KR102100419B1 - 항-pd1 항체 및 이의 치료 및 진단 용도 - Google Patents

항-pd1 항체 및 이의 치료 및 진단 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102100419B1
KR102100419B1 KR1020167009436A KR20167009436A KR102100419B1 KR 102100419 B1 KR102100419 B1 KR 102100419B1 KR 1020167009436 A KR1020167009436 A KR 1020167009436A KR 20167009436 A KR20167009436 A KR 20167009436A KR 102100419 B1 KR102100419 B1 KR 102100419B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
val
gly
thr
pro
Prior art date
Application number
KR1020167009436A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20160044063A (ko
Inventor
징 송
강 리
통 장
란란 슈
퀴 리우
하오 펭
Original Assignee
베이진 스위찰랜드 게엠베하
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 베이진 스위찰랜드 게엠베하 filed Critical 베이진 스위찰랜드 게엠베하
Publication of KR20160044063A publication Critical patent/KR20160044063A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102100419B1 publication Critical patent/KR102100419B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

예정 세포사-1 (Programmed Death-1: PD1, Pdcd-1 또는 CD279)에 특이적으로 결합하고, 면역세포에서 PD-1 매개 세포 신호 및 활성을 억제하는 항체, 리간드 결합에 요구되는 아미노산 잔기 세트에 결합하는 항체 및 암, 감염성 질환 또는 PD-1 매개 기능에 의해 조절되는 기타 병리학적 질환을 치료 또는 진단에 사용되는 이러한 항체의 용도를 제공한다.

Description

항-PD1 항체 및 이의 치료 및 진단 용도{Anti-PD1 Antibodies and their Use as Therapeutics and Diagnostics}
예정 세포사-1 (Programmed Death-1: PD1, Pdcd-1 또는 CD279)에 특이적으로 결합하고, 면역세포에서 PD-1 매개 세포 신호 및 활성을 억제하는 항체, 리간드 결합에 요구되는 아미노산 잔기 세트에 결합하는 항체 및 암, 감염성 질환 또는 PD-1 매개 기능에 의해 조절되는 기타 병리학적 질환의 치료 또는 진단에 사용되는 항체의 용도를 제공한다.
PD-1 (CD279로도 명명됨)은 CD28/CTLA4 공동 자극/억제 수용체 패밀리 (co-stimulatory/inhibitory receptor family)와 관련된 55 KD의 수용체 단백질이다 (Blank et al., 2005 Cancer Immunol Immunother 54:307-314). PD-1을 코딩하는 유전자 및 cDNA를 클로닝하여 마우스 및 인간에서의 특징을 살펴본 바 있다 (Ishida et al., 1992 EMBO J 11:3887-3395; Shinohara et al., 1994 Genomics 23:704-706). 전장 PD-1은 288개의 아미노산 잔기 (NCBI accession number: NP_005009)를 포함한다. 세포외 도메인은 1-167 아미노산 잔기로 구성되고, 세포질 C-말단 꼬리는 191-288 잔기를 포함하며, 이는 2개의 가설적 면역-조절 모티프인 면역수용체 티로신 기반 저해 모티프 (ITIM; Vivier et al., 1997 Immunol Today 18:286-291) 및 면역수용체 티로신 스위치 모티프 (ITSM; Chemnitz et al., 2004 J Immunol 173:945-954)를 포함한다.
지금까지, 2개의 서열 관련 리간드 PD-L1 (B7-H1) 및 PD-L2 (B7-DC)는 PD-1과 특이적으로 상호작용하여 세포 내 신호전달을 유도하고, CD3 및 CD28 매개 T-세포 활성화를 저해하는 것으로 확인되었으며 (Riley, 2009 Immunol Rev 229:114-125), 결국 T-세포 활성을 조절 예를 들어, 기타 성장 인자 및 싸이토카인 분비 뿐 아니라, 세포 성장, IL-2 및 IFN-γ 분비를 감소시키는 것이다.
PD-1의 발현은 T-세포, B-세포, 단핵세포 및 자연살해(NK) 세포와 같은 면역세포에서 빈번하게 확인된다. 기타 인간 조직, 예를 들어 근육, 상피, 신경 조직 등에서는 거의 발현되지 않는다. 또한, 고레벨의 PD-1 발현은 종종 면역세포의 활성과 관련이 있다. 예를 들어, 인간 T-세포주인 Jurkat이 PHA (phytohaemagglutinin) 또는 포르볼 에스테르 (12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate 또는 TPA)에 의해 활성화되면, 웨스턴 블랏에서 보이는 바와 같이 PD-1의 발현이 상향 조절되었다 (Vibharka et al., 1997 Exp Cell Res 232:25-28). 항-CD3 항체의 자극에 의해, 자극된 마우스 T- 및 B-림프구와 1차 인간 CD4+ T 세포에서 동일한 현상이 관찰되었다 (Agata et al., 1996 Int Immunol 8:765-772; Bennett et al., 2003 J Immunol 170:711-118). PD-1 발현 증가에 의해 효과 T세포를 자극하고, 활성화된 효과 T세포를 고갈 및 감소된 면역활성 방향으로 다시 안내한다. 따라서, PD-1 매개 저해 신호는 면역 관용에 중요한 역할을 한다 (Bour-Jordan et al., 2011 Immunol Rev 241:180-205).
다양한 암에서 종양 침윤 림프구 (tumor-infiltrating lymphocytes: TILs)의 PD-1 발현 및 종양 세포의 PD-1 리간드 발현 증가가 보고되었고, 다른 유형의 조직 및 기관 예를 들어 폐 (Konishi et al., 2004 Clin Cancer Res 10:5094-5100), 간 (Shi et al., 2008 Int J Cancer 128:887-896; Gao et al., 2009 Clin Cancer Res 15:971-979), 위 (Wu et al., 2006 Acta Histochem 108:19-24), 신장 (Thompson et al., 2004 Proc Natl Acad Sci 101:17174-17179; Thompson et al., 2007 Clin Cancer Res 13:1757-1761), 유방 (Ghebeh et al., 2006 Neoplasia 8:190-198), 난소 (Hamanishi et al. 2007 Proc Natl Acad Sci 104:3360-3365), 췌장 (Nomi et al., 2007 Clin Cancer Res 13:2151-2157), 멜라노사이트 (Hino et al., 2010 Cancer 116:1757-1766) 및 식도 (Ohigashi et al., 2005 Clin Cancer Res 11:2947-2953)가 포함된다. 더욱 빈번하게, 이러한 암에서 PD-1 및 PD-L1의 발현은 환자 생존 결과에 대한 좋지 못한 예후와 연관된다. PD-1 유전자를 낙아웃하여 이종이식 (Xenograft) 암 세포 성장을 억제한 형질전환 마우스를 통해, 암 제거 또는 관용을 위한 면역 시스템 조절에서의 PD-1 신호전달에 대한 중요성을 더욱 자세히 설명하였다 (Zhang et al., 2009 Blood 114:1545-1552).
PD-1 신호전달의 상향 조절에 의해 면역 관용의 암 증식으로 이어질 뿐 아니라, 인간의 바이러스 감염 및 확장으로도 이어진다. 유행성 간 감염 바이러스 HBV 및 HCV는 간세포에서 PD-1 리간드의 과발현을 유도하고 효과 T세포에서 PD-1 신호전달을 활성화하여, 바이러스 감염에 대한 T-세포 고갈 및 관용을 야기한다 (Boni et al., 2007 J Virol 81:4215-4225; Golden-Mason et al., 2008 J Immunol 180:3637-3641). 마찬가지로, HIV 감염은 유사한 기작으로 인간 면역 시스템을 빈번하게 회피한다. 길항 분자에 의해 PD-1 신호전달을 치료적으로 조절하여 관용으로부터 면역세포를 회복할 수 있고, 재활성시켜 암 및 만성 바이러스 감염을 제거할 수 있다 (Blank et al., 2005 Cancer Immunol Immunother 54:307-314; Okazaki et al., 2007 Int Immunol 19:813-824).
본 발명은 PD-1의 면역 억제를 위한 방법 및 조성물을 제공한다. 일 측면에서, 본 발명은 인간 PD-1에 특이적으로 결합하는 항체의 항원 결합 도메인이고, 서열번호 11-22, 31-42 및 59-63에서 선택된 서열을 가지는 상보성 결정 영역 (complementarity determining region : CDR)을 포함하는 도메인을 제공한다.
상기 CDR은 중쇄 가변영역 (Vh) 및 경쇄 가변영역 (Vk)으로 재조합할 수 있고, (CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3)와 (CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3) 서열 각각을 포함하며, PD-1 특이적 결합 및/또는 기능을 보유한다.
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 다음을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh) 또는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함한다:
Figure 112016034253110-pct00001
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 다음을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh) 또는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함한다:
a) mu317 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호11-13); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 (서열번호14-16);
b) mu326 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호17-19); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호20-22);
c) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호31-33); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호34-36);
d) 326-4A3 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호37-39); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호40-42);
e) 317-1H CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3 (서열번호11, 59, 13); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호14-16);
f) 317-4B2 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호11, 60, 13); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호61, 15, 16);
g) 317-4B5 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호11, 60, 13); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호61, 15, 16);
h) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호11, 32, 13); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호61, 15, 16);
i) 326-1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호17, 62, 19); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호20-22);
j) 326-3B1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호17, 62, 19); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(서열번호20-22);
k) 326-3G1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(서열번호17, 62, 19); 또는
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 (서열번호20-22).
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 다음을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh) 또는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함한다:
(a) CDR-H1 (서열번호 31), CDR-H2 (서열번호 12, 32, 59 또는 60) 및 CDR-H3 (서열번호 33),
CDR-L1 (서열번호 14, 34 또는 61), CDR-L2 (서열번호 35) 및 CDR-L3 (서열번호 36); 또는
(b) CDR-H1 (서열번호 37), CDR-H2 (서열번호 18, 38 또는 62) 및 CDR-H3 (서열번호 39),
CDR-L1 (서열번호 40), CDR-L2 (서열번호 41) 및 CDR-L3 (서열번호 42).
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 다음을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh) 또는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함한다:
Figure 112016034253110-pct00002
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 다음을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh) 또는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함한다:
Figure 112016034253110-pct00003
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 PD1 잔기에 특이적으로 결합한다: (a) K45 및 I93 (2008 PNAS에 기인한 AA 넘버링, 105:10483; 서열번호 2 중 K58 및 I106에 대응됨); 또는 (b) I93, L95 및 P97 (2008 PNAS에 기인한 AA 넘버링, 105:10483; 서열번호 2 중 I106, L108 및 P110에 대응됨).
구체적 구현예에서, 상기 도메인은 HEK293/OS8/PD-L1 세포 또는 EK293/OS8/PD-L2 세포와 공배양된 HuT78/PD-1 세포에서 IL-2 방출을 유도하고/유도하거나, HEK293/PD-L1 세포 또는 HEK293/PD-L2 세포와 공배양된 HuT78/P3Z 세포에서 IL-2 방출을 억제한다.
본 발명은 또한, 서열번호 83-88 중 임의의 서열, 특히 서열번호 87 또는 88을 포함하는 항체 IgG4 중쇄 효과기 (effector) 또는 불변 도메인을 제공한다.
본 발명은 또한, 표적 PD-1 결합 도메인을 포함하는 항체, F(ab) 또는 F(ab)2를 제공한다.
본 발명은 또한, 표적 PD-1 결합 도메인 및 서열번호 83-88, 특히 서열번호 87 또는 88을 포함하는 IgG4 중쇄 효과기 또는 불변 도메인을 포함하는 항체를 제공한다.
본 발명은 또한, 표적 PD-1 결합 도메인을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 특히, cDNA 서열을 제공한다.
본 발명은 상기 도메인을 암 또는 바이러스 감염 또는 기타 PD-1 길항작용이 요구되는 것으로 결정된 환자에 투여하는 단계를 포함하는 상기 표적 도메인을 사용하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한, (a) 마우스 CD8α의 C-말단 도메인 (113-220)에 융합된 항-인간 CD3 mAb OKT3의 단일쇄 가변영역 (single chain variable fragment : scFv) (서열번호 89); 또는 (b) 인간 CD3ζ 쇄의 세포질 도메인에 융합된 인간 PD-1의 세포외 및 막관통 도메인 (서열번호 90)을 포함하는 융합 단백질을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 융합 단백질을 발현하는 세포주로 어세이, 스크리닝 또는 항-PD-1 항체를 선별하는 것을 포함하는 표적 융합 단백질을 사용하는 방법을 제공한다.
도 1. PD-1/Fc (상단) 및 PD-1/His (하단)에 대한 개략도이다. ECD: 세포외 도메인. L: 링커. H: His 태그. Fc: 인간 IgG4의 γ4Fc 단편. N: N-말단. C: C-말단.
도 2. ELISA 중 인간 PD-1에 결합하는 마우스 mAb의 투여량 의존성 반응 곡선. 각 도면의 상단-왼쪽 코너는 마우스 mAb를 의미한다. MAb 317 및 517은 중쇄 및 경쇄 가변영역에 대한 높은 정도의 상동성을 공유한다. 결합 신호 강도는 직접적인 OD450 읽기에 의해 표시된다. 50 마이크로리터의 부피로 웰당 70 나노그램 미만까지 증가하는 농도로 항원 PD-1/His를 코팅하였다. 실시예 1에 방법이 기술되어 있다.
도 3은 FACS 분석을 통해 살아있는 세포에 발현되는 인간 PD-1에 결합하는 마우스 mAb에 대한 투여량 의존성 반응 곡선. 각 패널에 마우스 항체 코드와 EC50이 표시되어 있다. MFI는 평균 형광 강도를 나타낸다. HuT78/PD-1 세포를 웰당 5X104 세포로 96 웰 플레이트에 FACS를 위해 서스펜션하였다. 실시예 1에 기술된 바와 같이 세포 표면 표적에 결합하는 PD-1 mAb 및 FACS 검출을 수행하였다.
도 4. 항-PD-1 mAb의 기능 활성을 어세이하는데 사용되는 세포 공배양 시스템의 개략도이다. T-세포 (CD4+ 또는 CD8+)는 HuT78/PD-1 또는 PBMC 중 1차 T-세포를 나타낸다. TCR: T-세포 수용체. N: 핵. C: 세포질
도 5. HEK293/OS8/PD-L1 세포와 공배양된 HuT78/PD-1 세포에서 마우스 mAb에 의해 유도된 IL-2 분비에 대한 투여량 의존성 반응 곡선이다. 기준선: 모든 테스트 농도에서 mIgG에 의해 유도된 평균 IL-2 방출. 상단선: Prizm Software에 의한 회귀 계산에 기초한 최고 IL-2 방출.
도 6. (A) 세포주 HEK293/OS8/PD-L1와 공배양된 PBMC (공여체-19)에서 항-PD-1 mAb에 의해 유도된 IFN-γ 분비를 보여주는 히스토그램. (B) 세포주 HEK293/OS8/PD-L1와 공배양된 PBMC (공여체-20)에서 항-PD-1 mAb에 의해 유도된 IFN-γ 분비를 보여주는 히스토그램.
도 7. (A) 및 (B)는 효과 세포 (NK92MI/PD-1)와 표적 세포 (HuT78/PD-1)의 공배양에 의한 항-PD-1 mAb의 ADCC 활성. 대표성 있는 실험 결과에 대한 2개의 데이터 포인트로부터 평균을 계산하였다. mAb를 10μg/ml의 농도로 첨가하였다. 실시예 9에 기술된 바와 같이 실험을 수행하였다.
도 8. ELISA (상단 패널) 및 웨스턴 블랏 (하단 패널)을 통해 항-PD-1 mAb에 대한 결합 에피토프를 매핑. WT 또는 Mt PD-1을 포함하는 조건 배지를 사용하여 ELISA 및 웨스턴 블랏을 통해 결합 활성을 평가하였다. **는 mAb 결합 활성이 WT PD-1의 25-50%로 감소한 AA 잔기를 의미한다. ***는 mAb 결합 활성이 WT PD-1의 25% 미만으로 감소한 AA 잔기를 의미한다.
도 9. HEK293/OS8/PD-L1 세포와 공배양된, 다른 건강한 공여자로부터의 1차 인간 PBMC 중 인간화 항-PD-1 mAb에 의해 유도된 IFN-γ 방출.
도 10. 인간화 항-PD-1 mAb, hu317(A) 및 hu326(B)에 의해 향상된 NK92MI/PD-1 세포의 세포독성. 실시예 12에 기술한 바와 같이, 표적 폐암 세포 SK-MES-1/PD-L1을 1:2의 비율 (T:E)로 효과 세포와 공배양하였다.
도 11. 3개의 치료군인 비히클 (PBS), 인간 IgGs (huIgGs) 및 항-PD-1 mAb (hu317-1/IgG4mt2)에서의 개별적 종양 증식 곡선. 각 곡선은 종양 증식 경로, 각 패널의 우측에 기재된 숫자로 코드된 종양 포함 마우스를 나타낸다. 1일차에 Hep3B/OS8/PD-L1 세포(간세포 암종주 Hep3B에서 정립됨)를 접종하였고, 15일차에 PBMC를 이식하였으며, 18일, 28일 및 38일차 각각에 3회 투여량의 hu317-1/IgG4mt2를 주사하였다. 실시예 12에 방법을 기술하였다.
PD-1은 리간드인 PD-L1 또는 PD-L2에 결합시, 면역세포에서 저해 신호전달을 개시한다. 암 성장 및 바이러스 감염의 경우에, PD-1 신호전달의 활성이 면역 관용을 증진시켜, 암 또는 바이러스 감염 세포가 면역 감시 및 암 전이 또는 바이러스 부하 증가로부터 피하도록 한다. 치료제에 의한 PD-1 매개 세포 신호전달 억제는 T-세포, B-세포 및 NK 세포를 포함하는 면역 세포를 활성화시켜, 암 세포 성장 또는 바이러스 감염을 억제하는 면역 세포 기능을 향상시키고, 면역 감시 및 면역 기억 기능을 회복하여 이러한 인간의 질환을 치료한다.
본 발명은 항체를 제공하고, 상기 항체의 기능은 면역세포에서 리간드 유도 및 PD-1 매개 세포 신호전달에 길항적인 것이다. 마우스 항-PD-1 항체를 인간화하여, 골격영역 부위에서 인간 항체와 고도로 유사하도록 하였다. 변형된 인간 IgG4 변이체 포맷으로 제조된 전장 항체는 효과기 기능 및 물리화학적 특성 측면에서 고유한 세트의 특징을 가진다. 개시된 항-PD-1 항체는 암 치료, 바이러스 감염 제어 및 악화된 면역 관용과 기작론적으로 연관된 기타 인간 질병에 대한 치료적 용도에 적합하다.
정의
문맥상 달리 명시되지 않는 한, 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로 항체 (전장 단클론항체) 및 PD-1을 인식하는 한 항체 단편을 포함한다. 항체 분자는 대체적으로 단일특이성이나, 독점적특이성, 이종특이성, 또는 다가특이성으로 설명될 수 있다. 항체 분자는 특이적 결합 사이트를 통해 항원의 특이적 항원 결정영역 또는 에피토프에 결합한다. "항체 단편"은 전장 항체의 일부, 일반적으로 이의 항원 결합 또는 가변 영역을 포함한다. 항체 단편의 예시로는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체; 단일쇄 항체 분자; 및 항체 단편으로부터 형성된 다가특이적 항체가 포함된다.
단클론항체 (MAbs)는 당업자에 알려진 방법에 의해 수득할 수 있다. 예를 들어, Kohler et al (1975); U.S. Pat. No. 4,376,110; Ausubel et al (1987-1999); Harlow et al (1988); 및 Colligan et al (1993)을 참조할 수 있다. 본 발명의 mAbs는 IgG, IgM, IgE, IgA 및 이들의 임의의 서브 클래스를 포함하는 임의의 면역글로불린 클래스를 가질 수 있다. mAb를 생산하는 하이브리도마를 in vitro 또는 in vivo로 배양할 수 있다. 고역가의 mAb는 in vivo 생산을 통해 수득될 수 있고, 개별적 하이브리도마 유래 세포를 예를 들어 고유하게 프라이밍된 Balb/c 마우스 (pristine-primed Balb/c mice)와 같은 마우스에 복강내 주입하면 목적하는 mAb가 고농도로 포함된 복수액이 생산된다. 이러한 복수액 또는 배양 상등액으로부터 당업자에 잘 알려진 컬럼 크로마토그래피법을 사용하여 이소타입 IgM 또는 IgG의 mAb를 정제할 수 있다.
"분리된 폴리뉴클레오티드"는 자연적으로 발생하는 상태의 플랭크 (flank)된 서열에서 분리된 폴리뉴클레오티드 세그먼트 또는 단편을 의미하고, 예를 들어 일반적으로 단편에 인접한 서열 예를 들어, 자연적으로 존재하는 게놈 중 단편에 인접한 서열로부터 제거된 DNA 단편이다. 이에 따라, 상기 용어는 예를 들어 벡터, 자체 복제 플라스미드 또는 바이러스, 또는 원핵생물 또는 진핵생물의 게놈 DNA에 도입되는 재조합 DNA, 기타 서열과 독립적인 별도 분자 (예를 들어, cDNA로, 또는 PCR 또는 제한 효소 분해에 의해 생산되는 게놈 또는 cDNA 단편)로 존재할 수 있다. 재조합 DNA를 포함하며, 이는 추가 폴리펩티드 서열을 코딩하는 하이브리드 유전자의 일부이다.
"구조체"는 플라스미드, 코스미드, 자체 복제 폴리뉴클레오티드 분자, 파지 또는 선형 또는 환형 단일 가닥 또는 이중가닥 DNA 또는 RNA 폴리뉴클레오티드 분자와 같은 임의의 재조합 폴리뉴클레오티드 분자를 의미하고, 임의의 소스 유래일 수 있으며, 게놈 통합 또는 자체 복제가 가능하고, 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 분자가 기능적으로 작동 가능한 방식으로 연결 즉, 작동가능하게 연결된 폴리뉴클레오티드 분자를 포함한다. 재조합 구조체는 일반적으로 목적하는 숙주세포에서 폴리뉴클레오티드의 전사를 지시할 전사 개시 조절 서열에 작동가능하게 연결된 본 발명의 폴리뉴클레오티드를 포함할 것이다. 외인성 및 비-외인성 (즉, 내인성) 프로모터 둘 다 차용하여 본 발명의 핵산 발현이 진행되도록 할 수 있다.
"벡터"는 형질전환의 목적, 즉 외인성 DNA를 숙주세포에 도입하기 위해 사용될 수 있는 임의의 재조합 폴리뉴클레오티드 구조체를 의미한다. 벡터의 한 종류는 "플라스미드"이고, 추가 DNA 세그먼트가 라이게이션될 수 있는 환형 이중 가닥 DNA 룹을 의미한다. 벡터의 다른 종류는 바이러스 벡터이고, 추가 DNA 세그먼트가 바이러스 게놈으로 라이게이션될 수 있다. 일종의 벡터는 도입된 숙주세포에서 자체 복제 가능하다 (예를 들어, 박테리아 복제 개시점을 가지는 박테리아 벡터 및 에피좀 동물벡터). 기타 벡터 (예를 들어, 비에피좀 동물 벡터)는 숙주세포로 도입시 숙주세포의 게놈에 통합되어, 숙주 게놈과 함께 복제된다. 더욱이, 일종의 벡터는 작동가능하게 연결된 유전자의 발현을 지시할 수 있다. 본 명세서에서 이러한 벡터는 "발현벡터"를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 "발현벡터"는 숙주세포에 형질전환, 형질감염 또는 형질도입되었을 때 목적하는 유전자의 복제와 발현을 가능하도록 하는 핵산 분자를 의미한다. 발현벡터는 하나 이상의 선별가능한 표현형 마커 및 벡터의 지속성을 확보하고 목적한다면 숙주 내 증폭을 제공하기 위해 복제 개시점을 포함한다. 발현벡터는 세포 내의 폴리펩티드 발현을 유도하기 위한 프로모터를 추가로 포함한다. 적합한 발현벡터는 플라스미드 예를 들어, pBR322 유래이거나, 각종 pUC 플라스미드일 수 있으며, 상업적으로 입수가능하다. 기타 발현 벡터는 박테리오파지, 파지미드 유래이거나, 또는 코스미드 발현벡터일 수 있다.
본 발명의 추가 구현예
구체적 구현예에서, 본 발명은 본 명세서에 개시된 바와 같이 마우스 하이브리도마 클론을 스크리닝하여 확인한 마우스 단클론항체를 제공한다.
다른 구현예에서, 본 발명은 다음의 폴리뉴클레오티드 및 단백질 서열의 조성물을 제공한다:
a) cDNA 서열, 서열번호 3, 마우스 mAb 317의 중쇄 가변 영역을 코딩;
b) 마우스 mAb 317의 중쇄 가변 영역 또는 mu317_Vh에 대한 단백질 서열 (서열번호 4);
c) CDNA 서열, 서열번호 5, 마우스 mAb 317의 경쇄 가변 영역을 코딩;
d) 마우스 mAb 317의 경쇄 가변 영역 또는 mu317_Vk에 대한 단백질 서열 (서열번호 6);
e) CDNA 서열, 서열번호 7, 마우스 mAb 326의 중쇄 가변 영역을 코딩;
f) mAb 326의 중쇄 가변 영역 단백질 서열 또는 mu326_Vh (서열번호 8);
g) CDNA 서열, 서열번호 9, 마우스 mAb 326의 경쇄 가변 영역 코딩;
h) 마우스 mAb 326의 경쇄 가변 영역에 대한 단백질 서열 또는 mu326_Vk (서열번호 10).
일 측면에서, 본 발명은 상보성 결정 영역 (CDR) 서열을 포함하는 조성물을 제공하고, 표적 항원인 PD-1에의 결합을 매개하며, mu317 및 m326의 CDR 서열을 포함한다:
a) mu317 중쇄 CDR1 (mu317 H-CDR1)은 GFSLTSYGVH (서열번호 11)의 아미노산 서열을 포함한다;
b) mu317 H-CDR2는 VIWAGGSTNYNSALMS (서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함한다;
c) mu317 H-CDR3는 ARAYGNYWYIDV (서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함한다;
d) mu317 경쇄 CDR1 (mu317 L-CDR1)은 KASQSVSNDVA (서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함한다;
e) mu317 L-CDR2은 YAFHRFT (서열번호 15)의 아미노산 서열을 포함한다;
f) mu317 L-CDR3은 HQAYSSPYT (서열번호 16)의 아미노산 서열을 포함한다;
g) mu326 H-CDR1은 GYTFTNYGMN (서열번호 17)의 아미노산 서열을 포함한다;
h) mu326 H-CDR2은 WINNNNGEPTYAEEFKG (서열번호 18)의 아미노산 서열을 포함한다;
i) mu326 H-CDR3은 ARDVMDY (서열번호 19)의 아미노산 서열을 포함한다;
j) mu326 L-CDR1은 RASESVDNYGYSFMH (서열번호 20)의 아미노산 서열을 포함한다;
k) mu326 L-CDR2은 RASNLES (서열번호 21)의 아미노산 서열을 포함한다;
l) mu326 L-CDR3은 QQSKEYPT (서열번호 22)의 아미노산 서열을 포함한다.
다른 구현예에서, 본 발명은 마우스 mAbs mu317 및 mu326에서 유래한 인간화 단클론항체의 서열을 포함하는 조성물을 제공하며, 다음을 포함한다:
a) 인간화 mAb hu317-4B6은 서열번호 24의 중쇄 가변 영역에 대한 단백질 서열을 포함하며, 다음에 의해 코딩된다
b) hu317-4B6_Vh (서열번호 23)의 cDNA;
c) 인간화 mAb hu317-4B6 또한 서열번호 26의 경쇄 가변 영역에 대한 단백질 서열을 포함하며, 다음에 의해 코딩된다
d) hu317-4B6 (서열번호 25)의 cDNA;
e) 인간화 mAb hu326-4A3은 서열번호 28의 Vh 단백질 서열을 포함하며, 다음에 의해 코딩된다
f) hu326-4A3-Vh (서열번호 27)의 cDNA;
g) 인간화 mAb hu326-4A3은 또한 서열번호 30의 Vk 단백질 서열을 포함하며, 다음에 의해 코딩된다
h) hu326-4A3_Vk (서열번호 29)의 cDNA;
i) hu317-4B2_Vh (서열번호 43) 및 hu317-4B2_Vk (서열번호 44)의 단백질 서열;
j) hu317-4B5_Vh (서열번호 45) 및 hu317-4B5_Vk (서열번호 46)의 단백질 서열;
k) hu317-1_Vh (서열번호 48)의 단백질 서열 및 hu317-1_Vh (서열번호 47)를 코딩하는 cDNA;
l) hu317-1_Vk (서열번호 50)의 단백질 서열 및 hu317-1_Vk (서열번호 49)를 코딩하는 cDNA;
m) hu326-3B1_Vh (서열번호 51) 및 hu326-3B1_Vk (서열번호 52)의 단백질 서열;
n) hu326-3G1_Vh (서열번호 53) 및 hu326-3G1_Vk (서열번호 54)의 단백질 서열;
o) hu326-1_Vh (서열번호 56)의 단백질 서열 및 hu326-1_Vh (서열번호 55)를 코딩하는 cDNA;
p) hu326-1_Vk (서열번호 58)의 단백질 서열 및 hu326-1_Vk (서열번호 57)를 코딩하는 cDNA;
q) mu317 (서열번호 63-74)에서 유래한 기타 인간화 mAb의 단백질 서열;
r) mu326 (서열번호 75-82)에서 유래한 기타 인간화 mAb의 단백질 서열;
일 측면에서, 본 발명은 인간화 단클론항체의 CDR 서열을 포함하는 조성물을 제공한다. CDR은 동일 시리즈의 인간화 mAb 예를 들어 hu317 또는 hu326 사이에서 공유될 수 있다 (표 15-16 참조). 하기와 같이 중복되지 않은 CDR을 나열하였다:
a) H-CDR1 서열 GFSLTSYGVH (서열번호 31)로, 인간화 mAb hu317 및 mu317 중쇄 전체에서 공유;
b) H-CDR3 서열 ARAYGNYWYIDV (서열번호 33), 인간화 mAb hu317 및 mu317 중쇄 전체에서 공유;
c) L-CDR1 서열 KSSESVSNDVA (서열번호 34), 인간화 mAb hu317-4B2, hu317-4B5 및 hu317-4B6 경쇄 전체에서 공유;
d) L-CDR2 서열 YAFHRFT (서열번호 35), 인간화 mAb hu317 및 mu317 경쇄 전체에서 공유;
e) L-CDR3 서열 HQAYSSPYT (서열번호 36), 인간화 mAb hu317 및 mu317 경쇄 전체에서 공유;
f) hu317-4B6_Vh 중 H-CDR2 서열 VIYADGSTNYNPSLKS (서열번호 32);
g) hu317-4B2_Vh 및 hu317-4B5_Vh 중 H-CDR2 서열 VIYAGGSTNYNPSLKS (서열번호 60);
h) hu317-1_Vh 중 H-CDR2 서열 VIWAGGSTNYNPSLKS (서열번호 59);
i) hu317-1_Vk 중 L-CDR1 서열 KASQSVSNDVA (서열번호 11);
j) H-CDR1 서열 GYTFTNYGMN (서열번호 37), 인간화 mAb hu326 및 mu326 중쇄 전체에서 공유;
k) H-CDR3 서열 ARDVMDY (서열번호 39), 인간화 mAb hu326 및 mu326 중쇄 전체에서 공유;
l) L-CDR1 서열 RASESVDNYGYSFMH (서열번호 40), 인간화 mAb hu326 및 mu326 경쇄 전체에서 공유;
m) L-CDR2 서열 RASNLES (서열번호 41), 인간화 mAbs hu326 및 mu326 경쇄 전체에서 공유;
n) L-CDR3 서열 QQSKEYPT (서열번호 42), 인간화 mAbs hu326 및 mu326 경쇄 전체에서 공유;
o) hu326_4A3_Vh 중 H-CDR2 서열 WINNNNAEPTYAQDFRG (서열번호 38);
p) hu326_1 및 기타 hu317 mAbs의 Vh 중 H-CDR2 서열 WINNNNGEPTYAQGFRG (서열번호 62).
다른 측면에서, 본 발명은 인간화 항-PD-1 mAb의 항원에 대한 특정 결합 에피토프 및 이의 기능적 용도를 제공한다. 리간드가 결합하기 위한 PD-1 중 6개의 중요한 아미노산 (AA) 잔기를 개별적으로 변이시키고, 변이 및 야생형 PD-1 단백질을 사용하여 결합 에피토프를 평가하였다. 항체 결합을 현저하게 방해하는 변이를 가지는 잔기를 키 또는 주요한 결합 에피토프로 인식한다. hu317-4B5 및 hu317-4B6 mAb의 주요 결합 에피토프는 K45 및 I93 (2008 PNAS에 기인한 AA 넘버링, 105:10483; 서열번호 2 중 K58 및 I106에 대응됨)이고; hu326-3B1 및 hu317-4A3 mAb의 주요 결합 에피토프는 I93, L95 및 P97이다 (2008 PNAS에 기인한 AA 넘버링, 105:10483; 서열번호 2 중 I106, L108 및 P110에 대응됨).
추가 측면에서, 본 발명은 재조합 인간 IgG4 변이체의 불변 영역 서열을 포함하는 조성물을 제공하고, 인간화 항-PD-1 mAbs를 포함하는 대상 항체의 가변 영역에 연결될 수 있으며, 바람직한 효과기 기능 및 물리화학적 특성을 나타내었다. 서열은 다음과 같다:
IgG4mt10의 불변 영역 서열 (서열번호 88);
a) IgG4mt1의 참조서열 (서열번호 83);
b) IgG4mt2의 참조서열 (서열번호 84);
c) IgG4mt6의 참조서열 (서열번호 85);
d) IgG4mt8의 참조서열 (서열번호 86);
e) IgG4mt9의 참조서열 (서열번호 87).
다른 구현예에서, 본 발명은 항-PD-1 항체 기능을 어세이하는 방법을 제공하며, 재조합 융합 단백질을 발현하는 플라스미드 OS8을 사용하여 안정한 세포주 HEK293/OS8/PD-L1 또는 HEK293/OS8/PD-L2를 생산하며, OS8 (T 세포-활성분자) 및 PD-1 리간드를 공동발현한다. 세포주를 사용하여 T-세포 및 PBMC를 공동배양으로 결합시켜, 항-PD-1 mAb의 기능을 평가한다 (실시예 3 및 실시예 4 참조). 경우에 따라서, 재조합 융합 단백질을 발현하는 다른 플라스미드를 사용하여 안정한 세포주 HuT78/P3Z를 생산할 수 있고, 여기서 P3Z는 분자 센서 및 신호 전달 매개체 역할을 한다. P3Z가 PD-1 리간드에 결합되면, 세포내 신호를 전달하여 HuT78 세포 중 IL-2 방출을 활성화할 것이다. 시스템을 사용하여 항-PD-1 mAb의 저해 효과를 평가할 수 있다 (실시예 3 참조).
일 측면에서, 본 발명은 하기와 같은 재조합 융합 단백질의 아미노산 서열을 포함하는 조성물을 제공한다:
a) OS8 (서열번호 89)의 단백질 서열;
b) P3Z (서열번호 90)의 단백질 서열.
다른 측면에서, 본 발명은 명세서에 기술된 재조합 융합 단백질을 발현하는 안정한 세포주를 생산하는 방법 및 항-PD-1 mAb의 기능적 활성을 정량적으로 어세이하기 위해 상기 시스템을 사용하는 방법을 제공한다.
다른 구현예에서, 본 발명은 대상 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 상기 폴리뉴클레오티드는 발현을 위해 외인성 전사 조절 서열에 작동가능하게 연결될 수 있고, 벡터, 세포 등에 도입될 수 있다.
다른 구현예에서, 본 발명은 마우스 항-PD-1 항체 및 인간화 버전의 항-PD-1 항체를 제공하고, hu317-4B6, hu317-4B5, hu317-4B2 등 및 hu326-4A3, hu326-3B1, hu326-3G1 등을 포함하며, PD-1 매개 신호전달을 억제하고, 면역 세포 활성화하여 암 세포와 같은 표적 세포에 대한 사이토카인 분비 및 세포독성을 포함하는 면역반응 캐스케이드를 유발하며, 항체의 이러한 기능적 용도를 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 PD-1을 발현하는 수 종의 면역세포를 활성화하는 인간화 항-PD-1 항체 및 상기 항체의 기능적 용도를 제공하고, 상기 면역세포는 인간 T-세포, NK-세포 및 PBMCs를 포함하며, 이의 기능은 면역 반응 신호를 증폭하고, 면역 시스템을 고정하며, 암 세포 및 바이러스 감염을 제거하기 위한 면역 효과 세포로 작용하도록 한다.
다른 측면에서, 상기 인간화 항-PD-1 mAb를 치료제로 사용하여 PD-1 매개 세포내 신호전달에 의한 면역세포의 억제로 질병 악화 특히 암 및 바이러스 감염 유도와 관련된 인간 질병을 치료한다.
본 발명의 상기 조성물은 암, 신경 퇴행성 및 감염성 특허 바이러스성 질환과 인간 PD-1의 부적절 또는 장해 발현에 의한 기타 증상 및/또는 증상의 병원학 또는 병리학적 구성을 치료하기 위해 사용된다. 이에 따라, 본 발명은 대상 항-PD-1 단백질로 필요로 하는 개체의 암 치료 또는 암 진행을 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명은 추가로, 암 치료 또는 암 진행을 억제하기 위한 약제를 제조하기 위한 대상 폴리뉴클레오티드의 용도를 제공한다.
본 발명은 언급한 구체적 구현예의 모든 조합을 포함한다. 추가 구현예 및 본 발명의 전 범위에 대한 응용은 이하에서 주어진 상세한 설명에 의해 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명의 바람직한 구현예를 기재한 반면, 본 발명의 본질 및 범위 내 다양한 변경과 변형은 이러한 상세한 설명으로부터 당업자에 명확하게 될 것이므로, 상세한 설명 및 구체적 실시예는 예시로 주어진 것으로 이해되어야 할 것이다. 본 명세서에서 인용된 모든 공개물, 특허 및 특허출원, 이에 포함된 인용은 목적에 무관하게 전체로 참조하여 도입될 수 있다.
실시예
실시예 1: 항-PD-1 단클론항체의 생산
종래의 하이브리도마 융합 기술 (Kohler and Milstein 1976 Eur J Immunol 6:511-519; de St Groth and Sheidegger 1980, J Immunol Methods 35:1-21; Mechetner 2007 Methods Mol Biol 378:1-13)을 약간 변경한 것에 기초하여 항-PD-1 단클론항체 (mAb)를 생산하였다. 추가 검증을 위해 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) 및 FACS (fluorescence-activated cell sorting) 어세이로 높은 결합 활성을 가진 mAb를 선별하였다.
면역화를 위한 PD-1 재조합 단백질 및 결합 어세이
Origene에서 전장 인간 PD-1 cDNA 포함 발현 플라스미드를 입수하였다 (Cat. No. SC117011, NCBI Accession No: NM_005018.1, Beijing, China). PD-1의 1-168 아미노산으로 구성된 세포외 도메인 (서열번호 1, 서열번호 2)을 PCR로 증폭하고, C-말단을 His6 태그 또는 인간 IgG4 중쇄의 γFc 영역 어느 하나에 융합하고, pcDNA3.1 기반 발현 벡터 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)에 서브클로닝하여, 2개의 재조합 단백질 발현 플라스미드인 PD-1-EC/His 및 PD-1-EC/Fc (PD-1/His 및 PD-1/Fc으로 약칭됨)를 제조하였다. 면역원/항원 단백질의 개략도는 도 1에 나타내었다. 재조합 융합 단백질 생산을 위해, 1-3리터 배지(Invitrogen)의 293-F 세포에 PD-1/His 및 PD-1/Fc 플라스미드를 일시적으로 형질감염하였고, 회전 쉐이커가 장착된 CO2 인큐베이터에서 5-7일 동안 배양하였다. 재조합 단백질을 포함한 상등액을 수집하고 15000g에서 30분 동안 원심분리하여 제거하였다. Ni-세파로스 패스트 플로우 (Cat. No. 17531801, GE Lifesciences, Shanghai, China)를 사용하여 고정 금속 친화 크로마토그래피를 통해 정제한 다음, 하이로드 16/60 슈퍼덱스 200 컬럼 (Cat. No. 17106901, GE Lifesciences, Shanghai, China)을 사용하여 크기 배제 크로마토그래피를 통해 PD-1/His를 정제하였다. 프로틴 G 세파로스 패스트 플로우 컬럼 (Cat. No. 17061805, GE Lifesciences)을 사용하여 PD-1/Fc를 정제하였다. PD-1/His 및 PD-1/Fc 단백질 모두 PBS (phosphate buffered saline)로 희석하고, 작게 분주하여 -80oC 냉동기에 보관하였다.
공지의 서열(NCBI Accession No. NM_014143)에 기반하여 Genescript (Nanjing, China)로 인간 PD-L1 코딩 cDNA를 화학적 합성하였다. Origene (Cat. No. SC108873, NCBI Accession No. NM_025239.2, Beijing, China)에서 PD-L2 발현 플라스미드를 구입하였다. 두 cDNA 모두 pcDNA3.1/하이그로마이신 (Cat. No. V870-20, Invitrogen) 및 pcDNA3.1/V5-His (Cat. No. V810-20, Invitrogen) 각각에 클로닝하였다.
안정한 세포주 발현
PD-1, PD-L1 및 PD-L2 포함 pcDNA3.1 플라스미드를 HUT78 (ATCC, Manassas, VA, USA) 및 HEK293 (ATCC) 각각에 형질감염시키고, 하이그로마이신 200 마이크로그램 (Cat. No. 10687-010, Invitrogen) 또는 G418 (Sigma) 밀리미터당 1 mg 포함 배지로 선별하여, 인간 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2을 발현하는 안정한 세포주를 정립하였다. 종래 방법인 한계희석 또는 배양 웰 표면에서 단일 콜로니를 픽업하여 단일 클론을 분리하였다. 항-PD-1, PD-L1 및 PD-L2 항체 (Cat. No. 12-9969, 17-5983, 12-5888, eBioscience, San Diego, USA) 각각을 사용하여 웨스턴 블랏 및 FACS 분석을 통해 모든 클론을 스크리닝하였고, 하이브리도마 단클론항체를 스크리닝하기 위한 FACS 결합 어세이를 위해 발현이 가장 우수한 발현 클론을 선별하거나, 기능 어세이에 사용하였다.
면역화, 하이브리도마 융합 및 클로닝
5 마이크로그램의 PD-1/Fc 포함 보강제 (Cat. No. KX0210041, KangBiQuan, Beijing, China) 100ul를 피하 투여하여 8-12주령 Balb/c 마우스 (BEIJING HFK BIOCSIENCE CO.,LTD, Beijing, China)를 면역화하였다. 앞서 언급한 면역원으로 3주 차이를 두고 2회 주사하여 면역화를 수행하였다. 2회차 면역화 2주 후, FACS (다음 섹션)로 PD-1 결합을 평가하였다. 혈청 중 고역가 항-PD-1 항체 포함 마우스를 선별하여 임의의 보강제 없이 PD-1/Fc 50 마이크로그램을 복강내 주입하여 부스팅하였다. 부스팅 3일 후, 비장세포를 분리하고 표준 기술(Gefter, M.L. et al., 1977 Somat Cell Genet, 3:231-236)을 사용하여 마우스 골수종 세포주, SP2/0 세포 (ATCC)에 융합하였다.
ELISA 및 FACS에 의한 항체의 PD-1 결합 활성 평가
"Flanagan, M.L. et al. 2007 Methods in Molecular Biology 378:33-52"에 기술된 방법에 몇몇 변형을 포함하여, ELISA (Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Assay)로 하이브리도마 클론의 상등액을 처음 스크리닝하였다. 간략하게, 96웰 플레이트의 각 웰 기저를 50 마이크로리터의 PBS (phosphate buffered saline) 중 50-200 나노그램의 PD-1/His 또는 PD-1/Fc 단백질로 코팅하였다. HRP-연결 항-마우스 IgG 항체 (Cat. No. 7076S, Cell Signaling Technology, USA and Shanghai, China) 및 화학발광 제제 (Cat. No. PA107-01, TIANGEN, China)를 사용하여 ELISA 신호를 검출하고 현상하였으며, 450 nm 파장에서 플레이트 리더(PHREAstar FS, BMG LABTECH, Germany)에 의해 읽혔다. 종래 방법을 사용하여 FACS (fluorescence-activated cell sorting)를 통해 ELISA-양성 항체 생산 클론을 추가로 검증하였다. 앞서 언급한 PD-1 안정 발현 세포주, HuT78/PD-1 (105 세포/웰)를 V-하단 96-웰 플레이트 (Cat. No. 3897, Corning, USA and Shanghai, China)의 항-PD-1 하이브리도마 유래 상층액과 함께 염색하였다. 인간 Fc 수용체를 차단하기 위해, 세포를 인간 IgG (20μg/ml) (Cat. No. H11296, LifeHolder, USA and Shanghai, China)와 함께 사전 인큐베이션하였다. DylightTM 649-라벨링된 염소 항-마우스 IgG 항체 (Cat. No. 405312, Biolegend, San Diego, USA)로 PD-1 항체를 검출하였고, 유세포 분석기 (flow cytometer: Guava easyCyte 8HT, Merck-Millipore, USA and Shanghai, China)를 사용하여 세포 형광을 모니터링하였다.
ELISA 및 FACS 어세이 둘 다에서 양성 신호를 보였던 하이브리도마 세포의 조건화된 배지를 기능 어세이에 차용하여, 인간 면역세포-기반 어세이 (본 명세서)에서 우수한 기능적 활성을 가지는 항체를 동정하였다. 양성 기능적 활성을 가진 항체를 추가로 서브클로닝하고 검정하였다.
서브클로닝 및 무혈청 또는 낮은 혈청 배지로 조정
ELISA, FACS 및 기능 어세이를 통해 1차 스크리닝한 양성 하이브리도마 클론을 한계 희석법의 종래 방법으로 서브클로닝하였다. 양성 클론 각각을 96-웰 플레이트에 평판도말하였고, CO2 인큐베이터에서 10% 우태아혈청 (FBS, Cat. No. SH30084.03, Hyclone, Beijing, China) 포함 RPMI1640 배지 (Cat. No. SH30809.01B, Hyclone, Shanghai, China) 중에 배양하였다. 각각의 한계 희석 플레이트에서 3개의 서브클론을 선별하여 FACS 및 기능 어세이로 검정하였다. 기능 어세이를 통해 선별된 서브클론을 단클론항체로 정의하였다. 최상단의 서브클론을 1-3% FBS를 포함한 CDM4MAb 배지 (Cat. No. SH30801.02, Hyclone) 중에서 성장하도록 적응시켰다.
단클론항체의 발현과 정제
CDM4MAb 배지 (Cat. No. SH30801.02, Hyclone) 또는 Freestyle293 발현 배지 (Cat. No. 12338018, Invitrogen) 각각에 마우스 단클론항체 생산 하이브리도마 세포 또는 재조합 항체 플라스미드 형질감염된 293-F 세포 (Cat. No. R79007, Invitrogen)를 CO2 인큐베이터에서 37oC로 5-7일 동안 배양하였다. 10,000g에서 30분 동안 원심분리하여 조건화된 배지를 수집하고, 모든 세포 및 세포 잔해를 제거하였으며, 정제 전 0.22μm 막을 통해 필터링하였다. 마우스 또는 재조합 항체를 적용하여 제조사의 지시에 따라 단백질 A 컬럼 (Cat. No. 17127901, GE Life Sciences)에 결합시키고, PBS로 세척하였으며, 20mM 구연산염, 150mM NaCl 포함 버퍼로 pH 3.5에서 용출하였다. 용출된 물질을 1M Tris pH8.0로 중화하였고, 일반적으로 90% 이상의 순도를 가지는 항체가 포함된다. 단백질 A-친화로 정제된 항체를 PBS로 투석하거나 하이로드 16/60 슈퍼덱스 200 컬럼 (Cat. No. 17531801, GE Life Sciences)을 사용하여 추가 정제함으로써 응집체를 제거하였다. 280nm에서의 흡광도를 측정하거나, 한정농도의 소 IgG (Cat. No. 23212, Thermo Scientific)를 표준으로 사용하는 브래포드 어세이 (Bradford assay: Cat. No. 1856210, Thermo Scientific, Rockford, IL, USA)를 통해 단백질 농도를 측정하였다. 정제된 항체를 분주하여 -80oC 냉동기에 보관하였다.
실시예 2. 항-PD-1 항체 사이의 결합 활성 비교
수천개의 하이브리도마 클론 스크리닝을 통해, 몇몇 최상 단클론항체 (mAb)를 동정하였으며, 인간 PD-1에 높은 특이도 및 강도로 결합한다. ELISA 어세이 (도 2)에서 나타난 바와 같이, 최상 항체 중 3개는 이러한 결합 강도 및 특이도를 나타내었다. FACS 분석 결과에 의해, 선별된 단클론항체가 세포 표면에서 발현되는 천연 PD-1 단백질에 결합함을 입증하였다. 마우스 mAb317 (mu317), mu326 및 mu150는 농도 의존적 결합 활성을 나타내었고, 이들의 결합 EC50 (50% 활성에 효과가 있는 농도)은 대조군 mu55보다 현저히 낮았다 (도 3).
SPR(Surface Plasmon Resonance)에 의한 mAb 결합 친화도 평가
ELISA 및 FACS에서 높은 결합 활성을 나타낼 뿐 아니라 세포-기반 어세이에서 효능을 가지는 mAb (명세서에 언급)에 대하여, 실시간 결합 반응에서의 결합 동역학 상수를 검증하였다. 단백질 A 플로우 컬럼 (Cat. No. 17531801, GE Life Sciences)를 사용한 다음 하이로드 16/60 슈퍼덱스 200 컬럼 (Cat. No. 17106901, GE Life Sciences)을 사용한 크기 배제 크로마토그래피를 통해 하이브리도마 상층액에서 마우스 항-PD-1 mAb를 정제하였다. 정제된 항-PD-1 항체를 PBS 중에 0.5-1 mg/mL로 농축하고, 분주하여 -800C 냉동기에서 보관하였다.
PD-1 mAb에 대한 결합 친화도를 측정하기 위해, BIAcoreTM T-200 기기 (GE Life Sciences)를 사용하여 HBS-N 버퍼 (10 mM HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCl, 3 mM EDTA, 0.005% v/v 계면활성제 P20, GE Healthcare)에서 SPR 측정을 수행하였다. 표준 1차 아민 커플링 프로토콜을 사용하여 항-마우스 Fc CM5 바이오센서 칩(GE Healthcare)을 생산하였다. 1분 동안 10 μl/min로 0.3μg/ml의 PD-1 mAb를 항-마우스 Fc 표면 상에 포획하였다. 3.3nM 내지 120nM 까지 연속 희석한 PD-1/Fc를 항체 결합 표면에 3분간 30 μl/min로 주사한 다음, 10분의 해리 단계를 거쳤다. 일대일 랭뮤어 결합 모델 (BIA Evaluation Software, GE Life Sciences)을 사용하여 결합 속도 (K a 또는 k on) 및 해리 속도 (K d 또는 k off)를 계산하였다. k off/k on 비율로 평형 해리 상수 (K D)를 계산하였다.
표 1에 나타낸 바와 같이, mu326 및 mu517 둘 다 mu317과 관련된 동족 서열 패밀리 멤버로, 0.324 nM 및 0.289 nM 정도의 나노몰 이하 KD를 가지며, mu134에 비해 현저히 우수하였다. 표 1에 리스트한 3개의 mAb 사이에서 Kon 속도는 유사하였고, 그럼에도 Koff 속도는 현저히 달랐으며, mu134에서 훨씬 빠른 해리 속도가 관찰되었다.
표 1. 일종의 최상에 대한 결합상수
Figure 112016034253110-pct00004
SPR을 통한 항-PD-1 Fab의 친화도 측정
PCR에 의해 항-PD-1 mAb를 Fab 버전으로 변환하여, 중쇄 및 경쇄의 가변영역을 인간 IgG2-CH1 및 카파 체인의 불변 영역 N-말단에 융합하고, pcDNA3.1 벡터 (Invitrogen)에 서브클로닝하였다. 항체 전체의 일시적 발현과 유사한 일시적 형질감염 프로토콜을 사용하여, 293-F 세포에서 발현 벡터를 둘 다 함께 발현시켰다. 간략하게, Fab 카파 체인을 PCR 증폭하고 pcDNA3.1 기반 발현벡터(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)에 서브클로닝하였다. 별개의 플라스미드에서, 인간 IgG2 유래 CH1 코딩 서열과 함께 중쇄 가변영역 (VH)을 중첩 PCR에 의해 C-말단 c-Myc-His8 태그와 융합한 다음, 발현벡터에 서브클로닝하였다. IgG2 중쇄에 C232S 및 C233S (Kabat 잔기 넘버링, Kabat et al. Sequence of proteins of immunologic interest, 5th ed Bethesda, MD, NIH 1991) 변이를 도입하여, 이황화 결합 교환을 방지하고 IgG2-A 입체구조 내 인간 IgG2를 안정화하였다 (Lightle et al. 2010 Protein Sci 19(4): 753-762). 두 구조체 모두 Fab 성숙 서열의 업스트림에 신호 펩티드를 포함하였다. 위 2개의 플라스미드를 293-F 세포에 공동-형질감염시켜 Fab가 분비 발현되도록 하였고, 형질감염 6-7일 후 세포 배양 상등액을 수확하였다. Ni-세파로스 패스트 플로우 컬럼 (Cat. No. 17531801, GE Life Sciences)을 사용한 다음 하이로드 16/60 슈퍼덱스 200 컬럼 (Cat. No. 17106901, GE Life Sciences)을 사용한 크기 배제 크로마토그래피를 통해, 세포 배양 상등액으로부터 His8-태깅된 Fab를 정제하였다. 정제된 Fab를 PBS에 0.5-5 mg/mL로 농축하고 분주하여 -80oC 냉동기에서 보관하였다.
항-PD-1 Fabs의 친화도 측정을 위해, BIAcoreTM T-200 기기 (GE Life Sciences)로 SPR 에세이를 사용하였다. 간략하게, 인간 PD-1/His 또는 시노몰구스 원숭이 PD-1/His는 활성화된 CM5 바이오센서 칩 (Cat. No. BR100530, GE Life Sciences)과 커플링되어, 약 100-200 반응 단위 (response units: RU)를 달성한 다음, 1M 에탄올아민으로 반응하지 않은 군을 차단하였다. 0.12nM에서 90nM까지 증가하는 농도의 Fab 샘플을 SPR 러닝 버퍼 (10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 0.05% Tween 20, pH7.4)에 30μL/minute로 주입하고, 공백 유동세포에서 RU를 차감하여 인간 PD-1/His 또는 원숭이 PD-1/His에 대한 결합 반응을 계산하였다. 일대일 랭뮤어 결합 모델 (BIA Evaluation Software, GE Life Sciences)을 사용하여 결합 속도 (K a 또는 k on) 및 해리 속도 (K d 또는 k off)를 계산하였다. k off/k on 비율로 평형 해리 상수 (K D)를 계산하였다.
SPR로 측정된 항-PD-1 Fab의 결합 친화도를 표 18에 나타내었다. 각 항-PD-1 Fab는 인간 PD-1에 고친화도(K d = 0.15-1 nM)로 결합하였다. 326-3G1을 제외한 모든 Fab는 약간 낮으나 시노몰구스 원숭이 PD-1에 상응하는 친화도 (K d에서 5배 이내)로 결합하였다.
실시예 3. 인간 T 세포에서 항-PD-1 항체의 기능적 활성
안정한 세포주 생산
ATCC (American Type Culture Collection, Rockville, MD)에서 레트로바이러스 팩키징 세포주 PT67, 인간 T 세포주 HuT78 및 HEK293을 수득하였다. 앞서 언급한 프로토콜 (Zhang et al. 2005 Blood 106: 1544-1551)에 따라 PD-1 유전자 포함 pFB-네오 벡터 (Strategene/Agilent Tech, Santa Clara, CA)를 사용하여 레트로바이러스 형질도입에 의해 PD-1을 발현하는 HuT78 계대세포주 HuT78/PD-1를 생산하였다. 항-인간 CD3 mAb OKT3의 단일쇄 가변 단편(scFv) (Kipriyanov et al. 1997, PEDS 10:445-453)을 힌지, 막관통 및 세포질 도메인을 포함하는 마우스 CD8α (NCBI Accession No: NP_001074579.1)의 C-말단에 융합하여 T 세포 접합자인 막 고정 키메릭 Ab (OS8)를 구축하였다. 이와 같이 함으로써, 항-CD3 scFv는 세포 표면에 T 세포 활성 인자로 고정된다. pcDNA3.1 벡터에 인간 PD-L1, PD-L2 및 OS8 cDNA를 서브클로닝하였다. HEK293 및 Hep3B 세포 (ATCC)를 쌍을 이루는 플라스미드와 함께 공동-형질감염시킨 다음, 10-14일 동안 하이그로마이신 또는 G418로 선별하여, OS8 및 PD-L1 또는 PD-L2 cDNA를 둘 다 공동발현하는 안정화 세포주 HEK293/OS8/PD-L1, Hep3B/OS8/PD-L1 및 HEK293/OS8/PD-L2을 생산하였다. 이후 세포주를 앞서 언급한 바와 같이 한계희석으로 클로닝하였다 (Fuller SA, et al. Curr Protoc Mol Biol. Chapter 11:Unit11.8., 2001). 인간 PD-1의 세포외 및 막관통 도메인을 인간 CD3ζ쇄 (NCBI Accession No. NP_932170.1)의 세포질 도메인에 융합하여, P3Z로 명명된 키메릭 PD-1 수용체를 구축하였다. P3Z 코딩 cDNA 서열을 pFB-네오에 클로닝하였고, 레트로바이러스 형질도입을 통해 HuT78 세포에 전달하여 HuT78/P3Z 세포를 생산하였다.
HuT78/PD-1 세포 중 IL-2 방출에 의해 PD-1 항체 기능 측정
항-PD-1 항체가 PD-L1 유도 PD-1 신호전달의 상호작용을 차단할 수 있는지 확인하기 위하여, 웰당 RPMI1640 성장 배지 200 μl를 피딩한 평바닥 플레이트에서 HEK293/OS8/PD-L1 또는 HEK293/OS8/PD-L2 세포 (웰당 4x104)와 37℃에서 공동 배양하기 전에, HuT78/PD-1 세포 (96웰 플레이트에서 웰 당 1.5x104 세포)를 하이브리도마 상등액 또는 PD-1 항체와 15분 동안 사전 인큐베이션하였다. 16-18시간 이후, 공동 배양 상등액을 수집하였다. 인간 IL-2 Ready-Set-Go! ELISA 키트 (Cat. No. 88-7025, eBiosciences, San Diego, CA)를 사용하여 ELISA를 통해 IL-2를 어세이하였다. 이번 어세이에서, 항-PD-1 항체로 PD-1 신호전달이 차단되어, 향상된 TCR 신호전달 및 IL-2 생산을 나타내었다 (도 4).
도 5 및 표 2에 나타낸 바와 같이, 마우스 항-PD-1 mAb, mu317 및 mu326는 mu30보다 현저히 더 높은 기능적 활성을 유도하고, PD-L1-유도 PD-1 신호전달을 억제하여, 증가된 IL-2 분비를 유도하였다. 둘 다 각각 675 및 634 pg/ml로 더 높은 IL-2 분비를 나타내었고 (상단선, 표 2), 둘 다 mu30 항체보다 더 낮은 EC50 (50% 수준의 IL-2 분비 유도에서 mAb의 유효 농도)을 나타내었다.
표 2. HEK293/OS8/PD-L1 세포와 공배양된 HuT78/PD-1 세포 중 항-PD-1 mAb에 의해 유도된 IL-2 방출
Figure 112016034253110-pct00005
항-PD-1 mAbs의 HuT78/PD-1 세포 접합에 의한 PD-L1 유도 T-세포 활성화 차단 뿐 아니라, PD-L2 유래 IL-2 방출을 차단하였다. 표 3은 IL-2 분비 파라미터 (EC50)로 명시된 바와 같이, mu476에 비해 mu317 및 mu326이 T-세포 활성화에 훨씬 더 높은 효능을 가짐을 보여주는 데이터를 제시하였다.
표 3. HEK293/OS8/PD-L2 세포와 공배양된 HuT78/PD-1 세포 중 항-PD-1 mAbs에 의해 유도되는 IL-2 방출
Figure 112016034253110-pct00006

HuT78/P3Z 세포에서 IL-2 방출의 역방향 신호 전달에 의한 PD-1 항체 기능 측정
키메릭 수용체 P3Z에서, PD-1 신호전달 도메인을 CD3ζ의 세포질 도메인으로 교체하였다. 따라서, P3Z는 원래 PD-1 수용체로서 억제보다는 PD-L1과의 접합에 따른 활성을 매개한다. 이번 어세이에서, 96웰 평바닥 플레이트 (총 부피 200 μl/웰)에서 HEK293/PD-L1 또는 HEK293/PD-L2 세포 (5x104/웰)와 37℃에서 공동 배양하기 전에, HuT78/P3Z 세포 (3x104/웰)를 하이브리도마 상등액 또는 PD-1 항체와 15분 동안 사전 인큐베이션하였다. 16-18시간 이후, 공동 배양 상등액을 수집하였고, 앞서 언급한 바와 같이 ELISA로 IL-2 생산을 어세이하였다.
위에서 언급한 역방향 신호 전달 어세이에서 T 세포 활성을 직접 읽어 도출하는 것을 통해, 마우스 항-PD-1 mAbs의 기능적 활성을 추가로 확인하였다. 앞서 기술한 결과와 일치하게, 스크리닝한 mAb 중 mu317 및 mu326이 가장 우수한 기능적 활성을 나타내었다. 표 4 및 표 5에 나타낸 바와 같이, mu317 및 mu326이 낮은 활성의 mAb 중 하나인 mu37에 비해, IC50 및 최대 억제 측면에서 훨씬 더 효능이 있었다.
표 4. HEK293/PD-L1 세포와 공배양된 HuT78/P3Z 세포 중 항-PD-1 mAb에 의한 IL-2 분비 억제
Figure 112016034253110-pct00007
표 5. HEK293/PD-L2 세포와 공배양된 HuT78/P3Z 세포 중 항-PD-1 mAb에 의한 IL-2 분비 억제
Figure 112016034253110-pct00008

실시예 4. HEK293/OS8/PD-L1 세포와 공배양된 1차 인간 PBMC 중 항-PD-1 mAb에 의한 IFN-γ 분비 활성
선별된 PD-1에 대한 가장 우수한 mAb가 1차 인간 면역세포에 대한 기능적 효과도 나타내는지 검증하기 위하여, T-세포 (50-70%), B-세포와 NK 세포 (15-30%), 및 단핵세포 (2-10%)로 주로 구성되고, 신선하게 분리된 PBMC (peripheral blood mononuclear cell)를 사용하여, 항체 기능을 어세이하였다. 제조사의 지시에 따라 피콜 림프구 분리 배지 (Histopaque-1077; Sigma-Aldrich, MO)를 사용하여 밀도 기울기 원심분리를 통해, 건강한 공여자로부터 인간 PBMC를 분리하였다. 모든 인간 혈액 수집은 Beigene의 내부 절차를 따랐다. 이후 항-CD3 mAb (40 ng/mL) OKT3 (Cat. No. 16-0037, eBioscience, CA)로 어세이 전 3일 동안 PBMC를 자극하였다. 활성화된 PBMC (1차 T 세포) 상에서의 PD-1 발현은 개별 공여자에 따라 다양한 정도로 증가하였음을 FACS 분석 (실시예 1)을 통해 나타내었다 (표 6). TCR/CD3 복합체의 접합에 따라 PD-1 리간드-양성 종양세포에 대한 사전 활성화된 T 세포의 응답을 측정하기 위하여, 96웰 평바닥 플레이트에서 15-18시간 동안 HEK293/OS8/PD-L1 또는 HEK293/OS8/PD-L2 세포 (3x104) 중 어느 하나와 PBMC (1x104)를 공배양하였다. Ready-Set-Go! ELISA 키트 (Cat. No. 88-7316, eBiosciences)를 사용하여 ELISA로 세포 미포함 상등액 중 IFN-γ 레벨에 대하여 어세이하였으며, 이는 기타 면역 세포 활성화 뿐 아니라 T-세포 활성의 가장 중요한 표지자이다 (Thakur A. et al. 2012 Vaccine, 30:4907-4920).
Figure 112016034253110-pct00009
도 6은 사전 활성화된 PBMC와 HEK293/OS8/PD-L1의 공배양 중 mAb mu317 및 mu326의 존재에 의해 IFN-γ 축적이 투여량 의존적 방식으로 증가됨을 나타낸다. 다른 공여자 사이에서 마우스 IgG 처리에 대한 IFN-γ의 기본 레벨은 다양하나, mu317 및 mu326으로 처리된 PBMC에서 IFN-γ 분비 증가는 0.1 내지 10 μg/ml의 항체 처리 범위에서 통계적으로 유의하다. mIgG로 처리된 PBMC에 상응하는 레벨과 비교하여, 0.1 to 10 μg/ml 농도 레벨 사이에서 mu317 및 mu326에 의해 유도된 IFN-γ 분비는 각각 공여자-19 유래 PBMC에서 2.5 내지 3.2배 증가하였고, 공여자-20 유래 PBMC에서 1.4 내지 2.3배 증가하였다.
실시예 5. anti-PD1 mAbs에 의한 인간 NK 세포 활성화
NK 세포에서의 기능적 어세이를 위한 안정한 세포주
이전에 1차 인간 NK 세포는 IL-2 처리에 대한 응답으로 PD-1 단백질을 발현하고, PD-1 매개 신호전달 억제는 NK 세포의 세포독성을 향상시킨다는 것이 보고되었다 (2010 Blood, 116: 2286). NK 세포에서 항-PD-1 mAb에 의해 유도되는 기능적 효과를 정량적으로 어세이하기 위해, 인간 NK 세포주 NK92MI (ATCC) 및 폐암 세포주 SK-Mes-1 (ATCC)를 엔지니어링하여, 이전에 언급된 프로토콜 (Zhang et al. 2005, Blood 106: 1544-1551, Zhang et al. 2006, Cancer Res, 66: 5927)에 따라 레트로바이러스 형질도입을 통해 인간 PD-1 및 PD-L1 각각을 안정적으로 발현하도록 하였다. 2개의 안정적 세포주를 NK92MI/PD-1 및 SK-Mes-1/PD-L1로 명명하였다.
항-PD-1 Ab는 NK92MI/PD-1 세포에서 IFN-γ 생산 및 분비를 증진시킨다
웰당 총 6 x 104 세포를 포함하는 96웰 평바닥 플레이트에 1:2의 비율로 폐암 세포주 SK-MES-1/PD-L1와 공배양된 NK92MI/PD-1 세포에서 IFN-γ 생산 및 분비를 정량적으로 측정하여, NK 세포에 대한 항-PD-1 mAb의 기능적 활성을 어세이하였다. 공동 배양 시작 15분 전, NK92MI/PD-1 세포에 항-PD-1 mAb를 첨가하였고, 이후 세포를 CO2 인큐베이터에서 밤새 공배양하였다. 실시예 4에 기술된 바와 같이 ELISA로 무세포 상등액 중 IFN-γ 레벨에 대하여 어세이하였다.
낮은 농도의 항체 처리에 해당하는 기준선에서 고농도의 항체 처리에 해당하는 상단선까지 모든 항-PD-1 mAb는 유의한 IFN-γ 생산 증가를 유도하였다. 2개의 최상 항체인 mu317 및 mu326는 비교항체 5C에 비해 더 낮은 EC50을 보였으며, 이는 NK 세포에 대하여 더 우수한 효능의 활성 효과를 가짐을 의미한다 (표 7).
표 7. 항-PD-1 mAb 및 SK-MES-1/PD-L1 세포 존재하에 NK92MI/PD-1 세포에 의해 배지 (pg/ml) 중 분비된 IFN-γ
Figure 112016034253110-pct00010
항-PD-1 Ab는 NK92MI/PD-1 세포에 의해 매개된 암 세포 살해를 향상시킨다
CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay 키트 (Promega, Madison, WI)를 사용하여 LDH (lactate dehydrogenase) 방출 어세이로 SK-MES-1/PD-L1 세포에 대한 NK92MI/PD-1 세포의 세포독성을 측정하였다. 간략하게, 항-PD-1 mAb와 함께 최종 농도 0.004-10 μg/ml 범위 내로 NK92MI/PD-1 세포 (105)를 15분 동안 사전 인큐베이션하였고, 96-웰 V-바닥 플레이트에 배양된 면역세포에 효과기 세포 : 종양세포 (E:T) 5:1의 비율로 SK-MES-1/PD-L1 세포 (2x104)를 첨가한 다음, 5시간 동안 공배양하였다. 종양 세포의 완전한 용해를 최대 세포 살해로 설정하고, 각 샘플의 LDH-방출 어세이 결과를 최대 세포 살해의 백분율로 계산하였다. 공통된 표준값으로 10% 기준선을 사용하여, 플레이트 전체 모든 샘플의 세포 살해(%)를 정규화하였다.
앞서 설정된 특정 세포독성 어세이 중, 선별된 항-PD-1 mAb는 고농도 투입 mAb에서 19% 내지 20.2%의 범위로 순 종양 세포 살해 (net tumor cell killing: = 상단선-기준선)를 야기하였다. Mu317 및 mu326는 mu336보다 더 낮은 EC50을 나타내었고, 이는 NK92MI/PD-1 세포-매개 종양 세포 살해를 유도할 더 나은 효능을 의미한다 (표 8).
표 8. 항-PD-1 mAb에 의해 유도된 종양세포에 대한 NK92MI/PD-1 세포의 세포독성
Figure 112016034253110-pct00011

실시예 6. PD-1 mAb의 클로닝 및 서열 분석
100mm-조직 배양 디쉬에 특이적 mAb를 분비하는 마우스 하이브리도마 클론을 3 내지 10 X 106 세포 밀도로 배양하였고, 스윙 버킷 로터 (swing bucket rotor)에서 1500 rpm으로 원심분리하여 세포를 수확하였다. Ultrapure RNA 키트 (Cat. No. CW0581, CWBIOTECH, Beijing, China)를 사용하여 제조사의 프로토콜에 따라 총 세포 RNA를 분리하였다. 이중 탈이온수에 RNA를 재서스펜션하였고, NanoDrop (ThermoFisher, Shanghai, China)으로 농도를 측정하였다.
이전에 보고된 서열 (Brocks et al. 2001 Mol Med 7:461-469)에 기초하여 mAb cDNA 클로닝에 사용되는 PCR 프라이머를 Invitrogen (Beijing, China)을 통해 합성하였다. 역방향 전사효소 (Cat. No. AH301-02, Transgen Biotech, Beijing, China)를 사용하여 제1 가닥 cDNA를 합성하였다. PCR 제제 키트 (Cat. No. Ap221-12, TransGen Biotech, Beijing, China)를 사용하고 제조사의 프로토콜에 따라, 특이적 mAb cDNA의 PCR 증폭을 수행하였다. PCR 산물은 서비스 제공자 (GeneWiz, Beijing, China)를 통해 직접 서열분석하거나 pCR 벡터 (Invitrogen)에 서브클로닝한 이후 서열분석 (GeneWiz) 하였다.
서열 상동성 얼라인먼트에 의해 마우스 mAb의 단백질 서열을 분석하였다. 서열 상동성 및 에피토프 매핑 결과에 기초하여 mAb를 분류하였다 (실시예 13). Kabat (Wu, T.T. and Kabat, E.A., 1970 J. Exp. Med. 132: 211-250) 및 IMGT 시스템 (Lefranc M.-P. et al., 1999 Nucleic Acids Research, 27, 209-212)에 기초하여, 서열 해석 및 인터넷 기반 서열 분석 (http:// www.imgt.org/IMGT_vquest/share/textes/index.html 및 http:// www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/)을 통해 상보성 결정 영역 (CDR)을 동정하였다. 표 9에 나타낸 바와 같이, mu317 및 mu326의 CDR은 서열 길이 및 일치성에서 매우 상이하였다.
표 9. mu317 및 mu326의 CDR
Figure 112016034253110-pct00012

실시예 7. 마우스 Ab의 인간화
항체 3D 구조 시뮬레이션
CDR 룹 구조를 지지하는데 중요할 수 있는 골격영역 잔기를 동정하기 위해 mu317 및 mu326의 가변 도메인에 대한 3차원 구조를 시뮬레이션하였다. 1회차 항체 인간화에서 효능에 중요한 골격영역 잔기는 원래의 마우스 잔기로 유지하였다. 항체에 대하여 종래 정립된 구조 모델링법 (Morea et al. Methods 2000 20:267-279)을 채용하고, 항체의 알려진 정규 구조 (Al-Lazikani et al. 1997 Journal of Molecular Biology 273:927-948)에 기초하여 항-PD-1 mAb의 3D 구조를 시뮬레이션하였다. 간략하게, 마우스 항체의 각 가변영역 (Vk 및 Vh) 서열을 PDB 데이터베이스 (Protein Data Bank, http:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/)에서 블라스트하여, 공지의 고해상도 구조 (2.5 옹스트롱 미만의 해상도)와 가장 상동성 높은 항체 서열을 확인하였다. mu317 및 mu326을 모델링하기 위한 선별된 구조 템플레이트는 모델링될 표적 항체에 대하여 L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1 및 H-CDR2에서 동일한 부류의 정규 룹 구조를 가졌다. Vk 및 Vh에 대한 템플레이트가 다른 이뮤노글로불린에서 왔다면, 주요 쇄 원자의 최소자승법 (least-squares fit)으로 패킹하여 Vk-Vh 계면 잔기의 하이브리드 구조를 형성하였고, 이는 스위스-모델 프로그램 (Kiefer et al. 2009 Nucleic Acids Research 37, D387-D392)에 의한 구조 상동성 모델링에 대하여 템플레이트로 사용되었다. 일종의 곁쇄 입체구조를 적용하는 반면, 주요 쇄 입체구조는 유지하였다. 모구조 및 모델링된 구조가 동일한 잔기를 가지는 지점에서, 곁쇄 입체구조를 유지하였다. 잔기가 다른 지점에서, 템플레이트 구조, 로타머 라이브러리 (rotamer library) 및 패키징 고려사항에 기반하여 곁쇄 입체구조를 모델링하였다. 상동성 모델링 후, PLOP 프로그램 (Jacobson et al. 2002 Journal of Physical Chemistry 106:11673-11680)을 사용하여, 모든 원자 에너지를 최소화하고 Vk 및 Vh 계면을 최적화하기 위해 상동성 모델을 정제하였다. 이러한 단계는 특히, 상이한 항체 유래 세그먼트 구조가 함께 연결되는 영역에서 입체화학이 향상되도록 수행되었다.
표 10. 항체 구조 시뮬레이션에 사용된 구조 템플레이트
Figure 112016034253110-pct00013
인간화 정도를 향상 및/또는 항체 안정성을 향상시키기 위한 추가 라운드의 항체 엔지니어링을 가이드하기 위해, CDR 그래프트된 317-1 및 326-1에 대한 구조를 시뮬레이션 하였다. 선별된 구조 템플레이트를 표 10에 나타내었다. 가능한 H-CDR3 입체구조를 317-1에 대하여는 PDB 템플레이트 1AY1 및 326-1에 대하여는 3CXD에서 각각 가져왔다는 것을 제외하면, 앞선 절차와 동일한 방법으로 구조 시뮬레이션을 수행하였고, 유사한 크기 및 몸통 부위의 H-CDR3을 포함하였다. 그래프트된 H-CDR3 잔기에 대한 에너지 최소화는 PLOP 사용하여 수행하였다.
인간화
항-PD-1 mAb의 인간화를 위해, IMGT (http:// www.imgt.org/IMGT_vquest/share/textes/index.html) 및 NCBI (http:// www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/) 웹사이트에서 인간 이뮤노글로불린 유전자 데이터베이스를 블라스트하여, mu317 및 mu326 가변 영역의 cDNA 서열에 상동성인 인간 생식세포 IgG 유전자를 탐색하였다. PD-1 mAb에 높은 상동성을 가지는 인간 IGVH 및 IGV를 인간화를 위한 템플레이트로 선별하였다.
원칙대로 CDR-그래프팅을 통해 인간화를 수행하였다. 인간화의 1회차 라운드에서, 시뮬레이션된 3D 구조를 통해 가변영역의 골격영역 서열 중 마우스 아미노산 잔기가 인간 아미노산 잔기로 변이되도록 가이드하였고, 변화에도 항체 전반 및 룹 구조는 보유하고, 단지 마우스 아미노산 잔기만 앞서 언급한 바와 같이 인간 서열로 변이하였다. 인간화 mAb의 초기 버전은 hu317-1 (서열번호 47-50) 및 hu326-1 (서열번호 55-58)이고, 인간화 가변 중쇄가 인간 IgG2 불변영역 (NCBI accession No. P01859)에 융합된 중쇄 및 인간화 가변 경쇄 카파 (Vκ)가 인간 Ig 카파 C-영역 (NCBI Accession No. P01834)에 융합된 경쇄를 포함한다. 마찬가지로, mu317 및 mu326 유래 키메릭 항체를 생산하였으며, 인간 IgG2 불변영역에 융합된 마우스 VH, 인간 Ig 카파 C-영역에 융합된 마우스 Vκ로 구성된다. 전장 키메릭 항체는 각각 ch317 및 ch326로 명명된다. 모든 재조합 mAb는 실시예 1에 기술된 바와 같이 발현시키고 정제하였다.
FACS 및 기능 어세이를 통해 mAb hu317-1이 mu317 및 ch317와 거의 동일한 결합 활성 및 기능 활성을 보유하였음을 확인하였다. FACS에서 2개의 상이한 검출 항체인 염소 항-마우스 IgG 및 염소 항-인간 IgG가 사용되었다는 사실을 통해 mu317 vs. ch317와 hu317-1 사이의 FACS 분석에서 EC50 차이가 해석될 수 있다. 2개의 기능 어세이에서, 3가지 버전의 317 모두 더 동일하게 처리되었고, 결과 또한 서로 근접하였다 (표 11).
mu326에 대한 초기 라운드의 인간화 결과로, FACS 결합 어세이 및 HuT78/PD-1 세포 기반 IL-2 방출 어세이에서 기능적 활성이 ch326보다 약간 더 낮을 수 있을지라도, mAb hu326-1은 모항체 ch326 및 mu326과 유사한 기능적 특징을 보유하였다 (표 12).
표 11. FACS 및 기능 어세이에 의한 mu317, ch317 및 hu317-1 비교
Figure 112016034253110-pct00014
표 12. FACS 및 기능 어세이에 의한 mu317, ch317 및 hu317-1 비교
Figure 112016034253110-pct00015
1회차 라운드의 인간화에 기초하여, 항체 기능에 대한 영향을 평가하기 위해 hu317-1_Vh 및 Vκ 개별적으로 골격영역 (FR)에 존재하는 기타 마우스 아미노산(AA)를 추가로 변이시켰다. 표 13에 나타낸 바와 같이, hu317-1의 Vh 중 7개의 개별적 변이 및 Vκ에서 1개의 변이 모두 유사한 기능적 활성을 가진다. 변이 중 약간 더 약한 저해 기능을 가지는 hu317-2_K71V와 같이, 몇몇 Vh 변이에서는 약간의 변화만 관찰되었다. 그러나, 모든 마우스 아미노산 잔기가 인간으로 한꺼번에 변이(hu317-3A)되면, 나머지 변이보다 FACS 및 IL-2 방출 어세이에서 기능이 명확하게 더 약하다.
앞서 언급한 초기 시도에서, 남은 몇 개의 마우스 AA 잔기를 제외하고 hu326-1은 FR에서 상당한 인간화 수준에 도달하였다. 그럼에도 불구하고, mu326 보다 더 약한 기능을 가진다. 따라서, mAb326 기능에 대한 각 개별 AA의 공헌도를 탐색하기 위해, 마우스 잔기로 역방향 변이하거나, 인간 잔기로 정방향 변이하는 것 중 어느 하나로 더욱 개별적인 변이를 제작하였다. 표 14는 hu326-1_Vh 템플레이트 (서열번호 56, 서열번호 57) 기반하여 제작된 모든 개별 AA 변이 및 기능 어세이 결과를 나타낸 것이다. 원래의 mu326 mAb와 매칭하여, 대부분의 변이들이 hu326-1 보다 더 나은 기능적 활성을 나타내었다. 복수의 변이 (E46K 및 F95Y)가 EC50 또는 IC50에서 약간 더 낮은 약효를 나타내었으며, 이는 항체 구조 및 기능에서 이러한 잔기의 역할을 의미한다.
표 13. hu317-1 골격영역에서 인간화 변이를 포함하는 Fab의 기능적 활성 비교
Figure 112016034253110-pct00016
표 14. hu326-1 골격영역에서 변이를 포함하는 mAb의 기능적 활성 비교
Figure 112016034253110-pct00017
인간에서 치료제로 사용될 수 있는 mAbs 317 및 326에 대한 가능한 가장 우수한 Vh 및 Vκ 서열 조성을 확인하기 위해, FR에서 인간화 정도, 기능적 활성, 물리화학적 특성, 항체 의존적 세포 매개 세포독성 (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicy: ADCC) 및 보체 의존성 세포독성 (complement-dependent cytotoxicity: CDC)와 같은 항체 특성을 고려하여, 다양한 조합의 변이 (CDR 서열에서 몇몇 변이 포함)를 제작하였다. 변이 대부분은 자격 기준을 통과하지 못하는 것으로 간주되었다. 엔지니어링 과정을 통해, 효능 치료 용도로 6개의 인간화 재조합 mAb를 선별하였다: hu317-4B2 (서열번호 43-44), hu317-4B5 (서열번호 45-46), hu317-4B6 (서열번호 23-26), hu326-3B1 (서열번호 51-52), hu326-3G1 (서열번호 53-54) 및 hu326-4A3 (서열번호 27-30). 표 15 및 표 16에 나타낸 바와 같이, mAb의 CDR을 원래의 마우스 항체의 CDR과 비교하였다.
6개의 mAb 중, hu317-4B2, hu317-4B5 및 hu317-4B6은 서열에서 서로 근접하게 연관되고, 기능적 활성 및 길이에서 매우 유사하다. 한편, hu326-3B1, hu326-3G1 및 hu326-4A3은 서로 서열 및 기능에서 상당히 근접하다 (표 17-18). 2그룹의 각 mAb 내에서 몇몇 작은 차이가 있긴 하나, 서열 및 기능 뿐 아니라 많은 다른 특성, 예를 들어 물리화학적 특성 및 결합 에피토프 (실시예 10 및 11에 기술됨)를 공유하였다.
표 15. mAbs 317의 다른 버전 사이에서 CDR 비교
Figure 112016034253110-pct00018
표 16. mAbs 326의 다른 버전 사이에서 CDR 비교
Figure 112016034253110-pct00019
표 17. ELISA 및 FACS에 의해 어세이된 인간화 mAb의 결합 활성
Figure 112016034253110-pct00020
표 18. SPR에 의해 어세이된 Fab의 결합 친화도
Figure 112016034253110-pct00021
SPR에 의한 인간화 항-PD-1 Fab의 친화도 측정
PCR에 의해 항-PD-1 mAb를 Fab 버전으로 변환하여, 중쇄 및 경쇄 가변영역을 인간 IgG2-CH1의 N-말단 및 카파쇄의 불변영역에 각각 융합시키고, pcDNA3.1 벡터 (Invitrogen)에 서브클로닝하였다. 전장 항체의 일시적 발현과 유사한 일시적 형질감염 프로토콜을 사용하여 293-F 세포에서 발현벡터 둘 다를 공동 발현하였다. 간략하게, Fab 카파쇄를 PCR 증폭하고, pcDNA3.1-기반 발현벡터 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)에 서브클로닝하였다. 별개의 플라스미드에 중쇄 가변영역 (VH)과 함께, 오버 인간 IgG2로부터 CH1 코딩 서열을 중첩 PCR에 의해 C-말단 c-Myc-His8 태그에 융합시킨 다음, 발현벡터에 서브클로닝하였다. C232S 및 C233S (Kabat 잔기 넘버링, Kabat et al. Sequence of proteins of immunologic interest, 5th ed Bethesda, MD, NIH 1991) 변이를 IgG2 중쇄에 도입하여, 이황화 결합 교환을 방지하고 IgG2-A 입체구조 중 인간 IgG2를 안정화하였다 (Lightle et al. 2010 Protein Sci 19(4): 753-762). 두 가지 구조체 모두 Fab 성숙 서열의 업스트림에 신호 펩타이드를 포함하였다. 앞선 2개의 플라스미드를 293-F 세포에 공동 형질감염시켜 Fab의 분비된 발현을 수행하였고, 형질감염 6-7일 이후 세포 배양 상등액을 수확하였다. Ni-세파로스 패스트 플로우 컬럼 (Cat. No. 17531801, GE Life Sciences)을 사용한 다음, 하이로드 16/60 슈퍼덱스 200 컬럼 (Cat. No. 17106901, GE Life Sciences)을 사용하여 크기 배제 크로마토그래피하여 His8 태깅된 Fab를 세포 배양 상층액에서 정제하였다. PBS 중에 0.5-5 mg/mL로 정제된 Fab를 농축하고, 분주하여 -80℃ 냉동기에 보관하였다.
항-PD-1 Fab의 친화도 측정을 위해, BIAcoreTM T-200 기기 (GE Life Sciences)와 함께 SPR 어세이를 사용하였다. 간략하게, 인간 PD-1/His 또는 시노몰구스 원숭이 PD-1/His를 커플링하여 CM5 바이오센서 칩 (Cat. No. BR100530, GE Life Sciences)을 활성화함으로써, 약 100-200 응답 단위 (response units: RU)를 달성한 다음 1M 에탄올아민으로 미반응 그룹을 차단하였다. 0.12nM에서 90nM까지 증가하는 농도의 Fab 샘플을 SPR 러닝버퍼 (10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 0.05% Tween 20, pH7.4)에 30μL/분으로 주입하고, 공백 유동세포에서 RU를 차감하여 인간 PD-1/His 또는 원숭이 PD-1/His에 대한 결합 응답을 계산하였다. 일대일 랭뮤어 결합 모델 (BIA Evaluation Software, GE Life Sciences)을 사용하여 결합 속도 (k on) 및 해리 속도 (k off)를 계산하였다. k off/k on 비율로 평형 해리상수 (K d)를 계산하였다.
SPR로 측정된 항-PD-1 Fab의 결합 친화도를 표 18에 나열하였다. 각각의 항-PD-1 Fab는 인간 PD-1에 높은 친화도 (K d = 0.15-1 nM)로 결합하였다. 326-3G1를 제외한 모든 Fab는 시노몰구스 원숭이 PD-1에 대하여 약간 더 낮지만, 상당한 친화도 (Kd로 5배 이내)로 결합하였다.
실시예 8. 변형된 인간 IgG4 불변영역을 포함한 재조합 항-PD-1 mAb의 제조 및 발현
PD-1은 일차적으로 활성화된 T-세포에서 발현되므로, 자연적으로 발현된 유형의 IgG-γFc 모이어티가 연결된 PD-1 차단 항체는 IgG 서브클래스에 따라 다양한 정도로 γFc-매개 효과기 기능 예를 들어 ADCC 및 CDC를 유도할 것으로 예상되고, 이는 활성화된 T 세포를 제거한다 (Natsume A, et al, 2009 Drug Des Devel Ther. 3: 7-16). 이전 다수의 보고에서 인간 항체 서브클래스 IgG4는 보통의 ADCC를 가지고, CDC 효과기 기능은 거의 없는 것으로 보여진다 (Moore GL, et al. 2010 MAbs, 2:181-189). 한편, 자연적 IgG4는 산성 버퍼 또는 증가하는 온도와 같은 스트레스 조건에서 덜 안정한 것이 밝혀졌다 (Angal, S. 1993 Mol Immunol, 30:105-108; Dall'Acqua, W. et al, 1998 Biochemistry, 37:9266-9273; Aalberse et al. 2002 Immunol, 105:9-19). PD-1+ T 세포가 살해되는 것을 피하고, 항-PD-1 항체의 물리화학적 특성을 향상시키기 위하여, 변이 조합에 의해 엔지니어링된 IgG4를 인간화된 mAb에 연결하였고, FcγR 결합 또는 C1q 결합 활성이 감소되거나 없도록 함으로써, 이에 따라 ADCC 및 CDC 효과기 기능이 조절 또는 제거되는 것이다. 생물학적 제제로서 항체의 물리화학적 특성을 고려하면, IgG4의 덜 바람직한 고유 특성 중 하나는 용액 중 2개의 중쇄에 대한 역동적 분리로, 절반 항체를 형성하며, "Fab 암 교환 (Fab arm exchange)"이라 불리는 과정을 통해 in vivo에서 생성된 이중특이적 항체를 야기한다 (Van der Neut Kolfschoten M, et al. 2007 Science, 317:1554-157). 228 (EU 넘버링 시스템) 위치에서 세린을 프롤린으로 변이시키면 IgG4 중쇄 분리를 저해하는 것으로 보인다 (Angal, S. 1993 Mol Immunol, 30:105-108; Aalberse et al. 2002 Immunol, 105:9-19). 힌지 및 γFc 영역에서 몇몇 아미노산 잔기는 Fcγ 수용체와 항체 상호작용에 대한 영향을 가지는 것으로 보고되었다 (Chappel SM, et al. 1991 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:9036-9040; Mukherjee, J. et al., 1995 FASEB J, 9:115-119; Armour, K.L. et al., 1999 Eur J Immunol, 29:2613-2624; Clynes, R.A. et al., 2000 Nature Medicine, 6:443-446; Arnold J.N., 2007 Annu Rev Immunol, 25:21-50). 더욱이, 인간 집단에서 거의 발생하지 않는 몇몇 IgG4 아이소폼 (isoform)은 다른 물리화학적 특성을 나타낼 수 있다 (Brusco, A. et al. 1998 Eur J Immunogenet, 25:349-55; Aalberse et al. 2002 Immunol, 105:9-19). 그러나, 이전에 발견된 모든 변이 및 아이소폼을 특정 항체로 집중시키는 것이 앞서 언급한 치료제에 대한 모든 특징을 공유하는 이상적 항체 분리를 보장하는 것은 아니며, 이는 조합된 변이의 상반된 효과에서 야기될 수 있고, 효과기 기능에 대한 가변영역의 효과 및 항체의 물리화학적 특성으로부터 야기될 수 있다 (Igawa T. et al., 2010 Prot Eng Design Select, 23:385-392; Perchiacca J.M. and Tessier P.M., 2012 Ann Rev Biomol Eng 3:263-286).
가장 낮은 ADCC, CDC 및 불안정을 나타내는 항-PD-1 mAb를 제조하기 위해, 복수 조합의 변이를 도입하여 힌지 및 IgG4의 γFc 영역을 변형하였고, IgG4mt1 내지 IgG4mt12를 제조하였다. 몇몇 변형 IgG4 변이체는 어세이 결과에서 지적된 바와 같이 명확하게 덜 바람직하였고, 몇몇 관련 IgG4 변이체 및 변형 서열들은 표 19에 나타내었다. 이러한 항체에 대한 평가는 아래에 기술한다.
표 19. IgG4 변이체의 서열 변형
Figure 112016034253110-pct00022

실시예 9. IgG4mt10은 FcγR에 결합하지 않고, 가장 낮은 ADCC 및 CDC 효과기 기능을 가짐
ADCC는 항체가 세포 표면 표적 단백질에 결합한 다음 효과기 세포에 발현된 Fcγ 수용체 (FcγR)에 연결되면 개시된다. 인간 IgG1이 IgG2 및 IgG4에 비해 FcγR에 상당히 더 높은 결합 효과를 가지며, 특히 ADCC를 활성화하는 IgG1의 강도와 연관된 FcγR-I 및 FcγR-IIIA에 결합함이 잘 기록되어 있다. ADCC에 이어, 항체가 세포 표면 표적 및 C1q 단백질에 교차연결되면 CDC가 활성화된 다음 보체 복합체의 형성에 대한 케스케이드 반응 (cascade reaction) 및 표적 세포 용해가 일어난다. ADCC 및 CDC를 대신하여, FcγR 및 C1q에 결합하는 항체에 대한 어세이가 ADCC 및 CDC의 근본적 표지자 역할을 할 수 있다. 따라서, 모든 주요 FcγR에 결합하는 mAb를 체계적으로 평가하였다.
FcγR 결합
FcγR에 대한 다양한 IgG4 변이의 결합을 유세포 분석에 의해 측정하였다. 간략하게, 인간 FcγR을 발현하는 연속적 HEK293형질감염체를 구축하였다. 이러한 형질감염체는 FcγRI, FcγRIIA, FcγRIIB 또는 FcγRIIIA를 발현하였다. 복합 FcγR 서브유닛 (i.e., FcγRI 및 FcγRIIIA)은 FcRγ로 공동발현되었다. 다형성 변이체 (i.e., FcγRIIA H131 및 R131, FcγRIIIA F158 및 V158) 또한 포함되었다. 2차 항체 (염소 항-인간 IgG F(ab)`2-Alexa Fluor 488, Jackson ImmunoResearch，West Grove, PA, USA)를 사용하여 변형된 IgG4 변이체 (표 19)를 포함하는 항-PD-1 mAb가 FcγR+ HEK293 세포에 결합하는지 검출하였다. 예상한 바와 같이, IgG1포맷의 항-PD-1 mAb(hu317-1/IgG1 및 hu317-4B6/IgG1)는 FcγRI, FcγRIIA (H131 및 R131 대립유전자), FcγRIIB, 및 FcγRIIIA (V158 및 F158 대립유전자)을 포함하는 모든 FcγR에 강하게 결합하였다 (표 20). 흥미롭게도, 2개의 다른 버전의 인간화 mAb hu317-1 및 hu317-4B6 (Vh 및 Vκ 둘 다에서 차이가 있음)을 동일한 IgG4 변이체 포맷 예를 들어 IgG4mt1 또는 IgG4mt6 포맷으로 제작하면, 결합강도 (MFI)는 2배 내지 100배에 근접한 범위로 다양하다 (e.g. 455.2/115.7 = 3.9배; 13.6/1.0 = 13.6 배; 434.6/4.9 = 88.7 배; 및 기타, 표 20 참고). 이는 항체의 가변영역은 FcR에의 결합에 상당한 영향을 가져서, ADCC와 같은 효과기 기능에 대한 영향을 미친다는 다른 연구에 의한 결과에 상응한다 (Igawa T. et al., 2010 Prot Eng Design Select, 23:385-392; Perchiacca J.M. and Tessier P.M., 2012 Ann Rev Biomol Eng 3:263-286).
표 20에 기재된 바와 같이, IgG4mt10 포맷의 hu317-4B6 및 hu326-4A3이 제작되면, 표에 기재된 PD-1 mAb와 IgG 변이체 포맷 뿐 아니라, 연구에서 시험하였던 많은 다른 인간화 mAb 및 IgG 포맷의 FcγR에 대한 가장 낮은 결합 활성을 가진다. 이와 관련하여 IgG4mt10 포맷의 hu317-4B6 및 hu326-4A3의 특이성은 앞서 언급한 hu317-1와 같이 다소 상이한 서열 상동성을 가지는 동일한 패밀리의 인간화 mAb에까지 연장되지 않을 수 있다.
표 20. FACS에 의해 측정된 FcγR에 대한 항-PD-1 mAb의 결합 강도 (MFI*)
Figure 112016034253110-pct00023

ADCC
전형적 ADCC는 FcγRIIIA 또는 CD16에 결합하는 항체에 의한 NK 세포의 활성에 관여한다. 인간화 항-PD-1 mAb가 ADCC를 유도하는지 검증하기 위하여, CD16 (V158 대립유전자) 및 FcRγ 유전자를 포함하는 발현 플라스미드를 공동 형질도입하여 NK92MI 세포 (ATCC)로부터 생성된 NK92MI/CD16V 세포를 효과기 세포로 사용하였고, PD-1 발현 T 세포주, HuT78/PD-1을 표적 세포로 사용하였다. 96-웰 V-바닥 플레이트에서 5h시간 동안 HuT78/PD-1 세포와 동일한 숫자로 NK92MI/CD16V 세포 (4x104)를 공동 배양하였다. 앞선 항목에 기술된 LDH 방출 어세이로 세포독성을 측정하였다. hu317-4B2/IgG4mt6, hu317-4B6/IgG4mt6, hu317-4B6/IgG4mt10 및 hu326-4A3/IgG4mt10 모두 양성대조군과 비교하여 기본 수준의 ADCC를 가짐을 확인하였다 (도 7). 4개의 mAb 사이의 ADCC에서 작은 차이점은 실험적 오류가 원인일 수 있다 (도 7의 오차바 참조).
CDC
일반적으로 인간 IgG4 항체는 전형적 경로를 통해서는 어떠한 CDC도 유도하지 못한다. IgG4mt10포맷의 항-PD-1 mAb가 CDC를 유도할 것인지 PD-1-발현 T 세포주 Hut78/PD-1 및 건강한 공여자로부터의 신선한 인간 혈청을 사용하여 평가하였다. Celltiter glo 어세이 키트 (Promega, Beijing, China)를 통해 CDC에 의한 세포 용해를 측정하였다. 간략하게, 정상 인간 혈청 (normal human serum : NHS)을 첨가하기 전, 무혈청 RPMI1640 (Invitrogen)의 HuT78/PD-1 세포 (2x104)를 항-PD-1 항체 (10 μg/ml)와 함께 37℃에서 15분 동안 총 부피 120 μl 에서 96-웰 평판-바닥 플레이트 중 15% 또는 50%의 최종 농도로 인큐베이션하였다. 37℃에서 밤새 인큐베이션 한 후, 세포를 용해하고 ATP 농도에 대하여 어세이하였다. IgG4mt10포맷의 인간화 항-PD-1 mAb가 CDC를 통해 PD-1+ 1차 T 세포를 살해할 수 있는지 시험하기 위하여, 항-PD-1 Ab플러스 NHS와 공배양 전 3일 동안 항-CD3 Ab OKT3 (40 ng/ml)로 건강한 공여자에서 분리된 PBMC를 사전 활성화하였다. ATP의 양은 배양액에 존재하는 세포의 수와 직접적으로 비례한다. 96-웰 형광 강도 측정기 (PHERA Star FS, BMG LABTECH)를 사용하여 형광을 측정하였다. 생존 세포의 숫자에 비례하는 상대적 형광 단위 (relative fluoresence units : RFU)로 결과를 표시하였다. 다음과 같이 CDC 활성의 백분율을 계산하였다: % CDC 활성 =[(RFU 시험 - RFU 배경) / (총 세포 용해물에서 RFU - RFU 배경)] x 100. 일반적으로, 활성화된 PMBC에 결합하는 IgG4mt10포맷의 항-PD-1 mAb에 의해 매개되는 어떠한 ADCC도 검출할 수 없다. 과민성 실험 조건 예를 들어, PD-1 고발현 세포주, 높은 혈청 및 항체 농도를 사용하여 몇몇 경우에 극히 낮은 수준의 CDC를 검출하였고, 다른 버전과 항-PD-1 mAb 사이에 큰 차이점은 없었으며, 이는 IgG4 변이체 포맷의 항-PD-1 mAb는 통상적 형태의 IgG4와 같이 낮은 CDC 활성 또는 CDC 활성을 나타내지 않는다는 특징을 보유하였음을 의미한다.
실시예 10. IgG4mt10포맷의 인간화된 항-PD-1 mAbs는 스트레스 조건에서 향상된 안정성을 가진다
고온 및 산성 조건에서 항-PD-1 항체의 안정성
안정성 연구에 사용되는 항-PD-1 항체는 모두 앞선 항목에서 기술한 바와 같이, 단백질 A 컬럼에서 정제한 다음, 크기 배제 크로마토그래피 (SEC)로 정제하였다. 정제 이후, 분석적 SEC-HPLC (size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography)로 정제된 항체 샘플 중 응집체의 함량을 모니터링하였고, 0%-0.5% 범위 내에 해당하였다.
SEC-HPLC 분석을 위해, TSKgel G3000 SWXL 컬럼 (7.8x300 mm, Cat. No. 08541, Tosoh Bioscience, Shanghai, China)를 사용하여 등용매 용출 조건 (용출 버퍼 0.2M 소듐 포스페이트, pH 7.2)하에서 항체 샘플을 분석하였고, 이후 UV-215nm에서 검출하였다. 각 회차의 실시 중, 10 마이크로리터의 항체 샘플을 컬럼에 로딩하고 1mL/분의 유속으로 용출하였다. 단일 물질로부터 항체의 이합체 또는 더 큰 응집체 물질을 분리하고, 이합체 또는 응집체의 백분율은 UV 궤적에서 합산 피크 영역에 기초하여 측정하였다.
속도가 향상된 선반 안정성 연구를 위해, 항-PD-1 항체 (PBS 중 10-40mg/mL)를 고온 조건에서 항체의 안정성을 시험하기 위해 인큐베이터에서 40-50℃로 4-7일간 보관하였다. 이후 항체 샘플을 SEC-HPLC로 열 유도에 의해 형성된 이합체 및 응집체에 대하여 분석하였다. 분석된 항-PD-1 항체 각각에 대하여, 2% 미만이 더 큰 분자량 물질 (이합체 및 응집체)이 되었고, 이는 고온 조건에서 항-PD-1 항체가 우수한 안정성을 가짐을 의미한다.
산성 조건에서 항체의 안정성은 다운스트림 제조 공정에서 주요한 문제가 되어왔다 (Liu et al. 2010 mAbs 2:480-499). 단백질 A로부터 항체 용출 및 바이러스 불활성화는 대개 낮은 pH (2.5-4) 조건에서 항체의 인큐베이션을 요구한다. 그러나, 이러한 산성 조건은 잠재적으로 항체의 변형 및 응집을 야기할 수 있다. 인간 IgG4는 IgG1 및 IgG2 보다 덜 안정적인 것으로 알려져 있다 (2002 Immunology 105:9). 따라서, 다양한 IgG4 변이 형태로 제작된 인간화 mAb를 어세이하였다. 간략하게, 50 mM 소듐 사이트레이트, 100mM NaCl을 포함하는 낮은 pH 버퍼를 각 항체 샘플 (PBS 중 10 mg/mL)과 1:1 부피로 혼합하여, pH 3.6, 3.3, 3.0 또는 2.7각각에서 낮은 pH 조건 중 항체 안정성을 연구하였다. 실온에서 1시간 인큐베이션 한 후, 0.2M 소듐 포스페이트를 포함하는 1:5로 희석한 pH7.2 SEC-HPLC 용출 버퍼로 낮은 pH 조건의 항체 샘플을 중화하였다. 앞서 언급한 바와 같이 SEC-HPLC 분석을 수행하였고, 낮은 pH 조건에 의해 유도된 이합체 및 응집체의 백분율을 정량하였다. IgG1포맷의 항-PD-1 mAb 317-4B6이 바이오공정 관련 산성 조건에 가장 안정하였고, 심지어 pH값이 2.7로 낮아진 경우에도 안정하였다. 제조된 수개의 IgG4 변이체의 항-PD-1 mAb 중에서, 산 유도 응집체가 항-PD-1 mAb의 IgG1 포맷 317-4B6 및 326-4A3에 상응하는 정도로 현저하게 감소, 즉 수용성 응집체가 2% 미만 (표 21)이기 때문에, hu317-4B6/IgG4mt10 및 hu326-4A3/IgG4mt10이 산성 버퍼 조건에서 가장 안정하였다 (표 21).
표 21. 산성 버퍼에서 형성된 이합체 및 수용성 응집체 및 SEC-HPLC로 어세이
Figure 112016034253110-pct00024

실시예 11. 항-PD-1 mAb의 결합 에피토프 매핑
PD-1/PD-L1 및 PD-1/PD-L2 복합체의 결정 구조에 대한 이전 보고는 리간드 결합에 요구되는 PD-1의 주요 아미노산 잔기를 명확하게 이해할 수 있게 하였다 (Zhang et al. 2004 Immunity, 20:337-347; Lin D.Y. et al. 2008 PNAS 105:3011-3016; Lazar-Molnar E. et al. 2008 PNAS, 105:10483-10488). 실제로, 이러한 아미노산 잔기 중 6개는 PD-L1 결합에 요구되는 점 변이 분석을 통해 수용체 상에서 확인되었다. 6개의 AA 잔기 중 5개도 PD-L2 결합에 필요하였다 (Lin D.Y. et al. 2008 PNAS 105:3011-3016). 구조 유래 변이 분석으로부터의 정보에 기반하여, 기능적 mAb가 PD-1 매개 신호를 차단하도록 하기 위한 가장 효과적인 방법은 6개의 주요 AA 잔기에 결합하여 PD-1 리간드와 경쟁함으로써, 리간드 결합에 요구되는 결합 에피토프를 차지하는 것으로 가설을 세웠다. 가설을 검증하고 기능적 PD-1 항체에 의한 활성 메커니즘을 이해하기 위하여, 6개의 주요 AA각각을 Ala으로 치환하여 즉, K45A, I93A, L95A, P97A, I101A 및 E103A (Lin D.Y. et al. 2008 PNAS 105:3011-3016에 근거한 AA 잔기 넘버링)의 6개 PD-1 변이체를 제작하였다. Fast Mutagenesis System (Cat. No. FM111, Transgen Biotech, Beijing, China)을 사용한 PCR-가이드 변이법 또는 롤링 서클 변이법 (rolling-circle mutagenesis)을 위해 변이 PD-1/Fc 및 PD-1/His (도 1)을 템플레이트로 사용하였다. pcDNA-기반 발현벡터에 모든 변이를 서브클로닝하고, 시퀀싱에 의해 검증하였다. 변이된 PD-1 단백질 및 야생형 PD-1 단백질은 일시적 형질감염에 의해 발현되었고 (실시예 1에 기술됨), 배양 4-6일 후에 준비하였다. 웨스턴 블랏으로 CM (conditioned media)을 분석하여 정량 및 정성 측면에서 PD-1 단백질 발현을 검증하였다. 세포 잔해물을 제거한 후, 상등액 (CM)을 에피토프 매핑을 위해 ELISA 분석 또는 웨스턴 블랏에 바로 사용하였다.
인간화 항-PD-1 mAb의 결합 에피토프를 연구하기 위해, 야생형 (WT)과 변이 (Mt) PD-1을 사용하여 ELISA 어세이를 수행하여, hu317-4B5, hu317-4B6, hu326-3B1 및 hu326-4A3의 결합 활성을 평가하였다. 항체 결합 특징의 고유성을 검토하기 위한 비교를 위해, 2개의 레퍼런스 항체 (US8008449B2 및 US8168757B2각각으로부터 레퍼런스 Ab-1 및 레퍼런스 Ab-2)를 연구에 포함하였다. 동일 ELISA 어세이에서 모든 mAb를 위해, 96-웰 플레이트에WT 또는 Mt PD-1을 포함하는 동일 부피의 CM을 코팅하였다. WT PD-1 결합 신호의 평균 ELISA 리딩값을 표준으로 사용하여, 모든 ELISA 결과를 정규화하였다. 특정 Mt PD-1에 대한 ELISA 결합 신호는 가장 높은 항체 결합 리딩값 (100%로 설정)에 대하여 추가로 정규화하였다. 데이터 분석의 편의성을 위하여, 특정 변이에 대한 mAb의 ELISA 결합 신호가 WT PD-1에 대하여 50% 미만으로 떨어지면, 아미노산 잔기는 변이에 의해 항체 결합이 현저하게 제거된 것이므로, 중요한 결합 에피토프로 정의된다. 마찬가지로, 특정 변이에 대한 mAb의 ELISA 결합 신호가 25% 미만으로 떨어지면, 매우 중요한 것으로 정의된다. 도 8에 나타낸 바와 같이, PD-1에서 2개의 주요 AA 잔기인 K45 및 I93은 mAbs hu317-4B5 및 hu317-4B6 결합에 중요한 또는 매우 중요한 에피토프이고, 3개의 AA 잔기 I93, L95 및 P97은 hu326-3B1 및 hu326-4A3에 대하여 중요한 또는 매우 중요한 에피토프이다. 한편, 2개의 레퍼런스 항체는 구별되는 결합 에피토프를 가지며, P97는 레퍼런스 Ab-1에 대하여 중요한 반면, L95와 P97은 레퍼런스 Ab-2에 대하여 중요하다.
흥미롭게도, 웨스턴 블랏에서 PD-1 단백질이 변형되면, mAb hu317-4B5와 -4B6는 주요 결합 에피토프 (K45 및 I93)가 서로 근접하지 않음 (비선형)에도, WT PD-1에 여전히 결합 가능하다. PD-1 단백질은 웨스턴 블랏 과정의 SDS-PAGE에서 변형된 후에 어느 정도 복원됨을 의미하며, 항-PD-1 mAb가 이를 인지하고 결합할 수 있도록 한다. 이러한 관찰 결과를 활용하기 위해, 위 ELISA 연구에 사용된 모든 6가지 항체에 대한 웨스턴 블랏 분석을 수행하였다. 웨스턴 블랏에서의 전반적 결과는 ELISA 결과와 매우 잘 보완되었고, 즉 중요하거나 매우 중요한 에피토프가 변이되면 ELISA에서 낮은 결합 신호가 야기되고, 기타 변이 PD-1에의 결합과 비교하여 가장 약한 웨스턴 블랏 밴드를 나타낸다 (도 8). ELISA와 웨스턴 블랏 사이에 작은 몇몇 차이도 관찰되었고, 예를 들어 레퍼런스 Ab-2에 의한 I93A 및 E103A에 대한 ELISA 결합 신호는 웨스턴 블랏에서보다 상대적으로 더 강하였다. 이러한 AA 잔기는 또한 스트레스 조건 (즉, 변형 또는 원래의 입체구조 소실)일지라도 변이에 의해 결합에 영향을 미칠 수 있기 때문에 결합에 기여할 수 있음을 의미할 수 있다. 표 22에 요약된 바와 같이, 본 발명에서의 항-PD-1 mAb는 다른 항-PD-1 항체와 상이한 식별가능한 결합 에피토프를 가진다.
표 22. 항-PD-1 mAb에 대한 주요 에피토프 요약
Figure 112016034253110-pct00025

실시예 12.항-PD-1 mAb는 1차 인간 PBMC 활성화하고 이종이식 마우스 모델에서 종양 성장을 억제한다
인간화 항-PD-1 mAb는 인간 PBMC를 활성화한다
인간화 과정을 통해, ELISA, FACS 및 면역세포 기반 사이토카인 방출 어세이에 의해 평가된 바와 같이, 다양한 단계에서의 인간화 항-PD-1 mAb는 유사한 기능적 활성을 보유하였다. 최종 버전의 인간화 mAb에 대한 기능을 확인하기 위해, 1차 인간 PBMC를 사용하여 hu317-4B5, hu317-4B6, hu326-3B1 및 hu326-4A3의 활성화 기능을 어세이하였다. 그 결과에 의해, 개인의 유전적 배경에서의 차이로 인한 4명 공여자 사이의 활성화 정도가 다를지라도, 이러한 mAb가 인간화 과정에서 1차 PBMC를 활성화하는 원래의 마우스 mAb 기능을 유지함을 입증하였다 (도 9).
인간화 항-PD-1 mAb는 암 세포에 대한 NK 세포 기반 세포독성을 향상시킨다
원래의 마우스 mAb를 보면, 인간화 항-PD-1 mAb인 hu317-4B5, hu317-4B6, hu326-3B1 및 hu326-3G1는 표적 폐암 세포 SK-MES-1/PD-L1에 대한 NK92MI/PD-1 세포 매개 세포독성을 투여량 의존적 방식으로 향상시킨다 (도 10, 표 23). 이론적으로 인간화 항-PD-1 mAb는 PD-1 신호에 의해 매개되는 면역세포 내성을 파괴하여 면역세포 예를 들어 NK세포 및 세포독성 T-림프구에 의한 살해 활성을 향상시키는 기능을 할 수 있음이 명확한 것처럼 보인다.
인간화 항-PD-1 mAb는 인간 PBMC를 활성화하고, 마우스 이종이식 종양 모델에서 in vivo 종양 성장을 억제한다
위 모든 실험적 증거는 인간 암 세포로 이종이식하고, 이후 인간 PBMC 이식한 다음 암세포 성장을 in vivo 저해하기 위한 mAb 처리를 적용한 면역 부전 마우스를 사용하여 마우스 암 모델에서, 항-PD-1 mAb가 작용할 수 있음을 의미하였다. 다음과 같이 실험을 설계하였다. 8주령 SCID-수컷 마우스(Vital River Laboratories, China) 7마리의 우측 옆구리에 50% Matrigel (BD Biosciences, New Jesey, USA)의 Hep3B/OS8-PD-L1 세포 3x106을 피하 접종하였다. 종양 접종 15일 후, 100-250 mm3 사이의 종량 크기를 가지는 마우스를 임의 선택하고, 3개 처리군으로 분류하였다. 2명의 건강한 공여자로부터 100 마이크로리터의 모인 PBMC (5x105)를 종양 내로 주사하였다. PBMC 이식 3일 후, 항- PD-1 항체 (Hu317-IgG4mt2) 및 인간 IgG를 10 mg/kg의 투여량으로 각각 s.c.를 통해 투여하였다. 항체 처리는 총 3회 매 10일마다 1회 반복하였다. 음성 대조군으로서 병렬군에 PBS를 주사하였다. 7일에 시작하여 측경 양각기를 사용하여 1주일에 2회 종양을 측정하였다. 종양 부피는 다음의 식을 사용하여 측정하였다: [D X (d 2)]/2, 여기서 D는 종양의 장직경을 나타내고, d는 단직경을 나타낸다. 모든 동물 연구는 Beigene Animal Care 및 사용 절차에 따라 수행하였다.
in vivo 연구에서, 대조군의 60% 종양이 자동 퇴행되었을지라도, 나머지 in vivo 실험에서는 여전히 상당한 정보를 제공하며, 도 11에 제시되었다. 대조군에서, 비히클 처리 또는 인간 IgG (huIgG)-처리군 중 어느 하나는 각각 시작점에서의 기준선보다 더 크게 자라는 40% 종양 (5 마우스 중 2)을 가진다. PBS-처리군에서 2개의 종양은 훨씬 더 크게 자랐다 (2,000 mm3 초과, 종양 포함 마우스 한마리는 프로토콜에 의한 종양 사이즈 제한을 초과하여 조기 종결하였다). huIgG처리군에서 2개의 종양은 800 및 1,370 mm3의 크기로 자랐으며, PBS 처리 종양보다 더 작지만 평균 기준선인 164 mm3를 상당히 초과한다. 한편, 항- PD-1 mAb (hu317-1/IgG4mt2) 처리군에서, 종양은 완전히 퇴행하였거나, 기준선 크기로 근접하였다 (하나의 종양=200 mm3, PBMC 이식으로부터 2주에 기준선의 50%로 퇴화된 후 다시 천천히 자랐다). 결과는 앞서 언급한 항-PD-1 mAb가 마우스 in vivo 암 모델에서 종양세포 성장을 억제할 수 있는 인간 면역세포를 활성화할 수 있음을 의미하며, 이는 앞서 언급한 in vitro 실험 결과와 일치한다.
<110> BeiGene <120> ANTI-PD1 ANTIBODIES AND THEIR USE AS THERAPEUTICS AND DIAGNOSIS <130> 067 <160> 90 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 444 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 ccaggatggt tcttagactc cccagacagg ccctggaacc cccccacctt ctccccagcc 60 ctgctcgtgg tgaccgaagg ggacaacgcc accttcacct gcagcttctc caacacatcg 120 gagagcttcg tgctaaactg gtaccgcatg agccccagca accagacgga caagctggcc 180 gccttccccg aggaccgcag ccagcccggc caggactgcc gcttccgtgt cacacaactg 240 cccaacgggc gtgacttcca catgagcgtg gtcagggccc ggcgcaatga cagcggcacc 300 tacctctgtg gggccatctc cctggccccc aaggcgcaga tcaaagagag cctgcgggca 360 gagctcaggg tgacagagag aagggcagaa gtgcccacag cccaccccag cccctcaccc 420 aggccagccg gccagttcca aacc 444 <210> 2 <211> 148 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr 1 5 10 15 Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe 20 25 30 Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr 35 40 45 Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu 50 55 60 Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu 65 70 75 80 Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn 85 90 95 Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala 100 105 110 Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg 115 120 125 Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly 130 135 140 Gln Phe Gln Thr 145 <210> 3 <211> 354 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 3 caggtgcagc tgaaggagtc aggacctggc ctggtggcgc cctcaaagaa cctgtccatc 60 acttgcactg tctctgggtt ttcattaacc agctatggtg tacactggat tcgccagcct 120 ccaggaaagg gactggaatg gctgggagta atatgggccg gtggaagcac aaattataat 180 tcggctctca tgtccagact gagcatcagc aaagacaact ccaggagcca agttttctta 240 agaatgaaca gtctgcaaac tgatgacaca gccatgtact actgtgccag agcctatggt 300 aactactggt acatcgatgt ctggggcgca gggaccacgg tcaccgtctc ctca 354 <210> 4 <211> 118 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 4 Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Lys 1 5 10 15 Asn Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Arg Ser Gln Val Phe Leu 65 70 75 80 Arg Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 5 <211> 321 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 5 gacattgtga tgacccagac tcccaaattc ctgcttgtat cagcaggaga cagggttacc 60 ataacctgca aggccagtca gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca acagaagcca 120 gggcagtctc ctaaactgct gataaactat gcatttcatc gcttcactgg agtccctgat 180 cgtttcactg gcagtggata tgggacggat ttcattttca ccatcagcac tgtgcaggct 240 gaagacctgg cagtttattt ctgtcaccag gcttatagtt ctccgtacac gttcggaggg 300 gggaccaagc tggaaatgaa a 321 <210> 6 <211> 107 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 6 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Ile Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys 100 105 <210> 7 <211> 342 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 7 cagatccagt tggtgcagtc tggacctgag ctgaagaagc ctggagagac agtcaagatc 60 tcctgcaagg cttctgggta taccttcaca aactatggaa tgaactgggt gaagcaggct 120 ccaggaaagg gtttaaagtg gatgggctgg ataaacaata ataatggaga gccaacatat 180 gctgaagagt tcaagggacg gtttgccttc tctttggaaa cctctgccag cactgcctat 240 ttgcagatca acaacctcaa aaatgaggac acggctacat atttctgtgc aagagatgtt 300 atggactatt ggggtcaagg aacctcagtc accgtctcct ca 342 <210> 8 <211> 114 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 9 <211> 330 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 9 gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60 atatcctgca gagccagtga aagtgttgat aattatggct atagttttat gcactggtac 120 cagcagaaac caggacagcc accccaactc ctcatctatc gtgcatccaa cctagaatct 180 gggatccctg ccaggttcag tggcagtggg tctaggacag gcttcaccct caccattaat 240 cctgtggagg ctgatgatgt tgcaacctat tactgtcagc aaagtaaaga atatccgacg 300 ttcggtggag gcaccaagct ggaagtcaaa 330 <210> 10 <211> 110 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 10 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asp Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys 100 105 110 <210> 11 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 11 Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His 1 5 10 <210> 12 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 12 Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser 1 5 10 15 <210> 13 <211> 12 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 13 Ala Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val 1 5 10 <210> 14 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 14 Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 15 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 15 Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr 1 5 <210> 16 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 16 His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 17 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 17 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 18 <211> 17 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 18 Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 19 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr 1 5 <210> 20 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 20 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Tyr Ser Phe Met His 1 5 10 15 <210> 21 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 21 Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 22 Gln Gln Ser Lys Glu Tyr Pro Thr 1 5 <210> 23 <211> 354 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 cDNA-Vh <400> 23 caggtgcagc tgcaggagtc gggaccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcactg tctctgggtt ttcattaacc agctatggtg tacactggat ccggcagccc 120 ccagggaagg gactggagtg gatcggggtc atatacgccg atggaagcac aaattataat 180 ccctccctca agagtcgagt gaccatatca aaagacacct ccaagaacca ggtttccctg 240 aagctgagct ctgtgaccgc tgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agcctatggt 300 aactactggt acatcgatgt ctggggccaa gggaccacgg tcaccgtctc ctca 354 <210> 24 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 pro-Vh <400> 24 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Tyr Ala Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 25 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 cDNA-Vk <400> 25 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca agtccagcga gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca gcagaaacca 120 ggacagcctc ctaagctgct cattaactat gcatttcatc gcttcactgg ggtccctgac 180 cgattcagtg gcagcgggta tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcaggct 240 gaagatgtgg cagtttatta ctgtcaccag gcttatagtt ctccgtacac gtttggccag 300 gggaccaagc tggagatcaa a 321 <210> 26 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 pro-Vk <400> 26 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Glu Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 27 <211> 342 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A3 cDNA-Vh <400> 27 caggtgcagc tggtgcagag cggcagcgag ctgaagaagc ccggcgccag cgtgaaggtg 60 agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc aactacggca tgaactgggt gagacaggcc 120 cccggccagg gcctgaagtg gatgggctgg atcaacaaca acaacgccga gcccacctac 180 gcccaggact tcagaggcag attcgtgttc agcctggaca ccagcgccag caccgcctac 240 ctgcagatca gcagcctgaa gaccgaggac accgccgtgt actactgcgc cagagacgtg 300 atggactact ggggccaggg caccctggtg accgtgagca gc 342 <210> 28 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A3 pro-Vh <400> 28 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Ala Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 29 <211> 330 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A3 cDNA-Vk <400> 29 gacattgtgc tgacccagtc tccagcctcc ttggccgtgt ctccaggaca gagggccacc 60 atcacctgca gagccagtga aagtgttgat aattatggct atagttttat gcactggtat 120 cagcagaaac caggacaacc tcctaaactc ctgatttacc gtgcatccaa cctagaatct 180 ggggtcccag ccaggttcag cggcagtggg tctgggaccg atttcaccct cacaattaat 240 cctgtggaag ctgaggatac tgcaaattat tactgtcagc aaagtaaaga atatccgacg 300 ttcggcggag ggaccaaggt ggagatcaaa 330 <210> 30 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A3 pro-Vk <400> 30 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 31 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 31 Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His 1 5 10 <210> 32 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 32 Val Ile Tyr Ala Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 33 <211> 12 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 33 Ala Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val 1 5 10 <210> 34 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 L-CDR1 or CDR-L1 <400> 34 Lys Ser Ser Glu Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 35 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 35 Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr 1 5 <210> 36 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 36 His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 37 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 37 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 38 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A3 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 38 Trp Ile Asn Asn Asn Asn Ala Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe Arg 1 5 10 15 Gly <210> 39 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 39 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr 1 5 <210> 40 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 40 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Tyr Ser Phe Met His 1 5 10 15 <210> 41 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 41 Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 42 <211> 8 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 42 Gln Gln Ser Lys Glu Tyr Pro Thr 1 5 <210> 43 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B2 pro-Vh <400> 43 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Tyr Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 44 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B2 pro-Vk <400> 44 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Glu Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 45 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B5 pro-Vh <400> 45 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Tyr Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 46 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B5 pro-Vk <400> 46 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Glu Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 47 <211> 354 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-1 cDNA-Vh <400> 47 caggtgcagc tgcaggagtc gggaccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcactg tctctgggtt ttcattaacc agctatggtg tacactggat ccggcagccc 120 ccagggaagg gactggagtg gctgggggtc atatgggccg gtggaagcac aaattataat 180 ccctccctca agagtcgact gaccatatca aaagacaact ccaagagcca ggtttccctg 240 aagatgagct ctgtgaccgc tgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agcctatggt 300 aactactggt acatcgatgt ctggggccaa gggaccacgg tcaccgtctc ctca 354 <210> 48 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-1 pro-Vh <400> 48 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 49 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-1 cDNA-Vk <400> 49 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca aggccagcca gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca gcagaaacca 120 ggacagcctc ctaagctgct cattaactat gcatttcatc gcttcactgg ggtccctgac 180 cgattcagtg gcagcgggta tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcaggct 240 gaagatgtgg cagtttatta ctgtcaccag gcttatagtt ctccgtacac gtttggcggg 300 gggaccaagc tggagatcaa a 321 <210> 50 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-1 pro-Vk <400> 50 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 51 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3B1 pro-Vh <400> 51 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 52 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3B1 pro-Vk <400> 52 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 53 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3G1 pro-Vh <400> 53 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 54 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3G1 pro-Vk <400> 54 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 55 <211> 342 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 cDNA-Vh <400> 55 caggtgcagc tggtgcagag cggcagcgag ctgaagaagc ccggcgccag cgtgaaggtg 60 agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc aactacggca tgaactgggt gagacaggcc 120 cccggccagg gcctggagtg gatgggctgg atcaacaaca acaacggcga gcccacctac 180 gcccagggct tcagaggcag attcgtgttc agcctggaca ccagcgccag caccgcctac 240 ctgcagatca gcagcctgaa gaccgaggac accgccgtgt acttctgcgc cagagacgtg 300 atggactact ggggccaggg caccaccgtg accgtgagca gc 342 <210> 56 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 pro-Vh <400> 56 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 57 <211> 330 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 cDNA-Vk <400> 57 gacattgtgc tgacccagtc tccagcctcc ttggccgtgt ctccaggaca gagggccacc 60 atcacctgca gagccagtga aagtgttgat aattatggct atagttttat gcactggtat 120 cagcagaaac caggacaacc tcctaaactc ctgatttacc gtgcatccaa cctagaatct 180 ggggtcccag ccaggttcag cggcagtggg tctaggaccg atttcaccct cacaattaat 240 cctgtggaag ctaatgatac tgcaaattat tactgtcagc aaagtaaaga atatccgacg 300 ttcggcggag ggaccaaggt ggagatcaaa 330 <210> 58 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 pro-Vk <400> 58 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 59 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-1 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 59 Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 60 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B2 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 60 Val Ile Tyr Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 61 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B2 L-CDR1 or CDR-L1 <400> 61 Lys Ser Ser Glu Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 62 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 62 Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe Arg 1 5 10 15 Gly <210> 63 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3G1 H-CDR2 or CDR-H2 <400> 63 Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe Arg 1 5 10 15 Gly <210> 64 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3A1 pro-Vh <400> 64 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 65 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3C1 pro-Vh <400> 65 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 66 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3E1 pro-Vh <400> 66 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 67 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3F1 pro-Vh <400> 67 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 68 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3G1 pro-Vh <400> 68 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 69 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3H1 pro-Vh <400> 69 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 70 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-3I1 pro-Vh <400> 70 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 71 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B1 pro-Vh <400> 71 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 72 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B3 pro-Vh <400> 72 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Asn Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 73 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B4 pro-Vh <400> 73 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Pro Tyr Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 74 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4A2 pro-Vk <400> 74 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Asn Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 75 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3A1 pro-Vh <400> 75 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 76 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3C1 pro-Vh <400> 76 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 77 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3D1 pro-Vh <400> 77 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 78 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3E1 pro-Vh <400> 78 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 79 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3F1 pro-Vh <400> 79 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 80 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-3B N55D pro-Vh <400> 80 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asp Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 81 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A1 pro-Vk <400> 81 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 82 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-4A2 pro-Vk <400> 82 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 83 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt1 pro <400> 83 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 84 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt2 pro <400> 84 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 85 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt6 pro <400> 85 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 86 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt8 pro <400> 86 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Thr Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 87 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt9 pro <400> 87 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 88 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt10 pro <400> 88 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 89 <211> 367 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> OS8 pro <400> 89 Met Glu Arg His Trp Ile Phe Leu Leu Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp 115 120 125 Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser 145 150 155 160 Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys 165 170 175 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser 180 185 190 Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser 195 200 205 Gly Val Pro Ala His Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser 210 215 220 Leu Thr Ile Ser Gly Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 225 230 235 240 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu 245 250 255 Glu Ile Asn Ser Ser Val Val Pro Val Leu Gln Lys Val Asn Ser Thr 260 265 270 Thr Thr Lys Pro Val Leu Arg Thr Pro Ser Pro Val His Pro Thr Gly 275 280 285 Thr Ser Gln Pro Gln Arg Pro Glu Asp Cys Arg Pro Arg Gly Ser Val 290 295 300 Lys Gly Thr Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro 305 310 315 320 Leu Ala Gly Ile Cys Val Ala Leu Leu Leu Ser Leu Ile Ile Thr Leu 325 330 335 Ile Cys Tyr His Arg Ser Arg Lys Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro 340 345 350 Leu Val Arg Gln Glu Gly Lys Pro Arg Pro Ser Glu Lys Ile Val 355 360 365 <210> 90 <211> 304 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> P3Z pro <400> 90 Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln 1 5 10 15 Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp 20 25 30 Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp 35 40 45 Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val 50 55 60 Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala 65 70 75 80 Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg 85 90 95 Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg 100 105 110 Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu 115 120 125 Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val 130 135 140 Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro 145 150 155 160 Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly 165 170 175 Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Arg 180 185 190 Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 195 200 205 Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp 210 215 220 Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 225 230 235 240 Gln Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 245 250 255 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 260 265 270 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 275 280 285 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 290 295 300

Claims (17)

  1. 인간 PD-1에 특이적으로 결합하고 다음을 포함하는 항체 항원 결합 도메인을 포함하는 항체:
    하기 3개의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh); 및
    (a) 서열번호 31의 아미노산 서열을 갖는 CDR-H1,
    (b) 서열번호 32의 아미노산 서열을 갖는 CDR-H2, 및
    (c) 서열번호 33의 아미노산 서열을 갖는 CDR-H3
    하기 3개의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하는 경쇄 가변 영역 (Vk):
    (d) 서열번호 34의 아미노산 서열을 갖는 CDR-L1,
    (e) 서열번호 35의 아미노산 서열을 갖는 CDR-L2, 및
    (f) 서열번호 36의 아미노산 서열을 갖는 CDR-L3.
  2. 제1항에 있어서, 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh)을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체.
  3. 제1항에 있어서, 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (Vk)을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체.
  4. 제1항에 있어서, 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (Vh); 및 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (Vk);을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체.
  5. 제1항에 있어서, 다음의 인간 PD-1 잔기에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는 항체:
    (a) 서열번호 2에서 K58 및 I106; 또는
    (b) 서열번호 2에서 I106, L108 및 P110.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서, 서열번호 83 내지 서열번호 88로 구성된 군에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 IgG4 불변 도메인(IgG4 constant domain)을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체.
  7. 제6항에 있어서, 서열번호 87 또는 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 IgG4 불변 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체.
  8. 제1항의 항체의 F(ab) 또는 F(ab)2.
  9. 제1항의 항체를 포함하는 암 또는 바이러스 감염 치료용 약학 조성물.
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
KR1020167009436A 2013-09-13 2013-09-13 항-pd1 항체 및 이의 치료 및 진단 용도 KR102100419B1 (ko)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2013/083467 WO2015035606A1 (en) 2013-09-13 2013-09-13 Anti-pd1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20160044063A KR20160044063A (ko) 2016-04-22
KR102100419B1 true KR102100419B1 (ko) 2020-04-14

Family

ID=50736425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020167009436A KR102100419B1 (ko) 2013-09-13 2013-09-13 항-pd1 항체 및 이의 치료 및 진단 용도

Country Status (29)

Country Link
US (9) US8735553B1 (ko)
EP (3) EP3702373B9 (ko)
JP (1) JP6623353B2 (ko)
KR (1) KR102100419B1 (ko)
CN (6) CN112552401B (ko)
AU (3) AU2013400609B9 (ko)
BR (1) BR112016005408B1 (ko)
CA (3) CA2924172C (ko)
DK (2) DK3702373T3 (ko)
EA (1) EA034666B1 (ko)
ES (2) ES2927567T3 (ko)
FR (1) FR24C1001I1 (ko)
HK (1) HK1217501A1 (ko)
HR (1) HRP20221262T1 (ko)
HU (3) HUE049281T2 (ko)
IL (4) IL296026A (ko)
LT (1) LT3702373T (ko)
MX (1) MX2016003292A (ko)
NL (1) NL301252I2 (ko)
NO (1) NO2023045I1 (ko)
NZ (1) NZ718643A (ko)
PL (2) PL3044234T3 (ko)
PT (2) PT3702373T (ko)
RS (1) RS63571B9 (ko)
SG (1) SG11201601844TA (ko)
SI (1) SI3702373T1 (ko)
TW (1) TWI636995B (ko)
WO (1) WO2015035606A1 (ko)
ZA (1) ZA201601953B (ko)

Families Citing this family (573)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110229471A1 (en) 2008-11-26 2011-09-22 Cedars-Sinai Medical Center Methods of determining responsiveness to anti-tnf alpha therapy in inflammatory bowel disease
HUE035281T2 (en) 2011-01-14 2018-05-02 Univ California Therapeutic antibodies to ROR-1 protein and methods of their use
WO2013013188A1 (en) 2011-07-21 2013-01-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic protein kinase inhibitors
NO2797921T3 (ko) 2011-12-31 2018-02-03
EP4285988A3 (en) 2013-03-27 2024-03-06 Cedars-Sinai Medical Center Treating fibrosis by inhibiting tl1a
JP6204568B2 (ja) 2013-04-25 2017-09-27 ベイジーン，リミテッド タンパク質キナーゼ阻害剤としての縮合複素環化合物
WO2015010108A1 (en) 2013-07-19 2015-01-22 Cedars-Sinai Medical Center Signature of tl1a (tnfsf15) signaling pathway
EA029661B1 (ru) 2013-09-06 2018-04-30 Ауриген Дискавери Текнолоджиз Лимитед Производные 1,3,4-оксадиазола и 1,3,4-тиадиазола в качестве иммуномодуляторов
AU2014316686B2 (en) 2013-09-06 2018-11-22 Aurigene Discovery Technologies Limited Cyclic peptidomimetic compounds as immunomodulators
PL3363790T3 (pl) 2013-09-06 2020-07-27 Aurigene Discovery Technologies Limited Pochodne 1,2,4-oksadiazolu jako immunomodulatory
CN112552401B (zh) 2013-09-13 2023-08-25 广州百济神州生物制药有限公司 抗pd1抗体及其作为治疗剂与诊断剂的用途
EP3757130A1 (en) 2013-09-26 2020-12-30 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
DK3081576T3 (da) 2013-12-12 2019-10-21 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1-antistof, antigenbindende fragment deraf og medicinsk anvendelse deraf
EP3083685A2 (en) * 2013-12-20 2016-10-26 Intervet International B.V. Canine antibodies with modified ch2-ch3 sequences
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
KR20230097209A (ko) 2014-03-12 2023-06-30 예다 리서치 앤드 디벨럽먼트 캄파니 리미티드 Cns의 질환 및 손상을 치료하기 위한 전신적 조절 t 세포 수준 또는 활성의 감소
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
CN110156892B (zh) 2014-07-03 2023-05-16 百济神州有限公司 抗pd-l1抗体及其作为治疗剂及诊断剂的用途
AU2015292678B2 (en) * 2014-07-22 2020-10-22 Cb Therapeutics, Inc. Anti-PD-1 antibodies
US10435470B2 (en) 2014-08-05 2019-10-08 Cb Therapeutics, Inc. Anti-PD-L1 antibodies
ES2847311T3 (es) * 2014-08-05 2021-08-02 MabQuest SA Reactivos inmunológicos que se unen a PD-1
US9982052B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
DK3179992T3 (da) 2014-08-11 2022-07-11 Acerta Pharma Bv Terapeutisk kombination af en btk-inhibitor, en pd-1-inhibitor og/eller en pd-l1-inhibitor
WO2016033555A1 (en) 2014-08-28 2016-03-03 Halozyme, Inc. Combination therapy with a hyaluronan-degrading enzyme and an immune checkpoint inhibitor
TW201617368A (zh) 2014-09-05 2016-05-16 史坦森特瑞斯公司 新穎抗ｍｆｉ２抗體及使用方法
US11344620B2 (en) 2014-09-13 2022-05-31 Novartis Ag Combination therapies
JP6625627B2 (ja) 2014-10-14 2019-12-25 ハロザイム インコーポレイテッド アデノシンデアミナーゼ−２（ａｄａ２）、その変異体の組成物およびそれを使用する方法
WO2016073759A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 The Regents Of The University Of California Combination immunotherapy
WO2016077397A2 (en) * 2014-11-11 2016-05-19 Sutro Biopharma, Inc. Anti-pd-1 antibodies, compositions comprising anti-pd-1 antibodies and methods of using anti-pd-1 antibodies
MY189836A (en) 2014-11-21 2022-03-11 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against cd73 and uses thereof
CA2968382A1 (en) 2014-11-21 2016-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
ES2881484T3 (es) * 2014-12-22 2021-11-29 Pd 1 Acquisition Group Llc Anticuerpos anti-PD-1
US11639385B2 (en) 2014-12-22 2023-05-02 Pd-1 Acquisition Group, Llc Anti-PD-1 antibodies
WO2016117618A1 (ja) * 2015-01-20 2016-07-28 国立大学法人九州大学 慢性炎症性脱髄性多発神経炎の診断方法、キット及びバイオマーカー
SG10202108921VA (en) 2015-03-10 2021-09-29 Aurigene Discovery Tech Ltd 1,2,4-oxadiazole and thiadiazole compounds as immunomodulators
MX2017011644A (es) 2015-03-13 2017-12-04 Cytomx Therapeutics Inc Anticuerpos anti-pdl1, anticuerpos anti-pdl1 activables y metodos de uso de los mismos.
HUE048111T2 (hu) 2015-03-23 2020-05-28 Bayer Pharma AG Anti-CEACAM6 ellenanyagok és alkalmazásuk
CN106146667B (zh) * 2015-03-27 2020-06-19 四川大学华西医院 一种Exendin-4融合蛋白及其制备方法与用途
CN107530429B (zh) 2015-03-30 2021-12-07 斯特库比股份有限公司 特异性针对糖基化的pd-l1的抗体及其使用方法
US11933786B2 (en) 2015-03-30 2024-03-19 Stcube, Inc. Antibodies specific to glycosylated PD-L1 and methods of use thereof
EP3277716B1 (en) 2015-04-03 2020-06-24 XOMA Technology Ltd. Treatment of cancer using inhibitors of tgf-beta and pd-1
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
LT3283107T (lt) 2015-04-17 2020-09-10 Bristol-Myers Squibb Company Kompozicija apimanti ipilimumabo ir nivolumabo kombinaciją
ES2861352T3 (es) 2015-04-28 2021-10-06 Bristol Myers Squibb Co Tratamiento del melanoma positivo para PD-L1 utilizando un anticuerpo anti-PD-1
EP3988571A1 (en) 2015-04-28 2022-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1-negative melanoma using an anti-pd-1 antibody and an anti-ctla-4 antibody
SG11201708706YA (en) 2015-05-06 2017-11-29 Snipr Tech Ltd Altering microbial populations & modifying microbiota
WO2016179472A2 (en) * 2015-05-07 2016-11-10 University Of Maryland, Baltimore Modulation of natural killer cell tolerance
WO2016191751A1 (en) 2015-05-28 2016-12-01 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1 positive lung cancer using an anti-pd-1 antibody
PL3303394T3 (pl) 2015-05-29 2020-11-16 Agenus Inc. Przeciwciała anty-ctla-4 i sposoby ich zastosowania
WO2016196389A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cell carcinoma
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
CN105061597B (zh) * 2015-06-09 2016-04-27 北京东方百泰生物科技有限公司 一种抗pd-1的单克隆抗体及其获得方法
WO2017011580A2 (en) * 2015-07-13 2017-01-19 Cytomx Therapeutics, Inc. Anti-pd-1 antibodies, activatable anti-pd-1 antibodies, and methods of use thereof
JP2018522887A (ja) 2015-07-14 2018-08-16 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 免疫チェックポイント阻害剤を使用する癌の処置法
WO2017011831A1 (en) 2015-07-16 2017-01-19 Bioxcel Corporation A novel approach for treatment of cancer using immunomodulation
LT3328419T (lt) 2015-07-30 2021-11-10 Macrogenics, Inc. Pd-1 surišančios molekulės ir jų panaudojimo būdai
AU2016306597A1 (en) 2015-08-07 2018-02-22 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptide specific for LAG-3 and PD-1
WO2017024465A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
NZ739876A (en) 2015-08-25 2022-09-30 Beigene Ltd Process for preparing parp inhibitor, crystalline forms, and uses thereof
BR112018003186A2 (pt) 2015-09-01 2018-09-25 Agenus Inc. anticorpos anti-pd-1 e seus métodos de uso
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
WO2017055484A1 (en) 2015-09-29 2017-04-06 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for determining the metabolic status of lymphomas
CA2997963A1 (en) * 2015-09-29 2017-04-06 Celgene Corporation Pd-1 binding proteins and methods of use thereof
RU2722451C1 (ru) * 2015-09-29 2020-06-01 Шанхай Чжанцзян Биотекнолоджи Ко., Лтд. Pd-1 антитела и их применение.
RU2022102624A (ru) * 2015-10-01 2022-03-10 Хит Байолоджикс, Инк. Композиции и способы для соединения внеклеточных доменов типа i и типа ii в качестве гетерологичных химерных белков
CN106632674B (zh) * 2015-10-30 2018-11-16 泽达生物医药有限公司 一种抗pd-1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
SI3370733T1 (sl) 2015-11-02 2021-11-30 Board Of Regents The University Of Texas System Postopek za aktivacijo CD40 in blokada imunske nadzorne točke
CN108697791B (zh) 2015-11-03 2022-08-23 詹森生物科技公司 特异性结合pd-1的抗体及其用途
AU2016349632A1 (en) 2015-11-07 2018-05-24 Multivir Inc. Compositions comprising tumor suppressor gene therapy and immune checkpoint blockade for the treatment of cancer
CN106699889A (zh) * 2015-11-18 2017-05-24 礼进生物医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其治疗用途
JP2018538263A (ja) 2015-11-18 2018-12-27 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｐｄ−１抗体および抗ｃｔｌａ−４抗体の組合せを用いる肺癌の処置法
JP7003036B2 (ja) * 2015-12-02 2022-02-04 エスティーキューブ，インコーポレイテッド グリコシル化ｐｄ－１に対して特異的な抗体およびその使用方法
EP3389714A4 (en) 2015-12-14 2019-11-13 MacroGenics, Inc. BISPECIFIC MOLECULES HAVING IMMUNOREACTIVITY TO PD-1 AND CTLA-4 AND METHODS OF USE
US10392442B2 (en) 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
US11091556B2 (en) 2015-12-18 2021-08-17 Intervet Inc. Caninized human antibodies to human IL-4R alpha
PT3394093T (pt) 2015-12-23 2022-05-30 Modernatx Inc Métodos de utilização de polinucleotídeos que codificam ligandos ox40
ES2837155T3 (es) 2016-01-04 2021-06-29 Inst Nat Sante Rech Med Uso de PD-1 y Tim-3 como medida de células CD8+ para predecir y tratar el carcinoma de células renales
PL3402503T3 (pl) 2016-01-13 2021-04-19 Acerta Pharma B.V. Kombinacje terapeutyczne antyfolianu oraz inhibitora btk
JP2019509759A (ja) * 2016-01-14 2019-04-11 ビーピーエス バイオサイエンス、インク．Ｂｐｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ， Ｉｎｃ． 抗ｐｄ−１抗体及びその使用
US11214617B2 (en) 2016-01-22 2022-01-04 MabQuest SA Immunological reagents
EP3195878A1 (en) 2016-01-22 2017-07-26 Werner Lubitz Bacterial ghosts for the treatment of cancer
EP3405497A2 (en) 2016-01-22 2018-11-28 Mabquest SA Immunological reagents
AU2017219254B2 (en) 2016-02-17 2019-12-12 Novartis Ag TGFbeta 2 antibodies
CN109462996A (zh) 2016-03-17 2019-03-12 西达-赛奈医疗中心 通过rnaset2诊断炎性肠病的方法
TW201735949A (zh) 2016-03-24 2017-10-16 千禧製藥公司 治療抗ctla4及抗pd-1組合治療中的胃腸道免疫相關不良事件之方法
EP3433275A1 (en) 2016-03-24 2019-01-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating gastrointestinal immune-related adverse events in immune oncology treatments
MX2018011939A (es) 2016-03-29 2019-05-20 Stcube Inc Anticuerpos de funcion doble especificos para pd-l1 glicosilada y metodos de uso de los mismos.
EP3436480A4 (en) 2016-03-30 2019-11-27 Musc Foundation for Research Development METHOD FOR THE TREATMENT AND DIAGNOSIS OF CANCER BY TARGETING GLYCOPROTEIN A REPETITION PREDOMINANT (GARP) AND FOR EFFECTIVE IMMUNOTHERAPY ALONE OR IN COMBINATION
US11209441B2 (en) 2016-04-05 2021-12-28 Bristol-Myers Squibb Company Cytokine profiling analysis
US11459617B2 (en) 2016-04-29 2022-10-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Targeted measure of transcriptional activity related to hormone receptors
WO2017200796A1 (en) 2016-05-17 2017-11-23 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Engineered pd-1 variants
EP3458092A1 (en) 2016-05-18 2019-03-27 Modernatx, Inc. Mrna combination therapy for the treatment of cancer
DK3458083T3 (da) 2016-05-18 2023-01-30 Modernatx Inc Polynukleotider, der koder for interleukin-12 (il12), og anvendelser heraf
LT3458474T (lt) 2016-05-18 2022-10-10 Modernatx, Inc. Imunitetą moduliuojančius polipeptidus koduojančių mrnr deriniai ir jų naudojimas
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
CN105968200B (zh) 2016-05-20 2019-03-15 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人pd-l1人源化单克隆抗体及其应用
CN106008714B (zh) * 2016-05-24 2019-03-15 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人pd-1人源化单克隆抗体及其应用
CA3024508A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Agenus Inc. Anti-tim-3 antibodies and methods of use thereof
MX2018014610A (es) 2016-06-02 2019-02-28 Squibb Bristol Myers Co Uso de un anticuerpo anti proteina de muerte programada 1 (pd-1) en combinacion con un anticuerpo anti cumulo de diferenciacion 3d (cd30) en el tratamiento del linfoma.
RS64388B1 (sr) 2016-06-02 2023-08-31 Bristol Myers Squibb Co Pd-1 blokada nivolumabom kod refraktornog hočkinovog limfoma
CN109476754A (zh) 2016-06-03 2019-03-15 百时美施贵宝公司 抗-pd-1抗体在治疗结肠直肠癌患者中的用途
KR20230118713A (ko) 2016-06-03 2023-08-11 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법에 사용하기 위한 항-pd-1 항체
CN109475634A (zh) 2016-06-03 2019-03-15 百时美施贵宝公司 用于治疗复发性小细胞肺癌的方法的抗-pd-1抗体
GB201609811D0 (en) 2016-06-05 2016-07-20 Snipr Technologies Ltd Methods, cells, systems, arrays, RNA and kits
WO2017214182A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
US11472856B2 (en) 2016-06-13 2022-10-18 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
DK3471722T3 (da) * 2016-06-17 2023-12-04 Univ Pennsylvania Forbindelser, sammensætninger og fremgangsmåder til forebyggelse og/eller behandling af cancer
WO2017220989A1 (en) 2016-06-20 2017-12-28 Kymab Limited Anti-pd-l1 and il-2 cytokines
DK3476865T3 (da) 2016-06-28 2023-12-18 Biocytogen Pharmaceuticals Beijing Co Ltd Fremgangsmåde til konstruktion af pd-1-gen-modificeret humaniseret dyremodel og anvendelse deraf
EP3481393B1 (en) * 2016-07-05 2021-04-14 Beigene, Ltd. Combination of a pd-1 antagonist and a raf inhibitor for treating cancer
RU2656181C1 (ru) * 2016-07-13 2018-05-31 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Анти-pd-1-антитела, способ их получения и способ применения
JP2019528251A (ja) 2016-07-20 2019-10-10 エスティーキューブ，インコーポレイテッド グリコシル化ｐｄ−ｌ１に結合する抗体の組合せを使用するがんの処置および治療の方法
CN116478166A (zh) 2016-08-16 2023-07-25 百济神州(苏州)生物科技有限公司 一种化合物的晶型、其制备和用途
TWI739887B (zh) 2016-08-19 2021-09-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 使用包含btk抑制劑的組合產品治療癌症
JP6968872B2 (ja) 2016-08-26 2021-11-17 ベイジーン リミテッド 抗Ｔｉｍ−３抗体
CN110121352B (zh) 2016-09-01 2020-12-11 嵌合体生物工程公司 Gold优化的car t-细胞
US11726089B2 (en) 2016-09-06 2023-08-15 Incelldx, Inc. Methods of assaying neoplastic and neoplasia-related cells and uses thereof
EP3510378A4 (en) 2016-09-06 2020-07-08 IncellDx, Inc. METHOD FOR DETECTION OF PD-L1 EXPRESSION BY CELL AND USES THEREOF
KR102451510B1 (ko) 2016-09-08 2022-10-07 2세븐티 바이오, 인코포레이티드 Pd-1 호밍 엔도뉴클레아제 변이체, 조성물 및 사용 방법
MX2019002969A (es) 2016-09-14 2019-09-18 Beijing hanmi pharm co ltd Anticuerpo que se une especificamente a pd-1 y fragmento funcional del mismo.
US10751414B2 (en) 2016-09-19 2020-08-25 Celgene Corporation Methods of treating psoriasis using PD-1 binding antibodies
JP2019534859A (ja) 2016-09-19 2019-12-05 セルジーン コーポレイション Ｐｄ−１結合タンパク質を使用して白斑を治療する方法
CN114456269A (zh) * 2016-09-21 2022-05-10 基石药业（苏州）有限公司 一种新的pd-1单克隆抗体
CN110087730B (zh) * 2016-09-27 2023-03-28 百济神州(苏州)生物科技有限公司 使用包含parp抑制剂的组合产品治疗癌症
AU2017335732A1 (en) 2016-09-27 2019-04-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for enhancing immune checkpoint blockade therapy by modulating the microbiome
MA46529A (fr) 2016-10-11 2019-08-21 Agenus Inc Anticorps anti-lag-3 et leurs procédés d'utilisation
RU2755903C2 (ru) 2016-10-12 2021-09-22 Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем Способы и композиции для tusc2-иммунотерапии
US10322174B2 (en) 2016-10-26 2019-06-18 Cedars-Sinai Medical Center Neutralizing anti-TL1A monoclonal antibodies
EP3532504A1 (en) 2016-10-28 2019-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating urothelial carcinoma using an anti-pd-1 antibody
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
US10654929B2 (en) 2016-11-02 2020-05-19 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to PD-1 and uses thereof
JP7039582B2 (ja) 2016-11-03 2022-03-22 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 活性化可能な抗ｃｔｌａ－４抗体およびその使用
WO2018089423A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Musc Foundation For Research Development Cd38-nad+ regulated metabolic axis in anti-tumor immunotherapy
TWI780083B (zh) 2016-11-18 2022-10-11 丹麥商賽門弗鎮公司 抗pd-1抗體及組成物
WO2018094275A1 (en) 2016-11-18 2018-05-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
WO2018098352A2 (en) 2016-11-22 2018-05-31 Jun Oishi Targeting kras induced immune checkpoint expression
JP6992068B2 (ja) 2016-12-07 2022-02-03 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｃｔｌａ－４抗体およびそれらの使用方法
CA3046082A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
KR20190112263A (ko) 2016-12-12 2019-10-04 멀티비르 인코포레이티드 암 및 감염성 질환의 치료 및 예방을 위한 바이러스 유전자 치료요법 및 면역 체크포인트 억제제를 포함하는 방법 및 조성물
CN106519034B (zh) * 2016-12-22 2020-09-18 鲁南制药集团股份有限公司 抗pd-1抗体及其用途
CN113480530A (zh) 2016-12-26 2021-10-08 阿里根公司 芳香烃受体调节剂
WO2018129533A1 (en) 2017-01-09 2018-07-12 Shuttle Pharmaceuticals, Llc Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
BR112019014510A2 (pt) 2017-01-13 2020-02-18 Agenus Inc. Receptores de célula t que se ligam ao ny-eso-1 e métodos de uso dos mesmos
WO2018134279A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptides specific for lag-3 and pd-1
TW202313678A (zh) 2017-01-20 2023-04-01 法商賽諾菲公司 抗TGF-β抗體及其用途
WO2018134784A1 (en) 2017-01-20 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
AR110755A1 (es) 2017-01-20 2019-05-02 Genzyme Corp Anticuerpos dirigidos a hueso
WO2018134681A1 (en) 2017-01-20 2018-07-26 Sanofi Anti-tgf-beta antibodies and their use
MX2019007848A (es) 2017-01-20 2019-09-09 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co Ltd Anticuerpos anti-pd-1 y usos de los mismos.
CN108341871A (zh) * 2017-01-24 2018-07-31 三生国健药业（上海）股份有限公司 抗pd-1单克隆抗体及其制备方法和应用
TWI774726B (zh) 2017-01-25 2022-08-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 (S)-7-(1-(丁-2-炔醯基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醯胺的晶型、及其製備和用途
ES2893006T3 (es) 2017-02-10 2022-02-07 Novartis Ag 1-(4-amino-5-bromo-6-(1 H-pirazol-1-il)pirimidin-2-il)-1 H-pirazol-4-ol y su uso en el tratamiento del cáncer
TWI674261B (zh) 2017-02-17 2019-10-11 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 Nlrp3 調節劑
WO2018156973A1 (en) 2017-02-24 2018-08-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Assay for detection of early stage pancreatic cancer
AU2018223821B2 (en) 2017-02-27 2022-05-19 Shattuck Labs, Inc. TIGIT- and LIGHT-based chimeric proteins
CN115433187B (zh) 2017-02-28 2023-10-27 百济神州(苏州)生物科技有限公司 稠合的四环或五环二氢二氮杂䓬并咔唑酮的盐的结晶形式组合物及其用途
WO2018160540A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Sanofi Therapeutic rna
WO2018162944A1 (en) 2017-03-04 2018-09-13 Shenzhen Runshin Bioscience Recombinant antibodies to programmed death 1 (pd-1) and uses therefor
US20200095323A1 (en) * 2017-03-20 2020-03-26 The General Hospital Corporation MITIGATING Fc-Fc RECEPTOR INTERACTIONS IN CANCER IMMUNOTHERAPY
WO2018172508A1 (en) 2017-03-24 2018-09-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
CN107082812B (zh) * 2017-03-29 2018-11-13 上海科医联创生物科技有限公司 一种恢复衰竭性免疫细胞功能的融合蛋白及其应用
SG10202110594UA (en) 2017-03-31 2021-11-29 Bristol Myers Squibb Co Methods of treating tumor
EA201992350A1 (ru) 2017-04-05 2020-03-23 Симфоген А/С Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
KR102629972B1 (ko) 2017-04-13 2024-01-29 아게누스 인코포레이티드 항-cd137 항체 및 이의 사용 방법
CN106939049B (zh) 2017-04-20 2019-10-01 苏州思坦维生物技术股份有限公司 拮抗抑制人pd-1抗原与其配体结合的单克隆抗体及其制备方法与应用
US11492403B2 (en) 2017-04-20 2022-11-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Anti-phosphotyrosinylated programmed death 1 (PD-1) monoclonal antibodies, methods of making and methods of using thereof
WO2018193104A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-cd25 antibody-drug conjugate
WO2018193102A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
PL3618863T3 (pl) 2017-05-01 2023-11-06 Agenus Inc. Przeciwciała anty- tigit i sposoby ich zastosowania
CA3060935A1 (en) * 2017-05-01 2018-11-08 The Children's Medical Center Coporation Methods and compositions relating to anti-pd1 antibody reagents
US10543271B2 (en) 2017-05-12 2020-01-28 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
CA3063723A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
AR111760A1 (es) 2017-05-19 2019-08-14 Novartis Ag Compuestos y composiciones para el tratamiento de tumores sólidos mediante administración intratumoral
WO2018222711A2 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent
LT3631454T (lt) 2017-05-30 2023-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 atžvilgiu teigiamų navikų gydymas
AU2018275209A1 (en) 2017-05-30 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising an anti-LAG-3 antibody or an anti-LAG-3 antibody and an anti-PD-1 or anti-PD-L1 antibody
JOP20190279A1 (ar) 2017-05-31 2019-11-28 Novartis Ag الصور البلورية من 5-برومو -2، 6-داي (1h-بيرازول -1-يل) بيريميدين -4- أمين وأملاح جديدة
JP7348072B2 (ja) 2017-06-01 2023-09-20 コンピュジェン リミテッド 三重併用抗体療法
AU2018278327B2 (en) 2017-06-01 2023-03-16 Cytomx Therapeutics, Inc. Activatable anti-pdl1 antibodies and methods of use thereof
CN110678483B (zh) 2017-06-01 2023-09-22 百时美施贵宝公司 用抗pd-1抗体治疗肿瘤的方法
UA127900C2 (uk) 2017-06-14 2024-02-07 Ейдісі Терапьютікс Са Схема дозування для введення adc до cd19
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
KR20200019865A (ko) 2017-06-22 2020-02-25 노파르티스 아게 암 치료에 사용하기 위한 il-1베타 결합 항체
WO2018237157A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag CD73 BINDING ANTIBODY MOLECULES AND USES THEREOF
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag IL-1BETA BINDING ANTIBODIES FOR USE IN THE TREATMENT OF CANCER
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
KR20200020902A (ko) * 2017-06-26 2020-02-26 베이진 엘티디 간세포암(hepatocellular carcinoma: HCC)에 대한 면역 치료
WO2019006007A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag POSOLOGICAL REGIMES FOR ANTI-TIM3 ANTIBODIES AND USES THEREOF
EP3421494A1 (en) 2017-06-29 2019-01-02 Sanofi Use of isatuximab in combination with an anti-pd-1 antibody
KR20200028434A (ko) 2017-07-14 2020-03-16 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 Nlrp3 조정제
CA3070095A1 (en) 2017-07-20 2019-01-24 Novartis Ag Dosage regimens of anti-lag-3 antibodies and uses thereof
CN111148996A (zh) 2017-07-28 2020-05-12 百时美施贵宝公司 用于检查点抑制剂的预测性外周血生物标志物
WO2019023459A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
US11377449B2 (en) 2017-08-12 2022-07-05 Beigene, Ltd. BTK inhibitors with improved dual selectivity
EP3676616A1 (en) 2017-08-28 2020-07-08 Bristol-Myers Squibb Company Tim-3 antagonists for the treatment and diagnosis of cancers
JP7316263B2 (ja) 2017-08-31 2023-07-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
JP7208225B2 (ja) 2017-08-31 2023-01-18 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
JP7209697B2 (ja) 2017-08-31 2023-01-20 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
SG11202001319QA (en) 2017-09-04 2020-03-30 Agenus Inc T cell receptors that bind to mixed lineage leukemia (mll)-specific phosphopeptides and methods of use thereof
US11497756B2 (en) 2017-09-12 2022-11-15 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment regimen for cancers that are insensitive to BCL-2 inhibitors using the MCL-1 inhibitor alvocidib
WO2019061324A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Curis Inc. CRYSTALLINE FORMS OF IMMUNOMODULATORS
CN111344297B (zh) 2017-10-10 2023-10-20 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
SG11202003081WA (en) 2017-10-11 2020-05-28 Aurigene Discovery Tech Ltd Crystalline forms of 3-substituted 1,2,4-oxadiazole
WO2019072241A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Beijing Biocytogen Co., Ltd NON-HUMAN ANIMAL GENETICALLY MODIFIED WITH PD-1 HUMAN OR CHIMERIC
KR101982001B1 (ko) * 2017-10-13 2019-05-27 한국과학기술원 동종 또는 이종 거부반응을 이용한 항 pd-1 또는 항 pd-l1 항체 선별 방법
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3697801A1 (en) 2017-10-16 2020-08-26 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US20210040205A1 (en) 2017-10-25 2021-02-11 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
CN111372584A (zh) 2017-11-03 2020-07-03 奥瑞基尼探索技术有限公司 Tim-3和pd-1途径的双重抑制剂
JP2021502066A (ja) 2017-11-06 2021-01-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの診断及び療法
CA3081675A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Conjoint therapies for immunomodulation
WO2019090330A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2019094265A1 (en) * 2017-11-10 2019-05-16 Armo Biosciences, Inc. Pd1 polypeptide binding molecules
JP7201400B2 (ja) 2017-11-14 2023-01-10 ファイザー・インク Ｅｚｈ２阻害剤組合せ療法
AU2018368731A1 (en) 2017-11-16 2020-05-14 Novartis Ag Combination therapies
AU2018368745A1 (en) 2017-11-20 2020-05-28 Ariagen, Inc. Indole Compounds and Their Use
CN107952069A (zh) * 2017-11-24 2018-04-24 长春百克生物科技股份公司 重组疫苗及其应用
CN111801334B (zh) * 2017-11-29 2023-06-09 百济神州瑞士有限责任公司 使用包含btk抑制剂的组合治疗惰性或侵袭性b-细胞淋巴瘤
US20200371091A1 (en) 2017-11-30 2020-11-26 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
JP7314146B2 (ja) * 2017-12-28 2023-07-25 中外製薬株式会社 細胞傷害誘導治療剤
EP3735590A1 (en) 2018-01-04 2020-11-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma resistant
WO2019136432A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Novartis Ag Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
US11407723B2 (en) 2018-01-09 2022-08-09 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11713353B2 (en) 2018-01-15 2023-08-01 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against PD-1
KR20200109339A (ko) 2018-01-16 2020-09-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tim3에 대한 항체를 사용하여 암을 치료하는 방법
WO2019144126A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
SG11202006823XA (en) 2018-01-22 2020-08-28 Bristol Myers Squibb Co Compositions and methods of treating cancer
AU2019215031A1 (en) 2018-01-31 2020-08-20 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
WO2019157124A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Bristol-Myers Squibb Company Combination of a tetanus toxoid, anti-ox40 antibody and/or anti-pd-1 antibody to treat tumors
EP3749366A4 (en) * 2018-02-09 2021-11-10 BeiGene, Ltd. IMMUNOTHERAPY FOR UROTHELIAL CARCINOMA
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US20210080467A1 (en) 2018-02-21 2021-03-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of sk1 as biomarker for predicting response to immunecheckpoint inhibitors
EP3755716A4 (en) 2018-02-23 2021-08-04 Eucure (Beijing) Biopharma Co., Ltd ANTI-PD-1 ANTIBODIES AND THEIR USES
US11945834B2 (en) 2018-03-08 2024-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
GB201803746D0 (en) * 2018-03-08 2018-04-25 Ultrahuman Eight Ltd PD1 binding agents
GB201803745D0 (en) 2018-03-08 2018-04-25 Ultrahuman Eight Ltd PD1 binding agents
AU2019322487B2 (en) 2018-03-19 2024-04-18 Multivir Inc. Methods and compositions comprising tumor suppressor gene therapy and CD122/CD132 agonists for the treatment of cancer
WO2019183551A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against mica and/or micb and uses thereof
CA3094458A1 (en) 2018-03-25 2019-10-31 Snipr Biome Aps. Treating & preventing microbial infections
US10760075B2 (en) 2018-04-30 2020-09-01 Snipr Biome Aps Treating and preventing microbial infections
EP3774911A1 (en) 2018-03-30 2021-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CN112292399A (zh) 2018-04-04 2021-01-29 百时美施贵宝公司 抗cd27抗体及其用途
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
KR20210005106A (ko) 2018-04-25 2021-01-13 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 Nlrp3 조정제
CA3098374A1 (en) 2018-04-25 2019-10-31 Prometheus Biosciences, Inc. Optimized anti-tl1a antibodies
US11065317B2 (en) 2018-04-26 2021-07-20 Agenus Inc. Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof
US11957695B2 (en) 2018-04-26 2024-04-16 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions targeting glucocorticoid signaling for modulating immune responses
WO2019213660A2 (en) 2018-05-04 2019-11-07 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for modulating cgrp signaling to regulate innate lymphoid cell inflammatory responses
AU2019266205A1 (en) 2018-05-07 2020-10-22 Genmab A/S Methods of treating cancer with a combination of an anti-PD-1 antibody and an anti-tissue factor antibody-drug conjugate
KR20210010998A (ko) 2018-05-17 2021-01-29 난징 리즈 바이오랩스 씨오., 엘티디. 항체 결합 피디 1 및 그의 용도
WO2019224275A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2019232319A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Peloton Therapeutics, Inc. Compositions and methods for inhibiting cd73
PE20210320A1 (es) 2018-06-01 2021-02-16 Novartis Ag Moleculas de union contra bcma y usos de las mismas
CN108752460B (zh) * 2018-06-07 2022-05-10 江苏东抗生物医药科技有限公司 一种高亲和力的pd-1膜外区突变体的融合蛋白及其药物组合物和用途
SG11202012446UA (en) 2018-06-23 2021-01-28 Genentech Inc Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
BR122022012697B1 (pt) 2018-07-10 2023-04-04 Novartis Ag Usos de derivados de 3-(5-hidróxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6- diona, e kit
AU2019302642A1 (en) 2018-07-10 2021-02-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Modifying binding molecules to minimize pre-existing interactions
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
CA3106143A1 (en) 2018-07-11 2020-01-16 Actym Therapeutics, Inc. Engineered immunostimulatory bacterial strains and uses thereof
US20210277135A1 (en) 2018-07-13 2021-09-09 Bristol-Myers Squibb Company Ox-40 agonist, pd-1 pathway inhibitor and ctla-4 inhibitor combination for use in a method of treating a cancer or a solid tumor
TW202011991A (zh) 2018-07-18 2020-04-01 美商建南德克公司 用pd-1軸結合拮抗劑、抗代謝劑及鉑劑治療肺癌之方法
EP3823991A4 (en) * 2018-07-19 2022-08-03 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. ANTI-PD-1 ANTIBODIES, DOSAGES AND USES THEREOF
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
JP2021532143A (ja) 2018-07-26 2021-11-25 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company 癌の処置のためのｌａｇ−３併用療法
WO2020021061A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Humanized anti-pd-1 antibodies and uses thereof
BR112021002642A2 (pt) 2018-08-16 2021-05-04 Innate Tumor Immunity, Inc. compostos de 4-amino-1h-imidazo[4,5-c]quinolina substituídos e métodos aprimorados para a preparação dos mesmos
WO2020037092A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 Innate Tumor Immunity, Inc. Imidazo[4,5-c]quinoline derived nlrp3-modulators
US20210308123A1 (en) 2018-08-16 2021-10-07 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
WO2020041655A1 (en) 2018-08-24 2020-02-27 Sanofi Therapeutic rna for solid tumor cancers
KR20210052468A (ko) 2018-08-27 2021-05-10 피어이스 파마슈티컬즈 게엠베하 Cd137/her2 이중특이적 제제 및 pd-1 축 억제제를 포함하는 조합물 치료요법 및 이의 용도
US10780121B2 (en) 2018-08-29 2020-09-22 Shattuck Labs, Inc. FLT3L-based chimeric proteins
WO2020044252A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Dosage regimes for anti-m-csf antibodies and uses thereof
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
EP3847154A1 (en) 2018-09-03 2021-07-14 F. Hoffmann-La Roche AG Carboxamide and sulfonamide derivatives useful as tead modulators
WO2020049534A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Novartis Ag Sting agonist and combination therapy thereof for the treatment of cancer
WO2020061376A2 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
CN112930114B (zh) 2018-09-20 2023-10-03 艾欧凡斯生物治疗公司 由冷冻保存的肿瘤样品扩增til
JP7425049B2 (ja) 2018-09-25 2024-01-30 ハープーン セラピューティクス，インク． Ｄｌｌ３結合タンパク質および使用方法
CN112839962A (zh) 2018-10-09 2021-05-25 百时美施贵宝公司 用于治疗癌症的抗mertk抗体
CN112867803A (zh) 2018-10-16 2021-05-28 诺华股份有限公司 单独的或与免疫标志物组合的肿瘤突变负荷作为生物标志物用于预测对靶向疗法的应答
CN109470806A (zh) * 2018-10-19 2019-03-15 张骐 通过二维液相对单抗类产品细胞株进行高通量筛选的方法
JP2022512750A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 黒色腫に対する併用療法
EP3870609A1 (en) 2018-10-23 2021-09-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
US20230053449A1 (en) 2018-10-31 2023-02-23 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
WO2020097409A2 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
MX2021005686A (es) 2018-11-14 2021-07-07 Bayer Ag Combinacion farmaceutica de anti-ceacam6 y anticuerpos anti-pd-1 o anti-pd-l1 para el tratamiento del cancer.
TW202033555A (zh) 2018-11-16 2020-09-16 美商必治妥美雅史谷比公司 抗nkg2a抗體及其用途
KR20210093950A (ko) 2018-11-16 2021-07-28 네오이뮨텍, 인코퍼레이티드 Il-7 단백질 및 면역 관문 저해제의 조합으로 종양을 치료하는 방법
CN109452229B (zh) * 2018-11-19 2021-10-22 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 狗源化pd-1基因改造动物模型的制备方法及应用
JP2022513076A (ja) 2018-11-19 2022-02-07 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム Ｃａｒおよびｔｃｒ形質導入用のモジュール式ポリシストロニックベクター
WO2020106695A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Ariagen, Inc. Methods of treating cancer
CA3116564A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. Anti-pd-1 antibodies and uses thereof
WO2020104479A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating cancers and resistant cancers with anti transferrin receptor 1 antibodies
EP3883964A1 (en) 2018-11-20 2021-09-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Bispecific antibody targeting transferrin receptor 1 and soluble antigen
BR112021010297A2 (pt) 2018-11-28 2021-08-24 Board Of Regents, The University Of Texas System Edição de genomas multiplexadores de células imunes para aumentar a funcionalidade e resistência ao ambiente supressivo
AU2019386830A1 (en) 2018-11-29 2021-06-24 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for ex vivo expansion of natural killer cells and use thereof
KR20210098504A (ko) 2018-12-04 2021-08-10 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 다중 동위원소체 반응 모니터링에 의한 샘플내 보정 곡선을 사용한 분석 방법
US11034710B2 (en) 2018-12-04 2021-06-15 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. CDK9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
WO2020115261A1 (en) 2018-12-07 2020-06-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
KR102195135B1 (ko) * 2018-12-07 2020-12-24 한국과학기술원 면역조절제의 스크리닝 방법
EP3893886A4 (en) * 2018-12-10 2022-09-28 2seventy bio, Inc. PDCD-1 HOMING ENDONUCLEASE VARIANTS
AU2019396360A1 (en) 2018-12-11 2021-05-27 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Naphthyridine and quinoline derivatives useful as ALK5 inhibitors
EP3666905A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
WO2020120592A1 (en) 2018-12-12 2020-06-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for predicting and treating melanoma
WO2020127411A1 (en) 2018-12-19 2020-06-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating cancers by immuno-modulation using antibodies against cathespin-d
BR112021011874A2 (pt) 2018-12-20 2021-09-08 Novartis Ag Regime de dosagem e combinação farmacêutica compreendendo derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
WO2020132560A2 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Aim Immunotech Inc. Compositions and methods for cancer therapy
WO2020128613A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
WO2020127885A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Compositions for treating cancers and resistant cancers
JP2022514087A (ja) 2018-12-21 2022-02-09 ノバルティス アーゲー ＩＬ－１β結合抗体の使用
KR20210109564A (ko) 2018-12-21 2021-09-06 옹쎄오 신규의 컨쥬게이티드 핵산 분자 및 이의 용도
BR112021011351A2 (pt) 2018-12-21 2021-11-16 Novartis Ag Uso de anticorpos il-1 beta no tratamento ou prevenção de síndrome mielodisplásica
US11739156B2 (en) 2019-01-06 2023-08-29 The Broad Institute, Inc. Massachusetts Institute of Technology Methods and compositions for overcoming immunosuppression
CN111423510B (zh) 2019-01-10 2024-02-06 迈威(上海)生物科技股份有限公司 重组抗人pd-1抗体及其应用
KR20210114456A (ko) 2019-01-14 2021-09-23 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 암의 치료에 사용하기 위한 nlrp3-조정제로서의 치환된 퀴나졸린
CN113301962A (zh) 2019-01-14 2021-08-24 先天肿瘤免疫公司 用于治疗癌症的杂环nlrp3调节剂
KR20210114983A (ko) 2019-01-14 2021-09-24 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 Nlrp3 조정제
JP2022518399A (ja) 2019-01-14 2022-03-15 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｄ－１軸結合アンタゴニスト及びｒｎａワクチンを用いてがんを処置する方法
EP3911641A1 (en) 2019-01-14 2021-11-24 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
SG11202107396RA (en) 2019-01-21 2021-08-30 Sanofi Sa Therapeutic rna and anti-pd1 antibodies for advanced stage solid tumor cancers
US20220107323A1 (en) 2019-01-30 2022-04-07 Inserm(Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale) Methods and compositions for identifying whether a subject suffering from a cancer will achieve a response with an immune-checkpoint inhibitor
US20220117911A1 (en) 2019-02-04 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for modulating blood-brain barrier
AU2020221247A1 (en) 2019-02-12 2021-08-05 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Formulations comprising heterocyclic protein kinase inhibitors
BR112021015487A2 (pt) 2019-02-12 2021-10-05 Novartis Ag Combinação farmacêutica que compreende tno155 e um inibidor de pd-1
US20220098674A1 (en) 2019-02-13 2022-03-31 Inserm (Institut National De La Santé Et Dr La Recherch Médicale) Methods and compositions for selecting a cancer treatment in a subject suffering from cancer
KR20210129672A (ko) 2019-02-15 2021-10-28 노파르티스 아게 치환된 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체 및 이의 용도
US20220107320A1 (en) 2019-02-15 2022-04-07 Incelldx, Inc. Assaying Bladder-Associated Samples, Identifying and Treating Bladder-Associated Neoplasia, and Kits for Use Therein
MX2021009763A (es) 2019-02-15 2021-09-08 Novartis Ag Derivados de 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-il)isoindolin-2-il)piperidina -2,6-diona y usos de los mismos.
CN110297093B (zh) * 2019-03-18 2022-04-22 山西瑞豪生物科技有限公司 一种检测人免疫球蛋白g4的方法和试剂盒
EP3942023A1 (en) 2019-03-18 2022-01-26 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for modulating metabolic regulators of t cell pathogenicity
US11793802B2 (en) 2019-03-20 2023-10-24 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment of acute myeloid leukemia (AML) with venetoclax failure
EP3941463A1 (en) 2019-03-22 2022-01-26 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising pkm2 modulators and methods of treatment using the same
WO2020198676A1 (en) 2019-03-28 2020-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CN113677402A (zh) 2019-03-28 2021-11-19 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
US20220175815A1 (en) 2019-04-03 2022-06-09 Orega Biotech Combination therapies based on pd1 and il-17b inhibitors
TW202104218A (zh) 2019-04-15 2021-02-01 美商雅里俊公司 對掌性吲哚化合物及其用途
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
KR20220002967A (ko) 2019-04-19 2022-01-07 제넨테크, 인크. 항 mertk 항체 및 이의 사용 방법
WO2020221796A1 (en) 2019-04-30 2020-11-05 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
JP2022534555A (ja) 2019-05-09 2022-08-02 フジフィルム セルラー ダイナミクス，インコーポレイテッド ヘパトサイトの作製方法
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020231766A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
KR102503349B1 (ko) 2019-05-14 2023-02-23 프로벤션 바이오, 인코포레이티드 제1형 당뇨병을 예방하기 위한 방법 및 조성물
JP2022532766A (ja) 2019-05-17 2022-07-19 キャンサー プリベンション ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 家族性腺腫性ポリポーシスを処置するための方法
CA3141531A1 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Pfizer Inc. Combination therapies using cdk inhibitors
JP2022534981A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよび組み合わせ治療
WO2020243568A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
BR112021024402A2 (pt) 2019-06-03 2022-02-15 Univ Chicago Métodos e composições para tratamento de câncer com adjuvantes direcionados ao câncer
AU2020289485A1 (en) 2019-06-03 2022-02-03 The University Of Chicago Methods and compositions for treating cancer with collagen binding drug carriers
US11246906B2 (en) 2019-06-11 2022-02-15 Alkermes Pharma Ireland Limited Compositions and methods for subcutaneous administration of cancer immunotherapy
CA3143634A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 antibody
CA3143680A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
CN112225809B (zh) * 2019-06-30 2023-09-05 福州创方医药科技有限公司 一种靶向pd-1的单克隆抗体及其应用
CN117447596A (zh) * 2019-06-30 2024-01-26 福州创方医药科技有限公司 一种靶向pd-1的单克隆抗体及其应用
WO2021003417A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (tnk1) inhibitors and uses thereof
WO2021006199A1 (ja) 2019-07-05 2021-01-14 小野薬品工業株式会社 Ｐｄ－１／ｃｄ３二重特異性タンパク質による血液がん治療
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
WO2021026179A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
US20220332825A1 (en) 2019-08-08 2022-10-20 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Bispecific protein
US20220282333A1 (en) 2019-08-13 2022-09-08 The General Hospital Corporation Methods for predicting outcomes of checkpoint inhibition and treatment thereof
GB201912107D0 (en) 2019-08-22 2019-10-09 Amazentis Sa Combination
CR20220076A (es) 2019-08-30 2022-06-24 Agenus Inc Anticuerpos anti-cd96 y sus métodos de uso
WO2021048292A1 (en) 2019-09-11 2021-03-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
CN114450025A (zh) * 2019-09-11 2022-05-06 百济神州有限公司 使用包含多重酪氨酸激酶抑制剂和免疫检查点抑制剂的组合治疗癌症
JP2022548747A (ja) 2019-09-17 2022-11-21 バイアル－アールアンドディー インベストメンツ ソシエダッド アノニマ 酸性セラミダーゼ阻害剤としての置換されたｎ－複素環式カルボキサミド及び医薬としてのその使用
US20220380314A1 (en) 2019-09-17 2022-12-01 Bial - R&D Investments, S.A. Substituted, saturated and unsaturated n-heterocyclic carboxamides and related compounds for their use in the treatment of medical disorders
MX2022003237A (es) 2019-09-17 2022-07-04 Bial R&D Invest S A Imidazol carboxamidas sustituidas y su uso en el tratamiento de trastornos medicos.
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
AU2020350795A1 (en) 2019-09-22 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for LAG-3 antagonist therapy
AU2020353079A1 (en) 2019-09-25 2022-04-14 Bristol-Myers Squibb Company Composite biomarker for cancer therapy
MX2022003357A (es) 2019-09-25 2022-05-03 Seagen Inc Combinación de anticuerpo anti-cd30 conjugado con un farmaco, anti-pd-1 y quimioterapia para el tratamiento de cánceres hematopoyéticos.
WO2021064180A1 (en) 2019-10-03 2021-04-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for modulating macrophages polarization
US11793787B2 (en) 2019-10-07 2023-10-24 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for enhancing anti-tumor immunity by targeting steroidogenesis
EP4045686A1 (en) 2019-10-17 2022-08-24 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods for diagnosing nasal intestinal type adenocarcinomas
TW202128166A (zh) 2019-10-21 2021-08-01 瑞士商諾華公司 組合療法
EP4048285A1 (en) 2019-10-21 2022-08-31 Novartis AG Tim-3 inhibitors and uses thereof
CA3158638A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Prometheus Biosciences, Inc. Humanized antibodies to tnf-like ligand 1a (tl1a) and uses thereof
EP4051286A1 (en) 2019-10-29 2022-09-07 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods and compositions for treating uveal melanoma
AU2020374883A1 (en) 2019-10-29 2022-05-26 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination of a PD-1 antagonist, a VEGFR/FGFR/RET tyrosine kinase inhibitor and a CBP/beta-catenin inhibitor for treating cancer
US20220380765A1 (en) 2019-11-02 2022-12-01 Board Of Regents, The University Of Texas System Targeting nonsense-mediated decay to activate p53 pathway for the treatment of cancer
US20220390455A1 (en) 2019-11-05 2022-12-08 Bristol-Myers Squibb Company M-protein assays and uses thereof
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
MX2022005474A (es) 2019-11-08 2022-06-02 Bristol Myers Squibb Co Tratamiento de melanoma con antagonistas del gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3).
CN112794906B (zh) * 2019-11-13 2022-04-05 合肥瀚科迈博生物技术有限公司 抗4-1bb的单链抗体及其应用
TW202130618A (zh) 2019-11-13 2021-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及使用方法
EP4058465A1 (en) 2019-11-14 2022-09-21 Cohbar Inc. Cxcr4 antagonist peptides
KR20220103708A (ko) * 2019-11-21 2022-07-22 베이진 엘티디 항-pd1 또는 항-pdl1 항체와의 병용물 형태로 항-ox40 항체를 사용하는 암 치료의 방법
US20230000864A1 (en) 2019-11-22 2023-01-05 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Solid dose pharmaceutical composition
EP4061809A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Substituted 1,5-naphthyridines or quinolines as alk5 inhibitors
GB201917254D0 (en) 2019-11-27 2020-01-08 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
WO2021113644A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Multivir Inc. Combinations comprising a cd8+ t cell enhancer, an immune checkpoint inhibitor and radiotherapy for targeted and abscopal effects for the treatment of cancer
JP2023506187A (ja) 2019-12-09 2023-02-15 シージェン インコーポレイテッド Ｌｉｖ１－ａｄｃおよびｐｄ－１アンタゴニストとの併用療法
WO2021127554A1 (en) 2019-12-19 2021-06-24 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of dgk inhibitors and checkpoint antagonists
AU2020408198A1 (en) 2019-12-19 2022-07-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and vaccine compositions to treat cancers
US20230044381A1 (en) * 2019-12-20 2023-02-09 Guangdong Feipeng Pharmaceutical Co., Ltd Anti-human programmed death-1 monoclonal antibody
CA3165399A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Novartis Ag Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases
BR112022012918A2 (pt) 2020-01-07 2022-09-06 Univ Texas Variantes de enzima de exaustão de metiltioadenosina/adenosina humana melhorada para terapia do câncer
US20230348458A1 (en) 2020-01-10 2023-11-02 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
US20230076415A1 (en) 2020-01-17 2023-03-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
BR112022012310A2 (pt) 2020-01-17 2022-09-06 Novartis Ag Combinação compreendendo um inibidor de tim-3 e um agente hipometilante para uso no tratamento de síndrome mielodisplásica ou leucemia mielomonocítica crônica
CN115397859A (zh) 2020-01-30 2022-11-25 Ona疗法有限公司 治疗癌症和癌症转移的联合疗法
JP2023512654A (ja) 2020-01-31 2023-03-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｄ－１軸結合アンタゴニストおよびｒｎａワクチンを用いてネオエピトープ特異的ｔ細胞を誘導する方法
EP4100126A1 (en) 2020-02-05 2022-12-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods for discontinuing a treatment with a tyrosine kinase inhibitor (tki)
JP2023514152A (ja) 2020-02-06 2023-04-05 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｉｌ－１０およびその使用
WO2021167908A1 (en) 2020-02-17 2021-08-26 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for expansion of tumor infiltrating lymphocytes and use thereof
KR20220148846A (ko) 2020-02-28 2022-11-07 노파르티스 아게 다브라페닙, erk 억제제, 및 raf 억제제를 포함하는 삼중 약학적 조합물
EP4110955A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for diagnosing, prognosing and managing treatment of breast cancer
US20230045494A1 (en) 2020-02-28 2023-02-09 Orega Biotech Combination therapies based on ctla4 and il-17b inhibitors
JP2023517011A (ja) 2020-03-05 2023-04-21 ネオティーエックス セラピューティクス リミテッド 免疫細胞を用いて癌を治療するための方法および組成物
US20230235073A1 (en) 2020-03-06 2023-07-27 Ona Therapeutics, S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
BR112022017637A2 (pt) 2020-03-06 2022-11-08 Celgene Quanticel Res Inc Métodos de tratamento do câncer de pulmão de células pequenas e/ou câncer de pulmão de células não pequenas
EP3878446A1 (en) 2020-03-09 2021-09-15 Universite De Geneve Hsd11b1 inhibitors for use in immunotherapy and uses thereof
EP4126950A1 (en) 2020-03-23 2023-02-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ccr8 antibodies for treating cancer
US11673879B2 (en) 2020-03-31 2023-06-13 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Substituted pyrimidines and methods of use
CA3180635A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 Novartis Ag Dosing regimen for treating a disease modulated by csf-1r
WO2021216920A1 (en) 2020-04-22 2021-10-28 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
KR102623161B1 (ko) * 2020-10-08 2024-01-09 고려대학교 산학협력단 Pd-l1 친화도가 증가된 pd-1 변이체
US20230212256A1 (en) 2020-05-21 2023-07-06 Board Of Regents, The University Of Texas System T cell receptors with vgll1 specificity and uses thereof
US20230233474A1 (en) 2020-05-28 2023-07-27 Modernatx, Inc. Use of mrnas encoding ox40l, il-23 and il-36gamma for treating cancer
WO2021247836A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for targeting shp-2 to overcome resistance
US20210387983A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Crystalline alk5 inhibitors and uses thereof
TW202214857A (zh) 2020-06-19 2022-04-16 法商昂席歐公司 新型結合核酸分子及其用途
BR112022026202A2 (pt) 2020-06-23 2023-01-17 Novartis Ag Regime de dosagem compreendendo derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona
WO2021263167A2 (en) 2020-06-26 2021-12-30 Amgen Inc. Il-10 muteins and fusion proteins thereof
CN116133679A (zh) 2020-06-30 2023-05-16 门德斯有限公司 白血病衍生细胞在卵巢癌疫苗中的用途
JP2023532768A (ja) 2020-07-07 2023-07-31 バイオエヌテック エスエー Ｈｐｖ陽性癌の治療用ｒｎａ
WO2022009157A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Novartis Ag Lhc165 and spartalizumab combinations for treating solid tumors
US11787775B2 (en) 2020-07-24 2023-10-17 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
JP2023535610A (ja) 2020-07-28 2023-08-18 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル ガンを予防及び処置するための方法及び組成物
CN116134027A (zh) 2020-08-03 2023-05-16 诺华股份有限公司 杂芳基取代的3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途
KR20230058442A (ko) 2020-08-28 2023-05-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 간세포성 암종에 대한 lag-3 길항제 요법
WO2022047412A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230338587A1 (en) 2020-08-31 2023-10-26 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230265196A1 (en) 2020-09-02 2023-08-24 Pharmabcine Inc. Combination Therapy of a PD-1 Antagonist and an Antagonist for VEGFR-2 for Treating Patients with Cancer
EP4217394A1 (en) 2020-09-24 2023-08-02 Merck Sharp & Dohme LLC Stable formulations of programmed death receptor 1 (pd-1) antibodies and hyaluronidase variants and fragments thereof and methods of use thereof
CN112285224A (zh) * 2020-10-02 2021-01-29 朱吉安 一种抗pd-1单克隆抗体药物的质量标准检测方法
US20230374064A1 (en) 2020-10-05 2023-11-23 Bristol-Myers Squibb Company Methods for concentrating proteins
WO2022076596A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6
TW202233671A (zh) 2020-10-20 2022-09-01 美商建南德克公司 Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法
WO2022084531A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating glioma
JP2023548051A (ja) 2020-10-23 2023-11-15 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 肺がんのためのｌａｇ－３アンタゴニスト療法
AU2021369590A1 (en) 2020-10-28 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Combination of an ahr inhibitor with a pdx inhibitor or doxorubicine
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
CA3196076A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Chi-Chung Li Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
KR20230095119A (ko) 2020-11-04 2023-06-28 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체를 사용한 치료를 위한 투약
WO2022098648A2 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
WO2022097060A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
US20230051406A1 (en) 2020-11-13 2023-02-16 Catamaran Bio, Inc. Genetically modified natural killer cells and methods of use thereof
EP4244391A1 (en) 2020-11-16 2023-09-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for predicting and treating uveal melanoma
WO2022101484A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for predicting and treating uveal melanoma
JP2023549581A (ja) 2020-11-17 2023-11-27 シージェン インコーポレイテッド ツカチニブ及び抗ｐｄ－１／抗ｐｄ－ｌ１抗体の組み合わせによりがんを治療する方法
AU2021388155A1 (en) 2020-11-25 2023-06-15 Catamaran Bio, Inc. Cellular therapeutics engineered with signal modulators and methods of use thereof
WO2022119830A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Genentech, Inc. Methods and compositions for neoadjuvant and adjuvant urothelial carcinoma therapy
US20220168293A1 (en) 2020-12-02 2022-06-02 Pfizer Inc. Time to resolution of axitinib-related adverse events
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
EP4256067A2 (en) 2020-12-04 2023-10-11 Tidal Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles, and methods of synthesis and use thereof
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
AU2021411486A1 (en) 2020-12-28 2023-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
US20220233689A1 (en) 2020-12-28 2022-07-28 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumors
WO2022159492A1 (en) 2021-01-19 2022-07-28 William Marsh Rice University Bone-specific delivery of polypeptides
WO2022157715A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 Dcprime B.V. Methods of tumor vaccination
CA3206549A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Frederick G. Vogt Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
EP4284510A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Novartis AG Dosage regimes for anti-cd73 and anti-entpd2 antibodies and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
AU2022231961A1 (en) * 2021-03-10 2023-10-19 B.G. Negev Technologies & Applications Ltd., At Ben-Gurion University Reporter cells expressing chimeric polypeptides for use in determining presence and or activity of immune checkpoint molecules
EP4304633A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Mendus B.V. Methods of vaccination and use of cd47 blockade
WO2022194908A1 (en) 2021-03-17 2022-09-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
WO2022195551A1 (en) 2021-03-18 2022-09-22 Novartis Ag Biomarkers for cancer and methods of use thereof
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
KR20240005700A (ko) 2021-03-29 2024-01-12 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 체크포인트 억제제 요법 및 car t 세포 요법의 조합을 사용한 투여 및 치료 방법
WO2022212876A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
CA3213079A1 (en) 2021-04-13 2022-10-20 Kristin Lynne ANDREWS Amino-substituted heterocycles for treating cancers with egfr mutations
EP4322938A1 (en) 2021-04-14 2024-02-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) New method to improve nk cells cytotoxicity
EP4326903A1 (en) 2021-04-23 2024-02-28 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Methods and compositions for treating cell senescence accumulation related disease
EP4330282A1 (en) 2021-04-30 2024-03-06 F. Hoffmann-La Roche AG Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
JP2024516230A (ja) 2021-04-30 2024-04-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんのための治療及び診断方法並びに組成物
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN117412767A (zh) 2021-05-25 2024-01-16 雪绒花免疫公司 C-x-c基序趋化因子受体6（cxcr6）结合分子及其使用方法
WO2022251359A1 (en) 2021-05-26 2022-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Bicyclic inhibitors of alk5 and methods of use
TW202313117A (zh) 2021-06-03 2023-04-01 美商欣爍克斯公司 包含il-2接合物及西妥昔單抗(cetuximab)之頭頸癌組合療法
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
BR112023026404A2 (pt) 2021-06-18 2024-03-05 Genzyme Corp Formulações de anticorpo anti-tgf-beta e seus usos
AU2022302170A1 (en) 2021-07-02 2023-12-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating cancer
IL309831A (en) 2021-07-13 2024-02-01 BioNTech SE Multispecific binding agents against CD40 and CD137 in combined cancer therapy
WO2023010094A2 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
CA3224180A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating cancer
WO2023007472A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
WO2023014922A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Lat activating chimeric antigen receptor t cells and methods of use thereof
IL310662A (en) 2021-08-23 2024-04-01 Immunitas Therapeutics Inc Anti-CD161 antibodies and their uses
WO2023031366A1 (en) 2021-09-02 2023-03-09 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Anti-cecam6 antibodies with reduced side-effects
WO2023039249A1 (en) 2021-09-10 2023-03-16 Leap Therapeutics, Inc. Combination therapy
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
TW202321308A (zh) 2021-09-30 2023-06-01 美商建南德克公司 使用抗ｔｉｇｉｔ抗體、抗ｃｄ３８抗體及ｐｄ—１軸結合拮抗劑治療血液癌症的方法
CA3234457A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Cytovia Therapeutics, Llc Natural killer cells and methods of use thereof
WO2023057882A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Pfizer Inc. Combinations of azalactam compounds with a pd-1 axis binding antagonist for the treatment of cancer
WO2023057534A1 (en) 2021-10-06 2023-04-13 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
TW202330612A (zh) 2021-10-20 2023-08-01 日商武田藥品工業股份有限公司 靶向ｂｃｍａ之組合物及其使用方法
WO2023076880A1 (en) 2021-10-25 2023-05-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Foxo1-targeted therapy for the treatment of cancer
WO2023077034A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Lyell Immunopharma, Inc. Methods for culturing immune cells
CA3224890A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023079428A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Pfizer Inc. Combination therapies using tlr7/8 agonist
WO2023078900A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating triple negative breast cancer (tnbc)
WO2023080900A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating kidney cancer
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
TW202319073A (zh) 2021-11-12 2023-05-16 瑞士商諾華公司 用於治療肺癌的組合療法
WO2023097194A2 (en) 2021-11-24 2023-06-01 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
TW202332429A (zh) 2021-11-24 2023-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及其使用方法
WO2023111203A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Onxeo New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023122573A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
WO2023118165A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating melanoma
WO2023130081A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Neoimmunetech, Inc. Method of treating a tumor with a combination of il-7 protein and vegf antagonist
WO2023133424A2 (en) * 2022-01-05 2023-07-13 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins and anti-pd-1 fusion peptides
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023147488A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2023196988A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Modernatx, Inc. Methods of use of mrnas encoding il-12
EP4257609A1 (en) 2022-04-08 2023-10-11 iOmx Therapeutics AG Combination therapies based on pd-1 inhibitors and sik3 inhibitors
US20230326022A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine Learning Identification, Classification, and Quantification of Tertiary Lymphoid Structures
TW202345902A (zh) * 2022-04-14 2023-12-01 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 含有ｐｄ－１抗體的穩定高濃度精胺酸配製物及其使用方法
WO2023211972A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Medical University Of South Carolina Chimeric antigen receptor modified regulatory t cells for treating cancer
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
CN114920830B (zh) * 2022-05-07 2023-05-16 北京大学 Vκ4-1-IgLC多肽及其用途
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023218046A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023230554A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Pfizer Inc. Combination of a braf inhibitor, an egfr inhibitor, and a pd-1 antagonist for the treatment of braf v600e-mutant, msi-h/dmmr colorectal cancer
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
US20240002331A1 (en) 2022-06-08 2024-01-04 Tidal Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles, and methods of synthesis and use thereof
US11786531B1 (en) 2022-06-08 2023-10-17 Beigene Switzerland Gmbh Methods of treating B-cell proliferative disorder
WO2023241659A1 (en) * 2022-06-16 2023-12-21 Beigene, Ltd. Methods of treating lymphoma using anti-tigit antibodies
WO2024012364A1 (en) * 2022-07-12 2024-01-18 Beigene Switzerland Gmbh Preparation methods for a highly concentrated pd1 antibody solution by ultrafiltration/diafiltration (uf/df)
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024012584A1 (en) * 2022-07-15 2024-01-18 Beigene Switzerland Gmbh Methods of cancer treatment using anti-tigit antibodies
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4310197A1 (en) 2022-07-21 2024-01-24 Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda Method for identifying lung cancer patients for a combination treatment of immuno- and chemotherapy
WO2024023740A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Astrazeneca Ab Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2024028794A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Temple Therapeutics BV Methods for treating endometrial and ovarian hyperproliferative disorders
WO2024033399A1 (en) 2022-08-10 2024-02-15 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Sigmar1 ligand for the treatment of pancreatic cancer
WO2024033400A1 (en) 2022-08-10 2024-02-15 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Sk2 inhibitor for the treatment of pancreatic cancer
WO2024041652A1 (en) * 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment
WO2024044675A1 (en) 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment using anti-pd1 antibodies in combination with anti-tim3 antibodies
WO2024041651A1 (en) * 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment using anti-pd1 antibodies in combination with anti-tim3 antibodies and anti-lag3 antibodies
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024056716A1 (en) 2022-09-14 2024-03-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of dilated cardiomyopathy
WO2024069009A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
WO2024077095A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating bladder cancer
WO2024077166A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating lung cancer

Family Cites Families (205)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE792533A (fr) 1971-12-09 1973-06-08 Int Chem & Nuclear Corp Nouvelles pyrazolo (1,5a) pyrimidines et leur procede de preparation
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US5994514A (en) 1991-08-14 1999-11-30 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants
CA2118508A1 (en) 1992-04-24 1993-11-11 Elizabeth S. Ward Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
CA2163345A1 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Susan Adrienne Morgan Antibodies
JPH07291996A (ja) 1994-03-01 1995-11-07 Yuu Honshiyo ヒトにおけるプログラムされた細胞死に関連したポリペプチド、それをコードするｄｎａ、そのｄｎａからなるベクター、そのベクターで形質転換された宿主細胞、そのポリペプチドの抗体、およびそのポリペプチドまたはその抗体を含有する薬学的組成物
JP2778921B2 (ja) 1994-11-18 1998-07-23 三共株式会社 イミダゾピラゾール誘導体
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
NZ539776A (en) 1999-01-15 2006-12-22 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
WO2001014557A1 (en) 1999-08-23 2001-03-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
PL362804A1 (en) 1999-08-23 2004-11-02 Dana-Farber Cancer Institute Novel b7-4 molecules and uses therefor
MXPA02002111A (es) 1999-08-27 2002-10-31 Abbott Lab Compuestos de sulfonilfenilpirazol utiles como inhibidores de cox-2.
AU780052B2 (en) 1999-09-17 2005-02-24 Abbott Gmbh & Co. Kg Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
PL358215A1 (en) * 2000-03-24 2004-08-09 Micromet Ag Multifunctional polypeptides comprising a binding site to an epitope of the nkg2d receptor complex
US7416726B2 (en) 2000-04-13 2008-08-26 The Rockefeller University Enhancement of antibody-mediated immune responses
US20020094989A1 (en) 2000-10-11 2002-07-18 Hale Jeffrey J. Pyrrolidine modulators of CCR5 chemokine receptor activity
KR20030066657A (ko) 2000-11-15 2003-08-09 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 Ｐｄ-1 결손 마우스 및 그 용도
EP2354149B1 (en) 2000-12-12 2017-08-30 MedImmune, LLC Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
PT1347971E (pt) 2000-12-21 2006-06-30 Bristol Myers Squibb Co Inibidores tiazolilicos de tirosina-cinases da familia tec
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
MXPA03008031A (es) 2001-03-07 2003-12-04 Merck Patent Gmbh Tecnologia de expresion para proteinas que contienen porcion de anticuerpo isotipo hibrida.
CA2440211A1 (en) 2001-03-09 2002-09-19 Pfizer Products Inc. Benzimidazole anti-inflammatory compounds
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
JPWO2003004497A1 (ja) 2001-07-05 2004-10-28 住友製薬株式会社 新規複素環化合物
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US7662925B2 (en) 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
DE10161767T1 (de) 2002-07-03 2018-06-07 Honjo Tasuku Immunopotenzierende Zusammensetzungen, die einen Anti-PD-L1 Antikörper enthalten
CN1771231B (zh) 2002-08-26 2011-05-25 武田药品工业株式会社 钙受体调节性化合物及其用途
KR101050700B1 (ko) 2002-08-26 2011-07-20 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 칼슘 수용체 조절 화합물 및 이의 용도
EP1578447A4 (en) 2002-10-31 2009-06-03 Genentech Inc METHODS AND COMPOSITIONS THAT CAN INCREASE ANTIBODY PRODUCTION
US7521051B2 (en) * 2002-12-23 2009-04-21 Medimmune Limited Methods of upmodulating adaptive immune response using anti-PD-1 antibodies
AU2004204494B2 (en) 2003-01-09 2011-09-29 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) * 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
EP2270051B1 (en) 2003-01-23 2019-05-15 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Antibody specific for human PD-1 and CD3
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US7405295B2 (en) 2003-06-04 2008-07-29 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US20060183746A1 (en) 2003-06-04 2006-08-17 Currie Kevin S Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
WO2005005429A1 (en) 2003-06-30 2005-01-20 Cellular Genomics, Inc. Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of bruton’s tyrosine kinase by such compounds
CN1860118A (zh) 2003-07-29 2006-11-08 Irm责任有限公司 作为蛋白激酶抑制剂的化合物和组合物
CA2536408A1 (en) 2003-08-22 2005-03-03 Biogen Idec Ma Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
WO2005047290A2 (en) 2003-11-11 2005-05-26 Cellular Genomics Inc. Imidazo[1,2-a] pyrazin-8-ylamines as kinase inhibitors
US20050249723A1 (en) 2003-12-22 2005-11-10 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites
GB0400440D0 (en) 2004-01-09 2004-02-11 Isis Innovation Receptor modulators
EP1810979B1 (en) 2004-09-22 2012-06-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. STABILIZED HUMAN IgG4 ANTIBODIES
EP1812442A2 (en) 2004-11-10 2007-08-01 CGI Pharmaceuticals, Inc. Imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity
WO2006065946A1 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrid-2-ones useful as inhibitors of tec family protein kinases for the treatment of inflammatory, proliferative and immunologically-mediated diseases
TW200639163A (en) 2005-02-04 2006-11-16 Genentech Inc RAF inhibitor compounds and methods
JP2008533032A (ja) 2005-03-10 2008-08-21 シージーアイ ファーマシューティカルズ，インコーポレイティド 或る種の置換アミド、その製造方法及び使用方法
AU2006244885B2 (en) * 2005-05-09 2011-03-31 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
SI1907000T2 (sl) * 2005-06-08 2020-07-31 Dana-Farber Cancer Institute Postopki in sestavki za zdravljenje persistentne HIV infekcije z inhibicijo programiranih celični smrtnih 1 (PD-1) poti
HUE026039T2 (en) 2005-07-01 2016-05-30 Squibb & Sons Llc Human monoclonal antibodies programmed for death ligand 1 (PD-L1)
AU2006285038A1 (en) 2005-08-29 2007-03-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 3,5-disubstituted pyrid-2-ones useful as inhibitors of Tec family of non-receptor tyrosine kinases
EP1919906B1 (en) 2005-08-29 2011-10-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 3, 5-disubstituted pyrid-2-ones useful as inhibitors of tec family of non-receptor tyrosine kinases
WO2007026720A1 (ja) 2005-08-31 2007-03-08 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. 縮環ピラゾール誘導体
BRPI0617100A2 (pt) 2005-09-01 2011-07-12 Astellas Pharma Inc composto derivado de piridazinona, composição farmacêutica, método para previnir ou tratar uma doença e uso de um composto derivado de piridazinona
CA2632512A1 (en) 2005-12-08 2007-06-14 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic compounds with kinase inhibitory activity
KR20080098490A (ko) 2006-01-13 2008-11-10 파마시클릭스, 인코포레이티드 티로신 키나제 억제제 및 이의 용도
MY169492A (en) * 2006-03-23 2019-04-15 Bioarctic Neuroscience Ab Improved protofibril selective antibodies and the use thereof
PE20080069A1 (es) 2006-05-15 2008-02-22 Merck & Co Inc Compuestos biciclicos como agonistas del receptor 40 acoplado a proteina g (gpr40)
AU2007254179B2 (en) 2006-05-18 2013-03-21 Pharmacyclics Llc Intracellular kinase inhibitors
JO3235B1 (ar) 2006-05-26 2018-03-08 Astex Therapeutics Ltd مركبات بيررولوبيريميدين و استعمالاتها
CN101104640A (zh) 2006-07-10 2008-01-16 苏州大学 抗人pd-l1单克隆抗体制备及应用
EP2270200A3 (en) 2006-09-11 2011-07-13 CGI Pharmaceuticals, Inc. Kinase inhibitors, and methods of using and identifying kinase inhibitors
AR063946A1 (es) 2006-09-11 2009-03-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas pirimidinas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden.
AR063706A1 (es) 2006-09-11 2009-02-11 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas amidas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden.
AR063707A1 (es) 2006-09-11 2009-02-11 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas amidas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmacéuticas que las comprenden.
NZ601278A (en) 2006-09-22 2013-09-27 Pharmacyclics Inc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
US20100087464A1 (en) 2006-10-06 2010-04-08 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
ES2403546T3 (es) 2006-11-03 2013-05-20 Pharmacyclics, Inc. Sonda de actividad de la tirosina-cinasa de Bruton y procedimiento de utilización
JP2010522241A (ja) 2007-03-21 2010-07-01 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 増殖性疾患、アレルギー性疾患、自己免疫疾患または炎症性疾患として有用な縮合ヘテロ環化合物
WO2008144253A1 (en) 2007-05-14 2008-11-27 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
AU2008255352B2 (en) * 2007-05-31 2014-05-22 Genmab A/S Stable IgG4 antibodies
SI2170959T1 (sl) * 2007-06-18 2014-04-30 Merck Sharp & Dohme B.V. Protitelesa proti receptorjem pd-1 za humano programirano smrt
WO2009024531A1 (en) 2007-08-17 2009-02-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for treating and diagnosing hematologic malignancies
CL2008002793A1 (es) 2007-09-20 2009-09-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Compuestos derivados de amidas sustituidas, inhibidores de la actividad de btk; composicion farmaceutica que los comprende; utiles en el tratamiento del cancer, trastornos oseos, enfermedades autoinmunes, entre otras
JO3076B1 (ar) * 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
US7989465B2 (en) 2007-10-19 2011-08-02 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
US7982036B2 (en) 2007-10-19 2011-07-19 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstitued pyrimidines useful as kinase inhibitors
ES2499017T3 (es) 2007-10-23 2014-09-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Nuevos inhibidores de quinasa
WO2009077334A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel imidazo[1,2-a]pyridine and imidazo[1,2-b]pyridazine derivatives
NZ586916A (en) 2008-02-05 2012-06-29 Hoffmann La Roche Novel pyridinones and pyridazinones
KR101666229B1 (ko) * 2008-02-08 2016-10-14 메디뮨 엘엘씨 Ｆｃ 리간드 친화성이 감소된 항-ＩＦＮＡＲ１ 항체
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
US8426424B2 (en) 2008-05-06 2013-04-23 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
KR20110025224A (ko) 2008-06-27 2011-03-09 아빌라 테라퓨틱스, 인크. 헤테로아릴 화합물 및 이의 용도
JP5490789B2 (ja) 2008-07-02 2014-05-14 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー キナーゼ阻害剤としての新規なフェニルピラジノン
ES2552681T3 (es) 2008-07-15 2015-12-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Nuevas fenil-imidazopiridinas y piridazinas
US20110224235A1 (en) 2008-07-16 2011-09-15 Pharmacyclics, Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase for the treatment of solid tumors
CA2725512C (en) 2008-07-18 2016-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel phenylimidazopyrazines
US8476430B2 (en) 2008-07-24 2013-07-02 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful as kinase modulators
AU2009288289B2 (en) 2008-08-25 2012-11-08 Amplimmune, Inc. PD-1 antagonists and methods of use thereof
CN105574346A (zh) 2008-09-05 2016-05-11 新基阿维罗米克斯研究公司 多肽偶联物与不可逆抑制剂的设计方法和检测方法
WO2010029434A1 (en) 2008-09-12 2010-03-18 Isis Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
AU2009290544B2 (en) 2008-09-12 2015-07-16 Oxford University Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
KR102097887B1 (ko) * 2008-09-26 2020-04-06 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 인간 항-ｐｄ-１, ｐｄ-ｌ１, 및 ｐｄ-ｌ2 항체 및 그의 용도
KR101050829B1 (ko) 2008-10-02 2011-07-20 서울대학교산학협력단 항 ｐｄ-1 항체 또는 항 ｐｄ-ｌ1 항체를 포함하는 항암제
KR101686685B1 (ko) 2008-10-31 2016-12-14 제넨테크, 인크. 피라졸로피리미딘 ｊａｋ 억제제 화합물 및 방법
US20120028981A1 (en) 2008-11-05 2012-02-02 Principia Biopharma Inc. Kinase Knockdown Via Electrophilically Enhanced Inhibitors
EP2365970B1 (en) 2008-11-12 2018-03-21 Gilead Connecticut, Inc. Pyridazinones and their use as btk inhibitors
AU2009319701B2 (en) * 2008-11-28 2014-10-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for the treatment of infections and tumors
US8426428B2 (en) 2008-12-05 2013-04-23 Principia Biopharma, Inc. EGFR kinase knockdown via electrophilically enhanced inhibitors
CN114835812A (zh) * 2008-12-09 2022-08-02 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-pd-l1抗体及它们用于增强t细胞功能的用途
WO2010068810A2 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
WO2010068788A1 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic amides as btk inhibitors
WO2010068806A1 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Amide derivatives as btk inhibitors in the treatment of allergic, autoimmune and inflammatory disorders as well as cancer
ES2443948T3 (es) 2008-12-19 2014-02-21 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de carbazol carboxamida útiles como inhibidores de quinasas
US20100197924A1 (en) 2008-12-22 2010-08-05 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Preparation of aminotetralin compounds
JP5908728B2 (ja) 2009-01-06 2016-04-26 ダナ ファーバー キャンサー インスティテュート インコーポレイテッド ピリミド−ジアゼピノンキナーゼ骨格化合物及び疾患を治療する方法
EP3192811A1 (en) * 2009-02-09 2017-07-19 Université d'Aix-Marseille Pd-1 antibodies and pd-l1 antibodies and uses thereof
US8299077B2 (en) 2009-03-02 2012-10-30 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
SG175287A1 (en) 2009-04-24 2011-11-28 Hoffmann La Roche Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
US8765754B2 (en) 2009-04-29 2014-07-01 Locus Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolotriazine compounds
JP2012529535A (ja) 2009-06-12 2012-11-22 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー キナーゼモジュレーターとして有用なニコチンアミド化合物
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
US8846673B2 (en) 2009-08-11 2014-09-30 Bristol-Myers Squibb Company Azaindazoles as kinase inhibitors and use thereof
WO2011028952A1 (en) * 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
WO2011029043A1 (en) 2009-09-04 2011-03-10 Biogen Idec Ma Inc. Heteroaryl btk inhibitors
TWI557127B (zh) 2009-09-04 2016-11-11 百健Ｍａ公司 布魯頓氏酪胺酸激酶抑制劑
US7718662B1 (en) 2009-10-12 2010-05-18 Pharmacyclics, Inc. Pyrazolo-pyrimidine inhibitors of bruton's tyrosine kinase
ES2617281T3 (es) * 2009-10-28 2017-06-16 Janssen Biotech, Inc. Anticuerpos anti-glp-1r y sus usos
SI2506871T1 (sl) * 2009-11-30 2016-12-30 Janssen Biotech, Inc. Mutanti Fc protitelesa z odstranjenimi efektorskimi funkcijami
US10053513B2 (en) * 2009-11-30 2018-08-21 Janssen Biotech, Inc. Antibody Fc mutants with ablated effector functions
AU2011217770B2 (en) * 2010-02-19 2016-02-04 Xencor, Inc. Novel CTLA4-IG immunoadhesins
CA2794708C (en) 2010-03-29 2021-11-16 Zymeworks Inc. Antibodies with enhanced or suppressed effector function
CN110818724B (zh) 2010-05-07 2020-11-13 吉利德康涅狄格有限公司 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
LT2578585T (lt) 2010-05-31 2016-10-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Purinono darinys kaip btk kinazės inhibitorius
CA3007787C (en) 2010-06-03 2020-03-10 Pharmacyclics Llc The use of inhibitors of bruton's tyrosine kinase (btk)
EP2582668B1 (en) 2010-06-16 2016-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
SG186378A1 (en) 2010-06-23 2013-01-30 Hanmi Science Co Ltd Novel fused pyrimidine derivatives for inhibition of tyrosine kinase activity
US20120053189A1 (en) 2010-06-28 2012-03-01 Pharmacyclics, Inc. Btk inhibitors for the treatment of immune mediated conditions
US20120100166A1 (en) * 2010-07-15 2012-04-26 Zyngenia, Inc. Ang-2 Binding Complexes and Uses Thereof
WO2012021444A1 (en) 2010-08-10 2012-02-16 Avila Therapeutics, Inc. Besylate salt of a btk inhibitor
AR082590A1 (es) 2010-08-12 2012-12-19 Hoffmann La Roche Inhibidores de la tirosina-quinasa de bruton
CN106220614B (zh) 2010-09-01 2019-07-16 吉利德康涅狄格有限公司 吡啶酮/吡嗪酮、其制备方法及使用方法
KR101864908B1 (ko) 2010-09-01 2018-06-05 질레드 코네티컷 인코포레이티드 피리다지논, 그의 제조 방법 및 사용 방법
KR101941514B1 (ko) * 2010-12-22 2019-01-23 테바 파마슈티컬즈 오스트레일리아 피티와이 엘티디 개선된 반감기를 가지는 변형된 항체
MX336740B (es) 2011-03-29 2016-01-29 Roche Glycart Ag Variantes de fragmento cristalizable (fc) de los anticuerpos.
KR102289394B1 (ko) * 2011-03-31 2021-08-13 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 인간 프로그램화된 사멸 수용체 pd-1에 대한 항체의 안정한 제제 및 관련된 치료
EP2694486B1 (en) 2011-04-01 2018-01-10 University of Utah Research Foundation Substituted n-(3-(pyrimidin-4-yl)phenyl)acrylamide analogs as tyrosine receptor kinase btk inhibitors
CA2760174A1 (en) 2011-12-01 2013-06-01 Pharmascience Inc. Protein kinase inhibitors and uses thereof
RU2625034C2 (ru) * 2011-04-20 2017-07-11 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи Антитела и другие молекулы, которые связывают в7-н1 и pd-1
JP2014511894A (ja) 2011-04-20 2014-05-19 グラクソ グループ リミテッド 抗結核化合物としてのテトラヒドロピラゾロ［１，５‐ａ］ピリミジン
US20140107151A1 (en) 2011-05-17 2014-04-17 Principia Biophama Inc. Tyrosine kinase inhibitors
CN103582637B (zh) 2011-05-17 2015-08-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 酪氨酸激酶抑制剂
CA2836410C (en) 2011-05-17 2019-08-20 Principia Biopharma Inc. Tyrosine kinase inhibitors
US9376438B2 (en) 2011-05-17 2016-06-28 Principia Biopharma, Inc. Pyrazolopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
ES2693647T3 (es) * 2011-06-06 2018-12-13 Novo Nordisk A/S Anticuerpos terapéuticos
HUE059230T2 (hu) 2011-06-10 2022-10-28 Merck Patent Gmbh Vegyületek és eljárások BTK-inhibitor aktivitású pirimidin és piridin vegyületek elõállítására
BR112013032899A2 (pt) 2011-06-22 2017-01-24 Inserm Inst Nat De La Santé Et De La Rech Médicale anticorpos anti-axl e utilizações dos mesmos
WO2013008095A1 (en) 2011-07-08 2013-01-17 Novartis Ag Novel pyrrolo pyrimidine derivatives
MY193562A (en) * 2011-08-01 2022-10-19 Genentech Inc Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and mek inhibitors
AU2012344260B2 (en) 2011-11-28 2017-09-07 Merck Patent Gmbh Anti-PD-L1 antibodies and uses thereof
US20150210763A1 (en) 2012-02-09 2015-07-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha MODIFIED Fc REGION OF ANTIBODY
US10011660B2 (en) 2012-04-30 2018-07-03 Medimmune, Llc Molecules with reduced effector function and extended half-lives, compositions, and uses thereof
SG11201407190TA (en) 2012-05-15 2014-12-30 Bristol Myers Squibb Co Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
CN115093480A (zh) 2012-05-31 2022-09-23 索伦托药业有限公司 与pd-l1结合的抗原结合蛋白
WO2014007982A2 (en) * 2012-07-03 2014-01-09 Janssen Alzheimer Immunotherapy C-terminal and central epitope a-beta antibodies
CN107892719B (zh) 2012-10-04 2022-01-14 达纳－法伯癌症研究所公司 人单克隆抗-pd-l1抗体和使用方法
WO2014100490A1 (en) * 2012-12-19 2014-06-26 Adimab, Llc Multivalent antibody analogs, and methods of their preparation and use
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
TWI682941B (zh) 2013-02-01 2020-01-21 美商再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
EP3351095A1 (en) * 2013-02-20 2018-07-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals with modified immunoglobulin heavy chain sequences
CA2904377C (en) * 2013-03-15 2021-07-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Il-33 antagonists and uses thereof
JP6204568B2 (ja) 2013-04-25 2017-09-27 ベイジーン，リミテッド タンパク質キナーゼ阻害剤としての縮合複素環化合物
CN105683217B (zh) * 2013-05-31 2019-12-10 索伦托治疗有限公司 与pd-1结合的抗原结合蛋白
CN112552401B (zh) 2013-09-13 2023-08-25 广州百济神州生物制药有限公司 抗pd1抗体及其作为治疗剂与诊断剂的用途
KR20160066554A (ko) 2013-10-25 2016-06-10 파마싸이클릭스 엘엘씨 브루톤 타이로신 키나제 억제제 및 면역요법을 이용한 치료
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
CN110156892B (zh) 2014-07-03 2023-05-16 百济神州有限公司 抗pd-l1抗体及其作为治疗剂及诊断剂的用途
TW201607930A (zh) 2014-07-18 2016-03-01 百濟神州有限公司 作為ｔ７９０ｍ／ｗｔ－ｅｇｆｒ的選擇性和不可逆的激酶抑制劑的５－氨基－４－氨甲醯基－吡唑化合物及其用途
DK3179992T3 (da) 2014-08-11 2022-07-11 Acerta Pharma Bv Terapeutisk kombination af en btk-inhibitor, en pd-1-inhibitor og/eller en pd-l1-inhibitor
EP3180343A1 (en) 2014-08-14 2017-06-21 Assia Chemical Industries Ltd. Solid state forms of ibrutinib
TW201625304A (zh) 2014-10-24 2016-07-16 美國禮來大藥廠 泌尿上皮癌之療法
WO2016087994A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Acerta Pharma B.V. Btk inhibitors to treat solid tumors through modulation of the tumor microenvironment
EP3233103B1 (en) 2014-12-18 2020-10-14 Principia Biopharma Inc. Treatment of pemphigus
MA41265B1 (fr) 2014-12-24 2023-05-31 Principia Biopharma Inc Compositions pour administration de médicaments iléo-jéjunal.
US9139653B1 (en) * 2015-04-30 2015-09-22 Kymab Limited Anti-human OX40L antibodies and methods of treatment
PL3303632T5 (pl) 2015-05-29 2023-07-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Terapeutyczne i diagnostyczne sposoby stosowane w nowotworze
WO2017024465A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
US20190022092A1 (en) 2015-09-15 2019-01-24 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor and a GITR Binding Molecule, a 4-1BB Agonist, or an OX40 Agonist
TW201725044A (zh) 2015-10-01 2017-07-16 基利科學股份有限公司 用於治療癌症之btk抑制劑及查核點抑制劑之組合
EP3481393B1 (en) * 2016-07-05 2021-04-14 Beigene, Ltd. Combination of a pd-1 antagonist and a raf inhibitor for treating cancer
CN116478166A (zh) 2016-08-16 2023-07-25 百济神州(苏州)生物科技有限公司 一种化合物的晶型、其制备和用途
TWI739887B (zh) * 2016-08-19 2021-09-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 使用包含btk抑制劑的組合產品治療癌症
JP6968872B2 (ja) * 2016-08-26 2021-11-17 ベイジーン リミテッド 抗Ｔｉｍ−３抗体
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN110087730B (zh) 2016-09-27 2023-03-28 百济神州(苏州)生物科技有限公司 使用包含parp抑制剂的组合产品治疗癌症
EP3526241A1 (en) 2016-10-14 2019-08-21 Xencor, Inc. Il15/il15r heterodimeric fc-fusion proteins
TWI774726B (zh) 2017-01-25 2022-08-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 (S)-7-(1-(丁-2-炔醯基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醯胺的晶型、及其製備和用途
CA3057749A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
KR20200020902A (ko) * 2017-06-26 2020-02-26 베이진 엘티디 간세포암(hepatocellular carcinoma: HCC)에 대한 면역 치료
US11377449B2 (en) 2017-08-12 2022-07-05 Beigene, Ltd. BTK inhibitors with improved dual selectivity
CN111801334B (zh) * 2017-11-29 2023-06-09 百济神州瑞士有限责任公司 使用包含btk抑制剂的组合治疗惰性或侵袭性b-细胞淋巴瘤
EP3749366A4 (en) * 2018-02-09 2021-11-10 BeiGene, Ltd. IMMUNOTHERAPY FOR UROTHELIAL CARCINOMA
GB201803746D0 (en) 2018-03-08 2018-04-25 Ultrahuman Eight Ltd PD1 binding agents
JP2021517116A (ja) 2018-03-21 2021-07-15 エムイーアイ ファーマ，インク． 併用療法
TW202112376A (zh) 2019-06-10 2021-04-01 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 一種含有布魯頓氏酪胺酸激酶抑制劑的口服固體錠劑及其製備方法
US20220241285A1 (en) 2019-06-10 2022-08-04 Beigene Switzerland Gmbh Oral capsule and preparation method therefor

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
국내공개특허공보 10-2008-0011428 (2008.02.04.)*
국내공개특허공보 10-2010-0054780 (2010.05.25.)*

Also Published As

Publication number Publication date
EP3044234A1 (en) 2016-07-20
CN108715615A (zh) 2018-10-30
KR20160044063A (ko) 2016-04-22
AU2013400609A9 (en) 2020-03-05
WO2015035606A1 (en) 2015-03-19
IL272867B (en) 2021-07-29
EP4130044A1 (en) 2023-02-08
US20150315274A1 (en) 2015-11-05
IL284258B2 (en) 2023-02-01
EP3044234B9 (en) 2020-08-26
IL296026A (en) 2022-10-01
CA3080200A1 (en) 2015-03-19
EA201690567A1 (ru) 2016-08-31
BR112016005408A8 (pt) 2021-11-09
CA2924172A1 (en) 2015-03-19
IL284258B (en) 2022-10-01
ES2792183T3 (es) 2020-11-10
PT3044234T (pt) 2020-05-27
US20230303689A1 (en) 2023-09-28
NZ718643A (en) 2020-02-28
TWI636995B (zh) 2018-10-01
IL244514B (en) 2020-03-31
CN105531288A (zh) 2016-04-27
IL244514A0 (en) 2016-04-21
US9217034B2 (en) 2015-12-22
SG11201601844TA (en) 2016-04-28
AU2020201069B2 (en) 2022-03-24
CN107011441B (zh) 2020-12-01
DK3044234T3 (da) 2020-05-18
EP3702373B1 (en) 2022-08-24
EP3044234A4 (en) 2017-08-09
TW201538525A (zh) 2015-10-16
SI3702373T1 (sl) 2022-11-30
CN112457403A (zh) 2021-03-09
US11673951B2 (en) 2023-06-13
ES2927567T3 (es) 2022-11-08
BR112016005408A2 (pt) 2018-01-16
HUE049281T2 (hu) 2020-09-28
US20200216535A1 (en) 2020-07-09
NL301252I2 (nl) 2024-01-04
CN112552401A (zh) 2021-03-26
US20220119524A1 (en) 2022-04-21
AU2013400609A1 (en) 2016-05-05
NO2023045I1 (no) 2023-12-07
HUS2300041I1 (hu) 2023-12-28
US20180251551A1 (en) 2018-09-06
AU2013400609B9 (en) 2020-03-05
AU2022204171A1 (en) 2022-07-07
LT3702373T (lt) 2022-11-10
CN108715615B (zh) 2020-11-27
PT3702373T (pt) 2022-09-27
CN107090041A (zh) 2017-08-25
DK3702373T3 (da) 2022-09-12
US10519235B2 (en) 2019-12-31
BR112016005408B1 (pt) 2023-03-21
RS63571B1 (sr) 2022-10-31
EP3702373A2 (en) 2020-09-02
HUE060420T2 (hu) 2023-02-28
JP2016533763A (ja) 2016-11-04
CN105531288B (zh) 2020-12-11
CA3078121A1 (en) 2015-03-19
AU2013400609A8 (en) 2016-07-21
AU2013400609B2 (en) 2019-11-14
ZA201601953B (en) 2017-06-28
JP6623353B2 (ja) 2019-12-25
US20180111995A1 (en) 2018-04-26
PL3702373T3 (pl) 2022-12-05
US9988450B2 (en) 2018-06-05
EA034666B1 (ru) 2020-03-04
HRP20221262T1 (hr) 2022-12-09
US8735553B1 (en) 2014-05-27
US20150079109A1 (en) 2015-03-19
FR24C1001I1 (fr) 2024-02-23
AU2020201069A1 (en) 2020-03-05
IL284258A (en) 2021-07-29
CA2924172C (en) 2020-06-30
US9834606B2 (en) 2017-12-05
PL3044234T3 (pl) 2020-10-19
EP3702373A3 (en) 2020-11-11
IL272867A (en) 2020-04-30
US11186637B2 (en) 2021-11-30
EP3044234B1 (en) 2020-03-04
US20210230274A1 (en) 2021-07-29
CN107011441A (zh) 2017-08-04
HK1217501A1 (zh) 2017-01-13
CN107090041B (zh) 2018-11-16
CN112552401B (zh) 2023-08-25
RS63571B9 (sr) 2023-02-28
MX2016003292A (es) 2016-06-24
CN112457403B (zh) 2022-11-29
EP3702373B9 (en) 2022-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11186637B2 (en) Anti-PD1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
JP6800191B2 (ja) 抗ｐｄ−１抗体並びにその治療及び診断のための使用
EA044655B1 (ru) Антитела против pd1 и их применение в качестве терапевтических и диагностических средств

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
A101 Application to extend term of patent right by permit