CN103917541B - 抗病毒化合物 - Google Patents

抗病毒化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN103917541B
CN103917541B CN201280040554.3A CN201280040554A CN103917541B CN 103917541 B CN103917541 B CN 103917541B CN 201280040554 A CN201280040554 A CN 201280040554A CN 103917541 B CN103917541 B CN 103917541B
Authority
CN
China
Prior art keywords
base
compound
diaza
acid
octahydro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201280040554.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103917541A (zh
Inventor
J·A·布林克曼
H·李
R·萨拉布
S-S·苏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN103917541A publication Critical patent/CN103917541A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103917541B publication Critical patent/CN103917541B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F16—ENGINEERING ELEMENTS AND UNITS; GENERAL MEASURES FOR PRODUCING AND MAINTAINING EFFECTIVE FUNCTIONING OF MACHINES OR INSTALLATIONS; THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L—PIPES; JOINTS OR FITTINGS FOR PIPES; SUPPORTS FOR PIPES, CABLES OR PROTECTIVE TUBING; MEANS FOR THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L3/00—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets
    • F16L3/26—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets specially adapted for supporting the pipes all along their length, e.g. pipe channels or ducts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Clamps And Clips (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明公开了式I和II化合物，在式I和II中，各变量如本文所定义。本发明也公开了含有此类化合物的药用组合物以及在HCV感染的治疗中使用式I和II化合物的方法。

Description

抗病毒化合物
本发明提供了作为丙型肝炎病毒(HCV)抑制剂、HCV复制抑制剂的非核苷类式I或II化合物，这些化合物可以用于丙型肝炎感染。
丙型肝炎病毒(HCV)感染是在相当数量的感染个体中导致慢性肝病(例如肝硬化和肝细胞癌)的严重的健康问题。目前对于HCV感染的治疗包括单独使用重组干扰素-α或者与核苷类似物利巴韦林组合使用的免疫疗法。
几种病毒编码的酶是介入治疗的公认靶点，包括金属蛋白酶(NS2-3)、丝氨酸蛋白酶(NS3，氨基酸残基1-180)、解旋酶(NS3，全长)、NS3蛋白酶辅因子(NS4A)、膜蛋白(NS4B)、锌金属蛋白酶(NS5A)和RNA-依赖性RNA聚合酶(NS5B)。
用于介入治疗的一个被认定的靶点是HCV NS5A非结构蛋白。非结构蛋白NS5A是病毒复制和装配的重要组成部分。在已知的磷酸化位点或在该位点附近的NS5A的突变能够影响细胞培养系统中高水平复制的能力，这表明了NS5A磷酸化在病毒复制效率中的重要作用。NS5A的磷酸化的抑制剂可导致病毒RNA复制的减少。
开发治疗ＨＣＶ感染的有效疗法是人们明确和长期的需要。具体地讲，有必要开发用于治疗ＨＣＶ感染患者的化合物以及能够选择性抑制ＨＣＶ病毒复制的化合物。
本申请提供了式I或II化合物或其可药用的盐：
其中：
X为低级烷基；
每个R为低级烷基或苄基；
每个R’为低级烷基；
B和D独立选自下列基团：
Q1和Q2独立为H或F；
或者Q1和Q2一起形成杂环烷基；并且
L为
本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给予需要的患者治疗有效量的式I或II化合物。
本申请提供了包含式I或II化合物和可药用赋形剂的组合物。
本文中使用的术语“一个”实体或部分是指一或多个实体或部分；例如一个化合物是指一或多个化合物或者至少一个化合物。因此，术语“一个”、“一或多个”和“至少一个”在本文中可以互换使用。
术语“如上文所定义的”是指本发明概述部分所提供的每个基团的最广义的定义或者最广义的权利要求。在下面提供的所有其它实施方案中，在每个实施方案中出现的没有明确定义的取代基保留在本发明概述部分提供的最广义的定义。
在本说明书中使用的，无论是在过渡性短语(transitional phase)中或者是在权利要求中，术语“含有”和“包含”应当理解为具有开放性的意义。也就是说，该术语应当理解为与短语“至少具有”或“至少包含”具有相同的意义。当在工艺方法中使用时，术语“包含”是指该工艺方法至少包括所述的步骤，但是也可以包括其它步骤。当在化合物或组合物中使用时，术语“包含”是指所述化合物或组合物至少包括所述的特征或组成，但是也可以包括其它的特征或组成。
除非另有其它明确说明，本文中使用的词语“或”以“和/或”的“包含性”意义使用而并非“任一个／或”的“排他性”意义。
术语“独立的”在本文中用来表示一个变量被用于任何一种情况，而不考虑其在相同化合物中的具有相同或不同定义的变量是否存在。因此在其中R"出现两次并且被定义为“独立为碳或氮”的化合物中，两个R"可以均为碳，两个R"可以均为氮，或者一个R"可以为碳并且另一个为氮。
当任何变量在任何描绘和表述本发明使用的或要求保护的部分或结构式中出现一次以上时，其在每次出现时的定义独立于其在每个其它情况下的定义。同样，只有当在此类化合物会产生稳定的化合物时，取代基和/或变量的组合才是允许的。
在一个键末端的符号“*”或通过一个键所绘画的“------”均是指官能团或其它化学部分与作为其中一部分的该分子的其它部分的连接点。因此，
MeC(=O)OR4其中
例如：
绘画进环系中的键(并非连接在明确的顶点)是指该键可以与任何适当的环原子连接。
本文中使用的术语“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以但不是必须发生，该描述包括其中事件或情况发生的实例和它不发生的实例。例如，“任选取代的”是指任选取代的部分可以包括氢原子或取代基。
短语“任选的键”是指该键可以存在或可以不存在，该描述包括单键、双键或三键。如果取代基被指定为是“键”或“不存在”，则连接到该取代基中的原子直接相连。
本文中使用的术语“大约”是指近似地、在该范围中、粗略地或附近。当术语“大约”与一个数值范围一起使用时，通过扩展所列出的数值界限的上下端可改变该范围。通常，术语“大约”在本文中用于改变所述值的上下限的范围在20%。
某些化合物可能表现出互变异构现象。互变异构化合物可以存在两种或更多种可以相互转化的类型。质子转移互变异构体由两个原子之间的共价键合的氢原子的迁移而产生。互变异构体通常保持着平衡状态并且试图分离单一互变异构体的努力通常得到化学和物理性质与化合物的混合物一致的混合物。平衡的位置取决于分子内的化学特征。例如，在多种脂族醛和酮中，例如在乙醛中，酮形式占优势，而在酚类中，烯醇形式占优势。常见的质子转移互变异构体包括酮/烯醇酰胺/亚氨酸和脒互变异构体。后两个在杂芳基和杂环中特别常见，本发明包含化合物的所有互变异构形式。
除非另外定义，本文所用的技术和科学术语具有与本发明相关的领域中技术人员所通常理解的含义。本文可以参考本领域技术人员公知的各种方法和材料。列举药理学一般原则的标准参考著作包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis ofTherapeutics(治疗学的药理学基础),第10版,McGraw Hill Companies Inc.,纽约，(2001)。技术人员公知的任何适当的材料和/或方法均可以用于实施本发明。然而，描述了优选的材料和方法。除非另有说明，在下面描述和实施例中涉及的材料、试剂等 均可以获自商业。
本文中描述的定义可以增补以形成化学相关的组合，例如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”用作下面另一个术语的后缀时，例如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，它应当是指如上文所定义的烷基被一或两个选自其它具体名称的基团的取代基所取代。因此，例如，“苯基烷基”是指具有1－2个苯基取代基的烷基，因此包括苄基、苯基乙基和联苯基。“烷基氨基烷基”是具有1－2个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基”包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，本文中使用的术语“羟基烷基”用于定义下面所定义的杂烷基亚类。术语“-(芳)烷基”是指未取代的烷基或芳烷基。术语(杂)芳基是指芳基或杂芳基。
本文中使用的术语“螺环烷基”是指螺环环烷基，例如螺[3.3]庚烷。本文中使用的术语螺杂环烷基是指螺环杂环烷基，例如2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷。
本文中术语的术语“酰基”代表式-C(=O)R基团，其中R为氢或本文所定义的低级烷基。本文中使用的术语“烷基羰基”代表式C(=O)R基团，其中R为本文所定义的烷基。术语C1-6酰基是指含有6个碳原子的基团-C(=O)R。本文中使用的术语“芳基羰基”是指式C(=O)R基团，其中R为芳基；本文中使用的术语“苯甲酰基”指“芳基羰基”基团，其中R为苯基。
本文中使用的术语“酯”代表式-C(=O)OR基团，其中R为本文所定义的低级烷基。
本文中使用的术语“烷基”代表含有1－10个碳原子的非支链或支链、饱和的、单价烃基。术语“低级烷基”代表含有1－6个碳原子的直链或支链烃基。本文中使用的“C1-10烷基”是指由1－10个碳组成的烷基。烷基的实例包括但不限于低级烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正-丁基、异丁基、叔-丁基或戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。
当术语“烷基”用作另一个术语的后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，它应当是指如上文所定义的烷基被1－2个选自其它具体名称的基 团的取代基所取代。因此，例如“苯基烷基”代表基团R'R"-，其中R'为苯基，R"为本文所定义的亚烷基，应当理解苯基烷基部分的连接点在亚烷基上。芳基烷基包括但不限于苄基、苯基乙基、3-苯基丙基。术语“芳基烷基”或“芳烷基”具有同样的意义，但是R'为芳基。术语“(杂)芳基烷基”或“(杂)芳烷基”具有同样的意义，但是R'任选为芳基或杂芳基。
术语“卤代烷基”或“卤代-低级烷基”或“低级卤代烷基”是指含有1－6个碳原子的直链或支链烃基，其中一或多个碳原子被一或多个卤素原子取代。
除非另有说明，本文中使用的术语“亚烷基”代表1－10个碳原子的二价饱和线性烃基(例如(CH2)n)或2－10个碳原子的支链饱和的二价烃基(例如，-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。除了在亚甲基的情况下，亚烷基的开放价键不连接在相同的原子上。亚烷基的实例包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基、2-乙基亚丁基。
本文中使用的术语“烷氧基”是指-O-烷基基团，其中烷基如上文所定义，例如甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙氧基、正-丁氧基、异丁基氧基、叔-丁氧基、戊氧基、己氧基，包括其异构体。本文中使用的“低级烷氧基”代表携有前面所定义的“低级烷基”的烷氧基。本文中使用的“C1-10烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基为C1-10烷基。
术语“PCy3”是指被三个环部分三取代的膦。
术语“卤代烷氧基”或“卤代-低级烷氧基”或“低级卤代烷氧基”是指其中一或多个碳原子被一或多个卤素原子取代的低级烷氧基。
本文中使用的术语“羟基烷基”代表其中不同碳原子上的1－3个氢原子被羟基取代的本文所定义的烷基。
本文中使用的术语“烷基磺酰基”和“芳基磺酰基”是指式-S(=O)2R基团，其中R分别为烷基或芳基，烷基和芳基如本文所定义。本文中使用的术语“杂烷基磺酰基”代表式-S(=O)2R基团，其中R为本文所定义的“杂烷基”。
本文中使用的术语“烷基磺酰基氨基”和“芳基磺酰基氨基”是指式-NR'S(=O)2R基团，其中R分别为烷基或芳基，R'为氢或C1-3烷基，烷基和芳基如本文所定义。
本文中使用的术语“环烷基”是指含有3－8个碳原子的饱和的碳环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。本文中使用的“C3-7环烷基”是指由在碳环中3－7个碳原子组成的环烷基。
本文中使用的术语“羧基-烷基”是指其中一个氢原子被羧基取代的烷基部分，可以理解杂烷基的连接点通过碳原子。术语“羧基”是指–CO2H部分。
本文中使用的术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有5－12个环原子的单环或双环基团，它具有至少一个芳族环或部分不饱和的环，每个环含有4－8个原子并具有一或多个N、O或S杂原子，其余的环原子为碳原子，可以理解杂芳基的连接点位于芳族环或部分不饱和的环上。如本领域技术人员所公知，杂芳基环较其全碳对应环相比具有较少的芳族特性。因此，在本发明中，杂芳基不需要具有相同程度的芳族特性。杂芳基部分的实例包括具有5－6个环原子和1－3个杂原子的单环芳族杂环，包括但不限于吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、4,5-二氢-唑基、5,6-二氢-4H-[1,3]唑基、异唑、噻唑、异噻唑、三唑啉、噻二唑和二唑啉(oxadiaxoline)，它们可以任选被一或多个(优选1或2个)选自下列的取代基取代：羟基、氰基、烷基、烷氧基、硫代、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤代、低级卤代烷基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基、硝基、烷氧基羰基和氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基、二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、烷基羰基氨基和芳基羰基氨基。双环部分的实例包括但不限于喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并唑、苯并异唑、苯并噻唑、萘啶基、5,6,7,8-四氢-[1,6]萘啶基和苯并异噻唑。双环部分可以任选在任一环上被取代，但是连接点位于含有杂原子的环上。
本文中使用的术语“杂环基”、“杂环烷基”或“杂环”是指由一或多个环(优选1－2个环)组成的单价饱和的环基团，包括螺环环系，其每个环中含有3－8个原子并具有一或多个环杂原子(选自N、O或S(O)0-2)，除非另有说明，所述环可以任选被一或多个(优选1或2个)选自下列的取代基独立取代：羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤代、低级卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基及其离子形式。杂环的基团的实例包括但不限于吗啉基、哌嗪基、哌啶基、氮杂环丁基、吡咯烷基、六氢氮杂基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、唑烷基、噻唑烷基、异唑烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基及其离子形式。实例也可以是双环，例如3,8-二氮杂-双环并[3.2.1]辛烷、2,5-二氮杂-双环并[2.2.2]辛烷或八氢-吡嗪并[2,1-c][1,4]嗪。
本申请提供了式I或II化合物或其可药用的盐：
其中:
X为低级烷基；
每个R独立为低级烷基或苄基；
每个R’为低级烷基；
B和D独立选自下列基团：
Q1和Q2独立为H或F；
或者Q1和Q2一起形成杂环烷基；并且
L为
本申请提供了式I化合物，其中X为异丙基。
本申请提供了式I化合物，其中R’为甲基。
本申请提供了式I化合物，其中R’为甲基且X为异丙基。
本申请提供了式I或II化合物，其中R为甲基。
本申请提供了式I或II化合物，其中R为苄基。
本申请提供了式II化合物，其中每个R为甲基。
本申请提供了式I或II化合物，其中B为
本申请提供了式I或II化合物，其中D为
本申请提供了式I或II化合物，其中L为
本申请提供了式I或II化合物，其中L为
本申请提供了式I或II化合物，其中L为
本申请提供了式I或II化合物，其中L为
本申请提供了选自下列的化合物：
[(4S,7S)-4-(5-{4'-[2-((1S,9S)-9-[(甲氧基羰基)氨基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-基)-3H-咪唑-4-基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-苯基)-1H-苯并咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸苄基酯；
((4S,7S)-4-{5-[4-(6-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-喹喔啉-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基)-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-4,4-二氟-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[2-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂-螺[4.5]癸-3-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；和
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯。
本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给予需要的患者治疗有效量的式I或II化合物。
本申请提供了上述方法，该方法还包括给予免疫系统调节剂或抑制HCV复制的抗病毒药物或其组合。
本申请提供了上述方法，其中所述免疫系统调节剂为干扰素或化学衍生化的干扰素。
本申请提供了上述方法，其中所述抗病毒药物选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV引发酶抑制剂、HCV融合抑制剂及其组合。
本申请提供了在细胞中抑制HCV复制的方法，该方法包括给予式I或II化合物。
本申请提供了组合物，它包含式I或II化合物和可药用的赋形剂。
本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给予需要的患者治疗有效量的式I或II化合物。
本申请提供了上述方法，它还包括给予免疫系统调节剂或抑制HCV复制的抗病毒药物或其组合。
本申请提供了上述方法，其中所述免疫系统调节剂为干扰素或化学衍生化的干扰素。
本申请提供了上述方法，其中所述抗病毒药物选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV引发酶抑制剂、HCV融合抑制剂及其组合。
本申请提供了在细胞中抑制HCV复制的方法，该方法包括给予式I或II化合物。
本申请提供了包含式I或II化合物和可药用的赋形剂的组合物。
本申请提供了式I或II化合物在制备用于治疗HCV的药物中的用途。
本申请提供了如本文所述的任何化合物、组合物、方法或用途。
本发明所包含的并且在本发明范围内的代表性化合物的示例如下面表中所示。下面所提供的这些实施例和制备方法能够使得本领域技术人员更好地理解和实施本发明。它们不应当被认为是对本发明的范围的限定，仅仅是看作说明性的和代表性的。
通常而言，本申请中使用的命名法基于AUTONOMTM v.4.0，它是用于产生IUPAC系统命名法的Beilstein Institute计算机系统。如果绘画的结构和该结构给出的名称不相符时，则以绘画的结构为准。另外，如果一个结构或部分结构的立体化学没有采用例如粗体或虚线标明，则该结构或部分结构应当包含其所有的立体异构体。
表I描述了通式I或II化合物的示例：
表I
合成
通用流程
下面的流程描述了获得式I’－II’化合物的通用方法：
下面的流程描述了获得式I化合物的通用方法。
式I’化合物，其中B和D为氯代咪唑，L独立为芳基或喹啉基、萘基、喹唑啉基或喹喔啉(quinaxolinyl)，1可以采用下面文献中描述的咪唑衍生物氯化反应的标准反应条件制备自相应的咪唑2：例如Journal of Medicinal Chemistry(1986)，29(6)，1065—80；Journal of the Chemical Society，Perkin Transactions1：Organic和Bio-OrganicChemistry(1972-1999)(1983)(4)，809-11；Eur.Pat.Appl.(1990)EP 365030 A119900425； Journal of Heterocyclic Chemistry(1994),31(5),1121－3；PCT Int.Appl.(2007),WO2007070433。(流程1)
流程2
如流程2所示，相应于2的咪唑可以通过乙酸铵与酮-酰胺中间体3的反应而形成，该反应采用下面文献中所述的标准反应条件：例如Journal of Organic Chemistry(1937),2,319－27；Synlett(2001),(2),218－221。
流程3
采用酰胺偶合反应的标准方法，通式3的酮-酰胺化合物可以制备自相应的羧酸5和式4的胺。(流程3)
流程4
通过氢化反应，式4的氨基-酮酰胺可以制备自相应的苄氧基(bezyloxy)羰基(Z)保护的胺衍生物6。采用标准酰胺合成方法，通过羧酸衍生物7和差异保护的双-胺衍生物8的偶合反应，制备式6化合物。(流程4)
流程5
采用标准的BOC基团的去保护方法，通过BOC保护基团的选择性除去，式8化合物可以制备自差异保护的双-胺衍生物9。式9化合物又可以通过多种方法制备，包括例如流程5中所示的方法。在该方法中，芳基溴化衍生物11可以与硼酸酯衍生物10在Pd0–偶合反应条件下进行偶合反应，获得式9化合物。硼酸酯10和溴代芳基衍生物9可以通过报道的方法制备自相应的溴代-芳基苯乙酮原料。参见例如(BMS专利)。
通过将原料13转化为衍生物12，然后通过标准氨基甲酸酯形成反应，将其转化形成式5化合物，则式5化合物可以可以制备自原料13(Attwood,M.R等,Journal of theChemical Society,Perkin Transactions1:Organic and Bio-Organic Chemistry(1972－1999)1986,1011－19)。(流程6)
流程6
式7化合物可以通过采用获自商业的脯氨酸衍生物(例如H-Pro-OMe或3,3-二氟-Pro-OH)作为原料制备，采用标准酰胺偶合反应方法将其与各种氨基酸衍生物进行偶合反应。
式I’化合物(其中E为苯并咪唑部分)可以根据下面所示的反应顺序制备(流程7)。
流程7
LG(离去基团)＝OSO2CF3或Cl/Br/I
M＝B(OR)2
式16化合物可以与式15化合物通过标准Pd0-偶合方法进行偶合反应，获得目标化合物式14或Ib。式15化合物可以容易地通过流程8中所示反应流程制备。
剂量和给药：
本发明化合物可以用多种口服给药剂型和载体配制。口服给药可以为片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂或混悬液剂。当通过其它途径给药时，本发明化合物也是有效的，在其它给药途径中，所述给药包括持续的(静脉内滴注)局部肠胃外给药、肌肉内给药、静脉内给药、皮下给药、透皮给药(可以含有渗透促进剂)、颊腔内给 药、鼻腔给药、吸入给药和栓剂给药。优选的给药方法通常为采用常规日剂量方案的口服给药，该方案可以根据患病严重程度以及患者对活性成分的响应而调节。
本发明化合物及其可药用的盐以及一或多种常规赋形剂、载体或稀释剂可以制成药用组合物和单位剂量形式。药用组合物和单位剂型可以含有常规比例的常用成分，可以有或无其它活性化合物或成分，所述单位剂型可以含有任何适当的有效量的活性成分，其与采用的预期日剂量范围相当。药用组合物可以以固体(例如片剂或填充胶囊)、半固体、散剂、缓释制剂或液体(例如溶液剂、混悬液剂、乳剂、酏剂)或填充胶囊的形式口服使用；或以栓剂的形式用于直肠或阴道给药；或者以无菌注射溶液的形式用于胃肠外给药。典型制剂含有约5%至约95%的活性化合物(w/w)。术语“制剂”或“剂型”应当包括活性化合物的固体和液体制剂，本领域技术人员应当理解，活性成分可以根据目标器官或组织以及预期的剂量和药动学参数而存在于不同的制剂中。
本文中使用的术语“赋形剂”是指用于制备药用组合物的化合物，通常为安全无毒的并且不是生物学或其它方面所不期望的，包括兽用可接受的以及人类药用可接受的赋形剂。本发明的化合物可以单独给药，但通常可以与一或多种适当的药用赋形剂、稀释剂或载体一起混合后给药，所述赋形剂、稀释剂或载体可以根据预期的给药途径和标准制药实践而进行选择。
“可药用的”是指可以用于制备药用组合物的，通常为安全无毒的并且不是生物学或其它方面所不期望的，包括兽用可接受的以及人类药用可接受的。
活性成分的“可药用的盐”形式也可以在最初就赋予活性成分期望的药动学特性，该特性是其非盐形式所不具备的，它甚至可以对该活性成分与其体内治疗活性相关的药效学方面产生积极的影响。术语化合物的“可药用的盐”是指其为药学上可接受的盐，它具有母体化合物的期望的药理学性质。此类盐包括：(1)与无机酸形成的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成酸加成盐，所述酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来 酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环并[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘糠酸等；或(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子取代时形成的盐，所述离子如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱结合形成的盐，例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
固体形式制剂包括散剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散的颗粒剂。固体载体可以是一或多种物质，它们也可以作为稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或囊材。在散剂中，载体通常为微粉化的固体，它是与微粉化的活性成分的混合物。在片剂中，活性成分通常与具有必需粘性的载体以适当的比例混合，压制成期望的形状和大小。适当的载体包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、蔗糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可油等。固体形式的制剂除了活性成分外还可以含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
液体制剂也适合于口服给药，包括乳剂、糖浆剂、酏剂、水溶液、水性悬浮液。此类制剂包括可以在即将使用前转化为液体形式制剂的固体形式制剂。乳剂可以制备为溶液，例如丙二醇水溶液，或者可以含有乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶。水溶液可以通过将活性成分溶于水中并加入适当的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂而制备。水性混悬液可以通过将微粉化活性成分分散在含有粘性材料的水中而制备，所述材料例如天然或合成的胶类、树脂类、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它公知的助悬剂。
本发明化合物可以制成肠胃外给药的制剂(例如通过注射给药，例如推注或输液)，可以是在安瓿、预填充注射器、小容量输液或含有添加防腐剂的多剂量容器中的单位剂量形式。组合物可以采用例如在油性或水性载体 中的混悬液、溶液或乳液形式，例如聚乙二醇水溶液。油性或非水性载体、稀释剂、溶剂或载体的示例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和注射用有机酯(例如油酸乙酯)，可以含有配方成分，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂或助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为粉末形式，通过无菌固体的无菌离析获得，或者通过溶液的冷冻干燥获得，在使用前采用适当的载体(例如无菌、无热原水)重构。
本发明化合物可以制成软膏、霜剂或洗剂或透皮贴剂局部给药于表皮。软膏和霜剂可以例如采用水性或油性基质制备，可以添加适当的增稠剂和/或凝胶剂。洗剂可以采用水性或油性基质制备，通常也可以含有一或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、增稠剂或着色剂。适合于口腔局部给药的制剂包括：含有活性成分以及矫味基质(通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)的锭剂；含有活性成分以及惰性基质(例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)的糖锭剂；含有活性成分以及适当的液体载体的漱口剂。
本发明化合物可以制成作为栓剂给药的剂型。首先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯或可可油)熔融，然后将活性成分通过例如搅拌均匀分散。然后将熔融的均匀混合物倒入适当大小的模具中，将其冷却并固化。
本发明化合物可以制成阴道给药剂型。除了含有活性成分外，适当的阴道栓、棉条、霜剂、凝胶、糊剂、泡棉或喷雾剂中的载体在本领域中也是公知的。
本发明化合物可以制成鼻用给药制剂。将溶液剂或混悬液剂通过常规方法直接用于鼻腔，例如采用滴管、吸管或喷雾器使用。该制剂可以为单剂量或多剂量形式。在使用滴管或吸管的情况下，可以由患者给予适当的、预定体积的溶液或混悬液完成给药。在喷雾器的情况下，可以通过例如定量雾化喷雾泵完成给药。
本发明化合物可以制成气溶胶给药的形式，特别是给予呼吸道，包括鼻内给药形式。化合物通常为小粒子，例如5微米或更小的量级。此类粒子可以通过本领域中已知的方法获得，例如通过微粉化的方法获得。活性成分可以通过含有适当的抛射剂的加压容器提供，所述抛射剂例如氯氟碳类(CFC)，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷或二氧化碳 或其它适当的气体。气溶胶也可以适当地含有表面活性剂，例如卵磷脂。药物的剂量可以通过定量阀控制。或者，活性成分可以以干粉的形式提供，例如化合物在适当的粉末基质中的粉末混合物，所述基质例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物例如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷(PVP)。粉末载体可以在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以为单剂量形式，例如在如明胶的胶囊或短囊中，或者通过一次吸入完成粉末给药的水泡眼包装形式。
当需要时，制剂可以采用肠包衣制备，以便于活性成分的缓释或控释给药。例如，本发明化合物可以制成透皮或皮下传递装置。当化合物的缓释是必须的或者当患者对治疗方案的顺应性是至关重要的情况下，最好采用此类传递系统。透皮传递系统中的化合物通常附着于皮肤-粘附固体载体上。相关化合物也可以与渗透促进剂组合，例如氮酮(1-十二烷氮杂-环庚-2-酮)。缓释传递系统通过手术或注射皮下植入皮下层。皮下埋植物将化合物包埋在脂溶性膜(例如硅酮橡胶)或生物可降解聚合物(例如聚乳酸)中。
适当的制剂以及可药用的载体、稀释剂和赋形剂描述于Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy(雷明顿药物科学与实践)1995,由E.W.Martin编著,MackPublishing Company,第19版,Easton,Pennsylvania。有经验的制剂科学家可以在不违背说明书原则的情况下改进所述制剂以获得适合于特定给药途径的多种制剂而不会使得本发明的组合物不稳定或降低其治疗活性。
通过小幅度的改性(成盐、酯化等)可以容易地完成对本发明化合物的修饰，使其在水中或其它载体中更易溶解，这是本领域技术人员众所周知的。本领域技术人员同样公知的是，通过改变特定化合物的给药途径和剂量方案从而可以对本发明化合物的药动学进行调节以便于患者获得最佳有益作用。
本文中使用的术语“治疗有效量”是指为了减轻个体疾病症状所需要的量。在每个具体病例中，剂量可以根据个体的要求进行调节。该剂量可以根据多种因素在较大的范围内变化，所述因素例如待治疗疾病的严重程度、患者的年龄和一般健康情况、患者治疗所采用的其它药物、给药的途径和方法以及相关执业医师的偏好和经验。对于口服给药而言，在单一治疗和/ 或组合治疗中，日剂量在约0.01至约1000mg/kg体重之间应当是适当的。优选的日剂量在约0.1至约500mg/kg体重，更优选0.1至约100mg/kg体重，最优选1.0至约10mg/kg体重。因此，对于70kg的人的给药而言，剂量范围在每天约7mg至0.7g。该日剂量可以以单剂量或分剂量给药，通常在约每天1至5个剂量之间。通常，起始治疗采用小于化合物最佳剂量的较小的剂量。此后，剂量以较小的增量逐渐增加直到达到个体患者的最佳疗效。技术人员在治疗本文所述疾病时无需过度实验并根据自己的知识、经验和本申请公开即能够确定特定疾病和患者所需要的本发明化合物的治疗有效量。
药用制剂优选为单位剂量形式。在此类剂型中，该制剂被细分为含有适当量的活性成分的单位剂量。单位剂量形式可以为包装的制剂，含有独立的量的制剂的包装，例如包装在小瓶或安瓿中的片剂、胶囊和散剂。同样，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊或锭剂，或者它可以是适当数量的任何包装形式。
适应症和治疗方法
适应症
本发明化合物及其同分异构形式和可药用的盐可以用于治疗和预防HCV感染。
本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给予需要的患者治疗有效量的式I或II化合物。
本申请提供了抑制细胞中HCV复制的方法，该方法包括给予式I或II化合物。
组合疗法
本发明化合物及其同分异构形式和可药用的盐可以单独用于治疗和预防HCV感染，或者与其它靶向与HCV生命周期相关的病毒或细胞成分或功能的化合物组合使用。本发明中使用的化合物的种类包括但不限于所有种类的HCV抗病毒药物。
对于组合疗法而言，与本发明化合物组合使用的药物的专业类别包括例如：HCV聚合酶的核苷和非核苷抑制剂、蛋白酶抑制剂、解旋酶抑制剂、 NS4B抑制剂以及功能性抑制核糖体内部进入位点(IRES)的药物成分和具有下列作用的其它药物：抑制HCV细胞附着或病毒进入、HCV RNA转译、HCV RNA转录、复制或HCV成熟、装配或病毒释放。这些类别中的本发明中使用的特定化合物包括但不限于大环、杂环和线性HCV蛋白酶抑制剂，例如特拉匹韦(VX-950)、波西匹韦(SCH-503034)、那拉匹韦(narlaprevir)(SCH-900518)、ITMN-191(R-7227)、TMC-435350(a.k.a.TMC-435)、MK-7009、BI-201335、BI-2061(西鲁瑞韦(ciluprevir))、BMS-650032、ACH-1625、ACH-1095(HCV NS4A蛋白酶辅助因子抑制剂)、VX-500、VX-813、PHX-1766、PHX2054、IDX-136、IDX-316、ABT-450EP-013420(和congeners)和VBY-376；本发明使用的核苷HCV聚合酶(复制酶)包括但不限于R7128、PSI-7851、IDX-184、IDX-102、R1479、UNX-08189、PSI-6130、PSI-938和PSI-879；各种其它核苷和核苷类似物以及HCV抑制剂包括(但不限于)那些衍生为2'-C-甲基修饰的核苷、4'-氮杂修饰的核苷和7'-去氮杂修饰的核苷。本发明中使用的非核苷HCV聚合酶(复制酶)抑制剂包括但不限于HCV-796、HCV-371、VCH-759、VCH-916、VCH-222、ANA-598、MK-3281、ABT-333、ABT-072、PF-00868554、BI-207127、GS-9190、A-837093、JKT-109、GL-59728和GL-60667。
另外，本发明化合物可以与下列药物组合使用：环菲林和免疫菲林拮抗剂(例如，但不限于DEBIO化合物、NM-811以及环孢菌素及其衍生物)、激酶抑制剂、热休克蛋白(例如HSP90和HSP70)的抑制剂、其它免疫调节剂，所述调节剂包括但不限于：干扰素(-α、-β、-Ω、-γ、-λ或合成的)例如Intron A、Roferon-A、Canferon-A300、Advaferon、Infergen、Humoferon、Sumiferon MP、Alfaferone、IFN-β、Feron等；聚乙二醇衍生化的(PEG化的)干扰素化合物，例如PEG干扰素-α-2a(Pegasys)、PEG干扰素-α-2b(PEGIntron)、PEG化的IFN-α-con1等；干扰素化合物的长效制剂和衍生化物，例如白蛋白融合的干扰素、Albuferon、Locteron等；采用各种类型控释传递系统的干扰素(例如ITCA-638、通过DUROS皮下传递系统传递的Ω-干扰素)；刺激细胞中干扰素合成的化合物，例如 雷西莫特等；白介素；提高1类辅助T细胞响应的发展的化合物，例如SCV-07等；TOLL样受体激动剂，例如CpG-10101(actilon)、艾托立宾(isotorabine)、ANA773等；胸腺素α-1；ANA-245和ANA-246；组胺二盐酸盐；丙帕锗(propagermanium)；四氯癸烷氧化物(tetrachlorodecaoxide)；安普利近；IMP-321；KRN-7000；抗体，例如civacir、XTL-6865等；预防和治疗疫苗，例如InnoVac C、HCVE1E2/MF59等。另外，与NS5A抑制剂、I型干扰素受体激动剂(例如，IFN-α)和II型干扰素受体激动剂(例如，IFN-γ)的给药有关的任何上述方法均可以通过给予有效量的TNF-α拮抗剂而扩大应用范围。例如，适合用于此类组合疗法的非限定性TNF-α拮抗剂包括ENBREL、REMICADE和HUMIRA。
另外，本发明化合物可以与抗原生动物药物和其它可以有效治疗HCV感染的抗病毒药物组合使用，例如前药硝唑尼特(非限定)。硝唑尼特可以用作与本发明公开的化合物组合的药物，也可以用作与用于治疗HCV感染的其它药物组合的药物，所述其它药物例如聚乙二醇干扰素α-2a和利巴韦林。
本发明化合物也可以与其它形式的干扰素和聚乙二醇干扰素、利巴韦林或其类似物(例如他立韦林(tarabavarin)、左旋韦林(levoviron))、微RNA、小干扰RNA化合物(例如SIRPLEX-140-N等)、核苷或核苷类似物、免疫球蛋白、保肝药(hepatoprotectants)、抗炎药和其它NS5A抑制剂一起使用。HCV生命周期中其它靶点的抑制剂包括NS3解旋酶抑制剂；NS4A辅助因子抑制剂；反义寡核苷酸抑制剂，例如ISIS-14803、AVI-4065等；载体编码的短发夹(vector-encoded short hairpin)RNA(shRNA)；HCV特异性核糖酶，例如heptazyme、RPI、13919等；进入抑制剂，例如HepeX-C、HuMax-HepC等；α葡糖苷酶抑制剂，例如celgosivir、UT-231B等；KPE-02003002和BIVN401；IMPDH抑制剂。其它示例性HCV抑制剂化合物包括那些公开于下列专利公开中的化合物：U.S.Pat.Nos.5,807,876；6,498,178；6,344,465；和6,054,472；PCT专利申请公开号WO97/40028；
WO98/40381；WO00/56331,WO02/04425；WO03/007945；
WO03/010141；WO03/000254；WO01/32153；WO00/06529；
WO00/18231；WO00/10573；WO00/13708；WO01/85172；
WO03/037893；WO03/037894；WO03/037895；WO02/100851；
WO02/100846；WO99/01582；WO00/09543；WO02/18369；
WO98/17679,WO00/056331；WO98/22496；WO99/07734；
WO05/073216；WO05/073195和WO08/021927。
另外，例如利巴韦林和干扰素的组合可以与至少一种本发明化合物一起作为多重组合疗法给药。本发明不限定于前述种类或化合物，包括已知的和新的化合物以及生物学活性成分的组合。本发明的组合疗法应当包括任何化学上可相容的本发明组的化合物与本发明组的其它化合物以及本发明组之外的其它化合物的组合，前提是所述组合不会消除本发明组的化合物的抗病毒活性或其药用组合物的抗病毒活性。
组合疗法可以是依次的，即首先用一个药物治疗然后用第二个药物治疗(例如，其中每种治疗均包括不同的本发明化合物，或者其中一种治疗包括本发明化合物，另一种治疗包括一或多种生物学活性成分)，或者采用两种药物同时进行治疗。依次治疗可以在完成第一次治疗之后开始第二次治疗之前包括一段合理的时间。在相同时间采用两种药物的治疗可以是相同的日剂量或者不同的剂量。组合疗法无需限定两种药物，可以包括三种或更多种药物。同时和依次的组合疗法的剂量取决于组合疗法的各个成分的吸收、分布、代谢和排泄速度以及本领域技术人员公知的其它因素。剂量值取决于待缓和疾病的严重程度。还应当理解，对于任何特定患者而言，具体的剂量方案和时间安排可以根据个体的需要和本领域技术人员的判断或者根据组合疗法的给药的监控情况而依时间调整。
本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给予需要的患者治疗有效量的式I或II化合物。
本申请提供了上述方法，该方法还包括给予免疫系统调节剂或能够抑制HCV复制的抗病毒药物或其组合。
本申请提供了上述方法，其中所述免疫系统调节剂为干扰素或化学衍生化的干扰素。
本申请提供了上述方法，其中所述抗病毒药物选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV引发酶抑制剂、HCV融合抑制剂及其组合物。
实施例
缩写
常用是缩写包括：乙酰基(Ac)；偶氮-双-异丁酰基腈(AIBN)；大气压(Atm)；9-硼杂双环并[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)；2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(BINAP)；叔-丁氧基羰基(Boc)；焦碳酸二-叔-丁基酯或boc酸酐(BOC2O)；苄基(Bn)；丁基(Bu)；化学文摘注册号(CASRN)；苄氧基羰基(CBZ或Z)；羰基二咪唑(CDI)；1,4-二氮杂双环并[2.2.2]辛烷(DABCO)；二乙基氨基三氟化硫(DAST)；二亚苄基丙酮(dba)；1,5-二氮杂双环并[4.3.0]壬-5-烯(DBN)；1,8-二氮杂双环并[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)；N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)；1,2-二氯乙烷(DCE)；二氯甲烷(DCM)；2,3-二氯代-5,6-二氰基-1,4-苯并醌(DDQ)；偶氮二甲酸二乙基酯(DEAD)；偶氮二甲酸二-异丙基酯(DIAD)；二-异丁基氢化铝(DIBAL或DIBAL-H)；二-异丙基乙基胺(DIPEA)；N,N-二甲基乙酰胺(DMA)；4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；二甲基亚砜(DMSO)；1,1'-双-(二苯基膦基)乙烷(dppe)；1,1'-双-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)；1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)；2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)；乙基(Et)；乙酸乙酯(EtOAc)；乙醇(EtOH)；2-乙氧基-2H-喹啉-1-甲酸乙基酯(EEDQ)；乙醚(Et2O)；乙基异丙基醚(EtOiPr)；O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基六氟磷酸脲鎓乙酸盐(HATU)；乙酸(HOAc)；1-N-羟基苯并三唑(HOBt)；高效液相色谱(HPLC)；异丙醇(IPA)；异丙基氯化镁(iPrMgCl)；六甲基二硅氮烷(HMDS)；液相色谱质谱(LCMS)；六甲基二硅氮烷化锂(LiHMDS)；间-氯代过氧苯甲酸(m-CPBA)；甲醇(MeOH)；熔点(mp)；MeSO2-(甲磺酰基或Ms)；甲基(Me)；乙腈(MeCN)；间-氯代过苯甲酸(MCPBA)；质谱(ms)；甲基叔丁基醚(MTBE)；甲基四氢呋喃(MeTHF)；N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)；正丁基锂(nBuLi)；N-羧基内酸酐(carboxyanhydride)(NCA)； N-氯代琥珀酰亚胺(NCS)；N-甲基吗啉(NMM)；N-甲基吡咯烷酮(NMP)；氯代铬酸吡啶(PCC)；二氯代-((双-二苯基膦基)二茂铁)钯(II)(Pd(dppf)Cl2)；乙酸钯(II)(Pd(OAc)2)；三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3)；二铬酸吡啶(PDC)；苯基(Ph)；丙基(Pr)；异丙基(i-Pr)；每平方英寸的磅数(psi)；吡啶(pyr)；1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-叔丁基膦基)二茂铁(Q-Phos)；室温(环境温度、rt或RT)；仲丁基锂(sBuLi)；叔丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)；四-正丁基氟化铵(TBAF)；三乙胺(TEA或Et3N)；2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧化物(TEMPO)；三氟甲磺酸酯基或CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)；1,1'-双-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)；O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基四氟硼酸脲鎓(TBTU)；薄层色谱(TLC)；四氢呋喃(THF)；三甲基甲硅烷基或Me3Si(TMS)；对-甲苯磺酸单水合物(TsOH或pTsOH)；4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)和N-尿烷-N-羧基内酸酐(UNCA)。当与烷基部分使用时，常规命名法，包括前缀正(n)、异(i-)、仲(sec-)、叔(tert-)和新，具有其常规意义。(J.Rigaudy和D.P.Klesney,Nomenclature in Organic Chemistry(有机化学命名),IUPAC1979Pergamon Press,Oxford.)。
通用条件
本发明化合物可以通过下面实施例部分中所述说明性合成反应中描述的各种方法制备。
这些化合物制备中使用的原料和试剂通常可以获自商业供应商(例如AldrichChemical Co.)，或者可以根据下面参考文献中列示的步骤按照本领域技术人员已知的方法制备：例如Fieser和Fieser的Reagents for Organic Synthesis(有机合成试剂)；Wiley&Sons:New York,1991,第1－15卷；Rodd的Chemistry of Carbon Compounds(碳化合物的化学性质)，Elsevier Science Publishers,1989,第1－5卷和增补卷；OrganicReactions(有机反应),Wiley&Sons:纽约,1991,第1－40卷。应当理解，实施例部分中所示合成反应流程仅仅是某些本发明化合物合成方法的说明，可以对这些合成反应流程进行各种修改，对本领域技术人员参考本申请中所包含的公开内容提供了建议。
如果需要，合成反应流程中的原料和中间体可以采用常规技术分离并纯化，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱方法等。此类材料可以采用常规方法定性，包括物理参数和光谱数据。
除非有相反的说明，本文中所述反应通常在惰性氛围内、在大气压力下、于约-78℃至约150℃的温度范围内进行，通常于约0℃至约125℃进行，更通常并方便地于室温下(例如约20℃)进行。
本发明化合物上的各种取代基可以直接存在于原料化合物中、加成至任何中间体之一或者通过已知的置换或转化反应方法形成终产物后加成。如果取代基自身为反应性的，则取代基自身可以通过本领域已知的技术加以保护。各种保护基团在本领域中是已知的并可以采用。多种此类基团的示例可以参考：“Protective Groups in OrganicSynthesis(有机合成中的保护基团)”,Green等编著,John Wiley和Sons,1999。例如，硝基可以通过硝化反应加成并且硝基可以转化为另一类基团，例如通过还原反应形成氨基，通过氨基的重氮化反应以及采用卤素置换重氮基形成卤素。酰基可以通过Friedel-Crafts酰化反应而加成。然后酰基可以通过各种方法转化为相应的烷基；包括Wolff-Kishner还原反应和Clemmenson还原反应。氨基可以通过烷基化形成单-和二-烷基氨基；巯基和羟基可以通过烷基化形成相应的醚。伯醇可以通过本领域已知的氧化剂的氧化形成羧酸或醛，仲醇可以通过氧化形成酮。因此，可以采用取代反应或转化反应(alterationreactions)形成原料、中间体或终产物(包括分离的产物)分子中的各种取代基。
制备实施例
实施例1
[(4S,7S)-4-(5-{4'-[2-((1S,9S)-9-[(甲氧基羰基)氨基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-基)-3H-咪唑-4-基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯三氟乙酸(1:2)
向(1S,9S)-9-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(2.00g,4.68mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入肼(180mg,5.61mmol)。将反应物于室温下搅拌3h。真空浓缩乙醇和过量的肼，将残留物与乙醇共蒸发，获得(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为白色粉末(1.63g,100%)：ESI-LRMS m/e计算值：C14H23N3O4[M+]297，实测值：298[M+H+]。
向冰冷的(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(1.50g,5.04mmol)的DMF(15mL)溶液中加入碳酸钠(642mg,6.05mmol)，随后加入氯代甲酸甲酯(524mg,5.55mmol)。加入完成后，移除冰浴，将反应物于室温下搅拌2h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用2N盐酸水溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，获得(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为白色固体(1.28g,71%)：ESI-LRMS m/e计算值：C16H25N3O6[M+]355，实测值：356[M+H+]。
向溶于二氯甲烷(10mL)的(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(1.25g,3.52mmol)溶液中加入三氟乙酸(10mL)。将反应物于室温下搅拌1h，真空浓缩。加入甲苯(5mL)，将反应物真空浓缩，得到(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸，为白色固体(587mg,68%)：ESI-LRMS m/e计算值：C12H17N3O6[M+]299，实测值：300[M+H+]。
将(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸(219mg,732μmol,Eq:2.10)、1,1'-(联苯-4,4’-二基)双(2-氨 基乙酮)二盐酸盐(119mg,349μmol,Eq:1.00)(参见Bachand,C.等WO2008021927)和HATU(285mg,750μmol,Eq:2.15)在DMF(3mL)中的悬浮液采用N,N’-二异丙基乙胺(270mg,380μl,2.09mmol,Eq:6.00)处理。将反应混合物于23℃搅拌16h。反应混合物经酸性水溶液处理后，获得(4S,4'S,7S,7'S)-4,4'-(2,2'-(联苯-4,4’-二基)双(2-氧代乙烷(oxoethane)-2,1-二基))双(氮烷二基(azanediyl))双(氧代亚甲基)双(6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂7,4-二基)二氨基甲酸二甲基酯(345.8mg,77.6%)，为浅黄色胶状物：ESI-LRMS m/e计算值：C40H46N8O12[M+]830，实测值：831[M+H+]。
将(4S,4'S,7S,7'S)-4,4'-(2,2'-(联苯-4,4’-二基)双(2-氧代乙烷-2,1-二基))双(氮烷二基)双(氧代亚甲基)双(6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7,4-二基)二氨基甲酸二甲基酯(345mg,270μmol,Eq:1.00)和乙酸铵(208mg,2.7mmol,Eq:10.00)在溶剂二甲苯(2mL)和二氧六环(4mL)混合物中的溶液在密封下于140℃加热4h。将反应混合物冷却至23℃，分离固体。溶液经真空浓缩，得到209.7mg粗品产物，为浅红色胶状物。该产物经采用25g硅胶柱芯的CombiFlash设备纯化，用二氯甲烷、10%-甲醇－二氯甲烷0－70%梯度洗脱。产物采用5%甲醇-二氯甲烷洗脱。收率30.6mg，为浅红色粉末。该产物经反相HPLC进一步纯化，采用0.1%TFA水－0.1%乙腈洗脱，得到10mg的TFA盐，白色蓬松固体。ESI-LRMS m/e计算值：C40H44N10O8[M+]792，实测值：792,[M+H+],1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d7.78-8.00(m,8H),7.63(d,J=7.78Hz,2H),5.96(br,2H),4.54(br,4H),3.68(s,6H),3.25(br,2H),3.06(br,2H),2.36(m,6H),2.24(dd,J=6.65,12.42Hz,2H),1.94-2.18(m,6H),1.80(br.s.,2H)。
实施例2
{(4S,7S)-4-[5-(4-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-苯基)-1H-苯并咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯二盐酸盐
将(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸(184.7mg,605μmol)、4-溴苯-1,2-二胺(124mg,665μmol)、HATU(230mg,605μmol,Eq:1.00)的DMF(3mL)溶液采用N,N’-二异丙基乙胺(235mg,317μl,1.81mmol,Eq:3.00)处理。将溶液于23℃搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。浓缩有机层得到317.3mg的1:1的[(4S,7S)-4-(2-氨基-4-溴-苯基氨基甲酰基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯和[(4S,7S)-4-(2-氨基-5-溴-苯基氨基甲酰基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯的混合物，为浅棕色固体。该产物可以直接用于下一步骤。将该混合物(317mg,508μmol)的乙酸(3.12g,3mL,52.0mmol)溶液于90℃加热1hr。将反应混合物冷却至23℃，真空浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(30mL)，采用sat.NaHCO3、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。浓缩有机层得到[(4S,7S)-4-(5-溴-1H-苯并咪唑-2-基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯，为浅棕色粉末(191.3mg,79.5%)。ESI-LRMS m/e计算值：C18H20BrN5O4[M+]449，实测值：450[M+H+]。
将(4S,7S)-4-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(190mg,405μmol)、(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(223mg,405μmol)在1,2-二甲氧基乙烷(6mL)中的溶液采用碳酸氢钠(103mg,1.22mmol)处理。将混合物通过充入氩气15min除去氧气。然后，加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)(44.9mg,60.8μmol)，将反应物容器加盖，浸入预热保持在90℃的油浴中，加热14h。将反应混合物过滤并浓缩。将残留物溶于10%甲醇- 二氯甲烷中，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥。浓缩有机层，获得为棕色胶状物的粗品产物。粗品产物在ISCO Commander设备上纯化，采用0－100%－10%甲醇-二氯甲烷/二氯甲烷梯度洗脱25min。产物在约70%－10%甲醇-二氯甲烷/二氯甲烷附近洗脱出来。分离出16.5mg的{(4S,7S)-4-[5-(4-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-苯基)-1H-苯并咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯，为粘性棕色固体。将该产物溶于乙醇(3mL)，采用4N HCl的二氧六环(1mL)溶液处理。将溶液搅拌10min。然后将其浓缩，加入另一份3mL乙醇，再次浓缩，获得{(4S,7S)-4-[5-(4-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-苯基)-1H-苯并咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯二盐酸盐，为棕色粉末(16.5mg,4.8%)。ESI-LRMS m/e计算值：C38H45N5O7[M+]739，实测值：740[M+H+], 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H),7.82-7.98(m,5H),7.65(br.s.2H),7.49-7.59(m,2H),7.33(d,J=8.03Hz,1H),6.04(br.s.,1H),5.11-5.20(m,1H),4.43(d,J=12.30Hz,2H),4.08-4.18(m,2H),3.89(m,2H),3.69(dd,J=5.02,14.56Hz,3H),3.55(d,J=10.54Hz,3H),3.20(m,1H),2.95(m,1H),2.40(d,J=6.53Hz,1H),1.82-2.31(m,10H),1.73(br.s.1H),0.71-0.97(m,6H)。
实施例3
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸苄基酯
在10mL密封管中，将(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(55mg,111μmol)(中间体1)、(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸苄基酯(61.2mg,111μmol)(中间体6)和碳酸氢钠(饱和溶液,600μl,过量)与叔-丁醇(3.00mL)混合，获得浅棕色悬浮液，脱气5min。加入PdCl2(DPPF)(8.11mg,11.1μmol)，充入氮气。将其密封并于90℃加热4hr，然后用EtOAc(10ml)稀释，过滤并浓缩。粗品经硅胶柱纯化(CH2Cl2，2%、3%、5%、8%MeOH/CH2Cl2)，得到{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸苄基酯，为浅黄色固体(30mg,30.6%)。ESI-LRMS m/e计算值：C46H51N9O7：[M+]841，实测值：842[M+H]。1H NMR(DMSO-d6)δ：12.23(br.s.,1H),11.66-11.89(m,1H),7.72-7.85(m,5H),7.58-7.92(m,4H),7.48-7.55(m,1H),7.34-7.43(m,3H),7.22-7.35(m,1H),7.19-7.45(m,3H),5.81(br.s.,1H),5.77-5.86(m,1H),5.01-5.13(m,3H),4.92-5.21(m,2H),4.47(d,J=11.5Hz,1H),4.33-4.59(m,1H),4.00-4.13(m,1H),3.95-4.13(m,1H),3.72-3.86(m,1H),3.81(br.s.,1H),3.54(s,3H),3.45-3.64(m,2H),2.82-3.00(m,1H),2.79-2.96(m,1H),2.08-2.35(m,2H),1.76-2.05(m,3H),1.50-1.67(m,1H),0.80-0.95(m,6H)。
实施例4
((4S,7S)-4-{5-[4-(6-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-喹喔啉-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基)-氨基甲酸甲酯
在10mL梨形烧瓶中，将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(8.35mg, 47.7μmol)和DMF(1mL)混合，得到无色溶液。加入HATU(14.5mg,38.1μmol)并搅拌10min。加入(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(21mg,31.8μmol)的2ml DMF溶液和DIPEA(20.5mg,27.8μl,159μmol)，于室温下搅拌1hr。用盐水和H2O(每次10ml)稀释，过滤沉淀物，用H2O和己烷洗涤，于46℃高真空干燥，得到((4S,7S)-4-{5-[4-(6-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-喹喔啉-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基)-氨基甲酸甲酯，为淡棕色固体(15mg,53.1%)。ESI-LRMS m/e计算值：C42H47N11O7：[M+]817，实测值：818[M+H]。1H NMR(DMSO-d6)δ:12.34(br.s.,1H),12.02(br.s.,1H),9.29-9.68(m,1H),8.21-8.52(m,4H),7.71-8.11(m,5H),7.15-7.60(m,2H),5.83(br.s.,1H),5.12(br.s.,1H),4.46(br.s.,3H),4.09(br.s.,1H),3.85(br.s.,3H),3.56(d,J=7.5Hz,6H),2.90(br.s.,3H),1.56-2.39(m,8H),0.76-1.06(m,6H)。
实施例5
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-4,4-二氟-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯
在10mL密封管中，将(S)-1-((S)-4,4-二氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(52mg,97.7μmol)、(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(46.5mg,97.7μmol)和碳酸氢钠(饱和溶液,400μl,过量)与叔-丁醇(2.00mL) 混合获得浅棕色混悬液，将其脱气5min。加入PdCl2(DPPF)(7.15mg,9.77μmol)，充入氮气。将其密封并于90℃加热4hr，用EtOAc(10ml)稀释，过滤并真空浓缩。粗品混合物经硅胶柱纯化(CH2Cl2，2%、3%、5%、8%MeOH/CH2Cl2)，得到{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-4,4-二氟-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯，为浅黄色固体(26mg,31.5%)。ESI-LRMS m/e计算值：C40H45F2N9O7：[M+]801，实测值：802[M+H]。1H NMR(DMSO-d6)δ：12.23(br.s.,1H),11.98(br.s.,1H),7.72-7.84(m,4H),7.62-7.72(m,5H),7.57(d,J=1.8Hz,1H),7.50(d,J=8.0Hz,2H),5.81(br.s.,1H),5.30(t,J=7.5Hz,1H),4.39-4.55(m,3H),3.94(t,J=8.2Hz,1H),3.56(s,4H),3.55(br.s.,3H),2.84-2.95(m,1H),2.18-2.35(m,3H),2.12(dd,J=13.1,6.5Hz,1H),1.86-2.03(m,4H),1.64(d,J=13.3Hz,1H),1.09-1.26(m,1H),0.92(d,J=6.5Hz,1H),0.85(d,J=6.5Hz,6H)。
实施例6
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[2-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂-螺[4.5]癸-3-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯
在10mL密封管中，将(2S)-3-甲基-1-氧代-1-(3-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(45mg,79.4μmol)、(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(37.8mg,79.4μmol)和碳酸氢钠(饱和溶液,0.4mL)与叔-丁醇(2.6mL)混合获得浅棕色混悬液，将其脱氧5min。加入PdCl2(DPPF) (5.81mg,7.94μmol)，充入氮气。将其密封并于90℃搅拌4hr。反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，过滤并真空浓缩。残留物经硅胶柱纯化(CH2Cl2，2%、3%、5%、8%MeOH/CH2Cl2)，得到{(4S,7S)-4-[5(4'-{2-[2-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂-螺[4.5]癸-3-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯，为浅黄色固体(30mg,42.9%)。ESI-LRMSm/e计算值：C44H53N9O8，[M+]835，实测值：836[M+H]。1H NMR(DMSO-d6)δ:12.09-12.45(m,1H),7.57-7.99(m,11H),7.49(d,J=8.3Hz,2H),5.80(br.s.,1H),4.93-5.16(m,1H),4.46(d,J=11.3Hz,2H),3.92-4.27(m,1H),3.64(br.s.,3H),3.50-3.60(m,10H),2.88(t,J=10.3Hz,1H),1.77-2.36(m,6H),1.63(br.s.,2H),1.48(d,J=11.5Hz,1H),0.77-1.02(m,6H),0.67(d,J=6.5Hz,2H),0.12(d,J=6.8Hz,1H).
实施例7
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯
在密封的试管中，将1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(30mg,0.04mmol)加至(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯(200mg,0.43mmol)(中间体1)、(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(192mg,0.43mmol)(中间体2)和碳酸氢钠(102mg,0.1.21mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(6mL)和水(1mL)中的混合物中。向反应混合物中充入氮气，加盖、于80℃加热16h。浓缩反应混合物，将其在20%甲醇/二氯甲烷和水之间分配，水 相采用20%甲醇/二氯甲烷萃取。合并的有机相用饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物经50g Polaris C18A柱的反相HPLC纯化，采用乙腈/水(30%－100%)洗脱，获得{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯，为浅黄色固体(85mg,28%)：ESI-LRMS m/e计算值：C40H47N9O7[M+]765，实测值：766[M+H+]；1HNMR(DMSO-d6)δ：12.22(br.s.,1H),11.76(br.s.,1H),7.39-7.88(m,10H),7.29(d,J=7.8Hz,1H),5.55-5.65(m,1H),5.15-5.25(m,1H),4.50-4.75(m,2H),3.93-4.11(m,2H),3.79(br.s.,2H),3.53(d,J=8.2Hz,6H),2.86(t,J=10.5Hz,1H),1.81-2.29(m,13H),0.72-0.99(m,6H)。
中间体1
(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)丁-2-基氨基甲酸酯
于室温下，将N,N-二异丙基乙胺(3.2g,24.7mmol)滴加至2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮盐酸盐(2.0g,7.98mmol)、(S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-甲酸(1.72g,7.98mmol)、HATU(3.04g,7.98mmol)和DMF(20mL)的不均匀混合物中。加入完成后，将反应混合物于室温下搅拌2h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，采用水、1N盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物经ISCO快速色谱(TeledyneIscoRediSep快速柱40g；(0%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(S)-2-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯，为白色固体(2.50g,76%)：ESI-LRMS m/e计算值：C18H23BrN2O4[M+]410，实测值：411[M+H+]。
将(S)-2-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(2.50g,6.08mmol)和乙酸铵(2.34g,30.4mmol)在二甲苯(10mL)中的混合物 在密封的试管中于140℃加热4h。然后将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。有机部分采用饱和的碳酸氢钠溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物经ISCO快速色谱(Teledyne Isco RediSep快速柱40g；(00%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色固体(1.77g,74%)：ESI-LRMS m/e计算值：C18H22BrN3O2[M+]392，实测值：393[M+H+]。
将(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(2.45g,6.25mmol)和4.0M HCl/二氧六环溶液(15mL)在甲醇(30mL)中的混合物于室温下搅拌4h。将反应物真空浓缩。粗品混合物采用饱和的碳酸氢钠溶液碱化，水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机部分用饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，获得(S)-5-(4-溴苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑盐酸盐，为橙色固体(1.80g,98%)：ESI-LRMS m/e计算值：C13H14BrN3HCl[M+]328.5，实测值：293[M+H+](游离碱)。
于室温下，将N,N-二异丙基乙胺(2.92g,22.6mmol)滴加至(S)-5-(4-溴苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑盐酸盐(2.2g,7.53mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(1.32g,7.53mmol)、HATU(2.86g,7.53mmol)和DMF(20mL)的不均匀混合物中。加入完成后，将反应混合物于室温下搅拌5h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，采用水、1N盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物通过ISCO快速色谱(Teledyne Isco RediSep快速柱80g；(0%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得((S)-1-{(S)-2-[5-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯，为黄色固体(2.20g,765%)：ESI-LRMS m/e计算值：C20H25BrN4O3[M+]449，实测值：450[M+H+]。
将1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(436mg,0.53mmol)加至含有((S)-1-{(S)-2-[5-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(2.40mg,5.34mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(4.07g,16.0mmol)、乙酸钾(2.62mg,26.7mmol)和1,4-二氧六环(40mL)的混合物的密封试管中。向容器中充入氮气，加盖，于80℃在油浴中加热过夜。将反应物冷却至室温，通过硅藻土 过滤。将反应物真空浓缩。粗品混合物用二氯甲烷稀释，采用水、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物通过ISCO快速色谱(Teledyne Isco RediSep快速柱40g；(50%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯，为棕色固体(1.78g,67%)：ESI-LRMSm/e计算值：C26H37BN4O5[M+]496，实测值：497[M+H+]。
中间体2
(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯
向(1S,9S)-9-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(2.00g,4.68mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入肼(180mg,5.61mmol)。将反应物于室温下搅拌3h。将乙醇和过量的肼真空浓缩，残留物与乙醇一起共蒸发，获得(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为白色粉末(1.63g,100%)：ESI-LRMS m/e计算值：C14H23N3O4[M+]297，实测值：298[M+H+]。
向冰冷的(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(1.50g,5.04mmol)的DMF(15mL)溶液中加入碳酸钠(642mg,6.05mmol)，随后加入氯代甲酸甲酯(524mg,5.55mmol)。加入完成后，移除冰浴，将反应物于室温下搅拌2h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用2N盐酸水溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，获得(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为白色固体(1.28g,71%)：ESI-LRMS m/e计算 值：C16H25N3O6[M+]355，实测值：356[M+H+]。
向溶于二氯甲烷(10mL)中的(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(1.25g,3.52mmol)的溶液中加入三氟乙酸(10mL)。将反应物于室温下搅拌1h，真空浓缩。加入甲苯(5mL)，将反应物真空浓缩，得到(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸，为白色固体(587mg,68%)：ESI-LRMS m/e计算值：C12H17N3O6[M+]299，实测值：300[M+H+]。
于室温下，将N,N’-二异丙基乙胺(680mg,5.26mmol)滴加至(1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸(525mg,1.75mmol)、2-氨基-1-(4-溴-苯基)-乙酮盐酸盐(439mg,1.75mmol)、HATU(667mg,1.75mmol)和DMF(10mL)的不均匀混合物中。加入完成后，将反应物于室温下搅拌4h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、1N盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物通过ISCO快速色谱(Teledyne IscoRediSep快速柱40g；(30%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(4S,7S)-4-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯，为浅黄色固体(587mg,68%)：ESI-LRMS m/e计算值：C20H23BrN4O6[M+]495，实测值：496[M+H+]。
将(4S,7S)-4-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(500mg,1.01mmol)和乙酸铵(389mg,5.05mmol)在二甲苯(10mL)中的混合物在密封的试管中于140℃加热4h。然后将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。有机部分用饱和的碳酸氢钠溶液、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物通过ISCO快速色谱(Teledyne Isco RediSep快速柱40g；(30%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯，为黄色固体(435mg,91%)：ESI-LRMS m/e计算值：C20H22BrN5O4[M+]476，实测值：477[M+H+]。
中间体3
(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯
将1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(159mg,0.20mmol)加至含有(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(925mg,1.94mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(1.48g,5.83mmol)、乙酸钾(953mg,9.71mmol)和1,4-二氧六环(40mL)的混合物的密封试管中。向容器中充入氮气，加盖，于80℃在油浴中加热过夜。将反应物冷却至室温，通过硅藻土过滤。将反应物真空浓缩。粗品混合物用二氯甲烷稀释，采用水、饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。获得的粗品产物通过ISCO快速色谱(Teledyne Isco RediSep快速柱40g；(50%－100%乙酸乙酯/己烷))纯化，获得(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯，为棕色固体(358mg,35%)：ESI-LRMS m/e计算值：C26H34BN5O6[M+]523，实测值：524[M+H+]。
中间体4
(S)-1-((S)-4,4-二氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基-氨基甲酸甲酯
在50mL梨形烧瓶中，将(S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4,4-二氟吡咯烷-2-甲酸(1g,3.98mmol,Eq:1.00)和HATU(1.51g,3.98mmol,Eq:1.00)与DMF(15mL)混合，得到无色溶液，于23℃搅拌10min。加入2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮HCl(995mg,3.98mmol)，随后滴加DIPEA(1.54g,2.09mL,11.9mmol)。当胺加入完成后，该悬浮液变为橙色溶液。将其于室温下搅拌1hr，用盐水(100mL)和H2O(50mL)稀释。过滤沉淀物，用H2O洗涤并干燥，得到(S)-2-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。(1.8g,>96%)：ESI-LRMS m/e计算值：C18H21BrF2N2O4[M+]447，实测值：448[M+H+]。
在50mL密封试管中，将(S)-2-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(1.8g,4.02mmol)和乙酸、乙酸铵(1.55g,20.1mmol)与二甲苯(16mL)混合。将反应混合物加热至140℃并搅拌4hr。将反应混合物冷却，用EtOAc(50mL)稀释。将其用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩，经硅胶柱纯化(CH2Cl2，30%、50%、80%EtOAc/CH2Cl2)，得到(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色固体(1.77g,74%)：ESI-LRMS m/e计算值：C18H22BrF2N3O2[M+]428，实测值：429[M+H+]。
在10mL梨形烧瓶中，将(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(1.0g,2.33mmol)与CH2Cl2(6mL)混合，得到淡黄色溶液。加入TFA(2.96g,2mL,26.0mmol)，搅拌2hr。将其真空浓缩，得到(S)-5-(4-溴苯基)-2-(4,4-二氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑，为粘性油状物，无需进一步纯化可以直接用于下一步骤。
在20mL梨形烧瓶中，将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(416mg,2.38mmol)和HATU(695mg,1.83mmol)与DMF(10mL)混合，得到无色溶液。加入(S)-5-(4-溴苯基)-2-(4,4-二氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑(600mg, 1.83mmol)的2ml DMF溶液，随后滴加DIPEA(1.18g,1.6mL,9.14mmol)。将其于室温下搅拌1hr，然后倒入冰/水中。用EtOAc萃取(2×30mL)，用盐水和水洗涤。有机层经硫酸镁干燥，浓缩，经硅胶柱纯化(CH2Cl2，1%、2%、5%MeOH/CH2Cl2)，得到(S)-1-((S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基-氨基甲酸甲酯，为橙色泡沫状固体(650mg,73%)：ESI-LRMS m/e计算值：C20H25BrF2N4O3[M+]485，实测值：486[M+H+]。
在20ml密封管中，将(S)-1-((S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基-氨基甲酸甲酯(300mg,618μmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(471mg,1.85mmol)和乙酸钾(303mg,3.09mmol)与1,4-二氧六环(6mL)混合，得到淡黄色悬浮液。脱气20min。加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(50.5mg,61.8μmol)，充入氮气，于80℃密封加热16hr。将其冷却，用EtOAc(40mL)稀释。将混合物用盐水和水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩，经硅胶柱纯化(CH2Cl2，1%、2%、3%－5%MeOH/CH2Cl2)，得到(S)-1-((S)-4,4-二氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基-氨基甲酸甲酯，为橙色固体(300mg,87%)。ESI-LRMS m/e计算值：C26H37BF2N4O5[M+]532，实测值：533[M+H+]。
中间体5
(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-8-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯
在500mL圆底烧瓶中，将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(2.90g,16.6mmol)和HATU(6.29g,16.6mmol)与CH2Cl2(300mL)混合，得到无色悬浮液。加入TEA(5.03g,6.92mL,49.7mmol)，于室温下搅拌30min，加入(2S,4R)-4-羟基吡咯烷-2-甲酸甲酯HCl(3.01g,16.6mmol)，于室温搅拌5hr，用NaHCO3(饱和溶液,100mL)稀释，分离有机相，用CH2Cl2(2×100mL)萃取水层，有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。粗品物质经硅胶柱纯化(CH2Cl2,20%、40%、60%、80%EtOAc/CH2Cl2)，得到(2S,4R)-4-羟基-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酸甲基酯，为油状物(4.0g,79.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm0.88(dd,J=17.32,6.78Hz,17H)1.75-1.96(m,5H)2.10(br.s.,3H)3.46-3.62(m,16H)3.63-3.77(m,5H)4.33(d,J=8.03Hz,5H)5.21(d,J=3.76Hz,3H)7.30(d,J=8.78Hz,2H)。
在100mL圆底烧瓶中，将(2S,4R)-4-羟基-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(0.8g,2.65mmol)与CH2Cl2(20mL)混合，得到无色溶液，加入戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(2.24g,5.29mmol)，于室温搅拌2hr，用5%硫代硫酸钠(80mL)淬灭，加入NaHCO3(饱和溶液，100mL)，搅拌20min，反应混合物用CH2Cl2(2×100mL)萃取，合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。粗品产物经硅胶柱纯化(CH2Cl2,20%,40%,60%EtOAc/CH2Cl2)，得到(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-4-氧代吡咯烷-2-甲酸酯，为无色油状物(230mg,28.9%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm0.91–1.11(m,24H)1.97-2.11(m,10H)2.56-2.76(m,4H)2.87-3.09(m,4H)3.67(s,12H)3.77(s,12H)4.33-4.58(m,3H)5.03-5.16(m,3H)5.21-5.51(m,3H)。
在50mL圆底烧瓶中，将(S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-4-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(230mg,766μmol,Eq:1.00)和乙-1,2-二醇(238mg,214μl,3.83mmol,Eq:5)与甲苯(15mL)混合，得到无色溶液。加入对-甲苯磺酸单水合物(29.1mg,153μmol)，用Dean-Stark装置将反应混合物加热至110℃20hr，冷却后，用EtOAc(50mL)稀释，用NaHCO3(饱和溶液,200mL)洗涤，干燥并真空浓缩。粗品混合物经硅胶柱纯化(CH2Cl2,20%、30%、40%和60%EtOAc/CH2Cl2)，得到(S)-7-((S)-2-(甲氧基羰基 氨基)-3-甲基丁酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯，为油状物(110mg,41.7%).1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm0.95(d,J=6.78Hz,8H)1.05(d,J=6.78Hz,7H)1.57(s,2H)2.22(dd,J=13.18,6.90Hz,3H)2.37(dd,J=13.05,8.78Hz,2H)3.62-3.70(m,11H)3.71-3.87(m,10H)3.93-4.03(m,11H)4.25(d,J=2.76Hz,4H)4.59-4.78(m,2H)5.23-5.51(m,2H)5.26-5.51(m,2H)。
在10mL圆底烧瓶中，将(S)-7-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-8-甲酸甲酯(150mg,436μmol)与叔-丁醇(250μl)混合，得到无色溶液，加入LiOH(1M,871μl,Eq:2)，于室温搅拌2hr，用1N HCl酸化至pH3，用100ml EtOAc稀释，用盐水(5mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到(S)-7-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-8-甲酸，为白色固体，该物质不经进一步纯化直接使用(75mg,52.1%)。
在50mL烧瓶中，将(S)-7-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-8-甲酸(110mg,333μmol)与DMF(5.00mL)混合，得到无色溶液，加入HATU(127mg,333μmol)，于室温搅拌10min，然后加入2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮HCl(83.3mg,333μmol,Eq:1.00)，随后滴加DIPEA(129mg,174μl,999μmol)，加入DIPEA后悬浮液变为黄色溶液。于室温搅拌1hr，然后倾至盐水溶液(80mL)中，过滤沉淀物，用H2O洗涤，再溶于CH2Cl2(50mL)中，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到(S)-1-((S)-8-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯，为黄色固体(75mg,42.8%)。ESI-LRMS m/e计算值：C22H28BrN3O7[M+]526，实测值：527[M+H+]。
在5mL密封管中，将(S)-1-((S)-8-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(75mg,142μmol)与1,4-二氧六环(2mL)混合，得到淡黄色溶液，加入乙酸铵(110mg,1.42mmol)，于110℃搅拌过夜，冷却并用EtOAc(10mL)稀释，过滤并真空浓缩，得到(S)-1-((S)-8-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯，为淡棕色固体 (70mg,96.8%)。ESI-LRMS m/e计算值：C22H27BrN4O5[M+]507，实测值：508[M+H+]。
在20ml密封管中，将(S)-1-((S)-8-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(70mg,138μmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(105mg,414μmol)和乙酸钾(67.7mg,690μmol,Eq:5.0)与1,4-二氧六环(2mL)混合，得到淡黄色悬浮液。脱气20min，加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(11.3mg,13.8μmol)，充入N2，密封并于80℃搅拌16hr，冷却反应混合物，用EtOAc(10mL)稀释，通过硅藻土过滤，真空浓缩并经硅胶柱纯化(CH2Cl2,1%、2%、3%-5%MeOH/CH2Cl2)，得到(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-8-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯，为淡棕色固体(31mg,41.5%)。ESI-LRMS m/e计算值：C28H39BN4O7[M+]554，实测值：555[M+H+]。
中间体6
(2S)-3-甲基-1-氧代-1-(3-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(813mg,4.64mmol)与DMF(10mL)混合，得到无色溶液，加入HATU(1.76g,4.64mmol)，于室温搅拌10min，加入8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-3-甲酸乙酯(根据专利申请WO1998/08850中的方法制备)(900mg,4.22mmol)和DIPEA(1.91g,2.58mL,14.8mmol)并搅拌过夜，用H2O稀释并用EtOAc(2×100ml)萃取，有机层用盐水和H2O洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得 到(S)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-3-甲酸乙基酯，为粘的油状物(1.3g,83.2%)。C18H30N2O6ESI-LRMS m/e计算值：[M+]370，实测值：371[M+H+]。
在10mL圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-3-甲酸乙酯(300mg,810μmol)与THF(6ml)和叔-丁醇(1mL)混合，得到无色溶液，加入LiOH(1.0M,1.62mL,1.62mmol,Eq:2)，于室温将搅拌2hr，然后再加入LiOH(1.0M,1mL,1mmol)并再搅拌2hr，除去THF，用1N HCl酸化水溶液至pH=3，用EtOAc(100mL)稀释，用盐水(10mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-3-甲酸，为白色固体(270mg,97.4%)。ESI-LRMS m/e计算值：C16H26N2O6[M+]342，实测值：341[M-H+]。
在50mL烧瓶中，将2-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-3-甲酸(200mg,584μmol)与DMF(5.00mL)混合，得到无色溶液，加入HATU(222mg,584μmol)，于室温搅拌10min，随后加入2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮HCl(146mg,584μmol)，然后滴加DIPEA(264mg,357μl,2.04mmol)，加入DIPEA后悬浮液变为黄色溶液，于室温搅拌1hr，然后倾至盐水溶液(80mL)中，用EtOAc(2×60mL)萃取，用盐水和H2O洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色固体，经硅胶柱纯化(CH2Cl2,2%、4%、6%MeOH/CH2Cl2)，得到(2S)-1-(3-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯，为固体(200mg,63.6%)。ESI-LRMS m/e计算值：C24H32BrN3O6[M+]538，实测值：539[M+H+]。
在10mL密封管中，将(2S)-1-(3-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(200mg,371μmol)与二氧六环(6mL)混合，得到无色溶液，加入乙酸铵(286mg,3.71mmol)，于110℃搅拌过夜，冷却并用EtOAc(10mL)稀释，过滤混合物并真空浓缩，得到(2S)-1-(3-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯，为黄色固体 (170mg,88.1%)。ESI-LRMS m/e计算值：C24H31BrN4O4[M+]519，实测值：520[M+H+]。
在20ml密封管中，将(2S)-1-(3-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸甲酯(170mg,327μmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(249mg,982μmol)和乙酸钾(161mg,1.64mmol)与1,4-二氧六环(2.00mL)混合，得到淡黄色悬浮液。脱气20min，加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(26.7mg,32.7μmol)，充入N2，密封并于80℃搅拌16hr，然后冷却并用EtOAc(40mL)稀释，反应混合物通过硅藻土过滤，真空浓缩，经硅胶柱纯化(CH2Cl2,1%、2%、3%－5%MeOH/CH2Cl2)，得到(2S)-3-甲基-1-氧代-1-(3-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)丁-2-基氨基甲酸甲酯，为淡棕色固体(110mg,59.3%)。ESI-LRMS m/e计算值：C30H43BN4O6[M+]566，实测值：567[M+H+]。
中间体7
(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸苄基酯
在200mL圆底烧瓶中，将(1S,9S)-9-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(5g,11.7mmol)与乙醇(50mL)混合，得到无色悬浮液。加入肼(825mg,808μl,25.7mmol)，于室温搅拌2hr，粗品反应混合物经真空浓缩，与甲苯一起蒸发，加入2M乙酸水溶液(50mL)，于室温搅拌过夜，过滤沉淀物，滤液用碳酸钠溶液碱化，用CH2Cl2(2×150mL)萃取，合并的有机层经MgSO4干燥，真空浓缩， 得到(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为粘的白色固体(3.4g,97.8%)。ESI-LRMS m/e计算值：C14H23N3O4[M+]297，实测值：298[M+H+]。
在20mL梨形烧瓶中，将(1S,9S)-9-氨基-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(0.9g,3.03mmol)与DMF(8mL)混合，得到无色溶液，冷却至0℃。加入碳酸钠(385mg,3.63mmol)和氯甲酸苄基酯(516mg,432μl,3.03mmol)，于室温搅拌6hr。用盐水和H2O稀释，用EtOAc(2×60mL)萃取，合并的有机层用盐水和H2O洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到(1S,9S)-9-(苄氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯，为油状物(1.3g,99.5%)。ESI-LRMS m/e计算值：C18H21N3O6[M+]431，实测值：432[M+H+]。粗品不经纯化直接使用。
在10mL圆底烧瓶中，将(1S,9S)-9-(苄氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸叔-丁基酯(1.3g,3.01mmol)与CH2Cl2(5mL)混合，得到无色溶液。加入TFA(3.53g,2.38mL,31.0mmol)，于室温搅拌5hr，粗品反应混合物经真空浓缩，再溶于EtOAc(10mL)。蒸发得到(1S,9S)-9-(苄氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸，为泡沫状固体(1.0g,88.4%)。ESI-LRMS m/e计算值：C18H21N3O6[M+]375，实测值：376[M+H+]。
在50mL圆底烧瓶中，将(1S,9S)-9-(苄氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-甲酸(1g,2.66mmol)与DMF(15mL)混合，得到无色溶液。加入HATU(1.01g,2.66mmol)，于室温搅拌10min。加入2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮HCl(666mg,2.66mmol,Eq:1.00)和DIPEA(1.03g,1.4mL,7.99mmol)，于室温搅拌过夜。反应混合物用盐水和H2O稀释，用EtOAc(2×60mL)萃取，合并有机层，用盐水(2×20mL)、H2O(2×50mL)洗涤，经MgSO4干燥，真空浓缩。粗品产物经硅胶柱纯化(CH2Cl2,2%、3%、5%、6%、8%MeOH/CH2Cl2)，得到(4S,7S)-4-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸苄基酯，为浅黄色固体(1.2g,78.8%)。ESI-LRMS m/e计算值： C26H27BrN4O6[M+]571，实测值：572[M+H+]。
在10mL密封管中，将(4S,7S)-4-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸苄基酯(200mg,350μmol)与1,4-二氧六环(5mL)混合，得到淡黄色溶液。加入乙酸铵(270mg,3.5mmol)，于110℃加热反应混合物12hr，冷却并用EtOAc(2×30mL)稀释。合并的有机层用盐水和H2O洗涤，经MgSO4干燥，并真空浓缩，得到粘的油状物。粗品经硅胶柱纯化(CH2Cl2,2%、4%、6%、8%MeOH/CH2Cl2)，得到(4S,7S)-4-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸苄基酯，为黄色固体(66mg,34.1%).ESI-LRMS m/e计算值：C26H26BrN5O4[M+]552，实测值：553[M+H+]。
中间体8
(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯
在10mL密封管中，将(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(240mg,459μmol)(中间体3)、6-溴-2-氯代喹喔啉(112mg,459μmol)和Cs2CO3(299mg,917μmol)与1,4-二氧六环(3.00mL)和水(0.5mL)混合，得到淡棕色溶液。脱气10min，加入四(三苯膦)钯(0)(53.0mg,45.9μmol)。于80℃加热反应混合物16h，用EtOAc(6mL)稀释，真空浓缩。残留物经硅胶柱纯化(CH2Cl2,2%、3%、5%、8%和10%MeOH/CH2Cl2)，得到(4S,7S)-4-(5-(4-(6-溴喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸 甲酯，为红色固体(240mg,86.6%)。ESI-LRMS m/e计算值：C28H26BrN7O4[M+]604，实测值：605[M+H+]。
在20ml密封管中，将(4S,7S)-4-(5-(4-(6-溴喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(230mg,381μmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(290mg,1.14mmol)和乙酸钾(187mg,1.9mmol)与1,4-二氧六环(9.6mL)混合，得到淡黄色悬浮液。脱气20min，加入1,1'双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(31.1mg,38.1μmol)，充入N2，密封并于80℃搅拌3hr，然后冷却，用EtOAc(40mL)稀释。有机层用盐水和水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并经硅胶柱纯化(CH2Cl2,1%、2%、3%－5%、10%MeOH/CH2Cl2)，得到(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯，为棕色固体(140mg,56.5%)。ESI-LRMS m/e计算值：C34H38BN7O6[M+]651，实测值：652[M+H+]。
在10mL密封管中，将(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯(66.0mg,101μmol,Eq:1.00)、(S)-2-(5-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(50mg,101μmol)(Milbank,J等,WO2011/004276A1)和Cs2CO3(66.0mg,203μmol)与1,4-二氧六环(2.00mL)和水(0.5mL)混合，得到淡棕色悬浮液。脱气10min，加入四(三苯膦)钯(0)(11.7mg,10.1μmol)，加热反应混合物至80℃，搅拌16hr，用EtOAc(6mL)稀释并真空浓缩。残留物经硅胶柱纯化(CH2Cl2，2%、3%、5%、8%和10%MeOH/CH2Cl2)，得到(S)-2-(5-(2-(4-(2-((1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹喔啉-6-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色固体(62mg,68.7%)。ESI-LRMS m/e计算值：C46H58N10O7Si[M+]891，实测值：892[M+H+]。
在10mL梨形烧瓶中，将(S)-2-(5-(2-(4-(2-((1S,9S)-9-(甲氧基羰基氨基)-6,10-二氧代八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)喹喔啉-6-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔-丁基酯(30mg,33.7μmol)与EtOH(4mL)混合，得到橙色溶液。加入4N HCl的1,4-二氧六环(1.68mL,6.73mmol)溶液，于62℃搅拌过夜。真空浓缩粗品反应混合物，用Et2O中和，收集沉淀物，用Et2O洗涤并干燥，得到(4S,7S)-6,10-二氧代-4-(5-(4-(6-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)喹喔啉-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)八氢-1H-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基氨基甲酸甲酯，为橙色固体(21mg,94.4%)。ESI-LRMS m/e的计算值：C35H36N10O4[M+]660,实测值：661[M+H+]。
生物学实施例
采用复制子荧光素酶报告基因分析确定化合物对HCV GT1b复制子活性的抑制
Roche通过采用GT-1b Con1亚基因组双顺反复制子稳定地转染肝癌细胞系Huh-7，开发了2209-23细胞系。在获自R.Bartenschlager的处理过的Huh7细胞中创建亚基因组复制子细胞系(J Virol.2003Mar；77(5):3007-19)。通过采用H77株之一(但是不包括获自GT-1b Con1株的NS3蛋白的第一个75个氨基酸)置换GT-1b Con1亚基因组复制子的非结构性区域创建GT-1a H77亚基因组复制子载体pRLuc H771b75S/I(J Virol.200177:5352－59)。在获自R.Bartenschlager的处理过的Huh7细胞中创建GT-1a pRLuc H771b75S/I亚基因组复制子细胞系(J Virol.2003Mar；77(5):3007－19)。
所有亚基因组复制子细胞系均在杜氏改良伊戈尔培养基(Dulbecco’sModifiedEagle Medium)(DMEM-GlutamaxTM-I；Invitrogen Cat#10569-010)中培养。该培养基补充有10%胎牛血清(Invitrogen Cat#10082-147)、1%青霉素/链霉素(Mediatech Cat#30-002-CI)和500μg/ml的G418(Mediatech Cat#30-234-CI)。将细胞保持于37℃、潮湿的5%CO2环境中。
将2209-23细胞以每孔5000个细胞的细胞密度涂布在96孔板(Becton Dickinson,Cat#353296)。将细胞在90μl杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM-GlutamaxTM-I)(InvitrogenCat#10569-010)中涂布，培养基补充有5%胎牛血清(Invitrogen Cat#10082-147)、1%青霉素/链霉素(Mediatech Cat#30-002-CI)。将pRluc H771b75S/I细胞以3000个细胞/孔的密度涂布于96孔板，所述细胞在含有5%FBS和1%青霉素/链霉素的DMEM-GlutamaxTM-I中，最终体积为90μl。将细胞于37℃和5%CO2环境中平衡24小时，此时加入化合物。涂布后24小时加入化合物(或作为对照的介质)，化合物在体积为10ul的最终浓度为1%的DMSO中3倍稀释。加入化合物后72小时，采用海肾荧光素酶分析系统(Promega,cat#E2820)读取海肾荧光素酶报告基因信号。EC50值定义为与没有化合物存在的对照样品相比观察到的海肾荧光素酶报告基因减少50%时化合物的浓度，通过将化合物剂量-响应数据进行非线性拟合而测定。如果最大抑制百分率低于90%并且高于70%，则近似(approximated)为EC50。
采用HCV GT1b复制子细胞系测定WST1确定化合物的细胞毒性。
将2209-23细胞以每孔5000个细胞的细胞密度涂布于透明平底96孔板(BectonDickinson,Cat#353075)进行细胞存活能力研究。采用WST-1细胞扩增试验(RocheDiagnostic,Cat#11644807001)测定细胞存活能力。试验板以复制子分析中相同的模式构建。将化合物温育3天后，向每个孔中加入10μl的WST-1试剂，根据生产商说明于37℃和5%CO2温育2小时。采用MRX显示微量板读数仪(revelation microtiter plate reader)(LabSystem)于450nm测定吸收读数(参比滤波器(reference filter)于650nm)。CC50值定义为与不含化合物的未处理对照相比细胞存活能力下降50%所需要的化合物的浓度，该值通过将化合物剂量-响应数据进行非线性拟合而测定。代表性的试验数据如下面表II所示：
表II.
化合物编号 GT-1a(EC50)(nM) GT-1b(CC50)(μM)
I-1 10.6
I-2 156
I-3 2.95
I-4 0.13 8.16
I-5 0.92
I-6 1.5
I-7 1.1
为了明晰和理解的目的，通过说明和实施例相当详细地阐述了本发明。本领域技术人员显而易见的是，可以在权利要求的范围内进行改变和改进。因此，应当理解，上述说明书应当是说明性的而非限定性的。因此，本发明的范围并不取决于上述说明，而是取决于权利要求以及与该权利要求所要求保护的范围等同的范围。
本申请中引用的所有专利、专利申请和公布的内容以其全部内容、为了所有目的引入本文作为参考，如同每个专利、专利申请或公布所单独表述的程度和范围一样。

Claims (18)

1.式I或II化合物或其可药用的盐：
其中：
X为C1-C6烷基；
每个R独立为C1-C6烷基或苄基；
每个R’为C1-C6烷基；
B和D独立选自下列基团：
Q1和Q2独立为H或F；并且
L为
2.权利要求1的化合物，其中X为异丙基。
3.权利要求1的化合物，其中R’为甲基。
4.权利要求1－3中任一项的化合物，其中R为甲基。
5.权利要求1－3中任一项的化合物，其中R为苄基。
6.权利要求1－3中任一项的化合物，其中B为
7.权利要求1－3中任一项的化合物，其中D为
8.权利要求1－3中任一项的化合物，其中L为
9.权利要求1－3中任一项的化合物，其中L为
10.权利要求1－3中任一项的化合物，其中L为
11.权利要求1－3中任一项的化合物，其中L为
12.选自下列的化合物：
[(4S,7S)-4-(5-{4'-[2-((1S,9S)-9-[(甲氧基羰基)氨基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-1-基)-3H-咪唑-4-基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基]-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-苯基)-1H-苯并咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸苄基酯；
((4S,7S)-4-{5-[4-(6-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-喹喔啉-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基)-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-4,4-二氟-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[2-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-8-氧杂-2-氮杂-螺[4.5]癸-3-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯；和
{(4S,7S)-4-[5-(4'-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-6,10-二氧代-八氢-哒嗪并[1,2-a][1,2]二氮杂-7-基}-氨基甲酸甲酯。
13.权利要求1－12中任一项的化合物在制备治疗丙型肝炎病毒感染的药物中的用途。
14.权利要求1－12中任一项的化合物与抑制丙型肝炎病毒复制的免疫系统调节剂或抗病毒药物的组合在制备治疗丙型肝炎病毒感染的药物中的用途。
15.权利要求14的用途，其中所述免疫系统调节剂为干扰素或化学衍生化的干扰素。
16.权利要求14的用途，其中所述抗病毒药物选自
丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂、丙型肝炎病毒聚合酶抑制剂、
丙型肝炎病毒解旋酶抑制剂、丙型肝炎病毒引发酶抑制剂、
丙型肝炎病毒融合抑制剂及其组合。
17.权利要求1－12中任一项的化合物在制备在细胞中抑制HCV复制的药物中的用途。
18.组合物，该组合物包含权利要求1－12中任一项的化合物和可药用的赋形剂。
CN201280040554.3A 2011-10-10 2012-10-08 抗病毒化合物 Expired - Fee Related CN103917541B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161545216P 2011-10-10 2011-10-10
US61/545,216 2011-10-10
PCT/EP2012/069811 WO2013053657A1 (en) 2011-10-10 2012-10-08 Antiviral compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103917541A CN103917541A (zh) 2014-07-09
CN103917541B true CN103917541B (zh) 2016-08-17

Family

ID=46980962

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280040554.3A Expired - Fee Related CN103917541B (zh) 2011-10-10 2012-10-08 抗病毒化合物

Country Status (11)

Country Link
US (2) US9180193B2 (zh)
EP (1) EP2766365A1 (zh)
JP (1) JP5808496B2 (zh)
KR (1) KR101621181B1 (zh)
CN (1) CN103917541B (zh)
BR (1) BR112014008616A2 (zh)
CA (1) CA2847083A1 (zh)
HK (1) HK1199454A1 (zh)
MX (1) MX2014003705A (zh)
RU (1) RU2014117587A (zh)
WO (1) WO2013053657A1 (zh)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9326973B2 (en) 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN105530933B (zh) 2013-07-17 2018-12-11 百时美施贵宝公司 用于治疗hcv的包含联苯衍生物的组合产品
WO2017023631A1 (en) 2015-08-06 2017-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2017197046A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. C3-carbon linked glutarimide degronimers for target protein degradation
CN109562113A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的螺环降解决定子体
WO2017197055A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Heterocyclic degronimers for target protein degradation
WO2018224455A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Basf Se Substituted cyclopropyl derivatives

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004056818A1 (en) * 2002-12-19 2004-07-08 Astrazeneca Ab Oxazolidinone derivatives as antibacterial
CN1893978A (zh) * 2003-10-27 2007-01-10 沃泰克斯药物股份有限公司 用于hcv治疗的组合
WO2009003009A1 (en) * 2007-06-26 2008-12-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrrolidine as anti-infectives
WO2010148006A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors

Family Cites Families (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2062098A (en) 1934-05-25 1936-11-24 Acme Steel Co Strap seal and package
US2830344A (en) 1953-02-10 1958-04-15 Signode Steel Strapping Co Seal blank
US2871536A (en) 1955-01-18 1959-02-03 Signode Steel Strapping Co Seal blank
US3051424A (en) 1959-09-28 1962-08-28 Duhamel Gerard Pipe hanger
US3120938A (en) 1962-09-14 1964-02-11 Gregory Ind Inc Hanger
CH421810A (de) 1964-12-01 1966-09-30 Borbe Wanner Ag Klammerartiger Verschlussteil für Bandumreifungen
US3457600A (en) 1968-02-27 1969-07-29 Stanley Works Magazine seal blank
US3553794A (en) 1968-09-26 1971-01-12 Stanley Works Wireless strapping seal
CH509201A (de) 1970-12-10 1971-06-30 Strapex Ag Selbsttragendes Paket von gestapelten Verschlussplomben
US3722669A (en) 1971-03-19 1973-03-27 Signode Corp Fastener stack
US3996446A (en) 1973-04-30 1976-12-07 Hilti Aktiengesellschaft Attachment members arranged for weld fastening to a metallic base
JPS55130384A (en) 1979-03-31 1980-10-09 Taiyo Seikan Kk Handle ring welding equipment to can top plate
US4479625A (en) 1981-03-16 1984-10-30 Minerallac Electric Company Conduit hanger
JPH02262562A (ja) 1988-10-20 1990-10-25 Ishihara Sangyo Kaisha Ltd イミダゾール系化合物
EP0387472B1 (de) 1989-03-15 1993-03-03 STYNER & BIENZ AG Verdrillbarer Drahtbügel zum Verbinden oder Verschliessen von Gegenständen
CZ231092A3 (en) 1991-08-02 1993-02-17 Emhart Inc Arc welded joint between a carrier and a detail attached fixedly thereto
US5390883A (en) 1994-04-11 1995-02-21 Songhurst; Ronald W. Releasable mounting binder for wires and cables
US5552400A (en) * 1994-06-08 1996-09-03 Sterling Winthrop Inc. Fused-bicyclic lactams as interleukin-1β converting enzyme inhibitors
US5582297A (en) 1994-06-20 1996-12-10 Squire Corporation Limited Packaging
DE19505468C1 (de) 1995-02-17 1996-04-04 Sfs Ind Holding Ag Verpackung für Unterlegscheiben
US5560526A (en) 1995-03-06 1996-10-01 Jantzen; Jerry E. Cycle rack and bike rack
US5807876A (en) 1996-04-23 1998-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of IMPDH enzyme
US6054472A (en) 1996-04-23 2000-04-25 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Inhibitors of IMPDH enzyme
HUP0004421A3 (en) 1996-04-23 2002-10-28 Vertex Pharmaceuticals Inc Cam Urea derivatives and pharmaceutical compositions containing them, use thereof for the treatment of deseases mediated by impdh enzyme
BR9712544B1 (pt) 1996-10-18 2013-10-22 Inibidores de proteases de serina, composição farmacêutica compreendendo os mesmos e seus usos
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
EP0966465B1 (en) 1997-03-14 2003-07-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of impdh enzyme
US6010848A (en) 1997-07-02 2000-01-04 Smithkline Beecham Corporation Screening methods using an atpase protein from hepatitis C virus
EP1012180B1 (en) 1997-08-11 2004-12-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptide analogues
WO2000006529A1 (en) 1998-07-27 2000-02-10 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti S.P.A. Diketoacid-derivatives as inhibitors of polymerases
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
KR20010099623A (ko) 1998-08-21 2001-11-09 비로파마 인코포레이티드 바이러스 감염 및 관련 질병을 치료 또는 예방하는화합물, 조성물 및 방법
BR9913406A (pt) 1998-09-04 2002-01-29 Viropharma Inc Processo de tratamento de infecção causada por pelo menos um vìrus da famìlia flaviviridae e de doença associada com a citada infecção em um hospedeiro vivo possuindo a citada infecção
EP1115286A4 (en) 1998-09-25 2003-07-23 Viropharma Inc METHOD FOR TREATING AND PREVENTING VIRAL INFECTIONS AND DISEASES RELATED TO THEM
US6161804A (en) 1999-01-12 2000-12-19 Andrew Corporation Transmission line hanger
US6899305B2 (en) 1999-01-12 2005-05-31 Andrew Corporation Stackable transmission line hanger
EE200100492A (et) 1999-03-19 2002-12-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Ensüümi IMPDH inhibiitorid
US6079673A (en) 1999-04-01 2000-06-27 Andrew Corporation Transmission line hanger
US6566365B1 (en) 1999-11-04 2003-05-20 Biochem Pharma Inc. Method for the treatment of Flaviviridea viral infection using nucleoside analogues
DE10010933C1 (de) 2000-03-06 2001-08-16 Daimler Chrysler Ag Kabelhalter zur Befestigung von Kabeln in Fahrzeugstrukturen
AU2001261377A1 (en) 2000-05-10 2001-11-20 Smith Kline Beecham Corporation Novel anti-infectives
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
SV2003000617A (es) 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
JP2002233037A (ja) 2001-01-31 2002-08-16 Taihei Kk ケーブル敷設方法及びこの方法に使用するケーブル支持具
PL208713B1 (pl) 2001-06-11 2011-05-31 Virochem Pharma Inc Związek stanowiący pochodną tiofenu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca taki związek i jego zastosowanie
WO2002100846A1 (en) 2001-06-11 2002-12-19 Shire Biochem Inc. Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
AR035543A1 (es) 2001-06-26 2004-06-16 Japan Tobacco Inc Agente terapeutico para la hepatitis c que comprende un compuesto de anillo condensado, compuesto de anillo condensado, composicion farmaceutica que lo comprende, compuestos de benzimidazol, tiazol y bifenilo utiles como intermediarios para producir dichos compuestos, uso del compuesto de anillo con
US6841566B2 (en) 2001-07-20 2005-01-11 Boehringer Ingelheim, Ltd. Viral polymerase inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
JP2005511573A (ja) 2001-11-02 2005-04-28 グラクソ　グループ　リミテッド Ｈｃｖ阻害剤としての４−（５−員）−ヘテロアリールアシルピロリジン誘導体
WO2003037895A1 (en) 2001-11-02 2003-05-08 Glaxo Group Limited 4-(6-membered)-heteroaryl acyl pyrrolidine derivatives as hcv inhibitors
JP2005511572A (ja) 2001-11-02 2005-04-28 グラクソ　グループ　リミテッド Ｈｃｖ阻害剤としてのアシルジヒドロピロール誘導体
AR048401A1 (es) 2004-01-30 2006-04-26 Medivir Ab Inhibidores de la serina-proteasa ns3 del vhc
EP1962605A2 (en) 2005-12-12 2008-09-03 Merck & Co., Inc. 2-arylthiazole derivatives as cxcr3 receptor modulators
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20080078891A1 (en) 2006-09-15 2008-04-03 Blake Hobson Retention Clip Assembly
US7861981B2 (en) 2008-10-22 2011-01-04 Pratt & Whitney Canada Corp. Protective saddle mount for cable tie
WO2011004276A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Pfizer Limited Hepatitis c virus inhibitors
CN201487393U (zh) 2009-07-30 2010-05-26 成都泉涌科技有限公司 一种新型水管固定夹
WO2012123298A1 (en) * 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
WO2012175581A1 (en) * 2011-06-24 2012-12-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004056818A1 (en) * 2002-12-19 2004-07-08 Astrazeneca Ab Oxazolidinone derivatives as antibacterial
CN1893978A (zh) * 2003-10-27 2007-01-10 沃泰克斯药物股份有限公司 用于hcv治疗的组合
WO2009003009A1 (en) * 2007-06-26 2008-12-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrrolidine as anti-infectives
WO2010148006A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
JP5808496B2 (ja) 2015-11-10
KR101621181B1 (ko) 2016-05-13
EP2766365A1 (en) 2014-08-20
BR112014008616A2 (pt) 2017-04-18
KR20140076620A (ko) 2014-06-20
CN103917541A (zh) 2014-07-09
WO2013053657A1 (en) 2013-04-18
CA2847083A1 (en) 2013-04-18
JP2014528439A (ja) 2014-10-27
US9180193B2 (en) 2015-11-10
US20160169418A1 (en) 2016-06-16
RU2014117587A (ru) 2015-11-20
US20140255344A1 (en) 2014-09-11
US10215310B2 (en) 2019-02-26
MX2014003705A (es) 2014-07-22
HK1199454A1 (zh) 2015-07-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103917541B (zh) 抗病毒化合物
CN108299532B (zh) 一种抗病毒核苷类似物前药及其组合物、用途
CN105008350B (zh) 抗病毒化合物
CN103987723B (zh) Hcv ns5a 的抑制剂
CN104428289B (zh) 作为抗病毒剂的三唑化合物
TW201213321A (en) Hepatitis C virus inhibitors
CN104185624B (zh) 抗病毒化合物
US20120328565A1 (en) Antiviral compounds
CN103848821A (zh) 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物、药物组合物及它们的用途
CN105073726B (zh) 抗病毒三唑衍生物
CN104995179A (zh) 作为hcv抗病毒剂的n-杂芳基取代的苯胺衍生物
CN105051026A (zh) 抗病毒化合物
CN105026386B (zh) 抗病毒化合物
CN105051033B (zh) 抗病毒化合物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1199454

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160817

Termination date: 20171008

REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1199454

Country of ref document: HK