EA025794B1 - Противовирусные соединения - Google Patents

Противовирусные соединения Download PDF

Info

Publication number
EA025794B1
EA025794B1 EA201490132A EA201490132A EA025794B1 EA 025794 B1 EA025794 B1 EA 025794B1 EA 201490132 A EA201490132 A EA 201490132A EA 201490132 A EA201490132 A EA 201490132A EA 025794 B1 EA025794 B1 EA 025794B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
mmol
mixture
added
compound
concentrated
Prior art date
Application number
EA201490132A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490132A1 (ru
Inventor
Эзоп Чоу
Майкл О'Нэйл Ханрахан Кларк
Чанг Ю. Ким
Джон О. Линк
Хюн-Цзюн Пянь
Сяонин С. Шенг
Кяойин Ву
Original Assignee
Джилид Сайэнс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Джилид Сайэнс, Инк. filed Critical Джилид Сайэнс, Инк.
Publication of EA201490132A1 publication Critical patent/EA201490132A1/ru
Publication of EA025794B1 publication Critical patent/EA025794B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp

Abstract

Изобретение относится к противовирусным соединениям, к композициям, содержащим такие соединения, и к способам лечения, которые включают введение указанных соединений, а также к способам получения таких соединений и промежуточным соединениям, полезным для их получения.

Description

Настоящее изобретение в целом относится к соединениям, обладающим ингибирующей активностью в отношении вируса гепатита С.
Уровень техники
Установлено, что гепатит С представляет собой хроническое вирусное заболевание печени, которое характеризуется поражением печени. И хотя лекарства для направленной доставки к печени широко используются и уже показали свою эффективность, полезность этих лекарств ограничена их токсичностью и другими побочными эффектами. Ингибиторы ВГС являются полезными для ограничения заражения вирусом гепатита С (ВГС) и развития ВГС-инфекции, а также в диагностических исследованиях на заражение ВГС (вирусом гепатита С).
Существует необходимость в новых терапевтических агентах для лечения ВГС.
Краткое изложение сущности изобретения
Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из
- 3 025794
- 4 025794
- 5 025794
или фармацевтически приемлемую соль
Согласно одному варианту реализации настоящее изобретение обеспечивает соединение, обладающее улучшенными ингибирующими или фармакокинетическими свойствами, включая повышенную активность, направленную против развития вирусной устойчивости, улучшенную пероральную биодоступность, более высокую эффективность или пролонгированное эффективное время полужизни ίη νίνο. Некоторые соединения согласно настоящему изобретению вызывают меньше побочных эффектов, требуют менее сложных режимов дозирования или являться перорально активными.
Подробное описание изобретения
Далее приведено подробное описание изобретения со ссылкой на конкретные варианты реализации настоящего изобретения, примеры которых проиллюстрированы прилагаемыми структурами и формулами. Несмотря на то что в данном описании перечислены конкретные варианты реализации изобретения, подразумевается, что настоящее изобретение не ограничено приведенными вариантами реализации. Напротив, подразумевается, что настоящее изобретение включает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения, определенный указанными вариантами реализации.
Соединения согласно настоящему изобретению
Соединения согласно настоящему изобретению не включают ранее известные соединения. Однако применение соединений, о противовирусных свойствах которых не было известно прежде, для противовирусных целей (например, для достижения противовирусного эффекта при введении животному), входит в объем настоящего изобретения. Применительно к США, соединения или композиции, предложенные в данном изобретении, не включают соединения, которые могут попасть под действие 35 И8С §102 или попадают под действие 35 И8С §103.
Аккумуляция в клетках.
Согласно одному варианту реализации настоящее изобретение обеспечивает соединения, способные аккумулироваться в гепатоцитах человека. С физиологической точки зрения гепатоциты являются ключевым компонентом механизма защиты от инфекции. Гепатоциты можно выделить из обычных здоровых доноров, выделенные клетки промывают (например, фосфатно-солевым буфером) и хранят в среде для замораживания. Гепатоциты можно культивировать в многолуночных планшетах. В различное время из культуры отбирают пробы, которые можно использовать для анализа либо супернатанта, либо клеток (διηίΐΐι К. с1 а1. (2003) Βίοοά 102(7):2532-2540). Соединения согласно данному варианту реализации могут дополнительно содержать фосфонат или фосфонатное пролекарство. Чаще всего указанный
- 6 025794 фосфонат или фосфонатное пролекарство может иметь структуру К1, такую, как определено в данном описании.
Стереоизомеры.
Соединения согласно изобретению могут содержать хиральные центры, например хиральные атомы углерода или фосфора. Соответственно соединения согласно изобретению включают рацемические смеси всех стереоизомеров, включая энантиомеры, диастереоизомеры и атропоизомеры. Кроме того, соединения согласно изобретению включают обогащенные или разделенные оптические изомеры, соответствующие любым или всем асимметричным хиральным атомам. Другими словами, если на изображении присутствуют хиральные центры, данное соединение включает как хиральные изомеры, так и их рацемические смеси. Рацемические и диастереоизомерные смеси, а также выделенные или синтезированные отдельные оптические изомеры, по существу, не содержащие своих энантиомерных или диастереоизомерных антиподов, включены в объем настоящего изобретения. Рацемические смеси разделяют на отдельные, по существу, оптически чистые изомеры с использованием хорошо известных методик, таких как, например, разделение диастереоизомерных солей, образованных с оптически активными адъюнктами, например кислотами или основаниями, с последующим превращением в оптически активные вещества. В большинстве случаев желаемый оптический изомер синтезируют с использованием стереоспецифических реакций, в которых в качестве желаемого исходного вещества используют его подходящий стереоизомер.
В некоторых случаях соединения согласно настоящему изобретению могут существовать также в виде таутомерных изомеров. Хотя может быть изображена только одна делокализованная резонансная структура, все такие формы включены в объем изобретения. Например, могут существовать ен-аминовые таутомеры пуриновой, пиримидиновой, имидазольной, гуанидиновой, амидиновой и тетразольной систем, и все их возможные таутомерные формы включены в объем изобретения.
Соли и гидраты.
Примеры физиологически приемлемых солей соединений согласно настоящему изобретению включают соли, образованные с подходящим основанием, таким как щелочной металл (например, натрий), щелочноземельный металл (например, магний), аммоний и ΝΧ4+ (где X представляет собой С1-С4 алкил). Физиологически приемлемые соли, образованные с участием атома водорода или аминогруппы включают соли органических карбоновых кислот, таких как уксусная, бензойная, молочная, фумаровая, винная, малеиновая, малоновая, яблочная, изэтионовая, лактобионовая и янтарная кислоты; органических сульфоновых кислот, таких как метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая и паратолуолсульфоновая кислоты; и неорганических кислот, таких как соляная, серная, фосфорная и сульфаминовая кислоты. Физиологически приемлемые соли соединения с гидроксильной группой включают анион указанного соединения в комбинации с подходящим катионом, таким как Να' и ΝΧ4+ (где X независимо выбран из Н или С1-С4 алкильной группы).
Если речь идет о терапевтическом применении, соли соединений согласно настоящему изобретению, используемые в качестве активных ингредиентов, обычно являются физиологически приемлемыми, то есть представляют собой соли, образованные с физиологически приемлемой кислотой или основанием. Однако соли кислот или оснований, которые не являются физиологически приемлемыми, также могут найти применение, например, при получении или очистке физиологически приемлемого соединения. Все соли, независимо от того, происходят они или нет от физиологически приемлемой кислоты или основания, включены в объем настоящего изобретения.
Соли металлов обычно получают в результате взаимодействия гидроксида металла с соединением согласно настоящему изобретению. Примерами солей металлов, которые получают таким образом, являются соли, содержащие Ы+, Να' и К'. Менее растворимые соли металлов можно осаждать из раствора более растворимой соли путем добавления подходящего металл-содержащего соединения.
Кроме того, соли могут быть образованы путем присоединения кислоты (для этого могут быть использованы некоторые органические и неорганические кислоты, например НС1, НВг, Н2§О4, Н3РО4 или органические сульфоновые кислоты) к основным центрам, обычно аминам, или к кислотным группам. В заключение следует отметить, что композиции, приведенные в данном описании, включают соединения согласно настоящему изобретению в их неионизированной, а также в цвиттер-ионной форме, и их комбинации со стехиометрическим количеством воды, как в гидратах.
В объем настоящего изобретения также включены соли исходных соединений с одной или более аминокислотой. Для этих целей подходят любые природные или неприродные аминокислоты, особенно встречающиеся в природе аминокислоты, найденные в белках. Данные аминокислоты обычно содержит боковую цепь с основной или кислотной группой, например лизин, аргинин или глутаминовая кислота, или с нейтральной группой, например глицин, серии, треонин, аланин, изолейцин или лейцин.
Способы ингибирования ВГС.
Согласно другому аспекту изобретение относится к способам ингибирования активности ВГС, включающим стадию обработки образца, предположительно содержащего ВГС, соединением или композицией согласно настоящему изобретению.
Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать в качестве ингибиторов ВГС, в
- 7 025794 качестве промежуточных соединений при получении таких ингибиторов или иметь другое применение, как описано ниже. Данные ингибиторы обычно связываются с сайтами на поверхности или в полости печени. Соединения, связывающиеся в печени, могут отличаться степенью обратимости этого связывания. Соединения, связывающиеся, по существу, необратимо, являются идеальными кандидатами для применения в способах согласно настоящему изобретению. Соединения, связывающиеся, по существу, необратимо, содержащие метку, являются полезными в качестве зондов при регистрации ВГС. Соответственно изобретение относится к способам регистрации N83 в образце, предположительно содержащем ВГС, включающим стадии обработки образца, предположительно содержащего ВГС, композицией, содержащей соединение согласно настоящему изобретению, связанное с меткой, и определения влияния образца на активность метки. Подходящие метки хорошо известны в области диагностики и включают стабильные свободные радикалы, фторофоры, радиоизотопы, ферменты, хемилюминесцентные группы и хромогены. Соединения, приведенные в данном описании, метят стандартным образом, с использованием функциональных групп, таких как гидроксил или амино. Согласно одному из вариантов реализации настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I), которое содержит одну или более регистрируемую метку или которое связано или соединено с такой меткой.
В контексте данного изобретения образцы, предположительно содержащие ВГС, включают вещества природного и искусственного происхождения, такие как живые организмы; ткани или клеточные культуры; биологические образцы, такие как образцы биологических веществ (крови, сыворотки, мочи, спинномозговой жидкости, слез, мокроты, слюны, образцы тканей и тому подобные); лабораторные образцы; образцы пищевых продуктов, воды или воздуха; образцы биопродуктов, такие как экстракты клеток, в особенности рекомбинантных клеток, синтезирующих желаемый гликопротеин; и тому подобное. Обычно предполагается, что образец содержит ВГС. Образцы могут находиться в любой среде, включая воду и смеси органический растворитель/вода. Образцы включают живые организмы, такие как человек, и вещества искусственного происхождения, такие как клеточные культуры.
Стадия обработки согласно настоящему изобретению включает добавление соединения согласно изобретению к образцу или включает добавление предшественника композиции к образцу. Стадия добавления включает любой путь введения, такой как описано ниже.
При желании активность ВГС после применения соединения может быть определена с помощью любой методики, включая методики примой и непрямой регистрации активности ВГС. Могут быть использованы количественные, качественные и полуколичественные методики определения активности ВГС. Обычно используют одну из описанных ниже методик скрининга, однако любые другие методики, такие как определение физиологических характеристик живого организма, также пригодны.
Многие организмы заражены ВГС. Соединения согласно настоящему изобретению являются полезными в лечении или профилактике состояний, ассоциированных с активацией ВГС в организме животного или человека.
Однако при скрининге соединений, способных ингибировать ВГС, необходимо иметь в виду, что данные ферментного анализа не всегда коррелируют с результатами анализа, выполненного на клеточной культуре. Соответственно в качестве инструмента первичного скрининга обычно следует применять клеточный анализ.
Отбор ингибиторов ВГС.
Скрининг соединений согласно настоящему изобретению на ингибирующую активность в отношении ВГС может быть выполнен с помощью любых стандартных методик оценки ферментной активности. В контексте данного изобретения обычно сначала проводят скрининг соединений на ингибирование ВГС ίη νίίτο, и затем соединения, показывающие ингибирующую активность ίη νίΐΓΟ, используют в скрининге на ингибирующую активность ίη νίνο. Для исследования ίη νίνο используют соединения, имеющие ίη νίΐΓΟ Κί (константы ингибирования) <~5х 10-6 М, обычно - Κί <~1х 10-7 М и предпочтительно - Κί <~5х 10-8 М.
Полезные методики ίη νίΐΓΟ скрининга были подробно описаны ранее.
Фармацевтические препараты.
Соединения согласно настоящему изобретению готовят в виде препарата со стандартными носителями и эксципиентами, которые обычно выбирают в соответствии со сложившейся практикой. Таблетки обычно содержат эксципиенты, вещества, усиливающие скольжение, наполнители, связующие вещества и тому подобное. Водные препараты готовят в стерильной форме, обычно данные препараты являются изотоническими, если не предназначены для доставки путем перорального введения. Все препараты возможно содержат эксципиенты, такие как эксципиенты, описанные в НанйЬоок οί РНагтассн11са1 ΕχαρίсШ5 (1986). Эксципиенты включают аскорбиновую кислоту и другие антиоксиданты, хелатирующие агенты, такие как ЭДТА, углеводы, такие как декстрин, гидроксиалкилцеллюлоза, гидроксиалкилметилцеллюлоза, стеариновую кислоту и тому подобное. рН препаратов находится в диапазоне от приблизительно 3 до приблизительно 11, но обычно в диапазоне от приблизительно 7 до 10.
Хотя активные ингредиенты можно вводить в чистом виде, предпочтительно, чтобы они были приготовлены в виде фармацевтических препаратов. Препараты для использования как в ветеринарии, так и в лечении человека согласно изобретению содержат по меньшей мере один активный ингредиент, такой
- 8 025794 как определено выше, совместно с одним или более приемлемым носителем и возможно другими терапевтическими ингредиентами. Носитель(и) должен(ны) быть приемлемым(и) в том смысле, что должен(ны) быть совместимым(и) с другими ингредиентами препарата и физиологически безвредным(и) для реципиента.
Препараты согласно настоящему изобретению включают препараты, подходящие для путей введения, описанных ниже. Обычно препараты могут находиться в стандартной лекарственной форме и могут быть приготовлены с использованием методик, хорошо известных в области фармацевтики. Описание данных методик и препаратов можно найти в РепипдЮп'х Рйагтасеийса1 8аспсс5 (Маек РиЪйкЫид Со., Еа81ои, РА). Такие методики включают стадию смешивания активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или более вспомогательного ингредиента. В общем случае препараты приготавливают путем перемешивания активного ингредиента с жидкими носителями, или тонкоизмельченными твердыми носителями, или с теми и другими, до однородного состояния и, при необходимости, последующего формования данного продукта.
Препараты согласно настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут находиться в форме дискретных единиц дозирования, таких как капсулы, крахмальные облатки или таблетки, каждая из которых содержит заданное количество активного ингредиента; в форме порошка или гранул; в форме раствора или суспензии в водной или неводной жидкости: или в форме жидкой эмульсии типа масло-в-воде или жидкой эмульсии типа вода-в-масле. Активный ингредиент также может быть введен в форме болюса, электуария или пасты.
Таблетка может быть приготовлена путем прессования или формования возможно с одним или более вспомогательным ингредиентом. Прессованные таблетки можно приготовить путем прессования в подходящем устройстве активного ингредиента в сыпучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанного со связующим веществом, смазывающим веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно активным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки можно приготовить путем формования в подходящем устройстве смеси, содержащей порошкообразный активный ингредиент, увлажненной инертным жидким разбавителем. Таблетки могут быть покрыты оболочкой или иметь риску и могут быть приготовлены в виде препарата, с тем чтобы обеспечить замедленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента.
Для введения в глаза или другие внешние ткани, например в полость рта и кожу, предпочтительно использовать препараты в форме мази или крема для местного применения, содержащие активный(е) ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% (мас./мас.) (включая количество активного(ых) ингредиента(ов) в диапазоне от 0,1 до 20% с инкрементом 0,1% (мас./мас.), например 0,6% (мас./мас.), 0,7% (мас./мас.) и так далее), предпочтительно от 0,2 до 15% (мас./мас.) и наиболее предпочтительно от 0,5 до 10% (мас./мас.). Когда активные ингредиенты приготовлены в форме мази, может быть использована парафиновая или смешивающаяся с водой мазевая основа. Альтернативно, активные ингредиенты можноприготовить в форме крема с кремовой основой типа масло-в-воде.
При желании водная фаза кремовой основы может включать, например, по меньшей мере 30% (мас./мас.) многоатомного спирта, то есть спирта, содержащего две или более гидроксильных группы, такого как пропиленгликоль, бутан 1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая ПЭГ 400) и их смеси. Может оказаться желательным, чтобы препараты для местного введения включали соединение, которые улучшает абсорбцию или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные зоны. Примеры агентов, способствующих проникновению через кожу, включают диметилсульфоксид и соответствующие аналоги.
Масляная фаза эмульсий согласно настоящему изобретению может состоять, в известной степени, из известных ингредиентов. Несмотря на то что данная фаза может содержать только эмульгатор (также известный как эмульгирующий агент), желательно, чтобы она содержала смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром, или маслом, или с жиром и маслом. Предпочтительно масляная фаза содержит гидрофильный эмульгатор совместно с липофильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Также предпочтительно, когда масляная фаза содержит как масло, так и жир. Эмульгатор(ы), совместно со стабилизатором(ами) или без него, дают так называемый эмульгирующий воск, смесь данного воска с маслом и жиром образует так называемую эмульгирующую мазевую основу, которая формирует масляную дисперсную фазу кремовых препаратов.
Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, подходящие для использования в препарате согласно изобретению, включают Твин® 60, 8раи® 80, цетостеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и лаурилсульфат натрия.
Выбор подходящих масел или жиров, используемых в препарате, основан на том, какие желаемые косметические свойства нужно получить. Предпочтительно крем должен представлять собой нежирный, не оставляющий пятен и смывающийся продукт подходящей консистенции, которая не допускает его вытекания из тубы или других контейнеров. Можно использовать одно- или двухосновные сложные алкиловые эфиры с нормальной или разветвленной цепью, такие как ди-изоадипат, изоцетилстеарат, пропиленгликолевый диэфир жирных кислот кокосового масла, изопропилмиристат, децилолеат, изопропилпальмитат, бутилстеарат, 2-этилгексилпальмитат или смесь сложных эфиров с разветвленной цепью,
- 9 025794 известная как Стойато1 САР, последние три эфира являются предпочтительными. Данные эфиры можно применять по одному или в комбинации, в зависимости от требуемых свойств. В качестве альтернативы используют липиды с высокой температурой плавления, такие как белый мягкий парафин и/или вазелиновое масло, или другие минеральные масла.
Фармацевтические препараты согласно настоящему изобретению включают одно или более соединение согласно настоящему изобретению совместно с одним или более фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом и возможно другими терапевтическими агентами. Фармацевтические препараты, содержащие указанный активный ингредиент, могут находиться в любой форме, подходящей для предполагаемого пути введения. Для перорального использования можно приготовить, например, таблетки, пастилки, лепешки, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, сиропы или эликсиры. Композиции, предназначенные для перорального использования, могут быть приготовлены в соответствии с любой методикой приготовления фармацевтических композиций, известной в данной области техники; для получения препарата с приятным вкусом такие композиции могут содержать один или более агентов, включающих подслащивающие агенты, корригенты, окрашивающие агенты и консерванты. Таблетки могут содержать активный ингредиент в смеси с нетоксичным фармацевтически приемлемым эксципиентом, подходящим для изготовления таблеток. Такими эксципиентами могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или натрия, лактоза, моногидрат лактозы, натрий-кроскармелоза, повидон, фосфат кальция или натрия; гранулирующие агенты и разрыхлители, так как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, такие как целлюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, желатин или гуммиарабик; и смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут не иметь оболочки или могут быть покрыты оболочкой с использованием известных методик, включая микрокапсулирование, с целью замедления дезинтеграции и адсорбции в желудочно-кишечном тракте, что позволяет обеспечить пролонгированное действие на протяжении длительного периода. Например, может быть использовано такое замедляющее вещество, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, сам по себе или с воском.
Препараты для перорального использования могут находиться также в форме твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например фосфатом кальция или каолином, или в форме мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, такой как арахисовое масло, вазелиновое масло или оливковое масло.
Водные суспензии согласно настоящему изобретению содержат активные вещества в смеси с эксципиентами, подходящими для изготовления водных суспензий. Такие эксципиенты включают суспендирующий агент, такой как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик, и диспергирующие или увлажняющие агенты, такие как природный фосфатид (например, лецитин), продукт конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукт конденсации этиленоксида с неполным эфиром, образованным жирной кислотой и ангидридом гексита (например, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат). Водная суспензия также может содержать один или более консервант, такой как этил или н-пропил пара-гидрокси-бензоат, один или более окрашивающий агент, один или более корригент и один или более подслащивающий агент, такой как сахароза или сахарин.
Масляные суспензии можно приготовить в виде препарата путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле, таком как арахисовое масло, оливковое масло, кунжутное масло или кокосовое масло, или в минеральном масле, таком как вазелиновое масло. Пероральные суспензии могут содержать загуститель, такой как пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Для получения перорального препарата с приятным вкусом можно добавлять подслащивающие агенты, такие как указано выше, и корригенты. В данные композиции в качестве консерванта может быть добавлен антиоксидант, такой как аскорбиновая кислота.
Диспергируемые порошки и гранулы согласно настоящему изобретению, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, позволяют получить активный ингредиент в смеси с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантом. Примеры подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов приведены выше. В водной суспензии также могут присутствовать дополнительные эксципиенты, например подслащивающие агенты, корригенты и окрашивающие агенты.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению также могут находиться в форме эмульсий типа масло-в-воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, такое как оливковое масло или арахисовое масло, минеральное масло, такое как вазелиновое масло, или смесь этих масел. Подходящие эмульгирующие агенты включают природные камеди, такие как гуммиарабик и трагакант, природные фосфатиды, такие как соевый лецитин, эфиры или неполные эфиры, образованные жирными кислотами и ангидридами гексита, такие как сорбитанмоноолеат, и продукты конденсации указанных неполных эфиров с этиленоксидом, такие как полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат. Эмульсия
- 10 025794 также может содержать подслащивающие агенты и корригенты. Сиропы и эликсиры можно приготовить в виде препарата с подслащивающими агентами, такими как глицерин, сорбит или сахароза. Такие препараты также могут содержать агент, уменьшающий раздражение, консервант, корригент или окрашивающий агент.
Фармацевтические композиции согласно изобретению могут находиться в форме стерильного инъекционного препарата, такого как стерильная инъекционная водная или масляная суспензия. Данная суспензия может быть приготовлена в виде препарата в соответствии с известными в данной области техники методиками с использованием подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов, указанных выше. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном и приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутан-диоле, или может быть приготовлен в форме лиофилизированного порошка. Примерами приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, являются вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно можно использовать стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое безвкусное нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для приготовления инъекционных препаратов могут быть использованы жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Количество активного ингредиента, который может быть смешан с веществом носителя при приготовлении лекарственной формы для однократного введения, обычно варьирует в зависимости от объекта, который лечат, и от конкретного способа введения. Например, препарат с пролонгированным действием, предназначенный для перорального введения человеку, может содержать приблизительно от 1 до 1000 мг активного вещества в смеси с подходящим и приемлемым количеством носителя, которое может составлять от приблизительно 5 до приблизительно 95% (мас./мас.) от общей массы композиции. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена таким образом, чтобы вводимое количество препарата легко поддавалось измерению. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии, может содержать от приблизительно 3 до 500 мкг активного ингредиента на 1 мл раствора, чтобы инфузию подходящего объема препарата можно было проводить со скоростью приблизительно 30 мл/ч.
Препараты, подходящие для введения в глаза, включают глазные капли, где активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, главным образом в водном растворителе для активного ингредиента. В таких препаратах концентрация активного ингредиента составляет предпочтительно 0,5-20%, преимущественно 0,5-10%, в основном приблизительно 1,5% (мас./мас.).
Препараты, подходящие для местного введения в полость рта, включают таблетки, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно в сахарозе и гуммиарабике или в трагаканте; пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или в сахарозе и гуммиарабике; и жидкости для полоскания рта, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.
Препараты для ректального введения могут находиться в форме суппозитория с подходящей основой, содержащей, например, масло какао или салицилат.
Препараты, подходящие для внутрилегочного или назального введения, содержат частицы, имеющие размер в диапазоне, например, от 0,1 до 500 мкм (включая частицы, имеющие размер в диапазоне от 0,1 до 500 мкм с инкрементом 0,5 мкм, например частицы размером 0,5, 1, 30, 35 мкм и так далее), которые вводят путем быстрой ингаляции через носовой ход или путем ингаляции через полость рта, так чтобы они достигли альвеолярных мешочков. Подходящие препараты включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Препараты, подходящие для аэрозольного введения или введения в форме сухого порошка можно приготовить в соответствии со стандартными методиками и можно вводить совместно с другими терапевтическими агентами, например с соединениями, уже используемыми в лечении или профилактике состояний, ассоциированных с ВГС-активностью.
Препараты, подходящие для вагинального введения, могут находиться в форме пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спрея, содержащих наряду с активным ингредиентом подходящие для таких препаратов носители, известные в данной области техники.
Препараты, подходящие для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферные агенты, бактериостатические вещества и растворенные вещества, которые делают препарат изотоническим с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители.
Данные препараты находятся в упаковках для одноразового или многократного приема, например в герметично закрытых ампулах и пробирках, и могут храниться в лиофилизированном состоянии (после сублимационной сушки), требующем непосредственно перед использованием добавления стерильного жидкого носителя, например воды для инъекции. Экстемпоральные инъекционные растворы и суспензии получают из стерильных порошков, гранул и таблеток, описанных выше. Предпочтительные препараты в стандартной лекарственной форме представляют собой препараты, содержащие суточную дозу или суточную субдозу активного ингредиента, такую, как указано выше, или подходящую часть таких доз.
- 11 025794
Следует понимать, что кроме ингредиентов, упомянутых выше, препараты согласно настоящему изобретению могут содержать другие агенты, обычно используемые в данной области техники, которые пригодны для данного препарата, например агенты, подходящие для перорального введения, могут включать корригенты.
Настоящее изобретение дополнительно обеспечивает ветеринарные композиции, содержащие по меньшей мере один активный ингредиент, такой как определено выше, совместно с носителем для ветеринарных препаратов.
Носители для ветеринарных препаратов представляют собой вещества, полезные для введения ветеринарной композиции, совместимые с активным ингредиентом и в других отношениях являющиеся нейтральными или приемлемыми для использования в ветеринарии; данные носители могут быть твердыми, жидкими или газообразными веществами. Ветеринарные композиции можно вводить пероральным, парентеральным или любым другим желательным путем.
Соединения согласно настоящему изобретению также можно приготовить в виде препарата с контролируемым высвобождением активного ингредиента, что позволяет реже вводить лекарство или улучшает фармакокинетический или токсический профиль активного ингредиента. Соответственно в изобретении также предложены композиции, содержащие одно или более соединение согласно настоящему изобретению, приготовленное в виде препарата с замедленным или контролируемым высвобождением.
Эффективная доза активного ингредиента зависит, по меньшей мере, от природы состояния, которое лечат, токсичности, от того, будет ли соединение использовано для профилактики (более низкие дозы), от способа доставки и фармацевтического препарата и обычно определяется лечащим врачом на основе стандартных исследований с увеличением дозы. Можно предположить, что эффективная доза будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,0001 до приблизительно 100 мг/кг массы тела в сутки. Обычно от приблизительно 0,01 до приблизительно 10 мг/кг массы тела в сутки. В основном от приблизительно 0,01 до приблизительно 5 мг/кг массы тела в сутки. Чаще всего от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,5 мг/кг массы тела в сутки. Например, возможная суточная доза для взрослого человека с массой тела приблизительно 70 кг будет находиться в диапазоне от 1 мг до 1000 мг, предпочтительно в диапазоне от 5 мг до 500 мг, и может быть введена в форме однократных или многократных доз.
Пути введения.
Одно или более соединение согласно изобретению (в данном описании называемое активным ингредиентом) вводят любым путем, подходящим для состояния, которое лечат. Подходящие пути введения включают пероральный, ректальный, назальный, местный (включая трансбуккальный и сублингвальный), вагинальный и парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный, интрадермальный, интратекальный и эпидуральный) и тому подобное. Следует понимать, что предпочтительный путь введения зависит, например, от состояния реципиента. Преимущество соединений согласно настоящему изобретению заключается в том, что они являются перорально биодоступными и могут быть введены пероральным путем.
Комбинированная терапия.
Активные ингредиенты согласно изобретению также можно применять в комбинации с другими активными ингредиентами. При подборе таких комбинаций учитывают состояние, для лечения которых они предназначены, перекрестную реактивность ингредиентов и фармакологические свойства комбинации.
Кроме того, любое соединение согласно настоящему изобретению можно комбинировать с одним или более другим активным ингредиентом в стандартной лекарственной форме для одновременного или последовательно введения пациенту. Схемы комбинированной терапии включают как одновременный, так и последовательный режим введения. При последовательном введении комбинация может быть введена путем двух или более введений.
Комбинированная терапия может обеспечить синергизм и синергетический эффект, данные термины означают, что эффект, получаемый при совместном использовании активных ингредиентов больше суммы эффектов при использовании каждого из соединений по отдельности. Синергетический эффект может быть достигнут, когда активные ингредиенты (1) приготовлены совместно в виде одного препарата и их вводят или доставляют одновременно в виде комбинированного препарата, (2) доставляются поочередно или одновременно в виде отдельных препаратов или (3) доставляют с использованием некоторых других режимов. При терапии с доставкой лекарственного средства по схеме чередования синергетический эффект может быть достигнут в том случае, когда соединения вводят или доставляют последовательно, например в отдельных таблетках, пилюлях или капсулах или путем инъекций с использованием разных шприцов. В общем случае, при терапии с доставкой лекарственного средства по схеме чередования эффективные дозы активных ингредиентов вводят последовательно, то друг за другом, тогда как при комбинированной терапии эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят совместно.
Подходящие активные терапевтические агенты или ингредиенты, которые можно комбинировать с соединениями формулы I, могут включать интерфероны, например пегилированный г1РЫ-а2Ь, пегилиро- 12 025794 ванный г1РЫ-а2а, г1РЫ-а2Ь, ΙΡΝ а-2Ь ХЬ, г1РЫ-а2а, консенсусный ΙΡΝ а, инферген (тГсгдсп). ребиф, локтерон (1ос1егоп), Ανΐ-005, ПЭГ-инферген, пегилированный ΙΡΝ-β, пероральный интерферон а, ферон (Гегоп), реаферон, интермакс (иНегтах) а, г-ΙΡΝ-β, инферген + актиммун (асйттипе), ΙΡΝ-ω с ΌυΚΟδ и альбуферон (а1ЬиГегоп); аналоги рибавирина, например ребетол, копегус (соредик), левовирин (1еуоушп) νΧ-497 и вирамидин (тарибавирин); ингибиторы Ж5а, например Α-831 и Α-689; ингибиторы полимеразы Ж5Ь, например ΝΜ-283, валопицитабин, К1626, ΡδΙ-6130 (К1656), Η0ν-796, В1ЬВ 1941, МК-0608, ΝΜ-107, К7128, νθΗ-759, ΡΡ-868554, 08К625433 и ХТЬ-2125; ингибиторы Ж3-протеазы, например 8СН-503034 (8СН-7), νΧ-950 (Телапревир), ΙΤΜΝ-191 и ΒΙΡΝ-2065; ингибиторы а-глюкозидазы 1, например МХ-3253 (селгозивир (се1до81уи)) и υΤ-231 В; гепатозащитные агенты, например ΙΌΝ-6556, МЕ 3738, МйоО и ЬВ-84451; отличные от нуклеозидов ингибиторы ВГС, например бензимидазольные производные, бензо-1,2,4-тиадиазиновые производные и фенилаланиновые производные; и другие лекарства для лечения ВГС, например задаксин, нитазоксанид (аПпеа), ΒΙνΝ-401 (виростат (уиокРаЕ)), ΌΕΒΙΘ-025, νθΧ-410Ο ΕΜΖ-702, ΑνΙ 4065, бавитуксимаб, оглуфанид, ΡΥΝ-17, КРЕ02003002, актилон (асП1оп) (СРО-10101), ΚΚΝ-7000, С1уас1г, 0Ι-5005, ΑΝΑ-975 (изаторибин), ХТЬ-6865, ΑΝΑ 971, ΝΟν-205, тарвацин (тарвацин), ЕНС-18 и ΝΙΜ811.
Согласно еще одному варианту реализации настоящего изобретения, в данной заявке раскрыты фармацевтические композиции, содержащие соединение согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемую соль, сольват и/или сложный эфир, в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим агентом и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
Согласно настоящему изобретению в комбинации с соединением согласно настоящему изобретению может быть использован любой терапевтический агент, оказывающий терапевтическое действие при использовании в комбинации с соединением согласно настоящему изобретению. Например, терапевтические агенты, используемые в комбинации с соединением согласно настоящему изобретению могут представлять собой интерфероны, аналоги рибавирина, ингибиторы Ж3-протеазы, ингибиторы полимеразы Ж5Ь, ингибиторы а-глюкозидазы 1, гепатозащитные агенты, ненуклеозидные ингибиторы ВГС и другие лекарства для лечения ВГС.
Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения в данной заявке предложены фармацевтические композиции, которые содержат соединение согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемую соль, сольват и/или сложный эфир, в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим агентом, выбранным из группы, состоящей из пегилированного интерферона НЕЖ/УЬ, пегилированного интерферона гШЫ-а2а, γΙΡΝ-</.2Ε ШЫа-2Ь ХЬ, гШЫ-а2а, консенсусного интерферона ΙΡΝ а, инфергена, ребифа, локтерона, ΑνΙ-005, ПЭГ-инфергена, пегилированного ΙΡΝ-β, перорального интерферона а, ферона, реаферона, интермакса а, г-ΙΡΝ-β, инфергена + актиммуна, ΙΡΝ-ω с ΌυΚΟδ, альбуферона, ребетола, копегуса, левовирина, νΧ-497, вирамидина (тарибавирина), Α-831, Α-689, ΝΜ-283, валопицитабина, К1626, ΡδΙ-6130 (К1656), ВГС-796, В1ЬВ 1941, ΜΚ0608, ΝΜ-107, К7128, УСН-759, ΡΡ-868554, 08К625433, ХТЬ-2125, 8СН-503034 (8СН-7), νΧ-950 (Телапревира), ΙΤΜΝ-191 и В1ЬЖ2065, МХ-3253 (селгозивира), иТ-231В, ΙΌΝ-6556, ΜΕ 3738, Μί^Ο и ЬВ84451, бензимидазольных производных, бензо-1,2,4-тиадиазиновых производных и фенилаланиновых производных, задаксина, нитазоксанида (аПпеа), В1УЫ-401 (виростата), ОЕВ1О-025, УСХ-410С ΕΜΖ702, ΑνΙ 4065, бавитуксимаба, оглуфанида, ΡΥΝ-17, ΚΡΕ02003002, актилона φΡ0-10101), ΚΡΝ-7000, С1уас1г, 01-5005, ΑΝΑ-975 (изаторибина), ХТЬ-6865, ΑΝΑ 971, ΝΟν-205, тарвацина, ЕНС-18 и ΝΙΜ811, и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
Согласно еще одному варианту реализации настоящего изобретения в данной заявке предложен комбинированный фармацевтический агент, содержащий:
а) первую фармацевтическую композицию, содержащую соединение согласно настоящему изобретению, или фармацевтически приемлемую соль, сольват или сложный эфир указанного соединения; и
б) вторую фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент, выбранный из группы, состоящей из соединений, ингибирующих протеазу ВИЧ (вируса иммунодефицита человека), ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ, нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ, нуклеотидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ, ингибиторов интегразы ВИЧ, ингибиторов др41, ингибиторов СХСК4 (рецептора 4 хемокинов СХС), ингибиторов др120, ингибиторов ССК5 (рецептора 5 хемокинов С-С типа), интерферонов, аналогов рибавирина, ингибиторов ЖЛ-протеазы, ингибиторов а-глюкозидазы 1, гепатозащитных агентов, ненуклеозидных ингибиторов ВГС и других лекарств для лечения ВГС и их комбинаций.
Могут быть подобраны комбинации соединений формулы Ι и дополнительных активных терапевтических агентов для лечения пациентов, инфицированных ВГС и другими инфекциями, такими как ВИЧ-инфекция. Соответственно соединения формулы Ι можно комбинировать с одним или более соединением, полезным в лечении ВИЧ, например с соединениями, ингибирующими протеазу ВИЧ, отличными от нуклеозидов ингибиторами обратной транскриптазы ВИЧ, нуклеозидными ингибиторами обратной транскриптазы ВИЧ, нуклеотидными ингибиторами обратной транскриптазы ВИЧ, ингибиторами инте- 13 025794 гразы ВИЧ, ингибиторами др41, ингибиторами СХСР4, ингибиторами др120, ингибиторами ССР5, интерферонами, аналогами рибавирина, ингибиторами Νδβ-протеазы, ингибиторами полимеразы Ν856, ингибиторами α-глюкозидазы 1, гепатозащитными агентами, ненуклеозидных ингибиторами ВГС и другими лекарствами для лечения ВГС.
Более конкретно, одно или более соединение согласно настоящему изобретению можно комбинировать с одним или более соединением, выбранным из группы, состоящей из 1) ингибиторов протеазы ВИЧ, например ампренавира, атазанавира, фосампренавира, индинавира, лопинавира, ритонавира, лопинавира + ритонавира, нелфинавира, саквинавира, типранавира, бреканавира, дарунавира, ТМС-126, ТМС-114, мозенавира (ΌΜΡ-450), .ГЕ-2147 (А01776), ЛС1859, Ό035, Ь-756423, РО0334649, ΚΝΙ-272, ОРС-681, ЭРС-684 и С^640385Х, Ό017, РРЬ-100, 2) ненуклеозидного ингибитора обратной транскриптазы ВИЧ, например каправирина, эмивирина, делавиридина (όοΙανίΓίΗίηο), эфавиренза, невирапина, (+) каланолида А, этравирина, 0^5634, ПРС-083, ОРС-961, ОРС-963, М1У-150 и ТМС-120, ТМС-278 (рилпивирина), эфавиренза, В1ЬК 355 В8, УРХ 840773, υΚ-453,061, РОЕА806, 3) нуклеозидного ингибитора обратной транскриптазы ВИЧ, например зидовудина, эмтрицитабина, диданозина, ставудина, зальцитабина, ламивудина, абакавира, амдоксовира, элвуцитабина, аловудина, М1У-210, рацивира (±-РТС), ΌБ4РС, эмтрицитабина, фосфазида, фозивудина тидоксила (Γο/ίνυάίηο ΐίάοχίΐ), фосалвудина тидоксила, априцитибина (арпсШЫпе) (АУХ754), амдоксовира, КР-1461, абакавира + ламивудина, абакавира + ламивудина + зидовудина, зидовудина + ламивудина, 4) нуклеотидного ингибитора обратной транскриптазы ВИЧ, например тенофовира, тенофовира дизопроксил фумарата + эмтрицитабина, тенофовира дизопроксил фумарата + эмтрицитабина + эфавиренза и адефовира (айеГоук), 5) ингибитора интегразы ВИЧ, например куркумина, производных куркумина, цикориевой кислоты, производных цикориевой кислоты, 3,5-дикофеил-хинной кислоты, производных 3,5-дикофеил-хинной кислоты, ауринтрикарбоновой кислоты, производных ауринтрикарбоновой кислоты, кофеиновой кислоты фенетилового эфира, производных кофеиновой кислоты фенетилового эфира, тирфостина, производных тирфостина, кверцетина, производных кверцетина, 8-1360, зинтевира (х1Шеу1г) (АР-177), Ь-870812 и Ь-870810, ΜΚ-0518 (ралтегравира), ВМ8-707035, ΜΚ-2048, ВА-011, ВМ8-538158, 08К364735С, 6) ингибитора др41, например энфувиртида, сифувиртида (кРиуШИе), РВ006 М, ТК1-1144, 8РС3, ΌΕ86, Ьосик др41, СоуХ и РЕР 9, 7) ингибитора СХСК4, например ΑΜΌ-070,8) ингибитора входа, например 8Р01А, ΤΝΧ-355, 9) ингибитора др120, например ВМ8-488043 и В1оскА1Йе/СР, 10) ингибитора С6Р0 и ΝΑΌΗ-оксидазы, например иммунитина (ГштитПи), 10) ингибитора ССР5, например аплавирока, викривирока, ШСВ9471, РРО-140, ШСВ15050, РР-232798, ССР5тАЬ004 и маравирока, 11) интерферона, например пегилированного τΙΡΝ-α26, пегилированного ΓΐΡΝ-α2α, τΙΡΝ-α26, ΙΡΝα-26 ХЬ, ΓΐΡΝ-α2α, консенсусного ΙΡΝα, инфергена, ребифа, локтерона, АУ1-005, ПЭГ-инфергена, пегилированного ΙΡΝ-β, перорального интерферона а1рЬа, ферона, реаферона, интермакса а1рЬа, г-ΙΡΝ-β, инфергена + актиммуна, ΙΡΝ-ω с ΌυΡΟ8 и альбуферона, 12) аналогов рибавирина, например ребетола, копегуса, левовирина, УХ-497, и вирамидина (тарибавирина), 13) ингибиторов Ν85;·ε например А-831 и А-689, 14) ингибиторов полимеразы Ν856, например ΝΜ-283, валопицитабина, Р1626, Р8^6130 (Р1656), ВГС-796, ВП.В 1941, ΜΚ-0608, ΝΜ-107, Р7128, УСН-759, РР868554, 08Κ625433 и ХТЬ-2125, 15) ингибиторов №3-протеазы, например 8СН-503034 (8СН-7), УХ-950 (Телапревира), ΙΤΜΝ-191 и ВI^N-2065, 16) ингибиторов α-глюкозидазы 1, например МХ-3253 (селгозивира) и иТ-231В, 17) гепатозащитных агентов, например ΙΌΝ-6556, МЕ 3738, ΜίΙοΟ и ЬВ-84451, 18) ненуклеозидных ингибиторов ВГС, например бензимидазольных производных, бензо-1,2,4-тиадиазиновых производных и фенилаланиновых производных, 19) других лекарств для лечения ВГС, например задаксина, нитазоксанида (аПиеа), ВIVN-401 (виростата), ΌΕΕΙΟ-025, У0Х-410С, ΕΜΖ-702, АУ! 4065, бавитуксимаба, оглуфанида, РУЖ17, ΚΕΕ02003002, актилона (СР0-10101), ΚΡΝ-7000, с1уас1г, 0Ι-5005, ΑNΑ975 (изаторибина), ХТЬ-6865, ΑNΑ 971, Νθν-205, тарвацина, ЕНС-18 и ΝΙΜ811, 19) фармакокинетических усилителей, например ВА8-100 и 8РИ52, 20) ингибиторов РНКазы Н, например ΟΌΝ-93 и ΟΌΝ112, 21) других агентов, обладающих активностью в отношении ВИЧ, например У0У-1, РА-457 (бевиримата), амплигена (атрБдеп), НР0214, цитолина (суГоБи), полимуна (ро1утип), У0Х-410, ΚΌ247, ΑΜΖ 0026, СУТ 99007, А-221 НГУ, ВАУ 50-4798, М0Х010 (иплимумаба (1рНтитаЬ)), РВ8119, АЬС889 и РА1050040.
Метаболиты соединений согласно настоящему изобретению.
В объем настоящего изобретения также входят продукты метаболического распада ίη У1уо соединений, приведенных в данном описании. Такие продукты могут образовываться в результате, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, этерификации и так далее введенного соединения, главным образом, вследствие ферментативных реакций. Соответственно изобретение включает соединения, полученные способом, который включает осуществление контакта соединения согласно настоящему изобретению с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для образования продукта метаболического превращения. Для идентификации таких продуктов обычно используют соединение согласно настоящему изобретению, меченое радиоактивным изотопом (например, С14 или Н3); обнаруживаемую дозу (например, приблизительно более 0,5 мг/кг) меченого соединения вводят парентеральным путем животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна, или человеку, и после осуществ- 14 025794 ления контакта соединения с реципиентом в течение времени, достаточного для метаболического распада (обычно от приблизительно 30 с до 30 ч), выделяют продукты его превращения из мочи, крови или других биологических образцов. Данные продукты могут быть легко выделены, так как они содержат метку (немеченые продукты выделяют с использованием антител, способных связываться с эпитопами, сохранившимися после метаболического превращения). Структуры выделенных метаболитов определяют с использованием стандартного анализа, например путем МС или ЯМР. Обычно анализ метаболитов выполняют таким же путем, как в стандартных исследованиях метаболизма лекарств, соответствующие методики хорошо известны специалистам в данной области техники. Продукты превращения, поскольку они не обнаруживаются ίη νίνο, если реципиент не получал соединение, являются полезными в диагностических исследованиях для определения терапевтических доз соединений согласно настоящему изобретению, даже если эти продукты сами по себе не обладают никакой ингибирующей активностью в отношении ВГС.
Методики определения стабильности соединений в секретах суррогатного желудочно-кишечного тракта известны. В контексте данного описания соединения считаются стабильными в желудочнокишечном тракте, если у них удалено приблизительно менее 50 молярных процентов защитных групп после инкубации в течение 1 ч при 37°С в суррогатном кишечном или желудочном соке. Тот факт, что соединения остаются стабильными в желудочно-кишечном тракте, еще не означает, что они не могут быть гидролизированы ίη νίνο. Фосфонатные пролекарства согласно настоящему изобретению обычно стабильны в пищеварительной системе, но в значительной степени подвергаются гидролизу до исходного лекарства в просвете кишечника, печени или другом органе, где происходит метаболический распад, или внутри клеток.
Типичные способы получения соединений согласно настоящему изобретению.
Изобретение также относится к способам получения композиций согласно изобретению. Данные композиции получают с использованием любой пригодной методики органического синтеза. Многие из таких методик хорошо известны в данной области техники. Однако многие из известных методик дополнительно усовершенствованы, см. Сотрепбшт οί Огдатс 8уййейс МсОюбх (ίοΐιη \УПеу & δοηδ, №\ν Уогк), νοί. 1, 1ап Т. Ηπιτίδοη апб δкиуеη Ηαττίδοη, 1971; νοί. 2, 1ап Т. Ηπιτίδοη апб δкиуеη Ηαττίδοη, 1974; νοί. 3, Εοιιίδ δ. Иедебщ апб Ьегоу \Уабе. 1977; νοί. 4, Ьегоу С. \Уабе. ίτ., 1980; νοί. 5, Ьегоу С. \Уабе. ίτ., 1984; и νοί. 6, Мюкае! В. διηίΐΐι; а также Магск ί., Αбνаηсеб Огдатс Скет181ту, ТЫтб Ебкюп, (ίοΐιη \УПеу & δοηδ, №\ν ΥογΚ 1985), Τ’οιηρΐΌΐκηδί\Ό Огдатс δуηΐкеδ^δ. δеίесΐ^ν^ΐу, δΐ^аΐеду & Ейгшепсу ίη Μοбе^η Огдатс Скет^δΐ^у. 1п 9 Vοίитеδ, Ваггу Μ. Ττοδΐ, Εб^ΐο^-^η-Ск^еГ (Ρе^датοη ΡϊΌδδ, ΥογΕ 1993 ртшкпд).
Другие методики, подходящие для получения соединений согласно настоящему изобретению, описаны в публикации международной заявки № \УО 2006/020276.
Ниже предложен ряд типичных способов получения композиций согласно настоящему изобретению. Подразумевается, что предложенные способы иллюстрируют сущность получения указанных композиций и не ограничивают объем способов получения, которые можно использовать.
Обычно условия реакции, такие как температура, время проведения реакции, растворители, методики выделения и тому подобное, представляют собой стандартные условия реакции, которые используют в данной области техники для выполнения конкретных реакций. Подробное описание таких условий содержится в цитированном ссылочном материале и материале, приведенном в данной заявке. Обычно температура находится в диапазоне от -100 до 200°С, растворители являются апротонными или протонными и время выполнения реакции находится в диапазоне от 10 с до 10 суток. Выделение продукта обычно подразумевает гашение любого непрореагировавшего реагента и последующее распределение реакционной смеси между водным и органическим слоями (экстракцию) и отделение слоя, содержащего желаемый продукт.
Реакции окисления и восстановления обычно проводят при температуре, близкой к комнатной температуре (приблизительно 20°С), хотя при восстановлении гидридами металлов температуру часто понижают до 0 - -100°С, для восстановления обычно используют апротонные растворители, для окисления можно использовать либо протонные, либо апротонные растворители. Время выполнения реакции подбирают таким образом, чтобы осуществить желаемое превращение.
Реакции конденсации обычно проводят при температуре, близкой к комнатной температуре, хотя в случае неравновесных, кинетически контролируемых реакций конденсации температуру также часто понижают (0 - -100°С). Растворители могут быть либо протонными (обычно в случае равновесных реакций) или апротонными (обычно в случае кинетически контролируемых реакций).
Когда это необходимо, можно применять такие стандартные методики синтеза, как азеотропное удаление побочных продуктов реакции и использование безводных условий реакции (например, атмосферы инертного газа).
Термины обработанный, обрабатывать, обработка и т.п. применительно к химическому синтезу употребляются в значении контактировать/осуществлять контакт, смешивать, взаимодействовать, подвергать взаимодействию, приводить в соприкосновение и т.п., и обычно используются в данной области техники, когда необходимо указать, что одно или более химическое вещество обрабатывают таким образом, чтобы его превратить в одно или более другое химическое вещество. Это означает,
- 15 025794 что выражение соединение один обрабатывают соединением два синонимично выражениям соединение один подвергают взаимодействию с соединением два, соединение один контактирует с соединением два, соединение один взаимодействует с соединением два и другим выражениям, обычно используемым в области органического синтеза, когда необходимо указать, что соединение один обрабатывают соединением два, соединение один взаимодействует с соединением два или соединение один подвергают взаимодействию с соединением два и так далее. Например, термин обработка указывает приемлемый стандартный способ, каким органические химические соединения подвергают взаимодействию. Подразумевается, что реакцию выполняют с использованием стандартных концентраций (от 0,01 до 10 М, обычно от 0, 1 до 1 М), температур (от -100 до 250°С, обычно от -78 до 150°С, чаще от -78 до 100°С, преимущественно от 0 до 100°С), реакционных сосудов (обычно стеклянных, пластмассовых, металлических), растворителей, давления, газообразной среды (обычно воздуха для реакций, нечувствительных к присутствию кислорода и воды, или азота или аргона для реакций, чувствительных к присутствию кислорода и воды) и так далее, если не указано иное. Выбор условий и устройств, которые необходимо использовать для обработки в соответствии с конкретной методикой, основан на знании аналогичных реакций в области органического синтеза. В частности, средний специалист в области органического синтеза на основе знаний в данной области техники может выбрать условия и устройства, предположительно необходимые для успешного осуществления химических реакций описанных здесь методик.
Модификации каждой из типичных схем и схем, описанных в примерах (в дальнейшем типичных схем), позволяют получить различные аналоги конкретных типичных соединений. Подходящие методики органического синтеза, описанные выше посредством ссылки на соответствующие публикации, пригодны для такой модификации.
В каждой из типичных схем бывает полезно разделить полученные продукты реакции и/или разделить продукты реакции и исходные вещества. Желаемые продукты на каждой стадии или после нескольких стадий разделяют и/или очищают (в дальнейшем разделяют) до желаемой степени гомогенности с помощью методик, которые обычно используют для этих целей в данной области техники. Обычно такое разделение включает мультифазную экстракцию, кристаллизацию из растворителя или смеси растворителей, дистилляцию, сублимацию или хроматографию. Хроматография может включать любой набор методик, в том числе, например, методики и соответствующее оборудование для обратнофазовой и нормальнофазовой хроматографии; гель-фильтрации; ионообменной хроматографии; жидкостной хроматографии высокого, среднего и низкого давления; методики аналитической хроматографии для маломасштабного разделения, хроматографии в псевдоподвижном слое (§МВ) и препаративной тонкослойной или толстослойной хроматографии, а также методики тонкослойной хроматографии для маломасштабного разделения и флэш-хроматографии.
Другая группа методик разделения включает обработку смеси реагентом, который может избирательно связываться с желаемым продуктом, непрореагировавшим исходным веществом, побочным продуктом реакции и т.п. или обеспечивать выделение желаемого продукта другим образом. Такие реагенты включают адсорбенты или абсорбенты, такие как активированный уголь, молекулярные сита, ионообменные среды и тому подобное. Альтернативно, данные реагенты могут представлять собой кислоты, в случае основного соединения, основания в случае кислотного соединения, связующие реагенты, такие как антитела, связывающие белки, селективные хелатирующие агенты, такие как краун-эфиры, реагенты для жидкостной экстракции ионов (Ь1Х) и тому подобное.
Выбор подходящих методик разделения зависит от природы присутствующих в реакционной смеси веществ. Например, от температуры кипения и молекулярной массы при разделении путем дистилляции и сублимации, наличия или отсутствия полярных функциональных групп при разделении путем хроматографии, стабильности веществ в кислой и щелочной среде при мультифазовой экстракции и тому подобного. Специалист в данной области техники обычно использует методики, наиболее подходящие для достижения желаемого разделения.
Отдельный стереоизомер, например энантиомер, по существу, не содержащий своего стереоизомерного антипода, может быть получен путем разделения рацемической смеси с помощью такой методики, как получение диастереоизомеров с использованием агентов для оптического расщепления (§1егеосйет181гу о£ СагЬои Сотроиибк, (1962) Е.Ь. ЕНе1, МсОгате НШ; ЬосЬтиНег, С.Н., (1975) 1. СЬгота1одг., 113, 3) 283-302). Рацемические смеси хиральных соединений согласно изобретению можно разделить с выделением отдельных стереоизомеров с помощью любой подходящей методики, включая (1) образование ионных диастереоизомерных солей с хиральными соединениями и их разделение путем фракционной кристаллизации или с использованием других методик, (2) получение диастереоизомерных соединений с использованием хиральных разделяющих реагентов, разделение данных диастереоизомеров и их превращение в чистые стереоизомеры и (3) разделение, по существу, чистых или обогащенных стереоизомеров непосредственно в хиральных условиях.
В соответствии с методикой (1) диастереоизомерные соли могут быть получены путем взаимодействия энантиомерно чистых хиральных оснований, таких как бруцин, хинин, эфедрин, стрихнин, αметил-в-фенилэтиламин (амфетамин) и тому подобное, с асимметрическими соединениями, содержащи- 16 025794 ми кислотную функциональную группу, такими как карбоновая кислота и сульфоновая кислота. Полученные диастереоизомерные соли можноразделять путем фракционной кристаллизации или ионной хроматографии. Если необходимо разделить оптические изомеры амино-соединений, диастереоизомерные соли могут быть получены путем добавления хиральных карбоновых или сульфоновых кислот, таких как камфорсульфоновая кислота, винная кислота, миндальная кислота или молочная кислота.
Альтернативно, в соответствии с методикой (2) субстрат, который требуется разделить, подвергают взаимодействию с одним энантиомером хирального соединения с получением диастереоизомерной пары (ЕНе1, Е. апб \Убсп. 8. (1994) Шетеоейеткйу о£ Отдашс Сотроипбк, Ιοίιη \УПсу & 8оп§, 1пс., р. 322). Диастереоизомерные соединения могут быть получены в результате взаимодействия асимметрических соединений с энантиомерно чистыми хиральными разделяющими реагентами, такими как метилпроизводные, последующего разделения данных диастереоизомеров и их гидролиза с выходом свободного энантиомерно обогащенного ксантена. Методика определения оптической чистоты включает получение из рацемической смеси хиральных сложных эфиров, таких как метиловый эфир, например (-)метил хлорформиат (в присутствии основания), или эфир Мошера, а-метокси-а-(трифторметил)фенилацетат ПасоЬ III. (1982) I. Огд. Сйет. 47:4165), и анализ ЯМР-спектра на присутствие двух атропизомерных диастереоизомеров. Стабильные диастереоизомеры атропизомерных соединений можноразделять и выделены путем нормальнофазовой и обратнофазовой хроматографии в соответствии с методиками разделения атропизомерных нафтил-изохинолинов (Ноуе, Т., \УО 96/15111). В соответствии с методикой (3) рацемическая смесь двух энантиомеров может быть разделена путем хроматографии с использованием хиральной стационарной фазы (Сй1га1 Ысцнб Сйтота1одтарЬу (1989) V.! Ьоидй, Еб. Сйартап апб На11, Ыете Уогк; Окато1о, (1990) I. о£ Сйгота1одг. 513:375-378). Обогащенные или очищенные энантиомеры можно различить с помощью методик, используемых для различения других хиральных молекул с асимметрическими атомами углерода, таких как оптическое вращение и круговой дихроизм.
Примеры вариантов реализации настоящего изобретения
Конкретные значения и варианты реализации, указанные в данном описании для радикалов, заместителей и диапазонов, приведены только для иллюстрации и не исключают другие определенные в данном описании значения радикалов и заместителей или другие значения радикалов и заместителей в пределах определенных диапазонов.
Согласно одному из вариантов реализации соединение согласно изобретению выбрано из группы, состоящей из
- 18 025794
- 19 025794
- 21 025794
- 22 025794
- 23 025794
Примеры
Раздел А. Получение промежуточных соединений.
1. Получение промежуточного соединения I.
Стадия 1.
В сухую трехгорлую круглодонную колбу (1000 мл), продуваемую аргоном, добавляли безводный дихлорметан (100 мл) и Εΐ2Ζη (28 мл, 273 ммоль) при 0°С. (Внимание: источник аргона нельзя подсоединять через иглу. Использовать только соответствующий стеклянный адаптор. К колбе также можно подсоединить второй барботер для предотвращения чрезмерного нагнетания давления.) Затем в колбу добавляли по каплям циклопентен-3-ол (10,0 мл, 119 ммоль) (выделялось большое количество газообразного этана), и данную реакционную смесь оставляли перемешиваться до тех пор, пока не прекращалось выделение газа. Затем добавляли по каплям в течение периода времени, составляющего 30 мин, дииодметан (22 мл, 242 ммоль). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры, и перемешивание продолжали в течение ночи в принудительном потоке аргона до тех пор, пока ТСХ-анализ не показывал, что исходный спирт полностью израсходован. Затем реакционную смесь разбавляли СН2С12 и гасили путем добавления 2 М НС1 (белый осадок должен был полностью раствориться). Полученную двухфазную смесь вливали в делительную воронку, и собирали органический слой. Растворитель удаляли при пониженном давлении, пока не оставалось 100 мл вещества.
Стадия 2.
В колбу добавляли безводный дихлорметан (525 мл), затем добавляли по каплям триэтиламин (34 мл, 245 ммоль). Все это время реакционную смесь продолжали перемешивать при комнатной температуре в принудительном потоке аргона, затем в колбу добавляли порциями дисукцинимидилкарбонат (40,7 г, 159 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться до тех пор, пока ТСХ-анализ не показывал, что исходное вещество полностью израсходовано (2-3 суток). После завершения реакции реакционную смесь гасили путем добавления 1 М НС1 (200 млх2) и промывали Н2О (200 млх2). Желаемое вещество экстрагировали с использованием СН2С12 и объединенные органические слои сушили, используя безводный Мд§О4, и пропускали через силикагелевую подушку. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученное неочищенное вещество очищали с использованием флэш-хроматографии (К£ (фактор удерживания)=0,33, 1:1 гексан/ЕЮАс) с получением промежуточного соединения I (22 г, 75%): 1Н ЯМР (ядерный магнитный резонанс) (300 МГц, СИС13): δ 5. 24 (ΐ, 1Н), 3.82 (8, 4Н), 2.24 (т, 2Н), 2.03 (ά, 2Н), 1.38 (т, 2Н), 0.48 (т, 1Н), 0.40 (т, 1Н).
2. Получение промежуточного соединения II.
К раствору цис-3-гидроксибицикло[3,1,0]гексана (980 мг, 10 ммоль), 4-нитробензойной кислоты (2,0 г, 12 ммоль) и трифенилфосфина (3,0 г, 12 ммоль) в ТНР (тетрагидрофуране) (20 мл) добавляли диизопропилазодикарбоксилат (2,58 мл, 12 ммоль) при 0°С. Данную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре и затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением 2,2 г (0,96 г, 77%) указанного на схеме сложного эфира. ЖХ/МС (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия):=775,4 (М++1).
Полученный сложный эфир растворяли в ТНР (40 мл), и добавляли водный раствор гидроксида лития (2 г/20 мл). Данную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, и затем добавляли диэтиловый эфир (30 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали до объема ~10 мл. Добавляли дихлорметан (40 мл), и снова сушили над сульфатом натрия. Полученный раствор желаемого спирта концентрировали до объема ~20 мл и как есть использовали на следующей стадии реакции. Промежуточное соединение II получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении промежуточного соединения I.
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13): δ 4.80 (ΐ, 1Н), 3.82 (8, 4Н), 2.38 (т, 2Н), 2.01 (ά, 2Н), 1.40 (т, 2Н), 0.45 (т, 1Н), 0.02 (т, 1Н).
- 24 025794
3. Получение трипептидных промежуточных соединений.
Стадия 1.
М-трет-Вос-цис-4-Гидрокси-Ь-пролина метиловый эфир (100,0 г, 407,7 ммоль) и ΌΛΒΤΌ (1,4диазабицикло[2.2.2]октан) (1,5 экв., 68,6 г, 611,6 ммоль) растворяли в безводном толуоле (200 мл) в трехгорлой круглодонной колбе объемом 2 л, оснащенной механической мешалкой и капельной воронкой. После охлаждения полученного раствора в атмосфере Ν2 до 0°С через капельную воронку в течение 60 мин добавляли раствор 4-бром-бензолсульфонилхлорида (1,3 экв., 135,6 г, 530,0 ммоль) в 300 мл толуола. Данную реакционную смесь перемешивали и нагревали до комнатной температуры в течение ночи (16 ч). Смесь медленно вливали в 2 л 1 М водного раствора Ν;·ι2ί'Ό3,. и желаемый продукт экстрагировали ЕЮАс (2 л). Органическую фазу промывали 0,5н. НС1 (2 л), Н2О (1 л) и солевым раствором (1 л), затем сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением 195,45 г указанного на схеме брозилата в виде желтого маслянистого продукта.
К раствору указанного брозилата (407,7 ммоль) в дихлорметане (300 мл) медленно добавляли 4,0 М НС1 в диоксане (500 мл, 5 экв.), и полученный раствор оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли указанный на схеме эфир (500 мл), смесь перемешивали в течение 15 мин, и собирали путем фильтрования образовавшийся белый осадок. Полученное твердое вещество промывали диэтиловым эфиром и гексаном и затем сушили под вакуумом в течение ночи с выходом указанного на схеме амина в форме НС1-соли (153,0 г, 381,8 ммоль, выход 94% после двух стадий).
Стадия 2.
К раствору Вос-трет-бутилглицина (97,0 г, 420,0 ммоль) в ΌΜΡ (диметилформамиде) (200 мл) и ОС’М (дихлорметане) (200 мл) добавляли НАТи (О-(7-азабензотриазол-1-ил)-^^№,№тетраметилурония гексафторфосфат) (217,76 г, 572,7 ммоль) и основание Хюнига (126 мл, 1145,4 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 20 мин при комнатной температуре, и затем к данной смеси (содержащей вышеуказанную кислоту) за один прием добавляли раствор полученной на предыдущей стадии НС1-соли (153,0 г, 381,8 ммоль) и основания Хюнига (126 мл, 1145,4 ммоль) в ΌΜΡ (200 мл) и дихлорметане (200 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, контролируя реакцию с помощью ЖХ/МС. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления дихлорметана, и отфильтровывали образовавшееся белое твердое вещество. Оставшийся ΌΜΡ-раствор разбавляли этилацетатом (1 л), промывали последовательно 3% водным раствором ЫС1 (3x650 мл), насыщенным раствором ΝΉ4Ο (2x500 мл), 0,5н. водным раствором НС1 (2x600 мл), солевым раствором (500 мл), насыщенным раствором NаНСОз (3x500 мл) и солевым раствором (500 мл). Органическую фракцию сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением неочищенного трипептида (111 г).
Стадия 3.
К раствору полученного на предыдущей стадии сложного метилового эфира (120 г, 207,8 ммоль) в ТНР (300 мл) и МеОН (75 мл) добавляли раствор ЫОН (26, 18 г, 623,4 ммоль) в Н2О (150 мл). Данный раствор оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь подкисляли до рН приблизительно 5,5 путем добавления 3н. НС1 с использованием охлаждения в ледяной бане, перемешивали в течение 10 мин, и собирали путем фильтрования образовавшееся белое твердое вещество. Твердое вещество промывали еще раз водой, диэтиловым эфиром и гексаном. Твердое вещество сушили под вакуумом при 40°С в течение ночи с получением 95,78 г (82%) указанной на схеме кислоты.
Стадия 4.
К раствору полученной карбоновой кислоты (81,4 г, 144,27 ммоль) в ОМР (200 мл) и дихлорметане (200 мл) добавляли НАТИ (82,3 г, 216,4 ммоль) и основание Хюнига (47,5 мл, 432,8 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 20 мин при комнатной температуре, и затем к данной смеси (содержащей вышеуказанную кислоту), за один прием добавляли раствор указанного на схеме
- 25 025794 амина (158,7 ммоль) и основания Хюнига (47,5 мл, 1145,4 ммоль) в ΌΜΡ (200 мл) и дихлорметане (200 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, контролируя реакцию с помощью ЖХ/МС. Смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления дихлорметана, и отфильтровывали образовавшееся белое твердое вещество. Оставшийся ΌΜΡ-раствор разбавляли этилацетатом (600 мл) и промывали последовательно 3% водным раствором ЫС1 (2x550 мл), насыщенным раствором ΝΗ.·|0 (500 мл), 1н. водным раствором НС1 (500 мл), насыщенным раствором ЫаНСО3 (500 мл) и солевым раствором (300 мл). Органическую фракцию сушили (Να2δϋ4) и концентрировали с получением неочищенного трипептида (111 г).
Стадия 5.
Полученный неочищенный трипептид растворяли в 4н. НС1 в диоксане (300 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 2 ч. Затем концентрировали под вакуумом, и досуха упаривали с дихлорметаном (2x200 мл). Остаток растворяли в ЕЮАс (600 мл) и насыщенном водном растворе №НСО3 (1 л). Данную смесь интенсивно перемешивали. Через 10 мин за один прием добавляли угольной кислоты (бицикло[3,1,0]гекс-3-ил) 2,5-диоксо-пирролидин-1-иловый эфир (промежуточное соединение I, 41,4 г, 173,1 ммоль). Полученную смесь перемешивали дополнительно в течение 30 мин, затем органический слой собирали и промывали солевым раствором (500 мл), сушили (№28О4) и концентрировали. Полученный неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексан) с выходом 94,44 г (92%) трипептидного промежуточного соединения III.
4. Получение хинолинового промежуточного соединения IV.
Стадия 1.
1-(2-Амино-3-хлор-4-гидроксифенил)этанон (70,7 г, 354 ммоль) перемешивали в 48% водном растворе НВг (500 мл) при 110°С в течение 72 ч. Данную смесь охлаждали при перемешивании до 0°С, затем твердое вещество отфильтровывали и промывали водой. Полученное твердое вещество растирали с насыщенным раствором NаНСО3 (~350 мл), фильтровали, промывали водой и сушили под вакуумом с получением ~ 40 г (61%) неочищенного продукта в виде темно-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС=186 (М++1).
Стадия 2.
1- (2-Амино-3-хлор-4-гидроксифенил)этанон (40 г, 215 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (360 мл). Добавляли последовательно карбонат цезия (140 г, 430 ммоль) и бромацетальдегида диметилацеталь (54,5 г, 323 ммоль). Затем данную смесь интенсивно перемешивали при 65°С в течение 24 ч. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляли ЕЮАс (1 л) и Н2О (1 л). Органический слой экстрагировали ЕЮАс (1x400 мл). Объединенный органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (2x1 л), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого продукта в виде белого твердого вещества (39 г, 67%).
Стадия 3.
К смеси 1-[2-амино-3-хлор-4-(2,2-диметоксиэтокси)фенил]этанона (13 г, 47,5 ммоль) и изопропиламинотиазол-4-карбоновой кислоты гидробромида (12,64 г, 47,5 ммоль) в пиридине (150 мл) медленно добавляли оксихлорид фосфора (9,47 г, 61,8 ммоль) при -40°С. Затем данную смесь перемешивали при 0°С в течение 4 ч. После завершения реакции к смеси добавляли по каплям Н2О (30 мл). Затем смесь перемешивали при 0°С дополнительно в течение 15 мин. Смесь концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли ЕЮАс, промывали насыщенным водным раствором NаНСО3. Органический слой сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в СН2С12, к данному раствору медленно добавляли гексаны, начинало выпадать в осадок желтое твердое вещество. Гексаны продолжали добавлять до тех пор, пока в маточной жидкости не оставалась лишь небольшая часть продукта (18 г, 85%).
Стадия 4.
2- Изопропиламинотиазол-4-карбоновой кислоты [6-ацетил-2-хлор-3 -(2,2диметоксиэтокси)фенил]амид (18 г, 40,7 ммоль) суспендировали в толуоле (400 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли №Н (2,4 г, 61 ммоль), в процессе добавления регистрировали выделение Н2. В процессе нагревания до температуры дефлегмации смесь превращалась в прозрачный раствор. Реакция завершалась после нагревания при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. К смеси добавляли раствор АсОН (69,2 ммоль) в Н2О (3 об.). После интенсивного перемешивания в течение 1 ч при 0°С твердое вещество собирали путем фильтрования,
- 26 025794 промывали Н2О. Влажный фильтрационный осадок сушили до постоянной массы в условиях глубокого вакуума с получением промежуточного соединения IV (15 г, 86%).
5. Получение хинолинового промежуточного соединения V.
В круглодонную колбу объемом 250 мл вносили смесь твердых веществ, 2-хлор-3метоксифениламина (3,98 г, 25 ммоль) и малоновой кислоты (2,63 г, 25 ммоль), и добавляли оксихлорид фосфора (2,5 мл, 27,5 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 95°С при интенсивном перемешивании, происходило слабое пенообразование, которое заканчивалось в течение 1,5 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры. В полученное темно-коричневое смолообразное вещество добавляли оксихлорид фосфора (30 мл), и нагревали до 115°С. При нагревании вещество растворялось. После нагревания при температуре дефлегмации в течение 3 ч смесь концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли хлороформом и выливали в смесь лед/вода. рН смеси доводили до 10 путем добавления 3н. водного раствора ΝαΟΗ. Водный слой экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением продукта в виде белого твердого вещества (2,75 г, выход 46% после 2 стадий). ЖХ/МС=261,9 (М++1).
Смесь пиразола (3,1 г, 45,7 ммоль) и полученного на предыдущей стадии трихлорзамещенного соединения (1,2 г, 4,57 ммоль) нагревали в герметично закрытой пробирке для микроволновой печи. После плавления всех твердых веществ при 80°С из пробирки удаляли остаточную влагу с использованием централизованной вакуумной системы (1юи5С уасиит), и смесь оставляли перемешиваться при 115°С в течение 18 ч. Для растворения всех твердых веществ добавляли этилацетат и Н2О. Органическую фазу промывали 0,5н. водным раствором НС1 и солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Полученное твердое вещество растирали со смесью этилацетат/гексаны, собирали путем фильтрования и дополнительно сушили в условиях глубокого вакуума с получением указанного на схеме пиразола в виде бледно-желтого твердого вещества (1,28 г, с примесью небольшого количества бис-аддукта). ЖХ/МС=294,0 (М++1).
Полученный на предыдущей стадии продукт (650 мг, 2,2 ммоль) суспендировали в уксусной кислоте (7 мл) и ацетате натрия (2,2 г, 27 ммоль). Данную смесь нагревали при 130°С в течение 3 суток в герметично закрытой пробирке для микроволновой печи. Смесь отвердевала в процессе охлаждения до комнатной температуры. Для растворения смеси добавляли этилацетат и Н2О. К органическому слою добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия, и перемешивали в течение 5 мин. Затем органический слой промывали солевым раствором и концентрировали под вакуумом. Затем остаток растирали со смесью этилацетат/гексаны. Путем фильтрования собирали промежуточное соединение V (чистое вещество согласно ВЭЖХ-анализу) (300 мг, выход 50% после 2 стадий). ЖХ/МС=276,0 (М++1).
Раздел Б.
Пример 1. Получение соединения 1.
Смесь указанных на схеме метилового эфира (0,62 г, 1,1 ммоль), гидроксихинолина (0,34 г, 1,1 ммоль) и карбоната цезия (0,39 г, 1,2 ммоль) в ΝΜΡ Щ-метил-2-пирролидоне) (6 мл) перемешивали при 65°С в течение 16 ч. Смесь распределяли между этилацетатом (50 мл) и 3% водным раствором ЫС1 (50 мл). Органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (50 мл) и затем солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хро- 27 025794 матографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением продукта реакции (0,45 г, 64%) в виде красно-коричневого твердого вещества. Данный продукт растворяли в ТНР (2 мл) и МеОН (2 мл), и полученный раствор обрабатывали гидроксидом лития в воде (0,29 мг/2 мл) в течение 3 ч при комнатной температуре и нейтрализовали путем добавления 4н. НС1. После удаления летучих растворителей данную смесь экстрагировали дихлорметаном, и экстракт концентрировали досуха с получением указанной на схеме кислоты ЖХ/МС=642,3 (М++1).
К раствору полученной кислоты (440 мг, 0,69 ммоль) (1К,28)-1-амино-2винилциклопропанкарбоновой кислоты метилового эфира гидрохлорида (147 мг, 0,82 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,48 мл, 2,8 ммоль) добавляли НАТИ (390 мг, 1,0 ммоль) при 0°С, и перемешивали в течение 30 мин. К данной смеси добавляли при перемешивании этилацетат (50 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (50 мл). Органический слой отделяли и промывали 3% водным раствором ЫС1 (50 мл) и затем солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением продукта реакции (0,35 г, 66%) в виде красно-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС=765,5 (М++1). Данный продукт растворяли в дихлорметане (3 мл), и полученный раствор обрабатывали 4н. НС1 в диоксане (8 мл) в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрировали досуха с получением указанного на схеме амина.
К двухфазному раствору полученного амина (38 мг, 0,054 ммоль) в дихлорметане (20 мл) и 5% водном растворе бикарбоната натрия (20 мл) добавляли порциями раствор промежуточного соединения I в дихлорметане до тех пор, пока исходное вещество не было полностью израсходовано (четыре раза с интервалом 30 мин, в целом ~25 мг/1 мл). Отбирали слой дихлорметана и концентрировали. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии), используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА (трифторуксусная кислота)). Полученный продукт, сложный метиловый эфир, затем растворяли в смеси МеОН/вода (20 мл/2 мл). Добавляли избыток гидроксида лития (100 мг), и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Последовательно добавляли дихлорметан (40 мл) и 1н. НС1 (20 мл). При перемешивании добавляли по каплям насыщенный водный раствор бикарбоната натрия до тех пор, пока рН водной фазы не достигал ~7. Слой дихлорметана концентрировали, и остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением 14 мг (33%) соединения 1. 1Н ЯМР (300 МГц, СН3ОО): δ 8.75 (5, 1Н), 8.24 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 7.75 (т, 2Н), 7.34 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 5.87 (йй, 1Н), 5.77 (Ьг5, 1Н),
5.28 (й, 1=17.1 Гц, 1Н), 5.11 (й, 1=10.5 Гц, 1Н), 4.74 (ΐ, 1Н), 4.64 (й, 1Н), 4.51 (ΐ, 1Н), 4.20 (т, 2Н), 4.09 (т, 1Н), 4.05 (5, 3Н), 2.78 (т, 1Н), 2.59 (т, 1Н), 2.20 (ц, 1Н), 1.95 (йй, 1Н), 1.85 (йй, 1Н), 1.72 (т, 2Н), 1.43 (т, 2Н), 1.34 (й, 6Н), 1.19 (т, 2Н), 1.04 (5, 9Н), 0.38 (т, 2Н). ЖХ/МС=775.4 (М++1); ЖХ/МС: К,=2.45 мин.
Пример 2. Получение соединения 2.
Соединение 2 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали карбонат II. 'Н ЯМР (300 МГц, С1ТОЩ: δ 8.75 (5, 1Н), 8.28 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 7.77 (5, 1Н), 7.73 (5, 1Н), 7.34 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 5.86 (йй, 1Н), 5.77 (Ьг5, 1Н), 5.28 (й, 1=17.1 Гц, 1Н), 5.11 (й, 1=10.5 Гц, 1Н), 4.72 (ΐ, 1Н), 4.64 (й, 1Н), 4.18
- 28 025794 (т, 1Н), 4.12 (т, 2Н), 4.06 (5, 3Н), 2.78 (т, 1Н), 2.58 (т, 1Н), 2.20 (φ 1Н), 1.93 (άά, 1Н), 1.4-1.4 (т, 4Н), 1.34 (ά, 6Н), 1.30 (т, 2Н), 1.22 (т, 2Н), 1.04 (5, 9Н), 0.38 (ф 1Н), -0.14 (т, 1Н). ЖХ/МС=775.4 (М++1); ЖХ/МС: К<=2.33 мин.
Пример 3. Получение соединения 3.
Соединение 3 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали трипептидное промежуточное соединение, которое получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали 8-хлор-2-(2изопропиламинотиазол-4-ил)-7-метоксихинолин-4-ол. ЖХ/МС=809,5 (М++1); ЖХ/МС Р,=4.42 мин (продолжительность хроматографии: 6 мин).
Пример 4. Получение соединения 4.
Соединение 4 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 2, за исключением того, что использовали трипептид, который получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали 8-хлор-2-(2-изопропиламинотиазол-4-ил)-7-метоксихинолин-4-ол. ЖХ/МС=809,5 (М++1); ЖХ/МС: К,=4,38 мин (продолжительность хроматографии: 6 мин).
Пример 5. Получение соединения 5.
Соединение 5 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 3, за исключением того, что использовали указанный на схеме карбонат, который получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали экзо-бицикло[2,2,1]гептан-2-ол. ЖХ/МС=823,3 (М++1); аналитическая ВЭЖХ: К,=5,40 мин (продолжительность хроматографии: 7 мин).
Пример 6. Получение соединения 6
Соединение 6 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 3, за исключением того, что использовали указанный на схеме карбонат, который получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали (+)-эндо-бицикло[2,2,1]гептан-2-ол. ЖХ/МС=823,3 (М++1); аналитическая ВЭЖХ: К,=5,41 мин (продолжительность хроматографии: 7 мин).
- 29 025794
Пример 7. Получение соединения 7.
Соединение 7 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 3, за исключением того, что использовали трипептид, который получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали (1К,2§)-1-амино-2-этилциклопропанкарбоновой кислоты метилового эфира гидрохлорид.
Указанный на схеме карбонат получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали транс-6,6-дифторбицикло[3,1,0]гексан-3-ол (полученный в соответствии с №0266640558, с последующим хроматографическим разделением цис- и транс-изомеров на силикагеле). ЖХ/МС=847,5 (М++1); ЖХ/МС: К,=2.76 мин.
Пример 8. Получение соединения 8.
Соединение 8 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 7, за исключением того, что использовали указанный на схеме карбонат, который получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 1, за исключением того, что использовали цис-6,6-дифтор-бицикло[3,1,0]гексан-3-ол. ЖХ/МС=847,5 (М++1); ЖХ/МС: Щ=2,73 мин.
Пример 9. Получение соединения 9.
Указанный на схеме трипептид (391 мг, 0,55 ммоль) и промежуточное соединение V (150 мг, 0,55 ммоль) растворяли в ΝΜΡ (3 мл). К полученной смеси добавляли карбонат цезия (352 мг, 1,08 ммоль), и данную смесь нагревали при 70°С в течение 4 ч. К остатку добавляли этилацетат и 3% водный раствор ЫС1. Органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (х 1) и солевым раствором. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в ТНР (1,5 мл). К данной смеси добавляли последовательно водный раствор ЫОН (5,5 ммоль, 1,5 мл) и МеОН (2 мл). Реакция завершалась после интенсивного перемешивания в течение 1,5 ч при комнатной температуре. рН подводили до 5 путем добавления 4н. водного раствора НС1. К остатку добавляли этилацетат и солевой раствор, и органический слой концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением соединения 9 (120 мг, часть продукта теряли в процессе очистки вследствие плохой растворимости). 'Н ЯМР (300 МГц, ΌΜ80-ά6): δ 8.78 (5, 1Н), 8.56 (5, 1Н), 8.04 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.91 (5, 1Н), 7.51 (5, 1Н), 7.40 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.01 (ά, 1=8.4 Гц, 1Н), 6.67 (5, 1Н), 5.64-5.77 (т, 1Н), 5.58 (Ьг5, 1Н), 5.20 (ά, 1=17.7 Гц, 1Н), 5.05 (ά, 1=11.4 Гц, 1Н), 4.59 (1, 1Н), 4.44 (1, 1=8.4 Гц, 1Н), 4.33 (ά, 1Н), 3.94-4.07 (т, 2Н), 4.02 (5, 3Н), 2.48-2.60 (т, 1Н), 2.20-2.35 (т, 1Н), 1.85-2.11 (т, 2Н), 1.72-1.85 (т, 1Н), 1.50-1.51 (т, 2Н), 1.05-1.35 (т, 4Н), 0.93 (5, 9Н), 0.39 (д, 1Н), 0.25-0.38 (т, 1Н). ЖХ/МС=735.4 (М++1).
- 30 025794
Пример 10. Получение соединения 10.
Соединение 10 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 9. *Н ЯМР (300 МГц, ΏΜδΟ-46): δ 8.78 (8, 1Н), 8.31 (Ьг8, 1Н), 8.04 (4, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.91 (8, 1Н), 7.50 (8, 1Н), 7.38 (4, 1=9.3 Гц, 1Н), 6.98 (4, 1=9.9 Гц, 1Н), 6.66 (8, 1Н), 5.56 (8, 1Н), 4.59 (ΐ, 1Н), 4.44 (ΐ, 1=8.4 Гц, 1Н), 4.33 (4, 1Н), 3.94-4.07 (т, 2Н), 4.02 (8, 3Н), 2.48-2.60 (т, 1Н), 2.20-2.35 (т, 1Н), 1.85-2.11 (т, 2Н), 1.40-1.60 (т, 2Н), 1.06-1.30 (т, 4Н), 0.93 (8, 9Н), 0.90-1.05 (т, 4Н), 0.39 (ц, 1Н), 0.250.38 (т, 1Н). ЖХ/МС=737.4 (Μ++1).
Пример 11. Получение соединения 11.
Соединение 11 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 9. ЖХ/МС=863,5 (М++1).
Пример 12. Получение соединения 12.
Соединение 11 (25 мг) растворяли в 50% растворе ТРА в С1РСР. Реакция завершалась после перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в Ο4^Ν и Н2О, замораживали и лиофилизировали с получением соединения 12 в виде бледно-желтого твердого вещества (20 мг). ЖХ/МС=763,5 (М++1).
Пример 13. Получение соединения 13.
Указанный на схеме сложный метиловый эфир (0,95 г, 1,08 ммоль) растворяли в СН2С12 (10 мл), и добавляли 4н. НС1 в 1,4-диоксане (30 мл). Реакция завершалась после перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь концентрировали под вакуумом. К остатку добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (80 мл) и СН2С12 (80 мл). Продолжали интенсивное перемешивание до тех пор, пока остаток полностью не растворился. Органический слой промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. 250 мг (0,322 ммоль) полученного вещества растворяли в СН2С12 (2 мл), и затем добавляли уксусную кислоту (56 мкл, 0,967 ммоль) и ацетон (72 мкл, 0,967). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин, затем охлаждали до 0°С, и за один прием добавляли триацетоксиборгидрид натрия (102 мг, 0,483 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 ч к данной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и СН2С12. Органический слой промывали солевым раствором и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилаце- 31 025794 тат/гексаны) с получением продукта в виде бледно-желтого твердого вещества (180 мг). Полученное твердое вещество растворяли в ТНР (4 мл), и добавляли ЫОН (184 мг, 44 ммоль) в Н2О (4 мл) и затем МеОН (4 мл). Реакция завершалась в течение 2 ч. Смесь концентрировали под вакуумом. рН доводили до 2 путем добавления ТРА. Смесь концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением соединения 13 в виде ярко-желтого твердого вещества (128 мг). 'Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.66 (δ, 1Н), 8.22 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 8.00 (т, 1Н), 7.94 (б, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.79 (δ, 1Н), 7.58 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.14 (б, 1=8.4 Гц, 1Н), 5.70 (δ, 1Н), 4.72 (ΐ, 1=8.4 Гц, 1Н), 4.54 (б, 1=12.3 Гц, 1Н), 4.39 (ΐ, 1=6.6 Гц, 1Н), 4.01-4.25 (т, 2Н), 4.13 (δ, 3Н), 2.73-2.83 (т, 1Н), 2.50-2.62 (т, 1Н), 1.85-1.92 (т, 1Н), 1.60-1.80 (т, 5Н), 1.45-1.60 (3Н), 1.47 (б, 6Н), 1.101.30 (т, 3Н), 1.00 (δ, 9Н), 0.32-0.40 (т, 1Н), 0.25-0.35 (т, 1Н); ЖХ/МС=805.5 (М++1).
Пример 14. Получение соединения 14.
Указанный на схеме циклический трипептид (5 г, 10,4 ммоль) и пара-толуолсульфонил гидразид (14,6 г, 78,2 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (90 мл). Добавляли последовательно ацетат натрия (12,8 г, 156 ммоль) и Н2О (10 мл). Затем данную суспензию нагревали до 95°С. После перемешивания в течение 8 ч смесь охлаждали до комнатной температуры. К смеси добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Органический слой промывали 0,5н. водным раствором НС1, солевым раствором и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением желаемого продукта в виде белого твердого вещества (4,2 г, 84%). Полученное твердое вещество (4,2 г, 8,7 ммоль) и ЭАВСО (3,2 г, 27,9 ммоль) растворяли в толуоле (12 мл). К данной смеси добавляли по каплям 4бромбензолсульфонилхлорид (7,1 г 27,9 ммоль) в толуоле (12 мл). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли 5% водный раствор карбоната натрия и этилацетат, и интенсивно перемешивали в течение 20 мин. Водный слой экстрагировали этилацетатом (х1). Объединенный органический слой промывали 5% водным раствором карбоната натрия (х2), 1н. водным раствором НС1 (х 1), солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде желтоватого твердого вещества. Полученный неочищенный продукт растворяли в СН2С12, и добавляли 4н. НС1 в 1,4-диоксане. Реакция завершалась после перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали под вакуумом и дополнительно сушили в условиях глубокого вакуума в течение ночи. К 2,5 г неочищенного остатка (~3,9 ммоль) добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Данную смесь интенсивно перемешивали до тех пор, пока не растворилось твердое вещество (поддерживая рН водного слоя > 8). К смеси добавляли Р3 сукцинимидиловый эфир (1,13 г, 4,7 ммоль) в этилацетате. Реакция завершалась в течение 30 мин. Водный слой экстрагировали этилацетатом (х1). Объединенные органические слои концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением указанного на схеме брозилата в виде белого твердого вещества (2,5 г, выход 88% за 4 стадии). ЖХ/МС=724,3 (М++1).
Соединение 14 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 9, за исключением того, что использовали указанные на схеме макроциклический трипептид и хинолин. Ή ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.65 (δ, 1Н), 8.29 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.69 (δ, 1Н), 7.64 (б, 1=9.6 Гц, 1Н), 5.71 (δ, 1Н), 4.78 (б, 1=8.1, 1Н), 4.72 (б, 1Н), 4.40-4.52 (т, 3Н), 4.25 (б, 1Н), 4.00-4.18 (т, 2Н), 3.85-3.89 (т, 1Н), 3.47 (δ, 3Н), 2.63-2.80 (т, 2Н), 1.10-2.00 (т, 23Н), 1.35 (б, 1=6.3 Гц, 6Н), 0.300.39 (т, 2Н). ЖХ/МС=851.5 (М++1).
Пример 15. Получение соединения 15.
Соединение 15 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным
- 32 025794 при получении соединения 9, за исключением того, что использовали указанные на схеме макроциклический трипептид и хинолин. Ή ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.65 (5, 1Н), 8.33 (ά, 1=9.6 Гц, 1Н), 8.20 (5, 1Н), 7.76 (5, 1Н), 7.60 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 5.72 (5, 1Н), 4.75-4.82 (т, 3Н), 4.58-4.70 (т, 2Н), 4.30 (ά, 1Н), 4.09 (ά, 1Н), 3.92-4.06 (Ъг5, 4Н), 3.81 (1, 2Н), 3.59 (Ъг5, 4Н), 2.60-2.80 (т, 2Н), 1.10-2.00 (т, 23Н), 1.38 (ά, 1=5.4 Гц, 6Н), 0.32-0.42 (т, 2Н). ЖХ/МС=921.5 (М++1).
Пример 16. Получение соединения 16.
Соединение 16 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 9. 'Н ЯМР (300 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ 8.59 (5, 1Н), 8.11 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.80-7.96 (т, 4Н), 7.51 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.04 (ά, 1Н), 5.65-5.78 (т, 1Н), 5.58 (5, 1Н), 5.18 (ά, 1Н), 5.06 (ά, 1=10.5 Гц), 4.62 (1, 1Н), 4.45 (1, 1Н), 4.32 (ί, 1Н), 3.90-4.20 (т, 2Н), 4.04 (5, 3Н), 2.50-2.65 (т, 1Н), 2.22-2.38 (т, 1Н), 1.78-2.10 (т, 3Н), 1.42-1.60 (т, 3Н), 1.10-1.38 (3Н), 1.47 (ά, 6Н), 1.10-1.30 (т, 3Н), 0.94 (5, 9Н), 0.23-0.48 (т, 1Н); ЖХ/МС=803.5 (М++1).
Пример 17. Получение соединения 17.
В сухую круглодонную колбу (250 мл), продуваемую азотом, вносили указанный на схеме Восзащищенный дипептид. Затем в колбу добавляли безводный СН2С12 (15 мл), и полученную прозрачную желтую смесь перемешивали до полностью гомогенного состояния. Затем в колбу добавляли по каплям НС1 (5 мл, 4н. раствор в диоксане), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока не было полностью израсходовано исходное вещество (1,5 ч, по данным ЖХ/МС). Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученную соль амина использовали на следующей стадии. ЖХ/МС=473,0 (М++1).
В круглодонную колбу (500 мл), содержащую полученную соль амина, добавляли указанную на схеме аминокислоту (951,63 мг, 3,67 ммоль) и СН2С12 (150 мл). Затем добавляли ΌΙΡΕΑ (Ν,Νдиизопропилэтиламин) (2,56 мл, 14,68 ммоль), и полученную гомогенную смесь охлаждали до 0°С. Затем в колбу добавляли НАТИ (3,49 г, 9,18 ммоль), и данную реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Реакционную смесь продолжали перемешивать при комнатной температуре до тех пор, пока не было полностью израсходовано исходное вещество. После перемешивания в течение ночи реакция завершалась (согласно ТСХ- и ЖХ/МС-анализу). Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный трипептид использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=714,2 (М++1).
- 33 025794
В круглодонную колбу (100 мл), содержащую полученный на предыдущей стадии трипептид, добавляли безводный СН2С12 (15 мл). Данную смесь оставляли перемешиваться в течение нескольких минут. Добавляли по каплям НС1 (9,18 мл, 4н. раствор диоксане). Данную реакционную смесь продолжали перемешивать при комнатной температуре в течение 1,5 ч, пока ЖХ/МС-анализ не показывал, что исходное вещество полностью израсходовано. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученную соль амина использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=614,1 (М++1).
В круглодонную колбу (250 мл), содержащую полученную на предыдущей стадии соль амина, добавляли ЕЮАс (65 мл). Затем добавляли насыщенный раствор ЫаНСОз (60 мл), и полученный двухфазный раствор интенсивно перемешивали в течение 1 ч, пока обе фазы не становились гомогенными. В отдельной круглодонной колбе (50 мл) готовили раствор указанного на схеме эфира угольной кислоты (1,05 г, 4,40 ммоль) в ЕЮАс (15 мл), данный раствор добавляли в реакционную колбу через канюлю. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, пока ЖХ/МС-анализ не показывал, что исходное вещество полностью израсходовано. Органический слой отделяли, и удаляли при пониженном давлении растворитель. Полученное неочищенное вещество очищали с использованием флэш-хроматографи (ЕЮАс/1:1 ЕЮАс/МеОН) с выходом 1,0 г (выход 37% за 4 стадии) желаемого трипептида. ЖХ/МС=710,2 (М++1).
В сухую грушевидную колбу (50 мл), продуваемую аргоном, вносили указанный на схеме хинолин (500 мг, 1,32 ммоль), полученный трипептид (1,00 г, 1,35 ммоль) и безводный ΝΜΡ (4 мл). Колбу слегка нагревали для улучшения растворения. Затем добавляли С82СО3 (531,24 мг, 1,63 ммоль), и колбу помещали в предварительно нагретую до 65°С масляную баню. После перемешивания в течение 2,5 ч согласно ЖХ/МС-анализу 50% исходного вещества превращалось в желаемый продукт. Температуру маслянной бани увеличивали до 80°С, и реакционную смесь продолжали перемешивать еще в течение 2 ч. Затем колбу охлаждали до комнатной температуры, и добавляли последовательно раствор ЫОН в Н2О (10 мл, 25 ммоль) и раствор МеОН/ТНР (1:1; 40 мл). Затем колбу помещали в предварительно нагретую до 45°С масляную баню, и перемешивание продолжали до тех пор, пока исходное вещество не было полностью израсходовано. Через 3,5 ч растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученное неочищенное вещество разбавляли ЕЮАс и нейтрализовали путем добавления 1 М НС1. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (3x15 мл), и объединенные органические слои промывали 2% ЫС1 (3x10 мл) и солевым раствором (3x10 мл) и затем сушили с использованием Мд§О4. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и данное неочищенное вещество очищали, используя препаративную ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,05% ТРА)), с получением соединения 17 (400 мг; выход 35% за 2 стадии). 'Н ЯМР (СЭС13. 300 МГц) δ 8.62 (8, 1Н), 8.28 (т, 1Н), 7.67 (т, 2Н), 5.82 (т, 1Н), 5.30 (т, 1Н), 5.13 (т, 2Н), 4.72 (т, 1Н), 4.50 (8, 1Н), 4.37 (8, 1Н), 4.03 (т, 7Н), 3.92 (т, 6Н), 3.47 (8, 2Н), 3.32 (8, 2Н), 2.83 (т, 2Н), 2.61 (т, 2Н), 1.92 (т, 2Н), 1.72 (т, 4Н), 1.56 (т, 4Н), 1.18 (т, 6Н), 0.27 (т, 2Н).
Пример 18. Получение соединения 18.
Указанный на схеме бис-фенол (2,0 г, 6,58 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (50 мл) при 0°С, и порциями
- 34 025794 добавляли КаН (589 мг, 14,73 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Через 30 мин к смеси добавляли 2-(2-бром-этокси)тетрагидропиран (1,05 мл, 6,95 ммоль). Затем данную смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре, контролируя реакцию с помощью ВЭЖХ, ЖХ/МС. Через 18 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮЛс и 3% водным раствором ЫС1 и подкисляли до рН 6. Слои разделяли, и водный слой снова экстрагировали ЕЮЛс. Органические слои объединяли и промывали солевым раствором, сушили (М§8Оф) и концентрировали под вакуумом с получением желаемого продукта (2,61 г, 92%). ЖХ/МС=430 (М++1).
Стадии 1 и 2.
Использовали описанные выше методики. ЖХ/МС=890 (М++1).
Стадия 3.
Полученную на предыдущей стадии кислоту (503,5 мг, 0,566 ммоль) растворяли в МеОН (1,80 мл) и охлаждали до 0°С. К данному раствору добавляли концентрированную НС1 (1,8 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления растворителей. Данный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом соединения 18 в виде желтого твердого вещества (159,2 мг), ЖХ/МС=805 (М++1).
Пример 19. Получение соединения 19.
Стадия 1.
Смесь указанной на схеме кислоты, пара-ТаИНИН и ИаОАс в ΏΜΕ (1,2-диметоксиэтане) (10 мл)/ЩО (1 мл) нагревали до 95°С в течение 2 ч. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс (100 мл) и 1н. НС1 (до рН приблизительно 3). Слои разделяли, и выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом). Органические слои объединяли и концентрировали. Данный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением желтого твердого вещества. ЖХ/МС=892 (М++1).
Стадия 2.
Полученную на предыдущей стадии кислоту растворяли в МеОН (3 мл) и охлаждали до 0°С. К данному раствору добавляли концентрированную НС1 (3 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления растворителей. Данный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением желаемого соединения 19 в виде желтого твердого вещества (187,7 мг). ЖХ/МС=807 (М++1). Ή ЯМР (300 МГц, СБСф): δ 8.80 (Ъ, 1Н), 8.20 (ά, 1Н), 7.9 (т, 1Н), 7.50 (т, 1Н), 7.30 (ά, 1Н), 5.90-5.80 (т, 2Н), 5.10 (т, 1Н), 4.80-4.40 (т,4Н), 4.3 (т, 3Н), 4.05 (т, 3Н), 3.20 (т, 1Н), 3.00-2.70 (т, 1Н), 2.20 (т, 2Н), 1.80-1.60 (т, 6Н), 1.50 (т, 2Н), 1.3 (т, 9Н), 1.10-0.90 (т, 14Н), 0.50 (т, 2Н).
- 35 025794
Пример 20. Получение соединения 20.
Стадия 1.
Использовали методики, описанные выше; в качестве исходного вещества использовали указанный на схеме анилин (1,877 г), получали 2,56 г продукта. ЖХ/МС=337 (М++1).
Стадия 2.
Полученное на предыдущей стадии амидное соединенние (1,50 г, 4,45 ммоль) растворяли в третВиОН (12,5 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли трет-ВиОК (9,3 мл, 4,45 ммоль). Реакция завершалась через 6 ч при 75°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Подкисляли путем добавления 4н. НС1 (5 мл). Данную суспензию обрабатывали ЫаН2РО4 (0,5н.) и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали водой и диэтиловым эфиром и затем сушили с получением желаемого продукта (1,256 г, 89%). ЖХ/МС=319 (М++1).
Соединение 20 синтезировали с использованием методики, описанной выше. ЖХ/МС=779 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СБзОБ): δ 8.13 (ά, 1Н), 7.51 (8, 1Н), 7.47 (ά, 1Н), 6.91 (8, 1Н), 5.90-5.78 (т, 1Н),
5.53 (Ь, 1Н), 5.31-5.09 (άά, 2Н).4.68-4.49 т, 3Н), 4.21 (8, 1Н), 4.07 (Ь, 5Н), 3.22 (т, 1Н), 2.72 (т, 1Н), 2.51 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.97 (т, 1Н), 1.85 (т, 1Н), 1.73-1.63 (т, 2Н), 1.44 (8, 3Н), 1.41 (8, 3Н), 1.36-1.14 (т, 4Н), 1.01 (8, 9Н), 0.97 (8, 2Н), 0.33 (т, 2Н).
Пример 21. Получение соединения 21.
Соединение 21 синтезировали с использованием методики, описанной выше. ЖХ/МС=781 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.13 (ά, 1Н), 7.51 (8, 1Н), 7.47 (ά, 1Н), 6.91 (8, 1Н), 5.53 (Ь, 1Н) 4.70-4.40 (т, 3Н), 4.21 (8, 1Н), 4.07 (Ь, 5Н), 3.67 (Ь, 2Н), 2.72 (т, 1Н), 2.52 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.97 (т, 1Н), 1.85 (т, 1Н), 173-1.63 (т, 2Н), 1.44 (8, 3Н), 1.41 (8, 3Н), 1.36-1.14 (т, 4Н), 1.01 (8, 9Н), 0.97 (8, 2Н), 0.33 (т, 2Н).
Пример 22. Получение соединения 22.
Указанный на схеме бис-фенол (600 мг, 1,79 ммоль) растворяли в ИМР (18 мл) при 0°С, и к данной смеси добавляли С82СО3 (584 мг, 1,79 ммоль) и затем бромацетонитрил (0,15 мл). Полученную смесь нагревали до 65°С, контролируя реакцию с помощью ВЭЖХ и ЖХ/МС. Через 4 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и 3% водным раствором ЫС1. Слои разделяли, и водный слой снова экстрагировали ЕЮАс. Органические слои объединяли и промывали солевым раствором, сушили (Мд§О4) и концентрировали под вакуумом с получением указанного на схеме неочищенного продукта (536 мг, 80%). ЖХ/МС=375 (М++1).
- 36 025794
Стадия 1.
Использовали методики, описанные выше; из 508 мг промежуточного соединения II получали 491 мг продукта. ЖХ/МС=851 (М++1).
Стадия 2.
Полученный сложный метиловый эфир (491 мг, 0,578 ммоль) и ΝαΙ (1,738 г) смешивали в пиридине и нагревали до 115°С в течение 19 ч. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс и подкисляли до рН 4 путем добавления 0,5н. НС1. Экстрагировали ЕЮАс (3х), органические фазы объединяли и сушили над М§§04. Концентрированный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением желаемого соединения 22 в виде желтого твердого вещества (71 мг, 14,7%), ЖХ/МС=837 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СИ3ОИ): δ 8.63 (5, 1Н), 8.34 (ά, 1Н), 8.17 (5, 1Н), 7.76 (5, 1Н), 7.64 (ά, 1Н), 5.69 (Ь, 1Н), 5.38 (Ь, 2Н), 4.73-4.50 (т, 3Н), 4.16 (5, 1Н), 4.20-3.98 (т, 3Н), 2.80-2.58 (т, 2Н), 2.0-1.8 (т, 2Н), 1.66 (т, 4Н), 0.98 (5, 2Н), 0.34 (т, 2Н).
Пример 23. Получение соединения 23.
Стадия 1.
бис-Фенол (7 г, 23,4 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (50 мл), к данной смеси добавляли последовательно карбонат цезия (15,25 г, 46,8 ммоль) и бромацетальдегида диметилацеталь (4,13 мл, 35,1 ммоль). Затем смесь интенсивно перемешивали при 65°С, контролируя реакцию с помощью ВЭЖХ и ЖХ/МС. Добавляли еще 0,5 экв. бромацетальдегида диметилацеталя и 1 экв. карбоната цезия. Через 18 ч ЖХ/МС-анализ показывал, что исходное вещество полностью израсходовано, но образовалась большое количество бисалкилированного побочного продукта. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс. Смесь промывали 3% водным раствором ЫС1, солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя МеОН/ЕЮАс, с получением желаемого продукта (1,72 г, 19%). ЖХ/МС=390 (М++1).
Стадия 2.
К смеси указанного на схеме трипептида (1,46 г, 3,75 ммоль) и карбоната цезия (1,58 г, 4,88 ммоль) в ΝΜΡ (18,5 мл) при комнатной температуре добавляли за один прием, полученный на предыдущей стадии хинолин (2,94 г, 4,12 ммоль). Данную смесь перемешивали при 65°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к смеси добавляли ЕЮАс (100 мл). Смесь промывали 3% водным раствором ЫС1 (1x100 мл), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя ЕЮАс/гексан, с получением желаемого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества (2,07 г, 64%). ЖХ/МС=837 (М++18).
- 37 025794
Стадия 3.
К раствору полученного ацеталя (1,24 г, 1,43 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (16 мл) добавляли 1,4н. НС1 в Н2О (6 мл). Данную смесь перемешивали при 60°С в течение 1,5 ч. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления растворителей, выпаривали с толуолом (х2) для удаления остатка уксусной кислоты. Затем остаток растворяли в ЕЮАс (100 мл) и насыщенном ЫаНСО3 (100 мл), органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили (Ыа28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток дополнительно сушили в условиях глубокого вакуума в течение 1 ч с получением желаемого альдегида (1,16 г) и использовали как есть на следующей стадии.
Стадия 4.
Полученный неочищенный альдегид растворяли в СН2С12 (16 мл), и затем при 0°С к данной смеси добавляли морфолин (164 мкл, 1,89 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (462 мг, 2,18 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли по каплям ледяную уксусную кислоту (25 мкл, 7,8 ммоль). Реакция завершалась в течение 10 мин при 0°С. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора ЫаНСО3. После перемешивания в течение 20 мин органический слой промывали солевым раствором, сушили (Ыа28О4) и концентрировали под вакуумом. Данный неочищенный продукт согласно ЖХ/МС-анализу был достаточно чистым для дальнейшего использования без дополнительной очистки. ЖХ/МС=890 (М++1).
Полученный неочищенный продукт растворяли в ТНР (60 мл), и затем добавляли последовательно ЬЮН (1200 мг, 28,6 ммоль) в Н2О (20 мл) и МеОН (4 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. После завершения реакции рН доводили до 4 путем добавления ТРА при 0°С. Смесь экстрагировали ЕЮАс (2х200 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили (Ыа28О4) и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом соединения 23 в виде желтого твердого вещества (1,086 г, 73%). ЖХ/МС=876 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 7.94 (й, 1Н), 7.40 (5, 1Н), 7.44 (й, 1Н), 7.39 (5, 1Н), 7.04-7.01 (т, 1Н), 5.39 (т, 1Н), 4.32-4.20 (т, 5Н), 3.80-3.68 (т, 4Н), 3.59 (Ь5, 3Н), 3.40 (т, 2Н), 3.35-3.24 (т, 4Н), 3.93-3.92 (т, 2Н), 2.40-2.19 (т, 2Н), 1.65-1.47 (т, 2Н), 1.33-1.25 (т, 3Н), 1.16-1.11 (т, 1Н), 1.05-1.01 (т, 1Н), 0.96 (5, 3Н), 0.95 (5, 3Н), 0.86-0.79 (т, 3Н), 0.65 (5, 9Н), 0.57 (т, 2Н).
Пример 24. Получение соединения 24.
Стадия 1.
Смесь 2-аминооксазол-4-карбоновой кислоты этилового эфира (500 мг, 3,2 ммоль) и ацетона (2,35 мл, 32 ммоль) в ТНР (6 мл) перемешивали при комнатной температуре. Медленно, контролируя выделение тепла и выделение пузырьков газа, добавляли через шприц боран (ВН3-8Ме2) (10 М в ТНР, 0,64 мл, 6,4 ммоль). Затем таким же способом добавляли АсОН (0,362 мл, 6,4 ммоль). (Через 18 ч добавляли еще 2 экв. борана и АсОН). Данную смесь перемешивали в атмосфере азота, контролируя реакцию с помощью ЖХ/МС. Реакцию продолжали в течение 3 дней при комнатной температуре, затем реакционную смесь, которая все еще содержала некоторое количество 8М, концентрировали под вакуумом. Полученный остаток растворяли в ЕЮАс (100 мл), промывали насыщенным раствором ΝΉ4Ο, 0,1 М ХН4ОН и солевым раствором. Органическую фазу сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Данный неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования ЕЮАс/гексаны, с получением желаемого продукта (0,40 г, 64%). ЖХ/МС=199 (М++1).
Стадия 2.
К смеси полученного на предыдущей стадии сложного эфира, (2,5, 10,86 ммоль) ЕЮН (42 мл) и воды (28 мл) добавляли №ЮН (3,1 г, 77,4 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию контролировали с помощью ТСХ. После завершения обработки смесь охлаждали в ледяной бане и подкисляли до рН 3 путем добавления концентрированной НС1. Затем смесь концентрировали под вакуумом для удаления этанола. Оставшееся вещество экстрагировали СН2С12 (3х200 мл). Органические фазы объединяли, сушили (М§8О4) и концентрировали с получением желаемого продукта (1,86 г, 87%). ЖХ/МС=171 (М++1).
Стадия 3.
К полученной на предыдущей стадии кислоте (1,86 г, 10,94 ммоль) в ЭСМ (10 мл) добавляли СЭ1 (1,1'-карбонилдиимидазол) (1,774 г, 10,94 ммоль). Затем данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли указанный на схеме анилин (1,446 г, 8,75 ммоль) и затем СН38О3Н (2,13 мл, 32,82 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. После завершения реакции смесь разбавляли ЭСМ (100 мл) и промывали 1н. НС1 (2х 100 мл). К органической фазе добавляли К2СО3 (3,02 г, 21,88 ммоль), и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и полученный фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением желаемого продукта (863,4 мг, 22%). ЖХ/МС=382 (М++1).
Стадия 4.
Полученный на предыдущей стадии метилкетон (863,4 мг, 2,45 ммоль) суспендировали в толуоле (20 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли №-)Н (147,3 мг, 3,68 ммоль); в процессе добавления регистрировали выделение Н2. Реакционную смесь подвергали дефлегмации (110°С) в течение 3 ч. Смесь не превратилась в прозрачный раствор. Согласно ЖХ/МС-анализу еще оставалось приблизительно 1/3 исходного вещества. После охлаждения осторожно добавляли приблизительно 80 мг №-)Н и затем, для улучшения растворения, 20 мл ТНР. Данную смесь нагревали дополнительно в течение 2 ч, реакция доходила почти до конца. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь гасили, доводя значение рН до приблизительно 2-3 путем добавления концентрированной НС1. Данную суспензию перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Добавляли последовательно 10 мл СН3СН 5 мл Н2О и 20 мл диэтилового эфира. Смесь перемешивали в течение еще 0,5 ч, затем твердое вещество собирали путем фильтрования и промывали диэтиловым эфиром и гексаном. Влажный фильтрационный осадок сушили до постоянной массы в условиях глубокого вакуума (390 мг НС1-соли, 840 мг, 100%). ЖХ/МС=334 (М++1).
Стадия 5.
Использовали описанные выше методики; после очистки путем препаративной ВЭЖХ получали соединение 24 в виде желтого твердого вещества (30 мг). ЖХ/МС=794 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОЭ): δ 8.74 (8, 1Н), 8.54 (8, 1Н), 8.25 (4, 1Н), 7.59 (т, 2Н), 5.90-5.80 (т, 1Н), 5.65 (Ь8, 1Н), 5.31-5.09 (44, 2Н).4.73 (ΐ, 1Н), 4.54 (т, 1Н), 4.14 (8, 3Н), 4.11-3.99 (т, 5Н), 2.81-2.60 (т, 2Н), 2.2 (т, 1Н), 2.00-1.60 (т, 4Н), 1.50-1.40 (т, 2Н), 1.35 (8, 3Н), 1.33 (8, 3Н), 1.20 (т, 2Н), 1.02 (8, 9Н), 0.34 (т, 2Н).
Пример 25. Получение соединения 25.
Использовали описанные выше методики; после очистки путем препаративной ВЭЖХ получали соединение 25 в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=796 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОЭ): δ 8.64 (8, 1Н), 8.60 (8, 1Н), 8.26 (4, 1Н), 7.61 (т, 2Н), 5.67 (Ь8, 1Н), 4.73 (ΐ, 1Н), 4.53 (т, 1Н), 4.15 (8, 3Н), 4.12 (т, 5Н), 2.81-2.60 (т, 2Н), 2.2 (т, 1Н), 2.00-1.40 (т, 6Н), 1.36 (8, 3Н), 1.34 (8, 3Н), 1.23 (т, 2Н), 1.02 (8, 9Н), 0.34 (т, 2Н).
- 39 025794
Пример 26. Получение соединения 26.
Стадия 1.
Смесь 2-оксомасляной кислоты (15 г, 147 ммоль) и пара-ТкОН (300 мг) в бензоле (60 мл) и ЕЮН (125 мл) перемешивали при 90°С (при температуре дефлегмации) в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали под вакуумом (температура водяной бани < 20°С). Полученный остаток растворяли в ЕЮАс (200 мл), промывали насыщенным раствором NаНСОз и солевым раствором. Органическую фазу сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом (температура водяной бани ниже 20°С) с получением желаемого продукта (12,2 г, 64%). 'Н ЯМР (300 МГц, СЭСЕ): δ 4.30 (ф 2Н), 2.85 (ф 2Н), 1.35 (ΐ, 3Н), 1.11 (ΐ, 3Н).
Стадия 2.
К суспензии СиВг2 (32 г, 147, 1 ммоль) в ЕЮАс (500 мл) добавляли полученный на предыдущей стадии сложный эфир (6,2 г, 47,7 ммоль) в СНС13 (200 мл). Данную смесь перемешивали при 90°С (при температуре дефлегмации) в течение 16 ч. Ход реакции контролировали с помощью ТСХ-анализа (ЕЮАс:гексан=1:4, Щ (коэффициент удерживания)=0,5, К(=0,4). Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали через подушку силикагеля, используя для элюирования 200 мл раствора ЕЮАс/гексан (1:1). Фильтрат концентрировали под вакуумом (температура водяной бани < 20°С) с получением желаемого продукта (10,75 г, 108%). Данный продукт не удалась идентифицировать с помощью ЖХ/МС-анализа. !Н ЯМР (300 МГц, СПС13): δ 5.17 (ф 1Н), 4.38 (ф 2Н), 1.81 (ΐ, 3Н), 1.38 (ΐ, 3Н).
Стадия 3.
Смесь полученного на предыдущей стадии бромида (1,672 г, 8 ммоль) и изопропил-тиомочевины (0,944 г, 8 ммоль) в 12 мл ЕЮН нагревали в микроволновой печи при 50°С в течение 15 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением желаемого продукта. ЖХ/МС=229,9 (М++1).
Стадия 4.
К смеси полученного на предыдущей стадии сложного эфира (1,7 г, 7,45 ммоль) в ЕЮН (12 мл) и воде (8 мл) добавляли №ЮН (1,8 г, 44,7 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Ход реакции контролировали с помощью ТСХ-анализа. После завершения реакции смесь охлаждали в ледяной бане и подкисляли до рН 3 путем добавления концентрированной НС1. Затем смесь концентрировали под вакуумом для удаления этанола. Оставшуюся суспензию экстрагировали СН2С12 (3x200 мл). Органические фазы объединяли, сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением в качестве продукта реакции желаемой кислоты (1,2 г, 80%).
Стадия 5.
К полученной на предыдущей стадии кислоте (1,2 г, 5,99 ммоль) в ЭСМ (10 мл) добавляли СЭ1 (972 мг, 5,99 ммоль. Затем данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли указанный на схеме анилин (792 мг, 4,89 ммоль) и затем СН38О3Н (1,17 мл, 18 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли ЭСМ (100 мл) и промывали 1н. НС1 (2x100 мл). К органической фазе добавляли К2СО3 (1,66 г, 12 ммоль), и данную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением в качестве продукта реакции желаемого амида (1,46 г, 70%). ЖХ/МС=382 (М++1).
- 40 025794
Стадия 6.
Полученный на предыдущей стадии амид (1,46 г, 3,82 ммоль) суспендировали в толуоле (30 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли №-)Н (0,23 г, 5,73 ммоль), в процессе добавления регистрировали выделение Н2. Во время нагревания до температуры дефлегмации смесь превращалась в прозрачный раствор. Реакция завершалась после нагревания при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили путем добавления ΙΡΑ (5 мл), и затем добавляли гептан (30 мл). Данную суспензию перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Образовавшееся твердое вещество собирали путем фильтрования и промывали диэтиловым эфиром. Собранное твердое вещество растворяли в АсС'.%/Н2О (2:1) и затем подкисляли путем добавления 3н. НС1. Полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч, и твердое вещество снова собирали путем фильтрования. Влажный фильтрационный осадок сушили до постоянной массы в условиях глубокого вакуума (390 мг НС1-соли, 1,07 ммоль, 28%). ЖХ/МС=363 (М++1).
Стадия 7.
К смеси полученного на предыдущей стадии хинолина (0,39 г, 1,07 ммоль) и указанного на схеме брозилата (692 мг, 0,974 ммоль) в ΝΜΡ (10 мл) добавляли карбонат цезия (696 мг, 2,14 ммоль). Данную смесь перемешивали при 65°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к данной смеси добавляли ЕЮАс (60 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (60 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого сложного метилового эфира в виде желтого твердого вещества (0,59 г). ЖХ/МС=835).
Стадия 8.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир растворяли в ТНР (20 мл), добавляли ЫОН (0,6 г) в Н2О (10 мл), затем добавляли МеОН (1 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. После завершения реакции рН доводили до 7 путем добавления 40% ТРА в Н2О при 0°С. Смесь экстрагировали ЕЮАс. Объединенный органический слой концентрировали под вакуумом и затем очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением желаемого соединение 26 в виде желтого твердого вещества (714 мг, 79%). ЖХ/МС=823 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.74 (5, 1Н), 8.26 (ά, 1Н), 7.59 (ά, 1Н), 7.35 (5, 1Н), 6.00-5.74 (т, 2Н), 5.31-5.09 (άά, 2Н).4.69 (ΐ, 1Н), 4.52 (άά, 1Н), 4.21-3.96 (т, 10Н), 2.81 (т, 5Н), 2.58 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.94 (т, 1Н), 1.85-1.60 (т, 4Н), 1.45 (т, 1Н), 1.38 (5, 3Н), 1.35 (5, 3Н), 1.20 (т, 2Н), 1.01 (5, 9Н), 0.33 (т, 2Н).
Пример 27. Получение соединения 27.
Смесь соединения 26 (320 мг, 0,388 ммоль), пара-Т5NНNН2 (542 мг, 2,91 ммоль) и №ЮАс (477 мг, 5,82 ммоль) в смеси ΌΜΕ (10 мл) и Н2О (1 мл) нагревали при 95°С в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс (100 мл), и рН доводили до 3 путем добавления 1н. НС1. Органический и водный слои разделяли, и выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом). Органические слои объединяли и концентрировали. Данный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением соединения 27 в виде желтого твердого вещества (252 мг, 79%). ЖХ/МС=825 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.24 (ά, 1Н), 7.58 (ά, 1Н), 7.31 (5, 1Н), 5.72 (т, 1Н), 4.71 (ΐ, 1Н), 4.58 (άά, 1Н), 4.43 (ΐ, 1Н), 4.14 (5, 3Н), 4.05 (т, 1Н), 3.93 (т, 1Н), 2.81 (5, 3Н), 2.59 (т, 1Н),2.40 (άά, 2Н), 1.94 (т, 1Н), 1.80 (т, 1Н), 1.64 (т, 3Н), 1.52 (т, 1Н),
- 41 025794
1.38 (5, 3Н), 1.36 (5, 3Н), 1.27 (т, 2Н), 1.01 (5, 9Н), 0.33 (т, 2Н). Пример 28. Получение соединения 28.
Стадия 1.
К смеси брозилата (промежуточного соединения III) (15 г, 35 ммоль) и промежуточного соединения IV (27,5 г, 38,5 ммоль) в ΝΜΡ (200 мл) добавляли карбонат цезия (25,1 г, 77 ммоль). Данную смесь перемешивали при 65°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к данной смеси добавляли ЕЮАс (600 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (600 мл). Органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (1x600 мл), солевым раствором, сушили (Να2δϋ.1) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого сложного метилового эфира в виде желтого твердого вещества (23,6 г, 75%). ЖХ/МС=900, 13 (М++1).
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (23,6 г, 26 ммоль) растворяли в ледяной уксусной кислоте (200 мл), к данному раствору добавляли 1,4н. НС1 в Н2О (75 мл). Полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления растворителей и упаривали с толуолом (х2) для удаления остатка уксусной кислоты. Затем полученный остаток растворяли в ЕЮАс (500 мл) и насыщенном водном растворе №НСО3 (в количестве, достаточном для нейтрализации смеси); в процессе растворения регистрировали выделение СО2. Органический слой промывали солевым раствором, сушили (Να2§04) и концентрировали под вакуумом. Остаток дополнительно сушили в условиях глубокого вакуума в течение 1 ч и использовали как есть на следующей стадии. Полученное неочищенное вещество растворяли в СН2С12 (360 мл), и к данной смеси при 0°С добавляли морфолин (3,4 г, 39 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (7,2 г, 34 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли по каплям ледяную уксусную кислоту (0,47 г, 7,8 ммоль). Реакция завершалась в течение 10 мин при 0°С. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора №НСО3. После перемешивания в течение 20 мин органический слой промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого амина в виде желтого твердого вещества (12 г, 50%). ЖХ/МС=924,63 (М++1).
Стадия 3.
Полученный на предыдущей стадии амин (12 г, 13 ммоль) растворяли в ТНР (200 мл), добавляли ЫОН (11 г, 260 ммоль), растворенный в Н2О (200 мл), и затем МеОН (200 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. После завершения реакции рН доводили до 7 путем добавления при 0°С 4н. НС1 в Н2О. Смесь экстрагировали ЕЮАс (2x400 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом с получением желаемого соединения 28 в виде желтого твердого вещества (11 г, 93%). ЖХ/МС=911,52 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СЭ3ОЭ) δ 7.95 (б, 1Н), 7.90 (5, 1Н), 7.48 (5, 1Н), 7.31 (б, 1Н), 5.42 (5, 1Н), 4.37 (бб, 1Н), 4.20 (т, 2Н), 3.83-3.56 (т, 7Н), 3.50 (т, 2Н), 3.39 (т, 2Н), 2.45 (т, 1Н), 2.27(т, 1Н), 1.62 (т, 2Н), 1.50 (т, 1Н), 1.33 (т, 2Н), 1.18 (т, 1Н), 1.05 (т, 8Н), 0.90 (т, 3Н), 0.76 (т, 11Н), 0.14-0.04 (т, 2Н).
Пример 29. Получение соединения 29.
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили указанный на схеме бис-фенол (939 мг, 2,79 ммоль), морфолин этилхлорид (545 мг, 2,93 ммоль), С52СО3 (1,9 г, 5,87 ммоль) и NаI (84 мг, 0,56 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ЭМР (20 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, отбирали аликвоты, и фильтровали. Из данных аликвот выделяли путем препаративной обратнофазовой ВЭЖХ желаемый продукт. В результате получали хинолиновый продукт в форме ТРА-соли. Превращение в НС1-соль выполняли путем растворения данной ТРА-соли в смеси МеОН:4н. НС1/диоксаны и упаривания. Данную процедуру повторяли три раза с получением 200 мг продукта (выход: 14%).
- 42 025794
ЖХ/МС=449,32 (М++1).
Стадия 2.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили полученный на предыдущей стадии хинолин (200 мг, 0,38 ммоль), указанный на схеме брозилат (323 мг, 0,456 ммоль) и С52СО3 (372 мг, 0,76 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ΝΜΡ (5 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане в течение 4,5 ч. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция не проходила. Добавляли еще одну порцию С52СО3 (124 мг, 0,25 ммоль). Через 2 ч согласно ЖХ/МС-анализу брозилат был полностью израсходован, тогда как хинолин еще оставался. К реакционной смеси добавляли еще одну порцию брозилата (68 мг, 0,095 ммоль), и нагревание продолжали в течение ночи. Согласно ЖХ/МС- и ВЭЖХанализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли СН2С12. Добавляли небольшой объем 5% водного раствора ЫС1, слои разделяли. Выполняли обратную экстракцию водного слоя СН2С12 (дихлорметаном) (1х), и объединенные органические слои осветляли путем добавления ΜеОН и концентрировали. Остаток снова растворяли в ΜеОН, и путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли 317 мг сложного метилового эфира (выход: 72%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=922,59 (М++1).
Стадия 3.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (306 мг, 0,266 ммоль) растворяли в смеси ТНР (1,5 мл) и ΜеОН (1 мл), и данный раствор охлаждали до 0°С. ЫОН-Н2О (45 мг, 1,06 ммоль) растворяли в бН2О (0,5 мл), и полученный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНΡ/ΜеОН. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 2 ч реакция не была завершена. Добавляли еще одну порцию ЫОН-Н2О (23 мг, 0,54 ммоль). Через 1 ч реакция все еще не была завершена, поэтому добавляли еще одну порцию ЫОН-Н2О (23 мг, 0,54 ммоль). Через 3,5 ч согласно ВЭЖХанализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 29 сразу выделяли из реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ. Соединение 29 получали в виде желтого твердого вещества (223 мг, выход: 74%). ЖХ/МС=910,53 (М++1). ' Н ЯМР (300 МГц, СО3ОЭ) δ 8.33 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 8.23 (5, 1Н), 7.78 (5, 1Н), 7.62 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 5.86 (бб, 1=9.9, 16.5 Гц, 1Н), 5.73 (5, 1Н), 5.29 (б, 1=17.1 Гц, 1Н), 5.11 (б, 1=10.2 Гц, 1Н), 4.79 (5, 2Н), 4.70 (ΐ, 1=8.7 Гц, 1Н), 4.56 (т, 2Н), 4.20-3.92 (т, 8Н), 3.83 (5, 3Н), 3.59 (Ьгб5, 4Н), 2.78 (бб, 1=7.2, 14.1 Гц, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.21 (ц, 1=8.9 Гц, 1Н), 1.98 (т, 1Н), 1.86 (т, 1Н), 1.76-1.64 (т, 2Н), 1.46 (т, 1Н), 1.39 (б, 1=6.3 Гц, 6Н), 1.19 (т, 2Н), 1.04 (5, 12Н), 0.38 (т, 2Н).
Пример 30. Получение соединения 30.
ВосмА/д £ίζρ Тнр ΒοοΙθ-,
НО? . в/
Стадия 1.
Указанный на схеме спирт (3,42 г, 0,015 ммоль) растворяли в ТНР (55 мл). К данному раствору добавляли СВг4 (5,47 г, 0,017 ммоль). Ρ1ι3Ρ (4,46 г, 0,017 ммоль) растворяли в ТНР (20 мл) и медленно добавляли к данной реакционной смеси через капельную воронку. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По данным ТСХ реакция была завершена. Реакционную смесь разбавляли гексанами, и образовавшийся белый осадок удаляли путем фильтрования. В фильтрате выпадало в осадок дополнительное количество твердого вещества. Данную смесь переносили в делительную воронку, и органический слой экстрагировали насыщенным водным раствором NаНСО3 (2х), бН2О (2х) и солевым раствором (1х). Органический слой сушили над №28О4 с небольшим количеством Μ^^φ Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и из полученного фильтрата выделяли желаемый бромид (2,59 г, выход: 59%) путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюи- 43 025794 рования смесь ЕЮАс/гексаны. Данный бромид получали в виде бесцветного масла, которое со временем превращалось в кристаллическое твердое вещество. ЖХ/МС=293,02 (М++1).
Стадия 2.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили полученный на предыдущей стадии бромид (738 мг, 2,5 ммоль), бис-фенол (1 г, 2,4 ммоль), Сδ2СОз (1,21 г, 3,7 ммоль) и ΝηΙ (72 мг, 0,48 ммоль). К данной смеси добавляли ΌΜΡ (24 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане. Через 2 ч оставалось совсем небольшое количество бромида. К реакционной смеси добавляли еще одну порцию бромида (141 мг, 0,48 ммоль), и нагревание продолжали в течение 16 ч. На следующий день согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс. Данную смесь экстрагировали 5% водным раствором ЬЮ (который подщелачивали небольшим количеством насыщенного водного раствора NаΗСОз) (2х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над №-^О4 с небольшим количеством ΜдδО4. После удаления сушильных агентов путем вакуумной фильтрации из полученного фильтрата выделяли желаемый хинолин (800 мг, 61%) в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС=548,26 (М++1).
Стадия 3.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили полученный на предыдущей стадии хинолин (800 мг, 1,46 ммоль), указанный на схеме брозилат (1,24 г, 1,75 ммоль) и Сδ2СОз (570 мг, 1,75 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ΝΜΡ (14,6 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане. Через 2 ч реакция находилась на стадии прогресса. Нагревание продолжали еще в течение 9 ч, и затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, и полученную смесь экстрагировали 5% водным раствором ЕЮ (2х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над №-^О4 с небольшим количеством ΜдδО4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации. Желаемый сложный метиловый эфир выделяли из фильтрата путем колоночной хроматографии на силикагеле в виде желтовато-коричневатого твердого вещества (1,33 г, 89%). ЖХ/МС=1021,75 (М++1).
Стадия 4.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (1,33 г, 1,3 ммоль) растворяли в СЩСЬ (10 мл). Данный раствор охлаждали до 0°С, и добавляли по каплям 4н. ΗΟ в диоксанах (3,25 мл, 13 ммоль). Затем охлаждающую баню удаляли. Реакция согласно ЖХ/МС-анализу завершалась через 2 ч. Реакционную смесь концентрировали, перерастворяли в 0¾¾ и снова концентрировали. Остаток снова перерастворяли в СЩСЬ и затем экстрагировали насыщенным водным раствором NаΗСОз (1х). Органическую фазу сушили над №^О4 с небольшим количеством ΜдδО4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и фильтрат концентрировали с получением желаемого амина в виде желтоватой пены (1,23 г, 100%). ЖХ/МС=921,53 (М++1).
- 44 025794
Стадия 5.
Полученный на предыдущей стадии амин (608 мг, 0,66 ммоль) растворяли в 1,2-ОСЕ (1,2дихлорэтилене) (7 мл). К данному раствору добавляли 37% НСНО/Н2О (49 мкл, 0,66 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли NаНВ(ОАс)з (560 мг, 2,64 ммоль). Через 30 мин согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора NаНСΟз. Затем реакционную смесь разбавляли Е1ОАс и экстрагировали насыщенным водным раствором NаНСΟз (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над №28О4 с небольшим количеством М§8О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Остаток перерастворяли в МеОН, и данный раствор концентрировали. Перерастворяли в МеОН и концентрировали еще 2 раза с получением указанного на схеме метиламина (569 мг, выход: 92%) в виде розово-оранжевой пены. ЖХ/МС=935,59 (М++1).
Стадия 6.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (615 мг, 0,658 ммоль) растворяли в МеОН (2,2 мл) и ТНР (3,3 мл). Данный раствор охлаждали до 0°С, и медленно добавляли раствор ЫОН-Н2О (138 мг, 3,29 ммоль) в άН2Ο (0,5 мл). Затем охлаждающую баню удаляли. Через 3,5 ч реакция по данным ЖХ/МС- и ВЭЖХ-анализа завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и гасили путем добавления 1н. НС1. Соединение 30 (590 мг, выход: 78%) выделяли из погашеной реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=921,48 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО) δ 8.30 (ά, 1=10.2 Гц, 1Н), 8.29 (5, 1Н), 7.81(5, 1Н), 7.62 (ά, 1=10.2 Гц, 1Н), 5.86 (ά1, 1=9.9, 16.8 Гц, 1Н), 5.76 (5, 1Н), 5.28 (ά, 1=17.1 Гц, 1Н), 5.11 (ά, 1=10.2 Гц, 1Н), 4.72 (1, 1=8.4 Гц, 1Н), 5.59 (ά, 1=5.4 Гц, 3Н), 4.47 (1, 1=6.3 Гц, 1Н), 4.15 (5, 1Н), 4.12-3.99 (т, 2Н), 3.43 (5, 4Н), 3.32-3.18 (т, 8Н), 2.93 (5, 3Н), 2.80 (άά, 1=6.6, 14.1 Гц, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.22 (άά, 1=8.4, 9 Гц, 1Н), 1.95 (т, 1Н), 1.86-1.60 (т, 3Н), 1.46 (άά, 1=5.4, 9.3 Гц, 1Н), 1.38 (ά, 1=6.6 Гц, 6Н), 1.20 (т, 2Н), 1.03 (5, 12Н), 0.34 (т, 2Н).
Пример 31. Получение соединения 31.
Соединение 30 (97 мг, 0,084 ммоль) растворяли в ОМЕ (2 мл). К данному раствору добавляли άН2Ο (200 мкл), рТо1δΟ2NНNН2 (117 мг, 0,63 ммоль) и №ЮАс (103 мг, 1,26 ммоль). Затем реакционную колбу помещали на 2 ч в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество МеОН, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединение 31 (69 мг, выход 71%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=923,52 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО) δ 8.29 (ά, 1=9 Гц, 1Н), 8.28 (5, 1Н), 7.80 (5, 1Н), 7.60 (ά, 1=9 Гц, 1Н), 5.74 (5, 1Н), 4.74-4.56 (т, 4Н), 4.49 (1, 1=6.3 Гц, 1Н), 4.15 (5, 1Н), 4.18-3.99 (т, 2Н), 3.53 (5, 6Н), 3.47 (5, 6Н), 2.96 (5, 3Н), 2.78 (άά, 1=7.2, 14.1 Гц, 1Н), 2.60 (т, 1Н), 1.96 (т, 1Н), 1.82 (т, 1Н), 1.65 (т, 3Н), 1.52 (1, 1=7.5 Гц, 1Н), 1.43 (т, 2Н), 1.39 (ά, 1=6.3 Гц, 6Н), 1.23 (ц, 1=3.9 Гц, 2Н), 1.20 (т, 1Н), 1.02 (5, 14Н), 0.37 (т, 2Н).
Пример 32. Получение соединения 32.
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили бис-фенол (998 мг, 2,97 ммоль), указанный на схеме бромид (293 мкл, 3,11 ммоль), С52СО3 (2,03 г, 6,24 ммоль) и Ν;·ιΙ (89 мг, 0,59 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ОМР (33 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С мас- 45 025794 ляной бане в течение 7 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь переносили в 100 мл ЕЮАс. Твердое вещество отфильтровывали и промывали 50 мл ЕЮАс. Органические фазы объединяли и экстрагировали 5% водным раствором ЫС1 (3х 100 мл) и затем солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над №28О4. твердое вещество отфильтровывали, и удаляли при пониженном давлении растворитель. Полученное неочищенное вещество переносили в 10 мл метанола и очищали путем препаративной обратнофазовой ВЭЖХ. В результате получали хинолин в форме ТРА-соли. Превращение в НС1-соль выполняли путем растворения полученной ТРА-соли хинолина в смеси МеОН:4н. НС1/диоксаны и упаривания. Данную процедуру повторяли три раза с получением 305 мг указанного на схеме хинолина (выход: 24%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=394 (М++1).
Стадия 2.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили полученный на предыдущей стадии хинолин (305 мг, 0,78 ммоль), указанный на схеме брозилат (554 мг, 0,78 ммоль) и Сδ2СОз (760 мг, 2,34 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ΝΜΡ (10 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане в течение 4,5 ч. По данным ЖХ/МС-анализа реакция не проходила. Добавляли дополнительное количество Сδ2СОз (250 мг, 0,78 ммоль), и реакционную смесь нагревали в течение ночи. По данным ЖХ/МС- и ВЭЖХ-анализа реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс.
Добавляли небольшой объем 5% водного раствора ЫС1, и слои разделяли. Выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом) (1х), и объединенные органические слои сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток перерастворяли в ОСМ, и путем хроматографии на силикагеле выделяли 382 мг указанного на схеме сложного метилового эфира (выход: 57%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=868 (М++1).
Стадия 3.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (380 мг, 0,44 ммоль) растворяли в смеси ТНР (5 мл) и МеОН (2,5 мл) и охлаждали до 0°С. ЬЮН-Н2О (32 мг, 1,32 ммоль) растворяли в бН2О (2,5 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 2 ч реакция не была завершена. Добавляли еще одну порцию ЬЮН-Н2О (32 мг, 1,32 ммоль). Через 1 ч реакция все еще не была завершена, поэтому добавляли еще одну порцию ЬЮН-Н2О (32 мг, 1,32 ммоль). Через 3,5 ч согласно ВЭЖХ-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 32 сразу выделяли из реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ. Соединение 32 получали в виде желтого твердого вещества (235 мг, выход: 63%). ЖХ/МС=853 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СЭЮО) δ 8.75 (δ, 1Н), 8.29 (δ, 1Н), 8.27 (б, 1=9.4 Гц, 1Н), 7.83 (δ, 1Н), 7.68 (б, 1=9.4 Гц, 1Н), 5.86 (бб, 1=9.1, 16.5 Гц, 1Н), 5.77 (δ, 1Н), 5.31 (б, 1=17.4 Гц, 1Н), 5.13 (б, 1=11 Гц, 1Н), 4.75 (ΐ, 1=8.9 Гц, 1Н), 4.62 (б, 1=12.2 Гц, 1Н), 4.52 (δ, 1Н), 4.41 (т, 1Н), 4.13-4.05 (т, 4Н), 3.87 (δ, 3Н), 3.31 (δ, 3Н), 2.76 (т, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.22 (Я, 1=8.7 Гц, 1Н), 1.92-1.59 (т, 7Н), 1.48 (т, 1Н), 1.39 (б, 1=6.4 Гц, 6Н), 1.20 (т, 2Н), 1.02 (δ, 9Н), 0.49-0.32 (т, 3Н).
Пример 33. Получение соединения 33.
- 46 025794
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили указанный на схеме хинолин (810 мг, 2,05 ммоль), промежуточное соединение III (1,46 г, 2,05 ммоль) и С82СО3 (1,39 г, 4,3 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ΝΜΡ (10 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане в течение 16 ч. По данным ЖХ/МС- и ВЭЖХ-анализа реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс. Добавляли небольшой объем 5% водного раствора ЫС1, и слои разделяли. Выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом) (1х), и объединенные органические слои сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток перерастворяли в ЭСМ. и путем хроматографии на силикагеле выделяли 382 мг указанного на схеме сложного метилового эфира (выход: 63%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=869 (М++1).
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (1,12 г, 1,29 ммоль) растворяли в смеси ТНР (5 мл) и МеОН (2,5 мл). ЫОН (309 мг, 12,9 ммоль) растворяли в бН2О (4 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 4 ч реакция была завершена на 70%. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли еще одну порцию ЫОН-Н2О (32 мг, 1,32 ммоль). Через 3,5 ч согласно ВЭЖХ-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 33 сразу выделяли из реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ. Соединение 33 получали в виде желтого твердого вещества (913 мг, выход: 83%). ЖХ/МС=855 (М++1). 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОЭ) δ 8.64 (8, 1Н), 8.30 (8, 1Н), 8.26 (б, 1=9.5 Гц, 1Н), 7.83 (8, 1Н), 7.67 (б, 1=9.5 Гц, 1Н), 5.76 (8, 1Н), 4.75 (ΐ, 1=8.3 Гц, 1Н), 4.62 (ΐ, 1=11.9 Гц, 1Н), 4.51 (8, 2Н), 4.40 (т, 1Н), 4.13-4.05 (т, 4Н), 3.87 (8, 3Н), 3.31 (8, 3Н), 2.78 (т, 1Н), 2.60 (т, 1Н), 1.94-1.59 (т, 9Н), 1.48 (т, 1Н), 1.38 (б, 1=6.4 Гц, 6Н), 1.21 (т, 2Н), 1.01 (8, 9Н), 0.360.32 (т, 3Н).
Пример 34. Получение соединения 34.
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили указанные на схеме бис-фенол (1,02 г, 2,98 ммоль) и хлорид (471 мг, 3,27 ммоль), С82СО3 (2,01 г, 6,23 ммоль) и NаI (89 мг, 0,59 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ЭМР (24 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане в течение 7 ч. По данным ЖХ/МС реакция не проходила. Нагревание продолжали в течение ночи. На следующий день по данным ЖХ/МС превращение составляло 20%. Дополнительно добавляли 0,8 эквивалента NаI, и температуру увеличили до 85°С. Реакционную смесь снова нагревали в течение ночи. По данным ЖХ/МС имело место полное превращение. Реакционную смесь фильтровали через С18картридж. Затем удаляли при пониженном давлении растворитель. Полученное неочищенное вещество переносили в 10 мл метанола. Хинолин очищали путем препаративной обратнофазовой ВЭЖХ. В результате получали хинолин в форме ТРА-соли. Превращение в НС1-соль выполняли путем растворения полученной ТРА-соли в смеси МеОН:4н. НС1/диоксаны и упаривания. Данную процедуру повторяли три раза с получением 327 мг НС1-соли указанного на схеме хинолина (выход: 25%). ЖХ/МС=408 (М++1).
Стадия 2.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили полученный на предыдущей стадии хинолин (180 мг, 0,375 ммоль), указанный на схеме брозилат (400 мг, 0,563 ммоль) и С82СО3 (366 мг, 1,13 ммоль). Затем к данной смеси добавляли NΜΡ (5,6 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно на- 47 025794 гретой до 65°С масляной бане в течение 4,5 ч. По данным ЖХ/МС реакция не проходила. Добавляли дополнительное количество Сз2СО3 (150 мг, 0,45 ммоль), и реакционную смесь нагревали в течение ночи. Согласно ЖХ/МС- и ВЭЖХ-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс. Добавляли небольшой объем 5% водного раствора ЫС1, и слои разделяли. Выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом) (1х), и объединенные органические слои сушили над Иа28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток перерастворяли в ЭСМ. и путем хроматографии на силикагеле выделяли 237 мг указанного на схеме сложного метилового эфира (выход: 42%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=881 (М++1).
Стадия 3.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (237 мг, 0,269 ммоль) растворяли в смеси ТНР (1,5 мл) и МеОН (1 мл). ЬЮН-Н2О (30 мг, 1,07 ммоль) растворяли в 6Н2О (0,5 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 4 ч реакция была завершена на 40%. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Из данной реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ сразу выделяли соединение 34. Соединение 34 получали в виде желтого твердого вещества (218 мг, выход: 94%). ЖХ/МС=867 (М++1).
Пример 35. Получение соединения 35.
Соединение 34 (145 мг, 0,167 ммоль) растворяли в ОМЕ (1,5 мл). К данному раствору добавляли 6Н2О (150 мкл), рТо18О2ИНИН2 (187 мг, 1,0 ммоль) и ИаОАс (150 мг, 1,84 ммоль). Затем реакционную колбу помещали на 2 ч в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество МеОН, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединение 35 (97 мг, 63% выход) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=868 (М++1).
Пример 36. Получение соединения 36.
Стадия 1.
Альдегид (полученный так же, как в примере 28) (1,17 г, 1,38 ммоль) растворяли в ЭСМ (15 мл). К данному раствору добавляли указанный на схеме морфолин (239 мг, 2,07 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли ИаНВ(ОАс)3 (380 мг, 1,79 ммоль) и сразу же АсОН (24 мкл, 0,414 ммоль). Через 10 мин согласно ЖХ/МС-анализу реакция завершалась. Реакционную смесь гасили путем добавления полунасыщенного водного раствора ИаНСО3. Затем реакционную смесь разбавляли ЭСМ и экстрагировали насыщенным водным раствором ИаНСО3 (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над Иа28О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Остаток перерастворяли в МеОН, и данный раствор концентрировали. Перерастворяли в МеОН и концентрировали еще 2 раза. Полученное неочищенное вещество переносили в минимальный объем ЭСМ и очищали путем хроматографии на силикагеле с получением указанного на схеме сложного метилового эфира (908 мг, выход: 70%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=950 (М++1).
- 48 025794
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный метиловый эфир (772 мг, 0,813 ммоль) растворяли в смеси ТНЕ (7 мл) и ΜеΟΗ (5 мл). ЫОН-Н2О (171 мг, 4,07 ммоль) растворяли в ПН2О (3 мл), и данный раствор медленно добавляли к полученному раствору сложного эфира в ΤΗΡ/ΜеΟΗ, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 3 ч реакция завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 36 экстрагировали в ΕΐΟΑ^ Затем органическую фазу экстрагировали 1н. НС1, солевым раствором и затем сушили над Ж28О4. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и органические растворители удаляли при пониженном давлении. Соединение 36 (701 мг) выделяли с использованием препаративной ВЭЖХ в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=936 (М++1).
Пример 37. Получение соединения 37.
Соединение 36 (701 мг, 0,748 ммоль) растворяли в ΌΜΕ (5 мл). К данному раствору добавляли ПН2О (500 мкл), рТо18О2МНМН2 (697 мг, 3,74 ммоль) и NаΟΑс (613 мг, 7,48 ммоль). Затем реакционную колбу на 2 ч помещали в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество ΜеΟΗ, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединения 37 (802 мг, выход: 92%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=938 (М++1). 1Н ЯМР (400 МГц, СО3,ОЭ) δ 8.26 (5, 1Н), 7.98 (П, 1=9.4 Гц, 1Н), 7.86 (5, 1Н), 7.42 (5, 1Н), 7.24 (ά, 1=9.5 Гц, 1Н), 5.36 (5, 1Н), 4.51 (5, 6Н), 4.38-4.19 (т, 5Н), 3.82-3.45 (т, 5Н), 2.53-2.32 (т, 3Н), 1.84 (т, 1Н), 1.66-1.28 (т, 5Н), 1.18 (5, 7Н), 1.03 (ά, 1=6.5 Гц, 6Н), 0.89 (т, 1Н), 0.67 (5, 14Н), 0.14-0.04 (т, 2Н).
Пример 38. Получение соединения 38.
Βοθ Вое
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Αγ, вносили 60% NаΗ (4,26 г, 106 ммоль) и ТНЕ (60 мл). Медленно добавляли раствор указанного на схеме спирта (5 г, 26,67 ммоль) в ТНЕ (40 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавляли диметилсульфат (5,07 мл, 53,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствор МН4С1, которое сопровождалось интенсивным выделением газа. Данную смесь перемешивали в течение 15 мин, и затем разделяли органический и водный слои. Водный слой экстрагировали ΕΐΌΑ^ Органические слои объединяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток переносили в ΕΐΟΑс и промывали полунасыщенным водным раствором NаΗСΟз и затем солевым раствором. Органическую фазу сушили над Ж28О4, фильтровали, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением неочищенного желаемого метилового эфира (8,56 г, 42,03 ммоль) в виде бесцветного масла. ЖХ/МС=202 (М++1).
4.0 н. НС1, диоксан ОСМ
О—
- 49 025794
Стадия 2.
В колбу, продуваемую Аг, вносили полученный на предыдущей стадии метиловый эфир (8,56 г, 42,03 ммоль) и затем ИСМ (30 мл). Медленно добавляли 4,0н. НС1 в диоксане (30 мл, 120 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Согласно ЖХ/МСанализу реакция была завершена. Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением неочищенного желаемого амина (7 г, 50 ммоль), который использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=102 (М++1).
Стадия 3.
В колбу, продуваемую Аг, вносили полученный на предыдущей стадии амин (7 г, 50 ммоль), ТНР (150 мл), С.'В/-С1 (10,7 мл, 76 ммоль), и охлаждали до 0°С с помощью ледяной бани. Медленно добавляли Βί3Ν (21,1 мл, 150 ммоль). За ходом реакции следили с помощью ЖХ/МС. Реакция заканчивалась через 1 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток переносили в ЕЮАс и промывали 0,5н. водным раствором НС1, солевым раствором и сушили над №28О4. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном объеме ИСМ и очищали путем хроматографии на силикагеле с получением указанного на схеме карбамата (4,52 г, общий выход: 72%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС=236 (М++1).
Стадия 4.
В колбу, продуваемую Аг, вносили полученный на предыдущей стадии карбамат (4,5 г, 19,1 ммоль) и ЕЮН (50 мл). Колбу откачивали и снова наполняли Аг. Данную процедуру повторяли три раза. Затем в реакционную колбу добавляли 10% Ρά/С, и колбу откачивали. Затем колбу заполняли газообразным Н2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Н2, контролируя ход реакции с помощью ЖХ/МС. Через 3 ч реакция завершалась. Твердое вещество удаляли путем вакуумной фильтрации с использованием РТРЕ (тефлонового) фильтра. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток упаривали с ЕЮАс (3x50 мл) с получением неочищенного желаемого амина (2,03 г, 20,0 ммоль) в виде бесцветного масла. ЖХ/МС=102 (М++1).
Стадия 5.
Указанный на схеме альдегид (1,00 г, 1,17 ммоль) растворяли в ИСМ (15 мл), и добавляли полученный на предыдущей стадии амин (176 мг, 1,75 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ΝαΉΒ^Α^ (322 мг, 1,52 ммоль) и сразу же АсОН (20 мкл, 0,3 ммоль). Через 10 мин согласно ЖХ/МС-анализу реакция завершалась. Реакционную смесь гасили путем добавления полунасыщенного водного раствора NаНСО3. Затем реакционную смесь разбавляли ИСМ и экстрагировали насыщенным водным раствором NаНСО3 (3 х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над №28О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Остаток перерастворяли в МеОН, и данный раствор концентрировали. Перерастворяли в МеОН и концентрировали еще 2 раза с получением неочищенного сложного метилового эфира (968 мг, 88% выход) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=936 (М++1).
- 50 025794
Стадия 6.
Полученный на предыдущей стадии сложный эфир (968 мг, 1,03 ммоль) растворяли в смеси ТНР (10 мл) и МеОН (6 мл). ЫОН (200 мг, 4,67 ммоль) растворяли в άН2О (3 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 3 ч реакция завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 38 экстрагировали в ЕЮАс. который затем экстрагировали 1н. НС1 и солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над Ыа28О4. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и летучие органические вещества удаляли при пониженном давлении. Соединение 38 (900 мг) выделяли в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=922 (М++1).
Пример 39. Получение соединения 39.
Соединение 38 (900 мг, 0,977 ммоль) растворяли в БМЕ (5 мл). К данному раствору добавляли άН2О (1 мл), рТо18О2ИНЫН2 (920 мг, 4,93 ммоль) и ЫаОАс (850 мг, 10,36 ммоль). Затем реакционную колбу на 2 ч помещали в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу, реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество МеОН, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединение 39 (686 мг, выход: 76%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=924 (М++1).
Пример 40. Получение соединения 40.
Стадия 1.
Указанный на схеме альдегид (1,00 г, 1,17 ммоль) растворяли в БСМ (15 мл). К данному раствору добавляли пиперидин (173 мкл, 1,75 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли ЫаНВ(ОАс)3 (322 мг, 1,52 ммоль) и сразу же АсОН (20 мкл, 0,3 ммоль). Через 10 мин согласно ЖХ/МС-анализу реакция завершалась. Реакционную смесь гасили путем добавления полунасыщенного водного раствора ЫаНСО3. Затем реакционную смесь разбавляли БСМ и экстрагировали насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над Ыа28О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Остаток перерастворяли в МеОН, и данный раствор концентрировали. Перерастворяли в МеОН и концентрировали еще 2 раза с получением неочищенного желаемого сложного эфира (964 мг, выход: 90%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=920 (М++1).
- 51 025794
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный эфир (964 мг, 1,02 ммоль) растворяли в смеси ТНР (10 мл) и МеОН (6 мл). ЬЮН (200 мг, 4,67 ммоль) растворяли в йН2О (3 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 3 ч реакция завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 40 экстрагировали в ЕЮАс, который затем экстрагировали 1н. НС1 и затем солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над №-ь8О.-|. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и летучие органические вещества удаляли при пониженном давлении. Соединение 40 (900 мг) выделяли в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=906 (М++1).
Пример 41. Получение соединения 41.
Соединение 40 (900 мг, 0,977 ммоль) растворяли в ОМЕ (5 мл). К данному раствору добавляли йН2О (1 мл), рТо18О2NНNН2 (920 мг, 4,93 ммоль) и №ЮАс (850 мг, 10,36 ммоль). Затем реакционную колбу на 2 ч помещали в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество МеОН, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединение 41 (631 мг, выход: 69%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=908 (М++1).
Пример 42. Получение соединения 42.
Стадия 1.
Указанный на схеме альдегид (0,5 г, 0,584 ммоль) растворяли в ОСМ (8 мл). К полученному раствору добавляли указанный на схеме амин (181 мг, 0,887 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли NаНВ(ОАс)з (161 мг, 0,76 ммоль) и сразу же АсОН (10 мкл, 0,15 ммоль). Через 10 мин согласно ЖХ/МСанализу реакция завершалась. Реакционную смесь гасили путем добавления полунасыщенного водного раствора NаНСОз. Затем реакционную смесь разбавляли ОСМ и экстрагировали насыщенным водным раствором №)НСО3, (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над №28О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Остаток перерастворяли в МеОН, и данный раствор концентрировали. Перерастворяли в МеОН и концентрировали еще 2 раза с получением неочищенного желаемого сложного эфира (503 мг, выход: 95%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=1003 (М++1).
- 52 025794
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный эфир (503 мг, 0,501 ммоль) растворяли в смеси ТНР (5 мл) и МеОН (3 мл). ЫОН (100 мг, 2,34 ммоль) растворяли в 4Н2О (1,5 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНР/МеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 3 ч реакция завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 42 экстрагировали в ЕЮАс, который затем экстрагировали 1н. НС1 и затем солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над №-ь8О.-|. Твердое вещество удаляли путем фильтрования, и летучие органические вещества удаляли при пониженном давлении. Соединение 42 (450 мг) выделяли в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=989 (М++1).
Пример 43. Получение соединения 43.
Соединение 42 (450 мг, 0,501 ммоль) растворяли в ΌΜΕ (3 мл). К данному раствору добавляли 4Н2О (0,5 мл), ρТο18О2NНNН2 (425 мг, 2,46 ммоль) и №ЮАс (425 мг, 5,17 ммоль). Затем реакционную колбу на 2 ч помещали в предварительно нагретую до 95°С масляную баню. Согласно ЖХ/МС-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и добавляли небольшое количество МеОН, чтобы получить монофазную реакционную смесь. Затем реакционную смесь фильтровали, и из полученного фильтрата путем обратнофазовой ВЭЖХ выделяли соединение 43 (334 мг, выход: 67%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=991 (М++1).
Пример 44. Получение соединения 44.
Стадия 1.
2-(2-Изопропиламинотиазол-4-ил)хинолин-4,7-диол (2 г, 6,6 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (20 мл) в атмосфере Ν2. Затем добавляли при 0°С №-)Н (60%) (0,56 г, 14,2 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, и затем добавляли бром-ацетонитрил. Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли ЕЮАс и промывали 1н. НС1, поддерживая рН 4. Желаемый продукт выпадал в осадок. После фильтрации получали желтое твердое вещество, которое было достаточно чистым. Данное вещество использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=341,33 (М++1).
Стадия 2.
К смеси полученного на предыдущей стадии хинолина (1,32 г, неочищенный) и брозилаттрипептида (2,9 г, 4,3 ммоль) в ΝΜΡ (10 мл) добавляли карбонат цезия (2,5 г, 7,7 ммоль). Данную смесь перемешивали при 65°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и затем к данной смеси добавляли ЕЮАс (600 мл) и 3% водный раствор ЫС1. Органический слой отделяли и промывали 3% водным раствором ЫС1, солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом. Данное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (1,18 г, 1,49 ммоль). ЖХ/МС=790,38 (М++1).
- 53 025794
Стадия 3.
К раствору полученного на предыдущей стадии Вос-трипептида (1,18 г, 1,5 ммоль) в БСМ (10 мл) добавляли 4н. НС1 в диоксане (30 ммоль, 7,5 мл) при комнатной температуре. Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Согласно ЖХ/МС-анализу получали два продукта, один из которых представлял собой желаемое промежуточное соединение с удаленной Вос-группой, а другой представлял собой промежуточное соединение с удаленной Вос-группой, у которого нитрил в положении С-7 гидролизован до кислоты. Из реакционной смеси при пониженном давлении удаляли растворитель с получением указанного неочищенного вещества. К полученному неочищенному веществу в ИСМ добавляли насыщенный водный раствор NаНСО3 (15 мл), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли за один прием промежуточное соединение I (0,54 г, 2,25 ммоль), и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Согласно ЖХ/МС-анализу получали два продукта в соотношении 1:1; один пик соответствовал желаемому продукту, а другой пик соответствовал С-7-кислоте. Органическую фазу распределяли и промывали солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом. Данное неочищенное вещество, полученное в виде желтого твердого вещества, использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=814,42 (М++1).
Стадия 4.
К полученному на предыдущей стадии неочищенному веществу в диоксане добавляли водный раствор ЫОН (0,19 г, 4,5 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Согласно ЖХ/МС-анализу получали два основных соединения. Из реакционной смеси удаляли под вакуумом растворитель, и неочищенное вещество очищали путем препаративной ВЭЖХ. Соединение 44 (0,153 г, 0,183 ммоль) получали в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (300 МГц, СИ3ОИ) δ 8.30 (ά, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 7.73 (т, 2Н), 7.41 (ά, 1Н), 5.92-5.77 (т, 2Н), 5.28 (ά, 1Н), 5.11 (ά, 1Н), 4.96 (5, 2Н), 4.73-4.55 (т, 3Н), 4.19-4.06 (т, 3Н), 2.78 (т, 1Н), 2.58 (т, 1Н), 2.21 (т, 1Н), 1.96 (т, 2Н), 1.74-1.63 (т, 3Н), 1.46 (т, 3Н), 1.33 (т, 6Н), 1.22 (т, 2Н), 1.04 (5, 9Н), 0.49-0.37 (т, 2Н). ЖХ/МС=819.44 (М++1).
Пример 45. Получение соединения 45.
Стадия 1.
К смеси указанного на схеме хинолина (0,2 г, 0,53 ммоль) и брозилат-трипептида (0,412 г, 0,59 ммоль) в ΝΜΡ (4 мл) добавляли карбонат цезия (0,345 г, 1,1 ммоль). Данную смесь перемешивали при 65°С в течение 7 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли Е1ОАс, промывали 3% водным раствором ЫС1 и солевым раствором и затем сушили над Ж28О4 и концентрировали под вакуумом. Полученное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с выходом желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (0,26 г, 0,31 ммоль, 59%). ЖХ/МС=848,44 (М++1).
Стадия 2.
Смесь полученного на предыдущей стадии сложного эфира (0,26 г, 0,31 ммоль) и ΝαΙ (0,70 г, 0,45 ммоль) в пиридине (7 мл) нагревали при 110°С в течение ночи в атмосфере Ν2. За ходом реакции следили с помощью ЖХ-МС. Согласно ЖХ-МС превращение составляло 95%. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученное неочищенное вещество очищали путем препаративной ВЭЖХ, с выходом соединения 45 (0,085 г, 0,1 ммоль, 34%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=834,41 (М++1).
- 54 025794
Пример 46. Получение соединения 46.
Стадия 1.
К суспензии указанного на схеме амидного соединения (1,2 г, 3,41 ммоль) в толуоле (28 мл) добавляли при комнатной температуре №-)Н (60%) (0,20 г, 5,12 ммоль). Данную смесь нагревали до температуры дефлегмации и перемешивали в течение 2,5 ч. Согласно ЖХ-МС реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и добавляли АсОН (0,90 мл, 5,80 ммоль) в 3 мл Н2О, и данную смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин. В ходе перемешивания выпадало в осадок большое количество желтого твердого вещества. После фильтрации осадок на фильтре промывали Н2О, ЕьО и сушили в условиях глубокого вакуума. Полученное неочищенное желтое твердое вещество (1,00 г, 3,00 моль, 88%) использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=334,34 (М++1).
Стадия 2.
К суспензии полученного на предыдущей стадии неочищенного продукта в ЭСМ (50 мл) добавляли ВВг3 (1н. в ЭСМ) (13,4 мл, 13,4 ммоль). Данную смесь нагревали до температуры дефлегмации и перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали на лед. рН доводили до 14 путем добавления 4н. №ГОН. Водную фазу дважды экстрагировали ЭСМ, и рН доводили до приблизительно 4 путем добавления 2н. НС1. Выпавшее в осадок желтое твердое вещество выделяли путем фильтрования. Осадок на фильтре промывали Н2О, ЕеО и сушили в условиях глубокого вакуума. Получали желтое твердое вещество (0,41 г, 1,28 ммоль, 42%), которое использовали как есть в следующей реакции. ЖХ/МС=320,33 (М++1).
Стадия 3.
К смеси полученного на предыдущей стадии бис-фенола (0,41 г, 1,28 ммоль) и 1-бром-2-метоксиэтана (0,18 г, 1,28 ммоль) в ЭМР (3 мл) при комнатной температуре за один прием добавляли №-)Н (60%) (0,062 г, 2,58 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали в течение ночи в атмосфере Ν2. Полученное неочищенное вещество очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом указанное на схеме желаемого соединения в виде желтого твердого вещества (0,202 г, 0,53 ммоль, 41%). ЖХ/МС=378,34 (М++1).
Стадия 4.
Смесь полученного на предыдущей стадии хинолина (0,2 г, 0,53 ммоль), Ск2СО3 (0,35 г, 1,05 ммоль) и промежуточного соединения III (0,415 г, 0,58 ммоль) в NΜΡ (4 мл) нагревали до 65°С и перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли путем добавления ЕЮАс (10 мл), и данную смесь промывали Н2О, 5% ЫС1 и солевым раствором. Сушили над №28О4 и концентрировали, данное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с получением указанного на схеме сложного метилового эфира (0,19 г, 0,22 ммоль, 42%). ЖХ/МС=854,08 (М++1).
Стадия 5.
К раствору полученного на предыдущей стадии сложного метилового эфира (0,19 г, 0,22 ммоль) в МеОН (1 мл) и ТНР (1 мл) добавляли водный раствор ЫОН (0,18 г, 4,2 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное неочищенное вещество очищали путем
- 55 025794 препаративной ВЭЖХ с выходом соединения 46 в виде желтого твердого вещества (0,11 г, 0,13 ммоль, 60%). ' Н ЯМР (300 МГц, СИзОИ): δ 8.64 (δ, 1Η), 8.26 (б, 1Η), 7.69 (δ, 1Η), 7.64 (б, 1Η), 5.69 (δ, 1Η), 4.72 (бб, 1Η), 4.60-4.43 (т, 3Η), 4.14-4.01 (т, 3Η), 3.87 (δ, 2Н), 3.47 (δ, 2Н), 2.74 (т, 1Η), 2.63 (т, 1Η), 1.97-1.80 (т, 2Н), 1.67 (т, 3Η), 1.51 (т, 1Η), 1.49-1.34 (т, 7Н), 1.22 (т, 2Н), 1.02 (δ, 9Н), 0.34 (т, 2Н). ЖХ/МС=841.56 (М++1).
Пример 47. Получение соединения 47.
Стадия 1.
Указанную на схеме кислоту, используемую в качестве исходного вещества (2,87 г, 19,5 ммоль), и 1-[2-амино-3-хлор-4-(2-метоксиэтокси)фенил]этанон (4,72 г, 19,5 ммоль) растворяли в пиридине (180 мл). Полученный раствор охлаждали до -30°С, и затем к раствору добавляли по каплям РОС13. После добавления реакционную смесь нагревали до -10°С в течение 30 мин и перемешивали при -10°С в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили путем добавления при 0°С 20 мл ЩО, и полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин. Растворитель удаляли при пониженном давлении. К остатку добавляли ЕЮАс, и полученный раствор промывали насыщенным раствором NаΗСО3, ЩО и солевым раствором. Сушили над №^О.-| и концентрировали, данное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого продукта (4,2 г, 11,3 ммоль, 58%). ЖХ/МС=373,01 (М++1).
Стадия 2.
Смесь полученного на предыдущей стадии амида (2,0 г, 5,4 ммоль) и изопропиламина (3,2 г, 54 ммоль) в пропан-2-оле (20 мл) нагревали до 70°С в герметично закрытой пробирке. После нагревания в течение 3,5 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в ΤΗΡ (15 мл), и к данному раствору добавляли 0,3н. ΗΟ (40 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Смесь распределяли, и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением указанного на схеме амина (0,84 г, 2,13 ммоль, 40%). ЖХ/МС=396,21 (М++1).
Стадия 3.
К суспензии полученного на предыдущей стадии амина (1,38 г, 3,49 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли при комнатной температуре NаΗ (60%) (0,20 г, 5,12 ммоль). Данную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение 2,5 ч. Согласно ЖХ-МС реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, к реакционной смеси добавляли АсОΗ (0,90 мл, 5,80 ммоль) в 3 мл ЩО, и данную смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин. В ходе перемешивания выпадал в осадок хинолиновый продукт. После фильтрации осадок на фильтре промывали ЩО, ЕьО и сушили в условиях глубокого вакуума. Получали неочищенное желтое твердое вещество (1,18 г, 3,13 моль, 90%) достаточной чистоты которое использовали как есть в следующей реакции. ЖХ/МС=378,34 (М++1).
Стадия 4.
Смесь полученного на предыдущей стадии хинолина (0,77 г, 2,03 ммоль), Сδ2СО3 (1,3 г, 4 ммоль) и метилового эфира трипептида (1,6 г, 2,2 ммоль) в ΝΜΡ (10 мл) нагревали до 65°С и перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли путем добавления 25 мл ЕЮАс, и полученную смесь промывали ЩО, 5% ЫС1 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над №^О4 и концентрировали, полученное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с выходом указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества (1,2 г, 1,4 ммоль, 69%). ЖХ/МС=851,84 (М++1).
- 56 025794
Стадия 5.
К раствору полученного на предыдущей стадии сложного метилового эфира (0,5 г, 0,58 ммоль) в МеОН (5 мл) и ТНР (5 мл) добавляли водный раствор ЫОН (0,24 г, 5,8 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное неочищенное вещество очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом соединения 47 в виде желтого твердого вещества (0,33 г, 0,4 ммоль, 69%). !Н ЯМР (300 МГц, СОзОО): δ 8.58 (5, 1Н), 8.26 (ά, 1Н), 7.66 (5, 1Н), 7.62 (ά, 1Н), 5.89 (т, 1Н), 5.67 (Ь8, 1Н), 5.29 (άά, 1Н), 5.11 (т, 1Н), 4.72 (т, 1Н), 4.54-4.49 (т, 4Н), 4.15 (5, 1Н), 4.10-4.00 (т, 2Н), 3.87 (т, 2Н), 3.47 (5, 3Н), 2.75 (т, 1Н), 2.61(т, 1Н), 2.21 (т, 2Н), 1.94 (т, 1Н), 1.85 (т, 1Н), 1.72-1.61 (т, 3Н), 1.401.10 (т, 9Н), 1.02 (5, 9Н), 0.49-0.34 (т, 2Н). ЖХ/МС=837.94 (М++1).
Пример 48. Получение соединения 48
Стадия 1.
2,4-Дихлорхинолин-7-ол (2,23 г, 10,4 ммоль) и изопропил-(1Н-пиразол-3-ил)амин (1,44 г, 11,5 ммоль) растворяли в ΝΜ^ (30 мл) при комнатной температуре. Данную смесь нагревали до 115°С и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕГОАс и промывали 5% ЫС1 и солевым раствором. Органическую фракцию сушили над №28О4 и концентрации, полученное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с выходом указанного на схеме соединения (1,6 г, 5,28 ммоль, 51%). ЖХ/МС=303,30 (М++1).
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии хинолин (0,81 г, 2,67 ммоль) и НС1-соль (2-хлорэтил)диметиламина (0,42 г, 2,94 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (10 мл). Затем добавляли С52СО3 (1,74 г, 5,34 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 65°С и перемешивали в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕГОАс и промывали 5% ЫС1 и солевым раствором. Органическую фракцию сушили над №28О4 и концентрировали, полученное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле с выходом указанного на схеме соединения (0,5 г, 1,34 ммоль, 50%). ЖХ/МС=374,24 (М++1).
Стадия 3.
Трипептид в форме кислоты (0,51 г, 1,06 ммоль) растворяли в ЭМ8О (диметилсульфоксиде) (10 мл). К полученному раствору добавляли ΚΟГВи (0,6 г, 5,3 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Затем к реакционной смеси за один прием добавляли полученный на предыдущей стадии хлорхинолин (0,44 г, 1,17 ммоль), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли 0,5 мл АсОН, и реакционную смесь очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением соединение 48 (0,309 г, 0,37 ммоль, 36%). 'Н ЯМР (300 МГц, СПС13) Ή ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.64 (5, 1Н), 8.16 (ά, 1Н), 7.68 (5, 1Н), 7.34 (ά, 1Н),
7.28 (ά, 1Н), 6.28 (т, 1Н), 5.62 (Ь5, 1Н), 4.64 (άά, 2Н), 4.55 (т, 2Н), 4.19 (5, 1Н), 4.15-3.97 (т, 2Н), 3.69 (т, 2Н), 3.30 (5, 2Н), 3.02 (5, 6Н), 2.90-2.53 (т, 3Н), 2.02-1.80 (т, 3Н), 1.71-1.98 (т, 3Н), 1.51-1.34 (т, 3Н),
1.29 (ά, 6Н), 1.23-1.06 (т, 3Н), 1.02 (5, 9Н), 0.49-0.34 (т, 2Н). ЖХ/МС=817.71 (М++1).
Пример 49. Получение соединения 49
- 57 025794
Стадия 1.
Смесь α-хлорацетона (10,4 г, 112,8 ммоль) и аминотиоксо-уксусной кислоты этилового эфира (5,0 г, 37,6 ммоль) в этаноле (100 мл) перемешивали при 80°С в течение 6 ч. Остаток, полученный после концентрирования, очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с выходом сложного эфира (3,2 г, 50%) в виде белого твердого вещества. Затем полученный сложный этиловый эфир (1,5 г, 8,8 ммоль) растворяли в смеси ТНР/МеОН/вода (10 мл/10 мл/10 мл). Добавляли избыток гидроксида лития (3,0 г), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли этилацетат (100 мл). рН смеси доводили до 4 путем медленного добавления 1н. НС1. Слои разделяли, и органический слой сушили над Мд§О4. После концентрации желаемый продукт (0,8 г, 64%) получали в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС=143,7 (М++1).
Стадия 2.
К смеси, полученной на предыдущей стадии кислоты (0,36 г, 2,47 ммоль) и указанного на схеме анилина (0,40 г, 1,65 ммоль) в пиридине (15 мл), медленно добавляли РОС13 (0,38 г, 2,47 ммоль) при -40°С. Затем полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 4 ч. После завершения реакции к смеси добавляли по каплям Н2О (5 мл). Затем смесь перемешивали при 0°С дополнительно в течение 15 мин. Смесь концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли ЕЮАс и промывали насыщенным водным раствором NаНСОз. Органический слой сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением амида (0,45 г, 74%) в виде твердого вещества. Полученный амид (0,45 г, 1,22 ммоль) суспендировали в трет-ВиОН (10 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли трет-ВиОК (0,29 г, 2,57 ммоль). Полученную смесь нагревали до 75°С в течение 4 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь подкисляли, медленно добавляя 4н. НС1 в диоксане (1 мл). Полученный после концентрирования неочищенный продукт вливали в 1н. КН2РО4/Н2О (50 мл). Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрования и промывали водой. После сушки в условиях глубокого вакуума в течение ночи указанный на схеме хинолин (0,4 г, 93%) получали в виде твердого вещества. ЖХ/МС=350,8 (М++1).
Стадия 3.
К смеси указанного на схеме трипептида (0,20 г, 0,28 ммоль) и полученного на предыдущей стадии хинолина (0,10 г, 0,28 ммоль) в ММР (5 мл) добавляли карбонат цезия (0,18 г, 0,56 ммоль). Данную смесь перемешивали при 85°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к смеси добавляли ЕЮАс (50 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (50 мл). Органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (1х50 мл), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением в качестве продукта желаемого сложного метилового эфира в виде желтого твердого вещества (0,15 г, 65%).
Стадия 4.
Полученный сложный метиловый эфир (0,15 г, 0,18 ммоль) растворяли в ТНР (2 мл), добавляли раствор ЫОН (0,05 г, 1,8 ммоль) в Н2О (2 мл), затем добавляли МеОН (2 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После завершения реакции рН доводили до 4 путем добавления 4н. НС1 в Н2О при 0°С. Данную смесь экстрагировали ЕЮАс (2х20 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом с получением соединения 49 в виде желтого твердого вещества (0, 14 г, 95%). 1Н ЯМР (300 МГц, СЭзОЭ): δ
8.10 (б, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.70 (δ, 1Н), 7.44 (б, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.36 (δ, 1Н), 5.82 (бб, 1Н), 5.53 (Ьге, 1Н), 5.30 (б, 1=17.1 Гц, 1Н), 5.12 (б, 1=10.2 Гц, 1Н), 4.65 (т, 1Н), 4.58 (т, 1Н), 4.39 (т, 2Н), 4.22 (δ, 1Н), 4.10 (т, 2Н), 3.86 (т, 2Н), 3.49 (т, 4Н), 2.83 (т, 3Н), 2.57 (т, 3Н), 2.39 (т, 1Н), 2.18 (т, 1Н), 2.07 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н), 1.68 (т, 2Н), 1.44 (т, 1Н), 1.35 (т, 1Н), 1.23 (т, 1Н), 1.04 (δ, 9Н), 0.48 (т, 1Н), 0.30 (т, 1Н). ЖХ/МС=810.4 (М++1).
- 58 025794
Пример 50. Получение соединения 50.
Соединение 50 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 49. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.62 (5, 1Н), 8.08 (ά, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.69 (5, 1Н), 7.42 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.34 (5, 1Н), 5.51 (Ъг5, 1Н), 4.65-4.52 (т, 2Н), 4.38 (т, 2Н), 4.22 (5, 1Н), 4.10 (т, 1Н), 3.85 (т, 2Н), 3.49 (5, 3Н), 2.74 (т, 1Н), 2.56 (5, 3Н), 2.20 (т, 1Н), 2.08 (т, 1Н), 1.85 (т, 1Н), 1.68 (т, 3Н), 1.50-1.21 (т, 7Н), 1.02 (т, 12Н), 0.48 (т, 1Н), 0.30 (т, 1Н). ЖХ/МС=812.6 (М++1).
Пример 51. Получение соединения 51.
Стадия 1.
К смеси указанных на схеме трипептида (1,30 г, 1,92 ммоль) и хинолина (0,55 г, 1,53 ммоль) в NΜΡ (15 мл) добавляли карбонат цезия (0,94 г, 2,88 ммоль). Данную смесь перемешивали при 85°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к смеси добавляли Е1ОАс (50 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (50 мл). Органический слой промывали 3% водным раствором ЫС1 (1 х50 мл), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением в качестве продукта желаемого сложного метилового эфира в виде желтого твердого вещества (0,85 г, 65%). Раствор полученного продукта в дихлорметане (10 мл) обрабатывали 4н. НС1 в диоксане (20 мл) в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрировали досуха с получением указанного на схеме аминового соединения в форме НС1-соли. ЖХ/МС=708,9 (М++1).
Стадия 2.
К двухфазному раствору полученного на предыдущей стадии амина (0,71 г, 1,0 ммоль) в дихлорметане (40 мл) и 5% водном растворе бикарбоната натрия (40 мл) добавляли за четыре приема раствор промежуточного соединения I (0,36 г, 1,5 ммоль) в дихлорметане. Данный раствор продолжали добавлять до тех пор, пока исходное вещество не было полностью израсходовано. Слой дихлорметана отбирали и концентрировали. Затем полученный сложный метиловый эфир растворяли в смеси ТНР/МеОН/вода (5 мл/5 мл/5 мл). Добавляли избыток гидроксида лития (240 мг), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли этилацетат (40 мл), и рН смеси доводили до 4 путем медленного добавления 1н. НС1. После разделения слоев, органический слой концентрировали. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением соединения 51 (750 мг, 91%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.76 (5, 1Н), 8.25 (ά, 1=9.6 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 7.75 (т, 2Н), 7.36 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 5.91-5.82 (т, 1Н), 5.77 (Ъг5, 1Н), 5.31 (ά, 1=15.9 Гц, 1Н), 5.12 (ά, 1=10.2 Гц, 1Н), 4.74 (т, 1Н), 4.62 (т, 1Н), 4.52 (т, 1Н), 4.36 (т, 2Н), 4.25-4.05 (т, 3Н), 3.87 (т, 2Н), 3.46 (5, 3Н), 2.82 (т, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.22 (т, 2Н), 1.99-1.62 (т, 5Н), 1.35 (ά, 1=6.3 Гц, 6Н), 1.49-1.21 (т, 4Н), 1.02 (т, 9Н), 0.48 (т, 1Н), 0.34 (т, 1Н). ЖХ/МС=819.5 (М++1).
- 59 025794
Пример 52. Получение соединения 52.
К смеси соединения 51 (0,60 г, 0,73 ммоль) и ацетата натрия (0,83 г, 10,2 ммоль) в ОМЕ/Н2О (9 мл/1 мл) добавляли пара-толуолсульфонгидразид (0,96 г, 5,1 ммоль). Данную смесь перемешивали при 95°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и к смеси добавляли ЕЮАс (50 мл). Органический слой промывали 0,05н. водным раствором НС1 (1x50 мл), сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением соединения 52 (450 мг, 75%) в виде желтого твердого вещества. !Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.65 (5, 1Н), 8.27 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 7.76 (т, 2Н), 7.38 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 5.77 (Ьг5, 1Н), 4.74 (ΐ, 1Н), 4.62 (б, 1Н), 4.52 (ΐ, 1Н), 4.37 (т, 2Н), 4.18-4.04 (т, 3Н), 3.86 (т, 2Н), 3.46 (5, 3Н), 2.76 (т, 1Н), 2.58 (т, 1Н), 2.20 (ц, 1Н), 1.97-1.85 (т, 2Н), 1.70-1.65 (т, 3Н), 1.54 (т, 1Н), 1.46-1.41 (т, 2Н), 1.35 (т, 6Н), 1.22 (т, 2Н), 1.02 (т, 12Н), 0.48 (т, 1Н), 0.30 (т, 1Н). ЖХ/МС=821.6 (М++1).
Пример 53. Получение соединения 53.
Стадия 1.
К смеси указанных на схеме анилина (1,21 г, 6,06 ммоль) и кислоты (0,84 г, 6,09 ммоль) в пиридине (55 мл) медленно добавляли РОС13 (1,02 г, 6,68 ммоль) при -40°С. Затем данную смесь перемешивали при 0°С в течение 4 ч. После завершения реакции к смеси добавляли по каплям Н2О (5 мл). Затем смесь перемешивали при 0°С дополнительно в течение 15 мин. Смесь концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли ЕЮАс и промывали насыщенным водным раствором NаНСО3. Органический слой сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением амида (1,77 г, 92%) в виде твердого вещества. Полученный амид (1,70 г, 5,3 ммоль) суспендировали в трет-ВиОН (40 мл). К данной смеси при интенсивном перемешивании добавляли трет-ВиОК (1,30 г, 11,2 ммоль). Полученную смесь нагревали до 75°С в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь подкисляли, медленно добавляя 4н. НС1 в диоксане (5 мл). Полученный после концентрирования неочищенный продукт вливали в 1н. КН2РО4/Н2О (100 мл). Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрования и промывали водой. После сушки в условиях глубокого вакуума в течение ночи получали указанный на схеме хинолин (1,5 г, 94%) в виде твердого вещества. ЖХ/МС=302,4 (М++1).
Стадия 2.
Соединение 53 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 50, за исключением того, что использовали полученный на предыдущей стадии хинолин. Ή ЯМР (300 МГц, ОМ§О): δ 12.43 (Ьг5, 1Н), 9.59 (5, 1Н), 8.69 (5, 1Н), 8.57 (т, 1Н), 8.13 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.83 (5, 1Н), 7.51 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.06 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 5.68 (т, 1Н), 5.60 (Ьг5, 1Н), 5.21 (б, 1=18.0 Гц, 1Н), 5.07 (б, 1=9.9 Гц, 1Н), 4.67 (т, 1Н), 4.45 (т, 1Н), 4.32 (т, 1Н), 4.04 (т, 4Н), 2.66 (5, 3Н), 2.28 (т, 2Н), 2.03-1.80 (т, 4Н), 1.35-1.19 (т, 4Н), 0.95 (5, 9Н), 0.44 (т, 1Н), 0.33 (т, 1Н). ЖХ/МС=761.5 (М++1).
- 60 025794
Пример 54. Получение соединения 54.
Соединение 54 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 50 и соединения 52. 1Н ЯМР (300 МГц, ОМ8О): δ 9.59 (5, 1Н), 8.69 (5, 1Н), 8.41 (т, 1Н), 8.14 (й, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.84 (5, 1Н), 7.51 (й, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.04 (й, 1=8.7 Гц, 1Н), 5.60 (Ьг5, 1Н), 4.68 (т, 1Н), 4.45 (т, 1Н), 4.29 (т, 1Н), 4.04 (т, 5Н), 2.67 (т, 4Н), 2.28 (т, 2Н), 2.03-1.80 (т, 4Н), 1.581.42 (т, 4Н), 0.94 (т, 12Н), 0.44 (т, 1Н), 0.35 (т, 1Н). ЖХ/МС=763.3 (М++1).
Пример 55. Получение соединения 55.
Соединение 55 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 50, за исключением того, что использовали указанный на схеме Р2 хинолин. !Н ЯМР (300 МГц, СОзОО): δ 9.01 (5, 1Н), 8.76 (5, 1Н), 8.37 (й, 1=9.0 Гц, 1Н), 7.99 (5, 1Н), 7.70 (й, 1=9.9 Гц, 1Н), 5.89 (т, 1Н), 5.83 (Ьг5, 1Н), 5.31 (й, 1=15.3 Гц, 1Н), 5.13 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 4.75 (т, 1Н), 4.65 (т, 1Н), 4.41 (т, 1Н), 4.19-4.07 (т, 5Н), 3.56 (т, 1Н), 2.82 (т, 1Н), 2.63 (т, 1Н), 2.22 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.75-1.63 (т, 2Н), 1.56 (й, 1=7.2 Гц, 6Н), 1.49-1.20 (т, 5Н), 0.98 (5, 9Н), 0.48 (ц, 1Н), 0.34 (т, 1Н). ЖХ/МС=794.5 (М++1).
Пример 56. Получение соединения 56.
Соединение 56 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 52, за исключением того, что в качестве реагента использовали соединение 55. !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.92 (5, 1Н), 8.65 (5, 1Н), 8.30 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.92 (5, 1Н), 7.63 (й, 1=9.3 Гц, 1Н), 5.77 (Ьг5, 1Н), 4.75 (т, 1Н), 4.62 (т, 1Н), 4.45 (т, 1Н), 4.16 (т, 5Н), 3.55 (т, 1Н), 2.79 (т, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.97 (т, 1Н), 1.89 (т, 1Н), 1.80 (т, 3Н), 1.56 (й, 1=6.9 Гц, 6Н), 1.59-1.22 (т, 6Н), 1.05 (т, 12Н), 0.48 (ц, 1Н), 0.30 (т, 1Н). ЖХ/МС=796.4 (М++1).
Пример 57. Получение соединения 57.
Соединение 57 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, использованным при получении соединения 52. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.33 (т, 1Н), 7.83 (5, 1Н), 7.65 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 5.77 (Ьг5, 1Н), 4.77 (т, 1Н), 4.62 (т, 1Н), 4.42 (т, 1Н), 4.17 (5, 3Н), 4.17-4.05 (т, 3Н), 2.79 (т, 1Н), 2.61 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.98 (т, 1Н), 1.79 (т, 1Н), 1.70-1.49 (т, 4Н), 1.45-1.21 (т, 5Н), 1.38 (й, 1=6.6 Гц, 6Н), 1.05 (т, 12Н), 0.48 (т, 1Н), 0.30 (т, 1Н). ЖХ/МС=811.4 (М++1).
- 61 025794
Пример 58. Получение соединения 58.
К двухфазному раствору указанного на схеме амина (0,15 г, 0,19 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и 5% водном растворе бикарбоната натрия (10 мл) добавляли раствор указанного на схеме карбоната (0,08 г, 0,29 ммоль) в дихлорметане за четыре приема, до тех пор, пока исходный амин не был полностью израсходован. Слой дихлорметана отбирали и концентрировали. Затем полученный сложный метиловый эфир растворяли в смеси ТНР/МеОН/вода (2 мл/2 мл/2 мл). Добавляли избыток гидроксида лития (46 мг), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли этилацетат (40 мл), и рН смеси доводили до 4 путем медленного добавления 1н. НС1/Н2О. После разделения слоев органический слой концентрировали. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюентов воду/ацетонитрил (0,05% ТРА), с получением соединения 58 (140 мг, 88%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (300 МГц, СИ3ОП): δ 8.66 (т, 1Н), 8.32 (т, 2Н), 7.82 (5, 1Н), 7.63 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 5.76 (Ьг5, 1Н), 4.77 (т, 1Н), 4.66 (т, 1Н), 4.28-4.03 (т, 8Н), 2.84 (т, 1Н), 2.65 (т, 1Н), 2.08 (т, 2Н), 1.86-1.63 (т, 6Н), 1.79 (т, 1Н), 1.70-1.49 (т, 3Н), 1.55-1.36 (т, 2Н), 1.39 (ά, ί=6.9 Гц, 6Н), 1.28 (т, 2Н) 1.04 (т, 12Н), ЖХ/МС=841.4 (М++1).
Пример 59. Получение соединения 59.
К раствору указанного на схеме спирта (0,40 г, 1,1 ммоль) в ИМ§О (5 мл) медленно добавляли третбутилат калия (0,38 г, 3,3 ммоль). Затем добавляли указанный на схеме хлор-хинолин (0,32 г, 1,2 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли этилацетат (50 мл), и рН доводили до 2 путем добавления 1н. НС1. После разделения слоев органический слой сушили над №28О4. Полученный после концентрирования неочищенный продукт сушили в условиях глубокого вакуума в течение ночи и использовали как есть на следующей стадии.
К раствору полученной на предыдущей стадии кислоты (0,60 г, в неочищенном виде, 1,1 ммоль), (1К,2§)-1-амино-2-этилциклопропанкарбоновой кислоты метилового эфира гидрохлорида (0,22 г, 1,2 ммоль) и NΜΜ (Ν-метилморфолина) (0,56 г, 5,5 ммоль) добавляли при 0°С НАТИ (0,63 г, 1,65 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. К смеси добавляли при перемешивании этилацетат (50 мл) и 3% водный раствор ЫС1 (50 мл). Органический слой отделяли и промывали 3% водным раствором ЫС1 (50 мл) и затем солевым раствором, сушили над №-ь8О4 и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны) с получением указанного на схеме трипептида (0,28 г, 37%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС=692,8 (М++1).
Соединение 59 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, описанным вы- 62 025794 ше. !Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.81 (8, 1Н), 8.05 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.91 (8, 1Н), 7.49 (8, 1Н), 7.35 (т, 1Н), 7.12 (ά, .1 9.0 Гц, 1Н), 6.67 (8, 1Н), 5.53 (Ьг8, 1Н), 4.65 (т, 2Н), 4.55 (ά, ί=12.3 Гц, 1Н), 4.22-4.16 (т, 3Н), 3.95 (8, 3Н), 2.75 (т, 1Н), 2.56 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 2.10-1.85 (т, 3Н), 1.71-1.64 (т, 3Н), 1.52-1.38 (т, 3Н), 1.29-1.20 (т, 2Н), 1.02 (т, 12Н), 0.48 (т, 1Н), 0.36 (т, 1Н). ЖХ/МС=703.4 (М++1).
Пример 60. Получение соединения 60.
Стадия 1.
Указанный на схеме анилин (38,3 г, 206 ммоль) и 1-хлорметил-4-метоксибензол (29,4 мл, 216 ммоль) растворяли в безводном ИМР (412 мл) и обрабатывали С82СО3 (77,2 г, 326 ммоль), затем перемешивали в течение 90 мин при 50°С. Реакционную смесь концентрировали и затем распределяли между Н2О и ЕЮАс с получением гомогенного раствора. Затем выпаривали ЕЮАс. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывали и затем промывали Н2О, МеОН, 30% БСМ в гексане и 50% ЕЮАс в гексане. Твердое вещество сушили в условиях глубокого вакуума с получением РМВ (пара-метоксибензил)защищенного продукта (52,2 г, 83%) ЖХ/МС=306 (М++1).
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии анилин (52,2 г, 171 ммоль) и указанную на схеме кислоту (29,0 г, 196 ммоль) растворяли в безводном пиридине (853 мл) и обрабатывали РОС13 (18,8 мл, 205 ммоль) при -8°С. После перемешивания в течение 60 мин реакционную смесь концентрировали и распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1, затем экстрагировали ЕЮАс и БСМ. После удаления растворителя оставшийся неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (30-80% ЕЮАс/гексан) с получением указанного на схеме амида (44,6 г, 60%), масса/заряд 436. (М+Н).
Стадия 3.
Полученный на предыдущей стадии амид (9,04 г, 20,8 ммоль) и изопропил амин (17,7 мл, 208 ммоль) в ТНР (177 мл) перемешивали в течение 4 ч при 65°С. Данную смесь концентрировали, распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1 и затем экстрагировали ЕЮАс (этилацетатом) и БСМ. После удаления растворителя оставшийся неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (50-80% ЕЮАс/гексан) с получением указанного на схеме амина (6,06 г, 64%). ЖХ/МС=457,8 (М++1).
Стадия 4.
Полученный на предыдущей стадии амин (18,4 г, 40,3 ммоль) суспендировали в толуоле (300 мл), и затем добавляли ИаН (2,42 г, 60,4 ммоль). Данную смесь перемешивали в течение 80 мин при 125°С. После охлаждения до комнатной температуры добавляли АсОН (3,76 мл, 66,4 ммоль) в Н2О (300 мл). Образовавшееся твердое вещество отфильтровывали, промывали Н2О и толуолом и затем сушили в условиях глубокого вакуума в течение ночи с получением указанного на схеме хинолина (15,0 г, 84%). ЖХ/МС=440 (М++1).
Стадия 5.
Полученный на предыдущей стадии хинолин (1,00 г, 2,27 ммоль), трипептид-брозилат (1,78 г, 2,50 ммоль) и С82СО3 (1,85 г, 5,68 ммоль) в ИМР перемешивали в течение 3,5 ч при 65°С. Реакционную смесь распределяли между ЕЮАс и солевым раствором и затем экстрагировали ЕЮАс. Оставшийся после выпаривания летучих органических веществ неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (50-100% ЕЮАс/гексан) с получением указанного на схеме сложного эфира (1,64 г, 79%). ЖХ/МС=914 (М++1).
Стадия 6.
К полученному на предыдущей стадии сложному эфиру (6,29 г, 6,89 ммоль) в БСМ (100 мл) добавляли ТРА (10 мл). После перемешивания в течение 100 мин при комнатной температуре добавляли 100 мл толуола, и затем данную смесь концентрировали. Полученное неочищенное вещество распределяли между насыщенным раствором ИаНСО3 и БСМ и затем экстрагировали БСМ. Оставшийся после удале- 63 025794 ния летучих органических веществ неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (65-100% ЕЮАс/гексан) с получением указанного на схеме фенола (4,50 г, 82%). ЖХ/МС=793,7 (М++1).
Стадия 7.
Полученный фенол (520 мг, 0,655 ммоль) и указанный на схеме бромид (231 мг, 0,787 ммоль) растворяли в безводном ЭМР (5 мл) и обрабатывали С82СО3 (534 мг, 1,64 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин при 50°С. Реакционную смесь распределяли между Н2О и ЕЮАс и экстрагировали ЕЮАс. Экстракт промывали солевым раствором и сушили над №28О4. Оставшийся после удаления летучих органических веществ неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (80-100% ЕЮАс/гексан) с получением указанного на схеме сложного эфира (600 мг, 91%). ЖХ/МС=1005,7 (М++1).
Стадия 8.
Полученный на предыдущей стадии сложный эфир (600 мг, 0,597 ммоль) растворяли в безводном ЭСМ (6 мл) и затем обрабатывали 4н. НС1 в диоксане (3 мл, 12,0 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре добавляли толуол (6 мл), и данную реакционную смесь концентрировали. После сушки в условиях глубокого вакуума в течение 30 мин получали твердое вещество, которое растворяли в ТНР (5,37 мл). К данной смеси добавляли МеОН (1,79 мл) и 2н. ЫОН (3,58 мл). После перемешивания в течение 65 мин при 40°С реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь нейтрализовали путем добавления 2н. НС1 (3,8 мл) и концентрировали. Полученное неочищенное вещество очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением соединения 60 (301 мг, 50%): !Н ЯМР (С1);О1Е 300 МГц): δ 8.63 (8, 1Н), 8.47 (8, 1Н), 8.16 (б, 1Н), 7.53 (8, 1Н), 7.48 (б, 1Н), 5.805.71 (т, 1Н), 5.56 (Й8, 1Н), 5.18 (б, 1Н), 5.10 (б, 1Н), 4.61 (ΐ, 1Н), 4.49-4.41 (т, 3Н), 4.06-3.89 (т, 3Н), 3.293.18 (т, 8Н), 3.14 (ΐ, 2Н), 3.07 (ΐ, 2Н), 2.67-2.62 (т, 1Н), 2.54-2.51 (т, 1Н), 2.14-2.08 (т, 1Н), 1.89-1.84 (т, 1Н), 1.76-1.71 (т, 1Н), 1.63-1.53 (т, 2Н), 1.38-1.31 (т, 2Н), 1.27-1.24 (б, 6Н), 1.13-1.08 (т, 2Н), 0.93 (8, 9Н), 0.29-0.23 (т, 2Н); ЖХ/МС=891 (М++1).
Пример 61. Получение соединения 61.
Стадия 1.
В колбу, продуваемую Ν2, вносили указанные на схеме фенол (604 мг, 0,761 ммоль) и хлорид (170 мг, 0,913 ммоль), С82СО3 (620 мг, 1,90 ммоль) и NаI (60 мг, 0,45 ммоль). Затем к данной смеси добавляли ЭМР (7 мл), и полученную гетерогенную смесь нагревали в предварительно нагретой до 65°С масляной бане. Через 30 мин реакция согласно ЖХ/МС-анализу была завершена менее чем на 40%. Через 6 ч реакция завершалась. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали (3x100 мл) 5% ЫС1, полунасыщенным водным раствором NаНСО3 (100 мл) и солевым раствором. Органическую фазу сушили над №28О4, твердое вещество удаляли путем фильтрования, и фильтрат концентрировали. Полученный неочищенный сложный метиловый эфир использовали как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=907 (М++1).
- 64 025794
Стадия 2.
Полученный на предыдущей стадии сложный эфир (620 мг, 0,69 ммоль) растворяли в смеси ТНР (6 мл) и ΜеОН (2 мл). ЬЮН-Н2О (143 мг, 3,41 ммоль) растворяли в бН2О (2 мл), и данный раствор медленно добавляли к раствору сложного эфира в ТНΡ/ΜеОН, который предварительно охлаждали до 0°С. После завершения добавления ледяную баню удаляли. Через 3 ч реакция завершалась. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и нейтрализовали путем добавления 2н. НС1. Соединение 61 сразу выделяли из реакционной смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ с получением 472 мг (выход: 78%) желтоватого твердого вещества.
ЖХ/МС=892 (М++1). Ή ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 8.31 (5, 1Н), 8.02 (5, 1Н), 7.89 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.18-7.14 (т, 2Н), 5.53 (бб, 1=9.0, 15.8 Гц, 1Н), 5.20 (5, 1Н), 4.93 (б, 1=17.4 Гц, 1Н), 4.74 (б, 1=10.2 Гц, 1Н),
4.33 (т, 4Н), 4.11 (б, 1=12.7 Гц, 1Н), 3.84-3.22 (т, 12Н), 2.93 (Ьг5, 8Н), 2.29 (ц, 1=4.5 Гц, 1Н), 1.87 (т, 1Н), 1.66 (т, 1Н), 1.55 (т, 1Н), 1.35 (т, 1Н), 1.14 (т, 1Н), 0.97 (б, 1=6.45 Гц, 6Н), 0.87 (т, 1Н), 0.67 (5, 9Н), 0.13-0.01 (т, 2Н).
Пример 62. Получение соединения 62.
Стадия 1.
К раствору указанного на схеме фенола (1,10 г, 4,64 ммоль) в ΌΜΡ (21 мл) добавляли указанный на схеме бромид (1,40 г, 4,77 ммоль, 1,2 экв.) и карбонат цезия (3,80 г, 11,6 ммоль, 2,5 экв.). Полученную смесь помещали в предварительно нагретую баню (50°С, температура масляной бани) и интенсивно перемешивали в течение 55 мин. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали водой (1х). Выполняли обратную экстракцию водного слоя ЕЮАс (этилацетатом) (1х). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали. Полученный неочищенный продукт очищали путем колоночной хроматографии (50%75% ЕЮАс/гексаны) с получением указанного на схеме хинолина (1,71 г, 50%); ЖХ/МС: 515,28 (М++Н, рассчетное значение для С26Н36СШ6О3: 515,25).
Стадия 2.
К раствору указанного на схеме трипептида в форме кислоты (303 мг, 0,634 ммоль) в ΌΜί^ (3,3 мл) добавляли трет-бутилат калия (365 мг, 3,17 ммоль, 5 экв.). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли по каплям раствор полученного на предыдущей стадии хинолина (359 мг, 0,697 ммоль, 1,1 экв.) в ΌΜί^ (3 мл). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 16,5 ч. Реакционную смесь гасили уксусной кислотой (0,3 мл) и очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ (30-90% ΜеСN/Н2О-1% ТРА) с получением указанной на схеме кислоты (100 мг, 16%); ЖХ/МС: 958,27 (М++Н, рассчетное значение для С50Н7^9О10: 958,54).
Стадия 3.
К раствору полученной на предыдущей стадии кислоты (100 мг, 0,104 ммоль) в СН2С12 (0,2 мл) добавляли раствор 4н. НС1 в диоксане (1,0 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,25 ч, концентрировали и очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ (30-90% ΜеСN/Н2О-1%
- 65 025794
ΤΡΑ) с получением соединения 62 (10 мг, 11%): Ή ЯМР ^^еОВ, 400 МГц): δ 8.48 (5, 1Н), 7.98 (ά, 1Н), 7.43 (5, 1Н), 7.21 (5, 1Н), 7.05 (άά, 1Н), 7.03 (ά, 1Н), 6.10 (ά, 1Н), 5.49 (5, 1Н), 4.52-4.56 (т, 2Н), 4.41 (ά, 1Н), 4.23 (ί, 2Н), 4.10 (5, 1Н), 3.97 (т, 2Н), 3.85 (ί, 1Н), 3.18 φ, 4Н), 2.93 (ί, 2Н), 2.85 (т, 4Н), 2.61 (т, 1Н), 2.46 (т, 1Н), 2.03 (т, 1Н), 1.89 (т, 1Н), 1.80 (т, 2Н), 1.55 (ί, 4Н), 1.41 (т, 2Н), 1.35 (ά, 2Н), 1.19 (ά, 8Н), 0.92 (5, 9Н); ЖХ/МС: 858.30 (М++Н, С45Н64ЖО8 рассчетное значение: 858.49).
Пример 63. Получение соединения 63.
Раствор указанной на схеме кислоты (89,5 мг, 0,115 ммоль)и (15,5 мг, 0,116 ммоль) Νхлорсукцинимида в 2 мл ^ΜΡ перемешивали при 0°С в течение 20 ч, и к данной реакционной смеси дополнительно добавляли 5 мг Ν-хлорсукцинимида. Полученный раствор перемешивали при 0°С в течение 42 ч. Данный раствор фильтровали, и затем полученный продукт очищали ненсколько раз путем препаративной ВЭЖХ и полученный очищенный продукт лиофилизировали с получением 78,4 мг соединения 63. Ή ЯМР (300 МГц, СОзОО): δ 8.63 (5, 1Н), 8.30 (ά, 1Н, 1=9.0 Гц), 7.87 (5, 1Н), 7.74 (5, 1Н), 7.38 (ά, 1Н, 1=9.0 Гц), 5.76 (5, 1Н), 4.62-4.74 (т, 2Н), 4.55 (арр! ί, 1Н, 1=6.8 Гц), 4.13-4.24 (т, 2Н), 4.05-4.13 (т, 1Н), 4.06 (5, 3Н), 2.75-2.85 (т, 1Н), 2.55-2.67 (т, 1Н), 1.82-2.05 (т, 2Н), 1.60-1.72 (т, 3Н), 1.37-1.58 (т, 3Н), 1.32 (ά, 6Н, 1=6.6 Гц), 1.14-1.27 (т, 3Н), 0.95-1.06 (т, 12Н), 0.35-0.44 (т, 2Н); ЖХ/МС=811 (Μ++1).
Пример 64. Получение соединения 64.
Стадия 1.
Смесь указанного на схеме трипептида (1,0 г, 1,41 ммоль), хинолина (448,9 мг, 1,34 ммоль) и карбоната цезия (920 мг, 2,82 ммоль) в Ν-метилпирролидине перемешивали в бане (65°С) в течение 6 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (20 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и две фазы разделяли. Водную фракцию экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фракции промывали водой, объединяли, сушили ^дЗОД и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси гексана и этилацетата в качестве элюента, с получением 864 мг (76%) трипептида, содержащего некоторое количество примесей. ЖХ/МС=808 (М++1).
Стадия 2.
Смесь сложного метилового эфира (864 мг, 1,07 ммоль) и ЫОН (128,5 мг, 5,37 ммоль) в ТНЕ (5 мл), метаноле (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 14,5 ч. Реакционную смесь концентрировали до половины начального объема с использованием роторного испарителя. Данный концентрированный раствор подкисляли путем добавления 0,83 мл (10,77 ммоль) трифторуксусной кислоты, и затем данную смесь разбавляли водой (5 мл) и метанолом (5 мл) и перемешивали бане (0°С) в течение 1 ч. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили под вакуумом. Твердое вещество растворяли в а диоксан-ацетонитрил-водной смеси путем нагревания и затем лиофилизировали с получением 818 мг соединения 64. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.09 (ά, 1Н, 1=9.3 Гц), 7.72 (5, 1Н), 7.40 (ά, 1Н, 1=9.3 Гц), 7.34 (5, 1Н), 5.77-5.92 (т, 1Н), 5.56 (5, 1Н), 5.28 (ά, 1Н, 1=18.0 Гц), 5.10 (ά, 1Н, 1=10.2 Гц), 4.56-4.70 (т, 2Н), 4.52 (т, 1Н), 4.24 (Ьг 5, 1Н), 4.00-4.16 (т, 2Н), 4.06 (5, 3Н), 3.23 (гепт, 1Н, 1=6.6 Гц), 2.72-2.82 (т, 1Н), 2.45-2.58 (т, 1Н), 2.07-2.26 (т, 1Н), 1.92-2.06 (т, 1Н), 1.76-1.92 (т, 1Н), 1.62-1.76 (т, 2Н), 1.26-1.50 (т, 1Н), 1.41 (ά, 6Н, 1=6.6 Гц), 1.12-1.26 (т, 2Н), 1.02 (т, 9Н), 0.27-0.42 (т, 2Н); ЖХ/МС=794 (М++1).
- 66 025794
Пример 65. Получение соединения 65.
Смесь соединения 64 (520,9 мг, 0,573 ммоль), тозилгидразида (810 мг, 4,35 ммоль) и 707 мг (8,62 ммоль) ацетата натрия в диметоксиэтан (10 мл) и воде (1 мл) перемешивали бане (95°С) в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и небольшим количеств водного раствора NаНСОз. Затем данную смесь экстрагировали этилацетатом (х2). Объединенные экстракты сушили (Μ§8ϋ4) и концентрировали. Остаток растирали с 50% метанолом в воде при 0°С в течение 1 ч и образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрования. Твердое вещество растворяли в смеси диоксана, ацетонитрила и воды, подкисляли путем добавления 2-3 капель трифторуксусной кислоты, и лиофилизировали с получением 447 мг соединения 65. !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.07 (4, 1Н, 1=9.0 Гц), 7.70 (8, 1Н), 7.39 (4, 1Н, 1=9.0 Гц), 7.34 (8, 1Н), 5.54 (8, 1Н), 4.56-4.69 (т, 2Н), 4.51 (т, 1Н), 4.23 (Ьг8, 1Н), 4.00-4.14 (т, 2Н), 4.05 (8, 3Н),
3.22 (гепт, 1Н, 1=6.9 Гц), 2.68-2.80 (т, 1Н), 2.40-2.58 (т, 1Н), 1.93-2.06 (т, 1Н), 1.78-1.93 (т, 1Н), 1.581.72 (т, 3Н), 1.37-1.58 (т, 1Н), 1.41 (4, 6Н, 1=6.9 Гц), 1.27-1.37 (т, 1Н), 1.10-1.27 (т, 3Н), 0.94-1.10 (т, 12Н), 0.27-0.42 (т, 2Н); ЖХ/МС=796 (М++1).
Пример 66. Получение соединения 66.
Стадия 1.
Раствор указанного на схеме метилового (2,721 г, 8,13 ммоль) эфира в 100 мл СН2С12 перемешивали при комнатной температуре. Затем добавляли 42 мл (42 ммоль) ВВг3 в СН2С12. Полученную смесь подвергали дефлегмации в бане (50°С) в течение 5 ч, и затем дополнительно добавляли 8,4 мл (8,4 ммоль) ВВг3 в СН2С12. После нагревания в течение 2 ч при температуре дефлегмации, дополнительно добавляли 8,4 мл (8,4 ммоль) ВВг3 в СН2С12 и полученую смесь подвергали дефлегмации в течение 18 ч.
Полученную смесь вливали в 300 г льда и данную смесь подщелачивали путем добавления ~18 г (~450 ммоль) №ЮН. После разделения двух фаз водную фракцию экстрагировали водой (100 мл). Две водные фракции промывали СН2С12, объединяли, и рН подводили до ~6 концентрированной НС1. Полученную смесь перемешивали в ледяной бане в течение 1 ч и фильтровали. Твердое вещество промывали водой и сушили. Твердое вещество растирали в 100 мл воды при комнатной температуре в течение 1 ч и образовавшееся твердое вещество фильтровали и промывали водой, затем сушили под вакуумом с получением 2,566 г (98%) бис-фенола.
Стадия 2.
Смесь полученного бис-фенола (2,454 г, 7,65 ммоль) и 60% N34 (671 мг, 16,78 ммоль) помещали в круглодонную колбу объемом 250 мл и добавляли 40 мл ΌΜΡ при 0°С. Данную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и затем добавляли 0,80 мл (8,51 ммоль) 2-бромэтилметилового эфира. Полученную смесь перемешивали при 4°С в течение 48 ч и разбавляли этилацетатом (120 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (120 мл). Данную смесь подводили до рН 4-6 1н. НС1, дополнительно разбавлялии этилацетатом (~1 л), и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Верхнюю органическую фракцию отделяли от нижней водной фракции, которая содержал твердое вещество. Твердое вещество в водной фракции растворяли этилацетатом (1 л) и органическую фракцию отделяли. Эти две органические фракции промывали водой (1 л), объединяли, сушили (Μ§8Θ4) и концентрировали. Остаток растирали с 200 мл СН2С12 и нерастворимое вещество отфильтровывали. Полученный фильтрат концентрировали и очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси гексана, этилацетата и метанола в качестве элюента с получением 732 мг желаемого хинолина. ЖХ/МС=379 (М++1).
- 67 025794
Стадия 3.
Смесь указанного на схеме трипептида (595 мг, 0,837 ммоль), хинолина (300 мг, 0,791 ммоль) и карбоната цезия (546 мг, 1,68 ммоль) в 4,2 мл Ν-метилпирролидин перемешивали в бане, нагретой при 65°С в течение 16,5 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (20 мл) и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и полученные две фазы разделяли. Водную фракцию экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фракции промывали водой (х2), объединяли, сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 410 мг (61%) желаемого сложного метилового эфира, содержащего некоторое количество примесей. ЖХ/МС=852 (М++1).
Стадия 4.
Смесь полученного сложного эфира (410 мг, 0,48 ммоль) и ЫОН (115 мг, 4,81 ммоль) в ТНР (2 мл), метаноле (2 мл) и воде (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и затем концентрировали. Остаток растворяли в ЭМР и подкисляли путем добавления 0,45 мл (5,84 ммоль) трифторуксусной кислоты. Смесь разбавляли этилацетатом (200 мл), промывали водой (х2), сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток растворяли в диоксане и лиофилизировали с получением 372 мг соединения 66. 'Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.73 (з, 1Н), 8.08 (ά, 1Н, 1=8.6 Гц), 7.73 (з, 1Н), 7.41 (ά, 1Н, 1=9.0 Гц),
7.34 (з, 1Н), 5.76-5.94 (т, 1Н), 5.56 (з, 1Н), 5.28 (ά, 1Н, 1=16.8 Гц), 5.10 (ά, 1Н, 1=10.8 Гц), 4.57-4.70 (т, 2Н), 4.52 (т, 1Н), 4.38 (Ъг т, 2Н), 4.23 (Ъг, 1Н), 4.05-4.16 (т, 1Н), 3.86 (Ъг т, 2Н), 3.49 (з, 3Н), 3.23 (гепт, 1Н, 1=6.6 Гц), 2.70-2.82 (т, 1Н), 2.46-2.58 (т, 1Н), 2.12-2.26 (т, 1Н), 1.83-2.07 (т, 2Н), 1.62-1.75 (т, 2Н), 1.37-1.48 (т, 2Н), 1.41 (ά, 6Н, 1=6.6 Гц), 1.26-1.37 (т, 1Н), 1.19 (Ъг, 1Н), 1.02 (з, 9Н), 0.27-0.42 (т, 2Н); ЖХ/МС=838 (М++1).
Пример 67. Получение соединения 67.
Стадия 1.
Смесь промежуточного соединения III (628 мг, 0,881 ммоль), хинолина (317 мг, 0,837 ммоль) и карбоната цезия (632 мг, 1,94 ммоль) в 4,4 мл Ν-метилпирролидина перемешивали в бане, нагретой при 65°С в течение 16 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (20 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и две фазы разделяли. Водную фракцию экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фракции промывали водой (х2), объединяли, сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 504 мг (71%) сложного эфира. ЖХ/МС=854 (М++1).
Стадия 2.
Смесь полученного сложного эфира (504 мг, 0,59 ммоль) и ЫОН (71 мг, 2,96 ммоль) в ТНР (2 мл), метаноле (2 мл) и воде (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Дополнительно добавляли ЫОН (71 мг, 2,96 ммоль) и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Данный раствор концентрировали, и затем остаток растворяли в этилацетате и подкисляли путем добавления трифторуксусной кислоты. Полученный раствор промывали водой (х2), сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток растирали в 50% водном растворе метанола (5 мл) при 0°С в течение 2 ч и фильтровали. Затем полученное твердое вещество промывали водой, сушили под вакуумом с выходом 535 мг (95%) соединения 67. 'ΐ I ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.09 (ά, 1Н, 1=8.7 Гц), 7.74 (з, 1Н), 7.42 (ά, 1Н, 1=8.7 Гц), 7.37 (з, 1Н), 5.57 (з, 1Н), 4.48-4.70 (т, 3Н), 4.39 (т, 2Н), 4.22 (т, 1Н), 4.04-4.16 (т, 1Н), 3.86 (т, 2Н), 3.49 (з, 3Н), 3.23 (гепт, 1Н, 1=6.9 Гц), 2.69-2.82 (т, 1Н), 2.46-2.60 (т, 1Н), 1.76-2.08 (т, 2Н), 1.27-1.76 (т, 6Н), 1.41 (ά, 6Н, 1=6.9 Гц), 1.22 (т, 3Н), 1.01 (з, 9Н), 0.90-1.10 (т, 3Н), 0.28-0.42 (т, 2Н); ЖХ/МС=840 (М++1).
- 68 025794
Пример 68. Получение соединения 68.
Стадия 1.
Суспензию указанной на схеме кислоты (2,000 г, 9,62 ммоль) в метаноле (20 мл) и толуоле (20 мл) перемешивали при 0°С, добавляя по каплям 8 мл (16 ммоль) 2,0 М ТМ8СН^ в диэтиловом эфире. Выдерживали 30 мин при 0°С и 10 мин при комнатной температуре, полученный раствор концентрировали с использованием роторного испарителя с температурой бани <30°С, и полученный остаток дополнительно сушили под вакуумом. К остатку ресуспензированном в метаноле (15 мл) добавляли 3,75 мл (16,4 ммоль) 25% метилата натрия в метаноле и полученный раствор подвергали дефлегмации в бане, нагретой при 70°С в течение 1 ч. Данный раствор концентрировали, и затем остаток адсорбировали на силикагеле и очищали путем хроматографии с получением 997 мг желаемого сложного эфира. ЖХ/МС=174 (М++1).
Стадия 2.
Раствор полученного сложного эфира (992 мг) и ЫОН (274 мг, 11,44 ммоль) в ТНР (9 мл), метаноле (3 мл) и воде (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь концентрировали до ~1/3 объем, разбавляли водой (25 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (25 мл). Органический слой экстрагировали водой (1x25 мл). Водные фракции объединяли и подкисляли путем добавления 1н. НС1 (15 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (3x30 мл). Объединенные экстракты сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением 835 мг (92%) желаемой кислоты. ЖХ/МС=160 (М++1).
Стадия 3.
Раствор желаемой кислоты (824 мг) и ЫОН (274 мг, 5,18 ммоль) в пиридине (50 мл) перемешивали при -30 мин. Полученную смесь перемешивали в морозильнике в течение 2,5 ч и затем гасили путем добавления 2,5 мл воды и концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате и насыщенном водном растворе №-1НСО3,. Водную фракцию экстрагировали водой (1x1). Водные фракции сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получениемм 495 мг (28%) желаемой кислоты. ЖХ/МС=341 (М++1).
Стадия 4.
Смесь полученного на предыдущей стадии амида (495 мг, 1,45 ммоль) и трет-бутилата калия (350 мг, 3,12 ммоль) в трет-ВиОН (7,3 мл) перемешивали при 75°С в течение 7,5 ч. Добавляли 1,5 мл (6 ммоль) 4н. НС1 в диоксане, затем смесь концентрировали. Остаток растирали с 1н. NаН2ΡО4 (25 мл) при комнатной температуре в течение 1 ч и фильтровали. Твердое вещество промывали водой и затем эфиром и сушили под вакуумом с получением 423 мг желаемого хинолина. ЖХ/МС=323 (М++1).
Стадия 5.
Смесь трипептида (302 мг, 0,424 ммоль), хинолина (130 мг, 0,402 ммоль) и карбоната цезия (304 мг, 0,932 ммоль) в 3 мл Ν-метилпирролидина перемешивали в бане, нагретой при 65°С в течение 16 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (15 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и две фазы разделяли после дополнительного разбавления водой и этилацетатом. Органическую фракцию промывали водой (ж1), сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 199 мг (62%) желаемого сложного эфира содержащ некоторое количество примесей. ЖХ/МС=798 (М++1).
Стадия 6.
Смесь промежуточного соединения III (302 мг, 0,424 ммоль), хинолина (130 мг 0,402 ммоль) и (карбоната цезия 304 мг, 0,932 ммоль) в 3 мл Ν-метилпирролидина перемешивали в бане, нагретой при 65°С в течение 16 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (15 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и две фазы разделяли после дополнительного разбавления водой и этилацетатом. Органическую фракцию промывали
- 69 025794 водой (х1), сушили ^дЗО4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии с использованием сотЫ-йа5Ь гексаном-этилацетатом с получением 199 мг (62%) сложного эфира, содержащего некоторое количество примесей. ЖХ/МС=798 (М++1).
Смесь полученного сложного эфира (199 мг, 0,25 ммоль) и ЫОН (59 мг, 2,48 ммоль) в ТНР (4 мл), метаноле (2 мл) и воде (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч и концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате и воде и подкисляли путем добавления 0,3 мл (4,04 ммоль) трифторуксусной кислоты. После разделения двух фаз водную фракцию экстрагировали этилацетатом. Органические фракции объединяли, сушили ^дЗО4) и концентрировали, и затем остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением 132 мг соединения 68. 1Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.48 (5, 1Н), 8.08 (ά, 1Н, 1=9.6 Гц), 7.86 (5, 1Н), 7.63 (ά, 1Н, 1=9.6 Гц), 5.76 (Ьг, 1Н), 4.76 (т, 1Н), 4.60 (т, 1Н), 4.45 (1, 1Н), 4.31 (5, 3Н), 4.17 (5, 3Н), 4.15 (т, 1Н), 4.03-4.12 (т, 1Н), 2.74-2.85 (т, 1Н), 2.55-2.67 (т, 1Н), 1.862.02 (т, 1Н), 1.74-1.86 (т, 1Н), 1.28-1.74 (т, 6Н), 1.12-1.28 (т, 3Н), 1.02 (т, 9Н), 0.96-1.12 (т, 3Н), 0.300.44 (т, 2Н); ЖХ/МС=784 (М++1).
Пример 69. Получение соединения 69.
Смесь трипептида (101 мг, 0,142 ммоль), указанного на схеме хинолина (44 мг, 0,136 ммоль) и карбоната цезия (104 мг, 0,320 ммоль) перемешивали в 1 мл Ν-метилпирролидина в нагретой до 65°С бане в течение 16 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (5 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (5 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Полученные две фазы разделяли после дополнительноого разбавления водой и этилацетатом. Органическую фракцию промывали водой (х 1), сушили ^дЗО4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 71 мг желаемого сложного эфира, содержащего некоторое количество примесей. ЖХ/МС=796 (М++1).
Смесь полученного сложного эфира (71 мг, 0,090 ммоль) и ЫОН (21 мг, 0,881 ммоль) в ТНР (2 мл), метаноле (1 мл) и воде (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч и затем концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате и воде и подкисляли путем добавления 0,1 мл трифторуксусной кислоты. После разделения двух фаз, водную фракцию экстрагировали этилацетатом. Органические фракции объединяли, сушили (^дЗОД и концентрировали, и затем остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением 54 мг соединения 69. 1Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.75 (5, 1Н), 8.48 (5, 1Н), 8.31 (ά, 1Н, 1=9.6 Гц), 7.86 (5, 1Н), 7.63 (ά, 1Н, 1=9.0 Гц), 5.86 (т, 1Н), 5.77 (Ьг, 1Н), 5.29 (ά, 1Н, 1=17.1 Гц), 5.12 (ά, 1Н, 1=10.8 Гц), 4.73 (т, 1Н), 4.60 (т, 1Н),), 4.45 (т, 1Н), 4.31 (5, 3Н), 4.17 (5, 3Н), 4.15 (т, 1Н), 4.05-4.13 (т, 1Н), 2.74-2.92 (т, 1Н), 2.54-2.66 (т, 1Н), 2.14-2.27 (т, 1Н), 1.87-2.02 (т, 2Н), 1.761.87 (т, 1Н), 1.69-1.76 (т, 1Н), 1.63 (т, 1Н), 1.42-1.50 (т, 1Н), 1.28-1.42 (т, 1Н), 1.19 (Ьг, 1Н), 1.03 (т, 9Н), 0.30-0.44 (т, 2Н); ЖХ/МС=782 (М++1).
Пример 70. Получение соединения 70.
Стадия 1.
Раствор указанного на схеме сложного эфира (7,413 г, 42,22 ммоль) в ТНР (45 мл) перемешивали в охлажденной до 0°С бане, добавляя 1н. ЫОН (45 мл) в течение 30 мин. После добавления раствор перемешивали при 0°С в течение 2 ч и подкисляли путем добавления 13 мл (52 ммоль) 4н. НС1. Полученную смесь концентрировали до половины начального объема при пониженном давлении. Концентрированную смесь разбавляли водой, и затем продукт экстрагировали этилацетатом (100 млх2). Экстракты объединяли, промывали солевым раствором (50 мл х 1), сушили ^дЗО4) и концентрировали с получением 5,972 (96%) желаемой кислоты.
Стадия 2.
Смесь неочищенного фенола, указанного на схеме (3,345 г, 18,02 ммоль), и карбоната цезия (7,055 г, 21,65 ммоль) в ΌΜΤ (30 мл) перемешивали при комнатной температуре, добавляя 2- 70 025794 бромэтилметиловый эфир (1,9 мл, 20,22 ммоль). Смесь перемешивали при 65°С в течение 5 ч и разбавляли этилацетатом (500 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (250 мл). После разделения двух слоев, водную фракцию экстрагировали этилацетатом (300 мл), и органические фракции промывали водой (300 мл), Органические фракции объединяли, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 3,611 г (82%) желаемого анилина. ЖХ/МС=244 (М++1).
Стадия 3.
В смесь указанной на схеме кислоты (778 мг, 5,28 ммоль) и полученного на предыдущей стадии анилина (1,157 г, 4,75 ммоль) в ОМР (30 мл) при перемешивании в охлажденной до -25°С бане добавляли РОС13 (1,9 мл, 5,90 ммоль). Смесь перемешивали при -5 —15°С в течение 3 ч и затем 2,5 мл) и 5% водный раствор ЫС1 (250 мл). Через 5 мин данную смесь концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси гексана и этилацетата в качестве элюента, с получением 1, 131 г (64%) амида. ЖХ/МС=373 (М++1).
Стадия 4.
Смесь полученного на предыдущей стадии амида (1,031 г, 2,76 ммоль) в ТНР (9,5 мл) и циклопропиламине (1,9 мл, 27,42 ммоль) помещали в сосуд, выдерживающем повышенное давление, перемешивали в нагретой до 65°С бане в течение 5 ч и концентрировали. Остаток смешивали с водой, и затем данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, и затем разбавляли насыщенным водным раствором NаНСΟ3 (50 мл). Полученный продукт затем экстрагировали этилацетатом (100 млх2). Органические экстракты объединяли, промывали водой (100 мл), сушили (Мд§О4) и концентрировали, продукт очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с выходом 769 мг (71%) желаемого амина. ЖХ/МС=394 (М++1).
Стадия 5.
Суспензию полученного на предыдущей стадии амина (767 мг, 1,95 ммоль) и NаН (119 мг, 2,98 ммоль, 60% дисперсия в вазелиновом масле) в толуоле (11,5 мл) подвергали дефлегмации в нагретой до 110°С бане в течение 3 ч, затем дополнительно добавляли 41 мг NаН (1,03 ммоль, 60%). Смесь подвергали дефлегмации в течение 2 ч, и затем дополнительно добавляли 80 мг NаН (2,0 ммоль, 60%) и подвергали дефлегмации в течение 1 ч, и затем охлаждали до комнатной температуры. К данной суспензии добавляли раствор 0,38 мл (6,64 ммоль) уксусной кислоты в 2,3 мл воды, и полученую смесь перемешивали в охлажденной до 0°С бане в течение 30 мин и фильтровали. Собранное твердое вещество промывали водой и сушили под вакуумом с выходом 612 мг (84%) желаемого хинолина. ЖХ/МС=376 (М++1).
Стадия 6.
Смесь трипептида III (663 мг, 0,930 ммоль), указанного на схеме хинолина (332 мг, 0,883 ммоль) и карбоната цезия (674 мг, 2,07 ммоль) в 6,6 мл Ν-метилпирролидина перемешивали в нагретой до 65°С бане в течение 16 ч. Данную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (26 мл), и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, дополнительно добавляли 5% водный раствор ЫС1 и этилацетат, и две фракции разделяли. Водную фракцию экстрагировали этилацетатом (х 1) и две органические фракции промывали водой (х 1), объединяли, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 359 мг желаемого сложного эфира. ЖХ/МС=851 (М++1).
Стадия 7.
Смесь полученного на предыдущей стадии сложного эфира (359 мг, 0,423 ммоль) и ЫОН (200 мг,
8,35 ммоль) в ТНР (5 мл), метаноле (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Данный раствор подкисляли путем добавления трифторуксусной кислоты, и затем данную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, промывали водой, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, и собиранный продукт лиофилизировали с трифторуксусной кислотой с получением 261 мг соединения 70. !Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.66 (5, 1Н), 8.27 (ά, 1Н, 1=9.7 Гц), 7.70 (5, 1Н), 7.64 (ά, 1Н, 1=9.7 Гц), 5.68 (5, 1Н), 4.35-4.78 (т, 4Н), 4.02-4.20 (т, 2Н), 3.87 (Ъг, 2Н), 3.47 (5, 3Н), 2.4-2.9 (т, 2Н), 1.89-2.04 (т, 1Н), 1.77-1.89 (т, 1Н), 1.28-1.77 (т, 4Н), 1.23 (т, 3Н), 0.94-1.11 (т, 12Н), 0.85-0.94 (т, 2Н), 0.70 (Ъг, 2Н), 0.28-0.44 (т, 2Н); ЖХ/МС=837 (М++1).
- 71 025794
Пример 71. Получение соединения 71.
Смесь указанного на схеме трипептида (557 мг, 0,784 ммоль), хинолина (279 мг, 0,741 ммоль) и карбоната цезия (563 мг, 1,73 ммоль) в 5,6 мл Ν-метилпирролидине перемешивали в нагретой до 65°С бане в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (5 мл) и 5% водным раствором ЫС1 (20 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и две фазы разделяли после дополнительного разбавления 5% водным раствор ЫС1 (30 мл) и этилацетатом (50 мл). Водную фракцию экстрагировали этилацетатом (х 1) и две органические фракции промывали водой (х 1), объединяли, сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, с получением 288 мг (46%) желаемого сложного эфира. ЖХ/МС=849 (М++1).
Смесь полученного сложного эфира (288 мг, 0,339 ммоль) и ЫОН (41 мг, 1,71 ммоль) в ТНР (4 мл), метаноле (4 мл) и воде (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Данный раствор подкисляли путем добавления трифторуксусной кислоты, и затем данную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, промывали водой, сушили (М§8О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексана и этилацетата, и собиранный продукт лиофилизировали с трифторуксусной кислотой с получением 238 мг соединения 71. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.58 (5, 1Н), 8.24 (й, 1Н, 1=8.7 Гц), 7.64 (5, 1Н), 7.60 (й, 1Н, 1=8.7 Гц), 5.77-5.96 (т, 1Н), 5.66 (5, 1Н), 5.29 (й, 1Н, 1=17.4 Гц), 5.11 (й, 1Н, 1=9.9 Гц), 4.71 (т, 1Н), 4.42-4.62 (т, 3Н), 4.044.20 (т, 2Н), 3.87 (Ьг, 2Н), 3.47 (5, 3Н), 2.54-2.88 (т, 2Н), 2.10-2.30 (т, 1Н), 1.55-2.06 (т, 5Н), 1.27-1.50 (т, 3Н), 1.21 (т, 3Н), 1.03 (т, 9Н), 0.80-0.93 (т, 2Н), 0.69 (Ьг, 2Н), 0.30-0.44 (т, 2Н); ЖХ/МС=835 (М++1).
Пример 72. Получение соединения 72.
н
ΗΟ^'^Π'-^ΌΗ
О
ΔΔ
Н2ЗО4
ΝΗ,
СВг4
У
Вг
МеОН Л 0Н рр,1з
Стадия 1.
2-(2-Гидроксиэтиламино)-2-метилпропан-1-ол получали из 2-амино-2-метилпропан-1-ола в соответствии с модифицированной методикой Сой1е еΐ а1., 1. СЬет. 8ос. 1946, 289. К раствору 2-амино-2метилпропан-1-ола (250 мл, 2,61 моль 1,76 экв.) в Н2О (400 мл) при -5°С (температура №Ю1/ледяной бани) добавляли этиленоксид (65,25 г, 1,48 моль, конденсация при -78°С). Полученный раствор перемешивали в течение 16 ч; за это время температура повышалась до комнатной температуры. Н2О удаляли под вакуумом и оставшейся 2-амино-2-метилпропан-1-ол подвергали дистилляции. Неочищенный остаток растворяли в кипящем ЕЮАс, продукт осаждали добавленим гексанов с получением 2-(2-Гидроксиэтиламино)-2-метилпропан-1-ола (145,5 г, 74%) в виде бесцветных кристаллов. ЖХ/МС: 134,03 (М++Н, СбН1^О2 рассчетное значение: 134,12).
Стадия 2.
3,3-Диметилморфолин получали из 2-(2-гидроксиэтиламино)-2-метилпропан-1-ола в соответствии с модифицированной методикой Сой1е еΐ а1., I. СЬет. 8ос. 1946, 289. К Н28О4 (110 мл, 2,06 моль, 1,85 экв.) при 3°С (температура ледяной бани) медленно порциями добавляли 2-(2-гидроксиэтиламино)-2метилпропан-1-ол (145,5 г, 1,09 моль). Температура внутри реакционной смеси повышалась до 70°С. Полученный раствор нагревали до 185°С (температура масляной бани) в течение 2 ч; за это время раствор становился коричневым. После охлаждения до комнатной температуры добавляли Н2О (250 мл) и затем медленно добавляли твердый №ЮН до получения раствором щелочного рН. Данный раствор разбавляли ЕЮАс (500 мл) и полученную двухфазную смесь интенсивно перемешивали в течение 15 ч. Затем данный раствор фильтровали через целит и промывали Н2О и ЕЮАс. Органический слой отделяли и промывали солевым раствором. Водные слои снова дважды экстрагировали ЕЮАс. Полученные органические слои объединяли, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом (давление > 80 тор (10640 н/м2)). Полученный неочищенный продукт подвергали дистилляции (76°С, 98 тор (13034 н/м2)) с получением 3,3-диметилморфолина (46,0 г, 36%) в виде бесцветного масла. ЖХ/МС: 116,04 (М++Н, СбН^О рассчетное значение: 116,11).
- 72 025794
Стадия 3.
В сосуд, выдерживающий повышенное давление, содержащий 3,3-диметилморфолин (12,15 г, 106 ммоль) в МеОН (17 мл) при -78°С (внешняя температура, ацетон/СО2(5)) добавляли этиленоксид (6,2 мл, 125 ммоль, 1,2 экв., конденсация при -78°С). Полученный раствор герметезировали и перемешивали в течение 20 ч; за это время температура повышалась до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и данный неочищенный продукт подвергали дистилляции (75°С, 0,5 тор (66,5 н/м2)) с получением 2-(3,3-диметилморфолин-4-ил)этанола (14 г, 82%) в виде бесцветного масла с примесью 3,3-диметилморфолина (~15%). ЖХ/МС: 160, 10 (М++Н, С8Н^О2 рассчетное значение: 160,13).
Стадия 4.
К раствору 2-(3,3-диметилморфолин-4-ил)этанола (7,2 г, 45 ммоль) и СВг4 (16,4 г, 49 ммоль, 1,1 экв.) в ТНР (150 мл) добавляли по каплям раствор ΡΡ1ι3 (12,9 г, 49 ммоль, 1,1 экв.) в ТНР (75 мл). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч, затем суспензию разбавляли гексанами и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали под вакуумом, и полученное масло разбавляли СН2С12. Затем данный раствор промывали дважды насыщенным водным раствором NаНСО3 и солевым раствором. Водные слои снова экстрагировали СН2С12 и объединенные органические слои сушили над №28О4 и концентрировали. Полученный неочищенный продукт подвергали дистилляции (65°С, 0,5 тор) с выходом 4-(2-бром-этил)-3,3-диметилморфолина (5,4 г, 54%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (СПС13, 400 МГц) δ 3.69 (ΐ, 2Н), 3.28 (5, 2Н), 3.28 (ΐ, 2Н), 2.70 (ΐ, 2Н), 2.58 (ΐ, 2Н), 0.99 (5, 6Н); ЖХ/МС: 222.02 (М++Н, С8Н17В^О рассчетное значение: 222.05).
Стадия 5.
К раствору трипептидого промежуточного соединения (504 мг, 0,63 ммоль) в ИМР (6 мл) добавляли 4-(2-бромэтил)-3,3-диметилморфолин (165 мг, 0,74 ммоль, 1,2 экв.) и С52СО3 (520 мг, 1,59 ммоль, 2,5 экв.). Суспензию нагревали до 50°С (температура масляной бани) в течение 45 мин. Порциями добавляли дополнительное количество 4-(2-бромэтил)-3,3-диметилморфолин (410 мг, 1,84 ммоль, 3 экв.) до тех пор, пока путем ВЭЖХ не будет доказано, что реакция завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс и промывали солевым раствором. Водный слой снова экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические слои сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт растворяли в смеси ТНР (4 мл) и МеОН (1,2 мл), затем к данной смеси добавляли водный раствор ЫОН (1н., 3,2 мл, 5 экв.). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч, затем добавляли НС1 (1н., 3,2 мл) и данный раствор концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ (30-95% МеСМН2О/0,1% ТРА) с выходом соединения 72 (498 мг, 85%) в виде желтого порошка. 1Н ЯМР (Ш-МеОЭ, 400 МГц, 4:1 смесь ротомеров) основной ротомер): δ 8.70 (5, 1Н), 8.43 (5, 1Н), 8.26 (ά, 1Н), 7.50 (5, 1Н), 7.52 (ά, 1Н), 5.86 (άΐ, 1Н), 5.59 (5, 1Н), 5.28 (άά, 1Н), 5.10 (άά, 1Н), 4.69 (т, 3Н), 4.48 (ά, 1Н), 3.95-4.21 (т, 4Н), 3.75 (т, 3Н), 2.67 (т, 3Н), 2.17 (т, 1Н), 2.04 (т, 1Н), 1.94 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н), 1.65-1.73 (т, 2Н), 1.53 (5, 6Н), 1.43-1.53 (т, 2Н), 1.40 (т, 1Н) 1.35 (5, 3Н), 1.33 (5, 3Н), 1.21-1.27 (т, 2Н), 1.06 (т, 2Н), 1.04 (5, 9Н), 0.39 (т, 2Н); ЖХ/МС: 920.15 (М++Н, С47Н63СШ7О10 рассчетное значение: 920.43).
Пример 73. Получение соединения 73.
К раствору соединения 72 (164 мг, 0,18 ммоль) в ЭМЕ (3,6 мл) и Н2О (0,4 мл) добавляли паратолуолсульфонил гидразид (251 мг, 1,35 ммоль, 7,5 экв.) и №ЮАс (221 мг, 2,69 ммоль, 15 экв.). Реакционную смесь нагревали до 95°С (температура масляной бани) в течение 1,25 ч. Полученный раствор охлаждали до комнатной температуры и разбавляли МеОН и фильтровали. Полученный фильтрат очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ (20-65% МеСМН2О/0,1% ТРА) с выходом соединения 73 (35 мг, 21%) в виде желтого порошка. 1Н ЯМР (Ш-МеОЭ, 400 МГц, 4:1 смесь ротомеров) Основной ротомер: δ 8.59 (5,
- 73 025794
1Н), 8.43 (5, 1Н), 8.25 (ά, 1Н), 7.53 (5, 1Н), 7.50 (ά, 1Н), 5.59 (5, 1Н), 4.66 (т, 3Н), 4.47 (ά, 1Н), 3.95-4.21 (т, 4Н), 3.75 (т, 4Н), 2.67 (т, 4Н), 2.22 (т, 2Н), 2.01 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.65-1.73 (т, 4Н), 1.53 (5, 6Н), 1.43-1.53 (т, 4Н), 1.35 (5, 3Н), 1.33 (5, 3Н), 1.21-1.27 (т, 3Н), 1.04 (5, 9Н), 0.39 (т, 2Н); ЖХ/МС: 922.15 (М++Н, С47Н65СШ7О10 рассчетное значение: 922.45).
Пример 74. Получение соединения 74.
Стадия 1.
В трехгорлую колбу, оснащенную подвесной мешалкой и дефлегматором, добавляли малоновую кислоту (25,4 г, 244 ммоль) и мета-анизидин (27 мл, 244 ммоль). Затем добавляли порциями оксихлорид фосфора (33,5 мл, 366 ммоль). После прекращения выделения газа суспензию медленно нагревали до 95°С и перемешивали в течение 30 мин. Полученную пену затем охлаждали до комнатной температуры, и добавляли оксихлорид фосфора (100 мл, 732 ммоль). Смесь нагревали до 120°С и перемешивали в течение 3 ч. После охлаждения в ледяной бане медленно добавляли ледяную воду, чтобы погасить оставшийся оксихлорид фосфора, и затем добавляли 5н. №ЮН до тех пор, пока рН раствора не достигагал значение=8. Затем данную смесь разбавляли этилацетатом, и собирали органический слой. Затем органическую фазу промывали водой и солевым раствором. После сушки над сульфатом натрия и концентрирования полученный неочищенный остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (СН2С12) с выходом желаемого дихлорида.
Стадия 2.
Полученный дихлорид растворяли в серной кислоте (150 мл) и нагревали в масляной бане при 160°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры данную смесь вливали в охлаждённую до 0°С воду. Суспензию разбавляли этилацетатом, затем органическую фазу промывали водой и насыщенным водным раствором NаΗСΟ3. Затем органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением желаемого фенола (18,4 г, 35% после двух стадий).
Стадия 3.
К полученному фенолу (2,13 г, 9,95 ммоль) в 1-метил 2-пирролидоне (5 мл) добавляли пиразол (1,37 г, 10,9 ммоль) и данную смесь нагревали до 115°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры данную реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 и солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением желаемого продукта (2,92 г, 97%).
Стадия 4.
Раствор фенола полученного на предыдущей стадии (2,92 г, 9,68 ммоль), 4-(2-хлорэтил) морфолин гидрохлорида (2,16 г, 11,6 ммоль), С52СО3 (6,94 г, 21,3 ммоль) и NаI (200 мг, 1,33 ммоль) нагревали до 65°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли этилацетатом и затем промывали насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 и солевым раствором. Затем органическую фазу сушили над сульфатом натрия, концентрировали и очищали путем ВЭЖХ с получением хинолинового промежуточного соединения (1,54 г, 38%).
Стадия 5.
Указанный на схеме трипептид (500 мг, 1,04 ммоль) растворяли в безводном ЭМ8О (10 мл) и затем обрабатывали твердым ΚΟίВи (350 мг, 3,12 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре добавляли указанное на схеме хинолиновое промежуточное соединение (380 мг, 1,97 ммоль) и данную реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили уксусной кислотой (700 мкл) и очищали путем ВЭЖХ с получением соединения 74 (161 мг, 18%). 1Н ЯМР (С1ЫОП. 300 МГц) δ 8.57 (5, 1Н), 8.11 (ά, 1Н), 7.53 (5, 1Н), 7.31 (5, 1Н), 7.18 (άά, 1Н), 6.17 (ά, 1Н), 5.56 (т, 1Н), 4.71 (Г, 1Н), 4.64 (Г, 1Н), 4.59-4.55 (т, 2Н), 4.50 (ά, 1Н), 4.17 (5, 1Н), 4.10-3.78 (т, 6Н), 3.75-3.71 (т, 2Н), 3.64-3.28 (т, 4Н), 2.72-2.53 (т, 2Н), 2.05-1.88 (т, 2Н), 1.73-1.61 (т, 3Н), 1.50 (άά, 1Н), 2.53 (άά, 1Н), 1.38-1.02 (т, 5Н), 1.29 (5, 3Н), 1.37 (5, 3Н), 1.02 (5, 9Н), 0.40-0.37 (т, 2Н); ЬРМ8 рассчитано для
- 74 025794
С45Щ3ЩО9 [Μ+Η]+: 859.5, найдено: 859,2. Пример 75. Получение соединения 75.
Указанный на схеме трипептид (450 мг, 0,94 ммоль) растворяли в безводном ^ΜδО (10 мл) и обрабатывали твердым КОШи (582 мг, 5,18 ммоль). После выдерживания в течение 1 ч при комнатной температуре добавляли указанный на схеме хинолин (437 мг, 1,04 ммоль) и данную реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили уксусной кислотой (400 мкл), затем очищали путем ВЭЖХ с получением соединения 75 (632 мг, 80%). 1Н ЯМР (СИ3ОП, 400 МГц) δ 8.68 (δ, 1Η), 8.58 (б, 1Η), 8.12 (б, 1Η), 7.56 (б, 1Η), 7.31 (δ, 1Η), 7.19 (бб, 1Η), 6.19 (б, 1Η), 5.86-5.79 (т, 1Η), 5.57 (т, 1Η), 5.26 (бб, 1Η), 5.09 (бб, 1Η), 4.70 (ΐ, 1Η), 4.64 (ΐ, 1Η), 4.59-4.56 (т, 2Н), 4.51 (б, 1Η), 4.21 (δ, 1Η), 4.13-3.84 (т, 6Н), 3.75-3.73 (т, 2Н), 3.30-3.65 (т, 4Н), 2.74-2.68 (т, 1Η), 2.58-2.51 (т, 1Η), 2.22-2.16 (т, 1Η), 2.051.98 (т, 1Η), 1.94-1.89 (т, 1Η), 1.73-1.64 (т, 2Н), 1.52 (б, 1Η), 1.44 (бб, 1Η), 1.29 (δ, 3Η), 1.27 (δ, 3Η), 1.261.18 (т, 2Н), 1.03 (δ, 9Η), 0.40-0.37 (т, 2Н); ΕΚΜδ рассчитано для С^ЩЩОэ [Μ+Η]+: 857.5, найдено: 857,2.
Пример 76. Получение соединения 76.
Смесь 1-{[ 1-[2-(бицикло [3,1,0]гекс-3 -илоксикарбониламино)-3,3-диметилбутирил] -4-(4-бромбензолсульфонилокси)пирролидин-2-карбонил]амино}-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты метилового эфира (100 мг, 0,14 ммоль), 2-(5-изопропиламино-[1,3,4]тиадиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-ола (62 мг, 0,18 ммоль) и карбоната цезия (60 мг, 0,18 ммоль) в ΝΜΡ (1 мл) перемешивали при 65°С в течение 3 ч. Смесь нейтрализовали путем добавления ТРА (0,16 мл) и очищали путем ВЭЖХ с получением желаемого сложного эфира, растворяли в метаноле (10 мл), ТИР (15 мл) и водном растворе гидроксида лития (120 мг/3 мл). Смесь перемешивали при 45°С в течение 1 ч, концентрировали с целью удаления летучих растворителей, нейтрализовали путем добавления 1н. ΗΟ и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт концентрировали и очищали путем ВЭЖХ с получением соединения 76 (5,5 мг, 5%). ЖХ/МС=810,5 (М++1).
Пример 77. Получение соединения 77.
Стадия 1.
К смеси Ш-пиразол-3-иламина (8,3 г, 100 ммоль), ацетона (7,4 мл, 100 ммоль) и уксусной кислоты (12 мл, 200 ммоль) в ΊΉΡ (280 мл) порциями добавляли триацетоксиборгидрид натрия (27 г, 120 ммоль) при охлаждении в бане с ледяной водой. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем при 50°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли по каплям 10н. NаОΉ (40 мл), и осторожно перемешивали в течение 1 ч. Прозрачный раствор выделяли путем декантации. Полученный вязкий остаток промывали ΕΗΡ (2х50 мл). Весь таР-раствор, полученный после помывок, объединяли и концентрировали. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (ЕЮАс), с получением изопропил-(Ш-пиразол-3-ил)амина (8,5 г, 68%) в виде бесцветного масла. 1Н
- 75 025794
ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 7.34 (б, 1Н), 5.62 (б, 1Н), 3.58 (т, 1Н), 1.22 (б, 6Н).
Стадия 2.
Смесь 2,4-дихлор-7-метоксихинолина (1,34 г, 5,88 ммоль) и изопропил-(1Н-пиразол-3-ил)амина (1,10 г, 8,80 ммоль) нагревали при 115°С в течение 3 ч при перемешивании в герметично закрытой пробирке. После нагревания в течение ~20 мин (давление в пробирке увеличивалось) пробирку разгерметизовали иглой. Затем полученную смесь растворяли в дихлорметане и загружали на колонку силикагеля. В результате элюции дихлорметаном и метанолом получали [1-(4-хлор-7-метоксихинолин-2-ил)-1Нпиразол-3-ил]изопропиламин (1,53 г, 82%). ЖХ/МС=317,2 (М++1).
Стадия 3.
Смесь [1-(4-хлор-7-метоксихинолин-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил]изопропиламина (0,52 г, 1,6 ммоль) и моногидрата ацетата натрия (1,0 г) в уксусной кислоте (5 мл) перемешивали при 130°С в течение 2 суток. Смесь концентрировали и затем распределяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексаны), с получением [1-(4-гидрокси-7-метоксихинолин-2-ил)-1Н-пиразол-3ил]изопропиламина (0,09 г, 19%). ЖХ/МС=299,1 (М++1).
Стадия 4.
Смесь указанного на схеме трипептида (420 мг, 0,59 ммоль), [1-(4-гидрокси-7-метоксихинолин-2ил)-1Н-пиразол-3-ил]изопропиламина (174 мг, 0,58 ммоль) и карбоната цезия (0,22 мг, 0,68 ммоль) в ММР (2 мл) перемешивали при 65°С в течение 16 ч. К данной смеси добавляли раствор гидрата ЫОН (400 мг) в воде (3 мл). При перемешивании при 40°С добавляли метанол до тех пор, пока смесь не стала почти гомогенной, затем эту смесь перемешивали в течение 2 ч. После удаления летучих растворителей, смесь распределяли между этилацетатом и 3% водном раствором ЫС1. Водный раствор нейтрализовали путем добавления 1н. НС1, затем отбирали органический слой. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные слои объединяли и концентрировали. Остаток очищали путем ВЭЖХ с получением соединения 77 (260 мг, 51%) в виде соли ТРА. !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.60 (б, 1=3.0 Гц, 1Н), 8.07 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 7.62 (δ, 1Н), 7.29 (δ, 1Н), 7.17 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 6.26 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 5.85 (т, 1Н), 5.63 (Ьге, 1Н), 5.28 (б, 1=16.2 Гц, 1Н), 5.11 (б, 1=10.5 Гц, 1Н), 4.69 (ΐ, 1Н), 4.56 (т, 1Н), 4.16 (т, 1Н), 3.99 (δ, 3Н), 2.74 (т, 1Н), 2.55 (т, 1Н), 2.21 (ц, 1Н), 1.98 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н), 1.70 (т, 2Н), 1.44 (т, 2Н), 1.31 (б, 6Н), 1.21 (т, 2Н), 1.04 (δ, 9Н), 0.98 (т, 2Н), 0.34 (т, 2Н). ЖХ/МС=758.5 (М++1).
Пример 78. Получение соединения 78.
Получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам получения соединения 77, за исключением того, что использовали промежуточное соединени III, соединение 78. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.65 (δ, 1Н, подлежащий обмену), 8.61 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 8.09 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 7.62 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 7.17 (б, 1=9.6 Гц, 1Н), 6.25 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 5.63 (Ьге, 1Н), 4.69 (ΐ, 1Н), 4.55 (т, 2Н), 4.18 (т, 1Н), 4.05 (т, 2Н), 4.00 (δ, 3Н), 2.74 (т, 1Н), 2.55 (т, 1Н), 1.95 (т, 1Н), 1.82 (т, 1Н), 1.65 (т, 2Н), 1.41 (т, 4Н),
1.30 (б, 6Н), 1.22 (т, 4Н), 1.02 (δ, 9Н), 0.98 (т, 2Н), 0.35 (т, 2Н). ЖХ/МС=760.5 (М++1).
- 76 025794
Пример 79. Получение соединения 79.
Соединение 79 получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам, описанным выше. Ή ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.68 (5, 1Н, подлежащий обмену), 8.62 (б, 1=3.0 Гц, 1Н), 8.07 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 7.62 (5, 1Н), 7.29 (5, 1Н), 7.19 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 6.26 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 5.62 (Ьг5, 1Н), 4.69 (ΐ, 1Н), 4.54 (т, 2Н), 4.30 (т, 2Н), 4.17 (5, 1Н), 4.03 (т, 2Н), 3.84 (т, 2Н), 3.46 (5, 3Н), 2.74 (т, 1Н), 2.55 (т, 1Н), 1.96 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н), 1.68 (т, 3Н), 1.52 (ΐ, 1Н), 1.42 (т, 2Н), 1.30 (б, 6Н), 1.22 (т, 4Н), 1.02 (5, 9Н), 0.98 (т, 2Н), 0.35 (т, 2Н). ЖХ/МС=804.7 (М++1).
Пример 80. Получение соединения 80.
Стадия 1.
Смесь указанного на схеме трипептида (830 мг, 1,2 ммоль), 2-(3-изопропиламинопиразол-1-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-ола (410 мг, 1,2 ммоль) и карбоната цезия (440 мг, 1,35 ммоль) в ИМР (4 мл) перемешивали при 65°С в течение 16 ч. Смесь распределяли между этилацетатом (30 мл) и 3% ЫС1 (30 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Этилацетатные экстракты объединяли и концентрировали.
Стадия 2.
Неочищенное соединение, полученное на предыдущей стадии, растворяли в дихлорметане (20 мл) и добавляли 4н. НС1 в диоксане (20 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и концентрировали досуха. Остаток распределяли между этилацетатом и насыщенным раствором бикарбоната натрия. К полученному двухфазному раствору добавляли по каплям раствор промежуточного соединения I (344 мг, 1,4 ммоль) в этилацетате (3 мл), осторожно перемешивая. Этилацетатный слой отбирали и концентрировали.
Стадия 3.
Затем полученный остаток повторно растворяли в ТНР (20 мл), МеОН (20 мл) и воде (10 мл), содержащей ЫОН моногидрат (1,0 г), и перемешивали при 45°С в течение 1 ч. После удаления летучих растворителей раствор нейтрализовали путем добавления 1н. НС1 до рН ~5 и экстрагировали этилацетатом (50 мл). Органический экстракт концентрировали и очищали путем ВЭЖХ с получением после лиофилизации отобранной фракции соединения 80 (632 мг, ТРА-соль, 57%) в виде бледно-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.75 (5, 1Н, подлежащий обмену), 8.57 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 8.05 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.55 (5, 1Н), 7.25 (5, 1Н), 7.16 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 6.24 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 5.86 (т, 1Н), 5.58 (Ьг5, 1Н), 5.28 (б, 1=15.9 Гц, 1Н), 5.11 (б, 1=10.5 Гц, 1Н), 4.71 (ΐ, 1Н), 4.54 (т, 2Н), 4.28 (т, 2Н), 4.18 (5, 1Н), 4.03 (т, 2Н), 3.83 (т, 2Н), 3.46 (5, 3Н), 2.74 (т, 1Н), 2.55 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.96 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н), 1.68 (т, 2Н), 1.42 (т, 2Н), 1.30 (б, 6Н), 1.22 (т, 1Н), 1.02 (5, 9Н), 0.98 (т, 2Н), 0.36 (т, 2Н). ЖХ/МС=802.7 (М++1).
Пример 81. Получение соединения 81.
- 77 025794
Стадия 1.
К смеси брозилата метилового эфир (1,41 г, 1,95 ммоль) и карбоната цезия (1,90 г, 5,82 ммоль) в NΜΡ (6,5 мл) добавляли уксусную кислоту (0,35 мл, 5,82 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем при 65°С в течение 16 ч. Смесь распределяли между этилацетатом (40 мл) и 3% водным растором ЫС1 (40 мл). Этилацетатный слой концентрировали досуха, и полученный остаток повторно растворяли в метаноле (20 мл) и ТНР (20 мл). Добавляли раствор гидроксида лития (1,0 г/10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Дополнительно добавляли раствор гидроксида лития (0,5 г/5 мл) и перемешивали при 45°С в течение 2 ч. После удаления летучих растворителей добавляли этилацетат (40 мл). Водный слой нейтрализовали до рН ~2 путем добавления 6 н. НС1. Затем этилацетатный слой промывали солевым раствором и концентрировали досуха, с получением желаемого спирта (920 мг, 96%) в виде бесцветного твердого вещества. ЖХ/МС=490,3 (М1).
Стадия 2.
К раствору полученного спирта (420 мг, 0,85 ммоль) в ЭМ8О (10 мл) добавляли 1,0 М трет-бутилат калия в ТНР и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли раствор {1-[4хлор-7-(2-морфолин-4-ил-этокси)хинолин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}изопропиламина (440 мг, 1,06 ммоль) в ТНР (2 мл). Затем данную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, нейтрализовали уксусной кислотой и концентрировали с целью удаления летучих растворителей. Остаток подвергали очистке путем ВЭЖХ, с получением после лиофилизации соединения 81 (340 мг в виде ТРА соли, 35%) в виде желтоватого твердого вещества. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.62 (б, 1=2.7 Гц, 1Н), 8.17 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.62 (8, 1Н), 7.33 (8, 1Н), 7.23 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 6.25 (б, 1=2.4 Гц, 1Н), 5.62 (Ьг8, 1Н), 4.75 (т, 2Н), 4.67 (8, 1Н), 4.59 (т, 2Н), 4.33 (б, 1=6.6 Гц, 1Н), 3.8-4.1 (т, 6Н), 3.75 (т, 2Н), 3.49 (Ьг8, 4Н) 2.68 (т, 2Н), 1.1-2.1 (т, 28Н, включая дублет 1=6.3 Гц при 1.30 м.д. для изопропил-Ме), 0.39 (т, 2Н). ЖХ/МС=871.6 (М++1).
Пример 82. Получение соединения 82.
Стадия 1.
Указанный на схеме амид (18,8 г, 0,078 ммоль) растворяли в ЕЮН (75 мл). К данному раствору добавляли 12н. водный раствор НС1. Затем данную реакционную смесь помещали в предварительно нагретую до 115°С баню и перемешивали в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем дополнительно охлаждали с помощью ледяной бани. Образовавшиеся небольшие белые иглы выделяли путем вакуумной фильтрации, промывали ЕьО и выдерживали в условиях глубокого вакуума в течение 16 ч. Выход указанной на схеме гидрохлоридной соли составлял 10,1 г (67%). ЖХ/МС=158,3 (М++1).
Стадия 2.
Указанный на схеме амин (10,1 г, 0,052 моль) растворяли в 1 М растворе ВВг3 в СН2С12 (163 мл, 0,163 моль). Это приводило к образованию большого количества дыма и газа. Реакционную смесь помещали в предварительно нагретую до 40°С баню. Реакционную смесь из Ν2 Ппе переносили в сушилку заполненную Са8О4. Реакционную смесь нагревали в течение 8 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На следкующий день реакция согласно ЖХ/МС-анализу завершилась. Реакционную смесь помещали в ледяную баню и очень медленно добавляли МеОН, при этом образовалось большое количество газообразного НВг. В реакционной смеси, в конечном счете, получили очень густую белую суспензию. К данной суспензии добавляли дополнительное количество МеОН до тех пор, пока все вещество не перейдет в раствор, и затем концентрировали с получением белого сиропа, растворяли в бН2О и данный раствор экстрагировали ЕЮАс (2х). Органические экстракты отставляли, поскольку они
- 78 025794 содержат чистый фенол. Водный слой затем подводили до рН 7 твердым NаНСОз и дополнительно экстрагировали ЕЮАс (2х). Эти органические фракции объединяли, экстрагировали солевым раствором и сушили над №28О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Желаемый фенол выделяли из данного остатка путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов. Полученное вещество смешивали с исходным ЕЮАс экстрактом, содержащем чистый фенол, с выходом 7,07 г (95%) слегка желтоватого твердого вещества. ЖХ/МС=144,3 (М++1).
Стадия 3.
В колбу, содержащую указанный на схеме фенол (3,5 г, 0,024 моль) и С82СО3 (9,4 г, 0,029 моль) добавляли ΌΜΡ (120 мл) и затем ΜеОΕιВ^ (2,52 мл, 0,027 моль). Затем данную смесь помещали в предварительно нагретую до 65°С баню. Реакционную смесь перемешивали в течение 4,25 ч, добавляли дополнительно ΜеОΕίВ^ (200 мкл, 0,0021 моль). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь распределяли между ЕЮАс и 5% водным раствором ЫС1. Образовавшееся твердое вещество растворяли путем добавления к данной смеси 4Н2О. Слои разделяли, и органический слой промывали дополнительно 5% водным раствором ЫС1 (2х) и солевым раствором (1х). Затем органический слой сушили над №28О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный фильтрат концентрировали. Желаемый феноловый эфир выделяли из данного остатка путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов, в виде бесцветной жидкости (4,7 г, 98%). ЖХ/МС=202,2 (М++1).
Стадия 4.
Указанный на схеме анилин (4,7 г, 0,023 моль) растворяли в СН2С12 (125 мл). К данному раствору добавляли 1,1'-тиокарбонилди-2(1Н)-пиридон (5,58 г, 0,023 моль) за один прием. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем реакционную смесь концентрировали, при этом из раствора выпадало белое твердое вещество. Весь выпавший осадок повторно растворяли в СН2С12 и после колоночной хроматографии на силикагеле с использованием для элюирования смеси ЕЮАс и гексанов желаемый изотиоцианат выделяли в виде белого твердого вещества (5,36 г, 96%). !Н ЯМР (400 МГц, (СО3)28О): δ 7.35 (ΐ, 1=8 Гц, 1Н), 7.19 (44, 1=8.8, 4.6 Гц, 1Н), 7.14 (44, 1=8, 1.6 Гц, 1Н), 4.22 (т, 2Н), 3.69 (т, 2Н), 3.32 (8, 3Н).
Стадия 5.
К суспензии №-)Н (60% дисперсия в вазелиновом масле, 1,06 г, 0,026 моль) в ТНР (120 мл) охлажденной в ледяной бане добавляли по каплям диэтилмалонат (3,34 мл, 0,022 моль). Ледяную баню затем удаляли и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Затем реакционную смесь охлаждали в ледяной бане и медленно но непрерывной струей добавляли раствор изотиоцианата (5,36 г, 0,022 моль) в ТНР (80 мл). Колбу, в которой содержался раствор изотиоцианата в ТНР, промывали еще раз ТНР (20 мл) и полученный раствор также добавляли к реакционной смеси. Затем охлаждающую баню удаляли и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Затем реакционную смесь концентрировали и полученную желтую пену выдерживали в условиях глубокого вакуума в течение ночи.
Раствор вышеупомянутого синтезированного продукта в ΌΜΡ (100 мл) охлаждали до -45°С. К данной реакционной смеси медленно капельным способом добавляли этилиодид (2,13 мл, 0,026 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч в охлаждаемой при -45°С бане и затем при перемешивании оставляли нагреваться в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли 4Н2О, в результате смесь становилась непрозрачной и выпадал белый осадок. Затем погашенную реакционную смесь экстрагировали смесью ЕьО:гексаны (1:1), и затем ЕьО. и затем ЕЮАс. Полученные ЕЮАс-экстракты объединяли и снова экстрагировали 5% водным раствором ЫС1 (2х). Органические экстракты объединяли и экстрагировали солевым раствором и затем сушили над №28О4. Затем сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный фильтрат концентрировали. Смесь 8-алкилированных и Ν-алкилированных соединений выделяли из данного остатка путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов, в виде восковидного кристаллического твердого вещества (9,11 г,
- 79 025794
96%). ЖХ/МС (КТ=3,95)=432,2 (М++1); ЖХ/МС (КТ=4,02)=432,0 (М++1).
Стадия 6.
Смесь δ-алкилированных и Ν-алкилированных соединений (9,1 г, 0,021 моль) растворяли в Р1ъО (80 мл). Полученный раствор помещали в предварительно нагретую до 320°С песочную баню. Через 17 мин (температура внутри реакционной смеси=220°С) согласно ТСХ-анализу реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и полученный хинолин выделяли после загрузки реакционной смеси прямо на колонку силикагеля. С колонки смывали Р1ъО. используя в качестве элюента 100% гексаны. Затем указанный на схеме хинолин смывали с колонки, используя градиентный элюент при содержании Е(ОАс=35%. Полученный хинолин выделяли в виде белого, кристаллического твердого вещества (6,8 г, 84%). ЖХ/МС=386,2 (М++1).
Стадия 7.
Полученный хинолин (6,8 г, 0,0176 моль) смешивали с ТНР (40 мл). Затем добавляли ΜеОН (40 мл), и затем добавляли за один прием 1н. водный раствор №ЮН (88 мл, 0,088 моль). Из данных реагентов получали раствор, и реакционную смесь нагревали. Затем данную реакционную смесь помещали в предварительно нагретую до 85°С баню и перемешивали в течение 19,5 ч и проверяли с помощью ЖХ/МС. Реакция была не завершена, поэтому дополнительно добавляли №ЮН (1,2 г в 20 мл бН2О) и данную реакционную смесь продолжали перемешивать. Еще через 4 ч дефлегматор удаляли и данную реакционную смесь концентрировали путем выпаривания органических растворителей из реакционной смеси. Затем дефлегматор снова устанавливали на реакционную колбу и нагревание продолжали дополнительно в течение 10 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакция согласно ЖХ/МС-анализу завершалась. Реакционную смесь помещали в ледяную баню и рН подводили 4н. НС1 до 4. Погашенная таким образом реакционная смесь становилась густой, образовался осадок, который экстрагировали СН2С12. Органические фазы концентрировали и остаток суспендировали в ΜеОН. Полученное белое твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации, с выходом желаемой карбоновой кислоты в виде блестящего белого твердого вещества (3,84 г, 61%). ЖХ/МС=358,1 (М++1).
Стадия 8.
Полученную карбоновую кислоту (3,84 г, 0,0107 моль) суспендировали в Р1ъО (32 мл). Данную смесь помещали в предварительно нагретую до 310°С песочную баню. Когда температура внутри смеси достигала 150°С, карбоновая кислота переходила в раствор. Температуру внутри реакционной смеси поддерживали при 250°С в течение 15 мин, и затем смесь охлаждали до комнатной температуры. При охлаждении из раствора выпадал твердый осадок. Это твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации, осадок промывали на фильтре гексанами, с получением желаемого декарбоксилированного хинолина в виде бледно-желтого твердого вещества (3,19 г, 94%). ЖХ/МС=314,2 (М++1).
Стадия 9.
Полученный декарбоксилированный хинолин (2,59 г, 0,0083 моль) растворяли в ΌΜΕ (28 мл). К данному раствору добавляли С52СО3 (8, 1 г, 0,0249 моль) и через 3 мин ΡΜΒ0 (1,69 мл, 0,01245 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Завершение реакции определяли с помощью ЖХ/МС. Реакционную смесь гасили путем добавления 5% водного раствора ЫС1 и ЕЮАс.
Водный слой разбавляли бН2О и образовавшиеся слои разделяли. Органический слой экстрагировали бН2О (1х), 5% водным раствором ЫС1 (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над смесью №28О4 и Μ§δО4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный фильтрат концентрировали. Желаемый РМВ-защищенный хинолин выделяли из данного остатка путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов (2,04 г, 56%). ЖХ/МС=434,1 (М++1).
- 80 025794
Стадия 10.
Полученный РМВ-защищенный хинолин (2,0 г, 0,00461 моль) растворяли в СН2С12 (46 мл). К данному раствору добавляли тСРВА (4,59 г, 0,00922 моль) за один прием. За ходом реакции следили с помощью ЖХ/МС. Через 30 мин к данной реакционной смеси добавляли дополнительное количество тСРВА (700 мг), а через 3 ч еще (180 мг). За ходом реакции следили с помощью ЖХ/МС. Через 3,5 ч реакционную смесь разбавляли СН2С12, и к данной реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор ИаН§О3. Все твердое вещество растворяли в этом двухслойном растворителе. Слои разделяли, и органический слой промывали насыщенным водным раствором ИаН§О3 (1 х) и 2н. ИаОН (2х). Органическую фазу сушили над Иа28О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный фильтрат концентрировали с выходом желаемого сульфона (2,19 г, 100%) в виде белого кристаллического твердого вещества. ЖХ/МС=466,1 (М++1), 488,2 (М++23).
Стадия 11.
В колбу, содержащую полученный сульфон (600 мг, 0,00129 моль) добавляли 1Рг-аминопиразол (1,6 г, 0,01288 моль). Реакционную колбу помещали в масляную баню предварительно нагретую до 115°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь распределяли между άН2О и ЕЮАс. Органическую фазу экстрагировали άН2О (1х), солевым раствором (1 х) и затем сушили над Иа28О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный хинолиновый продукт предварительно очищали сначала путем удаления большей части примесей путем хроматографии на силикагеле, используя для элюирования ЕЮАс и гексаны, и затем на промываемой колонке смесью МеОН и СН2С12 с выходом все еще неочищенного продукта. Очистку заканчивали путем обратнофазовой ВЭЖХ с выходом в качестве продукта указанного на схеме хинолина (250 мг, 51%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС=377,1 (М++1).
Стадия 12.
В круглодонную колбу вносили полученный хинолин (236 мг, 0,626 ммоль), промежуточное соединение III (446 мг, 0,626 ммоль) и С82СО3 (358 мг, 1,10 ммоль). Добавляли ИМР (3,2 мл), и колбу, содержащую реакционную смесь, помещали в масляную баню при 65°С. За ходом реакции следили с помощью ЖХ/МС. Через 5,5 ч реакция остановилась. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между ЕЮАс и άН2О. Слои разделяли и затем органическую фазу экстрагировали άН2О (1х), 5% водным раствором ЫС1 (3х) и солевым раствором (1х). Затем органическую фазу сушили над смесью Иа28О4 и Мд§О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали. Продукт приведенной на схеме реакции выделяли путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов, в виде белого твердого вещества (465 мг, 87%). ЖХ/МС=852,1 (М++1).
Стадия 13.
Полученный сложный метиловый эфир (465 мг, 0,542 ммоль) растворяли в ТНР (2,7 мл) и МеОН (1,8 мл). В другой колбе готовили раствор ЬЮН (114 мг, 2,71 ммоль) в άН2О (900 мкл) и добавляли в первую колбу при комнатной температуре. Затем реакционную колбу помещали в масляную баню при
- 81 025794
32°С. За ходом реакции следили с помощью ЖХ/МС. Через 6 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь нейтрализовали путем добавления 2н. НС1 и осветляли МеОН. Смесь хранили в хоодильнике в течение ночи. Соединение 82 выделяли из этой смеси путем обратнофазовой ВЭЖХ и затем подвергали лиофильной сушки с получением желтого порошка (434 мг, 86%). ЖХ/МС=839,0 (М++1). !Н ЯМР (400 МГц, ϋϋ3€Ν): δ 8.65 (ά, 1=2.8 Гц, 1Н), 8.61 (к, 1Н), 8.01 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.31 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.31 (к, 1Н), 6.21 (б, 1=2.8 Гц, 1Н), 5.50 (к, 1Н), 4.67 (ΐ, 1=8 Гц, 1Н), 4.58 (ΐ, 1=6.8 Гц, 1Н), 4.49 (б, 6=11.6 Гц, 1Н), 4.37 (ΐ, 1=4.4 Гц, 2Н), 4.20 (к, 1Н), 4.05 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 3.86 (т, 1Н), 3.85 (ΐ, 1=4.4 Гц, 1Н), 3.48 (к, 3Н), 2.70 (бб, 1=13.6, 8 Гц, 1Н), 2.56 (т, 1Н), 2.00 (т, 1Н), 1.88(т, 1Н), 1.67 (т, 3Н), 1.51 (квинтет, 1=8 Гц, 1Н), 1.39 (т, 2Н), 1.32 (б, 1=6.8 Гц, 6Н), 1.22 (бб, 1=9.2, 4.4 Гц, 2Н), 1.18 (т, 1Н), 1.01 (т, 12Н), 0.38 (т, 1Н), 0.33 (т, 1Н).
Пример 83. Получение соединения 83.
Стадия 1.
В круглодонную колбу вносили указанный на схеме хинолин (288 мг, 0,918 ммоль), промежуточное соединение III (654 мг, 0,917 ммоль) и Ск2СО3 (523 мг, 1,61 ммоль). Затем данную смесь суспендировали в ИМР. Затем реакционную смесь помещали в баню нагретую до 65°С и перемешивали в течение 7,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между бН2О и ЕЮАс. Затем органический слой экстрагировали бН2О (1ж), 5% водным раствором ЫС1 (3ж) и солевым раствором (Ы). Затем органическую фазу сушили над смесью №28О4 и Мд§О4. Сушильные агенты удаляли путем вакуумной фильтрации и полученный фильтрат концентрировали. Указанный на схеме продукт реакции выделяли из данного остатка путем колоночной хроматографии на силикагеле, используя для элюирования смесь ЕЮАс и гексанов, с выходом в виде белого твердого вещества (590 мг, 82%). ЖХ/МС=787,7 (М++1).
Стадия 2.
Указанный на схеме сложный метиловый эфир (590 мг, 0,749 ммоль) растворяли в ТНР (3,75 мл) и МеОН (2,5 мл). Полученный раствор охлаждали в ледяной бане и затем добавляли по каплям раствор ЫОН (157 мг, 3,74 ммоль) в бН2О (3,75 мл). Затем ледяную баню удаляли и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь снова охлаждали в ледяной бане и рН реакционной смеси подводили до 1-2 с использованием 1н. НС1. Полученный раствор становился мутным (мелкие белые частиц твердого вещества). Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (2ж) и объединенные органические слои экстрагировали солевым раствором и сушили над №-ь8О4. Сушильный агент удаляли путем вакуумной фильтрации, и полученный фильтрат концентрировали с получением соединения 83 в виде белой пены (598 мг). 106 мг неочищенного продукта соединения 83 очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ и затем лиофилизировали с получением белого порошка (88 мг). ЖХ/МС=773,5 (М++1). !Н ЯМР (400 МГц, ϋϋ3€Ν): δ 7.51 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.16 (к, 1Н), 6.82 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 6.26 (к, 1Н), 5.95 (б, 1=8.4 Гц, 1Н), 5.33 (6ϊ, 1=19.6, 9.6 Гц, 1Н), 4.91 (к, 1Н), 4.89 (б, 1=11.2 Гц, 1Н), 4.71 (б, 1=11.2 Гц, 1Н), 4.31 (ΐ, 1=6.4 Гц, 1Н), 4.08 (ΐ, 1=8.8 Гц, 1Н), 3.99 (б, 1=12 Гц, 1Н), 3.93 (б, 1=3.2 Гц, 2Н), 3.86 (т, 1Н), 3.55 (б, 1=10.4 Гц, 1Н), 3.39 (ΐ, 1=10.4 Гц, 2Н), 3.02 (к, 3Н), 2.98 (квартет, 1=7.2 Гц, 2Н), 2.16 (бб, 1=14.4, 7.2 Гц, 1Н), 1.94 (т, 1Н), 1.77, (квартет, 1=8.8 Гц, 1Н), 1.61 (т, 1Н), 1.56 (квинтет., 1=2.4 Гц, 1Н), 1.48 (т, 1Н), 1.32 (бб, 1=7.6, 5.6 Гц, 1Н), 1.24 (б, 1=14.4 Гц, 1Н), 1.06 (ΐ, 1=7.6 Гц, 3Н), 0.97 (т, 2Н), 0.80 (т, 2Н), 0.58 (к, 9Н), -0.02 (т, 2Н).
- 82 025794
Пример 84. Получение соединения 84.
Соединение 83 (490 мг, 0,634 ммоль) растворяли в ΌΜΕ (6,34 мл). К данному раствору добавляли ПН2О (634 мкл), рТо18О2МНМН2 (884 мг, 4,75 ммоль), и затем NаΟΑс (780 мг, 9,51 ммоль). Затем реакционную смесь помещали в баню с температурой 95°С и перемешивали в течение 1,75 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и соединение 84 очищали путем обратнофазовой ВЭЖХ и затем лиофилизировали с получением желтоватого порошка (270 мг, 55%). ЖХ/МС=775,7 (М++1). 1Н ЯМР (400 МГц, СО3СОП): δ 7.99 (ά, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.33 (ά, 1=9.2 Гц, 1Н), 6.82 (5, 1Н), 5.51 (5, 1Н), 4.64 (ί, 1=8.4 Гц, 1Н), 4.52 (ί, 1=7.2 Гц, 1Н), 4.48 (ά, 1=13.6 Гц, 1Н), 4.38 (ά, 1=3.2 Гц, 2Н), 4.16 (5, 1Н), 4.00 (άά, 1=14, 4.4 Гц, 1Н), 3.84 (ί, 1=4.4 Гц, 2Н), 3.47 (5, 3Н), 3.44 (άά, 1=6.8, 2 Гц, 2Н), 2.69 (άά, 1=14.4, 8 Гц, 1Н), 2.49 (άάά, 1=14.4, 9.6, 4.4 Гц, 1Н), 1.98 (т, 1Н), 1.85 (т, 1Н), 1.65 (άί, 1=14.8, 7.6 Гц, 3Н), 1.50 (ί, 1=7.6 Гц, 4Н), 1.40 (άά, 1=8, 4.8 Гц, 1Н), 1.34 (ά, 1=14.4 Гц, 1Н), 1.20 (т, 3Н), 1.00 (5, 12Н), 0.36 (т, 1Н), 0.32 (квинтет., 1=4 Гц, 1Н).
Пример 85. Получение соединения 85.
Стадия 1.
К раствору указанного на схеме хинолина (450 мг, 0,965 ммоль) в ТНЕ (5,0 мл) медленно добавляли 21% NаΟΕί в этаноле (1,10 мл, 2,89 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, и затем добавляли 2н. НС1 (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 5 мин, разбавляли ΕίΟΑс (10 мл) и перемешивали в течение 5 мин. После разделения слоев, водный слой экстрагировали ΕίΟΑс (10 мл). Объединенные органические фракции сушили (Ж28О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 385 мг (96%) РМВ-защищенного этокси хинолина. ЖХ/МС=418 (М++1).
Стадия 2.
Раствор полученного РМВ-защищенного хинолина 385 мг (0,923 ммоль) в дихлорметане (5,0 мл) и ΤΡΑ (5,0 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Цвет этого раствора по мере продвижения реакции менялся от бесцветного к пурпурному. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении, рН доводили до 8 путем добавления 5% бикарбоната натрия, затем экстрагировали ΕίΟΑс (20 млх2). Объединенные органические экстракты сушили (Ж28О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 254 мг (92%) желаемого гидроксил хинолина. ЖХ/МС=298 (М++1).
Стадия 3.
Смесь промежуточного соединения III (800 мг, 1,12 ммоль), хинолина (332 мг, 1,12 ммоль) и карбоната цезия (802 мг, 2,46 ммоль) в ΝΜΡ (5 мл) перемешивали при 65°С в течение 16 ч. Затем данную смесь разбавляли ΕίΟΑс (20 мл) и 5% ЫС1 (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Два образовавшихся слоя разделяли и водный слой экстрагировали ΕίΟΑс (20 мл). Объединенные органические фракции промывали 5% ЫС1 (3x20 мл), водой и затем солевым раствором. Органическую фракцию сушили (Ж28О4) и концентрировали. Полученное неочищенное вещество очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 685 мг (79%) желаемого сложного эфира. ЖХ/МС=773 (М++1).
Стадия 4.
К смеси сложного эфира (685 мг, 0,88 ммоль) в ТНЕ (3 мл) и метаноле (5 мл), добавляли раствор моногидрата ПОН (210 мг, 5,0 ммоль) в воде (3 мл). Смесь перемешивали при 35°С в течение 3 ч. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении и рН доводили до 2 10% НС1. К данной смеси добавляли метанол (5 мл), и смесь очищали путем обратнофазовой препаративной ВЭЖХ с использованием смеси ацетонитрила 0,1% ΤΡΑ и воды в качестве элюента с получением 323 мг (48%) со- 83 025794 единения 85. 'ΐ I ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ (м.д.) 7.85 (ά, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.15 (ά, 1=9.2 Гц, 1Н), 6.37 (з, 1Н), 5.34 (Ъг, 1Н), 4.53-4.35 (Ъг, 5Н), 4.24 (Ъг, 2Н), 4.08 (з, 1Н), 3.99-3.87 (Ъг, 1Н), 3.74-3.72 (т, 2Н), 3.36 (з, 3Н), 2.60 (т, 1Н), 2.40 (т, 1Н), 1.93 (т, 1Н), 1.82 (т, 2Н), 1.58-1.52 (Ъг, 4Н), 1.43-1.36 (Ъг, 4Н), 1.31-1.21 (Ъг, 2Н), 1.13-1.03 (Ъг, 3Н), 0.91 (з, 9Н), 0.84 (з, 1Н), 0.21-0.02 (Ъг, 2Н). ЖХ/МС=760 (М++1).
Пример 86. Получение соединения 86.
Стадия 1.
К смеси ИаН (214 мг, 5,35 ммоль) в ТНР (3,5 мл) добавляли по каплям 2-метоксиэтиловый спирт (253 мкл, 3,21 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, и затем добавляли раствор указанного на схеме хинолина (534 мг, 1,07 ммоль) в ТНР (1,5 мл), и полученный раствор перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь гасили путем добавления 2н. НС1 (10 мл) и полученую смесь перемешивали в течение 5 мин. Данную смесь разбавляли ЕЮАс (20 мл), перемешивали в течение 5 мин и затем два слоя разделяли и водную фракцию экстрагировали ЕЮАс (20 мл). Объединенные органические фракции сушили (Иа28О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 504 мг (98%) РМВ-защищенного бис-метоксиэтокси хинолина. ЖХ/МС=448 (М++1).
Стадия 2.
Раствор полученного РМВ-защищенного хинолина 504 мг (1,12 ммоль) в дихлорметане (5,0 мл) и ТРА (5,0 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Цвет раствора менялся по мере продвижения реакции от бесцветного до пурпурного. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении, рН доводили до 8 путем добавления 5% бикарбоната натрия, затем экстрагировали ЕЮАс (2х 10 мл). Объединенные органические фракции сушили (Иа28О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 367 мг (100%) желаемого гидроксил хинолина. ЖХ/МС=328 (М++1).
Стадия 3.
Смесь промежуточного соединения III (800 мг, 1,12 ммоль), указанного на схеме хинолина (367 мг, 1,12 ммоль) и карбоната цезия (802 мг, 2,46 ммоль) в ИМР (5 мл) перемешивали при 65°С в течение 16 ч. Затем данную смесь разбавляли ЕЮАс (20 мл) и 5% ЫС1 (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Два образовавшихся слоя разделяли, и водную фракцию экстрагировали ЕЮАс (20 мл). Объединенные органические фракции промывали ЫС1 (3х20 мл) и затем водой, и затем солевым раствором, полученные фракции сушили (Иа28О4) и концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гексанов и этилацетата, с получением 829 мг (92%) желаемого сложного эфира. ЖХ/МС=803 (М++1).
Стадия 4.
К смеси полученного сложного эфира (829 мг, 1,02 ммоль) в ТНР (3 мл) и метаноле (5 мл) добавляли раствор моногидрата ЫОН (210 мг, 5,0 ммоль) в воде (3 мл). Смесь перемешивали при 35°С в течение 3 ч. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении, и рН раствора доводили до 2 10% НС1. К данной смеси добавляли метанол (5 мл) и полученную смесь очищали путем обратнофазовой препаративной ВЭЖХ, используя смесь ацетонитрила, 0,1% ТРА и воды в качестве элюента с получением 528 мг (66%) соединения 86. 'Н ЯМР (400 МГц, СП3ОО): δ (м.д.) 7.81 (ά, 1=8.99 Гц, 1Н), 7.10 (ά, 1=9.2 Гц, 1Н), 6.35 (з, 1Н), 5.28 (Ъг, 1Н), 4.59-4.36 (Ъг, 5Н), 4.22 (Ъг, 2Н), 4.08 (з, 1Н), 3.89-3.85 (Ъг, 1Н), 3.75-3.70 (т, 2Н), 3.36 (з, 3Н), 3.34 (з, 3Н), 2.58 (т, 1Н), 2.38 (т, 1Н), 1.93 (т, 1Н), 1.82 (т, Н), 1.58-1.50 (Ъг, 4Н), 1.42-1.23 (Ъг, 4Н), 1.1-1.05 (Ъг, 3Н), 0.88 (з, 9Н), 0.82 (з, 1Н), 0.19-0.2 (Ъг, 2Н). ЖХ/МС=790 (М++1).
Пример 87. Получение соединения 87.
Стадия 1.
Указанный на схеме дигидроксихинолин (2 г, 6,6 ммоль) растворяли в ЭМР (50 мл) при 0°С и порциями добавляли ИаН (792 мг, 19,8 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем добавляли 4-(2-хлорэтил)-морфолин гидроксихлорил (1,36 г, 7,3 ммоль). Смесь перемешивали при 60°С в те- 84 025794 чение 5 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли Е1ОАс и 3% водным раствором ЫС1. Два образовавшихся слоя разделяли и водную фракцию снова экстрагировали Е1ОАс. Объединенные органические фракции промывали солевым раствором, сушили ^дЗО4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси ΜеОН/ЕΐОΑс с получением 1,46 г (43%) желаемого продукта. ЖХ/МС=415 (М++1).
Стадия 2.
Соединение 87 (570 мг в виде ТРА-соли, 74% чистоты) получали в соответствии с методиками, аналогичными методикам получения соединения 82 с использованием указанного на схеме макроциклического трипептида (1,2 г мг, 1,7 ммоль, содержащего >30% примесей) и указанного на схеме хинолина (500 мг, 0,965, 20% примесей). Ή ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.64 (5, 1Н), 8.33 (ά, 1Н), 8.22 (5, 1Н), 7.83 (5, 1Н), 7.78 (ά, 1Н), 7.41 (άά, 1Н), 5.7 (Ь, 1Н), 4.78-4.62 (т, 5Н), 4.30 (ά, 1Н), 4.29-4.07 (т, 7Н), 3.79 (1, 2Н), 3.54 (Ьг5, 4Н), 2.80-2.60 (т, 2Н), 1.10-2.04 (т, 34Н), 0.97-0.92 (т, 1Н), 0.32-0.42 (т, 2Н). ЖХ/МС=888.7 (М++1).
Пример 88. Получение соединения 88.
Стадия 1.
Смесь указанного на схеме защищенного гидроксипролина (10 г, 40,8 ммоль), РИС (23,0 г, 61,2 ммоль) и 10 г 4А молекулярны сит в дихлорметане (150 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Полученную смесь фильтровали через а подушку целита, подушку промывали дихлорметаном. Полученный фильтрат концентрировали, и остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле смесью Е1ОАс/гексан с получением 7,86 г (79%) желаемого кетона. ЖХ/МС=144 (М++1-Вос).
Стадия 2.
Смесь полученного кетона (4,3 г, 17,7 ммоль) в дихлорметане (80 мл) перемешивали при -78°С в атмосфере Ν2, медленно добавляя БАЗТ (5,8 мл, 44,25 ммоль). Данную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 24 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой. После разделения двух слоев водную фракцию экстрагировали дихлорметаном (300 мл) и объединенные органические фракции сушили ^дЗО4) и концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси Е1ОАс/гексан с получением 4,37 г (93%) желаемого дифторного соединения. ЖХ/МС=166 (М++1-Вос).
Стадия 3.
Смесь полученного дифтор-сложного эфира (4,37 г, 16,5 ммоль) в ТНР (50 мл) перемешивали при -78°С в атмосфере Ν2, добавляли по каплям в течение 30 мин 1 М Б1ВАЬ в ТНР (36,3 мл, 36,3 ммоль). Данную смесь осавляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 48 ч. Смесь разбавляли Е1ОАс (100 мл) и насыщенным натрий калий тартратом (100 мл), и полученую смесь интенсивно перемешивали в течение 30 мин до тех пор, пока две фазы не разделялись. После разделения двух слоев, водную фракцию экстрагировали Е1ОАс (2х 100 мл) и объединенные органические фракции промывали солевым раствором, сушили ^дЗО4) и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси Е1ОАс/гексан с получением 1,56 г (40%) желаемого спирта. ЖХ/МС=138 (М++1-Вос).
Стадия 4.
Смесь указанного на схеме трипептида (500 мг, 0,616 ммоль) и спирта (175 мг, 0,739 ммоль), полученного на предыдущей стадии, ΡΡ1ι3 (261 мг, 0,986 ммоль) и Б1АЭ (0,191 мл, 0,986 ммоль) в ТНР (10 мл) подвергали дефлегмации в течение 3 ч. Данную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, и затем остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси Е1ОАс/гексан с получением 628 мг (99%) желаемого продукта. ЖХ/МС=1031,3 (М++1).
- 85 025794
Стадия 5.
Указанное на схеме Вοс-защищенное соединение растворяли в 4н. ΗΟ в диоксане (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта. ЖХ/МС=930,2 (М++1).
Стадия 6.
Вышеуказанное соединени растворяли в ТОР (3 мл), ΜеОΉ (3 мл) и воде (10 мл), содержащей Ε^Η (462 мг, 11,56 ммоль), и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Полученный раствор подкисляли путем добавления ТРА и затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом 500,8 мг (76% за две стадии) соединения 88 в виде бис-ТРА соли. 1Н ЯМР (300 МГц, СИ3ОП): δ 8.64 (δ, 1Η), 8.33 (б, 1Η), 8.22 (δ, 1Η), 7.78 (δ, 1Η), 7.60 (б, 1Η), 5.72 (Ь, 1Η), 4.90-4.55 (т, 5Η), 4.22-4.13 (т, 2Η), 4.00-3.88 (т, 2Η), 3.00-2.60 (т, 3Η), 2.00-1.80 (т, 2Η), 1.70-1.65 (т, 2Η), 1.57-1.40 (т, 2Η), 1.40 (δ, 3Η), 1.38 (δ, 3Η), 1.22 (т, 2Η), 1.03-0.92 (т, 10Η), 0.35 (т, 2Η). ЖХ/МС=916.2 (М++1).
Пример 89. Получение соединения 89.
Стадия 1.
Приведенную выше схему снятия Вοс-защитной группы реализовали с помощью методики примера 88, стадии 5.
Стадия 2.
К раствору вышеупомянутою бе-Вοс соединения в 1,2-дихлорэтане (6 мл) добавляли NаВΉ(ОАс)3 (520 мг, 2,45 ммоль) и формальдегид (37% в воде, 0,1 мл, 1,23 ммоль) при комнатной температуре. Через 1 ч данную смесь концентрировали, разбавляли ЕЮАс (100 мл), промывали насыщенным раствором NаΉСО3 и солевым раствором, сушили (Ца^О4) и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного метилированного соединения. ЖХ/МС=944,2 (М++1).
Стадия 3.
Вышеуказанное метилированное соединение растворяли в ТОР (3 мл), ΜеОΉ (3 мл) и воде (10 мл), содержащей ΡΏΗ (500 мг) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Полученный раствор подкисляли путем добавления ТРА и затем концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом 510 мг (69% за 3 стадии) соединения 89 в виде бис-ТРА соли. !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОО): δ 8.64 (δ, 1Η), 8.31 (б, 1Η), 8.23 (δ, 1Η), 7.73 (δ, 1Η), 7.62 (б, 1Η), 5.72 (Ь, 1Η), 4.90-4.50 (т, 5Η), 4.30-3.68 (т, 7Η), 3.20 (δ, 3Η), 3.05-2.60 (т, 3Η), 2.00-1.80 (т, 2Η), 1.70-1.63 (т, 2Η), 1.54-1.40 (т, 2Η), 1.40 (δ, 3Η), 1.38 (δ, 3Η), 1.22 (т, 2Н), 1.03-0.92 (т, 10Η), 0.34 (т, 2Η). ЖХ/МС=930.2 (М++1).
Пример 90. Получение соединения 90.
Стадия 1.
Смесь указанного на схеме реагента (1,17 г, 1,44 ммоль) и 3-гидроксиметил-морфолин-4карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (376 мг, 1,73 ммоль), РРк3 (604 мг, 2,30 ммоль) и ΌΙΛΌ (0,445 мл, 2,30 ммоль) в ТОР (15 мл) подвергали дефлегмации в течение 3 ч. Согласно ЖХ/МС получен желаемый продукт вместе побочным продуктом и оставалась часть исходного вещества. Добавляли еще раз исходные реагенты в количнстве половины от исходного добавления и полученную смесь подвергали
- 86 025794 дефлегмации в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс (100 мл), промывали насыщенным раствором NаНСО3 и солевым раствором, сушили (Яа28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле ЕЮАс/гексан и затем препаративном ВЭЖХ с получением 142 мг (10%) желаемого продукта. ЖХ/МС=1010,3 (М++1).
Стадия 2.
Вышеуказанное Вос-защищенное соединение (55 мг, 0,054 ммоль) растворяли в 4н. НС1 в диоксане (3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс (20 мл), промывали насыщенным раствором NаНСО3 и солевым раствором, сушили (Яа28О4) и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного деблокированного продукта ЖХ/МС=910,3 (М++1).
Стадия 3.
Вышеуказанное соединение и ЫОН (50 мг) растворяли в ТНР (5 мл), МеОН (0,5 мл) и воде (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Полученный раствор подкисляли путем добавления ТРА и затем концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом 17 мг (28% за две стадии) соединения 90. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.64 (δ, 1Н), 8.31 (б, 1Н), 8.25 (δ, 1Н), 7.80 (δ, 1Н), 7.68-7.55 (т, 4Н), 5.72 (Ь, 1Н), 4.794.47 (т, 5Н), 4.25-3.84 (т, 10Н), 3.50-3.39 (т, 2Н), 2.86-2.60 (т, 2Н), 2.00-1.80 (т, 2Н), 1.70-1.62 (т, 2Н), 1.54-1.40 (т, 2Н), 1.40 (δ, 3Н), 1.38 (δ, 3Н), 1.34-1.20 (т, 4Н), 1.03-0.92 (т, 10Н), 0.35 (т, 2Н). ЖХ/МС=896.2 (М++1).
Пример 91. Получение соединения 91.
Соединение 91 получали в соответствии с методиками, описанными в примере 89. После очистки путем препаративной ВЭЖХ, 25,5 мг (27%) соединения 91 получали в виде бис-ТРА соли. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.64 (δ, 1Н), 8.29 (б, 1Н), 8.23 (δ, 1Н), 7.78 (δ, 1Н), 7.73 (т, 1Н), 5.72 (Ь, 1Н), 4.79-4.47 (т, 5Н), 4.30-3.95 (т, 10Н), 3.61-3.43 (т, 2Н), 3.17 (δ, 3Н), 2.86-2.50 (т, 2Н), 2.00-1.80 (т, 2Н), 1.70-1.61 (т, 2Н), 1.57-1.40 (т, 2Н), 1.40 (δ, 3Н), 1.38 (δ, 3Н), 1.34-1.20 (т, 4Н), 1.05-0.90 (т, 10Н), 0.35 (т, 2Н). ЖХ/МС=910.3 (М++1).
Пример 92. Получение соединения 92.
Соединение 92 получали в соответствии с методиками, описанными в примере 90. После очистки путем препаративной ВЭЖХ 17,4 мг соединения 92 получали в виде бис-ТРА соли. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.64 (δ, 1Н), 8.29 (б, 1Н), 8.22 (δ, 1Н), 7.78 (δ, 1Н), 7.61 (б, 1Н), 5.71 (Ь, 1Н), 4.73-4.49 (т, 5Н), 4.25-3.84 (т, 10Н), 3.50-3.39 (т, 2Н), 2.86-2.60 (т, 2Н), 2.00-1.80 (т, 2Н), 1.70-1.62 (т, 2Н), 1.54-1.40 (т, 2Н), 1.40 (δ, 3Н), 1.38 (δ, 3Н), 1.30-1.20 (т, 4Н), 1.05-0.91 (т, 10Н), 0.33 (т, 2Н). ЖХ/МС=896.2 (М++1).
- 87 025794
Пример 93. Получение соединения 93.
Соединение 93 получали в соответствии с методиками, описанными в примере 89. После очистки путем препаративной ВЭЖХ 16,0 мг соединения 93 получали в виде бис ТРА соли. 1Н ЯМР (300 МГц, СО3ОП): δ 8.63 (5, 1Н), 8.31 (б, 1Н), 8.24 (5, 1Н), 7.80 (5, 1Н), 7.64 (5, 1Н), 5.72 (Ь, 1Н), 4.75-4.47 (т, 5Н), 4.20-3.92 (т, 10Н), 3.61-3.40 (т, 2Н), 3.18 (5, 3Н), 2.80-2.55 (т, 2Н), 2.00-1.80 (т, 2Н), 1.70-1.62 (т, 2Н), 1.50-1.40 (т, 2Н), 1.40 (5, 3Н), 1.38 (5, 3Н), 1.20-1.10 (т, 4Н), 1.05-0.97 (т, 10Н), 0.35 (т, 2Н). ЖХ/МС=910.3 (М++1).
Пример 94. Получение соединения 94.
Стадия 1.
К раствору 1-[2-амино-3-хлор-4-(2,2-диметоксиэтокси)фенил]этанона (2 г, 7,3 ммоль) в пиридине (20 мл) медленно добавляли циклогексанкарбонил хлорид (1,12 г, 7,7 ммоль) при 0°С. Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем к данной смеси добавляли Н2О (10 мл). Полученный продукт экстрагировали ЕЮАс, промывали солевым раствором, сушили (Иа28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением 1,9 г, (65%) желаемого амида в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС=383,8 (М++1).
Стадия 2.
Полученный амид (1,9 г, 5,0 ммоль) и трет-ВиОК (0,62 г, 0,55 ммоль) растворяли в трет-ВиОН (20 мл) при комнатной температуре и перемешивали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. После завершения реакции к данной реакционной смеси добавляли 3н. НС1, чтобы подвести рН приблизительно до 3; в результате желаемый продукт выпадал в осадок. Твердое вещество отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром и сушили в условиях глубокого вакуума с получением желаемого хинолина в виде белого твердого вещества (1,6 г, 100%). ЖХ/МС=366,1 (М++1).
Стадия 3.
Соединение 94 (170 мг) синтезировали в соответствии с некоторыми из методик, описанными выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=852,9 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОО): δ 8.06 (б, 1Н), 7.32 (б, 1Н), 7.04 (5, 1Н), 5.45 (Ь, 2Н), 4.34 (бб, 1Н), 4.25 (б, 1Н), 4.15 (бб, 1Н), 3.79-2.98 (т, 11Н), 2.42 (т, 1Н), 2.25 (т, 1Н), 1.75-1.61 (т, 3Н), 1.54-1.45 (т, 3Н), 1.35-1.00 (т, 10Н), 0.91-0.84 (т, 2Н), 0.73-0.61 (т, 12Н), 0.14-0.03 (т, 2Н).
Пример 95. Получение соединения 95.
Стадии 1 и 2.
Полученный хинолин синтезировали в соответствии с методиками, описанными выше в примере 94. ЖХ/МС=324,2 (М++1).
Стадия 3.
Соединение 95 (550 мг) синтезировали с использованием методик, описанных выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=810,5 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.33 (ά, 1Н), 7.60 (ά, 1Н), 6.77 (5, 1Н), 5.69 (Ъ5, 1Н), 4.78 (Ъ, 2Н), 4.66 (άά, 1Н), 4.51 (т, 1Н), 4.13-3.31(т, 11Н), 2.96-2.68 (т, 2Н), 2.572.49 (т, 1Н), 2.01-1.81 (т, 2Н), 1.69-1.35 (т, 10Н), 1.24-1.10 (т, 2Н), 1.05-0.94 (т, 12Н), 0.36-0.33 (т, 2Н).
Пример 96. Получение соединения 96.
Стадии 1 и 2.
Полученный хинолин синтезировали с использованием методик, описанных выше в примере 94. ЖХ/МС=342,7 (М++1).
Стадия 3.
Соединение 96 (260 мг) синтезировали с использованием методик, описанных выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=829,4 (М++1).
Пример 97. Получение соединения 97.
Стадия 1.
Указанная на схеме соль имидазола (2,99 г, 16 ммоль) и указанный на схеме анилин (2 г, 14,5 ммоль) растворяли в этаноле (7 мл) в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при 30°С в течение ночи. Данную смесь фильтровали, и затем полученный фильтрат концентрировали. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с выходом желаемого продукта конденсации в виде бесцветного масла (3,6 г, 87%). ЖХ/МС=285,9 (М++1).
- 89 025794
Стадия 2.
Раствор продукта конденсации (3,6 г, 87%) в дифениловом эфире (36 мл) помещали в горячую песочную баню (300°С) и данную смесь оставляли перемешиваться в течение 12 мин, поддерживая температуру раствора приблизительно 240-250°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, и желаемый продукт осаждали в виде коричневого твердого вещества. Твердое вещество отфильтровывали, промывали гексаном и сушили в условиях глубокого вакуума с получением желаемого хинолина (2,33 г, 9,7 ммоль, 77%). ЖХ/МС=240,0 (М++1).
Стадия 3.
К раствору полученного хинолина (2,33 г, 9,7 ммоль) в ΌΜΡ (30 мл) добавляли карбонат цезия (12,64 г, 39 ммоль) и 2-бром-1,1-диметоксиэтан (2,6 г, 15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 65°С в течение 10 ч. Данную смесь фильтровали, фильтрат разбавляли ЕГОАс и Н2О и затем рН доводили до 3. путем добавления 3н. НС1 Отделенную органическую фракцию промывали 5% ЫС1 и солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением 8-хлор-7-(2,2-диметоксиэтокси)-2-этоксихинолин-4-ола в виде белого твердого вещества (1,27 г, 3,87 ммоль, 40%). ЖХ/МС=328,1 (М++1).
Стадия 4.
Соединение 97 (754 мг) синтезировали с использованием методик, описанных выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=814,6 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 7.61 (ά, 1Н), 6.82 (ά, 1Н), 6.01 (5, 1Н), 5.01 (5, 1Н), 4.41-4.30 (т, 1Н), 4.29-4.19 (т, 3Н), 4.15-4.01 (т, 2Н), 3.95-2.95(т, 12Н), 2.30 (т, 1Н),
2.10 (т, 1Н), 2.84-0.59 (т, 19Н), 0.2-0.04 (т, 2Н).
Пример 98. Получение соединения 98.
Стадия 1.
К смеси указанного на схеме брозилата (1,1 г, 1,52 ммоль) и карбоната цезия (0,99 г, 3,04 ммоль) в NΜΡ (10 мл) добавляли указанный на схеме хинолин (0,40 г, 1,22 ммоль) при комнатной температуре за один прием. Смесь перемешивали при 85°С в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕГОАс (100 мл). Смесь промывали 3% водным раствором ЫС1 (1x100 мл), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕГОАс/гексан с получением желаемого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества (0,70 г, 71%). ЖХ/МС=813 (М++1).
Стадия 2.
К раствору полученного сложного эфира (0,70 г, 0,86 ммоль) в НОАс (10 мл) добавляли 1,4н. водный раствор НС1 (5 мл) и полученный раствор перемешивали при 60°С в течение 1,5 ч. После завершения реакции данную смесь концентрировали с целью удаления растворителя. Остаток растворяли в ЕГОАс (100 мл) и промывали насыщенным раствором NаΗСΟ3, и затем органический слой сушили (№28О4) и концентрировали с получением желаемого неочищенного альдегида. К раствору полученного неочищенного продукта альдегида в СН2С12 (20 мл) добавляли морфолин (112 мкл, 1,29 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (237 мг, 1,12 ммоль) при 0°С. Затем к данной смеси добавляли по каплям ледя- 90 025794 ную уксусную кислоту (25 мкл, 7,8 ммоль). Реакция завершалась в течение 10 мин при 0°С. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного раствора NаНСО3. После перемешивания данной смеси в течение 20 мин слои отделяли, органические слои промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт был достаточной чистоты для использования как есть (согласно ЖХ/МС). ЖХ/МС=838 (М++1).
Стадия 3.
К раствору полученного неочищенного продукта в ТНР (6 мл), добавляли раствор ЫОН (384 мг, 16 ммоль) в Н2О (6 мл) и затем МеОН (6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. После завершения реакции добавляли ТРА при 0°С, чтобы рН подвести до 4, и продукт экстрагировали ЕЮАс (2x100 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Полученный продукт очищали путем препаративной ВЭЖХ с выходом соединения 98 в виде белого твердого вещества (0,51 г, 53%). ЖХ/МС=824 (М++1). 1Н ЯМР (400 МГц, СИ3ОП): δ 8.05 (ά, >8.8 Гц 1Н), 7.21 (ά, >9.2 Гц, 1Н), 6.38 (5, 1Н), 5.61 (т, 1Н), 5.39 (т, 2Н), 4.87 (т, 1Н), 4.63-4.54 (т, 5Н), 4.26 (т, 1Н), 4.07 (т, 2Н), 4.01 (т, 1Н), 3.87 (т, 1Н), 3.76 (т, 3Н), 3.48 (т, 2Н), 2.63-2.54 (т, 1Н), 2.54-2.47 (т, 2Н), 2.33-2.67 (т, 1Н), 2.04-1.89 (т, 3Н), 1.87 (т, 1Н), 1.75 (т, 2Н), 1.67-1.59 (т, 3Н), 1.55 (т, 2Н), 1.46-1.37 (т, 8Н), 1.29-1.14 (т, 4Н), 0.39 (т, 2Н).
Пример 99. Получение соединения 99.
Соединение 98 (0,20 г, 0,24 ммоль) и пара-толуолсульфонил гидразид (0,31 г, 1,68 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (2 мл) и добавляли ацетат натрия (0,28 г, 3,36 ммоль) и Н2О (0,2 мл). Затем данную суспензию нагревали при 95°С при перемешивании в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ИМР (4 мл) и очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением соединения 99 в виде белого твердого вещества (0,12 г, 60%). ЖХ/МС=826 (М++1). 1Н ЯМР (400 МГц, СИЮИ): δ 8.03 (ά, >9.2 Гц, 1Н), 7.23 (ά, >9.2), 3.42 (т, 2Н), 2.59 (т, 2Н), 2.04-1.89 (т, 3Н), 1.87 (т, 1Н), Нг, 1Н), 6.41 (5, 1Н), 5.38 (Ь5, 1Н), 4.75-4.69 (т, 2Н), 4.61-4.54 (т, 6Н), 4.49 (т, 1Н), 4.32 (т, 1Н), 4.083.98 (т, 5Н), 3.75 (т, 5Н 1.75 (т, 2Н), 1.67-1.59 (т, 3Н), 1.55 (т, 2Н), 1.46-1.37 (т, 8Н), 1.29-1.14 (т, 4Н), 0.37 (т, 2Н).
Пример 100. Получение соединения 100.
Стадия 1.
2,4,8-Трихлор-7-метоксихинолин (0,32 г, 1,19 ммоль) растворяли в изопропиламине (4 мл) в герметично закрытой пробирке и перемешивали при 50°С в течение 10 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, промывали Н2О, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с получением желаемого дихлорхинолина (0,231 г, 0,81 ммоль, 68%). ЖХ/МС=285,1 (М++1).
Стадия 2.
Смесь полученного дихлорхинолина (0,145 г, 0,51 ммоль) и ацетата натрия (0,625 г, 7,6 ммоль) в НОАс (2 мл) помещали в герметично закрываемую пробирку и перемешивали при 130°С в течение 17 ч. Данную смесь охлаждали до комнатной температуры, и затем твердеющюю смесь растворяли путем добавления ЕЮАс и промывали Н2О и насыщенн раствором NаНСО3 (3х). В ходе промывки насыщенным раствором Ν3Π^3, желаем продукт выпадал в осадок и его отфильтровывали. Осадок на фильтре обрабатывали толуолом и концентрировали (3х) с получением 8-хлор-2-изопропиламино-7-метоксихинолин4-ола (0,09 г, 67%). ЖХ/МС=267,1 (М++1).
Стадия 3.
Соединение 100 (110 мг) синтезировали с использованием методик, описанных выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=728,4 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОП): δ 8.02 (ά, 1Н), 7.26 (ά, 1Н), 6.45
- 91 025794 (Ь8, 1Н), 5.61 (Ь8, 1Н), 5.06 (Ь8, 1Н), 4.68 (άά, 1Н), 4.56-4.45 (т, 2Н), 4.25-3.97(т, 6Н), 3.32 (8, 1Н), 2.762.68 (т, 2Н), 2.56-2.49 (т, 1Н), 2.14 (т, 1Н), 1.99-1.78 (т, 2Н), 1.68-1.64 (т, 3Н), 1.53-1.16 (т,6Н), 1.050.94 (т, 14Н), 0.37-0.30 (т, 2Н).
Пример 101. Получение соединения 101.
Стадии 1 и 2.
Желаемый хинолин синтезировали с использованием методик, аналогичных описанным выше в примере 100. ЖХ/МС=283,1 (М++1).
Стадия 3. Соединение 101 (82 мг) синтезировали с использованием методик, описанных выше для приготовления соединение 82. ЖХ/МС=744,4 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.02 (ά, 1Н), 7.306 (ά, 1Н), 6.51-6.37 (т, 1Н), 5.58-5.45 (т, 1Н), 4.68 (άά, 1Н), 4.56-4.44 (т, 2Н), 4.15-3.96(т, 5Н), 3.79 (т, 4Н), 3.55-3.47 (т, 2Н), 3.31 (т, 1Н), 2.72-2.49 (т, 2Н), 2.14 (т, 1Н), 1.99-1.78 (т, 2Н), 1.68-1.64 (т, 3Н), 1.531.22 (т,6Н), 1.20-0.94 (т, 14Н), 0.37-0.30 (т, 2Н).
Пример 102. Получение соединения 102.
Стадия 1.
Смесь 2,4,8-трихлор-7-метоксихинолина (100 мг, 0,38 ммоль), 4-метил-4Н-1,2,4-триазол-3-тиола (44 мг, 0,38 ммоль) и карбоната цезия (185 мг, 0,57 ммоль) в ИМР (2 мл) перемешивали при 50°С в течение 22 ч. Согласно ЖХ/МС получили часть продукта вместе с промежуточными продуктами. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс (100 мл) и промывали 3% ЫС1 и солевым раствором. Органический слой и нерастворимое вещество объединяли и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением 89 мг (67%) желаемого однозамещенного продукта. ЖХ/МС=341,2 (М++1).
Стадия 2.
Смесь вышеупомянутого дихлорхинолина (48 мг, 0,14 ммоль) и ИаОАс (173 мг, 2,11 ммоль) в НОАс (2 мл) перемешивали при 130°С в течение 36 ч в герметично закрытой пробирке. После охлаждения до комнатной температуры данную смесь разбавляли ЕЮАс (20 мл) и промывали насыщенным раствором ИаНСО3 и солевым раствором. Органический слой и нерастворимое веществ объединяли и концентрировали под вакуумом с получением желаемого гидроксихинолина, чистого, в виде белого твердого вещества, используемого как есть на следующей стадии. ЖХ/МС=323,11 (М++1).
Стадия 3.
Смесь промежуточного соединения III (130 мг, 0,182 ммоль), полученного гидроксихинолина и карбоната цезия (137 мг, 0,42 ммоль) в ИМР (2 мл) перемешивали при 65°С в течение 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры данную смесь разбавляли ТНР (5 мл) и МеОН (1 мл) и к данной смеси добавляли гидроксид лития (100 мг) в воде (3 мл). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре и нейтрализовали путем добавления ТРА. После удаления летучих растворителей остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением 53 мг (42% за две стадии) соединения 102 в виде ТРА соли. !Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОБ): δ 8.85 (8, 1Н), 8.11 (ά, 1Н), 7.44 (ά, 1Н), 6.22 (8, 1Н), 5.81 (Ь, 1Н),
4.50 (т, 1Н), 4.3-4.0 (т, 4Н), 4.06 (8, 3Н), 3.72 (8, 3Н), 2.47 (т, 2Н), 2.04 (т, 2Н), 1.75-1.1.79 (т, 10Н),
- 92 025794
1.03-0.92 (т, 14Н), 0.44 (т, 2Н). ЖХ/МС=784.1 (М++1). Пример 103. Получение соединения 103.
Стадия 1.
К смеси промежуточного соединения III (0,15 г, 0,21 ммоль) и карбоната цезия (0,14 г, 0,42 ммоль) в NΜΡ (5 мл) добавляли указанный на схеме хинолин (0,05 г, 0,21 ммоль) при комнатной температуре за один прием. Смесь перемешивали при 85°С в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс (30 мл). Смесь промывали 3% водным раствором ЫС1 (1x20 мл), солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс/гексан с получением желаемого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества (0,09 г, 60%). ЖХ/МС=710 (М++1).
Стадия 2.
Полученный сложный эфир (0,06 г, 0,085 ммоль) и иодид натрия (0,25 г, 1,67 ммоль) растворяли в пиридине (3 мл) и нагревали до 115°С в течение 7 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали с целью удаления большей части пиридина. Остаток растворяли в ЭМР (2 мл) и очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением соединения 103 в виде твердого веществаэ (0,02 г, 35%). ЖХ/МС=696 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СП3ОО): δ 8.15 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 7.57 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.40 (8, 1Н), 5.49 (8, 1Н), 4.69 (т, 1Н), 4.51-4.41 (т, 2Н), 4.16 (т, 1Н), 4.08(8, 3Н), 4.01 (т, 1Н), 2.69 (т, 1Н), 2.49 (т, 1Н), 2.00 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.69 (т, 2Н), 1.50 (т, 1Н), 1.43-1.36 (т, 3Н), 1.25-1.13 (т, 3Н), 1.04-0.95 (т, 12Н), 0.35-0.27 (т, 2Н).
Пример 104. Получение соединения 104.
Стадия 1.
Указанный на схеме сложный метиловый эфир хинолина (0,20 г, 0,75 ммоль) растворяли в ТНР (5 мл) при охлаждении до 0°С добавляли 1 М ОГВАЬ в гексане (2,3 мл, 2,30 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем к данной смеси медленно добавляли Н2О (2 мл). рН смеси доводили до 2 путем добавления 1н. НС1. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили под вакуумом в течение ночи с выходом желаемого спирта (180 мг, 93%). ЖХ/МС=240 (М++1).
Стадия 2.
Соединение 104 (0,31 г, 56%) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 82. ЖХ/МС=701 (М++1). Ή ЯМР (300 МГц, С1);О1)) δ 8.41 (б, 1=9.9 Гц, 1Н), 7.74 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.54 (8, 1Н), 5.75 (8, 1Н), 5.16 (8, 2Н), 4.73 (т, 1Н), 4.61 (т, 1Н), 4.49 (т, 1Н), 4.33 (т, 1Н),
4.19 (8, 3Н), 4.09 (т, 1Н), 2.85 (т, 1Н), 2.60 (т, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 1.94(т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.69 (т, 2Н),
1.50 (т, 1Н), 1.43-1.36 (т, 3Н), 1.25-1.13 (т, 3Н), 1.04-0.95 (т, 12Н), 0.38-0.31 (т, 2Н).
- 93 025794
Пример 105. Получение соединения 105.
Стадия 1.
В раствор указанного на схеме анилина (0,30 г, 1,5 ммоль) и пиридина (0,24 г, 3,0 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°С при перемешивании в течение 15 мин добавляли 3,3-диметилакрилоил хлорид (0,24 г, 2,0 ммоль), и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Данную смесь концентрировали, и затем остаток растворяли в ЕЮАс (50 мл) и промывали насыщенным раствором NаНСО3, 1н. НС1, и солевым раствором. Органическую фракцию сушили (№28О4), концентрировали и очищали путем хроматографии на силикагеле ЕЮАс/гексан с получением желаемого амида в виде светло-коричневого твердого вещества (0,35 г, 80,3%). ЖХ/МС=282 (М++1).
Стадия 2.
В раствор амида (0,32 г, 1,1 ммоль) в трет-ВиОН (10 мл) при интенсивном перемешивании добавляли трет-ВиОК (0,27 г, 2,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Данную смесь подкисляли путем добавления 4н. НС1 (1 мл) и концентрировали, и затем остаток растворяли в ЕЮАс (30) и промывали Н2О (10 мл) и солевым раствором (10 мл). Органическую фракцию сушили (№28О4), концентрировали и очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс/гексан с получением желаемого хинолина в виде светло-коричневого твердого вещества (0,11 г, 37%). ЖХ/МС=264 (М++1).
Стадия 3.
Соединение 105 (0,10 г, 66%) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 82. ЖХ/МС=725 (М++1). !Н ЯМР (400 МГц, С1);О1)) δ 8.35 (5, 1=9.6 Гц, 1Н), 8.30 (5, 1Н), 7.67 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.33 (5, 1Н), 6.79 (5, 1Н), 5.73 (5, 1Н), 4.76 (ΐ, 1=8.8 Гц, 1Н), 4.64 (й, 1=12.4 Гц, 1Н),
4.30 (ΐ, 1=10.8 Гц, 1Н), 4.16 (5, 1Н), 4.08-4.01 (т, 2Н), 2.80 (т, 1Н), 2.60 (т, 1Н), 2.22(й, 1=12.8 Гц, 6Н), 1.92 (т, 1Н), 1.48 (т, 1Н), 1.74-1.40 (т, 6Н), 1.27-1.13 (т, 4Н), 1.04-0.96 (т, 12Н), 0.36-0.32 (т, 2Н).
Пример 106. Получение соединения 106.
Стадия 1.
В раствор указанного на схеме анилина (8,0 г, 29,3 ммоль) и пиридина (4,6 г, 58,6 ммоль) в дихлорметане (100 мл) при перемешивании при 0°С в течение 15 мин добавляли 3,3-диметилакрилоил хлорид (4,2 г, 35,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученную смесь концентрировали, и затем остаток растворяли в ЕЮАс (200 мл) и промывали насыщенным раствором NаНСО3, 1н. НС1 и солевым раствором. Органическую фракцию сушили (№28О4), концентрировали и очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс/гексан с получением желаемого амида в виде светло-коричневого твердого вещества (6,0 г, 57,6%). ЖХ/МС=355 (М++1).
Стадия 2.
В раствор полученного амида (6,0 г, 16,9 ммоль) в трет-ВиОН (120 мл) при интенсивном перемешивании добавляли трет-ВиОК (3,9 г, 35,4 ммоль). Смесь нагревали при 75°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Данную смесь подкисляли путем добавления 4н. НС1 (10 мл) и концентрировали, затем остаток растворяли в ЕЮАс (200 мл) и промывали Н2О (50 мл) и солевым раствором (100 мл). Органическую фракцию сушили (№28О4), концентрировали и очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс/гексан с получением желаемого хинолина в виде светлокоричневого твердого вещества (1,62 г, 28%). ЖХ/МС=338 (М++1).
- 94 025794
Стадия 3.
Соединение 106 (0,51 г, 75%) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 98. ЖХ/МС=824 (М++1). ' Н ЯМР (300 МГц, С1+ОП) δ 8.30 (5, 1=9.3 Гц, 1Н), 8.30 (5, 1Н), 7.57 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.18 (5, 1Н), 6.69 (5, 1Н), 5.62 (5, 1Н), 4.74-4.67 (т, 3Н), 4.58-4.52 (т, 2Н), 4.16 (т, 1Н), 4.08-3.99 (т, 6Н), 3.79 (т, 2Н), 3.57 (т, 4Н), 2.80 (т, 1Н), 2.60 (т, 1Н), 2.29 (5, 3Н), 2.14 (5, 3Н), 2.02 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.69 (т, 3Н), 1.50 (т, 1Н), 1.43-1.36 (т, 2Н), 1.24-1.13 (т, 3Н), 1.04-0.96 (т, 12Н), 0.36-0.32 (т, 2Н).
Пример 107. Получение соединения 107.
Соединение 107 (0,14 г, 70%) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 98. ЖХ/МС=836 (М++1). Ή ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 8.41 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.68 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.34 (5, 1Н), 6.78(5, 1Н), 5.74 (Ь5, 1Н), 4.81-4.72 (т, 5Н), 4.48 (т, 1Н), 4.24(т, 1Н), 4.06-3.99 (т, 4Н), 4.08-3.98 (т, 5Н), 3.82 (т, 2Н), 3.57 (т, 4Н), 2.74-2.67(т, 2Н), 2.24 (б, 1=21.2 Гц, 6Н), 2.04-1.89 (т, 2Н), 1.87 (т, 1Н), 1.75 (т, 2Н), 1.67-1.59 (т, 3Н), 1.55 (т, 2Н), 1.46-1.37 (т, 4Н), 1.29-1.14 (т, 4Н), 0.37 (т, 2Н).
Пример 108. Получение соединения 108.
Соединение 108 (0,17 г, 60%) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 98. ЖХ/МС=834 (М++1). Ή ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 8.43 (б, 1=9.2 Гц, 1Н), 7.66 (б, 1=9.6 Гц, 1Н), 7.35 (5, 1Н), 6.78(5, 1Н), 5.77 (Ь5, 1Н), 5.62 (т, 1Н), 5.38 (т, 1Н), 4.81 (т, 4Н), 4.72 (ΐ, 1=8.0 Гц, 1Н), 4.39 (ΐ, 1=6.8 Гц, 1Н), 4.13 (т, 1Н), 4.05-3.99 (т, 4Н), 3.82 (т, 2Н), 3.56 (т, 3Н), 2.74-2.67(т, 2Н),
2.22 (б, 1=16.0 Гц, 6Н), 1.93-1.88 (т, 2Н), 1.78-1.74 (т, 2Н), 1.67-1.59 (т, 3Н), 1.55 (т, 2Н), 1.46-1.37 (т, 4Н), 1.29-1.14 (т, 4Н), 0.35 (т, 2Н).
- 95 025794
Пример 109. Получение соединения 109.
Соединение 109 синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 98. ЖХ/МС=820,55 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.00 (ά, 1Н), 7.23 (ά, 1Н), 6.46 (5, 1Н), 5.37 (Ъ, 1Н), 5.29 (т, 1Н), 5.04 (άά, 1Н), 4.42-4.31 (т, 5Н), 4.19 (άά, 1Н), 3.84 (т, 1Н), 3.71-3.65 (т, 5Н), 3.47 (т, 1Н), 3.24 (т, 4Н), 2.98 (т,3Н), 2.37 (т, 2Н), 2.27-2.15 (т, 2Н), 1.96 (т, 1Н), 1.67-1.44 (т, 2Н), 1.34-1.07 (т, 10Н), 0.93-0.82 (т, 2Н), 0.05-0.00 (т, 1Н).
Пример 110. Получение соединения 110.
Соединение 110 синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 99. ЖХ/МС=822,38 (М++1). !Н ЯМР (300 МГц, СО3ОО): δ 8.23 (ά, 1Н), 7.49 (ά, 1Н), 6.68 (5, 1Н), 5.59 (5, 1Н), 4.68-4.61 (т, 3Н), 4.52 (άά, 1Н), 4.45 (άά, 1Н), 4.17 (т, 1Н), 3.95-3.80 (т, 4Н), 3.71 (т, 2Н), 3.48 (Ъ, 3Н), 3.22 (т, 1Н), 2.69-2.52 (т, 3Н), 1.91-1.84 (т, 1Н), 1.79-1.64 (т,3Н), 1.59-1.08 (т, 20Н), 0.31-0.24 (т, 1Н).
Пример 111. Получение соединения 111.
Стадия 1.
Смесь 2,4,8-трихлор-7-метоксихинолина (2,48 мг, 9,45 ммоль) и Н2§О4 (20 мл) герметизировали в пробирке для микроволновой печи и нагревали при 150°С в течение 1 ч в микроволновой печи химического реактора. После охлаждения до комнатной температуры смесь медленно при интенсивном перемешивании вливали в смесь вода/лед. Коричневое твердое вещество отфильтровывали, промывали холодной водой и сушили с получением 1,54 г (66%) желаемого продукта. ЖХ/МС=350,24 (М++3).
Стадия 2.
К раствору 2,4,8-трихлорхинолин-7-ола (1,74 г, 7,0 ммоль) в ОМР (70 мл) добавляли С52СО3 (10,26 г, 31,5 ммоль) и NаI (210 мг, 1,4 ммоль). Смесь нагревали до 65°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры, данную смесь разбавляли Е1ОАс и 3% водным раствором ЫС1. После разделения двух слоев, органическую фракцию сушили (№28О4) и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси Е1ОАс/гексан, затем МеОН/Е1ОАс в качестве элюентов с получением 1,9 г (75%) желаемого продукта. ЖХ/МС=363,0 (М++3).
Стадия 3.
Смесь 2,4,8-трихлор-7-(2-морфолин-4-ил-этокси)хинолина (900 мг, 2,49 ммоль) и изопропиламина (30 мл) герметизировали в пробирке и нагревали до 50°С в течение 10 ч. Данную смесь концентрировали,
- 96 025794 и затем остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс/гексан в качестве элюента с получением 930 мг (97%) желаемого продукта. ЖХ/МС=384,0 (М++1).
Стадия 4.
Раствор вышеупомянутую 4,8-дихлорхинолина (930 мг, 2,42 ммоль) и ацетата натрия (3,0 г, 36,3 ммоль) в уксусной кислоте (12 мл) нагревали до 130°С в течение 18 ч. Данную смесь концентрировали под вакуумом, и затем остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением 882 мг (76%) желаемого гидроксихинолинового продукта. ЖХ/МС=366,0 (М++1).
Стадия 5. Соединение 111 (400 мг) синтезировали с использованием описанной выше методики получения соединения 98. ЖХ/МС=837,4 (М++1). !Н ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 8.63 (8, 1Н), 8.38 (4, 1Н),
8.24 (8, 1Н), 7.80 (4, 1Н), 6.94 (8, 1Н), 6.16 (Ь, 1Н), 5.29 (т, 2Н), 5.03 (ΐ, 1Н), 4.37 (т, 4Н), 4.23 (т, 1Н), 3.90 (т, 2Н), 3.70 (т, 4Н), 3.45 (ΐ, 2Н), 3.21 (Ь, 3Н), 2.98 (8, 1Н), 2.40 (т, 1Н), 2.20 (т, 2Н), 1.98 (ц, 1Н), 1.631.28 (т, 6Н), 1.20-1.07 (т, 10Н), 1.04-0.84 (т, 2Н), 0.39 (т, 2Н).
Пример 115.
Далее даны иллюстрации типичных фармацевтических лекарственных форм, содержащих соединение формулы I (соединение X), для терапевтического или профилактического применения у человека.
(1) Таблетка 1
Соединение Х=
Лактоза
Повидон
Кроскармелоза натрия
Микрокристаллическая целлюлоза Стеарат магния (2) Таблетка 2
Соединение Х=
Микрокристаллическая целлюлоза Крахмал
Натриевая соль гликолята крахмала Стеарат магния (3) Капсула
Соединение Х=
Коллоидный диоксид кремния
Лактоза
Прежелатинизированный крахмал Стеарат магния (4) Инъекция 1(1 мг/мл)
Соединение Х= (в форме свободной кислоты) Первичный кислый фосфат натрия Вторичный кислый фосфат натрия Натрия хлорид
1,0 н. Раствор гидроксида натрия (подведение рН до 7,0-7,5)
Вода для инъекций мг/таблетку
100,0
77.5
15,0
12,0
92.5
3,0
300,0 мг/таблетку
20,0
410,0
50,0
15,0
5,0
500,0 мг/капсулу
10,0
1.5
465.5
120,0
3,0
600,0 мг/мл
1,0
12,0
0,7
4,5 сколько требуется сколько требуется до 1 мл
- 97 025794 (5) Инъекция 2 (10 мг/мл)
Соединение Х= (в форме свободной кислоты) Вторичный кислый фосфат натрия Первичный кислый фосфат натрия Полиэтиленгликоль 400 01 н. раствор гидроксида натрия (подведение рН до 7,0-7,5)
Вода для инъекций (6) Аэрозоль
Соединение Х=
Олеиновая кислота
Т рихлормонофторметан
Дихлордифторметан
Дихлортетрафторэтан мг/мл
10,0
0,3
1,1
200,0 сколько требуется сколько требуется до 1 мл мг/баллон
20,0
10,0
5,000,0
10,000,0
5,000,0
Вышеуказанные препараты можно приготовить с использованием стандартных методик, хорошо известных в области фармацевтики.
Биологические способы анализа.
Активность Νδ3-фермента.
Комплекс очищенной Ж3-протеазы и пептида Νδ4Α инкубировали с последовательными разведениями соединений согласно настоящему изобретению в ΌΜ^ (в качестве растворителя). Реакции запускали путем добавления меченого пептидного субстрата, и измеряли кинетику увеличения флуоресценции. Для вычисления ИК50 строили кривую скорости увеличения флуоресценции с использованием модели нелинейной регрессии. Сначала анализировали активность в отношении протеазы генотипа 1Ь. В зависимости от эффективности, полученной с использованием протеазы 1Ь, дополнительно можно проанализировать протеазы других генотипов (1а, 2а, 3) и/или ферменты, устойчивые к ингибиторам протеаз (мутанты Ό168Υ, Ό168ν или А156Т). При всех анализах в качестве контроля использовали В1БЖ2061. Данный способ анализа применяли для оценки соединений, полученных в примерах, найденные значения ИК50 составляли менее чем приблизительно 1 мкМ.
Эффективность репликации и цитотоксичность.
Клетки Ний-1ис (стабильно реплицирующийся репликон Вайеп8сЫадег'5 13891ис-иЫ-пео/Ж3-3'/ЕТ с генотипом 1Ь) в течение 72 ч обрабатывали соединениями согласно настоящему изобретению, используя последовательные разведения указанных соединений (в качестве растворителя использовали ΌΜ^). Количество копий репликона измеряли с помощью биолюминесценции, вычисление ΕС50 выполняли с использованием нелинейной регрессионной модели. Параллельно по планшетам, которые обрабатывали теми же соединениями, используя те же разведения, определяли цитотоксичность соединений с применением системы анализа жизнеспособности клеток Се11Тйег-01о фготеда). В зависимости от эффективности ингибирования репликона 1Ь, соединения можно проанализировать с использованием репликона с генотипом 1а и/или устойчивых к ингибиторам репликонов, кодирующих мутации Ό168Υ или А156Т. При всех анализах в качестве контроля использовали В1Ь^2061. Данный способ анализа использовали для оценки соединений, полученных в примерах 1-81, найденные значения ΕС50 обычно составляли приблизительно менее 5 мкМ.
Влияние белков сыворотки на эффективность репликации.
Анализ репликации выполняли в обычной среде для клеточных культур (ΌΜΕΜ (модифицированная по способу Дульбекко среда Игла) + 10% ЕВЗ (эмбриональная сыворотка телят)) с добавлением сывороточного альбумина человека (40 мг/мл) или гликопротеина а-кислоты (1 мг/мл) в физиологических концентрациях. Для определения относительной эффективности репликации ΕС50 в присутствии белков сыворотки человека сравнивали с ΕС50 при использовании обычной среды.
Ферментативная селективность.
Степень ингибирования протеаз млекопитающих, включая панкреатическую эластазу свиньи, лейкоцитарную эластазу человека, протеазу 3 и катепсин Ό, измеряли при концентрации Кт, используя соответствующие субстраты для каждого из ферментов. Количественную оценку избирательности получали путем сравнения значений ИК50 для каждого из указанных ферментов со значением ИК50, полученным для Νδ31Ь-протеазы.
Цитотоксичность, измеренная на МТ-4 клетках.
Клетки МТ4 в течение 5 суток обрабатывали соединениями согласно настоящему изобретению, с использованием последовательных разведений указанных соединений. По окончании обработки измеряли жизнеспособность клеток с применением системы анализа Се11Тйег-01о ^гошеда^ вычисление ΕС50 выполняли с использованием модели нелинейной регрессии.
Концентрация соединений, ассоциированных с клетками, при ΕС50.
Культуры Ний-1ис инкубировали с добавлением соединением в концентрации, равной ΕС50. В по- 98 025794 следовательные моменты времени (в интервале 0-72 ч) клеточные пробы промывали (2х) холодной средой и экстрагировали 85% ацетонитрилом, в эти же моменты времени также экстрагировали пробы среды. Клеточные экстракты и экстракты среды анализировали с помощью ЖХ/МС/МС для определения молярной концентрации соединений в каждой фракции.
Растворимость и стабильность.
Растворимость определяли путем отбора аликвоты из исходного 10 мМ раствора в ЭМ§О и приготовления тест-раствора (РВ§ (фосфатно-солевой буфер), рН 7,4 и 0,1н. НС1, рН 1,5), содержащего соединение в конечной концентрации 100 мкМ и ЭМ§О в конечной концентрации 1%. Полученные тестрастворы инкубировали при комнатной температуре с перемешиванием в течение 1 ч. Затем растворы центрифугировали, и полученные супернатанты анализировали с использованием ВЭЖХ/УФ. Растворимость вычисляли путем сравнения количества соединения, обнаруживаемого в тест-растворе, с количеством соединения, обнаруживаемым в ЭМ§О при той концентрации. Также определяли стабильность соединений после инкубации в течение 1 ч в среде для тестирования при 37°С.
Стабильность в криоконсервированных гепатоцитах человека, собаки и крысы.
Каждое соединение инкубировали в течение 1 ч в суспензии гепатоцитов (100 мкл, 80000 клеток на лунку) при 37°С. Криоконсервированные гепатоциты ресуспендировали в культуральной среде без сыворотки. Суспензию переносили в 96-луночные планшеты (50 мкл/на лунку). Соединения разбавляли инкубационной средой до концентрации 2 мкМ и добавляли к суспензии гепатоцитов в момент начала инкубации. Пробы отбирали через 0, 10, 30 и 60 мин после начала инкубации, реакцию останавливали путем добавления 0,3% муравьиной кислоты в смеси, состоящей из 90% ацетонитрила и 10% воды. Концентрацию соединения в каждой пробе анализировали с использованием ЖХ/МС/МС. Время полуудаления соединения в суспензии гепатоцитов определяли путем аппроксимации кривой концентрация-время с применением однопараметрической экспоненциальной функции. Полученные данные также пересчитывали для оценки внутрипеченочного клиренса и/или общего печеночного клиренса.
Стабильность во фракции §9 печени человека, собаки и крысы.
Каждое соединение инкубировали в течение 1 ч в §9-суспензии (500 мкл, 3 мг белка/мл) при 37°С (п=3). Отсчет времени начинали с момента добавления соединения в §9-суспензию. Пробы отбирали через 0, 10, 30 и 60 мин после начала инкубации. Концентрацию соединения в каждой пробе анализировали с использованием ЖХ/МС/МС. Время полуудаления соединения в §9-суспензии определяли путем аппроксимации кривой концентрация-время однопараметрической с применением экспоненциальной функции.
Сасо-2-проницаемость.
Измеряли как прямую (А-в-В), так и обратную (В-в-А) проницаемость. Монослои Сасо-2 выращивали до конфлюентности клеток в 12-луночных планшетах Со51аг Тгап5^е11® на микропористых поликарбонатных мембранах, покрытых коллагеном. Дозы соединений наносили на апикальную сторону для измерения прямой проницаемости (А-в-В) или на базолатеральную сторону для измерения обратной проницаемости (В-в-А). Клетки инкубировали при 37°С в термостате во влажной атмосфере, содержащей 5% СО2. В начале инкубации, через 1 ч и через 2 ч после начала инкубации из приемной камеры отбирали аликвоты объемом 200 мкл и заменяли их свежим буфером для анализа. Концентрацию соединения в каждой пробе определяли с использованием ЖХ/МС/МС. Вычисляли кажущуюся проницаемость (Рарр).
Связывание с белками плазмы крови.
Связывание с белками плазмы измеряли с использованием равновесного диализа. Каждое соединение инокулировали в плазму до конечной концентрации 2 мкМ. Инокулированную плазму и фосфатный буфер размещали с противоположных сторон собранных диализных ячеек, которые затем медленно вращали в водяной бане (37°С). В конце инкубации определяли концентрацию соединения в плазме и фосфатном буфере. Используя следующее уравнение, вычисляли процент несвязанного соединения
Г С, % Несвязанного соединения = ЮО· --— (С,. + С/ где Сг и СЬ - концентрации свободного и связанного соединения, которые представляют собой последиализные концентрации соединения в буфере и плазме соответственно.
СУР450-профиль.
Каждое соединение инкубировали с каждым из 5 рекомбинантных ферментов СУР450 человека, включая СУР1Л2, СУР2С9, СУР3А4, СУР2Э6 и СУР2С19, в присутствии НАДФ(Н) (восстановленного никотинамидадениндинуклеотидфосфата) или без НАДФ(Н). Пробы последовательно отбирали из инкубационной смеси в начальный момент и через 5, 15, 30, 45 и 60 мин после начала инкубации. Концентрацию соединения в инкубационной смеси определяли с помощью ЖХ/МС/МС. Долю соединения, которая остается после инкубации в течение указанных периодов времени, вычисляли путем сравнивания с пробой, взятой в начале инкубации.
- 99 025794
Стабильность в плазме крови крысы, собаки, обезьяны и человека.
Соединения инкубировали в плазме (крысы, собаки, обезьяны и человека) при 37°С в течение 2 ч. Соединения добавляли в плазму до конечной концентрации 1 и 10 мкг/мл. Аликвоты отбирали через 0, 5, 15, 30, 60 и 120 мин после добавления соединения. Концентрацию соединений и его основных метаболитов в каждой из аликвот, отобранных в указанные моменты времени, измеряли путем ЖХ/МС/МС.
Все публикации, патенты и патентные документы включены в данное описании посредством ссылки, как если бы для каждой публикации, патента или патентного документа в отдельности было указано, что она/он включена/включен в данное описание посредством ссылки. Изобретение описано посредством ссылки на различные конкретные и предпочтительные воплощения и методики. Однако следует понимать, что может быть сделано много других вариаций и модификаций, которые не выходят за пределы существа и объема изобретения.

Claims (16)

1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из
100 025794
- 101 025794
102 025794
- 103 025794
- 104 025794
- 105 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 106 025794
С1 или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
- 107 025794
5. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 108 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
7. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
8. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 109 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
10. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 110 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
11. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 111 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
12. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
13. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 112 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
14. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемая соль.
- 113 025794
17. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 114 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
18. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из
- 115 025794 или его фармацевтически приемлемая соль.
EA201490132A 2007-06-29 2008-06-26 Противовирусные соединения EA025794B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US93775207P 2007-06-29 2007-06-29
US95977107P 2007-07-16 2007-07-16
US3798808P 2008-03-19 2008-03-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490132A1 EA201490132A1 (ru) 2014-06-30
EA025794B1 true EA025794B1 (ru) 2017-01-30

Family

ID=40121200

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200971078A EA019749B1 (ru) 2007-06-29 2008-06-26 Противовирусные соединения
EA201490132A EA025794B1 (ru) 2007-06-29 2008-06-26 Противовирусные соединения

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200971078A EA019749B1 (ru) 2007-06-29 2008-06-26 Противовирусные соединения

Country Status (19)

Country Link
US (5) US8178491B2 (ru)
EP (1) EP2162431B1 (ru)
JP (3) JP5465666B2 (ru)
KR (2) KR101596524B1 (ru)
CN (1) CN101790524B (ru)
AP (1) AP2874A (ru)
AR (1) AR067442A1 (ru)
AU (1) AU2008271116B2 (ru)
BR (1) BRPI0813500A2 (ru)
CA (1) CA2691442C (ru)
CO (1) CO6251245A2 (ru)
EA (2) EA019749B1 (ru)
EC (1) ECSP109904A (ru)
IL (2) IL202764A (ru)
MX (1) MX2009013827A (ru)
NZ (1) NZ582096A (ru)
TW (1) TWI395746B (ru)
UA (1) UA98494C2 (ru)
WO (1) WO2009005676A2 (ru)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY140680A (en) * 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
RU2008152171A (ru) 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
KR101596524B1 (ko) * 2007-06-29 2016-02-22 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 화합물
AR070413A1 (es) * 2008-02-04 2010-04-07 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores macrociclicos de proteasa de serina
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
UA103496C2 (ru) 2008-09-17 2013-10-25 Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх Комбинация ингибитора протеазы ns3 hcv с интерфероном и рибавирином
EP2344487A4 (en) * 2008-09-23 2012-03-21 Boehringer Ingelheim Int HEPATITIS C INHIBITOR COMPOUNDS
JP2012520891A (ja) * 2009-03-19 2012-09-10 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング スルホニルキノリンの製造方法
TW201040181A (en) 2009-04-08 2010-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
US8633320B2 (en) * 2009-05-05 2014-01-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing bromo-substituted quinolines
US8232246B2 (en) 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
AR077712A1 (es) 2009-08-05 2011-09-14 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores de serina proteasa macrociclica
NZ598465A (en) 2009-10-30 2013-10-25 Boehringer Ingelheim Int Dosage regimens for hcv combination therapy comprising bi201335, interferon alpha and ribavirin
US8476225B2 (en) 2009-12-04 2013-07-02 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
AR082453A1 (es) 2010-04-21 2012-12-12 Novartis Ag Compuestos de furopiridina, composiciones farmaceuticas que los contienen y usos de los mismos
WO2012047764A1 (en) * 2010-10-04 2012-04-12 Intermune, Inc. Therapeutic antiviral peptides
US20130273005A1 (en) * 2010-12-20 2013-10-17 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating hcv
PE20140039A1 (es) 2010-12-30 2014-03-01 Enanta Pharm Inc Inhibidores de serina proteasa de hepatitis c a base de macrociclicos de fenantridina
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
TW201309690A (zh) 2011-02-10 2013-03-01 Idenix Pharmaceuticals Inc 巨環絲胺酸蛋白酶抑制劑，其醫藥組合物及其於治療ｈｃｖ感染之用途
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
CA2840242C (en) 2011-09-16 2019-03-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating hcv
GB2506086A (en) 2011-10-21 2014-03-19 Abbvie Inc Methods for treating HCV comprising at least two direct acting antiviral agent, ribavirin but not interferon
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
ES2527544T1 (es) 2011-10-21 2015-01-26 Abbvie Inc. Tratamiento mono (PSI-7977) o de combinación con AAD para su uso en el tratamiento del VHC
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
CA2856722C (en) 2011-11-30 2022-11-22 Emory University Antiviral jak inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
US20150166498A1 (en) * 2012-05-29 2015-06-18 Nai Inc. Dihydroorotic acid dehydrogenase inhibitor
UA119315C2 (uk) 2012-07-03 2019-06-10 Гіліад Фармассет Елелсі Інгібітори вірусу гепатиту с
US20140100364A1 (en) 2012-10-08 2014-04-10 Abbvie Inc. Compounds Useful For Making HCV Protease Inhibitors
MA37992B1 (fr) 2012-10-19 2018-09-28 Bristol Myers Squibb Co Composes inhibiteurs de protéase ns3 pour une utilisation dans le traitement de l’infection par le virus de l'hépatite c.
EP2914613B1 (en) 2012-11-02 2017-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9334279B2 (en) 2012-11-02 2016-05-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2914614B1 (en) 2012-11-05 2017-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
CN105748499B (zh) 2013-01-31 2018-12-28 吉利德制药有限责任公司 两个抗病毒化合物的联用制剂
US9580463B2 (en) 2013-03-07 2017-02-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9617310B2 (en) * 2013-03-15 2017-04-11 Gilead Sciences, Inc. Inhibitors of hepatitis C virus
US11814664B2 (en) 2013-05-24 2023-11-14 Genomatica, Inc. Microorganisms and methods for producing (3R)-hydroxybutyl (3R)-hydroxybutyrate
MX2016002185A (es) 2013-08-27 2016-06-06 Gilead Pharmasset Llc Formulacion combinada de dos compuestos antivirales.
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
CN103965286B (zh) * 2014-04-22 2017-11-03 南京安赛莱医药科技有限公司 丙型肝炎病毒（hcv）ns3蛋白酶抑制剂
US20190022116A1 (en) 2014-12-26 2019-01-24 Emory University N4-Hydroxycytidine and Derivatives and Anti-Viral Uses Related Thereto
CN105646208B (zh) * 2016-02-24 2018-10-16 潍坊晶润化工股份有限公司 丙酮酸甲酯的制备方法
WO2017189978A1 (en) 2016-04-28 2017-11-02 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
CN109562113A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的螺环降解决定子体
EP3454856A4 (en) 2016-05-10 2019-12-25 C4 Therapeutics, Inc. HETEROCYCLIC DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
EP3455218A4 (en) 2016-05-10 2019-12-18 C4 Therapeutics, Inc. C3 CARBON-BASED GLUTARIMIDE DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
SG11201809893WA (en) 2016-05-27 2018-12-28 Gilead Sciences Inc Methods for treating hepatitis b virus infections using ns5a, ns5b or ns3 inhibitors
BR102017011025A2 (pt) 2016-06-02 2017-12-19 Gilead Pharmasset Llc Formulation of combination of three antiviral compounds
CA3082191C (en) 2017-12-07 2021-09-21 Emory University N4-hydroxycytidine and derivatives and anti-viral uses related thereto
CN109796736B (zh) * 2018-12-25 2021-05-18 金发科技股份有限公司 一种聚碳酸酯组合物及其制备方法和应用

Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009543A2 (en) * 1998-08-10 2000-02-24 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
WO2000059929A1 (en) * 1999-04-06 2000-10-12 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
WO2004032827A2 (en) * 2002-05-20 2004-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2004094452A2 (en) * 2003-04-16 2004-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
WO2004093798A2 (en) * 2003-04-18 2004-11-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2005037214A2 (en) * 2003-10-14 2005-04-28 Intermune, Inc. Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of hcv replication
WO2005070955A1 (en) * 2004-01-21 2005-08-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
WO2005095403A2 (en) * 2004-03-30 2005-10-13 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
WO2006020276A2 (en) * 2004-07-16 2006-02-23 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
WO2007001406A2 (en) * 2004-10-05 2007-01-04 Chiron Corporation Aryl-containing macrocyclic compounds
WO2007008657A2 (en) * 2005-07-11 2007-01-18 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2007015824A2 (en) * 2005-07-25 2007-02-08 Intermune, Inc. Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2007044933A1 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1230595B (it) * 1988-10-24 1991-10-28 Ausimont Srl Perossiacidi immido derivati
US5610054A (en) * 1992-05-14 1997-03-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic RNA molecule targeted against Hepatitis C virus
MY147327A (en) * 1995-06-29 2012-11-30 Novartis Ag Somatostatin peptides
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
US5658940A (en) * 1995-10-06 1997-08-19 Celgene Corporation Succinimide and maleimide cytokine inhibitors
US5633388A (en) * 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
WO1997043310A1 (en) 1996-05-10 1997-11-20 Schering Corporation Synthetic inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
AP1019A (en) 1996-10-18 2001-10-16 Vertex Pharma Inhibitors of serinre proteases, particularly hepatitis C virus NS3 protease.
GB9623908D0 (en) * 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
AU7127298A (en) 1997-04-14 1998-11-11 Emory University Serine protease inhibitors
GB9707659D0 (en) 1997-04-16 1997-06-04 Peptide Therapeutics Ltd Hepatitis C NS3 Protease inhibitors
HUP0100100A3 (en) 1997-08-11 2001-12-28 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Hepatitis c inhibitor peptide analogues, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
IL134232A0 (en) 1997-08-11 2001-04-30 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Hepatitis c inhibitor peptides
IT1299134B1 (it) 1998-02-02 2000-02-29 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per la produzione di peptidi con proprieta' inibitrici della proteasi ns3 del virus hcv, peptidi cosi' ottenibili e peptidi
EP1066247B1 (en) 1998-03-31 2006-11-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
GB9812523D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Angeletti P Ist Richerche Bio Peptide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
ES2244204T3 (es) 1998-07-27 2005-12-01 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Derivados de dicetoacidos como inhibidores de polimerasas.
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
KR20010099623A (ko) 1998-08-21 2001-11-09 비로파마 인코포레이티드 바이러스 감염 및 관련 질병을 치료 또는 예방하는화합물, 조성물 및 방법
BR9913406A (pt) 1998-09-04 2002-01-29 Viropharma Inc Processo de tratamento de infecção causada por pelo menos um vìrus da famìlia flaviviridae e de doença associada com a citada infecção em um hospedeiro vivo possuindo a citada infecção
CN1324212A (zh) 1998-09-25 2001-11-28 维洛药品公司 治疗或预防病毒感染及有关疾病的方法
US6608027B1 (en) * 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
US6566365B1 (en) 1999-11-04 2003-05-20 Biochem Pharma Inc. Method for the treatment of Flaviviridea viral infection using nucleoside analogues
ID30204A (id) 1999-12-27 2001-11-15 Japan Tobacco Inc Senyawa-senyawa cincin terfusi dan penggunaannya sebagai obat
WO2001085172A1 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Smithkline Beecham Corporation Novel anti-infectives
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
GB0017676D0 (en) 2000-07-19 2000-09-06 Angeletti P Ist Richerche Bio Inhibitors of viral polymerase
WO2002060926A2 (en) 2000-11-20 2002-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c tripeptide inhibitors
US6867185B2 (en) * 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
CA2369711A1 (en) 2002-01-30 2003-07-30 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2369970A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US6828301B2 (en) 2002-02-07 2004-12-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
DE60334205D1 (en) * 2002-05-20 2010-10-28 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische sulfonamid-hepatitis-c-virus-hemmer
PL213029B1 (pl) * 2002-05-20 2012-12-31 Bristol Myers Squibb Co Podstawiona pochodna cykloalkilowa, zawierajaca ja kompozycja oraz ich zastosowanie
EP1590442A4 (en) 2003-02-07 2007-07-18 Enanta Pharm Inc MACROCYCLIC HEPATITIS C SERIN PROTEASE INHIBITORS
ES2354282T3 (es) 2003-03-05 2011-03-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Análogos peptídicos inhibidores de la hepatitis c.
CA2516016C (en) * 2003-03-05 2012-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibiting compounds
JP4231524B2 (ja) * 2003-04-10 2009-03-04 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 大環状化合物の製造方法
BRPI0410456B8 (pt) 2003-05-21 2021-05-25 Boehringer Ingelheim Int compostos inibidores de hepatite c, composição farmacêutica, uso dos mesmos, bem como artigo de fabricação
WO2004113365A2 (en) 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7125845B2 (en) 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
ATE512971T1 (de) 2004-07-20 2011-07-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga als hepatitis c-hemmer
UY29016A1 (es) 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW200738742A (en) 2005-07-14 2007-10-16 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
TWI389908B (zh) 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
KR101596524B1 (ko) * 2007-06-29 2016-02-22 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 화합물

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009543A2 (en) * 1998-08-10 2000-02-24 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
WO2000059929A1 (en) * 1999-04-06 2000-10-12 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
WO2004032827A2 (en) * 2002-05-20 2004-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2004094452A2 (en) * 2003-04-16 2004-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
WO2004093798A2 (en) * 2003-04-18 2004-11-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2005037214A2 (en) * 2003-10-14 2005-04-28 Intermune, Inc. Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of hcv replication
WO2005070955A1 (en) * 2004-01-21 2005-08-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
WO2005095403A2 (en) * 2004-03-30 2005-10-13 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
WO2006020276A2 (en) * 2004-07-16 2006-02-23 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
WO2007001406A2 (en) * 2004-10-05 2007-01-04 Chiron Corporation Aryl-containing macrocyclic compounds
WO2007008657A2 (en) * 2005-07-11 2007-01-18 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2007015824A2 (en) * 2005-07-25 2007-02-08 Intermune, Inc. Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2007044933A1 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CN101790524A (zh) 2010-07-28
US20120190866A1 (en) 2012-07-26
WO2009005676A2 (en) 2009-01-08
JP2013227323A (ja) 2013-11-07
MX2009013827A (es) 2010-03-01
KR20150006905A (ko) 2015-01-19
AU2008271116A1 (en) 2009-01-08
BRPI0813500A2 (pt) 2015-01-06
EA201490132A1 (ru) 2014-06-30
WO2009005676A3 (en) 2009-03-05
TWI395746B (zh) 2013-05-11
NZ582096A (en) 2012-05-25
US20090257978A1 (en) 2009-10-15
EP2162431B1 (en) 2017-06-07
KR20100057778A (ko) 2010-06-01
EA200971078A1 (ru) 2010-10-29
AR067442A1 (es) 2009-10-14
IL202764A (en) 2016-07-31
CN101790524B (zh) 2014-07-16
JP2010532351A (ja) 2010-10-07
EP2162431A2 (en) 2010-03-17
AP2010005107A0 (en) 2010-02-28
TW200916459A (en) 2009-04-16
AU2008271116B2 (en) 2012-09-20
CA2691442C (en) 2014-01-21
US20150080569A1 (en) 2015-03-19
IL202764A0 (en) 2010-06-30
JP2015057435A (ja) 2015-03-26
US20130053577A1 (en) 2013-02-28
US20130274439A1 (en) 2013-10-17
CA2691442A1 (en) 2009-01-08
EA019749B1 (ru) 2014-06-30
KR101596524B1 (ko) 2016-02-22
ECSP109904A (es) 2010-03-31
UA98494C2 (ru) 2012-05-25
CO6251245A2 (es) 2011-02-21
US8420597B2 (en) 2013-04-16
US8283442B2 (en) 2012-10-09
US8178491B2 (en) 2012-05-15
JP5763126B2 (ja) 2015-08-12
IL246547A0 (en) 2016-08-31
JP5465666B2 (ja) 2014-04-09
US8809266B2 (en) 2014-08-19
AP2874A (en) 2014-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA025794B1 (ru) Противовирусные соединения
AU2020286299B2 (en) Polycyclic-carbamoylpyridone compounds and their pharmaceutical use
CA2692145C (en) Antiviral compounds
EP1742642B1 (en) Phosphonate analogs of hiv integrase inhibitor compounds
US20170044192A1 (en) Antiviral beta-amino acid ester phosphodiamide compounds
EA018098B1 (ru) Фосфинатные соединения (варианты)
EA034749B1 (ru) Противовирусные соединения
CA3112326A1 (en) Antiviral pyridopyrazinedione compounds
US10676497B2 (en) Type of taxane compound, preparation method and application thereof
CN112218878A (zh) Ntcp抑制剂
AU2014200403B2 (en) Antiviral compounds
AU2012265598A1 (en) Antiviral compounds

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU