NO328952B1 - Tripeptidforbindelser, fremgangsmate for fremstilling av disse, farmasoytisk preparat, anvendelse av forbindelsene for fremstilling av et medikament for behandling av sykdom. - Google Patents

Tripeptidforbindelser, fremgangsmate for fremstilling av disse, farmasoytisk preparat, anvendelse av forbindelsene for fremstilling av et medikament for behandling av sykdom. Download PDF

Info

Publication number
NO328952B1
NO328952B1 NO20010683A NO20010683A NO328952B1 NO 328952 B1 NO328952 B1 NO 328952B1 NO 20010683 A NO20010683 A NO 20010683A NO 20010683 A NO20010683 A NO 20010683A NO 328952 B1 NO328952 B1 NO 328952B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
alkyl
optionally substituted
substituted
amino
formula
Prior art date
Application number
NO20010683A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20010683D0 (no
NO20010683L (no
Inventor
Marc-Andre Poupart
Anne-Marie Faucher
Montse Llinas-Brunet
Murray D Bailey
Dale R Cameron
Elise Ghiro
Nathalie Goudreau
Jean Rancourt
Youla S Tsantrizos
Dominik M Wernic
Teddy Halmos
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Ca Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim Ca Ltd filed Critical Boehringer Ingelheim Ca Ltd
Publication of NO20010683D0 publication Critical patent/NO20010683D0/no
Publication of NO20010683L publication Critical patent/NO20010683L/no
Publication of NO328952B1 publication Critical patent/NO328952B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelser, fremgangsmåte for deres syntese, preparater og fremgangsmåter for behandling av hepatitt C virus (HCV) infeksjon. Spesielt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse nye peptidanaloger, farmasøytiske preparater inneholdende slike analoger og fremgangsmåter for anvendelse av disse analogene ved behandling av HCV infeksjon.
Hepatitt C-virus (HCV) er det viktige etiologiske middelet for post-transfusjon og samfunnservervet ikke-A ikke-B hepatitt verden over. Det er anslått at over 150 millioner mennesker verden over er infisert av viruset. En høy prosentdel av bærere blir kronisk infisert og mange tilfeller utvikler seg til kronisk leversykdom, såkalt kronisk hepatitt C. Denne gruppen har i sin tur stor risiko for å utvikle alvorlig leversykdom så som leverkirrose, hepatocellulært karsinom og terminal leversykdom som fører til død.
Mekanismen hvorved HCV etablerer viral levedyktighet og forårsaker en høy rate av kronisk leversykdom er fremdeles ikke fullstendig klarlagt. Det er ikke kjent hvorledes HCV samvirker med, og innvaderer vertens immunsystem. I tillegg er rollene av cellulære og av humorale immunresponser ved beskyttelse mot HCV infeksjon og sykdom fremdeles ikke etablert. Immunoglobuliner har vært rapportert for profylakse av transfusjonsassosiert viral hepatitt, imidlertid anbefaler Center for Disease Control fremdeles ikke immunoglobulinbehandling for dette formålet. Mangelen på en effektiv beskyttende immunrespons hemmer utviklingen av en vaksine eller adekvate forholdsregler for etter-eksponeringsprofylakseforholdsregler, slik at i den nærmeste fremtid er håpene knyttet til antivirale intervensjoner.
Forskjellige kliniske undersøkelser har vært gjennomført med det mål å identifisere farmasøytiske midler som er i stand til effektivt å behandle HCV infeksjon i pasienter som lider av kronisk hepatitt C. Disse undersøkelsene har innbefattet anvendelsen av interferon alfa, alene eller i kombinasjon med andre antivirale midler. Slike undersøkelser har vist at et betydelig antall av deltagerene ikke viser respons på disse terapiene, og av de som viste fordelaktig respons ble en stor andel funnet å få tilbakefall etter avslutning av behandlingen.
Inntil nylig var inteferon (IFN) den eneste tilgjengelige terapien med beviselig fordel som er godkjent i klinisk praksis for pasienter med kronisk hepatitt C. Imidlertid er den vedvarende responsraten lav, og interferonbehandling induserer også alvorlige bivirkninger (dvs retinopati, tyroidititt, akutt pankreatitt, depresjon) som nedsetter livskvaliteten for behandlede pasienter. Nylig er interferon i kombinasjon med ribavidin godkjent for pasienter som ikke viser respons på IFN alene. Imidlertid lettes bivirkningene forårsaket av IFN ikke ved denne kombinasjonsterapien.
Det eksisterer derfor et behov for utvikling av effektive antivirale midler for behandling av HCV infeksjon som overvinner begrensningene ved eksisterende farmasøytiske terapier.
HCV er et omhyllet positivt kjede RNA virus i Flaviviridae familien. Enkeltkjede HCV RNS genomet er ca 9500 nukleotider av lengde og har en enkelt åpen leserramme (ORF) som koder et enkelt stort polyprotein på ca 3000 aminosyrer. I infiserte celler spaltes dette polyproteinet ved multiple seter ved cellulære og virale proteaser for å fremstille de strukturelle og ikke-strukturelle (NS) proteinene. I tilfelle HCV bevirkes genereringen av modne, ikke-strukturelle proteiner (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A og NS5B) ved hjelp av to virale proteaser. Den første, som fremdeles er dårlig karakterisert, spalter NS2-NS3 sammenføyningen; den andre er en serin protease inneholdt innenfor det N-terminale området av NS3 (hittil betegnet som NS3 protease) og formidler all etterfølgende spaltning nedstrøms for NS3, både i cis, ved NS3-NS4A spaltningssetet, og i trans, for de gjenværende NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B setene. NS4A proteinet synes å tjene flere funksjoner, idet det virker som en kofaktor for NS3 proteasen og assisterer eventuelt i membran lokaliseringen av NS3 og andre virale replikase komponenter. Kompleksdannelsen av NS3 proteinet med NS4A synes nødvendig for bearbeidelseshendelsene, som fremmer den proteolytiske virkningsfullheten ved alle setene. NS3 proteinet viser også nukleosid trifosfatase og RNA helikase aktiviteter. NS5B er en RNA-avhengig RNA polymerase som er innbefattet i replikeringen av HCV.
En generell strategi for utviklingen av antivirale midler er å inaktivere viralt kodede enzymer som er vesentlig for replikeringen av viruset. I denne gaten beskriver patentsøknaden WO 97/06804 (-) enantiomeren av nukleosid analog cytosin-1,3-oksatiolan (også kjent som 3TC) som aktiv mot HCV. Denne forbindelsen, selv om den er rapportert som sikker i tidligere kliniske forsøk mot HIV og HBV, har fremdeles ikke blitt bevist å være klinisk aktiv mot HCV og dens virknings-mekanisme mot viruset er fremdeles ikke rapportert.
Intense bestrebelser på å oppdage forbindelser som inhiberer NS3 protease eller RNA helikase av HCV har ført til følgende beskrivelser: • US patent 5.633.388 beskriver heterocyklisk substituerte karboksamider og analoger som aktive mot HCV. Disse forbindelsene er rettet mot helikase
aktiviteten av NS3 proteinet av viruset, men kliniske forsøk er hittil ikke rapportert.
• Et fenantrenkinon er rapportert av Chu et al., (Tet. Lett., (1996), 7229-7232) å ha aktivitet mot HCV NS3 proteasen in vitro. Ingen ytterligere utvikling vedrørende
denne forbindelse er rapportert.
• En artikkel presentert ved den niende internasjonel konferansen vedrørende antiviral forskning, Urabandai, Fukyshima, Japan (1996) (Antiviral Research,
(1996), 30, 1, A23 (sammendrag 19)) rapporterer tiazolidinderivater som inhibitoriske overfor HCV proteasen.
Flere undersøkelser har rapportert forbindelser som er inhibitoriske ovenfor andre serin proteaser, så som human leukocytt elastase. Én familie av disse forbindelsene er rapportert i WO 95/33764 (Hoechst Marion Roussel, 1995). Peptidene beskrevet i denne søknaden er morfolinylkarbonylbenzoyl peptidanaloger som er strukturelt forskjellige fra peptidene ifølge foreliggende oppfinnelse.
• WO 98/17679 fra Vertex Pharmaceuticals Inc. beskriver inhibitorer av serin protease, spesielt hepatitt C virus NS3 protease. Disse inhibitorene er peptidanaloger basert på det NS5A/5B naturlige substratet. Selv om flere tripeptider er beskrevet inneholder alle disse peptidanalogene C-terminal aktivert karbonyl-funksjon som et vesentlig trekk. Disse analogene ble også rapportert å være aktive mot annen serin protease og er derfor ikke spesifikke for HCV NS3
protease.
• Hoffman LaRoche har også rapportert heksapeptider som er proteinase inhibitorer nyttige som antivirale midler for behandlingen av HCV infeksjon. Disse
peptidene inneholder et aldehyd eller en boronsyre ved C-terminalen.
• Steinkuhler et al. og Ingallinella et al. har publisert vedrørende NS4A-4B produkt inhibering (Biochemistry (1998), 37, 8899-8905 og 8906-8914). Imidlertid omfatter de presenterte peptidene og peptidanalogene ikke, og det fører heller ikke til, utformingen av peptidene i foreliggende oppfinnelse.
En fordel ved foreliggende oppfinnelse er at den tilveiebringer tripeptider som er inhibitoriske overfor NS3 proteasen av hepatitt C-viruset.
En ytterligere fordel ved ett trekk ved foreliggende oppfinnelse ligger i det faktum at disse peptidene spesifikt inhiberer NS3 proteasen og ikke viser signifikant inhibitoraktivitet ved konsentrasjoner opp til 300 u.M mot andre serin proteaser, så som human leukocytt elastase (HLE), svine pankreatisk elastase (PPE) eller bovint pankreatisk kymotrypsin eller cystein protease, så som human lever katepsin B (kat.
B).
En ytterligere fordel ved foreliggende oppfinnelse er at den tilveiebringer små peptider av lav molekylvekt som kan være i stand til å penetrere cellemembraner og kan være aktive i cellekultur og in vivo med god farmakokinetisk profil.
Innbefattet innenfor omfanget av oppfinnelsen er racemater, diastereoisomerer og optiske isomerer av en forbindelse av formel (I):
hvori B er H, en C6 eller C10 aryl, C7-16 aralkyl; Het eller (lavere alkyl)-Het, hvorav alle eventuelt er substituert med Ci.6alkyl; Ci.6alkoksy; Ci-6alkanoyl; hydroksy; hydroksyalkyl; halogen; halogenalkyl; nitro; cyano; cyanoalkyl; amino eventuelt substituert med Ci^alkyl; amido; eller (C1-6 alkyl)amid; eller B er en karboksyl av formel R4-0-C(0)-; et amid av formel R4-N(R5)-C(0)-; et tioamid av formel R4-N(R5)-C(S)-; eller et sulfonyl av formel R4-SO2 hvori R4 er (i) Ci_i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci.6alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med C-i-6alkyl, amido eller (Ci_ 6 alkyl)amid; (ii) C3-7cykloalkyl, C3-7cykloalkoksy eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci^alkyl, amido eller (C1-6 alkyl)amid; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; amido; eller (C1-6 alkyl)amid; (iv) C6 eller Cio aryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (C1.6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl; eller (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (Ci.6alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl;
R5 er H eller Ci.6alkyl;
eller B er et acylderivat av formel R4-C-(0)-; hvor
R4er (i) C^o alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci_6 alkanoyl, hydroksy, C1-6 alkoksy, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med C1-6 alkyl; (ii) C3.7 cykloalkoksy, eller C4.io alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (C-|.6 alkoksy)karbonyl, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med Ci-6 alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller disubstituert med C-i-6 alkyl; (iv) C6 eller C10 aryl eller C7_i6 aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6 alkyl, hydroksy, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med C-i-6 alkyl; eller (v) Het eller (C1-6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med C1-6 alkyl, hydroksy eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med C-|.6 alkyl;
med den forutsetning at når R4 er et amid eller et tioamid er R4 ikke (ii) en cykloalkoksy; og
Y er H eller Ci.6alkyl;
R3 er Ci.8alkyl, C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, Ci.6alkoksy, Ci^tioalkyl, amido, (Ci^alkyl)amido, C6 eller C-ioaryl, eller C7-i6aralkyl;
R2 er CH2-R2C NH-R20, O-R20 eller S-R20, hvori R2o er en mettet eller umettet C3-7-cykloalkyl eller C4-io(alkylcykloalkyl), hvorav alle er eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21,
eller R2o er en C6 eller C-ioaryl eller C7-i4aralkyl, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21,
eller R2o er Het eller (C1.6 alkyl)-Het, begge eventuelt mono- di- eller tri-substituert med R21,
hvor hver R21 uavhengig er Ci-6alkyl; Ci.6alkoksy; Ci.6 tioalkyl; sulfonyl; NO2; OH; SH; halogen, halogenalkyl, amino eventuelt mono- eller di-substituert med C1-6-alkyl, C6 eller Ci0aryl, C7.i4aralkyl, Het eller (Ci_6 alkyl)-Het;
amido eventuelt mono-substituert med Ci.6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7-i4aralkyl, Het eller (Ci.6 alkyl)-Het;
karboksyl; karboksy(Ci-6 alkyl); C6 eller Cioaryl, C7.i4aralkyl eller Het, hvor nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22;
hvor R22 er Ci^alkyl, C3-7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci^alkyl; sulfonyl; (C1.6 alkyl)sulfonyl; NO2; OH;
SH; halogen, halogenalkyl; karboksyl; amid; (C1-6 alkyl)amid; eller Het
eventuelt substituert med Ci^alkyl
R<1> er H, Ci.6alkyl, C3.7cykloalkyl, C2-6alkenyl eller C2-6alkynyl, alle eventuelt substituert med halogen;
hvor Het, enten alene eller i kombinasjon med annet radikal er et monovalent radikal avledet avledet ved fjernelse av et hydrogenatom fra en fem-, seks- eller syv-leddet mettet eller umettet (omfattende aromatisk) heterocyklus inneholdende fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel eller Het er en heterocyklus som definert ovenfor kondensert til én eller flere andre cykluser, enten disse er en heterocyklus eller en hvilken som helst annen cyklus;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav.
Innbefattet innenfor rammen av oppfinnelsen er et farmasøytisk preparat omfattende en anti-hepatitt C viralt effektiv mengde av en forbindelse av formel I, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav, i blanding med et farma-søytisk akseptabelt bærermedium eller hjelpemiddel.
Et viktig trekk ved oppfinnelsen tillater behandling av hepatitt C viral infeksjon i et pattedyr ved administrering til pattedyret av en anti-hepatitt C viralt effektiv mengde av forbindelsen av formel I, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav eller et preparat som beskrevet ovenfor.
Et annet viktig trekk tillater inhibering av replikeringen av hepatitt C virus ved eksponering av viruset mot en hepatitt C viral NS3 protease inhiberende mengde av forbindelsen av formel I, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav eller et preparat som beskrevet ovenfor.
Ytterligere et annet trekk omfatter en fremgangsmåte for behandling av hepatitt C viral infeksjon i et pattedyr ved administrering til dette av en anti-hepatitt C viralt effektiv mengde av en kombinasjon av forbindelsen av formel I, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav. Ifølge en utførelsesform omfatter de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse et ytterligere immunomodulatorisk middel. Eksempler på ytterligere immunomodulatoriske midler omfatter, men er ikke begrenset til, a-, p- og 8-interferoner.
Detaljert beskrivelse av foretrukne utførelsesformer
Definisjoner
Slik de benyttes her gjelder følgende definisjoner med mindre annet er angitt: Med referanse til tilfellene hvor (R) eller (S) anvendes for å angi konfigurasjonen av en substituent, f.eks R<1> av forbindelsen av formel I, gjøres betegnelsen innenfor rammen av oppfinnelsen og ikke i forbindelse med substituenten alene.
De naturlige aminosyrene, med unntak av glysin, inneholder et kiralt karbonatom. Med mindre annet spesifikt er angitt, er forbindelsene inneholdende naturlige aminosyrer med L-konfigurasjonen foretrukket. Imidlertid overveies det at, når spesifisert, noen aminosyrer av formel I kan være enten av D- eller L-konfigurasjon eller kan være blandinger av D- og L-isomerer, innbefattet racemiske blandinger.
Betegnelsen "P1, P2 og P3" som angitt her refererer til stillingen av amino-syrerestene med start fra den C-terminale enden av peptidanalogene og med utstrekning mot N-terminalen [dvs P1 refererer til stilling 1 fra C-terminalen, P2: andre stilling fra C-terminalen osv) (se Berger A. & Schechter I., Transactions of the Royal Society London series (1970), B257, 249-264].
Forkortelsene for a-aminosyrene anvendt i foreliggende søknad er angitt i tabell A.
Slik betegnelsen her benyttes refererer "1-aminocyklopropylkarboksylsyre"
(Acca) til en forbindelse av formelen:
Slik betegnelsen her benyttes refererer "tert-butylglysin" til en forbindelse av formelen:
Betegnelsen "rest" under henvisning til en aminosyre eller et aminosyrederivat betyr en rest avledet fra den tilsvarende a-aminosyren ved å eliminere hydroksy I fra karboksygruppen og ett hydrogen fra a-aminogruppen. F.eks representerer betegn-elsene Gin, Ala, Gly, Ile, Arg, Asp, Phe, Ser, Leu, Cys, Asn, Sar og Tyr av forkortelser som angitt "restene" av L-glutamin, L-alanin, glysin, L-isoleucin, L-arginin, L-aspartinsyre, L-fenylalanin, L-serin, L-leucin, L-cystein, L-asparagin, sarkosin og L-tyrosin.
Betegnelsen "sidekjede" med referanse til en aminosyre eller aminosyrerest betyr en gruppe knyttet til a-karbonatomet av a-aminosyren. F.eks er R-gruppe sidekjeden for glysin hydrogen, for alanin er det metyl, for valin er det isopropyl. For de spesifikke R-gruppene eller sidekjedene av a-aminosyrene vises det til A.L. Lehningers bok Biochemistry (se kapittel 4).
Betegnelsen "halogen" som anvendt her, betyr en halogensubstituent valgt fra brom, klor, fluor eller jod.
Betegnelsen "C-i-6alkyl" eller "(lavere)alkyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen substituent, betyr acykliske, rette eller forgrenede alkyl-substituenter inneholdende fra 1 til seks karbonatomer og omfatter f.eks metyl, etyl, propyl, butyl, tert-butyl, heksyl, 1-metyletyl, 1-metylpropyl, 2-metylpropyl, 1,1-dimetyl-etyl.
Betegnelsen "C3.7cykloalkyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen substituent, betyr en cyklalkylsubstituent inneholdende fra tre til syv karbonatomer og omfatter cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl og cyklo-heptyl. Denne betegnelsen omfatter også "spiro"-cyklisk gruppe så som spiro-cyklopropyl eller spirocyklobutyl:
Betegnelsen "umettet cykloalkyl" omfatter f.eks cykloheksenyl:
Betegnelsen "C4.io(alkylcykloalkyl) som anvendt her betyr en cykloalkylrest inneholdende fra tre til syv karbonatomer forbundet til en alkylrest, idet de for-bundede restene inneholder opp til ti karbonatomer; f.eks cyklopropylmetyl, cyklopentyletyl, cykloheksylmetyl, cykloheksyletyl eller cykloheptyletyl.
Betegnelsen "C2-ioalkenyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen rest, betyr en alkylrest som definert ovenfor inneholdende fra 2 til 10 karbonatomer, og videre inneholdende minst én dobbeltbinding. F.eks omfatter alkenyl allyl og vinyl.
Betegnelsen "Ci.6alkanoyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen rest, betyr rette eller forgrenede 1-oksoalkylrester inneholdende ett til seks karbonatomer og omfatter formyl, acetyl, l-oksopropyl(propionyl), 2-metyl-1-oksopropyl, 1-oksoheksyl og lignende.
Betegnelsen "Ci-6alkoksy" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen rest, betyr resten -0(C-i.6alkyl) hvor alkyl er som definert som ovenfor inneholdende opp til seks karbonatomer. Alkoksy omfatter metoksy, etoksy, propoksy, 1-metyletoksy, butoksy og 1,1-dimetyletoksy. Den sistnevnte resten er vanlig kjent som tert-butoksy.
Betegnelsen "C3.7cykloalkoksy" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen rest, betyr en C3.7cykloalkylgruppe forbundet til et oksygenatom, så som f.eks:
Betegnelsen "C6 eller Cioaryl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr enten en aromatisk monocyklisk gruppe inneholdende 6 karbonatomer eller en aromatisk bicyklisk gruppe inneholdende 10 karbonatomer. F.eks omfatter aryl fenyl, 1-naftyl eller 2-naftyl.
Betegnelsen "C7.i6aralkyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr en C6 eller C10 aryl som definert ovenfor forbundet til en alkylgruppe, hvor alkyl er som definert ovenfor inneholdende fra 1 til 6 karbonatomer. C7.i6aralkyl omfatter f.eks benzyl, butylfenyl eller 1-naftylmetyl.
Betegnelsen "aminoaralkyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr en aminogruppe substituert med en C7.i6aralkylgruppe, så som f.eks aminoaralkyl:
Betegnelsen "(lavere alkyl)amid" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr et amid mono-substituert med en Ci.6alkyl, så som:
Betegnelsen "karboksy(lavere)alkyl" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr en karboksylgruppe (COOH) forbundet gjennom en (lavere)alkylgruppe som definert ovenfor og omfatter f.eks smørsyre.
Betegnelsen "heterocyklus" eller "Het" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med en annen rest, betyr en enverdig rest avledet ved fjernelse av et hydrogenatom fra en fem-, seks- eller syv-leddet mettet eller umettet (omfattende aromatisk) heterocyklus inneholdende fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel. Videre betyr "Het" som anvendt her, en heterocyklus som definert ovenfor kondensert til én eller flere andre cykluser, enten disse er en heterocyklus eller en hvilken som helst annen cyklus. Eksempler på egnede heterocykluser omfatter: pyrrolidin, tetrahydrofuran, tiazolidin, pyrrol, tiofen, diazepin, 1H-imidazol, isoksazol, tiazol, tetrazol, piperidin, 1,4-dioksan, 4-morfolin, pyridin, pyrimidin, tiazol[4,5-b]pyridin, kinolin eller indol, eller følgende heterocykluser:
Betegnelsen "(lavere alkyl)-Het" som anvendt her, betyr en heterocyklisk rest som definert ovenfor forbundet via en kjede eller forgrenet alkylgruppe, hvor alkyl er som definert ovenfor inneholdende fra 1 til 6 karbonatomer. Eksempler på (lavere alkyl)-Het omfatter:
Betegnelsen "farmasøytisk akseptabel ester" som anvendt her, enten alene eller i kombinasjon med annen substituent, betyr estere av forbindelsen av formel I hvori hvilke som helst av karboksylfunksjonene av molekylet, men fortrinnsvis karboksyterminalen, er erstattet med en alkoksykarbonylfunksjon:
hvori R enheten av esteren er valgt fra alkyl (f.eks metyl, etyl, n-propyl, t-butyl, n-butyl); alkoksyalkyl (f.eks metoksymetyl); alkoksyacyl (f.eks acetoksymetyl); aralkyl (f.eks benzyl); aryloksyalkyl (f.eks fenoksymetyl); aryl (f.eks fenyl), eventuelt substituert med halogen, Ci^alkyl eller Ci^alkoksy. Andre egnede promedikament estere som finnes i Design of prodrugs, Bundgaard, H. red. Elsevier (1985). Slike farmasøytisk akseptable estere hydrolyseres vanligvis in vivo når de injiseres inn i et pattedyr og transformeres til syreformen av forbindelsen av formel I.
Med hensyn til esterene beskrevet ovenfor inneholder, med mindre annet er angitt, en hvilken som helst alkylenhet tilstede fordelaktig 1 til 16 karbonatomer, spesielt 1 til 6 karbonatomer. Eventuell arylenhet tilstede i slike estere omfatter fordelaktig en fenylgruppe.
Spesielt kan esterane være en Ci.6alkylester, en usubstituert benzylester eller en benzylester substituert med minst ett halogen, Ci-6alkyl, Ci^alkoksy, nitro eller trifluormetyl.
Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" som anvendt her omfatter de avledet fra farmasøytisk akseptable baser. Eksempler på egnede baser omfatter kolin, etanolamin og etylendiamin. Na<+>, K<+> og Ca<++> salter er også omfattet innenfor omfanget av oppfinnelsen (se også Pharmaceutical salts, Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sei., (1977), 66, 1-19).
Foretrukne utførelsesformer
Innbefattet innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse er forbindelser av formel I hvori
B fortrinnsvis er en C6 eller Cio aryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med C-|.6alkyl; eller
B fortrinnsvis er Het eller (lavere alkyl)-Het, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, Ci-6alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med d-6alkyl.
Alternativt er B fortrinnsvis R4-S02, hvor R4 fortrinnsvis er Ci.6alkyl; amido; (lavere alkyl)amid; C6 eller Cioaryl, C7-i4aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med C-i-6 alkyl.
Alternativt er B fortrinnsvis et acylderivat av formel R4-C(0)- hvor R4 fortrinnsvis er
(i) C-i-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci-6alkoksy eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci_6alkyl, hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci-6alkyl. Alternativt er B fortrinnsvis en karboksyl av formel R4-0-C(0)- hvor R4 fortrinnsvis er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci^alkanoyl, hydroksy, Ci.6. alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; (ii) C3-7cykloalkyl, C4-ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amido. Alternativt er B fortrinnsvis et amid av formel R4-N(R5)-C(0)- hvor R4 fortrinnsvis er (i) Ci.i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci.6. alkoksy, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.3alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (lavere alkyl)amid, eller amino eventuelt substituert med Ci^alkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; og
R5 er fortrinnsvis H eller metyl.
Alternativt er B fortrinnsvis tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 fortrinnsvis er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-6alkanoyl eller Ci_6alkoksy; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eller amido.
Mer foretrukket er B en C6 eller Cioaryl eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci. 6alkoksy, Ci^alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, slik at B f.eks er: eller B er mer foretrukket Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, C1-6-alkanoyl, hydroksy, halogen, amido, (lavere alkyl)amid, eller amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci-6alkyl, slik at B f.eks er:
Alternativt er B mer foretrukket R4-S02, hvor R4 fortrinnsvis er C6 eller Cioaryl, en C7-i4aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl; amido, (lavere alkyl)-amid, slik at B f.eks er:
Alternativt er B mer foretrukket et acylderivat av formelen R4-C(0)-, hvor R4 fortrinnsvis er (i) C-i-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci.6alkoksy, eller (ii) C3-7cykloalkyl eller C4-ioalkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, slik at B f.eks er:
eller R4 er fortrinnsvis
(iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci_6alkyl, hydroksy, slik at B f.eks er:
eller R4 er fortrinnsvis:
(v) Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy eller amino, slik at B f.eks er: Alternativt er B mer foretrukket en karboksyl av formel R4-0-C(0)-, hvor R4 fortrinnsvis er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci^alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy eller amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl, C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci^alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl, slik at B f.eks er:
eller R4 er fortrinnsvis
(iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy, amido, eller amino eventuelt mono-substituert med Ci.6alkyl, slik at B f.eks er: Alternativt er B mer foretrukket et amid av formel R4-N(R5)-C(0)-, hvor R4 fortrinnsvis er (i) C-Moalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6. alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl; og
R5 er H eller metyl, slik at B f.eks er:
eller R4 er fortrinnsvis
(iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_3alkyl, slik at B f.eks er:
eller R4 er fortrinnsvis
(iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido eventuelt substituert med Ci_6alkyl; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido, slik at B f.eks er:
Alternativt er B mer foretrukket et tioamid av formel R4-NH-C(S)-, hvor R4 fortrinnsvis er
R4 er (i) Ci-i0alkyl; eller (ii) C3.7cykloalkyl, slik at B f.eks er:
Mest foretrukket er B et amid av formelen R4-NH-C(0)-, hvor R4 fortrinnsvis er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, C-|.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6-alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci_6alkyl;
eller R4 er fortrinnsvis
(iv) C6 eller Cioaryl eller Cy.^aralkyl eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy, amino eller amido, slik at B f.eks er
Ytterligere mer foretrukket er B fert-butoksykarbonyl (Boe) eller Fortrinnsvis er Y H eller metyl. Mer foretrukket er Y H.
Fortrinnsvis er R<3> Ci^alkyl, C3-7cykloalkyl eller C^ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, Ci-6alkoksy, Ci.6tioalkyl, acetamido, C6 eller Cio-aryl eller C7-i6aralkyl, slik at R3 f.eks er:
Mer foretrukket er R3 sidekjeden av tert-butylglysin (Tbg), Ile, Val, Chg eller:
Mest foretrukket er R3 sidekjeden av Tbg, Chg eller Val.
Innbefattet innenfor omfanget av oppfinnelsen er forbindelser av formel I hvori R2 fortrinnsvis er S-R20 eller O-R201 hvor R20 fortrinnsvis er en C6 eller Cioaryl, C7-16-aralkyl, Het eller-CH2-Het, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21.
Fortrinnsvis er R21 Ci^alkyl; Ci-6alkoksy; lavere tioalkyl; amino eller amido eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7.i6aralkyl, Het eller (lavere alkyl)-Het; N02; OH; halogen; trifluormetyl; karboksyl; C6 eller Cioaryl, C7.i6aralkyl, eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22- Mer foretrukket er R21 Ci-6alkyl; Ci-6alkoksy; amino; di(lavere alkyl)amino; (lavere alkyl)amid; C6 eller Cioaryl, eller Het, idet nevnte aryl eller Het eventuelt er substituert med R22.
Fortrinnsvis er R22 Ci^alkyl, C3.7cykloalkyl; Ci.6alkoksy; amino; mono-eller di-(lavere alkyl)amino; (lavere aikyl)amid; sulfonylalkyl; NO2; OH;
halogen; trifluormetyl; karboksyl eller Het. Mer foretrukket er R22 Ci.6-alkyl; C3-7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino; mono- eller di(lavere alkyl)-amino; amido; (lavere alkyl)amid; halogen; trifluormetyl eller Het. Mest foretrukket er R22 Ci_6alkyl; Ci.6alkoksy; halogen; amino eventuelt mono-
eller di-substituert med lavere alkyl; amido; (lavere alkyl)amid; eller Het. Enda mer foretrukket er R22 metyl; etyl; isopropyl; tert-butyl; metoksy;
klor; amino eventuelt mono- eller di-substituert med lavere alkyl; amido, (lavere alkyl)amid; eller (lavere alkyl) 2-tiazol.
Alternativt er R2 valgt fra gruppen bestående av:
Mer foretrukket er R21-naftylmetoksy; 2-naftylmetoksy; benzyloksy, 1-naftyloksy; 2-naftyloksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor. Mest foretrukket er R2 1 -naftylmetoksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor, slik at R2 f.eks er:
Enda mer foretrukket er R2:
Mer foretrukket er R21A Ci-6alkyl, så som isopropyl, tert-butyl eller cykloheksyl;
Ci.6alkoksy, så som metoksy,
lavere tioalkyl, så som halogen, så som klor; amino eventuelt mono-substituert med Ci^alkyl; eller C6 eller Ci0aryl, slik at R2ia f.eks er; dimetylamino, Ph-N(Me)-; usubstituert C6 eller Cioaryl, C7-i6aralkyl, slik som f.eks fenyl eller eller R2ia er mer foretrukket Het eventuelt substituert med R22 hvor R22 er Ci^alkyl, Ci-6alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, eller Het, slik at R2ia f.eks er:
Mest foretrukket er R2iA C6, Ci0aryl eller Het, alle eventuelt substituert med R22 som definert ovenfor, slik at R2iA f.eks er:
Enda mer foretrukket er R2:
hvor R22A fortrinnsvis er Ci_6alkyl (så som metyl); Ci_6alkoksy (så som metoksy); eller halogen (så som klor); R22B er fortrinnsvis Ci_6alkyl, amino eventuelt mono-substituert med d-ealkyl, amido, eller (lavere alkyl)amid; og R21B er fortrinnsvis Ci.6alkyl, Ci^alkoksy, amino, di(lavere alkyl)amino, (lavere alkyl)amid, NO2, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl. Mer foretrukket er R2ib Ci.6alkoksy, eller di(lavere alkyl)amino. Mest foretrukket er R21B metoksy.
Som beskrevet ovenfor er P1 segmentet av forbindelsene av formel I en cyklobutyl eller cyklopropylring, begge eventuelt substituert med Ri.
Fortrinnsvis er R<1> H, Ci.3alkyl, C3-5cykloalkyl, eller C2-talkenyl eventuelt substituert med halogen. Mer foretrukket er R<1> etyl, vinyl, cyklopropyl, 1 eller 2-brometyl eller 1 eller 2-bromvinyl. Mest foretrukket er Ri vinyl.
Når Ri ikke er H så er P1 fortrinnsvis et cyklopropylsystem av formelen:
hvor Ci og C2 hver representerer et asymmetrisk karbonatom ved stillingene 1 og 2 av cyklopropylringen. På tross av andre mulige asymmetriske sentre ved andre segmenter av forbindelsene av formel I betyr nærværet av disse to asymmetriske sentrene at forbindelsene av formel I kan eksistere som racemiske blandinger av
diastereoisomerer. Som vist i de etterfølgende eksemplene kan de racemiske blandingene fremstilles og deretter separeres til individuelle optiske isomerer, eller disse optiske isomerene kan fremstilles ved kiral syntese.
Følgelig kan forbindelsen av formel I eksistere som en racemisk blanding av diastereoisomerer ved karbon 1, men hvor Ri ved karbon 2 er orientert syn til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten: eller forbindelsen av formel I kan eksistere som en racemisk blanding av diastereoisomerer hvor Ri ved stilling 2 er orientert anti til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten:
I sin tur kan de racemiske blandingene separeres i individuelle optiske isomerer.
Et meget interessant funn ved foreliggende oppfinnelse vedrører addisjonen av en Ri substituent på karbon 2, så vel som den rommelige orienteringen av P1 segmentet. Funnet vedrører konfigurasjonen av det asymmetriske karbon 1. En foretrukket utførelsesform er én hvori R-i ikke er H og karbon 1 har R konfigurasjonen.
Mer eksplisitt har innføringen av en substituent (Ri) ved C2 en virkning på potensen når Ri innføres på en måte slik at C1 har R konfigurasjonen. F.eks har forbindelsene 901 (1R.2S) og 203 (1R.2R) aktiviteter på henholdsvis 25 og 82 nM. Ved sammenligning med den usubstituerte cyklopropylforbindelsen 111 (475 nM) observeres en vesentlig økning i virkestyrke. Som videre vist for forbindelser 901 og 203 når karbon 1 har R konfigurasjonen blir HCV NS3 protease inhiberingen ytterligere fremmet ved konfigurasjon av substituent Ri (f.eks alkyl eller alkylen) ved karbon 2 av cyklopropylringen, f.eks forbindelsen som har Ri "syn" til karboksyl har høyere potens (25 nM) enn "anti" enantiomeren (82 nM). Man kan se effekten av R vs S konfigurasjonen ved C1 ved å sammenligne forbindelser 801 (1R.2S) med dens tilsvarende (1S.2R) isomer som har potenser på henholdsvis 6 nM og >10 u.M, en forskjell på over 1500 ganger.
Derfor er en mest foretrukket forbindelse en optisk isomer som har R^ substituenten og karbonyl i en syn orientering i følgende absolutte konfigurasjon:
I tilfellet hvor Ri f.eks er etyl har de asymmetriske karbonatomene ved stillingene 1 og 2 R,R konfigurasjonen.
Innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse er forbindelser med formel I hvori
B er en C6 eller Cio aryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, Ci^alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med Ci-ealkyl; eller Het eller (lavere alkyl)-Het, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci_6-alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med C1.6-alkyl, eller
B er R4-SO2, hvor R4 fortrinnsvis er amido; (lavere alkyl)amid; C6 eller Ci0aryl, C7-14-aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med Ci.6 alkyl, eller B er et acylderivat av formel R4-C(0)- hvor R4 er
(i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci-6alkoksy, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci^alkyl; (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci^alkyl,
hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci-6alkyl, eller
B er en karboksyl av formel R4-0-C(0)- hvor R4 er
(i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci.6. alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; (ii) C3.7cykloalkyl, C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci^alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci^alkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl, amido eller
(lavere alkyl)amido, eller
B er et amid av formel R4-N(R5)-C(0)- hvor R4 er
(i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-6alkanoyl, hydroksy, C1.6-alkoksy, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4-ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med C-|.3alkyl; (iv) C6 eller Ci0aryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci_6alkyl, hydroksy, amido, (lavere alkyl)amid, eller amino eventuelt substituert med Ci.6. alkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)-amid; og
R5 er fortrinnsvis H eller metyl eller
B er tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 er
(i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci^alkanoyl eller Ci_6alkoksy; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med
karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eller amido;
Y er H eller metyl;
R<3> er d-salkyl, C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, C-i-6alkoksy, Ci.6tioalkyl, acetamido, C6 eller Cioaryl, eller C7-i6aralkyl;
R2 er S-R20 eller O-R20 hvori R20 fortrinnsvis er en C6-ioaryl, C7-i6aralkyl, Het eller CH2-Het, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21, hvori
R21 er Ci-6alkyl; Ci^alkoksy; lavere tioalkyl; amino eller amido eventuelt mono-eller di-substituert med Ci_6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7-i6aralkyl, Het eller (lavere alkyl)-Het; NO2; OH; halogen; trifluormetyl; karboksyl; C6 eller C10 aryl, C7-16-aralkyl eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22. hvori
R22 er Ci-ealkyl; C3-7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino; mono- eller di-(lavere alkyl)amino; (lavere alkyl)amid; sulfonylalkyl; N02; OH; halogen;
trifluormetyl; karboksyl eller Het; eller
R2 er valgt fra gruppen bestående av:
eller R2 er 1-naftylmetoksy; 2-naftylmetoksy; benzyloksy; 1-naftyloksy; 2-naftyloksy eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor;
P1 segmentet er en cyklobutyl eller cyklopropyl ring, begge eventuelt substituert med Ri, hvor R<1> er H, Ci^alkyl, C3-5cykloalkyl eller C2-4alkenyl, eventuelt substituert med halogen, og nevnte Ri ved karbon 2 er orientert syn til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten:
Innbefattet innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse er forbindelser av formel I hvor B er en C6 eller C10 aryl, eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci. 6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, hydroksyalkyl, halogen, halogenalkyl, nitro, cyano, cyanoalkyl, amido, (lavere alkyl)amid eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med C-i-ealkyl; eller B er Het eventuelt substituert med Ci^alkyl, Ci-6alkoksy, C1-6-alkanoyl, hydroksy,halogen, amido, (lavere alkyl)amid, eller amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci^alkyl; eller B er R4-SO2, hvor R4 er C6 eller Cioaryl, en C7-i4aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med Ci_6alkyl; amido, (lavere alkyl)amid; eller B er et acylderivat av formel R4-C(0)- hvor R4 er (i) C1.10 eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci-6alkoksy; eller (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl; eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amido eller amino; eller B er en karboksyl av formel R4-0-C(0)- hvor R4 er (i) Ci.i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-6alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy eller amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl, C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci^alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci^alkyl; eller (v) Het eller (lavere alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-ealkyl,
hydroksy eller amino eventuelt mono-substituert med Ci.6alkyl;
eller B er et amid av formel R4-N(R5)-C(0)- hvor R4 er
(i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; og R5 er H eller metyl; eller R4 er (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci^alkyl; eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido eventuelt substituert med Ci-ealkyl; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci-ealkyl, hydroksy, amino eller amido; eller B er tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 er
(i) Ci-ioalkyl; eller (ii) C3-7cykloalkyl; eller
B er et amid av formelen R4-NH-C(0)- hvor R4 er
(i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6. alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl eventuelt substituert med Ci.6alkyl,
hydroksy, amino eller amido;
YerH;
R<3> er sidekjeden av tert-butylglysin (Tbg), Ile, Val, Chg eller:
R2 er 1-naftylmetoksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor, eller
R2er
hvor R21A er Ci.6alkyl; Ci.6alkoksy; C6, Ci0aryl eller Het; lavere tioalkyl; halogen, amino eventuelt mono-substituert med Ci_6alkyl; eller C6, Cioaryl, C7-i6aralkyl eller Het, eventuelt substituert med R22, hvor R22 er Ci^alkyl, Ci.6alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, eller Het; P1 er en cyklopropylring hvor karbon 1 har R konfigurasjonen,
og R<1> er etyl, vinyl, cyklopropyl, 1 eller 2-brometyl eller 1 eller 2-bromvinyl.
Ytterligere innbefattet innenfor rammen av oppfinnelsen er forbindelser av formel I hvori:
B er tert-butoksykarbonyl (Boe) eller
R3 er sidekjeden av Tbg, Chg eller Val;
R2 er:
hvor R22A er Ci-6alkyl (så som metyl); Ci-6alkoksy (så som metoksy); eller halogen (så som klor); R22b er Ci-ealkyl, amino eventuelt mono-substituert med Ci-6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amid; og R2ib er Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, amino, di(lavere alkyl)amino, (lavere alkyl)amid, N02, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl; og P1 er:
Innbefattet innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse er hver forbindelse av formel I som presentert i tabeller 1 til 10.
Ifølge en alternativ utførelsesform kan de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse videre innbefatte et annet anti-HCV middel. Eksempler på anti-HCV midler omfatter a- eller p-interferon, ribavirin og amantadin.
Ifølge en annen alternativ utførelsesform kan de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse i tillegg omfatte andre inhibitorer av HCV protease.
Ifølge nok en alternativ utførelsesform kan de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse i tillegg omfatte en inhibitor av andre mål i HCV livssyklusen, innbefattende, men ikke begrenset til, helikase, polymerase, metalloprotease eller internt ribosom inntredensete (IRES).
De farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres oralt, parenteral eller via et implantert reservoar. Oral administrering eller administrering ved injeksjon er foretrukket. De farmasøytiske prepatene ifølge foreliggende oppfinnelse kan inneholde hvilke som helst konvensjonelle, ikke-toksiske farmasøytisk akseptable bærere, hjelpestoffer eller vehikler. I noen tilfeller kan pH av preparatet justeres med farmasøytiske akseptable syrer, baser eller buffere for å fremme stabiliteten av den formulerte forbindelsen eller dens avlever-ingsform. Betegnelsen parenteral som anvendt her innbefatter subkutan, intrakutan, intravenøs, intramuskulær, intra-artikulær, intrasynovial, intrasternal, intratekal og intralesjonal injeksjons- eller infusjonsteknikker.
De farmasøytiske preparatene kan være i form av et sterilt, injiserbart preparat, f.eks som en steril injiserbar vandig eller oljeholdig suspensjon. Suspensjonen kan formuleres i henhold til teknikker kjent innen faget ved anvendelse av egnede dispersjonsmidler eller fuktemidler (så som f.eks Tween 80) og suspenderende midler.
De farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres oralt i en hvilken som helst oralt aksepterbar doseringsform omfattende, men ikke begrenset til, kapsler, tabletter, vandig suspensjoner og opp-løsninger. I tilfelle tabletter for oral anvendelse omfatter bærere som er vanlige anvendte laktose og maisstivelse. Smøremidler, så som magnesiumstearat, tilsettes også typisk. For oral administrering i kapselform er nyttige fortynningsmidler laktose og tørket maisstivelse. Når vandige suspensjoner administreres oralt kombineres den aktive bestanddelen med emulgerende og suspenderende midler. Om ønsket kan visse søtningsmidler og/eller smaksgivende midler og/eller fargemidler tilsettes.
Andre egnede vehikler eller bærere for de ovenfor angitte preparatene og formuleringene kan finnes i standard farmasøytiske bøker, f.eks i "Remington's Pharmaceutical Sciences", The Science and Practice of Pharmacy, 19. utgave, Mack Publishing Company, Easton, Penn., (1995).
Doseringsnivåer på mellom ca 0,01 og ca 100 mg/kg kroppsvekt pr dag, fortrinnsvis mellom ca 0,5 og ca 75 mg/kg kroppsvekt pr dag av protease inhibitor-forbindelsene som her er beskrevet er nyttige i en monoterapi for forebyggelse og behandling av HCV formidlet sykdom. Typisk blir de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse administrert fra ca 1 til ca 5 ganger pr dag eller, alternativt, som kontinuerlig infusjon. Slik administrering kan anvendes som en kronisk eller akutt terapi. Mengden av aktiv bestanddel som kan kombineres med bærematerialene for å fremstille en enkelt doseringsform vil variere avhengig av den behandlede verten og den spesielle administreringsmåten. Et typisk preparat vil inneholde fra ca 5% til ca 95% aktiv bestanddel (v/v). Typisk inneholder slike preparater fra ca 20% til ca 80% aktiv forbindelse.
Fagmannen vil erkjenne at lavere eller høyere doser enn de angitt ovenfor kan være påkrevet. Spesifikk dosering og behandlings fremgangsmåter for enhver spesiell pasient vil avhenge av en rekke faktorer, innbefattende aktiviteten av den spesifikke forbindelsen som anvendes, alderen, kroppsvekten, generell helsestatus, kjønn, diett, tidspunkt for administrering, utskillelseshastighet, legemiddelkombi-nasjon, graden og forløpet av infeksjonen, pasientens disposisjon overfor infeksjon og bedømmelsen som gjøres av den behandlende legen. Genrelt initieres behandlingen med små doseringer som er vesentlig mindre enn den optimale dosen av peptidet. Deretter økes doseringen med små inkrementer inntil den optimale effekten under forholdene er nådd. Generelt blir forbindelsen mest fordelaktig administrert ved konsentrasjonsnivå som generelt vil gi antiviralt effektive resultater uten å forårsake noen skadelig eller nedbrytende bivirkninger.
Når preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter en kombinasjon av en forbindelse av formel I og ett eller flere ytterligere terapeutiske eller profylaktiske midler, bør både forbindelsen og det ytterligere middelet være tilstede ved doserings-nivået på mellom ca 10 og 100%, og mer foretrukket mellom ca 10 og 80%, av doseringen som normalt administreres i en monoterapi fremgangsmåte.
Når disse forbindelsene eller deres farmasøytisk akseptable salter formuleres sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer kan det resulterende preparatet administreres in vivo til pattedyr, så som menneske, for å inhibere HCV NS3 protease eller for å behandle eller forhindre HCV virusinfeksjon. Slik behandling kan også oppnås ved å anvende forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i kombinasjon med midler som omfatter, men som ikke er begrenset til: immunomodulatoriske midler, så som a-, p eller y-interferoner; andre antivirale midler så som ribavirin, amantadin; andre inhibitorer av HCV NS3 protease; inhibitorer av andre mål i HCV livssyklusen, som omfatter, men ikke er begrenset til, helikase, polymerase, metalloprotease eller internt ribosom inntredensete (IRES); eller kombinasjoner derav. De ytterligere midlene kan kombineres med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse for å skape en enkelt doseringsform. Alternativt kan disse ytterligere midlene administreres separat til et pattedyr som del av en flerdoseform.
Følgelige gir en annen utførelsesform av foreliggende oppfinnelse anledning til å inhibere HCV NS3 proteaseaktivitet i pattedyr ved administrering av en forbindelse av formel I, hvori substituentene er som definert ovenfor.
I en foretrukket utførelsesform gir oppfinnelsen anledning til å redusere HCV NS3 protease aktivitet i et pattedyr. Dersom det farmasøytiske preparatet omfatter bare en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse som den aktive komponenten kan slike fremgangsmåter i tillegg omfatte trinnet med administrering til nevnte pattedyr av et middel valgt fra et immunomodulatorisk middel, et antiviralt middel, en HCV proteaseinhibitor, en inhibitor av andre mål i HCV livssyklusen, så som helikase, polymerase eller metalloprotease eller IRES. Slikt ytterligere middel kan administreres til pattedyret før, samtidig med eller etter administrering av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse.
I en alternativ foretrukket utførelsesform gir oppfinnelsen anledning til å inhibere viral replikasjon i et pattedyr. Slike fremgangsmåter er nyttige for behandling eller forebyggelse av HCV sykdom. Dersom det farmasøytiske preparatet omfatter bare en forbindelse ifølge oppfinnelsen som den aktive komponenten kan slike fremgangsmåter i tillegg omfatte trinnet med administrering til nevnte pattedyr av et middel valgt fra et immunomodulatorisk middel, et antiviralt middel, en HCV proteaseinhibitor, eller en inhibitor av andre mål i HCV livssyklusen. Slikt ytterligere middel kan administreres til pattedyret før, samtidig med eller etter administrering av preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse.
Forbindelsene angitt her kan også anvendes som laboratoriereagenser. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes for å behandle eller forhindre viral kontaminering av materialer og derfor redusere faren for viral infeksjon av laboratorie eller medisinsk personell eller pasienter som kommer i kontakt med slike materialer (f.eks blod, vev, kirurgiske instrumenter og bekledninger, laboratorieinstrumenter og bekledninger, og blodsamlings apparaturer og materialer).
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes som forskningsreagenser. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes som positiv kontroll for å validere surrogat cellebaserte analyser eller in vitro eller in vivo virale replikasjonsanalyser.
Fremgangsmåte
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse syntetiseres ifølge en generell prosess som vist i skjema I (hvor CPG er en karboksylbeskyttende gruppe og APG er en aminobeskyttende gruppe):
Skjema I
Kort sammenfattet kan P1, P2 og P3 sammenføyes ved velkjente peptid-koplingsteknikker. P1, P2 og P3 gruppene kan føyes sammen i en hvilken som helst rekkefølge så lenge som sluttforbindelsen tilsvarer peptidene av formel I. F.eks kan P3 sammenføyes til P2-P1; eller P1 sammenføyes til P3-P2.
Generelt forlenges peptider av avbeskyttelse av a-aminogruppen av den N-terminale resten og kopling av den ubeskyttede karboksylgruppen av den neste egnet N-beskyttede aminosyren gjennom en peptidbinding ved å anvende fremgangsmåtene som er beskrevet. Denne avbeskyttelses og koplings prosedyren gjentas inntil den ønskede sekvensen er oppnådd. Denne koplingen kan utføres med de oppbyggene aminosyrene på trinnvis måte, som angitt i skjema I, eller ved fast fase peptidsyntese i henhold til fremgangsmåten opprinnelig beskrevet i Merrifield, J. Am. Chem. Soc, (1963), 85, 2149-2154.
Kopling mellom to aminosyrer, en aminosyre og et peptid, eller to peptid-fragmenter kan utføres ved å anvende standard koplingsprosedyrer som azid-metoden, blandet karbonsyre-karboksylsyre anhydrid (isobutyl kloroformat) fremgangsmåten, karbodiimid (dicykloheksylkarbodiimid, diisopropylkarbodiimid eller vannoppløselig karbodiimid) fremgangsmåten, aktiv ester (p-nitrofenylester, N-hydroksysuksinisk imidoester) fremgangsmåten, Woodward reagens K-fremgangsmåten, karbonyldiimidazolfremgangsmåten, fosforholdige reagenser eller oksidasjons-reduksjonsmetoden. Noen av disse fremgangsmåtene (spesielt karbodiimid fremgangsmåten) kan fremmes ved tilsetning av 1-hydroksybenzotriazol. Disse koplingsreaksjonene kan utføres i enten oppløsning (flytende fase) eller fast fase.
Mer eksplisitt omfatter koplingstrinnet dehydrativ kopling av en fri karboksyl av én reaktant med den frie aminogruppen av en annen reaktant i nærvær av et koplingsmiddel for å danne en forbindende amidbinding. Beskrivelse av slike koplingsmidler finnes i generelle lærebøker vedrørende peptid kjem i, f.eks M. Bodanszky, "Peptide Chemistry" 2. rev. utg., Springer-Verlag, Berlin, Tyskland,
(1993). Eksempler på egnede koplingsmidler er N,N'-dicykloheksylkarbodiimid, 1-hydroksybenzotriazol i nærvær av N,N'-dicykloheksylkarbodiimid eller N-etyl-N'-[(3-dimetylamino)propyl]karbodiimid. Et praktisk og nyttig koplingsmiddel er det kommersielt tilgjengelige (benzotriazol-1 -yloksy)tris-(dimetylamino)fosfonium-heksafluorfosfat, enten alene eller i nærvær av 1-hydroksybenzotriazol. Et annet praktisk og nyttig koplingsmiddel er kommersielt tilgjengelig 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluroniumtetrafluorborat. Enda et annet praktisk og nyttig koplingsmiddel er kommersielt tilgjengelig 0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluroniumheksafluorfosfat.
Koplingsreaksjonen gjennomføres i et inert oppløsningsmiddel, f.eks diklormetan, acetonitril eller dimetylformamid. Et overskudd av et tertiært amin, f.eks diisopropyletylamin, N-metylmorfolin eller N-metylpyrrolidin, tilsettes for å opprettholde reaksjonsblandingen ved en pH på ca 8. Reaksjonstemperaturen varierer vanligvis mellom 0°C og 50°C, og reaksjonstiden varierer vanligvis mellom 5 min og 241.
Når en fast fase syntetisk tilnærmelse anvendes er den C-terminale karboksylsyren knyttet til en uoppløselig bærer (vanligvis polystyren). Disse uoppløselige bærere inneholder en gruppe som vil reagere med karboksylgruppen og danne en binding som er stabil ved forlengelsesbetingelsene, men som lett avspaltes senere. Eksempler på disse er: klor- eller brommetylharpiks, hydroksymetylharpiks, trityl-harpiks og 2-metoksy-4-alkoksybenzylalkoholharpiks.
Mange av disse harpiksene er kommersielt tilgjengelige med den ønskede C-terminale aminosyren allerede inkorporert. Alternativt kan aminosyren inkorporeres på den faste bæreren ved kjent fremgangsmåte (Wang, S.-S., J. Am. Chem. Soc,
(1973), 95,1328; Atherton, E.; Shepard, R.C. "Solid-phase peptide synthesis; a practical approach" IRL Press: Oxford, (1989); 131-148). I tillegg til foregående er andre fremgangsmåter for peptidsyntese beskrevet i Stewart and Young, "Solid Phase Peptide Synthesis", 2. utg., Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984); Gross, Meienhofer, Udenfriend, Eds., "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", bind. 1, 2, 3, 5 og 9, Academic Press, New-York, (1980-1987); Bodansky et al., "The Practice of Peptide Synthesis" Springer-Verlag, New-York (1984).
De funksjonelle gruppene av de oppbyggende aminosyrene må generelt beskyttes under koplingsreaksjonene for å unngå dannelse av uønskede bindinger. Beskyttende grupper som kan anvendes er angitt i Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1981) og "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", vol. 3, Academic Press, New York (1981). a-karboksylgruppen av den C-terminale resten er vanligvis beskyttet som en ester (CPG) som kan avspaltes for å gi karboksylsyren. Beskyttende grupper som kan anvendes omfatter: 1) alkylestere så som metyl, trimetylsilyl eller t-butyl, 2) aralkylestere så som benzyl og substituert benzyl, eller 3) estere som kan avspaltes ved mild basebehandling eller mild reduktiv fremgangsmåte så som trikloretyl og fenacylestere. a-aminogruppen av hver aminosyre som skal koples til den voksende peptid-kjeden må være beskyttet (APG). Enhver beskyttende gruppe kjent innen teknikken kan anvendes. Eksempler på slike grupper innbefatter: 1) acylgrupper så som formyl, trifluoracetyl, ftalyl og p-toluensulfonyl; 2) aromatiske karbamatgrupper så som benzyloksykarbonyl (Cbz eller Z) og substituerte benzyloksykarbonyler, og 9-fluorenylmetyloksykarbonyl (Fmoc); 3) alifatiske karbamatgrupper så som tert-butoksykarbonyl (Boe), etoksykarbonyl, diisopropylmetoksykarbonyl og allyloksy-karbonyl; 4) cykliske alkylkarbamatgrupper så som cyklopentyloksykarbonyl og adamantyloksykarbonyl; 5) alkylgrupper så som trifenylmetyl og benzyl; 6) trialkylsilyl så som trimetylsilyl; og 7) tiolholdige grupper så som fenyltiokarbonyl og ditiasuksinoyl. Den foretrukne a-aminobeskyttende gruppen er enten Boe eller Fmoc. Mange aminosyrederivater egnet beskyttet for peptidsyntese er kommersielt tilgjengelige.
Den a-aminobeskyttende gruppen av den nyadderte aminosyreresten spaltes før kopling av den neste aminosyren. Når Boc-gruppen anvendes er de valgte fremgangsmåtene trifluoreddiksyre, ren eller i diklormetan, eller HCI i dioksan eller i etylacetat. Det resulterende ammoniumsaltet nøytraliseres deretter, enten før koplingen eller in situ med basiske oppløsningsmidler så som vandige buffere eller tertiære aminer i diklormetan eller acetonitril eller dimetylformamid. Når Fmoc-gruppen anvendes er de valgte reagensene piperidin eller substituert piperidin i dimetylformamid, men ethvert sekundært amin kan anvendes. Avbeskyttelsen utføres ved en temperatur mellom 0°C og romtemperatur (RT) vanligvis 20-22°C.
Hvilken som helst av aminosyrene som har sidekjedefunksjonaliteter må beskyttes under fremstillingen av peptidet ved anvendelse av hvilke som helst av de ovenfor omtalte gruppene. Fagmannen vil erkjenne at valg og anvendelse av egnede beskyttende grupper for disse sidekjedefunksjonalitetene avhenger av aminosyren og nærværet av andre beskyttende grupper i peptidet. Valget av slike beskyttende grupper er viktig ved at gruppen ikke må fjernes under avbeskyttelse og koplingen av a-aminogruppen.
Når f.eks Boe anvendes som a-aminobeskyttende gruppe er følgende sidekjede beskyttende grupper egnede: p-toluensulfonyl (tosyl) enheter kan anvendes for å beskytte aminosidekjeden av aminosyrer, så som Lys og Arg; acet-amidometyl, benzyl (Bn) eller t-butylsulfonyl enheter kan anvendes for å beskytte den sulfidholdige sidekjeden av cystein; benzyl (Bn) etere kan anvendes for å beskytte de hydroksy holdige sidekjedene av serin, treonin eller hydroksyprolin; og benzylestere kan anvendes for å beskytte de karboksyholdige sidekjedene av aspartinsyre og glutaminsyre.
Når Fmoc velges for a-aminbeskyttelsen er vanlige tert-butylbaserte beskyttende grupper egnede. F.eks kan Boe anvendes for lysin og arginin, tert-butyl-eter for serin, treonin og hydroksyprolin, og tert-butylester for aspartinsyre og gluatminsyre. Trifenylmetyl (Trityl) enhet kan anvendes for å beskytte den tiolholdige sidekjeden av cystein.
Når forlengelsen av peptidet er fullført fjernes alle de beskyttende gruppene. Når en syntese i flytende fase anvendes blir de beskyttende gruppene fjernet ved den fremgangsmåten som dikteres ved valget av beskyttende grupper. Disse fremgangsmåtene er velkjente for fagfolk.
Når en fast fase syntese anvendes avspaltes peptidet fra harpiksen samtidig med fjernelsen av de beskyttende gruppene. Når Boe beskyttelsesfremgangsmåten anvendes i syntesen er behandling med vannfrie HF-holdige additiver, så som dimetylsulfid, anisol, tioanisol eller p-kresol ved 0°C den foretrukne fremgangsmåten for spaltning av peptidet fra harpiksen. Spaltningen av peptidet, kan oppnås ved hjelp av andre syrereagenser, så som trifluormetansulfonsyre/trifluoreddiksyre-blandinger. Dersom Fmoc beskyttelsesfremgangsmåten anvendes spaltes den N-terminale Fmoc-gruppen med reagenser som tidligere er beskrevet. De andre beskyttende gruppene og peptidet spaltes fra harpiksen ved anvendelse av opp-løsninger fra trifluoreddiksyre og forskjellige additiver så som anisol osv.
1. Syntese av en avsluttende gruppe B
Forskjellige endeavsluttende grupper B innføres på følgende måte:
1.1) Når B er en aryl, aralkyl: med de arylerte aminosyrene fremstilt ved én av de tre fremgangsmåtene nedenfor:
a) Direkte nukleofil fortrengning på en fluor-nitro arylenhet:
Kort sammenfattet blir 4-fluor-3-nitrobenzotrifluorid (a) omsatt med L-aminosyre (b) i nærvær av en base så som kaliumkarbonat ved 80°C for å gi den ønskede N-aryl aminosyren (c); b) Kopper katalyserte koplinger ifølge Ma et al. (J. Am. Chem. Soc. 1998, 120, 12459-12467):
Kort sammenfattet blir brom-4-fluorbenzen (d) omsatt med L-aminosyre (b) i nærvær av en base, så som kaliumkarbonat og en katalytisk mengde kopper-jodid ved 90°C for å gi den ønskede N-aryl aminosyren (e); eller
c) Nukleofil fortrengning av et triflat ved hjelp av et anilin:
Kort sammenfattet blir o-anisidin (f) omsatt med triflat (g) i nærvær av en base,
så som 2,6-lutidin ved 90°C for å gi benzylester (h). Hydrogenering med 10% Pd/C ga den ønskede N-aryl aminosyren (i).
1.2) Når B er et aminotiazolderivat:
a) Fmoc-tiocyanatet fremstilt i henhold til Kearney et al., 1998, J. Org. Chem., 63, 196 ble omsatt med en beskyttet P3 rest eller hele peptidet eller et
peptidsegment for å tilveiebringe tiourea.
b) Tioureaderivatet omsettes med et egnet bromketon for å tilveiebringe det tilsvarende tiazolderivatet.
1.3) Når B er R4-C(0)-, R4-S(0)2:
Beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptidsegment koples til henholdsvis et egnet acylklorid eller sulfonylklorid, som enten er kommersielt tilgjengelig eller for hvilket syntesen er velkjent innen teknikken.
1.4) Når B er R40-C(0)-:
Beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptidsegment koples til et egnet klor-format som enten er kommersielt tilgjengelig eller hvis syntese er velkjent innen teknikken. For Boc-derivater anvendes (Boc)20. a) Cyklobutanol behandles med fosgen for å gi det tilsvarende klorformatet. b) Klorformatet behandles med det ønskede Nhk-tripeptidet i nærvær av en base, så som trietylamin for å gi cyklobutylkarbamatet.
1.5) Når B er R4-N(R5)-C(0)- eller R4-NH-C(S)-, behandles det beskyttede P3 eller hele peptidet eller et peptidsegment med fosgen etterfulgt av amin som beskrevet i SynLett. feb. 1995; (2); 142-144.
2. Syntese av P2 enheter
2.1 Syntese av forstadier:
A) Syntese av halogenarylmetanderivater.
Fremstillingen av halogenmetyl-8-kinolin Ild ble utført i henhold til fremgangsmåten ifølge K.N. Campbell et al., J. Amer. Chem. Soc, (1946), 68, 1844.
Kort sammenfattet blir 8-kinolin karboksylsyre Ila omdannet til den tilsvarende alkoholen Mc ved reduksjon av det tilsvarende acylhalogenidet Ub med et reduserende middel, så som litiumaluminiumhydrid. Behandling av alkohol Mb med den egnede hydrohalogensyren gir det ønskede halogenderivatet Ild. En spesifikk utførelsesform av denne fremgangsmåten er presentert i eksempel 1.
B) Syntese av aryl alkoholderivater:
2-fenyl-4-hydroksykinolinderivater Ille ble fremstilt i henhold til Giardina et al. (J. Med. Chem., (1997), 40, 1794-1807).
R22 & R21B = alkyl, OH, SH, halogen, NH2, N02.
Kort sammenfattet blir benzoylacetamid (Illa) kondensert med det egnede anilinet (I I Ib) og iminet som ble oppnådd ble ringsluttet med polyfosforsyre for å gi det tilsvarende 2-fenyl-4-hydroksykinolinet (Ille). En spesifikk utførelses-form av denne prosessen er presentert i eksempel 2.
Eller alternativ kan fremgangsmåten utføres på en annen måte: Benzoyletylester (Illa) ble kondensert med det egnede anilinet (lllb) i nærvær av syre og det oppnådde iminet ble ringsluttet ved oppvarming ved 260-280°C for å gi det tilsvarende 2-fenyl-4-hydroksykinolinet (Ille). En spesifikk utfør-elsesform av denne prosessen er presentert i eksempel 3 (forbindelse 3e).
2.2 Syntese av P2:
A) Syntesen av 4-substituert prolin (hvor R<2> er knyttet til ringen via et karbonatom) (med stereokjemien som vist):
utføres som vist i skjema IV i henhold til fremgangsmåten beskrevet av J. Ezquerra et al. (Tetrahedron, (1993), 38, 8665-8678) og C. Pedregal et al.
(Tetrahedron Lett., (1994), 35, 2053-2056).
Kort sammenfattes beskyttes Boc-pyroglutaminsyre som en benzylester. Behandling med en sterk base så som litiumdiisopropylamid etterfulgt av tilsetning av et alkylerende middel (Br-R<20> eller l-R<20>) gir de ønskede forbindelsene IVe etter reduksjon av amidet og avbeskyttelse av esteren.
B) Syntese av 0-substituert-4-(R)-hydroksyprolin:
kan utføres ved å anvende de forskjellige fremgangsmåtene beskrevet nedenfor. 1) Når R<20> er aralkyl eller (lavere alkyl)-Het, kan fremgangsmåten utføres ifølge fremgangsmåten beskrevet av E.M. Smith et al. (J. Med. Chem. (1988), 31, 875-885). Kort sammenfattet behandles kommersielt tilgjengelig Boc-4-(R)-hydroksyprolin med en base så som natriumhydrid eller kalium tert-butoksid og det resulterende alkoksidet omsettes med halogen-R<20> (Br-R20, l-R<20>, etc) for å gi de ønskede forbindelsene. Spesifikke utførelsesformer av denne fremgangsmåten er presentert i eksempler 4, 5 og 7. 2) Når R<20> er aryl eller Het, kan forbindelsene også fremstilles via en Mitsunobu reaksjon (Mitsunobu (1981), Synthesis, January, 1-28; Rano et al., (1995), Tet. Lett. 36(22), 3779-3792; Krchnak et al., (1995), Tet. Lett. 36(5), 62193-6196; Richter et al., (1994), Tet. Lett. 35(27), 4705-4706). Kort sammenfattet behandles kommersielt tilgjengelig Boc-4-(S)-hydroksyprolin metylester med den egnede arylalkoholen eller tiolen i nærvær av trifenylfosfin og dietylazodikarboksylat (DEAD) og den resulterende esteren hydrolyseres til syren. Spesifikke utførelsesformer av denne prosessen er presentert i eksempler 6 og 8.
Alternativt kan Mitsunobu reaksjonen utføres i fast fase (skjema V). 96-brønns blokkering av modell 396 syntetiseringsinnretningen (Advanced ChemTech) tilveiebringes med alikvoter av harpiksbundet forbindelse (Va) og en rekke aryl-alkoholer eller tioler og egnede reagenser tilsettes. Etter inkubering vaskes hvert harpiksbundet produkt (Vb), tørkes og avspaltes fra harpiksen.
En Suzuki reaksjon (Miyaura et al., (1981), Synth. Comm. 11, 513; Sato et al.,
(1989), Chem. Lett., 1405; Watanabe et al., (1992), Synlett., 207; Takayuki et
al., (1993), J. Org. Chem. 58, 2201; Frenette et al., (1994), Tet. Lett. 35(49), 9177-9180; Guiles et al., (1996), J. Org. Chem. 61, 5169-5171) kan også anvendes for ytterligere å funksjonalisere arylsubstituenten.
3. Syntese av P1 enheter
3.1 Syntese av de 4 mulige isomerene av 2-substituert 1-aminocyklopropyl karboksylsyre
Syntesen ble utført i henhold til skjema VI.
a) Kort sammenfattet omsettes di-beskyttet malonat Via og 1,2-dihalogenalkan Vlb eller cyklisk sulfat VIc (syntetisert ifølge K. Burgess og Chun-Yen KE (Synthesis,
(1996), 1463-1467) under basiske betingelser for å gi diesteren Vid. b) En regioselektiv hydrolyse av den mindre hindrede esteren utføres for å gi syren Vie. c) Denne syren Vie underkastes en Curtius omordning for å gi en racemisk blanding av 1-aminocyklopropylkarboksylsyrederivater Vlf med R<1> syn til
karboksylgruppen. En spesifikk utførelsesform for denne syntesen er presentert i
eksempel 9.
d, e) Alternativt danner den selektive esterdannelsen fra syren Vie med et egnet halogenid (P<*>CI) eller alkohol (P<*>OH) diester Vig hvori P<*> esteren er kompatibel med den selektive hydrolysen av P esteren. Hydrolyse av P ester tilveiebringer
syre VI h.
f) En Curtius omordning på Vlh gir en racemisk blanding av 1-aminocyklopropylkarboksylsyrederivater Vli med R<1> gruppe anti til karboksylgruppen. En spesifikk
utførelsesform for denne syntesen er presentert i eksempel 14.
En alternativ syntese for fremstillingen av derivater VIlf (når R<1> er vinyl og syn til karboksylgruppen) beskrevet nedenfor.
Behandling av kommersielt tilgjengelig eller lett oppnåelige iminer Vila med 1,4-dihalogenbuten VIIb i nærvær av en base gir, etter hydrolyse av det resulterende iminet VIle, VIId som har allylsubstituenten syn til karboksylgruppen. Spesifikke ut-førelsesformer av denne fremgangsmåten er presentert i eksempler 15 og 19.
Oppløsning av alle de ovenfor angitte enantiomere blandingene ved karbon 1 (Vie og VIId) kan utføres via: 1) enzymatisk separasjon (eksempler 13,17 og 20);
2) krystallisasjon med en kiral syre (eksempel 18); eller
3) kjemisk derivatisering (eksempel 10).
Etter oppløsning kan bestemmelse av den absolutte stereokjemien utføres som angitt i eksempel 11.
Enantiomerisk oppløsning og stereokjemi bestemmelse kan utføres på den samme måten for de enantiomere blandingene ved karbon 1 hvor substituenten ved C2 er anti til karboksylgruppen (Vli).
3.2. Syntese av 1-aminocyklobutyl karboksylsyre
Syntesen av 1,1-aminocyklobutankarboksylsyre utføres i henhold til "Kavin Douglas; Ramaligam Kondareddiar; Woodard Ronald, Synth. Commun. (1985), 15 (4), 267-72.
Kort sammenfattet gir behandling av forbindelse Villa med en base i nærvær av VII Ib det tilsvarende cyklobutylderivatet Ville. Hydrolyse av isocyanat- og ester-gruppene av Ville under sure betingelser (HCI) gir saltsyresaltet av 1-amino-cyklo-butylkarboksylsyre Vllld. Karboksylsyren forestres senere under metanol i HCI. En spesifikk utførelsesform av denne forestringen er beskrevet i eksempel 21.
3.2 Syntese av 2-substituert 1-aminocyklobutyl karboksylsyre
a) Et beskyttet glysinesterderivat, så som imin IXa alkyleres med en homoallylisk elektrofil IXb ved å anvende en egnet base så som et metallhydrid, hydroksid
eller alkoksid. Nyttige avspaltbare grupper i IXb omfatter halogener (X = Cl, Br, I) eller sulfonatestere (mesylat, tosylat eller triflat). Den allyliske alkoholfunksjonali-teten i IXb beskyttes med hydroksylbeskyttende grupper som er velkjente innen
teknikken (f.eks acetat, silyl, acetaler).
b) I et andre trinn blir hydroksylfunksjonen av monoalkylert derivat IXc avbeskyttet og omdannet til en egnet elektrofilfunksjon X så som beskrevet ovenfor for forbindelse IXb. c) Ringslutning av IXd til cyklobutanderivat IXe utføres ved behandling med en base (metallhydrider, alkoksider), etterfulgt av hydrolyse ved anvendelse av vandige
mineralsyrer og nøytralisasjon med en mild base. Ved dette trinnet kan syn og
anti-isomerer av IXe separeres ved flash kromatografi.
d) Eventuelt kan dobbeltbindingen i IXe også hydrogeneres under standard betingelser for å gi det tilsvarende mettede derivatet IXf.
Oppfinnelsen omfatter videre en fremgangsmåte for fremstilling av en peptidanalog av formel (I) hvor P1 er en substituert aminocyklopropyl karboksylsyrerest, omfattende trinnet: koplinget av et peptid valgt fra gruppen bestående av: APG-P3-P2; eller APG-P2;
med et P1 mellomprodukt av formelen:
hvor Ri er Ci-ealkyl, cykloalkyl eller C2-6alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen, CPG er en karboksylbeskyttende gruppe og APG er en aminobeskyttende gruppe og P3 og P2 er som definert ovenfor.
Oppfinnelsen omfatter videre en fremgangsmåte for fremstilling av: 1) en serin protease inhibitor peptidanalog, eller 2) en HCV NS3 protease inhibitor peptidanalog, denne fremgangsmåten omfatter trinnet:
• kopling av en (egnet beskyttet) aminosyre, peptid eller peptidfragment med et P1 mellomprodukt av formelen:
hvor Ri er Ci-ealkyl, C3.7cykloalkyl eller C2-6alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen, og CPG er en karboksylbeskyttende gruppe.
Oppfinnelsen omfatter derfor en fremgangsmåte for fremstilling av: 1) en protease inhibitor peptidanalog, eller 2) en serin protease inhibitor peptidanalog, denne prosessen omfatter trinnet:
• kopling av (egnet beskyttet) aminosyre, peptid eller peptidfragment med et mellomprodukt med formelen:
hvor CPG er en karboksylbeskyttende gruppe.
Oppfinnelsen omfatter også anvendelsen av et P1 mellomprodukt av formelen:
hvor Ri er Ci.6alkyl, cykloalkyl eller C2-6alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen, for fremstilling av: 1) en serin protease inhibitor peptidanalog, eller 2) en HCV NS3 protease inhibitor peptidanalog.
Oppfinnelsen omfatter også anvendelse av et mellomprodukt med formelen:
hvor CPG er en karboksylbeskyttende gruppe, for fremstilling av: 1) en protease inhibitor peptidanalog, eller 2) en serin protease inhibitor peptidanalog.
Oppfinnelsen omfatter også anvendelse av et P1 mellomprodukt av formelen:
hvor Ri er C-i-6alkyl, cykloalkyl eller C2-ealkenyl, alle eventuelt substituert med halogen, for fremstilling av en forbindelse av formel I som definert ovenfor.
Endelig omfatter oppfinnelsen også anvendelse av en prolinanalog av formelen:
hvor R21A er Ci-6alkyl; Ci-6alkoksy, lavere tioalkyl; halogen, amino eventuelt mono-substituert med Ci-ealkyl; C6, Cioaryl, C7-iSaralkyl eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22, hvor R22 er Ci^alkyl, Ci.6alkoksy, amido, (lavere alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, eller Het og
R21B er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, amino, di(lavere alkyl)amino, (lavere alkyl)amid, NO2, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl;
for syntesen av 1) en serin protease inhibitor peptidanalog, 2) en HCV NS3 protease inhibitor peptidanalog, eller 3) en peptidanalog av formel I som definert ovenfor.
Eksempler
Foreliggende oppfinnelse illustreres i større detalj ved de følgende, ikke-begrensende eksempler.
Temperaturer er angitt i grader Celsius. Oppløsnings prosentdeler uttrykker en vekt til volum relasjon, og oppløsningsforhold uttrykker en volum til volum relasjon, med mindre annet er angitt. Kjernemagnetiske resonans (NMR) spektra ble registrert på et Bruker 400 MHz spektrometer; de kjemiske skiftene (8) er rapportert i deler pr million. Flash kromatografi blir utført på silikagel (Si02) i henhold til Stills flash kromatografiteknikk (W.C. Still et al., J. Org. Chem., (1978), 43, 2923).
Forkortelser anvendt i eksemplene omfatter: Bn: benzyl; Boe: tert-butyloksy-karbonyl {Me3COC(0)}; BSA: bovint serum albumin; CHAPS: 3-[(3-kolamidopropyl)-dimetylammonio]-1-propansulfonat; DBU: 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en; CH2Cl2=DCM: metylenklorid; DEAD: dietylazodikarboksylat: DIAD: diisopropylazo-dikarboksylat; DIEA: diisopropyletylamin; DIPEA: diisopropyletylamin; DMAP: dimetylaminopyridin; DCC: 1,3-dicykloheksylkarbodiimid; DME: 1,2-dimetoksyetan; DMF: dimetylformamid; DMSO: dimetylsulfoksid; DTT: ditiotreitol eller treo-1,4-dimerkapto-2,3-butandiol; DPPA: difenylfosforylazid; EDTA: etylendiamintetraeddik-syre; Et: etyl; EtOH: etanol; EtOAc: etylacetat; Et20: dietyleter; HATU: [O-7-aza-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat]; HPLC: høy ytelses væskekromatografi; MS: massespektrometri (MALDI-TOF: matriks assistert laser desorpsjons ionisasjons -Time of Flight, FAB: hurtig atom bombardement); LAH: litiumaluminiumhydrid; Me: metyl; MeOH: metanol; MES: (2-{N-morfolino}etan-sulfonsyre); NaHMDS: natrium bis(trimetylsilyl)amid; NMM: N-metylmorfolin; NMP: N-metylpyrrolidin; Pr: propyl; Succ: 3-karboksypropanoyl; PNS: 4-nitrofenylamino eller p-nitroanilid; TBAF: tetran-n-butylammoniumfluorid; TBTU: 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametyluronium tetrafluorborat; TCEP: tris(2-karboksyetyl)fosfinhydroklorid; TFA: trifluoreddiksyre; THF: tetrahydrofuran; TIS: triisopropylsilan; TLC: tynnsjikt kromatografi; TMSE: trimetylsilyletyl; Tris/HCI: tris(hydroksymetyl)amino-metanhydroklorid.
P2 byggeblokker
Eksempel 1
Syntese av brommetyl-8-kinolin (1):
Til kommersielt tilgjengelig 8-kinolinkarboksylsyre (2,5 g, 14,4 mmol) ble det tilsatt rent tionylklorid (10 ml, 144 mmol). Denne blandingen ble oppvarmet til 80°C i 11 før overskuddet tionylklorid ble avdestillert under redusert trykk. Til det resulterende brunaktige faststoffet ble det tilsatt absolutt EtOH (15 ml) som var oppvarmet til 80°C i 11 før det ble konsentrert i vakuum. Resten ble fordelt mellom EtOAc og mettet vandig NaHCC>3, og den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi en brunaktig olje (2,8 g). Dette materialet (ca 14,4 mmol) ble tilsatt dråpevis i løpet av 35 min til en LAH (0,76 g, 20,2 mmol)/Et20 suspensjon som ble avkjølt til -60°C. Reaksjonsblandingen ble langsomt oppvarmet til -35°C i løpet av 1,51 før reaksjonen var fullført. Reaksjonen ble stoppet med MgSO4.10H2O, langsomt i løpet av 30 min og deretter fuktig THF. Blandingen ble fordelt mellom Et20 og 10% vandig NaHC03. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi et gulaktig faststoff (2,31 g, 80% over 2 trinn) svarende til alkoholen. Alkoholen (2,3 g, 11,44 mmol) ble oppløst i AcOH/HBr (20 ml, 30% oppløsning fra Aldrich) og oppvarmet ved 70°C i 2,51. Blandingen ble konsentrert i vakuum til tørrhet, fordelt mellom EtOAc (100 ml) og mettet vandig NaHCC«3 før det ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi den ønskede forbindelsen (1) som et brunaktig faststoff (2,54 g, 100%).
Eksempel 2
Syntese av 2-fenyl-4-hydroksykinolin (2):
Kommersielt tilgjengelig etylbenzoylacetat (6,00 g, 31,2 mmol) ble oppvarmet ved 85°C (forseglet rør) i 75 ml 30% NH4OH i 21. Det faste stoffet dannet ved avkjøling ble frafiltrert og oppvarmet til tilbakeløp i vann i 21. Oppløsningen ble ekstrahert tre ganger med CH2CI2. De organiske lagene ble kombinert, tørket over MgS04l filtrert og konsentrert. Den gule resten ble flash kromatografert på silikagel, under eluering med EtOAc:heksan (3:7) for å gi det tilsvarende amidet som et hvitt, faststoff, 1,60 g, 31% utbytte.
Dette amidet (250 mg, 1,53 mmol) ble tilbakeløpsbehandlet ved anvendelse av en Dean-Stark apparatur med anilin (143 mg, 1,53 mmol) og anilin HCI (10 mg, 0,08 mmol) i toluen (10 ml) i 161. Oppløsningen ble konsentrert for å gi en brun olje som ble blandet med polyfosforsyre (2 g) og oppvarmet ved 135°C i 20 min. Reaksjonsblandingen ble helt i vann og justert til pH 8 med 5 M NaOH. Den vandige suspensjonen ble ekstrahert to ganger med etylacetat. De organiske lagene ble kombinert, vasket med saltvannsoppløsning, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Resten ble flash kromatografert på silikagel, under eluering med 3% MeOH i etylacetat, for å gi 2-fenyl-4-hydroksykinolin (2), 67 mg, 20% utbytte.
<1>H NMR (DMSO-de) 8 8,11 (d, J = 7 Hz, 1H), 7,86-7,83 (m, 2H), 7,77 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,68 (dd, J = 8, 7 Hz, 1H), 7,61-7,58 (m, 3H), 7,35 (dd, J = 8, 7 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H).
Eksempel 3
Syntese av 4-hydroksy-2-fenyl-7-metoksykinolin (3)
4-hydroksy-2-fenyl-7-metoksykinolin (e):
En oppløsning av etylbenzoylacetat (b) (100,0 g, 0,52 mol), m-anisidin (a)
(128,1 g, 1,04 mol) og 4 N HCI/dioksan (5,2 ml) i toluen (1,0 I) ble tilbakeløps-behandlet i 6,251 i en Dean-Stark apparatur. Den avkjølte toluenoppløsningen ble suksessivt vasket med vandig 10% HCI (2 x 300 ml), 1 N NaOH (2 x 300 ml), H20 (300 ml) og saltvannsoppløsning (150 ml). Toluenfasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk for å gi en 1,2:1,0 blanding av ester c og amid d (144,6 g, 45%/38% rått utbytte) som en mørk, brun olje. Den rå oljen ble oppvarmet til 280°C i 80 min mens generert EtOH ble destillert. Det avkjølte mørke faststoffet som ble oppnådd ble triturert med CH2CI2 (200 ml). Suspensjonen ble filtrert og det resulterende faste stoffet ble vasket med CH2CI2 for å gi e (22,6 g, 17% fra a) som et beige faststoff: <1>H NMR (DMSO-d6) 6 8,00 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81-7,82 (m, 2H), 7,57-7,59 (m, 3H), 7,20 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,26 (s, 1H), 3,87 (s, 3H).
4-klor-2-fenyl-7-metoksykinolin (3):
En suspensjon av e (8,31 g, 33,1 mmol) i POCI3 (90 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 21 (klar oppløsning oppnådd ved oppvarming). Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Resten ble fordelt mellom 1N NaOH (eksoterm, 10 N NaOH tilsatt for å opprettholde høy pH) og EtOAc (500 ml). Det organiske laget ble vasket med H20 (100 ml) og saltvannsoppløsning (100 ml), ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk for å gi 3 (8,60 g, 96%) som et blekt, gult faststoff: <1>H NMR (DMSO-d6) 5 8,28-8,30 (m, 2H), 8,20 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,54-7,58 (m, 3H), 7,52 (D, J = 2,5 Hz, 1H), 7,38 (dd, J = 9,1, 2,5 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H). Denne reaksjonen ble gjentatt tre ganger og ga alltid 96-98% utbytte hvilket er signifikant høyere enn utbyttet på 68% rapportert i J. Med. Chem. 1997, 40, 1794.
Eksempel 4
Syntese av Boc-4(R)-(naftalen-1-ylmetoksy)prolin (4):
Kommersielt tilgjengelig Boc-4(R)-hydroksyprolin (5,00 g, 21,6 mmol) ble oppløst i THF (100 ml) og avkjølt til 0°C. Natriumhydrid (60% dispersjon i olje, 1,85 g, 45,4 mmol) ble tilsatt porsjonsvis i løpet av 10 min, og suspensjonen ble om rørt ved RT i 11. Deretter ble 1-(brommetyl)naftalen (8,00 g, 36,2 mmol) (fremstilt som beskrevet i E.A. Dixon et al. Can. J. Chem., (1981), 59, 2629-2641) tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 181. Blandingen ble helt i vann (300 ml) og vasket med heksan. Det vandige laget ble surgjort med 10% HCI og ekstrahert to ganger med etylacetat. De organiske lagene ble kombinert og vasket med salt-vannsoppløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Resten ble renset ved flash kromatografi (49:49:2 heksan:etylacetal:eddiksyre) for å gi forbindelsen i overskriften som en fargeløs olje (4,51 g, 56% utbytte). <1>H NMR (DMSO-d6) indikerte nærvær av to rotamerer: 8 8,05 (m, 1H), 7,94 (m, 1H), 7,29 (d, J = 14 Hz, 1H), 7,55-7,45 (m,
4H), 4,96 (m, 2H), 4,26 (br.s, 1H), 4,12 (dd, J=J=8Hz, 1H), 3,54-3,42 (m, 2H), 2,45-2,34 (m, 1H), 2,07-1,98 (m, 1H), 1,36 (s, (3/9) 9H), 1,34 (s, 6/9) 9H).
Eksempel 5
Syntese av Boc-4(R)-(8-kinolinmetoksy)prolin (5):
Boc-4(R)-hydroksyprolin (1,96 g, 8,5 mmol) i vannfri THF (20 ml) ble tilsatt til en suspensjon av NaH (1,4 g, 60% i olje, 34 mmol) i THF (100 ml). Blandingen ble omrørt i 30 min før brommetyl-8-kinolin fra eksempel 1 (2,54 g, 11,44 mmol) ble tilsatt i THF (30 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70°C (51) før overskudd NaH ble forsiktig ødelagt med våt THF. Reaksjonen ble konsentrert i vakuum og det resulterende materialet ble oppløst i EtOAc og H20. Den basiske vandige fasen ble separert og surgjort med 10% vandig HCI til pH ~5 før den ble ekstrahert med EtOAc (150 ml). Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi en brun olje. Rensning ved flash kromatografi (elueringsmiddel: 10% MeOH/CHCI3) ga den ønskede forbindelsen (5) som et blekt, gult faststoff (2,73 g, 86%). HPLC (97,5%); <1>H-NMR (DMSO-d6) viser rotamer populasjoner i et 6:4 forhold, 8 12-11,4 (bs, 1H), 8,92 (2 x d, J = 4,14 og 4,14 Hz, 1H), 8,38 (2 x d, J = 8,27 og 8,27 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 7,94 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,63-7,54 (m, 2H), 5,14 (2xs, 2H), 4,32-4,29 (m, 1H), 4,14-4,07 (m, 1H), 3,52-3,44 (m, 2H), 2,43-2,27 (m, 1H), 2,13-2,04 (m, 1H), 1,36 og 1,34 (2 x s, 9H).
Eksempel 6
Fremstilling av Boc-4(R)-(7-klorkinolin-4-okso)prolin (6):
Kommersielt tilgjengelig Boc-4(S)-(hydroksyprolinmetylester (500 mg, 2,04 mmol) og 7-klor-4-hydroksykinolin (440 mg, 2,45 mmol) ble plassert i tørr THF (10 ml) ved 0°C. Trifenylfosfin (641 mg, 2,95 mmol) ble tilsatt, etterfulgt av langsom tilsetning av DIAD (426 mg, 2,45 mmol). Blandingen ble omrørt ved RT i 201. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert, opptatt i etylacetat og ekstrahert tre ganger med HCI 1N. Den vandige fasen ble gjort basisk med Na2CC>3 og ekstrahert to ganger med etylacetat. De organiske lagene ble kombinert, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert for å gi en gul olje. Oljen ble renset ved flash kromatografi for å gi metylesteren som et hvitt, faststoff, 498 mg, 58% utbytte.
Denne metylesteren (400 mg, 0,986 mmol) ble hydrolysert med 1M vandig natriumhydroksid (1,7 ml, 1,7 mmol) i metanol (4 ml) ved 0°C i 31. Oppløsningen ble konsentrert for å fjerne metanolen og nøytralisert med 1M vandig HCI. Suspensjonen ble konsentrert til tørrhet og opptatt i metanol (20 ml), saltene ble frafiltrert og filtratet konsentrert for å gi den ønskede forbindelsen (6) som et hvitt, faststoff, 387 mg, kvantitativt utbytte.
<1>H NMR (DMSO-de) (ca 1:1 blanding av rotamerer) 8 8,74 (d, J = 5 Hz, 1H), 8,13-8,09 (m, 1H), 7,99 og 7,98 (s, 1H), 7,58 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 5 Hz, 1H), 5,26-5,20 (m, 1H), 4,10-4,01 (m, 1H), 3,81-3,72 (m, 1H) 3,59 (dd, J = 12, 10 Hz, 1H), 2,41-2,31 (m, 2H), 1,34 og 1,31 (s, 9H).
Eksempel 7
Syntese av Boc-4(R)-(2-fenyl-7-metoksykinolin-4-okso)prolin (7):
Boc-4(R)-(2-fenyl-7-metoksykinolin-4-okso)prolin (7):
Kalium tert-butoksid (8,16 g, 72,7 mmol) ble tilsatt i små porsjoner, i løpet av 15 min, til en oppløsning av Boc-4(R)-hydroksyprolin (6,73 g, 29,1 mmol) i DMSO (83 ml), holdt ved 25°C. Blandingen ble omrørt ved 25°C i 1,51. Klor-2-fenyl-7-metoksykinolin 3 (8,61 g, 32,0 mmol) ble tilsatt i 4 porsjoner i løpet av 15 min til reaksjonsblandingen. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 191. Den resulterende suspensjonen ble helt i H20 (650 ml) og blandingen ble vasket med Et20 (3 x 150 ml) for å fjerne overskudd klorkinolin (EtOAc ble senere funnet å være mer effektiv). Det vandige laget ble surgjort med vandig 1 N HCI (38 ml av beregnet 1,5 ekvivalent påkrevet, 43,6 ml) til pH 4-5. Det hvite faststoffet som ble utfelt ble samlet ved filtrering. Det fuktige faststoffet ble tørket under redusert trykk over P205 for å gi prolinderivatet 7 (12,6 g, 91%, inneholder 2,3 v/v av DMSO) som et beige faststoff: <1>H NMR (DMSO-de) 8 (2:1 blanding av rotamerer) 8,27 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 8,00, 7,98 (2d, J = 9,2 -9,2 Hz, 1H), 7,48-7,56 (m, 3H), 7,45, 7,43 (2s, 1H), 7,39 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 9,2 2,5 Hz, 1H), 5,53-5,59 (m, 1H), 4,34-4,41 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,76 (bred s, 2H), 2,63-2,73 (m, 1H), 2,32-2,43 (m, 1H), 1,36, 1,33 (2s 9H).
Eksempel 8
Syntese av Boc-4(R)-(2-fenyl-6-nitrokinolin-4-okso)prolin (8):
Dietylazodikarboksylat (0,77 ml, 4,89 mmol) ble tilsatt dråpevis til en omrørt oppløsning av trifenylfosfin (1,28 g, 4,88 mmol) i 15 ml tetrahydrofuran ved 0°C. Etter 30 min omrøring under nitrogen ble det tilsatt en oppløsning av Boc-4(S)-hydroksyprolinmetylester (1,00 g, 4,08 mmol) i 5 ml tetrahydrofuran etterfulgt av en suspensjon av kommersielt tilgjengelig 6-nitro-2-fenyl-4-kinolinol (1,30 g, 4,88 mmol) i 10 ml av det samme oppløsningsmiddelet. Den røde blandingen ble omrørt i 15 min ved 0°C og ved RT over natten. Oppløsningsmiddelet ble inndampet i vakuum. Den gjenværende oljen ble fortynnet i etylacetat og vasket to ganger med natriumbikarbonat, en gang med vann og en gang med saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet i vakuum. Resten ble kromatografert over silikagel (70:30 vol/vol, heksaner-etylacetat) for å gi den ønskede metylesteren som et svakt gult, faststoff (1,70 g, 85%).
<1>H NMR (CDCI3) rotamerer = 3:7 8 9,03 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,46 (dd, J = 9, 2,5 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,14-8,07 (m, 2H), 7,59-7,50 (m, 3H), 7,19 (s, 1H), 5,39-5,30 (m, 1H), 4,67 (t, J = 8 Hz, 0,3 H), 4,61 (t, J = 8 Hz, 0,7 H), 4,07-4,01 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,89-2,73 (m, 1H), 2,55-2,47 (m, 1H), 1,49 (s, 2,7H), 1,45 (s, 6,3 H).
Til en oppløsning av metylesteren (503 mg, 1,02 mmol) i en blanding av THF: H20 (10:4 ml) ble det tilsatt litiumhydroksid monohydrat (85 mg, 2,05 mmol). 2 ml MeOH ble tilsatt for å få en homogen oppløsning. En hvit utfelling resulterte i løpet av 30 min. Den resulterende suspensjonen ble omrørt ved RT i ytterligere 61. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med en vandig oppløsning av sitronsyre 10% og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet i vakuum for å gi 416 mg (85%) av den ønskede syren (8).
<1>H NMR (DMSO-de): 5 8,92-8,87 (m, 1H), 8,47 (dd, J = 9, 3Hz, 1H), 8,38-8,32 (m, 2H), 8,19 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,62-7,55 (m, 3H), 5,73-5,66 (m, 1H), 4,41 (t, J = 8 Hz, 1H), 3,89-3,76 (m, 2H), 2,83-2,72 (m, 1H), 2,47-2,35 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).
P1 byggeblokker
Eksempel 9
A) Syntese av blanding av (1R,2R)/(1S,2R) 1-amino-2-etylcyklopropyl
karboksylsyre
a) Til en suspensjon av benzyltrietylammoniumklorid (21,0 g, 92,19 mmol) i en 50% vandig NaOH oppløsning (92,4 g i 185 ml H20) ble det trinnvis tilsatt di-tert-butyl-malonat (20,0 g, 92,47 mmol) og 1,2-dibrombutan (30,0 g, 138,93 mmol). Reaksjonsblandingen ble kraftig omrørt over natten ved RT, en blanding av is og vann ble deretter tilsatt. Råproduktet ble ekstrahert med CH2CI2 (3x) og trinnvis vasket med vann (3x) og saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Resten ble flash kromatografert (7 cm, 2 til 4%
Et20 i heksan) for å gi det ønskede cyklopropanderivatet 9c (19,1 g, 70,7 mmol, 76% utbytte). <1>H NMR (CDCI3) 8 1,78-1,70 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,46 (s, 9H),
1,44-1,39 (m, 1H), 1,26-1,64 (m, 3H), 1,02 (t, 3H, J = 7,6 Hz).
b) Til en suspensjon av kalium tert-butoksid (6,71 g, 59,79 mmol, 4,4 ekv.) i tørr eter (100 ml) ved 0°C ble det tilsatt H20 (270 ul, 15,00 mmol, 1,1 ekv.). Etter 5 min
ble diester 9c (3,675 g, 13,59 mmol) i eter (10 ml) tilsatt til suspensjonen. Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved RT, deretter helt i en blanding av is og vann og vasket med eter (3x). Det vandige laget ble surgjort med en 10% vandig sitronsyreoppløsning ved 0°C og ekstrahert med AcOET (3x). Det kombinerte organiske laget ble trinnsvis vasket med vann (2x) og saltvannsopp-løsning. Etter den vanlige behandlingen (Na2S04, filtrering, konsentrasjon) ble den ønskede syren 9d isolert som en blek, gul olje (1,86 g, 8,68 mmol, 64% utbytte). <1>H NMR (CDCI3) 8 2,09-2,01 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 3,8, 9,2 Hz, 1H), 1,81-1,70 (m, 1H), 1,66 (dd, J = 3,0, J = 8,2 Hz, 1H), 1,63-1,56 (m, 1H), 1,51 (s,
9H), 1,0 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
c) Til syren 9d (2,017 g, 9,414 mmol) i tørr benzen (32 ml) ble det trinnvis tilsatt Et3N (1,50 ml, 10,76 mmol, 1,14 ekv.) og DPPA (2,20 ml, 10,21 mmol, 1,08 ekv.).
Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp i 3,51, deretter ble 2-trimetyl-silyletanol (2,70 ml, 18,84 mmol, 2,0 ekv.) tilsatt. Tilbakeløpet ble opprettholdt over natten, deretter ble reaksjonsblandingen fortynnet med Et20 og trinnvis vasket med en 10% vandig sitronsyreoppløsning, vann, mettet vandig NaHC03, vann (2x) og saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandlingen (MgS04, filtrering, konsentrasjon) ble resten renset ved flash kromatografi (5 cm, 10% AcOEt-heksan) for å gi det ønskede karbamatet 9e (2,60 g, 7,88 mmol, 84% utbytte) som en blek, gul olje. MS (FAB) 330 (MH<+>); <1>H NMR (CDCI3) 8 5,1 (bs, 1H), 4,18-4,13 (m, 2H), 1,68-1,38 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,24-1,18 (m, 1H), 1,00-0,96 (m, 5H), 0,03 (s, 9H).
d) Til karbamat 9e (258 mg, 0,783 mmol) ble det tilsatt en 1,0 M TBAF oppløsning i THF (940 ul, 0,94 mmol, 1,2 ekv.). Etter 4,51 ble det tilsatt en ytterligere mengde
av 1,0 M TBAF (626 ul, 0,63 mmol, 0,8 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved RT, oppvarmet til tilbakeløp i 30 min og deretter fortynnet med AcOEt. Oppløsningen ble trinnsvis vasket med vann (2x) og saltvannsopp-løsning. Etter den vanlige behandlingen (MgS04, filtrering og konsentrasjon) ble
det ønskede aminet 9f isolert (84 mg, 0,453 mmol, 58% utbytte) som en blek, gul væske. <1>H NMR (CDCI3) 8 1,96 (bs, 2H), 1,60-1,40 (m, 2H), 1,47 (s, 9H), 1,31-1,20 (m, 1H), 1,14 (dd, J = 4,1, 7,3 Hz, 1H), 1,02 (dd, J = 4,1, 9,2 Hz, 1H), 0,94 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Eksempel 10
Kjemisk oppløsning av t-butyl-(1R,2R)/(1S,2R)1-amino-2-etylcyklopropyl karboksylat (fra eksempel 9):
Forbindelse 9e fra eksempel 9 (8,50 g, 25,86 mmol) ble behandlet med 1M TBAF/THF (26 ml) ved tilbakeløp i 45 min. Den avkjølte reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc, vasket med vann (3x) og saltvannsoppløsning (1x), deretter tørket (MgS04), filtrert og inndampet for å gi det frie aminet som en lys, gul olje. Det frie aminet ble oppløst i vannfri CH2CI2 (120 ml), NMM (8,5 ml, 77,57 mmol), forbindelse 4 (eksempel 4) (10,08 g, 27,15 mmol) og HATU (11,79 g, 31,03 mmol) ble tilsatt trinnsvis. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved RT over natten, deretter opparbeidet som beskrevet tidligere. Den rå diastereomere blandingen ble separert ved flash kromatografi (elueringsmiddel-heksan : Et20; 25:75) for å gi dipeptidet 10a (det mindre polare elueringspunktet) som et hvitt skum (4,42 g; 64% av det teoretiske utbyttet). Ved dette tidspunktet var begge isomerer separert, men den absolutte stereokjemien var fremdeles ikke kjent.
Eksempel 11
Bestemmelse av den absolutte stereokjemien for forbindelser 10a og 10b ved korrelasjon med kjent t-butyl (1R-amino-2R-etylcyklopropyl karboksylat
Prof. A. Charette fra University of Montreal, tilveiebragte forbindelse 11a med den absolutte stereokjemien som vist, som ble bestemt ved røntgen krystallografi (J. Am. Chem. Soc, 1995, 117, 12721). Forbindelse 11a (13,2 mg, 0,046 mmol) ble oppløst i 1M HCI/EtOAc (240 ul) og ble omrørt ca 481. Blandingen ble inndampet til tørrhet for å tilveiebringe forbindelse 11b som en lys, gul pasta og ble koplet til forbindelse 4 (18 mg, 0,049 mmol) som beskrevet i eksempel 10 ved anvendelse av NMM (20,3 ul, 0,185 mmol) og HATU (21,1 mg, 0,056 mmol) i CH2CI2. Råmaterialet ble renset ved flash kromatografi (elueringsmiddel - heksan : Et20; 50:50) for å tilveiebringe dipeptidet 11c som en olje (7,7 mg; 31%). Ved TLC, HPLC og NMR sammenligning ble dipeptidet 11c funnet å være identisk med den mindre polare forbindelsen 10a oppnådd i eksempel 10, for derved å identifisere den absolutte stereokjemien av 10a som (1R.2R).
Eksempel 12
Fremstilling av (1 R,2R)/(1 S,2R)1 -Boc-amino-2-etylcyklopropylkarboksylsyre:
(12a)
Karbamatet 9e fra eksempel 9 (2,6 g, 7,88 mmol) ble omrørt i 40 min i TFA ved 0°C. Blandingen ble deretter konsentrert og fortynnet med THF (10 ml). En vandig NaOH oppløsning (700 mg, 17,5 mmol i 8,8 ml H20) ble tilsatt etterfulgt av en THF (13 ml) oppløsning av (Boc)20 (2,06 g, 9,44 mmol, 1,2 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved RT (pH ble holdt ved 8 ved tilsetning av en 10% vandig NaOH oppløsning ved behov), deretter fortynnet med H20, vasket med Et20 (3X) og surgjort ved 0°C med en 10% vandig sitronsyreoppløsning. Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (3X) og suksessivt vasket med H20 (2X) og saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandling (MgS04, filtrering og konsentrasjon) ble den ønskede Boc-beskyttede aminosyren (12a) (788 mg, 3,44 mmol, 44% utbytte) isolert. <1>H NMR (CDCI3) 8 5,18 (bs, 1H), 1,64-1,58 (m, 2H), 1,55-1,42 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,32-1,25 (m, 1H), 0,99 (t, 3H, J = 7,3 Hz).
Fremstilling av (1 R,2R)/(1 S,2R)1 -Boc-amino-2-etylcyklopropylkarboksylsyre: metylester (12b)
Boc-derivatet 12a (0,30 g, 1,31 mmol) ble oppløst i Et20 (10 ml) og behandlet med nyfremstilt diazometan i Et20 ved 0°C inntil den gule fargen av et svakt overskudd av diazometan forble. Etter omrøring i 20 min ved RT ble reaksjonsblandingen konsentrert til tørrhet for å gi 12b som en klar, fargeløs olje (0,32 g, 100%). <1>H NMR (CDCI3) 5 5,1 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 1,62-1,57 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 1,53-1,43 (m, 1H), 1,28-1,21 (m, 2H), 0,95 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Eksempel 13
Enzymatisk oppløsning av metyl (1R,2R)/(1S,2R)1-Boc-1-amino-2-etylcyklopropylkarboksylat:
a) Den enantiomere blandingen av (1S,2R)/(1R,2R)1-Boc-amino-2-etylkarboksylsyre metylester fra eksempel 10 (0,31 g, 1,27 mmol) ble oppløst i aceton (3 ml) og deretter fortynnet med vann (7 ml) mens den raskt ble omrørt. pH av opp-løsningen ble justert til 7,5 med 0,05 M vandig NaOH før Alcalase® [2,4 I ekstrakt fra Novo Nordisk Industnals] (300 mg) ble tilsatt. Under inkubering ble pH stabilisert med NaOH og en pH stat ble satt opp for å overvåke tilsetningen av NaOH oppløsningen. Etter 401 ble blandingen fortynnet med EtOAc og H2O (med 5 ml mettet NaHC03) og fasene separert. Den vandige fasen ble surgjort med 10% vandig HCI og ekstrahert med EtOAc, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi syre 13a (48,5 mg). Den absolutte stereokjemien ble bestemt ved anvendelse av korrelasjonen beskrevet i eksempler 10 og 11. b) Behandling av en alikvot av syre 13a med diazometan i Et20 for å gi metylesteren fulgt av analyse ved HPLC ved anvendelse av en kiral kolonne [Chiralcel® OD-H,
2,5% isopropanol/heksan, isokratisk] viste et 51:1 forhold av (S,R) isomeren.
Eksempel 14
Syntese av (1 R,2S)/(1 S,2S)1 -amino-2-etylcyklopropylkarboksylsyre:
Med utgangspunkt fra syre 9d beskrevet i eksempel 9:
c) Til 9d (1,023 g, 4,77 mmol) i CH3CN (25 ml) ble det suksessivt tilsatt DBU (860 ul, 5,75 mmol, 1,2 ekv.) og allylbromid (620 ul, 7,16 mmol, 1,5 ekv.).
Reaksjonsblandingen ble omrørt i 41 ved RT og deretter konsentrert. Resten ble fortynnet med Et20 og suksessivt vasket med en 10% vandig sitronsyreopp-løsning (2x), H20, mettet vandig NaHC03, H20 (2x) og saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandlingen (MgS04, filtrering og konsentrasjon) ble den ønskede esteren 14a isolert (1,106 g, 3,35 mmol, 91% utbytte) som en farveløs olje. MS (FAB) 255 (MH<+>); <1>H NMR (CDCI3) 8 5,96-5,86 (m, 1H), 5,37-5,22 (m, 2H), 4,70-4,65 (m, 1H), 4,57-4,52 (m, 1H), 1,87-1,79 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,45-1,40 (m, 1H), 1,33-1,24 (m, 3H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
d) Til ester 14a (1,106 g, 4,349 mmol) i tørr CH2CI2 (5 ml) ved RT ble det tilsatt TFA (5 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1,51 og deretter konsentrert for å gi
14b (854 mg, 4,308 mmol, 99% utbytte). MS (FAB) 199 (MH<+>); <1>H NMR (CDCI3)
8 5,99-5,79 (m, 1H), 5,40-5,30 (m, 2H), 4,71-4,62 (m, 2H), 2,22-2,00 (m, 2H), 1,95-1,88 (m, 1H), 1,84-1,57 (m, 2H), 0,98 (t, J = 7,3 Hz, 3H). e) Til syre 14b (853 mg, 4,30 mmol) i tørr benzen (14,8 ml) ble det trinnvis tilsatt Et3N (684 ul, 4,91 mmol, 1,14 ekv.) og DPPA (992 ul, 4,60 mmol, 1,07 ekv.).
Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpsbehandlet i 4,51, deretter ble 2-trimetylsilyl-etanol (1,23 ml, 8,58 mmol, 2,0 ekv.) tilsatt. Tilbakeløpet ble opprettholdt over natten, deretter ble reaksjonsblandingen fortynnet med Et,20 og trinnvis vasket med en 10% vandig sitronsyreoppløsning, vann, mettet vandig NaHCC>3, vann (2x) og saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandlingen (MgS04, filtrering, konsentrasjon) ble resten flash kromatografert (5 cm, 10 til 15% AcOEt-heksan) for å gi karbamat 14c (1,212 g, 3,866 mmol, 90% utbytte) som en blek, gul olje. MS (FAB) 314 (MH<+>); <1>H NMR (CDCI3) 8 5,93-5,84 (m, 1H), 5,32-5,20 (m, 2H), 5,05 (bs, 1H), 4,60-4,56 (m, 2H), 4,20-4,11 (m, 2H), 1,71-1,60 (m, 3H), 1,39-1,22
(m, 1H), 1,03 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 0,96-0,86 (m, 1H), 0,04 (s, 9H).
f) Til karbamat 14c (267 mg, 0,810 mmol) ble det tilsatt en 1,0 M TBAF oppløsning i THF (1,62 ml, 1,62 mmol, 2,0 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten
ved RT, tilbakeløpsbehandlet i 30 min og deretter fortynnet med AcOEt. Opp-løsningen ble trinnvis vasket med vann (2x) og saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandlingen (MgS04, filtrering og konsentrasjon) ble det ønskede aminet 14d isolert (122 mg, 0,721 mmol, 89% utbytte som en blek, gul væske. <1>H NMR (CDCI3) 8 5,94-5,86 (m, 1H9, 5,31-5,22 (m, 2H), 4,58 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 1,75 (bs, 2H), 1,61-1,53 (m, 2H), 1,51-1,42 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,70-0,62 (m, 1H).
Eksempel 15
Syntese av etyl-(1 R,2S)/(1 S,2S)-1 -amino-2-vinylcyklopropylkarboksylat:
a) Til en THF oppløsning (180 ml) av kalium tert-butoksid (4,62 g, 41,17 mmol, 1,1 ekv.) ved -78°C ble det tilsatt kommersielt tilgjengelig imin 15a (10,0 g, 37,41
mmol) i THF (45 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 0°C og omrørt ved denne temperaturen i 40 min. Blandingen ble deretter avkjølt tilbake til -78°C for tilsetningen av 1,4-dibrombuten 15b (8,0 g, 37,40 mmol) og deretter omrørt ved 0°C i 11 og avkjølt tilbake til -78°C for tilsetning av kalium tert-butoksid (4,62 g, 41,17 mmol, 1,1 ekv.). Reaksjonsblandingen ble endelig omrørt ytterligere én
time ved 0°C og konsentrert for å gi forbindelse 15c.
b, c, d) 15c ble opptatt i Et20 (265 ml) og behandlet med 1N vandig HCI oppløsning (106 ml). Etter 3,51 ved RT ble lagene separert og det vandige laget ble vasket med Et^O (2x) og gjort basisk med en mettet vandig NaHC03 opp-løsning. Det ønskede aminet ble ekstrahert med Et20 (3x) og det kombinerte organiske ekstraktet ble vasket med saltvannsoppløsning. Etter den vanlige behandlingen (MgSCv, filtrering og konsentrering) ble resten behandlet med en 4N HCI oppløsning i dioksan (187 ml, 748 mmol). Etter konsentrasjon ble hydrokloridsalt 15d isolert som et brunt, faststoff (2,467 g, 12,87 mmol, 34% utbytte). <1>H NMR (CDCI3) 8 9,17 (bs, 3H), 5,75-5,66 (m, 1H), 5,39 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,35-4,21 (m, 2H), 2,77-2,70 (m, 1H), 2,05 (dd, J = 6,4, 10,2 Hz, 1H), 1,75 (dd, J = 6,4, 8,3 Hz, 1H), 1,33 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
Eksempel 16
Fremstilling av (1 R,2S)/(1 S,2S)1 -Boc-amino-2-vinylcyklopropylkarboksylsyre etylester:
Hydrokloridsaltet 15d (1,0 g, 5,2 mmol) og (Boc)20 (1,2 g, 5,7 mmol) ble oppløst i THF (30 ml) og behandlet med DMAP (0,13 g, 1,04 mmol, 0,2 ekv.) og diisopropyletylamin (2,8 ml, 15,6 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 241 før den ble fortynnet med EtOAc (40 ml) og vasket trinnvis med mettet NaHC03 (vandig), 5% vandig HCI og mettet saltvannsoppløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for etter-rensning ved flash kromatografi (15% EtOAc/heksan), 16a (0,29 g, 23%). <1>H NMR (CDCI3) 8 5,80-5,72 (m, 1H), 5,29-5,25 (dd, J = 17,2, 17,2 Hz, 1H), 5,24-5,1 (bs, 1H), 5,10 (dd, J = 9,2, 9,2 Hz, 1H), 4,22-4,13 (m, 2H), 2,15-2,04 (m, 1H), 1,85-1,73 (bs, 1H), 1,55-1,5 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,26 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Eksempel 17
Enzymatisk oppløsning av etyl (1R,2S)/(1S,2S)-1-amino-2-vinylcyklopropyl-karboksylat
a) Racemisk derivat 17a (0,29 g, 1,14 mmol) ble oppløst i aceton (5 ml) og fortynnet med H20 (10 ml). pH ble regulert med 0,2 N vandig NaOH til 7,2 før Alcalase® ble
tilsatt (300 mg). For å holde pH konstant under inkubering ble en NaOH oppløsning tilsatt ved hjelp av en pH stat titrator i løpet av 9 dager inntil den teoretiske mengden base var tilsatt. Etter syre/base ekstraksjon som beskrevet i eksempel 13 ble den uhydrolyserte esteren (0,15 g, 100%) og det hydrolyserte materialet (0,139 g, 95%)
isolert. Analyse av den uhydrolyserte esteren ved HPLC ved anvendelse av en kiral kolonne viste et forhold på 43:1 av den ønskede forbindelsen 17c som ble tilskrevet (R,S) stereokjemien basert på kjemisk korrelasjon som beskrevet i eksempler 10 og 11.
Betingelser for HPLC analyse: Chiracel® OD-H (4,6 mm x 25 cm), isokratiske betingelser ved anvendelse av en mobil fase av 2,5% isopropanol/heksan.
Eksempel 18
Oppløsning av (1R,2S)/(1S,2S)1- amino-2-vinylcyklopropylkarboksylat ved krystallisasjon med dibenzoyl-D-vinsyre
Til en oppløsning av rått racemisk (1S.2S og 1R.2S) etyl 1 -amino-2-vinyl-cyklopropylkarboksylat [oppnådd fra N-(difenylmetylen)glysinetylester (25,0 g, 93,5 mol) som beskrevet i eksempel 15] i EtOAc (800 ml) ble det tilsatt dibenzoyl-D-vinsyre (33,5 g, 93,5 mol). Blandingen ble oppvarmet til tilbakeløp, etterlatt ved RT i 15 min, deretter avkjølt til 0°C. Et hvitt, faststoff ble oppnådd etter 30 min. Det faste stoffet ble filtrert, vasket med EtOAc (100 ml) og lufttørket. Det faste stoffet ble suspendert i aceton (70 ml), ultralydbehandlet og filtrert (3x). Det faste stoffet ble deretter krystallisert to ganger i varm aceton (porsjon A). Moderlutene ble
konsentrert, og resten ble rekrystallisert tre ganger i varm aceton (porsjon B). De to porsjonene av amorfe hvite faststoffer av dibenzoyl-D-vinsyresalt ble kombinert (5,53
g) og suspendert i en blanding av Et20 (250 ml) og mettet NaHC03 oppløsning (150 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvannsoppløsning, tørket (MgS04) og
filtrert. Filtratet ble fortynnet med 1 N HCI/Et20 (100 ml) og konsentrert under
redusert trykk. Den oljeformige resten ble evaporert med CCI4 for å gi etyl 1(R)-amino-2(S)-vinyl cyklopropankarboksylat hydroklorid (940 mg, 11% utbytte) som et hvitt, hygroskopisk faststoff: [a]<25>D + 39,5°C (c 1,14 MeOH); [a]<25>365 + 88,5°C (c 1,14 MeOH); <1>H NMR (DMSO-d6) 8 9,07 (bred s, 2H), 5,64 (ddd, J = 17,2, 10,4, 8,7 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,19 (dd, J = 10,4, 1,6 Hz, 1H), 4,24-4,16 (m, 2H), 2,51-2,45 (m, topper hindret ved DMSO, 1H), 1,84 (dd, J = 10,0, 6,0 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 8,3, 6,0 Hz, 1H), 1,23 (t, J = 7,1 Hz, 3H), MS (ESI) m/z 156 (MH)<+>; den enantiomeriske renheten ble bestemt å være 91% ee ved HPLC analyse (CHIRALPAK AS<®> kolonne, Heks:i-PrOH) av Boc-derivatet.
Eksempel 19
Fremstilling av (1R,2S)/(1S,2S)-1-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre metyl-ester hydroklorid (19f)
Fremstilling av imin 19b
Glysinetylester hydroklorid 19a (1519,2 g, 10,88 mol, 1,0 ekv.) ble suspendert
i tert-butylmetyleter (8 I). Benzaldehyd (1155 g, 10,88 mol, 1 ekv.) og vannfritt natriumsulfat (773 g, 5,44 mol, 05 ekv.) ble tilsatt og blandingen ble avkjølt til 5°C i et is-vannbad. Trietylamin (2275 ml, 16,32 mol, 1,5 ekv.) ble tilsatt dråpevis i løpet av 15 min (anvend 0,5 I tert-butylmetyleter for rensning) og blandingen ble omrørt i 401 ved romtemperatur. Reaksjonen ble deretter stoppet ved tilsetning av iskaldt vann (5 I) og det organiske laget ble separert. Den vandige fasen ble ekstrahert med tert-butylmetyleter (1 I) og de kombinerte organiske fasene vasket med en blanding av mettet NaHC03 (400 ml) og vann (1,6 I) og deretter saltvannsoppløsning.
Oppløsningen ble tørket over MgS04, konsentrert under redusert trykk og den gjenværende gule oljen ble tørket til konstant vekt under vakuum. Imin 19b ble oppnådd som en tykk, gul olje som størknet ved -20°C (2001 g, 96% utbytte): <1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 8 8,30 (s, 1H), 7,79 (m, 2H), 7,48-7,39 (m, 3H), 4,40 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,24 (q, J = 7 Hz, 2H), 1,31 (t, J = 7 Hz, 3H).
Fremstilling av racemisk N-Boc-(1R,2S)/(1S,2S)-1-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre etylester hydroklorid 19e: Litium tert-butoksid (4,203 g, 52,5 mmol, 2,1 ekv.) ble suspendert i tørr toluen (60 ml). Imin 19b (5,020 g, 26,3 mmol, 1,05 ekv.) og dibromid 19c (5,348 g, 25 mmol, 1 ekv.) ble oppløst i tørr toluen (30 ml) og denne oppløsningen ble tilsatt dråpevis i løpet av 30 min til den omrørte oppløsning av LiOtBu ved romtemperatur. Etter fullførelse ble den dypt røde blandingen omrørt i ytterligere 10 min og stoppet ved tilsetning av vann (50 ml) og tert-butylmetyleter (TBME, 50 ml). Den vandige fasen ble separert og ekstrahert en andre gang med TBME (50 ml). De organiske fasene ble kombinert, 1 N HCI (60 ml) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 21. Den organiske fasen ble separert og ekstrahert med vann (40 ml). De vandige fasene ble deretter kombinert, mettet med salt (35 g) og TBME (50 ml) ble tilsatt. Den omrørte blandingen ble deretter gjort basisk til pH 13-14 ved forsiktig tilsetning av 10 N NaOH. Det organiske laget ble separert og den vandige fasen ekstrahert med TBME (2 x 50 ml). De organiske ekstraktene inneholdende fritt amin 19d ble kombinert og ditertbutyldikarbonat (5,46 g, 25 mmol, 1 ekv.) ble tilsatt. Etter omrøring over natten ved romtemperatur viste TLC noe uomsatt fritt amin. Ytterligere ditertbutyldikarbonat (1,09 g, 5 mmol, 0,2 ekv.) ble tilsatt, og blandingen ble tilbakeløpsbehandlet i 21, ved hvilket punkt TLC analyse indikerte fullstendig omdanning av 19d til karbamat 19e. Oppløsningen ble avkjølt til romtemperatur, tørket over MgS04 og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved flash kromatografi ved anvendelse av 10%, deretter 20% EtOAc/heksan som elueringsmiddel. Renset 19e ble oppnådd som en klar, gul olje som langsomt størknet under vakuum (4,014 g, 63% utbytte).
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz), 8 5,77 (ddd, J = 17, 10,9 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 17, 1,5 Hz, 1H), 5,18 (bred s, 1H), 5,11 (dd J = 10, 1,5 Hz, 1H), 4,24-4,09 (m, 2H), 2,13 (q, J = 8,5 Hz, 1H), 1,79 (bred m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,26 (t, J = 7 Hz, 3H).
Fremstilling av tittelforbindelse 19f via trans-forestring av 19e:
Etylester 19e (10,807 g, 42,35 mmol) ble oppløst i tørr metanol (50 ml) og en oppløsning av natriummetoksid i MeOH (25% v/v, 9,7 ml, 42 mmol, 1 ekvivalent) ble tilsatt. Blandingen ble oppvarmet til 50°C i 2 t, ved hvilket punkt TLC analyse indikerte fullstendig trans-forestring (19e, Rf 0,38, 19f Rf 0,34 i 20% EtOAc/heksan). Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og surgjort til pH ved anvendelse av 4 N HCI i dioksan. Utfelt NaCI ble fjernet ved filtrering (anvendt tert-butylmetyleter for vasking) og flyktige bestanddeler ble fjernet under redusert trykk. Tert-butylmetyleter (100 ml) ble tilsatt til resten og faste stoffer ble fjernet ved filtrering. Inn-dampning av filtratet under redusert trykk og tørking under vakuum ga ren metylester 19f (10,11 g, 99% utbytte).
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 5 5,75 (ddd, J = 17, 10, 9 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 17, 1 Hz, 1H), 5,18 (bred s, 1H), 5,11 (ddd, J = 10, 1,5, 0,5 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,14 (q, J = 9 Hz, 1H), 1,79 (bred m, 1H), 1,50 (bred m, 1H), 1,46 (s, 9H).
Eksempel 20
Enzymatisk oppløsning av (1R,2R)-1-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre metylester hydroklorid
Fremstilling av N-Boc-(1R,2S)-1-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre metylester 20a: Racemisk ester 19f (0,200 g, 0,83 mmol) ble oppløst i aceton (3 ml) og vann (7 ml) ble tilsatt. 0,05 M NaOH (1 dråpe) ble tilsatt for å bringe pH av oppløsningen til ~8 og deretter ble Alcalase® 2,4 I (Novo Nordisk Biochem, 0,3 g i én ml vann) tilsatt. Blandingen ble kraftig omrørt ved romtemperatur, idet pH av oppløsningen ble holdt ved 8 ved anvendelse av en automatisk titrator. Ved begynnelsen av dag 4 og dag 5 av omrøringen ved pH 8 ble ytterligere enzymoppløsning tilsatt (2 x 0,3 g). Etter en samlet tid på 5 dager ble totalt 8,3 ml 0,05 M NaOH forbrukt. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc og vann, og den organiske fasen ble separert. Etter vasking med saltvannsoppløsning ble det organiske ekstraktet tørket (MgS04) og konsentrert under vakuum. Forbindelse 20a (0,059 g, 30% utbytte) ble oppnådd som en klar olje: <1>H NMR identisk med det av forbindelse 19f. HPLC (Chiralcel ODH, 4,6 x 250 mm, isokratisk 1% EtOH i heksan, 0,8 ml/min strømningshastighet):
(1R,2S)-2 Rf 19,3 min (97%); (1S,2R)-2 Rf 17,0 min (3%).
Fremstilling av (1R,2S)-1-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre metylester hydroklorid 20b: Forbindelse 20a (39,96 g, 165,7 mmol) ble oppløst i dioksan (25 ml) og opp-løsningen tilsatt dråpevis under omrøring til 4 N HCI i dioksan (Aldrich, 250 ml). Etter 45 min indikerte TLC analyse fullstendig avbeskyttelse. Flyktige bestanddeler ble fjernet under redusert trykk og resten ble to ganger samfordampet med MeOH (2 x 100 ml). Eter (300 ml) og MeOH (10 ml) ble tilsatt til den brune, oljeformige resten og blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur, hvilket resulterte i utfelling av et halvfast stoff. Ytterligere MeOH (10 ml) ble tilsatt og omrøring ble fortsatt i 61 ved hvilket punkt et gulaktig faststoff ble samlet ved filtrering. Produktet ble vasket med 5% MeOH i eter (50 ml) og eter (2 x 50 ml), og tørket i vakuum for å gi forbindelse 20b som et gulaktig faststoff (22,60 g, 76% utbytte). Filtrater (innbefattende vaskeoppløsninger) ble inndampet i vakuum for å gi ytterligere 20b som en brun olje (7,82 g, 26% utbytte). Begge fraksjoner var rene nok for anvendelse i syntesen av HCV proteaseinhibitorer: [a]D<25> + 38,2° (c 1,0, MeOH).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 9,15 (bred s, 3H), 5,65 (ddd, J = 17, 10, 9 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17, 1,5 Hz, 1H), 5,19 (dd, J = 10, 1,5 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,50 (q, overlapp med DMSO signal, J = 9 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 10, 6 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 8, 6 Hz, 1H).
Eksempel 21
Syntese av 1-aminocyklobutylkarboksyre metylester
1,1-aminocyklobutankarboksylsyre ble fremstilt i henhold til Kavin Douglas; Ramaligam Kondareddiar; Woodard Ronald, Synth, commun. (1985), 15 (4), 267-72. Aminosyresaltet (21a) (1,00 g, 6,6 mmol) ble omrørt i tørr metanol (40 ml) ved -20°C og blandingen mettet med tørt hydrogenklorid for å gi (21b). Omrøring av denne blandingen ble fortsatt i 41. Den varme oppløsningen ble filtrert, og filtratet konsentrert (Rotavap, 30°C) for å etterlate en rest som ved titrering i etyleter ga et hvitt pulver (0,907 g, 83%) etter filtrering og tørking. <1>H NMR (400 MHz, D2) 8 CH30 (3H, s, 3,97 ppm); CH2 (2H, m, 2,70-2,77 ppm); CH2 (2H, m, 2,45-2,53 ppm) og CH2 (2H, m, 2,14-2,29 pm).
TRIPEPTIDER
Eksempel 22
Generell fremgangsmåte for koplingsreaksjoner utført på fast bærer.
Syntesen ble utført på en parallell syntetiseringsinnretning modell ACT396 fra Advanced ChemTech® med 96-brønns blokken. Typisk ble 24 peptider syntetisert parallelt ved anvendelse av standard fastfase teknikker. Utgangs (Fmoc-amino)-cyklopropan (eventuelt substituert) karboksylsyre-Wang harpiks ble fremstilt ved DCC/DMAP koplingsmetoden (Atherton, E; Scheppard, R.C. Solid Phase Peptide Synthesis, a Practical Approach; IRL Press: Oxford (1989); pp 131-148).
Hver brønn ble fylt med 100 mg av utgangsharpiksen (ca 0,05 mmol). Harpiksene ble vasket trinnvis med 1,5 ml porsjoner av NMP (1X) og DMF (3X). Den Fmoc beskyttende gruppen ble fjernet ved behandling med 1,5 ml av en 25% vol/vol oppløsning av piperidin i DMF i 20 min. Harpiksene ble vasket med 1,5 ml porsjoner av DMF (4X), MeOH (3X) og DMF (3X). Koplingen ble utført i DMF (350 ul), ved anvendelse av 400 ul (0,2 mmol) av en 0,5 M oppløsning av Fmoc-aminosyre/HOBt hydrat i DMF, 400 ul (0,4 mmol) av en 1 M oppløsning av DIPEA i DMF og 400 ul (0,2 mmol) av en 0,5 M oppløsning av TBTU i DMF. Etter risting i 11 ble brønnen tømt, harpiksene ble vasket med 1,5 ml DMF og koplingen ble gjentatt ytterligere én gang under de samme betingelsene. Harpiksene ble deretter vasket som beskrevet ovenfor og cyklusen ble gjentatt med den neste aminosyren.
Endeavslutningsgruppene ble påført på to måter:
1. I form av en karboksylsyre ved å anvende fremgangsmåten beskrevet ovenfor (f.eks eddiksyre) eller, 2. Som et acylerende middel så som et anhydrid eller et syreklorid. Det følgende eksempelet illustrerer endeavslutningen med ravsyreanhydrid: Etter Fmoc avbeskyttelsen og etterfølgende vaskefremgangsmåter ble DMF tilsatt (350 ul) etterfulgt av 400 ul hver av en DMF oppløsning av ravsyreanhydrid (0,5 M, 0,2 mmol) og DIPEA (1,0 M, 0,4 mmol). Harpiksene ble omrørt i 21 og et gjen-koplingstrinn ble utført. Ved avslutningen av syntesen ble harpiksen vasket med 1,5 ml porsjoner av DCM (3x), MeOH (3x), DCM (3x) og ble tørket under vakuum i 21. Spaltning fra harpiksen og samtidig sidekjedeavbeskyttelse ble bevirket ved tilsetning av 1,5 ml av en blanding av TFA, H20, DTT og TIS (92,5:2,5:2,5:2,5). Etter risting i 2,51 ble harpiksen filtrert og vasket med 1,5 ml DCM. Filtratene ble kombinert og konsentrert ved vakuum sentrifugering. Hver forbindelse ble renset ved preparativ revers fase HPLC ved anvendelse av en C18 kolonne (22 mm ganger 500 mm). De produktholdige fraksjonene ble identifisert ved MALDI-TOF masse spektrometri, kombinert og lyofilisert.
Eksempel 23
Generell fremgangsmåte for koplingsreaksjoner utført i oppløsning {se også R.
Knorr et al., Tetrahedron Letters, (1989), 30 1927.}
Reaktantene, dvs et fritt amin (1 ekv.) (eller dets hydrokloridsalt) og den frie karboksylsyren (1 ekv.) ble oppløst i CH2CI2, CH3CN eller DMF. Under en nitrogen-atmosfære ble fire ekvivalenter av N-metylmorfolin og 1,05 ekvivalenter av koplings-middelet tilsatt til den omrørte oppløsningen. Etter 20 min ble det tilsatt én ekvivalent av den andre reaktanten, dvs en fri karboksylsyre. (Praktiske og effektive koplingsreagenser for dette formålet er (benzotriazol-l-yloksy)tri-(dimetylamino)-fosfoniumheksafluorfosfat (HOBT) eller fortrinnsvis 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluroniumtetrafluorborat (TBTU) eller 0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluroniumtetrafluorborat (HATU). Reaksjonen ble overvåket ved hjelp av TLC. Etter fullførelse av reaksjonen ble oppløsningsmiddelet avdampet under redusert trykk. Resten ble oppløst i EtOAc. Oppløsningen ble vasket trinnvis med 10% vandig sitronsyre, mettet vandig NaHC03 og saltvannsoppløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Når resten var renset ble det utført ved flash kromatografi som beskrevet ovenfor.
Eksempel 24
Syntese av forbindelse 304
a) (R,R) isomeren av Boc-Et-Acca-OMe 13 c (0,12 g, 0,49 mmol) oppnådd fra enzymatisk oppløsning (eksempel 13) ble behandlet med 4N HCI/dioksan (45
min) før det ble konsentrert i vakuum for å gi et hvitt, faststoff. Til dette HCI-saltet (ca 0,49 mmol) ble det tilsatt TBTU (0,17 g, 0,54 mmol), Boc-4(R)-(8-kinolinmetyl-oksy)prolin 5 (fra eksempel 5) (0,18 g, 0,49 mmol) og DIPEA (0,3 ml, 1,7 mmol) i MeCN (10 ml). Blandingen ble omrørt ved RT i 3,51 før den ble konsentrert i vakuum. Det resulterende materialet ble oppløst i EtOAc og vasket trinnvis med
mettet vandig NaHC03 og saltvannsoppløsning. Tørket (MgS04), filtrert og
konsentrert for å gi 24b et hvitt, faststoff (0,122 g, 50%).
b) 24b (0,12 g, 0,25 mmol) ble behandlet ved RT med 4 N HCI/dioksan (30 min) før det ble konsentrert i vakuum. Det resulterende hydrokloridsaltet (ca 0,25 mmol)
ble behandlet med Boc-Chg-OH H20 (75 mg, 0,27 mmol), TBTU (87 mg, 0,27 mmol) i MeCN (10 ml) og endelig ved 0°C med DIPEA (0,15 ml, 0,87 mmol). Resten ble fortynnet med EtOAc, trinnvis vasket med mettet vandig NaHC03 og saltvannsoppløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert for å gi 24c som et beige, faststoff (0,2 g). Dette materialet (0,14 g) ble oppløst i DMSO og renset ved preparativ HPLC for å gi 24c som et hvitt, faststoff etter lyofilisering (35 mg, 33%). HPLC (98%); MS (FAB) m/z: 637,3 (MH<+>); HRMS beregnet for C35H48N407 (MH<+>) 637,36011: funnet 637,36250; <1>H-NMR (DMSO-d6) viser en rotamerpopulasjon, 8 8,91 (2 x d, J = 4,1 og 4,1 Hz, 1H), 8,40-8,36 (m, 2H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,6-7,54 (m, 2H), 6,80 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,18 og 5,16 (2 x s, 2H), 4,40 (bs, 1H), 4,31 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 11,44 Hz, 1H), 4,03 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,78-3,72 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 2,35-2,27 (m, 1H), 2,06-1,97 (m, 1H), 1,71-1,55 (m, 10H), 1,53-1,38 (m, 2H), 1,26 (s, 9H), 1,18-1.06 (m, 2H), 1,02-0,93 (m, 2H), 0,89 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Forbindelse 304:
c) Til 24c (30 mg, ca 0,047 mmol) ble det tilsatt MeOH (1 ml), THF (1 ml) og litium-hydroksidmonohydrat (12 mg, 0,29 mmol) i H20 (1 ml). Den klare oppløsningen
ble raskt omrørt i 481 før den ble konsentrert i vakuum. Det rå peptidet ble oppløst i DMSO og renset ved preparativ HPLC for å gi forbindelse 304 som et hvitt, faststoff etter lyofilisering (21 mg, 72%). HPLC (99%); MS (FAB) m/z: (MH<+>) 623,3; HRMS beregnet for C34H46N407 (MH<+>) 623,34448, funnet: 623,34630,<1>H NMR (DMSO-de) viser en rotamerpopulasjon på 1:1, 8 8,90 (2 x d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,89 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7,6-7,53 (m, 2H), 6,88 og 6,79 (2 x d, J = 8,6 og 7,9 Hz, 1H), 5,17 og 5,16 (2 x s, 2H), 4,43-4,35 (bs, 1H), 4,29 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,82-3,71 (m, 1H), 2,35-2,27 (m, 1H), 2,06-1,97 (m, 1H), 1,72-1,53 (m, 10H), 1,52-1,44 (m, 2H), 1,37 og 1,29 (2 x s, 9H), 1,18-1,05 (m, 3H), 1,0-0,94 (m, 1H), 0,91 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Eksempel 25
Syntese av forbindelse 301
forbindelse 301
a) Forbindelse 25a (=12a) (282 mg, 1,23 mmol) ble suspendert i vannfri CH3CN (6
ml). DBU (221 ul, 1,48 mmol) og benzylbromid (161 ul, 1,35 mmol) ble trinnvis tilsatt
og reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved RT. Blandingen ble konsentrert, den resulterende oljen ble fortynnet med EtOAc og 10% vandig sitronsyre og trinnvis vasket med 10% sitronsyre (2x), mettet vandig NaHC03 (2x), vann (2x) og saltvanns-oppløsning (1x). EtOAc laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet til tørrhet. Den rå, fargeløse oljen ble renset ved flash kromatografi (elueringsmiddel - heksan: EtOAc; 95:5 til 90:10) for å tilveiebringe det benzylerte produktet 25b som en farge-løs olje (368 mg; 93%).
MS (FAB) 318,2 MH" 320,2 MH<+> 342,2 (M+Na)<+>
<1>H NMR (CDCI3) 8 7,37-7,28 (m, 5H), 5,22-5,10 (m, 1H), 5,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 12 Hz, 1H), 1,60-1,40 (m, 4H), 1,39 (s, 9H), 1,31-1,22 (m, 1H), 0,91 (t, J = 7,5, 14,5 Hz, 3H).
b) Forbindelse 25b (368 mg, 1,15 mmol) ble behandlet med 4 N HCI/dioksan (6 ml) som beskrevet tidligere. Det rå hydrokloridsaltet ble koplet til forbindelse 4 (fra
eksempel 4) (470,8 mg, 1,27 mmol) med NMM (507 ul, 4,61 mmol) og HATU (istedenfor TBTU, 525,6 mg, 1,38 mmol) i CH2CI2 (6 ml) som beskrevet i eksempel 22 for å gi det rå racemiske dipeptidet som en oransj olje. Det rå materialet ble renset ved flash kromatografi (elueringsmiddel - heksan: Et20; 50:50) for å tilveiebringe det rå dipeptidet 25c (det mindre polare elueringspunktet) som et hvitt skum (223 mg; 68% av det teoretiske utbyttet).
MS 571,4 MH" 573,3 MH<+> 595,3 (M+NA)<+>
<1>H NMR (CDCI3), ca 1:1 blanding av rotamerer, 8 8,03 (b d, J = 8 Hz, 1H), 7,86 (b d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,82 (b d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,61 (b s, 0,5 H), 7,57-7,40 (m, 4H), 7,31-7,21 (m, 5H), 6,48 (b s, 0,5 H), 5,22-5,11 (m, 1H), 5,08-4,81 (m, 3H), 4,41-3,74 (m, 3H), 3,49-3,18 (m, 1H), 2,76-1,90 (m, 2H), 1,69-1,48 (m, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,40-1,23 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,5, 15 Hz, 3H). c) Dipeptidet 25c (170,1 mg, 0,297 mmol) ble behandlet med 4 N HCI/dioksan (2 ml) som beskrevet tidligere. Det rå hydrokloridsaltet ble koplet til Boc-Chg-OH (84,1 mg,
0,327 mmol) med NMM (130,7 ul, 1,19 mmol) og HATU (istedenfor TBTU, 135,5 mg; 0,356 mmol) i CH2CI2 (2 ml) i 2,751 ved RT, deretter opparbeidet som beskrevet
tidligere for å tilveiebringe det rå tripeptidet 25d som et elfenbensfarget skum (ca 211, 4 mg; 100%).
MS (FAB) 712,5 MH<+>
Forbindelse 301:
d) Det rå tripeptidet 25d (ca 15,4 mg, 0,022 mmol) ble oppløst i absolutt etanol (2 ml) og en anslått mengde (spatelspiss) av både 10% Pd/C katalysator og
ammoniumacetat ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert over natten under en hydrogenfylt ballong ved RT og atmosfærisk trykk. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom en 0,45 um Millex® filter, inndampet til tørrhet, deretter fortynnet med EtOAc og 10% vandig sitronsyre, og vasket igjen med 10% vandig sitronsyre (1x), vann (2x) og saltvannsoppløsning (1x). Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert, inndampet til tørrhet og lyofilisert for å tilveiebringe tripeptidet 301 som et hvitt, amorft faststoff (11,0 mg; 82%).
MS (FAB) 622,5 MH+ 644,5 (m+Na)+
<1> NMR (DMSO), ca. 1:4 blanding av rotamerer, 8 8,54 & 8,27 (s, 1H), 8,06-7,99 (m, 1H), 7,96-7,91 (m, 1H), 7,87 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,57-7,42 (m, 4H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,46-4,19 (m, 2H), 4,17-4,01 (m, 2H), 3,88-3,67 (m, 1H), 2,28-2,19 (m, 1H), 2,05-1,93 (m, 1H), 1,73-1,43 (m, 8H), 1,32-1,07 (m, 6H), 1,28 (s, 9H), 1,03-0,85 (m, 2H), 0,91 (t, J = 7,5, 15 Hz, 3H).
Eksempel 26
Syntese av forbindelse 306
forbindelse 306
a) Syren 26a (180 mg, 0,500 mmol) og aminet 15d (96 mg, 0,500 mmol) ble koplet ved anvendelse av TBTU (192 mg, 0,600 mmol) og DIPEA (226 mg, 1,75 mmol) i
CH2CI2 (10 ml) i 201. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, opptatt i etylacetat, vasket to ganger med mettet NaHC03 og én gang med saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket på MgS04, filtrert og konsentrert for å gi 26c som en brun olje, anvendt uten rensning i det neste trinnet.
b, c) Den rå forbindelsen 26c (ca 0,500 mmol) ble omrørt i 30 min i HCI 4N/dioksan (4 ml) og konsentrert til tørrhet. Det faste stoffet ble opptatt i CH2CI2 (10 ml) og DIPEA (226 mg, 1,75 mmol) ble tilsatt etterfulgt av Boc-Chg-OH monohydrat (138 mg, 0,500 mmol) og TBTU (192 mg, 0,600 mmol). Oppløsningen ble omrørt ved RT i 51. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, opptatt i etylacetat, vasket to ganger med mettet NaHC03 og én gang med saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket på MgS04, filtrert og konsentrert for å gi en brun olje, renset ved flash kromatografi for å gi 26d som en gul olje, 204 mg, 64% over to koplinger.
<1>H NMR (CDCI3) 5 8,77-8,74 (m, 1H), 8,14 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 9,7 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 5 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,7 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 5 Hz, 1H), 5,80-5,70 (m, 1H), 5,35-5,27 (m, 2H), 5,14-5,07 (m, 2H), 4,89-4,83 (m, 1H), 4,39-4,32 (m, 1H), 4,30-4,24 (m, 1H), 4,20-4,07 (m, 2H), 4,00-3,92 (m, 1H), 3,04-2,92 (m, 1H), 2,39-2,29 (m, 1H), 2,16-2,04 (m, 1H), 1,91-1,83 (m, 1 H), 1,82-1,62 (m, 7 H), 1,45-1,35 (m, 9H), 1,27-1,07 (m, 8H). d) 26d (136 mg, 0,214 mmol) ble oppløst i THF (4 ml) og MeOH (2 ml). En vandig oppløsning (2 ml) av LiOH hydrat (72 mg, 1,72 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved RT i 201. Oppløsningen ble konsentrert og renset ved preparativ HPLC for å gi forbindelsen 306 (den mindre polare isomeren) som et hvitt, faststoff (25 mg).
Forbindelse 306: MS(FAB) 607,4 (MH+)
<1>H NMR (DMSO-de) 8 9,16 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,35 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,7 Hz, 1H), 7,76 (dd, J = 8, 7 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,75-5,66 (m, 2H), 5,19 (d, J = 18 Hz, 1 H); 5,07 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10, 8 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 10 Hz, 1 H); 3,87-3,83 (m, 1H), 2,66-2,59 (m, 1H), 2,36-2,30 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 18, 9 Hz, 1H), 1,75-1,56 (m, 8 H), 1,38-1,35 (m, 1H), 1,25-1,22 (m, 1 H), 1,09 (s, 9 H), 1,12-0,95 (m, 3H).
Eksempel 27
Syntese av forbindelse 307
c) En oppløsning av syren (8) fra eksempel 8 (505 mg, 105 mmol) i 5 ml diklormetan ble behandlet med TBTU (376 mg, 1,17 mmol). HCI-saltet av (R,S) vinyl AccaOEt (18) (fra eksempel 18) (279 mg, 1,46 mmol) i 7 ml diklormetan inneholdende (0,60 ml, 5,46 mmol) av N-metylmorfolin ble tilsatt til den foregående oppløsningen av den aktiverte esteren. Den resulterende oppløsningen ble omrørt ved RT over natten. Oppløsningsmiddelet ble avdampet i vakuum. Resten fortynnet med etylacetat, ble vasket to ganger med en mettet oppløsning av natriumbikarbonat og én gang med saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet i vakuum. Resten ble kromatografert over silikagel (60:40 vol/vol, heksaner-etylacetat) for å gi 173 mg (27%) av dipeptidet 27c.
d, e) En oppløsning av dipeptidet 27c (70 mg, 0,114 mmol) i 3 ml hydrogenklorid 4,0 M oppløsning i 1,4-dioksan ble omrørt ved RT i 11 (en utfelling kom ut av reaksjonen etter 10 min). Oppløsningsmiddelet ble fjernet i vakuum. Aminhydrokloridsaltet 27d (0,114 mmol), fortynnet i 1,5 ml acetonitril, ble nøytralisert ved tilsats av 65 ul (0,591 mmol) av N-metylmorfolin. En oppløsning av Boe ChgOH H20 (39 mg, 0,142 mmol) i 1,5 ml acetonitril ble behandlet med TBTU (46 mg, 0,143 mmol) og deretter tilsatt til den forutgående oppløsningen av aminet. Den resulterende oppløsningen ble om-rørt ved RT (i 2 dager). Oppløsningsmiddelet ble fjernet i vakuum. Resten, fortynnet med etylacetat, ble vasket to ganger med en mettet oppløsning av natriumbikarbonat og én gang med saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet i vakuum. 86 mg (100%) av tripeptidet 27e ble oppnådd. Denne rå
forbindelsen ble anvendt i den neste reaksjonen uten ytterligere rensning.
f) Til en oppløsning av tripeptid 27e (86 mg, 0,114 mmol) i 5 ml av en blanding THF:H20 (2,5:1) ble det tilsatt litiumhydroksid monohydrat (22 mg, 0,524 mmol).
Ytterligere 0,25 ml MeOH ble tilsatt for å få en homogen oppløsning. Den resulterende oppløsningen ble omrørt ved RT over natten før oppløsningsmiddelet ble inndampet i vakuum. Resten ble fordelt mellom vann og EtOAc. Det vandige laget ble surgjort med 1 M HCI og deretter ekstrahert to ganger med etylacetat. Den ønskede forbindelsen er funnet i etylacetat som kommer fra den første basiske ekstraksjonen. Dette organiske laget ble tørket (MgS04), filtrert og inndampet i vakuum for å gi 69 mg av den rå syren, som ble renset ved preparativ HPLC. Forbindelsen ble oppløst i MeOH (4 ml) og injisert på en ekvilibrert Whatman Partisil 10-ODS-3 (2,2 x 50 cm) C18 revers fasekolonne. (A, = 230 nm, oppløsningsmiddel A = 0,06% TFA/H20, oppløsningsmiddel B = 0,06% TFA/CH3CN). Renseprogram: 20% til 70% av oppløsningsmiddel B i 60 min. Fraksjoner ble analysert ved analytisk HPLC. Egnede fraksjoner ble samlet og lyofilisert for å tilveiebringe 50 mg (60%) av det ønskede tripeptidet 307 som et hvitt, amorft faststoff.
Forbindelse 307: <1>H NMR (DMSO-d6) rotamerer ~ 2:8 8 8,86 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,85 (s, 0,2 H), 8,64 (s, 0,8 H), 8,49 (dd, J = 9,5, 3 Hz, 0,2 H), 8,45 (dd, J = 9,2 Hz, 0,8 H), 8,39-8,33 (m, 2H), 8,20 (d, J = 9,5 Hz, 0,2 H), 8,18 (d, J = 9,5 Hz, 0,8 H), 7,81 (s, 0,2H), 7,78 (s, 0,8 H), 7,64-7,56 (m, 3H), 6,87 (d, J = 8 Hz, 0,8 H), 6,36 (d, J = 9 Hz, 0,2 H), 5,82-5,67 (m, 2H), 5,27-5,17 (m, 1H), 5,09-5,03 (m, 1H), 4,73 (t, J = 8 Hz, 0,2 H), 4,55 (dd, J = 10, 7,5 Hz, 0,8 H), 4,49-4,40 (m, 1H), 4,00-3,95 (m, 1H), 3,83-3,76 (m, 1H), 2,87-2,80 (m, 0,2 H), 2,69-2,62 (m, 0,8 H), 2,39-2,26 (m, 1H), 2,08-2,00 (m, 1H), 1,75-1,41 (m, 7H), 1,37 (s, 1,8 H), 1,32-1,27 (m, 1H), 1,17-0,82 (m, 5H), 0,94 (s, 7,2 H).
Eksempel 28
Syntese av forbindelse 311
Forbindelse 311 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 24, men ved å anvende de egnede byggeblokkene.
Forbindelse 311 <1>H NMR (DMSO-d6) 8,98 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,24 (d, J = 9 Hz, 1 H), 8,08 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 6 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5,75-5,66 (m, 1H), 5,57 (br s, 1 H), 5,24-5,19 (m, 1H), 5,08-5,01 (m, 1 H), 4,57-4,40 (m, 2 H), 4,00-3,96 (m, 1 H), 3,82 (dd, J = 9,8 Hz, 1H), 2,59-2,54 (m, 1 H), 2,32-2,26 (m, 1 H), 1,99 (dd, J = 17, 9 Hz, 1 H), 1,74-1,55 (m, 8 H), 1,37 (s, 1 H), 1,26-1,22 (m, 1 H), 1,14-1,08 (m, 9 H); 1,02-0,91 (m, 3 H).
Eksempel 29
Syntese av forbindelse 302
Forbindelse 302 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 27, men ved å anvende de egnde byggeblokkene.
<1>H NMR (DMSO-de) 8 8,34 (s, 1 H), 8,04-8,01 (m, 1 H), 7,94-7,92 (m, 1 H), 7,87 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,54-7,50 (m, 3 H), 7,45 (dd, J = 17, 8 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 8 Hz, 1 H), 4,94 (dd, J = 55, 12 Hz, 2 H), 4,34 (s, 1 H), 4,27 (dd, J = 8, 8 Hz, 1 H), 4,16 (d, J = 11 Hz, 1 H), 4,07 (dd, J = 8, 8 Hz, 1 H), 3,72-3,65 (m, 2 H), 3,59-3,54 (m, 1 H), 2,24-2,18 (m, 1 H), 2,02-1,95 (m, 2 H), 1,75-1,70 (m, 1 H), 1,53-1,44 (m, 2 H), 1,32-1,27 (m, 1 H), 1,21-1,17 (m, 1 H), 0,96-0,85 (m, 10 H), 0,80-0,77 (m, 5 H), 0,62-0,57 (m, 1
H).
Eksempel 30
Syntese av forbindelse 308
Forbindelse 308 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 27, men ved å anvende de egnede byggeblokkene.
<1>H NMR (DMSO-de) rotamerer = 2:8 8 8,77 (s, 0,2 H), 8,45 (s, 0,8 H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 0,8 H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 0,2 H), 7,89-7,83 (m, 1H), 7,55-7,37 (m, 4 H), 7,05-6,59 (m, 1 H), 6,95 (d, J = 8 Hz, 0,8 H), 6,26 (d, J = 8,5 Hz, 0,2 H), 5,81-5,64 (m, 1 H), 5,33-5,28 (m, 1 H), 5,26-5,15 (m, 1 H), 5,08-5,02 (m, 1 H), 4,60 (t, J = 7,5 Hz, 0,2 H), 4,38-4,27 (m, 1,8 H), 4,09-3,91 (m, 1,8 H), 3,74 (dd, J = 12,5, 4 Hz, 0,2 H), 2,69-2,60 (m, 0,2 H), 2,50-2,40 (m, 1H), 2,36-2,28 (m, 0,2 H), 2,23-2,14 (m, 0,8 H), 2,05-1,97 (m, 0,8 H), 1,76-1,44 (m, 7H), 1,37 (s, 1,8 H), 1,29 (s, 7,2 H), 1,28-1,20 (m, 1 H), 1,16-0,88 (m, 5H).
Eksempel 31
Syntese av forbindelse 309
Forbindelse 309 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 27, men ved å anvende de egnede byggeblokkene.
<1>H NMR (DMSO-de) rotamerer = 2:8 8 8,75 (s, 0,2 H), 8,50 (s, 0,8 H), 7,89-7,78 (m, 3 H), 7,50-7,44 (m, 1 H), 7,42-7,32 (m, 2 H), 7,17-7,09 (m, 0,8 H), 7,08-7,03 (m, 0,2 H), 6,79 (d, J = 8,5 Hz, 0,8 H), 6,33 (d, J = 9 Hz, 0,2 H), 5,81-5,65 (m, 1 H), 5,30-5,16 (m, 2 H), 5,10-5,02 (m, 1H), 4,56 (t, J = 7,5 Hz, 0,2 H), 4,33 (t, J = 8 Hz, 0,8 H), 4,10-3,90 (m, 2,8 H), 3,74-3,68 (m, 0,2 H), 2,45-2,37 (m, 1 H), 2,34-2,17 (m, 1 H), 2,05-1,97 (m, 1 H), 1,76-1,48 (m, 7 H), 1,37 (s, 1,8 H), 1,23 (s, 7,2 H), 1,21-0,88 (m, 6H).
Eksempel 32
Syntese av forbindelse 305
Forbindelse 305 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 27, men ved å anvende de egnede byggeblokkene.
<1>H NMR (DMSO-de) rotamerer (1:9) 8 8,68 (s, 0,1 H), 8,43 (s, 0,9 H), 8,04-8,00 (m, 1 H), 7,95-7,91 (m, 1 H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,57-7,49 (m, 3H), 7,47-7,42 (m, 1 H), 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 0,9 H), 6,21 (d, J = 8,5 Hz, 0,1 H), 5,80-5,64 (m, 1 H), 5,21 (dd, J = 17, 2 Hz, 0,1 H), 5,18 (dd, J = 17, 2 Hz, 0,9 H), 5,06 (dd, J = 10,5, 2 Hz, 1 H), 5,02-4,85 (m, 2 H), 4,43 (t, J = 7,5 Hz, 0,1 H), 4,34 (br s, 1 H), 4,23 (t, J = 8,5 Hz, 0,9 H), 4,16-4,05 (m, 1,8 H), 3,89-3,82 (m, 0,2 H), 3,74 (dd, J = 11, 3,5 Hz, 0,9 H), 3,53 (dd, J = 12,5, 4 Hz, 0,1 H), 2,30-2,21 (m, 1H), 2,02-1,94 (m, 2H), 1,74-1,38 (m, 7 H), 1,36 (s, 0,9 H), 1,28 (s, 8,1 H), 1,25-0,87 (m, 6 H).
Eksempel 33
Syntese av forbindelse 303
Forbindelse 303 ble fremstilt ved å anvende fremgangsmåten beskrevet i eksempel 27, men ved å anvende de egnede byggeblokkene.
<1>H NMR (DMSO-de) 8 8,29 (s, 1 H), 8,04-8,01 (m, 1 H), 7,94-7,92 (m, 1 H), 7,87 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,56-7,52 (m, 3H), 7,46 (dd, J = 8, 7 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 9 Hz, 1 H), 5,01 (d, J = 12 Hz, 1 H), 4,86 (d, J = 12 Hz, 1 H), 4,34 (, br.s, 1 H), 4,24 (t, J = 8 Hz, 1 H), 4,18-4,09 (m, 2 H), 3,74-3,53 (m, 3 H), 2,24-2,18 (m, 1H), 2,04-1,95 (m, 1 H), 1,74-1,45 (m, 10 H), 1,31-1,1,13 (m, 4 H), 0,96-9,86 (m, 7 H), 0,79-0,76 (m, 5 H).
Eksempel 34
Syntese av forbindelse 403
a) Kopling av P2 med P2
Metylesterderivatet av 7 (34a) (170 mg, 0,355 mmol) ble omrørt i 50% THF
metanol (4 ml) og vandig LiOH (1M, 1 ml) ved RT i 11. Oppløsningen ble konsentrert (Rotavap, 30°C) og resten surgjort til pH 6 og oppløsningen lyofilisert. Det resulterende pulveret ble omrørt i tørr DMF (3 ml) i nærvær av DIEA (0,4 ml), etterfulgt av trinnvis tilsetning av 1,1-aminocyklobutylkarboksylsyre metylester hydroklorid (34b) (140 mg, 0,845 mmol) og TBTU (134 mg, 0,417 mmol). Etter omrøring i 181 ved RT ble blandingen renset ved flash kromatografi på silikagel (230-400 Mesh) ved å anvende 1:2 etylacetat-heksan for å gi en oransj olje (98 mg, 90% renhet ved HPLC).
b) Kopling av P1-P2 med P3
Dipeptidet 34b (97 mg, 90%, 0,155 mmol) ble omrørt i 4 N HCI-dioksan (5 ml)
i 11 ved RT. Oppløsningen ble deretter konsentrert til tørrhet (Rotavap, høy vakuum)
for å gi et beige faststoff. Dette materialet ble omrørt i tørr DMF (2 ml) ved RT i nærvær av DIEA (0,4 ml) etterfulgt av tilsetning av L-Boc-Tbg (80 mg, 0,35 mmol) og TBTU (112 mg, 0,35 mmol). Etter omrøring i 2 dager ved RT ble oppløsningen helt i etylacetat for å generere den frie basen ved anvendelse av 5% vandig
kaliumkarbonat. Den organiske fasen ble opparbeidet for å gi en gul oljeformig rest. Materialet ble renset ved flash kromatografi på silikagel kolonne (230-400 Mesh) ved anvendelse av 1:2 & 3:1 vol/vol etylacetat:heksan for å gi 40 mg av en olje, homogen i henhold til HPLC.
Metylesteren (40 mg) ble endelig forsåpet i 1 N kaliumhydroksid (2 ml) i metanol (4 ml) ved omrøring ved RT i 31. Blandingen ble konsentrert (Rotavap, 30°C) og surgjort til pH 4 med 2 N saltsyre. Denne blandingen ble renset ved preparativ HPLC på C18 kolonne ved anvendelse av en gradient av 0-50% vandig acetonitril (0,1% TFA) ved 220 nm. Fraksjonene ble samlet, konsentrert til halve volumet og lyofilisert for å gi 403 som et hvitt, voluminøst faststoff (10 ml).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 Blanding av rotamerer: NH+ (1 H, s, 8,5 ppm), CH (3 H, m, 8,2 ppm), Ph (5H, bred s, 7,66 & 7,53 ppm), CH (1H, bred, 7,22 ppm), NH (1 H, d, J = 7,6 Hz, 6,71 ppm), CHO (1 H, bred s, 5,76 ppm), CH (2 H, m, 4,58-4,49 ppm), CH (1 H, m, 4,04 ppm); CH30 (3 H, s, 3,97 ppm), CH (1 H, d, 3,86 ppm), CH (7 H, meget bred, 1,8-2,6 ppm), Boc-gruppe (9H, s, 1,25 ppm) og t-butylgruppe (9 H, s, 0,97 ppm).
MS. viste M+H + ved m/e 675 (100%).
HPLC topp 98% ved 18,9 min.
Eksempel 35
Syntese av forbindelse 333 (tabell 3)
En oppløsning av m-anisid (35a) (9,15 ml, 81,4 mmol) og dimetylacetylen-dikarboksylat (35b) (10,0 ml, 81,3 mmol) i 160 ml metanol oppvarmes under tilbake-løp i 21. Oppløsningsmiddelet fjernes i vakuum og resten renses ved en flash kolonnekromatografi (90:10 heksaner-etylacetat). Forbindelse 35c (17,0 g, 79% utbytte) oppnås som en oransj olje.
<1>H NMR (CDCI3) 8 9,62 (bred s, 1H), 7,17 (dd, J = 7 og 8,5 Hz, 1H), 6,66-6,62 (m, 1 H), 6,49-6,45 (m, 2 H), 5,38 (s, 1 H), 3,77 (s, 3 H), 3,74 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H).
Difenyleter (50 ml) oppvarmes i et sandbad opp til en indre temperatur på «250°C. Diesteraddukt (35c) (7,5 g, 28,3 mmol), oppløst i 5 ml difenyleter tilsettes i løpet av 2 min til det kokende oppløsningsmiddelet. Oppvarmingen opprettholdes i 5 min, og reaksjonsblandingen tillates deretter å avkjøles ned til romtemperatur. Raskt utfelles et beige faststoff. Det faste stoffet filtreres og tritureres deretter med metanol. For å gi 4,1 g (62% utbytte) av den ønskede forbindelsen 35d.
<1>H NMR (DMSO-de) 8 7,97 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,40 (d, J = 2 Hz, 1 H), 6,96 (dd, J = 9 og 2 Hz, 1 H), 6,55 (s, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 3,84 (s, 3H).
En oppløsning av cis-4-hydroksy-L-prolinderivatet (35e) (1,71 g, 5,33 mmol), 4-hydroksykinolinderivat (35f) (1,25 g, 5,36 mmol) og trifenylfosfin (2,80 g, 10,68 mmol) i 75 ml THF avkjøles ned til 0°C for tilsetningen dråpe for dråpe (« 11) av DEAD (1,70 ml, 10,80 mmol). Reaksjonsblandingen tillates deretter å oppvarmes langsomt til romtemperatur, og omrøringen ble fortsatt natten over. Oppløsnings-middelet fjernes i vakuum, og resten renses ved en flash kolonnekromatografi (70:30 etylacetat-heksaner). Forbindelse 35g (0,7 g av ren forbindelse 35g og 1,8 g av forbindelse 35g forurenset med «50% av trifenylfosfatoksid) oppnås som et hvitt, faststoff.
<1>H NMR (CDCI3) rotamerer (4:6) 8 8,04 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 7,40-7,32 (m, 6 H), 7,23 (dd, J = 9 og 2,5 Hz, 1 H), 5,33-5,13 (m, 3 H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 0,4 H), 4,54 (t, J = 8 Hz, 0,6 H), 4,07 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 4,04=3,80 (m, 2 H), 2,78-2,65 (m, 1 H), 2,47-2,34 (m, 1 H), 1,45 (s, 3,6 H), 1,37 (s, 5,4 H).
Til prolinbenzylesterderivat (35g) (0,70 g, 1,31 mmol) i oppløsning i en blanding av metanol-etylacetat (10 ml - 10 ml) tilsettes 100 mg 10% Pd/C. Den resulterende suspensjonen omrøres ved romtemperatur under hydrogenatmosfære i 1,51. Katalysatoren filtreres deretter på en Millex-HV Millipore (0,45 um filterenhet) og oppløsningsmidlene avdampes i vakuum. Kvantitativt utbytte av den ønskede syren 35h (0,59 g) oppnås.
<1>H NMR (CDCI3) rotamerer 70:30 8 8,06 (d, J = 9,5 Hz, 0,3 H), 8,01 (d, J = 9 Hz, 0,7 H), 7,56 (d, J = 2 Hz, 1 H), 7,44 (bred s, 0,7 H), 7,41 (bred s, 0,3 H), 7,24 (dd, J = 9 og 2,5 Hz, 1 H), 5,31-5,25 (m, 1 H), 4,67 (t, J = 7,5 Hz, 0,7 H), 4,55 (t, J = 7,5 Hz, 0,3 H), 4,08 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,04-3,80 (m, 2 H), 2,83-2,72 (m, 1H), 2,71-2,47 (m, 1 H), 1,46 (s, 9 H).
Saltet av aminet 35i (215 mg, 1,21 mmol) i 7 ml acetonitril behandles med 0,95 ml DIEA (5,45 mmol). Denne oppløsningen tilsettes deretter til en oppløsning av syre 35h (590 mg, 1,32 mmol) og TBTU (389 mg, 1,21 mmol) i 5 ml CH3CN, den resulterende oppløsningen omrøres ved romtemperatur over natten. Oppløsnings-middelet fjernes i vakuum og resten fortynnes med etylacetat og vaskes to ganger med en mettet oppløsning av natriumbikarbonat, én gang med saltvannsoppløsning og tørkes over MgS04. Oppløsningsmiddelet fjernes i vakuum og resten renses ved flash kolonnekromatografi (75:25 AcOEt-heksaner) for å gi 527 mg (70% utbytte) av det ønskede dipeptidet (35j). <1>H NMR (CDCI3) 8 8,01 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,55 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,22 (dd, J = 9 og 2,5 Hz, 1 H), 5,81-5,71 (m, 1 H), 5,36-5,28 (m, 2 H), 5,18-5,12 (m, 1 H), 4,61-4,45 (m, 1 H), 4,07 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 3,91-3,74 (m, 2 H), 3,72 (s, 3 H), 2,99-2,84 (m, 1 H), 2,49-2,34 (m, 1 H), 2,20-2,08 (m, 1 H), 1,97-1,84 (m, 1 H), 1,58-1,52 (m, 1 H), 1,44 (s, 9 H).
Diesteren 35j (716 mg, 1,25 mmol) i oppløsning i en blanding av THF-MeoH (1,5 ml-1,5 ml) avkjøles til 0°C før den behandles med en vandig oppløsning av NaOH 1 M (1,25 ml, 1,25 mmol). Etter 1 times omrøring ved 0°C tilsettes 3 dråper iseddiksyre for å nøytralisere NaOH. Oppløsningsmidlene fjernes i vakuum og forbindelsen tørkes på pumpen i få timer.
En oppløsning av syre 35k natriumsaltet (1,25 mmol) og Et3N (0,19 ml, 1,36 mmol) i 8 ml THF avkjøles til 0°C og isobutylkloroformat (0,18 ml, 1,39 mmol) tilsettes. Etter 40 min tilsettes diazometan (9 ml, 6,30 mmol) og den resulterende opp-løsningen omrøres ved 0°C i 30 min og ved romtemperatur i 21. Oppløsnings-midlene fjernes i vakuum. Resten, fortynnet med etylacetat, vaskes to ganger med en mettet oppløsning av NaHC03, én gang med saltvannsoppløsning og tørkes over MgS04, oppløsningsmiddelet inndampes under vakuum, og resten renses ved flash kolonnekromatografi (50:50 heksaner/AcOEt) for å gi 378 mg (52% utbytte) av det ventede diazoketonet 35I.
<1>H NMR (CDCI3) 8 8,00 (d, J = Hz, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,35 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 7,20 (dd, J = 9 og 2,5 Hz, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 5,81-5,71 (m, 1 H), 5,35-5,28 (m, 3 H), 5,17-5,13 (m, 1 H), 4,61-4,40 (m, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 3,96-3,74 (m, 2 H), 3,72 (s, 3 H), 2,94-2,38 (m, 2 H), 2,18-2,06 (m, 1 H), 1,98-1,84 (m, 1 H), 1,57-1,52 (m, 1 H), 1,42 (s, 9 H).
Til en avkjølt (0°C) oppløsning av diazoketonet 351 (0,37 g, 0,642 mmol) i 15 ml THF tilsettes det 0,25 ml HBr 48%. Den resulterende gule oppløsningen omrøres ved 0°C i 1 t. Reaksjonsblandingen fordeles mellom etylacetat og en mettet opp-løsning av NaHCC<3. Den organiske fasen vaskes ytterligere én gang med NaHC03 og tørkes med NaS04. Etter avdampning av oppløsningsmidlene i vakuum isoleres 0,36 g (90% utbytte) av a-bromketonet 35m. a-bromketonet 35m (170 mg, 0,271 mmol) i 10 ml isopropanol behandles med 1-acetyl-2-tiourea (64 mg, 0,542 mmol). Den resulterende oppløsningen oppvarmes ved 75°C i 11. Oppløsningsmiddelet fjernes i vakuum. Resten fortynnes med etylacetat og vaskes to ganger med en mettet oppløsning av NaHC03, én gang med saltvannsoppløsning og tørkes med MgS04. Avdampning av oppløsningsmiddelet i vakuum ga 182 mg (>100%) av råmaterialet 35n.
Dipeptidet 35n (145 mg, 0,223 mmol) behandles med 3 ml av en 4 M opp-løsning av HCI i dioksan. Den resulterende oppløsningen omrøres ved romtemperatur i 1 t. Oppløsningsmiddelet fjernes i vakuum og resten tørkes over pumpen.
Saltet av aminet 35o i 5 ml CH3CN behandles med 195 ul (1,12 mmol) av DIEA. Denne oppløsningen tilsettes deretter til oppløsningen av Boc-tert-butyl-glysinet (103 mg, 0,446 mmol) og HATU (186 mg, 0,489 mmol) i 3 ml CH3CN. Reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur over natten. CH3CN inndampes i vakuum. Resten fortynnet med etylacetat vaskes to ganger med en mettet opp-løsning av NaHC03, én gang med saltvannsoppløsning og tørkes med MgS04. Etter fjernelse av oppløsningsmiddelet oppnås 274 mg av det rå tripeptidet 35p (>100%).
Tripeptidet 35p (56 mg, 0,0733 mmol) i 4 ml av en 4 M oppløsning av HCI i dioksan, omrøres ved romtemperatur i 21. Oppløsningsmiddelet fjernes i vakuum og resten tørkes over pumpen.
Saltet av aminet oppnådd oppløses i 4 ml CH2CI2 og behandles med 0,13 ml DIEA (0,746 mmol) etterfulgt av 26 mg trifosfen (0,0876 mmol). Etter 31 inkubering tilsettes 1,2,2-trimetylpropylamin (20 mg, 0,146 mmol) (syntetisert som beskrevet i Moss N., Gauthier J., Ferland J.M., feb. 1995, SynLett. (2), 142-144). Isbadet fjernes og reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur over natten. CH2CI2 inndampes i vakuum. Resten, fortynnet med etylacetat vaskes to ganger med en mettet oppløsning av NaHC03, én gang med saltvannsoppløsning og tørkes med MgS04 for å gi 60 mg («100%) av den ønskede urea 35q.
En oppløsning av metylester 35q (57 mg, 0,0721 mmol) i en blanding av THF:H20 (2,5 ml:1 ml) behandles med fast LiOH H20 (25 mg, 0,595 mmol) og 1 ml MeOH tilsettes for å gjøre oppløsningen klar. Etter omrøring i 41 ved romtemperatur nøytraliseres reaksjonen ved tilsetning av en 1 M oppløsning av HCI. Oppløsnings-midlene fjernes i vakuum, og resten renses ved en preparativ kromatografi. Forbindelsen oppløses i 2,5 ml MeOH, injiseres i en ekvilibrert Whatman Partisil 10-ODS-3 (2,2 x 50 cm) Cis revers fase kolonne. Renseprogram: Lineær gradient ved 20 ml/nm, X 220 nm, injisert ved 10% A opp til 60% A i løpet av 60 min. A: 0,06% TFA/CH3CN; B:0,06%; TFA/H20. Fraksjoner ble analysert ved analytisk HPLC. Det samlede produktet ble lyofilisert for å gi 15 mg av forbindelse 333 som et beige, hvitt faststoff (27% utbytte).
<1>H NMR (DMSO-d6) 8 8,88 (s, 0,2 H), 8,84 (d, J = 4,5 Hz, 0,2 H), 8,68 (d, J = 8,5 Hz, 0. H), 8,56 (s, 0,8 H), 8,40-8,13 (m, 1,5 H), 7,96 (d, J = 9,0 Hz, 0,2 H), 7,72-7,44 (m, 2,4 H), 7,35-7,09 (m, 1,2 H), 6,98 (d, J = 9 Hz, 0,2 H), 6,15 (d, J = 9 Hz, 0,2 H), 6,06 (d, J = 9 Hz, 0,8 H), 5,93 (d, J = 9,5 Hz, 0,24 H), 5,86 (d, J = 9 Hz, 0,8 H), 5,79-5,67 (m, 1 H), 5,69-5,44 (m, 1 H), 5,24-5,14 (m, 1 H), 5,09-5,01 (m, 1 H), 4,50-4,35 (m, 2 H), 4,24 (d, J = 9,0 Hz, 0,2 H), 4,20 (d, J = 9,0 Hz, 0,8 H), 4,06-3,98 (m, 2 H), 3,95 (s, 3 H), 3,77-3,60 (m, 2 H), 2,58-2,50 (m, 1 H), 2,33-2,28 (m, 1 H), 2,22 (s, 2,4 H), 2,21 (s, 0,6 H), 2,02 (q, J - 9 Hz, 1 H), 1,56-1,38 (m, 1 H), 1,28-1,22 (m, 1 H), 0,97 (s, 9 H), 0,83 (d, J = 6 Hz, 3 H), 0,72 (s, 9 H).
MS(FAB) 778,3 (m + H)<+>, 776,3 (M - H).
Eksempel 36
Kloning, ekspresjon og rensning av den rekombinante HCV NS3 proteasen type 1b.
Serum fra en HCV-infisert pasient ble oppnådd gjennom et eksternt sam-arbeid (Bernard Willems MD, Hopital St-Luc, Montréal, Canada og dr. Donald Murphy, Laboratoire de Santé Publique du Québec, Ste-Anne de Bellevue, Canada). Et fremstilt full-lengde cDNA templat av HCV genomet ble konstruert fra DNA fragmenter oppnådd ved revers transkripsjon-PCR (RT-PCR) av serum RNA og ved anvendelse av spesifikke primere valgt på basis av homologi mellom andre genotype 1b stammer. Fra bestemmelsen av hele den genomiske sekvensen ble en genotype 1b tilskrevet HCV isolatet i henhold til klassifiseringen ifølge Simmonds et al. (J. Clin. Microbiol., (1993), 31, p. 1493-1503). Aminosyresekvensen av det ikke-strukturelle området, NS2-NS4B, ble vist å være mer enn 93% identisk med HCV genotype 1b (BK, JK og 483 isolater) og 88% identisk med HCV genotype 1a (HCV-1 isolat). Et DNA fragment som koder polyprotein forstadiet (NS3/NS4A/NS4B/NS5A/NS5B) ble generert ved hjelp av PCR og innført i eukaryotiske ekspresjonsvektorer. Etter transient transfeksjon ble polyprotein bearbeidelsen formidlet ved HCV NS3 proteasen demonstrert ved nærvær av det modne NS3 proteinet ved anvendelse av Western blot analyse. Det modne NS3 proteinet ble ikke observert med ekspresjon av et polyprotein forstadium inneholdende mutasjonen S1165A, som inaktiverer NS3 proteasen, hvilket bekrefter funksjonaliteten av HCV NS3 proteasen.
DNA fragmentet som koder den rekombinante HCV NS3 proteasen (aminosyre 1027 til 1206) ble klonet i den pET11d bakterielle ekspresjons vektoren. NS3 protease ekspresjonen i E. coli BL21 (DE3)pLysS ble indusert ved inkubering med 1 mM IPTG i 31 ved 22°C. En typisk fermentering (18 I) ga ca 100 g av våt cellepasta. Cellene ble resuspendert i lyseringsbuffer (3,0 ml/g) bestående av 25 mM natriumfosfat, pH 7,5, 10% glyserol (vol/vol), 1 mM EDTA, 0,01% NP-40 og lagret ved -80°C. Celler ble opptint og homogenisert etter tilsetningen av 5 mM DTT. Magnesiumklorid og DNase ble deretter tilsatt til homogenatet ved endelige konsentrasjoner på henholdsvis 20 mM og 20 ug/ml. Etter en 25 min inkubering ved 4°C ble homogenatet ultralydbehandlet og sentrifugert ved 15000 x g i 30 min ved 4°C. pH av supernatanten ble deretter justert til 6,5 ved anvendelse av en 1 M natriumfosfatoppløsning.
Et ytterligere gel filtrerings kromatografitrinn ble addert til 2 trinns rense-prosedyren beskrevet i WO 95/22985. Kort sammenfattet blir supernatanten fra det bakterielle ekstraktet belagt på en SP HiTrap kolonne (Pharmacia) på forhånd ekvilibrert ved en strømningshastighet på 2 ml/min i buffer A (50 mM natriumfosfat, pH 6,5, 10% glyserol, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0,01% NP-40). Kolonnen ble deretter vasket med buffer A inneholdende 0,15 M NaCI og proteasen eluert ved påføring av 10 kolonnevolumer av en lineær 0,15 til 0,3 M NaCI gradient. NS3 proteaseholdige fraksjon ble oppsamlet og fortynnet til en endelig NaCI konsentrasjon på 0,1 M. Enzymet ble videre renset på HiTrap Heparin kolonne (Pharmacia) ekvilibrert i buffer B (25 mM natriumfosfat, pH 7,5, 10% glyserol, 5 mM DTT, 0,01% NP-40). Prøven ble belagt ved en strømningshastighet på 3 ml/min. Kolonnen ble deretter vasket med buffer B inneholdende 0,15 M NaCI ved en strømningshastighet på 1,5 ml/min. To trinns vaskinger ble utført i nærvær av buffer B inneholdende 0,3 eller 1 M NaCI. Proteasen ble utvunnet i 0,3 M NaCI vaskingen, fortynnet 3 ganger med buffer B, igjen pålagt på HiTrap Heparin kolonnen og eluert med buffer B inneholdende 0,4 M NaCI. Endelig ble NS3 proteaseholdige fraksjoner påført på en Superdex 75 HiLoad 16/60 kolonne (Pharmacia) ekvilibrert i buffer B inneholdende 0,3 M NaCI. Renheten av HCV NS3 proteasen oppnådd fra de sammenslåtte fraksjonene ble bedømt å være høyere enn 95% ved SDS-PAGE etterfulgt av densitometrianalyse.
Enzymet ble lagret ved -80°C og ble deretter tint på is og fortynnet like før anvendelse.
Eksempel 37
Rekombinant HCV NS3 protease/NS4A kofaktor peptid radiometrisk analyse
Enzymet ble klonet, uttrykket og fremstilt i henhold til fremgangsmåten beskrevet i eksempel 36. Enzymet ble lagret ved -80°C, opptint på is og fortynnet like før anvendelse i analysebufferen inneholdende NS4A kofaktor peptidet.
Substratet anvendt for den NS3 protease/NS4A kofaktor peptid radiometriske analysen, DDIVPC-SMSYTW, spaltes mellom cysteinet og serinrestene ved hjelp av enzymet. Sekvensen DDIVPC-SMSYTW tilsvarer NS5A/NS5B naturlig spaltningssetet hvori cysteinresten i P2 er substituert for et prolin. Peptidsubstratet DDIVPC-SMSYTW og tracer biotin-DDIVPC-SMS[<125>l-Y]TW inkuberes i den rekombinante NS3 proteasen og NS4A peptid kofaktoren KKGSWIVGRIILSGRK (molart forhold enzym:kofaktor 1:100) i fravær eller nærvær av inhibitorer. Separasjonen av substrat fra produkter utføres ved å tilsette avidin-belagte agaroseperler til analyseblandingen etterfulgt av filtrering. Mengden av SMS[<125>I-Y]TW produkt funnet i filtratet tillater beregning av prosentdel av substratomdanning og prosentdel inhibering.
A. Reagenser
Tris og Tris-HCI (UltraPure) ble oppnådd fra Gibco-BRL. Glyserol (UltraPure), MES og BSA ble innkjøpt fra Sigma. TCEP ble oppnådd fra Pierce, DMSO fra Aldrich og NaOH fra Anachemia.
Analysebuffer: 50 mM Tris HCI, pH 7,5, 30% (v/vol) glyserol, 1 mg/ml BSA, 1 mM TCEP (TCEP tilsatt like før anvendelse fra en 1 M forrådsoppløsning i vann).
Substrat: DDIVPCSMSYTW, 25 uM endelig konsentrasjon (fra en 2 mM for-rådsoppløsning i DMSO lagret ved -20°C for å unngå oksidasjon).
Tracer: redusert monojodert substrat biotin DDIVPC SMS[<125>I Y]TW (~1 nM endelig konsentrasjon).
HCV NS3 protease type 1b, 25 nM endelig konsentrasjon (fra en forrådsopp-løsning i 50 mM natriumfosfat, pH 7,5, 10% glyserol, 300 mM NaCI, 5 mM DTT, 0,01% NP-40)
NS4A kofaktor peptid: KKGSWIVGRIILSGRK, 2,5 uM endelig konsentrasjon (fra en 2 mM forrådsoppløsning i DMSO lagret ved -20°C).
B. Fremgangsmåte
Analysen ble utført i en 96-brønns polystyren plate fra Costar. Hver brønn inneholdt: 20 ul substrat/tracer i analysebuffer; 10 ul ± inhibitor i 20% DMSO/analysebuffer;
10 (il NS3 protease 1b/NS4 kofaktor peptid (molforhold 1:100).
Blindprøve (ingen inhibitor og intet enzym) og kontroll (ingen inhibitor) ble også fremstilt på den samme analyseplaten.
Den enzymatiske reaksjonen ble initiert ved tilsetning av enzym/NS4A peptid oppløsningen og analyseblandingen ble inkubert i 40 min ved 23°C under forsiktig omrøring. Ti (10) ul av 0,5 N NaOH ble tilsatt og 10 ul 1 M MES, pH 5,8 ble tilsatt for å stoppe den enzymatiske reaksjonen.
Tyve (20) ul av avidin-belagte agaroseperler (innkjøpt fra Pierce) ble tilsatt i en Millipore MADP N65 filtreringsplate. Den stoppede analyseblandingen ble overført til filtreringsplaten, og inkubert i 60 min ved 23°C under forsiktig omrøring.
Platene ble filtrert ved anvendelse av en Millipore MultiScreen Vacuum Manifold Filtration apparatur, og 40 ul av filtratet ble overført i en opaque 96-brønns plate inneholdende 60 ul scintillasjons fluid pr brønn.
Filtratene ble tellet på et Packard TopCount instrument ved anvendelse av en <125>l-væskeprotokoll i 1 min.
%inhibering ble beregnet med følgende ligning:
lOO-I^ellingermh-tellingerbimdpraveV^ellingercti-tellingerbimdprBveJxIOO]
En ikke-lineær kurve tilpasning med Hill modellen ble anvendt på inhibitor-konsentrasjonsdata, og den 50% effektive konsentrasjonen (IC5o) ble beregnet ved anvendelse av SAS software (Statistical Software System; SAS Institute, Inc. Cary,
N.C.).
Eksempel 38
Full-lengde NS3-NS4A heterodimer proteinanalyse
Det NS2-NS5B-3' ikke-kodende området ble klonet ved RT-PCR inn i pCR®3 vektoren (Invitrogen) ved anvendelse av RNA ekstrahert fra serum av et HCV genotype 1b infisert individ (tilveiebragt av dr. Bernard Willems, Hopital St-Luc, Montréal, Québec, Canada). NS3-NS4A DNA området ble deretter underklonet ved hjelp av PCR inn i pFastBac™ HTa baculovirus ekspresjons vektoren (Gibco/BRL). Vektor sekvensen omfatter et område som koder en 28-rest N-terminal sekvens som inneholder et heksahistidin-merke. Bac-to-Bac™ baculovirus ekspresjonssystemet (Gibco/BRL) ble anvendt for å fremstille det rekombinante baculovirus. Det full-lengde modne NS3 og NS4A heterodimer proteinet (His-NS3-NS4AFL) ble uttrykket ved å infisere 10<6> Sf21 celler/ml med det rekombinante baculovirus ved en multiplisitet for infeksjon på 0,1-0,2 ved 27°C. Den infiserte kulturen ble høstet 48 til 641 senere ved sentrifugering ved 4°C. Cellepelleten ble homogenisert i 50 mM NaP04l pH 7,5, 40% glyserol (v/vol), 2 mM p-merkaptoetanol, i nærvær av en cocktail av protease inhibitorer. His-NS3-NS4AFL ble deretter ekstrahert fra celle lysatet med 1,5% NP-40, 0,5% Triton X-100, 0,5 M NaCI og en DNase behandling. Etter ultrasentrifugering ble det oppløselige ekstraktet fortynnet 4 ganger og bundet på en Pharmacia Hi-Trap Ni-kelaterende kolonne. His-NS3-NS4AFL ble eluert i en
>90% ren form (som bedømt ved SDS-PAGE), ved anvendelse av en 50 til 400 mM imidazol gradient. His-NS3-NS4AFL ble lagret ved -80°C i 50 mM natriumsulfat, pH 7,5, 10% (v/vol) glyserol, 0,5 M NaCI, 0,25 M imidazol, 0,1% NP-40. Det ble opptint på is og fortynnet like før anvendelse.
Proteaseaktiviteten av His-NS3-NS4AFL ble analysert i 50 mM Tris-HCI, pH 8,0, 0,25 M natriumcitrat, 0,01% (v/vol) n-dodecyl-p-D-maltosid, 1 mM TCEP. Fem (5) uM av det internt slukkede substratet antranilyl-DDIVPAbuC(0)-0]-AMY(3-N02)TW-OH i nærvær av forskjellige konsentrasjoner av inhibitor ble inkubert med 1,5 nM av His-NS3-NS4AFL i 45 min ved 23°C. Den endelige DMSO konsentrasjonen overskred ikke 5,25%. Reaksjonen ble terminert med tilsetning av 1 M MES, pH 5,8. Fluorescens av det N-terminale produktet ble overvåket på et Perkin-Elmer LS-50B fluormeter utstyrt med en 96-brønns plateleser (eksitasjons bølgelengde: 325 nm; emisjons bølgelengde: 423 nm).
% inhibering ble beregnet med følgende ligning:
En ikke-lineær kurve tilpasning med Hill modellen ble anvendt på inhibitor-konsentrasjonsdata, og den 50% effektive konsentrasjonen (IC50) ble beregnet ved anvendelse av SAS software (Statistical Software System; SAS Institute, Inc. Cary,
N.C.).
Eksempel 39
NS3 protease celle-basert analyse
Denne analysen ble utført med Huh-7 celler, en human cellelinje avledet fra et hepatom, ko-transfektert med 2 DNA konstruksjoner: - et som uttrykker et polyprotein omfattende de HCV ikke-strukturelle proteinene sammensmeltet til tTA i følgende rekkefølge: NS3-NS4A-NS4B-NS5A-tTA (betegnet NS3), - den andre uttrykkende reporterproteinet, utskilte alkalisk fosfatase, under kontroll av tTA (betegnet SEAP).
Polyproteinet må spaltes ved hjelp av NS3 proteasen for at de modne proteinene skal frigis. Ved frigivelse av de modne proteinene antas det at de virale proteinene vil danne et kompleks ved membranen av det endoplasmatiske retikulum mens tTA vil migrere til kjernen og transaktivere SEAP genet. Derfor bør reduksjon av NS3 proteolytisk aktivitet føre til reduksjon av modne tTA nivåer og samtidig reduksjon i SEAP aktivteten.
For å kontrollere for andre effekter av forbindelsene ble en parallell transfeksjon utført hvor en konstruksjon som uttrykker tTA alene (betegnet tTA) ble ko-transfektert med SEAP konstruksjonen, slik at SEAP aktiviteten er uavhengig av NS3 proteolytisk aktivitet.
Fremgangsmåte for analysen: Huh-7 celler, dyrket i CHO-SFMII + 10% FCS (føtalt kalveserum), ble ko-transfektert med enten NS3 og SEAP eller tTA og SEAP, ved anvendelse av FuGene protokollen (Boehringer Mannheim). Etter 51 ved 37°C ble cellene vasket, trypsinisert og utplatet (ved 80 000 celler/brønn) i 96-brønns plater inneholdende et område av konsentrasjoner av forbindelsene som skal under-søkes. Etter en 241 inkuberingsperiode ble en porsjon av mediet trukket og SEAP aktiviteten i denne porsjonen ble målt med Phospha-Light kit (Tropix).
Analyser av prosent inhibering av SEAP aktivitet med hensyn til forbindelse konsentrasjon ble utført med SAS software for å oppnå EC50.
Toksisiteten av forbindelsen (TC5o) ble deretter bedømt ved anvendelse av MTT analysen som følger: 20ul av en MTT oppløsning (5 mg/ml medium) ble tilsatt pr brønn og inkubert ved 37° i 41;
mediet ble fjernet og 50 ul av 0,01 N HCI + 10% Triton X-100 ble tilsatt;
etter risting ved RT i minst 11 ble OD for hver brønn avlest ved 595 nm bølge-lengde.
TC50 ble beregnet på samme måte som EC50.
Eksempel 40
Spesifisitetsanalyser
Spesifisiteten av forbindelsene ble bestemt mot en rekke serin proteaser: human leukocytt elastase, svine pankreatisk elastase og bovint pankreatisk a-kymotrypsin og en cystein protease: human lever katepsin B. I alle tilfeller ble det anvendt en 96-brønns plate formatanalyse ved anvendelse av et kolorimetrisk p-nitroanilin (pNA) substrat spesifikt for hvert enzym. Hver analyse omfattet et 11 enzyminhibitor for-inkubering ved 30°C, etterfulgt av tilsetning av substrat og hydrolyse til «30% omdanning, som målt på en UV Thermomax® mikroplateleser. Substratkonsentrasjoner ble holdt så lave som mulig sammenlignet med Km for å redusere substratkonkurranse. Forbindelseskonsentrasjoner varierte fra 300 til 0,06 uM avhengig av deres potens.
Sluttbetingelsene for hver analyse var som følger:
• 50 mM Tris-HCI pH 8, 0,5 M Na2S04, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 0,01% Tween-20 med; • [100 uM Succ-AAPF-pNA og 250 pM a-kymotrypsin], [133 uM Succ-AAA-pNA og 8 nM svine elastase], [133 uM Succ-AAV-pNA og 8 nM leukocytt elastase]; eller • [100 mM NaHP04, pH 6, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 1 mM TCEP, 0,01% Tween-20, 30 uM Z-FR-pNA og 5 nM katepsin B (forrådsenzymet ble aktivert i buffer inneholdende 20 mM TCEP før anvendelse)].
Et representativt eksempel er sammenfattet nedenfor for svine pankreatisk elastase: I en polystyren flatbunnet 96-brønns plate ble det tilsatt, ved anvendelse av en Biomek væske håndteringsinnretning (Beckman): • 40 ul av analysebuffer (50 mM Tris-HCI pH 8, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA); • 20 ul av enzymoppløsning (50 mM Tris-HCI pH 8, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 40 nM svine pankreatisk elastase); og • 20 ul av inhibitoroppløsning (50 mM Tris-HCI, pH 8, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 1,5 mM -0,3 uM inhibitor, 15% vol/vol DMSO).
Etter 60 min for-inkubering ved 30°C, ble det tilsatt 20 ul av substratopp-løsning (50 mM Tris-HCI, pH 8, 0,5 M Na2S04, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA, 665 uM Succ-AAA-pNA) til hver brønn, og reaksjonen ble videre inkubert ved 30°C i 60 min, hvoretter absorbansen ble avlest på UV Thermomax® plateleseren. Rader av brønner ble allokert for kontroller (ingen inhibitor) og for blindprøver (ingen inhibitor og intet enzym).
De sekvensielle 2 gangers fortynningene av inhibitoroppløsningen ble utført på en separat plate ved hjelp av væske håndteringsinnretningen ved anvendelse av 50 mM Tris-HCI pH 8, 50 mM NaCI, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 15% DMSO. Alle andre spesifisitetsanalyser ble utført på en lignende måte.
Prosentdelen inhibering ble beregnet ved anvendelse av formelen:
En ikke-lineær kurve tilpasning med Hill modellen ble anvendt på inhibitor-konsentrasjonsdata, og den 50% effektive konsentrasjonen (IC50) ble beregnet ved anvendelse av SAS software (Statistical Software System; SAS Institute, Inc. Cary,
N.C.).
Tabell over forbindelser
De følgende tabellene opplister forbindelser som er representative for oppfinnelsen. Forbindelser ifølge oppfinnelsen ble analysert enten i én eller begge av analysene ifølge eksempelene 37 og 38, og ble funnet å være aktive med IC50 under 50 uM (A): under 5 uM (B) eller under 0,5 uM (C).
Aktivitet i celler og spesifisitet:
Representative forbindelser ifølge oppfinnelsen ble også testet i den surrogat celle-baserte analysen fra eksempel 39, og i én eller flere analyser ifølge eksempel 40. F.eks ble forbindelse 601 fra tabell 6 funnet å ha en IC50 på 50 nM i analysen ifølge eksempel 37 og 30 nM i analysen ifølge eksempel 38. EC50 som bestemt ved analysen ifølge eksempel 39 er 8,2 uM. I spesifisitetsanalysene ifølge eksempel 40 ble den samme forbindelsen funnet å ha følgende aktivitet: HLE >75 uM; PPE >75 uM; a-Chym. >75 uM; Cat. B>75 uM. Disse resultatene indikerer at denne familien av forbindelser er meget spesifikk for NS3 proteasen og minst visse medlemmer av denne familien er aktive i en surrogat celle-basert analyse.
Følgende forkortelser er anvendt i de angitte tabellene:
MS: masse spektrometriske data; AC: acetyl; Bn: benzyl; Boe: tert-butyoksy-karbonyl; cHeks: cykloheksyl; Chg: cykloheksylglysin (2-amino-2-cykloheksyl-eddiksyre); iPr: isopropyl; O-Bn: benzyloksy; Ph: fenyl; t-Bu: tert-butyl; Tbg: tert-butylglysin; 1-eller 2-Np: 1-eller 2-naftyl; 1-eller 2-NpCH20: 1, eller 2-naftylmetoksy.

Claims (78)

  1. Forbindelse, karakterisert ved formel (I) omfattende racemater, diastereoisomerer og optiske isomerer av hvor B er H, en C6 eller C10 aryl, C7-16 aralkyl; Het eller (Ci-6 alkyl)-Het, hvorav alle eventuelt er substituert med Ci-ealkyl; Ci.6alkoksy; Ci.6alkanoyl; hydroksy; C1-6 hydroksyalkyl; halogen; Ci.6 halogenalkyl; nitro; cyano; Ci-6 cyanoalkyl; amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; amido; eller (Ci-6 alkyl)amid; eller B er et karboksyl av formel R4-0-C(0)-; et amid av formel R4-N(R5)-C(0)-; et tioamid av formel R4-N(R5)-C(S)-; eller et sulfonyl av formel R4-S02 hvori
    R4 er (i) Ci_i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl, amido eller (C1-6 alkyl)amid; (ii) C3-7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl, amido eller (Ci.6 alkyl)amid; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; amido; eller (Ci^ alkyl)amid; (iv) C6 eller C10 aryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci-ealkyl, hydroksy, amido, (Ci_6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; eller (v) Het eller (Ci-6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (C1-6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; R5 er H eller Ci-ealkyl; eller B er et acylderivat av formel R4-C-(0)-; hvor R4er (i) Cm0 alkyl eventuelt substituert med karboksyl, C1-6 alkanoyl, hydroksy, C-i-6 alkoksy, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med C-i-6 alkyl; (ii) C3.7 cykloalkoksy, eller C4-10 alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (C1.6 alkoksy)karbonyl, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med Clb alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller disubstituert med C-i-6 alkyl; (iv) C6 eller C10 aryl eller C7-16 aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci_6 alkyl, hydroksy, eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med Ci.6 alkyl; eller (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6 alkyl, hydroksy eller amino eventuelt mono- eller disubstituert med Ci.6 alkyl; med den forutsetning at når R4 er et amid eller et tioamid er R4 ikke (ii) en cykloalkoksy; Y er H eller Ci.6alkyl; R3 er Ci-ealkyl, C3.7cykloalkyl eller C4-1 oalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, Ci.6alkoksy, Ci-etioalkyl, amido, (C1-6 alkyl)amido, C6 eller Ci0aryl, eller C7-i6aralkyl; R2 er CH2-R20, NH-R20, O-R20 eller S-R20, hvori R2o er en mettet eller umettet C3.7-cykloalkyl eller C4-1 o(alkylcykloalkyl), hvorav alle er eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21, eller R2o er en C6 eller Cioaryl eller C7-i4aralkyl, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21, eller R2o er Het eller (C1.6 alkyl)-Het, begge eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21,
    hvor hver R21 uavhengig er Ci-6alkyl; Ci-6alkoksy; C1-6 tioalkyl; sulfonyl; NO2; OH; SH; halogen, C1-6 halogenalkyl; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7-i4aralkyl, Het eller (Ci.6 alkyl)-Het; amido eventuelt mono-substituert med Ci-6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7.i4aralkyl, Het eller (C1-6 alkyl)-Het; karboksyl; karboksy(Ci.6 alkyl); C6 eller Ci0aryl, C7-i4aralkyl eller Het, hvor nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22;
    hvor R22 er Ci^alkyl, C3-7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci-6alkyl; sulfonyl; (Ci.6 alkyl)sulfonyl; N02; OH; SH; halogen, Ci.6 halogenalkyl; karboksyl; amid; (Ci.6 alkyl)amid; eller Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl; R<1> er H, Ci-ealkyl, C3.7cykloalkyl, C2-6alkenyl eller C2-6alkynyl, alle eventuelt substituert med halogen; hvor Het, enten alene eller i kombinasjon med annet radikal er et monovalent radikal avledet avledet ved fjernelse av et hydrogenatom fra en fem-, seks- eller syv-leddet mettet eller umettet (omfattende aromatisk) heterocyklus inneholdende fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel eller Het er en heterocyklus som definert ovenfor kondensert til én eller flere andre cykluser, enten disse er en heterocyklus eller en hvilken som helst annen cyklus; eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav.
  2. 2. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at B er C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6. alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci_6 hydroksyalkyl, halogen, Ci.6 halogenalkyl, nitro, cyano, C1-6 cyanoalkyl, amido, (Ci-6 alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; eller B er Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, alle eventuelt substituert med Ci-ealkyl, Ci.6alkoksy, Ci-6alkanoyl, hydroksy, C1-6 hydroksyalkyl, halogen, Ci_6 halogenalkyl, nitro, cyano, Ci.6 cyanoalkyl, amido, (Ci.6 alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl.
  3. 3. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at B er R4-S02, hvor R4 er Ci.6alkyl; amido; (Ci-6 alkyl)amid; C6 eller Cioaryl, C7-i4aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med Ci.6 alkyl.
  4. 4. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atBer acylderivat av formel R4-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci.6alkoksy, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4-ioalkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl; (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-ealkyl, hydroksy, eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl.
  5. 5. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at B er en karboksyl av formel R4-0-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci_6alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl, amido eller (C1-6 alkyl)amid; (ii) C3.7cykloalkyl, C4-ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, amido eller (Ci.6 alkyl)amid; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amido, (Ci-6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; eller (v) Het eller (Ci-e alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, amido eller (C1.6 alkyl)amido.
  6. 6. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er et amid med formel R4-N(R5)-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-6alkanoyl, hydroksy, Ci-e-alkoksy, amido, (Ci.6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci_6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.3alkyl; (iv) C6 eller C10aryl eller C7.i8aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amido, (Ci_6 alkyl)amid, eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl; eller (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl, amido eller (Ci.6 alkyl)amid; og R5 er H eller metyl.
  7. 7. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er et tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, C-|.6alkanoyl eller Ci.6alkoksy; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eller amido.
  8. 8. Forbindelse av formel I ifølge krav 2 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er C6 eller Cioaryl eventuelt substituert med Ci-ealkyl, Ci.6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci^ hydroksyalkyl, halogen, Ci.6 halogenalkyl, nitro, cyano, Ci-6 cyanoalkyl, amido, (Ci_6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci^alkyl.
  9. 9. Forbindelse av formel I ifølge krav 2 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved atBer Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, halogen, amido, (Ci.6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl.
  10. 10. Forbindelse av formel I ifølge krav 4 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er et acylderivat av formelen R4-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci-6alkoksy; eller (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci_6alkoksy)karbonyl, eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, eller (v) Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy eller amino.
  11. 11. Forbindelse av formel I ifølge krav 5 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er en karboksyl av formel R4-0-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-6alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy eller amido, (Ci^ alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3-7cykloalkyl, C4_i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci-e alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci^alkyl; eller (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci_6alkyl, hydroksy, amido, eller amino eventuelt mono-substituert med Ci-6alkyl.
  12. 12. Forbindelse av formel I ifølge krav 6 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er et amid av formel R4-N(R5)-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, C1-6-alkoksy, amido, (Ci_6 alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci-6alkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.3alkyl, eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido eventuelt substituert med Ci-ealkyl; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido, og R5 er H.
  13. 13. Forbindelse av formel I ifølge krav 7 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at B erettioamid av formel R4-NH-C(S)-, hvor R4 er (i) Ci_i0alkyl; eller (ii) C3-7cykloalkyl.
  14. 14. Forbindelse av formel I ifølge krav 12 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er et amid av formelen R4-NH-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6-alkoksy, amido, (Ci-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amino eller amido.
  15. 15. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at B er
  16. 16. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atYerH eller metyl.
  17. 17. Forbindelse av formel I ifølge krav 16 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atYerH.
  18. 18. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R3 er Ci-ealkyl, C3.7cykloalkyl eller C4.ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, Ci.6alkoksy, Ci_6tioalkyl, acetamido, C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl.
  19. 19. Forbindelse av formel I ifølge krav 18 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R3 er sidekjeden av tert-butylglysin (Tbg), Ile, Val, Chg eller:
  20. 20. Forbindelse av formel I ifølge krav 19 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R3 er sidekjeden av Tbg, Chg eller Val.
  21. 21. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atR2er S-R2o eller 0-R2o, hvor R20 er en C6 eller Cioaryl, Cy-uaralkyl, Het eller-CH2-Het, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R2i, hvor R21 er Ci-ealkyl; Ci.6alkoksy; Ci-6 tioalkyl; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, C6 eller Cioaryl, Cy-uaralkyl, Het eller (Ci.6 alkyl)-Het; amido eventuelt monosubstituert med Ci-6 alkyl, C6 eller Cioaryl, C7-i4aralkyl, Het eller (Ci.6alkyl)-Het; N02; OH; halogen; trifluormetyl; karboksyl; C6 eller Cioaryl, Cr.^aralkyl, eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22, hvori R22 er Ci.6alkyl, C3.7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino; mono- eller di-( Ci.6 alkyl)amino; (Ci-6 alkyl)amid; sulfonyl Ci-6 alkyl; N02; OH; halogen, trifluormetyl; karboksyl eller Het.
  22. 22. Forbindelse av formel I ifølge krav 21 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2i er Ci-ealkyl; Ci_6alkoksy; amino, di(Ci-6 alkyl)amino; (Ci_6 alkyl)amid; C6 eller Ci0aryl, eller Het, idet nevnte aryl eller Het eventuelt er substituert med R22, hvor R22 er Ci-6alkyl; C3-7cykloalkyl; Ci-6alkoksy; amino; mono- eller di(Ci_6 alkyl)amino; (Ci_6 alkyl)amid; halogen; trifluormetyl eller Het.
  23. 23. Forbindelse av formel I ifølge krav 22 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R22 er Ci-ealkyl; Ci-6alkoksy; halogen; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6 alkyl; (Ci.6 alkyl)amid; eller Het.
  24. 24. Forbindelse av formel I ifølge krav 23 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atR22er metyl; etyl; isopropyl; tert-butyl; metoksy; klor; amino eventuelt mono- eller di-substituert med C1-6 alkyl; eller (C1.6 alkyl)amid
  25. 25. Forbindelse av formel I ifølge krav 21 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2 er valgt fra gruppen bestående av:
  26. 26. Forbindelse av formel I ifølge krav 21 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2 er 1-naftylmetoksy; 2-naftylmetoksy; benzyloksy, 1-naftyloksy; 2-naftyloksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert i krav 21.
  27. 27. Forbindelse av formel I ifølge krav 26 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2 er 1-naftylmetoksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert i krav 26.
  28. 28. Forbindelse av formel I ifølge krav 27 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atR2er valgt fra gruppen bestående av
  29. 29. Forbindelse av formel I ifølge krav 26 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2 er: hvor R2ia er Ci-ealkyl, Ci.6alkoksy, C1-6 tioalkyl; halogen; amino eventuelt mono-substituert med Ci.6alkyl; eller C6, Ci0aryl eller Cy-uaralkyl eller Het, nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt substituert med R22, hvor R22 er Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, (C1-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl, eller Het; og R21B er Ci-6alkyl, Ci.6alkoksy, amino, di(Ci_6 alkyl)amino, (C1-6 alkyl)amid, NO2, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl.
  30. 30. Forbindelse av formel I ifølge krav 29 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2ia er C6, Cioaryl eller Het, alle eventuelt substituert med R22 som definert i krav 29.
  31. 31. Forbindelse av formel I ifølge krav 30 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2ia er valgt fra gruppen bestående av:
  32. 32. Forbindelse av formel I ifølge krav 29 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2 er: hvor R22A er Ci.6alkyl eller Ci-6alkoksy; og R2ib er Ci-ealkyl, Ci.6alkoksy, amino, di(Ci-6 alkyl)amino, (C1-6 alkyl)amid, NO2, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl.
  33. 33. Forbindelse av formel I ifølge krav 29 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav,karakterisert ved at R2 er:
    hvor R22B er Ci.6alkyl, amino eventuelt mono-substituert med Ci.6alkyl, eller (C1-6 alkyl)amid; og R2ib er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, amino, di(Ci-6 alkyl)amino, (C1-6 alkyl)amid, N02, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl.
  34. 34. Forbindelse av formel I ifølge krav 32 eller 33 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R2ib er Ci-6alkoksy, eller di(Ci_ 6 alkyl)amino.
  35. 35. Forbindelse av formel I ifølge krav 32 eller 33 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at R21B er metoksy.
  36. 36. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at P1 er cyklobutyl eller cyklopropylring, begge eventuelt substituert med Ri, hvor R<1> er H, Ci^alkyl, C3-5cykloalkyl eller C2-4alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen.
  37. 37. Forbindelse av formel I ifølge krav 36 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at P1 er cyklopropyl og R<1> er etyl, vinyl, cyklopropyl, 1 eller 2-brometyl eller 1 eller 2-bromvinyl.
  38. 38. Forbindelse av formel I ifølge krav 37 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atR^r vinyl.
  39. 39. Forbindelse av formel I ifølge krav 37 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atRi ved karbon 2 er orientert syn til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten:
  40. 40. Forbindelse av formel I ifølge krav 37 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atRi ved stilling 2 er orientert anti til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten:
  41. 41. Forbindelse av formel I ifølge krav 37 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at karbon 1 har R konfigurasjonen:
  42. 42. Optisk isomer av en forbindelse med formel I ifølge 41 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert
    ved at Ri substituenten og karbonyl i en syn orientering i følgende absolutte konfigurasjon:
  43. 43. Forbindelse av formel I ifølge krav 42 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at Ri er etyl, følgelig har de asymmetriske karbonatomene ved stillinger 1 og 2 R,R konfigurasjonen.
  44. 44. Forbindelse av formel I ifølge krav 42 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved atRier vinyl, følgelig har de asymmetriske karbonatomene ved stillinger 1 og 2 R,S konfigurasjonen.
  45. 45. Forbindelse av formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at
    B er en C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci^alkyl, C1-6-alkoksy, Ci-6alkanoyl, hydroksy, Ci^ hydroksyalkyl, halogen, C1-6 halogenalkyl, nitro, cyano, C1-6 cyanoalkyl, amido, (Ci_6 alkyl)amido, eller amino eventuelt substituert med Ci-ealkyl; eller Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl; Ci.6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, C1-6 hydroksyalkyl, halogen, Ci^ halogenalkyl, nitro, cyano, Ci.6 cyanoalkyl, amido, (Ci.6 alkyl)amido eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; eller
    B er R4-SO2, hvor R4 fortrinnsvis er amido; (C1-6 alkyl)amid; C6 eller Cioaryl, C7-14-aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med Ci.6 alkyl eller
    B er et acylderivat av formelen R4-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci.6alkoksy, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl eller C4-ioalkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (iv) Ce eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl, eller
    B er et karboksyl av formel R4-0-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6-alkoksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl, amido eller (Ci_6 alkyl)amid; (ii) C3-7cykloalkyl, C4-1 oalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl, amido eller (Ci_6 alkyl)amid; (iv) C6 eller Ci0aryl eller C7.16aralkyl, eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (C1-6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; eller (v) Het eller (Ci-6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-ealkyl, hydroksy, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl, amido eller (Ci.6 alkyl)amido, eller
    B er et amid med formel R4-N(R5)-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci^alkanoyl, hydroksy, Ci.6.
    alkoksy, amido, (C1-6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci^alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4-i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci_6 alkyl)amido, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.3alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amido, (C1-6 alkyl)amid, eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl;
    eller (v) Het eller (Ci-6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl, amido eller (Ci.6 alkyl)amid; og
    R5 er H eller metyl, eller
    B er et tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl eller Ci.6alkoksy; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4-ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eller amido;
    Y er H eller metyl;
    R<3> er Ci.8alkyl, C3.7cykloalkyl, eller C4-i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med hydroksy, Ci-6alkoksy, Ci-etioalkyl, acetamido, C6 eller Cioaryl, eller C7.i4aralkyl;
    R2 er S-R20 eller O-R20, hvori R20 fortrinnsvis er en C6 eller Cioaryl, C7.i4aralkyl, Het eller-CH2-Het, alle eventuelt mono-, di- eller tri-substituert med R21, hvor R21 er Ci-ealkyl; Ci_6alkoksy; Ci-6 tioalkyl; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl, C6 eller Cioaryl, C7.i6aralkyl, Het eller (Ci.6 alkyl)-Het; amido eventuelt mono-substituert med Ci.6 alkyl, C6 eller C10 aryl, C7.i4aralkyl, Het eller (Ci.6 alkyl)-Het; N02; OH; halogen, trifluormetyl; karboksyl; C6 eller Ci0aryl, C7.i4aralkyl eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het er eventuelt substituert med R22, hvor R22 er Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl; Ci.6alkoksy; amino; mono- eller di-( C1.6 alkyl)amino; (C1-6 alkyl)amid; sulfonyl-Ci-6 alkyl; N02; OH; halogen; trifluormetyl; karboksyl eller Het; eller
    R2 er valgt fra gruppen bestående av: eller R2 er 1-naftylmetoksy; 2-naftylmetoksy; benzyloksy, 1-naftyloksy; 2-naftyloksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor; og P1 segmentet er en cyklopropylring, begge eventuelt substituert med Ri, hvor R<1> er Ci.3alkyl, C3-5cykloalkyl eller C2^alkenyl eventuelt substituert med halogen, og nevnte Rt ved karbon 2 er orientert syn til karbonyl ved stilling 1, representert ved resten:
    eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav.
  46. 46. Forbindelse med formel I ifølge krav 45 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at B er en C6 eller Cioaryl eventuelt substituert med Ci-ealkyl, Ci_6alkoksy, Ci-6alkanoyl, hydroksy, C1-6 hydroksyalkyl, halogen, Ci.6 halogenalkyl, nitro, cyano, Ci.6 cyanoalkyl, amido, (C1-6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; eller B er Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, Ci.6alkoksy, Ci.6alkanoyl, hydroksy, halogen, amido, (Ci_6 alkyl)amid, eller amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-6alkyl; eller B er R4-SO2, hvor R4 er C6 eller Ci0aryl, en C7-i4aralkyl eller Het, alle eventuelt substituert med C1.6 alkyl; amido, (C1-6 alkyl)amid; B er et acylderivat av formelen R4-C(O)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, hydroksy eller Ci_6alkoksy;
    eller (ii) C3-7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, begge eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy eller amino;
    eller B er et karboksyl av formel Pm-O-C(O)-, hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci-ealkanoyl, hydroksy, Ci-6-alkoksy eller amido, (C1-6 alkyl)amid; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci.6alkyl; (ii) C3-7cykloalkyl, C4-ioalkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci.6 alkyl)amid; amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci_6alkyl; eller (iv) C6 eller Cioaryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl; eller (v) Het eller (Ci.6 alkyl)-Het, begge eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amido eller amino eventuelt mono-substituert med Ci-6alkyl;
    eller B er et amid med formel R4-N(R5)-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci.6.
    alkoksy, amido, (C1-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-ealkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci-6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci_e alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci_6alkyl; og R5 er H eller metyl; eller
    R4 er (iii) amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci-3alkyl; eller (iv) C6 eller C10 aryl eller C7.i6aralkyl, alle eventuelt substituert med Ci-ealkyl, hydroksy, amino eller amido eventuelt substituert med Ci-6alkyl; eller (v) Het eventuelt substituert med Ci-6alkyl, hydroksy, amino eller amido; eller B er et tioamid av formel R4-NH-C(S)-; hvor R4 er (i) Ci-ioalkyl eller (ii) C3.7cykloalkyl; eller
    YerH;
    R<3> er sidekjeden av tert-butylglysin (Tbg), Ile, Val, Chg eller: R2 er 1-naftylmetoksy; eller kinolinoksy usubstituert, mono- eller di-substituert med R21 som definert ovenfor; eller R2 er:
    hvor R21A er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, Ci.6 tioalkyl; halogen; amino eventuelt mono-substituert med Ci-ealkyl; eller C6-ioaryl, C7-i4aralkyl eller Het, eventuelt substituert med R22, hvor R22 er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, (Ci-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl, eller Het;
    P1 er en cyklopropylring hvor karbon 1 har R konfigurasjonen,
    R<1> er etyl, vinyl, cyklopropyl, 1 eller 2-brometyl eller 1 eller 2-bromvinyl.
  47. 47. Forbindelse med formel I ifølge krav 46 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller ester derav, karakterisert ved at
    B er et amid med formel R4-NH-C(0)-, hvor R4 er (i) Ci-i0alkyl eventuelt substituert med karboksyl, Ci.6alkanoyl, hydroksy, Ci-6.
    alkoksy, amido, (C1-6 alkyl)amid, amino eventuelt mono- eller di-substituert med Ci. 6alkyl; (ii) C3.7cykloalkyl eller C4.i0alkylcykloalkyl, alle eventuelt substituert med karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amido, (Ci.6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci-6alkyl; (iv) C6 eller Cioaryl eller C7-i6aralkyl eventuelt substituert med Ci.6alkyl, hydroksy, amino eller amido;
    R<3> er sidekjeden av Tbg, Chg eller Val;
    R2 er: hvor R22A er Ci-6alkyl (så som metyl) eller Ci-6alkoksy (så som metoksy); eller halogen (så som klor); R22Ber Ci-ealkyl, amino eventuelt mono-substituert med Ci-ealkyl; eller (Ci-6 alkyl)amid; og R2ib er Ci^alkyl, Ci-6alkoksy, amino, di(Ci-6 alkyl)-amino, (Ci-6 alkyl)amid, N02, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl; og P1 er:
  48. 48. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor B, R3, R2 er som definert nedenfor:
  49. 49. Forbindelse nr. 111 ifølge krav 48.
  50. 50. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen:
  51. 51. Forbindelse nr. 203 ifølge krav 50.
  52. 52. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor B, R3, R2 og Ri er som definert nedenfor:
  53. 53. Forbindelse ifølge krav 52, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 307, 314, 317, 321, 324, 325, 326, 327, 329, 331, 332, 333 og 334.
  54. 54. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen:
  55. 55. Forbindelse ifølge krav 54, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 403, 405 og 406.
  56. 56. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor R3 er som definert nedenfor:
  57. 57. Forbindelse ifølge krav 56, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 501, 509 og 510.
  58. 58. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor R3, R21A og R21B er som definert nedenfor:
  59. 59. Forbindelse ifølge krav 58, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 610, 611, 612, 615, 616, 617, 620, 621, 622, 625, 626, 627, 628, 629 og 630.
  60. 60. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor R3 og R2-ia er som definert nedenfor:
  61. 61. Forbindelse ifølge krav 60, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 701, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709 og 711 til 737.
  62. 62. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor B, R3 og R22 er som definert nedenfor:
  63. 63. Forbindelse ifølge krav 62, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av forbindelse nr: 801 til 825, 827 til 858 og 861 til 873.
  64. 64. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor B er som definert nedenfor:
  65. 65. Forbindelse ifølge krav 45, karakterisert ved at den er representert ved formelen: hvor B, X, R3, z og R21B er som definert nedenfor:
  66. 66. Farmasøytisk preparat som omfatter en forbindelse av formel I ifølge krav 1, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav, i blanding med et farmasøytisk akseptabelt bærermedium eller hjelpemiddel.
  67. 67. Forbindelse av formel (I) ifølge et hvilket som helst av krav 1 til 65 som et medikament.
  68. 68. Anvendelse av en forbindelse av formel (I) ifølge krav 1, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav eller et farmasøytisk preparat ifølge krav 66 for fremstilling av et medikament for behandling av en hepatitt C viral infeksjon i et pattedyr.
  69. 69. Anvendelse av en forbindelse av formel (I) ifølge krav 1, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav for fremstilling av et farmasøytisk preparat for å inhibere replikeringen av hepatitt C virus.
  70. 70. Anvendelse av en kombinasjon av en forbindelse av formel I ifølge krav 1, eller et terapeutisk akseptabelt salt eller en ester derav med et annet anti-HCV middel for fremstillingen av et medikament for å behandle en hepatitt C virusinfeksjon.
  71. 71. Anvendelse ifølge krav 70, hvor nevnte andre anti-HCV middel er et interferon.
  72. 72. Anvendelse ifølge krav 70 eller 71, hvor nevnte andre anti-HCV middel er valgt fra gruppen bestående av: a- eller p-interferon, ribavirin eller amantadin.
  73. 73. Anvendelse ifølge krav 70, hvor nevnte andre anti-HCV middel omfatter en inhibitor av andre mål i HCV livssyklusen, valgt fra: helikase, polymerase, metalloprotease eller IRES.
  74. 74. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av krav 1, hvor P1 er en substituert aminocyklopropyl karboksylsyrerest, karakterisert ved at den omfatter trinnet: kopling av et peptid valgt fra gruppen bestående av: APG-P3-P2; eller APG-P2; med et P1 mellomprodukt av formel:
    hvor Ri er Ci-6alkyl, cykloalkyl eller C2-6alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen, CPG er er karboksylbeskyttende gruppe og APG er en aminobeskyttende gruppe og P3 og P2 er som definert ovenfor.
  75. 75. Anvendelse av et P1 mellomprodukt av formelen:
    hvor Ri er Ci-ealkyl, cykloalkyl eller C2-6alkenyl, alle eventuelt substituert med halogen og CPG er en karboksylbeskyttende gruppe, for fremstilling av en forbindelse av formel(1) som definert over.
  76. 76. Fremgangsmåte ifølge krav 74, karakterisert ved at nevnte karboksylbeskyttende gruppe (CPG) er valgt fra gruppen bestående av:
    alkylestere, aralkylestere og estere som er spaltbare ved hjelp av mild basebehandling eller milde reduktive fremgangsmåter.
  77. 77. Fremgangsmåte ifølge krav 74, karakterisert ved at nevnte aminobeskyttende gruppe (APG) er valgt fra gruppen bestående av:
    acylgrupper, aromatiske karbamatgrupper, alifatiske karbamatgrupper, cykliske alkylkarbamatgrupper, alkylgrupper, trialkylsilyl og tiolholdige grupper.
  78. 78. Anvendelse av en prolinanalog med formelen:
    hvor R21A er Ci-ealkyl; Ci.6alkoksy; C1-6 tioalkyl; halogen; amino eventuelt mono-substituert med Ci-ealkyl; C6, Cioaryl, C7-i6aralkyl eller Het, idet nevnte aryl, aralkyl eller Het eventuelt er substituert med R22, hvor R22 er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, amido, (C1.6 alkyl)amid, amino eventuelt mono-eller di-substituert med Ci.6alkyl, eller Het; og R21B er Ci.6alkyl, Ci-6alkoksy, amino, di(Ci-6 alkyl)amino, (C1-6 alkyl)amid, NO2, OH, halogen, trifluormetyl eller karboksyl;
    hvor Het er et monovalent radikal avledet avledet ved fjernelse av et hydrogenatom fra en fem-, seks- eller syv-leddet mettet eller umettet (omfattende aromatisk) heterocyklus inneholdende fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel eller Het er en heterocyklus som definert ovenfor kondensert til én eller flere andre cykluser, enten disse er en heterocyklus eller en hvilken som helst annen cyklus;
    for syntese av en peptidanalog av formel I ifølge krav 29.
NO20010683A 1998-08-10 2001-02-09 Tripeptidforbindelser, fremgangsmate for fremstilling av disse, farmasoytisk preparat, anvendelse av forbindelsene for fremstilling av et medikament for behandling av sykdom. NO328952B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9593198P 1998-08-10 1998-08-10
US13238699P 1999-05-04 1999-05-04
PCT/CA1999/000736 WO2000009543A2 (en) 1998-08-10 1999-08-09 Hepatitis c inhibitor tri-peptides

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20010683D0 NO20010683D0 (no) 2001-02-09
NO20010683L NO20010683L (no) 2001-04-02
NO328952B1 true NO328952B1 (no) 2010-06-28

Family

ID=26790767

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20010683A NO328952B1 (no) 1998-08-10 2001-02-09 Tripeptidforbindelser, fremgangsmate for fremstilling av disse, farmasoytisk preparat, anvendelse av forbindelsene for fremstilling av et medikament for behandling av sykdom.
NO20100004A NO336663B1 (no) 1998-08-10 2010-01-05 Fremgangsmåte for oppløsning av en enantiomer blanding av 1-amino-2-vinylcyclopropyl karboksylsyrederivater

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20100004A NO336663B1 (no) 1998-08-10 2010-01-05 Fremgangsmåte for oppløsning av en enantiomer blanding av 1-amino-2-vinylcyclopropyl karboksylsyrederivater

Country Status (43)

Country Link
US (11) US6323180B1 (no)
EP (2) EP1105413B1 (no)
JP (2) JP4485685B2 (no)
KR (2) KR100631439B1 (no)
CN (2) CN101143892B (no)
AR (3) AR020880A1 (no)
AT (1) ATE430158T1 (no)
AU (1) AU769738B2 (no)
BG (1) BG65738B1 (no)
BR (2) BRPI9913646B8 (no)
CA (2) CA2338946C (no)
CO (1) CO5261542A1 (no)
CY (2) CY1109291T1 (no)
CZ (2) CZ302766B6 (no)
DE (1) DE69940817D1 (no)
DK (2) DK1105413T3 (no)
EA (1) EA003906B1 (no)
EE (1) EE05517B1 (no)
ES (2) ES2405930T3 (no)
HK (2) HK1040085B (no)
HR (1) HRP20010102B1 (no)
HU (2) HU229262B1 (no)
ID (1) ID27839A (no)
IL (3) IL141012A0 (no)
IN (3) IN211493B (no)
ME (1) ME00381B (no)
MX (2) MX257413B (no)
MY (1) MY127538A (no)
NO (2) NO328952B1 (no)
NZ (1) NZ510396A (no)
PE (1) PE20000949A1 (no)
PH (1) PH11999002002B1 (no)
PL (1) PL204850B1 (no)
PT (2) PT2028186E (no)
RS (3) RS50798B (no)
SA (1) SA99200617B1 (no)
SI (2) SI2028186T1 (no)
SK (2) SK288068B6 (no)
TR (2) TR200200129T2 (no)
TW (1) TWI250165B (no)
UA (1) UA75026C2 (no)
WO (1) WO2000009543A2 (no)
ZA (1) ZA200100971B (no)

Families Citing this family (423)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4080541B2 (ja) 1996-10-18 2008-04-23 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド セリンプロテアーゼ、特にｃ型肝炎ウイルスｎｓ３プロテアーゼの阻害因子
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
UA74546C2 (en) * 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
CA2383865A1 (en) * 1999-06-25 2001-01-04 Basf Aktiengesellschaft Corynebacterium glutamicum genes encoding metabolic pathway proteins
AR029903A1 (es) 2000-04-05 2003-07-23 Schering Corp Inhibidores macrociclicos de la ns3-serina proteasa, del virus de la hepatitis c, que comprenden partes p2 n-ciclicas, composiciones farmaceuticas y utilizacion de los mismos para la manufactura de un medicamento
CN1432022A (zh) 2000-04-19 2003-07-23 先灵公司 含有烷基和芳基丙氨酸p2部分的丙型肝炎病毒的大环ns3－丝氨酸蛋白酶抑制剂
US6713502B2 (en) 2000-05-05 2004-03-30 Smithkline Beecham Corporation Anti-infectives
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
US7012066B2 (en) 2000-07-21 2006-03-14 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
CZ2003195A3 (cs) 2000-07-21 2003-04-16 Schering Corporation Peptidové inhibitory serinové proteázy NS3 a farmaceutický prostředek
SV2003000617A (es) * 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
US6846806B2 (en) 2000-10-23 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of Hepatitis C virus NS3 protein
HUP0500456A3 (en) * 2000-11-20 2012-05-02 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c tripeptide inhibitors, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
MXPA03005219A (es) 2000-12-12 2003-09-25 Schering Corp Peptidos diarilicos como inhibidores de ns3-serina proteasa en hepatitis de virus c.
WO2002057287A2 (en) 2001-01-22 2002-07-25 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
ATE349463T1 (de) 2001-07-11 2007-01-15 Vertex Pharma Verbrückte bizyklische serinproteaseinhibitoren
US7108092B2 (en) 2001-09-14 2006-09-19 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Front grill impact-absorbing structure for a vehicle
NZ531681A (en) * 2001-10-24 2007-05-31 Vertex Pharma Inhibitors of serine protease, particularly hepatitis C virus NS3-NS4A protease, incorporating a fused ring system
US20050009873A1 (en) * 2001-11-02 2005-01-13 Gianpaolo Bravi Acyl dihydro pyrrole derivatives as hcv inhibitors
US6867185B2 (en) * 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
PE20030857A1 (es) 2002-01-23 2003-10-25 Schering Corp Compuestos como inhibidores de la proteasa serina ns3 del virus de la hepatitis c
US7119072B2 (en) * 2002-01-30 2006-10-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
CA2369970A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
NZ561851A (en) 2002-04-11 2009-05-31 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis C virus NS3 - NS4 protease
EP1506172B1 (en) * 2002-05-20 2011-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
ATE481106T1 (de) 2002-05-20 2010-10-15 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische sulfonamid-hepatitis-c-virus- hemmer
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
ES2315568T3 (es) * 2002-05-20 2009-04-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores del virus de la hepatitis c basados en cicloalquilo p1' sustituido.
KR100457857B1 (ko) * 2002-05-23 2004-11-18 (주) 비엔씨바이오팜 2-[2-(3-인돌릴)에틸아미노]피리딘 유도체, 그 제조방법및 이를 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물
JP2005533817A (ja) 2002-06-28 2005-11-10 イデニクス（ケイマン）リミテツド フラビウィルス科ウィルス感染治療用の修飾２′および３′−ヌクレオシドプロドラッグ
US20040033959A1 (en) * 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
WO2004014313A2 (en) * 2002-08-12 2004-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Combination pharmaceutical agents as inhibitors of hcv replication
EP1408031A1 (en) * 2002-10-09 2004-04-14 3 D Gene Pharma Pyrolidine derivatives useful in treatment of hepatitis C virus infection
WO2004037818A1 (en) 2002-10-24 2004-05-06 Glaxo Group Limited 1-acyl-pyrrolidine derivatives for the treatment of viral infections
US20050075279A1 (en) * 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7601709B2 (en) 2003-02-07 2009-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
EP1601685A1 (en) * 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds
DE602004029866D1 (de) * 2003-03-05 2010-12-16 Boehringer Ingelheim Pharma Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
KR100960802B1 (ko) * 2003-03-08 2010-06-01 주식회사유한양행 씨형 간염바이러스 감염 치료용 엔에스3 프로테아제 억제제
WO2004092203A2 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
ATE422895T1 (de) * 2003-04-16 2009-03-15 Bristol Myers Squibb Co Makrocyclische isochinolinpeptidinhibitoren des hepatitis-c-virus
US7176208B2 (en) * 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US6846836B2 (en) 2003-04-18 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company N-substituted phenylurea inhibitors of mitochondrial F1F0 ATP hydrolase
PT1615613E (pt) * 2003-04-18 2010-02-09 Enanta Pharm Inc Inibidores da serina protease da hepatite c macrocíclicos de quinoxalinilo
PT1654261E (pt) * 2003-05-21 2008-01-18 Boehringer Ingelheim Int Compostos inibidores da hepatite c
ES2726998T3 (es) 2003-05-30 2019-10-11 Gilead Pharmasset Llc Análogos de nucleósidos fluorados modificados
US7273851B2 (en) * 2003-06-05 2007-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tri-peptide hepatitis C serine protease inhibitors
WO2004113365A2 (en) * 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7125845B2 (en) * 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
BRPI0412849A (pt) 2003-07-25 2006-09-26 Idenix Cayman Ltd compostos, composições e usos de análogos de nucleosìdeo de purina para o tratamento de flaviviridae, incluindo hepatite c
CA2536570A1 (en) 2003-08-26 2005-03-10 Schering Corporation Novel peptidomimetic ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
US8377952B2 (en) 2003-08-28 2013-02-19 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage formulation
US8025899B2 (en) 2003-08-28 2011-09-27 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage form
TW201127828A (en) 2003-09-05 2011-08-16 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
DE602004031645D1 (de) * 2003-09-22 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Pharma Makrozyklische peptide mit wirkung gegen das hepatitis-c-virus
KR20060085248A (ko) * 2003-09-26 2006-07-26 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스 ｎｓ3 세린 프로테아제의마크로사이클릭 억제제
CA2541634A1 (en) 2003-10-10 2005-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
DK1680137T3 (da) 2003-10-14 2013-02-18 Hoffmann La Roche Makrocyklisk carboxylsyre- og acylsulfonamidforbindelse som inhibitor af HCV-replikation
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US8187874B2 (en) 2003-10-27 2012-05-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Drug discovery method
EP1944042A1 (en) 2003-10-27 2008-07-16 Vertex Pharmceuticals Incorporated Combinations for HCV treatment
KR20060120166A (ko) 2003-10-27 2006-11-24 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ３－ｎｓ４ａ 단백질분해효소 저항성 돌연변이
US20050119318A1 (en) * 2003-10-31 2005-06-02 Hudyma Thomas W. Inhibitors of HCV replication
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP1689770A1 (en) * 2003-11-20 2006-08-16 Schering Corporation Depeptidized inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US7309708B2 (en) 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP2007513200A (ja) * 2003-12-08 2007-05-24 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 超臨界流体処理によるルテニウム副生物の除去
ZA200605248B (en) 2003-12-15 2007-10-31 Japan Tobacco Inc Cyclopropane compounds and pharmaceutical use thereof
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
CA2549851C (en) * 2004-01-21 2012-09-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
AR048401A1 (es) * 2004-01-30 2006-04-26 Medivir Ab Inhibidores de la serina-proteasa ns3 del vhc
SE0400199D0 (sv) * 2004-01-30 2004-01-30 Medivir Ab HCV Protease inhbitors
AU2005212257A1 (en) 2004-02-04 2005-08-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
US20050182252A1 (en) 2004-02-13 2005-08-18 Reddy K. R. Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives
US7582770B2 (en) 2004-02-20 2009-09-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
PT1719773E (pt) 2004-02-24 2009-06-03 Japan Tobacco Inc Compostos heterotetracíclicos fundidos e a sua utilização como inibidores da polimerase do hcv
US20070049593A1 (en) 2004-02-24 2007-03-01 Japan Tobacco Inc. Tetracyclic fused heterocyclic compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
CA2557301A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-15 Schering Corporation Cyclobutenedione groups-containing compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
WO2005087721A2 (en) 2004-02-27 2005-09-22 Schering Corporation Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
US7635694B2 (en) 2004-02-27 2009-12-22 Schering Corporation Cyclobutenedione-containing compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
RU2006134002A (ru) 2004-02-27 2008-04-10 Шеринг Корпорейшн (US) Новые соединения, действующие как ингибиторы сериновой протеазы ns3 вируса гепатита с
TW200536528A (en) 2004-02-27 2005-11-16 Schering Corp Novel inhibitors of hepatitis C virus NS3 protease
ATE438622T1 (de) 2004-02-27 2009-08-15 Schering Corp 3,4-(cyclopentyl)kondensierte prolinverbindungen als inhibitoren der ns3-serinprotease des hepatitis-c-virus
TWI314927B (en) 2004-02-27 2009-09-21 Schering Corporatio Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
US7816326B2 (en) 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
KR101135765B1 (ko) * 2004-03-12 2012-04-23 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 아스파르트산 아세탈 카스파아제 억제제의 제조를 위한방법 및 중간체
RU2006136084A (ru) * 2004-03-15 2008-04-27 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) Способ получения микроциклических соединений
BRPI0509467A (pt) * 2004-03-30 2007-09-11 Intermune Inc compostos macrocìclicos como inibidores de replicação viral
US7754718B2 (en) 2004-05-05 2010-07-13 Yale University Antiviral helioxanthin analogs
WO2005113581A1 (en) 2004-05-20 2005-12-01 Schering Corporation Substituted prolines as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
JP5156374B2 (ja) * 2004-05-25 2013-03-06 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 非環式ｈｃｖプロテアーゼインヒビターの調製方法
AU2005254057B2 (en) 2004-06-15 2011-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
US20070265222A1 (en) 2004-06-24 2007-11-15 Maccoss Malcolm Nucleoside Aryl Phosphoramidates for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
CA2556669C (en) * 2004-06-28 2012-05-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
AR050174A1 (es) 2004-07-16 2006-10-04 Gilead Sciences Inc Derivados de fosfonatos con actividad antiviral. composiciones farmaceuticas
EP1771454B1 (en) * 2004-07-20 2011-06-15 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibitor peptide analogs
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
CN101023094B (zh) * 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
US7597884B2 (en) 2004-08-09 2009-10-06 Alios Biopharma, Inc. Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use
EP1789074A4 (en) * 2004-08-09 2009-08-12 Alios Biopharma Inc PROTEASE-RESISTANT HYPERGLYCOSYL SYNTHETIC POLYPEPTIDE VARIANTS, ORAL FORMULATIONS AND METHODS OF USING THE SAME
US7550559B2 (en) 2004-08-27 2009-06-23 Schering Corporation Acylsulfonamide compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
PT3109244T (pt) * 2004-09-14 2019-06-04 Gilead Pharmasset Llc ¿preparação de ribofuranosil pirimidinas e purinas 2¿-fluoro-2¿-alquil substituídas ou outras opcionalmente substituídas e os seus derivados
WO2006030892A1 (ja) * 2004-09-17 2006-03-23 Nippon Shinyaku Co., Ltd. 複素環化合物の製造方法
CN102160891A (zh) 2004-10-01 2011-08-24 威特克斯医药股份有限公司 Hcv ns3-ns4a蛋白酶抑制
US7659263B2 (en) 2004-11-12 2010-02-09 Japan Tobacco Inc. Thienopyrrole compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
US7323447B2 (en) * 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN101160317B (zh) 2005-03-08 2013-03-27 贝林格尔·英格海姆国际有限公司 制备大环化合物的方法
US7879797B2 (en) * 2005-05-02 2011-02-01 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) * 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AP2007004245A0 (en) 2005-05-13 2007-12-31 Virochem Pharma Inc Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
NZ563365A (en) * 2005-06-02 2011-02-25 Schering Corp Combination of HCV protease inhibitors with a surfactant
US20070237818A1 (en) * 2005-06-02 2007-10-11 Malcolm Bruce A Controlled-release formulation of HCV protease inhibitor and methods using the same
US20060276404A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Anima Ghosal Medicaments and methods combining a HCV protease inhibitor and an AKR competitor
US8119602B2 (en) 2005-06-02 2012-02-21 Schering Corporation Administration of HCV protease inhibitors in combination with food to improve bioavailability
AU2006259348B2 (en) 2005-06-17 2010-07-22 Novartis Ag Use of sanglifehrin in HCV
US7608592B2 (en) 2005-06-30 2009-10-27 Virobay, Inc. HCV inhibitors
CN101242816B (zh) * 2005-06-30 2012-10-31 维罗贝股份有限公司 Hcv抑制剂
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI387603B (zh) * 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
EP1910378B1 (en) * 2005-07-20 2012-06-20 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibitor peptide analogs
JP5249028B2 (ja) 2005-07-25 2013-07-31 インターミューン・インコーポレーテッド Ｃ型肝炎ウイルス複製の新規大環状阻害剤
ATE496042T1 (de) 2005-07-29 2011-02-15 Tibotec Pharm Ltd Makrocyclische inhibitoren des hepatitis-c-virus
TW200745061A (en) 2005-07-29 2007-12-16 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis C virus
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
TWI375670B (en) 2005-07-29 2012-11-01 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
CN101273042B (zh) 2005-07-29 2013-11-06 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
MX2008001402A (es) 2005-07-29 2008-04-04 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c.
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
CN101273030B (zh) 2005-07-29 2012-07-18 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
KR20080036598A (ko) * 2005-08-01 2008-04-28 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ３ 프로테아제 억제제로서의 마크로사이클릭펩티드
AU2006275413B2 (en) 2005-08-02 2012-07-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
EP1915054A4 (en) 2005-08-09 2010-09-01 Merck Sharp & Dohme CYCLIC ACETAL DERIVATIVES OF RIBONUCLEOSIDES FOR THE TREATMENT OF RNA-DEPENDENT RNA VIRUS INFECTIONS
EP1915378A4 (en) 2005-08-12 2009-07-22 Boehringer Ingelheim Int VIRUS POLYMERASE INHIBITORS
US8399615B2 (en) 2005-08-19 2013-03-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates
EP2357170A1 (en) * 2005-08-19 2011-08-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates
US7964624B1 (en) 2005-08-26 2011-06-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
CA2621360C (en) 2005-09-09 2013-12-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Ring-closing metathesis process for the preparation of macrocyclic peptides
DE602006019323D1 (de) 2005-10-11 2011-02-10 Intermune Inc Verbindungen und verfahren zur inhibierung der replikation des hepatitis-c-virus
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7705138B2 (en) 2005-11-11 2010-04-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hepatitis C virus variants
EP1951748B1 (en) 2005-11-11 2013-07-24 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus variants
WO2007081517A2 (en) 2005-12-21 2007-07-19 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
KR20080080395A (ko) * 2005-12-21 2008-09-03 아보트 러보러터리즈 항바이러스 화합물
EP2345652A1 (en) 2005-12-21 2011-07-20 Abbott Laboratories Antiviral compounds
RU2467007C2 (ru) * 2005-12-21 2012-11-20 Эбботт Лэборетриз Производные [1,8]нафтиридина, полезные в качестве ингибиторов репликации вируса hcv
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
JP5436864B2 (ja) 2006-02-27 2014-03-05 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｖｘ−９５０を含む共結晶体およびそれを含む医薬組成物
JP2009529059A (ja) 2006-03-08 2009-08-13 アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド 抗ｃ型肝炎ウイルス活性を有する置換アミノチアゾール誘導体
EP1993994A2 (en) 2006-03-16 2008-11-26 Vertex Pharmceuticals Incorporated Deuterated hepatitis c protease inhibitors
ES2543840T3 (es) 2006-04-11 2015-08-24 Novartis Ag Inhibidores espirocíclicos del VHC/VIH y sus usos
GB0609492D0 (en) * 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
BRPI0712021A2 (pt) 2006-05-23 2012-01-03 Irm Llc composto e composiÇÕes como inibidores da protease ativadora de canal
US7728148B2 (en) * 2006-06-06 2010-06-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US9526769B2 (en) 2006-06-06 2016-12-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US8268776B2 (en) 2006-06-06 2012-09-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US20080187516A1 (en) * 2006-06-06 2008-08-07 Ying Sun Acyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
GB0612423D0 (en) * 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
UY30437A1 (es) * 2006-06-26 2008-01-31 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macroceclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c
KR20090024834A (ko) * 2006-07-05 2009-03-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 억제제
WO2008008776A2 (en) 2006-07-11 2008-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US20090035267A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
US7718612B2 (en) * 2007-08-02 2010-05-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Pyridazinonyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
US20080038225A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7605126B2 (en) 2006-08-11 2009-10-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acylaminoheteroaryl hepatitis C virus protease inhibitors
WO2008022006A2 (en) * 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis c virus protease inhibitors
US7582605B2 (en) * 2006-08-11 2009-09-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus-containing hepatitis C serine protease inhibitors
US20090098085A1 (en) * 2006-08-11 2009-04-16 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
RU2009109355A (ru) 2006-08-17 2010-09-27 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) Ингибиторы вырусной полимеразы
WO2008063727A2 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
US8138164B2 (en) * 2006-10-24 2012-03-20 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
AU2007309546A1 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. HCV NS3 protease inhibitors
WO2008051514A2 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
CA2667031C (en) * 2006-10-27 2013-01-22 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
CN101568346B (zh) * 2006-10-27 2015-11-25 默沙东公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US20080108632A1 (en) * 2006-11-02 2008-05-08 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
NZ576780A (en) 2006-11-15 2011-12-22 Virochem Pharma Inc Thiophene analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008059046A1 (en) 2006-11-17 2008-05-22 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
WO2008073282A2 (en) 2006-12-07 2008-06-19 Schering Corporation Ph sensitive matrix formulation
GB0625349D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
AU2007335962B2 (en) * 2006-12-20 2012-09-06 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa Antiviral indoles
US8236950B2 (en) * 2006-12-20 2012-08-07 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0625345D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
WO2008074035A1 (en) * 2006-12-27 2008-06-19 Abbott Laboratories Hcv protease inhibitors and uses thereof
WO2008095058A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-07 Taigen Biotechnology Co. Ltd. Hcv protease inhibitors
ES2379905T3 (es) 2007-02-27 2012-05-04 Vertex Pharmceuticals Incorporated Co-cristales y composiciones farmacéuticas que los comprenden
NZ579295A (en) 2007-02-27 2012-03-30 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases
WO2008106167A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy comprising matrix metalloproteinase inhibitors and caspase inhibitors for the treatment of liver diseases
EP2144604B1 (en) 2007-02-28 2011-09-21 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of chronic viral hepatitis C using RO 113-0830
CN101679240A (zh) * 2007-03-23 2010-03-24 先灵公司 Hcv ns3蛋白酶的p1-非可差向异构化酮酰胺抑制剂
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US20080267917A1 (en) * 2007-04-26 2008-10-30 Deqiang Niu N-functionalized amides as hepatitis c serine protease inhibitors
US20080317712A1 (en) * 2007-04-26 2008-12-25 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US20080292587A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-27 Ying Sun Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US8377872B2 (en) 2007-04-26 2013-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cyclic P3 tripeptide hepatitis C serine protease inhibitors
US7910587B2 (en) * 2007-04-26 2011-03-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl dipeptide hepatitis C virus inhibitors
EP2177523A1 (en) * 2007-05-03 2010-04-21 Intermune, Inc. Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
CN102872461A (zh) 2007-05-04 2013-01-16 弗特克斯药品有限公司 用于治疗hcv感染的组合治疗
WO2008139288A2 (en) * 2007-05-09 2008-11-20 Pfizer Inc. Substituted heterocyclic derivatives and compositions and their pharmaceutical use as antibacterials
JP2010526834A (ja) 2007-05-10 2010-08-05 インターミューン・インコーポレーテッド Ｃ型肝炎ウイルス複製の新規ペプチド阻害剤
GB0709791D0 (en) * 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
EP2162431B1 (en) 2007-06-29 2017-06-07 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US8513186B2 (en) 2007-06-29 2013-08-20 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
EP2178885A1 (en) * 2007-07-17 2010-04-28 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic indole derivatives for the treatment of hepatitis c infections
WO2009010804A1 (en) * 2007-07-19 2009-01-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic compounds as antiviral agents
US8242140B2 (en) 2007-08-03 2012-08-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CL2008002549A1 (es) 2007-08-30 2010-09-03 Vertex Pharma Cocristal que comprende vx-950 y un formador de cocristal seleccionado de acido 3-metoxi-4hidroxibenzoico,acido 2,4-dihidroxibenzoico y acido 2,5-dihidroxibenzoico; metodo de preparacion; composicion farmaceutica que comprende el cocristal, util como agente antiviral en el tratamiento del hcv.
GB0718575D0 (en) 2007-09-24 2007-10-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Nucleoside derivatives as inhibitors of viral polymerases
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
WO2009055335A2 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8383583B2 (en) 2007-10-26 2013-02-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic, pyridazinone-containing hepatitis C serine protease inhibitors
WO2009064955A1 (en) 2007-11-14 2009-05-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic tetrazolyl hepatitis c serine protease inhibitors
WO2009070689A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic, c5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis c virus ns3 protease
WO2009070692A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2009076173A2 (en) 2007-12-05 2009-06-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated tripeptide hcv serine protease inhibitors
US8361958B2 (en) * 2007-12-05 2013-01-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl HCV serine protease inhibitors
CA2708047A1 (en) 2007-12-06 2009-06-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Process for making macrocyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
WO2009079353A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic hcv serine protease inhibitors
US8476257B2 (en) 2007-12-19 2013-07-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
CN102036966A (zh) * 2008-01-24 2011-04-27 益安药业 作为hcv丝氨酸蛋白酶抑制剂的二氟化三肽
US8101567B2 (en) * 2008-01-24 2012-01-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl-containing tripeptide HCV serine protease inhibitors
EP2250174B1 (en) 2008-02-04 2013-08-28 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
WO2009100225A1 (en) 2008-02-07 2009-08-13 Virobay, Inc. Inhibitors of cathepsin b
WO2009108507A1 (en) 2008-02-25 2009-09-03 Merck & Co., Inc. Therapeutic compounds
CN102015652A (zh) * 2008-03-20 2011-04-13 益安药业 作为丙型肝炎病毒抑制剂的氟化大环化合物
TW200946541A (en) * 2008-03-27 2009-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Solid forms of an anti-HIV phosphoindole compound
SG175692A1 (en) 2008-04-15 2011-11-28 Intermune Inc Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
US8163921B2 (en) * 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2720850A1 (en) * 2008-04-28 2009-11-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
WO2009134987A1 (en) * 2008-04-30 2009-11-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Difluoromethyl-containing macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
US20090285774A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN101580535B (zh) * 2008-05-16 2012-10-03 太景生物科技股份有限公司 丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP5529120B2 (ja) 2008-05-29 2014-06-25 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
TW201004632A (en) 2008-07-02 2010-02-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
PL2310095T3 (pl) 2008-07-22 2013-03-29 Msd Italia Srl Makrocykliczne związki chinoksaliny jako inhibitory proteazy NS3 HCV
JP2011528686A (ja) 2008-07-23 2011-11-24 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー ヘテロ環式抗ウイルス性化合物
US8207341B2 (en) * 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
PE20110388A1 (es) * 2008-09-16 2011-07-01 Boehringer Ingelheim Int Formas cristalinas de un derivado de peptido como inhibidores de hcv
NZ591030A (en) * 2008-09-17 2012-10-26 Boehringer Ingelheim Int Combination of hcv ns3 protease inhibitor with interferon and ribavirin
BRPI0920513A2 (pt) 2008-09-26 2019-09-24 F Hoffamann La Roche Ag derivados de pirina ou pirazina para tratar hcv
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP3025727A1 (en) 2008-10-02 2016-06-01 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating liver disease
EA201170441A1 (ru) * 2008-10-15 2012-05-30 Интермьюн, Инк. Терапевтические противовирусные пептиды
BRPI0919973A2 (pt) 2008-10-30 2015-12-08 Hoffmann La Roche derivados de arilpiridona antivirais heterocíclicos
MX2011005151A (es) * 2008-11-21 2011-05-30 Boehringer Ingelheim Int Composicion farmaceutica de un potente inhibidor de hvc para su administracion oral.
PE20150939A1 (es) 2008-12-03 2015-07-19 Presidio Pharmaceuticals Inc Inhibidores de la proteina no estructural 5a del virus de la hepatitis c
NZ593806A (en) 2008-12-03 2014-04-30 Presidio Pharmaceuticals Inc Inhibitors of hcv ns5a
US20100272674A1 (en) * 2008-12-04 2010-10-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2379579A1 (en) 2008-12-19 2011-10-26 Gilead Sciences, Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
JP2012513397A (ja) 2008-12-22 2012-06-14 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗ウイルス化合物
BRPI0924121A2 (pt) 2008-12-22 2019-09-24 Hoffmann La Roche compostos antivirais heterocíclicos
JP5793084B2 (ja) 2008-12-23 2015-10-14 ギリアド ファーマセット エルエルシー プリンヌクレオシドの合成
CA2748057C (en) 2008-12-23 2018-07-03 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidates
BRPI0922508A8 (pt) 2008-12-23 2016-01-19 Pharmasset Inc Análogos de nucleosídeo
SG172848A1 (en) 2009-01-07 2011-08-29 Scynexis Inc Cyclosporine derivative for use in the treatment of hcv and hiv infection
WO2010082050A1 (en) 2009-01-16 2010-07-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic and 7-aminoalkyl-substituted benzoxazocines for treatment of hepatitis c infections
GB0900914D0 (en) 2009-01-20 2009-03-04 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
US8102720B2 (en) * 2009-02-02 2012-01-24 Qualcomm Incorporated System and method of pulse generation
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
JP5690286B2 (ja) 2009-03-04 2015-03-25 イデニク プハルマセウティカルス，インコーポレイテッド ホスホチオフェン及びホスホチアゾールｈｃｖポリメラーゼ阻害剤
EP2403844A1 (en) 2009-03-06 2012-01-11 F. Hoffmann-La Roche AG Heterocyclic antiviral compounds
EP2408449A4 (en) 2009-03-18 2012-08-08 Univ Leland Stanford Junior METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING INFECTION WITH A FLAVIVIRIDAE FAMILY VIRUS
BRPI1012282A2 (pt) 2009-03-27 2015-09-22 Presidio Pharmaceuticals Inc inibidores de anel fundidos da hepatite c.
US8927576B2 (en) 2009-04-06 2015-01-06 PTC Therpeutics, Inc. HCV inhibitor and therapeutic agent combinations
US8377962B2 (en) 2009-04-08 2013-02-19 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
EP2421831A1 (en) 2009-04-25 2012-02-29 F. Hoffmann-La Roche AG Heterocyclic antiviral compounds
EP2429568B1 (en) 2009-05-13 2016-08-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
TWI598358B (zh) 2009-05-20 2017-09-11 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
AR077004A1 (es) 2009-06-09 2011-07-27 Hoffmann La Roche Compuestos heterociclicos antivirales
EP2445875A2 (en) 2009-06-24 2012-05-02 F. Hoffmann-La Roche AG Heterocyclic antiviral compound
US8232246B2 (en) * 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
JP2012532146A (ja) * 2009-07-02 2012-12-13 ドクター・レディーズ・ラボラトリーズ・リミテッド アミノビニルシクロプロパンカルボン酸誘導体の分割のための酵素および方法
CA2767692C (en) 2009-07-07 2017-03-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition for a hepatitis c viral protease inhibitor
WO2011014487A1 (en) 2009-07-30 2011-02-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis c virus ns3 protease inhibitors
AR077712A1 (es) 2009-08-05 2011-09-14 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores de serina proteasa macrociclica
WO2011019066A1 (ja) * 2009-08-10 2011-02-17 住友化学株式会社 光学活性な１－アミノ－２－ビニルシクロプロパンカルボン酸エステルの製造方法
US8324417B2 (en) 2009-08-19 2012-12-04 Virobay, Inc. Process for the preparation of (S)-2-amino-5-cyclopropyl-4,4-difluoropentanoic acid and alkyl esters and acid salts thereof
US8389560B2 (en) * 2009-09-15 2013-03-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. HCV protease inhibitors
CA2775697A1 (en) * 2009-09-28 2011-03-31 Intermune, Inc. Cyclic peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2011049908A2 (en) * 2009-10-19 2011-04-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bismacrokyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
KR20120106942A (ko) 2009-10-30 2012-09-27 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 Ｂｉ２０１３３５, 인터페론 알파 및 리바비린을 포함하는 ｈｃｖ 병용 치료요법을 위한 투여 용법
WO2011063076A1 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis c virus with oxoacetamide compounds
JP2013512247A (ja) 2009-11-25 2013-04-11 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド フラビウイルス感染症の治療または予防のための５−アルキニル−チオフェン−２−カルボン酸誘導体およびそれらの使用
MY159958A (en) 2009-12-18 2017-02-15 Idenix Pharmaceuticals Inc 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
EP2515902A1 (en) 2009-12-24 2012-10-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US20110178107A1 (en) * 2010-01-20 2011-07-21 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
AU2011209051B2 (en) 2010-01-27 2015-01-15 AB Pharma Ltd. Polyheterocyclic compounds highly potent as HCV inhibitors
US8530497B2 (en) 2010-03-11 2013-09-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Crystalline salts of a potent HCV inhibitor
CA2794145A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2550278A1 (en) 2010-03-24 2013-01-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2550268A1 (en) 2010-03-24 2013-01-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
TW201139438A (en) 2010-03-24 2011-11-16 Vertex Pharma Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
CN102858790A (zh) 2010-03-31 2013-01-02 吉利德制药有限责任公司 核苷氨基磷酸酯
EP2552203B1 (en) 2010-04-01 2017-03-22 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8877707B2 (en) 2010-05-24 2014-11-04 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of HCV NS5A
WO2011156545A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Viral dynamic model for hcv combination therapy
WO2011159826A2 (en) 2010-06-15 2011-12-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hcv ns5b protease mutants
WO2012006070A1 (en) 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2585448A1 (en) 2010-06-28 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
UY33473A (es) 2010-06-28 2012-01-31 Vertex Pharma Compuestos y métodos para el tratamiento o la prevencion de infecciones por flavivirus
AU2011292040A1 (en) 2010-08-17 2013-03-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of Flaviviridae viral infections
PE20140015A1 (es) 2010-09-21 2014-02-16 Enanta Pharm Inc Inhibidores de las proteasas de serina del vhc derivados de prolinas macrociclicas
KR20130116245A (ko) * 2010-09-30 2013-10-23 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 Ｈｃｖ 감염 치료용 병용 요법
BR112013008510A2 (pt) 2010-10-08 2016-07-05 Novartis Ag vitamina e formulações de inibidores de sulfamida ns3
PT3042910T (pt) 2010-11-30 2019-04-16 Gilead Pharmasset Llc 2'-espiro-nucleósidos para utilização na terapia da hepatite c
MX2013006951A (es) * 2010-12-16 2013-10-03 Abbvie Inc Compuestos antivirales.
MX2013007677A (es) 2010-12-30 2013-07-30 Abbvie Inc Inhibidores macrociclicos de serina proteasa de hepatitis.
AU2011352145A1 (en) 2010-12-30 2013-07-18 Abbvie Inc. Phenanthridine macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2012109398A1 (en) 2011-02-10 2012-08-16 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating hcv infections
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012123298A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
EP2691409B1 (en) 2011-03-31 2018-02-21 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2012171332A1 (zh) 2011-06-16 2012-12-20 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙型肝炎病毒的大环状杂环化合物及其制备和应用
JPWO2012176715A1 (ja) 2011-06-21 2015-02-23 三菱瓦斯化学株式会社 １−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸アミドおよびその塩、ならびにその製造方法
WO2012175581A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
CN102807607B (zh) * 2011-07-22 2013-10-23 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的稠环杂环类化合物、其中间体及其应用
WO2013016499A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for preparation of thiophene compounds
WO2013016492A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiophene compounds
DE202012012998U1 (de) 2011-08-31 2014-06-13 Daniel Elias Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels
US8951985B2 (en) 2011-09-12 2015-02-10 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
EP2755983B1 (en) 2011-09-12 2017-03-15 Idenix Pharmaceuticals LLC. Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
CN103917541B (zh) 2011-10-10 2016-08-17 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒化合物
US8507460B2 (en) 2011-10-14 2013-08-13 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3′,5′-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
EA201490836A1 (ru) 2011-10-21 2014-11-28 Эббви Инк. Комбинационное лечение (например, с abt-072 или abt-333) с помощью daa для применения при лечении hcv
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
GB2515941A (en) 2011-10-21 2015-01-07 Abbvie Inc Methods for treating HCV comprising at least two direct acting antiviral agent, ribavirin but not interferon
EP2780026B1 (en) 2011-11-15 2019-10-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
EP2785184B1 (en) 2011-11-30 2020-06-10 Emory University Compositions comprising jak inhibitors and haart drugs for use in the prevention or treatment of hiv
MX349036B (es) 2011-12-06 2017-07-07 Univ Leland Stanford Junior Metodos y composiciones para tratar enfermedades virales.
EP2791161B1 (en) 2011-12-16 2016-02-10 F.Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of hcv ns5a
DK2794628T3 (en) 2011-12-20 2017-07-10 Riboscience Llc 4'-AZIDO-3'-FLUORO-SUBSTITUTED NUCLEOSIDE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF HCV RNA REPLICATION
PT2794629T (pt) 2011-12-20 2017-07-20 Riboscience Llc Derivados de nucleósidos substituídos em 2¿-4¿-difluor-2¿-metilo, como inibidores da replicação do arn de vhc (vírus da hepatite c)
US20140356325A1 (en) 2012-01-12 2014-12-04 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Novel 2'-c-methyl nucleoside derivative compounds
KR20140109433A (ko) 2012-01-12 2014-09-15 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 강력한 hcv 억제제의 안정화된 약제학적 제형
WO2013133927A1 (en) 2012-02-13 2013-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions of 2'-c-methyl-guanosine, 5'-[2-[(3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)thio]ethyl n-(phenylmethyl)phosphoramidate]
RU2014137052A (ru) 2012-02-24 2016-04-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Противовирусные соединения
WO2013137869A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in an hcv-hiv coinfected patient population
WO2013142157A1 (en) 2012-03-22 2013-09-26 Alios Biopharma, Inc. Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog
WO2013147749A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient subgenotype populations
WO2013147750A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
US9296778B2 (en) 2012-05-22 2016-03-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphate prodrugs for HCV infection
AU2013266393B2 (en) 2012-05-22 2017-09-28 Idenix Pharmaceuticals Llc D-amino acid compounds for liver disease
EP2852604B1 (en) 2012-05-22 2017-04-12 Idenix Pharmaceuticals LLC 3',5'-cyclic phosphoramidate prodrugs for hcv infection
US20140010783A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Hoffmann-La Roche Inc. Antiviral compounds
ES2674980T3 (es) 2012-10-08 2018-07-05 Idenix Pharmaceuticals Llc Análogos de 2'-cloro nucleósidos para infección por VHC
MX360452B (es) 2012-10-19 2018-11-01 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores del virus de la hepatitis c.
EP2909223B1 (en) 2012-10-19 2017-03-22 Idenix Pharmaceuticals LLC Dinucleotide compounds for hcv infection
US10723754B2 (en) 2012-10-22 2020-07-28 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-bridged nucleosides for HCV infection
US9598433B2 (en) 2012-11-02 2017-03-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2014071007A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2014070974A1 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014078436A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
US20140140951A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-Alanine Ester of Rp-Nucleoside Analog
CN103804208B (zh) * 2012-11-14 2016-06-08 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种丙肝药物中间体的制备方法
EP2935304A1 (en) 2012-12-19 2015-10-28 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
KR20150109451A (ko) 2013-01-23 2015-10-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 항바이러스성 트라이아졸 유도체
WO2014121417A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014121418A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014134251A1 (en) 2013-02-28 2014-09-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions
US9309275B2 (en) 2013-03-04 2016-04-12 Idenix Pharmaceuticals Llc 3′-deoxy nucleosides for the treatment of HCV
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
US9428469B2 (en) 2013-03-05 2016-08-30 Hoffmann-La Roche Antiviral compounds
WO2014137869A1 (en) 2013-03-07 2014-09-12 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014138374A1 (en) 2013-03-08 2014-09-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
EA201591722A1 (ru) 2013-03-14 2016-02-29 Ачиллион Фармасьютикалз, Инк. Новые способы получения совапревира
WO2014165542A1 (en) 2013-04-01 2014-10-09 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
MY186547A (en) 2013-05-16 2021-07-26 Riboscience Llc 4?-fluoro-2?-methyl substituted nucleoside derivatives
US20180200280A1 (en) 2013-05-16 2018-07-19 Riboscience Llc 4'-Fluoro-2'-Methyl Substituted Nucleoside Derivatives as Inhibitors of HCV RNA Replication
MA38678A1 (fr) 2013-05-16 2017-07-31 Riboscience Llc Dérivés nucléosidiques 4'-azido, 3'désoxy-3'-fluoro substitués
US10005779B2 (en) 2013-06-05 2018-06-26 Idenix Pharmaceuticals Llc 1′,4′-thio nucleosides for the treatment of HCV
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
MX2016002185A (es) 2013-08-27 2016-06-06 Gilead Pharmasset Llc Formulacion combinada de dos compuestos antivirales.
US20160229866A1 (en) 2013-09-20 2016-08-11 Idenix Pharmaceuticals Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
EP3063165A1 (en) 2013-11-01 2016-09-07 Idenix Pharmaceuticals LLC D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
EP3074399A1 (en) 2013-11-27 2016-10-05 Idenix Pharmaceuticals LLC 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US9717797B2 (en) 2013-12-05 2017-08-01 International Business Machines Corporation Polycarbonates bearing aromatic N-heterocycles for drug delivery
WO2015095419A1 (en) 2013-12-18 2015-06-25 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-or nucleosides for the treatment of hcv
EP3089757A1 (en) 2014-01-03 2016-11-09 AbbVie Inc. Solid antiviral dosage forms
EP2899207A1 (en) 2014-01-28 2015-07-29 Amikana.Biologics New method for testing HCV protease inhibition
EP3114122A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
WO2015134780A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
WO2015134561A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
WO2015161137A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
CN109689063A (zh) 2016-04-28 2019-04-26 埃默里大学 含有炔烃的核苷酸和核苷治疗组合物及其相关用途
TW201919649A (zh) 2017-09-21 2019-06-01 美商里伯賽恩斯有限責任公司 作為ｈｃｖ ｒｎａ複製抑制劑之經４′－氟－２′－甲基取代之核苷衍生物
JP2022510407A (ja) 2018-12-04 2022-01-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 多重反応同位体分子種反応モニタリングによる、サンプル内検量線を用いた分析方法

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0475255A3 (en) * 1990-09-12 1993-04-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid
JPH05155827A (ja) * 1991-12-09 1993-06-22 Banyu Pharmaceut Co Ltd ｃｉｓ−２−アミノシクロプロパンカルボン酸誘導体の製造法
IT1272179B (it) 1994-02-23 1997-06-16 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodologia per riprodurre in vitro l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 del virus hcv.
CN1141591A (zh) * 1994-02-23 1997-01-29 布·安格莱荻公司分子生物学研究所 体外再生丙型肝炎病毒(hcv)ns3蛋白酶的解蛋白活性的方法
US5500208A (en) 1994-06-07 1996-03-19 The Procter & Gamble Company Oral compositions comprising a novel tripeptide
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
IT1277914B1 (it) * 1995-08-22 1997-11-12 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per produrre - in forma pura e in quantita' elevate - polipeptidi con l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 di hcv, e
CA2165996C (en) * 1995-12-22 2002-01-29 Murray Douglas Bailey Stereoselective preparation of 2-substituted succinic derivatives
DE19600034C2 (de) 1996-01-02 2003-12-24 Degussa 1,1,2-Trisubstituierte Cyclopropanverbindungen, Verfahren zu deren Herstellung und Dihydroxyethyl-substituierte 1-Amino-cyclopropan-1-carbonsäure
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
JP4080541B2 (ja) 1996-10-18 2008-04-23 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド セリンプロテアーゼ、特にｃ型肝炎ウイルスｎｓ３プロテアーゼの阻害因子
JP2002512625A (ja) 1997-05-29 2002-04-23 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としての複素環アミド化合物
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
ES2241157T3 (es) 1997-08-11 2005-10-16 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Peptidos inhibidores de la hepatitis c.
SE9704543D0 (sv) * 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
DE19835120C1 (de) * 1998-08-04 1999-10-21 Westfalia Separator Ag Verfahren und Vorrichtung zum Einstellen des Flüssigkeitsgehalts des aus einer selbstentleerenden Schleudertrommel eines Separators ausgetragenen Feststoffes
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6277830B1 (en) * 1998-10-16 2001-08-21 Schering Corporation 5′-amino acid esters of ribavirin and the use of same to treat hepatitis C with interferon
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
EP1601685A1 (en) * 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds
DE602004029866D1 (de) * 2003-03-05 2010-12-16 Boehringer Ingelheim Pharma Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c

Also Published As

Publication number Publication date
HUP0105144A3 (en) 2002-11-28
IN211493B (no) 2008-01-25
JP2002522554A (ja) 2002-07-23
IN2007MU00706A (no) 2007-07-20
ATE430158T1 (de) 2009-05-15
AR073428A2 (es) 2010-11-03
CN101143892A (zh) 2008-03-19
SA99200617A (ar) 2005-12-03
MY127538A (en) 2006-12-29
JP5021711B2 (ja) 2012-09-12
PT1105413E (pt) 2009-06-30
CA2338946C (en) 2010-10-12
KR100631439B1 (ko) 2006-10-09
EA200100228A1 (ru) 2001-10-22
US6329379B1 (en) 2001-12-11
PT2028186E (pt) 2013-03-27
HUP0105144A2 (hu) 2002-04-29
KR20010085363A (ko) 2001-09-07
MX257413B (es) 2008-05-27
USRE42164E1 (en) 2011-02-22
CY1109291T1 (el) 2014-07-02
ES2405930T3 (es) 2013-06-04
PL204850B1 (pl) 2010-02-26
YU9401A (sh) 2003-02-28
KR100672229B1 (ko) 2007-02-28
NZ510396A (en) 2004-02-27
US6420380B2 (en) 2002-07-16
DK1105413T3 (da) 2009-08-17
AU5273199A (en) 2000-03-06
JP2010043124A (ja) 2010-02-25
IL196545A (en) 2012-06-28
HUP1300080A2 (no) 2002-04-29
CZ301268B6 (cs) 2009-12-30
EP2028186A3 (en) 2009-04-01
IN2001MU00127A (no) 2005-03-04
KR20060083992A (ko) 2006-07-21
BR9913646B1 (pt) 2014-12-02
US6329417B1 (en) 2001-12-11
US6323180B1 (en) 2001-11-27
MXPA01001423A (es) 2001-08-01
CA2445938A1 (en) 2000-02-24
US6534523B1 (en) 2003-03-18
BR9917805B1 (pt) 2014-06-17
US6268207B1 (en) 2001-07-31
EP1105413A2 (en) 2001-06-13
EA003906B1 (ru) 2003-10-30
CZ2001516A3 (cs) 2001-08-15
RS53562B1 (sr) 2015-02-27
AR020880A1 (es) 2002-06-05
HU229262B1 (en) 2013-10-28
UA75026C2 (en) 2006-03-15
PE20000949A1 (es) 2000-09-26
CO5261542A1 (es) 2003-03-31
US20020016442A1 (en) 2002-02-07
US6410531B1 (en) 2002-06-25
CY1113935T1 (el) 2016-07-27
EE05517B1 (et) 2012-02-15
CA2445938C (en) 2012-10-30
ID27839A (id) 2001-04-26
RS50798B (sr) 2010-08-31
HRP20010102A2 (en) 2002-02-28
IL141012A0 (en) 2002-02-10
AU769738B2 (en) 2004-02-05
CA2338946A1 (en) 2000-02-24
DE69940817D1 (en) 2009-06-10
TR200200129T2 (tr) 2002-06-21
BG65738B1 (bg) 2009-09-30
CN1323316A (zh) 2001-11-21
JP4485685B2 (ja) 2010-06-23
WO2000009543A2 (en) 2000-02-24
NO336663B1 (no) 2015-10-12
PL346626A1 (en) 2002-02-25
NO20010683D0 (no) 2001-02-09
TR200100432T2 (tr) 2001-09-21
TWI250165B (en) 2006-03-01
RS20090459A (en) 2010-06-30
USRE41894E1 (en) 2010-10-26
IL141012A (en) 2009-09-01
NO20100004L (no) 2001-04-02
SK2062001A3 (en) 2001-10-08
ES2326707T3 (es) 2009-10-16
USRE41356E1 (en) 2010-05-25
EP2028186A2 (en) 2009-02-25
EP2028186B1 (en) 2013-01-23
SA99200617B1 (ar) 2006-06-24
HK1040085B (zh) 2008-05-30
WO2000009543A3 (en) 2000-05-25
HK1113164A1 (en) 2008-09-26
HK1040085A1 (en) 2002-05-24
HRP20010102B1 (en) 2010-07-31
EE200100081A (et) 2002-08-15
CZ302766B6 (cs) 2011-10-26
USRE40525E1 (en) 2008-09-30
SI1105413T1 (sl) 2009-10-31
BG105232A (en) 2001-11-30
AR069583A2 (es) 2010-02-03
SI2028186T1 (sl) 2013-06-28
MX261584B (es) 2008-10-22
US20020037998A1 (en) 2002-03-28
EP1105413B1 (en) 2009-04-29
ZA200100971B (en) 2002-06-26
HU230701B1 (hu) 2017-10-30
SK288068B6 (sk) 2013-05-03
ME00381B (me) 2011-10-10
SK286994B6 (sk) 2009-09-07
CN100339389C (zh) 2007-09-26
MEP58508A (en) 2011-05-10
CN101143892B (zh) 2010-12-08
BR9913646A (pt) 2001-06-05
IL196545A0 (en) 2011-07-31
BRPI9913646B8 (pt) 2021-05-25
PH11999002002B1 (en) 2007-10-19
DK2028186T3 (da) 2013-03-25
NO20010683L (no) 2001-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6534523B1 (en) Hepatitis C inhibitor tri-peptides
KR100629791B1 (ko) Ｃ형 간염 억제제 펩타이드, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
CA2370396A1 (en) Hepatitis c inhibitor tri-peptides
MXPA01001422A (en) Hepatitis c inhibitor peptides

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired