RU2286985C2 - Новые 1,2-дифенилазетидиноны, их применение для лечения нарушений липидного обмена, лекарственное средство и способ его получения - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы I

в которой R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга означают (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N((С₁-С₆)алкил)-, -N((C₁-С₆)алкилфенил)- или -NH-; Н, F, Cl, Br, I, O-(С₁-С₆)алкил, NH₂; (LAG) означает остаток ациклического моносахара; триалкиламмонийалкильный остаток или -O-(SO₂)-ОН; причем всегда по меньшей мере один из остатков R1-R6 должен иметь значение (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N((С₁-С₆)алкил)-, -N((С₁-С₆)алкилфенил)- или -NH- и причем остатки R1 и R2 не должны иметь значения -O-сахарный остаток, а также к их фармацевтически приемлемым солям. Указанные соединения обладают терапевтически пригодным гиполипидемическим действием, отличаются очень незначительной всасываемостью (резорбцией) и соответственно могут быть использованы для применения в качестве медикаментов при лечении нарушений липидного обмена, таких как гиперлипидемия, снижение уровня сывороточного холестерина, при лечении артериосклеротических явлений и инсулиновой резистентности. 4 н. и 8 з.п. ф-лы.

Description

Изобретение касается замещенных дифенилазетидинонов, их физиологически совместимых солей, а также физиологически функциональных производных.

Дифенилазетидиноны (например, эзетимибы), а также их применение для лечения гиперлипидемии, а также артериосклероза и гиперхолестеринемии уже описаны (см. Drugs of the Future 2000, 25(7):679-685) и US 5756470).

Задачей изобретения является получение новых соединений, обладающих терапевтически пригодным гиполипидемическим действием. Задача изобретения, в основном, состояла в поиске новых соединений, которые по сравнению с известными из уровня техники соединениями отличаются очень незначительной всасываемостью (резорбцией). Под очень незначительной резорбцией понимают интестинальную резорбцию менее 10%, преимущественно менее или равную 5%. В особенности новые соединения должны обладать более низкой резорбцией, чем эзетимибы.

При низкой резорбции фармацевтически активные вещества, как правило, проявляют заметно меньше побочных эффектов.

Изобретение касается, следовательно, соединений формулы I

в которой означают

R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга (C₀-C₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(C=O)-, -CH=CH-, -C≡C-, -N((C₁-C₆)алкил)-, -N((С₁-С₆)алкилфенил)- или -NH-; H, F, Cl, Br, I, CF₃, NO₂, CN, COOH, COO(C₁-C₆)алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)алкил, CON[(C₁-C₆)алкил]₂, (C₁-C₆)алкил, (C₂-C₆)алкенил, (C₂-C₆)алкинил, O-(C₁-C₆)алкил, причем в алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

SO₂-NH₂, SO₂NH(C₁-C₆)алкил, SO₂N[(C₁-C₆)алкил]₂, S-(C₁-C₆)алкил, S-(CH₂)_n-фенил, SO-(C₁-C₆)алкил, SO-(CH₂)_n-фенил, SO₂-(C₁-C₆)алкил, SO₂-(CH₂)_n-фенил, причем n=0-6 и фенильный остаток однократно или двукратно может быть замещен F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)алкилом, (C₁-C₆)алкилом, NH₂;

NH₂, NH-(C₁-C₆)алкил, N((C₁-C₆)алкил)₂, NH(C₁-C₇)ацил, фенил, O-(CH₂)_n-фенил, причем n=0-6 и фенильное кольцо одно-, двух- или троекратно может быть замещено F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)алкилом, (C₁-C₆)алкилом, NH₂, NH(C₁-C₆)алкилом, N[(C₁-C₆)алкил]₂, SO₂-CH₃, COOH, COO-(C₁-C₆)алкилом, CONH₂;

(LAG) - остаток моно-, ди-, три-, тетрасахаров, сахарная кислота, аминосахар; остаток аминокислоты, олигопептидный остаток, состоящий из 2-9 аминокислот; триалкиламмонийалкильный остаток; -O-(SO₂)-OH;

причем всегда по меньшей мере один из остатков R1-R6 должен иметь значение (C₀-C₃₀)алкилен-LAG, причем один или более C-атомов алкиленового остатка могут быть замещены группами -O-, -(C=O)-, -CH=CH-, -C≡C-, -N((C₁-C₆)алкил)-, -N((C₁-C₆)алкилфенил)- или -NH- и остатки R1 и R2 не должны иметь значение -О-сахарный остаток или -О-сахарная кислота,

а также к их фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительны соединения формулы I, в которых по меньшей мере один из остатков R1-R6 имеет значение (C₀-C₃₀)алкилен-LAG, причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены группами -O-, -(C=O)-, -N((C₁-C₆)алкил)- или -NH-.

Особенно предпочтительны соединения формулы I, в которых один из остатков R1 или R3 имеет значение (C₀-C₃₀)алкилен-LAG, причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены группами -O-, -(C=O)-, -N(CH₃)- или -NH-.

Наиболее предпочтительны соединения формулы I, в которых один из остатков R1 или R3 имеет значение -(СН₂)_0-1-NH-(C=O)_0-1-(C₀-C₂₅)алкилен(С=O)_0-1-N(R7)_0-1-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены О-атомом и R7 означает H или СН₃.

Далее предпочтительны соединения формулы I, в которых группа LAG является остатком моносахара.

Под триаммонийалкильным остатком понимают следующие группы:

в которых n=0-10 и Alk₁, Alk₂, Alk₃ означают независимо друг от друга линейный или разветвленный алкильный остаток с 1-20 атомами углеводорода.

Фармацевтически приемлемые соли благодаря своей высокой растворимости в воде по сравнению с исходными или основными соединениями особенно пригодны для медицинского применения. Эти соли должны содержать фармацевтически совместимые анионы и катионы. Фармацевтически приемлемые кислотно-аддивные соли соединений согласно изобретению представляют собой соли неорганических кислот, таких как соляная кислота, бромистоводородная, фосфорная, метафосфорная, азотная, сульфоновая и серная кислота, а также органических кислот, как, например, уксусная, бензолсульфоновая, бензойная, лимонная, этансульфоновая, фумаровая, глюконовая, гликолевая, изотионовая, молочная, лактобионовая, малеиновая, яблочная, метансульфоновая, янтарная, п-толуолсульфоновая, винная и трифторуксусная кислоты. Для медицинских целей особенно предпочтителен способ, в котором применяется хлорная соль. Пригодными фармацевтически приемлемыми основными солями являются аммониевые соли, соли щелочных металлов (как натриевые и калиевые соли) и соли щелочно-земельных металлов (такие, как магниевые и кальциевые соли). Соли с фармацевтически неприемлемым анионом также относятся к данному изобретению в качестве полезных промежуточных продуктов для приготовления или очистки фармацевтически приемлемых солей и/или для использования для нетерапевтических целей, например для применения in vitro.

Используемые понятия "физиологически функциональные производные" означают каждое физиологически приемлемое производное соединения согласно изобретению, например эфир, которое при введении млекопитающему, например человеку (прямо или косвенно), образует такое соединение или активный метаболит.

Одним из следующих объектов данного изобретения являются пролекарства (Prodrugs) соединений согласно изобретению. Такие пролекарства могут быть in vivo метаболизированы до одного из соединений согласно изобретению. Такие пролекарства сами по себе могут быть или не быть эффективными.

Соединения согласно изобретению могут существовать также в различных полиморфных формах, например в виде аморфных и кристаллически полиморфных формах. Все полиморфные формы соединений согласно изобретению относятся к данному изобретению и являются объектами изобретения.

Все последующие ссылки на "соединение(я) согласно формулы (I)" распространяются на "соединение(я) согласно формулы (I)", как описано ранее, а также их соли, сольваты и физиологически функциональные производные, как описано выше.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли и физиологически функциональные производные представляют собой идеальные лекарственные средства для лечения нарушений обмена липидных веществ, особенно гиперлипидемии. Соединения формулы I пригодны также для регулирования уровня сывороточного холестерина, а также для предупреждения и лечения артериосклеротических явлений.

Соединение(я) формулы I могут приниматься совместно с другими активными веществами.

Количество соединения формулы (I), которое необходимо для достижения желаемого биологического эффекта, зависит от ряда факторов, например от конкретного выбранного соединения, цели применения, способа введения и клинического состояния пациента. В общем дневная доза находится в области 0,1-100 мг (обычно 0,1-50 мг) в день на килограмм веса тела, например 0,1-10 мг/кг/день. Таблетки и капсулы могут содержать, например, 0,01-100 мг, чаще всего 0,02-50 мг. В случае фармацевтически приемлемых солей названные весовые количества относятся к весу соли производного дифенилазетидинониона. Для профилактики и лечения вышеназванных состояний соединения формулы (I) могут применяться в чистом виде, но предпочтительнее их применять вместе с приемлемыми носителями в виде фармацевтической композиции. Носитель, естественно, должен быть приемлемым, в том смысле, что он должен быть совместимым с другими компонентами композиции и не оказывать вредного воздействия на здоровье пациента. Носитель может быть твердым веществом или жидкостью или в виде того и другого и преимущественно вместе с соединением используется для изготовления отдельной разовой дозы, например в виде таблетки, которая содержит от 0,05 до 95% активного вещества. Могут присутствовать и другие фармацевтически активные вещества, включая другие соединения формулы I. Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть изготовлены известными фармацевтическими способами, которые в основном заключаются в том, что компоненты смешиваются с фармакологически приемлемыми носителями и/или вспомогательными веществами.

Фармацевтические композиции согласно изобретению пригодны для орального и перорального (например, сублингвального) введения, хотя пригодный способ введения зависит в каждом отдельном случае от вида и тяжести излечиваемого заболевания и от вида применяемого соединения формулы (I). Предметом изобретения являются также дражированные фармацевтические препараты и дражированные фармацевтические препараты пролонгированного действия. Предпочтительны препаративные формы, стойкие к кислой среде и желудочному соку. Подходящими стойкими к желудочному соку покрытиями являются ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы и анионные полимеры метакриловой кислоты и метилметакрилата.

Пригодные фармацевтические соединения для орального приема могут находиться в виде отдельных дозированных единиц, например в виде капсул, капсул-облаток, сосательных таблеток или таблеток, которые содержат определенные количества соединения формулы (I); в виде порошка или гранулятов; в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости; или в виде эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле. Такие композиции, как уже упоминалось, могут быть получены каким-нибудь подходящим фармацевтическим способом, который включает стадию, на которой активное вещество и носитель (который может состоять из одного или более компонентов) приводятся в контакт. В общем, композиции готовят путем равномерного и гомогенного перемешивания активного вещества с жидким и/или тонкодисперсным твердым носителем, после чего продукт, если необходимо, формуют. Так, например, можно изготовить таблетку, при этом порошок или гранулят соединения прессуют или формуют, при необходимости с одним или более дополнительных компонентов. Прессованные таблетки могут быть изготовлены путем таблетирования соединения в свободно текучей форме, как, например, в виде порошка или гранулята, при необходимости смешанные со связующим, веществом, придающим скользкость, инертными разбавителями и/или одним или более поверхностно-активным/диспергирующим веществом в специальных аппаратах. Формованные таблетки могут быть изготовлены в специальных аппаратах путем формования порошкообразного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем.

Фармацевтические составы, пригодные для перорального (сублингвального) введения, включают сосательные таблетки, содержащие соединение формулы (I) с вкусовыми добавками, обычно сахарозой и гуммиарабиком или трагантом, и пастилки, которые содержат соединение в инертной основе, как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик.

В качестве других активных веществ для комбинированных препаратов пригодны все антидиабетические средства, которые перечислены в красном списке 2001, глава 12. Они могут комбинироваться с соединениями формулы I согласно изобретению, особенно для синергетического улучшения воздействия. Прием комбинированных препаратов может осуществляться как путем раздельного введения активных веществ пациенту, так и в форме комбинированных препаратов, в которых несколько активных веществ находятся в одном фармацевтическом препарате.

Антидиабетические средства включают инсулин и производные инсулина, как, например, Lantus^® или HMR 1964, GLP-1-производные, как, например, опубликованные в заявке WO 98/08871 фирмы Novo Nordisk A/S, а также оральные гипогликемические активные вещества.

Оральные гипогликемические активные вещества включают преимущественно сульфонилмочевину, бигуадин, меглитинид, оксадиазолидион, тиазолидиндион, ингибиторы глюкозидазы, антагонисты глюкагона, GLP-1-агонисты, открыватели калиевых каналов, как, например, опубликованные в заявках WO 97/26265 и WO 99/03861 фирмы Novo Nordisk A/S, инсулинсенсибилизирующие вещества, ингибиторы ферментов печени, которые участвуют в стимуляции глюконеогенеза и/или глюкогенолиза, модуляторы поглощения глюкозы, соединения, изменяющие жировой обмен, такие как антигиперлипидемические активные вещества и антилипидемические активные вещества, соединения, уменьшающие усвоение пищевых продуктов, PPAR- и PXR-агонисты и активные вещества, влияющие на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибиторами HMGCoA-редуктазы, такими как симвастатин, флювастатин, правастатин, ловастатин, аторвастатин, церивастатин, розувастатин.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором резорбции холестерина, как, например, эзетимибы, тиквезиды, памаквезиды.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с PPAR-гамма-агонистом, как, например, розиглитазон, пиоглитазон, JTT-501, Gl 262570.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с PPAR-альфа-агонистом, как, например, GW 9578, GW 7647.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с PPAR-альфа/гамма-агонистом, как, например, GW 1536, AVE 8042, AVE 8134, AVE 0847.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с фибратом, как, например, фенофибрат, клофибрат, безафибрат.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с MTP-ингибитором, как, например, Bay 13-9952, BMS-201038, R-103757.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором резорбции желчных кислот, как, например, HMR 1453.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с CETP-ингибитором, как, например, Bay 194789.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с полимерным абсорбером желчных кислот, как, например, холестирамин, колесольвам.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с индуктором LDL-рецептора, как, например, HMR1171, HMR1586.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ACAT-ингибитором, как, например, авазимиб.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с антиоксидантом, как, например, ОРС-14117.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором липопротеинлипазы, как, например, NO-1886.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором АТФ-цитратлиазы, как, например, SB-204990.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором скваленсинтетазы, как, например, BMS-188494.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с антагонистом липопротеина, как, например, Cl-1027 или никотиновой кислотой.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором липазы, как, например, орлистат.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с инсулином.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с сульфонилмочевиной, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипизид или гликазид.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с бигуанидом, как, например, метформин.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с меглитинидом, как, например, репаглинид.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с тиазолидиндионом, как, например, троглитазон, циглитазон, пиоглитазон, розиглитазон или с соединениями, опубликованными в WO 97/41097 Dr. Reddy's Research Foundation, особенно 5-[[4-[(3,4-дигидро-3-метил-4-оксо-2-хиназолинилметокси]фенил]метил]-2,4-тиазолидиндион.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с ингибитором α-глюкозидазы, как, например, миглитол или акарбоза.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с активным веществом, которое воздействует на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипизид, глиазид или репаглинид.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с более чем одним из вышеназванных соединений, как, например, в комбинации с сульфонилмочевиной и метформином, с сульфонилмочевиной и акарбозой, репаглинидом и метформином, инсулином и сульфонилмочевиной, инсулином и метформином, инсулином и троглитазоном, инсулином и ловастатином и т.д.

В других формах выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с CART-агонистами, NPY-агонистами, МС4-агонистами, агонистами орексина, Н3-агонистами, TNF-агонистами, CRF-агонистами, CRF BP-антагонистами, агонистами урокортина, β3-агонистами, агонистами меланоцитстимулирующего гормона (MSH), ССК-агонистами, ингибиторами восстановления серотонина, смешанными серотонин- и норадренергенными соединениями, 5НТ-агонистами, агонистами бомбезина, антагонистами галанина, гормонами роста, с соединениями, высвобождающими гормон роста, TRH-агонистами, отщепляющими протеин 2- или 3-модуляторами, агонистами лептина, DA-агонистами (бромокриптин, допрексин), ингибиторами липазы/амилазы, PPAR-модуляторами, RXR-модуляторами или TR-β-агонистами.

В одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является лептин.

В одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является дексамфатамин или амфетамин.

В одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является фенфлурамин или дексенфлурамин.

Еще в одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является сибутрамин.

В одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является орлистат.

В одной из форм выполнения изобретения дополнительным активным веществом является мазиндол или фентермин.

В одной из форм выполнения изобретения соединения формулы I вводятся в комбинации с балластными веществами, преимущественно нерастворимыми балластными веществами, как, например, Caromax^®. Комбинация с Caromax^® может находиться в одной готовой лекарственной форме или вводиться путем раздельного приема соединений формулы I и Caromax®. Caromax® может также вводиться в виде пищевых продуктов, как, например, в выпечных изделиях или хлопьях мюсли. Комбинации соединений формулы I с Caromax^® наряду с улучшенным действием особенно отличаются снижением LDL-холестерина по сравнению с отдельными активными веществами, а также своей улучшенной переносимостью.

Следует иметь в виду, что каждая подходящая комбинация соединений согласно изобретению с одним или более вышеназванными соединениями и по выбору одним или более другими фармакологически активными веществами является объектом защиты данного изобретения.

Далее предметом изобретения являются стереоизомерные смеси формулы I, а также чистые стереоизомеры формулы I, а также диастереомерные смеси формулы I и чистые диастереомеры. Разделение смесей происходит хроматографическим способом.

Предпочтительны рацемические, а также энантиомерно чистые соединения формулы I следующей структуры:

Под остатками сахара понимают соединения, которые образуются из альдоз и кетоз с 3-7 С-атомами, которые могут относиться к D- или L-ряду; к ним также относятся аминосахара, сахарные спирты или сахарные кислоты. Среди них следует назвать: глюкозу, маннозу, фруктозу, галактозу, рибозу, эритрозу, глицериновый альдегид, седогептулозу, глюкозамин, галактозамин, глюкуроновую кислоту, галактуроновую кислоту, глюконовую кислоту, галактоновую кислоту, манноновую кислоту, глюкамин, 3-амино-1,2-пропандиол, глюкаровую кислоту и галактаровую кислоту.

Под дисахарами понимают сахариды, состоящие из двух звеньев сахаров. Ди-, три- или тетрасахариды образуются ацетальподобными связями двух или более сахаров. При этом связи могут быть в α- или β-форме. В качестве примера следует назвать лактозу, мальтозу или целлобиозу.

Если сахар является замещенным, замещение происходит преимущественно по атому водорода ОН-группы сахара.

Для гидроксильных групп сахаров пригодны следующие защитные группы: бензил-, ацетил, бензоил-, пивалоил-, тритил-, трет-бутилдиметилсилил-, бензилиден-, циклогексилиден- или изопропилидензащитная группа.

Под термином «аминокислоты» или «остатки аминокислот» понимают, например, стереоизомерные формы, т.е. D- или L-формы следующих соединений:

Аланин	глицин	пролин
Цистеин	гистидин	глутамин
Аспарагиновая кислота	изолейцин	аргинин
Глутаминовая кислота	лизин	серин

Фенилаланин	лейцин	треонин
Триптофан	метионин	валин
Тирозин	аспарагин

2-аминоадипиновая кислота	2-аминоизомасляная кислота
3-аминоадипиновая кислота	3-аминоизомасляная кислота
бета-аланин	2-аминопимелиновая кислота
2-аминомасляная кислота	2,4-диаминомасляная кислота
4-аминомасляная кислота	десмозин
пиперидинкарбоновая кислота	2,2-диаминопимелиновая кислота
6-аминокапроновая кислота	2,3-диаминопропионовая кислота
2-аминогептановая кислота	N-этилглицин
2-(2-тиенил)глицин	3-(2-тиенил)аланин
пеницилламин	саркозин
N-этиласпарагин	N-метилизолейцин
гидроксилизин	6-N-метиллизин
аллогидроксилизин	N-метилвалин
3-гидроксипролин	норвалин
4-гидроксипролин	норлейцин
изодесмозин	орнитин
аллоизолейцин
N-метилглицин

Краткое название аминокислот соответствует общепринятым обозначениям (см. Schröder, Lübke. Пептиды, т.1, Нью-Йорк, 1965, стр. XXII-XXIII; Houben-Weyl. Методы органической химии, том XV/1 и 2, Штуттгарт, 1974). Аминокислоты pGlu означают пироглутамил, Nal - 3-(2-нафтил)аланин, Azagly-NH₂-соединение формулы NH₂-NH-CONH₂ и D-Asp-D-форма аспарагиновой кислоты. Пептиды по своей химической природе представляют собой амиды кислот и при гидролизе разлагаются до аминокислот.

Под олигопептидами понимают пептиды, которые состоят из 2-9 вышеназванных аминокислот.

Пригодными защитными группами (см. например, T.W.Greene. "Защитные группы в органическом синтезе") для аминокислот в первую очередь являются:

Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(Mtr), Arg(PMV), Asp(OBzl), Asp(OBut), Cys(4-MeBzl), Cys(Acm), Cys(SBut), Glu(Obzl), Glu(Obut), His(Tos), His(Fmoc), His(Dnp), His(Trt), Lys(Cl-Z), Lys(Boc), Met(O), Ser(Bzl), Ser(But), Thr((Bzl), Thr(But), Trp(Mts), Trp(CHO), Tyr(Br-Z), Tyr(Bzl) или Tyr(But).

В качестве аминозащитных групп применяют преимущественно бензилоксикарбонил-(Z)-остаток, отщепляемый путем катализируемого гидрирования, 2-(3,5-диметилоксифенил)пропил(2)оксикарбонил (Ddz-) или тритил-(Trt)-остаток, отщепляемые под действием сильных кислот, и 9-флуоренилметилоксикарбонил-(Fmoc)-остаток, отщепляемый под действием вторичного амина.

Далее изобретение касается способа получения производных дифенилазетидинона формулы I

где х и у могут означать независимо друг от друга 0-10.

Связывание -(СН₂)х-NH₂- в соединении II может происходить альтернативно на одном или обоих фенильных кольцах.

Способ получения соединений формулы I отличается тем, что амин формулы II подвергают взаимодействию с алкилирующим или ацилирующим реагентом, что преимущественно в омега-положении имеет дополнительную функциональную группу, возможно, в защищенной форме. Это применяется (после снятия защиты) для связывания группы (LAG), например, с образованием эфиров, аминов или амидных соединений.

Последующие примеры служат для более подробного пояснения изобретения, однако не ограничивают его продуктами и формами выполнения, описанными в примерах.

Пример I

4-[3-(3-Гидрокси-3-фенилпропил)-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 5-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексиламино)пентановой кислоты (3)

а) 4-[3-(3-Гидрокси-3-фенилпропил)-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 5-бромопентановой кислоты (2)

416 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-(3-гидрокси-3-фенилпропил)-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (1) растворяли в 10 мл сухого дихлорметана и смешивали с 0,2 мл триэтиламина. При охлаждении льдом туда же добавляли 200 мг 5-бромвалерилхлорида, растворенного в 2 мл дихлорметана и перемешивали 5 часов при комнатной температуре. Смешивали с 5 мл воды, подкисляли 0,5 N HCl до рН ~3, фазы разделяли, промывали водную фазу небольшим количеством дихлорметана, сушили объединенные органические растворы сульфатом натрия и остаток очищали после удаления растворителя фильтрацией на колонках в присутствии кизельгеля. Получали соединение 2 в виде масла с молекулярным весом 579,54 (С₃₁Н₃₅BrN₂O₄); MS (FAB): 581/579 (M+H⁺).

b) 4-[3-(3-Гидрокси-3-фенилпропил)-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]-бензиламид 5-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексиламино)пентановой кислоты (3)

300 мг 2 растворяли в 10 мл диметилформамида и смешивали с 191 мг 6-аминогексан-1,2,3,4,5-пентанола. Перемешивали при 80°С до окончания реакции, что контролировали методом тонкослойной хроматографии (около 2 часов). Затем в вакууме удаляли растворитель и остаток подвергали хроматографии через кизельгель (носитель: CH₂Cl₂/метанол/концентрированный аммиак = 30:10:2). Получали соединение 3 с молекулярным весом 679,82 (С₃₇Н₄₉N₃O₉); MS (FAB): 680(M+H⁺).

Пример II

4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензиламид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (4)

а) 4-[5-(4-Фторфенил)-1-(4-фторфениламино)-5-гидрокси-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентил]бензонитрил (5)

2,5 г 3-[5-(4-фторфенил)-5-гидроксипентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она растворяли в 30 мл дихлорметана в среде аргона, к нему добавляли 3,9 г 4-[(4-фторфенилимино)метил]бензонитрила и охлаждали до -10°С. К этой смеси добавляли 6,4 мл диизопропилэтиламина и в течение 30 мин 4,05 мл триметилсилилхлорида таким образом, чтобы температура не превышала -5°С. При этой температуре еще 1 час перемешивали и затем охлаждали до -25°С. Затем медленно добавляли 0,8 мл титантетрахлорида. Темную смесь перемешивали в течение ночи при температуре между -25°С и -30°С, затем разлагали 35 мл 7- процентного раствора винной кислоты и 1 час при комнатной температуре перемешивали. Затем добавляли 15 мл 20%-ного раствора гидрокарбоната натрия и снова перемешивали 1 час. После разделения фаз органическую фазу промывали 30 мл воды, высушивали над сульфатом магния и концентрировали до объема около 10 мл. После добавления 2 мл бис-триметилсилилацетамида нагревали 30 мин до обратного потока и сгущали в вакууме. Кристаллизацию остатка проводили смесью этилацетат/гептан. Отсасывали и сушили в вакууме. Получали соединение 5 с молекулярным весом 653,81 (С₃₇Н₃₇F₂N₃O₄Si); MS (ESI+): 654,3 (M+H⁺), 582,2 (M+H⁺-Si(CH₃)₃).

b) {1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензонитрил (6)

2 г соединения 5 растворяли в 20 мл эфира метил-трет-бутила и нагревали со 100 мг тетрабутиламмонийфторидтригидрата и 1,3 мл бис-триметилсилилацетамида около 1 часа до 40°С. За ходом реакции следили по тонкослойной хроматограмме. По окончании реакции добавляли вначале 0,2 мл ледяной уксусной кислоты, перемешивали 30 минут и сгущали. Остаток смешивали с 20 мл смеси изопропанол/2N серная кислота = 10:1 и 1 час перемешивали. После добавления на конце шпателя твердого гидрокарбоната натрия снова сгущали в вакууме, поглощали этилацетатом, органическую фазу промывали водой, сушили, остаток очищали после удаления растворителя через хроматографическую колонку (SiO₂, CH₂Cl₂/метанол = 100:1). Получали соединение 6 с молекулярным весом 418,45 (C₂₅H₂₀F₂N₂O₂); MS (DC1+): 419 (M+H⁺).

с) 4-(4-Аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-он (7)

200 мг соединения 6 растворяли в 20 мл этанола и гидрировали 0,5 мл концентрированного аммиака над никелевым катализатором Ренея 30 часов при давлении водорода 75 бар и при 25°С. Отсасывали от катализатора, сгущали в вакууме и осадок очищали путем фильтрации через колонку (SiO₂, CH₂Cl₂/метанол/концентрированный NH₃=100:10:1). Получали продукт 7 с молекулярным весом 422,5 (C₂₅H₂₂F₂N₂O₂); MS (DCl+): 423 (M+H⁺), 405 (M+H⁺-H₂O).

d) 4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензиламид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (4)

50 мг соединения 7 и 25 мг 3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-она растворяли в 5 мл метанола и перемешивали с 10 мг Na₂CO₃ в течение ночи. Отсасывали, сгущали в вакууме и остаток очищали путем колоночной фильтрации (SiO₂, CH₂Cl₂/метанол = 10:1). Получали соединение 4 с температурой плавления выше 180°С и молекулярным весом 600,6 (С₃₁Н₃₄F₂N₂O₈); MS (ESI+): 601 (M+H⁺), 583 (M+H⁺-H₂O).

Пример III

4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 12-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)додекановой кислоты (8)

а) 12-(2,3,4,5,6-Пентагидроксигексаноиламино)додекановая кислота (9)

3,5 г 12-аминододекановой кислоты растворяли в 500 мл метанола и перемешивали с 2,7 г тонкодисперсного порошка карбоната натрия и 4,8 г 3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-она 30 часов при комнатной температуре. Отфильтровывали, сгущали и остаток растворяли в 70 мл воды. При охлаждении льдом постепенно добавляли 1N соляную кислоту до рН 1-2 (около 50-55 мл). Выпавшую свободную кислоту отсасывали и промывали небольшим количеством холодной воды и сушили при среднем вакууме при 35°С. Получали соединение 9 с молекулярным весом 393,48 (С₁₈H₃₅NO₈); MS (ESI+); 394(M+H⁺):(ESI-):392 (М-Н)^-.

b) 4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 12-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)додекановой кислоты (8) получали аналогично примеру II из 1-(4-аминометилфенил)-3-(3-гидрокси-3-фенилпропил)-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она. Получали 4-[3-[3-гидрокси-3-фенилпропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 12-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)-додекановой кислоты с точкой плавления 100°С и молекулярным весом 792 (С₄₄Н₆₁N₃O₁₀); MS (ESI+); 792 (M+H⁺).

3-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-он (10)

30 г 3-[5-(4-фторфенил)-5-гидроксипентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она растворяли в 50 мл ДМФ. После добавки 14,3 г имидазола и 19 г трет-бутилдиметилсилилхлорида в 25 мл ДМФ перемешивали при комнатной температуре до полного окончания реакции (2-4 часа). Реакционный раствор сгущали, смешивали с водой и экстрагировали этилацетатом. После высушивания органической фазы над сульфатом магния и сгущения получали соединение 10: C₂₆H₃₄FNO₄Si (471,65); MS (ESI): 494 (M+Na).

3-[(4-Фторфенилимино)метил]бензонитрил (11)

К 12 г м-цианобензальдегида в 60 мл изопропанола по каплям вносили 88 мл п-фторанилина. Через 1 час при 60°С продукт выпадал в осадок. При комнатной температуре отфильтровывали и осадок промывали изопропанолом. После высушивания получали соединение 11 с температурой плавления 101°С. C₁₄Н₉FN₂ (224,24).

3-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-фторфениламино)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентил]бензонитрил (12)

К 14 г 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она (10) и 12,5 г 3-[(4-фторфенилимино)метил]бензонитрила (11) в 200 мл метиленхлорида добавляли при 10°С 24 мл диизопропилэтиламина и по каплям 7,1 мл триметилсилилхлорида. Через 1 час при -10°С по каплям вводили 3,4 мл титантетрахлорида. Перемешивали 3 часа при -10°С и следующие 12 часов оставляли при -30°С. В заключение смешивали с 8 мл уксусной кислоты и 140 мл 7% водного раствора винной кислоты и следующие 2 часа перемешивали при комнатной температуре. После добавления 50 мл 20% водного раствора гидросульфита натрия еще раз в течение 1 часа перемешивали и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу высушивали над сульфатом магния, сгущали и очищали путем хроматографии на кизельгель/этилацетат/гептан = 1/3->1/1. Получали соединение 12: C₄₀H₄₃F₂N₃O₄Si (695,89) MS (ESI) 696 (M+H).

3-[3-[3-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-оксоазетидин-2-ил]бензонитрил (13)

Смесь из 13 г 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-фторфениламино)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентил]бензонитрила (12), 50 мл бис-триметилсилилацетамида, 0,5 г тетрабутиламмонийфторида и 100 мл трет-бутилметилового эфира перемешивали в среде аргона 10 часов при комнатной температуре. По окончании реакции медленно при охлаждении с помощью льда добавляли 5 мл уксусной кислоты и концентрировали. Остаток разделяли хроматографически на кизельгеле (этилацетат/гептан = 1/8). Получали соединение 13: C₃₁H₃₄F₂N₂O₂Si (532,71) MS (ESI) 555 (M+Na).

3-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензонитрил (14)

К 7,8 г 3-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-оксоазетидин-2-ил]бензонитрила (13) в 200 мл метанола добавляли 10 мл 1N соляной кислоты и перемешивали 12 часов. Реакционную смесь смешивали с водным раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу высушивали над сульфатом магния, сгущали и очищали хроматографически на кизельгеле (этилацетат/гептан=1/3->1/1). Получали соединение 14: C₂₅H₂₀F₂N₂O₂ (418,45) MS (ESI) 401 (M+H-H₂O).

Пример IV

4-(3-Аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-он (15)

В автоклаве при 75 бар в атмосфере водорода в течение 20 часов проводили реакцию 2,5 г 3-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензонитрила (5) в 100 мл этанола и 15 мл концентрированного аммиака с 1,0 г никелевого катализатора Ренея. Реакционный раствор фильтровали, сгущали и разделяли с помощью хроматографии с кизельгелем (метиленхлорид/метанол=10/1). Получали соединение 15: C₂₅H₂₄F₂N₂O₂ (422,48) MS (ESI) 405 (M+H-H₂O).

Пример V

3-{2-(4-Фторфенил)-4-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензиламид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (16)

К раствору из 100 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она 6 и 46 мг 3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-она в 5 мл метанола добавляли 25 мг карбоната натрия и перемешивали при комнатной температуре до полного завершения реакции. Реакционный раствор фильтровали и сгущали. Остаток очищали ВЭЖХ (Knauer Eurospher-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусная кислота/ацетонитрил (0,1% трифторуксусная кислота) = 80/20->10/90). Получали соединение 16: C₃₁H₃₄F₂N₂O₈ (600,62); MS (ESI): 601 (M+H).

Пример VI

[3-(3-{2-(4-Фторфенил)-4-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пропил]триметиламмоний; 2,2,2-трифторацетат (17)

Раствор из 100 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (15), 64 мг 3-карбоксипропилтриметиламмонийхлорида, 93 мкл диизопропилкарбодиимида, 65 мг гидроксибензотриазола, 60 мкл диизопропилэтиламина в 2 мл метиленхлорида перемешивали в течение 12 часов при комнатной температуре. Добавляли воду и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу высушивали над сульфатом магния, сгущали и разделяли посредством ВЭЖХ (Knauer Eurospher-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусная кислота)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусная кислота) = 80/20->10/90). Получали соединение 17: C₃₂H₃₈F₂N₃O₃ (550,67); MS (ESI); 551 (M+H).

Пример VII

[3-(3-{2-(4-Фторфенил)-4-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)-2-гидроксипропил]триметиламмоний; 2,2,2-трифторацетат (18)

Соединение 18 получали аналогично соединению 17 из 100 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она 15, 64 мг (3-карбокси-2-гидроксипропил)триметиламмонийхлорида, 93 мкл диизопропилкарбодиимида, 65 мг гидроксибензотриазола в 2 мл метиленхлорида. Реакционный раствор без ступени экстракции сгущали и затем очищали посредством ВЭЖХ (Meck-Hibar-Lichrospher 100-RP-18, вода (0,1% трифторуксусная кислота)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусная кислота) = 80/20->10/90). Получали соединение 18: C₃₂H₃₈F₂N₃O₄ (566,67); MS (ESI): 567 (M+H).

Пример VIII

[5-(3-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенилкарбамоил)пентил]амид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (19)

Соединение 19 получали аналогично соединению 18 из 100 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (15), 108 мг 6-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)гексановой кислоты, 93 мкл диизопропилкарбодиимида, 65 мг гидроксибензотриазола в 2 мл метиленхлорида. Получали соединение 19: C₃₇H₄₅F₂N₃O₉ (713,78), MS (ESI): 714 (M+H).

{2-[2-(2,3,4,5,6-Пентагидроксигексаноиламино)этокси]этокси}уксусная кислота (20)

К раствору из 450 мг [2-(2-аминоэтокси)этокси]уксусной кислоты и 318 мг 3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-она в 10 мл метанола добавляли 172 мг карбоната натрия и перемешивали при комнатной температуре до полного завершения реакции. Реакционный раствор фильтровали и сгущали. Осадок поглощали водой и ацетонитрилом (1/1), причем образовывались 2 фазы. Водную фазу сгущали, и она содержала соединение 20: C₁₂H₂₃NO₁₀ (341,32); MS (ESI): 342 (M+H).

Пример IX

(2-{2-[(3-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил]метокси]этокси}этил)амид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (21)

Соединение 21 получали аналогично соединению 18 из 100 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (15), 122 мг {2-[2-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)этокси]этокси}уксусной кислоты (20), 93 мкл диизопропилкарбодиимида, 65 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида. Получали соединение 21: C₃₇H₄₅F₂N₃O₁₁ (745,78); MS (ESI): 746 (М+H).

Пример Х

(2-{2-[(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил]метокси]этокси}этил)амид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (22)

Соединение 22 получали аналогично соединению 18 из 100 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она, 122 мг {2-[2-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноиламино)этокси]-этокси}уксусной кислоты (20), 93 мкл диизопропилкарбодиимида, 65 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида и 1 мл ацетонитрила. Получали соединение 22: C₃₇H₄₅F₂N₃O₁₁ (745,78); MS (ESI): 746 (М+H).

2,3,4-Триацетокси-1-{2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил}-5-гидроксипентиловый эфир уксусной кислоты (23)

Суспензия из соединения 1, 12 г 2,3,4-триацетокси-1-{2-[2-(2-ацидоэтокси)этокси]ацетил}-5-гидроксипентилового эфира уксусной кислоты и 1,0 г никеля Ренея в 100 мл этанола встряхивали в аппарате для гидрирования в атмосфере водорода 4 часа. Реакционный раствор фильтровали и сгущали. Остаток содержал соединение 23: C₂₀H₃₃NO₁₂ (479,49); MS (ESI): 480 (M+H).

{2-[2-({2-[2-(3,4,5,6-Тетраацетокси-7-гидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]этокси}-уксусная кислота (24)

Раствор из 500 мг 2,3,4-триацетокси-1-{2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил}-5-гидроксипентилового эфира уксусной кислоты (23), 1,15 г [2-(2-карбоксиметоксиэтокси)этокси]уксусной кислоты, 400 мкл диизопропилкарбодиимида, 288 мг гидроксибензотриазола в 20 мл метиленхлорида перемешивали 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор сгущали и очищали посредством ВЭЖХ (Knauer Eurospher-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусная кислота)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусная кислота) = 80/20->10/90). Получали соединение 24: C₂₈H₄₅NO₁₈ (683,67); MS (ESI): 684 (M+H).

[2-({2-[2-(3,4,5,6-Тетраацетокси-7-гидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]уксусная кислота (25)

Соединение 25 получали аналогично соединению 24 из 500 мг 2,3,4-триацетокси-1-{2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил}-5-гидроксипентилового эфира уксусной кислоты (23), 927 мг (2-карбоксиметоксиэтокси)уксусной кислоты, 400 мкл диизопропилкарбодиимида, 288 мг гидроксибензотриазола в 20 мл метиленхлорида. Получали соединение 25: C₂₆H₄₁NO₁₇ (639,61); MS (ESI): 640 (M+H).

{2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-Пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]уксусная кислота (26)

Раствор из 200 мг {2-[2-({2-[2-(3,4,5,6-тетраацетокси-7-гидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]-этокси}уксусной кислоты (24) в 5 мл метанола смешивали с 100 мкл 5,4 М раствора натрийметанолята в метаноле и перемешивали 2 часа при комнатной температуре. Реакционный раствор смешивали с 1 г амберлита IR 120, 10 минут перемешивали, фильтровали, сгущали и получали 26: C₂₀H₃₇NO₁₄ (515,52); MS (ESI): 516 (M+H).

[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-Пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]уксусная кислота (27)

Соединение 27 получали аналогично соединению 26 из 200 мг соединения 25. Получали соединение 27: C₂₆H₄₁NO₁₇ (471,46); MS (ESI): 472 (M+H).

Пример XI

N-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензил)-2-{2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил)}метокси)-этокси]этокси}ацетамид (28)

Соединение 28 аналогично соединению 18 получали из 62 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она, 76 мг {2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил)}метокси)этокси]этокси} уксусной кислоты (17), 57 мкл диизопропилкарбодиимида, 40 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида. Получали соединение 19: C₄₅H₅₉F₂N₃O₁₄ (919,98); MS (ESI): 920 (М+H).

Пример XII

N-(3-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензил)-2-{2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)-этокси]этокси}ацетамид (29)

Соединение 29 аналогично соединению 18 получали из 62 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (15), 76 мг {2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]этокси} уксусной кислоты (26), 57 мкл диизопропилкарбодиимида, 40 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида. Получали соединение 29: C₄₅H₅₉F₂N₃O₁₄ (919,98); MS (ESI): 920 (М+H).

Пример XIII

N-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензил)-2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил)}метокси)этокси]ацетамид (30)

Соединение 30 аналогично соединению 18 получали из 68 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она, 76 мг [2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил)}метокси)этокси]уксусной кислоты (27), 62 мкл диизопропилкарбодиимида, 44 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида. Получали соединение 30: C₄₃H₅₅F₂N₃O₁₄ (875,93); MS (ESI): 876 (М+H).

Пример XIV

N-(3-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензил)-2-[2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил)}метокси)этокси]ацетамид (31)

Соединение 31 аналогично соединению 18 получали из 68 мг 4-(3-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (15), 76 мг [2-({2-[2-(3,4,5,6,7-пентагидрокси-2-оксогептилокси)этокси]этилкарбамоил}метокси)этокси]уксусной кислоты (27), 62 мкл диизопропилкарбодиимида, 44 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида. Получали соединение 31: C₄₃H₅₅F₂N₃O₁₄ (875,93); MS (ESI): 876 (М+H).

Пример XV

[3-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пропил]триметиламмонийтрифторацетат (32)

91 мг (3-карбоксипропил)триметиламмонийхлорида растворяли в 5 мл диметилформамида и раствор охлаждали до 0°С. Последовательно друг за другом добавляли 0,055 мл N-метилморфолина, 210 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она, 77 мг N-гидроксибензотриазола и 96 мг 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорида, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали 12 часов. Реакционную смесь сгущали в вакууме и осадок поглощали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, перемешивали и в вакууме сгущали. Этот осадок несколько раз вымешивали в ацетоне и суспензию фильтровали. Объединенные фильтраты сгущали и очищали хроматографически (RP18; ацетонитрил/вода 1/2 с 0,1% трифторуксусной кислотой). Получали [3-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пропил]триметиламмонийтрифторацетат с молекулярным весом 550,67 (C₃₂H₃₈F₂N₃O₃; катион); MS (ESI): 551,24 (М+H⁺).

Пример XVI

Додецил-[3-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пропил]-диметиламмонийтрифторацетат (33)

Соединение примера XVI получали, как в примере XV, с той разницей, что вместо (3-карбоксипропил)триметиламмонийхлорида применяли (3-карбоксипропил)додецилдиметиламмонийхлорид. Получали додецил-[3-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пропил]-диметиламмонийтрифторацетат с молекулярным весом 703,96 (C₄₃H₅₉F₂N₃O₃; катион); MS (ESI): 704,70 (М+H⁺).

Пример XVII

Додецил-[10-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)децил]-диметиламмонийтрифторацетат (34)

Соединение примера XVII получали, как в примере XV, с той разницей, что вместо (3-карбоксипропил)триметиламмонийхлорида применяли (10-карбоксидецил)додецилдиметиламмонийхлорид. Получали додецил-[10-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)децил]-диметиламмонийтрифторацетат с молекулярным весом 803,16 (C₅₀H₇₄F₂N₃O₃; катион); MS (ESI): 803,77 (М⁺).

Пример XVIII

Бензил-4-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}бутил)-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)аммонийтрифторацетат (35)

а) 5-[Бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]метиловый эфир пентановой кислоты (36)

1,37 г 6-бензиламиногексан-1,2-3,4,5-пентанола суспендировали при комнатной температуре в 30 мл сухого диметилформамида, смешивали с 1,45 г карбоната калия, 0,83 г йодида калия и 0,86 мл метиловым эфиром 5-бромвалериановой кислоты и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день реакционную смесь фильтровали и фильтрат в вакууме сгущали и подвергали очистке хроматографическим способом (кизельгель; этиловый эфир уксусной кислоты/метанол/вода 5/1/0,1). Получали 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]метиловый эфир пентановой кислоты с молекулярным весом 385,46 (C₁₉H₃₁NO₇); MS (ESI): 386,33 (М+H⁺).

b) 5-[Бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]пентановая кислота (37)

0,46 г 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]-метилового эфира пентановой кислоты растворяли в смеси из 5 мл этанола и 5 мл воды при комнатной температуре, смешивали с 0,4 г гидроокиси калия и перемешивали 2 часа при 80°С. Затем охлажденную реакционную смесь сгущали в вакууме, осадок поглощали водой, нейтрализовали соляной кислотой и снова сгущали. Сырой продукт суспендировали в этаноле; суспензию фильтровали и фильтрат сгущали в вакууме. Получали 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]пентановую кислоту с молекулярным весом 371,43 (C₁₈H₂₉NO₇); MS (ESI): 372,2 (М+H⁺).

с) 3-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-он (38)

27 г 3-[5-(4-Фторфенил)-5-гидроксипентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она с 13,6 г трет-бутилдиметилсилилхлорида и 10,2 г имидазола растворяли в 36 мл диметилформамида и перемешивали 90 минут при 60°С. По окончании реакции смесь растворяли в этилацетате и дважды встряхивали с водой. Органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и сгущали в вакууме. Получали 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-он с молекулярным весом 471,65 (C₂₆H₃₄FNO₄Si); MS (ESI): 340,28 (MH⁺-HOSi(CH₃)₂CH₃)₃.

d) 4-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрил (39)

16,2 г 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она растворяли в 350 мл дихлорметана. Раствор смешивали с 19,8 мл основания Хенига и 10,14 г 4-[(4-метоксифенилимино)метил]бензонитрила и охлаждали до -10°С. К охлажденному раствору добавляли 8,52 мл триметилсилилтрифталата и перемешивали 30 минут при -10°С. Раствор охлаждали до -30°С и добавляли 44 мл раствора титантетрахлорида. Реакционную смесь 2 часа перемешивали при температуре между -30°С и -40°С. Затем раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры, реакционный раствор промывали поочередно 200 мл 2N серной кислоты, 300 мл 20%-ного раствора гидросульфита натрия и насыщенным раствором поваренной соли. Органическую фазу высушивали над сульфатом магния, сгущали в вакууме и осадок очищали над кизельгелем смесью н-гептан/этилацетат 3/1. Получали 4-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрил с молекулярным весом 707,93 (C₄₁H₄₆FN₃O₅Si); MS (ESI): 590,51 (MH⁺-C₇H₅N₂).

e) 4-[3-[3-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (40)

13,2 г 4-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрила растворяли в 380 мл метил-трет-бутилового эфира, смешивали с 18,6 мл N,O-бис(триметилсилил)ацетамида и 1,86 мл 1М раствора тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране и перемешивали 2 часа при комнатной температуре. По окончании реакции добавляли 10 мл уксусной кислоты, реакционную смесь сгущали в вакууме и осадок очищали над кизельгелем смесью толуол/этилацетат 50/1. Получали 4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]-бензонитрил с молекулярным весом 544,75 (C₃₂H₃₇FN₂O₃Si); MS (ESI): 545,56 (М+H⁺).

f) 4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (41)

3,5 г 4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрила растворяли в 65 мл тетрагидрофурана, смешивали с 0,74 мл уксусной кислоты и 8,03 мл 1 М раствора тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране и перемешивали 2 часа при комнатной температуре. Затем добавляли 4,82 мл раствора тетрабутиламмонийфторида и перемешивали следующие 3 часа при температуре кипения с обратным холодильником. Охлажденную реакционную смесь сгущали в вакууме и осадок очищали хроматографически через кизельгель смесью н-гептан/этилацетат 2/1. Получали 4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил с молекулярным весом 430,48 (C₂₆H₂₃FN₂O₃); MS (ESI): 431,24 (М+H⁺).

g) 1-(4-Аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-он (42)

1,22 г 4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрила растворяли в 90 мл этанола, смешивали с 10 мл концентрированного раствора аммиака и избытком никеля Ренея и перемешивали 8 часов при 60°С и давлении 10 бар в атмосфере водорода. Реакционную смесь в течение ночи охлаждали до комнатной температуры; на следующий день отделяли от катализатора, фильтрат сгущали в вакууме и остаток очищали хроматографически через кизельгель смесью дихлорметан/метанол/раствор аммиака 10/1/0,1. Получали 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-он с молекулярным весом 434,51 (C₂₆H₂₇FN₂O₃); MS (ESI): 418,2 (MH⁺-NH₃).

h) Бензил-(4-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}бутил)(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)-аммонийтрифторацетат (35)

100 мг 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]-пентановой кислоты и 110 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она растворяли при комнатной температуре в 2 мл сухого диметилформамида, смешивали с 42 мг N-гидроксибензотриазола и 52 мг 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорида и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день реакционную смесь сгущали в вакууме и подвергали хроматографической очистке через RP18 смесью ацетонитрил/вода с 0,1% трифторуксусной кислоты. Получали бензил-(4-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}бутил)-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)аммонийтрифторацетат с молекулярным весом 787,93 (C₄₄H₅₄FN₃O₉; катион); MS (ESI): 788,70 (М+H⁺).

Пример XIX

(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензиламид 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино] пентановой кислоты (43)

Соединение примера XIX получали из 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]пентановой кислоты и 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она аналогично соединению примера XVIII. Получали 4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензиламид 5-[бензил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]пентановой кислоты с молекулярным весом 775,89 (C₄₃H₅₁F₂N₃O₈); MS (ESI): 776,4 (М+H⁺).

Пример ХХ

N-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензил}ацетамид (44)

Соединение примера ХХ получали способом, в котором уксусную кислоту аналогично примеру XVIII смешивали с 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-оном. Получали N-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензил}ацетамид с молекулярным весом 476,55 (C₂₈H₂₉FN₂O₄); MS (ESI): 477,22 (М+H⁺).

Пример XXI

[5-(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)-5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пентил]триметиламмонийхлорид (45)

Соединение примера XXI получали аналогично ходу реакции примера XIX, в котором 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-он смешивали с [5-карбокси-5-(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)пентил]-триметиламмонийхлоридом. Получали [5-(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)-5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пентил]триметиламмонийхлорид с молекулярным весом 815,99 (C₄₉H₅₃F₂N₄O₅; катион); MS (ESI): 815,81 (М+H⁺).

Пример XXII

[5-Амино-5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пентил]-триметиламмонийхлорид гидрохлорид (46)

110 мг соединения примера XXI растворяли в 2 мл сухого диметилформамида и смешивали с 0,1 мл пиперидина. Реакционную смесь перемешивали 2 часа при комнатной температуре и по окончании реакции сгущали в вакууме. Осадок вымешивали в воде, отсасывали, промывали водой и фильтрат подкисляли 2N соляной кислотой. Смесь сгущали в вакууме и осадок высушивали в высоком вакууме. Сырой продукт суспендировали в дихлорметане; органическую фракцию декантировали, осадок поглощали метанолом, сгущали в вакууме и высушивали в высоком вакууме. Получали [5-амино-5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)пентил]-триметиламмонийхлорид гидрохлорид с молекулярным весом 593,74 (C₃₄H₄₃F₂N₄O₃; катион); MS (ESI): 593,37 (М⁺).

3-[2-[(4-Бромфенил)-(4-фторфениламино)метил]-5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-он (47)

В 40 мл абсолютного дихлорметана растворяли 4,4 г 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она. Добавляли 5,2 г (4-бромбензилиден)-(4-фторфенил)амина и 8,6 мл этилдиизопропиламина до того, как раствор охладится до -10°С. Затем по каплям добавляли 2,94 мл триметилсилилхлорида, причем температура сохранялась ниже -5°С. Затем полчаса перемешивали при -10°С, затем реакционный раствор снова охлаждали до -30°С и по каплям добавляли 1,2 мл титантетрахлорида, причем температура поддерживалась между -30 и -15°С. Получали реакционный раствор черного цвета, который еще 3 часа перемешивали при -20°С, после чего его оставляли, пока он не достигнет температуры 0°С. Затем в приведенной последовательности с 10-минутным перерывом добавляли при перемешивании 10 мл ледяной уксусной кислоты, 100 мл 7-процентного водного раствора винной кислоты и в заключение 100 мл 20-процентного водного раствора гидросульфита натрия. Затем дважды экстрагировали дихлорметаном, органическую фазу промывали 1 раз насыщенным раствором поваренной соли и сушили над сульфатом натрия. Удаляли растворитель в ротационном испарителе и осадок очищали на хроматографической колонке (SiO₂; этилацетат/гептан 1:4) Продукт получался в виде белых кристаллов из смеси диэтиловый эфир/пентан. C₃₉H₄₃BrF₂N₂O₄Si (749) MS (ESI): М⁺.

4-(4-Бромфенил)-3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он (48)

В 70 мл трет-бутилметилового эфира суспендировали 3,34 г 3-[2-[(4-бромфенил)-(4-фторфениламино)метил]-5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она. Затем добавляли 3,8 мл бис(триметилсилил)ацетамида и 144 мг трибутиламмонийфторидтригидрата. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, перед тем как добавить 0,7 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь сгущали на ротационном испарителе и осадок очищали на хроматографической колонке (SiO₂; этилацетат/гептан 1:4). Продукт получался в виде светлого масла. C₃₀H₃₄BrF₂NO₂Si (586) MS (ESI): М⁺-131.

3-{5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-2-[(4-фторфениламино)-(4-гидроксифенил)метил]пентаноил}-4-фенилоксазолидин-2-он (49)

В 80 мл абсолютного дихлорметана растворяли 10 г 3-{5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил}-4-фенилоксазолидин-2-она. Добавляли 9,12 г 4-[(4-фторфенилимино)метил]фенола и 19,6 мл этилдиизопропиламина, после чего раствор охлаждали до -10°С. Затем по каплям добавляли 6,7 мл триметилсилилхлорида, причем температура реакционной смеси поддерживалась ниже -5°С. Перемешивали полчаса при -10°С, затем реакционный раствор охлаждали до -30°С и по каплям добавляли 2,7 мл титантетрахлорида, причем температуру поддерживали между -30°С и -15°С. Получали реакционный раствор черного цвета, который еще 3 часа перемешивали при -20°С, после чего оставляли до достижения температуры 0°С. И только затем в заданной последовательности с 10-минутным интервалом при перемешивании добавляли 6 мл уксусной кислоты, 60 мл 7-процентного водного раствора винной кислоты и в заключение 100 мл 20-процентного водного раствора гидросульфита натрия. Затем трижды экстрагировали дихлорметаном, органическую фазу один раз промывали насыщенным раствором поваренной соли и высушивали над сульфатом натрия. Растворитель удаляли на ротационном испарителе и осадок очищали на хроматографической колонке (SiO₂; этилацетат/гептан 1:4) Продукт получали в виде белых кристаллов из смеси диэтиловый эфир/пентан. C₃₉H₄₄F₂N₂O₅Si (686) MS (ESI): М⁺-241.

3-[3-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-он (50)

В 60 мл трет-бутилметилового эфира суспендировали 2,63 г 3-{5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-2-[(4-фторфениламино)-(4-гидроксифенил)метил]пентаноил}-4-фенилоксазолидин-2-она. Затем добавляли 3,22 мл бис(триметилсилил)ацетамида и 122 мг трибутиламмонийфторидтригидрата. Реакционную смесь перемешивали три часа при комнатной температуре, после чего добавляли 0,6 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь сгущали на ротационном испарителе и осадок очищали на хроматографической колонке (SiO₂; этилацетат/гептан 1:4). Продукт получали в виде светлых кристаллов C₃₀H₃₅F₂NO₃Si (523) MS (ESI): М⁺-131.

[3-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пропил]триметиламмонийбромид (51)

В 4 мл абсолютного ацетонитрила растворяли 210 мг 3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 170 мг комплекса KF·алюминий (1,15 мол/100 г) и 200 мг (3-бромпропил)триметиламмонийбромида. Реакционную смесь 4 часа перемешивали при комнатной температуре и затем фильтровали. На ротационном испарителе маточный раствор сгущали и осадок очищали через патрон из 5 г SiO₂ (дихлорметан/метанол 5:1). Продукт получался в виде масла. C₃₆H₄₉BrF₂NO₃Si (703) MS (ESI): М⁺-80.

Пример XXIII

[3-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пропил]триметиламмонийбромид (52)

В 10 мл метанола растворяли 180 мг (3-{4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-оксоазетидин-2-ил]фенокси}пропил)триметиламмонийбромида. Затем добавляли 1 мл 0,1 М водного раствора HCl и реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Нейтрализовали разбавленным водным раствором гидрокарбоната натрия и сгущали в ротационном испарителе. Осадок очищали через патрон из 10 г SiO₂ (дихлорметан/метанол 5:1). Продукт получался в виде гигроскопического твердого вещества. C₃₀H₃₅BrF₂N₂O₃ (589) MS (ESI): М⁺-80.

[5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)пропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пентил]триметиламмонийбромид (53)

В 3 мл абсолютного ацетонитрила растворяли 370 мг 3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 300 мг комплекса KF·алюминий (1,15 мол/100 г) и 375 мг (3-бромпентил)триметиламмонийбромида. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем фильтровали. В ротационном испарителе маточный раствор сгущали и осадок очищали через картридж с 5 г SiO₂ (дихлорметан/метанол 4:1). Продукт получался в виде масла. C₃₈H₅₃BrF₂N₂O₃Si (731) MS (ESI): М⁺-80.

Пример XXIV

[5-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пентил]триметиламмонийбромид (54)

В 20 мл метанола растворяли 548 мг [5-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-(изопропилдиметилсиланилокси)пропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пентил]триметиламмонийбромида. Затем добавляли 1 мл 0,1 М водного раствора HCl и реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Нейтрализовали разбавленным водным раствором гидрокарбоната натрия и сгущали в ротационном испарителе. Осадок очищали через картридж с 10 г SiO₂ (дихлорметан/метанол 5:1). Продукт получался в виде гигроскопического твердого вещества. C₃₂H₃₉BrF₂N₂O₃ (617) MS (ESI): М⁺-80.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(4-йодбутокси)фенил]азетидин-2-он (55)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 100 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 80 мг порошкообразного карбоната калия и 0,2 мл дийодбутана. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1). Продукт получался в виде масла. C₂₈H₂₈F₂INO₃ (591) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXV

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-{4-метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]бутокси}фенил)азетидин-2-он (56)

В 5 мл абсолютного диметилформамида растворяли 100 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(4-йодбутокси)фенил]азетидин-2-она. Затем добавляли 132 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт (89 мг) получался в виде масла. C₃₅H₄₄F₂N₂O₈ (658) MS (ESI): М⁺.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(5-йодпентилокси)фенил]азетидин-2-он (57)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 150 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 120 мг порошкообразного карбоната калия и 0,33 мл дийодпентана. Реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1). Продукт получался в виде масла. C₂₉H₃₀F₂INO₃ (605) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXVI

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-{5-[метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]пентилокси}фенилазетидин-2-он (58)

В 5 мл абсолютного диметилформамида растворяли 170 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(5-йодпентилокси)фенил]азетидин-2-она. Затем добавляли 220 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали 2 часа при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт получался в виде масла. C₃₆H₄₆F₂N₂O₈ (672) MS (ESI): М⁺.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(6-йодгексилокси)фенил]азетидин-2-он (59)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 100 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 80 мг порошкообразного карбоната калия и 0,25 мл дийодгексана. Реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1).Продукт получался в виде масла. C₃₀H₃₂F₂INO₃ (619) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXVII

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-{6-[метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]гексилокси}фенил)азетидин-2-он (60)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 136 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(6-йодгексилокси)фенил]азетидин-2-она. Затем добавляли 172 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали 2,5 часа при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт получался в виде масла. C₃₇H₄₈F₂N₂O₈ (686) MS (ESI): М⁺.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(8-йодоктилокси)фенил]азетидин-2-он (61)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 150 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 120 мг порошкообразного карбоната калия и 0,44 мл дийодоктана. Реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1). Продукт получался в виде масла. C₃₂H₃₆F₂INO₃ (647) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXVIII

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-{8-[метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]октилокси}фенил)азетидин-2-он (62)

В 5 мл абсолютного диметилформамида растворяли 150 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(8-йодоктилокси)фенил]азетидин-2-она. Затем добавляли 180 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали 2 часа при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт получался в виде масла. C₃₉H₅₂F₂N₂O₈ (714) MS (ESI): М⁺.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(10-йоддецилокси)фенил)азетидин-2-он (63)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 150 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 120 мг порошкообразного карбоната калия и 865 мг дийоддекана. Реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1). Продукт получался в виде масла. C₃₄H₄₀F₂INO₃ (675) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXIX

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-{10-[метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]децилокси}фенил)азетидин-2-он (64)

В 5 мл абсолютного диметилформамида растворяли 170 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(10-йоддецилокси)фенил]азетидин-2-она. Затем добавляли 200 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали 2 часа при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт получался в виде масла. C₄₁H₅₆F₂N₂O₈ (742) MS (ESI): М⁺.

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-{2-[2-(2-йодэтокси)этокси]этокси}фенил)азетидин-2-он (65)

В 10 мл абсолютного диметилформамида растворяли 150 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 120 мг порошкообразного карбоната калия и 0,4 мл 1,2-бис(дийодэтокси)этана. Реакционный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали через SiO₂-картридж (н-гептан; н-гептан/этилацетат 4:1). Продукт получался в виде масла. C₃₀H₃₂F₂INO₅ (651) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXX

1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-{4-[2-(2-{2-[метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амино]этокси}этокси)этокси]фенил}азетидин-2-он (66)

В 5 мл абсолютного диметилформамида растворяли 230 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-{2-[2-(2-йодэтокси)этокси]этокси}фенил)азетидин-2-она. Затем добавляли 280 мг 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола и реакционный раствор перемешивали 2 часа при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при вакууме, создаваемом масляным насосом, при 40°С осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ. Продукт получался в виде масла. C₃₇H₄₈F₂N₂O₁₀ (718) MS (ESI): М⁺.

Метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амид гекс-5-еновой кислоты (67)

В 3 мл абсолютного метиленхлорида растворяли 1,11 г 5-гексеновой кислоты. Затем по каплям добавляли 1,4 мл тионилхлорида. Перемешивали 3 часа при комнатной температуре и затем сгущали в ротационном испарителе. В 5 мл абсолютного метиленхлорида суспендировали 1,09 г 6-метиламиногексан-1,2,3,4,5-пентанола. После внесения по каплям хлорида 5-гексеновой кислоты, растворенного в 3 мл абсолютного метиленхлорида, перемешивали 4 часа при комнатной температуре. Образовавшийся осадок отфильтровывали от продукта реакции, фильтрат сгущали на ротационном испарителе и маслянистый полупродукт без очистки использовали далее в реакции. C₁₃H₂₅NO₆ (291) MS (ESI): М⁺.

Метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амид 6-{4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-оксоазетидин-2-ил]фенил}гекс-5-еновой кислоты (68)

В 300 мкл триэтиламина вносили 110 мг 4-(4-бромфенил)-3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-она и 136 мг метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амида гекс-5-еновой кислоты в прокаленной закрытой трубке в атмосфере аргона. После добавления 6 мг ацетата палладия и 14 мг трифенилфосфина 4 часа перемешивали при 100°С. Затем реакционную смесь поглощали дихлорметаном, фильтровали и сгущали на ротационном испарителе. Очистка остатка через SiO₂-картридж (дихлорметан/метанол 20:1-5:1) давала продукт. C₄₃H₅₈F₂N₂О₈Si (796).

Пример XXXI

Метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амид 6-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенил)гекс-5-еновой кислоты (69)

В 6 мл метанола растворяли 70 мг метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амида 6-{4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)-4-оксоазетидин-2-ил]фенил}гекс-5-еновой кислоты. Затем добавляли 0,1N HCl (водную), перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем нейтрализовали 1 N гидроокисью натрия и сгущали на ротационном испарителе. Остаток перемешивали в дихлорметане, фильтровали и маточный раствор сгущали в ротационном испарителе. Получали продукт после очистки препаративной ВЭЖХ: C₃₁H₄₄F₂N₂О₈ (682) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXXII

2-{[4-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)бутил]метиламино}этансульфоновая кислота (70)

В 3 мл метанола растворяли 64,5 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(4-йодбутокси)фенил]азетидин-2-она. Затем растворяли 60,7 мг 2-метиламиноэтансульфоновой кислоты в 1 мл воды и добавляли 30,4 мг карбоната калия. Реакционный раствор перемешивали 8 часов при 50°С. После сгущения в ротационном испарителе при 40°С остаток пропускали через картридж обратной фазы (метанол). Полученный полупродукт растворяли в горячем метаноле. Образовавшийся при охлаждении осадок отфильтровывали и маточный раствор сгущали на ротационном испарителе. Продукт получался в виде масла. C₃₁H₃₆F₂N₂O₆S (602) MS (ESI): М⁺-18.

Пример XXXIII

1-(4-Фторфенил)-3-[1-(4-фторфенил)-2-оксо-4-(4-сульфооксифенил)азетидин-3-ил]пропиловый эфир уксусной кислоты (71)

120 мг (0,27 ммол) 1-(4-фторфенил)-3-[1-(4-фторфенил)-2-(4-гидроксифенил)-4-оксоазетидин-3-ил]пропилового эфира уксусной кислоты растворяли в 3 мл пиридина и добавляли 200 мг комплекса Me₃NSO₃ (Aldrich). Суспензию перемешивали 30 часов при комнатной температуре. Затем разбавляли в 5 мл метиленхлорид/метанол/концентрированный аммиак (30/5/1) и очищали методом флэш-хроматографии с одинаковым растворителем. Продукт получался в виде аморфного твердого вещества. C₂₆H₂₃F₂NO₇S (531,54) MS (ESI): М⁺=532,2.

Пример XXXIV

Моно-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенил)эфир серной кислоты (72)

75 мг (0,14 ммол) 1-(4-фторфенил)-3-[1-(4-фторфенил)-2-оксо-4-(4-сульфооксифенил)азетидин-3-ил]пропилового эфира уксусной кислоты растворяли в 2 мл метанола и смешивали с 0,3 мл 1N NaOMe/MeOH. После 2 часов выдерживания при комнатной температуре нейтрализовали смесью метанола с соляной кислотой и сгущали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии. Получали продукт в виде твердого аморфного вещества. C₂₄H₂₁F₂NO₆S (489,50) MS (ESI): М⁺=490,2.

Пример XXXV

2,3,4,5-Тетраацетокси-1-{3-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]-бензилкарбамоил}пентиловый эфир уксусной кислоты (73)

112 мг (0,24 ммол) 1-(3-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она растворяли в 5 мл метиленхлорида и 0,5 мл триэтиламина. При 0°С добавляли 0,5 г 2,3,4-триацетокси-1-(ацетоксихлорокарбонилметил)бутилового эфира уксусной кислоты и оставляли оттаиваться до комнатной температуры. Через 30 минут разбавляли этилацетатом и затем фильтровали через кизельгель. Растворитель отгоняли, а остаток очищали флэш-хроматографией. Получали продукт в виде аморфного твердого вещества. С₄₂H₄₇FN₂O₁₄ (882,84) MS (ESI): М⁺=823,3.

Пример XXXVI

3-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламид 2,3,4,5,6-пентагидроксигексановой кислоты (74)

90 мг (109 мкмолей) 2,3,4,5-тетраацетокси-1-{3-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}пентилового эфира уксусной кислоты растворяли в 7 мл метанола и смешивали с 0,5 мл 1N NaOMe/MeOH. После 2 часов выдерживания при комнатной температуре нейтрализовали смесью метанола с соляной кислотой и сгущали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии. Получали продукт в виде твердого аморфного вещества. С₃₂H₃₇FN₂O₉ (612,66) MS (ESI): М⁺=613,2.

Пример XXXVII

Метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амид 6-(4-{3-[1-(4-фторфенил)-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-3-ил]-1-гидроксипропил}фенил)гекс-5-еновой кислоты (75)

200 мг метил-(2,3,4,5,6-пентагидроксигексил)амида гекс-5-еновой кислоты и 72 мг 3-[3-(4-бромфенил)-3-гидроксипропил]-1-(4-фторфенил)-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она готовили аналогично примеру XXXI. Получали продукт в виде аморфного твердого вещества.

Эффективность соединений формулы I испытывалась нижеописанными методами.

Влияние абсорбции холестерина + ³H-выделения таурохолевой кислоты по фекальным выделениям мышей, крыс или хомяков

Мыши NMRI, крысы Wistar или хомяки Golden Syrian (в группах n=4-6) содержались на стандартной диете (альтромин, Lage(Lippe)) в клетках. Во второй половине дня перед дачей радиоактивных меченых атомов (¹⁴C-холестерин) животных держали натощак и адаптировали на колосниковой решетке.

Дополнительно в течение 24 часов перед пероральным введением контрольного кормления (¹⁴C-холестерин в Intralipid® 20 (Pharmacia-Upjohn)) животных метили ³H-TCA (таурохолевая кислота) (например, 1 мкКи для мыши, до 5 мкКи для крысы).

Тест на абсорбцию холестерина: Одной мыши вводили перорально с помощью желудочного зонда 0,25 мл Intralipid® 20 (Pharmacia-Upjohn) (вкалывание 0,25 мкКи ¹⁴С-холестерина в 0,1 мг холестерина).

Тестируемые вещества раздельно растворяли в 0,5%/(метилцеллюлоза (Sigma)/5% Solutol (BASF, Людвигсхафен)) или добавляли в подходящую основу.

Объем вводимого тестируемого вещества составлял 0,5 мл на одну мышь. Тестируемое вещество вводилось непосредственно перед контрольным кормлением (Intralipid с лабильным ¹⁴C-холестерином) (тест на абсорбцию холестерина).

В течение 24 часов собирали кал: фекальные выделения через 24 часа анализировали на ¹⁴С-холестерин и ³Н-таурохолевую кислоту (ТСА).

Извлекали печень, гомогенизировали и аликвоту сжигали в оксимате (модель 307, Packard) для определения количества поглощенного/резорбированного ¹⁴С-холестерина.

Оценка результатов:

Пробы кала:

Определяли общий вес, водой доводили до определенного объема, затем гомогенизировали, аликвотное количество высушивали и сжигали в оксимате (модель 307, Packard для сжигания радиоактивных меченых образцов): количество радиоактивного ³Н-H₂O и ¹⁴С-СО₂ пересчитывали на выделенное количество ³Н-таурохолевой кислоты или ¹⁴С-холестерина (бинарный изотопный метод). Значения ED₂₀₀ интерполировали из кривой эффективности доз как дозу, которая удваивает выделение TCA или холестерина, в пересчете на одновременно обрабатываемую контрольную группу.

Пробы печени:

Поглощенное количество ¹⁴С-холестерина в печени пересчитывалось на введенную дозу. Значения ED₅₀ интерполировали из кривой эффективности доз как дозу, которая уменьшает вдвое (50%) поглощение ¹⁴С-холестерина в печени в пересчете на контрольную группу.

Следующие значения ED₅₀ доказывают активность соединений формулы I согласно изобретению.

Пример	ED50(печень) [мг/мышь]
II	0,1
III	0,003
XIII	0,3
XV	0,01
XVIII	1,0
XX	0,03
XXI	1,0
XXIV	0,3
XXV	0,3
XXX	0,1

Из таблицы можно видеть, что соединения формулы I обладают очень хорошим холестеринпонижающим действием.

Всасываемость

Всасываемость соединений формулы I испытывалась на Сасо-клеточной модели (A.R. Hilgers с сотр., Caco-2 cell monolayers as a model for drug transport across the intestinal mucosa, Pharm. Res. 1990, 7, 902).

Из приведенных данных можно видеть, что соединения формулы I согласно изобретению по сравнению с известными из уровня техники соединениями (структура сравнения) проявляют заметно более низкую резорбцию.

	Структура сравнения	Пример
Кажущийся коэффициент разделения Рарр [см/с] (по Hilgers)	4,88×10-06

Оцениваемая резорбция человека 100%

Структура сравнения: Эзетимиб

Примеры получения лекарственных средств, содержащих соединения согласно изобретению

Пример А

Мягкие желатиновые капсулы, содержащие 100 мг активного вещества на капсулу:

Компоненты	масса на капсулу
активное вещество	100 мг
смесь триглицеридов,	400 мг
фракционированная
из кокосового масла
	500 мг

Пример В

Эмульсия, содержащая 60 мг активного вещества на 5 мл

Компоненты	на 100 мл эмульсии
активное вещество масло нейтральное	1,2 г по необходимости
натрийкарбоксиметилцеллюлоза	0,6 г
полиоксиэтилен-стеарат	по необходимости
глицерин чистый	0,2 до 2,0 г
вкусовая добавка	по необходимости
вода (обессоленная
или дистиллированная)	до 100 мл

Пример С

Ректальная лекарственная форма, содержащая 40 мг активного вещества на суппозиторий

Компоненты	на суппозиторий
активное вещество	40 мг
основа суппозитория	до 2 г

Пример D

Таблетки, содержащие 40 мг активного вещества на таблетку

Компоненты	на таблетку
активное вещество	40 мг
лактоза	600 мг
кукурузный крахмал	300 мг
растворимый крахмал	20 мг
стеарат магния	40 мг
	1000 мг

Пример Е

Драже, содержащее 50 мг активного вещества на драже:

Компоненты	на драже
активное вещество	40 мг
кукурузный крахмал	100 мг
лактоза	60 мг
растворимый крахмал	5 мг
стеарат магния	10 мг
коллоидная кремниевая кислота	5 мг
	260 мг

Для получения содержимого твердых желатиновых капсул используется следующие рецептуры:

а) активное вещество	100 мг
кукурузный крахмал	300 мг
	400 мг
b) активное вещество	140 мг
молочный сахар	180 мг
кукурузный крахмал	180 мг
	500 мг

Пример G

Капли, которые получают в соответствии со следующей рецептурой (100 мг активного вещества на 1 мл (20 капель))

Компоненты
активное вещество	10 мг
метиловый эфир
бензойной кислоты	0,07 г
этиловый эфир
бензойной кислоты	0,03 г
этанол 96%-ный	5 мл
вода деминерализованная	до 100 мл

Claims (12)

1. Соединения формулы I

в которой означают R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N((С₁-С₆)алкил)-, -N((С₁-С₆)алкилфенил)- или -NH-;

Н, F, Cl, Br, I, O-(С₁-С₆)алкил, NH₂;

(LAG) остаток ациклического моносахара; триалкиламмонийалкильный остаток или -O-(SO₂)-OH;

причем всегда по меньшей мере один из остатков R1-R6 должен иметь значение (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N((С₁-С₆)алкил)-, -N((С₁-С₆)алкилфенил)- или -NH- и причем остатки R1 и R2 не должны иметь значения -O-сахарный остаток,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединения формулы I по п.1, отличающиеся тем, что в них означают

R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, N((С₁-С₆)алкил)- или -NH-;

Н, F, Cl, Br, I, O-(С₁-С₆)алкил, NH₂;

(LAG) остаток ациклического моносахара; триалкиламмонийалкильный остаток или -O-(SO₂)-OH;

причем всегда по меньшей мере один из остатков R1-R6 должны иметь значение (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N((С₁-С₆)алкил)-или -NH- и причем остатки R1 и R2 не должны иметь значения -O-сахарный остаток,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

3. Соединения формулы I по п.1 или 2, отличающиеся тем, что в них означают

R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, N(СН₃)- или -NH-,

Н, F, Cl, Br, I, O-(С₁-С₆)алкил, NH₂;

(LAG) остаток ациклического моносахара; триалкиламмонийалкильный остаток или -O-(SO₂)-OH;

причем всегда по меньшей мере один из остатков R1 или R3 должны иметь значение (С₀-С₃₀)алкилен-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены -O-, -(С=O)-, -N(CH₃)- или -NH- и остатки R1 и R2 не должны иметь значения -О-сахарный остаток,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

4. Соединения формулы I по одному или более пп.1-3, отличающиеся тем, что в них означают

R1, R2, R3, R4, R5, R6 независимо друг от друга -(CH₂)_0-1-NH-(C=O)_0-1-(С₃-С₂₅)алкилен(С=O)_0-1-N(R7)_0-1-(LAG), причем один или более С-атомов алкиленового остатка может быть замещен O-атомом и R7 означает Н, СН₃;

Н, F, Cl, Br, I, O-(С₁-С₆)алкил, NH₂;

(LAG) остаток ациклического моносахара;

причем один из остатков R1 или R3 имеет значение -(CH₂)_0-1-NH-(C=O)_0-1-(C₃-C₂₅)алкилен(C=O)_0-1-N(R7)_0-1-LAG, причем один или более С-атомов алкиленового остатка могут быть замещены O-атомом,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

5. Соединения по одному или более пп.1-4, пригодные для применения в качестве медикаментов при лечении нарушений липидного обмена.

6. Лекарственное средство, обладающее холестерин-понижающим действием и содержащее одно или более соединений по одному или более пп.1-4.

7. Способ получения лекарственного средства, обладающего холестерин-понижающим действием и содержащего одно или более соединений по одному или более пп.1-4, отличающийся тем, что активное вещество смешивают с фармацевтически пригодным носителем и эту смесь приводят в пригодную для введения форму.

8. Применение соединений по одному или более пп.1-4 для изготовления медикаментов для лечения нарушений липидного обмена.

9. Применение по п.8 для изготовления медикаментов для лечения гиперлипидемии.

10. Применение по п.8 для изготовления медикаментов для снижения уровня сывороточного холестерина.

11. Применение по п.8 для изготовления медикаментов для лечения артериосклеротических явлений.

12. Применение по п.8 для изготовления медикаментов для лечения инсулиновой резистентности.