TWI406660B - Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑 - Google Patents

Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑 Download PDF

Info

Publication number
TWI406660B
TWI406660B TW096143432A TW96143432A TWI406660B TW I406660 B TWI406660 B TW I406660B TW 096143432 A TW096143432 A TW 096143432A TW 96143432 A TW96143432 A TW 96143432A TW I406660 B TWI406660 B TW I406660B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
compound
group
formula
reaction
alkyl
Prior art date
Application number
TW096143432A
Other languages
English (en)
Other versions
TW200838529A (en
Inventor
Pierre Jean-Marie Bernard Raboisson
Kock Herman Augustinus De
Gowan David Craig Mc
De Vreken Wim Van
Lili Hu
Abdellah Tahri
Sandrine Marie Helene Vendeville
Original Assignee
Tibotec Pharm Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37894415&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TWI406660(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Tibotec Pharm Ltd filed Critical Tibotec Pharm Ltd
Publication of TW200838529A publication Critical patent/TW200838529A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI406660B publication Critical patent/TWI406660B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/056—Ortho-condensed systems with two or more oxygen atoms as ring hetero atoms in the oxygen-containing ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4741—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having oxygen as a ring hetero atom, e.g. tubocuraran derivatives, noscapine, bicuculline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Description

C型肝炎病毒之巨環抑制劑
本發明係有關對於C型肝炎病毒(HCV)之複製具有抑制活性之巨環化合物。另外有關包含此等化合物為活性成份之組成物且有關製備此等化合物及組成物之方法。
C型肝炎病毒是全世界慢性肝病的主因，且已成為重要醫學研究之焦點。HCV係為黃病毒科(Flaviviridae family)病毒之C型肝炎病毒屬(hepacivirus genus)的成員，與黃病毒屬(flavivirus genus)及動物瘟疫病毒科關係密切，黃病毒屬包括數種包括人類疾病之病毒，諸如登革熱病毒(dengue virus)及黃熱病病毒，而動物瘟疫病毒科則包括牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。HCV係為正鏈單股RNA病毒，具有約9,600個鹼基之基因體。該基因體同時包含選擇RNA二次結構之5’及3’未轉譯區及編碼單一聚合蛋白質之中心開放讀碼框架。聚合蛋白質編碼十種基因產物，其係藉由同時由宿主及病毒蛋白酶所介導之精巧系列的轉譯同時及轉譯後內生性蛋白質水解切除自前驅物聚合蛋白質生成。病毒結構性蛋白質係包括核蛋白衣蛋白及兩種被膜糖蛋白E1及E2。非結構性(NS)蛋白質編碼某些必要之病毒酶功能(解旋酶、聚合酶、蛋白酶)以及具有未知功能之蛋白質。病毒基因體之複製係由RNA－依賴性RNA聚合酶介導，由非結構性蛋白質5b(NS5B)所編碼。除了聚合酶之外，病毒解旋 酶及蛋白酶功能(兩者皆編碼於雙功能性NS3蛋白質中)已顯示係HCV RNA之複製所必要。在NS3絲胺酸蛋白酶之外，HCV亦編碼在NS2區中之金屬蛋白酶。
在初次急性感染之後，大部分受感染之個體皆發展成慢性肝炎，因為HCV主要在肝細胞中複製，而非直接為細胞病變性。尤其，缺乏積極之T－淋巴細胞反應及病毒之高突變傾向皆增進高度之慢性感染率。慢性肝炎可發展成肝纖維化，導致肝硬化、末期肝病及HCC(肝細胞癌)，使其成為肝移植之主因。
主要之HCV基因型有6種，而亞型超過50種，有地理差異之分布。第1型HCV係為歐洲及美國之主要基因型。HCV之遺傳異質性的徹底研究具有重要之診斷及臨床意涵，也許說明疫苖發展的困難性及對治療的缺乏反應。
HCV之傳染可透過受污染血液或血液產品而發生，例如在輸血之後或在靜脈內藥物使用之後。導入血液篩檢所使用之診斷試驗已使得輸血後HCV發生率呈下降趨勢。然而，因為末期肝病之進展緩慢，故目前之感染仍為未來數十年的沉重醫藥及經濟重擔。
目前之HCV療法係基於(聚乙二醇化)干擾素－α(IFN－α)與病毒唑(ribavirin)之組合。此種組合療法在40%以上之感染基因型1病毒患者身上產生持續病毒性反應，而感染基因型2及3者則有約80%。除了對第1型HCV之功效有限之外，此種組合療法具有明顯之副作用，且許多患者之耐受性不佳。主要副作用係包括類似流感之症狀、血液異常 及神經精神症狀。因此需要更有效、方便且更佳耐受性之治療。
近來，有兩種擬肽HCV蛋白酶抑制劑受到成為臨床候選藥物之關注，即WO 00/59929所揭示之BILN－2061及WO 03/87092所揭示之VX－950。學術及專利文獻中亦揭示許多類似之HCV蛋白酶抑制劑。已知BILN－2061或VX－950之持續投藥選擇對抗個別藥物之HCV突變型，所謂藥物脫逃突變型。此等藥物脫逃突變型於HCV蛋白酶基因體中具有特徵突變，尤其是D168V、D168A及/或A156S。是故，需要具有不同抗藥模式之其他藥物，以提供無效患者治療選擇，且使用多種藥物之組合療法在未來是標準模式，即使是第一線治療亦然。
使用HIV藥物之實驗，尤其是使用HIV蛋白酶抑制劑，進一步強調次優藥物動力學及複雜之投藥方案迅速導致疏忽性依從性不足。此點又表示個別藥物於HIV方案中之24小時谷濃度(最低血漿濃度)在一天的大部分時間經常低於IC90 或ED90 臨界值。玆認為24小時谷水平至少為IC50 ，更實際地，為IC90 或ED90 ，係為減緩發展藥物脫逃突變型所必要。達成該等谷水平所需之藥物動力學及藥物新陳代謝對藥物設計提供嚴苛之挑戰。具有多胜肽鍵結之先前技術HCV蛋白酶抑制劑之強擬肽性質對有效投藥方案造成藥物動力障礙。
需要可克服目前HCV療法之缺點諸如副作用、有限之功能、出現抗藥性及依從性不足之HCV抑制劑。
本發明係有關以下醫藥相關性質中之一或多項優異的HCV抑制劑，即效價強度、低胞毒性、改良之藥物動力學、改良之抗藥性圖譜、可接受之劑量及藥量負擔。此外，本發明化合物具有相對低之分子量且易於自市售或可輕易經由技術界已知之合成方法取得的起始物質開始合成。
WO 2005/010029揭示氮雜－胜肽巨環C型肝炎絲胺酸蛋白酶抑制劑。WO 2005/073216及WO 2005/073195描述系列之各具有脯胺酸及環烷基部分的直鏈及巨環HCV蛋白酶抑制劑。本發明化合物具有連接於脯胺酸或環烷基部分之特別經取代的喹啉氧基片段，該片段尚未揭示於所列參考資料。
本發明係有關HCV複製之抑制劑，其可由式(I)表示： 及其鹽及立體異構物，其中各虛線(以－－－－－表示)係獨立地表示視情況存在之雙鍵； X係為N、CH且當X帶有雙鍵時其係為C；R1 係為－OR7 、－NH－SO2 R8 ；R2 係為氫，且當X係為C或CH時，R2 亦可為C1－6 烷基；R3 係為氫、C1－6 烷基、C1－6 烷氧基C1－6 烷基、C3－7 環烷基；n係為3、4、5或6；R4 係為C1－6 烷基或C3－7 環烷基；R5 係表示氫、鹵基、C1－6 烷基、羥基、C1－6 烷氧基、多鹵基C1－6 烷基；R6 係表示氫、C1－6 烷氧基、單－或二C1－6 烷基胺基；或R5 及R6 可視情況與其所連接之碳原子一起形成5－或6－員不飽和或部分不飽和環，且其中該環可視情況包含一或兩個選自O、N及S之雜原子；R7 係為氫；視情況經C1－6 烷基取代之C3－7 環烷基；或視情況經C3－7 環烷基取代之C1－6 烷基；R8 係為視情況經C1－6 烷基取代之C3－7 環烷基；視情況經C3－7 環烷基取代之C1－6 烷基；或－NR8a R8b ，其中R8a 及R8b 各獨立地為C1－6 烷基，或R8a 及R8b 與其所連接之氮一起形成5－或6－員飽和雜環性環。
本發明另外有關製備式(I)化合物、其加成鹽及立體化學異構形式之方法且有關此等製備方法中所使用之中間物。
本發明亦有關式(I)化合物本身、其加成鹽及立體化學異構形式，其係作為藥劑。本發明另外有關醫藥組成物，其包含載劑及抗病毒有效量之本發明所述式(I)化合物。該醫藥組成物可包含前述化合物與其他抗HCV藥劑之組合 物。本發明另外有關用以投予患有HCV感染之個體的前述醫藥組成物。
本發明亦有關式(I)化合物、或其加成鹽或立體化學異構形式之用途，其係用以製造抑制HCV複製之藥劑。或者，本發明有關抑制溫血動物之HCV複製的方法，該方法係包含投予有效量之式(I)化合物，或其加成鹽或立體化學異構形式。
使用於前文及下文中時，應用以下定義，除非另有陳述。
術語鹵基係氟、氯、溴及碘之總稱。
術語「多鹵基C1－6 烷基」係定義為經單－或多鹵基取代之C1－6 烷基，尤其是最多經一、二、三、四、五、六或更多個鹵原子所取代之C1－6 烷基，諸如具有一或多個氟原子之甲基或乙基，例如二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基。較佳係為三氟甲基。亦包括有全氟C1－6 烷基，其係為其中所有氫原子皆被氟原子所置換之C1－6 烷基，例如五氟乙基。當多於一個時，鹵原子係連接於在多鹵基C1－6 烷基定義內之烷基，該等鹵原子可相同或相異。
本發明作為基團或基團之一部分使用之「C1－4 烷基」係定義具有1至4個碳原子直鏈或分支鏈飽和烴基，諸如例如甲基、乙基、1－丙基、2－丙基、1－丁基、2－丁基、2－甲基－1－丙基；「C1－6 烷基」係涵蓋C1－4 烷基及其具有5或6個碳原子之較高碳類似物，諸如例如1－戊基、2－戊基、3－戊基、1－己基、2－己基、2－甲基－1－丁基、2－甲基－1－戊基、2－乙基－1－丁基、3－甲基－2－戊基及諸如此類者。C1－6 烷基中重要的係 為C1－4 烷基。
作為基團或基團之一部分之術語「烯基」係定義具有飽和碳－碳鍵結及至少一個(或較佳一個)雙鍵之直鏈及分支鏈烴基。術語「烯基」可表示前述具有不同數目之碳原子的烴基，例如2至6、3至6、2至4、3至4個等。本發明所使用之作為基團或基團之一部分的術語「C5－8 烯基」係定義具有飽和碳－碳鍵結及至少一個(或較佳一個)雙鍵且具有5至8個碳原子之直鏈及分支鏈烴基，諸如例如2－戊烯基、3－戊烯基、2－己烯基、3－己烯基、4－己烯基、2－甲基－2－丁烯基、2－甲基－2－戊烯基、2－庚烯基、3－庚烯基、1－辛烯基、2－辛烯基、3－辛烯基、4－辛烯基及諸如此類者。
C3－7 環烷基係環丙基、環丁基、環戊基、環己基及環庚基之總稱。
C1－6 烷氧基係意指C1－6 烷基氧基，其中C1－6 烷基係如前定義。
如本發明前文所使用，術語(＝O)或酮基在連接於碳原子時係形成羰基部分，在連接於硫原子時係形成亞碸部分，而兩個該術語連接於硫原子時係磺醯基部分。只要環或環系統被酮基取代，則該酮基所連接之碳原子必為飽和碳。
應注意定義中所使用之任一分子部分上的基團位置可位於該部分上之任何一處，只要其係化學安定性。當任一變數在任一部分中出現一次以上時，每次定義皆係獨立。
變數之定義中所使用的基團係包括所有可能之異構物，除非另有陳述。例如吡啶基係包括2－吡啶基、3－吡啶 基及4－吡啶基；戊基係包括1－戊基、2－戊基及3－戊基。
不管下文何處使用，術語「式(I)之化合物」、或「本發明化合物」或類似術語皆意以包括式(I)化合物、其加成鹽；及其立體化學異構形式。
式(I)化合物具有數個對掌性中心且存有立體化學異構形式。本發明所使用之術語「立體化學異構形式」係定義由藉相同鍵序所鍵結之相同原子構成，但具有不同而不可相互改變之三維結構的式(I)化合物可能具有的所有可能化合物。關於使用(R)或(S)命名取代基內對掌性原子之絕對組態的情況，該命名是在考慮整體化合物而非單獨考慮該取代基之下完成。
除非另有提及或說明，否則化合物之化學命名係涵蓋該化合物可能具有之所有可能立體化學異構形式的混合物。該混合物可含有該化合物之基本分子結構的所有非鏡像異構物及/或鏡像異構物。本發明化合物之所有立體化學異構形式(純物質形式或彼此混合物)預定涵蓋於本發明範圍內。
本發明所提及之純立體異構形式的化合物及中間物係定義為實質上不含該化合物或中間物具有相同基本分子結構之其他鏡像異構或非鏡像異構形式的異構物。尤其，術語「立體異構上純的」係指立體異構過量至少為80%(即最少80%之一種異構物且最多20%之其他可能異構物)至立體異構過量為100%(即100%之一種異構物且無其他異構物)的化合物或中間物，更特別是，立體異構過量為90% 至100%之化合物或異構物，再更特別是立體異構過量為94%至100%且最特別是立體異構過量為97%至100%。應以類似方式理解術語「鏡像異構純的」及「非鏡像異構純的」，但個別考慮所研究之混合物的鏡像異構過量及非鏡像異構過量。
本發明化合物及中間物之純立體異構形式可藉由應用技術界已知之方法而製得。例如，鏡像異構物可藉以光學活性酸或鹼使其非鏡像異構鹽選擇性結晶而彼此分離。其實例有酒石酸、二苄醯基酒石酸、二甲苯醯基酒石酸及樟腦磺酸。或鏡像異構物可藉層析技術使用對掌性靜態相分離。該純立體化學異構形式亦可自對應純立體化學異構形式之適當起始物質衍生，其限制條件為反應係立體選擇性地進行。若需要特定立體異構物，則較佳係該化合物藉立體選擇性製備方法合成。此等方法較佳係採用鏡像異構純的起始物質。
式(I)化合物之非鏡像異構外消旋物可分別藉習用方法製得。可有利地採用之適當物理性分離方法有例如選擇性結晶及層析，例如管柱層析。
就某些式(I)化合物或其鹽及其製備中所使用之中間物而言，絕對立體化學組態非實驗決定。熟習此技術者可使用技術界已知方法諸如例如X－射線繞射決定該等化合物之絕對組態。
本發明亦預期包括本發明化合物上出現之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序但不同質量數之原 子。在一般非限制實例下，氫之同位素係包括氚及氘。碳之同位素係包括C－13及C－14。
供治療使用時，式(I)化合物之鹽係為其中相對離子之醫藥上可接受者，該鹽可稱為醫藥上可接受之酸及鹼加成鹽。然而，發現非醫藥上可接受之酸及鹼的鹽亦可使用於例如製備或純化醫藥上可接受之化合物。所有鹽，不論是醫藥上可接受與否，皆包括於本發明範圍內。
前文提及之醫藥上可接受之酸及鹼加成鹽意以包含式(I)化合物可形成之治療活性無毒性酸及鹼加成鹽形式。The醫藥上可接受之酸加成鹽可適宜地以該適當之酸處理該鹼形式而製得。適當之酸係包含例如無機酸，諸如氫鹵酸，例如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及諸如此類之酸；或有機酸，諸如例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、順丁烯二酸、反丁烯二酸、蘋果酸(即羥基丁二酸)、酒石酸、檸樣酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對 p甲苯 磺酸、環己基胺基磺酸、水楊酸、對 －胺基水楊酸、雙羥基萘酸及諸如此類之酸。相對地，該等鹽形式可藉著以適當之鹼處理轉化成游離鹼形式。
含有酸性質子之式(I)化合物亦可藉著以適當之有機及無機鹼處理而轉化成其無毒性金屬或胺加成鹽形式。適當之鹼鹽形式係包含例如銨鹽，鹼金屬及鹼土金屬鹽，例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣及諸如此類之鹽；與有機鹼形成之鹽，例如苄星、N －甲基－D－葡萄糖胺、海巴胺鹽，及與胺基酸形 成之鹽，諸如例如精胺酸、離胺酸及諸如此類者。
本發明所使用之術語「加成鹽」或「鹽」亦意以包含式(I)化合物及其(非溶劑合物)鹽可形成之溶劑合物。該等溶劑合物有例如水合物、醇合物例如甲醇合物、乙醇合物、丙醇合物及諸如此類者。較佳係醫藥上可接受之溶劑合物。因此本發明亦涵蓋本發明所述之式(I)化合物的醫藥上可接受之溶劑合物。
某些式(I)化合物亦可以其互變異構形式存在。該等形式雖非明確顯示於前述式中，但預期係包括於本發明範圍內。
如前文所提及，式(I)化合物具有數個不對稱中心。為了更有效地表示此等不對稱中心中之每一個，使用以下結構式所所示之編號系統。
不對稱中心係位於巨環之1、4及6位置及位於5－員環之碳原子3'，當R2 取代基係為C1－6 烷基時位於碳原子2’且當X係為CH時係位於碳原子1’。此等不對稱中心中之每一個 各可出現其R或S組態。
位置1之立體化學較佳係對應於L－胺基酸組態者，即L－脯胺酸者。
當X係為CH時，取代於環－戊烷環之位置1’及5’的兩個羰基較佳係為反式組態。位置5’之羰基取代基較佳係為對應於L－脯胺酸組態之組態。取代於位置1'及5'之羰基較佳係如下式結構中所示 式(I)化合物係包括如以下結構片段所示之環丙基： 其中C7 係表示位置7之碳且位置4及6上之碳係環丙烷環之不對稱碳原子。
儘管式(I)化合物之其他片段上有其他可能之不對稱中心，但此兩不對稱中心之存在表示化合物可存在為非鏡像異構物混合物之形式，諸如其中位置7之碳組態係如下式地對羰基成順式或對醯胺成順式之式(I)化合物的非鏡像異構物。
一具體實施態樣係有關其中位置7之碳的組態係對羰基成順式之式(I)化合物。另一具體實施態樣係有關其中位置4之碳的組態係為R之式(I)化合物。特定子群之式(I)化合物係為其中位置7之碳的組態係對羰基成順式且其中位置4之碳的組態係為R的化合物。
式(I)化合物亦可包括脯胺酸殘基(當X係為N)或環戊基或環戊烯基殘基(當X係為CH或C)。較佳係為其中位於1(或5’)位置之取代基及位置3’之取代基係為反式組態之式(I)化合物。特別重要的是其中位置1具有對應於L－脯胺酸之組態且位置3’之取代基相對於位置1係為反式組態的式(I)化合物。較佳式(I)化合物係具有以下式(I－a)及(I－b)之結構所示的立體化學： 本發明之一具體實施態樣係有關式(I)或式(I－a)之化合物或式(I)化合物之任一子群的化合物，其中符合一或多項以下條件：(a)R2 係為氫；(b)X係為氮；(c)雙鍵係存在於碳原子7及8之間。
本發明之一具體實施態樣係有關式(I)或式(I－a)、(I－b)之化合物或任一子群之式(I)化合物的化合物，其中若適用則可符合一或多項以下條件：(a)R2 係為氫；(b)X係為CH；(c)雙鍵係存在於碳原子7及8之間。
特定子群之式(I)化合物係為以下結構式表示者：
式(I－c)及(I－d)之化合物中，個別具有式(I－a)及(I－b)化合物之立體化學組態特別重要。
式(I)化合物或任一子群之式(I)化合物中介於碳原子7及8之間的雙鍵可為順式或反式組態。較佳係介於碳原子7及8之間的雙鍵係為順式組態，如式(I－c)及(I－d)所示。
介於碳原子1'及2'之間的雙鍵可存在於式(I)化合物，或存在於任一子群之式(I)化合物中，如以下式(I－e)所示。
其他特定子群之式(I)化合物係為以下結構式表示者：
式(I－f)、(I－g)或(I－h)之化合物中，具有式(I－a)或(I－b)化合物之立體化學組態的化合物特別重要。
式(I－a)、(I－b)、(I－c)、(I－d)、(I－e)、(I－f)、(I－g)及(I－h)化合物中，若適合，X、n、R1 、R2 、R3 、R4 、R5 及R6 係如式(I)化合物或本發明所述之任一式(I)化合物子群之定義所述。
應瞭解前文定義之式(I－a)、(I－b)、(I－c)、(I－d)、(I－e)、(I－f)、(I－g)或(I－h)化合物子群及任何其他本發明所定義之子群亦包括該等化合物之立體化學異構形式且亦包含任何加成鹽。
當n係為3時，由「n」括弧之部分－CH2 －係對應於式(I)化合物或任一子群之式(I)化合物中的丙烷二基。當n係為4時，由「n」括弧之部分－CH2 －係對應於式(I)化合物或任 一子群之式(I)化合物中的丁烷二基。當n係為5時，由「n」括弧之部分－CH2 －係對應於式(I)化合物或任一子群之式(I)化合物中的戊烷二基。當n係為6時，由「n」括弧之部分－CH2 －係對應於式(I)化合物或任一子群之式(I)化合物中的己烷二基。特別子群之式(I)化合物係為其中n係為4或5之化合物。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中(a)R1 係為－OR7 ，尤其是其中R7 係為C1－6 烷基，諸如甲基、乙基或第三 丁基(或第三丁基)或較佳係其中R7 係為氫；(b)R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，尤其是其中R8 係為C1－6 烷基或C3－7 環烷基，例如其中R8 係為甲基或環丙基；或其中R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，其中R8 係為環丙基；(c)R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，尤其是其中R8 係為經C1－6 烷基取代之C3－7 環烷基，較佳係其中R8 係為環丙基、環丁基、環戊基或環己基，其各經C1－4 烷基所取代，即經甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基或異丁基所取代；或(d)R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，其中尤其是R8 係為－NR8a R8b ，其中R8a 及R8b 各係獨立地為C1－6 烷基；或R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，其中R8a 及R8b 與其所連接之氮一起形成5－或6－員含氮飽和雜環性環，該環可進一步含有O、S或N原子，該N－原子可帶有氫原子或可帶有C1－6 烷基或C1－6 烷基羰基；諸如例如吡咯啶基、六氫吡啶基、嗎福啉 基、六氫吡基、4－C1－6 烷基六氫吡基或4－C1－6 烷基羰基六氫吡基；(e)R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，其中R8 尤其是經C1－4 烷基取代之環丙基，即經甲基、乙基、丙基或經異丙基取代之環丙基；(f)R1 係為－NHS(＝O)2 R8 ，其中尤其是R8 係為1－甲基環丙基(或1－甲基－1－環丙基)。本發明其他具體實施態樣有式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中(a)R2 係為氫；(b)R2 係為C1－6 烷基，尤其是甲基。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中(a)X係為N、C(X係經由雙鍵連接)或CH(X係經由單鍵連接)且R2 係為氫；(b)X係為C(X係經由雙鍵連接)且R2 係為C1－6 烷基，較佳係甲基。
本發明其他具體實施態樣有式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中(a)R3 係為氫；(b)R3 係為C1－6 烷基；(c)R3 係為C1－6 烷氧基C1－6 烷基或C3－7 環烷基。
本發明較佳具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R3 係為氫或C1－6 烷基；或R3 係為 氫或甲基；或R3 係為C1－4 烷基；或R3 係為甲基。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R4 係為C1－4 烷基；或其中R4 係為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第二 丁基、第三丁基、1－甲基－丁基、2－甲基－丁基、3－甲基－丁基、1,2－二甲基－丙基、戊基、1－甲基－戊基、2－甲基－戊基、3－甲基－戊基、4－甲基－戊基、1,1－二甲基－丁基、1,2－二甲基－丁基、1,3－二甲基－丁基、2,2－二甲基－丁基、3,3－二甲基－丁基、1,1,2－三甲基－丙基、1,2,2－三甲基－丙基或己基。於一具體實施態樣中，R4 係為甲基、乙基、丙基或異丙基。另一具體實施態樣中，R4 係為乙基。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R5 係為氫、鹵基、C1－6 烷基或多鹵基－C1－6 烷基；或其中R5 係為氫、C1－4 烷基或鹵基；或其中R5 係為氫，甲基、乙基、異丙基、第三 丁基、氟、氯、溴或三氟甲基。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R6 係為氫、C1－6 烷氧基或二C1－6 烷基胺基；或其中R6 係為氫、甲氧基或二甲基胺基；或其中R6 係為氫或甲氧基。
本發明具體實施態樣係為式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R5 及R6 與其所連接之碳原子一起形成5－或6－員不飽和或部分不飽和環，且其中該環可視情況包含一或兩個選自O及N之雜原子。一具體實施態樣係有關 式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R5 及R6 與其所連接之碳原子一起形成5－員部分不飽和環，其中該不飽和係介於帶有R5 及R6 之碳原子之間。環之其餘部分係飽和，且該環係包含一或兩個氧環原子。一特定具體實施態樣係有關式(I)之化合物或任一子群之式(I)化合物，其中R5 及R6 與其所連接之喹啉部分一起形成選自以下環之環系統：
式(I)化合物係由三種建構單元P1、P2、P3組成。建構單元P1進一步含有P1’尾部。以下化合物(I－i)及(I－j)中標有星號之羰基可為建構單元P2或建構單元P3之一部分。因化學之因素，其中X係為C之式(I)化合物的建構單元P2係併入連接於位置1’之羰基。
建構單元P1與P2、P2與P3及P1與P1’(當R1 係為－NH－SO2 R8 時)之連接包括形成醯胺鍵。單元P1及P3之連接包括雙鍵形成。建構單元P1、P2及P3用以製備化合物(I－i)或(I－j)之連接可依任何所示順序完成。其中一步驟係包括環化，以形成巨環。
以下展示有化合物(I－i)，其係為其中碳原子C7及C8藉雙鍵連接之式(I)之化合物，及化合物(I－j)，其係為其中碳原子C7及C8藉單鍵連接之式(I)之化合物。式(I－j)之化 合物可藉由還原巨環中之雙鍵而自對應之式(I－i)化合物製備。
應注意式(I－c)化合物中，介於單元P2及P3之間的醯胺鍵形成可於脲片段之兩個不同位置完成。第一個醯胺鍵涵蓋吡咯啶環之氮及相鄰之羰基(標有星號)。備擇之第二個醯胺鍵形成係包括帶有星號之羰基與－NHR3 基團的反應。建構單元P2及P3之間的兩種醯胺鍵形成皆可行。
下述合成方法係表示亦可應用於外消旋物、立體化學純異構物或終端產物或任何立體異構混合物。該外消旋物或立體化學混合物可於合成方法之任何階段分離成立體異構形式。於一具體實施態樣中，中間物及終端產物係具有前述式(I－a)及(I－b)化合物所述之立體化學。
為了簡化式(I)化合物或中間物之結構表示，基團 係以R9 表示且虛線係表示將該基團R9 連接於分子之其餘部分的鍵結。
於一具體實施態樣中，化合物(I－i)係藉由先形成醯胺鍵且接著於P3及P1之間形成雙鍵且同時環化成巨環而製備。
較佳具體實施態樣中，其中介於C7 與C8 間之鍵結係為雙鍵之化合物(I)，其係如前定義之式(I－i)化合物，可如以下反應流程圖所示般製備： 巨環之形成可於適當之金屬觸媒，諸如例如Miller,S.J.,Blackwell,H.E.,Grubbs,R.H.J.Am.Chem.Soc.118,(1996),9606－9614；Kingsbury,J.S.,Harrity,J.P.A.,Bonitatebus,P.J.,Hoveyda,A.H.,J.Am.Chem.Soc.121,(1999),791－799；及Huang等人，J.Am.Chem.Soc.121,(1999),2674－2678所記載之以Ru為主的觸媒；例如 Hoveyda－Grubbs觸媒存在下經由烯烴複分解反應進行。
可使用空氣安定性釕觸媒，諸如氯化雙(三環己基膦)－3－苯基－1H－茚－1－亞基釕(Neolyst M1® )或二氯化雙(三環己基膦)－[(苯硫基)亞甲基]釕(IV)。其他可使用之觸媒有Grubbs第一及第二代觸媒，即個別為亞苄基－雙(三環己基膦)二氯釕及(1,3－雙－(2,4,6－三甲基苯基)－2－亞咪唑啶基)二氯(苯基亞甲基)－(三環己基膦)釕。特別重要的是Hoveyda－Grubbs第一及第二代觸媒，其個別係為二氯(鄰－ 異丙氧苯基亞甲基)(三環己基膦)－釕(II)及1,3－雙－(2,4,6－三甲基苯基)－2－亞咪唑啶基)二氯－(鄰－ 異丙氧苯基亞甲基)釕。此反應亦可使用其他含有其他過渡金屬(諸如Mo)之觸媒。
複分解反應可於適當之溶劑中進行，該溶劑係諸如例如醚類，例如四氫呋喃(THF)、二烷；鹵化烴，例如二氯甲烷、CHCl3 、1,2－二氯乙烷及諸如此類者，烴類，例如甲苯。較佳具體實施態樣中，複分解反應係於甲苯中進行。此等反應係於高溫下在氮氛圍下進行。
式(I)之化合物，其中巨環中介於C7及C8間之鍵係為單鍵，即式(I－j)之化合物，可藉由將式(I－i)化合物中之C7－C8雙鍵還原自式(I－i)之化合物。此還原可藉著於貴金屬觸媒諸如例如Pt、Pd、Rh、Ru或Raney鎳存在下以氫進行催化氫化而進行。重要的是氧化鋁上之Rh。氫化反應較佳係於溶劑諸如例如醇(諸如甲醇、乙醇)或醚(諸如THF)或其混合物中進行。亦可添加水於此等溶劑或溶劑混合物中。
R1 基團可於合成之任一階段連接於P1建構單元，即如前所述於環化之前或之後或於環化及還原之前或之後。其中R1 係表示－NHSO2 R8 之式(I)化合物，該化合物係以式(I－k－1)表示，可藉由於兩部分之間形成醯胺鍵以將R1 基團連接於P1而製備。相同地，其中R1 係表示－OR7 之式(I)化合物，即化合物(I－k－2)，可藉由形成酯鍵將R1 基團連接於P1而製備。於一具體實施態樣中，該－OR7 基團係於如以下反應流程圖所述般合成式(I)化合物的最後步驟中導入，其中G係表示基團： 其中虛線係表示將基團G連接於分子之其餘部分的鍵結。
中間物(2a)可藉由醯胺形成反應諸如下述用以形成醯胺鍵之任一方法與胺(2b)偶合。尤其，(2a)可使用偶合劑處理，例如N,N’ －羰基－二咪唑(CDI)、N－乙基氧基羰基－2－乙 基氧基－1,2－二氫喹啉(EEDQ)、N－異丁基氧基－羰基－2－異丁基氧基－1,2－二氫喹啉(IIDQ)、1－乙基－3－(3’－二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDCI)或六氟磷酸苯并三唑－1－基－氧基－三－吡咯啶－鏻(市售名PyBOP®)於溶劑諸如醚(例如THF)或鹵化烴(例如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷)中，與所需之磺醯胺(2b)反應，較佳係於(2a)與偶合劑反應之後。(2a)與(2b)之反應較佳係於鹼例如三烷基胺(諸如三乙基胺或二異丙基乙基胺)或1,8－二氮雜雙環[5.4.0]十一碳－7－烯(DBU)存在下進行。中間物(2a)亦可轉化成活化形式，例如通式G－CO－Z之活化形式，其中Z係表示鹵基或活性酯之其餘部分，例如Z係為芳氧基，諸如苯氧基、對－硝基苯氧基、五氟苯氧基、三氯－苯氧基、五氯苯氧基及諸如此類者；或Z可為混合酐之其餘部分。於一具體實施態樣中，G－CO－Z係為醯基氯(G－CO－Cl)或混合酸酐(G－CO－O－CO－R或G－CO－O－CO－OR，後者中之R係為例如C1 －4 烷基，諸如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基、異丁基或苄基)。活化形式G－CO－Z與磺醯胺(2b)反應。
如前述反應中所述之(2a)中羧酸的活化可導致下式氮雜內酯中間物之內環化反應 其中X、R2 、R3 、R9 、n係如前文所述且其中立體中心可具有前述立體化學組態，例如(I－a)或(I－b)。中間物(2a－1)可使用習用方法自反應混合物單離，所單離之中間物(2a－1)隨後與(2b)反應或含有(2a－1)之反應混合物可與(2b)進一步反應而不單離(2a－1)。於一具體實施態樣中，其中與偶合劑之反應係於水不溶混溶劑中進行，含有(2a－1)之反應混合物可以水或以稍帶鹼性之水洗滌，以移除所有水溶性副產物。所得之洗滌溶液隨後可在無附加純化步驟下與(2b)反應。中間物(2a－1)之單離另一方面可提供特定優點，其中單離之產物在視情況進一步純化後可與(2b)反應，產生較少副產物且反應較易操作。
中間物(2a)可藉由酯形成反應與醇(2c)偶合。例如(2a)及(2c)在物理性(例如藉異沸水移除)或化學性(使用脫水劑)移除水的同時進行反應。中間物(2a)亦可轉化成活化形式G－CO－Z，諸如前文提及之活化形式，且隨之與醇(2c)反應。酯形成反應較佳係於鹼諸如鹼金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽(例如碳酸氫鈉及碳酸氫鉀)或三級胺(諸如在胺基形成反應所提及之胺，尤其是三烷基胺，例如三乙基胺)存在下進行。可使用於酯形成反應之溶劑係包含醚類，諸如THF；鹵化烴，諸如二氯甲烷、CH2 Cl2 ；烴類，諸如甲苯；極性非質子溶劑，諸如二甲基甲醯胺(DMF)、二甲基亞碸(DMSO)、二甲基乙醯胺(DMA)；及諸如此類溶劑。
其中R3 係為氫之式(I)化合物，該化合物係以(I－l)表示，亦可如以下反應流程圖藉由自氮經保護之中間物(3a)移除 保護基PG而製備。保護基PG尤其是任一種下文提及之氮保護基且可使用亦於下文提及之方法移除：
前述反應中之起始物質(3a)可依以下用以製備式(I)化合物之方法製備，但使用其中基團R3 係為PG之中間物。
式(I)化合物亦可藉由中間物(4a)與中間物(4b)如以下反應流程圖所述般地反應而製備，其中各種基團係具有前述意義：
(4b)中之Y係表示羥基或脫離基LG，諸如鹵基，例如溴基或氯基或芳基磺醯基，例如甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基或甲苯磺酸酯基及諸如此類者。
於一具體實施態樣中，(4a)與(4b)之反應係為O－芳基化反應且Y係表示脫離基。此反應可依E.M.Smith等人(J.Med.Chem.(1988),31,875－885)所述方法進行。尤其，此反應係於鹼(較佳係強鹼)存在下於反應惰性溶劑(例如形成醯胺鍵時所提及之溶劑中之一)中進行。。
特定具體實施態樣中，起始物質(4a)係於強至足以自羥基抽出氫之鹼(例如鹼金屬鹵化物之鹼諸如LiH或氫化鈉或鹼金屬醇鹽諸如甲醇或乙醇鈉或鉀、第三丁醇鉀)存在下於反應惰性溶劑(偶極非質子溶劑，例如DMA、DMF及諸如此類者)中與(4b)反應。形成之醇合物與芳基化劑(4b)反應，其中Y係為適當之前述脫離基。使用此類O－芳基化反應將(4a)轉化成(I)不改變在帶有羥基之碳上的立體化學組態。
或者，(4a)與(4b)之反應亦可經由Mitsunobu反應進行(Mitsunobu,1981,Synthesis,January,1－28；Rano等人，Tetrahedron Lett.,1995,36,22,3779－3792；Krchnak等人，Tetrahedron Lett.,1995,36,5,6193－6196；Richter等人，Tetrahedron Lett.,1994,35,27,4705－4706)。此反應係包含於三苯膦及活化劑(諸如偶氮基羧酸二烷酯，例如偶氮基二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮基二甲酸二異丙酯(DIAD)或諸如此類者)存在下以其中Y係為羥基之(4b)處理中間物(4a)。該Mitsunobu反應改變在帶有羥基之碳上的立體化學組態。
可將(4b)基團導至(4a)上之另一類型反應係為Brosylate反應，使(4a)與對－溴苯磺醯基在三乙基胺或二異丙基三乙 基胺及THF存在下反應，之後添加其中Y係為羥基之(4b)以提供化合物(I)。如同Mitsunobu反應，在帶有羥基之碳上的立體化學組態亦改變。
或者，為製備式(I)化合物，先形成建構單元P2及P1之間的醯胺鍵，之後將P3建構單元偶合至P1－P2中之P1部分，之後在環閉合之同時於P2－P1－P3之P3及P2部分之間進行胺基甲酸酯或酯鍵形成。
再另一備擇合成方法係於建構單元P2及P3之間形成醯胺鍵，之後將建構單元P1偶合於P3－P2中之P3部分，且於環閉合之同時於P1－P3－P2之P1與P2之間進行最後醯胺鍵形成。
建構單元P1及P3可連接於P1－P3序列。若需要，連接P1及P3之雙鍵可被還原。所形成之P1－P3序列，不論還原與否，皆可偶合於建構單元P2且所形成之序列P1－P3－P2隨後藉形成醯胺鍵而環化。
任一先前研究之建構單元P1及P3皆可經由雙鍵形成而連接，例如藉由下文所述之烯烴複分解反應或Wittig型反應。若需要，則所形成之雙鍵可被還原，如同前述將(I－i)轉化成(I－j)。該雙鍵亦可在稍後階段還原，即在添加第三種建構單元之後或在巨環形成之後。建構單元P2及P1係藉醯胺鍵形成來連接且P3及P2係藉胺基甲酸酯或醯胺形成而連接。
尾部P1’可於合成式(I)化合物之任一階段鍵結於P1建構單元，例如在偶合建構單元P2及P1之前或之後；在將 P3建構單元偶合於P1之前或之後；或在環閉合之前或之後。
可先製備個別建構單元且隨後偶合或者，可在所需分子組成之稍後階段偶合且修飾建構單元之前驅物。各建構單元中之官能性可加以保護來避免副反應。
醯胺鍵之形成可使用標準方法進行，諸如胜肽合成中用以偶合胺基酸的方法。後者包括一種反應物之羧基與另一種反應物之胺基脫水偶合，形成連接之醯胺鍵。醯胺鍵形成可藉由於偶合劑存在下使起始物質反應或藉由將羧基官能性轉化成活性形式(諸如活性酯、混合酐或羧酸氯化物或溴化物)而進行。該等偶合反應之一般描述可參見胜肽化學之一般書籍，例如M.Bodanszky,“Peptide Chemistry”,2nd rev ed.,Springer－Verlag,Berlin,Germany,(1993)。
醯胺鍵形成之偶合反應實例包括疊氮化物方法、混合碳酸－羧酸酐(氯甲酸異丁酯)方法、碳化二亞胺(二環己基碳化二亞胺、二異丙基碳化二亞胺或水溶性碳化二亞胺諸如N －乙基－N '－[(3－二甲基胺基)丙基]碳化二亞胺)方法、活性酯方法(例如對 －硝基苯基、對 －氯苯基、三氯苯基、五氯－苯基、五氟苯基、N －羥基琥珀醯亞胺及諸如此類之酯)、Woodward試劑K－方法、1,1－羰基二咪唑(CDI或N,N'－羰基－二咪唑)方法、磷試劑或氧化－還原方法。其中有些方法可藉由添加適當之觸媒而促進，例如在碳化二亞胺方法中藉由添加1－羥基苯并三唑、DBU或4－DMAP(4－二甲基胺基吡啶)。其他偶合劑有六氟磷酸(苯井三唑－1－基氧基)－三－(二甲基胺基) 鏻，單獨使用或存有1－羥基－苯并三唑或4－DMAP；或四氟硼酸2－(1H－苯并三唑－1－基)－N,N,N',N'－四－甲基脲鎓或六氟磷酸O－(7－氮雜苯并三唑－1－基)－N,N,N',N'－四甲基脲鎓。此等偶合反應可於溶液(液相)或固相中進行。
較佳醯胺鍵形成係採用N－乙基氧基羰基－2－乙基－氧基－1,2－二氫喹啉(EEDQ)或N－異丁基氧基－羰基－2－異丁基氧基－1,2－二氫喹啉(IIDQ)進行。與典型酸酐方法不同地，EEDQ及IIDQ不需要鹼，亦不需要低反應溫度。一般，該方法係包括使等莫耳數量之羧基與胺組份於有機溶劑(可使用各式各樣之溶劑)中反應。之後添加過量之EEDQ或IIDQ，且使反應於室溫下攪拌。
偶合反應較佳係於惰性溶劑諸如鹵化烴(例如二氯甲烷、氯仿)、偶極非質子溶劑諸如乙腈、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、DMSO、六甲基磷酸三醯胺(HMPT)、醚類諸如THF中進行。
在許多情況下，偶合反應係於適當之鹼存在下完成，該鹼係諸如三級胺，例如三乙基胺、二異丙基乙基胺(DIPEA)、N －甲基－嗎福啉、N －甲基吡咯啶、4－DMAP或DBU。反應溫度可介於0℃及50℃範圍內且反應時間可介於15分鐘及24小時範圍內。
建構單元中接合之官能基可加以保護以避免形成不需要之鍵結。可使用之適當保護基係例如Greene,“Protective Groups in Organic Chemistry”,John Wiley & Sons,New York(1999)及“The Peptides：Analysis,Synthein,Biology”, Vol.3,Academic Press,New York(1987)所列。
羧基可保護成酯，其可切除產生羧酸。可使用之保護基包括1)烷基酯，諸如甲基、三甲基矽烷基及第三 丁基；2)芳基烷基酯，諸如苄基及經取代之苄基；或3)可藉弱鹼或弱還原方式切除之酯，諸如三氯乙基及苯醯甲基酯。
胺基可藉各種N－保護基加以保護，諸如：1)醯基，諸如甲醯基、三氟乙醯基、酞醯基及對－ 甲苯磺醯基；2)芳族胺基甲酸酯基，諸如苄基氧基羰基(Cbz或Z)及經取代之苄基氧基羰基，及9－茀基甲基氧基羰基(Fmoc)；3)脂族胺基甲酸酯基，諸如第三 丁基氧基羰基(Boc)、乙氧基羰基、二異丙基甲氧基－羰基及烯丙基氧基羰基；4)環狀烷基胺基甲酸酯基，諸如環戊基氧基羰基及金剛烷基氧基羰基；5)烷基諸如三苯基甲基、苄基或經取代之苄基諸如4－甲氧基苄基；6)三烷基矽烷基諸如三甲基矽烷基或第三丁基二甲基矽烷基；及7)含硫醇之基團，諸如苯硫基羰基及二硫雜琥珀醯基。重要之胺基保護基係為Boc及Fmoc。
胺基保護基較佳係於後續偶合步驟之前切除。N－保護基之移除可依技術界已知之方法完成。使用Boc基團時，所選擇之方法係為純或在二氯甲烷中之三氟乙酸或在二烷或乙酸乙酯中之HC1。形成之銨鹽隨後在偶合之前或於原 位以鹼性溶液(諸如緩衝劑水溶液或在二氯甲烷或乙腈或二甲基甲醯胺中之三級胺)中和。使用Fmoc基團時，所選擇之試劑係為在二甲基甲醯胺中之六氫吡啶或經取代六氫吡啶，但可使用任何二級胺。脫保護係於介於0℃及室溫之間的溫度進行，通常約15至25℃，或20至22℃。
其他可干擾建構單元之偶合反應的官能基亦可加以保護。例如羥基可加以保護成為苄基或經取代之苄基醚類，例如4－甲氧基苄基醚，苄醯基或經取代之苄醯基酯，例如4－硝基苄醯基酯或使用三烷基矽烷基(例如三甲基矽烷基或第三 丁基二甲基矽烷基)。
其他胺基可藉可選擇性切除之保護基來加以保護。例如當使用Boc作為α－胺基保護基時，適用以下側鏈保護基：對－甲苯磺醯基(甲苯磺醯基)部分可用以保護其他胺基；苄基(Bn)醚類可用以保護羥基；且苄基酯類可用以保護其他羧基。或當選擇Fmoc進行α－胺基保護時，通常可接受以第三 丁基為主之保護基。例如，Boc可使用於其他胺基；第三 丁基醚使用於羥基；而第三丁基酯使用於其他羧基。
可於合成方法之任一階段移除任何保護基，但較佳係在完成巨環之建構後移除不涉及反應步驟之任何官能性的保護基。保護基之移除可依任何由所選擇保護基指定之方式完成，該方式係熟習此技術者所熟知。
其中X係為N之式(1a)中間物，該中間物係以式(1a－1)表示，可自中間物(5a)開始製備，其與烯胺(5b)於羰基導入劑存在下如以下流程圖所述般地進行反應。
羰基(CO)導入劑係包括光氣或光氣衍生物，諸如CDI及諸如此類者。於一具體實施態樣中，(5a)係於適當之鹼及溶劑存在下CO導入劑反應，該鹼及溶劑可為前述醯胺形成反應所使用之鹼及溶劑。特定具體實施態樣中，該鹼係為碳酸氫鹽，例如NaHCO3 或三級胺諸如三乙基胺及諸如此類者，且溶劑係為醚或鹵化烴，例如THF、CH2 Cl2 、CHCl3 及諸如此類者。之後，如前述流程圖般添加胺(5b)以得到中間物(1a－1)。使用類似反應條件之備擇路徑係包括先使CO導入劑與烯胺(5b)反應且隨之使所形成之中間物與(5a)反應。
中間物(1a－1)可備擇地如下製備：
PG1 係為O－保護基，其可為任何本發明所提及之基團，尤其是苄醯基或經取代之苄醯基，諸如4－硝基苄醯基。後一種情況下，此基團可藉由於包含水及水溶性有機溶劑諸如脂族醇(甲醇、乙醇)及THF之水性介質中與鹼金屬氫氧化物(LiOH、NaOH、KOH)反應而移除，尤其是當PG1 係為4－硝基－苄醯基時使用LiOH。
中間物(6a)係類似前述者於羰基導入劑存在下與(5b)反應，且此反應產生中間物(6c)。此等中間物加以脫保護，尤其是使用前述反應條件。形成之醇(6d)係如前文針對(4a)與(4b)反應所述般地與中間物(4b)反應，此反應產生中間物(1a－1)。
其中X係為C的式(1a)之中間物，該中間物係以式(1a－2)表示，可藉由醯胺形成反應自中間物(7a)開始製備，其係如以下反應流程圖所示般，使用製備醯胺之反應條件(諸如前述者)與胺(5b)反應。
中間物(1a－1)可備擇地如下製備：
PG1 係為前述之O－保護基。可使用如同前述之反應條件：前述之醯胺形成、如保護基描述中之移除PG1 及如(4a)與試劑(4b)反應般地導入R9 。
式(2a)之中間物可藉由先將開鏈醯胺(9a)環化成巨環酯(9b)，接著如下將其轉化成(2a)而製備：
PG2 係為羧基保護基，例如前述羧基保護基中之一，尤其是C1－4 烷基或苄基，例如甲基、乙基或第三丁基。(9a)成為(9b)之反應係為複分解反應且係如前述般進行。基團PG2 係依亦描述於前文之方法移除。當PG2 係為C1－4 烷基時，其係藉著於水性溶劑(例如酯族醇/水混合物)中以鹼水解移除，例如使用NaOH或較佳之LiOH。苄基可藉三甲基矽烷基溴(TMSBr)移除。
備擇合成中，中間物(2a)可如下製備：
PG1 基團係選擇使得其相對於PG2 可選擇性地切除。PG2 可為例如甲基或乙基酯，其可藉著於水性介質中以鹼金屬氫氧化物處理而移除，此情況PG1 例如係為苄基。PG2 可為可在酸性條件下移除之第三丁基或PG1 可為可藉氫氧化鈉或氫氧化鋰處理而移除之苄醯基或PG1 可為可藉二氯二氰基醌(DDQ)或TMSBr移除之視情況經取代的苄基(例如對－甲氧基苄基)。PG1 亦可為乙氧基甲基，其可於DIPEA及二氯甲烷(DCM)存在下以氯甲基乙基醚導入，且可於THF/甲醇/水存在下以鹽酸切除。
首先，中間物(10a)係環化成巨環酯(10b)，後者藉移除PG1 基團而脫保護成為(10c)，此與中間物(4b)反應，之後移除羧基保護基PG2 。該環化、PG1 及PG2 之脫保護及與(4b) 之偶合係如前文所述。
該R1 基團可於合成之任一階段導入，或為前述最後步驟或較早，在巨環形成之前。以下流程圖中，導入係為－NH－SO2 R8 或－OR7 之基團R1 (其係如前文所述)：
前述流程圖中，PG2 係如前定義且L1 係為P3基團 其中n及R3 係如前定義且當X係為N時，L1 亦可為氮－保護基(PG，如前定義)且當X係為C時，L1 亦可為基團－COOPG2a ，其中基團PG2a 係為如同PG2 之羧基保護基，但其中PG2a 對於PG2 可選擇性切除。於一具體實施態樣中，PG2a 係為第三丁基且PG2 係為甲基或乙基。
其中L1 係表示基團(b)之中間物(11c)及(11d)係對應於 中間物(1a)且可如前文所述般地進一步處理。
P1及P2建構單元之偶合
P1及P2建構單元係依前述方法使用醯胺形成反應連接。P1建構單元可具有羧基保護基PG2 (如同(12b))或可已經連接於P1’基團(如同(12c))。L2 係為N－保護基(PG)或基團(b)，如前文所述。L3 係為羥基、－OPG1 或如前文所述之基團－O－R9 。在任一以下反應流程圖中，L3 係為羥基，在每一反應步驟之前，其可加以保護成為基團－OPG1 ，若需要，隨後脫保護回到游離羥基官能性。如同前文所述，該羥基官能性可轉化成基團－O－R9 。
前述流程圖之方法中，環丙基胺基酸(12b)或(12c)係依前述方法以醯胺鍵之形成偶合於P2建構單元(12a)之酸官能性。製得中間物(12d)或(12e)。後者中，L2 係為基團(b)， 形成之產物係為P3－P2－P1序列，涵蓋先前反應流程圖中之某些中間物(11c)或(11d)。使用適於所使用保護基之條件移除(12d)中之酸保護基，接著如前述般與胺H2 N－SO2 R8 (2b)或與HOR7 (2c)偶合，再次產生中間物(12e)，其中－COR1 係為醯胺或酯基。當L2 係為N－保護基時，其可移除產生中間物(5a)或(6a)。於一具體實施態樣中，此反應中之PG係為BOC基團且PG2 係為甲基或乙基。當另外L3 係為羥基時，起始物質(12a)係為Boc－L－羥基脯胺酸。特定具體實施態樣中，PG係為BOC，PG2 係為甲基或乙基且L3 係為－O－R9 。
於一具體實施態樣中，L2 係為基團(b)且此等反應包括將P1偶合於P2－P3，其產生前述中間物(1a－1)或(1a)。另一具體實施態樣中，L2 係為N－保護基PG，其係如前文所述，而偶合反應產生中間物(12d－1)或(12e－1)，使用前述反應條件自其移除基團PG，個別得到中間物(12f)或(12g)，其涵蓋如前文所述之中間物(5a)及(6a)：
於一具體實施態樣中，前述流程圖中之基團L3 係表示基團－O－PG1 ，其可導至其中L3 係為羥基之起始物質(12a)上。此情況下PG1 係選擇使得其相對於係為PG之基團L2 可選擇性地切除。
相同地，其中X係為C之P2建構單元，其係為環戊烷或環戊烯衍生物，可如以下流程圖所述般地連接於P1建構單元，其中R1 、R2 及L3 係如前文所述且PG2 及PG2a 係為羧基保護基。PG2a 一般係選擇使得其相對於基團PG2 可選擇性地切除。移除(13c)中之PG2 基團產生中間物(7a)或(8a)，其可如前文所述般地與(5b)反應。
特定具體實施態樣中，當X係為CH時，R2 係為H，且當X及帶有R2 之碳係由單鍵連接時(P2係為環戊烷部分)，PG2a 及L3 一起形成鍵結且P2建構單元係由下式表示：
雙環性酸(14a)係個別如同前文(14b)及(14c)所述般與(12b)或(12c)反應，其中內酯係開鏈產生中間物(14c)及(14e)。內酯可使用酯水解方法開鏈，例如使用前文鹼移除(9b)中之PG1 基團所述之反應條件，尤其是使用鹼性條件，諸如鹼金屬氫氧化物，例如NaOH，KOH，尤其是LiOH。
中間物(14c)及(14e)可如下文所述般地進一步處理。
P3及P2建構單元之偶合
就具有吡咯啶部分之P2建構單元而言，P3及P2或P3及P2－P1建構單元係依前述用以偶合(5a)與(5b)之方法使用胺基甲酸酯形成反應連接。用以偶合具有吡咯啶部分之P2單元的一般方法係呈現於以下反應流程圖中，其中L3 係如前文所述且L4 係為基團－O－PG2 、基團
於一具體實施態樣中，(15a)中之L4 係為基團－OPG2 ，可移除PG2 基團且形成之酸與環丙基胺基酸(12b)或(12c)偶合，產生中間物(12d)或(12e)，其中L2 係為基團(d)或(e)。
使P3單元與P2單元或與P2－P1單元(其中P2係為環戊烷或環戊烯)偶合之一般方法係顯示於以下流程圖。L3 及L4 係如前文所述。
特定具體實施態樣中，L3 及L4 一起可形成如(14a)中之內酯橋，P3單元與P2單元之偶合如下：
雙環性內酯(14a)於醯胺形成反應中與(5b)反應成醯胺(16c)，其中該內酯橋係開鏈成(16d)。醯胺形成及內酯開鏈反應所使用之反應條件係如前文或下文所述。中間物(16d)又可如前述般偶合於P1基團。
前述流程圖中之反應係使用如同前述(5a)、(6a)、(7a)或(8a)與(5b)之反應的方法進行，尤其是前述其中L4 係為基團(d)或(e)之反應係對應於前述(5a)、(6a)、(7a)或(8a)與(5b)之反應。
用以製備式(I)化合物之建構單元P1、P1’、P2及P3可自技術界已知之中間物開始製備。以下更詳細地描述數種合成。
可先製備個別建構單元且隨後偶合，或者，可在所需分子組成之稍後階段偶合且修飾建構單元之前驅物。
各建構單元中之官能性可加以保護來避免副反應。
P2建構單元之合成
P2建構單元係含有經基團－O－R9 取代之吡咯啶、環戊烷或環戊烯部分。
含有吡咯啶部分之P2建構單元可自市售羥基脯胺酸衍生。
含有環戊烷環之P2建構單元的製備可如以下流程圖所示般進行。
雙環性酸(17b)可例如自3,4－雙(甲氧基－羰基)－環戊酮(17a)製備，如Rosenquist等人於Acta Chem.Scand.46(1992)1127－1129中所述。此方法之第一步驟包括於溶劑(諸如甲醇)中以還原劑(如硼氫化鈉)還原該酮基，接著將酯水解且最後使用內酯形成方法環閉合成雙環性內酯(17b)，尤其是於弱鹼(諸如吡啶)存在下使用乙酸酐。(17b)中之羧酸官能性可隨之藉著導入如前文所述之適當羧基保護基(諸如基團PG2 )而加以保護，因而提供雙環性酯(17c)。基團PG2 ，尤其是酸不安定性，諸如第三丁基，係例如藉著於酸或路易士酸存在下以異丁烯處理而導入。(17c)使用 前述反應條件之內酯開鏈，尤其是使用氫氧化鋰，產生酸(17d)，其可進一步使用於與P1建構單元之偶合反應中。(17d)中之游離酸亦可加以保護，較佳係使用對於PG2 可選擇性切除之酸保護基PG2a ，該羥基官能性可轉化成基團－OPG1 或轉化成基團－O－R9 。移除基團PG2 時所得之產物係為中間物(17g)及(17i)，其係對應於前述中間物(13a)或(16a)。
具有特定立體化學之中間物可藉著於前述反應序列中離析中間物而製備。例如(17b)可依技術界已知方法離析，例如藉由以光學活性鹼作用之鹽形式或對掌性層析，形成之立體異構物可如前述般進一步處理。(17d)中之OH及COOH基團係位於順式位置。可於導入OPG1 或O－R9 之反應中使用逆轉立體化學之特定試劑，逆轉帶有OH功能之碳的立體化學，而製備反式類似物，諸如例如藉由應用Mitsunobu反應。
於一具體實施態樣中，中間物(17d)係偶合於P1單元(12b)或(12c)，該偶合反應對應於(13a)或(16a)與相同P1單元使用相同條件之偶合。隨後如前文所述般地導入－O－R9 取代基，接著移除酸保護基PG2 ，產生中間物(8a－1)，其係中間物(7a)之子群或中間物(16a)之一部分。移除PG2 之反應產物可進一步偶合於P3建構單元。於一具體實施態樣中，(17d)中之PG2 係為可於酸性條件下移除之第三丁基，例如使用三氟乙酸。
不飽和P2建構單元，即環戊烯環，可如以下流程圖所說明般地製備。
3,4－雙(甲氧基羰基)環戊酮(17a)如Dolby等人於J.Org.Chem.36(1971)1277－1285中所述之溴化消去反應，接著以還原如硼氫化鈉還原酮官能性，提供環戊烯醇(19a)。於溶劑(如二烷與水之混合物)中使用例如氫氧化鋰之選擇性酯水解提供經羥基取代之單酯環戊烯醇(19b)。
不飽和P2建構單元，其中R2 亦可非氫，可如以下流程圖所示般製備。
市售3－甲基－3－丁烯－1－醇(20a)之氧化，尤其是藉由氧化劑如氯鉻酸吡啶鎓之氧化，產生(20b)，其例如於甲醇中以乙醯氯處理轉化成對應之甲基酯，接著以溴進行溴化反應，產生α－溴酯(20c)。後者隨後與烯基酯(20e)縮合，該酯係藉由酯形成反應自(20d)製得。(20e)中之酯較佳係為可例如藉由於鹼(如二甲基胺基吡啶)存在下，以二碳酸二－第三丁酯處理，而自對應之市售酸(20d)製備之第三丁基酯。中間物(20e)係於溶劑(如THF)中以諸如二異丙胺化鋰之鹼處理，且與(20c)反應產生烯基二酯(20f)。(20f)藉如前文所述般進行之烯烴複分解反應環化，提供環戊烯衍生物(20g)。(20g)之立體選擇性環氧化可使用Jacobsen不對稱環氧化方法進行，以得到環氧化物(20h)。最後，例如藉由添加鹼，尤其是DBN(1,5－二氮雜雙環－[4.3.0]壬－5－烯)，於鹼性條件下進行環氧化物開鏈反應，產生醇(20i)。中間物(20i)中之雙鍵可視情況例如使用如碳上鈀之觸媒藉由催化氫化還原，產生對應之環戊 烷化合物。可移除該第三丁基酯以產生對應之酸，此酸隨後偶合於P1建構單元。
該－R9 基團可於本發明化合物合成之任一適當階段導至吡咯啶、環戊烷或環戊烯環上。其中一份研究係先將－R9 基團導至該環，之後添加其他所需之建構單元，即P1(視情況具有P1’尾部)及P3，接著形成巨環。另一份研究係使不帶有－O－R9 取代基之建構單元P2與各個P1及P3偶合，並於巨環形成之前或之後添加－R9 基團。在後一種方法中，P2部分係具有羥基，其可藉由羥基保護基PG1 保護。
R9 基團可如同前述自(4a)開始合成(I)般，藉由經羥基取代之中間物(21a)與中間物(4b)反應而導至建構單元P2。此等反應係表示於以下流程圖，其中L2 係如前文所述且L5 及L5a 係彼此獨立地表示羥基、羧基保護基－OPG2 或－OPG2a 或L5 亦可表示P1基團，諸如前文所述之基團(d)或(e)，或L5a 亦可表示P3基團，諸如前文所述之基團(b)。基團PG2 及PG2a 係如前文所述。當基團L5 及L5a 係為PG2 或PG2a 時，其係選擇使得每一基團相對於彼此係選擇性可切除。例如L5 及L5a 中之一可為甲基或乙基且另一者為苄基或第三丁基。
於一具體實施態樣中，在(21a)中，L2 係為PG且L5 係為－OPG2 或在(21d)中，L5a 係為－OPG2 且L5 係為－OPG2 ，而PG2 基團係如前述般移除。
或者，當操作經羥基取代之環戊烷類似物時，喹啉取代基可經由類似Mitsunobu反應藉化合物(2a')之羥基與所需之醇於三苯膦及活化劑如DEAD、DIAD或諸如此類者存在下反應而導入。
另一具體實施態樣中，基團L2 係為BOC，L5 係為羥基且起始物質(21a)係為市售BOC－羥基脯胺酸或其任何其他立體異構形式，例如BOC－L－羥基脯胺酸，尤其是後者之反式異構物。當(21b)中之L5 係為羧基－保護基時，其可依前述方法移除成為(21c)。再另一具體實施態樣中，(21b－1)中之PG係為Boc且PG2 係為低碳烷基酯，尤其是甲基或乙基酯。後者酯成為酸之水解可藉標準方法完成，例如於甲醇中使用鹽酸之酸水解或使用鹼金屬氫氧化物諸如NaOH，尤其是使用LiOH。另一具體實施態樣中，經羥基取代之環戊烷或環戊烯類似物(21d)係轉化成(21e)，其在L5 及L5a 係為－OPG2 或－OPG2a 時，可藉由移除基團PG2 轉化成對應之酸(21f)。移除(21e－1)中之PG2a 產生類似之中間物。
中間物Y－R9 (4b)可依技術界已知方法使用已知起始物質製備。以下更詳細描述該等異構物之數種合成路徑。例如前述中間物喹啉之製備係顯示於以下流程圖中。
苯胺(22a)與亞胺醚(22b)之縮合產生化合物(22c)。該縮 合較佳係於溶解該亞胺醚之溶劑(例如乙醇或甲醇)中進行。喹啉(22d)之形成係藉化合物(22c)之新電子性芳族環化達成。此親電子性芳族環化一般係於高溫(尤其是約或高於200℃之溫度)於可在200℃或更高溫沸騰之溶劑(例如二苯醚)中進行。
P1建構單元之合成
製備P1片段所使用之環丙烷胺基酸係市售或可使用技術界已知之方法製備。
尤其是胺基乙烯基－環丙基乙基酯(12b)可根據WO 00/09543所述方法或以下流程圖所說明般製得，其中PG2 係為前述羧基保護基：
於鹼存在下以1,4－二鹵基－丁烯處理市售或可輕易得到之亞胺(23a)，在水解後產生環丙基胺基酸(12b)，其具有對羧基成順式之烯丙基取代基。離析鏡像異構混合物(12b)產生(12b－1)。離析係使用技術界已知之方法進行，諸如酶分離；以對掌性酸結晶；或化學衍化；或藉由對掌性管柱層 析。中間物(12b)或(12b－1)可如前述般偶合於適當之P2衍生物。
用以製備其中R1 係為－OR7 或－NH－SO2 R8 的通式(I)化合物之P1建構單元可藉由胺基酸(24a)個別與適當之醇或胺於酯或醯胺形成之標準條件下反應而製備。如以下反應流程圖所述，N－經保護環丙基胺基酸(26a)係藉著導入N－保護基PG且移除PG2 而製備，且胺基酸(24a)係轉化成醯胺(12c－1)或酯(12c－2)，其係中間物(12c)之子群，其中PG係如前文所述。
(24a)與磺醯胺(2b)之反應係為醯胺形成方法。類似之與(2c)反應係為酯形成反應。兩者皆可依前述方法進行。此反應產生中間物(24b)或(24c)，藉標準方法(諸如前述者)自其移除胺基保護基。此又個別產生所需之中間物(12c－1)及(12c－2)。起始物質(26a)可藉由先導入N－保護基PG且隨之移除基團PG2 而自前述中間物(12b)製備。
於一具體實施態樣中，(24a)與(2b)之反應係藉著於溶劑 (如THF)中以偶合劑(例如CDI或諸如此類者)處理起始胺基酸，接著於鹼(諸如DBU)存在下與(2b)反應而完成。
中間物(12c－1)或(12c－2)又可如前述般地偶合於適當之脯胺酸、環戊烷或環戊烯衍生物。
P3建構單元之合成
P3建構單元係市售或可依熟習此技術者已知之方法製備。此等方法中之一係顯示於以下流程圖中且使用單醯化之胺，諸如三氟乙醯胺或經Boc－保護之胺。
前述流程圖中，R與CO基團一起形成N－保護基，尤其是R係為第三丁氧基、三氟甲基；R3 及n係如前定義且LG係為脫離基，尤其是鹵素，例如氯或溴。
單醯化之胺(25a)係以強鹼(諸如氫化鈉)處理，之後與試劑LG－C5－8 烯基(25b)，尤其是鹵基C5－8 烯基反應，形成對應之經保護之胺(25c)。(25c)脫保護產生(5b)，其係為建構單元P3。脫保護係視官能基R而定，因此若R係為第三丁氧基，則對應之經Boc－保護之胺的脫保護可使用酸性處理(例如三氟乙酸)完成。或者，當R係為例如三氟甲基時，R－CO基團之移除係使用鹼(例如氫氧化鈉)完成。
以下流程圖說明另一種製備P3建構單元之方法，即一 級C5－8 烯基胺之Gabriel合成，其可使用鹼諸如NaOH或KOH且使用(25b)處理酞醯亞胺(26a)(其係如前文所述)，接著將中間物N－烯基醯亞胺水解生成一級C5－8 烯基胺(5b－1)。
前述流程圖中，n係如前定義。
式(I)之化合物可依技術界已知之官能基轉變反應彼此轉化。例如胺基可N－烷基化，硝基還原成胺基，鹵原子可交換成另一鹵基。
純立體化學異構形式之式(I)化合物可藉由應用技術界已知之方法而製得。非鏡像異構物可藉物理性方法分離，諸如選擇性結晶及層析技術，例如逆流分布、液體層析及諸如此類者。
式(I)化合物可製得為鏡像異構物之外消旋混合物，其可依技術界已知之離析方法彼此分離。足夠鹼性或酸性之外消旋式(I)之化合物可藉由與適當之對掌性酸、個別地與對掌性鹼反應，而轉化成對應之非鏡像異構鹽形式。該非鏡像異構鹽形式隨後例如藉由選擇性或分步結晶而分離，且藉鹼或酸自彼釋出鏡像異構物。分離鏡像異構形式之式(I)化合物的備擇方式係包括液體層析，尤其是使用對掌性靜態相之液體層析。該純立體化學異構形式亦可自對應之純 立體化學異構形式的適當起始物質衍化，其限制條件為反應係立體選擇性地發生。較佳，若需要特定立體異構物，則該化合物可藉立體選擇性製備方法合成。此等方法可較佳地採用鏡像異構純之起始物質。
另一態樣中，本發明係有關一種醫藥組成物，其包含治療有效量之本發明所述式(I)化合物或本發明所述之式(I)化合物任一子群的化合物及醫藥上可接受之載劑。治療有效量在本文中係為足以在受感染個體或具有受感染風險之個體預防地作用於、安定化或減低病毒感染之量，尤其是HCV病毒感染。再另一態樣中，本發明有關一種製備前述醫藥組成物之方法，其包含細密地混合醫藥上可接受之載劑與治療有效量之本發明所述式(I)化合物或本發明所述之式(I)化合物任一子群的化合物。
因此，本發明化合物或其任何子群可調配成各種供投藥使用之醫藥形式。至於適當之組成物，可列出所有一般使用於全身投予藥物之組成物。製備本發明醫藥組成物時，有效量之作為活性成份的特定化合物(視情況為加成鹽形式或金屬錯合物)與醫藥上可接受之載劑結合成細密之摻合物，該載劑可視投藥所需之製劑形式而採用各式各樣之形式。期望此等醫藥組成物係為適於(尤其是)經口、直腸、經皮或藉非經腸注射投藥之單元劑型。例如製備經口劑型之組成物時，可採用任一種一般醫藥介質，若為經口液體製劑諸如懸浮液、糖、酊劑、乳液及溶液，則為諸如例如水、二醇、油、醇及諸如此類者；或若為粉末、丸劑、膠 囊及錠劑，則為固體載劑，諸如澱粉、糖、高嶺土、潤滑劑、黏合劑、崩解劑及諸如此類者。因其投藥簡易，故錠劑及膠囊代表列佳之經口劑量單元形式，此情況顯然採用固體醫藥載劑。就非經腸組成物而言，載劑通常包含無菌水，至少大部分是，唯可包括其他成份，例如用以增加溶解度。可製備例如可注射溶液，其中載劑係包含鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水與葡萄糖溶液之混合物。亦可製備可注射懸浮液，此情況下，可採用適當之液體載劑、懸浮劑及諸如此類者。亦包括固體形式製劑，其預期在使用前即時轉化成液體形式製劑。適於經皮投藥之組成物中，載劑係視情況包含滲透促進劑及/或適當之潤濕劑，視情況結合有低比例之具有任何性質的適當添加劑，該添加劑對皮膚不引發明顯負面影響。
本發明化合物亦可藉由技術界用以經由此方式投藥之方法及調配物經口吸入或吹入而投藥。因此，本發明化合物通常可於溶液、懸浮液或乾粉形式投藥於肺部，以溶液較佳。發展用以經口吸入或吹入輸送溶液、懸浮液或乾粉之任何系統皆適用於本發明化合物之投藥。因此，本發明亦提供一種適於藉吸入或吹入經口投藥之醫藥組成物，其包含式(I)化合物及醫藥上可接受之載劑。較佳係本發明化合物經由吸入霧化或氣溶膠化劑量之溶液而投藥。
特佳係將前述醫藥組成物調配成單元劑型，以使投藥簡便且劑量均勻。本發明所使用之單元劑型係表示適於作為單元劑量之物理上不連續單元，每一單元各含有經計算可 產生所需之療效的預定量活性成份且結合有所需之醫藥載劑。該單元劑型之實例有錠劑(包括刻痕或塗劑)、膠囊、丸劑、栓劑、粉包、薄藥片、注射溶液或懸浮液及諸如此類者及其分格多次劑量。
本發明組成物－包括單元劑型－可含有量介於約0,1%至70%或約0,5%至50%或約1%至25%或約5%至20%範圍內之活性成份，其餘者包含載劑，其中前述百分比係相對於組成物或劑型之總重的重量/重量。
式(I)化合物顯示抗病毒性質。可使用本發明化合物及方法治療之病毒感染及其相關疾病係包括由HCV及其他病原性黃病毒所造成之感染，諸如黃熱病、登革熱(第1至4型)、聖路易斯腦炎(St.Louis encephalitis)、日本腦炎、墨萊溪谷腦炎(Murray valley encephalitis)、西尼羅河病毒及昆津病毒(Kunjin virus)。與HCV相關之疾病係包括進行性肝纖維化、導致肝硬化之發炎及壞死、末期肝疾及HCC；且就其他病原性黃病毒而言，疾病係包括黃熱病、登革熱、出血熱及腦炎。數種本發明化合物對於HCV突變病毒株亦具活性。此外，許多本發明化合物顯示有利之藥物動特性且在生物可利用性上具有引人注意之性質，包括可接受之半衰期、AUC(曲線下面積)及波峰值，且並無不利之現象，諸如快速開始作用性及組織滯留性不足。
式(I)化合物對抗HCV之體外抗病毒活性係於細胞HCV複製子系統中基於Lohmann等人(1999)Science 285：110－113，如Krieger等人(2001)Journal of Virology 75： 4614－4624所述般進一步修飾而加以測試，此係進一步於實施例部分中加以例證。此模型雖非HCV之完全感染模型，但目前廣泛接受為有效之自主HCV RNA複製模型。此細胞模型中具有抗HCV活性之化合物被視為哺乳類HCV感染之治療的進一步發展之候選物。應瞭解重要的是區分專一性地干擾HCV功能之化合物與於HCV複製子模型中產生胞毒或抑制細胞生長效應且結果導致HCV RNA或連結報告基因酶濃度降低之的化合物。技術界已知使用螢光氧化還原染料諸如刃天青基於例如粒線體酶活性評估細胞胞毒性之檢測。此外，細胞逆篩檢(counter screen)係用以評估連結報告基因活性之非選擇性抑制，諸如螢火蟲螢光素酶。適當之細胞類型可藉由穩定地轉染螢光素酶報告基因而建立，該基因之表現係視基本上活性之基因啟動子而定，而該等細胞可作為消除非選擇性抑制劑之逆篩檢。
因其抗病毒性質，尤其是抗－HCV性質，式(I)化合物或其任何子群、其加成鹽及立體化學異構形式，可用於治療患有病毒感染－尤其是HCV感染－之個體且可用於預防此等感染。通常，本發明化合物可用於治療感染病毒－尤其是黃病毒諸如HCV－之溫血動物。
本發明化合物或其任何子群因此可作為藥劑。該種作為藥劑之用途或治療方法係包含將可有效對抗與病毒感染－尤其是HCV感染－有關之病況的量全身投藥於被病毒感染之個體或易受病毒感染之個體。
本發明亦有關本發明化合物或其任何子群於製造用以 治療或預防病毒感染－尤其是HCV感染－之藥劑的用途。
本發明另外有關一種治療受病毒感染或處於受病毒感染之風險下的溫血動物－尤其是HCV－的方法，該方法係包含投予抗病毒有效量之本發明所述式(I)化合物或本發明所述之任一式(I)化合物子群的化合物。
基於以下所呈現之試驗數據，預期有效日劑量對平均70公斤之個體係介於約10毫克至約2克或約20毫克至約1000毫克或約50毫克至約750毫克或約100毫克至約500毫克之範圍內。劑量可隨重量且針對兒科應用調整。日劑量可每日投藥或多次投藥，諸如每日兩次、每日三次或每日四次。
而且，先前已知之抗－HCV化合物(諸如例如干擾素－α(IFN－α)、聚乙二醇化干擾素－α及/或病毒唑(ribavirin)與式(I)化合物之組合物可於組合療法中作為藥劑。術語「組合療法」係有關含有指定之(a)式(I)化合物及(b)視情況存在之另一種抗－HCV化合物的產物，作為同時、分別或連續用以治療HCV感染(尤其是治療HCV感染)之組合製劑。
抗－HCV化合物涵蓋選自以下之藥劑：HCV聚合酶抑制劑，NM283，R803，JTK－109及JTK－003；HCV蛋白酶(NS2－NS3及NS3－NS4A)抑制劑，WO02/18369之化合物(參見例如第273頁第9至22行及第274頁第4行至第276頁第11行)，BILN－2061，VX－950，SCH 503034；HCV生命周期中其他標的之抑制劑，包括解旋酶及金屬蛋白酶抑制劑，ISIS－14803；免疫調節劑，諸如α－、β－及γ－干擾素， 聚乙二醇衍化之干擾素－α化合物，於細胞中刺激干擾素之合成的化合物，間白素，促進第1型輔助T細胞反應之發展的化合物及胸腺肽；其他抗病毒劑，諸如病毒唑(ribavirin)，金剛胺及替比夫定(telbivudine)，內部核糖體進入位點之抑制劑，廣效型病毒抑制劑，諸如IMPDH抑制劑(例如US5,807,876、US6,498,178、US6,344,465、US6,054,472、WO97/40028、WO98/40381、WO00/56331之化合物及黴酚酸及其衍生物且包括但不限於VX－950、VX－497、VX－148及/或VX－944)；或任一前述者之組合物。
因此，為對抗或治療HCV感染，式(I)化合物可與以下藥物組合共同投藥：例如干擾素－α(IFN－α)、聚乙二醇化干擾素－α及/或病毒唑(ribavirin)以及基於針對HCV抗原決定部位之抗體、小干擾RNA(siRNA)、核酶、DNAzyme、反義RNA、例如NS3蛋白酶、NS3解旋酶及NS5B聚合酶之小分子拮抗劑的療劑。
是故，本發明係有關式(I)化合物或其如前定義之任何子群之用途，其係用於製造可在受HCV病毒感染之哺乳類中抑制HCV活性的藥劑，其中該藥劑係使用於組合療法，該組合療法較佳係包含式(I)化合物及另一種HCV抑制性化合物，例如(聚乙二醇化)IFN－α及/或病毒唑(ribavirin)。
再另一態樣中，提供本發明所述式(I)化合物與抗－HIV化合物的組合物。後者較佳係為對藥物代謝及/或藥物動力學具有正面影響，改善生物可利用性的HIV抑制劑。該種HIV抑制劑之一實例為利托那韋(ritonavir)。因此本發明另 外提供一種組合物，其包含(a)式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；及(b)利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽。
化合物利托那韋(ritonavir)及其醫藥上可接受之鹽及其製備方法已描述於WO 94/14436中。利托那韋(ritonavir)之較佳劑型參見US 6,037,157及其中所列之文件：US 5,484,801、US 08/402,690及WO 95/07696及WO 95/09614。利托那韋(ritonavir)具有下式：
另一具體實施態樣中，包含(a)式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；及(b)利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽的組合物；進一步包含選自本發明所述化合物之其他抗－HCV化合物。
本發明之一具體實施態樣中，提供一種製備本發明所述之組合物的方法，其包含組合式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽的步驟。本發明備擇具體實施態樣提供一種方法，其中該組合物係包含一或多種本發明所述之其他藥劑。
本發明組合物可作為藥劑。該種作為藥劑之用途或治療 方法係包含於受HCV感染之個體全身性投予可對抗與HCV及其他病原性黃病毒及瘟疫病毒有關之病況的量。因此，本發明組合物可用於製造可用以治療、預防或對抗哺乳類之HCV感染或與其相關之疾病的藥劑，該藥劑尤其是用以治療與HCV及其他病原性黃病毒及瘟疫病毒相關之病況。
本發明之一具體實施態樣中，提供一種醫藥組成物，其包含本發明所述之任一具體實施態樣的組合物及醫藥上可接受之賦形劑。尤其，本發明提供一種醫藥組成物，其包含(a)治療有效量之式(I)的HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，(b)治療有效量之利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽，及(c)醫藥上可接受之賦形劑。該醫藥組成物視情況進一步包含選自以下之其他藥劑：HCV聚合酶抑制劑、HCV蛋白酶抑制劑、HCV生命周期中其他標的之抑制劑、免疫調節劑、抗病毒劑及其組合物。
組成物可調配成適當之醫藥劑型，諸如前述劑型。每一種活性成份各可分別調配且調配物可共同投藥，可提供同時含兩者且若需要則含其他活性成份之單一調配物。
本發明所使用之術語「組合物」係涵蓋包含特定成份之產物，及自特定成份之組合物直接或間接產生之任何產物。
於一具體實施態樣中，本發明所提供之組合物亦可調配成用以同時、分別或依序使用於HIV療法之組合製劑。該種情況下，通式(I)化合物或其任何子群係調配於含有其他醫藥上可接受之賦形劑的醫藥組成物中，而利托那韋 (ritonavir)係分別調配於含有其他醫藥上可接受之賦形劑的醫藥組成物中。此兩種個別之醫藥組成物可適當地為同時、分別或依序使用之組套的一部分。
因此，本發明組合物之個別組份可於治療期間於不同時間分別投藥或以分開或單一組合物形式同時地投藥。本發明因此應涵蓋所有該種同時或交替治療的方案，而術語「投藥」應如此解釋。較佳具體實施態樣中，分別之劑型係約同時投藥。
於一具體實施態樣中，本發明組合物係含有利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽，其量足以使式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑的生物可利用性於臨床上較單獨投予該式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑時的生物可利用性改善。
另一具體實施態樣中，本發明組合物利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽，其量足以使式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑選自t1/2 、Cmin 、Cmax 、Css 、12小時之AUC或24小時之AUC的至少一項藥物動力變數相對於單獨投予式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑時的該至少一項藥物動力變數增加。
另一具體實施態樣係有關一種改善HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑之生物可利用性的方法，其係於需要此種改善之個體投予本發明所定義的組合物，此組合物係包含治療有效量之該組合物的各個組份。
另一具體實施態樣中，本發明係有關利托那韋(ritonavir) 或其醫藥上可接受之鹽之用途，其係作為式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑選自t1/2 、Cmin 、Cmax 、Css 、12小時之AUC或24小時之AUC的至少一項藥物動力變數之改善劑；其限制條件為該用途不於人類或動物體中進行。
本發明所使用之術語「個體」係表示作為治療、觀察或實驗目標之動物，較佳係哺乳類，最佳為人類。
生物可利用性係定義為投藥劑量到達體循環之比例。t1/2 係表示半衰期或血漿濃度降至其原始值之一半所花費的時間。Css 係為穩態濃度，即藥物輸入率等於排出率之濃度。Cmin 係定義為投藥間隔中所測得之最低(最小)濃度。Cmax 係表示投藥間隔中所測得之最高(最大)濃度。AUC係定義為在特定時間期間於血漿濃度－時間曲線下之面積。
本發明組合物可於該組合物所包含之各組份專屬的劑量範圍投藥於人類。包含於該組合物中之組份可一起或分別投藥。式(I)之NS3/4a蛋白酶抑制劑或其任何子群及利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽或酯，可具有在約0.02至約3.0克/日範圍內或在約0.03至約2.0克/日範圍內或在約50毫克至約1000毫克/日範圍內或在約100毫克至約500毫克/日範圍內之劑量水平。
當式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑及利托那韋(ritonavir)係組合投藥時，式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑對利托那韋(ritonavir)之重量比係適當地於約40：1至約1：15或約30：1至約1：15或約15：1至約1：15範圍內，一般約10：1至約1：10且更一般約8：1至約1： 8。亦可使用約6：1至約1：6或約4：1至約1：4或約3：1至約1：3或約2：1至約1：2或約1.5：1至約1：1.5範圍內之式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑對利托那韋(ritonavir)之重量比。於一態樣中，式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑的重量係等於或大於利托那韋(ritonavir)，其中式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑對利托那韋(ritonavir)之重量比係適當地在約1：1至約15：1範圍內，一般約1：1至約10：1且更一般約1：1至約8：1。亦可使用在約1：1至約6：1或約1：1至約5：1或約1：1至約4：1或約3：2至約3：1或約1：1至約2：1或約1：1至約1.5：1範圍內之式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑對利托那韋(ritonavir)的重量比。
本發明所使用之術語「治療有效量」係表示活性或組份或藥劑在組織、系統、動物或人類中產生研究人員、獸醫、醫師或其他臨床人員在本發明所尋求之生物或醫學反應的量，其包括舒緩所治療之疾病的症狀。因為本發明係有關包含二或更多種藥劑之組合物，故「治療有效量」係為該等藥劑一起使得組合效果產生所需之生物或醫學反應的量。例如治療有效量之包含(a)式(I)化合物及(b)利托那韋(ritonavir)的組成物係為結合時具有治療有效之組合效果的式(I)化合物之量及利托那韋(ritonavir)之量。
通常預期抗病毒有效每日量係為0.01毫克/公斤至500毫克/公斤體重，更佳為0.1毫克/公斤至50毫克/公斤體重。可適當地於一日之間在適當間隔以兩個、三個、四個 或更多個次劑量投予所需之劑量。該次劑量可調配成單元劑型，例如含有1至1000毫克，尤其是5至200毫克活性成份/單元劑型。
如熟習此技術者所熟知，實際劑量及投藥頻率係視所使用之特定式(I)化合物、待治療之特定病況、待治療之病況的嚴重程度、患者之年齡、體重、性別、病症程度及一般健康狀況以及該個體可能服用之其他藥劑而定。此外，該有效每日用量可因待治療個體之反應且/或視開立本發明化合物處方之醫師的評估而降低或增加。前述有效每日用量範圍因此僅供參考。
根據一具體實施態樣，式(I)之HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑及利托那韋(ritonavir)可每日一次或兩次共同投藥，較佳係經口，其中每劑之式(I)化合物的量約1至約2500毫克，而每劑之利托那韋(ritonavir)的量係1至約2500毫克。另一具體實施態樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約50至約1500毫克式(I)化合物及約50至約1500毫克利托那韋(ritonavir)。再另一具體實施態樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約100至約1000毫克式(I)化合物及約100至約800毫克利托那韋(ritonavir)。再另一具體實施態樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約150至約800毫克式(I)化合物及約100至約600毫克利托那韋(ritonavir)。再另一具體實施態樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約200至約600毫克式(I)化合物及約100至約400毫克利托那韋(ritonavir)。再另一具體實施態 樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約200至約600毫克式(I)化合物及約20至約300毫克利托那韋(ritonavir)。再另一具體實施態樣中，每日一次或兩次共同投藥之每劑用量係約100至約400毫克式(I)化合物及約40至約100毫克利托那韋(ritonavir)。
每日一次或兩次投藥之式(I)化合物(毫克)/利托那韋(ritonavir)(毫克)例示組合物係包括50/100、100/100、150/100、200/100、250/100、300/100、350/100、400/100、450/100、50/133、100/133、150/133、200/133、250/133、300/133、50/150、100/150、150/150、200/150、250/150、50/200、100/200、150/200、200/200、250/200、300/200、50/300、80/300、150/300、200/300、250/300、300/300、200/600、400/600、600/600、800/600、1000/600、200/666、400/666、600/666、800/666、1000/666、1200/666、200/800、400/800、600/800、800/800、1000/800、1200/800、200/1200、400/1200、600/1200、800/1200、1000/1200及1200/1200。每日一次或兩次投藥之式(I)化合物(毫克)/利托那韋(ritonavir)(毫克)其他例示組合物係包括1200/400、800/400、600/400、400/200、600/200、600/100、500/100、400/50、300/50及200/50。所有前述比例皆為毫克/毫克。
本發明之一具體實施態樣中，提供一種製造物件，其包含可治療HCV感染或可抑制HCV之NS3蛋白酶的組成物；及包裝材料，其包含指示該組合物可用以治療C型肝炎病毒感染的標籤；其中該組成物係包含本發明所述之式 (I)或其任何子群的化合物或組合物。
本發明化合物及組合物可使用於高通量標的分析物檢測，諸如用以測量該組合物於HCV治療中之功效的檢測。
 實施例
以下實施例係用以說明本發明而非限制。
實施例1： 17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之製備
步驟A
3－甲氧基－2－甲基苯胺(1.09克，7.95毫莫耳)及3－乙氧基－3－亞胺基丙酸乙酯鹽酸鹽(1.44克，7.36毫莫耳)於乙醇(15毫升)中之溶液於室溫在氮下攪拌48小時。之後，於減壓下蒸發溶劑。殘留物於乙醚中濕磨並過濾。蒸發濾液，之後殘留物藉管柱層析純化(乙酸乙酯/庚烷，10：90)產生1.97克(89 %)標的產物(1－3 )：m/z ＝280(M＋H)＋ 。
步驟B ：4－羥基－2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉(1－4)之合成
(1－3 )(5.54克，19.8毫莫耳)於二苯醚(20毫升)中之混合物於250℃加熱30分鐘。之後，反應混合物冷卻至室溫。藉管柱層析純化(梯度庚烷至乙酸乙酯/庚烷，70：30)，接著自乙酸乙酯再結晶產生2.46克(53%)標題產物(1－4 )之黃色針狀物：m/z ＝234(M＋H)＋ 。
步驟C ：中間物(1－5)之合成
氫化鈉(1.05當量)於0℃緩緩添加於N －甲基三氟－乙醯胺(25克)於DMF(140毫升)中之溶液中。混合物於室溫在氮下攪拌1小時。之後，逐滴添加溴己烯(32.1克)於DMF(25毫升)中之溶液，混合物加熱至70℃歷經12小時。反應混合物倒於水(200毫升)上且以二乙醚萃取(4×50毫升)，乾燥(MgSO4 )，過濾並蒸發產生35克標的產物(1－5 )之帶黃色油，其不進一步純化地使用於後續步驟。
步驟D ：(己－5－烯基)(甲基)胺(1－6)之合成
氫氧化鉀(187.7克)於水(130毫升)中之溶液逐滴添加於(1－5 )(35克)於甲醇(200毫升)中之溶液。混合物於室溫攪拌12小時。之後，反應混合物倒於水上(100毫升)且以乙醚萃取(4×50毫升)，乾燥(MgSO4 )，過濾且於大氣壓下蒸餾乙醚。形成之油藉著於真空下蒸餾純化(13 mm Hg壓力，50℃)產生7.4克(34%)標題產物(1－6 )之無色油：1 H－MMR(CDCl3 )：δ 5.8(m,1H),5(ddd,J ＝17.2 Hz,3.5 Hz,1.8 Hz,1H),4.95(m,1H),2.5(t,J ＝7.0 Hz,2H),2.43(s,3H),2.08(q,J ＝7.0 Hz,2H),1.4(m,4H),1.3(br s,1H)。
步驟E ：中間物(1－8)之合成
3－酮基－2－氧雜－雙環[2.2.1]庚烷－5－甲酸(1－7 )(500毫克，3.2毫莫耳)於4毫升DMF中在0℃下添加於在DMF(3毫升)中之HATU(六氟磷酸2－(1H－7－氮雜苯并三唑－1－基)－1,1,3,3－四甲基脲鎓甲基銨(methanaminium)；1.34克，3.52毫莫耳)及N －甲基己－5－烯基胺((1－6 )，435毫克，3.84毫莫耳)中，接著DIPEA。於0℃攪拌40分鐘後，混合物 於室溫攪拌5小時。之後，蒸發溶劑，殘留物溶於乙酸乙酯(70毫升)且以飽和NaHCO3 (10毫升)洗滌。水層以乙酸乙酯萃取(2×25毫升)。結合有機層，以飽和NaCl(20毫升)洗滌，乾燥(Na2 SO4 )並蒸發。藉快速層析純化(乙酸乙酯/石油醚，2：1)產生550毫克(68%)標的產物(1－8 )之無色油：m/z ＝252(M＋H)＋ 。
步驟F ：中間物(1－9)之合成
LiOH之溶液(105毫克於4毫升水中)於0℃添加於內酯醯胺(1－8 )中。1小時後，完全轉化(HPLC)。混合物以1N HCl酸化至pH 2－3，以乙酸乙酯萃取，乾燥(MgSO4 )，蒸發，以甲苯共蒸發數次，於高度真空下乾燥隔夜，產生520毫克(88%)標的產物(1－9 )：m/z ＝270(M＋H)＋ 。
步驟G ：中間物(1－11)之合成
1－(胺基)－2－(乙烯基)環丙烷甲酸乙基酯鹽酸鹽(1－10 ) (4.92克，31.7毫莫耳)及HATU(12.6克，33.2毫莫耳)添加於(1－9 )(8.14克，30.2毫莫耳)中。混合物於冰浴中在氬下冷卻，之後連續添加DMF(100毫升)及DIPEA(12.5毫升,11.5毫莫耳)。於0℃歷經30分鐘後，溶液於室溫攪拌另外3小時。之後，反應混合物分溶於乙酸乙酯及水之間，連續以0.5 N HCl(20毫升)及飽和NaCl(2×20毫升)洗滌並乾燥(Na2 SO4 )。藉快速層析純化(乙酸乙酯/CH2 Cl2 /石油醚，1：1：1)產生7.41克(60%)標的產物(1－11 )之無色油：m/z ＝407(M＋H)＋ 。
步驟H ：中間物(1－12)之合成
DIAD(271毫克，1.30毫莫耳)於－20℃氮氛圍下添加於(1－11 )(351毫克，0.86毫莫耳)、喹啉(1－4 )(207毫克，0.89毫莫耳)及三苯膦(387毫克，1.5毫莫耳)於無水THF(15毫升)中之溶液中。之後將反應溫至室溫。24小時後，反應混合物以冰冷水中止反應，之後以乙醚萃取。有機層連續地乾燥(Na2 SO4 )，過濾並蒸發。殘留物以快速管柱層析純化(乙酸乙酯/CH2 Cl2 ，1：9)產生520毫克(92%)標的產物 (1－12 )：m/z ＝622(M＋H)＋ 。
步驟I ：(1)之合成
(1－12 )(520毫克，0.753毫莫耳)及Hoveyda－Grubbs第一代觸媒(48毫克，0.080毫莫耳)於經乾燥及脫氣之1,2－二氯乙烷(400毫升)中之溶液於80℃在氮下加熱36小時。之後，蒸發溶劑且殘留物藉矽膠層析純化(乙魅)產生279毫克(62%)標的產物(1 )：m/z ＝594(M＋H)＋ 。
步驟J ：17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2)之合成
LiOH.H2 O(803毫克)於水(6毫升)中之溶液添加於(1 )(279毫克，0.470毫莫耳)於THF(10毫升)及甲醇(10毫升)中之攪拌溶液中。72小時之後，蒸發溶劑且殘留物分溶於經酸化之水(pH＝5)與乙酸乙酯之間。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並蒸發。之後殘留物藉管柱層析純化(甲醇/CH2 Cl2 ，2.5：97.5)產生標題產物(2 )之白色粉末：m/z ＝566(M＋H)＋ .1 H NMR(CDCl3 )：1.10－1.14(m,3H),1.10－1.21(m,1H),1.31－1.42(m,1H),1.40－1.50(m,4H),1.50－1.65(m,1H),1.68－1.83(m,2H),1.83－1.95(m,2H),2.10－2.20(m,1H),2.21－2.34(m,2H),2.35－2.49(m,1H),2.50－2.65(m,5H),2.97(s,3H),3.18－3.30(m,1H),3.92(s,3H),4.48－4.62(m,3H),4.80－4.88(m,1H),5.13－5.23(m,1H),560－5.70(m,1H),7.00(d,1H),7.41(s,1H),7.81(d,1H)。
實施例2： N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環－丙基)磺醯胺(3 )之製備
(2)(182毫克，0.32毫莫耳)及CDI(139毫克，0.29毫莫耳)於無水THF(10毫升)中之混合物於氮下回流加熱1.5小時。LCMS分析顯示一個中間物(2－1 )波峰(安定之中間物，其可藉於矽膠上純化單離)。反應混合物冷卻至室溫且添加環丙基－磺醯胺(93毫克，0.76毫莫耳)。之後，添加DBU(138毫克，0.91毫莫耳)。反應混合物於室溫攪拌1小時，之後於55℃加熱12小時。之後，蒸發溶劑，殘留物分溶於乙酸乙酯與酸性水(pH＝3)之間。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並蒸發。粗製物藉管柱層析純化(乙酸乙酯/CH2 Cl2 ，1：9)。殘留物於水中超音波振盪1小時，過濾且以異丙基乙醚洗滌，產生標題產物(3 )之白色粉末：m/z ＝669(M＋H)＋ .1 H NMR(CDCl3 )：0.90－1.30(m,5H),1.31－1.52(m,6H),1.61－1.72(m,1H),1.73－1.99(m,3H),2.09－2.20(m,1H),2.30－2.42(m,2H),2.48－2.62(m,5H),2.70－2.83(m,1H),3.01(s,3H),3.30－3.41(m,2H),3.94(s,3H),4.50－4.73(m,3H),5.05(t,J ＝10.0Hz,2H),5.62－5.69(m,1H),5.95(s,1H),6.35(br s,1H),7.01(d,J ＝9.1 Hz,1H),7.85(d,J ＝9.1Hz,1H),10.8(br s,1H)。
實施例3： 17－[2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(4 )之製備
標題化合物(4 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基－喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載的方法(步驟A－J)自3－甲氧基苯胺製備：m/z ＝552(M＋H)＋ 。
1 H NMR(CDCl3 )：1.10－1.21(m,1H),1.31－1.42(m,1H),1.45(t,J ＝7.1 Hz,3H),1.50－1.65(m,1H),1.71－1.85(m,2H),1.85－2.00(m,3H),2.15－2.51(m,7H),3.00(s,3H),3.21－3.32(m,1H),3.51－3.62(m,1H),3.91(s,3H),4.51－4.62(m,3H),4.91－4.96(m,1H),5.15(dd,J ＝10.0 andJ ＝8.0 Hz,1H),5.65(ddd,J ＝10.0,J ＝6.6 Hz,J ＝6.7Hz,1H),6.00(s,1H),6.95(dd,J ＝8.9 Hz,J＝2.3 Hz,1H),7.22(s,1H),7.26(d,J ＝2.3 Hz,1H),7.88(d,J ＝8.9 Hz,1H)。
實施例4： N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)－磺醯胺(5 )之製備
標題化合物(5 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(3 )之合成所記載的方法自17－[2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(4 )製備：m/z ＝555(M＋H)＋ .1 H NMR(CDCl3 )：0.80－0.90(m,1H),0.92－1.0(m,4H),1.00－1.3(m,3H)，1.41(t,J ＝7.1 Hz,3H),1.45－1.71(m,2H),1.8－1.95(m,4H),2.21－2.62(m,4H),2.73－2.81(m,1H),2.9－2.94(m,1H),3.0(s,3H),3.31－3.41(m,1H),3.90(s,3H),4.44(q,J ＝7.1 Hz,2H),5.0－5.08(m,2H),5.6－5.65(m,1H),5.98(s,1H),6.8(br s,1H),7.10(dd,J ＝9.1 Hz andJ ＝2.5 Hz,1H),7.12(d,J ＝2.5 Hz,1H),7.28(s,1H),7.9(d,J ＝9.1 Hz,1H),11.02(br s,1H)。
實施例5： 17－[8－溴－2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(6 )之製備
標題化合物(6 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基－喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載之方法(步驟A－J)自2－溴－3－甲氧基苯胺製備：m/z ＝631(M＋H)＋ 。
實施例6： N －[17－[8－溴－2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(7 )之製備
標題化合物(7 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(3 )之合成 所記載的方法自17－[8－溴－2－乙氧基－7－甲氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(6 )製備：m/z ＝734(M＋H)＋ 。
實施例7： 17－[2－乙氧基－8,9－二氫呋喃并[2,3－h]喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(8 )之製備
標題化合物(8 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]－十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載之方法(步驟A－J)自4－胺基－2,3－二氫苯并呋喃製備：m/z ＝564(M＋H)＋ 。
實施例8： N －[17－[2－乙氧基－8,9－二氫呋喃并[2,3－h]喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(9 )之製備
標題化合物(9 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(3 )之合成所記載的方法自17－[2－乙氧基－8,9－二氫呋喃并[2,3－h]－喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(8 )製備：m/z ＝667(M＋H)＋ 。
實施例9： 17－[8－氯－2－乙氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(10 )之製備
標題化合物(10 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基－喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載方法(步驟A－J)自2－氯苯胺製備：m/z ＝556(M＋H)＋ 。
實施例10： N －[17－[8－氯－2－乙氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氯雜三環[13.3.0.04.6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)－磺醯胺(11 )之製備
標題化合物(11 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基(環丙基)磺醯胺(3 )之合成所記載的方法自17－[8－氯－2－乙氧基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(10 )製備：m/z ＝659(M＋H)＋ 。
實施例11： 17－[2－乙氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－ 甲酸(12 )之製備
標題化合物(12 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3004,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載的方法(步驟A－J)自2－甲基苯胺製備：m/z ＝536(M＋H)＋ 。
實施例12： N －[17－[2－乙氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)－磺醯胺(13 )之製備
標題化合物(13 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基 喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(3 )之合成所記載的方法自17－[2－乙氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(12 )製備：m/z ＝639(M＋H)＋ 。
實施例13： 17－[8－乙氧基[1,3]間二氧雜環戊烯并[4,5－h]喹啉－6－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(14 )之製備
標題化合物(14 )係依17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基－喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(2 )之合成所記載的方法(步驟A－J)自苯并[1,3]二酮基1－4－基胺製備：m/z ＝566(M＋H)＋ 。
實施例14： N －[17－[8－乙氧基[1,3]間二氧雜環戊烯并[4,5－h]喹啉－6－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基]－(環丙基)磺醯胺(15 )之 製備
標題化合物(15 )係依N －[17－[2－乙氧基－7－甲氧基－8－甲基喹啉－4－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環－[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－羰基](環丙基)磺醯胺(3 )之合成所記載的方法自17－[8－乙氧基[1,3]間二氧雜環戊烯并[4,5－h]喹啉－6－基氧基]－13－甲基－2,14－二酮基－3,13－二氮雜三環[13.3.0.04,6 ]十八碳－7－烯－4－甲酸(14 )製備：m/z ＝669(M＋H)＋ 。
實施例 15：式(I)之化合物之活性
複製子檢測 於細胞檢測中檢測式(I)化合物抑制HCV RNA複製之活性。該檢測證明式(I)化合物於細胞培養物中展現對抗HCV複製子功能之活性。此細胞檢測係基於如Lohmann等人(1999)Science vol.285 pp.110－113所述之雙順反子表現建構，於多標的篩檢策略中使用Krieger等人(2001)Journal of Virology 75：4614－4624之修飾。基本上，該方法如下。
該檢測採用穩定轉染細胞系Huh－7 luc/neo(以下稱為Huh－Luc)。此細胞系蘊含有編碼雙順反子表現建構之RNA，其包含自腦心肌炎病毒(EMCV)之內部核糖體進入位點(IRES)轉譯的第1型HCVb之野生型NS3－NS5B區，前方為報告基因部分(FfL－螢光素酶)及可選擇標記部分(neoR ，新黴素磷酸轉移酶)。該結構係以5’及3’NTR(未轉譯區)與第1型HCVb分界。於G418(neoR )存在下之複製子細胞的持續培養係與HCV RNA之複製有關。表現HCV RNA之穩定轉染複製子細胞－自主且高度地複製，特別編碼螢光素酶－係用以篩檢抗病毒化合物。
複製子細胞於以各種濃度添加之試驗及對照化合物存在下接種於384孔板中。培育三日後，藉由檢測螢光素酶活性(使用標準螢光素酶檢測受質及試劑及Perkin Elmer ViewLuxTM ultraHTS微量板成像器)來測量HCV複製。對照培養物中複製子細胞在不存有任何抑制劑時具有高度螢光素酶表現。於Huh－Luc細胞上偵測化合物對於螢光素酶活性之抑制活性，以得到各個試驗化合物之劑量－反應曲線。計算EC50 值，該值表示該化合物使所偵測之螢光素酶活性－或詳言之為遺傳連結之HCV複製子RNA複製之能力－的水平降低50%所需之量。
抑制檢測 此項體外檢測之目的係測量本發明化合物之HCV NS3/4A蛋白酶複體抑制性。此檢測對於本發明化合物抑制 HCV NS3/4A蛋白水解活性的功效提供指標。
全長C型肝炎NS3蛋白酶之抑制基本上係如Poliakov,2002 Prot Expression & Purification 25 363 371所述般測量。簡言之，酯肽受質Ac－DED(Edans)EEAbuΨ[COO]ASK(Dabcyl)－NH2 (AnaSpec,San Jos,USA)之水解係於胜肽輔助因子KKGSVVIVGRIVLSGK(keEngstrm,Department of Medical Biochemistry and Microbiology,Uppsala University,Sweden)存在下以螢光光譜測量(Landro,1997 Biochem 36 9340－9348)。酶(1 nM)於50 mM HEPES(4－(2－羥基乙基)－1－六氫吡乙烷磺酸)pH 7.5，10 mM二硫蘇糖醇，40%甘油，0.1%正辛基－D－糖苷中在30℃以25 μM NS4A輔助因子及抑制劑培育10分鐘，此時藉由添加0.5 μM受質來起始反應。抑制劑溶於DMSO中，超音波振盪30秒且迴盪。在測量之間將溶液儲存於－20℃。
DMSO於檢測試樣中之最終濃度係調整至3.3%。水解率係根據公開方法(Liu,1999 Analytical Biochemistry 267 331－335)針對內濾器加以修正。Ki 值係藉非線性迴歸分析(GraFit,Erithacus Software,Staines,MX,UK)使用競爭抑制模型及固定Km 值(0.15 μM)來估計。所有測量皆最少重複兩次。
下表1列出前述任一實施例所製備之化合物。R9 欄中結構的虛線係表示該基圍連接於分子之其餘部分的鍵結。所試驗之化合物的活性亦列於表1。

Claims (12)

  1. 一種具有下式之化合物 及其鹽及立體異構物，其中各虛線(以-----表示)係獨立地表示視情況存在之雙鍵；X 係為N、CH且當X帶有雙鍵時其係為C；R 1 係為-OR7 、-NH-SO2 R8 ；R 2 係為氫，且當X係為C或CH時，R 2 亦可為C1-6 烷基；R 3 係為氫、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基C1-6 烷基、C3-7 環烷基；n 係為3、4、5或6；R 4 係為C1-6 烷基或C3-7 環烷基；R 5 係表示氫、鹵基、C1-6 烷基、羥基、C1-6 烷氧基、多鹵基C1-6 烷基；R 6 係表示氫、C1-6 烷氧基、單-或二C1-6 烷基胺基；或R 5 及R 6 可視情況與其所連接之碳原子一起形成5-或6-員不飽和或部分不飽和環，且其中該環可視情況包含一或 兩個選自O、N及S之雜原子；R 7 係為氫；視情況經C1-6 烷基取代之C3-7 環烷基；或視情況經C3-7 環烷基取代之C1-6 烷基；R 8 係為視情況經C1-6 烷基取代之C3-7 環烷基；視情況經C3-7 環烷基取代之C1-6 烷基；或-NR8a R8b ，其中R8a 及R8b 各獨立地為C1-6 烷基或R8a 及R8b 與其所連接之氮一起形成5-或6-員飽和雜環性環。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係具有式(I-c)或(I-d)：
  3. 如申請專利範圍第1至2項中任一項之化合物，其中(a)R1 係為-OR7 ，其中R7 係為C1-6 烷基或氫；(b)R1 係為-NHS(=O)2 R8 ，其中R8 係為甲基或環丙基；或R1 係為-NHS(=O)2 R8 ，其中R8 係為經甲基取代之環丙基。
  4. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其中n係為4或5。
  5. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其中R3 係為氫或C1-6 烷基，尤其R3 係為氫或甲基。
  6. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其中R5 係為氫，甲基、乙基、異丙基、第三丁基、氟、氯、溴或三氟甲基。
  7. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其中R6 係為氫或甲氧基。
  8. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其中R5 及R6 與其所連接之喹啉部分一起形成選自以下之環：
  9. 一種包含以下組份之醫藥組合物(a)如申請專利範圍第1至8項中任一項所定義之化合物或其醫藥上可接受之鹽；及(b)利托那韋(ritonavir)或其醫藥上可接受之鹽。
  10. 一種醫藥組成物，其包含載劑及作為活性成份之抗病毒有效量的如申請專利範圍第1至8項中任一項之化合物或如申請專利範圍第9項之組合物。
  11. 一種如申請專利範圍第1至8項中任一項之化合物或如申請專利範圍第9項之組合物的用途，其係用於製造供抑制HCV複製使用的藥劑。
  12. 一種製備如申請專利範圍第1至8項中任一項之化合物的方法，其中該方法係包含：(a)藉由於C7 及C8 之間形成雙鍵，尤其是經由烯烴複分解反應，同時如以下反應流程圖所述般地環化成巨環，製備其中介於C7 與C8 間之鍵結係為雙鍵的式(I)化合物，其係為式(I-i)之化合物： 其中以上及以下反應流程圖中R9 係表示基團 (b)藉由將式(I-j)化合物中之C7-C8雙鍵還原而將式(I-i)化合物轉化成式(I)化合物，其中巨環中介於C7及C8間之鍵係為單鍵，即式(I-j)之化合物： (c)如以下流程圖所示般，藉由於中間物(2a)與磺醯基胺(2b)之間形成醯胺鍵製備其中R1 係表示-NHSO2 R8 之式(I)化合物，該化合物係由式(I-k-1)表示，或藉由於中間物(2a)與醇(2c)之間形成酯鍵而製備其中R1 係表示-OR7 之式(I)化合物，即化合物(I-k-2)，其中G係表示基團： (d)自對應之氮-經保護中間物(3a)製備其中R3 係為氫之式(I)化合物，該化合物係以(I-1)表示，其中PG係表示氮保護基： (e)如以下反應流程圖所述般地使中間物(4a)與中間物(4b)反應：(a)其中(4b)中之Y係表示羥基或脫離基；且當Y係表示羥基時，(4a)與(4b)之反應係為Mitsunobu反應；且當Y係表示脫離基時，(4a)與(4b)之反應係為置換反應；(f)藉由官能基轉變反應將式(I)之化合物彼此轉化；或(g)藉由游離形式之式(I)化合物與酸或鹼反應而製備鹽形式。
TW096143432A 2006-11-17 2007-11-16 Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑 TWI406660B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06124359 2006-11-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW200838529A TW200838529A (en) 2008-10-01
TWI406660B true TWI406660B (zh) 2013-09-01

Family

ID=37894415

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW096143432A TWI406660B (zh) 2006-11-17 2007-11-16 Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑

Country Status (17)

Country Link
US (2) US8637663B2 (zh)
EP (1) EP2097402B1 (zh)
JP (2) JP2010510192A (zh)
KR (1) KR20090079881A (zh)
CN (1) CN101535294B (zh)
AR (1) AR064258A1 (zh)
AU (1) AU2007321182B2 (zh)
BR (1) BRPI0718798A2 (zh)
CA (1) CA2661338C (zh)
CL (1) CL2007003299A1 (zh)
DK (1) DK2097402T3 (zh)
EA (1) EA200970493A1 (zh)
ES (1) ES2470568T3 (zh)
HK (1) HK1136824A1 (zh)
MX (1) MX2009005219A (zh)
TW (1) TWI406660B (zh)
WO (1) WO2008059046A1 (zh)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
CN101273030B (zh) * 2005-07-29 2012-07-18 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
AR064258A1 (es) * 2006-11-17 2009-03-25 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de hepatitis c
US20090155209A1 (en) * 2007-05-03 2009-06-18 Blatt Lawrence M Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2185524A1 (en) * 2007-05-10 2010-05-19 Intermune, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
BRPI0911260A2 (pt) * 2008-04-15 2015-09-29 Intermune Inc composto, composição farmacêutica, método de inibição de atividade da protease de ns3/ns4 in, vitro e usos de compostos
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
TW201040181A (en) 2009-04-08 2010-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
WO2011017389A1 (en) 2009-08-05 2011-02-10 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors useful against viral infections, particularly hcv
CA2775697A1 (en) * 2009-09-28 2011-03-31 Intermune, Inc. Cyclic peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2504344A4 (en) * 2009-11-24 2013-06-05 Boehringer Ingelheim Int HEPATITIS C INHIBITOR COMPOUNDS
JP5833022B2 (ja) 2010-01-27 2015-12-16 エービー・ファーマ・リミテッド Ｃ型肝炎ウィルス阻害剤としてのポリ複素環式化合物
EP2658858A4 (en) 2010-12-30 2014-06-25 Enanta Pharm Inc MACROCYCLIC INHIBITORS OF HEPATITIS C SERINE PROTEASE PHENANTHRIDINE
WO2012092409A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Phararmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2012109398A1 (en) * 2011-02-10 2012-08-16 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating hcv infections
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2857705A1 (en) 2011-06-16 2012-12-20 AB Pharma Ltd. Macrocyclic heterocyclic compounds for inhibiting hepatitis c virus and preparation and use thereof
PT2909205T (pt) 2012-10-19 2017-02-06 Bristol Myers Squibb Co Derivados de carbamato de hexadecahidrociclopropa(e)pirrolo(1,2- a)(1,4)diazaciclopentadecinilo substituídos com 9-metilo como inibidores da protease não estrutural 3 (ns3) para o tratamento de infeções por vírus da hepatite c
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9334279B2 (en) 2012-11-02 2016-05-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9598433B2 (en) 2012-11-02 2017-03-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9409943B2 (en) 2012-11-05 2016-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP6342922B2 (ja) 2013-03-07 2018-06-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
CN104557954A (zh) * 2013-10-16 2015-04-29 上海唐润医药科技有限公司 抗hcv的大环化合物
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
JP7208074B2 (ja) 2019-03-19 2023-01-18 Ntn株式会社 出力電圧検出回路

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005073195A2 (en) * 2004-01-30 2005-08-11 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5087876A (en) 1990-07-16 1992-02-11 Semitest, Inc. Apparatus and method for making surface photovoltage measurements of a semiconductor
KR100360964B1 (ko) 1992-12-29 2002-11-22 아보트 러보러터리즈 레트로바이러스성 프로테아제 억제 화합물의 중간체의제조방법
IL110752A (en) 1993-09-13 2000-07-26 Abbott Lab Liquid semi-solid or solid pharmaceutical composition for an HIV protease inhibitor
US5559158A (en) 1993-10-01 1996-09-24 Abbott Laboratories Pharmaceutical composition
IL111991A (en) 1994-01-28 2000-07-26 Abbott Lab Liquid pharmaceutical composition of HIV protease inhibitors in organic solvent
US6037157A (en) 1995-06-29 2000-03-14 Abbott Laboratories Method for improving pharmacokinetics
US5807876A (en) 1996-04-23 1998-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of IMPDH enzyme
US6054472A (en) 1996-04-23 2000-04-25 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Inhibitors of IMPDH enzyme
HUP0004421A3 (en) 1996-04-23 2002-10-28 Vertex Pharmaceuticals Inc Cam Urea derivatives and pharmaceutical compositions containing them, use thereof for the treatment of deseases mediated by impdh enzyme
EP0966465B1 (en) 1997-03-14 2003-07-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of impdh enzyme
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
EE200100492A (et) 1999-03-19 2002-12-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Ensüümi IMPDH inhibiitorid
UA74546C2 (en) 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
SV2003000617A (es) 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
WO2003087092A2 (en) 2002-04-11 2003-10-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 - ns4 protease
US7125845B2 (en) 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
US7700552B2 (en) * 2005-07-29 2010-04-20 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
PE20070343A1 (es) * 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
PE20070210A1 (es) * 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
CN101273030B (zh) * 2005-07-29 2012-07-18 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
JP5230417B2 (ja) * 2005-07-29 2013-07-10 テイボテク・フアーマシユーチカルズ Ｃ型肝炎ウイルスの大員環インヒビター
PE20070211A1 (es) * 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
AR064258A1 (es) * 2006-11-17 2009-03-25 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de hepatitis c

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005073195A2 (en) * 2004-01-30 2005-08-11 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
AR064258A1 (es) 2009-03-25
US20100022578A1 (en) 2010-01-28
EP2097402A1 (en) 2009-09-09
EA200970493A1 (ru) 2009-10-30
CA2661338C (en) 2015-05-12
BRPI0718798A2 (pt) 2013-12-03
CN101535294A (zh) 2009-09-16
HK1136824A1 (zh) 2010-07-09
US8637663B2 (en) 2014-01-28
KR20090079881A (ko) 2009-07-22
ES2470568T3 (es) 2014-06-24
AU2007321182A1 (en) 2008-05-22
CN101535294B (zh) 2014-09-24
AU2007321182B2 (en) 2013-11-14
CL2007003299A1 (es) 2008-08-22
JP2014221756A (ja) 2014-11-27
WO2008059046A1 (en) 2008-05-22
EP2097402B1 (en) 2014-04-09
US20140113929A1 (en) 2014-04-24
DK2097402T3 (da) 2014-06-30
JP6153495B2 (ja) 2017-06-28
JP2010510192A (ja) 2010-04-02
MX2009005219A (es) 2009-05-27
US9365582B2 (en) 2016-06-14
TW200838529A (en) 2008-10-01
CA2661338A1 (en) 2008-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI406660B (zh) Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑
RU2481340C2 (ru) Пиримидин-замещенные макроциклические ингибиторы hcv
KR101381176B1 (ko) Ｃ형 간염 바이러스의 마크로사이클릭 억제제
TWI412535B (zh) Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑（五）
CN101627020B (zh) 抑制hcv的大环苯基氨基甲酸酯
JP5171624B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルスの大環状阻害剤
JP4797067B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルスの大員環式阻害剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees