CN115433187B - 稠合的四环或五环二氢二氮杂䓬并咔唑酮的盐的结晶形式组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本文公开了(R)‑2‑氟‑10a‑甲基‑7,8,9,10,10a,11‑六氢‑5,6,7a,11‑四氮杂环庚并[def]环戊并[a]芴‑4(5H)‑酮的盐及其结晶形式组合物(多晶型物)。本文还公开了制备这些结晶形式组合物的方法以及使用这些结晶形式中的至少一种治疗受试者中对抑制PARP应答的癌症，特别是与BRCA1/2突变体活性或其他HR缺陷相关的癌症的方法。

Description

稠合的四环或五环二氢二氮杂䓬并咔唑酮的盐的结晶形式组 合物及其用途
本申请是申请日为2018年2月27日、中国申请号为201880014315.8、发明名称为“稠合的四环或五环二氢二氮杂䓬并咔唑酮的盐的结晶形式组合物及其用途”的发明申请的分案申请。
技术领域
本文公开了(R)-2-氟-10a-甲基-7,8,9,10,10a,11-六氢-5,6,7a,11-四氮杂环庚并[def]环戊并[a]芴-4(5H)-酮的盐及其结晶形式组合物(多晶型物)。本文还公开了制备这些结晶形式组合物的方法以及使用这些结晶形式组合物中的至少一种治疗受试者中对抑制PARP应答的癌症，特别是与BRCA1/2突变体活性或其他HR缺陷相关的癌症的方法。
背景技术
癌症的特点和驱动力之一是遗传不稳定性[Hanahan D and Weinberg R A,Hallmarks of cancer:the next generation.Cell,2011.144(5):p.646-74.]。特别是在家族性癌症中，乳腺癌易感性BRCA1和BRCA2肿瘤抑制基因中的突变(同源重组(HR)中的关键因素)已与发展乳腺癌或卵巢癌的风险增加相关[Li X and Heyer W D,Homologousrecombination in DNA repair and DNA damage tolerance.Cell Res,2008.18(1):p.99-113.]。正是在该患者群体中多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的抑制剂最近获得关注。PARP家族成员PARP1和PARP2在DNA复制、转录调控和DNA损伤修复中发挥着重要作用[Rouleau M,Patel A,Hendzel M J,et al.,PARP inhibition:PARP1 and beyond.NatRev Cancer,2010.10(4):p.293-301.]。在2005年，两篇突破性的《自然》杂志(Nature)文章表明单独给予的PARP抑制剂可杀死癌细胞，所述癌细胞具有先前存在的DNA修复缺陷，特别是BRCA1/2基因的突变[Bryant H E,Schultz N,Thomas H D,et al.,Specific killingof BRCA2-deficient tumours with inhibitors of poly(ADP-ribose)polymerase.Nature,2005.434(7035):p.913-7；Farmer H,McCabe N,Lord C J,et al.,Targeting the DNA repair defect in BRCA mutant cells as a therapeuticstrategy.Nature,2005.434(7035):p.917-21]。
PARP抑制和突变的BRCA在临床前模型中综合起来是致命的，这暗示了一种简洁的、具有靶向性且毒性最小的治疗患者的方式。
(R)-2-氟-10a-甲基-7,8,9,10,10a,11-六氢-5,6,7a,11-四氮杂环庚并[def]环戊并-[a]芴-4(5H)-酮(下文称为化合物1)作为一种高选择性和强效Parp1/2抑制剂已经被公开，参见WO 2013/097225A1，通过引用将其并入本文。
化合物1有效地抑制细胞内PARP活性并特异性抑制具有BRCA1/2突变或其它HR缺陷的细胞系的增殖。化合物1在比奥拉帕尼(olaparib)低的多的剂量显著诱导BRCA1突变乳腺癌异种移植物模型中的肿瘤消退。化合物1具有卓越的DMPK性质和显著的脑渗透性。
临床前生化研究、基于细胞的研究和动物研究中产生的数据表明化合物1可在抑制具有BRCA基因突变或同源性重组缺陷的肿瘤中提供显著的患者益处。化合物1具有良好脑渗透性且可在更多适应症诸如成胶质细胞瘤中显示出活性。此外，食物效应是与向最近进食的患者给予药物相关的风险。该风险来源于这样的可能性：吸收进入血流可能受到不利影响，以至于患者有吸收不足以补救给药的病症的风险。然而，仍然需要某种形式的化合物1作为活性药物成分(API)，其在物理和化学上是稳定的并且易于处理，并且表现出各种释放要求特性以满足临床要求。
发明内容
本申请的发明人从化合物1的结晶倍半水合物作为起始物质与一些酸的反应获得化合物1的盐，并且发现一些所获得的盐是结晶性的，并且表现出满足各种释放要求的特点溶出分布。发明人发现，化合物1的马来酸盐的一种结晶形式在FaSSIF(约0.2mg/mL)和FeSSIF(约0.5mg/mL)中与化合物1的结晶倍半水合物(分别为<0.1mg/mL和1mg/mL)相比表现出相当的溶解度，表明结晶马来酸盐可用于显著降低食物效应。此外，结晶马来酸盐在生物相关介质中也表现出稳定的溶出分布，表明药物制剂中的延长释放分布。此外，发明人还发现，化合物1的磷酸盐的一种结晶形式和化合物1的富马酸盐的一种结晶形式在生物相关介质中也表现出特定的溶出分布，即，发现它们在第一时间点表现出更高的溶解度，但这些值在平衡较长时间后下降了。
本文公开了(R)-2-氟-10a-甲基-7,8,9,10,10a,11-六氢-5,6,7a,11-四氮杂环庚并[def]环戊并-[a]芴-4(5H)-酮(化合物1)的盐的结晶形式组合物，特别是其磷酸盐组合物、马来酸盐组合物和富马酸盐组合物。本文还公开了制备这些结晶形式组合物的方法，以及使用它们治疗对抑制PARP有响应的癌症的方法。
在第一方面，本文公开了化合物1的盐的结晶形式的组合物，其具有式I，
其中M为H3PO4或马来酸或富马酸，且m为约0.5至约2.0的数。
在第一方面的一个实施方案中，本文公开了化合物1磷酸盐的结晶形式组合物。在一些实施方案中，化合物1磷酸盐的结晶形式组合物为结晶一水合物(即化合物1磷酸盐的结晶形式，下文称为形式A)。
在第一方面的另一个实施方案中，本文公开了化合物1马来酸盐的结晶形式组合物。在一些实施方案中，化合物1马来酸盐的结晶形式组合物为无水非溶剂化结晶形式(即化合物1马来酸盐的结晶形式，下文称为形式B)。
在第一方面的又一个实施方案中，本文公开了化合物1富马酸盐的结晶形式组合物。在一些实施方案中，化合物1富马酸盐的结晶形式组合物为结晶倍半水合物(即化合物1富马酸盐的结晶形式，下文称为形式C2)。
在第二方面，本文公开了制备本文公开的结晶形式组合物的方法。
在第三方面，本文公开了治疗受试者中与BRCA1/2突变体活性或其他HR缺陷相关的疾病、障碍或病症的方法，其通过向受试者给予本文公开的化合物1的盐的结晶形式组合物。在一些实施方案中，所述结晶形式组合物为形式A、形式B或形式C2。在一个实施方案中，所述疾病或障碍或病症为选自以下的癌症：脑癌、肺癌(包括小细胞肺癌)、肾癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、黑素瘤、皮肤癌、肾上腺癌、子宫颈癌、淋巴瘤或甲状腺肿瘤以及它们的并发症。
在第四方面，本文公开了本文公开的化合物1的盐的结晶形式组合物在制备用于治疗与BRCA1/2突变体活性或其他HR缺陷相关的疾病、障碍或病症的药物中的用途。在一些实施方案中，所述结晶形式组合物为形式A、形式B或形式C2。在一个实施方案中，所述疾病或障碍或病症为选自以下的癌症：脑癌、肺癌(包括小细胞肺癌)、肾癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、黑素瘤、皮肤癌、肾上腺癌、子宫颈癌、淋巴瘤或甲状腺肿瘤以及它们的并发症。
附图说明
图1A示出化合物1的结晶倍半水合物的XRPD图。
图1B示出化合物1的结晶倍半水合物的TGA/DSC曲线。
图1C示出化合物1的结晶倍半水合物的1H-NMR。
图2A示出形式A的XRPD图。
图2B示出形式A的TGA/DSC曲线。
图2C示出加热(170℃)之前和之后形式A的XRPD图叠加。
图2D示出加热(170℃)后的形式A的TGA/DSC曲线。
图3A示出形式B的XRPD图。
图3B示出形式B的TGA/DSC曲线。
图3C示出形式B的1H-NMR。
图3D示出加热(150℃)之前和之后形式B的XRPD图叠加。
图3E示出加热(150℃)后的形式B的TGA/DSC曲线。
图4A示出形式C1的XRPD图。
图4B示出形式C1的TGA/DSC曲线。
图4C示出形式C1的1H-NMR。
图5A示出实施例4的形式C2的XRPD图。
图5B示出实施例4的形式C2的TGA/DSC曲线。
图5C示出实施例4的形式C2的1H-NMR。
图6A示出实施例5的形式C2的TGA/DSC曲线。
图6B示出实施例5的形式C2的1H-NMR。
图6C示出实施例5的形式C2的VT-XRPD图叠加。
图6D示出储存(在实施例5中)之前和之后形式C3的XRPD图叠加。
图7A-7D示出形式A、形式B、形式C2在室温(25±3℃)的动力学溶解度曲线。
具体实施方式
定义
除非在本文件的其他地方具体定义，否则本文使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。
如本文(包括所附权利要求)所用，除非上下文另外明确指出，否则词语诸如“一 个”、“一种”和“该”的单数形式包括其相应的复数指代。例如，提及“结晶形式”包括一种或多种这样的不同结晶形式，并且提及“方法”包括提及本领域普通技术人员已知的可对本文所述的方法进行修改或替换的等同步骤和方法。
如本文所公开的，结晶形式是大致纯的结晶。如本文所用，术语“大致纯的”是指所述结晶形式的至少85wt％，优选至少95wt％，更优选至少99wt％。
对于本文公开的晶体形式，仅总结主峰(即最具特征的、显著的、独特的和/或可再现的峰)；通过常规方法从衍射光谱可以获得额外的峰。本文所公开的主峰可以在误差界限内重现(在最后给定的小数位±2，或在规定值±0.2)。
如本文所公开的，提及表述诸如“基本上与图2A一致的X射线粉末衍射图”是指显示如图2A中的主要峰的X射线粉末衍射图，其中主要峰是指相对于图2A中的最高峰(其相对强度指定为100％)，相对强度大于10％，优选大于20％的峰。
在整个说明书和随后的权利要求书中，除非上下文另有要求，否则词语“包含”以及诸如“包括”和“含有”的变型将被理解为暗示包含所述整数或步骤或者整数或步骤的组，但不排除任何其他整数或步骤或者整数或步骤的组。当在本文中使用时，术语“包含”可以用术语“含有”代替或者有时当在本文中用术语“具有”代替。
本文使用的术语“治疗有效量”是指当给予受试者以治疗疾病或者疾病或病症的至少一种临床症状时足以实现对疾病、障碍或病症的这种治疗的化合物的量。“治疗有效量”可随化合物，疾病、病症和/或疾病或病症的症状，疾病、病症的严重程度，和/或疾病或病症的症状，待治疗的受试者的年龄和/或待治疗的受试者的体重而变化。在任何给定情况下适当的量对于本领域技术人员来说是显而易见的，或者可以通过常规实验确定。在组合疗法的情况下，“治疗有效量”是指用于有效治疗疾病、障碍或病症的组合对象的总量。
包含本文公开的化合物的药物组合物可以通过口服、吸入、经直肠、肠胃外或局部给药给予有此需要的受试者。对于口服给药，药物组合物可以是常规的固体制剂诸如片剂、粉剂、颗粒、胶囊等，液体制剂诸如水或油混悬液或其他液体制剂诸如糖浆、溶液、混悬液等；对于肠胃外给药，药物组合物可以是溶液、水溶液、油混悬浓缩物、冻干粉末等。优选地，药物组合物的制剂选自片剂、包衣片剂、胶囊、栓剂、鼻喷雾剂或注射剂，更优选片剂或胶囊。药物组合物可以是具有精确剂量的单一单位给药。产物，药物组合物还可以包含另外的活性成分。
本文公开的药物组合物的所有制剂可以通过制药领域中的常规方法制备。例如，活性成分可以与一种或多种赋形剂混合，然后制成所需的制剂。“药学上可接受的赋形剂”是指适用于所需药物制剂的常规药物载体，例如：稀释剂；媒介物，诸如水、各种有机溶剂等；填充剂，诸如淀粉、蔗糖等；粘合剂，诸如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；润湿剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂，诸如季铵化合物；表面活性剂，诸如十六烷醇；吸收载体，诸如高岭土和皂土；润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙二醇等。此外，药物组合物还包含其他药学上可接受的赋形剂，诸如分散剂、稳定剂、增稠剂、络合剂、缓冲剂、渗透促进剂、聚合物、芳香剂、甜味剂和染料。
术语“疾病”是指任何疾病、不适、病患、症状或适应症，并且可以与术语“障碍”或“病症”互换。
如本文所公开的，“受试者”是指人类或非人类动物。
以下技术用于鉴定、表征或分析结晶形式：X射线粉末衍射(XRPD)图、TGA和DSC、核磁共振(NMR)、色谱技术诸如HPLC和离子色谱(IC)法。
在PANalytical Empyrean X射线粉末衍射仪上产生如图1A、2A、2C、3A、3D、4A、5A、6C和6D所示的X射线粉末衍射(XRPD)图。表1列出了所用的XRPD参数。
表1 XPRD测试的参数
在来自TA Instruments的TA Q200/Q2000 DSC上产生如图1B、2B、2D、3B、3E、4B、5B和6A所示的差示扫描量热(DSC)。在来自TA Instruments的TA Q500/Q5000 TGA上产生如图1B、2B、2D、3B、3E、4B、5B和6A所示的热重分析(TGA)。表2列出了所用的DSC和TGA的详细参数。
表2 TGA和DSC测试的参数
参数 TGA DSC
方法 梯度升温法(Ramp) 梯度升温法(Ramp)
样品盘 铝，开放式 铝，卷曲式
温度 室温-期望温度 25℃-期望温度
加热速率 10℃/min 10℃/min
吹扫气体 N2 N2
在Bruker 400M NMR光谱仪上使用DMSO-d6收集如图1C、3C、4C、5C和6B所示的核磁共振(NMR)。
采用Agilent 1100HPLC并且表3列出了用于化学计量比测量的详细色谱条件。
表3色谱条件和参数
表4列出了用于确定化学计量比的抗衡离子含量测量的离子色谱(IC)法。
表4用于Cl-、SO42-和PO43-含量测量的IC法
参数 IC
柱 IonPac AS18分析柱(4×250mm)
流动相 25mM NaOH
注入体积 25μL
流速 1.0mL/min
池温度 35℃
柱温度 35℃
电流 80mA
运行时间 6.0min(Cl-),12min(SO4 2-),28.0min(PO4 3-)
在一个方面，本文公开了化合物1的盐的结晶形式组合物，其具有式I，
其中M为H3PO4或马来酸或富马酸，且m为约0.5至约2.0的数。在一些实施方案中，m为约0.8至约1.2的数；优选约0.9至约1.1的数；更优选约1.0的数。
化合物1磷酸盐的结晶形式组合物(形式A)
在第一方面的一个实施方案中，本文公开了化合物1的磷酸盐的结晶形式组合物(形式A)，
在一些实施方案中，化合物1磷酸盐的结晶形式为大致纯的。
在一些实施方案中，形式A为结晶一水合物。
在一些实施方案中，形式A特征在于X射线粉末衍射图包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.5±0.2°、10.2±0.2°和25.2±0.2°；
优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.5±0.2°、10.2±0.2°、13.7±0.2°、20.6±0.2°和25.2±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.5±0.2°、10.2±0.2°、13.4±0.2°、13.7±0.2°、19.5±0.2°、20.6±0.2°、25.2±0.2°和27.6±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.5±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、13.4±0.2°、13.7±0.2°、18.9±0.2°、19.5±0.2°、20.6±0.2°、25.2±0.2°、26.9±0.2°和27.6±0.2°。
在一些实施方案中，形式A具有表5中总结的X射线粉末衍射图。
表5形式A的X射线衍射图
在一些实施方案中，形式A具有基本上与图2A一致的X射线粉末衍射图。
优选地，形式A具有基本上与图2B一致的DSC，和/或具有基本上与图2B一致的TGA。
化合物1马来酸盐的结晶形式组合物(形式B)
在第一方面的另一个实施方案中，本文公开了化合物1的马来酸盐的结晶形式组合物(形式B)，
在一些实施方案中，化合物1马来酸盐的结晶形式为大致纯的。
在一些实施方案中，形式B为无水非溶剂化的结晶形式。
在一些实施方案中，形式B特征在于X射线粉末衍射图包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.3±0.2°、10.0±0.2°、14.1±0.2°和25.0±0.2°；
优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.3±0.2°、10.0±0.2°、14.1±0.2°、17.8±0.2°、19.2±0.2°和25.0±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.3±0.2°、10.0±0.2°、12.8±0.2°、14.1±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、19.2±0.2°、19.5±0.2°、25.0±0.2°、26.1±0.2°和28.2±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.3±0.2°、10.0±0.2°、12.8±0.2°、14.1±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、19.2±0.2°、19.5±0.2°、25.0±0.2°、26.1±0.2°、28.2±0.2°和29.3±0.2°。
在一些实施方案中，形式B具有表6中总结的X射线粉末衍射图。
表6形式B的X射线衍射图
在一些实施方案中，形式B具有基本上与图3A一致的X射线粉末衍射图。
优选地，形式B具有基本上与图3B一致的DSC，和/或具有基本上与图3B一致的TGA。
化合物1富马酸盐的结晶形式组合物(形式C1、C2和C3)
在第一方面的又一个实施方案中，本文公开了化合物1的富马酸盐的结晶形式组合物(即化合物1富马酸盐的结晶形式)，
在一些实施方案中，所述化合物1富马酸盐组合物具有三种结晶形式(下文称为形式C1、C2和C3)。
在一些实施方案中，化合物1富马酸盐的结晶形式组合物为形式C1，其具有表7中总结的X射线粉末衍射图。
表7形式C1的X射线衍射图
在一些实施方案中，形式C1为水合物。
在一些实施方案中，形式C2为倍半水合物。
在一些实施方案中，化合物1富马酸盐的结晶形式组合物为形式C2，其特征在于X射线粉末衍射图包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.8±0.2°和24.3±0.2°；
优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°和24.3±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°和28.4±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、20.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、19.12±0.2°、20.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.1±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、16.8±0.2°、18.2±0.2°、19.12±0.2°、20.2±0.2°、22.8±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、26.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°；
更优选包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰：约6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.1±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、16.8±0.2°、17.7±0.2°、18.2±0.2°、19.12±0.2°、20.2±0.2°、22.8±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、26.3±0.2°、26.7±0.2°、27.8±0.2°、28.4±0.2°和29.5±0.2°。
在一些实施方案中，形式C2具有表8中总结的X射线粉末衍射图。
表8形式C2的X射线衍射图
在一些实施方案中，形式C2具有基本上与图5A一致的X射线粉末衍射图。
优选地，形式C2具有基本上图5B与一致的DSC，和/或具有基本上与图5B一致的TGA。
制备结晶形式组合物的方法
本文还公开了制备化合物1的盐的结晶形式组合物的方法，包括将化合物1的结晶倍半水合物及其酸或其酸酐于溶剂中的混悬液在一定温度浆化一定的持续时间来获得期望的结晶形式。
在一些实施方案中，化合物1的结晶倍半水合物和酸的摩尔比为约1。在一些实施方案中，所述酸为H3PO4或马来酸或富马酸或其酸酐。在一些实施方案中，所述溶剂为乙酸乙酯、丙酮、乙腈、异丙醇/H2O(19:1,v:v)或其混合物。在一些实施方案中，浆化的温度为室温(25±3℃)。在一些实施方案中，浆化的持续时间为约1小时至3天或更长；优选约1天至3天。在一些实施方案中，所述结晶形式组合物为形式A、形式B、形式C1或形式C2。在一些实施方案中，所述溶剂为丙酮、ACN或异丙醇/H2O(19:1,v:v)，并且所述结晶形式组合物为形式A。在一些实施方案中，所述溶剂为丙酮、ACN或异丙醇/H2O(19:1,v:v)，并且所述结晶形式组合物为形式B。在一些实施方案中，所述溶剂为异丙醇/H2O(19:1,v:v)，并且所述结晶形式组合物为形式C2。在一些实施方案中，所述方法进一步包括：在浆化之前或期间向所述混悬液中添加期望的结晶形式的晶种。在一些实施方案中，浆化伴随着搅拌混悬液。在一些实施方案中，通过将溶剂添加至化合物1的结晶倍半水合物及其酸或酸酐的混合物中来形成混悬液。
实施例
通过以下说明本发明的实施例进一步举例说明本发明，但不限于此。在本发明的实例中，除非另有明确说明，否则所述技术或方法是本领域中的常规技术或方法。
实施例1：化合物1的结晶倍半水合物的制备
化合物1的结晶倍半水合物公开于未公布的PCT申请PCT/CN2016/096200中，通过引用将其整个内容并入本文。
方案1：大规模合成化合物1(游离碱)的方法
将溴乙酸叔丁酯(51.7Kg)溶于无水乙腈(72Kg)中。将温度升至65-75℃，然后添加甲基吡咯啉(22Kg)。反应完成后将反应混合物浓缩，通过添加THF然后浓缩除去残余的乙腈。GC显示完全除去乙腈后，添加更多THF并搅拌。过滤并收集所得固体。获得44.1Kg灰白色固体化合物-2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.91(s,2H),4.15(m,2H),3.29(m,2H),2.46(s,3H),),2.14(m,2H),1.46(s,9H)ppm。
步骤2：化合物-3的合成
向三甲基甲硅烷基乙炔(12.4Kg)于THF中的冷(-60℃)溶液中添加正丁基锂(43.4Kg)于己烷中的溶液。完成添加正丁基锂溶液后，将所得混合物再搅拌1-2h，然后将全部溶液转移至在-60℃冷却的化合物-2(31Kg)于THF中的混悬液中。转移完成后，将所得混合物温热至室温并搅拌1h。将反应混合物用水淬灭，用石油醚萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩得到25.1Kg化合物-3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.34(d,J＝16.0Hz,1H),3.15(m,1H),2.78(d,J＝16.0Hz,1H),2.27(m,1H),1.93(m,1H),1.68(m,3H),1.41(s,9H),1.24(s,3H),0.13(s,9H)ppm。
步骤3：化合物-4的合成
向70.1Kg化合物-3于THF中的冷(0-5℃)溶液中添加四丁基氟化铵(13.3Kg)于THF中的溶液。脱甲硅烷基化完成后，用水淬灭反应混合物，用石油醚(290Kg)萃取并将有机相浓缩且通过硅胶垫。浓缩滤液得到48Kg化合物-4。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.36(d,J＝16.0Hz,1H),3.15(m,1H),2.82(d,J＝16.0Hz,1H),2.28(m,1H),1.97(m,1H),1.70(m,3H),1.41(s,9H),1.26(s,3H)ppm。
步骤4：化合物-5的合成
将化合物-4(48Kg)于THF中的溶液温热至50-60℃。向上述溶液中添加(-)-二-对甲基苯甲酰基-L-酒石酸(69.6Kg)于THF中的溶液。将所得混合物在50-60℃搅拌1-2h，然后逐渐冷却至0-10℃。将所得盐固体过滤并重新混悬于甲基叔丁基醚中且在50-60℃加热1h。将混合物逐渐冷却至0-5℃。过滤所得固体得到13.1Kg灰白色固体。将固体用氢氧化钠水溶液处理，用石油醚萃取，浓缩得到13.1Kg化合物-5(ee≥96％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.36(d,J＝16.0Hz,1H),3.15(m,1H),2.82(d,J＝16.0Hz,1H),2.29(m,1H),1.97(m,1H),1.70(m,3H),1.41(s,9H),1.26(s,3H)ppm。
步骤5：化合物-6的合成
将中间体B(14Kg)、二(三苯基)二氯化钯(0.7Kg)、CuI(0.42Kg)和四甲基胍(11.5Kg)溶于DMF(48.1Kg)中。搅拌所得溶液并脱气，然后在氮气下加热。滴加化合物-5(9.24Kg)于DMF(16Kg)中的溶液。冷却后，浓缩有机相，残余物与水(145Kg)和甲基叔丁基醚(104Kg)搅拌，使全部混合物通过硅藻土垫，分离。将有机相用硫脲(14Kg)于水(165kg)和盐水(100Kg)中的溶液洗涤，浓缩。将残余物溶于正庚烷(120Kg)和乙酸乙酯(28Kg)的混合物中。将溶液与炭(1.4kg)混合，在40-50℃加热1-2h，经硅胶垫过滤。浓缩滤液得到化合物-6固体(14.89Kg)和液体滤液(13Kg庚烷溶液，含1.24Kg化合物-6)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(d,J＝9.6Hz,1H),7.55(m,3H),7.32(m,2H),3.87(s,3H),3.37(d,J＝16.0Hz,1H),3.22(m,1H),2.94(d,J＝16.0,Hz,1H),2.60(m,1H),2.48(m,1H),2.29(s,3h),2.26(m,1H),1.82(m,2H),1.49(s,3H),1.43(s,9H)ppm。
步骤6：化合物-7的合成
将上述化合物-6的庚烷溶液加至冷的三氟甲磺酸(66.1Kg)中，同时保持内部温度低于25℃。然后分批添加固体化合物-6(14.87Kg)。完成添加化合物-6后，将反应混合物温热至25-30℃并搅拌直至反应完成。将全部混合物倾入乙酸钠(123.5Kg)于水(240Kg)中的溶液中。然后通过添加固体碳酸钾(46.1Kg)将溶液的调节至pH 7-8。用二氯甲烷(509Kg)萃取残余物，浓缩。将残余物与正庚烷(41Kg)混合，再浓缩，得到析出物，将析出物过滤并用正庚烷(8Kg)洗涤且干燥。获得8.78Kg化合物-7。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,1H),7.35(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),7.08(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),3.79(s,3H),3.68(d,J＝17.2Hz,1H),3.21(d,J＝17.2Hz,1H),3.06(m,1H),2.68(m,1H),1.96(m,1H),1.74(m,1H),1.49(s,3H)ppm。
步骤7：化合物1-粗品1的合成
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将化合物-7(8.76Kg)溶于甲醇(69Kg)中并内部冷却低于25℃。添加乙酸(9.3Kg)和水合肼(7.4Kg,85％)，同时保持内部温度低于25℃。脱气并用氮气再充填(重复三次)后，将反应混合物在55-60℃搅拌4h。反应完成后，将混合物与水(29Kg)混合。将有机相浓缩并添加碳酸钾(12.5Kg)于水(40Kg)中的溶液。将所得固体过滤，用水(18.3Kg)洗涤。将固体用水(110Kg)浆化，离心，干燥并用乙醇(9.4Kg)浆化，离心，用乙醇洗涤，真空干燥，得到化合物1-粗品1(7.91Kg)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.0(s,1H),10.2(s,1H),7.31(dd,1H,J＝9.6,2.0Hz),7.19(dd,1H,J＝9.6,2.0Hz),3.77(d,1H,J＝16.4Hz),3.34(d,1H,J＝16.4Hz),2.97-3.02(m,1H),2.54-2.58(m,1H),2.35-2.40(m,1H),1.90-1.94(m,1H),1.73-1.75(m,1H),1.47(s,3H),1.43-1.45(m,1H)ppm.MS(ESI)m/e[M+1]+299。
步骤8：化合物1-粗品2的合成
在氮气保护下，将化合物1(粗品1)(7.88Kg)与异丙醇(422Kg)搅拌并在70-80℃加热1-2h直至固体完全消失。添加(+)-二-对甲基苯甲酰基-D-酒石酸(10.25Kg)于异丙醇(84.4Kg)中的溶液。将混合物搅拌14-16h，过滤并用异丙醇(16Kg)洗涤，干燥。将所得盐加至碳酸钾(6.15Kg)于水(118Kg)中的经搅拌溶液中。将析出物离心，过滤，用水(18Kg)洗涤。将固体用水(110Kg)浆化，离心，干燥。将固体溶于THF(75Kg)中，添加活性炭(0.8Kg)。将混合物脱气，再用氮气保护，搅拌并在40-45℃加热1-2h，冷却，经硅藻土过滤，浓缩，得到固体，其进一步用乙醇(6.5Kg)浆化，过滤，得到5.6Kg化合物1粗品2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.0(s,1H),10.2(s,1H),7.31(dd,1H,J＝9.6,2.0Hz),7.19(dd,1H,J＝9.6,2.0Hz),3.77(d,1H,J＝16.4Hz),3.34(d,1H,J＝16.4Hz),2.97-3.02(m,1H),2.54-2.58(m,1H),2.35-2.40(m,1H),1.90-1.94(m,1H),1.73-1.75(m,1H),1.47(s,3H),1.43-1.45(m,1H)ppm.MS(ESI)m/e[M+1]+
步骤9：化合物1的结晶倍半水合物的制备
将化合物1-粗品2(5.3Kg)与异丙醇(41.6Kg)和水(15.9Kg)的溶液混合。将混合物脱气并在氮气下再进行保护，然后加热至60℃并搅拌2-4h直至固体完全溶解。将温度升至70-80℃并添加水(143Kg)。将所得混合物加热至内部温度为70-80℃，然后停止加热，但轻微搅拌16h。将析出物过滤，用水(19Kg)洗涤并用水(21kg)浆化2h。将所得固体过滤，用水(20Kg)洗涤。将经过滤的固体在低于45℃的温度干燥24-36h，获得晶体产物(4.22kg)。
图1A的XRPD图证实所得化合物1的结晶倍半水合物的结晶形式。化合物1的结晶倍半水合物的TGA/DSC曲线示于图1B中，其中在约60℃失去0.5个水分子并且在100℃失去1.0个水分子，证实结晶形式中水的摩尔数为1.5。化合物1的结晶倍半水合物的1H-NMR示于图1C中。
化合物1的结晶倍半水合物的定量元素分析示于表9中。实测的和计算的C、H、N含量的绝对差值低于0.3％并与其分子式C16H15FN4O·1.5H2O一致。分析一式两份进行。
表9：化合物1结晶倍半水合物的定量元素分析
分析 理论值(％) 实测值(％) 绝对差值(％)
C 59.07 59.05 0.02
H 5.58 5.59 0.01
N 17.22 17.48 0.26
实施例2：化合物1磷酸盐的结晶形式(形式A)的制备
将23.0μL的浓H3PO4(85％)用3.0 mL的异丙醇/H2O(19:1,v:v)稀释，然后添加至20mL玻璃小瓶中约100 mg的化合物1的结晶倍半水合物中。将所得混合物或混悬液在室温浆化约1天，以获得104.5 mg的期望结晶形式(产率79.0％)。
根据HPLC/IC的结果，形式A的化学计量比(酸/化合物1)为1.0。XRPD图用于表征形式A；参见图2A。
图2B中的TGA/DSC曲线显示，在150℃之前重量损失5.5％，伴随多次热事件，然后在239.2℃(起始温度)急剧放热。形式A在加热至170℃并且在环境条件冷却后如XRPD图所示没有观察到形式变化；参见图2C。图2D中的加热后的样品的TGA/DSC曲线显示，在150℃之前，两步重量损失为1.2％和4.2％，在分解之前具有多个热事件，这与初始形式A样品相似，表明形式A为水合物，其中结合的水含量接近一水合物的计算的含水量(4.3％)。
实施例3：化合物1马来酸盐的结晶形式(形式B)的制备
将3.0 mL的异丙醇/H2O(19:1,v:v)添加至20 mL玻璃小瓶中的约200 mg的化合物1的结晶倍半水合物和马来酸(1.0摩尔当量)中以形成混悬液，将其在室温浆化约1天，得到255.4 mg的期望结晶形式(产率91.9％)。
XRPD图用于将产物表征为形式B。图3B中的TGA/DSC曲线显示出在160℃之前5.3％的重量损失和在131.8℃(峰值温度)处的小吸热，推测这是由去除残余溶剂(0.1摩尔当量异丙醇,1.4％)和马来酸(熔点约135℃)引起的。
通过溶液NMR检测形式B的化学计量比(酸/化合物1)为1.1，参见图3C。
形式B在加热至150℃并在环境条件冷却后如XRPD图所示没有观察到形式变化；参见图3D。图3E中的TGA/DSC曲线显示出在分解之前轻微的重量损失并且没有观察到热信号。与TGA/DSC和溶液NMR的结果相关，形式B被证实为无水物。
实施例4：化合物1富马酸盐的结晶形式(形式C2)的制备
将化合物1的结晶倍半水合物的THF溶液(约25mg)添加至1.5mL小瓶中并在室温蒸发至干。将约9.8mg的富马酸和0.4mL的异丙醇/H2O(19:1,v/v)添加至小瓶中并在室温搅拌2天。通过离心分离期望的结晶。
XRPD图用于表征形式C2；参见图5A。
图5B中的TGA/DSC曲线显示出在213.6℃(峰温度)分解之前在高达150℃时5.8％的重量损失和在132.7℃的宽吸热峰，这表明形式C2被推测为水合物形式。
通过1H NMR谱确定形式C2的化学计量比(酸/化合物1)为1.0；参见图5C。
有趣的是，发明人发现，当上述溶剂(异丙醇/H2O)变为EtOAC或丙酮时，获得不同的晶形(称为形式C1)。形式C1的XRPD图示于图4A中。形式C1的TGA/DSC曲线示于图4B中，其中在191.9℃(峰温度)分解之前，形式C1在100℃显示4.0％的重量损失，且在110.1℃具有宽吸热峰。另外，通过图4C所示的1H NMR谱，形式C1的化学计量比被确定为1.1。形式C1也被推测为水合物。与形式C1相比，形式C2表现出更高的脱水温度和更规则的热信号。
如下表所示，还研究了用于浆化的溶剂对所得结晶形式的影响。
*对于所有酸而言，化合物1和酸的摩尔比均为1:1。
实施例5：化合物1富马酸盐的结晶形式(形式C2)的可选择制备
将3.0mL的异丙醇/H2O(19:1，v:v)添加至20mL玻璃小瓶中的约200mg的化合物1的结晶倍半水合物和富马酸(1.0摩尔当量)中以形成混悬液，将其在室温浆化1天，然后将实施例4中制备的结晶形式(形式C2)作为晶种添加至玻璃小瓶中，再在室温浆化2天，获得254.2mg的期望结晶形式(产率91.5％)。
所得固体的XRPD图与图5A的一致，也称为形式C2。图6A中的TGA/DSC曲线显示在120℃之前两步重量损失为1.1％和6.1％，其中在115.2℃(起始温度)具有宽吸热，随后分解。根据NMR的结果，形式C2的化学计量比(酸/游离碱)为1.0；参见图6B。
为了确认形式C2在加热期间的形式变化，在氮气保护下进行VT-XRPD。结果表明，在将形式C2加热至140℃并用N2流冷却回到30℃后，观察到一种名为形式C3的新形式(参见图6C)，并在暴露于环境条件(约25℃/70％RH)1小时后转换回形式C2(参见图6D)。与VT-XRPD结果相关，形式C2被推测为水合物，倍半水合物的理论含水量为6.1％，且在环境条件下具有良好的物理稳定性。
实施例6：理化性质测试
进一步研究本文制备的形式A、B和C2的固态稳定性、溶解度/溶出度和吸湿性。
I.固态稳定性测试
每种样品(形式A、B或C2)暴露于25℃/60％RH和40℃/75％RH的两种条件。储存一周后，所有样品通过XRPD进行表征以测试任何固体形式变化，并通过HPLC进行表征以检查纯度变化。如表10所示，没有观察到任何盐的固体形式或HPLC纯度变化，表明在测试条件下本文公开的结晶形式具有良好的物理和化学稳定性。
表10一周的稳定性评价
II.动力学溶解度测试
将约20mg的每种样品(形式A、B或C2)在注入每个4mL塑料小瓶中的3.0mL三种生物相关介质(即禁食状态小肠液(FaSSIF)、进食状态模拟肠液(FeSSIF)和模拟胃液(SGF))中或H2O中平衡。在室温通过研磨(25rpm)混合混悬液，每个混悬液分别在1小时、4小时和24小时结束时取样。本文公开的结晶形式的动力学溶解度曲线显示在图7A-7D中。
与化合物1的结晶倍半水合物相比，所有三种盐均在水中显示改善的溶解度，但在SGF中显示较小的溶解度。形式B在FaSSIF(约0.2mg/mL)和FeSSIF(约0.5mg/mL)中观察到稳定的溶出速率和可比的溶解度，表明食物效应显著降低。另一方面，形式B的特定稳定的溶出分布也表明其在延长释放制剂中的潜在用途。形式B的固体即使在媒介物中混悬长达24小时后也是物理稳定的。对于形式A和形式C2，在第一时间点在FaSSIF和FeSSIF中观察到良好的溶解度，但是在平衡较长时间后这些值下降，这可能是由固体形式变化引起的。
III.吸湿性测试
为了研究作为湿度函数的固体形式稳定性，收集DVS等温线图(25℃)和XRPD图，参见表11。推测解吸附和吸附之间的摄取百分比差异与水分代替可能的残余溶剂有关。
表11 DVS结果
*：从吸附循环的水摄取得出结论。
化合物1对BRCA1/2突变体活性的功效可在未公开的PCT申请PCT/CN2016/096200中找到，其全部内容通过引用并入本文。
测试1：化合物1的结晶倍半水合物对多聚(ADP-核糖基)化(PAR化)酶的抑制和选择性
通过使用市售的PARP1/2化学发光测定试剂盒(Chemiluminescent Assay Kit)(BPS Bioscience Inc.)确定化合物1倍半水合物在抑制PARP1、PARP2、TNKS1和TNKS2的多聚(ADP-核糖基)化(PAR化)活性方面的生化效能，并从杆状病毒感染的Sf9细胞中表达且纯化经GST标签的酶(参见用于酶构建物的表12)。PARP1和PARP2酶来自测定试剂盒，而TNKS1和TNKS2酶是自制的(produced in-house)。根据厂商的说明书进行该测定。简言之，将H2A和H2B蛋白固定在板的表面上，然后与连续稀释的化合物和靶标酶孵育0.5小时。然后，向孔中添加生物素化的NAD和DNA(对于TNKS1或TNKS2不需要DNA)以启动反应。通过添加链霉亲和素(streptavidin)-HRP和HRP底物后的化学发光，测量生物素化的PAR化产物。使用Graphpad Prism软件将剂量-响应％抑制数据拟合至四参数逻辑模型，获得化合物1倍半水合物的IC50。
表12总结了化合物1倍半水合物针对PARP1、PARP2、TNKS1和TNKS2酶的IC50。如表12中所示，化合物1倍半水合物有效地抑制PARP1和PARP2的催化活性，其中IC50分别为1.3和0.92nM。在对TNKS1和TNKS2的抑制作用中，其比对PARP1或PARP2的抑制作用弱超过100倍。
表12：生化测定中通过化合物1倍半水合物抑制PARP
酶 化合物1倍半水合物的IC50
全长PARP1 1.3±0.058nM(n＝3)
PARP2(aa2-583) 0.92nM
TNKS1(aa1021-1327) 0.23μM
TNKS2(aa667-1166) 0.14μM
n：测定的次数；未指定时n＝1。
测试2：细胞内靶标抑制
HeLa细胞获赠于国家生物科学研究所(National Institute of BiologicalSciences(北京))并保存于补充有胎牛血清(10％FBS)、100单位/mL青霉素和0.1mg/mL链霉素的DMEM中且在95％湿度和5％CO2保持于37℃培养箱中。经由过氧化氢(H2O2)孵育后，诱导细胞内PARP活性并提高内源性PAR水平。如下进行该测定：
将细胞以5000个细胞/孔(100μL)的密度接种于具有透明底和黑色壁的96孔板中。将板在37℃在5％CO2气氛下孵育4小时，然后与特定浓度(通常为0.01nM-10μM)的受试化合物孵育。翌日，添加H2O2于PBS中的溶液(终浓度200μM)并将板在37℃保持5分钟。然后通过板翻转轻微地除去培养基，并用冰冷的MeOH在-20℃将细胞固定20分钟。除去固定液并用PBS的重复洗涤后，添加检测缓冲液(50μL/孔,含有PBS、Tween(0.1％)和BSA(1mg/mL))以及初级PAR mAb(Alexis ALX-804-220,1:2000)、二级抗-小鼠Alexa Fluor 488抗体(MolecularProbes A11029,1:2000)和核染料DAPI(Molecular Probes D3571,150nM)并在4℃在暗处孵育过夜。除去溶液并用PBS重复洗涤后，通过ArrayScan VTI(ThermoFisher)评估PAR多聚物水平。在增加的PARP抑制剂浓度存在下基于残余酶活性确定抑制百分比。通过使用XLfit软件将剂量依赖性数据拟合至四参数逻辑模型来计算IC50值。
在这些条件下，化合物1的结晶倍半水合物抑制细胞内PAR形成，其中IC50为0.24nM，并且比维利帕尼和奥拉帕尼(其所具有的细胞PAR形成IC50分别为2.66nM和0.47nM)更有效。
表13：过氧化氢预处理的HELA细胞中对细胞PAR形成的抑制。
PAR化测定中的IC50(nM)
奥拉帕尼 0.47±0.13(n＝10)
维利帕尼 2.66±0.66(n＝10)
化合物1倍半水合物 0.24±0.10(n＝10)
测试3：癌细胞杀死的合成致死性
将非BRCA基因突变或其它同源性重组缺陷的MDA-MB-231细胞保存于补充有胎牛血清(10％FBS)、100单位/ml青霉素0.1mg/ml链霉素的DMEM中。将BRCA1-缺陷的细胞系MDA-MB-436保存于补充有10％FBS、100单位/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素的RPMI-1640中。在95％湿度和5％CO2将两种细胞系保持于37℃培养箱中。
针对每个细胞系使96孔板中每孔所接种的肿瘤细胞数目最优化以确保历经7天治疗期的对数生长。使细胞贴壁16小时，然后用特定浓度的受试化合物处理。使化合物暴露7天后，使用CellTiter-Glo发光细胞存活力测定(Promega)确定化合物的生长抑制活性。使用PHERAstar FS读取器(BMG Labtech)测量发光信号。细胞存活力以相对于模拟治疗对照(mock treatment control)表示。通过使用XLfit软件将剂量依赖性数据拟合至四参数逻辑模型来计算生长抑制的EC50值。
在这些条件下，MDA-MB-231(其BRCA基因为野生型)对于EC50为约9μM的化合物1相对耐药。相比之下，BRCA1缺陷的肿瘤细胞系(MDA-MB-436)对化合物1极度敏感。在受试的肿瘤细胞中，化合物1显示比维利帕尼更有效且与奥拉帕尼类似。
表14：具有BRCA1或BRCA2突变的肿瘤细胞的选择性杀死
测试4：化合物1的结晶倍半水合物的体内药理学
在携带皮下人MDA-MB-436(BRCA1突变体)乳腺癌的BALB/c裸鼠中评价化合物1对PARP的体内药效学(PD)活性。此外，在该异种移植物模型中探讨血浆和肿瘤组织中化合物1浓度(PK,药代动力学)与其对PAR化的作用(PD,药效学)之间的关系。在小鼠的MDA-MB-436乳腺癌异种移植物中，口服给予化合物1引起PAR化的时间依赖性和剂量依赖性抑制。肿瘤组织中PAR化的抑制与化合物1的肿瘤药物浓度相关性良好。在以0.34mg/kg或更高的单一口服剂量给予化合物1后4小时观察到对PAR化的有效抑制。在5.45mg/kg，化合物1在MDA-MB-436肿瘤组织中诱导强烈且持续的PAR化抑制。在单一口服给予0.17至10.9mg/kg化合物1后4小时，化合物1在MDA-MB-436异种移植物中诱导对PAR水平的剂量依赖性抑制。在5.45mg/kg，化合物1诱导对PAR水平的快速和有效抑制。在处理后0.5小时PAR化抑制为98％。经过前12小时抑制保持在高水平(>80％)，但在24小时回至53％。在小鼠异种移植物模型的效能研究中，这些数据支持BID给药。剂量滴定和时间过程研究均表明肿瘤组织中的化合物1浓度需要超过0.5μmol/kg以实现至少80％PAR化抑制。
在H209 SCLC异种移植物模型中探究化合物1的体内效能以评价化合物1与替莫唑胺(TMZ，一种DNA烷化剂)的组合功效。在该模型中TMZ单药非常有效。一个治疗周期导致所有动物均无肿瘤。然而，在第二个周期迅速发生耐药。化合物1与TMZ的组合明显延迟耐药且不具有另外的毒性。在多个周期后肿瘤仍对组合治疗敏感。为了探讨化合物1是否能够克服TMZ耐药，通过在体内用多个周期的TMZ处理H209肿瘤产生TMZ-耐药性(TR)H209肿瘤。在该异种移植物小鼠模型中，衍生的H209-TR细胞系仍然对化合物1与TMZ的组合敏感。化合物1具有明显的脑渗透性，使得其在与TMZ组合用于治疗脑肿瘤或与具有脑转移的肿瘤方面具有吸引力。具有已建立的颅内H209异种移植物的小鼠用于进一步探究化合物1与TMZ对脑中SCLC的组合活性。在该颅内模型中，与TMZ单药相比，添加化合物1明显延长了动物存活。
测试5：化合物1的结晶倍半水合物的毒理学
在大鼠和犬中在单次和重复剂量研究中在多达28天表征了化合物1的非临床毒性分布。不良反应包括体重或体重增加和食物消耗量的减少；WBC、NEUT、LYMP、RBC、HGB、HCT和APTT的减少；以及PLT的增加。骨髓被认为是主要靶标器官且组织病理学变化的严重度从最小变化至明显。毒性为剂量依赖性的，与全身暴露相关且在28天恢复期后可逆。化合物1显示出对hERG电流无明显影响，其中IC50＝25.97μM。在Ames测定中未记录到致突变性(mutagenicity)。总之，可获得的毒理学数据充分支持了化合物1在I期研究中对晚期和进展性癌症患者的临床进展。毒性可进行临床监测和处理。
测试6：化合物1的结晶倍半水合物的药代动力学
针对药代动力学研究所用的物种是大鼠和犬。在两种物种中化合物1均具有良好至优异的口服生物利用度(>40％)。口服给药后，大鼠中的消除半衰期范围为3.1至5.0小时，而犬中的消除半衰期范围为1.5至2.5小时。在大鼠(8.67-15.2mL/min/kg)和犬(18.3-18.5mL/min/kg)中清除均是中等的。大鼠和犬中的稳态分布体积分别为2.4L/kg和1.9L/kg。在两个物种多次口服给药后没有化合物1的累积。
测试7：化合物1的结晶倍半水合物的ADME
人、猴、犬、大鼠和小鼠血浆中化合物1的血浆蛋白结合(PPB)分别为95.7％、88.9％、79.0％、84.9％和85.0％。在大鼠中口服给药后，在所有检查的器官中均检测到化合物1。药物浓度在给药后0.25至1小时达到最大并在给药后24小时降至小于峰浓度的10％。
化合物1在人、犬、大鼠和小鼠肝微粒体中缓慢代谢，而在猴肝微粒体中迅速代谢，其中鉴定出共计5种代谢物(M1、M2、M3、M4和M5)。口服给药后，在大鼠的粪便、血浆、尿和胆汁中实测到六种代谢物M1、M2、M3、M5、M6和M7。化合物1主要在粪便中排泄。口服给药后，粪便中化合物1的累积排泄量为15％至20％(直至48小时)。在大鼠中低于1％的化合物1在尿和胆汁中排泄。
CYP3A是负责化合物1代谢的主要CYP同工型，而CYP2C8有助于化合物1代谢至较小的程度。对于CYP2C9，化合物1是中等抑制剂(IC50＝6.48μM)，而其对于其它CYP同工型的IC50均大于10μM。化合物1不是人CYP1A2、CYP2B6和CYP3A的诱导剂。
测试8：临床试验
使用化合物1的结晶倍半水合物制备胶囊，对25位受试者(每日两次(bid)给药剂量为2.5、5、10、20、40、80和120mg)完成了I期临床安全性研究。结果显示2.5-120mg每日两次剂量是安全的且耐受良好。在BRCA1/2突变体卵巢癌患者中化合物1治疗引起部分或完全响应。这些初步数据证明化合物1的结晶倍半水合物在BRCA1/2突变体或HR-缺陷的癌症治疗中是有效的。
虽然本发明的前述书面描述使普通技术人员能够制作和使用目前被认为是其最佳模式的内容，但普通技术人员将理解并认识到本发明的具体实施方式的变型、组合和等同物、方法和实施例的存在。因此，本发明不应受上述实施方案、方法和实施例的限制，而应受所要求保护的本发明的范围和精神内的所有实施方案和方法的限制。

Claims (20)

1.一种组合物，包括式Ia的结晶形式，
其中所述结晶形式为一水合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.5±0.2°、10.2±0.2°、13.4±0.2°、13.7±0.2°、19.5±0.2°、20.6±0.2°、25.2±0.2°和27.6±0.2°。
2.权利要求1的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.5±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、13.4±0.2°、13.7±0.2°、18.9±0.2°、19.5±0.2°、20.6±0.2°、25.2±0.2°、26.9±0.2°和27.6±0.2°。
3.权利要求1的组合物，其中所述结晶形式具有基本上与图2A一致的X射线粉末衍射图。
4.权利要求1-3中任一项的组合物，其中所述结晶形式特征在于具有基本上与图2B一致的DSC，和/或具有基本上与图2B一致的TGA。
5.一种组合物，包括式Ib的结晶形式，
其中所述结晶形式为无水物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.3±0.2°、10.0±0.2°、12.8±0.2°、14.1±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、19.2±0.2°、19.5±0.2°、25.0±0.2°、26.1±0.2°和28.2±0.2°。
6.权利要求5的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.3±0.2°、10.0±0.2°、12.8±0.2°、14.1±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、19.2±0.2°、19.5±0.2°、25.0±0.2°、26.1±0.2°、28.2±0.2°和29.3±0.2°。
7.权利要求5的组合物，其中所述结晶形式具有基本上与图3A一致的X射线粉末衍射图。
8.权利要求5-7中任一项的组合物，其中所述结晶形式特征在于具有基本上与图3B一致的DSC，和/或具有基本上与图3B一致的TGA。
9.一种组合物，包括式Ic的结晶形式，
其中所述结晶形式为倍半水合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°和28.4±0.2°。
10.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°。
11.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、20.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°。
12.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、18.2±0.2°、19.1±0.2°、20.2±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°。
13.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.1±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、16.8±0.2°、18.2±0.2°、19.1±0.2°、20.2±0.2°、22.8±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、26.3±0.2°、27.8±0.2°和28.4±0.2°。
14.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式特征在于包含具有独立选自以下2θ角度值的衍射峰的X射线粉末衍射图：6.4±0.2°、9.8±0.2°、13.1±0.2°、13.4±0.2°、13.8±0.2°、16.8±0.2°、17.7±0.2°、18.2±0.2°、19.1±0.2°、20.2±0.2°、22.8±0.2°、24.0±0.2°、24.3±0.2°、26.3±0.2°、26.7±0.2°、27.8±0.2°、28.4±0.2°和29.5±0.2°。
15.权利要求9的组合物，其中所述结晶形式具有基本上与图5A一致的X射线粉末衍射图。
16.权利要求9-15中任一项的组合物，其中所述结晶形式特征在于具有基本上与图5B一致的DSC，和/或具有基本上与图5B一致的TGA。
17.权利要求1-3、5-7和9-15中任一项的组合物，其中所述结晶形式特征在于具有>85％的纯度，或>95％的纯度或>99％的纯度。
18.权利要求1-17中任一项的组合物用于制备治疗受试者中与BRCA1/2突变体活性相关的疾病的药物的用途。
19.权利要求18的用途，其中所述疾病为癌症。
20.权利要求18的用途，其中所述疾病为选自以下的癌症：脑癌、肺癌、肾癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、皮肤癌、肾上腺癌、子宫颈癌、淋巴瘤或成胶质细胞瘤。
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS56616B1 (sr) 2011-12-31 2018-02-28 Beigene Ltd Kondenzovani tetra ili penta-ciklični dihidrodiazepinokarbazoloni kao parp inhibitori
CA2994895A1 (en) 2015-08-25 2017-03-02 Beigene, Ltd. Process for preparing parp inhibitor, crystalline forms, and uses thereof
CN110087730B (zh) * 2016-09-27 2023-03-28 百济神州(苏州)生物科技有限公司 使用包含parp抑制剂的组合产品治疗癌症
US10899763B2 (en) 2017-02-28 2021-01-26 Beigene, Ltd. Crystalline forms of salts of fused penta-cyclic dihydrodiazepinocarbazolones, and uses thereof
CN111171001B (zh) * 2019-05-16 2022-04-29 百济神州(苏州)生物科技有限公司 一种parp抑制剂中间体的结晶方法
CN113402502B (zh) * 2019-05-16 2022-10-14 百济神州(苏州)生物科技有限公司 一种parp抑制剂中间体制备的物料组合体系
WO2021046014A1 (en) 2019-09-03 2021-03-11 Teva Czech Industries S.R.O Solid state forms of pamiparib and process for preparation thereof

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103703004A (zh) * 2011-12-31 2014-04-02 百济神州有限公司 作为parp抑制剂的稠合的四环或五环的二氢二氮杂*并咔唑酮
TW201444842A (zh) * 2013-05-22 2014-12-01 Beigene Ltd 作為ｐａｒｐ抑制劑的稠合四或五環二氫二氮呯并咔唑酮
WO2015188169A1 (en) * 2014-06-07 2015-12-10 Academia Sinica Novel sesquiterpene derivatives and their use in inflammation and cancer treatment
WO2016205299A1 (en) * 2015-06-16 2016-12-22 Targent, Llc New crystalline polymorphs of 1,6-dibromo-1,6-dideoxy-dulcitol

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1140936B1 (en) 1999-01-11 2004-03-17 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic inhibitors of poly(adp-ribose) polymerases
EP1339402B1 (en) 2000-12-01 2010-08-25 Eisai Inc. Azaphenanthridone derivatives and their use as parp inhibitors
PT1585749E (pt) 2003-01-09 2008-10-23 Pfizer Derivados de diazepinoindole como inibidores de cinase
US20080146638A1 (en) 2006-01-17 2008-06-19 Abbott Laboratories Combination therapy with parp inhibitors
SG193842A1 (en) 2008-08-06 2013-10-30 Biomarin Pharm Inc Dihydropyridophthalazinone inhibitors of poly(adp-ribose)polymerase (parp)
JP6623353B2 (ja) 2013-09-13 2019-12-25 ベイジーン スウィッツァーランド ゲーエムベーハー 抗ｐｄ−１抗体並びにその治療及び診断のための使用
JP6526189B2 (ja) 2014-07-03 2019-06-05 ベイジーン リミテッド 抗ｐｄ−ｌ１抗体並びにその治療及び診断のための使用
US9637488B2 (en) 2015-01-29 2017-05-02 Fuqiang Ruan Heterocyclic compounds as inhibitors of class I PI3KS
CA2994895A1 (en) 2015-08-25 2017-03-02 Beigene, Ltd. Process for preparing parp inhibitor, crystalline forms, and uses thereof
CN110087730B (zh) 2016-09-27 2023-03-28 百济神州(苏州)生物科技有限公司 使用包含parp抑制剂的组合产品治疗癌症
US10899763B2 (en) 2017-02-28 2021-01-26 Beigene, Ltd. Crystalline forms of salts of fused penta-cyclic dihydrodiazepinocarbazolones, and uses thereof
WO2019015561A1 (en) 2017-07-17 2019-01-24 Beigene, Ltd. TREATMENT OF CANCERS USING A COMBINATION COMPRISING INHIBITORS OF PARP, TEMOZOLOMIDE AND / OR RADIOTHERAPY

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103703004A (zh) * 2011-12-31 2014-04-02 百济神州有限公司 作为parp抑制剂的稠合的四环或五环的二氢二氮杂*并咔唑酮
CN106220635A (zh) * 2011-12-31 2016-12-14 百济神州有限公司 作为parp抑制剂的稠合的四环或五环的二氢二氮杂*并咔唑酮
TW201444842A (zh) * 2013-05-22 2014-12-01 Beigene Ltd 作為ｐａｒｐ抑制劑的稠合四或五環二氫二氮呯并咔唑酮
WO2015188169A1 (en) * 2014-06-07 2015-12-10 Academia Sinica Novel sesquiterpene derivatives and their use in inflammation and cancer treatment
WO2016205299A1 (en) * 2015-06-16 2016-12-22 Targent, Llc New crystalline polymorphs of 1,6-dibromo-1,6-dideoxy-dulcitol

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