TW201919649A

TW201919649A - 作為ｈｃｖｒｎａ複製抑制劑之經４′－氟－２′－甲基取代之核苷衍生物

Info

Publication number: TW201919649A
Application number: TW107133372A
Authority: TW
Inventors: 馬克史密斯; 克勞斯Ｇ克朗普
Original assignee: 美商里伯賽恩斯有限責任公司
Priority date: 2017-09-21
Filing date: 2018-09-21
Publication date: 2019-06-01
Also published as: EP3684374A1; IL273398B1; US10682369B2; CA3075645A1; AR112702A1; JP7299897B2; CN111194217B; WO2019060740A1; CN111194217A; KR20200056420A; AU2018335411B2; JP2020534374A; IL273398A; SG11202002431SA; US11351186B2; EP3684374A4; US20190231804A1; US20210046100A1; AU2018335411A1

Abstract

式I之胞苷核苷類似物(其中變量係如本文所闡述)與式II之尿苷核苷類似物(其中變量係如本文所闡述)之組合

對HCV聚合酶之抑制產生協同效應。

Description

作為HCV　RNA複製抑制劑之經4'-氟-2'-甲基取代之核苷衍生物

本發明係關於作為HCV複製子RNA複製抑制劑之核苷衍生物之組合。具體而言，本發明係關於作為亞基因體C型肝炎病毒(HCV) RNA複製抑制劑之胞苷及尿苷嘧啶核苷衍生物之組合之用途及含有此等化合物之醫藥組合物。具體而言，式I之胞苷核苷類似物與式II之尿苷核苷類似物之組合對HCV聚合酶之抑制產生協同效應。

C型肝炎病毒係全世界慢性肝病之主要原因。感染HCV之患者具有發生肝硬化且隨後發生肝細胞癌之風險，且因此HCV係肝臟移植之主要指徵。目前僅有兩種經批准之療法可用於治療HCV感染(R. G. Gish，Sem. Liver. Dis., 1999, 19, 35)。該等療法係干擾素-a單一療法及最近之核苷類似物利巴韋林(ribavirin)(Virazole)與干擾素-a之組合療法。

許多批准用於治療病毒感染之藥物係核苷或核苷類似物且該等核苷類似物藥物中之大多數經由抑制病毒聚合酶抑制病毒複製，之後轉化成相應三磷酸酯。此至三磷酸酯之轉化通常藉由細胞激酶介導，且因此直接評估作為HCV複製抑制劑之核苷僅可使用基於細胞之分析便捷地進行。對於HCV，缺乏真正的基於細胞之病毒複製分析或動物感染模型之可用性。

C型肝炎病毒屬黃病毒科(Flaviridae)。其為RNA病毒，編碼較大多蛋白之RNA基因體在處理之後產生必要複製機制以確保子代RNA之合成。據信，由HCV RNA基因體編碼之大多數非結構蛋白質參與RNA複製。Lohmann等人，[V. Lohmann等人，Science, 1999, 285, 110-113]已闡述人類肝細胞瘤(Huh7)細胞系之構築，其中已引入亞基因體HCV RNA分子且顯示以高效率複製。據信，該等細胞系中之RNA複製機制與受感染肝細胞中之全長HCV RNA基因體之複製相同。用於分離該等細胞系之亞基因體HCV cDNA純系已形成開發用於鑑別HCV複製之核苷類似物抑制劑之基於細胞之分析的基礎。

在第一態樣中，提供治療HCV之方法，其係藉由向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合來實施：

其中：
每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一X獨立地係O或S；
每一Y獨立地係H或F；且
每一Y’獨立地係F或OH；
或其藥理上可接受之鹽(或本文中所揭示之其任何實施例)。

在第二態樣中，提供選自以下之式I化合物：
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；
磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；
磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；
磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；
(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；
磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；
((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及
((R)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；及
其S_P 及R_P 差向異構物之混合物；或
前述化合物中之每一者之醫藥上可接受之鹽。

在第三態樣中，亦提供式III化合物：

其中：
R係O-R¹ 或NHR^1’ ；
或R與R⁵ 一起形成鍵；
R’係N(R⁴ )C(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ 或-OR³ ；
R¹ 係H、低碳數鹵代烷基或芳基，其中芳基係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烯基、低碳數炔基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基、-N(R^1a )₂ 、醯基胺基、-SO₂ N(R^1a )₂ 、-COR^1b 、-SO₂ (R^1c )、-NHSO₂ (R^1c )、硝基或氰基取代；
每一R^1a 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R^1b 獨立地係-OR^1a 或-N(R^1a )₂ ；
每一R^1c 係低碳數烷基；
R^1’ 係-C(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H、低碳數烷基、-(CH₂ )_r N(R^1a )₂ 、低碳數羥基烷基、-CH₂ SH、-(CH₂ )S(O)_p Me、-(CH₂ )₃ NHC(=NH)NH₂ 、(1H-吲哚-3-基)甲基、(1H-吲哚-4-基)甲基、-(CH2)_m C(=O)R^1b 、芳基及芳基低碳數烷基，其中芳基可視情況經一或多個羥基、低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、硝基或氰基取代；
或R^2a 係H且R^2b 與R⁴ 一起形成(CH₂ )_n ；
每一R³ 係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一R⁴ 係H、低碳數烷基，或R^2b 與R⁴ 一起形成(CH₂ )₃ ；
R⁵ 係H、C(=O)R^1c 、C(=O)R^1b 、P(=O)(OR¹ )(OR^1a )或P(=O)(OR¹ )(NR⁴ R⁷ )；
R⁶ 係OH或F；
R⁷ 係C(R^2a R^2b )C(=O)OR³
m係0至3；
n係3、4或5；
p係0至2；
r係1至6；
X係O或S；且
鹼基係尿嘧啶、胞嘧啶、鳥嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶或雜環烷基，其各自可視情況經一或多個羥基、低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、硝基或氰基取代；
或其藥理上可接受之鹽。

式I、II及III之化合物可用於治療由C型肝炎病毒(HCV)介導之疾病。

本申請案亦提供用於治療C型肝炎病毒(HCV)感染之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式III化合物。

本申請案進一步提供組合物，其包含式I、II及III之化合物及醫藥上可接受之賦形劑。

相關申請案之交叉參考

本申請案根據35 U.S.C § 119(e)主張對2017年9月21日提出申請之美國臨時申請案第62/561,237號之優先權之權益，該臨時申請案之揭示內容係以全文引用的方式併入本文中。

已顯示式I及II之化合物係肝細胞瘤細胞系中亞基因體C型肝炎病毒複製之抑制劑。該等化合物作為用於治療人類HCV感染之抗病毒藥物應係有效的。
定義：

除非另有說明，否則申請專利範圍及本說明書中所使用之以下術語具有以下含義。

如本文所使用之術語「烷基」表示含有1至12個碳原子之直鏈或具支鏈烴殘基。較佳地，術語「烷基」表示含有1至7個碳原子之直鏈或具支鏈烴殘基且在本文中可稱為低碳數烷基。最佳者係甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基或戊基。烷基可未經取代或經取代。取代基係選自以下中之一或多者：環烷基、硝基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、烷基羰基及環烷基羰基。在一個實施例中，烷基未經取代。

如本文所使用之術語「環烷基」表示含有3至7個碳原子之視情況經取代之環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基。取代基係選自以下中之一或多者：環烷基、硝基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、烷基羰基及環烷基羰基。在一個實施例中，環烷基未經取代。

如本文所使用之術語「環烷基羰基」表示式-C(=O)R之基團，其中R係如上文所定義之環烷基。

如本文所使用之術語「烷氧基」表示視情況經取代之直鏈或具支鏈烷基-氧基，其中「烷基」(包括低碳數烷基)部分係如上文所定義。實例包括且不限於甲氧基、乙氧基、正丙基氧基、異丙基氧基、正丁基氧基、異丁基氧基、第三丁基氧基、戊基氧基、己基氧基、庚基氧基，包括其異構物。

如本文所使用之術語「烷基胺基」表示直鏈或具支鏈烷基-NH-基團，其中「烷基」(包括低碳數烷基)部分係如上文所定義。

如本文所使用之術語「二烷基胺基」表示直鏈或具支鏈(烷基)₂ -N-基團，其中「烷基」(包括低碳數烷基)部分係如上文所定義。

如本文所使用之術語「烷氧基烷基」表示如上文所定義之烷氧基，其鍵結至如上文所定義之烷基(包括低碳數烷基)。實例係甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、丙氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基丁基、丙基氧基丁基、丁基氧基丁基、第三丁基氧基丁基、甲氧基戊基、乙氧基戊基、丙基氧基戊基，包括其異構物。

如本文所使用之術語「烯基」表示具有2至7個碳原子、較佳2至4個碳原子且具有一個或兩個烯烴雙鍵、較佳一個烯烴雙鍵之未經取代或經取代之烴鏈基團。含有2至4個碳原子之烯基在本文中可稱為低碳數烯基。取代基係選自以下中之一或多者：環烷基、硝基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、烷基羰基及環烷基羰基。在一個實施例中，烯基未經取代。實例係乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)或2-丁烯基(巴豆基)。

如本文所使用之術語「炔基」表示具有2至7個碳原子、較佳2至4個碳原子且具有一個或(若可能)兩個三鍵、較佳一個三鍵之未經取代或經取代之烴鏈基團。含有2至4個碳原子之炔基在本文中可稱為低碳數炔基。取代基係選自以下中之一或多者：環烷基、硝基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、烷基羰基及環烷基羰基。在一個實施例中，炔基未經取代。實例係乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基或3-丁炔基。

如本文所使用之術語「羥基烷基」表示如上文所定義之直鏈或具支鏈烷基(包括低碳數烷基)，其中1個、2個、3個或更多個氫原子由羥基取代。實例係羥基甲基、1-羥基乙基、2-羥基乙基、1-羥基丙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、羥基異丙基、羥基丁基及諸如此類。

如本文所使用之術語「鹵代烷基」表示如上文所定義之直鏈或具支鏈烷基(包括低碳數烷基)，其中1個、2個、3個或更多個氫原子由鹵素取代。實例係1-氟甲基、1-氯甲基、1-溴甲基、1-碘甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基、三碘甲基、1-氟乙基、1-氯乙基、1-溴乙基、1-碘乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-碘乙基、2,2-二氯乙基、3-溴丙基或2,2,2-三氟乙基及諸如此類。

除非另有說明，否則如本文所使用之術語「芳基」表示視情況經取代之苯基及萘基(例如1-萘基、2-萘基或3-萘基)。芳基之適宜取代基可選自針對烷基所命名之彼等，然而，另外，鹵素、羥基、烷氧基及視情況經取代之烷基(即，如上文所定義之未經取代或經取代之烷基)、鹵代烷基、烯基、炔基及芳基氧基係可添加至選擇之取代基。在一個實施例中，取代基不包括烷氧基。

如本文所使用之術語「芳基烷基」表示連接至烷基之芳基，每一術語係如上文所定義。當芳基係苯基時，其在本文中亦可稱為苯基烷基。

如本文所使用之術語「雜環基」或「雜環烷基」表示含有一或多個選自氮、氧及硫之雜原子之視情況經取代之飽和、部分不飽和或芳香族單環、二環或三環雜環系統，其亦可稠合至視情況經取代之飽和、部分不飽和或芳香族單環碳環或雜環。雜環基之適宜取代基可選自針對烷基所命名之彼等，然而，另外，視情況經取代之烷基、烯基、炔基、側氧基(=O)或胺基磺醯基(-SO₂ NH₂ )係可添加至選擇之取代基。適宜雜環之實例係噁唑基、異噁唑基、呋喃基、四氫呋喃基、1,3-二氧雜環戊基、二氫吡喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、吡嗪基、異噻唑基、二氫噁唑基、嘧啶基、四唑基、1-吡咯啶基、2-吡咯啶基、3-吡咯啶基、吡咯啶酮基、(N-氧化物)-吡啶基、1-吡咯基、2-吡咯基、三唑基(例如1,2,3-三唑基或1,2,4-三唑基)、1-吡唑基、2-吡唑基、4-吡唑基、六氫吡啶基、嗎啉基(例如4-嗎啉基)、硫嗎啉基(例如4-硫嗎啉基)、噻唑基、吡啶基、二氫噻唑基、咪唑啶基、吡唑啉基、六氫吡嗪基、1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、噻二唑基(例如1,2,3-噻二唑基)、4-甲基六氫吡嗪基、4-羥基六氫吡啶-1-基。

如本文所使用之術語「醯基」(「烷基羰基」)表示式C(=O)R之基團，其中R係氫、含有1至7個碳原子之未經取代或經取代之直鏈或具支鏈烴殘基或苯基。最佳醯基係其中R係氫、含有1至4個碳原子之未經取代之直鏈或具支鏈烴殘基或苯基之彼等。

如本文所使用之術語「醯基胺基」表示式-NHC(=O)R之基團，其中R係氫、含有1至7個碳原子之未經取代或經取代之直鏈或具支鏈烴殘基或苯基。最佳醯基係其中R係氫、含有1至4個碳原子之未經取代之直鏈或具支鏈烴殘基或苯基之彼等。

術語鹵素或鹵基代表氟、氯、溴或碘，較佳為氟、氯或溴。

如本文所使用之術語「苯基烷基」表示連接至如上文所定義之烷基之苯基。實例包括(但不限於)苄基、苯乙基及諸如此類。

在整個本申請案給出之化合物之圖示表示中，加粗錐形線()指示在不對稱碳所屬之環平面上方之取代基且虛線()指示在不對稱碳所屬之環平面下方之取代基。

本發明之化合物可展現立體異構現象。該等化合物可為式I、II或III之化合物之任何異構物或該等異構物(包括差向異構物)之混合物。如本文所使用之R_P 及S_P 係指磷原子處之立體化學。本發明之具有一或多個不對稱碳原子之化合物及中間體可作為立體異構物之外消旋混合物獲得，該等混合物可拆分。

式I、II或III之化合物可展現互變異構現象，此意味著本發明之化合物可作為兩種或更多種能夠輕易相互轉化之化合物存在。在許多情形下，其僅意指氫原子在兩個其他原子之間之交換，該氫原子與該兩個其他原子中之任一者形成共價鍵。互變異構化合物彼此以動態平衡存在，因此製備單獨物質之嘗試通常導致形成基於組分之結構顯示所有預計化學及物理性質之混合物。

互變異構現象之最常見類型係涉及羰基或酮基化合物及不飽和羥基化合物或烯醇者。結構變化係氫原子在碳與氧原子之間移位，且具有鍵重排。舉例而言，在許多脂肪族醛及酮(例如乙醛)中，酮形式佔優；在酚中，烯醇形式係主要組分。

鹼性式I、II或III之化合物可與無機酸(例如氫鹵酸(例如鹽酸及氫溴酸)、硫酸、硝酸及磷酸及諸如此類)及與有機酸(例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、柳酸、檸檬酸、甲烷磺酸及對甲苯磺酸及諸如此類)形成醫藥上可接受之鹽。此等鹽之形成及分離可根據業內已知之方法來進行。
實施例 ：
用於治療 HCV 之方法

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合：

其中：
每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一X獨立地係O或S；
每一Y獨立地係H或F；且
每一Y’獨立地係F或OH；
或其藥理上可接受之鹽。
在一個實施例中，式(I)化合物係其中每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、苯基或苯基低碳數烷基者。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式I化合物係：
。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式II化合物係索非布韋(Sofosbuvir)：
。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中式II係：
。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中式II化合物係：
。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：
。

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：

本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式I化合物及該式II化合物係

本申請案亦提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合，其中該式I化合物係選自由以下組成之群：

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；

(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；

(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；

磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；

(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；

(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；

磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及

((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；

((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及

((R)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；及

其S_P 及R_P 差向異構物之混合物；或
前述化合物中之每一者之其醫藥上可接受之鹽。

在前述段落之另一實施例中，式(II)化合物獨立地選自：
；
II-1
；
II-2
；
II-3
及
；
II-4
或其S_P 及R_P 差向異構混合物。

本申請案亦提供治療HCV之方法，其係藉由向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合來實施，其中該式I化合物係選自由以下組成之群：
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-2-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-3’,5’-環磷酸異丙基酯；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-3’,5’-環硫代磷酸異丙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-胞苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-2-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-2-(異丙氧基羰基)乙基酯；
4’-氟-2’-甲基胞苷-3’,5’-環磷酸異丙基酯；
4’-氟-2’-甲基胞苷-3’,5’-環硫代磷酸異丙基酯；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-磷醯二胺；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基胞苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-硫代磷醯二胺；
4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-磷醯二胺；及
4’-氟-2’-甲基胞苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]硫代磷醯二胺。

本申請案亦提供治療HCV之方法，其係藉由向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合來實施，其中該式II化合物係選自由以下組成之群：
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-2-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-3’,5’-環磷酸異丙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-2-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-苯基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基酯；
硫代胺基磷酸4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-(O)-1-萘基-N-(S)-2-(異丙氧基羰基)乙基酯；
4’-氟-2’-甲基尿苷-3’,5’-環磷酸異丙基酯；
4’-氟-2’-甲基尿苷-3’,5’-環硫代磷酸異丙基酯；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-磷醯二胺；
2’-去氧-2’,4’-二氟-2’-甲基尿苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-硫代磷醯二胺；
4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]磷醯二胺；及
4’-氟-2’-甲基尿苷-5’-{N,N’-雙[(S)-1-(異丙氧基羰基)乙基]-硫代磷醯二胺。

亦提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合(或本文中其實施例中之任一者)，該方法進一步包含投與利巴韋林、聚乙二醇干擾素-α、司美匹韋(simeprevir)、雷迪帕韋(ledipasvir)、達卡他韋(daclatasvir)及維帕他韋(velpatasvir)中之一或多者。

本申請案亦提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與組合物，該組合物包含式I化合物及/或式II化合物

其中：
每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一X獨立地係O或S；
每一Y獨立地係H或F；且
每一Y’獨立地係F或OH；
或其藥理上可接受之鹽；
(或本文中其任何實施例)與至少一種載劑、稀釋劑或賦形劑之混合物。

另外，本申請案提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物或式I與式II之組合：

其中：
每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一X獨立地係O或S；
每一Y獨立地係H或F；且
每一Y’獨立地係F或OH；
或其藥理上可接受之鹽；
(或本文中其實施例)，其進一步與NS3A HCV蛋白酶抑制劑組合。

本申請案進一步提供治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物或式I與式II之組合：

其中：
每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；
每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；
每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；
每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；
每一X獨立地係O或S；
每一Y獨立地係H或F；且
每一Y’獨立地係F或OH；
或其藥理上可接受之鹽；
(本文中其任何實施例)，其進一步與額外NS5B HCV聚合酶抑制劑組合。

本申請案提供用於抑制細胞中HCV複製之方法，其包含投與式I化合物及/或式II化合物之組合。

本申請案提供式I化合物與式II化合物之組合之用途，其用於製造用於治療HCV之藥劑。

本申請案提供如本文所闡述之化合物、組合物或方法。

本發明所涵蓋且在本發明範圍內之式(I)之代表性化合物之實例提供於下表1中。

一般而言，本申請案中所使用之命名係基於熟習此項技術者常見之標準核酸命名。若所繪示之結構與該結構之給定名稱之間存在差異，則以所繪示之結構為準。另外，若結構或結構之一部分的立體化學未以(例如)粗體或虛線表示出來，則應將該結構或該結構之一部分理解為涵蓋其所有立體異構物。
可用於本文所揭示方法中之其他式I化合物揭示於下表2中：

組合療法

本發明之化合物及其異構形式以及其醫藥上可接受之鹽單獨或在與靶向參與HCV生命週期之病毒或細胞元件或功能之其他化合物組合使用時可用於治療及預防HCV感染。可用於本發明中之化合物類別包括(但不限於) HCV抗病毒劑之所有類別。

對於組合療法，可在與本發明之化合物組合時使用之藥劑之機械類別包括(例如) HCV聚合酶之核苷及非核苷抑制劑、蛋白酶抑制劑、解旋酶抑制劑、NS4B抑制劑及在功能上抑制內部核糖體進入位點(IRES)之醫藥劑及抑制HCV細胞黏附或病毒進入、HCV RNA轉譯、HCV RNA轉錄、複製或HCV成熟、組裝或病毒釋放之其他藥劑。該等類別中且可用於本發明中之具體化合物包括(但不限於)大環、雜環及直鏈HCV蛋白酶抑制劑，例如特拉匹韋(telaprevir)(VX-950)、博賽匹韋(boceprevir)(SCH-503034)、那拉匹韋(narlaprevir)(SCH-9005 18)、ITMN- 191 (R-7227)、TMC-435350 (亦稱TMC-435)、MK- 7009、BI-201335、BI-2061 (西魯匹韋(ciluprevir))、BMS-650032、ACH-1625、ACH-1095 (HCV NS4A蛋白酶輔因子抑制劑)、VX-500、VX-8 13、PHX-1766、PHX2054、IDX- 136、IDX-3 16、ABT-450 EP-0 13420 (及同類物)及VBY-376；可用於本發明中之核苷類HCV聚合酶(複製酶)抑制劑包括(但不限於) R7128、PSI-785 1、IDX-184、IDX-102、R1479、UNX-08 189、PSI-6130、PSI-938及PSI-879以及各種其他核苷及核苷酸類似物及HCV抑制劑，包括(但不限於)衍生為2'-C-甲基改質之核苷(核苷酸)、4'-氮雜改質之核苷(核苷酸)及7'-去氮雜改質之核苷(核苷酸)之彼等。可用於本發明中之非核苷類HCV聚合酶(複製酶)抑制劑包括(但不限於) HCV-796、HCV-371、VCH-759、VCH-916、VCH- 222、ANA-598、MK-3281、ABT-333、ABT-072、PF-00868554、BI-207127、GS-9190、A- 837093、JKT-109、GL-59728及GL-60667。

另外，本發明之化合物可與以下組合使用：親環素(cyclophyllin)及親免素(immunophyllin)拮抗劑(例如(但不限於) DEBIO化合物、NM-811以及環孢素及其衍生物)；激酶抑制劑；熱休克蛋白抑制劑(例如，HSP90及HSP70)；可包括(但不限於)以下之其他免疫調節劑：干擾素(-α、-β、-ω、-γ、-λ或合成)，例如Intron A、Roferon-A、Canferon-A300、Advaferon、Infergen、Humoferon、Sumiferon MP、Alfaferone、IFN-β、Feron及諸如此類；聚乙二醇衍生(聚乙二醇化)之干擾素化合物，例如PEG干擾素-α-2a (Pegasys)、PEG干擾素-α-2b (PEGIntron)、聚乙二醇化之IFN-α -con1及諸如此類；干擾素化合物之長效調配物及衍生化形式，例如白蛋白融合之干擾素、Albuferon、Locteron及諸如此類；具有各種受控遞送系統類型之干擾素(例如ITCA-638，即由DUROS皮下遞送系統遞送之ω-干擾素)；刺激細胞中之干擾素合成之化合物，例如雷西莫特(resiquimod)及諸如此類；介白素；增強1型輔助T細胞反應產生之化合物，例如SCV-07及諸如此類；類鐸受體促效劑，例如CpG-10101 (阿替隆(actilon))、艾托拉濱(isotorabine)、ANA773及諸如此類；胸腺素α-1；ANA-245及ANA-246；組織胺二鹽酸鹽；丙帕鍺(propagermanium)；四氯癸烷氧化物(tetrachlorodecaoxide)；聚肌胞(ampligen)；IMP-321；KRN-7000；抗體，例如西瓦賽(civacir)、XTL-6865及諸如此類；及預防性及治療性疫苗，例如InnoVac C、HCV E1E2/MF59及諸如此類。另外，涉及投與NS5A抑制劑、I型干擾素受體促效劑(例如，IFN-α)及II型干擾素受體促效劑(例如，IFN-γ)之上述方法中之任一者可藉由投與有效量之TNF-α拮抗劑來增強。適用於此等組合療法之例示性、非限制性TNF-α拮抗劑包括ENBREL、REMICADE及HUMIRA。

另外，本發明之化合物可與抗原生動物劑及認為有效治療HCV感染之其他抗病毒劑組合使用，例如(但不限於)前藥硝唑尼特(nitazoxanide)。硝唑尼特可用作與本發明中所揭示之化合物組合以及與可用於治療HCV感染之其他藥劑(例如聚乙二醇干擾素α-2a及利巴韋林)組合之藥劑。

本發明之化合物亦可與以下一起使用：干擾素及聚乙二醇化干擾素之替代形式、利巴韋林或其類似物(例如，他立韋林(tarabavarin)、左旋韋林(levoviron))、微小RNA、小干擾RNA化合物(例如，SIRPLEX-140-N及諸如此類)、核苷酸或核苷類似物、免疫球蛋白、肝保護劑、抗發炎劑及其他NS5A抑制劑。HCV生命週期中其他靶標之抑制劑包括NS3解旋酶抑制劑；NS4A輔因子抑制劑；反義寡核苷酸抑制劑，例如ISIS-14803、AVI-4065及諸如此類；載體編碼之短髮夾RNA (shRNA)；HCV特異性核酶，例如庚酶(heptazyme)、RPI、13919及諸如此類；進入抑制劑，例如HepeX-C、HuMax-HepC及諸如此類；α葡萄糖苷酶抑制劑，例如西戈斯韋(celgosivir)、UT-231B及諸如此類；KPE-02003002及BIVN 401以及IMPDH抑制劑。其他說明性HCV抑制劑化合物包括以下公開案中所揭示之彼等：美國專利第5,807,876號；第6,498,178號；第6,344,465號；及第6,054,472號；PCT專利申請公開案第WO97/40028號；第WO98/40381號；第WO00/56331號、第WO02/04425號；第WO03/007945號；第WO03/010141號；第WO03/000254號；第WO01/32153號；第WO00/06529號；第WO00/18231號；第WO00/10573號；第WO00/13708號；第WO01/85172號；第WO03/037893號；第WO03/037894號；第WO03/037895號；第WO02/100851號；第WO02/100846號；第WO99/01582號；第WO00/09543號；第WO02/18369號；第WO98/17679號、第WO00/056331號；第WO98/22496號；第WO99/07734號；第WO05/073216號、第WO05/073195號及第WO08/021927號。

另外，舉例而言，利巴韋林與干擾素之組合可作為與本發明化合物中之至少一者之多重組合療法投與。本發明並不限於上文所提及之類別或化合物且涵蓋已知及新穎之化合物及生物活性劑之組合。本發明之組合療法意欲包括本發明組之化合物與本發明組之其他化合物或本發明組外之其他化合物之任何化學上相容之組合，只要該組合不消除本發明組之化合物之抗病毒活性或醫藥組合物自身之抗病毒活性即可。

組合療法可為依序的，亦即首先用一種藥劑治療且然後用第二藥劑治療(例如，其中每一治療包含本發明之不同化合物或其中一種治療包含本發明之化合物且另一者包含一或多種生物活性劑)或其可為同時(並行)利用兩種藥劑之治療。依序療法可在完成第一療法之後在開始第二療法之前包括合理時間。同時利用兩種藥劑之治療可以相同日劑量或以分開劑量。組合療法不需限於兩種藥劑且可包括三種或更多種藥劑。並行及依序組合療法二者之劑量均將端視組合療法之組分之吸收、分佈、代謝及排泄速率以及熟習此項技術者已知之其他因素而定。劑量值亦將隨欲緩和之病況之嚴重程度而變化。應進一步理解，對於任一特定個體而言，具體劑量方案及時間表應根據個體需要及投與或監督組合療法之投與之熟習此項技術者之判斷隨時間進行調整。

本申請案提供用於治療C型肝炎病毒(HCV)感染之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之本發明化合物中之任一者之化合物。

本申請案提供上述方法，其進一步包含投與免疫系統調節劑或抑制HCV複製之抗病毒劑或其組合。

本申請案提供上述方法，其中免疫系統調節劑係干擾素或化學衍生化之干擾素。

本申請案提供上述方法，其中抗病毒劑係選自由以下組成之群：HCV蛋白酶抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、HCV解旋酶抑制劑、HCV引發煤抑制劑、HCV融合抑制劑及其組合。

應理解，本文對治療之提及延伸至預防以及對現存病況之治療，且動物之治療包括人類以及其他哺乳動物之治療。此外，如本文所使用，C型肝炎病毒(HCV)感染之治療亦包括與C型肝炎病毒(HCV)感染相關或由C型肝炎病毒(HCV)感染介導之疾病或病況或其臨床症狀之治療或預防。
劑量及投與

如生物實例之下表A所示，式I化合物具有有效作為用於治療人類之HCV感染之抗病毒藥物的潛力，或代謝成展現此活性之化合物。

活性化合物或其前藥衍生物或鹽可與另一抗病毒劑(例如抗肝炎劑)組合投與，包括式I之彼等。當活性化合物或其衍生物或鹽與另一抗病毒劑組合投與時，活性可較母體化合物增加。此可藉由製備衍生物且根據本文所闡述之方法測試其抗HCV活性容易地進行評價。

活性化合物之投與可在連續(靜脈內滴注)至每天若干次經口投與(例如，Q.I.D)範圍內且可包括經口、局部非經腸、肌內、靜脈內、皮下、經皮(其可包括滲透增強劑)、經頰及栓劑投與以及其他投與途徑。

本文所揭示之化合物以及其醫藥上可用之鹽可用作呈任何醫藥調配物形式之藥劑。醫藥調配物可經口(例如以錠劑、包衣錠劑、糖衣藥丸、硬質及軟質明膠膠囊、溶液、乳液、糖漿或懸浮液形式)或經直腸(例如以栓劑形式)來經腸投與。其亦可非經腸(肌內、靜脈內、皮下或胸骨內注射或輸注技術) (例如以注射溶液形式)、經鼻(例如以鼻噴霧或吸入噴霧形式)、局部等投與。

對於醫藥製劑之製造，本文所揭示之化合物以及其醫藥上可用之鹽可與治療惰性之無機或有機賦形劑一起調配以用於產生錠劑、包衣錠劑、糖衣藥丸、硬質及軟質明膠膠囊、溶液、乳液或懸浮液。

本文所揭示之化合物可與醫藥上可接受之載劑混合調配。舉例而言，本發明之化合物可作為藥理上可接受之鹽經口投與。由於本發明之化合物大部分具有水溶性，故其可在生理鹽水溶液(例如，緩衝至pH約7.2至7.5)中靜脈內投與。出於此目的可使用習用緩衝劑，例如磷酸鹽、碳酸氫鹽或檸檬酸鹽。當然，熟習此項技術者可在本說明書之教示內修改該等調配物以在不使本發明之組合物不穩定或損害其治療活性之情形下提供多種用於特定投與途徑之調配物。具體而言，可(例如)藉由微小改質(鹽調配、酯化等)來容易地將本發明化合物加以改質以使其更易溶於水或其他媒劑中，此為熟習此項技術者所熟知。熟習此項技術者亦熟知，可對特定化合物之投與途徑及劑量方案加以修改以管控本發明化合物之藥物動力學從而在患者中獲得最大有益效應。

對於非經腸調配物，載劑通常將包含無菌水或氯化鈉水溶液，但可包括其他成分，包括有助於分散之彼等。當然，倘若欲使用無菌水且維持為無菌，則亦應對組合物及載劑進行滅菌。亦可製備可注射懸浮液，在該情形下可採用適當的液體載劑、懸浮劑及諸如此類。

用於錠劑、包衣錠劑、糖衣藥丸及硬質明膠膠囊之適宜賦形劑係(例如)乳糖、玉米澱粉及其衍生物、滑石及硬脂酸或其鹽。若期望，錠劑或膠囊可腸溶包衣或藉由標準技術持續釋放。用於軟質明膠膠囊之適宜賦形劑係(例如)植物油、蠟、脂肪、半固體及液體多元醇。用於注射溶液之適宜賦形劑係(例如)水、鹽水、醇、多元醇、甘油或植物油。用於栓劑之適宜賦形劑係(例如)天然及硬化油、蠟、脂肪、半液體或液體多元醇。用於經腸使用之溶液及糖漿之適宜賦形劑係(例如)水、多元醇、蔗糖、轉化糖及葡萄糖。

本發明之醫藥製劑亦可作為持續釋放調配物或其他適當調配物來提供。

醫藥製劑亦可含有防腐劑、增溶劑、穩定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、用於調整滲透壓之鹽、緩衝劑、掩蔽劑或抗氧化劑。醫藥製劑亦可含有業內已知之其他治療活性劑。

劑量可在寬限值內變化，且當然在每一特定情形下將調整至適合個體需要。對於經口投與而言，在單一療法及/或組合療法中，介於約0.01 mg/kg體重/天與約100 mg/kg體重/天之間的日劑量應係適當的。較佳之日劑量係介於約0.1 mg/kg體重/天與約500 mg/kg體重/天之間，更佳介於0.1 mg/kg體重/天與約100 mg/kg體重/天之間且最佳介於1.0 mg/kg體重/天與約100 mg/kg體重/天之間。典型製劑將含有約5%至約95%之活性化合物(w/w)。日劑量可作為單劑量投與或以分開劑量(通常每天1至5個劑量)投與。

在某些醫藥劑型中，化合物之前藥形式(尤其包括醯基化(乙醯化或其他)衍生物、吡啶酯及本發明化合物之各種鹽形式)較佳。熟習此項技術者應認識到如何容易地將本發明化合物改質成前藥形式以有促進活性化合物遞送至宿主生物體或患者內之靶位點。熟習此項技術者亦應利用前藥形式之有利藥物動力學參數(若適用)以將本發明化合物遞送至宿主生物體或患者內之靶向位點以使化合物之預期效應最大化。
一般合成

本發明之化合物可藉由下文實例部分中所闡述之說明性合成反應中所繪示之多種方法製得。

製備該等化合物所用之起始材料及試劑通常可自商業供應商(例如Aldrich Chemical Co.)獲得，或藉由熟習此項技術者已知之方法遵循諸如以下等參考文獻中所述之程序來製備：Fieser及Fieser，Reagents for Organic Synthesis ; Wiley & Sons: New York, 1991, 第1-15卷；Rodd，Chemistry of Carbon Compounds , Elsevier Science Publishers, 1989, 第1-5卷及增刊；及Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, 第1-40卷。應瞭解，實例部分中所示之合成反應方案僅說明可合成本發明化合物之一些方法，且可對該等合成反應方案作出各種修改且將建議熟習此項技術者參考本申請案中所含之揭示內容。

合成反應方案之起始材料及中間體可使用習用技術(包括(但不限於)過濾、蒸餾、結晶、層析及諸如此類)來分離並純化(若期望)。此等材料可使用習用方式(包括物理常數及光譜數據)予以表徵。

除非作出相反指定，否則本文所闡述之反應通常係在惰性氣氛下在大氣壓下於約-78℃至約150℃、通常約0℃至約125℃範圍之反應溫度下且更通常且便捷地於約室溫(或環境溫度，例如約20℃)下進行。

本發明之化合物上之各個取代基可存在於起始化合物中，藉由已知之取代方法或轉化反應添加至中間體中之任一者或在形成最終產物後添加。若取代基自身具有反應性，則取代基自身可根據業內已知之技術經保護。業內已知且可採用多種保護基團。許多可能基團之實例可參見Green等人，「Protective Groups in Organic Synthesis 」，John Wiley and Sons, 1999。舉例而言，硝基可藉由硝化添加且硝基可轉化成其他基團，例如藉由還原轉化成胺基，及藉由重氮化胺基並用鹵素替代重氮基轉化成鹵素。醯基可藉由夫裡德耳-誇夫特(Friedel-Crafts)醯化添加。然後可藉由各種方法(包括沃夫-開歇納(Wolff-Kishner)還原及克萊門森(Clemmenson)還原)將醯基轉變成相應烷基。胺基可經烷基化以形成單烷基胺基及二烷基胺基；且巰基及羥基可經烷基化以形成相應醚。可藉由業內已知之氧化劑氧化一級醇以形成羧酸或醛，且可氧化二級醇以形成酮。因此，可採用取代或交替反應以貫穿起始材料、中間體或最終產物(包括經分離產物)之分子提供多種取代基。
式 II 化合物之合成：

式II化合物可如下文方案1至4中所圖示說明及闡述來製備。
方案 1
1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮之合成

起始材料1 可根據Sofia, M. J.等人，J. Med. Chem. (2010 ), 53(19),7202-7218及Clark, J. L.等人，J. Med. Chem. (2005 ), 48(17),5504-5508所闡述之程序來製備。使1 碘化，之後在鹼性條件下消除碘化物可產生中間體2 。利用苯甲醯基保護2 中之3’-羥基，之後進行關鍵立體特異性氟化反應可獲得中間體3 。在4’ α位置處安裝氟化物之類似轉變先前已由Ajmera, S.等人，J. Med. Chem. (1988 ), 31(6),1094-1098及Moffatt, J.G.等人，J. Am. Chem. Soc. (1971 ), 93(17), 4323-4324予以闡述。利用苯甲酸鈉置換3 中之5’碘化物，之後去保護3’, 5’苯甲醯基獲得核苷中間體4 。
方案 2
1-((2R,3R,4S,5S)-5-氟-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮之合成

保護、碘化且然後在鹼性條件下消除碘提供中間體7 。在4’-位置處使7 氟化可如Ajmera, S.等人，J. Med. Chem. (1988 ), 31(6),1094-1098及Moffatt, J.G.等人，J. Am. Chem. Soc. (1971 ), 93(17), 4323-4324中所闡述來進行。利用苯甲酸鈉置換5’碘化物8 應得到中間體9 。遵循Hayakawa, H等人，Chem. Pharm. Bull. , (1987 ), 35(6), 2605-2608所闡述之類似方法，去保護，之後利用1,3-二氯-1,1,3,3-四異丙基二矽氧烷(DIPSCl)選擇性保護3’-羥基及5’-羥基，之後在戴斯-馬丁(Dess-Martin)條件下氧化可獲得酮11 。在標準條件下去保護以去除矽基保護基團應產生期望產物12 。
方案 3
式II化合物之合成，其中鹼基係尿嘧啶，X係O或S，R係-OAr (其中Ar係苯基或萘基)且R’係NHCH(CH₃ )C(=O)O-異丙基，Y係F且Y’係OH或F

式II之胺基磷酸酯化合物可藉由使核苷4 或12 與類型13 之經適宜取代之磷醯氯酯或其硫類似物在強鹼存在下縮合來製備。式II之偶合產物16 係最初在偶合反應下以兩種非鏡像異構物之混合物形式獲得且可藉由手性管柱、手性HPLC或手性SFC層析分離成其相應手性鏡像異構物。
方案 4
式II化合物之合成，其中鹼基係尿嘧啶，X係O或S，R及R’係NHCH(CH₃ )C(=O)O-異丙基，Y係F且Y’係OH或F

本發明中之式II之磷醯二胺化合物可藉由使核苷4 或12 與類型17 之經適宜取代之二胺基磷醯氯或二胺基硫代膦醯氯(phosphorodiamidothioic chloride)在強鹼存在下縮合來製備。
式(I)化合物可藉由上文方案1-4中所揭示之方法利用業內已知之方法及下文實例來製備。
實例

提供以下該等實例及製備方法以使熟習此項技術者能夠更清楚地理解並實踐本發明。其不應視為限制本發明之範圍，而僅用於說明及代表本發明。

本申請案中所使用之縮寫包括：乙醯基(Ac)，乙酸(HOAc)，偶氮-雙- 異丁腈(AIBN)，1-N-羥基苯并三唑(HOBt)，氣氛(Atm)，高壓液相層析(HPLC)，9-硼二環[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)，甲基(Me)，第三丁氧基羰基(Boc)，乙腈(MeCN)，焦碳酸二-第三丁基酯或boc酸酐(BOC₂ O)，1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)，苯甲醯基(Bz)，苄基(Bn)，間氯過氧苯甲酸(MCPBA)，丁基(Bu)，甲醇(MeOH)，苄基氧基羰基(cbz或Z)，熔點(mp)，羰基二咪唑(CDI)，MeSO₂ - (甲磺醯基或Ms)，1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷(DABCO)，質譜(ms)，三氟二乙基胺基硫(DAST)，甲基第三丁基醚(MTBE)，二亞苄基丙酮(Dba)，N-羧基酸酐(NCA)，1,5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，N-溴琥珀醯亞胺(NBS)，1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)，N-甲基嗎啉(NMM)，N-甲基吡咯啶酮(NMP)，1,2-二氯乙烷(DCE)，氯鉻酸吡啶鎓鹽(PCC)，N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)，重鉻酸吡啶鎓鹽(PDC)，二氯甲烷(DCM)，丙基(Pr)，偶氮二甲酸二乙基酯(DEAD)，苯基(Ph)，偶氮二甲酸二-異丙基酯DIAD，磅/平方英吋(psi)，二-異丙基乙胺(DIPEA)，吡啶(pyr)，二-異丁基氫化鋁DIBAL-H，室溫rt或RT，N,N-二甲基乙醯胺(DMA)，第三丁基二甲基矽基或t -BuMe₂ Si (TBDMS)，4-N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)，三乙胺(Et₃ N或TEA)，N,N-二甲基甲醯胺(DMF)，三氟甲磺酸酯或CF₃ SO₂ -(Tf)，二甲基亞碸(DMSO)，三氟乙酸(TFA)，1,1'-雙- (二苯基膦基)乙烷(dppe)，2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)，1,1'-雙- (二苯基膦基)二茂鐵(dppf)，薄層層析(TLC)，乙酸乙酯(EtOAc)，四氫呋喃(THF)，二乙醚(Et₂ O)，三甲基矽基或Me₃ Si (TMS)，乙基(Et)，對甲苯磺酸單水合物(TsOH或pTsOH)，六甲基二矽氮烷鋰(LiHMDS)，4-Me-C₆ H₄ SO₂ -或甲苯磺醯基(Ts)，異丙基(i -Pr)，N-胺基甲酸酯-N-羧基酸酐(UNCA)，乙醇(EtOH)。包括前綴正(n)、異(i-)、第二(sec-)、第三(tert-)及新(neo)之習用命名當與烷基部分一起使用時具有其習用含義。(J. Rigaudy及D. P. Klesney，Nomenclature in Organic Chemistry ，IUPAC1979 Pergamon Press, Oxford.)。
合成實例

給出式I化合物及中間體(參考物)之以下製備以使熟習此項技術者能夠更清晰地理解並實踐本揭示內容。不應將其視為限制本揭示內容之範圍，而僅用於說明及代表本揭示內容。

除非另有註明，否則所有反應均係使用市售材料及試劑不經進一步純化來進行。所有反應均係藉由矽膠板(Keiselgel 60 F254, Merck)上之薄層層析(TLC)及/或超高效液相層析(UPLC)來監測。藉由UV光且藉由於過錳酸鉀中使TLC板染色並用熱槍炭化達成TLC板上斑點之可視化。在具有Acquity PDA檢測器、QDA質量檢測器及二元溶劑系統之Waters Acquity UPLC儀器上記錄UPLC 1。在具有Acquity PDA檢測器、QDA質量檢測器及四元溶劑系統之Waters Acquity UPLC HClass儀器上記錄UPLC 2。使用於乙腈中之0.1%甲酸及於水中之0.1%甲酸之不同梯度在CSH C18管柱(2.1 × 50 mm 1.7 µm)上以0.8 mL/min運行UPLC 1酸性方法。使用乙腈、水及於水中之2%甲酸之不同梯度在CSH C18管柱(2.1 × 50 mm 1.7 µm)上以0.8 mL/min運行UPLC 2酸性方法。使用乙腈及利用氨水溶液調整至pH 10之10 mM NH₄ HCO₃ 之不同梯度在XB C18管柱(2.1 × 50 mm 2.5 µm)或XB C8管柱(2.1 × 50 mm 2.5 µm)上以0.8 mL/min運行鹼性方法。所有產物均藉由¹ H NMR及(若適當)¹³ C、³¹ P及¹⁹ F NMR予以表徵。NMR光譜數據記錄在JEOL ECX300 MHz或JEOL ECX400 MHz光譜儀上。化學位移係以百萬分率值(ppm)表示且指定為s (單峰)；br s (寬單峰)；d (雙峰)；t (三重峰)；q (四重峰)；quint (五重峰)或m (多重峰)。急速管柱層析係在矽膠上使用40-63微米Fluorochem矽膠LC60A及試劑級庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷及甲醇作為溶析液來實施。使用具有PDA檢測器及3100質量檢測器之Waters自動純化系統利用X-Bridge C18管柱(19 × 150 mm)或XSelect C18管柱(19 × 150 mm)以20 mL/min來進行質量定向製備型HPLC。
參考物 1
4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25之合成

步驟1 ：1-[(2R,3R,4R)-3- 氟-4- 羥基-3- 甲基-5- 亞甲基氧雜環戊-2- 基]-1,2,3,4- 四氫嘧啶-2,4- 二酮2 之製備

步驟(i)：在1 h之時期期間向1-[(2R,3R,4R,5S)-3-氟-4-羥基-3-甲基氧雜環戊-2-基]-1,2,3,4-四氫嘧啶-2,4-二酮1 (2602 g, 10.00 mol, 1 eq)、PPh₃ (3410 g, 13.00 mol, 1.30 eq)及咪唑(885.0g, 13.00mol, 1.30 eq)於THF (25 L)中之攪拌溶液分多次添加碘(2665 g, 10.50 mol, 1.05 eq)，同時保持內部溫度介於10℃-20℃之間。使攪拌的反應混合物升溫至環境溫度持續20 h。將懸浮液過濾並將濾液濃縮，從而產生呈淺黃色油狀物之粗產物。將殘餘物懸浮於甲醇(8.0 L)中，收集固體並用石油醚(8 L)洗滌，乾燥，從而產生3430 g呈白色固體之1-[(2R,3R,4R,5S)-3-氟-4-羥基-5-(碘甲基)-3-甲基氧雜環戊-2-基]-1,2,3,4-四氫嘧啶-2,4-二酮(92.67%)。¹ H NMR (DMSO-d6,400MHz) δ_H 11.52 (s,1H), 7.61-7.63 (d, 1H), 5.91-6.05 (m, 2H), 5.675.69 (d, J = 20 HZ, 1H), 4.06-4.10 (m, 1H), 3.77-3.80 (m, 1H), 3.49-3.65 (m, 3H), 1.21-1.27 (d, 3H)。

步驟(ii)：向1-[(2R,3R,4R,5S)-3-氟-4-羥基-5-(碘甲基)-3-甲基氧雜環戊-2-基]-1,2,3,4-四氫嘧啶-2,4-二酮(5000 g, 13.509 mol, 1.0 eq)於甲醇(25.0 L)中之溶液添加甲醇鈉(30%於甲醇中，6080 g, 33.77 mol, 2.5 eq)。將反應混合物在60℃下攪拌5 h且然後冷卻至10℃。將懸浮液過濾並將濾液濃縮，從而產生呈棕黃色固體之粗產物，其不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

將粗製殘餘物溶解於乙腈(25.0 L)中，且添加乙酸酐(2758 g, 27.018 mol, 2.00 eq)。將反應混合物在65℃下攪拌15 h。基於LC-MS，添加額外量之乙酸酐(276.0 g, 2.70 mol, 0.2 eq)。12 h後，將反應混合物在減壓下濃縮以去除乙腈(15.0 L)。將殘餘物冷卻至10℃並過濾。用最少量之乙腈及H₂ O洗滌濾餅，直至濾液之pH為7為止，然後將其在真空中乾燥，從而產生2461 g (64.1%)呈白色固體之乙酸(3R,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫嘧啶-1-基)-4-氟-4-甲基-2-亞甲基氧雜環戊-3-基酯。

向乙酸(3R,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫嘧啶-1-基)-4-氟-4-甲基-2-亞甲基氧雜環戊-3-基酯(2461 g, 8.662 mol, 1.0 eq)於甲醇(12.30 L)中之溶液添加甲醇鈉(30%於甲醇中，77.97 g, 0.433 mol, 0.05 eq)。將反應混合物在50℃下攪拌15 h。基於HPLC，添加額外量之甲醇鈉(30%於甲醇中，77.97 g, 0.433 mol, 0.05 eq)。再過8 h後，反應完成且然後冷卻至5℃。在5℃下攪拌12 h後，藉由過濾收集沈澱產物，用最少量之甲醇洗滌濾餅，在真空中乾燥，從而產生1856 g (88.4%)呈灰白色固體之1-[(2R,3R,4R)-3-氟-4-羥基-3-甲基-5-亞甲基氧雜環戊-2-基]-1,2,3,4-四氫嘧啶-2,4-二酮2 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ (ppm): 11.56 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.16-6.12 (d, 1H), 5.98 (s, 1H), 5.68-5.66 (s, 1H), 4.63-4.53 (m, 2H), 4.28 (s, 1H), 1.37-1.31 (d, 3H)。

步驟 2 ： 1-((2R ,3R ,4S ,5R )-3,5- 二氟 -4- 羥基 -5-( 碘甲基 )-3- 甲基 - 四氫呋喃 -2- 基 ) 嘧啶 -2,4(1H ,3H )- 二酮 21 之製備

向1-[(2R,3R,4R)-3-氟-4-羥基-3-甲基-5-亞甲基氧雜環戊-2-基]-1,2,3,4-四氫嘧啶-2,4-二酮2 (1855 g, 7.66 mol, 1.0 eq)及TEA.3HF (1976 g, 12.254 mol, 1.6 eq)於DCM (37 L)中之溶液添加N-碘琥珀醯亞胺(3274 g, 14.552 mol, 1.9 eq)。將反應混合物在25℃下攪拌24 h。然後添加10% NaHSO₃ 水溶液(13 L)並將混合物攪拌2 h。藉由過濾收集沈澱產物。將濾餅與另一批合併(以1555 g 0001289-015-01開始)。用最少量之DCM、5% NaHCO₃ 水溶液(直至濾液之pH為7-8為止)及H₂ O洗滌合併之固體，在真空中乾燥，從而產生5060 g (92.6%)呈淺黃色固體之粗產物。將粗產物(2500 g)於甲醇(37.5 L)中之混合物加熱至回流持續2 h且然後冷卻至5℃。在5℃下攪拌2 h後，藉由過濾收集沈澱產物，用最少量之甲醇洗滌濾餅，乾燥，從而產生1970 g (78.8%)呈淺黃色固體之1-((2R ,3R ,4S ,5R )-3,5-二氟-4-羥基-5-(碘甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H ,3H )-二酮21 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ_H 11.63 (s, 1H), 7.81-7.51 (m, 1H), 6.31-5.95 (m, 2H), 5.73-5.71 (d, 1H), 4.56-3.78 (m, 3H), 1.30-1.25 (m, 3H)。

步驟3：異丁酸(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-2-(碘甲基)-4-甲基四氫呋喃-3-基酯22之製備

在環境溫度下向1-((2R ,3R ,4S ,5R )-3,5-二氟-4-羥基-5-(碘甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H ,3H )-二酮21 (400 g, 1.03 mol, 1 eq.)於EtOAc (2 L)中之攪拌懸浮液添加4-二甲基胺基吡啶(6.30 mg, 51.5 mmol, 5 mol%)及三乙胺(172 mL, 1.24 mol)。將所得懸浮液冷卻至0℃且在40 min期間逐滴添加異丁醯氯(130 mL, 1.24 mol, 1.2 eq.)，從而維持溫度＜10℃。將反應混合物在環境溫度下攪拌3 h。將水(1 L)及EtOAc (300 mL)添加至反應混合物，並分離各相。隨後用EtOAc (2 L)萃取水層。將有機層合併，經MgSO₄ 及SiO₂ 乾燥並過濾。用EtOAc (300 mL)洗滌濾餅且將濾液在真空中在40℃下濃縮，從而產生呈白色固體之異丁酸(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-2-(碘甲基)-4-甲基四氫呋喃-3-基酯22 (461 g，98%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 8.59 (br s, 1H), 7.30 (br d, 1H), 5.83 (dd, 1H), 3.71-3.38 (m, 2H), 2.77 (sept, 1H), 1.45 (d, 3H), 1.26 (d, 3H)。ES⁺ m/z 459 MH⁺

步驟 4 ： 3- 氯苯甲酸 ((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(2,4- 二側氧基 -3,4- 二氫嘧啶 -1(2H )- 基 )-2,4- 二氟 -3-( 異丁醯基氧基 )-4- 甲基四氫呋喃 -2- 基 ) 甲基酯 23 之製備

在0℃下向異丁酸(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-2-(碘甲基)-4-甲基四氫呋喃-3-基酯22 (461 g, 1.01 mol, 1 eq.)及3-氯苯甲酸(173 g, 1.11 mol, 1.1 eq.)、磷酸氫二鉀(364 g, 2.09 mol, 2.08 eq.)及硫酸四正丁基銨(345 g, 1.02 mol, 1.07 eq.)於EtOAc (3.5 L)及水(900 mL)中之攪拌混合物在20 min期間逐份添加3-氯過氧苯甲酸(966 g, 3.92 mol, 3.9 eq., 70% w/w)。將混合物升溫至18℃並攪拌16 h。將混合物冷卻至0℃，之後在30 min期間逐滴添加Na₂ SO₃ (2.4 L，10%水溶液)，從而使得內部溫度保持＜5℃。分離各相，且用Na₂ SO₃ (2 × 2 L，10%水溶液)、NaHCO₃ (4 × 2 L，飽和水溶液)、鹽水(2 L)洗滌有機相並經MgSO₄ 及SiO₂ 乾燥且過濾。將濾液在真空中在40℃下濃縮，從而產生膠狀物。將材料溶解於EtOAc (1.2 L)中。將NaHCO₃ (800 mL，飽和水溶液)添加至反應混合物並攪拌24 h。然後將有機相分離，且用NaHCO₃ (飽和水溶液)、鹽水洗滌，經MgSO₄ 乾燥並在真空中在40℃下濃縮，從而產生橙色膠狀物。將材料再溶解於EtOAc中並添加SiO₂ 。將混合物攪拌15 min，且然後經由SiO₂ 墊過濾。用EtOAc洗滌濾餅並在真空中在40℃下濃縮，從而產生呈橙色膠狀物之3-氯苯甲酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基-四氫呋喃-2-基)甲基酯23 (426 g，87%產率)。
¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 8.96 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.43 (t, 1H), 7.20 (d, 1H), 5.67 (m, 1H), 4.61 (dq, 2H), 2.74 (sept, 1H), 1.44 (d, 3H), 1.25 (d, 3H)。ES^- m/z 485 M-H

步驟 5 ： 3-氯苯甲酸((2S,3S,4R,5R)-2,4-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基-5-(2-側氧基-4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)嘧啶-1(2H)-基)四氫呋喃-2-基)甲基酯24之製備

在環境溫度下向3-氯苯甲酸((2S,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯23 (1.02 g, 210 mmol, 1 eq.)及三唑(144 g, 2.10 mol, 10 eq.)於CH₂ Cl₂ (1 L)中之攪拌混合物添加Et₃ N (291 mL, 2.10 mol, 10 eq.)。將所得混合物冷卻至0℃，且逐滴添加氧氯化磷(V)(49.0 mL, 524 mmol, 2.5 eq.)，從而維持溫度＜10℃。將混合物在0℃下攪拌3 h。將該混合物添加至水並萃取至CH₂ Cl₂ 中。將有機相合併，經MgSO₄ 乾燥，過濾並將溶劑在真空中在40℃下濃縮，從而產生呈橙色油狀物之3-氯苯甲酸((2S,3S,4R,5R)-2,4-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基-5-(2-側氧基-4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)嘧啶-1(2H)-基)四氫-呋喃-2-基)甲基酯24 (118 g，定量)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 9.25 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.01-7.80 (m, 3H), 7.62 (d, 1H), 7.64 (t, 1H), 4.68 (m, 1H), 2.76 (m, 1H), 1.45 (br d, 3H), 1.30-1.15 (m, 6H)。ES⁺ m/z 538 MH⁺

步驟6：4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25之製備

在環境溫度下向3-氯苯甲酸((2S,3S,4R,5R)-2,4-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基-5-(2-側氧基-4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)嘧啶-1(2H)-基)四氫呋喃-2-基)甲基酯24於THF (1 L)中之攪拌混合物添加NH₃ (200 mL，濃水溶液)。將混合物在環境溫度下攪拌16 h。將該混合物在真空中在40℃下濃縮。向所得漿液添加MeOH (250 mL)及NH₃ (250 mL，7 N於MeOH中)，並將混合物在環境溫度下攪拌2 h。在真空中在40℃下濃縮該混合物，從而產生橙色膠狀物。添加EtOAc，且將混合物在環境溫度下攪拌16 h。藉由過濾收集所得固體，且用EtOAc(500 mL)及Et₂ O (500 mL)洗滌，從而產生呈灰白色固體之4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (57.0 g，65%產率)。¹ H NMR (MeOD, 300 MHz) δ_H 7.82 (br s, 1H), 6.52 (br d, 1H), 5.89 (d, 1H), 4.07 (br t, 1H), 1.30 (d, 1H)。
參考物 2
1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基-四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮4 之合成

向3-氯苯甲酸((2S,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-2,-二氟-3-(異丁醯基氧基)-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯23 (238 g, 489 mmol)於MeOH (100 mL)中之溶液添加NH₃ (1 L，7 N於MeOH中)。將混合物在環境溫度下攪拌16 h。在真空中濃縮該混合物。將所得油狀物於CH₂ Cl₂ (200 mL)中攪拌1 h，且藉由過濾收集所得固體，用Et₂ O洗滌並在真空中在50℃下乾燥48 h。獲得呈灰白色固體之1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮4 (102 g，75%產率)。¹ H NMR (MeOD, 300 MHz) δ_H 7.80 (d, 1H), 6.45 (br d, 1H), 5.71 (d, 1H), 4.15 (br m, 1H), 3.77 (m, 2H), 1.37 (d, 1H)。¹⁹ F NMR (MeOD, 283 MHz) δ_F -135 (m, 1F), -159 (m, 1F)。ES⁺ m/z 279 MH⁺
實例 1
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯I-1 之合成

步驟1 ：二氯磷酸萘-1- 基酯26 之製備

在氬下在-78℃下向氧氯化磷(V)(30.1 mL, 327 mmol, 1 eq.)於二乙醚(500 mL)中之攪拌溶液添加1-萘酚(47.1 g, 327 mmol, 1 eq.)。經2 h逐滴添加三乙胺(45.0 mL, 327 mmol, 1 eq.)，從而維持溫度＜-60℃。經2 h使反應混合物升溫至環境溫度，然後攪拌16 h。經由矽藻土過濾該混合物，並用二乙醚洗滌濾餅，從而產生無色溶液。將濾液在減壓下(蒸餾溫度25℃)濃縮，從而產生呈黃色油狀物之二氯磷酸萘-1-基酯26 (78.2 g，92%產率)。³¹ P NMR (CDCl₃ , 161 MHz) δ_p 4.44 (s)。

步驟2 ：((R)-( 萘-1- 基氧基)( 全氟苯氧基) 磷醯基)-L- 丙胺酸異丙基酯27 之製備

在氬下在-78℃下向二氯磷酸萘-1-基酯26 (78.2g, 299 mmol, 1 eq.)及異丙基-L-丙胺酸(41.9 g, 299 mmol, 1 eq.)於二氯甲烷中之攪拌溶液逐滴添加三乙胺(43 mL, 589 mmol, 2 eq.)，從而維持溫度＜-70℃。將反應混合物在-78℃下攪拌30 min，然後在0℃下攪拌30 min。

將五氟苯酚(66.0 g, 359 mmol, 1.2 eq.)及三乙胺(43 mL, 589 mmol, 2 eq.)於二氯甲烷(100 mL)中攪拌，且將此混合物逐滴添加至本體反應混合物。1 h後，將反應混合物在減壓下濃縮，從而產生白色固體。將該固體懸浮於乙酸乙酯/庚烷(1:1, 300 mL)中並添加二氧化矽。將混合物攪拌5 min，然後過濾。用乙酸乙酯/庚烷(1:1, 200 mL)洗滌濾餅。將濾液在減壓下濃縮。將所得殘餘物懸浮於1:4乙酸乙酯:庚烷(500 mL)中，並在環境溫度下攪拌16 h。藉由過濾收集沈澱物，從而產生呈白色固體之((R)-(萘-1-基氧基)-(全氟苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯26 (49.2 g, 32%, ＞99:1d.r. )。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz):8.10-8.13 (m, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.51-7.61 (m, 3H), 7.42 (t, 1H), 4.95-5.03 (m, 1H), 4.14-4.27 (m, 1H), 3.98-4.06 (m, 1H), 1.42 (q, 3H), 1.18-1.25 (m, 6H)。³¹ P NMR (CDCl₃ , 122 MHz):- 0.05 (s)。¹⁹ F NMR (CDCl₃ , 238 MHz):- 152.54 - -153.40 (d, 1F), -158.86 - -159.61 (t, 1F), -161.62 - -162.30 (t, 1F)

步驟 3 ： ((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4- 胺基 -2- 側氧基嘧啶 -1(2H)- 基 )-2,4- 二氟 -3- 羥基 -4- 甲基四氫呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷醯基 )-L- 丙胺酸 異丙基 酯 I-1 之製備

在氬下在-10℃下在30 min期間向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮(13.9 g, 50.1 mmol, 1 eq.)於二甲基甲醯胺(70 mL)中之攪拌溶液逐滴添加第三丁基氯化鎂(1 M於THF中，100 mL, 100 mmol, 2 eq.)，從而維持內部溫度＜10℃。將反應混合物在-5℃下攪拌20 min，且然後添加((R)-(全氟-苯氧基)(萘氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯(37.8 g, 75.1 mmol, 1.5 eq.)。將反應混合物在-5℃下攪拌3 h，且添加至氯化銨(飽和水溶液，200 mL)及2-MeTHF (200 mL)。分離各相並用2-甲基四氫呋喃萃取水相。將有機相合併，且經硫酸鎂乾燥，過濾並將溶劑在減壓下去除。藉由乾式急速層析(二氧化矽，2.5-10%甲醇/二氯甲烷)純化所得油狀物，從而產生橙色油狀物。然後藉由Isolera (120 g ZIP SPHERE，二氧化矽，用5%-7.5%甲醇/二氯甲烷溶析)純化含有產物之流份。將清潔流份溶解於水/乙腈中並冷凍乾燥，從而產生呈灰白色固體之((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-1 (3.16 g)。¹ H NMR (含有D₂ O之DMSO-d₆ ，400 MHz):8.03 (m, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.55-7.52 (m, 2H), 7.43-7.37 (m, 2H), 7.11 (m, 1H), 6.41 (br d, 1H), 5.58-5.50 (m, 1H), 4.77 (sept, 1H), 4.28 (m, 2H), 3.99 (t, 1H), 1.22-1.02 (m, 12H)；¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz):-123 (m, 1F) -154 (m, 1F)；³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz): 4.74 (s)。ES⁺ m/z 597 MH⁺
實例 2
((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-3之合成

在氬下保持在0℃下經30分鐘向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (41 g, 134 mmol, 1.0 eq.)於無水二甲基甲醯胺(410 mL)中之攪拌溶液添加^t BuMgCl (296 mL，於四氫呋喃中之1.0 M溶液，300 mmol, 2.0 eq.)，從而維持內部溫度低於10℃。將所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後添加呈固體之((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯28 (134 g, 300 mmol, 2.0 eq.)。將所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後經1 h升溫至環境溫度。將所得混合物在環境溫度下攪拌30分鐘，然後再冷卻至0℃。用2-甲基四氫呋喃 (400 mL)稀釋反應混合物，且然後藉由添加氯化銨淬滅，然後用水及乙酸乙酯進一步稀釋。添加矽藻土(約75 g)，並將混合物過濾，用水及乙酸乙酯沖洗濾餅。分離各層且用乙酸乙酯萃取水層。用碳酸氫鈉(飽和水溶液)洗滌合併之乙酸乙酯萃取物，並用乙酸乙酯反萃取碳酸氫鈉水溶液。使合併之乙酸乙酯萃取物經硫酸鎂乾燥，過濾並在減壓下濃縮，從而產生棕色油狀物。將該油狀物再溶解於乙酸乙酯中且用碳酸氫鈉(用水將飽和水溶液稀釋至1.0 L)洗滌。用乙酸乙酯反萃取碳酸氫鈉水溶液，且使合併之乙酸乙酯萃取物經硫酸鎂乾燥，過濾並在減壓下濃縮，從而產生呈棕色油狀物之粗產物(113 g)。藉由重複乾式急速管柱層析在二氧化矽上利用乙酸乙酯-甲醇(0-15%)、然後二氯甲烷-甲醇(0-10%)混合物純化粗製物，從而產生灰白色泡沫狀物，將其自水-乙腈(35%)冷凍乾燥，從而產生呈灰白色非晶形固體及95:5非鏡像異構物混合物之((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-3 (27.3 g)。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz): 7.38-7.27 (br m, 5H), 7.21-7.16 (m, 3H), 6.45 (d, 1H), 6.12 (br s, 2H), 5.70 (d, 1H), 4.83 (七重峰, 1H), 4.24 (br s, 2H), 4.04 (br td, 1H), 3.79 (br s, 1H), 1.20 (d, 3H), 1.17 (d, 3H), 1.11 (d, 6H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz): -120.3及-122.9 (br s 1F), -148.5及-154.7 (br s, 1F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz): 4.22 (s)。ES⁺ 546.97。
實例 3
((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯之合成
I-4

步驟1 ：( 第三丁氧基羰基)-L- 丙胺酸環己基酯30 之製備

向(第三丁氧基羰基)-L-丙胺酸(5 g, 26.4 mmol, 1 eq.)、4-(二甲基胺基)吡啶29 (323 mg, 2.64 mmol, 10 mol%)及Et₃ N (14.7 mL, 106 mmol, 4 eq.)於CH₂ Cl₂ (50 mL)中之攪拌溶液添加N -(3-二甲基胺基丙基)-N ′ -乙基碳二亞胺鹽酸鹽(10.1 g, 52.9 mmol, 2 eq.)。將反應混合物在0℃下攪拌1 h。添加環己醇(3.35 mL, 31.7 mmol, 1.2 eq.)，且將反應混合物在環境溫度下攪拌48 h。將反應混合物在真空中濃縮，從而產生油性固體，將其用Et₂ O及水分配。分離各相且用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌有機相，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生無色油狀物。藉由急速層析(SiO₂ ，用11%-14% EtOAc/庚烷溶析)進行純化產生(第三丁氧基羰基)-L-丙胺酸環己基酯30 (1.76 g，25%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 5.04 (br s, 1H), 4.83-4.76 (m, 1H), 4.27 (br quint, 1H), 1.84 (br s, 2H), 1.72 (br s, 2H), 155-1.23 (m, 6H), 1.37 (d, 3H) 。

步驟 2 ： L- 丙胺酸 環己基 酯 31 之製備

在0℃下向(第三丁氧基羰基)-L-丙胺酸環己基酯30 (1.76 g, 6.49 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (18 mL)中之攪拌溶液添加三氟乙酸(2 mL)。將反應混合物在環境溫度下攪拌2 h，然後使其靜置16 h。將反應混合物添加至NaHCO₃ (70 mL，飽和水溶液)。分離各相，且用CH₂ Cl₂ 萃取水相。將有機相合併且經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生呈黃色油狀物之L-丙胺酸環己基酯31 (1.179 g，100%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 4.77 (m, 1H), 3.51 (m, 1H), 1.83-0.85 (m, 13H)。

步驟 3 ： (( 全氟苯氧基 )( 苯氧基 ) 磷醯基 )-L- 丙胺酸 環己基 酯 32 之製備

在Ar下在-78℃下向二氯磷酸苯基酯(1.23 g, 5.84 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (10 mL)中之溶液添加L-丙胺酸環己基酯31 (1 g, 5.84 mmol)及Et₃ N (0.81 mL, 5.84 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (5mL)中之溶液。將反應混合物在-78℃下攪拌30 min，且然後升溫至環境溫度。將混合物冷卻至0℃，且添加五氟苯酚(1.07 g, 5.84 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (5mL)中之溶液，之後添加Et₃ N (0.81 mL, 5.84 mmol, 1 eq.)。將反應混合物在0℃下攪拌2 h，然後在環境溫度下攪拌16 h。將混合物在真空中濃縮，從而產生白色固體。將該固體懸浮於EtOAc/庚烷(1:1, 100 mL)中且添加SiO₂ (5 g)。將混合物在環境溫度下攪拌5 min，且過濾。用EtOAc/庚烷(1:1, 200 mL)洗滌濾餅。將濾液在真空中濃縮，從而產生白色固體。藉由急速層析(SiO₂ ，用20% EtOAc/庚烷溶析)進行純化，從而產生(( 全氟苯氧基)( 苯氧基) 磷醯基)-L- 丙胺酸環己基酯32 (1.62 g，56%產率)。

步驟4 ：((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4- 胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯I-4之製備

在氬下在0℃下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (284 mg, 1.02 mmol, 1 eq.)於無水THF (6 mL)中之攪拌懸浮液添加^t BuMgCl (1.28 mL, 1.28 mmol, 2 eq., 1 M於THF中)。向反應混合物添加((((R)-1-(環己基氧基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)(全氟苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯(632 mg, 1.28 mmol)，且將反應混合物在0℃下攪拌2 h。將反應混合物添加至NH₄ Cl (10 mL，飽和水溶液)，且萃取至2-MeTHF中。使合併之有機相經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生棕色油狀物。藉由急速層析(SiO₂ ，用10%-15% MeOH/CH₂ Cl₂ 溶析)進行純化產生黃色泡沫狀物，其藉由MDAP (XSelect C18，用30% MeCN/水溶析)進行純化。將含有產物之流份冷凍乾燥，從而產生呈白色固體之((R)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯(R_P )(14 mg, 2%)及((S)-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯，目標I-4 (S_P )，(49 mg, 8%)。

R_P 非鏡像異構物：¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz) δ_H 7.40-7.20 (br m, 3H), 7.19-7.10 (br m, 3H), 6.45 (d, 1H), 6.21-6.10 (br m, 2H), 5.70 (d, 1H), 4.60 (br s, 1H), 4.30-4.20 (br m, 2H), 3.96 (br td, 1H), 3.78 (br q, 1H), 1.68 (s, 2H), 1.60 (br s, 2H), 1.43 (br s, 1H), 1.35-br m, 5H),m 1.19 (d, 3H), 1.18/1.12 (s, 3H, 旋轉異構)；¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F (旋轉異構) -120.1--120.3/-122.4--122.7 (br m, 1F), -148.3--148.6/-154.7--155.0 (br m, 1F)；³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 4.18 (s)。UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=2.101 min, 98.94% ESIposm/z 587 MH⁺

S_P 非鏡像異構物(I-4)：¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz) δ_H 7.40-7.27 (br m, 5H), 7.22-7.10 (br m, 3H), 6.47 (d, 1H), 6.19-6.12 (br m, 2H), 5.71 (d, 1H), 4.61 (br s, 1H), 4.25 (br s, 2H), 4.04 (br td, 1H), 3.87-3.75 (br m, 1H), 1.67 (br s, 2H), 1.61 (br s, 2H), 1.43 (br s, 1H), 1.38-1.25 (br m, 5H), 1.23/1.15 (s, 3H, 旋轉異構) 2.21 (d, 3H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F (旋轉異構) -120.3/-123.0 (s m, 1F), 148.5/-154.5--154.8 (br m, 1F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 4.21 (s)。UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=2.12 min, 99.49% ESIposm/z 587 MH⁺
實例 4
((S/R_P )-(((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯I-5 之合成

步驟1 ：L- 丙胺酸戊-3- 基酯33 之製備

在環境溫度下向3-戊醇(15.2 mL, 140 mmol, 2.5 eq.)及L-丙胺酸(5 g, 56.1 mmol, 1 eq.)之攪拌溶液添加亞硫醯氯(6.1 mL, 84.2 mmol, 1.5 eq.)。將反應混合物加熱至回流持續24 h，然後冷卻至環境溫度。將混合物添加至劇烈攪拌之CH₂ Cl₂ 及NaHCO₃ (飽和水溶液)之混合物。將此混合物攪拌15 min，且然後分離各相。用CH₂ Cl₂ 洗滌水相且將有機相合併，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮。使所得油狀物與甲苯及EtOAc一起共沸，從而產生呈淡棕色油狀物之L-丙胺酸戊-3-基酯33 (905 mg, 10%)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 4.77 (quint, 1H), 3.53 (q, 1H), 1.62-1.52 (m, 4H), 1.34 (d, 1H), 0.87 (t, 6H)。

步驟2 ：(( 全氟苯氧基)( 苯氧基) 磷醯基)-L- 丙胺酸戊-3- 基酯34 之製備

在Ar下在-78℃下向二氯磷酸苯基酯(1.2 g, 5.68 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (4 mL)中之溶液添加L-丙胺酸戊-3-基酯(905 mg, 5.84 mmol)於CH₂ Cl₂ (12 mL)中之溶液。添加Et₃ N (0.79 mL, 5.68 mmol, 1 eq.)。將反應混合物在-78℃下攪拌1 h，且然後升溫至環境溫度。將混合物冷卻至0℃，且添加五氟苯酚(1.05 g, 5.68 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (4 mL)中之溶液，之後添加Et₃ N (1.58 mL, 11.4 mmol, 2 eq.)。將反應混合物在0℃下攪拌15 min，然後在環境溫度下攪拌2 h。將混合物在真空中濃縮，從而產生白色固體。將該固體懸浮於EtOAc/庚烷(1:1, 100 mL)中且添加SiO₂ (5 g)。將混合物在環境溫度下攪拌5 min，並過濾。用EtOAc/庚烷(1:1, 200 mL)洗滌濾餅。將濾液在真空中濃縮，從而產生呈白色固體之((全氟苯氧基)-(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯34 (1.9 g，69%產率) (為非鏡像異構物之1:1混合物)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 7.36 (t, 2H), 7.29-7.19 (m, 3H), 4.81 (六重峰, 1H), 4.24-4.15 (m, 1H), 4.07-3.94 (m, 1H), 1.62-1.55 (m, 4H), 1.48 (d, 1.5H), 1.47 (d, 1.5H), 0.90-0.84 (m, 6H)。³¹ P NMR (CDCl₃ , 122 MHz) δ_p -0.99 (s)。

步驟 3 ： ((((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯I-5之製備

在氬下在0℃下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (265 mg, 0.955 mmol, 1 eq.)於無水THF (6 mL)中之攪拌懸浮液添加^t BuMgCl (1.43 mL, 1.28 mmol, 1.5 eq., 1 M於THF中)。向混合物添加((全氟苯氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯34 (690 mg, 1.43 mmol)，且將反應混合物在0℃下攪拌1.5 h。將反應混合物添加至NH₄ Cl (10 mL，飽和水溶液)，且萃取至EtOAc中。用NaHCO₃ (飽和水溶液)、鹽水洗滌有機相，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生棕色油狀物。藉由MDAP( XSelect C18, MeCN/水)進行純化。將含有產物之流份冷凍乾燥，從而產生呈白色固體之((((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)-(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯I-5 (156 mg，28%產率，差向異構物之混合物)。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz) δ_H 7.43-7.08 (m, 7H), 6.49 (d, 1H), 6.23-6.09 (m, 2H), 5.70 (d, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.24 (m, 2H), 4.03 (t, 1H), 3.80 (m, 1H), 1.54 (m, 3H), 1.30-1.00 (m, 5H), 0.82-0.70 (m, 6H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -120 (m), -122 (m), -123.0 (m), -148 (m), -154 (m)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 4.25 (s)。UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=2.489 min, 19.65% ESIposm/z 587 MH⁺ R_P , RT=2.610 min, 69.11% ESIposm/z 587 MH⁺
實例 5
(2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-異丙氧基-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸異丙基酯I-6 之合成

步驟1 ：((((R)-1-( 異丙基氧基)-1- 側氧基丙-2- 基) 胺基)( 全氟- 苯氧基)- 磷醯基)-L- 丙胺酸異丙基酯35 之製備

在Ar下向冷卻至-78℃之POCl₃ (0.360 mL, 3.81 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (2.5 mL)中之攪拌溶液逐滴添加作為於CH₂ Cl₂ (2.5 mL)中之溶液之L-丙胺酸異丙基酯35 (1.00 g, 7.62 mmol, 2 eq.)，從而維持溫度＜ -60℃。逐滴添加 Et₃ N (1.06 mL, 7.62 mmol, 2 eq.)，從而維持溫度＜ -60℃。將混合物在-78℃下攪拌1 h，然後升溫至0℃並攪拌45 min。將五氟苯酚(700 mg, 3.81 mmol, 1 eq.)及Et₃ N (1.06 mL, 7.62 mmol, 2 eq.)於CH₂ Cl₂ (4 mL)中之預攪拌混合物添加至主反應混合物，並在0℃下攪拌2 h，且然後在環境溫度下攪拌2 h。向混合物添加SiO₂ (約5 g)及EtOAc (50 mL)。將反應混合物攪拌5 min，且然後過濾。用EtOAc (100 mL)洗滌濾餅。將濾液在真空中濃縮，從而產生油性固體。藉由急速層析(SiO2，用33%-50% EtOAc/庚烷溶析)進行純化，從而產生呈白色固體之((((R)-1-(異丙基氧基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-(全氟苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯36 (619 mg，33%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 5.06 (七重峰, 2H), 4.07 (sept, 2H), 3.74 (q, 2H), 1.46 (d, 3H), 1.43 (d, 3H), 1.28 (d, 6H), 1.27 (d, 6H)。³¹ P NMR (CDCl₃ , 162 MHz) δ_p 10.70 (s)。

步驟 2 ： (2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-異丙氧基-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸異丙基酯I-6之製備

在氬下在0℃下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (100 mg, 0.360 mmol, 1 eq.)於無水DMF (3 mL)中之攪拌懸浮液添加^t BuMgCl (0.72 mL, 0.72 mmol, 2 eq., 1 M於THF中)。向混合物添加((全氟苯氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸戊-3-基酯36 (690 mg, 0.72 mmol, 2 eq.)，且將反應混合物在0℃下攪拌1.5 h。用2-MeTHF稀釋該反應混合物且添加至NH₄ Cl (飽和水溶液)及水。將水相萃取至2-MeTHF中。使合併之有機相經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生棕色油狀物。藉由急速層析(SiO₂ ，用10%-15% MeOH/CH₂ Cl₂ 溶析)進行純化產生灰白色泡沫狀物，其藉由MDAP( XSelect C18，用20%-40% MeCN/水溶析)進行純化。將含有產物之流份冷凍乾燥，從而產生呈白色固體之(2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-異丙氧基-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸異丙基酯I-6 (24 mg，11%產率)。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz) δ_H 7.33 (br s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.46 (d, 1H), 6.06 (d, 1H), 5.78 (d, 1H), 4.98 (q, 2H), 4.90-4.80 (m, 2H), 4.04 (br s, 3H), 3.77-3.65 (m, 2H), 1.22 (d, 6H), 1.17-1.13 (m, 5H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -22.3 (t, 1F), -154.9 (sept, 1F)³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 13.6 (s)。UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=1.687 min, 98.54 ESInegm/z 582 [M-H]^-
實例 6
(2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-(環己氧基)-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸環己基酯I-7 之合成

步驟1 ：((((R)-1-( 環己基氧基)-1- 側氧基丙-2- 基) 胺基)( 全氟苯氧基) 磷醯基)-L- 丙胺酸環己基酯37 之製備

在Ar下向冷卻至-78℃之POCl₃ (303 µL, 3.25 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ (2 mL)中之攪拌溶液逐滴添加作為於CH₂ Cl₂ (2 mL)中之溶液之L-丙胺酸環己基酯(1.11 g, 6.49 mmol, 2 eq.)。逐滴添加Et₃ N (0.902 mL, 6.49 mmol, 2 eq.)。將混合物在-78℃下攪拌1 h，然後升溫至0℃並攪拌30 min。將五氟苯酚(657 mg, 3.57 mmol, 1.1 eq.)及Et₃ N (0.902 mL, 6.49 mmol, 2 eq.)於CH₂ Cl₂ (2 mL)中之預攪拌混合物添加至主反應混合物，並在0℃下攪拌2 h。將混合物在真空中濃縮，從而產生白色固體。將該固體懸浮於EtOAc/庚烷(2:3)中且與SiO₂ 一起攪拌。將混合物過濾，且用EtOAc/庚烷(2:3)洗滌濾餅。將濾液在真空中濃縮，從而產生無色油狀物。藉由Isolera (SiO₂ ，80 g ZIP SPHERE柱，用12%-100% EtOAc/庚烷溶析)進行純化產生呈白色固體之((((R)-1-(環己基氧基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)(全氟苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯37 (250 mg, 25%)。¹ H NMR (CDCl₃ , 400 MHz) δ_H 4.86-4.78 (m, 2H), 4.14-4.01 (m, 2H), 3.79-3.69 (m, 2H), 1.85-1.72 (m, 8H), 1.62-1.25 (m, 18H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -154 (d, 2F), -160 (t, 1F), -162 (d, 2F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 10.7 (s)。

步驟 2 ： (2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-(環己氧基)-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸環己基酯I-7之製備

在氬下在0℃下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (168 mg, 0.607 mmol, 1 eq.)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液添加^t BuMgCl (1.28 mL, 0.911 mmol, 2 eq., 1 M於THF中)。將反應混合物在0℃下攪拌15 min，從而產生懸浮液。向此混合物添加((((R)-1-(環己基氧基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)(全氟-苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸環己基酯(502 mg, 0.911 mmol, 1.5 eq.)，且在0℃下攪拌2 h。將混合物添加至NH₄ Cl (30 mL，飽和水溶液)，且萃取至2-MeTHF中。將有機相合併且經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮。藉由MDAP (XSelect C18，用30%-60% MeCN/水溶析)進行純化產生呈白色固體之(2S)-2-[[[(2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基-嘧啶-1-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基-四氫呋喃-2-基]甲氧基-[[(1S)-2-(環己氧基)-1-甲基-2-側氧基-乙基]胺基]磷醯基]胺基]丙酸環己基酯I-7 (58.5 mg，15%產率)。¹ H NMR (含有D₂ O之DMSO-d₆ , 400 MHz) δ_H 7.32 (d, 1H), 6.44 (d, 1H), 5.78 (d, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.03 (m, 3H), 3.72 (m, 2H), 1.86-1.00 (m, 29H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -122 (m, 1F) -155 (m, 1F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 13.6 (s)。UPLC (中性，2-95%, CSH C18) RT=2.377 min, 99.5% ESIposm/z 664 MH⁺
實例 7
磷酸((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯I-8之合成

步驟1 ：磷酸全氟苯基酯二苯基酯39 之製備

在Ar下在0℃下向五氟苯酚(2 g, 10.9 mmol, 1 eq.)及Et₃ N (3.79 mL, 27.2 mmol)於CH₂ Cl₂ 中之攪拌溶液添加氯磷酸二苯基酯38 (2.70 mL, 13.0 mmol, 1.2 eq.)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且然後在環境溫度下攪拌16 h。將反應混合物在真空中濃縮。將所得油狀物懸浮於EtOAc中且用水及鹽水洗滌，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生呈淡棕色油狀物之磷酸全氟苯基酯二苯基酯39 (4.23 g，94%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ_H 7.42-7.35 (m, 5H), 7.32-7.24 (m, 5H)。³¹ P NMR (CDCl₃ , 161 MHz) δ_p -16.4 (s)。UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=2.377 min ESIposm/z 417 MH⁺

步驟2 ：磷酸((2S,3S,4R,5R)-5-(4- 胺基-2- 側氧基嘧啶-1(2H)- 基)-2,4- 二氟-3- 羥基-4- 甲基四氫呋喃-2- 基) 甲基酯二苯基酯I-8 之製備

在環境溫度下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (150 mg, 0.54 mmol, 1 eq.)及磷酸全氟苯基酯二苯基酯(270 mg, 0.65 mmol)於無水MeCN中之攪拌懸浮液添加1-甲基咪唑(0.22 mL, 2.71 mmol, 5 eq.)並攪拌3 h。將反應混合物添加至EtOAc及鹽水。分離各相，並用EtOAc萃取水相。使合併之有機層經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中濃縮，從而產生棕色油狀物。藉由急速層析(SiO₂ ，用10%-15% MeOH/CH₂ Cl₂ 溶析)進行純化，之後藉由MDAP (XSelect C18，用30%-60% MeCN/水溶析)進行純化產生呈白色固體之磷酸((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯I-8 (9.5 mg，3.5%產率)。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 300 MHz) δ_H 7.38/7.23-7.20 (br m, 13H), 6.48/6.27/5.90-5.64 (3H, m), 4.59 (br s, 1H), 4.47/4.06 (br t, 1H), 1.03/1.17 (br d, 3H) (旋轉異構)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 283 MHz) δ_F -120.0/-12.8 (m, 1F), -148.9/-154.1 (m, 1F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p -11.5. UPLC (酸，2-95%, CSH C18) RT=1.43 min, 97.21% ESInegm/z 508 [M-H]^-
實例 8
((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-9之合成

步驟 1 ： ((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-9之製備

在氬下在0℃下向4-胺基-1-((2R ,3R ,4R ,5R )-3-氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H )-酮-甲烷40 (301 mg, 1.77 mmol, 1 eq.)於無水THF (10 mL)中之攪拌混合物添加^t BuMgCl (1.75 mL, 1.75 mmol, 1.5 eq., 1 M於THF中)。將混合物在0℃下攪拌15 min，且添加((S)-(全氟苯氧基-)(苯基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯(793 mg, 1.75 mmol, 1.5 eq.)。將混合物在0℃下攪拌1 h。將混合物添加至NH₄ Cl (飽和水溶液)且萃取至EtOAc中。用Na₂ HCO₃ (飽和水溶液)、鹽水洗滌有機相，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中在40℃下濃縮。藉由HPLC (XSelect C18，用25%-30% MeCN/水溶析)純化粗產物。將含有產物之流份合併並冷凍乾燥，從而產生呈白色固體之((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯I-9 (137 mg，30%產率)。¹ H NMR (DMSO-d₆ with D₂ O, 400 MHz) δ_H 7.51-7.03 (m, 6H), 6.08 (br m, 1H), 5.68 (d, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 3.81-3.62 (m, 2H), 1.24-1.02 (m, 12H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -159 (m, 1F)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 4.42 (s)。UPLC (中性，2-95%, CSH C18) RT=1.763 min, 100% ESIposm/z 279 MH⁺
實例 9
((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基(4-甲氧基苄基)磷醯二胺I-10 之合成

步驟1 ：4- 甲氧基苄基( 全氟苯基) 磷醯二胺41 之製備

在Ar下將氧氯化磷(V)(609 µL, 6.52 mmol, 1 eq.)於CH₂ Cl₂ 中之溶液冷卻至-78℃。向混合物逐滴添加4-甲氧基苄基胺(1.70 mL, 13.0 mmol, 2 eq.)，且然後添加三乙胺(2.73 mL, 19.6 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌1 h，然後升溫至0℃。添加五氟苯酚(1.80 g, 9.78 mmol, 1.5 eq.)。使混合物經1 h升溫至環境溫度。將混合物在真空中濃縮，從而產生黃色固體。藉由Isolera (SiO₂ ，80 g ZIP SPHERE柱，用0-50% EtOAc/庚烷溶析)進行純化產生呈白色固體之4-甲氧基苄基(全氟苯基)磷醯二胺41 (2.00 g，61%產率)。¹ H NMR (CDCl₃ , 400 MHz) δ_H 7.23 (m, 4H), 6.85 (m, 4H), 4.18 (m, 4H), 3.78 (s, 6H)。³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 13.4 (s)。

步驟 2 ： ((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基(4-甲氧基苄基)磷醯二胺I-10之製備

在Ar下在0℃下向4-胺基-1-((2R,3R,4S,5S)-3,5-二氟-4-羥基-5-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮25 (200 mg, 0.721 mmol, 1 eq.)於無水THF (10 mL)中之攪拌混合物添加^t BuMgCl (1.08 mL, 1.44 mmol, 1.5 eq., 1 M於THF中)。將混合物在0℃下攪拌15 min，且添加4-甲氧基苄基(全氟苯基)磷醯二胺(495 mg, 1.08 mmol, 1.5 eq.)。將混合物在0℃下攪拌1 h。將該混合物添加至NH₄ Cl (飽和水溶液)且萃取至EtOAc中。用Na₂ HCO₃ (飽和水溶液)、鹽水洗滌有機相，經MgSO₄ 乾燥，過濾並在真空中在40℃下濃縮。以同等規模重複此，且將粗製材料合併並藉由MDAP (XSelect C18，用MeCN/水溶析)進行純化。將含有產物之流份合併並冷凍乾燥，從而產生呈白色固體之((2S,3S,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基(4-甲氧基苄基)磷醯二胺I-10 (113 mg，13%產率)。¹ H NMR (含有D₂ O之DMSO-d₆ ，300 MHz) δ_H 7.27 (d, 1H), 7.19 (m, 4H), 6.81 (m, 4H), 6.43 (d, 1H), 5.70 (d, 1H), 5.10 (m, 1H), 4.10-3.77 (m, 6H), 3.60 (s, 6H), 1.14 (d, 3H)。¹⁹ F NMR (DMSO-d₆ , 376 MHz) δ_F -122 (m, 1F) -155 (m, 1F)³¹ P NMR (DMSO-d₆ , 161 MHz) δ_p 17.1 (s)。UPLC (中性，2-95%, CSH C18) RT=1.795 min, 99.6% ESIposm/z 595 MH⁺
生物實例
HCV 複製子分析

此分析量測式I化合物抑制HCV RNA複製之能力及因此其用於治療HCV感染之潛在效用。該分析利用報導基因作為細胞內HCV複製子RNA含量之簡單讀出。將海腎螢光素酶(Renilla luciferase )基因引入至基因型1b複製子構築體NK5.1之第一開放閱讀框中(N. Krieger等人，J. Virol. 2001 75(10):4614)，緊接在內部核糖體進入位點(IRES)序列之後，且經由來自口蹄疫病毒之自裂解肽2A與新黴素磷酸轉移酶(NPTII)基因融合(M.D. Ryan及J. Drew，EMBO 1994 13(4):928-933)。在活體外轉錄之後，將RNA電穿孔至人類肝細胞瘤Huh7細胞中，且分離並擴增G418抗性群落。穩定選擇之細胞系2209-23含有複製型HCV亞基因體RNA，且複製子所表現之海腎 螢光素酶 之活性反映其在細胞中之RNA含量。該分析在一式兩份之板中進行，一個在不透明白板中進行且一個在透明板中進行，以便平行量測化合物之抗病毒活性及細胞毒性，從而確保所觀察到之活性不係由於細胞增殖降低或由細胞死亡而引起。

將表現海腎 螢光素酶 報導基因之HCV複製子細胞(2209-23)於含有5%胎牛血清(FBS，Invitrogen目錄號10082-147)之杜貝克氏改良鷹氏培養基(Dulbecco’s MEM)(Invitrogen目錄號10569-010)中進行培養，且以5000個細胞/孔平鋪至96孔板上並培育過夜。24小時後，將化合物於生長培養基中之不同稀釋液添加至細胞，然後將其在37℃下再培育三天。在培育時間結束時，收穫白板中之細胞，且藉由使用海腎 螢光素酶 分析系統(Promega目錄號E2820)來量測螢光素酶活性。以下段落中所闡述之所有試劑均包括在製造商之套組中，且遵循製造商之說明書來進行試劑之製備。將細胞用100 mL磷酸鹽緩衝鹽水(pH 7.0) (PBS) /孔洗滌一次且用20 ml 1×海腎螢光素酶 分析溶解緩衝液溶解，之後在室溫下培育20 min。然後將板插入至Centro LB 960微量板光度計(Berthold Technologies)中，並將100 ml海腎螢光素酶分析緩衝液注射至每一孔中且使用2秒延遲、2秒量測程式來量測信號。IC₅₀ (即使複製子含量相對於未經處理之細胞對照值降低50%所需之藥物濃度)可自螢光素酶活性降低之百分比對如上所述藥物濃度之曲線來計算。

使用來自Roche Diagnostic之WST-1試劑(目錄號1644807)用於細胞毒性分析。將10微升WST-1試劑添加至透明板之每一孔，包括僅含有培養基作為空白之孔。然後將細胞在37℃下培育2 h，且使用MRX Revelation微量滴定板讀數儀(Lab System)在450 nm處(參照濾光片在650 nm處)量測OD值。同樣，CC₅₀ (即使細胞增殖相對於未經處理之細胞對照值降低50%所需之藥物濃度)可自WST-1值降低之百分比對如上所述藥物濃度之曲線來計算。
組合療法分析方案及結果
方法：
1. 細胞培養基

DMEM 生長培養基 含有補充有10%熱不活化胎牛血清(FBS)、1× MEM非必需胺基酸、2 mM L-麩醯胺酸、100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之杜貝克氏改良鷹氏培養基(Dulbecco’s Modification of Eagle’s Medium，DMEM)。

HCV 複製子分析培養基 含有補充有5%熱不活化FBS、1× MEM非必需胺基酸、2 mM L-麩醯胺酸、100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之無酚紅之DMEM。
2. 細胞培養

將HCV 1b複製子細胞(其在Huh7-Lunet細胞中表現雙順反子基因型1b複製子)在37℃及5% CO₂ 下於DMEM生長培養基加上250 μg/ml G418中培養。
3. 抗病毒組合分析

在HCV 1b複製子細胞中實施HCV抑制劑組合分析。將HCV 1b複製子細胞以4000個細胞/孔/100 µl之密度接種於96孔平底白板中24小時，之後進行化合物處理。對於藥物組合研究，將化合物原液(於100% DMSO中之1.75 mM ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯化合物II-1 及1 mM ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯化合物I-1 )於複製子分析培養基中分別稀釋100倍，從而產生於1% DMSO中之17.5 mMII-1 及10 mMI-1 。然後將兩種化合物於含有1% DMSO之複製子分析培養基中連續稀釋1.5倍以分別獲得10次濃縮之濃度範圍：對於II-1 ，-1.75-0.068 mM及對於I-1 ，1-0.088 mM。將12.5 μl之II-1 (水平藥物)及12.5 μl之I-1 (垂直藥物)之該等10次濃縮之連續稀釋液添加至複製子細胞。所有測試點之細胞培養基中DMSO之最終濃度為0.2%。處理後三天，藉由添加70 µl/孔之One-Glo®試劑(Promega)量測複製子螢光素酶活性來測定抗病毒活性。使用讀數設定為0.5 sec/孔之Perkin Elmer EnSpire讀數儀量測相對光單位(RLU)。使用表A中所示之模板產生化合物II-1 及化合物I-1 組合之藥物治療方案。
4. 數據分析

使用Prichard及Shipman開發之MacSynergy^TM II程式分析數據。藉由表面偏差體積(體積表示為μM濃度乘以μM濃度乘以百分比，或μM² %)以95%置信度經龐費洛尼(Bonferroni)調整計算每對抑制劑之組合效應。
表 A 用於組合研究之化合物治療模板
VC：媒劑對照(0.2% DMSO)
CC：細胞對照(無細胞，僅複製子分析培養基)
結果

如上可見，式I之胞苷核苷類似物與式II之尿苷核苷類似物之組合對HCV聚合酶之抑制產生協同效應。

若適當，以特定形式或根據用於實施所揭示功能之方式或用於獲得所揭示結果之方法或製程表示之在上述說明書或以下申請專利範圍中所揭示的特徵，可單獨地或以此等特徵之任一組合用於實現呈多種形式之本發明。

出於清晰及理解之目的，上述發明已藉助圖解說明及實例十分詳細地加以闡述。熟習此項技術者應明瞭，可在隨附申請專利範圍之範圍內進行改變及修改。因此，應理解，上述闡述意欲具有說明性而非具有限制性。因此，本發明之範圍不應參照上文闡述來確定，而應參照以下隨附申請專利範圍以及此等申請專利範圍所授權之全部等效內容範圍來確定。

本申請案中所引用之所有專利、專利申請案及公開案出於所有目的均係以全文引用的方式併入本文中，其併入程度如同將每一個別專利、專利申請案或公開案如此個別地指示併入一般。

Claims

一種治療HCV之方法，其包含向有需要之患者投與式I化合物與式II化合物之組合：其中：每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；每一X獨立地係O或S；每一Y獨立地係H或F；且每一Y’獨立地係F或OH；或其藥理上可接受之鹽。
如請求項1之方法，其中：每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、苯基或苯基低碳數烷基；每一X獨立地係O或S；每一Y獨立地係H或F；且每一Y’獨立地係F或OH；或其藥理上可接受之鹽。
如請求項1或2之方法，其中該式I化合物係選自由以下組成之群： ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及 ((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及 ((R)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；及其S_P 及R_P 差向異構物之混合物；或前述化合物中之每一者之其醫藥上可接受之鹽。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物係：。
如請求項1至20中任一項之方法，其中該式II化合物係：。
如請求項1至21中任一項之方法，其中該式II化合物係：。
如請求項1至21中任一項之方法，其中該式II化合物係：。
如請求項1至21中任一項之方法，其中該式II化合物係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：。
如請求項2之方法，其中該式I化合物及該式II化合物分別係：。
如請求項1至29中任一項之方法，其中式I化合物與式II化合物之該組合進一步包含以下中之一或多者：利巴韋林(ribavirin)、聚乙二醇干擾素-α、司美匹韋(simeprevir)、雷迪帕韋(ledipasvir)、達卡他韋(daclatasvir)及維帕他韋(velpatasvir)。
一種組合物，其包含式I化合物及式II化合物與至少一種載劑、稀釋劑或賦形劑之混合物其中：每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；每一X獨立地係O或S；每一Y獨立地係H或F；且每一Y’獨立地係F或OH；或其藥理上可接受之鹽。
如請求項31之方法，其中每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、苯基或苯基低碳數烷基。
一種治療HCV之方法，其係藉由向有需要之患者投與式I化合物或式I與式II之組合來實施，其進一步與NS3A HCV蛋白酶抑制劑組合其中：每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；每一X獨立地係O或S；每一Y獨立地係H或F；且每一Y’獨立地係F或OH；或其藥理上可接受之鹽。
如請求項33之化合物，其中每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基。
一種治療HCV之方法，其係藉由向有需要之患者投與式I化合物或式I與式II之組合來實施，其進一步與額外NS5B HCV聚合酶抑制劑組合其中：每一R獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R’獨立地係O-R¹ 或NHC(R^2a )(R^2b )C(=O)OR³ ；每一R¹ 獨立地係苯基或萘基，其視情況經一或多個低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、低碳數鹵代烷基或氰基取代；每一R^2a 及R^2b 獨立地係H或低碳數烷基；每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基；每一X獨立地係O或S；每一Y獨立地係H或F；且每一Y’獨立地係F或OH；或其藥理上可接受之鹽。
如請求項35之化合物，其中每一R³ 獨立地係H、低碳數烷基、低碳數鹵代烷基、環烷基、苯基或苯基低碳數烷基。
一種式I化合物，其係選自由以下組成之群： ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及 ((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((S )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2,4-二氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸環己基酯； (((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)((胺基)磷醯基)-L -丙胺酸二環己基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸戊-3-基酯；磷酸((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲基酯二苯基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯； ((R )-(((2S ,3S ,4R ,5R )-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H )-基)-2-氟-3,4-二羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(萘-1-基氧基)磷醯基)-L -丙胺酸異丙基酯；及 ((R)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羥基-4-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷醯基)-L-丙胺酸異丙基酯；及其S_P 及R_P 差向異構物之混合物；或前述化合物中之每一者之其醫藥上可接受之鹽。