CN102014911A

CN102014911A - Hcv ns3蛋白酶抑制剂

Info

Publication number: CN102014911A
Application number: CN200980115230XA
Authority: CN
Inventors: N·J·利弗顿; J·A·麦克考利; J·W·布彻; K·F·吉尔伯特; C·J·麦金泰尔; M·T·鲁德
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2008-04-28
Filing date: 2009-04-16
Publication date: 2011-04-13
Also published as: JP2011518882A; CA2720850A1; EP2271345B1; WO2009134624A1; EP2271345A1; EP2271345A4; US20110046161A1; AU2009241445A1; US8461107B2

Abstract

本发明涉及用作丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶抑制剂的式(I)大环化合物、其合成及其用于治疗或预防HCV感染的用途。

Description

HCV NS3蛋白酶抑制剂

技术领域

本发明涉及可用作丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶抑制剂的大环化合物，这些化合物的合成和这些化合物用于治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的用途。

背景技术

丙型肝炎病毒(HCV)感染是在相当大量的估计占世界人口2-15％的感染个体中引起慢性肝脏疾病例如肝硬变和肝细胞癌的主要健康问题。根据美国疾病控制中心，仅在美国估计有三千九百万感染人群，大约是感染人类免疫缺陷病毒(HIV)人群数量的五倍。根据世界卫生组织，全世界有大于一亿七千万感染个体，每年至少3至4百万人群被感染。一旦被感染，大约20％的人清除病毒，但是大约80％感染的人群在他们的余生携带HCV。10-20％的慢性感染个体最后发展为肝破坏的肝硬变或癌症。病毒疾病通过污染的血液和血液制品污染的针肠胃外传染或通过性传染和从感染的母亲和携带的母亲垂直传染至她们的后代。

HCV感染的目前治疗限制于单独用重组干扰素-α或核苷类似物利巴韦林组合的免疫治疗，这些治疗具有有限的临床益处。而且，没有建成的HCV疫苗。因此，存在对有效抵抗慢性HCV感染的改进治疗剂的紧迫需要。HCV感染的治疗已在下列参考中讨论：B.Dymock等人，“Novel approaches to treatment of hepatitis C virus infection,”11 Antiviral Chem.& Chemotherapy 79-96(2000)；H.Rosen等人，“Hepatitis C virus：current understanding and prospects future therapies，”5 Molec.Med.Today393-399(1999)；D.Moradpour等人，“Current和evolving therapieshepatitis C，”11 Euro.J.Gastroenterol.Hepatol.1189-1202(1999)；R.Bartenschlager，“Candidate Targets Hepatitis C Virus-Specific AntiviralTherapy，”40Intervirology 378-393(1997)；G.M.Lauer和B.D.Walker，“Hepatitis C Virus Infection，”345 N.Engl.J.Med.41，52(2001)；B.W.Dymock，“Emerging therapies hepatitis C virus infection，”6 Emerging Drugs 13-42(2001)；和C.Crabb，“Hard-Won Advances Spark Excitementabout Hepatitis C，”Science：506-507(2001)。

几种病毒编码的酶是治疗干预的公认靶，其包括金属蛋白酶(NS2-3)、丝氨酸蛋白酶(NS3)、解旋酶(NS3)和RNA依赖的RNA聚合酶(NS5B)。NS3蛋白酶位于NS3蛋白的N末端结构域。由于它负责在NS3/4A位点的分子内切割和在NS4A/4B、NS4B/5A和NS5A/5B连接处的下游分之间加工，因此NS3蛋白酶被认为是主要的药靶。以往的研究已鉴定几类肽，例如美国专利申请公开US2005/0020503、US2004/0229818和US2004/00229776中讨论的六肽以及三肽，其显示抑制NS3蛋白酶的活性程度。本发明的目的是提供显示针对HCV NS3蛋白酶活性的另外的化合物。

发明概述

本发明涉及式(I)大环化合物及其药学可接受的盐。这些化合物作为化合物或它们药学可接受的盐或作为药物组合物成分，可用于抑制HCV(丙型肝炎病毒)NS3(非结构3)蛋白酶，预防或治疗HCV感染的一种或多种症状。作为药物组合物成分，这些化合物和盐可以是主要活性治疗剂，并且当适当时，可与其他治疗剂组合，所述其他治疗剂包括但不限于其他HCV抗病毒剂、抗感染剂、免疫调节剂、抗生素或疫苗。更具体地，本发明涉及式(I)化合物及其药学可接受的盐：

(式I)

其中：

选自：

其中：

各个L独立地选自N和CH，条件是L是N时其总数为1至4；

R¹选自-CO₂H和-CONHSO₂(环丙基)；

R²选自乙基和乙烯基；

R³选自环戊基、环己基和-C(CH₃)₃；

各个R⁴独立地选自卤原子、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₇烷基、C₂-C₇烯基、-CN、-CF₃、-OCF₃、SCH₃、-SO₂(CH₃)、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈环烷氧基、C₁-C₆卤代烷基、苯基、萘基和杂芳基，其中

各个所述R⁴杂芳基选自5-和6-元芳香环，其具有独立地选自N、O和S的1、2或3个杂原子，所述R⁴杂芳基通过选自C或N的环原子连接，

各个所述R⁴苯基、萘基和杂芳基被0至4个取代基取代，所述取代基独立地选自卤原子、-OR⁵、-SR⁵、-N(R⁵)₂、-N(C₁-C₆烷基)O(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、C₁-C₆卤代烷基、(C₁-C₆卤代烷氧基)、-NO₂、-CN、-CF₃、-SO₂(C₁-C₆烷基)、-S(O)(C₁-C₆烷基)、-NR⁵SO₂R⁶、SO₂N(R⁶)₂、-NHCOOR⁶、-NHCOR⁶、-NHCONHR⁶、-CO₂R⁵、-C(O)R⁵和-CON(R⁵)₂，所述R⁴苯基、萘基和杂芳基的2个相邻取代基可一起形成3-元至6-元环，其含有独立地选自N、O和S的0至3个杂原子；

各个R⁵独立地为H或C₁-C₆烷基；

各个R⁶独立地为H、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基(C₁-C₅)烷基、芳基、芳基(C₁-C₄)烷基、杂芳基、杂芳基(C₁-C₄烷基)、杂环基或杂环基(C₁-C₈烷基)；

Y选自-C(O)-、-C(O)O-和-C(O)NH-；

M选自C₄-C₇亚烷基和C₄-C₇亚烯基，其中所述M被独立地选自C₁-C₈烷基的0至3个取代基取代，条件是两个相邻取代基可一起形成3至6元环。

本发明还包括含有本发明化合物的药物组合物和制备这些药物组合物的方法。本发明进一步包括治疗或降低HCV感染的一种或多种症状的可能性或严重性的方法。

本发明的其它实施方案、方面和特征在随后的说明书、实施例和所附权利要求中进一步描述或应从其中显而易见。

发明详述

本发明包含式(I)化合物及其药学可接受的盐。这些化合物及它们药学可接受的盐是HCV蛋白酶抑制剂(例如HCV NS3蛋白酶抑制剂)。优选的化合物是那些针对HCV NS3基因型1b R155K具有高活性(例如5nM或更小、1nM或更小、0.5nM或更小或0.1mM或更小的Ki)的化合物。R155K是自然界发生的HCV 1b突变并提供针对一些NS3蛋白酶抑制剂的抗性。下文实施例85说明不同化合物提供针对这一突变高活性的能力。

本申请中式I化合物包括式I中包含的不同实施方案和亚式(式Ia和Ib)的化合物。

式I化合物的不同实施方案包括下列：

在第一实施方案中，选自：

其他取代基如上式I中提供。在第一实施方案的一方面，存在0或1个R⁴，以及如果存在，其选自-Br、-Cl、-CN、苯基、-O-苯基、-OCF₃、

-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

在第二实施方案中，R¹是-CO₂H，其他取代基如上式I或上述第一实施方案中提供。

在第三实施方案中，R¹是-C(O)NHSO₂环丙基，其他取代基如上式I或第一实施方案中提供。

在第四实施方案中，R²是-CH₂CH₃，其他取代基如上式I或第一至第三实施方案中提供。

在第五实施方案中，R²是-CH＝CH₂，其他取代基如上式I或第一至第三实施方案中提供。

在第六实施方案中，R³是环戊基，其他取代基如上式I或第一至第五实施方案中提供。

在第七实施方案中，R³是环己基，其他取代基如上式I或第一至第五实施方案中提供。

在第八实施方案中，R³是-C(CH₃)₃，其他取代基如上式I或第一至第五实施方案中提供。

在第九实施方案中，M选自

其中Z是

其他取代基如上式I或第一至第八实施方案提供。

在本发明的另一方面，式I化合物具有下列结构：

式Ia

其中“a”是任选存在的键，R⁴如果存在，其选自-Br、-Cl、-CN、苯基、-O-苯基、-OCF₃、-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃

式Ia化合物的不同实施方案包括下列：

在第一实施方案中，R⁴存在并选自-Br、-Cl、-CN、-OCF₃、-OCH₃、

-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

在第二实施方案中，R⁴不存在。

在第三实施方案中，“a”不存在和R⁴如上述通式Ia或第一或第二实施方案中提供。

在第四实施方案中，“a”存在和R⁴如上述通式Ia或第一或第二实施方案中提供。

在本发明的另一方面，式I化合物具有以下结构：

式Ib

其中“a”是任选存在的键和R⁴如果存在，其选自-Br、-Cl、-CN、苯基、-O-苯基、-OCF₃、-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

式Ib化合物的不同实施方案包括下列：

在第一实施方案中，R⁴存在并选自-Br、-Cl、-CN、-OCF₃、

-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

在第二实施方案中，R⁴不存在。

在第三实施方案中，“a”不存在，R⁴如上述通式Ia或第一或第二实施方案中提供。

在第四实施方案中，“a”存在，R⁴如上述通式Ia或第一或第二实施方案中提供，

在本发明的另一实施方案中，本发明的化合物是如下显示的实施例1至84中提供的化合物或其药学可接受的盐。

本发明的其他实施方案包括下列：

(a)药物组合物，其包含有效量的式(I)化合物和药学可接受的载体。

(b)(a)的药物组合物，其进一步包含选自HCV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂。

(c)(b)的药物组合物，其中HCV抗病毒剂是选自HCV蛋白酶抑制剂和HCV NS5B聚合酶抑制剂的抗病毒剂。

(d)药物组合，其是(i)式(I)化合物和(ii)选自HCV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂；其中式(I)化合物和第二治疗剂分别以使组合有效抑制HCV NS3蛋白酶、或治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状的可能性或严重性的量应用。.

(e)(d)的组合，其中HCV抗病毒剂是选自HCV蛋白酶抑制剂和HCV NS5B聚合酶抑制剂的抗病毒剂。

(f)在需要其的对象中抑制HCV NS3蛋白酶的方法，其包括向对象施用有效量的式(I)化合物。

(g)在需要其的对象中治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的方法，其包括向对象施用有效量的式(I)化合物。

(h)(g)的方法，其中式(I)化合物与有效量的选自HCV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的至少一种第二治疗剂组合施用。

(i)(h)的方法，其中HCV抗病毒剂是选自HCV蛋白酶抑制剂和HCV NS5B聚合酶抑制剂的抗病毒剂。

(j)在需要其的对象中抑制HCV NS3蛋白酶的方法，其包括向对象施用药物组合物(a)、(b)或(c)或组合(d)或(e)。

(k)在需要其的对象中治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的方法，其包括向对象施用药物组合物(a)、(b)或(c)或组合(d)或(e)。

在上文提供的化合物的实施方案中，应理解的是各个实施方案可与一个或多个其他实施方案组合，达到这种组合提供稳定化合物并与实施方案的描述一致的程度。进一步理解的是上文(a)至(k)提供的组合物和方法的实施方案理解为包括化合物的所有实施方案，其包括由实施方案的组合产生的这些实施方案。

本发明还包括本发明化合物(i)用于(a)抑制HCV NS3蛋白酶或(b)治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性，(ii)用作(a)抑制HCV NS3蛋白酶或(b)治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的药物，或(iii)在制备(a)抑制HCV NS3蛋白酶或(b)治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的药物中的用途。在这些用途中，本发明的化合物可以任选与一种或多种选自HCV抗病毒剂、抗感染剂和免疫调节剂的第二治疗剂组合使用。

本发明的其它实施方案包括上文(a)-(k)中所述的药物组合物、组合和方法以及上述段落中所述的应用，其中所用的本发明化合物是一种上文所述的实施方案、亚实施方案、类或亚类的化合物。在所有这些实施方案中，化合物可以任选以药学可接受的盐的形式使用。

如本文所用，尽管不是必须明确表述的，所有范围包括端点，所有亚范围包括在这些范围中。另外，如本文所用，术语“或”表示选择，当适当时，可以是组合的；即，术语“或”包括每个单独所列的选择以及它们的组合，如果该组合不是互相排斥的。

如本文所用，术语“烷基”是指具有在特定范围内的多个碳原子的任何直链或支链饱和的烷基。因此，例如，“C_1-6烷基”(或“C₁-C₆烷基”)是指任何己基烷基和戊基烷基异构体以及正、异、仲和叔丁基，正和异丙基，乙基和甲基。作为另一个实例，“C_1-4烷基”是指正、异、仲和叔丁基，正和异丙基，乙基和甲基。烷基可如所述被取代。

术语“卤化的”是指其中氢原子已被卤素取代的基团或分子。类似地，术语“卤代烷基”是指卤化的烷基。术语“卤素”(“halogen”或“halo”)是指氟、氯、溴和碘原子(或者称为氟、氯、溴和碘)。

术语“烷氧基”是指“烷基-O-”基。烷氧基可如所述被取代。

术语“亚烯基”是指含有双键和具有在特定范围内的多个碳原子的任何直链或支链亚烯基。因此，例如，“-C_2-6亚烯基-”是指任何C₂至C₆直链或支链亚烯基。亚烯基可如所述被取代。

术语“亚烷基”是指具有在特定范围内的多个碳原子的任何直链或支链亚烷基(或者为烷二基)。因此，例如，″-C_1-6亚烷基-″是指任何C₁至C₆直链或支链亚烷基。亚烷基的实例包括-(CH₂)_1-6-、-(CH₂)_1-4-、-(CH₂)_1-3-、-(CH₂)_1-2-、-CH₂-和-CH(CH₃)-。亚烷基可如所述被取代。

术语“环烷基”是指任何具有在特定范围内的多个碳原子的烷烃或烯烃的环。因此，例如，“C_3-8环烷基”(或“C₃-C₈环烷基”)是指环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。术语“环烷氧基”是指“环烷基-O-”基。环烷基可如所述被取代。

如本文所用，除非另外指出，术语“碳环”(及其变化形式例如“碳环的”或“碳环基”)是指(i)饱和或不饱和的C₃至C₈单环或(ii)饱和或不饱和的C₇至C₁₂双环环系统。(ii)中的各个环独立于另一环或与另一环稠合并且各个环是饱和或不饱和的。碳环基可如所述例如被C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、芳基、卤素、-NH₂或-OH取代。碳环可在任何碳原子与分子的其他部分连接，该连接产生稳定化合物。稠合的双环碳环是碳环的亚型；即，术语“稠合的双环碳环”一般是指C₇至C₁₀双环系统，其中各个环是饱和或不饱和的并且两个相邻碳原子由环系统中的各个环共用。两个环均是饱和的稠合的双环碳环是饱和的双环系统。饱和的碳环还称为环烷基环，例如环丙基、环丁基等等。一个或两个环是不饱和的稠合的双环碳环是不饱和的双环系统。稠合的双环不饱和碳环的亚型是这样的双环碳环，其中一个环是苯环并且另一个环是饱和或不饱和的，通过任何碳原子的连接以产生稳定化合物。该亚型的代表性实例包括

和

当适当时，所述环系统包括特定环原子连接的变量的含义(anindication of variable)。例如，在结构

中，变量R⁴表示为浮动变量，其可连接至任何环原子，条件是这种连接导致稳定环的形成。

术语“芳基”是指芳香族单和多碳环系统，还称为“芳烃”，其中在多环系统中单个的碳环相互稠合或通过单键相互连接。合适的芳基包括苯基、萘基和亚联苯基。芳基可如所述被取代。

术语“杂芳基”和“杂芳环”是指稳定的5或6元单环芳香环，稳定的7至12元双环系统或稳定的11至15元三环系统，其由碳原子和选自N、O和S的一个或多个杂原子组成。在取代的杂芳环含有至少一个氮原子(例如吡啶)的情况下，这些取代可引起N-氧化物形成。代表性杂芳环的实例包含吡啶基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻吩基(thienyl orthiophenyl)、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、

唑基、异

唑基、

二唑基、噻唑基、异噻唑基和噻二唑基。

除非另外明确指出，具体的基团，例如烷基、环烷基、芳基和杂芳基是未取代的。在不同实施方案中，烷基、环烷基、芳基和杂芳基被一至三个取代基取代，所述取代基选自：卤素、C₁-C₂₀烷基、-CF₃、-NH₂、-N(C₁-C₆烷基)₂、-NO₂、氧代基(oxo)、-CN、-N₃、-OH、-O(C₁-C₆烷基)、C₃-C₁₀环烷基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、(C₀-C₆烷基)S(O)_0-2-、芳基-S(O)_0-2-、(C₀-C₆烷基)S(O)_0-2(C₀-C₆烷基)-、(C₀-C₆烷基)C(O)NH-、H₂N-C(NH)-、-O(C₁-C₆烷基)CF₃、(C₀-C₆烷基)C(O)-、(C₀-C₆烷基)OC(O)-、(C₀-C₆烷基)O(C₁-C₆烷基)-、(C₀-C₆烷基)C(O)_1-2(C₀-C₆烷基)-、(C₀-C₆烷基)OC(O)NH-、芳基、芳烷基、杂芳基、杂环基烷基、卤代芳基、卤代芳烷基、卤代杂芳基、卤代杂环基烷基、氰芳基、氰芳烷基、氰杂环和氰杂环基烷基。

除非有明确相反的说明，本文所引用的所有范围包括端点。例如，描述为含有“1至3个杂原子”的杂芳基环意思是可含有1、2或3个杂原子的环。还应理解的是本文所引用的任何范围被包括在它的范围内，所有亚范围包括在那个范围内。杂原子N和S的氧化形式也还包括在本发明的范围内。

当任何变量(例如L)在任何组成或式(I)或本发明说明或描述化合物的任何其他式中出现超过一次时，其在各次出现的定义独立于其在其他各出现处的定义。而且，取代基和/或变量的组合只有在这些组合产生稳定化合物时才被允许。

除非有明确相反的说明，允许在环(例如芳基或杂芳基环)中的任何原子被确定的取代基取代，条件是这种环取代是化学上允许的并产生稳定化合物。“稳定”化合物是指化合物可被制备和分离并保持它的结构和性质或可在足够长的时间段保持实质上未改变以将化合物用于本文所述的目的(例如向对象治疗性或预防性施用)。

作为取代基和取代基方式选择的结果，本发明某些化合物可具有不对称中心，并可作为立体异构体的混合物或作为单独的非对映异构体或对映异构体存在。这些化合物的所有异构形式，无论分离的或是混合物，均在本发明的范围内。

化合物还包括化合物的稳定络合物，例如稳定水合物。

如本领域普通技术人员应认识到的，本发明某些化合物可以作为互变异构体存在。对于本发明的目的，式(I)化合物是指该化合物本身或其任何互变异构体本身或两种或更多互变异构体的混合物。

本发明化合物用于抑制HCV蛋白酶(例如HCV NS3蛋白酶)和治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性。例如，本发明的化合物用于治疗在怀疑过去通过例如输血、体液交换、叮咬、意外针刺的方式暴露于HCV或在手术过程中暴露于患者血液的方式引起的HCV感染。

本发明的化合物用于抗病毒剂化合物筛选测定的制备和实施。例如，本发明的化合物用于分离酶突变体，该酶突变体是更有效的抗病毒剂化合物的良好筛选工具。而且，本发明的化合物用于确立或测定其他抗病毒剂与HCV蛋白酶的结合位点，例如通过竞争性抑制。因此，本发明的化合物可以是用于这些目的而销售的商用产品。

本发明化合物可以药学可接受的盐形式施用。术语“药学可接受的盐”是指具有母体化合物的有效性并且在生物学或其它方面不是不理想的(例如，对其接受者而言既不是有毒的也不是在其它方面有害的)的盐。合适的盐包含酸加成盐，其可例如通过将本发明化合物溶液与药学可接受的酸溶液例如盐酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸或苯甲酸混合形成。许多本发明的化合物具有酸性部分，在这种情况下，其合适的药学可接受的盐可包括碱金属盐(例如钠或钾盐)、碱土金属盐(例如钙或镁盐)和与合适的有机配体形成的盐例如季铵盐。而且，在酸(-COOH)或醇基存在的情况下，药学可接受的酯可用于改变化合物的溶解性和水解特征。

提及本发明的化合物时，术语“施用”及其变型(例如“施用”化合物)是指向需要治疗的个体提供化合物或化合物的前药。当本发明的化合物或其前药与一种或多种其它活性剂(例如用于治疗HCV感染的抗病毒剂)联合提供时，“施用”及其变型各自理解为包括同时和相继提供化合物或盐和其它药物。

如本文所用，术语“前药”意指包括无活性药物形式或化合物，其在所施用的个体的机体中通过酶、化学和代谢过程的作用被转化成活性药物形式或化合物。

如本文所用，术语“组合物”意指包括包含特定成分的产物以及组合特定成分直接或间接产生的任何产物。

“药学可接受的”是指药物组合物的成分必须相互兼容并对其接受者无害。

如本文所用，术语“对象”(或者本文称为“患者”)是指作为治疗、观察或实验目标的动物，优选哺乳动物，最优选人。

如本文所用，术语“有效量”是指研究人员、兽医、医生或其他临床医生所探寻的在组织、系统、动物或人中引起生物学或医学反应的活性化合物或药物的量。在一个实施方案中，有效量是缓解所治疗的疾病或病症的一种或多种症状的“治疗有效量”。在另一个实施方案中，有效量是降低疾病或病症的一种或多种症状严重性或可能性的“预防有效量”。该术语在本文中还包括足以抑制HCV NS3蛋白酶从而引起所寻求反应的活性化合物的量(即，“抑制有效量”)。当活性化合物(即，活性成分)作为盐施用时，提及活性成分的量是指游离酸或游离碱形式的化合物。

为了抑制HCV NS3蛋白酶和治疗HCV感染和/或降低HCV感染症状可能性或严重性的目的，本发明化合物，任选以盐的形式，可通过产生活性剂与药物的作用位点接触的方式施用。它们可通过与药物联合中使用的常规方式施用，如作为单个治疗剂或治疗剂组合。它们可单独施用，但通常与基于所选的施用途径和标准药物惯例而选择的药物载体一起施用。本发明的化合物可例如通过一种或多种下列途径施用：口服、肠胃外(包括皮下注射，静脉内，肌肉内，胸骨内注射或灌注技术)，通过吸入(例如以喷雾形式)或直肠给药，以含有有效量化合物和常规无毒性药学可接受载体(carriers)、佐剂和载体(vehicles)的药物组合物单位剂量的形式。适于口服施用的液体制备物(例如悬浮液、糖浆液、酏剂等等)可根据本领域已知技术制备并可利用任何常用介质，例如水、甘油、油、醇等等。适于口服施用的固体制备物(例如粉剂、丸剂、胶囊和片剂)可根据本领域已知技术制备并可利用固体赋形剂，如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等等。肠胃外组合物可根据本领域已知技术制备并可通常利用灭菌水作为载体和任选地其他成分，例如溶解性助剂。注射溶液可根据本领域已知方法制备，其中载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或含有盐和葡萄糖混合物的溶液。适用于制备药物本发明组合物和制备适用于组合物成分的方法的进一步指导在Remington′s Pharmaceutical Sciences，20^th edition(ed.A.R.Gennaro，Mack Publishing Co.，2000)中提供。

本发明的化合物可以单次剂量或分次剂量每天0.001至1000mg/kg哺乳动物(例如人)体重的剂量范围口服施用。一个剂量范围是以单次剂量或分次剂量每天口服0.01至500mg/kg体重。另一个剂量范围是以单次剂量或分次剂量每天口服0.1至100mg/kg体重。用于口服施用时，组合物可以含有1.0至500mg活性成分的片剂或胶囊形式提供，具体地为1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400和500mg活性成分，用于对治疗患者的剂量的症状性调整。用于任何具体患者的具体剂量水平和给药频率可以变化并应取决于多种因素，包括应用的具体化合物的活性、那种化合物的代谢稳定性和作用长度、年龄、体重、一般健康、性别、饮食、施用方式和时间、排泄速度、药物组合、具体病症的严重性和宿主经受的治疗。

如上所述，本发明还涉及利用本发明化合物与一种或多种治疗剂组合抑制HCV NS3蛋白酶、抑制HCV复制或预防或治疗HCV感染的方法，以及包含本发明化合物和一种或多种选自HCV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的治疗剂的药物组合物。这些对HCV具有活性的治疗剂包括利巴韦林、levovirin、viramidine、胸腺素α-1、干扰素-β、干扰素-α、PEG化的干扰素-α(peg干扰素-α)、干扰素-α和利巴韦林的组合、peg干扰素-α和利巴韦林的组合、干扰素-α和levovirin的组合以及peg干扰素-α和levovirin的组合。干扰素-α包括重组干扰素-α2a(例如ROFERON干扰素，获自Hoffmann-LaRoche，Nutley，NJ)、PEG化的干扰素-α2a(PEGASYS)、干扰素-α2b(例如INTRON-A干扰素获自Schering Corp.，Kenilworth，NJ)、PEG化的干扰素-α2b(PEGINTRON)、重组复合干扰素(例如干扰素alphacon-1)和纯化的干扰素-α产品。Amgen的重组复合干扰素具有商标名INFERGEN。Levovirin是利巴韦林的L-对映异构体，其已显示与利巴韦林类似的免疫调节活性。Viramidine表示WO 01/60379中公开的利巴韦林类似物。组合的单个组分可在治疗过程的不同时间分别施用或以分开的或单个的组合形式同时施用。

用于治疗HCV感染时，本发明化合物还可与作为HCV NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的药物组合施用。HCV NS3丝氨酸蛋白酶是重要的病毒酶并已被描述为用于抑制HCV复制的极佳靶向。HCV NS3蛋白酶抑制剂的基于底物和不基于底物的抑制剂在国际专利申请公开WO98/22496、WO 98/46630、WO 99/07733、WO 99/07734、WO 99/38888、WO 99/50230、WO 99/64442、WO 00/09543、WO 00/59929、WO 02/48116和WO 02/48172、英国专利号GB 2337262和美国专利号6,323,180中公开。

利巴韦林、levovirin和viramidine可通过抑制细胞内的酶肌苷单磷酸脱氢酶(IMPDH)调节鸟嘌呤核苷酸的细胞内(intracellular pools)库发挥它们抗HCV作用。IMPDH是在鸟嘌呤核苷酸从头生物合成中对生物合成途径的限速酶。利巴韦林在细胞内易于磷酸化，单磷酸盐衍生物是IMPDH的抑制剂。因此，抑制IMPDH表示用于发现HCV复制抑制剂的另一有效靶向。因此，本发明化合物还可与IMPDH抑制剂组合施用，例如在国际专利申请公开WO 97/41211和WO 01/00622中公开的VX-497；另一个IMPDH抑制剂例如在WO 00/25780中公开的；或霉酚酸酯(mycophenolate mofetil)。参见A.C.Allison和E.M.Eugui，44(Suppl.)Agents Action165(1993).

用于治疗HCV感染时，本发明化合物还可与抗病毒剂金刚胺(1-氨基金刚烷)组合施用。对于该药物的全面描述，参见J.Kirschbaum，12Anal.Profiles Drug Subs.1-36(1983)。

用于治疗HCV感染时，本发明化合物还可与抗病毒剂聚合酶抑制剂R7128(Roche)组合施用。

本发明化合物还可与抗病毒剂2’-C-支链核糖核苷组合用于治疗HCV感染，所述抗病毒剂在R.E.Harry-O’Kuru等人，62 J.Org.Chem.1754-59(1997)；M.S.Wolfe等人，36 Tet.Lett.7611-14(1995)；美国专利号3,480,613；和国际专利申请公开WO 01/90121，WO 01/92282，WO02/32920，WO 04/002999，WO 04/003000和WO 04/002422中公开；各个内容通过引用全部并入本文。这些2’-C-支链核糖核苷包括但不限于2’-C-甲基-胞苷、2’-C-甲基-尿苷、2’-C-甲基-腺苷、2’-C-甲基-鸟苷和9-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-2，6-二氨基嘌呤和核糖C-2’、C-3’和C-5’羟基相应的氨基酸酯和5’-磷酸衍生物的相应任选取代的环1，3-丙二醇酯。

本发明化合物还可与其他核苷组合用于治疗HCV感染，所述其他核苷具有抗HCV性质，例如在国际专利申请公开WO 02/51425，转让给Mitsubishi Pharma Co rp.；WO 01/79246，WO 02/32920，WO 02/48165和WO2005/003147(其包括R1656，(2’R)-2’-脱氧-2’-氟-2’-C-甲基胞苷，显示为第77页化合物3-6)；WO 01/68663；WO 99/43691；WO 02/18404和WO2006/021341和美国专利申请公开US 2005/0038240，其包括4’-叠氮核苷例如R1626，4’-叠氮胞苷；美国专利申请公开US2002/0019363、US 2003/0236216、US 2004/0006007和US 2004/0063658；以及国际专利申请公开WO 02/100415、WO 03/026589、WO 03/026675、WO 03/093290、WO 04/011478、WO 04/013300和WO 04/028481中公开；各个内容通过引用全部并入本文。

用于治疗HCV感染时，本发明化合物还可与作为HCV NS5B聚合酶抑制剂的药物组合施用。可用作组合治疗的这些HCV NS5B聚合酶抑制剂包括但不限于在国际专利申请公开WO 02/057287、WO02/057425、WO 03/068244、WO 2004/000858、WO 04/003138和WO2004/007512；美国专利号6,777,392和美国专利申请公开US2004/0067901中公开的；各个内容通过引用全部并入本文。其他这些HCV聚合酶抑制剂包括但不限于valopicitabine(NM-283；Idenix)和2’-F-2’-β-甲基胞苷(还参见WO 2005/003147)。

在一个实施方案中，用于与本发明HCV NS3蛋白酶抑制剂组合的核苷HCV NS5B聚合酶抑制剂选自下列化合物：4-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-阿糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-甲基氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-二甲基氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-环丙基氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C-乙烯基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C-羟甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C-氟甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-5-甲基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸；4-氨基-5-溴-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-5-氯-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-5-氟-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；2，4-二氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；2-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；2-氨基-4-环丙基氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；2-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；4-氨基-7-(2-C-乙基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2-C，2-O-二甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；2-氨基-5-甲基-7-(2-C，2-O-二甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；4-氨基-7-(3-脱氧-2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(3-脱氧-2-C-甲基-β-D-阿糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-2-氟-7-(2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(3-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(3-C-甲基-β-D-木糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(2，4-二-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；4-氨基-7-(3-脱氧-3-氟-2-C-甲基-β-D-核糖呋喃基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶；和相应的5′-三磷酸盐；或其药学可接受的盐。

本发明化合物还可与HCV聚合酶的非核苷抑制剂组合用于治疗HCV感染，所述HCV聚合酶的非核苷抑制剂例如在国际专利申请公开WO 01/77091；WO 01/47883；WO 02/04425；WO 02/06246；WO 02/20497；WO 2005/016927(特别是JTK003)中公开的；各个内容通过引用全部并入本文；和HCV-796(Viropharma Inc.)。

在一个实施方案中，用于与本发明HCV NS3蛋白酶抑制剂组合得非核苷HCV NS5B聚合酶抑制剂选自下列化合物：14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因(benzodiazocine)-11-羧酸；14-环己基-6-(2-吗啉-4-基乙基)-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲氧基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-3-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；甲基({[(14-环己基-3-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-基)羰基]氨基}磺酰基)乙酸酯；({[(14-环己基-3-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-基)羰基]氨基}磺酰基)乙酸；14-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-3-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-甲酰胺；3-氯-14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因11-羧酸；N′-(11-羧基-14-环己基-7，8-二氢-6H-吲哚并[1，2-e][1，5]氧氮苯并辛因(benzoxazocin)-7-基)-N，N-二甲基乙烷-1，2-二铵双(三氟乙酸)盐；14-环己基-7，8-二氢-6H-吲哚并[1，2-e][1，5]氧氮苯并辛因-11-羧酸；14-环己基-6-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-3-甲氧基-6-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲氧基-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-[3-(二甲基氨基)丙基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-7-氧代-6-(2-哌啶-1-基乙基)-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-(2-吗啉-4-基乙基)-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-[2-(二乙基氨基)乙基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-(1-甲基哌啶-4-基)-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-7-氧代-6-(2-哌啶-1-基乙基)-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-甲酰胺；14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-甲酰胺；14-环戊基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-氧代-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；6-烯丙基-14-环己基-3-甲氧基-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环戊基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；14-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-5，6，7，8-四氢吲哚并[2，1-a][2，5]苯并二吖辛因-11-羧酸；13-环己基-5-甲基-4，5，6，7-四氢呋喃[3′，2′：6，7][1，4]二吖辛因[1，8-a]吲哚-10-羧酸；15-环己基-6-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-氧代-6，7，8，9-四氢-5H-吲哚并[2，1-a][2，6]苯并氮杂

(benzodiazonine)-12-羧酸；15-环己基-8-氧代-6，7，8，9-四氢-5H-吲哚并[2，1-a][2，5]苯并氮杂

-12-羧酸；13-环己基-6-氧代-6，7-二氢-5H-吲哚并[1，2-d][1，4]苯并二氮-10-羧酸；及其药学可接受的盐。

本发明化合物的HCV NS3蛋白酶抑制活性可使用本领域已知的测试来检测。一种这类测试是如下和在国际专利申请公开WO 2006/102087描述的HCV NS3蛋白酶时间分辨荧光(TRF)测试。这类测试的其他实例在例如国际专利申请公开WO 2005/046712中描述。

例如可在含有50mM HEPES pH 7.5、150mM NaCl、15％甘油、0.15％TRITON X-100、10mM DTT和0.1％PEG 8000的测试缓冲液中以终体积100μl进行NS3蛋白酶测试。NS3和NS4A蛋白酶与DMSO中不同浓度的抑制剂预温育30分钟。通过加入TRF肽底物(终浓度100nM)开始反应。将NS3调节的底物水解在1小时后在室温用100μl的500mM MES，pH 5.5淬灭。利用在340nm激发和在615nm具有400μs延迟的发射，使用VICTOR V2或FUSION荧光光度计(Perkin Elmer Lifeand Analytical Sciences)检测产物荧光。选择不同酶形式的测试浓度以产生信号与背景比值(S/B)为10-30。使用对数据的标准四参数拟合得出IC₅₀值。使用下式从IC₅₀值得出K_i值。

IC₅₀＝K_i(1+[S]/K_M)，等式(1)，

其中[S]是反应中底物肽的浓度且K_M是米氏常数。参见P.Gallinari等人，38 B_IOCHEM.5620-32(1999)；P.Gallinari等人，72J.V_IROL.6758-69(1998)；M.Taliani等人，240 A_NAL.B_IOCHEM.60-67(1996)。

本发明还包含制备式(I)化合物的方法。本发明化合物可使用容易得到的起始原料、反应物和常规合成步骤，根据下列反应方案和实施例或修改容易制备的。在这些反应中，还可能的是使用变体，其本身是本领域普通技术人员已知的，但未更详细的提及。而且，根据下列反应方案和实施例，制备本发明的化合物的其他方法对本领域普通技术人员应是显而易见的。除非另外指出，所有变量如上定义。下列反应方案和实施例仅用于说明本发明及其实践。

烯烃易位反应催化剂包括下列基于钌的种类：F.Miller等人，118 J.AM.C_HEM.SOC.9606(1996)；G.Kingsbury等人，121 J.Am.Chem.Soc.791(1999)；H.Scholl等人，1 O_RG.LETT.953(1999)；美国专利申请公开US2002/0107138；K.Furstner等人，64 J.O_RG.C_HEM.8275(1999)。这些催化剂在环闭合易位反应中的用途在文献中是熟知的(例如Trnka和Grubbs，34 ACC.C_HEM.R_ES.18(2001)。

下列实施例仅用于说明本发明及其实践。实施例不解释为限制本发明的范围或精神。

缩写表

BOC(还称为Boc) 叔丁氧基羰基

B(OMe)₃ 三甲基硼酸盐

BOP 苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲基氨基)-

六氟

磷酸盐

Brosyl chloride 4-溴苯基磺酰氯

tBuOH 叔丁醇

BuLi 丁基锂

CAN 硝酸铵高铈(Ceric ammonium nitrate)

CDCl₃ 氘-三氯甲烷

CDI N，N′-羰基二咪唑

CH₃CN 乙腈

mCPBA 间氯过苯甲酸

Cs₂CO₃ 碳酸铯

CuI 碘化铜

Cu(I)Br·SMe₂ 溴化铜(I)二甲基硫络合物

DABCO 1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷

DBA(还称为dba) 二亚苄基丙酮

DBU 1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯

DCC 二环己基碳二亚胺

DCE 二氯乙烷

DCM 二氯甲烷

DEAD 二乙基偶氮二羧酸酯

DIAD 二异丙基偶氮二羧酸酯

DIEA 二乙胺

DIPA 二乙基丙胺

DIPEA 二异丙基乙胺

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

DPPF(还称为dppf) 1，1′-双(二苯基膦)二茂铁

EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺

ESI 电喷射离子化

Et₂O 二乙醚

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

H₂ 氢或氢气

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲

(uronium)六氟磷酸盐

HBr 氢溴酸

HCl 盐酸

HMPA 六甲基磷酰胺

HOAc 乙酸

HOAt 1-羟基-7-氮杂苯并三唑

HOBT 1-羟基苯并三唑

H₂O 水

H₂O₂ 过氧化氢

HPLC 高效液相色谱

I₂ 碘

KHSO₄ 硫酸氢钾

K₂SO₄ 硫酸钾

K₂CO₃ 碳酸钾

KOH 氢氧化钾

LAH 氢化锂铝

LCMS 高效液相色谱质谱

LiOH 氢氧化锂

LiOH·H₂O 一水合氢氧化锂

LRMS 低分辨率质谱

Me₃Al 三甲基铝

MeLi 甲基锂

MeOH 甲醇

MgSO₄ 硫酸镁

MsCl 甲磺酰氯

N₂ 氮或氮气

NH₄Cl 氯化铵

NH₄OH 氢氧化铵

Nle 正亮氨酸

NMP N-甲基吡咯烷酮

NaH 氢化钠

NaHCO₃ 碳酸氢钠

NaHSO₃ 亚硫酸氢钠

NaOH 氢氧化钠

NaOMe 甲醇钠

Na₂SO₃ 亚硫酸钠

Na₂S₂O₃ 硫代硫酸钠

Na₂SO₄ 硫酸钠(无水)

PCy₃ 三环己基膦

POBr 磷酰溴

POBr₃ 磷酰三溴

P₂O₅ 五氧化膦(P₄O₁₀)

Pd/C 碳上钯

PhMe 甲苯

PPh₃ 三苯基膦

RT 室温，大约25C

Ru/C 碳上钌

SiO₂ 二氧化硅或硅胶

TBAF 四丁基氟化铵

TBTU O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼

酸盐

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TIPSOTf 三异丙基甲硅烷基三氟甲磺酸盐

TMSCl 氯三甲基硅烷

TsCl 对甲苯磺酰基氯

Zn(CN)₂ 氰化锌

中间体合成

中间体A

中间体A3：(1R，2R)-1-氨基-N-(环丙基磺酰基)-2-乙基环丙烷甲酰胺盐酸盐

步骤1：叔丁基((1R，2R)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙基环丙基)氨基甲酸酯

向氢化容器中加入叔丁基((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)氨基甲酸酯(164g，0.50mol)(US 6,995,174)和5％Ru/C(干，7.5wt％，12.4g)的MeOH(1000mL)浆液并搅拌。将容器置于N₂(20psi)下并排气至大气压(3x)以除去残留的氧。然后将容器置于H₂(50psi)下。20小时后，将容器排气至大气压。然后将反应浆液转移出反应容器并通过SOLKA FLOK(34g，用100mL MeOH湿化)过滤，得到清澈的、浅褐色溶液。将SOLKA FLOK用MeOH(200mLx2)漂洗。合并的MeOH溶液在减压下浓缩，得到作为白色固体的粗产物(153g)。粗产物在EtOAc(800mL)中浆液化，温热至40℃并熟化30分钟。然后向溶液中加晶种，熟化30分钟，并通过滴液漏斗用30分钟加入庚烷(500mL)。将部分结晶的固体冷却至RT并熟化过夜，之后加入另外的庚烷(500mL)。1小时后，通过滴液漏斗加入另外的庚烷(250mL)并将白色浆液保持1小时。过滤溶液并用庚烷/EtOAc(500mL，4∶1)漂洗固体，在减压下干燥得到叔丁基((1R，2R)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙基环丙基)氨基甲酸酯(125.9g)。

步骤2：(1R，2R)-1-氨基-N-(环丙基磺酰基)-2-乙基环丙烷甲酰胺盐酸盐(中间体A3)

将步骤1的产物(92g，0.28mol)的DCM(1200mL)溶液冷却至0℃，，往该溶液中鼓入HCl 10分钟。然后除去冷却浴并将反应混合物搅拌2小时。往反应混合物中鼓入N₂5分钟，将挥发物蒸发。残余物与DCM(3x)共沸得到乳白色粉末(75g)。LRMS(M+H)⁺计算值＝233；实际值233。

中间体A4：反式-4-戊-4-烯-1-基四氢呋喃-3-醇

在-5℃向CuI(1.66g，8.71mmol)在THF(100mL)中的混合物中加入0.5M溴(戊-4-烯-1-基)镁溶液(116mL，5.81mmol)。将溶液搅拌1小时并冷却至-20℃。滴加3，6-二氧杂二环[3.1.0]己烷(5.0g，58.1mmol)并将反应混合物缓慢温热至RT并搅拌15小时。反应混合物用NH₄Cl_(aq.)淬灭并用Et₂O(3x)萃取。合并的有机物用H₂O和盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥、过滤和浓缩。粗产物在SO₂上纯化(梯度洗脱，10-100％EtOAc/己烷)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ5.83-5.75(m，1H)；5.04-4.95(m，2H)；4.14-4.07(m，3H)；3.85(m，1H)；3.70(m，1H)；3.44(m，1H)；2.07(m，3H)；1.45(m，3H)ppm.

中间体A5：反式-2-戊-4-烯-1基环戊醇

用20分钟将5-溴戊-1-烯(11.81mL，100mmol)的Et₂O(100mL)溶液加入镁(2.43g，100mmol)中。产生的悬浮液在回流下加热40分钟，然后冷却至20℃，吸至注射器中，并在-5℃滴加至搅拌过的CuI(3.17g，16.6mmol)在THF(160mL)中的悬浮液中。将得到的溶液在-5℃搅拌30分钟，然后冷却至-20℃。滴加环戊烯氧化物(7.21mL，83mmol)并用2小时将得到的混合物温热至20℃，然后搅拌48小时。通过加入NH₄Cl_(aq.)将反应淬灭；然后分离各层并用Et₂O萃取水层。用H₂O和盐水洗涤合并的有机相，然后用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到残余物，通过SiO₂上的柱色谱(梯度洗脱，1-100％EtOAc/石油醚)纯化，得到作为液体的标题化合物(7.92g，62％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)

5.88-5.76(m，1H)，5.01(d，J＝17.2Hz，1H)，4.95(d，J＝10.6Hz，1H)，3.83(brs，1H)，2.12-2.00(m，2H)，1.99-1.84(m，2H)，1.76-1.30(m，7H)，1.24-1.11(m，2H).

中间体A6：反式-2-丁-3-烯-1基环戊醇

以中间体A5类似方式，使用溴化丁-3-烯基镁制备标题化合物。

中间体A7：反式-2-烯丙基-1基环戊醇

以中间体A5类似方式，使用溴化烯丙基镁制备标题化合物。

中间体A8：(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基乙酸酯

将AMANO LIPASE PS(7.0g，64.7mmol)加入反式-2-戊-4-烯-1-基环戊醇(10.0g，64.7mmol)和乙酸乙烯酯(19.5g，129.4mmol)的Et₂O(275mL)的溶液中。将混合物搅拌16小时，然后通过硅藻土过滤。浓缩滤液得到残余物，将残余物通过SiO₂柱色谱纯化(梯度洗脱，0-100％Et₂O/石油醚)，在第一流分中得到标题化合物(5.43g，43％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ5.89-5.72(m，1H)，5.00(d，J＝18.1Hz，1H)，4.95(d，J＝11.0Hz，1H)，4.82-4.73(m，1H)，2.11-1.98(m，2H)，2.03(s，3H)，1.98-1.85(m，3H)，1.71-1.60(m，3H)，1.50-1.35(m，3H)，1.29-1.14(m，2H)；[α]_D＝-36.1(c＝0.73CHCl₃中)。后出的流分含有富对映体(enantio-enriched)的(1S，2S)-2-戊-4-烯-1-基环戊醇。

中间体A9：(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊醇

将搅拌过的(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基乙酸酯(3.79g，19.3mmol)的MeOH(320ml)溶液用甲醇NaOMe(25％，8.1ml，35.4mmol)处理并在20℃搅拌15小时。分批加入DOWEX 50WX8-100离子交换树脂(用MeOH洗涤过)直到pH是中性，然后将混合物通过硅藻土过滤。在真空中浓缩滤液并将残余物在EtOAc和H₂O之间分配。分离有机层，用盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到作为液体的标题化合物(2.61g，88％)，将其直接用于随后的反应。[α]D-37.3(c＝0.65，CHCl₃).

中间体A10(1R，2R)-2-丁-3-烯-1-基环戊醇

使用中间体A9的制备中所述的方法，从中间体A6制备标题化合物。

中间体A11：(1R，2R)-2-烯丙基-1-基环戊醇

使用中间体A9的制备中所述的方法，从中间体A7制备标题化合物。

中间体A12：2-丁-3-烯-1-基环丙醇

在-78℃，将1.0M溴化己烯基镁(113ml，113mmol)溶液缓慢加入甲酸甲酯(3.53ml，56.5mmol)和三异丙醇氯化钛(56.5ml，56.5mmol)在THF(210mL)中的混合物中。将反应物在-78℃搅拌10分钟，然后将其温热至-40℃并熟化2小时。将反应物温热至室温，然后加热至40℃1小时。在冰冷的10％硫酸(500mL)中将反应淬灭。将产物用二乙基醚(3X100mL)萃取，用饱和NaHCO_3(aq.)、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和浓缩得到～15gm油。使用5-15％乙酸乙酯/己烷，将油在二氧化硅上层析得到作为油的标题化合物(1.0g，8％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)

5.80(m，1H)，5.02(d，J＝17.2Hz，1H)，4.95(d，J＝10.6Hz，1H)，3.21(m，1H)，2.20-2.00(m，2H)，1.88(s，1H)，1.45-1.15(m，4H)，0.92(m，1H)，0.70(m，1H)，0.36(m，1H).

中间体B

中间体B1：(2S)-环戊基[({[(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基]氧基}羰基) 氨基]乙酸

步骤1：甲基(2S)-环戊基(异氰酸基)乙酸酯

将(2S)-氨基(环戊基)乙酸甲酯盐酸盐(3.21g，16.57mmol)在DCM(69mL)和饱和NaHCO_3(aq.)(132mL)中的悬浮液冷却至0℃，用三光气(2.21g，7.46mmol)处理。将混合物在0℃搅拌3小时，然后温热至20℃并用DCM稀释。分离各层并用DCM再萃取水相。用盐水洗涤合并的有机相并用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到作为油状固体的标题化合物(2.95g，97％)，其直接用于随后的步骤。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ4.36(d，J＝4.8Hz，1H)，3.73(s，1H)，2.35-2.24(m，1H)，1.76-1.24(m，8H).

步骤2：甲基(2S)-环戊基[({[(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]乙酸酯

将甲基(2S)-环戊基(异氰酸基)乙酸酯(1.57g，8.56mmol)和(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊醇(中间体A9)(1.20g，7.78mmol)在PhMe(56mL)中的溶液用DMAP(O.95g，7.78mmol)分批处理。将得到的混合物在85℃搅拌5小时，然后冷却至20℃并用EtOAc和HCl_(aq.)(1N)稀释。分离有机层，用盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到残余物，其通过柱色谱(梯度洗脱，4-40％Et₂O/石油醚)纯化得到作为油的标题化合物(1.97g，76％)。LCMS(ES+)m/z 338(M+H)⁺.

步骤3：(2S)-环戊基[({[(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]乙酸

将在THF∶H₂O为1∶1的混合物(60mL)中的甲基(2S)-环戊基[({[(1R，2R)-2-戊-4-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]乙酸酯(1.97g，5.84mmol)和LiOH·H₂O(O.74g，17.51mmol)混合物加热至40℃。将溶液搅拌4小时，然后冷却至20℃。在减压下除去THF并用EtOAc萃取剩余的水溶液。用H₂O和盐水洗涤有机相，然后用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到作为油的标题化合物(1.85g，98％)，其直接用于随后的步骤。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ12.25(br s，1H)，7.28(d，J＝8.1Hz，1H)，5.84-5.71(m，1H)，4.98(d，J＝17.4Hz，1H)，4.92(d，J＝10.1Hz，1H)，4.60-4.52(m，1H)，3.78(t，J＝8.O Hz，1H)，2.18-2.05(m，1H)，2.04-1.94(m，3H)，1.91-1.74(m，3H)，1.70-1.06(m，15H).

中间体B2：(2S)-[({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基)氨基](环己基)乙酸

步骤1：甲基(2S)-[({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基)氨基](环己基)乙酸酯

将N，N′-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(8.28g，32.3mmol)和三乙胺(4.51ml，32.3mmol)加入中间体A11(3.4g，26.9mmol)的乙腈(70ml)溶液中，并在N₂气下留置搅拌6小时。将甲基(2S)-氨基(环己基)乙酸酯盐酸盐(8.39g，40.4mmol)和三乙胺(7.51ml，53.9mmol)加入反应物中混合物中，在N₂气下留置搅拌12小时。将反应物在真空中浓缩，用EtOAc稀释并用1N HCl、盐水、饱和NaHCO₃和盐水洗涤有机物。用Na₂SO₄干燥有机物，过滤，在减压下除去挥发物得到残余物，其通过柱色谱(梯度洗脱，10-30％EtOAc/己烷)纯化得到作为油的标题化合物(5.2g，60％)。LCMS(ES+)m/z 324.08(M+H)⁺.

步骤2：(2S)-[({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基)氨基](环己基) 乙酸

将LiOH·H₂O(2.02g，48.2mmol)加入中间体B2步骤1中得到的产物(5.2g，16.1mmol)在THF∶MeOH∶H₂O为2∶1∶1的混合物(100mL)中的溶液中并搅拌12小时。在减压下除去有机物；用稀盐酸酸化剩余的水溶液并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相并用Na₂SO₄干燥。过滤并除去挥发物得到作为油的标题化合物(4.9g，100％)，其直接用于随后的步骤。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)∶δ5.77(ddt，J＝17.0，10.2，6.8Hz，1H)；5.08(d，J＝8.8Hz，1H)；5.07-4.91(m，2H)；4.75(s，1H)；4.30(dd，J＝9.0，4.9Hz，1H)；2.27-2.19(m，1H)；2.05-1.71(m，10H)；1.81-1.48(m，6H)；1.36-1.04(m，8H).

中间体B3：甲基(2S)-[({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基)氨基](环戊基)乙酸酯

使用中间体B2的制备中所述的方法，从(2S)-氨基(环戊基)乙酸甲酯盐酸盐和中间体A11制备标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ5.85-5.71(m，1H)；5.08(d，J＝8.7Hz，1H)；5.07-4.93(m，2H)；4.75(s，1H)；4.35-4.27(m，1H)；2.31-2.19(m，2H)；2.10-1.75(m，4H)；1.93-1.59(m，2H)；1.92-1.33(m，8H)；1.49-1.22(m，3H).

中间体B4：甲基N-({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基)-3-甲基-L- 缬氨酸酯

使用中间体B2的制备中所述的方法，从3-甲基-L-缬氨酸甲酯盐酸盐和中间体A11制备标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ5.83-5.71(m，1H)；5.17(d，J＝9.7Hz，1H)；5.04(s，1H)；5.03-4.91(m，1H)；4.74(s，1H)；4.19(d，J＝9.5Hz，1H)；2.32-2.14(m，1H)；2.02-1.82(m，4H)；1.68-1.61(m，3H)；1.35-1.13(m，2H)；1.03(s，9H).

中间体B5：N-{[(2-丁-3-烯-1-基环戊基)氧基]羰基}-3-甲基-L-缬氨酸

使用中间体B2的制备中所述的方法，从3-甲基-L-缬氨酸甲酯盐酸盐和中间体A6制备标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.80(m，1H)，5.17(d，J＝8.9Hz，1H)，5.00(d，J＝17.1Hz，1H)，4.94(d，J＝10.6Hz，1H)，4.72(brs，1H)，4.19(d，J＝8.9Hz，1H)，2.08(m，2H)，1.92(m，3H)，1.64(m，4H)，1.38-1.12(m，2H)，1.02(s，9H).

中间体B6：(2S)-({[(2-丁-3-烯-1-基环丙基)氧基]羰基}氨基)(环戊基) 乙酸

使用中间体B 1的制备中所述的方法，从(2S)-氨基(环戊基)乙酸甲酯盐酸盐和中间体A12制备标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)5.82(m，1H)，5.20(m，1H)，5.02(d，J＝17.1Hz，1H)，4.95(d，J＝10.6Hz，1H)，4.40-3.60(m，4H)，2.40-1.50(m，8H)，1.50-1.20(m，4H)，1.02(m，1H)，0.82(m，1H)，0.51(m，1H).

中间体B7：(2S)-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基](环戊基)乙酸

使用中间体B1的制备中所述的方法，从(2S)-氨基(环戊基)乙酸甲酯盐酸盐和中间体A10制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 310.0(M+H)+.

中间体C

中间体C1：2-丁-3-烯-1-基异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

将高酞酸酐(1.5g，9.25mmol)、3-丁烯-1-胺(1.129ml，11.10mmol)和4A分子筛(300mg)在甲苯(15ml)中合并，在微波中加热至160℃40分钟。用CH₂Cl₂稀释反应混合物并用硅藻土过滤浆液。在真空中浓缩滤液并通过柱色谱(梯度洗脱，10-20％EtOAc/己烷)纯化产生的残余物得到作为油的标题化合物(0.75g，36％)。LCMS(ES+)m/z 216.03(M+H)+.

中间体C2：2-丁-3-烯-1-基-6-甲氧基异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

步骤1：2-(羧甲基)-4-甲氧基苯甲酸

将二异丙胺(3.43ml，24.07mmol)的THF(3mL)溶液冷却至-78℃并滴加正丁基锂(9.63ml，24.07mmol)，将溶液温热至0℃5分钟，然后再冷却至-78℃。滴加在THF(3mL)中的4-甲氧基-2-甲基苯甲酸(1g，6.02mmol)和二甲基碳酸酯(1.013ml，12.04mmol)。在加入完毕后，将反应物缓慢温热至RT并搅拌4小时。用10mL的H₂O淬灭反应并将其搅拌16小时。分离各层，用H₂O(2x)洗涤有机物，在冰浴中合并所有的水相萃取液并用6N HCl将pH调整至2～3。过滤产生的白色沉淀并在真空下干燥得到作为白色固体的标题化合物(1.09g，86％)。LCMS(ES+)m/z211.05(M+H)⁺.

步骤2：2-丁-3-烯-1-基-6-甲氧基异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

根据中间体C1的步骤，使用2-(羧甲基)-4-甲氧基苯甲酸代替高酞酸酐制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 246.04(M+H)⁺.

中间体C3：2-丁-3-烯-1-基-6-氯异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

根据中间体C2的步骤，使用2-(羧甲基)-4-氯苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 250.01(M+H)⁺.

中间体C4：2-丁-3-烯-1-基-7-氟异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

根据中间体C2的步骤，使用2-(羧甲基)-5-氟苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 234.08(M+H)⁺.

中间体C5：2-烯丙基异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮

根据中间体C1的步骤，使用丙-2-烯-1-胺代替3-丁烯-1-胺制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 202.04(M+H)⁺.

中间体D

中间体D1：3-烯丙基喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

根据Chern，Ji-Wang，J.Heterocyclic Chem.，27，1467(1990)制备标题化合物。

中间体D2：3-烯丙基-7-溴喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

步骤1：4-溴-2-[(乙氧基羰基)氨基]苯甲酸

在室温下将氯甲酸乙酯(5.00ml，52.1mmol)加入2-氨基-4-溴苯甲酸(3.75g，17.36mmol)的THF(70ml)溶液中。将混合物加热至70℃并留置搅拌24小时。将反应物浓缩得到油状固体。用甲苯(50mL)稀释产生的固体，浓缩，然后用5％乙醚/己烷(100mL)研磨，过滤，然后用己烷洗涤固体，得到作为固体的标题化合物(4.6gm，92％)。LCMS(ES⁺)m/z 287.88(M+H)⁺.

步骤2：3-烯丙基-7-溴喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

在室温下将BOP(8.47g，19.16mmol)加入4-溴-2-[(乙氧基羰基)氨基]苯甲酸(4.6g，15.97mmol)、N-甲基吗啉(3.51ml，31.9mmol)和烯丙基胺(1.434ml，19.16mmol)的DMF(50ml)溶液中。将混合物在室温搅拌4小时。将DBU(24.07ml，160mmol)加入反应物中并将温度升高至60℃。将混合物在60℃搅拌1小时。将混合物在0.5N HCL(200mL)淬灭并用3N HCL将pH调整至1.5。观察到深白色(thick white)固体。将反应物用水稀释至～400mL，搅拌10分钟和过滤固体。用0.5N HCL(50mL)洗涤固体，然后用水洗涤浆液并吸干过夜得到作为固体的标题化合物(4.5gm，100％)。LCMS(ES⁺)m/z 280.87(M+H)⁺.

中间体D3：3-烯丙基-7-氯喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-4-氯苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 236.98(M+H)⁺.

中间体D4：3-烯丙基-7-(三氟甲基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 271.25(M+H)⁺.

中间体D5：3-烯丙基-7-(甲基磺酰基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-4-甲基磺酰基苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 281.3(M+H)⁺.

中间体D6：3-烯丙基-7-(甲氧基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-4-甲氧基苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 233.1(M+H)⁺.

中间体D7：3-烯丙基-8-甲氧基喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-3-甲氧基苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 233.3(M+H)⁺.

中间体D8：3-烯丙基-5-甲氧基喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮

利用与中间体D2类似的步骤，使用2-氨基-6-甲氧基苯甲酸制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 233.02(M+H)⁺.

中间体D9：3-烯丙基-2-羟基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮

将2-氨基吡啶(996mg，10.58mmol)和二乙基烯丙基丙二酸酯(2098μl，10.58mmol)组合并加热至160℃纯(neat)9小时，冷却至室温后。褐色溶液固化。过滤固体并用Et₂O洗涤，得到作为棕褐色固体的标题化合物(580mg，27％)。LCMS(ES+)m/z 203.02(M+H)+.

中间体D10：3-烯丙基-2-羟基-8-甲氧基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮

将双(五氯苯基)烯丙基丙二酸酯(905mg，1.412mmol)和三乙胺(0.359ml，2.58mmol)加入2-氨基-4-甲氧基吡啶(160mg，1.289mmol)的丙酮(6.5ml)浆液中。将浆液搅拌16小时，过滤并用丙酮洗涤，得到作为白色固体的标题化合物(194mg，65％)。LCMS(ES⁺)m/z 233.0(M+H)⁺.

实施例1：(3aR，7S，10S，12R，23E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

步骤1：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-[(2-丁-3-烯-1-基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-3-基)氧基]吡咯烷-1，2-二羧酸酯

将Cs₂CO₃(1.1g，3.39mmol)加入2-丁-3-烯-1-基异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮(0.49g，2.26mmol)和1-叔丁基2-甲基(2S，4S)-4-{[(4-溴苯基)磺酰基]氧基}吡咯烷-1，2-二羧酸酯(1.05g，2.26mmol)的NMP(10mL)溶液中，并在40℃将反应混合物搅拌16小时。将另外部分的1-叔丁基2-甲基(2S，4S)-4-{[(4-溴苯基)磺酰基]氧基}吡咯烷-1，2-二羧酸酯(1.0g，2.16mmol)加入并在40℃将反应混合物搅拌16小时。冷却反应混合物并倾倒至EtOAc和H₂O的混合物上，并分离各层。用H₂O(2x)、1N HCl(1x)和盐水洗涤有机层，用Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。通过柱色谱(梯度洗脱，10-40％EtOAc/己烷)纯化产生的残余物得到作为油的标题化合物(0.83g，83％)。LCMS(ES+)m/z 443.0(M+H)⁺.

步骤2：甲基(4R)-4-[(2-丁-3-烯-1-基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-3-基)氧基]-L-脯氨酸酯

将来自步骤1的一部分产物(150mg，0.34mmol)溶解于CH₂Cl₂(4ml)，在冰浴中冷却，然后加入TFA(4ml)。将反应物温热至室温并搅拌1.5小时。将反应物浓缩并将产生的油在CH₂Cl₂和饱和NaHCO₃之间分配，用CH₂Cl₂(2x)萃取，合并有机物并用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥有机物，过滤，在真空中浓缩，得到作为油的标题化合物(113mg，97％)。LCMS(ES+)m/z 342.9(M+H)⁺.

步骤3：甲基(4R)-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-烯丙基环戊基]氧基}羰基) 氨基]-2-环戊基乙酰基}-4-[(2-丁-3-烯-1-基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-3-基) 氧基]-L-脯氨酸酯

将中间体B3(356mg，1.2mmol)、HATU(424mg，1.115mmol)和DIEA(0.487ml，2.79mmol)加入到步骤2的产物(318mg，0.929mmol)的DMF(8ml)溶液中。搅拌16小时后，将反应混合物用EtOAc稀释并用1N HCl(2x)、盐水、饱和NaHCO₃(2x)、盐水洗涤。用Na₂SO₄干燥有机物，过滤，在真空中浓缩，通过柱色谱(梯度洗脱，15-50％EtOAc/己烷)纯化产生的残余物得到作为油的标题化合物(0.276g，48％)。LCMS(ES+)m/z 620.2(M+H)⁺.

步骤4：甲基(3aR，7S，10S，12R，23E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯

向步骤3的产物(390mg，0.63mmol)的DCE(100mL)脱气溶液中加入对苯醌(20.4mg，0.19mmol)和Zhan 1b催化剂(73mg，0.094mmol)。16小时后，将反应物在真空中浓缩，粗产物通过柱色谱(梯度洗脱，15-40％EtOAc/己烷)纯化，得到作为灰色泡沫的标题化合物(215mg，53％)。LCMS(ES+)m/z 592.1(M+H)⁺.

步骤5：(3aR，7S，10S，12R，23E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸

将一水合氢氧化锂(5.77μl，0.208mmol)加入步骤4的一部分产物(40mg，0.068mmol)的THF∶MeOH∶H₂O 2∶1∶1(2ml)溶液中，并留置搅拌2小时。将反应混合物用6N HCl(35μL)处理。在减压下除去有机物并用EtOAc萃取剩余的水溶液。用盐水洗涤有机物并用Na₂SO₄干燥。过滤并除去溶剂后得到作为白色固体的标题化合物(39mg，100％)。LCMS(ES+)m/z 578.1(M+H)⁺.

步骤6：(3aR，7S，10S，12R，23E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

将中间体A1(21.61mg，0.081mmol)、HATU(30.8mg，0.081mmol)、DIEA(0.047ml，0.270mmol)加入步骤5的产物(39mg，0.068mmol)的DMF(1ml)溶液中，并留置搅拌16小时。将反应物通过逆相层析直接纯化，将产生的产物在真空中浓缩，得到作为白色固体的标题化合物(30mg，56％)。LCMS(ES+)m/z 790.2(M+H)⁺.

根据实施例1中所列步骤和使用适当的中间体A、B和C，制备下列化合物。

实施例13：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯

将Pd/C(21.58mg，0.020mmol)加入实施例1步骤4的产物(80mg，0.135mmol)的THF(4ml)溶液中，并在氢气中搅拌16小时。将反应物通过注射器滤器过滤并在减压下除去有机物。产生的残余物通过柱色谱(梯度洗脱，20-45％ EtOAc/己烷)纯化，得到作为灰色泡沫的标题化合物(66mg，82％)。LCMS(ES⁺)m/z 594.1(M+H)⁺.Rh/C，EtOAc-MeOH(50∶50).

步骤2：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸

根据实施例1步骤5的步骤，使用来自步骤1的产物制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 580.1(M+H)⁺.

步骤3：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

根据实施例1步骤6的步骤，使用来自步骤2的产物制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 792.2(M+H)⁺.

根据实施例1步骤1-4中所列步骤，通过实施例13和使用适当的A、B和C中间体，制备下列化合物。

实施例37：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12- 桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并 [12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，26aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，26，26a-十四氢-1H，10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[19，20][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯

利用实施例1类似步骤，利用中间体C5和B1制备标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 606.2(M+H)⁺.

步骤2：甲基(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12- 桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并 [12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯

将PdOAc₂(6.67mg，0.030mmol)加入到二乙基醚/THF(2ml)中的甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，26aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，26，26a-十四氢-1H，10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[19，20][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯(90mg，0.149mmol)混合物中，并将混合物搅拌5分钟。向该混合物中滴加重氮甲烷(0.97mmol，10当量)的二乙基醚(2mL)溶液。将反应物搅拌10分钟并加入另外的重氮甲烷(2mL)和催化剂。在1hr中，加入另外2次填料的重氮甲烷溶液(2mL)和催化剂，产生～95％的转化。将反应混合物用氮抽气蒸发并通过制备型HPLC纯化残余物得到标题化合物(60mg，65％)。LCMS(ES⁺)m/z 620.1(M+H)⁺.

步骤3：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12- 桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并 [12，11-b]异喹啉-10-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸酯以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 606.1(M+H)⁺.

步骤4：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12- 桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并 [12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，21a，22，22a，23，24，25，25a-十八氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[19，20]环丙[14，15][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环二十并[12，11-b]异喹啉-10-羧酸以66％的产率得到标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 818.4(M+H)⁺.

实施例38：(3aR，7S，10S，12R，24aS)-16-氯-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，22a，23，23a，24，24a-十六氢-1H，10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19]环丙[15，16][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并 [12，11-b]异喹啉-10-甲酰胺

以实施例37类似方式，利用中间体C3和B3制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 838.2(M+H)+.

实施例39：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

步骤1：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]吡咯烷-1，2-二羧酸酯

以实施例1步骤1类似方式，利用3-烯丙基喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮以83％的产率得到标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 430.0(M+H)⁺.

步骤2：甲基(4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]-L- 脯氨酸酯

利用实施例1步骤2类似步骤，利用1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]吡咯烷-1，2-二羧酸酯以99％的产率得到标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 330.0(M+H)⁺.

步骤3：甲基(4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]-2-环戊基乙酰基}-L-脯氨酸酯

按照实施例1步骤3的类似方式，利用甲基(4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]-L-脯氨酸酯和中间体B7以64％的产率得到标题化合物。LCMS(ES⁺)m/z 621.1(M+H)⁺.

步骤4：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯

以实施例1步骤4类似方式，利用甲基(4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]-2-环戊基乙酰基}-L-脯氨酸酯以93％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 593.1(M+H)+.

步骤5：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并]11，12-b]喹唑啉-10-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 579.1(M+H)+.

步骤6：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸以64％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 791.2(M+H)+.

根据实施例39所列步骤和使用适当的A、B和D中间体，制备下列化合物。

实施例59：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代-16-苯基 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9， 12-桥亚甲基环戊 [18，19们，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-溴-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯

以实施例39类似方式，从中间体D2开始制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 671.0(M+H)+.

步骤2：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-16- 苯基-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯

在密封管中，将含水的碳酸钠(2M，0.223ml，0.447mmol)和Pd(Ph₃P)₄(17.21mg，0.015mmol)加入甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-溴-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯(100mg，0.149mmol)的甲苯(1.5mL)溶液中。加入苯基硼酸(27.2mg，0.223mmol)并将混合物加热至90℃。将反应留置搅拌2小时，将其冷却并用含水的KHSO₄稀释。将产物萃取至乙酸乙酯，用含水的碳酸氢钠洗涤，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩至泡沫。使用20-50％乙酸乙酯/己烷，将泡沫在二氧化硅上层析得到81mg泡沫。LCMS(ES+)m/z 669.0(M+H)+.

步骤3：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代-16-苯基 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-16-苯基-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 867.37(M+H)+.

实施例60：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2R)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙基环丙基)-5，8，19-三氧代-16-苯基 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-16-苯基-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 869.39(M+H)+.

实施例61：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-16-甲基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-16-甲基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b] 喹唑啉-10-羧酸酯

将四甲基锡(0.041ml，0.298mmol)、氯化锂(50.5mg，1.191mmol)、三苯基膦(15.62mg，0.060mmol)和氯化双(三苯基膦)钯(II)(15.68mg，0.022mmol)加入实施例59步骤1的甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-溴-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯(100mg，0.149mmol)的氮吹洗过的DMF(2ml)溶液中。将混合物加热至90℃3小时。将反应物用含水的KHSO₄稀释并将产物萃取至乙酸乙酯。用含水的碳酸氢钠洗涤有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩和使用20-50％乙酸乙酯/己烷在二氧化硅上层析得到作为泡沫的标题化合物，(74mg，82％)。LCMS(ES+)m/z 607.3(M+H)+.

步骤2：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-16-甲基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-16-甲基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 805.3(M+H)+.

实施例62：(1R，14E，18S，22R，26S，29S)-26-环戊基-N-((1R，2R)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙基环丙基)-7-甲基-11，24，27-三氧代-2，23-二氧杂-4，12，25，28-四氮杂戊环[26.2.1.0 ^3，12 .0 ^5，10 .0 ^18，22 ]三十一碳-3，5，7，9，14- 戊烷-29-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-16-甲基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 807.3(M+H)+.

实施例63：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基 -N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯

将氰化锌(5.20μl，0.082mmol)加入实施例59步骤1的甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-溴-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯(50mg，0.074mmol)的氮吹洗过的DMF(1ml)溶液中，然后加入Pd(Ph₃P)₄(8.60mg，7.45μmol)并将混合物在100℃加热3小时。通过反相层析过滤和纯化反应得到标题化合物。(36mg，78％)。LCMS(ES+)m/z618.3(M+H)+.

步骤2：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基 -N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。(ES+)m/z 816.3(M+H)+.

实施例64：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基 -N-((1R，2R)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙基环丙基)-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

以实施例39类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-16-氰基-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯制备标题化合物。(ES+)m/z 818.3(M+H)+.

实施例65：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

步骤1：甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯

以实施例13类似方式，利用1∶1EtOAc∶MeOH中的甲基(4R)-4-[(3-烯丙基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)氧基]-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]-2-环戊基乙酰基}-L-脯氨酸酯和5％碳上铑作为催化剂制备标题化合物。LCMS(ES+)m/z 595.1(M+H)+.

步骤2：(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊 [18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸酯以90％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 581.1(M+H)+.

步骤3：(3aR，7S，10S，12R，25aR)-7-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-5，8，19-三氧代 -1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，22，23，24，25，25a-十六氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(3aR，7S，10S，12R，22E，25aS)-7-环戊基-5，8，19-三氧代-1，2，3，3a，5，6，7，8，11，12，21，24，25，25a-十四氢-10H，19H-9，12-桥亚甲基环戊[18，19][1，10，3，6，12]二氧杂三氮杂环十九并[11，12-b]喹唑啉-10-羧酸以60％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 793.1(M+H)+，

根据实施例59-65所列步骤和使用适当的A、B和D中间体，制备下列化合物。

实施例81

(1R，10E，和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基- 磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5，10-三烯-25-甲酰胺

步骤1：2-(苄氧基)-6-氟吡啶

在氮气下往烘干后的3颈2L圆底烧瓶中加入苄醇(9.04ml，87mmol)和四氢呋喃(75ml)。连接含有2，6-二氟吡啶(10.00g，87mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液的滴液漏斗。将氢化钠(3.82g，96mmol)以小部分(in smallportions)加入，同时搅拌。50℃在油浴中加热45分钟；冷却至室温。滴加滴液漏斗中的内含物。18小时后，倒入水中。用乙酸乙酯萃取三次，用盐水洗涤合并的有机部分，用无水硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发滤液。将粗产物进行快速柱层析，用己烷洗脱。蒸发流分得到作为无色油的标题化合物。(17.70g，87mmol，100％的产率)。LCMS(ES+)m/z 204.3(M+H)⁺.

步骤2：(4R)-4-{[6-(苄氧基)吡啶-2-基]氧基}-1-(叔丁氧羰基)-L-脯氨酸

在氮气下往500mL的3颈圆底烧瓶中加入Boc-L-4-羟基脯氨酸(Chem Impex)(2.00g，8.65mmol)和DMSO(80ml)。连接含有步骤1的产物(1.758g，8.65mmol)的DMSO(10ml)溶液的滴液漏斗。在冰浴中冷却反应至+18℃。在保持内部温度＜20℃的同时缓慢加入叔丁醇钾(2.91g，25.9mmol)。在室温搅拌45分钟。冷却至15℃。滴加滴液漏斗中的内含物。加热至室温。搅拌1.5小时。倒入2.5％硫酸氢钾中。用乙酸乙酯萃取三次，依次用水、盐水洗涤合并的有机部分，用无水硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发滤液得到作为白色泡沫的标题化合物。(3.58g，8.65mmol，100％的产率)。LCMS(ES+)m/z 415.3(M+H)⁺.

步骤3：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-{[6-(苄氧基)吡啶-2-基]氧基}吡咯烷-1，2-二羧酸酯

在氮气下往500mL圆底烧瓶中加入步骤2的产物(7.17g，17.30mmol)、甲醇(50ml)和二氯甲烷(50ml)。连接含有二乙基醚中的三甲基硅烷基重氮甲烷(2.0M)(25.9ml，51.9mmol)的滴液漏斗。在冰浴中冷却反应烧瓶。滴加滴液漏斗中的内含物。起泡(Bubbles)，0.5小时后HPLC/MS表象良好。通过滴加2.5％硫酸氢钾淬灭。蒸发以除去甲醇。加入水。用乙酸乙酯萃取三次，用无水硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发滤液。进行快速柱层析，用80己烷/20乙酸乙酯洗脱。蒸发含有产物的流分得到作为无色油的标题化合物。(6.50g，15.17mmol，88％的产率)。LCMS(ES+)m/z 429.3(M+H)⁺.

步骤4：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-[(6-羟基吡啶-2-基)氧基]吡咯烷 -1，2-二羧酸酯

往帕尔罐(Parr jar)中加入步骤3的产物(6.50g，15.17mmol)、EtOH(100ml)和10％Pd/C(0.250g，2.349mmol)。在48psi氢化。18小时后反应完成。通过硅藻土过滤。蒸发滤液得到作为白色泡沫的标题化合物。(4.95g，14.63mmol，96％的产率)。LCMS(ES+)m/z 339.3(M+H)⁺.

步骤5：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-{[6-(烯丙氧基)吡啶-2-基]氧基} 吡咯烷-1，2-二羧酸酯

在氮气下往500mL圆底烧瓶中加入步骤4的产物(4.95g，14.63mmol)、四氢呋喃(200ml)、烯丙基溴(2.53ml，29.3mmol)和碳酸铯(4.77g，14.63mmol)。在60℃油浴中加热18小时。HPLC/MS表象良好(o.k)。冷却，蒸发，加入2.5％硫酸氢钾。用乙酸乙酯萃取三次，用盐水洗涤合并的有机部分，用无水硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发滤液。进行快速柱层析，用70己烷/30乙酸乙酯洗脱。蒸发含有产物的流分得到作为苍白色油的标题化合物。(4.56g，12.05mmol，82％的产率)。LCMS(ES+)m/z 379.3(M+H)⁺.

步骤6：1-叔丁基2-甲基(2S，4R)-4-[(1-烯丙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2- 基)氧基]吡咯烷-1，2-二羧酸酯

在氮气下往烘干后的100mL凯式烧瓶中加入步骤5的产物(2.82g，7.45mmol)和甲苯(15ml)。用氮气脱气5分钟。加入四(三苯基膦)合钯(0)(0.431g，0.373mmol)。在60℃油浴中加热1小时。HPLC/MS显示产物。2小时后HPLC/MS表象良好。冷却，蒸发，进行快速柱层析，用99二氯甲烷/1甲醇洗脱。蒸发含有产物的流分得到作为油/泡沫的标题化合物。(1.91g，5.05mmol，67.7％的产率)。LCMS(ES+)m/z 379.3(M+H)⁺.

步骤7：(2S，4R)-4-[(1-烯丙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基)氧基]-2-(甲氧基羰基)-吡咯烷

氯化物

往100mL圆底烧瓶中加入步骤6的产物(1.91g，5.05mmol)，然后加入HCl(4.0M，在二

烷中)(30mL，120mmol)。在室温搅拌1小时。蒸发。加入乙醇，蒸发，重复(repeated)。标题化合物以苍白色泡沫形式残留。(1.59g，5.05mmol，100％的产率)。LCMS(ES+)m/z 279.3(M+H)⁺.

步骤8：甲基(4R)-4-[(1-烯丙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基)氧基]-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]-2-环戊基乙酰基}-L-脯氨酸酯

按照实施例1步骤3的类似方式，利用(2S，4R)-4-[(1-烯丙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基)氧基]-2-(甲氧基羰基)-吡咯烷氯化物和中间体B7以71％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 570.3(M+H)⁺.

步骤9：甲基(1R，10E和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5，10-三烯-25-羧酸酯

以实施例1步骤4类似方式，利用甲基(4R)-4-[(1-烯丙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基)氧基]-1-{(2S)-2-[({[(1R，2S)-2-丁-3-烯-1-基环戊基]氧基}羰基)氨基]-2-环戊基乙酰基}-L-脯氨酸酯以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 542.3(M+H)⁺.

步骤10：(1R，10E和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5，10-三烯 -25-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(1R，10E和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5，10-三烯-25-羧酸酯以83％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 528.3(M+H)⁺.

步骤11：(1R，10E和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基 -N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5，10-三烯-25-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(1R，10R和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5，10-三烯-25-羧酸以31％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 740.3(M+H)⁺.

实施例82(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

步骤1：甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19- 二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯

按照实施例13步骤1的类似方式，利用甲基(1R，10E和10Z，14S，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5，10-三烯-25-羧酸酯，用乙醇代替THF作为溶剂，以94％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 544.3(M+H)⁺.

步骤2：(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯，以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 530.3(M+H)⁺.

步骤3：(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)-氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24- 三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸，以得到61％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 742.3(M+H)⁺.

实施例83：(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

步骤1：甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-7，20，23-三氧代 -2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯

在氮气下往25mL圆底烧瓶中加入实施例82步骤1的产物(238mg，0.438mmol)、NBS(39.0mg，0.219mmol)和乙腈(15ml)。在室温搅拌10分钟。HPLC/MS显示主要为期望的；很少的起始原料。加入另外的10mgNBS。仍保留很少的起始原料。另加入10mg NBS。HPLC/MS表象良好。冷却，蒸发，进行ISCO层析，用己烷/乙酸乙酯梯度洗脱。蒸发含有产物的流分得到作为白色固体的标题化合物。(224mg，0.360mmol，82％的产率)。LCMS(ES+)m/z 623.3(M+H)⁺.

步骤2：(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19- 二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯，以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 609.8(M+H)⁺.

步骤3：(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(1R，14R，18R，22S，25S)-6-溴-22-环戊基-7，20，23-三氧代-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸，以49％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 821.3(M+H)⁺.

实施例84：(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-6-苯基-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

步骤1：甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-6-苯基 -2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯

在氮气下往烘干后的100mL凯式烧瓶中加入实施例83步骤1的产物(100mg，0.161mmol)、二

烷(5ml)、苯基硼酸(24.48mg，0.201mmol)、碳酸铯(65.4mg，0.201mmol)、三环己基膦(l3.51mg，0.048mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(17.65mg，0.019mmol)。在80℃油浴中加热20小时。HPLC/MS表象良好。冷却，倒入2.5％硫酸氢钾。用乙酸乙酯萃取三次，用盐水洗涤合并的有机部分，用无水硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发滤液。进行ISCO层析，用己烷/乙酸乙酯梯度洗脱。蒸发含有产物的流分得到作为白色剩余固体的标题化合物。(75mg，0.121mmol，75％的产率)。LCMS(ES+)m/z 620.3(M+H)⁺.

步骤2：(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-6-苯基 -2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸

按照实施例1步骤5的类似方式，利用甲基(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-6-苯基-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸酯，以100％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 606.3(M+H)⁺.

步骤3：(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-N-((1R，2S)-1-{[(环丙基磺酰基)氨基]羰基}-2-乙烯基环丙基)-7，20，23-三氧代-6-苯基-2，19-二氧杂 -8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0 ^3，8 .0 ^14，18 ]廿七碳-3，5-二烯-25-甲酰胺

按照实施例1步骤6的类似方式，利用(1R，14R，18R，22S，25S)-22-环戊基-7，20，23-三氧代-6-苯基-2，19-二氧杂-8，21，24-三氮杂四环[22.2.1.0^3，8.0^14，18]廿七碳-3，5-二烯-25-羧酸，以50％的产率得到标题化合物。LCMS(ES+)m/z 818.3(M+H)⁺.

实施例87：NS3蛋白酶1b R155K K _i 活性

使用如下和在国际专利申请公开WO 2006/102087描述的蛋白酶时间分辨荧光(TRF)测试来测量HCV NS3蛋白酶抑制活性。使用具有R155K突变修饰的HCV基因型1b(BK)NS3进行测试。

在含有50mM HEPES pH 7.5、150mM NaCl、15％甘油、0.15％TRITON X-100、10mM DTT和0.1％PEG 8000的测试缓冲液中以终体积100μl进行测试。NS3和NS4A蛋白酶与DMSO中的不同浓度抑制剂预温育30分钟。通过加入TRF肽底物(终浓度100nM)开始反应。NS3调节的底物水解在1小时后在室温用100μl的500mM MES，pH 5.5淬灭。利用在340nm激发和在615nm 400μs延迟的发射，使用VICTORV2或FUSION荧光光度计(Perkin Elmer Life and Analytical Sciences)检测产物荧光。选择含有R155K突变的酶的测试浓度以产生信号与背景比值(S/B)为10-30。使用对数据的标准四参数拟合得出IC₅₀值。使用下式从IC₅₀值得出K_i值。

IC₅₀＝K_i(1+[S]/K_M)，等式(1)，

其中[S]是反应中底物肽的浓度且K_M是米氏常数。参见P.Gallinari等人，38 B_IOCHEM.5620-32(1999)；P.Gallinari等人，72 J.V_IROL.6758-69(1998)；M.Taliani等人，240 A_NAL.B_I0CHEM.60-67(1996)。

以下提供的活性表说明了观察到的活性，其中化合物活性落入下列范围：

A：K_i 1nM至5nM

B：K_i 0.5nM至1nM

C：K_i 0.1nM至0.5nM

D：K_i＜0.1nM

活性表

其他实施方案在下列权利要求中。尽管已显示并描述几个实施方案，但是可产生各种修改而不偏离本发明的精神和范围。

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.式(I)化合物或其药学可接受的盐：

其中：

选自：

各个L独立地选自N和CH，条件是L是N时其总数为1至4，

R¹选自-CO₂H、-CONHSO₂(环丙基)和-CONHSO₂(1-甲基环丙基)；

R²选自乙基和乙烯基；

R³选自环戊基、环己基和-C(CH₃)₃；

各个所述R⁴苯基、萘基和杂芳基被0至4个取代基取代，所述取代基独立地选自卤原子、-OR⁵、-SR⁵、-N(R⁵)₂、-N(C₁-C₆烷基)O(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、C₁-C₆卤代烷基、(C₁-C₆卤代烷氧基)、-NO₂、-CN、-CF₃、-SO₂(C₁-C₆烷基)、-S(O)(C₁-C₆烷基)、-NR⁵SO₂R⁶、SO₂N(R⁶)₂、-NHCOOR⁶、-NHCOR⁶、-NHCONHR⁶、-CO₂R⁵、-C(O)R⁵和-CON(R⁵)₂，所述R⁴苯基、萘基和杂芳基的2个相邻取代基可一起形成3-至6-元环，该环含有独立地选自N、O和S的0至3个杂原子；

Y选自-C(O)-、-C(O)O-和-C(O)NH-；

各个R⁵独立地为H或C₁-C₆烷基；

2.根据权利要求1的化合物，其中

选自：

3.根据权利要求2的化合物，其中R⁴存在0或1个，如果存在，其选自-Br、-Cl、-CN、苯基、-O-苯基、-OCF₃、-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

4.根据权利要求1-3任一项的化合物，其中R¹是-C(O)OH。

5.根据权利要求1-3任一项的化合物，其中R¹是-C(O)NHSO₂环丙基。

6.根据权利要求1-3任一项的化合物，其中R¹是-C(O)NHSO₂(1-甲基环丙基)。

7.根据权利要求1-6任一项的化合物，其中R²是-CH₂CH₃。

8.根据权利要求1-6任一项的化合物，其中R²是-CH＝CH₂。

9.根据权利要求1-8任一项的化合物，其中R³是环戊基。

10.根据权利要求1-8任一项的化合物，其中R³是环己基。

11.根据权利要求1-8任一项的化合物，其中R³是-C(CH₃)₃。

12.根据权利要求1-11任一项的化合物，其中M选自

其中Z是

13.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述化合物具有下列结构：

其中“a”是任选存在的键，R⁴如果存在，其选自-Br、-Cl、-CN、苯基、-O-苯基、-OCF₃、-OCH₃、-C(O)OH、-CH₃和-C(O)CH₃。

14.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述化合物具有下列结构：

15.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述化合物具有下列结构：

16.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述化合物具有下列结构：

17.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：

18.化合物或其药学可接受的盐，所述化合物是选自实施例1-86的化合物。

19.药物组合物，其包含有效量的根据权利要求1-18任一项的化合物和药学可接受的载体。

20.根据权利要求19的药物组合物，其进一步包含选自HCV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂。

21.根据权利要求19的药物组合物，其进一步包含选自HCV蛋白酶抑制剂和HCV NS5B聚合酶抑制剂的第二治疗剂。

22.根据权利要求1-18任一项的化合物在制备用于在需要其的对象中抑制HCV NS3蛋白酶活性的药物中的用途。

23.根据权利要求1-18任一项的化合物在制备用于在需要其的对象中预防或治疗HCV感染的药物中的用途。

24.治疗感染HCV的患者的方法，其包括向所述患者施用治疗有效量的根据权利要求1-18任一项的化合物的步骤。