NO325273B1 - GLP-1-derivater - Google Patents

GLP-1-derivater Download PDF

Info

Publication number
NO325273B1
NO325273B1 NO19990950A NO990950A NO325273B1 NO 325273 B1 NO325273 B1 NO 325273B1 NO 19990950 A NO19990950 A NO 19990950A NO 990950 A NO990950 A NO 990950A NO 325273 B1 NO325273 B1 NO 325273B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
glp
arg26
arg
lys
derivative according
Prior art date
Application number
NO19990950A
Other languages
English (en)
Other versions
NO990950D0 (no
NO990950L (no
Inventor
Per Franklin Nielsen
Liselotte Bjerre Knudsen
Per Olaf Huusfeldt
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27221005&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO325273(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of NO990950D0 publication Critical patent/NO990950D0/no
Publication of NO990950L publication Critical patent/NO990950L/no
Publication of NO325273B1 publication Critical patent/NO325273B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin

Description

Oppfinnelsens område
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye derivater av humant glukagonlignende peptid-1 (GLP-1) og analoger av slike som har en langvarig virkningsprofil, og farmasøytisk preparat og anvendelse av dem.
Oppfinnelsens bakgrunn
Peptider har utstrakt anvendelse innen medisinsk praksis og ettersom de kan fremstilles ved hjelp av teknologi med rekombinant DNA, kan det forventes at deres betydning vil øke også i årene som kommer. Når naturlig forekommende peptider eller analoger derav anvendes i terapi, finnes det generelt at de fjernes hurtig fra blodet. Hurtig fjerning fra blodet av et terapeutisk middel er ubeleilig i tilfeller hvor det er ønsket å opprettholde et høyt blodnivå derav over et langvarig tidsrom, ettersom gjentatte administreringer da vil være nødvendig. Eksempler på peptider som fjernes hurtig fra blodet, er: ACTH, kortikotropinfrigjørende faktor, angiotensin, kalsitonin, insulin, glukagon, glukagonlignende peptid-1, glukagonlignende peptid-2, insulinlignende vekstfaktor-1, insulinlignende vekstfaktor-2, gastrisk inhibitorpeptid, veksthormonfrigjørende faktor, hypofyseadenylatsyklaseaktiverende peptid, sekretin, enterogastrin, somatostatin, somatotropin, somatomedin, paratyroidhormon, trombopoietin, erytropoietin, hypotalamusfrigjørende faktorer, prolaktin, tyroidstimulerende hormoner, endorfiner, enkefaliner, vasopressin, oksytocin, opioder og analoger derav, superoksiddismutase, interferon, asparaginase, arginase, arginindeaminase, adenosindeaminase og ribonuklease. I noen tilfeller er det mulig å påvirke frigjørelsesprofilen til peptider ved å tilføre egnede farmasøytiske preparater, men denne fremgangsmåten har forskjellige ulemper og er ikke generelt anvendbar.
Hormonene som regulerer insulinutskillelse tilhører den såkalte enteroinsularaksen, som betegner en gruppe hormoner frigjort fra mage- og tarmkanalslimhinnen som svar på tilstedeværelsen og absorpsjonen av næringsstoffer i tarmen, som fremmer en tidlig og forsterket frigjørelse av insulin.
Den forsterkende effekt på insulinutskillelse, den såkalte inkretineffekten, er sannsynligvis av avgjørende betydning for en normal glukose toleranse. Mange av mage-og tarmkanalhormonene, inkludert gastrin og sekretin (kolecystokinin er ikke insulinotrop hos mennesket) er insulinotrope, men de eneste fysiologisk betydningsfulle, de som er ansvarlige for inkretineffekten, er det glukoseavhengige, insulinotrope polypeptid, GIP, og glukagonlignende peptid-1 (GLP-1). Pga. den insulinotrope effekt tiltrakk GIP, isolert i 1973 (1) umiddelbart betydelig interesse blant sukkersykeforskere. Et stort antall undersøkelser utført i løpet av de etterfølgende år, indikerte imidlertid klart at en mangelfull utskillelse av GIP ikke var involvert i patogenesen av insulinavhengig diabetes mellitus (IDDM) eller ikke-insulinavhengig diabetes mellitus (NIDDM) (2). Som er insulinotropt hormon ble dessuten GIP funnet å være nesten ineffektivt ved NIDDM (2). Det andre inkretinhormonet, GLP-1, er det sterkeste insulinotrope stoff som er kjent (3). I motsetning til GIP er det overraskende effektivt ved stimulering av insulinutskillelse hos NIDDM-pasienter. I tillegg og i motsetning til de øvrige insulinotrope hormonene (muligens med unntak av sekretin), inhiberer det også sterkt glukagonutskillelse. Pga. disse virkningene har det uttalte blodglukosesenkende effekter, særlig hos pasienter med NIDDM.
GLP-1, et produkt av proglukagonet (4), er ett av de yngste medlemmene av
. sekretin-VIP-familien av peptider, men er allerede etablert som et viktig tarmhormon med regulerende virkning i glukosemetabolisme og mage- og tarmkanalutskiHelse og - metabolisme (5). Glukagongenet prosesseres forskjellig i bukspyttkjertelen og tynntarmen. I bukspyttkjertelen (9) fører prosesseringen til dannelsen og parallellutskillelsen av 1) glukagon selv, som opptar stillingene 33-61 i proglukagon (PG); 2) et N-terminalt peptid med 30 aminosyrer [PG (1-30)] som ofte kalles glicentinrelatert pankreatisk peptid, GRPP (10, 11); 3) et heksapeptid som tilsvarer PG (64-69); 4) og til sist det såkalte hovedproglukagonfragment [PG (72-158)], hvor de to glukagonlignende sekvensene er begravd (9). Glukagon synes å være det eneste biologisk aktive produkt. I motsetning til dette er det i tarmslimhinnen glukagon som er begravd i et stort molekyl, mens de to glukagonlignende peptidene dannes hver for seg (8). De følgende produkter dannes og utskilles parallelt: 1) glicentin, som tilsvarer PG (1-69), hvor glukagonsekvensen opptar restene nr. 33-61 (12); 2) GLP-1 (7-36)amid (PG (78-107) )amid (13), ikke som opprinnelig antatt PG (72-107)amid eller 108, som er inaktivt). Små mengder av C-terminalt glycinforlenget, men like bioaktivt GLP-l(7-37), (PG(78-108) ) dannes også (14); 3) intervenerende peptid-2 (PG(lll-122)amid) (15); og 4) GLP- 2 (PG(126-158)) (15, 16). En fraksjon av glicentin spaltes videre til GRPP (PG(l-30)) og oksyntomodulin (PG (33-69)) (17, 18). Av disse peptidene har GLP-1 de tidligst biologiske virkningene.
Ettersom det utskilles parallelt med glicentin/enteroglukagon, følger det at de mange undersøkelsene av enteroglukagonutskillelse (6, 7) i en viss utstrekning også gjelder for GLP-1-utskillelse, men GLP-1 metaboliseres hurtigere med en plasmahalveringstid hos mennesker på 2 min (19). Karbohydrat- eller fettrike måltider stimulerer utskillelse (20), sannsynligvis som et resultat av direkte interaksjon av ennå uabsorberte næringsstoffer med mikrovillien i L-cellene av åpen type i tarmslimhinnen. Endokrin- eller nervemekanismer som fremmer GLP-1-utskillelse, kan foreligge, men har ennå ikke blitt demonstrert hos mennesker.
Inkretinfunksjonen til GLP-1 (29-31) er blitt klart illustrert i forsøk med GLP-1 - reseptorantagonisten, eksendin 9-39, som dramatisk reduserer inkretineffekten utløst ved hjelp av oral glukose hos rotter (21, 22). Hormonet reagerer direkte med Ø-cellene via GLP-1-reseptoren (23) som tilhører glukagon/VIP/kalsitonin-familien av G-proteinkoblede 7-transmembranomfattende reseptorer. Viktigheten av GLP-1-reseptoren når det gjelder å regulere insulinutskillelse, ble illustrert i nyere forsøk hvor en målrettet avbryting av GLP-1-reseptorgenet ble utført hos mus. Dyr som er homozygote for avbrytelsen, hadde svært forstyrret glukosetoleranse og fastehyperglykemi, og selv heterozygote dyr var glukoseintolerante (24). Signaloverføringsmekanismen (25) involverer primært aktivering av adenylatsyklase, men forhøyelser av intracellulære Ca<2+>er også av avgjørende betydning (25, 26). Virkningen av hormonet beskrives best som en forsterkelse av glukosestimulert insulinfrigjørelse (25), men mekanismen som kobler glykose- og GLP-1-stimulering er ikke kjent. Den kan omfatte en kalsiumindusert kalsiumfrigjørelse (26, 27). Som allerede nevnt er den insulinotrope virkning av GLP-1 bevart i diabetiske p-celler. Forholdet mellom den sist nevnte og dens evne til å bibringe "glukosekompetanse" til isolerte, insulinutskillende celler (26, 28), som gir dårlig respons på glukose eller GLP-1 alene, men fullt ut til en kombinasjon av de to, er heller ikke kjent. Like viktig er det imidlertid at hormonet også sterkt inhiberer glukagonutskillelse (29). Mekanismen er ikke kjent, men synes å være parakrin, via insulin- eller somatostatinceller som er i nærheten av hverandre (25). Også den glukagonostatiske virkning er glukoseavhengig, slik at inhibitoreffekten avtar etter hvert som blodglukose avtar. Pga. denne dobbeltvirkningen dersom plasma-GLP-1-konsentrasjonene øker enten ved hjelp av forøkt utskillelse, eller ved hjelp av eksogen infusjon, økes det molare forhold mellom insulin og glukagon i blodet som når leveren via portblodomløpet, hvorved hepatisk glukoseproduksjon reduseres (30). Som et resultat avtar blodglukosekonsentrasjoner. Pga. glukoseavhengigheten til de insulinotrope og glukagonostatiske virkninger, er den glukosesenkende effekt selvbegrensende, og hormonet forårsaker derfor ikke hypoglykemi uansett dose (31). Effektene bevares hos pasienter med diabetes mellitus (32), hos hvem infusjoner av svakt suprafysiologiske doser av GLP-1 fullstendig kan normalisere blodglukoseverdier til tross for dårlig metabolsk kontroll og sekundær svikt til sulfonylurea (33). viktigheten av den glukagonostatiske effekt illustreres ved hjelp av det funn at GLP-1 også senker blodglukose hos sukkersykepasienter av type-1, uten rest-P-celleutskillelseskapasitet (34).
I tillegg til dens virkninger på bukspyttkjerteløyene har GLP-1 kraftige virkninger på mage- og tarmkanalen. Innsprøytet i fysiologiske mengder inhiberer GLP-1 sterkt pentagastrinindusert så vel som måltidsindusert magesyreutskillelse (35, 36). Den inhiberer også magetømmende hastighet og pankreatisk enzymutskillelse (36). Lignende inhibitoreffekter på mage- og bukspyttkjertelutskillelse og -motilitet, kan utløses hos mennesker etter perfusjon av tynntarmen med karbohydrat- eller lipidholdige oppløsninger (38, 38). Samtidig stimuleres GLP-1-utskillelse i stor grad, og det er blitt antatt at GLP-1 kan være i det minste delvis ansvarlig for denne såkalte "ilealbrudd"-effekt (38). Faktisk tyder nyere undersøkelser på at ilealbruddeffektene av GLP-1 fysiologisk sett kan være viktigere enn dens effekter på bukspyttkjerteløyene. Ved disse doseresponsundersøkelsene påvirker således GLP-1 magetømmingshastighet ved innsprøytningshastigheter som er minst så lave som de som kreves for å påvirke øyutskillelse (39).
GLP-1 synes å ha en effekt på matinntak. Intraventrikulær administrering av GLP-1 inhiberer i stor grad matinntak hos rotter (40, 42). Denne effekten synes å være svært spesifikk. N-terminalt forlenget GLP-1 (PG 72-107)amid er således inaktivt og passende doser av GLP-1-antagonisten, eksendin 9-39, ødelegger effektene av GLP-1 (41). Akutt, perifer administrering av GLP-1 inhiberer ikke matinntak akutt hos rotter (41, 42). Det er imidlertid stadig mulig at GLP-1 utskilt fra tynntarm-L-cellene også vil kunne virke som et metthetssignal.
Ikke bare de insulinotrope effektene, men også effektene av GLP-1 på mage- og tarmkanalen bevares hos sukkersykepasienter (43) og kan hjelpe til å innskrenke mål- tidsinduserte glukoseutslag, men vil også kunne påvirke matinntak, noe som er mer betydningsfullt. Administrert intravenøst, kontinuerlig i én uke, er GLP-1 ved 4 ng/kg/min blitt påvist å forbedre glykemisk kontroll dramatisk hos NIDDM-pasienter uten signifikante bivirkninger (44). Peptidet er fullstendig aktivt etter subkutan administrering (45), men nedbrytes hurtig hovedsakelig pga. nedbrytning ved hjelp av dipeptidylpeptidase-IV-lignende enzymer (46, 47).
Aminosyresekvensen til GLP-1 er blant annet angitt av Schmidt et al.
[Diabetologia, 28, 704-707 (1985)]. Selv om de interessante, farmakologiske egenskapene til GLP-1 (7-3 8) og analoger derav har tiltrukket mye oppmerksomhet i de senere år, er bare lite kjent om strukturen til disse molekylene. Sekundærstrukturen til GLP-1 i miceller er blitt beskrevet av Thorton et al. [Biochemistry, 33, 3532-3539
(1944)], men i normal oppløsning anses GLP-1 som et svært fleksibelt molekyl. Overraskende nok fant vi at derivatisering av dette forholdsvis lite og svært fleksible molekyl resulterte i forbindelser hvis plasmaprofil var svært langvarig og likevel hadde bibeholdt aktivitet.
GLP-1 og analoger av GLP-1 og fragmenter derav er potensielt anvendbare blant annet ved behandlingen av sukkersyke av type 1 og type 2. Den hurtige fjerning fra blodet begrenser imidlertid anvendbarheten av disse forbindelsene og det er således fortsatt et behov for forbedringer innen dette området. Følgelig er det ett formål ved foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe derivater av GLP-1 og analoger derav som har en langvarig virkningsprofil i forhold til GLP-1 (7-3 7). Det er et ytterligere formål ved oppfinnelsen å tilveiebringe derivater av GLP-1 og analoger derav som har en saktere fjerning fra blodet enn GLP-l(7-37). Det er et ytterligere formål ved oppfinnelsen å tilveiebringe et farmasøytisk preparat som omfatter en forbindelse ifølge oppfinnelsen, og å anvende en forbindelse ifølge oppfinnelsen for å tilveiebringe et slikt preparat. Det er også et formål ved foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en fremgangsmåte for behandling av insulinavhengig og ikke-insulinavhengig diabetes mellitus.
Litteraturhenvi snin ger
1. Pederson RA. Gastric Inhibitory Polypeptide. I Walsh JH, Dockray GJ (red.) Gut peptides: Biochemistry and Physiology. Raven Press, New York 1994, s. 217259. 2. Krarup T. Immunoreactive gastric inhibitory polypeptide. Endocr Rev 1988;9:122-134. 3. Orskov C. Glucagon-like peptide-1, a new hormone of the enteroinsular axis. Diabetologia 1992; 35:701-711. 4. Bell GI, Sanchez-Pescador R, Laybourn PJ, Najarian RC. Exon duplication and divergence in the human preproglucagon gene. Nature 1983; 304: 368-371. 5. Hoist JJ. Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) - a newly discovered GI hormone. Gastroenterology 1994; 107: 1848-1855. 6. Hoist JJ. Gut glucagon, enteroglucagon, gut GLI, glicentin - current status. Gastroenterology 198 3 ;84:1602-1613. 7. Hoist JJ, Orskov C. Glucagon and other proglucagon-derived peptides. In Walsh JH, Dockray GJ, eds. Gut peptides: Biochemistry and Physiology. Raven Press, New York, pp. 305-340, 1993. 8. Orskov C, Hoist JJ, Knuhtsen S, Baldissera FGA, Poulsen SS, Nielsen CV. Glucagon-like peptides GLP-1 and GLP-2, predicted products of the glucagon gene, are secreted separately from the pig small intestine, but not pancreas. Endocrinology 1986; 119:1467-1475. 9. Holst JJ, Bersani M, Johnsen AH, Kofod H, Hartmann B, Orskov C. Proglucagon processing in porcine and human pancreas. J Biol Chem, 1994; 269: 18827-1883. 10. Moody AJ, Hoist JJ, Thim L, Jensen SL. Relationship of glicentin to proglucagon and glucagon in the porcine pancreas. Nature 1981; 289: 514-516. 11. Thim L, Moody AJ, Purification and chemical characterisation of a glicentin-related pancreatic peptide (proglucagon fragment) from porcine pancreas. Biochim Biophys Acta 1982;703:134-141. 12. Thim L, Moody AJ. The primary structure of glicentin (proglucagon). Regul Pept 1981;2:139-151. 13. Orskov C, Bersani M, Johnsen AH, Hmjrup P, Hoist JJ. Complete sequences of glucagon-like peptide-1 (GLP1) from human and pig small intestine. J. Biol. Chem. 1989;264:12826-12829. 14. Orskov C, Rabenhoj L, Kofod H, Wettergren A, Hoist JJ. Production and secretion of amidated and glycineextended glucagon-like peptide-1 (GLP-1) in man. Diabetes 1991; 43:535-539. 15. Buhl T, Thim L, Kofod H, Orskov C, Harling H, & Hoist JJ: Naturally occurring products of proglucagon 111-160 in the porcine and human small intestine. J. Biol. Chem. 1988;263:8621-8624. 16. Q rskov C, Buhl T, Rabenhrj L, Kofod H, Hoist JJ: Carboxypeptidase-B-like processing of the C-terminus of glucagon-like peptide-2 in pig and human small intestine. FEBS letters, 1989;247:193-106. 17. Hoist JJ. Evidence that enteroglucagon (11) is identical with the C-terminal sequence (residues 33-69) of glicentin. Biochem J. 1980;187:337-343. 18. Bataille D, Tatemoto K, Gespach C, Jornvall H, Rosselin G, Mutt V. Isolation of glucagon-37 (bioactive enteroglucagon/oxyntomodulin) from porcine jejuno-ileum. Characterisation of the peptide. FEBS Lett 1982;146:79-86. 19. Orskov C, Wettergren A, Hoist JJ. The metabolic rate and the biological effects of GLP-1 7-36amide and GLP1 7-37 in healthy volunteers are identical. Diabetes 1993;42:658-661. 20. Elliott RM, Morgan LM, Tredger JA, Deacon S, Wright J, Marks V. Glucagon-like peptide-1 (7-36)amide and glucose-dependent insulinotropic polypeptide secretion in response to nutrient ingestion in man: acute post-prandial and 24-h secretion patterns. J Endocrinol 1993; 138: 159-166. 21. Kolligs F, Fehmann HC, Goke R, Goke B. Reduction of the incretin effect in rats by the glucagon-like peptidel receptor antagonist exendin (9-39)amide. Diabetes 1995; 44: 16-19. 22. Wang Z, Wang RM, Owji AA, Smith DM, Ghatei M, Bloom SR. Glucagon-like peptide-1 is a physiological incretin in rat. J. Clin. Invest. 1995; 95: 417-421. 23. Thorens B. Expression cloning of the pancreatic b cell receptor for the gluco-incretin hormone glucagon-like peptide 1. Proe Nati Acad Sei 1992;89:8641-4645. 24. Scrocchi L, Auerbach AB, JoynerAL, Drucker DJ. Diabetes in mice with targeted disruption of the GLP-1 receptor gene. Diabetes 1996; 45: 21 A. 25. Fehmann HC, Goke R, Goke B. Cell and molecular biology of the incretin hormones glucagon-like peptide-I (GLP-1) and glucose-dependent insulin releasing polypeptide (GIP). Endocrine Reviews, 1995; 16: 390-410. 26. Gromada J, Dissing S, Bokvist K, Renstrom E, Frokjaer-Jensen J, Wulff BS, Rorsman P. Glucagon-like peptide I increases cytoplasmic calcium in insulin-secreting bTC3-cells by enhancement of intracellularcalcium mobilisation. Diabetes 1995; 44: 767-774. 27. Holz GG, Leech CA, Habener JF. Activation of a cAMP-regulated Cat,--signaling pathway in pancreatic R-cells by the insulinotropic hormone glucagon-like peptide-1. J Biol Chem, 1996; 270: 17749-17759. 28. Holz GG, Ki hltreiber WM, Habener JF. Pancreatic beta-cells are rendered glucose competent by the insulinotropic hormone glucagon-like peptide-1(7-37). Nature 1993;361:362-365. 29. Q rskov C, Hoist JJ, Nielsen OV: Effect of truncated glucagon-like peptide-1 (proglucagon 78-107 amide) on endocrine secretion from pig pancreas, antrum and stomach. Endocrinology 1988;123:2009-2013. 30. Hvidberg A, Toft Nielsen M, Hilsted J, Orskov C, Hoist JJ. Effect of glucagon-like peptide-1 (proglucagon 78-107amide) on hepatic glucose production in healthy man. Metabolism 1994;43:104-108. 31. Qualmann C, Nauck M, Hoist JJ, Orskov C, Creutzfeldt W. Insulinotropic actions of intravenous glucagon-like peptide-1 [7-36 amide] in the fasting state in healthy subjects. Acta Diabetologica, 1995; 32: 13-16.. 32. Nauck MA, Heimesaat MM, Orskov C, Hoist JJ, Ebert R, Creutzfeldt W. Preserved incretin activity of GLP-1 (7-36amide) but not of synthetic human GIP in patients with type 2-diabetes mellitus. J Clin Invest 1993;91:301-307. 33. Nauck MA, Kleine N, Orskov C, Hoist JJ, Willms B, Creutzfeldt W. Normalisation of fasting hyperglycaemia by exogenous GLP-1 (7-36amide) in type 2-diabetic patients. Diabetologia 1993;36:741-744. 34. Creutzfeldt W, Kleine N, Willms B, Orskov C, Hoist JJ, Nauck MA. Glucagonostatic actions and reduction of fasting hyperglycaemia by exogenous glucagon-liem, peptide-1 (7-36amide) in type I diabetic patients. Diabetes Care 1996; 19: 580-586. 35. Schjoldager BTG, Mortensen PE, Christiansen J, Orskov C, Hoist JJ. GLP-1 (glucagon-like peptide-1) and truncated GLP-1, fragments of human proglucagon, inhibit gastric acid secretion in man. Dig. Dis. Sei. 1989; 35: 703-708. 36. Wettergren A, Schjoldager B, Mortensen PE, Myhre J, Christiansen J, Hoist JJ. Truncated GLP-1 (proglucagon 72-107amide) inhibits gastric and pancreatic functions in man. Dig Dis Sei 1993;38:665-673. 37. Layer P, HoistJJ, Grandt D, Goebell H: Ileal release of glucagon-like peptide-1 (GLP-1): association with inhibition of gastric acid in humans. Dig Dis Sei 1995; 40: 1074-1082.
i
38. Layer P, Holst JJ. GLP-1: A humoral mediator of the ilea) brake in humans? Digestion 1993; 54: 385-386. 39. Nauck M, Ettler R, Niedereichholz U, Orskov C, Holst JJ, Schmiegel W. Inhibition of gastric emptying by GLP1 (7-36 amide) or (7-37): effects on postprandial glycaemia and insulin secretion. Abstract. Gut 1995; 37 (suppl. 2): 5 A124. 40. Schick RR, vorm Walde T, Zimmermann JP, Schusdziarra V, Classen M. Giucagon-like peptide l-a novel brain peptide involved in feeding regulation. in Ditschuneit H, Gries FA, Hauner H, Schusdziarra V, Wechsler JG (eds.) Obesity in Europe. John Libbey & Company ltd, 1994; pp. 363-367. 41. Tang-Christensen M, Larsen PJ, Goke R, Fink-Jensen A, Jessop DS, Moller M, Sheikh S. Brain GLP-1 (7-36) amide receptors play a major role in regulation of food and water intake. Am. J. Physiol., 1996, in press. 42. Turton MD, 0'Shea D, Gunn I, Beak SA, Edwards CMB, Meeran K, et al. A role for glucagon-like peptide-1 in the regulation of feeding. Nature 1996; 379: 69-72. 43. Willms B, Werner J, Creutzfeldt W, Orskov C, Holst JJ, Nauck M. Inhibition of gastric emptying by glucagonlike peptide-1 (7-36 amide) in patients with type-2-diabetes mellitus. Diabetologia 1994; 37, suppl.l: Al 18. 44. Larsen J, Jallad N, Damsbo P. One-week continuous infusion of GLP-1 (7-37) improves glycaemic control in NIDDM. Diabetes 1996; 45, suppl. 2: 233A. 45. Ritzel R, Orskov C, Holst JJ, Nauck MA. Pharmacokinetic, insulinotropic, and glucagonostatic properties of GLP-1 [7-36 amide] after subcutaneous injection in healthy volunteers. Dose-response relationships. Diabetologia 25 1995; 38: 720-725. 46. Deacon CF, Johnsen AH, Holst JJ. Degradation of glucagon-like peptide-1 by human plasma in vitro yields an N-terminally truncated peptide that is a major endogenous metabolite in vivo. J Clin Endocrinol Metab 1995; 80: 952-957. 47. Deacon CF, Nauck MA, Toft-Nielsen M, Pridal L, Willms B, HoistJJ. 1995. Both subcutaneous and intravenously administered glucagon-like peptide-1 are rapidly degraded from the amino terminus in type II diabetic patients and in healthy subjects. Diabetes 44: 1126-1131.
Oppsummering av oppfinnelsen
Humant GLP-1 er et peptid med 38 aminosyrerester som skriver seg fra preproglukagon som syntetiseres blant annet i L-cellene i den nedre tynntarm, i bukspyttkjertelen og i hjernen. Prosessering av preproglukagon til GLP-1 (7-36)amid, GLP-1 (7-3 7) og GLP-2 inntrer hovedsakelig i L-cellene. Et enkelt system anvendes for å beskrive fragmenter og analoger av dette peptidet. F.eks. betegner således Gly<8->GLP-1(7-37) et fragment av GLP-1 som formelt er avledet fra GLP-1 ved å fjerne aminosyrerestene nr. 1-6 og bytte ut den naturlig forekommende aminosyrerest i 8-stilling (Ala) med Gly. Likeledes betegner Lys<34>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37) GLP-1(7-37) hvor e-aminogruppen i Lys-resten i 34-stilling er blitt tetradekanoylert. Når det i denne teksten henvises til C-terminalt forlengede GLP-1-analoger, er aminosyreresten i 3 8-stilling Arg med mindre annet er angitt, den eventuelle aminosyrerest i 39-stilling er også Arg med mindre annet er angitt, og den eventuelle aminosyrerest i 40-stilling er Asp med mindre annet er angitt. Dersom en C-terminalt forlenget analog strekker seg til 41-, 42-, 43-, 44- eller 45-stillingene, er dessuten aminosyresekvensen i denne forlengelsen som i den tilsvarende sekvens i humanpreproglukagon, med mindre annet er angitt.
Ved sitt bredeste aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse derivater av GLP-1 og analoger derav. Derivatene ifølge oppfinnelsen har interessante farmakologiske egenskaper, særlig har de en mer langvarig virkningsprofil enn opphavspeptidene.
I den foreliggende tekst anvendes betegnelsen "en analog" for å betegne et peptid hvor én eller flere aminosyrerester i opphavspeptidet er blitt byttet ut med en annen aminosyrerest og/eller hvor én eller flere aminosyrerester i opphavspeptidet er blitt fjernet og/eller hvor én eller flere aminosyrerester er blitt tilføyd til opphavspeptidet. Slik addisjon kan finne sted enten i N-enden eller C-enden av opphavspeptidet, eller i begge deler.
Uttrykket "derivat" er i den foreliggende tekst brukt for å betegne et peptid hvor én eller flere av aminosyrerestene i opphavspeptidet er blitt modifisert kjemisk, f.eks. ved alkylering, acylering, esterdannelse eller amiddannelse.
Uttrykket "et GLP-1-derivat" bruks i den foreliggende tekst ti å betegne et derivat av GLP-1 eller en analog derav. I den foreliggende tekst er opphavspeptidet hvorfra et slikt derivat formelt avledes, noen steder henvist til som "GLP-1-resten" av derivatet.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor minst én aminosyrerest i opphavspeptidet har en lipofil substituent festet, med det forbehold at dersom bare én lipofil substituent er til stede og denne substituenten er bundet til den N-terminale eller til den C-terminale aminosyrerest i opphavspeptidet, så er denne substituenten en alkylgruppe eller en gruppe som har en co-karboksylsyregruppe.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat som har bare én lipofil substituent.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat som har bare én lipofil substituent, hvor substituenten er en alkylgruppe eller en gruppe som har en co-karboksylsyregruppe og som er bundet til den N-terminale aminosyrerest i opphavspeptidet.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat som har bare én lipofil substituent, hvor substituenten er en alkylgruppe eller en gruppe som har en co-karboksylsyregruppe, og som er en bundet til en C-terminale aminosyrerest i opphavspeptidet.
Ved en foretrukket utførelsesform vedrører, som beskrevet i krav 1, foreliggende oppfinnelse et derivat av et GLP-1 (7-3 7) eller av en analog av GLP-1 (7-3 7),karakterisertved at det har bare én lipofil substituent som er bundet eventuelt via et mellomledd til en aminosyrerest som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, eller har bare to lipofile substituenter, hvorav én er bundet eventuelt via et mellomledd til den C-terminale aminosyrerest og den andre er bundet eventuelt via et mellomledd til en aminosyrerest som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, eller har bare to lipofile substituenter som er bundet eventuelt via et mellomledd til aminosyrerester som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, hvor i alt opp til 10 aminosyrerester i GLP(7-37) eller analogen derav er byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som den genetiske kode kan kode for.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat som har bare én lipofil substituent, hvor substituenten kan være bundet til hvilken som helst aminosyrerest som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest i opphavspeptidet.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor to lipofile
. substituenter er til stede.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor to lipofile substituenter er til stede, idet én er bundet til den N-terminale aminosyrerest, mens den andre er bundet til den C-terminale aminosyrerest.
Ved en annen foretrukket utførelsesform vedrører, som beskrevet i krav 2, foreliggende oppfinnelse et derivat av en analog av GLP-1 (7-37) der analogen er GLP-1(7-C), hvor C er valgt fra gruppen som omfatter 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44 og 45 , hvor derivatet har bare én lipofil substituent som er bundet eventuelt via et mellomledd til den C-terminale aminosyrerest.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor den lipofile substituent omfatter fra 4 til 40 karbonatomer, mer foretrukket fra 8 til 25 karbonatomer.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til en aminosyrerest på en slik måte at en karboksylgruppe i den lipofile substituent danner en amidbinding med en aminogruppe i aminosyreresten.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til en aminosyrerest på en slik måte at en aminogruppe i den lipofile substituent danner en amidbinding med en karboksylgruppe i aminosyreresten.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent, eventuelt via et mellomledd, er bundet til e-aminogruppen i en Lys-rest som finnes i peptidet.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til aminosyreresten ved hjelp av et mellomledd som er en uforgrenet alkan-a,co-dikarboksylsyregruppe med 1-7 metylengrupper, fortrinnsvis to metylengrupper, hvor mellomleddet danner en bro mellom en aminogruppe i peptidet og en aminogruppe i den lipofile substituent.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd som er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller et dipeptid, slik som Gly-Lys. I den foreliggende tekst anvendes uttrykket "et dipeptid, slik som Gly-Lys" for å betegne et dipeptid hvor den C-terminale aminosyrerest er Lys, His eller Trp, fortrinnsvis Lys, og hvor den N-terminale aminosyrerest er valgt fra gruppen som omfatter Ala, Arg, Asp, Asn, Gly, Glu, Gin, Ile, Leu, Val, Phe og Pro.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd som er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller er et dipeptid, slik som Gly-Lys, og hvor en karboksylgruppe i peptidet danner en amidbinding med en aminogruppe i en Lys-rest, eller et dipeptid som inneholder en Lys-rest og den andre aminogruppe i Lys-resten eller et dipeptid som inneholder en Lys-rest, danner en amidbinding med en karboksylgruppe i den lipofile substituent.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd som er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller er et dipeptid, slik som Gly- Lys, og hvor en aminogruppe i peptidet danner en amidbinding med en karboksylgruppe i aminosyreresten eller dipeptidmellomleddet, og en aminogruppe i aminosyreresten eller dipeptidmellomleddét danner en amidbinding med en karboksylgruppe i den lipofile substituent.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd som er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller er et dipeptid, slik som Gly-Lys, og hvor en karboksylgruppe i peptidet danner en amidbinding med en aminogruppe
i aminosyrerestmellomleddet eller dipeptidmellomleddet, og karboksyl gruppen i aminosyrerestmellomleddet eller dipeptidmellomleddet danner en amidbinding med en aminogruppe i den lipofile substituent.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor en lipofil substituent er bundet til peptidet ved hjelp av et mellomledd som er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller er et dipeptid, slik som Gly-Lys, og hvor en karboksylgruppe i peptidet danner en amidbinding med en aminogruppe i et mellomledd som er Asp eller Glu, eller et dipeptidmellomledd som inneholder en Asp- eller Glu-rest og en karboksylgruppe i mellomleddet danner en amidbinding med en aminogruppe i den lipofile substituent.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som omfatter et delvis eller fullstendig hydrogenert syklopentanfenatrenskj ellett.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en rettkjedet eller forgrenet alkylgruppe.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er acylgruppen i en rettkjedet eller forgrenet fettsyre.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en acylgruppe valgt fra gruppen som omfatter CH3(CH2)nCO-, hvor n er et helt tall fra 4 til 38, fortrinnsvis et helt tall fra 4 til 24, mer foretrukket valgt fra gruppen som omfatter CH3(CH2)6CO-, CH3(CH2)8CO-, CH3(CH2)10CO-, CH3(CH2)12CO-, CH3(CH2)i4CO-, CH3(CH2)16CO-, CH3(CH2)18CO-, CH3(CH2)20CO- og CH3(CH2)22CO-.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en acylgruppe i en rettkjedet eller forgrenet alkan-a,co-dikarboksylsyre.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en acylgruppe valgt fra gruppen som omfatter HOOC(CH2)mCO-, hvor m er et helt tall fra 4 til 38, fortrinnsvis et helt tall fra 4 til 24, mer foretrukket valgt fra gruppen som omfatter HOOC(CH2)i4CO-, HOOC(CH2)i6CO-, HOOC(CH2),8CO-, HOOC(CH2)20CO- og HOOC(CH2)22CO-.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen CH3(CH2)p((CH2)qCOOH)CHNH-CO(CH2)2CO-, hvor p og q er hele tall og p + q er et helt tall fra 8 til 33, fortrinnsvis fra 12 til 28.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen CH3(CH2)rCONHCH(COOH)(CH2)2CO-, hvor r er et helt tall fra 10 til 24.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen CH3(CH2)sCONHCH((CH2)2COOH)CO-, hvor s er et helt tall fra 8 til 24.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen COOH(CH2)tCO-, hvor t er et helt tall fra 8 til 24.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen
-NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)uCH3, hvor u er et helt tall fra 8 til 18.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen
-NHCH(COOH)(CH2)4NH-COCH((CH2)2COOH)NH-CO(CH2)wCH3, hvor w er et helt tall fra 10 til 16. Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen -NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)xCH3, hvor x er et helt tall fra 10 til 16. Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som er en gruppe med formelen -NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)NHCO(CH2)yCH35hvor y er 0 eller et helt tall fra 1 til 22.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat med en lipofil substituent som kan være negativt ladet. En slik lipofil substituent kan f.eks. være en substituent som har en karboksylgruppe.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvis peptid er valgt fra gruppen som omfatter GLP-1 (1-45) eller en analog derav.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat avledet fra et GLP-1 - fragment valgt fra gruppen som omfatter GLP-1 (7-35), GLP-1 (7-36), GLP-1 (7-3 6)amid, GLP-1 (7-37), GLP-1 (7-3 8), GLP-1 (7-39), GLP-1 (7-40) og GLP-1 (7-41) eller en analog derav.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er en GLP-1-analog avledet fra en GLP-1 - analog valgt fra gruppen som omfatter GLP-l(l-35), GLP-l(l-36), GLP-l(l-36)amid, GLP-1 (1-37), GLP-l(l-38), GLP-l(l-39), GLP-l(l-40) og GLP-1(1-41) eller en analog derav.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor betegnelsesanalogen omfatter derivater hvor i alt opp til 15, fortrinnsvis opp til 10 aminosyrerester er blitt byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest.
Beskrevet, men ikke eksplisitt krevd er et GLP-1-derivat hvor betegnelsesanalogen omfatter derivater hvor i alt opp til 15, fortrinnsvis opp til 10 aminosyrerester er blitt byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som kan kodes for av den genetiske kode.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor betegnelsesanalogen omfatter derivater hvor i alt opp til 6 aminosyrerester er blitt byttet ut med en annen a-aminosyrerest som kan kodes for av den genetiske kode.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-l(A-B)-derivat, hvor A er et helt tall fra 1 til 7 og B er et helt tall fra 38 til 45 eller en analog derav som omfatter en lipofil substituent bundet til den C-terminale aminosyrerest og eventuelt en andre lipofil substituent bundet til én av de øvrige aminosyrerestene.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform angår oppfinnelsen analoger av GLP-l(7-37) valgt fra gruppen som omfatter Arg<26->GLP-l(7-37); Arg<34->GLP-1(7-37); Lys<36->GLP-1 (7-37); Arg<2634>Lys<36->GLP-l(7-37); Arg<26>34Lys38GLP-l(7-38); Arg26 34Lys39-GLP-l(7-39); Arg<26-34>Lys<40->GLP-l (7-40); Arg<26>Lys36-GLP-l(7-37); 20 Arg<3>4Lys3<6->GLP-l(7-37); Arg<26>Lys<39->GLP-l (7-39); Arg34Lys<40->GLP-1(7-40); Arg2634Lys36 39-GLP-l(7-39); Arg26 34Lys3640-GLP-1(7-40); GIy<8>Arg26-GLP-l(7-37);Gly8Arg<34->GLP-l(7-37); Gly<8>Lys<36->GLP-l(7-37); Gly8Arg2634Lys36-GLP-1 (7-37); GIy<8>Arg26-34Lys3<9->GLP-l(7-39);GIy<8>Arg<26-34>Lys<40->GLP-l(7-40);GIy<8>Arg<26>Lys<36->GLP-l (7-37); GIy<8>Arg<3>4Lys3<6->GLP-l(7-37); GIy<8>Arg26Lys<39->GLP-l (7-39); Gly<8>Arg<34>Lys<4>(<>->GLP-1 (7-40); Gly<8>Arg26'34LyS<36-39->GLPl (7-39) og GIy<8>Arg<26->34Lys3<6-40->GLP-l (7-40).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform angår oppfinnelsen analoger av GLP-1 (7-37) valgt fra gruppen som omfatter Arg26 34Lys38GLP-l (7-38); Arg26 34Lys39GLP-1(7-39); Arg<26>'<34>Lys<40>GLP-l (7-40); Arg2634Lys41 GLP-1 (7-41); Arg26'34Lys4<2>GLP-l (7-42); Arg26'34Lys43 GLP-1 (7-43); Arg<26>'34Lys4<4>GLP-1(7-44); Arg26'34Lys45GLP-l(7-45); Arg2634Lys38GLP-l(1-38); Arg26'34Lys39GLP-l(l-39); Arg26,4Lys40GLP-1 (1 -40); Arg<26>'<34>Lys<41>GLP-1(1-41); Arg26»34Ly542GLP-l(1 -42); Arg<26,34>Lys<43>GLP-l(l-43); Arg<26>'34Lys4<4>GLP-l (1-44); Arg<28>'34Lys4<5>GLP-l(l-45); Arg26'34Lys38GLP-l(2-38); Arg26'34Lys39GLP-l(2-39); Arg26'34Lys40GLP-l(2-40); Arg26'34Lys41GLP-l(2-41); Arg26>34Lys42GLP-1(2-42); Arg26>34Lys43GLP-l(2-43); Arg26'34Lys44GLP-1(2-44); Arg26'34Lys45GLP-1(2-45); Arg26'34Lys38GLP-l(3-38);Arg26-34Lys3<9>GLP-l (3-39);Arg26-34Lys4<0>GLP-1(3-40); Arg<26>'<34>Lys<4>,GLP-l(3-41); Arg26-34Lys42GLP-l(3-42);Arg26'34Lys43GLP-l(3-43); Arg26'34Lys44GLP-l(3-44); Arg26'34Lys45GLP-l(3-45); Arg26'34Lys38GLP-l(4-38); Arg26'34Lys39GLP-l(4-39); Arg26'34Lys40GLP-l(4-40);Arg26'34Lys41GLP-l(4-41);; Arg26'34Lys42GLP-1(4-42); Arg26'34Lys43GLP-1 (4-43); Arg26'34Lys44GLP-1 (4-44); Arg26'34Lys45GLP-1 (4-45); Arg26-34Lys38GLP-l(5-38); Arg26,34Lys39GLP-l(5-39); Arg26'34Lys40GLP-l(5-40); Arg26'34Lys4,GLP-l(5-41); Arg26'34Lys42GLP-1 (5-42); Arg26-34Lys43GLP-1(5-43); Arg26'34Lys44GLP-1 (5-44); Arg26-34Lys45GLP-1 (5-45); Arg26'34Lys38GLP-1 (6-38); Arg26'34Lys39GLP-1 (6-39); Arg26'34Lys40GLP-1 (6-40); Arg26'34Lys45GLP-1 (6-41); Arg26'34Lys42GLP-1 (6-42); Arg26-34Lys43GLP-1 (6-43); Arg26'34Lys44GLP-1 (6-44); Arg26>34Lys45GLP-1 (6-45); Arg26Lys38GLP-1(1-38); Arg34Lys38GLP-1(1 -38); Arg26'34Lys36'38GLP-l(l-38); Arg26Lys38GLP-l(7-38); Arg34Lys38GLP-1(7-38); Arg26'34LyS36'38GLP-1 (7-38); Arg26,34Lys38GLP-1 (7-38); Arg<26>Lys<39>GLP-1(1-39); Arg<3>4Lys3<9>GLP-l(l-39); Arg26-34LyS36,39GLP-l (1 -39); Arg<26>Lys<39>GLP-l(7-39);Arg<3>4Lys3<9>GLP-l(7-39) og Arg26,34LyS36'39GLP-l(7-39).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor peptidet er valgt fra gruppen som omfatter Arg<26->GLP-l(7-37); Arg<34->GLP-1(7-37);Lys3<6->GLP-l(7-37), Arg<26>'<34->Lys<36->GLP-1(7-37), Arg<26>Lys<36->GLP-1(7-37),Arg34Lys3<6->GLP-1(7-37), Gly<8>Arg<26->GLP-l-(7-37), Gly<8>Arg<34->GLP-l(7-37), Gly8Lys36-GLP-1 -(7-37), Gly8Arg26'34Lys36-GLP-1 (7-37), Gly8Arg26Lys36-GLP-1 (7-37) og Gly<8>Arg<34>Lys<36->GLP-1(7-37).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor peptidet er valgt fra gruppen som omfatter Arg<26->Lys38-GLP-l(7-38), Arg26'34Lys38-GLP-1 (7-38), Arg26'34Lys36'38-GLP-1 (7-38), Gly8Arg26Lys38-GLP-1 (7-38) og Gly<8>Arg<26>'34Lys3<6,38->GLP-l (7-38).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor peptidet er valgt fra gruppen som omfatter Arg26-Lys<39->GLP-1(7-39), Arg26'34Lys3<6>"<39->GLP-1(7-39), Gly<8>Arg26Lys<39->GLP-l(7-39) og Gly<8>Arg<26>'<34>Lys<36,39->GLP-1(7-39).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat hvor peptidet er valgt fra gruppen som omfatter Arg34-Lys<40->GLP-1(7-40), Arg<26>'<34>Lys<36>'<40->GLP-1(7-40), Gly<8>Arg34Lys<40->GLP-1(7-40) og Gly<8>Arg26'34Lys<36,40->GLP-1(7-40).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et GLP-1-derivat som er valgt fra gruppen som omfatter:
Lys26(N<E->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Lys3<4>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Lys<26,34->bis(N<E->tetradekanoyl)-GLP-1(7-37),
Gly8Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-1 (7-3 7),
Gly8Lys3<4>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Gly<8>Lys<26,34->bis(N<E->tetradekanoyl)-GLP-1 (7-3 7),
Arg26Ly s34(NE-tetradekanoyl)-GLP-1 (7-3 7),
Lys<26>(N<*->tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Lys<34>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l (7-38),
Lys26-34-bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<26>(N<B->tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<34>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Gl<y8>Lys<26,34->bis(N<*->tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Arg26Lys<34>(N€-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Lys26(N'-tetradekanoyl)-GLP-l (7-39),
Lys3<4>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l (7-39),
Lys<26>"<34->bis(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-39),
GlAys2<6>(N"-tetradcskanoyl)-GLP-l(7-39),
Gly8Lys34(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-39),
Gly"Lys<26-34->bis(N<«->tetradekanoyl)-GLP-l(7-39),
Arg<26>Lys<34>(N<«->tetradekanoyl)-GLP-l(7-39),
Lys26(N"-tetradekanoyl)-GLP-l (7-40),
Lys<34>(N<*->tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Lys<26-34->bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Gly8Lys3<4>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26,34->bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Arg26Lys<34>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-40),
Lys<26>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36),
Lys34(N'-tetradekanoyl)-GLP-l (7-36),
Lys<26-34->bis(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36),
Gly8Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-36),
Gly<8>Lys<34>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36),
Gly<8>Lys<26,34->bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36),
Ar^Lys^CN^-tetradekanoyO-GLP-lCT-ae),
Lys26(N"-tetradekanoyl)-GLP-l (7-35),
Lys3<4>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l (7-35),
Lys<26>l<34->bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-35),
Gly8Lys2<6>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-35),
Gly8Lys<34>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-35),
Gly<8>L<y>s<26>l<34->bis(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-35),
Arg26Lys3<4>(N<s->tetradekanoyl)-GLP-l(7-35),
Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)amid,
Lys<34>(N<8->tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)amid,
Lys<26,34->bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)amid,
Gly8Lys2<6>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<34>(N"-tetradekaiioyl)-GLP-l(7-36)amid,
Gly8Lys26'34-bis(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)ainid,
Arg<2>6Lys3<4>(N<*->tetradekanoyl)-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Arg26Lys3<4>(N€-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)Arg<34->GLP-l(7-37),
Gly8Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)Arg<34->GLP-l(7-37),
Arg26'34Lys3<6>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Gly8Arg26'34Lys36(N«-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg<26>Lys<34>(N"-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Lys<26>(N<*->tetradekanoyl)Arg<34->GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys2<6>(N"-tetradekanoyl)Arg34-GLP-l(7-38),
Arg26-34Lys3<6>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Arg26-34Lys3<8>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg26'34Lys3<6>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg<2>6Lys3<4>(N'-tetradekanoyl)-GLP-l(7-39),
Lys^C^-tetradekanoyOAr^-GLP-lCTOP),
Gl/Ly^^^tetradekanoy^Ar^-GLP-lCT-S^,
Ar^^Lys^Cr^-tetradekanoyO-GLP-lCT-S^,
GVAr^Lys^Cr^-tetradekanoyO-GLP-HT^O),
Lys^Cr^-tetradekanoyOAr^-GLP-lC<y>^O),
Gly^ys^CN^tetradekanoyOAr^-GLP-UT^O),
Arg^Lys^CN^tetradekanoyO-GLP-lCT^O),
GyAr^Lys^CN^-tetradekanoyO-GLP-KT^O),
Lys26(N"-(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Lys^CN^-Ceo-karboksynonadekanoy^J-GLP-lCT-a?),
Lys<26,34->bis(N<*->(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys2<6>(N'-((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys<34>(N<s->(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys26-34bis(Ne-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Lys<26>(N'-(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Lys3<4>(N<e->(Q)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26,34->bis(N"-(a>-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Gly8Lys26(N"-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<34>(N"-(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<26,34>bis(N'-(a-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26>(N"-((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Lys34(N*-(do-karboksynonadekanoyl))-GLP-1 (7-39),
Lys<26-34->bis(N<*->(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<2>6(N'-(a-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<34>(N<*->(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<26>l<34>bis(N<e->(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Lys2<6>(N"-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Lys3<4>(N"-((B-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Lys<26-34->bis(N<«->(a>-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Gly'Lys<26>(N,-(m-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Lys3<4>(N'-((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26>34>bis(N'-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Lys<26>(N<*->(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Lys34(Ne-(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Lys<26>'<34->bis(N"-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Gly8Lys<26>(N<e->(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Gly8Lys3<4>(N<*->((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Gly<8>Lys<26,34>bis(N<8->((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36),
Lys26(N'-((D-karboksynonfldekanoyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys<3>4(N<B->(Q-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys2W4-bis(N"-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36)aniid,
Gly8Lys26(N<e->(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly8Lys3<4>(N'-((B-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26,34>bis(N'-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys2<6>(N'-(a>-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Lys<34>(N"-(o)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Lys<26>'<34->bis(N<e->((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Gly8Lys2<6>(N'-((B-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Gly8Lys3<4>(N'-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys<26,34->bis(N<e->(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-35),
Arg26Lys3<4>(N<s->(a)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg<2>6Lys3<4>(N"-(Q)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Lys2<6>(N<*->(a)-karboksynonadekanoyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Gly8Lys26(N,-(©-karboksynonadekanoyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Arg<26>,<34>Lys3<6>(N<E->(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg26>34Lys3<6>(N"-(©-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37),
Arg26Lys34(N'-((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg26Lys3<4>(N<*->(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26>(N'-(©-karboksynonadekanoyl))Arg<34->GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys26(N"-((D-karboksynonadekanoyl))Arg<34->GLP-l(7-38),
Arg26'34Lys<36>(N«-((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Arg26"34Lys3<8>(N"-(a)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg<26-34>Lys<36>(N'-(a)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38),
Arg26Lys34(N<e->((D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Arg^<6>Lys<34>(N<a->(o)-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Lys2<6>(N<e->(©-karboksynonadekanoyl))Arg34-GLP-l(7-39),
Gly8Lys26(N8-(a-karboksynonadekanoyl))Arg34-GLP-l(7-39),
Arg26"34Lys3<6>(N,-(æ-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-39),
Gly8Arg26l34Lys36(l^-(æ-kaiboksynonadekanoyl))-GLP-^
Arg26Lys34(Ns-(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Arg<26>Lys<34>(N<B->((B-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Lys2<6>(N<*->(a>-karboksynonadekanoyl))Arg34-GLP-l(7-40),
Gly8Lys26(N'-((D-karboksynoiiadekanoyl))Arg34-GLP-l(7-40),
Arg26'34Lys3<6>(N'-(<D-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Arg26>34Lys36(N'-(æ-karboksynonadekaiioyl))-GLP-l(7-40)>
Lys2<6>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys3<4>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys<26>'<34->bis(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys2<6>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys3<4>(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly^ys^^-bisO^-CT-deoksykoloy^-GLP-KTO?),
Arg26Lys<34>(N<s->(7-<d>eoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys2<6>(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys34(N,-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26>'<34->bis(N<«->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly"Lys<26>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly'Lys<34>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<26>'<34->bis(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Arg26Lys3<4>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys26(tf-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39)^
Lys<34>(N<«->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<26>'<34->bis(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly'Lys<26>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly8Lys3<4>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<26-34->bis(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Arg26Lys3<4>(N<£->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<26>(N<*->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Lys<34>(N<s->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Lys26l3<4->bis(<N<,>-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Lys2<6>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys3<4>(N<£->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26>'<34->bis(N<8->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Arg<26>Lys<34>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-40),
Lys26(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Lys34(N*-(7-deoksykoloyl))-GLP-l (7-36),
Lys<26>'<34->bis(N,-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly8Lys2<6>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly<8>Lys<34>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly"L<y>s<26-34->bis(N<*->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Arg26Lys3<4>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36),
Lys2<6>(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Lys<34>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Lys26'3<4->bis(N,-(7-deoks<y>kolo<y>l))-GLP-l(7-35),
Gly8Lys2<6>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys34(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys<26-34->bis(N,,-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Arg26Lys3<4>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-35),
Lys26(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys34(N<«->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys<26,34->bis(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-i(7-36)amid,
Gly8Lys2<6>(N<*->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly8Lys<34>(N<e->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26>l<34->bis(N<s->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Arg<26>Lys<34>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Arg<2>6Lys3<4>(N<«->(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys<26>(N'-(7-deoksykoloyl))Arg34-GLP-l(7-37),
Gly8Lys<26>(N<e->(7-deoksykoloyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Arg26>34Lys3<6>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg26-34Lys3<6>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys26(N«-(koloyl))-GLP-l (7-37),
Lys34(N'-( koloyl))-GLP-l(7-37),
Lys26,3<4->bis(N'-(koloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys<26>(N<«->(koloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys3<4>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-37),
Gly^ys^^bisCr^-CkoloylW-GLP-lCT-ST),
Ar^Lys^CN^CkoloyOJ-GLP-UT-ST),
GVAr^Lys^Cr^-CT-deoksykoloyl^-GLP-lCT-a<g>),
Lys^CN^CT-deoksykoloy^Arg^-GLP-lCT-Sg),
Gly'Lys2<6>(N'-(7-deoksykoloyl))Arg34-GL<P->l(7-38),
Arg26'34Lys36(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Arg26>34Lys<38>(N'-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly8Arg26"34Lys36(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys2<6>(N<*->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Lys3<4>(N'-( koloyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26>34->bis(N<e->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<26>(N<E->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Gly8Lys3<4>(N<e->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<26>'<34->bis(N"-(koloyl))-GLP-l(7-38),
Arg26Lys34(N*-(koloyl))-GLP-l (7-38),
Gly<8>Arg<26>Lys<34>(N"-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys26(N<«->(7-deoksykoloyl))Arg34-GLP-l(7-39),
Gly8Lys2<6>(N"-(7-deoksykoloyl))Arg34-GL<P->l(7-39),
Arg26-34Lys3<6>(N«-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly8Arg26-34Lys36(Ne-(7-deoksykoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys2<6>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Lys3<4>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<26>'<34->bis(N"-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Gly8Lys26(Ne-(koloyl))-GLP-1 (7-39),
Gly<8>Lys<34>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<26>34->bis(N"-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Arg26Lys3<4>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Gly^Ar^Lys^CNr-CT-deoksykoloyl^-GLP-lC<y>^O),
Lys<26>(N"-(7-deoksykoloyl))Arg<34->GLP-l(7-40),
Gly^ys^-CT-deoksykoloylWArg^-GLP-HT^O),
^^Lys^CN^-CT-deoksykoloy^-GLP-lCT^O),
Gly,W<6,34>Lys<36>(N,-(7-deoksykol°y1))-GLP-l(7-40),
Lys<26>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Lys<34>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Lys2W4-bis(N*-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys2<6>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys3<4>(N<E->(koloyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Lys2W4-bis(Ns-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Arg26Lys3<4>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Lys26(N«-(koloyl))-GLP-l(7-36),
Lys34(N«-(koloyl))-GLP-l (7-36),
Lys<26>'<34->bis(N<*->(koloyl))-GLP-l(7-36),
Gly'Lys<26>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-36),
Gly'Lys<34>(N<«->(ko<l>oyl))-GLP-l(7-36),
Gly<8>L<y>s<26>'<34->bis(N<«->(koloyl))-GLP-l(7-36),
Arg26Lys3<4>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-36),
Lys2<6>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-35),
Lys3<4>(N<«->(koloyl))-GLP-l(7-35),
Lys<26>'<34->bis(N<s->(koloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys<26>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-35),
Gly8Lys<34>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys<26,34->bis(N'-(koloyl))-GLP-l(7-35),
Arg26Lys3<4>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-35),
Lys26(N'-(koloyl))-GLP-l (7-36)amid,
Lys<34>(t<f->(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys<26>34->bis(N<*->(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26>(N<«->(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly8Lys3<4>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26-34->bis(N"-(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Arg<26>Lys<34>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Arg26Lys3<4>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-37),
Lys<26>(N<e->(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Gly8Lys<26>(N<6->(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Arg26-34Lys3<6>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg26l34Lys3<6>(N<e->(k<o>loyl))-GLP-l(7-37),
Lys26(N<e->(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys<34>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys<26>l<34->bis(N<«->(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8Lys2<6>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Lys<34>(N<s->(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Lys<26>34->bis(N<*->(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Arg26Lys3<4>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg26Lys<34>(N<8->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Lys2<6>(N"-(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-38),
Gly8Lys<26>(N<E->(kolo<y>l))Arg<34->GLP-l(7-38),
Arg26>3<4>Lys<36>(N'-(koloyl))-GLP-l(7-38),
Arg26'34Lys3<8>(N<e->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg<26>l<34>L<ys36>(N<«->(koloyl))-GLP-l(7-38),
Lys2<6>(N<*->(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys3<4>(N<e->(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Lys<26>'<34->bis(N'-0itokoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly'Lys<26>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
GlAys<34>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Lys<2W4->bis(N<1>,-(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Arg<26>Lys<34>(N<E->(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly<8>Arg26Lys<34>(N<e->(koloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<26>(N<c->(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys2<6>(N'-(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-39),
Arg26'34Lys36(N'-(koloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Arg<26>'<34>Lys<36>(N<a->(koloyl))-GLP-l(7-39),
Lys2<6>(N<«->(litokoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<34>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-39),
Lys<26>"<34->bis(N<«->aitokoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<26>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys34(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Lys<26>"<34->bis(N<a->Gitokoloyl))-GLP-l(7-39),
Arg<26>Lys<34>(N"-0itokoloyl))-GLP-l(7-39),
Gly<8>Arg<26>Lys<34>(N"-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Lys2<6>(N'-(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26>(N<e->(koloyl))Arg<34->GLP-l(7-40),
Arg26-34Lys3<6>(N,-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Arg26'34Lys36(N«-(koloyl))-GLP-l(7-40),
Lys<26>(N"-Gitokoloyl))-GLP-l(7-40),
Lys3<4>(N<e->(litokoloyl))-GLP-l(7-40),
Lys<26>'<34->bis(N<fi->0itokoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Lys2<6>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly8Lys3<4>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-40),
Gly<8>Lys<26>'<34->bis(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-40))
Ar^Lys^CN^aitokoloylW-GLP-lCT-S?),
Lys<26>(N"-aitokoloyl))-GLP-l(7-36),
Lys^-Oitokoloyl^-GLP-ia-Se),
Lys26>3<4->bis(<N>"-aitokoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly'Lys<26>(N<E->0itokoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly'Lys<34>(N<*>.-(litokoloyl))-GLP-l(7-36),
Gly'Lys<26>'<34->bis(N<e->aitokoloyl))-GLP-l(7-36),
Arg<26>Lys<34>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-36),
Lys<26>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-35),
Lys3<4>(N<«->(Utokoloyl))-GLP-l (7-35),
Lys<26>'<34->bis(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys<26>(N<«->(litokoloyl))-GLP-l(7-35),
Gly<8>Lys34(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-35),
Gly8Lys<2W4->bis(N"-0itokoloyl))-GLP-l(7-35),
Arg<26>Lys<34>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-35),
Lys26(N<s->(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys<34>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Lys<26>'<34->bis(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26>(N"-aitokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<34>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Lys<26>"<34->bis(N<*->(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Arg<26>Lys<34>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-36)amid,
Gly<8>Arg<2>6Lys3<4>(N"-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Lys26(N<a->(litokoloyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Gly<8>Lys<26>(N<*->0itokoloyl))Arg<34->GLP-l(7-37),
Arg26>34Lys<36>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Arg<26-34>Lys3<8>(N'-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly<8>Arg<26->34Lys3<6>(Ne-(litokoloyl))-GLP-l(7-37),
Gly8 Arg26Lys34(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 8),
Lys<26>(N<e->(litokoloyl))Arg<34->GLP-1 (7-3 8),
Gly8Lys<26>(N<E->(litokoloyl))Arg<34->GLP-l(7-38),
Arg<26>'<3>4Lys3<6>(N<e->(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 8),
Arg<26>'<34>Lys3<8>(N<E->(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 8),
Gly<8>Arg26'34Lys36(Ne-(litokoloyl))-GLP-l(7-38),
Gly8 Arg26Lys34(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 9),
Lys26(NE-(litokoloyl))Arg34-GLP-1 (7-3 9),
Gly8Lys<26>(N<E->(litokoloyl))Arg<34->GLP-1(7-39),
Arg26"34Lys3<6>(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 9),
Gly8 Arg26'34Lys36(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-3 9),
Gly8 Arg26Lys34(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-40),
Lys2<6>(N<E->(litokoloyl))Arg<34->GLP-1(7-40),
Gly8Lys26(N<E->(litokoloyl))Arg<34->GLP-l(7-40),
Arg26'34Lys36(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-40) og
Gly<8>Arg26'34Lys3<6>(NE-(litokoloyl))-GLP-1 (7-40).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse et farmasøytisk preparat som omfatter et GLP-1-derivat og en farmasøytisk akseptabel vehikkel eller bærer.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse anvendelsen av et GLP-1-derivat ifølge oppfinnelsen til fremstilling av et medikament som har en langvarig virkningsprofil i forhold til GLP-l(7-37).
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse anvendelsen av et GLP-1-derivat ifølge oppfinnelsen til fremstilling av et medikament med langvarig effekt, for behandling av ikke-insulinavhengig diabetes mellitus.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse anvendelsen av et GLP-1-derivat ifølge oppfinnelsen til fremstilling av et medikament med langvarig effekt, for behandling av insulinavhengig diabetes mellitus.
Ved en ytterligere foretrukket utførelsesform vedrører foreliggende oppfinnelse anvendelsen av et GLP-1-derivat ifølge oppfinnelsen til fremstilling av et medikament med langvarig effekt, for behandling av fedme.
Nærmere beskrivelse av oppfinnelsen
For å oppnå en tilfredsstillende, langvarig virkningsprofil for GLP-1-derivatet, omfatter den lipofile substituent som er bundet til GLP-1-resten, fortrinnsvis 4-40 karbonatomer, særlig 8-25 karbonatomer. Den lipofile substituent kan være bundet til en aminogruppe i GLP-1-resten ved hjelp av en karboksylgruppe i den lipofile substituent, som danner en amidbinding med en aminogruppe i aminosyreresten som den er bundet til. Alternativt kan den lipofile substituent være bundet til aminosyreresten på en slik måte at en aminogruppe i den lipofile substituent danner en amidbinding med en karboksylgruppe i aminosyreresten. Som en ytterligere mulighet kan den lipofile substituent være bundet til GLP-1-resten via en esterbinding. Formelt kan esteren dannes enten ved omsetning mellom en karboksylgruppe i GLP-1-resten og en hydroksylgruppe i det som skal bli substituenten, eller ved omsetning mellom en hydroksylgruppe i GLP-1-resten og en karboksylgruppe i det som skal bli substituenten. Som et ytterligere alternativ kan den lipofile substituent være en alkylgruppe som innføres i den primære aminogruppe i GLP-1-resten.
Ved én foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen bindes den lipofile substituent til GLP-1-resten ved hjelp av et mellomledd på en slik måte at en karboksylgruppe i mellomleddet danner en amidbinding med en aminogruppe i GLP-1-resten. Eksempler på egnede mellomledd er ravsyre, Lys, Glu eller Asp, eller et slikt dipeptid som Gly-Lys. Når mellomleddet er ravsyre, kan én karboksylgruppe i denne danne en amidbinding med en aminogruppe i aminosyreresten, og den andre karboksyl gruppen kan danne en amidbinding med en aminogruppe i den lipofile substituent. Når mellomleddet er Lys, Glu eller Asp, kan karboksylgruppen danne en amidbinding med en aminogruppe i aminosyreresten, og aminogruppen kan danne en amidbinding med en karboksylgruppe i den lipofile substituent. Når Lys anvendes som mellomledd, kan et ytterligere mellomledd i noen tilfeller innføyes mellom e-aminogruppen i Lys og den lipofile substituent. Ved én foretrukket utførelsesform er et slikt ytterligere mellomledd ravsyre som danner en amidbinding med e-aminogruppen i Lys, og med en aminogruppe som er til stede i den lipofile substituent. Ved en annen foretrukket utførelsesform er et slikt ytterligere mellomledd Glu eller Asp som danner en amidbinding med e-aminogruppen i Lys og en annen amidbinding med en karboksylgruppe som er til stede i den lipofile substituent, dvs. den lipofile substituent er en NE<->acylert lysinrest.
Ved én annen foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse har den lipofile substituent en gruppe som kan være negativt ladet. Én foretrukket gruppe som kan være negativt ladet, er en karboksylsyregruppe.
Opphavspeptidet kan fremstilles ved hjelp av en fremgangsmåte som omfatter dyrkning av en vertscelle som inneholder en DNA-sekvens som koder for polypeptidet og som er i stand til å uttrykke polypeptidet i et egnet næringsmedium under betingelser som tillater ekspresjonen av peptidet, hvoretter det resulterende peptid utvinnes fra kulturen.
Mediet som anvendes til å dyrke cellene, kan være hvilket som helst vanlig medium som er egnet for å dyrke vertscellene, slik som minimale eller komplekse medier som inneholder passende suppleringsstoffer. Egnede medier er tilgjengelige fra kommersielle leverandører, eller kan fremstilles i henhold til publiserte oppskrifter (f.eks. i kataloger fra American Type Culture Collection). Peptidet som fremstilles av cellene, kan så utvinnes fra dyrkningsmediet ved hjelp av vanlige fremgangsmåter, inkludert separasjon av vertscellene fra mediet ved sentrifugering eller filtrering, utfelling av de proteinholdige komponenter i supernatanten eller filtratet ved hjelp av et salt, f.eks. ammoniumsulfat, rensing ved hjelp av flere forskjellige kromatografisk fremgangsmåter, f.eks. ionebytterkromatografi, gelfiltreringskromatografi, affinitetskromatografi eller lignende, avhengig av den aktuelle peptidtype.
DNA-sekvensen som koder for opphavspeptidet, kan passende være av genom-eller cDNA-opprinnelse, f.eks. erholdt ved å fremstille et genom- eller cDNA-bibliotek og screene med hensyn på DNA-sekvenser som koder for hele eller en del av peptidet ved hybridisering under anvendelse av
syntetiske oligonukleotidprober i overensstemmelse med standardteknikker (se f.eks. Sambrook, J, Fritsch, EF and Maniatis, T, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 1989). DNA-sekvensen som koder for peptidet, kan også fremstilles syntetisk ved hjelp av etablerte standardmetoder, f.eks.
fosfoamidittmetoden beskrevet av Beaucage and Caruthers, Tetrahedron Letters 22
(1981), 1859-1869 eller metoden beskrevet av Matthes et al., EMBO Journal 3 (1984), 801-805. DNA-sekvensen kan også fremstilles ved hjelp av polymerasekjedereaksjon under anvendelse av spesifikke primere, f.eks. som beskrevet i US 4 683 202 eller Saiki et al., Science 239 (1988), 487-491.
DNA-sekvensen kan innføyes i hvilken som helst vektor som på lettvint måte kan underkastes fremgangsmåter med rekombinant DNA og valget av vektor vil ofte avhenge av vertscellen som den skal innføres i. Vektoren kan således være en autonomt replikerende vektor, dvs. en vektor som foreligger som en ekstrakromosomal enhet, hvis replikasjon er uavhengig av kromosomal replikasjon, f.eks. et plasmid. Alternativt kan vektoren være én som, når den innføres i en vertscelle, integreres i vertscellegenomet og replikerer sammen med kromosomet eller kromosomene som den er blitt integrert i.
Vektoren er fortrinnsvis en ekspresjonsvektor hvor DNA-sekvensen som koder for peptidet, er operativt bundet til tilleggssegmenter som er påkrevd for transkripsjon av DNA-en, slik som en promoter. Promoteren kan være hvilken som helst DNA-sekvens som oppviser transkripsjonsaktivitet i den valgte vertscelle og kan være avledet fra gener som koder for proteiner som enten er homologe eller heterologe for vertscellen. Eksempler på egnede promotorer for styring av transkripsjonen av den DNA som koder for peptidet ifølge oppfinnelsen i flere forskjellige vertsceller, er vel kjent innen teknikken, jf. f.eks. Sambrook et al, supra.
DNA-sekvensen som koder for peptidet, kan om nødvendig også være operativt forbundet med en egnet terminator, egnede polyadenyleringssignaler, transkripsjonsfremmersekvenser og translasjonsfremmersekvenser. Den rekombinante vektor ifølge oppfinnelsen kan videre omfatte en DNA-sekvens som gjør det mulig for vektoren å replikere i den aktuelle vertscelle.
Vektoren kan også omfatte en selekterbar markør, f.eks. et gen, hvis produkt kompiementerer en defekt i vertscellen eller én som gir resistens overfor et legemiddel, f.eks. ampicillin, kanamycin, tetrasyklin, kloramfenikol, neomycin, hygromycin eller metotreksat.
For å styre et opphavspeptid ifølge foreliggende oppfinnelse, til det sekretoriske reaksjonsspor i vertscellene, kan det tilveiebringes en sekretorisk signalsekvens (også kjent som en ledersekvens, preprosekvens eller presekvens) i den rekombinante vektor. Den sekretoriske signalsekvens knyttes til DNA-sekvensen som koder for peptidet, i den korrekte leseramme. Sekretoriske signalsekvenser er vanligvis plassert 5' i forhold til DNA-sekvensen som koder for peptidet. Den sekretoriske signalsekvens kan være den som normalt er forbundet med peptidet, eller kan være fra et gen som koder for et annet utskilt protein.
Fremgangsmåtene som anvendes til å ligere DNA-sekvensene som koder for hhv. det foreliggende peptid, promoteren og eventuelt terminatoren og/eller den sekretoriske signalsekvens, og for å innføye dem i egnede vektorer som inneholder den informasjon som er nødvendig for replikasjon, er vel kjent for fagfolk innen teknikken (jf. f.eks. Sambrook et al., supra.
Vertscellen som DNA-sekvensen eller den rekombinante vektor innføres i, kan være hvilken som helst celle som er i stand til å produsere det foreliggende peptid, og omfatter bakterier, gjær, sopper og høyere eukaryote celler. Eksempler på egnede vertsceller som er godt kjent og anvendt innen teknikken, er uten begrensing E. coli, Sacchardmyces cerevisiae eller pattedyr-BHK- eller CHO-cellelinjer.
Eksempler på forbindelser som kan være anvendbare som GLP-1-rester i henhold til foreliggende oppfinnelse, er beskrevet i internasjonal patentsøknad nr. WO 87/06941 (The General Hospital Corporation) som vedrører et peptidfragment som omfatter GLP-1(7-37) og funksjonelle derivater derav, og dets anvendelse som et insulinotropt middel.
Ytterligere GLP-1-analoger er beskrevet i internasjonal patentsøknad nr.
90/11296 (The General Hospital Corporation) som vedrører peptidfragmenter som omfatter GLP-l(7-36) og funksjonelle derivater derav, og som har en insulinotrop aktivitet som overskrider den insulinotrope aktivitet til GLP-l(l-36) eller GLP-l(l-37) og deres anvendelse som insulinotrope midler.
I internasjonal patentsøknad nr. 91/11457 (Buckley et al.) beskrives analoger av de aktive GLP-1-peptider 7-34, 7-35, 7-36 og 7-37 som også kan være anvendbare som GLP-1-rester i henhold til foreliggende oppfinnelse.
Farmasøytiske preparater
Farmasøytiske preparater som inneholder et GLP-1-derivat ifølge foreliggende oppfinnelse, kan administreres parenteralt til pasienter som trenger en slik behandling. Parenteral administrering kan utføres ved hjelp av subkutan, intramuskulær eller intravenøs injeksjon ved hjelp av en sprøyte, eventuelt en penlignende sprøyte. Alternativt kan parenteral administrering utføres ved hjelp av en infusjonspumpe. En ytterligere mulighet er et preparat som kan være et pulver eller en væske for administrering av GLP-1-derivatet i form av en nese- eller lungespray. Som en enda ytterligere mulighet kan GLP-1-derivatene ifølge oppfinnelsen også administreres transdermalt, f.eks. som et plaster, eventuelt et iontoforetisk plater eller transmukosalt, f.eks. bukalt.
Farmasøytiske preparater som inneholder et GLP-1-derivat ifølge foreliggende oppfinnelse, kan fremstilles ved hjelp av vanlige teknikker, f.eks. som beskrevet i Remington's Pharmaceutical Sciences, 1985 eller i Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19. utg., 1995.
De injiserbare preparater av GLP-1-derivatet ifølge oppfinnelsen kan således fremstilles ved å anvende de vanlige teknikkene innen farmasøytisk industri som omfatter oppløsning og blanding av bestanddelene etter hva som er passende for å få det ønskede sluttprodukt.
Ifølge én fremgangsmåte oppløses GLP-1-derivatet i en vannmengde som er noe mindre enn sluttvolumet til preparatet som skal fremstilles. Et isotont middel, et konserveringsmiddel og en buffer tilsettes etter behov og pH-verdien i oppløsningen reguleres om nødvendig ved å anvende en syre, f.eks. saltsyre, eller en base, f.eks. vandig natriumhydroksid, etter behov. Til sist reguleres volumet av oppløsningen med vann slik at man får den ønskede konsentrasjon av bestanddelene.
Eksempler på isotone midler er natriumklorid, mannitol og glyserol.
Eksempler på konserveringsmidler er fenol, m-kresol, metyl-p-hydroksybenzoat og benzylalkohol.
Eksempler på egnede buffere er natriumacetat og natriumfosfat.
I tillegg til de ovenfor nevnte bestanddeler kan oppløsninger som inneholder et GLP-1-derivat ifølge foreliggende oppfinnelse, også inneholde et overflateaktivt middel for å forbedre oppløseligheten og/eller stabiliteten til GLP-1-derivatet.
Et preparat for neseadministrering av bestemte peptider kan f.eks. fremstilles som beskrevet i europeisk patent nr. 272097 (Novo Nordisk A/S) eller i WO 93/18785.
Ifølge én foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse tilveiebringes GLP-1-derivatet i form av et preparat som er egnet for administrering ved injeksjon. Et slikt preparat kan enten være en injiserbar oppløsning som er klar for bruk eller det kan være en mengde av et fast preparat, f.eks. et lyofilisert produkt, som må oppløses i et oppløsningsmiddel før det kan injiseres. Den injiserbare oppløsning inneholder fortrinnsvis ikke mindre enn ca. 2 mg/ml, fortrinnsvis ikke mindre enn ca. 5 mg/ml, mer foretrukket ikke mindre enn ca. 10 mg/ml av GLP-1-derivatet og fortrinnsvis ikke mer enn ca. 100 mg/ml av GLP-1-derivatet.
GLP-1-derivatene ifølge denne oppfinnelsen kan anvendes ved behandlingen av forskjellige sykdommer. Det bestemte GLP-1-derivat som skal anvendes, og det optimale dosenivå for enhver pasient, vil avhenge av sykdommen som skal behandles, og av mange forskjellige faktorer, inkludert virkningsfullheten av det bestemte peptidderivat som anvendes, alderen, kroppsvekten, den fysiske aktivitet og kosten til pasienten, av en mulig kombinasjon med andre legemidler og av alvorligheten av tilfellet. Det er anbefalt at doseringen av GLP-1-derivatet ifølge denne oppfinnelsen, bestemmes for hver enkelt pasient av fagfolk innen teknikken.
Man forestiller seg særlig at GLP-1-derivatet vil være anvendbart for fremstilling av et medikament med en langvarig virkningsprofil for behandling av ikke-insulinavhengig diabetes mellitus og/eller for behandling av fedme.
Foreliggende oppfinnelse er ytterligere illustrert ved hjelp av de følgende eksempler som imidlertid ikke skal oppfattes som begrensende for omfanget av beskyttelsen. Trekkene som er beskrevet i beskrivelsen ovenfor og de følgende eksempler kan, både hver for seg og i hvilken som helst kombinasjon derav, være avgjørende for realisering av oppfinnelsen i diverse former derav.
Eksempler
De følgende akronymer for kommersielt tilgjengelige kjemikalier er brukt:
DMF: N,N-dimetylformamid
NMP: N-metyl-2-pyrrolidon
EDPA: N-etyl-N,N-diisopropylamin
EGTA: Etylen-glykol-bis(P-aminoetyleter)-N,N,N',N'-tetraeddiksyre GTP: Guanosin-5'-trifosfat
TFA: Trifluoreddiksyre
THF: Tetrahydrofuran
Myr-ONSu: Tetradekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester
Pal-ONSu: Heksadekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-1 -yl-ester
Ste-ONSu: Oktadekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester HOOC-(CH2)6-COONSu: co-karboksyheptansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester HOOC-(CH2)io-COONSu: co-karboksyundekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester HOOC-(CH2)i2-COONSu: co-karboksytridekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester
HOOC-(CH2)i4-COONSu: co-karboksypentadekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester HOOC-(CH2)i6-COONSu: co-karboksyheptadekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester HOOC-(CH2)i8-COONSu: co-karboksynonadekansyre-2,5-dioksopyrrolidin-l-yl-ester
Forkortelser:
PDMS: plasmadesorpsj onsmassespektrometri
MALDI-MS: Matriksassistert laserdesorpsjons/ioniserings-massespektrometri HPLC:Væskekromatografi med høy yteevne
amu: atomvektenheter
Analyser
Plasmadesorpsjonsmassespektrometri
Prøvepreparerin<g>:
Prøven oppløses i 0,1 % TFA/EtOH (1:1) ved en konsentrasjon på 1 |ig/ul.
Prøveoppløsningen (5-10 ul) plasseres på et nitrocellulosemål (Bio-ion AB, Uppsala, Sverige) og får adsorbere til måloverflaten i 2 min. Målet skilles deretter med 2 x 25 ul 0,1 % TFA og tørkes ved sentrifugering. Deretter plasseres nitrocellulosemålet i en målkarusell og innføres i massespektrometret.
MS- analvse:
PDMS-analyse ble utført ved å anvende et "Bio-ion 20 time-of flighf-instrument (Bio-ion Nordic AB, Uppsala, Sverige). En akselerasjonsspenning på 15 kV ble påført og molekylioner dannet ved bombardering av nitrocelluloseoverflaten med 252 Cf-fisjonsfragmenter, ble akselerert mot en stoppdetektor. Den resulterende "time-of-flight"-spektrum ble kalibrert i et sann-massespektrum under anvendelse av H+<->og NO<+->ionene ved m/z hhv. 1 og 30. Massespektra ble generelt akkumulert for 1,0 x 106-fisjonshendelser, tilsvarende 15-20 min. Resulterende bestemte vekter tilsvarer alle iso-topgjennomsnittsberegnede molekylvekter. Nøyaktigheten av vektberegning er generelt bedre enn 0,1 %.
MALDI- MS
MALDI-TOF-MS-analyse ble utført ved å anvende et Voyager RP-instrument (PerSeptive Biosystems Inc., Framingham, MA) utstyrt med forsinket ekstraksjon og operert på lineær måte. Alfa-cyan-4-hydroksykanelsyre ble brukt som matriks og vektberegninger ble basert på ekstern kalibrering.
Eksempel
Syntese av Lys<26>(N<E->t<e>tradekanoyl)-GLP-l(7-37)
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra GLP-1 (7-37). En blanding av GLP-1 (7-37)
(25 mg, 7,45 um), EDPA (26,7 mg, 208 um), NMP (520 ul) og vann (260 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Myr-ONSu (2,5 mg, 7,67 um) i NMP (62,5 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i 20 min. En ytterligere mengde av Myr-ONSu (2,5 mg, 7,67 nm) i NMP (62,5 ul) ble tilsatt og den resulterende blanding forsiktig ristet i 5 min. Etter en total reaksjonstid på 40 min ble reaksjonen stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (12,5 mg, 166 umol) i 50 % vandig etanol (12,5 ml). Tittelforbindelsen ble isolert fra reaksjonsblandingen ved hjelp av HPLC under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system, utbytte: 1,3 mg (svarende til 4,9 % av det teoretiske utbytte). Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Det isolerte produkt ble analysert ved hjelp av PDMS og m/z- verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 567,9 ± 3. Den resulterende molekyl vekt er således 3 566,9 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 565,9 amu). Acyleringsstedet (Lys26) ble verifisert ved hjelp av enzymatisk spalting av tittelforbindelsen med Staphylococcus aureus V8-protease og etterfølgende vektbestemmelse av peptidfragmentene ved hjelp av PDMS.
I tillegg til tittelforbindelsen ble det isolert to andre GLP-1-derivater fra reaksjonsblandingen ved å anvende den samme kromatografiske kolonne og en grunnere gradient (35-38 % acetonitril over 60 min), se eksemplene 2 og 3.
Eksempel 2
Syntese av Lys<34>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37)
Tittelforbindelsen ble isolert ved hjelp av HPLC fra reaksjonsblandingen beskrevet i eksempel 1. PDMS-analyse ga et protonert molekylion ved m/z 3 567,7 ± 3. Molekylvekten finnes således å være 3 566,7 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 565,9 amu). Acyleringsstedet ble bestemt på grunnlag av fragmenteringsmønsteret.
Eksempel 3
Syntese av Lys<26,34->bis(N<E->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37)
Tittelforbindelsen ble isolert ved hjelp av HPLC fra reaksjonsblandingen beskrevet i eksempel 1. PDMS-analyse ga et protonert molekylion ved m/z 3 778,4 ± 3. Molekylvekten finnes således å være 3 777,4 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 776,1 amu).
Eksempel 4
Syntese av Lys<26>(N<e->t<e>tradekanoyl)Arg<34->GLP-l(7-37)
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra Arg<34->GLP-l(7-37). En blanding av Arg<34->GLP-1(7-37) (5 mg, 1,47 um), EDPA (5,3 mg, 41,1 nm), NMP (105 ul) og vann (50 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Myr-ONSu (0,71 mg, 2,2 um) i NMP (17,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i 20 min. Etter en total reaksjonstid på 30 min ble reaksjonen stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (25 mg, 33,3 umol) i 50 % vandig etanol (2,5 ml). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av HPLC som beskrevet i eksempel 1. PDMS-analyse ga et protonert molekylion ved m/z 3 594,9 ± 3. Molekylvekten finnes således å være 3 593,9 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 593,9 amu).
Eksempel 5
Syntese av Gly<8>Arg26'34Lys<36>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37)
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra Gly<8>Arg<26,34>Lys3<6->GLP-l(7-37) som ble innkjøpt fra QCB. En blanding av Gly<8>Arg<26,34>Lys3<6->GLP-l(7-37) (1,3 mg, 0,39 nm), EDPA (1,3 mg, 10 nm), NMP (125 ul) og vann (30 ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Myr-ONSu (0,14 mg, 0,44 nm) i NMP (3,6 yd), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 15 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (0,1 mg, 1,33 nmol) i 50 % vandig etanol (10 ni). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av HPLC og tittelforbindelsen (60 ng, 4 %) ble isolert.
Eksempel 6
Syntese av Arg<26>'34Lys3<6>(N<E->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av Arg<26>'34Lys3<6->GLP-l(7-37)-OH (5,0 mg, 1,477 umol), EDPA (5,4 mg, 41,78 umol), NMP (105 ul) og vann (50 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Myr-ONSu (0,721 mg, 2,215 umol) i NMP (18 ul). Reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 45 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,5 mg, 33,3 umol) i 50 % vandig etanol (250 ul). Reaksjonsblandingen ble renset av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (1,49 mg, 28 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 595 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 594 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 594 amu).
Eksempel 7
Syntese av Lys26,34bis(Ne-(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av GLP-l(7-37)-OH (70 mg, 20,85 umol), EDPA (75,71 mg, 585,8 umol), NMP (1,47 ml) og vann (700 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i8-COONSu (27,44 mg, 62,42 umol) i NMP (686 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (34,43 mg, 458,7 umol) i 50 % vandig etanol (3,44 ml). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (8,6 mg, 10 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 4 006 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 4 005 ± 3 amu (teoretisk verdi: 4 005 amu).
Eksempel 8
Syntese av Arg26'3<4>Lys<36>(N<e->(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-l (7-36)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<36->GLP-l(7-36)-OH (5,06 mg, 1,52 umol), EDPA (5,5 mg, 42,58 umol), NMP (106 ul) og vann (100 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i8-COONSu (1,33 mg, 3,04 umol) i NMP (33,2 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2,5 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,50 mg, 33,34 umol) i 50 % vandig etanol (250 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,46 mg, 8 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 652 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 651 3 amu (teoretisk verdi: 3 651 amu).
Eksempel 9
Syntese av Arg<26,>34Lys3<8>(N<e->(a-karboksynonadekanoyl))-GLP-1(7-38)-OH
En blanding av Arg<26>'<34>Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (5,556 mg, 1,57 umol), EDPA (5,68 mg, 43,96 umol), NMP (116,6 ul) og vann (50 ni) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)ig-COONSu (1,38 mg, 3,14 umol) i NMP (34,5 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2,5 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,5 mg, 33,3 nmol) i 50 % vandig etanol (250 ni)- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,7 mg, 12 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 866 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 865 3 amu (teoretisk verdi: 3 865 amu).
Eksempel 10
Syntese avArg34Lys26(N<E->(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (5,04 mg, 1,489 umol), EDPA (5,39 mg, 41,70 umol), NMP (105 ul) og vann (50 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i8-COONSu (1,31 mg, 2,97 umol) i NMP (32,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 30 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,46 mg, 32,75 umol) i 50 % vandig etanol (246 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (1,2 mg, 22 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 709 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 708 3 amu (teoretisk verdi: 3 708 amu).
Eksempel 11
Syntese av Arg<34>Lys<26>(N<E->(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-1(7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (5,8 mg, 1,714 umol), EDPA (6,20 mg, 47,99 umol), NMP (121,8 ul) og vann (58 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i6-COONSu (2,11 mg, 5,142 umol) i NMP (52,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,83 mg, 37,70 umol) i 50 % vandig etanol (283 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolon nekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,81 mg, 13 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 681 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 680 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 680 amu).
Eksempel 12
Syntese av Arg26'34Lys36(Ne-(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av Arg<26,>34Lys3<6->GLP-l(7-37)-OH (3,51 mg, 1,036 umol), EDPA (3,75 mg, 29,03 umol), NMP (73,8 ul) og vann (35 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i6-COONSu (1,27 mg, 3,10 umol) i NMP (31,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t og 10 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (1,71 mg, 22,79 umol) i 50 % vandig etanol (171 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,8 mg, 21 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 682 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 681 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 681 amu).
Eksempel 13
Syntese av Arg26'34Lys38(Ne-(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-l (7-38)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (5,168 mg, 1,459 umol), EDPA (5,28 mg, 40,85 umol), NMP (108,6 ul) og vann (51,8 ni) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i6-COONSu (1,80 mg, 4,37 umol) i NMP (45 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t og 15 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,41 mg,
32,09 \ imo\) i 50 % vandig etanol (241 Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,8 mg, 14 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS..m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 838 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 837 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 837 amu).
Eksempel 14
Syntese av Arg<26,>34Lys3<6>(N<e->(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-1(7-36)-OH
En blanding av Arg<26,>34Lys<36->GLP-l(7-36)-OH (24,44 mg, 7,34 nmol), EDPA (26,56 mg, 205,52 nmol), NMP (513 og vann (244,4 ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i6-COONSu (9,06 mg, 22,02 nmol) i NMP (1,21 ml), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 30 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (12,12 mg, 161,48 nmol) i 50 % vandig etanol (1,21 ml). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (7,5 mg, 28 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 625 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 624 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 624 amu).
Eksempel 15
Syntese av Arg26'34Lys36(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av Arg<26>'<34>Lys<36->GLP-l(7-37)-OH (4,2 mg, 1,24 umol), EDPA (4,49 mg, 34,72 nmol), NMP (88,2 ul) og vann (42 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)io-COONSu (1,21 mg, 3,72 nmol) i NMP (30,25 reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 40 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,04 mg, 27,28 nmol) i 50 % vandig etanol (204 ni). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,8 mg, 18 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 598 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 597 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 597 amu).
Eksempel 16
Syntese av Arg26,34Lys38(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-1(7-38)-OH
En blanding av Arg<26>'34Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (5,168 mg, 1,46 nmol), EDPA (5,28 mg, 40,88 nmol), NMP (108.6 ni) og vann (51,7 ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)io-COONSu (1,43 mg, 4,38 nmol) i NMP (35,8 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,41 mg, 32,12 nmol) i 50 % vandig etanol (241 n0- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,85 mg, 16 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 753 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 752 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 752 amu).
Eksempel 17
Syntese av Lys<26,34>bis(N<E->(æ-karboksyundekanoyl))-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av GLP-1 (7-37)-OH (10,0 mg, 2,98 nmol), EDPA (10,8 mg, 83,43 }o.mol), NMP (210 ni) og vann (100 \ il) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)io-COONSu (2,92 mg, 8,94 nmol) i NMP (73 reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (4,92 mg, 65,56 nmol) i 50 % vandig etanol (492 [ il). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/- TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (1,0 mg, 9 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 781 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 780 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 780 amu).
Eksempel 18
Syntese av Arg26,34Lys36(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-l(7-36)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<36->GLP-l(7-36)-OH (15,04 mg, 4,52 nmol), EDPA (16,35 mg, 126,56 nmol), NMP (315,8 \ x\) og vann (150,4 ni) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)io-COONSu (4,44 mg, 13,56 nmol) i NMP (111 ml), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 40 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (7,5 mg, 99,44 nmol) i 50 % vandig etanol (750 n0-Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (3,45 mg, 22 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 540 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 539 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 539 amu).
Eksempel 19
Syntese avArg34Lys26(N<e->(co-karboksyundekanoyl))-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (5,87 mg, 1,73 nmol), EDPA (6,27 mg, 48,57 nmol), NMP (123,3 ul) og vann (58,7 ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)io-COONSu (1,70 mg, 5,20 nmol) i NMP (42,5 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 40 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,86 mg, 286 nmol) i 50 % vandig etanol (286 ni)- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (1,27 mg, 20 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 597 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 596 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 596 amu).
Eksempel 20
Syntese av Arg<34>Lys<26>(N<E->(co-karboksyheptanoyl))-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (4,472 mg, 1,32 nmol), EDPA (4,78 mg, 36,96 nmol), NMP (94 ul) og vann (44,8 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)6-COONSu (1,07 mg, 3,96 nmol) i NMP (26,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 1 t og 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,18 mg, 29,04 nmol) i 50 % vandig etanol (218 ni)- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,5 mg, 11 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 540 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 539 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 539 amu).
Eksempel 21
Syntese av Arg<26>'34Lys3<8>(N<E->(co-karboksyheptanoyl))-GLP-l(7-38)-OH
En blanding av Arg<26,>34Lys3<8->GLP-l(7-38)-OH (5,168 mg, 1,459 nmol), EDPA (5,28 mg, 40,85 nmol), NMP (108,6 ni) og vann (51,6 ni) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)6-COONSu (1,18 mg, 4,37 nmol) i NMP (29,5 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 1 t og 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,40 mg, 32,09 nmol) i 50 % vandig etanol (240 Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,5 mg, 9 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 697 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 695 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 695 amu).
Eksempel 22
Syntese av Arg26,34Lys36(Ne-(co-karboksyheptanoyl))-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<36->GLP-l(7-37)-OH (5,00 mg, 1,47 umol), EDPA (5,32 mg, 41,16 nmol), NMP (105 ul) og vann (50 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)6-COONSu (1,19 mg, 4,41 nmol) i NMP (29,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,42 mg, 32,34 nmol) i 50 % vandig etanol (242 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,78 mg, 15 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 542 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 541 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 541 amu).
Eksempel 23
Syntese av Arg<26,>34Lys3<6>(N<e->(©-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-36)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<36->GLP-l(7-36)-OH (5,00 mg, 1,50 nmol), EDPA (5,44 mg, 42,08 nmol), NMP (210 ul) og vann (50 ni) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)6-COONSu (1,22 mg, 4,5 nmol) i NMP (30,5 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,47 mg, 33,0 umol) i 50 % vandig etanol (247 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,71 mg, 14 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 484 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 483 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 483 amu).
Eksempel 24
Syntese av Lys<26,34>bis(N<E->(to-karboksyheptanoyl))-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av GLP-1 (7-37)-OH (10 mg, 2,5 nmol), EDPA (10,8 mg, 83,56 nmol), NMP (210 ni) og vann (100 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)6-COONSu (2,42 mg, 8,92 nmol) i NMP (60,5 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 2 t og 35 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (4,92 mg, 65,54 nmol) i 50 % vandig etanol (492 n0- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (2,16 mg, 24 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 669 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 668 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 668 amu).
Eksempel 25
Syntese av Arg34Lys26(Ne-(co-karboksypentadekanoyl))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av Arg<34>GLP-l(7-37)-OH (4,472 mg, 1,321 umol), EDPA (4,78 mg, 36,99 umol), NMP (93,9 ul) og vann (44,7 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i4-COONSu (1,519 mg, 3,963 umol) i NMP (38 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 11 ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,18 mg, 29,06Umol) i 50 % vandig etanol (218 ni)- Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,58 mg, 12 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 654 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 653 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 653 amu).
Eksempel 26
Syntese av Arg<26>'34Lys3<6>(N<E->(co-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-36)-OH
En blanding av Arg<26>'34Lys3<6->GLP-l(7-36)-OH (5,00 mg, 1,50 nmol), EDPA (5,44 mg, 42,08 nmol), NMP (210 ni) og vann (50 ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i4-COONSu (1,72 mg, 4,5 nmol) i NMP (43 reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 11 ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,48 mg, 33 nmol) i 50 % vandig etanol (248 \ d). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,58 mg, 11 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 596 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 595 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 595 amu).
Eksempel 27
Syntese av litokolinsyre-2,5-diokso-pyrrolidin-l-yl-ester
Til en blanding av litokolinsyre (5,44 g, 14,34 mmol), N-hydroksysuccinimid
(1,78 g, 15,0 mmol), vannfritt THF (120 ml) og vannfritt acetonitril (30 ml), holdt ved 10 °C, ble det tilsatt en oppløsning av N,N'-disykloheksylkarbodiimid (3,44 g, 16,67 mmol) i vannfritt THF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 161, filtrert og konsentrert under vakuum. Resten ble oppløst i diklormetan (450 ml), vasket med en 10 % vandig Na2C03-oppløsning (2 x 150 ml) og vann (2 x 150 ml) og tørket (MgS04). Det ble filtrert og filtratet konsentrert under vakuum, hvorved man fikk en krystallinsk rest. Resten ble rekrystallisert fra en blanding av diklormetan (30 ml) og n-heptan (30 ml), hvorved man fikk tittelforbindelsen (3,46 g, 51 %) som et krystallinsk, fast stoff.
Eksempel 28
Syntese av Arg<34>Lys<26>(Ne-litokolyl)-GLP-l(7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (4,472 mg, 1,32 umol), EDPA (4,78 mg, 36,96 umol), NMP (94 ul) og vann (44,8 ul) ble forsiktig ristet i 10 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av litokolinsyre-2,5-diokso-pyrrolidin-1-yl-ester (1,87 mg, 3,96 umol) i NMP (46,8 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 11 ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,18 mg, 29,04 umol) i 50 % vandig etanol (218 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (1,25 mg, 25 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 744 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 743 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 743 amu).
Eksempel 29
Syntese av Na<->tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<t>
Til en suspensjon av H-Glu(OH)-OBu<t>(2,5 g, 12,3 mmol), DMF (283 ml) og EDPA (1,58 g, 12,3 mmol) ble det dråpe for dråpe tilsatt en oppløsning av Myr-ONSu (4,0 g, 12,3 mmol) i DMF (59 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 t ved romtemperatur og så konsentrert under vakuum, hvorved man fikk et totalvolum på 20 ml. Resten ble fordelt mellom 5 % vandig sitronsyre (250 ml) og etylacetat (150 ml) og fasene ble separert. Den organiske fase ble konsentrert under vakuum og resten oppløst i DMF (40 ml). Den resulterende oppløsning ble dråpe for dråpe tilsatt til en 10 % vandig oppløsning av sitronsyre (300 ml) holdt ved 0 °C. Den utfelte forbindelse ble samlet opp og vasket med isavkjølt vann og tørket i en vakuumtørkeovn. Den tørkede forbindelse ble oppløst i DMF (23 ml) og HONSu (1,5 g, 13 mmol) ble tilsatt. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av N,N'-disykloheksylkarbodiimid (2,44 g,
11,9 mmol) i diklormetan (47 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 t ved romtemperatur og den utfelte forbindelse ble frafiltrert. Utfellingen ble rekrystallisert fra N-heptan/2-propanol, hvorved man fikk tittelforbindelsen (3,03 g, 50 %).
Eksempel 30
Syntese av Glu22'2<3>'<30>Arg<26>'<34>Lys<38>(N<E->(Y-glutamyl(N<a->tetradekanoyl)))-GLP-l(7-38)-OH
En blanding av Glu22,23'3<0>Arg26>34Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (1,0 mg, 0,272 umol), EDPA (0,98 mg, 7,62 umol), NMP (70 ul) og vann (70 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na-tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>, fremstilt som beskrevet i eksempel 29, (0,41 mg, 0,816 umol) i NMP (10,4 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 45 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (0,448 mg, 5,98 umol) i 50 % vandig etanol (45 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (0,9 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble immobilisert på en Varian 500 mg "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (10 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (10 ml). Eluatet ble konsentrert under vakuum og reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/- TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,35 mg, 32 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 4 012 3. Den resulterende molekylvekt er således 4 011 ±3 amu (teoretisk verdi: 4 011 amu).
Eksempel 31
Syntese av Glu<23,26>Arg<34>Lys<38>(N<e->(Y-glutamyl(N<a->tetradekanoyl)))-GLP-l(7-38)-OH
En blanding av Glu23'26Arg34Lys38-GLP-1 (7-3 8)-OH (6,07 mg, 1,727 umol), EDPA (6,25 mg, 48,36 umol), NMP (425 ul) og vann (425 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na-tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>, fremstilt som beskrevet i eksempel 29, (2,65 mg, 5,18 umol) i NMP (66,3 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 45 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (2,85 mg, 38,0 umol) i 50 % vandig etanol (285 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (5,4 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble immobilisert på en Varian 500 mg "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (10 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (10 ml). Eluatet ble konsentrert under vakuum og reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/- TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,78 mg, 12 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 854 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 853 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 853 amu).
Eksempel 32
Syntese av Lys<26>'<34->bis(N<e->(©-karboksytridekanoyl))-GLP-l (7-37)-0H
En blanding av GLP-1 (7-37)-OH (30 mg, 8,9 umol), EDPA (32,3 mg, 250 umol), NMP (2,1 ml) og vann (2,1 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i2-COONSu (12,7 mg, 35,8 umol) i NMP (318 ul),.reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 1 t og 40 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (3,4 mg, 44,7 u-mol) i 50 % vandig etanol (335 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (10 mg, 29 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 840 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 839 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 839 amu).
Eksempel 33
Syntese av Lys26,34-bis(N6-(Y-glutamyl(Na-tetradekanoyl)))-
GLP-l(7-37)-OH. (NNC 90-1167).
En blanding av GLP-1 (7-37)-OH (300 mg, 79,8 umol), EDPA (288,9 mg, 2,24 mmol), NMP (21 ml) og vann (21 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na<->tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<4>, fremstilt som beskrevet i eksempel 29, (163 mg, 319,3 umol) i NMP (4,08 ml), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 1 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (131,8 mg, 1,76 mmol) i 50 % vandig etanol (13,2 ml). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (250 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble oppdelt i fire like porsjoner. Hver porsjon ble eluert på en Varian 500 mg "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 0,1 % vandig TFA (3,5 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med 70 % vandig acetonitril (4 ml). De kombinerte eluater ble fortynnet med 0,1 % vandig TFA (300 ml). Den utfelte forbindelse ble samlet opp ved sentrifugering, vasket med 0,1 % vandig TFA (50 ml) og til sist isolert ved sentrifugering. Til utfellingen ble det tilsatt TFA (60 ml) og den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt i 1 t og 30 min ved romtemperatur. Overskudd av TFA ble fjernet under vakuum og resten ble helt over i vann (50 ml). Den utfelte forbindelse ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (27,3 mg, 8 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 4 036 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 4 035 ± 3 amu (teoretisk verdi: 4 035 amu).
Eksempel 34
Syntese av Arg<26,34>Lys38(N<e->(co-karboksypentadekanoyl))-GLP-1 (7-3 8)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<38>GLP-l(7-38)-OH (30 mg, 8,9 umol), EDPA (32,3 mg, 250 p.mol), NMP (2,1 ml) og vann (2,1 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i4-COONSu (13,7 mg, 35,8 nmol) i NMP (343 ni), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 11 ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en opp-løsning av glysin (3,4 mg, 44,7 nmol) i 50 % vandig etanol (335 Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (4,8 mg, 14 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 894 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 893 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 893 amu).
Eksempel 35
Syntese av Na<->heksadekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>
Til en suspensjon av H-GluCOHVOBu' (4,2 g, 20,6 mmol), DMF (500 ml) og EDPA (2,65 g, 20,6 mmol) ble det dråpe for dråpe tilsatt en oppløsning av Pal-ONSu (7,3 g, 20,6 mmol) i DMF (100 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 64 t ved romtemperatur og så konsentrert under vakuum til et totalvolum på 20 ml. Resten ble fordelt mellom 10 % vandig sitronsyre (300 ml) og etylacetat (250 ml) og fasene ble separert. Den organiske fase ble konsentrert under vakuum og resten oppløst i DMF (50 ml). Den resulterende oppløsning ble dråpe for dråpe tilsatt til en 10 % vandig oppløsning av sitronsyre (500 ml) holdt ved 0 °C. Den utfelte forbindelse ble samlet opp og vasket med isavkjølt vann og tørket i en vakuumtørkeovn. Den tørkede forbindelse ble oppløst i DMF (45 ml) og HONSu (2,15 g, 18,7 mmol) ble tilsatt. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av N,N'-disykloheksylkarbodiimid (3,5 g, 17 mmol) i diklormetan (67 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 t ved romtemperatur og den utfelte forbindelse ble frafiltrert. Utfellingen ble rekrystallisert fra N-heptan/2-propanol, hvorved man fikk tittelforbindelsen (6,6 g, 72 %).
Eksempel 36
Syntese av Lys<26,34->bis(N<E->(y-glutamyl(N<a->heksadekanoyl)))-GLP-1 (7-3 7)-OH
En blanding av GLP-1 (7-37)-OH (10 mg, 2,9 umol), EDPA (10,8 mg, 83,4 umol), NMP (0,7 ml) og vann (0,7 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na<->heksadekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<1>, fremstilt som beskrevet i eksempel 33, (163 mg, 319,3 umol) i NMP (4,08 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 1 t og 20 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (4,9 mg, 65,6 umol) i 50 % vandig etanol (492 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (9 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding eluert på en Varian 1 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (10 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (10 ml). Eluatet ble konsentrert under vakuum og resten renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (2,4 mg, 20 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 4 092 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 4 091 ±3 amu (teoretisk verdi: 4 091 amu).
Eksempel 37
Syntese av Arg<34>Lys<2>6(NE-(Y-glutamyl(N<a->heksadekanoyl)))-GLP-1 (7-3 7)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (3,7 mg, 1,1 nmol), EDPA (4,0 mg, 30,8 umol), acetonitril (260 ul) og vann (260 ni) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na<->heksadekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>, fremstilt som beskrevet i eksempel 35, (1,8 mg, 3,3 nmol) i acetonitril (44,2 ni) og reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 11 og 20 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (1,8 mg, 24,2 nmol) i 50 % vandig etanol (181 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (12 ml) og NMP (300 ni) ble tilsatt og den resulterende blanding eluert på en Varian 1 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (10 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (6 ml). Eluatet fikk stå i 2 t ved romtemperatur og ble så konsentrert under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,23 mg, 6 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 752 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 751 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 751 amu).
Eksempel 38
Syntese av Arg<26>'<34>Lys3<8>(NE-(Y-glutamyl(N<a->tetradekanoyl)))-GLP-1 (7-38)-OH
En blanding av Arg<26,34->Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (14 mg, 4,0 nmol), EDPA (14,3 mg, 110,6 nmol), NMP (980 ul) og vann (980 nO ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na-tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>, fremstilt som beskrevet i eksempel 29, (12,1 mg, 23,7 umol) i NMP (303 ul) og reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (6,5 mg, 86,9 mmol) i 50 % vandig etanol (652 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (50 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble eluert på en Varian 1 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (15 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (6 ml). Eluatet fikk stå i 1 t og 45 min ved romtemperatur og ble så konsentrert under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (3,9 mg, 26 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 881 ±3. Den resulterende molekylvekt er således 3 880 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 880 amu).
Eksempel 39
Syntese av Arg<26,34>Lys<38>(N<e->(co-karboksypentadekanoyl))-GLP-1(7-38)-0H
En blanding av Arg<26,34>Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (14 mg, 4,0 umol), EDPA (14,3 mg, 111 umol), NMP (980 ul) og vann (980 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i4-COONSu (4,5 mg, 11,9 umol) i NMP (114 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 1 t og 45 min ved romtemperatur. En ytterligere oppløsning av HOOC-(CH2)h-COONSu (4,0 mg, 10,4 umol) i NMP (100 ul) ble tilsatt og den resulterende blanding ble forsiktig ristet i ytterligere 11 og 30 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (1,5 mg, 19,8 umol) i 50 % vandig etanol (148 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (3,9 mg, 26 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 809 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 808 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 808 amu).
Eksempel 40
Syntese av Arg<26>'34Lys3<8>(N<E->(7-glutamyl(N<a->heksadekanoyl)))-GLP-1 (7-3 8)-OH
En blanding av Arg<26,34>Lys<38->GLP-l(7-38)-OH (14 mg, 4,0 umol), EDPA (14,3 mg, 110,6 umol), NMP (980 ul) og vann (980 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na-heksadekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<l>, fremstilt som beskrevet i eksempel 35, (6,4 mg, 11,9 umol) i NMP (160 ul) og reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 1 t og 20 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (6,5 mg, 87 mmol) i 50 % vandig etanol (653 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (50 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble eluert på en Varian
1 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (10 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (6 ml). Eluatet fikk stå i 1 t og 30 min ved romtemperatur og ble så konsentrert under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (7,2 mg, 47 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av PDMS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 881 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 880 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 880 amu).
Eksempel 41
Syntese av Arg<18>23>'<2>6'30'34Lys<38>(N<e->heksadekanoyl)-GLP-1(7-38)-OH
En blanding av Arg<18>'<23>'<26>'30'34Lys<38->GLP-l-(7-38)-OH (1,0 mg, 0,27 umol), EDPA (0,34 mg, 2,7 umol) og DMSO (600 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Pal-ONSu (0,28 mg, 0,8 umol) i NMP (7 ul). Reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur og fikk så stå i ytterligere 6 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (1,6 mg, 21,7 umol) i 50 % vandig etanol (163 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/- TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (0,17 mg, 16 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av MALDI-MS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 961 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 960 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 960 amu).
Eksempel 42
Syntese av Arg<26>'34Lys3<8>(N<e->(co-karboksytridekanoyl))-GLP-1 (7-3 8)-0H
En blanding av Arg<26,34>Lys<38>GLP-l(7-38)-OH (14 mg, 4,0 umol), EDPA (14,3 mg, 111 umol), NMP (980 ul) og vann (980 ul) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av HOOC-(CH2)i2-COONSu (4,2 mg, 11,9 umol) i NMP (105 ul), reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 1 t og 50 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en opp-løsning av glysin (6,5 mg, 87 umol) i 50 % vandig etanol (652 ul). Reaksjonsblandingen ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (5,8 mg, 39 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av MALDI-MS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 780 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 779 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 781 amu).
Eksempel 43
Syntese av Arg34Lys26(Ne-(Y-glutamyl(Na-tetradekanoyl)))-GLP-l (7-37)-OH
En blanding av Arg<34->GLP-l(7-37)-OH (15 mg, 4,4 umol), EDPA (16 mg, 124 umol), NMP (2 ml) og vann (4,8 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na<->tetradekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<1>, fremstilt som beskrevet i eksempel 29, (12,1 mg, 23,7 umol) i NMP (303 ul) og reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (6,5 mg, 86,9 mmol) i 50 % vandig etanol (652 ul). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (50 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble eluert på en Varian 1 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (15 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (6 ml). Eluatet fikk stå i 1 t og 45 min ved romtemperatur og ble så konsentrert under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitril gradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (3,9 mg, 26 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av MALDI-MS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 723 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 722 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 723 amu).
Eksempel 44
Syntese av N<Q->oktadekanoyl-Glu(ONSu)-OBu<t>
Til en suspensjon av H-Glu(OH)-OBu' (2,82 g, 13,9 mmol), DMF (370 ml) og EDPA (1,79 g, 13,9 mmol) ble det dråpe for dråpe tilsatt en oppløsning av Ste-ONSu (5,3 g, 13,9 mmol) i DMF (60 ml). Diklormetan (35 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 t ved romtemperatur og så konsentrert under vakuum. Resten ble fordelt mellom 10 % vandig sitronsyre (330 ml) og etylacetat (200 ml) og fasene ble separert. Den organiske fase ble konsentrert under vakuum og resten oppløst i DMF (60 ml). Den resulterende oppløsning ble dråpe for dråpe tilsatt til en 10 % vandig oppløsning av sitronsyre (400 ml) holdt ved 0 °C. Den utfelte forbindelse ble samlet opp og vasket med isavkjølt vann og tørket i en vakuumtørkeovn. Den tørkede forbindelse ble oppløst i DMF (40 ml) og HONSu (1,63 g, 14,2 mmol) ble tilsatt. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av DCC (2,66 g, 12,9 mmol) i diklormetan (51 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 64 t ved romtemperatur og den utfelte forbindelse ble frafiltrert. Utfellingen ble rekrystallisert fra N-heptan/2-propanol, hvorved man fikk tittelforbindelsen (4,96 g, 68 %).
Eksempel 45
Syntese av Arg<26>'34Lys3<8>(N<£->(Y-<g>lutamyl(N<a>-oktadekanoyl)))-GLP-1(7-3 8)-0H
En blanding av Arg<26,34->GLP-l(7-38)-OH (28 mg, 7,9 umol), EDPA (28,6 mg, 221,5 umol), NMP (1,96 ml) og vann (1,96 ml) ble forsiktig ristet i 5 min ved romtemperatur. Til den resulterende blanding ble det tilsatt en oppløsning av Na-oktadekanoyl-GlutONSu^OBu1 (17,93 g, 31,6 umol), fremstilt som beskrevet i eksempel 44, i NMP (448 ul) og reaksjonsblandingen ble forsiktig ristet i 2 t ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en oppløsning av glysin (13,1 mg, 174 nmol) i 50 % vandig etanol (1,3 ml). En 0,5 % vandig oppløsning av ammoniumacetat (120 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble oppdelt i 2 like porsjoner. Hver porsjon ble eluert på en Varian 5 g "C8 Mega Bond Elut"-innsats, den immobiliserte forbindelse ble vasket med 5 % vandig acetonitril (25 ml) og til sist frigjort fra innsatsen ved eluering med TFA (25 ml). De kombinerte eluater fikk stå i 1 t og 25 min ved romtemperatur og ble så konsentrert under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi under anvendelse av en cyanpropylkolonne (Zorbax 300SB-CN) og et standard acetonitril/TFA-system. Kolonnen ble varmet opp til 65 °C og acetonitrilgradienten var 0-100 % over 60 min. Tittelforbindelsen (3,6 mg, 11 %) ble isolert og produktet ble analysert ved hjelp av MALDI-MS. m/z-verdien for det protonerte molekylion ble funnet å være 3 940 ± 3. Den resulterende molekylvekt er således 3 939 ± 3 amu (teoretisk verdi: 3 937 amu).
Biologiske funn
Protrahert virkning av GLP- 1- derivater etter s. c.- administrering
Den protraherte virkning av et antall GLP-1-derivater ifølge oppfinnelsen, ble bestemt ved å overvåke konsentrasjonen derav i plasma etter s.c.-administrering til friske griser ved å anvende fremgangsmåten beskrevet nedenunder. For sammenligning ble også konsentrasjonen i plasma av GLP-l(7-37) etter s.c.-administrering fulgt, resultatene er gjengitt i tabell 1. Den protraherte virkning av andre GLP-1-derivater ifølge oppfinnelsen kan bestemmes på den samme måte.
Griser (50 % Duroc, 25 % Yorkshire, 25 % dansk landrase, ca. 40 kg) ble fastet fra begynnelsen av forsøket. Til hver gris ble det administrert 0,5 nmol testforbindelse pr. kg kroppsvekt i en 50 uM isoton oppløsning (5 mM fosfat, pH 7,4, 0,02 % Tween-20 (Merck), 45 mg/ml mannitol (pyrogenfri, Novo Nordisk). Det ble tatt blodprøver fra et kateter i vena jugularis på de tidspunkter som er angitt i tabell 1. 5 ml av blodprøvene ble helt over i avkjølt glass inneholdende 175 ul av den følgende oppløsning: 0,18 M EDTA, 1 500 KIE/ml aprotinin (Novo Nordisk) og 3 % bacitracin (Sigma), pH 7,4. Innen 30 min ble prøvene sentrifugert i 10 min ved 5-6 000 x g. Temperaturen ble holdt ved 4 °C.
Supernatanten ble pipettert over i forskjellige glass og holdt ved minus 20 °C inntil bruk.
Plasmakonsentrasjonene av peptidene ble bestemt ved hjelp av RIA under anvendelse av et monoklonalt antistoff som er spesifikk for det N-terminale området i GLP-l(7-37). Kryssreaktivitetene var lavere enn 1 % med GLP-l(l-37) og GLP-1 (8-36)amid og < 0,1 % med GLP-l(9-37), GLP-l(10-36)amid og GLP-1(1 l-36)amid. Hele fremgangsmåten ble utført ved 4 °C.
Analysen ble utført på følgende måte: 100 ul plasma ble blandet med 271 ul 96 % etanol, blandet under anvendelse av en vorteksblander og sentrifugert ved 2 600 x g i 30 min. Supernatanten ble dekantert over i Minisorp-rør og inndampet fullstendig (Savant Speedvac AS290). Inndampingsresten ble rekondisjonert i analysebufferen bestående av
'80 mM NaH2P04/Na2HP04, 0,1 % HSA (Orpha 20/21, Behring), 10 mM EDTA, 0,6 mM tiomersal (Sigma), pH 7,5. Prøver ble rekondisjonert i volumer egnet for deres
forventede konsentrasjoner, og fikk rekondisjoneres i 30 min. Til 300 ul prøve ble 100 ul antistoffoppløsning i fortynningsbuffer inneholdende 40 mM NaH2P04/Na2HPC>4, 0,1 % HSA, 0,6 mM tiomersal, pH 7,5, tilsatt. En ikke-spesifikk prøve ble fremstilt ved å blande 300 ul buffer med 100 ul fortynningsbuffer. Individuelle standarder ble fremstilt fra frysetørkede standardløsninger, oppløst i 300 ul analysebuffer. Alle prøver ble forinkubert i Minisorp-rør med antistoff som beskrevet ovenfor i 72 t. 200 ul "tracer" i fortynningsbuffer inneholdende 6-7 000 CPM, ble tilsatt, prøver ble blandet og inkubert i 48 t. 1,5 ml av en suspensjon av 200 ml pr. liter heparinstabilisert bovinplasma og 18 g pr. liter aktivt karbon (Merck) i 40 mM NaH2P04/Na2HP04, 0,6 mM tiomersal, pH 7,5,
ble tilsatt til hvert rør. Før bruk ble suspensjonen blandet og fikk stå i 2 t ved 4 °C. Alle prøver ble inkubert i 1 t ved 4 °C og så sentrifugert ved 3 400 x g i 25 min. Umiddelbart etter sentrifugeringen ble supernatanten dekantert og tellet i en y-teller. Konsentrasjonen i prøvene ble beregnet ut fra individuelle standardkurver. De følgende
plasmakonsentrasjoner ble funnet, beregnet som prosent av den maksimale konsentrasjon for de enkelte forbindelsene (n = 2):
Som det fremgår av tabell 1, har GLP-1-derivatene ifølge oppfinnelsen en langvarig virkningsprofil i forhold til GLP-1 (7-3 7) og er mye mer motstandsdyktig i plasma enn GLP-1 (7-37). Det fremgår også fra tabell 1 at tidspunktet da toppkonsentrasjonen i plasma oppnås, varierer innenfor brede grenser, avhengig av det bestemte GLP-1-derivat som velges.
Stimulering av cAMP- dannelse i en cellelinje som uttrykker den klonede human- GLP- 1-reseptor
For å demonstrere virkningsfullhet av GLP-1-derivatene, ble deres evne til å stimulere dannelse av cAMP i en cellelinje som uttrykker den klonede human-GLP-1-reseptor, testet. En EC50ble beregnet ut fra dose-respons-kurven.
Baby-hamster-nyreceller (BHK-celler) som uttrykker humanbukspyttkjertel-GLP-1-reseptoren, ble brukt (Knudsen and Pridal, 1996, Eur. J. Pharm., 318, 429-435). Plasmamembraner ble preparert (Adelhorst et al., 1994, J. Biol. Chem. 269, 6275) ved homogenisering i buffer (10 mmol/1 Tris-HCl og 30 mmol/1 NaCl, pH 7,4, som i tillegg inneholder 1 mmol/1 ditiotreitol, 5 mg/l leupeptin (Sigma, St. Louis, MO, USA), 5 mg/l pepstatin (Sigma, St. Louis, MO, USA), 100 mg/l bacitracin (Sigma, St. Louis, MO, USA) og 16 mg/l aprotinin [Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd, Danmark)]. Homogenatet ble sentrifugert på toppen av et lag med 41 % (vekt/volum) sukrose. Hvite bånd mellom de to lagene ble fortynnet i buffer og sentrifugert. Plasmamembranene ble lagret ved -80 °C inntil de ble brukt.
Analysen ble utført i 96-brønners mikrotiterplater i et totalvolum på 140 ul. Bufferen som ble brukt, var 50 mmol/1 Tris-HCl, pH 7,4, med tilsetning av 1 mmol/1 EGTA, 1,5 mmol/MgS04, 1,7 mmol/1 ATP, 20 mM GTP, 2 mmol/1 3-isobutyl-l-metylxantin, 0,01 % Tween-20 og 0,1 % humanserumalbumin (Reinst, Behringwerke AG, Marburg, Tyskland). Forbindelser som skulle testes med hensyn på agonistaktivitet, ble oppløst og fortynnet i buffer, tilsatt til membranpreparatet og blandingen ble inkubert i 2 t ved 37 °C. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av 25 ul 0,05 mol/l HC1. Prøver ble fortynnet 10 ganger før analyse med hensyn på cAMP ved hjelp av en
scintillasjonsproksimitetsanalyse (RPA 538, Amersham, Storbritannia). De følgende resultater ble funnet:

Claims (72)

1. Derivat av et GLP-1 (7-3 7) eller av en analog av GLP-1 (7-3 7),karakterisert vedat det har bare én lipofil substituent som er bundet eventuelt via et mellomledd til en aminosyrerest som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, eller har bare to lipofile substituenter, hvorav én er bundet eventuelt via et mellomledd til den C-terminale aminosyrerest og den andre er bundet eventuelt via et mellomledd til en aminosyrerest som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, eller har bare to lipofile substituenter som er bundet eventuelt via et mellomledd til aminosyrerester som ikke er den N-terminale eller C-terminale aminosyrerest, hvor i alt opp til 10 aminosyrerester i GLP(7-37) eller analogen derav er byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som den genetiske kode kan kode for.
2. Derivat av en analog av GLP-1 (7-37), karakterisert vedat analogen er GLP-1(7-C), hvor C er valgt fra gruppen som omfatter 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44 og 45 , hvor derivatet har bare én lipofil substituent som er bundet eventuelt via et mellomledd til den C-terminale aminosyrerest.
3. Derivat av en analog av GLP-1(7-37), karakterisert vedat (a) analogen er GLP-1 (A-B) hvor A er et helt tall fra 1 til 7 og B er et helt tall fra 38 til 45, hvor analogen har i alt opp til 10 aminosyrerester byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som den genetiske kode kan kode for, og (b) derivatet har én lipofil substituent bundet eventuelt via et mellomledd til den C-terminale aminosyrerest og en andre eventuelt lipofil substituent bundet eventuelt via et mellomledd til én av de øvrige aminosyrerester.
4. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, karakterisert vedat analogen av GLP-1(7-37) er valgt fra gruppen bestående av:Arg<26->GLP-l(7-37); Arg<34->GLP-l(7-37); L<y>s<36->GL<P-1>(<7-37>); Arg26-34Lys36-GLP-l(7-37); Arg2634Lys38GLP-l(7-38); Arg26-34Lys39-GLP-l(7-39);Arg26-34Lys40-GLP-l (7-40); Arg<2>6Lys3<6->GLP-l(7-37); 20 Arg34Lys36-GLP-l(7-37);Arg26Lys3<9->GLP-l (7-39);Arg<3>4Lys4<0->GLP-1(7-40); Arg26-34Lys36 39-GLP-1(7-39); Arg26 34 Lys36 40-GLP-1(7-40); Gly8Arg26-GLP-1 (7-37); Gly<8>Arg<34->GLP-l(7-37);Gly8Lys3<6->GLP-l(7-37); Gly<8>Arg26"34Lys<36->GLP-1 (7-37); GIy<8>Arg<26>-<3>4Lys3<9>-GLP-1(7-39); GIy<8>Arg<26-34>Lys4<0->GLP-l(7-40); GIy<8>Arg<2>6Lys3<6->GLP-l (7-37); GIy<8>Arg34Lys3<6->GLP-l(7-37); GIy<8>Arg26Lys3<9->GLP-l (7-39); Gly<8>Arg<34>Lys<40->GLP.
1 (7-40); Gly8Arg26'34LyS36 39-GLPl (7-39) and GIy8Arg26 34Lys36-40-GLP-l (7-40).
5. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1 -3, karakterisert vedat analogen av GLP-1 (7-37) er valgt fra gruppen bestående av:Arg<26-34>Lys<38>GLP-l (7-38); Arg<26>-<34>Lys<39>GLP-l(7-39);Arg26-34Lys40GLP-l(7-40);Arg26-34Lys41 GLP-1 (7-41); Arg26 34Lys42GLP-l (7-42);Arg26'34Lys43GLP-l (7-43);Arg<26>'<34>Lys<44>GLP-1(7-44); Arg<26>'<34>Lys<45>GLP-1(7-45); Arg26-34Lys38GLP-l(l-38); Arg26'34Lys39GLP-l(l-39); Arg26'4Lys40GLP-l(l-40); Arg26'34Lys41GLP-l(l-41);Arg26'34Ly542GLP-l(l-42); Arg26'34Lys43GLP-l(l-43);Arg26'34Lys44GLP-l(1-44);Arg28'34Lys4<5>GLP-l(l-45); Arg<26-34>Lys<38>GLP-l(2-38); Arg26'34Lys39GLP-l(2-39); Arg26'34Lys40GLP-1(2-40); Arg26'34Lys41 GLP-1(2-41);Arg26-34Lys42GLP-l(2-42);Arg26'<3>4Lys4<3>GLP-l(2-43);Arg<26-34>Lys<44>GLP-l(2-44);Arg26'34Lys45GLP-l(2-45);Arg<26>'<34>Ly<s38>GLP-l(3-38); Arg<26>'<34>Lys<39>GLP-l (3-39); Arg26-34Lys40GLP-l(3-40); Arg26'34Lys41GLP-l(3-41); Arg26'34Lys42GLP-l(3-42); Arg26'34Lys43GLP-l(3-43);Arg26'34Lys44GLP-l(3-44);Arg26'34Lys45^ Arg26-34Lys38GLP-l(4-38); Arg26'34Lys39GLP-l(4-39); Arg26'34Lys40GLP-1(4-40); Arg26-34Lys41GLP-l(4-41);; Ar^ Arg26'34Lys44GLP-l(4-44);Arg2^ Arg26'34Lys39GLP-l(5-39);Arg^^ Arg26'34Lys42GLP-l(5-42); Arg26'34Lys43GLP-1(5-43); Arg26'34Lys44GLP-l(5-44); Arg26'34Lys45GLP-l(5-45);Arg26^ Arg26-34Lys40GLP-l(6-40); Arg26'34Lys41GLP-l(6-41); Arg26'34Lys42GLP-1(6-42); Arg26'34Lys43GLP-l(6-43); Arg26'34Lys44GLP-1(6-44); Arg26'34Lys45GLP-1(6-45); Arg26Lys38GLP-l(l-38); Arg34Lys38GLP-l(l-38);Arg26'34Lys36'38GLP-l(l-38);Arg26Lys<38>GLP-l(7-38);Arg34Lys38GLP-l(7-38);Arg<26>'34LyS<36>"<38>GLP-l(7-38);Arg26'34Lys3<8>GLP-l(7-38);Arg<26>Lys<39>GLP-l(l-39);Arg<3>4Lys39GLP-l(l-39);Arg26'34LyS<36>'<39>GLP-l (1 -39); Arg<2>6Lys3<9>GLP-l(7-39);Arg34Lys3<9>GLP-l(7-39) og Arg26,34LyS<36,39>GLP-1(7-39).
6. Derivat av en analog av GLP-l(7-37), karakterisert vedat minst én aminosyrerest i analogen har en lipofil substituent og analogen er valgt fra gruppen bestående av: Arg ' Lys GLP-1 (7-38) ;Arg26-3<4>Lys<39>GLP-l(7-39); Arg<26-34>Lys<40>GLP-l (7-40); Arg26 34Lys41 GLP-1 (7-41) ; Arg26 34Lys42GLP-l (7-42); Arg<26>'<34>Lys<43>GLP-l (7-43); Arg<26>'34Lys4<4>GLP-l(7-44);Arg<26>'<34>Lys<45>GLP-l(7-45); Arg<26->34Lys3<8>GLP-l(l-38); Arg<26>'34Lys3<9>GLP-l(l-39) ;Arg26'4Lys4<0>GLP-l(l-40); Arg26'34Lys4<1>GLP-l(l-41); Arg<26>'<34>Ly5<42>GLP-l(l-42) ;Arg26'34Lys4<3>GLP-l(l-43); Arg<26>'<34>Lys<44>GLP-l (1-44); Arg28'34Lys<45>GLP-1(1-45);Arg26'34Lys3<8>GLP-l(2-38); Arg<26>'<34>Lys<39>GLP-l(2-39); Arg26*3<4>Lys<40>GLP-1(2-40);Arg26-34Lys4<1>GLP-l(2-41); Arg<26>'<34>Lys42GLP-1(2-42); Arg26'3<4>Lys<43>GLP-1(2-43); Arg<26>'<34>Lys<44>GLP-1(2-44); Arg<26>'34Lys<45>GLP-1(2-45); Arg26'3<4>Lys<38>GLP-1(3-38);Arg26'34Lys3<9>GLP-l (3-39); Arg<26>'<34>Ly<s40>GLP-1(3-40); Arg26'3<4>Lys<4>,GLP-1(3-41); Arg<26>'<34>Lys<42>GLP-l(3-42); Arg<26>'<34>Lys<43>GLP-l(3-43); Arg26'3<4>Lys<44>GLP-1(3-44); Arg26'34Lys4<5>GLP-l(3-45); Arg<26>"<34>Lys<38>GLP-l(4-38); Arg26'3<4>Lys<39>GLP-1(4-39);Arg26'34Lys<40>GLP-l(4-40); Arg26,34Lys41 GLP-1(4-41);; Arg<26>'<34>Lys<42>GLP-1(4-42); Arg<26,34>Lys<43>GLP-1(4-43); Arg26'34Lys4<4>GLP-1(4-44); Arg<26>'<3>4Lys<45>GLP-1(4-45); Arg<26>'<34>Lys<38>GLP-l(5-38); Arg<26>>34Lys3<9>GLP-l(5-39); Arg<26,>34Lys<40>GLP-1(5-40); Arg<26>'<34>Lys<4>,GLP-l(5-41); Arg26'34Lys42GLP-l(5-42); Arg26'34Lys<43>GLP-1(5-43);Arg26'34Lys4<4>GLP-l(5-44); Arg<25>'<34>Lys<45>GLP-1(5-45); Arg26-3<4>Lys<38>GLP-1(6-38); Arg<26>'<34>Lys<39>GLP-l(6-39); Arg<26>'<34>Lys<40>GLP-1(6-40); Arg26'3<4>Lys<41>GLP-1(6-41);Arg26,34Lys4<2>GLP-l(6-42); Arg<26>'<34>Lys<43>GLP-1(6-43); Arg<26>-34Lys4<4>GLP-1(6-44); Arg<26>'<34>Lys<45>GLP-l(6-45); Arg<26>Lys3<8>GLP-l(l-38); Arg<34>Lys<38>GLP-l(l-38) ;Arg26'34Lys<36>'<38>GLP-l(l-38); Arg<26>Lys<38>GLP-1(7-38); Arg34Lys<38>GLP-l(7-38); Arg26'34LyS36'38GLP-l(7-38); Arg26'34Lys38GLP-l(7-38); Arg26Lys39GLP-l(l-39);Arg34Lys3<9>GLP-l(l-39); Arg26'34LyS36>39GLP-l (1 -39); Arg<26>Lys<39>GLP-l(7-39) ;Arg34Lys39GLP-l(7-39) og Arg<26>'34LyS36'39GLP-l(7-39), med det forbehold at dersom bare én lipofil substituent er til stede og denne substituenten er bundet til den N-terminale eller til den C-teTminale aminosyrerest, så er denne substituenten en alkylgruppe eller en gruppe som har en co-karboksylsyregruppe.
7. Derivat ifølge hvilket som helst av de forutgående krav,karakterisert vedat den lipofile substituent omfatter 4-40 karbonatomer, mer foretrukket 8-25 karbonatomer.
8. Derivat ifølge hvilket som helst av de forutgående krav,karakterisert vedat en lipofil substituent er bundet til en aminosyrerest på en slik måte at en karboksylgruppe i den lipofile substituent danner en amidbinding med en aminogruppe i aminosyreresten.
9. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1 -7, karakterisert vedat en lipofil substituent er bundet til en aminosyrerest på en slik måte at en aminogruppe i den lipofile substituent danner en amidbinding med en karboksylgruppe i aminosyreresten.
10. Derivat ifølge hvilket som helst av de forutgående krav,karakterisert vedat den lipofile substituent er bundet til aminosyreresten ved hjelp av et mellomledd.
11. Derivat ifølge krav 10, karakterisert vedat mellomleddet er en uforgrenet alkan-a,©-dikarboksylsyregruppe med 1-7 metylengrupper, fortrinnsvis to metylengrupper, som danner en bro mellom en aminogruppe i peptidet og en aminogruppe i den lipofile substituent.
12. Derivat ifølge krav 10, karakterisert vedat mellomleddet er en aminosyrerest, bortsett fra Cys, eller et dipeptid, som f.eks. Gly-Lys.
13. Derivat ifølge krav 12, karakterisert vedat en karboksylgruppe i GLP-1(7-3 7) danner en amidbinding med en aminogruppe i Lys eller et dipeptid som inneholder en Lys-rest, og den andre aminogruppen i Lys-mellomleddet eller et dipeptidmellomledd som inneholder en Lys-rest, danner en amidbinding med en karboksylgruppe i den lipofile substituent.
14. Derivat ifølge krav 12, karakterisert vedat en aminogruppe i peptidet danner en amidbinding med en karboksylgruppe i aminosyreresten eller dipeptidmellomleddet, og en aminogruppe i aminosyreresten eller dipeptidmellomleddet danner en amidbinding med en karboksylgruppe i den lipofile substituent.
15. Derivat ifølge krav 12, karakterisert vedat en karboksylgruppe i peptidet danner en amidbinding med en aminogruppe i aminosyrerestmellomleddet eller dipeptidmellomleddet, og en karboksylgruppe i aminosyrerestmellomleddet eller dipeptidmellomleddet danner en amidbinding med en aminogruppe i den lipofile substituent.
16. Derivat ifølge krav 12, karakterisert vedat en karboksylgruppe i peptidet danner en amidbinding med en aminogruppe i et mellomledd som er Asp eller Glu, eller et dipeptidmellomledd som inneholder en Asp- eller Glu-rest og en karboksylgruppe i mellomleddet danner en amidbinding med en aminogruppe i den lipofile substituent.
17. Derivat ifølge hvilket som helst av de forutgående krav,karakterisert vedat den lipofile substituent omfatter et delvis eller fullstendig hydrogenert syklopentanfenantrenskjelett.
18. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent er en rettkjedet eller forgrenet alkylgruppe.
19. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent er en acylgruppe i en rettkjedet eller forgrenet fettsyre.
20. Derivat ifølge krav 19, karakterisert vedat acylgruppen er valgt fra gruppen som omfatter CH3(CH2)nCO-, hvor n er 4-38, fortrinnsvis CH3(CH2)6CO-, CH3(CH2)8CO-, CH3(CH2)10CO-, CH3(CH2)12CO-, CH3(CH2),4CO-, CH3(CH2),6CO-, CH3(CH2)18CO-, CH3(CH2)20CO- og CH3(CH2)22CO-.
21. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent er en acylgruppe i en rettkjedet eller forgrenet alkan-a,co-dikarboksylsyre.
22. Derivat ifølge krav 21, karakterisert vedat acylgruppen er valgt fra gruppen som omfatter HOOC(CH2)mCO-, hvor m er 4-38, fortrinnsvis 4-24, mer foretrukket valgt fra gruppen som omfatter HOOC(CH2)14CO-, HOOC(CH2),6CO-, HOOC(CH2),8CO-, HOOC(CH2)20CO- og HOOC(CH2)22CO-.
23. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel CH3(CH2)p((CH2)qCOOH)CHNH-CO(CH2)2CO-, hvor p og q er hele tall og p + q er et helt tall fra 8 til 33, fortrinnsvis fra 12 til 28.
24. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel CH3(CH2)rCO-NHCH(COOH)(CH2)2CO-, hvor r er et helt tall fra 10 til 24.
25. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel CH3(CH2)sCO-NHCH((CH2)2COOH)CO-, hvor s er et helt tall fra 8 til 24.
26. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel -NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)uCH3, hvor u er et helt tall fra 8 til 18.
27. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel -NHCH(COOH)(CH2)4NH-COCH((CH2)2COOH)-NHCO(CH2)wCH3, hvor w er et helt tall fra 10 til 16.
28. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel -NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)xCH3, hvor x er et helt tall fra 10 til 16.
29. Derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, karakterisert vedat den lipofile substituent med mellomleddet er en gruppe med formel -NHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)-NHCO(CH2)yCH3, hvor y er 0 eller et helt tall fra 1 til 22.
30. Derivat ifølge hvilket som helst av de forutgående krav,karakterisert vedat i alt opp til 6 aminosyrerester er blitt byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som den genetiske kode kan kode for.
31. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys<26>(N<e->tetradekanoyl)-GLP-l(7-37).
32. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys34(N8-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37).
33. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26,34-bis(NE-tetradekanoyl)-GLP-1(7-37).
34. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26(Ne-tetradekanoyl)Arg34-GLP-l(7-37).
35. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Gly8Arg26,34Lys36(N6-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37).
36. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys36(NE-tetradekanoyl)-GLP-l(7-37).
37. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26'34-bis(NE-(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-37).
38. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys38(Ne-(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-l(7-38).
39. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-(co-karboksynonadekanoyl))-GLP-1(7-37).
40. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-l(7-37).
41. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys36(Ne-(co-karboksyheptadekanoyl))-GLP-l(7-37).
42. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys38(Ne-(co-karboksyheptadekanoyl)-GLP-l(7-38).
43. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys36(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-l(7-37).
44. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys38(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-l(7-38).
45. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26,34bis(N8-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-1(7-37).
46. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-(co-karboksyundekanoyl))-GLP-1(7-37).
47. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(NE-(co-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-37).
48. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys38(Ne-(co-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-38).
49. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys26(NE-(co-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-37).
50. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26'34bis(Ne-(co-karboksyheptanoyl))-GLP-1(7-37).
51. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-(co-karboksypentadekanoyl))-GLP-l(7-37).
52. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-litokolyl)-GLP-l(7-37).
53. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Glu22'23'3Wg26,34Lys38(Ne-(Y-glutarhyl(Na-tetradekanoyl)))-GLP-1 (7-3 8).
54. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Glu23,26Arg34Lys38(Ne-(Y-glutamyl(Na-tetra-dekanoyl)))-GLP-l(7-38).
55. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26'34-bis(Ne-(co-karboksytridekanoyl))-GLP-1(7-37).
56. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26'34-bis(NE-(Y-glutarnyl(Na-tetradekanoyl)))- GLP-1(7-37).
57. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys38(NE-(©-karboksypentadekanoyl))-GLP-l(7-38).
58. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Lys26'34-bis(NE-(Y-glutamyl(Na-heksadekanoyl)))-GLP-l (7-37).
59. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(NE-(Y-glutarnyl(Na-heksadekanoyl)))-GLP-1 (7-3 7).
60. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys38(NE-(Y-glutamyl(Na-tetradekanoyl)))-GLP-1 (7-3 8).
61. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys38(Ne-(co-karboksypentadekanoyl))-GLP-l(7-38).
62. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys38(Ne-(Y-glutamyl(Na-heksadekanoyl)))-GLP-1 (7-3 8).
63. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg18,23,26,30,34Lys38(NE-heksadekanoyl)-GLP-1(7-38).
64. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26'34Lys38(NE-(©-karboksytridekanoyl))-GLP-l(7-38).
65. Derivat ifølge krav 1, karakterisert vedat det er Arg34Lys26(Ne-(y-glutamyl(Na-tetradekanoyl)))-GLP-1(7-37).
66. Derivat ifølge krav 3, karakterisert vedat det er Arg26,34Lys38(Ne-(y-glutamyl(Na-oktadekanoyl)))-GLP-l(7-38).
67. Farmasøytisk preparat, karakterisert vedat det omfatter et derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-68 og en farmasøytisk akseptabel vehikkel eller bærer.
68. Anvendelse av et derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-66 til fremstilling av et medikament som har en langvarig virkningsprofil i forhold til GLP-1(7-37).
69. Anvendelse av et derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-66 til fremstilling av et medikament for behandling av ikke-insulinavhengig diabetes mellitus.
70. Anvendelse av et derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-66 til fremstilling av et medikament for behandling av insulinavhengig diabetes mellitus.
71. Anvendelse av et derivat ifølge hvilket som helst av kravene 1-66 til fremstilling av et medikament for behandling av fedme.
72. Anvendelse av et derivat av et GLP-l(7-37) eller av en analog derav til fremstilling av et medikament med en langvarig virkningsprofil for behandling av fedme, hvor minst én aminosyrerest i GLP-1(7-3 7) eller analogen derav har en lipofil substituent bundet eventuelt via et mellomledd og hvor i alt opp til 10 aminosyrerester er byttet ut med hvilken som helst a-aminosyrerest som den genetiske kode kan kode for, med det forbehold at dersom bare én lipofil substituent er til stede og denne substituenten er bundet til den N-terminale eller til den C-terminale aminosyrerest i GLP-1(7-37) eller analogen derav, så er denne substituenten en alkylgruppe eller en gruppe som har en co-karboksylgruppe.
NO19990950A 1996-08-30 1999-02-26 GLP-1-derivater NO325273B1 (no)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK93196 1996-08-30
DK125996 1996-11-08
DK147096 1996-12-20
PCT/DK1997/000340 WO1998008871A1 (en) 1996-08-30 1997-08-22 Glp-1 derivatives

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO990950D0 NO990950D0 (no) 1999-02-26
NO990950L NO990950L (no) 1999-04-28
NO325273B1 true NO325273B1 (no) 2008-03-17

Family

ID=27221005

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19990950A NO325273B1 (no) 1996-08-30 1999-02-26 GLP-1-derivater
NO2009027C NO2009027I2 (no) 1996-08-30 2009-11-18 Arg34Lys26(N epsilon-(gamma-glutamyl(N alfa-heksadecanoyl))-GLP-1-(7-37)
NO2019036C NO2019036I1 (no) 1996-08-30 2019-09-20 Liraglutid - forlenget SPC

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO2009027C NO2009027I2 (no) 1996-08-30 2009-11-18 Arg34Lys26(N epsilon-(gamma-glutamyl(N alfa-heksadecanoyl))-GLP-1-(7-37)
NO2019036C NO2019036I1 (no) 1996-08-30 2019-09-20 Liraglutid - forlenget SPC

Country Status (21)

Country Link
EP (2) EP0944648B1 (no)
JP (3) JP3149958B2 (no)
KR (1) KR100556067B1 (no)
CN (1) CN1271086C (no)
AT (1) ATE356830T1 (no)
BR (1) BRPI9711437B8 (no)
CA (2) CA2264243C (no)
CZ (1) CZ300837B6 (no)
DE (3) DE69737479D1 (no)
DK (1) DK0944648T3 (no)
ES (1) ES2283025T3 (no)
FR (1) FR09C0054I2 (no)
HU (1) HU227021B1 (no)
IL (3) IL128332A0 (no)
NL (1) NL300422I2 (no)
NO (3) NO325273B1 (no)
PL (1) PL192359B1 (no)
PT (1) PT944648E (no)
RU (1) RU2214419C2 (no)
UA (1) UA72181C2 (no)
WO (1) WO1998008871A1 (no)

Families Citing this family (477)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998005351A1 (en) 1996-08-08 1998-02-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Methods for regulating gastrointestinal motility
US6458924B2 (en) 1996-08-30 2002-10-01 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US7235627B2 (en) 1996-08-30 2007-06-26 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
CA2264243C (en) * 1996-08-30 2004-10-05 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives
US6268343B1 (en) 1996-08-30 2001-07-31 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
UA65549C2 (uk) 1996-11-05 2004-04-15 Елі Ліллі Енд Компані Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція
US6380357B2 (en) 1997-12-16 2002-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 crystals
ATE466026T1 (de) * 1998-02-27 2010-05-15 Novo Nordisk As Derivate von glp-1 und exendin mit verlängertem wirkdauer-profil
AU2610599A (en) * 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S N-terminally truncated glp-1 derivatives
WO1999043341A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 %, forming partially structured micellar-like aggregates
EP1060191B1 (en) 1998-02-27 2010-04-28 Novo Nordisk A/S Derivatives of glp-1 analogs
AU3247799A (en) 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action
DE69942307D1 (de) 1998-02-27 2010-06-10 Novo Nordisk As N-terminal veränderte glp-1 abkömmlinge
EP1950224A3 (en) 1998-03-09 2008-12-17 Zealand Pharma A/S Pharmacologically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis
AU5027299A (en) 1998-07-31 2000-02-28 Novo Nordisk A/S Use of glp-1 and analogues for preventing type ii diabetes
EP1666054A1 (en) * 1998-08-28 2006-06-07 Eli Lilly &amp; Company Method for administering insulinotropic peptides
CA2341454A1 (en) * 1998-08-28 2000-03-09 Benjamin Lee Hughes Method for administering insulinotropic peptides
US6720407B1 (en) 1998-08-28 2004-04-13 Eli Lilly And Company Method for administering insulinotropic peptides
WO2000015224A1 (en) 1998-09-17 2000-03-23 Eli Lilly And Company Protein formulations
MY155270A (en) * 1998-09-24 2015-09-30 Lilly Co Eli Use of glp-1 or analogs in treatment of stroke
EP2322545A1 (en) 1998-12-07 2011-05-18 Ipsen Pharma Analogues of GLP-1
EP1359159A3 (en) * 1998-12-07 2004-07-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Analogues of GLP-1
KR100458748B1 (ko) * 1998-12-07 2004-12-03 더 어드미니스트레이터즈 오브 더 튜래인 어듀케이셔널 훤드 Ｇｌｐ-1 유사체
US6902744B1 (en) * 1999-01-14 2005-06-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Exendin agonist formulations and methods of administration thereof
JP4732590B2 (ja) * 1999-03-15 2011-07-27 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１及び近縁ペプチドのイオン交換クロマトグラフィー分離
US6444788B1 (en) 1999-03-15 2002-09-03 Novo Nordisk A/S Ion exchange chromatography of GLP-1, analogs and derivatives thereof
US6451987B1 (en) 1999-03-15 2002-09-17 Novo Nordisk A/S Ion exchange chromatography of proteins and peptides
HUP0200297A3 (en) 1999-03-17 2002-09-30 Novo Nordisk As Method for acylating peptides and the glutaminic acid derivatives as acylating agents
US6451974B1 (en) 1999-03-17 2002-09-17 Novo Nordisk A/S Method of acylating peptides and novel acylating agents
KR20020002480A (ko) * 1999-03-17 2002-01-09 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 펩티드의 아실화법 및 신규한 아실화제
JP2002544127A (ja) * 1999-04-30 2002-12-24 アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 修飾されたエキセンジンおよびエキセンジン・アゴニスト
US6924264B1 (en) 1999-04-30 2005-08-02 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Modified exendins and exendin agonists
US6514500B1 (en) 1999-10-15 2003-02-04 Conjuchem, Inc. Long lasting synthetic glucagon like peptide {GLP-!}
US6329336B1 (en) 1999-05-17 2001-12-11 Conjuchem, Inc. Long lasting insulinotropic peptides
EP1076066A1 (en) 1999-07-12 2001-02-14 Zealand Pharmaceuticals A/S Peptides for lowering blood glucose levels
US6528486B1 (en) 1999-07-12 2003-03-04 Zealand Pharma A/S Peptide agonists of GLP-1 activity
WO2001035988A1 (en) * 1999-11-12 2001-05-25 Novo Nordisk A/S Use of glp-1 agonists for the inhibition of beta cell degeneration
US6569832B1 (en) 1999-11-12 2003-05-27 Novo Nordisk A/S Inhibition of beta cell degeneration
US6844321B2 (en) * 2000-01-31 2005-01-18 Novo Nordisk A/S Crystallization of a GLP-1 analogue
AU2001237254A1 (en) 2000-03-08 2001-09-17 Novo-Nordisk A/S Lowering serum lipids
DE10013895A1 (de) 2000-03-21 2001-10-04 Dmc2 Degussa Metals Catalysts Cerdec Ag Verfahren zur katalytischen Umsetzung von Kohlenmonoxid in einem Wasserstoff enthaltenden Gasgemisch
BR0113178A (pt) * 2000-08-02 2004-04-06 Theratechnologies Inc Peptìdeos biológicos modificados com potência aumentada
EP1346722B1 (en) 2000-12-01 2008-12-10 Takeda Pharmaceutical Company Limited Method for producing preparation containing bioactive substance
EA005584B1 (ru) * 2000-12-07 2005-04-28 Эли Лилли Энд Компани Слитые белки glp-1
PT1345895E (pt) 2000-12-21 2007-02-28 Sanofi Aventis Deutschland Novas difenilazetidinonas, processo para a sua preparação, fármacos contendo estes compostos e sua utilização para o tratamento de distúrbios do metabolismo lipídico
NZ526594A (en) 2000-12-21 2004-08-27 Aventis Pharma Gmbh Diphenyl azetidinone derivatives, method for the production thereof, medicaments containing these compounds, and their use
WO2002069994A2 (en) * 2001-03-07 2002-09-12 Novo Nordisk A/S Combined use of derivatives of glp-1 analogs and ppar ligands
US6573237B2 (en) 2001-03-16 2003-06-03 Eli Lilly And Company Protein formulations
US8981061B2 (en) 2001-03-20 2015-03-17 Novo Nordisk A/S Receptor TREM (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof
DE10142660A1 (de) 2001-08-31 2003-03-20 Aventis Pharma Gmbh Verwendung von Derivaten von C2-substituierten Indan-1-ol-Systemen zur Herstellung von Medikamenten zur Prophylaxe oder Behandlung von Obesitas
US6653492B2 (en) 2001-05-02 2003-11-25 Novo Nordick A/S Preparation of bile acids
EP1385867B1 (en) * 2001-05-02 2006-08-30 Novo Nordisk A/S Preparation of bile acids
PE20021091A1 (es) 2001-05-25 2003-02-04 Aventis Pharma Gmbh Derivados de fenilurea sustituidos con carbonamida y procedimiento para su preparacion
PT1412384E (pt) 2001-06-28 2008-03-28 Novo Nordisk As Formulação estável de glp-1 modificado
US7595172B2 (en) * 2001-07-24 2009-09-29 Novo Nordisk A/S Method for making acylated polypeptides
US20030082671A1 (en) 2001-07-24 2003-05-01 Thomas Hoeg-Jensen Method for making acylated polypeptides
IL160474A0 (en) 2001-08-22 2004-07-25 Aventis Pharma Gmbh Combination products of 1,4-benzothiepine 1,1-dioxide derivatives with other active ingredients and the use thereof
DE10142661B4 (de) 2001-08-31 2004-06-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Mehrfach substituierte Indan-1-ol-Systeme und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10142722A1 (de) 2001-08-31 2003-03-27 Aventis Pharma Gmbh C2-substituierte Indan-1-one und ihre Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10142665B4 (de) 2001-08-31 2004-05-06 Aventis Pharma Deutschland Gmbh C2-Disubstituierte Indan-1-one und ihre Derivate
DE10142666A1 (de) 2001-08-31 2003-03-20 Aventis Pharma Gmbh Verwendung von C2-substituierten Indan-1-ol-Systemen zur Herstellung von Medikamenten zur Prophylaxe oder Behandlung von Obesitas
PL208515B1 (pl) 2001-08-31 2011-05-31 Sanofi Aventis Deutschland Pochodne diarylocykloalkilowe, środki lecznicze zawierające te związki oraz ich zastosowanie jako aktywatorów PPAR
US7399777B2 (en) 2001-08-31 2008-07-15 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmceuticals
DE10142663B4 (de) 2001-08-31 2004-08-19 Aventis Pharma Deutschland Gmbh C2-Disubstituierte Indan-1-ol-Systeme
DE10142668A1 (de) 2001-08-31 2003-03-20 Aventis Pharma Gmbh Verwendung von C2-substituierten Indan-1-on-Systemen zur Herstellung von Medikamenten zur Prophylaxe oder Behandlung von Obesitas
DE10142662B4 (de) 2001-08-31 2004-07-08 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Derivate von C2-substituierten Indan-1-ol-Systemen und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10142667B4 (de) 2001-08-31 2004-06-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh C2-substituierte Indan-1-ole und ihre Derivate und ihre Verwendung als Arzneimittel
US6884812B2 (en) 2001-08-31 2005-04-26 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
DE10142659A1 (de) 2001-08-31 2003-03-20 Aventis Pharma Gmbh Verwendung von mehrfach substituierten Indan-1-ol. Systemen zur Herstellung von Medikamenten zur Prophylaxe oder Behandlung von Obesitas
US7459432B2 (en) 2001-09-24 2008-12-02 Imperial College Innovations Ltd. Modification of feeding behavior
EP1444219A1 (en) 2001-10-12 2004-08-11 Novo Nordisk A/S Substituted piperidines and their use for the treatment of diseases related to the histamine h3 receptor
CA2463908A1 (en) * 2001-10-18 2003-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Human glucagon-like-peptide-1 mimics and their use in the treatment of diabetes and related conditions
US7238671B2 (en) 2001-10-18 2007-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Human glucagon-like-peptide-1 mimics and their use in the treatment of diabetes and related conditions
KR101018318B1 (ko) 2001-12-21 2011-03-04 노보 노르디스크 에이/에스 Ｇｋ 활성제로서의 아미드 유도체
JP2005518408A (ja) 2001-12-29 2005-06-23 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ 異常脂肪血症を治療するための、ｇｌｐ−１化合物と他の薬物との組み合わせ使用
AU2003200839B2 (en) * 2002-01-08 2008-12-11 Eli Lilly And Company Extended glucagon-like peptide-1 analogs
WO2003057235A2 (en) * 2002-01-10 2003-07-17 Imperial College Innovations Ltd Modification of feeding behavior
US8058233B2 (en) 2002-01-10 2011-11-15 Oregon Health And Science University Modification of feeding behavior using PYY and GLP-1
EP2409569B1 (en) 2002-02-20 2017-08-16 Emisphere Technologies, Inc. Method for administering GLP-1 molecules
US7223796B2 (en) 2002-04-11 2007-05-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acyl-4-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use
US7049341B2 (en) 2002-06-07 2006-05-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh N-benzoylureidocinnamic acid derivatives, processes for preparing them and their use
US7176194B2 (en) 2002-06-19 2007-02-13 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Ring-substituted diphenylazetidinones, process for their preparation, medicaments comprising these compounds, and their use
US7176193B2 (en) 2002-06-19 2007-02-13 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acid-group-substituted diphenylazetidinones, process for their preparation, medicaments comprising these compounds, and their use
US7671047B2 (en) 2002-06-19 2010-03-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cationically substituted diphenylazetidinones, process for their preparation, medicaments comprising these compounds, and their use
AU2003243921B2 (en) 2002-06-27 2009-05-07 Novo Nordisk A/S Aryl carbonyl derivatives as therapeutic agents
JP5685355B2 (ja) * 2002-07-04 2015-03-18 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１および糖尿病の処置方法
DE10231370B4 (de) 2002-07-11 2006-04-06 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Thiophenglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US7262220B2 (en) 2002-07-11 2007-08-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Urea- and urethane-substituted acylureas, process for their preparation and their use
MXPA05000053A (es) 2002-07-12 2005-04-08 Aventis Pharma Gmbh Benzoilureas heterociclicamente sustituidas, metodo para su produccion y su uso como medicamentos.
US7141561B2 (en) 2002-07-25 2006-11-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted diaryl heterocycles, process for their preparation and their use as medicaments
US8821915B2 (en) 2002-08-09 2014-09-02 Veroscience, Llc Therapeutic process for the treatment of the metabolic syndrome and associated metabolic disorders
AU2003271452A1 (en) * 2002-09-25 2004-04-19 Theratechnologies Inc. Modified glp-1 peptides with increased biological potency
US7273921B2 (en) 2002-09-25 2007-09-25 Novo Nordisk A/S Method for producing acylated peptides
KR101131783B1 (ko) * 2002-09-25 2012-03-30 노보 노르디스크 에이/에스 아실화된 펩타이드의 제조방법
US20040157922A1 (en) 2002-10-04 2004-08-12 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Carboxyalkoxy-substituted acyl-carboxyphenylurea derivatives and their use as medicaments
US7208504B2 (en) 2002-10-12 2007-04-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Bicyclic inhibitors of hormone sensitive lipase
US7411039B2 (en) 2002-10-14 2008-08-12 Novo Nordisk A/S GLP-2 compounds, formulations, and uses thereof
DE10258007B4 (de) 2002-12-12 2006-02-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Aromatische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US7655618B2 (en) 2002-12-27 2010-02-02 Diobex, Inc. Compositions and methods for the prevention and control of insulin-induced hypoglycemia
MXPA05006994A (es) 2002-12-27 2005-10-18 Diobex Inc Composiciones y metodos para la prevencion y el control de hipoglucemia inducida por insulina.
GB0300571D0 (en) * 2003-01-10 2003-02-12 Imp College Innovations Ltd Modification of feeding behaviour
US20040242583A1 (en) 2003-01-20 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Pyrimido[5,4-e][1,2,4]triazine-5,7-diones, processes for preparing them and their use
US7179941B2 (en) 2003-01-23 2007-02-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Carbonylamino-substituted acyl phenyl urea derivatives, process for their preparation and their use
EP1592471B1 (en) 2003-02-04 2011-03-23 Novo Nordisk A/S Injection device with rotatable dose setting mechanism
US7390814B2 (en) 2003-02-13 2008-06-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted hexahydropyrazino [1,2-a] pyrimidine-4,7-dione derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7652007B2 (en) 2003-02-13 2010-01-26 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Nitrogen-substituted hexahydropyrazino[1,2-A]pyrimidine-4,7-dione derivatives, processes for their preparation and their use as medicaments
DE10306250A1 (de) 2003-02-14 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Substituierte N-Arylheterozyklen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10308355A1 (de) 2003-02-27 2004-12-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Aryl-cycloalkyl substituierte Alkansäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
US7148246B2 (en) 2003-02-27 2006-12-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl derivatives having bioisosteric carboxylic acid groups, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
DE10308353A1 (de) 2003-02-27 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkylderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10308351A1 (de) 2003-02-27 2004-11-25 Aventis Pharma Deutschland Gmbh 1,3-substituierte Cycloalkylderivate mit sauren, meist heterocyclischen Gruppen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10308352A1 (de) 2003-02-27 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Arylcycloalkylderivate mit verzweigten Seitenketten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
JP4548335B2 (ja) 2003-03-07 2010-09-22 味の素株式会社 腸管細胞のインスリン産生細胞への変換誘導剤、及び糖尿病治療剤
US7501440B2 (en) 2003-03-07 2009-03-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted benzoylureidopyridylpiperidine-and-pyrrolidinecarboxylic acid derivatives, processes for preparing them and their use
UA92451C2 (en) 2003-03-19 2010-11-10 Эли Лилли Энд Компани Polyethelene glycol link glp-1 compounds
EP1609855A4 (en) * 2003-03-28 2008-06-11 Nat Inst Of Agrobio Sciences METHOD FOR PRODUCING A VEGETABLE STORAGE ORGANIZATION HIGH PRODUCTION OF RECOMBINANT PROTEIN AND NEW RECOMBINANT PROTEIN
DE10314610A1 (de) 2003-04-01 2004-11-04 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Neues Diphenylazetidinon mit verbesserten physiologischen Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung
ATE467616T1 (de) 2003-04-11 2010-05-15 High Point Pharmaceuticals Llc Verbindungen mit aktivität an der 11beta- hydroxasteroiddehydrogenase
AU2004232858B2 (en) 2003-04-23 2009-07-09 Mannkind Corporation Hydraulically actuated pump for long duration medicament administration
JP4936884B2 (ja) 2003-06-03 2012-05-23 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 安定化された薬学的ペプチド組成物
JP2007524592A (ja) 2003-06-03 2007-08-30 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 安定化された薬学的ペプチド組成物
ATE445642T1 (de) 2003-08-21 2009-10-15 Novo Nordisk As Trennung von polypeptiden mit einer racemisierten aminosäure
WO2005023291A2 (en) * 2003-09-11 2005-03-17 Novo Nordisk A/S Use of glp1-agonists in the treatment of patients with type i diabetes
CN101380476A (zh) * 2003-09-19 2009-03-11 诺沃挪第克公司 治疗肽的清蛋白结合型衍生物
EP1684793B1 (en) * 2003-11-13 2011-09-21 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical composition comprising an insulinotropic glp-1(7-37) analogue, asp(b28)-insulin, and a surfactant
US20060287221A1 (en) 2003-11-13 2006-12-21 Novo Nordisk A/S Soluble pharmaceutical compositions for parenteral administration comprising a GLP-1 peptide and an insulin peptide of short time action for treatment of diabetes and bulimia
RU2421238C2 (ru) 2003-11-20 2011-06-20 Ново Нордиск А/С Пептидная композиция, содержащая пропиленгликоль, являющаяся оптимальной для изготовления и применения в инъекционных устройствах
EP2298337B1 (en) 2003-12-09 2017-02-22 Novo Nordisk A/S Regulation of food preference using GLP-1 agonists
WO2005058252A2 (en) 2003-12-16 2005-06-30 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Glp-1 pharmaceutical compositions
EP1711523B1 (en) * 2003-12-16 2012-10-10 Ipsen Pharma Analogues of glp-1
JP2007537141A (ja) 2003-12-18 2007-12-20 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ 新規なｇｌｐ−１化合物
US20060286129A1 (en) 2003-12-19 2006-12-21 Emisphere Technologies, Inc. Oral GLP-1 formulations
BRPI0506662B8 (pt) 2004-01-06 2021-05-25 Novo Nordisk As compostos ativadores de glucoquinase
CA2552526A1 (en) * 2004-01-08 2005-07-21 Theratechnologies Inc. Glucagon-like peptide-1 analogs with long duration of action
CA2552043A1 (en) 2004-01-21 2005-08-04 Novo Nordisk A/S Transglutaminase mediated conjugation of peptides
US7241787B2 (en) 2004-01-25 2007-07-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted N-cycloexylimidazolinones, process for their preparation and their use as medicaments
US7402674B2 (en) 2004-01-31 2008-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh, 7-Phenylamino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7498341B2 (en) 2004-01-31 2009-03-03 Sanofi Aventis Deutschland Gmbh Heterocyclically substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7470706B2 (en) 2004-01-31 2008-12-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl-substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
DE102004005172A1 (de) 2004-02-02 2005-08-18 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Indazolderivate als Inhibitoren der Hormon Sensitiven Lipase
KR100564618B1 (ko) 2004-03-11 2006-03-28 삼성전자주식회사 디스크 드라이브의 층간 탐색 방법
GT200500063A (es) 2004-04-01 2005-10-14 Metodo para tratar la esquizofrenia y/o anormalidades glucoregulatorias
DE602004004631D1 (de) 2004-04-01 2007-03-22 Sanofi Aventis Deutschland Oxadiazolone, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung als Pharmazeutika
EP1604988A1 (en) 2004-05-18 2005-12-14 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Pyridazinone derivatives, methods for producing them and their use as pharmaceuticals
US8410047B2 (en) 2004-06-11 2013-04-02 Novo Nordisk A/S Counteracting drug-induced obesity using GLP-1 agonists
WO2006014425A1 (en) 2004-07-02 2006-02-09 Biovalve Technologies, Inc. Methods and devices for delivering glp-1 and uses thereof
US8710181B2 (en) 2004-08-31 2014-04-29 Novo Nordisk A/S Use of tris(hydroxymethyl) aminomethane for the stabilization of peptides, polypeptides and proteins
WO2006028970A1 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Cengent Therapeutics, Inc. Derivatives of thiazole and thiadiazole inhibitors of tyrosine phosphatases
EP1799711B1 (en) 2004-10-07 2012-06-20 Novo Nordisk A/S Protracted exendin-4 compounds
JP2008515856A (ja) * 2004-10-07 2008-05-15 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 遅延性ｇｌｐ−１化合物
CA2586771A1 (en) * 2004-11-12 2006-05-18 Novo Nordisk A/S Stable formulations of insulinotropic peptides
GB0426146D0 (en) 2004-11-29 2004-12-29 Bioxell Spa Therapeutic peptides and method
WO2006058923A1 (en) 2004-12-03 2006-06-08 Novo Nordisk A/S Heteroaromatic glucokinase activators
TWI376234B (en) 2005-02-01 2012-11-11 Msd Oss Bv Conjugates of a polypeptide and an oligosaccharide
EP1846447B1 (en) 2005-02-02 2013-08-21 Novo Nordisk A/S Insulin derivatives
ES2438145T3 (es) 2005-02-02 2014-01-16 Novo Nordisk A/S Nuevos derivados de insulina
ES2484796T3 (es) 2005-03-18 2014-08-12 Novo Nordisk A/S Compuestos de GLP-1 extendidos
TWI372629B (en) * 2005-03-18 2012-09-21 Novo Nordisk As Acylated glp-1 compounds
US8512288B2 (en) 2006-08-23 2013-08-20 Medtronic Minimed, Inc. Infusion medium delivery device and method with drive device for driving plunger in reservoir
US8137314B2 (en) 2006-08-23 2012-03-20 Medtronic Minimed, Inc. Infusion medium delivery device and method with compressible or curved reservoir or conduit
US20080097291A1 (en) 2006-08-23 2008-04-24 Hanson Ian B Infusion pumps and methods and delivery devices and methods with same
US8840586B2 (en) 2006-08-23 2014-09-23 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir filling and infusion medium delivery
US7955305B2 (en) 2005-05-06 2011-06-07 Medtronic Minimed, Inc. Needle inserter and method for infusion device
US7905868B2 (en) 2006-08-23 2011-03-15 Medtronic Minimed, Inc. Infusion medium delivery device and method with drive device for driving plunger in reservoir
US8277415B2 (en) 2006-08-23 2012-10-02 Medtronic Minimed, Inc. Infusion medium delivery device and method with drive device for driving plunger in reservoir
JPWO2006126673A1 (ja) * 2005-05-27 2008-12-25 第一三共株式会社 組み合わせによる糖尿病治療薬
DE102005026762A1 (de) 2005-06-09 2006-12-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Azolopyridin-2-on-derivate als Inhibitoren von Lipasen und Phospholipasen
ATE529404T1 (de) 2005-06-30 2011-11-15 High Point Pharmaceuticals Llc Phenoxyessigsäuren als ppar-delta-aktivatoren
WO2007003604A2 (en) 2005-07-04 2007-01-11 Novo Nordisk A/S Hists1mine h3 receptor antagonists
JP4960355B2 (ja) 2005-07-14 2012-06-27 ノボ・ノルデイスク・エー／エス ウレア型グルコキナーゼ活性化剤
ES2426345T3 (es) 2005-07-20 2013-10-22 Eli Lilly And Company Compuesto unidos en posición 1-amino
EP1767545B1 (en) * 2005-09-22 2009-11-11 Biocompatibles UK Limited GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) fusion polypeptides with increased peptidase resistance
CA2629223C (en) 2005-11-17 2013-08-06 Eli Lilly And Company Glucagon receptor antagonists, preparation and therapeutic uses
JP5096363B2 (ja) * 2005-12-16 2012-12-12 ネクター セラピューティックス Ｇｌｐ−１のポリマ複合体
EA015717B1 (ru) 2005-12-22 2011-10-31 ХАЙ ПОЙНТ ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ЭлЭлСи Феноксиуксусные кислоты в качестве активаторов ppar дельта
SI1984009T1 (sl) 2006-01-18 2013-02-28 Qps, Llc Farmacevtski sestavki z izboljĺ ano stabilnostjo
US11497846B2 (en) 2006-02-09 2022-11-15 Deka Products Limited Partnership Patch-sized fluid delivery systems and methods
US11478623B2 (en) 2006-02-09 2022-10-25 Deka Products Limited Partnership Infusion pump assembly
EP1993633B1 (en) 2006-02-09 2016-11-09 Deka Products Limited Partnership Pumping fluid delivery systems and methods using force application assembly
US11364335B2 (en) 2006-02-09 2022-06-21 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
DK2383271T3 (da) 2006-03-13 2013-10-07 Kyorin Seiyaku Kk Aminoquinoloner som GSK-3-inhibitorer
JP5312054B2 (ja) 2006-03-15 2013-10-09 ノボ・ノルデイスク・エー／エス アミリンとインスリンの混合物
NZ570524A (en) 2006-03-28 2011-08-26 High Point Pharmaceuticals Llc Benzothiazoles having histamine H3 receptor activity
EP2982399B1 (en) 2006-03-30 2017-12-06 Valeritas, Inc. Multi-cartridge fluid delivery device
SI2049475T1 (sl) 2006-04-24 2012-04-30 Lilly Co Eli Pirolidinoni substituirani s cikloheksilom kot inhibitorji 11-betahidroksisteroid dehidrogenaze 1
DE602006009631D1 (de) 2006-05-10 2009-11-19 Biocompatibles Uk Ltd GLP-1 Peptide enthaltende kugelförmige Mikrokapseln, deren Produktion und deren Verwendung
PL2079732T3 (pl) 2006-05-29 2012-05-31 High Point Pharmaceuticals Llc 3-(1,3-benzodioksol-5-ylo)-6-(4-cyklopropylopiperazyn-1-ylo)-pirydazyna, jej sole i solwaty oraz jej zastosowanie jako antagonisty receptora histaminowego h3
DE102006028862A1 (de) 2006-06-23 2007-12-27 Merck Patent Gmbh 3-Amino-imidazo[1,2-a]pyridinderivate
CA2657911C (en) 2006-07-11 2012-02-21 Quest Pharmaceutical Services, Llc Pharmaceutical compositions for sustained release delivery of peptides
KR20090039787A (ko) 2006-07-18 2009-04-22 센토코 인코포레이티드 인간 ｇｌｐ-1 모방체, 조성물, 방법 및 용도
MX2009001043A (es) 2006-08-08 2009-02-06 Sanofi Aventis Imidazolidina-2,4-dionas sustituidas con arilaminoarilalquilo, procedimiento para preparalas, medicamentos que comprenden estos compuestos y su uso.
US7828764B2 (en) 2006-08-23 2010-11-09 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir filling and infusion medium delivery
US7789857B2 (en) 2006-08-23 2010-09-07 Medtronic Minimed, Inc. Infusion medium delivery system, device and method with needle inserter and needle inserter device and method
US7794434B2 (en) 2006-08-23 2010-09-14 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir filling and infusion medium delivery
US7811262B2 (en) 2006-08-23 2010-10-12 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir filling and infusion medium delivery
ES2531934T3 (es) 2006-09-01 2015-03-20 Novo Nordisk Health Care Ag Glicoproteínas modificadas
MX2009002282A (es) 2006-09-07 2009-03-20 Nycomed Gmbh Tratamiento de combinacion para diabetes mellitius.
EP2086951B1 (en) 2006-11-15 2011-12-21 High Point Pharmaceuticals, LLC Novel 2-(2-hydroxyphenyl) benzothiadiazines useful for treating obesity and diabetes
TWI428346B (zh) 2006-12-13 2014-03-01 Imp Innovations Ltd 新穎化合物及其等對進食行為影響
US8318778B2 (en) 2007-01-11 2012-11-27 Novo Nordisk A/S Urea glucokinase activators
DE102007002260A1 (de) 2007-01-16 2008-07-31 Sanofi-Aventis Verwendung von substituierten Pyranonsäurederivaten zur Herstellung von Medikamenten zur Behandlung des Metabolischen Syndroms
DE102007005045B4 (de) 2007-01-26 2008-12-18 Sanofi-Aventis Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE102007008420A1 (de) 2007-02-21 2008-08-28 Merck Patent Gmbh Benzimidazolderivate
EP1975176A1 (en) * 2007-03-27 2008-10-01 Biocompatibles UK Limited Novel glp-1 fusion peptides, their production and use
WO2008136845A2 (en) 2007-04-30 2008-11-13 Medtronic Minimed, Inc. Reservoir filling, bubble management, and infusion medium delivery systems and methods with same
US8434528B2 (en) 2007-04-30 2013-05-07 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods for reservoir filling
US8323250B2 (en) 2007-04-30 2012-12-04 Medtronic Minimed, Inc. Adhesive patch systems and methods
US8597243B2 (en) 2007-04-30 2013-12-03 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir air bubble management
US7963954B2 (en) 2007-04-30 2011-06-21 Medtronic Minimed, Inc. Automated filling systems and methods
US7959715B2 (en) 2007-04-30 2011-06-14 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods allowing for reservoir air bubble management
US8613725B2 (en) 2007-04-30 2013-12-24 Medtronic Minimed, Inc. Reservoir systems and methods
EA021544B1 (ru) 2007-06-04 2015-07-30 Бен-Гурион Юниверсити Оф Дзе Негев Рисерч Энд Дивелопмент Оторити Триарильные соединения и фармацевтические композиции, их содержащие
US20080319221A1 (en) 2007-06-22 2008-12-25 Bernd Junker Esters of Pentahydroxyhexylcarbamoyl Alkanoic Acids
WO2009010428A1 (en) 2007-07-16 2009-01-22 Novo Nordisk A/S Protease stabilized, pegylated insulin analogues
JP2009019027A (ja) * 2007-07-16 2009-01-29 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
WO2009030771A1 (en) 2007-09-05 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Peptides derivatized with a-b-c-d- and their therapeutical use
EP2190872B1 (en) 2007-09-05 2018-03-14 Novo Nordisk A/S Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use
WO2009030774A1 (en) * 2007-09-05 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Truncated glp-1 derivatives and their therapeutical use
CN102351880B (zh) 2007-09-11 2014-11-12 杏林制药株式会社 作为gsk-3 抑制剂的氰基氨基喹诺酮和四唑并氨基喹诺酮
CN102344457B (zh) 2007-09-12 2015-07-22 杏林制药株式会社 作为 gsk-3 抑制剂的螺环状氨基喹诺酮
DE102007048716A1 (de) 2007-10-11 2009-04-23 Merck Patent Gmbh Imidazo[1,2-a]pyrimidinderivate
DE102007063671A1 (de) 2007-11-13 2009-06-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
PL2597103T3 (pl) 2007-11-16 2017-04-28 Novo Nordisk A/S Stabilne kompozycje farmaceutyczne zawierające liraglutyd i degludec
US20100317057A1 (en) 2007-12-28 2010-12-16 Novo Nordisk A/S Semi-recombinant preparation of glp-1 analogues
US8881774B2 (en) 2007-12-31 2014-11-11 Deka Research & Development Corp. Apparatus, system and method for fluid delivery
US8900188B2 (en) 2007-12-31 2014-12-02 Deka Products Limited Partnership Split ring resonator antenna adapted for use in wirelessly controlled medical device
US10080704B2 (en) 2007-12-31 2018-09-25 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
US9456955B2 (en) 2007-12-31 2016-10-04 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
US8414563B2 (en) 2007-12-31 2013-04-09 Deka Products Limited Partnership Pump assembly with switch
MX361885B (es) 2007-12-31 2018-12-18 Deka Products Lp Ensamble de bomba de infusion.
US10188787B2 (en) 2007-12-31 2019-01-29 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
DE102008003568A1 (de) 2008-01-09 2009-07-16 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
DE102008025008A1 (de) 2008-05-24 2009-11-26 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
CN101970476B (zh) 2008-01-09 2014-08-27 塞诺菲-安万特德国有限公司 具有超延迟时效特征的胰岛素衍生物
MY152979A (en) 2008-01-09 2014-12-15 Sanofi Aventis Deutschland Novel insulin derivatives having an extremely delayed time-action profile
DE102008003566A1 (de) 2008-01-09 2009-07-16 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
DE102008025007A1 (de) 2008-05-24 2009-11-26 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
US20110046071A1 (en) * 2008-03-05 2011-02-24 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. GLP-1 Receptor Agonists And Related Active Pharmaceutical Ingredients For Treatment Of Cancer
CN102037008B (zh) 2008-03-18 2016-08-31 诺沃-诺迪斯克有限公司 蛋白酶稳定化的、酰化胰岛素类似物
DE102008017590A1 (de) 2008-04-07 2009-10-08 Merck Patent Gmbh Glucopyranosidderivate
CN101555214B (zh) 2008-04-08 2012-07-11 北京嘉事联博医药科技有限公司 苯基环丁基酰胺衍生物及其光学异构体、制备方法和用途
EP4074327A1 (en) 2008-06-27 2022-10-19 Duke University Therapeutic agents comprising elastin-like peptides
AR072707A1 (es) 2008-07-09 2010-09-15 Sanofi Aventis Compuestos heterociclicos, procesos para su preparacion, medicamentos que comprenden estos compuestos y el uso de los mismos
JP5977945B2 (ja) 2008-08-06 2016-08-24 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有するコンジュゲートタンパク質
CN102149411A (zh) 2008-09-12 2011-08-10 诺沃—诺迪斯克有限公司 酰化肽或蛋白的方法
CA2738389C (en) 2008-09-15 2017-01-17 Deka Products Limited Partnership Systems and methods for fluid delivery
DE102009038210A1 (de) 2009-08-20 2011-03-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
LT2349324T (lt) 2008-10-17 2017-12-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulino ir glp-1 agonisto derinys
DE102008051834A1 (de) 2008-10-17 2010-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
DE102008053048A1 (de) 2008-10-24 2010-04-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
DK2344519T3 (en) 2008-11-07 2017-01-23 Massachusetts Gen Hospital C-TERMINAL FRAGMENTS OF GLUCAGON SIMILAR PEPTID-1 (GLP-1)
IT1392655B1 (it) 2008-11-20 2012-03-16 Bio Ker S R L Site-specific monoconjugated insulinotropic glp-1 peptides.
US8927549B2 (en) 2008-11-21 2015-01-06 High Point Pharmaceuticals, Llc Adamantyl benzamide derivatives
CN102307904A (zh) 2008-12-05 2012-01-04 安吉奥开米公司 神经降压素或神经降压素类似物的缀合物及其用途
WO2010068601A1 (en) 2008-12-08 2010-06-17 Sanofi-Aventis A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof
DK2370462T3 (da) 2008-12-15 2014-09-08 Zealand Pharma As Glucagon-analoger
BRPI0823378A2 (pt) 2008-12-15 2019-09-24 Zealand Pharma As análogos de glucagon
EP2370461B1 (en) 2008-12-15 2013-10-02 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
KR20110126592A (ko) 2008-12-15 2011-11-23 질랜드 파마 에이/에스 글루카곤 유사체
EP2389389B1 (en) 2009-01-22 2015-04-15 Novo Nordisk Health Care AG Stable growth hormone compounds
BRPI1007313A2 (pt) 2009-01-23 2016-02-10 Novo Nordisk As derivados de fgf21 com ligante de albumina a-b-c-d-e e seu uso.
CN102942626B (zh) * 2009-03-05 2015-11-04 江苏豪森医药集团有限公司 胰高血糖素样肽-2类似物及其制备方法和用途
MX2011009414A (es) 2009-03-11 2011-10-19 Kyorin Seiyaku Kk 7-cicloalquiloaminoquinolonas como inhibidores de gsk-3.
AU2014265118B2 (en) * 2009-06-05 2016-11-17 Veroscience Llc Combination of dopamine agonists plus first phase insulin secretagouges for the treatment of metabolic disorders
US9352025B2 (en) 2009-06-05 2016-05-31 Veroscience Llc Combination of dopamine agonists plus first phase insulin secretagogues for the treatment of metabolic disorders
ES2682644T3 (es) 2009-06-05 2018-09-21 Veroscience Llc Combinación de agonistas de dopamina más secretagogos de insulina de primera fase para el tratamiento de trastornos metabólicos
CN102802657A (zh) * 2009-06-11 2012-11-28 诺沃-诺迪斯克有限公司 用于治疗2型糖尿病的glp-1和fgf21组合
CN102574903B (zh) 2009-07-13 2015-07-08 西兰制药公司 酰化胰高血糖素类似物
EP2453948B1 (en) 2009-07-15 2015-02-18 DEKA Products Limited Partnership Apparatus, systems and methods for an infusion pump assembly
CN101987868B (zh) * 2009-07-30 2013-09-04 江苏豪森医药集团有限公司 Glp-1类似物的衍生物或其可药用盐和用途
US8614182B2 (en) 2009-07-30 2013-12-24 Jiangsu Hansoh Pharmaceuticals Co., Ltd. GLP-1 analogues and their pharmaceutical salts and uses
EP2461831B1 (en) 2009-08-06 2018-11-21 Novo Nordisk Health Care AG Growth hormones with prolonged in-vivo efficacy
BR112012003973A2 (pt) 2009-08-26 2015-09-08 Sanofi Sa hidratos de fluoroglicosídeo heteroaromático cristalinos, produtos farmacêuticos compreendendo estes compostos e seu uso
JP2013506635A (ja) 2009-10-02 2013-02-28 サノフイ 骨疾患を処置するための薬剤を製造するためのｓｇｌｔ−１／ｓｇｌｔ−２阻害剤活性を有する化合物の使用
EP2491054A2 (en) 2009-10-22 2012-08-29 Cadila Healthcare Limited Short chain peptidomimetics based orally active glp-1 agonist and glucagon receptor antagonist
ES2855146T3 (es) 2009-11-13 2021-09-23 Sanofi Aventis Deutschland Composición farmacéutica que comprende un agonista de GLP-1, una insulina y metionina
TWI468171B (zh) 2009-11-13 2015-01-11 Sanofi Aventis Deutschland 含ｇｌｐ－１激動劑及甲硫胺酸之醫藥組成物
JP5411366B2 (ja) 2009-12-16 2014-02-12 ノヴォ ノルディスク アー／エス 二重アシル化ｇｌｐ−１誘導体
PL2525834T3 (pl) 2010-01-22 2020-10-19 Novo Nordisk Health Care Ag Hormony wzrostu o przedłużonej skuteczności in-vivo
RU2012134974A (ru) 2010-01-22 2014-02-27 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг Стабилизированное соединение гормона роста
EP2525848B1 (en) 2010-01-22 2016-08-03 DEKA Products Limited Partnership System for shape-memory alloy wire control
EP2539364A1 (en) 2010-02-26 2013-01-02 Novo Nordisk A/S Peptides for treatment of obesity
BR112012021231A2 (pt) 2010-02-26 2015-09-08 Basf Plant Science Co Gmbh método para acentuar o rendimento em plantas, planta, construto, uso de um construto, método para a produção de uma planta transgênica, partes coletáveis de uma planta, produtos derivados de uma planta, uso de um ácido nucleíco e método para a produção de um produto
US9422330B2 (en) * 2010-03-01 2016-08-23 Novo Nordisk A/S Preparative RP-HPLC method for purifying peptides
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US20130143798A1 (en) 2010-03-26 2013-06-06 Novo Nordisk A/S Novel glucagon analogues
WO2011123943A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Mount Sinai Hospital Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist
DE102010015123A1 (de) 2010-04-16 2011-10-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
SG184988A1 (en) 2010-04-27 2012-11-29 Zealand Pharma As Peptide conjugates of glp-1 receptor agonists and gastrin and their use
WO2011136361A1 (ja) 2010-04-30 2011-11-03 株式会社 三和化学研究所 生理活性物質等の生体内安定性向上のためのペプチド及び生体内安定性が向上した生理活性物質
WO2011157827A1 (de) 2010-06-18 2011-12-22 Sanofi Azolopyridin-3-on-derivate als inhibitoren von lipasen und phospholipasen
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
UY33462A (es) 2010-06-23 2012-01-31 Zealand Pharma As Analogos de glucagon
KR20130086343A (ko) 2010-06-24 2013-08-01 질랜드 파마 에이/에스 글루카곤 유사체
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
CN103179978A (zh) 2010-08-30 2013-06-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 Ave0010用于制造供治疗2型糖尿病用的药物的用途
US9040481B2 (en) 2010-11-02 2015-05-26 The General Hospital Corporation Methods for treating steatotic disease
EP2637698B1 (en) 2010-11-09 2022-04-20 Novo Nordisk A/S Double-acylated glp-1 derivatives
BR112013014942B1 (pt) 2010-12-16 2020-01-28 Novo Nordisk As composições sólidas para administração, e seus usos
JP2014502984A (ja) 2011-01-19 2014-02-06 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１組成物
WO2012098188A1 (en) 2011-01-19 2012-07-26 Novo Nordisk A/S Glp-1 particles and compositions
US20140011733A1 (en) 2011-01-20 2014-01-09 Zealand Pharma A/S Combination of acylated glucagon analogues with insulin analogues
WO2012104834A1 (en) 2011-02-03 2012-08-09 Pharmedica Ltd. New oral dissolving films for insulin administration, for treating diabetes
US8828994B2 (en) 2011-03-08 2014-09-09 Sanofi Di- and tri-substituted oxathiazine derivatives, method for the production thereof, use thereof as medicine and drug containing said derivatives and use thereof
EP2683698B1 (de) 2011-03-08 2017-10-04 Sanofi Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8809324B2 (en) 2011-03-08 2014-08-19 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
WO2012120057A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Neue substituierte phenyl-oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
EP2683704B1 (de) 2011-03-08 2014-12-17 Sanofi Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
EP2683701B1 (de) 2011-03-08 2014-12-24 Sanofi Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120055A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
US8901114B2 (en) 2011-03-08 2014-12-02 Sanofi Oxathiazine derivatives substituted with carbocycles or heterocycles, method for producing same, drugs containing said compounds, and use thereof
WO2012120056A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Tetrasubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
MX2013011175A (es) 2011-03-28 2013-11-01 Novo Nordisk As Analogos de glucagon novedosos.
WO2012140117A1 (en) * 2011-04-12 2012-10-18 Novo Nordisk A/S Double-acylated glp-1 derivatives
WO2012150503A2 (en) 2011-05-03 2012-11-08 Zealand Pharma A/S Glu-glp-1 dual agonist signaling-selective compounds
EP2707713A2 (en) 2011-05-10 2014-03-19 Zealand Pharma A/S Glu-glp-1 dual agonist signaling-selective compounds
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
EP2729157B1 (en) 2011-07-06 2019-01-16 The General Hospital Corporation A pentapeptide derived from the c-terminus of glucagon-like peptide 1 (glp-1) for use in treatment
JP6367115B2 (ja) 2011-08-29 2018-08-01 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング ２型糖尿病患者の血糖コントロールに使用する組合せ医薬
AR087744A1 (es) 2011-09-01 2014-04-16 Sanofi Aventis Deutschland Composicion farmaceutica para uso en el tratamiento de una enfermedad neurodegenerativa
CN103189389B (zh) * 2011-09-03 2017-08-11 深圳市健元医药科技有限公司 新的glp‑ⅰ类似物及其制备方法和用途
JP6126097B2 (ja) 2011-09-06 2017-05-10 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１誘導体
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
AU2012311484B2 (en) 2011-09-23 2017-04-13 Novo Nordisk A/S Novel glucagon analogues
TW201315742A (zh) 2011-09-26 2013-04-16 Novartis Ag 治療代謝病症之雙功能蛋白質
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
US20130096059A1 (en) 2011-10-04 2013-04-18 Jens Stechl Glp-1 agonist for use in the treatment of stenosis or/and obstruction in the biliary tract
ES2562651T3 (es) 2011-10-04 2016-03-07 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Lixisenatida para el uso en el tratamiento de la estenosis o/y la obstrucción del sistema de conductos pancreáticos
JP6359972B2 (ja) 2011-11-03 2018-07-18 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１受容体アゴニストペプチドガストリンコンジュゲート
WO2013083826A2 (en) 2011-12-09 2013-06-13 Novo Nordisk A/S Glp-1 agonists
CN104011064A (zh) 2011-12-29 2014-08-27 诺沃—诺迪斯克有限公司 包含非成蛋白质性的氨基酸的二肽
US9550830B2 (en) 2012-02-15 2017-01-24 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (TREM-1)
EP2814844B1 (en) 2012-02-15 2017-08-02 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (trem-1)
EP2814842B1 (en) 2012-02-15 2018-08-22 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind peptidoglycan recognition protein 1
US11524151B2 (en) 2012-03-07 2022-12-13 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
HUE039406T2 (hu) 2012-03-22 2018-12-28 Novo Nordisk As GLP-1 peptid készítményei és azok elõállítása
CN111494324B (zh) 2012-03-22 2023-05-16 诺和诺德股份有限公司 包含递送剂的组合物及其制备
AU2013255752B2 (en) 2012-05-03 2017-11-09 Zealand Pharma A/S Glucagon-like-peptide-2 (GLP-2) analogues
BR112014027348B1 (pt) 2012-05-03 2022-12-20 Zealand Pharma A/S Compostos agonistas duplos gip-glp-1 e métodos
EP2846824B1 (en) * 2012-05-08 2017-04-05 Novo Nordisk A/S Double-acylated glp-1 derivatives
CN104519902B (zh) 2012-05-08 2017-10-27 诺和诺德股份有限公司 双酰化glp‑1衍生物
EP2664374A1 (en) * 2012-05-15 2013-11-20 F. Hoffmann-La Roche AG Lysin-glutamic acid dipeptide derivatives
CN104487056A (zh) 2012-06-20 2015-04-01 诺和诺德A/S（股份有限公司） 包含肽和递送剂的片剂制剂
SI2866825T1 (sl) 2012-07-01 2020-07-31 Novo Nordisk A/S Uporaba dolgo delujočih peptidov GLP-1
US20150157619A1 (en) 2012-07-10 2015-06-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pharmaceutical preparation for injection
ES2620111T3 (es) 2012-07-23 2017-06-27 Zealand Pharma A/S Análogos de glucagón
FR2994848B1 (fr) 2012-08-30 2014-08-22 Univ Paris Curie Traitement de l'arthrose par les hormones incretines ou leurs analogues
TWI608013B (zh) 2012-09-17 2017-12-11 西蘭製藥公司 升糖素類似物
UA116217C2 (uk) 2012-10-09 2018-02-26 Санофі Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону
JP2016500682A (ja) 2012-10-17 2016-01-14 ノヴォ ノルディスク アー／エス 経口ペプチドデリバリーのための脂肪酸アシル化アミノ酸
US20150297573A1 (en) 2012-10-24 2015-10-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING Beta-CELL SURVIVAL
WO2014093696A2 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Massachusetts Institute Of Technology Insulin derivatives for diabetes treatment
SI2934567T1 (sl) 2012-12-21 2018-10-30 Sanofi Derivati eksendina-4 kot dualni GLP1/GIP ali trigonalni agonisti GLP1/GIP/glukagon
CN103059127B (zh) * 2013-01-07 2014-12-17 天津嘉宏科技有限公司 Glp-1类似物及其制备方法与应用
US9707273B2 (en) 2013-03-01 2017-07-18 Fundació Hospital Universitari Vall D'hebron—Institut De Recerca Peptides for use in the topical treatment of retinal neurodegenerative diseases, in particular in early stages of diabetic retinopathy and other retinal diseases in which neurodegeneration plays an essential role
RS62633B1 (sr) 2013-03-15 2021-12-31 Protagonist Therapeutics Inc Analozi hepcidina i njihove primene
JP6464145B2 (ja) 2013-04-05 2019-02-06 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 成長ホルモン化合物製剤
WO2014170496A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Novo Nordisk A/S Stable, protracted glp-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
WO2015003145A1 (en) 2013-07-03 2015-01-08 Deka Products Limited Partnership Apparatus, system and method for fluid delivery
EP3033112B1 (en) * 2013-08-15 2020-10-07 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives, and uses thereof
GB201315335D0 (en) 2013-08-29 2013-10-09 Of Singapore Amino diacids containing peptide modifiers
US9988429B2 (en) 2013-10-17 2018-06-05 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
EP3057984B1 (en) 2013-10-17 2018-07-11 Zealand Pharma A/S Acylated glucagon analogues
JP6657101B2 (ja) 2013-11-05 2020-03-04 ベン グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネガフ リサーチ アンド ディベロップメント オーソリティ 糖尿病及びそれから生じる疾患合併症の治療のための化合物
EP3065767B1 (en) 2013-11-06 2020-12-30 Zealand Pharma A/S Gip-glp-1 dual agonist compounds and methods
WO2015067716A1 (en) 2013-11-06 2015-05-14 Zealand Pharma A/S Glucagon-glp-1-gip triple agonist compounds
EP3080149A1 (en) 2013-12-13 2016-10-19 Sanofi Dual glp-1/glucagon receptor agonists
EP3080150B1 (en) 2013-12-13 2018-08-01 Sanofi Exendin-4 peptide analogues as dual glp-1/gip receptor agonists
WO2015086730A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Non-acylated exendin-4 peptide analogues
WO2015086729A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Dual glp-1/gip receptor agonists
CN103884846B (zh) * 2014-03-06 2016-06-08 杭州九源基因工程有限公司 一种利拉鲁肽生物学活性的检测方法
TW201625670A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自ｅｘｅｎｄｉｎ－４之雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑
TW201625669A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自艾塞那肽－４（Ｅｘｅｎｄｉｎ－４）之肽類雙重ＧＬＰ－１／升糖素受體促效劑
TW201625668A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 作為胜肽性雙重ｇｌｐ－１／昇糖素受體激動劑之艾塞那肽－４衍生物
CN106132985B (zh) * 2014-04-07 2020-10-13 诺和诺德股份有限公司 双酰化glp-1化合物
PL3139948T3 (pl) 2014-05-07 2020-08-10 Novo Nordisk A/S Leczenie cukrzycy z zastosowaniem glp-1 i anty-il-21
RS62392B1 (sr) 2014-05-16 2021-10-29 Protagonist Therapeutics Inc Tioetar peptidni antagonisti alfa4beta7 integrina
JP2017525656A (ja) 2014-06-04 2017-09-07 ノヴォ ノルディスク アー／エス 医療用のｇｌｐ−１／グルカゴン受容体コアゴニスト
US9932381B2 (en) 2014-06-18 2018-04-03 Sanofi Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists
CN104987383A (zh) * 2014-07-08 2015-10-21 四川百利药业有限责任公司 一种glp-1衍生物
GB2528436A (en) 2014-07-15 2016-01-27 Lancaster Univ Business Entpr Ltd Treatment of neurological diseases
CA2955460A1 (en) 2014-07-17 2016-01-21 Protagonist Therapeutics, Inc. Oral peptide inhibitors of interleukin-23 receptor and their use to treat inflammatory bowel diseases
MX2017000484A (es) 2014-07-17 2017-05-01 Novo Nordisk As Mutagenesis dirigida al sitio anticuerpos receptor desencadenante expresado en las celulas mieloides de tipo 1 (trem-1) para reducir la viscosidad.
ES2685987T3 (es) 2014-09-05 2018-10-15 University Of Copenhagen Análogos de péptidos gip
SG11201702553RA (en) 2014-10-01 2017-04-27 Protagonist Therapeutics Inc NOVEL α4β7 PEPTIDE MONOMER AND DIMER ANTAGONISTS
US10301371B2 (en) 2014-10-01 2019-05-28 Protagonist Therapeutics, Inc. Cyclic monomer and dimer peptides having integrin antagonist activity
DK3006045T3 (en) 2014-10-07 2017-07-17 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical formulations for oral administration of peptide or protein drugs
CN107001439B (zh) 2014-10-29 2021-12-21 西兰制药公司 Gip激动剂化合物及方法
WO2016083499A1 (en) * 2014-11-27 2016-06-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives and uses thereof
CR20170314A (es) 2014-12-12 2017-10-20 Sanofi Aventis Deutschland Formulación de relación fija de insulina glargina/lixisenatida
EP3236991B1 (en) 2014-12-23 2019-06-19 Novo Nordisk A/S Fgf21 derivatives and uses thereof
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
AR103954A1 (es) 2015-03-18 2017-06-14 Zealand Pharma As Análogos de amilina
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
EP3273981B1 (en) 2015-03-24 2020-04-29 INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes
DK3283507T3 (da) 2015-04-16 2020-01-02 Zealand Pharma As Acyleret glucagonanalog
AR105319A1 (es) 2015-06-05 2017-09-27 Sanofi Sa Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico
TW201706291A (zh) 2015-07-10 2017-02-16 賽諾菲公司 作為選擇性肽雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑之新毒蜥外泌肽（ｅｘｅｎｄｉｎ－４）衍生物
US10787490B2 (en) 2015-07-15 2020-09-29 Protaganist Therapeutics, Inc. Peptide inhibitors of interleukin-23 receptor and their use to treat inflammatory diseases
JP2018529749A (ja) 2015-10-07 2018-10-11 シプルメット・ゲーエムベーハー ペプチド薬物を経口送達するための医薬製剤
WO2017117411A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Protagonist Therapeutics, Inc. Analogues of hepcidin mimetics with improved in vivo half lives
EP3196206A1 (en) 2016-01-20 2017-07-26 Lonza Ltd Method for preparation of liraglutide
EP3205660A1 (en) 2016-02-10 2017-08-16 Polypeptide Laboratories Holding (PPL) AB Method for preparation of peptides with pswang linker
HUE060529T2 (hu) 2016-01-20 2023-03-28 Polypeptide Laboratories Holding Ppl Ab Eljárás psWANG linkerrel rendelkezõ peptidek elõállítására
EP3205664A1 (en) 2016-02-11 2017-08-16 Polypeptide Laboratories Holding (PPL) AB Method for preparation of liraglutide using bal linker
WO2017149070A1 (en) 2016-03-03 2017-09-08 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives and uses thereof
WO2017149109A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Novo Nordisk A/S Liraglutide in diabetic foot ulcer
WO2017149105A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Novo Nordisk A/S Liraglutide in renal conditions
JP6991196B2 (ja) 2016-03-23 2022-02-03 バッヘン・ホールディング・アクチエンゲゼルシャフト グルカゴン様ペプチドを製造するための方法
CN109311960A (zh) 2016-03-23 2019-02-05 巴切姆股份公司 胰高血糖素样肽1类似物的纯化方法
CN115925790A (zh) 2016-03-23 2023-04-07 领导医疗有限公司 用于合成α4β7肽拮抗剂的方法
US10071140B2 (en) 2016-09-09 2018-09-11 Zealand Pharma A/S Amylin analogues
WO2018057977A1 (en) 2016-09-23 2018-03-29 Delpor, Inc. Stable compositions for incretin mimetic compounds
WO2018065634A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of peptide or protein drugs
WO2018096162A1 (en) 2016-11-28 2018-05-31 Novo Nordisk A/S Insulin degludec in cardiovascular conditions
WO2018096164A1 (en) 2016-11-28 2018-05-31 Novo Nordisk A/S Insulin degludec for treating diabetes
WO2018096163A1 (en) 2016-11-28 2018-05-31 Novo Nordisk A/S Insulin degludec for improvement of glycaemic control and reduction of acute and long-term diabetes complications
EP3551202B1 (en) 2016-12-06 2024-01-24 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods of enhancing the potency of incretin-based drugs in subjects in need thereof
WO2018104558A1 (en) 2016-12-09 2018-06-14 Zealand Pharma A/S Acylated glp-1/glp-2 dual agonists
US11130793B2 (en) 2016-12-09 2021-09-28 Zealand Pharma A/S GLP-1/GLP-2 dual agonists
CA3043151A1 (en) 2016-12-09 2018-06-14 Zealand Pharma A/S Acylated glp-1/glp-2 dual agonists
WO2018103868A1 (en) 2016-12-09 2018-06-14 Zealand Pharma A/S Acylated glp-1/glp-2 dual agonists
GB201621987D0 (en) 2016-12-22 2017-02-08 Archer Virgil L See Archer Sheri A Arecor Ltd Novel composition
JP2020514365A (ja) 2017-03-15 2020-05-21 ノヴォ ノルディスク アー／エス メラノコルチン４受容体に結合可能な二環式化合物
WO2018210919A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Novo Nordisk A/S Glp-1 compositions and uses thereof
BR112019025195A8 (pt) 2017-05-31 2020-07-07 Univ Copenhagen análogos do peptídeo gip de ação prolongada
KR20200044016A (ko) 2017-08-24 2020-04-28 노보 노르디스크 에이/에스 Glp-1 조성물 및 그 용도
WO2019048660A1 (en) 2017-09-10 2019-03-14 Novo Nordisk A/S MIC-1 AND GLP-1 FOR USE IN THE TREATMENT OF OBESITY
US10278957B2 (en) 2017-09-11 2019-05-07 Protagonist Therapeutics, Inc. Opioid agonist peptides and uses thereof
WO2019120480A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 Novo Nordisk A/S Solubility of glp-1 peptide
HUE063787T2 (hu) 2018-02-02 2024-01-28 Novo Nordisk As Egy GLP-1 agonistát, egy N-(8-(2-hidroxibenzoil)amino) kaprilsav sót és egy síkosítóanyagot tartalmazó szilárd készítmények
EP3749345A4 (en) 2018-02-08 2022-04-06 Protagonist Therapeutics, Inc. CONJUGATED HEPCIDIN MIMETICS
EP3759120A1 (en) 2018-02-27 2021-01-06 Zp Spv 3 K/S Compstatin analogues and their medical uses
PE20201343A1 (es) 2018-04-02 2020-11-25 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti-trem-1 y usos de los mismos
MX2020010505A (es) 2018-04-05 2021-01-15 Sun Pharmaceutical Ind Ltd Analogos novedosos de glp-1.
EP3773475A1 (en) 2018-04-06 2021-02-17 Cyprumed GmbH Pharmaceutical compositions for the transmucosal delivery of therapeutic peptides and proteins
WO2019200594A1 (zh) 2018-04-19 2019-10-24 杭州先为达生物科技有限公司 酰化的glp-1衍生物
CA3098372A1 (en) 2018-04-24 2019-10-31 Deka Products Limited Partnership Apparatus and system for fluid delivery
TWI829687B (zh) 2018-05-07 2024-01-21 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 包含glp-1促效劑與n-(8-(2-羥基苯甲醯基)胺基)辛酸之鹽的固體組成物
WO2019222072A1 (en) * 2018-05-15 2019-11-21 Savior Lifetec Corporation Preparation method of liraglutide derivative
US20210221867A1 (en) 2018-05-15 2021-07-22 Novo Nordisk A/S Compounds Capable of Binding to Melanocortin 4 Receptor
US10905738B2 (en) 2018-07-05 2021-02-02 Biozeus Desenvolvimento De Produtos Biofarmacêuticos Synthetic peptides, prodrugs, pharmaceutical compositions and uses
WO2020053414A1 (en) 2018-09-14 2020-03-19 Novo Nordisk A/S Bicyclic compounds capable of acting as melanocortin 4 receptor agonists
KR20210102911A (ko) 2018-12-03 2021-08-20 안타그 테라퓨틱스 에이피에스 변형된 gip 펩티드 유사체
EP3938037A1 (en) 2019-03-15 2022-01-19 Diet4Life ApS Combination of dietary peptides
JP2022527812A (ja) 2019-04-01 2022-06-06 ノヴォ ノルディスク アー／エス リラグルチドに対する抗体およびその使用
KR20220044277A (ko) 2019-07-10 2022-04-07 프로타고니스트 테라퓨틱스, 인코포레이티드 인터루킨-23 수용체의 펩티드 억제제 및 염증성 질환을 치료하기 위한 이의 용도
CA3148536A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 Anne Pernille Tofteng SHELTON Compstatin analogues and their medical uses
CN114728042A (zh) 2019-11-06 2022-07-08 诺和诺德股份有限公司 用于痴呆的glp-1受体激动剂
US20220395559A1 (en) 2019-11-07 2022-12-15 Novo Nordisk A/S Solid compositions comprising a glp-1 agonist, an sglt2 inhibitor and a salt of n-(8-(2-hydroxybenzoyl)amino)caprylic acid
WO2021105393A1 (en) 2019-11-29 2021-06-03 Novo Nordisk A/S Processes for obtaining stable glp-1 compositions
CN111040022B (zh) 2019-12-23 2021-12-14 万新医药科技(苏州)有限公司 针对胰高血糖素样肽-1受体、胰高血糖素受体、以及抑胃肽受体的三重激动剂
AU2020418207A1 (en) 2019-12-30 2022-08-25 Gan & Lee Pharmaceuticals Co., Ltd. Long-acting GLP-1 compound
EP4090670A1 (en) 2020-01-15 2022-11-23 Janssen Biotech, Inc. Peptide inhibitors of interleukin-23 receptor and their use to treat inflammatory diseases
PE20221575A1 (es) 2020-02-18 2022-10-06 Novo Nordisk As Formulaciones farmaceuticas
EP4126003A1 (en) 2020-03-30 2023-02-08 Zealand Pharma A/S Glp-1/glp-2 dual agonists
EP4126004A1 (en) 2020-03-30 2023-02-08 Zealand Pharma A/S Agonist combination
US11478533B2 (en) 2020-04-27 2022-10-25 Novo Nordisk A/S Semaglutide for use in medicine
EP4142695A1 (en) 2020-04-29 2023-03-08 Novo Nordisk A/S Solid compositions comprising a glp-1 agonist and histidine
US20230173032A1 (en) 2020-05-07 2023-06-08 Frederiksberg Hospital Treatment of Hyperuricemia
JP2023541827A (ja) 2020-09-07 2023-10-04 サイプルメド ゲーエムベーハー Ｇｌｐ－１受容体アゴニストの改善された医薬製剤
CN115925995A (zh) * 2020-09-30 2023-04-07 北京质肽生物医药科技有限公司 多肽缀合物和使用方法
AU2021383828A1 (en) 2020-11-20 2023-07-06 Janssen Pharmaceutica Nv Compositions of peptide inhibitors of interleukin-23 receptor
BR112023012422A2 (pt) 2021-01-24 2023-12-12 Michael David Forrest Inibidores da atp sintase - usos cosmético e terapêutico
FR3120189A1 (fr) 2021-03-01 2022-09-02 Farid Bennis Composition pharmaceutique pour une administration par voie orale d’un agoniste du récepteur du GLP-1
WO2023285347A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 Novo Nordisk A/S Novel fatty acid modified urocortin 2 derivatives and the uses thereof
WO2023012263A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Novo Nordisk A/S Solid oral peptide formulations
AU2022339044A1 (en) 2021-09-03 2024-03-14 Zealand Pharma A/S Dosage regime
WO2023038039A1 (ja) 2021-09-08 2023-03-16 塩野義製薬株式会社 抗肥満作用の関与する疾患の予防及び治療用医薬
WO2023192873A1 (en) * 2022-03-28 2023-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic immunomodulators
WO2024061919A1 (en) 2022-09-19 2024-03-28 Zealand Pharma A/S Combination therapy
WO2024068848A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Zealand Pharma A/S Methods for treating obesity
EP4345104A1 (en) 2022-09-30 2024-04-03 Bachem Holding AG Method for preparing liraglutide

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
EP0587255A1 (en) 1986-05-05 1994-03-16 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
NZ222907A (en) 1986-12-16 1990-08-28 Novo Industri As Preparation for intranasal administration containing a phospholipid absorption enhancing system
DK0512042T3 (da) * 1990-01-24 1998-05-11 Douglas I Buckley GLP-1-analoger anvendelige ved diabetesbehandling
DK36492D0 (da) 1992-03-19 1992-03-19 Novo Nordisk As Praeparat
GB9409496D0 (en) * 1994-05-12 1994-06-29 London Health Ass Method for improving glycaemic control in diabetes
US5512549A (en) * 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
CA2264243C (en) * 1996-08-30 2004-10-05 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
NL300422I1 (nl) 2010-01-04
AU732957B2 (en) 2001-05-03
CA2468374C (en) 2010-12-21
BR9711437A (pt) 2000-01-18
EP1826216A1 (en) 2007-08-29
CZ62999A3 (cs) 1999-07-14
UA72181C2 (uk) 2005-02-15
NL300422I2 (nl) 2010-04-01
ES2283025T3 (es) 2007-10-16
CZ300837B6 (cs) 2009-08-26
NO2019036I1 (no) 2019-09-20
WO1998008871A1 (en) 1998-03-05
JP2001011095A (ja) 2001-01-16
IL128332A (en) 2008-04-13
PL331896A1 (en) 1999-08-16
KR20000035964A (ko) 2000-06-26
AU732957C (en) 1998-03-19
BRPI9711437B8 (pt) 2021-05-25
EP0944648B1 (en) 2007-03-14
NO990950D0 (no) 1999-02-26
EP0944648A1 (en) 1999-09-29
DE69737479T4 (de) 2010-05-06
JP3149958B2 (ja) 2001-03-26
HU227021B1 (en) 2010-05-28
AU3847897A (en) 1998-03-19
PL192359B1 (pl) 2006-10-31
DE122009000079I1 (de) 2010-05-27
RU2214419C2 (ru) 2003-10-20
CA2264243A1 (en) 1998-03-05
NO2009027I1 (no) 2009-11-30
ATE356830T1 (de) 2007-04-15
CA2264243C (en) 2004-10-05
IL128332A0 (en) 2000-01-31
DE69737479D1 (de) 2007-04-26
NO990950L (no) 1999-04-28
FR09C0054I2 (fr) 2011-04-01
CN1271086C (zh) 2006-08-23
KR100556067B1 (ko) 2006-03-07
DE69737479T2 (de) 2007-11-29
NO2009027I2 (no) 2015-01-19
PT944648E (pt) 2007-06-26
DK0944648T3 (da) 2007-07-02
BRPI9711437B1 (pt) 2017-05-16
CA2468374A1 (en) 1998-03-05
CN1232470A (zh) 1999-10-20
HUP9903714A3 (en) 2000-07-28
DE122009000079I2 (de) 2011-06-16
FR09C0054I1 (no) 2009-04-12
IL189136A0 (en) 2008-06-05
JP2000500505A (ja) 2000-01-18
IL189136A (en) 2015-05-31
JP2006348038A (ja) 2006-12-28
HUP9903714A2 (hu) 2000-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO325273B1 (no) GLP-1-derivater
EP1056775B1 (en) Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action
EP1060191B1 (en) Derivatives of glp-1 analogs
EP1061946B1 (en) Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 %, forming partially structured micellar-like aggregates
US6268343B1 (en) Derivatives of GLP-1 analogs
US6458924B2 (en) Derivatives of GLP-1 analogs
US8097698B2 (en) Derivatives of GLP-1 analogs
AU3847897C1 (en) GLP-1 derivatives
EP1840134B1 (en) GLP-1 derivatives
MXPA99001823A (en) Glp-1 derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
CREP Change of representative

Representative=s name: ONSAGERS AS, POSTBOKS 6963 ST OLAVS PLASS, 0130 OS

SPCG Granted supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: LIRAGLUTID; REG. NO/DATE: EU/1/09/529/001-005 20090804 FIRST REG. NO/DATE: EU/1/09/529/001-005 20090630

Spc suppl protection certif: 2009027

Filing date: 20091118

Extension date: 20220822

MK1K Patent expired
SPCF Filing of supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: LIRAGLUTID - FORLENGET SPC; REG. NO/DATE: EU/1/12/830/001-002 20130701

Spc suppl protection certif: 2019036

Filing date: 20190920

SPCG Granted supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: LIRAGLUTID - FORLENGET SPC; REG. NO/DATE: EU/1/12/830/001-002 20130701

Spc suppl protection certif: 2019036

Filing date: 20190920

Extension date: 20230222

SPCX Expiry of an spc

Spc suppl protection certif: 2009027