EA003906B1 - Трипептидные ингибиторы вируса гепатита c - Google Patents

Трипептидные ингибиторы вируса гепатита c Download PDF

Info

Publication number
EA003906B1
EA003906B1 EA200100228A EA200100228A EA003906B1 EA 003906 B1 EA003906 B1 EA 003906B1 EA 200100228 A EA200100228 A EA 200100228A EA 200100228 A EA200100228 A EA 200100228A EA 003906 B1 EA003906 B1 EA 003906B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
optionally substituted
tert
formula
amido
Prior art date
Application number
EA200100228A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200100228A1 (ru
Inventor
Монсе Ллина-Брюне
Мюррей Д. Байли
Даль Камерон
Анн-Мари Фоше
Элиза Гиро
Натали Гудреу
Тедди Альмос
Марк-Андре Пупар
Жан Ранкур
Иула С. Тсантризо
Доминик М. Верник
Брюно Симоно
Original Assignee
Бёрингер Ингельхайм (Канада) Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бёрингер Ингельхайм (Канада) Лтд. filed Critical Бёрингер Ингельхайм (Канада) Лтд.
Publication of EA200100228A1 publication Critical patent/EA200100228A1/ru
Publication of EA003906B1 publication Critical patent/EA003906B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

В изобретении описаны рацематы, диастериоизомеры и оптические изомеры формулы (I), где В обозначает Н, С- или Сарил, C-C-аралкил, Het или (низш.)алкил-Het, все необязательно замещенные C-C-алкилом, C-C-алкоксигруппу, C-C-алканоил, гидроксигруппу, гидроксиалкил, галоген, галоалкил, нитро-, цианогруппу, цианалкил, аминогруппу, необязательно замещенную C-C-алкилом, амидогруппу или (низш.)алкиламид или В обозначает ацильное производное формулы R-C(O)-, карбоксил формулы R-О-С(О)-, амид формулы R-N(R)-C(O)-, тиоамид формулы R-N(R)-C(S)-или сульфонил формулы R-SO, где Rобозначает Н или C-C-алкил, и Y обозначает Н или C-C-алкил, Rобозначает C-C-алкил, C-C-циклоалкил или C-C-алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, C-C-алкоксигруппой, C-C-тиоалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидогруппой, С-или Сарилом или C-C-аралкилом, Rобозначает CH-R, NH-R, O-Rили S-R, где Rобозначает насыщенный или ненасыщенный C-C-циклоалкил или C-C(алкилциклоалкил), необязательно моно-, ди- или тризамещенный радикалом R, или Rобозначает С- или Сарил или C-C-аралкил, необязательно замещенный, или Rобозначает Het или (низш.)алкил-Het, оба необязательно замещенные, Het или (низш.)алкил-Het, карбоксил, карбокси(низш.)алкил, C- или Сарил, C-C-аралкил или Het, где арил, аралкил или Het являются необязательно замещенными, и Rобозначает Н, C-C-алкил, C-C-циклоалкил, C-C-алкенил или C-C-алкинил, все необязательно замещенные галогеном, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.

Description

Настоящее изобретение относится к соединениям, способам их синтеза, композициям и способам лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С (НСУ). В частности, настоящее изобретение относится к новым пептидным аналогам, к фармацевтическим композициям, содержащим такие аналоги, и к способам применения этих аналогов для лечения НСУинфекции. Настоящее изобретение также относится к способам и промежуточным продуктам синтеза этих пептидных аналогов.
Предпосылки создания изобретения
Вирус гепатита С (НСУ) является основным возбудителем гепатита, который не относится к гепатитам А и В и который возникает после переливания крови и поражает людей во всем мире. Было установлено, что свыше 150 миллионов людей в мире заражено таким вирусом. Высокий процент носителей становится хронически инфицированными, а у многих пациентов это приводит к хроническому заболеванию печени, так называемому хроническому гепатиту С. В свою очередь эта группа больных имеет высокий риск заболевания такой серьезной болезнью печени, как цирроз печени, печеночно-клеточный рак и последняя стадия болезни печени, приводящая к смерти.
Механизм, с помощью которого происходит сохранение вируса НСУ в организме и обеспечивается высокий коэффициент заболеваемости хронической болезнью печени, пока недостаточно изучен. Не известно, каким образом НСУ взаимодействует с иммунной системой хозяина и преодолевает ее действие. Кроме того, до настоящего времени еще не выявлена роль клеточных и гуморальных иммунных ответов в защите от НСУ-инфекции и при заболевании гепатитом. Имеются данные о том, что иммуноглобулины могут применяться для профилактики связанного с переливанием крови вирусного гепатита, однако Центр по контролю заболеваемости в настоящее время не рекомендует лечение с использованием иммуноглобулинов для этой цели. Отсутствие эффективного защитного иммунного ответа затрудняет разработку вакцины или адекватных профилактических мер после экспозиции, и поэтому в ближайшее время надежды в основном возлагаются на антивирусные средства.
С целью выявления фармацевтических агентов, обладающих эффективностью в отношении лечения НСУ-инфекции у пациентов, страдающих хроническим гепатитом С, были проведены различные клинические испытания. В этих испытаниях применяли интерферональфа индивидуально или в сочетании с другими антивирусными агентами. Эти исследования показали, что у основного большинства участников эксперимента не обнаружено реакции на такие схемы лечения, а из тех участников, кото рые оказались чувствительными к лечению, у большей части после окончания лечения наблюдали рецидив.
Таким образом, в настоящее время терапия с использованием интерферона (ΙΡΝ) остается единственным доступным методом лечения пациентов, страдающих хроническим гепатитом С, с доказанной в клинических условиях эффективностью. Однако длительность действия такого лечения является непродолжительной, а лечение интерфероном вызывает, кроме того, серьезные побочные действия (т.е. ретинопатию, тиреоидит, острый панкреатит, депрессию), что снижает качество жизни пациентов, подвергающихся лечению.
В настоящее время интерферон в сочетании с рибавирином предложен для лечения пациентов, не чувствительных только к ΙΡΝ. Однако побочные действия, вызванные ΙΡΝ, не уменьшаются при такой совместной терапии.
Таким образом, существует необходимость в разработке эффективных антивирусных агентов для лечения НСУ-инфекции, которые были бы лишены недостатков существующих методов лечения на основе фармацевтических средств.
НСУ представляет собой заключенную в оболочку положительную цепь РНК-ового вируса семейства Р1ау1ушбае. Геном НСУ, представленный одноцепочечной РНК, состоит из 9500 нуклеотидов и имеет одну открытую рамку считывания (ОРС), которая кодирует один большой полипротеин, состоящий примерно из 3000 аминокислот. В зараженных клетках этот полипротеин расщепляется во многих сайтах клеточными и вирусными протеазами с образованием структурных и неструктурных (N8) протеинов. В случае НСУ под действием двух вирусных протеаз образуются зрелые неструктурные протеины (N82, N83, Ν84Α, Ν84Β, Ν85Α и Ν85Β). Первая из них, которая пока еще недостаточно охарактеризована, расщепляет связь Ν82-Ν83, а вторая представляет собой серинпротеазу, содержащуюся в Ν-концевой области Ν83 (далее обозначена как ЖЗ-протеаза). и опосредует все последующие расщепления, происходящие по ходу транскрипции относительно Ν83, как в цис-ориентации в сайте расщепления Ν83-Ν84Α, так и в транс-ориентации в остальных сайтах Ν84Α-Ν84Β, Ν84Β-Ν85Α, Ν85Α-Ν85Β. Протеин Ν84Α, вероятно, обладает множественными функциями, действуя в качестве кофактора для Ν83-протеазы и возможно способствуя локализации на мембране Ν83 и других вирусных репликаз. Образование комплекса протеина Ν83 с Ν84Α, вероятно, необходимо для процессирования, усиления протеолитической эффективности во всех сайтах. Протеин Ν83 также обладает нуклеозидтрифосфатазной активностью и РНК-геликазной активностью. Ν85Β представляет собой РНК-зависимую
РНК-полимеразу, принимающую участие в репликации НСУ.
Общая стратегия разработки антивирусных агентов состоит в инактивации кодируемых вирусом ферментов, которые важны для репликации вируса. В этой связи в заявке XVО 97/06804 описан (-)-энантиомер нуклеозидного аналога цитозин-1,3-оксатиолана (также известный как 3ТС), активный в отношении НСУ. Хотя в проведенных ранее клинических испытаниях для этого соединения обнаружена активность в отношении ВИЧ и НВУ, пока нет клинического подтверждения его активности в отношении НСУ и не выявлен его механизм действия в отношении этого вируса.
Значительные усилия, предпринятые для выявления соединений, которые ингибируют И83-протеазу или РНК-геликазу НСУ, привели к следующим результатам.
В патенте И8 5633388 описаны замещенные гетероциклом карбоксамиды и их аналоги, обладающие активностью в отношении НСУ. Объектом воздействия этих соединений является геликазная активность протеина N83 вируса, однако пока нет данных об их клинических испытаниях.
У С1ш и др. (Те!. Ьей. (1996), 7229-7232) описан фенантренхинон, обладающий активностью в отношении N83-протеазы НСУ ίη νίίτο. Никакие дополнительные данные об этом соединении не опубликованы.
В научном докладе, представленном на Девятой международной конференции по антивирусным исследованиям (ΝίηίΗ 1п1егпа11опа1 Со η Ге ге псе οη Αηΐίνίπι1 Кекеагсй, ИгаЬапбац РикуДиша. 1арап (1996) (Ащйзга1 Кекеагсй, (1996), 30, 1, А23 (тезис 19)), сообщалось о триазолидиновых производных, обладающих ингибирующей активностью в отношении НСУпротеазы.
В некоторых исследованиях описаны соединения, обладающие ингибирущим действием в отношении других серинпротеаз, таких как человеческая эластаза лейкоцитов. Одна группа таких соединений описана в νθ 95/33764 (НоесйД Малом Кои88е1, 1995). Описанные в данной заявке пептиды представляют собой морфолинилкарбонилбензоилпептидные аналоги, которые структурно отличаются от пептидов по настоящему изобретению.
В νθ 98/17679 (на имя Уег!ех Рйагтасеи41са18 1пс.) описаны ингибиторы серинпротеазы, в частности N83-протеазы вируса гепатита С. Эти ингибиторы представляют собой пептидные аналоги, основой которых является природный субстрат Ν85Α/5Β. Хотя некоторые из этих трипептидов являются известными, характерной особенностью всех указанных пептидных аналогов является то, что они содержат Сконцевую активированную карбонильную функцию. Для этих аналогов также известно, что они являются активными в отношении дру гой серинпротеазы, и, таким образом, они не являются специфичными для N83-протеазы НСУ.
В сообщениях, опубликованных фирмой НоГГтап ЬаКосйе, также содержатся сведения о гексапептидах, являющихся ингибиторами протеиназы, в качестве антивирусных агентов для лечения НСУ-инфекции. Эти пептиды содержат альдегид или бороновую кислоту на С-конце.
У 8!ешкиЫег и др. и 1пда111пе11а и др. опубликованы данные о продукте ингибирования №4А-4В (Вюсйеткйу (1998), 37, 8899-8905 и 8906-8914). Однако описанные в этих публикациях пептиды или пептидные аналоги не включают пептиды по настоящему изобретению и не могут привести к их созданию.
Одно из преимуществ настоящего изобретения состоит в том, что в нем предложены трипептиды, которые обладают ингибирующей активностью в отношении N83-протеазы вируса гепатита С.
Еще одно преимущество настоящего изобретения заключается в том, что эти пептиды специфически ингибируют N83-протеазу и не проявляют заметной ингибирующей активности в концентрации до 300 мкМ в отношении других серинпротеаз, таких как эластаза лейкоцитов человека (НЕЕ), эластаза панкреатической железы свиньи (РРЕ) и бычий химотрепсин панкреатической железы, или цистеинпротеаз, таких как катепсин В печени человека (Са! В).
Помимо этого еще одним преимуществом настоящего изобретения является то, что в нем предлагаются небольшие пептиды с низкой молекулярной массой, которые обладают способностью проникать через клеточные мембраны и могут проявлять активность в культуре клеток и ίη νίνο и отличаются хорошим фармакокинетическим профилем.
Краткое изложение сущности изобретения
В изобретении предлагаются соединения формулы (I), в том числе его рацематы, диастереоизомеры и оптические изомеры я2
Я’ |------В’ I 15с<СН2), ! о N 11-ОН н II 0 (I) в которой
В обозначает Н, С6- или С10арил, С7-С16 аралкил, Не! или (низш.)алкил-Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппу С1-С6алканоил, гидроксигруппу, гидроксиалкил, галоген, галоалкил, нитрогруппу, цианогруппу, цианалкил, необязательно замещенную С1-С6алкилом аминогруппу, амидогруппу или (низш.)алкиламид, или
В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, карбоксил формулы К4-О-С(О)-, амид формулы К4-Ы(К5)-С(О)-, тиоамид форму лы Κ4-Ν(Κ5)-Ο(8)- или сульфонил формулы Я48О2, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1 -С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидоили (низш.)алкиламидом, (II) Сз-С7циклоалкил, С3-С7циклоалкокси или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом аминогруппой, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С6алкилом, амидогруппу или (низш.)алкиламид, (IV) С6- или С10арил или С7-С14аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, и
Я5 обозначает Н или С1-С6алкил, при условии, что когда Я4 обозначает амид или тиоамид, то Я4 не обозначает указанную в (II) циклоалкоксигруппу,
Υ обозначает Н или С1-С6алкил,
Я3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидогруппой, С6- или С10арилом или С7-С16аралкилом,
Я2 обозначает СН2-Я20, ΝΗ-Κ20. О-Я20 или 8-Я20, где
Я20 обозначает насыщенный или ненасыщенный С3-С7циклоалкил или С4-С10(алкилциклоалкил), все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом Я21, или
Я20 обозначает С6- или С10арил или С7-С14 аралкил, все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом Я21, или
Я20 обозначает Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом Я21, где
Я21 в каждом случае независимо обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, (низш.)тиоалкил, сульфонил, ΝΟ2, ОН, 8Н, галоген, галоалкил, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10арилом, С7С14аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!, либо означает амидогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10арилом, С7-С16аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!, или означает карбоксил, карбокси(низш.)алкил, С6или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом Я22, где
Я22 обозначает С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом, сульфонил, (низш.)алкилсульфонил, ΝΟ2, ОН, 8Н, галоген, галоалкил, карбоксил, амид, (низш.)алкиламид или Не!, необязательно замещенный С1-С6алкилом,
Я1 обозначает Н, С1-С6 алкил, С3С7циклоалкил, С2-С6алкенил или С2-С6алкинил, все необязательно замещенные галогеном, или его фармацевтически приемлемая соль либо сложный эфир.
Объектом настоящего изобретения также является фармацевтическая композиция, включающая эффективное в отношении вируса гепатита С количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли либо его сложного эфира в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом.
Еще одним объектом изобретения является способ лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного в отношении вируса гепатита С количества соединения формулы I или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира или описанной выше композиции.
Еще одним объектом изобретения является способ ингибирования репликации вируса гепатита С путем обработки вируса ингибирующим №3-протеазу вируса гепатита С количеством соединения формулы I или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира или описанной выше композиции.
Другим объектом изобретения является способ лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного в отношении вируса гепатита С количества комбинации, включающей соединения формулы I или его терапевтически приемлемую соль либо сложный эфир. Согласно одному из вариантов фармацевтические композиции по изобретению включают дополнительный иммуномодулятор. Примеры дополнительных иммуномодуляторов включают α-, β- или γ-интерфероны, но не ограничены ими.
Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления Определения
Если не указано иное, то в контексте настоящего описания используемые понятия имеют следующие значения.
В тех случаях, когда для обозначения конфигурации заместителя, например Я1 в соединении формулы I, используют символы (Я) или (8), то такое обозначение относится ко всему соединению, а не только к заместителю.
Природные аминокислоты, за исключением глицина, содержат хиральный атом углерода. Если не указано иное, то предпочтительными являются соединения, содержащие природные аминокислоты с Ь-конфигурацией. Однако предполагается, что в конкретных случаях некоторые аминокислоты формулы I могут иметь либо Ό-, либо Ь-конфигурацию или могут являться смесями Ό- и Ь-изомеров, включая рацемические смеси.
Обозначение Р1, Р2 и Р3 в контексте настоящего описания относится к положению аминокислотных остатков, начиная с С-конца пептидных аналогов в сторону Ν-конца [т.е. Р1 обозначает положение 1 относительно С-конца, Р2 обозначает положение 2 относительно Сконца и т.д.) (см. Вегдег А. и ЗсЬесЬкет I., Тгаизасйоиз о£ 1Не Яоуа1 Зоаеку Ьопйои зепез (1970), В257, 249-264].
Сокращения α-аминокислот, использованные в описании, приведены в таблице А.
Таблица А
Аминокислота Символ
1-Аминоциклопропилкарбоновая кислота Асса
Аланин А1а
Аспарагиновая кислота Азр
Цистеин Суз
Циклогексилглицин (также называемый: 2- СЬд
амино-2-циклогексилуксусной кислотой)
Глутаминовая кислота О1и
Изолейцин 11е
Лейцин Ьеи
Фенилаланин РЬе
Пролин Рго
Валин Уа1
трет-Бутилглицин ТЬд
В контексте настоящего описания понятие 1-аминоциклопропилкарбоновая кислота (Асса) относится к соединению формулы о
В контексте настоящего описания понятие трет-бутилглицин относится к соединению формулы о
Понятие остаток со ссылкой на аминокислоту или аминокислотное производное обозначает радикал, полученный из соответствующей α-аминокислоты путем удаления гидроксильной или карбоксильной группы и одного водорода α-аминогруппы. Например, понятия О1и, А1а, О1у, 11е, Агд, Азр, РЬе, Зет, Ьеи, Суз, Азп, Заг и Туг обозначают остатки Ь-глутамина, Ь-аланинина, глицина, Ь-изолейцина, Ьаргинина, Ь-аспарагиновой кислоты, Ь-фенилаланина, Ь-серина, Ь-лейцина, Ь-цистеина, Ьаспарагина, саркозина и Ь-тирозина соответственно.
Понятие боковая цепь со ссылкой на аминокислоту или аминокислотный остаток обозначает группу, присоединенную к атому αуглерода α-аминокислоты. Например, Я-группа боковой цепи глицина обозначает водород, аланина - метил, валина - изопропил. Конкретные Я-группы или боковые цепи α-аминокислот описаны в А.Е.ЕеЬщидет'з 1ех1 оп ВюсЬет1зкту (см. главу 4).
Понятие гало в контексте настоящего описания обозначает галогеновый заместитель, выбранный из группы, включающей бром, хлор, фтор или йод.
Понятие С|-С6алкил или (низш.)алкил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим заместителем обозначает ациклические алкильные заместители с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, например метил, этил, пропил, бутил, трет-бутил, гексил, 1метилэтил, 1-метилпропил, 2-метилпропил, 1,1диметилэтил.
Понятие С3-С7циклоалкил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим заместителем обозначает циклоалкильный заместитель, содержащий от 3 до 7 атомов углерода, например циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Это понятие также включает спироциклическую группу, такую как спироциклопропил или спироциклобутил:
Понятие ненасыщенный циклоалкил включает, например, циклогексенил:
Понятие С4-С10(алкилциклоалкил) в контексте настоящего описания обозначает циклоалкильный радикал, содержащий от 3 до 7 атомов углерода, связанных с алкильным радикалом, причем присоединенные радикалы содержат до 10 атомов углерода, например циклопропилметил, циклопентилэтил, циклогексилметил, циклогексилэтил или циклогептилэтил.
Понятие С2-С10алкенил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает алкильный радикал, как он определен выше, содержащий от 2 до 10 атомов углерода и, кроме того, содержащий по меньшей мере одну двойную связь. Например, алкенил включает аллил и винил.
Понятие С1-С6алканоил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает 1оксоалкильные радикалы, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, например формил, ацетил, 1оксопропил (пропионил), 2-метил-1-оксопропил, 1-оксогексил и т. п.
Понятие С1-С6алкокси в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает радикал -О(С1-С6алкил), где алкил имеет указанные выше значения, содержащий до 6 атомов углерода.
Примеры алкокси включает метокси, этокси, пропокси, 1-метилэтокси, бутокси и 1,1диметилэтокси. Последний радикал обычно называют трет-бутокси.
Понятие С3-С7циклоалкокси в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает С3-С7 циклоалкильную группу, связанную с атомом кислорода, такую как:
Понятие С6- или Сю-арил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает либо ароматическую моноциклическую группу, содержащую 6 атомов углерода, либо ароматическую бициклическую группу, содержащую 10 атомов углерода. Например, арил включает фенил, 1нафтил или 2-нафтил.
Понятие С7-С16аралкил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает С6- или Сю-арил, как он определен выше, связанный с алкильной группой, где алкил имеет указанные выше значения, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Примерами С7-С16аралкила являются бензил, бутилфенил и 1-нафтилметил.
Понятие аминоаралкил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает аминогруппу, замещенную С7-С16аралкильной группой, такую, как аминоаралкил:
Понятие (низш.)алкиламид в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает амид, монозамещенный С1-С6алкилом, такой как
Понятие карбокси(низш.)алкил в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает карбоксильную группу (СООН), связанную через (низш.)алкильную группу, как она определена выше, и включает, например, масляную кислоту.
Понятие гетероцикл или Не! в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим радикалом обозначает одновалентный радикал, полученный удалением водорода из 5-, 6- или 7-членного насыщенного или ненасыщенного (в том числе ароматического) гетероцикла, содержащего от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из ряда, включающего азот, кислород и серу. Кроме того, Не! в контексте настоящего описания обозначает гетероцикл, как он определен выше, сконденсированный с одним или несколькими другими циклическими группами, которые могут представлять собой гетероцикл или любую другую циклическую группу. В качестве примеров соответствующих гетероциклов можно назвать пирролидин, тетрагидрофуран, тиазолидин, пиррол, тиофен, диазепин, 1Н-имидазол, изоксазол, тиазол, тетразол, пиперидин, 1,4-диоксан, 4-морфолин, пиридин, пиримидин, тиазол [4,5-Ь] пиридин, хинолин или индол или следующие гетероциклы:
Понятие (низш.)-Не! в контексте настоящего описания обозначает гетероциклический радикал, как он определен выше, связанный через алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, где алкил имеет указанные выше значения и содержит от 1 до 6 атомов углерода. Примеры (низш.)алкил-Не! включают
Понятие фармацевтически приемлемый сложный эфир в контексте настоящего описания индивидуально или в сочетании с другим заместителем обозначает сложные эфиры соединения формулы I, в которых любая из карбоксильных функций в молекуле, предпочтительно С-концевая функция, замещена алкоксикарбонильной функцией:
где фрагмент В сложного эфира выбирают из группы, включающей алкил (например метил, этил, н-пропил, трет-бутил, н-бутил), алкоксиалкил (например метоксиметил), алкоксиацил (например ацетоксиметил), аралкил (например бензил), арилоксиалкил (например феноксиметил), арил (например фенил), необязательно замещенный галогеном, С1-С4алкилом или С1-С4 алкоксигруппой. Другие пригодные в качестве пролекарства сложные эфиры описаны в публикации Эеыдп о£ ртобшдк, Виибдаатб Н., изд-во Екеу1ет (1985), которая включена в настоящее описание в качестве ссылки. Такие фармацевтически приемлемые сложные эфиры обычно гидролизуются ίη νίνο при введении млекопитающему и превращаются в кислотную форму соединения формулы I.
Что касается описанных выше сложных эфиров, то, если не указано иное, любой присутствующий алкильный фрагмент предпочтительно содержит 1-16 атомов углерода, особенно предпочтительно 1-6 атомов углерода. Любой присутствующий в таких сложных эфирах арильный фрагмент предпочтительно содержит фенильную группу.
В частности, сложные эфиры могут представлять собой С1-С16алкиловые эфиры, незамещенный бензиловый эфир или бензиловый эфир, замещенный по меньшей мере одним заместителем, выбранным из галогена, С1-С16алкила, С1-С16алкокси-, нитрогруппы или трифторметила.
Понятие фармацевтически приемлемая соль в контексте настоящего описания включает соли, полученные из фармацевтически приемлемых оснований. Примерами приемлемых оснований являются холин, этаноламин и этилендиамин. В объем настоящего изобретения также включены соли Να +, К + и Са44 (см. также публикацию Рйаттасеи!1са1 χαΐΐχ. Виде, 8.М. и др., 1. Рйатт. 8съ, (1977), 66, 1-19, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки).
Предпочтительные варианты осуществления
В объем данного изобретения включены соединения формулы I, в которых радикал В предпочтительно обозначает С6- или С10арил, С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно замещенной С1С6алкилом, или же радикал В предпочтительно обозначает Не! или (низш.)алкил-Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой необязательно замещенной С1-С6алкилом.
В другом варианте В предпочтительно обозначает В4-8О2, где В4 предпочтительно обозначает С1-С6алкил, амидо, (низш.)алкиламид, С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом.
Кроме того, в другом варианте В предпочтительно обозначает ацильное производное формулы В4-С(О)-, где В4 предпочтительно обозначает:
(I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10 алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидо-, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом, (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом.
В другом варианте В предпочтительно обозначает карбоксил формулы В4-О-С(О)-, где
В4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидоили (низш.)алкиламидом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.) алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.) алкиламидом. В альтернативном варианте В предпочтительно обозначает амид формулы
ΚγΝ(Β5Χ(Ο)-, где Ρ.·ι предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещен- ный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.) алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.) алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1С6алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, и Р5 предпочтительно обозначает Н или метил.
В другом варианте В предпочтительно обозначает тиоамид формулы ^-N^^8)-, где В4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом или С1-С6 алкоксигруппой, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амино- или амидогруппой.
Более предпочтительно В обозначает С6или С10арил, необязательно замещенный С1-С6 алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, гало геном, галоалкилом, нитроцианогруппой, цианалкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, и в этом случае В, например, обозначает:
или В наиболее предпочтительно обозначает Не!, необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, галогеном, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой необязательно моно-или дизамещенной С1-С6алкилом, в этом случае В, например, обозначает:
В другом варианте В наиболее предпочтительно обозначает К4-8О2-, где К4 предпочтительно обозначает С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, все необязательно замещенные С1С6алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, и в этом случае В, например, обозначает
В альтернативном варианте В наиболее предпочтительно обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, где К4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкоксигруппой, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси) карбонилом, и в этом случае В, например, обозначает
А -А а;ад0 ύ ,ό.
о
или Кд предпочтительно обозначает (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидроксигруппой, и в этом случае В, например, обозначает
или К4 предпочтительно обозначает (V) Не!, необязательно замещенный С1-С6 алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой, и в этом случае В, например, обозначает
В альтернативном варианте В наиболее предпочтительно обозначает карбоксил формулы Кд-О-С(О)-, где Кд предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси- или амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6ал килом, и в этом случае В, например, обозначает ΑΑ ΑΑ;αχ Оа или К4 предпочтительно обозначает (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой, необязательно монозамещенной С1-С6алкилом, и в этом случае В, например, обозначает:
В альтернативном варианте В наиболее предпочтительно обозначает амид формулы К4Н(К5)-С(О)-, где К4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещен- ный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, и
К5 обозначает Н или метил, и в этом случае В, например, обозначает:
или В4 предпочтительно обозначает (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-Сзалкилом, и в этом случае В, например, обозначает:
н или В4 предпочтительно обозначает (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, необязательно замещенной С1 -С6алкилом, или (V) Не!, необязательно замещенный С1С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, и в этом случае В, например, обозначает:
В другом варианте В наиболее предпочтительно обозначает тиоамид формулы В4-ЫНС(8)-, где В4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил или (II) С3-С7 циклоалкил, и в этом случае В, например, обозначает:
Наиболее предпочтительно В обозначает амид формулы В4-НН-С(О)-, где В4 предпочтительно обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещен- ный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом,
•'γ’Ά н : н . о или ° ;
или В4 предпочтительно обозначает (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, и в этом случае В, например, обозначает:
Еще более предпочтительно В обозначает трет-бутоксикарбонил (Вос) или
Предпочтительно Υ обозначает Н или метил. Более предпочтительно Υ обозначает Н.
Предпочтительно В3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, ацетамидогруппой, С6- или С10арилом или С7С16аралкилом, и в этом случае В, например, обозначает
Более предпочтительно В3 обозначает боковую цепь трет-бутилглицина (ТЬд), Не, ναΙ, Сйд или
Наиболее предпочтительно В3 обозначает боковую цепь ТЬд, Сйд или ναΐ.
Предпочтительны далее те соединения формулы I, в которых В2 предпочтительно обозначает 8-В20 или О-В20, где В20 предпочтительно обозначает С6- или С10арил, С7-С16аралкил, Не! или -СН2-Не!, все необязательно моно-, диили тризамещенные радикалом В21.
Предпочтительно В21 обозначает С1-С6 алкил, С1-С6алкокси, (низш.)тиоалкил, амино- или амидогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10арилом, С7С16 аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил, С6- или С10арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом В22. Более предпочтительно В21 обозначает С1С6алкил, С1-С6алкокси, амино, ди(низш.)алкиламино, (низш.)алкиламид, С6- или С10арил или Не!, где арил или Не! необязательно замещены радикалом В22.
Предпочтительно В22 обозначает С1С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, моно- или ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.)алкиламид, сульфонилалкил,
ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил или Не!. Более предпочтительно В22 обозначает С1С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, моно- или ди(низш.)алкиламиногруппу, амидогруппу, (низш.)алкиламид, галоген, трифторметил или Не!. Еще более предпочтительно В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, галоген, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (низш.)алкилом, амидогруппу, (низш.)алкиламид или Не!. Наиболее предпочтительно В22 обозначает метил, этил, изопропил, трет-бутил, метокси, хлор, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (низш.)алкилом, амидогруппу, (низш.)алкиламид или (низш.)алкил-2-тиазол.
В альтернативном варианте К2 предпочтительно выбирают из ряда, включающего
Более предпочтительно К2 обозначает 1нафтилметокси-, 2-нафтилметокси-, бензилокси-, 1-нафтилокси-, 2-нафтилокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом К21. Наиболее предпочтительно К2 обозначает 1-нафтилметокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом К21, который имеет указанные выше значения, и в этом случае К2, например, обозначает
Еще более предпочтительно К2 обозначает:
Более предпочтительно К21А обозначает
- С1-С6алкил, такой как изопропил, третбутил или циклогексил,
- С1-С6алкоксигруппу, такую как метокси,
- (низш.)тиоалкил, такой как
- галоген, такой как хлор,
- аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, или С6-или С10арил, и в этом случае К21А, например, обозначает диметиламино, Ри-Ы(Ме)-,
- незамещенный С6- или С10арил, С7-С16 аралкил, такой как, например, фенил или
или К21А более предпочтительно обозначает Не!, необязательно замещенный радикалом К22, где К22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6 алкокси, амидо, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С.’|-С6алкилом, или Не!, и в этом случае К21А, например, обозначает
Наиболее предпочтительно К21А обозначает С6-, Сюарил или Не!, все замещенные радикалом К22, как определено выше, и в этом случае К21А, например, обозначает:
Еще более предпочтительно К2 обозначает:
где К22А предпочтительно обозначает С1-С6 алкил (например метил), С1-С6алкокси (например метокси) или галоген (например хлор), К22В предпочтительно обозначает С1-С6алкил, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, и К21В предпочтительно обозначает С1С6алкил, С1-С6алкокси, амино, ди(низш.)алкиламино, (низш.)алкиламид, NО2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил. Более предпочтительно К21В обозначает С1-С6алкокси или ди(низш.)алкиламино. Наиболее предпочтительно К.2ц; обозначает метокси.
Как описано выше, сегмент Р1 соединений формулы Ι обозначает циклобутильное или циклопропильное кольцо, каждое из которых необязательно замещено радикалом К1.
Предпочтительно К1 обозначает Н, С1С3алкил, С3-С5циклоалкил или С2-С4алкенил, необязательно замещенный галогеном. Более предпочтительно К1 обозначает этил, винил, циклопропил, 1- или 2-бромэтил или 1- или 2бромвинил. Наиболее предпочтительно К1 обозначает винил.
Когда К1 не обозначает Н, то Р1 предпочтительно обозначает циклопропильную систему формулы
о где С1 и С2 каждый обозначает асимметричный атом углерода в положениях 1 и 2 циклопропильного кольца. Независимо от других возможных асимметричных центров на других сегментах соединений формулы Ι присутствие этих двух асимметричных центров обозначает, что соединения формулы Ι могут существовать в виде рацемических смесей диастереоизомеров. Как проиллюстрировано в приведенных ниже примерах, могут быть получены рацемические смеси, которые затем можно разделить на индивидуальные оптические изомеры, или эти оптические изомеры могут быть получены с помощью хирального синтеза.
Отсюда следует, что соединение формулы Ι может существовать в виде рацемической смеси диастереоизомеров относительно атома угле рода в положении 1, причем когда К1 на атоме углерода в положении 2 находится в син-ориентации относительно карбонильной группы в положении 1, оно представлено радикалом:
или же соединение формулы I может существовать в виде рацемической смеси диастереоизомеров, причем когда К1 на атоме углерода в положении 2 находится в антиориентации относительно карбонильной группы в положении 1, оно представлено радикалом:
В свою очередь, рацемические смеси могут быть разделены на индивидуальные оптические изомеры.
Наиболее важное значение согласно изобретению имеет добавление заместителя К на атоме углерода в положении 2, а также пространственная ориентация сегмента Р1. Особенность касается конфигурации асимметричного углерода в положении 1. Предпочтительным вариантом осуществления является вариант, когда К1 не обозначает Н и атом углерода в положении 1 имеет К-конфигурацию.
Более конкретно, введение заместителя (К1) в С2 оказывает влияние на активность, когда К1 встроен таким образом, чтобы С1 находился в К-конфигурации. Например, соединения 901 (1К,28) и 203 (1К,2К) обладают активностью в концентрации 25 и 82нМ соответственно. По сравнению с незамещенным циклопропильным соединением 111 (475нМ) обнаружено заметное повышение активности. Кроме того, как установлено для соединений 901 и 203, когда углерод в положении 1 имеет К-конфигурацию, ингибирование Ы83-протеазы НСУ может быть дополнительно увеличено за счет соответствующей конфигурации заместителя К1 (например алкила или алкилена) на атоме углерода в положении 2 циклопропильного кольца. Так, например, соединение, в котором К1 находится в син-ориентации относительно карбоксила, обладает более высокой активностью (25нМ), чем его анти-энантиомер (82нМ). Обнаружена роль К-конфигурации относительно 8конфигурации на С1 при сравнении активности соединений 801 (1К,28) и его соответствующего (18,28)-изомера, которые проявляют активность при 6нМ и > 10мкМ соответственно, т.е. различие между которыми составляет более 1500 раз.
Таким образом, наиболее предпочтительным соединением является оптический изомер, в котором заместитель К1 и карбонил находятся в син-ориентации, как это представлено на примере следующей абсолютной конфигурации:
В случае, когда К1 обозначает, например, этил, асимметричные атомы углерода в положениях 1 и 2 имеют К,К-конфигурацию.
В объем настоящего изобретения включены соединения формулы I, в которых
В обозначает С6- или С10арил или С7-С16 аралкил, все необязательно замещенные С1-С6 алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом, или означает Нс1 или (низш.)алкилНе1. все необязательно замещенные С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или
В обозначает К4-8О2, где К4 предпочтительно обозначает амидо, (низш.)алкиламид, С6или С10арил, С7-С14аралкил или Нс1, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, или
В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси-или С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, (V) Нс1 или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой необязательно замещенной С1С6алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой необязательно замещенной С1-С6алкилом, или В обозначает карбоксил формулы К4-О-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С16алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом;
(II) С3-С7 циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1 -С6алкокси)карбонилом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амидо-, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, или
В обозначает амид формулы Κ4-Ν(Κ5)С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкил- циклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1 -С3алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необяза- тельно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, и К5 предпочтительно обозначает Н или метил, или В обозначает тиоамид формулы Κ·|-ΝΗ-ί’(8)-. где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом или С1-С6 алкоксигруппой, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амино- или амидогруппой, Υ обозначает Н или метил,
К3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, ацетамидогруппой, С6- или С10арилом или С7-С16аралкилом,
К2 обозначает 8-К20 или О-К20, где
К20 предпочтительно обозначает С6- или С10арил, С7-С16аралкил, Не! или СН2-Не!, все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом К21, где
К21 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, (низш.)тиоалкил, амино- или амидогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6 алкилом, С6- или С10арилом, С7-С16аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!, или означает ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил, С6- или С10арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом К22, где
К22 обозначает С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1-С6алкокси, амино-, моно- или ди (низш.)алкиламиногруппу, (низш.)алкиламид, сульфонилалкил, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил или Не!, или
К2 выбирают из группы, включающей
или
К2 обозначает 1-нафтилметокси-, 2-нафтилметокси-, бензилокси-, 1-нафтилокси-, 2нафтилокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом К21, как он определен выше, сегмент Р1 обозначает циклобутильное или циклопропильное кольцо, оба необязательно замещенные радикалом К1, где К1 обозначает Н, С1-С3алкил, С3-С5циклоалкил или С2-С4алкенил, необязательно замещенный галогеном, и где К1 на атоме углерода в положении 2 находится в син-ориентации относительно карбонильной группы в положении 1, представленное радикалом:
В объем настоящего изобретения включены соединения формулы I, в которых В обозначает С6- или С10арил, необязательно замещенный С1-С6алкилом,
С1 -С6алкоксигруппой, С1 -С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или В обозначает Не! необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6 алканоилом, гидроксигруппой, галогеном, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или В обозначает К4-8О2, где К4 обозначает С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, или означает амидо, (низш.)алкиламид, или В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6 алкоксигруппой, или (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси) карбонилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидроксигруппой, или (V) Не!, необязательно замещенный С1 С6алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой, или В обозначает карбоксил формулы В4О-С(О)-, где
В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси- или амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7 циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой необязательно монозамещенной С1-С6алкилом, или В обозначает амид формулы В4-М(В5)-С(О)-, где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещен- ный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, и
В5 обозначает Н или метил, или
В4 обозначает (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амино или амидо или и
В обозначает тиоамид формулы Κ4-ΝΉС(8)-, где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, или (II) С3-С7 циклоалкил, или В обозначает амид формулы Р4^Н-С(О)-. где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-,
С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16 аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, Υ обозначает Н,
В3 обозначает боковую цепь третбутилглицина (ТЬд), Не, Vа1, СНд или
В2 обозначает 1-нафтилметокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом В21, который имеет указанные выше значения, или
В2 обозначает
где В21А обозначает С1-С6алкил, С1-С6 алкокси, С6-С10арил или Не!, (низш.)тиоалкил, галоген, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, или С6-, С10арил, С7С16аралкил или Не!, необязательно замещенные В22, где
В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, амидо, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6 алкилом, или Не!,
Р1 обозначает циклопропильное кольцо, в котором атом углерода в положении 1 имеет Вконфигурацию,
В1 обозначает этил, винил, циклопропил, 1- или 2-бромэтил или 1- или 2-бромвинил.
В объем изобретения также включены соединения формулы I, в которых В обозначает трет-бутоксикарбонил (Вос) или
Уа!,
В3 обозначает боковую цепь ТЬд, СЬд или
В22А обозначает С1-С6алкил (такой как метил), С1-С6алкокси (такой как метокси) или га25 логен (такой как хлор), Я22В обозначает С1С6алкил, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)акиламидом, и Я21В обозначает С1-С6 алкил, С1-С6алкокси, амино, ди(низш.)алкиламино, (низш.)алкиламид, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил, и Р1 означает
И, наконец, в объем изобретения включено каждое соединение формулы I, представленное в таблицах 1-10.
Согласно другому варианту фармацевтические композиции по изобретению могут дополнительно включать другой анти-НС ν-агент. Примеры таких анти-НСV-агентов включают αили β-интерферон, рибавирин и амантадин.
Согласно еще одному варианту фармацевтические композиции по изобретению могут дополнительно включать другие ингибиторы протеазы НС'А.
Согласно другому варианту фармацевтические композиции по изобретению могут дополнительно включать ингибитор других мишеней жизненного цикла НСV, в том числе геликазу, полимеразу, металлопротеазу или внутренний сайт входа в рибосому (ГЯЕ8), при этом дополнительные ингибиторы не ограничены вышеперечисленными.
Фармацевтические композиции по изобретению можно вводить орально, парентерально или с помощью устройства для имплантации. Предпочтительным является оральное введение или введение с помощью инъекции. Фармацевтические композиции по изобретению могут содержать любые общепринятые нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты или наполнители. В некоторых случаях рН композиции можно регулировать с помощью фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферов с целью повышения стабильности соединения, введенного в композицию или в форму для его введения. В контексте настоящего описания понятие парентеральный включает подкожный, внутрикожный, внутривенный, внутримышечный, внутрисуставной, интрасиновиальный, интрастернальный, интратекальный пути введения с помощью инъекции или инфузии, а также введение в область повреждения.
Фармацевтические композиции могут иметь форму стерильного препарата для инъекции, например стерильной инъецируемой водной или жирорастворимой суспензии. Эта суспензия может быть получена с помощью хорошо известных методов с использованием диспергирующих или смачивающих агентов (таких как Твин 80) и суспендирующих агентов.
Фармацевтические композиции по изобретению могут вводиться орально в виде любой приемлемой дозируемой формы для орального введения, включая (, но не ограничиваясь ими) капсулы, таблетки и водные суспензии и растворы. В случае таблеток для орального введения обычно применяемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Как правило, в композицию также добавляют замасливатели, такие как стеарат магния. Для орального введения в форме капсул приемлемыми разбавителями являются лактоза и безводный кукурузный крахмал. Когда оральным путем вводят водные суспензии, действующее вещество объединяют с эмульгирующими и суспендирующими агентами. При необходимости могут быть добавлены определенные подслащивающие вещества и/или корригенты и/или красители.
Другие пригодные наполнители или носители для указанных выше препаративных форм и композиций описаны в широко распространенных фармацевтических справочниках, например, в Яеш1пд!ои'8 Рйагтасеи!1са1 Заеисек, Тйе 8с1еисе аиб Ргасбсе о£ Рйагтасу, 19-е изд., изд-во Маск РиЫкЫид Сотрапу, Еа§!оп, Репп., (1995).
Соединение по изобретению, являющееся ингибитором протеазы можно вводить в дозах в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 100 мг/кг веса тела в день, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 75 мг/кг веса тела в день, для монотерапии с целью предупреждения и лечения опосредованной НСV болезни. Как правило, фармацевтические композиции по изобретению можно вводить от примерно 1 до примерно 5 раз в день или в другом варианте путем непрерывной инфузии. Такое введение может применяться как для экстренного, так и для длительного лечения. Количество действующего вещества, которое может быть объединено с носителями для получения стандартной дозируемой формы, должно варьироваться в зависимости от пациента, подлежащего лечению, и конкретного пути введения. Обычная композиция может содержать от примерно 5 до примерно 95% действующего вещества (мас.%). Предпочтительно такие композиции содержат от примерно 20 до примерно 80% действующего вещества.
Очевидно, что применяемые дозы могут изменяться как в большую, так и меньшую стороны по сравнению с указанными выше. Специфические схемы дозирования и лечения для любого конкретного пациента могут зависеть от различных факторов, включая активность конкретно применяемого соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол, рацион, время введения, скорость выведения, сочетание лекарственных средств, серьезность и особенности развития болезни, предрасположенность пациента к инфекции, и определяются лечащим врачом. Как правило, лечение начинают с не больших доз, которые существенно ниже оптимальной дозы пептида. Затем дозу постепенно повышают до достижения оптимального действия в конкретных условиях. Обычно наиболее предпочтительно вводить соединение в таком диапазоне концентраций, которые обеспечивают антивирусную активность, но не обладают какими-либо вредными или опасными побочными действиями.
Когда композиции по изобретению включают комбинацию соединения формулы I и одного или нескольких дополнительных терапевтических или профилактических агентов, то дозы этих соединения и дополнительных агентов должны составлять от примерно 10 до 100%, более предпочтительно от примерно 10 до 80% от дозы, обычно применяемой в режиме монотерапии.
Когда эти соединения или их фармацевтически приемлемые соли объединяют в препаративной форме с фармацевтически приемлемым носителем, то полученная композиция может вводиться ίη νίνο млекопитающему, такому как человек, для ингибирования №3-протеазы НСУ или для лечения или предупреждения инфекции, вызываемой вирусом НСУ. Аналогичный терапевтический эффект также может быть достигнут при использовании соединения по изобретению в сочетании с агентами, включающими иммуномодуляторы, такие как α-, β- или γинтерфероны, другие антивирусные агенты, такие как рибавирин, амантадин, другие ингибиторы №3-протеазы НСУ, ингибиторы других мишеней в жизненном цикле НСУ, которые включают (но не ограничиваясь только ими) геликазу, полимеразу, металлопротеазу или внутренний сайт входа в рибосому (1КЕ8), либо их комбинацию, при этом ингибиторы не ограничены вышеперечисленными. Дополнительные агенты могут быть объединены с соединениями по изобретению с получением однократной дозируемой формы. В альтернативном варианте эти агенты можно вводить млекопитающему по отдельности в виде части многократной дозируемой формы.
Другим объектом изобретения является способ ингибирования активности Ν83протеазы НСУ у млекопитающего путем введения соединения формулы Ι, в котором заместители имеют указанные выше значения.
Этот способ предпочтительно может применяться для понижения активности Ν83протеазы НСУ у млекопитающего. Если фармацевтическая композиция включает только соединение по изобретению в качестве действующего вещества, то такой способ дополнительно может предусматривать введение млекопитающему агента, выбранного из иммуномодулятора, антивирусного агента, ингибитора протеазы НСУ или ингибитора других мишеней в жизненном цикле НСУ, таких как геликаза, полимераза, металлопротеаза или 1КЕ8. Такой до полнительный агент может вводиться млекопитающему до, одновременно или после введения композиций по изобретению.
Согласно еще одному предпочтительному варианту этот способ может применяться для ингибирования репликации вируса у млекопитающего. Такой способ может применяться для лечения или предупреждения вызываемой НСУ болезни. Если фармацевтическая композиция включает только соединение по изобретению в качестве действующего вещества, то такой способ дополнительно может предусматривать введение млекопитающему агента, выбранного из иммуномодулятора, антивирусного агента, ингибитора протеазы НСУ или ингибитора других мишеней в жизненном цикле НСУ. Такой дополнительный агент может вводиться млекопитающему до, одновременно или после введения композиции по изобретению.
Предлагаемые в изобретении композиции также могут применяться в качестве лабораторных реагентов. Соединения по изобретению также могут применяться для лечения или предупреждения вирусного загрязнения материалов, и тем самым они понижают риск заражения вирусом персонала лабораторий или медицинских учреждений, которые имеют контакт с такими материалами (например кровью, тканями, хирургическими инструментами и предметами одежды, лабораторными инструментами и предметами одежды, приборами и материалами для сбора крови).
Предлагаемые в изобретении композиции также могут применяться в качестве реагентов для исследований. Соединения по изобретению могут также использоваться в качестве положительного контроля для обоснованного выбора заменителей в опытах на клетках или в опытах по репликации вирусов ίη νίίΓο или ίη νίνο.
Способ получения соединений
Соединения по настоящему изобретению синтезировали в соответствии с общим методом, проиллюстрированным на схеме I (СРС обозначает карбоксильную защитную группу, а АРС обозначает аминозащитную группу): Схема Ι
В-РЗ-Р2-Р1
Способ состоит в основном в следующем: Р1, Р2 и Р3 могут быть связаны с помощью хорошо известных методов пептидного сочетания. Группы Р1, Р2 и Р3 могут быть соединены друг с другом в любом порядке таким образом, чтобы полученное конечное соединение соответствовало пептидам формулы I. Например, Р3 может быть связан с Р2-Р1 или Р1 может быть связан с Р3-Р2.
Обычно пептиды удлиняют путем удаления α-аминогруппы на №концевом остатке и путем сочетания с незащищенной карбоксильной группой следующей пригодной соответствующим образом N-защищенной аминокислоты через пептидную связь, используя описанные методы. Эту процедуру удаления защитной группы и сочетания повторяют до получения требуемой последовательности. Это сочетание можно осуществлять с использованием в качестве составляющих аминокислот ступенчатым синтезом, как показано на схеме I, или с помощью твердофазного пептидного синтеза с использованием метода, впервые описанного в работе Метйе1б, 1. Ат. Сйет. 8ос., (1963), 85. 2149-2154, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки.
Сочетание между двумя аминокислотами, аминокислотой и пептидом или двумя пептидными фрагментами можно осуществлять с помощью стандартных методов, таких как азидный метод, метод на основе смешанного ангидрида угольной-карбоновой кислоты (изобутилхлорформиат), карбодиимидный (дициклогексилкарбодиимид, диизопропилкарбодиимид или водорастворимый карбодиимид) метод, метод на основе активного сложного эфира (паранитрофениловый эфир, Ы-гидроксисукцинимидовый эфир), К-метод с использованием реагента Вудварда, карбонилдиимидазольный метод, метод, основанный на использовании фосфорных реагентов, и окислительно-восстановительные методы. Некоторые из этих методов (прежде всего карбодиимидный метод) можно интенсифицировать добавлением 1-гидроксибензотриазола. Эти реакции сочетания можно проводить либо в растворе (жидкая фаза), либо в твердой фазе.
Стадия сочетания включает, в частности, дегидрационное сочетание свободного карбоксила одного реагента со свободной аминокислотой другого реагента в присутствии агента сочетания с получением амидной связи. Такие агенты сочетания описаны в общедоступных справочниках по химии пептидов, например, у М. Вобатохку, Рерйбе Сйеткйу, 2-е изд., переработанное, изд-во 8ргтдег-Уег1ад, Вег1т, Сегтану (1993). Примерами приемлемых агентов сочетания являются НИ-дициклогексилкарбодиимид, 1-гидроксибензотриазол в присутствии ИИ-дициклогексилкарбодиимида или Иэтил-И'- [(3 -диметиламино)пропил] карбодиимида. Пригодным для применения на практике агентом сочетания, который имеется в продаже, является гексафторфосфат бензотриазол-1илокси)трис(диметиламино)фосфония либо индивидуально, либо в присутствии 1-гидроксибензотриазола. Другим пригодным для применения на практике агентом сочетания, который имеется в продаже, является тетрафторборат 2(1Н-бензотриазол-1-ил)-М,М,М',М'-тетраметилурония. Еще одним пригодным для применения на практике агентом сочетания, который имеется в продаже, является гексафтофосфат О-(7азабензотриазол-1 -ил)-М,М,М',М'-тетраметилурония.
Реакцию сочетания проводят в инертном растворителе, например дихлорметане, ацетонитриле или диметилформамиде. Для поддержания значения рН реакционной смеси на уровне примерно 8 добавляют избыток третичного амина, например диизопропилэтиламина, N метилморфолина или №метилпирролидона. Температура реакции, как правило, составляет от 0 до 50°С, а время проведения реакции, как правило, варьируется от 15 мин до 24 ч.
При применении твердофазного синтеза Сконцевую карбоновую кислоту присоединяют к нерастворимому носителю (обычно полистиролу). Эти нерастворимые носители содержат группу, которая может взаимодействовать с карбоксильной группой с образованием связи, которая сохраняет стабильность в течение требуемого продолжительного промежутка времени, а затем легко расщепляется. В качестве примера таких носителей можно назвать хлор- или бромметиловую смолу, гидроксиметиловую смолу, тритиловую смолу и 2-метокси-4алкоксибензилалоконоловую смолу.
Многие такие смолы с уже включенной требуемой С-концевой аминокислотой имеются в продаже. В другом варианте аминокислота может быть включена в твердый носитель с помощью известных методов ^аид 8.-8., 1. Ат. Сйет. 8ос., (1973), 95, 1328; АЙюйоп Е., 8йерагб К.С., 8ойб-рйа§е рерйбе куЩйекк; а ргасйса1 арргоасй, изд-во ШЬ Ргекк, ОхГогб (1989), 131148). Помимо вышеописанных, можно применять и другие методы пептидного сочетания, описанные в таких публикациях, как 8!е^аг! и Уошзд, 8ойб Рйаке Рерйбе 8уЩ11е5к, 2-е изд., изд-во Р1егсе Сйетка1 Со., КоскГогб, 1Ь (1984); Тйе Рерйбек: Апа1у515, 8уШйез!^, Вк1оду, под ред. Сгокк, Ме^еηйοГе^, υбеηГ^^еηб, т. 1, 2, 3, 5 и 9, изд-во Асабетк Ргекк, №\\-Уогк, (19801987); Вобащку и др., Тйе Ргасйсе оГ Рерйбе 8уЩ11е5к, изд-во 8рппдег-Уег1ад, №\\-Уогк (1984), которые включены в настоящее описание в качестве ссылки.
Функциональные группы применяемых аминокислот, как правило, должны быть защищены во время реакций сочетания во избежание формирования нежелательных связей. Защитные группы, которые могут применяться для этой цели, описаны в таких публикациях, как Стене, Рго!есйуе Сгоирк ίη Огдашс Сйеткйу, изд-во 1ойп V^1еу & 8опк, №\у Уогк (1981), и Тйе Рерйбек: АпаР^к, 8уЩ11е5к, Вк1оду, том 3, изд-во Асабетк Ргекк, №\ν Уогк (1981), которые включены в настоящее описание в качестве ссылки.
α-Карбоксильную группу С-концевого остатка, как правило, защищают в виде сложного эфира (СРС), который должен быть расщеплен с образованием карбоновой кислоты. Защитные группы, которые могут применяться для этой цели, включают 1) сложные алкиловые эфиры, такие как метиловый, триметилсилилэтиловый и трет-бутиловый, 2) сложные аралкиловые эфиры, такие как бензиловый и замещенный бензиловый, или 3) сложные эфиры, которые могут расщепляться в результате обработки слабым основанием или в слабых восстановительных условиях, такие как трихлорэтиловый и фенациловый эфиры.
α-Аминогруппа каждой аминокислоты, которая должна присоединяться, удлиняя пепетидную цепь, должна быть защищенной (АРС). Для этого могут применяться любые защитные группы. Примеры таких групп включают 1) ацильные группы, такие как формил, трифторацетил, фталил и паратолуолсульфонил, 2) ароматические карбаматные группы, такие как бензилоксикарбонил (СЬ/ или Ζ) и замещенные бензилоксикарбонилы, а также 9-флуоренилметилоксикарбонил (Етос), 3) алифатические карбаматные группы, такие как трет-бутоксикарбонил (Вос), этоксикарбонил, диизопропилметокси-карбонил и аллилоксикарбонил, 4) циклические алкилкарбаматные группы, такие как циклопентилоксикарбонил и адамантилоксикарбонил, 5) алкильные группы, такие как трифенилметил и бензил, 6) триалкилсилил, такой как триметилсилил, и 7) тиолсодержащие группы, такие как фенилтиокарбонил и дитиасукциноил. Предпочтительными α-аминозащитными группами являются либо Вос, либо Етос. Многие аминокислотные производные, защищенные таким образом, как это требуется для синтеза пептидов, имеются в продаже.
α-Аминозащитную группу вновь добавляемого остатка аминокислоты отщепляют перед сочетанием со следующей аминокислотой. Если применяют группу Вос, то выбирают метод на основе трифторуксусной кислоты, чистой или в дихлорметане, или НС1 в диоксане или в этилацетате. Образовавшуюся аммонийную соль затем нейтрализуют либо до сочетания, либо ίη χίΐιι с помощью основных растворов, таких как водные буферы или третичные амины в дихлорметане, ацетонитриле или диметилформамиде. Если применяют группу Етос, то выбирают такие реагенты, как пиперидин или замещенный пиперидин в диметилформамиде, но также может использоваться любой вторичный амин. Удаление защитных групп проводят при температуре в интервале от 0°С до комнатной температуры (КТ), обычно составляющей 20-22°С.
Любые аминокислоты, имеющие функционально активные группы в боковой цепи, должны быть защищены в процессе получения пептида с помощью любой из описанных выше групп. Очевидно, что выбор и применение защитных групп для этих функционально актив ных групп в боковой цепи зависит от аминокислоты и присутствия других защитных групп в пептиде. Выбор таких защитных групп является важным в том плане, что группа не должна быть удалена во время удаления защитных групп и сочетания α-аминогруппы.
Так, например, когда в качестве αаминозащитной группы используют Вос, то приемлемыми являются следующие защитные группы боковой цепи:
паратолуолсульфонильные (тозильные) фрагменты могут применяться для защиты аминогруппы боковой цепи таких аминокислот, как Ьук и Агд, ацетамилометильный, бензильный (Вп) или трет-бутилсульфонильные фрагменты могут применяться для содержащей сульфид боковой цепи цистеина, простые бензиловые (Вп) эфиры могут применяться для содержащих гидроксигруппу боковых цепей серина, треонина или гидроксипролина, а сложные бензиловые эфиры могут применяться для защиты содержащих карбоксильные группы боковых цепей аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты.
Когда для защиты α-аминогрупп выбирают Етос, как правило, приемлемыми являются защитные группы на основе трет-бутила. Например, Вос может применяться для лизина и аргинина, простой трет-бутиловый эфир для серина, треонина и гидроксипролина и сложный трет-бутиловый эфир для аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты. Трифенилметильный фрагмент (тритил) может применяться для защиты содержащей сульфид боковой цепи цистеина.
После завершения удлинения пептида все защитные группы удаляют. Если используют синтез в жидкой фазе, то защитные группы удаляют любым методом, который зависит от выбора защитных групп. Эти методы хорошо известны в данной области.
Если используют синтез в твердой фазе, то пептид отщепляют от смолы одновременно с удалением защитных групп. Если для синтеза применяют метод на основе защиты с помощью Вос, то обработка безводной НЕ, содержащей такие добавки, как диметилсульфид, анизол, тиоанизол или паракрезол, при 0°С представляет собой предпочтительный метод отщепления пептида от смолы. Отщеплять пептид также можно с помощью других кислотных реагентов, таких как смеси трифторметансульфоновой кислоты/трифторуксусной кислоты. Если для синтеза применяют метод на основе защиты с помощью Етос, то Ν-концевую групп Етос отщепляют с помощью указанных выше реагентов. Другие защитные группы и пептиды отщепляют от смолы с помощью раствора трифторуксусной кислоты и различных добавок, таких как анизол и т. д.
1. Синтез блокирующей группы В
Различные блокирующие группы В вводят следующим образом.
1.1. Когда В обозначает арил, аралкил: арилированные аминокислоты получают одним из трех описанные ниже методов.
а) Прямое нуклеофильное замещение на фторнитроарильном фрагменте
Этот метод в основном состоит в следующем: 4-фтор-3-нитробензотрифторид (а) подвергают при 80°С взаимодействию с Ьаминокислотой (Ь) в присутствии основания, такого как карбонат калия, получая требуемую Ν-ариламинокислоту (с).
б) Катализируемое медью сочетание по методу, описанному Ма и др. (I. Ат. СЬет. Зос.
1998, 120, 12459-12467):
СООН
(й) (Ь> (е)
Этот метод в основном состоит в следующем: бром-4-фторбензол (б) подвергают при 90°С взаимодействию с Ь-аминокислотой (Ь) в присутствии основания, такого как карбонат калия, и каталитического количества йодида меди, получая требуемую Ν-ариламинокислоту (е)·
в) Нуклеофильное замещение трифлата на анилин:
Этот метод состоит в основном в следующем: орто-анизидин (ί) подвергают при 90°С взаимодействию с трифлатом (д) в присутствии основания, такого как 2,6-лутидин, получая сложный бензиловый эфир (Ь). После гидрирования в присутствии 10% Рб/С получают требуемую Ν-ариламинокислоту (ί).
1.2. Когда В обозначает аминотриазольное производное:
а) Рппос-Ы=С=5
Н2Ь1-Рэ-[Р2-Р(}-СООМе-------------Ртос-МН-С(5)-НМ-Р3-{Рг-Р1}-СООМе
1-Р3ЧРг-Р,>СООМе
а) Ртос-тиоцианат, полученный по методу, описанному у Кеагиеу и др., 1998, I. Огд. СЬет, 63,196, подвергают взаимодействию с защищенным фрагментом Р3 или со всем пептидом или сегментом пептида, получая тиомочевину.
б) Производное тиомочевины подвергали взаимодействию с соответствующим бромкето ном, получая соответствующее тиазольное про изводное.
1.3. Когда В обозначает Я4-С(О)-, Я4-З(О)2:
Защищенный фрагмент Р3 или весь пептид или фрагмент пептида подвергают сочетанию с соответствующим ацилхлоридом или сульфонилхлоридом соответственно, который либо имеется в продаже, либо синтез которого хорошо известен.
1.4. Когда В обозначает Я4О-С(О)-:
Защищенный фрагмент Р3 или весь пептид или фрагмент пептида подвергают сочетанию с соответствующим хлорформиатом, который либо имеется в продаже, либо синтез которого хорошо известен. Для получения Воспроизводных используют (Вос)2О.
Например:
а) Циклобутанол обрабатывают фосгеном, получая соответствующий хлорформиат.
б) Хлорформиат обрабатывают требуемым NН2-трипептидом в присутствии основания, такого как триэтиламин, получая циклобутилкарбамат.
1.5. Когда В обозначает К4-№(К5)-С(О)или К4-ЯН-С(З>:
Защищенный фрагмент Р3 или весь пептид либо фрагмент пептида обрабатывают фосгеном, а затем амином, как описано в ЗуиЬеН. РеЬ 1995, (2), 142-144.
Синтез фрагментов Р2
2.1. Синтез предшественников
А) Синтез галоарилметановых производ ных.
Получение галометил-8-хинолина 11б осуществляют по методу, описанному Κ.Ν. СатрЬе11 и др., I. Атег. СЬет. Зос., (1946), 68, 1844.
Схема II
11а 11Ь цс Пй
Этот метод состоит в основном в следующем: 8-хинолинкарбоновую кислоту На превращают в соответствующий спирт Нс восстановлением ацилгалогенида НЬ с помощью вос становителя, такого как алюмогидрид лития. После обработки спирта НЬ соответствующей галогенводородной кислотой получают следующее галогенсодержащее производное Нб. Конкретные варианты осуществления этого метода представлены в примере 1.
Б) Синтез ариловых спиртовых производных.
2-Фенил-4-гидроксихинолиновые производные Шс получают по методу, описанному у
С1агФпа и др. (I. Меб. СЬет. (1997), 40, 17941807).
Этот метод состоит в основном в следующем: бензоилацетамид (Ша) конденсируют с соответствующим анилином (ШЬ) и полученный имин циклизуют с полифосфорной кислотой (ПФК), получая соответствующий 2-фенил4-гидроксихинолин (Шс). Конкретный вариант осуществления этого метода представлен в примере 2.
В другом варианте этот метод можно осуществлять следующим путем: сложный бензоилэтиловый эфир (Ша) конденсируют с соответствующим анилином (ШЬ) в присутствии кислоты и полученный имин циклизуют нагреванием при 260-280°С, получая соответствующий 2-фенил-4-гидроксихинолин (Шс). Конкретный вариант осуществления этого метода представлен в примере 3 (соединение 3е).
2.2. Синтез Р2.
А) Синтез 4-замещенного пролина (где К2 присоединен к кольцу через атом углерода) (имеющий показанное ниже стереохимическое строение):
СООН осуществляли в соответствии со схемой IV по методам, описанным у 1. Ехс.|иегга и др. (Те!гаЬебгоп (1993), 38, 8665-8678) и у С. Ребгеда1 и др. (Те!гаЬебгоп Ье!!. (1994), 35, 2053-2056).
Схема IV
Этот метод состоит в основном в следующем: Вос-пироглутаминовую кислоту защищают в виде бензилового эфира. После обработки сильным основанием, таким как диизопропиламид лития, с последующим добавлением алкилирующего агента (Вг-К20 или ВК20) получают требуемое соединение Ше после восстановления амида и удаления сложного эфира.
Б) Синтез О-замещенного-4-(К)-гидроксипролина:
соон можно осуществлять с помощью различных описанных ниже методов.
1) Когда К20 обозначает арил, аралкил, Не! или (низш.)алкил-Не!, синтез можно осуществлять согласно методике, описанной у Е.М. 8тЬ11 и др. (1. Меб. СЬет. (1988), 31, 875-885). Этот метод состоит в основном в следующем:
имеющийся в продаже Вос-4-(К)-гидроксипролин обрабатывают основанием, таким как гидрид натрия или трет-бутоксид калия, и образовавшийся алкоксид подвергают взаимо20 20 20 действию с гало-К (Вг-К , ВК и т.д.), получая требуемые соединения. Конкретные варианты осуществления этого метода представлены в примерах 4, 5 и 7.
2) В другом варианте, когда К20 обозначает арил или Не!, соединения также могут быть получены по реакции Митсунобу (МйкипоЬи (1981), 8уп1Ьек1к, январь, 1-28; Капо и др. (1995), Те!. Ье!!. 36(22), 3779-3792; КгсЬпак и др. (1995), Те!. Ьей. 36(5), 62193-6196; КюЬ!ег и др. (1994), Те!. Ьей. 35(27), 4705-4706). Этот метод состоит в основном в следующем: имеющийся в продаже метиловый эфир Вос-4(8)-гидроксипролина подвергают взаимодействию с соответствующим ариловым спиртом или тиолом в присутствии трифенилфосфина и диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) и образовавшийся сложный эфир гидролизуют с получением кислоты. Конкретные варианты осуществления этого метода представлены в примерах 6 и 8.
В альтернативном варианте реакцию Митсунобу можно проводить в твердой фазе (схема V). С этой целью в 96-луночный блок синтезатора модели 396 (поставляемый фирмой СЬетТесЬ) вносят аликвоты связанного со смолой соединения (Уа) и различные ариловые спирты или тиолы и добавляют соответствующие реагенты. После инкубации каждый связанный со смолой продукт (Ш) промывают, сушат и отщепляют от смолы.
Для дополнительного введения функциональных групп в арильный заместитель может также применяться реакция Сузуки (М1уаига и др. (1981), 8уп1Ь. Сотт. 11, 513; 8а!о и др. (1989), СЬет. Ье!!., 1405; ^а!апаЬе и др. (1992), 8уп1ей., 207; Такауик и др. (1993), Югд. СЬет. 58, 2201; Егепейе и др. (1994), Те!. Ье!!. 35(49). 9177-9180; Сибек и др. (1996), 1. Огд. СЬет. 61, 5169-5171).
3. Синтез фрагментов Р1
3.1. Синтез 4-х возможных изомеров 2замещенной 1-аминоциклопропилкарбоновой кислоты.
Синтез осуществляют согласно схеме VI.
Этот метод состоит в основном в следующем.
а) Дважды защищенный малонат VI;·! и 1,2дигалоалкан ΎΦ или циклический сульфат VII; (синтезированный по методу, описанному у К. Вигдекк и Ошп-Уеп КЕ (8уп1Нек1к (1996), 14631467) подвергают взаимодействию в основных условиях, получая диэфир У!б.
б) Осуществляют избирательный по отношению к определенной области гидролиз наименее пространственно затрудненного эфира, получая кислоту Ще.
в) Эту кислоту Ще подвергают перегруппировке Курциуса, получая рацемическую смесь производных 1-аминоциклопропилкарбоновой кислоты VII, в которых К1 находится в син-ориентации относительно карбоксильной группы. Конкретный вариант осуществления этого метода представлен в примере 9.
г, д) В альтернативном варианте избирательное образование эфира из кислоты Ще с помощью галогенида (Р*С1) или спирта (Р*ОН) позволяет получить диэфир Щд, в котором эфир Р* может подвергаться избиральному гидролизу в виде эфира Р. Гидролиз эфира Р позволяет получить кислоту VIII.
е) Перегруппировка Курциуса кислоты VIII позволяет получить рацемическую смесь производных 1-аминоциклопропилкарбоновой кислоты VII, в которых группа К1 находится в антиориентации относительно карбоксильной группы. Конкретный вариант осуществления этого метода представлен в примере 14.
Ниже описан альтернативный вариант синтеза производных VIII (где К1 обозначает винил и находится в син-ориентации относительно карбоксильной группы).
Схема VII
Обработкой имеющегося в продаже имина VII;·! с помощью 1,4-дигалобутена VIШ в присутствии основания после гидролиза образовавшего имина УПс получают соединение VIIά, которое имеет аллильный заместитель, который находится в син-ориентации относительно карбоксильной группы. Конкретные варианты осу ществления этого метода представлены в примерах 15 и 19.
Разделение всех указанных выше энантиомерных смесей относительно углерода в положении 1 (Ще и ΎΠά) можно осуществлять по средством:
1) ферментативного разделения (примеры 13, 17 и 20),
2) кристаллизации с хиральной кислотой (пример 18) или
3) химической дериватизации (пример 10).
После разделения абсолютную стереохимию можно определить по методике, описанной в примере 11.
Разделение энантиомеров и определение стереохимического строения можно осуществ лять аналогично тому, как это описано для энантиомерных смесей относительно углерода в положении 1, в которых заместитель С2 находится в анти-ориентации относительно карбоксильной группы (VII).
3.2. Синтез 1-аминоциклобутилкарбоновой кислоты.
Синтез 1,1-аминоциклобутанкарбоновой кислоты осуществляют по методу, описанному у Каут Ооид1ак, КатаНдат КопбагебФаг, Аообагб Копа1б, 8уп111. Соттип. (1985). 15(4), 26772.
Схема VIII
Этот метод состоит в основном в следующем: обработкой соединения VIII;·! основанием в присутствии 'УШЬ получают соответствующее циклобутильное производное ЩПс. Путем гидролиза изоцианата и сложноэфирных групп ЩПс в кислотных условиях (НС1) получают гидрохлорид 1-аминоциклобутилкарбоновой кислоты ЩПй. Карбоновую кислоту затем этерифицируют в метанольном растворе в НС1. Конкретный вариант осуществления этого метода представлен в примере 21.
3.3. Синтез 2-замещенной 1-аминоциклобутилкарбоновой кислоты.
Схема IX
Η,Ν^ΟΟ,η Λ Η, >у|усо,п Κβ и
а) Защищенное производное в виде эфира глицина, такое как имин Ыа, алкилировали с помощью гомоаллильного электрофила IX с использованием соответствующего основания, такого как гидрид, гидроксид или алкоксид металла. Пригодные уходящие группы в IX включают галогены (X обозначает С1, Вг, I) или сульфонатные эфиры (мезилат, тозилат или трифлат). Аллильную спиртовую функциональную группу в IX защищали с помощью гидроксизащитных групп, хорошо известных в данной области (например ацетата, силила, ацеталей).
б) На второй стадии защитную группу гидроксильной функции моноалкилированного производного РХ удаляли и превращали в соответствующую электрофильную функцию X, как описано выше для соединения IX.
в) Циклизацию £Хй с получением циклобутанового производного £Хе проводили обработкой основанием (гидриды, алкоксиды металлов) с последующим гидролизом с помощью водных минеральных кислот и нейтрализации слабым основанием. На этой стадии син- и антиизомеры Ые могут быть разделены экспрессхроматографией.
г) Двойную связь в Ые также необязательно можно гидрировать в стандартных условиях с получением соответствующего насыщенного производного IX
Изобретение также относится к способу получения пептидного аналога формулы (I), в котором Р1 обозначает остаток замещенной аминоциклопропилкарбоновой кислоты, предусматривающий сочетание пептида, выбранного из ряда, включающего АРС-Р3-Р2 и АРС-Р2, с помощью промежуточного продукта Р1 формулы:
где В1 обозначает С1-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, СРС обозначает карбоксизащитную группу, АРС обозначает аминозащитную группу, а Р3 и Р2 имеют указанные выше значения.
Изобретение также относится к способу получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором N83протеазы НСV, предусматривающему сочетание (соответствующим образом защищенной) аминокислоты, пептида или фрагмента пептида с промежуточным продуктом Р1 формулы
о о о или о где В1 обозначает С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, а СРС обозначает карбоксизащитную группу.
Изобретение также относится к способу получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором протеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, предусматривающему сочетание (соответствующим образом защищенной) аминокислоты, пептида или фрагмента пептида с промежуточным продуктом формулы
о где СРС обозначает карбоксизащитную группу.
Изобретение также относится к промежуточному продукту Р1 формулы
где В1 обозначает С1-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, предназначенному для получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором Х3-протеазы НСV.
Изобретение также относится к применению промежуточного продукта формулы
о где СРС обозначает карбоксизащитную группу, для получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором протеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпро теазы.
Изобретение также относится к применению промежуточного продукта Р1 формулы
о о о о
ИЛИ где В1 обозначает С1-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещен ные галогеном, предназначенному для получения соединения формулы I, как оно определено выше.
И, наконец, изобретение также относится к применению аналога пролина формулы
в которой В.21А обозначает С1-С6алкил, С1-С6 алкокси, (низш.)тиоалкил, галоген, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6 алкилом, С6-, С10-арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены В22, где В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, амидо, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6 алкилом, или Не!, а В21в обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, амино, ди(низш.)алкиламино, (низш.)алкиламид, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил, для синтеза 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором N83-протеазы НСУ, или 3) пептидного аналога формулы I, как он определен выше.
Примеры
Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах, не ограничивающих его объем.
Температуры указаны в градусах Цельсия. Проценты для растворов представляют собой отношения массы к объему (мас./об.), а соотношения в растворах представляют собой объемные соотношения, если не указано иное.
Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали с помощью спектрометра фирмы Вгискег при частоте 400 МГц, химические сдвиги (δ) выражены в част./млн. Экспресс-хроматографию проводили на силикагеле (81О2) согласно методу Стилла (\У.С. 81111 и др., I. Огд. Сйет., (1978), 43, 2923). В примерах использованы следующие сокращения:
Вп
Вос
БСА
ХАПС
ДБУ
СН2С12=ДХМ
ДЭАД
ДИАД
ДИЭА
ДИПЭА
ДМАП
ДЦК
ДМЭ
ДМФ
ДМСО
ДТТ
ДФФА
ЭДТК
Εΐ
Е!ОН
Е!ОАс
Е!2О
ГАТУ
ЖХВР
МС
АГЛ бензил трет-бутилоксикарбонил {Ме3СОС(О)} бычий сывороточный альбумин 3-[(3-холамидопропил)диметиламмоний]-1пропансульфонат
1,8-диазабицикло [5.4.0]ундец-7-ен метиленхлорид диэтилазодикарбоксилат диизопропилазодикарбоксилат диизопропилэтиламин диизопропилэтиламин диметиламинопиридин 1,3-дициклогексилкарбодиимид 1,2-диметилоксиэтан диметилформамид диметилсульфоксид дитиотреитол или трео-1,4-димеркапто-2,3бутандиол дифенилфосфорилазид этилендиаминтетрауксусная кислота этил этанол этилацетат диэтиловый эфир гексафторфосфат О-7-азабензотриазол-1ил)-1,1,3,3-тетраметилурония жидкостная хроматография высокого раз решения масс-спектрометрия (МАЕЭ1-ТОЕ: Ма!пх А§818!ед Еазег ϋίδΟΓρΐΐοη 1от/а!юп-Т1те оГ ЕНдЫ (время пролета при лазерной десорбционной ионизации с участием матрицы; ЕАв: бомбардировка ускоренными атомами) алюмогидрид лития
Ме метил
МеОН метанол
МЭС (2-{У-морфолино }этансульфоновая кислота)
Ν;ιΙΙ\ΙΙ)8 бис(триметилсилил)амид натрия
Ν-ММ Ν-метилморфолин
Ν-МП Ν-метилпирролидин
Рг пропил
8исс 3-карбоксипропаноил
ΡNА 4-нитрофениламино или паранитроанилид
ТБАФ тетра-н-бутиламмонийфторид
ТБТУ тетрафторборат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)- 1,1,3,3-тетраметилурония
ТКЭФ гидрохлорид трис(2-карбоксиэтил)фосфина
ТФК трифторуксусная кислота
ТГФ тетрагидрофуран
ТИС триизопропилсилан
ТСХ тонкослойная хроматография
ТМСЭ триметилсилилэтил
Трис/НС1 гидрохлорид трис(гидроксиметил)аминометана
Элементы структуры Р2
Пример 1. Синтез бромметил-8-хинолина (2).
К имеющейся в продаже 8-хинолинкарбоновой кислоте (2,5 г, 14,4 ммоля) добавляли чистый тионилхлорид (10 мл, 144 ммоля). Эту смесь выдерживали при 80°С в течение 1 ч, после чего избыток тионилхлорида удаляли путем перегонки при пониженном давлении. К образовавшемуся твердому продукту коричневатого цвета добавляли абсолютный Е!ОН (15 мл) и смесь выдерживали с нагреванием при 80°С в течение 1 ч, после чего концентрировали в вакууме. Остаток распределяли между Е!ОАс и насыщенным водным раствором NаНСОз, органическую фазу сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали, получая масло коричневатого цвета (2,8 г). Этот продукт (приблизительно 14,4 ммоля) добавляли по каплям в течение 35 мин к суспензии АГЛ (0,76 г, 20,2 ммоля) в Е!2О, которая была охлаждена до -60°С. Реакционную смесь медленно нагревали в течение 1,5 ч до -35°С до тех пор, пока не завершится реакция. Реакцию прекращали, медленно добавляя в течение 30 мин Мд8О4-10Н2О, а затем влажный ТГФ. Смесь распределяли между Е!2О и 10%ным водным раствором NаНСОз. Органическую фазу сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали, получая твердый продукт желтоватого цвета (2,31 г, 80% для 2 стадий), представляющий собой спирт. Этот спирт (2,3 г, 11,44 ммоля) растворяли в АсОН/НВг (20 мл, 30%ный раствор, фирма А1бпс11) и выдерживали с нагреванием при 70°С в течение 2,5 ч. Смесь концентрировали в вакууме досуха, распределяли между Е!ОАс (100 мл) и насыщенным водным раствором NаНСОз, после чего сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали, получая требуемое соединение (1) в виде твердого вещества коричневатого цвета (2,54 г, 100%).
Пример 2. Синтез 2-фенил-4-гидроксихинолина (2).
Имеющийся в продаже этилбензоилацетат (6,00 г, 31,2 ммоля) выдерживали с нагреванием при 85°С (в запечатанной пробирке) в течение 2 ч в 75 мл 30%-ного N^0^ Образовавшийся после охлаждения твердый продукт фильтровали и кипятили с обратным холодильником в воде в течение 2 ч. Раствор экстрагировали три раза СН2С12. Органические слои объединяли, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток желтого цвета хроматографировали на силикагеле, элюируя смесью Е!ОАс: гексан (3:7), с получением соответствующего амида в виде твердого вещества белого цвета, 1,60 г, выход 31%.
Этот амид (250 мг, 1,53 ммоля) кипятили с обратным холодильником в аппарате ДинаСтарка с анилином (143 мг, 1,53 ммоля) и анилин-НС1 (10 мг, 0,08 ммоля) в толуоле (10 мл) в течение 16 ч. Раствор концентрировали, получая масло коричневого цвета, которое было смешано с полифосфорной кислотой (2 г) и которое выдерживали с нагреванием при 135°С в течение 20 мин. Реакционную смесь сливали в воду и значение рН доводили до 8 с помощью 5М №1ОН. Водную суспензию дважды экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, промывали соляным раствором, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали экспресс-хроматографии на силикагеле, элюируя 3%-ным МеОН в этилацетате, с получением 2-фенил-4-гидроксихинолина (2), 67 мг, выход 20%.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,11 (б, 1 = 7 Гц, 1Н), 7,86-7,83 (т, 2Н), 7,77 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 7,68 (бб, 1 = 8,7 Гц, 1Н), 7,61-7,58 (т, 3Н), 7,35 (бб, 1 = 8,7 Гц, 1Н), 6,34 (8, 1Н).
Пример 3. Синтез 4-гидрокси-2-фенил-7-
4-Гидрокси-2-фенил-7-метоксихинолин (е).
Раствор, содержащий этилбензоилацетат (Ь) (100,0 г, 0,52 моля), метаанидизин (а) (128,1 г, 1,04 моля) и 4н. НС1/диоксан (5,2 мл) в толуоле (1,0 л), кипятили с обратным холодильником в течение 6,25 ч в аппарате Дина-Старка. Охлажденный толуоловый раствор последовательно промывали водным 10%-ным раствором НС1 (2х300 мл), 1н. №1ОН (2х300 мл), Н2О (300 мл) и соляным раствором (150 мл). Толуольную фазу сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая смесь (1,2:1,0) сложного эфира с и амида б (144,6 г, выход неочищенных продуктов 45%/38%) в виде масла темно-коричневого цвета. Неочищенное масло нагревали до 280°С в течение 80 мин, отгоняя при этом образовавшийся Е!ОН. Полученный охлажденный твердый продукт растирали с СН2С12 (200 мл). Суспензию фильтровали и образовавшийся твердый продукт промывали СН2С12, получая соединение е (22,6 г, 17% относительно а) в виде твердого вещества бежевого цвета.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,00 (б, 1 = 9,0 Гц, 1Н), 7,81-7,82 (т, 2Н), 7,57-7,59 (т, 3Н), 7,20 (б, 1 = 2,2 Гц, 1Н), 6,94 (бб, 1 = 9,0, 2,2 Гц, 1Н), 6,26 (8, 1Н), 3,87 (8, 3Н).
4-Хлор-2-фенил-7-метоксихинолин (3).
Суспензию соединения е (8,31 г, 33,1 ммоля) в РОС13 (90 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч (после нагревания получали прозрачный раствор). Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между 1н. №1ОН (экзотермическая реакция, для поддержания высокого значения рН добавляли 10н. №1ОН) и Е!ОАс (500 мл). Органический слой промывали Н2О (100 мл) и соляным раствором (100 мл), а затем сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая соединение 3 (8,60 г, выход 96%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,28-8,30 (т, 2Н),
8,20 (8, 1Н), 8,10 (б, 1 = 9,1 Гц, 1Н), 7,54-7,58 (т, 3Н), 7,52 (б, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 7,38 (бб, 1 = 9,1, 2,5 Гц, 1Н), 3,98 (8, 3Н).
Эту реакцию повторяли трижды и продукт всегда получали с выходом 96-98%, что существенно превышает 68%-ный выход, о котором сообщалось в 1. Меб. Сйет. 1997, 40, 1794.
Пример 4. Синтез Вос-4-(Я)-(нафталин-1илметокси) пролина (4).
соон (4)
Имеющийся в продаже Вос-4-(Я)-гидроксипролин (5,00 г, 21,6 ммоля) растворяли в ТГФ (100 мл) и охлаждали до 0°С. Порциями в течение 10 мин добавляли гидрид натрия (60%ная дисперсия в масле, 1,85 г, 45,4 ммоля) и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавляли 1(бромметил) нафталин (8,00 г, 36,2 ммоля) (полученный по методу, описанному у Е.А. Б1хои и др., Сап. 1. Сйет., (1981), 59, 2629-2641) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Смесь сливали в воду (300 мл) и промывали гексаном. Водный слой подкисляли 10%-ным водным раствором НС1 и дважды экстрагировали этилацетатом. Водные слои объединяли и промывали соляным раствором, сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью экспрессхроматографии (смесь гексан:этилацетат:уксусная кислота в соотношении 49:49:2), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (4,51 г, выход 56%).
1Н-ЯМР (ДМСО-б6), результаты свидетельствуют о наличии двух ротамеров: δ 8,05 (т, 1Н), 7,94 (т, 1Н), 7,29 (б, 1=14 Гц, 1Н), 7,557,45 (т, 4Н), 4,96 (т, 2Н), 4,26 (шир. к, 1Н), 4,12 (бб, 1=8 Гц, 1Н), 3,54-3,42 (т, 2Н), 2,45-2,34 (т, 1Н), 2,07-1,98 (т, 1Н) 1,36 (к, (3/9), 9Н), 1,34 (к, (6/9), 9Н).
Пример 5. Синтез Вос-4-(К)-(8-хинолинметокси)пролина (5).
К суспензии №1Н (1,4 г, 60%-ная в масле, 34 ммоля) в ТГФ (100 мл) добавляли Вос-4-(К)гидроксипролин (1,96 г, 8,5 ммоля) в безводном ТГФ (20 мл). Эту смесь перемешивали в течение 30 мин, после чего добавляли бромметил-8хинолин из примера 1 (2,54 г, 11,44 ммоля) в ТГФ (30 мл). Реакционную смесь выдерживали с нагреванием при 70°С (5ч), после чего избыток №1Н осторожно растворяли влажным ТГФ. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и образовавшийся продукт растворяли в Е!ОАс и Н2О. Основную водную фазу отделяли и подкисляли с помощью 10%-ного водного раствора НС1 до рН ~5, после чего экстрагировали Е!ОАс (150 мл). Органическую фазу сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали, получая масло коричневого цвета. После очистки с помощью экспресс-хроматографии (элюент: 10%-ный МеОН/СНС13) получали требуемое соединение (5) в виде твердого вещества светло-желтого цвета (2,73 д, выход 86%), ЖХВР (97,5%).
1Н-ЯМР (ДМСО-б6), результаты свидетельствуют о наличии ротамеров в соотношении 6:4: δ 12-11,4 (шир. к, 1Н), 8,92 (2 х б, 1 = 4,14 и 4,14 Гц, 1Н), 8,38 (2 х б, 1 = 8,27 и 8,27 Гц, 1Н), 7,91 (б, 1 = 7,94 Гц, 1Н), 7,77 (б, 1 = 7,0 Гц, 1Н), 7,63-7,54 (т, 2Н), 5,14 (2 х к, 2Н), 4,32-4,29 (т, 1Н), 4,14-4,07 (т, 1Н), 3,52-3,44 (т, 2Н), 2,432,27 (т, 1Н), 2,13-2,04 (т, 1Н), 1,36 и 1,34 (2 х к, 9Н).
Пример 6. Получение Вос-4-(К)-(7-хлорхинолин-4-оксо)пролина (6).
о
Имеющийся в продаже метиловый эфир Вос-4-(8)-гидроксипролина (500 мг, 2,04 ммоля) и 7-хлор-4-гидроксихинолин (440 мг, 2,45 ммоля) растворяли в безводном ТГФ (10 мл) при 0°С. Добавляли трифенилфосфин (641 мг, 2,95 ммоля), а затем медленно добавляли ДИАД (426 мг, 2,45 ммоля). Смесь перемешивали при КТ в течение 20 ч. Затем реакционную смесь концентрировали, растворяли в этилацетате и трижды экстрагировали 1н. НС1. Водную фазу подщелачивали с помощью №ьСО3 и дважды экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали, получая масло желтого цвета. Это масло очищали экспресс-хроматографией, получая сложный метиловый эфир в виде твердого вещества белого цвета, 498 мг, выход 58%.
Этот сложный метиловый эфир (400 мг, 0,986 ммоля) подвергали гидролизу с помощью 1М водного раствора гидроксида натрия (1,7 мл, 1,7 ммоля) в метаноле (4 мл) при 0°С в течение 3 ч. Раствор концентрировали для удаления метанола и нейтрализовали 1М водным раствором НС1. Суспензию концентрировали досуха и растворяли в метаноле (20 мл), соли отфильтровывали и фильтрат концентрировали, получая требуемое соединение (6) в виде твердого вещества белого цвета, 387 мг, количественный выход.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6) (смесь ротамеров в соотношении приблизительно 1:1): δ 8,74 (б, 1 = 5 Гц, 1Н), 8,13-8,09 (т, 1Н), 7,99 и 7,98 (к, 1Н), 7,58 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,02 (б, 1 = 5 Гц, 1Н), 5,26-
5,20 (т, 1Н), 4,10-4,01 (т, 1Н), 3,81-3,72 (т, 1Н), 3,59 (бб, 1 = 12, 10 Гц, 1Н), 2,41-2,31 (т, 2Н), 1,34 и 1,31 (к, 9Н).
Пример 7. Синтез Вос-4-(К)-(2-фенил-7метоксихинолин-4-оксо)пролина (7).
Вос-4-(К)-(2-фенил-7-метоксихинолин-4оксо)пролин (7).
К раствору Вос-4-(К)-гидроксипролина (6,73 г, 29,1 ммоля) в ДМСО (83 мл), температуру которого (раствора) поддерживали на уровне 25°С, малыми порциями в течение 15 мин добавляли трет-бутоксид калия (8,16 г, 72,7 ммоля). Смесь перемешивали при 25°С а течение 1,5 ч. К реакционной смеси 4 порциями в течение 15 мин добавляли хлор-2-фенил-7метоксихинолин 3 (8,61 г, 32,0 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 19 ч. Образовавшуюся суспензию сливали в Н2О (650 мл) и смесь промывали Е!2О (3х150 мл) для удаления избытка хлорхинолина (в последующем было установлено, что Е!ОАс является более эффективным). Водный слой подкисляли 1н. водным раствором НС1 (по расчету теребуется
1,5 экв., т.е. 38 мл, брали 43,6 мл) до значения рН 4-5. Осадившийся твердый продукт белого цвета выделяли фильтрацией. Влажный твердый продукт сушили при пониженном давлении над Р2О5, получая пролиновое производное 7 (12,6 г, выход 91%, содержание ДМСО 2,3 об.%) в виде твердого вещества бежевого цвета.
1Н-ЯМР (ДМСО-66) (смесь ротамеров 2:1): δ 8,27 (б, 1 = 7,0 Гц, 2Н), 8,00, 7,98 (26, 1 = 9,2, ~9,2 Гц, 1Н), 7,48-7,56 (т, 3Н), 7,45, 7,43 (28, 1Н), 7,39 (6, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 7,17 (66, 1 = 9,2, 2,5 Гц, 1Н), 5,53-5,59 (ш, 1Н), 4,34-4,41 (т, 1Н), 3,93 (8, 3Н), 3,76 (шир. 8, 2Н), 2,63-2,73 (т, 1Н), 2,32-2,43 (т, 1Н), 1,36, 1,33 (28, 9Н).
Пример 8. Синтез Вос-4-(В)-(2-фенил-6нитрохинолин-4-оксо)пролина (8).
К раствору трифенилфосфина (1,28 г, 4,88 ммоль) в 15 мл тетрагидрофурана при 0°С по каплям при перемешивании добавляли диэтилазодикарбоксилат (0,77 мл, 4,89 ммоля). После перемешивания в течение 30 мин в атмосфере азота добавляли раствор метилового эфира Вос4-(8)-гидроксипролина (1,00 г, 4,08 ммоля) в 5 мл тетрагидрофурана, а затем суспензию имеющегося в продаже 6-нитро-2-фенил-4хинолинола (1,30 г, 4,88 ммоля) в 10 мл этого же растворителя. Смесь красного цвета перемешивали в течение 15 мин при 0°С и в течение ночи при КТ. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток в виде масла растворяли в этилацетате и промывали дважды бикарбонатом натрия, однократно водой и однократно соляным раствором. Органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток хроматографировали на силикагеле (гексан:этилацетат, в объемном соотношении 70:30), получая требуемый сложный метиловый эфир в виде твердого вещества светло-желтого цвета (1,70 г, выход 85%).
1Н-ЯМР(СПС13), ротамеры ~3:7: δ 9,03 (6, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 8,46 (66, 1 = 9, 2,5 Гц, 1Н), 8,18 (6, 1 = 9 Гц, 1Н), 8,14-8,07 (т, 2Н), 7,59-7,50 (т, 3Н), 7,19 (8, 1Н), 5,39-5,30 (т. 1Н), 4,67 (!, 1 = 8 Гц, 0,3Н), 4,61 (!, 1 = 8 Гц, 0,7Н), 4,07-4,01 (т, 2Н), 3,81 (8, 3Н), 2,89-2,73 (т, 1Н), 2,55-2,47 (т, 1Н), 1,49 (8, 2,7Н), 1,45 (8, 6,3Н).
К раствору полученного выше метилового эфира (503 мг, 1,02 ммоля) в смеси ТГФ:Н2О (10:4 мл) добавляли моногидрат гидроксида лития (85 мг, 2,05 ммоля). Добавляли 2 мл МеОН для получения гомогенного раствора. Через 30 мин образовывался осадок белого цвета. Образовавшуюся суспензию перемешивали при КТ еще в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли 10%-ным водным раствором лимонной кислоты и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и упаривали в вакууме, получая 416 мг (выход 85%) требуемой кислоты (8).
!Н-ЯМР (ДМСО-66): δ 8,92-8,87 (т, 1Н), 8,47 (66, 1 = 9, 3 Гц, 1Н), 8,38-8,32 (т, 2Н), 8,19 (6, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,77 (8, 1Н), 7,62-7,55 (т, 3Н), 5,73-5,66 (т, 1Н), 4,41 (!, 1 = 8 Гц, 1Н), 3,89-3,76 (т, 2Н), 2,83-2,72 (т, 1Н), 2,47-2,35 (т, 1Н), 1.38 (8, 9Н).
Элементы структуры Р1
Пример 9.
А) Синтез смеси изомеров (1В, 2В)/(18, 2В)-1-амино-2-этилциклопропилкарбоновой кислоты.
ВиЮ2С'х^ч’СО21Ви
9а
б) 'ВиОК, Н2о
Εξό ____ _________ „ от 0* С до КТ 2 96 2 Μβ-δί'^/^’θ н этил в сия-ориентацим относ, эфира Эе
Η2Ν СО21Ви дефлегмации θί этил в шн-ориентвции относ, эфира смесь изомеров (ВК)/(5Й)
а) К суспензии бензилтриэтиламмонийхлорида (21,0 г, 92,19 ммоля) в 50%-ном водном растворе №ЮН (92,4 г в 185 мл Н2О) последовательно добавляли ди-трет-бутилмалонат (20,0 г, 92,47 ммоля) и 1,2-дибромбутан (30,0 г, 138,93 ммоля). Реакционную смесь интенсивно перемешивали в течение ночи при КТ, а затем добавляли смесь льда и воды. Неочищенный продукт трижды (3х) экстрагировали СН2С12, последовательно промывали водой (3х) и соляным раствором. Органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали экспресс-хроматографии (7 см, от 2 до 4% Е!2О в гексане), получая требуемое циклопропановое производное 9с (19,1 г, 70,7 ммоля, выход 76%).
!Н-ЯМР (СЭС13): δ 1,78-1,70 (т, 1Н), 1,47 (8, 9Н), 1,46 (8, 9Н), 1,44-1,39 (т, 1Н), 1,26-1,64 (т, 3Н), 1,02 (!, 3Н, 1= 7,6 Гц).
б) К суспензии трет-бутоксида калия (6,71 г, 59,79 ммоля, 4,4 экв.) в безводном простом эфире (100 мл) при 0°С добавляли Н2О (270 мкл, 15,00 ммоля, 1,1 экв.). Через 5 мин к суспензии добавляли сложный диэфир 9с (3,675 г, 13,59 ммоля) в простом эфире (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при КТ, а затем сливали на смесь лед/вода и промывали простым эфиром (3х). Водный слой подкисляли 10%-ным водным раствором лимонной кислоты при 0° С и экстрагировали АсОЕ! (3х). Объединенные органические слои последовательно промывали водой (2х) и соляным раствором. После обычной переработки (№28О4, фильтрация, концентрирование) выделяли требуемую кислоту 96 в виде масла светло-желтого цвета (1,86 г, 8,68 ммоля, выход 64%).
Ή-ЯМР (СЭС13): δ 2,09-2,01 (т, 1Н), 1,98 (66, 1 = 3,8, 9,2 Гц, 1Н), 1,81-1,70 (т, 1Н), 1,66 (66, 1 = 3,0, 1 = 8,2 Гц, 1Н), 1,63-1,56 (т, 1Н), 1,51 (к, 9Н), 1,0 (1,1 = 7.3 Гц, 3Н).
в) К полученной выше кислоте 96 (2,017 г, 9,414 ммоля) в безводном бензоле (32 мл) последовательно добавляли Ε13Ν (1,50 мл, 10,76 ммоля, 1,14 экв.) и ДФФА (2,20 мл, 10,21 ммоля, 1,08 экв.). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3,5 ч, а затем добавляли 2-триметилсилилэтанол (2,70 мл, 18,84 ммоля, 2,0 экв.). Кипячение с обратным холодильником продолжали в течение ночи и затем реакционную смесь разбавляли Е12О и последовательно промывали 10%-ным водным раствором лимонной кислоты, водой, насыщенным водным раствором NаНСОз, водой (2х) и соляным раствором. После обычной перебработки (Мд§О4, фильтрация, концентрирование) остаток очищали с помощью экспресс-хроматографии (5 см, 10%-ный АсОЕ1 в гексане), получая требуемый карбамат 9е (2,60 г, 7,88 ммоля, выход 84%) в виде масла светло-желтого цвета.
МС (РАБ) 330 (МН+).
Ή-ЯМР (СЭС13): δ 5,1 (шир. к, 1Н), 4,184,13 (т, 2Н), 1,68-1,38 (т, 4Н), 1,45 (к, 9Н), 1,24-
1,18 (т, 1Н), 1,00-0,96 (т, 5Н), 0,03 (к, 9Н).
г) К карбамату 9е (258 мг, 0,783 ммоля) добавляли 1,0М раствор ТБАФ в ТГФ (940 мкл, 0,94 ммоля, 1,2 экв.). Через 4,5 ч добавляли дополнительное количество 1,0М ТБАФ (626 мкл, 0,63 ммоля, 0,8 экв.). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи, кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин, а затем разбавляли АсОЕ1. Раствор последовательно промывали водой (2х) и соляным раствором. После обычной переработки (Мд§О4, фильтрация, концентрирование) выделяли требуемый амин 9ί (84 мг, 0,453 ммоля, выход 58%) в виде жидкости светло-желтого цвета.
Ή-ЯМР (СВС13): δ 1,96 (шир. к, 2Н), 1,60-
1,40 (т, 2Н), 1,47 (к, 9Н), 1,31-1,20 (т, 1Н), 1,14 (66, 1 = 4,1, 7,3 Гц, 1Н), 1,02 (66, 1 = 4,1, 9,2 Гц, 1Н), 0,94 (1, 1 = 7,3 Гц, 3Н).
Пример 10. Химическое разделение изомеров трет-бутил-(1К, 2К)/(1Б, 2К)-1-амино-2этилциклопропилкарбоксилата (из примера 9)
9е смесь изомеров (ЯЯ)/(8К)
1Оа 10Ь изомеры, разделенные колоночной хроматографией (ЙН)-изомер (ЗК)-иэомер
Соединение 9е из примера (8,50 г, 25,86 ммоля) обрабатывали 1М ТБАФ/ТГФ (26 мл) при кипячении с обратным холодильником в течение 45 мин. Охлажденную реакционную смесь разбавляли Е1ОАс, промывали водой (3х) и соляным раствором (1х), а затем сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали, получая свободный амин в виде масла светло-желтого цвета. Этот свободный амин растворяли в безводном СН2С12 (120 мл), Ν-ММ (8,5 мл, 77,57 ммоля), последовательно добавляли соединение 4 (пример 4) (10,08 г, 27,15 ммоля) и ГАТУ (11,79 г, 31,03 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи, а затем обрабатывали по описанной выше методике. Неочищенную смесь диастереоизомеров разделяли с помощью экспресс-хроматографии (элюент: гексан:Е12О в соотношении 25:75), получая дипептид 10а (менее полярное элюированное пятно) в виде пены белого цвета (4,42 г; выход 64% от теоретического) и 10Ь (более полярное элюированное пятно) в виде пены цвета слоновой кости (4 г, выход 57% от теоретического). К этому моменту времени два изомера были разделены, но абсолютное стереохимическое строение еще не было известно.
Пример 11. Определение абсолютного стереохимического строения соединений 10а и 10Ь на основе корелляции с известным трет-бутил 1К-амино-2К-этилциклопропилкарбоксилатом.
Соединение 11а, имеющее приведенное выше абсолютное стереохимическое строение, которое было определено с помощью рентгеноструктурного анализа (1. Ат. СЬет. Бос., 117. 12721, 1995), было предоставлено проф. А. Сйатейе из Монреальского университета. Соединение 11а (13,2 мг, 0,046 ммоля) растворяли в 1М НС1/Е1ОАс (240 мкл) и перемешивали в течение приблизительно 48 ч. Смесь упаривали досуха, получая соединение 11Ь в виде пасты светло-желтого цвета, которое подвергали сочетанию с соединением 4 (18 мг, 0,049 ммоля), как это описано в примере 10, используя Ν-ММ (20,3 мкл, 0,185 ммоля) и ГАТУ (21,1 мг, 0,056 ммоля) в СН2С12. Неочищенный продукт очищали с помощью экспресс-хроматографии (элюент: гексан:Е12О в соотношении 50:50), получая дипептид 11с в виде масла (7,7 мг; выход 31%). Путем сравнения данных, полученных с помощью ТСХ, ЖХВР и ЯМР, было установлено, что дипептид 11с идентичен менее полярному соединению 10а, полученному в примере 10, а это свидетельствует о том, что абсолютное стереохимическое строение соединения 10а описывается как (1К,2К).
Пример 12. Получение изомеров (1К, 2К)/(18,2К)-1-Вос-амино-2-этилциклопропилкарбоновой кислоты (12а).
1.ТФК, о*с
2. бОдн. ΝίΟΗ, ТГФ (Вос^О
9е 12а
Карбамат 9е из примера 9 (2,6 г, 7,88 ммоля) смешивали в течение 40 мин с ТФК при 0°С. Затем смесь концентрировали и разбавляли ТГФ (10 мл). Добавляли водный раствор №ОН (700 мг, 17,5 ммоля в 8,8 мл Н2О), а затем раствор (Вос)2О (2,06 г, 9,44 ммоля, 1,2 экв.) в ТГФ (13 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при КТ (значение рН поддерживали на уровне 8 путем добавления при необходимости 10%-ного водного раствора №1ОН), а затем разбавляли Н2О, промывали Е!2О (3х) и подкисляли при 0°С с помощью 10%-ного водного раствора лимонной кислоты. Водный слой экстрагировали Е!ОАс (3х) и последовательно промывали Н2О (2х) и соляным раствором. После обычной переработки (Мд8О4, фильтрация и концентрирование) выделяли требуемую Вос-защищенную аминокислоту (12а) (788 мг, 3,44 ммоля, выход 44%).
!Н-ЯМР (СБС13): δ 5,18 (шир. 8, 1Н), 1,641,58 (т, 2Н), 1,55-1,42 (т, 2Н), 1,45 (8, 9Н), 1,32-
1,25 (т, 1Н), 0,99 (!, 3Н, 1= 7,3 Гц).
Получение изомеров метилового эфира (1К,2К)/(18,2К)-1 -Вос-амино -2-этилциклопро пилкарбоновой кислоты (12Ь).
Вос-защищенное производное 12а (0,30 г,
1,31 ммоля) растворяли в Е!2О (10 мл) и обрабатывали свежеприготовленным диазометаном в Е!2О при 0°С до тех пор, пока не появлялась устойчивая желтая окраска, свидетельствующая о небольшом избытке диазометана. После перемешивания в течение 20 мин при КТ реакционную смесь концентрировали досуха, получая соединение 12Ь в виде прозрачного бесцветного масла (0,32 г, выход 100%).
!Н-ЯМР (СБС13): δ 5,1 (шир. 8, 1Н), 3,71 (8, 3Н), 1,62-1,57 (т, 2Н), 1,55 (8, 9Н), 1,53-1,43 (т, 1Н), 1,28-1,21 (т, 2Н), 0,95 (!, 1 = 7,3 Гц, 3Н).
Пример 13. Ферментативное разделение изомеров метил-(1К, 2К)/(18, 2К)-Вос-1-амино2-этилциклопропилкарбоксилата.
н о
13Ь (8,Н)‘
а) Смесь энантиомеров метилового эфира (18,2К)/(1К,2К)-1-Вос-амино-2-этилкарбоновой кислоты из примера 10 (0,31 г, 1,27 ммоля) растворяли в ацетоне (3 мл) и затем при интенсивном перемешивании разбавляли водой (7 мл). Значение рН раствора доводили до 7,5 с помощью 0,05М водного раствора №1ОН, после чего добавляли алкалазу А1са1а8е® [2,4 л экстракта, полученного от фирмы Νονο Νογ6ι8Κ 1п6и81па18] (300 мг). В процессе инкубации значение рН стабилизировали с помощью №1ОН и измеряли значение рН для регулирования процесса добавления раствора №1ОН. Через 40 ч смесь разбавляли Е!ОАс и Н2О (в смеси с 5 мл насыщенного ΝβΠ^^ и фазы разделяли. Водную фазу подкисляли с помощью 10%-ного водного раствора НС1 и экстрагировали Е!ОАс, сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали, получая кислоту 13а (48,5 мг). Абсолютное стереохимическое строение определяли с помощью корреляции аналогично примерам 10 и 11.
б) Обработкой аликвотного количества кислоты 13а диазометаном в Е!2О получали метиловый эфир, при этом анализ с помощью ЖХВР с использованием хиральной колонки [СЫга1се1® ОЭ-Н, 2,5%-ный изопропанол в гексане, изократическая] показал, что соотношение (8,К)-изомеров составляет 51:1.
Пример 14. Синтез изомеров (1К, 28)/(18, 28)-1-амино-2-этилциклопропилкарбоновой
В качестве исходного продукта использовали кислоту 96, описанную в примере 9.
в) К кислоте 96 (1,023 г, 4,77 ммоля) в СН3С№ (25 мл) последовательно добавляли ДБУ (860 мкл, 5,75 ммоля, 1,2 экв.) и аллилбромид (620 мкл, 7,16 ммоля, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при КТ и затем концентрировали. Остаток разбавляли Е!2О и последовательно промывали 10%-ным водным раствором лимонной кислоты (2х), Н2О, насыщенным водным раствором NаНСО3, Н2О (2х) и соляным раствором. После обычной переработки (Мд8О4, фильтрация и концентрирование) выделяли требуемый сложный эфир 14а (1,106 г, 3,35 ммоля, выход 91%) в виде бесцветного масла.
МС (РАВ) 255 (МН+).
!Н-ЯМР (СБС13): δ 5,96-5,86 (т, 1Н), 5,37-
5,22 (т, 2Н), 4,70-4,65 (т, 1Н), 4,57-4,52 (т, ‘Анализ с помощью ЖХВР на колонке СЫгасе!· Οϋ-Η ’ 'Возможно использование друпис сложных эфиров (например ЕО
1Н), 1,87-1,79 (т, 1Н), 1,47 (δ, 9Н), 1,45-1,40 (т, 1Н), 1,33-1,24 (т, 3Н), 1,03 (1, 1=7,3 Гц, 3Н).
г) К сложному эфиру 14а (1,106 г, 4,349 ммоля) в безводном СН2С12 (5 мл) при КТ добавляли ТФК (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч и затем концентрировали, получая соединение 14Ь (854 мг, 4,308 ммоля, выход 99%).
МС (РАВ) 199 (МН+).
Ή-ЯМР (СБС13): δ 5,99-5,79 (т, 1Н), 5,405,30 (т, 2Н), 4,71-4,62 (т, 2Н), 2,22-2,00 (т, 2Н), 1,95-1,88 (т, 1Н), 1,84-1,57 (т, 2Н), 0,98 (1, 1= 7,3 Гц, 3Н).
д) К кислоте 14Ь (853 мг, 4,30 ммоля) в безводном бензоле (14,8 мл) последовательно добавляли Ε13Ν (684 мкл, 4,91 ммоля, 1,14 экв.) и ДФФА (992 мкл, 4,60 ммоля, 1,07 экв.). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4,5 ч, а затем добавляли 2триметилсилилэтанол (1,23 мл, 8,58 ммоля, 2,0 экв.). Кипячение с обратным холодильником продолжали в течение ночи, после чего реакционную смесь разбавляли Е12О и последовательно промывали 10%-ным водным раствором лимонной кислоты, водой, насыщенным водным раствором №1НСО3. водой (2х) и соляным раствором. После обычной перебработки (Мд8О4, фильтрация, концентрирование) остаток подвергали экспресс-хроматографии (5 см, от 10 до 15% АсОЕ1-гексан), получая карбамат 14с (1,212 г, 3,866 ммоля, выход 90%) в виде масла светло-желтого цвета.
МС (РАВ) 314 (МН+).
Ή-ЯМР (СБС13): δ 5,93-5,84 (т, 1Н), 5,32-
5,20 (т, 2Н), 5,05 (шир. δ, 1Н), 4,60-4,56 (т, 2Н), 4,20-4,11 (т, 2Н), 1,71-1,60 (т, 3Н), 1,39-1,22 (т, 1Н), 1,03 (1, 1=7,6 Гц, 3Н), 0,96-0,86 (т, 1Н), 0,04 (8, 9Н).
е) К карбамату 14с (267 мг, 0,810 ммоля) добавляли 1,0М раствор ТБАФ в ТГФ (1,62 мл, 1,62 ммоля, 2,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при КТ, кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин и затем разбавляли АсОЕ1. Раствор последовательно промывали водой (2х) и соляным раствором. После обычной переработки (Мд8О4, фильтрация и концентрирование) выделяли требуемый амин 146 (122 мг, 0,721 ммоля, выход 89%) в виде жидкости светло-желтого цвета.
Ή-ЯМР (СБС13): δ 5,94-5,86 (т,1Н), 5,31-
5,22 (т, 2Н), 4,58 (б, 1=5,7 Гц, 2Н), 1,75 (шир. 8, 2Н), 1,61-1,53 (т, 2Н), 1,51-1,42 (т, 2Н), 1,00 (1, 1=7,3 Гц, 3Н), 0,70-0,62 (т, 1Н).
Пример 15. Синтез изомеров этил(1В,28)/( 18,28)-1 -амино-2-винилциклопропилкарбоксилата.
РБ к Л +
ΡΝΝ СОгЕ1
НС1
а) К раствору трет-бутоксида калия (4,62 г, 41,17 ммоля, 1,1 экв.) в ТГФ (180 мл) при -78°С добавляли имеющийся в продаже имин 15а (10,0 г, 37,41 ммоля) в ТГФ (45 мл). Реакционную смесь нагревали до 0°С и перемешивали при этой температуре в течение 40 мин. Затем смесь снова охлаждали до -78°С, добавляли 1,4дибромбутен 15Ь (8,0 г, 37,40 ммоля) и затем перемешивали при 0°С в течение 1 ч и снова охлаждали до -78°С, после чего добавляли третбутоксид калия (4,62 г, 41,17 ммоля, 1,1 экв.). В завершение реакционную смесь перемешивали еще более часа при 0°С и концентрировали, получая соединение 15с.
б, в, г) Соединение 15с растворяли в Е12О (265 мл) и обрабатывали 1н. водным раствором НС1 (106 мл). После выдерживания в течение 3,5 ч при КТ слои разделяли и водный слой промывали Е12О (2х) и подщелачивали насыщенным водным раствором NаНСО3. Требуемый амин экстрагировали Е12О (3х) и объеди ненные органические экстракты промывали соляным раствором. После обычной переработки (Мд8О4, фильтрация и концентрирование) остаток обрабатывали 4н. раствором НС1 в диоксане (187 мл, 748 ммоля). После концентрирования выделяли гидрохлорид 15б в виде твердого вещества коричневого цвета (2,467 г, 12,87 ммоля, выход 34%).
Ή-ЯМР (СБС13): δ 9,17 (шир. 8, 3Н), 5,755,66 (т, 1Н), 5,39 (б, 1=17,2 Гц, 1Н), 5,21 (б, 1=10,2 Гц, 1Н), 4,35-4,21 (т, 2Н), 2,77-2,70 (т, 1Н), 2,05 (бб, 1=6,4, 10,2 Гц, 1Н), 1,75 (бб, 1= 6,4, 8,3 Гц, 1Н), 1,33 (1, 1= 7,0 Гц, 3Н).
Пример 16. Получение изомеров этилового эфира (1В,28/18,28)-1-Вос-амино-2-винилциклопропилкарбоновой кислоты.
Гидрохлорид 15б (1,0 г, 5,2 ммоля) и (Вос)2О (1,2 г, 5,7 ммоля) растворяли в ТГФ (30 мл) и обрабатывали ДМАП (0,13 г, 1,04 ммоля, 0,2 экв.) и диизопропилэтиламином (2,8 мл, 15,6 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч, после чего разбавляли Е1ОАс (40 мл) и промывали последовательно насыщенным раствором NаНСО3 (водный), 5%-ным водным раствором НС1 и насыщенным соляным раствором. Органическую фазу сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали, получая после очистки с помощью экспресс-хроматографии (15%-ный Е1ОАс в гексане) соединение 16а (0,29 г, выход 23%).
Ή-ЯМР (СБС13): δ 5,80-5,72 (т, 1Н), 5,29-
5,25 (бб, 1=17,2, 17,2 Гц, 1Н), 5,24-5,1 (шир. 8, 1Н), 5,10 (бб. 1=9,2, 9,2 Гц, 1Н), 4,22-4,13 (т,
2Н), 2,15-2,04 (т, 1Н), 1,85-1,73 (шир. 8, 1Н), 1,55-1,5 (т, 1Н), 1,49 (8, 9Н), 1,26 (1, 1=7,3Гц, 3Н).
Пример 17. Ферментативное разделение изомеров этил-(1В,28)/( 18,28)-1-амино-2-винилциклопропилкарбоксилата.
ял X? яд ¢.. Κί8χ3 н о ЫаОН Н О Н О
16а винил в сии-ориентацик 17в(8,8) ________17с (Я,8Р относ, эфира 'Анализ с помощью ЖХВР на колонке СЫгасе1· Οϋ-Η
а) Производное 17а в виде рацемической смеси (0,29 г, 1,14 ммоля) растворяли в ацетоне (5 мл) и разбавляли Н2О (10 мл). Значение рН доводили до 7,2 с помощью 0,2н. водного раствора №ЮН, после чего добавляли алкалазу А1са1аке® (300 мг). Для поддержание значения рН в процессе инкубации на постоянном уровне с помощью статического титратора рН в течение 9 дней добавляли раствор №ЮН до тех пор, пока не было добавлено теоретически рассчитанное количество основания. После экстракции кислотой/основанием, как это описано в примере 13, выделяли негидролизованный сложный эфир (0,15 г, выход 100%) и гидролизованный продукт (0,139 г, выход 95%). Путем анализа негидролизованного сложного эфира с помощью ЖХВР с использованием хиральной колонки было установлено, что соотношение требуемого соединения 17с составляет 43:1, а на основе химической корелляции согласно методу, описанному в примерах 10 и 11, было установлено, что его стереохимическое строение соответствует (В,8).
Условия проведения анализа с помощью ЖХВР: СЫга1се1® ΟΌ-Н (4,6 мм х 25 см), изо кратические условия с использованием в качестве подвижной фазы 2,5%-ного изопропанола в гексане.
Пример 18. Разделение изомеров (1В,28)/ (18,28)-1-амино-2-винилциклопропилкарбоксилата путем кристаллизации с помощью дибензоил-Э-винной кислоты
К раствору неочищенной рацемической смеси (18,28)- и (1В, 28)-изомеров этил-1амино-2-винилциклопрпилкарбокситата [полученного согласно примеру 15 из этилового эфира №(дифенилметилен)глицина (25,0 г, 93,5 моля)] в Е!ОАс (800 мл) добавляли дибензоилΌ-винную кислоту (33,5 г, 93,5 моля). Смесь нагревали до температуры дефлегмации, выдерживали при КТ в течение 15 мин, а затем охлаждали до 0°С. Через 30 мин получили твердое вещество белого цвета. Это твердое вещество отфильтровывали, промывали Е!ОАс (100 мл) и сушили на воздухе. Твердое вещество суспендировали в ацетоне (70 мл), обрабатывали ультразвуком и фильтровали (3х). Затем твердое вещество дважды перекристаллизовывали в горячем ацетоне (партия А). Маточные растворы концентрировали и остаток трижды перекристаллизовывали в горячем ацетоне (партия Б). Две партии соли дибензоил-Э-винной кислоты в виде аморфного твердого продукта белого цвета объединяли (5,53 г) и суспендировали в смеси Е!2О (250 мл) и насыщенного раствора №1НС’Оз (150 мл). Органический слой промывали соляным раствором, сушили (Мд8О4) и фильтровали. Фильтрат разбавляли 1н. НС1/Е!2О (100 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Маслянистый остаток упаривали с СС14, получая гидрохлорид этил-1(В)-амино-2-(8)-винилциклопропанкарбоксилата (940 мг, выход 11%) в виде гигроскопического твердого вещества белого цвета: [α]25Β +39,5°С (с 1,14 МеОН); [а]25365 +88,5°С (с 1,14 МеОН).
1Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 9,07 (шир. к, 2Н), 5,64 (ббб, 1=17,2, 10,4, 8,7 Гц, 1Н), 5,36 (бб, 1=17,2, 1,6 Гц, 1Н), 5,19 (бб, 1=10,4, 1,6 Гц, 1Н),
4,24-4,16 (т, 2Н), 2,51-2,45 (т, выделению пиков препятствовал ДМСО, 1Н), 1,84 (бб, 1=10,0, 6,0 Гц, 1Н), 1,64 (бб, 1=8,3, 6,0 Гц, 1Н), 1,23 (!, 1=7,1 Гц, 3Н).
МС (Е8Г): т/ζ 156 (МН)+.
Чистота энантиомера Вос-защищенного производного по данным ЖХВР-анализа составила 91% (колонка типа СШВАЬРАК А8®, гексан/изо-РгОН).
Пример 19. Получение изомеров гидрохлорида метилового эфира (1В,28)/(18, 28)-1амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты (191).
Получение имина 19Ь.
Гидрохлорид этилового эфира глицина 19а (1519,2 г, 10,88 моля, 1,0 экв.) суспендировали в метил-трет-бутиловом эфире (8 л). Добавляли бензальдегид (1155 г, 10,88 моля, 1 экв.) и безводный сульфат натрия (773 г, 5,44 моля, 0,5 экв.) и смесь охлаждали до 5°С в бане со смесью лед-вода. По каплям в течение 15 мин добавля ли триэтиламин (2275 мл, 16,32 моля, 1,5 экв.) (для промывки использовали 0,5 л метил-третбутилового эфира) и смесь перемешивали в течение 40 ч при комнатной температуре. Реакцию прекращали, добавляя ледяную воду (5 л), и отделяли органический слой. Водную фазу экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром (1 л) и объединенные органические фазы промывали смесью насыщенного NаНСО3 (400 мл) и воды (1,6 л), а затем соляным раствором. Раствор сушили над Мд8О4, концентрировали при пониженном давлении и остаток в виде масла желтого цвета сушили в вакууме до постоянной массы. В результате получили имин 19Ь в виде густого масла желтого цвета, которое отверждалось при -20°С (2001 г, выход 96%).
Ή-ЯМР (СИС13, 400 МГц): δ 8,30 (к, 1Н), 7,79 (т, 2Н), 7,48-7,39 (т, 3Н), 4,40 (б, 1=1,3 Гц, 2Н), 4,24 (ф 1=7 Гц, 2Н), 1,31 (!, 1=7 Гц, 3Н).
Получение рацемической смеси изомеров гидрохлорида этилового эфира Ν-Вос-! 1 К, 28)/ (18,28)-1-амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты 19е.
трет-Бутоксид лития (4,203 г, 52,5 ммоля, 2,1 экв.) суспендировали в безводном толуоле (60 мл). Имин 19Ь (5,020 г, 26,3 ммоля, 1,05 экв.) и дибромид 19с (5,348 г, 25 ммолей, 1 экв.) растворяли в безводном толуоле (30 мл) и этот раствор добавляли по каплям в течение 30 мин при перемешивании к раствору Ь1О1Ви при комнатной температуре. После завершения добавления смесь темно-красного цвета перемешивали еще в течение 10 мин и реакцию прекращали путем добавления воды (50 мл) и метил-трет-бутилового эфира (МТБЭ, 50 мл). Водную фазу отделяли и повторно экстрагировали с помощью МТБЭ (50 мл). Органические фазы объединяли, добавляли 1н. НС1 (60 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Органическую фазу отделяли и экстрагировали водой (40 мл). Затем водные фазы объединяли, насыщали солью (35 г) и добавляли МТБЭ (50 мл). Затем перемешанную смесь подщелачивали до рН 13-14 путем осторожного добавления 10н. ИаОН. Органический слой отделяли и водную фазу экстрагировали МТБЭ (2х50 мл). Объединяли органические экстракты, содержащие свободный амин 19б, и добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (5,46 г, 25 ммолей, 1 экв.). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре по данным ТСХ оставалось некоторое количество непрореагировавшего свободного амина. Добавляли дополнительную порцию ди-трет-бутилдикарбоната (1,09 г, 5 ммолей, 0,2 экв.) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч, после чего ТСХанализ показал, что соединение 19б полностью превратилось в карбамат 19е. Раствор охлаждали до комнатной температуры, сушили над Мд8О4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали экспресс-хроматографией, используя в качестве элюента смесь сначала 10%-ного, а затем 20%-ного Е!ОАс в гексане. Таким путем получили очищенное соединение 19е в виде прозрачного масла желтого цвета, которое медленно отверждалось в вакууме (4,014 г, выход 63%).
Ή-ЯМР (СИС13, 400 МГц): δ 5,77 (ббб, 1 = 17, 10, 9 Гц, 1Н), 5,28 (бб, 1 = 17, 1,5 Гц, 1Н),
5,18 (шир. к, 1Н), 5,11 (бб 1 = 10, 1,5 Гц, 1Н),
4,24-4,09 (т, 2Н), 2,13 (φ 1 = 8,5 Гц, 1Н), 1,79 (шир. т, 1Н), 1,46 (т, 1Н), 1,45 (к, 9Н), 1,26 (!, 1 = 7 Гц, 3Н).
Получение указанного в заголовке соединения 19£ путем переэтерификации соединения 19е.
Этиловый эфир 19е (10,807 г, 42,35 ммоля) растворяли в безводном метаноле (50 мл) и добавляли раствор метоксида натрия в МеОН (25 об.%, 9,7 мл, 42 ммоля, 1 экв.). Смесь выдерживали при 50°С в течение 2 ч, после чего ТСХанализ показал, что реакция переэтерификации завершилась (соединение 19е: К£ 0,38, соединение 19£: К£ 0,34 в смеси 20%-ный Е!ОАс в гексане). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подкисляли до рН 4 с помощью 4н. НС1 в диоксане. Осадившийся №1С1 удаляли фильтрацией (используя метилтрет-бутиловый эфир для промывки) и летучие компоненты удаляли при пониженном давлении. К остатку добавляли метил-трет-бутиловый эфир (100 мл) и твердые частицы удаляли фильтрацией. После упаривания фильтрата при пониженном давлении и сушки в вакууме получили чистый метиловый эфир 19£ (10,11 г, выход 99%).
Ή-ЯМР (СИС13, 400 МГц): δ 5,75 (ббб, 1 = 17, 10, 9 Гц, 1Н), 5,28 (бб, 1 = 17,1 Гц, 1Н), 5,18 (шир. к, 1Н), 5,11 (ббб, 1 = 10, 1,5, 0,5 Гц, 1Н), 3,71 (к, 3Н), 2,14 (φ 1 = 9 Гц, 1Н), 1,79 (шир. т, 1Н), 1,50 (шир. т, 1Н), 1,46 (к, 9Н).
Пример 20. Ферментативное разделение изомеров гидрохлорида метилового эфира (ГК,28)-1-амино-2-винилпропанкарбоновой ки слоты.
Получение метилового эфира Ν-Вос(ГК,28)-1-амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты 20а.
Рацемическую смесь изомеров сложного эфира 19£ (0,200 г, 0,83 ммоля) растворяли в ацетоне (3 мл) и добавляли воду (7 мл). Добавляли 0,05М №ЮН (1 каплю) для доведения значения рН раствора до ~8 и затем добавляли 2,4 л алкалазы А1са1аке® (фирма №уо №гб1кк ВюсЬет, 0,3 г в 1 мл воды). Смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре, поддерживая значение рН раствора на уровне 8 с использованием автоматического титратора. В начале 4-го и 5-го дня перемешивания при рН 8 добавляли дополнительные порции раствора фермента (2х0,3 г). В течение полных 5 дней было израсходовано в общей сложности 8,3 мл 0,05М №ЮН. Реакционную смесь разбавляли Е!ОАс и водой и отделяли органическую фазу. После промывки соляным раствором органический экстракт сушили (Мд8О4) и концентриро вали под вакуумом. Таким путем получили соединение 20а (0,059 г, выход 30%) в виде прозрачного масла.
Характеристики 1Н-ЯМР-спектра идентичны соответствующим характеристикам соединения 19Г.
ЖХВР (СЫга1се1 ΟΌΗ, 4,6 х 250 мм, изократические условия 1%-ный Е!ОН в гексане, скорость потока 0,8 мл/мин): (1К,28)-2 К, 19,3 мин (97%); (18,2К)-2 К 17,0 мин (3%).
Получение гидрохлорида метилового эфира (1К,28)-1-амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты 20Ь.
Соединение 20а (39,96 г, 165,7 ммоля) растворяли в диоксане (25 мл) и полученный раствор по каплям добавляли при перемешивании к 4н. раствору НС1 в диоксане (фирма А1бпсН, 250 мл). Через 45 мин ТСХ-анализ показал, реакция удаления защитных групп завершилась. Летучие компоненты удаляли при пониженном давлении и остаток дважды упаривали совместно с МеОН (2х100 мл). К маслянистому остатку коричневого цвета добавляли простой эфир (300 мл) и МеОН (10 мл) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, в результате чего образовывался осадок в виде полутвердого вещества. Добавляли дополнительную порцию МеОН (15 мл) и перемешивание продолжали в течение 6 ч, после чего твердый продукт желтоватого цвета собирали фильтрацией. Продукт промывали 5%-ным МеОН в простом эфире (50 мл) и простым эфиром (2х50 мл), а затем сушили в вакууме, получая соединение 20Ь в виде твердого вещества желтоватого цвета (22,60 г, выход 76%). Фильтраты (включая смывы) упаривали в вакууме, получая дополнительную порцию соединения 20Ь в виде масла коричневого цвета (7,82 г, выход 26%). Обе фракции имели чистоту, достаточную для применения в синтезе ингибиторов протеазы ΗΟΎ: [а]с 25 +38,2° (с 1,0, МеОН).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 9,15 (широкий к, 3Н), 5,65 (ббб, 1 = 17, 10, 9 Гц, 1Н), 5,36 (бб, 1 = 17, 1,5 Гц, 1Н), 5,19 (бб, 1 = 10, 1,5 Гц, 1Н), 3,74 (к, ЗН), 2,50 (μ, перекрывается сигналом от ДМСО, 1 = 9 Гц, 1Н), 1,86 (бб, 1 = 10,6 Гц, 1Н), 1,64 (бб, 1 = 8,6 Гц, 1Н).
Пример 21. Синтез метилового эфира 1аминоциклобутилкарбоновой кислоты.
21а
1,1-Аминоциклобутанкарбоновую кислоту получали по методу, описанному у Кауш Иоид1ак, КатаНдат Копбагебб1аг, Аообагб Копа1б, 8уп!Н. Соттип., 15 (4), 267-72 (1985). Соль аминокислоты (21а) (1,00 г, 6,6 ммоля) перемешивали в безводном метаноле (40 мл) при -20°С и смесь насыщали безводным хлористым водо родом, получая соединение (21Ь). Перемешивание этой смеси продолжали в течение 4 ч. Горячий раствор фильтровали и фильтрат концентрировали (роторный испаритель типа Ко!ауар, 30°С) с получением остатка, который растирали в этиловом эфире, получая после фильтрации и сушки порошок белого цвета (0,907 г, выход 83%).
Ή-ЯМР (400 МГц, ϋ2): δ СН3О (3Н, к, 3,97 част./млн), СН2 (2Н, т, 2,70-2,77 част./млн), СН2 (2Н, т, 2,45-2,53 част./млн) и СН2 (2Н, т, 2,142,29 част./млн).
Трипептиды
Пример 22. Общий метод проведения реакций сочетания на твердом носителе.
Синтез осуществляли на синтезаторе параллельного действия модели АСТ396 фирмы Абуапсеб СНетТесН®, имеющем 96-луночный блок. Обычно с использованием стандартных методов твердо-фазного синтеза одновременно синтезируют 24 пептида. Исходный продукт, представляющий собой (Етос-амино)циклопропан-(необязательно замещенную) карбоновую кислоту, связанную со смолой Ванга, получали методом ДЦК/ДМАП-сочетания (А(Нег1оп Е., 8сНеррагб К.С., 8о11б РНаке РерНбе 8уп!Нек1к, а РгасНса1 АрргоасН; изд-во IК^ Ргекк, ОхГогб (1989), стр. 131-148).
В каждую лунку вносили по 100 мг исходной смолы (приблизительно 0,05 ммоля). Смолы промывали последовательно порциями по 1,5 мл Ν-МП (1х) и ДМФ (3х). 3ащитную группу Етос удаляли путем обработки с помощью 1,5 мл 25 об.%-ного раствора пиперидина в ДМФ в течение 20 мин. Смолы промывали порциями по 1,5 мл ДМФ (4х), МеОН (3х) и ДМФ (3х). Реакцию сочетания проводили в ДМФ (350 мкл) с использованием 400 мкл (0,2 ммоля) 0,5М раствора Етос-аминокислота/гидрат ГОБТ в ДМФ, 400 мкл (0,4 ммоля) 1М раствора ДИПЭА в ДМФ и 400 мкл (0,2 ммоля) 0,5М раствора ТБТУ в ДМФ. После встряхивания в течение 1 ч лунки осушали, смолы промывали 1,5 мл ДМФ и повторяли еще раз реакцию сочетания в тех же условиях. Затем смолы промывали по описанной выше методике и повторяли весь цикл со следующей аминокислотой.
Блокирующие группы вводили следующими двумя путями:
1) в форме карбоновой кислоты с использованием описанного выше протокола (например, уксусной кислоты) или
2) в виде ацилирующего агента, такого как ангидрид или хлорангидрид.
В следующем примере проиллюстрировано блокирование с использованием ангидрида янтарной кислоты. После удаления защитной группы Етос и последующего осуществления процесса в соответствии с протоколом промывки добавляли ДМФ (350 мкл), а затем по 400 мкл каждого из растворов ангидрида янтарной кислоты (0,5М, 0,2 ммоля) в ДМФ и ДИПЭА (1,0М, 0,4 ммоля). Смолы перемешивали в течение 2 ч и осуществляли стадию повторного сочетания. После окончания синтеза смолу промывали порциями по 1,5 мл ДХМ (3х), МеОН (3х), ДХМ (3х) и сушили в вакууме в течение 2 ч. Отщепление от смолы и удаление присутствующих боковых цепей осуществляли путем добавления 1,5 мл смеси ТФК, Н2О, ДТТ и ТИС (92,5:2,5:2,5:2,5). После встряхивания в течение 2,5 ч смолу фильтровали и промывали 1,5 мл ДХМ. Фильтраты объединяли и концентрировали путем вакуумного центрифугирования. Каждое соединение очищали с помощью препаративной ЖХВР с обращенной фазой с использованием колонки типа С 18 (22 мм на 500 мм). Содержащие продукт фракции идентифицировали с помощью масс-спектрометрии МАБО!ТОЕ, объединяли и лиофилизировали.
Пример 23. Общий метод проведения реакций сочетания в растворе {см. также К. Кпогг и др., Тейийебгоп Ьейегк, 30, 1927 (1989)}.
Реагенты, т.е. свободный амин (1 экв.) (или его гидрохлорид) и свободную карбоновую кислоту (1 экв.), растворяли в СН2С12, ίΉ30Ν или ДМФ. К раствору при перемешивании в атмосфере азота добавляли четыре эквивалента Νметилморфолина и 1,05 эквивалентов агента сочетания. Через 20 мин добавляли один эквивалент второго реагента, т.е. свободной карбоновой кислоты. (Целесообразными для применения и эффективными агентами сочетания для этой цели являются (гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония (ГОБТ) либо предпочтительно тетрафторборат 2-(1Н-бензотриазол-1 -ил)-НЧ№,№-тетраметилурония (ТБТУ) или тетрафторборат О-(7азабензотриазол-1 -ил)-НЧ№,№-тетраметилурония (ГАТУ)). За ходом реакции наблюдали с помощью ТСХ. По завершении реакции растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в Е!ОАс. Раствор промывали последовательно 10%-ным водным раствором лимонной кислоты, насыщенным водным раствором №1НСО3 и соляным раствором. Органическую фазу сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью экспрессхроматографии по описанной выше методике.
Пример 24. Синтез соединения 304.
/ъ —
н о (5) = 24а 24Ь й А н о
24С н О соединение 304
а) (К,К)-изомер Вос-Е!-Асса-ОМе 13с (0,12 г, 0,49 ммоля), полученный путем ферментатив ного разделения (пример 13), обрабатывали смесью 4н. НС1/диоксан (45 мин), после чего концентрировали в вакууме, получая твердое вещество белого цвета. К этому гидрохлориду (приблизительно 0,49 ммоля) добавляли ТБТУ (0,17 г, 0,54 ммоля), Вос-4-(К)-(8-хинолинметилокси)пролин 5 (из примера 5) (0,18 г, 0,49 ммоля) и ДИПЭА (0,3 мл, 1,7 ммоля) в МеСN (10 мл). Смесь перемешивали при КТ в течение 3,5 ч, после чего концентрировали в вакууме. Образовавшийся продукт растворяли в Е!ОАс и промывали последовательно насыщенным водным раствором №1НСО3 и соляным раствором. После сушки (Мд§О4), фильтрации и концентрирования получали соединение 24Ь в виде твердого вещества белого цвета (0,122 г, выход 50%).
б) Соединение 24Ь (0,12 г, 0,25 ммоля) обрабатывали при КТ смесью 4н. НС1/диоксан (30 мин), после чего концентрировали в вакууме. Образовавшийся гидрохлорид (приблизительно 0,25 ммоля) обрабатывали Вос-Сйд-ОН-Н2О (75 мг, 0,27 ммоля), ТБТУ (87 мг, 0,27 ммоля) в МеСN (10 мл) и в завершение ДИПЭА (0,15 мл, 0,87 ммоля) при 0°С. Остаток разбавляли Е!ОАс, последовательно промывали насыщенным водным раствором NаНСО3 и соляным раствором, сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 24с в виде твердого вещества белого цвета (0,2 г). Этот продукт (0,14 г) растворяли в ДМСО и очищали с помощью препаративной ЖХВР, получая после лиофилизации соединение 24с в виде твердого вещества белого цвета (35 мг, выход 33%); ЖХВР (98%).
МС (ЕАВ) т/ζ: 637,3 (МН+).
МСВР: рассчитано для С35Н48НО7 (МН+) 637,36011: обнаружено 637,36250.
Результаты анализа с помощью 1Н-ЯМР (ДМСО-б6) свидетельствуют о наличии ротамеров: δ 8,91 (2хб, 1 = 4,1 и 4,1 Гц, 1Н), 8,40-8,36 (т, 2Н), 7,90 (б, 1 = 7,6 Гц, 1Н), 7,77 (б, 1 = 7,0 Гц, 1Н), 7,6-7,54 (т, 2Н), 6,80 (б, 1 = 8,6 Гц, 1Н),
5,18 и 5,16 (2хк, 2Н), 4,40 (шир. к, 1Н), 4,31 (!, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 4,12 (б, 1 = 11,44 Гц, 1Н), 4,03 (!, 1 = 7,9 Гц, 1Н), 3,78-3,72 (т, 1Н), 3,56 (к, 3Н), 2,35-2,27 (т, 1Н), 2,06-1,97 (т, 1Н), 1,71-1,55 (т, 10Н), 1,53-1,38 (т, 2Н), 1,26 (к, 9Н), 1,181,06 (т, 2Н), 1,02-0,93 (т, 2Н), 0,89 (!, 1 = 7,3 Гц, 3Н).
Соединение 304.
в) К соединению 24с (30 мг, приблизительно 0,047 ммоля) добавляли МеОН (1 мл), ТГФ (1 мл) и моногидрат гидроксида лития (12 мг, 0,29 ммоля) в Н2О (1 мл). Прозрачный раствор интенсивно перемешивали в течение 48 ч, после чего концентрировали в вакууме. Неочищенный пептид растворяли в ДМСО и очищали с помощью препаративной ЖХВР, получая после лиофилизации соединение 304 в виде твердого вещества белого цвета (21 мг, выход 72%); ЖХВР (99%).
МС (РАБ) т/ζ: (МН+) 623,3.
МСВР: рассчитано для С34Н4^4О7 (МН+) 623,34448, обнаружено: 623,34630.
Результаты анализа с помощью 1Н-ЯМР (ДМСО-й6) свидетельствуют о наличии ротамеров в соотношении 1:1: δ 8,90 (2хй, 1 = 4,1 Гц, 1Н), 8,37 (й, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 8,26 (8, 1Н), 7,89 (й, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 7,77 (й, 1 = 6,7 Гц, 1Н), 7,6-7,53 (т, 2Н), 6,88 и 6,79 (2хй, 1 = 8,6 и 7,9 Гц, 1Н), 5,17 и 5,16 (2x8, 2Н), 4,43-4,35 (шир. 8, 1Н), 4,29 (!, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 3,82-3,71 (т, 1Н), 2,35-2,27 (т, 1Н), 2,06-1,97 (т, 1Н), 1,72-1,53 (т, 10Н), 1,52-1,44 (т, 2Н), 1,37 и 1,29 (2x8, 9Н), 1,18-1,05 (т, 3Н), 1,0-0,94 (т, 1Н), 0,91 (!, 1 = 7,3 Гц, 3Н).
Пример 25. Синтез соединения 301.
соединение 301 '
а) Соединение 25а (т.е. 12а) (282 мг, 1,23 ммоля) суспендировали в безводном СН3С№ (6 мл). Добавляли последовательно ДБУ (221 мкл, 1,48 ммоля) и бензилбромид (161 мкл, 1,35 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при КТ. Смесь концентрировали, образовавшееся масло разбавляли Е!ОАс и 10%ным раствором лимонной кислоты и последовательно промывали 10%-ным раствором лимонной кислоты (2х), насыщенным водным раствором NаНСО3 (2х), водой (2х) и соляным раствором (1х). Этилацетатный слой сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали досуха. Неочищенное бесцветное масло очищали с помощью экспресс-хроматографии (элюент: гексан/Е!ОАс в соотношении от 95:5 до 90:10), получая бензилированный продукт 25Ь в виде бесцветного масла (368 мг; выход 93%). МС (РАВ) 318,2 МН-, 320,2 МН+, 342,2 (М+Х)+.
1Н-ЯМР (СЭС13): δ 7,37-7,28 (т, 5Н), 5,22-
5,10 (т, 1Н), 5,19 (й, 1= 12 Гц, 1Н), 5,16 (й, 1= 12 Гц, 1Н), 1,60-1,40 (т, 4Н), 1,39 (8, 9Н), 1,31-1,22 (т, 1Н), 0,91 (!, 1= 7,5, 14,5 Гц, 3Н).
б) Соединение 25Ь (368 мг, 1,15 ммоля) обрабатывали смесью 4н. НС1/диоксан (6 мл), как это описано выше. Неочищенный гидрохлорид аналогично примеру 22 подвергали реакции сочетания с соединением 4 (из примера 4) (470,8 мг, 1,27 ммоля) с использованием Ν-ММ (507 мкл, 4,61 ммоля) и ГАТУ (вместо ТБТУ, 525,6 мг, 1,38 ммоля) в СН2С12 (6 мл), получая неочищенную рацемическую смесь изомеров дипеп тида в виде масла оранжевого цвета. Неочищенный продукт очищали с помощью экспрессхроматографии (элюент: гексан/Е!2О в соотношении 50:50), получая чистый дипептид 25с (менее полярное элюированное пятно) в виде пены белого цвета (223 мг; выход 68% от теоретического).
МС 571,4 МН-, 573,3 МН+, 595,3 (М+Х)+.
1Н-ЯМР (СЭС13), смесь ротамеров в соотношении примерно 1:1: δ 8,03 (шир. й, 1= 8 Гц, 1Н), 7,86 (шир. й, 1= 7,5 Гц, 1Н), 7,82 (шир. й, 1=
6,5 Гц, 1Н), 7,61 (шир. 8, 0,5Н), 7,57-7,40 (т, 4Н), 7,31-7,21 (т, 5Н), 6,48 (шир. 8, 0,5Н), 5,22-
5,11 (т, 1Н), 5,08-4,81 (т, 3Н), 4,41-3,74 (т, 3Н), 3,49-3,18 (т, 1Н), 2,76-1,90 (т, 2Н), 1,691,48 (т, 3Н), 1,40 (8, 9Н), 1,40-1,23 (т, 2Н), 0,92 (!, 1= 7,5, 15 Гц, 3Н).
в) Дипептил 25с (170,1 мг, 0,297 ммоля) обрабатывали смесью 4н. НС1/диоксан (2 мл), как это описано выше. Неочищенный гидрохлорид подвергали сочетанию с Вос-СНд-ОН (84,1 мг, 0,327 ммоля) с использованием Ν-ММ (130,7 мкл, 1,19 ммоля) и ГАТУ (вместо ТБТУ, 135,5 мг, 0,356 ммоля) в СН2С12 (2мл) в течение 2,75 ч при КТ, после чего обрабатывали по описанной выше методике, получая неочищенный трипептид 25й в виде пены цвета слоновой кости (приблизительно 211,4 мг; выход 100%).
МС (РАВ) 712,5 МН+.
Соединение 301.
г) Неочищенный трипептид 25й (приблизительно 15,4 мг, 0,022 ммоля) растворяли в абсолютном этаноле (2 мл), добавляли приблизительное количество (на кончике шпателя) катализатора (10%-ный Рй/С) и ацетата аммония. Смесь подвергали гидрированию в течение ночи в сосуде, заполненном водородом, при КТ и атмосферном давлении. Реакционную смесь фильтровали через фильтр типа М111ех® с размерами пор 0,45 мкм, упаривали досуха, а затем разбавляли Е!ОАс и 10%-ным водным раствором лимонной кислоты и еще раз промывали 10%-ным водным раствором лимонной кислоты (1х), водой (2х) и соляным раствором (1х). Органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали, упаривали досуха и лиофилизировали, получая трипептид 301 в виде аморфного твердого вещества белого цвета (11,0 мг; выход 82%). МС (РАВ) 622,5 МН+ 644,5 (М+Х)+.
1 Н-ЯМР (ДМСО), смесь ротамеров в соотношении приблизительно 1:4: δ 8,54 и 8,27 (8, 1Н), 8,06-7,99 (т, 1Н), 7,96-7,91 (т, 1Н), 7,87 (й, 1 = 8 Гц, 1Н), 7,57-7,42 (т, 4Н), 6,81 (й, 1 = 8 Гц, 1Н), 4,99 (й, 1= 12 Гц, 1Н), 4,88 (й, 1 = 12 Гц, 1Н), 4,46-4,19 (т, 2Н), 4,17-4,02 (т, 2Н), 3,883,67 (т, 1Н), 2,28-2,19 (т, 1Н), 2,05-1,93 (т, 1Н), 1,73-1,43 (т, 8Н), 1,32-1,07 (т, 6Н), 1,28 (8, 9Н), 1,03-0,85 (т, 2Н), 0,91 (!, 1 = 7,5, 15 Гц, 3Н).
Пример 26. Синтез соединения 306.
26с
б) 4н. НС1
в) Вос-СНО-ОН ТБТУ
СН^
соединение 306
а) Кислоту 26а (180 мг, 0,500 ммоля) и амин 15б (96 мг, 0,500 ммоля) подвергали реакции сочетания с использованием ТБТУ (192 мг, 0,600 ммоля) и ДИПЭА (226 мг, 1,75 ммоля) в СН2С12 (10 мл) в течение 20 ч. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в этилацетате, дважды промывали насыщенным раствором NаНСΟ3 и один раз соляным раствором. Органический слой сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 26с в виде масла коричневого цвета, которое использовали на следующей стадии без очистки.
б, в) Неочищенное соединение 26с (приблизительно 0,500 ммоля) перемешивали в течение 30 мин в смеси 4н. НС1/диоксан (4 мл) и концентрировали досуха. Твердый продукт растворяли в СН2С12 (10 мл) и добавляли ДИПЭА (226 мг, 1,75 ммоля), а затем моногидрат ВосСйд-ОН (138 мг, 0,500 ммоля) и ТБТУ (192 мг, 0,600 ммоля). Раствор перемешивали при КТ в течение 5 ч. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в этилацетате, промывали дважды насыщенным раствором NаНСΟ3 и один раз соляным раствором. Органический слой сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали, получая масло коричневого цвета, которое очищали с помощью экспресс-хроматографии, получая соединение 26б в виде масла желтого цвета, 204 мг, выход 64% после двух реакций сочетания.
Ή-ЯМР (СБС13:) δ 8,77-8,74 (т, 1Н), 8,14 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 8,02 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,69 (бб, 1 = 9, 7 Гц, 1Н), 7,52 (б, 1 = 5 Гц, 1Н), 7,47 (бб, 1 = 8, 7 Гц, 1Н), 6,78 (б, 1 = 5 Гц, 1Н), 5,80-5,70 (т, 1Н), 5,35-5,27 (т, 2Н), 5,14-5,07 (т, 2Н), 4,89-
4,83 (т, 1Н), 4,39-4,32 (т, 1Н), 4,30-4,24 (т, 1Н), 4,20-4,07 (т, 2Н), 4,00-3,92 (т, 1Н), 3,042,92 (т, 1Н), 2,39-2,29 (т, 1Н), 2,16-2,04 (т, 1Н), 1,91-1,83 (т, 1Н), 1,82-1,62 (т, 7Н), 1,451,35 (т, 9Н), 1,27-1,07 (т, 8Н).
г) Соединение 26б (136 мг, 0,214 ммоля) растворяли в ТГФ (4 мл) и МеОН (2 мл). Добавляли водный раствор (2 мл) гидрата ЫОН (72 мг, 1,72 ммоля) и реакционную смесь переме шивали при КТ в течение 20 ч. Раствор концентрировали и очищали с помощью препаративной ЖХВР, получая соединение 306 (менее полярный изомер) в виде твердого вещества белого цвета (25 мг).
Соединение 306.
МС (РАВ): 607,4 (МН+);
!Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 9,16 (б, 1 = 6 Гц, 1Н), 8,55 (8, 1Н), 8,35 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 8,12 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 8,05 (бб, 1 = 8, 7 Гц, 1Н), 7,76 (бб, 1 = 8, 7 Гц, 1Н), 7,59 (б, 1 = 6 Гц, 1Н), 7,02 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 5,75-5,66 (т, 2Н), 5,19 (б, 1 = 18 Гц, 1Н), 5,07 (б, 1 = 10 Гц, 1Н), 4,55 (б, 1 = 12 Гц, 1Н), 4,43 (бб, 1 = 10, 8 Гц, 1Н), 4,03 (б, 1 = 10 Гц, 1Н), 3,87-3,83 (т, 1Н), 2,66-2,59 (т, 1Н), 2,36-2,30 (т, 1Н), 1,98 (бб, 1 = 18, 9 Гц, 1Н), 1,75-1,56 (т, 8Н), 1,38-1,35 (т, 1Н), 1,25-1,22 (т, 1Н), 1,09 (8, 9Н), 1,12-0,95 (т, 3Н).
Пример 27. Синтез соединения 307.
в) Раствор кислоты (8) из примера 8 (505 мг, 105 ммолей) в 5 мл дихлорметана обрабатывали ТБТУ (376 мг, 1,17 ммоля). К полученному раствору активированного сложного эфира добавляли гидрохлорид (Я,8)-винил-АссаОЕ! (18) (из примера 18) (279 мг, 1,46 ммоля) в 7 мл дихлорметана, содержащего Ν-метилморфолин (0,60 мл, 5,46 ммоля). Образовавшийся раствор перемешивали при КТ в течение ночи. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом, промывали дважды насыщенным раствором бикарбоната натрия и один раз соляным раствором. Органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток хроматографировали на силикагеле (гексан-этилацетат в объемном соотношении 60:40), получая 173 мг (выход 27%) дипептида 27с.
г, д) Раствор дипептида 27с (70 мг, 0,114 ммоля) в 3 мл 4,0М раствора соляной кислоты в
6Ί
1,4-диоксане перемешивали при КТ в течение 1 ч (через 10 мин из реакционной смеси выпадал осадок). Растворитель удаляли в вакууме. Гидрохлорид амина 27б (0,114 ммоля), растворенный в 1,5 мл ацетонитрила, нейтрализовали путем добавления 65 мкл (0,591 ммоля) Νметилморфолина. Раствор Вос-СЬдОН-Н2О (39 мг, 0,142 ммоля) в 1,5 мл ацетонитрила обрабатывали ТБТУ (46 мг, 0,143 ммоля) и затем добавляли к полученному выше раствору амина. Образовавшийся раствор перемешивали при КТ (в течение 2 дней). Растворитель удаляли в вакууме. Остаток, разбавленный этилацетатом, дважды промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и один раз соляным раствором. Органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и упаривали в вакууме. Таким путем получили 86 мг (выход 100%) трипептида 27е. Это неочищенное соединение использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.
е) К раствору трипептида 27е (86 мг, 0,114 ммоля) в 5 мл смеси ТГФ:Н2О (2,5:1) добавляли моногидрат гидроксида лития (22 мг, 0,524 ммоля). Дополнительно добавляли 0,25 мл МеОН для получения гомогенного раствора. Образовавшийся раствор перемешивали при КТ в течение ночи, после чего растворитель выпаривали в вакууме. Остаток распределяли между водой и ЕкОАс. Водный слой подкисляли с помощью 1М НС1 и затем дважды экстрагировали этилацетатом. Требуемое соединение было обнаружено в этилацетатной фракции, полученной после первой основной стадии экстракции. Этот органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и упаривали в вакууме, получая 69 мг неочищенной кислоты, которую очищали с помощью препаративной ЖХВР. Соединение растворяли в МеОН (4 мл) и вносили в уравновешенную колонку типа \У11а1тап РагбзП 10-ОЭЗ3 (2,2х50 см) С18 для хроматографии с обращенной фазой (λ = 230 нм, растворитель А: 0,06%-ная ТФК/Н2О, растворитель Б: 0,06%-ная ТФК/СНзСЦ). Программа очистки: градиент от 20% до 70% растворителя Б в течение 60 мин. Фракции анализировали с помощью аналитической ЖХВР. Соответствующие фракции собирали и лиофилизировали, получая 50 мг (выход 60%) требуемого трипептида 307 в виде аморфного твердого вещества белого цвета.
Соединение 307: 1Н-ЯМР (ДМСО-б6), соотношение ротамеров ~2:8: δ 8,86 (б, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 8,85 (з, 0,2Н), 8,64 (з, 0,8Н), 8,49 (бб, 1 = 9,5, 3 Гц, 0,2Н), 8,45 (бб, 1 = 9,2 Гц, 0,8Н), 8,39-8,33 (т, 2Н), 8,20 (б, 1 = 9,5 Гц, 0,2Н), 8,18 (б, 1 = 9,5 Гц, 0,8Н), 7,81 (з, 0,2Н), 7,78 (з, 0,8Н), 7,64-7,56 (т, 3Н), 6,87 (б, 1 = 8 Гц, 0,8Н), 6,36 (б, 1 = 9 Гц, 0,2Н), 5,82-5,67 (т, 2Н), 5,27-5,17 (т, 1Н), 5,095,03 (т, 1Н), 4,73 (к, 1 = 8 Гц, 0,2Н), 4,55 (бб, 1 = 10, 7,5 Гц, 0,8Н), 4,49-4,40 (т, 1Н), 4,00-3,95 (т, 1Н), 3,83-3,76 (т, 1Н), 2,87-2,80 (т, 0,2Н), 2,69
2,62 (т, 0,8Н), 2,39-2,26 (т, 1Н), 2,08-2,00 (т, 1Н), 1,75-1,41 (т, 7Н), 1,37 (з, 1,8Н), 1,32-1,27 (т, 1Н), 1,17-0,82 (т, 5Н), 0,94 (з, 7,2Н).
Пример 28. Синтез соединения 311.
Соединение 311 получали аналогично примеру 24, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
Соединение 310: !Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,98 (б, 1 = 6 Гц, 1Н), 8,52 (з, 1Н), 8,24 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 8,08 (б, 1 = 2 Гц, 1Н), 7,63 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,37 (б, 1 = 6 Гц, 1Н), 6,98 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 5,75-5,66 (т, 1Н), 5,57 (шир. з, 1Н), 5,24-5,19 (т, 1Н), 5,08-5,01 (т, 1Н), 4,57-4,40 (т, 2Н), 4,003,96 (т, 1Н), 3,82 (бб, 1 = 9,8 Гц, 1Н), 2,59-2,54 (т, 1Н), 2,32-2,26 (т, 1Н), 1,99 (бб, 1 = 17, 9 Гц, 1Н), 1,74-1,55 (т, 8Н), 1,37 (з, 1Н), 1,26-1,22 (т, 1Н), 1,14-1,08 (т, 9Н), 1,02-0,91 (т, 3Н).
Пример 29. Синтез соединения 302.
Соединение 302 получали аналогично примеру 27, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
!Н-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,34 (з, 1Н), 8,048,01 (т, 1Н), 7,94-7,92 (т, 1Н), 7,87 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 7,54-7,50 (т, 3Н), 7,45 (бб, 1 = 17, 8 Гц, 1Н),
7,22 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 4,94 (бб, 1 = 55, 12 Гц, 2Н), 4,34 (з, 1Н), 4,27 (бб, 1 = 8, 8 Гц, 1Н), 4,16 (б, 1 = 11 Гц, 1Н), 4,07 (бб, 1 = 8, 8 Гц, 1Н), 3,72-3,65 (т, 2Н), 3,59-3,54 (т, 1Н), 2,24-2,18 (т, 1Н), 2,02-1,95 (т, 2Н), 1,75-1,70 (т, 1Н), 1,53-1,44 (т, 2Н), 1,32-1,27 (т, 1Н), 1,21-1,17 (т, 1Н), 0,96-0,85 (т, 10Н), 0,80-0,77 (т, 5Н), 0,62-0,57 (т, 1Н).
Пример 30. Синтез соединения 308.
308
Соединение 308 получали аналогично 27, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
1Н-ЯМР (ДМСО-йб), соотношение ротамеров ~2:8: δ 8,77 (з, 0,2Н), 8,45 (з, 0,8Н), 8,13 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,8Н), 8,03 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,2Н), 7,89-
7,83 (т, 1Н), 7,55-7,37 (т, 4Н), 7,05-6,59 (т, 1Н), 6,95 (б, 1 = 8 Гц, 0,8Н), 6,26 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,2Н), 5,81-5,64 (т, 1Н), 5,33-5,28 (т, 1Н), 5,265,15 (т, 1Н), 5,08-5,02 (т, 1Н), 4,60 (к, 1 = 7,5 Гц,
0,2Н), 4,38-4,27 (т, 1,8Н), 4,09-3,91 (т, 1,8Н), 3,74 (бб, 1 = 12,5, 4 Гц, 0,2Н), 2,69-2,60 (т, 0,2Н), 2,50-2,40 (т, 1Н), 2,36-2,28 (т, 0,2Н), 2,23-2,14 (т, 0,8Н), 2,05-1,97 (т, 0,8Н), 1,76-1,44 (т, 7Н), 1,37 (8, 1,8Н), 1,29 (8, 7,2Н), 1,28-1,20 (т, 1Н), 1,16-0,88 (т, 5Н).
Пример 31. Синтез соединения 309.
Соединение 309 получали аналогично примеру 27, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
Ή-ЯМР (ДМСО-б6), соотношение ротамеров ~2:8: δ 8,75 (8, 0,2Н), 8,50 (8, 0,8Н), 7,89-7,78 (т, 3Н), 7,50-7,44 (т, 1Н), 7,42-7,32 (т, 2Н), 7,17-7,09 (т, 0,8Н), 7,08-7,03 (т, 0,2Н), 6,79 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,8Н), 6,33 (б, 1 = 9 Гц, 0,2Н), 5,81-5,65 (т, 1Н), 5,30-5,16 (т, 2Н), 5,10-5,02 (т, 1Н), 4,56 (!, 1 = 7,5 Гц, 0,2Н), 4,33 (!, 1 = 8 Гц, 0,8Н), 4,10-3,90 (т, 2,8Н), 3,74-3,68 (т, 0,2Н), 2,45-2,37 (т, 1Н), 2,34-2,17 (т, 1Н), 2,05-1,97 (т, 1Н), 1,76-1,48 (т, 7Н), 1,37 (8, 1,8Н), 1,23 (8, 7,2Н), 1,21-0,88 (т, 6Н).
Пример 32. Синтез соединения 305.
Соединение 305 получали аналогично примеру 27, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
Ή-ЯМР (ДМСО-б6), соотношение ротамеров (1:9): δ 8,68 (8, 0,1Н), 8,43 (8, 0,9Н), 8,04-8,00 (т, 1Н), 7,95-7,91 (т, 1Н), 7,87 (б, 1 = 8,5 Гц, 1Н), 7,57-7,49 (т, 3Н), 7,47-7,42 (т, 1Н), 6,82 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,9Н), 6,21 (б, 1 = 8,5 Гц, 0,1Н), 5,805,64 (т, 1Н), 5,21 (бб, 1 = 17, 2 Гц, 0,1Н), 5,18 (бб, 1 = 17, 2 Гц, 0,9Н), 5,06 (бб, 1 = 10,5, 2 Гц, 1Н), 5,02-4,85 (т, 2Н), 4,43 (!, 1 = 7,5 Гц, 0,1Н), 4,34 (шир. 8, 1Н), 4,23 (!, 1 = 8,5 Гц, 0,9Н), 4,164,05 (т, 1,8Н), 3,89-3,82 (т, 0,2Н), 3,74 (бб, 1 = 11, 3,5 Гц, 0,9Н), 3,53 (бб, 1 = 12,5, 4 Гц, 0,1Н), 2,30-2,21 (т, 1Н), 2,02-1,94 (т, 2Н), 1,74-1,38 (т, 7Н), 1,36 (8, 0,9Н), 1,28 (8, 8,1Н), 1,25-0,87 (т, 6Н).
Пример 33. Синтез соединения 303.
Соединение 303 получали аналогично примеру 27, но с использованием соответствующих структурообразующих элементов.
Ή-ЯМР (ДМСО-б6): δ 8,29 (8, 1Н), 8,048,01 (т, 1Н), 7,94-7,92 (т, 1Н), 7,87 (б, 1 = 8 Гц, 1Н), 7,56-7,52 (т, 3Н), 7,46 (бб, 1 = 8,7 Гц, 1Н),
7,19 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 5,01 (б, 1 = 12 Гц, 1Н), 4,86 (б, 1 = 12 Гц, 1Н), 4,34 (шир. 8, 1Н), 4,24 (!, 1 = 8 Гц, 1Н), 4,18-4,09 (т, 2Н), 3,74-3,53 (т, 3Н),
2,24-2,18 (т, 1Н), 2,04-1,95 (т, 1Н), 1,74-1,45 (т, 10Н), 1,31-1,13 (т, 4Н), 0,96-0,86 (т, 7Н), 0,79-0,76 (т, 5Н).
Пример 34. Синтез соединения 403.
ДМФ (34Ь)
а) Сочетание Р2 с Р1.
Производное в виде метилового эфира соединения 7 (34а) (170 мг, 0,355 ммоля) перемешивали в смеси 50%-ный ТГФ-метанол (4 мл) и водного ЫОН (1М, 1 мл) при КТ в течение 1ч. Раствор концентрировали (роторный испаритель типа ΡοΙηνηρ. 30°С), остаток подкисляли до рН 6 и раствор лиофилизировали. Образовавшийся порошок перемешивали в безводном ДМФ (3 мл) в присутствии ДИЭА (0,4 мл), а затем последовательно добавляли гидрохлорид метилового эфира 1,1-аминоциклобутилкарбоновой кислоты (34Ь) (140 мг, 0,845 ммоля) и ТБТУ (134 мг, 0,417 ммоля). После перемешивания в течение 18 ч при КТ смесь очищали с помощью экспресс-хроматографии на силикагеле (230-400 меш) с использованием смеси этилацетат-гексан 1:2, получая масло оранжевого цвета (98 мг, чистота 90% по данным ЖХВР).
б) Сочетание Р1-Р2 с Р3.
<341»
Дипептид 34Ь (97 мг, 90%, 0,155 ммоля) перемешивали в смеси 4н. НС1-диоксан (5 мл) в течение 1 ч при КТ. 3 атем раствор концентрировали досуха (Ео1ауар, глубокий вакуум), получая твердое вещество бежевого цвета. Этот продукт перемешивали в безводном ДМФ (2 мл) при КТ в присутствии ДИЭА (0,4 мл), а затем добавляли Ь-Вос-ТЬд (80 мг, 0,35 ммоля) и ТБТУ (112 мг, 0,35 ммоля). После перемешивания в течение 2 дней при КТ раствор сливали в этилацетат и получали свободное основание с использованием 5%-ного водного раствора карбоната калия. Органическую фазу обрабатывали, получая маслянистый остаток желтого цвета. Продукт очищали экспресс -хроматографией на колонке с силикагелем (230-400 меш) с ис пользованием смеси этилацетата и гексана в объемном соотношении 1:2 и 3:1, получая 40 мг масла, гомогенного по данным ЖХВР-анализа.
После этого метиловый эфир (40 мг) омыляли в 1н. гидроксиде калия (2 мл) в метаноле (4 мл) с перемешиванием при КТ в течение 3 ч. Смесь концентрировали (Ко1ауар, 30°С) и подкисляли до рН 4 с помощью 2н. соляной кислоты. Эту смесь очищали с помощью препаративной ЖХВР на колонке С18, используя градиент от 0 до 50% водного раствора ацетонитрила (0,1% ТФК) при 220 нм. Фракции объединяли, концентрировали до половинного объема и лиофилизировали, получая соединение 403 в виде пушистого твердого вещества белого цвета (10 мг).
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66), смесь ротамеров: δ ΝΉ+ (1Н, к, 8,6 част./млн), СН (3Н, т,
8,2 част./млн), Рй (5Н, шир. к, 7,66 и 7,53 част./млн), СН (1Н, шир. 7,22 част./млн), ΝΉ (1Н, 6, 1= 7,6 Гц, 6,71 част./млн), СНО (1Н, шир. к, 5,76 част./млн), СН (2Н, т, 4,58-4,49 част./млн), СН (1Н, т, 4,04 част./млн), СН3О (3Н, к, 3,97 част./млн), СН (1Н, 6, 3,86 част./млн), СН (7Н, очень широкий, 1,8-2,6 част./млн), Вос-группа (9Н, к, 1,25 част./млн) и трет-бутильная группа (9Н, к, 0,97 част./млн).
МС показала М+Н+ при т/е 675 (100%). ЖХВР-пик: 98% при 18,9 мин.
Пример 35. Синтез соединения 333 (табл. 3)
Раствор мета-анизидина (35а) (9,15 мл, 81,4 ммоля) и диметилацетилендикарбоксилата (35Ь) (10,0 мл, 81,3 ммоля) в 160 мл метанола нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью экспресс-хроматографии на колонке (гексан-этилацетат в соотношении 90:10). Соединение 35с (17,0 г, выход 79%) по лучили в виде масла оранжевого цвета.
Ή-ЯМР (СОС13): δ 9,62 (шир. к, 1Н), 7,17 (66, 1 = 7 и 8,5 Гц, 1Н), 6,66 - 6,62 (т, 1Н), 6,496,45 (т, 2Н), 5,38 (к, 1Н), 3,77 (к, 3Н), 3,74 (к, 3Н), 3,71 (к, 3Н).
О Л
НО (35с) (356)
Дифениловый эфир (50 мл) нагревали в песочной бане до внутренней температуры ~250°С. Аддукт в виде диэфира (35с) (7,5 г, 28,3 ммоля), растворенный в 5 мл дифенилового эфира, добавляли в течение 2 мин к кипящему растворителю. Нагревание продолжали в течение 5 мин и затем реакционной смеси давали охладиться до комнатной температуры. При этом быстро происходило осаждение твердого вещества бежевого цвета. Твердое вещество отфильтровывали и затем растирали с метанолом, получая 4,1 г (выход 62%) требуемого соединения 356.
Ή-ЯМР (ДМСО-66): δ 7,97 (6, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,40 (6, 1 = 2 Гц, 1Н), 6,96 (66, 1 = 9 и 2 Гц, 1Н), 6,55 (к, 1Н), 3,95 (к, 3Н), 3,84 (к, 3Н).
Раствор, содержащий цис-4-гидрокси-Ьпролинового производного (35е) (1,71 г, 5,33 ммоля), 4-гидроксихинолинового производного (351) (1,25 г, 5,36 ммоля) и трифенилфосфин (2,80 г, 10,68 ммоля) в 75 мл ТГФ охлаждали до 0°С, после чего по каплям добавляли (~1ч) ДДЭАД (1,70 мл, 10,80 ммоля). 3атем реакционной смеси давали медленно нагреться до комнатной температуры и продолжали перемешивание в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью экспресс-хроматографии на колонке (этилацетатгексан в соотношении 70:30). Таким путем получили соединение 35д (0,7 г чистого соединения 35д и 1,8 г соединения 35д, содержащего ~50% примеси в виде оксида трифенилфосфата) в виде твердого вещества белого цвета.
Ή-ЯМР (СОС13), смесь ротамеров (4:6): δ 8,04 (6, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,54 (6, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 7,40-7,32 (т, 6Н), 7,23 (66, 1 = 9 и 2,5 Гц, 1Н), 5,33-5,13 (т, 3Н), 4,66 (1, 1 = 7,5 Гц, 0,4 Н), 4,54 (1, 1 = 8 Гц, 0,6 Н), 4,07 (к, 3Н), 3,94 (к, 3Н), 4,043,80 (т, 2Н), 2,78-2,65 (т, 1Н), 2,47-2,34 (т, 1Н), 1,45 (к, 3,6Н), 1,37 (к, 5,4Н).
К производному бензилового эфира пролина (35д) (0,70 г, 1,31 ммоля), растворенному в смеси метанол-этилацетат (10 мл/10 мл) добавляли 100 мг 10%-ного Р6/С. Образовавшуюся суспензию перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 1 1/2 ч. 3атем катализатор отфильтровывали с помощью фильтра МШех-НУ М1Шроге (размер пор 0,45 мкм) и растворители выпаривали в вакууме. Таким путем получили требуемую кислоту 3511 (0,59 г) с количественным выходом.
Ή-ЯМР: (СОС13), смесь ротамеров 70:30: δ 8,06 (6, 1 = 9,5 Гц, 0,3 Н), 8,01 (6, 1 = 9 Гц, 0,7 Н), 7,56 (6, 1 = 2 Гц, 1Н), 7,44 (шир. к, 0,7 Н),
7,41 (шир. к, 0,3 Н), 7,24 (66, 1 = 9 и 2,5 Гц, 1Н), 5,31-5,25 (т, 1Н), 4,67 (1, 1 = 7,5 Гц, 0,7 Н), 4,55 (1, 1 = 7,5 Гц, 0,3 Н), 4,08 (к, 3Н), 3,95 (к, 3Н), 4,04-3,80 (т, 2Н), 2,83-2,72 (т, 1Н), 2,71-2,47 (т, 1Н), 1,46 (к, 9Н).
(ЗЭД (35) (35()
Соль амина 351 (215 мг, 1,21 ммоля) в 7 мл ацетонитрила обрабатывали 0,95 мл ДИЭА (5,45 ммоля). 3атем этот раствор добавляли к раствору кислоты 35й (590 мг, 1,32 ммоля) и ТБТУ (389 мг, 1,21 ммоля) в 5 мл СН3СМ и образовавшийся раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разбавляли этилацетатом, дважды промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и один раз соляным раствором и сушили над Мд8О4. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью экспресс-хроматографии на колонке (АсОЕ!-гексан в соотношении 75:25), получая 527 мг (выход 70%) требуемого дипептида (35)).
'Н-ЯМР (СБС13): δ 8,01 (б, 1 = 9 Гц, 1Н), 7,55 (б, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 7,45 (к, 1Н), 7,22 (бб, 1 = 9 и 2,5 Гц, 1Н), 5,81-5,71 (т, 1Н), 5,36-5,28 (т, 2Н), 5,18-5,12 (т, 1Н), 4,61-4,45 (т, 1Н), 4,07 (к, 3Н), 3,94 (к, 3Н), 3,91-3,74 (т, 2Н), 3,72 (к, 3Н), 2,99-2,84 (т, 1Н), 2,49-2,34 (т, 1Н), 2,20-2,08 (т, 1Н), 1,97-1,84 (т, 1Н), 1,58-1,52 (т, 1Н), 1,44 (к, 9Н).
Раствор диэфира 35_) (716 мг, 1,25 ммоля) в смеси ТГФ:МеОН (1,5 мл/1,5 мл) охлаждали до 0°С, после чего обрабатывали 1М водным раствором №ОН (1,25 мл, 1,25 ммоля). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С добавляли 3 капли ледяной уксусной кислоты с целью нейтрализовать №1ОН. Растворители удаляли в вакууме и соединение сушили в вакууме в течение нескольких часов.
течение 2 ч. Растворители удаляли в вакууме. Остаток, разбавленный этилацетатом, дважды промывали насыщенным раствором МаНСО3, один раз соляным раствором и сушили над Мд8О4, растворитель выпаривали в вакууме и остаток очищали с помощью экспрессхроматографии на колонке (гексан/АсОЕ! в соотношении 50:50), получая 378 мг (выход 52%) требуемого диазокетона 351.
'Н-ЯМР (СБС13): δ 8,00 (б, 1 = 9 Гц, 1Н),
7,42 (к, 1Н), 7,35 (б, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 7,20 (бб, 1 = 9 и 2,5 Гц, 1Н), 6,92 (к, 1Н), 5,81-5,71 (т, 1Н), 5,35-5,28 (т, 3Н), 5,17-5,13 (т, 1Н), 4,61-4,40 (т, 1Н), 3,97 (к, 3Н), 3,96-3,74 (т, 2Н), 3,72 (к, 3Н), 2,94-2,38 (т, 2Н), 2,18-2,06 (т, 1Н), 1,98-
1,84 (т, 1Н), 1,57-1,52 (т, 1Н), 1,42 (к, 9Н).
<ЗЯ) (35т)
К охлажденному (0°С) раствору диазокетона 351 (0,37 г, 0,642 ммоля) в 15 мл ТГФ добавляли 0,25 мл 48%-ной НВг. Образовавшийся раствор желтого цвета перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным раствором №НСО3. Органическую фазу промывали еще один раз №НСО3 и сушили с помощью Ма8О4. После выпаривания растворителей в вакууме получили 0,36 г (выход 90%) α-бромкетона 35т.
α-Бромкетон 35т (170 мг, 0,271 ммоля) в 10 мл изопропанола обрабатывали 1-ацетил-2тиомочевиной (64 мг, 0,542 ммоля). Образовавшийся раствор выдерживали с нагреванием при 75°С в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом и промывали дважды насыщенным раствором №НСО3, один раз соляным раствором и сушили над Мд8О4. После выпаривания растворителя в вакууме получили 182 мг (выход >100%) неочищенного продукта 35η.
Раствор натриевой соли кислоты 35к (1,25 ммоля) и Е!3М (0,19 мл, 1,36 ммоля) в 8 мл ТГФ охлаждали до 0°С и добавляли изобутилхлорформиат (0,18 мл, 1,39 ммоля). Через 40 мин добавляли диазометан (9 мл, 6,30 ммоля) и образовавшийся раствор перемешивали при 0°С в течение 30 мин и при комнатной температуре в
(35η) (350)
(35ρ)
Дипептид 35и (145 мг, 0,223 ммоля) обрабатывали 3 мл 4М раствора НС1 в диоксане. Образовавшийся раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворители удаляли в вакууме и остаток сушили в вакууме.
Соль амина 35о в 5 мл СН3С№ обрабатывали 195 мкл (1,12 ммоля) ДИЭА. 3атем этот раствор добавляли к раствору Вос-третбутилглицина (103 мг, 0,446 ммоля) и ГАТУ (186 мг, 0,489 ммоля) в 3 мл СН3С№ Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. 04^Ν выпаривали в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом и промывали дважды насыщенным раствором NаНСО3, один раз соляным раствором и сушили над Мд8О4. После удаления растворителя получили 274 мг неочищенного трипептида 35р (выход >100%).
Трипептид 35р (56 мг, 0,0733 ммоля) в 4 мл 4М раствора НС1 в диоксане премешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток сушили в вакууме.
Полученную соль амина растворяли в 4 мл СН2С12 и обрабатывали 0,13 мл ДИЭА (0,746 ммоля), а затем 26 мг трифосгена (0,0876 ммоля). После инкубации в течение 3 ч добавляли 1,2,2-триметилпропиламин (20 мг, 0,146 ммоля) (синтезированного по методу, описанному у Мо88 Ν., 6аи!Ыег ί., Рег1аи6 ГМ., РеЬ., ЗуиЬей. (2), 142-144, 1995). Ледяную баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. СН2С12 выпаривали в вакууме. Остаток, разбавленный этилацетатом, дважды промывали насыщенным раствором NаНСО3, один раз соляным раствором и сушили над Мд8О4, получая 60 мг (выход ~100%) требуемой мочевины 35д.
Раствор метилового эфира 35с.| (57 мг, 0,0721 ммоля) в смеси ТГФ:Н2О (2,5 мл/1 мл) обрабатывали твердым Ь1ОН-Н2О (25 мг, 0,595 ммоля) и добавляли 1 мл МеОН с получением прозрачного раствора. После перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали путем добавления 1 М раствора НС1. Растворители удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью препаративной хроматографии. Соединение, растворенное в 2,5 мл МеОН, вносили в уравновешенную колонку типа \УНа1тап РагЙ811 10-ОЭ8-3 (2,2х50 см) С18 для хроматографии с обращенной фазой. Программа очистки: линейный градиент 20 мл/нм, λ220 нм, возрастание от 10% А до 60% А в течение 60 мин. А: 0,06%-ная ТФК/СН3С№ Б: 0,06%-ная ТФК/Н2О. Фракции анализировали с помощью аналитической ЖХВР. Собранный продукт лиофилизировали, получая 15 мг соединения 333 в виде твердого вещества белого цвета (выход 27%).
!Н-ЯМР (ДМСО-66): δ 8,88 (8, 0,2Н), 8,84 (6, 1=4,5 Гц, 0,2Н), 8,68 (6, I = 8,5 Гц, 0, Н), 8,56 (8, 0,8Н), 8,40-8,13 (т, 1,5Н), 7,96 (6, I = 9,0 Гц, 0,2Н), 7,72-7,44 (т, 2,4Н), 7,35-7,09 (т, 1,2Н), 6,98 (6, I = 9 Гц, 0,2Н), 6,15 (6, I = 9 Гц, 0,2Н), 6,06 (6, .1 = 9 Гц, 0,8Н), 5,93 (6, I = 9,5 Гц, 0,24Н), 5,86 (6, I = 9 Гц, 0,8Н), 5,79-5,67 (т, 1Н), 5,69-5,44 (т, 1Н), 5,24-5,14 (т, 1Н), 5,09-5,01 (т, 1Н), 4,50-4,35 (т, 2Н), 4,24 (6, I = 9,0 Гц, 0,2Н), 4,20 (6, I = 9,0 Гц, 0,8Н), 4,06-3,98 (т, 2Н), 3,95 (8, 3Н), 3,77-3,60 (т, 2Н), 2,58-2,50 (т, 1Н), 2,33-2,28 (т, 1Н), 2,22 (8, 2,4Н), 2,21 (8, 0,6Н), 2,02 (φ I = 9 Гц, 1Н), 1,56-1,38 (т, 1Н), 1,28-1,22 (т, 1Н), 0,97 (8, 9Н), 0,83 (6, I = 6 Гц, 3Н), 0,72 (8, 9Н).
МС (РАВ): 778,3 (М+Н)+, 776,3 (М-Н)-.
Пример 36. Клонирование, экспрессия и очистка рекомбинантной №3-протеазы НСV типа 1Ь.
Сыворотку пациента, зараженного НСV, получали в рамках международного сотрудничества (доктор медицины Вегиаг6 \УП1ет8, Норйа1 8!-Ьис, Мои!геа1, Саиа6а, и д-р Иоиа16 МигрНу, ЬаЬога!опе 6е 8аи!е РиЬПцие 6и Квебек, 8!еАиие 6е Ве11е\'ие, Саиа6а). Конструировали полноразмерную кДНК-матрицу генома НСV из фрагментов ДНК, полученных с помощью ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) сывороточной РНК и с использованием праймеров, выбранных на основе гомологии между штаммами с другими генотипами 1Ь. После определения полной геномной последовательности оценивали генотип 1Ь изолята НСУ согласно классификации 8ίιηιηοηά8 и др. (1. Сйп. МюгоЬ^Ь (1993), 31, стр. 1493-1503). Было установлено, что аминокислотная последовательность неструктурной области, т.е. Ν82-Ν84Β, была более чем на 93% идентична генотипу 1Ь НСУ (изоляты ВК, Л< и 483) и на 88% идентична генотипу 1а НСУ (изолят НСУ-1). Фрагмент ДНК, кодирующий полипротеиновый предшественник (№3/№4А/Ы84В/№5А/Ы8-5В), получали с помощью ПЦР и встраивали в эукариотические экспрессионные векторы. После непродолжительной трансфекции процессирование полипротеина, опосредованное N83-пροтеазοй НСУ, выявляли по наличию зрелого протеина Ν83 с использованием анализа методом Вестернблоттинга. 3релый протеин Ν83 не образовывался при экспрессии предшественника полипротеина, содержащего мутацию 81165 А, которая инактивирует №3-протеазу, что подтверждает функциональную активность Ν83протеазы НСУ.
Фрагмент ДНК, содержащий рекомбинантную Ν83-протеазу НСУ (аминокислоты 1027-1206), клонировали в бактериальном экспрессионном векторе рЕТ116. Экспрессию Ν83протеазы в штамме Е.^Н ВЬ21(ПЕ3)рЬу88 индуцировали инкубацией с 1мМ ИПТГ в течение 3 ч при 22°С. С помощью обычной ферментации (18 л) получали примерно 100 г влажной клеточной пасты. Клетки ресуспендировали в буфере для лизиса (3,0 мл/г), включающего 25мМ фосфат натрия, рН 7,5, 10% глицерина (об./об.), 1мМ ЭДТК, 0,01% ΝΈ-40, и хранили при -80° С. Клетки подвергали оттаиванию и гомогенизировали после добавления 5мМ ДТТ. 3атем к гомогенату добавляли хлорид магния и ДНКазу в конечных концентрациях 20мМ и 20 мкг/мл соответственно. После инкубации в течение 25 мин при 4°С гомогенат обрабатывали ультразвуком и центрифугировали при 15000хд в течение 30 мин при 4°С. 3атем значение рН супернатанта доводили до 6,5 с помощью 1М раствора фосфата натрия.
К двухступенчатой процедуре очистки, описанной в XV О 95/22985 (включена в настоящее описание в качестве ссылки), добавляли стадию гель-фильтрации. Этот метод в основном состоит в следующем: супернатант бактериального экстракта вносили в предварительно уравновешенную колонку 8Р Н1Тгар (фирма Рйагташа) при скорости потока 2 мл/мин в буфере А (50мМ фосфат натрия, рН 6,5, 10% глицерина, 1мМ ЭДТК, 5мМ ДТТ, 0,01% ΝΓ-40). 3 атем колонку промывали буфером А, содержащим 0,15М №С1, и протеазу элюировали с помощью 10 объемов элюента относительно объема колонки с линейным градиентом от 0,15 до 0,3М №С1. Фракции, содержащие Ν83 протеазу, объединяли и разбавляли до конечной концентрации №1С1 0,1М. Фермент дополнительно очищали на Н1Тгар-гепариновой колонке (фирма Рйагтааа), уравновешенной в буфере Б (25мМ фосфат натрия, рН 7,5, 10% глицерина, 5мМ ДТТ, 0,01% №-40). Образец загружали при скорости потока 3 мл/мин. 3атем колонку промывали буфером Б, содержащим 0,15М №С1, при скорости потока 1,5 мл/мин. Осуществляли две стадии промывки в присутствии буфера Б, содержащего 0,3М или 1М №С1. Протеазу выделяли в смыве 0,3М №С1, разбавляли в 3 раза буфером Б, повторно вносили в Н1Тгаргепариновую колонку и элюировали буфером Б, содержащим 0,4М №С1. В завершение фракции, содержащие №3-протеазу, вносили в колонку 8ирег6ех 75 НКцай 16/60 (фирма Рйагтааа), уравновешенную буфером Б, содержащим 0,3М №С1. С помощью электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии ДСН (ДСН-ПААГ) с последующим денсиометрическим анализом было установлено, что чистота Ν83-протеазы НСУ, полученной из объединенных фракций, составляет более 95%.
Фермент хранили при -80°С и перед использованием подвергали оттаиванию на льду и разбавляли.
Пример 37. Радиометрический анализ Ν83протеазы НСУ/пептидного кофактора №4А.
Фермент клонировали, экспрессировали и получали согласно протоколу, описанному в примере 36. Фермент хранили при -80°С, подвергали оттаиванию на льду и перед применением разбавляли в буфере для анализа, содержащем пептидный кофактор №4А.
Субстрат ΌΌΙУРС-8М8УТ\У, который используется для радиометрического анализа Ν83протеазы/пептидного кофактора №4А, расщепляется между остатками цистеина и серина с помощью фермента. Последовательность О1УРС-8М8УТ\У соответствует естественному сайту расщепления №5А/№5В, в котором остаток цистеина в Р2 заменен на пролин. Пептидный субстрат ОО1УРС-8М8УТ\У и метку биοтин-^^IУРС-8М8[125I-Υ] Т\У инкубировали с рекомбинантой Ν83-протеазой и пептидным кофактором №4А ККС8УУ1УСК11Й8СКК (молярное соотношение фермент/кофактор 1:100) в присутствии ингибиторов или без них. Отделение субстрата от продуктов проводили, добавляя покрытые авидином агарозные гранулы к смеси для анализа, с последующей фильтрацией. Количество продукта 8М8[1251-У]Т^, обнаруженное в фильтрате, позволяет рассчитать процент превращения субстрата и процент ингибирования.
А. Реагенты.
Трис и Трис-НС1 (высокой степени чистоты (и1!гаРиге)) были получены от фирмы СЛотВКЬ. Глицерин (и1!гаРиге), МЭС и БСА были получены от фирмы 8щта. ТКЭФ был получен от фирмы Р1егсе, ДМСО был получен от фирмы А1бпс11 и №1ОН - от фирмы Апасйеш1а.
Буфер для анализа: 50мМ Трис-НС1, рН 7,5, 30% (мас./об.) глицерина, 1 мг/мл БСА, 1мМ ТКЭФ (ТКЭФ добавляли непосредственно перед применением из 1М маточного раствора в воде).
Субстрат: □О1УРС8М8УТ^, конечная концентрация 25мкМ (из 2мМ маточного раствора в ДМСО, хранившегося -20°С во избежание окисления).
Метка: восстановленный моноиодированный субстрат биотина ОП1УРС8М8[1251 У|Т\У (конечная концентрация ~1нМ).
№3-протеаза типа 1Ь НСУ, конечная концентрация 25нМ (из маточного раствора, содержащего 50мМ фосфат натрия, рН 7,5, 10% глицерина, 300мМ №С1, 5мМ ДТТ, 0,01% ΝΡ40).
Пептидный кофактор Ν84Λ:
ККС8УУ1УСК11Ь8СРК, конечная концентрация 2,5мкМ (из 2мМ маточного раствора в ДМСО, хранившегося при -20°С).
Б. Протокол.
Анализ проводили в 96-луночном полистирольном планшете фирмы Со81аг. Каждая лунка содержала:
мкл субстрата/метки в буфере для анализа;
мкл ингибитора в 20% ДМСО/буфере для анализа;
мкл N83-протеазы 1Ь/пептидного кофактора N84 (молярное соотношение 1:100).
На этом же планшете для анализа также готовили чистый контроль (без ингибитора и без фермента) и контроль (без ингибитора).
Ферментативную реакцию инициировали, добавляя раствор фермента/пептида N84А, и анализируемую смесь инкубировали в течение 40 мин при 23°С при осторожном перемешивании. Добавляли десять (10) мкл 0,5н. №1ОН и 10 мкл 1М МЭС, рН 5,8, для прекращения ферментативной реакции.
В фильтрационный планшет типа М1Шроте МАЭР N65 добавляли двадцать (20) мкл покрытых авидином агарозных гранул (полученных от фирмы Р1егсе). Смесь для анализа, в которой прекращена ферментативная реакция, переносили в фильтрационный планшет и инкубировали в течение 60 мин при 23 °С с осторожным перемешиванием.
Содержимое планшетов фильтровали с помощью устройства для вакуумной фильтрации типа М1Шроте Ми1118сгееп Уасиит МапИЫб ИИтайоп и 40 мкл фильтрата переносили в непрозрачный 96-луночный планшет, содержащий по 60 мкл сцинтилляционной жидкости на лунку.
Радиоактивность фильтратов подсчитывали с помощью счетчика Раскагб ТорСоип1, используя протокол на основе 1251-жидкости в течение 1 мин.
Ингибирование (в %) рассчитывали по следующему уравнению:
100 - [(количество импульсовингибитора - количество импульсовчистого контроля)/(количество импульсовконтроля - количество ИМПулЬСоВчистого контроля) х I00]
Данные о зависимости ингибирования от концентрации аппроксимировали нелинейной кривой с использованием модели Хилла и величину эффективной концентрации, при которой происходит 50%-ное ингибирование (1С50). рассчитывали с помощью программного обеспечения 8А8 (81аЙ811са1 8оП\таге 8у81ет, 8А8 1п8111и1е, 1пс. Сагу, N.0.).
Пример 38. Анализ полноразмерного гетеродимерного протеина №3-№4А.
Некодирующую область №2-№5В-3' клонировали с помощью ОТ-ПЦР в векторе рСВ®3 (фирма 1пуйтодеп), используя РНК, экстрагированную из сыворотки, зараженной генотипом НСУ 1Ь (предоставлена д-ром Вегпагб ХУШеиъ, Норйа1 81-Ьис, Моп1геа1, ОпеЬес, Сапаба). 3атем №3-№4А-область ДНК субклонировали с помощью ПЦР (полимеразная цепная реакция) в экспрессионном бакусоловирусном векторе рРа8®ас™ НТа (фирма С1Ьсо/ВвЬ). Последовательность вектора включала область, которая кодирует состоящую из 28 остатков ^концевую последовательность, содержащую метку из шести остатков гистидина. Для получения рекомбинантного бакуловируса использовали бакуловирусную систему экспрессии Вас-1о-Вас™ (фирма С1Ьсо/ВВЬ). Полноразмерный зрелый гетеродимерный протеин N83 и №4А (Н18-№3№4АРЬ) экспрессировали, заражая 106 клеток линии 8Г21/мл рекомбинантным бакуловирусом с фактором заражения 0,1-0,2 при 27°С. 3араженную культуру собирали через 48-64 ч центрифугированием при 4°С. Клеточный дебрис гомогенизировали в смеси, содержащей 50мМ NаРО4, рН 7,5, 40% глицерина (мас./об.), 2мМ β-меркаптоэтанол, в присутствии смеси ингибиторов протеаз. 3атем Н18-№3-№4АРЬ экстрагировали из клеточного лизата с помощью 1,5% №-40, 0,5% Тритона Х-100, 0,5М №1С1 и обработки ДНКазой. После ультрацентрифугирования растворимый экстракт разбавляли в 4 раза и связывали с №-хелатирующей колонкой типа Н1-Тгар. Н18-№3-№4АРЬ элюировали в форме, имеющей чистоту >90% (что подтверждено с помощью ДСН-ПААГ), используя градиент имидазола от 50 до 400мМ. Н18№3-№4АРЬ хранили при -80°С в смеси, содержащей 50мМ фосфат натрия, рН 7,5, 10% (мас./об.) глицерина, 0,5М №С1, 0,25М имидазол, 0,1% №-40. Перед применением его подвергали оттаиванию на льду и разбавляли.
Протеазную активность Н^8-N83-N84ΛР^ оценивали в 50мМ Трис-НС1, рН 8,0, 0,25М цитрате натрия, 0,01% (мас./об.) н-додецил-β-Όмальтозиде, 1мМ ТКЭФ. Инкубировали 5мкМ субстрата антранил-^^IУРАЬи[С(О)-О]-ΛМΥ (3^О;)Т\У-ОН, в котором была прекращена внутренняя реакция, в присутствии различных концентраций ингибитора с 1,5 нМ Н18-Ы83Ν84ΑΓΈ в течение 45 мин при 23°С. Конечная концентрация ДМСО не превышала 5,25%. Реакцию прекращали, добавляя 1М МЭС, рН 5,8. Флуоресценцию Ν-концевого продукта определяли с помощью флуориметра типа Регк1и-Е1тег Й8-50В, снабженного 96-луночным планшетридером (длина волны возбуждения 325 нм; длина волны испускания 423 нм).
Ингибирование (в %) определяли по следующему уравнению:
100 - [(количество импульсовингибитора количество импульсовчистого контроля)/(количество импульсовконтроля - Количество ИМПулЬСоВчистого контороля) х 100]
Данные о зависимости ингибирования от концентрации аппроксимировали нелинейной кривой с использованием модели Хилла и величину эффективной концентрации, при которой происходит 50%-ное ингибирование (ТС50), рассчитывали с помощью программного обеспечения 8А8 (8!аЙ8Йса1 8о Штаге 8у8!ет, 8А8 !π8ΐί!и!е, Шс. Сагу, КС.).
Пример 39. Анализ Ν83-протеазы на клеточном уровне.
Этот анализ проводили с использованием клеток линии Ний-7, представляющих собой линию клеток человека, полученную из гепатомы, которую совместно трансфектировали двумя конструкциями ДНК:
- первая экспрессирует полипротеин, со- держащий неструктурные протеины НСV, слитые с !ТА в следующей последовательности: Ν83-Ν84Λ-Ν84Β-Ν85Λ-ΙΤΛ (обозначена как
Ν83);
- вторая экспрессирует репортерный протеин, секретирующий щелочную фосфататзу под контролем !ТА (обозначена как 8ЕАР).
Полипротеин должен быть расщеплен Ы83-протеазой для выделения зрелых протеинов. При выделении зрелых протеинов вирусные протеины, вероятно, формируют комплекс на мембране эндоплазматического ретикулума, в то время как !ТА может мигрировать в ядро и трансактивировать ген 8ЕАР. Таким образом, восстановление протеолитической активности Ν83 должно привести к восстановлению уровней зрелого !ТА и способствовать понижению активности 8ЕАР.
Для оценки других воздействий соединений осуществляли параллельную трансфекцию, при которой проводили совместную трансфекцию конструкцией, экспрессирующей только !ТА (обозначена как !ТА), и конструкцией 8ЕАР, при этом 8ЕАР-активность не зависела от протеолитической активности Ν83.
Протокол анализа: клетки линии Ний-7, выращенные в СНО-8РМЛ +10% ФТС (фетальная телячья сыворотка), совместно трансфектировали либо Ν83 и 8ЕАР, либо !ТА и 8ЕАР, используя протокол РиСеие1 (фирма Воейпидег Маппйейп). После инкубации в течение 5 ч при
37°С клетки промывали, обрабатывали трипсином и высевали (80000 клеток/лунку) в 96луночные планшеты, содержащие различные концентрации тестируемых соединений. После 24-часовой инкубации вносили аликвоту среды и активность 8ЕАР в этой аликвоте определяли с помощью набора Рйо8рйа- Ыдй! (фирма Тгор1х).
Оценивали процент ингибирования активности 8ЕАР в зависимости от концентрации соединения с помощью программного обеспечения 8А8, получая значение ЕС50.
атем определяли токсичность соединения (ТС50) с помощью анализа на основе МТТ согласно следующей процедуре:
- в лунку добавляли 20 мкл раствора МТТ (5 мг/мл среды) и инкубировали при 37°С в течение 4 ч,
- среду удаляли и добавляли 50 мкл смеси 0,01н. НС1 + 10% Тритона Х-100,
- после встряхивания при КТ в течение по меньшей мере 1 ч в каждой лунке определяли ОП при длине волны 595 нм.
3начение ТС50 рассчитывали так же, как и ЕС50.
Пример 40. Определение специфической активности.
Специфическую активность соединений определяли в отношении различных серинпротеаз: эластазы лейкоцитов человека (НЬЕ), эластазы панкреатической железы свиньи (РРЕ) и бычьего α-химотрипсина панкреатической железы (α-Сйут.), катепсина В печени человека (Са!. В.). Во всех случаях использовали протокол, основанный на применении 96-луночных планшетов и специфичного для каждого фермента субстрата для колориметрического анализа пара-нитроанилина (рЫА). Каждый анализ включал предварительную инкубацию в течение 1 ч фермента-ингибитора при 30°С с последующим добавлением субстрата и гидролизом до ~30%-ного превращения, которое оценивали с помощью планшет-ридера для микротитрационных планшетов типа υν Тйегтотах®. Концентрации субстрата поддерживали на уровне ниже возможного значение КМ с целью уменьшения конкуренции субстрата. Концентрации соединений варьировали от 300 до 0,06мкМ в зависимости от их активности.
Конечные условия каждого анализа были следующими:
- 50мМ Трис-НС1 рН 8, 0,5М Ыа28О4, 50мМ ЫаС1, 0,1мМ ЭДТК, 3% ДМСО, 0,01% Твина 20 с;
- [100мкМ 8исс-ААРР-рХА и 250пМ αхимотрипсин], [133мкМ 8исс-ААА-рЫА и 8нМ эластаза свиньи], [133мкМ 8исс-ААV-рNА и 8нМ эластаза лейкоцитов] или
- [100мМ ЫаНРО4 рН 6, 0,1мМ ЭДТК, 3% ДМСО, 1мМ ТСЭФ, 0,01% Твина 20, 30мкМ ΖРЯ-рЫА и 5нМ катепсин В (исходный фермент активировали перед применением в буфере, содержащем 20мМ ТСЭФ)].
Ниже в качестве характерного примера обобщены условия для эластазы панкреатической железы свиньи.
В плоскодонный полистирольный 96луночный планшет, используя ручной заборник для жидкостей типа Вютек (фирма Весктап), добавляли следующие компоненты:
- 40 мкл буфера для анализа (50мМ ТрисНС1, рН 8, 50мМ №С1, 0,1мМ ЭДТК),
- 20 мкл раствора фермента (50мМ ТрисНС1, рН 8, 50мМ №С1, 0,1мМ ЭДТК, 0,02% Твина 20, 40нМ эластаза панкреатической железы свиньи) и
- 20 мкл раствора ингибитора (50мМ ТрисНС1, рН 8, 50мМ №С1, 0,1мМ ЭДТК, 0,02% Твина 20, 1,5мМ-0,3мкМ ингибитор, 15 об.% ДМСО).
После предварительной инкубации в течение 60 мин при 30°С в каждую лунку добавляли по 20 мкл раствора субстрата (50мМ Трис-НС1, рН 8, 0,5М №28О4, 50мМ №С1, 0,1мМ ЭДТК, 665мкМ 8ιι^-ΑΑΑ-]3ΝΑ) и реакционную смесь дополнительно инкубировали в течение 60 мин при 30°С, после чего определяли время абсорбции с помощью планшет-ридера типа и V ТНегтотах®. Ряды лунок оставляли для контрольного опыта (без ингибитора) и для чистого контрольного опыта (без ингибитора и без фермента).
Проводили последовательные двукратные разбавления раствора ингибитора на отдельном планшете с помощью ручного заборника жидкости, используя 50мМ Трис-НС1, рН 8, 50мМ №С1, 0,1мМ ЭДТК, 0,02% Твина 20, 15% ДМСО.
Все опыты по определению специфической активности проводили аналогичным образом.
Ингибирование (в %) определяли по сле дующему уравнению:
[1((УФингибитора - УФчистого контроля)/(УФконтроля - УФчистого контроля) х 100]
Данные о зависимости ингибирования от концентрации аппроксимировали нелинейной кривой с использованием модели Хилла и величину эффективной концентрации, при которой происходит 50%-ное ингибирование (Ή50), рассчитывали с помощью программного обеспечения 8А8 (8!аНкНса1 8ойгаге 8ук!ет, 8А8 ШкН1п1е, Шс. Сагу, Ν.Ο.).
Таблицы соединений
В следующих таблицах представлены характерные соединения по изобретению. Эти соединения по изобретению оценивали либо с помощью одного, либо обоих анализов, описанных в примере 37 и примере 38, и было установлено, что они обладают активностью, а их значение Ή50 составляет ниже 50мкМ (диапазон активности А), ниже 5мкМ (диапазон активно сти Б) или ниже 0,5мкМ (диапазон активности В).
Активность в опытах на клетках и специфическая активность
Указанные выше соединения по изобретению также тестировали на модельной линии клеток, как описано в примере 39, или с помощью одного или нескольких анализов, описанных в примере 40. Так, например, для соединения 601 из таблицы 6 было установлено, что его значение Κ'.'50 составляет 50нМ в опыте, описанном в примере 37, и 30нМ в опыте, описанном в примере 38. 3начение ЕС50, определенное по методу, описанному в примере 39, составляет 8,2мкМ. В опытах по определению специфичности, описанных в примере 40, было установлено, что это же соединение обладает следующей активностью: НЬЕ >75мкМ, РРЕ >75мкМ; αСНут. >75мкМ, Са,. В >75мкМ. Эти результаты свидетельствуют о том, что эта группа соединений обладает высокой специфичностью в отношении N83-протеазы и по меньшей мере некоторые представители этой группы обладают активностью в опытах на модельной линии клеток.
В приведенных ниже таблицах использованы следующие сокращения.
МС данные масс-спектрометрии Ас ацетил Вп бензил Вос трет-бутоксикарбонил цикло-Нех циклогексил СНд циклогексилглицин (2-амино2-циклогексилуксусная кислота) изо-Рг изопропил О-Вп бензилокси РН фенил трет-Ви третбутил ТЬд трет-бутилглицин 1- или 2-Νμ 1- или 2-нафтил 1- или 2^рСН2О 1- или 2нафтилметокси
Таблица 1 вг
Соед. В К3 К2 мс Диапазон
101 Вос цикло-Нех - О - СН2 -1 -нафтил 594 А
102 цикло-Нех -О-СН2“1-нафтил 632 А
103 цикло-Нех -О-СН2_1-нафтил 642 А
104 2/ цикло-Нех -О-СН2-1-нафтил 728 А
105 цикло-Нех - О - СН2-1 -нафтил 619 А
106 Вос цикло-Нех 702 Б
107 а цикло-Нех -О-СН2~1-нафтил 720 Μ + Νβ + А
108 Вос изо-Рг Тро νο, 662 А
Таблица 2
Таблица 3
А2
Соед. В К3 К2 к1 мс Диапазон
301 Вос цикло- - 0 - СН2-1-нафтил этил 622 А
302 изо-Рг -О-СН2-1-нафтил этил 582 А
303 'у'-'А циклоНех - О - СН2-1-нафтил этил 622 А
304 Вос циклоНех ^осн) этил 623 А
305 Вос цикло- -О-СН2-1-нафтил винил 620 Б
306 Вос циклоНех ©^ винил 607 Б
307 Вос циклоНех винил 728 В
308 Вос циклоНех ВИТТИ л 606 Б
309 Вос циклоНех винил 606 Б
310 Вос циклоНех ©^ винил 607 Б
Соед. В к3 К2 к1 мс Диапазон
311 Вос циклоНех винил 641 Б
312 Вос циклоНех винил 607 А
313 Вос циклоНех винил 621 Б
314 Вос циклоНех винил 683 В
315 Вос циклоНех винил 698 Б
316 ацетил циклоНех винил 625 Б
317 Вос циклоНех винил 740 В
318 СР3- С(О)- изо-Рг θ-ψ© винил 639,3 Б
319 $ / циклоНех винил 732,3 В
Соед. В к3 К2 к1 мс Диапазон
320 -¼ циклоНех ВИНИЛ 704,3 Б
321 Вос третВи ВИНИЛ 658,7 В
322 Вос третВи тОб / ВИНИЛ 717,6 Б
323 Вос третВи А 672,4 Б
324 Вос третВи °Х?СС ВИНИЛ 727,5 В
325 Вос третВи А 701,4 В
326 Вос третВи /=1 ВИНИЛ 708,3 В
327 третВи ВИНИЛ 610,3 В
Соед. № К3 МС Диапазон активности
501 трет-Ви 581,3 В
502 Н 539,2 А
503 V V 625,3 Б
504 л* —о 582,6 Б
505 μ —о 583,2 Б
506 Ύ 659,2 Б
507 Ύ° г; 670,2 Б
508 & 703,3 Б
Таблица 4 н!
Соед. В К3 К2 К1 МС Диапазон
401 Вос изо-Рг н 589,1 А
402 Вос трет-Ви / И 603,6 А
403 Вос трет-Ви ζ И 675,4 В
404 Вос трет-Ви °уг 3-( = СН2) 687,1 Б
405 Вос трет-Ви 2-винил 702,3 В
406 Вос трет-Ви 2-Е1 703,3 В
Таблица 5
Соед. № К3 МС Диапазон активности
509 581,3 В
510 581,2 В
511 О-уОН 637,2 Б
Таблица 6
О
Соед. К3 К21А К21В МС Диапазон
601 изо-Рг РЬ 7-ОМе 673,3 В
602 трет-Ви РЬ 8-ОМе, 717,2 В
603 изо-Рг РЬ 7-этил 671,2 В
604 трет-Ви - 7-ОМе 611,2 В
605 трет-Ви РЬ 7-О-изо-Рг 715,3 В
606 трет-Ви - 7-С1 615,2 В
607 изо-Рг - 7-С1 601,2 В
608 СН2-изо-Рг - 7-С1 615,3 Б
609 трег-Ви о --- - 680,2 Б
610 трет-Ви С1 - 613,3 В
611 трет-Ви РЬ 7-Ν(Μβ)2 700,5 В
612 трет-Ви а 666,4 В
613 трет-Ви <λ - 650,4 Б
614 трет-Ви 664,5 Б
615 трет-Ви - 7-Ν(Μβ)2 624,5 В
616 трет-Ви 678,4 (М-Н) + В
Соед. К3 К21А К21В МС Диапазон
617 трет-Ви 1 О 664,5 В
618 трет-Ви Ме Ме— 638,5 Б
619 трет-Ви РЬ Ме-ЬЦх 700,5 Б
620 трет-Ви а 679,5 В
621 трет-Ви “ДГ 678,3 В
622 трет-Ви 625,4 В
623 трет-Ви МеО- 611,3 В
624 трет-Ви (Ме)2Ы- 624,4 Б
625 трет-Ви РЬ 7-8(Ме) 703,4 В
626 трет-Ви РЬ 7-Вг 737,3 В
627 трет-Ви РЬ 7-Р 675,3 В
628 трет-Ви Ύ к ВЧУ 7-Ν(Μβ)2 764,2 В
629 трет-Ви УА 7-Ы(Ме)2 764,3 В
630 трет-Ви У=° N А 7-Ν(ΕΟ2 792,3 В
Таблица 7
о
Соед. № К3 К21Л мс Диапазон активности
701 трет-Ви 691,3 В
702 трет-Ви 713,4 В
703 трет-Ви Ме'^О^ 655,3 В
704 трет-Ви сЯ\ 728,4 В
705 трет-Ви а 696,4 в
706 трет-Ви у 693,3 в
707 трет-Ви сг 694,3 в
708 трет-Ви РЬ-И(Ме)- 716,4 в
709 трет-Ви 709,2 в
710 трет-Ви ноос- 655,3 Б
711 трет-Ви УГ 708,2 В
712 трет-Ви <Ме)2Ы- 654,3 В
713 трет-Ви 692,3 (М-Н)· в
Соед. № В3 К21А МС Диапазон активности
714 трет-Ви уг 722,3 В
715 трет-Ви (X 688,3 В
716 трет-Ви а 688,3 В
717 трет-Ви Ме УУ 723,3 В
718 трет-Ви νη2 626,3 В
719 трет-Ви Хг 751,2 в
720 трет-Ви 733,4 в
721 трет-Ви 724,1 в
722 трет-Ви 737,3 в
723 трет-Ви Хк 751,4 в
724 трет-Ви Хи 708,4 в
725 трет-Ви Ν^Ν Мх 689,4 в
726 трет-Ви изо-Рг 653,3 в
Соед. № К3 К21А МС Диапазон активности
727 трет-Ви 688,3 В
728 трет-Ви О. ζ© Хг 786,1 В
729 трет-Ви п 689,3 В
730 трет-Ви д % 669,2 в
731 трет-Ви 669,2 В
732 трет-Ви \=Ν %Ау 791,0 в
733 трет-Ви Ύ Ύτ 765,3 В
734 трет-Ви 671,3 в
735 трет-Ви 683,3 В
736 трет-Ви трет-Ви 667,4 В
737 трет-Ви цикло-Нех 693,4 в
Таблица 8
Соед. № В к3 К22 мс Диапазон активности
801 АА· трет-Ви 686,7 В
802 »а О трет-Ви 727,7 В
803 ДА трет-Ви 685,7 В
804 о ί трет-Ви 711,7 в
805 Ас трет-Ви - 629,6 В
806 о ί трет-Ви 725,7 В
807 АА трет-Ви 672,4 в
808 Суд трет-Ви 712,4 в
Соед. № в К3 е22 МС Диапазон активности
809 а изо-Рг - 649,3 В
810 трет-Ви 749,3 В
811 Вос трет-Ви 4-С1 721,3 В
812 Суд трет-Ви 706,2 В
813 АА трет-Ви - 702,2 В
814 Вос трет-Ви 2-С1 721,3 В
815 Вос трет-Ви 3-С1 721,3 В
816 -А трет-Ви 658,3 В
817 трет-Ви - 720,2 В
818 СкЛ трет-Ви - 728,3 В
819 изо-Рг 762,3 В
820 ж изо-Рг 732,2 В
821 ОМе X изо-Рг 679,1 В
822 “Хк изо-Рг 663,3 В
823 Вос трет-Ви 2-ОМе 717,2 В
824 Вос трет-Ви 3-ОМе 719,2 В
825 Вос трет-Ви 4-ОМе 719,2 В
Соед. № В к3 К22 МС Диапазон активности
826 изо-Рг 663,3 Б
827 Ме О трет-Ви 673,2 В
828 изо-Рг 691,3 В
829 <?а Ме трет-Ви 734,3 В
830 А трет-Ви - 645,3 В
831 ХА о трет-Ви 701,3 В
832 Ме о ν-’- трет-Ви - 801,3 В
833 о трет-Ви - 715,2 В
834 л изо-Рг - 663,3 В
835 трет-Ви 702,5 В
836 ХА изо-Рг 694,4 В
837 ха изо-Рг 683,3 В
838 ·»—кА изо-Рг 679,1 В
Соед. № В К3 Е22 мс Диапазон активности
839 ΎΑ изо-Рг 674,5 В
840 Хк изо-Рг 667,4 В
841 Вос трет-Ви 2-Ме 701,5 В
842 Вос трет-Ви З-Ме 701,5 В
843 Вос трет-Ви 4-Ме 701,5 В
844 аА трет-Ви 4-ОМе 716,6 В
845 тхд изо-Рг 706,9 С
846 <ХА изо-Рг - 693,4 В
847 Вос цикло-Нех - 713,4 В
848 Вос л 687,5 В
849 Вос л 701,5 В
850 Вос т Ύ 731,5 в
851 Вос 1 Υ 689,5 В
852 Вос 1 X 689,5 В
853 Вос А V 765,5 в
Соед. № В к3 «22 МС Диапазон активности
854 изо-Рг - 723,4 (М-Н) + В
855 изо-Рг 693,3 В
856 Хк изо-Рг 688,3 В
857 ““-ά,Α трет-Ви 716,4 В
858 -ΛΧ I ме трет-Ви 700,4 В
859 а изо-Рг - 655,4 Б
860 ш изо-Рг - 759,3 В
861 изо-Рг 688,3 В
862 А изо-Рг 685,3 В
863 са изо-Рг - 699,4 В
864 а изо-Рг 667,3 В
865 САА трет-Ви 701,4 В
866 трет-Ви 702,4 В
867 О-а трет-Ви 701,3 в
Соед. № В к3 к22 МС Диапазон активности
868 са трет-Ви - 713,3 В
869 ал трет-Ви - 699,4 В
870 трет-Ви - 700,4 В
871 ал трет-Ви - 714,3 В
872 трет-Ви 714,4 В
873 ά-Α трет-Ви 714,3 В
Таблица 9
Соед. № В МС Диапазон активности
901 Вос 685,3 в
902 —А 0 825,4 в
903 О Η0γΟΑ °ό 769,3 в
904 ”тА 707,3 в
905 хл 685,2 в
906 ул 728,2 в
907 ал 717,2 в
Соед. № В МС Диапазон активности
908 Л 691,2 В
909 °а О' 727,2 В
910 а 715,3 В
911 X О 721,3 В
912 л 733,2 В
913 ал 713,3 в
914 л 0. Л у—N 805,3 в
915 να 692,2 в
916 Λ Η 680,3 в
Таблица 10

Claims (85)

  1. ФОРМУЛА И3ОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I), включая его рацематы, диастереоизомеры и оптические изомеры
    И (I) в которой В обозначает Н, С6- или Сварил, С7С)6аралкил; Не! или (низш.)алкил-Не!, все необязательно замещенные С)-С6алкилом; С)-С6 алкоксигруппу; С1-С6алканоил; гидроксигруппу; гидроксиалкил; галоген; галоалкил; нитрогруппу; цианогруппу; цианалкил; аминогруппу, необязательно замещенную С1-С6алкилом; амидогруппу; или (низш.)алкиламид; или В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-; карбоксил формулы К4-О-С(О)-; амид формулы КгМЕ5)-С(О)-; тиоамид формулы Кд-^К)С(8)- или сульфонил формулы К4-8О2, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидоили (низш.)алкиламидом;
    (II) С3-С7циклоалкил, С3-С7циклоалкокси или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом;
    (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С6алкилом; амидогруппу или (низш.)алкиламид, (IV) С6- или С)0арил или С7-С)6аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, и
    К5 обозначает Н или С1-С6алкил;
    Υ обозначает Н или С|-С6алкил;
    К3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидогруппой, С6- или С10арилом или С7-С16 аралкилом;
    К2 обозначает СН2-К20, -Ж-К20, О-К20 или 8-К20· где К20 обозначает насыщенный или ненасыщенный С3-С7циклоалкил или С4-С)0(алкилциклоалкил), все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом К21, или К20 обозна чает С6- или С)0арил или С7-С14аралкил, все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом К21, или К20 обозначает Не! или (низш.) алкил-Не!, оба необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом К21, где К21 в каждом случае независимо обозначает С)-С6алкил, С)-С6алкокси; (низш.)тиоалкил; сульфонил; NΟ2; ОН; 8Н; галоген; галоалкил; аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С)-С6алкилом, С6- или С)0арилом, С7-С)4аралкилом, Не! или (низш.)алкилНе!; или означает амидогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10 арилом, С7-С14аралкилом, Не! или (низш.)алкилНе!; или означает карбоксил; карбокси (низш.)алкил; С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, причем указанный арил, аралкил или Не!, необязательно замещены радикалом К22, где К22 обозначает С)-С6алкил; С3-С7 циклоалкил; С1-С6алкокси; аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом; сульфонил; (низш.)алкилсульфонил; NΟ2; ОН; 8Н; галоген; галоалкил; карбоксил; амид; (низш.)алкиламид или Не!, необязательно замещенный С1-С6алкилом;
    К1 обозначает Н; С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил, С2-С6алкенил;
    где низший алкил, либо один, либо в сочетании с другим заместителем, означает ациклический с прямой или разветвленной цепью заместитель, содержащий от одного до шести углеродных атомов;
    аминоаралкил, либо один, либо в сочетании с другим радикалом, означает аминогруппу, замещенную С7-С18аралкильной группой;
    (низший алкил) амид, либо один, либо в сочетании с другим радикалом, означает амид, монозамещенный С1-С6алкилом, карбокси (низший) алкил, либо один, либо в сочетании с другим радикалом, означает карбоксильную группу (СООН), связанную через низшую алкильную группу, определенную выше;
    Не! обозначает моновалентный радикал, образованный путем удаления атома водорода от пяти-, шести или семичленного насыщенного или ненасыщенного (включая ароматический) гетероцикла, содержащего от одного до четырех гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы; и (низший алкил) Не! означает гетероциклический радикал так, как это определено выше для Не!, связанного через цепь или разветвленную алкильную группу, где алкил имеет вышеопределенные значения, содержащую от 1 до 6 углеродных атомов;
    или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир.
  2. 2. Соединение формулы I по п.1, в котором
    В обозначает С6- или Сварил, С7-С!6аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом; С)-С6алкоксигруппу; С1-С6алканоил; гид97 роксигруппу; гидроксиалкил; галоген; галоалкил; нитро; цианогруппу; цианалкил; аминогруппу, необязательно замещенную С1-С6алкилом; амидогруппу или (низший алкил)амидогруппу; или В обозначает Не1 или (низш.)алкилНе1, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитро-, цианогруппой, цианалкилом, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом.
  3. 3. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает К4-БО2, где обозначает С1-С6 алкил, амидогруппу, (низш.)алкиламид, С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не1, все необязательно замещенные С1-С6алкилом.
  4. 4. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом;
    (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси) карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, (V) Не1 или (низш.)алкил-Не1, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом.
  5. 5. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает карбоксил формулы К4-О-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С!0алкилцикло- алкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не1 или (низш.)алкил-Не1, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом.
  6. 6. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает амид формулы К4-Ы(К5)-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не1 или (низш.)алкил-Не1, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, и
    К5 обозначает Н или метил.
  7. 7. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает тиоамид формулы Κ^ΝΉ-^δ)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом или С1-С6 алкоксигруппой, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С!0алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминоили амидогруппой.
  8. 8. Соединение формулы I по п.2, в котором В обозначает С6- или Сварил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, гидроксиалкилом, галогеном, галоалкилом, нитроцианогруппой, цианалкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом.
  9. 9. Соединение формулы I по п.2, в котором В обозначает Не1, необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6алканоилом, гидроксигруппой, галогеном, амидо-, (низш.)алкиламидо- или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом.
  10. 10. Соединение формулы I по п.4, в котором В обозначает ацильное производное формулы К4-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкоксигруппой,
    100 (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси) карбонилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С!6аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидроксигруппой, или (V) Не!, необязательно замещенный С1С6алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой.
  11. 11. Соединение формулы I по п.5, в котором В обозначает карбоксил формулы К4-ОС(О)-, где Ρ4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси- или амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой или аминогруппой, необязательно монозамещенной С1-С6алкилом.
  12. 12. Соединение формулы I по п.6, в котором В обозначает амид формулы К.4-N(К5)-С(О)-. где Ρ4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещен- ный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С!6аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, амино- или необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не!, необязательно замещенный С1С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, и
    Ρ5 обозначает Н.
  13. 13. Соединение формулы I по п.7, в котором В обозначает тиоамид формулы К^МН-ЦЗ)-, где Ρ4 обозначает (I) С1-С10алкил или (II) С3-С7циклоалкил.
  14. 14. Соединение формулы I по п.12, в котором В обозначает амид формулы Κ4-NН-С(О)-, где Ρ4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой.
  15. 15. Соединение формулы I по п.1, в котором В обозначает трет-бутоксикарбонил (Вос) или группу формулы
  16. 16. Соединение формулы I по п. 1, в котором Υ обозначает Н или метил.
  17. 17. Соединение формулы I по п.16, в котором Υ обозначает Н.
  18. 18. Соединение формулы I по п.1, в котором Ρ3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, ацетамидогруппой, С6-или С10арилом или С7-С16аралкилом.
  19. 19. Соединение формулы I по п.18, в котором К3 обозначает боковую цепь третбутилглицина (ТЬд), Не, Vа1, Сйд или
  20. 20. Соединение формулы I по п.19, в котором К3 обозначает боковую цепь ТЬд, Сйд или Уа1.
  21. 21. Соединение формулы I по п.1, в котором К2 обозначает 8-К20 или О-К20, где К20 обозначает С6- или С10арил, С7-С16аралкил, Не! или -СН2-Не!, все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом К21, где К21 обозначает С1-С6алкил; С4-С6 ал кокси; (низш.)тиоалкил, амино- или амидогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1С6алкилом, С6- или С10арилом, С7-С16аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!; или означает NО2; ОН; галоген; трифторметил; карбоксил; С6- или С10арил; С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом К22, где К22 обозначает С1-С6алкил; С3-С7цик лоалкил; С1-С6алкокси; аминогруппу; моно- или динизший алкиламино; (низший алкил)амид; (низший алкил)сульфонил, NО2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил или Не!.
  22. 22. Соединение формулы I по п.21, в котором К21 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси-,
    101
    102 амино-, ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.) алкиламид, С6-или Сюарил или Не!, где арил или Не! необязательно замещены В22, где В22 обозначает С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1С6алкокси, аминогруппу, моно- или ди(низш.) алкиламино-, амидогруппу, (низш.)алкиламид, галоген, трифторметил или Не!.
  23. 23. Соединение формулы I по п.22, в котором В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкоксигруппу, галоген, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (низш.)алкилом, амидогруппу, (низш.)алкиламид или Не!.
  24. 24. Соединение формулы I по п.23, в кото- ром В22 обозначает метил, этил, изопропил, трет-бутил, метокси, хлор, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (низш.)алкилом, амидогруппу, (низш.)алкиламид или (низш.) алкил-2-тиазол.
  25. 25. Соединение формулы I по п.21, в котором В2 выбран из ряда, включающего
  26. 26. Соединение формулы I по п.21, в котором В2 обозначает 1-нафтилметокси-, 2-нафтилметокси-, бензилокси-, 1-нафтилокси-, 2нафтилокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом В21, где В21 имеет значения, указанные в п.21.
  27. 27. Соединение формулы I по п.26, в котором В2 обозначает 1-нафтилметокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом В21, где В21 имеет значения, указанные в п.26.
  28. 28. Соединение формулы I по п.27, в котором В2 выбран из ряда, включающего
  29. 29. Соединение формулы I по п.26, в котором В2 обозначает группу формулы где В21А обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкоксигруппу, (низш.)тиоалкил, галоген, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом В22, где В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, амидо, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (С1-С6)алкилом, или Не!, и
    В21В обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, амино, ди(низш.)алкиламино, (низш.)алкиламид, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил.
  30. 30. Соединение формулы I по п.29, в котором В21А обозначает С6- или С10арил или Не!, все необязательно замещенные радикалом В22, который имеет значения, указанные в п.21.
  31. 31. Соединение формулы I по п.30, в котором В21А выбирают из ряда, включающего
  32. 32. Соединение формулы I по п.29, в котором В2 обозначает группу формулы где В22А обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкоксигруппу или галоген и
    В21В обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.)алкиламид, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил.
  33. 33. Соединение формулы I по п.29, в котором В2 обозначает группу формулы где В22В обозначает С1-С6алкил, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)акиламидом, и В21В обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.) алкиламид, ΝΟ2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил.
  34. 34. Соединение формулы I по п.32 или 33, в котором В21в обозначает С1-С6алкоксигруппу или ди(низш.)алкиламиногруппу.
  35. 35. Соединение формулы I по п.32 или 33, в котором В21в обозначает метоксигруппу.
  36. 36. Соединение формулы I по п.1, в котором Р1 обозначает циклобутильное или циклопропильное кольцо, оба необязательно замещенные радикалом В1, где В1 обозначает Н, С1С3алкил, С3-С5циклоалкил или С2-С4алкенил, все необязательно замещенные галогеном.
  37. 37. Соединение формулы I по п.36, в котором Р1 обозначает циклопропил, а В1 обозначает этил, винил, циклопропил, 1- или 2-бромэтил или 1- или 2-бромвинил.
  38. 38. Соединение формулы I по п.37, в котором В1 обозначает винил.
  39. 39. Соединение формулы I по п.37, в котором В1 на атоме углерода в положении 2 находится в син-ориентации относительно карбонильной группы в положении 1, представленное радикалом
    103
    104
  40. 40. Соединение формулы I по п.37, в котором В1 на атоме углерода в положении 2 находится в анти-ориентации относительно карбонильной группы в положении 1, представленное радикалом
  41. 41. Соединение формулы I по п.37, в котором атом углерода в положении 1 имеет Вконфигурацию о
  42. 42. Оптический изомер соединения формулы I по п.41, в котором заместитель В1 и карбонил находятся в син-ориентации, как это представлено следующей абсолютной конфигурацией:
  43. 43. Соединение формулы I по п.42, в котором В1 обозначает этил, в результате чего асимметричные атомы углерода в положениях 1 и 2 имеют В,В-конфигурацию.
  44. 44. Соединение формулы I по п.42, в котором В1 обозначает винил, в результате чего асимметричные атомы углерода в положениях 1 и 2 имеют В,8-конфигурацию.
  45. 45. Соединение формулы I по п.1, где В обозначает С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом; С1-С6алкоксигруппу; С1-С6алканоил; гидроксигруппу; гидроксиалкил; галоген; галоалкил; нитро; цианогруппу; цианалкил; амидо; (низш.) алкиламидогруппу; или аминогруппу, необязательно замещенную С1-С6алкилом, или В обозначает В4-8О2, где В·, предпочтительно обозначает амидогруппу, (низш.)алкиламид; С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, или В обозначает ацильное производное формулы В4С(О)-, где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси) карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6 алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой необязательно замещенной С1-С6алкилом, или
    В обозначает карбоксил формулы В4-ОС(О)-, где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С!0алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)алкиламидом, или
    В обозначает амид формулы В4-^В5)С(О)-, где В4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С!0алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкоки)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1С6алкилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, и
    В5 обозначает Н или метил, или
    В обозначает тиоамид формулы В4-NНС(8)-, где В4 обозначает
    105
    106 (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом или С1-С6 алкоксигруппой, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, аминоили амидогруппой,
    Υ обозначает Н или метил,
    Я3 обозначает С1-С8алкил, С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные гидрокси-, С1-С6алкоксигруппой, С1-С6тиоалкилом, ацетамидогруппой, С6- или С10арилом или С7-С16аралкилом,
    Я2 обозначает 8-Я20 или О-Я20, где Я20 предпочтительно обозначает С6или С10арил, С7-С16аралкил, Не! или СН2-Не!, все необязательно моно-, ди- или тризамещенные радикалом Я21, где Я21 обозначает С1-С6алкил; С1-С6алкоксигруппу; (низш.)тиоалкил; амино- или амидогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом, С6- или С10арилом, С7-С16 аралкилом, Не! или (низш.)алкил-Не!; или означает ЫО2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил, С6- или С10арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом Я22, где Я22 обозначает С1-С6алкил, С3-С7циклоалкил, С1-С6алкоксигруппу, аминогруппу, моно- или ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.) алкиламид, сульфонилалкил, ЫО2, ОН, галоген, трифторметил, карбоксил или Не!, или
    Я2 выбирают из группы, включающей или Я2 обозначает 1-нафтилметокси-, 2нафтилметокси-, бензилокси-, 1-нафтилокси-, 2нафтилокси- или хинолилоксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом Я21, где Я21 имеет указанные выше значения, и сегмент Р1 обозначает циклопентильное кольцо, оба необязательно замещенные радикалом Я1, где Я1 обозначает Н, С1-С3алкил, С3-С5 циклоалкил или С2-С4алкенил, необязательно замещенный галогеном, и где этот радикал Я1 на атоме углерода в положении 2 находится в синориентации относительно карбонильной группы в положении 1, представленное радикалом или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир.
  46. 46. Соединение формулы I по п.45, в котором В обозначает С6- или Сварил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппу; С1-С6алканоил; гидроксигруппу; гидроксиалкил; галоген; галоалкил; нитро; циано- группу; цианалкил; амидогруппу;
    (низш.)алкиламид или аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом; или В обозначает Не!, необязательно замещенный С1-С6алкилом, С1-С6алкоксигруппой, С1С6алканоилом, гидроксигруппой, галогеном, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или В обозначает Я4-8О2, где Я4 обозначает С6- или С10арил, С7-С14аралкил или Не!, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, или означает амидогруппу, (низш.)алкиламид, или В обозначает ацильное производное формулы Я4-С(О)-, где Я4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, гидрокси- или С1-С6алкоксигруппой, или (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, оба необязательно замещенные гидроксигруппой, карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С!6аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидроксигруппой, или (V) Не!, необязательно замещенный С1-С6 алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой, или В обозначает карбоксил формулы Я4-ОС(О)-, где Я4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси- или амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил, С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, или (IV) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, аминогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (V) Не! или (низш.)алкил-Не!, оба необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амидо- или аминогруппой, необязательно монозамещенной С1-С6алкилом, или
    В обозначает амид формулы Я4-Ы(Я5)С(О)-, где Я4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом или аминогруппой, необязательно моноили дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С!0алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой,
    107
    108 необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом, и
    К5 обозначает Н или метил, или
    К4 обозначает (III) аминогруппу, необязательно моноили дизамещенную С1-С3алкилом, или
    ЦУ) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, все необязательно замещенные С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, необязательно замещенной С1-С6алкилом, или (У) Не!, необязательно замещенный С1С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой, или
    В обозначает тиоамид формулы К.4-ННС(8)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил или (II) С3-С7циклоалкил, и
    Υ обозначает Н,
    К3 обозначает боковую цепь третбутилглицина (ТЬд), Не, Уа1, С11§ или
    К2 обозначает 1-нафтилметокси- или хинолиноксигруппу, незамещенную, моно- или дизамещенную радикалом К21, где К21 имеет указанные выше значения, или
    К2 обозначает где К21А обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкоксигруппу, С6-, С10арил или Не!, (низш.)тиоалкил, галоген, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, или С6-, Сварил, С7С16аралкил или Не!, необязательно замещенный радикалом К22, где К22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси-, амидогруппу, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную С1-С6алкилом, или Не!,
    Р1 обозначает циклопропильное кольцо, в котором атом углерода в положении 1 имеет Кконфигурацию, и К1 обозначает этил, винил, циклопропил, 1- или 2-бромэтил или 1- или 2-бромвинил.
  47. 47. Соединение формулы I по п.46, в котором В обозначает амид формулы К4-№-С(О)-, где К4 обозначает (I) С1-С10алкил, необязательно замещенный карбоксилом, С1-С6алканоилом, гидрокси-, С1-С6алкокси-, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6алкилом, (II) С3-С7циклоалкил или С4-С10алкилциклоалкил, все необязательно замещенные карбоксилом, (С1-С6алкокси)карбонилом, амидогруппой, (низш.)алкиламидом, аминогруппой, необязательно моно- или дизамещенной С1-С6 алкилом,
    ДУ) С6- или С10арил или С7-С16аралкил, необязательно замещенный С1-С6алкилом, гидрокси-, амино- или амидогруппой,
    К3 обозначает боковую цепь ТЬд, Сйд или Уа1, где К22А обозначает С1-С6алкил (такой как метил), С1-С6алкоксигруппу (такую как метоксигруппу) или галоген (такой как хлор),
    К22В обозначает С1-С6алкил, аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6алкилом, амидогруппой или (низш.)акиламидом, и
    К21В обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси, аминогруппу, ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.)алкиламид, NО2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил, и
    Р1 обозначает
  48. 48. Соединение по п.45, представленное формулой в1 где В, К3, К2 имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В к3 К2 101 Вос циклогексил - 0 - С Н 2 -1 - нафтил 102 1 Ιιι циклогексил - 0 - С Н 2 -1 - нафтил 103 циклогексил - 0 - СН2 -1 -нафтил 104 9/ циклогексил -О-СН2-1 -нафтил 105 циклогексил -О-СН2-1-нафтил
    109
    110
  49. 49. Соединение № 111 по п. 48.
  50. 50. Соединение по п. 45, представленное формулой н2 где В, В3, В2 и В1 имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В к3 К2 к1 201 Вос циклогексил -О-СН2-1~нафгил этил 202 Вос циклогексил -О-СН2-1-нафтил ЭТИЛ 203 Вос трет-бутил винил 1К, 2К
  51. 51. Соединение № 203 по п.49.
  52. 52. Соединение по п.45, представленное формулой к2 где В, В3, В2 и В1 имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В К3 К2 к1 301 Вос циклогексил -О-СН2-1-нафтил этил 302 изопропил -О-СН2-1-нафтил этил 303 у-А циклогексил - О - СН2-1 - нафтил этил 304 Вос циклогексил этил 305 Вос циклогексил - О - СН2-1 -нафтил винил 306 Вос циклогексил βφ ч винил
    Соед. № В К3 К2 к1 317 Вос циклогексил винил 318 СР3-С(О)- изопропил 1 винил 319 Ах циклогексил 8-/ о винил 320 -Ча циклогексил винил 321 Вос трет-бутил Аро ζ° винил 322 Вос трет-бутил СР, винил 323 Вос трет-бутил А^о Ζ А 324 Вос трет-бутил О ®сс Ζ 1 винил
    111
    112
    Соед. N° В К3 к2 к1 325 Вос трет-бутил О 326 Вос трет-бутил винил 327 АЛ трет-бутил винил 328 Вос трет-бутил винил 329 Вос трет-бутил X винил 330 Вос трет-бутил винил 331 АЛ трет-бутил винил 332 Вос трет-бутил этил
    Соед. N° В к3 К2 к1 333 трет-бутил А винил 334 трет-бутил Асг винил
  53. 53. Соединение по п.52, выбранное из группы, включающей соединения № 307, 314, 317, 319, 321, 324, 325, 326, 327, 329, 331, 332, 333 и 334.
  54. 54. Соединение по п.45, представленное формулой к* где В, К3, К2 и К.1 имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В К3 к2 к1 401 Вос изопропил н 402 Вос трет-бутил н
    Соед. N° В К3 К2 К1 403 Вос трет-бутил ζ Н 404 Вос трет-бутил 3-( = сн2) 405 Вос трет-бутил 2-винил 406 Вос трет-бутил 2-Е1
  55. 55. Соединение по п.54, выбранное из группы, включающей соединения № 403, 405 и 406.
  56. 56. Соединение по п.45, представленное формулой
    О где К3 имеет значения, указанные в следующей таблице:
    113
    114
  57. 57. Соединение по п.56, выбранное из группы, включающей соединения № 501, 509 и 510.
  58. 58. Соединение по п.46, представленное формулой где Я3, Я21А и К.21В имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № К3 К21А К21В 601 изопропил фенил 7-ОМе 602 трет-бутил фенил 8-ОМе, 603 изопропил фенил 7-этил 604 трет-бутил - 7-ОМе 605 трет-бутил фенил 7-О-изопропил 606 трет-бутил - 7-С1 607 изопропил - 7-С1 608 СН2 изопропил - 7-С1 609 трет-бутил о - 610 трет-бутил С1 - 611 трет-бутил фенил 7-Ν(Με)2 612 трет-бутил - 613 трет-бутил а - 614 трет-бутил - 615 трет-бутил - 7-Ν(Μβ)2 616 трет-бутил
    Соед. № К3 К21А К21В 617 трет-бутил - 618 трет-бутил Ме Ме—Νχ,Χ 619 трет-бутил РП Не - 620 трет-бутил 7 Р 621 трет-бутил 622 трет-бутил - 623 трет-бутил МеО- - 624 трет-бутил <Με)2Ν- - 625 трет-бутил фенил 7-5(Ме) 626 трет-бутил фенил 7-Вг 627 трет-бутил фенил 7-Е 628 трет-бутил № 7-ШМе)2 629 трет-бутил Ц 7-Ы(Ме)2 630 трет-бутил N Χν 7-Ν(Εί)2
  59. 59. Соединение по п.58, выбранное из группы, включающей соединения № 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 610, 611, 612, 615, 616, 617, 620, 621, 622, 625, 626, 627, 628, 629 и 630.
  60. 60. Соединение по п.46, представленное формулой о
    где Я3 и Я21А имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № К3 К21А 701 трет-бутил 702 трет-бутил 703 трет-бутил 704 трет-бутил СЯ\ 705 трет-бутил Сс 706 трет-бутил 707 трет-бутил сг 708 трет-бутил фенил-Ы(Ме)- 709 трет-бутил 710 трет-бутил ноос- 711 трет-бутил ‘ХУ
    Соед. № К3 К21А 712 трет-бутил (Ме)2Ы- 713 трет-бутил Ме 714 трет-бутил X) 715 трет-бутил X) 716 трет-бутил ΆΤ 717 трет-бутил Αί 718 трет-бутил νη2 719 трет-бутил ΛαΛ 720 трет-бутил РУ 721 трет-бутил ΎΊ 1 722 трет-бутил X/ 723 трет-бутил ~Хг 724 трет-бутил XX
    115
    116
    Соед. № К3 К21А 725 трет-бутил 726 трет-бутил изопропил 727 трет-бутил Ск 728 трет-бутил у° ЧУ 729 трет-бутил 730 трет-бутил д °х 731 трет-бутил 4 ч 732 трет-бутил ν* / λ .Ν. -. 733 трет-бутил Ύ чу 734 трет-бутил 735 трет-бутил 736 трет-бутил трет-бутил 737 трет-бутил циклогексил
  61. 61. Соединение по п.60, выбранное из группы, включающей соединения № 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709 и 711-737.
  62. 62. Соединение по п.45, представленное формулой
    Соед. № В К3 К22 808 ОЛ трет-бутил 809 Ок изопропил 810 9Чг трет-бутил 811 Вос трет-бутил 4-С1 812 трет-бутил • 813 ΥΌ трет-бутил - 814 Вос трет-бутил 2-С1 815 Вос трет-бутил 3-С1 816 о трет-бутил 817 СГ·^ трет-бутил 818 Оч трет-бутил 819 чк изопропил 820 изопропил 821 ом· ч изопропил 822 Хк изопропил 823 Вос трет-бутил 2-ОМе 824 Вос трет-бутил 3-ОМе
    где В, К3 и Κ22 имеют значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В к3 К22 825 Вос трет-бутил 4-ОМе 826 СУ изопропил 827 Ме о' мАА трет-бутил 828 изопропил 829 ι 1 трет-бутил 830 трет-бутил 831 у а о · трет-бутил 832 Ме о ЧАА о трет-бутил 833 м. О ~ с трет-бутил 834 .4 изопропил 835 трет-бутил 836 Хк изопропил 837 β 1 изопропил 838 изопропил
    117
    118
    Соед. № В К3 К22 839 Хк изопропил 840 Хк изопропил - 841 Вос трет-бутил 2-Ме 842 Вос трет-бутил З-Ме 843 Вос трет-бутил 4-Ме 844 трет-бутил 4-ОМе 845 ГСк изопропил 846 <Хк изопропил - 847 Вос циклогексил - 848 Вос Λ 849 Вос А 850 Вос Б 851 Вос г* —о 852 Вос V 853 Вос Υ
    Соед. № В К3 Е22 854 СЯЦ изопропил 855 изопропил 856 О. изопропил 857 “ХА трет-бутил 858 А. 1 Ме трет-бутил 859 а изопропил 860 ΌΑ изопропил - 861 ах изопропил - 862 А изопропил 863 ах изопропил 864 ----------------------------------------------------------------------------------------1 я 1 изопропил 865 <ха трет-бутил 866 трет-бутил 867 ах трет-бутил
    Соед. № В К3 К22 868 САА трет-бутил - 869 ал трет-бутил 870 трет-бутил 871 ахС трет-бутил • 872 χΛ трет-бутил - 873 . о трет-бутил
  63. 63. Соединение по п.62, выбранное из группы, включающей соединения № 801-825, 827-858 и 860-873.
  64. 64. Соединение по п.46, представленное формулой где В имеет значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № В 901 Вос 902 х—χΑ Ό
    Соед. № В 903 ‘''л'-''· Ό 904 хА 905 аЛ 906 γΧ 907 /®а о <1 Ϊ 908 А 909 σ4 910 1 ί 911 хА 912 οχ 913 /η ιΐ
    119
    120
  65. 65. Соединение по п.64, представленное формулой где В, X, К3, Ζ и К2)В значения, указанные в следующей таблице:
    Соед. № в-х- к3 Ζ К21В 1001 фенил-1Ч(Ме)- изопропил О н 1002 Вос-ΝΗ- трет-бутил δ ОМе 1003 Оц Ме изопропил О
  66. 66. Фармацевтическая композиция, включающая эффективное в отношении вируса гепатита С количество соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом.
  67. 67. Способ лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С, у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного в отношении вируса гепатита С количества соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира.
  68. 68. Способ лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С, у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного в отношении вируса гепатита С количества композиции по п.67.
  69. 69. Способ ингибирования репликации вируса гепатита С путем обработки вируса ингибирующим N83-протеазу вируса гепатита С количеством соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира.
  70. 70. Способ лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С, у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного в отношении вируса гепатита С количества соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира в сочетании с другим анти-НСУ аген том.
  71. 71. Способ по п.70, где указанный другой анти-НСV агент выбирают из группы, включающей α- или β-интерферон, рибавирин и амантадин.
  72. 72. Способ по п.70, где указанный другой анти-НСV агент представляет собой ингибитор других мишеней в жизненном цикле НСV, выбранных из группы, включающей геликазу, полимеразу, металлопротеазу или ГКЕ8 (внутренний сайт входа в рибосому).
  73. 73. Способ получения пептидного аналога формулы (I) по п.1, где Р1 представляет собой остаток замещенной аминоциклопропилкарбоновой кислоты, предусматривающий сочетание пептида, выбранного из ряда, включающего АРС-Р3-Р2 или АРС-Р2, с промежуточным продуктом Р1 формулы в которой К1 обозначает С)-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, СРС обозначает карбоксильную защитную группу, АРС обозначает аминозащитную группу, а Р3 и Р2 имеют указанные выше значения.
  74. 74. Способ получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором N83-протеазы НС¥, предусматривающий сочетание (соответствующим образом защищенных) аминокислоты, пептида или пептидного фрагмента с промежуточным продуктом Р1 формулы в которой К| обозначает С1-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, а СРС обозначает карбоксильную защитную группу.
  75. 75. Способ получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором протеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, предусматривающий сочетание (соответствующим образом защищенных) аминокислоты, пептида или пептидного фрагмента с промежуточным продуктом формулы о
    в которой СРС обозначает карбоксильную защитную группу.
  76. 76. Применение промежуточного продукта Р1 формулы где К) обозначает С)-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещен121
    122 ные галогеном, а СРС обозначает карбоксильную защитную группу, для получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором №3-протеазы НСУ.
  77. 77. Применение промежуточного продукта Р1 формулы о
    в которой СРС обозначает карбоксильную защитную группу, для получения 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором протеазы, или 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы.
  78. 78. Применение промежуточного продукта Р1 формулы в которой В! обозначает С1-С6алкил, циклоалкил или С2-С6алкенил, все необязательно замещенные галогеном, а СРС обозначает карбоксильную защитную группу, для получения соединения формулы I, как оно определено выше.
  79. 79. Соединение, являющееся аминокислотным аналогом, формулы о
  80. 80. Способ по п.73, 74 или 75, где карбоксильную защитную группу (СРС) выбирают из ряда, включающего сложные алкиловые эфиры, сложные аралкиловые эфиры и сложные эфиры, которые расщепляются при обработке слабыми основаниями или в мягких восстановительных условиях.
  81. 81. Способ по п.73, 74 или 75, где аминозащитную группу (АРС) выбирают из ряда, включающего ацильные группы, ароматические карбаматные группы, алифатические карбаматные группы, циклические алкильные карбаматные группы, алкильные группы, триалкилсилильные и тиолсодержащие группы.
  82. 82. Применение аналога пролина формулы где В21А обозначает С1-С6алкил; С1-С6 алкоксигруппу; (низш.)тиоалкил; галоген; аминогруппу, необязательно монозамещенную С1-С6 алкилом; С6-, С10арил, С7-С16аралкил или Не!, где арил, аралкил или Не! необязательно замещены радикалом В22, где В22 обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкоси-, амидогруппу, (низш.)алкиламид, аминогруппу, необязательно моно- или дизамещенную (С1-С6)алкилом или Не!, и
    В21в обозначает С1-С6алкил, С1-С6алкокси-, амино-, ди(низш.)алкиламиногруппу, (низш.) алкиламид, NО2, ОН, галоген, трифторметил или карбоксил, для синтеза 1) пептидного аналога, являющегося ингибитором серинпротеазы, 2) пептидного аналога, являющегося ингибитором №3-протеазы НСУ, или 3) пептидного аналога формулы I.
  83. 83. Применение эффективного в отношении вируса гепатита С количества соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира для приготовления композиции для лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С у млекопитающего.
  84. 84. Применение ингибирующего N83протеазу вируса гепатита С количества соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира для приготовления композиции для ингибирования репликации вируса гепатита С.
  85. 85. Применение эффективного в отношении вируса гепатита С количества комбинации соединения формулы I по п.1 или его терапевтически приемлемой соли либо сложного эфира и интерферона для приготовления композиции для лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С у млекопитающего.
EA200100228A 1998-08-10 1999-08-09 Трипептидные ингибиторы вируса гепатита c EA003906B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9593198P 1998-08-10 1998-08-10
US13238699P 1999-05-04 1999-05-04
PCT/CA1999/000736 WO2000009543A2 (en) 1998-08-10 1999-08-09 Hepatitis c inhibitor tri-peptides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200100228A1 EA200100228A1 (ru) 2001-10-22
EA003906B1 true EA003906B1 (ru) 2003-10-30

Family

ID=26790767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200100228A EA003906B1 (ru) 1998-08-10 1999-08-09 Трипептидные ингибиторы вируса гепатита c

Country Status (43)

Country Link
US (11) US6323180B1 (ru)
EP (2) EP1105413B1 (ru)
JP (2) JP4485685B2 (ru)
KR (2) KR100631439B1 (ru)
CN (2) CN101143892B (ru)
AR (3) AR020880A1 (ru)
AT (1) ATE430158T1 (ru)
AU (1) AU769738B2 (ru)
BG (1) BG65738B1 (ru)
BR (2) BRPI9913646B8 (ru)
CA (2) CA2445938C (ru)
CO (1) CO5261542A1 (ru)
CY (2) CY1109291T1 (ru)
CZ (2) CZ302766B6 (ru)
DE (1) DE69940817D1 (ru)
DK (2) DK1105413T3 (ru)
EA (1) EA003906B1 (ru)
EE (1) EE05517B1 (ru)
ES (2) ES2326707T3 (ru)
HK (2) HK1040085B (ru)
HR (1) HRP20010102B1 (ru)
HU (2) HU230701B1 (ru)
ID (1) ID27839A (ru)
IL (3) IL141012A0 (ru)
IN (3) IN211493B (ru)
ME (1) ME00381B (ru)
MX (2) MX257413B (ru)
MY (1) MY127538A (ru)
NO (2) NO328952B1 (ru)
NZ (1) NZ510396A (ru)
PE (1) PE20000949A1 (ru)
PH (1) PH11999002002B1 (ru)
PL (1) PL204850B1 (ru)
PT (2) PT1105413E (ru)
RS (3) RS50798B (ru)
SA (1) SA99200617B1 (ru)
SI (2) SI2028186T1 (ru)
SK (2) SK286994B6 (ru)
TR (2) TR200100432T2 (ru)
TW (1) TWI250165B (ru)
UA (1) UA75026C2 (ru)
WO (1) WO2000009543A2 (ru)
ZA (1) ZA200100971B (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA015415B1 (ru) * 2005-06-30 2011-08-30 Вайробей, Инк. Ингибиторы вируса гепатита с (hcv)
RU2475494C2 (ru) * 2006-06-26 2013-02-20 Энанта Фармасьютикалз, Инк. Хиноксалинилмакроциклические ингибиторы серинпротеазы вируса гепатита с

Families Citing this family (421)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2409985A3 (en) 1996-10-18 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors de serine proteases, especially of the NS3 protease of the hepatitis C virus
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
UA74546C2 (en) * 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
KR100878334B1 (ko) * 1999-06-25 2009-01-14 백광산업 주식회사 대사 경로 단백질을 코딩하는 코리네박테리움 글루타미쿰유전자
KR20030036152A (ko) 2000-04-05 2003-05-09 쉐링 코포레이션 Ｎ-사이클릭 ｐ2 잔기를 포함하는 ｃ형 간염 바이러스의매크로사이클릭 ｎｓ3-세린 프로테아제 억제제
NZ521456A (en) 2000-04-19 2004-07-30 Schering Corp Macrocyclic NS3-Serine protease inhibitors of hepatitis C virus comprising alkyl and aryl alanine P2 moieties
JP2003532726A (ja) 2000-05-05 2003-11-05 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規抗感染症薬
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
HUP0303358A3 (en) 2000-07-21 2005-10-28 Schering Corp Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus and pharmaceutical compositions containing them
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
DK1385870T3 (da) 2000-07-21 2010-07-05 Schering Corp Peptider som inhibitorer af NS3-serinprotease fra hepatitis C-virus
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
SV2003000617A (es) * 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
US6846806B2 (en) 2000-10-23 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of Hepatitis C virus NS3 protein
EP1337550B1 (en) * 2000-11-20 2006-05-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c tripeptide inhibitors
CN1301994C (zh) 2000-12-12 2007-02-28 先灵公司 作为c型肝炎病毒ns3－丝氨酸蛋白酶抑制剂的二芳基肽
EP1539188B1 (en) 2001-01-22 2015-01-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
WO2003006490A1 (en) 2001-07-11 2003-01-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Bridged bicyclic serine protease inhibitors
CA2455683C (en) 2001-09-14 2010-06-08 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Front grill impact-absorbing structure for a vehicle
EP1441720B8 (en) 2001-10-24 2012-03-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine protease, particularly hepatitis c virus ns3-ns4a protease, incorporating a fused ring system
JP2005511572A (ja) * 2001-11-02 2005-04-28 グラクソ　グループ　リミテッド Ｈｃｖ阻害剤としてのアシルジヒドロピロール誘導体
US6867185B2 (en) * 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
WO2003062228A1 (en) 2002-01-23 2003-07-31 Schering Corporation Proline compounds as ns3-serine protease inhibitors for use in treatment of hepatites c virus infection
US7119072B2 (en) * 2002-01-30 2006-10-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
CA2369970A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
PL373399A1 (en) 2002-04-11 2005-08-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
AU2003299519A1 (en) * 2002-05-20 2004-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2003099316A1 (en) * 2002-05-20 2003-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclicsulfonamide hepatitis c virus inhibitors
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
AU2003301959A1 (en) * 2002-05-20 2004-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Substituted cycloalkyl p1' hepatitis c virus inhibitors
KR100457857B1 (ko) * 2002-05-23 2004-11-18 (주) 비엔씨바이오팜 2-[2-(3-인돌릴)에틸아미노]피리딘 유도체, 그 제조방법및 이를 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물
TW200500374A (en) 2002-06-28 2005-01-01 Idenlx Cayman Ltd 2' and 3' -nucleoside produrgs for treating flavivridae infections
US20040033959A1 (en) * 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
AU2003261434A1 (en) * 2002-08-12 2004-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Iminothiazolidinones as inhibitors of hcv replication
EP1408031A1 (en) * 2002-10-09 2004-04-14 3 D Gene Pharma Pyrolidine derivatives useful in treatment of hepatitis C virus infection
ATE418554T1 (de) 2002-10-24 2009-01-15 Glaxo Group Ltd 1-acyl-pyrrolidin-derivate für die behandlung von viralen infektionen
US20050075279A1 (en) * 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7601709B2 (en) 2003-02-07 2009-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
ATE486889T1 (de) * 2003-03-05 2010-11-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
WO2004101605A1 (en) * 2003-03-05 2004-11-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibiting compounds
KR100960802B1 (ko) * 2003-03-08 2010-06-01 주식회사유한양행 씨형 간염바이러스 감염 치료용 엔에스3 프로테아제 억제제
US7148347B2 (en) * 2003-04-10 2006-12-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
US7173004B2 (en) * 2003-04-16 2007-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis C virus
CA2522561C (en) 2003-04-18 2012-07-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7176208B2 (en) * 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US6846836B2 (en) 2003-04-18 2005-01-25 Bristol-Myers Squibb Company N-substituted phenylurea inhibitors of mitochondrial F1F0 ATP hydrolase
UY28323A1 (es) * 2003-05-21 2004-12-31 Boehringer Ingelheim Int Compuestos inhibidores de la hepatitis c
WO2005003147A2 (en) 2003-05-30 2005-01-13 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
WO2004113365A2 (en) * 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7273851B2 (en) 2003-06-05 2007-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tri-peptide hepatitis C serine protease inhibitors
US7125845B2 (en) * 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2005009418A2 (en) * 2003-07-25 2005-02-03 Idenix (Cayman) Limited Purine nucleoside analogues for treating diseases caused by flaviviridae including hepatitis c
CN1867579A (zh) 2003-08-26 2006-11-22 先灵公司 丙肝病毒的新的肽模拟物ns3－丝氨酸蛋白酶抑制剂
US8377952B2 (en) 2003-08-28 2013-02-19 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage formulation
US8025899B2 (en) 2003-08-28 2011-09-27 Abbott Laboratories Solid pharmaceutical dosage form
MY148123A (en) 2003-09-05 2013-02-28 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
PE20050431A1 (es) * 2003-09-22 2005-07-19 Boehringer Ingelheim Int Peptidos macrociclicos activos contra el virus de la hepatitis c
BRPI0414814A (pt) * 2003-09-26 2006-11-14 Schering Corp inibidores macrocìclicos de protease de serina ns3 de vìrus de hepatite c
KR20060130027A (ko) 2003-10-10 2006-12-18 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 세린 프로테아제, 특히 ｈｃｖ ｎｓ3-ｎｓ4ａ 프로테아제의억제제
NZ546347A (en) 2003-10-14 2009-11-27 Intermune Inc Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
KR20060120166A (ko) 2003-10-27 2006-11-24 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ３－ｎｓ４ａ 단백질분해효소 저항성 돌연변이
WO2005043118A2 (en) 2003-10-27 2005-05-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Drug discovery method
EP1944042A1 (en) 2003-10-27 2008-07-16 Vertex Pharmceuticals Incorporated Combinations for HCV treatment
US20050119318A1 (en) * 2003-10-31 2005-06-02 Hudyma Thomas W. Inhibitors of HCV replication
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2546290A1 (en) * 2003-11-20 2005-06-09 Schering Corporation Depeptidized inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP2007513200A (ja) * 2003-12-08 2007-05-24 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 超臨界流体処理によるルテニウム副生物の除去
CA2549660A1 (en) 2003-12-15 2005-06-30 Japan Tobacco Inc. Cyclopropane compounds and pharmaceutical use thereof
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
ES2358333T3 (es) * 2004-01-21 2011-05-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Péptidos macrocíclicos con acción contra el virus de la hepatitis c.
SE0400199D0 (sv) * 2004-01-30 2004-01-30 Medivir Ab HCV Protease inhbitors
WO2005073195A2 (en) * 2004-01-30 2005-08-11 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors
AU2005212257A1 (en) 2004-02-04 2005-08-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
US20050182252A1 (en) 2004-02-13 2005-08-18 Reddy K. R. Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives
TWI368507B (en) 2004-02-20 2012-07-21 Boehringer Ingelheim Int Viral polymerase inhibitors
US20070049593A1 (en) 2004-02-24 2007-03-01 Japan Tobacco Inc. Tetracyclic fused heterocyclic compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
SI1719773T1 (sl) 2004-02-24 2009-08-31 Japan Tobacco Inc Kondenzirane heterotetraciklične spojine in njihova uporaba kot inhibitorji polimeraze HCV
CA2557247A1 (en) 2004-02-27 2005-09-22 Schering Corporation Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
US7635694B2 (en) 2004-02-27 2009-12-22 Schering Corporation Cyclobutenedione-containing compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
ES2349328T3 (es) 2004-02-27 2010-12-30 Schering Corporation Nuevos compuestos como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
US7816326B2 (en) 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
CA2557301A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-15 Schering Corporation Cyclobutenedione groups-containing compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
DE602005015834D1 (de) 2004-02-27 2009-09-17 Schering Corp 3,4-(cyclopentyl)kondensierte prolinverbindungen als inhibitoren der ns3-serinprotease des hepatitis-c-virus
EP1730165A1 (en) 2004-02-27 2006-12-13 Schering Corporation Inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
CA2557495C (en) 2004-02-27 2014-04-15 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
WO2005090334A2 (en) * 2004-03-12 2005-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates for the preparation of aspartic acetal caspase inhibitors
CA2556917C (en) * 2004-03-15 2013-07-09 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
CA2560897C (en) * 2004-03-30 2012-06-12 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
CN1980657A (zh) 2004-05-05 2007-06-13 耶鲁大学 新颖的抗病毒赛菊宁黄质类似物
EP1773868B1 (en) 2004-05-20 2009-07-15 Schering Corporation Substituted prolines as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
JP5156374B2 (ja) * 2004-05-25 2013-03-06 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 非環式ｈｃｖプロテアーゼインヒビターの調製方法
AU2005254057B2 (en) 2004-06-15 2011-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
US20070265222A1 (en) 2004-06-24 2007-11-15 Maccoss Malcolm Nucleoside Aryl Phosphoramidates for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
WO2006000085A1 (en) * 2004-06-28 2006-01-05 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
NZ552405A (en) 2004-07-16 2011-04-29 Gilead Sciences Inc Pyrrolidine containing antiviral compounds
WO2006007708A1 (en) * 2004-07-20 2006-01-26 Boehringer Engelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
CN101023094B (zh) * 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
US7597884B2 (en) * 2004-08-09 2009-10-06 Alios Biopharma, Inc. Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use
AU2005273968A1 (en) * 2004-08-09 2006-02-23 Alios Biopharma Inc. Synthetic hyperglycosylated, protease-resistant polypeptide variants, oral formulations and methods of using the same
JP2008511633A (ja) 2004-08-27 2008-04-17 シェーリング コーポレイション Ｃ型肝炎ウィルスｎｓ３セリンプロテアーゼの阻害因子としてのアシルスルホンアミド化合物
SI3109244T1 (sl) * 2004-09-14 2019-06-28 Gilead Pharmasset Llc Priprava 2'fluoro-2'-alkil-substituiranih ali drugih neobvezno substituiranih ribofuranozil pirimidinov in purinov in njihovih derivatov
WO2006030892A1 (ja) * 2004-09-17 2006-03-23 Nippon Shinyaku Co., Ltd. 複素環化合物の製造方法
CN101072575A (zh) 2004-10-01 2007-11-14 威特克斯医药股份有限公司 Hcv ns3－ns4a蛋白酶抑制
US7659263B2 (en) 2004-11-12 2010-02-09 Japan Tobacco Inc. Thienopyrrole compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
US7323447B2 (en) * 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
PL1863833T3 (pl) 2005-03-08 2014-03-31 Boehringer Ingelheim Int Sposób otrzymywania związków makrocyklicznych
CA2606195C (en) * 2005-05-02 2015-03-31 Merck And Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20080016597A (ko) 2005-05-13 2008-02-21 바이로켐 파마 인코포레이티드 플라비바이러스 감염의 예방 또는 치료용 화합물 및 그의예방 또는 치료 방법
US20060276404A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Anima Ghosal Medicaments and methods combining a HCV protease inhibitor and an AKR competitor
JP5160415B2 (ja) * 2005-06-02 2013-03-13 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 医薬処方物およびそれを用いる治療方法
US20070237818A1 (en) * 2005-06-02 2007-10-11 Malcolm Bruce A Controlled-release formulation of HCV protease inhibitor and methods using the same
NZ563361A (en) 2005-06-02 2011-02-25 Schering Corp HCV protease inhibitors in combination with food
AU2006259348B2 (en) 2005-06-17 2010-07-22 Novartis Ag Use of sanglifehrin in HCV
TWI449711B (zh) * 2005-06-30 2014-08-21 Virobay Inc Ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）抑制劑
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AR057456A1 (es) * 2005-07-20 2007-12-05 Merck & Co Inc Inhibidores de la proteasa ns3 del vhc
EP1910378B1 (en) * 2005-07-20 2012-06-20 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibitor peptide analogs
US20090148407A1 (en) * 2005-07-25 2009-06-11 Intermune, Inc. Novel Macrocyclic Inhibitors of Hepatitis C Virus Replication
MY141245A (en) 2005-07-29 2010-03-31 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
CN101273042B (zh) * 2005-07-29 2013-11-06 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
BRPI0614242A2 (pt) 2005-07-29 2011-03-15 Medivir Ab inibidores macrocìclicos do vìrus da hepatite c, combinação e composição farmacêutica compreendendo os mesmos, bem como uso e processo para a preparação dos referidos inibidores
PL1913015T3 (pl) 2005-07-29 2014-04-30 Janssen R&D Ireland Makrocykliczne inhibitory wirusa zapalenia wątroby typu C
TW200745061A (en) 2005-07-29 2007-12-16 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis C virus
MY139988A (en) 2005-07-29 2009-11-30 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
BRPI0614205A2 (pt) * 2005-08-01 2016-11-22 Merck & Co Inc composto, composição farmacêutica, e, uso de composto
CN101277950B (zh) * 2005-08-02 2013-03-27 弗特克斯药品有限公司 丝氨酸蛋白酶抑制剂
WO2007021610A2 (en) 2005-08-09 2007-02-22 Merck & Co., Inc. Ribonucleoside cyclic acetal derivatives for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US8076365B2 (en) 2005-08-12 2011-12-13 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US8399615B2 (en) 2005-08-19 2013-03-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates
ES2449268T3 (es) * 2005-08-19 2014-03-19 Vertex Pharmaceuticals Inc. Procesos
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
US7964624B1 (en) 2005-08-26 2011-06-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
ES2364426T3 (es) 2005-09-09 2011-09-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Proceso de metátesis con cerrado del anillo para la preparación de péptidos macrocíclicos.
ATE493409T1 (de) 2005-10-11 2011-01-15 Intermune Inc Verbindungen und verfahren zur inhibierung der replikation des hepatitis-c-virus
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2008123606A (ru) 2005-11-11 2009-12-20 Вертекс Фармасьютикалз, Инк (Us) Варианты вируса гепатита с
US7705138B2 (en) 2005-11-11 2010-04-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hepatitis C virus variants
US7910595B2 (en) * 2005-12-21 2011-03-22 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
EP2345652A1 (en) 2005-12-21 2011-07-20 Abbott Laboratories Antiviral compounds
CN102702194A (zh) 2005-12-21 2012-10-03 雅培制药有限公司 抗病毒化合物
EP1971611B1 (en) 2005-12-21 2012-10-10 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CN102614490A (zh) 2006-02-27 2012-08-01 弗特克斯药品有限公司 包含vx-950的共晶体和包含所述共晶体的药物组合物
JP2009529059A (ja) 2006-03-08 2009-08-13 アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド 抗ｃ型肝炎ウイルス活性を有する置換アミノチアゾール誘導体
WO2007109080A2 (en) 2006-03-16 2007-09-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deuterated hepatitis c protease inhibitors
RU2448976C2 (ru) 2006-04-11 2012-04-27 Новартис Аг Ингибиторы hcv/вич и их применение
GB0609492D0 (en) * 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
KR101069051B1 (ko) 2006-05-23 2011-09-29 아이알엠 엘엘씨 채널 활성화 프로테아제 억제제로서의 화합물 및 조성물
US20080187516A1 (en) * 2006-06-06 2008-08-07 Ying Sun Acyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
US7728148B2 (en) * 2006-06-06 2010-06-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US8268776B2 (en) 2006-06-06 2012-09-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US9526769B2 (en) 2006-06-06 2016-12-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
GB0612423D0 (en) * 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
RU2008152171A (ru) * 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
EP2049474B1 (en) 2006-07-11 2015-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
US7718612B2 (en) * 2007-08-02 2010-05-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Pyridazinonyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US20090035267A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
US7605126B2 (en) * 2006-08-11 2009-10-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acylaminoheteroaryl hepatitis C virus protease inhibitors
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
US7582605B2 (en) * 2006-08-11 2009-09-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus-containing hepatitis C serine protease inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
WO2008022006A2 (en) * 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis c virus protease inhibitors
US20080038225A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US20090098085A1 (en) * 2006-08-11 2009-04-16 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
CA2660555A1 (en) 2006-08-17 2008-02-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CA2666814A1 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
CA2667165A1 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
WO2008051514A2 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
EP2079479B1 (en) * 2006-10-24 2014-11-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
KR101615500B1 (ko) * 2006-10-27 2016-04-27 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Ｈｃｖ ｎｓ3 프로테아제 억제제
CA2667032A1 (en) * 2006-10-27 2008-05-15 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
TW200827364A (en) * 2006-11-02 2008-07-01 Taigen Biotechnology Co Ltd HCV protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20090086081A (ko) 2006-11-15 2009-08-10 바이로켐 파마 인코포레이티드 플라비바이러스 감염의 치료 또는 예방용 티오펜 유사체
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EA200970493A1 (ru) 2006-11-17 2009-10-30 Тиботек Фармасьютикалз Лтд. Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с
MX2009006056A (es) * 2006-12-07 2009-06-16 Schering Corp Formulacion de matriz sensible al ph.
WO2008133753A2 (en) * 2006-12-20 2008-11-06 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0625345D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
GB0625349D0 (en) * 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
JP2010513450A (ja) * 2006-12-20 2010-04-30 イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー 抗ウイルス性インドール
WO2008074035A1 (en) * 2006-12-27 2008-06-19 Abbott Laboratories Hcv protease inhibitors and uses thereof
WO2008095058A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-07 Taigen Biotechnology Co. Ltd. Hcv protease inhibitors
ATE542815T1 (de) 2007-02-27 2012-02-15 Vertex Pharma Kokristalle und pharmazeutische zusammensetzungen damit
CA2679426A1 (en) 2007-02-27 2008-09-04 Luc Farmer Inhibitors of serine proteases
WO2008106167A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy comprising matrix metalloproteinase inhibitors and caspase inhibitors for the treatment of liver diseases
ATE525068T1 (de) 2007-02-28 2011-10-15 Conatus Pharmaceuticals Inc Verfahren zur behandlung von chronischer viraler hepatitis c mithilfe von ro 113-0830
MX2009010205A (es) * 2007-03-23 2009-10-19 Schering Corp Inhibidores de cetoamida p1-no epimerizables de proteasa ns3 de virus de hepatitis c.
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US7910587B2 (en) * 2007-04-26 2011-03-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl dipeptide hepatitis C virus inhibitors
US20080317712A1 (en) * 2007-04-26 2008-12-25 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US20080267917A1 (en) * 2007-04-26 2008-10-30 Deqiang Niu N-functionalized amides as hepatitis c serine protease inhibitors
US8377872B2 (en) 2007-04-26 2013-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cyclic P3 tripeptide hepatitis C serine protease inhibitors
US20080292587A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-27 Ying Sun Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US20090155209A1 (en) * 2007-05-03 2009-06-18 Blatt Lawrence M Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
MX2009011930A (es) 2007-05-04 2009-11-18 Vertex Pharma Terapia de combinacion para el tratamiento de infeccion de virus de hepatitis c.
MX2009012117A (es) * 2007-05-09 2009-11-23 Pfizer Composiciones y derivados heterociclicos sustituidos y su uso farmaceutico como antibacterianos.
EP2185524A1 (en) 2007-05-10 2010-05-19 Intermune, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
GB0709791D0 (en) * 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
WO2009005677A2 (en) * 2007-06-29 2009-01-08 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
KR101596524B1 (ko) * 2007-06-29 2016-02-22 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 화합물
AU2008277442A1 (en) * 2007-07-17 2009-01-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa Macrocyclic indole derivatives for the treatment of hepatitis C infections
JP5433573B2 (ja) * 2007-07-19 2014-03-05 イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・エルレ・エルレ 抗ウイルス剤としての大環状化合物
CA2693997C (en) 2007-08-03 2013-01-15 Pierre L. Beaulieu Viral polymerase inhibitors
JP5443360B2 (ja) 2007-08-30 2014-03-19 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 共結晶体およびそれを含む医薬組成物
GB0718575D0 (en) 2007-09-24 2007-10-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Nucleoside derivatives as inhibitors of viral polymerases
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
US20090111757A1 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8383583B2 (en) 2007-10-26 2013-02-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic, pyridazinone-containing hepatitis C serine protease inhibitors
JP2011503201A (ja) 2007-11-14 2011-01-27 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環状テトラゾリルｃ型肝炎セリンプロテアーゼ阻害剤
US8030307B2 (en) * 2007-11-29 2011-10-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic, C5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis C virus NS3 protease
US8263549B2 (en) * 2007-11-29 2012-09-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
EP2224942A4 (en) * 2007-12-05 2012-01-25 Enanta Pharm Inc FLUORATED TRIPEPTIDE HCV SERINE PROTEASE INHIBITORS
WO2009076166A2 (en) * 2007-12-05 2009-06-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl hcv serine protease inhibitors
US8193346B2 (en) 2007-12-06 2012-06-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Process for making macrocyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
WO2009079353A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic hcv serine protease inhibitors
EP2234977A4 (en) 2007-12-19 2011-04-13 Boehringer Ingelheim Int VIRAL POLYMERASE INHIBITORS
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
MX2010008109A (es) * 2008-01-24 2010-09-22 Enanta Pharm Inc Tripéptidos difluorizados como inhibidores de proteasa de serina de virus de hepatitis c (hcv).
US8101567B2 (en) * 2008-01-24 2012-01-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl-containing tripeptide HCV serine protease inhibitors
AU2009210789B2 (en) 2008-02-04 2014-01-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
MX2010008371A (es) * 2008-02-07 2010-10-04 Virobay Inc Inhibidores de catepsina b.
US8591878B2 (en) 2008-02-25 2013-11-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Therapeutic compounds
US8372802B2 (en) * 2008-03-20 2013-02-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
TW200946541A (en) * 2008-03-27 2009-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Solid forms of an anti-HIV phosphoindole compound
AP2010005416A0 (en) 2008-04-15 2010-10-31 Intermune Inc Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication.
US8163921B2 (en) * 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AU2009241445A1 (en) * 2008-04-28 2009-11-05 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US8211891B2 (en) * 2008-04-30 2012-07-03 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Difluoromethyl-containing macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
US20090285774A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN101580535B (zh) * 2008-05-16 2012-10-03 太景生物科技股份有限公司 丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8044023B2 (en) 2008-05-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
EP2476690A1 (en) 2008-07-02 2012-07-18 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
ES2491090T3 (es) 2008-07-22 2014-09-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Combinaciones de un compuesto de quinoxalina macrocíclica que es un inhibidor de la proteasa NS3 del VHC con otros agentes del VHC
ES2383273T3 (es) 2008-07-23 2012-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Compuestos heterocíclicos antivíricos
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
EP2687526A1 (en) * 2008-09-16 2014-01-22 Boehringer Ingelheim International Gmbh Crystalline forms of a 2-thiazolyl- 4-quinolinyl-oxy derivative, a potent HCV inhibitor
MY152824A (en) * 2008-09-17 2014-11-28 Boehringer Ingelheim Int Combination of hcv ns3 protease inhibitor with interferon and ribavirin.
WO2010034671A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Pyrine or pyrazine derivatives for treating hcv
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2341924A4 (en) 2008-10-02 2013-01-23 David Gladstone Inst METHOD FOR THE TREATMENT OF HEPATITIS C VIRUS INFECTIONS
AU2009303483A1 (en) * 2008-10-15 2010-04-22 Intermune, Inc. Therapeutic antiviral peptides
MX2011004133A (es) 2008-10-30 2011-05-24 Hoffmann La Roche Derivados de arilpiridona antiviral heterociclica.
CA2738732A1 (en) * 2008-11-21 2010-05-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition of a potent hcv inhibitor for oral administration
PT2373172E (pt) 2008-12-03 2013-10-21 Presidio Pharmaceuticals Inc Inibidores de ns5a de hcv
WO2010065668A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
US20100272674A1 (en) * 2008-12-04 2010-10-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20110114582A (ko) 2008-12-19 2011-10-19 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ３ 프로테아제 억제제
AU2009330333A1 (en) 2008-12-22 2011-07-07 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
KR20110094352A (ko) 2008-12-22 2011-08-23 에프. 호프만-라 로슈 아게 헤테로사이클릭 항바이러스 화합물
SG172363A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Synthesis of purine nucleosides
WO2010075517A2 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Pharmasset, Inc. Nucleoside analogs
CL2009002207A1 (es) 2008-12-23 2011-02-18 Gilead Pharmasset Llc Compuestos derivados de 3-hidroxi-5-(9h-purin-9-il)tetrahidrofuran-2-il, inhibidor de la replicacion de arn viral dependiente de arn; composicion farmaceutica; uso para el tratamiento de hepatitis c.
MX2011007195A (es) 2009-01-07 2013-07-12 Scynexis Inc Derivado de ciclosporina para el uso en el tratamiento de infección de virus de hepatitis c (vhc) y virus de inmunodeficiencia humana (vih).
WO2010082050A1 (en) 2009-01-16 2010-07-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic and 7-aminoalkyl-substituted benzoxazocines for treatment of hepatitis c infections
GB0900914D0 (en) 2009-01-20 2009-03-04 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
US8102720B2 (en) * 2009-02-02 2012-01-24 Qualcomm Incorporated System and method of pulse generation
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
US8193372B2 (en) 2009-03-04 2012-06-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole HCV polymerase inhibitors
WO2010100178A1 (en) 2009-03-06 2010-09-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
WO2010107739A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions of treating a flaviviridae family viral infection
KR20110131312A (ko) 2009-03-27 2011-12-06 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 융합된 고리 ｃ형 간염 억제제
US8927576B2 (en) 2009-04-06 2015-01-06 PTC Therpeutics, Inc. HCV inhibitor and therapeutic agent combinations
TW201040181A (en) 2009-04-08 2010-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
MX2011011112A (es) 2009-04-25 2011-11-18 Hoffmann La Roche Compuestos antivirales heterociclicos.
US8936781B2 (en) 2009-05-13 2015-01-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
TWI428332B (zh) 2009-06-09 2014-03-01 Hoffmann La Roche 雜環抗病毒化合物
CA2762675A1 (en) 2009-06-24 2010-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compound
US8232246B2 (en) * 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
EP2448912A4 (en) * 2009-07-02 2014-05-28 Reddys Lab Ltd Dr ENZYMES AND METHODS FOR DEDOLDING AMINOVINYL-CYCLOPROPANECARBOXYLIC ACID DERIVATIVES
ME01718B (me) 2009-07-07 2014-09-20 Boehringer Ingelheim Int Farmaceutska kompozicija za inhibitor proteaze virusnog Hepatitis C
WO2011014487A1 (en) 2009-07-30 2011-02-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis c virus ns3 protease inhibitors
TW201117812A (en) 2009-08-05 2011-06-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
CN102471239A (zh) 2009-08-10 2012-05-23 住友化学株式会社 光学活性的1-氨基-2-乙烯基环丙甲酸酯的制造方法
US8324417B2 (en) 2009-08-19 2012-12-04 Virobay, Inc. Process for the preparation of (S)-2-amino-5-cyclopropyl-4,4-difluoropentanoic acid and alkyl esters and acid salts thereof
SI2477980T1 (sl) * 2009-09-15 2017-01-31 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Inhibitorji HCV proteaze
CN102741270B (zh) * 2009-09-28 2015-07-22 英特穆恩公司 C型肝炎病毒复制的环肽抑制剂
WO2011049908A2 (en) * 2009-10-19 2011-04-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bismacrokyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
EA201200650A1 (ru) 2009-10-30 2012-12-28 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Курсы комбинированного лечения вируса гепатита с, включающие bi201335, интерферон-альфа и рибавирин
US20110117055A1 (en) 2009-11-19 2011-05-19 Macdonald James E Methods of Treating Hepatitis C Virus with Oxoacetamide Compounds
CA2781614A1 (en) 2009-11-25 2011-06-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-alkynyl-thiophene-2-carboxylic acid derivatives and their use for the treatment or prevention of flavivirus infections
MX2012006877A (es) 2009-12-18 2012-08-31 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores de virus de hepatitis c de arileno o heteroarileno 5, 5 - fusionado.
US20130072523A1 (en) 2009-12-24 2013-03-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US20110178107A1 (en) * 2010-01-20 2011-07-21 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
CN102140100B (zh) 2010-01-27 2014-06-11 爱博新药研发(上海)有限公司 高效抑制丙型肝炎病毒的多环化合物及其制备方法和用途
US8530497B2 (en) 2010-03-11 2013-09-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Crystalline salts of a potent HCV inhibitor
CA2794145A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
MX2012010919A (es) 2010-03-24 2013-02-01 Vertex Pharma Analogos para el tratamiento o prevencion de infecciones por flavivirus.
TW201141857A (en) 2010-03-24 2011-12-01 Vertex Pharma Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
TW201139438A (en) 2010-03-24 2011-11-16 Vertex Pharma Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
AP3515A (en) 2010-03-31 2016-01-11 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
WO2011123586A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
CA2800509A1 (en) 2010-05-24 2011-12-01 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
WO2011156545A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Viral dynamic model for hcv combination therapy
WO2011159826A2 (en) 2010-06-15 2011-12-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hcv ns5b protease mutants
WO2012006070A1 (en) 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
AR081691A1 (es) 2010-06-28 2012-10-10 Vertex Pharma Derivados de tiofeno, metodos para su preparacion y su uso en el tratamiento o la prevencion de infecciones por flavivirus
WO2012006060A1 (en) 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
WO2012024363A2 (en) 2010-08-17 2012-02-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flaviviridae viral infections
NZ608720A (en) 2010-09-21 2015-03-27 Enanta Pharm Inc Macrocyclic proline derived hcv serine protease inhibitors
MX2013003060A (es) * 2010-09-30 2013-05-30 Boehringer Ingelheim Int Terapia de combinacion para tratar infeccion por hcv.
EA201390532A1 (ru) 2010-10-08 2013-09-30 Новартис Аг Композиции сульфамидых ингибиторов ns3, содержащие витамин е
JP6069215B2 (ja) 2010-11-30 2017-02-01 ギリアド ファーマセット エルエルシー 化合物
MX2013006951A (es) * 2010-12-16 2013-10-03 Abbvie Inc Compuestos antivirales.
CN103380132B (zh) 2010-12-30 2016-08-31 益安药业 菲啶大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2012109398A1 (en) 2011-02-10 2012-08-16 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating hcv infections
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012123298A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
EP2691409B1 (en) 2011-03-31 2018-02-21 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2012171332A1 (zh) 2011-06-16 2012-12-20 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙型肝炎病毒的大环状杂环化合物及其制备和应用
JPWO2012176715A1 (ja) 2011-06-21 2015-02-23 三菱瓦斯化学株式会社 １−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸アミドおよびその塩、ならびにその製造方法
WO2012175581A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
CN102807607B (zh) * 2011-07-22 2013-10-23 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的稠环杂环类化合物、其中间体及其应用
TW201317223A (zh) 2011-07-26 2013-05-01 Vertex Pharma 噻吩化合物
WO2013016499A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for preparation of thiophene compounds
DE202012012998U1 (de) 2011-08-31 2014-06-13 Daniel Elias Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels
US9403863B2 (en) 2011-09-12 2016-08-02 Idenix Pharmaceuticals Llc Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2013039855A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
CN103917541B (zh) 2011-10-10 2016-08-17 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒化合物
EP2768838A1 (en) 2011-10-14 2014-08-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
ES2527544T1 (es) 2011-10-21 2015-01-26 Abbvie Inc. Tratamiento mono (PSI-7977) o de combinación con AAD para su uso en el tratamiento del VHC
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
AR088463A1 (es) 2011-10-21 2014-06-11 Abbvie Inc Metodos para el tratamiento de hcv
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
WO2013074386A2 (en) 2011-11-15 2013-05-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
CA3131037A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Emory University Antiviral jak inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
AU2012347785B2 (en) 2011-12-06 2017-03-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for treating viral diseases
CN103987723B (zh) 2011-12-16 2017-03-01 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 Hcv ns5a 的抑制剂
AU2012357986B2 (en) 2011-12-20 2017-02-02 Riboscience Llc 4'-Azido, 3'-fluoro substituted nucleoside derivatives as inhibitors of HCV RNA replication
AU2012357940B2 (en) 2011-12-20 2017-02-16 Riboscience Llc 2',4'-difluoro-2'-methyl substituted nucleoside derivatives as inhibitors of HCV RNA replication
US20140356325A1 (en) 2012-01-12 2014-12-04 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Novel 2'-c-methyl nucleoside derivative compounds
CN104244926A (zh) 2012-01-12 2014-12-24 勃林格殷格翰国际有限公司 作为强效的hcv 抑制剂的稳定的药物制剂
WO2013133927A1 (en) 2012-02-13 2013-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions of 2'-c-methyl-guanosine, 5'-[2-[(3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)thio]ethyl n-(phenylmethyl)phosphoramidate]
EP2817291A1 (en) 2012-02-24 2014-12-31 F. Hoffmann-La Roche AG Antiviral compounds
WO2013137869A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in an hcv-hiv coinfected patient population
US9012427B2 (en) 2012-03-22 2015-04-21 Alios Biopharma, Inc. Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog
WO2013147750A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
WO2013147749A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient subgenotype populations
WO2013143581A1 (en) 2012-03-28 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in specific patient subgenotype sub-population
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
AU2013266393B2 (en) 2012-05-22 2017-09-28 Idenix Pharmaceuticals Llc D-amino acid compounds for liver disease
US20140010783A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Hoffmann-La Roche Inc. Antiviral compounds
US10513534B2 (en) 2012-10-08 2019-12-24 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′-chloro nucleoside analogs for HCV infection
EP2909223B1 (en) 2012-10-19 2017-03-22 Idenix Pharmaceuticals LLC Dinucleotide compounds for hcv infection
EA025560B1 (ru) 2012-10-19 2017-01-30 Бристол-Майерс Сквибб Компани Ингибиторы вируса гепатита с
US10723754B2 (en) 2012-10-22 2020-07-28 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-bridged nucleosides for HCV infection
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2014070964A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014071007A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2914614B1 (en) 2012-11-05 2017-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
CN103804208B (zh) * 2012-11-14 2016-06-08 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种丙肝药物中间体的制备方法
US20140140951A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-Alanine Ester of Rp-Nucleoside Analog
EP2938624A1 (en) 2012-11-14 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
EP2935304A1 (en) 2012-12-19 2015-10-28 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
KR20150109451A (ko) 2013-01-23 2015-10-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 항바이러스성 트라이아졸 유도체
WO2014121418A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014121417A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
US20150065439A1 (en) 2013-02-28 2015-03-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions
EP2970358B1 (en) 2013-03-04 2021-06-30 Idenix Pharmaceuticals LLC 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
WO2014137930A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Thiophosphate nucleosides for the treatment of hcv
RU2015136256A (ru) 2013-03-05 2017-04-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Противовирусные соединения
WO2014137869A1 (en) 2013-03-07 2014-09-12 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014138374A1 (en) 2013-03-08 2014-09-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Oral combination therapy for treating hcv infection in specific patient sub-population
EP2970195B1 (en) * 2013-03-14 2017-08-02 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Processes for producing sovaprevir
WO2014165542A1 (en) 2013-04-01 2014-10-09 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
MA46490A1 (fr) 2013-05-16 2021-04-30 Riboscience Llc Dérivés de nucléosides 4'- fluoro-2' - méthyle substitués
EA201592185A1 (ru) 2013-05-16 2016-05-31 Рибосайенс Ллк 4'-азидо, 3'-дезокси-3'-фторзамещенные нуклеозидные производные
US20180200280A1 (en) 2013-05-16 2018-07-19 Riboscience Llc 4'-Fluoro-2'-Methyl Substituted Nucleoside Derivatives as Inhibitors of HCV RNA Replication
WO2014197578A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
WO2015017713A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
ES2900570T3 (es) 2013-08-27 2022-03-17 Gilead Pharmasset Llc Formulación de combinación de dos compuestos antivirales
EP3046924A1 (en) 2013-09-20 2016-07-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
WO2015066370A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
WO2015081297A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US9717797B2 (en) 2013-12-05 2017-08-01 International Business Machines Corporation Polycarbonates bearing aromatic N-heterocycles for drug delivery
EP3083654A1 (en) 2013-12-18 2016-10-26 Idenix Pharmaceuticals LLC 4'-or nucleosides for the treatment of hcv
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
EP2899207A1 (en) 2014-01-28 2015-07-29 Amikana.Biologics New method for testing HCV protease inhibition
WO2015134561A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
WO2015134560A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
EP3113763A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
EP3131914B1 (en) 2014-04-16 2023-05-10 Idenix Pharmaceuticals LLC 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
WO2017189978A1 (en) 2016-04-28 2017-11-02 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
AR112702A1 (es) 2017-09-21 2019-11-27 Riboscience Llc Derivados de nucleósidos sustituidos con 4’-fluoro-2’-metilo como inhibidores de la replicación de hcv arn
US20220099637A1 (en) 2018-12-04 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Methods of analysis using in-sample calibration curve by multiple isotopologue reaction monitoring

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0475255A3 (en) * 1990-09-12 1993-04-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid
JPH05155827A (ja) * 1991-12-09 1993-06-22 Banyu Pharmaceut Co Ltd ｃｉｓ−２−アミノシクロプロパンカルボン酸誘導体の製造法
IT1272179B (it) 1994-02-23 1997-06-16 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodologia per riprodurre in vitro l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 del virus hcv.
CN1141591A (zh) * 1994-02-23 1997-01-29 布·安格莱荻公司分子生物学研究所 体外再生丙型肝炎病毒(hcv)ns3蛋白酶的解蛋白活性的方法
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
IT1277914B1 (it) * 1995-08-22 1997-11-12 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per produrre - in forma pura e in quantita' elevate - polipeptidi con l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 di hcv, e
CA2165996C (en) * 1995-12-22 2002-01-29 Murray Douglas Bailey Stereoselective preparation of 2-substituted succinic derivatives
DE19600034C2 (de) 1996-01-02 2003-12-24 Degussa 1,1,2-Trisubstituierte Cyclopropanverbindungen, Verfahren zu deren Herstellung und Dihydroxyethyl-substituierte 1-Amino-cyclopropan-1-carbonsäure
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
EP2409985A3 (en) 1996-10-18 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors de serine proteases, especially of the NS3 protease of the hepatitis C virus
JP2002512625A (ja) 1997-05-29 2002-04-23 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としての複素環アミド化合物
ES2241157T3 (es) * 1997-08-11 2005-10-16 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Peptidos inhibidores de la hepatitis c.
US6767991B1 (en) 1997-08-11 2004-07-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptides
SE9704543D0 (sv) * 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
DE19835120C1 (de) * 1998-08-04 1999-10-21 Westfalia Separator Ag Verfahren und Vorrichtung zum Einstellen des Flüssigkeitsgehalts des aus einer selbstentleerenden Schleudertrommel eines Separators ausgetragenen Feststoffes
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6277830B1 (en) * 1998-10-16 2001-08-21 Schering Corporation 5′-amino acid esters of ribavirin and the use of same to treat hepatitis C with interferon
US6608027B1 (en) 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
WO2004101605A1 (en) * 2003-03-05 2004-11-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibiting compounds
ATE486889T1 (de) * 2003-03-05 2010-11-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA015415B1 (ru) * 2005-06-30 2011-08-30 Вайробей, Инк. Ингибиторы вируса гепатита с (hcv)
RU2475494C2 (ru) * 2006-06-26 2013-02-20 Энанта Фармасьютикалз, Инк. Хиноксалинилмакроциклические ингибиторы серинпротеазы вируса гепатита с

Also Published As

Publication number Publication date
US20020037998A1 (en) 2002-03-28
WO2000009543A3 (en) 2000-05-25
BR9913646B1 (pt) 2014-12-02
MEP58508A (en) 2011-05-10
BG65738B1 (bg) 2009-09-30
USRE40525E1 (en) 2008-09-30
PH11999002002B1 (en) 2007-10-19
ME00381B (me) 2011-10-10
IN2001MU00127A (ru) 2005-03-04
DK1105413T3 (da) 2009-08-17
BR9913646A (pt) 2001-06-05
RS53562B1 (sr) 2015-02-27
ID27839A (id) 2001-04-26
AU5273199A (en) 2000-03-06
SK286994B6 (sk) 2009-09-07
EP2028186A2 (en) 2009-02-25
IL141012A (en) 2009-09-01
DE69940817D1 (en) 2009-06-10
SK2062001A3 (en) 2001-10-08
BR9917805B1 (pt) 2014-06-17
IL196545A (en) 2012-06-28
NO336663B1 (no) 2015-10-12
TWI250165B (en) 2006-03-01
YU9401A (sh) 2003-02-28
HK1113164A1 (en) 2008-09-26
EE200100081A (et) 2002-08-15
IL196545A0 (en) 2011-07-31
USRE42164E1 (en) 2011-02-22
NO20010683L (no) 2001-04-02
US20020016442A1 (en) 2002-02-07
NO20100004L (no) 2001-04-02
NO20010683D0 (no) 2001-02-09
ES2405930T3 (es) 2013-06-04
CA2445938A1 (en) 2000-02-24
US6329417B1 (en) 2001-12-11
MXPA01001423A (es) 2001-08-01
PL346626A1 (en) 2002-02-25
DK2028186T3 (da) 2013-03-25
TR200100432T2 (tr) 2001-09-21
EE05517B1 (et) 2012-02-15
HK1040085A1 (en) 2002-05-24
PT1105413E (pt) 2009-06-30
SK288068B6 (sk) 2013-05-03
CA2338946C (en) 2010-10-12
NZ510396A (en) 2004-02-27
US6420380B2 (en) 2002-07-16
JP4485685B2 (ja) 2010-06-23
ATE430158T1 (de) 2009-05-15
JP2010043124A (ja) 2010-02-25
HU229262B1 (en) 2013-10-28
USRE41356E1 (en) 2010-05-25
CA2338946A1 (en) 2000-02-24
BRPI9913646B8 (pt) 2021-05-25
CZ301268B6 (cs) 2009-12-30
MY127538A (en) 2006-12-29
EP2028186B1 (en) 2013-01-23
CN101143892B (zh) 2010-12-08
BG105232A (en) 2001-11-30
CN101143892A (zh) 2008-03-19
KR100631439B1 (ko) 2006-10-09
EP1105413A2 (en) 2001-06-13
CN1323316A (zh) 2001-11-21
SA99200617A (ar) 2005-12-03
ZA200100971B (en) 2002-06-26
EP2028186A3 (en) 2009-04-01
RS20090459A (en) 2010-06-30
CY1109291T1 (el) 2014-07-02
KR100672229B1 (ko) 2007-02-28
HRP20010102A2 (en) 2002-02-28
IL141012A0 (en) 2002-02-10
CY1113935T1 (el) 2016-07-27
UA75026C2 (en) 2006-03-15
HRP20010102B1 (en) 2010-07-31
EP1105413B1 (en) 2009-04-29
KR20060083992A (ko) 2006-07-21
CA2445938C (en) 2012-10-30
HU230701B1 (hu) 2017-10-30
US6534523B1 (en) 2003-03-18
CN100339389C (zh) 2007-09-26
US6268207B1 (en) 2001-07-31
RS50798B (sr) 2010-08-31
JP5021711B2 (ja) 2012-09-12
AR073428A2 (es) 2010-11-03
PL204850B1 (pl) 2010-02-26
CZ2001516A3 (cs) 2001-08-15
US6323180B1 (en) 2001-11-27
CO5261542A1 (es) 2003-03-31
IN211493B (ru) 2008-01-25
PE20000949A1 (es) 2000-09-26
US6329379B1 (en) 2001-12-11
IN2007MU00706A (ru) 2007-07-20
AR020880A1 (es) 2002-06-05
HUP0105144A3 (en) 2002-11-28
MX261584B (es) 2008-10-22
US6410531B1 (en) 2002-06-25
EA200100228A1 (ru) 2001-10-22
HUP1300080A2 (ru) 2002-04-29
PT2028186E (pt) 2013-03-27
SA99200617B1 (ar) 2006-06-24
AU769738B2 (en) 2004-02-05
AR069583A2 (es) 2010-02-03
USRE41894E1 (en) 2010-10-26
SI1105413T1 (sl) 2009-10-31
TR200200129T2 (tr) 2002-06-21
SI2028186T1 (sl) 2013-06-28
CZ302766B6 (cs) 2011-10-26
JP2002522554A (ja) 2002-07-23
NO328952B1 (no) 2010-06-28
HK1040085B (zh) 2008-05-30
WO2000009543A2 (en) 2000-02-24
KR20010085363A (ko) 2001-09-07
MX257413B (es) 2008-05-27
HUP0105144A2 (hu) 2002-04-29
ES2326707T3 (es) 2009-10-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA003906B1 (ru) Трипептидные ингибиторы вируса гепатита c
AU764655B2 (en) Hepatitis C inhibitor peptides
US7705146B2 (en) Hepatitis C inhibitor peptide analogs
ES2363131T3 (es) Inhibidores del virus de la hepatitis c.
AU2006233208B2 (en) Hepatitis C virus inhibitors
MXPA01001422A (en) Hepatitis c inhibitor peptides

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KZ KG MD TJ TM

MK4A Patent expired

Designated state(s): BY RU