性およびＢ細胞増殖を刺激する。
他の態様において、本発明の核酸配列は、マウスまたはヒトなどの哺乳動物において抗体を生成する間、人工的アジュバントとして使用するのに有用である。
別の態様において、ＣｐＧが仲介する白血球活性化への患者の反応を阻害することにより、自己免疫障害を治療する。本発明は、自己免疫障害を改善するため、バフィロマイシン、クロロキン、およびモネンシンなどのエンドソーム酸性化の阻害剤の投与を提供する。特に、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ
ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）をこの方法で治療する。
本発明の核酸配列はまた、他の障害（例えば腫瘍または癌、またはウイルス、真菌、細菌または寄生虫感染）を予防または改善するのに使用してもよい。さらに、該核酸配列を投与して、患者のワクチンに対する反応を刺激してもよい。さらに、請求される核酸分子配列を使用して、患者の免疫反応をＴｈ２からＴｈ１に変化させることにより、喘息性障害を治療し、または予防してもよい。
さらに、脱感作療法の一種として、請求される核酸分子を特定のアレルゲンと共に患者に投与し、喘息性障害に関連するアレルギー性反応の発生を治療し、または予防してもよい。
さらに、本明細書に記載される、本発明の核酸配列が、白血病細胞の細胞周期への進入を誘導する能力は、慢性白血病細胞の感受性を増加させた後に慣用的切除化学療法（ａｂｌａｔｉｖｅ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ）を行うことにより、または該核酸配列を他の免疫療法と組み合わせることにより、白血病を治療する際に該核酸を使用することに論拠を与える。
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および請求項により、より明らかになるであろう。
（発明の詳細な説明）
（定義）
本明細書において、以下の用語および句は、以下に述べる意味を有するものとする：
「アレルゲン」は、感受性患者においてアレルギー性または喘息性反応を誘導することが可能な物質を指す。アレルゲンのリストは膨大であり、そして花粉、昆虫毒、動物ふけ（ｄａｎｄｅｒ）塵、真菌胞子および薬剤（例えば、ペニシリン）を含んでもよい。天然の、動物および植物アレルゲンの例には、以下の属（ｇｅｎｕｓ）に特異的なタンパク質が含まれる：イヌ属（Ｃａｎｉｎｅ）（カニス・ファミリアリス（Ｃａｎｉｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ））；デルマトファゴイデス属（Ｄｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ）（例えばコナヒョウダニ（Ｄｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓｆａｒｉｎａｅ））；ネコ属（Ｆｅｌｉｓ）（フェリス・ドメスティクス（Ｆｅｌｉｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ））；ブタタサ属（Ａｍｂｒｏｓｉａ）（ブタクサ（Ａｍｂｒｏｓｉａ ａｒｔｅｍｉｉｓｆｏｌｉａ））；ドクムギ属（Ｌｏｌｉｕｍ）（例えばホソムギ（Ｌｏｌｉｕｍ ｐｅｒｅｎｎｅ）またはネズミムギ（Ｌｏｌｉｕｍ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ））；スギ属（Ｃｒｙｐｔｏｍｅｒｉａ）（スギ（Ｃｒｙｐｔｏｍｅｒｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ））；アルテルナリア属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）（アルテルナリア・アルテルナタ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ））；ハンノキ属（Ａｌｄｅｒ）；ハンノキ属（Ａｌｎｕｓ）（アルヌス・グルティノサ（Ａｌｎｕｓ ｇｕｌｔｉｎｏｓａ））；カバノキ属（Ｂｅｔｕｌａ）（ベツラ・ベルコサ（Ｂｅｔｕｌａ ｖｅｒｒｕｃｏｓａ））；カシ属（Ｑｕｅｒｃｕｓ）（クウェルクス・アルバ（Ｑｕｅｒｃｕｓ ａｌｂａ））；オリーブ属（Ｏｌｅａ）（オリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａ））；ヨモギ属（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）（ヨモギ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｖｕｌｇａｒｉｓ））；オオバコ属（Ｐｌａｎｔａｇｏ）（例えばヘラオオバコ（Ｐｌａｎｔａｇｏ ｌａｎｃｅｏｌａｔａ））；ヒカゲミズ属（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ）（例えばパリエタリア・オフィチナリス（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）またはパリエタリア・ユダイカ（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｊｕｄａｉｃａ））；チャバネゴキブリ属（Ｂｌａｔｔｅｌｌａ）（例えばチャバネゴキブリ（Ｂｌａｔｔｅｌｌａ ｇｅｒｍａｎｉｃａ））；ミツバチ属（Ａｐｉｓ）（例えばアピス・ムルティフロルム（Ａｐｉｓ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ））；イトスギ属（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ）（例えばクプレスス・セムペルビレンス（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ）、クプレスス・アリゾニカ（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ ａｒｉｚｏｎｉｃａ）およびクプレスス・マクロカルパ（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ ｍａｃｒｏｃａｒｐａ））；ビャクシン属（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ）（例えばユニペルス・サビオノイデス（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｓａｂｉｎｏｉｄｅｓ）、ユニペルス・ビルギニアナ（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｖｉｒｇｉｎｉａｎａ）、ユニペルス・コムニス（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）およびユニペルス・アシェイ（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ａｓｈｅｉ））；クロベ属（Ｔｈｕｙａ）（例えばツヤ・オリエンタリス（Ｔｈｕｙａ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ））；ヒノキ属（Ｃｈａｍａｅｃｙｐａｒｉｓ）（例えばヒノキ（Ｃｈａｍａｅｃｙｐａｒｉｓ ｏｂｔｕｓａ））；ゴキブリ属（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ）（例えばワモンゴキブリ（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ ａｍｅｒｉｃａｎａ））；カモジグサ属（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ）（例えばアグロピロン・レペンス（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ ｒｅｐｅｎｓ））；ライムギ属（Ｓｅｃａｌｅ）（例えばライムギ（Ｓｅｃａｌｅ ｃｅｒｅａｌｅ））；コムギ属（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ）（例えばコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ））；カモガヤ属（Ｄａｃｔｙｌｉｓ）（例えばカモガヤ（Ｄａｃｔｙｌｉｓ ｇｌｏｍｅｒａｔａ））；ウシノケグサ属（Ｆｅｓｔｕｃａ）（例えばヒロハノウシノケグサ（Ｆｅｓｔｕｃａ ｅｌａｔｌｏｒ））；イチゴツナギ属（Ｐｏａ）（例えばナガハグサ（Ｐｏａ ｐｒａｔｅｎｓｉｓ）またはポア・コンプレサ（Ｐｏａ ｃｏｍｐｒｅｓｓａ））；カラスムギ属（Ａｖｅｎａ）（例えばマカラスムギ（Ａｖｅｎａ ｓａｔｉｖａ））；シラゲガヤ属（Ｈｏｌｃｕｓ）（例えばシラゲガヤ（Ｈｏｌｃｕｓｌａｎａｔｕｓ））；ハルガヤ属（Ａｎｔｈｏｘａｎｔｈｕｍ）（例えばハルガヤ（Ａｎｔｈｏｘａｎｔｈｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ））；オオカニツリ属（Ａｒｒｈｅｎａｔｈｅｒｕｍ）（例えばオオカニツリ（Ａｒｒｈｅｎａｔｈｅｒｕｍ ｅｌａｔｉｕｓ））；ヌカボ属（Ａｇｒｏｓｔｉｓ）（例えばコヌカグサ（Ａｇｒｏｓｔｉｓ ａｌｂａ））；アワガエリ属（Ｐｈｌｅｕｍ）（例えばオオアワガエリ（Ｐｈｌｅｕｍ ｐｒａｔｅｎｓｅ））；クサヨシ属（Ｐｈａｌａｒｉｓ）（例えばクサヨシ（Ｐｈａｌａｒｉｓ ａｒｕｎｄｉｎａｃｅａ））；スズメノヒエ属（Ｐａｓｐａｌｕｍ）（例えばパスパルム・ノタツム（Ｐａｓｐａｌｕｍ ｎｏｔａｔｕｍ））；モロコシ属（Ｓｏｒｇｈｕｍ）（例えばソルグム・ハレペンシス（Ｓｏｒｇｈｕｍ ｈａｌｅｐｅｎｓｉｓ））；およびスズメノチャヒキ属（Ｂｒｏｍｕｓ）（例えばコスズメノチャヒキ（Ｂｒｏｍｕｓ ｉｎｅｒｍｉｓ））。
「アレルギー」は、物質（アレルゲン）に対する後天的過敏症を指す。アレルギー性疾患には、湿疹、アレルギー性鼻炎またはコリーザ、枯草熱、気管支喘息、じんま疹および食物アレルギー、および他のアトピー性疾患が含まれる。
「喘息」は炎症、気道の狭窄、および吸入作用物質（ｉｎｈａｌｅｄ ａｇｅｎｔ）に対する気道反応性の増加により特徴付けられる呼吸器系の障害である。喘息は、すべてではないが、しばしばアトピー性またはアレルギー性症状と関連している。
「免疫系不全（ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ）」は、患者の免疫系が正常能力では機能していないか、または、例えば患者における腫瘍または癌（例えば、脳、肺（例えば小細胞および非小細胞）、卵巣、乳房、前立腺、結腸の腫瘍と共に他の癌および肉腫）、または感染を除くために、患者の免疫反応を高めることが有用であるような、疾患または障害を意味するものとする。
感染性ウイルスの例には以下のものが含まれる：レトロウイルス科（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｌｄａｅ）（例えば、ＨＩＶ−Ｉ（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ、ＬＡＶまたはＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶとも称される）またはＨＩＶ−ＩＩＩ；およびＨＩＶ−ＬＰなどの他の単離体などのヒト免疫不全ウイルス（ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ）類）；ピコルナウイルス科（Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ）（例えばポリオウイルス（ｐｏｌｉｏ ｖｉｒｕｓ）類、肝炎Ａウイルス（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ａ ｖｉｒｕｓ）；エンテロウイルス（ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ）類；ヒトコクサッキーウイルス（ｈｕｍａｎ ｃｏｘｓａｃｋｉｅ ｖｉｒｕｓ）類、ライノウイルス（ｒｈｉｎｏｖｉｒｕｓ）類、エコーウイルス（ｅｃｈｏｖｉｒｕｓ）類）；カルシウイルス科（Ｃａｌｃｉｖｉｒｉｄａｅ）（例えば胃腸炎を起こす株）；トガウイルス科（Ｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅ）（例えばウマ脳炎ウイルス（ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ
ｖｉｒｕｓ）類、風疹ウイルス（ｒｕｂｅｌｌａ ｖｉｒｕｓ）類）；フラビウイルス科（Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、デング熱ウイルス（ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ）類、脳炎ウイルス（ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）類、黄熱病ウイルス（ｙｅｌｌｏｗ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）類）；コロナウイルス科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、コロナウイルス（ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）類）；ラブドウイルス科（Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、水疱性口内炎ウイルス（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ
ｖｉｒｕｓ）類、狂犬病ウイルス（ｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ）類）；フィロウイルス科（Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えばエボラウイルス（ｅｂｏｌａ ｖｉｒｕｓ）類）；パラミクソウイルス科（Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、パラインフルエンザウイルス（ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ）類、流行性耳下腺炎ウイルス（ｍｕｍｐｓ ｖｉｒｕｓ）、麻疹ウイルス（ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ）、ＲＳウイルス（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ））；オルソミクソウイルス科（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、インフルエンザウイルス（ｉｎｆｌｕｅｎｚａ
ｖｉｒｕｓ）類）；ブンガウイルス科（Ｂｕｎｇａｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、ハンターンウイルス（Ｈａｎｔａａｎ ｖｉｒｕｓ）類、ブンガウイルス（ｂｕｎｇａ ｖｉｒｕｓ）類、フレボウイルス（ｐｈｌｅｂｏｖｉｒｕｓ）類およびナイロウイルス（Ｎａｉｒｏ ｖｉｒｕｓ）類）；アレナウイルス科（Ａｒｅｎａ ｖｉｒｉｄａｅ）（出血性熱ウイルス（ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）類）；レオウイルス科（Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えば、レオウイルス（ｒｅｏｖｉｒｕｓ）類、オルビウイルス（ｏｒｂｉｖｉｒｕｓ）類およびロタウイルス（ｒｏｔａｖｉｒｕｓ）類）；ビルナウイルス科（Ｂｉｒｎａｖｉｒｉｄａｅ）；ヘパドナウイルス科（Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ）（肝炎Ｂウイルス（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ））；パルボウイルス科（Ｐａｒｖｏｖｌｒｉｄａｅ）（パルボウイルス（ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ）類）；パポバウイルス科（Ｐａｐｏｖａｖｉｒｉｄａｅ）（パピローマウイルス（ｐａｐｉｌｌｏｍａ ｖｉｒｕｓ）類、ポリオーマウイルス（ｐｏｌｙｏｍａ ｖｉｒｕｓ）類）；アデノウイルス科（Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ）（大部分のアデノウイルス（ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）類）；ヘルペスウイルス科（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ）（単純疱疹ウイルス（ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ （ＨＳＶ））１および２、水痘−帯状疱疹ウイルス（ｖａｒｉｃｅｌｉａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ）、サイトメガロウイルス（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ（ＣＭＶ））、疱疹ウイルス（ｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒｕｓ）類）；ポックスウイルス科（Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ）（痘瘡ウイルス（ｖａｒｉｏｌａ ｖｉｒｕｓ）類、ワクシニアウイルス（ｖａｃｃｉｎｉａ ｖｉｒｕｓ）類、ポックスウイルス（ｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）類）；およびイリドウイルス科（Ｉｒｉｄｏｖｉｒｉｄａｅ）（例えばブタコレラウイルス（Ａｆｒｉｃａｎ ｓｗｉｎｅ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ））；および分類されないウイルス（例えば、スポンジ型脳症（Ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ）の病因病原体、デルタ肝炎の病原体（肝炎Ｂウイルスの不完全付随体と考えられている）、非Ａ非Ｂ肝炎の病原体（１型＝経口感染、２型＝非経口感染（すなわち、肝炎Ｃ））；ノーウォーク（Ｎｏｒｗａｌｋ）および関連ウイルス、およびアストロウイルス（ａｓｔｒｏｖｉｒｕｓ）類）。
感染性細菌の例には以下のものが含まれる：ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉｓ）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、レジュネラ・ニューモフィリア（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ）種（例えば結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、トリ結核菌（Ｍ．ａｖｉｕｍ）、Ｍ．イントラセルラレ（Ｍ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、Ｍ．カンサイ（Ｍ．ｋａｎｓａｉｉ）、Ｍ．ゴルドナイ（Ｍ．ｇｏｒｄｏｎａｅ））、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）（Ａ群連鎖球菌）、ストレプトコックス・アガラクティアイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）（Ｂ群連鎖球菌）、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）（ヴィリダンス群（ｖｉｒｉｄａｎｓ ｇｒｏｕｐ））、糞便連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ストレプトコックス・ボビス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ）、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）（嫌気性種）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｌａｅ）、病原性カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）種、腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）種、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｒａｃｉｓ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、コリネバクテリウム（ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種、ブタ丹毒菌（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ ｒｈｕｓｉｏｐａｔｈｉａｅ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｒｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ）、エンテロバクター・アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、パスツレラ・ムルトチダ（Ｐａｓｔｕｒｅｌｌａ ｍｕｌｔｏｃｉｄａ）、バクテロイド（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）種、フゾバクテリウム・ヌタレアツム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、ストレプトバチラス・モニリフォルミス（Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｉｕｍ）、フランベジアトレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐｅｒｔｅｎｕｅ）、レプトスピラ属（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）およびイスラエル放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｌｉ）。
感染性真菌の例には以下のものが含まれる：クリプトコックス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、ヒストプラズマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、コクシジオイデス・イミティス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ）、ブラストミセス・デルマティティディス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、トラコーマ病原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、口瘡カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）。他の感染性生物（すなわち原生動物）には：熱帯性マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）およびトキソプラズマ・ゴンジ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ）が含まれる。
「免疫刺激性核酸分子」は、非メチル化シトシン、グアニンジヌクレオチド配列（すなわち「ＣｐＧ ＤＮＡ」またはグアノシンが続くシトシンを含み、そしてリン酸結合により結合するＤＮＡ）を含み、そして脊椎動物リンパ球を刺激する（例えば、該リンパ球に分裂促進作用を有し、または該リンパ球からのサイトカイン発現を誘導または増加させる）。免疫刺激性核酸分子は、二重鎖でもよいし、一本鎖でもよい。一般的には、ｉｎ ｖｉｖｏでは二重鎖分子がより安定である一方、一本鎖分子は増加した免疫活性を有する。
好ましい態様の１つにおいて、本発明は、以下の式により表されるＣｐＧモチーフを含む単離免疫刺激性核酸配列を提供する：
５’Ｎ１Ｘ１ＣＧＸ２Ｎ２３’
式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１はアデニン、グアニンまたはチミンであり；Ｘ２はシトシンまたはチミンであり；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である。
別の態様において、本発明は、以下の式により表されるＣｐＧモチーフを含む単離免疫刺激性核酸配列を提供する：
５’Ｎ１Ｘ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４Ｎ２３’
式中、少なくとも１つのヌクレオチドが連続するＣｐＧを分離し；Ｘ１Ｘ２はＧｐＴ、ＧｐＧ、ＧｐＡ、ＡｐＴおよびＡｐＡからなる群より選択され；Ｘ３Ｘ４はＴｐＴまたはＣｐＴからなる群より選択され；Ｎはいかなるヌクレオチドであってもよく、そしてＮ１＋Ｎ２は約０−２６塩基であり、ただしＮ１およびＮ２はＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず；そして該核酸配列は長さ約８−３０塩基である。
好ましくは、本発明の免疫刺激性核酸配列は、ＧｐＴ、ＧｐＧ、ＧｐＡおよびＡｐＡからなる群より選択されるＸ１Ｘ２を含み、そしてＸ３Ｘ４はＴｐＴ、ＣｐＴおよびＧｐＴからなる群より選択される（例えば、表５を参照されたい）。細胞への取りこみを容易にするため、ＣｐＧを含む免疫刺激性核酸分子は、好ましくは長さ８から３０塩基の範囲にある。しかし、いかなる大きさの核酸（数ｋｂ長のものであっても）も、こうしたより大きな核酸は細胞内でオリゴヌクレオチドに分解されるため、十分な免疫刺激性モチーフが存在するのであれば免疫刺激性である。好ましい合成オリゴヌクレオチドは、５’および／または
３’末端またはその近傍にＣＣＧＧ四量体または１つより多いＣＣＧまたはＣＧＧ三量体を含まず、および／またはコンセンサス分裂促進性ＣｐＧモチーフはパリンドロームではない。オリゴヌクレオチドがリン酸バックボーン修飾を取りこんだ安定化オリゴヌクレオチドを用いて、免疫刺激反応を延長してもよい。例えば、該修飾は、ホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート修飾である。より詳細には、リン酸バックボーン修飾は、核酸の５’端、例えば核酸の５’端の最初の２つのヌクレオチドで起こる。さらに、リン酸バックボーン修飾は、核酸の３’端、例えば核酸の３’端の最後の５つのヌクレオチドで起こってもよい。
好ましくは、免疫刺激性ＣｐＧ ＤＮＡはオリゴヌクレオチドである場合、８から３０塩基の大きさの範囲である。また別に、ＣｐＧジヌクレオチドを、プラスミド中で大量スケールで産生し、その後、患者に投与する際に、オリゴヌクレオチドに分解させてもよい。好ましい免疫刺激性核酸分子（例えば、ワクチンの有効性を高めるのに使用するため、または患者における抗体（すなわち体液性）反応を刺激することにより、免疫系不全を治療するための該分子）は、Ｂ細胞、単球および／またはナチュラルキラー細胞反応（例えばサイトカイン、増殖、溶解または他の反応）に関し、比較的高い刺激指数を有する。
本発明の核酸配列は、例えば患者におけるサイトカイン産生を刺激する。サイトカインには、限定されるわけではないが、ＩＬ−６、ＩＩ−１２、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−αおよびＧＭ−ＣＳＦが含まれる。典型的な配列には：ＴＣＣＡＴＧＴＣＧＣＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ（ＳＥＱＩＤ Ｎｏ：４２）、ＴＣＣＡＴＧＴＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：４３）、およびＴＣＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：５６）が含まれる。
本発明の核酸配列はまた、ヒトなどの患者のナチュラルキラー細胞の溶解活性を刺激するのにも有用である。こうした配列の特定の、しかし限定されない例には：
が含まれる。
本発明の核酸配列はまた、ヒトなどの患者においてＢ細胞増殖を刺激するのにも有用である。こうした配列の特定の、しかし限定されない例には：
が含まれる。
他の側面において、本発明の核酸配列は、哺乳動物において抗体を産生する間に用いるアジュバントとして有用である。こうした配列の特定の、しかし限定されない例には：ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）、ＧＴＣＧ（Ｔ／Ｃ）ＴおよびＴＧＴＣＧ（Ｔ／Ｃ）Ｔが含まれる。さらに、請求される核酸配列を投与して、患者の免疫反応をＴｈ２からＴｈ１に変化させることにより、喘息性障害の症状を治療し、または予防してもよい。典型的な配列にはＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）が含まれる。
特定の免疫刺激性ＣｐＧ ＤＮＡの刺激指数を、さまざまな免疫細胞検定において試験してもよい。好ましくは、Ｂ細胞増殖に関する免疫刺激性ＣｐＧ ＤＮＡの刺激指数は、少なくとも約５、好ましくは少なくとも約１０、より好ましくは少なくとも約１５、そして最も好ましくは少なくとも約２０である。該指数は、詳細を実施例１に記載するように、ネズミＢ細胞培養物を２０μＭのＯＤＮと３７℃で２０時間接触させ、そして１μＣｉの３Ｈウリジンでパルス標識し；そして４時間後に採取しそしてカウントした、該Ｂ細胞培養物中の３Ｈウリジンの取りこみにより測定される。Ｉｎ ｖｉｖｏでの使用、例えば、患者における細胞仲介（局所）免疫反応を刺激することにより免疫系不全を治療するためには、免疫刺激性ＣｐＧ ＤＮＡが単球性細胞によるサイトカイン分泌および／またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞溶解活性を効果的に誘導することが可能であることが重要である。
好ましい免疫刺激性ＣｐＧ核酸は、治療徴候に依存して、実施例１２に記載される検定により測定されるように、少なくとも約５００ｐｇ／ｍｌのＴＮＦ−α、１５ｐｇ／ｍｌのＩＦＮ−γ、７０ｐｇ／ｍｌのＧＭ−ＣＳＦ、２７５ｐｇ／ｍｌのＩＬ−６、２００ｐｇ／ｍｌのＩＬ−１２をもたらすべきである。他の好ましい免疫刺激性ＣｐＧ ＤＮＡは、実施例４に詳細に記載される検定により測定されるように、少なくとも約１０％、より好ましくは少なくとも約１５％、そして最も好ましくは少なくとも約２０％のＹＡＣ−１細胞特異的溶解、または少なくとも約３０、より好ましくは少なくとも約３５、そして最も好ましくは少なくとも約４０％の２Ｃ１１細胞特異的溶解をもたらすべきである。
「核酸」または「ＤＮＡ」は複数のヌクレオチド（すなわち、リン酸基、および置換ピリミジン（例えばシトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）またはウラシル（Ｕ））または置換プリン（例えばアデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ））のどちらかである交換可能な有機塩基と連結した糖（例えばリボースまたはデオキシリボース）を含む分子）を意味する。本明細書において、該用語は、リボヌクレオチドと共にオリゴデオキシリボヌクレオチドを指す。該用語はまた、ポリヌクレオシド（すなわちポリヌクレオチドからリン酸を除いたもの）およびポリマーを含む他のいかなる有機塩基も含むものとする。核酸分子は、現存する核酸供給源（例えばゲノムまたはｃＤＮＡ）から得てもよいが、好ましくは合成（例えばオリゴヌクレオチド合成により産生される）である。
「核酸搬送複合体」は、標的手段（例えば、標的細胞（例えばＢ細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）表面により高い親和性結合、および／または標的細胞による細胞取りこみの増加を生じる分子）と結合した（例えばイオンまたは共有結合する；または内部に被包される）核酸分子を意味するものとする。核酸分子搬送複合体の例には：ステロール（例えば、コレステロール）、脂質（例えば、陽イオン脂質、ヴィロソームまたはリポソーム）、または標的細胞特異的結合剤（例えば、標的細胞特異的受容体により認識されるリガンド）と結合した核酸が含まれる。好ましい複合体は、標的細胞により内在化する前に著しく結合が失われるのを防ぐため、ｉｎ ｖｉｖｏで十分に安定でなくてはならない。しかし、該複合体は、核酸が機能型で放出されるよう、細胞内の適切な条件下で切断可能であるべきである。
「パリンドローム配列」は反転リピート（すなわち、ＡＢＣＤＥＥ’Ｄ’Ｃ’Ｂ’Ａ’のような配列、ここでＡおよびＡ’は通常のワトソン−クリック塩基対を形成することが可能な塩基である）を意味するものとする。Ｉｎ ｖｉｖｏでは、こうした配列が二重鎖構造を形成してもよい。
「安定化核酸分子」は、ｉｎ ｖｉｖｏ分解（例えば、エキソまたはエンドヌクレアーゼを介する）に比較的耐性がある核酸分子を意味するものとする。安定化は長さまたは二次構造の結果である可能性がある。数１０から数１００ｋｂ長である、非メチル化ＣｐＧを含む核酸分子は、ｉｎ ｖｉｖｏ分解に比較的耐性である。より短い免疫刺激性核酸分子に関しては、二次構造を安定化し、そしてその効果を高めてもよい。例えば、核酸分子の３’端が上流領域に対し自己相補性を有し、それにより折りたたまれそして一種のステムループ構造を形成することが可能であれば、該核酸分子は安定化され、そしてより高い活性を示す。
本発明の好ましい安定化核酸分子は、修飾バックボーンを有する。免疫刺激における使用に関し、特に好ましい安定化核酸分子はホスホロチオエート（すなわち、核酸分子の少なくとも１つのリン酸酸素がイオウにより置きかえられている）またはホスホロジチオエート修飾核酸分子である。より詳細には、リン酸バックボーン修飾は、核酸の５’端、例えば核酸の５’端の最初の２つのヌクレオチドで起こる。さらに、リン酸バックボーン修飾は、核酸の３’端、例えば核酸の３’端の最後の５つのヌクレオチドで起こってもよい。核酸分子を安定化するのに加え、本明細書にさらに報告されるように、ホスホロチオエート修飾核酸分子（ホスホロジチオエート修飾を含む）は、本明細書に示される非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸分子の、免疫刺激の程度を増加させることが可能である。”Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｙ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ａｎａｌｏｇｓ”と題される国際特許出願公告第ＷＯ ９５／２６２０４号もまた、ホスホロチオエート修飾オリゴヌクレオチドの非配列特異的免疫刺激効果に関して報告している。本明細書に報告されるように、ホスホロチオエートバックボーンを有し、非メチル化ＣｐＧを含む核酸分子は、優先的にＢ細胞活性を活性化させることが見出されている一方、ホスホジエステルバックボーンを有し、非メチル化ＣｐＧを含む核酸分子は、優先的に単球性（マクロファージ、樹状細胞および単球）およびＮＫ細胞活性を活性化させることが見出されている。好ましいヒトモチーフを持つホスホロチオエートＣｐＧオリゴヌクレオチドもまた、単球性およびＮＫ細胞の強い活性化剤である。
他の安定化核酸分子には：アルキルおよびアリールホスホネート（荷電ホスホン酸酸素がアルキルまたはアリール基により置き換えられている）、ホスホジエステルおよび荷電酸素部分がアルキル化されたアルキルホスホトリエステルなどの非イオン性ＤＮＡ類似体（ａｎａｌｏｇ）が含まれる。片方または両方の末端に、テトラエチレングリコールまたはヘキサエチレングリコールなどのジオールを含む核酸分子もまた、ヌクレアーゼ分解にかなりの耐性を持つことが示されている。
「患者」は、ヒトまたは、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、トリ、サル、ラットおよびマウスを含む脊椎動物を意味するものとする。
本明細書において、「ベクター」という用語は、連結している別の核酸を輸送することが可能な核酸分子を指す。好ましいベクターは、自律複製および連結する核酸の発現が可能であるものである（例えば、エピソーム）。機能可能であるように連結した遺伝子の発現を指示することが可能なベクターは、本明細書において、「発現ベクター」と呼ばれる。一般的に、組換えＤＮＡ技術において利用される発現ベクターは、しばしば「プラスミド」の形態であり、これは一般的に環状二重鎖ＤＮＡループを指し、ベクター型である際、染色体に結合しない。本明細書において、「プラスミド」および「ベクター」は、プラスミドが最もよく使用される型のベクターであるため、互いに交換可能であるように使用されている。しかし、本発明は、同等の機能を提供する発現ベクターの他の型であって、そして引き続き本明細書において当業に知られる前記ベクターを含むよう意図される。
非メチル化ＣｐＧを含むある種の核酸はｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで示されるようにＢ細胞刺激活性を有する
内因性レトロウイルス配列に特異的な２つのアンチセンスオリゴヌクレオチドのリンパ球刺激作用を、添付される実施例１および２に記載されるプロトコルを用いて調べた経過において、驚くべきことに２４の「コントロール」（一群の「アンチセンス」ＯＤＮに対する、さまざまなスクランブル、センスおよびミスマッチコントロールを含む）中の２つもまた、Ｂ細胞活性化およびＩｇＭ分泌を仲介する一方、他の「コントロール」はいかなる影響も持たないことが見出された。
２つの観察により、該「コントロール」ＯＤＮによるＢ細胞活性化の機構は、アンチセンス効果に関連しない可能性が示唆される。１）ＧｅｎＢａｎｋに記載される脊椎動物ＤＮＡ配列と比較すると、非刺激性ＯＤＮと比較した際に見られるより、高い相同性は見られず、そして２）２つのコントロールは１０μｇの脾臓ポリＡ＋ＲＮＡとのノーザンブロットに対し、ハイブリダイゼーションを示さなかった。これらのＯＤＮを異なる合成装置で再合成しても、またポリアクリルアミドゲル電気泳動または高圧液体クロマトグラフィーにより徹底的に精製しても、同一の刺激が得られ、不純物の可能性は排除された。同様の刺激はＣ３Ｈ／ＨｅＪマウス由来のＢ細胞を用いても見られ、リポ多糖（ＬＰＳ）混入が結果を説明する可能性が排除された。
２つの「コントロール」ＯＤＮが、２つの「アンチセンス」ＯＤＮと同様なＢ細胞活性化を引き起こしたという事実により、４つのＯＤＮすべては、他の非刺激性コントロールＯＤＮすべてに欠如する配列モチーフが関与する、ある種の非アンチセンス機構を通じてＢ細胞を刺激している可能性が生じる。これらの配列を比較すると、４つの刺激性ＯＤＮはすべて、非刺激性コントロールとは異なる配列背景にあるＣｐＧジヌクレオチドを含むことが発見された。
刺激性ＯＤＮに存在するＣｐＧモチーフが、観察された刺激の原因であるのかどうか決定するため、さまざまな配列背景のメチル化、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む、またはＣｐＧジヌクレオチドを含まない、長さ５から４２塩基の範囲の３００を超えるＯＤＮを合成した。これらのＯＤＮには元の２つの「コントロール」（ＯＤＮ１および２）および元来「アンチセンス」として合成された２つ（ＯＤＮ ３Ｄおよび３Ｍ；Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４３：２４４８（１９８９））が含まれ、その後脾臓細胞に対するｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を調べた（それぞれの配列は表１に記載される）。ＣｐＧジヌクレオチドを含む、いくつかのＯＤＮは、Ｂ細胞活性化およびＩｇＭ分泌を誘導した；この刺激の程度は、典型的にはより多くのＣｐＧジヌクレオチドを付加することにより増やすことが可能であった（表１；ＯＤＮ２を２ａに、３Ｄを３Ｄａおよび３Ｄｂに比較されたい）。刺激はアンチセンス機構または不純物に起因するものではないようであった。ＯＤＮはγδまたは他のＴ細胞集団の検出可能な増殖を引き起こさなかった。
分裂促進性ＯＤＮ配列は、ＣｐＧジヌクレオチドに突然変異が起こった場合（表１；ＯＤＮ１を１ａに；３Ｄを３Ｄｃに；３Ｍを３Ｍａに；および４を４ａに比較されたい）、またはＣｐＧジヌクレオチドのシトシンが５−メチルシトシンに置きかえられた場合（表１；ＯＤＮ １ｂ、２ｂ、３Ｄｄ、および３Ｍｂ）、一様に非刺激性になった。ＣｐＧモチーフを一部メチル化することにより、刺激効果の部分的損失が引き起こされた（表１の２ａを２ｃに比較されたい）。対照的に、他のシトシンのメチル化は、ＯＤＮ活性を減少させなかった（ＯＤＮ １ｃ、２ｄ、３Ｄｅおよび３Ｍｃ）。これらのデータは、ＣｐＧモチーフがＢ細胞を活性化するＯＤＮに存在する必須な要素であることを裏付けた。
これらの研究の経過において、ＣｐＧジヌクレオチドに隣接する塩基が、ＯＤＮにより誘導されるネズミＢ細胞活性化を決定するのに、重要な役割を果たしていることが明確になった。最適刺激モチーフは、２つの５’プリン（好ましくはＧｐＡジヌクレオチド）および２つの３’ピリミジン（好ましくはＴｐＴまたはＴｐＣジヌクレオチド）に隣接するＣｐＧからなることが決定された。ＣｐＧモチーフをこの理想的配列に近づけるようＯＤＮに突然変異を加えると、刺激が改善された（例えば、表１、ＯＤＮ ２を２ｅに；３Ｍを３Ｍｄに比較されたい）が、モチーフを壊すような突然変異は刺激を減少させた（例えば、表１、ＯＤＮ
３Ｄを３Ｄｆに；４を４ｂおよび４ｄに比較されたい）。一方、ＣｐＧモチーフの外側での突然変異は、剌激を減少させなかった（例えば、表１、ＯＤＮ １を１ｄに；３Ｄを３Ｄｇに；３Ｍを３Ｍｅに比較されたい）。ヒト細胞の活性化に関しては、最良の隣接塩基はわずかに異なっていた（表５を参照されたい）。
試験されたもののうち、８塩基より短いＯＤＮは非刺激性であった（例えば、表１、ＯＤＮ ４ｅ）。試験された４８個の８塩基ＯＤＮのうち、高刺激性配列は、相補的な「パリンドローム」ＡＡＣＧＴＴを含むＴＣＡＡＣＧＴＴ（ＯＤＮ
４）と同定された。このモチーフをさらに最適化すると、両端にＧを含むＯＤＮが、特にＯＤＮの末端ヌクレオチド間結合をホスホロチオエート修飾することによりヌクレアーゼ耐性が与えられた場合、刺激の増加を示した。最初の２つおよび最後の５つのヌクレオチド間結合がホスホロチオエート修飾された、ＯＤＮ
１５８５（５’ＧＧＧＧＴＣＡＡＣＧＴＴＣＡＧＧＧＧＧＧ ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１２））は、マウス脾臓細胞増殖に平均２５．４倍の増加を引き起こしたのに比べ、両端の１０個のＧが１０個のＡに置きかえられた以外はＯＤＮ
１５８５と同じ配列を有するＯＤＮ １６３８により誘導される増殖は平均３．２倍の増加であった。Ｇリッチ端の効果はシス（ｃｉｓ）であり；ポリＧ端を持っがＣｐＧモチーフを持たないＯＤＮを、１６３８と共に細胞に加えても増殖増加は得られなかった。８塩基対より長い核酸分子に関しては、非メチル化ＣｐＧを含む非パリンドロームモチーフが、より免疫刺激性であることが見出された。
５’端のＴｐＣジヌクレオチドと共に６塩基パリンドロームを含む、他のオクタマーＯＤＮもまた活性があった（例えば、表１、ＯＤＮ ４ｂ、４ｃ）。５’端の他のジヌクレオチドは刺激を減少させた（例えば、ＯＤＮ ４ｆ；１６の可能なジヌクレオチドをすべて試験した）。３’ジヌクレオチドが存在しても、５’ジヌクレオチドの欠失を相殺するには不充分であった（例えば、表１、ＯＤＮ
４ｇ）。パリンドロームを破壊すると、オクタマーＯＤＮの刺激が除去された（例えば、表１、ＯＤＮ ４ｈ）が、より長いＯＤＮにはパリンドロームは必要とされなかった。
（表１：マウスＢ細胞のオリゴヌクレオチド刺激）
刺激指数（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ）は、少なくとも３つの別々の実験に由来する、平均および標準偏差であり、そしてＯＤＮ非添加で培養されたウェルと比較している。
ＮＤ＝未実験
ＣｐＧジヌクレオチドを下線で示す。
点は同一性；ダッシュ（−）は欠失を示す。
Ｚは５メチルシトシンを示す。
（表２．ネズミＩＬ−６産生およびＢ細胞活性化に対する最適ＣｐＧモチーフの同定）
点は同一性を示す；ＣｐＧジヌクレオチドは下線で示す；ＮＤ＝未実験
ａ実験は少なくとも３回行い、同様の結果であった。ＣＨ１２．Ｌ．Ｘおよび脾臓Ｂ細胞の両方において、非刺激コントロール培養のＩＬ−６レベルは１０ｐｇ／ｍｌ以下だった。非刺激培養のＩｇＭレベルは５４７±８２ｎｇ／ｍｌであった。ＣｐＧジヌクレオチドは下線で示し、そして点は同一性を示す。
ｂ［３Ｈ］ウリジン取りこみは、非刺激コントロール（２３２２．６７±２１３．６８ｃｐｍ）に対する倍増加により示した（ＳＩ：刺激指数）。細胞は２０μＭのさまざまなＣｐＧ Ｏ−ＯＤＮにより刺激した。データは３つ組の平均±ＳＤを表す。
ｃＥＬＩＳＡにより測定。
リンパ球活性化の動態（ｋｉｎｅｔｉｃｓ）を、マウス脾臓細胞を用いて調べた。細胞をＯＤＮ添加と同時にパルス標識し、そしてちようど４時間後に採取すると、すでに３Ｈウリジン取りこみは２倍増加していた。刺激は１２−４８時間でピークに達し、そしてその後減少した。２４時間後、損なわれていない（ｉｎｔａｃｔ）ＯＤＮは検出されず、おそらくその後の刺激が落ちた原因と考えられる。抗ＩｇＭ（分裂促進する以下の用量）を含むまたは含まない精製Ｂ細胞をＣｐＧ ＯＤＮと共に培養すると、２つの分裂促進剤を組み合わせた場合、相乗作用により４８時間後に約１０倍の増殖増加が見られた。刺激の程度は濃度依存性であり、そして、両方に最適な条件下では、ＬＰＳのものより常に高かった。ヌクレアーゼ耐性ホスホロチオエートバックボーンを含むオリゴヌクレオチドは、非修飾オリゴヌクレオチドのおよそ２００倍の効力であった。
細胞周期解析を用い、ＣｐＧ−ＯＤＮにより活性化されたＢ細胞の比率を測定した。ＣｐＧ−ＯＤＮは、９５％以上のＢ細胞で周期開始（ｃｙｃｌｉｎｇ）を誘導した。フローサイトメトリーにより、ＣＤ２３（周辺帯）およびＣＤ２３＋（濾胞）サブ集団に分類した脾臓Ｂリンパ球は、ＯＤＮ誘導刺激に対し、同等に反応し、パーコール勾配分画化により単離した休止および活性化Ｂ細胞集団も両方とも同様だった。これらの研究により、ＣｐＧ−ＯＤＮは本質的にすべてのＢ細胞が細胞周期に進入するのを誘導することが立証された。
免疫刺激性核酸分子はネズミＢ細胞アポトーシスを遮断する
ＷＥＨＩ−２３１などのある種のＢ細胞株は、抗ＩｇＭによるその抗原受容体のクロスリンクに反応し、増殖阻害および／またはアポトーシスを経るよう誘導される（Ｊａｋｗａｙ，Ｊ．Ｐ．ら，”Ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＷＥＨＩ−２３１
ｂｙ ａｎｔｉ−ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ”Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：２２２５（１９８６）；Ｔｓｕｂａｔａ，Ｔ．，Ｊ．ＷｕおよびＴ．Ｈｏｎｊｏ：”Ｂ−ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ ｉｓ ｂｌｏｃｋｅｄ ｂｙ ａ Ｔ−ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌ ｔｈｒｏｕｇｈ ＣＤ４０．”Ｎａｔｕｒｅ ３６４：６４５（１９９３））。ＷＥＨＩ−２３１細胞は、ＬＰＳなど、ある種の刺激により、そしてＣＤ４０リガンドにより、この増殖停止から解放される。ＣｐＧモチーフを含むＯＤＮもまた、ＷＥＨＩ−２３１を抗ＩｇＭが誘導する増殖停止から保護することが見出され、この作用には補助的な細胞集団が必要とされないことが示された。これに続く研究により、ＣｐＧ ＯＤＮはＢｃｌ−ｘおよびｍｙｃ発現を誘導し、これがアポトーシスからの保護の原因となっている可能性が示される。また、ＣｐＧ核酸はまた、ヒト細胞でもアポトーシスを遮断することが見出されている。このアポトーシス阻害は、これがＣｐＧ ＤＮＡによる免疫活性化を高め、そして延長することから、重要である。
ネズミＩＬ−６およびＩｇＭ分泌誘導およびＢ細胞増殖に最適なＣｐＧモチーフの同定
最適Ｂ細胞刺激ＣｐＧモチーフがＩＬ−６分泌に最適なＣｐＧモチーフと同一であるかを評価するため、ＣｐＧジヌクレオチドに隣接する塩基を漸次置換した、一群のＯＤＮを研究した。脾臓Ｂ細胞およびＣＨ１２．ＬＸ細胞を両方とも用い、このＯＤＮ群を、Ｂ細胞増殖、Ｉｇ産生、およびＩＬ−６分泌に対する作用に関し解析した。表２に示されるように、最適刺激モチーフは、２つの５’プリンおよび２つの３’ピリミジンに隣接した非メチル化ＣｐＧを含む。一般的に、５’プリンをピリミジンに、または３’ピリミジンをプリンに突然変異させると、その作用が有意に減少する。５’プリンをＣに変えると特に有害であったが、５’プリンをＴに変えるか、または３’ピリミジンをプリンに変えた場合は、影響はより目立たなかった。これらの解析および他のＯＤＮの成績から、ＩＬ−６分泌の誘導に最適なＣｐＧモチーフはＴＧＡＣＧＴＴであることが決定され、これは最適分裂促進性およびＩｇＭ誘導ＣｐＧモチーフと同一であった（表２）。このモチーフは調べたパリンドロームを含む配列（１６３９、１７０７および１７０８）のいずれより、刺激性が高かった。
細菌ＤＮＡまたはオリゴヌクレオチド中のＧｐＧモチーフによるネズミサイトカイン分泌の誘導
実施例９に記載されるように、ＣｐＧ ＤＮＡ刺激後に、脾臓細胞より分泌されるＩＬ−６量をＥＬＩＳＡにより測定した。ＣｐＧ ＤＮＡに刺激された脾臓細胞により産生されるＩＬ−６に、Ｔ細胞がほとんどまたはまったく寄与していないことを示す予備研究にしたがい、全脾臓細胞よりもむしろ、Ｔ細胞除去脾臓細胞培養物をｉｎ ｖｉｔｒｏ研究に用いた。表３に示されるように、ＩＬ−６産生は大腸菌ＤＮＡと共に培養した細胞では顕著に増加したが、子ウシ胸腺ＤＮＡと共に培養した細胞では増加しなかった。大腸菌ＤＮＡで観察されたＩＬ−６産生の増加は、他の細菌産物の混入によるものではないことを確認するために、解析前に該ＤＮＡをＤＮＡｓｅにより消化した。ＤＮＡｓｅ前処理により、大腸菌ＤＮＡにより誘導されるＩＬ−６産生は失われた（表３）。さらに、ＬＰＳ非反応性Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウス由来の脾臓細胞は、細菌ＤＮＡに反応し、同様のレベルのＩＬ−６を産生した。大腸菌ＤＮＡに誘導されるＩＬ−６分泌が細菌ＤＮＡ中の非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドにより仲介されるのかどうかを解析するため、メチル化大腸菌ＤＮＡおよび一群の合成ＯＤＮを調べた。表３に示すように、ＣｐＧ ＯＤＮはＩＬ−６分泌を有意に誘導した（ＯＤＮ ５ａ、５ｂ、５ｃ）が、ＣｐＧメチル化大腸菌ＤＮＡ、またはメチル化ＣｐＧを含む（ＯＤＮ ５ｆ）、またはＣｐＧを含まないＯＤＮ（ＯＤＮ ５ｄ）は誘導しなかった。ＣｐＧジヌクレオチド以外の部位の変化（ＯＤＮ ５ｂ）または他のシトシンのメチル化（ＯＤＮ ５ｇ）は、ＣｐＧ ＯＤＮの効果を減少させなかった。３つのＣｐＧを持つＯＤＮ中の単一のＣｐＧのメチル化の結果、刺激の部分的減少が生じた（ＯＤＮ ５ｃを５ｅに比較されたい；表３）。
（表３．細菌ＤＮＡまたはオリゴヌクレオチド中のＣｐＧモチーフによる ネズミＩＬ−６分泌の誘導）
ＤＢＡ／２マウス由来のＴ細胞除去脾臓細胞を、酵素処理を行ったまたは行わないホスホジエステル修飾オリゴヌクレオチド（Ｏ−ＯＤＮ）（２０μＭ）、予ウシ胸腺ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）または大腸菌ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）で、またはＬＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）で２４時間刺激した。データは３つ組の平均（ｐｇ／ｍｌ）±ＳＤを表す。ＣｐＧジヌクレオチドは下線で示し、そして点は同一性を示す。Ｚは５−メチルシトシンを示す。
ＣｐＧモチーフは人工アジュバントとして使用してもよい
免疫反応の非特異的刺激因子は、アジュバントとして知られている。アジュバントの使用は、可溶性抗原に反応する強い抗体を誘導するのに必須である（ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ニューヨーク、最新版；本明細書に援用される）。アジュバントの全般的な効果は劇的で、そしてその重要性は強調されすぎることはない。アジュバントの作用により、抗原をはるかに少ない用量で使用することが可能になり、そしてより持続性の高い抗体反応が生成される。免疫反応の非特異的活性化はしばしば、免疫反応獲得における成功および失敗の間の違いを生む可能性がある。アジュバントは何か特に避ける理由がない限り、最初の注射の際に使用するべきである。ほとんどのアジュバントは２つの構成要素を取り込む。１つの構成要素は、迅速な異化作用から抗原を保護するよう設計される（例えばリポソームまたは合成界面活性剤（Ｈｕｎｔｅｒら，１９８１））。リポソームは、免疫原が外部脂質層に取りこまれ、捕らえられた分子が免疫系により発見されない場合のみ有効である。もう一方の構成要素は、免疫反応を非特異的に刺激するであろう物質である。これらの物質は、リンホカインのレベルを上昇させることにより作用する。リンホカインは、抗原加工細胞の活性を直接刺激し、そして注射部位で局所炎症反応を引き起こす。初期の研究は、完全に熱殺細菌（Ｄｉｅｎｅｓ １９３６）またはリポ多糖（ＬＰＳ）（Ｊｏｈｎｓｏｎら，１９５６）に頼っていた。ＬＰＳはかなり毒性が高く、そして、その構造的構成要素の解析を通じて、そのアジュバントとしての特性のほとんどは、リピドＡとして知られる部分にあることが示されている。リピドＡは、ＬＰＳよりはるかに毒性が低いが、依然として母体であるＬＰＳ分子のよりよいアジュバント特性を維持する、多くの合成および天然型として入手可能である。リピドＡ化合物はしばしばリポソームを用いて搬送される。
最近、より容認できる副作用を持つ、強力なアジュバントを発見しようとする熱心な欲求から、新規合成アジュバントの産生が行われてきた。本発明は、ＣｐＧを含む核酸を含むアジュバントである、配列１８２６、ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）を提供する。該配列は、強力な免疫活性化配列であり、そして完全フロイントアジュバントに匹敵するまたは勝る有効性を持つが、明らかな毒性を持たない、優れたアジュバントである。ＣｐＧモチーフによるネズミエＬ−６分泌誘導の滴定（ｔｉｔｒａｔｉｏｎ）
細菌ＤＮＡおよびＣｐＧ ＯＤＮはＴ細胞除去ネズミ脾臓細胞において用量依存性にＩＬ−６産生を誘導したが、脊椎動物ＤＮＡおよびＣｐＧを含まないＯＤＮは誘導しなかった（図１）。ＩＬ−６産生は細菌ＤＮＡのおよそ５０μｇ／ｍｌ、またはＣｐＧ Ｏ−ＯＤＮのおよそ４０μＭで横ばい状態になった。細菌ＤＮＡおよびＣｐＧ ＯＤＮにより産生されるＩＬ−６の最高レベルは、それぞれ１−１．５ｎｇ／ｍｌおよび２−４ｎｇ／ｍｌであった。これらのレベルは、ＬＰＳ刺激後に見られるもの（０．３５ｎｇ／ｍｌ）より有意に高かった（図１Ａ）。ヌクレアーゼ耐性ＤＮＡバックボーンを持つＣｐＧＯＤＮもまたＩＬ−６産生を誘導するかどうかを評価するため、Ｓ−ＯＤＮをＴ細胞除去ネズミ脾臓細胞に加えた。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮもまた、ＣｐＧ Ｏ−ＯＤＮとほぼ同じレベルで用量依存性にＩＬ−６産生を誘導したが、ＣｐＧを含まないＳ−ＯＤＮはＩＬ−６を誘導しなかった（図１Ｃ）。０．０５μＭの濃度のＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮは、これらの細胞において最大限のＩＬ−６産生を誘導することが可能であった。この結果により、ヌクレアーゼ耐性ＤＮＡバックボーン修飾は、ＣｐＧ ＤＮＡがＩＬ−６分泌を誘導する配列特異的能力を維持し、そしてＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮはこの検定系においてＣｐＧ Ｏ−ＯＤＮより８０倍以上強力であることが示された。
Ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＣｐＧ ＤＮＡによるネズミＩＬ−６分泌の誘導
細菌ＤＮＡおよびＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮがｉｎ ｖｉｖｏでＩＬ−６分泌を誘導する能力を評価するため、ＢＡＬＢ／ｃマウスに、１００μｇの大腸菌ＤＮＡ、子ウシ胸腺ＤＮＡ、またはＣｐＧまたは非刺激性Ｓ−ＯＤＮを静脈注射し、そして刺激２時間後に放血させた。大腸菌ＤＮＡ注射群由来の血清中のＩＬ−６レベルは、およそ１３ｎｇ／ｍｌであったが、子ウシ胸腺ＤＮＡまたはＰＢＳ注射群由来の血清中にはＩＬ−６は検出されなかった（表４）。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮもまたｉｎ ｖｉｖｏでＩＬ−６分泌を誘導した。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ注射群由来の血清中のＩＬ−６レベルは、およそ２０ｎｇ／ｍｌであった。対照的に、非刺激性Ｓ−ＯＤＮ刺激群由来の血清中にはＩＬ−６は検出されなかった（表４）。
（表４．Ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＣｐＧ ＤＮＡ刺激により誘導されるネズミＩＬ−６分泌）
マウス（２匹／群）に１００μｌのＰＢＳ、２００μｇの大腸菌ＤＮＡまたは子ウシ胸腺ＤＮＡ、または５００μｇのＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮまたはＣｐＧを含まないコントロールＳ−ＯＤＮを静脈注射した。マウスを注射２時間後に放血させ、そして各血清を１：１０希釈したものをＩＬ−６ ＥＬＩＳＡにより解析した。ＩＬ−６ ＥＬＩＳＡの感度限界は５ｐｇ／ｍｌであった。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮの配列は、５’ＧＣＡＴＧＡＣＧＴＴＧＡＧＣＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：４８）であり、そして非刺激性Ｓ−ＯＤＮの配列は５’ＧＣＴＡＧＡＴＧＴＴＡＧＣＧＴ３’（ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：４９）である。配列４８にはＣｐＧがあるが、本明細書に説明されるように、刺激をもたらすには３’端に近すぎる。データは、２つ組の平均±ＳＤを表す。実験は少なくとも２回行い、同様な結果が得られた。
Ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＣｐＧモチーフによる刺激後のネズミＩＬ−６分泌の動態
Ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＣｐＧ ＤＮＡによるＩＬ−６分泌誘導の動態を評価するため、ＢＡＬＢ／ｃマウスにＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ、またはＣｐＧを含まないコントロールＳ−ＯＤＮを静脈注射した。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ注射群では、血清ＩＬ−６レベルは１時間以内に有意に上昇し、そして２時間でピークに達し、およそ９ｎｇ／ｍｌのレベルとなった（図２）。血清中のＩＬ−６タンパク質は、４時間後、急速に減少し、そして刺激１２時間後には基底レベルに戻った。ＣｐＧ ＤＮＡ刺激群と対照的に、非刺激性Ｓ−ＯＤＮまたはＰＢＳ注射群由来の血清中には、有意なＩＬ−６増加は見られなかった（図２）。
Ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＣｐＧモチーフにより誘導されるＩＬ−６ ｍＲＮＡ発現の組織分布および動態
図２に示されるように、血清ＩＬ−６レベルは、ＣｐＧ ＤＮＡ刺激後に急速に増加する。この血清ＩＬ−６の起源で可能性がある組織およびＣｐＧ ＤＮＡ刺激後のｉｎ ｖｉｖｏにおけるＩＬ−６遺伝子発現の動態を調べるため、ＢＡＬＢ／ｃマウスにＣｐＧまたはＣｐＧを含まないＳ−ＯＤＮを静脈注射し、そして肝臓、脾臓、胸腺、および骨髄から、刺激後さまざまな時点で、ＲＮＡを抽出した。図３Ａに示されるように、肝臓、脾臓、および胸腺におけるＩＬ−６ ｍＲＮＡレベルはＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ注射後３０分以内に増加した。肝臓ＩＬ−６ ｍＲＮＡは、注射後２時間でピークに達し、そして急速に減少し、そして刺激後８時間で基底レベルに戻った（図３Ａ）。脾臓ＩＬ−６ ｍＲＮＡは、刺激後２時間でピークに達し、そしてその後次第に減少した（図３Ａ）。胸腺ＩＬ−６
ｍＲＮＡは、注射後１時間でピークに達し、そしてその後次第に減少した（図３Ａ）。骨髄におけるＩＬ−６ ｍＲＮＡはＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮ注射後１時間以内に有意に増加したが、その後、基底レベルに戻った。ＣｐＧ Ｓ−ＯＤＮに反応し、肝臓、脾臓および胸腺は、骨髄よりもより実質的なＩＬ−６ ｍＲＮＡ発現増加を示した。
ＣｐＧ ＤＮＡにより誘導されるネズミサイトカイン発現のパターン
Ｉｎ ｖｉｖｏまたは全脾臓細胞において、以下のインターロイキン：ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、またはＩＬ−１０のタンパク質レベルに、最初の６時間以内に有意な増加は検出されなかった（Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｄ．Ｍ．ら，（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：２８７９−２８８３）。しかし、ＴＮＦ−αレベルは３０分以内に増加し、そしてＩＬ−６レベルはＣｐＧ ＯＤＮを注射されたマウスの血清において、２時間以内に著しく増加した。脾臓細胞からのＩＬ−１２およびインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）ｍＲＮＡ発現の増加もまた、最初の２時間以内に検出された。
（表５． ＣｐＧオリゴによるヒトＰＢＭＣサイトカイン分泌の誘導）
点は同一性を示す；ＣｐＧジヌクレオチドは下線で示す。
１Ｒ＆Ｄ ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅキットを用いてＥＬＩＳＡにより測定（ｐｇ／ｍｌ）。細胞は示されたオリゴデオキシヌクレオチド（１２μｇ／ｍｌ）と共に１０％の自己血清中で、ＴＮＦ−αの場合は４時間、他のサイトカインの場合は２４時間培養した後、上清を採取し、そして検定した。データは、オリゴデオキシヌクレオチドを添加していないウェルより高いサイトカインレベルを表している。
（ＣｐＧ ＤＮＡはヒトＰＢＭＣ、特に単球からのサイトカイン分泌を促進する）
マウスサイトカイン発現を研究するのに用いたのと同一群のＯＤＮを用い、ヒト細胞もまたＣｐＧモチーフにより、サイトカインを発現（または増殖）するよう誘導されるのかを決定し、そして原因となるＣｐＧモチーフを同定した。オリゴヌクレオチド１６１９（ＧＴＣＧＴＴ）がＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ分泌の最適誘導因子であり、そしてごく近い値でオリゴヌクレオチド１６３４（ＧＴＣＧＣＴ）のほとんど同一のモチーフが続いた（表５）。オリゴデオキシヌクレオチド１６３７および１６１４（ＧＣＣＧＧＴおよびＧＡＣＧＧＴ）は強いＩＬ−６分泌を導いたが、相対的に他のサイトカインはほとんど誘導しなかった。したがって、ヒトリンパ球は、ネズミリンパ球と同様、周囲の塩基次第で、ＣｐＧジヌクレオチドに差別的に反応し、サイトカインを分泌するようである。さらに、ネズミ細胞を最もよく刺激するモチーフは、ヒト細胞に最も効果的なものとは異なる。あるＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチドは、ヒト細胞の活性化に関し劣っている（それぞれ、パリンドローム形成配列ＧＡＣＧＴＣおよびＣＡＣＧＴＧを含む、オリゴデオキシヌクレオチド１７０７、１７０８）。
単球に選択的に（しかし細胞障害性Ｔリンパ球およびＮＫ細胞にも）毒性を示し、そしてＢ細胞Ｉｇ分泌に影響しないＬ−ロイシル−Ｌ−ロイシンメチルエステル（Ｌ−ＬＭＥ）処理により、サイトカイン分泌が失われることから、該ＤＮＡに反応する細胞は単球であるようである（表６）。トリパンブルー排除試験によると、Ｌ−ＬＭＥ処理でも生存しつづけた細胞は９５％を超える生存性を有し、これらの細胞にサイトカイン反応が見られないのは、単にすべての細胞タイプが非特異的に死んだことを反映しないことを示した。大腸菌（ＥＣ）ＤＮＡに反応するサイトカイン分泌は、ＥＣ ＤＮＡのメチル化により失われることから、非メチル化ＣｐＧモチーフを必要とする（表６、下から２段目）。ＬＰＳ混入レベルは、天然およびメチル化ＤＮＡにおいて同一であるため、そして混入ＬＰＳの最大量の２倍の量を添加しても影響がなかったため（未提示）、ＤＮＡへのＬＰＳ混入では結果を説明できない。
（表６．ＣｐＧ ＤＮＡがヒトＰＢＭＣからのサイトカイン分泌を誘導する）
１すべてのサイトカインレベルは前の表に記載したように、Ｒ＆Ｄ ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅキットを用いたＥＬＩＳＡにより測定した。結果は異なるドナー由来のＰＢＭＣを用いたものの典型的なものである。
２これらの条件下のサイトカイン産生が単球（または他のＬ−ＬＭＥ感受性細胞）由来であるかどうか決定するため、細胞を１５分間、Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシンメチルエステル（Ｌ−ＬＭＥ）で前処理した。
３ＥＣ ＤＮＡは２Ｕ／μｇ ＤＮＡのＣｐＧメチラーゼ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）を用い、製造者の指示にしたがってメチル化し、そしてメチル化をＨｐａ−１１およびＭｓｐ−Ｉ消化により確認した。陰性コントロールとして、最高濃度のＥＣ ＤＮＡ中に最大量の２倍のＬＰＳを含む試料を含んだが、これらの実験条件下では検出可能なサイトカイン産生を誘導しなかった。ＮＤ＝未実験
Ｌ−ＬＭＥで処理したＰＢＭＣにおいてサイトカイン産生が失われることから、単球がＣｐＧ ＤＮＡに反応するサイトカイン産生の原因である可能性が示唆された。この仮説をより直接的に試験するため、非常に精製されたヒト単球およびマクロファージに対するＣｐＧ ＤＮＡの効果を試験した。仮説どおり、ＣｐＧ ＤＮＡはヒトマクロファージによるサイトカイン、ＩＬ−６、ＧＭ−ＣＳＦ、およびＴＮＦ−αの産生を直接活性化したが、ＣｐＧを含まないＤＮＡはしなかった（表７）。
（表７． 精製ヒトマクロファージにおいて、 ＣｐＧ ＤＮＡはサイトカイン発現を誘導する）
（ＣｐＧモチーフに反応しネズミＩｇＭ産生を誘導する際のＩＬ−６の生物学的役割）
上述の動態研究により、ＣｐＧ刺激後１時間以内に起こるＩＬ−６分泌の誘導が、ＩｇＭ分泌に先行することが明らかになった。ＯＤＮが誘導するＩＬ−６分泌に対する最適ＣｐＧモチーフはＩｇＭに対し最適なものと同じである（表２）ことから、ＣｐＧモチーフが独立してＩｇＭおよびＩＬ−６産生を誘導するのか、またはＩｇＭ産生は、先行するＩＬ−６分泌に依存するのかを調べた。中和抗ＩＬ−６抗体を添加すると、ＣｐＧ ＯＤＮが仲介するｉｎ ｖｉｔｒｏのＩｇＭ産生が、用量依存性に阻害されたが、コントロール抗体では阻害されなかった（図４Ａ）。対照的に、抗ＩＬ−６添加は、基底レベルまたはＣｐＧ誘導Ｂ細胞増殖のどちらにも影響しなかった（図４Ｂ）。
ＣｐＧ ＤＮＡに反応するＩＬ−６プロモーターの転写活性増加
ＣｐＧ ＤＮＡ刺激後のＩＬ−６ ｍＲＮＡおよびタンパク質のレベル増加は、転写または転写後制御の結果である可能性があった。ＩＬ−６プロモーターの転写活性がＣｐＧ ＤＮＡと共に培養されるＢ細胞において上方制御（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）されているか決定するため、ＣｐＧ ＤＮＡに反応してＩＬ−６を産生するネズミＢ細胞株、ＷＥＨＩ−２３１にＩＬ−６プロモーター−ＣＡＴ構築物（ｐＩＬ−６／ＣＡＴ）（Ｐｏｔｔｒａｔｚ，Ｓ．Ｔ．ら，１７Ｂ−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６−ｐｒｏｍｏｔｅｒ−ｒｅｐｏｒｔｅｒ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ ｂｙ ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：９４４）をトランスフェクションした。ＣｐＧ ＯＤＮまたはＣｐＧを含まないＯＤＮのさまざまな濃度で刺激した後、ＣＡＴ検定を行った。図５に示すように、ＣｐＧ ＯＤＮは用量依存性にＣＡＴ活性の増加を誘導したが、ＣｐＧを含まないＤＮＡはＣＡＴ活性を誘導しなかった。これにより、ＣｐＧがＩＬ−６プロモーターの転写活性を誘導することが確認された。
ＣｐＧ ＯＤＮによるＢ細胞活性化の、５’および３’ホスホロチオエートヌクレオチド間結合数への依存
ＯＤＮバックボーンの部分的イオウ修飾がＢ細胞活性化を高めるのに十分であるかを決定するため、同一の配列を持つが、５’端および３’端に異なる数のＳヌクレオチド間結合を持つ一連のＯＤＮの効果を試験した。ＯＤＮのヌクレアーゼ分解に関する先の研究に基づいて、細胞内エキソまたはエンドヌクレアーゼによる分解からのＯＤＮの最適保護を提供するには、５’端に少なくとも２つのホスホロチオエート結合が必要であることが決定された。したがって、２つの５’ホスホロチオエート修飾結合、およびさまざまな数の３’修飾結合を含むキメラＯＤＮのみを調べた。
これらのＯＤＮのリンパ球刺激作用を、処理された脾臓細胞培養中のＲＮＡ合成（３Ｈウリジン取りこみにより）、またはＤＮＡ合成（３Ｈチミジン取りこみにより）の総レベルを測定することにより、３つの濃度（３．３、１０、および３０μＭ）で試験した（実施例１０）。ＣｐＧモチーフを持つＯ−ＯＤＮ（ホスホロチオエート修飾０／０）は少なくとも１０μＭの濃度で培養物に添加されなければ、脾臓細胞刺激を起こさなかった（実施例１０）。しかし、この配列が５’端で２つのＳ結合および３’端で少なくとも３つのＳ結合により修飾されると、３．３μＭの用量で、有意な刺激が見られた。この低い用量では、３’端修飾塩基の数が増えるにつれ、刺激レベルも次第に増加し、修飾塩基数が６に達するかまたは６を超えると、刺激指数は減少し始めた。一般的に、脾臓細胞刺激に対し最適な３’端Ｓ結合の数は５であった。これらの実験において、試験された３つの濃度すべてで、Ｓ−ＯＤＮは最適キメラ化合物より刺激性が低かった。
（バックボーン修飾のタイプに対するＣｐＧ仲介リンパ球活性化の依存）
ホスホロチオエート修飾ＯＤＮ（Ｓ−ＯＤＮ）は、ホスホジエステル修飾ＯＤＮ（Ｏ−ＯＤＮ）よりはるかにヌクレアーゼに耐性である。したがって、Ｓ−ＯＤＮおよびＳ−Ｏ−ＯＤＮ（すなわち、中央の結合はホスホジエステルであるが、５’端の２つおよび３’の５つの結合はホスホロチオエート修飾である、キメラホスホロチオエートＯＤＮ）により引き起こされる免疫刺激が、Ｏ−ＯＤＮに比べ多いのは、前者のヌクレアーゼ耐性に起因する可能性がある。ＣｐＧ ＯＤＮによる免疫刺激におけるＯＤＮヌクレアーゼ耐性の役割を決定するため、メチルホスホネート（ＭＰ）、ホスホロチオエートメチル（ＭＰＳ）、ホスホロチオエート（Ｓ）、またはホスホロジチオエート（Ｓ２）ヌクレオチド間結合のいずれかにより５’端および３’端がヌクレアーゼ耐性となっているキメラＯＤＮの刺激効果を試験した（実施例１０）。これらの研究により、そのヌクレアーゼ耐性にも関わらず、ＭＰ−Ｏ−ＯＤＮは実際、Ｏ−ＯＤＮより免疫刺激性が低かった。しかし、両方の非架橋Ｏ分子を５’および３’のＭＰＳヌクレオチド間結合に置きかえることにより、ＭＰおよびＳ修飾を組み合わせると、免疫刺激は、Ｏ−ＯＤＮにより引き起こされるレベルより、わずかに高いレベルまで回復した。
Ｓ−Ｏ−ＯＤＮは、少なくとも３．３μＭを超える濃度では、Ｏ−ＯＤＮよりはるかに刺激性が高く、そしてＳ−ＯＤＮよりもさらに刺激性が高い。３μＭ以下の濃度では、３Ｍ配列を持つＳ−ＯＤＮは、対応するＳ−Ｏ−ＯＤＮより効果があるが、３Ｄ配列を持つＳ−ＯＤＮは、対応するＳ−Ｏ−ＯＤＮより効果が低かった（実施例１０）。これら２つの配列の刺激性ＣｐＧモチーフを比較すると、３Ｄ配列は、ＣｐＧに２つの５’プリンおよび２つの３’ピリミジンが隣接し、刺激性モチーフと完全に一致することが認められた。しかし、ＯＤＮ ３ＤにおいてＣｐＧにすぐ隣接する塩基は最適ではなく；５’ピリミジンおよび３’プリンを有する。さらなる試験に基づいて、免疫刺激に対する配列必要条件は、Ｓ−Ｏ−またはＯ−ＯＤＮよりもＳ−ＯＤＮに対してより厳しいことが見出された。最適ＣｐＧモチーフに対しわずかにしか一致しないＳ−ＯＤＮは、ほとんどまたはまったくリンパ球活性化を引き起こさない（例えば配列３Ｄ）。しかし、モチーフによく一致するＳ−ＯＤＮは、特に重要なのはＣｐＧにすぐ隣接する部位であるが、対応するＳ−Ｏ−ＯＤＮより効果が高かった（例えば配列３Ｍ、配列４および６）が、より高い濃度（３μＭを超える濃度）では、Ｓ−Ｏ−ＯＤＮのピーク効果がより高かった（実施例１０）。
Ｓ２−Ｏ−ＯＤＮは著しく刺激性が高く、そして試験濃度すべてで、対応するＳ−ＯＤＮまたはＳ−Ｏ−ＯＤＮよりかなり高いリンパ球活性化を引き起こした。
ＳまたはＳ２置換を持つＣｐＧ ＯＤＮに見られるＢ細胞刺激の増加は、以下の作用：ヌクレアーゼ耐性、細胞取りこみ上昇、タンパク質結合上昇、および細胞内局在の変化、のいずれかまたはすべての結果である可能性がある。しかし、ＭＰ−Ｏ−ＯＤＮは実際、ＣｐＧモチーフを持つＯ−ＯＤＮより刺激性が低いため、ヌクレアーゼ耐性が唯一の説明ではありえない。以前の研究により、リンパ球によるＯＤＮ取りこみは、バックボーンの化学的特質により著しく影響を受けることが示されている（Ｚｈａｏら，（１９９３）Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ
ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｐｈｏｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒ，ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ，ａｎｄ ｍｉｘｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ ａｎｄ ｍｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ３，５３−６６；Ｚｈａｏら，（１９９４）Ｓｔａｇｅｓ ｐｅｃｉｆｉｃ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｅｄｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ Ｂ ｃｅｌｌ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ．Ｂｌｏｏｄ ８４，３６６０−３６６６．）。最高細胞膜結合および取りこみはＳ−ＯＤＮで見られ、続いてＳ−Ｏ−ＯＤＮ、Ｏ−ＯＤＮ、およびＭＰ−ＯＤＮであった。この差別的取りこみは、免疫刺激の程度とよく相関している。
非メチル化ＣｐＧを含むオリゴはＮＫ細胞刺激活性を有する
ＣｐＧを含むオリゴヌクレオチドがＢ細胞に加え、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性を刺激するか決定する実験を行った。表８に示されるように、ＣｐＧ ＯＤＮ１および３Ｄｄと共に培養した脾臓細胞中で著しいＮＫ活性の誘導が見られた。対照的に、ＣｐＧを含まないコントロールＯＤＮで処理したエフェクターでは相対的に誘導が見られなかった。
（表８．ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）によるＮＫ活性誘導）
（ＣｐＧを含まないＤＮＡでは見られない、ＣｐＧモチーフを持つＤＮＡによるＮＫ活性誘導）
３７℃で１８時間培養し、そしてその後Ｋ５６２（ヒト）またはＹａｃ−１（マウス）標的細胞殺傷に関し検定した細菌ＤＮＡは、Ｂ細胞除去マウス脾臓細胞およびヒトＰＢＭＣ両方においてＮＫ溶解活性を誘導したが、脊椎動物ＤＮＡは誘導しなかった（表９）。細菌ＤＮＡの刺激活性が非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドのレベルが増加した結果であるのかを決定するため、非メチル化、メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む、またはＣｐＧジヌクレオチドを含まない５０を超える合成ＯＤＮの活性化特性を試験した。表９にまとめた結果により、合成ＯＤＮは、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む限り、有意にＮＫ活性を刺激することが可能であることが立証された。ＣｐＧがパリンドローム中にあるＯＤＮ（パリンドロームＡＡＣＧＴＴを含むＯＤＮ１５８５など）の刺激効果と、パリンドロームを持たないＯＤＮ（１６１３または１６１９など）のものでは、違いがなかったが、最適刺激は一般的にＣｐＧが２つの５’プリンまたは５’ＧｐＴジヌクレオチドおよび２つの３’ピリミジンに隣接するＯＤＮで見られることが認められた。動態実験により、ＮＫ活性はＯＤＮ添加後１８時間前後でピークに達することが立証された。このデータは、ネズミＮＫ反応が、先行するＣｐＧ ＤＮＡによる単球活性化に依存し、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、およびＩＦＮ−α／β産生につながることを示す（実施例１１）。
（表９． ＣｐＧを含まないＤＮＡでは見られない、ＣｐＧモチーフを含むＤＮＡによるＮＫ活性誘導）
ＯＤＮ配列中のＣｐＧジヌクレオチドは下線により示す；Ｚはメチルシトシンを示す。
小文字はヌクレアーゼ耐性ホスホロチオエート修飾ヌクレオチド間結合を示し、滴定実験において、隣接する塩基次第で、非修飾ＯＤＮの２０倍を超える効力があった。ＯＤＮ取りこみレベルを有意に増加させるポリＧ端（ｇ）をいくつかのＯＤＮで使用した。
これらの研究すべてから、ＣｐＧ ＤＮＡの免疫効果のより完全な理解が進み、これは図６にまとめられている。
ＣｐＧモチーフによる免疫活性化は、ＣｐＧに隣接する塩基、およびＯＤＮ中に存在するＣｐＧの数および間隔に依存する可能性がある。理想的塩基背景における単一のＣｐＧは非常に強力でそして有用な免疫活性化因子である可能性があるが、より優れた効果は、適切な間隔および隣接塩基を持ついくつかのＣｐＧを含むＯＤＮで見られる可能性がある。ネズミＢ細胞を活性化するのに最適なＣｐＧモチーフはＴＧＡＣＧＴＴである。
以下の研究を行い、ヒト細胞を刺激するのに最適なＯＤＮ配列を、ＣｐＧジヌクレオチドの数、間隔、および隣接塩基を変化させた効果を調べることにより、同定した。
（ヒトＮＫ細胞の活性化に関する最適ＣｐＧモチーフを持つホスホロチオエートＯＤＮの同定）
臨床有用性を有するためには、ＯＤＮはヌクレアーゼ分解に対し保護される形で患者に投与されなければならない。ホスホジエステルＯＤＮを用い、これを達成する方法が当業によく知られており、そして脂質への被包またはナノ粒子（ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ）などの搬送系が含まれる。この保護はまた、ヌクレオチド間結合がヌクレアーゼ耐性であるものを含む修飾ＤＮＡバックボーンなど、ＤＮＡへの化学的置換を用いて達成してもよい。いくつかの修飾により、細胞取りこみの上昇など、付加的な望ましい特性が与えられる可能性がある。例えば、ホスホジエステル結合を、非架橋酸素原子の１つをホスホロチオエートＤＮＡを構成するイオウと置きかえることを介して修飾してもよい。ホスホロチオエートＯＤＮは細胞取りこみを高め（Ｋｒｉｅｇら，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．６：１３３，１９９６．）、そしてＣｐＧモチーフも有する場合はＢ細胞刺激を改善してきた。ＮＫ活性化はｉｎ ｖｉｖｏアジュバント効果と強く相関するため、ヒトＮＫ細胞を活性化するであろうホスホロチオエートＯＤＮの同定は非常に重要である。
異なるホスホロチオエートＯＤＮ（さまざまな塩基背景のＣｐＧジヌクレオチドを含む）がヒトＮＫ活性化（表１０）に及ぼす効果を調べた。２コピーのＴＧＴＣＧＴＴモチーフを含む、ＯＤＮ １８４０は、有意なＮＫ溶解活性を有した（表１０）。ＮＫ活性化に最適な付加的なＯＤＮをさらに同定するため、異なる数および間隔のＣｐＧモチーフを含む、およそ１００のＯＤＮを、ＯＤＮ １９８２をコントロールとして調べた。結果を表１１に示す。
有効なＯＤＮは５’端がＴＣまたはＴＧで始まったが、この必要条件は強制的ではなかった。内部ＣｐＧモチーフを持つＯＤＮ（例えばＯＤＮ １８４０）は一般的に、５’ＴＣの直後にＧＴＣＧＣＴモチーフを持つもの（例えばＯＤＮ １９６７および１９６８）より効力の弱い刺激因子である。３’側に第二のＧＴＣＧＴＴモチーフを有するＯＤＮ１９６８は、この第二のモチーフを欠くＯＤＮ
１９６７より常に刺激性が高かった。しかし、ＯＤＮ １９６７は、実験１および３ではＯＤＮ １９６８よりわずかに強力であったが、実験２ではそうではなかった。第三のＧＴＣＧＴＴモチーフを有するＯＤＮ２００５は、１９６８より平均してわずかに高いＮＫ活性を誘導した。しかし、各モチーフ間に２つのＴを付加することによりＧＴＣＧＴＴモチーフ間の間隔が増えた、ＯＤＮ ２００６は、モチーフの１つにのみ間の２つのＴが付加された、ＯＤＮ ２００５およびＯＤＮ ２００７より優れていた。ＣｐＧモチーフ間の最小許容間隔は、ＯＤＮが３’端に２つのピリミジン（好ましくはＴ）を持つ限り、１ヌクレオチドであった（例えばＯＤＮ ２０１５）。驚くべきことに、５’にＴを持つように２つのＧＴＣＧＴＴモチーフを端と端をつけてつないでも、ＮＫ活性のかなり強い誘導剤が生成された（例えばＯＤＮ ２０１６）。ＯＤＮ ２００２は、アデニンがそのＣｐＧを分離している（すなわち、ＣＧＡＣＧＴＴ）事実にも関わらず、かなりのＮＫ活性を誘導することから、チミン（Ｔ）が分離する連続ＣｐＧジヌクレオチドの選択が絶対であるわけではない。ＣｐＧを含まない（例えばＯＤＮ １９８２）、ＣｐＧが連続する、またはよくない配列背景のＣｐＧを含む（例えばＯＤＮ ２０１０）ＯＤＮがＮＫ活性化に刺激効果を持たないことにも注目すべきである。
（表１０． ＮＫ溶解活性（ＬＵ）のＯＤＮ誘導）
１溶解単位（ＬＵ）は記載した（８）ように測定した。簡潔には、ＰＢＭＣを正常ドナーから収集し、そしてフィコール上でスピンし、その後示されたＯＤＮ（６μｇ／ｍｌで培養物に添加）を含みまたは含まず２４時間培養した。その後、５１Ｃｒ標識Ｋ５６２細胞を溶解する能力を調べた。示した結果は、何人かの異なる正常ヒトドナーで得られた典型的なものである。２本オリゴ混合物は、各位における４塩基すべての無作為選択を含む。
（表１１． 優れたモチーフを持つホスホロチオエートＣｐＧ ＯＤＮによる
ＮＫ ＬＵの誘導）
１ＰＢＭＣは実質的に本明細書で示された通りである。結果は６つの別々の実験の典型である；各実験は異なるドナーを表す。２これはＯＤＮ １８４０をメチル化した型である；Ｚ＝５−メチルシトシン、ＬＵは溶解単位；ＮＤ＝未実験；ＣｐＧジヌクレオチドは明確にするため、下線で示している。
（ヒトＢ細胞増殖の活性化に最適なＣｐＧモチーフを持つホスホロチオエートＯＤＮの同定）
ＣｐＧ ＯＤＮがＢ細胞増殖を誘導する能力は、そのアジュバント可能性のよい評価基準となる。実際、強いアジュバント作用を持つＯＤＮは一般的にまた、Ｂ細胞増殖も誘導する。Ｂ細胞増殖を誘導するのに最適なＣｐＧ ＯＤＮがＮＫ細胞活性を誘導するものと同じであるかどうか決定するため、ＯＤＮの同様な一群（表１２）を試験した。最も一定した刺激は、ＯＤＮ ２００６で見られた（表１２）。
（表１２． ホスホロチオエートＣｐＧ ＯＤＮによるヒトＢ細胞増殖の誘導）
１細胞＝外科的採取後−７０℃で保存したヒト脾臓細胞または正常ドナーから収集しそしてフィコール上でスピンしたＰＢＭＣ。細胞は９６ウェルのＵ底マイクロタイタープレート上で、示したＯＤＮ（６μｇ／ｍｌで培養物に添加）を含みまたは含まず培養した。Ｎ＝１２実験。細胞は４−７日間培養し、採取前に１８時間、１μ Ｃｉの３Ｈチミジンでパルス標識し、そしてシンチレーションカウントした。刺激指数＝示されたＯＤＮにより培養期間に渡り刺激した（培養を調整した後、ＯＤＮをさらに添加しなかった）ウェルにおけるｃｐｍに対する、ＯＤＮを含まないウェルにおけるｃｐｍの割合。ＮＤ＝未実験。
ヒトＩＬ−１２分泌を誘導するホスホロチオエートＯＤＮの同定
ＣｐＧ ＯＤＮがＩＬ−１２分泌を誘導する能力は、特に、非常にＩＬ−１２に依存するＴｈ１免疫反応を誘導する能力に関し、そのアジュバント可能性のよい評価基準となる。したがって、一群のホスホロチオエートＯＤＮがヒトＰＢＭＣからｉｎ ｖｉｔｒｏでＩＬ−１２を誘導する能力を調べた（表１３）。これらの実験により何人かのヒトＰＢＭＣにおいて、ほとんどのＣｐＧ ＯＤＮがＩＬ−１２分泌を誘導する可能性があることが示された（例えば実験（ｅｘｐｔ）１）。しかし、他のドナーは２、３のＣｐＧ ＯＤＮにしか反応しなかった（例えば実験２）。ＯＤＮ ２００６はほとんどの被験者からのＩＬ−１２分泌の安定した誘導剤であった（表１３）。
（表１３．ホスホロチオエートＣｐＧ ＯＤＮによるヒトＩＬ−１２分泌誘導）
１ＰＢＭＣは正常ドナーから収集し、そしてフィコール上でスピンした後、９６ウエルマイクロタイタープレート上で、培養に６μｇ／ｍｌで添加される、示されたＯＤＮを含みまたは含まず、１０６細胞／ウェルで培養した。上清を２４時間後収集し、そして方法に記載されるＥＬＩＳＡによりＩＬ−１２レベルを試験した。異なるドナーに対応する各実験で、標準曲線を走らせた。
（Ｂ細胞および単球／ＮＫ細胞特異的オリゴヌクレオチドの同定）
図６に示されるように、ＣｐＧ ＤＮＡは非常に精製されたＢ細胞および単球性細胞を直接刺激することが可能である。ＣｐＧ ＤＮＡがこれらの細胞種を活性化する機構には多くの類似性がある。例えば、どちらも以下にさらに説明するＮＦκＢ活性化を必要とする。
ＣｐＧ ＤＮＡの異なる免疫作用のさらなる研究において、１種以上のＣｐＧモチーフがあることが発見された。特に、オリゴ１６６８はマウスＢ細胞に最適なモチーフを持ち、Ｂ細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞両方の活性化の強い誘導剤である一方、オリゴ１７５８は、弱いＢ細胞活性化剤であるが、依然として優れたＮＫ反応を誘導する（表１４）。
（表１４． 異なるＣｐＧモチーフが ネズミＢ細胞およびＮＫ活性化を最適に刺激する）
ＣｐＧジヌクレオチドを下線で示す；オリゴヌクレオチドはヌクレアーゼ耐性を高めるため、ホスホロチオエート修飾バックボーンを持つよう合成した。１実施例１に記載されるように、２００ｎＭ濃度のオリゴデオキシヌクレオチドと４８時間培養した後の、Ｈチミジン取りこみにより測定した。２溶解単位で測定した。
（免疫刺激性核酸の目的論的基礎）
脊椎動物ＤＮＡは、非常にメチル化されており、ＣｐＧジヌクレオチドは少数である。刺激性ＣｐＧモチーフは微生物ゲノムＤＮＡには一般的であるが、脊椎動物ＤＮＡには非常にまれである。さらに、細菌ＤＮＡはＢ細胞増殖および免疫グロブリン（Ｉｇ）産生を誘導する一方、哺乳動物ＤＮＡは誘導しないことが報告されている（Ｍｅｓｓｌｎａ，Ｊ．Ｐ．ら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：１７５９（１９９１））。実施例３にさらに記載される実験では、ＣｐＧメチラーゼによる細菌ＤＮＡのメチル化が分裂促進性をなくすることが見出され、ＣｐＧの状態の相違が細菌ＤＮＡによるＢ細胞刺激の原因であることを立証している。このデータは、以下の結論：細菌ＤＮＡに存在する非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドが細菌ＤＮＡの刺激作用の原因であること、を支持する。
目的論的には、ＣｐＧモチーフによるリンパ球活性化は、細菌ＤＮＡを宿主ＤＮＡから区別することが可能な免疫防御機構を代表するようである。アポトーシス（細胞死）のため、炎症の多くの解剖学的部分および領域に一般的に存在するであろう宿主ＤＮＡは、ＣｐＧ抑制およびメチル化のため、ほとんどまたはまったくリンパ球活性化を誘導しないであろう。しかし、非メチル化ＣｐＧモチーフを含む細菌ＤＮＡが存在すると、正確に感染した解剖学的部分、すなわち有益な部位で、リンパ球活性化が引き起こされることが可能となる。本新規活性化経路は、Ｔ細胞依存性抗原特異的Ｂ細胞活性化に代わる迅速な方法を提供する。ＣｐＧ経路は抗原受容体を通したＢ細胞活性化と相乗作用するため、細菌抗原に特異的な抗原受容体を持つＢ細胞は１つの活性化情報を細胞膜Ｉｇを通じて、そして第二の情報を細菌ＤＮＡから受け取り、そしてしたがって優先して活性化される傾向にあるであろう。本経路と、Ｂ細胞活性化の別の経路との相関関係は、ポリクローナル抗原を用い抗原特異的反応を誘導する生理学的機構を提供する。
しかし、Ｂ細胞活性化は完全に非特異的ではないようである。細菌産物に特異的な抗原受容体を持つＢ細胞は、１つの活性化情報を細胞膜Ｉｇを通じて、そして第二の情報を細菌ＤＮＡから受け取り、それによりより強力に抗原特異的免疫反応を誘発する。他の免疫防御機構と同様、細菌ＤＮＡに対する反応は、ある環境では望ましくない結果を有する可能性がある。例えば、自己抗原に対する自己免疫反応もまた、自己抗原がまた、細菌ＤＮＡにより誘発される自己反応性Ｂ細胞への第二の活性化情報を提供する可能性があることから、細菌感染により優先的に誘発される傾向があるであろう。実際、細菌感染による自己免疫誘導は、よく見られる臨床的観察である。例えば、自己免疫疾患である全身性エリテマトーデスは：ｉ）抗ＤＮＡ抗体の産生により特徴付けられ；ｉｉ）ＤＮＡメチルトランスフェラーゼを阻害する薬剤により誘導され（Ｃｏｒｎａｃｃｈｉａ，Ｅ．Ｊ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９２：３８（１９９３））；そしてｉｉｉ）ＤＮＡメチル化の減少と関与する（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，Ｂ．Ｌ．ら，Ａｒｔｈ．Ｒｈｅｕｍ ３５：６４７（１９９２））が、細菌ＤＮＡの抗原受容体への結合によると共に、少なくとも部分的にＣｐＧモチーフにより提供される刺激情報を通じて、ＤＮＡ特異的Ｂ細胞活性化により、誘発されるようである。
さらに、免疫系が強力にそして非特異的に活性化されることによる高い罹患率および死亡率に特徴付けられる敗血症は、直接多くのリンパ球を活性化するのに十分な濃度に達した、死んだ細菌から放出される、細菌ＤＮＡおよび他の産物により開始される可能性がある。敗血症症候群におけるＣｐＧ ＤＮＡの役割に関するさらなる証拠は、Ｃｏｗｄｅｒｙ，Ｊ．ら，（１９９６）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １５６：４５７０−４５７５に記載されている。
表面Ｉｇ受容体を通じてＢ細胞を誘発する抗原と異なり、ＣｐＧ−ＯＤＮは検出可能なＣａ２＋流入、タンパク質チロシンリン酸化の変化、またはＩＰ ３生成をまったく誘導しなかった。ＣｐＧモチーフを含むまたは含まないＦＩＴＣ結合ＯＤＮを用いたフローサイトメトリーを、Ｚｈａｏ，Ｑら（Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ３：５３−６６（１９９３））に記載されるように行い、そして同等の膜結合、細胞取りこみ、流出および細胞内局在が示された。これにより、ＣｐＧ ＯＤＮに特異的な細胞膜タンパク質はない可能性が示唆される。細胞膜を通じて作用するよりむしろ、本データは、非メチル化ＣｐＧを含むオリゴヌクレオチドは、活性のために細胞に取りこまれることが必要であることを示唆する。固相テフロン（登録商標）支持体に共有結台したＯＤＮは非刺激性であり、アビジン・ビーズまたはアビジンコーティングペトリ皿に固定されたビオチン化ＯＤＮも同様であった。ＦＩＴＣまたはビオチンに結合したＣｐＧ ＯＤＮは完全に分裂促進特性を保持し、立体障害がないことを示した。
最近のデータは、転写因子ＮＦκＢが、ＣｐＧ効果の直接または間接的な媒介体として関与していることを示している。例えば、Ｂ細胞または単球をＣｐＧ ＤＮＡで処理した１５分以内に、ＮＦκＢ結合活性レベルが上昇する（図７）。しかし、ＣｐＧモチーフを持たないＤＮＡによっては上昇しない。さらに、ＮＦκＢの２つの異なる阻害剤である、ＰＤＴＣおよびグリオトキシン（ｇｌｉｏｔｏｘｉｎ）は、Ｂ細胞増殖または単球性細胞サイトカイン分泌により測定される、ＣｐＧ ＤＮＡによるリンパ球刺激を完全に遮断し、ＮＦκＢ活性化が両方の細胞種に必要であることを示唆した。
ＮＦκＢが活性化されうる機構にはいくつかの可能性がある。これらには、さまざまなプロテインキナーゼの活性化を介すもの、または反応性酸素種の生成を介すものが含まれる。Ｂ細胞および単球性細胞をＣｐＧ ＤＮＡで処理した直後に誘導されるプロテインキナーゼ活性化に関する証拠は見出されておらず、そしてプロテインキナーゼＡ、プロテインキナーゼＣおよびタンパク質チロシンキナーゼの阻害剤は、ＣｐＧが誘導する活性化に何の影響も持たない。しかし、ＣｐＧ ＤＮＡは、Ｒｏｙａｌｌ，Ｊ．Ａ．およびＩｓｃｈｉｒｏｐｏｕｌｏｓ，Ｈ．（Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ ３０２：３４８−３５５（１９９３））に記載されるように高感度蛍光色素ジヒドロローダミン１２３により検出されるように、Ｂ細胞および単球性細胞の両方で、反応性酸素種産生の迅速な誘導を引き起こす。さらに、これらの反応性酸素種の生成に対する阻害剤は、ＣｐＧ ＤＮＡによるＮＦκＢの誘導および後の細胞増殖およびサイトカイン分泌の誘導を完全に遮断した。
遡って研究を進めると、次の疑問は、ＣｐＧ ＤＮＡがどのように反応性酸素種生成をこれほど速く導くのかであった。発明者らによる以前の研究により、オリゴヌクレオチドおよびプラスミドまたは細菌ＤＮＡは細胞によりエンドソーム中に取りこまれることが立証された。これらのエンドソームは、細胞内部で急速に酸性化される。この酸性化段階がＣｐＧ ＤＮＡが反応性酸素種を活性化する機構において重要であるかを決定するため、異なる機構を通じて働くクロロキン、モネンシン、およびバフィロマイシンを含む、エンドソーム酸性化の特異的阻害剤により、該酸性化段階を遮断した。図８Ａは、反応性酸素種のレベルを決定するための、マウスＢ細胞をジヒドロローダミン１２３色素と共に用いたフローサイトメトリー研究からの結果を示す。図のパネルＡ中の色素のみの試料は色素に陽性である細胞２８．６％のバックグラウンドレベルを示す。期待されたように、反応性酸素種のこのレベルは、陽性コントロールであるＰＭＡおよびイオノマイシンで２０分処理した細胞で、８０％に非常に上昇した（パネルＢ）。ＣｐＧオリゴで処理した細胞もまた、反応性酸素種レベルの上昇をしめし、５０％を超える細胞が陽性となった（パネルＤ）。しかし、ＣｐＧが交換された以外は同一の配列を持つオリゴヌクレオチドで処理した細胞は、反応性酸素種レベルにおけるこの有意な上昇を示さなかった（パネルＥ）。
クロロキンが存在すると、結果は非常に異なる（図８Ｂ）。クロロキンは細胞における反応性酸素種のバックグラウンドレベルをわずかに下げ、パネルＡ中の未処理細胞は陽性であるものを４．３％しか持たない。クロロキンは、ＣｐＧ ＤＮＡで処理した細胞における反応性酸素種の誘導を完全に抑える（パネルＢ）が、ＰＭＡおよびイオノマイシンで処理した細胞中の反応性酸素種レベルを減少させない（パネルＥ）。これにより、ＰＭＡにイオノマイシンを加えた場合と異なり、Ｂ細胞をＣｐＧ ＤＮＡで処理した後の反応性酸素種の生成は、ＤＮＡがエンドソーム中で酸性化段階を経ることが必要であることが立証される。これは完全に新規な白血球活性化機構である。クロロキン、モネンシン、およびバフィロマイシンはまた、ＣｐＧ ＤＮＡによるＮＦκＢ活性化も、続く増殖およびサイトカイン分泌誘導と共に、遮断するようである。
ＣｐＧ ＤＮＡによる慢性免疫活性化および自己免疫障害
ＣｐＧ ＤＮＡによるＢ細胞活性化は、Ｂ細胞受容体を通じた情報と相乗作用する。これにより、ＤＮＡ特異的Ｂ細胞は、細菌ＤＮＡがその抗原受容体に同時に結合することにより、そして共刺激性ＣｐＧ仲介情報により活性化される可能性が出てくる。さらに、ＣｐＧ ＤＮＡはＢ細胞をアポトーシス耐性であるよう誘導する。ＤＮＡなどの自己抗原に対する免疫反応を防御するのに重要と考えられる機構である。実際、ｂ ＤＮＡへの曝露により、抗ＤＮＡ抗体産生が誘発される可能性がある。このようにＣｐ ＧＤＮＡが自己免疫を助長する潜在的可能性があるとすると、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス患者において、低メチル化ＣｐＧが豊富な血漿ＤＮＡの循環レベル上昇が永続的に見られることは、したがって、注目に値する。これらの知見により、狼癒（ｌｕｐｕｓ）原因病理形成においてＣｐＧ ＤＮＡが慢性免疫活性化に対し何らかの役割を果たしていることが示唆される。
狼瘡の治療に効果的な医薬品（ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）の種類には、クロロキンなどの抗マラリア薬剤がある。これらの薬剤の治療機構は不明であるが、これらはエンドソーム酸性化を防ぐことが知られている。ＣｐＧ ＤＮＡによる白血球活性化は、細胞表面受容体への結合を仲介しているのでなく、細胞取りこみが必要であり、これは酸性化されたクロロキン感受性細胞内区画への吸収エンドサイトーシスを介して起こる。これにより、ＣｐＧ ＤＮＡによる白血球活性化は酸性化エンドソームと関連して起こる可能性が示唆され、そしてｐＨ依存性である可能性すらある。この仮説を試験するため、ＤＮＡ酸性化の特異的阻害剤を適用し、エンドソーム酸性化が阻害されている場合、Ｂ細胞または単球がＣｐＧ ＤＮＡに反応することが可能であるかどうかを決定した。
ＣｐＧ ＤＮＡへの反応において検出される白血球活性化の最初の事象は、反応性酸素種（ＲＯＳ）の産生であり、初代脾臓細胞およびＢおよび単球細胞株両方において、５分以内に誘導される。異なる作用機構を持つクロロキン、バフィロマイシンＡ、およびモネンシンを含むエンドソーム酸性化の阻害剤は、ＣｐＧが誘導するＲＯＳの生成を遮断したが、ＰＭＡ、またはＣＤ４０またはＩｇＭ連結により仲介されるＲＯＳ生成には影響を与えなかった。これらの研究は、さまざまな経路を通じた白血球活性化においてＲＯＳ生成が一般的な事象であることを示している。このＲＯＳ生成は、一般的に、ＣｐＧ ＤＮＡに対するＲＯＳ反応にのみ必要とされるエンドソーム酸性化とは独立している。ＣｐＧに反応するＲＯＳ生成は、ＮＦκＢ阻害剤グリオトキシンにより阻害されず、ＮＦκＢ活性化に従属的なものではないことを裏付ける。
ＣｐＧ ＤＮＡのエンドソーム酸性化が他の免疫刺激性効果にも必要とされるか決定するため、実験を行った。ＬＰＳおよびＣｐＧ ＤＮＡは両方とも、同様の迅速なＮＦκＢ活性化を誘導し、プロトオンコジーンｍＲＮＡレベルおよびサイトカイン分泌を上昇させた。ＤＮＡによるＮＦκＢ活性化は、ＣｐＧメチラーゼで処理したｂＤＮＡによっても、またはＣｐＧを破壊するよう塩基を交換したＯＤＮによっても誘導されないため、ＣｐＧモチーフに依存していた。特異的抗体を用いたスーパーシフト実験により、活性化ＮＦκＢがｐ５０およびｐ６５構成要素を含む複合体を形成することが示された。期待されなかったことではないが、ＬＰＳまたはＣｐＧ処理細胞におけるＮＦκＢ活性化は、ＩκＢαおよびＩκＢβの分解を伴った。しかし、エンドソーム酸性化阻害剤は、選択的にＣｐＧ誘導細胞活性化事象のすべてを遮断したが、ＬＰＳ誘導事象は遮断しなかった。ＣｐＧ仲介白血球活性化を阻害すると決定されたクロロキン濃度が非常に低い（＜１０μＭ）のは、これが抗マラリア活性および他の報告された免疫作用に必要とされる（例えば１００−１０００μＭ）よりかなり低い濃度であることから、注目に値する。これらの実験は、ＣｐＧ ＤＮＡの刺激性作用の仲介においてｐＨ依存性情報伝達機構が役割を果たしていることを支持する。
（表１５． エンドソーム酸性化またはＮＦκＢ活性化の阻害剤による ＣｐＧ誘導ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１２発現の特異的遮断）
表１５レジェンド。ＩＬ−１２およびＴＮＦ−α検定：ネズミ単球細胞株Ｊ７７４（ＩＬ−１２検定には１ｘ１０５細胞／ｍｌ、またはＴＮＦ−αには１ｘ１０６細胞／ｍｌ）を、示した濃度の示した阻害剤を含みまたは含まず２時間培養し、そしてその後、２μＭのＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）１８２６（ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴＳＥＱＩＤ Ｎｏ：１０）またはＬＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）で４時間（ＴＮＦ−α）または２４時間（ＩＬ−１２）刺激し、上清を採取した。ＩＬ−１２またはＴＮＦ−αに関するＥＬＩＳＡ（ｐｇ／ｍｌ）を上清を用いて、実質的に記載されるように（Ａ．Ｋ．Ｋｒｉｅｇ，Ａ．−Ｋ．Ｙｉ，Ｓ．Ｍａｔｓｏｎ，Ｔ．Ｊ．Ｗａｌｄｓｃｈｍｉｄｔ，Ｇ．Ａ．Ｂｉｓｈｏｐ，Ｒ．Ｔｅａｓｄａｌｅ，Ｇ．Ｋｏｒｅｔｚｋｙ，およびＤ．Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３７４，５４６（１９９５）；Ｙｉ，Ａ．−Ｋ．，Ｄ．Ｍ．Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｔ．Ｌ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｓ．ＭａｔｓｏｎおよびＡ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５７，５３９４−５４０２（１９９６）；Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．，１２８，１２８−１３３（１９９６））行った。ＣｐＧモチーフを欠くＯＤＮと共に培養した細胞はサイトカイン分泌を誘導しなかった。同様のＣｐＧ反応特異的阻害が、ＩＬ−６検定、および初代脾臓細胞またはＢ細胞株ＣＨ１２．ＬＸおよびＷＥＨＩ−２３１を用いた実験で見られた。２．５μｇ／ｍｌのクロロキンは、＜５μＭに同等である。ＰＤＴＣおよびカルパイン阻害剤ＩおよびＩＩを含むＮＦ−κＢ活性化の他の阻害剤から、示した阻害剤と同様の結果が得られた。示した結果は、１０の異なる実験から得られたものの典型である。
ＣｐＧモチーフによる過剰な免疫活性化は、低メチル化ＣｐＧ ＤＮＡの循環レベル上昇と関連する自己免疫疾患、全身性エリテマトーデスの病因形成に寄与している可能性がある。クロロキンおよび関連する抗マラリア化合物は、全身性エリテマトーデスおよび他のいくつかの自己免疫疾患に効果的な治療薬剤であるが、その作用機構は不明である。非常に低い濃度のクロロキンがＣｐＧ仲介白血球活性化を特異的に阻害する能力を持つことを我々が立証したことにより、その有益な効果の新規機構が存在する可能性が示唆される。狼瘡再発は、しばしば微生物感染により誘発されると考えられていることは、注目に値する。感染組織に存在するｂＤＮＡレベルは局所炎症反応を誘導するのに十分である可能性がある。ＣｐＧ ＤＮＡが敗血症症候群および他の疾患の媒介体として役割を果たしているらしいことと共に、我々の研究により、エンドソーム酸性化の阻害剤として作用する抗マラリア薬剤の新規治療適用の可能性が示唆される。
ＣｐＧ誘導ＲＯＳ生成は、細胞活性化、またはこの活性化を仲介する情報の付随的な結果である可能性があった。ＲＯＳスカベンジャーであるＮ−アセチル−Ｌ−システイン（ＮＡＣ）はＣｐＧが誘導するＮＦκＢ活性化、サイトカイン産生およびＢ細胞増殖を遮断し、これらの経路においてＲＯＳ生成が原因としての役割を果たしていることが示唆される。これらのデータはＮＦκＢ活性化におけるＲＯＳの役割を支持する先の証拠と矛盾しない。ＷＥＨＩ−２３１Ｂ細胞（５ｘ１０５細胞／ｍｌ）をクロロキン（５μｇ／ｍｌ［＜１０μＭ］）またはグリオトキシン（０．２μｇ／ｍｌ）を含み、または含まず、３０分間、前培養した。分取した細胞をその後上記のように、１μＭのＣｐＧ ＯＤＮ（１８２６）またはＣｐＧを含まないＯＤＮ（１９１１）、またはホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）およびイオノマイシン（ｉｏｎｏ）を含むまたは含まないＲＰＭＩ培地中で１０分間培養した。細胞はその後ジヒドロローダミン１２３で染色し、そして細胞内ＲＯＳ産生を、記載されるようにフローサイトメトリーにより解析した（Ａ．Ｋ．Ｋｒｉｅｇ，Ａ．−Ｋ．Ｙｉ，Ｓ．Ｍａｔｓｏｎ，Ｔ．Ｊ．Ｗａｌｄｓｃｈｍｉｄｔ，Ｇ．Ａ．Ｂｉｓｈｏｐ，Ｒ．Ｔｅａｓｄａｌｅ，Ｇ．Ｋｏｒｅｔｚｋｙ，およびＤ．Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３７４，５４６（１９９５）；Ｙｉ，Ａ．−Ｋ．，Ｄ．Ｍ．Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｔ．Ｌ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｓ．ＭａｔｓｏｎおよびＡ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５７，５３９４−５４０２（１９９６）；Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．，１２８，１２８−１３３（１９９６））。単球性細胞株であるＪ７７４細胞は、同様のｐＨ依存性ＣｐＧ誘導ＲＯＳ反応を示した。対照的にＣｐＧ ＤＮＡは細胞外ＲＯＳ、また検出可能な好中球ＲＯＳの生成を誘導しなかった。これらのクロロキン濃度（およびエンドソーム酸性化の他の阻害剤に使用された濃度）は、Ｔｏｎｋｉｎｓｏｎら（Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２２，４２６８（１９９４）：Ａ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ，Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．Ｓ．Ａｋｈｔａｒ監修，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，中，ｐｐ．１７７（１９９５））に記載されるように、フルオレセイン結合ＯＤＮを用いた内在化ＣｐＧ ＤＮＡの酸性化を防いだ。エンドソーム酸性化阻害に必要な濃度より高濃度では、非特異的阻害効果が見られた。各実験は少なくとも３回行い、同様な結果が得られた。
ＮＦκＢは遺伝子発現の重要な制御因子として知られているが、ＣｐＧ ＤＮＡに対する転写反応における役割は不明であった。このＮＦκＢ活性化がＣｐＧが仲介する遺伝子発現誘導に必要であるかどうかを決定するため、ＩκＢリン酸化阻害剤であるピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）の存在下または非存在下で、細胞をＣｐＧ ＤＮＡにより活性化した。ＮＦκＢのこれらの阻害剤は、ＣｐＧが誘導するプロトオンコジーンおよびサイトカインｍＲＮＡおよびタンパク質発現を完全に遮断し、これらの事象におけるＮＦκＢの媒介体としての本質的な役割が立証された。阻害剤のいずれも、これらの研究に用いた実験条件下で、細胞生存性を減少させなかった。ネズミ単球細胞株Ｊ７７４を、５μｇ／ｍｌの子ウシ胸腺（ＣＴ）、大腸菌（ＥＣ）、またはメチル化（ｍＥＣ）ＤＮＡ（記載されるように、ＣｐＧメチラーゼを用いてメチル化したもの４）、または０．７５μＭのＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ １８２６；表１５）またはＣｐＧを含まないＯＤＮ（ＯＤＮ １７４５；ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ）の存在下で１時間培養し、その後、細胞を溶解し、そして核抽出物を調製した。コンセンサスＮＦκＢ部位を含む二重鎖ＯＤＮを５’放射標識し、そしてＥＭＳＡのプローブとして、実質的に記載されるように使用した（Ｊ．Ｄ．Ｄｉｇｎａｍ，Ｒ．Ｍ．ＬｅｂｏｖｉｔｚおよびＲ．Ｇ．Ｒｏｅｄｅｒ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１１，１４７５（１９８３）；Ｍ．Ｂｒｉｓｋｉｎ，Ｍ．Ｄａｍｏｒｅ，Ｒ．Ｌａｗ，Ｇ．Ｌｅｅ，Ｐ．Ｗ．Ｋｉｎｃａｄｅ，Ｃ．Ｈ．Ｓｉｂｌｅｙ，Ｍ．ＫｕｅｈｌおよびＲ．Ｗａｌｌ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０，４２２（１９９０））。ｐ５０／ｐ６５ヘテロ二量体の位置を、ｐ６５およびｐ５０に特異的な抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，カリフォルニア州サンタクルーズ）を用いたスーパーシフト法により決定した。ＬＰＳ誘導では見られない、ＣｐＧ誘導ＮＦκＢ活性化に対するクロロキン阻害はＪ７７４細胞を用いて証明した。該細胞はクロロキン（２０μｇ／ｍｌ）の存在下または非存在下で２時間、前培養し、そしてその後、上記のようにＥＣ ＤＮＡ、ＣｐＧを含むＯＤＮ、ＣｐＧを含まないＯＤＮまたはＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）により１時間刺激した。ＣｐＧが誘導する、同様のクロロキン感受性ＮＦκＢ活性化がＢ細胞株ＷＥＨＩ−２３１および初代脾臓細胞でも見られた。これらの実験はクロロキン濃度２．５から２０μｇ／ｍｌの範囲にわたり３回行われ、同様の結果が得られた。
ＣｐＧ刺激ｍＲＮＡ発現は、Ｂ細胞および単球において、エンドソーム酸性化およびＮＦκＢ活性化を必要とすることも証明された。Ｊ７７４細胞（２ｘ１０６細胞／ｍｌ）を、クロロキン（２．５μｇ／ｍｌ［＜５μＭ］）、またはＩκＢタンパク質分解を妨げ、そしてしたがってＮＦκＢ活性化を遮断するセリン／スレオニンプロテアーゼ阻害剤であるＮ−トシル−Ｌ−フェニルアラニンクロロメチルケトン（ＴＰＣＫ；５０μＭ）の存在下または非存在下で、２時間培養した。細胞をその後、大腸菌ＤＮＡ（ＥＣ；５０μｇ／ｍｌ）、子ウシ胸腺ＤＮＡ（ＣＴ；５０μｇ／ｍｌ）、ＬＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）、ＣｐＧを含むＯＤＮ（１８２６；１μＭ）、またはＣｐＧを含まないコントロールＯＤＮ（１９１１；１μＭ）を添加し、３時間刺激した。ＷＥＨＩ−２３１ Ｂ細胞（５ｘ１０５細胞／ｍｌ）を、グリオトキシン（０．１μｇ／ｍｌ）またはビスグリオトキシン（０．１μｇ／ｍｌ）の存在下または非存在下で２時間培養し、その後０．５μＭのＣｐＧを含むＯＤＮ（１８２６）またはＣｐＧを含まないコントロールＯＤＮ（１９１１；ＴＣＣＡＧＧＡＣＴＴＴＣＣＴＣＡＧＧＴＴ）で８時間刺激した。どちらの場合も、細胞を採取し、そしてＲＮＡｚｏｌを用い製造者のプロトコルにしたがってＲＮＡを調製した。複数プローブＲＮａｓｅプロテクション検定を、記載されるように行った（Ａ．−Ｋ．Ｙｉ，Ｐ．Ｈｏｒｎｂｅｃｋ，Ｄ．Ｅ．ＬａｆｒｅｎｚおよびＡ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５７，４９１８−４９２５（１９９６））。リボソームＲＮＡを積載（ｌｏａｄ）コントロール（Ｌ２３）として用い、各レーンに同程度の量のＲＮＡを積載した。これらの実験は３回行い、同様の結果が得られた。
結果は、白血球が細胞内ＲＯＳのｐＨ依存性生成を含む新規機構を通してＣｐＧ ＤＮＡに反応することを示す。ｐＨ依存性段階は、ＣｐＧ ＤＮＡの輸送またはプロセシング、ＲＯＳ生成、または何らかの他の事象である可能性がある。ＲＯＳは広く、さまざまな細胞種における情報伝達経路の二次メッセンジャーであると考えられているが、Ｂ細胞における刺激情報を仲介することは以前には示されていなかった。
おそらく、エンドソーム内または近傍に、ＣｐＧモチーフを含むＤＮＡを特異的に認識するタンパク質があり、そして反応性酸素種生成を導いているものと思われる。細胞質内で特異的にＣｐＧ ＤＮＡに結合する可能性がある、いかなるタンパク質も検出するため、ＣｐＧモチーフを含むまたは含まない５’放射活性標識オリゴヌクレオチドと共に、電気泳動移動度シフト検定（ＥＭＳＡ）を用いた。ＣｐＧモチーフを有する一本鎖オリゴヌクレオチドに特異的に結合するタンパク質に相当するらしいバンドが見出されたが、ＣｐＧモチーフを欠くオリゴヌクレオチド、またはメチル化されたＣｐＧモチーフのオリゴヌクレオチドに対応するものはなかった。この結合活性は、ＮＦκＢ結合部位を含むオリゴヌクレオチドを過剰に添加すると、遮断された。これにより、ＮＦκＢまたは関連するタンパク質が、刺激性ＣｐＧオリゴヌクレオチドに結合するタンパク質またはタンパク質複合体の構成要素であることが示唆される。
ＮＦκＢが強く活性化されている時点で、ＣＲＥＢ／ＡＴＦタンパク質の活性化は見られなかった。これらのデータはしたがって、ＮＦκＢタンパク質が実際にＣｐＧ核酸に結合する証拠を提供せず、むしろ、タンパク質がＣｐＧ活性に何らかの方法で必要とされる証拠を提供する。ＣＲＥＢ／ＡＴＦまたは関連タンパク質が、何らかの方法でＮＦκＢタンパク質または他のタンパク質と相互作用する可能性があり、したがってＣＲＥＢタンパク質結合モチーフおよび最適ＣｐＧモチーフの著しい類似性を説明することは可能である。該オリゴがＣＲＥＢ／ＡＴＦまたは関連タンパク質に結合し、そしてこれがＮＦκＢ活性化につながる可能性は残っている。
また別に、ＣｐＧ核酸が、ＣＤ４０の細胞質領域に結合するＴＲＡＦタンパク質の１つに結合し、そしてＣＤ４０がクロスリンクされた際にＮＦκＢ活性化を仲介する可能性が高い。こうしたＴＲＡＦタンパク質の例には、ＴＲＡＦ−２およびＴＲＡＦ−５が含まれる。
（免疫刺激性核酸作成法）
本発明に使用するため、当業によく知られる多くの方法のいずれかを用いて核酸を新規に合成してもよい。例えばｂ−シアノエチルホスホロアミダイト法（Ｓ．Ｌ．ＢｅａｕｃａｇｅおよびＭ．Ｈ．Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ，（１９８１）Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．２２：１８５９）；ヌクレオシドＨ−ホスホン酸法（Ｇａｒｅｇｇら，（１９８６）Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．２７：４０５１−４０５４；Ｆｒｏｅｈｌｅｒら，（１９８６）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．１４：５３９９−５４０７；Ｇａｒｅｇｇら，（１９８６）Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．２７：４０５５−４０５８，Ｇａｆｆｎｅｙら，（１９８８）Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．２９：２６１９−２６２２）である。これらの化学反応は、市場において入手可能な、さまざまな自動化オリゴヌクレオチド合成機により行われてもよい。また別に、制限酵素、エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼを用いるものなど既知の技術を用いて、存在する核酸配列（例えばゲノムまたはｃＤＮＡ）からオリゴヌクレオチドを調製してもよい。
Ｉｎ ｖｉｖｏで使用するための核酸は、分解（例えば、エンドおよびエキソヌクレアーゼを介した）に比較的耐性であることが好ましい。ステムループなどの二次構造は、分解に対し核酸を安定化することが可能である。また別に、核酸安定化は、リン酸バックボーン修飾を介して達成してもよい。好ましい安定化核酸は、少なくとも部分的にホスホロチオエート修飾バックボーンを有する。ホスホロチオエートは、ホスホロアミダイトまたはＨ−ホスホン酸化学反応のどちらかを使用する自動化技術を用い、合成してもよい。アリールおよびアルキルホスホネートは、例えば、米国特許第４，４６９，８６３号に記載されるように作成してもよく；
そしてアルキルホスホトリエステル（荷電酸素部分が、米国特許第５，０２３，２４３号および欧州特許第０９２，５７４号に記載されるようにアルキル化されている）は商業的に入手可能な試薬を用いて、自動化固相合成により調製してもよい。他のＤＮＡバックボーン修飾および置換を作成する方法が記載されてきている（Ｕｈｌｍａｎｎ，Ｅ．およびＰｅｙｍａｎ，Ａ．（１９９０）Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．９０：５４４；Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ，Ｊ．（１９９０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．１：１６５）。ＣｐＧモチーフを含む２’−Ｏ−メチル核酸もまた、免疫活性化を引き起こし、エトキシ修飾ＣｐＧ核酸も同様である。実際、ＣｐＧ効果を完全に無効にするバックボーン修飾は見つかっていないが、Ｃを５−メチルＣに置きかえることにより、効果は非常に減少する。
Ｉｎ ｖｉｖｏ投与には、核酸を、標的細胞（例えば、Ｂ細胞、単球性細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）表面へのより高い親和性結合および／または標的細胞による細胞取りこみ上昇をもたらす分子と結合し、「核酸搬送複合体」を形成してもよい。核酸を、適切な分子と、当業によく知られる技術を用いて、イオンまたは共有結合させてもよい。例えば、プロテインＡ、カルボジイミド、およびＮ−スクシニミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）など、さまざまなカップリングまたはクロスリンク剤を使用してもよい。核酸はまた、よく知られる技術を用いて、リポソームまたはヴィロソーム中に被包してもよい。
免疫刺激性核酸分子の治療的用途
免疫刺激性特性に基づき、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸分子をｉｎ ｖｉｖｏで患者に投与し、「免疫系不全」を治療してもよい。また別に、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸分子を、免疫系不全を有する患者から得たリンパ球（例えばＢ細胞、単球性細胞またはＮＫ細胞）とｅｘ ｖｉｖｏで接触させ、そして活性化されたリンパ球をその後、患者に再移植してもよい。
本明細書に報告されるように、非メチル化ＣｐＧを含む核酸分子に反応し、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−１０、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＧＭ−ＣＳＦ、ＲＡＮＴＥＳおよびおそらく他のものを分泌する脾臓細胞数が上昇する。ＩＬ−６発現の上昇は、Ｂ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞および単球性細胞において起こることが見出された。
免疫刺激性核酸分子はまた、ワクチンと共に患者に投与し、患者の免疫系を助長し、そしてそれによりワクチンからのよりよい反応をもたらしてもよい。好ましくは、免疫刺激性核酸分子はワクチンよりわずかに前かまたは同時に投与される。所望により、最小限の抗原を含む慣用アジュバントをワクチンと共に投与してもよい。慣用アジュバントは、抗原吸収を高めることにより、さらにワクチン投与を改善する可能性があるからである。
ワクチンがＤＮＡワクチンである際、少なくとも２つの構成要素がその有効性を決定する。第一に、ワクチンによりコードされる抗原が免疫反応の特異性を決定する。第二に、プラスミドのバックボーンにＣｐＧモチーフが含まれるのであれば、ワクチンに対するアジュバントとして機能する。したがって、ＣｐＧ ＤＮＡは効果的な「危険信号」として作用し、そして、免疫系が領域内の新規抗原に対し強力に反応するようにする。この作用様式はおそらく主に、樹状細胞および他の「プロフェッショナル」抗原提示細胞に対するＣｐＧ ＤＮＡの刺激性局所作用と共に、Ｂ細胞に対する共刺激作用に起因する。
リンパ球を直接刺激し、そして抗原特異的反応を共刺激する、免疫刺激性オリゴヌクレオチドおよび非メチル化ＣｐＧを含むワクチンは、単独で注射された際は不活性であり、そして抗原を吸収し、そしてそれにより免疫細胞により効果的に提示することを通じて作用すると考えられている慣用アジュバント（例えば、アルミニウム沈降物）とは基本的に異なる。さらに、慣用アジュバントはある種の抗原にしか働かず、抗体（体液性）免疫反応（Ｔｈ２）のみを誘導し、そして細胞性免疫反応（Ｔｈ１）誘導はほとんど行わない。多くの病原体に対し、体液性反応は防御にほとんど寄与せず、そして有害ですらありうる。
さらに、免疫刺激性オリゴヌクレオチドは、化学療法または免疫療法適用の前、同時、後に投与し、悪性細胞に対する、続く化学療法または免疫療法への反応性を高めても、またＧＭ−ＣＳＦなどの回復性サイトカインの誘導を通じた骨髄回復を速めてもよい。ＣｐＧ核酸はまたナチュラルキラー細胞の溶解活性および抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を増加させる。ＮＫ活性およびＡＤＣＣの誘導は、単独または他の治療と組み合わせ、癌免疫療法に有益であるようである。
記載される免疫刺激性核酸分子の他の用途は、無害なアレルゲンに対しＩｇＥ抗体が生成されることにより一般的に引き起こされるアレルギーの脱感作におけるものである。非メチル化ＣｐＧ核酸により誘導されるサイトカインは主に、「Ｔｈ１」と呼ばれる種類であり、細胞性免疫反応により主に特徴付けられ、そしてＩＬ−１２およびＩＦＮ−γと関係する。免疫反応の他の主要な種類は、Ｔｈ２免疫反応と称され、むしろ抗体免疫反応およびＩＬ−４、ＩＬ−５およびＩＬ−１０産生と関係する。一般的に、アレルギー性疾患は、Ｔｈ２型免疫反応により仲介され、そして自己免疫疾患はＴｈ１免疫反応により仲介されるようである。免疫刺激性核酸分子が患者における免疫反応をＴｈ２（ＩｇＥ抗体産生およびアレルギーと関係する）からＴｈ１反応（アレルギー性反応に対し防御性である）にシフトする能力に基づき、単独のまたはアレルゲンと組み合わせた、有効用量の免疫刺激性核酸（または核酸を含むベクター）を患者に投与し、アレルギーを治療または予防してもよい。
非メチル化ＣｐＧモチーフを含む核酸はまた、喘息の治療において、有意な治療利用性を有する可能性がある。Ｔｈ２サイトカイン、特にＩＬ−４およびＩＬ−５は喘息患者の気道で上昇している。これらのサイトカインは、ＩｇＥアイソタイプスイッチ、好酸球走化性および活性化、およびマスト細胞増殖を含む、喘息性炎症反応の重要な側面を促進する。Ｔｈ１サイトカイン、特にＩＦＮ−γおよびＩＬ−１２は、Ｔｈ２クローン形成およびＴｈ２サイトカイン産生を抑制することが可能である。
以下の実施例１２に詳細に記載されるように、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチド（すなわち、ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ；ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）は、ネズミ喘息モデルにおいて、炎症性細胞浸潤および好酸球増加症の発展を防ぐが、コントロールオリゴヌクレオチド（ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ；ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１１）は防がない。さらに、好酸球性炎症は、Ｔｈ２反応の抑制およびＴｈ１反応の誘導と関連していた。
療法に使用する際、適切な有効量の、単独のまたは搬送複合体として処方された免疫刺激性核酸分子を、オリゴヌクレオチドが適切な標的細胞（例えばＢ細胞および単球性細胞）に取りこまれるようないかなる様式により、患者に投与してもよい。好ましい投与経路には、経口および経皮（例えばパッチ（ｐａｔｃｈ）を介して）が含まれる。投与の他の経路の例には、注射（皮下、静脈内、腸管外（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）、腹腔内、鞘内など）が含まれる。注射は大量（ｂｏｌｕｓ）または連続注入であってもよい。
単独核酸または核酸搬送複合体を、薬学的に許容されるキャリアーと共に投与してもよい。本明細書において、「薬学的に許容されるキャリアー」という句は、核酸または核酸搬送複合体と共に投与してもよく、そして核酸が意図する機能で働くようにする基質を含むことを意図する。こうしたキャリアーの例には、溶液、溶媒（ｓｏｌｖｅｎｔ）、分散媒体（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｍｅｄｉａ）、遅延剤（ｄｅｌａｙ ａｇｅｎｔ）、乳剤およびそれに匹敵するものが含まれる。薬学的活性基質に対するこうした媒体の使用は当業によく知られている。核酸と共に使用するのに適した他のいかなる慣用キャリアーも本発明の範囲内にある。
核酸分子の「有効量」という用語は、望ましい生物学的作用を実現するに必要または十分な量を指す。例えば、少なくとも１つの非メチル化ＣｐＧを含む核酸の、免疫系不全を治療するための有効量は、腫瘍、癌、または細菌、ウイルスまたは真菌感染を除くのに必要な量である可能性がある。ワクチンアジュバントとしての使用の有効量は、患者のワクチンに対する免疫反応を助長するのに有用な量である可能性がある。喘息治療の「有効量」とは、喘息に関連するＴｈ２型免疫反応をＴｈ１型反応に変更するのに有用な量である可能性がある。いかなる特定の適用に対する有効量も、治療される疾患または異常、投与される特定の核酸（例えば、非メチル化ＣｐＧモチーフの数または核酸におけるその位置）、患者の大きさ、または疾患または異常の重症度次第で変化する可能性がある。通常の当業者は、特定のオリゴヌクレオチドの有効量を不必要な実験を必要とすることなく、経験的に決定することが可能である。
本発明はさらに以下の実施例により説明されるが、該実施例はいかなる意味でもさらなる限定としてみなされるべきではない。本出願を通じて引用されるすべての参考文献の全内容（論文（ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）、発行特許、公表特許出願、および同時係属特許出願を含む）は、明白に援用される。
非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸配列であって、Ｔｈ１型免疫活性化、サイトカイン産生、ＮＫ溶解活性、およびＢ細胞増殖を刺激することを含む、免疫反応を調節する前記配列が開示される。該配列はまた、合成アジュバントとしても有用である。
（実施例１：Ｂ細胞総ＲＮＡ合成および細胞周期に対するＯＤＮの効果）
６−１２週齢の特定病原体除去（ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｆｒｅｅ）ＤＢＡ／２またはＢＸＳＢマウス（アイオワ大学動物飼育施設にて繁殖；実質的な系統相違は見られなかった）より得た、抗Ｔｈｙ−１．２および補体、およびリンパ球Ｍ（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ Ｍ）（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，カナダ・オンタリオ州ホーンビー）上での遠心分離（「Ｂ細胞」）によりＴ細胞を除去した脾臓からＢ細胞を精製した。Ｂ細胞に含まれるＣＤ４＋またはＣＤ８＋細胞は１％未満だった。８ｘ１０４のＢ細胞を３つ組で、９６ウェルマイクロタイタープレートの、１０％ＦＢＳ（６５℃３０分で、熱失活）、５０μＭの２−メルカプトエタノール、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、および２ｍＭのＬ−グルタミン酸を含む１００μｌのＲＰＭＩ中に分注した。培養開始時に２０μＭのＯＤＮを添加し、３７℃で２０時間培養し、細胞を１μＣｉの３Ｈウリジンでパルス標識し、そして４時間後、採取しそしてカウントした。全脾臓細胞を２０μＭのＯＤＮを含み４８時間培養した後、Ｉｇ分泌Ｂ細胞をＥＬＩＳＡスポット検定を用いて数え上げた。表１に報告されるデータは、ＯＤＮを含まず培養した細胞に比較した刺激指数を表す。３Ｈチミジン取りこみ検定でも同様の結果が示されたが、分解されたＯＤＮから放出されるチミジンによる非特異的阻害がある程度見られた（Ｍａｔｓｏｎ．ＳおよびＡ．Ｍ．Ｋｒｉｅｇ（１９９２）Ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ３Ｈ−ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ２：３２５）。
（実施例２：Ｂ細胞からのＩｇＭ産生に対するＯＤＮの効果）
殺したばかりのマウスの脾臓由来の単一細胞懸濁物を、抗Ｔｈｙ１、抗ＣＤ４、および抗ＣＤ８および補体により、Ｌｅｉｂｓｏｎら（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５４：１６８１（１９８１））の方法により処理した。休止Ｂ細胞（＜０２％Ｔ細胞混入）をＤｅＦｒａｎｃｏら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５５：１５２３（１９８２）の方法により、非連続パーコール勾配の６３−７０％のバンドより単離した。これらを３０μＭのＯＤＮまたは２０μｇ／ｍｌのＬＰＳ中で、上記のように４８時間培養した。活発にＩｇＭを分泌するＢ細胞数は、ＥＬＩｓｐｏｔ検定（Ｋｌｉｎｍａｎ，Ｄ．Ｍ．ら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４：５０６（１９９０））により測定すると、この時点で最大であった。この検定において、Ｂ細胞は抗Ｉｇコーティングマイクロタイタープレート上で６時間インキュベーションした。Ｂ細胞が産生したＩｇ（＞９９％はＩｇＭ）をホスファターゼ標識抗Ｉｇ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ，アラバマ州バーミンガム）を用いて検出した。個々のＢ細胞から産生された抗体を、ホスファターゼが存在すると青い不溶性沈降物を形成するＢＣＩＰ（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ミズーリ州セントルイス）の添加により視覚化した。２０−４０スポット／ウエルを産生する細胞の希釈物を用いて、抗体分泌Ｂ細胞／試料の総数を測定した。
すべての検定は３つ組で行った（データを表１に報告する）。いくつかの実験において、培養上清をＥＬＩＳＡによりＩｇＭに関し検定し、そしてＣｐＧ−ＯＤＮに反応する同様の上昇が示された。
（実施例３：細菌ＤＮＡによるＢ細胞刺激）
ＤＢＡ／２のＢ細胞をＤＮＡなし、または５０μｇ／ｍｌのａ）マイクロコックス・リソデイクテイクス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ）；ｂ）ＮＺＢ／Ｎマウス脾臓；およびｃ）ＮＦＳ／Ｎマウス脾臓ゲノムＤＮＡと共に４８時間培養し、その後細胞採取４時間前に３Ｈチミジンでパルス標識した。２つ組ＤＮＡ試料をＤＮＡＳＥＩにより３７℃で３０分消化し、その後細胞培養に加えた。大腸菌ＤＮＡもまた、ＥＬＩＳＡスポット検定を用いると、４８時間後までにＩｇＭ分泌Ｂ細胞数を８．８倍誘導した。
ＤＢＡ／２のＢ細胞を添加物なし、または５０μｇ／ｍｌのＬＰＳまたは２０μＭのＯＤＮ１；１ａ；４；または４ａを添加し、培養した。細胞を培養し、そして４、８、２４および４８時間で採取した。ＢＸＳＢ細胞を実施例１のように、５、１０、２０、４０または８０μＭのＯＤＮ １；１ａ；４；または４ａまたはＬＰＳと共に培養した。この実験において、ＯＤＮを含まないウェルは３８３３ｃｐｍであった。各実験は、少なくとも３回行い、同様の結果が得られた。３つ組ウェルの標準偏差は、５％未満であった。
（実施例４：ナチュラルキラー細胞活性に対するＯＤＮの効果）
１０ｘ１０６のＣ５７ＢＬ／６脾臓細胞を４０μＭのＣｐＧ ＯＤＮまたはＣｐＧを含まないＯＤＮを含むまたは含まない２ｍｌのＲＰＭＩ（実施例１に記載されるように補足）中で４８時間培養した。細胞を洗浄し、そしてその後、２つのＮＫ感受性標的細胞株（Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．ら，（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：１７）であるＹＡＣ−１および２Ｃ１１を用いた短期５１Ｃｒ放出検定において、エフェクターとして使用した。Ｖ底マイクロタイタープレートの０．２ｍｌ中の１０４個の５１Ｃｒ標識標的細胞に、エフェクター細胞をさまざまな濃度で添加し、そして５％ＣＯ２中で３７℃４時間培養した。
プレートをその後遠心分離し、上清の分取を放射活性に関しカウントした。エフェクター細胞の存在下に放出される５１Ｃｒから、標的細胞が単独培養される際放出される５１Ｃｒを引いたものを、２％酢酸で細胞溶解した後に放出される総カウントから、細胞が単独培養された際放出される５１Ｃｒを引いたもので割り、特異的溶解率を算出した。
（実施例５：ＣｐＧホスホロチオエートＯＤＮを用いたｉｎ ｖｉｖｏ研究）
マウスの重量を測定し、そして０．２５ｍｌの無菌ＰＢＳまたはＰＢＳ中に溶解した示されたホスホロチオエートＯＤＮと共にＩＰを注射した。２４時間後、脾臓細胞を採取し、洗浄し、そしてＢ細胞にゲートを設けるため、フィコエリトリン結合６Ｂ２をビオチン結合抗Ｌｙ−６Ａ／Ｅまたは抗Ｉａｄ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ，カリフォルニア州サンディエゴ）または抗Ｂｌａ−１（Ｈａｒｄｙ，Ｒ．Ｒ．ら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５９：１１６９（１９８４））と共に用い、フローサイトメトリー用に染色した。各条件に対し２匹のマウスを用い、そして個別に解析した。
（実施例６：Ｂ細胞活性化に対するホスホロチオエートＯＤＮの滴定）
Ｂ細胞を、コントロール配列ＯＤＮ １ａまたはＣｐＧ ＯＤＮ １ｄおよび３Ｄｄの配列を持つホスホロチオエートＯＤＮと共に培養し、そして２０時間後、３Ｈウリジンでパルス標識するか、または４４時間後、３Ｈチミジンでパルス標識し、採取しそしてｃｐｍを測定した。
（実施例７：アポトーシスからのＢ細胞救済）
ＷＥＨＩ−２３１細胞（５ｘ１０４／ウェル）を、ＬＰＳまたはコントロールＯＤＮ １ａまたはＣｐＧ ＯＤＮ １ｄおよび３Ｄｄの存在下または非存在下で、３７℃で１時間培養した後、抗ＩｇＭ（１μｇ／ｍｌ）を添加した。細胞をさらに２０時間培養した後、２μＣｉ／ウェルの３Ｈチミジンで４時間パルス標識した。本実験において、ＯＤＮも抗ＩｇＭも含まない細胞は、抗ＩｇＭの添加により９０．４ｘ１０３ｃｐｍの３Ｈチミジン取りこみを示した。表１に示されるホスホジエステルＯＤＮも同様の防御を示したが、ＯＤＮ分解による、ある程度の非特異的抑制を伴った。各実験は少なくとも３回繰り返し、同様の結果が得られた。
（実施例８：ネズミＩＬ−６のｉｎ ｖｉｖｏ誘導）
ＤＢＡ／２メスマウス（２か月齢）に５００ｇのＣｐＧまたはコントロールのホスホロチオエートＯＤＮと共にＩＰを注射した。注射後さまざまな時点でマウスを放血させた。各時点で２匹のマウスを調べた。ＩＬ−６はＥＬＩＳＡにより測定し、そしてＩＬ−６濃度は組換えＩＬ−６を用いて生成した標準曲線との比較により算出した。検定感度は１０ｐｇ／ｍｌだった。８時間後には検出不能レベルであった。
（実施例９：ネズミＩＬ−６転写の全身性誘導）
マウス系統および細胞株。５−１０週齢のＤＢＡ／２、ＢＡＬＢ／ｃ、およびＣ３Ｈ／ＨｅＪを、リンパ球供給源として用いた。すべてのマウスはＴｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（メイン州バーハーバー）から得られ、そして特定病原体除去条件下で、アイオワ大学動物飼育施設で繁殖し、そして維持された。マウスＢ細胞株ＣＨ１２．ＬＸはＧ．Ｂｉｓｈｏｐ博士（アイオワ大学、アイオワシティ）の好意により提供された。
細胞調製。マウスを頚椎脱臼により殺した。マウスの脾臓から無菌的に単一細胞懸濁を調製した。Ｔ細胞除去マウス脾臓細胞は、抗Ｔｈｙ−１．２および補体、およびリンパ球Ｍ（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，カナダ・オンタリオ州ホーンビー）上での遠心分離により、記載されるように（Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．ら，（１９８９）Ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ
ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４３：２４４８）調製した。
ＯＤＮおよびＤＮＡ。ホスホジエステルオリゴヌクレオチド（Ｏ−ＯＤＮ）およびバックボーン修飾ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド（Ｓ−ＯＤＮ）はアイオワ大学のＤＮＡ中央施設またはＯｐｅｒｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カリフォルニア州アラメダ）より得られた。大腸菌ＤＮＡ（Ｂ株）および子ウシ胸腺ＤＮＡはＳｉｇｍａ（ミズーリ州セントルイス）より購入した。すべてのＤＮＡおよびＯＤＮはフェノール：クロロホルム：イソアミルアルコール（２５：２４：１）および／またはエタノール沈澱により精製した。大腸菌および子ウシ胸腺ＤＮＡは、使用前に１０分間煮沸した後、氷上で５分冷却し、一本鎖にした。いくつかの実験では、大腸菌および子ウシ胸腺ＤＮＡを、５ｍＭのＭｇＣｌ２を含む１Ｘ ＳＳＣ中でＤＮａｓｅＩ（２Ｕ／μｇＤＮＡ）により３７℃で２時間消化した。大腸菌ＤＮＡ中のＣｐＧジヌクレオチドのシトシンをメチル化するため、大腸菌ＤＮＡを、１６０μＭのＳ−アデノシルメチオニンを補ったＮＥＢｕｆｆｅｒ２中でＣｐＧメチラーゼ（Ｍ．ＳｓｓＩ；２Ｕ／μｇ ＤＮＡ）で処理し、そして３７℃で一晩インキュベーションした。メチル化ＤＮＡは上記のように精製した。メチル化効率はＨｐａＩＩ消化後、ゲル電気泳動による解析により確認した。すべての酵素はＮｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ（マサチューセッツ州ビバリー）より購入した。カブトガニ検定（Ｌｉｍｕｌｕｓ ａｓｓａｙ）によると、ＯＤＮ中のＬＰＳレベルは１２．５ｎｇｌ／ｍｇより低く、そして大腸菌および子ウシ胸腺ＤＮＡはＤＮＡ１ｍｇ当たり２．５ｎｇ未満のＬＰＳを含んだ。
細胞培養。すべての細胞は５％ＣＯ２加湿インキュベーター中で３７℃で培養し、１０％（ｖ／ｖ）熱失活ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１．５ｍＭのＬ−グルタミン、５０μｇ／ｍｌのＣｐＧを含むまたはＣｐＧを含まないホスホジエステルＯＤＮ（Ｏ−ＯＤＮ）（２０μＭ）、ホスホロチオエートＯＤＮ（Ｓ−ＯＤＮ）（０．５μＭ）、または大腸菌または子ウシ胸腺ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）を補ったＲＰＭＩ−１６４０中で３７℃で２４時間（ＩＬ−６産生に対し）、または５日間（ＩｇＭ産生に対し）維持した。刺激物質の濃度は、滴定を伴う予備実験に基づき選択された。いくつかの場合では、細胞はさまざまな濃度（１−１０μｇ／ｍｌ）のネズミＩＬ−６に対する中和ラットＩｇＧ１抗体（ハイブリドーマＭＰ５−２０Ｆ３）またはコントロールとして大腸菌ｂ−ガラクトシダーゼに対するラットＩｇＧ１ ｍＡｂ（ハイブリドーマＧＬ１１３；ＡＴＣＣ、メリーランド州ロックビル）（２０）と共にＣｐＧ Ｏ−ＯＤＮにより５日間処理した。インキュベーション終了時に、培養上清分画を下記のようにＥＬＩＳＡにより解析した。
ＩＬ−６およびＩｇＭのｉｎ ｖｉｖｏ誘導。ＢＡＬＢ／ｃマウスに、ＰＢＳ、子ウシ胸腺ＤＮＡ（２００μｇ／１００μｌＰＢＳ／マウス）、大腸菌ＤＮＡ（２００μｇ／１００μｌＰＢＳ／マウス）、またはＣｐＧを含むまたはＣｐＧを含まないＳ−ＯＤＮ（２００μｇ／１００μｌＰＢＳ／マウス）を静脈内（ｉｖ）注射した。マウス（２匹／群）をさまざまな時点で後眼窩（ｒｅｔｒｏｏｒｂｉｔａｌ）穿刺により放血させ、そして頚椎脱臼により屠殺した。肝臓、脾臓、胸腺および骨髄を除去し、そしてこれらの臓器からＲＮＡｚｏ／Ｂ（Ｔｅｌ−Ｔｅｓｔ、テキサス州フレンズウッド）を用い製造者のプロトコルにしたがってＲＮＡを調製した。
ＥＬＩＳＡ。平底Ｉｍｍｕｎ １プレート（Ｄｙｎａｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，バージニア州チャンティリー）を炭酸−炭酸水素緩衝液（ｐＨ９．６）（１．５ｎＭ Ｎａ２ＣＯ３，３５ｍＭＮａＨＣＯ３）中で、１００μｌ／ウェルの抗マウスＩＬ−６ｍＡｂ（ＭＰ５−２０Ｆ３）（２μｇ／ｍｌ）または抗マウスＩｇＭμ鎖特異的抗体（５μｇ／ｍｌ；Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）を用い４℃で一晩コーティングした。プレートをその後ＴＰＢＳ（０．５ｍＭ ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ，２．６８ｍＭ ＫＣｌ，１．４７ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４，０．１４Ｍ ＮａＣｌ，６．６ｍＭ Ｋ２ＨＰＯ４，０．５％Ｔｗｅｅｎ２０）で洗浄し、ＴＰＢＳ中の１０％ＦＣＳで室温で２時間ブロッキングし、そしてその後再度洗浄した。培養上清、マウス血清、組換えマウスＩＬ−６（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ）または精製マウスＩｇＭ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、カリフォルニア州サンデイエゴ）は、１０％ＦＣＳ中で適切に希釈し、そして３つ組ウェル中で室温で６時間インキュベーションした。プレートを洗浄し、そして１００μｌ／ウェルのビオチン化ラット抗マウスＩＬ−６モノクローナル抗体（ＭＰ５−３２Ｃ１１Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ）（１０％ＦＣＳ中に１μｇ／ｍｌ）またはビオチン化抗マウスＩｇ（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）を添加し、そして４５分間室温でインキュベーションした後ＴＰＢＳで洗浄した。１０％ＦＣＳで１：４０００希釈した西洋ワサビ（Ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ）ペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）結合アビジン（Ｂｉｏ−ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、カリフォルニア州ハーキュルス）（１００μｌ／ウェル）を添加し、そして室温で３０分インキュベーションした。プレートを洗浄し、そして０．０５Ｍリン酸−クエン酸緩衝液（ｐＨ５．０）中のｏ−フェニレンジアミンジヒドロクロリド（ＯＰＤ；Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）で３０分染色した。０．６７ＮＨ２ＳＯ４を用いて反応を停止し、そしてプレートをマイクロプレート読み取り装置（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．、マサチューセッツ州ウォータータウン）上で４９０−６００ｎｍで読み取った。結果は図１および２に示す。
ＲＴ−ＰＣＲ。ＩＬ−６に対する、センスプライマー、アンチセンスプライマー、および内部オリゴヌクレオチドプローブを、公表された配列を用いて合成した（Ｍｏｎｔｏｇｏｍｅｒｙ，Ｒ．Ａ．およびＭ．Ｓ．Ｄａｌｌｍａｎ（１９９１），Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｆｅｔａｌ ｔｈｙｍｉｃ ｏｎｔｏｇｅｎｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）１４７：５５４）。ｃＤＮＡ合成およびＩＬ−６ＰＣＲは、Ｐｅｒｋｉｎ．Ｅｌｍｅｒ Ｃｏｒｐ．（カリフォルニア州ヘイワード）からのＲＴ−ＰＣＲ試薬を用い実質的にＭｏｎｔｏｇｏｍｅｒｙおよびＤａｌｌｍａｎに記載されるように行った（Ｍｏｎｔｏｇｏｍｅｒｙ，Ｒ．Ａ．およびＭ．Ｓ．Ｄａｌｌｍａｎ（１９９１），Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｆｅｔａｌｔｈｙｍｉｃ ｏｎｔｏｇｅｎｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）１４７：５５４）。試料は３０サイクルの増幅の後、ゲル電気泳動をしその後、非ブロット（ｕｎｂｌｏｔ）解析（Ｓｔｏｙｅ，Ｊ．Ｐ．ら，（１９９１）ＤＮＡ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｄｒｉｅｄ ｇｅｌｓ ｗｉｔｈ ｆｒａｇｍｅｎｔｅｄ ｐｒｏｂｅｓ：ａｎ
ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｖｅｒ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ３：１２３）により解析した。簡潔には、ゲルを室温で、変性緩衝液（０．０５Ｍ ＮａＯＨ，１．５Ｍ ＮａＣｌ）中で３０分ハイブリダイズし、その後再生緩衝液（１．５Ｍ ＮａＣｌ，１Ｍ Ｔｒｉｓ，ｐＨ８）中で３０分インキュベーションし、そして再蒸留水中で３０分洗浄した。ゲルを乾燥し、そして１０μｇ／ｍｌの変性サケ精子ＤＮＡを含むハイブリダイゼーション緩衝液（５Ｘ ＳＳＰＥ，０．１％ＳＤＳ）中で４７℃で２時間プレハイブリダイズさせた。ゲルを２ｘ１０６ｃｐｍ／ｍｌのＩＬ−６に対するｇ−［３２Ｐ］ＡＴＰ末端標識内部オリゴヌクレオチドプローブ（５’ＣＡＴＴＴＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＣＣＡ３’；ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：５６）と４７℃で一晩ハイブリダイズし、室温で４回洗浄し（２Ｘ ＳＳＣ，０．２％ＳＤＳ）、そしてオートラジオグラフを行った。結果は図３に示した。
細胞増殖検定。培地、ＣｐＧを含むまたはＣｐＧを含まないＳ−ＯＤＮ（０．５μＭ）またはＯ−ＯＤＮ（２０μＭ）でＤＢＡ／２マウス脾臓Ｂ細胞（５ｘ１０４細胞／１００μｌ／ウェル）を３７℃で２４時間処理した。細胞は最後の４時間、［３Ｈ］チミジンまたは［３Ｈ］ウリジン（１μＣｉ／ウェル）のいずれかでパルス標識した。［３Ｈ］用取りこみ量をＬｉｑｕｉｄ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．、イリノイ州ダウナーズグローブ）を用い測定した。
トランスフェクションおよびＣＡＴ検定。ＷＥＨＩ−２３１細胞（１０７細胞）を、２０μｇのコントロールまたはヒトＩＬ−６プロモーター−ＣＡＴ構築物（アーカンソー大学のＳ．Ｍａｎｏｌａｇａｓの好意により提供）（ｐｏｔｔｒａｔｚ，Ｓ．Ｔ．ら，（１９９４）１７Ｂ−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６ｐｒｏｍｏｔｅｒ−ｒｅｐｅｒｔｅｒ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓｂｙ ａｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：９４４）と共に２５０ｍＶおよび９６０μＦで電気泳動した。電気泳動後、細胞をさまざまな濃度のＣｐＧを含むまたはＣｐＧを含まないＤＮＡにより刺激した。クロラムフェニコ−ル・アセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）活性をトランスフェクションの１６時間後、溶液検定（Ｓｅｅｄ，Ｂ．およびＪ．Ｙ．Ｓｈｅｅｎ（１９８８）Ａ ｓｉｎｇｌｅ ｐｈａｓｅ−ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ ａｃｅｔｙｌ
ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｇｅｎｅ ７６：２７１）により測定した。
結果は図５に示している。
（実施例１０：オリゴヌクレオチドの修飾が ＣｐＧモチーフによるＢ細胞活性化の度合いを決定する）
標準的方法（ＢｅａｃａｇｅおよびＣａｒｕｔｈｅｒｓ（１９８１）Ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅｓ―Ａ ｎｅｗ ｃｌａｓｓ ｏｆ ｋｅｙ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ ｆｏｒ ｄｅｏｘｙｐｏｌｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２２，１８５９−１８６２．）を用いて、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．（カリフォルニア州フォスターシティ）モデル３８０Ａ、３８０Ｂ、または３９４ＤＮＡ合成機により、ＯＤＮを合成した。ホスホジエステルＯＤＮを標準的ベーターシアノエチルホスホロアミダイト化学反応を用いて合成した。ホスホロチオエート結合は、標準的なヨウ素酸化の代わりに、イオウ元素を用い亜リン酸結合を酸化することにより導入した。４つの一般的なヌクレオシドホスホロアミダイトをＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓより購入した。すべてのホスホジエステルおよびチオエート含有ＯＤＮは濃アンモニアで５５℃で１２時間処理することにより脱保護した。ＯＤＮをゲル排除クロマトグラフィーにより精製し、そして使用前に凍結乾燥した。ホスホロジチオエート結合は、デオキシヌクレオシドＳ−（ｂ−ベンゾイルメルカプトエチル）ピロリジノチオホスホロアミダイト（Ｗｉｅｓｌｅｒ，Ｗ．Ｔ．ら，（１９９３）Ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏ ｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ａｎａｌｏｇｓ−Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ａｇｒａｗａｌ，Ｓ．（監修），Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，１９１−２０６．）を用いることにより導入した。ジチオエートを含むＯＤＮは、濃アンモニアで５５℃で１２時間処理し脱保護した後、逆相ＨＰＬＣ精製を行った。
ホスホジエステルと共にメチルホスホノチオエートまたはメチルホスホネートを望ましいヌクレオチド間結合部位に含むオリゴマーを合成するため、２つの異なる合成サイクルを用いた。２つのサイクルの主な合成上の相違は、カップリング試薬であり、ジアルキルアミノメチルヌクレオシドホスフィンを使用し、そしてメチルホスホノチオエートの場合は酸化試薬を用いた。どちらかの誘導体を合成するため、ジアルキルアミノメチルヌクレオシドホスフィンの場合はカップリング反応速度が遅いため、縮合（ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ）時間を増やしている（ＪａｇｅｒおよびＥｎｇｅｌｓ，（１９８４）Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｍｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ ｖｉａ ａｐｈｏｓｐｈｏｎａｍｉｄｉｔｅ ａｐｐｒｏａｃｈ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２４，１４３７−１４４０）。カップリング段階が完了した後、メチルホスフィノジエステルを硫化試薬（二硫化炭素／ピリジン／トリエチルアミン中の５％イオウ元素、１００ミリモルのＮ，Ｎ−ジアメチルアミノピリジン）で各連続４５０秒で４回処理し、メチルホスホノチオエートを産生した。メチルホスホネート結合を生成するため、メチルホスフィノジエステルを標準的酸化試薬（テトラヒドロフラン／２，６−ルチジン／水中の０．１Ｍヨウ素）で処理した。
シリカゲル結合オリゴマーを１：１（ｖ／ｖ）の蒸留ピリジン／濃アンモニアで、４日間４℃で処理した。上清を真空で乾燥し、水に溶解し、そしてＧ５０／５０Ｓｅｐｈａｄｅｘカラム上でクロマトグラフィーを行った。
本明細書において、Ｏ−ＯＤＮはホスホジエステルであるＯＤＮを指し；Ｓ−ＯＤＮは完全にホスホロチオエート修飾されたものであり；Ｓ−Ｏ−ＯＤＮは中央の結合がホスホジエステルであるが、２つの５’および５つの３’結合がホスホロチオエート修飾されているキメラＯＤＮであり；Ｓ２−Ｏ−ＯＤＮは中央の結合がホスホジエステルであるが、２つの５’および５つの３’結合がホスホロジチオエート修飾されているキメラＯＤＮであり；そしてＭＰ−Ｏ−ＯＤＮは中央の結合がホスホジエステルであるが、２つの５’および５つの３’結合がメチルホスホネート修飾されているキメラＯＤＮである。調べたＯＤＮ配列（ＣｐＧジヌクレオチドは下線により示されている）には：
が含まれる。これらの配列はこれらの研究の過程で試験した文字通り何百ものＣｐＧを含むおよびＣｐＧを含まないＯＤＮの代表である。
マウス。Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（メイン州バーハーバー）から得、特定病原体除去条件下で維持したＤＢＡ／２、またはＢＸＳＢマウスを、５−１０週齢でリンパ球供給源として使用し、実質的に同一の結果が得られた。
細胞増殖検定。細胞増殖検定には、マウス脾臓細胞（５ｘ１０４細胞／１００μｌ／ウェル）を、５％ＣＯ２加湿インキュベーター中３７℃で、１０％（ｖ／ｖ）の熱失活ウシ胎児血清（Ｏ−ＯＤＮを用いる実験には６５℃に熱し、または修飾ＯＤＮのみを用いる実験には５６℃に熱する）、１．５μＭＬ−グルタミン、５０μＭ２−メルカプトエタノール、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、および１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補ったＲＰＭＩ−１６４０中で、示されるように２４時間または４８時間培養した。１μＣｉの３Ｈウリジンまたはチミジンを（示されるように）各ウェルに添加し、そして細胞をさらに４時間培養した後採取した。フィルターをシンチレーション計測によりカウントした。３つ組ウェルの標準偏差は５％未満であった。結果は図６−８に示している。
（実施例１１：ＮＫ活性誘導）
ホスホジエステルＯＤＮはＯｐｅｒｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カリフォルニア州アラメダ）より購入した。ホスホロチオエートＯＤＮはアイオワ大学ＤＮＡ中央施設、またはＴｈｅ Ｍｉｄｌａｎｄ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｃｏｍｐａｎｙ（テキサス州ミッドランド）より購入した。
大腸菌（Ｂ株）ＤＮＡおよび子ウシ胸腺ＤＮＡはＳｉｇｍａ（ミズーリ州セントルイス）より購入した。すべてのＤＮＡおよびＯＤＮはフェノール：クロロホルム：イソアミルアルコール（２５：２４：１）および／またはエタノール沈澱により精製した。カブトガニ検定によれば、ＯＤＮ中のＬＰＳレベルは１２．５ｎｇ／ｍｇ未満であり、そして大腸菌および子ウシ胸腺ＤＮＡはＤＮＡ１ｍｇ当たり、２．５ｎｇ未満のＬＰＳしか含まなかった。
ウイルスを含まない４−６週齢のＤＢＡ／２、Ｃ５７ＢＬ／６（Ｂ６）および先天的無胸腺ＢＡＬＢ／Ｃマウスは米国癌研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ；メリーランド州ベセスダ）の退役軍人問題（Ｖｅｔｅｒａｎｓ Ａｆｆａｉｒｓ）を通じた契約により得た。Ｃ５７ＢＬ／６ ＳＣＩＤマウスはアイオワ大学動物飼育施設のＳＰＦバリア施設で繁殖した。
ヒト末梢単核白血球（ＰＢＭＣ）は以前記載されたように得られた（Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．ら，（１９９０）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８５：４５３；Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．およびＷ．Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４５：１０３９；Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．およびＷ．Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０；１７）。ヒトまたはマウス細胞を５％ＣＯ２加湿インキュベーターの２４ウェルプレート中で（Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．ら，（１９９０）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８５：４５３；Ｂａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．およびＷ．Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４５：１０３９；およびＢａｌｌａｓ，Ｚ．Ｋ．およびＷ．Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：１７）、培地のみを含み、またはＣｐＧを含むまたはＣｐＧを含まないＯＤＮを示された濃度で、または大腸菌または子ウシ胸腺ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）を含み、５ｘ１０６／ウエルで３７℃で２４時間培養した。すべての培養物は１８時間で採取し、そして細胞を標準的に４時間、エフェクターとして用いた。Ｋ５６２（ヒト）またはＹＡＣ−１（マウス）標的細胞に対する５１Ｃｒ放出検定を以前記載したように行った。溶解単位（ＬＵ）の算出には、１ＬＵを３０％の特異的溶解をもたらすのに必要な細胞数として定義した。示したところで、ＩＦＮ−β（Ｌｅｅ Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ、カリフォルニア州サンディエゴ）またはＩＬ−１２（Ｃ１５．１、Ｃ１５．６、Ｃ１７．８およびＣ１７．１５；Ｔｈｅ Ｗｉｓｔａｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、ペンシルバニア州フィラデルフィアのＧｉｏｒｇｉｏ Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ博士より提供）に対する中和抗体またはそのアイソタイプコントロールを培養開始時に１０μｇ／ｍｌの濃度で添加した。抗ＩＬ−１２添加には、各１０μｇの４つのＭＡＢ（またはアイソタイプコントロール）を同時に添加した。組換えヒトＩＬ−２は、１００Ｕ／ｍｌの濃度で使用した。
（実施例１２：ネズミ喘息モデルにおける炎症性細胞浸潤および好酸球増加症の発展の予防）
６−８週齢のＣ５６ＢＬ／６マウス（Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、メイン州バーハーバーより）に、５０００個のマンソン住血吸虫卵を、第０日および第７日に腹腔内（ｉ．ｐ．）投与することにより免疫化した。マンソン住血吸虫卵は、Ｔｈ２免疫反応（例えば、ＩｇＥ抗体産生）を誘導する抗原（マンソン住血吸虫卵抗原（ＳＥＡ））を含む。ＩｇＥ抗体産生は喘息の重要な原因であることが知られている。
免疫化マウスをその後、非メチル化ＣｐＧモチーフを含む（すなわちＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ；ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ：１０）または含まない（すなわちコントロール、ＴＣＣＡＴＧＡＧＣＴＴＣＣＴＧＡＧＴＣＴ；ＳＥＱ
ＩＤ Ｎｏ：１１）オリゴヌクレオチドで処理した（２００μｌの生理食塩水中に３０μｇ、ｉ．Ｐ．注射による）。可溶性ＳＥＡ（２５μｌの生理食塩水中に１０μｇ）を鼻腔内点滴注入により第１４日および第２１日に投与した。生理食塩水をコントロールとして用いた。
マウスを気道攻撃後のさまざまな時点で屠殺した。全肺洗浄を行い、気道および肺胞の炎症性細胞を採取した。洗浄液のサイトカインレベルをＥＬＩＳＡにより測定した。ノーザン解析およびＲＴ−ＰＣＲ研究を行うため、ＣｓＣｌ勾配によりＲＮＡを全肺から単離した。組織学的試験のため、肺を膨張させ、そして４％パラホルムアルデヒドを用いて灌流した。
図９は、マウスに最初に卵をｉ．ｐ．投与した際、そしてその後卵抗原を吸入させた際（白丸）、多くの炎症性細胞が肺に存在することを示す。しかし、マウスに最初に非メチル化ＣｐＧモチーフを含む核酸を卵と共に与えた場合、続いて卵抗原を吸入させても肺中の炎症性細胞は増加しなかった（白三角）。
図１０は、肺洗浄中に存在する好酸球のみを測定した場合、同様の結果が得られることを示す。好酸球は最も密接に喘息と結び付けられる炎症性細胞種である。
図１１は、卵への最初の曝露時にマウスをコントロールオリゴで処理した場合、続くＳＥＡ吸入後、肺への好酸球浸潤にほとんど影響がないことを示す。したがって、マウスが第１４ま日たは第２１日に卵を吸入すると、肺において急性炎症反応が発展する。しかし、第０日および第７日の、最初の抗原曝露時に卵と共にＣｐＧオリゴを与えると、第１４日にマウスに卵抗原を吸入させた際、好酸球増加はほとんど完全に抑えられる。
図１２は、非常に低い用量のオリゴヌクレオチド（＜１０μｇ）によりこの防御が与えられることを示す。
図１３は、生じる炎症反応が肺中のＴｈ２サイトカインＩＬ−４のレベルと相関することを示す。
図１４は、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドを投与すると、実際に、肺のサイトカイン反応が、Ｔｈ１型免疫反応を示すＩＬ−１２産生へと変化しうることを示す。
図１５は、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドを投与するとまた、肺のサイトカイン反応が、Ｔｈ１型免疫反応を示すＩＦＮ−γ産生へと変化しうることを示す。
実施例１３：ＣｐＧオリゴヌクレオチドはヒトＰＢＭＣがサイトカインを分泌するよう誘導する
ヒトＰＢＭＣを標準的なフィコール・ハイパック上の遠心分離により、全血から調製した。細胞（５ｘ１０５／ｍｌ）を１０％の自己血清中で、９６ウェルマイクロタイタープレートで、ＣｐＧまたはコントロールオリゴデオキシヌクレオチド（ホスホジエステルオリゴヌクレオチドは２４μｇ／ｍｌ；ヌクレアーゼ耐性ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは６μｇ／ｍｌ）と共に、ＴＮＦ−αの場合は４時間、他のサイトカインの場合は２４時間培養し、上清を採取してそして、Ｒ＆Ｄ ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅキットまたは試薬を用い（ｐｇ／ｍｌ）、またはＢｉｏｓｏｕｒｃｅ（ＩＬ−１２の場合）のサイトカインＥＬＩＳＡキットを用いたＥＬＩＳＡにより測定した。検定は製造者の指示にしたがい行った。データは、オリゴヌクレオチドを添加しないウエルより高いサイトカインレベルとして、表６に示す。
当業者は、ルーチンの実験法以上のものを用いなくても、本明細書に記載される本発明の特定の態様には多くの同等物があることを認識するであろうし、または確認することが可能であろう。こうした同等物は以下の請求項により含まれるよう意図される。

Claims (26)

  1. 非げっ歯類被験体において喘息を処置または予防するための組成物であって、該被験体において喘息を処置または予防するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含み、ここで、該被験体は、ＣｐＧ免疫刺激性核酸と同時に抗原を投与されない、組成物。
  2. 被験体において喘息を処置または予防するための組成物であって、該被験体において喘息を処置または予防するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含み、ここで、該組成物が、ＣｐＧ免疫刺激性核酸が経口投与されるように処方される、組成物。
  3. 被験体においてアレルギーを処置または予防するための組成物であって、該被験体おいてアレルギーを処置または予防するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含み、ここで、該アレルギーがアレルギー性喘息ではない、組成物。
  4. 前記被験体が、ＣｐＧ免疫刺激性核酸と同時に外因性アレルゲンを投与されない、請求項３に記載の組成物。
  5. 被験体において細胞障害性リンパ球応答を誘導するための組成物であって、該被験体において細胞障害性リンパ球応答を誘導するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含む、組成物。
  6. 被験体において固形腫瘍を処置するための組成物であって、該被験体において固形腫瘍を処置するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量および該被験体においてＡＤＣＣを誘導するための抗体を含む、組成物。
  7. 被験体において癌を処置するための組成物であって、該組成物は、ＣｐＧ免疫刺激性核酸を含み、ここで、被験体は、癌の化学治療剤または免疫治療剤を、ＣｐＧ免疫刺激性核酸と一緒にか、またはＣｐＧ免疫刺激性核酸を投与する前に投与される、組成物。
  8. 被験体において骨髄の発達を増強するための組成物であって、該被験体において骨髄の発達を増強するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含む、組成物。
  9. 前記被験体が、前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸と一緒にか、またはＣｐＧ免疫刺激性核酸を投与する前に化学治療剤に曝露される、請求項８に記載の組成物。
  10. 骨髄の発達を増強するための組成物であって、該組成物は、骨髄の発達を増強するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量を含む、組成物。
  11. 被験体において癌を処置するための組成物であって、該被験体において癌を処置するためのＣｐＧ免疫刺激性核酸の有効量、および該被験体においてＡＤＣＣを誘導するための抗体を含み、ここで、該癌はリンパ腫ではない、組成物。
  12. 前記ＣｐＧ刺激性核酸が、ＴＣＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  13. 前記ＣｐＧ刺激性核酸がＴＧＴＣＧＴＴＧＴＣＧＴＴＧＴＣＧＴＴＧＴＣＧＴＴまたはＴＣＧＴＣＧＴＴＧＴＣＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  14. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が安定化される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  15. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、少なくとも１つのリン酸バックボーン修飾により安定化される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  16. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、経口、経皮、皮下、静脈内、非経口、腹腔内または鞘内に投与される、請求項１〜９および１１のいずれか１項に記載の組成物。
  17. 前記被験体がヒトである、請求項１〜９および１１のいずれか１項に記載の組成物。
  18. 前記被験体が、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、トリ、またはサルである、請求項１〜９および１１のいずれかに記載の組成物。
  19. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、ステロール、陽イオン脂質、ヴィロソーム、またはリポソームとともに処方される、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物。
  20. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、少なくとも以下の式：
    ５’Ｘ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４３’
    を含む配列を有する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物であって、ここで、Ｃは、非メチル化Ｃであり、Ｘ１Ｘ２およびＸ３Ｘ４はヌクレオチドであり、該核酸は８〜３０ヌクレオチドの長さであり、そして以下：
    ＡＣＣＧＡＴＧＡＣＧ ＴＣＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＧＧＴＧＡＣＧＧＣＡ ＣＣＡＣＧＡＣＧＧＣ ＣＡＣＣＧＴＧＣＴＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＧＡＣＴ ＧＣＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＧＡＣＧ ＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＧＡＣＧＴＣＧＣＣＧ ＧＴＧＡＣＧＧＣＡＣ ＣＡＣＧＡＣＣＧＡＴ、
    ＡＣＣＡＣＧＡＣＣＧ ＡＴＧＡＣＧＴＣＧＣ ＣＧＧＴＧＡＣＧＧＣ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＡＣＧ ＴＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＧＣＧ ＣＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＴＣＧＧＴＧＣＡＧＧ ＧＡＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＧＡＣＧ ＴＣＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＣＧＡＴ ＣＧＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＡＴＣＧ ＡＴＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＴＣＧＣ ＧＡＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＧＣＧＣ ＧＣＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＣＧＴＡ ＣＧＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＴＣＧＧＴＧＣＧＧＣ ＣＧＡＴＧＴＣＧＣＡ ＧＧＡＣＣＣＧＧＴＣ、
    ＡＡＡＡＧＡＡＧＴＧ ＧＧＧＡＣＧＴＣＴＴ ＡＣＧＡＴＣＡＣＣＡ、
    ＡＡＡＡＧＡＡＧＴＧ ＧＧＧＡＣＧＴＣＣＴ ＡＣＧＡＴＣＡＣＣＡ、
    ＡＡＡＡＧＡＡＧＴＧ ＣＧＧＡＣＧＴＣＣＧ ＡＣＧＡＴＣＡＣＣＡ、
    ＡＡＡＡＧＡＡＧＴＧ ＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴ ＡＣＧＡＴＣＡＣＣＡ、
    ＴＧＡＣＡＧＡＣＣＧ ＡＴＧＡＣＧＴＣＧＣ ＣＧＧＴＧＧＡＣＧＧ、
    ＧＡＣＧＴＣＧＡＣＧ ＴＣＧＡＣＧＴＣＧＡ ＣＧＴＣＧＡＣＧＴＣ、
    ＣＡＣＧＴＧＣＡＣＧ ＴＧＣＡＣＧＴＧＣＡ ＣＧＴＧＣＡＣＧＴＧ、
    ＡＡＣＧＴＴＡＡＣＧ ＴＴＡＡＣＧＴＴＡＡ ＣＧＴＴＡＡＣＧＴＴ、
    ＧＣＧＣＧＣＧＣＧＣ ＧＣＧＣＧＣＧＣＧＣ ＧＣＧＣＧＣＧＣＧＣ、
    ＧＧＧＧＧＧＧＧＧＧ ＧＧＧＡＣＧＴＣＧＧ ＧＧＧＧＧＧＧＧＧＧ、
    ＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ ＡＡＧＡＣＧＴＣＡＡ ＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ、
    ＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴ ＴＴＧＡＣＧＴＣＴＴ ＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴ、
    ＣＣＣＣＣＣＣＣＣＣ ＣＣＧＡＣＧＴＣＣＣ ＣＣＣＣＣＣＣＣＣＣ、
    ＧＣＧＣＧＣＧＣＧＣ ＧＣＧＡＣＧＴＣＧＣ ＧＣＧＣＧＣＧＣＧＣ、
    ＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡ ＧＡＧＡＣＧＴＣＧＡ ＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡ、
    ＡＣＣＧＡＴＣＧＡＴ ＣＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＴＣＧ ＡＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＴＣＧＣ ＧＡＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＧＣＧＣ ＧＣＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＣＧＴＡ ＣＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＧＣＧ ＣＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＣＧＧＣ ＣＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＧＴＣＧ ＡＣＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＣＧＣＧ ＣＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＣＧＣ ＧＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＡＧＣ ＴＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＴＴＡＴ ＡＡＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＴＡＴＡ ＴＡＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＧＴＡ ＣＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＧＡＡＴ ＴＣＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＣＴＧＣ ＡＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    ＡＣＣＧＡＴＡＡＡＴ ＴＴＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧおよび、ＡＣＣＧＡＴＣＣＴＡ ＧＧＧＣＣＧＧＴＧＡ ＣＧＧＣＡＣＣＡＣＧ、
    の配列のいずれでもない、組成物。
  21. Ｘ１Ｘ２がＧｐＴ、ＧｐＧ、ＧｐＡ、ＡｐＴまたはＡｐＡであり；Ｘ３Ｘ４は、ＴｐＴまたはＣｐＴである、請求項２０に記載の組成物。
  22. Ｘ１Ｘ２がＧｐＡであり、そしてＸ３Ｘ４がＴｐＴである、請求項２０に記載の組成物。
  23. 前記核酸が、５’末端および３’末端にポリＧ配列を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  24. 前記核酸が、該核酸の３’末端に少なくとも２つのホスホロチオエート結合、および該核酸の５’末端に少なくとも５つのホスホロチオエート結合を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  25. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、８〜４２のヌクレオチドの長さである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
  26. 前記ＣｐＧ免疫刺激性核酸が、８〜３０のヌクレオチドの長さである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
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Families Citing this family (834)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL105325A (en) * 1992-04-16 1996-11-14 Minnesota Mining & Mfg Immunogen/vaccine adjuvant composition
US6498147B2 (en) * 1992-05-22 2002-12-24 The Scripps Research Institute Suppression of nuclear factor-κb dependent processes using oligonucleotides
CA2110946A1 (en) * 1992-12-09 1994-06-10 Elazar Rabbani Induction of immunocompatibility by nucleic acid
US20030109469A1 (en) * 1993-08-26 2003-06-12 Carson Dennis A. Recombinant gene expression vectors and methods for use of same to enhance the immune response of a host to an antigen
US5849719A (en) 1993-08-26 1998-12-15 The Regents Of The University Of California Method for treating allergic lung disease
US6727230B1 (en) 1994-03-25 2004-04-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6207646B1 (en) * 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6429199B1 (en) 1994-07-15 2002-08-06 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules for activating dendritic cells
US7935675B1 (en) * 1994-07-15 2011-05-03 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US20030026782A1 (en) * 1995-02-07 2003-02-06 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US5981501A (en) * 1995-06-07 1999-11-09 Inex Pharmaceuticals Corp. Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers
US7422902B1 (en) * 1995-06-07 2008-09-09 The University Of British Columbia Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
US6825174B2 (en) * 1995-06-07 2004-11-30 East Carolina University Composition, formulations & method for prevention & treatment of diseases and conditions associated with bronchoconstriction, allergy(ies) & inflammation
US7034007B1 (en) * 1995-06-07 2006-04-25 East Carolina University Low adenosine anti-sense oligonucleotide, compositions, kit & method for treatment of airway disorders associated with bronchoconstriction, lung inflammation, allergy(ies) & surfactant depletion
EP0909323B1 (en) 1996-01-04 2007-02-28 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Helicobacter pylori bacterioferritin
US20030078223A1 (en) * 1996-01-30 2003-04-24 Eyal Raz Compositions and methods for modulating an immune response
EP0879284B1 (en) * 1996-01-30 2009-07-29 The Regents of The University of California Gene expression vectors which generate an antigen specific immune response and methods of using the same
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US20040147022A1 (en) * 1996-06-06 2004-07-29 Baker Brenda F. 2'-methoxy substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US9096636B2 (en) 1996-06-06 2015-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US20050119470A1 (en) * 1996-06-06 2005-06-02 Muthiah Manoharan Conjugated oligomeric compounds and their use in gene modulation
US20040171031A1 (en) * 1996-06-06 2004-09-02 Baker Brenda F. Sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
US5898031A (en) * 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
CA2268825C (en) 1996-10-11 2006-04-18 The Regents Of The University Of California Immunostimulatory polynucleotide/immunomodulatory molecule conjugates
KR100518903B1 (ko) 1996-10-25 2005-10-06 미네소타 마이닝 앤드 매뉴팩춰링 캄파니 Ｔｈ2 매개 질병 및 관련 질병의 치료용 면역 반응 조절 화합물
EP0855184A1 (en) 1997-01-23 1998-07-29 Grayson B. Dr. Lipford Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination
NZ337054A (en) * 1997-01-30 2001-03-30 Chiron Corp Microparticles PLA and PLG with adsorbed viral antigen to stimulate immune responses particularly for intracellular viruses such as HSV-1 or HSV-2, varicella zoster virus. epstein-barr virus or cytomegalovirus (CMV)
US6884435B1 (en) * 1997-01-30 2005-04-26 Chiron Corporation Microparticles with adsorbent surfaces, methods of making same, and uses thereof
JP2001513776A (ja) * 1997-02-28 2001-09-04 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション ＬＰＳ関連障害の処置における非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸の使用
US6406705B1 (en) * 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
DK1005368T3 (da) * 1997-03-10 2010-01-04 Ottawa Hospital Res Inst Anvendelse af nukleinsyrer, der indeholder ikke-metyleret CpG dinukleotid i kombination med alun som hjælpestoffer
US6426334B1 (en) * 1997-04-30 2002-07-30 Hybridon, Inc. Oligonucleotide mediated specific cytokine induction and reduction of tumor growth in a mammal
US20030104044A1 (en) * 1997-05-14 2003-06-05 Semple Sean C. Compositions for stimulating cytokine secretion and inducing an immune response
EP1027033B1 (en) 1997-05-14 2009-07-22 The University Of British Columbia High efficiency encapsulation of nucleic acids in lipid vesicles
AU7690898A (en) 1997-05-20 1998-12-11 Ottawa Civic Hospital Loeb Research Institute Vectors and methods for immunization or therapeutic protocols
US6589940B1 (en) 1997-06-06 2003-07-08 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
EP1374894A3 (en) * 1997-06-06 2004-09-22 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
US20040006034A1 (en) * 1998-06-05 2004-01-08 Eyal Raz Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
JP4101888B2 (ja) 1997-06-06 2008-06-18 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 免疫刺激オリゴヌクレオチド、その組成物およびその使用方法
US6221882B1 (en) * 1997-07-03 2001-04-24 University Of Iowa Research Foundation Methods for inhibiting immunostimulatory DNA associated responses
AU2003203948B2 (en) * 1997-09-05 2005-12-22 The Regents Of The University Of California Use of immunostimulatory oligonucleotides for preventing or reducing antigen-stimulated, granulocyte-mediated inflammation
JP4663113B2 (ja) * 1997-09-05 2011-03-30 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 抗原刺激顆粒球媒介炎症を予防または軽減するための免疫刺激オリゴヌクレオチドの使用
ATE356630T1 (de) * 1998-04-03 2007-04-15 Univ Iowa Res Found Verfahren und produkte zur stimulierung des immunsystems mittels immunotherapeutischer oligonukleotide und zytokine
WO1999056755A1 (en) * 1998-05-06 1999-11-11 University Of Iowa Research Foundation Methods for the prevention and treatment of parasitic infections and related diseases using cpg oligonucleotides
JP2002514397A (ja) * 1998-05-14 2002-05-21 コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー ＣｐＧオリゴヌクレオチドを用いる造血調節の方法
WO1999059578A1 (en) 1998-05-19 1999-11-25 Research Development Foundation Triterpene compositions and methods for use thereof
DK1077722T3 (da) * 1998-05-22 2006-11-27 Ottawa Health Research Inst Fremgangsmåder og produkter til induktion af mukosaimmunitet
KR19990086271A (ko) * 1998-05-27 1999-12-15 손경식 면역세포의 신규한 엔도뉴클레아제 및 이를 사용한 면역보조제
US6562798B1 (en) * 1998-06-05 2003-05-13 Dynavax Technologies Corp. Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof
US20040247662A1 (en) * 1998-06-25 2004-12-09 Dow Steven W. Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
US6693086B1 (en) * 1998-06-25 2004-02-17 National Jewish Medical And Research Center Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
US20030022854A1 (en) * 1998-06-25 2003-01-30 Dow Steven W. Vaccines using nucleic acid-lipid complexes
WO2000006588A1 (en) * 1998-07-27 2000-02-10 University Of Iowa Research Foundation STEREOISOMERS OF CpG OLIGONUCLEOTIDES AND RELATED METHODS
JP4620251B2 (ja) * 1998-08-10 2011-01-26 アンチジェニックス・インコーポレイテッド Ｃｐｇおよびサポニンアジュバントの組成物並びにその方法
EP1113818B1 (en) * 1998-09-18 2006-05-17 Dynavax Technologies Corporation METHODS OF TREATING IgE-ASSOCIATED DISORDERS AND COMPOSITIONS FOR USE THEREIN
CA2344558A1 (en) * 1998-10-09 2000-04-20 Dynavax Technologies Corporation Anti hiv compositions comprising immunostimulatory polynucleotides and hiv antigens
US6867289B1 (en) * 1998-10-26 2005-03-15 Board Of Regents, The University Of Texas Systems Thio-modified aptamer synthetic methods and compositions
JP2002532547A (ja) * 1998-12-22 2002-10-02 パナシーア ファーマスーティカルズ エルエルシー 皮膚の病変の治療
US6558951B1 (en) * 1999-02-11 2003-05-06 3M Innovative Properties Company Maturation of dendritic cells with immune response modifying compounds
ATE464907T1 (de) * 1999-02-17 2010-05-15 Csl Ltd Immunogene komplexe und methoden in bezug auf diese
CA2371994C (en) * 1999-02-26 2010-09-28 Guido Grandi Enhancement of bactericidal activity of neisseria antigens with oligonucleotides containing cg motifs
DE60020677T2 (de) 1999-02-26 2006-05-04 Chiron Corp., Emeryville Mikroemulsionen mit adsorbierten makromolekülen und mikropartikeln
GB2348132B (en) * 1999-03-02 2004-08-04 Nedaa Abdul-Ghani Nasif Asthma/allergy therapy that targets t-lymphocytes and/or eosinophils
FR2790955B1 (fr) * 1999-03-19 2003-01-17 Assist Publ Hopitaux De Paris Utilisation d'oligonucleotides stabilises comme principe actif antitumoral
US6977245B2 (en) * 1999-04-12 2005-12-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
WO2000061151A2 (en) * 1999-04-12 2000-10-19 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
US6562801B1 (en) 1999-04-15 2003-05-13 Board Of Regents, The University Of Texas System PpGpp and pppGpp as immunomodulatory agents
ES2228497T3 (es) * 1999-04-19 2005-04-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Composicion adyuvante que comprende saponina y un oligonucleotido inmunoestimulante.
GB9908885D0 (en) * 1999-04-19 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Vccine
US6558670B1 (en) 1999-04-19 2003-05-06 Smithkline Beechman Biologicals S.A. Vaccine adjuvants
AU762857B2 (en) * 1999-04-20 2003-07-10 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Vaccine
US20050002958A1 (en) * 1999-06-29 2005-01-06 Smithkline Beecham Biologicals Sa Vaccines
EP1198249B1 (en) * 1999-06-29 2005-10-19 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Use of cpg as an adjuvant for hiv vaccine
US6514948B1 (en) 1999-07-02 2003-02-04 The Regents Of The University Of California Method for enhancing an immune response
FR2795963A1 (fr) * 1999-07-08 2001-01-12 Pasteur Merieux Serums Vacc Polynucleotide immunostimulant
DE19935756A1 (de) 1999-07-27 2001-02-08 Mologen Forschungs Entwicklung Kovalent geschlossenes Nukleinsäuremolekül zur Immunstimulation
US20050244434A1 (en) * 1999-08-12 2005-11-03 Cohen David I Tat-based tolerogen compositions and methods of making and using same
US20050226890A1 (en) * 1999-08-12 2005-10-13 Cohen David I Tat-based vaccine compositions and methods of making and using same
AU783745B2 (en) * 1999-08-13 2005-12-01 Hybridon, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
JP2003507341A (ja) * 1999-08-19 2003-02-25 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 免疫刺激配列およびそれを使用するための組成物を用いて免疫応答を調節するための方法およびそれを使用するための組成物
ATE376838T1 (de) * 1999-08-27 2007-11-15 Inex Pharmaceuticals Corp Zusammensetzungen zur stimulation der zytokin sekretion und zur induktion einer immunantwort
US20050249794A1 (en) * 1999-08-27 2005-11-10 Semple Sean C Compositions for stimulating cytokine secretion and inducing an immune response
KR100863630B1 (ko) * 1999-09-25 2008-10-15 유니버시티 오브 아이오와 리써치 파운데이션 면역자극성 핵산
EP1688147A1 (en) * 1999-09-27 2006-08-09 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods Related to Immunostimulatory Nucleic Acid-Induced Interferon
US6949520B1 (en) * 1999-09-27 2005-09-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
WO2001022990A2 (en) * 1999-09-27 2001-04-05 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
CN1796404A (zh) 1999-10-29 2006-07-05 启龙有限公司 奈瑟球菌的抗原性肽
US7223398B1 (en) 1999-11-15 2007-05-29 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory compositions containing an immunostimulatory sequence linked to antigen and methods of use thereof
ATE378348T1 (de) * 2000-01-14 2007-11-15 Us Health Oligodeoxynukleotide und ihre verwendung zur induktion einer immunreaktion
WO2001095935A1 (en) * 2000-01-20 2001-12-20 Ottawa Health Research Institute Immunostimulatory nucleic acids for inducing a th2 immune response
CA2398756A1 (en) * 2000-01-31 2001-08-02 Eyal Raz Immunomodulatory polynucleotides in treatment of an infection by an intracellular pathogen
US7585847B2 (en) * 2000-02-03 2009-09-08 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory nucleic acids for the treatment of asthma and allergy
US20030130217A1 (en) * 2000-02-23 2003-07-10 Eyal Raz Method for treating inflammatory bowel disease and other forms of gastrointestinal inflammation
CA2399550A1 (en) 2000-02-23 2001-08-30 The Regents Of The University Of California Method for treating inflammatory bowel disease and other forms of gastrointestinal inflammation
WO2001062092A1 (en) * 2000-02-25 2001-08-30 Thomas Jefferson University Formulations and methods for using the same to elicit an immune response
US20040131628A1 (en) * 2000-03-08 2004-07-08 Bratzler Robert L. Nucleic acids for the treatment of disorders associated with microorganisms
US20020098199A1 (en) 2000-03-10 2002-07-25 Gary Van Nest Methods of suppressing hepatitis virus infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
US20010046967A1 (en) 2000-03-10 2001-11-29 Gary Van Nest Methods of preventing and treating respiratory viral infection using immunomodulatory polynucleotide
US20030129251A1 (en) 2000-03-10 2003-07-10 Gary Van Nest Biodegradable immunomodulatory formulations and methods for use thereof
US7157437B2 (en) 2000-03-10 2007-01-02 Dynavax Technologies Corporation Methods of ameliorating symptoms of herpes infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
US7129222B2 (en) 2000-03-10 2006-10-31 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory formulations and methods for use thereof
WO2001076642A1 (en) * 2000-04-07 2001-10-18 The Regents Of The University Of California Synergistic improvements to polynucleotide vaccines
WO2001083503A2 (en) * 2000-05-01 2001-11-08 Hybridon, Inc. MODULATION OF OLIGONUCLEOTIDE CpG-MEDIATED IMMUNE STIMULATION BY POSITIONAL MODIFICATION OF NUCLEOSIDES
US6696064B2 (en) * 2000-06-20 2004-02-24 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Methods of protecting vasculature from damage by diphtheria toxin-and pseudomonas toxin-based immunotoxins during therapy
AU7013401A (en) * 2000-06-22 2002-01-02 Univ Iowa Res Found Methods for enhancing antibody-induced cell lysis and treating cancer
AU2001276831A1 (en) 2000-06-22 2002-01-02 Rxkinetix, Inc. Delivery vehicle composition and methods for delivering antigens and other drugs
ATE376059T1 (de) * 2000-06-23 2007-11-15 Wyeth Corp Assemblierung von wildtyp und chimären influenzavirus-ähnlichen partikeln (vlps)
WO2002002172A1 (en) * 2000-06-30 2002-01-10 Univ Jefferson Dna palindrome - oligoguanylic acid compositions and uses thereof
KR100917101B1 (ko) * 2000-08-04 2009-09-15 도요 보세키 가부시키가이샤 플렉시블 금속적층체 및 그 제조방법
CA2420499A1 (en) * 2000-08-25 2002-02-28 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of treatment or prevention of autoimmune diseases with cpg-containing polynucleotide
JP2005500806A (ja) * 2000-09-15 2005-01-13 コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー ＣｐＧに基づく免疫アゴニスト／免疫アンタゴニストの高スループットスクリーニングのためのプロセス
EP1322656B1 (en) * 2000-09-26 2008-01-16 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory activity of immunostimulatory oligonucleotide analogs by positional chemical changes
AU2002214127B2 (en) 2000-10-27 2007-06-07 J. Craig Venter Institute, Inc. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A and B
WO2006091720A2 (en) * 2000-12-08 2006-08-31 3M Innovative Properties Company Compositions and methods for targeted delivery of immune response modifiers
EP1350262B8 (en) * 2000-12-08 2008-08-13 Coley Pharmaceuticals GmbH Cpg-like nucleic acids and methods of use thereof
US6677347B2 (en) * 2000-12-08 2004-01-13 3M Innovative Properties Company Sulfonamido ether substituted imidazoquinolines
ATE471374T1 (de) * 2000-12-27 2010-07-15 Dynavax Tech Corp Immunomodulatorische polynukleotide und verfahren zur deren verwendung
KR20030070101A (ko) * 2001-01-12 2003-08-27 아마토 세이야쿠 가부시키가이샤 미생물 감염 방지제
US7320793B2 (en) * 2001-01-19 2008-01-22 Cytos Biotechnology Ag Molecular antigen array
DE10290185D2 (de) * 2001-01-31 2004-04-15 Mologen Forschungs Entwicklung Tumorvakzine
US20030050268A1 (en) * 2001-03-29 2003-03-13 Krieg Arthur M. Immunostimulatory nucleic acid for treatment of non-allergic inflammatory diseases
JP2004533236A (ja) * 2001-04-13 2004-11-04 ワイエス 化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓ）の表面タンパク質
US20070128229A1 (en) * 2002-04-12 2007-06-07 Wyeth Surface proteins of Streptococcus pyogenes
KR100886095B1 (ko) 2001-04-16 2009-02-27 와이어쓰 홀딩스 코포레이션 폴리펩티드 항원을 암호화하는 신규한 스트렙토코쿠스 뉴모니애 개방형 판독 프레임 및 이를 포함하는 조성물
US7034140B2 (en) * 2001-04-24 2006-04-25 E.I. Du Pont De Nemours And Company Genes involved in isoprenoid compound production
EP1390494A2 (en) 2001-05-21 2004-02-25 Intercell AG Method for stabilising of nucleic acids
US6818787B2 (en) * 2001-06-11 2004-11-16 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US7785610B2 (en) * 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
US20030199466A1 (en) 2001-06-21 2003-10-23 Fearon Karen L. Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same - ll
WO2003002065A2 (en) * 2001-06-29 2003-01-09 Chiron Corporation Hcv e1e2 vaccine compositions
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
US7666674B2 (en) 2001-07-27 2010-02-23 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of sterically stabilized cationic liposomes to efficiently deliver CPG oligonucleotides in vivo
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
WO2003012061A2 (en) * 2001-08-01 2003-02-13 Coley Pharmaceutical Gmbh Methods and compositions relating to plasmacytoid dendritic cells
EP1501359A4 (en) * 2001-08-03 2007-04-18 Celldex Therapeutics Inc COMPOSITIONS CONTAINING IMMUNOSTIMULATING OLIGONUCLEOTIDES AND USES THEREOF FOR AMPLIFYING IMMUNOTHERAPIES INDIRECTLY DISENGAGED BY THE FC RECEPTOR
US20030133988A1 (en) * 2001-08-07 2003-07-17 Fearon Karen L. Immunomodulatory compositions, formulations, and methods for use thereof
WO2003020884A2 (en) * 2001-08-14 2003-03-13 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Method for rapid generation of mature dendritic cells
KR100991644B1 (ko) * 2001-08-17 2010-11-02 콜리 파마슈티칼 게엠베하 활성이 개량된 조합 모티프 면역자극성 올리고뉴클레오티드
CA2457903C (en) 2001-08-24 2018-04-17 University Of Victoria Innovation And Development Corporation Proaerolysin containing protease activation sequences and methods of use for treatment of prostate cancer
EP1427445A4 (en) * 2001-08-30 2006-09-06 3M Innovative Properties Co METHOD FOR MATURIZING PLASMACYTIDES DENDRITIC CELLS USING IMMUNE RESPONSE MODIFYING MOLECULES
JP2005501917A (ja) * 2001-09-07 2005-01-20 ザ トラスティーズ オブ ボストン ユニバーシティ 免疫複合体関連疾患を処置するための方法および組成物
ES2335979T3 (es) 2001-09-14 2010-04-07 Cytos Biotechnology Ag Empaquetamiento de cpg inmunoestimuladores en particulas similares a virus: metodo de preparacion y su uso.
AU2002347404A1 (en) * 2001-09-14 2003-04-01 Cytos Biotechnology Ag In vivo activation of antigen presenting cells for enhancement of immune responses induced by virus like particles
AU2002353783A1 (en) 2001-09-24 2003-04-07 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of SUPPRESSORS OF CpG OLIGONUCLEOTIDES AND METHODS OF USE
US20030119774A1 (en) * 2001-09-25 2003-06-26 Marianna Foldvari Compositions and methods for stimulating an immune response
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
IL160837A0 (en) * 2001-10-05 2004-08-31 Coley Pharm Gmbh Toll-like receptor 3 signaling agonists and antagonists
DK1455593T3 (da) 2001-10-06 2013-08-26 Merial Ltd Fremgangsmåder og sammensætninger til fremme af vækst og medfødt immunitet hos unge dyr
CN100438908C (zh) * 2001-10-06 2008-12-03 梅瑞尔有限公司 CpG制剂及相关方法
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
CA2462203A1 (en) * 2001-10-12 2003-11-20 University Of Iowa Research Foundation Methods and products for enhancing immune responses using imidazoquinoline compounds
US7276489B2 (en) * 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
JP2005516897A (ja) * 2001-11-07 2005-06-09 イネックス ファーマシューティカルズ コーポレイション 改善された粘膜のワクチン及びその使用方法
WO2003039592A2 (de) * 2001-11-09 2003-05-15 Medigene Aktiengesellschaft Zelluläre impfstoffe mit adjuvanzien
US7179798B2 (en) * 2001-11-16 2007-02-20 Russell R. Roby Methods and compositions for the treatment of pain and other hormone-allergy-related symptoms using dilute hormone solutions
PT1719511E (pt) * 2001-11-16 2009-03-06 Coley Pharm Group Inc N-[4-(4-amino-2-etil-1h-imidazo[4,5-c]quinolina-1- -il)-butil]-metano-sulfonamida, uma composição farmacêutica que a contém e sua utilização
US20050250716A1 (en) * 2001-12-07 2005-11-10 Intercell Ag Immunostimulatory oligodeoxynucleotides
US8466116B2 (en) 2001-12-20 2013-06-18 The Unites States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of CpG oligodeoxynucleotides to induce epithelial cell growth
AU2002366710A1 (en) * 2001-12-20 2003-07-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of USE OF CpG OLIGODEOXYNUCLEOTIDES TO INDUCE ANGIOGENESIS
CA2365732A1 (en) * 2001-12-20 2003-06-20 Ibm Canada Limited-Ibm Canada Limitee Testing measurements
EP1467755A1 (en) * 2001-12-21 2004-10-20 Antigenics Inc. Compositions comprising immunoreactive reagents and saponins, and methods of use thereof
WO2003066649A1 (en) * 2002-02-04 2003-08-14 Biomira Inc. Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides
US8088388B2 (en) * 2002-02-14 2012-01-03 United Biomedical, Inc. Stabilized synthetic immunogen delivery system
EP2572707A3 (en) 2002-02-20 2013-11-06 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
US7030129B2 (en) * 2002-02-22 2006-04-18 3M Innovative Properties Company Method of reducing and treating UVB-induced immunosuppression
US6923958B2 (en) * 2002-03-02 2005-08-02 The Scripps Research Institute DNA vaccines encoding CEA and a CD40 ligand and methods of use thereof
EP1490395A4 (en) * 2002-03-15 2006-06-21 Wyeth Corp MUTANTS OF NON-TYPABLE HAEMOPHILUS INFLUENZAE P4 PROTEIN WITH REDUCED ENZYMATIC ACTIVITY
EP2258712A3 (en) 2002-03-15 2011-05-04 Multicell Immunotherapeutics, Inc. Compositions and Methods to Initiate or Enhance Antibody and Major-histocompatibility Class I or Class II-restricted T Cell Responses by Using Immunomodulatory, Non-coding RNA Motifs
AU2003218181A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-29 Multicell Immunotherapeutics, Inc. Immunostimulatory double stranded RNA and methods of inducing, enhancing or modulating the immune response
US8153141B2 (en) 2002-04-04 2012-04-10 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory G, U-containing oligoribonucleotides
US20030224013A1 (en) * 2002-04-19 2003-12-04 Cole Garry T. Methods for protection against Coccidioides spp. infection using Coccidioides spp. urea amidohydrolase (Ure) protein
US20040009943A1 (en) * 2002-05-10 2004-01-15 Inex Pharmaceuticals Corporation Pathogen vaccines and methods for using the same
US20040009944A1 (en) * 2002-05-10 2004-01-15 Inex Pharmaceuticals Corporation Methylated immunostimulatory oligonucleotides and methods of using the same
US20040013649A1 (en) * 2002-05-10 2004-01-22 Inex Pharmaceuticals Corporation Cancer vaccines and methods of using the same
US9045727B2 (en) 2002-05-17 2015-06-02 Emory University Virus-like particles, methods of preparation, and immunogenic compositions
WO2004042001A2 (en) * 2002-05-17 2004-05-21 Emory University Virus-like particles, methods of preparation, and immonogenic compositions
KR100456681B1 (ko) * 2002-05-22 2004-11-10 주식회사 대웅 박테리아의 염색체 ｄｎａ 파쇄물과 비독성리포폴리사카라이드를 포함하는 면역강화 및 조절 조성물
CA2388049A1 (en) 2002-05-30 2003-11-30 Immunotech S.A. Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof
US20040009949A1 (en) * 2002-06-05 2004-01-15 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Method for treating autoimmune or inflammatory diseases with combinations of inhibitory oligonucleotides and small molecule antagonists of immunostimulatory CpG nucleic acids
EP1513552B1 (en) * 2002-06-20 2010-12-01 Cytos Biotechnology AG Packaged virus-like particles in combination with cpg for use as adjuvants with allergens : method of preparation and use
US7807803B2 (en) * 2002-07-03 2010-10-05 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7569553B2 (en) * 2002-07-03 2009-08-04 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7576066B2 (en) * 2002-07-03 2009-08-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US20040053880A1 (en) * 2002-07-03 2004-03-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7605138B2 (en) * 2002-07-03 2009-10-20 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
EP1551221A4 (en) * 2002-07-03 2007-08-01 Coley Pharm Group Inc NUCLEIC ACID COMPOSITIONS FOR STIMULATING IMMUNE RESPONSES
AU2003255969A1 (en) * 2002-07-17 2004-02-02 Coley Pharmaceutical Gmbh Use of cpg nucleic acids in prion-disease
US20060270620A1 (en) * 2002-07-23 2006-11-30 University Of South Florida Method of Enhancing Therapeutic Effect of Nucleic Acids
JP2005533855A (ja) 2002-07-24 2005-11-10 インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト 病原性ウイルスからの別のリーディングフレームによりコードされる抗原
EP1575504A4 (en) 2002-08-01 2009-11-04 Us Gov Health & Human Serv METHOD FOR THE TREATMENT OF INFLAMMATORY ARTHROPATHIES WITH SUPPRESSORS OF THE CPG OLIGONUCLEOTIDES
CA2495570C (en) 2002-08-15 2012-12-04 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory compositions and methods of stimulating an immune response
AR040996A1 (es) 2002-08-19 2005-04-27 Coley Pharm Group Inc Acidos nucleicos inmunoestimuladores
US7785608B2 (en) * 2002-08-30 2010-08-31 Wyeth Holdings Corporation Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease
GB0220194D0 (en) 2002-08-30 2002-10-09 Chiron Spa Improved vesicles
US7595303B1 (en) * 2002-09-05 2009-09-29 University Of South Florida Genetic adjuvants for immunotherapy
CN1694959B (zh) * 2002-09-13 2013-09-18 雷普利瑟公司 非序列互补的抗病毒寡核苷酸
US20050196382A1 (en) * 2002-09-13 2005-09-08 Replicor, Inc. Antiviral oligonucleotides targeting viral families
JP2006504687A (ja) 2002-09-13 2006-02-09 インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト Ｃ型肝炎ウイルスペプチドの単離方法
US8263091B2 (en) * 2002-09-18 2012-09-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of treating and preventing infections in immunocompromised subjects with immunostimulatory CpG oligonucleotides
US7301554B2 (en) * 2002-09-20 2007-11-27 Ricoh Company, Ltd. Light scanning device, scanning line adjusting method, scanning line adjusting control method, image forming apparatus, and image forming method
AU2003268737A1 (en) * 2002-10-02 2004-04-23 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Novel method of constructing monoclonal antibody
US8043622B2 (en) 2002-10-08 2011-10-25 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of treating inflammatory lung disease with suppressors of CpG oligonucleotides
BRPI0315228A8 (pt) 2002-10-11 2018-04-03 Chiron Srl Vacinas de polipeptídeo para ampla proteção contra linhagens meningocócicas hipervirulentas
CA2503457A1 (en) * 2002-10-25 2004-05-06 University Of Connecticut Health Center Apparatus and method for immunotherapy of a cancer through controlled cell lysis
EP2241325B1 (en) * 2002-10-29 2012-02-08 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Use of CPG oligonucleotides in the treatment of hepatitis C virus infection
EP1572122A4 (en) * 2002-11-01 2008-04-09 Us Gov Health & Human Serv METHOD FOR PREVENTING INFECTIONS FROM BIOLOGICAL TERRORISM AGENTS WITH IMMUNOSTIMULATORY CPG OLIGONUCLEOTIDES
WO2004044132A2 (en) * 2002-11-05 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modified oligonucleotides for use in rna interference
AU2003288660A1 (en) 2002-11-15 2004-06-15 Chiron Srl Unexpected surface proteins in neisseria meningitidis
US10100316B2 (en) * 2002-11-21 2018-10-16 Archemix Llc Aptamers comprising CPG motifs
US20050124565A1 (en) * 2002-11-21 2005-06-09 Diener John L. Stabilized aptamers to platelet derived growth factor and their use as oncology therapeutics
US8039443B2 (en) * 2002-11-21 2011-10-18 Archemix Corporation Stabilized aptamers to platelet derived growth factor and their use as oncology therapeutics
US8853376B2 (en) 2002-11-21 2014-10-07 Archemix Llc Stabilized aptamers to platelet derived growth factor and their use as oncology therapeutics
EP2329827A3 (en) * 2002-11-21 2011-07-13 Bayhill Therapeutics, Inc. Methods and immune modulatory nucleic acid compositions for preventing and treating disease
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
AU2003300831A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-30 Hawaii Biotech, Inc. Recombinant vaccine against flavivirus infection
AU2003287316A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-30 3M Innovative Properties Company Assays relating to toll-like receptor activity
AU2003287324A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-30 3M Innovative Properties Company Gene expression systems and recombinant cell lines
JP2006512927A (ja) * 2002-12-11 2006-04-20 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド ５’ｃｐｇ核酸およびその使用方法
US8158768B2 (en) 2002-12-23 2012-04-17 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory sequence oligonucleotides and methods of using the same
DE60329223D1 (de) * 2002-12-23 2009-10-22 Dynavax Tech Corp Oligonukleotide mit einer immunsystemstimulierenden sequenz und verfahren zu deren anwendung
JP2006516099A (ja) * 2002-12-23 2006-06-22 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 分枝状の免疫調節化合物及び該化合物の使用方法
US8034378B2 (en) 2002-12-27 2011-10-11 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc Immunogenic compositions containing phospholipid
EP2572715A1 (en) 2002-12-30 2013-03-27 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory Combinations
EP2172213B1 (en) 2003-01-30 2013-04-03 Novartis AG Injectable vaccines against multiple meningococcal serogroups
US7354907B2 (en) * 2003-02-07 2008-04-08 Idera Pharmaceuticals, Inc. Short immunomodulatory oligonucleotides
US7375180B2 (en) * 2003-02-13 2008-05-20 3M Innovative Properties Company Methods and compositions related to IRM compounds and Toll-like receptor 8
WO2004074454A2 (en) 2003-02-20 2004-09-02 University Of Connecticut Health Center Methods and compositions for the treatment of cancer and infectious disease using alpha (2) macroglobulin-antigenic molecule complexes
GB2398783A (en) 2003-02-26 2004-09-01 Antonio Lanzavecchia A method for producing immortalised human B memory lymphocytes
EP1599726A4 (en) * 2003-02-27 2009-07-22 3M Innovative Properties Co SELECTIVE MODULATION OF TLR-MEDIATED BIOLOGICAL ACTIVITY
EP1601365A4 (en) 2003-03-04 2009-11-11 3M Innovative Properties Co PROPHYLACTIC TREATMENT OF UV-INDUCED EPIDERMAL NEOPLASIA
CN100439386C (zh) * 2003-03-05 2008-12-03 长春华普生物技术有限公司 增强蛋白类疫苗免疫效果的含CpG单链脱氧寡核苷酸
US7179253B2 (en) 2003-03-13 2007-02-20 3M Innovative Properties Company Method of tattoo removal
CA2518282C (en) * 2003-03-13 2012-11-06 3M Innovative Properties Company Methods of improving skin quality
CA2517673C (en) 2003-03-24 2013-08-13 Intercell Ag Improved vaccines for preventing viral infection
US20040192585A1 (en) 2003-03-25 2004-09-30 3M Innovative Properties Company Treatment for basal cell carcinoma
CA2520181A1 (en) * 2003-03-26 2004-10-14 Astral Inc. Selected rna motifs to include cell death and/or apoptosis
US20060210588A1 (en) * 2003-03-26 2006-09-21 Cytos Biotechnology Ag Hiv-peptide-carrier-conjugates
AU2004224762B2 (en) * 2003-03-26 2009-12-24 Kuros Us Llc Packaging of immunostimulatory oligonucleotides into virus-like particles: method of preparation and use
US7537767B2 (en) 2003-03-26 2009-05-26 Cytis Biotechnology Ag Melan-A- carrier conjugates
AU2004226605A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-14 Coley Pharmaceutical Group, Ltd. Immunostimulatory nucleic acid oil-in-water formulations for topical application
WO2004091500A2 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds
NZ543467A (en) 2003-04-10 2008-07-31 Novartis Vaccines & Diagnostic The severe acute respiratory syndrome coronavirus
US20040265351A1 (en) * 2003-04-10 2004-12-30 Miller Richard L. Methods and compositions for enhancing immune response
AU2004232848A1 (en) 2003-04-21 2004-11-04 Archemix Corp. Stabilized aptamers to platelet derived growth factor and their use as oncology therapeutics
JP4673217B2 (ja) * 2003-04-23 2011-04-20 由紀夫 佐藤 メチル化ＣｐＧポリヌクレオチド
US20050250106A1 (en) * 2003-04-24 2005-11-10 David Epstein Gene knock-down by intracellular expression of aptamers
RU2364419C2 (ru) * 2003-04-25 2009-08-20 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс, Инк. Композиции, содержащие катионные микрочастицы и днк hcv е1е2, и способы их применения
WO2004096144A2 (en) * 2003-04-28 2004-11-11 3M Innovative Properties Company Compositions and methods for induction of opioid receptors
CN1798563A (zh) * 2003-05-15 2006-07-05 独立行政法人科学技术振兴机构 免疫刺激剂
US8080642B2 (en) 2003-05-16 2011-12-20 Vical Incorporated Severe acute respiratory syndrome DNA compositions and methods of use
EP2179729B1 (en) 2003-06-02 2016-07-20 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic compositions based on microparticles comprising adsorbed toxoid and a polysaccharide-containing antigen
AU2004252091B2 (en) 2003-06-05 2010-06-10 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Poly-gamma-glutamic conjugates for eliciting immune responses directed against bacilli
US8008267B2 (en) * 2003-06-11 2011-08-30 Idera Pharmaceuticals, Inc. Stabilized immunomodulatory oligonucleotides
BRPI0411514A (pt) * 2003-06-20 2006-08-01 Coley Pharm Gmbh antagonistas de receptor toll-like de molécula pequena
US20060251623A1 (en) * 2003-07-10 2006-11-09 Caytos Biotechnology Ag Packaged virus-like particles
US20050013812A1 (en) * 2003-07-14 2005-01-20 Dow Steven W. Vaccines using pattern recognition receptor-ligand:lipid complexes
WO2005011629A1 (en) * 2003-07-31 2005-02-10 3M Innovative Properties Company Bioactive compositions comprising triazines
JP2007501252A (ja) * 2003-08-05 2007-01-25 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 免疫応答調整剤を含有する製剤
CA2535117A1 (en) * 2003-08-12 2005-03-03 3M Innovative Properties Company Oxime substituted imidazo-containing compounds
US20050065136A1 (en) * 2003-08-13 2005-03-24 Roby Russell R. Methods and compositions for the treatment of infertility using dilute hormone solutions
US20060035242A1 (en) 2004-08-13 2006-02-16 Michelitsch Melissa D Prion-specific peptide reagents
US8071652B2 (en) * 2003-08-21 2011-12-06 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Method of treating irritable bowel syndrome
AU2004268616B2 (en) * 2003-08-25 2010-10-07 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds
WO2005018574A2 (en) * 2003-08-25 2005-03-03 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory combinations and treatments
EP1658076B1 (en) * 2003-08-27 2013-03-06 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted imidazoquinolines
CA2536578A1 (en) * 2003-09-02 2005-03-10 3M Innovative Properties Company Methods related to the treatment of mucosal associated conditions
CA2537763A1 (en) * 2003-09-05 2005-03-17 3M Innovative Properties Company Treatment for cd5+ b cell lymphoma
CA2538794C (en) 2003-09-12 2016-04-19 Antigenics, Inc. Vaccine for treatment and prevention of herpes simplex virus infection
JP4989225B2 (ja) * 2003-09-25 2012-08-01 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 核酸親油性接合体
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
WO2005032583A2 (en) 2003-10-02 2005-04-14 Chiron Srl Liquid vaccines for multiple meningococcal serogroups
EP1673087B1 (en) * 2003-10-03 2015-05-13 3M Innovative Properties Company Alkoxy substituted imidazoquinolines
US7544697B2 (en) * 2003-10-03 2009-06-09 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and analogs thereof
US20090075980A1 (en) * 2003-10-03 2009-03-19 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and Analogs Thereof
CA2542099A1 (en) * 2003-10-11 2005-04-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Methods and compositions for enhancing innate immunity and antibody dependent cellular cytotoxicity
GB0323965D0 (en) * 2003-10-13 2003-11-19 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic compositions
SG123799A1 (en) * 2003-10-30 2006-07-26 Coley Pharm Gmbh C-class oligonucleotide analogs with enchanced immunostimulatory potency
US20050239733A1 (en) * 2003-10-31 2005-10-27 Coley Pharmaceutical Gmbh Sequence requirements for inhibitory oligonucleotides
CA2543685A1 (en) * 2003-10-31 2005-05-12 3M Innovative Properties Company Neutrophil activation by immune response modifier compounds
US20050100983A1 (en) * 2003-11-06 2005-05-12 Coley Pharmaceutical Gmbh Cell-free methods for identifying compounds that affect toll-like receptor 9 (TLR9) signaling
US7897767B2 (en) 2003-11-14 2011-03-01 3M Innovative Properties Company Oxime substituted imidazoquinolines
US8598192B2 (en) * 2003-11-14 2013-12-03 3M Innovative Properties Company Hydroxylamine substituted imidazoquinolines
RU2409576C2 (ru) * 2003-11-25 2011-01-20 3М Инновейтив Пропертиз Компани Системы, содержащие имидазольное кольцо с заместителями, и способы их получения
US20050277127A1 (en) * 2003-11-26 2005-12-15 Epitomics, Inc. High-throughput method of DNA immunogen preparation and immunization
US20050287118A1 (en) * 2003-11-26 2005-12-29 Epitomics, Inc. Bacterial plasmid with immunological adjuvant function and uses thereof
WO2005055932A2 (en) * 2003-12-02 2005-06-23 3M Innovative Properties Company Therapeutic combinations and methods including irm compounds
US20050226878A1 (en) * 2003-12-02 2005-10-13 3M Innovative Properties Company Therapeutic combinations and methods including IRM compounds
US9090673B2 (en) * 2003-12-12 2015-07-28 City Of Hope Synthetic conjugate of CpG DNA and T-help/CTL peptide
SG149013A1 (en) 2003-12-17 2009-01-29 Wyeth Corp Immunogenic peptide carrier conjugates and methods of producing same
EP2479184A3 (en) 2003-12-17 2013-09-04 Janssen Alzheimer Immunotherapy Beta immunogenic peptide carrier conjugates and methods of producing the same
JP4817599B2 (ja) * 2003-12-25 2011-11-16 独立行政法人科学技術振興機構 免疫活性増強剤とこれを用いた免疫活性の増強方法
EP1701955A1 (en) * 2003-12-29 2006-09-20 3M Innovative Properties Company Arylalkenyl and arylalkynyl substituted imidazoquinolines
US8735421B2 (en) * 2003-12-30 2014-05-27 3M Innovative Properties Company Imidazoquinolinyl sulfonamides
WO2005067500A2 (en) * 2003-12-30 2005-07-28 3M Innovative Properties Company Enhancement of immune responses
KR100558851B1 (ko) * 2004-01-08 2006-03-10 학교법인연세대학교 면역조절능력이 증가된 ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드변형체
US7973016B2 (en) * 2004-01-23 2011-07-05 Joslin Diebetes Center Methods of treating, reducing, or preventing autoimmune conditions
US20050181035A1 (en) * 2004-02-17 2005-08-18 Dow Steven W. Systemic immune activation method using non CpG nucleic acids
US20050256073A1 (en) * 2004-02-19 2005-11-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides
DK1716234T3 (da) * 2004-02-20 2014-01-20 Mologen Ag Substitueret, ikke-kodende nukleinsyremolekyle til terapeutisk og profylaktisk immunstimulering i mennesker og højerestående dyr
US20060193821A1 (en) * 2004-03-05 2006-08-31 Diener John L Aptamers to the human IL-12 cytokine family and their use as autoimmune disease therapeutics
EP1722815A1 (en) 2004-03-09 2006-11-22 Chiron Corporation Influenza virus vaccines
US8569474B2 (en) 2004-03-09 2013-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand
US7927580B2 (en) * 2004-03-16 2011-04-19 Nanirx, Inc. Tat-based immunomodulatory compositions and methods of their discovery and use
US7820175B2 (en) 2004-03-19 2010-10-26 Herbal Spring, Llc Herbal therapy for the treatment of food allergy
CA2559863A1 (en) * 2004-03-24 2005-10-13 3M Innovative Properties Company Amide substituted imidazopyridines, imidazoquinolines, and imidazonaphthyridines
TWI235440B (en) * 2004-03-31 2005-07-01 Advanced Semiconductor Eng Method for making leadless semiconductor package
JP2007531746A (ja) * 2004-04-02 2007-11-08 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド Ｉｌ−１０応答を誘導するための免疫活性化核酸
US20050260755A1 (en) * 2004-04-06 2005-11-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sequential delivery of oligomeric compounds
WO2005105106A2 (en) * 2004-04-21 2005-11-10 Roby Russell R Hormone treatment of macular degeneration
WO2005105107A2 (en) * 2004-04-21 2005-11-10 Roby Russell R Hormone treatment of multiple sclerosis
US7579450B2 (en) * 2004-04-26 2009-08-25 Archemix Corp. Nucleic acid ligands specific to immunoglobulin E and their use as atopic disease therapeutics
CN101426524A (zh) * 2004-04-28 2009-05-06 3M创新有限公司 用于粘膜接种疫苗的组合物和方法
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
PL1740217T3 (pl) 2004-04-30 2012-03-30 Novartis Ag Szczepienie koniugatem meningokokowym
JP5014122B2 (ja) * 2004-05-06 2012-08-29 アメリカ合衆国 ブドウ膜炎の治療のための方法および組成物
GB0410220D0 (en) 2004-05-07 2004-06-09 Kirkham Lea Ann Mutant pneumolysin proteins
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
CN1296378C (zh) * 2004-05-17 2007-01-24 中国人民解放军第三军医大学 高免疫活性 CpG－S ODN 和拮抗 CpG－S ODN 作用的 CpG－N ODN 的基因序列及其应用
JP5331340B2 (ja) 2004-05-18 2013-10-30 バイカル インコーポレイテッド インフルエンザウィルスワクチン組成物、及びその使用方法
JP4896021B2 (ja) 2004-05-21 2012-03-14 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド 呼吸器系病原体ワクチンのためのアルファウイルスベクター
AU2005247910A1 (en) 2004-05-21 2005-12-08 Wyeth Altered fibronectin-binding protein of Staphylococcus aureus
ES2560449T3 (es) 2004-05-28 2016-02-19 Oryxe Una mezcla para administración transdérmica de compuestos de peso molecular bajo y alto
US20050267145A1 (en) * 2004-05-28 2005-12-01 Merrill Bryon A Treatment for lung cancer
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
AU2005252663B2 (en) * 2004-06-03 2011-07-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation
WO2006080946A2 (en) * 2004-06-08 2006-08-03 Coley Pharmaceutical Gmbh Abasic oligonucleotide as carrier platform for antigen and immunostimulatory agonist and antagonist
US8017779B2 (en) * 2004-06-15 2011-09-13 3M Innovative Properties Company Nitrogen containing heterocyclyl substituted imidazoquinolines and imidazonaphthyridines
TW200613554A (en) 2004-06-17 2006-05-01 Wyeth Corp Plasmid having three complete transcriptional units and immunogenic compositions for inducing an immune response to HIV
WO2006009832A1 (en) * 2004-06-18 2006-01-26 3M Innovative Properties Company Substituted imidazo ring systems and methods
US7897609B2 (en) * 2004-06-18 2011-03-01 3M Innovative Properties Company Aryl substituted imidazonaphthyridines
US8026366B2 (en) * 2004-06-18 2011-09-27 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted thiazoloquinolines and thiazolonaphthyridines
WO2006065280A2 (en) * 2004-06-18 2006-06-22 3M Innovative Properties Company Isoxazole, dihydroisoxazole, and oxadiazole substituted imidazo ring compounds and methods
US7482158B2 (en) * 2004-07-01 2009-01-27 Mathison Brian H Composite polynucleic acid therapeutics
EP2484374A1 (en) 2004-07-18 2012-08-08 CSL Limited Immuno stimulating complex and oligonucleotide formulations for inducing enhanced interferon-gamma responses
US20060025390A1 (en) * 2004-07-28 2006-02-02 Roby Russell R Treatment of hormone allergy and related symptoms and disorders
US20060165716A1 (en) 2004-07-29 2006-07-27 Telford John L Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
ES2381557T3 (es) 2004-08-03 2012-05-29 Innate Pharma Métodos terapéuticos y de diagnóstico y composiciones para determinar 4IG-B7-H3 y su receptor homólogo en las células NK
EP1786450A4 (en) * 2004-08-27 2009-11-11 3M Innovative Properties Co HIV IMMUNOSTIMATORY COMPOSITIONS
WO2006026760A2 (en) * 2004-09-02 2006-03-09 3M Innovative Properties Company 1-amino imidazo-containing compounds and methods
US7884086B2 (en) * 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
EP2149583B1 (en) 2004-09-24 2015-10-28 Novartis AG Modified VP1-capsid protein of parvovirus B19
JP2008000001A (ja) * 2004-09-30 2008-01-10 Osaka Univ 免疫刺激オリゴヌクレオチドおよびその医薬用途
KR101346989B1 (ko) 2004-10-06 2014-02-06 메디뮨 엘엘씨 냉장 온도 안정성 인플루엔자 백신 조성물
WO2006042156A2 (en) 2004-10-08 2006-04-20 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA AS represneted by THE SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES, CENTERS FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION Modulation of replicative fitness by using less frequently used synonymous codons
WO2006042254A2 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 3M Innovative Properties Company Adjuvant for dna vaccines
MY159370A (en) * 2004-10-20 2016-12-30 Coley Pharm Group Inc Semi-soft-class immunostimulatory oligonucleotides
AU2005333603A1 (en) 2004-10-21 2007-01-04 Wyeth Immunogenic compositions of Staphylococcus epidermidis polypeptide antigens
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
EP2436391A3 (en) 2004-11-02 2012-07-04 Archemix LLC Stabilized aptamers to platelet derived growth factor and their use as oncology therapeutics
WO2006065549A2 (en) 2004-12-03 2006-06-22 Medical University Of Ohio Attenuated vaccine useful for immunizations against coccidioides spp. infections
US20110070575A1 (en) * 2004-12-08 2011-03-24 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunomodulatory Compositions, Combinations and Methods
WO2006065751A2 (en) * 2004-12-13 2006-06-22 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cpg oligonucleotide prodrugs, compositions thereof and associated therapeutic methods
WO2006073760A2 (en) 2004-12-17 2006-07-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Regulation of mink in thymocytes and t lymphocytes
AU2005321940B2 (en) * 2004-12-29 2012-04-19 Mannkind Corporation Methods to trigger, maintain and manipulate immune responses by targeted administration of biological response modifiers into lymphoid organs
AU2005322898B2 (en) * 2004-12-30 2011-11-24 3M Innovative Properties Company Chiral fused (1,2)imidazo(4,5-c) ring compounds
JP5313502B2 (ja) 2004-12-30 2013-10-09 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 置換キラル縮合［１，２］イミダゾ［４，５−ｃ］環状化合物
US8461174B2 (en) * 2004-12-30 2013-06-11 3M Innovative Properties Company Treatment for cutaneous metastases
CA2590974C (en) 2005-01-27 2017-10-03 Children's Hospital & Research Center At Oakland Gna1870-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by neisseria meningitidis
WO2006080596A1 (en) * 2005-01-28 2006-08-03 Hyung-Joo Kwon Oligonucleotides derived from mycobacterium for stimulating immune function, treating immune-related diseases, atopic dermatitis and/or protecting normal immune cell
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
US9248127B2 (en) * 2005-02-04 2016-02-02 3M Innovative Properties Company Aqueous gel formulations containing immune response modifiers
US7968563B2 (en) 2005-02-11 2011-06-28 3M Innovative Properties Company Oxime and hydroxylamine substituted imidazo[4,5-c] ring compounds and methods
WO2006091517A2 (en) 2005-02-18 2006-08-31 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Immunogens from uropathogenic escherichia coli
PL2351772T3 (pl) 2005-02-18 2017-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Białka i kwasy nukleinowe z bakterii Escherichia coli związanej z zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych/posocznicą
US20080009455A9 (en) * 2005-02-24 2008-01-10 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory oligonucleotides
CA2600036A1 (en) 2005-03-04 2006-09-14 Dynavax Technologies Corporation Vaccines comprising oligonucleotides having immunostimulatory sequences (iss) wherein the iss are conjugated to antigens and stabilized by buffer conditions and further excipients
US8101345B1 (en) 2005-03-25 2012-01-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Proinflammatory nucleic acids
US7943636B2 (en) 2005-04-01 2011-05-17 3M Innovative Properties Company 1-substituted pyrazolo (3,4-C) ring compounds as modulators of cytokine biosynthesis for the treatment of viral infections and neoplastic diseases
AU2006232377A1 (en) 2005-04-01 2006-10-12 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridine-1,4-diamines and analogs thereof
EP2425851A1 (en) 2005-04-08 2012-03-07 Wyeth LLC Multivalent Pneumococcal Polysaccharide-Protein Conjugate Composition
WO2006110656A2 (en) * 2005-04-08 2006-10-19 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of viral infections and other medical disorders
US7709001B2 (en) 2005-04-08 2010-05-04 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
US8642577B2 (en) * 2005-04-08 2014-02-04 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of poxvirus infections
SG161260A1 (en) * 2005-04-08 2010-05-27 Coley Pharm Group Inc Methods for treating infectious disease exacerbated asthma
AU2006235507B2 (en) 2005-04-12 2012-08-30 Duke University Method of inducing neutralizing antibodies to human immunodeficiency virus
JP2008536515A (ja) 2005-04-18 2008-09-11 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド ワクチンの調製のためのｂ型肝炎ウイルス表面抗原の発現
CA2605808A1 (en) * 2005-04-25 2006-11-02 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory compositions
AU2006241149A1 (en) * 2005-04-26 2006-11-02 Coley Pharmaceutical Gmbh Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity
US8916161B2 (en) 2005-06-14 2014-12-23 Sophiris Bio Inc. Method of treating or preventing benign prostatic hyperplasia using modified pore-forming proteins
CA2613442C (en) 2005-06-30 2016-08-23 Archemix Corp. Materials and methods for the generation of fully 2'-modified nucleic acid transcripts
US8101385B2 (en) 2005-06-30 2012-01-24 Archemix Corp. Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides
PL2269622T3 (pl) 2005-07-01 2014-05-30 Index Pharmaceuticals Ab Sposób do modulowania wrażliwości na steroidy
PT2179737E (pt) 2005-07-01 2013-12-05 Index Pharmaceuticals Ab Método para modular a capacidade de resposta aos esteróides
JP2009500412A (ja) * 2005-07-07 2009-01-08 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 癌の処置のための、抗ｃｔｌａ−４抗体とｃｐｇモチーフ含有合成オリゴデオキシヌクレオチドとの組み合わせ治療
WO2007008904A2 (en) 2005-07-08 2007-01-18 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Targeting poly-gamma-glutamic acid to treat staphylococcus epidermidis and related infections
EP2614709A1 (en) 2005-07-18 2013-07-17 Novartis AG Small animal model for HCV replication
WO2007012285A1 (fr) * 2005-07-28 2007-02-01 Changchun Huapu Biotechnology Co., Ltd. Desoxynucleosides monocatenaires resistant aux infections virales
CA2622679A1 (en) * 2005-09-16 2007-08-09 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory single-stranded ribonucleic acid with phosphodiester backbone
EA013375B1 (ru) * 2005-09-16 2010-04-30 Коли Фармасьютикал Гмбх МОДУЛЯЦИЯ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ КОРОТКОЙ ИНТЕРФЕРИРУЮЩЕЙ РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (siРНК) С ПОМОЩЬЮ МОДИФИКАЦИИ НУКЛЕОТИДОВ
WO2007041190A2 (en) * 2005-09-30 2007-04-12 The University Of Iowa Research Foundation Polymer-based delivery system for immunotherapy of cancer
EP2357000A1 (en) 2005-10-18 2011-08-17 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
CA2625969A1 (en) 2005-10-28 2007-05-03 Index Pharmaceuticals Ab Composition and method for the prevention, treatment and/or alleviation of an inflammatory disease
US20110180430A1 (en) 2005-11-04 2011-07-28 Novartis Vaccines And Diagnostics Srl Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
DK1951299T3 (da) 2005-11-04 2012-04-02 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenzavacciner indeholdende kombinationer af partikelformige adjuvanser og immunforstærkere
EP2377552A3 (en) 2005-11-04 2013-05-15 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Influenza vaccines with reduced amount of emulsion adjuvant
ES2420829T3 (es) 2005-11-04 2013-08-27 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Vacunas adyuvantadas con antígeno de no virión preparadas a partir de virus de la gripe cultivados en cultivo celular
CN102864152B (zh) * 2005-11-07 2015-11-18 艾德拉药物股份有限公司 包含经修饰的免疫刺激性二核苷酸的基于寡核苷酸的化合物之免疫刺激特性
CA2630220C (en) 2005-11-22 2020-10-13 Doris Coit Norovirus and sapovirus antigens
PL1957647T3 (pl) 2005-11-25 2015-07-31 Zoetis Belgium S A Oligorybonukleotydy immunostymulujące
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
EP1973608A1 (en) 2005-12-14 2008-10-01 Cytos Biotechnology AG Immunostimulatory nucleic acid packaged particles for the treatment of hypersensitivity
NZ570106A (en) 2006-01-27 2012-04-27 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccines containing hemagglutinin and matrix proteins
US20080045473A1 (en) 2006-02-15 2008-02-21 Coley Pharmaceutical Gmbh Compositions and methods for oligonucleotide formulations
EP1988896A4 (en) 2006-02-22 2011-07-27 3M Innovative Properties Co CONJUGATES TO MODIFY IMMUNE REACTIONS
EP2397852B1 (en) 2006-03-14 2013-12-04 Oregon Health and Science University Methods for detecting a mycobacterium tuberculosis infection
US8063063B2 (en) * 2006-03-23 2011-11-22 Novartis Ag Immunopotentiating compounds
ATE539079T1 (de) * 2006-03-23 2012-01-15 Novartis Ag Imidazochinoxalinverbindungen als immunmodulatoren
EP2382987A1 (en) 2006-03-24 2011-11-02 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH Storage of influenza vaccines without refrigeration
US20100285062A1 (en) 2006-03-31 2010-11-11 Novartis Ag Combined mucosal and parenteral immunization against hiv
US20100016250A1 (en) 2006-04-14 2010-01-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Toll-like receptor 9 agonists
TW200806315A (en) * 2006-04-26 2008-02-01 Wyeth Corp Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions
AU2007268534B2 (en) 2006-05-31 2011-07-14 Osaka University Immunostimulatory oligonucleotide and pharmaceutical application thereof
US20080026986A1 (en) * 2006-06-05 2008-01-31 Rong-Fu Wang Reversal of the suppressive function of specific t cells via toll-like receptor 8 signaling
EP2054431B1 (en) 2006-06-09 2011-08-31 Novartis AG Conformers of bacterial adhesins
SG172696A1 (en) 2006-06-12 2011-07-28 Cytos Biotechnology Ag Processes for packaging oligonucleotides into virus-like particles of rna bacteriophages
MX2008016036A (es) 2006-06-20 2009-04-07 Transgene Sa Vacuna viral recombinante.
US8128921B2 (en) * 2006-07-11 2012-03-06 University Of Connecticut Use of conditional plasmodium strains lacking nutrient transporters in malaria vaccination
US8153116B2 (en) 2006-07-11 2012-04-10 University Of Connecticut Use of conditional plasmodium strains lacking an essential gene in malaria vaccination
US7906506B2 (en) * 2006-07-12 2011-03-15 3M Innovative Properties Company Substituted chiral fused [1,2] imidazo [4,5-c] ring compounds and methods
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
AU2007285484B2 (en) 2006-08-16 2013-05-02 Novartis Ag Immunogens from uropathogenic Escherichia coli
JP5954921B2 (ja) 2006-09-11 2016-07-20 ノバルティス アーゲー 卵を使用しないインフルエンザウイルスワクチンの作製
KR101251707B1 (ko) * 2006-09-27 2013-04-11 콜리 파마슈티칼 게엠베하 면역 자극 활성이 증강된 소수성 Ｔ 유사체를 함유하는 ＣｐＧ 올리고뉴클레오티드 유사체
DE102006050655A1 (de) * 2006-10-24 2008-04-30 Halmon Beheer B.V. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung allergischer Erkrankungen
US20100144846A1 (en) * 2006-10-26 2010-06-10 Coley Pharmaceutical Gmbh Oligoribonucleotides and uses thereof
ES2761949T3 (es) 2006-11-01 2020-05-21 Ventana Med Syst Inc Haptenos, conjugados de haptenos, composiciones de los mismos y método para su preparación y uso
WO2008057529A2 (en) * 2006-11-06 2008-05-15 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Peptide-based vaccine compositions to endogenous cholesteryl ester transfer protein (cetp)
PL2094849T3 (pl) 2006-11-09 2014-06-30 Dynavax Tech Corp Długotrwała zmiana przebiegu choroby z zastosowaniem oligonukleotydów immunostymulujących
US20090285819A1 (en) * 2006-11-15 2009-11-19 Functional Genetics, Inc. Methods and compositions for treating influenza
US20110045022A1 (en) 2006-12-06 2011-02-24 Theodore Tsai Vaccines including antigen from four strains of influenza virus
AR064642A1 (es) 2006-12-22 2009-04-15 Wyeth Corp Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi
US20080149123A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-26 Mckay William D Particulate material dispensing hairbrush with combination bristles
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
DK2918598T3 (en) 2007-02-28 2019-04-29 The Govt Of U S A As Represented By The Secretary Of The Dept Of Health And Human Services Brachyury polypeptides and methods of use
EP2139516A4 (en) * 2007-04-13 2011-06-29 Univ Duke METHOD FOR INDUCING NEUTRALIZING ANTIBODIES AGAINST THE HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS
US8518903B2 (en) 2007-04-19 2013-08-27 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Use of toll-like receptor-9 agonists
EP2152903A2 (en) 2007-04-26 2010-02-17 Ludwig Institute for Cancer Research, Ltd. Methods for diagnosing and treating astrocytomas
WO2008134077A1 (en) * 2007-04-30 2008-11-06 Archemix Corp. Metabolic profile directed aptamer medicinal chemistry
CA2687441A1 (en) * 2007-05-17 2008-11-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Class a oligonucleotides with immunostimulatory potency
HUE025645T2 (hu) * 2007-05-18 2016-04-28 Adiutide Pharmaceuticals Gmbh Immunstimuláló hatású foszfát-módosított oligonukleotid analógok
CA2687178C (en) 2007-05-23 2014-02-04 Ventana Medical Systems, Inc. Polymeric carriers for immunohistochemistry and in situ hybridization
WO2008142133A1 (en) * 2007-05-24 2008-11-27 Glaxosmithkline Biologicals S.A Lyophilised antigen composition
EP2185191B1 (en) 2007-06-27 2012-09-12 Novartis AG Low-additive influenza vaccines
GB0713880D0 (en) * 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
US7879812B2 (en) 2007-08-06 2011-02-01 University Of Iowa Research Foundation Immunomodulatory oligonucleotides and methods of use therefor
JP2010536878A (ja) * 2007-08-21 2010-12-02 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション インフルエンザタンパク質を製造および使用する組成物および方法
ES2561483T3 (es) 2007-09-12 2016-02-26 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antígenos mutantes de GAS57 y anticuerpos de GAS57
CN101820908A (zh) * 2007-10-09 2010-09-01 科利制药公司 包含改性糖部分的免疫刺激寡核苷酸类似物
US20110014231A1 (en) * 2007-11-05 2011-01-20 Mor Research Applications Ltd Anti-measles cancer immunotherapy
EP2217716A4 (en) 2007-11-09 2011-02-09 Salk Inst For Biological Studi USE OF TAM RECEPTOR INHIBITORS AS ANTIMICROBIAL AGENTS
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
AU2008335457B2 (en) 2007-12-07 2015-04-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Compositions for inducing immune responses
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
BRPI0821240B8 (pt) 2007-12-21 2022-10-04 Novartis Ag formas mutantes de estreptolisina o
PE20091104A1 (es) * 2007-12-21 2009-07-18 Wyeth Corp Virus de la estomatitis vesicular atenuado modificado geneticamente, composiciones y metodos de uso del mismo
WO2009094190A2 (en) * 2008-01-25 2009-07-30 Chimerix, Inc. Methods of treating viral infections
HUE025027T2 (en) * 2008-01-31 2016-07-28 Curevac Gmbh (NuGiXmGnNv) nucleic acids and derivatives of the formula as immunostimulants / adjuvants
EP2245048B1 (en) 2008-02-21 2014-12-31 Novartis AG Meningococcal fhbp polypeptides
WO2009114485A2 (en) 2008-03-10 2009-09-17 Children's Hospital & Research Center At Oakland Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use
EP2268309B1 (en) 2008-03-18 2015-01-21 Novartis AG Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
WO2009140626A2 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Dynavax Technologies Corporation Long term disease modification using immunostimulatory oligonucleotides
EP2278979A4 (en) 2008-05-21 2012-09-26 Us Gov Health & Human Serv PROCESS FOR TREATING PNEUMOCONIOSIS WITH OLIGODESOXYNUCLEOTIDES
DK2300799T3 (en) 2008-06-05 2015-12-14 Ventana Med Syst Inc Process for the histo chemical processing and use of a composition for histo chemical processing
EP2303318A2 (en) 2008-06-20 2011-04-06 Wyeth LLC Compositions and methods of use of orf1358 from beta-hemolytic streptococcal strains
CN104001170B (zh) 2008-06-27 2016-08-24 硕腾有限责任公司 新颖的佐剂组合物
TWI351288B (en) * 2008-07-04 2011-11-01 Univ Nat Pingtung Sci & Tech Cpg dna adjuvant in avian vaccines
US20110136897A1 (en) * 2008-08-14 2011-06-09 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Toll-like receptor 9 agonists for the treatment of anxiety-related disorders and inflammatory disorders
WO2010027818A2 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Conserved hemagglutinin epitope, antibodies to the epitope, and methods of use
EP2331127A2 (en) 2008-09-18 2011-06-15 Novartis AG Vaccine adjuvant combinations
AU2009294850B2 (en) 2008-09-22 2015-07-02 Oregon Health & Science University Methods for detecting a Mycobacterium tuberculosis infection
AU2009304552B2 (en) 2008-10-16 2015-02-19 Dalhousie University Combination adjuvant formulation
US8691502B2 (en) 2008-10-31 2014-04-08 Tremrx, Inc. T-cell vaccination with viral vectors via mechanical epidermal disruption
CN102203122A (zh) 2008-11-05 2011-09-28 惠氏有限责任公司 用于预防β-溶血链球菌(BHS)疾病的多组分免疫原性组合物
TW201029663A (en) * 2008-11-12 2010-08-16 Theraclone Sciences Inc Human M2e peptide immunogens
BRPI0923225A2 (pt) 2008-12-02 2016-10-04 Chiralgen Ltd metodo para sintese de acidos nucleicos modificados no atomo de fosforo
ES2572563T3 (es) 2008-12-09 2016-06-01 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Oligonucleótidos inmunoestimulantes
EP2376108B1 (en) 2008-12-09 2017-02-22 Pfizer Vaccines LLC IgE CH3 PEPTIDE VACCINE
US8552165B2 (en) * 2008-12-09 2013-10-08 Heather Davis Immunostimulatory oligonucleotides
BRPI1005670A8 (pt) 2009-01-05 2017-12-26 Epitogenesis Inc composições adjuvantes e processos de uso.
US20100233270A1 (en) 2009-01-08 2010-09-16 Northwestern University Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles
NZ594029A (en) 2009-01-12 2014-01-31 Novartis Ag Cna_b domain antigens in vaccines against gram positive bacteria
WO2010099472A2 (en) 2009-02-27 2010-09-02 The U.S.A. Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Spanx-b polypeptides and their use
CA2754618A1 (en) 2009-03-06 2010-09-10 Novartis Ag Chlamydia antigens
CA2755897C (en) 2009-03-23 2020-01-28 Nanirx, Inc. Treatment of cancers with immunostimulatory hiv tat derivative polypeptides
BRPI1009828A2 (pt) 2009-03-24 2019-03-12 Novartis Ag adjuvante de proteína de ligação de fator h meningocócica
MX2011010050A (es) 2009-03-25 2011-12-14 Univ Texas Composiciones para estimulación de resistencia inmune innata de mamiferos a patógenos.
WO2010115118A2 (en) 2009-04-03 2010-10-07 Antigenics, Inc. Methods for preparing and using multichaperone-antigen complexes
JP2013505201A (ja) * 2009-04-03 2013-02-14 デューク ユニバーシティー 広域反応性中和抗ｈｉｖ抗体を誘導するための配合物
AU2010238255B2 (en) 2009-04-14 2014-10-16 Novartis Ag Compositions for immunising against Staphylococcus aureus
BRPI1011836A2 (pt) * 2009-04-21 2017-05-16 Selecta Biosciences Inc imunonanoterapêuticos que fornecem uma resposta induzida por th1
EP2424562B1 (en) 2009-04-30 2015-10-07 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pneumococcal vaccine and uses thereof
EA022699B1 (ru) 2009-05-27 2016-02-29 Селекта Байосайенсиз, Инк. НАЦЕЛЕННЫЕ СИНТЕТИЧЕСКИЕ НАНОНОСИТЕЛИ С pH-ЧУВСТВИТЕЛЬНЫМ ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СРЕДСТВ
CN102802665B (zh) 2009-06-15 2015-11-25 新加坡国立大学 流感疫苗、组合物及使用方法
PL2445522T3 (pl) 2009-06-22 2018-01-31 Wyeth Llc Kompozycje immunogenne antygenów Staphylococcus aureus
AU2010301043B2 (en) 2009-06-22 2014-01-09 Wyeth Llc Compositions and methods for preparing Staphylococcus aureus serotype 5 and 8 capsular polysaccharide conjugate immunogenic compositions
MX342945B (es) 2009-07-06 2016-10-18 Ontorii Inc * Profármacos de ácido nucleico novedosos y métodos de uso de los mismos.
EP3178490B1 (en) 2009-07-15 2022-04-20 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Rsv f protein compositions and methods for making same
CA2768343A1 (en) 2009-07-16 2011-01-20 Novartis Ag Detoxified escherichia coli immunogens
CN102481309B (zh) 2009-07-17 2014-06-18 翰林大学校产学协力团 包含脂质体包胶的寡核苷酸和表位的免疫刺激性组合物
US8614200B2 (en) 2009-07-21 2013-12-24 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating ocular conditions
NZ618391A (en) 2009-07-30 2015-07-31 Pfizer Vaccines Llc Antigenic tau peptides and uses thereof
US20110033515A1 (en) * 2009-08-04 2011-02-10 Rst Implanted Cell Technology Tissue contacting material
US8252913B2 (en) * 2009-08-18 2012-08-28 Baxter International Inc. Aptamers to tissue factor pathway inhibitor and their use as bleeding disorder therapeutics
US8598327B2 (en) 2009-08-18 2013-12-03 Baxter International Inc. Aptamers to tissue factor pathway inhibitor and their use as bleeding disorder therapeutics
EA201592264A1 (ru) 2009-08-26 2016-08-31 Селекта Байосайенсиз, Инк. Композиции, которые индуцируют хелперное действие т-клеток
CN102596240B (zh) 2009-08-27 2015-02-04 诺华股份有限公司 包括脑膜炎球菌fHBP序列的杂交多肽
BR112012004276A2 (pt) 2009-08-27 2017-10-24 Novartis Ag adjuvante compreendendo alumínio, oligonucleotídeo e policátion
WO2011026111A1 (en) 2009-08-31 2011-03-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Oral delivery of a vaccine to the large intestine to induce mucosal immunity
CN102612558B (zh) 2009-09-03 2015-02-11 辉瑞疫苗有限责任公司 Pcsk9疫苗
US20120237536A1 (en) 2009-09-10 2012-09-20 Novartis Combination vaccines against respiratory tract diseases
GB0917003D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Purification of bacterial vesicles
GB0917002D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Improved shigella blebs
WO2011039631A2 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Novartis Ag Expression of meningococcal fhbp polypeptides
BR112012009014B8 (pt) 2009-09-30 2022-10-04 Novartis Ag Processo para preparar conjugado de polissacarídeo capsular de s. aureus tipo 5 ou tipo 8 e molécula de transporte crm197, conjugado e composição imunogênica
WO2011041886A1 (en) 2009-10-07 2011-04-14 University Of Victoria Innovation And Development Corporation Vaccines comprising heat-sensitive transgenes
WO2011047340A1 (en) 2009-10-16 2011-04-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Insertion of foreign genes in rubella virus and their stable expression in a live, attenuated viral vaccine
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
MX2012004850A (es) 2009-10-27 2012-05-22 Novartis Ag Polipeptidos fhbp meningococicos modificados.
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
EP2501397B1 (en) 2009-11-20 2017-10-04 Oregon Health and Science University Methods for producing an immune response to tuberculosis
JP6007105B2 (ja) 2009-12-22 2016-10-12 セルデックス・セラピューティクス・インコーポレイテッド ワクチン組成物
US9006218B2 (en) 2010-02-12 2015-04-14 Chimerix Inc. Nucleoside phosphonate salts
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2011109422A2 (en) 2010-03-02 2011-09-09 The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Compositions and methods for the treatment of cancer
WO2011109833A2 (en) 2010-03-05 2011-09-09 President And Fellows Of Harvard College Induced dendritic cell compositions and uses thereof
WO2011112599A2 (en) 2010-03-12 2011-09-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary. Department Of Health & Human Services Immunogenic pote peptides and methods of use
EP2547357A1 (en) 2010-03-18 2013-01-23 Novartis AG Adjuvanted vaccines for serogroup b meningococcus
CN110845585A (zh) 2010-03-30 2020-02-28 奥克兰儿童医院及研究中心 改性的h因子结合蛋白（fhbp）及其使用方法
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
EP2556151A1 (en) 2010-04-07 2013-02-13 Novartis AG Method for generating a parvovirus b19 virus-like particle
WO2011130379A1 (en) 2010-04-13 2011-10-20 Novartis Ag Benzonapthyridine compositions and uses thereof
US9278135B2 (en) 2010-04-26 2016-03-08 Chimerix Inc. Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
CA2798136C (en) 2010-05-14 2019-06-04 Oregon Health & Science University Recombinant hcmv and rhcmv vectors and uses thereof
CN107029223A (zh) 2010-05-26 2017-08-11 西莱克塔生物科技公司 合成纳米载体联合疫苗
BR112012030337B1 (pt) 2010-05-28 2021-04-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc Vacina compreendendo um ou mais oligonucleotídeo(s) de cpg isolado(s) ou um agonista de tlr e colesterol, e uso da mesma
EP2575988A1 (en) 2010-05-28 2013-04-10 Tetris Online, Inc. Interactive hybrid asynchronous computer game infrastructure
MX2020004501A (es) 2010-06-03 2021-11-09 Pharmacyclics Llc El uso de inhibidores de la tirosina quinasa de bruton (btk).
SI3170508T1 (sl) 2010-06-04 2020-01-31 Wyeth Llc Formulacije cepiva
CA2800774A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Vaccines Llc Ige ch3 peptide vaccine
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
CA2803239A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Novartis Ag Combinations of meningococcal factor h binding proteins
WO2012006293A1 (en) 2010-07-06 2012-01-12 Novartis Ag Norovirus derived immunogenic compositions and methods
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
HUE052850T2 (hu) 2010-08-23 2021-05-28 Wyeth Llc Neisseria meningitidis RLP2086 antigéneket tartalmazó stabil készítmények
ES2585328T5 (es) 2010-09-10 2022-12-14 Wyeth Llc Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis
EP2616545B1 (en) 2010-09-14 2018-08-29 University of Pittsburgh - Of the Commonwealth System of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for influenza
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
JP5868324B2 (ja) 2010-09-24 2016-02-24 株式会社Ｗａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｊａｐａｎ 不斉補助基
US9072760B2 (en) 2010-09-24 2015-07-07 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education TLR4 inhibitors for the treatment of human infectious and inflammatory disorders
US10668092B2 (en) 2010-09-24 2020-06-02 The John Hopkins University Compositions and methods for treatment of inflammatory disorders
GB201017519D0 (en) 2010-10-15 2010-12-01 Novartis Vaccines Inst For Global Health S R L Vaccines
US9994443B2 (en) 2010-11-05 2018-06-12 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
WO2012072769A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Novartis Ag Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations
EP2468866A1 (en) * 2010-12-21 2012-06-27 Index Pharmaceuticals AB Biologically active oligonucleotides capable of modulating the immune system
PL3150222T3 (pl) 2010-12-22 2020-05-18 Wyeth Llc Stabilne immunogenne kompozycje antygenów staphylococcus aureus
WO2012088425A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Gap junction-enhancing agents for treatment of necrotizing enterocolitis and inflammatory bowel disease
CN103501810A (zh) 2010-12-22 2014-01-08 拜耳知识产权有限责任公司 牛物种中增强的免疫应答
GB201021867D0 (en) 2010-12-23 2011-02-02 Mologen Ag Non-coding immunomodulatory DNA construct
WO2012085668A2 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
EP2471926A3 (en) 2010-12-30 2012-07-11 Intervet International BV Immunostimulatory oligodeoxynucleotides
WO2012103361A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novartis Ag Rsv immunization regimen
WO2012109675A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 Baxter International Inc. Aptamers to tissue factor pathway inhibitor and their use as bleeding disorder therapeutics
US20140004142A1 (en) 2011-03-02 2014-01-02 Pfizer Inc. Pcsk9 vaccine
US9044420B2 (en) 2011-04-08 2015-06-02 Immune Design Corp. Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
US9452212B2 (en) 2011-04-14 2016-09-27 Dynavax Technologies Corporation Methods and compositions for eliciting an immune response against hepatitis B virus
WO2012149307A2 (en) 2011-04-27 2012-11-01 Immune Design Corp. Synthetic long peptide (slp)-based vaccines
CN103842374A (zh) 2011-05-13 2014-06-04 诺华股份有限公司 融合前的rsv f抗原
FR2975600B1 (fr) 2011-05-24 2013-07-05 Assist Publ Hopitaux De Paris Agents pour le traitement de tumeurs
CN103547675A (zh) * 2011-05-26 2014-01-29 英特维特国际股份有限公司 免疫刺激性寡脱氧核苷酸
US9353115B2 (en) 2011-06-01 2016-05-31 Janus Biotherapeutics, Inc. Immune system modulators
US9359361B2 (en) 2011-06-01 2016-06-07 Janus Biotherapeutics, Inc. Immune system modulators
CN103582496B (zh) 2011-06-03 2016-05-11 3M创新有限公司 具有聚乙二醇链段的异双官能连接基以及由其制成的免疫应答调节剂缀合物
EP2718292B1 (en) 2011-06-03 2018-03-14 3M Innovative Properties Company Hydrazino 1h-imidazoquinolin-4-amines and conjugates made therefrom
WO2012174455A2 (en) 2011-06-17 2012-12-20 University Of Tennessee Research Foundation Group a streptococcus multivalent vaccine
WO2012177760A1 (en) 2011-06-20 2012-12-27 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for h1n1 influenza
ITMI20111182A1 (it) 2011-06-28 2012-12-29 Canio Buonavoglia Vaccino per coronavirus canino
US11058762B2 (en) 2011-07-06 2021-07-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic compositions and uses thereof
CA2840989A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic combination compositions and uses thereof
WO2013007703A1 (en) * 2011-07-08 2013-01-17 Universität Zürich CLASS A CpG OLIGONUCLEOTIDES FOR PREVENTION OF VIRAL INFECTION IN CATS
CN103764171B (zh) 2011-07-08 2016-08-17 诺华股份有限公司 酪氨酸连接方法
WO2013012758A1 (en) 2011-07-19 2013-01-24 Ontorii, Inc. Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids
US20130023736A1 (en) 2011-07-21 2013-01-24 Stanley Dale Harpstead Systems for drug delivery and monitoring
US10030052B2 (en) 2011-07-25 2018-07-24 Glaxosmithkline Biologicals Sa Parvovirus Vp1 unique region polypeptides and compositions thereof
KR20140050698A (ko) 2011-07-29 2014-04-29 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 체액성 및 세포독성 t 림프구(ctl) 면역 반응을 발생시키는 합성 나노운반체
GB201114923D0 (en) 2011-08-30 2011-10-12 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2013039792A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Immunogens based on an hiv-1 gp120 v1v2 epitope
ES2732708T3 (es) 2011-09-14 2019-11-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procedimientos de fabricación de glucoconjugados de sacárido-proteína
WO2013038385A2 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Novartis Ag Escherichia coli vaccine combination
US20140234360A1 (en) 2011-09-30 2014-08-21 The United States of America, as represented by the Secretary, Dept.of Health and Human Services Influenza vaccine
EP2763677B1 (en) 2011-10-04 2020-02-26 Janus Biotherapeutics, Inc. Novel imidazole quinoline-based immune system modulators
EP3269728B1 (en) 2011-10-20 2020-12-16 The Government of The United States of America as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Dengue virus e-glycoprotein polypeptides containing mutations that eliminate immunodominant cross-reactive epitopes
EP2776069A1 (en) 2011-11-07 2014-09-17 Novartis AG Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
CA2858519A1 (en) 2011-12-08 2013-06-13 Novartis Ag Clostridium difficile toxin-based vaccine
SG11201402650RA (en) 2012-01-16 2014-06-27 Elizabeth Mckenna Compositions and methods for the treatment of hepatic diseases and disorders
WO2013108272A2 (en) 2012-01-20 2013-07-25 International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology Blood stage malaria vaccine
JP6336915B2 (ja) 2012-02-07 2018-06-06 ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション 計算で最適化した広い反応性を示すｈ３ｎ２、ｈ２ｎ２、およびｂ型インフルエンザウイルスの抗原
IN2014DN05695A (ja) 2012-02-13 2015-05-15 Univ Pittsburgh
JP2015509713A (ja) 2012-02-24 2015-04-02 ノバルティス アーゲー 線毛タンパク質および組成物
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
MY167723A (en) 2012-03-09 2018-09-21 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
US9421250B2 (en) 2012-03-23 2016-08-23 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pathogenic phlebovirus isolates and compositions and methods of use
US9597385B2 (en) 2012-04-23 2017-03-21 Allertein Therapeutics, Llc Nanoparticles for treatment of allergy
US10279026B2 (en) 2012-04-26 2019-05-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigens and antigen combinations
WO2013160335A2 (en) 2012-04-26 2013-10-31 Novartis Ag Antigens and antigen combinations
CA2871490C (en) 2012-04-27 2022-10-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Use of cpg oligonucleotides co-formulated with an antibiotic to accelerate wound healing
PL2844282T3 (pl) 2012-05-04 2019-11-29 Pfizer Antygeny związane z gruczołem krokowym i schematy immunoterapii oparte na szczepionce
CA2874210A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Novartis Ag Meningococcus serogroup x conjugate
IN2014DN09618A (ja) 2012-05-23 2015-07-31 Us Sec Dep Of Health And Human Services
WO2013177397A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Multivalent meningococcal conjugates and methods for preparing cojugates
WO2013192144A2 (en) 2012-06-19 2013-12-27 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Rift valley fever virus replicon particles and use thereof
WO2013189506A1 (en) 2012-06-19 2013-12-27 Volvo Lastvagnar Ab A device for controlling a gas flow, an exhaust aftertreatment system and a system for propelling a vehicle
KR102057217B1 (ko) 2012-06-20 2020-01-22 에스케이바이오사이언스 주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
EP2869842A1 (en) 2012-07-06 2015-05-13 Novartis AG Immunogenic compositions and uses thereof
KR102450907B1 (ko) 2012-07-13 2022-10-04 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 키랄 제어
CN104684893B (zh) 2012-07-13 2016-10-26 日本波涛生命科学公司 不对称辅助基团
RU2677639C2 (ru) 2012-07-13 2019-01-18 Шин Ниппон Биомедикал Лэбораториз, Лтд. Хиральный адъювант нуклеиновой кислоты
MX2015000789A (es) 2012-07-19 2015-05-07 Zoetis Llc Composiciones de virus de la gripe bovina.
BR112015001690A2 (pt) 2012-07-24 2017-11-07 Pharmacyclics Inc mutações associadas com a resistência a inibidores da tirosina quinase de bruton (btk)
AU2013295770A1 (en) 2012-07-27 2015-01-29 Zoetis Services Llc Tick toxin compositions
RU2645071C2 (ru) 2012-08-16 2018-02-15 Пфайзер Инк. Способы гликоконъюгирования и композиции
EP2892549A1 (en) 2012-09-04 2015-07-15 Bavarian Nordic A/S Methods and compositions for enhancing vaccine immune responses
WO2014043535A1 (en) 2012-09-14 2014-03-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Compositions for the treatment of cancer
US20150224181A1 (en) 2012-09-14 2015-08-13 The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Se Brachyury protein, non-poxvirus non-yeast vectors encoding brachyury protein, and their use
EP2897635A1 (en) 2012-09-18 2015-07-29 Novartis AG Outer membrane vesicles
JP2015535829A (ja) 2012-09-21 2015-12-17 マッケーナ、エリザベス 天然に存在するＣｐＧオリゴヌクレオチド組成物およびその治療的適用
US9562066B2 (en) * 2012-09-25 2017-02-07 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Oral therapy of necrotizing enterocolitis
CN104582718B (zh) 2012-10-03 2017-10-24 诺华股份有限公司 免疫原性组合物
WO2014071231A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Pharmacyclics, Inc. Tec family kinase inhibitor adjuvant therapy
WO2014074785A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Methods of predicting outcome and treating breast cancer
KR20140075196A (ko) 2012-12-11 2014-06-19 에스케이케미칼주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
KR20140075201A (ko) 2012-12-11 2014-06-19 에스케이케미칼주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
TWI465241B (zh) 2012-12-19 2014-12-21 Ind Tech Res Inst 圓柏（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）萃取物或木酚素（ｌｉｇｎａｎ）用於製造抑制血管新生之藥物的用途
FI3363806T3 (fi) 2012-12-20 2023-01-31 Glykokonjugaatiomenetelmä
CA2936092A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Stabilized hepatitis b core polypeptide
CA2900008A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Children's Medical Center Corporation Protein antigens that provide protection against pneumococcal colonization and/or disease
JP6446377B2 (ja) 2013-03-08 2018-12-26 ファイザー・インク 免疫原性融合ポリペプチド
CN105188744A (zh) 2013-03-14 2015-12-23 哈佛大学的校长及成员们 基于纳米颗粒的组合物
DE102013004595A1 (de) 2013-03-15 2014-09-18 Emergent Product Development Germany Gmbh RSV-Impfstoffe
CA2907098A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Zoetis Services Llc Cross-protection of bovines against b. trehalosi infection by a multi-valent vaccine
KR102233251B1 (ko) 2013-04-03 2021-03-26 엔-폴드 엘엘씨 신규 나노입자 조성물
EP2986717A1 (en) 2013-04-19 2016-02-24 The Regents of The University of California Lone star virus
AR095882A1 (es) 2013-04-22 2015-11-18 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos contra csf-1r humano con un agonista de tlr9
CN103550783A (zh) * 2013-04-27 2014-02-05 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 一种核酸类药物靶向递送系统及其制备方法
CN112999344A (zh) 2013-05-15 2021-06-22 阿尔伯达大学董事会 E1e2 hcv疫苗及使用方法
WO2014201245A1 (en) 2013-06-12 2014-12-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Tlr-9 agonist with tlr-7 and/or tlr-8 agonist for treating tumors
CN105530957B (zh) * 2013-07-19 2022-03-29 台湾卫生研究院 CpG寡脱氧核苷酸、包含其的免疫组合物及组合物用于制备治疗以刺激免疫反应的药物的应用
AU2014292926B2 (en) 2013-07-25 2020-03-05 Exicure Operating Company Spherical nucleic acid-based constructs as immunostimulatory agents for prophylactic and therapeutic use
EP3024476A1 (en) 2013-07-26 2016-06-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of bacterial infections
CA2923129C (en) 2013-09-08 2020-06-09 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
AR097584A1 (es) 2013-09-12 2016-03-23 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos contra el csf-1r humano y anticuerpos contra el pd-l1 humano
NZ757210A (en) 2013-09-19 2022-12-23 Zoetis Services Llc Oil-based adjuvants
WO2015048635A1 (en) 2013-09-27 2015-04-02 Duke University Mper-liposome conjugates and uses thereof
WO2015048785A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Los Alamos National Security, Llc Mosaic conserved region hiv immunogenic polypeptides
US9663556B2 (en) 2013-10-04 2017-05-30 Pin Pharma, Inc. Treatment of cancers with immunostimulatory HIV tat derivative polypeptides
KR102006527B1 (ko) 2013-11-01 2019-08-02 화이자 인코포레이티드 전립선-연관 항원의 발현을 위한 벡터
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
CA2929600A1 (en) 2013-11-28 2015-06-04 Bavarian Nordic A/S Compositions and methods vectors for inducing an enhanced immune response using poxvirus vectors
CA2932122C (en) 2013-12-03 2022-04-19 Northwestern University Liposomal particles, methods of making same and uses thereof
AU2014361788B2 (en) 2013-12-13 2019-10-10 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Multi-epitope TARP peptide vaccine and uses thereof
US11708411B2 (en) 2013-12-20 2023-07-25 Wake Forest University Health Sciences Methods and compositions for increasing protective antibody levels induced by pneumococcal polysaccharide vaccines
US10322173B2 (en) 2014-01-15 2019-06-18 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent
JPWO2015108047A1 (ja) * 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 免疫誘導活性を有するキラル核酸アジュバンド及び免疫誘導活性剤
US10149905B2 (en) 2014-01-15 2018-12-11 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having antitumor effect and antitumor agent
KR20230152178A (ko) 2014-01-16 2023-11-02 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 키랄 디자인
NZ755769A (en) 2014-01-21 2023-06-30 Pfizer Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
SG11201605883UA (en) 2014-01-21 2016-08-30 Immune Design Corp Compositions for use in the treatment of allergic conditions
CA2937184A1 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Pfizer Inc. Streptococcus pneumoniae capsular polysaccharides and conjugates thereof
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP3583947B1 (en) 2014-01-21 2023-10-11 Pfizer Inc. Streptococcus pneumoniae capsular polysaccharides and conjugates thereof
WO2016130569A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Mj Biologics, Inc. A composition comprising pedv antigens and methods for making and using the composition
US10279019B2 (en) 2014-02-11 2019-05-07 Stc.Unm PCSK9 peptide vaccine conjugated to a Qbeta carrier and methods of using the same
JP2017505792A (ja) 2014-02-14 2017-02-23 ファイザー・インク 免疫原性糖タンパク質コンジュゲート
GB2523187A (en) 2014-02-18 2015-08-19 Mologen Ag Covalently closed non-coding immunomodulatory DNA construct
EP3556353A3 (en) 2014-02-25 2020-03-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems
KR20160122849A (ko) * 2014-02-28 2016-10-24 바이엘 애니멀 헬스 게엠베하 면역자극성 플라스미드
ES2702325T3 (es) 2014-03-11 2019-02-28 Univ Minnesota Vacunas contra el virus de la diarrea epidémica porcina y métodos de uso de las mismas
US9885086B2 (en) 2014-03-20 2018-02-06 Pharmacyclics Llc Phospholipase C gamma 2 and resistance associated mutations
RS59971B1 (sr) 2014-03-26 2020-03-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Mutantni stafilokokni antigeni
US9549914B2 (en) 2014-04-03 2017-01-24 The Johns Hopkins University Treatment of human cytomegalovirus by modulating Wnt
WO2015164798A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 Tria Bioscience Corp. Synthetic hapten carrier compositions and methods
JP2017516810A (ja) * 2014-05-23 2017-06-22 グレゴリー コーション， コーティング方法および材料
WO2015184272A2 (en) 2014-05-30 2015-12-03 Sanofi Pasteur Biologics Llc Expression and conformational analysis of engineered influenza hemagglutinin
CN106535876B (zh) 2014-06-04 2020-09-11 埃克西奎雷股份有限公司 免疫调节剂通过脂质体球形核酸的多价递送以用于预防或治疗应用
EP3160453A1 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment with synthetic nanocarriers and immune checkpoint inhibitors
JP2017522312A (ja) 2014-07-15 2017-08-10 イミューン デザイン コーポレイション Ｔｌｒ４アゴニストアジュバント及びレンチウイルスベクターを用いたプライム・ブーストレジメン
US20170275287A1 (en) 2014-08-22 2017-09-28 Janus Biotherapeutics, Inc. Novel n2, n4, n7, 6-tetrasubstituted pteridine-2,4,7-triamine and 2, 4, 6, 7-tetrasubstituted pteridine compounds and methods of synthesis and use thereof
WO2016044839A2 (en) 2014-09-19 2016-03-24 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Compositions and methods for treating viral infections through stimulated innate immunity in combination with antiviral compounds
CR20170181A (es) 2014-10-06 2017-05-31 Exicure Inc Compuestos anti-tnf
US20160129097A1 (en) * 2014-11-06 2016-05-12 Jeremy Delk Method of processing a veterinary tumor vaccine and a veterinary tumor vaccine processing kit
AU2015349680A1 (en) 2014-11-21 2017-06-08 Northwestern University The sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates
JP6536964B2 (ja) * 2014-12-26 2019-07-03 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所 免疫賦活活性を有する核酸多糖複合体の抗腫瘍薬としての応用
EP3240801B1 (en) 2014-12-31 2021-01-20 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Combination tumor immunotherapy
HRP20230416T1 (hr) 2015-01-15 2023-07-07 Pfizer Inc. Imunogeni pripravci, namijenjeni upotrebi u cjepivima protiv pneumokoka
LT3244920T (lt) 2015-01-16 2023-08-25 Zoetis Services Llc Snukio ir nagų ligos vakcina
EP3256608A4 (en) 2015-02-13 2019-02-20 Icahn School of Medicine at Mount Sinai RNA-containing compositions and methods for their use
BR112017017460A2 (pt) 2015-02-19 2018-04-10 Pfizer Inc. composições de neisseria meningitidis e métodos das mesmas
MX2017011648A (es) 2015-03-12 2017-11-02 Zoetis Services Llc Metodos de piolisina y composiciones.
TWI718144B (zh) 2015-05-04 2021-02-11 美商輝瑞股份有限公司 Ｂ型鏈球菌多醣－蛋白質軛合物、製造軛合物之方法、含軛合物之免疫原性組成物、及其用途
WO2016180852A1 (en) 2015-05-12 2016-11-17 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for preparing antigen-specific t cells from an umbilical cord blood sample
WO2016183371A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Methods for the treatment or prevention of ischemic tissue damage
AU2016260540B2 (en) 2015-05-13 2021-01-07 Agenus Inc. Vaccines for treatment and prevention of cancer
US10584148B2 (en) 2015-06-02 2020-03-10 Sanofi Pasteur Inc. Engineered influenza antigenic polypeptides and immunogenic compositions thereof
EP3307307A4 (en) 2015-06-09 2019-05-01 The Board of Regents of the University of Oklahoma COMPOSITIONS AND TREATMENTS FOR HAEMOPHILUS INFLUENZAE
CN108291210B (zh) 2015-06-10 2022-03-11 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 生产和纯化含核酸组合物的方法
US11013795B2 (en) 2015-06-26 2021-05-25 Seqirus UK Limited Antigenically matched influenza vaccines
EP3301179B1 (en) * 2015-07-09 2019-06-05 National Institute for Materials Science Immunostimulating oligonucleotide complex
EP3325008A1 (en) 2015-07-21 2018-05-30 Pfizer Inc Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
CN108025062A (zh) 2015-07-31 2018-05-11 拜耳动物保健有限责任公司 猪科动物物种中增强的免疫应答
PL3334454T3 (pl) 2015-08-14 2023-01-30 Zoetis Services Llc Kompozycje mycoplasma bovis
EP3344276B1 (en) 2015-09-03 2020-04-22 The Board of Regents of the University of Oklahoma Peptide inhibitors of clostridium difficile tcdb toxin
LU92821B1 (en) 2015-09-09 2017-03-20 Mologen Ag Combination comprising immunostimulatory oligonucleotides
WO2017048807A1 (en) 2015-09-17 2017-03-23 Jrx Biotechnology, Inc. Approaches for improving skin hydration or moisturization
GB2542425A (en) 2015-09-21 2017-03-22 Mologen Ag Means for the treatment of HIV
US10526309B2 (en) 2015-10-02 2020-01-07 The University Of North Carolina At Chapel Hill Pan-TAM inhibitors and Mer/Axl dual inhibitors
WO2017062246A1 (en) 2015-10-05 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Human rota virus g9p[6] strain and use as a vaccine
JP7171433B2 (ja) 2015-10-30 2022-11-15 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ Ｈｅｒ－２発現固形腫瘍の処置のための組成物および方法
WO2017085586A1 (en) 2015-11-20 2017-05-26 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
JP7110108B2 (ja) 2015-12-09 2022-08-01 ジンガン メディスン（オーストラリア） プロプライアタリー リミティド 治療用免疫調節組成物
CA3010977A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Zoetis Services Llc Novel cross protective vaccine compositions for porcine epidemic diarrhea virus
PL3407910T3 (pl) 2016-01-29 2022-08-16 Bavarian Nordic A/S Rekombinowana zmodyfikowana szczepionka przeciwko wirusowi krowianki ankara (mva) przeciwko wirusowi zapalenia mózgu koni
WO2017189448A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bivalent immunogenic conjugate for malaria and typhoid
US20190298824A1 (en) 2016-05-04 2019-10-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Serv Albumin-binding immunomodulatory compositions and methods of use thereof
US11173207B2 (en) 2016-05-19 2021-11-16 The Regents Of The University Of Michigan Adjuvant compositions
US11033615B2 (en) 2016-05-31 2021-06-15 The Government of the United States, As Represented by the Secretary of the Army Fort Detrick, Maryland Zika virus vaccine and methods of production
US10844097B2 (en) 2016-06-02 2020-11-24 Sanofi Pasteur Inc. Engineered influenza antigenic polypeptides and immunogenic compositions thereof
CN115746107A (zh) 2016-06-03 2023-03-07 圣诺菲·帕斯图尔公司 经改造的流感血凝素多肽的修饰
WO2017218339A1 (en) 2016-06-13 2017-12-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Nucleic acids encoding zika virus-like particles and their use in zika virus vaccines and diagnostic assays
EP3269385A1 (en) 2016-07-12 2018-01-17 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
WO2017220753A1 (en) 2016-06-22 2017-12-28 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
WO2018009604A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric dengue/zika viruses live-attenuated zika virus vaccines
WO2018009603A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 The United State of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Service Chimeric west nile/zika viruses and methods of use
CN109862908B (zh) 2016-08-05 2023-05-02 圣诺菲·帕斯图尔公司 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物
MX2019001341A (es) 2016-08-05 2019-07-04 Sanofi Pasteur Inc Composicion de conjugado de polisacarido neumococico multivalente-proteina.
US10182146B2 (en) * 2016-08-22 2019-01-15 Nice Ltd. System and method for dynamic redundant call recording
WO2018039629A2 (en) 2016-08-25 2018-03-01 Northwestern University Micellar spherical nucleic acids from thermoresponsive, traceless templates
WO2018036852A1 (en) 2016-08-25 2018-03-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Intermittent dosing of an anti-csf-1r antibody in combination with macrophage activating agent
US10172933B2 (en) 2016-10-31 2019-01-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Mosaic vaccines for serotype a foot-and-mouth disease virus
US10751402B2 (en) 2016-11-09 2020-08-25 Pfizer Inc. Immunogenic compositions and uses thereof
EP3558360A1 (en) 2016-12-22 2019-10-30 F. Hoffmann-La Roche AG Treatment of tumors with an anti-csf-1r antibody in combination with an anti-pd-l1 antibody after failure of anti-pd-l1/pd1 treatment
CA3050622A1 (en) 2017-01-20 2018-07-26 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
US10183070B2 (en) 2017-01-31 2019-01-22 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2018144438A1 (en) 2017-01-31 2018-08-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Methods for production of capsular polysaccharide protein conjugates from streptococcus pneumoniae serotype 19f
AR111211A1 (es) 2017-02-06 2019-06-19 Australian Meat & Live Stock Composiciones inmunoestimulantes y sus usos
GB201703529D0 (en) 2017-03-06 2017-04-19 Cambridge Entpr Ltd Vaccine composition
US10525119B2 (en) 2017-03-31 2020-01-07 Boston Medical Center Corporation Methods and compositions using highly conserved pneumococcal surface proteins
US11696954B2 (en) 2017-04-28 2023-07-11 Exicure Operating Company Synthesis of spherical nucleic acids using lipophilic moieties
AU2018283973A1 (en) 2017-06-11 2020-01-16 Molecular Express, Inc. Methods and compositions for substance use disorder vaccine formulations and uses thereof
EP3641828B1 (en) 2017-06-23 2023-11-22 Affinivax, Inc. Immunogenic compositions
WO2019018744A1 (en) 2017-07-21 2019-01-24 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IMMUNOGENIC COMPOSITIONS OF NEISSERIA MENINGITIDIS
KR20200051004A (ko) 2017-09-07 2020-05-12 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 폐렴구균 폴리사카라이드 및 면역원성 폴리사카라이드-담체 단백질 접합체에서의 그의 용도
EP4233880A3 (en) 2017-09-08 2023-09-20 MiNA Therapeutics Limited Hnf4a sarna compositions and methods of use
EP3690030A4 (en) 2017-09-28 2021-06-23 Industry-Academic Cooperation Foundation, Yonsei University METHOD FOR MANUFACTURING MYELOID-DERIVED SUPPRESSOR CELLS, SUPPRESSOR CELLS MANUFACTURED FROM MYEOLID AND USES THEREOF
US11235046B2 (en) 2017-11-04 2022-02-01 Nevada Research & Innovation Corporation Immunogenic conjugates and methods of use thereof
SG11202005255PA (en) 2017-12-06 2020-07-29 Merck Sharp & Dohme Compositions comprising streptococcus pneumoniae polysaccharide-protein conjugates and methods of use thereof
US11116830B2 (en) 2017-12-18 2021-09-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bacterial polysaccharide-conjugated carrier proteins and use thereof
JP2021506851A (ja) 2017-12-19 2021-02-22 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 抗原−アジュバントカップリング試薬および使用の方法
CN111629751A (zh) 2018-01-22 2020-09-04 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 广泛保护性灭活流感病毒疫苗
BR112020016859A2 (pt) 2018-02-28 2020-12-29 Pfizer Inc. Variantes de il-15 e usos da mesma
BR112020017645A2 (pt) * 2018-03-02 2020-12-29 Elicio Therapeutics Inc. Compostos que incluem uma sequência kras mutante e um lipídio e usos dos mesmos
US11633471B2 (en) 2018-03-06 2023-04-25 Unm Rainforest Innovations Compositions and methods for reducing serum triglycerides
WO2019191257A1 (en) 2018-03-28 2019-10-03 Sanofi Pasteur Inc. Methods of generating broadly protective vaccine compositions comprising hemagglutinin
EP3773708A2 (en) 2018-04-03 2021-02-17 Sanofi Antigenic epstein barr virus polypeptides
EP3773698A1 (en) 2018-04-03 2021-02-17 Sanofi Ferritin proteins
CN112512565A (zh) 2018-04-03 2021-03-16 赛诺菲 抗原性流感-铁蛋白多肽
WO2019195276A1 (en) 2018-04-03 2019-10-10 Sanofi Antigenic ospa polypeptides
JP2021519597A (ja) 2018-04-03 2021-08-12 サノフイＳａｎｏｆｉ 抗原性呼吸器合胞体ウイルスポリペプチド
KR20230146098A (ko) 2018-05-23 2023-10-18 화이자 인코포레이티드 GUCY2c에 특이적인 항체 및 이의 용도
WO2019224715A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 Pfizer Inc. Antibodies specific for cd3 and uses thereof
EP3574915A1 (en) 2018-05-29 2019-12-04 Neovacs Immunogenic product comprising il-4 and/or il-13 for treating disorders associated with aberrant il-4 and/or il 13 expression or activity
CN110004150B (zh) * 2018-08-01 2023-03-10 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸序列及其应用
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
AU2019393745A1 (en) 2018-12-04 2021-06-10 California Institute Of Technology HIV vaccine immunogens
EP3894547A1 (en) 2018-12-12 2021-10-20 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Recombinant mumps virus vaccine expressing genotype g fusion and hemagglutinin-neuraminidase proteins
EP3893926A1 (en) 2018-12-12 2021-10-20 Pfizer Inc. Immunogenic multiple hetero-antigen polysaccharide-protein conjugates and uses thereof
WO2020123989A1 (en) 2018-12-14 2020-06-18 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Crimean-congo hemorrhagic fever virus replicon particles and use thereof
JP7275277B2 (ja) 2018-12-19 2023-05-17 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－タンパク質コンジュゲートを含む組成物およびその使用方法
WO2020128893A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Pfizer Inc. Combination treatments of cancer comprising a tlr agonist
CN114957407A (zh) 2019-04-02 2022-08-30 赛诺菲 抗原性多聚呼吸道合胞病毒多肽
US20220184199A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
CN114072506A (zh) * 2019-05-10 2022-02-18 中天(上海)生物科技有限公司 用于调节免疫应答的二聚CpG寡核苷酸
AU2020290969A1 (en) * 2019-06-14 2022-02-03 G Tech Bio Llc Activated lymphocytic cells and methods of using the same to treat cancer and infectious conditions
EP3999093A4 (en) 2019-07-19 2023-11-22 Merck Sharp & Dohme LLC ANTIGEN GLYCOPROTEIN E POLYPEPTIDES, COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
CN114222584A (zh) 2019-07-30 2022-03-22 辉宝动物保健公司 一种用于禽类粘膜施用的组合物
US20220265803A1 (en) 2019-07-31 2022-08-25 Sanofi Pasteur Inc. Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate compositions and methods of using the same
JP2022545181A (ja) 2019-08-30 2022-10-26 ユニバーシティ オブ ロチェスター がん治療のためのセプチン阻害剤
CN110646557A (zh) * 2019-10-12 2020-01-03 北京航空航天大学 携带idh基因突变的胶质母细胞瘤患者的尿液代谢标志物及其用途
JP2021087420A (ja) 2019-11-01 2021-06-10 ファイザー・インク Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ組成物およびその方法
US11702474B2 (en) 2019-12-17 2023-07-18 Pfizer Inc. Antibodies specific for CD47, PD-L1, and uses thereof
BR112022010228A2 (pt) 2019-12-17 2022-09-06 Us Health Vacinas de parasita de leishmania viva atenuada com características de segurança aumentadas
US20230241196A1 (en) 2020-01-27 2023-08-03 Oregon State University Gonorrhea subunit vaccine
WO2021163448A2 (en) 2020-02-13 2021-08-19 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Vaccine and methods for detecting and preventing filariasis
WO2021165928A2 (en) 2020-02-23 2021-08-26 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
EP4110382A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Sanofi Pasteur Inc. High dose influenza vaccine for pediatric subjects
US11213482B1 (en) 2020-03-05 2022-01-04 University of Pittsburgh—Of the Commonwealth System of Higher Educat SARS-CoV-2 subunit vaccine and microneedle array delivery system
WO2021211279A1 (en) 2020-04-17 2021-10-21 Regents Of The University Of Minnesota SARS-CoV-2 SPIKE RECEPTOR BINDING DOMAIN AND COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
EP3900739A1 (en) 2020-04-21 2021-10-27 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Synthetic streptococcus pneumoniae saccharide conjugates to conserved membrane protein
US20230226218A1 (en) 2020-05-11 2023-07-20 Erytech Pharma Red Cell Extracellular Vesicles (RCEVs) Containing Cargoes and Methods of Use and Production Thereof
EP4182346A1 (en) 2020-07-17 2023-05-24 Pfizer Inc. Therapeutic antibodies and their uses
US20230321212A1 (en) 2020-08-26 2023-10-12 Pfizer Inc. Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof
JP2023542036A (ja) 2020-09-17 2023-10-04 ネオヴァクス ＩｇＥ介在性炎症性障害を治療するためのＩｇＥフラグメントを含む免疫原性産物
WO2022066973A1 (en) 2020-09-24 2022-03-31 Fred Hutchinson Cancer Research Center Immunotherapy targeting pbk or oip5 antigens
JP2023542528A (ja) 2020-09-24 2023-10-10 フレッド ハッチンソン キャンサー センター Ｓｏｘ２抗原を標的とする免疫療法
IL302362A (en) 2020-10-27 2023-06-01 Pfizer ESCHERICHIA COLI preparations and their methods
CA3200602A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
JP2023549736A (ja) 2020-11-10 2023-11-29 ファイザー・インク コンジュゲートさせた莢膜糖抗原を含む免疫原性組成物およびその使用
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
WO2022147373A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibody-guided pcsk9-mimicking immunogens lacking 9-residue sequence overlap with human proteins
CA3206754A1 (en) 2021-02-03 2022-08-11 Ramaswamy Kalyanasundaram Vaccine and methods for preventing filariasis and dirofilariasis
AU2022281543A1 (en) 2021-05-28 2023-11-23 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
TW202306969A (zh) 2021-05-28 2023-02-16 美商輝瑞大藥廠 包含結合之莢膜醣抗原的免疫原組合物及其用途
WO2022261251A1 (en) 2021-06-08 2022-12-15 Glyde Bio Inc. Immunogenic compositions comprising tumour-associated antigen
EP4104830A1 (en) 2021-06-16 2022-12-21 Burghardt Wittig Sequential innate and adaptive immune modulation for cancer treatment
AU2022311955A1 (en) 2021-07-16 2024-01-18 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Universal vaccine for influenza virus based on tetrameric m2 protein incorporated into nanodiscs
WO2023018817A1 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Sanofi Pasteur Inc. Truncated influenza neuraminidase and methods of using the same
WO2023059857A1 (en) 2021-10-08 2023-04-13 Sanofi Pasteur Inc. Multivalent influenza vaccines
AR127585A1 (es) 2021-11-05 2024-02-07 Sanofi Sa Vacuna de arn de virus sincicial respiratorio
WO2023079113A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Sanofi Hybrid multivalent influenza vaccines comprising hemagglutinin and neuraminidase and methods of using the same
WO2023081798A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Sanofi Pasteur Inc. Multivalent influenza vaccines comprising recombinant hemagglutinin and neuraminidase and methods of using the same
US20230310571A1 (en) 2021-11-30 2023-10-05 Sanofi Pasteur Inc. Human metapneumovirus vaccines
WO2023102388A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Sanofi Pasteur Inc. Human metapneumovirus viral vector-based vaccines
WO2023111262A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Sanofi Lyme disease rna vaccine
WO2023135515A1 (en) 2022-01-13 2023-07-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023144206A1 (en) 2022-01-27 2023-08-03 Sanofi Pasteur Modified vero cells and methods of using the same for virus production
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023177577A1 (en) 2022-03-14 2023-09-21 Sanofi Pasteur Inc. Machine-learning techniques in protein design for vaccine generation
WO2023201109A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Yale University Exatecan formulation
WO2023214082A2 (en) 2022-05-06 2023-11-09 Sanofi Signal sequences for nucleic acid vaccines
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives
WO2024003239A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Bavarian Nordic A/S RECOMBINANT MODIFIED saRNA (VRP) AND VACCINIA VIRUS ANKARA (MVA) PRIME-BOOST REGIMEN
WO2024069420A2 (en) 2022-09-29 2024-04-04 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising an rsv f protein trimer

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996002555A1 (en) * 1994-07-15 1996-02-01 The University Of Iowa Research Foundation Immunomodulatory oligonucleotides
JP2001503267A (ja) * 1996-10-30 2001-03-13 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション 免疫刺激性核酸分子

Family Cites Families (522)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2004A (en) * 1841-03-12 Improvement in the manner of constructing and propelling steam-vessels
US2010A (en) * 1841-03-18 Machine foe
US2002A (en) * 1841-03-12 Tor and planter for plowing
US2003A (en) * 1841-03-12 Improvement in horizontal windivhlls
US2005A (en) * 1841-03-16 Improvement in the manner of constructing molds for casting butt-hinges
US3521637A (en) * 1967-11-28 1970-07-28 Nelson J Waterbury Tampon or similar sanitary napkin containing vitamin a
US3627874A (en) 1969-07-16 1971-12-14 Merck & Co Inc Vaccine preparation
US3761585A (en) 1971-04-05 1973-09-25 Beecham Group Ltd Vaccines containing modified allergenic material
US3906092A (en) 1971-11-26 1975-09-16 Merck & Co Inc Stimulation of antibody response
DE2643213C2 (de) * 1976-09-25 1985-02-21 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Verfahren zum Abschwächen oder Inaktivieren von Mikroorganismen
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
DE3280400D1 (de) 1981-10-23 1992-06-04 Molecular Biosystems Inc Oligonukleotides heilmittel und dessen herstellungsverfahren.
US5023243A (en) * 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
ES8301593A1 (es) 1981-11-16 1983-01-01 Union Ind Y Agro Ganader S A U Procedimiento de obtencion de una leche humanizada adiciona-da de nucleotidos con destino a la alimentacion infantil.
US5766920A (en) * 1982-08-11 1998-06-16 Cellcor, Inc. Ex vivo activation of immune cells
SE8205892D0 (sv) 1982-10-18 1982-10-18 Bror Morein Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin
US4452775A (en) * 1982-12-03 1984-06-05 Syntex (U.S.A.) Inc. Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules
SE8405493D0 (sv) 1984-11-01 1984-11-01 Bror Morein Immunogent komplex samt sett for framstellning derav och anvendning derav som immunstimulerande medel
US5308626A (en) * 1985-06-28 1994-05-03 Toni N. Mariani Lymphokine activated effector cells for antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) treatment of cancer and other diseases
DE3775783D1 (de) 1986-01-14 1992-02-20 Nederlanden Staat Verfahren zur herstellung immunologischer komplexe und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzung.
US4806463A (en) 1986-05-23 1989-02-21 Worcester Foundation For Experimental Biology Inhibition of HTLV-III by exogenous oligonucleotides
US5194428A (en) 1986-05-23 1993-03-16 Worcester Foundation For Experimental Biology Inhibition of influenza virus replication by oligonucleotide phosphorothioates
US5059519A (en) 1986-07-01 1991-10-22 University Of Massachusetts Medical School Oligonucleotide probes for the determination of the proclivity for development of autoimmune diseases
US5075109A (en) * 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US5264423A (en) 1987-03-25 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US5276019A (en) 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
ES2007350A6 (es) 1987-05-29 1989-06-16 Ganadera Union Ind Agro Productos alimenticios enriquecidos con nucleosidos yno nucleotidos para la nutricion infantil y de adultos, y procedimiento para su preparacion.
CA1339596C (en) 1987-08-07 1997-12-23 New England Medical Center Hospitals, Inc. Viral expression inhibitors
NZ230747A (en) 1988-09-30 1992-05-26 Bror Morein Immunomodulating matrix comprising a complex of at least one lipid and at least one saponin; certain glycosylated triterpenoid saponins derived from quillaja saponaria molina
US5004810A (en) 1988-09-30 1991-04-02 Schering Corporation Antiviral oligomers
US5087617A (en) * 1989-02-15 1992-02-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for treatment of cancer using oligonucleotides
US5112605A (en) * 1989-03-17 1992-05-12 Genentech, Inc. Temporal gamma-interferon administration for allergies
US5693622A (en) 1989-03-21 1997-12-02 Vical Incorporated Expression of exogenous polynucleotide sequences cardiac muscle of a mammal
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5629158A (en) * 1989-03-22 1997-05-13 Cemu Bitecknik Ab Solid phase diagnosis of medical conditions
US4958013A (en) 1989-06-06 1990-09-18 Northwestern University Cholesteryl modified oligonucleotides
US5399346A (en) * 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
US5178860A (en) * 1989-09-01 1993-01-12 Coopers Animal Health Limited Adjuvant complexes and vaccine made therefrom
US4981684A (en) * 1989-10-24 1991-01-01 Coopers Animal Health Limited Formation of adjuvant complexes
US5399676A (en) * 1989-10-23 1995-03-21 Gilead Sciences Oligonucleotides with inverted polarity
US5676954A (en) 1989-11-03 1997-10-14 Vanderbilt University Method of in vivo delivery of functioning foreign genes
US5786189A (en) 1989-11-29 1998-07-28 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccine
US5457189A (en) 1989-12-04 1995-10-10 Isis Pharmaceuticals Antisense oligonucleotide inhibition of papillomavirus
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5514788A (en) * 1993-05-17 1996-05-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide modulation of cell adhesion
US5514577A (en) * 1990-02-26 1996-05-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide therapies for modulating the effects of herpes viruses
US5248670A (en) 1990-02-26 1993-09-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides for inhibiting herpesviruses
US5166195A (en) 1990-05-11 1992-11-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibitors of the human immunodeficiency virus phosphorothioate oligonucleotides
EP0533838B1 (en) 1990-06-11 1997-12-03 NeXstar Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid ligands
EP0468520A3 (en) 1990-07-27 1992-07-01 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Immunostimulatory remedies containing palindromic dna sequences
US5245022A (en) * 1990-08-03 1993-09-14 Sterling Drug, Inc. Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides
US5591720A (en) 1990-08-16 1997-01-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating the effects of cytomegalovirus infections
US6042838A (en) 1991-02-15 2000-03-28 Uab Research Foundation immunogenic compositions for mucosal administration of pneumococcal surface protein A (PspA)
CA2082951C (en) * 1991-03-15 1999-12-21 Robert M. Platz Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor
US5683985A (en) 1991-04-18 1997-11-04 The Salk Institute For Biological Studies Oligonucleotide decoys and methods relating thereto
US5498410A (en) * 1991-04-22 1996-03-12 Gleich; Gerald J. Method for the treatment of eosinophil-associated conditions with anionic polymers
US5681555A (en) 1991-04-22 1997-10-28 Gleich; Gerald J. Method for the treatment of bronchial asthma by parenteral administration of anionic polymers
WO1994008003A1 (en) 1991-06-14 1994-04-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDE INHIBITION OF THE ras GENE
EP0587749A4 (en) 1991-05-31 1995-08-30 Genta Inc Compositions and delivery systems for transdermal administration of neutral oligomers
US5582986A (en) 1991-06-14 1996-12-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide inhibition of the ras gene
US6030954A (en) * 1991-09-05 2000-02-29 University Of Connecticut Targeted delivery of poly- or oligonucleotides to cells
US5576302A (en) 1991-10-15 1996-11-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating hepatitis C virus having phosphorothioate linkages of high chiral purity
JPH07501525A (ja) 1991-11-15 1995-02-16 テンプル　ユニバーシティ　‐　オブ　ザ　コモンウェルス　システム　オブ　ハイヤー　エデュケーション ｃ−ｍｙｂプロトオンコジーンに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドによる黒色腫の処置
AU3143993A (en) 1991-11-18 1993-06-15 Tanox Biosystems, Inc. Anti-sense oligonucleotides for isotype-specific suppression of immunoglobulin production
US5858784A (en) * 1991-12-17 1999-01-12 The Regents Of The University Of California Expression of cloned genes in the lung by aerosol- and liposome-based delivery
ES2174845T3 (es) 1992-02-04 2002-11-16 Chiron Corp Terapeutica de la hepatitis.
US5643578A (en) * 1992-03-23 1997-07-01 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of DNA transcription unit
US6498147B2 (en) 1992-05-22 2002-12-24 The Scripps Research Institute Suppression of nuclear factor-κb dependent processes using oligonucleotides
WO1993024640A2 (en) 1992-06-04 1993-12-09 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for in vivo gene therapy
US5726518A (en) * 1992-07-22 1998-03-10 Nikon Corporation Supporting device of relative moving element of vibration actuator or vibration motor
US5585479A (en) 1992-07-24 1996-12-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Antisense oligonucleotides directed against human ELAM-I RNA
EP0652890B1 (en) 1992-07-27 1998-01-14 HYBRIDON, Inc. Oligonucleotide alkylphosphonothioates
US6107062A (en) * 1992-07-30 2000-08-22 Inpax, Inc. Antisense viruses and antisense-ribozyme viruses
WO1994004196A1 (en) 1992-08-14 1994-03-03 Imperial Cancer Research Technology Limited Tumour therapy
US5429199A (en) * 1992-08-26 1995-07-04 Kennametal Inc. Cutting bit and cutting insert
HUT72400A (en) 1992-10-05 1996-04-29 Hybridon Inc Therapeutic anti-hiv oligonucleotide, pharmaceutical compositions containing them and methods for use of compositions
US5593972A (en) * 1993-01-26 1997-01-14 The Wistar Institute Genetic immunization
DE69429337T3 (de) * 1993-04-02 2012-08-30 Anticancer Inc. Verfahren zur verabreichung von förderlichen zusammensetzungen auf die haarfollikel
US5567604A (en) 1993-04-23 1996-10-22 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-viral guanosine-rich oligonucleotides
SG54115A1 (en) * 1993-04-27 1998-11-16 Gerber Scient Products Inc Thermal printing apparatus with improved power supply
US5840497A (en) 1993-06-11 1998-11-24 The Commonwealth Of Australia Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization Method for specific silencing of genes by DNA methylation
KR960703170A (ko) * 1993-06-23 1996-06-19 알버트 디. 프리센. 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 인간면역결핍바이러스감염에서 그것의 치료적이용(antisense oligonucleotides and therapeutic use thereof in human immunodeficiency virus infection)
AU688364B2 (en) 1993-07-19 1998-03-12 Gen-Probe Incorporated Oligonucleotides with activity against human immunodeficiency virus
US6004534A (en) 1993-07-23 1999-12-21 Massachusetts Institute Of Technology Targeted polymerized liposomes for improved drug delivery
US6605708B1 (en) 1993-07-28 2003-08-12 Hybridon, Inc. Building blocks with carbamate internucleoside linkages and oligonucleotides derived therefrom
US5849719A (en) * 1993-08-26 1998-12-15 The Regents Of The University Of California Method for treating allergic lung disease
US5830877A (en) 1993-08-26 1998-11-03 The Regents Of The University Of California Method, compositions and devices for administration of naked polynucleotides which encode antigens and immunostimulatory
US5804566A (en) 1993-08-26 1998-09-08 The Regents Of The University Of California Methods and devices for immunizing a host through administration of naked polynucleotides with encode allergenic peptides
US5679647A (en) 1993-08-26 1997-10-21 The Regents Of The University Of California Methods and devices for immunizing a host against tumor-associated antigens through administration of naked polynucleotides which encode tumor-associated antigenic peptides
CA2169635C (en) 1993-08-26 2002-11-12 Dennis A. Carson Method, compositions and devices for administration of naked polynucleotides which encode biologically active peptides
US5985847A (en) 1993-08-26 1999-11-16 The Regents Of The University Of California Devices for administration of naked polynucleotides which encode biologically active peptides
US20030109469A1 (en) * 1993-08-26 2003-06-12 Carson Dennis A. Recombinant gene expression vectors and methods for use of same to enhance the immune response of a host to an antigen
FR2711670B1 (fr) * 1993-10-22 1996-01-12 Pasteur Institut Vecteur nucléotidique, composition le contenant et vaccin pour l'immunisation à l'encontre d'une hépatite.
DE4338704A1 (de) * 1993-11-12 1995-05-18 Hoechst Ag Stabilisierte Oligonucleotide und deren Verwendung
US5595756A (en) * 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
AU1313095A (en) 1993-12-23 1995-07-10 Biognostik Gesellschaft Fur Biomolekulare Diagnostik Mbh Antisense nucleic acids for the prevention and treatment of disorders in which expression of c-erbb plays a role
US5712384A (en) 1994-01-05 1998-01-27 Gene Shears Pty Ltd. Ribozymes targeting retroviral packaging sequence expression constructs and recombinant retroviruses containing such constructs
US5728518A (en) * 1994-01-12 1998-03-17 The Immune Response Corporation Antiviral poly-and oligonucleotides
US5646126A (en) 1994-02-28 1997-07-08 Epoch Pharmaceuticals Sterol modified oligonucleotide duplexes having anticancer activity
EP0804249A2 (en) 1994-03-15 1997-11-05 Brown University Research Foundation Polymeric gene delivery system
US5596091A (en) * 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
WO1995026204A1 (en) 1994-03-25 1995-10-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs
US6727230B1 (en) * 1994-03-25 2004-04-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs
US5451569A (en) 1994-04-19 1995-09-19 Hong Kong University Of Science And Technology R & D Corporation Limited Pulmonary drug delivery system
US5696248A (en) 1994-06-15 1997-12-09 Hoechst Aktiengesellschaft 3'-modified oligonucleotide derivatives
US5741516A (en) 1994-06-20 1998-04-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US6429199B1 (en) * 1994-07-15 2002-08-06 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules for activating dendritic cells
US20030050263A1 (en) * 1994-07-15 2003-03-13 The University Of Iowa Research Foundation Methods and products for treating HIV infection
US20030026782A1 (en) * 1995-02-07 2003-02-06 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US7935675B1 (en) * 1994-07-15 2011-05-03 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6239116B1 (en) * 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
AU3133695A (en) 1994-07-18 1996-02-16 University Of North Carolina At Chapel Hill, The Oligonucleoside compounds and methods for inhibiting tumor growth, invasion and metastasis
US5646262A (en) * 1994-07-28 1997-07-08 Georgetown University Antisense oligonucleotides against hepatitis B viral replication
US5753613A (en) * 1994-09-30 1998-05-19 Inex Pharmaceuticals Corporation Compositions for the introduction of polyanionic materials into cells
US5785992A (en) * 1994-09-30 1998-07-28 Inex Pharmaceuticals Corp. Compositions for the introduction of polyanionic materials into cells
US6027726A (en) * 1994-09-30 2000-02-22 Inex Phamaceuticals Corp. Glycosylated protein-liposome conjugates and methods for their preparation
WO1996012008A1 (en) 1994-10-13 1996-04-25 Merck & Co., Inc. Synthesis of methylase-resistant genes
US6630455B1 (en) 1995-01-13 2003-10-07 Vanderbilt University Methods for inducing mucosal immune responses
US6008202A (en) * 1995-01-23 1999-12-28 University Of Pittsburgh Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production
US5795587A (en) * 1995-01-23 1998-08-18 University Of Pittsburgh Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production
US5674483A (en) * 1995-01-31 1997-10-07 National Jewish Medical And Research Center Treatment for diseases involving inflammation
DE19502912A1 (de) 1995-01-31 1996-08-01 Hoechst Ag G-Cap Stabilisierte Oligonucleotide
EP0810882A4 (en) 1995-02-09 1999-05-19 Icn Pharmaceuticals METHOD AND COMPOSITION FOR REGULATING THE CD28 EXPRESSION
US5932556A (en) 1995-09-17 1999-08-03 Tam; Robert C Methods and compositions for regulation of CD28 expression
GB9505438D0 (en) 1995-03-17 1995-05-03 Sod Conseils Rech Applic Antisense oligonucleotides
US5703057A (en) 1995-04-07 1997-12-30 Board Of Regents The University Of Texas System Expression library immunization
ATE210466T1 (de) * 1995-04-13 2001-12-15 Milkhaus Lab Inc Methoden zur behandlung von atemwegserkrankungen
US6096721A (en) * 1995-04-13 2000-08-01 Milkhaus Laboratory, Inc. Method for treating mucositis by sublingual administration of DNA
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
US5858987A (en) * 1995-05-05 1999-01-12 Mitotix, Inc. E6AP antisense constructs and methods of use
MX9708663A (es) 1995-05-11 1998-02-28 Applied Research Systems Inhibidor de actividad il-6.
US5955059A (en) * 1995-06-06 1999-09-21 Trustees Of Boston University Use of locally applied DNA fragments
US5830878A (en) 1995-06-07 1998-11-03 Megabios Corporation Cationic lipid: DNA complexes for gene targeting
US5981501A (en) 1995-06-07 1999-11-09 Inex Pharmaceuticals Corp. Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers
US6040296A (en) * 1995-06-07 2000-03-21 East Carolina University Specific antisense oligonucleotide composition & method for treatment of disorders associated with bronchoconstriction and lung inflammation
US7034007B1 (en) * 1995-06-07 2006-04-25 East Carolina University Low adenosine anti-sense oligonucleotide, compositions, kit & method for treatment of airway disorders associated with bronchoconstriction, lung inflammation, allergy(ies) & surfactant depletion
US6025339A (en) * 1995-06-07 2000-02-15 East Carolina University Composition, kit and method for treatment of disorders associated with bronchoconstriction and lung inflammation
US5705385A (en) * 1995-06-07 1998-01-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
US5994315A (en) 1995-06-07 1999-11-30 East Carolina University Low adenosine agent, composition, kit and method for treatment of airway disease
WO1996040964A2 (en) 1995-06-07 1996-12-19 Inex Pharmaceuticals Corporation Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
WO1997000957A1 (en) 1995-06-23 1997-01-09 President And Fellows Of Harvard College Transcriptional regulation of genes encoding vascular endothelial growth factor receptors
US5985662A (en) 1995-07-13 1999-11-16 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of hepatitis B virus replication
US6248720B1 (en) * 1996-07-03 2001-06-19 Brown University Research Foundation Method for gene therapy using nucleic acid loaded polymeric microparticles
EP0840623B1 (en) 1995-07-21 2007-07-18 Brown University Research Foundation Compositions for gene therapy comprising nucleic acid loaded polymeric microparticles
US5968909A (en) 1995-08-04 1999-10-19 Hybridon, Inc. Method of modulating gene expression with reduced immunostimulatory response
US6667293B1 (en) * 1995-09-12 2003-12-23 Hybridon, Inc. Use of cyclodextrins to modulate gene expression with reduced immunostimulatory response
EP0871487B1 (en) 1995-10-04 2009-05-27 Immunex Corporation Dendritic cell stimulatory factor
US5736152A (en) * 1995-10-27 1998-04-07 Atrix Laboratories, Inc. Non-polymeric sustained release delivery system
US5780448A (en) * 1995-11-07 1998-07-14 Ottawa Civic Hospital Loeb Research DNA-based vaccination of fish
EP0879284B1 (en) 1996-01-30 2009-07-29 The Regents of The University of California Gene expression vectors which generate an antigen specific immune response and methods of using the same
US20030078223A1 (en) * 1996-01-30 2003-04-24 Eyal Raz Compositions and methods for modulating an immune response
US5994316A (en) 1996-02-21 1999-11-30 The Immune Response Corporation Method of preparing polynucleotide-carrier complexes for delivery to cells
SE9600648D0 (sv) * 1996-02-21 1996-02-21 Bror Morein Receptorbimdande enhet
SE9600647D0 (sv) 1996-02-21 1996-02-21 Bror Morein Ny användning
US5843770A (en) 1996-03-11 1998-12-01 The Immune Response Corporation Antisense constructs directed against viral post-transcriptional regulatory sequences
US6620805B1 (en) 1996-03-14 2003-09-16 Yale University Delivery of nucleic acids by porphyrins
US6030955A (en) * 1996-03-21 2000-02-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York And Imclone Systems, Inc. Methods of affecting intracellular phosphorylation of tyrosine using phosphorothioate oligonucleotides, and antiangiogenic and antiproliferative uses thereof
US6121247A (en) 1996-03-29 2000-09-19 The Johns Hopkins University Therapy for allergic diseases
US6184037B1 (en) 1996-05-17 2001-02-06 Genemedicine, Inc. Chitosan related compositions and methods for delivery of nucleic acids and oligonucleotides into a cell
AU705647B2 (en) 1996-07-10 1999-05-27 Immunex Corporation Method of activating dendritic cells
ATE340259T1 (de) 1996-07-16 2006-10-15 Archibald James Mixson Kationisches vehikel: dns komplexe und ihre verwendung in gentherapie
US5854418A (en) 1996-07-25 1998-12-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) viral macrophage inflammatory protein-1α II (vMIP-1α II) and uses thereof
US5856462A (en) * 1996-09-10 1999-01-05 Hybridon Incorporated Oligonucleotides having modified CpG dinucleosides
DE19637223A1 (de) * 1996-09-13 1998-04-09 Beiersdorf Ag Wiederlösbare, selbstklebende Vorrichtung
CA2268825C (en) * 1996-10-11 2006-04-18 The Regents Of The University Of California Immunostimulatory polynucleotide/immunomodulatory molecule conjugates
US6562345B1 (en) * 1996-11-12 2003-05-13 City Of Hope Immuno-reactive peptide CTL epitopes of human cytomegalovirus
US20060002959A1 (en) * 1996-11-14 2006-01-05 Government Of The United States Skin-sctive adjuvants for transcutaneous immuization
US20060002949A1 (en) * 1996-11-14 2006-01-05 Army Govt. Of The Usa, As Rep. By Secretary Of The Office Of The Command Judge Advocate, Hq Usamrmc. Transcutaneous immunization without heterologous adjuvant
US6797276B1 (en) * 1996-11-14 2004-09-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Use of penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response
SE9604296D0 (sv) 1996-11-22 1996-11-22 Astra Ab New pharmaceutical formulation of polypeptides
JP2002512599A (ja) 1996-12-27 2002-04-23 アイ・シー・エヌ・フアーマシユーテイカルズ・インコーポレイテツド 富グアニジンオリゴアプタマー及び免疫応答の調節方法
FR2757876B1 (fr) 1996-12-27 1999-04-09 Biovector Therapeutics Sa Conjuges d'un vecteur particulaire et d'oligonucleotides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
EP0855184A1 (en) 1997-01-23 1998-07-29 Grayson B. Dr. Lipford Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination
US20030064945A1 (en) * 1997-01-31 2003-04-03 Saghir Akhtar Enzymatic nucleic acid treatment of diseases or conditions related to levels of epidermal growth factor receptors
GB9702021D0 (en) 1997-01-31 1997-03-19 Imperial College Medicaments
US7517952B1 (en) * 1997-02-25 2009-04-14 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
JP2001513776A (ja) * 1997-02-28 2001-09-04 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション ＬＰＳ関連障害の処置における非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸の使用
DK1005368T3 (da) * 1997-03-10 2010-01-04 Ottawa Hospital Res Inst Anvendelse af nukleinsyrer, der indeholder ikke-metyleret CpG dinukleotid i kombination med alun som hjælpestoffer
US6406705B1 (en) 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
US5965542A (en) 1997-03-18 1999-10-12 Inex Pharmaceuticals Corp. Use of temperature to control the size of cationic liposome/plasmid DNA complexes
US6426334B1 (en) 1997-04-30 2002-07-30 Hybridon, Inc. Oligonucleotide mediated specific cytokine induction and reduction of tumor growth in a mammal
US20030104044A1 (en) * 1997-05-14 2003-06-05 Semple Sean C. Compositions for stimulating cytokine secretion and inducing an immune response
EP1027033B1 (en) * 1997-05-14 2009-07-22 The University Of British Columbia High efficiency encapsulation of nucleic acids in lipid vesicles
US6835395B1 (en) 1997-05-14 2004-12-28 The University Of British Columbia Composition containing small multilamellar oligodeoxynucleotide-containing lipid vesicles
EP0983289A4 (en) 1997-05-19 2001-04-25 Merck & Co Inc OLIGONUCLEOTIDE ADJUVANT
AU7690898A (en) 1997-05-20 1998-12-11 Ottawa Civic Hospital Loeb Research Institute Vectors and methods for immunization or therapeutic protocols
JP4101888B2 (ja) * 1997-06-06 2008-06-18 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 免疫刺激オリゴヌクレオチド、その組成物およびその使用方法
US20040006034A1 (en) * 1998-06-05 2004-01-08 Eyal Raz Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
US6589940B1 (en) 1997-06-06 2003-07-08 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
US6221882B1 (en) * 1997-07-03 2001-04-24 University Of Iowa Research Foundation Methods for inhibiting immunostimulatory DNA associated responses
AU8428998A (en) 1997-07-24 1999-02-16 Inex Pharmaceuticals Corporation Preparation of lipid-nucleic acid particles using a solvent extraction and direct hydration method
US5877309A (en) * 1997-08-13 1999-03-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides against JNK
DE69833438T2 (de) 1997-08-19 2006-10-26 Idera Pharmaceuticals, Inc., Cambridge Hiv-spezifische oligonukleotide und verfahren zu deren verwendung
JP4663113B2 (ja) 1997-09-05 2011-03-30 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 抗原刺激顆粒球媒介炎症を予防または軽減するための免疫刺激オリゴヌクレオチドの使用
US6749856B1 (en) 1997-09-11 2004-06-15 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services Mucosal cytotoxic T lymphocyte responses
CN1285753A (zh) * 1997-12-02 2001-02-28 鲍德杰克特疫苗公司 透皮给药微粒疫苗组合物
WO1999030686A1 (en) 1997-12-12 1999-06-24 Inex Pharmaceuticals Corp. Cationic drugs encapsulated in anionic liposomes
US7393630B2 (en) * 1997-12-16 2008-07-01 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Use of microparticles combined with submicron oil-in-water emulsions
EP1041976B1 (en) 1997-12-23 2006-04-05 Inex Pharmaceuticals Corp. Polyamide oligomers
GB9727262D0 (en) 1997-12-24 1998-02-25 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
US20050031638A1 (en) * 1997-12-24 2005-02-10 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccine
JPH11209289A (ja) * 1998-01-22 1999-08-03 Taisho Pharmaceut Co Ltd 粘膜免疫誘起剤
WO1999043350A1 (en) 1998-02-25 1999-09-02 Iomai Corporation Use of skin penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response induced by adp-ribosylating exotoxin
PT1062248E (pt) * 1998-03-12 2004-10-29 Lucite Int Uk Ltd Composicao de polimero
ATE356630T1 (de) * 1998-04-03 2007-04-15 Univ Iowa Res Found Verfahren und produkte zur stimulierung des immunsystems mittels immunotherapeutischer oligonukleotide und zytokine
AU746163B2 (en) 1998-04-09 2002-04-18 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Adjuvant compositions
WO1999055743A1 (en) 1998-04-28 1999-11-04 Inex Pharmaceuticals Corporation Polyanionic polymers which enhance fusogenicity
WO1999056755A1 (en) 1998-05-06 1999-11-11 University Of Iowa Research Foundation Methods for the prevention and treatment of parasitic infections and related diseases using cpg oligonucleotides
JP2002514397A (ja) * 1998-05-14 2002-05-21 コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー ＣｐＧオリゴヌクレオチドを用いる造血調節の方法
DK1077722T3 (da) 1998-05-22 2006-11-27 Ottawa Health Research Inst Fremgangsmåder og produkter til induktion af mukosaimmunitet
US6881561B1 (en) 1998-05-27 2005-04-19 Cheil Jedang Corporation Endonuclease of immune cell, process for producing the same and immune adjuvant using the same
US6248329B1 (en) * 1998-06-01 2001-06-19 Ramaswamy Chandrashekar Parasitic helminth cuticlin nucleic acid molecules and uses thereof
US6562798B1 (en) * 1998-06-05 2003-05-13 Dynavax Technologies Corp. Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof
ATE274923T1 (de) 1998-06-10 2004-09-15 Biognostik Ges Stimulierung des immunsystems
EP1089751A4 (en) * 1998-06-23 2001-07-25 Univ Leland Stanford Junior ADJUVANTE THERAPY
US20040247662A1 (en) 1998-06-25 2004-12-09 Dow Steven W. Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
US20030022854A1 (en) * 1998-06-25 2003-01-30 Dow Steven W. Vaccines using nucleic acid-lipid complexes
US6693086B1 (en) 1998-06-25 2004-02-17 National Jewish Medical And Research Center Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
JP2002520038A (ja) 1998-07-20 2002-07-09 アイネックス ファーマシューティカルズ コーポレイション リポソームカプセル化核酸複合体
WO2000006588A1 (en) 1998-07-27 2000-02-10 University Of Iowa Research Foundation STEREOISOMERS OF CpG OLIGONUCLEOTIDES AND RELATED METHODS
GB9817052D0 (en) 1998-08-05 1998-09-30 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
EP0979869A1 (en) 1998-08-07 2000-02-16 Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH Short oligonucleotides for the inhibition of VEGF expression
JP4620251B2 (ja) 1998-08-10 2011-01-26 アンチジェニックス・インコーポレイテッド Ｃｐｇおよびサポニンアジュバントの組成物並びにその方法
US20010034330A1 (en) 1998-08-10 2001-10-25 Charlotte Kensil Innate immunity-stimulating compositions of CpG and saponin and methods thereof
JP2002523048A (ja) * 1998-08-20 2002-07-30 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 共役二重結合の形成に関係する植物脂肪酸改質酵素の遺伝子
AU777225B2 (en) 1998-09-03 2004-10-07 Coley Pharmaceutical Gmbh G-motif oligonucleotides and uses thereof
US20020065236A1 (en) 1998-09-09 2002-05-30 Yew Nelson S. CpG reduced plasmids and viral vectors
FR2783170B1 (fr) * 1998-09-11 2004-07-16 Pasteur Merieux Serums Vacc Emulsion immunostimulante
EP1671646A3 (en) 1998-09-18 2007-08-29 Dynavax Technologies Corporation Methods of treating IgE-associated disorders and compositions for use therein
EP1113818B1 (en) 1998-09-18 2006-05-17 Dynavax Technologies Corporation METHODS OF TREATING IgE-ASSOCIATED DISORDERS AND COMPOSITIONS FOR USE THEREIN
AU776288B2 (en) 1998-10-05 2004-09-02 Regents Of The University Of California, The Methods and adjuvants for stimulating mucosal immunity
CA2344558A1 (en) 1998-10-09 2000-04-20 Dynavax Technologies Corporation Anti hiv compositions comprising immunostimulatory polynucleotides and hiv antigens
TR200101055T2 (tr) 1998-10-16 2001-09-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvan sistemler ve aşılar
AUPP807399A0 (en) 1999-01-08 1999-02-04 Csl Limited Improved immunogenic lhrh composition and methods relating thereto
US6887464B1 (en) 1999-02-02 2005-05-03 Biocache Pharmaceuticals, Inc. Advanced antigen presentation platform
WO2000046365A1 (en) 1999-02-02 2000-08-10 Biocache Pharmaceuticals, Inc. Advanced antigen presentation platform
AU2870300A (en) 1999-02-05 2000-08-25 Genzyme Corporation Use of cationic lipids to generate anti-tumor immunity
US6207819B1 (en) 1999-02-12 2001-03-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds, processes and intermediates for synthesis of mixed backbone oligomeric compounds
WO2000054803A2 (en) * 1999-03-16 2000-09-21 Panacea Pharmaceuticals, Llc Immunostimulatory nucleic acids and antigens
FR2790955B1 (fr) 1999-03-19 2003-01-17 Assist Publ Hopitaux De Paris Utilisation d'oligonucleotides stabilises comme principe actif antitumoral
SI1162999T1 (sl) 1999-03-19 2007-04-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Vakcina proti Streptococcus pneumoniae
US6625426B2 (en) * 1999-03-22 2003-09-23 Ronald Baratono Combined rear view mirror and telephone
US6977245B2 (en) * 1999-04-12 2005-12-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
WO2000061151A2 (en) 1999-04-12 2000-10-19 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
WO2000062787A1 (en) 1999-04-15 2000-10-26 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for use in potentiating antigen presentation by antigen presenting cells
ES2228497T3 (es) 1999-04-19 2005-04-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Composicion adyuvante que comprende saponina y un oligonucleotido inmunoestimulante.
US6558670B1 (en) * 1999-04-19 2003-05-06 Smithkline Beechman Biologicals S.A. Vaccine adjuvants
ATE275727T1 (de) 1999-04-29 2004-09-15 Coley Pharm Gmbh Screening nach modulatoren der funktion von immunstimulatorischer dna
BR0010323A (pt) 1999-05-06 2002-01-08 Immune Response Corp Inc Composições imunogênicas, kit e método de confecção da mesma para uso na imunização de um mamìfero
US6737066B1 (en) * 1999-05-06 2004-05-18 The Immune Response Corporation HIV immunogenic compositions and methods
WO2000075304A1 (fr) 1999-06-08 2000-12-14 Aventis Pasteur Oligonucleotide immunostimulant
CA2412345A1 (en) 1999-06-16 2000-12-21 University Of Iowa Research Foundation Antagonism of immunostimulatory cpg-oligonucleotides by 4-aminoquinolines and other weak bases
US20050002958A1 (en) * 1999-06-29 2005-01-06 Smithkline Beecham Biologicals Sa Vaccines
GB9915204D0 (en) 1999-06-29 1999-09-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
EP1198249B1 (en) 1999-06-29 2005-10-19 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Use of cpg as an adjuvant for hiv vaccine
US6514948B1 (en) * 1999-07-02 2003-02-04 The Regents Of The University Of California Method for enhancing an immune response
FR2795963A1 (fr) * 1999-07-08 2001-01-12 Pasteur Merieux Serums Vacc Polynucleotide immunostimulant
DE19935756A1 (de) * 1999-07-27 2001-02-08 Mologen Forschungs Entwicklung Kovalent geschlossenes Nukleinsäuremolekül zur Immunstimulation
AU783745B2 (en) 1999-08-13 2005-12-01 Hybridon, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
JP2003507341A (ja) 1999-08-19 2003-02-25 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 免疫刺激配列およびそれを使用するための組成物を用いて免疫応答を調節するための方法およびそれを使用するための組成物
US20050249794A1 (en) 1999-08-27 2005-11-10 Semple Sean C Compositions for stimulating cytokine secretion and inducing an immune response
US6395678B1 (en) * 1999-09-01 2002-05-28 Aero-Terra-Aqua Technologies Corporation Bead and process for removing dissolved metal contaminants
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921147D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
KR100863630B1 (ko) * 1999-09-25 2008-10-15 유니버시티 오브 아이오와 리써치 파운데이션 면역자극성 핵산
US6949520B1 (en) 1999-09-27 2005-09-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
WO2001022990A2 (en) * 1999-09-27 2001-04-05 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
AU1236801A (en) * 1999-10-27 2001-05-08 Chiron Corporation Activation of hcv-specific t cells
US7223398B1 (en) 1999-11-15 2007-05-29 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory compositions containing an immunostimulatory sequence linked to antigen and methods of use thereof
AU772617B2 (en) 1999-11-19 2004-05-06 Csl Limited Vaccine compositions
AU4139801A (en) * 1999-12-06 2001-06-12 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas, The Controlled delivery of antigens
WO2001045750A1 (en) 1999-12-21 2001-06-28 The Regents Of The University Of California Method for preventing an anaphylactic reaction
WO2001051083A2 (en) 2000-01-13 2001-07-19 Antigenics Inc. Innate immunity-stimulating compositions of cpg and saponin and methods thereof
ATE378348T1 (de) * 2000-01-14 2007-11-15 Us Health Oligodeoxynukleotide und ihre verwendung zur induktion einer immunreaktion
WO2001095935A1 (en) * 2000-01-20 2001-12-20 Ottawa Health Research Institute Immunostimulatory nucleic acids for inducing a th2 immune response
US6852705B2 (en) * 2000-01-21 2005-02-08 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
CA2398432C (en) 2000-01-26 2012-06-19 Hybridon, Inc. Modulation of oligonucleotide cpg-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
AT409085B (de) 2000-01-28 2002-05-27 Cistem Biotechnologies Gmbh Pharmazeutische zusammensetzung zur immunmodulation und herstellung von vakzinen
CA2398756A1 (en) 2000-01-31 2001-08-02 Eyal Raz Immunomodulatory polynucleotides in treatment of an infection by an intracellular pathogen
US20030158134A1 (en) 2000-01-31 2003-08-21 Gerald Voss Vaccine for the prophylactic or therapeutic immunization against hiv
US7585847B2 (en) 2000-02-03 2009-09-08 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory nucleic acids for the treatment of asthma and allergy
FR2805265B1 (fr) 2000-02-18 2002-04-12 Aventis Pasteur Oligonucleotides immunostimulants
US20030130217A1 (en) * 2000-02-23 2003-07-10 Eyal Raz Method for treating inflammatory bowel disease and other forms of gastrointestinal inflammation
CA2399550A1 (en) 2000-02-23 2001-08-30 The Regents Of The University Of California Method for treating inflammatory bowel disease and other forms of gastrointestinal inflammation
EP1261366A4 (en) 2000-02-24 2003-06-18 Univ Leland Stanford Junior ADJUVANT TREATMENT BY ACTIVATING DENDRITIC CELLS IN VIVO
US20020156033A1 (en) * 2000-03-03 2002-10-24 Bratzler Robert L. Immunostimulatory nucleic acids and cancer medicament combination therapy for the treatment of cancer
US20040131628A1 (en) * 2000-03-08 2004-07-08 Bratzler Robert L. Nucleic acids for the treatment of disorders associated with microorganisms
US20030129251A1 (en) * 2000-03-10 2003-07-10 Gary Van Nest Biodegradable immunomodulatory formulations and methods for use thereof
US20020107212A1 (en) 2000-03-10 2002-08-08 Nest Gary Van Methods of reducing papillomavirus infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
US20010046967A1 (en) 2000-03-10 2001-11-29 Gary Van Nest Methods of preventing and treating respiratory viral infection using immunomodulatory polynucleotide
US20020098199A1 (en) 2000-03-10 2002-07-25 Gary Van Nest Methods of suppressing hepatitis virus infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
US7157437B2 (en) * 2000-03-10 2007-01-02 Dynavax Technologies Corporation Methods of ameliorating symptoms of herpes infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
US6851845B2 (en) * 2000-03-10 2005-02-08 The Maitland Company, Inc. Method and apparatus for processing waste material
US20020028784A1 (en) * 2000-03-10 2002-03-07 Nest Gary Van Methods of preventing and treating viral infections using immunomodulatory polynucleotide sequences
US7129222B2 (en) * 2000-03-10 2006-10-31 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory formulations and methods for use thereof
CA2404041A1 (en) 2000-03-28 2001-10-04 The Regents Of The University Of California Methods for increasing a cytotoxic t lymphocyte response in vivo
US8246945B2 (en) * 2000-04-06 2012-08-21 University Of Arkansas Methods and reagents for decreasing clinical reaction to allergy
WO2001076642A1 (en) 2000-04-07 2001-10-18 The Regents Of The University Of California Synergistic improvements to polynucleotide vaccines
US7524826B2 (en) 2000-04-14 2009-04-28 Mcmaster University And Hamilton Health Sciences Corporation Method of inhibiting the generation of active thrombin on the surface of a cell within an atherosclerotic plaque
US6321873B1 (en) * 2000-04-21 2001-11-27 Tra-Lor-Mate, Inc. Ladder mounting system
WO2001083503A2 (en) 2000-05-01 2001-11-08 Hybridon, Inc. MODULATION OF OLIGONUCLEOTIDE CpG-MEDIATED IMMUNE STIMULATION BY POSITIONAL MODIFICATION OF NUCLEOSIDES
US6893821B2 (en) * 2000-05-05 2005-05-17 The Regents Of The University Of California Agents that modulate DNA-PK activity and methods of use thereof
US20020013287A1 (en) 2000-05-09 2002-01-31 Reliable Biopharmaceuticals, Inc. St Louis Missouri Polymeric compounds useful as prodrugs
ES2243497T3 (es) 2000-05-12 2005-12-01 PHARMACIA & UPJOHN COMPANY LLC Composicion de vacuna, procedimiento de preparacion de la misma y procedimiento para vacunacion de vertebrados.
US6339630B1 (en) * 2000-05-18 2002-01-15 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Sealed drive screw operator
GB0011903D0 (en) * 2000-05-18 2000-07-05 Astrazeneca Ab Combination chemotherapy
WO2001093902A2 (en) 2000-06-07 2001-12-13 Biosynexus Incorporated Immunostimulatory rna/dna hybrid molecules
AU7013401A (en) * 2000-06-22 2002-01-02 Univ Iowa Res Found Methods for enhancing antibody-induced cell lysis and treating cancer
US20020165178A1 (en) * 2000-06-28 2002-11-07 Christian Schetter Immunostimulatory nucleic acids for the treatment of anemia, thrombocytopenia, and neutropenia
JP5511117B2 (ja) 2000-07-27 2014-06-04 チルドレンズ ホスピタル アンド リサーチ センター アット オークランド 髄膜炎菌に起因する疾患に対する広域防御のためのワクチン
AU2001286405B2 (en) 2000-07-31 2007-05-10 Yale University Innate immune system-directed vaccines
US20020198165A1 (en) * 2000-08-01 2002-12-26 Bratzler Robert L. Nucleic acids for the prevention and treatment of gastric ulcers
EP1373564A2 (de) * 2000-09-01 2004-01-02 Epigenomics AG Diagnose von bestehenden erkrankungen oder der prädisposition für bestimmte erkrankungen
MXPA03001834A (es) 2000-09-01 2003-08-01 Epigenomics Ag Metodo para determinar el grado de metilacion de determinadas citocinas en adn genomico en el contexto de secuencia 5'-cpg-3'.
US20020091097A1 (en) * 2000-09-07 2002-07-11 Bratzler Robert L. Nucleic acids for the prevention and treatment of sexually transmitted diseases
JP2005500806A (ja) * 2000-09-15 2005-01-13 コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー ＣｐＧに基づく免疫アゴニスト／免疫アンタゴニストの高スループットスクリーニングのためのプロセス
GB0023008D0 (en) 2000-09-20 2000-11-01 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
US6787524B2 (en) * 2000-09-22 2004-09-07 Tanox, Inc. CpG oligonucleotides and related compounds for enhancing ADCC induced by anti-IgE antibodies
EP1322656B1 (en) 2000-09-26 2008-01-16 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory activity of immunostimulatory oligonucleotide analogs by positional chemical changes
SE0003538D0 (sv) * 2000-09-29 2000-09-29 Isconova Ab New immunogenic complex
US7537772B1 (en) * 2000-10-02 2009-05-26 Emergent Product Development Gaithersburg Inc. Chlamydia protein, gene sequence and the uses thereof
FR2814958B1 (fr) 2000-10-06 2003-03-07 Aventis Pasteur Composition vaccinale
GB0025577D0 (en) 2000-10-18 2000-12-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
PT2266603E (pt) * 2000-10-18 2012-11-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacinas tumorais
CA2426047A1 (en) 2000-11-02 2002-05-10 Inex Pharmaceuticals Corporation Therapeutic oligonucleotides of reduced toxicity
WO2002046749A2 (en) * 2000-12-08 2002-06-13 3M Innovative Properties Company Screening method for identifying compounds that selectively induce interferon alpha
EP1350262B8 (en) 2000-12-08 2008-08-13 Coley Pharmaceuticals GmbH Cpg-like nucleic acids and methods of use thereof
WO2002053141A2 (en) * 2000-12-14 2002-07-11 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Inhibition of angiogenesis by nucleic acids
ATE471374T1 (de) * 2000-12-27 2010-07-15 Dynavax Tech Corp Immunomodulatorische polynukleotide und verfahren zur deren verwendung
US7337306B2 (en) * 2000-12-29 2008-02-26 Stmicroelectronics, Inc. Executing conditional branch instructions in a data processor having a clustered architecture
US20030050268A1 (en) 2001-03-29 2003-03-13 Krieg Arthur M. Immunostimulatory nucleic acid for treatment of non-allergic inflammatory diseases
US7713942B2 (en) 2001-04-04 2010-05-11 Nordic Vaccine Technology A/S Cage-like microparticle complexes comprising sterols and saponins for delivery of polynucleotides
US7105495B2 (en) 2001-04-30 2006-09-12 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
US7176296B2 (en) 2001-04-30 2007-02-13 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
US20030129605A1 (en) 2001-05-04 2003-07-10 Dong Yu Immunostimulatory activity of CpG oligonucleotides containing non-ionic methylphosophonate linkages
JP2006512401A (ja) * 2001-06-05 2006-04-13 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン ナノエマルジョンワクチン
WO2002102307A2 (en) 2001-06-15 2002-12-27 Ribapharm Nucleoside vaccine adjuvants
US7785610B2 (en) 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
US20030199466A1 (en) 2001-06-21 2003-10-23 Fearon Karen L. Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same - ll
US20040132677A1 (en) 2001-06-21 2004-07-08 Fearon Karen L. Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same-IV
WO2003000232A2 (en) 2001-06-25 2003-01-03 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Method for preparation of vesicles loaded with immunostimulator y oligodeoxynucleotides
US20030003970A1 (en) 2001-06-28 2003-01-02 Alan Johnson Portable communications device
WO2003002065A2 (en) 2001-06-29 2003-01-09 Chiron Corporation Hcv e1e2 vaccine compositions
US6982033B2 (en) * 2001-07-13 2006-01-03 Donald Hubbard H Aerobic treatment plant with filter pipe
US7666674B2 (en) 2001-07-27 2010-02-23 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of sterically stabilized cationic liposomes to efficiently deliver CPG oligonucleotides in vivo
WO2003040308A2 (en) 2001-07-27 2003-05-15 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of sterically stabilized cationic liposomes to efficiently deliver cpg oligonucleotides in vivo
WO2003012061A2 (en) * 2001-08-01 2003-02-13 Coley Pharmaceutical Gmbh Methods and compositions relating to plasmacytoid dendritic cells
US20030133988A1 (en) * 2001-08-07 2003-07-17 Fearon Karen L. Immunomodulatory compositions, formulations, and methods for use thereof
CA2456201A1 (en) 2001-08-10 2003-02-27 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory oligonucleotide formulations and methods for use thereof
WO2003020884A2 (en) * 2001-08-14 2003-03-13 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Method for rapid generation of mature dendritic cells
KR100991644B1 (ko) * 2001-08-17 2010-11-02 콜리 파마슈티칼 게엠베하 활성이 개량된 조합 모티프 면역자극성 올리고뉴클레오티드
EP1427445A4 (en) 2001-08-30 2006-09-06 3M Innovative Properties Co METHOD FOR MATURIZING PLASMACYTIDES DENDRITIC CELLS USING IMMUNE RESPONSE MODIFYING MOLECULES
AU2002353783A1 (en) * 2001-09-24 2003-04-07 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of SUPPRESSORS OF CpG OLIGONUCLEOTIDES AND METHODS OF USE
US20030119774A1 (en) 2001-09-25 2003-06-26 Marianna Foldvari Compositions and methods for stimulating an immune response
KR20040053136A (ko) 2001-09-28 2004-06-23 펄듀 리서치 파운데이션 리간드-면역원 공액체를 이용한 치료 방법
IL160837A0 (en) * 2001-10-05 2004-08-31 Coley Pharm Gmbh Toll-like receptor 3 signaling agonists and antagonists
DK1455593T3 (da) 2001-10-06 2013-08-26 Merial Ltd Fremgangsmåder og sammensætninger til fremme af vækst og medfødt immunitet hos unge dyr
CN100438908C (zh) 2001-10-06 2008-12-03 梅瑞尔有限公司 CpG制剂及相关方法
CA2462203A1 (en) * 2001-10-12 2003-11-20 University Of Iowa Research Foundation Methods and products for enhancing immune responses using imidazoquinoline compounds
WO2003035836A2 (en) 2001-10-24 2003-05-01 Hybridon Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5' ends
US7276489B2 (en) 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
JP2005516897A (ja) 2001-11-07 2005-06-09 イネックス ファーマシューティカルズ コーポレイション 改善された粘膜のワクチン及びその使用方法
PT1719511E (pt) 2001-11-16 2009-03-06 Coley Pharm Group Inc N-[4-(4-amino-2-etil-1h-imidazo[4,5-c]quinolina-1- -il)-butil]-metano-sulfonamida, uma composição farmacêutica que a contém e sua utilização
TW200303759A (en) 2001-11-27 2003-09-16 Schering Corp Methods for treating cancer
AU2002258011B2 (en) * 2001-12-04 2009-01-08 The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services National Institutes Of Health Chimeric molecule for the treatment of TH2-like cytokine mediated disorders
DE10161755B4 (de) * 2001-12-15 2005-12-15 Infineon Technologies Ag Kontaktstift zum Testen mikroelektronischer Bauteile mit kugelförmigen Kontakten
AU2002366710A1 (en) * 2001-12-20 2003-07-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of USE OF CpG OLIGODEOXYNUCLEOTIDES TO INDUCE ANGIOGENESIS
US8466116B2 (en) * 2001-12-20 2013-06-18 The Unites States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of CpG oligodeoxynucleotides to induce epithelial cell growth
EP1467755A1 (en) 2001-12-21 2004-10-20 Antigenics Inc. Compositions comprising immunoreactive reagents and saponins, and methods of use thereof
WO2003066649A1 (en) 2002-02-04 2003-08-14 Biomira Inc. Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides
US8088388B2 (en) 2002-02-14 2012-01-03 United Biomedical, Inc. Stabilized synthetic immunogen delivery system
US20030232443A1 (en) 2002-06-18 2003-12-18 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of centromere protein B expression
US8153141B2 (en) 2002-04-04 2012-04-10 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory G, U-containing oligoribonucleotides
US7323164B2 (en) * 2002-04-11 2008-01-29 Zymogenetics, Inc. Use of interleukin-24 to treat ovarian cancer
US7371734B2 (en) * 2002-04-22 2008-05-13 Bioniche Life Sciences Inc. Oligonucleotide compositions and their use for the modulation of immune responses
US6948271B2 (en) * 2002-05-06 2005-09-27 Innovative Supply, Inc. Identification and tracking system for deceased bodies
US6870124B2 (en) * 2002-05-08 2005-03-22 Dana Corporation Plasma-assisted joining
WO2003094829A2 (en) 2002-05-10 2003-11-20 Inex Pharmaceuticals Corporation Pathogen vaccines and methods for using the same
AU2003229433B2 (en) 2002-05-10 2008-04-24 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Methylated immunostimulatory oligonucleotides and methods of using the same
US20040009944A1 (en) 2002-05-10 2004-01-15 Inex Pharmaceuticals Corporation Methylated immunostimulatory oligonucleotides and methods of using the same
AU2003246396B2 (en) 2002-05-28 2008-08-21 Merck Patent Gmbh A method for generating antigen-presenting cells
CA2388049A1 (en) 2002-05-30 2003-11-30 Immunotech S.A. Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof
US20040009949A1 (en) * 2002-06-05 2004-01-15 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Method for treating autoimmune or inflammatory diseases with combinations of inhibitory oligonucleotides and small molecule antagonists of immunostimulatory CpG nucleic acids
US7569553B2 (en) * 2002-07-03 2009-08-04 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
WO2004004654A2 (en) 2002-07-03 2004-01-15 Cambridge Scientific, Inc. Vaccines to induce mucosal immunity
US7605138B2 (en) 2002-07-03 2009-10-20 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US20040053880A1 (en) * 2002-07-03 2004-03-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7807803B2 (en) * 2002-07-03 2010-10-05 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7576066B2 (en) * 2002-07-03 2009-08-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
AU2003255969A1 (en) 2002-07-17 2004-02-02 Coley Pharmaceutical Gmbh Use of cpg nucleic acids in prion-disease
CN1468957A (zh) 2002-07-19 2004-01-21 中国人民解放军第二军医大学 一种用作人用治疗性疫苗佐剂的质粒
US20050209183A1 (en) 2002-07-25 2005-09-22 Phenion Gmbh & Co. Kg Cosmetic or pharmaceutical preparations comprising nucleic acids based on non-methylated CPG motifs
EP1393745A1 (en) 2002-07-29 2004-03-03 Hybridon, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5'ends
EP1575504A4 (en) * 2002-08-01 2009-11-04 Us Gov Health & Human Serv METHOD FOR THE TREATMENT OF INFLAMMATORY ARTHROPATHIES WITH SUPPRESSORS OF THE CPG OLIGONUCLEOTIDES
SG172476A1 (en) * 2002-08-12 2011-07-28 Dynavax Tech Corp Immunomodulatory compositions comprising a cationic condensing agent, an immunostimulatory compound comprising 5'-cg-3', an a non ionic detergent
AR040996A1 (es) * 2002-08-19 2005-04-27 Coley Pharm Group Inc Acidos nucleicos inmunoestimuladores
US6928476B2 (en) * 2002-08-23 2005-08-09 Mirra, Inc. Peer to peer remote data storage and collaboration
US6744084B2 (en) * 2002-08-29 2004-06-01 Micro Technology, Inc. Two-transistor pixel with buried reset channel and method of formation
JP4173861B2 (ja) * 2002-09-13 2008-10-29 イデニクス（ケイマン）リミテツド 耐性ＨＢＶ菌株の治療のためのβ−Ｌ−２’−デオキシヌクレオシド及び併用療法
US6994870B2 (en) * 2002-09-18 2006-02-07 Jaw-Ji Tsai Local nasal immunotherapy with allergen strip for allergic rhinitis
US8263091B2 (en) * 2002-09-18 2012-09-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of treating and preventing infections in immunocompromised subjects with immunostimulatory CpG oligonucleotides
AU2003278845A1 (en) 2002-09-19 2004-04-08 Coley Pharmaceutical Gmbh Toll-like receptor 9 (tlr9) from various mammalian species
US6988995B2 (en) * 2002-09-30 2006-01-24 Carl Zeiss Meditec, Inc. Method and system for detecting the effects of Alzheimer's disease in the human retina
US8043622B2 (en) * 2002-10-08 2011-10-25 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of treating inflammatory lung disease with suppressors of CpG oligonucleotides
EP2241325B1 (en) 2002-10-29 2012-02-08 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Use of CPG oligonucleotides in the treatment of hepatitis C virus infection
EP1572122A4 (en) * 2002-11-01 2008-04-09 Us Gov Health & Human Serv METHOD FOR PREVENTING INFECTIONS FROM BIOLOGICAL TERRORISM AGENTS WITH IMMUNOSTIMULATORY CPG OLIGONUCLEOTIDES
WO2004041183A2 (en) 2002-11-01 2004-05-21 The Regents Of The University Of California Methods of treating pulmonary fibrotic disorders
JP2006512927A (ja) * 2002-12-11 2006-04-20 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド ５’ｃｐｇ核酸およびその使用方法
KR100525321B1 (ko) 2002-12-13 2005-11-02 안웅식 파필로마바이러스 항원 단백질 및ＣｐＧ-올리고데옥시뉴클레오타이드를 포함하는파필로마바이러스 유발 질환의 예방 또는 치료용 약제학적조성물
JP2006516099A (ja) 2002-12-23 2006-06-22 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 分枝状の免疫調節化合物及び該化合物の使用方法
DE60329223D1 (de) * 2002-12-23 2009-10-22 Dynavax Tech Corp Oligonukleotide mit einer immunsystemstimulierenden sequenz und verfahren zu deren anwendung
MXPA05007652A (es) 2003-01-16 2006-02-22 Hybridon Inc Modulacion de propiedades inmunoestimulantes de compuestos basados en oligonucleotido mediante la utilizacion de dinucleotidos inmunoestimulantes modificados.
US7189781B2 (en) * 2003-03-13 2007-03-13 H.B. Fuller Licensing & Finance Inc. Moisture curable, radiation curable sealant composition
US20070041998A1 (en) 2003-03-24 2007-02-22 Intercell Ag Use of alum and a th1 immune response inducing adjuvant for enhancing immune responses
AU2004224762B2 (en) 2003-03-26 2009-12-24 Kuros Us Llc Packaging of immunostimulatory oligonucleotides into virus-like particles: method of preparation and use
AU2004226605A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-14 Coley Pharmaceutical Group, Ltd. Immunostimulatory nucleic acid oil-in-water formulations for topical application
US20050004144A1 (en) * 2003-04-14 2005-01-06 Regents Of The University Of California Combined use of IMPDH inhibitors with toll-like receptor agonists
EP1631687A2 (en) 2003-04-22 2006-03-08 Coley Pharmaceutical GmbH Methods and products for identification and assessment of tlr ligands
JP3887346B2 (ja) * 2003-04-28 2007-02-28 株式会社東芝 映像信号処理装置及び映像信号処理方法、映像表示装置
MXPA05012421A (es) 2003-05-16 2006-02-22 Hybridon Inc Tratamiento sinergistico de cancer usando inmunomeros junto con agentes quimioterapeuticos.
EP1484336A1 (en) * 2003-06-02 2004-12-08 Pevion Biotech Ltd. Methods for synthesizing conformationally constrained peptides, peptidometics and the use thereof as synthetic vaccines
US8008267B2 (en) 2003-06-11 2011-08-30 Idera Pharmaceuticals, Inc. Stabilized immunomodulatory oligonucleotides
CN1816353B (zh) * 2003-06-13 2010-05-05 阿斯比奥制药株式会社 用于预防或治疗Th1型免疫疾病的药物组合物
EP2246067B1 (en) * 2003-06-17 2017-02-15 MannKind Corporation Methods to elicit, enhance and sustain immune responses against MHC class I-restricted epitopes, for prophylactic or therapeutic purposes
BRPI0411514A (pt) 2003-06-20 2006-08-01 Coley Pharm Gmbh antagonistas de receptor toll-like de molécula pequena
US20040265833A1 (en) 2003-06-23 2004-12-30 Cathy Lofton-Day Methods and nucleic acids for the analysis of colorectal cell proliferative disorders
US20060251623A1 (en) 2003-07-10 2006-11-09 Caytos Biotechnology Ag Packaged virus-like particles
EP1648502B1 (en) 2003-07-11 2010-12-01 Intercell AG Hcv vaccines
US20050013812A1 (en) 2003-07-14 2005-01-20 Dow Steven W. Vaccines using pattern recognition receptor-ligand:lipid complexes
JP2007531699A (ja) 2003-07-15 2007-11-08 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 免疫刺激性オリゴヌクレオチドおよび／またはイムノマー化合物をサイトカインおよび／または化学療法剤または放射線療法と組み合わせて用いる、免疫系の相乗的刺激
WO2005014110A1 (en) * 2003-07-22 2005-02-17 Cytos Biotechnology Ag Cpg-packaged liposomes
BRPI0413906A (pt) 2003-08-28 2006-10-24 Immune Response Corp Inc composições imunogênicas de hiv, kit e métodos relacionados
AP2006003542A0 (en) * 2003-09-05 2006-04-30 Anadys Pharmaceuticals Inc Administration of TLR7 ligands and prodrugs for treatment of infection by hepatitis C virus.
JPWO2005023289A1 (ja) 2003-09-08 2007-11-01 株式会社インテレクチャル・プロパティ・コンサルティング 慢性ｃ型肝炎を治療するための医薬組成物
GB0321615D0 (en) * 2003-09-15 2003-10-15 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
WO2005027920A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives for the treatment of rickets or vitamin d deficiency
JP4989225B2 (ja) * 2003-09-25 2012-08-01 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 核酸親油性接合体
CA2542099A1 (en) 2003-10-11 2005-04-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Methods and compositions for enhancing innate immunity and antibody dependent cellular cytotoxicity
US20050087538A1 (en) * 2003-10-23 2005-04-28 Wolfe Darrell R. Iceless multiple can cooler
US20050215501A1 (en) 2003-10-24 2005-09-29 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods and products for enhancing epitope spreading
SG123799A1 (en) 2003-10-30 2006-07-26 Coley Pharm Gmbh C-class oligonucleotide analogs with enchanced immunostimulatory potency
US20050239733A1 (en) 2003-10-31 2005-10-27 Coley Pharmaceutical Gmbh Sequence requirements for inhibitory oligonucleotides
US20050100983A1 (en) * 2003-11-06 2005-05-12 Coley Pharmaceutical Gmbh Cell-free methods for identifying compounds that affect toll-like receptor 9 (TLR9) signaling
JP4088246B2 (ja) * 2003-12-05 2008-05-21 富士通株式会社 リングネットワークのマスタ設定方法及び装置
KR101138131B1 (ko) 2003-12-08 2012-04-23 이데라 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 작은 올리고뉴클레오티드-기초 화합물에 의한 면역자극특성의 조절
US9090673B2 (en) 2003-12-12 2015-07-28 City Of Hope Synthetic conjugate of CpG DNA and T-help/CTL peptide
US20070172315A1 (en) * 2003-12-18 2007-07-26 Barrett Robert K Method and Apparatus for Creating Soil or Rock Subsurface Support
EP1550458A1 (en) 2003-12-23 2005-07-06 Vectron Therapeutics AG Synergistic liposomal adjuvants
KR100558851B1 (ko) 2004-01-08 2006-03-10 학교법인연세대학교 면역조절능력이 증가된 ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드변형체
AU2005213460A1 (en) * 2004-02-06 2005-08-25 Mayo Foundation For Medical Education And Research Complexed polypeptide and adjuvant for improved vaccines
US20050181035A1 (en) 2004-02-17 2005-08-18 Dow Steven W. Systemic immune activation method using non CpG nucleic acids
US20050256073A1 (en) 2004-02-19 2005-11-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides
DK1716234T3 (da) 2004-02-20 2014-01-20 Mologen Ag Substitueret, ikke-kodende nukleinsyremolekyle til terapeutisk og profylaktisk immunstimulering i mennesker og højerestående dyr
CN101217973A (zh) 2004-03-12 2008-07-09 海布里顿公司 使用第二代免疫调节寡核苷酸增强的hiv疫苗活性
JP2007531746A (ja) * 2004-04-02 2007-11-08 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド Ｉｌ−１０応答を誘導するための免疫活性化核酸
US7303881B2 (en) * 2004-04-30 2007-12-04 Pds Biotechnology Corporation Antigen delivery compositions and methods of use
WO2005115449A1 (en) * 2004-05-28 2005-12-08 Alk-Abelló A/S Method of treating allergy and infection by eliciting an iga antibody response
US8399025B2 (en) * 2004-06-04 2013-03-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Polyamine modified particles
WO2006080946A2 (en) 2004-06-08 2006-08-03 Coley Pharmaceutical Gmbh Abasic oligonucleotide as carrier platform for antigen and immunostimulatory agonist and antagonist
US7756043B1 (en) * 2004-06-09 2010-07-13 Sprint Communications Company L.P. Method for identifying high traffic origin-destination node pairs in a packet based network
US7427405B2 (en) 2004-06-15 2008-09-23 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory oligonucleotide multimers
KR20070028537A (ko) 2004-06-15 2007-03-12 이데라 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 면역자극 올리고누클레오티드 다량체
EP1766610A1 (en) * 2004-06-25 2007-03-28 TC Electronic A/S Method of evaluating perception intensity of an audio signal and a method of controlling an input audio signal on the basis of the evaluation
JP2008512350A (ja) * 2004-07-01 2008-04-24 イェール ユニバーシティ 標的化され、そして高密度で薬物が負荷されるポリマー性物質
EP2484374A1 (en) 2004-07-18 2012-08-08 CSL Limited Immuno stimulating complex and oligonucleotide formulations for inducing enhanced interferon-gamma responses
US20070129320A9 (en) * 2004-07-18 2007-06-07 Coley Pharmaceutical Group, Ltd. Methods and compositions for inducing innate immune responses
WO2006015560A1 (de) 2004-08-09 2006-02-16 Mologen Ag Immunmodulierendes mittel in verbindung mit chemotherapeutischen massnahmen
US20060058261A1 (en) * 2004-09-15 2006-03-16 Andre Aube Chitin derivatives for hyperlipidemia
MY159370A (en) * 2004-10-20 2016-12-30 Coley Pharm Group Inc Semi-soft-class immunostimulatory oligonucleotides
KR100721928B1 (ko) * 2004-11-05 2007-05-28 주식회사 바이오씨에스 ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드를 함유하는 피부질환의치료 또는 예방용 약학적 조성물
WO2006053090A2 (en) 2004-11-08 2006-05-18 Idera Pharmaceuticals Synergistic inhibition of vegf and modulation of the immune response
WO2006072251A1 (en) 2005-01-07 2006-07-13 Alk-Abellò A/S Method of preventive treatment of allergy by oromucosal administration of an allergy vaccine
WO2007042554A2 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 Cancer Research Technology Ltd. Methods and compositions for treating immune disorders
US20080009455A9 (en) * 2005-02-24 2008-01-10 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory oligonucleotides
SG161260A1 (en) 2005-04-08 2010-05-27 Coley Pharm Group Inc Methods for treating infectious disease exacerbated asthma
AU2006241149A1 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Coley Pharmaceutical Gmbh Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity
US7325152B2 (en) * 2005-06-30 2008-01-29 Infineon Technologies Ag Synchronous signal generator
JP2009500412A (ja) * 2005-07-07 2009-01-08 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 癌の処置のための、抗ｃｔｌａ−４抗体とｃｐｇモチーフ含有合成オリゴデオキシヌクレオチドとの組み合わせ治療
AU2006284889B2 (en) * 2005-08-31 2011-08-18 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Methods of altering an immune response induced by CpG oligodeoxynucleotides
CA2622679A1 (en) 2005-09-16 2007-08-09 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory single-stranded ribonucleic acid with phosphodiester backbone
EA013375B1 (ru) 2005-09-16 2010-04-30 Коли Фармасьютикал Гмбх МОДУЛЯЦИЯ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ КОРОТКОЙ ИНТЕРФЕРИРУЮЩЕЙ РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (siРНК) С ПОМОЩЬЮ МОДИФИКАЦИИ НУКЛЕОТИДОВ
JP2009510096A (ja) 2005-09-27 2009-03-12 コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー アダプターオリゴヌクレオチドを用いたｔｌｒ媒介免疫応答の調節
US20070093439A1 (en) 2005-10-25 2007-04-26 Idera Pharmaceuticals, Inc. Short immunomodulatory oligonucleotides
US20070243209A1 (en) * 2005-10-28 2007-10-18 Health Research, Inc. Compositions and methods for prevention and treatment of fungal diseases
CA2625969A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-03 Index Pharmaceuticals Ab Composition and method for the prevention, treatment and/or alleviation of an inflammatory disease
DK1951299T3 (da) 2005-11-04 2012-04-02 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenzavacciner indeholdende kombinationer af partikelformige adjuvanser og immunforstærkere
US20110180430A1 (en) 2005-11-04 2011-07-28 Novartis Vaccines And Diagnostics Srl Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
US7470674B2 (en) 2005-11-07 2008-12-30 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
US7776834B2 (en) 2005-11-07 2010-08-17 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
JP5184366B2 (ja) 2005-11-07 2013-04-17 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 修飾された免疫刺激性ジヌクレオチドを含む、オリゴヌクレオチドに基づく化合物の免疫刺激特性
JP2009514525A (ja) 2005-11-07 2009-04-09 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 修飾された免疫刺激性ジヌクレオチドを含む、オリゴヌクレオチドに基づく化合物の免疫刺激特性
PL1957647T3 (pl) * 2005-11-25 2015-07-31 Zoetis Belgium S A Oligorybonukleotydy immunostymulujące
EP1962909A4 (en) 2005-12-20 2012-04-18 Idera Pharmaceuticals Inc IMMUNOSTIMULATING ACTIVITY OF PALINDROMIC IMMUNOMODULATORY OLIGONUCLEOTIDES (IMO TM) CONTAINING DIFFERENT LENGTHS OF PALINDROMIC SEGMENTS
US20080045473A1 (en) * 2006-02-15 2008-02-21 Coley Pharmaceutical Gmbh Compositions and methods for oligonucleotide formulations
DE102006007433A1 (de) 2006-02-17 2007-08-23 Curevac Gmbh Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure
WO2008019018A2 (en) * 2006-08-03 2008-02-14 William Soo Hoo Bioactive molecular matrix and methods of use in the treatment of disease
US20080124366A1 (en) * 2006-08-06 2008-05-29 Ohlfest John R Methods and Compositions for Treating Tumors
WO2008019486A1 (en) * 2006-08-16 2008-02-21 Protiva Biotherapeutics, Inc. Nucleic acid modulation of toll-like receptor-mediated immune stimulation
US8027888B2 (en) 2006-08-31 2011-09-27 Experian Interactive Innovation Center, Llc Online credit card prescreen systems and methods
WO2008033432A2 (en) 2006-09-12 2008-03-20 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immune modulation by chemically modified ribonucleosides and oligoribonucleotides
EP2068918B1 (en) * 2006-09-26 2012-05-02 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
US20090181078A1 (en) * 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
JP2010504982A (ja) 2006-09-27 2010-02-18 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド Ｔｌｒのリガンドと抗ウイルス剤との組成物
KR101251707B1 (ko) 2006-09-27 2013-04-11 콜리 파마슈티칼 게엠베하 면역 자극 활성이 증강된 소수성 Ｔ 유사체를 함유하는 ＣｐＧ 올리고뉴클레오티드 유사체
US20100144846A1 (en) * 2006-10-26 2010-06-10 Coley Pharmaceutical Gmbh Oligoribonucleotides and uses thereof
WO2008057529A2 (en) * 2006-11-06 2008-05-15 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Peptide-based vaccine compositions to endogenous cholesteryl ester transfer protein (cetp)
WO2008070672A2 (en) * 2006-12-04 2008-06-12 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions and methods to treat cancer with cupredoxins and cpg rich dna
US8057804B2 (en) * 2006-12-28 2011-11-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Herpes simplex virus combined subunit vaccines and methods of use thereof
EP2591800A1 (en) * 2006-12-28 2013-05-15 The Trustees of The University of Pennsylvania Herpes simplex virus combined subunit vaccines and methods of use thereof
AR066405A1 (es) * 2007-04-20 2009-08-19 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna
CA2687441A1 (en) 2007-05-17 2008-11-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Class a oligonucleotides with immunostimulatory potency
EP2591787A1 (en) * 2007-08-13 2013-05-15 Pfizer Inc Combination motif immune stimulatory oligonucleotides with improved activity
JP2010536878A (ja) * 2007-08-21 2010-12-02 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション インフルエンザタンパク質を製造および使用する組成物および方法
US9370531B2 (en) * 2007-08-31 2016-06-21 New York University Method of providing patient specific immune response in amyloidoses and protein aggregation disorders
US7892567B2 (en) * 2007-10-01 2011-02-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for immunization against chlamydial infection and disease
CN101820908A (zh) 2007-10-09 2010-09-01 科利制药公司 包含改性糖部分的免疫刺激寡核苷酸类似物
AR069704A1 (es) * 2007-12-18 2010-02-10 Alcon Res Ltd Sistema de administracion de rnai de interferencia y usos del mismo
US7720322B2 (en) * 2008-06-30 2010-05-18 Intuitive Surgical, Inc. Fiber optic shape sensor
TWI351288B (en) * 2008-07-04 2011-11-01 Univ Nat Pingtung Sci & Tech Cpg dna adjuvant in avian vaccines
US20100166782A1 (en) * 2008-07-25 2010-07-01 Martha Karen Newell Clip inhibitors and methods of modulating immune function
US8053422B2 (en) * 2008-12-04 2011-11-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Anti-cancer oligodeoxynucleotides

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996002555A1 (en) * 1994-07-15 1996-02-01 The University Of Iowa Research Foundation Immunomodulatory oligonucleotides
JP2001503267A (ja) * 1996-10-30 2001-03-13 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション 免疫刺激性核酸分子

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JPN4007016901; Ｊ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　Ｍｅｄ．，　（１９９６．０９），　４４，　［７］，　ｐ．３８０Ａ *
JPN4007016902; Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ Ｖｏｌ．９３，　Ｎｏ．７, 199604, ｐ．２８７９-２８８３ *
JPN4007016903; Ｊ．　Ｅｘｐ．　Ｍｅｄ． Ｖｏｌ．１８２, 1995, ｐ．１５２７-１５３６ *
JPN4007016904; 医学のあゆみ Ｖｏｌ．１７３，　Ｎｏ．７, 1995, ｐ．６４１-６４５ *
JPN4007017516; Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｖｏｌ．２７３，　Ｎｏ．５２７３, 19960719, ｐ．３５２-３５４ *
JPN6010044314; ＴＲＩＮＣＨＩＥＲＩ，Ｇ．: 'Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ-１２：　ａ　ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅ　ｗｉｔｈ　ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｔｈａｔ　ｂｒｉｄｇｅ　ｉｎｎａｔｅ　ｒｅｓｉｓｔ' Ａｎｎｕａｌ　Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．１３，　２５１-７６, 1995, ｐ．１３，　２５１-７６ *

Also Published As

Publication number Publication date
US20100125101A1 (en) 2010-05-20
AU5242498A (en) 1998-05-22
US20050049216A1 (en) 2005-03-03
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ES2624859T3 (es) 2017-07-17
US6207646B1 (en) 2001-03-27
US7888327B2 (en) 2011-02-15
US20040132685A1 (en) 2004-07-08
AU775185B2 (en) 2004-07-22
US8158592B2 (en) 2012-04-17
JP2004041224A (ja) 2004-02-12
US7723022B2 (en) 2010-05-25
CA2270345C (en) 2014-05-13
AU2004218696A1 (en) 2004-11-04
US20050239732A1 (en) 2005-10-27
US20050032736A1 (en) 2005-02-10
DK0948510T3 (da) 2006-10-30
CA2270345A1 (en) 1998-05-07
US20050233995A1 (en) 2005-10-20
US20030050261A1 (en) 2003-03-13
EP2360252A1 (en) 2011-08-24
US20050070491A1 (en) 2005-03-31
US20050267064A1 (en) 2005-12-01
US20060003955A1 (en) 2006-01-05
WO1998018810A1 (en) 1998-05-07
US20050171047A1 (en) 2005-08-04
JP5082063B2 (ja) 2012-11-28
AU2004218696B2 (en) 2008-11-06
US7723500B2 (en) 2010-05-25
PT948510E (pt) 2006-12-29
EP1746159A2 (en) 2007-01-24
KR100689942B1 (ko) 2007-03-09
US20050148537A1 (en) 2005-07-07
EP2322615A1 (en) 2011-05-18
DE69736331D1 (de) 2006-08-24
US20060089326A1 (en) 2006-04-27
US8258106B2 (en) 2012-09-04
EP0948510A1 (en) 1999-10-13
US20070078104A1 (en) 2007-04-05
US20040229835A1 (en) 2004-11-18
EP1714969A2 (en) 2006-10-25
AU9724901A (en) 2002-02-07
US20050233999A1 (en) 2005-10-20
US8129351B2 (en) 2012-03-06
US20040198688A1 (en) 2004-10-07
CN100338086C (zh) 2007-09-19
US20050277604A1 (en) 2005-12-15
US20050277609A1 (en) 2005-12-15
US20050059625A1 (en) 2005-03-17
US20080026011A1 (en) 2008-01-31
US20040167089A1 (en) 2004-08-26
EP0948510B1 (en) 2006-07-12
US20050049215A1 (en) 2005-03-03
US20050004061A1 (en) 2005-01-06
ATE332966T1 (de) 2006-08-15
EP2360252B1 (en) 2017-02-08
US20090202575A1 (en) 2009-08-13
US8058249B2 (en) 2011-11-15
DE69736331T2 (de) 2007-08-09
EP2360252B8 (en) 2017-04-12
US7402572B2 (en) 2008-07-22
US20040147468A1 (en) 2004-07-29
US20070066553A1 (en) 2007-03-22
US7879810B2 (en) 2011-02-01
JP2008289495A (ja) 2008-12-04
US7517861B2 (en) 2009-04-14
KR20000052994A (ko) 2000-08-25
US20050215500A1 (en) 2005-09-29
US20080031936A1 (en) 2008-02-07
US7674777B2 (en) 2010-03-09
CN1235609A (zh) 1999-11-17
US20050054602A1 (en) 2005-03-10
EP0948510A4 (en) 2000-08-02
NZ335397A (en) 2000-11-24
ES2268736T3 (es) 2007-03-16
EP1714969A3 (en) 2010-03-03
JP2003286174A (ja) 2003-10-07
JP2001503267A (ja) 2001-03-13
EP1746159A3 (en) 2009-11-25
US20050123523A1 (en) 2005-06-09

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