PT1345895E - Novas difenilazetidinonas, processo para a sua preparação, fármacos contendo estes compostos e sua utilização para o tratamento de distúrbios do metabolismo lipídico - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "NOVAS DIFENILAZETIDINONAS, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO, FÁRMACOS CONTENDO ESTES COMPOSTOS E SUA UTILIZAÇÃO PARA O TRATAMENTO DE DISTÚRBIOS DO METABOLISMO LIPÍDICO" A invenção refere-se a difenilazetidinonas substituídas e aos seus sais fisiologicamente aceitáveis. Já foram descritas difenilazetidinonas (tal como, p. ex., ezetimibas) , bem como a sua utilização para o tratamento de hiperlipidemia, bem como arteriosclerose e hipercolesterolemia [conf. Drugs of the Future 2000, 25(7):679-685) e documento US 5756470] . O documento WO 9716455 e Vaccaro et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters Volume. 8, N°. 3, páginas 35-40, bem como páginas 313 até 318 revelam derivados de azetidinona. A invenção teve como base o objectivo de disponibilizar compostos adicionais que desenvolvem uma acção hipolipidémica terapeuticamente aproveitável. O objectivo consistiu, em particular, em encontrar novos compostos que, face aos compostos descritos no estado da técnica, são muito reduzidamente reabsorvíveis. Por muito reduzidamente reabsorvíveis entende-se uma reabsorção intestinal menor a 10%, de um modo preferido, menor ou igual a 5%. 1

Os novos compostos devem apresentar, em particular, uma reabsorção mais reduzida que a ezetimiba.

No caso de uma reabsorção activas farmacêuticas mostram, efeitos secundários. A invenção refere-se, por fórmula I, mais reduzida, as substâncias em regra, nitidamente menos conseguintes, a compostos da R1

R2 R3 onde significam

Rl, R3 independentemente um do outro, - (CH2) o-rNH- (C=0) o- i_alquileno (Co_C25) — (C=0) o-ι-N (R7) o-ι-LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de 0, H, F, Cl, Br, I, CF3, N02, CN, COOH, C00-alquilo (Ci-C6) , C0NH2, CONH-alquilo (C1-C6) , CON [alquilo (Ci-C6) ] 2, alquilo (Ci-Cô) , alcenilo (C2-Ce) , alcinilo (C2-C6) , 0-alquilo (Ci-Cô) , em que, nos resíduos de alquilo, um, vários ou todos os hidrogénios podem estar substituídos por flúor; 2 SO2N [alquilo(Ci — SO2-NH2, S02NH-alquilo (Ci-C6) , C6) ] 2/ S-alquilo (C1-C6) , S-(CH2) n_fenilo, S0-alquilo (C1-C6) , SO-(CH2) n-fenilo, S02-alquilo (Ci —

Ce), S02- (CH2) n_fenilo, em que n pode ser = 0 - 6 e o resíduo fenilo pode estar substituído até duas vezes com F, Cl, Br, OH, CF3, NO2, CN, OCF3, 0-alquilo (C1-C6) , alquilo (Ci-Cõ) , NH2; NH2, NH-alquilo (Ci-C6) , N (alquilo (Ci-C6) ) 2, NH-acilo (C1-C7) , fenilo, 0-(CH2) n_fenilo, em que n pode ser =0-6, em que o anel fenilo pode estar substituído uma até três vezes com F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, OCF3, 0-alquilo (Ci-C6) , alquilo (Ci-C6) , NH2, NH-alquilo (Ci-C6) , N (alquilo (Ci-C6) ) 2, S02-CH3, COOH, COO-alquilo (Ci~ C6) , conh2; R2, R4, R5, R6 independentemente uns dos outros, - (CH2) 0-1-NH- (C=0) 0-1-alquileno (C3-C25) - (C=0) 0-1-N (R7) 0-1-LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de O, H, F, Cl, Br, I, CF3, N02, CN, COOH, COO-alquilo (Ci-C6) , CONH2, CONH-alquilo (Ci-C6) , CON [alquilo (Ci-C6) ] 2í alquilo (Ci-C6) , alcenilo (C2-Cg) , alcinilo (C2-C6) , O-alquilo (Ci-Cô) , em que, nos resíduos de alquilo, um, vários ou todos os hidrogénios podem estar substituídos por flúor; SO2-NH2, S02NH-alquilo (Ci-C6) , S02N [alquilo (Ci-C6) ] 2, S-alquilo (Ci-C6) , S-(CH2) n-fenilo, S0- alquilo (C1-C6) , SO-(CH2) n-fenilo, S02-alquilo (Ci-Cs) , S02- (CH2) n_fenilo, em que n pode ser = 0 - 6 e o resíduo fenilo pode estar substituído até duas 3 no2, cn, ocf3, o- vezes com F, Cl, Br, OH, CF3, alquilo (C1-C6) , alquilo (Ci-C6) , NH2; NH2, NH-alquilo (Ci-C6) , N (alquilo (Ci-C6) ) 2, NH-acilo (C1-C7) , fenilo, 0- (CH2) n-fenilo, em que n pode ser =0-6, em que o anel fenilo pode estar substituído uma até três vezes com F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-alquilo (Ci-C6) # alquilo (C1-C6) , NH2, NH-alquilo (Ci-Cg) , N (alquilo (C1-C6) ) 2, SO2-CH3, COOH, COO-alquilo (Ci — C6), CONH2; R7 H, CH3 ; (LAG) resíduo de açúcar; onde um dos resíduos RI ou R3 possui o significado de - (CH2) o-i-NH- (C=0) 0-1-alquileno (C3-C25) - (C=0) 0-1-N (R7) 0-1-LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de O, bem como seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis são particularmente adequados para aplicações médicas devido à sua hidrossolubilidade mais elevada face aos compostos de partida ou de base. Estes sais têm de apresentar um anião ou catião farmaceuticamente aceitável. Sais de adição ácida farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de acordo com a invenção são sais de ácidos inorgânicos, tal como o ácido clorídrico, bromídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico, sulfónico e sulfúrico, bem como de ácidos orgânicos, tal como, p. ex., o ácido acético, benzenossulfónico, benzóico, cítrico, etanossulfónico, fumárico, glucónico, glicóico, isotiónico, 4 láctico, lactobiónico, maleico, málico, metanossulfónico, succínico, p-toluenossulfónico, tartárico e trifluoroacético. Para fins médicos é utilizado, de um modo preferido em particular, o sal de cloro. Sais básicos farmaceuticamente aceitáveis adequados são sais de amónio, sais de metais alcalinos, (tal como sais de sódio e de potássio) e sais de metais alcalino-terrosos (tal como sais de magnésio e de cálcio) .

Os sais com um anião farmaceuticamente inaceitável pertencem igualmente ao âmbito da invenção como produtos intermediários úteis para a preparação ou purificação de sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou para a utilização em aplicações não terapêuticas, por exemplo aplicações in vitro.

Os compostos de acordo com a invenção também podem estar presentes em várias formas polimórficas, p. ex., como formas polimórficas amorfas ou cristalinas. Todas as formas polimórficas dos compostos de acordo com a invenção pertencem ao âmbito da invenção e são um outro aspecto da invenção.

Em seguida, todas as referências a "composto(s) de acordo com a fórmula (1)" referem-se a composto (s) da fórmula I como descritos anteriormente, bem como aos seus sais e solvatos como aqui descritos.

Os compostos da fórmula I e seus sais farmaceuticamente aceitáveis representam fármacos ideais para o tratamento de distúrbios do metabolismo lipídico, em particular de hiperlipidemia. Os compostos da fórmula I adequam-se igualmente para a intervenção ao nivel de colesterol sérico, bem como para a prevenção e tratamento de sintomas arterioescleróticos. 5 Ο(s) composto (s) da fórmula (I) também podem ser administrados em combinação com outras substâncias activas. A quantidade de um composto de acordo com a fórmula (I) que é necessária para alcançar o efeito biológico desejado, depende de uma série de factores, p. ex., do composto especifico seleccionado, da utilização prevista, do tipo da administração e do estado clínico do doente. De um modo geral, a dose diária encontra-se na gama de 0,1 mg até 100 mg (tipicamente de 0,1 mg e 50 mg) por dia, por quilograma de peso corporal, p. ex., 0, Ι-ΙΟ mg/kg/dia. Os comprimidos ou cápsulas podem conter, por exemplo, de 0,01 até 100 mg, tipicamente de 0,02 até 50 mg. No caso de sais farmaceuticamente aceitáveis, as indicações de peso mencionadas anteriormente referem-se ao peso do ião de difenilazetidinona derivado do sal. Para a profilaxia ou terapia dos estados acima mencionados, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser, eles próprios, utilizados como composto, de um modo preferido, contudo, estão presentes com um suporte aceitável na forma de uma composição farmacêutica. O suporte tem naturalmente de ser aceitável no sentido de ser compatível com os outros componentes da composição e de não ser prejudicial à saúde do doente. O suporte pode ser uma substância sólida ou um líquido, ou ambos, e é, de um modo preferido, formulado com o composto na forma de dose individual, por exemplo, como comprimido que pode conter de 0,05% até 95% em peso da substância activa. Podem estar igualmente presentes outras substâncias farmaceuticamente activas, inclusivamente outros compostos de acordo com a fórmula (I) . As composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser preparadas segundo um dos métodos farmacêuticos conhecidos que consistem, no essencial, na mistura dos componentes com suportes e/ou substâncias auxiliares farmacologicamente aceitáveis. 6

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção são as que são adequadas para a administração por via oral ou perorai (p. ex. sublinqual) se bem que o modo de administração mais adequado, em cada caso individual, depende do tipo e severidade do estado a tratar e do tipo do composto de acordo com a fórmula (I) respectivamente utilizado. As formulações drageadas e formulações retardadas drageadas também pertencem ao âmbito da invenção. Preferidas são formulações resistentes ao ácido e ao suco gástrico. Os revestimentos gastrorresistentes adequados incluem acetato ftalato de celulose, acetato ftalato de polivinilo, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose e polímeros aniónicos de ácido metacrilico e éster metilico do ácido metacrilico.

Os compostos farmacêuticos adequados para a administração por via oral podem estar presentes em unidades separadas, tal como, por exemplo, cápsulas, cápsulas de obreira, comprimidos de chupar ou comprimidos, que contêm respectivamente uma quantidade determinada do composto de acordo com a fórmula (I); na forma de pós ou granulados; na forma de solução ou suspensão num liquido aquoso ou não aquoso; ou na forma de uma emulsão óleo em água ou água em óleo. Estas composições podem ser preparadas, tal como já mencionado, segundo qualquer método farmacêutico adequado que inclua um passo no qual se juntam a substância activa e o suporte (que pode consistir num ou em vários componentes adicionais). De um modo geral, as composições são preparadas por mistura uniforme e homogénea da substância activa com um suporte liquido e/ou sólido finamente distribuído, depois da qual, caso necessário, o produto é moldado. Assim pode preparar-se, por exemplo, um comprimido, prensando ou moldando um pó ou um granulado do composto, eventualmente com um ou vários componentes adicionais. Os comprimidos prensados podem ser 7 preparados por compressão do composto na forma fluida livre, tal como, por exemplo, um pó ou um granulado, eventualmente misturado com um aglutinante, antiaderente, diluente inerte e/ou um (vários) agentes tensioactivos/dispersantes numa máquina adequada. Os comprimidos moldados podem ser preparados por moldagem do composto pulverulento, humedecido com um diluente liquido inerte, numa máquina adequada.

As composições farmacêuticas que são adequadas para uma administração perorai (sublingual), incluem comprimidos de chupar que contêm um composto de acordo com a fórmula (I) com um aromatizante, habitualmente sacarose e goma-arábica ou goma tragacante, e pastilhas, que incluem o composto numa base inerte, tal como gelatina e glicerina ou sacarose e goma-arábica .

Adequados como substâncias activas adicionais para os preparados de combinação são:

Todos os agentes antidiabéticos que estão mencionados na Rote Liste 2001, capitulo 12. Estes podem ser combinados com os compostos da fórmula I de acordo com a invenção, em particular para a melhoria sinergética da acção. A administração da combinação de substâncias activas pode realizar-se por toma separada das substâncias activas pelo doente ou na forma de preparados de combinação onde, numa preparação farmacêutica, estão presentes várias substâncias activas.

Os agentes antidiabéticos incluem insulina e derivados de insulina, tal como, p. ex., Lantus® ou HMR 1964, derivados de GLP-1, tal como, p. ex., os que foram revelados no documento WO 98/08871 da Novo Nordisk A/S, bem como substâncias activas hipoglicémicas activas por via oral.

As substâncias activas hipoglicémicas activas por via oral incluem, de um modo preferido, sulfonilureias, biguanidinas, meglitinidas, oxadiazolidindionas, tiazolidindionas, inibidores de glucosidase, antagonistas de glucagona, agonistas de GLP-1, agentes de abertura de canais de potássio, tal como, p. ex., os que foram revelados nos documentos WO 97/26265 e WO 99/03861 da Novo Nordisk A/S, sensitizadores de insulina, inibidores de enzimas hepáticas que estão envolvidas na estimulação da gluconeogénese e/ou glicogenólise, moduladores da absorção de glicose, compostos que alteram o metabolismo lipidico, tal como substâncias activas anti-hiperlipidémicas e substâncias activas anti-lipidémicas, compostos que reduzem a ingestão de alimentos, agonistas de PPAR e PXR e substâncias activas que actuam sobre o canal de potássio dependente de ATP das células beta.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de HMGCoA redutase tal como simvastatina, fluvastatina, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, cerivastatina, rosuvastatina.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de reabsorção de colesterol tal como, p. ex., ezetimiba, tiquesida, pamaquesida.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um agonista PPAR gama tal como, p. ex., rosiglitazona, pioglitazona, JTT-501, G1 262570. 9

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um agonista PPAR alfa tal como, p. ex., GW 9578, GW 7647.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um agonista misto PPAR alfa/gama tal como, p. ex., GW 1536, AVE 8042, AVE 8134, AVE 0847.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um fibrato tal como, p. ex., fenofibrato, clofibrato, bezafibrato.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de MTP tal como, p. ex., Bay 13-9952, BMS-201038, R-103757.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de reabsorção de ácido biliar tal como, p. ex., HMR 1453.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de CETP tal como, p. ex., Bay 194789.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um adsorvente polimérico de ácido biliar tal como, p. ex., colestiramina, colesevelam. 10

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um indutor de receptor de LDL tal como, p. ex., HMR1171, HMR1586. Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de ACAT tal como, p. ex., avasimiba. Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um antioxidante tal como, p ex., OPC-14117. Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de lipoproteina lipase tal como, p. ex., NO-1886. Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de ATP-citrato -liase tal como, p. ex ., SB-204990. Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de esqualeno sintetase tal como, p. ex., BMS-188494.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um antagonista de lipoproteina(a) tal como, p. ex., CI-1027 ou ácido nicotinico.

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de lipase tal como, p. ex., orlistato. 11

Numa forma de realização da invenção os compostos da fórmula I são administrados em combinação com insulina. Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com uma sulfonilureia, tal como, P· ex., tolbutamida, glibenclamida, glipizida ou glimepirida. Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com uma biguanida tal como, p. ex., metformina.

Novamente numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com uma meglitinida tal como, p. ex., repaglinida.

Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com uma tiazolidindiona tal como, p. ex., troglitazona, ciglitazona, pioglitazona, rosiglitazona ou os compostos revelados no documento WO 97/41097 pela Dr. Reddy's Research Foundation, em particular 5-[ [4-[ (3,4-di-hidro-3-metil-4-oxo-2-quinazolinilmetoxi]fenil]metil]-2,4-tiazolidindiona.

Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com um inibidor de α-glucosidase tal como, p. ex., miglitol ou acarbose.

Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com uma substância activa que actua sobre o canal de potássio dependente de ATP das células beta tal como, p. ex., tolbutamida, glibenclamida, glipizida, glimepirida ou repaglinida. 12

Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com mais do que um dos compostos mencionados anteriormente, p. ex., em combinação com uma sulfonilureia e metformina, uma sulfonilureia e acarbose, repaglinida e metformina, insulina e uma sulfonilureia, insulina e metformina, insulina e troglitazona, insulina e lovastatina, etc. .

Numa outra forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com agonistas de CART, agonistas de NPY, agonistas de MC4, agonistas de orexina, agonistas de H3, agonistas de TNF, agonistas de CRF, antagonistas BP de CRF, agonistas de urocortina, agonistas de /33, agonistas de MSH (hormona estimuladora de melanocitos), agonistas de CCK, inibidores de reabsorção de serotonina, compostos mistos de serotonina e noradrenérgicos, agonistas de 5HT, agonistas de bombesina, antagonistas de galanina, hormona de crescimento, compostos libertadores de hormona de crescimento, agonistas de TRH, 2- ou 3-moduladores de proteinas desacopladoras, agonistas de leptina, agonistas de DA (bromocriptina, doprexina), inibidores de lipase/amilase, moduladores de PPAR, moduladores de RXR ou agonistas de TR-/3.

Numa forma de realização da invenção a outra substância activa é leptina.

Numa forma de realização a outra substância activa é dexanfetamina ou anfetamina.

Numa forma de realização a outra substância activa é fenfluramina ou dexfenfluramina. 13

Ainda numa outra forma de realização a outra substância activa é sibutramina.

Numa forma de realização a outra substância activa é orlistato • Numa forma de realização a outra substância activa é mazindol i ou fentermina. Numa forma de realização os compostos da fórmula I são administrados em combinação com fibras alimentares, de um modo preferido fibras alimentares insolúveis, tal como, p. ex. Caromax®. A combinação com Caromax® pode realizar-se numa preparação ou por toma separada de compostos da fórmula I e Caromax®. Neste caso, Caromax® também pode ser administrado na forma de alimentos tal como, p. ex., bolachas ou barras de cereais. A combinação de compostos da fórmula I com Caromax® distingue-se, a par de uma melhoria de acção, em particular na diminuição do colesterol de LDL, face às substâncias activas individuais, também pela sua aceitabilidade melhorada.

Entenda-se que qualquer combinação adequada dos compostos de acordo com a invenção com um ou vários dos compostos mencionados anteriormente e, opcionalmente, uma ou várias substâncias farmacologicamente activas adicionais, é considerada como estando incluída no campo de protecção da presente invenção.

Objecto da invenção são, além disso, tanto misturas estereoisoméricas da fórmula I, como também os estereoisómeros puros da fórmula I, bem como misturas diastereoisoméricas da 14 fórmula I, como também os diastereómeros puros. A separação das misturas realiza-se por via cromatográfica.

Preferidos são compostos racémicos como também enantiomericamente puros da fórmula I com a seguinte estrutura: R1

R4

Por resíduos de açúcar entendem-se compostos que derivam de aldoses e cetoses com 3 até 7 átomos de carbono, que podem pertencer à série D ou L: nestes incluem-se também aminoaçúcares, álcoois de açúcar ou ácidos de açúcar. A título de exemplo sejam mencionados, glucose, manose, frutose, galactose, ribose, eritrose, gliceraldeído, sedo-heptulose, glucosamina, galactosamina, ácido glucurónico, ácido galacturónico, ácido glucónico, ácido galactónico, ácido manónico, glucamina, 3-amino-l,2-propandiol, ácido glucárico e ácido galactárico.

Com diaçúcares consideram-se sacarídeos que consistem em duas unidades de açúcar. Di, tri ou tetrassacarídeos resultam da ligação de tipo acetal de 2 ou vários açúcares. As ligações podem ocorrer neste caso na forma a ou /3. A título de exemplo sejam mencionados a lactose, maltose e celobiose. 15

Quando o açúcar está substituído, então a substituição ocorre, de um modo preferido, no átomo de hidrogénio de um grupo OH do açúcar.

Para os grupos hidroxilo dos açúcares consideram-se essencialmente os seguintes grupos de protecção: grupos de protecção benzilo, acetilo, benzoílo, pivaloílo, tritilo, terc-butildimetilsililo, benzilideno, ciclo-hexilideno ou isopropilideno. A invenção refere-se, além disso, a um processo para a preparação de derivados de difenilazetidinona da fórmula I. R1 R6 R5

x e y podem significar, independentemente um do outro, 0 até 10. A união de -(CH2)x-NH2 no composto II pode ser, alternativamente, também a um dos outros dois anéis fenilo. O processo para a preparação dos compostos da fórmula I é caracterizado por se transformar uma amina da fórmula II com um reagente de alquilação ou de acilação que, de um modo preferido, comporta uma funcionalidade adicional - eventualmente na forma 16 protegida - na posição ómega. Esta é utilizada (após desprotecção) para a união do (LAG), por exemplo, sob formação de ligações éter, amina ou amida.

Os exemplos seguintes servem para a explicação mais detalhada da invenção, sem limitar a mesma aos produtos e formas de realização descritos nos exemplos.

Exemplo I 4-[3-(3-Hidroxi-3-fenilpropil)-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 5-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexilamino) -pentanóico (3_)

a) Ácido 5-bromo-pentanóico-4-[3-(3-hidroxi-3-fenil- propil)-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida (2)

Dissolvem-se 416 mg de 1-(4-aminometil-fenil)-3-(3-hidroxi-3-fenil-propil)-4-(4-metoxifenil)-azetidin-2-ona (jL) em 10 mL de diclorometano seco e mistura-se com 0,2 mL de trietilamina. Sob arrefecimento com gelo, juntam-se 200 mg de cloreto de 5-bromovalerilo dissolvidos em 2 mL de diclorometano e agita-se 5 horas à temperatura ambiente. Mistura-se com 5 mL de água, acidifica-se (pH ~ 3) com HC1 0,5 N, separa-se as fases, lava-se a fase aquosa com pouco diclorometano, seca-se as soluções 17

orgânicas reunidas com sulfato de sódio e purifica-se o residuo, após remoção do solvente, por filtração em coluna em silica gel. Obtém-se 2_ como óleo com o peso molecular 579, 54 (C3iH35BrN204) MS (FAB) : 581/579 (M+H+) . b) 4-[3-(3-Hidroxi-3-fenilpropil)-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 5-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexilamino)-pentanóico (.3)

Dissolvem-se 300 mg de 2_ em 10 mL de dimetilf ormamida e mistura-se com 191 mg de 6-amino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol. Agita-se a 80 °C até a transformação, controlada por cromatografia de camada fina, estar substancialmente terminada (após aproximadamente 2 horas). Em seguida, remove-se o solvente no vácuo e cromatografa-se o residuo sobre silica gel (eluente: CíhC^/metanol/amoníaco concentrado = 30:10:2). Obtém-se 3_ com o peso molecular 679, 82 (C37H49N3O9) ; MS (FAB): 680 (M+H+) . 18

Exemplo II 4 —{1—(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilamida do ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (_4)

a) 4-[5-(4-Fluoro-fenil)-1-(4 — fluoro-fenilamino)-5-hidroxi-2- (2-oxo-4-feniloxazolidin-3-carbonil) -pentil] -benzonitrilo (_5)

Dissolvem-se, sob árgon, 2,5 g de 3-[5-(4-fluoro-fenil)-5-hidroxi-pentanoí1]-4-fenil-oxazolidin-2-ona em 30 mL de diclorometano, junta-se 3,9 g de 4-[(4 — fluoro-fenilimino)-metil]-benzonitrilo e arrefece-se até aos -10 °C. A esta mistura, junta-se 6,4 mL de diisopropiletilamina e, num intervalo de 30 min., 4,05 mL de cloreto de trimetilsililo, de modo que a temperatura não ultrapasse os -5 °C. Agita-se novamente 1 hora a esta temperatura e arrefece-se depois até aos -25 °C. Adicionam-se depois, lentamente, 0,8 mL de tetracloreto de titânio. Agita-se a mistura escura durante a noite a - 25 até 19 -30 °C, decompõe-se depois com 35 mL de solução a 7 porcento de ácido tartárico e agita-se novamente 1 hora à temperatura ambiente. Subsequentemente junta-se 15 mL de uma solução de hidrogenocarbonato de sódio a 20 porcento e agita-se novamente 1 hora. Após separação de fases, lava-se a fase orgânica com 30 mL de água, seca-se sobre sulfato de magnésio e concentra-se até cerca de 10 mL. Após adição de 2 mL de bistrimetilsililacetamida, aquece-se 30 min. até ao refluxo e concentra-se depois em vácuo. Leva-se o residuo até à cristalização com acetato de etilo/heptano. Filtra-se por sucção e seca-se em vácuo. Obtém-se _5 com o peso molecular 653, 81 (C37H37F2N3O4SÍ) ; MS (ESI + ) : 654,3 (M+H+) , 582,2 (M+H+ -Si(CH3)3). b) {1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi- propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzonitrilo (6)

Dissolvem-se 2 g de _5 em 20 mL éter terc-butilmetilico e aquece-se cerca de 1 h até aos 40 °C com 100 mg de tri-hidrato de fluoreto de tetrabutilamónio e 1,3 mL de bistrimetilsililacetamida. Monitoriza-se a reacção no cromatograma de camada fina. Terminada a transformação, adiciona-se primeiro 0,2 mL de éster acético glacial, agita-se 30 min. e concentra-se. Mistura-se o residuo com 20 mL de uma mistura de isopropanol/ácido sulfúrico 2 N = 10:1 e agita-se 1 hora. Após adição de uma ponta de espátula de hidrogenocarbonato de sódio sólido, concentra-se novamente em vácuo, recolhe-se com acetato de etilo, lava-se a fase orgânica com água, seca-se e purifica-se o residuo, após remoção do solvente, por cromatografia em coluna (SÍO2, CH2Cl2/metanol = 100:1). Obtém-se 6 com o peso molecular 418,45 (C25H20F2N2O2) ; MS (DCI + ) : 419 (M+H+) . 20 c) 4-(4-Aminometil-fenil)-1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4- fluoro-fenil) -3-hidroxipropil] -azetidin-2-ona (7_)

Dissolvem-se 200 mg de _6 em 20 mL de etanol e hidrogena-se com 0,5 mL de amoníaco concentrado sobre níquel de Raney, 30 horas a 75 bar de hidrogénio e 25 °C. Filtra-se por sucção do catalisador, concentra-se em vácuo e purifica-se o resíduo por filtração em coluna (Si02, CH2Cl2/metanol/NH3 conc. = 100:10:1). Obtém-se 7_ com o peso molecular 422,5 (C25H22F2N2O2) ; MS (DCI + ) : 423 (M+H+) , 405 (M+H+ - H20) . d) 4 —{1—(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilamida do ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (_4)

Dissolvem-se 50 mg de 1_ e 25 mg de 3,4,5-tri-hidroxi-6-hidroximetil-tetra-hidro-piran-2-ona em 5 mL de metanol e agita-se com 10 mg de Na2C03 durante a noite. Filtra-se por sucção, concentra-se em vácuo e purifica-se o resíduo por filtração em coluna (Si02, CH2Cl2/metanol = 10:1) . Obtém-se _4 com um ponto de fusão acima de 180 °C e o peso molecular 600, 6 (C31H34F2N2O8) ; MS (ESI + ) : 601 (M+H+) , 583 (M+H+ - H20) . 21

Exemplo III 4-[3-[3-(4-Fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 12-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)-dodecanóico (8)

o a) Ácido 12-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)- dodecanóico (_9)

Dissolvem-se 3,5 g de ácido 12-aminododecanóico em 500 mL de metanol e agita-se, 30 horas à temperatura ambiente, com 2,7 g de carbonato de sódio finamente pulverizado e 4,8 g de 3,4,5-tri-hidroxi-6-hidroximetiltetra-hidro-piran-2-ona. Separa-se por filtração, concentra-se e dissolve-se o resíduo em 70 mL de água. Sob arrefecimento com gelo, adiciona-se gradualmente ácido clorídrico 1 N, até o valor de pH se encontrar a 1-2 (cerca de 50 - 55 mL). O ácido livre precipita, filtra-se por sucção e lava-se posteriormente com pouca água fria e seca-se em vácuo fino a 35 °C. Obtém-se _9 com o peso molecular 393, 48 (CisfbsNOs) ; MS (ESI + ) : 394 (M+H+) ; (ESI-):392 (M-H)~. b) 4-[3-[3-(4-Fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 12-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)-dodecanóico (8) 22

Prepara-se analogamente ao exemplo II, partindo de 1-(4-aminometil-fenil)-3-(3-hidroxi-3-fenil-propil)-4-(4-metoxi-fenil)-azetidin-2-ona. Obtém-se 4-[3-(3-hidroxi-3-fenil- propil)-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 12-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)-dodecanóico com o ponto de fusão 100 °C e o peso molecular 792 (C44H61N3O10) ; MS (ESI + ) : 792 (M+H+) .

3-[5-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4 — fluoro-fenil)-pentanoíl]-4-fenil-oxazolidin-2-ona (10)

Dissolvem-se 30 g de 3-[5-(4-fluoro-fenil)-5-hidroxi-pentanoí1]-4-fenil-oxazolidin-2-ona em 50 mL de DMF. Após adição de 14,3 g de imidazole e 19 g de cloreto de terc-butil-dimetilsililo em 25 mL de DMF, agita-se, à temperatura ambiente (2-4 h) , até à transformação completa. Concentra-se a solução reaccional, mistura-se com água e extrai-se com éster etílico do ácido acético. Após secagem da fase orgânica sobre sulfato de magnésio e concentração, obtém-se 10: C26H34FNO4SÍ (471, 65) MS (ESI) 494 (M + Na) 23 3- [ (4-Fluoro-fenilimino)-metil]-benzonitrilo (11) A 12 g de meta-ciano-benzaldeído em 60 mL de isopropanol juntam-se, gota a gota, 88 mL de para-fluoroanilina. Após lha 60 °C, o produto precipita. Deixa-se chegar até à temperatura ambiente, separa-se por filtração e lava-se o residuo com isopropanol. Após secagem, obtém-se 1_1 com o ponto de fusão 101 °C. C14H9FN2 (224,24) . 3-[5-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4 — fluoro-fenil)-1-(4-fluoro-fenilamino)-2-(2-oxo-4-fenil-oxazolidin-3-carbonil)-pentil]-benzonitrilo (12)

A 14 g de 3-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4-fluoro-fenil) -pentanoíl]-4-fenil-oxazolidin-2-ona (1_0) e 12,5 g de 3-[ (4-fluoro-fenilimino) -metil] -benzonitrilo 11_ em 200 mL de cloreto de metileno juntam-se, a 10 °C, 24 mL de diisopropiletilamina e juntam-se, gota a gota, 7,1 mL de cloreto de trimetilsililo. Após 1 h, juntam-se, gota a gota, a -10 °C, 3,4 mL de tetracloreto de titânio. Agita-se 3 h a -10 °C e deixa-se em repouso 12 h adicionais a -30 °C. Subsequentemente, mistura-se com 8 mL de ácido acético e 140 mL de uma solução aquosa a 7% de ácido tartárico e agita-se 2 h adicionais à temperatura ambiente. Após adição de 50 mL de solução aquosa a 20% de hidrogenossulfureto de sódio, agita-se novamente lhe extrai-se com cloreto de metileno. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, concentra-se e purifica-se por cromatografia em silica gel/acetato de etilo/heptano = 1/3 -> 1/1). Obtém-se 12 C40H43F2N3O4SÍ (695, 89) MS (ESI) 696 (Μ + H) 3-[3-[3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil)-propil]-1-(4-fluoro-fenil)-4-oxo-azetidin-2-il]-benzonitrilo (13)

Agita-se uma mistura de 13 g de 3-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi) -5-(4-fluoro-fenil)-1-(4-fluoro-fenilamino)-2-(2-oxo-4-fenil-oxazolidin-3-carbonil)-pentil]-benzonitrilo _12, 50 mL de bistrimetilsililacetamida, 0,5 g de fluoreto de tetrabutilamónio e 100 mL de éter terc-butilmetílico sob árgon, 10 h, à temperatura ambiente. Terminada a reacção, juntam-se lentamente, sob arrefecimento com gelo, 5 mL de ácido acético e concentra-se. Separa-se o resíduo por cromatografia em sílica gel (acetato de etilo/heptano = 1/8). Obtém-se 13: C31H34F2N2O2SÍ (532,71) MS (ESI) 555 (M + Na) 25 3 —{1—(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzonitrilo (14)

A 7,8 g de 3-[3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil)-propil]-1-(4-fluoro-fenil)-4-oxo-azetidin-2-il]-benzonitrilo (1_3) em 200 mL de metanol, juntam-se 10 mL de ácido cloridrico 1 N e agita-se 12 h. Mistura-se a reacção com solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio e extrai-se com cloreto de metileno. Seca-se a orgânica fase sobre sulfato de magnésio, concentra-se e purifica-se através de uma cromatografia em silica gel (acetato de etilo/heptano = 1/3 -> 1/1). Obtém-se 14: C25H20F2N2O2 (418,45) MS (ESI) 401 (Μ + H - H20) 26

Exemplo V 3 —{2 — (4-Fluoro-fenil)-4-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilamida do ácido 2,3,4,5,6- penta-hidroxi-hexanóico (16)

F A uma solução de 100 mg de 4-(3-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona 6_ e 46 mg de 3,4,5-tri-hidroxi-6-hidroximetil-tetra-hidro-piran-2-ona em 5 mL de metanol, juntam-se 25 mg de carbonato de sódio e agita-se, à temperatura ambiente, até à transformação completa. Filtra-se a solução reaccional e concentra-se.

Purifica-se o resíduo por HPLC (Knauer Eurospher-100-10-C18, água (0,1% de ácido trifluoroacético)/acetonitrilo (0,1% de ácido trifluoroacético) = 80/20 -> 10/90). Obtém-se 16: C31H34F2N2O8 (600, 62) MS (ESI) 601 (Μ + H) 27

Exemplo VIII

[5-(3-{1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-fenilcarbamoí1)-pentil]-amida d ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (19)

Prepara-se 1_9 analogamente a 1_8 partindo de 100 mg de 4-(3-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona L5, 108 mg de ácido 6-(2,3,4,5,6- penta-hidroxi-hexanoílamino)-hexanóico, 93 pL de diisopropilcarbodiimida, 65 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de cloreto de metileno. Obtém-se 10: C37H45F2N3O9 (713,78) MS (ESI) 714 (Μ + H)

O OH OH

íVd"

OH OH Ácido {2-[2-(2,3,4,5,β-penta-hidroxi-hexanoílamino)-etoxi]-etoxi}-acético (20) A uma solução de 450 mg de ácido [2-(2-amino-etoxi)-etoxi]-acético e 318 mg de 3,4,5-tri-hidroxi-6-hidroximetil-tetra-hidro-piran-2-ona em 10 mL de metanol juntam-se 172 mg de 28 carbonato de sódio e agita-se, à temperatura ambiente, até à transformação completa. Filtra-se a solução reaccional e concentra-se. Recolhe-se o resíduo em água e acetonitrilo (1/1), em que se formam 2 fases. Concentra-se a fase aquosa e contém 2_0 : C12H23NO10 (341,32) MS (ESI) 342 (Μ + H)

Exemplo IX (2 —{2 —[ (3 —{1— (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilcarbamoí1)-metoxi]-etoxi}-etil)-amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (21)

Prepara-se 2_1 analogamente a 1_8 partindo de 100 mg de 4- (3-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona (L5) , 122 mg de ácido {2 — [2 — (2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)-etoxi]-etoxi}-acético (20) , 93 pL de diisopropilcarbodiimida, 65 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilformamida. Obtém-se 21: C37H45F2N3O11 (745, 78) MS (ESI) 746 (Μ + H) 29

Exemplo X (2 —{2 — [ (4 —{1— (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil) - 3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilcarbamoí1)-metoxi]-etoxi}-etil)-amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (22)

Prepara-se 2_2 analogamente a 1_8 partindo de 100 mg de 4- (4-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona, 122 mg de ácido {2 —[2 — (2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanoílamino)-etoxi]-etoxi}-acético 2 0, 93 yL de diisopropilcarbodiimida, 65 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilf ormamida e 1 mL de acetonitrilo. Obtém-se 22: C37H45F2N3O11 (745,78) MS (ESI) 746 (Μ + H) Éster 2,3,4-triacetoxi-l-{2-[2-(2-amino-etoxi)-etoxi]- acetil}-5-hidroxi-pentilico do ácido acético (23)

30

Agita-se uma suspensão de 1,12 g de éster 2,3,4-triacetoxi-1—{2 — [2- (2-azido-etoxi)-etoxi]-acetil}-5-hidroxipentílico do ácido acético e 1,0 g de níquel de Raney em 100 mL de etanol, num aparelho de hidrogenação, 4 h, sob atmosfera de hidrogénio. Filtra-se a solução reaccional e concentra-se. O resíduo contém 23; C20H33NO12 (479, 49) MS (ESI) 480 (Μ + H)

Ácido {2—[2—({2—[2—(3,4,5,6-tetra-acetoxi-7-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-etoxi}-acético (24)

Agita-se, 12 h à temperatura ambiente, uma solução de 500 mg de éster 2,3, 4-triacetoxi-l-{2-[2-(2-amino-etoxi)-etoxi]-acetil}-5-hidroxi-pentílico do ácido acético 2_3, 1,15 g de ácido [2-(2-carboximetoxi-etoxi)-etoxi]-acético, 400 yL de diisopropilcarbodiimida, 288 mg de hidroxibenzotriazole em 20 mL de cloreto de metileno. Concentra-se a solução reaccional e separa-se por HPLC (Knauer Eurospher-100-10-C18, água (0,1% de ácido trifluoroacético)/acetonitrilo (0,1% de ácido trif luoroacético) = 80/20 -> 10/90). Obtém-se 2_4: C28H45NO18 (683,67) MS (ESI) 684 (Μ + H) 31 Ácido [2-( {2-[2-(3,4,5,6-tetra-acetoxi-7-hidroxi-2-oxo- heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-acético (25)

Prepara-se 2_5 analogamente a 2_4 partindo de 500 mg de éster 2,3,4-triacetoxi-l-{2-[2-(2-aminoetoxi)-etoxi]-acetil}-5-hidroxi-pentilico do ácido acético 2_3, 927 mg de ácido (2- carboximetoxi-etoxi)-acético, 400 pL de diisopropilcarbodiimida, 288 mg de hidroxibenzotriazole em 20 mL de cloreto de metileno. Obtém-se 25: C26H41NO17 (639, 61) MS (ESI) 640 (Μ + H) Ácido {2—[2—({2—[2—(3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo- heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-etoxi}-acético (26)

O O OH OH

Mistura-se, à temperatura ambiente, uma solução de 200 mg de ácido {2-[2-({2-[2-(3,4,5,6-tetra-cetoxi-7-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoil}-metoxi)-etoxi]-etoxi}-acético (24) em 5 mL de metanol com 100 pL de uma solução 5,4 M de metanolato de sódio em metanol e agita-se 2 h. Mistura-se a 32 solução reaccional com 1 g de Amberlite IR 120, agita-se 10 min filtra-se, concentra-se e obtém-se 26: C20H37NO14 (515,52) MS (ESI) 516 (Μ + H) Ácido [2 — ({2 — [2 — (3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi) etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-acético (27)

O

OH OH

HO

O

OH

OH OH

Prepara-se 2_7 analogamente a 2_6 partindo de 200 mg de 2_5 Obtém-se 27: C26H41N4O17 (471,46) MS (ESI) 472 (Μ + H)

Exemplo XI N- (4 —{1— (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il)-benzi1)— 2 —{2 —[2-({2-[2-(3,4,5, 6, 7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-etoxi}-acetamida (28)

Prepara-se 2_8 analogamente a 1_8 partindo de 62 mg de 4- (4 aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3- 33 hidroxi-propil]-azetidin-2-ona, 76 mg de ácido {2—[2 — ({2 — [2 — (3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi ]-etoxi }-acético 1_7, 57 pL de diisopropilcarbodiimida, 40 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilformamida. Obtém-se 19: C45H59F2N3O14 (919,98) MS (ESI) 920 (Μ + H)

Exemplo XII N- (3 —{1— (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzi1)— 2 —{2 —[2-({2-[2-(3,4,5, 6, 7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-etoxi}-acetamida (29)

Prepara-se 2_9 analogamente a 1_8 partindo de 62 mg de 4- (3-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona L5, 76 mg de ácido {2 — [2 — ({2—[2 — (3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi ]-etoxi }-acético 2_6, 57 pL de diisopropilcarbodiimida, 40 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilformamida. Obtém-se 29: C45H59F2N3O14 (919,98) MS (ESI) 920 (Μ + H) 34

Exemplo XIII N- (4 —{1— (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzi1)-2-[2-({2-[2-(3,4,5, 6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-acetamida (30)

Prepara-se 3_0 analogamente a 1_8 partindo de 68 mg de 4- (4-aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona, 76 mg de ácido [2— ({2—[2 — (3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoil}-metoxi) -etoxi] -acético (2_7) , 62 yL de diisopropilcarbodiimida, 44 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilformamida. Obtém-se 30: C43H55F2N3O14 (875, 93) MS (ESI) 876 (Μ + H) 35

Exemplo XIV N- (3-{1- (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzi1)-2-[2-({2-[2-(3,4,5, 6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoí1}-metoxi)-etoxi]-acetamida (31)

Prepara-se _31 analogamente a _18 partindo de 68 mg de 4 — (3 — aminometil-fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil] -azetidin-2-ona (M5) , 76 mg de ácido [2— ({2— [2 — (3,4,5,6,7-penta-hidroxi-2-oxo-heptiloxi)-etoxi]-etilcarbamoil}-metoxi)-etoxi]-acético {21), 62 yL de diisopropilcarbodiimida, 44 mg de hidroxibenzotriazole em 2 mL de dimetilformamida. Obtém-se 31: C43H55F2N3O14 (875, 93) MS (ESI) 876 (Μ + H)

Exemplo XVII

Trifluoroacetato de dodecil-[10-(4-{1-(4-fluoro-fenil)-3-[3- (4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilcarbamoíl)-decil]-dimetil-amónio (34)

Obtém-se o composto do exemplo XVII como o do exemplo XV com a diferença de ser empregue o cloreto de (10-carboxi-decil)- 36 dodecil-dimetil-amónio em vez de cloreto de (3-carboxi-propil)-trimetil-amónio . Obtém-se trifluoroacetato de dodecil-[10-(4-{1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil] -4-oxo-azetidin-2-il}-benzilcarbamoí1)-decil]-dimetil-amónio com o peso molecular de 803, 16 (C50H74F2N3O3; catião) ; MS (ESI): 803,77 (M+) .

Exemplo XVIII

Benzil-(4 —{4 —[3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilcarbamoí1}-butil)-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amónio; trifluoroacetato (35) a) Éster metílico do ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil ) -amino]pentanóico (36)

Suspendem-se, à temperatura ambiente, 1,37 g de 6-benzilamino-hexan-1,2,3,4,5-pentanol em 30 mL de dimetilformamida seca, mistura-se com 1,45 g de carbonato de potássio, 0,83 g de iodeto de potássio e 0,86 mL de éster metílico de ácido 5-bromovalérico e agita-se durante a noite à temperatura ambiente. No dia seguinte, filtra-se a mistura 37 reaccional e concentra-se o filtrado no vácuo e submete-se a uma cromatografia para a purificação (silica gel; éster etilico do ácido acético/metanol/água 5/1/0,1). Obtém-se éster metilico do ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,β-penta-hidroxi-hexil)-amino]- pentanóico com o peso molecular 385, 46 (C19H31NO7) ; MS (ESI): 386, 33 (M+H+) . b) Ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentanóico (37)

Dissolvem-se, à temperatura ambiente, 0,46 g de éster metilico do ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino)-pentanóico numa mistura de 5 mL de etanol e 5 mL de água, mistura-se com 0,4 g de hidróxido de potássio e agita-se 2 h a 80 °C. Em seguida concentra-se a mistura reaccional arrefecida

no vácuo, recolhe-se o residuo em água, neutraliza-se com ácido clorídrico e concentra-se novamente. Suspende-se o produto bruto em etanol; filtra-se a suspensão e concentra-se o filtrado no vácuo. Obtém-se ácido 5-[benzil-(2,3, 4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentanóico com o peso molecular 371,43 (C18H29NO7) ; MS (ESI): 372,2 (M+H+) . c) 3-[5-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4-fluoro-fenil)-pentanoil]-4-fenil-oxazolidin-2-ona (38)

Dissolvem-se 27 g de 3-[5-(4-fluoro-fenil)-5-hidroxi-pentanoil]-4-fenil-oxazolidin-2-ona com 13,6 g de terc-butil-cloreto de dimetilsililo e 10,2 g de imidazole em 36 mL de dimetilformamida e agita-se 90 min. a 60 °C. Terminada a reacção, dissolve-se a mistura em éster etilico do ácido acético e extrai-se duas vezes com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtra-se e concentra-se no vácuo. Obtém-se 38 3-[5-(terc-butil-dimetilsilaniloxi)-5-(4 — fluoro-fenil)-pentanoí1]-4-fenil-oxazolidin-2-ona com o peso molecular 471,65 (C26H34FNO4S1) ; MS (ESI): 340,28 (MH+ - HOSi (CH3) 2C (CH3) 3) . d) 4- [5- (terc-Butil-dimetil-silaniloxi) -5- (4-fluoro-fenil) -1-(4-metoxi-fenil)-2-(2-oxo-4-fenil-oxazolidin-3-carbonil)-pentilamino]-benzonitrilo (39)

Dissolvem-se 16,2 g de 3-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4-fluoro-fenil)-pentanoil]-4-fenil-oxazolidin-2-ona em 350 mL de diclorometano. Mistura-se a solução com 19,8 mL de base de Hunig e com 10,14 g de 4-[(4-metoxi-fenilimino)-metil]-benzonitrilo e arrefece-se até aos -10 °C. Adicionam-se 8,52 mL de triflato de trimetilsililo à solução arrefecida e agita-se 30 min. a -10 °C. Arrefece-se então a solução até aos -30 °C, e juntam-se 44 mL de solução de tetracloreto de titânio. Agita-se a mistura reaccional 2 h a -30 até -40 °C. Em seguida, deixa-se aquecer a solução até à temperatura ambiente, lava-se a solução reaccional sucessivamente com 200 mL de ácido sulfúrico 2 N, 300 mL de solução de hidrogenossulfureto de sódio a 20% e solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, concentra-se no vácuo e purifica-se o residuo sobre silica gel com n-heptano/éster etilico do ácido acético 3/1. Obtém-se 4-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4-fluoro-fenil)-1-(4-metoxi-fenil)-2-(2-oxo-4-fenil-oxazolidin-3-carbonil)-pentilamino]-benzonitrilo com o peso molecular 707,93 (C41H46FN3O5SÍ) ; MS (ESI): 590,51 (MH+ - C7H5N2) . 39 e) 4-[3-[3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro- fenil)-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il] -benzonitrilo (40)

Dissolvem-se 13,2 g de 4-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-5-(4 — fluoro-fenil)-1-(4-metoxi-fenil)-2-(2-oxo-4-fenil-oxazolidin-3-carbonil)-pentilamino]-benzonitrilo em 380 mL de éter terc-butilmetilico, mistura-se com 18,6 mL de N,0-bis (trimetilsilil)-acetamida e 1,86 mL de uma solução 1 M de fluoreto de tetrabutilamónio em tetra-hidrofurano e agita-se 2 h à temperatura ambiente. Terminada a reacção, adiciona-se 10 mL de ácido acético, concentra-se a mistura reaccional no vácuo e purifica-se o resíduo sobre sílica gel com tolueno/éster etílico do ácido acético 50/1. Obtém-se 4-[3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4 — fluoro-fenil)-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il ]-benzonitrilo com o peso molecular 544,75 (C32H37FN2O3SÍ) ; MS (ESI): 545,56 (M+H+) . f) 4-[3-[3-(4-Fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi- fenil) -4-oxo-azetidin-l-il]-benzonitrilo (41)

Dissolvem-se 3,5 g de 4-[3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil)-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il ] -benzonitrilo em 65 mL de tetra-hidrofurano, mistura-se com 0,74 mL de ácido acético e 8,03 mL de uma solução 1 M de fluoreto de tetrabutilamónio em tetra-hidrofurano e agita-se 2 h à temperatura ambiente. Em seguida, junta-se 4,82 mL da solução de fluoreto de tetrabutilamónio e agita-se 3 h adicionais à temperatura de refluxo. Concentra-se a mistura reaccional arrefecida no vácuo, e purifica-se o resíduo cromatograficamente sobre sílica gel com n-heptano/éster etílico do ácido acético 2/1. Obtém-se 4-[3-[3- (4-fluoro-fenil)-3- 40 hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzonitrilo com o peso molecular 430,48 (C26H23FN2O3) ; MS (ESI) : 431,24 (M+H+) . g) 1-(4-Aminometil-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-metoxifenil)-azetidin-2-ona (42)

Dissolvem-se 1,22 g de 4-[3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzonitrilo em 90 mL de etanol, mistura-se com 10 mL de solução concentrada de amoniaco e um excesso de niquel de Raney e agita-se 8 h a 60 °C e uma pressão de 10 bar de hidrogénio. Arrefece-se a mistura reaccional durante a noite até à temperatura ambiente; no dia seguinte separa-se do catalisador, concentra-se o filtrado no vácuo e purifica-se o residuo cromatograficamente sobre sílica gel com diclorometano/metanol/solução de amoniaco 10/1/0,1. Obtém-se 1-(4-aminometil-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-metoxi-fenil)-azetidin-2-ona com o peso molecular 434,51 (C26H27FN2O3) ; MS (ESI): 418,2 (MH+ - NH3) . h) Benzil-(4-{4-[3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilcarbamoíl}-butil)-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amónio; trifluoroacetato (35)

Dissolvem-se, à temperatura ambiente, 100 mg de ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentanóico e 110 mg de 1-(4-aminometil-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-metoxi-fenil)-azetidin-2-ona em 2 mL de dimetilformamida seca, mistura-se com 42 mg de N-hidroxi-benzotriazole e 52 mg de cloridrato de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida e agita-se durante a noite à temperatura ambiente. No dia seguinte concentra-se a mistura 41 reaccional no vácuo e cromatografa-se, para a purificação, sobre RP18 com acetonitrilo/água com 0,1% de ácido trifluoroacético. Obtém-se benzil- (4 — {4 —[3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil] -2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilcarbamoí1}-butil)-(2,3,4,5,β-penta-hidroxi-hexil)-amónio; trifluoroacetato com o peso molecular 787, 93 (C44H54FN3O9; catião) ; MS (ESI): 788,70 (M+H+) .

Exemplo XIX

4-{1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi- propil] -4-oxo-azetidin-2-il } -benzilamida do ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentanóico (43)

Prepara-se o composto do exemplo XIX partindo de ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentanóico e 4-(4-aminometil-fenil)-1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-azetidin-2-ona analogamente ao composto do exemplo XVIII. Obtém-se 4-{1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil) -3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-benzilamida do ácido 5-[benzil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]- 42 pentanóico com o peso molecular 775, 89 (C43H51F2N3O8) ; MS (ESI): 776, 4 (M+H+) . 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(4-iodo-butoxi)-fenil]-azetidin-2-ona (55)

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta dissolvem-se 100 mg de 1- (4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 80 mg de carbonato de potássio pulverizado e 0,2 mL de diiodobutano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo através de um cartucho de S1O2 (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1). Obtém-se o produto como óleo. C28H28F2INO3 (591) MS (ESI): M+-18 43

Exemplo XXV 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-{4-[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-butoxi}-fenil)-azetidin-2-ona (56)

F

Em 5 mL de dimetilformamida absoluta dissolvem-se 100 mg de 1- (4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(4-iodo-butoxi)-fenil]-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 132 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto (89 mg) como óleo. C35H44F2N2O8 (658) MS (ESI) : M+ 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(5-iodo-pentiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona (57) o

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta dissolvem-se 150 mg de 1- (4-fluoro-fenil)-3-[3- (4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4- 44 (4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 120 mg de carbonato de potássio pulverizado e 0,33 mL de diiodopentano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o residuo através de um cartucho de SiCç (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1). Obtém-se o produto como óleo. C29H30F2INO3 (605) MS (ESI) : M+-18

Exemplo XXVI 1- (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4 —{5 —[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-pentiloxi}-fenil)-azetidin-2-ona (58)

Em 5 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 170 mg de 1- (4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(5-iodo-pentiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 220 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, 45 purifica-se o residuo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto como óleo. C36H46F2N2O8 (672) MS (ESI) : M+ 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(6-iodo-hexiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona (59)

F

F

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 100 mg de 1- (4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 80 mg de carbonato de potássio pulverizado e 0,25 mL de diiodo-hexano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o residuo através de um cartucho de SÍO2 (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1). Obtém-se o produto como óleo. C30H32F2INO3 (619) MS (ESI): M+-18 46

Exemplo XXVII 1- (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil] -4-(4-{6-[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-hexiloxi}-fenil)-azetidin-2-ona (60)

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 136 mg de 1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(6-iodo-hexiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 172 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2,5 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto como óleo. C37H48F2N2O8 (686) MS (ESI): M+ 47 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(8-iodo-octiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona (61)

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 150 mg de 1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 120 mg de carbonato de potássio pulverizado e 0,44 mL de diiodooctano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o residuo através de um cartucho de SiCç (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1) . Obtém-se o produto como óleo. C32H36F2INO3 (647) MS (ESI): M+-18 48

Exemplo XXVIII 1- (4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-{8-[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-octiloxi}-fenil)-azetidin-2-ona (62)

Em 5 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 150 mg de 1- (4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-hidroxi-propil]-4- [4-(8-iodo-octiloxi)-fenil]-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 180 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto como óleo. C39H52F2N2O8 (714) MS (ESI) : M+ 49 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(10-iodo-deciloxi)-fenil]-azetidin-2-ona (63)

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 150 mg de 1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 120 mg de carbonato de potássio pulverizado e 865 mg de diiododecano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o residuo através de um cartucho de SiCç (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1). Obtém-se o produto como óleo. C34H40F2INO3 (675) MS (ESI): M+-18 50

Exemplo XXIX 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4 —{10 —[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-deciloxi}-fenil)-azetidin-2-ona (64)

Em 5 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 170 mg de 1- (4 — fluoro-fenil)-3-[3- (4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-[4-(10-iodo-deciloxi)-fenil]-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 200 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto como óleo. C41H56F2N2O8 (742) MS (ESI): M+ 51 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4- (4 — {2 —[2-(2-iodo-etoxi)-etoxi]-etoxi}-fenil)-azetidin-2-ona (65)

Em 10 mL de dimetilformamida absoluta, dissolvem-se 150 mg de 1-(4 — fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-hidroxi-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 120 mg de carbonato de potássio pulverizado e 0,4 mL de 1,2- bis(diiodoetoxi)etano. Agita-se a solução reaccional durante a noite à temperatura ambiente. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o residuo através de um cartucho de SÍO2 (n-heptano; n-heptano/acetato de etilo 4:1). Obtém-se o produto como óleo. C30H32F2INO5 (651) MS (ESI) : M+-18 52

Exemplo XXX 1-(4-Fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil] 4-{4-[2-(2-{2-[metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amino]-etoxi}-etoxi)-etoxi]-fenil}-azetidin-2-ona (66)

Em 5 mL de dimetilf ormamida absoluta, dissolvem-se 230 mg de 1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4 — fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4 —{2 —[2-(2-iodo-etoxi)-etoxi]-etoxi}-fenil)-azetidin-2-ona. Juntam-se depois 280 mg de 6-metilamino-hexan-l,2,3,4,5-pentanol e agita-se a solução reaccional a 50 °C durante 2 h. Após a concentração no evaporador rotativo, sob vácuo de bomba de óleo a 40 °C, purifica-se o resíduo por HPLC preparativa. Obtém-se o produto como óleo. C37H48F2N2O10 (718) MS (ESI): M+ 53

Metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amida do ácido hex-5-enóico (67)

'3

Em 3 mL de dicloreto de metileno absoluto, dissolvem-se 1,11 g de ácido 5-hexenóico. Adicionam-se depois, gota a gota, 1,4 mL de cloreto de tionilo. Agita-se à temperatura ambiente durante 3 h e concentra-se depois no evaporador rotativo. Em 5 mL de dicloreto de metileno absoluto, suspendem-se 1,09 g de 6-metilamino-hexan-1,2,3,4,5-pentanol. Após adição, gota a gota, de ácido 5-hexenóico dissolvido em 3 mL de dicloreto metileno absoluto, agita-se durante 4 h à temperatura ambiente. Separa-se o precipitado originado por filtração do produto reaccional, concentra-se o filtrado no evaporador rotativo e transforma-se adicionalmente o produto bruto oleoso sem purificação. C13H25NO6 (291) MS (ESI) : M+ 54

Metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amida do ácido 6 — { 4 — [3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil) -propil]-1-(4-fluoro-fenil)-4-oxo-azetidin-2-il]-fenil}-hex-5-enóico (68)

Colocam-se inicialmente 110 mg de 4-(4-bromo-fenil)-3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil)-propil]-1-(4-fluoro-fenil)-azetidin-2-ona e 136 mg de metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil ) -amida do ácido hex-5-enóico em 300 pL de trietilamina, num tubo fechado completamente aquecido, sob árgon. Após adição de 6 mg de acetato de paládio e 14 mg de trifenilfosfina, agita-se a 100 °C durante 4 h. Recolhe-se depois a mistura reaccional em diclorometano, filtra-se e concentra-se no evaporador rotativo. A purificação do residuo através de um cartucho de SÍO2 (diclorometano/metanol 20:1 - 5:1) origina o produto. C43H58F2N2O8SÍ (796) 55

Exemplo XXXI

Metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amida do ácido 6 —(4 — {1- (4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-oxo-azetidin-2-il}-fenil)-hex-5-enóico (69)

Em 6 mL de metanol dissolvem-se 70 mg de metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amida do ácido 6-{4-[3-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-(4-fluoro-fenil)-propil]-1-(4-fluoro-fenil) -4-oxo-azetidin-2-il]-fenil}-hex-5-enóico. Juntam-se depois HC1 (aquoso) 0,1 N e agita-se à temperatura ambiente durante a noite. Em seguida, neutraliza-se com solução aquosa 1 N de hidróxido de sódio e concentra-se no evaporador rotativo. Mistura-se o resíduo com diclorometano, filtra-se e concentra-se a água-mãe no evaporador rotativo. Obtém-se o produto após purificação por HPLC preparativa: C31H44F2N2O8 (682) MS (ESI): M+- 18 56

Exemplo XXXV Éster 2,3,4,5-tetra-acetoxi-l-{3-[3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilcarbamoí1}-pentílico do ácido acético (73)

Dissolvem-se 112 mg de (0,24 mmole) de 1-(3-aminometil-fenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-4-(4-metoxi-fenil) -azetidin-2-ona em 5 mL de cloreto de metileno e 0,5 mL de trietilamina. Junta-se, a 0 °C, 0,5 g de éster 2,3,4-triacetoxi-

1-(acetoxi-clorocarbonil-metil)-butílico do ácido acético e deixa-se descongelar até à temperatura ambiente. Após 30 minutos, dilui-se com acetato de etilo e filtra-se depois através de sílica gel. Separa-se o solvente por destilação e purifica-se o resíduo com cromatografia flash. Obtém-se o produto como substância sólida amorfa: C42H47FN2O14 (822,84) MS (ESI) : M+= 823,3. 57

Exemplo XXXVI 3-[3-[3-(4-Fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilamida do ácido 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexanóico (74)

F

Dissolvem-se 90 mg (109 pmole) de éster 2,3,4,5-tetra-acetoxi-1-{3-[3-[3-(4-fluoro-fenil)-3-hidroxi-propil]-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-l-il]-benzilcarbamoí1}-pentilico do ácido acético em 7 mL de metanol e mistura-se com 0,5 mL de NaOMe/MeOH 1 N. Após 2 horas à temperatura ambiente, neutraliza-se com ácido clorídrico metanólico e concentra-se. Purifica-se o residuo com cromatografia flash. Obtém-se o produto como substância sólida amorfa. C32H37FN2O9 (612,66) MS (ESI): M+= 613,2. 58

Exemplo XXXVII

Metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil)-amida do ácido 6-(4-{3-[1-(4 — fluoro-fenil)-2-(4-metoxi-fenil)-4-oxo-azetidin-3-il]-1-hidroxi-propil}-fenil)-hex-5-enóico (75)

Preparam-se 200 mg de metil-(2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexil) -amida do ácido hex-5-enóico e 72 mg de 3-[3-(4-bromo-fenil)-3-hidroxi-propil]-1-(4 — fluoro-fenil)-4-(4-metoxi-fenil)-azetidin-2-ona analogamente à sintese do exemplo XXXI. Obtém-se o produto como substância sólida amorfa.

Os compostos da fórmula I de acordo com a invenção foram testados quanto à sua acção com o método descrito em seguida:

Influência da absorção de colesterol + excreção de ácido 3H-taurocólico com base na excreção fecal no murganho, rato e hamster

Mantêm-se murganhos NMRI, ratos Wistar, ou hamsters Golden Syrian (em grupos de n=4-6) em jaulas metabólicas sob dieta padrão (Altromin, Lage (Lippe) ) . Na tarde antes da toma do 59 marcador radioactivo (14C-colesterol) , colocam-se os animais em jejum e adaptam-se às grades.

Adicionalmente, marcam-se os animais subcutaneamente, 24 horas antes da aplicação perorai da refeição teste (14C-colesterol em Intralipid® 20, Pharmacia-Upjohn), com 3H-TCA (ácido taurocólico) (p. ex. 1 yCi/murganho até 5 yCi/rato).

Teste de absorção de colesterol: administram-se por via perorai com a sonda gástrica 0,25 mL/murganho de Intralipid® 20 (Pharmacia-Upjohn) (picado com 0,25 yCi de 14C-colesterol em 0,1 mg de colesterol).

Preparam-se separadamente as substâncias teste em 0,5%/(metilcelulose (Sigma)/5% solutol (BASF, Ludwigshafen) ou um veículo adequado. O volume de aplicação da substância teste perfaz 0,5 mL /murganho. A substância teste é aplicada imediatamente antes da refeição teste (Intralipid com marcador 14C-colesterol) (teste de absorção de colesterol).

Reúne-se as fezes durante 24 h: determina-se a eliminação fecal de 14C-colesterol e 3H ácido taurocólico (TCA) após 24 horas.

Removem-se os fígados, homogeneízam-se e incineram-se alíquotas no oxímetro (modelo 307, Packard) para a determinação da quantidade de 14C-colesterol ingerida/absorvida. 60

Avaliação:

Amostras de fezes:

Determinar o peso total, completar com água até um volume definido, depois homogeneizar, evaporar aliquota à secura e incinerar no oximetro (modelo 307, Packard para incineração das amostras marcadas radioactivamente): A quantidade radioactiva de 3H-H20 e 14C-C02 é extrapolada para a quantidade excretada em ácido 3H-taurocólico e 14C-colesterol, respectivamente (técnica de isótopos duais) . Os valores de ED200 como dose são interpolados a partir de uma curva de dose-acção como as doses que duplicam a excreção em TCA e colesterol, respectivamente, relativamente a um grupo de controlo tratado simultaneamente.

Amostras hepáticas: A quantidade ingerida de 14C-colesterol no figado é relativa à dose aplicada. Os valores de ED50 são interpolados a partir de uma curva de dose-acção como a dose que reduz para metade a absorção de 14C-colesterol no figado (50%) , relativamente a um grupo de controlo.

Os valores de ED5o seguintes demonstram a actividade dos compostos da fórmula I de acordo com a invenção. 61

Exemplo N° ED50 (figado) [mg/murganho] II 0,1 III 0,003 XIII 0,3 XVIII 1,0 XXV 0,3 XXX 0,1

Pode-se depreender da tabela que os compostos da fórmula I possuem uma muito boa acção diminuidora de colesterol.

Reabsorbabilidade:

Testou-se a reabsorbabilidade dos compostos da fórmula I no modelo de células Caco (A.R. Hilgers et al., Caco-2 cell monolayers as a model for drug transport across the intestinal mucosa, Pharm. Res. 1990, 7, 902). A partir dos dados medidos pode-se depreender que os compostos da fórmula I, de acordo com a invenção, apresentam uma reabsorção nitidamente mais reduzida face aos compostos descritos no estado da técnica (estrutura de referência):

Estrutura de referência Exemplo Coeficiente de partição aparente Papp [cm/s] (de acordo com a literatura de Hilgers) o O \—1 X ao 00 »>.

Reabsorção humana estimada 100% 62

Estrututura de referência: Ezetimiba

Lisboa, 14 de Fevereiro de 2007 63

Claims (12)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Compostos da fórmula I,

   Rl, R3 independentemente um do outro, - (CH2) o-rNH- (C=0) o-i-alquileno (Co —C25) — (C=0) o-i—N (R7) o-i — LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de 0, H, F, Cl, Br, I, CF3, N02, CN, COOH, COO-alquilo (Ci-Cõ) , CONH2, CONH-alquilo (Ci-Ce) , CON [alquilo (Ci-Cô) ] 2^ alquilo (Ci-Cô) , alcenilo (C2-C6) , alcinilo (C2-C6) , O-alquilo (C1-C6) , em que, nos resíduos de alquilo, um, vários ou todos os hidrogénios podem estar substituídos por flúor; S02-NH2, S02NH-alquilo (Ci-Cô) , S02N [alquilo (Ci-C6) ] 2, S-alquilo (Ci-C6) , S- (CH2) n-fenilo, SO-alquilo (Ci-C6) , SO-(CH2) n_fenilo, S02-alquilo (Ci-Ce) , S02- (CH2) η-fenilo, em que n pode ser = 0 - 6 e o resíduo fenilo pode estar substituído até duas 1 no2, cn, ocf3, o- vezes com F, Cl, Br, OH, CF3, alquilo (Ci-C6) , alquilo (Ci-C6) , NH2; NH2, NH-alquilo (C1-C6) , N (alquilo (Ci-Cô) ) 2/ NH-acilo (C1-C7) , fenilo, 0- (CH2) n-fenilo, em que n pode ser =0-6, em que o anel fenilo pode estar substituído uma até três vezes com F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-alquilo (Ci-C6) / alquilo (C1-C6) , NH2, NH-alquilo (C1-C6) , N (alquilo (Ci-C6) ) 2, S02-CH3, C00H, COO-alquilo (C2- C6) , C0NH2; R2, R4, R5, R6 independentemente uns dos outros, - (CH2) 0-1-NH- (C=0) 0-1-alquileno (C3-C25) - (C=0) 0-1-N (R7) 0-1-LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de 0, H, F, Cl, Br, I, CF3, N02, CN, COOH, COO-alquilo (Ci-C6) , C0NH2, CONH-alquilo (Ci-C6) , CON [alquilo (Ci-Cê) ] 2, alquilo (0χ-0ε) , alcenilo (C2-C6) , alcinilo (C2-C6) , O-alquilo (0χ-0ε) , em que, nos resíduos de alquilo, um, vários ou todos os hidrogénios podem estar substituídos por flúor; S02-NH2, S02NH-alquilo (Cx-C6) , S02N [alquilo (Cx-C6) ] 2, S-alquilo (Οχ-Οε) , S-(CH2) n_fenilo, S0- alquilo (Οχ-Οε) , S0- (CH2) n-fenilo, S02-alquilo (Cx — Ce) , S02-(CH2) n-fenilo, em que n pode ser = 0 - 6 e o resíduo fenilo pode estar substituído até duas vezes com F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, 0CF3, 0-alquilo (Cx-Ce) , alquilo (Cx-Cô) í NH2; NH2, NH-alquilo (Cx-C6) , N (alquilo (Cx-C6) ) 2, NH-acilo (C1-C7) , fenilo, 0- (CH2) n-fenilo, em que n pode ser =0-6, em que o anel fenilo pode estar 2 substituído uma até três vezes com F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-alquilo (Ci-Ce) alquilo (C1-C6) , NH2, NH-alquilo (Ci-Ce) N (alquilo (Ci-Ce) ) 2, S02-CH3, COOH, COO-alquilo (Ci~ C6) , CONH2; R7 (LAG) H, CH3; resíduo de açúcar; onde um dos resíduos RI ou R3 possui o significado de - (CH2) 0-1-NH- (C=0) 0-1-alquileno (C0-C25) - (C=0) 0-1-N (R7) 0-1-LAG, em que um ou vários átomos de C do resíduo de alquileno podem estar substituídos por átomos de 0, bem como seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
2. 2. Fármaco contendo um ou várias dos compostos de acordo com a reivindicação 1.
3. 3. Fármaco contendo um ou vários dos compostos de acordo com a reivindicação 1 e pelo menos uma outra substância activa.
4. 4. Fármaco, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por conter um ou vários compostos que normalizam o metabolismo lipídico como substância activa adicional.
5. 5. Fármaco, de acordo com a reivindicação 3 ou 4, caracterizado por conter um ou vários agentes antidiabéticos, substâncias activas hipoglicémicas, inibidores de HMGCoA redutase, inibidores de reabsorção de colesterol, agonistas PPAR gama, agonistas PPAR alfa, agonistas PPAR alfa/gama, fibratos, inibidores de MTP, 3 inibidores de reabsorção de ácido biliar, inibidores de CETP, adsorventes poliméricos de ácido biliar, indutores de receptor de LDL, inibidores de ACAT, antioxidantes, inibidores de lipoproteina lipase, inibidores de ATP-citrato-liase, inibidores de esqualeno sintetase, antagonistas de lipoproteina(a) , inibidores de lipase, insulinas, sulfonilureias, biguanidas, meglitinidas, tiazolidindionas, inibidores de α-glucosidase, substâncias activas gue actuam sobre o canal de potássio dependente de ATP das células beta, agonistas de CART, agonistas de NPY, agonistas de MC4, agonistas de orexina, agonistas de H3, agonistas de TNF, agonistas de CRF, antagonistas BP de CRF, agonistas de urocortina, agonistas de β3, agonistas de MSH (hormona estimuladora de melanocitos), agonistas de CCK, inibidores de reabsorção de serotonina, compostos mistos de serotonina e noradrenérgicos, agonistas de 5HT, agonistas de bombesina, antagonistas de galanina, hormonas de crescimento, compostos libertadores de hormonas de crescimento, agonistas de TRH, 2- ou 3-moduladores de proteinas desacopladoras, agonistas de leptina, agonistas de DA (bromocriptina, doprexina), inibidores de lipase/amilase, moduladores de PPAR, moduladores de RXR ou agonistas de TR-β ou anfetaminas como substância activa adicional.
6. 6. Fármaco, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por conter simvastatina, fluvastatina, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, cerivastatina ou rosuvastatina como inibidor de HMGCoA redutase. 4
7. 7. Compostos de acordo com a reivindicação 1 para a aplicação como medicamento para o tratamento de distúrbios do metabolismo lipidico.
8. 8 . Processo para a preparação de um fármaco contendo um ou vários dos compostos de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a substância activa ser misturada com um suporte farmaceuticamente adequado e esta mistura ser levada a uma forma adequada para a administração.
9. 9. Utilização dos compostos de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para o tratamento de hiperlipidemia.
10. 10. Utilização dos compostos de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para a diminuição do nivel de colesterol sérico.
11. 11. Utilização dos compostos de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para o tratamento de sintomas arterioescleróticos.
12. 12. Utilização dos compostos de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para o tratamento de resistência à insulina. Lisboa, 14 de Fevereiro de 2007 5