CZ301268B6 - Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C - Google Patents

Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C Download PDF

Info

Publication number
CZ301268B6
CZ301268B6 CZ20010516A CZ2001516A CZ301268B6 CZ 301268 B6 CZ301268 B6 CZ 301268B6 CZ 20010516 A CZ20010516 A CZ 20010516A CZ 2001516 A CZ2001516 A CZ 2001516A CZ 301268 B6 CZ301268 B6 CZ 301268B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
amido
amino
optionally substituted
formula
Prior art date
Application number
CZ20010516A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2001516A3 (cs
Inventor
Llinas-Brunet@Montse
D. Bailey@Murray
Cameron@Dale
Faucher@Anne-Marie
Ghiro@Elise
Goudreau@Nathalie
Halmos@Teddy
Poupart@Marc-André
Rancourt@Jean
S. Tsantrizos@Youla
M. Wernic@Dominik
Original Assignee
Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. filed Critical Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd.
Publication of CZ2001516A3 publication Critical patent/CZ2001516A3/cs
Publication of CZ301268B6 publication Critical patent/CZ301268B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Racemáty, diastereoizomery a optické izomery slouceniny obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají specifický význam, nebo jejich farmaceuticky vhodné soli nebo estery. Použití sloucenin obecného vzorce I pro výrobu léciva pro lécení hepatitidy typu C (HCV).

Description

Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C
Oblast techniky
Současný vynález se týká sloučenin, způsobu jejich přípravy, přípravků a postupů terapie virové hepatitidy typu C. Vynález se především týká nových peptidových analogů, farmaceutických přípravků obsahujících tyto analoga a postupů jejich použití při terapii virové hepatitidy typu C. Vynález se také týká meziproduktů a způsobu jejích přípravy k syntéze shora uvedených peptidových analog.
Dosavadní stav techniky
Virus způsobující hepatitidu typu C (HCV) je hlavním etiologickým agens post-transfúzní nebo nenozokomiální non-A, non-B-hepatitidy. Přibližné 150 milionů lidí na světě je tímto virem infikováno. Vysoké procento nosičů v populaci je chronicky infikováno a přechází do chronického stadia onemocnění, tzv. chronické hepatitidy typu C. Tato skupina pacientů je ohrožena vážným až smrtelným onemocněním jater, jakými jsou jatemí cirhóza, hepatocelulární karcinom a jatemí selhání.
Mechanismus vzniku virové perzistence a příčina častého přechodu do chronického stadia jaterního onemocněni nejsou přesně vysvětleny. Není známé jak HCV napadá a poškozuje imunitní systém hostitele. Není ani objasněna role buněčné a humorální imunitní odpovědi proti infekci virem HCV. K profylaxi posttransfúzní virové hepatitidy jsou doporučovány imunoglobuliny, ačkoli the Centre for Disease Control (Ústav pro kontrolu infekčních chorob) v současné době použití imunoglobulinů k tomuto účelu nedoporučuje. Nedokonale účinná obranná imunitní odpověď znemožňuje vývoj vakcíny nebo zavedení profylaktických opatření po expozici nákaze.
Jedinou možností řešení v blízké budoucnosti jsou intervence namířené proti virům samotným.
Ke zjištění účinných farmaceutických činidel vhodných k terapii infekcí virem HCV u pacientů s chronickou hepatitidou typu C se již provedlo mnoho rozličných klinických studií. Během těchto studií se sledovalo užití interferonu alfa samotného nebo v kombinaci s ostatními anti35 virovými léčivy. Studie prokázaly, Že u podstatně části sledovaných pacientů je tato terapie neúčinná, a pokud účinná je, pak ve velkém procentu případů dochází po ukončení terapie k relapsu onemocnění.
Jedinou a podle klinických studií prokazatelně vhodnou terapií chronické virové hepatitidy C bylo donedávna podávání interferonu (IFN). Taková terapie však vede jen u malého procenta případů k podstatnému zlepšení a navíc terapie interferonem má závažné vedlejší účinky (retinopatie, thyroiditis, akutní pankreatitida, deprese), které snižují kvalitu života takto léčených pacientů. Kombinace s ribavirinem má pozitivní účinek u pacientů neodpovídajících na léčbu samotným interferonem, tato kombinace však nesnižuje výskyt vedlejších nežádoucích účinků způsobených interferonem samostatně podaným.
Z uvedeného vyplývá nutnost účinného antivirového činidla k terapii infekce HCV, které překoná současné omezeni farmakologické terapie tohoto závažného onemocnění.
HCV patří do skupiny jednořetězovych RNA virů s pozitivní polaritou a lipidovou obálkou, čeleď Flaviviridae. Jediný řetězec RNA genomu HCV tvoří podélně přibližně 9500 nukleotidů s jednoduchým otevřeným čtecím rámcem (open reading frame ORF) k dekódování jediného velkého polyproteinu o přibližně 3000 aminokyselinách. V infikovaných buňkách je tento polyprotein mnohoČetně štěpen buněčnými a virovými proteázami za vzniku strukturálních a nestruk55 turálních (NS) proteinů. V případě HCV je tvorba zralých nestrukturálních proteinů (NS2, NS3,
Jinou předností současného vynálezu je, že se týká shora uvedených peptidů, které specificky inhíbují NS3 proteázu a které nemají do 300 μπιοί signifikantní inhÍbiční účinek na ostatní serinové proteázy, jakými jsou lidská leukocytámí elastáza (HLE), prasečí pankreatická elastáza (PPE) nebo hovězí pankreatický chymotrypsin nebo na cysteinové proteázy (lidský jatemí katepsin B (Cat B)).
Další předností tohoto vynálezu je, že se týká malých peptidů o nízké molekulární hmotnosti, které dobře penetrují membránami buněk, působí uvnitř buněk a in vivo mají dobrý farmakokínetický profil.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou racemáty, diastereoizomery a optické izomery sloučeniny obecného 15 vzorce I:
R’
kde B je atom vodíku, C6 nebo C]Oaryl, C7_16aralkyl, heterocyklus nebo (nižší alkyl>-Het, popřípadě substituované Ci^alkylem Ci^alkoxy-skupinou, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylovou skupinou, atomem halogenu, halogenalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, aminoskupinou, popřípadě substituovanou C)óalkylem, amidoskupina nebo (nižší alkyl)amidoskupina nebo
B je karboxyl vzorce R4-O-C(O)~, amidoskupina vzorce R4-N(R5)-C(O)-, thio-amidoskupina R4-N(R^)-C(S)- nebo sulfonyl vzorce R4-SO2, kdeR^je i/ Ci_io alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Cj-salkanoylem, hydroxyskupinou, C]^alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci_6alkvlem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo i i/ C3_7 cykloalkyl, C3_7cykloalkoxy nebo C4 ^alkyl-cykloalkyi, vždy eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (C^alkoxy)karbonylovou skupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C i^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo iii/ aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C ^alkylem, amidoskupina nebo (nižší alkyl)-amidoskupina nebo iv/ C6 nebo Cioaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C ^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ci^alkylem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší aIkyI)-Het, oba eventuálně substituované C|^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C^alkylem,
-3NS4A, NS4B, NS5A a NS5B) způsobená dvěmi virovými proteázami. První z nich, velmi špatně popsaná, štěpí místo spojení NS2-NS3. Druhá, serinová proteáza je v N-terminální oblasti molekuly NS3 (proto označovaná jako NS3 proteáza) zprostředkovaná všechna štěpení za NS3 dolů, v cis pro NS3-NS4 štěpení a v trans pro štěpení ve zbývajících místech, tedy NS4A-NS4B,
NS4B-NS5A, NS5A-NS5B. Protein NS4A má zřejmě několik funkcí, je kofaktorem NS3 proteázy a pravděpodobně napomáhá membránové lokalizaci NS3 a ostatních virových replikových komponent. Komplex tvořící NS3 protein a NS4A je zřejmě důležitým mezičlánkem ovlivňujícím proteolytické pochody na popsaných místech štěpení proteinu. NS3 protein vykazuje nukleosid-trifosfatázovou a RNA-helikázovou aktivitu. Protein NS5B je RNA-dependentní io RNA polymeráza ovlivňující replikaci viru HCV.
Při výzkumu a vývoji antivirového činidla se hlavním cílem stala taková látka, která inaktivuje virem kódované enzymy, které jsou esenciální pro replikaci viru. Zveřejněná přihláška WO 97/06804 popisuje (-)-enantiomer nukleosidového analoga cytosin-l,3-oxathiolanu (3TC), který je účinný proti HCV viru. Tato sloučenina, která byla označena v předchozími klinickými studiemi za bezpečnou, je prokazatelně účinná proti virům HIV a HBV. Stále ještě zbývá klinicky doložit její účinnost proti HCV a popsat mechanismus antivirového účinku.
Rozsáhlé úsilí objevit sloučeniny, které ínhibují NS3-proteázu nebo RNA-helikázu viru HCV vedlo k následujícím odhalením:
Patent US 5 633 388 popisuje heterocykly substituované karboxamidy a jejich analoga účinné proti víru HCV. Účinek těchto sloučenin je namířen proti helikázovému účinku proteinu NS3. Výsledky klinických testů nejsou zatím k dispozici.
Podle studie vedené Chu a spol. (Tet. Lett,, 1996, str. 7229-7232) je fenantren-chinon ín vitro účinný proti proteáze NS3 proteinu. Výsledky dalšího výzkumu této sloučeniny nebyly zatím zveřejněny.
Studie prezentovaná na deváté mezinárodní konferenci o antivirovém výzkumu (Urabai, Fukyshima, Japonsko 1996, Antiviral Research, 30. 1. 1996, A23 (článek 19)) popisuje thiazolidinové deriváty jako inhibitory HCV proteázy.
Několik studií se zabývalo sloučeninami inhibujícími jiné serinové proteázy, především lidskou leukocytámí elastázu. Jedna skupina z těchto sloučenin je popsána ve zveřejněné přihlášce WO 95/33764 (Hoechst Marion Rousse, 1995). Peptidy popisované v této přihlášce jsou strukturálně odlišné od peptidů podle současného vynálezu,
Zveřejněná přihláška WO 98/17679 (Vertex Pharmaceuticals lne.) se týká inhibitorů serinové proteázy, především proteázy NS3 proteinu HCV viru. Tyto inhibitory jsou analoga peptidů odvozená od NS5A/5B. Všechny tyto peptidy obsahují jako svoji základní vlastnost C-konec aktivovaný karbonylovou funkční skupinou. Tyto peptidy jsou podle popisu účinné proti jiným serinovým proteázám a nejsou tudíž specificky účinné proti proteáze NS3 proteinu viru HCV.
Hoffman LaRoche také popisuje hexapeptidy jako antivirová činidla působící jako inhibitory proteináz vhodná k terapii infekcí HCV virem. Tyto peptidy obsahují na svém C-terminálu aldehyd nebo kyselinu boritou.
Steinkíihler a spol, a Ingallinella a spol. popisují inhibici produkty štěpení na N-konci (Bio50 chemistry 1998, 37, 8899-8905 a 8906—8914). Tyto peptidy a jejich analoga nijak nepřipomínají peptidy podle současného vynálezu.
Předností současného vynálezu je, že se týká tripeptidů ínhibujících NS3 proteázu viru HCV.
-2R5 je atom vodíku nebo C^alkyl;
za předpokladu, že pokud R4 je amidoskupina nebo thioamid, pak R4 není ií/ cykloalkoxy;
a
Y je atom vodíku nebo C^alkyl;
R3 je Ci_8alkyl, C3 7cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný 10 hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, Ct 6thioalkýlem. amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou, C<, nebo C10arylem nebo C7_i6 aralkylem,
R2 je CH2-R20, NH-R20, 0-R2o nebo S-R20, kde R2o je nasycený nebo nenasycený C3_7cykloalkyl nebo C4_10(alkylcykloalkyl), vždy eventuálně mono-, di- nebo tri- substituované R2i nebo
R20 znamená C6 nebo CiOaryl nebo C7_]4aralkyl, vždy eventuálně mono-, di- nebo tri—substituované R2t nebo
R20 je heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně mono-, di- nebo tri-substituované R21, kde každé R2| je nezávisle Ci^alkyl, Ci_6alkoxy, nižší thioalkyl, sulfonyl, nitroskupina, 25 hydroxyskupina, merkaptoskupína, atom halogenu, haloalkyl, aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C]^alkylem, C6 nebo Cioarylem, C7„i4aralkyl, heterocyklem nebo (nižší alkyl}-Het; amidoskupina eventuálně mono- substituovaná Ci_6alkylem, C6 nebo
Cioarylem, C7_i4 aralkylem, heterocyklem nebo (nižší alkylf-Het; karboxylová skupina, karboxy-(nížší alkyl), C6 nebo C10 aryl, C7_|4 aralkyl nebo heterocyklus, shora uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je C]6alkyl, C3_7cykloalkyl, C(^alkoxy, aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C^alkylem, sulfonylová skupina, (nižší alkyl)-sulfonylová skupina, nitroskupina, hydroxyskupina, merkaptoskupína, atom halogenu, haloalkyl, karboxy35 lová skupina, amidoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina nebo heterocyklus eventuálně substituovaný C| ^alkylem,
R1 je atom vodíku, Cj^alkyl, C3.7cykloalkyl, C2^alkenyl nebo C2_ó alkinyl, vždy eventuálně substituovaný atomem halogenu, nebo jejich farmaceuticky vhodné soli nebo estery.
Podstatou vynálezu je farmaceutický přípravek obsahující účinné množství sloučeniny obecného vzorce 1, které působí proti viru HCV, nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru, v adiční směsi s farmaceuticky vhodným nosičem nebo pomocnou látkou.
Důležitou podstatou vynálezu je způsob terapie virové hepatitidy typu C savců, která spočívá v podání specificky anti-HCV působícího účinného množství sloučeniny obecného vzorce 1 nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru nebo shora uvedeného přípravku.
Jinou podstatou vynálezu je způsob inhibice replikace víru hepatitidy typu C působením takovým množstvím sloučeniny obecného vzorce I nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru nebo shora uvedeného přípravku, které způsobí inhíbici virové proteázy NS3 proteinu viru HCV.
-4Další podstatou vynálezu je způsob terapie virové hepatitidy C u savců podáním specificky proti HCV viru působícího účinného množství kombinace sloučeniny obecného vzorce I nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru. Podstatou vynálezu je přípravek obsahující další imunomodulační činidlo. Příkladem takového činidla jsou α-, β- a δ-interferony.
Radikály označené R a S, popisují konfiguraci radikálu ve vztahu ke sloučenině (například Ri sloučeniny obecného vzorce I). Jde o vztah radikálu ke sloučenině.
Přirozeně se vyskytující aminokyseliny kromě glycinu obsahují chirální atom uhlíku. Pokud není dále uvedeno jinak, pak preferujeme aminokyseliny v L-konfíguraci. V případech blíže určených předkladatelé předpokládají, že některé aminokyseliny obecného vzorce I mohou mít konfiguraci buď D-, nebo L- nebo se mohou vyskytovat ve směsi IX a L-izomerů, včetně racemických směsí.
Výrazy „PÍ, P2, P3...“ se používají k označení pozice zbytku aminokyseliny od C-konce peptidu směrem kN-konci (PÍ označuje pozici 1 od C- konce, P2 označuje druhou pozici od C-konce...). Literatura: A. Berger & I. Schechter, Transactions of the Royal Society London series B257, 249-264(1970)).
Zkratky pro α-aminokyseliny jsou uvedeny v následující tabulce A:
aminokyselina symbol
1 -aminocyklopropyl-karboxylová kyselina Acca
Alanin Ala
Aspartová kyselina Asp
Cystein Cys
Cykíohexylglycin (2-amino-2-cyklohexyloctová kyselina) Chg
Glutamová kyselina Glu
Izoleucin tle
Leucin Leu
Fenylalanin Phe
Prolín Pro
terc-butylglycin Tbg
Valin Val ]
-5Termín „1-aminocyklopropyl-karboxylová kyselina“ (Acca) znamená sloučeninu obecného vzorce:
h2n
OH
Termín „terc.-butylglycin“ (Tbg) znamená sloučeninu obecného vzorce:
O
HjN
OH '
Termín „zbytek“ aminokyseliny nebo derivátu aminokyseliny znamená radikál odvozený od odpovídající α-aminokyseliny odštěpením hydroxylu karboxylové skupiny a jednoho vodíkového atomu α-aminoskupiny. Například termíny Gin, Ala, Gly, Ile, Arg, Asp, Phe, Ser, Leu, Cys, Asn, Sar a Tyr znamenají „zbytky“ L-glutaminu, L-alaninu, glycinu, L-izoleucinu, L-argininu,
L-aspartové kyseliny, L-fenylalaninu, L-serinu, L-leucinu, L-cysteinu, L-asparaginu, sarkosinu a L-tyrosinu.
Termín „vedlejší řetězec“ aminokyseliny nebo zbytku aminokyseliny znamená skupinu vázanou na atom α-uhlíku a-aminokyseliny. Například, R- vedlejší řetězec u glycinu je atom vodíku, u alaninu je to methyl, u valinu je to izopropyl. Specifické R-skupiny nebo vedlejší řetězce α-aminokyselin jsou uvedeny v učebnici A. L. Lehningefs text on Biochemistry (kapitola 4). Jako „halogen“ označujeme atom halogenu, a to atom brómu, chlóru, fluóru nebo jódu.
Termín „Ci^alkyl“ nebo „(nižší) alkyl“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená přímý nebo větvený řetězec alkylových zbytků obsahující až šest atomů uhlíku včetně, například methyl, ethyl, propyl, butyl, hexyl, 1-methylethyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, 1,1-dimethyIethyl (tj. terc-butyl).
Termín „C3_7cykloalkyl“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená zbytek cykloalkylu obsahující od tří do sedmi atomů uhlíku a zahrnuje cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl acykloheptyl.
Termín „spiro“ -cyklická skupina označuje například spiro-cyklopropyl nebo spiro-cyklobutyl:
Termín „C4_io (alkyIcykloalkyl)“ znamená zbytek cykloalkylu obsahující od čtyř do deseti atomů uhlíku vázaný na zbytek alkylu. Vázané zbytky obsahují až deset atomů uhlíku, například cyklo35 propylmethyl, cyklopentylethyl, cyklohexylmethyl, cyklohexyl ethyl nebo cykloheptylethyl.
-6Termín „C2_io alkenyl“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená zbytek alkylu obsahující od 2 do 10 atomů uhlíku a dále obsahující nejméně jednu dvojnou vazbu. Jde například o alkenyl včetně alylu a vinylu.
Termín „C]_$ alkanoyl“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená přímý nebo větvený zbytek 1-oxoalkylu obsahující jeden až šest atomů uhlíku. Mezi takové alkanyly patří formy, acetyl, l-oxopropyl(propionyl), 2-methyl-l-oxopropyl, 1-oxohexyl.
Termín „C^ alkoxy“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným radikálem, znamená zbytek io -O(C]_(,alkyl), kde shora definovaný alkyl obsahuje až šest atomů uhlíku. Alkoxy znamená methoxy, ethoxy, propoxy, 1-methyl-ethoxy, butoxy a 1,1-dimethyl-ethoxy (známý jako tercbutoxy).
Termín „C3_7cykloalkoxy“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená
C3_7cykloalkylovou skupinu vázanou na atom kyslíku například:
Termín „C6 nebo CiOaryl“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená buď aromatickou monocyklickou skupinu obsahující 6 atomů uhlíku, nebo aromatickou bicyklickou skupinu obsahující 10 atomů uhlíku. Například aryl znamená fenyl, 1-naftyl nebo 2-naftyl.
Termín „C7 ]6aralky l“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená C6 nebo Cio aryl vázaný na alkylovou skupinu, kde shora definovaný alkyl obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku. Mezi C7_16aralkyly patří například butylfenyl a 1-naftylmethyl.
Termín „amino-aralkyl“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená aminoskupiny substituované s C7.i6aralkýlovou skupinu. Jde například o amino-aralkyl:
Termín „(nižší alkyl)amid“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným radikálem znamená amidoskupinu mono-substituovanou Ci ^alkylem:
Termín „karboxy-(nižší)alkyl“, použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená karboxylovou skupinu (COOH) vázanou na (nižší) alkylovou skupinu. Jde například o kyselinu máselnou.
Termín „heterocyklus“ nebo „Het“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená monovalentní zbytek odvozený odštěpením atomu vodíku z pěti-, šesti- nebo sedmičetného nasyceného nebo nenasyceného (včetně aromatického) heterocyklu obsahujícího od jednoho do čtyř heteroatomů, a to atomu dusíku, kyslíku a síry. Navíc výraz „Het“, znamená shora definovaný heterocyklus fúzovaný do jednoho nebo více jiných cyklů za vzniku hetero40 cyklu nebo jiného dalšího cyklu. Příkladem vhodných heterocyklu jsou: pyrrolidin, tetrahydrofuran, thiazolidin, pyrrol, thiofen, diazepin, lH-imidazol, izoxazol, thiazol, tetrazol, piperidin, 1,4-dioxan, 4-morfolin, pyridin, pyrimidin, thiazol-[4,5-b]-pyridin, chinolin nebo indol nebo následující heterocykly:
Termín „(nižší alkyI)-Het“, zde uváděný, znamená heterocyklický zbytek vázaný na řetězec nebo větvenou alkylovou skupinu, kde shora definovaný alkyl obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku. Příkladem „(nižší alkylj-Het“ je:
Termín „farmaceuticky vhodný ester“ použitý samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená estery sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém jakákoli karboxylová funkční skupina, ale především karboxy-konec, je nahrazena alkoxykarbonylovou funkční skupinou:
O
io ve které R skupina esteru nezávisle znamená alkyl (methyl, ethyl, n-propyl, t-butyl, n-butyl), alkoxyalkyl (methoxymethyl), alkoxyacyl (acetoxymethyl), aralkyl (benzyl), aryloxyalkyl (fenoxymethyl) nebo aryl (fenyl) eventuálně substituovaný halogenem, C]^ alkylem nebo zbytkem Cm alkoxy. Ostatní vhodné farmaceuticky vhodné estery lze nalézt v publikaci „Design of prodrugs“ Bundgaard, H. Ed. Elsevier (1985). Takové farmaceuticky vhodné estery jsou hydroly15 zovány in vivo po injekční aplikaci savcům a přeměněny na kyselinu sloučeniny obecného vzorce 1.
S odkazem na shora popsané estery a pokud není uvedeno jinak, obsahuje každá alkylová skupina od jednoho do šestnácti atomů uhlíku, především od jednoho do šesti atomů uhlíku. Je
2o vhodné, když každá arylová skupina přítomná v takových esterech obsahuje fenylovou skupinu.
Především jde o tyto estery: Ci_i6alkylester, nesubstituovaný benzylester nebo benzylester substituovaný nejméně jedním atomem halogenu, Ci^alkylem, zbytkem Cj.^alkoxy, nitroskupinou nebo trifluormethylem.
Termín „farmaceuticky vhodné soli“ znamená soli odvozené od farmaceuticky vhodných zásad. Příkladem vhodných zásad jsou cholin, ethanolamin a ethylen-diamin. Podstata tohoto vynálezu se týká i sodných, draselných a vápenatých solí. Literatura: „Pharmaceutical salts“, S. M. Birge a spol., J. Pharm. Sci. (1977), 66,1-19).
Podstata současného vynálezu se především týká sloučeniny obecného vzorce I, kde B je především Q nebo Cioaryl nebo C7_]6 aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C, alky lem. C, 6alkoxy. C, _6alkanoy lem. hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupina eventuálně substituovanou Ci^alkylem nebo
B je heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, vždy eventuálně substituovaný Obálky lem. Ci_6alkoxy, C|_6alkanovlem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C| 6alkylem nebo
B je především R4-SO2, kde R4 je především C^alkyl, amidoskupina, (nižší alkylj-amidoskupina, C6 nebo Cioaryl, C7_i4 aralkyl nebo heterocyklus, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem nebo
-8B je především acylový derivát vzorce &Η3(Ο)kde R4 je především i/ Ci_ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo
C|.6 alkoxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl}-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C ^alkylem;
ii/ C3-7cykIoalkyl nebo C4_!0alkylcykloalkyl, oba eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (Ci_6alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Cj_6alkylem;
ív/ C6 nebo Cio aryl nebo C7_16aralkyl, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C i^alky lem;
v/ heterocyklus nebo (nižší alkylj-Het, oba eventuálně substituovaný C ^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou C^alkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)— amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C,^alkylem.
B je především a karboxyl vzorce R4-O-C(O}-, kde R4 je především i/ Ci_)0 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C|_óalkanoylem, hydroxyskupinou, Ci_6alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C i^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidem;
ii/ C^-vcykloalkyl, C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Cj^alkoxyj-karbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ci^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidem;
iv/ C6 nebo C)Oaryl nebo C7_i6aralkyl eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkylý-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C ^alkylem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl}-Het, oba eventuálně substituovaný Ci^ alkylem, hydroxy35 skupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ct_6 alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidoskupinou.
B je především amid vzorce R4~N(R5)-C(O)40 kde R4 je především i/ C(_io alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, Cj^alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou C| 6alkylem, ii/ C3_7 cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C)^alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ci^alkylem, iii/ aminoskupina eventuálně mono- nebo di-substituovaná C1-3 alkylem, iv/ C6 nebo C10 aryl nebo C7_16 aralkyl, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci^ alkylem nebo
-9v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované C] ^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci_6 alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl )-amidem a
Rs je především atom vodíku nebo methyl.
B znamená především thioamid vzorce R4-NH-C(S)-, lí) kde R4 je především i/ Ci-w alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C|_6 alkanoylem nebo Ci^alkoxy;
ii/ C3 7 cykloalkyl nebo C4_i0alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, 15 (Ci 6 alkoxy)-karbonylem, aminoskupinou nebo amidoskupinou.
B především znamená C6 nebo Cm aryl eventuálně substituovaný C i^alkvlem, C^alkoxy, Ct-^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo amino20 skupinou eventuálně mono- nebo dí-substituovanou Ci^alkylem, takže B je například:
nebo B je především heterocyklus eventuálně substituovaný Cj^alkylem, Ct-calkoxy, 25 C|_6alkanoylem, hydroxyskupinou, atomem halogenu, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou C^alkylem, takže B je například:
B je především R4-SO2, kde R4 je především C6 nebo Cm aryl, Ci_l4aralkyl nebo heterocyklus, vždy eventuálně substituovaný C] ^alkylem, amidoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina,
-10takže B je například B:
B je především acylový derivát vzorce R4-C(O)-.
kde Říje především i/ Ct_10 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo Ci^alkoxy;
ii/ C3_7 cykloalkyl nebo C4-ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný hydroxyskupinou, karboxylem, (Ci^ alkoxyj-karbonylem.
takže B je například:
nebo R4 je především iv/ C6 nebo CiOaryl nebo C7_)6 aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C] 6alkýlem, hydroxyskupinou,
nebo R4 je především v/ heterocyklus eventuálně substituovaný Cj^alkylem, hydroxyskupinou, 20 amidoskupinou nebo aminoskupinou, takže B je například:
- 11 B je především karboxyl vzorce Ki-O-C(OK kde R4 je především i/ Cj_10a1kyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci_6alkanoylem, hydroxyskupinou, C,_6 alkoxy nebo amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci /.alkylem;
ii) C3_7 cykloalkyl, C4-10 alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C|alkoxy )karbony lem, amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C| 6alkýlem, takže B je například:
nebo R4 je především iv/ Có nebo CiOaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C| 6alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou C|^alkylem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl )-Het, oba eventuálně substituované Chatky lem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono-substituovanou C^alkylem, takže B je například:
B je především amid vzorce R4-N(R5)-C(O)-, kde R4 je především i/ Ct_io alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C]_6alkanoylem, hydroxyskupinou, 6alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci^alkylem, ii/ C3_7 cykloalkyl nebo C^ioalkylcykloalkyh vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C| 6alkoxy)-karbonylem. amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C| ^alkylem
R5 je atom vodíku nebo methyl, takže B je například:
- 12nebo R4 je především iii) aminoskupina eventuálně mono-nebo di-substituovaná C ^alkylem, takže B je například:
nebo R4 je především iv/ C6 nebo CI0 aryl nebo Cy^aralkyl, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupínou nebo amidoskupinou eventuálně substituovanou Ci ^alkylem nebo v/ heterocyklus eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupínou nebo amidoskupinou, takže B je například:
B je především thioamid vzorce Rt-NH-QS)-, 15 kde R4 je především i/ C1-10 alkyl nebo ii/ C3-7cykloalkyl, takže B je například:
Velmi výhodné je, když B znamená amid vzorce R4-NH_C(O)-, kde R4 je především i/ C1 -iOalky 1 eventuálně substituovaný karboxylem, C|^alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupínou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci^alkylem, ii/ C3 7 cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C|_6alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou nebo aminoskupínou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ci^alkylem,
-13Λ.
o
nebo R4 je především iv/ C6 nebo Cioaryl nebo C7_!ůaralkyl, vždy eventuálně substituovaný CMalkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupinou, takže B je například:
o
Preferujeme, když B je terc.-butoxykarbonyl (Boc) nebo O
Preferujeme, když Y je atom vodíku nebo methyl. Nejvíce preferujeme, když Y je atom vodíku, io
Preferujeme, když R3 je Cm alkyl, C3.7 cykloalkyl nebo C4_i0alkylcyk1oalkyl, vždy eventuálně substituovaný hydroxyskupinou, C|_6alkoxy, Cj^ thioalkylem, acetamidovou skupinou, C6 nebo Cjoarylem nebo (\]6 aralkylem, takže R3 je například:
Y.
Preferujeme, když R3 je vedlejší řetězec terc-butylglycinu (Tbg), Ile, Val, Chg nebo nebo
-14Nejvíce preferujeme, když R3 je vedlejší řetězec Tbg, Chg nebo Val.
Podstata současného vynálezu se týká sloučeniny vzorce I, kde preferujeme, když
R2 je S-R20 nebo O-R20, kde R2q je především C6 nebo Cioaryl, C7_i6 aralkyl, heterocyklus nebo -CH2-Het vždy eventuálně mono-, di- nebo tri-substituované R2i, kde R2i je C^alkyl, Cj^alkoxy, nižší thioalkyl, amino skupina nebo amidoskupina eventuálně mono- nebo di-substituovaná C]^alkylem, C6 nebo Cioarylem, C7_i& aralkylem, heterocyklem nebo (nižší alkyl)-heterocyklem, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl, karboxylová skupina, C6 nebo Cioaryl, Cv-^aralkyl, nebo heterocyklus, shora uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný
R22.
Preferujeme, když R2i je Cj-óalkyl, Cj^alkoxy, aminoskupina, aminoskupina, di—(nižší alkyl)-aminoskupina, (nižší alkylj-amidoskupina, C6 nebo C10aryl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný pomocí R22.
Preferujeme, když R22 je Ci^alkyl, Ci^alkoxy, aminoskupina, mono- nebo di—(nižší alkyl)-aminoskupina, (nižší alkyl)-amid, sulfonylalkyl, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl, karboxylová skupina nebo heterocyklus.
Především preferujeme, když R22 je Ci^alkyl, alkoxy, halogen, aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná nižším alkylem, amidoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina nebo heterocyklus.
Nejvíce preferujeme, když R22 je methyl, ethyl, izopropyl, terc-butyl, alkyl, amidoskupina, (nižší alkyl)amidoskupina nebo (nižší alkyl) 2-thiazol.
Preferujeme, když R2 je 1 -naftylmethoxy- 2-naftylmethoxy- benzyioxy-, 1 -naftyloxy-, 35 2-naftyloxy- nebo chinolinoxy- nesubstituovaný, mono- nebo di-substituovaný R2i.
Nejvíce preferujeme, když R2 je 1-naftylmethoxy- nebo chinolinoxy, nesubstituovaný, mono- nebo di-substituovaný R2i (shora definovaný), takže R2 je například:
15Nejvíce preferujeme, když R2 je:
Preferujeme, když R2ia je C^alkyí (izopropyl, terc-butyl nebo cyklohexyí), Ci^alkoxy (methoxy) a dále:
t nižší thioalkyl:
halogen (chlór), aminoskupina eventuálně mono-substituovaná C^alkylem nebo C6 nebo C|Oaryl, takže R2)A je například dimethylamino, Ph-N(Me)-, dále nesubstituovaný C6 nebo C^aryl, C7_i6 arylalkyl (fenyl) nebo , nebo R2ia je především heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je CXalkyl, C]_6 alkoxy, aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná nižším alkylem, amidoskupina, (nižší alkylý-amidoskupina nebo heterocyklus, takže R2ja je například:
We
Ν'
II i ‘I nebo
Nejvíce preferujeme, když R2tA je C6, C]Oaryl nebo Het, vždy eventuálně substituovaný R22,
-16takže Rsia je například:
M
kde R22A je především Ci_e alkyl (methyl), Ci_6 alkoxy (methoxy) nebo halogen (chlór),
R22b je především Ci-ealkyl, aminoskupina, eventuálně mono- substituovaná alkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou a
R21B je Ci -6 alkyl, alkoxy, aminoskupina, di-(nižší alkyl)-aminoskupina, (nižší atkyl)-amid, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl nebo karboxyl.
Především preferujeme, když R2ib je Ci^alkoxy nebo di—(nižší alkyl)-aminoskupina.
Nejvíce preferujeme, když R2jb je methoxy.
Vynález se především týká sloučeniny obecného vzorce I, kde PÍ segment (cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh) je substituovaný Ri.
Je vhodné, když R1 je atom vodíku, Ci_3, C3_5cykloalkyl nebo C2^alkenyl eventuálně substituovaný halogenem.
Preferujeme, když R1 je ethyl, vinyl, cyklopropyl, l- nebo 2-brom-ethyl nebo 1- nebo 2-brom-vinyl.
Nejvíce preferujeme, když Ri je vinyl.
-17Pokud R, není atom vodíku, a pak PÍ je především cyklopropylový kruh vzorce:
NH o
kde C] a C2 znamenají asymetrické atomy uhlíku v pozicích 1 a 2 cyklopropylového kruhu. I když nevylučujeme přítomnost ostatních možných center asymetrie v jiných segmentech slouče5 niny obecného vzorce I, přítomnost těchto dvou center asymetrie způsobuje, že sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat jako racemické směsi diastereoizomerů. Jak je následně popsáno v příkladech provedení vynálezu, tyto racemické směsi se připraví, a pak se rozdělí do jednotlivých optických izomerů nebo lze tyto optické izomery připravit chirální syntézou.
io Sloučenina obecného vzorce I se může vyskytovat jako racemická směs diastereoizomerů na uhlíku 1, kde R, na uhlíku 2 je orientováno do syn pozice vzhledem ke karbonylu na pozici 1, a zbytek je charakterizován následujícím vzorcem:
nebo sloučenina obecného vzorce I, může být racemickou směsí diastereoizomerů, kde Ri na 15 uhlíku 2 je orientováno do anti pozice ke karbonylu na uhlíku 1, a zbytek je charakterizován následujícím vzorcem:
Racemické směsi lze separovat na individuální optické izomery.
Nejzajímavější vlastnost současného vynálezu spočívá v prostorovém uspořádání PÍ segmentu a v adici R] substituentu na atomu uhlíku 2. Podstata vynálezu se týká konfigurace asymetrického atomu uhlíku na pozici 1. Preferovanou podstatou vynálezu je sloučenina podle vzorce 1, kde Ri není atom vodíku a asymetrický atom uhlíku na pozici 1 má R konfiguraci.
- 18Přítomnost substituentu Ri na uhlíku C2 zvyšuje účinnost sloučeniny, pokud Cl je pak vR konfiguraci. Například sloučeniny 901 (1R,2S) a 203 (1R,2R) mají účinnost 25 a 82 nM, nesubstituovaná cyklopropylová sloučenina 111 ma účinnost 475 nM.
Pokud atom uhlíku v pozici 1 má R konfiguraci (např. sloučenina 901 a 203), pak inhibice proteázy NS3 viru HCV je dále zvýšena pozicí substituentu Ri (alkylu nebo alkylenu) na uhlíku 2 cyklopropylového kruhu, tzn. že sloučenina, kde Ri je syn ke karboxyiové skupině, má vyšší účinnost (25nM) než v případě anti enantiomeru (82nM). Z porovnání účinnosti sloučenin 801 (IR, 2S), která je 6 nM a jejího odpovídajícího (1 S,2S) izomeru, jehož účinnost je vyšší než ío 10 μΜ, vyplývá, že izomer (IR,2S) je í 500x účinnější než izomer (1S,2S)!!
Nejvíce preferovanou sloučeninou podle současného vynálezu je optický izomer s Rj substituentem a karbonylem v orientaci syn v následující absolutní konfiguraci:
V případě, že například Ri je ethyl, pak asymetrické atomy uhlíku v pozicích 1 a 2 mají R,R konfiguraci.
Podstata současného vynálezu se týká sloučeniny obecného vzorce I, kde B je především C6 nebo Cioaiyl nebo C7_i6 aralkyl, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, Ci^alkoxy, C^alkanoyl, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci_6 alkylem neboje heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, vždy eventuálně substituovaný C)^alkylem, Ci^alkoxy, C|6alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)— amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C ^alkylem nebo B je Rf-SO2, kde R4 je především amidoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupÍna, C6 nebo CiOaryl,
C714 aralkyl nebo heterocyklus, všechny eventuálně substituované alkylem nebo
B je acetylový derivát vzorce R4-C(O)kdeR4 jei/ Ci_iOalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo
Ct^alkoxy skupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci^ alky lem, ii/ Cv^cykloalkyl nebo C4 ioalkylcyklo-alkyl, oba eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (Ci^alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)— amidem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Cj^alkylem.
iv/ C6 nebo C10 aryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituované Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ct ^alkylem, substituované Ci^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci^alkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C1 ^alkylem nebo
-19B je karboxyl vzorce R4-O-C(O)-, kde R4 je i/ C]_io eventuálně substituovaný karboxylem, C^alkanoylem, hydroxy5 skupinou, Cj^alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo dí substituovanou C] 6alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl}-amidem, ii/ C3_7cykloalkyl, C4_10alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituované karboxylem, (Ci_6alkoxy)-karbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovaná
Ci_6alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidem, iv/ C6 nebo C|Oaryl nebo C7_ióaralkyl eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituované Ct 6alkýlem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl}-Het, oba eventuálně substituované C,^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou C] .6aikýlem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo
B je amid vzorce C(O)— kde R4 je i/ C|_3o alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C| ^alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Ci^alkvlem, ii/ C3_7 cykloalkyl nebo C4_I0alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Ci_6alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C ^alkylem;
iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná Ci^ alkylem;
iv/ C6 nebo C]Oaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C]^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci_$ alkylem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované C)^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou Ct_6 alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkylj-amidem a
Rs je především atom vodíku nebo methyl nebo
B je thioamid vzorce R4-NH-C(S)-.
kde R4 je i/ Ci_i0 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci_6 alkanoylem nebo C] 6afkoxv;
i i/ C3_7cykloalkyl nebo CY,oalky Icykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, 50 (C]j6 alkoxy-karbonylem, aminoskupinou nebo amidoskupinou,
Y je atom vodíku nebo methyl,
-20R3 je Cm alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituované hydroxyskupinou, C^alkoxy, C^thioal kýlem, acetamidem, C6 nebo CiOarylem nebo C7_i6 aralkylem,
R2 je S-R20 nebo O—R2o, kde R20 je především C6 nebo C10 aryl, C7-i6aralkyl, Het nebo
-CH2-Het, vždy eventuálně mono-, di- nebo tri-substituované R2Í, kde R2| je Ct^alkyl, 10 Ci_6alkoxy, nižší thíoalkyl, aminoskupina nebo amidoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C^alkylem, C6 nebo Cjoarylem, C7_i6 aralkylem, heterocyklem nebo (nižší alkyI)-Het, dále nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl, karboxylová skupina, C6 nebo C10aryl, C7.]6 aralkyl nebo heterocyklus, shora uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný pomocí R22, kde
R22 je Ci^alkyL C3_7cykloalkyl, C^alkoxy, aminoskupina, mono- nebo di—(nižší alkylj-aminoskupina, (nižší alkyl)-amid, sulfonylalkyl, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl, karboxylová skupina nebo heterocyklus nebo
R2 je jedna z následujících skupin:
R2 je 1-naftylmethoxy-, 2-naftylmethoxy- benzyloxy-, 1-naftyloxy- 2-naftyloxy- nebo chinolinoxy- nesubstituovaný, mono- nebo di-substituovaný R2i,
P1 segment je cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh, oba eventuálně substituované Ri, kde
R1 je atom vodíku, Ci_3alkyl, C3_5cykloalkyl nebo C2^alkenyl eventuálně substituované halogenem a zároveň Ri na atomu uhlíku v pozici 2 je syn vzhledem ke karbonylu v pozici 1;
'. „ ,
Podstata současného vynálezu se týká sloučeniny obecného vzorce I, kde B je především C6 nebo Cioaryl, eventuálně substituovaný C ^alkylem, Ci_6alkoxy, Ci^alkanoyl, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou CH, alkylem nebo
B je heterocyklus eventuálně substituovaný CMalkylem, Ci^alkoxy, Cj^alkanoylem, hydroxyskupinou, halogenem, amidoskupinou, (nižší alkylj-amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou C] ^alkylem nebo
-21B je R4-SO2, kde R4 je C6 nebo C]Oaryl, C7 ]4 aralkyl nebo heterocyklus, vždy eventuálně substituovaný Cj 6 alkylem, amidoskupina, (nižší alkyl) amidoskupina nebo
B je především acylový derivát vzorce R|-C(O)-, kde R4 je i/ Cnoalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo Ci_6alkoxyskupinou nebo ií/ Cj^cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, oba eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (C)6alkoxy)-karbonylem nebo iv/ C6 nebo C!0 aryl nebo C7_ióaralkyl, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, 15 hydroxyskupinou, v/ heterocyklus eventuálně substituovaný Cí^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou nebo
B je karboxyl vzorce R4-O-C(O)-, kde R4 je i/ Ci_10 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, C| óalkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C, 6alkýlem, ii/ Ci_7cykloalkyl, C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C16alkoxy)-karbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovaná C i^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)-amidem;
iv/ Cfe nebo Cioaryl nebo Cv^aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C]6al kýlem nebo v/ heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované Ci^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou eventuálně mono-substituovanou
C^alkylem nebo
B je amid vzorce R4-N(R5)-C(O)kde R4 je i/ C|_i0 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci_6alkanoylem, hydroxy40 skupinou, Cb6alkoxv, amidoskupinou, (nižší alkyl)~amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di-substituovanou C| 6alkýlem, i i/ Cs_7 cykloalkyl nebo C4_]t)alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Ci 6alkoxy)-karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)-amidoskupinou nebo aminoskupi45 nou eventuálně mono- nebo di- substituovanou CT_6alkýlem, iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo di-substituovaná C|_3 alkylem, iv/ C$ nebo C^aryl nebo C7_|ňaralkyl, vždy eventuálně substituovaný C ^alkylem. 50 hydroxyskupinou, aminoskupinou, nebo amidoskupinou eventuálně substituovanou alkylem nebo v/ heterocyklus eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou
-22R5 je atom vodíku nebo methyl nebo
B je thioamid vzorce Rj-NH-QS)-, kdeRJe i/ Ci-io alkyl nebo i i/ C3_7cykloalkyl nebo ίο B je amid vzorce R,-NH-C(O)-, kde Rt je i/ Ci_i0 alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci_$alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkytj-amidoskupinou nebo aminoskupínou eventuálně mono- nebo di-substituovanou Cj^alkylem;
ii/ C3_7 cykloalkyl nebo C4 |0alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (C^alkoxyý-karbonylein, amidoskupinou, (nižší alkyl) amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ci^alkylem, iv/ C6 nebo C]Oaryl nebo C7_i6aralkyl eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupínou,
Y je atom vodíku nebo methyl,
R3 je vedlejší řetězec terc-butylglycinu (Tbg), Ile, Val, Chg nebo:
R2 je 1 -naftylmethoxy nebo chinolinoxy nesubstituovaný, mono- nebo di- substituovaný R?i (shora uvedený) nebo
R2 je:
kde R2ia je Cj^alkyl, C^alkoxy, C6, CiOaryl nebo heterocyklus, nižší thioalkyl, halogen, aminoskupina eventuálně mono- substituovaná C^alkylem, nebo C6 nebo C)0 aryl, C7-ic ary laiky 1 nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je C^alkyl, C)..6 alkoxy, aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C,^ alkylem, amidoskupina, (nižší alkylý-amidoskupina nebo heterocyklus,
-23PÍ je cyklopropylový kruh, kde atom v pozici 1 má R konfiguraci,
a R1 je ethyl, vinyl, cyklopropyl, 1- nebo 2-bromethyI nebo 1- nebo 2-bromvinyl.
Podstata současného vynalezu se týká sloučenin obecného vzorce I, kde B je terc-butoxykarbonyl (Boc) nebo
R3 je vedlejší řetězec Tbg, Chg nebo Val;
nebo kde R22A je alkyl (methyl), C] alkoxy (methoxy) nebo halogen (chlór),
R22B je alkyl, aminoskupina eventuálně mono-substituovaná C|_6 alkylem, amidoskupina 15 nebo (nižší alkyl)amid a
R21B je C| 6alkyl, C^alkoxy, aminoskupina, di-(nÍ7Ší alkylý-aminoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl nebo karboxyl a
PÍ je:
Podstatou současného vynálezu je každá sloučenina obecného vzorce I, která je uvedená v tabulkách 1-10.
Podstatou vynálezu je farmaceutický přípravek, který obsahuje další anti-HCV činidla. Příkladem takových látek jsou a- nebo β-interferon, ribavirin a amantadin.
-24Podstatou současného vynálezu je farmaceutický přípravek podle současného vynálezu, který také obsahuje jiné inhibitory HCV proteázy.
Další podstatou současného vynálezu je farmaceutický přípravek podle současného vynálezu, který obsahuje jiná inhibiční činidla zasahující jiným způsobem do biologických pochodů viru HCV, včetně například helikázy, polymerázy, metaloproteázy nebo IRES.
Farmaceutický přípravek podle současného vynálezu lze podat orálně, parenterálně nebo cestou implantovaného zásobníku. Preferujeme podání orální nebo injekční. Součástí farmaceutického přípravku podle současného vynálezu mohou být obvyklé netoxické farmaceuticky vhodné nosiče, pomocné látky a jiné přísady. Ke zvýšení stability některých sloučenin nebo jejich lékových forem, je v některých případech nutná úprava pH přípravku přidáním farmaceuticky vhodných kyselin, zásad nebo pufrů.
Jako parenterální podání označujeme podání subkutánní, intrakutánní, intravenózní, intramuskulámí, intra-artikulámí, intrasynoviální, intrastemální, intrathékální, injekční aplikace do léze nebo infuzní formou.
Jednou z vhodných forem farmaceutického přípravku podle současného vynálezu je sterilní injekční přípravek, respektive sterilní injekční přípravek ve formě vodné nebo olejová suspenze. Tuto suspenzi lze připravit obecně známými postupy za použití vhodných disperzních činidel nebo smáčedel (Tween 80) a suspenzních činidel.
Farmaceutický přípravek podle současného vynálezu lze orálně podat ve formě kapslí, tablet, vodných suspenzí a roztoků. Tablety pro orální podání obsahují nosiče obecně používané pro orální podání, včetně laktózy a kukuřičného škrobu. Obvykle se přidají i lubrikační činidla (stearát hořečnatý). Při výrobě kapslí pro orální podání se použijí ředidla (laktóza) a sušený kukuřičný škrob. V případě vodných suspenzí podávaných orálně se účinná látka sloučí s emulzifikačními a suspenzními činidly. Do přípravku lze přidat i určitá sladidla a/nebo látky pro úpravu chuti a/nebo látky pro úpravu barvy.
Ostatní vhodné přísady a nosiče pro přípravu farmaceutického přípravku podle současného vynálezu jsou uvedeny ve farmaceutické literatuře: „Remingtonů Pharmaceutical Sciences“, The
Science and Practice of Pharmacy, 19* Ed. Mack Publishing Company, Easton, Penn, (1995).
V případě použití sloučenin podle současného vynálezu jako inhibitorů proteázy HCV k prevenci a k léčbě onemocnění způsobených virem HCV, pak je dávkování v rozmezí od přibližně 0,01 do přibližně 100 mg/kg tělesné hmotnosti a den, především v rozmezí od přibližně 0,5 do přibližně
75 mg/kg tělesné hmotnosti a den. Farmaceutické přípravky podle současného vynálezu se podávají jedenkrát až pětkrát denně nebo eventuálně jako kontinuální infuze. Tuto formu podání lze použít při léčbě chronického nebo akutního onemocnění. Velikost jediné dávky lékové formy, která obsahuje účinnou složku eventuálně s materiálem nosiče, se liší podle stavu pacienta a způsobu podání léčiva. Obvykle obsahuje od přibližně 5 % hmotnostních do přibližně 95% hmotnostních účinné složky. Preferujeme, když tyto přípravky obsahují od přibližně 20 % do přibližně 80 % účinné sloučeniny.
Velikost jednotlivých dávek účinné sloučeniny ovlivňuje mnoho v oboru známých okolností. Dávkování a režimy dávkování se u jednotlivých pacientů liší podle věku, tělesné hmotnosti, celkového zdravotního stavu, pohlaví, dietních návyků, době podání a míře vylučování. Závisí také na použité lékové kombinaci, závažnosti a průběhu infekčního onemocnění, a dále na dispozici pacienta k infekčním onemocněním a také na terapeutické zkušenosti lékaře.
Terapie obvykle začíná podáváním malých dávek, podstatně nižších než je optimální dávka peptidu. Dávkování se pak postupně pomalu zvyšuje přidáváním malých množství účinné látky
-25do nastavení optimálního dávkování s požadovaným účinkem. Je důležité, aby dávkování bylo stanoveno tak, aby nezpůsobovalo pacientovi vážné a kvalitu života omezující vedlejší účinky.
Pokud přípravek podle současného vynálezu obsahuje kombinaci sloučeniny obecného vzorce I a jedno nebo více dalších terapeutických nebo profýlaktických činidel, pak by jednotková dávka sloučeniny podle současného vynálezu spolu s dalším činidlem měla být přítomna v množství od 10 do 100 %. Preferujeme množství účinné látky a dalších terapeutických nebo proíýlaktických činidel podávaných jako monoterapeutikum v rozmezí od přibližně 10 do 80 %.
io Pokud se sloučeniny podle současného vynálezu nebo jejich farmaceuticky vhodné soli podávají společně s farmaceuticky vhodným nosičem k inhíbici proteáz NS3 viru HCV nebo k terapii nebo prevenci infekce virem HCV, pak lze vytvořený přípravek podávat in vivo savcům (člověku). Tuto terapii lze provést podáním sloučeniny podle současného vynálezu v kombinaci s činidly, mezi které také patří: imunomodulační Činidla (α-, β-, nebo γ-interferony), jiná antivirová činidla (ribavirin, amantadin), další inhibitory proteáz NS3 viru HCV, inhibitory dalších životně důležitých biologických procesů viru HCV (inhibitory helikázy, polymerázy, metaloproteázy. IRES nebo kombinace těchto činidel. Tyto další terapeutická a proťylaktická činidla lze sloučit se sloučeninami podle současného vynálezu za vzniku jediné účinné dávky. Tyto další složky lze také savcům podat odděleně jako součást mnohočetných jednotlivých dávek.
Podstata současného vynálezu se týká způsobu inhibice NS3 proteázy viru HVC u savců podáním sloučeniny obecného vzorce I, substituované podle shora uvedených definic.
Preferovaná podstata současného vynálezu se týká způsobu snížení proteázové aktivity NS3 viru
HCV u savců. Pokud farmaceutický přípravek obsahuje pouze sloučeninu podle současného vynálezu jako účinnou složku, pak tento způsob navíc zahrnuje následné podání imunomodulačních činidel, antivirových činidel, inhibitorů HCV proteáz nebo inhibitoru jiných životně důležitých funkcí viru HCV (inhibitoru helikázy, polymerázy, metaloproteázy nebo IRES). Tyto činidla lze podat savcům před, současně nebo následně po podání přípravku podle současného vynálezu.
Jiná podstata současného vynálezu se týká inhibice virové replikace u savců. Tento postup je významný v terapii a prevenci infekčních onemocnění způsobených virem HCV. Pokud farmaceutický přípravek obsahuje pouze sloučeninu podle současného vynálezu jako účinnou složku, pak tento způsob navíc zahrnuje následné podání imunomodulaČních činidel, antivirových činidel, inhibitorů HCV proteáz nebo inhibitoru jiných životně důležitých funkcí viru HCV (inhibitoru helikázy, polymerázy, metaloproteázy nebo IRES). Tyto činidla lze podat savcům před, současně nebo následně po podání přípravku podle současného vynálezu.
Sloučeniny podle současného vynálezu lze použít jako laboratorní reakční činidla. Sloučeniny podle současného vynálezu lze také použít k terapii nebo prevenci virové kontaminace materiálu, a tak snížit riziko virové infekce laboratorního nebo lékařského personálu, pacientů nebo osob, které jsou vystaveny styku s infekčním materiálem (krev, tkáně, chirurgické a laboratorní nástroje a prádlo, zásobníky krve a transfúzních zařízení).
Sloučeniny podle současného vynálezu lze použít jako reakční činidla pro výzkum. Sloučeniny podle současného vynálezu lze také použít jako pozitivní kontrolu při stanoveních za použití náhradních buněk nebo při replikačních in vitro nebo in vivo stanoveních.
Přehled postupu přípravy
Sloučeniny podle současného vynálezu se připraví podle postupu popsaného schématem I (kde CPG znamená ochrannou skupinu karboxylu a APG znamená ochrannou skupinu aminoskupiny):
-26Schéma I
P1
P1-CPG + APG-P2
APG-P2-P1-CPG
Zbytky Pl, P2 a P3 lze navázat obecně známými technikami pro vazbu peptidů. Skupiny Pl, P2 a P3 lze společně spojit jakýmkoli způsobem tak, aby výsledné peptidy odpovídaly sloučenině uvedeného vzorce I. Například, skupinu P3 lze navázat ke P2-P1 nebo Pl navázat na P3-P2.
Peptidy se obvykle prodlouží odštěpením ochranné skupiny z α-amino skupiny N-konce peptidu a následnou vazbou na nechráněnou karboxylovou skupinu aminokyseliny schráněným N-koncem, a to peptidovou vazbou popsaným způsobem. Tato deprotekce a následná vazba se io opakuje do vzniku požadované sekvence. Vazebná reakce se provede metodou postupné syntézy (schéma I) nebo kondenzací fragmentů (o dvou nebo několika aminokyselinách) nebo kombinací obou metod. Peptidy lze připravit syntézou peptidů na pevné fázi podle popsaného postupu Merrifielda uveřejněného v J. Am. Chem. Soc. (1963), 85,2149-2154.
Vazbu dvou aminokyselin, aminokyseliny a peptidu nebo dvou zbytků peptidů lze provést standardními vazebnými postupy - azidovou metodou, metodou směsných anhydridů kyseliny karbonylové a karboxylové (izobutyl-chlormravenčan), metodou karbodiimidovou (dicyklohexyl-karbodiimid, diizopropyl-karbodiimid nebo ve vodě rozpustný karbodiimid), metodou aktivovaného esteru (p-nitrofenyl-ester, imido-ester kyseliny N-hydroxysukcinové), K-meto20 dou Woodwardovým činidlem, metodou karbonyl-diimidazolovou, metodou s činidly fosforu nebo oxidačně-redukčními metodami. Některé uvedené metody (především karbodiimidovou metodu) lze pozitivně ovlivnit přidáním 1-hydroxy-benzotriazolu. Uvedené vazebné reakce lze provést buď v roztoku (kapalná fáze), nebo na pevné fázi.
Vazebná reakce, která vede ke vzniku amidové vazby, zahrnuje vazbu volného karboxylu jednoho reakčního činidla s volnou aminoskupinou druhého reakčního činidla za přítomnosti vazebného činidla. Popisem vazebných činidel se zabývá učebnice chemie peptidů (M. Bodanszky, „Peptide Chemistry“, druhé upravené vydání, Springer-Verlag, Berlin, Germany, (1993)).
Příkladem vhodných vazebných činidel je Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimid, 1-hydroxybenzotriazol za přítomnosti N,N'~dicyklohexylkarbodiimidu nebo N-ethyl-N'-[(3-dimethylamino)propylj-karbodiimidu. Velmi praktická a použitelná jsou komerčně dostupná vazebná činidla (benzotriazol-l-yl-oxy)tris-(dimethylamino)-fosfonium-hexafluorfosfát, a to buď samostatný, nebo za přítomnosti 1-hydroxybenzotriazolu. Jiným komerčně dostupným činidlem je 24 1 H-benzotriazol-l-yiy-Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethyl-uronium-tetrafluor-borát. Dalším komerčně dostupným Činidlem je O47-azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N -tetramethyluroniumhexafluorfosfát.
Vazebná reakce se provede v inertním rozpouštědle (dichlormethanu, acetonitrilu nebo dimethylformamidu). Do reakČní směsi se v přebytku přidá terciární amin (diizopropylethylamin,
-27N-methylmorfolin nebo N-methylpyrrolidin) k pH reakční směsi přibližně 8. Teplota reakční směsi je v rozmezí 0 a 50 °C a reakční doba je v rozmezí 15 minut až 24 hodin.
Pokud se peptid připravuje metodou na pevné fázi, pak karboxylová skupina na C-konci je 5 připevněna na nerozpustný nosič (obvykle polystyren). Tento nerozpustný nosič obsahuje skupinu, která vstoupí do reakce s karboxy lovou skupinou za vzniku vazby, která je vůči elongaci stabilní, ale je později štěpena. Lze použít: chlor- nebo brom-methylovou pryskyřici, hydroxymethylovou pryskyřici, tritylovou pryskyřici a 2-methoxy-4-alkoxy-benzyl-alokonolovou pryskyřici.
Většina těchto pryskyřic sjiž inkorporovaným C-koncem aminokyseliny je na trhu dostupná. Aminokyseliny lze eventuálně inkorporovat do pevné fáze obecně známými postupy (S. S. Wang, J. Am. Chem. Soc., (1973), 95, 1328, E. Atherton, R. C. Shepard „Solid-phase peptide synthesis, a practical approach“ IRL Press: Oxford, (1989), 131-148.
Dalšími postupy syntézy peptidů se zabývají následující publikace: Stewart a Young „Solid-Phase Peptide Synthesis“, druhé vydání, Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984),
Gross, Meienhofer, Udenfriend, Eds., „The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology“, sv. 1,2,3,5, a 9, Academie Press, New-York, (1980-1987), Bodansky a spol., „The Practice of Peptide Synthesis“ Springer-Verlag, New-York (1984).
Funkční skupiny jednotlivých aminokyselin vstupujících do vazebné reakce musí být chráněny, tak aby se zabránilo vzniku nežádoucích vazeb. Popisem ochranných skupin se zabývají publi25 kace: Green- „Protective Groups in Organic Chemistry“, John Wiley & Sons, New York (1981) a „The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology“, sv. 3, Academie Press, New York (1981).
Karboxylové skupiny vázané na α-uhlíkový atom C-konce peptidu jsou obvykle chráněny estery (CPG), jejichž oddělením vznikne kyselina karboxylová. Vhodnými ochrannými skupinami jsou:
1) alkylestery (methylu, trimethy Isily (ethylu a t-butylu),
2) aralkylestery (benzylestery a estery substituovaného benzylu) nebo
3) estery, které lze štěpit mírným působením zásadou nebo mírným redukčním činidlem (trichlorethylem a fenacyl-estery).
Aminoskupina vázaná na a uhlíkový atom každé aminokyseliny musí být pro uvedení do vazebné reakce na narůstajícím peptidovém řetězci chráněna ochrannou skupinou aminokyselin (APG). Lze použít jakoukoli v oboru známou ochrannou skupinu. Příkladem vhodných skupin jsou:
1) acylové skupiny (formyl, trifluoracetyl, ftalyl, a p-toluensulfonyl),
2) aromatické karbamátové skupiny (benzyloxykarbonylová skupina Cbz nebo Z), substituované benzyloxykarbonylové skupiny a 9-fluorfenyl-methyloxykarbonyl (Fmoc),
3) alifatické karbamátové skupiny (terc.-butyloxykarbonyl (Boc), ethoxykarbonyl, diizopropyl-methoxykarbonyl a alyloxykarbonyl),
4) cyklické alkyl-karbamátové skupiny (cyklopenty I-oxy karbony 1 a adamantyl-oxykarbonyl),
5) alkylové skupiny (trifenyl-methyl a benzyl),
-286) trialky 1-silyl (trimethylsilyl) a
7) thiol obsahující skupiny (fenyl-thiokarbonyl a dkhiasukcinoyl).
Preferovanou ochrannou skupinou aminoskupiny vázané na α-uhlíkovém atomu aminokyseliny je buď Boc, nebo Fmoc. Na trhuje pro syntézu peptidů k dispozici mnoho eventuálně chráněných derivátů aminokyselin.
io Před uvedením do reakce s další aminokyselinou je nutné odštěpení ochranné skupiny z α-aminoskupiny. Pokud je ochrannou skupinou Boc, pak k odštěpení ochranné skupiny lze zvolit čistou kyselinu trifluoroctovou nebo její roztok v dichlormethanu, dále kyselinu chlorovodíkovou v dioxanu nebo v ethylacetátu. Vytvořená amoniová sůl se pak neutralizuje buď před vazebnou reakcí, nebo in šitu přidáním zásaditých roztoků (vodných roztoků pufrů, terciárních aminů v dichlormethanu, acetonitrilu nebo dimethylformamidu). Pokud se použije skupina Fmoc, pak činidlem volby je piperidin nebo substituovaný piperidin v dimethylformamidu, ale lze také zvolit některý sekundární amin. Odštěpení ochranných skupin se provede při teplotě v rozmezí od 0 °C do teploty místnosti (RT), obvykle 20 až 22 °C.
Každá funkční skupina vedlejšího řetězce aminokyseliny se během přípravy peptidu musí chránit shora uvedenými ochrannými skupinami. Výběr a použití vhodných ochranných skupin těchto funkčních skupin závisí na druhu aminokyseliny a přítomnosti jiných ochranných skupin v peptidu. Výběr ochranných skupin se řídí také tím, že se tyto skupiny nesmí odstranit během deprotekce a vazebných reakcí a-aminoskupin.
Pokud je Boc ochrannou skupinou α-aminoskupiny, pak jako ochrannou skupinu vedlejšího řetězce lze použít následující skupiny: p-toluensulfonylovou (tosylovou) skupinu lze použít k ochranně aminoskupiny vedlejšího řetězce lysinu a argininu. Acetamidomethylovou, benzylovou nebo t-butylsuífonylovou skupinu lze použít k ochraně sulfidové skupiny vedlejšího řetězce cysteinu. Benzyl-(Bn)-étery jsou vhodné k ochraně hydroxyskupiny vedlejšího řetězce šeřinu, threoninu nebo hydroxyprolinu. Benzylestery se používají k ochraně karboxy skupiny vedlejšího řetězce aspartové kyseliny a glutamové kyseliny.
Pokud jako ochrannou skupinu α-aminoskupiny použijeme Fmoc, pak lze vedlejší řetězce aminokyselin chránit vazbou s ochrannými skupinami založenými na terc-butylu. Pro lysin a arginin lze použít terc-butyloxy-karbonyl (Boc), terc-butyléter pro serin, threonin a hydroxyprolin a terc-butyl-ester pro kyseliny aspartovou a glutamovou. Trifenylmethylovou (tritylovou) skupinu lze použít k ochraně sulfidové skupiny vedlejšího řetězce cysteinu.
Po elongaci peptidu se všechny ochranné skupiny odstraní. Pokud jsme zvolili metodu syntézy peptidu v roztoku, pak se ochranné skupiny odštěpí sloučeninami typickými pro jednotlivé ochranné skupiny.
Pokud se peptídy připravují metodou syntézy na pevné fázi, pak je vytvořený peptid oštěpen z pryskyřice se současným odstraněním ochranných skupin. V případě použití ochranné terc-butyloxykarbonylové skupiny (Boc), pak preferovaným způsobem odštěpení peptidu z pryskyřice je působení bezvodým roztokem fluorovodíku obsahujícího přísady (dimethylsulfid, anizol thioanizol nebo p-kresol) při teplotě 0 °C. Odštěpení peptidu lze dosáhnout i jinými kyselými reakcními Činidly (směsí trifluormethan-sulfonové kyseliny a kyseliny trifluoroctové).
Při použití Fmoc ochranných skupin se skupina Fmoc na N-terminálu peptidu odštěpí činidly shora popsanými. Ostatní ochranné skupiny a peptidy se z pryskyřice odštěpí za použití roztoku kyseliny trifluoroctové a různých přísad (anizolu atd.).
-29Syntéza ochranné (capping) skupiny B
1.1) Pokud B znamená aryl, aralkyl, pak se arylované aminokyseliny připraví jednou z následujících tří metod;
a) Přímé nukleofílní nahrazení fluor-nitroskupiny arylu:
(a)
H^^COOH (b)
4-Fluor-3-nitro-benzo-trifluorid (a) se při teplotě 80 °C uvede do reakce s L-am i noky se linou (b) za přítomnosti zásady (uhličitanu draselného) za vzniku požadované N-aryl-aminokyselmy (c).
b) Vazebná reakce katalyzovaná mědí (podle Ma a spol., J. Am. Chem. Soc, 1998, 120, 12459-12467);
(d) (b) (e)
Brom^t-fluor-benzen (d) se uvede do reakce s L-aminokyselinou (b) za přítomnosti zásady (uhličitanu draselného) a katalytického množství jodidu měďného při teplotě 90 °C za vzniku požadované N-aiylaminokyseliny (e) nebo
c) Nukleofílní nahrazení trifluoracetátu anilinem:
+ TfO^COOBn
NHj
Í0
(9) ^N^COOBn O H
Do reakce se uvede o-anisidin (f) s trifluoracetátem (g) za přítomnosti zásady (2,6-lutidinu) při teplotě 90 °C za vzniku benzyl-esteru (h). Hydrogenací za přítomnosti 10% katalyzátoru palladia na aktivním uhlí vznikne požadovaná N-ary l-am inokyselina (i).
-301.2) Pokud B znamená amino-thiazolový derivát:
a) Fmoc-NjcG=S
H2N’P3-íP2-p’]'COOMe-:--- Fmoc-NH-C(S)-HN-P3-lP2-P-3-COOMe
b) DBU. DMF
Rl
NH-C(S)*HN-P3*{P2-P1}-COOMe
R2
ΧγΟΗ
a) Fmoc-thiokyanát (připravený podle Keamey a spol., 1998, J. Org. Chem, 63, 196) se uvede do reakce s chráněným zbytkem P3 nebo celým peptidem nebo peptidového segmentu za vzniku thiomočoviny.
b) Derivát thiomočoviny je uveden do reakce s vhodným bromketonem za vzniku odpovídajícího thiazolového derivátu.
ίο 1.3) Pokud B je RHAO)-, R4-S(O)2:
Chráněný P3 nebo celý peptid nebo peptidový segment se naváže na vhodný acyl-chlorid nebo sulfonyl-chlorid, které jsou buď na trhu dostupné, nebo je jejich syntéza v oboru známá.
1.4) Pokud B je 1^0-0(0)-:
Chráněný P3, celý peptid nebo peptidový segment se naváže na vhodný chlormravenčan, který je buď na trhu dostupný, nebo je jeho syntéza v oboru známá. Pro Boc-deriváty se používá (Boc)3O.
Například:
a) Na cyklobutanol se působí fosgenem za vzniku odpovídajícího chlormravenČanu.
b) Na chlormravenčan se působí požadovaným NHr-tripeptidem za přítomnosti zásady (triethylaminu) za vzniku cyklobutyl-karbamátu.
1.5) Pokud B je R,-N (R5)-C(0>-, nebo R4-NH-C(S)-, pak se chráněný P3 nebo celý peptid nebo peptidový segment působí fosgenem, a následně aminem podle SynLett, únor 1995; (2); 142-144.
-312. Syntéza P2 zbytků
2.1 Syntéza prekurzorů:
A) Syntéza haloaryl-metanových derivátů
Příprava halomethyI-8-chinolinu lid se provede podle postupu K. N. Campbella a spol,, J, Amer. Chem. Soc., (1946), 68, 1844.
Schéma II
lla llb 11c
Kyselina 8-chinolin-karboxylová Ha se přemění na odpovídající alkohol líc redukcí odpovídajícího acyl-halogenidu Hb redukčním činidlem (lithium-aluminium-hydridem). Působením odpovídající halogen vodíkovou kyselinou vznikne požadovaný derivát lid. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 1,
B) Syntéza aryl-alkoholových derivátů:
2-fenyl-4-hydroxychinolínové deriváty IIIc se připraví podle Giardinaa spol., (J. Med. Chem, (1997), 40, 1794-1807).
Schéma III
R22 & R21B - alkyl, hydroxyskupina, merkaptoskupina, atom halogenu, aminoskupina, nitroskupina.
Kondenzací benzoyl-acetamidu lila s vhodným anilinem Illb vznikne imin, který se cyklizuje 30 působením kyseliny póly fosforečné za vzniku odpovídajícího 2-fenyM-hydroxychinolinu IIIc.
Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 2.
Jiným způsobem přípravy je postup popsaný v příkladě 3: Benzylester Hla se kondenzuje odpovídajícím anilinem IIIb za přítomnosti kyseliny nebo iminu získaného cyklizací zahříváním k teplotě 260 až 280 °C za vzniku odpovídajícího 2-f'enyM-hvdroxychinolinu IIIc. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 3 (sloučenina 3e).
-322.2, Syntéza P2:
A) Syntéza 4-substituovaného prolinu, kde R2 je s uhlíkovým cyklem spojeno atomem uhlíku podle znázorněného prostorového uspořádání:
Boc
Sloučenina se připraví podle schématu IV a podle postupů J. Ezquerra a spol. (Tetrahedron, 1993, 38, 8665-8678) a C. Pedregal a spol. (Tetrahedron Lett, 1994,35, 2053-2056).
io Schéma IV
Boc-pyroglutamová kyselina je chráněna za vzniku jejího benzylesteru. Působením silnou zásadou (diizopropylamidem lithným), a následným přidáním alkylačního činidla (Br-R20 nebo I-R20) se po redukci amidem a odštěpením esterové ochranné skupiny vytvoří požadovaná slou15 čeninalVe.
B) Syntéza O-substituovaného-4-(R)-hydroxyprolinu:
COOH se provede různými způsoby následně popsanými:
1) Pokud je R20 aryl, heterocyklus, aralkyl nebo (nižší alkylj-heterocyklus, pak je postup přípravy popsán E. M. Smithem a spol. (J, Med. Chem. (1988), 31, 875-885). Na komerčně dostupný Boc-4(R)-hydroxyprolin se působí zásadou (hydridem sodným nebo terc-butyloxidem draselným) a vytvořený alkoxid se uvede do reakce s halogen-R20 (Br-R20,I-R20, atd„) za vzniku požadovaných sloučenin. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladech 4,5 a 7,
2) Pokud R20 je aryl nebo heterocyklus, pak lze sloučeniny také připravit Mitsunobovou reakcí (Mitsunobu 1981, Synthesis, leden, 1-28; Ráno a spol., 1995, Tet. Lett. 36 (22), 3779-3792; Krchňák a spol., 1995, Tet. Lett. 36 (5), 62193-6196; Richter a spol., (1994), Tet. Lett. 35 (27),
4705-4706). Na komerčně dostupný methylester Boc-4(S)-hydroxyprolinu se působí vhodným
-33aryl-alkoholem nebo thiolem za přítomnosti trifenylfosfmu a diethylazo-dikarboxylátu (DEAD). Vytvořený ester se hydrolyzuje na kyselinu. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladech 6 a 8.
Schéma V
Mitsunobovu reakci lze provést na pevné fázi (Schéma V). Na desku s 96 prohlubněmi pro Model 396 syntetizátoru (advanced ChemTech) vybavené alikvoty pryskyřici vázající sloučeniny Va se přidají aryl-alkoholy nebo thioly a vhodná reakční činidla. Po inkubaci, se produkt Vb vázaný na pryskyřici promyje, suší a odštěpí z pryskyřice.
Reakcí podle Suzuki (Miyaura a spol., 1981, Synth. Comm. 11,513, Sáto a spol., 1989, Chem. Lett, 1405, Watanabe a spol., 1992, Synlett, 207, Takayuki a spol., 1993, J. Org. Chem. 58,2201,
Frenette a spol., 1994, Tet. Lett. 35 (49), 9177-9180, Guiles a spol., (1996), J. Org. Chem. 61, 5169-5171) lze k arylovému substituentu vázat další funkční skupiny.
3. Syntéza skupin PÍ
3.1 Syntéza 4 možných izomerů 2-substituovaných t-aminocyklopropyl-karboxylových kyselin
Syntéza se provede podle schématu VI.
-34Schéma VI
Vlf
R, je .syn k esteru nebo
P*COO w COOF Vig e>
P’COO , COOH vin
a) Di-chráněný malonát Via a 1,2-dihaloalkan VIb nebo cyklický sulfát Víc (K. Burgess aChun-Yen KE, Synthesis, 1996, 1463-1467) se uvedou do reakce pri zásaditém pH za vzniku diesteru Vid, io b) Místně selektivní hydrolýzou méně blokovaného esteru vznikne kyselina Vle.
-35c) Reakcí podle Curtise se kyselina Vle uspořádá za vzniku racemické směsi derivátu 1-aminocyklopropyl-karboxylové kyseliny Vlf, kde R1 je syn vzhledem ke karboxylové skupině. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 9.
d) e) Alternativním způsobem přípravy je vytvoření selektivního esteru z kyseliny Vle za použití vhodného halogenidu (P*C1) nebo alkoholu (P*OH) za vzniku diesteru Vlg, kde P* ester se odštěpí selektivní hydrolýzou. Hydrolýzou P esteru vznikne kyselina Vlh.
f) Uspořádáním podle Curtise kyseliny Vlh se vytvoří racemická směs derivátů 1-aminoio cyklopropyl-karboxylové kyseliny VIí, kde R1 je v ani i ke karboxylové skupině.
Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 14.
Alternativní syntéza přípravy derivátů Vlf, kde R] je vinyl syn ke karboxylové skupině, je popsána dále.
Schéma Vil
CO2P
Vila
R = H. alkyl, aryl + halo
Na komerčně dostupný nebo snadno vyrobíte!ný imin Vila se za přítomnosti zásady působí
2o 1,4-dihalobutenem VHb. Po hydrolýze vytvořeného iminu Vile vznikne Vild s alylovým substituentem v poloze syn ke karboxylové skupině. Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladech 15 a 19.
Rozdělení shora uvedených směsí enantiomerů s asymetrickým atomem uhlíku v poloze 1 (Vie a Vild) lze provést:
1) Enzymatickou separací (příklady 13, 17 a 20),
2) krystalizaci s chirální kyselinou (příklad 18) nebo
3) chemickou derivatizací (příklad 10).
Po rozdělení lze absolutní stereochemii izomerů určit postupem podle příkladu 11.
Rozdělení a následné určení absolutní stereochemie izomerů, kde substituent na atomu uhlíku v poloze 2 je v poloze anti ke karboxylové skupině (Vli), lze provést způsobem uvedeným pro směsi enantiomerů na asymetrickém uhlíku v poloze 1.
3.2 Syntéza 1-amino-cykl obuty I-karboxylové kyseliny
Syntéza 1, ] -amino-cyklobutan-karboxylové kyseliny se provede podle Kavin Douglas; Ramaligam Kondareddiar; Woodad Ronald, Synth. Commun. (1985), 15 (4), 267-72.
-36Schéma VIII
Vlila v»fc
X = halogen
Villc Vllld hydrochlorid
Na sloučeninu Vlila se působí zásadou za přítomnosti VHIb za vzniku odpovídajícího cyklobutylového derivátu VIIIc. Hydrolýzou izokyanátových a esterových skupin VIIIc za přítomnosti kyseliny (HC1) vznikne hydrochlorid 1-amino-cyklobutyl-karboxylové kyseliny Vllld, Karboxylová kyselina se následně esterifíkuje za přítomnosti methanolu v chlorovodíku, Podrobný popis této podstaty vynálezu je uveden v příkladě 21.
3.3 Syntéza 2-substituované 1-amino-cyklobutyl-karboxylové kyseliny
Schéma IX
a) Chráněný glycin-esterový derivát (imin IXa) se alkyluje homoalylickým elektrofilem IXb za použití vhodné zásady (hydrid, hydroxid nebo alkoxid kovu). Vhodnými odŠtěpitelnými skupinami v IXb jsou halogeny (X - atom chlóru, brómu nebo jódu) nebo sulfonát-estery (mesylát, tosylát nebo trifluoracetát). Funkční skupina alylického alkoholu v IXb je chráněna hydroxylovými ochrannými skupinami (acetát, silyl, acetaly).
b) Druhým krokem přípravy je odstranění ochranné skupiny z hydroxylu monoalkylovaného derivátu IXc a přeměna na vhodnou elektrofilní funkční skupinu X (podle shora popsaného postupu pro sloučeninu IXb).
c) Cyklizace IXd na cyklobutanový derivát IXe se provede působením zásadou (hydridy, alkoxidy kovu), a následně hydrolýzou za použití vodného roztoku minerální kyseliny a neutralizaci mírnou zásadou. Následně lze syn a antí-izomery IXe oddělit rychlou chromatografií.
d) Eventuálně se dvojná vazba v IXe hydrogenuje za standardních podmínek za vzniku odpovídajícího nasyceného derivátu IXf.
Další podstatou vynálezu je postup přípravy peptidového analoga obecného vzorce I, kde PÍ je substituovaný zbytek aminocyklopropylkarboxylové kyseliny, který má tyto části:
· vazebná reakce APG-P3-P2 nebo APG-P2 • s PÍ meziproduktem vzorce:
O-CPG
CPG
O-CPG kde R| je Cí^alky 1, cykloalkyl nebo C2^alkenyl, vždy eventuálně substituované halogenem, CPG je ochranná skupina karboxylové skupiny aminokyseliny a APG znamená ochrannou skupinu aminoskupiny a P3 a P2 jsou shora popsány.
Podstata vynálezu se týká postupu přípravy: 1) peptidového analoga inhibitoru serinové proteázy nebo 2) peptidového analoga inhibitoru HCV NS3 proteázy, který zahrnuje:
ío • vazebnou reakci (vhodně chráněné) aminokyseliny, peptidu 1 nebo peptidového fragmentu • s PÍ meziproduktem vzorce:
kde Ri je C^alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C2_6alkenyL vždy eventuálně substituovaný halogenem a CPG je ochranná skupina karboxyskupiny.
Podstata vynálezu se týká postupu přípravy: 1) peptidového analoga inhibitoru proteázy nebo 2) peptidového analoga inhibitoru serinové proteázy, který zahrnuje:
• vazebnou reakci (vhodně chráněné) aminokyseliny, peptidu nebo peptidového frag20 mentu • s meziproduktem vzorce:
kde CPG je ochranná skupina karboxylu.
Podstatou vynálezu je použití PÍ meziproduktu vzorce:
kde Rj je Ci^alkyl, cykloalkyl nebo Ci^alkenyl. vždy eventuálně substituované halogenem, CPG znamená ochrannou skupinu karboxyskupiny
-38pro přípravu 1) peptidového analoga inhibitoru proteázy nebo 2) peptidového analoga inhibitoru HCV NS3 proteázy.
Podstatou vynálezu je použití PÍ meziproduktu vzorce:
kde CPG znamená ochrannou skupinu karboxyskupiny, pro přípravu 1) peptidového analoga inhibitoru proteázy nebo 2) peptidového analoga inhibitoru serinové proteázy.
Podstatou vynálezu je použití PÍ meziproduktu vzorce:
kde Ri je Ci_6alkyl, cykloalkyl nebo C2_óalkenyl, vždy eventuálně substituované halogenem, CPG znamená ochrannou skupinu karboxyskupiny pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I,
Podstata současného vynálezu se týká použití prolinového analoga vzorce;
kde R2ja je Ci^alkyl, C]^alkoxy, nižší thioalkyl, halogen, aminoskupina eventuálně monosubstituovaná C,^alkylem. dále C6, C)0 aryl, C7-ie aralkyl nebo heterocyklus, shora uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je alkyl, Ci^alkoxy, amidoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina, aminosku25 pina eventuálně mono- nebo di-substituovaná C^ alkylem nebo Het, a kde R2ib je Ci^alkyl, Ci_6alkoxy, aminoskupina, di—(nižší alkyíj-aminoskupina, (nižší alkyl) amid, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethylová nebo karboxylová skupina v přípravě: 1) peptidového analoga inhibitoru serinové proteázy nebo
2) peptidového analoga inhibitoru HCV NS3 proteázy nebo
3) peptidového analoga shora uvedeného obecného vzorce Ϊ.
-39Příklady provedení vynálezu
Sloučeniny podle současného vynálezu jsou podrobněji popsány následnými nelimitujícími příklady.
Teplota je uvedena ve stupních Celsia. Roztoky jsou vyjádřeny ve hmotnostně objemových procentech, poměry roztoků jsou vyjádřeny ve vztahu objemů, pokud není uvedeno jinak. Hodnoty spektra NMR se odečítají na spektrometru Broker 400 MHz, hodnoty chemického posunu se udávají v částicích na milion (ppm). Rychlá chromatografie se provede na silikagelu (SiO2) podle io Stillovy techniky rychlé chromatografie (W. C. Still a spol., J. Org. Chem., 1978, 43,2923).
Použité zkratky
Bn
Boc BSA CHAPS DBU
CH2CI2 = DCM
DEAD DIAD DIEA DIPEA DMAP
DCC DME DMF DMSO DTT
DPPA EDTA Et
EtOH
EtOAc
Et2O HATU
HPLC
MS
MALD1-TOF FAB LAH Me
MeOH
MES
NaHMDS
NMM
NMP
Pr
Succ PNA TBAF TBTU TCEP
TFA benzyl terc-butyloxykarbonyl {Me3COC(O)} hovězí sérový albumin
3-[(3-cholamido-propyl)dimethyl-amonio]-]-propan-sulfonát
1,8-diazabicyklo-[5,4,0]-undec-7-en methylen-chlorid diethylazodikarboxylát diizopropyl-azodikarboxylát diizopropylethylamin diizopropylethylamin dimethylaminopyridin
1,3-dicyklohexyl-karbodiimid
1,2-dimethyl-oxyethan dimethylformamid dimethylsulfoxid dithiothreitol nebo threo-l,4-dimerkapto-2,3-butandioI d i feny I fosfory l-azid ethylen-diamin-tetraoctová kyselina ethyl ethanol ethylacetát diety léter [0-7-azabenzotriazol-l-yl)-l, 1,3,3-tetramethyluronium-hexafluorfosfát] kapalinová chromatografie s vysokou rozlišovací schopností hmotnostní spektrometrie hmotnostní spektrometrie MALD1-TOF bombardování rychlými atomy lithium-aluminium-hydrid methyl methanol (2-{N-morfolino}-ethan-sulfonová kyselina) bis-(trimethylsilyl)—amid sodný
N-methylmorfolin
N-methylpyrrolidin propyl
3- karboxypropanoyl
4- nitrofenyl-amino- nebo p-nitroanilin tetra-n-butylammonium-fluorid
2-( 1 H-benzotriazol-l-yl)_l ,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborát tris-(2-karboxyethyl)-fosfin-hydrochlorid kyselina trifluoroctová
-40THF tetrahydrofuran
TIS triizopropylsilan
TLC chromatografie na tenké vrstvě
TMSE trimethylsilylethyl
Tris/HCl tris-(hydroxymethyl)-aminomethan-hydrochlorid.
Stavební jednotky P2
Příklad 1
Do 2,5 g (14,4 mmol) komerčně dostupné 8-chinolin-karboxylové kyseliny se přidá 10 ml (144 mmol) čistého thionyl-chloridu. Tato směs se 1 hodinu zahřívá na teplotu 80 °C, a pak se přebytek thionyl-chloridu se odstraní destilací za sníženého tlaku. Do vytvořené nahnědlé pevné látky se přidá 15 ml absolutního ethanolu, směs se 1 hodinu zahřívá na teplotu 80 °C, a pak se zahustí ve vakuu. Vytvořený zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku 2,8 g hnědého oleje. Tento materiál (přibližně 14,4 mmol) se po kapkách přidá během 35 minut do suspenze 0,76g (20,2 mmol) lithium-aluminium-hydridu v diethyléteru, která se zchladí na teplotu -60 °C. Reakční směs se během 1,5 hodiny pomalu zahřeje -35 °C, Reakce se ukončí pomalým přidáním během 30 minut vodného roztoku síranu hořečnatého (MgSO4 . 1OH2O), a pak vodného roztoku tetrahydrofuranu. Směs se rozdělí mezí dietyléter a 10% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku 2,31 g (výtěžek 80%) nažloutlé pevné látky odpovídajícího alkoholu. Ve 20 ml 30% roztoku kyseliny octové v bromovodíku (Aldrich) se rozpustí 2,3 g (11,44 mmol) tohoto alkoholu a reakční směs se 2,5 hodiny zahřívá na teplotu 70 °C. Směs se zahustí ve vakuu do sucha, rozdělí se mezi 100 ml ethylacetátu a nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, produkt se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku 2,54 g požadované sloučeniny 1 jako nahnědlé pevné látky s výtěžkem 100 %.
Příklad 2
Syntéza 2-fenyl-4-hydroxychinolinu (2):
V uzavřené trubici se na teplotu 85 °C 2 hodiny zahřívá roztok 6,00 g (31,2 mmol) komerčně dostupného ethyl-benzylacetátu v 75 ml 30% roztoku hydroxidu amonného. Pevný produkt získaný zchlazením reakční směsi se filtruje a 2 hodiny zahřívá pod refluxem ve vodě. Roztok se třikrát extrahuje methylenchloridem. Organické podíly se sloučí, suší se nad síranem horečnatým, filtrují se a zahustí. Vytvořený žlutý zbytek se čistí rychlou chromatografii na koloně silikagelu
-41 při eluci směsí ethylacetátu a hexanu v poměru 3 : 7 za vzniku 1,60 g odpovídajícího amidu jako bílé pevné látky s výtěžkem 31 %.
Směs 250 mg (1,53 mmol) tohoto amidu, 143 mg (1,53 mmol) anilinu a 10 mg (0,08 mmol) 5 anilin-hydrochloridu v 10 ml toluenu se 16 hodin zahřívá pod refluxem za použití DeanStarkova zařízení. Roztok se zahustí za vzniku hnědého oleje, který se smísí se 2 g fosforečné kyseliny a směs se 20 minut zahřívá na teplotu 135 °C. Reakční směs se vlije do vody a přivede se kpH 8 přidáním 5M roztoku hydroxidu sodného. Vodná suspenze se dvakrát extrahuje ethylacetátem. Organické podíly se sloučí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, io suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a zahustí. Vytvořený zbytek se po absorpci na kolonu silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci 3% roztokem methanolu v ethylacetátu za vzniku mg (20% výtěžek) 2-fenyM-hydroxychinolinu (2).
'H NMR (DMSO-dj): δ 8,11 (d, J = 7 Hz, 1H), 7,86 - 7,83 (m, 2H), 7,77 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,68 15 (dd, J = 8,7 Hz, 1H), 7,61 - 7,58 (m, 3H), 7,35 (dd, J = 8,7 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H).
Příklad 3
Syntéza 4-hydroxy-2-fenyl-7-methoxyehinolinu (3)
4-hydroxy-2-fenyl-7-methoxychinolin (e):
Roztok 100,0 g (0,52 mol) ethyl-benzylacetátu (b), 128,1 g (1,04 mol) m-anisidinu (a) a 5,2 ml 25 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu v 1,0 1 toluenu se 6,25 hodin zahřívá pod refluxem za použití Dean-Starkova zařízení. Zchlazený toluenový roztok se postupně promyje dvakrát 300 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, dvakrát 300 ml 1 N roztoku hydroxidu sodného, jedenkrát 300 ml vody a jedenkrát 150 ml nasyceného roztoku chloridu sodného.
Toluenový podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za sníženého tlaku za 30 vzniku 144,6 g směsi esteru c a amidu d (45 % / 38 % surový výtěžek) v poměru 1,2 : 1,0 jako tmavě hnědého oleje. Surový olej se 80 minut zahřívá na teplotu 280 °C, přičemž se destilací odstraní ethanol. Zchlazením vytvořená tmavá pevná látka se rozetře s 200 ml methylenchloridu.
Suspenze se filtruje a vytvořená pevná látka se promyje methylenchloridem za vzniku 22,6 g (17 % z produktu a) produktu e jako béžové pevné látky.
‘H NMR (DMSO-d6): δ 8,00 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81 - 7,82 (m, 2H), 7,57 - 7,59 (m, 3H), 7,20 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 9,0,2,2 Hz, 1H), 6,26 (s, 1H), 3,87 (s, 3H). 4-chloro-2-fenyl-7-methoxychinolin (3)
-42Suspenze 8,31 g (33,1 mmol) produktu e v 90 ml chloridu fosforylu (POCfi) se 2 hodiny zahřívá pod refluxem. Zahříváním vznikne čirý roztok, který se zahustí za sníženého tlaku. Vytvořený zbytek se rozdělí mezi IN roztok hydroxidu sodného (exotermní reakce, přidá se ION roztok hydroxidu sodného k vysoké hodnotě pH) a 500 ml ethylacetátu. Organický podíl se promyje
100 ml vody a 100 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za sníženého tlaku za vzniku 8,60g (96 %) 4-chlor-2-fenyl-7-methoxychinolinu (3) jako světle žluté pevné látky.
!H NMR (DMSO-dó): δ 8,28 - 8,30 (m, 2H), 8,20 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9, 1 Hz, 1H), 7,54 - 7,58 io (m, 3H), 7,52 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,38 (dd, J = 9,1,2,5 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H).
Tato reakce se opakuje třikrát s 96 až 98% výtěžkem, který je významně vyšší než 68% výtěžek podle J. Med. Chem. 1997,40,1794,
Příklad 4
Syntéza Boc-4(RXnafta1en-l-yl-methoxy)prolinu (4):
Ve 100 ml tetrahydrofuranu se rozpustí 5,00 g (21,6 mmol) komerčně dostupného Boc-4(R)hydroxyprolinu a roztok se zchladí na teplotu 0 °C. Po částech se během 10 minut přidá 1,85 g (45,4 mmol) 60% disperze hydridu sodného v oleji a suspenze se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Následně se přidá 8,00 g (36,2 mmol) l-(brommethyl)naftalenu, jehož příprava je popsána v E. A. Dixon a spol. Can. J. Chem., (1981), 59,2629-2641. Směs se 18 hodin zahřívá na teplotu refluxu, vlije se do 300 ml vody a promyje se hexanem. Vodný podíl se okyselí přidáním 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a dvakrát se extrahuje se ethylacetátem. Organické podíly se sloučí a promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a zahustí, Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí hexanu, ethylacetátu a kyseliny octové v poměru 49:49:2 za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako
4,51 g (56% výtěžek) bezbarvého oleje.
*HNMR (DMSO-d6) zjistila přítomnost dvou rotamerů: δ 8,05 (m, 1H), 7,94 (m, 1H), 7,29 (d, J = 14 Hz, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 4H), 4,96 (m, 2H), 4,26 (br s, 1H), 4,12 (dd, J = 8 Hz, 1H), 3,54 - 3,42 (m, 2H), 2,45 - 2,34 (m, 1H), 2,07- 1,98 (m, 1H), 1,36 (s, (3/9) 9H), 1,34 (s, (6/9)
9H).
Příklad 5
Syntéza Boc-4(R)-(8-chinolin-methoxy)-prolinu (5):
-43Do suspenze 1,4 g (34 mmol) 60% disperze hydridu sodného v oleji ve 100 ml tetrahydrofuranu se přidá 1,96 g (8,5 mmol) Boc^t(R)-hydroxyprolinu v 20 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Tato reakční směs se nejprve 30 minut míchá, a pak se přidá roztok 2,54 g (11,44 mmol) brommethyl-8-chinolinu (příklad 1) v 30 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se 5 hodin zahřívá na s teplotu 70 °C, přebytek hydridu sodného se opatrně odstraní vodným roztokem tetrahydrofuranu.
Reakční směs se zahustí ve vakuu a vytvořený materiál se rozpustí v ethylacetátu a vodě.
Zásaditý vodný podíl se oddělí a okyselí k pH přibližně 5 přidáním 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, a následně se extrahuje 150 ml ethylacetátu. Organický podíl se suší nad síranem horečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku hnědého oleje. Čištění rychlou chromatografií ío při eluci 10% roztokem methanolu v chloroformu se získá 2,73 g (86 %) požadované sloučeniny (5) jako světle žluté pevné látky.
HPLC (97,5%), *H-NMR (DMSO-dó) prokázala rotamery v poměru 6:4: δ 12-11,4 (bs, 1H), 8,92 (dvakrát d, j -4,14 a 4,14 Hz, 1H), 8,38 (dvakrát d, J = 8,27 a 8,27 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 7,94 Hz, 1H). 7,77 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,63 - 7,54 (m, 2H), 5,14 (dvakrát s, 2H), 4,32 - 4,29 (m, 1H), 4,14 - 4,07 (m, 1H), 3,523,44 (m, 2H), 2,43 - 2,27 (m, 1H), 2,13-2,04 (m, 1H), 1,36 a 1,34 (dvakrát s, 9H).
Příklad 6
Příprava Boc-4(R}-(7-chlor-chinolin-4-oxo)prolinu (6):
Směs 500 mg (2,04 mmol) komerčně dostupného methylesteru Boc^4(S)-hydroxyprolinu a 440 mg (2,45 mmol) 7-chlor-4-hydroxychinolitu se umístí do 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu při teplotě 0 °C. Nejprve se přidá 461 mg (2,95 mmol) trifenylfosfinu, a následné se pomalu přidá 426 mg (2,45 mmol) diizopropyl-azodikarboxylátu DIAD. Směs se 20 hodin míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se pak zahustí, zpracuje ethylacetátem a třikrát se extrahuje IN roztokem kyseliny chlorovodíkové. Vodný podíl se převede na zásadité pH přidáním uhličitanu sodného a dvakrát se extrahuje ethylacetátem. Organické podíly se sloučí, suší se nad síranem horečnatým, filtrují se a zahustí za vzniku zbytku jako žlutého oleje, který se čistí rychlou chromatografií za vzniku 498 mg methylesteru výsledné sloučeniny 6 jako bílé pevné látky s 58% výtěžkem.
Za použití 1,7 ml (1,7 mmol) 1M vodného roztoku hydroxidu sodného ve 4 ml methanolu se při teplotě 0 °C 3 hodiny hydrolyzuje 400 mg (0,986 mmol) shora vyrobeného methylesteru sloučeniny 6. Roztok se zahustí k odstranění methanolu a neutralizuje se přidáním 1M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Suspenze se zahustí do sucha a zpracuje ve 20 ml methanolu, soli se odstraní filtrací a filtrát se zahustí za vzniku 387 mg (kvantitativní výtěžek) požadované sloučeniny 6 jako bílé pevné látky.
'HNMR (DMSO-df.) (směs rotamerů v poměru 1:1): δ 8,74 (d, J= 5 Hz, 1H), 8,13- 8,09 (m, 1H), (s, 1H), 7,58 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 5 Hz, 1H), 5,26 - 5,20 (m, 1H), 4,10 - 4,01
-44(m, 1H), 3,81 - 3,72 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 12,10 Hz, 1H), 2,41 - 2,31 (m, 2H), 1,34 a 1,31 (s, 9H).
Příklad 7
Syntéza Boc^l(R)-(2-fenyl-7-inethoxychinolin-4-oxo}-prolinu (7):
Boc-4(R)-[(7-methoxy-2-fenyM-chinolinyl)oxy]-L-prolin (7): io
Do roztoku 6,73 g (29,1 mmol) komerčně dostupného 4-(S)-hydroxyprolinu v 83 ml DMSO se při teplotě 25 °C po malých částech během 15 minut přidá 8,16 g (72,7 mmol) terc-butoxidu draselného. Směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě 25 °C, Do vytvořené reakční směsi se během 15 minut přidá ve čtyřech částech 8,61 g (32,0 mmol) chlor-2-fenyl-7-methoxychinolinu (3).
Reakční směs se 19 hodin míchá při teplotě 25 °C. Vytvořená suspenze se vlije do 650 ml vody a směs se třikrát promyje 150 ml dietyléteru k odstranění přebytku chlor-chinolinu (účinnější byl následně shledán ethylacetát). Vodný podíl se okyselí k pH 4 až 5 přidáním 1N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové (vypočteno 38 ml 1,5 ekv., požadováno 43,6 ml). Bílá pevná látka jako sraženina se oddělí filtrací. Vlhká pevná látka se suší za sníženého tlaku nad oxidem fosforečným za vzniku 12,6 g (výtěžek 91 %, obsahuje 2,3 % hmotnostních DMSO) prolinového derivátu (7) jako béžové pevné látky.
’HNMR (DMSO-cL) (směs rotamerů v poměru 2:1): δ 8,27 (d, J= 7,0 Hz, 2H), 8,00, 7,98 (2d,J = Hz, 1H), 7,48- 7,56 (m, 3H), 7,45, 7,43 (2s, 1H), 7,39 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 9,2, 2,4 Hz, 1H), 5,53 - 5,59 (m, 1H), 4,34 - 4,41 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,76 (široké s, 2H), 2,63 - 2,73 (m, 1H), 2,32 - 2,43 (m, 1H), 1,36,1,33 (2s, 9H).
Příklad 8
Syntéza Boc-4 (R)-(2-fenyi-6-nitrochinolin-4-oxo)prolinu (8)
(δ)
Do míchaného roztoku 1,28 g (4,88 mmol) trifenylfosfinu v 15 ml tetrahydrofuranu se při teplotě 0 °C po kapkách přidá 0,77 ml (4,89 mmol) diethyl-azodikarboxylátu. Po 30 minutách míchání v atmosféře dusíku se přidá roztok 1,00 g (4,08 mmol) methylesteru Boc-4(S)-hydroxyprolinu v 5 ml tetrahydrofuranu, a následně suspenze 1,30 g (4,88 mmol) komerčně dostupného
6-nitro-2-fenyl-4-chinolinolu v 10 ml stejného rozpouštědla. Červená směs se při teplotě 0 °C míchá 15 minut a přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpařuje ve vakuu.
Olej se zředí ethylacetátem a promyje se dvakrát hydrogenuhličitanem sodným, jedenkrát vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem io hořečnatým, filtruje se a odpařuje ve vakuu. Vytvořený zbytek se čistí chromatografii na silikagelu při eluci směsí hexanů a ethylacetátu 70:30 za vzniku 1,70 g (výtěžek 85 %) požadovaného methylesteru jako světle žluté pevné látky.
'H NMR (CDC13) rotamery = 3:7:5 9,03 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,46 (dd, J = 9,2,5 Hz, 1H), 8,18 15 (d,J = 9Hz, 1H), 8,14 - 8,07 (m, 2H), 7,59- 7,50 (m, 3H), 7,19 (s, 1H), 5,39 - 5,30 (m, 1H),
4,67 (t, J = 8 Hz, 0,3H), 4,61 (t, J = 8 Hz, 0,7H), 4,07 - 4,01 (m, 2H). 3.81 (s, 3H), 2,89 - 2,73 (m, 1H), 2,55-2,47 (m, 1H), 1,49 (s, 2,7H), 1,45 (s, 6,3H).
Do roztoku 503 mg (1,02 mmol) methylesteru ve směsi 10 ml tetrahydrofuranu a 4 ml vody se 20 přidá 85 mg (2,05 mmol) monohydrátu hydroxidu lithného. Do vzniku homogenního roztoku se přidají 2 ml methanolu. Po 30 minutách vznikne bílá sraženina. Vytvořená suspenze se dalších hodin míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí 10% vodným roztokem citrónové kyseliny a extrahuje se ethylacetátem. Organický podíl se suší nad síranem horečnatým, filtruje se a odpařuje ve vakuu za vzniku 416 mg (85%) požadované kyseliny (8).
'H NMR (DMSO-ds): δ 8,92 - 8,87 (m, 1H), 8,47 (dd, J = 9,3 Hz, 1H), 8,38 - 8,32 (m, 2H), 8,19 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,62 - 7,55 (m, 3H), 5,73 - 5,66 (m, 1H), 4,41 (t, J = 8 Hz, 1H), 3,89 - 3,76 (m, 2H), 2,83 - 2,72 (m, 1H), 2,47 - 2,35 (m, 1 Η), 1,38 (s, 9H).
Stavební jednotky P1
Příklad 9
Syntéza směsi (IR, 2R) / (1S, 2R) l-amino-2-ethyl-cyklopropyl-karboxylové kyseliny
ButO2C^ CO2tBu 9a
b)6uOK, H?O
OX až teplota místnosti
d) 1.0 M TBAF ŤHF teplota místnosti až reflux
H2N
CO2tBu
9f etyi syn k esteru směs (RR/SS)
-46a) Do suspenze 21,0 g (92,19 mmol) benzyl-triethyl-amonium-chloridu v 50% vodného roztoku 92,4 g hydroxidu sodného v 185 ml vody se postupně přidá 20,0 g (92,47 mmol) dieter-butyhnalonátu a 30,0g (138,93 mmol) 1,2-dibrombutanu. Reakční směs se energicky míchá přes noc při teplotě místnosti, pak se přidá směs ledu a vody. Surový produkt se třikrát extrahuje methylenchloridem, a postupně se třikrát promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí. Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií (7 cm, 2 až 4% roztok dietyléteru v hexanu) za vzniku 19,1 g (70,7 mmol, výtěžek 76 %) požadovaného cyklopropanového derivátu 9c, 'HNMR (CDC13): δ 1,78- 1,70 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,441,39 (m, 1H), 1,26 - 1,64 (m, 3H), 1,02 (t, 3H, J = 7,6 Hz).
b) Do suspenze 6,71 g (59,79 mmol, 4,4 ekv.) terc-butoxidu draselného v 100 ml bezvodého éteru se při teplotě 0 °C přidá 270 μΐ (15,00 mmol, 1,1 ekv.) vody. Po 5 minutách se do suspenze přidá 3,675 g (13,59 mmol) diesteru 9c v 10 ml éteru, Reakční směs se míchá přes noc pří teplotě místnosti, a pak se vlije do směsi ledu a vody a třikrát se promyje éterem. Vodný podíl se při teplotě 0 °C okyselí přidáním 10% vodného roztoku kyseliny citrónové a třikrát se extrahuje ethylacetátem. Sloučený organický podíl se postupně dvakrát promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po obvyklém zpracování (sušení nad síranem sodným, filtrací a zahuštění) vznikne 1,86 g (8,68 mmol, 64% výtěžek) požadované kyseliny 9d jako světle žlutého oleje.
'HNMR (CDCb): δ 2,09 - 2,01 (m, 1H), 1,98 (dd, J= 3,8, 9,2 Hz, 1H), 1,81 - 1,70 (m, 1H), 1,66 (dd, J = 3,0, J = 8,2 Hz, 1H), 1,63 - 1,56 (m, 1H), 1,51 (s, 9H), 1,0 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
c) Do směsi 2,017 g (9,414 mmol) kyseliny 9d ve 32 ml bezvodého benzenu se postupně přidá 1,50 ml (10,76 mmol, 1,14 ekv.) triethylnitritu a 2,20 ml (10,21 mmol, 1,08 ekv.) DPPA. Reakční směs se zahřívá pod refluxem 3,5 hodiny, pak se přidá 2,70 ml (18,84 mmol, 2,0 ekv.) 2-trimethyl-silyl-ethanolu. Reakční směs se pod refluxem přes noc zahřívá, pak se reakční směs zředí dietyléterem a postupně se promyje 10% vodným roztokem citrónové kyseliny, vodou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dvakrát vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po obvyklém zpracování (sušení nad síranem horečnatým, filtraci a zahuštění) se zbytek čistí rychlou chromatografií (5 cm, 10% roztok ethylacetátu v hexanu) za vzniku 2,60 g (7,88 mmol, 84% výtěžek) požadovaného karbamátu 9e jako světle žlutého oleje.
Hmotnostní spektrometrie (FAB) 330 (MH+).
'HNMR (CDC13): δ 5,1 (bs, 1H), 4,18- 4,13 (m, 2H), 1,68 - 1,38 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,24 - 1,18 (m, 1 Η), 1,00 - 0,96 (m, 5H), 0,03 (s, 9H).
d) Do 258 mg (0,783 mmol) karbamátu 9e se přidá roztok 940 μΐ (0,94 mmol, 1,2 ekv.) 1,OM roztoku tetra-n-butylammonium-fluoridu (TBAF) v tetrahydrofuranu. Po 4,5 hodině se přidá dalších 626 μΐ (0,63 mmol, 0,8 ekv.) 1,0 M roztoku TBAF. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, 30 minut se refluxuje, a pak se zředí ethylacetátem. Roztok se postupně promyje dvakrát vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po obvyklém zpracování (sušení nad síranem hořečnatým, filtraci a zahuštění) se získá 84 mg (0,453 mmol, výtěžek 58 %) požadovaného aminu 9f jako světle žluté kapaliny.
‘HNMR (CDCb): δ 1,96 (bs, 2H), 1,60- 1,40 (m, 2H), 1,47 (s, 9H), 1,31-1,20 (m, 1H), 1,14 (dd, J = 4,1, 7,3 Hz, 1H), 1,02 (dd, J = 4,1,9,2 Hz, 1H), 0,94 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
-47Příklad 10
Chemické rozdělení t—butyl—(1 R,2R)/( 1 S,2R)-l-amino-2-ethylcyklo-propyl-karboxylátu (výsledné sloučeniny příkladu 9):
(R,R)/(S,S) w
Izomery oddělené chromatografií 5 RR izomer SR izomer
Na 8,50 g (25,86 mmol) sloučeniny 9e (příklad 9) se při teplotě refluxu 45 minut působí 26 ml 1M roztoku tetra-n-butylamonium-fluoridu (TBAF) v tetrahydrofuranu. Zchlazená reakční směs se zředí ethylacetátem, třikrát se promyje vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného, a pak se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje za vzniku volného aminu ío jako světle žlutého oleje. Volný amin se rozpustí ve 120 ml bezvodého methylenchloridu a do roztoku se postupně přidá 8,5 ml (77,57 mmol) roztoku N-methylmorfolinu, 10,08 g (27,15 mmol) sloučeniny 4 (příklad 4) a 11,79 g (31,03 mmol) HATU. Reakční směs se pres noc míchá při teplotě místnosti, a pak zpracuje podle shora uvedeného postupu. Surová diastereomerická směs se rozdělí rychlou chromatografií při eluci směsí hexanu a dietyIéteru v poměru
25:75 za vzniku dipeptidu 10a (méně polární eluční skvrna) jako 4,42 g bílé pěny (64 % teoretického výtěžku) a 10b (méně polární eluční skvrna) jako 4g nažloutlé pěny (57 % teoretického výtěžku). V tomto případě jsou odděleny oba izomery, i když jejich stereochemické vlastnosti stále nejsou známé.
Příklad 11
Zjištění stereochemické konfigurace sloučeniny 10a a 10b korelací se známou konfiguraci t-buty Η1 R-amino-2R-ethylcyklopropyl-karboxylátu
přímé porovnání pomocí TLC, HPLCaNMR
-48Prof. A. Charette z University of Montreal popsal přípravu sloučeniny 11 a, jejíž stereochemickou konfiguraci určil rentgenovou krystalografií (J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 12721). Ve 240 μΐ 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové v ethylacetátu se rozpustí 13,2 mg (0,046 mmol) sloučeniny Ha a směs se míchá přibližně 48 hodin. Směs se odpařuje do sucha za vzniku sloučeniny 11b jako světle žluté pasty, která se sloučí se 18 mg (0,049 mmol) sloučeniny 4 (příklad 10) za použití 20,3 μΐ (0,185 mmol) N-methylmorfolinu a 21,1 mg (0,056mmol) HATU v methylenchloridu. Surový materiál se čistí rychlou chromatografíi při eluci směsí hexanu v dietyléteru v poměru 50:50 za vzniku dipeptidu 1 lc jako 7,7 mg oleje (výtěžek 31 %). TLC, HPLC a NMR analýzou dipeptidu 1 lc se zjistilo, že jde o identickou sloučeninu s méně polární sloučeninou 10a i o (příklad 10) s konfigurací (1R, 2R).
Příklad 12 (1 R,2R)/( 1 S,2R)-1 -Boc-amino-2-ethy 1-cyklopropy 1-karboxy lová kyselina (12a)
1.TFA, 0qC
2. vodný NaOH, THF. (Boc)30
9e
12a
Roztok 2,6 g (7,88 mmol) karbamátu 9e (příklad 9) v TFA se 40 minut míchá při teplotě 0 °C. Směs se pak zahustí a zředí 10 ml tetrahydrofúranu. Přidá se 700 mg (17,5 mmol) vodného roztoku hydroxidu sodného v 8,8 ml vody, a následně roztok 2,06 g (9,44 mmol, 1,2 ekv.) (Boc)20 v
13 ml tetrahydrofúranu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti při udržování pH 8 eventuálním přidáváním 10% vodného roztoku hydroxidu sodného, zředí se vodou, třikrát se promyje dietyléterem a při teplotě 0 °C se okyselí přidáním 10% vodného roztoku kyseliny citrónové. Vodný podíl se třikrát extrahuje ethylacetátem a postupně se dvakrát promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtraci a zahuštění vznikne 788 mg (3,44 mmol, výtěžek 44%) požadované Boc-chráněné aminokyseliny (12a).
^NMR (CDC13): δ 5,18 (bs, 1H), 1,64- 1,58 (m, 2H), 1,55 - 1,42 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,32 - 1,25 (m, 1H), 0,99 (t, 3H, J = 7,3 Hz).
Příprava methylesteru (1R,2R) / (lS,2R)-l-Boc-amino-2-ethyl-cyklo-propyl-karboxylové kyseliny (12b)
V 10 ml dietyléteru se rozpustí 0,30 g (1,31 mmol) Boc-derivátu 12a a na reakční roztok se při teplotě 0 °C působí čerstvě připraveným roztokem diazomethanu v dietyléteru za vzniku žlutého zabarvení roztoku, způsobeného mírným přebytkem roztoku diazomethanu. Po 20 minutách míchání při teplotě místnosti se reakční směs zahustí do sucha za vzniku sloučeniny 12b jako 0,32 g (100 %) čirého bezbarvého oleje.
*H NMR (CDC13): δ 5,1 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 1,62- 1,57 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 1,53- 1,43 (m, 1H), 1,28 - 1,21 (m, 2H), 0,95 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
-49Příklad 13
Enzymatická rezoluce methyl-(l R2R)/( 1 S,2R)-Boc-1 -amino-2-ethyl-cyklopropyl-karboxylátu
>LjN%o«e H o * analýza pomocí HPLC za použití Chiracet® OD-Hkolony ** ostatní estery jsou také přijatelné (Et)
a) Ve 3 ml acetonu se rozpustí 0,31 g (1,27 mmol) směsi enantiomerů methylesteru (1S,2R) / (lR,2R)-l-Boc-amino-2-ethyl-karboxylové kyseliny (příklad 10), a pak se roztok za energického míchání zředí 7 ml vody. Hodnota pH roztoku se udržuje na 7,5 přidáváním io 0,05M vodného roztoku hydroxidu sodného, a následně se přidá 300 mg Alcalase® (2,4 1 extraktu vyrobeného v Novo Nordisk Industrials). Během inkubace se pH stabilizuje přidáváním hydroxidu sodného za použití pHstat tritrátoru. Po 40 hodinách se směs zředí ethylacetátem a vodou (obsahujícího 5 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného) a podíly se oddělí. Vodný podíl se okyselí přidáním 10% vodného roztoku kyseliny chloro15 vodíkové a extrahuje se ethylacetátem, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku 48,5 mg kyseliny 13a. Stereochemická konfigurace se určí analýzou popsanou v příkladech 10 a 11.
b) Na podíl kyseliny 13a se působí roztokem diazomethanu v dietyléteru za vzniku methyl20 esteru, který se analyzuje HPLC za použití chirální kolony Chiralcel® OD~H eluci 2,5% roztokem izopropanolu v hexanu za izokratických podmínek. Z analýzy vyplývá, že jde o směs s přítomností (1S, 2R) izomeru 15:1.
Příklad 14 (1R,2S) / (lS,2S)-l-amino-2-ethyl-cyklopropyl-karboxylová kyselina
-50c) DBU,
HO2Cz CO2tBu 9d
CHjCN teplota místnosti allylO2Cz CO2tBu 14a
rnÍStnosti ety! anti ke kyseliné (RS)/(SS)
Výchozí sloučeninou přípravy je sloučenina 9d, jejíž příprava je popsána v příkladě 9:
c) Do roztoku l ,023 g (4,77 mmol) sloučeniny 9d ve 25 ml methylkyanidu se postupně přidá
860 μΐ (5,75 mmol, l,2 ekv.) DBU a 620 μΐ (7,16 mmol, 1,5 ekv.) allyl-bromidu. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnosti, a pak se zahustí. Vytvořený zbytek se zředí dietyléterem a postupně se dvakrát promyje 10% vodným roztokem kyseliny citrónové, vodou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dvakrát vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtraci a zahuštění se io získá 1,106 g (3,35 mmol) esteru sloučeniny 14a s 91% výtěžkem jako bezbarvého oleje.
Hmotnostní spektrometrie (FAB) 255 (MH+), ‘HNMR (CDCh): δ 5,96- 5,86 (m, 1H), 5,37- 5,22 (m, 2H), 4,70- 4,65 (m, 1H),
4,57- 4,52 (m, 1H), 1,871,79 (m, 1H), 1,47 (s,9H), 1,45- 1,40 (m, 1H), 1,33 - 1,24 (m, 3H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
d) Do roztoku 1,106 g (4,349 mmol) esteru 14a v 5 ml bezvodého methylenchloridu se při teplotě místnosti přidá 5 ml kyseliny trifluor-octové. Reakční směs se 1,5 hodiny míchá, a pak se zahustí za vzniku 854 mg (4,308 mmol) sloučeniny 14b s 99% výtěžkem.
Hmotnostní spektrometrie (FAB) 199 (MH+), ’HNMR (CDC13): 6 5,99- 5,79 (m, 1H), 5,40- 5,30 (m, 2H), 4,71-4,62 (m, 2H),
2,22 - 2,00 (m, 2H), 1,95 - 1,88 (m, 1H), 1,84 - 1,57 (m, 2H), 0,98 (t, J - 7,3 Hz, 3H).
e) Do roztoku 853 mg (4,30 mmol) kyseliny 14b v 14,8 ml bezvodého benzenu se postupně přidá 684 μΐ (4,91 mmol, 1,14 ekv.) triethylnitrítu a 992 μΐ (4,60 mmol, 1,07 ekv.) DPPA. Reakční směs se 4,5 hodiny zahřívá pod refluxem, a pak se přidá 1,23 ml (8,58 mmol,
2,0 ekv.) 2-trimethyl-silyl-ethanolu. Směs se pod refluxem zahřívá přes noc, a pak se zředí dietyléterem a postupně se promyje jedenkrát 10% vodným roztokem kyseliny citrónové, jedenkrát vodou, jedenkrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dvakrát vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtraci a zahuštění se zbytek čistí rychlou chromatografií (5 cm) při eluci 10 až
15% roztokem ethylacetátu v hexanu za vzniku 1,212 g (3,866 mmol) karbamátu 14c jako světle žlutého oleje s 90% výtěžkem.
-51 Hmotnostní spektrometrie (FAB) 314 (MH+), 'H NMR (CDCIj): δ 5,93 - 5,84 (m, 1H), 5,32 - 5,20 (m, 2H), 5,05 (bs, 1H), 4,60 - 4,56 (m,2H), 4,20-4,11 (m, 2H), 1,71 - 1,60 (m,3H), 1,39- 1,22(m, IH), 1,03 (t, J = 7,6 Hz,
3H), 0,96 - 0,86 (m, 1H), 0,04 (s, 9H).
f) Do 267 mg (0,810 mmol) karbamátu 14c se přidá 1,62 ml (1,62 mmol, 2,0 ekv.) l,0M roztoku tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá přes noc io při teplotě místnosti, refluxuje se 30 minut, a pak se zředí ethylacetátem. Roztok se postupně promyje dvakrát vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtrací a zahuštění se připraví 122 mg (0,721 mmol) požadovaného aminu 14d s 89% výtěžkem jako světle žluté kapaliny.
'H NMR (CDCI,): δ 5,94 - 5,86 (m, 1H), 5,31 - 5,22 (m, 2H), 4,58 (d. J = 5,7 Hz, 2H), 1,75 (bs,2H), 1,61 - 1,53 (m, 2H), 1,51 - 1.42 (m, 2H), 1,00 (t, J= 7,3 Hz, 3H). 0,70- 0.62 (m, 1H).
Příklad 15
Syntéza ethy 1-(1 R,2S) / (1 S,2S)-l-amino-2-vinyl-cyklopropyIkarboxyIátu
Ph
Ph
+
COgEt
Br
a)»BuOK — —
15a
15b
THE
-78 eCaž0eC
N COjEt
a) Do l80ml tetrahydrofuranového roztoku 4,62 g (41,17 mmol, 1,1 ekv.) terc-butoxidu 25 draselného se pří teplotě -78 °C přidá 10,0 g (37,41 mmol) komerčně dostupného iminu 15a ve 45 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se zahřeje na teplotu 0 °C a 40 minut se míchá při této teplotě. Směs se opět zchladí na teplotu -78 °C a přidá se 8,0 g (37,40 mmol) 1,4-dibrombutenu 15b. Reakční směs se pak 1 hodinu míchá při teplotě 0 °C, zchladí se na teplotu -78 °C, a pak se přidá 4,62 g (41,17 mmol, 1,1 ekv.) terc-butoxidu draselného.
Nakonec se reakční směs míchá další jednu hodinu při teplotě 0 °C a zahustí se za vzniku sloučeniny 15c.
b) c) d) Sloučenina 15c se zpracuje 265 ml diety léteru a na roztok se působí 106 ml 1N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Po 3,5 hodinách při teplotě místnosti se podíly oddělí a vodný podíl dvakrát se promyje díetyléterem a převede na zásadité pH přidáním nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Požadovaný amin se třikrát extrahuje díetyléterem a kombinovaný organický extrakt se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtrací a zahuštění se na vytvořený zbytek působí 187 ml (748 mmol) 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu. Po zahuštění sc získá hydrochloríd 15d jako 2,467 g (12,87 mmol) hnědé pevné látky s 34% výtěžkem.
-52'HNMR (CDCIj): δ 9,17 (bs, 3H), 3,75- 5,66 (m, 1H), 5,39 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,35 - 4,21 (m, 2H), 2,77 - 2,70 (m, 1H), 2,05 (dd, J = 6,4, 10,2 Hz, 1H), 1,75 (dd, J = 6,4, 8,3 Hz, 1H), 1,33 (t, J = 7,0 Hz, 3H),
Příklad 16 ethyl-ester (IR,2S / lS,2S)-l-Boc-amino-2-vinyl-cyklopropylkarboxylové kyseliny (Boc)2Q cíh3n+
COjEt
15d
DtPEA
DMAP
THF
io vinyl syn k esteru
Ve 30 ml tetrahydrofuranu se rozpustí l ,0 g (5,2 mmol) hydrochloridu 15d a 1,2 g (5,7 mmol) (Boc)2O a na směs se působí 0,13 g (1,04 mmol, 0,2 ekv.) dimethyl-aminopyridinu a 2,8 ml (15,6 mmol) diizopropyl-ethylaminu. Reakční směs se 24 hodin míchá, a následně se zředí 40 ml ethylacetátu a postupně se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného,
5% vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí. Zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci 15% roztokem ethylacetátu v hexanu za vzniku 0,29 g výsledné sloučeniny 16a s výtěžkem 23%.
'HNMR(CDCIj): δ 5,80- 5,72 (m, 1H), 5,29-5,25 (dd, J = 17,2 Hz, 1H), 5,24-5,1 (bs, 1H), 5,10 (dd, J = 9,2, 9,2 Hz, 1H), 4,22-4,13 (m, 2H), 2,15 - 2,04 (m, 1H), 1,85 - 1,73 (bs, 1H), 1,55 - 1,5 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,26 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Příklad 17
Enzymatické rozdělení ethyl-(1R,2S) / (!S,2S)-l-amÍno-2-vinyl-cyklopropyl-karboxylátu
16a vinyl syn k esteru
a) Alcatase
NaOH
17c(HřSZ ’* analýza pomoci HPLCza použiti Chiracei® OD-H kolony
a) V 5 ml acetonu se rozpustí 0,29 g (1,14 mmol) racemického derivátu 17a a směs se zředí 10 ml 30 vody. Hodnota pH se upraví přidáním 0,2N vodného roztoku hydroxidu sodného na pH 7,2, a následně se přidá 300 mg Alcalase®. Po dobu 9 dní inkubace se roztok hydroxidu sodného přidává pH/stát titrátorem, přičemž se během této doby přidá teoreticky vypočítané množství zásady. Následná extrakce je popsána v příkladě 13 za vzniku 0,15 g (100 %) nehydrolyzovaného esteru a 0,139 g (95 %) hydrolyzovaného materiálu. Analýzou nehydrolyzovaného esteru pomocí
HPLC za použití chirální kolony se prokázala přítomnost požadované sloučeniny 17c v poměru 43:1 (chemická korelace popsaná v příkladech 10 a 11).
-53Podmínky HPLC analýzy: kolona Chiralcel® OD-H (4,6 mm x 25 cm), izokratické podmínky, mobilní fáze: 2,5% roztok izopropanolu v hexanu.
Příklad 18
Rozdělení (1R,2S) / (1 S,2S)-l-amino-2 vinyl -cyklopropyl-karboxylátu krystalizací s dibenzylD-vinnou kyselinou
io Do roztoku surového racemického (1 S,2S a lR,2S)-ethyl-l-amino-2-vinyI-cyklopropyl”karboxylátu (získaného z 25,0 g (93,5 mol) ethylesteru N-(difeny1-methylen)-glycinu podle postupu příkladu 15) v 800 ml ethylacetátu se přidá 33,5 g (93,5 mol) dibenzyl-D-vinné kyseliny. Směs se zahřívá pod refluxem, míchá se 15 minut při teplotě místnosti, a pak se zchladí na teplotu 0 °C. Po 30 minutách se získá bílá pevná látka. Pevný produkt se filtruje, promyje se 100 ml ethyl15 aeetátu a suší se na vzduchu. Pevný produkt se uvede do suspenze v 70 ml acetonu, a po působením ultrazvukem se třikrát filtruje. Pevný produkt se nechá kiystalízovat dvakrát z horkého acetonu (získaná část A). Matečné louhy se zahustí a vytvořený zbytek se třikrát krystalizuje z horkého acetonu (získaná Část B). Získané amorfní bílé produkty části A a B jako soli kyseliny dibenzyl-D-vínné se sloučí za vzniku 5,53 g produktu, který se uvede do suspenze ve směsi
2 50 ml dietyléteru a 150 ml nasyceného roztoku hydrogenuhliěitanu sodného. Organický podíl se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a filtruje se. Filtrát se zředí 100 ml 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dietyléteru a zahustí se za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se odpařuje s tetrachlórmethanem za vzniku 940 mg ethyl-I(R)— amino-2(S)-vinyl“cyklopropan-karboxylát“hydrochloridu s 11 % výtěžkem jako bílé hygro25 skopické pevné látky, [a]2SD+39,5° (c 1,14 methanol), [<x]2iD +88,5° (c 1,14 methanol), 'HNMR (DMSO-d,): δ 9,07 (široké s, 2H), 5,64 (ddd, J = 17,2, 10,4, 8,7 Hz, IH), 5,36 (dd, J= 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,19 (dd, J= 10,4, 1,6 Hz, 1H), 4,24- 4,16 (m,2H), 2,51- 2,45 (m, vrcholy bráněné DMSO, 1H), 1,84 (dd, J = 10,0,6,0 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 8,3, 6,0 Hz, 1H), 1,23 (t,J = 7,1 Hz, 3H), hmotnostní spektrometrie (ESI) m/z 156 (MH) +, čistota enantiomerů: 91 % přebytek enantiomerů HPLC analýzou Boc derivátu (kolona CH1RALPAK AS®, směs hexanu a izopropanolu).
Příklad 19
Příprava hydrochloridu methyl-esteru (1R,2S) / (lS,2S)-l-amino-2-vmyl-cyklopropan45 karboxylové kyseliny (19f)
H3N*^CO2Et .HCi 19a
Na,SO4 Z TBME EtjN *νλοοζε
19c
LiOtBu (2,1 ekv.) toluen / teplota místnosti, a pak H3O’, pak NaOH
19b
HjN^COjEt
2W
BoCgO
TBME
BocHN^CQzEt
2w
I9d
19e
NaOMe *
MeOH
BocHN^COjMe
2v^s
19f
Příprava iminu 19b
Do suspenze se uvede 1519,2 g (10,88 mol, 1,0 ekv.) hydrochloridu ethylesteru glycinu 19a v 8 I terc-butylmetyléteru. Po přidání 1155 g (10,88 mol, 1 ekv.) benzaldehydu a 773g (5,44 mol, 0,5 ekv.) bezvodého sulfátu sodného se směs zchladí na teplotu 5 °C v lázni ledu a vody. Po kapkách se během 15 minut přidá 2275 ml (16,32 mol, 1,5 ekv.) triethylaminu (za použití 0,5 1 terc-butylmetyléteru). Reakční směs se míchá 40 hodin pří teplotě místnosti, Reakce se pak ukončí přidáním 5 1 ledově studené vody a organický podíl se oddělí. Vodný podíl se extrahuje io 11 terc-butylmetyléteru a kombinované organické podíly se promyjí směsí 400 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 1,61 vody, a pak nasyceným roztokem chloridu sodného. Roztok se suší nad síranem horečnatým, zahustí za sníženého tlaku a vytvořený žlutý olej se suší ve vakuu do konstantní hmotnosti. Získá se 2001 g (96% výtěžek) iminu 19b jako hustého žlutého oleje, který tuhne při teplotě -20 °C.
*HNMR (CDCh, 400 MHz): δ 8,30 (s, 1H), 7,79 (m, 2H), 7,48- 7,39 (m, 3H), 4,40 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,24 (q, J = 7 Hz, 2H), 1,31 (t, J - 7 Hz, 3H).
Příprava racemického hydrochloridu ethyl-esteru N-Boc-(ÍR,2S) / (lS,2S)-l-amino-2-vinyl20 cyklopropan-karboxy love kyseliny 19e:
Do suspenze se uvede 4,203 g (52,5 mmol, 2,1 ekv.) terc-butoxidu lithného v 60 ml bezvodého toluenu. Ve 30 ml bezvodého toluenu se rozpustí 5,020 g (26,3 mmol, 1,05 ekv.) iminu 19b a 5,348 g (25 mmol, 1 ekv.) dibromidu 19c a tento roztok se při teplotě místnosti během 30 minut po kapkách přidá do míchaného roztoku terc-butoxídu lithného. Vytvořená temně červená směs se míchá dalších 10 minut a reakce se ukončí přidáním 50 ml vody a 50 ml terc-butylmetyléteru (TBME). Vodný podíl se oddělí a podruhé se extrahuje 50 ml TBME. Organické podíly se sloučí, přidá se 60 ml 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti. Organický podíl se oddělí a extrahuje se 40 ml vody. Vodné podíly se pak sloučí, sytí se 35 g soli a 50 ml TBME. Míchaná směs se pak převede na zásadité pH 13-14 opatrným přidáním 10 N roztoku hydroxidu sodného. Organický podíl se oddělí a vodný podíl dvakrát extrahuje 50 ml TBME. Organické extrakty obsahující volný amin 19d se sloučí a přidá se 5,46 g (25 mmol, 1 ekv.) diterc-butyldikarbonátu, Reakční směs se pres noc míchá při teplotě místností, a pak se podle TLC zjistí přítomnost nezpracovaného volného aminu. Po přidání 1,09 g (5 mmol,
0,2 ekv.) diterc-butyldikarbonátu se směs 2 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem. Následná
TLC potvrdí úplnou přeměnu sloučeniny 19d na 19e. Roztok se zchladí na teplotu místnosti, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se za sníženého tlaku. Zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci nejprve 10%, a pak 20% roztokem ethylacetátu v hexanu. Čištěním se vytvoří 4,014 g (63% výtěžek) čirého žlutého oleje sloučeniny 19d, který pomalu tuhne ve vakuu.
*H NMR (CDC13,400 MHz): δ 5,77 (ddd, J - 17,10,9 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 17,1,5 Hz, 1H), 5,18 (široké s, 1H), 5,11 (dd, J = 10,1,5 Hz, 1H), 4,24 - 4,09 (m, 2H), 2,13 (q, J - 8,5 Hz, 1H), 1,79 (široké m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,26 (t, J = 7 Hz, 3H).
-55Příprava výsledné sloučeniny 19f trans-esterifikací sloučeniny 19e:
V 50 ml bezvodého methanolu se rozpustí 10,807 g (42,35 mmol) ethylesteru 19e, a následně se 5 přidá 9,7 ml (42 mmol, 1 ekv.) 25 % hmotnostních roztoku methoxidu sodného v methanolu.
Směs se 2 hodiny zahřívá na teplotu 50 °C. TLC analýzou se potvrdí zpracování výchozích sloučenin trans-esterifikací (19e: Rf = 0,38, 19f: Rf = 0,34, v 20% roztoku ethylacetátu v hexanu). Reakční směs se zchladí na teplotu místnosti a okyselí k pH 4 za použití 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu. Chlorid sodný jako sraženina se odstraní filtrací (promytí terc-butylio methyl-éterem) a těkavé podíly se odstraní za sníženého tlaku. Do vytvořeného zbytku se přidá
100 ml terc-butyl-metyléteru a pevná látka se odstraní filtrací. Odpařováním filtrátu za sníženého tlaku a sušením ve vakuu se získá 10,11 g (99% výtěžek) čistého methylesteru 19f.
'H NMR (CDCIj, 400 MHz): δ 5,75 (ddd, J = 17, 10,9 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 17, 1 Hz, 1H), 5,18 15 (široké s, 1H), 5,11 (ddd, J = 10,1, 5,0,5 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,14 (q, J= 9 Hz, 1H), 1,79 (široké m. 1H), 1,50 (široké m, 1H), 1,46 (s, 9H).
Příklad 20
Enzymatická rezoluce hydrochloridu methylesteru (IR, 2S)-l-amino-2-vinyl-cyklopropan™ karboxylové kyseliny
BocHN CCLMe
19f
BocHN COzMe 20a
Alcalase 2.4L pH 8.2-S.5
4N HCí-dioxan· ->.
20b
Příprava methylesteru N-Boc-( 1 R,2S)-l-amino-2-vinyl-cyklopropankarboxylové kyseliny
20a:
Ve 3 ml acetonu se rozpustí 0,200 g (0,83 mmol) racemického esteru 19f, a následně se přidá v 3 ml acetonu a 7 ml vody. K hodnotě pH 8 se přidá 1 kapka 0,05M roztoku hydroxidu sodného, a pak se přidá 2,41 Alcalase® (Novo Nordisk Biochem, 0,3 g v 1 ml vody). Směs se míchá energicky při teplotě místnosti při udržování pH roztoku 8 za použití automatického titračního zařízení. Začátkem 4. a 5. dne míchání při pH 8 se přidají 0,3 g enzymatického roztoku. Po celkem 5 dnech se spotřebuje celkem 8,3 ml 0,05M roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se zředí ethyíacetátem a vodou a organický podíl se oddělí. Po promytí nasyceným roztokem chloridu sodného se organický extrakt suší nad síranem hořečnatým a zahustí ve vakuu. Získá se
0,059 g (30% výtěžek) sloučeniny 20a jako čirého oleje.
'H NMR identická se sloučeninou 19f.
HPLC (Chiralcel ODH 4,6 x 250 mm, izokratická eluce 1% roztokem ethanolu v hexanu rychlostí průtoku 0,8 ml/min):
-56(IR, 2S)-2: Rt = 19,3 min (97%);
(1S, 2R}-2: Rt = 17,0 min (3%).
Příprava hydrochloridu methylesteru (lR,2S)-l-amino-2-vinyl-cyklopropan-karboxylové kyseliny 20b:
Ve 25 ml dioxanu se rozpustí 39,96 g (165,7 mmol) sloučeniny 20a a roztok se za stálého io míchání po kapkách přidá do 250 ml 4 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu (Aldrich).
Po 45 minutách se TLC analýzou potvrdí zpracování výchozích sloučenin. Těkavé podíly se odstraní za sníženého tlaku a zbytek dvakrát odpařuje se 100 ml methanolu. Do hnědého olejovitého zbytku se přidá 300 ml éteru a 10 ml methanolu, směs se míchá přes noc při teplotě místnosti za vzniku sraženiny jako polotuhé látky. Po dalším přidání 15 ml methanolu se v míchání pokračuje 6 hodin, a pak se nažloutlá pevná látka sebere filtrací. Produkt se promyje 50 ml 5% roztokem methanolu v éteru a dvakrát 50 ml éteru. Po sušení ve vakuu vznikne 22,60 g (76% výtěžek) sloučeniny 20b jako nažloutlé pevné látky. Filtrát (včetně promývacích podílů) se odpařuje ve vakuu za vzniku dalšího podílu sloučeniny 20b jako 7,82 g (26% výtěžek) hnědého oleje. Oba podíly jsou dostatečně čisté pro použití k výrobě inhibitorů HCV proteáz:
[a]D 25 +38,2° (c 1,0, methanol).
‘HNMR (400 MHz, DMSO-Λ): δ 9,15 (široké s, 3H), 5,65 (ddd, J = 17, 10,9 Hz, 1H), 5,36 (dd, J - 17,1, 1,5 Hz, 1H), 5,19 (dd, J - 10,1,5 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,50 (q, prekiytý DMSO,
J - 9 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 10, 6 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 8, 6 Hz, 1H).
Příklad 21
Syntéza methylesteru 1-aminocyklobutyl-karboxylové kyseliny
hci/ch3oh hydrochiorid
21a
1,1-Amino-cyklobutan-karboxylová kyselina se připraví podle Kavin Douglas; Ramaligam Kondareddiar; Woodard Ronald, Synth. Commun, (1985), 15 (4), 267-72. Ve 40 ml bezvodého methanolu se při teplotě -20 °C míchá 1,00 g (6,6 mmol) sůl aminokyseliny (21a). Směs se sytí bezvodým chlorovodíkem za vzniku sloučeniny (21 b). Míchání této směsi pokračuje další 4 hodiny, horký roztok se filtruje a filtrát se zahustí (Rotavap, 30 °C) za vzniku zbytku, který se čistí rozetřením v etyléteru. Po filtraci a sušení vznikne 0,907 g (83 %) bílého prášku.
’HNMR (400 MHz, D2): δ CH3O (3Hs, 3,97 ppm); CH2 (2H,m, 2,70- 2,77 ppm); CH2 40 (2H, m, 2,45 - 2,53 ppm) a CH2 (2H, m, 2,14 - 2,29 ppm).
Trípeptidy
Příklad 22
Obecný postup vazebných reakcí na pevné fázi.
-57Syntéza se provede na paralelním syntetizátoru (model ACT396, Advanced ChemTechs) na deskách s 96 prohlubněmi. Obvykle se vyrábí 24 peptidů v paralele za použití standardních technik syntézy na pevné fázi. Výchozí komplex (Fmoc-amino)-cyklopropan (eventuálně substituovaná)-karboxylová kyselina - pryskyřice Wang se připraví vazebnou reakcí DCC/5 DMAP (E. Atherton, R. C. Scheppard, Solid Phase Peptide Synthesis, a Practical Approach; IRL Press: Oxford (1989); str. 131-148).
Každá prohlubeň se naplní 100 mg výchozí pryskyřice (přibližně 0,05 mmol). Pryskyřice se promyje postupně 1,5 ml podíly jedenkrát NMP a třikrát dimethylformamidu. Ochranné skupiny ío Fmoc se odstraní působením 20 minut 1,5 ml 25 % objemových roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Pryskyřice se promyje 1,5 ml podíly, a to čtyřikrát dimethyl-formamidem, třikrát methanolem a třikrát dimethyl-formamidem. Vazebná reakce se provede v 350 μΐ dimethylformamidu, za použití 400 μΐ (0,2 mmol) 0,5M roztoku Fmoc-aminokyseliny v HOBt-hydrátu v dimethylformamidu, 400 μΐ (0,4 mmol) 1M roztoku DIPEA v dimethylformamidu a 400 μΙ (0,2 mmol) 0,5M roztoku TBTU v dimethylformamidu. Po 1 hodině protřepávání se prohlubně vysuší, pryskyřice se promyje 1,5 ml dimethylformamidu a vazebná reakce se opakuje ještě jednou za stejných podmínek. Pryskyřice se pak promyje podle shora uvedeného postupu a cyklus se opakuje pro každou aminokyselinu.
Ochranné (capping) skupiny se uvedou do vazby dvěma způsoby:
1. V podobě karboxylové kyseliny, která se naváže podle shora uvedeného postupu nebo
2. jako acylační činidlo (anhydrid nebo kyselý chlorid).
Následující příklad popisuje ochranu anhydridem kyseliny sukcinové;
Po oddělení ochranné skupiny Fmoc a následným promytím se přidá 350 μΐ dimethylformamidu, a následně 400 μ] (0,2 mmol) 0,5M dimethylformamidového roztoku anhydridu kyseliny sukci30 nové a 400 μΐ (0,4 mmol) l,0M roztoku DIPEA. Pryskyřice se 2 hodiny míchá, a pak se provede vazebná reakce. Nakonec se pryskyřice promyje 1,5 ml podíly, a to třikrát roztokem dichlormethanu, třikrát methanolem, třikrát roztoku dichlormethanu a suší se 2 hodiny ve vakuu. Odštěpení z pryskyřice a průvodní vazba ochranné skupiny na vedlejší řetězec se provede přidáním 1,5 ml směsi kyseliny trifluoroctové, vody, dithiothreitolu (DTT) a triizopropyl-silanu (TIS) v poměru 92,5 : 2,5 : 2,5 : 2,5. Po 2,5 hodinách protřepávání se pryskyřice filtruje a promyje 1,5 ml roztokem dichlormethanu. Filtrát se sloučí a zahustí vakuovou centrifugách Každá sloučenina se čistí preparativní HPLC na reverzní fázi za použití kolony C18 (22 mm x 500 mm). Podíly obsahující produkt se určil hmotnostní spektrometrií MALDI-TOF, sloučí se a lyofilizují.
Příklad 23
Obecný postup vazebných reakcí v kapalné fázi {viz také R, Knorr a spol., Tetrahedron Letters, (1989), 30, 1927.}
Reakční činidla, t.j. 1 ekv. volného aminu (nebo jeho hydrochloridu) a 1 ekv. volné karboxylové kyseliny se rozpustí v methylenchloridu, methylkyanidu nebo dimethylformamidu. V atmosféře dusíku se do míchaného roztoku přidají 4 ekv. N-methylmorfolinu a 1,05 ekv. vazebného činidla.
Po 20 minutách se přidá 1 ekv. druhého reakčního činidla, tj. volné karboxylové kyseliny. (Praktickými a účinnými vazebnými činidly jsou k tomuto účelu: (benzotriazol-l-yl-oxy)tris(dimethyl-amino)-fosfonium-hexafluorfosfát (HOBT) nebo především 2-0H-benzotriazol-1yl)-N,N,Nř,N'-tetramethyluronium-tetrafluorborát (TBTU nebo O-(7-azabenzotriazol-l-yl)Ν,Ν.Ν',Ν-tetramethyluronium-tetrafluorborát (HATU). Průběh reakce se sleduje TLC.
-58Po ukončení reakce se rozpouštědlo odpařuje za sníženého tlaku. Vytvořený zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Roztok se promyje postupně 10% vodným roztokem kyseliny citrónové, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného.
Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za sníženého tlaku. Pokud se zbytek čistí, pak se čištění provede rychlou chromatografií shora uvedeným postupem.
Příklad 24 o
Syntéza sloučeniny 304
' ° 0XOH
sloučenina 304
a) Na 0,12 g (0,49 mmol) (R,R)-izomeru Boc-Et-Acca-OMe 13c získaného enzymatickou rezolucí (příklad 13) se 45 minut působí 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové vdioxanu, a pak se směs zahustí ve vakuu za vzniku bílé pevné látky. Do přibližně 0,49 mmol hydrochloridu se přidá 0,17 g (0,54 mmol) TBTU, 0,18 g (0,49 mmol) BOC-4(R)-(8-chinolinmethyloxy)prolinu 5 (příklad 5) a 0,3 ml (1,7 mmol) DIPEA v 10 ml methylkyanidu. Směs se 3,5 hodiny míchá při teplotě místnosti, a pak se zahustí ve vakuu. Vytvořený materiál se rozpustí v ethylacetátu a promyje postupně nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliči20 tanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku sloučeniny 24b jako 0,122 g (50% výtěžek) bílé pevné látky.
b) Na 0,12 g (0,25 mmol) sloučeniny 24b se 30 minut působí pri teplotě místnosti 4N roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu, a pak se zahustí ve vakuu. Na přibližně 0,25 mmol vytvořeného hydrochloridu se působí 75 mg (0,27 mmol) Boc-Chg-OH · H2O, 87 mg (0,27 mmol) TBTU v 10 ml methylkyanidu, a nakonec pri teplotě 0 °C 0,15 ml (0,87 mmol) DIPEA. Zbytek se zředí ethylacetátem, postupně se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku 0,2 g sloučeniny 24c jako Špinavě bílé pevné lát30 ky. Vznikne 0,14 g produktu, který se rozpustí v dimethylsulfoxidu a čistí se preparativní
HPLC. Po lyofilizaci vznikne 35 mg (33% výtěžek) sloučeniny 24c jako bílé pevné látky. HPLC (98%);
Hmotnostní spektrum (FAB) m/z: 637,3 (MH+);
HRMS vypočteno pro C35H48N4O7 (MH+); 637,36011: nalezeno: 637,36250;
-59'Η NMR (DSMO-d^): výskyt rotamerů; δ 8,91 (dvakrát d, J = 4,1 a 4,1 Hz, 1H), 8,40 - 8,36 (m,2H), 7,90 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,77 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,6- 7,54 (m, 2H), 6,80 (d, 3 = 8,6 Hz, 1H), (dvakrát s, 2H), 4,40 (bs, 1H), 4,31 (t, J= 8,3 Hz, 1H), 4,12 (d, J - 11,44 Hz, 1H), 4,03 (t, 3 = 7,9 Hz, 1H), 3,78 - 3,72 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 2,35 - 2,27 (m, 1H), 2,06- 1,97 (m, 1H), 1,71 - 1,55 (m, 10H), 1,53 - 1,38 (m, 2H), 1,26 (s, 9H),
1,18 - 1,06 (m, 2H), 1,02 - 0,93 (m, 2H), 0,89 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
sloučenina 304:
ío c) Do 30 mg (přibližně 0,047 mmol) sloučeniny 24c se přidá 1 ml methanolu, 1 ml tetrahydrofuranu a 12 mg (0,29 mmol) monohydrátu hydroxidu lithného v 1 ml vody. Čirý roztok se energicky míchá 48 hodin, a pak se zahustí ve vakuu. Surový peptid se rozpustí v dimethylsulfoxidu a čistí se preparativní HPLC. Po lyofilizaci vznikne 21 mg (72% výtěžek) sloučeniny 304 jako bílé pevné látky. HPLC (99%);
Hmotnostní spektrum (FAB) m/z: (MH+) 623,3;
HRMS vypočteno pro C34H46N4O7 (MH+): 623,34448, nalezeno: 623,34630,
Ή NMR (DMSO-d6): výskyt rotamerů 1:1: δ 8,90 (dvakrát d, J= 4, 1 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,89 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,67,53 (m, 2H), 6,88 a 6,79 (dvakrát d, J = 8,6 a 7,9 Hz, 1H), 5,17 a 5,16 (dvakrát s, 2H), 4,43 4,35 (bs, 1H), 4,29 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,82 - 3,71 (m, 1H), 2,35 - 2,27 (m, 1H), 2,06 - 1,97 (m, 1 H), 1,72 - 1,53 (m, 10 H), 1,52 - 1,44 (m, 2H), 1,37 a 1,29 (dvakrát s, 9H), 1,18 - 1,05 (m, 3H), 1,0 - 0,94 (m, 1H), 0,91 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Příklad 25
Syntéza sloučeniny 301
sloučenina 301
-60a) Do suspenze se uvede 282 mg (1,23 mmol) sloučeniny 25a (=12a) v 6 ml bezvodého methylkyanidu. Postupně se přidá 221 μΐ (1,48 mmol) DBU a 161 μΐ (1,35 mmol) benzylbromidu a vytvořená reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Směs se zahustí, vytvořený olej se zředí ethylacetátem a 10% vodným roztokem citrónové kyseliny a postup5 ně dvakrát se promyje 10% roztokem citrónové kyseliny, dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dvakrát vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátový podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje se do sucha. Surový bezbarvý olej se čistí rychlou chromatografii při eluci gradientem poměrů směsi hexanů a ethylacetátu od 95: 5 do 90: 10 za vzniku 368 mg (93 %) benzylovaného i o produktu 25b jako bezbarvého oleje.
Hmotnostní spektrum (FAB): 318,2 MH, 320,2 MH+, 342,2 (M+Na)+, 'HNMR (CDCIí): δ 7,37 - 7,28 (m, 5H), 5,22 - 5,10 (m, 1H), 5,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 12 Hz, 1H), 1,60 - 1,40 (m, 4H), 1,39 (s, 9H), 1,31 - 1,22 (m, 1H), 0,91 (t, J = 7,5,
14,5 Hz, 3H).
b) Na 368 mg (1,15 mmol) sloučeniny 25b se působí 6 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu podle shora uvedeného postupu. Surový hydrochlorid se naváže na 470,8 mg (1,27 mmol) sloučeniny 4 (příklad 4) za použití 507 μΐ (4,61 mmol) NMM a 525,6 mg (1,38 mmol) HATU (namísto TBTU) v 6 ml methylenchloridu podle postupu popsaného v příkladě 22 za vzniku surového racemického dipeptidu jako oranžového oleje. Surový materiál se čistí rychtou chromatografii při eluci směsí hexanu a dietyléteru v poměru 50:50 za vzniku 223 mg (teoretický výtěžek 68 %) čistého dipeptidu 25c (méně polární skvrna) jako bílé pěny.
Hmotnostní spektrum 571,4 MH-, 573,3 MH+, 595,3 (M+Na)+, 'HNMR (CDC13): směs rotamerů přibližně 1:1: δ 8,03 (b d, J = 8 Hz, 1H), 7,86 (bd, J = 7,5 Hz, 1H), 7,82 (b d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,61 (bs, 0,5 H), 7,57 - 7,40 (m, 4H), 7,31 - 7,21 (m, 5H), 6,48 (bs, 0,5H), 5,22- 5,11 (m, 1 H), 5,08-4,81 (m, 3H), 4,41 - 3,74 (m, 3H),
3,49-3,18 (m, 1H), 2,76- 1,90 (m, 2H), 1,69- 1,48 (m, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,40- 1,23 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,5,15 Hz, 3H).
c) Na 170,1 mg (0,297 mmol) dipeptidu 25c se působí 2 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu podle shora uvedeného postupu. Surový hydrochlorid se naváže na
84,1 mg (0,327 mmol) Boc-Chg-OH za použití 130,7 μΐ (1,19 mmol) NMM a 135,5 mg (0,356 mmol) HATU (namísto TBTU) v 2 ml methylenchloridu během 2,75 hodin při teplotě místností, a pak se zpracuje podle shora uvedeného postupu za vzniku přibližně 211,4 mg surového tripeptidu 25d jako bílé pěny s výtěžkem 100 %.
Hmotnostní spektrum (FAB): 712,5 MH+.
sloučenina 301:
d) Ve 2 ml absolutního ethanolu se rozpustí přibližně 15,4 mg (0,022 mmol) surového tripeptidu 25d, a následně se přidá odhadnuté množství (Špička špachtle) 10% roztoku palladia na aktivním uhlí a octanu amonného. Směs se hydrogenuje přes noc v atmosféře vodíku při teplotě místnosti a při atmosférickém tlaku. Reakční směs se filtruje přes 0,45 pm Millex® filtr, odpařuje se do sucha, zředí se ethylacetátem a 10% vodným roztokem kyseliny citrónové a promyje se znovu jedenkrát 10% vodným roztokem citrónové kyseliny, dvakrát vodou a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se, odpařuje do sucha a lyofilizuje za vzniku 11,0 mg (výtěžek 82 %) tripeptidu 301 bílé pevné látky.
Hmotnostní spektrum (FAB): 622,5 MH+, 644,5 (M+Na)+,
-61 ’Η NMR (DMSO), směs rotamerů přibližně 1:4: δ 8,54 & 8,27 (s, 1H), 8,06 - 7,99 (m, 1H), 7,96 - 7,91 (m, 1 H), 7,87 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,57 - 7,42 (m, 4H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,46-4,19 (m, 2H), 4,17-4,02 (m, 2H), 3,88- 3,67 (m, 1H), 2,28- 2,19 (m, 1H), 2,05- 1,93 (m, 1H), 1,73 - 1,43 (m, 8H),
1,32- 1,07 (m, 6H), 1,28 (s, 9H), 1,03-0,85 (m, 2H), 0,91 (t, J = 7,5, 15Hz,3H).
Příklad 26
Syntéza sloučeniny 306
ío a) Za použití 192 mg (0,600 mmol) TBTU a 226 mg (1,75 mmol) DIPEA v 10 ml methylenchloridu se během 20 hodin sloučí 180 mg (0,500 mmol) kyseliny 26a a 96 mg (0,500 mmol) aminu 15d, Reakční směs se zahustí, zpracuje se ethylacetátem, promyje se dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za i? vzniku 26c jako hnědého oleje, který se použije v následujícím kroku syntézy bez dalšího čištění,
b) c) Přibližně 0,500 mmol surové sloučeniny 26c se 30 minut míchá v 4 ml chlorovodíku v dioxanu a zahustí se do sucha. Pevný produkt se zpracuje 10 ml methylenchloridu, a pak se postupně přidá 226 mg (1,75 mmol) DIPEA, 138 mg (0,500 mmol) monohydrátu
Boc-Chg-OH a 192 mg (0,600 mmol) TBTU. Roztok se 5 hodin míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se zahustí, zpracuje se ethylacetátem, promyje se dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku hnědého oleje, který se čistí rychlou chromatografií za vzniku 204 mg (výtěžek 64 % během dvou vazebných reakcí) sloučeniny 26d jako žlutého oleje.
-62*H NMR (CDCb): δ 8,77 - 8,74 (m, 1H), 8,14 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 9, 7 Hz, 1H), 7,52 (d, J - 5 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,7 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 5 Hz, 1H), 5,80-5,70 (m, 1H), 5,35 - 5,27 (m, 2H), 5,14-5,07 (m, 2H), 4,89- 4,83 (m, 1H), 4,39- 4,32 (m, 1H), 4,30- 4,24 (m, 1H), 4,20- 4,07 (m, 2H), 4,00 - 3,92 (m, 1H),
3,04- 2,92 (m, 1H), 2,39 - 2,29 (m, 1H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,91-1,83 (m, 1H), 1,821,62 (m, 7H), 1,45 - 1,35 (m, 9H), 1,27 - 1,07 (m, 8H).
c) Ve 4 ml tetrahydrofuranu a 2 ml methanolu se rozpustí 136 mg (0,214 mmol) sloučeniny 26d. Přidají se 2 ml vodného roztoku 72 mg (1,72 mmol) hydrátu hydroxidu lithného io a reakční směs se 20 hodin míchá při teplotě místnosti. Roztok se zahustí a čistí preparativní
HPLC za vzniku 25 mg sloučeniny 306 (méně polární izomer) jako bílé pevné látky, sloučenina 306:
Hmotnostní spektrum (FAB) 607,4 (MH+), *H NMR (DMSO-de): δ 9,16 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,35 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,12 (d, 15 J = 9 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8, 7 Hz, 1H), 7,76 (dd, J = 8, 7 Hz, 1H), 7,59 (d = 6 Hz, 1H),
7,02 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,75 - 5,66 (m, 2H), 5,19 (d, J = 18 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10,8 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 10 Hz, 1H), 3,87 - 3,83 (m, 1H), 2,66-2,59 (m, 1H), 2,36-2,30 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 18,9Hz, 1H), 1,75- 1,56 (m, 8 H), 1,38 - 1,35 (m, 1H), 1,25 - 1,22 (m, 1 H), 1,09 (s, 9 H), 1,12 - 0,95 (m, 3H).
Příklad 27
Syntéza sloučeniny 307
-63c) Na roztok 505 mg (105 mmol) kyseliny (8) (příklad 8) v 5 mi dichlormethanu se působí 376 mg (1,17 mmol) TBTU. Do roztoku aktivovaného esteru se přidá 279 mg (1,46 mmol) hydrochloridu (R,Sý-vinyl-AccaOEt (18) (příklad 18) v 7 ml dichlormethanu obsahující 0,60 ml (5,46 mmol) N-methyl-morfolinu. Vytvořený roztok se přes noc míchá při teplotě místnosti.
Rozpouštědlo se odpařuje ve vakuu. Vytvořený zbytek zředí se ethylacetátem, dvakrát se promyje nasyceným roztokem bikarbonátu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje ve vakuu. Vytvořený zbytek se čistí chromatografií na silikagelu při eluci směsí hexanů a ethylacetátu v poměru 60:40 za vzniku 173 mg dipeptidu 27c s výtěžkem 27 %.
io d, e) Při teplotě místnosti se 1 hodinu míchá roztok 70 mg (0,114 mmol) dipeptidu 27c v 3 ml 4,0 M roztoku chlorovodíku v 1,4 dioxanu (po 10 minutách vznikne sraženina). Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a vytvořených 0,114 mmol amin-hydrochloridu 27d se zředí 1,5 ml acetonitrilu. Roztok neutralizuje přidáním 65 μΐ (0,591 mmol) N-rnethylmorfolinu. Na roztok 39 mg (0,142 mmol) Boc-ChgOH · H2O v 1,5 ml acetonitrilu se působí 46 mg (0,143 mmol) TBTU, a pak se vytvořený roztok přidá do shora uvedeného roztoku aminu. Vytvořený roztok se 2 dny míchá při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu. Vytvořený zbytek se zředí ethylacetátem, dvakrát se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje ve vakuu. Vznikne 86 mg (výtěžek 100 %) tripeptidu 27e. Surová výsledná sloučenina se použije v následujícím postupu syntézy bez dalšího čištění.
d) Do roztoku 86 mg (0,114 mmol) tripeptidu 27e v 5 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 2,5 : 1 se přidá 22 mg (0,524mmol) monohydrátu hydroxidu lithného. Přidá se dalších
0,25 ml methanolu za vzniku homogenního roztoku, který se pres noc míchá při teplotě místnosti, a pak se rozpouštědlo odpařuje ve vakuu. Vytvořený zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Vodný podíl se okyselí přidáním 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové, a pak extrahuje dvakrát ethylacetátem. Požadovaná sloučenina se vyskytuje v ethylacetátu z první zásadité extrakce.
Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje ve vakuu za vzniku 69 mg surové kyseliny, která se čistí preparatomí HPLC. Sloučenina se rozpustí ve 4 ml methanolu a nastřikuje se na ekvilibrovaný sorbent Whatman Partisil 10-ODS-3 (2,2 x 50cm) Cl8 reversní fáze kolony. (λ= 230 nm, rozpouštědlo A = 0,06% roztok kyseliny trifluoroctové ve vodě, rozpouštědlo B = 0,06% roztok kyseliny trifluoroctové v methylkyanidu). Program čištění: od 20 do 70% rozpouštědla B během 60 minut. Podíly se analyzují analytickou HPLC. Podíly obsahující výsledný produkt se seberou a lyofílizují za vzniku 50 mg (60%) požadovaného tripeptidu 307 jako bílé pevné látky.
sloučenina 307:
‘H NMR (DMSO-d,) rotamery: δ 8,86 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,85 (s, 0,2H), 8,64 (s, 0,8H), 8,49 (dd, J = 9,5, 3 Hz, 0,2H), 8,45 (dd, J = 9,2 Hz, 0,8H), 8,39 - 8,33 (m, 2H), 8,20 (d, J = 9,5 Hz, 0,2H), 8,18 (d, J = 9,5 Hz, 0,8H), 7,81 (s, 0,2H), 7,78 (s, 0,8H), 7,64 - 7,56 (m, 3H), 6,87 (d, J = 8 Hz, 0,8H), 6,36 (d, J = 9 Hz, 0,2H), 5,82 - 5,67 (m, 2H), 5,27 - 5,17 (m, 1H), 5,09 - 5,03 (m, 1H), 4,73 (t, J = 8 Hz, 0,2H), 4,55 (dd, J = 10,7,5 Hz, 0,8H), 4,49 - 4,40 (m, 1H), 4,00 - 3,95 (m, 1H), 3,83 - 3,76 (m, 1H), 2,87 - 2,80 (m, 0,2H), 2,69 - 2,62 (m, 0,8H), 2,39 - 2,26 (m, 1H), 2,08 - 2,00 (m, 1H), 1,75- 1,41 (m, 7H), 1,37 (s, 1,8H), 1,32- 1,27 (m, 1H), 1,17-0,82 (m, 5H), 0,94 (s, 7,2H).
-64Příklad 28
Syntéza sloučeniny 311
Sloučenina 311 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 24, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek.
Sloučenina 310: 'H NMR (DMSO-d6): δ 8,98 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,24 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 6 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8 Hz, 1H),
5,75- 5,66 (m, 1H), 5,57 (br s, 1H), 5,24- 5,19 (m, 1H), 5,08-5,01 (m, 1H), 4,57- 4,40 (m, 2H), 4,00 - 3,96 (m, lH),3,82(dd,J = 9,8Hz, 1H), 2,59 - 2,54 (m, 1H), 2,32-2,26 (m, 1H), 1,99 (dd, J= 17,9 Hz, 1H), 1,74- 1,55 (m, 8H), 1,37 (s, 1H), 1,26- 1,22 (m, 1H), 1,14- 1,08 (m,9H), 1,02-0,91 (m,3H).
Příklad 29
Syntéza sloučeniny 302
Sloučenina 302 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 27, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek:
Ή NMR (DMSO-dí): δ 8,34 (s, IH), 8,04 - 8,01 (m, 1H), 7,94- 7,92 (m, 1 H), 7,87 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 3H), 7,45 (dd, J = 17,8 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,94 (dd, J = 55,12 Hz, 2H), 4,34 (s, 1H), 4,27 (dd, J = 8,8 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 11 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 8,8 Hz, 1H), 3,72 - 3,65 (m, 2H), 3,59-3,54 (m, 1H), 2,24-2,18 (m, 1H), 2,02- 1,95 (m,2H), 1,75- 1,70 (m, 1H), 1,53- 1,44 (m, 2H), 1,32- 1,27 (m, 1H), 1,21 - 1,17 (m, 1H), 0,96 - 0,85 (m, 10 H), 0,80 - 0,77 (m, 5 H), 0,62 - 0,57 (m, 1 H).
-65Příklad 30
Syntéza sloučeniny 308
Sloučenina 308 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 27, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek.
'HNMR (DMSO-dj) rotamery « 2 : 8: δ 8,77 (s, 0,2H), 8,45 (s, 0,8H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz,
0,8H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 0,2H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,55 - 7,37 (m, 4H), 7,05 - 6,59 (m, 1H), io 6,95 (d, J = 8 Hz, 0,8H), 6,26 (d, J = 8,5 Hz, 0,2H), 5,81 - 5,64 (m, 1H), 5,33 - 5,28 (m, 1H),
5,26- 5,15 (m, 1H), 5,08 - 5,02 (m, 1H), 4,60 (t, J = 7,5 Hz, 0,2H), 4,38 - 4,27 (m, 1,8H),
4,09- 3,91 (m, 1,8H), 3,74 (dd, J= 12,5, 4 Hz, 0,2H), 2,69 - 2,60 (m, 0,2H), 2,50- 2,40 (m, 1H), 2,36- 2,28 (m,0,2H), 2,23- 2,14 (m, 0,8H), 2,05- 1,97 (m, 0,8H), 1,76- 1,44 (m, 7H), 1,37 (s, 1,8H), 1,29 (s, 7,2H), 1,28- 1,20 (m, 1H), 1,16-0,88 (m, 5H).
Příklad 31
Syntéza sloučeniny 309
Sloučenina 309 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 27, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek.
'HNMR (DMSO-d6) rotamery » 2 : 8: δ 8,75 (s, 0,2H), 8,50 (s, 0,8H), 7,89- 7,78 (m, 3H), 25 7,50 - 7,44 (m, 1H), 7,42 - 7,32 (m, 2H), 7,17 - 7,09 (m, 0,8H), 7,08 - 7,03 (m, 0,2H), 6,79 (d,
J = 8,5 Hz, 0,8H), 6,33 (d, J = 9 Hz, 0,2H), 5,81 - 5,65 (m, 1H), 5,30 - 5,16 (m, 2H), 5,10- 5,02 (m, 1H), 4,56 (t, J = 7,5 Hz, 0,2H), 4,33 (t, J = 8 Hz, 0,8H), 4,10 - 3,90 (m, 2,8H), 3,74 - 3,68 (m, 0,2H), 2,45 - 2,37 (m, 1H), 2,34 - 2,17 (m, 1H), 2,05 - 1,97 (m, 1H), 1,76- 1,48 (m, 7H), 1,37 (s, 1,8H), 1,23 (s, 7,2H), 1,21 - 0,88 (m, 6H).
-66Příklad 32
Syntéza sloučeniny 305
Sloučenina 305 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 27, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek.
Ή NMR (DMSOM6) rotamery (1 : 9): δ 8,68 (s, O,1H), 8,43 (s, 0,9H), 8.04- 8,00 (m, 1H),
7,95-7,91 (m, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,57- 7,49 (m, 3H), 7,47- 7,42 (m, 1H), 6,82 io (d, J = 8,5Hz, 0,9H), 6,21 (d, J= 8,5 Hz, 0,lH), 5,80- 5,64 (m, 1H), 5,21 (dd, J- 17,2 Hz,
0,lH), 5,18 (dd, J= 17,2 Hz, 0,9H), 5,06 (dd, J = 10,5, 2 Hz, 1H), 5,02- 4,85 (m,2H), 4,43 (t, J = 7,5 Hz, 0,1H), 4,34 (brs, 1H), 4,23 (t, J = 8,5 Hz, 0,9H), 4,16 - 4,05 (m, 1,8H), 3,89 - 3,82 (m, 0,2H), 3,74 (dd, J = 11, 3,5 Hz, 0,9H), 3,53 (dd, J - 12, 5,4 Hz, 0,1 H), 2,30 - 2,21 (m, 1H),
2,02 - 1,94 (m, 2H), 1,74 - 1,38 (m, 7H), 1,36 (s, 0,9H), 1,28 (s, 8, 1H), 1,25 - 0,87 (m, 6H).
Příklad 33
Syntéza sloučeniny 303
Sloučenina 303 se připraví podle postupu popsaného v příkladě 27, ale za použití odpovídajících stavebních jednotek.
'HNMR (DMSO-d6): δ 8,29 (s, 1H), 8,04- 8,01 (m, 1H), 7,94- 7,92 (m, 1 H), 7,87 25 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,56 - 7,52 (m, 3H), 7,46 (dd, J - 8,7 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,01 (d, J=l2Hz, 1H), 4,86 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,34 (brs, 1H), 4,24 (t, J = 8Hz, 1 H), 4,18-4,09 (m,2H), 3,74 - 3,53 (m, 3H), 2,24-2,18 (m, 1H), 2,04- 1,95 (m, 1H), 1,74- 1,45 (m, 10 H), 1,31 - 1,13 (m, 4 H), 0,96 - 0,86 (m, 7 H), 0,79 - 0,76 (m, 5 H).
-67Příklad 34
(34a)
1. vodný LiOH vodný CHjOH
->
2. TBTU
01ΕΛ 0gfi} EZ^NHrHCÍ
COjCHj
OMF
a) Vazebná reakce P2 s PÍ
Při teplotě místnosti se 1 hodinu míchá 170 mg (0,355 mmol) methylesterového derivátu 7 (34a) ve 4 ml 50% roztoku tetrahydrofuranu v methanolu a 1 ml 1M vodného roztoku hydroxidu lithného. Roztok se zahustí (Rotavap, 30 °C), zbytek se okyselí k pH 6 a roztok se lyofílizuje.
Vytvořený prášek se míchá v 3 ml bezvodého dimethyl formám idu za přítomnosti 0,4 ml DIE A, a následně se postupně přidá 140 mg (0,845 mmol) hydrochloridu methylesteru 1,1-aminocyklobutyl-karboxylové kyseliny 34b a 134 mg (0,417 mmol) TBTU. Po 18 hodinách míchání při teplotě místnosti se směs čistí rychlou chromatografií na sílikagelu (230-400 Mesh) při eluci směsí ethylacetátu a hexanu v poměru 1:2 za vzniku 98 mg (čistota podle HPLC 90%) oranžo15 vého oleje.
b) Vazebná reakce P1-P2 s P3
1. HCUdioxan
2. Boc-NH^cOjH
TBTU/DiEA/DMF
->
3. vodný KOH
4. vodný TFA
V 5 ml 4N roztoku chlorovodíkové v dioxanu se 1 hodinu míchá 97 mg (90%, 0,155 mmol) dipeptidu 34b při teplotě místnosti, Roztok se pak zahustí do sucha (Rotavap, vysoké vakuum) za vzniku béžové pevné látky. Tento materiál se míchá ve 2 ml bezvodého dimethyl formám idu při teplotě místnosti za přítomností 0,4 ml DIEA, a následně se přidá 80 mg (0,35 mmol) L-BocTbg a 112 mg (0,35 mmol) TBTU. Po 2 dnech míchání při teplotě místnosti se roztok vlije do ethylacetátu k získání volných bází za použití 5% vodného roztoku uhličitanu draselného.
Organický podíl se zpracuje za vzniku žlutého olejovitého zbytku. Materiál se čistí rychlou chromatografií na sílikagelu (230-400 Mesh) za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 1:2 a 3:1. Získá se 40 mg oleje, podle HPLC homogenního.
Mícháním při teplotě místnosti se během 3 hodin saponifikuje 40 mg methylesteru ve 2 ml 1N 30 roztoku hydroxidu draselného ve 4 ml methanolu. Reakční směs se zahustí (Rotavap, 30 °C) akpH 4 se okyselí přidáním 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Směs se čistí preparativní
HPLC na 08 koloně při eluci gradientem koncentrací vodného roztoku acetonitrilu od 0 do
-6850% obsahujícího 0,1 % roztok kyseliny trifluoroctové při 220 nm. Podíly obsahující požadovaný produkt se oddělí, zahustí na poloviční objem a lyofilizuje se za vzniku 10 mg sloučeniny 403 bílé pevné látky.
’H NMR (400 MHz, DMSO-dJ: δ směs rotamerů: NH+ (1H, s, 8,6 ppm), CH (3H, m, 8,2 ppm), Ph (5H, široké s, 7,66 a 7,53 ppm), CH (1H, široké, 7,22 ppm), NH (1H, d, J= 7,6 Hz, 6,71 ppm), CHO (1H, široké s, 5,76 ppm), CH (2H, m, 4,58-4,49 ppm), CH (1H, m, 4,04 ppm), CH3O (3H, s, 3,97 ppm), CH (1H, d, 3,86 ppm), CH (7H, velmi široké, 1,8 - 2,6 ppm), Boc skup. (9H, s, 1,25 ppm) a t-butyl skup. (9H, s, 0,97 ppm).
o
Hmotnostní spektrometrie: M+H+ při m/e 675 (100%),
HPLC vrchol 98% při teplotě 18,9 minut.
Příklad 35
Roztok 9,15 ml (81,4 mmol) m-anisidinu 35a a 10,0 ml (81,3 mmol) dimethyl-acetylen-dikarboxylátu 35b ve 160 ml methanolu se 2 hodiny zahřívá pod refluxem. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se čistí rychlou chromatografií na koloně při eluci směsí hexanů a ethylacetátu v poměru 90:10. Získá se 17,0 g (79% výtěžek) sloučeniny 35c jako oranžového oleje.
'HNMR (CDCb): δ 9,62 (široké s, 1H), 7,17 (dd, J = 7 a 8,5 Hz, 1 H), 6,66- 6,62 (m, 1H), 6,49 - 6,45 (m, 2H), 5,38 (s, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
V lázni písku při vnitřní teplotě přibližně 250 °C se zahřívá 50 ml difenyléteru. V 5 ml difenyléteru se rozpustí 7,5 g (28,3 mmol) sloučeniny 35c a roztok se během 2 minut přidá do vroucího rozpouštědla, Směs se 5 minut zahřívá, a reakční směs se pak nechá zchladit na teplotu místnosti. Rychle se vytvoří béžová pevná látka jako sraženina, která se oddělí filtrací, a pak se rozetře s methanolem. Vznikne 4,1 g (62% výtěžek) požadované sloučeniny 35d.
'HNMR(DMSO46): δ 7,97 (d, J - 9 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,96 (dd, J = 9a2 Hz,
1H), 6,55 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,84 (s, 3H).
-69OMe
BocN.
MeO3C.
OH
OBn
PSe)
Roztok 1,71 g (5,33 mmol) derivátu cis-4-hydroxy-L-prolinu 35e, 1,25 g (5,36 mmol) derivátu 4-hydroxy-chinoIinu 35f a 2,80 g (10,68 mmol) trifenylfosfmu v 75 ml tetrahydrofuranu se zchladí na teplotu 0°C, pomalu po kapkách se během 1 hodiny přidá 1,70 ml (10,80 mmol)
DEAD. Reakční směs se pak nechá zahřát pomalu na teplotu místnosti a v míchání se pokračuje přes noc. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se čistí rychlou chromatografit při eluci směsí ethylacetátu a hexanů v poměru 70:30. Vznikne 0,7 g čisté sloučeniny 35g a 1,8 g sloučeniny 35g kontaminované přibližně 50% trifenylfosfát-oxidem jako bílé pevné látky.
Ή NMR (CDCIj) rotamery v poměru 4 : 6: δ 8,04 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 2,5 Hz, 1H),
7,40 - 7,32 (m, 6H), 7,23 (dd, J = 9 a 2,5 Hz, 1H), 5,33 - 5,13 (m, 3H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 0,4H), 4,54 (t, J = 8 Hz, 0,6H), 4,07 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 4,04 - 3,80 (m, 2H), 2,78 - 2,65 (m, 1H), 2,47 - 2,34 (m, 1H), 1,45 (s, 3,6H), 1,37 (s, 5,4H).
(3Ssl (35h)
Do roztoku 0,70 g (1,31 mmol) benzyl-esteru derivátu prolinu 35g ve směsi 10 ml methanolu a 10 ml ethylacetátu se přidá 100 mg 10% katalyzátoru palladia na aktivním uhlí. Vytvořená suspenze se míchá při teplotě místnosti v atmosféře vodíku 1,5 hodiny. Katalyzátor se pak filtruje na filtrační jednotce Millex-HV Millipore (0,45 pm) a rozpouštědlo se odpařuje ve vakuu. Vytvoří se kvantitativní výtěžek 0,59 g požadované kyseliny 35h.
Ή NMR (CDClj) rotamery v poměru 70 : 30: δ 8,06 (d, J = 9,5 Hz, 0,3H), 8,01 (d, J = 9 Hz, 0,7 H), 7,56 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,44 (široké s, 0,7 H), 7,41 (široké s, 0,3 H), 7,24 (dd, J = 9 H), 4,08 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,04 - 3,80 (m, 2H), 2,83 - 2,72 (m, 1H), 2,71 - 2,47 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
o <35h) (35i) 135)
Na 215 mg (1,21 mmol) soli aminu 35i v 7 ml acetonítrilu se působí 0,95 ml (5,45 mmol) DIEA. Tento roztok se pak přidá do roztoku 590 mg (1,32 mmol) kyseliny 35h a 389 mg (1,21 mmol) TBTU v 5 ml methylkyanidu. Vytvořený roztok se pres noc míchá při teplotě místnosti.
Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se zředí ethylacetátem a promyje dvakrát nasyceným roztokem bikarbonátu sodného, jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem horečnatým. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se Čistí rychlou chromatografii na koloně při eluci směsí ethylacetátu a hexanů v poměru 75:25 za vzniku 527 mg (70% výtěžek) požadovaného dipeptidu 35j.
o 'H NMR (CDCb): δ 8,01 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,22 (dd, J = 9 a 2,5 Hz, 1H), 5,81- 5,71 (m, 1H), 5,36-5,28 (m,2H), 5,18 - 5,12 (m, 1H), 4,61-4,45 (m, 1H), 4,07 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 3,91 - 3,74 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,99- 2,84 (m, 1H), 2,49-2,34(m, 1H),2,20-2,08(m, 1H), 1,97- 1,84(m, 1H), 1,58- 1,52(m, 1H), l,44(s,9H.
<33j) Ρ»)
Roztok 716 mg (1,25 mmol) diesteru 35j ve směsi 1,5 ml tetrahydrofuranu a 1,5 ml methanolu se zchladí na teplotu 0 ŮC, a pak se na zchlazený reakční roztok působí 1,25 ml (1,25 mmol) 1M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po 1 hodině míchání při teplotě 0 °C se směs neutralizuje přidáním 3 kapek ledové kyseliny octové. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a sloučenina se suší několikahodinovým odčerpáváním.
O psk)
OMe
O
Roztok 1,25 mmol sodné soli kyseliny 35k a 0,19 ml (1,36 mmol) triethylnitritu v 8 ml tetrahydrofuranu se zchladí na teplotu 0 °C a přidá se 0,18 ml (1,39 mmol) izobutyl-chlor-mravenčanu. Po 40 minutách se přidá 9 ml (6,30 mmol) diazomethanu a vytvořený roztok se 30 minut míchá při teplotě 0 °C a 2 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu. Vytvořený zbytek se zředí ethyíacetátem, dvakrát se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem hořečnatým, rozpouštědlo se odpařuje ve vakuu a zbytek se čistí rychlou chromatografii na koloně při eluci směsí hexanů a ethylacetátu v poměru 50:50 za vzniku 378 mg (52% výtěžek) io požadovaného diazoketonu 351.
'H NMR (CDCIj): δ 8,00 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,35 (d, J = 2,5 Hz, IH), 7,20 (dd, J = 9 a 2,5 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,81 - 5,71 (m, 1H), 5,35- 5,28 (m, 3H), 5,17- 5,13 (m, IH), 4,61 - 4,40 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,96 -3,74 (m, 2H), 3,72 (s,3H), 2,94- 2,38 (m, 2H),
2,18-2,06 (m, 1H), 1,98 - 1,84 (m, 1H), 1,57- 1,52 (m, 1H), 1,42 (s,9H).
Do zchlazeného (0 °C) roztoku 0,37 g (0,642 mmol) diazoketonu 351 v 15 ml tetrahydrofuranu se přidá 0,25 ml 48 % bromovodíku. Vytvořený žlutý roztok se 1 hodinu míchá při teplotě 0 °C. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Orga20 nický podíl se ještě jednou promyje hydrogenuhličitanem sodným a suší se nad síranem sodným. Po odpařování rozpouštědla ve vakuu vznikne 0,36 g (90% výtěžek) α-bromketonu 35m.
o
Na roztok 170 mg (0,271 mmol) α-bromketonu 35m v 10 ml izopropanolu se působí 64 mg (0,542 mmol) l-acetyl-2-thio-močoviny. Vytvořený roztok se 1 hodinu zahřívá na teplotu 75 °C. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Vytvořený zbytek se zředí ethylacetátem a dvakrát se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem hořečnatým. Odpařováním rozpouštědla ve vakuu vznikne 182 mg (výtěžek vyšší než 100 %) surového produktu 35n.
Na 145 mg (0,223 mmol) dipeptidu 35n se působí 3 ml 4M roztoku chlorovodíku v dioxanu. ΐΰ Vytvořený roztok se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se suší odčerpáváním. Na sůl aminu 35o v 5 ml methylkyanidu se působí
195 μΐ (1,12 mmol) DIEA. Tento roztok se pak přidá do roztoku 103 mg (0,446 mmol) Boc-tercbutylglycinu a 186 mg (0,489 mmol) HATU v 3 ml methylkyanidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti. Methylkyanid se odpaří ve vakuu a vytvořený zbytek se zředí ethyl-73acetátem, dvakrát se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla se získá 274 mg (> 100 %) surového tripeptidu 35p.
Roztok 56 mg (0,0733 mmol) tripeptidu 35p ve 4 ml 4M roztoku chlorovodíku v dioxanu se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se suší odčerpáváním.
Získaná sůl aminu se rozpustí ve 4 ml methylenchloridu a na roztok se působí 0,13 ml io (0,746 mmol) DIE A, a následně 26 mg (0,0876 mmol) trifosgenu. Po 3 hodinách inkubace se přidá 20 mg (0,146 mmol) 1,2,2-trimethyl-propylaminu (jehož syntéza je popsaná vN. Moss,
J. Gauthier, J, M. Ferla, Feb. 1995, SynLett. (2), str. 142-144). Ledová lázeň se odstraní a reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti. Po odpaření methylenchloridu ve vakuu se vytvořený zbytek zředí ethylacetátem, dvakrát se promyje nasyceným roztokem hydrogen15 uhličitanu sodného a jedenkrát nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem hořečnatým za vzniku 60 mg (výtěžek 100 %) požadované močoviny 35q.
-74Na roztok 57 mg (0,0721 mmol) methylesteru 35q ve směsi 2,5 ml tetrahydrofuranu a 1 ml vody se působí 25 mg (0,595 mmol) pevného hydrátu hydroxidu lithného (LiOH H2O), a následně se přidá 1 ml methanolu k vytvoření čirého roztoku. Po 4 hodinách míchání při teplotě místnosti se reakční směs neutralizuje přidáním 1M roztoku chlorovodíku. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním ve vakuu a zbytek se čisti preparativní chromatografií. Sloučenina se rozpustí v 2,5 ml methanol, vstříkne se na ekvilibrovaný sorbent Whatman Partisil 10-ODS-3 (2,2x50 cm) C18kolony v reverzní fázi. Postup čištění: lineární gradient rychlostí průtoku 20 ml/nm, λ 220 nm, vstříknuto při 10% A do 60% A během 60 minut. A: 0,06% roztok kyseliny trifluoroctové v methylkyanidu; B: 0,06% kyseliny trifluoroctové ve vodě. Podíly se analyzují analytickou HPLC. Produkt sebere a lyofilizuje za vzniku 15 mg sloučeniny 333 jako špinavě bílé pevné látky s 27% výtěžkem.
‘H NMR (DMSO-d6): δ 8,88 (s, 0,2H), 8,84 (d, J = 4,5 Hz, 0,2H), 8,68 (d, J = 8,5 Hz, 0. H), 8,56 (s, 0,8H), 8,40- 8,13 (m, 1,5H), 7,96 (d, J = 9,0 Hz, 0,2H), 7,72-7,44 (m,2,4H), 7,35-7,09 (m, 1,2H), 6,98 (d, J = 9 Hz, 0,2H), 6,15 (d, J = 9 Hz, 0.2H), 6,06 (d, J = 9 Hz, 0,8H), 5,93 (d, 3 = 9,5 Hz, 0,24H), 5,86 (d, J = 9 Hz, 0,8H), 5,79 - 5,67 (m, 1H), 5,69- 5,44 (m, 1H), 5,24 - 5,14 (m, 1H), 5,09- 5,01 (m, 1H), 4,50-4,35 (m, 2H), 4,24 (d, J = 9,0 Hz, 0,2H), 4,20 (d, J = 9,0 Hz, 0,8H), 4,06 - 3,98 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,77 - 3,60 (m, 2H), 2,58 - 2,50 (m, 1H), 2,33 - 2,28 (m, 1H), 2,22 (s, 2,4H), 2,21 (s, 0,6H), 2,02 (q, J = 9 Hz, 1H), 1,56 - 1,38 (m, 1H), 1,28 - 1,22 (m, 1H), 0,97 (s, 9H), 0,83 (d, J = 6 Hz, 3H), 0,72 (s, 9H).
Hmotnostní spektrum (FAB) 778,3 (m + H) +, 776,3 (M-H)-.
Příklad 36
Klonování, exprese a čištění rekombinantní proteázy NS3 viru HCV typu 1 b.
Sérum virem HCV infikovaného pacienta se získá širší spolupráci vědeckých týmů (Bernard Willems MD, Hópital St-Luc, Montreal, Kanada a Dr. Donald Murfy, Laboratoire de Santé Publique du Québec, Ste-Anne de Bellevue, Canada). Kopie HCV genomu, resp. cDNA v celé délce, která se získá reverzní transkripcí-polymerázovou řetězovou reakcí (RT-PCR) sérové RNA za použití specifických příměrů vybraných na základě homologie mezi ostatními liniemi genotypu lb. Tento HCV izolát byl zařazen do genotypové skupiny lb (Simmonds a spol., 3. Clin. Microbiol., (1993), 31, str. 1493-1503) na základě stanovení jeho kompletní genomické sekvence. Sekvence aminokyselin nestrukturální oblasti NS2-NS4B se ukázala zvíce než 93 % identická s HCV genotypem lb (BK, JK a 483 izolantů) a z 88% identická s HCV genotypem la (HCV1 izolát). DNA fragment kódující polyproteinový prekurzor (NS3/NS4A/NS4B/NS5A/ ZNS5B) se vyrobí pomocí PCR a zavede se do eukaryotního expresního vektoru. Po přechodné transfekci se zpracování polyproteinu zprostředkované proteázou NS3 víru HCV projeví při Westem-blot analýze přítomností kompletního funkčního NS3 proteinu. Tento NS3 protein se neprojevil expresí polyproteinového prekurzoru s mutací S1165A, která inaktivuje NS3 proteázu, čímž se potvrzuje funkční schopnost proteázy NS3 viru HCV,
DNA fragment kódující rekombinantní proteázu NS3 viru HCV (aminokyseliny 1027 až 1206) se klonuje v bakteriálním expresním vektoru pETl ld. Exprese NS3 proteázy v E. coli BL21 (DE3) pLysS se navodí 3 hodinovou inkubací lmM roztokem IPTG při teplotě 22 °C. Fermentací (18 1) vznikne přibližně 100 g vlhké buněčné pasty. Buňky se znovu uvedou do suspenze v 3,0 ml/g lyzátového pufru obsahujícího 25mM roztoku fosfátu sodného o pH 7,5, 10% objemových glycerolu, 1 mM roztoku EDTA a 0,01% NP-40 a uskladní se při teplotě -80 °C, Buňky se rozmrazí a homogenizují s následným přidáním 5mM roztoku DTT. Přidá se chlorid hořečnatý a DNáza do konečné koncentrace homogenátu 20 mM a 20 pg/ml. Po 25 minutách inkubace při teplotě 4 °C se homogenát zpracuje působením ultrazvuku a centrifuguje se 30 minut při 15000xg při teplotě 4 °C. Hodnota pH supematantu se pak upraví na 6,5 za použití 1M roztoku fosfátu sodného.
-75K postupu čištění ve dvou krocích popsanému ve zveřejněné přihlášce WO 95/22985 se přidá ještě gelová filtrace, Supematant z bakteriálního extraktu vstříkne na sorbent kolony SP HiTrap (Pharmacia), který se předem ekvilibruje v pufru A o rychlosti průtoku 2 ml/min (50 mM roztoku fosfátu sodného o pH 6,5, 10% glycerol, lmM roztoku EDTA, 5mM roztoku DTT, 0,01% NP-40). Kolona se promyje pufrem A obsahujícím 0,15M roztoku chloridu sodného a proteáza se eluuje deseti objemy kolony lineárním gradientem od 0,15 do 0,3M roztoku chloridu sodného. Podíly obsahující NS3 proteázu se spojí a zředí do konečné koncentrace 0,lM chloridu sodného. Enzym se dále čistí na koloně HiTrap Heparin (Pharmacia), jejíž sorbent se ekvilibruje pufrem B io (25mM roztoku fosfátu sodného o pH 7,5, 10% glycerol, 5 mM roztoku DTT, 0,01 % NP-40). Vzorek nastřikuje při průtokové rychlosti 3 ml/min. Kolona se pak promyje pufrem B obsahujícím 0,15M roztoku chloridu sodného průtokovou rychlostí 1,5 ml/min. Promytí se provede ve dvou krocích za přítomnosti pufru B obsahujícího 0,3 nebo 1 M roztoku chloridu sodného. Proteáza se promyje 0,3 M roztokem chloridu sodného, trojnásobně se zředí pufrem B, a znovu se umístí na kolonu HiTrap Heparin při eluci pufrem B obsahujícím 0,4 M roztoku chloridu sodného. Podíly obsahující NS3 proteázu se umístí na kolonu Superdex 75 HiLoad 16/60 (Pharmacia) ekvilibrované pufrem B obsahujícím 0,3M roztoku chloridu sodného. Podle SDSPAGE a následnou denzitometrickou analýzou je čistota proteázy NS3 viru HCV získané ze spojených podílů vyšší než 95 %.
Enzym se uskladní při teplotě -80 °C, a před použitím se rozmrazí na ledu a zředí.
Příklad 37
Radiometrické hodnocení působení komplexu rekombinantní proteázy NS3 viru HCV a NS4A peptidového kofaktoru
Enzym se klonuje, exprimuje a připraví podle postupu popsaného v příkladě 30. Enzym se uskladní při teplotě -80 °C, rozmrazí se na ledu a před zkouškou se zředí pufrem pro zkoušku obsahujícím peptidový NS4A kofaktor.
Mezi cysteinovými a serinovými zbytky se enzymaticky štěpí substrát pro radiometrickou zkoušku DDIVPC-SMSYTW. Sekvence DDIVPC-SMSYTW odpovídá přirozenému místu
Štěpení NS5A/NS5B, kde cysteinový zbytek v segmentu P2 se nahradil prolinem. Peptidový substrát DDIVPC-SMSYTW a indikátor biotín-DDIVPC-SMS[125I-Y]TW se inkubují s rekombinantní NS3 proteázou a NS4A peptidovým kofaktorem KKGSVVIVHGRIILSGRK (molámí poměr enzym : kofaktor = 1:100) bez nebo s použitím inhibitorů. Oddělení substrátu z produktu se provede přidáním kuliček avidinem obalené agarózy, a následně filtrací. Z množství SMS[nsI40 Y]TW produktu ve filtrátu lze vypočítat přeměnu substrátu v procentech a procenta inhibice,
A. Činidla
Tris a Tris-HCl (UltraPure) vyrábí firma Gibco-BRL. Glycerol (UltraPure), MES a BSA vyrábí firma Sigma. TCEP lze získat od firmy Pierce, DMSO z Aldrich a hydroxid sodný z Anachemia.
Pufr pro zkoušku: 50 mM roztok Tris HC1 o pH 7,5, 30 % hmotnostně / objemová glycerolu, 1 mg/ml BSA, 1 mM roztoku TCEP (TCEP se přidá před použitím z 1M zásobního roztoku ve vodě).
Substrát: DDIVPCSMSYTW, konečná koncentrace 25 μΜ (k zabránění oxidace se používá z 2mM zásobního roztoku v DMSO uskladněného při teplotě -20 °C).
Indikátor: redukovaný monojodovaný substrát biotin DDIVPC SMS[125I Y]TW o výsledné kon55 centraci přibližně lnM.
-76Proteáza NS3 viru HCV typu lb o konečné koncentraci 25nM (ze zásobního roztoku 50mM fosfátu sodného o pH 7,5,10% glycerolu, 300mM roztoku chloridu sodného, 5 mM DTT, 0,01% NP40).
Peptidový NS4A kofaktor: KKGSVVIVGRIILSGRK, konečná koncentrace roztoku 2,5μΜ (ze 2mM zásobního roztoku v DMSO uskladněného pri teplotě -20 °C).
B. Protokol postupu
Zkouška se provede na polypropylenové plotně s 96 prohlubněmi firmy Costar. Každá prohlubeň obsahuje:
μΐ substrátu / indikátoru v pufru pro zkoušku
10 μΐ ± inhibitoru v 20% roztoku DMSO / pufru pro zkoušku μΐ NS3 proteázy typu lb / NS4 peptidový kofaktor (molámí poměr =1:100).
Slepý vzorek (žádný inhibitor a žádný enzym) a kontrolní vzorek (žádný inhibitor) se také připra20 ví na stejné plotně zkoušky.
Enzymatická reakce se zahájí přidáním roztoku komplexu enzymu a NS4A peptidu a zkoumaná směs se 40 minut inkubuje pri teplotě 23 °C pri mírné agitaci. K ukončení enzymatické reakce se přidá 10 μΐ 0,5N roztoku hydroxidu sodného a 10 μΐ 1M roztoku MES o pH 5,8.
Na filtrační desku Millipore MADP N65 se přidá 20 μΐ kuliček avidinem obalené agarózy (Pierce). Po ukončení enzymatické reakce se zkoumaná směs přenese na filtrační desku a při mírné agitaci se inkubuje 60 minut při teplotě 23 °C.
Desky se filtrují za použití filtračního zařízení Millipore MultiScren Vacuum Manifold Filtration. Na neprůhlednou desku s 96 prohlubněmi obsahující 60 μΐ scintilačního kokteilu v každé prohlubni se přenese 40 μΙ filtrátu.
Radioaktivita filtrátu se měří na zařízení TopCount firmy Packard s použitím protokolu pro 125 I-kapalina za 1 minutu.
Procenta inhibice se vypočítají podle následující rovnice:
lOO-tÍpočeU-početsicpVípočeW-početsicp) X 100]
Výsledky experimentu s různými koncentracemi inhibitoru byly proloženy nelineární křivkou na základě Hillova modelu a byla určena IC50 (koncentrace vedoucí k 50% inhibici) za použití SAS softwarového programu (Statistical Software System, SAS institute, lne. Cary, N. C.).
Příklad 38
Sledování aktivity NS3-NS4A heterodimerového proteinu (o celé délce)
Nekódující segment NS2-NS5B-3' se klonuje pomocí RT-PCR ve vektoru pCR®3 (Invitrogen) za použití RNA extrahované ze séra infikovaného jedince virem HCV genotypem lb (poskytnutého Dr. Bernardem Willemsem, Hópital St-Luc, Montreal, Québec, Canada). DNA oblast NS3NS4A se nejprve klonuje pomocí PCR ve vektoru exprese baculoviru pFastBac HTa (Gibco/BRL). Vektorová sekvence obsahuje oblast kódující 28-zbytek N-terminální sekvenci
-77o 28 zbytcích se značkou z 6 histidinů. Systém exprese baciloviru Bac-to-Bac™ (Gibco/BRL) se použije k přípravě rekombinantního baculovíru. Heterodimerový zralý protein NS3 a NS4A o plné délce (His-N$3-NS4AFL) se exprimuje 0,1-0,2 násobnou infekcí 106 Sf21 buněk / ml rekombinantním bacílovirem při teplotě 27 °C. Infikovaná kultura buněk se sklidí po 48 až
64 hodinách odstředěním při teplotě 4 °C.
Buněčná peleta se homogenizuje v 50mM roztoku NaPO4 o pH 7,5, 40 % hmotnostně objemových glycerolu a 2mM roztoku β-merkaptoethanolu za přítomnosti směsi proteázových inhibitorů. His-NS3-NS4AFL se z buněčného lyzátu extrahuje za použití 1,5% NP-40, 0,5% ío TritonXlOO, 0,5M chloridu sodného a DNázy. Po odstředění ultracentrifugou se rozpustný extrakt čtyřnásobně zředí a absorbuje na chelatační kolonu Pharmacia Hi-Trap Ni- kde se HisNS3-NS4AFL eluuje ve více než 90% formě (podle SDS-PAGE) gradientem 50 až 400 mM roztoku imidazolu. Tento produkt, HÍS-NS3-NS4AFL se uskladní při teplotě -80 °C v 50mM roztoku fosfátu sodného o pH 7,5, 10% (hmotnostně/objemových) glycerolu, 0,5M roztoku chloridu sodného, 0,25M roztoku imidazolu, 0,1 % NP-40. Produkt se před použitím rozmrazí na ledu a zředí.
Aktivita proteázy His-NS3-NS4AFL se sleduje v 50mM roztoku Tris-HCl o pH 8,0, 0,25M roztoku citrátu sodného, 0,01% (hmotnostně/objemových) n-dodecyl-(3-I>-maltosidu a lmM roztoku TCEP. Roztok 1,5 nM His-NS3-NS4AFL se 45 minut inkubuje při teplotě 23 °C s 5μΜ roztokem vnitřně zhašeného substrátu antranilyl-DDIVPAbu[C(O)-O]-AMY(3-NO2)TW-OH za přítomnosti různých koncentrací inhibitoru. Konečná koncentrace DMSO nepřesáhla 5,25 %. Reakce se ukončí přidáním 1M roztoku MES o pH 5,8. Fluorescence N-konec produktu se odečítá florimetrem Perkin-Elmer LS-50B vybaveném čtečkou plotny s 96 prohlubněmi (vlnová délka excitačního záření: 325 nm, vlnová délka emisního záření: 423 nm). Výsledky experimentu s různými koncentracemi inhibitoru byly proloženy nelineární křivkou na základě Híllova modelu a byla určena IC5o (koncentrace vedoucí k 50% inhibici) za použití SAS softwarového programu (Statistical Software System, SAS Institute, lne. Cary, N. C.).
Příklad 39
Sledování účinku NS3 proteázy v buňkách
Sledování se provede na linii lidských buněk získaných z hepatomu označovaných jako Huh-7. Do buněk byly současně transfekcí zavedeny 2 DNA systémy:
1. systém exprimující polyprotein obsahující nestrukturální proteiny viru HCV ve fúzi stTA v následujícím pořadí: NS3-NS4A-NS4B-NS5A-tTA (označovaný jako NS3),
2. systém exprimující reporterový protein, sekreční alkalickou fosfatázu, pod kontrolou tTA (označovaný jako SEAP).
K uvolnění dokonalých proteinů se polyprotein musí štěpit NS3 proteázou. Po uvolnění zralých proteinů se předpokládá, že virové proteiny vytvoří komplex na membráně endoplazmatického retikula, zatímco tTA migruje do jádra a změní aktivitu SEAP genu. Z toho vyplývá, že by snížení NS3 proteolytické aktivity mělo vést ke snížení hladiny zralého tTA a k průvodnímu snížení SEAP aktivity.
Ke kontrole ostatních účinků sloučenin se provede paralelní transfekce, kde se systém exprimující samotný tTA (označovaný tTA) současně transfektuje systémem SEAP tak, aby aktivita SEAP byla nezávislá na NS3 proteolytické aktivitě.
-78Protokol postupu zkoušky:
Buňky Huh-7 se pěstují na CHO-SFMII + 10% FCS (fetální telecí sérum), transfekují se buď NS3 a SEAP, nebo tTA a SEAP za použití protokolu FuGen (Boehringer Mannheim). Po
5 hodinách při teplotě 37 ĎC se buňky promyjí, netráví trypsinem se a umístí na plotnu s 96 prohlubněmi (80 000 buněk / prohlubeň) obsahující různé koncentrace zkoumaných sloučenin. Po 24 hodinách inkubace se podíl živného prostředí oddělí a aktivita SEAP v tomto podílu se měří pomocí kitu Phosfa-Light (Tropix).
io Výpočet procent inhibice SEAP aktivity v závislosti na koncentraci sloučeniny se provede SAS softwarovým programem, kterým se vypočítá hodnota EC5o.
Toxický účinek sloučeniny (TC5o) se následně hodnotí zkouškou MTT: 20 μΐ MTT roztoku (5 mg/ml živného prostředí) se přidá do každé prohlubně a 4 hodiny se inkubuje při teplotě
37 °C, živné prostředí se odstraní a přidá se 50 μΐ 0,01N roztoku kyseliny chlorovodíkové + 10%
Triton X-100. Směs se protřepává nejméně 1 hodinu při teplotě místnosti, absorbance každé prohlubně se odečítá při vlnové délce 595 nm.
Hodnota TC5(j se vypočítá podle stejného postupu jako při výpočtu EC5o.
Příklad 40
Stanovení specifity sloučenin
Specifita zkoumaných sloučenin se stanoví porovnáním jejich účinku na několik proteáz: lidskou leukocytámí elastázu, prasečí pankreatickou elastázu a hovězí pankreatický α-chymotrypsin a na jednu cysteinovou proteázou: lidským jatemím ketapsinem B. Ve všech případech se použije postup s plotnou s 96 prohlubněmi za použití kolorimetrického p-nitroanilinového (pNA) substrátu specifického pro každý enzym. Každá série se předem inkubuje 1 hodinu s inhibitorem enzymu při teplotě 30 °C, a následně se přidá substrát. Hydrolýza se sleduje do 30% konverze čtečkou mikroploten UV Thermomax®. Koncentrace substrátu se udržuje na nejnižší možné hodnotě vzhledem k KM k zamezení kompetice se substrátem. Koncentrace sloučenin se pohybuje od 300 do 0,06 μΜ v závislostí na jejich účinnosti.
Podmínky každé zkoušky:
mM Tris-HCl o pH 8, 0,5 M síranu sodného, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 0,01 % Tween-20 s, [100 μΜ Succ-AAPF-pNA a 250 pM a-chymotrypsin], [133 μΜ Suee-AAA-pNA a 8 nM prasečí elastázy], [133 μΜ Succ-AAV-pNA a 8 nM leukocytámí elastázy], nebo [100 mM hydrogenfosforečnanu sodného o pH 6, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, lmM TCEP, 0,01% Tween-20, 30 μΜ Z-FR-pNA a 5oM katepsin B (enzym v zásobním roztoku se před použitím aktivuje v pufru obsahujícím 20 mM TCEP)].
Znázorňující příklad užití prasečí pankreatické elastázy:
Na polystyrénovou plotnu s plochým dnem a s 96 prohlubněmi se za použití pipetovacího automatu Biomek (Beckman) přidá:
* 40 μΐ pufru pro zkoušku (50 mM Tris-HCl o pH 8, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM
EDTA), μΐ roztoku enzymu (50 mM Tris-HCl o pH 8, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM EDTA, 002% Tween-20,40 nM prasečí pankreatické elastázy) a
-7920 μΐ roztoku inhibitoru (50 mM Tris-HCI o pH 8, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 1,5 mM - 0,3 μΜ inhibitoru, 15% objemových DMSO).
Po 60 minutách předběžné inkubace při teplotě 30 °C se do každé prohlubně přidá 20 μΙ roztoku substrátu (50 mM Tris/HCl o pH 8, 0,5 M síranu sodného, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM EDTA, 665 μΜ Succ-AAA-pNA) a reakční směs se dále inkubuje 60 minut při teplotě 30 °C. Hodnota absorbance se odečítá na ěteěkou destiček UV Thermomax®. Na několik řad prohlubní se umístí kontrolní vzorky (bez inhibitoru) a slepé vzorky (bez inhibitoru a bez enzy mu).
io Následné dvojnásobné zředění roztoku inhibitoru se provede na separované plotně pipetovacím automatem za použití 50 mM Tris-HCI o pH 8, 50 mM chloridu sodného, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 15% DMSO. Všechny ostatní stanovení specifity se provedou obdobným způsobem.
Procenta inhibice se vypočítají za použití rovnice:
[H(UVinh-UVslep) / (UVkomr-UVslep))] X 100
Výsledky experimentu s různými koncentracemi inhibitoru byly proloženy nelineární křivkou na základě Hillova modelu a byla určena IC5o (koncentrace vedoucí k 50% inhibici) za použití SAS softwarového programu (Statistical Software System, SAS Institute, lne. Cary, N. C.).
Tabulky sloučenin
Sloučeniny podle současného vynálezu se podrobily stanovením podle příkladů 37 a 38. Míra jejich účinku byla rozdělena do skupin podle hodnoty IC50: skupina A - hodnota IC nižší než 50 μΜ, skupina B - hodnota 1C nižší než 5 μΜ, skupina C - hodnota IC nižší než 0,5 μΜ,
Aktivita v buňkách a specifita zkoumaných sloučenin:
Reprezentativní sloučeniny podle současného vynálezu se sledují zkouškou podle příkladu 39 a jednou nebo více zkouškami příkladu 40. Například sloučenina 601 tabulky 6 má podle zkoušky příkladu 37 hodnotu IC50 = 50 nM a 30 nM podle zkoušky příkladu 38. Hodnota EC50 = 8,2 μΜ se určí zkouškou podle příkladu 39. Stanovením specifity podle v příkladu 40 se získají následující hodnoty pro uvedenou sloučeninu: HLE > 75 μΜ, PPE > 75 μΜ, α-chym. > 75 μΜ, kat.
B > 75 μΜ.
Uvedené výsledky potvrzují, že tato skupina sloučenin je vysoce specifická pro NS3 proteázu.
Seznam uvedený v tabulkách znázorňuje vlastnosti sloučenin podle současného vynálezu. Použité zkratky:
MS
Ac
Bn
Boc cHex
Chg iPr
O-Bn
Ph t-Bu
Tbg
1-nebo 2 Np 1-nebo 2-NpCH3O výsledky hmotnostní spektrometrie, acetyl, benzyl, terc-butyloxykarbony 1, cyklohexyl, cyklohexyl-glycin (2-amino-2-cyklohexyl-octová kyselina), izopropyl, benzyloxy, fenyl, terc.-butyl, terc.-butylglycin,
1-nebo 2-naftyl,
1- nebo 2-naftylmethoxy.
-80Tabulka 1
Tab1 slouč^č '101 “ Ϊ02
OH
103
B
MS
í? cHex m
-O-CHr 1-naftyl 728 účinnost
A
A~
104
105 j?“ cHex O-CH2-1-naftyl’ ~619
0-s^
cHex
108
Boc
702 B
720 - A M+Na* ’ “662 Á
-81 111
Tab1
SlOU£_
109
110
Tabulka 2
Tab 2 slouč. é.
20Í
Boc cyklohexyl O-CH2-I-nafty I
202
203
Boc cyklohexyl -0-CH2-1-naftyl
Boc íBu
Ri antíke·* karboxykj etyl (jeden izomer) etyi
Giny izomer) ms ... ;
účinnost
622 a'
122 A
vinyl 687.5 AR,2R ‘
-82Tabulka 3
Ra
Tab 3 i siouč. c.
r3
301 Boc cHex
302 yAA “iPr
303 yA : cHex
304 Boc cHex
-O-CH2-1-naftyl béHřlíiaftyl
R, syn Re karboxylu ethyl
MS ethyl
-O’-CH2-1-naftyl ~ ěttíyl
ethyl
305
306
307
BOC
Boc
Boc
308
309
310 cHex cHex cHex
Boc cHex
Boc cHex
Boc cHex ^OCH-O-CH2-í-naftyl T
OIOj
účinnost
í 622 A
_ ' - -_
582 A
: 622 A
: 623 A
620 B
607 B
”728 i
606 ’ B
606 B
vinyl 607 B
-83Tab . 3 B Rs R2 slouč, č.
syni» ·™ηηοΒ» katooxyju ________- ___ vinyl 64Ϊ B vinyl 607 A vinyl 621 B ;
/
625 B
639.3 B
698' B
TabteS slouČ. o.
~3Í9
B R3
Rz
320
321
322
323
324
325
326
Boc £ÍBÚ
Boc t£u
Boc ř*Bu
Boc ~ i-Bu
Boc ’ i-Bu
R1 MS ... + syn ke uclnr,ost . „karboxylu__________ - vinyl 732.3 C vinyl 704.3 B
vinyl 717.6 . &
viny! ; 658.7 C
672.4 B vinyi 727.5 C
701.4 C
Π v
US /
vinyl 708.3 C
Ri MS syn ke karboxyJUvinyl
610.3 vinyl 615.3 vinyl : 665.3 vinyl ‘ 627.5 vinyl ; 656.5 ethyl 689.3 účinnost
vinyl . 778.3 vinyl 764.4
C
B
F
A
C
Č c
c”
86Tabulka 4
R2
OH
Tab 4 Et Rg Řj slouč. č.
404 Boc
405 Boc
406 Boc
Rt . MS 1 účinnost
h~“ 589.1 A
— Ίη 603.6 A
η““ 675~4 Č~
34=ch7 687.1 B
2-vinyl . 702.3 ; C
’ 2-Ét ' 703.3 c
-87Tabulka 5
88Tab 5 R, MS stouč.č. · i Účinnost
Tabulka 6
Tab 6 sloué. č. Ra r^ia
601 APr Ph
602 t-Bu --
603“ ~Τ-ρΓ' Ph
604 t-Bu —
60$ t-Bu Ph
606 ' Téu -
607 —
606 ČHÍ/Pr -
609 t-Bu 0.......
610 t-Bu
6Ϊ1 ABu p__
612 ABu cc
613 ř-fiu <x
614~........ í-Bu ......<ϋ
~615 “řBu '
Rí1B MS účinnost
*’7-ÓMe 673.3“; .....C
, ’ ÍOMe,“ 7-OMe 717.2 c
7-eihyl '67lT“ c
7OMe” 611.2 c
' 7-0-ÍPr 715.3 c
7-CI ' 6Ϊ5.2 c
” 7-Cl 601 2..... c
7-Čí ’ ’ 615.3 ~
*“ 680.2'
- 613.3 c
7-N{Me)2 700.5
— - 666.4 c
- ~650.4
- 'δΜ.'δ-'
7-N(Me)2' ’ 624Ϊ5’ ~Č
Tab 6 slouč- Č. 616 Rs ΪΒίΓ““ Rjha Haia MS 678.4“ (M-Hf
617 ř-Bu 0— • 6645 ' -
616 t s T* We— hk^ 638.5
619 ř-Bu Ph Me— 1 ; 7oó?eT
620~ 1 EBu ΎΧ 679.5
621 ř-Bu “Ύτ 678.3 ~ '
“622 f-BU : — 6254
623 f-Bu MeO- - 611.3'
624 ř-Bu (Me)jŇ- — 624.4
“ 625 ’ ř-Bu Ph 7-S(Me) 703.4
626 ř-Bu ; Ph 7-Br 737.3
627 ř-Bu ~ Ph ~ 7-F 675.3
628 ř-Bu - ~7-N(Me)2 764.2
f , účinnost
C
B
B~ ~Č
C ~Č c
~e c
Č c
č
629 '' t£u 3 7-N(Me)2' 764.3
630 t-Bu ~ ’ - 7-N(Eth' 792.3
-91 Tabulka 7
Tab 7 siouč. č.
701 “ 702~ “703 '704
705 “706“ 707 >08“ “709 >10 “ 71 í“
r3 RilA MS účinnost
/-Bu N=/ 691.3 c~~
~ΐΒΪΓ~ 713.4 c
' >bíT *6553 c
frBU ď\ 728.4~ c
ř-Bu o?' “ 696.4“ “ ~č~
ΪΒιΓ” ČT, 693.3 c
H5u θ' ; 694.3 ’c' '
ř-Bu' ’ Ph-N(Mej- T >16>’ ΊΓ
frBu --^y- 7092 ' c
------ “ HÓÓC- 655.3
£Bu '7082 F
ř-Bu (MejjN- 654.3*'” C
712
-93Tab 7 Rs R^a slouč č. .
MS
689.4 účinnost
....
c
-94Tabulka 8
-95R22
Tab 8 slouč. č.
B
Ra
809 “07 ” 7ρ”
810 αβΤ
“ΙΓΓ Boc Z-BÚ
812 ΟΧ ABu
βΐϊ χλ ABu
814 Boc ABu
815 Boc ABu
~816 χχ .....ΎβϊΓ
817 ςρΑ ABu
8Í8 0-Α .....ABu”
819 XX ' APr
820 ' Χα APr
APr
MS
649.3
749.3
706.2
702.2
2- CI 721.3
3- CÍ 721/í “ “658.3
720.2
728.3
762.3
732.2 účinnost
821
822
823
82Í
825
679.1 “C.
Boc
Boc
Boc
APr
663.3
ABu 2-δδΰΓ 717.2 ABu £ÓMe' '719J ABu ΪΟΜβ' ” 7195
Tab .8 síóuč. č. B *3 Rjs MS
826 Cv APr ~ ’ 663.3
827 ’ ~ MÓ 0 ‘ «Α A : ABu - 673?2
828 ; ... ΐΓΊΐ ' APr 691.3
účinnost
829
A
ABu
734.3
830
83?
645.3
Me 0
ABu
701.3
832
Me o
VA.
ABu
801.3
833
ABu
715.2
o
834 2 ......I APr ’ 663.3
835 Μ· M· .9 ř-Bu 2”” “702.5
836~ APr A 694.4
*837 a APr A..... ’683.3“
838 APr ' “ 679.1
Tab' 8 slouč č. B Rs R22 WS“ účinnost
839 APr - ”6745” Č
840 APr 667.4 C
841 Boc ABu 2-Me 701.5 c
842 Boc ÁBu — 7Ó1.5 c
“843 • Boc ABu~ ' 4*Me 701.5 r c
844 ~ 'ABu“ “4-ÓMe ’ ~716.6~ C~
845 “ap7 706.9 ; 1 c
846 ' 7ίΡΓ'”* — 693.4 c
847 ' Boc cHex — 713.4 c
848 Boc — 687.5
Λ
849 1 Boc ~ Λ 701.5 C .
850 Boc • I 1 -~ψ· v T .....73Ϊ.5 ~
851 Boc 7 1...... Y ’ ' - “6895 “ “c
852 Boc V 58975 ~c
Tab · 8 B R3 R22
účinnost 765.5' ......~C~ ~T23Á C~ (M-Hf
693/3 C~
688^3 C~ ' 7Ϊ6.4 C t
πχΰΓ’ ~c
655.4-~ ~B~
759.3......'C
Tab 8 slouč. č. B R3 R= MS účinnost
866 V'”'1' ř-Bu 702?4 ”c“
'“867' 0...Λ “ř-BiT - 701.3 ” c
868 cu“ řBu~ — 713*3 ’ ”‘c “
”869 <\A í-Bu 699.4 c
870” ‘ A A ' f-Bu ~ - 700.4” ” “0”
871 AA 3&Γ * '1Ί4,3 c
872~ ~í-Bu’ 714.4 ” ~ c
873 ' f-Bu “714.3 c
M , „I»» μ *. 1. J _____
100
Tabulka 9
-101 -
-102
Tabulka 10
Tab/310 slouč. č.
“Ίόοϊ
MS účinnost
1002
1003
Boc-NH· ř-Bu
OMe
663.3
703.4
663.3

Claims (5)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce I, její racemáty, diastereoizomery a optické izomery:
    kde B je atom vodíku, C6 nebo Cioaryl, C7 )6aralkyl, heterocyklus nebo (nižší alkyl)—Het, popřípadě substituované Cj^alkylem Ci_6alkoxyskupinou, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou,
    15 hydroxyalkylovou skupinou, atomem halogenu, halogenalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem. aminoskupinou, popřípadě substituovanou Ci^alkylem, amidoskupina nebo (nižší alkyl)amidoskupina nebo
    B je karboxyl vzorce Ri-O-C(O)-, amidoskupina vzorce R4-N(R5)-C(O)-. thioamido20 skupina vzorce Ri-N(R6)-€(S)- nebo sulfonyl vzorce Rj-SO2,
    -103kde R, je i) C|_10alkyI eventuálně substituovaný karboxylem, C] 6alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou C| ^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyljamidoskupinou nebo ii) C3_7 cykloalkyl, C3_7cykloalkoxy nebo C^ioalkylcykloalkyl, eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (C,6alkoxy)karbonylovou skupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C| ^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidoskupinou nebo iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo di- substituovaná C| ^alkylem, amidoskupina nebo (nižší alkyl)amidoskupina nebo ív) C6 nebo CiOaiyl nebo C7_|6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný 15 C| ^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou CY^alkylem nebo
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyI)-Het, oba eventuálně substituované 20 C t^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo di- substituovanou Ct^alkylem.
    R5 je atom vodíku nebo C, 6alkyI,
    25 nebo B znamená acylový derivát vzorce R4-C(O)~, kde
    R4 znamená
    i) Ci_foalkyl, popřípadě substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, 30 C| 6alkoxyskupinou nebo aminoskupinou, popřípadě mono- nebo disubstítuovanou
    CMalkýlovým zbytkem, ii) Cv7cykloalkyl, C3_7cykloalkoxyskupinu, C410alkylcykloalkyl, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány hydroxyskupinou, karboxylem, Ci ^aíkoxykarbony lovou skupinou
    35 nebo aminoskupinou, popřípadě mono- nebo disubstítuovanou Ci-«alkylovou skupinou, iii) aminoskupinu, popřípadě mono- nebo disubstítuovanou Ci^alkylovou skupinou, iv) C6 nebo C|Oaryl nebo C'7 16aralkyl. přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituo40 vány C| 6alkýlovou skupinou, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou, popřípadě mono- nebo disubstítuovanou Cj^alkylovou skupinou nebo
    v) Het nebo (nižší a!kyI)~Het, obě tyto skupiny jsou popřípadě substituovány C] ./.alkylovou skupinou, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou, popřípadě mono- nebo disubstítuovanou
    45 Ci-ealkylovou skupinou, za předpokladu, že pokud B je amidoskupina nebo thioamid, pak R4 je shora uvedený zbytek kromě i i) cykioalkoxy a
    50 Y je atom vodíku nebo Ci^alkyl,
    R3 je Ct_8alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C4_]0alkylcykloalkyl, eventuálně substituované hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, Ci_6thioalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyljamidoskupinou, C6 nebo Cioarylem nebo Cv-^aralkylem,
    - 104R2 je CH2-R20, NH-R20, O-Rm nebo S—R20·, kde R20 je nasycený nebo nenasycený C37cykloalkyl nebo C4_,0(alkylcykloalkyl), eventuálně mono-, di- nebo tri- substituované R2i nebo
    R20 je Có nebo Cw aryl nebo C7„j4 aralkyl, eventuálně mono-, di- nebo trisubstituované R2] nebo
    R2o je beterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně mono-, di- nebo trisubstituované R2i,
    10 kde každé R2j je nezávisle Cj^alkyl, Cj^alkoxy, nižší thioalkyl, sulfonyl, nitroskupina, hydroxyskupina, merkaptoskupina, atom halogenu, haloalkyl, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná Cj^alkylem, C6 nebo Cjoarylem, C\14aralkyl, heterocyklem nebo (nižší alkyl)— Het; amidoskupina eventuálně monosubstituovaná Cj ^alkylem, C6 nebo Cjoarylem, C7_i4aralkylem, heterocyklem nebo (nižší alkyl)-Het; karboxylová skupina, karboxy-(nižší
    15 alkyl), C6 nebo Cjoaryl, C7_i4aralkyl nebo beterocyklus, shora uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je Cj-oalkyl, C3-7cykloalkyl, Cj-oalkoxy, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná Ci^alkylem, sulfonylová skupina, (nižší a1kyl)sulfonylová skupina, nitroskupina,
    20 hydroxyskupina, merkaptoskupina, atom halogenu, haloalkyl, karboxylová skupina, amidoskupina (nižší alkyl)amidoskupina nebo heterocyklus eventuálně substituovaný Ci^alkylem,
    Ri je atom vodíku, Cj^alkyl, C3_7cykloalkyl, C2^alkenyl nebo C2_6alkynyl, vždy eventuálně substituovaný atomem halogenu kde (nižší) alkyl samostatně nebo v kombinaci s dalším substitu25 entem znamená alkylový substituent s cyklickým, přímým nebo rozvětveným řetězcem o 1 až 6 atomech uhlíku, „aminoaralkyl“, samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem znamená aminoskupinu, substituovanou C7_i6aralkylovou skupinou, (nižší alkyl)amid, samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem, znamená amid, monosubstitu30 ováný Cj-oalkylovým zbytkem, karboxy(nižší)alkyl, samostatně nebo v kombinaci s jiným zbytkem znamená karboxylovou skupinu COOH, vázanou přes (nižší)alkyI ve svrchu uvedeném významu,
    35 Het znamená jednovazný zbytek, odvozený odstraněním atomu vodíku od 5-, 6- nebo 7-členného nasyceného nebo nenasyceného (včetně aromatického) heterocyklu, obsahujícího 1 až 4 heteroatomy ze skupiny atom dusíku, kyslíku a síry, nebo jde o heterocyklický zbytek ve svrchu uvedeném významu, kondenzovaný s jedním nebo větším počtem dalších kruhů a
    40 (nižší alkyl)-Het znamená heterocyklický zbytek ve významu, uvedeném svrchu pro Het, vázaný přes alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, přičemž alkyl má svrchu uvedený význam a obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku, nebo jejich farmaceuticky vhodné soli nebo estery.
  2. 2. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je C6 nebo CjOaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C^alkylem, Cj^alkoxy, Cj^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou
    50 C i^alkylem nebo
    B je heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, vždy eventuálně substituované Cj^alkylem, C| 6alkoxy, Cj^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo
    55 aminoskupinou eventuálně substituovanou Cj ^alkylem.
    -1053. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je R4-SO2, a kde R4 je Ci^alky 1, amidoskupina, (nižší alkyljamídoskupina, C6 nebo Cioaryl, C7_i4aralkyl nebo heterocyklus, přičemž Ců nebo C,o-aryl nebo C7_]6aralkyl nebo Het jsou popřípadě substituovány C| ^alkylem.
    4. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je acylový derivát vzorce I<4-C(O)akde R4 je:
    i) Ci_iOalkyI eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo C^alkoxy10 skupinou, nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C^alkylem, ii) C3-7 cykloalkyl nebo C4^10alkylcykloalkyl, oba eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (Ci_6alkoxy)karbonylem, nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C ^alkylem, iv) C6 nebo C!Oaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C1 ^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci ^alkylem,
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované C)6alkylem, hydroxy20 skupinou, nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci^alkylem.
    5, Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je karboxyl vzorce R4-O-C(O)- a kde Rije:
    25 i) C|_ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C, ^alkanoylem, hydroxyskupinou, C|_6alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Ci^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem, ii) Cv_7cykloalkyl, C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem,
    30 (C|^alkoxy)karbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem, ív) C6 nebo CiOaryl nebo C7-i6araIkyl, vždy eventuálně substituovaný C í^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono35 nebo disubstituovanou C i 6alkýlem nebo
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované Q ^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C|^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidoskupinou.
    6, Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je amid vzorce R4-N(R5)~C(Q)- a kde R^e:
    i) C, walkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou,
    45 Ci ^alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mononebo disubstituovanou C ^alkylem, ii) Cv7cykloalkyl nebo C410alky (cykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Ci^alkoxyjkarbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou even50 tuálně mono nebo disubstituovanou C|^alkylem, iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná Ci^alkylem,
    -106iv) C6 nebo Cioaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidem nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci-oalkylem nebo
    5 v) heterocyklus nebo (nižší alkyI)-Het, oba eventuálně substituované C|^alkylem, hydroxyskupinou. aminoskupinou eventuálně substituovanou Cj-salkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem a
    R5 je atom vodíku nebo methyl.
    7. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 1, kde B je thioamid vzorce Rr-NH-QS)-, kde RJe:
    i) Ci .ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C^alkanoylem nebo C ^alkoxy, ii) C3_7cykloalkyl nebo C4-ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Cj ^alkoxyjkarbonylem, aminoskupinou nebo amidoskupinou.
    8. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 2, kde B je C6 nebo Cioaryl eventuálně sub20 stituovaný CMalkylem, C|^alkoxy, C^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, atomem halogenu, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Cj^alkylem.
    9. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 2, kde B je heterocyklus eventuálně substituo25 váný Cióalkýlem, Ci^alkoxy, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, atomem halogenu, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Ci ^alkylem.
    10. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 4, kde B je acylový derivát vzorce R4-C(O>30 a kde R4 je:
    i) C i-ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo Cj_6alkoxy, ii) C3_7cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem,
    35 (Ci ^alkoxy )karbony lem, iv) C6 nebo Cioaryl nebo C7_i6aralkyl vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou nebo
    40 v) heterocyklus eventuálně substituovaný C ^alkylem, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou.
    11. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 5, kde B je karboxylový zbytek vzorce Rjj—O—C—(O)— a kde R4 je:
    45 i) Ci ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C^alkanoylem, hydroxyskupinou, Cj^alkoxy nebo amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou, aminoskupinou eventuálně mono·nebo disubstituovanou C1<6alkylem, ii) C3 7cykloalkyl nebo C4_i0alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem,
    50 (C]_6alkoxy)karbonylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono nebo disubstituovanou C^alkylem, iv) Có nebo CiOaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou, eventuálně substituovanou C^alkylem,
    -107v) heterocyklus nebo (nižší alkyI)-Het, oba eventuálně substituované C ^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně monosubstituovanou Ci ^alkylem.
    12. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 6, kde B je amid vzorce R4-N(R5)-C(O)- a kde
    5 R4 je:
    i) Ci_)Oalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C^alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou, nebo aminoskupinou eventuálně mononebo disubstituovanou C ^alkylem, ii) C3_7cykloalky 1 nebo C4_10alkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (Ci^alkoxy)karbonylem, amidoskupinou, (nižší alky l)amidoskup inou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou (^alkylem,
    15 iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná C]_3alkylem, i v) C6 nebo Cjoaryl nebo C7_i6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný Cj ^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou eventuálně substituovanou C] ^alkylem nebo
    20 v) heterocyklus eventuálně substituovaný C)_6alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou a Rs je atom vodíku.
    25 13. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 7, kde B je thioamid vzorce R4-NH-C(S)a kde RJe:
    i) Cj _ioalkyl nebo
    30 ii) C3_7cykloalkyl.
    14. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 12, B je amid vzorce R^-NH-QO)- a kde R4 je:
    i) C|_iOalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ct_6alkanoylem, hydroxyskupinou,
    35 Ci-ealkoxy, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mononebo disubstituovanou C|^alkylem, ii) C3_7cykloalkyl nebo C^ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, (CMalkoxyjkarbonylem. amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou
    40 eventuálně mono- nebo disubstituovanou Ct 6alkýlem, iv) C6 nebo C10aryl nebo C7_I6aralkyl, vždy eventuálně substituovaný C^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, nebo aminoskupinou.
    45 15. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde B je terc-butoxykarbonyl (Boc) nebo sloučenina vzorce:
    16. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde Y je atom vodíku nebo methyl, 50 17. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 16, kde Y je atom vodíku,
    -10818. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde R3 je Ci_8alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C^ioalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, C^thioalkylem, acetamidoskupinou, C6 nebo Cioarylem nebo Cv^aralkylem.
    5 19. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 18, kde R3 je vedlejší řetězec terc-butylglycinu (Tbg), Ile, Val, Chgnebo:
    20. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 19, kde R3 je vedlejší řetězec Tbg, Chg nebo Vak io
    21. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde R2 je S-R20 nebo 0-R2o a kde R20 je C6 nebo Cioaiyl, Cj-uaralkyl, heterocyklus nebo -CH2-Het, vždy eventuálně mono-, di nebo trisubstituované R^i, kde R2] je Ci^alky 1, Ci^alkoxy, nižší thioalkyl, aminoskupina, popřípadě mono- nebo disubstituovaná Ci^alkylem, CĎ nebo Cio-arylem, nebo C7-i4aralkylem nebo Het nebo (nižší alkyl)Het, amido, popřípadě monosubstituovaná C| 6alkýlem, C6 nebo Cjo-arylem nebo C7_i4aralkylem nebo Het nebo (nižší alkyI)Het, NO2, OH, atom halogenu, trifluormethyl, karboxyl, C6 nebo
    20 Ci<raryl nebo C7_]4aralkyl nebo Het, přičemž C6 nebo C)0-aryl nebo C714aralkyl nebo Het jsou popřípadě substituovány R22, kde R22 je Cj^alkyl, C3_7cykloalkyl, C! óalkoxy, aminoskupina, mono- nebo di—(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amid, sulfonylalkyl, nitroskupina, hydroxyskupina, atom halogenu,
    25 trifluormethyl, karboxylová skupina nebo heterocyklus.
    22. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 21, kde R2i je C^alkyl, Ci^alkoxy, aminoskupina, di(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amidoskupina, C6 nebo Cioaryl, nebo heterocyklus, shora uvedený aryl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22 a kde R22 je Cj^alkyl, C3-7cykloalkyl, Ci^alkoxy, aminoskupina, mono- nebo di-(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amid, atom halogenu, trifluormethyl nebo heterocyklus.
    23. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 22, kde R22 je Ci^alky 1, Ci^alkoxy, atom halogenu, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná nižším alkylem, (nižší alkyl)amidoskupina nebo heterocyklus.
    40 24. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 23, kde R22 je methyl, ethyl, izopropyl, terc-butyl, methoxy, atom chlóru, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná nižším alkylem, (nižší alkyl)amidoskupina.
    25. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 21, kde R2 je jedna z následujících skupin:
    -109
    26. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 21, kde R2 je l-naftylmethoxy, 2-naftylmethoxy, benzyloxy, 1-naftyloxy, 2-naftyloxy nebo chinolinoxy nesubstituovaný, mono- nebo disubstituovaný R21, který je definován nárokem 21.
    5 27. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 26, kde R2 je 1-naftylmethoxy nebo chinolinoxy nesubstituovaný, mono- nebo disubstituovaný R2j, který je určen nárokem 26.
    28. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 27, kde R2 je jedna z následujících skupin:
    10 29. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 26, kde R2 je:
    kde R2ia je Ci^alkyl, Ci^alkoxy, nižší thioalkyl, atom halogenu, aminoskupina eventuálně monosubstituovaná C ^alkylem, dále C6 nebo Cioaryl, C?_i6 aralkyl nebo heterocyklus, uvedený aryl, arylalkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22, kde R22 je Ci^alky 1, C^alkoxy, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná C]6alkylem, (nižší alkyl)amidoskupina nebo heterocyklus,
    R21B je C] 6alkyl, C,_$alkoxy, aminoskupina, di—(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyljamid, 20 nitroskupina, hydroxyskupina, atom halogenu, trifluormethyl nebo karboxyl.
    30. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 29, kde R2]A je C6, C]Oaryl nebo heterocyklus, eventuálně substituované R22, které je určeno nárokem 29.
    25 31. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 30, kde R21A je jedna z následujících skupin:
    >
    -11032. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 29, kde R2 je:
    5 kde R22Aje C )óalky 1 nebo Cj^alkoxy
    R21B je Cj^alkyl, Cj_6alkoxy, aminoskupina, di-(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amid, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl nebo karboxyl.
    10 33. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 29, kde
    R2 je:
    kde R22b je Ct-óalkyl, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná Cj^alkylem, (nižší 15 alkyl)amidoskupina a
    R2ib je Ci^alkyl, Ci_&alkoxy, aminoskupina, di—(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amid, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethyl nebo karboxyl.
    20 34. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 32 nebo 33, kde R2]B je Ci ^alkoxy nebo di—(nižší alkyl)aminoskupina.
    35. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 32 nebo 33, kde R2]B je methoxy.
    25 36. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde PÍ je cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh substituovaný Ri kde
    R, je atom vodíku, Cj^alkyl, C3-jcykloalkyl nebo C2^alkenyl eventuálně substituovaný halogenem.
    37. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 36, kde PÍ je cyklopropylový kruh a kde R] je ethyl, vinyl, cyklopropyl, 1- nebo 2-bromethyl nebo 1- nebo 2-bromvinyl.
    38. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 37, kde Rj je vinyl.
    39. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 37, kde Ri na uhlíku 2 je orientováno do syn vzhledem ke karbonylu na pozici 1 a zbytek je charakterizován následujícím vzorcem:
    -111-
    40. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 37, kde FL na uhlíku 2 je orientováno do ani i vzhledem ke karbonylu na pozici 1 a zbytek je charakterizován následujícím vzorcem:
    5 41. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 37, kde atom uhlíku 1 má R konfiguraci:
    42. Optický izomer sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 41, kde uvedený substituent R| a karbonyl jsou v syn orientaci, charakterizovaný následující absolutní konfigurací:
    ío 43. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 42, kde Ri je ethyl a atomy uhlíku na pozici 1 a 2 mají R,R konfiguraci.
    44. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 42, kde R) je vinyl a atomy uhlíku na pozici 1 a 2 mají R,S konfiguraci.
    45. Sloučenina obecného vzorce 1 podle nároku 1, kde B je C6 nebo Cioaryl nebo C7-i6 aralkyl, eventuálně substituované C|^alkylem, Cm,alkoxy, C|_6alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C] 6alkýlem
    20 nebo heterocyklus nebo (nižší alkyl)~Het, vždy eventuálně substituovaný Ci^alkylem, Ci ^alkoxy, CMalkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C ^alkylem nebo
    -112B je R4—SO2» kde R4 je amidoskupina, (nižší alkyl)amidoskupina, C6 nebo C|Oaryl, C7_j4aralkyl nebo heterocyklus, vždy eventuálně substituovaný C ^alkylem nebo B je acylový derivát vzorce R4-C(CXK kde R4 je
    i) Ci-ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo C^alkoxyskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Ci^alkylem, ii) C>7cykloalkyl nebo C4-ioalkylcykloaIkyl, oba vždy eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (C^alkoxyjkarbonylem nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou G^alkylem, iv) C6 nebo CiOaryl nebo C7_l6aralkyl, eventuálně substituované C)^alkylem, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Cj^alkylem.
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované Ci^alkylem, hydroxyskupinou, nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci^alkylem nebo
    B je karboxyl vzorce R4-O-C(0}-, kde R^e
    i) C|-ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C^alkanoylem, hydroxyskupinou, C16alkoxy, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem, ii) C3_7cykioalkyl nebo C4_i0alkylcykloalkyl, eventuálně substituované karboxylem, (C| 6alkoxy)karbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C ^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem, iv) Ct nebo CtOaryl nebo C7 ]6aralky l, eventuálně substituovaný Cj^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou G ^alkylem nebo
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované G^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Chatky lem. amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidoskupinou nebo
    B je amid vzorce R4-N(R5)-C(O)kde R4 je
    i) Ci_!oalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, G-ealkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, amidoskupinou (nižší alkyl)amidoskupinou, nebo aminoskupinou eventuálně mononebo disubstituovanou C i^alky lem, ii) C37cykloalkyl nebo C4.i0alkylcykloalkyl, eventuálně substituované karboxylem, (Ci^alkoxy)karbonylem, amidoskupinou (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Cj ^alkylem, iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná G_3alkylem,
    -113i v) C6 nebo C10aryl nebo C7.i6aralkyl, eventuálně substituované C|-«alkylem. hydroxyskupinou, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidem nebo amínoskupinou eventuálně substituovanou C) 6alkylem nebo
    5 v) heterocyklus nebo (nižší alkyí)-Het, oba eventuálně substituované C]^alkylem, hydroxyskupinou, amínoskupinou eventuálně substituovanou C^alkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl )amídem, a
    R5 je atom vodíku nebo methyl nebo B je thioamid vzorce R^NH-C^S)-,
    15 kde Říje:
    i) C]_10alkyl eventuálně substituovaný karboxylem, C) óa]kanoylem nebo Ci^alkoxy, i i) C3_7cykloalkyl nebo C4 loalkylcykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný karboxylem, 20 (Ci^alkoxyjkarbonvlem, amínoskupinou nebo amidoskupinou,
    Y je atom vodíku nebo methyl,
    R3 je C18alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C4.joalkyícykloalkyl, vždy eventuálně substituovaný 25 hydroxyskupinou, Ci_talkoxy, Ci_6thioalkylem, acetamidoskupinou, C6 nebo CiOarylem nebo
    C7_i<;aralkylem,
    R2 je S—R2o nebo O—R2q, so kde R2o je C6 nebo Cioaryl nebo C7_i6aralkyl, Het nebo -CH2-Het, vždy eventuálně mono-, di nebo trisubstituované R2i, kde R21 je CMalkyl, Ci_6alkoxy} nižší thioalkyl, aminoskupina, popřípadě mono- nebo disubstituovaná C,..«alkylem, C6 nebo Cjo-arylem nebo C7_)4aralkylem nebo Het nebo (nižší alkyl)Het,
    35 amido, popřípadě monosubstituovaná C^alkylem, C6 nebo Cio-arylem nebo C7_i4aralkylem nebo Het nebo (nižší alkyl)Het, NO2, OH, atom halogenu, trifluormethyl, karboxyl, C« nebo Cio-aryl nebo C7_i4aralkyl nebo Het, přičemž C6 nebo Cio-aiyl nebo C7 i4aralkyl nebo Het jsou popřípadě substituovány R22,
    40 kde
    R22 je Ci «alkyl, Ci-cykloalkyl, C|_«alkoxy, aminoskupina, mono- nebo di—(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)amid, sulfonylalkyl, nitroskupina, hydroxyskupina, atom halogenu, trífluormethyl, karboxylová skupina nebo heterocyklus nebo chinolinoxy nesubstituovaný, mono- nebo disubstituovaný R21, který je shora definovaný a PÍ
    - 114segment je cyklopropylovy kruh substituovaný Rb kde Rj je atom vodíku, Ci_3alkyJ„ C3_5cykloalkyl nebo C2^alkenyl eventuálně substituovaný halogenem a zároveň R| na atomu uhlíku v pozicí 2 je syn vzhledem ke karbonylu v pozicí 1:
    R *1
    R
    O
    O
    O nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo ester.
    46. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 45, kde B je C6 nebo Cioaryl, eventuálně substituovaný Ci^alkylem, C^alkoxy, C^alkanoylem, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, ío halogenem, haloalkylem, nitroskupinou, kyanoskupinou, kyanoalkylem, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C ^alkylem nebo
    B je heterocyklus eventuálně substituovaný C^alkylem, Ci-óalkoxy, Ci^alkanoylem,
    15 hydroxyskupinou, atomem halogenu, amidoskupinou, (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C^alkylem nebo B je R4—SO2
    20 kde R4 je C6 nebo Cjoaryl, C7_i4aralkyl nebo heterocyklus, vždy eventuálně substituovaný Ci-ealkylem, amidoskupina, (nižší alkyl)aminoskupina nebo B je acylový derivát vzorce R4-C(O)25 kdeR4je
    i) Ci ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, hydroxyskupinou nebo Cj^alkoxyskupinou,
    30 ii) C3^cykloalkyl nebo C4-ioalkylcykloalkyl, oba eventuálně substituované hydroxyskupinou, karboxylovou skupinou, (Ci^alkoxy)karbonylem, iv) Có nebo CI0aryI nebo C7_]6aralkyl, eventuálně substituované C^alkylem, hydroxyskupinou,
    35 v) heterocyklus eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou nebo B je karboxyl vzorce R4-O-C(O)-,
    40 kdeR^e
    i) Ci ioalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci_6alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci_6alkoxy nebo amidoskupinou (nižší alkyl)amidem, aminoskupinou eventuálně mono nebo di-substituovanou C| ^alkylem,
    -115ii) C\ 7cykloalky 1 nebo C4_i0alkylcykloalkyl, eventuálně substituované karboxylem, (C^alkoxyjkarbonylem, aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovaná Ci-oalkylem, amidoskupinou nebo (nižší alkyl)amidem,
    5 iv) C6 nebo Cioaryl nebo C7_|6aralkyl, eventuálně substituovaný Cj ^alkylem, hydroxyskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou C^alkylem nebo
    v) heterocyklus nebo (nižší alkyl)-Het, oba eventuálně substituované C|^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amidoskupinou eventuálně monosubstituovanou Cj.^alkylem
    10 nebo
    B je amid vzorce R4-N(RS)-C(O)kde R4 je
    i) Ci_tOalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci_(,alkanoylem, hydroxyskupinou, C]_6alkoxy, amidoskupinou (nižší alkyl)amidoskupinou, nebo aminoskupinou eventuálně mono nebo disubstituovanou C i^alky lem,
    20 ii) C3_7cykloalkyl nebo C4_ioalkylcykloalkyl, eventuálně substituované karboxylem, (Ci^alkoxyjkarbonylem, amidoskupinou (nižší alkyl)amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou Ci^alkylem, iii) aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná C]_3alkylem, iv) C6 nebo Cioaryl nebo Cv ^aralkyl eventuálně substituované C16alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně substituovanou Ci^alkylem nebo
    v) heterocyklus substituovaný Cr^alkylem, hydroxyskupinou, aminoskupinou nebo amid o30 skupinou a R5 je atom vodíku nebo methyl, nebo B je thioamid vzorce R4-NH-C(S)-, kde R4 je i) Ci_toalkyl nebo ii) C3.7cykloalkyl nebo Y je atom vodíku,
    4o R3 je vedlejší řetězec terc-butylglycinu (Tbg), Ile, Val, Chg nebo
    R2 je 1-naftylmethoxy nebo chinolinoxy nesubstituovaný, mono- nebo disubstituovaný R2[ (shora uvedený) nebo
    45 R2 je
    -116kde R2ia je Cj^alkyl, Ct^alkoxy, nižší thioalkyl, halogen, aminoskupina, popřípadě monosubstituovaná Cj^alkylem, C6 nebo C10aryl, C7_i4aralkyl nebo heterocyklus, popřípadě substituovaný R22, kde R22 je Ci.6alkyl, Cj^alkoxy, aminoskupina, popřípadě mono- nebo disubstituovaná C| ^alkylem (nižší alkyl)amido-skupina nebo heterocyklus,
    R21B je Ci_6alkyl, C^alkoxy, aminoskupina, di(nižší alkylj-aminoskupina, (nižší alkyl)-amidoskupina, nitroskupina, halogen, trífluormethyl nebo karboxyl a PÍ je cyklopropylový kruh, kde atom v pozici 1 má R konfiguraci a Ri je ethyl, vinyl, cyklopropyl, 1- nebo 2-bromethyl nebo 1- nebo 2-bromvinyl.
    47. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 46, kde
    B je amid vzorce R4-NH-C(O)-, kde R4 je
    i) Ci_iOalkyl eventuálně substituovaný karboxylem, Ci^alkanoylem, hydroxyskupinou, Ci^alkoxy, amidoskupinou (nižší alkyl)amidoskupinou, nebo aminoskupinou eventuálně mono nebo disubstituovanou C ^alkylem, ii) (\7cykl0alkyl nebo C^alkylcykloalkyl, eventuálně substituované karboxylem, (C|^alkoxy)karbonylem, amidoskupinou (nižší alkyl)amtdoskupinou nebo aminoskupinou eventuálně mono- nebo disubstituovanou C^alkylem, iv) C6 nebo CiOaryl nebo C7_16aralkyl eventuálně substituovaný Ci^alkylem, hydroxyskupinou, amidoskupinou nebo aminoskupinou,
    R3 je vedlejší řetězec Tbg, Chg nebo Val,
    R2 je
    R22B je Ci^alkyl, aminoskupina eventuálně monosubstituovaná Ci^alkylem nebo (nižší alkyl)amidem a
    -117R2ib je Ci^alkyl, C3 ^alkoxy, aminoskupina, di(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyljamidoskupina, nitroskupina, hydro xyskupina, halogen, trifluormethyl nebo karboxyl a PÍ je:
    48. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    OH kde B, R3, R2 jsou následně definovány:
    Tabl slouč. č. “óC B Boc Ra cHex “ 102 Qa cHex 105 “ OA cHex > 1 í Ϊ06 ~ Boc cHex
    -O-CH2-1-nafty!
    -118108 Boc iPr
    Q
    OTO
    NO,
    49. Sloučenina 111 podle nároku 48.
    50. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    kde B, R3, R2 a Rt jsou následně definovány:
    S Ř2 ' RÍ siouč. q. __ _ __ anfr' ke karboxylu
    201 :Boc čyclohexyl n n-U-1 nafh/l «W
    -O-Gl-tr i nanyi ^eden izomer)
    202' 7boc Sycióhexyl -_ocH^.i”naflyÍ *yi : : (jiný izomer)
    51. Sloučenina 203 podle nároku 50. io
    52. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    -119Ι.Δ JU1ZOO D kde B, R3, R2 a Ri jsou následně definovány:
    Tab. 3 B R3 f?2 R, slouč. č. syn ke _ karboxylu 301 Boc cHex -0-CH2-1-naftyi ethyl ' ”302 ” iPr -O-CHí-l-naftyl ethyl
    -120I
    Tab 3 síouá č.
    303”
    R3 cHex
    R2
    -O-CH2^aftyM
    Ri syn ke karboxyl u ethyl
    305 Boc cHex -O-CH2-I -naftyl 4 , vinyl
    J
    -121 Ri :
    syn ke karboxylu vinyl ; ;
    f-Bu vinyl
    321
    Boc
    - 122Tab 3 slouč, č.
    322
    B Rs
    Boc TBu”
    R2
    323
    Boc í-Bu
    Ri syn ke karboxylu j vinyl i ;
    t
    -123Tab 3 B R3 R2 R, slouč. č. syn ke __________________ _ karboxyl U
    53. Sloučeniny podle nároku 52, kterou je sloučenina ze skupiny 307, 314, 317, 321, 324, 325, 326,327,329,331,332,333 a 334.
    54. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    R2 kde B, R3, R2 a Ri jsou následně definovány:
    -124-
    55. Sloučenina podle nároku 54, kterou je sloučenina ze skupiny 403,405 a 406.
    5 56. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce I:
    -125kde R3je:
    Tab S slouč. č. Rs Tab 5 .....Ř, slouč. č. . n ’ *— — ...... ......
    603 X ; 509 I Y , 1 504 | Y ; šió 'i Y 505“ | Y ' 5 ' θγ°Η
    57. Sloučenina podle nároku 1, kterou je sloučenina ze skupiny 501,409 a 510.
    58. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce I:
    - 126kde R3, R2ja a R2ib jsou:
    Tab 6 slouc. č. r3 Rne 601 APr Ph ” 7-OMe 602 t-Bu Ph ' ÍOMe? 7-OMe 603 i-Pr Ph 7-eftyT 604 t-Bu — 7-OMe~ ŠOS “ t-Bu “ Ph 7<£Fr 606 řBu - 7-CÍ ' 607 Fr - 7ΪΓ 608 CHz-/Pr — 7-CI 610 ř-Bu Cl — 611 ř-Bu Ph 7-N(Me)2 6Í2 frBu “oC — 613 “ÍBÓ ZE
    127
    Tab 6 R, RaA R21B sloně. ě.
    615 iBu 7-N(Mejz i 616 ř-Bu 617 ř-Bu O- 620 f-Bu 621 t-Bu “Yr '
    622 f-Bu
    623 t-Bu MeO- ~7^S(Me) . 7-Br
    Tf
    74J(Mejz ;
    7-N(Me)n ;
    7-N(Ét)z ;
    128
    59. Sloučenina podle nároku 58, vybraná ze skupiny následujících sloučenin: 601, 602, 603, 604,605,606,607,610,611,612,615,616,617,620,621,622,625,626,627,628,629 a 630.
    60. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    kde R3 a R2ia jsou:
    Tab 7 R3 Ríia slouč. č.____________________
    701 f-Bu
    N=/
    -129VA*VU U
    Tab 7 r3 slouč. č. 707 t-Bu 708 EBu 70$ f-Bu 710 EBu 711 ř-Bu 712 řBU
    ”714 f-Bu~
    R21A
    715 t-Bu 7Ϊ6 £bu 717 i-Bu......~ 718 ř-Bu 719 f-8u~* 720 řBÍT 721' f-Bu
    rf
    Π M
    NH;
    i
    -130
    Tab 7 R3 slouč. č,____
    722 f-Bu
    R21A
    -131-
    Tab 7 slouc. č. Ra FW 733 ř-Bu 734 t-Bu 735 í-Bu 736 f-Bu ř-Bu / a 737 FBu ČHex
    61. Sloučenina podle nároku 60, vybraná ze skupiny následujících sloučenin: 701, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709 a 711 až 737.
    5 62. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    -132 -
    133
    Tab 8 B slouc. c ” 818
    R» ř-Bi7
    Rí2
    APr
    819
    823
    Boc
    ABu 2-OMe
    824
    Boc
    825
    826
    Boc
    827
    O..Me 6
    828
    829
    ABu
    ABu'
    AP?
    ABu
    ΤΡγ '*»<·« * 1 I n
    ABu
  3. 3- OMe
  4. 4- OMě
    830
    831
    Y ' Mi“’ o f-Bu
    Γβϊι
    832 * f-Bu
    134Tab 8 slouč. č “833“' r3
    ABu
    APr“
    R22
    838 «ΧΟχ APr 839 “XX APr“” ** 84θ” XX APr 84Ϊ Boc ¥bu 24Λθ” 842 Boc ΪΒΰ 3-Me” 8*ώ” Boc ABu “ £mž~ ”84?” ABu 4-OMe H 845 ra APr 846 a, APr”' - 847 Boc cHex —
    -135-
    855 hPr 856 “X ' ÍP?’ 857 Η M3u 858 \1 I? ( Me f-Bt?
    859'........ X .......ÁPr
    136
    -13763. Sloučenina podle nároku 62 vybraná ze skupiny sloučenin: 801 až 825, 827 až 858 a 861 až 873.
    64. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    kde B je:
    Tab 9 B slouč. č.
    901 Boc
    -138-
    Tab 9 β .slouč. č._______________
    -13965. Sloučenina podle nároku 45 obecného vzorce:
    kde B, X, R3, z a R21B jsou:
    Tab 10 B-X- slouč. č. 1001 ™Ph-N(Me^' hPr 1002 “Boč-ŇEl· ’ — : f-Bu a 1003 ~ČT
    RtfB
    Č>' '
    S ' “ ‘ όΜθΓ
    O i“’
  5. 5 66. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 působící proti virové hepatitidě typu C nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru ve směsi s farmaceuticky vhodným nosičem nebo pomocnou látkou.
    io 67. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 65 jako léčivo,
    68. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo terapeuticky vhodné soli nebo esteru nebo přípravku podle nároku 66 pro výrobu léčiva proti virové hepatitidě typu C u savců.
    15 69. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru pro výrobu léčiva pro inhibici replikace viru hepatitidy C.
    70. Použití kombinace sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její terapeuticky vhodné soli nebo esteru a jiného anti-HCV činidla pro výrobu léčiva pro léčení virové
    20 hepatitidy C u savců.
    71. Použití podle nároku 70, při němž je jiným anti-HCV činidlem interferon.
    72. Použití podle nároku 70, nebo 71, při němž uvedené jiné antivirové činidlo obsahuje
    25 a- nebo β-interferon, ribavirin nebo amantadin.
    73. Použití podle nároku 70, při němž uvedené antivirové činidlo obsahuje inhibitor jiných životních pochodů viru HCV, především helikázy, polymerázy, metaloproteázy nebo IRES.
    30 74. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, kde PÍ je substituovaný zbytek kyseliny aminocyklopropylkarboxylové, vyznačující se tím, že se do vazebné reakce uvede peptid vybraný ze skupiny stávající se z APG-P3-P2 nebo APG-P2 a meziprodukt PÍ obecného vzorce:
    -140- kde Ri je Ci^alkyl, C3_7cykloalkyl nebo C2^alkenyl eventuálně substituovaný halogenem, CPG je ochranná skupina karboxylové skupiny a APG je ochranná skupina aminoskupiny, P3 až P2 jsou definovány v nároku 1.
    75. Použití PÍ meziproduktu vzorce:
    li kde Ri je Ci^alky 1, C3_7cykloalkyl nebo C2^alkenyl, vždy eventuálně substituovaný halogenem a CPG je ochranná skupina karboxylu, pro přípravu shora určené sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1.
    io 76. Způsob podle nároku 74, vyznačující se tím, že ochranná skupina karboxylové skupiny aminokyseliny (CPG) je vybrána z alkylesterů, aralkylesterů a esterů odštěpitelných působením mírné zásady nebo mírného redukčního činidla.
    77. Způsob podle nároku 74, vyznačující se tím, že ochranná skupina aminoskupiny aminokyseliny (APG) je vybrána z: acylových skupin, aromatických karbamátových skupin,
    15 alifatických karbamátových skupin, cyklických alkylkarbamátových skupin, alkylových skupin, trialkylsilylových nebo thiol-obsahujících skupin.
    78. Použití prolinového analoga vzorce:
    ^21
    21B
    OH
    HN^
    O kde R2iA je C i^alky l, Ci^alkoxy, nižší thioalkyl, halogen, aminoskupina eventuálně mono20 substituovaná Ci^alkylem, dále C6, Cioaryl, C7-i6aralkyl nebo heterocyklus, uvedený aryl, aralkyl nebo heterocyklus eventuálně substituovaný R22j kde R22 je Ci^alkyl, Ci-óalkoxy, amidoskupina, (nižší alkyl)amídoskupina, aminoskupina eventuálně mono- nebo disubstituovaná ^alkylem nebo heterocyklus, a kde R2ib je Ci^alkyl, Ci^alkoxy, aminoskupina, di—(nižší alkyl)aminoskupina, (nižší alkyl)25 amidoskupina, nitroskupina, hydroxyskupina, halogen, trifluormethylová nebo karboxylová skupina pro přípravu peptidového analoga shora uvedeného obecného vzorce I podle nároku l.
CZ20010516A 1998-08-10 1999-08-09 Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C CZ301268B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9593198P 1998-08-10 1998-08-10
US13238699P 1999-05-04 1999-05-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2001516A3 CZ2001516A3 (cs) 2001-08-15
CZ301268B6 true CZ301268B6 (cs) 2009-12-30

Family

ID=26790767

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20090004A CZ302766B6 (cs) 1998-08-10 1999-08-09 Zpusob rozdelení enanciomerní smesi methyl-(1R,2S)/(1S,2R)-t-butoxykarbonyl-1-amino-2-vinylcyklopropylkarboxylátu
CZ20010516A CZ301268B6 (cs) 1998-08-10 1999-08-09 Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20090004A CZ302766B6 (cs) 1998-08-10 1999-08-09 Zpusob rozdelení enanciomerní smesi methyl-(1R,2S)/(1S,2R)-t-butoxykarbonyl-1-amino-2-vinylcyklopropylkarboxylátu

Country Status (43)

Country Link
US (11) US6323180B1 (cs)
EP (2) EP2028186B1 (cs)
JP (2) JP4485685B2 (cs)
KR (2) KR100672229B1 (cs)
CN (2) CN100339389C (cs)
AR (3) AR020880A1 (cs)
AT (1) ATE430158T1 (cs)
AU (1) AU769738B2 (cs)
BG (1) BG65738B1 (cs)
BR (2) BRPI9913646B8 (cs)
CA (2) CA2445938C (cs)
CO (1) CO5261542A1 (cs)
CY (2) CY1109291T1 (cs)
CZ (2) CZ302766B6 (cs)
DE (1) DE69940817D1 (cs)
DK (2) DK1105413T3 (cs)
EA (1) EA003906B1 (cs)
EE (1) EE05517B1 (cs)
ES (2) ES2405930T3 (cs)
HK (1) HK1040085B (cs)
HR (1) HRP20010102B1 (cs)
HU (2) HU230701B1 (cs)
ID (1) ID27839A (cs)
IL (3) IL141012A0 (cs)
IN (3) IN211493B (cs)
ME (1) ME00381B (cs)
MX (2) MX257413B (cs)
MY (1) MY127538A (cs)
NO (2) NO328952B1 (cs)
NZ (1) NZ510396A (cs)
PE (1) PE20000949A1 (cs)
PH (1) PH11999002002B1 (cs)
PL (1) PL204850B1 (cs)
PT (2) PT1105413E (cs)
RS (3) RS20090459A (cs)
SA (1) SA99200617B1 (cs)
SI (2) SI1105413T1 (cs)
SK (2) SK288068B6 (cs)
TR (2) TR200200129T2 (cs)
TW (1) TWI250165B (cs)
UA (1) UA75026C2 (cs)
WO (1) WO2000009543A2 (cs)
ZA (1) ZA200100971B (cs)

Families Citing this family (423)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1133649C (zh) 1996-10-18 2004-01-07 沃泰克斯药物股份有限公司 丝氨酸蛋白酶、特别是丙型肝炎病毒ns3蛋白酶的抑制剂
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
UA74546C2 (en) * 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
KR20070087034A (ko) * 1999-06-25 2007-08-27 바스프 악티엔게젤샤프트 대사 경로 단백질을 코딩하는 코리네박테리움 글루타미쿰유전자
SK14192002A3 (sk) 2000-04-05 2003-03-04 Schering Corporation Makrocyklické zlúčeniny, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
EP1274724A2 (en) 2000-04-19 2003-01-15 Schering Corporation Macrocyclic ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus comprising alkyl and aryl alanine p2 moieties
EP1278743A4 (en) * 2000-05-05 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp NEW ANTI-INFECTIOUS ACTIVE SUBSTANCES
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
NZ523781A (en) 2000-07-21 2004-10-29 Corvas Int Inc Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
KR100904788B1 (ko) 2000-07-21 2009-06-25 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제억제제로서의 신규한 펩티드
SV2003000617A (es) 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
US6846806B2 (en) 2000-10-23 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of Hepatitis C virus NS3 protein
CN100391967C (zh) * 2000-11-20 2008-06-04 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 丙型肝炎三肽抑制剂
KR20030091946A (ko) 2000-12-12 2003-12-03 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제억제제로서의 디아릴 펩티드
CA2433878C (en) 2001-01-22 2008-11-25 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
MXPA04000293A (es) 2001-07-11 2004-05-04 Vertex Pharma Inhibidores de serina proteasa biciclica de puente.
DE10297210B4 (de) 2001-09-14 2009-01-02 Honda Giken Kogyo K.K. Aufprall absorbierende Frontgrillanordnung für ein Kraftfahrzeug
ATE539744T1 (de) 2001-10-24 2012-01-15 Vertex Pharma Hemmer von serin-protease, insbesondere von hepatitis-c-virus-ns3-ns4a-protease, mit einem kondensierten ringsystem
WO2003037893A1 (en) * 2001-11-02 2003-05-08 Glaxo Group Limited Acyl dihydro pyrrole derivatives as hcv inhibitors
US6867185B2 (en) * 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
WO2003062228A1 (en) 2002-01-23 2003-07-31 Schering Corporation Proline compounds as ns3-serine protease inhibitors for use in treatment of hepatites c virus infection
US7119072B2 (en) * 2002-01-30 2006-10-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2369970A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
CN100381440C (zh) 2002-04-11 2008-04-16 沃泰克斯药物股份有限公司 丝氨酸蛋白酶、特别是丙型肝炎病毒ns3-ns4蛋白酶的抑制剂
JP4312718B2 (ja) * 2002-05-20 2009-08-12 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
MY140680A (en) * 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
PL213029B1 (pl) * 2002-05-20 2012-12-31 Bristol Myers Squibb Co Podstawiona pochodna cykloalkilowa, zawierajaca ja kompozycja oraz ich zastosowanie
DE60334205D1 (en) 2002-05-20 2010-10-28 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische sulfonamid-hepatitis-c-virus-hemmer
KR100457857B1 (ko) * 2002-05-23 2004-11-18 (주) 비엔씨바이오팜 2-[2-(3-인돌릴)에틸아미노]피리딘 유도체, 그 제조방법및 이를 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물
JP2005533817A (ja) 2002-06-28 2005-11-10 イデニクス（ケイマン）リミテツド フラビウィルス科ウィルス感染治療用の修飾２′および３′−ヌクレオシドプロドラッグ
US20040033959A1 (en) * 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
AU2003261434A1 (en) * 2002-08-12 2004-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Iminothiazolidinones as inhibitors of hcv replication
EP1408031A1 (en) * 2002-10-09 2004-04-14 3 D Gene Pharma Pyrolidine derivatives useful in treatment of hepatitis C virus infection
US7304087B2 (en) * 2002-10-24 2007-12-04 Glaxo Group Limited 1-acyl-pyrrolidine derivatives for the treatment of viral infections
US20050075279A1 (en) * 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7601709B2 (en) 2003-02-07 2009-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CA2516018C (en) * 2003-03-05 2011-08-23 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
EP1601685A1 (en) * 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds
KR100960802B1 (ko) * 2003-03-08 2010-06-01 주식회사유한양행 씨형 간염바이러스 감염 치료용 엔에스3 프로테아제 억제제
CA2522205A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
JP4733023B2 (ja) 2003-04-16 2011-07-27 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルスの大環状イソキノリンペプチド阻害剤
US7176208B2 (en) 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2004093798A2 (en) 2003-04-18 2004-11-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US6846836B2 (en) 2003-04-18 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company N-substituted phenylurea inhibitors of mitochondrial F1F0 ATP hydrolase
HRP20080014T3 (en) * 2003-05-21 2008-02-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
EP3521297B1 (en) 2003-05-30 2021-12-22 Gilead Pharmasset LLC Modified fluorinated nucleoside analogues
WO2004113365A2 (en) * 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7273851B2 (en) 2003-06-05 2007-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tri-peptide hepatitis C serine protease inhibitors
US7125845B2 (en) * 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CN1852915A (zh) 2003-07-25 2006-10-25 艾登尼科斯（开曼）有限公司 治疗包括丙型肝炎的黄病毒科病毒所致疾病的嘌呤核苷类似物
MXPA06002250A (es) 2003-08-26 2006-05-17 Schering Corp Inhibidores peptidomimeticos novedosos de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
US8025899B2 (en) 2003-08-28 2011-09-27 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage form
US8377952B2 (en) 2003-08-28 2013-02-19 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage formulation
TWI359147B (en) 2003-09-05 2012-03-01 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hcv n
AU2004274051A1 (en) * 2003-09-22 2005-03-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
KR20060085248A (ko) * 2003-09-26 2006-07-26 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스 ｎｓ3 세린 프로테아제의마크로사이클릭 억제제
AU2004282148A1 (en) 2003-10-10 2005-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incoporated Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
CN103145715B (zh) 2003-10-14 2016-08-03 F·霍夫曼-罗须公司 作为hcv复制抑制剂的巨环羧酸和酰基磺酰胺
WO2005043118A2 (en) 2003-10-27 2005-05-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Drug discovery method
US7494660B2 (en) 2003-10-27 2009-02-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated HCV NS3-NS4A protease resistance mutants
EP1944042A1 (en) 2003-10-27 2008-07-16 Vertex Pharmceuticals Incorporated Combinations for HCV treatment
US20050119318A1 (en) * 2003-10-31 2005-06-02 Hudyma Thomas W. Inhibitors of HCV replication
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN1902216A (zh) * 2003-11-20 2007-01-24 先灵公司 丙肝病毒ns3蛋白酶的去肽化抑制剂
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) * 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2547770A1 (en) * 2003-12-08 2005-06-23 Fabrice Gallou Removal of ruthenium by-product by supercritical fluid processing
CN1901971A (zh) 2003-12-15 2007-01-24 日本烟草产业株式会社 环丙烷化合物及其药物应用
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
ATE495185T1 (de) * 2004-01-21 2011-01-15 Boehringer Ingelheim Int Makrocyclische peptide mit wirkung gegen das hepatitis-c-virus
MY153011A (en) * 2004-01-30 2014-12-31 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors
SE0400199D0 (sv) * 2004-01-30 2004-01-30 Medivir Ab HCV Protease inhbitors
WO2005077969A2 (en) 2004-02-04 2005-08-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
US20050182252A1 (en) 2004-02-13 2005-08-18 Reddy K. R. Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives
US7582770B2 (en) 2004-02-20 2009-09-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US20070049593A1 (en) 2004-02-24 2007-03-01 Japan Tobacco Inc. Tetracyclic fused heterocyclic compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
EP2206715A1 (en) 2004-02-24 2010-07-14 Japan Tobacco, Inc. Fused heterotetracyclic compounds and use thereof as hcv polymerase inhibitor
EP1737821B1 (en) 2004-02-27 2009-08-05 Schering Corporation 3,4-(cyclopentyl)-fused proline compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
EP1742914A1 (en) * 2004-02-27 2007-01-17 Schering Corporation Cyclobutenedione groups-containing compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
CA2557247A1 (en) 2004-02-27 2005-09-22 Schering Corporation Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
ATE478889T1 (de) 2004-02-27 2010-09-15 Schering Corp Neuartige verbindungen als hemmer von hepatitis c-virus ns3-serinprotease
ATE470660T1 (de) 2004-02-27 2010-06-15 Schering Corp Schwefelverbindungen als inhibitoren der ns3- serinprotease des hepatitis-c-virus
US7816326B2 (en) 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
US7635694B2 (en) 2004-02-27 2009-12-22 Schering Corporation Cyclobutenedione-containing compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
US7205330B2 (en) 2004-02-27 2007-04-17 Schering Corporation Inhibitors of hepatitis C virus NS3 protease
ES2532967T3 (es) * 2004-03-12 2015-04-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Proceso y productos intermedios para la preparación de inhibidores de la acetal caspasa aspártica
US20050209135A1 (en) 2004-03-15 2005-09-22 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
BRPI0509467A (pt) * 2004-03-30 2007-09-11 Intermune Inc compostos macrocìclicos como inibidores de replicação viral
KR20070011451A (ko) 2004-05-05 2007-01-24 예일 유니버시티 신규의 항바이러스 헬리오크산틴 유사체
ES2328596T3 (es) 2004-05-20 2009-11-16 Schering Corporation Prolinas sustituidas como inhibidores de la serina proteasa del virus ns3 de la hepatitis c.
CA2568008C (en) * 2004-05-25 2014-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing acyclic hcv protease inhibitors
CA2568379A1 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Merck & Co., Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
CA2571079A1 (en) 2004-06-24 2006-02-02 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
WO2006000085A1 (en) * 2004-06-28 2006-01-05 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
CA2571984C (en) * 2004-07-16 2012-04-10 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
ES2366478T3 (es) * 2004-07-20 2011-10-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Análogos peptídicos inhibidores de la hepatitis c.
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
CN101023094B (zh) * 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
US7597884B2 (en) 2004-08-09 2009-10-06 Alios Biopharma, Inc. Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use
MX2007001589A (es) * 2004-08-09 2007-08-02 Alios Biopharma Inc Variantes de polipeptido resistentes a proteasa, hiperglicosiladas sinteticas, formulaciones orales y metodos para utilizar las mismas.
CN101068828A (zh) 2004-08-27 2007-11-07 先灵公司 用作丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的酰基磺酰胺化合物
AU2005285045B2 (en) * 2004-09-14 2011-10-13 Gilead Sciences, Inc. Preparation of 2'fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
WO2006030892A1 (ja) * 2004-09-17 2006-03-23 Nippon Shinyaku Co., Ltd. 複素環化合物の製造方法
CN102160891A (zh) 2004-10-01 2011-08-24 威特克斯医药股份有限公司 Hcv ns3-ns4a蛋白酶抑制
US7659263B2 (en) 2004-11-12 2010-02-09 Japan Tobacco Inc. Thienopyrrole compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
US7323447B2 (en) * 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN101160317B (zh) 2005-03-08 2013-03-27 贝林格尔·英格海姆国际有限公司 制备大环化合物的方法
US7879797B2 (en) * 2005-05-02 2011-02-01 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) * 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102718744A (zh) 2005-05-13 2012-10-10 Viro化学制药公司 治疗或预防黄病毒感染的组合物和方法
WO2006130666A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Medicaments and methods combining a hcv protease inhibitor and an akr competitor
US20070237818A1 (en) * 2005-06-02 2007-10-11 Malcolm Bruce A Controlled-release formulation of HCV protease inhibitor and methods using the same
CN101212970B (zh) * 2005-06-02 2010-07-21 先灵公司 Hcv蛋白酶抑制剂与表面活性剂的组合物
NZ563361A (en) 2005-06-02 2011-02-25 Schering Corp HCV protease inhibitors in combination with food
KR20080033274A (ko) 2005-06-17 2008-04-16 노파르티스 아게 Ｈｃｖ에서 상글리페린의 용도
US7608592B2 (en) 2005-06-30 2009-10-27 Virobay, Inc. HCV inhibitors
ZA200711069B (en) * 2005-06-30 2009-03-25 Virobay Inc HCV inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AR057456A1 (es) * 2005-07-20 2007-12-05 Merck & Co Inc Inhibidores de la proteasa ns3 del vhc
CA2615921C (en) * 2005-07-20 2011-09-13 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs with a quinoline or a thienopyridine moiety
CN101263156A (zh) * 2005-07-25 2008-09-10 因特蒙公司 C型肝炎病毒复制的新颖大环抑制剂
MY142972A (en) 2005-07-29 2011-01-31 Tibotec Pharm Ltd Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
EP1912996B1 (en) * 2005-07-29 2012-06-20 Janssen R&D Ireland Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
ATE524475T1 (de) 2005-07-29 2011-09-15 Tibotec Pharm Ltd Makrocyclische inhibitoren des hepatitis-c-virus
JP5171624B2 (ja) 2005-07-29 2013-03-27 テイボテク・フアーマシユーチカルズ Ｃ型肝炎ウイルスの大環状阻害剤
CA2617099C (en) 2005-07-29 2014-03-25 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
EA014293B1 (ru) 2005-07-29 2010-10-29 Тиботек Фармасьютикалз Лтд. Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с
EP1913016B1 (en) * 2005-08-01 2013-01-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Macrocyclic peptides as hcv ns3 protease inhibitors
EP2256113A1 (en) * 2005-08-02 2010-12-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
CA2618560A1 (en) 2005-08-09 2007-02-22 Merck & Co., Inc. Ribonucleoside cyclic acetal derivatives for the treatment of rna-dependent rna viral infection
JP5015154B2 (ja) 2005-08-12 2012-08-29 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼインヒビター
US8399615B2 (en) 2005-08-19 2013-03-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates
EP2194043B1 (en) 2005-08-19 2013-12-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
US7964624B1 (en) 2005-08-26 2011-06-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
US7951773B2 (en) 2005-09-09 2011-05-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Ring-closing metathesis process for the preparation of macrocyclic peptides
DK1999129T3 (da) 2005-10-11 2011-02-07 Intermune Inc Forbindelser og fremgangsmåder til inhibering af replikationen af hepatitis C-virus
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7705138B2 (en) 2005-11-11 2010-04-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hepatitis C virus variants
EP2392590A3 (en) 2005-11-11 2012-03-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hepatitis C virus variants
EP2345652A1 (en) 2005-12-21 2011-07-20 Abbott Laboratories Antiviral compounds
CA2633760A1 (en) * 2005-12-21 2007-07-05 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
CA2633757A1 (en) * 2005-12-21 2007-07-05 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
ES2395386T3 (es) 2005-12-21 2013-02-12 Abbott Laboratories Compuestos antivirales
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CN102614490A (zh) 2006-02-27 2012-08-01 弗特克斯药品有限公司 包含vx-950的共晶体和包含所述共晶体的药物组合物
EP1996565A2 (en) 2006-03-08 2008-12-03 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Substituted aminothiazole derivatives with anti-hcv activity
AU2007227544B2 (en) 2006-03-16 2012-11-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deuterated hepatitis C protease inhibitors
BRPI0710878A2 (pt) 2006-04-11 2015-03-31 Novartis Ag Compostos orgânicos e seus usos
GB0609492D0 (en) * 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
WO2007137080A2 (en) 2006-05-23 2007-11-29 Irm Llc Compounds and compositions as channel activating protease inhibitors
US20080187516A1 (en) * 2006-06-06 2008-08-07 Ying Sun Acyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
US9526769B2 (en) 2006-06-06 2016-12-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US8268776B2 (en) 2006-06-06 2012-09-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US7728148B2 (en) * 2006-06-06 2010-06-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
GB0612423D0 (en) * 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
AR061629A1 (es) * 2006-06-26 2008-09-10 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macrociclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c. proceso de obtencion y composiciones farmaceuticas
KR20090024834A (ko) * 2006-07-05 2009-03-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 억제제
US7935670B2 (en) 2006-07-11 2011-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7718612B2 (en) * 2007-08-02 2010-05-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Pyridazinonyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
US20090035267A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
US7605126B2 (en) * 2006-08-11 2009-10-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acylaminoheteroaryl hepatitis C virus protease inhibitors
US20090098085A1 (en) * 2006-08-11 2009-04-16 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
US20080038225A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008022006A2 (en) * 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis c virus protease inhibitors
US7582605B2 (en) * 2006-08-11 2009-09-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus-containing hepatitis C serine protease inhibitors
EP2054388A4 (en) 2006-08-17 2009-10-28 Boehringer Ingelheim Int VIRAL POLYMERASE INHIBITORS
CA2666814A1 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
AU2007309546A1 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. HCV NS3 protease inhibitors
CA2667146C (en) * 2006-10-24 2016-01-19 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
CA2667266C (en) * 2006-10-24 2015-11-24 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
WO2008057209A1 (en) * 2006-10-27 2008-05-15 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
AU2007318164B2 (en) * 2006-10-27 2013-02-07 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
WO2008057995A2 (en) * 2006-11-02 2008-05-15 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US7772180B2 (en) * 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
MX2009005185A (es) 2006-11-15 2009-07-07 Virochem Pharma Inc Analogos de tiofeno para el tratamiento o prevencion de infecciones de flavivirus.
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008059046A1 (en) 2006-11-17 2008-05-22 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
EP2099430A2 (en) * 2006-12-07 2009-09-16 Schering Corporation Ph sensitive matrix formulation
GB0625349D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
GB0625345D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
US8236950B2 (en) * 2006-12-20 2012-08-07 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
AU2007335962B2 (en) * 2006-12-20 2012-09-06 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa Antiviral indoles
WO2008074035A1 (en) * 2006-12-27 2008-06-19 Abbott Laboratories Hcv protease inhibitors and uses thereof
WO2008095058A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-07 Taigen Biotechnology Co. Ltd. Hcv protease inhibitors
EA200970806A1 (ru) 2007-02-27 2010-08-30 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Сокристаллы и содержащие их фармацевтические композиции
MX2009009176A (es) 2007-02-27 2009-09-28 Vertex Pharma Inhibidores de serina-proteasas.
WO2008106167A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy comprising matrix metalloproteinase inhibitors and caspase inhibitors for the treatment of liver diseases
AU2008219622A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of liver diseases using specified matrix metalloproteinase (MMP) inhibitors
CN101679240A (zh) * 2007-03-23 2010-03-24 先灵公司 Hcv ns3蛋白酶的p1-非可差向异构化酮酰胺抑制剂
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US8377872B2 (en) 2007-04-26 2013-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cyclic P3 tripeptide hepatitis C serine protease inhibitors
US20080317712A1 (en) * 2007-04-26 2008-12-25 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US20080292587A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-27 Ying Sun Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US7910587B2 (en) * 2007-04-26 2011-03-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl dipeptide hepatitis C virus inhibitors
US20080267917A1 (en) * 2007-04-26 2008-10-30 Deqiang Niu N-functionalized amides as hepatitis c serine protease inhibitors
AU2008247509A1 (en) * 2007-05-03 2008-11-13 Array Biopharma, Inc. Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus replication
MX2009011930A (es) 2007-05-04 2009-11-18 Vertex Pharma Terapia de combinacion para el tratamiento de infeccion de virus de hepatitis c.
EP2155716A2 (en) * 2007-05-09 2010-02-24 Pfizer Inc. Substituted heterocyclic derivatives and compositions and their pharmaceutical use as antibacterials
TW200902520A (en) 2007-05-10 2009-01-16 Intermune Inc Novel peptide inhibitors of hepatitis C virus replication
GB0709791D0 (en) * 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
EA025794B1 (ru) 2007-06-29 2017-01-30 Джилид Сайэнс, Инк. Противовирусные соединения
AR068794A1 (es) 2007-06-29 2009-12-09 Gilead Sciences Inc Compuestos antivirales
EP2178885A1 (en) * 2007-07-17 2010-04-28 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic indole derivatives for the treatment of hepatitis c infections
JP5433573B2 (ja) * 2007-07-19 2014-03-05 イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・エルレ・エルレ 抗ウイルス剤としての大環状化合物
JP2010535156A (ja) 2007-08-03 2010-11-18 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼ阻害剤
WO2009032198A1 (en) 2007-08-30 2009-03-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Co-crystals and pharmaceutical compositions comprising the same
GB0718575D0 (en) 2007-09-24 2007-10-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Nucleoside derivatives as inhibitors of viral polymerases
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
WO2009055335A2 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8383583B2 (en) 2007-10-26 2013-02-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic, pyridazinone-containing hepatitis C serine protease inhibitors
US8304385B2 (en) 2007-11-14 2012-11-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic tetrazolyl hepatitis C serine protease inhibitors
WO2009070692A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2009070689A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic, c5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis c virus ns3 protease
US8361958B2 (en) * 2007-12-05 2013-01-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl HCV serine protease inhibitors
MX2010006210A (es) 2007-12-05 2010-08-10 Enanta Pharm Inc Inhibidores de serina proteasa de hcv de tripeptido fluorado.
EP2224920A4 (en) 2007-12-06 2012-05-09 Enanta Pharm Inc PROCESS FOR THE PREPARATION OF MACROCYCLIC OXIMYL HEPATITIS C PROTEASE INHIBITORS
US8273709B2 (en) 2007-12-14 2012-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic HCV serine protease inhibitors
WO2009076747A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
CA2712940A1 (en) * 2008-01-24 2009-07-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl-containing tripeptide hcv serine protease inhibitors
US8501682B2 (en) * 2008-01-24 2013-08-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Difluorinated tripeptides as HCV serine protease inhibitors
ES2437147T3 (es) 2008-02-04 2014-01-09 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Inhibidores de serina proteasa macrocíclicos
BRPI0907729A2 (pt) 2008-02-07 2015-07-14 Virobay Inc Métodos para tratar doenças mediadas pela catepsina b em um mamífero e para tratar um indivíduo diagnosticado tanto com hcv quanto com fribose em um mamífero
JP5608563B2 (ja) 2008-02-25 2014-10-15 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 治療用化合物
JP5490778B2 (ja) * 2008-03-20 2014-05-14 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤としてのフッ素化大環状化合物
TW200946541A (en) * 2008-03-27 2009-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Solid forms of an anti-HIV phosphoindole compound
CN102046622A (zh) 2008-04-15 2011-05-04 因特蒙公司 丙型肝炎病毒复制的新颖大环抑制剂
US8163921B2 (en) * 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP2011518882A (ja) * 2008-04-28 2011-06-30 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤
WO2009134987A1 (en) * 2008-04-30 2009-11-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Difluoromethyl-containing macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
US20090285774A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN101580535B (zh) * 2008-05-16 2012-10-03 太景生物科技股份有限公司 丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8044023B2 (en) 2008-05-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
CN102177172A (zh) 2008-07-02 2011-09-07 埃迪尼克斯医药公司 用于治疗病毒感染的化合物和药物组合物
EP2540349B1 (en) 2008-07-22 2014-02-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Pharmaceutical compositions comprising a macrocyclic quinoxaline compound which is an hcv ns3 protease inhibitor
JP2011528686A (ja) 2008-07-23 2011-11-24 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー ヘテロ環式抗ウイルス性化合物
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
BRPI0918513A2 (pt) 2008-09-16 2015-12-01 Boehringer Ingelheim Int formas cristalinas de um derivado de 2-tiazolil-4-quinolinil-óxi, seu sal de sódio, suas composições farmacêuticas e seu uso
AU2009293493B2 (en) * 2008-09-17 2014-09-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination of HCV NS3 protease inhibitor with interferon and ribavirin
KR20110061640A (ko) 2008-09-26 2011-06-09 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｈｃｖ 치료용 피린 또는 피라진 유도체
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP3025727A1 (en) 2008-10-02 2016-06-01 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating liver disease
KR20110075019A (ko) * 2008-10-15 2011-07-05 인터뮨, 인크. 치료용 항바이러스성 펩티드
AU2009309813A1 (en) 2008-10-30 2010-05-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral arylpyridone derivatives
MX2011005151A (es) * 2008-11-21 2011-05-30 Boehringer Ingelheim Int Composicion farmaceutica de un potente inhibidor de hvc para su administracion oral.
WO2010065668A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
EP2373172B1 (en) 2008-12-03 2013-07-17 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
US20100272674A1 (en) * 2008-12-04 2010-10-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2379579A1 (en) * 2008-12-19 2011-10-26 Gilead Sciences, Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
EP2367813A1 (en) 2008-12-22 2011-09-28 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
EP2379534A1 (en) 2008-12-22 2011-10-26 F. Hoffmann-La Roche AG Heterocyclic antiviral compounds
NZ593647A (en) 2008-12-23 2013-08-30 Gilead Pharmasset Llc Synthesis of purine nucleosides
TW201026716A (en) 2008-12-23 2010-07-16 Pharmasset Inc Nucleoside analogs
MX2011006891A (es) 2008-12-23 2011-10-06 Pharmasset Inc Fosforamidatos de nucleosidos.
EP2385838A1 (en) 2009-01-07 2011-11-16 Scynexis, Inc. Cyclosporine derivative for use in the treatment of hcv and hiv infection
WO2010082050A1 (en) 2009-01-16 2010-07-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic and 7-aminoalkyl-substituted benzoxazocines for treatment of hepatitis c infections
GB0900914D0 (en) 2009-01-20 2009-03-04 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
US8102720B2 (en) * 2009-02-02 2012-01-24 Qualcomm Incorporated System and method of pulse generation
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
EP2403860B1 (en) 2009-03-04 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole as hcv polymerase inhibitors
BRPI1016266A2 (pt) 2009-03-06 2019-09-24 Hoffmann La Roche compostos antivirais heterocíclicos
WO2010107739A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions of treating a flaviviridae family viral infection
US9150554B2 (en) 2009-03-27 2015-10-06 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Fused ring inhibitors of hepatitis C
WO2010118009A1 (en) * 2009-04-06 2010-10-14 Ptc Therapeutics, Inc. Hcv inhibitor and therapeutic agent combinations
US8377962B2 (en) 2009-04-08 2013-02-19 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
WO2010122082A1 (en) 2009-04-25 2010-10-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
US8936781B2 (en) 2009-05-13 2015-01-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
TWI428332B (zh) 2009-06-09 2014-03-01 Hoffmann La Roche 雜環抗病毒化合物
BRPI1011744A2 (pt) 2009-06-24 2016-03-22 Hoffmann La Roche composto antiviral heterocíclico.
US8232246B2 (en) * 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
JP2012532146A (ja) * 2009-07-02 2012-12-13 ドクター・レディーズ・ラボラトリーズ・リミテッド アミノビニルシクロプロパンカルボン酸誘導体の分割のための酵素および方法
HRP20140445T1 (hr) 2009-07-07 2014-06-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Farmaceutski sastav za inhibitor proteaze virusnog hepatitisa c
US8828930B2 (en) 2009-07-30 2014-09-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis C virus NS3 protease inhibitors
EP2461811B1 (en) 2009-08-05 2016-04-20 Idenix Pharmaceuticals LLC. Macrocyclic serine protease inhibitors useful against viral infections, particularly hcv
EP2465845A4 (en) * 2009-08-10 2013-01-09 Sumitomo Chemical Co PREPARATION FOR OPTICALLY ACTIVE 1-AMINO-2-VINYLCYCLOPROPANCARBOXYLIC ACID ESTER
US8324417B2 (en) 2009-08-19 2012-12-04 Virobay, Inc. Process for the preparation of (S)-2-amino-5-cyclopropyl-4,4-difluoropentanoic acid and alkyl esters and acid salts thereof
US8389560B2 (en) * 2009-09-15 2013-03-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. HCV protease inhibitors
KR20130026410A (en) * 2009-09-28 2013-03-13 Intermune Inc Cyclic peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
US9193740B2 (en) * 2009-10-19 2015-11-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bismacrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
EP2493470A1 (en) 2009-10-30 2012-09-05 Boehringer Ingelheim International GmbH Dosage regimens for hcv combination therapy comprising bi201335, interferon alpha and ribavirin
WO2011063076A1 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis c virus with oxoacetamide compounds
EP2504329A1 (en) 2009-11-25 2012-10-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-alkynyl-thiophene-2-carboxylic acid derivatives and their use for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2513113B1 (en) 2009-12-18 2018-08-01 Idenix Pharmaceuticals LLC 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
US20130072523A1 (en) 2009-12-24 2013-03-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US20110178107A1 (en) * 2010-01-20 2011-07-21 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
AU2011209051B2 (en) 2010-01-27 2015-01-15 AB Pharma Ltd. Polyheterocyclic compounds highly potent as HCV inhibitors
US8530497B2 (en) 2010-03-11 2013-09-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Crystalline salts of a potent HCV inhibitor
CA2794145A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
TW201141857A (en) 2010-03-24 2011-12-01 Vertex Pharma Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2550262A1 (en) 2010-03-24 2013-01-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
MX2012010919A (es) 2010-03-24 2013-02-01 Vertex Pharma Analogos para el tratamiento o prevencion de infecciones por flavivirus.
BR112012024884A2 (pt) 2010-03-31 2016-10-18 Gilead Pharmasset Llc síntese estereosseletiva de ativos contendo fósforo
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
BR112012024661A2 (pt) 2010-04-01 2015-09-15 Centre Nat Rech Scient composto, composição farmacêutica e método de tratamento de um hospedeiro infectado com vírus de hepatite c
CA2800509A1 (en) 2010-05-24 2011-12-01 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
WO2011156545A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Viral dynamic model for hcv combination therapy
EP2582717A2 (en) 2010-06-15 2013-04-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hcv ns5b polymerase mutants
UY33473A (es) 2010-06-28 2012-01-31 Vertex Pharma Compuestos y métodos para el tratamiento o la prevencion de infecciones por flavivirus
WO2012006070A1 (en) 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2585448A1 (en) 2010-06-28 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
CA2808291A1 (en) 2010-08-17 2012-02-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flaviviridae viral infections
UY38339A (es) 2010-09-21 2020-12-31 Enanta Pharm Inc Inhibidores de las proteasas de serina del vhc derivados de prolinas macrocíclicas
JP2013540112A (ja) * 2010-09-30 2013-10-31 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｈｃｖ感染を治療するための併用療法
EP2624826B1 (en) 2010-10-08 2018-07-18 Novartis AG Vitamin e formulations of sulfamide ns3 inhibitors
TW201242974A (en) 2010-11-30 2012-11-01 Gilead Pharmasset Llc Compounds
CA2819894A1 (en) * 2010-12-16 2012-06-21 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
JP2014502620A (ja) 2010-12-30 2014-02-03 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環状ｃ型肝炎セリンプロテアーゼ阻害剤
BR112013016480A2 (pt) 2010-12-30 2016-09-20 Abbvie Inc macrocíclo da fenantridina inibadores da protease da serina da hepatite c
AR085352A1 (es) 2011-02-10 2013-09-25 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores macrociclicos de serina proteasa, sus composiciones farmaceuticas y su uso para tratar infecciones por hcv
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012123298A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
WO2012154321A1 (en) 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8962810B2 (en) 2011-06-16 2015-02-24 AB Pharma Ltd. Macrocyclic heterocyclic compound for inhibiting hepatitis C virus and preparation and use thereof
JPWO2012176715A1 (ja) 2011-06-21 2015-02-23 三菱瓦斯化学株式会社 １−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸アミドおよびその塩、ならびにその製造方法
US20120328565A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 Brinkman John A Antiviral compounds
CN102807607B (zh) * 2011-07-22 2013-10-23 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的稠环杂环类化合物、其中间体及其应用
WO2013016499A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for preparation of thiophene compounds
TW201313697A (zh) 2011-07-26 2013-04-01 Vertex Pharma 製備噻吩化合物之方法
DE102012016127A1 (de) 2011-08-31 2013-02-28 Daniel Elias Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels
EP2755983B1 (en) 2011-09-12 2017-03-15 Idenix Pharmaceuticals LLC. Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
CN103906759A (zh) 2011-09-12 2014-07-02 埃迪尼克斯医药公司 用于治疗病毒感染的化合物和药物组合物
CN103917541B (zh) 2011-10-10 2016-08-17 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒化合物
WO2013056046A1 (en) 2011-10-14 2013-04-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2013059630A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Abbvie Inc. Methods for treating hcv comprising at least two direct acting antiviral agent, ribavirin but not interferon.
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
DE112012002813T5 (de) 2011-10-21 2014-06-05 Abbvie Inc. Kombinationsbehandlung (z.B. mit ABT-072 oder ABT-333 von DAAs zur Verwendung in der Behandlung von HCV)
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US9328138B2 (en) 2011-11-15 2016-05-03 Msd Italia S.R.L. HCV NS3 protease inhibitors
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
WO2013082476A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Emory University Antiviral jak inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
PE20142102A1 (es) 2011-12-06 2015-01-04 Univ Leland Stanford Junior Metodos y composiciones para tratar enfermedades virales
KR20140104030A (ko) 2011-12-16 2014-08-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 Hcv ns5a의 억제제
RS56212B1 (sr) 2011-12-20 2017-11-30 Riboscience Llc 2',4'-difluoro-2'-metilom supstituisani nukleozidni derivati kao inhibitori replikacije rna hcv-a
PE20141599A1 (es) 2011-12-20 2014-10-30 Hoffmann La Roche Derivados de los nucleosidos sustituidos en 4'-azido, 3'-fluoro como inhibidores de la replicacion del rna del vhc
WO2013106344A1 (en) 2012-01-12 2013-07-18 Ligand Pharmaceuticals, Inc. 2 '-c-methyl nucleosides containing a cyclic phosphate diester of 1, 3-propanediol (2-oxo-[1, 3, 2]-dioxaphosphorinane) at position 5'
SG11201404042VA (en) 2012-01-12 2014-08-28 Boehringer Ingelheim Int Stabilized pharmaceutical formulations of a potent hcv inhibitor
US20130217644A1 (en) 2012-02-13 2013-08-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical Compositions of 2'-C-Methyl-Guanosine, 5'-[2[(3-Hydroxy-2,2-Dimethyl-1-Oxopropyl)Thio]Ethyl N-(Phenylmethyl)Phosphoramidate]
KR20140130449A (ko) 2012-02-24 2014-11-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 항바이러스 화합물
JP2015509980A (ja) 2012-03-14 2015-04-02 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｈｃｖ−ｈｉｖ同時感染患者集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
US9012427B2 (en) 2012-03-22 2015-04-21 Alios Biopharma, Inc. Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog
WO2013147750A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
WO2013147749A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient subgenotype populations
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
NZ702744A (en) 2012-05-22 2016-12-23 Idenix Pharmaceuticals Llc D-amino acid compounds for liver disease
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
US20140010783A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Hoffmann-La Roche Inc. Antiviral compounds
EA030189B8 (ru) 2012-10-08 2018-10-31 Иденикс Фармасьютикалз Ллс Аналоги 2'-хлоронуклеозидов для инфекции вгс
EP2909223B1 (en) 2012-10-19 2017-03-22 Idenix Pharmaceuticals LLC Dinucleotide compounds for hcv infection
MX360452B (es) 2012-10-19 2018-11-01 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores del virus de la hepatitis c.
EP2909222B1 (en) 2012-10-22 2021-05-26 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2914613B1 (en) 2012-11-02 2017-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014071007A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2914614B1 (en) 2012-11-05 2017-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014078436A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
CN103804208B (zh) * 2012-11-14 2016-06-08 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种丙肝药物中间体的制备方法
US20140140951A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-Alanine Ester of Rp-Nucleoside Analog
EP2935304A1 (en) 2012-12-19 2015-10-28 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
RU2015132550A (ru) 2013-01-23 2017-03-02 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Противовирусные производные триазола
WO2014121417A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014121418A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014134251A1 (en) 2013-02-28 2014-09-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions
WO2014137930A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Thiophosphate nucleosides for the treatment of hcv
US9309275B2 (en) 2013-03-04 2016-04-12 Idenix Pharmaceuticals Llc 3′-deoxy nucleosides for the treatment of HCV
CN105008350B (zh) 2013-03-05 2018-05-08 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒化合物
JP6342922B2 (ja) 2013-03-07 2018-06-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
WO2014138374A1 (en) 2013-03-08 2014-09-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
EA201591722A1 (ru) 2013-03-14 2016-02-29 Ачиллион Фармасьютикалз, Инк. Новые способы получения совапревира
EP2981542B1 (en) 2013-04-01 2021-09-15 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
EA201592185A1 (ru) 2013-05-16 2016-05-31 Рибосайенс Ллк 4'-азидо, 3'-дезокси-3'-фторзамещенные нуклеозидные производные
BR112015028764B1 (pt) 2013-05-16 2022-09-27 Riboscience Llc Derivados de nucleosídeo de 4-fluoro-2-metil substituídos como inibidores de replicação de rna do hcv
US20180200280A1 (en) 2013-05-16 2018-07-19 Riboscience Llc 4'-Fluoro-2'-Methyl Substituted Nucleoside Derivatives as Inhibitors of HCV RNA Replication
EP3004130B1 (en) 2013-06-05 2019-08-07 Idenix Pharmaceuticals LLC. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
EP3650014B1 (en) 2013-08-27 2021-10-06 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
WO2015042375A1 (en) 2013-09-20 2015-03-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
US20160271162A1 (en) 2013-11-01 2016-09-22 Idenix Pharmacueticals, Llc D-alanine phosphoramide pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
WO2015081297A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US9717797B2 (en) 2013-12-05 2017-08-01 International Business Machines Corporation Polycarbonates bearing aromatic N-heterocycles for drug delivery
EP3083654A1 (en) 2013-12-18 2016-10-26 Idenix Pharmaceuticals LLC 4'-or nucleosides for the treatment of hcv
EP3089757A1 (en) 2014-01-03 2016-11-09 AbbVie Inc. Solid antiviral dosage forms
EP2899207A1 (en) 2014-01-28 2015-07-29 Amikana.Biologics New method for testing HCV protease inhibition
EP3114122A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
US20170135990A1 (en) 2014-03-05 2017-05-18 Idenix Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
WO2015134780A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
US10202411B2 (en) 2014-04-16 2019-02-12 Idenix Pharmaceuticals Llc 3′-substituted methyl or alkynyl nucleosides nucleotides for the treatment of HCV
JP7129703B2 (ja) 2016-04-28 2022-09-02 エモリー ユニバーシティー アルキン含有ヌクレオチド及びヌクレオシド治療組成物並びにそれらに関連した使用
TWI860279B (zh) 2017-09-21 2024-11-01 美商里伯賽恩斯有限責任公司 作為hcv rna複製抑制劑之經4'-氟-2'-甲基取代之核苷衍生物
CN113167802B (zh) 2018-12-04 2025-02-07 百时美施贵宝公司 通过多同位素体反应监测使用样品内校准曲线的分析方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19600034A1 (de) * 1996-01-02 1997-07-03 Huels Chemische Werke Ag Cyclopropanverbindungen und Verfahren zu deren Herstellung
WO1999007733A2 (en) * 1997-08-11 1999-02-18 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptides
EP1105413A2 (en) * 1998-08-10 2001-06-13 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0475255A3 (en) * 1990-09-12 1993-04-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid
JPH05155827A (ja) * 1991-12-09 1993-06-22 Banyu Pharmaceut Co Ltd ｃｉｓ−２−アミノシクロプロパンカルボン酸誘導体の製造法
IT1272179B (it) 1994-02-23 1997-06-16 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodologia per riprodurre in vitro l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 del virus hcv.
CN1141591A (zh) * 1994-02-23 1997-01-29 布·安格莱荻公司分子生物学研究所 体外再生丙型肝炎病毒(hcv)ns3蛋白酶的解蛋白活性的方法
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
IT1277914B1 (it) * 1995-08-22 1997-11-12 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per produrre - in forma pura e in quantita' elevate - polipeptidi con l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 di hcv, e
CA2165996C (en) * 1995-12-22 2002-01-29 Murray Douglas Bailey Stereoselective preparation of 2-substituted succinic derivatives
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
CN1133649C (zh) 1996-10-18 2004-01-07 沃泰克斯药物股份有限公司 丝氨酸蛋白酶、特别是丙型肝炎病毒ns3蛋白酶的抑制剂
JP2002512625A (ja) 1997-05-29 2002-04-23 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としての複素環アミド化合物
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
SE9704543D0 (sv) * 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
DE19835120C1 (de) * 1998-08-04 1999-10-21 Westfalia Separator Ag Verfahren und Vorrichtung zum Einstellen des Flüssigkeitsgehalts des aus einer selbstentleerenden Schleudertrommel eines Separators ausgetragenen Feststoffes
US6277830B1 (en) * 1998-10-16 2001-08-21 Schering Corporation 5′-amino acid esters of ribavirin and the use of same to treat hepatitis C with interferon
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2516018C (en) * 2003-03-05 2011-08-23 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
EP1601685A1 (en) * 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19600034A1 (de) * 1996-01-02 1997-07-03 Huels Chemische Werke Ag Cyclopropanverbindungen und Verfahren zu deren Herstellung
WO1999007733A2 (en) * 1997-08-11 1999-02-18 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptides
EP1105413A2 (en) * 1998-08-10 2001-06-13 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Tetrahedron Letters (1995) 36, 2979-2982 *

Also Published As

Publication number Publication date
HUP1300080A2 (cs) 2002-04-29
KR20060083992A (ko) 2006-07-21
US6534523B1 (en) 2003-03-18
YU9401A (sh) 2003-02-28
IL141012A (en) 2009-09-01
USRE41356E1 (en) 2010-05-25
CZ2001516A3 (cs) 2001-08-15
CN1323316A (zh) 2001-11-21
IL196545A0 (en) 2011-07-31
SA99200617A (ar) 2005-12-03
BR9917805B1 (pt) 2014-06-17
EP2028186B1 (en) 2013-01-23
ES2326707T3 (es) 2009-10-16
NO20100004L (no) 2001-04-02
KR100672229B1 (ko) 2007-02-28
CY1113935T1 (el) 2016-07-27
SA99200617B1 (ar) 2006-06-24
CA2338946C (en) 2010-10-12
EP1105413A2 (en) 2001-06-13
ID27839A (id) 2001-04-26
CN101143892A (zh) 2008-03-19
PH11999002002B1 (en) 2007-10-19
US6323180B1 (en) 2001-11-27
HRP20010102B1 (en) 2010-07-31
USRE41894E1 (en) 2010-10-26
IN2007MU00706A (cs) 2007-07-20
AU769738B2 (en) 2004-02-05
CA2445938A1 (en) 2000-02-24
NZ510396A (en) 2004-02-27
US6420380B2 (en) 2002-07-16
CN100339389C (zh) 2007-09-26
PT2028186E (pt) 2013-03-27
MXPA01001423A (es) 2001-08-01
US6329417B1 (en) 2001-12-11
PL204850B1 (pl) 2010-02-26
HU230701B1 (hu) 2017-10-30
IN2001MU00127A (cs) 2005-03-04
JP2010043124A (ja) 2010-02-25
HUP0105144A3 (en) 2002-11-28
EA003906B1 (ru) 2003-10-30
SI2028186T1 (sl) 2013-06-28
ME00381B (me) 2011-10-10
HRP20010102A2 (en) 2002-02-28
NO336663B1 (no) 2015-10-12
KR20010085363A (ko) 2001-09-07
MX257413B (es) 2008-05-27
CN101143892B (zh) 2010-12-08
JP2002522554A (ja) 2002-07-23
MY127538A (en) 2006-12-29
MEP58508A (en) 2011-05-10
US6410531B1 (en) 2002-06-25
TR200200129T2 (tr) 2002-06-21
BRPI9913646B8 (pt) 2021-05-25
AR073428A2 (es) 2010-11-03
EP2028186A3 (en) 2009-04-01
KR100631439B1 (ko) 2006-10-09
BG65738B1 (bg) 2009-09-30
WO2000009543A2 (en) 2000-02-24
HUP0105144A2 (hu) 2002-04-29
PL346626A1 (en) 2002-02-25
SK2062001A3 (en) 2001-10-08
USRE40525E1 (en) 2008-09-30
MX261584B (es) 2008-10-22
JP5021711B2 (ja) 2012-09-12
US6329379B1 (en) 2001-12-11
UA75026C2 (en) 2006-03-15
HK1040085B (zh) 2008-05-30
IL141012A0 (en) 2002-02-10
PE20000949A1 (es) 2000-09-26
AR020880A1 (es) 2002-06-05
CZ302766B6 (cs) 2011-10-26
NO328952B1 (no) 2010-06-28
SI1105413T1 (sl) 2009-10-31
EA200100228A1 (ru) 2001-10-22
WO2000009543A3 (en) 2000-05-25
RS53562B1 (sr) 2015-02-27
CA2338946A1 (en) 2000-02-24
SK288068B6 (sk) 2013-05-03
NO20010683L (no) 2001-04-02
ZA200100971B (en) 2002-06-26
CA2445938C (en) 2012-10-30
EE200100081A (et) 2002-08-15
AR069583A2 (es) 2010-02-03
DK2028186T3 (da) 2013-03-25
SK286994B6 (sk) 2009-09-07
EE05517B1 (et) 2012-02-15
HU229262B1 (en) 2013-10-28
US6268207B1 (en) 2001-07-31
IL196545A (en) 2012-06-28
PT1105413E (pt) 2009-06-30
EP1105413B1 (en) 2009-04-29
NO20010683D0 (no) 2001-02-09
BR9913646B1 (pt) 2014-12-02
CY1109291T1 (el) 2014-07-02
DE69940817D1 (en) 2009-06-10
EP2028186A2 (en) 2009-02-25
US20020016442A1 (en) 2002-02-07
ES2405930T3 (es) 2013-06-04
US20020037998A1 (en) 2002-03-28
USRE42164E1 (en) 2011-02-22
RS20090459A (en) 2010-06-30
ATE430158T1 (de) 2009-05-15
RS50798B (sr) 2010-08-31
TR200100432T2 (tr) 2001-09-21
BR9913646A (pt) 2001-06-05
DK1105413T3 (da) 2009-08-17
HK1113164A1 (en) 2008-09-26
JP4485685B2 (ja) 2010-06-23
AU5273199A (en) 2000-03-06
CO5261542A1 (es) 2003-03-31
BG105232A (en) 2001-11-30
IN211493B (cs) 2008-01-25
HK1040085A1 (zh) 2002-05-24
TWI250165B (en) 2006-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ301268B6 (cs) Peptidové inhibitory viru hepatitidy typu C
JP4435982B2 (ja) Ｃ型肝炎インヒビターペプチド

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20190809