ES2175409T5 - Extraccion de esterol con un disolvente polar para dar un aceite microbiano bajo en esterol. - Google Patents

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO DE TRATAMIENTO DE UN ACEITE, CONSISTENTE EN PONER EN CONTACTO DICHO ACEITE CON UN DISOLVENTE POLAR, PARA EXTRAER AL MENOS UN COMPUESTO SOLUBLE EN DICHO DISOLVENTE Y, A CONTINUACION, SEPARAR EL DISOLVENTE QUE CONTIENE DICHO COMPUESTO, DEL ACEITE ASI TRATADO. EL ACEITE ES DE ORIGEN MICROBIANO Y SE EXTRAE, BIEN DE UN CALDO DE FERMENTACION O DE UN FILTRADO DEL MISMO, UTILIZANDO HEXANO. EL COMPUESTO QUE SE EXTRAE ES NORMALMENTE UN ESTEROL O UN DIGLICERIDO. EL DISOLVENTE ES ETANOL CON HASTA EL 5 % DE AGUA. EL ACEITE PUEDE CONTENER UN ACIDO GRASO POLIINSATURADO, COMO UN ACIDO GRASO C18, C20 O C22 OM -3 U OM -6, COMO EL ACIDO ARAQUIDONICO.

Description

Extracción de esterol con un disolvente polar para dar un aceite microbiano bajo en esterol.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a aceites (microbianos) purificados (tal como por extracción) que contienen ácidos grasos poliinsaturados (AGPI), especialmente aceites con un contenido en esterol inferior a 1,5%.

Fundamento de la invención

Hay una tendencia creciente a incluir en productos alimentarios productos lípidos que contienen ácidos grasos poliinsaturados derivados de diversos procedimientos de fermentación. Esto es de importancia en la recientemente establecida deseabilidad de incorporar ciertos ácidos grasos poliinsaturados en una fórmula infantil.

Se han descrito diversos procedimientos para la producción fermentativa de lípidos o aceites que contienen ácidos grasos poliinsaturados. Son ejemplos el documento de patente EP-A-155420 para la producción, a partir de Mortierella, de un lípido que contiene ácido \gamma-linolénico (AGL), los documentos de patente EP-A-223960, EP-A-276541 y WO-A-92/13086 para la producción, a partir de Mortierella y/o Pythium, de un aceite que contiene ácido araquidónico (AAR), los documentos de patente WO-A-91/07498 y WO-A-91/11918 para la producción, a partir de Crypthecodinium cohnii o Thraustochytrium, de un aceite que contiene ácido docosahexenoico (ADH), y el documento de patente WO-A-91/14427 para la producción, a partir de Nitzschia, de un aceite que contiene ácido eicosapentenoico (AEP). Típicamente, la especie microbiana que produce el lípido que contiene el (los) ácido(s) graso(s) poliinsaturado(s) deseado(s) se cultiva en un medio adecuado y la biomasa se recolecta antes de obtenerse el lípido deseado.

Para obtener un concentrado de lípido que tenga un contenido relativamente alto de triglicéridos, en el procedimiento de extracción se usa típicamente un disolvente no polar para el lípido (por ejemplo hexano) o CO_{2} supercrítico. Por ejemplo, el documento de patente EP-A-246324 describe un procedimiento de extracción fraccionada para el aislamiento de lípidos a partir de Mortierella, para obtener diferentes extractos que están enriquecidos en lípidos polares o no polares (neutros). El extracto de lípido neutro tiene todavía, sin embargo, un contenido relativamente bajo de triglicéridos (89,3%), y un alto contenido en esterol (9,4%). La patente de EE.UU. Nº 4.857.329 describe un procedimiento de extracción que comprende el uso de CO_{2} supercrítico para eluir selectivamente lípidos neutros a partir de biomasa de Mortierella. Sin embargo, el contenido en triglicéridos del extracto de lípido no excede de 86%.

Yamada et al, en Industrial applications of single cell oils, Eds. Kyle and Ratledge, 118-138 (1992), describen un aceite que contiene ácido araquidónico extraído, usando hexano, a partir de biomasa de Mortierella alpina. El aceite purificado tiene un contenido en triglicéridos de 90%.

El documento de patente JP-A-62/179598 describe un procedimiento en el que un material que contiene una grasa (o aceite) se dispersa en etanol acuoso y se tritura. El material triturado se separa del dispersante. El material separado se extrae con n-hexano para obtener la grasa (o aceite).

El documento de patente JP-A-62/065689 se refiere a un aceite de glicéridos refinado del cual se ha retirado una goma tal como un fosfolípido, triglicérido, ácido graso libre, extrayendo una composición cruda de aceite de glicéridos a partir de un microorganismo, diluyendo la composición con un disolvente orgánico y poniéndola en contacto con una membrana semipermeable.

De este modo, no ha sido posible hasta ahora obtener un aceite microbiano de triglicéridos con un alto contenido en triglicéridos, es decir 95% o superior, usando una tecnología previa de fermentación y extracción. No ha sido posible tampoco preparar aceites que tengan un contenido en esterol particularmente bajo (por ejemplo, inferior a 1,5%).

Descripción de la invención

La presente invención se refiere generalmente a un procedimiento para preparar un aceite (microbiano) con un alto contenido en triglicéridos y un bajo contenido en "insaponificables", en el que un aceite extraído, obtenido o derivado de una biomasa microbiana es tratado con un disolvente polar.

La presente invención puede proporcionar de este modo un aceite microbiano (o derivado de microbios) que tiene un alto contenido en triglicéridos, tal como \geq 95%. Sin embargo, el aceite puede tener un contenido en triglicéridos de al menos 97%, preferiblemente \geq 98%, y óptimamente \geq 99%. El aceite (microbiano) tiene también un bajo contenido en esterol (\leq 1,5%). Preferiblemente, el contenido en esterol es \leq 1%, tal como \leq 0,6%, óptimamente \leq 0,3%.

El aceite de la invención puede usarse en diversas composiciones tales como composiciones farmacéuticas (o terapéuticas), cosméticas, de piensos o alimentarias (para consumo humano o animal), especialmente en una fórmula infantil o suplemento nutricional.

Un primer aspecto de la presente invención se refiere por lo tanto a un procedimiento de tratar un aceite derivado de microbios (un aceite derivado de un microorganismo), comprendiendo el procedimiento: (a) poner en contacto el aceite con un disolvente polar para extraer al menos un esterol que sea soluble en el disolvente; y (b) separar del aceite (así tratado) al menos algo del disolvente que contiene el esterol, de modo que el aceite resultante tiene un contenido en esterol inferior a 1,5%.

El aceite derivado de microbios puede extraerse, obtenerse, o producirse por uno o más microorganismo(s). A menudo éste será la misma especie de microorganismo, pero puede ser considerada por la invención una mezcla de dos o más microorganismos diferentes. El procedimiento de la invención puede ser por lo tanto subsiguiente a la producción del propio aceite. El aceite puede ser uno que se produzca por, o exista dentro (por ejemplo intracelularmente) del microorganismo(s). Alternativamente, puede obtenerse a partir de una composición (usualmente acuosa) obtenida o que resulta de una fermentación (de los microorganismos). Esta composición (acuosa) puede contener a los propios microorganismos: en ese caso, es usualmente un caldo de fermentación. Los microorganismos (o biomasa como se hace referencia en la técnica) pueden retirarse (después de la fermentación) por varios métodos, por ejemplo filtración, centrifugación o decantación. El aceite puede extraerse u obtenerse a partir de esta biomasa.

Es usual que el aceite microbiano se haya obtenido por extracción. Esto habrá implicado preferiblemente una extracción usando un disolvente no polar, o preferiblemente un disolvente no miscible con el agua, o al menos un disolvente que es capaz de extraer componentes oleosos. Tal disolvente puede ser un alcano C_{6-10}, por ejemplo hexano, o dióxido de carbono (supercrítico).

Diferentes microorganismos producirán diferentes aceites. Estos pueden diferir en la cantidad de ácidos grasos poliinsaturados (AGPI) así como en otros componentes, y de hecho los AGPI pueden estar en diferentes formas, por ejemplo diglicéridos, triglicéridos y/o fosfolípidos. Como tales, incluso los aceites derivados de microbios pueden diferir significativamente de aceites que contengan uno o más de estos AGPI que se hayan obtenido a partir de otras fuentes (por ejemplo animales o peces o vegetales).

Los microorganismos contemplados pueden variar extensamente, aunque preferiblemente serán capaces de producir uno o más AGPI, por ejemplo en una fermentación. Los microorganismos pueden ser bacterias, algas, hongos o levaduras. Se describen procedimientos de fermentación, microorganismos y aceites que contienen AGPI adecuados en la solicitud internacional co-pendiente Nº PCT/EP97/01448 (presentada el 21 de marzo de 1997 en nombre de Gist-brocades B.V.).

Las algas preferidas son del género Crypthecodinium, Porphyridium o Nitzchia. Los hongos preferidos son del género Thraustochytrium, Mortierella, Pythium, Mucorales o Entomophthora, en particular de la especie Mortierella alpina.

El esterol extraído puede ser un alcohol alicíclico que tenga una cadena principal de cuatro anillos conjugados, tres anillos aromáticos C_{6} y un anillo de ciclopentano (por ejemplo desmosterol, colesterol), un alcohol alifático o terpénico, (tocoferol). Puede estar presente en el medio de fermentación una cera o un agente antiespumante, tal como polipropilenglicol.

Los esteroles preferidos incluyen desmosterol, tal como el 5-desmosterol. Si está presente más de un esterol, entonces adecuadamente de 70 a 90%, por ejemplo de 80 a 85%, de los esteroles es desmosterol (por ejemplo para un aceite producido por Mortierella).

El aceite contendrá preferiblemente al menos un AGPI. Este AGPI se habrá producido usualmente por el microbio o microorganismo.

Los AGPI contemplados por la invención son ácidos grasos poliinsaturados C20 y C22 \omega-3 y C18, C20 y C22 \omega-6. En particular, pueden incluir ácido \gamma-linolénico (AGL), ácido dihomo-\gamma-linolénico (ADL), ácido araquidónico (AAR), ácido eicosapentenoico (AEP) y ácido docosahexenoico (ADH). El ADH es producido por algas u hongos, tales como algas dinoflageladas, por ejemplo del género Crypthecodinium, o un hongo, por ejemplo del género Thraustochytrium. Los AGL, ADL o AAR pueden ser producidos por hongos, tales como del género Mortierella, Pythium o Entomoph-thora. El AEP puede ser producido por un alga, tal como del género Porphyridium o Nitzschia. Típicamente, el aceite contendrá dominantemente o solamente un AGPI, aunque los aceites pueden contener uno o más AGPI, por ejemplo en una cantidad inferior.

En los procedimientos de la invención, después de que se haya añadido el disolvente al aceite, las dos fases (aceite y disolvente) usualmente se separarán. Esto luego puede permitir fácilmente la retirada de una fase de la otra. Eso puede dar luego un aceite con un bajo contenido en esterol, no mayor que 1,5%.

Un segundo aspecto de la invención se refiere por lo tanto a un aceite tratado o preparado por un procedimiento conforme al primer aspecto, como se indica en la reivindicación 18.

Un tercer aspecto se refiere a un aceite microbiano que comprende al menos un ácido graso poliinsaturado (AGPI) que tiene un contenido en esterol no mayor que 1,5%, como se indica en la reivindicación 19. El contenido (total) de esterol puede de hecho no ser mayor que 1%, por ejemplo inferior a 0,6%. Usando los procedimientos de la invención, puede lograrse un contenido en esterol no mayor que 0,3%.

Se comprenderá que el aceite del tercer aspecto puede prepararse usando el procedimiento del primer aspecto.

Los diferentes aceites de la invención pueden prepararse, por ejemplo, usando diferentes disolventes, a diferentes temperaturas, como se describirá más adelante.

La presente invención proporciona por lo tanto un procedimiento para preparar un aceite (por ejemplo microbiano), en el que el aceite es tratado con uno o más disolventes polares. Estos disolvente(s) pueden retirar por lo tanto uno o más esteroles que sean solubles en el disolvente. Esto puede dar como resultado concentrar o 97%, por ejemplo al menos 98%, y por último al menos 99%.

Simultáneamente con el aumento del contenido en triglicéridos, el tratamiento con disolvente puede dar ventajosamente como resultado la retirada de una o más impurezas del aceite. En particular, este tratamiento puede dar como resultado la disminución de la cantidad de "insaponificables". Estos insaponificables que pueden ser retirados por el tratamiento con disolvente pueden incluir los esteroles, alcoholes alifáticos y terpénicos, ceras y agentes antiespumantes descritos anteriormente. Usualmente, el tratamiento con el disolvente no alterará el perfil del AGPI o el aceite así tratado.

El disolvente polar comprende preferiblemente un alcanol C_{1-6}, por ejemplo etanol. El disolvente, sin embargo, puede ser uno acuoso. Los disolventes preferidos comprenden por lo tanto un alcohol (por ejemplo etanol) y agua. Sin embargo, el disolvente puede comprender otros líquidos, y éstos pueden ser acetona y/o isopropanol.

Si el disolvente comprende etanol, éste puede tener un contenido en agua desde 0 hasta 20%, tal como desde 1 hasta 7%, y opcionalmente desde 2 hasta 4%. Si el disolvente comprende metanol, acetona y/o isopropanol (IPA), entonces el contenido en agua es preferiblemente de 0 a 2%, de 5 a 50% y de 5 a 15%, respectivamente. El disolvente puede comprender por lo tanto una mezcla de dos o más líquidos. Se ha encontrado que el etanol que contiene una pequeña cantidad de agua (por ejemplo 97% etanol, 3% agua) puede mejorar significativamente el rendimiento de triglicéridos después del tratamiento con disolvente. Esto es porque los triglicéridos son relativamente insolubles en este disolvente particular. Tener el disolvente a una temperatura desde 15 hasta 30ºC, por ejemplo desde 20 hasta 25ºC, también reduce la cantidad de triglicéridos disueltos en el disolvente.

Usando diferentes disolventes se puede variar la cantidad de esterol (o de hecho de AGPI) que se extrae. Como se ha discutido anteriormente, una mezcla de etanol y agua puede proporcionar un alto rendimiento de triglicéridos, ya que aunque este disolvente disolverá los esteroles, los triglicéridos son sin embargo relativamente insolubles en él.

El AGPI existirá generalmente en varias formas, tales como triglicéridos y diglicéridos. Estos compuestos son efectivamente una molécula de glicerol con uno o más (aunque usualmente sólo uno) de los AGPI unidos a esta cadena principal. Preferiblemente, la forma de triglicérido será dominante. En el aceite del tercer aspecto (por ejemplo a partir del procedimiento del primer aspecto), la cantidad de diglicéridos presentes es preferiblemente no mayor que 2,2%, y preferiblemente inferior a 1%. El disolvente usado aquí está preferiblemente a una temperatura desde 10 hasta 40ºC, por ejemplo desde 20 hasta 30ºC.

La cantidad de esterol que va a extraerse, o el contenido en triglicéridos, puede ajustarse variando varios parámetros del procedimiento. Por ejemplo, se puede ajustar la relación de disolvente a aceite, la temperatura durante la extracción y/o repitiendo el procedimiento de extracción. Si se va a realizar más de una extracción, se prefiere un procedimiento de extracción a contra-corriente, que puede minimizar pérdidas de triglicérido.

Usualmente, el aceite será un aceite crudo obtenido después de una extracción a partir de una biomasa microbiana (por ejemplo secada) con un disolvente adecuado, seguido por evaporación de ese disolvente (no miscible con el agua). El aceite puede someterse a una o más etapas de refinado antes de someterse al procedimiento de la invención.

El aceite de la invención, o uno que resulte de un procedimiento del primer aspecto, puede usarse para diversos propósitos sin más procesamiento, o puede someterse adicionalmente a una o más etapas de refinado. El aceite puede usarse como un aditivo o un suplemento, por ejemplo en composiciones alimentarias, tales como una fórmula infantil. Sin embargo, puede usarse también en composiciones cosméticas o farmacéuticas. La invención, en un aspecto adicional, se refiere por lo tanto a una composición, tal como un producto alimentario, pienso o una composición farmacéutica o una composición cosmética, que comprende, o a la que se ha añadido, un aceite de la invención. Composiciones preferidas son alimentos, tales como una fórmula infantil o un suplemento nutricional.

El aceite de la invención puede tener por lo tanto un bajo contenido en esterol y óptimamente un bajo contenido en diglicéridos. Óptimamente, puede tener también un alto contenido en triglicéridos. Esto hace el aceite particularmente adecuado para propósitos nutricionales, y puede usarse como un suplemento nutricional. El aceite puede suministrarse como un aceite, o puede encapsularse, por ejemplo, en una cápsula de gelatina. El aceite puede de este modo incorporarse en alimentos, piensos o productos alimentarios, adecuados para consumo humano o animal. Ejemplos adecuados son bebidas y pan dietéticos. Contemplado particularmente es el uso en una fórmula infantil, o en cosméticos.

Los rasgos distintivos y características preferidos de un aspecto de la invención son aplicables igualmente, mutatis mutandis, a otro aspecto.

La invención se describirá ahora, a modo de ejemplo, con referencia a los siguientes ejemplos que se proporcionan meramente como manera de ilustración, y no están para que se interpreten como limitantes sobre la invención.

Ejemplo comparativo 1

Recuperación de aceite de AAR crudo a partir de biomasa de M. alpina

Se filtraron en una prensa filtradora de membrana (tipo de tela: propex 46K2) 500 l de caldo obtenido después de la fermentación de Mortierella alpina. El caldo se filtró con una diferencia de presión de 0,2 bares. Los 500 l de caldo se filtraron, en 21 minutos, sobre un área de filtro total de 6,3 m^{2}, lo que dio como resultado un flujo medio de aproximadamente 230 l/m^{2}h. La torta del filtro se lavó en 30 minutos con 10 volúmenes de torta de agua corriente a un caudal medio de 320 l/m^{2}h.

La torta se prensó a 5,5 bares durante 30 minutos torta usando un extrusor de un solo tornillo con un cilindro perfilado y un tornillo universal. La hilera usada para la extrusión tenía agujeros de 2 mm de diámetro.

El secado del producto extrudido se llevó a cabo con aire (800 Nm^{3}/m^{2}h) en un secador de lecho fluidizado. El valor prefijado de la temperatura del lecho fue 80ºC. El diámetro de la biomasa extrudida secada fue 2 mm y su contenido en materia seca, después del secado, fue aproximadamente 96%.

Se extrajo luego del producto extrudido, usando hexano como disolvente, un aceite crudo que contenía ácido araquidónico (aceite de AAR).

Ejemplos 2 y 3

Tratamiento del aceite de AAR microbiano con etanol al 100%

Se extrajeron 5 ml de aceite de AAR crudo del producto extrudido del ejemplo 1, por agitación a mano durante 1 minuto con un volumen de etanol al 100%. Subsiguientemente, las capas inferior y superior se separaron por centrifugación durante 5 minutos a 5000 rpm. Las muestras se analizaron por medio de RMN (600 MHz) (en busca de tri- y di-glicéridos, esteroles (sólo se midió el contenido en desmosterol) y agente antiespumante).

La extracción del aceite de AAR crudo, con 9 volúmenes de etanol al 100% a dos temperaturas diferentes, dio como resultado un aceite con un nivel disminuido de esterol y diglicéridos (DG), y un nivel aumentado de triglicéridos (TG, véase la tabla 1). El rendimiento de TG es el tanto por ciento de triglicéridos que permanece en el aceite después de la extracción con disolvente. También se retiró y se encontró en el etanol agente antiespumante después de la extracción. Sin embargo, el rendimiento de triglicéridos fue bajo debido al hecho de que algo del TG se disolvió (y de ese modo se retiró) en el etanol.

TABLA 1 Extracción del aceite de AAR crudo con etanol al 100% (datos para el aceite tratado)

1

Clave:	TG:	triglicéridos
	DG:	diglicéridos
	Esterol:	como desmosterol

Ejemplos 4 A 6, 8 y 9 y Ejemplo comparativo 7

Tratamiento del aceite de AAR microbiano con etanol al 97%

Los ejemplos 2 y 3 se repitieron, salvo que usando etanol al 97% a volúmenes variantes con relación al aceite.

La extracción del aceite de AAR crudo con 1, 3 y 9 volúmenes de etanol al 97% dio como resultado un aceite con un nivel disminuido de esterol y diglicéridos, y un nivel aumentado de triglicéridos (véase la tabla 2).

El rendimiento de triglicéridos fue superior a 92% debido al hecho de que no mucho aceite se disolvió en etanol al 97%. A temperatura ambiente (aproximadamente 20ºC), se observó un rendimiento más alto de triglicéridos y una mejor retirada de diglicéridos y esteroles. Remarcablemente, no se encontró etanol en el aceite tratado.

TABLA 2 Extracción del aceite de AAR crudo con etanol al 97% (datos para el aceite tratado)

2

Clave:	TG:	triglicéridos
	DG:	diglicéridos
	Esterol:	como desmosterol
	*	\begin{minipage}[t]{120mm} Debido al aumento de la fase inferior (aceite) porque el etanol se disolvió parcialmente en el aceite y así la separación de fases fue más difícil.\end{minipage}

Se analizó también la fase de etanol después de la extracción y se observó un aumento significativo de esteroles. También se extrajo y se encontró en la fase de etanol el agente antiespumante (polipropilenglicol) (véase la tabla 3).

TABLA 3 Extracción del aceite de AAR crudo con etanol al 97% (datos para la fase de etanol)

3

Clave:	TG:	triglicéridos
	DG:	diglicéridos
	Esterol:	como desmosterol

Claims (24)

1. Un procedimiento de tratar un aceite derivado de un microorganismo, comprendiendo el procedimiento:

(a) poner en contacto el aceite con un disolvente polar para extraer al menos un esterol que sea soluble en el disolvente; y

(b) separar del aceite al menos algo del disolvente que contiene el esterol, de modo que el aceite resultante tiene un contenido en esterol inferior a 1,5%.

2. Un procedimiento conforme a la reivindicación 1, en el que el aceite se obtiene o extrae de una composición que resulta de una fermentación, opcionalmente un caldo de fermentación.

3. Un procedimiento conforme a la reivindicación 2, en el que el aceite se deriva, obtiene o extrae de microorganismos presentes en la composición.

4. Un procedimiento conforme a la reivindicación 2, en el que los microorganismos se retiran en primer lugar de la composición, opcionalmente filtrando la composición.

5. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que los microorganismos son secados antes de obtener el aceite.

6. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en el que el aceite se ha extraído usando un disolvente para los triglicéridos.

7. Un procedimiento conforme a la reivindicación 6, en el que el disolvente es hexano, dióxido de carbono supercrítico o isopropanol.

8. Un procedimiento conforme a cualquier reivindicación precedente, en el que el aceite es producido por, o el microorganismo es, una bacteria, hongo, levadura o alga.

9. Un procedimiento conforme a la reivindicación 8, en el que el microorganismo es del género Crypthecodinium, Mucorales, Thraustochytrium, Mortierella, Pythium, Entomophthora, Porphyridium o Nitzschia.

10. Un procedimiento conforme a la reivindicación 1, en el que el aceite se deriva de Mortierella alpina o en el que el esterol es producido por, o está presente intracelularmente dentro de, el microorganismo.

11. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el esterol es desmosterol.

12. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el aceite comprende al menos un ácido graso poliinsaturado (AGPI).

13. Un procedimiento conforme a la reivindicación 12, en el que el AGPI es un ácido graso poliinsaturado C18, C20 ó C22 \omega3 ó \omega6.

14. Un procedimiento conforme a la reivindicación 13, en el que el AGPI es AGL, ADL, AAR, AEP o ADH.

15. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el disolvente polar comprende un alcanol C_{1-6} o acetona.

16. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, en el que el disolvente es etanol o isopropanol, o etanol y desde 1 hasta 5% de agua.

17. Un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la cantidad de disolvente usado en la extracción es desde 1 hasta 9 veces el volumen del aceite que se va a tratar.

18. Un aceite tratado o preparado por un procedimiento conforme a una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde el aceite tiene un contenido en triglicéridos de al menos 95% y/o comprende ácidos grasos poliinsaturados (AGPIs) C20 o C22 \omega-3 u \omega-6.

19. Un aceite microbiano que comprende al menos un ácido graso poliinsaturado (AGPI) y que tiene un contenido en esterol no mayor que 1,5%, donde el aceite tiene un contenido en triglicéridos de al menos 95% y/o el AGPI es un AGPI C20 o C22 \omega-3 u \omega-6.

20. Un aceite conforme a la reivindicación 18 ó 19 que tiene un contenido en esterol no mayor que 1%.

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21. El uso de un aceite conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 18 a 20 en una composición farmacéutica, cosmética, de pienso o de un producto alimentario (para consumo por seres humanos o animales).

22. Una composición que comprende, o a la que se ha añadido, un aceite conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 18 a 20.

23. Una composición conforme a la reivindicación 22, que es un producto alimentario, pienso, o una composición farmacéutica, o un suplemento nutricional para consumo por seres humanos o animales.

24. Una composición conforme a la reivindicación 22 ó 23, que es una fórmula infantil o una composición cosmética.