HUE027549T2 - Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére - Google Patents

Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére Download PDF

Info

Publication number
HUE027549T2
HUE027549T2 HUE11165210A HUE11165210A HUE027549T2 HU E027549 T2 HUE027549 T2 HU E027549T2 HU E11165210 A HUE11165210 A HU E11165210A HU E11165210 A HUE11165210 A HU E11165210A HU E027549 T2 HUE027549 T2 HU E027549T2
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
compound
formula
antibody
group
reaction mixture
Prior art date
Application number
HUE11165210A
Other languages
English (en)
Inventor
Peter D Senter
Svetlana Doronina
Brian E Toki
Original Assignee
Seattle Genetics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Seattle Genetics Inc filed Critical Seattle Genetics Inc
Publication of HUE027549T2 publication Critical patent/HUE027549T2/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/642—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the peptide or protein in the drug conjugate being a cytokine, e.g. IL2, chemokine, growth factors or interferons being the inactive part of the conjugate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6867—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of a blood cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

mjêmfmmmmMMmû m alkalmazásuk mmt mît aiüi« betegség vagy fertgzéses betegség KEiELÉSÉil
Leírás
1,  TAtátüÁNY TERÜLETE
[Oiilj A jelen találmány hatóanyag-'összekötöímásnéven knkefVIlgandum kenjugâtumokra és hátöanyag-iínker (típusú) vegyülétekre, készteéeyéte, amelyek hatóanyag-összekdiö-ligandyrn konjugátumoí vagy hatóanyag-linker (típusú) vegyütetet tartalmaznak, valamint ezek rák, autoimmun betegség vagy fertőzéséé betegség kezelésében való alkalmazására vonatkozik.
2. ämÄLMÄW HÁTTERE (ÔÛÔ2J Számos rövid pepiid vegyütetet izoláltak természetes forrásokból és Így találták, hogy ezeknek biológiai aktivitásuk van. E vegyüleíek analógjait szintén előállították:, és némelyik esetén így találták, hogy van biológiai aktivitásuk. Így például az aurisrfain E (5635483 számú USA szabadalom; Pettit et al.) a döiasztstin 10-nek, egy tengeri eredetű természetes terméknek a szintetikus analógja, olyan szer. amely gátolja a tubulin poliméíizációját oly módon, hogy a fubuünon ugyanazon helyhez kötődik, mint a vioknsxtim amely rákellenes hatóanyag p:. R. Pettit, Prog. Chem. Org. Nat. Prod., 70; 1-79 (1997). A doiasztatin 10, az auhsztatin PE és az aurisztatio B iineans peptidèfc, tiégy aminosavat tartalmaznak, amelyek közül három a vegyöletek doiasztatin-osopoftíáfean egyedülálló. Jelenleg mind a doiasztatin 10-et, mind az aunsztaíin Pii4 ráki kezelésire vonatkozó humán klinikai: kísérletekben alkalmazzák. A doiasztatin 10 és az aedsztatin E közötti szerkezeti különbség a O-terminátis maradékban van, ahol a döiasztatih; 10 tiazóilénetsl-amrn-csöpor^a az aúrisztain E-ben noreíednn-egységre van kicserélve. P0Í8| A következő dokumentumok doiasztatin- és aurísztatin-vegyo eteket; és analógjaikat, valamint rák koz#lésében történő alkalmazásukat ismertetik; WO 96/33212 AI sz. nemzetközi közzétételi irat ( Telkek u Hormone fvlfg. Co., IÄ); WG88/14855 Ai sz.. nemzetközi közzététel irat (Arizona Board et Regents): EP 695757 A2 sz, európai szabadalmi közzétételi irat (Arizona Board of EP 695758 A2 sz. európai szabadalmi közzététel irat (Arizona Board of Regents); EP 695759 A2 sz. európai sz&badaimi közzététel irat (Arizona Board of Regents);: WO 96/99564 AI m, nemzetközi közzétételi Irat (Teikeku Hormone; Mfg. Co., Ltd.};; WO 98193954 Ä1 sz, nemzetközi közzététel irat (Teikeku Hormone Mf§. Cö„
Ltd.); 8 323 315 81 sz. Üi; szabadalom (Pettit et al.); G R. Pettit et a!., Anti Cancer Drug Oes. 13(4); 243-277 (1998); G,R. Petit étal, AniPCancer Drug Oes. 10(7): 529-544 (1995); és K. Miyazaki et al., Chem. Pharm Bull. 43(16), 1708-18 (1995).
[Û0O4| A dolasztatin csoportba fartpzó vegyuletekre és analógjaikra vonatkozó in vfe: adatok: eliéném a teripiis hatás eléréséhez szükséges dózisoknál jelentkező szignifikáns általános toziéitások rontják hatékonyságukat a klinikai vizsgálatokban Ezért egyértelmű szükséglet mutatkozik a szakterületen olyan dötasztain-származékok iránt, amelyek szignifikánsan alacsonyabb toxicités!,: ugyanakkor hasznos terápiás hatékonyságot mutatnak a jelenlegi dolasztatin hatóanyagot: használó terápiákhoz képest. E bejelentés 2, fejezetében idézett bármely hivatkozás említése nem jelenti annak elismerését, hogy a hivatkozás ezen bejelentésre nézve a technika állását képezi.
3, A TALÁLMÁNY «SZEFOGLALftSA 9©5] Egy szempontból a jelen találmány olyan gyógyszerkészítményt biztosit, amely embereknek: való Intravénás adagoláshoz van adaptálva, ás tartalmaz la képlett vegyuleteket:
vagy azok gyógyszerészetileg elfogadható sóját vagy szétváljál ahol I« jelentése monokíonáíis antitest, amely immunspeciikus&n képes kötni a CD3Ö antigént; ~k~ jelentése stretoher (nyújtó vagy feszítő) egység; a értéke 1 ; mindegyik AN- jelentése,függetlenül, aminosav egység; w jelentése egész szám, amelynek értéke 2 -12; •Y·· jelentése önfeláldozó távtartó (selfammoiative spacer) egység; y értéke 1 vagy 2; p értéke 1 ™ körülhelüi 20, és jelentése a készítményben az -.Aa-VWYy-D egységek antitestenként! átlagos száma; és -D jelentése hatóanyag egység, ahol az la képieíu vegyületek szerkezete
[000?! la képlettí vegyülei vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója vagy szelváfa („hatóanyag-összekőtó-ilgandum konJ«góterf) alkalmas rák, autoimmun betegség vagy fertőzéséé betegség kezelésére vagy megelőzésére állat esetén, [00081 Ismertetünk lia képlete hatóanyagdigandum vegyületeket is:
és gyógyszerészetileg elfogadható sóikat és szoilvatjaikat, ahol az egyes helyzetektől függetlenül: R1 jelentését ~H, -CrCs alkíl (azaz 1~8 szénatomos alkil) és -CrCe karbociklíl csoport kézül választjuk; és R2 jelentését ~H és -CrOs aiki! csoport közül választjuk; vagy R1 és R2 összekapcsolódik, jelentésük -(CRaRb)R- képletü csoport, ahoi Rs és R':' jelentését függetlenül, --H, -61-% aiki! és -CVGg k&fhöciki csoport közéi választjuk, és h értékéi 2, 3, 4, 5 és S kézi választjuk, és gyűrűt képeznek a szénatommá!, amelyhez kapcsolódnak;
Rs jéléhtésát -H,. -CrGe aíklt, -C3-C8 karbocikiil, -Ö-(Cr£s ài| -aril, -Crûs alkil-ahi, -€í-£s aikli-tCrC® karhooiki), -G^-Ce hsterodkli és -Cr Cg alkiHGr C-e heteroclkii!} csoport közöl választjuk: R4 jelentését ~H, -CrCg alkil, -CrCs karfeoöikli, -0-(Ci-G3 aikll); -árit -CrCa ilkl-ari, -GrCg- alkil-CCg-Cg karbociklti), -Cg-Cs heteföcikl és -Gi-Gy aikihCCg-Cg heterodkiil) csoport közül választjuk, ahol; R5 jelentését -H és -metli csoport közül választjuk; vagy R4 és R5 összekapcsolódik, jelentésük ~(CR;5R%~ képletű csoport, ahol Ra és Ri5 jelentését, függetlenül, -H, -CrC.3 alkil- és -Cs-Os karboolklll csoport kezűi választják, és π értékét 2,3,4, 5 és 6 közül választjuk, és gyűrűt képeznek a szénatommal, amelyhez kapcsolódnak; R6 jelentését -N és -GrOg alkil csoport közül választjuk; R? jelentését -H, -CrCs alkil, -CTg karbodklil, -C>(Cr-Cs alkil}-, -aril, -C?-Cs alkll-árit, -CrCs alkil-(Cy-Cg kafboeikll), ~QrO§ heterodki és -€i-€t aÍkii~(£rCs heterceiki) csoport közül választjuk; mindegyik R8 jelentését, függetlenül, -H: -OH, -G·:-Ce alkil: -C3-Cgkarbocikiil és -0-(Ci-Ce alkil) csoport közül választjuk; R§ jelentését -H és ~Cr:Gg alkil csoport közül választjuk; X jelentése -O-, -S-, -NH- vagy ~N(R14)-csoport: R11 jelentését -H, -OH. -ΝΒ*, -NHR54, Sí&amp;%, -Ci-Cg alkil, -C3-Cs karbodklil, -O-íGmOy alkil), .artl-:,-Or€g alkii-anl, -Cs-Cs aikiHC3-C3 karbodklil). ~G3~£g heterpclklf és -ÜtCg :atk!i-(CrG§: héterodklil) csoport közül választjük; vagy R"' jelentése oxigénatom, amely a szénatommal együtt, amelyhez kapcsolódik, karbonilegységet |G®0) képez, éé az ezen a szénatomon levő hidrogénatom a.<€-05 csoportban lévő kettöskötés egyikével van kicserélve; mindegyik jelentését, függetlenül, -an!~ és -C3-03: hetérocskisí csoport közi! választjuk: mindegyik R·4 jelentésé, függetlenül, -H vagy -Ci-G3 alkil csoport; és R16 jelentése -Yy-Wsv-éT képlefíí csoport, ahol mindegyik -W- jelentése, föggéilenui amínosav egység; -Y- jelentése távtartó tspaeer) egység;: w jelentése egész szám, amelynek értéke 0 - 12; y értéke 0. 1 vagy 2; és -A' jelentéséi a következők közül választjuk:
ahol G jelentését -Cl, Br, ~k -O-mezil és -O-tozil csoport kezűt választjuk: J jelentését -Cl, ~Br. 4: -F, -OH, -Ö-N-szukdmmici -O-^-nitrofenil}, -O-pentafluoríenk -Q-tetmfieorfeoil és -O-C(O) OR1§ csoport közül választjuk;
Rt? jelentését -C-Cdo alfelén-, -Cs-Ca karbocikío-, -0-(0,-(¾ alkil)-, ahíén--, Ό : "C : alfelén-ariién- -artlén-GrC·^ alkslèn-, -C,-C:8 alfelénrtCVC* karbocikío)-, -(Cd-Cs karbocIkloj-Ci-G^ alfelén·, -Cb-Ca heterociklo-. --Cr-Cho a!k!!én~(Cs~Cg helerocskíojs ~(C-j-C8 heteroaklo}-Ci-C<0 alfelén-. -(CHsCH20)r és “(CH2CH2ö}rCH2“ képiéül csoport közül választjuk; r jelentése egész szárny amelynek értéke 1 - 10;: és RiC' jelentése -Őrös alkil vagy -aril csoport. ptOöttj lia kèpletü vegyület vagy gyógyszerészefiieg elfogadható sója vagy szölváija (Jiatóanyag-összekótö” vegyület) alkalmazható rák, autoimmun betegség vagy fertózéses betegség kezelésére állat esetén, vagy pedig alkalmazható intermedierként nalôanyag-ôsszekôtG'liganduni konjugátum szintéziséhez. P§1§| Olyan készítményeket Is Ismertetünk: amelyek tartalmadnál hatóanyag·· issdefâtô-ligândym konjugáíumot hatásos mennyiségbe^ valamint gyógyszerészetileg elfogadható hordozót vagy vivőaoyagot. p011| Olyan készítményeket Is ismertetünk, amelyek tartalmaznak hatóanyag-összekötő yegyületet hatásos mennyiségiben, valamint gyögyszerészetíteg elfogadható hordözét vagy vívöanysget.
[0Ö12£ E§árásokat is ismertetünk tumorsejt vagy ráksejt elpusztítására vagy szágófodásának gátlására, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk iatöanyag-összekötö-ilgandurn konjugátum hatásos mennyiségét, pö13J Eljárásokat is Ismertetünk rák kezelésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét. PW4| Eljárásokat is ismertetőnk rák: kezelésire, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk batóanyag-ősszekófldigahdom konjugátum hatásos mennyiségéh pt)1S| Eljárásokat is Ismertetünk olyan sejt elpusztítására vagy replikáíodásának gátlására, amely autoimmun antitestét expresszi!, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét |Ü0181 Elárásokat Is ismertetőnk olyan sejt elpusztítására vagy repiikátódásának gátlására, amely autoimmun antitestet expresszái, amelyek során erre: rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekotö-lgandum: konjugátum hatásos mennyiségét. pSITl Eljárásokat, is ismertetünk autoimmun betegség kezelésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét. pOU] Eljárá« sokat is Ismertetünk autoimmun betegség kezelésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk haíóanyag-összekötö-íigandurr! konjugátum hatásos mennyiségét. 108191 Eljárásokat' is ismertetőnk fertőzése® betegség kezelésére, amelyek során erre rsszötuiö álfáinak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét. PO20] Eljárásokat is ismertetünk fertőzése® betegség kezelésére: amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag--összékóti-!igaoduó5 konjugátum hatásos mennyiségéi [0021] Eljárásokat is ismertetünk tumorsejt vagy ráksejt szaporodásának megelőzésére, amelyek során erre rászoruló állatnák beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét, p02$] Eprásokat is ismertetünk tumorsejt vágy ráksejt ázáporodásának megelőzésére, amelyek során erre rászoruló illatnak beadjuk hatóanyag-összekötö-ligandum konjugátum hatásos mennyiségét. pi!3j Eprásokat is ismertetünk rák megelőzésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóariyag-összeköte vegyidet hatásos mennyiségéi [0024] Eprásokat Is ismertetünk rák megelőzésére, amelyek során éne rászoruló állatnak beadjuk hatőanyag-osszekötö-tigandum konjugátum hatásos mennyiségét. PÉ2S| Eljárásokat is ismertetünk olyan sejt szaporodásinak megelőzésére, amely autoimmun antitestet exprès szál, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyölet hatásos mennyiségét, [0028]: Eprásokat Is Ismertetünk olyan sejt szaporodásának megelőzésére, amely autoimmun antitestet expresszál, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő-ilgandum koejugitum hatásos mennyiségét.
[002?! Eljárásokat is ismertetünk autoimmun betegség; megelőzésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatőanyag-ősszekötő vegyület hatásos mennyiségét.
[0028] Eljárásokat is ismertetünk autoimmun betegség megelőzésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő-ligandum konjugátum hatásos mennyiséget.
[00211 Eprásokat is ismertetünk tertözéses betegség megelőzésére, amelyek során eue rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag-összekötő vegyület hatásos mennyiségét, §0030] Efárásokat is ismertetünk fertozéses betegség: megelőzésére, amelyek során erre rászoruló állatnak beadjuk hatóanyag^ősszékötő-tigandum: konjugátum hatásos mennyiségét. pi31] Ismertetünk olyan hátóányagPsszekötő Vegyüietéf is, amely alkalmazható intermedierként h atoa ny a g -össze k ötó- Hg a nd u m konjugátum szintetizálására. [0032] A jelen találmány még jobban érthető az áléból részletes leírás, ábrák és szemléltető példák alapján, amelyeket a találmány kivitel alakjainak, megvalósítási módjainak példaképpen való bemutatására szánunk. ijgissffiigûïœ^^ |0Ö33]
Az 1 ábra 41 léptető vegyüfei és S3 képfetű vegyülat H3398 sej&amp;onaltai szembeni clíoloxidíasát mutatja. A -D~ vénái képvisel a 49 képletü vegyüíetek az.....O- vonat pedig az S3 képletű vegyüiefét. A 2. ábra 84, 81, 88 és 88 kiplétö vegyüíetek H3398 sejivonaitaf szembeni dlotoxicitásáí mutatja A vonal a 84 képfetü vegyületet a vonal a 88 képletö vegyülte!, a -A- vonal a 88 képletü vegyüieiet, a -X- vonal pedig a 88 képletű vegyüiefet képviseli. A 3. ábra 84, 8i, 88 és 18 képletü vegyüíetek HCÏ-118 sejívonaüai szembeni dtotoxiertását mutatja. A a- vonal a 84 képletű vegyületet, a -m~ vonal a SS képletű vegyüíetek a - A- vonat a 88 képletü vegyületet, a -.K- vonal pedig:a 88 képletü vegyületet képviseli A 4 ábra 88 és 88 képletü vágyóiét H3396 sejtvonallal szembeni dtotoxidtását mutatja. Ä ~g~ vonal a 81 képletű vegyületet, míg a -2 vonal a 88 képletü
Az 5 ábra 88, SS és 18 képletü: vegyüieiek Kárpas humán vastagbél-végűé! sejtvonaíla! szémbenj dtotoxieitásái mutatja. A -♦·- vonat a 81 képletű vegyületet, á A- vonal a 83 képletü vegyületet, a -X- vonal pedig a SS képletű vegyületet képvisel; A 6. ábra 86 és $7 képletü vegyüleí H3396 sejivonaiSail szembeni citotoxicitását mutatja a kezelési időtartam függvényében. A sejteket a konjugátum hatásának a vizsgálat teljes ideje alatt tettük ki mosás nélkül (98 óra), vagy pedig 2 éra hosszat tettük ki, mostuk, majd inkubáluk tovább! 94 éra hosszat. Ä 96 órás periódus végén a sejteket Atamar Blue-vai kezeltük a sejtek életképességének megbaíározására. A -0- vödé! a 18 képlétü vegyületet képviseli 2 órás * kezeléssel: á — vonal a 17 képletű vegyületet képvisel 2 órás kezeléssel, á vonal a 81 képletű vegyületet képviseli 91 órás kezeléssel a - - vonal pedig a 87 képletü vegyületet képvisel il órás kezeléssel A 7. ábra 88 ~~ 89 képletü vegyüíetek csupasz egerekbe Iropíantált 12887 humán tüdő adenokardnómai xenograft tumorok növekedésére gyakorolt hatását mutálja A -X- vonal a nem-kezeit fúrnod képviseli a ~¥ - vonal a 68 képletü vegyületet,: a vonal 8$ képletü vegyületet, a -X- vonal a 17 képletű vegyulefet, a - 0~ vonal pedig a 69 képleté vegyutetet képviseli, A 8. ábra 6S - 69 képleíű vegyuletek csupasz egerekbe implantât Karpas bumáu aoapláziás nagysepes lymphoma xenograft tumorok növekedésére gyakorolt hatását mutatja. A -X- vonal a nem-kezeit tumort képviseli, a A vonal a 6? képletű: vagyületet, a vonal a 69 képletei vegyuletek a-Δ- vonal a 86 képletü vegye letet, a -o- vonal pedig a 88 képlett! vegyületet képviseli.
6. A TALÁLMÁhlY RÉSZLETES ISMERTETéSE
5.1, DEFINÍCIÓK 1003¾ „állat” például, de nem kizárólag: ember, patkány, egér, fengerímalac, majom, sertés, kecske, tehén, lő. kutya,: macska, madár és szárnyas:. |0Ö3S| Az „aril" vagy „anlcsoporf kifejezés karbociklusos aromás csoportra vonatkozik. Árucsoportok például, de nem nem kizárólag, a férni·, naíílk és antraoenteopoft Egy karbociklusos aromás csoport vagy heterociklusos aromás csoport lehet szuhsztlfuálatían, vagy pedig egy vagy több csoporttal szubsztituált, így például, de nem kizárólag, -€rOrÄK -0-(Cr~C§-alkH)-, -arlk, -0(0^3 -DC(0)R?, -C(0)0R\ -C(Q)NH2, -Çtô|RMR!, -C|0}NCI?|rNHCCO)R!, -S(D},Rb *S(0)R’.-0H, -halogén, -¾ -NH2, -MH(R:},. -N(R’}2 és/vagy -CH esoporltal; ahol mindegyik R! jelentését, függetlenül, -Ct-Cs álkii és arilcsoport közül választjuk. PÍ38J A „CrCs-alkir vagy „Ct-Cs-alkil osopprf kifejezés, ahogyan Itt használjuk, egyenesláncú vagy elágazó, teltet vagy telítetlen, 1 -- 8 szénatomos szénhidrogén csoportra vonatkozik. Jellegzetes „CÜrCs-öltóF'· csoportok például, de nem klzirolsg, a -metil, -etil, -n-propii, -n-butíl-n-penbl, -n-hexii, -n-heplií, -n-okíli, n-nonil és a -n-decii csoport; míg elágazó CrCs alkii csoportok például, de nem kizárólag, az dzopropíl, -szak-butik -Izobufü, -tere-betil,. -izopentíl, 2-meflbutk expert,Allelen atkrkcsopo«.pé&amp;feiK de nem kizárólag, a vlnll, -alii, -l-hufanll, -^-butenli -izobutlíenlL ~1-penfeni, -2-pentenll, -3~rnetík1-butent, -2-meti-2~Püten|, -t J-dimetil-g-Pütenit 1~bex?h, 2-hexik 3~hexik -acetilén#, -proplnil, 44rutlnl, -2~buílni, -1-pentini, ^-penttnil, -Smsetlhi-butin! metik étik, props k izopropik, e-butlb, izobubk szokbutlk t&amp;rc-buïû-, n-pentik, izopentth peepéntik n-hexll-,; izohexll-, 2~meiilpenti:k:, 3^metipeht!k, 2,2-dimeflthutik 2,3-dlmetiíhutik 2,2-dimeHipeníik 2,3-dimetipentík 3,3-dimetilpentih 2,3,4-írimetllpentlk 3-metilhexik 2,2-dimetlihexlk 2,4-dtmeülhexi-, 2,5-dimetiíhexlh 3,5-dimeliihexik 2,4-dimetüpentlk, 2-metllheptik, 3--metílheptík η-heptîk Izoheptik, n- okti- és ko0ktil--#0por|:,: GrPs alil csoport lehel szubsztituáiatlan, vagy pedig egy vagy több osdpobfa) így például., de nem kizárólag, -CrCg aikil, 4>(€t-€$ alkif);f -aril,. -'C(0}R\ -QC(p}R\ -C(Ö)GR\ -CíO)NH2, -OppHR’, -QtOINiR^^RHCP}^5;, -S(G)2R\ -S(0)R\ -OH, halogén, ~N3, ~NH2, -NHfR), -RCR'ls és/vagy -CN seoporitat; ahol mindegyik R’ jelentését, függetlenül, -CrCs alkií- és árucsoport közül választjuk. p03?j Egy „Cs-Cg karbocíklif' csoport 3-, 4-, 5-, 6-, 7- vagy l-tagú telített vagy telfetíen nem-aromás karbodkíusos gyűrűi. Jellegzetes Cr£e kárbodklit csoportok géildáüi: de nem kizárólag, a -dkfopfopi, -dkiebutil, -cíklopeotll -cíklopenta-dienll. -eikiohexE -ciklohexenil, -1,3-dklohexadlensí,: -1 4 -dkiohexadlenil, -clklo-hépti, -f ,3-çiklôheptadienii, ~f,3:,:5~dktóheptaióenl cílkiooktií és a -cikíooktadienl; csoport. Egy €3-Ca karböeíkf csoport lehet szubsztítuálafían, vagy pedig egy vagy főbb csoporttal szubszütuátt így például, de nem kizárólag, -CrC3 alkií, -Ö-iCt-Cs áilkil), -aril, -€(Op; -ÛCfOP’, ~C(0)0E': -C(0)NH2. -C(0)NHR\ -CCtJjNIRbrRMCfÖjR1, -S{Ö}2R\ -S{0)R\-0H, -halogén, ~RS. -NH2. -NH{R’)j; . -i(R!)s és -CH csoportéi; aboli mindegyik W jelentését, függetlenül -Ci~Cs slkH és árucsoport közöl választjuk.
[0038] A „Cg-Cg karöodikiíf vagy ,,C3--C.g karboeíkioesoporf kifejezés olyan fent. definiált C3-C3 karbociklií csopoftot jelent, amelyben a kathecikiiilesdpoit: hidrogénatomjainak egyikét vegyértékkifés helyettesíti.
[0038] Egy „C-rCio aíkilén” csoport ~{ΟΗ2)μ<:}~ képietű egyenesíáncú telített szénhídrogéncsopoíf. Cr-C-o alkilénesoporíök például: a métáién-, etilén-, propilén-.... bubién··, peníilén-, hexilén-, hepiilén-, oktiíén-, noniién- és a dekaléncsoport. [0040] Egy „árkén” csoport. olyan árucsoport. amely két kovalens kötéssel rendelkezik, amelyek lehetnek erto~, méta- vagy pam-eirendezésben, amint a kivetkező szerkezetek ;myia|ák::
amelyekben a fenilcsoposi lehet szubsztituáiatlan vagy legfeljebb négy csoporttal szubszíiíuált, így például de nem kizárólag, -CpCe alkll, -0-(CrCs alkd), -aril-, -GP|R\ -OCpjR’, -C(0)0R:;. -C(0}NH2, -Cíö)f##r, -C{Ö)N{RV. -NHC(0)R\ -S(0)2R\ -S(0)R\~0H, -halogén, -N3 , -NH2, -NHfR’}, -NCR% és -CN csoporttal; ahol mindegyik R: jelentését, függeienöl -CiPg aikil és arijesoport közül választjuk ΡΙ41] A „Cg-Cg heierociklif vagy „0·*-0δ heterociklil csoport" kifejezés olyan aromás vagy nem-aromás C3~C.§ katbocikiií csoportra vonatkozik, amelyben egy -négy gyűrű-szénatom, függetlenül, ki van cserélve az O, S és N által alkotott csoportból választott heteroatommal. Jellegzetes CVCg heíerociklil csoportok például a benzofuranik benzotiofén-, Indols!-, benzopirazolík kumarsnste izokinoiinsk pirroNI-: tlofenik feranik tiazoiil-, Imidazollk. pirazoíik tnazohk kioolinik, píirlmldlnil·, plridinih piridonlk ptrazisiih pihdazisith izplszol-, Izoxazoiil-és a tetrazofilcsoport Egy €3-€k heterpcikl csoport lehet szubsztituálatlan vagy pedig legfeljebb bét csoporttal szubsziituált, tgy például de nem kizárólag, ~C ;~Ca aikíi. ~0-(CrC8 alksi), -aril, -C(0)R\ ~ÖCfö)R\ ~C{ö)OR\ -C(0)NH2, ~C(Q)NHE'', -C(0)N(R’}2, -NHG{0)R’, -SiO^Rc -S(0)R\-QH, -balogén, -N3, ~NH2t -MNpk * N(R’)s és ~CN csoporttal; ahol mindegyik R; jelentését, függetlenül -GrCs alkil és árucsoport közül választjuk, '{$$421 A XA-Cs heterociklo” vagy ,Α'€δ heterocikíocsoporf kifejezés olyan fent definiált C3-Ca heterociklii csoportot jelent, amelyben a lieterociklilcsoport hldmgéoafemjaibak egyikét vegyértékkotés betyettesifi. Egy Ck-Cg heterodklo-csoport tehet siubsztituálatlan, vagy pedig legfeljebb hat csoporttal szubsztituáít, így például ie nem kizárólag, -Cró* alkil -ö-(CrEg~alkIl -aril, ~C|Ö]R!, -0C(0)R:, -C(0)0R', -CtOsNHy, -G(CpHR!, •CfOjfP'h -NHCsOiRl -S(0)2R, -S(Ö)R\ -Öli -haiogém -NHg, As ~0N csoporttal;; aboi mindegyik R’ jelentését, függetlenül, -öt-ög-alkil'· és ariicsoport közöl választjuk.
[0043] A „találmány szerinti vegyuleí kifejezés hatóanyag-összekötő yegyütetet vagy hatóanyag-összekötő-iigandum konjugátumot jelent, [0044] Egy kiviteli alak esetén a találmány szerinti vegyültetek izolált vagy tisztított formában vannak. Ahogyan irt haszeáljyk, az „Izolált" kifejezés azt jelenti, hogy (a) egy természetes forrás, igy például növényi vagy állati sejt vagy sejrtenyészet többi komponensétől, vagy pedig (b) egy szintetikus szerves kémiai reakcioelegy többi komponensétől el van választva Ahogyan itt használjuk, a „tisztiLoti" kifejezés azt jelenti, hogy amikor izoláltok, az izolálom legálibi M%f előnyösen tegoíibb S8% találmány szerinti vegyületet tartalmaz az Izolálom tömegére vonafoztatva. PÖAS] „Hkiroxil védőcsoporf például a metoxlmeihéter-, 2 ~m etoxietoxi mets i -éter· , tetra hidropiran it-éter-. benzii-éter-, p-metoxibenzil-èter-, trimeiiisziyhétem teFc^utildimelí-sBll-éter·-, trlfooimeÉl-sziii-èfor-, aÄ észter-, szüésztfcálí àæiât-èsztéi-, plvateài-, benzoáth mefinszulfonát- és a 0* fotuetszuifonafosopefi [0046] A „kiiépocsoporf kifejezés olyan funkciós csoportra vonatkozik, amely másik funkciós csoporttal helyettesíthető. Ilyen; kifépöcsoportok jól ismertek a szakterületen, és a példáik többek között a hafogenid- (pl. kloriö, bromid. jodrd) metánszulfor#· (mezil), p-ioíuoiszuifonil- (tozil), frsftuormetfezulíoml-· (triftát) és trifluormetilszulfonátcsopoítok.
[SO#] Az „antitest” kifejezés, ahogyan Itt használok, teljes hosszúságú immunglobulin molekulát vagy teljés hosszúságú immunglobulin molekula Immunolögiaiiag aktív részét jelenti, azaz olyan molekulát, amely tartalmaz olyan anfigérfkőtóééiph amely Immunspeeifikusan képes kötődni egy fontos cél antigénjéhez vagy annak részéhez, ilyen célok például ráksejtek vagy olyan sejtek, amelyek autoimmun betegségekkel kapcsolatos autoimmun antitesteket termelnek. Az Itt ismertetett immuhgiobufin tartozhat az immunglobulin molekulák bármely fipsihöz (pl. IgG, IgE, IgM, IgD, IgA és IgY), osztályához (pl. IgGI, lgG2, lgG3, igG4, Igái és lg.A2) vagy alcsoportjához. Az immunglobulinok származhatnak: bármely fajtói. Eúönyösen azonban az immunglobulin humán, egér vágy nyúl eredetű A találmányban alkalmazható antitestek monoklonálisak, és lehetnek például monokionális, bispedfikus, humán, humanizál vagy kiméra aotMesték, egyfáncú antitestek, Fv, Fab fragmensek, F(ab’) fragmensek, F(ab')s fragmensek, Fab expresszáló könyvtár által termeit fragmensek,: anti-idfotípusos (anti-ld) antitestek, CDR'-k és a fentiek bármelyikének epitópköto fragmensei, amelyek immiunspeolikusan képesek kötődni a CD3Ö antigénhez. P04SJ A „gyógyszerészetüeg elfogadható só” kifejezés, ahogyan itt használjuk, egy találmány szerinti vegyüieí gyógyszsrészedeg elfogadható szerves vagy szervetlen sóira utal A találmány szerint vegyítetek legalább egy aminocsoportof tartalmaznak, és ennek megfelelően ezzel az amineospporttaS savaddíóios sók képezhetők. Előnyős sók például a szulfát··, cihát··, acetái·, oxalát-, klorld-, bromid-, jödid-, nitrát biszulfát-: foszfát··, savas foszfát··, Izemköfíoát-, laktat-, szaircÄ-, savas cifrát-, tartarát-, öleit··, tannât-, pantotenál-, bifartarát-, aszkorbát-, szukcinàt-, rnaleát-, genhzlnát-, fumarát-, gíukonát-, glukaronát-, szacharáb, formiát·, benzoáb, glutamák metánszulfonák eíánszulfonáí-·, benzoiszuifonát-, p~ toluolszdfonát- és pamoát- (azaz ll -metiién-hsszCú-hiőroxi-S-naáoát}) sók. Egy gyÉgyszefeszetiieg efegadhatö só magában foglalhatja agy Pisik molekula, így például aeetátíon, ü^oinátoíü "M§y más ellenien zárványát. Az elenim bármely olyan szerves vagy szervetlen csoport ledet, amely stabilizálja az anyavegyeleten levő töltést. Ezenkívül egy győgyszerészetileg elfogadható só szerkezetében fsidaímizhat egynél több, töltéssel rendelkező atomot. Olyan esetekben, amikor több, töltéssel rendelkező atom képezi részét, a gyógyszerészeíileg eit'ogadhato só Äh efíeniőnnál rendelkezhet így egy gyógyszerészetííeg elfogadható só egy; vagy több, töltéssé! rendelkező atommal és/vagy egy vagy több elleoioonál Is rendelkezhet. fői#! A „gyógyszerészetííeg elfogadható szolváf kifejezés egy vagy több ofdöszermötetóia és egy találmány szerinti vegyület asszociációjára vonatkozik. Győgyszerészetlleg elfogadható szoiváíokat képező oldószerek például a víz, izopropanol etanol, metanol, DMSÖ, etíl-asetát, ecetsav és az etanolamin. pOiil Rákkal kapcsolatosan a „kezelés" kifejezés a kővetkezők bármelyikét vagy mindegyikét jelenti: tumorsejtek vágy ráksejtek növekedésének megelőzése, tumorsejtek vagy ráksejtek replikációjának megelőzése, általános tumorderheies csökkentése és a betegséggel kapcsolatos egy vagy főbb tünet enyhítése. |0ŐS1] Autoimmun betegséggel kapcsolatosan a „kezelés” kifejezés a következők bármelyikét vagy mindegyikét jelenti: autoimmun betegáílapottal kapcsolatos sejtek, például, de nem kizárólag, autoimmun antitestet termelni képes sejtek replikációjának megelőzése, az autolmmumantfest terhelés csökkentess és a betegséggel kapcsolatos egy vagy több tünet enyhítése. P§S23 Fertőződés betegséggel kapcsolatosan a „kezelés” kifejezés a kővetkezők bármelyikét vagy mindegyikét jelenti: a fertözéses betegséget okozó patogén növekedésének, szaporodásának vagy replikációjának megelőzése és a fertözéses betegség egy vagy több tünetének enyhítése. pÉ$31 A kővetkező rövidítésekéi használjuk, amelyek definíciója á megadott:: AÊ -aurisztatin E; Boo ™ M<mmdbutoxikart>onll}; dt-öitruie; dap— dolaprcin; DCC -1 J-dloíklohexilkarbödiimid;: OQM diklôrmetàn; DEA - dieiiiamin; DEAD ** dielilazödikarbokílit; OEPC djetiitoszlbriiciánidát; DIÁD - diizöpraplazo·-dikarbokjlatj DIEA MM&amp;impmpjl&amp;íii&amp;rm: ml - dolaizoleum; DblAP ** 4-dlmetllamtnppiddin!· DME - etiiéngtlkaklimeííl--éíer fvagy 1 Gtoimetoxetán); DívfF ~~ MAédímefiiformamid. DMSO dimefli-szulfoxid;: doe ~ dőfafénln; döv ~ NfN~ dimeíüvalm; OTMB -· öJ’-őftióbíszf^-nitrobenzoesav}; ÖTPA ~ dietiiéntdamín- pentaeœtsav; DIT ···· ditiotreitoí, EDöi - 1 - ( 3"d írr^ éti f ö m I r-opro p i I ) - 3-et ; ! k a rbotí ; j rn i a -hidrokiorid: EEOQ ~ 2-etDX^1-·etox!kaΓboπil··1>2··dfhädΓokuΊo!ln; ES-fvi$ elekifonszórásos tömegspektrometna; EtOAc ~ eikacetát: Fmoc - N-{§-iyp«iIrTetoxíkarbonll}; gfy ~ gííein; NATO - ^»siíúróniiim~^xisfíy0ríosz^t;. HÄ ~ 1HPLC -nágynyemásű folyadikkromafogriia; le-~ izötecin; lys ~ ilzin; MeCM - aoÉsnitríí; ÄÖH - metanol; Mtr ~ 4~aniziyfeúsimati! (vagy 4-metoxitritl); n©r— |fS, noi^dnn; PAB ™ pmrnínofeenzit; PBS - foszfáttal pufferolt sóoídat (pH 7,4¾. PEG ~ poíietüénglskol; Ph - fenil; Bnp - pmítrofenit; ÜÜ -6~mateimíd(ácapFoil; Ph - fern!.; phe ···· trteniáianín: PyBrop ~ bróm4.nsz^:b"roiidino-*foszfónkini--hexaflüOffoszfáti SEC - méretkízárásos kromatografía, iy - szukoiNmid; TFA ,·- trífluoreoetsáv; TL0 ~~ vékonyféteg'kmmatorgáfla; CV ~ okraifeöíya; ml ~ valtm
S3. MáTŐ«MaG-ŐSSZEKÖTŐ-ÍIGANPUM KONJUGÁTUM 0Oi4j Amin! a fentiekben közöttük, a találmány p^égyszaífeiszífményt biztosít, amely émbereknék való intravénás adagoláshoz mm. adaptálva, tadalmaz la kèpiefy vegyüietekéf
vagy azok gyógyszerészetíleg elfogadható sóját vagy szolvátjáf, ahol
Le jelentése monokionáíis antitest, amely iromunspecíflkusan képes kötődni a 0030 antigénhez; -Ä- jelentése stretcher (nyújtó vagy feszítő) egység, á értéké 1; mindegyik -W- jelentése, függetlenül aminosav egység; w jelentése egész szám, amelynek értéke 2 - fi; ~Y- jelentése önfeláldozó távtartó (self-smmolatlve spacer) egység; y értéke 1 vagy 2; p értéke 1 - körülbelül 20, és jelentése az Ά^Λ^γνo egységek átlagos száma per antitest a készimén|l5en;; és D jelentése hatóanyag egység, ahol az la képletö vegyüíetek szerkezete
vágy azok: gyégyszetészetijeg elfogadható sója vagy szolvatja, |Ö0|S| Egy kiviteli alak szedni p értéke 1 - körülbelül 8, p05S| Másik kiviteti alak izonnt p értéke t --- körülbelül 3. p0§?| Másik kiviteti alak Szennt p értéke körülbelül 3 - körülbelül &amp; ipOlBI Még további kiviteli alak szerint p értéke körülbelül?· ->körülbelül B. pöili Másik kiviteli alak szerint p értéke körülbelül 8, p6(IÓ| Másik kivit#!! flak szerint p értéke körülbelül 4, pÖSli További kiviteli álak szerint p értéke körülbelül 2. pöi2| Egy szemléltetésképpen bemutatott la képieíü vegyidet szerkezete
és gyógyszerészetileg elfogadható sói és szolvátfai, ahol p értéke körülbelül körülbelül 9, 10063] Egy kiviteli alak szerint p értéke i -körülbelül 3.
[0064J Misik kiviteli alak szerint p értéke körülbelül 3 - körülbelül 5.
[0065] Mássk kiviteli alak szennt p értéke körülbelül 8. £00ó|| További kiviteli alak szerint p értéke körülbelül 4. POOTI További .kiviteli, alak szerint p értéke körülbelül Ά p0B$l ügy értendő, hogy p jelentése az Û egységek átlagos száma per iganöürn az la képletö hatóanyag~összekötŐ4iganéum tenjygafurnbarr. |00S8| Egy kiviteli alak szerint p értéke 1 -15. |00?0] Másik kiviteli aiak szerint p értéke 1 - 10. P0711 Másik kiviteli alak szerint p értéke 1 — körülbelül 8.
[0072] További kiviéi: aiak szerint p értéke 1 ~ köruibeiy; 5, [0073] Misik kivitelt alak szerint p értéke 1 ** körülbelül 3. p0741 Egy kiviteli alak széria! p értéke körülbelül 3 ··· körülbelül 5. P07§| Egy kiviéi alak szerint p értéke körülbelül: 7 - körülbelül 9. P07S] Misik kiviéi! alak szerint p értéke körülbelül 3.
[0077] További kiviéi alak szerint p értéke körülbelül 4. P078J További kiviéi! alak szerint p értéke körülbelül 2. p078f M la képletei batóanyág-összekotó-ilganéum konjugitumok létezhetnek keverékeik fermájiban, ahol egy keverék míhöegyik (íéle| komponense esetén p értéke különböző. így például létezhet egy haioanyagmsszekotortsgandum konjugátum két különálló konjugátum kévéréke fortnájiban, egyik konjugátum komponens esetén fi értéké 7, tilg a másik kénjugáturtv komponens esetén p értéke 8. P0801 Egy kiviteli aiak szerint a hatoanyag-összeketo-ligandum konjugátum bárom különálló konjugátum keveréke, ahol p értéke a három különálló konjugátum esetén 1, t, Illetve 3. főttül] Más kiviteli alak szerint a batóanyagésszekötő-ligandum konjugátum bárom; különltlé konjugátum keveréke, ahol p Értéke a három különálló kanjigáiym esetén 3,4, illetve 5. P082J További kiviéi! alak szerint a hatóanyag-Összeköto4ganöüm kerpgitom három különálló konjugátum keveréke ferniájaban létezik, aboi p értéke a három különálló konjugáíum esetén 5, 6, illetve 7.
[8083] További kiviteli alak szerint a hatóanyag-összekötöólgandum könjugálum három különálló konjugátum keveréke formájában létezik, aboi p értéke a három különálló konjugátum esetén 7, 8, illetve 9.
[8084] További kiviteli alak szerint a batöanyagmsszeköíö-liganduro konjugátum három különálló konjugátum keveréke formáiéban létezik,: ahol p értéke a .báron) különálló konjugátum esetén 9, 10, illetve 1 i [008S] További kiviteli alak szerint a hatóanyag-összékötoTgandüm konjugátum bárom különálló koniugátum keveréke formájában létezik, ahol p értéke a három különálló koojugátuiTí esetén: Ili, 12. illetve 13.
[0088] Másik kiviteli alak szerint a hatoanyag-összekotö-ilgandum konjugátum három különálló konjugátum keveréke formájában létezik, ahol p értéke a három különálló konjugátum esetén 13,14, Illetve 15, 1108711: ismertetünk íii képtelü vagy üleíekeí is:
M és gyógyszerészeiileg elfogadható lóikat és szolvátjalkak ahol az egyes helyzetektől függetlenül; R2 jelentését -H és --OrCg áltól csoport közül választjuk; R5 jelentését --R, -GrGs alkll, -CrGg karboclkiil, -0-(CrCs alkll}, -anf, -CrCr alkil-anl·, ~€rCá“héteröoiklusos és -GrCg alkil-(C2"C8 hétérödklti} csoport közül választjuk; R<f jeíéhtését: -Ή, -CrGs alkll, -Gg-Gg karfeocikísl, -CHCrC-s alkl}, -árit, -CrGg àlkiMÂ: -Cí:~Cs aikiMGA karboetktil), *£A helereeiklll és -CG-Gg aiktt--C03~ C8 héteroclktii) csoport közűi választjuk, ahol; R&amp; jelentését --hl és -metll csoport közül választjuk; vagy R4 és összekapcsolódik, jelentésűk -· <CRSRV képleté csoport, ahol R® és Rö jelentését függetlenül -H, CrC« alkll és -Gg~Gg karbociklil ostort közül választjük, és n értékét 2, 3: 4, 6 és 6 közül választjuk, és gyűrűt képeznek a szénatommal amelyhez kapcsolódnak; R6 jelentését -H és -CrCe alkll csigert közül választjuk; R? jelentését -R, -C,-Cs alkll -C3-s kafhoolkll -G-fCrCg alkll), -aril, -Ci-Ga alkii-aril, -G^-Ctg a!kíl-(CrG8 karbocikill); -Gs-Gs hetefocikrli és -Ui-G® aHdlH[Gs~C8 heteroösklM) csoport közül választjuk; mindegyik Rs jelentését, függetlenül, 4fy -GR, -G-j-üg alkll; ~GrG8 karPoeiklil és -OüCrCg alkll) csapod közül választjuk; jelentését --H és CrC§ alkll csoport közül választjuk; R'h jelentését -H, -OH, -NH2, -HHR14, ~N(R14)2í ~CrC8 alkll, ~CrCa karboolkiil ~ O-jdrCg alkll):, -aril -c^r-Gg: eskü-árit, álkii-yóg-Gg, káfbüciklil), ~Gs~Gi heteroaklil és -Ct-Gs alklHGg-Ga heterocikíi!) csoport közül választjuk; vagy Rn jelentése oxigénatom, amely a szénatommal együtt, amelyhez kapcsolódik, karfeonllegységet (G«Ö| képez, és az ezen a szénatomon levő hidrogénatom a (C--Ö) csoportban levő kettöskőtés egekével van kicserélve; mlndegysk Ru jelentésÉI:, függetlenül, -aril és 4^0¾ beteroeíklll lőport közöl választjuk; R1Ä jelentését hidrogénatom, -OH, ~N:H2, NNR'4 -N(Rhj2; ~CrCs a&amp;H, -C3-Cs karbocikiil, -O-ißr^B: alkil), ~®ák «ÄFirii, -atktt^CirCçè karboclklll), «CtrCe hetérooikiil és -aikiMCrCs hetemclki) csoport kgzui választjuk; mindegyik Be jelentésé, függetlenül -H. vágy -CrC8 alkíl csoport;
Bejelentése képleté csoport, aboi mihdegylk Ä jeléntêse. függetlenül,, anánosav egység-'Ύ- jelentése távfarté (spacer) egység; w jelentése egész szám, amelynek értéke 0 - 12: y értéke Ű, 1 vagy 2; és A’ jelentésit a következők közül választjuk:
ahol G jelentését -¾ *Br, 4, -ö-mezl és -ö-tozil csoport közül választjuk; j jelentését -Cl, -Ütr, -I, 4v~OH -O-N-szukdimmid, ~044~nitrafenll), *0--pehtaf!:uörtenil:l Ortetratluorfenll és -0-0(0:)-OR^ csoport közül
Rv jelentését -Cr-Cio alkiiéo- 4^-0¾ karboçikfo^ 4M^rCs alkil)-, -ariién-, -0-r
Gie alkiién-arttém, -anién-€5--Cíö alköén-, ~C$~Cm aMén^&amp;s karteÄloh -(C*€* karlsoeikio}-CrCio alkflém, 4Ä betereoskfe-, -€rOi0 alkilén-(C3-ee heterocikloh -(C;rCrheterocskk>}-€ i -C i o-alkHén-, -(GHaOHgÖjr as (GH2GHaO)rGHr csoportok közöl választjuk; ahol r jelentése egész szám, amelynek értéke 1 ~~ 1Q: és rV° jelentése -CVCs atksl- vagy -aril csoport POÜI Az olyan Ili képlete vegyilek amelynek szerkezete
olyan vegyülel amely alkalmazható iatéanyag^osszekéti-llgandgm koniugátum kláiákltására a jetan találmányt» való alkalmazásra. |0ÜS§| A IM képletek szerinti vegyületek alkalmasak fék, autoimmun betegség vagy fertözéses betegség Kezelésére vagy megelőzésére állat esetért. |00iÖ| A háfóanyag-összekőtö-figaeöum konjugátumban levő összekötő egység összeköti a hatóanyag egységet és a ligandiim egységet, és képiele: ahol
~A~ jelentése stretcher (nyújtó vagy feszíti} egység; a értéke 1; mindegyik -W- jelentése, függetlenül amfnosav egység: w jelentése egész szám, amelynek értéke, függetlenül 2 ---12; -Y- jelentése önfeláldozó távtartó (self immolatlve spacer) egység; és y értéke 1 vagy 2.
&amp;ΛΛ -, A STRETCHER EGYSÉG |0Öf1| A stretcher egység (-A-) egy lígandum egységet kapcsol egy amínosav egységhez (-W-). E tekintetben egy figaockim (L) tartalmaz olyan tunkotés csoportot, amely egy stretcher funkciós csoportjával kötést tud képezni Alkalmas funkciós csoportok, amelyek egy ligand úrnőn akár természetesen Jeten felnek, akár kémiai átalakítással hcshaték létre, például a szulitlifil-- amíno-; :Uémml~x. JmrâaxS-, szénhidrát anomer hidmxiiesoportja és a karboxHosoportok, Előnyös íigandurrteunkciés csoportok: a szulfhidrih ás az arntnoosopcrt. Szufhidhtcsopodok kialakíthatók egy llgandoni intmrootekaláris diszaid·-kétásénak redukciójával, Más módon szulfhldriicsopörtök kialakíthatók egy iígaodurn lizinvootekijiarésze aminocsoportjanak reakciójával, :2drnÍnöfíolán (fraut-reagens) vagy más szüli híd alcsoport kialakítására szolgáié reagens segítségéve!, pplj Egy kiviteli alak szerint a stretcher egység: kötést képez a llgapdem egység kénátomjávai A kénatom származhat egy tsgandum szulfeídhicsopedjából. |ÍÓi3J A stretcher egység a következő képletnek fele! meg:
s.4,2.. m jmmmm egység piB4J Az amlnosav egység (~W~) a stretcher egységet a távtartó (spacer) egységhez köti, ha a: távtartó egység. @Af)w képlete'
(VII) a hol R?ö Jelentése IzOproplIdsdport, és R*’1 Jelentése: (OH ,ΑλΝ H C O N tY képlete csoport. piiil A távtartó egység (-Y-) egy amlnosav egységet köt a hatóanyag egységhez. A távtartó egység önfeiáldozá -Yy·· olyan p-aminobenzlhalkohol (PAS) egység (lásd: a 2, reakclóváziatet), ahol %} nincs jelen, azaz m értéke 0, Egy önfálaliozó távtartó egységet tartalmazó találmány szerinti vegyidet felszabad ithtetite te -Û egységét anélkül, légy szükség tenne külön hidroílzáló lépésre. -Y- olyan RAB csoport:, amely -WA~ egységhez kapcsolódik a RAB csoport smino-nltrogénjén keresztül és közvetlené! kapcsolódik a -D egységhez egy karbonâtcsoporton keresztül. Anélkül hogy elmélethez ragaszkodnánk, a 2. reakcióvázlaton bemutatnak egy lehetséges mechanizmust a hatóanyag felszabadulására a PAB-esoportról amely közvetlenül van csatolva a -D egységhez egy karbamáfcsoporion keresztül 2. reakcióvázlat
ahol Qm nincs jelem azaz m értéke ö; és p értéke 1 - körülbelül 20, |üü#@l A távtartó egységet fYr) a (X) képlet szemlélteti
ahol Qm nincs jelen, azaz m értélre Q.
SJ. A HATÓANYAG EGYSÉG piSTJ -D jelentése hatóanyag egység, amely tartalmaz olyan mírogénaiomot, amely képes kétest kialakítani a távtartó égyieggei!:;hiy™1 vagy 2,
SJ. A UGANPUM EGYSÉG fOM! A ligandurn egység (L-) olyan monoklonaih antitest, amely immunspectiikusan képes kötődni a GD3Ö antigénhez A tigsndum képes kötődni komplexet képezni vagy reagálni egy olyan séitpópglácíón levő maradéklak amelyet terápiásán vagy másféleképpen blolégíáiiagi módosítani kívánunk, A Igaodum ágy működik, hegy a hatóanyag égyaéget az adott megcélzott sejtpopulációhoz száll ltja amellyel a ligandurn reagál, ilyen llgandumok többek között a fe|es hosszúságú antitestek és antitest tagmensek, födifí Egy igandum: egység kötést képez m összekötő stretcher egységével. Egy igaodum egység égy összekötőhöz a ligandurn hetéroafomján keresztül tud kötést képezni, Heteroatomok;,, amelyek jelen fehetnek a ligandurn ogységöetk például kén (egy kiviteli alak szerint egy fíganduro sZulthiddlmsopöfljälöf}, oxigén (egy kiviteli alak szerint egy lígándum karböhih karboxil- vagy hidroxlicsoportjából) és nitrogén (egy kivitel alak szerint egy ligandurn primer vagy szekunder amínocsöporijáböl). Ezek a hetroafomok jelen tehetnek a ligandurn természetes állapotában, például természetben előforduló antitestben a ligandumon, vagy pedig kémiai módositással bevihetők a llgandumha. |01ÍÍ1 Egy előnyös kiviteli alak szerint egy ligandurn szulfhidrilcsoporiot tartalmaz, és a ligandurn egy szulíhídntesoport kénatomján keresztül kötődik az összekötőhöz. mm Másik kiviteli alak szerint a ligandurn tartalmazhat egy vagy több szénhidrátcsoportot, amely(ek) kémiailag módös'ifhaiő{k), hogy egy vagy több szuihidrfeopoíf alakulón ki. A iipandum egység a stretcher egységhez a szufhídmcsoport kénatomján keresztül kötődik, £8182| További kiviteli alak szerint a ligandurn tartalmazhat egy vagy több szénhidíátösopörtöi amely(ek) oxídálhatóck} aídehidesoport(ök} PC NO) kialakításához (lásd: tagozza, et ab, J. Med. Chem. 1989, 32(3),548-55). A megfelelő aldehid kötést képezhet a speicheren lévő reaktiv hellyel, A stretchereo levő reaktiv helyek, amelyek képesek reagálni a igándemön levő karbopllcsoportlaf, többek között, de nem kizárólag, a hidrazin és a hidroxilamin, |0181| Ismertetünk továbbá nem-ímmunreaktív protein, poiipeptid vagy pepiid iigandumekat, ilyenek például a transzferrin, epidermális növekedést faktor („EGE”), bomhezin, gaszfrin, gasztrio-kihoosátö: pepiid, vida®ezka~efadaí| növekedési lektor, 11-2, tL-8. transzformáié növekedési faktorok; („TGE”), így például a TGF-a és TGF-fk vakolnia növekedés! faktor (,,VGF::), inzulin és inzulinszerü növekedési faktor I és || lekének, valamint apoprotein kissöröségü fipoproteinbol. Ρ1δ4| Alkalmazható monokionális antitest ligandumok a CD3Û antigén elleni antitestek homogén populációi. A fontos antigén elleni monokionális antitest (m.Ab) előállítható a szakterületen ismert bármely technika segítségévei, amely hozzájárul, hogy folytonos sejtvonalak tenyészetben antitest molekulákat termeljenek. Ilyenek például, de nem kizárólag, a hibridóma technika, amelyet eredetileg Kohler és Misiéin ismertetett (1975, Nature 256, 495-497), a humán B-sejt hibridóma technika (Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4: 72) és az EVE-hibddéma technika (Cole et al., 1985, Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Lies, Inc., pp. 77-96). Ilyen antitestek bármely immunglobulin-osztályhoz, így például IgG, IgM, IgE, IgA és igD osztályhoz és ezek bármely alcsoportjához tartozhatnak A jelen találmányban alkalmazott mAh-okat termelő hibridóma tenyésztheti m ¥É®. vagy in vivo P1Ö5| Alkalmazható monokionális antitest hgandumok például, de nem kizárólag, a humán monoklonahs antitestek vagy ksméra humán-egér (vagy más faj) monokionális antitestek. Humán: monoklonales antitestek a szakterületen ismert számos technika bátmélyíkévei: elöá!Hihetők (például Teng et ai,, 1983, Proc, Natl. Acad. Sel,: U.SA 80, 7308-7312, Kézbőr et al., 1983, Immunology Today 4, 72-79; és ölsson et al. . 1982, Math Enzymol. 92, 3-18), [0108] A ligandom lehet bispeciflkus antitest Is. Bispeclflkus antitestek előállítására szolgáló eljárások ismertek a szakterületen. Teljes hosszúságú bispecífikus antitestek hagyományos termelése két immunglobulin nehézlánc-könnyűíánc pár együttes expresszáltatásán alapszik, ahol a két lánc különböző speolficitássat rendelkezik (Misteln et al,, 1983, Nature 395:537-539). Az immunglobuln nehéz-· és könnyüláncok véletlenszerű készletének köszönhetően ezek a hibridomák (kvadremák) 10 különböző antitest molekula potenciális keverékét termeik, amelyek közül csak egy rendelkezik a korrekt hispecifikus szerkezettel. A korrekt molekula tisztítása, ami rendszerint affinliás-kromatr^ráfiás lépésekkel történik, meglehetősen nehézkes, és a termék hozama alacsony.
Ehhez hasonló eljárásodat ismertetnek: a WO 93/08829 mámé némzeíkőzi közzétételi Iratban és a követkézé szakífödalmí helyen; Trauneckér et al, EiíVIBÖ M 10:3665-3659 (1991:^ 1010¾ Ettől éltérő és előnyösebb megközelítés szerint a kívánt kötési spédfíbiflsökkaí (antitest-antigén kötőhelyekkel) rendelkező antitest variábilis öornénekát füzionáííaijuk Immunglobulin konstans dómén szekvenciákhoz. AiÜZiő előnyösen immunglobulin nehézláné konstansdoménnei történik, amely a csukló:, Ükt2 és OH3 régióknak legalább egy részét tartalmazza. Előnyös, ha az első nehézíáne konstans régió (CH1), amely tartalmazza a kőnnyüiánc kötéséhez szükséges helyet, a tuzÄ legalább egyikében jelen van. Az immungídbutln nehézlánc fúziókat, valamint kívánt esetben az immunglobulin könnyűláncot kódoló DNS-eket különálló ekpresszíós vektorokba inszertáljuk, ás együtt-traoszfektáljuk egy megfelelő gazdaszervezetbe, Ez nagy flexibilitást biztosit a kérőm: polpepíid-fragmens kölcsönös arányának beállítására nézve olyan kiviteli alakok esetén, amikor a három poíipepiidiáncot nem egyenlő arányban alkalmazzuk az optimális hozam biztosításához kialakított konstrukcióban. Lehetséges azonban két vagy mindhárom polípeptidlánc kódoló szekvenciáját egyetlen expresszios vektorba ípszertálni, ha legalább két azonos arányba! vett pöipepiidlánb expipsszíőjá magas hozamot eredményez, vagy pedig ha az arányoknak nincs küiönöséhb jelentőségük, [0100] 1 megközelítés egy előnyös kiviteli alakja esetén a bispeciíikus antitestek hibrid immunglobüin nehéziáncot tartalmaznak, egy első kötöspeclflcltással az egyik karon, valamint hibrid Immunglobulin nehézlánc - könnyüiánc párt (amely egy második köiőspecífioitást bíztoslt| a másik karon. Ez az aszimmetrikus szerkezet megkönnyíti a kívánt bispedikus yegyüiei elválasztását a nem-kivánt immunglohutinlábö+kom^ mivel az a tény, hogy az immunglobulin: könoyiijánc a bíspeeifikus molekulának csak az egyik felében van jelen, biztosítja az elválasztás könnyű útját (VVÖ 94/04690 számú nemzetköz! közzétételi irat). £0109] Bispecikus antitestek létrehozásának további részleteit lásd például a kővetkező szakirodalmi helyen. Suresh et al., Methods in Enzymology, 1916, 121 210 ilyen technikák segítségével hispedf'íkus antitest ligandumok Itlfthatók elő az itt meghatározott betegségek kezelésében vagy megelőzésében történő alkalmazáshoz. pt10| Bifunkelós antitesteket szintén ismertetnek az EPA-01Ö538S számé ©urôpai szabadairni közzétételi iratban. Amint e hivatkozásban ismertetetik, hibrid vagy bifunkciós antitestek kialakithatók biológiailag, azaz sejtíúziós technikákkal, vagy pedig kémiailag, különösen tériálősítö fkeresztkőtésí képzői szerekkel vagy diszulfidhlö-kiilakítü reagensekkel, és tártaimaihathak teljes antitesteket vagy azok ífagoienséi!. ilyen bibtid antitestek előállítására szolgáló eljárásokat ismertetnek például s WC) 83/03679 számú nemzetközi közzététel iratban: és az EFAÄ17B77 száhiü európai szabadalmi közzétételi iratban .
[0111] A ligandum lábét egy antitest olyan funkcionálisán aktiv fragmense, származéka vagy analógja, amely immunspeciíikusan képes kötődni a CD30 antigénhez, I szempóntból a junkcioniHsan aktiv" kifejezés azt jelentő hogy a: fragmens, származék vagy analóg képes anti-antHdlötiposos antitestekei kiváltani, amelyek ugyanazt az antigént Ismerik fel, mint amelyet azon antitest ismert fel, amelybii a fragmens, származék vagy analog ered Közelebbről· egy előnyös kiviteli alak esetén az immunglobulin molekula Idioipnsának aniigenstása fokozható a keret· és C DE »szekvenciák deléciôjàval.. amelyek az antigént specifikusan felismerő ÇDR szekvenciához viszonyítva ^terminális irányban helyezkednek el. Annak meghatározasára. hogy mely CDR-szekveneiák kötődnek az antigénhez,, alkalmazhatok CDR-szekvendákaí tartalmazó szintetikus peptidek sisei|íá^|é?sí vizsgálatokban, bármely, a szakterületen ismert kötési vizsgálatban (pl. BIA-mag vizsgálat). P11l| További alkalmazható ligandumok. többek között olyan antitestek fra|mense|t így például, de nem kizárólag, F(abf)2 íragmensek, amelyek, tartalmazzák i varsák Hm régiót, a könnyiláhe konstans régió és a nehézlánc CH1 dómén előállítható az antitest molekula pepszines bontásával, valamint Fab fragmensek, amelyek létrehozhatók a F(ab’)2 íragmensek diszulfid hidjainak redukálásával. További alkalmas ligandlumol még antitestek nohézlánc és könnyülánc dimerjei, vagy ezek bármely mihimálís fragmense, Így például Fvs vagy egyszálú antitestek (;$GA~k) (például ahogyan a következő szakirodalmi helyeken ismertétik: 1)8-4946778 számú szabadalom; Bird, 1988, Science 242;423-42; Huston et ah. 1988, Rroe. Nati Acsd, Síi USA 85:5:879-5883; és Ward et al, 1989, Nature 334:544-64), vagy pedig bármely más, az antitesttel azonos speoiiolíást mutató molekula.
[0113] Ezenkívül rekomölháns antitestek, például az olyan kiméra és humanizált monöklonáfls antitestek, amelyek tartalmaznak mind humán, mind nem-humán részt, és amelyek Élfállfclók standard rekombináns DNS technikák segítségévei, szintén aikáimaz Itgadddmök· Ksméra antitestnek nevezünk olyan molekulát, amelyben a küiöhhözl részek iúlénMzb állatfajokból származnak, tgy például azok, amelyek vafíáéltS: régiója egér mopokiöháiis eredetű,: konstans régiója padiig: humán Immunglobulin eredetű: fiasd például- US--4818567 számú szabadalom, Cabilly et si.;; és 08-4816397 számú szabadalom, Boss et ai). Himianizált efrifestékhék nevezünk olyan, nem-humán faitól származó antitest molekulákat, amelyek rendelkeznék egy vagy több, nem-humán fajtól származó komplementaritást meghatározó régióval (GDR) és humán immunglobulin molekula fceretrégiôjàva! jtásd; 1):8-5585089 számú szabadalom, Quaenf. Ilyen kimére és humanizált mopoklonátis antitestek eiöáilfthatók a szakterületen isméd rekombináns DNS-techníkákkal, például a következő szakirodalmi helyeken ismerteteti eljárások se||ségévei: VVO 87/02671 számú nemzetközi közzétételi irat; 184187 számú európai szabadalmi közzététel!: irat; 171498 számú európai szabadalmi közzétételi irat. 173494 számú európai szabadalmi; közzétételi irat;; Wö 86/01533 számú nemzetközt közzétételi írat; US-4816567 szárnu szabadalom; 125023 számú európai szabadalmi közzététel irt Berter et ai., 1988, Science 240:1041-1043; üu et al., 1987, Proc, Natl. Acad. Sei. USA 84:3430-3443; Üu et ai., 1987, J, Immunol. 130:3521-3528; Sun étal,, 1987, Proc. Natt,: Acad, Soi. USA 84:214-218: Nishimura et al, 19Í7, Cane. Res. 47:999-1605; Wood et al., 1988, Natúré 314:448-44:9; és Shaw et al, 1988. J. Natl. Cancer Inst. 80:1553-1559; Morrison, 1985, Science 229:1202-1207; Oi et ai, 1988, SsoTechnlques 4:214; 08-5225539 számú szabadalom, Jones et al., 1988, Nature 321:582-528; ¥erboëyan et al. fl988) Science 239:1834; es Beidler et al.. 1988, 3, immunoi. 141:4053-4060. |0114] A teljesen humán antitestek különösen kívánatos ügandumok. Ilyen antitestek eléállthitók: öiyan transzgecikus egerek alkalmazásával; amelyek nem képesek endogén tmmungfobultn nehéz- és könnyOlánc géneket expresszáíni, de amelyek képesek expresszálnl humán nehéz- és könnyűlánc géneket. A trahszgenikus egereket normal módon immunizáljuk kiválasztott antigénnel, például a találmány szerinti pofipeptid egészével vagy egy részével, Az antigénnel szembeni monokionáiis antitestek előállíthatok szokásos hlbrídóma technológia segítségévei. A franszgenlkus egerekben elhelyezkedő humán Immupgjoboln transzgének átrendeződnek a B-séjt differéhciálodás során, majd osztály-váltáson és szOm&amp;Wm® mutáción mennek kereszti!, így, ilyen technikák alkalmazásával előáifthatók terápiásán alkalmazható |gC|, IgA, IgM és IgE antitestek. Humán antitestek előállítására vonatkozó éken faóhhőtggia áttekintését lásd a következő szakirodalmi helyen: tonlérg and Huszár (1985, int Rév Immunoi. 13:65-83). Humán antitestek és humid monoklohalis antitestéi' előállítására szolgáié ezen: technológia !$ ílyéh antitestek előállításához való profökctlok: részletes tárgyaláshoz lásd példáuí a kővetkező szakirodáim! helyeket: 118-562612:6 számú szabadalom; US-5633425 számú szábadálőm; US-558S825 számú szabadalom; US-S681016 számé szabadalom; és US-5545806 számú: szabadalom Más humán antitestek kereskedelmileg beszerezhetők példáéi az Abpnix, Inc, (Freemoni CA) és Genphafrn .(San Jose, CA) cégektől.
[0115J Olyan teifesen humán antitestek, amelyek egy kiválasztott epkopot ismernek fék létrehozhatók olyan technologie segítségével, amelyet „irányított szelekciódnak nevezünk. E mepözeíttés szerint egy kiválasztott nem-humán monoklonális antitestet, például egy egér antitestet használunk arra, hogy Irányítsa az ugyanazon epitőpoí felismerő: teljesen bumáh antitest szelekcióját ihiespers et al. (1994) Biotechnology 1:2::8:18-006):, |Û116] Mas kivitel alakok esetén a ligand um egy antitestnek vagy funkcionálisan aktív fragmensének fúziós proteinje, példáuí amelyben az antitest kovalens kötésen (pl. peptidkötésen) keresztül az N-termináisnii vagy a C-íerminálísoál van fuzíonáííaíva egy másik protein (vagy annak részé, előnyösen a proteinnek legalább 10, 20 vagy 50 aminosavbol álló része) amínosav·szekvenciájához, amely nem az antitest. Az antitest vagy annak fragmense előnyösen kovalensen van kapcsolva a másik proteinhez a konstans dóméra NHerminátisanií. p117| Ä ligandum antitestek közé tartoznak többek között olyan analógok és származékok, amelyeket módosítottunk, például bármilyen típusú molekula kovalens csatolásával amennyiben az Ilyen kovalens csatolmány lehetővé teszi, hegy az antitest megtartsa antigénkotő ihimunspeOificításat, így például, de nem kizárólag. az antitestek származékai és analógjai közé tartoznak azok, amelyeket tovább médosÉööunk, például gllkozilezéssél, aceöíezéssel pegllezéssel, foszíoníezéssel, athídálással Ismert yédo/blokköíő csoportokkal való: szârrnazêkképzéssef, proteolikús hasftissal, eetlutaris ligandum egységhez vagy más proteinhez való kapcsolással stb. A számos kémia! módosítás bármelyike végrehajtható ismert technikák segítségével így például, de nem kizárólag, specifikus kémiai hasítással aceüézésssl fórmiiezéssel tunikamioin metabotikus szintézisével stb. Ezenkívül az analóg. vâÿf mémmék tartalmazhat egy vagy több nem-természetes amínosavat is. jéllBj A ligandem: antitestek közé tartoznak többek között olyan antitestek, amelyek azon arblnosav-maradekokbao tartalmaznak módosításokat fpi helyettesítést, dsléciot vagy addíclótl amelyek Fe-receptorokkal lepnek kölcsönhatásba.. A: iipadom antitestek közé tartoznak különösen olyan antitestek, amelyek: módosításokat tartalmaznak olyan aminosav-rnaradékokban, amelyekről kimutattak, Hogy részt vesznek az Fc dómén és az FcRn receptor közötti kölcsönhatásban (lásd például: VVO 87^34831 számé: nemzetközi közzétételi trat). Ráksejt antigénre immunspecifikus antitestek: kereskedelmileg beszerezhetik például a Öénenteeh (San Francisco, ISA) cégtől vagy pedig előállíthatok bármely, a szakterületén jártas szakember számára Ismert eljárással például kémiai SÉirtéztssei vagy rekombtnáns: expressziis feehnikikkal. Ráksejt anigénre immunspecifikys antitesteket ködőid oukleoidSzákvéhöia beszerezhető például a tBéhBank adatbázisból vagy ehhez: hasonló adatbázisból irodalmi publikációkból vagy pedig rutin klónozás és szekvenáiás útján.
Bizonyos megvalósítást mód szerint rák kezelésére vagy megelőzésére: szolgáló Ismert aetkCCÄ antitesteket alkalmazunk a találmány szériái készítményekkel és módszerekkel: kapcsolatosan. A CD30 antigénre immunspeoilkus antitestek kereskedelmileg beszerezhetők, vagy pedig eídáiiíihaték bármely, a szakterületen jártas szakember számira Ismert eljárással, például kémiai szintézissel vagy rekomhináns expresszibe technikákkal C03Ô antigénre immunspecifikus antitesteket kódoló nukleotibszekvenoia beszerezhető pékiáui a GenÖank adatbázisból vagy ehhez hasonló adatbázisból irodalmi publikációkból vagy pedig rutin klónozás és szekvenáiás utján. p12Öj A találmányban alkalmazhatók €030 antigén ellen! mAb-k, például ACW fiövren, M. A, Olsen, K. J., Cheng, 1., Avila, ö„ and Podack, E. R. "Functional effects of €030 m a targe granular lymphoma ceti Ine ft*' X Immunol., 151, 588i-50Ô6,: 1993). Számos további, tumorral kapcsolatos antigénhez kötődő tnternatizatő: antiest ismert, amelyekről áttekintő publikációkban beszámoltak IFranke, A. E., Sievers, £., L, and Scheinberg, 0, A,, "Cell surface receptor-targeted therapy of acut myeloid leukemia: a review" Cancer Biother Radiopharm. 2000,15. 459-76; Murray, J. 1., '‘Monoclonal antibody treatment of solid tumors: a coming of age" Semin Oncol. 2000, 27.. 64-70; Breitling, F., and Oubei, S , Recombinant Anfifoedles, Jofvn Wley, and Sons, Mew York, 1998).
[8121} A találmányban való alkalmazáshoz megfelelő antitestek előállihatők bármely, a szaikteruleten antitest szintetizálására ismert elírással, különösen kémiai szintézissel vagy rekombináns expresszléval, és előnyösen rekombmáns exgmsszlos technikákkai: állítjuk ezeket elő. 8.6.1 p12£| A találmány szerinti figandum antitestek etöáTíhatok bármely, a szakterületén antitestek szintetizálására ismert eljárás segítségével, különösen kémiai szintézissel vagy rekombináns expresszióval és előnyösen rekomblnans expressziős technikával állítjuk ezeket elő [0123] A llgandnm: antitesték vagy azok fragmense, származéka vagy analógja rekomblnáns exgressziéjához olyan nukteinsavat kell konstruálni, amely kódolja az antitestei Ha az antitest nukieoiíd-szekveoeiája ismert, az antitestet kódoló nuklélnSáv összeállítható kémiailag szintetizált oligonukleotldokbol (például amint a követkéző sakimdalmi helpn ismertetik; Katmeter et al, 1994, BloTechniques 12:242}, amelynek során m antitestet ködőié szekvenciák részelt tartalmazó, részben átfedő oiigonukteofidokai szintetizálunk,; ezeket osszeotvaszljuk és figlfuk, majd a ligái öligonukleotidokat FÜR segítségével amplSká|yk, 101241 Más módon, antitestet kódoló nnkleipsáv molekula iuaíakihaíő megfelelő forrásból, Ha az adod antitestet kódoló nuklelosavat tartalmazó klón nem áll rendelkezésre, de ismert az antitest szekvenciája, az antitestet kódoló hukleinsáv létrehozható megfelelő forrásból (például antitest cidNB könyvtárból vagy bármely az Immunglobulint expresszálő szövetből vagy sejtekböi létrehozott cDNS könyvtárból} PCR-ampliflkáoló segítségével a szekvencia 3;- és ő’-végéhez hibhdizálni képes szintetikus primerek alkalmazásával, vagy pedig klónozás segítségével az adott génszekvenciára specifikus oligonukleoiid-próba alkalmazásával.
[81211! A €039 antigénre specifikus antitestek bármely, a szakterületen ismert eprássai létrehozhatók, például monoklonáls antitestek létrehozásával, pl. ahogyan Kohler és Misteln ismertette (19211,, Hátúm 256:495-48?}, vagy pedig ahogyan Kézbőr és munkatársai (1983, Immunology Today 4:72:} vagy Cola és munkatársai Ismertették (1985 in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Älan R. Mss, lec., pp, 77-98). Más módon az antitestnek legalább a Fab részét kódoló klón nyerhet# Fáh-ekpresszáló könyvtárak szknneíéséveí (például ahogyan a következő szakirodalmi helyen ismertették: Huse et ai , 1989, Science 248:1275-1281) olyan Fab-fragmensek Honjaira nézve amelyek az adott antigénhez kötődnek, vagy pedig antitest könyvtárak szknneíéséveí (lásd például: Ciackson et si, 1991, Nature 352:824; Hane ét al, 19S7 Free. Natl. Acad. lei. USA 94:4937). |012i| Na reh#lkezúhk az antitestnek: legalább a variábilis doménjét ködeié nukleinsav-szekveneiávsl, akkor ez bevihető olyan vektorba, amely tartalmazza az antitest konstans régióját kódoló nnkleotid-szekvenciaí (lásd pl,.: WO 88/05807 számú nemzetközi közzétételi irat; WC) 88/01030 számú nemzetközi közzétételi irat: U§~i122484 számú szabadalom). Hozzáterhetök olyan vektorok, amelyek tartalmazzák a teles könnye- vagy nehézláncot ami lehetővé teszi a teljes antitest-mölekolá expresszlóját Ezután az antitestet kódoló nekleinsav alkalmazható az olyan nukleotid-heiyettesitések vagy deléciók bestéiére, amelyek szükségesek ahhoz, hogy helyettesítsünk (vagy törőpnk) egy vagy több variábilis régióbeli dsziein-oiaradékot, amelyek) reszt vesz(nek) láncon belüli dlszyidtetdban olyan amlnosavval, amely nem tartalmaz szuiíhidrilcsoportot. Ilyen módosítások bármely, a szakterülaían ismert, adott mutációk vagy deléciók nakleotid-szekvéneiába történő bevitelére szolgáló eprással, Így például, de nem kizárólag, kémiai mutagenezissel is ín mim helyspecifikos muiagenezissil (Hutchinson el ah, 1978, J. Biol, Chem. 253.8551) végrehajthatok. |8127j Ezenkívül alkalmazhatók Jóméra antitestek* előállítására kifejlesztett technikák (Borbsen et al, 1954, Proc, Natl. Acad. Sei. 81:851-855; Heuberger et al, 1984, Nature 312:804-181; Takeda et al, 1985, Nature 314:452-484) megfelelő antigén specifieitássál rendelkező egér antitest molekula génjeinek és megfelelő biológiai aktivitással rendelkező humán antitest molekula génjeinek összekapcsolása útján. Kiméra antitestnek olyan molekulát nevezünk, amelyben a különböző részek különböző állatfajokból származnak, ilyenek például azok, amelyek rendelkeznek egér monckíonálls antitestből származó variábilis régióval is humán immunglobulin konstans régióval, például a humanizált antiæstek. P12i| lias módon,, egylancú antitestek előállítására leírt technikák (US~40e47?8 számú szabadalom: 3;rd, 1988, Science 242:423-42; Huston et al, 1:188, Proc. Natl. Acad. Sel. USA :85:5879-8888: és Ward et al, 7989, Nature 334:544-54) adaptálhatok egylánce antitestek előálltására. Egylancú antitesteket úgy alakítunk kl, bogy m Fv régió nehéz- és kbhnyüiâne ffagmenseít egy imloosav-hídon keresztül összekapcsoljuk, így egyiáncú poíipephdet kapunk, Funkcionális Fv íragmensek E. coftáb têrténô összeállításának technikái szintén alkalmazhatok Pkeria et ai,, 1981, Science 242:1038-1041) [Ö129J Adott epitöpokat felismeri antitest~íra|men$ek létrehozhatók isméit technikákkal Ilyen fragmensek péíldaut, de nem kizárólag, a F|ah!}2 íragmensek, amelyek előállíthatok áz antitest molekula pepszlnes hóntásávál, valamint a Fab Irgamensek, amelyek létrehozhatók a F(ab:)2 íragmensek dlszutidhídjainak redukálásával [018i| Ha rendelkezünk egy íkjandum antitestei köddé hekleinsav-szekvenciával, az antitest termeléséhez való vektor a szakterületen ismert technikák alkalmazásival) rekomhináns ÛHS technológia útién előállítható. Ä szakterületen jártas szakemberek számira jól Ismert eljárások alkalmazhatók es^fesszjós vektorok konstruálására, amelyek az antitestet kódoló szekvenciákat és megféíiió transzkripciós és transzlációs kontroli-szekvenciákat tartalmaznak. Ilyen e|árls#k például az in vitm rekomMnáns DNS technikák, szintézis technikák és ín vivo genetikus rekombináció. Lásd például a következe szakirodalmi helyeken isrnalétól technikákat: Sambrook ét al. (1990, Molecular Cloning, Ä Laboratory Manual 2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY) és Ausubel et ai. (eds., 1998, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley &amp; Sons, NY). pi31J Egy antitest nuktecdrd·szekvenciáját tartalmazó expresszibe vektor vagy egy antitest nokieotid-szekvencíája szokásos technikákkal fpi. elektroporáctóvaí, llposzómás transzfékcióval és kalcium-toszfátos kicsapással) átvihető gazdasejtbe, és azután a transzfektilt sejtek szokásos technikákkal tenyészthetik, hogy antitestet termeljenek. Adott megvalósítási módok esetén: az antitest expresszíóját konstitutív, indukálható vagy szövet-specifikus promoterrei szabályozzuk. i$132| A rekambinans ligandum: antitest expresszilfatásához alkalmazott gazdasejtek lehetnek baktériumseftek, például EschemMa coli vagy előnyösen eutcanota sejtek, küidndsen teljes rekombináns immunglobulin molekula expmsszáltatásáhöZ. Külbnbsen: emlős sejtek, például kínai borosig petefészeksejtek (CHO) egy vektorral, például humán citomegalovirus fi intermedier korai gén promoter etemével együtt hatékony expresszibs rendszer tmmunpobuiinokhoz (Foecking et al., 198, dene 46:101;; Coekett et al.. 199¾ Stoïeehnology 1:2), pliS] :¾ immunglobulin figandornok mpmmÉâMtàsém különböző gazda™ expresses vektor rendszerek használhatók. Az ilyen gazda-expressziós rendszerek olyan eszközt: képviselnek, amelynek segítségével az antitest kódoló szekvenciái: termeihetok és utána tlsztlthatók, de olyan sejteket is képviselnek* amelyek a megfelelő nukieotld kódoló szekvenciákkal transzformálva vagy tránszfektálvá: m expresszálhak iígandum immunglobulin molekulái Ilyenek például, de nem kizárólag, a mikroorganizmusok, például a baktériumok (pl, £ mii és S. suMÊsl, amelyek immunglobulin kódoló szekvenciákat tartalmazó rekombináns bakteriofág DNS sei, piazmid DNS vagy kozni id DNS expresszős vektorral vannak transzformálva: élesztők (pl. Sacchammyees* PMiía), amelyek Immunglobulin kódoló szekvenciákat tartalmazó takontbináns élesztő expressziós vektorokkal vannak transzformálva; rovarsejt-rendszerek, amelyek immunglobulin kódoló szekvenciákat tartalmazó rekombináns vírus expressziós vektorokkal (pl. bacuiovírussai) vannak fertőzve; növényse|brendszorek, amelyek immunglobulin kódoló szekvenciákat tárlatmazÉ rekombináns virus expressziós vektorokkal (Ilyenek pl. kariét mozaikviíUS: (CabfV) és dohány mezafkyírys (TMV)) vannak ledóZve, vagy pedig immunglobulin kódoló szekvermiákat tartalmazó rekombináns piazmid expressziós vektorokkal (pl. Ti plazmiddai) vannak transzformálva; vagy emlős sejt rendszerek (pl, COS. CHO, BH, 293. 2931, 316 sejtek), amelyek emlős sejtek genonijáfoól szármázó promotereket (pl metallotionein promotert) vagy emlős vírusokból eredő promotereket (pl. az adenovirus késői promotert; a vakéin la vírus 7.5K promotert) tartalmazó rekombináns expressziós konstrukciókat tartalmaznak.
[0134] Bakténumrendsxerek esetén előnyösen számos expressziós vektor választható az expresszálendó antitest előirányzott feihasznáSásitől függően. így például, ha nagy mennyiségű ilyen protein termelendő, olyan imkioípk tehetnek kívánatosak, amelyek olyan fúziós protein termékek expressziójának magas szintjét irányítják, amelyek könnyen tlsziithaiók. Ilyen vektorok például, de nem kizárólag, az E botéhoz pUR278 expressziós vektor (Ruther e? ab 1933, EMBO J. 2:1791), amelyben: az antitestet kódoló szekvencia egyedileg: llgáibató a vektorba iac Z kódoló rég sóval keretben, úgy hogy fúziós protein: termelődik; a pIN vektorok (Inouye &amp; foduye, 1885, Nucleic Adds Res. 13:3101-3109; Van Heeke &amp; iottoStir, 1989, j. Biol Chem, 24:5503-5509}; és hasonlók pGEX vektorok szinténaikairriazhatok idegen polipeptidek expmsszáitatására. fúziós proteinekként glutafsorr S-iranszferázzai (GST). Ilyen fúziós proteinek általában oldhatók, és fcsáft sejtekből könnyen tisztíthatok gíutatien-agaróz gyöngékből áiiő mátrixra való abszofhealtatas és kötés után szabad glutatton jpleolÉtében végzett duálissal â pGEX vektorokat úgy tervezték, hogy tartalmaznak trombint vagy Xa faktor protsáz hasiéhelyekef, tgy a klónozott ©élzott géntormék felszabadítható a Olt* maradékról P138| Bovarrendszerhen idegen gének expresszáítaiásához vektorként Aüíögrapim wÊarmm nukleáris pöllhedrozís virus! |ΑοΝΡ¥} vagy Qrosaphüa M&amp;iamgaMméB származó analóg: vírust használunk Λ vírus Sp&amp;áaptera fmgípertím sejtekben növekszik. Az antitestet kódoló szekvencia egyedileg klónozható a virus nem-esszencláíis régióiba (például polihedrin génbe} és helyezhető: AcbíRy promoter (például a polihedrin promoter} kontrollá alá.
[0136] Emlős gazdásepek esetén számos vífusalapú expresszién rendszer haszniihato. Olyan esetekben, ha adénovtrest alkalmazunk expresszién vektorként, a fontos antitestet kódoló szekvencia ligálhaió egy adenovirus íranszkfipdos/transzlációs kontroll komplexhez, például a késői promoterhez és hiromösztatő vezető szekvenciához. Ez a kimére gén azutánin vitro vagy in vivő rekombinációvá; inszertálhatő az adenovirus genomba. A virus genom nem-esszenciális régiójába (pl. El vagy E3 régióba) történő leszereld olyan rekómófhlhs vírust eredményez, amely életképes és képes fertőzött gazdaszervezetekben expresszálni az immunglobulin rnolekuiá! (lásd például Logan &amp; Shenk, 1984, Proc. Natl Acad. So. USA 81:355-359). Bizonyos imöiáeiős szignálok szintén szükségesek lehetnek az ínszértált antitosfkóööió szekvenciák hatékony transzlációjához; Ilyen szignálók például az ATG inioiáclös kodon és határos: szekvenciák. Ezenkívül az inioiáclös koclonnak fázisban kail lennie a kívánf: kodon szekvencia leolvasási keretével, hogy biztosítsuk a teljes inszert transzlációját. Ezek az exogen fransziáaós kontroll szignálok és iniciáclós kodonok különböző, akár természetes, akér szintetikus eredetűek lehetnek. Az expresszié hatékonysága fokozható megfelelő transzkripciós enbanszer elemek, transzkripciós temnldátorok stb. beépítésével (lásd: Bittner ef al, 1987, Methods in Enzymof. 153:51-544}.
[0137] imeltétt egy gazdasejt törzs megvaiaszfhato úgy, hogy modulálja az ipspgrtált szekvenciák ixpresszióját, vagy pedig módosítsa és dolgozza fel a fémterméket m adott kívánatos módon: Protein temiékek ilyen módosításai (pl gükoziiezés) is feldolgozásuk (pl. hasítás} fontosak lehetőst: a protein működéséhez, Különböző gazdasejtiknekjellegzetes és sajátos mechanizmusaik vannak á proteinek is géntermékek pöSZOrahsziációs feldolgozásához és módosításához. Megfelelő gazdasejt-vonaiak vagy gazdarendszerek még választhatok úgy, hogy biztosítsák az expresszált idegen protein korrekt médositását és feldolgozását. E célra eukanóia gazdasejtek használhatok, ámelyek: rendeikezjiek oellulátis gépezettel a primer transzkriptum helyes feldolgozásához, a géntermék: glkozílezÉséhez És íosztorHezéséhez. Ilyen emlős gazdasejtek például de nem: kizárólag, CBG, VERY, BH, Hala, COB, MÓR, 283, 2931, 3T3, «38, BÏ483, Hs678T, HTB2, 8T2Ö és Ï47D, CRL7Ö3Öés Bs57B8st, pH38] A rekólibináns proteinek hosszú ideig fertő, nagy hozamot biztosító termeléséhez stabil expresszié előnyös, így például koastmétlfetok olyan sejtvonalak, amelyek stabilan ékpresszálnak antitestet. Vírus eredeti reptikáeót fertalmázé expressziós vektorok alkalmazása helyed. gazdasejtek transzformálhatok megfelelő expresszios kontroíieíemekkeí (pl. promoter, enhanszer, szekvenciák, transzkripciós termináíorok, políadeniiezési helyek stb.) kontrollált ONS~sel, valamint szelektálható markerrel. Az idegen DNS bejuttatását követően a konstruált sejteket 1-2 napig hagyjuk növekedni gazdagított közegben, majd váltok szelektív közegre. A rekombináns plazmáidban levő szelektálható marker a szeiekoióvai szemben ellenállást biztosít, és tehetővé teszi a sejtek Számári, hogy kromoszómáikba stabilan Integrálják a plazmídoí és olyan gócokat képezzenek, amelyek azután klónozhatok és sejlvönaíakká növelhetők. Ez az eljárás előnyösen íhasenáfhstó olyan sejtvonalak konstruálására, amelyek expresszálják az antitestet. Ilyen konstruált sejtvonalak különösen hasznosak lehetnek olyan tumor-antigének szkríneíésébao és kiértékelésében, amelyek közvetlen vagy közveteit módon kölcsönhatásba tépnek az antitest ligandummai. plii] Számos szelekciós rendszer használható, példáéi, de nem kizárólag, B Ifefpes simplex virus timidimkináz (YVígíer et aty 1977, (fell 11:823}, liipoxandn·· guarfin-feszforíboziNranszferáz (Szybalska &amp; Szybalski, 192, Proc. Natl, Acad. Scl. USA :48:202} és adenin-tbszforihozlhimnszferáz (Lovvy et ai., 1980, Cell 22:817} ginek alkalmazhatók tk-, hgprl-, Illetve apri-sejtekben. Anómetaboiií rezisztencia szintén használható szelekciós alapként a következő génekhez; dhfr, amely rezisztenciái biztosit metotrexáttai szemben (Wig 1er et al., 1980, Proc. Nah. Acad, Sei. USA 77:357; O'Hare et ai., 1981, Proe. M0, Acad. Set USA 78:1527¾ g:pts amely rezís|tenói|t: biztosi: míkoíenolsavvai szemben (Mùigan &amp; Berg, 1981, Proc, Nati, Acad. Soi USA 78:2072); ceo, amely rezisztenciát biztosít amínoghkozd G-418-caí szemben (Clinical: Pharmacy 12:488-508: Wa and Wo, 1981, Biotherapy 3:87-95; ïoisfoshev, 1893, Ann, Rev, Pharmacol. Toxicol. 32:573-596: Mulligan, 1883, Science 280:926*932; és Morgan and Andersen, 1988, Ann, Rév. pochem, 62:191-217; May, 1993, TIB: TECH 11(5):155-215) és Aigro, amely rezisztenciát biztosit higmmtelnnel szemben (Santene et ai, 1984, Séné 30.147). Alkalmazhat©, a mkombmâm DNS technológia szakleruielèn: Ismert; szokásos eljárásokat ismertetnek: Ausuhel et al. (eds,, 1993,: Sorrent Protocols: in Molecular Biology, John Wiley A Sons, NY; Kriegler, 1980, Gene transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY); és Dracopoii ét aj. (éds), 1994, Current Protocols In Human Genetics, 12. és 1:3. fejezet (John Wiley &amp; Séns, NY,}; Colberre-Garapin et ai. (1981, J, Mot Biol. 150:: 1| [0140] Az antitest expressziojinak szintje fokozható vektor amptifikációvat pttekintist lásd: Bebbington and Hentschel, The use of vectors based on gene amplication for the expression of cloned genes In mammalian cells in DNA cloning, Vol.3. (Academic Press, New York, 1987)):, Ha egy antitestet expresszáló vektor rendszerben levő marker ampilílkálhato, a gazdasejt tenyészeteben jelen lévő inhibitor szintjének emelése növeli a marker gén kópiászámát. Mlvél az ampfffkált régió kapcsolatos az antitest nukleotíd székvencilpVál az antitest termelése szintén fokozódik (Grouse et ai,, 1983, Mol. Cell,: Biol. 3:257). pi 41] A gazdasejt egyött-transzfoktálhátó két találmány szénnli exprésszios vektorral, az első nehézlánc eredetű poiipeptldet kódoló vektor, ml| a második könnyűiáno eredetó poiipeptldet kódoló vektor; A két vektor tartalmazhat azonos szelektálható markereket, ami a nehéz- és a kbnnyóiánc polpeptldek azonos mértékű expresszió)át teszi lehetivé. Eljárhatunk úgy Is, hogy egyetlen vektort alkalmazunk, amely mindkettőt, a nehéz- ês a könnyűiébe pölipéptídet febdép. ilyen esetekben a kbnnyulincot a nehézioné elé kell helyezni, hogy ne kapjunk löldsleges mennyiségi toxikus szabad nebéziáncoi (Proddfoot, 1186, Nature 322:52; Kohler, 1980, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 77:2197). A nehéz- és kênnyuiincokat kodolö szekvenciák tadaímazhatnak GNS-i vagy genomt ÖNS4.
[0142] Miután az antitest rekombmáns módon expresszálbdott, tisztítható bármely, a szakterületen ismert antitest tisztítására szolgáló eljárással, például kromatográfiás (pl. ioncserélő-, áiinttás-, különösen: protein A utáni antigénre specifikus affinitás-, valamint méret szerinti osziopkromatögráfiás) úton, centrifugálássak differenciáló oldással vagy bármely más, proteinek tisztítására szolgáié: standard technikával.
SX Â TALÁLMÁNY. SZERINTI VEGYOLETEK SZINTÉZISE
[0143] Ez a fejezet általános információkat tartalmaz ligandum-hâiôanyag konjugáiumok és Intermediereik szintéziséhez. Az ismertetés szélesebb kerti:, mint: a jelen: találmánynak az Igénypontokban meghatározott oltalmi kőre, és tartalmaz információkat a jelen találmányban alkalmazható vegyuietekkei analóg vagyütelekre vonatkozóan is [0144] Ahogyan az alábbiakban részletesebben Ismertetjük, a találmány szerinti vegyutetek kényelmesen előállíthatok olyan összekötő (linker) alkalmazásával, amely két vagy több reaktív helyet tartalmaz a hatóanyag és ligandum megkötésére. A találmány egy szempontja szerint egy összekötőnek van egy reáltív helye, amely rendelkezik elektron csoporttal, amely reaktív egy a iigandumon levő nukleofil csoportra nézve. Alkalmas nukieofil csoportok egy Ugandámon például, de nem kízárölag,, a szutfhiöril-, Múmxib és az amínocsoportok. Egy ligandum nukleofil csoportjának a heteroatomja reaktív egy összekötőn levő elektród! csoportra nézve, és kovalens kötést képez egy összekötő egységhez. Az eíektrof I csoport maieimidcsopefi Az elektrohl csoport kényelmes helyet biztosit ligandumkapcsolisboz. P14I| Reaktív helyként szintén alkalmas egy karbonát funkciós csoport egy összekötőn, amely egy hatóanyag amínocsoportjával képes reagálni és káröamát kapcsolódást képezni. P146| Peptid alapú hatóanyagok jellemzően eiöáiíiíhaiők oly módon, hogy pepítekölést képezünk két vagy több aminosav és/vagy pepííd-fragmens között Ilyen pepiid kötések kialakíthatók például folyadékfázisó szintézis-módszerrel (lásd: E. Schroder and K. Lubke. 'The Peptides', volume 1, ρρ ?ô-136, 1966, Academic Press], amely jiol ismert a peptidkér$ia szakterületén.
[0147] Egy megvalósítási mód szerint hatóanyagot úgy állítunk elő, hogy egy dipepíid és egy iripeptíd körülbelül sztöchlomethkus ekvivalensét kombináljuk, előnyösen egy-edényes makóiéban, alkalmas kondenzációs körülmények között.
Ez! a megközelítést illusztrálja a következő 5 ~ 7. reakcióvázlat. így például a I képleiű tnpeptid előállítható az 5. reakdóvázíaton bemutatott módon, a 9 képletu dipeptld pedig a §t reakcidkázlaton bemutatott mődon. Α,δ képletu és 9 képtető két bagmens a 7 reakdêvézlafon beiliufátött módon konderszáltatható, így kapunk 10 képlptö hatóanyaga!.
[014$] Egy illusztrációképpen bemutatóik elekirofll niafeimldesoportoi tartalmazó siretoher szintézisét ézémliltetjúk a 8 - il. reákcióváztatön, Összekötő szintézisére szolgáló általános isítferWfcÖiRfl< a 10. reakcióvázlaton. A 11. reakosóváztat olyan összekötő egység konstruálását mutatja be, amely vakol ósöpórttal: elektrolit maiéimidésopörtíál és egy RAB önfeláldozó távtartó ösöpörttat rendelkezik, A 12. reakcióvázlat olyan; összekötő szintézisét ábrázöfa, amely phe-tys csoportot, elektrolit niaiéimiőosoportot tartalmaz RAB önfeláldozó távtartó csoporttal vagy a nélkül. A 13. reakcióvázlat általánosan vázolja fel egy hatóanyag-összekötő vegyület szintézisét, míg a 14. reakcióvázlat egy alternatív •utatmutató egy hatóanyag-összekötő vegyület előállítására. A 15. reaköióvázlai egy BH.MS csoportot tartalmazó elágazó összekötő szintézisét ábrázolja. A 16. reakcióvázlat egy isgandum egy hatóanyag-összekötő vegyülethez való csatolását vázolja fel hatóanyag-'összékötö-lgandum konjugitum ki&amp;takítisábóz, a 17. reakcióvázlat pedig olyan hatöanyag-összekötő-ligandüm konjugátum szintézisét szemlélteti, amely 2 vagy 4 hatóanyag egységet tartalmaz lígandumonként.
pi4§3 Amint az 5. reakciivázfat szemlélteti, egy 1 képletü védett amlnosavat (ahol PG jelentése amin-védöosopöft R4 jelentését hidrogénatom, Üü-Cg altéi CrC« kardodéi, -0-(CrC8 atksí), -ad, alkü-arlL itt<ti(C3~C8 karbocíklil), C;rCa heierodklii és alkjl-(C3-C8 heterocíkl) csoport közül választjuk, ahoi R$ jelentését H és metitesopört közül választjuk; vagy R4 és R? kapcsolódik, jelentésük -fÜR3R&amp;jn~ képleté csoport* ahol R3 és Rö jelentését, függetlenül, hidrogénatom, G-pGg alktl és CrGa karbocíki csoport kézül vÉiaszfuk, és n értékét 2, % 4< í és i közét választjuk, és gyűrűt képeznek a szénifommáh amelyhez kaposolöctnakj alkalmas kapcsolási körülmények között, például PyBrop és díizopropiíamin jelenlétiben, vagy pedig: DCC alkalmazásával (lásd például: líllyazaki, K» et, al, Chem. Harm, Buli. 1995, 43(10), 1706-1718) 2 képiefű fem-hütíhészterrel kapcsosunk (ahol R° jelentését Ή és -Ci-Ca aikdcsoport közöl yáiaszfuk: R' jelentését hidrogénatom:, CrQs atkii, Cs-C8 karhodklil, -Ö-fCrké aíkil-anl aJkiHG^C« karfeociki|:1 heterodkkl és alktfrtGr^ hetéíoctky) csopöd közül választjuk). £0150! Megfelelő PG yèdocsoportok és az ammocsoport védöcscporttal történő védésére szolgáié megfelelő szintetikus eljárások a szakterületen j§ ílméftek, Lásd például: Greene. UW. and- Wats, P.G.M., Protective Groups: in Organic Synthesis, Ind Emisem 1001. John Wiiay &amp; Sons Előnyös 1 képletű védett .mmssimk a PG-Ne és különösen a PG-Vak míg: további megfelelő védet! am Idősavak többek között: de nem kizárólag: a: PG-dkíohexiícfiídn: PG-cíkíöhexlaianín, PG-amínooikloprópád-d-karbonsav, PG-arrmioizovajsav, Pö-féhilaíanih,: FGAenííglcín és PG-mmmutilgPin:. 2 előnyős védőesoport. Pmöfe egy másik előnyös védöesopört Előnyös 2 képiéin (em-butii~észter a dolaizefeyin-ferc--butPészter pisil A 3 képleté dipépfid tisztítható, például kromatográfiás iioe, és azután vidoesoportja elíávallhaté, például í% és 1Ö%~os ΡΦ&amp; segítségével eianotban, fia PG jelentése benzilők!kafbönli--dsópo;rt< vagy pedig dieiilamin segítségévei, ha védőesőportként Frfiéü van jelen. A kapott 4 képletű amin könnyen képez péptidkötést egy 5 képiétől amlnosawal (áfiol R ' jéléntésat -H, -C*«C* sfki! és AV G8 kárhocikíll csoport közül választjuk; és R2 jelentését -H és -Gi-G® aíkii csoport közút választjuk; vagy R* és Rf kapesölödik, jelentésűk .-(GRWp· képleté csoport, ahol Rs és Rfc jélénièséi függetlenül, -B, ~ÇrC* al» és -GrG* kafhecíki csoport közül választjuk, és n értékét 2, 3,4, 5 és 6 közül választjuk, és gyűrűt képemet.« szénatommal, amelyhez kapcsolódnak; és R3 jelentését hidrogénatom, Ci-G® alkil, CrGs •ferhoethtii, -0<£CrG« alkil), -ári, alktkarit a!kif~pr£8 karbeciklit), GrG® heteroeM is aikitRGrGrMeroeikiil) osoport közöl választjuk). MAPdialklk amlnesavak előnyösek i képletű: aminosavakkint, ilyen például a kereskedelmileg: beszerezhető M^-'dinfietil-valn, kiás M^éiaiktkaminosavak etöálílhaíök reduktív biszalkílezéseel, ismert eljárások útján (lásd például: ipvvman, R,E, Gtröud, H.H i Ghem. Soc,, 11® 1342-1340), FmomMe-L~Va! és Fmoe-Me-L-glicm két előnyös 5 képletű aminosav Ahmonoalkil-szánnazékok szintéziséhez. A 4 képletű amin és m 5 képletű aminosav reakciójával, DEPG kaposolöreagens alkalmazásával bázisként trietilarninnal © kèptetu tnpeptidet kapunk. pii2| Az 5. reakcióvázlaton szemléltetésképpen bemutatóit DEPC kapcsoló módszert és a PyBrop kapcsoló módszert az alábbiakban vázoljuk fél A általános eljárás, leivé B általános eljárás címek alatt. Z-védett amlnról a védocsoport katalitikus hidrogènezésset történő eltávolítását szemléltető módszert vázoljuk fel a C általános eljárás cím alatt |01δ3] A általános eljárás: Peptidsziniézis DEPC alkalmazásával Az Aévédetí vagy N,W-díszubsztitu ált 4 képlati aminosavat vagy papidat (1.0 ekv.} és 5 képletö amint (1,1 ekv.) aprotikus oldószerrel például diídórmetánnal (0,1 - 0,5 M) hígítjuk, Azután hozzáadunk: agy szerves bázist például trietiamint vagy dlizppröpíletllaríimt (1,5 ekv.), majd: DEPC4 (1,1 ekv,), A kapott oldatot keverjük, előnyösen argonaimoszíérában legfeljebb 12 órán át, miközben HPLC vagy TLO ségltségével monitorozzuk, Az oldószert vákuumban szobahőmérsékletei? eltávolítjuk, és a nyers térmiket tisztítjuk, például HPLC vagy gyors esziopkromatográis (szikagil oszlop) segítségével. A releváns frakciókat egyesítjük és vákuumban koncentráljuk, így 8 képletu trlpeptidet kapunk, amelyet: egy éjszakán át vákuumban száriunk, 10154] B általános eljárási Peptidszintézts PyBrop alkalmazásával A 2 képletö aminosavat (1,0 ekv.), amely adott esetben karboxil-védécsoporiot tartalmaz, annyi aprohkus oldószerrel, például dikíórmetánnaí vagy DME-vel hígítjuk, hogy 0,5 és 1.0 mM közötti koncentrációjú oldatot kapjunk, majd diizopropiletílamltit (1,5 ekv.) adunk hozzá. Szilául formában, egy részletben Fmoo- vagy Z-védett 1 képletö amlnosevat |1(1 ekv.) adunk hozzá, majd a kapott elegyhex Py8rop~t (1,2 ekv ) adunk. A reakciót TLO vagy HPLC segítségével monitorozzuk, majd az A általános iprásnál Ismertetetthez hasonló módon feldolgozzuk, |01§5] C általános eljárás: 2 védőcsoport eltávolítása katalitikus hldrogénezéssel Z-védeti 3 képletö amlnosavai vagy pepiidet alkalmas edényben, például vastag falú kerekfenekü lombikban annyi etanollal hígítunk, hogy 0,8 és 1,0 mU közötti koncentrációjú oldatot kapjunk. 10%-os, szénhordozós palládiumot adagolunk (510 tömeg%), és a reakcióelegyet h id rogénatniosztérába helyezzük. A reakció lefolyását HPLC segítségével monitorozzuk, és a reakció általában 1 -2 óra alatt telessé válik. A i'sakcíóelegyet előmosott ceítsPiegen szűrjük, és a celltet szűrés után poláros szerves oldószerrel, például metanollal utánamössuk, .Az Algáit oldatot vákuumban koncentráljuk, a kapott maradékot szerves oldószerre!, előnyösen toíuölfal hígítjuk A szerves oldószert ezután vákuumban eltávolítjuk, így a védőcsoport nélküli 4 képletu amint kapjuk. P15SJ: Az 1 táblázatban tripepiid intermedierek reprezentatív1 példáit (39 ~ 43 képletu vegyületeket) somijuk fel, amelyeket az reakoiévázlál szerint állítottunk eíő. 1 táblázat
fûlüTJ A S képietű dipepíid könnyen előállítható a T képietű módosított aminosav Böe-dolapmíd (lásd például: Petiit G.R.. el ál, Synthesis* 1896, 719-725), valamint (1S,2R)--noreíednn, 1..- vagy Ddeniíaianin, vagy pádig a szintetikus 8 képietű p-aeelifenetílami?·! (US4445518 számú szabadalom; Shaveí et: ai.) kondenzáltitásával a pepíidkémiá teruléíén jól isméd kondehzáíészerek, így például DEPC alkalmazásával, tríeiamio jeieniétébem amint a 6. reákcióváziáíon bemutatjuk. ? képietű vegyület kereskedelmileg beszerezhető vegyüietékkeí szintén kondenzáitathsstó ilyen módon, 9 képietű dipepiidek kialakítására. Ilyen célra használható, kemskedelmieg beszerezhető vegyűietek pádéul, de nem kizárólag, a norefedrin, e%dnh és Sídéreolzömegeik (Slgmá-Sigmá-AldFieh), y vagy ödenilaianinol: (Sigma-Aidhch), 2-feníietilamtn (Slgma-Aldoch), 2-14-ammétéail)étilamlii (Sigma-Aldrich), ig-etindlamin-l^-dltenl (Sigma-Aidriőb} vagy 4-Ç2~amirmetil}fenel pigma-Aídheh), vagy pedig szintetikusan előállított p-aoeil^aetílanrindal, Ldenilalanln aril- és heterociklo-amldiai. 1-izidcrnetll-S-feníieiiamín Ctenilalanlnolból a következő szakirodalmi helyen Ismertetett általinas eljárás szerint előállítva: J. Chem. Research iS), 1992,391) és Í-ét-hidroxlfenil)-2-· téalletílamln (0359036 A2 számú európai szabadalmi iközzétételi Irat):, többek között.
IdiihAiMl!
ahpiR* jelentéséi függetlenéi -Ht, -OK -CrC| álklt; "Çâ-Çg karfeoeiki és -ö-|úr Cs álkli) csoport közül választjuk; R9 jelentését -H és ~CrC* elkil-osoport közöl váiasztjök· és R:° jelentéséi a következek közül válászfék:
ahol Z jelentése -O-, -S-, -NH- va§y»kiiRuH R1' jefentését-H -OH, ~ΝΗ2, MHMr^· ”NP^.)äf« -Gi-Ce atkik 4Ä karboeikiii -0-(Ci-C8 aikii), aril, ~CrC* alkil-aríi -C<-C§ atlí-(CrCs karbooÉiíij:, -%€g heíeteciki és --CrCs heteroeikÉi csoport közül választjuk; vagy Rr: jéiéníése oxigénatom, amely a szénatommal együtt, amelyhez kapesolédfk, karbenllegységét (C~0) képez, és az ezen a szénatomon léve hidrogénatom a fO*Oj csoportban tevő ikeöoskötés egyikével van kiese mivé; mindegyik R52 jelentését, függetíenüi -aril és -Ca-Cs heteroeikíil csoport közül választjuk; :R1S jelentését: ~Hÿ -Öli -NH», -NHR1\ --Np14)^ -CrCs aikii, -Cs-Ca karbocikiíi, -ö-{Ci-C8 alkil), -aril, -CrC8 aíkkani. -CrC8 a!kil-(C3-C8 kamoclkltl), heterocíktil és -CÄ alkiNCr^ beíerooikkü csoport közül választjuk; és mindegyik RM jelentése, függetíenüi Ή vagy -CrCe nrkrl csoport. |01S8] A 2 táblázatban dipeplldek repiezentatív példáit (44 - 48 képlete vegyületek} sorofuk fel, amelyekét a 6. reakciövázíat szerint állítottunk elő. 2;J|]>jázjj
P1SÍ| ÂJ. reakcfávázlat olyan; effifást. .szemléiét ámeíy S képiből frípepnd és 9 Képlétu dspeptki összekapcsolásával 10 képletet hatóanyag kialakítására alkalmazható, S képleté és § képletö peptidek kapcsolása Prös sav, pi, TFÁ a lkaim ázásával végezhető, hagy elősegítsük a Boc és íem-hutlí-észter iehasitását 9 képlett! dtpeptidföl illetve 8 képlstû tnpepttdröi, amelyet kondenzációs körülmények követnek, például DEPC vagy hasonló kapcsoló reagens alkalmazásával, fölösleges mennyiségű bázis pnetilamln vagy ennek ekvivalenssé jelenlétében, így 10 képietü hatóanyagot kapunk. LïliÉíi
[0168J 10 képletű hatóanyag szintetizálásának egy szemléltető eljárását; ahogyan a 7. reakcióváziat ábrázolja, a D általános eprásban vázoljuk.
[01811 Ä 18 általános képletü hatóanyag R10 csopoftja kívánt esetben tovább móddélható, hogy olyan funkciós csoportot tartalmazzon, amely lehetővé teszi.,
. Λ *N hogy a hatóanyagot összekötőhöz csatoljuk. A 10 képletü hatóanyag R:"' csöpörfáhak alkalmazható módosításai például, ele nem kizárólag, az alábbiakban Ismertetett iéhiiai átalakítások.
[818$| Ha Rí0 jelentése
R50 csoport hidroxílcsoportja reagáltatható kereskedelmileg kapható vagy sziflléttasatt kialakított karbonsavakkal vagy karbonsav-származékokkal, Ilyenek peidaúi, de nem kizárólag, a karbonsav-észterek, savkioridok, anhidridek és karbonátok, hogy a szakterületen jól ismert elárásók szerint: a megfelelő észtert kapják. Kapcsolószerek például, de nem kizárólag, a DQCíDPMP és EDCf/HOBt hasznosak lehetnek ilyen, alkoholok és karbonsavak vagy karbonsav- $2É«^zékôfe közöli kapcsolási reakciókban. Egy előnyős megwiósttási mód szerint a karbonsavak szuhszftuált vagy nen>szubsztltuéíi aril-karbonsavak, Ilyen példáéi :a 4-aminobenzoesav. így a fent bemutatott R!v' csoport htdroxtfcsoportjának karbeosavvai történd konbenzÉtiatásá olyan 19 ikatánös szerkezetű bat:öaoyagelát: eredményez, ahol R1ü jeienfese
«agy
és ahol Rn, R'2, R14 és Rn' jelentése a fentiekben megadott, és X jelentését OH, HHz és ~NHRU csoportok közül választjuk,
Pflil Ha Be jelentése
a hátöanyag azídocsoportja redukálható (erre egy példát lásd: J. Cbem Research Ißh 189¾ 391), hogy a megfeleli smtoeszármazékot kap|uks ahol R :<í jelenteké
amelynek aminocsoportja általános peptidkapcsolási körülmények között reagáitatbatd egy karbonsav karboxíicsoportjávai, hogy olyan 19 általános szerkezetű hatóanyagot kapjunk, ahol R?í5 jelentése
vagy
é$ ahol R'1, Ru\ Rm és R15 jelentése a fentiekben megadott, és X jelentését ÖN, -:NHg és *hfHRt4 esopohok közül választjuk. |§164] A fentiekre való tekintettel alkalmazható karbonsavak például, de nem kizárólag, a 4-#dlbobenzoesaV> p-acetObenzoesav és a 2-ammo-4~ tiazolkarfeoxllsay (Tygér Scientific, Ine,, Evéng, Ml). |01 $§] A 1Ö képlétű hatóanyag arniniartalmú R‘° csoportján Fmoc~ védett aminocsoport lehet jéléh (lásd például a 2. táblázatban abmzoiakaí). Az \Fmm. csoport eltávolítható a védétt aminrél, diefítamtn alkalmazásával (szemléltető példaként lásd az E általános eljárást az alábbiakban). |01S6| D általános eljárás: Hatóanyag szintézise. 9 képletü dipepiid (1,0 ekv.} •és 6 képlete trlpéptid |1 ekv.) keverékét annyi apreikus szerves oldoszerrei péidául dlkiprmeténrial hígítjuk, hogy 0.1 M oldatot kapjunk, majd erős savat, például trifluoracetsavat (1(2 v/v) adunk hozzá,, és a kapott elepyet nitroginatmosztérában <} °Gmn 2 óra hosszat keverjük. A reakció TL£ vagy előnyösen HPL.G segítségével monitorozható Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a kapott maradékot azeotréposan kétszer szárijuk, előnyösen toluol alkalmazásával. A kapod maradékot nagyvákuumban 12 óra hosszat szárítjuk, majd aproikus oldószerrel, például diklórmetánnai hígítjuk. Ezután szerves bázist, például thetífamlní vagy óiizopropletiiarniot (Ι,β ekv.) adunk hozzá:, azután PyBrop-t (1.2 ekv.) vagy DEPC-t (1,2 ekv.) adagolunk, a maradék kémiai hinkolonalitásától figgóen, A reakciói TtC vagy HFt€ segítségével monitorozzuk,: és mintán teljessé vált, a reakcióelegyet az A általános eljárásnál ismertetetthez hasonló vagy azzal azonos módón feldolgozzuk. p107] E általános eljárás: Fmos eltávolítása dletîlarmn segítségével. Fmoc-védett 10 képletű hatóanyagot, aprohkus szerves oldószerrel, példáéi díkíörmetinnal hígítunk, és a kapott oldathoz dietilamint adunk (1/2 v/v). A reakció lefolyását ÏLC vagy HPLC segítségével monitorozzuk, és a reakció jellemzően 2 ófán belül végbemegy. A reakeioelegyet vákuumban koncemrá§uk>: és a kapott maradékot azeotóposan szárítjuk, előnyösen toluol alkalmazásával:, majd nagyvákuumban: szárítjuk, így 1ö képletű hatóanyagot kapunk, amelyről az amino·* védöesopödöt eltávolítottuk. p1S8] A fenti epresek tehát hasznosíthatók olyan hatóanyagok előálliisara, amelyek alkalmazhatók a jelen találmányban.
[0189] A jelen találmány szerinti hatóanyag-összekötő vegyidet eiőátiífásáiioz a hatóanyagot az összekötőn levő reaktív hellyel reagiltaiuk. M összekötő szerkezeté általiban a kivetkező:
ahol mind a távtartó egység C-Y~): mind a stretcher egpèg (-A-) jelen van. fö170] Egy alkalmas összekötő általában tartalmaz egy amroosav egységet egy stretcher egységhez és egy távtartó egységhez kapcsolva. Az 1-es reaktív hely a távtartó egység végén, a 2~es reaktív hely pedig a stretcher végén van jelen. §0171] A találmány egy megvalósítási: módja szerint az 1-es reaktív hely a hatóanyag nitrogén-atomjára nézve reaktív, míg a 2-es reaktiv hely a tigahdurrr szuifhidril csopodjára nézve reaktív, Az 1-es és 2-es reaktív helyek lehetnek különböző: funkcióé csoportokra nézve: reaktívak, pi?2] A találmány egy szemgonpbéí az 1~es reaktív hely
£0173] A találmány egy másik szempontjából az 1 -es reaktív hely
ahol R jelentése -Br, -Cl. -Ο-Su vagy -0^4-nitroféní|osópof1, [81?4§ Összekötők, amelyek
csoportot tartalmaznak az t-es reaktív helynél, ajMj ^ jelentése -Br vagy -Cl, előállíthatok olyan osszekotokpot, amelyek
csoportot tartalmaznak az 1-as reaktív helynél, oly módon, hogy a -COOH csoportot reagáltatjuk PX* vagy PX» képletei vegyuletlei, ahol X jelentése -Br vagy -Cl. Más módom az olyan összekötők, amelyek
csoportot tartalmaznak az hm. reaktív helynél, előállíthatok olyan összekötőkhöz amelyek
csoportot tartalmaznak az 1-es reaktív helynél; oly módon, hogy a -COOH csoportot tíonil-kteriddaí reagáítatfak. Xarhonsavák savhalogénldekké törtinö konverziójának általános tárgyalását lásd a kővetkező szakirodalmi helyen: Marod, Advanced Organic Qhemrstry-Peactiöns, Mechanisms and Structure, 4th £d.: 1092, John Wiley and Sons, New York, p. 437-438. pi?§| A találmány egy tövéből szemponpóöl az 1~es reaktív hely
fői 76} A találmány egy még további szemponl|afeol az 1-es reaktív hely
ahol R jelentése -Cl, -0~CH(CI)CCb vagy 43Y4-nlrötenll) csoport.
[CtlYTJ Összekötők, amelyek
csoportét tartalmaznak az 1 -es reaktiv helynél ^ípálll^atók olyan összekötőkből amelyek
csoportot tartalmaznak az 1 -es reaktív helynél oly mődon, hegy ^ -OH csoportot foszgénnef vagy íhíoszgéone! reajgáltaíjuk,, így megfeíolo kiorofern^atot kapónk. Összekötők, amelyek
csoportot tartalmaznak az 1 -es reaktív helynél ahol R jelentése -0-CH(CI)CCI3 vagy -0-(4-nítrofenii) csoport, előállíthatok olyan összekötőkből amelyek
csoportot tartalmaznak az 1 -es reaktív helynél oly módon, hogy az -OC(ö)CI csopoirtot NO-CHCCIjCOts:, Illetve: t1Ö~(4-mltm%njj} képletű vegyü lettel teagálialjuk. Ezen kémia tárgyalását lásd: March, Advanced Organic Chemistry ~ Reactions, MechanisíY's and Structure. 4th Ed . 1992. John: Wiley and Sons, New York, p. hon pt IS] A találmány egy további szempontja szerint az 1-es reaktív boly
ahol X jelentése -E, 01 -ir, 4 vagy kiiepocsopert, például -Ö-mezii, -O-tozll vagy ~ O-triflát csoport. pi?i| Összekötők, amelyek
csoportot tartalmaznak az 1-es reaktív helynél; ahol X jelentése -0-mezlj, ~0~tozil vagy -O-tnflát csoport, előállíthatok olyan összekötőkből, amelyek
csoportot tartalmaznak az 1-es reaktiv helynél, oly módon, hogy az *ÖH csoportot különböző reagensekkel reagáltatok,. ilyenek például a HCi, BÖCIg,, PC(S, P€% és POCÍ3 (ahol X: jelentése Ci); HBt, P8r3, ΡΒγ5 és 808¾ (ahol X jelentése 8r); Hí (ahoi X jelentése I); és CHsCHsNSF* (DáST), SF.1: SeF4 és p4öIup|$zpífop|lrf!áöríd^ (ahol X jelentése F). Alkoholok alkifdrafpgeniöföé történő kopyerzíéjámk; általános tárgyalását lásd: March, Advanced Organic Chemistry - Reactions, Mechanisms and Structure, 4th Ed , 1992, John Wiley and Sons, New York:, p. 431-413,.
[0180] Összekötök, amelyek
csoportot tartalmaznak az 1~es reaktív helynél, ahol X jelentése -CXmezlí, -Ortozll vagy -O-triflát csoport, előálllthatók olyan összekötőkből, amelyek
csoportot tartalmaznak az: 1-es reaktív helynél, oly módon, hogy az -OH csoportot különböző mezlk toztk illetve triflátcsoport bevitelére képes reagenssel reagáltatjok. Ilyen reagensek és eljárások a szerves szintézisek szakterületén jártas szakemberek számira jól ismertek. A mezlk iozll- és triflátcsoport mint kiíépőosoportok általános tárgyalását lásd: March, Advanced Organic Chemistry -Reactions, .Mechanisms and Structure, 4th Ed., 1992, John Wiley and Sons, New York, p. 353-354.
ftHSij Egy megvalósítási mód szerint, ha egy távtartó egység (··¥·) jelen van, az 1-es reaktív hely vagy
csoport, ahoi R jelentése -Cf, -Ö-CH{CÍ}CCÍ3 vagy -0-(A~oitrofenslj, és X jelentése ~ F, -Cl, -ßr, -I vagy kFépŐesopoft például ö mezil, -O-tozil vagy -O-trifiát csoport IP#2$ A találmány egy további szemp ontja szerint az 1 -es reaktiv hely
Pl 8¾ A találmány egy még további szempontja szerint az 1-es reaktiv hely
képletűp»nitrofenibl<arbonátcsopoft. |81B4| A találmány egy szempontja szerint a 2~és reaktív hely egy íiol-akceptor csoport, amely képjetű maleimidesopoá.
fOi'SI] Alkalmazható összekötők beszerezhetők kereskedelmi forrásokból, így példáéi a ypieouisf Bíoseiehóds Inc. (Botilden CÙ) cégtől, vagy pedig az IIS--6214345 (Firestone et ai.) számú szabadalomban ismertetett módokon szintetizálhatok Izeket az alábbiakban a 8 10. reakeiováziatokon foglaljuk
Ossza. 8. reakcióvázfat
« X jeleniêse -Cfr « -«OCH,- » «port, és szám, amely** értó*® W8yO ~ 10, ha X lelertèse .-CHr Kepletu · - 10 ha X i^emése -CHzOCfh- képlete csoport. 4 í.áA|e,fc^ .. 4 » ^pirpsdef y«fï©fcîlr
HiAstm &amp; Q s'A<íkr;őváz=aton beiiUtatött eljárás szenet a Γ1Ι"3.«..» —i* '» «w—“ »*™ ;«« «-—«, ο» ».. -»*. · =*» * te,tolunk egy p-nrWfe"«-ta,rbonát reakttv ^ csoportos. 9, reakolóv'ázlat
átet E jelentésé ~CHg* iragy -CHgOOHs- képiéin csoport. éé e íe.entéss egész szám, amelynek értéke $ · 8. pufi Más módon: PEörtoáíeímld és PEG-halogênacetamid sb etcher előállítható a következő szakirodalmi helyen ismertetett módon: hnsch* el al,; Bioconjugate CHem. 1998, /. 188·· 188 |01881 A 18. reakcídvázláí é|y maleímíd stretcher csoportot és aóött esetben p-amino-Óeoztkéter érvfeláldozo távtartőt tartalmazó összekötő szemléltetésképpen bemutatott általinos szintézisét illusztrálja. 10. reakcuóvázlai
alls! G jelentése *Ci^a1kih· -OK Ci-g-aikil}··, halogén, -nitro- vagy -ciano-csoport; m jeieriasa egész s^ám: amelynek liléké 0 - 4; és n jelentése egész szám, amelynek értéke 0 - 1ö. |0189] Alkalmas stretőherek vihetők be egy összekötőbe a Molecular Biosciences (Bontder, :'&amp;0) cégtől beszerezhető intermedierek alkalmazásával, amelyeket az alábbiakban ismertetőiig, szerves szintézisek ismert technikáinak segítségével. piSOf (Illa) képlete stretcberek bevihetők összekötőbe oly mórién, hogy a kővetkező intermediereket rgagájfafjMk egy aminosav egység N-terminálisával ahogyan a 11. és 111. reakcílvázfaien bemutatjuk:
ahoi n értéke 1 - 10, és T jelentése -H vagy -SögMa,
ahol' n értéke 0 - 3, és
[Û191] (iiüb) kèpietô stretcher egységek bevihetők oly módon összekötőbe, hogy a következő intermediereket ..reagáltál)uk egy amtnosav egység N-termínátisával:
ahel X jelentése -Br vagy -I, és
pi92] ||¥] képfetü stretcher egységek bevihetők összekötőbe oly módon, hogy a következe inferrhedtoreket reagáltatjuk egy amtnosav egység Nderroináíisáva!
és
pl93] (Va) képlete stretcher egységek bevihetők összekötőbe oly módon, hogy a következő intermedierekéi reagáltatjuk egy amínosav egység N-termináíisával és
101141 kiás, a találmányban alkalmazható stretcherek Ismert eljárásokkal sántetlzátimtők. Az alábbi képlet szerinti aminoox! strecherek előállíthatok aikik halogenidek és N-Boe-hldroxiiamin reagáltatásávat; a következő szakirodalmi helyen Ismertetett eljárások szerint: Jones, DS. et al., Tetrahedron Letters, 2000, 41(10), i63Mi3t;é$' GJon, C et at, Tetrahedron, 1967, 23(11). 4441-4447.
HtTrOók'--ecor| ahol ~Rí7"|®!entését -€i-Gio «βΝΙ&amp;ι*, 4k4k karfcoeíkl©** -P-CO-oCg atklih -ariién--, -Gi-Cjs alktfémahlénr, atkltén--, -0-:-0-0 alkilén-íC^Crkarboeiklok - (G3^Cs-karbacikfe)''CrGio alkitén-, -CrG8 leteroelkjo^ -C<-C!0 alkkén-kGo-Cg théterociktö^, -•{Ca-Cs'balBrocsklö^öi 'Giö ajkifên-, ~(Gf%CMzO)r, -lüH^CHsOlrGH®-képleté csoport közűi választjuk; és r jelentése egész szám, amelynek értéke 1 -10: [0195] Az alábbi képiét szerinti Izoiioclanái szíretcherek előállíthatók izotiooanitökarberjeav-klqéáekból, ahogyan a követkézé szakirodáira helyen ismerteik: Angew übem,, 1071, 87(14), 517.
abél ~R’7-}el^llésé:âi? Itt ismertetett. 10196} A 11. reakciévázlat olyan vai-cii: dipeptid összekötő előállítási eljárását métáié be, amely maleimiö sireteherref és adott esetben p-aminoöenzil éniélildpzó távtartóval rendelkezik. jj-jeakciévázia!
ahol Ö jelentése -Ci.~C8 álhit -0-(Ci.8 aikil)s haíogénatom, nitro·· vagy doanocsöpöft és rn jelentése egész szám, amelynek értéke Ö ~-4. P1S?| A 12. reakaóvázlat olyan phe-iys(Wf) dipepíid összekötő szintézisét matatja be, amely maleimid siretoher egységgel és p-aminobénzii önfeláldozó távtartó egységgel rendelkezik, A 23 képleté (lys(Mtr)) kiindulási anyag Ämskedelfnileg beszereztető ÇBachem, Torrance, CA), vagy pedig a következő szakirodalmi helyen ismerteteti módon előállítható: Ouhowchlk, et al. Tetrahedrom Letters 1997. 38: 5257-60. 12. reakcióvázlat
ahol Q jelentés# -Cos aikil. ·0·(0;..δ alkll). haíogénatom, nitro- vagy cianoesopofl, és m jelentése egész szám, amelynek értéke ö -4. P1ii| Amint a 13, neakcíóvázíafon bemetaljuk: egy összekötő reagáitatható egy 10 képiéti hatóanyag aminocsoporfjival olyan hatóanyag-összekötő vegyőlet kialakitására, amely -múé> vagy karbamâtcsoportoî tartalmaz a hatóanyag egység és az összekötő egység összekötésére. Ha az 1-es reaktív hely karbonsav-csoport, mint például a 20 képlető linkerbeo, a kapcsolási reakció HA1~U vagy PyBrop és megfelelő aminbázis alkalmazásival hajtható végre, így W. képlető hatőanyag-összekötö vegyöíeíet kapónk, amely amíikötést fertalmaz a batóanpg egység és az összekötő egység között. Ha az 1-es reaktiv hely karbonátcsoport, leint például a 31 képleté összekötőben, az összekötő kapcsolható HOBt alkalnazásávaí DMP/prridin etegyheo a hatóanyaghoz, így 32 képlető hatóanyag-összekötö vegyöletet kapunk, amely karbamátkötést tartalmaz a hatóanyag égység és az összeköti egység között, P190| Ha az 1-es reaktív hely hidroxilcsoport, mint például a 33 képieiű összekötőteen, az összekötő kapcsolható egy hatóanyagon levő fenolcsoport segítségévei Mitsimobiekémia utján, így 34 képlete hatóanyag-összekötő vegyuieiei kapunk, amelyben éterkötés van a hatóanyag egység és az összekötő egység között. 1Ô2ÔÔ3 Más esetben, ha az 1-es reaktiv hely egy Jó küépőcsopöít mint példán! a 70 képlelö összekötőben, az összekötő egy hatóanyag hidroxiicsoportjávai vagy aminocsoportjaval kapcsolható össze nukleoiil szubsztituoiós eljárás útján, így olyan hatóanyag -összekötő vegyöletet kapunk, amelyben éferkötés van (34 képlető vegyüieíöen) vagy aminkötés van (71 képlető vegyi! letben) a hatóanyag egység és az összekötő egység között. P201| Hatóanyag-összekötő vegyőlet kialakítása céljából, hatóanyagnak ligandumhoz való kapcsolására alkalmazható szemléltető módszereket ábrázó! a 13. reakciévázlat, amelyeket a G - J általános eljárásokban vázolunk tel. 13. riikçiévàjtet ι
[0202J G általános eljárás: Amid kialakítása HATII alkalmazásával. 10 képletü latóanyaget és karbonsav reaktív helyet tartalmazó M-védei összekötőt (I j ekv;) hígítunk megfelelő szerves oldószerről1, például díkíármeténnai, és a kapod oldatot HATU~val (1,5ekv,) és szerves bázissal, előnyösen pirldinnei (1,5 ekv.) kezeljük. A reakciáeiegyei Inert atmoszférában: előnyösen argonban 8 őrá ioéSzet keverjük, miközben a reakcíóeiegyet HPIC segítségévei monitorozzuk. A reákofóeieiyet: koncentráljuk, és a kapott maradékot HPIC útján fiszflljuk, így 30 képletü amidot kapunk, [0203J H általános eljárás: Karba mát kialakítása HOBt segítségével, p-Nitrofenii-karbonát reaktív helyet tartalmazó 31 képletü összekötőt (1,1 ekv.) és 10 léplé® hatóanyagot (1,0 ekv.) annyi aprotikus oldószerrel, például PPF'-fél hígítunk, hogy 50 ~ 1Ö0 mM köncentráéiéjú oldatot kapjunk, és a kapott oldatot HOBt-vel (2,0 ekv.) kezeljük, és Inert atmoszférába, előnyösen argonatmoszíérába bélyazzik, A reakcíóeiegyet 15 percig keverjük, majd szerves bázist, például pllidínf (1/4 v/y) adunk hozzá, és a reakció tefbtyásit HPLC segítségével monitorozzuk. Az összekötő jellemzően 18 óra alatt fogy el. Ä reakcíóeiegyet vákuumban koncentráluk, és a kaputt maradéköt fsztifuk, például HPIO ufán:< így 12 képiuiü karbamátef kapunk, [02Ö4] I általános eljárás: Éter kialakítása flttsonöbu-kérma segítségével Szabad hídroxíicsoporíöi tartalmazó 10 általános képietű hatóanyagot annyi INF-lel hígítunk, hogy 1,0 M oldatot kapjunk, ehhez az oldathoz az 1-es reaktív helyűé! hidrexliesoportof tartalmazó összekötőt (33 képietű vegyületét; 1J ekv.), majd tnfeniífoszflnt (1,5 ekv.} adunk, A reakcsóelegyet argonaímoszférába helyezzük és 0 ;:'C-ra hűljük. Ezután egy fecskéndőyéí cseppenként DEAD4 (1,5 eky.) adunk hozza, és a makciőelegyet szobahőmérsékleten kevétjöi, miközben HPLC segítségével rnonítorozzuk. A reakció jellemzően, a szubéztráftól függően, 0,5 -12 ara alatt végbemegy. A reakolóeíegyef (a THF térfogatának megfelelő mennyiségben vett) vízzel hígítjuk és EtOAccal extrahájuk. Az EtöAc~os réteget egymás után vízzel és sősvízzei mossuk, map fyigSCA fölött szárijuk és koncentráljuk. A kapott maradékét gyors oszlopkrooiatográtia segítségével, megfelelő eluáíészer alkaltnazásávaítísztt|uk, így 34 képietű étert kapunk. PICÍSJ d általános «pris: Éter/amín kialakítása nukfeofíf szubsztitúcióval. Szabad hidroxilesoportot vagy szabad amínocsoportot tartalmazó 1í általános kipíető hatóanyagot annyi poláros aprót ikus oldószerrel, például THFrteí, OMF-fel vagy öltSO-val hígítunk, hogy 1,0 M koncentrációjú oldatot kapjunk, és ehhez az oldathoz nem-nukleofil bázist, például piridint, diizopropiletilamint vagy trieiámint adunk (körülbelül 1,1 ekv.). A reakblőeíegyét: kőfölbélul 1 óra hosszat keverjük, és a kapott oldathoz T0 képietű összekötő poláros aprotlkus oldószerrel, például THF-fel, DblF-fei vagy DMSQ-vaí készült mintegy 1,0 M koncentrációjú oldatát adjuk. A kapott reakeíőélsgyét Inert atmoszférában keverjük, miközben TLC vagy HPLC segítségévei monitorozzuk. A reakció jellemzően 0,5 - 12 óra alatt végbemegy, é szubsztrlióktó! függően. A reakcióelegyei vízzel hígítjuk (a reakaóelegy térfogatával; azonos mennyiségben) és EtOAc-ba extraháijuk. .Az EtOAc-os réteget egymás után mossuk vízzel 1 N HCí-lel és sósvízzel, majd fvigSCb fölött szárítjuk és koncentráljuk. A kapott maradékot gyors oszlöpkromaiogíáfiás: úton jfiegiélelo eluálőszer segítségével tiszt ltjuk, így 34 képietű étert vagy 71 képietű amint kapunk, attól függően, hogy a 1Ö képietű hatóanyag szabad hidroxilesoportot vagy szabad anmocsùpùïQt tartalmazott-e. A találmány szerinti hatoanyag-ósszeköto vegyületek előállításának egy másik eljárását vázolja fel a 14. reakcióvázlat. A 14. reakcióvázlat szerinti eljárás alkalmazásával a hatóanyagot olyan részleges összekötői egységhez (például 19a képié® vegyúíeihsz) csatoluk, amely narrt rendelkezik stretcher egységgel. így M képlete Intermediert kapunk, amely Fmoo-védett Hderminátssal rendelkező aminosav egységet tartalmaz. Az Fmoc csoportot azután eltávolítjuk, és a kapott 38 képletei amin intermediert PyBrop vagy DEPC segítségével katalizált kapcsolást reakción keresztül Streicher egységhez csatoljuk. Olyan hatóanyag-összekötő vegyüljetek konstruálását amelyek 39 képletű brómaceíamid stretched vagy 38 képlete PEG-maieimld stretched tartalmaznak, a 14, reakcióvázíaíon szemléltetjük, 14. reakéővázlef
,ί-ίΐ ~£MG*<s alkll). haloqénátom, nítrémvagy V,v· 0^" " ' " ahol Q jelentése -C- &amp; ésmjeíer#se egész szám, amelynek értéke 0 —4 [0207] Az olyan összekötő egység előállításának módszerest amely elágazó távtartót tartalmaz, a 1i. featóővázlntöh muta?}íik be. ISjMkiáőyázItt
[Û20SJ A 15. reakcióvázlat olyan vakolt dípéfStttí összekötő szintézisét szemlélteti, amely mBtméé stretcher egységgel és biszirnhsdroxlmetlhsztirol (BHMS) egységgel rendelkezik. A 8HMS intermedier (T§ képletű vegyület) szintéziséi körából. szakirodalom szerinti eljárások (lásd: WO 9813059 számú nemzetközi közzétételi irat (Firestone et ai,} és Crozét Μ,Ρ, Archaímbauít, G.; Vaneiie, P.; htougnier R Tetrahedron Lett, it 985, M, 5133 -5134} javított változata szerint végezzük és kereskedelmileg beszerezhető dleLÍI-(4-nitrobenz!l)íoszfonátöt (M ijkêplêîû vegyüfelj ês kereskedelmileg beszerezhető tJ-dlmefiM Juíiazán-i-ont (72 képleiű vegyulet) alkalmazunk kiinddíási anyégként 77 és f$ képleté összekötök előállíthatok fi képlete intermedierből a 11. reakcióvázlatnái ismertetért módszer szerint. |02i9] A 16. reakciövázlaí a találmány szerinti olyan hatóanyag-összeköiö-iigindurh konjugatumok előállításinak mértszemt szemléltei, amelyek antitestenként körülbelül 2 ~ körülbetüf4 hatóanyagot tartalmaznak. 16. reakaóvázlat
&amp; általános eljárás: Antitestenként körülbelül 2 - körülbelül 4 hatóanyagot tartalmazó konjygáfumök előállítása áz antitest temteges rninkálma 10210] Olyan könjogáiumok eláállásálioz, amelyek antitestenként 2 hatóanyagot tartalmaznak, általában úgy járunk el, hogy az illető antitestet redukálószer, például: dltlotreitol (DIT) vagy írikarbonihetiííoszíin ffGiP) (körülbelül 1,8 ekv.) segítségévei redukáljuk 1 mkl PTPAdartakné PBS-ben, amelynek pH-jái 50 mM boraiéi 8 értékre álltjuk. Az oldatot 37 C~on 1 óra hosszat; inkubáljuk, és 60 mt-es G25 sőmentesitó oszlopén tisztijük, amelyet 4 ö£Abn P8S/1 mM ÖTPA segítségével kiegyenf tétünk. A tloí-koncentráció az M általános eljárás szedni módon hati;rozhata meg, a protein-koncentráció az A280 érték 1,58 extlhkclős koefficienssel (mg/mí) történő osztásával határozható meg,, és a tioi: antitest arány az N általános eljárás szerirí ti módon határozható meg . §02111 Olyan konlugátumok, amelyek antitestenként 4 hatóanyagot tartalmaznak, ugyanilyen; módszerrel: előállíthatók, azonban az antitest részleges redukálásához körülbelül 4,2 ekvivalens megfelelő redukálószer felhasználásival.
Hatômy^heezékMëkt^i^Mm a részlegesen mÿ&amp;kàft antitesthez P212| A részlegesen redukált antitest minták egy megfelelő hatóanyag -összekötő vegyülefhez konjugilhatől antitestenként körülbelül 2.4, Illetve körülbelül 4,6 mokekvivalens hatóanyag-összekötő vegyület alkalmazásával, így antitestenként 2, ifiéivé 4 hatóanyagot tartalmazó konjugátumot kapunk. A konjugációs reakcioeiegyeket 1 óra hosszat jégen inkubáljuk, a hatóanyagra vonatoztatva körülbeiü; 20-szoros fölöslegben vett eiszteinnei lefojtjuk, és G25 sómeniesitő oszlopon körülbelül 4 °C-on eleálya tisztítjuk. A kapott hatóanyag» osszekotcdlgandurn konjugálurnokat körülbelül 3 mg/hrt koncentrációra koncentráljuk, sterilre szórjuk, slkyofokha osztjuk és fagyasztva tároljuk.
[Ö213J A 17. reakciovázíat hatóanyag-összekötö-Ngandum konjugátum oly módon történő konstruálását ismerteti, amelynek során egy tigandom szylhidfilpsoporljat egy hatóanyag-ősszekötö vegyüleí összekötő-csoportján levő tlol-akoeptor csoporttal reagáltatjuk. 17. reakcióváziaf
[0214] ügandum antitestnek hatóanyag-összekötő vegyüíethez történő kapcsolását szemléltető eljárásokat az alábbiakban az L. -·· R általános eljárásokkal vázölfuk fel. pMiJ L általános eljárás: Antitest Jigandum kapcsolása hatóanyag« összekötő vegyit felhez Az összes reakciólépést jellemzően 4 °C-on hajtjuk végre. Ha a liga odúm egy vagy több diszulfid kötést tartalmazó monoklonáils antitest, a monoklonáils antitest foszfáttal pufféról! sóoldaftal (pH~?,2) készült oldatát p-20 mg/mi) diftoíreitoílal (10 sni végső koncerÁfáció) redukáljuk 37 °C-on 30 percig (lásd: M általános eljárás), és a kis mölékulatöroegü kömpönensek elválasztását mérefklzárásos^kförtiptógfáfia segítségévei végezzük Sephadex G25 oszlopon, 1 mM dietlléntriaminpentaecetsavat tartalmazó PBS-ben, p21i| A ligandum szulíhidnl-fariaírttát 5,5'''dítio bisz(2~nitrobenzoes3v) (DIN8} alkalmazásával határozhatjuk meg, amint az M általános é|áráshil ismertettük (lásd: Riddles, P. vY., Blakeley, R. L. and Zemer, 8. (1979) Anal. Blochern. 94, 75- 81). Az 1. általános eljárás szeriéi módon redukált íigandum P88~seí készült oldatához hatóanyag-összekötő vegyi let MeCN-nel készült oldatát adjuk olyan mennylségben: hogy az oldat 20% tvteCN/PBS (téri./téri) összetételű legyen. A hatóanyag-összekötő vegyüíet menrryisége mintegy 10%-kai több. mint a ligandumon található szulfhídrilcsopoft összes száma. Az reakdiöelegyet 60 percig 4 °€--on tártjuk, majd ciszteinf adagolunk {20-szofös fölöslegben a hatóanyag-összekötő vegyüíet koncentrációjára vonatoztatva). az oldatot ultraszűréssel koncentráljuk, és a kis molekulatömege? komponenseket géiszüréssel eltávolítjuk. A hatóanyag-összekötő vegyüieteknek az antitestre vonatkoztatott számát uv/láthato spektroszkópia segítségével határozzuk meg a llganöumok és a hatóanyag-összekötő vegyülitek relatív exinkciós koefficienseiből származtatod képletek alkalmazisával, amint az 0 általános eprásban Ismertepk. A lefojtott hatóanyag-összekötő vegyüíet mennyiséget azután a P általános eliráshat ismertetői modor? határozzuk meg. reverz fázisú HPLC segítségével. A hatóanyag-összekötö-lígandum konjugátumok íigandum antitesteinek aggregációs állapotát méretkizárásos HPLC útján határozhapk rneg, amint az R általános eláráshan Ismertetjük. A hatöanyag-összekötő-ligandum konjugátumok hászoilhitúk további tiáztitis nélkül.
[Û21TJ il általános eljárás: Antitest láncok közötti dtszulfidhídjainak redukálása. 24 mg antitest alkalmas pufférrel készült oldatához (2,4 ml 10 mg/mi-es oldat) hozzáadunk 3öö gí borát-pufíert fÖÜÜ mÜ nátrlunvborát/50Ö mM nátnimv kíöhd. pH~8.G}, majd 300 μί ditlotreiíolt (DTT: 100 rnM-os oldat H20-ban). A reákcióéiegyei vortex berendezés segítségével keverjük, és 3? °C-on 30 percig snkubáíjuk. Három PD1Ö oszlopot kiegyenlítünk 1 mfvl DfPA4 tartalmazó PBS-sel (PBS-ben), és a redukált antitestei a három PID10 oszloprői eluáljuk. és 4,2 mi PBS/OTPA oldatban (1,4 ml oszloponként) gyűjtjük. A redukált antitestet azután jégen tároljuk. A tioicsoportok antitestenként? számát és az antitest koncentrációját az N általános eljárás szerinti módon határozzuk meg.
[0218] M általános eljárás: Tiolcsoportok iíganduroonkénti számának meghatározása. i[021il Ligandum referenciamintáját vagy az L általános eljárás szerinti módon redukált antitest mintáját körülbelül 1.40 (tömeg/tömeg) arányban PBS-sel hígítjuk, és az oldat uv-abszöröanct^át mérjik 280 nm-nél, standard uv spektroszkópiáé módszerrel. A íigandum:PBS arány az oldatban előnyösen olyan, hogy az uv- afeszoffeaneia: Äitbelöl 0,13 ~ 0,2 AO (afeszofba?)da egpég) legyen..
[Û22Û1 Egy ligand um tesztminíájáí vagy az L, általános eljárás szériái módon redukált antätest íesztmintáját 120 arányban hígítjuk olyan PBS oldattal, amely iPÜS rmlNiterenkéni körülbelül 15 pl DÏM8 törzsoidatot tartalmaz. Ezután készítünk egy vakrniniát* amely a tesztbídsttal azonos koncentrációban DTNB-t tartalmaz (azaz 15 pt DTNB főrzsöldat/m! PBS). A spektrofotométer reíerenciaériékéí a vakmintával nyilára: állítjuk, majd 412 nmeiéi mérjük a tesztminta abszorbanciájál [0221| Az antitest moi-köngeotrácíojáf azután a következő képlel segítségével határozzuk meg;:: [Ugandum] - (DQm&amp;£4efc) x hígítást faktor.
[0222] A tiolcsoportok möhköneehtráCíójái a követkézé képlet segítségével határozzuk meg: í SH] « ^ hígítást faktor.
[0223] Ezután számítjuk az fSH|[Uganduml arányt. Egy redukált monokíooálls antitest íígándym tartalmazhat 1 - körülbelül 20 szuifhidniosoportot, de jellemzően körülbelül i -* körülbelül 9 szulfhldrítesopcrttal rendelkezik így előnyős megvalóshási mód szerint az fSHMUgondum] arány kérülbeiíi?- körülbelül i.
[0224] Nyilvánvaló, hogy az [$H]/[Ugandum) arány az -A3~Vyw-YyrD egységek átlagos számát jeleni; a ligand um egységre: vonatoztalva.
[0225] ö általános eljárás: Hatóanyag molekuláknak egy hatóanyag-összekötő-antitest konjugátumbao tevő antiteste vonatoztatott számának maghalarozasa. A haíosnyagiantíiest arányt egy hatóanyag-ősszekötö-antitesf konjugáfum esetén ügy határozzuk meg, hogy a kővetkező eprássaí mérjük a dííiolreitoiiat (DTT) redukálható tlólcsoportok számát, amelyek a konjugálás után megmaradnak; 2ÖÖ mi hatóanyag-összekőtö-antítest konjugátum mintát kezelünk PfT-yél (1ÖÖ mii oldat vízben); így a OTT koncentrációját 10 mM~ra állítjuk. A kapott, oldatot 3? ®C-on 30 percig inkubáljuk. majd PD10 oszlopról eluáíjuk, etuáloszerkéní FEifDPTAd alkalmazunk. Ezután mérjük a redukált konjugátum OSgaö értékét, valamint a CI; általános epres szerinti módón mérjük a moláris koncentrációt. |022$]: A tioi melons köneenfmekpt DTNB segítségévei határozzuk meg, amint az y általános eijárásnái ismertettük. Azután számijuk a tioldmocenírácíó antitest-koncentrációhoz viszonyított aranyát, és a hatóanyagdigandum arányi: a tioi:antitest arány (N általános eljárás szerint? módon meghatározva), valamint az előbbi bekezdés szerinti módon meghatározott hatóanyag :antítesi arány különbsége adja, [0227] P általános! eljárás: A lefojtott hatóanyag-összekötő vagy Ci lat kosijugátumbam Ez a vizsgára! a hatóanyag-összakőíő-antsíest konjugáiumban levő hatóanyag-összekötő azon mennyiségének kvantitatív meghatározását teszi lehetővé, amely nines kovalensen kötve az antitesthez. Feltételezve, hogy a reakaóesegyben a hatóanyag-összekötő összes maleimidcsoportját lefojtottuk císzteinnet, a aemdootötf hitóahyig a haÄnyag-összekötö vegyülef ciszteinnei lefojtott addunktama, azaz hatóanyag-ÖssZekÖtő-Gys. A proteinszefi hatóanyag·· összekötő-antitest konjugátumőf denatyriiutc, kicsapjuk és eentrifugiliássái izoláljuk olyan körülmények között, ahol a hafóanyag-összekötő-Gys oldható. A nem-kötött hafóanyag-ősszekÖtŐ~Cys~t mennyiségiéi ősfekti§uk HPLG segítségével, és a kapott kromatograrnot standard görbével összevetve meghatározzuk a nem-kötött hatóanpg-osszekötŐ-Cys koncentrációját a mintában, Ezt a koncentrációi: osztok a hatóanyag teljes koncentrációjává! a konjagátonifeam amelyet az 0 általános eljárás és a Q álálánas eljárás szerinti módon határoztunk meg, fÖ22S] Közeiebbröl: 100 ml IDŐ pki hatóanyag-lfker-Gys adduktum .punkaoldatot” készítünk, oly módon, hogy F0:0 mii cisztein PBS/DPTA-va! készült oldatából 1: pi-t és egy hatóanyag-összekötő vegyűlet törzsoldafának megldéíö térfogatát adjuk 08 pl 50% metanol/PBS oldathoz. A «megfelelő ÍirfÖ|af~öt literben számftjdk kl a következő képlet alapján:: ¥ ~ ie-8/|Hafóanyag~ összékötöj, Ezután hat kémcsövet feicimkézunk a kővetkezőképpen: "ön “:0,5’\ "f1',: W: ::3" és !!5”. és megfelelő mennyiségű munkaoldatokat bemérünk mindegyik csőbe, és annyi 50% metanol/PBS oldattal hígítjuk, hogy a térfogat 1G0 mí-t tegyen ki m:indegyík: osőben, A címkék a standard: μ bt koncentrációját jelölik. |Ö22Si 50 pl bátőanyag-összekötö-aniiíesf kenj ugatom oldatot és 50 pl cisztesnnel lefojtott reakcioeiagy-eídatoi G0rrrO gyűjtünk külőn-külön íesztesövekhe, és mindegyiket hígítjuk -20 °C-ra lehűtött 50 μ! metanollal· A mintákat azután 10 perc alatt -20 °C-ra hűtjük.
[0231] Ezután a mintáké: 10 percig 13000 rpm sebességgel centrifugáljuk egy asztali centrifugával. Ä fetüluszőkai HPLG fiolákba visszük át, és mindegyik minta 90 pl-es alíkvopt külőn-külön elemezzük HPI..C segítségével (C12 RP oszlop; (FheomenexJ;; 1,0 mi/perc átfolyási sebesség mellett monitorozzuk a hatóanyag összekötő yegyüiet abszorbsncsa-maxsimuminál- Az alkalfnazöl:l eluáJósaer MeCNi lineáris gradiense 10 ~ É0°/o vizes 5 mM ammöniomdoszfátbao, ::pH~7,4, 10 Pensen át majd §0% MeCN 5 percen át, majd visszatérve a kezdeti körülményekhez^ A hatöaoyagHösszeköífi-üys adöokium jellemzően körülbelül 7 pere és körüíhéiyf tö pere között eluslödtk. §6231] Ezután a standard görbét készlünk úgy, begy a standardok esies-területét felrajzoljuk a koncentrációjuk (phé-ban) függvényében, üneáris regressziós analízist végzünk, begy meghatározzuk a standard görbe egyenletét és kerretádös koefficiensét. Rs értékek jellemzően >0,9% A regressziós egyenletből meghatározzuk a batóanyag"összekötó-Cys adönktum kenoentraelojat a HFUD. mintában és a konjugátumóan a következő képletek alkalmazáséval: iHa?éanyag-összekötö--Cys|HPÍ:c “ CCsúcsferüjai - befogott anyagpmeredekseg [Hatóanyag^sszakild'-^lisBiy^ttavt ~ I x |Ha|öányag»osPzekötó-Cys](HP-,c ***$ [Û232J Â jelenlevő hatőanyag-összekefö-Üys addukturn százaléka a kővetkező képlet alkalmazásával határozható meg;
Hafáanyagmsszékötö-Cys % ~ l#ö * |Hatöányag”összekötö-eys|^ygáfef,p|HatDanyag] ahol fhatóanyag] ~ jkonjugátum] χ hatóanyag/Ah, [konjugátum] a konjugátum koncentráció-vizsgálatban meghatározva, és a hatóanyag: antitest arany a batöanyag;antiest arány vizsgálatban meghatározva. p233J Q általános ©prést Hafóanyag-összekötő-antítesí konjugátum koficentrációjának meghatározása hatóanyag összekötőkre vonatkozóan, minimális uv-abszorbancia segítségével 2SÖ nménél. Hatóanyag'összekötő-antitest. konjugétum koncentrációja ugyanolyan módon határozható meg, mint az eredeti antitest konpenbádiója a megfelelő hígítás ahszGfbanölájáoak mérésével 28# nmmél. a következő képlet alkalmazásával: |lóónjugátumMmg/ml|™ (ÖOsac x hígítás! faktob1f4j * f§234] Hatóanyag-összeköto-antitesi konjugátum koncentrációjának meghatározása a hatóanyag összekötőkre vonatkozóan valódi uv~ abézöfharséíá segítségévéi 2SÖ nménél fpk 68 és 68 képletű vegyüietekl y Ivei a 68 és 8S képletű vegyüieték abszerbanciái átfedik egy antitest abszörbanciáit, a korf ugatom koncentráció spektrofotometriás meghatározása a leghasznosabb, ha a mérést mind 270 nm-nél, mind 2|ö nm-nef kapott abszorbaneia segítségével végezzük. Ezen adatok alkalmazásával ® hatóan^ág-ósszékdtödlgandum konjugaium moláris koncentrációját a következő képiét adja meg: [Koiojogáiumj ~ (DÖsso x 1,23e"'* ~-OQt?q n % htglési taiktör ahol az 1,23e's én ö.Sőe'-' értékeket a hatóanyag és az antitest moláris exíínkcíős koeffioieosibcf számítjuk, amelyek becslése a következő: egye hatóanyag ~ 2,08e4 és« antitest ~ 1 ,87e" %é* hatóanyag ~ i:,i?e4 éssú antitest * 2,240" pilil R általános eljárás: Az antitest aggregáctós állapotának meghatározása egy hafóanyag-összekoto-hgandum konjugatumban. Haicanyagtösszekötő-íigandum konjugátum alkalmas mennyiségét: (-10 gg) rnéretkizirásös kromatográfiás pËC) oszlopról (Tosoh Biosep SW300Ö 4,8 mm x 30 cm etuálás 0;35 mfpéP-hél PBS segítségével) standard körülmények között eluáljuk. Kromatogramokat veszünk lél 220 rím nél és 280 rím nél, és az ODxacyÖD^o arányt számítuk. Ä megfelelő aggregátum reteneiós Ideje jellemzően körülbelül 5.5 perc és körülbelül 7 perc közötti, és a monomer hatóanyag-összekötő-antitest: konjugátuméval körülbelül azonos OO^ÖDass aránnyal rendelkezik. § ,&amp; msÉTwémm P2381 Más szempontokból a jelen találmány olyan gyágyszerÉszerkészitményt biztosit, amely intravénás adagoláshoz van adaptálva, előnyösen tartalmaz la képleté vegyülefei hatásos mennyiségben ás gyogyszerészefiieg elfogadható hordozót vagy vlvoanyagol. .Az egyszerűség: kedvéért a találmányban alkalmazható la képlétö vegyületekeí egyszerűen találmány szerinti vegyületekként említhetjük. A készítmények alkalmasak embernek történő adagolásra. P237J A jelen találmány szerinti készítmények bármilyen formában lehetnek, amely lehetővé teszi, hogy a készítményt embernek intravénásán adagoljuk. így például a készítmény lehet szilárd vagy folyékony. Az adagolás itt ismertetett más utjai, többek között, orális, toplkális, pareníeráiis, szuhiingvaiís, rektálís, vagináüs, okuiáíls és intranazális adagolás. Parenterllis adagolás pékiául bőr alá aduit injekciós, izomba, szegycsontba adott injekciós vagy infúziós technikák. A taiáimány szerinti gyógyszerkészítmények úgy fórmuialhatók, hogy egy találmány çzeriof yegyület a készítmény állatnak történi beadása után biológiailag fmzzáíérhető legyen:. A készítmények lehetnek egy vagy több dózisegység formájában. P238J A győgyszerkészítménpk eloáiíitásáboz használt anyagok az alkalmazott mennyiségben lehetnek nem-toxikusak. A .szakterületen jártas szakemberek számára nyilvánvaló, hegy a gyógyszerkészítményben található aktiv összetevőik) optimális dózisa különböző tényezőktől függ; ilyen tényezők például, de nem kizárólag, az állat típusa |jpt. ember), a taiáimány szerinti vegyidet adott formája, az adagolás módja és egyszerűen az alkalmazott készítmény. pi3Í| A gyógyszerészetileg elfogadható hordozó vagy vlvöanyag lehet szemcsés, hogy a készítmények például por alakúak legyenek, A vívőanyag(ök) féhet(nék) fdlyadékÇokh például amikor a készítmény injektálható folyadék. p24é| A készítmény lehet folyadék formájú: például oldat, emulzió vagy szuszpenzio. A folyadék alkalmas lehet Injekciós továbbításra. Injekciós utón történő adagolásra szolgáló készítményben jelen lehet egy vagy több felületaktív anyag, tartósítószer, nedvesítőszer, diszpergálőszer, szuszpéndifèszèr, puffén stabilizáló és izotonizáló szer is, |Û241] A találmány szennti folyékony készjtínényéki; akár oldatok, szüszpénziók vagy más hasonló formák, tartalmazhatnak egyet vagy többét á következők kézül is: steril hfgltószerek, például kfjékdlós víz, sóoldat, előnyösen fiziológiás sóoldat, Mingermfdat izotóniás nátrium-klorid, stabilizált olajok, például szintetikus mono-vagy digleendek, amelyek szolgálhatnak öídászarkéní vagy szuszpendáló közegként, potietiléngükoiok, glcann, biklodeztriíT, propilénglíkof vagy mis oldószerek; aniibakienáiis szerek, például bénziimiohói vagy metii-parabén; antioxldánsok, például aszkorbinsav vagy náinum-biszuifii; keiáfképzo anyagok, például etléodlâminteiraeoetsav; pufférek, például; acetátok,, nitrátok vagy foszfátok, valamint tonicitást beállító anyagok, például nátrium-klorid vagy dexfróz iParenteráiis készítmény foglalható üvegből, műanyagból vagy más anyagból készült ampullába:, eldobható; fecskendőbe vagy pedig töbhdózisos fiolába:. Fiziológiás sóoldat előnyös acfuyáns, így injektálható készítmény előnyösén steril [0242] A találmány szerinti vegyület adóit rendellenesség vagy állapot, kezelésében hatásos mennyisége függ a rendellenesség vagy állapot természetétől, és standard klinikai technikákkal meghatározható. Emellett adott esetben IP víim vagy m vivő vizsgálatok vehetők igénybe segítségül az optimális dózistariományök meghatározásához. A készítményekben; alkalmazandó pontot dózis függ az adagolás útjáról és a betegség vagy rendellenesség súlyosságától, és a gyakorié orvos megítélése, valamint minden pfyés páciens körülményét alapján kelt meghatározni, P2A2] A készítmények egy találmány szedni vegyület olyan hatásos mennyiségét tartalmazzák, hogy egv mégtefeló dózist kapjunk. Ez a mennyiség jeiemzien legalább körülbelül 0,01% tnlátméay Μ$3Φ· vegyitek a készítmény tömegére vonatoztatva. A jelen találmány szerinti előnyös készítményeket úgy állttjuk elő, hogy a parenterális dózisegység körülbelül 0,01 tömeg% ™;körülbelül 2 íomeg% találmány szehntf yégyüietet tartalmazzon, [02441 Intravénás adagoláshoz a készítmény tartalmazhat körülbelül 1 -korülbaSPl 25Ô mg: találmány szerinti vegyületet az állat testtömeg Ailogmmpifa vonatoztatva, A találmány szerinti vegyület adagolt mennyisége előnyösen a testtömegre vonatkoztatott körülbelül 4 - körülbelül 25 mg tartományba esik. 102451 A találmány szerinti vegyület állatnak adagolt dózisa általában jetlemzién körülbelül Ô,1 mg/kg; - körülbelül 250 mg/kg az êllaiteÂrt^蜷 vongâoztatÿâ Az; állatnak adagolt dózis előnyösen körülbelül ©,1 mg/kg: — körülbelül 20 mg/kg az állat testtömegére vsnatoztáte, előnyösebben körülbelül 1 mg/kg - körülbelül 10 mg/kg az állat: testtömegére vonatoztatva.
[024$] A találmány szerinti vegyületek vagy készítmények adagolhatok Intravénásán bármely kényelmes úton, például injekcióé vagy infúziós úton. ^ilönbözö ^átlltómndszBrek/hatóanyagleadó rendszerek Ismertek, például Ilposzómákba, mikrorészecskékbe, mlkrokapszulákba, kapszulákba stb, történő kapszülázás végezhető, és alkalmazhatók találmány szerinti vegyüiei: vagy készítmény adagolására, Bizonyos megválösttási módok esetén egynél több találmány szenni vegyületet vagy készítményt adagolunk egy állatnak Az előnyös adagolási mód a gyakorló orvos megítélésére van bízva, és részben függ a kezelésre szoruló állapot helyétől (például a rák vagy autoimmun betegség helyétől), p24?| A „ylvóanyag” kifejezésen olyan higilószerf, adjuvénst vagy segédanyagot értünk, amellyel együtt egy találmány szerinti vegyületet adagolunk. Ilyen gyógyszerészeti yívöanyagök lettéinek folyadékok, például víz és olajok, beleértve a kőolaj, állati, növényi vagy szintetikus eredetüeket Is, Ilyenek például a földimogyoró piai, szójabab ólat, ásványi olaj, szezámmag olaj és hasonlók. A yivőanyagok lehetnek sóoldaí, akácmézga, zselatin, keményítő-massza, íafkum, keratin, kolloid szilícíum-oxkí, karfeamid és hasonlók. Ezenkívül alkalmazhatók meg segédanyagok, stabilizáló-, sűrítő-, slkosié-és színezőanyagok. Egy kiviteli alak szerint, lia állatnak adagoljuk, a találmány szedni vegyüietek vagy készítmények és a gyógyszerészehíeg elfogadható vivöanyagok sterilek. A víz előnyös yivőáhyag, ha m találmány szerinti vegyületet; intravénásán adagoljuk. Sóoldatok és vizes dexíróz- ás glicerin-oldatok szintén alkalmaznátok Injektálható oldatokhoz folyékony vivöanyagokkéni. À jelen készítmények kívánt esetben kis mennyiségben nedvesítő*· és ematgeálászereket vagy pH-puférelő anyagokat is tartalmazhatnak. piál] A jelen készítmények lehelnek oldatok, szuszpenziók, emulziók, tabletták, kapszulák, folyadékot tartalmazó kapszulák, porok formájában, vagy pedig: bármely más, Intravénás adagoláshoz adaptált formában. Alkalmas gyógyszerészeti vivöanyagokai ismerteinek a következő szakirodalmi helyen: "Remington’s Pharmaceutical Sciences* |E,W. y artin). !Ql$9f A találmány szerinti yegyuletef embereknek való intravénás adagoláshoz adaptált gyógyszerkészítményként rotin eprásokkal formuláljuk. Az intravénás adagoláshoz alkalmazott vsvőanyagok vagy hordozók jellemzően steril izotóníás vizes pefferoídatofe, Ha szükséges,, a készítmények tartalmazhatnak szokibillzálószert is. intravénás adagolásra szánt készítmények adott esetben tartalmazhatnak helyi érzésteleniföt, például llgnokaínt m Injekció helyénél jelentkező fájdalom enyhítésére. Az összetevőket általában különállóan vagy összekeverve, egységdózis term^ában biztosítjuk, például száraz lioflllzilt por vagy vízmentes koncentrátum formájában, hermetikusan lezárt konténerben, például ampuliban vagy tasakhan, a hatóanyag mennyiségének megadásával. Ha egy találmány szerinti vegyidet Infúziósán adagolandó, elkészíthető például Infúziós palánkká!:, amely gyógyszerészeti minőségű: steril vizet vagy sóoldatot: tartalmaz. Ha a találmány szerinti vegyüietei injekciósán adagoljuk, egy ampulla steril Injekciós víz vagy sóoldat biztosítható, hegy az összetevők adagolás előtt összekeverhetek legyenek. PPÖJ A gyôgyszei1<^i^éB^k.#liôà8}tïà à l^ÿ^részeti szaMereieíen jő! ismert módszerek segítségével:. Így példáé! egy injekciós adagolásra szánt készítmény előállítható oly módon, hegy egy találmány szerinti vegyületet oldat képzéséhez vízzel kombinálunk Felületaktív anyag adható homogén: oldat vagy szuszpenzió kialakulásának elősegítésére. A felületaktív anyagok olyan vegyietek, amelyek nem-kovalens kölcsönhatásba lépnek egy találmány szerinti vegyuleitel, hogy elősegítsék az aktív vegyület vizes szállítórendszerben való oldódását vagy homöiiá szuszpendáiását
8.9. A TALÁLMÁNY SZERINTI «GYULETEK TERÁRáSALKALjgÁM |Ö2S1| A találmány szerinti vegyietek alkalmasak rák, autoimmun betegség vagy fertózéses betegség kezelésére állat esetén.
[Ő2S2J A találmány szerint! vegyületek alkalmasak tumorsejt vagy ráksejt szaporodásának gátlására, vagy pedig rák kezelésére állat esetén. A találmány szerint: vegyületek ennek megfelelően különböző helyzetekben alkalmazhatók állati rákok kezelésére. A éaföapyág-ósszekötődígandom konjugáiumek alkalmazhatók hatóanyag vagy hatóanyag egység szállítására tumorsejthez vagy ráksejthez. Anélkül, hogy ragaszkodnánk az elmélethez, egy megvalósítási mód szerint egy találmány szerinti vegyület ligaodum egysége képes kötődni egy ráksejttel vagy egy tumorsejttel asszociált antigénhez. Illetve asszociáiódni ezekkel, és a találmány szerinti vegyület receptor által közvetített endoeífezissal be tud jutni a tumorsejtbe vagy ráksejtbe. Az antigén lehet tumorsejthez vagy ráksejthez kapcsolt, vagy pedig lehet a tumorsejttel vagy ráksejttel asszociált extraceiiuíáris mátrixprotein. Ha benn van a sejtben, az összekötő egységen belüli egy vagy több specifikus pepiid szekvencia hidroiittkusan hasltódik egy vagy több, tumorsejttel vagy ráksejttel asszociált proíeáz által, ami a hatóanyag vagy hatóanyag-összekötő vegyület felszabadulását eredményezi. Ä felszabadult hatóanyag vagy hatóanyag-összekötő vegyület azután szabadon vándorol a sejttölyadékban és citoíoxikus aktivitásokat Indukál Egy alternativ megvalósítási mód szerint a hatóanyag vagy hatóanyag egység a találmány szerint: vegyüleiről a fumorsejten vagy ráksejten kívül iehasModik le, és a hatóanyag vagy hatóanyag-összekötő vegyület azután hatol be a sejtbe.
[Û253J Így mégvilösifásl mod szerint a íigandum egység képes kötődni a íumorsejthez vagy ráksejthez.
[0254] Más megvalósítási mód szerint a llgandum egység képes kötődni a tumorsejt' vagy ráksejt-antigénhez, amely a tumorsejt vagy ráksejt felületén fatálható, fö2S3] Más megvalósítási Mod szerint a llgandum egység képes kötődni a tumorsejt- vagy ráksejt-antigénhez, amely egy a tíjmöfsejitel vagy ráksejttel asszociált extraceluiáns mátrixprofein.
[0258] Egy megvalósítási mód szerint a tumorsejt vagy ráksejt olyan típusú tumorhoz vagy rákhoz tartozik, amelynek az állat kezelésére vagy megelőzésére szorul [Ö2á?í A Ugandám egység tumorsejttei vagy ráksejttel szembeni specifieitása fontos lehet azon tumorok vagy rákok meghatározásában, amelyek a leghatékonyabban kezelhetők, így például 8R98 llgandummal rendelkező találmány szerinti vegyöfeiek hasznosak lehetnek antigén-pozitlv karcinómák (carcinomák) kezelésére, ilyenek például a tüdő. emto, vastagbél. petefészkek iS: hasnyálmirigy karói némái And-CÖSő vagy anti-CD4ő lígandum egységei tadalmszo találmány szerinti vegyüietek hasznosak lehetnek rosszindulatú hematplogiat esetek kezelésére.
[0238] Rákok egyes további, a találmány szerinti vegyülefekkel kezelhető típusait a 3. táblázatban soroljuk fel, a korlátozás szándéka nélkül
Szilárd tumorok többek között de nem kizárólag; fibrosarcoma mppsárcoma iiposáfcoma oHöndrosarcoma osteogen sarcoma chordoma angiosarcoma endofellaiis sarcoma lymphanglosarcoma lymphangioendotelialis sarcoma synovioma mesothelioma
Ewing-tamor leiomyosarcoma rhabdomyosarcoma vastagbélrák vastagbéi-végbét-f ák veserák hasnyáimihgyrák csontfák emlőrák petefészekrák prosztatarák nyeiöcsörák gyomorrák szájrák orrrák torokfák pikkelysejtes kareinóma bazális sejtes kmámmá adenokarolnóma izzadsagmirigy-kareinoma faggyúmiflgy-karolnóma szemölcsös kareinóma szemolesós adenokarclnómák cvstade π o karc; n ó ma veib--karcinéma bronchogén kareinóma veseselt-kaminóma hepatoma epevezefék-karcinóma chorion kareinóma seminoma embrionális kareinóma
Wilms* tumor méhnyakrák méhrák hererák kissejtes tüdő karcinőma hólyagkardnóma tüdőrák hámszövet karcinőma glsorna glioblastoma multiforme astrocytoma medulloblastoma craniopharyngioma ependymoma pineaioma hemaoglöPlasforoa hallási neuroma oligodendroglioma meningioma bőrrák melanoma neuroblastoma retinoblastoma vérmsonbrákok például de nem kizárólag;; akut ümíobiaszics leukémia "ALL” B-sejtes akut llmfoblasztos leukémia T-sejtes akut llmfoblasztos leukémia akut mleioblasztos leukémia "AMI” akut prornieiocltás leukémia "API" akut monoblasztos leukémia akut eritroleukémiás leukémia akut megakarioblasztos leukémia akut mielomonocítás leukémia akut nemdlmíöostás leukémia akut ^ern-dífferendálodot leukémia krónikus mielocltás leukémia XML" krónikus Hmfocüás leukémia "CUö hajás sejtes leukémia myeloma multiplex ájku-t és krónikus leukémák: iimfőblasztos mielogén limfóaös mielocitás leukémiák lymphpmá^
Hodgkln-kór noa“Hodgkln--íympóorna myeloma multiplex Waíden$tróm--makíöglobulinémia nehéziáno bétégsép polycythemia vers |Ú2SS] A találmány szerinti vegyiletek kemolerapeutikurnokkéní is használhatók nem-célzói fomiában, így például a hatóanyagok maguk vagy a hatóanyag-Összekötő vegyöleték használhatók petefészek', CNS-, vese-, tüdő-, vastagbél· rik, melanoma vagy hematológiai rákok vágy tumorok kezelésére. |Ô2S0j A találmány szerinti vegyiletek tumor vagy rák künjugáíum-specifíkus céíbavéleléí biztosítják, így csökken e vegyületek általános toxicitása. Az összekötő egység stabilizálja a találmány szerinti vegyüteteket a vérben, tumorspecifikus proteázok azonban mégis hasítják a sejten belül, így felszabadítják a hatóanyagot p2it] Rák. például ~ de nem kizárólag · tumor, rneiasztázis vagy bármilyen betegség vagy rendellenesség, amelyre aam^oatrblált sejtszaporodás jellemző, kézelheiő vagy megelőzhető találmány szerinti vegyiíei adagolásával. 10202] Más megvalósítási módok esetén a találmány a találmány szerinti vegyületek alkalmazását biztosítja rák kezelésére vagy megelőzésére, amelynek során kezelésre szoruló állatnék találmány szerinti vegyujet és kemoterápiás szer hatásos mennyiségét adagolok. Egy megvalósítási mód esetén a kemoterápiás szer olyan anyag, amellyel a rák kezelését nem találtuk retrakternek, IVjásik megvalósítás! módi szerint a kemoterápiás siet olyan anyái, âmëïyel a rák kezelését reíraktarnek találtuk, A találmány szeriéi yegyúíéték adagolhatok olyan állatnak, amely rák kezeléseként sebészeti beavatkozáson is keresztülment p203| Egy megvalósítás! módi esetén másodíágos kezelési módszerként radioteráplát alkalmazunk, p2i4|; Egy bizonyos megvalósítási mód esetén a tálálmlny szerinti vegyilletet a kemoterápiás szerre! vagy a raöíoterápláva! párhuzamosain adagolók. Egy bizonyos megvalósítás! mód esetén a kemoterápiás szert vagy radioterápiát a találmány szerinti vegyület adagolása előtt vagy után alkalmazzuk, előnyösen legalább egy órával, ót órával, M órával, egy nappal, egy hittei,, egy hónappal, vagy még előnyösebben néhány hónappal (pl akár három hónappal) a találmány szerinti yegyület adagolása eled vagy után alkalmazzuk, [0265] Kemoterápiás szer adagolható kúraszerű kezelési sorozat folyamán, és adagolható a 4, táblázatban felsorolt kemoterápiás ágensek bármelyike vagy azok kombinációja A besugárzásra vonatkozóan- bármely radioterápiás protokoll alkalmazható a kezelendő rák típusától függően, így például, de nem kizárólag, röntgensugár alkalmazható, különösen nagyenergiájú megavoitos (1 MeV-nál nagyobb energiájú sugáÉezeiés) alkalmazható mély tumorok esetén, és elektron-sugárnyaláb és ortovoltos röntgen-sugárzás afkafmazbató bőrrákok esetén. Gamma-sugarat klboosátó raetloizotópok, így például a rádium, kobalt és más elemek radioaktiv Izotópja szintén atkalmazhato. p2áS| Emellett a találmány rák kezeléséhez járul hozzá egy találmány szerinti végyüiéttei kemoterápia vagy radiöterápíá, alternatívájaként, ahol a kemoterápia: vagy a radioierápia tűi toxikusnak bizonyult vagy bizonyulhat, például a kezel állatnak elfogadhatatlan vagy elviselhetetlen mellékhatásokat okoz. A kezelt állat adott esetben kezelhető a rák kezelésére szolgáló más módszerekkel is, így például sebészeti utón, rádíoferápláva! vagy kemoterápiával attól függően, melyik kezelést találjuk elfogadhatónak vagy elvtselhetőnek, P267| A találmány szedni vegyületek alkalmazhatok in víiro vagy ex vivő módon, így például bizonyos rákok kezelésére, Ilyenek például, de nem kizárólag:, a leukémiák és lymghömák, az ilyen kezelések körébe tartozik például az adtológ össejEáíü:ttetés:. Ez többlépéses efárást jelenthet, erTielyoek saras az allai autolog hemafopoíetikus őssejtjeit összegeiül, az összes ráksejtet kihajtjuk: a beteg maradék esoniveíosejt-popylációját azután besugározzuk a találmány szerinti vegyidet nagy dózisának adagolásával, nagy dózisé radioterápévai együtt vagy a nélkül és a beültetendő őssejteket infúzióval visszajuttatjuk az állatba. Ezután támogató ellátást biztosítunk, miközben a helyreáll és áz állat felépül
f.10.2. RÁK T5lBÍWT6áN¥A66At TÖRTÉNŐ KËZËLÉSE
[0288] Ä jelen találmány kóréba tartoznak rák kezelésére szolgáló alkalmazások, oly módon, hogy az ilyen kezelésre szoruló állatnak egy találmány szerinti vegyüiet és egy másik terápiás szer, amely egy rákellenes szer, hatásos mennyiségét adagoljuk. Alkalmas rákellenes szerek például de nem kizárólag, a meíoírexát, távol, L-aszparagináz, merkaptopurirt, iioguanin, hídroxikarbamkí, citarabín, cíkloíoszfamki. ifoszfamid. nitrozokarbamidok, clszplatin, karboplatin, mitomicin, dákarbazin, prokarbizin, legetekén ; nitrogén-mustárok, cifoxán. etopozíde, 5-tluoruracil 8CNU, ínnotekán, ksmptotecinek, bleomicin, doxorubicin, Idarubidin, daunorubidn, daktinomiein, pílkaraicíe, msioxantron, aszparagináz, vinblasztin, vlnkászin,, vinorelhln, pakiltaxel és a docetaxel Egy előnyős megvalósítási mód szedőt a rákellenes szerek közé tartoznak, de nem kizárólag, a 4. táblázatban felsorolt hatóanyagok,
4. TÀ8LÂZAT
Alkiezöszerek
Nitrogén-mustárok: cikíofoszfarnid ifoszfamid trofószfamid klorsmbuoil
Nifrozokarbanúdólő karmosain (BCNU) iömüsztió: (öQNÜ)
Aikilszulfonátok buszyjisd freoszulfán
Trlazinok: dakarbszln
Platina-tartalmú vegyülefek: clszplatin karboptatin Növényi alkaloidok
Vinka-alkaloi'dok: vínkriszlin vsnbfsszbn vindezln vsnorölöln
Taxoidok: paklitaxef doceiaxol DNS topöizomeréz Inhibitorok
Epipodofítíí-nek: etopozid teotpozid topotokén 8-arnlnokainptotocin kampiotecin khsznatol
ytömicinak: mtomícin C
Anilmeiabotitok
Antlfdátok; DHFR-'lnhibriorok; meiotrexát tnmetmmt IMP'-dehidrogenáz Inhibitorok: mlkotenolsav
ísazofunn ribavirin EJ CAR
Rifeonukleotid-reduktáz inhibitorok: hidroxikarbamrd daforoxamin Pírimldin-analógok:
Uracil-analögök: S-íiuoruracil íloxundln doxitlundin ratitrexod
Citözln-analógok: oltáráéin (ara G) ckozitvaraibinozíd
Hudarabm
Purin-anaiôgok: merkaptopunn tioguanin
Hormon-terápiák:
Receptor antagonisták:
Antiósztrogének: tamoxifen raioxiíén megesiro! LHRH agonisták: gosoreíte tenprotiteacetát
Anhandrogének; ffutamid
PikafütamiP
Retinoidok/Deítoidok
Ds* vitamin analógok: EB 1089 CB 1093 KH 1060
Foíodinamikus terápiák: vertoporfín (ΒΡΟ-ΜΑ) ftaiocianin Pc4 fotöszenzitizálé demetöx;~häpokreihn A (2BÄ-2-DMHA)
Cstokinek: interferon-a inferferon-y tymornekrózis-fakfor
Egyebek·, fzöprenifezés inihíbítorcsk; fovaszfatin Öopamfnerg-oeuröfoxinek: 1 -metil44entipodtnium-ion
Seftóiktus inhibitorok: sziaurosponn
Akrinormdnek: aktmomian D daktinomicin
Bieornicinek: bíeomicin A2 bíeomicin B2 pepbmsüin
Aitricikiîriék: daunorubiein doxorubicin Çadrlomicm} idarubicin epirubidn plrarubMb zoruhicin mitoxantron MDR inhibitorok: verapamil
Da2* AIP~áz: inhibitorok: iapszigargin mi. autoimmun betegségek kezelése [0269] A találmány szerinti vegyiletek használhatók olyan eejtek pusziílasára: vagy repiíkácíójának gátlására: amelyik autoimmun: betegséget háznak; létre, vagy pedig használhatók autoimmun betegség kezelésére. A találmány szerinti vegyOleíek ennek megfelelően különböző helyzetikben: alkalmazhatók autolmmunbetegség kezelésére állat esetén. A ha^abyagmsszekotő-'liganduni konjugáiumok alkalmazhatók egy hatóanyag célbavett sejthez történő eljuttatáséra Anélkül, hogy ragaszkodnánk az elmélethez, egy megvalósítási mód szerint a hatóanyagmsszeköfő-fgandum korpgafurn asszooiálódik egy antigénnel a oélbavett seit felületén, És a találmány szenntl vegyüiet receptor által közvetített endocitózissal bejut a célbavett sejtbe. Ha már benn van a sejtben, az összekötő egységen belüli egy vagy több specifikus peptld-szekvencia enzlmaftkusan vagy bidroiiflkusan hasítódlk. ami a hatóanyag felszabadulását eredményezd A felszabadult hatóanyag azután szabadon vándorol a sejtfoly adókban, és citotoxikus aktivitásokat indukál. Egy alternatív megvalósítási rnöd szerint a hatoányái tehailfodlk a tálatrnány szerinti vegyületrői a célbavett sejten kívül, és azután a hatóanyag behatol a sejtbe.
[O270J Egy megvalósítási mód szerint a Igandom egység az autoimmun antigénhez képes kiindul, |Ö2?1] Másik megvalósítási mód szerint a ligandum egység az autoimmun: antigénhez képes kötódnl, amely a sej! felületén van.
[Ö27.2] Egy másik megvalósítási mód szerint a célbavett sejt olyan típusú, amely az olyan betegséget okozó autoimmun antigént termeli, amelynek az áltat kégliére vagy megelőzésére szorul. P2?3| Egy előnyös megvalósítási múű szerint a llganduoi az autoimmun beteg állapotai kapcsolatos, aktivált limfoeitákhoz képes kötődni, P274J További megvalósítási mód szerint a találmány szerint vegyuleíek elpusztítják: azon sejteket vagy gátolják a szaporodásukat, amelyek egy adói: autoimmun betegséggel kapcsolatos autoimmun antitestét: termeinek. |Ö2?I| Autoimmun betegségek egyes típusai, amelyek a találmány szerinti vegyüíetekkef kezelhetők, többek között, de nem kizárólag: Th2-límfociiákkal kapcsolatos rendetleneaségék (például atoplás dermatitis, atoplás asztma, rhitioeonjucivils, allergiás nátha, Ömenn-szmdrórna. általános elmeszesedés és grafbversus-host betegség): Th1 lymphocitákkal kapcsolatos rendellenességek (például reumás izületi gyulladás, sclerosis multiplex, pszoriázis, Siorgrerv szlndróma, Hashimoto-thyroidifis, Grave-betegség, primer epecirrózis. Wegener-granulomatesis és tuberkulózis); aktivált B-ltmíöeitákkal kapcsolatos rendellenességek (például általános lupus erythematosus, Goodpasture-szindróma, reumáé izületi gyulladás és l-es típusú cukorbetegség): valamint az 5. táblázaiban felsoiroltak:.
5. TÁBLÁZAT
Aktív krónikus májgyulladás Addison-kór
Allergiás fogmeder-gyulladás Allergiás reakció Allergiás nátha Alport szindróma Anaphíaxis Ízületmerevségeí okozó csugolyagyulladás
AmiUoszfoiipki-szindróma
Arthritis (izületi gyulladás)
Ascariasis (orsőíérgesség)
Aspergillosis Atoplás allergia Atropiás börgyulladás
Atfopíás nátha Behcet-kor Madádenyésztő-tűdő Bronebsális asztma Caplamszlndfoma
Cardiornyopathlâ (szlvizorndbanlaiom) Cöiiákia
Chagas-kor
Krónikus glomerulonephritis
Gogan-szindróma
Hideg agglutinin betegség
Veleszületett rubeola fertőzés CREST-szind réme
Crohn-betegség
Cryoglobulinemia
Cushlng-szindroma
Dermatomyositis
Diszkóid lupusz
Dressler-szlndrőma
Eaton-Lamhert-szlndróma
Eohovlrus fertőzés
Encephalomyelitis
Endokrin szembetegség
Epstein-Barr vírus fertőzés Ló kebesség
Eryíhematosis
Evan-szindróma
Feiíy -szindróma
Fibromyalgia f u ohm ug á rtestgy u I ladás
Gyomorsorvadás
Gyomor-bél allergia Ónássejtes arteritis
Glomerulonephritis
Goodpasture-szindróma Graf! v. Host betegség Graves-hetegség Guiliain-Baffe-betegség Hasbtmeto-paíssmtrig^-giyultadás Hemolltikus vérszegénység HenodvSchoniein Purpura Idlopaíhiás mellékvese sorvadás Idiopaihlás füdöfibrózis igA. nephropathia Gyulladásos bélbetegség (IBD) Inzulin-függő diabetes mellitus Fiatalkori arthritis F saraikon diabetes mellitus (I-es típusé)
Lambert-Eaton szmd roma
Lamlnitis
Lichen planus
Lupoid: hepatitis
Lupus ümfoeltopénia (csökkent iimfocita-szám) Meniere-kor
Kevert kötőszöveti betegség Sclerosis multiplex Myasthenia Gravis Vészes vérszegénység Poiygiandulans szmdrámák léé előtti: eibufulás Primer agammaqlobulinerma Primer biiaris cirrózis Psoriasis
Psoriasisos izületi gyulladás Ravnauds-tunet Ismétlődő vetélés Reiter-szsndfôma
Reumás láz
Eeumeszerü Izületi gyulladás
Sampter-szlnürőma
Schistosomiasis
Schmktoszindröma
Scleroderma
Shulrnan-szindróma
Sjorgervszindróma
StifT-yan·-szindróma
Sympathetic Ophthalmia (szimpátiás szemgyulladás) Általános lupus erythematosis
Takayasu -arteritis
Halántékútöér-gyuliadás
Thyroiditis (paízsmidgy-gyutladás) THmmhoeytopema (csökkent ímmhocí!a--szám} Thyrotoxicosis (körös paizsmíngy4ulíeogés)
Toxikus epidermatic necrolysis B-tipusű inzuiirurézisztencia
Les típusú diabetes mellitus
Ulceratív colitis
Uveitis
Vitiligo
Waldenstrom-macroglöbulemia
Wegener-granulomatosss mmmmm betegséged több hatóanyaggal történő
KEZELÉSE P2TS1 A jelen találmány körébe tartoznak autoimmun betegség kezelésére szolgáló alkalmazások is, oly módon, Hogy az ilyen kezelésre szoruló áltatnak egy találmány szerinti vegyület és egy másik, autoimmun betegség kezelésére isméd terápiás szer Hatásos mennyiségét adagoljuk. Egy megvalósítási mód szerint az autoimmun betegség elleni szerek például, de nem kizárólag, a 6, táblázatban felsorolt szerek.
6. TÁBLÁZAT ciklosporm cjklosporin Ä mikophenitát mofetil .szíroíimus? takrollrnusz enanercept prednizon azaíiopnn
metótrexát-dkíofoszfamM prednizon aminokapronsav klorokvin
Mdroxíklorokvin hidrokortizon dexarneiazon ktorambucsi
OHEA danazol hrorookfiptin meioxicám
Infliximab
ő,12, FERTÔZÉSES BETEGSÉGEK KEZELÉSE
[0277J A. találmány szerinti vegyöleiek használhatok fertőzései betegséget okozó sejtek pusztítására vagy szaporodásának gátlására, vagy pedig fertőzése® betegség kezelésére. A találmány szerinti vegyületek ennek megléteiden különböző helyzetekben alkalmazhatók fertőzéséé betegség kezelésére állat esetén. A hatéanyag-összekötö-ligandum konjügáturnek alkalmazhatók egy hatóanyag eélbavetf sejthez történő eljuttatására. Anélküli, hogy ragaszkodnánk az elmélethez, egy megvalósítási mód szerint a hatóanyag-összekótő-llgandum konjugáíum asszooiálédik egy antigénnel a oéibavett sejt felületén, és a találmány szerinti vegyület receptor által közvetíteti endocitózissai bejut a célbaveft sejtbe.
Ha már Äh var? a sejtben, m összekötőn belül? égy vagy több spedikus pepiid* szekvencia enzirnailkusan vagy bidroiittkusan hasitédik, ami a hatóanyag: felszabadulását eredményezi, A felszabadult hatóanyag azután szabadén vándorol a sejtfolyadékban, és citotoxikus aktivitásokat indukál. Egy alternativ megvalósítási mód szerint a. hatóanyag febasítödik a találmány szerinti vegyöletrol a oélbavet sejten kívül, és azután a hatóanyag behatol a sejtbe. |027S| Egy megvalósítási mód szerint a figandum egység a fertözéses betegség sejthez képes kötődni (027SJ Így megvalósítási mód szerint a fertőzésen betegség olyan típusé fertözéses betegség, amelynek az állat kezelésére vagy megelőzésére szorul. (0280) Egy megvalósítási mód szerint a találmány szerinti vegyietek elpusztítják az adott fertözéses betegséget okozó sejteket vagy gátolják azok szaporodását. |Öͧ1 J Fertözéses betegségek: egyes típusait amelyek a találmány szerinti vegyietekkel kezelhetők, a 7, ilblázathan soroljuk fel, á koriátozáS: szándéka nélkül.
7. TÁBLÁZAT
Baktériumok által okozott betegségek:
Diptheria (diftéria)
Pertussis fszamárköbögés)
Rejtett hakteriémia Húgyúti fertőzés
Gastroenteritis (gyomor-bél hurut)
Cellulitis
Epiglottitis ígégefedö-gyuiiadás)
Tracheitis (légcsögyuíiadás)
Adenoid Hy perírophia
Reiropharyngealis Abcess (garat mögötti tályog) Impétigo (dtvar)
Ecthyma (pustulás börbeszürodés)
Pneumonia (tüdőgyulladás)
Endocarditis (szivbelhártya-gyuliadás)
Septic Arthritis (széphkus Izületigyulladás)
Pneumococcusos
Peritonitis (hashártya-gyulladás)
Baciermia
Meningitis (agyhártyagyulladás)
Akut Purulens Meningitis (akut gennyes agyhá rtya~gy ulladás) U rethritis (h ugyesög y y il adás)
Cervicitis (mádnyak-gyulladás)
Proctitis (vég bél-gyulladás)
Pharyngitis (torokgyulladás)
Salpingitis (méhkért-gyulladás)
Epididymitis (mellékltére-gyulladás)
Gonorrhea
Syphilis
Listeriosis
Anthrax:
Nocardiosis
Salmonella
Typhus abdominalis (tífusz) Vérhas
ConjurUivitís (kötohártya-gyullaoás)
Sinusitis (mellèküreg-gyulladâs)
Brucellosis
Tullaremia
Cholera (kolera)
Buhenlc Plague (buhopestls)
Tetanus
Nekrotizáió bélhurut
Actinomycosis
Kevert anaerob fertőzések
Syphilis
Visszatérd láz
Leptospirosis
Lyme-kór
Paíkányharapásdáz Tuberculosis {tüdöbaj}
Lymphadenitis {nyírokcsomó-gyuiladás}
Lepra
Chlamydia:
Chtamydiás tüdőgyulladás Trachoma tnklyziós kötőhártya-gyulladás Általános gomhahetegsegek:
Histoplamosls
Coceicidiodomyeosis
Blastomycosis
Sporotrichosis
Cryptoooccsis Általános candidiasis
Aspergillosis
Mucormycosis
Mycetoma
Chromomycosis
Rickettsiák által okozott betegségek:
Typhus (kiütéses tífusz)
Rocky Mountain láz Ehrlichiosis
Keleti kullancs által terjesztett ricketísíosí's R'iokéttsiás kiütés Q-táz
Bartoneitosis Parazitás betegségek:
Malaria Bahesiasis Afrikai álomkor ChagaS'kór Leishmaniasis Dum-dum láz
Toxoplasmosis
Meningoencephalitis (agyvelö-agyburokgyuíiadás) Keratitis (sza ru h à rty a-gy u 11 adás)
Amoeebiasis
Giardiasis
Cryptosporidiasis
Isospohasis
Cyclospodasis yiorosporidiosis
Ascariasis
Osforgliiszta fertőzés Horogféreg fertőzés Fonalféreg fertőzés Ocular Larva Migrans Trichinosis
Medinai féreg-fertőzés (GuineaWorm Disease, Dracunculiasis)
Umfaílkcs fonalféreg fertőzés Loiasis
Folyóparti vakság
Kutya Dlrofilana immifis fertőzés
Schistosomiasis Úszó-viszketegség
Keleti tOdömétely
Keleti májmétely
Fascioliasis (mételyfertőzés)
Fascloiopsiasis Opisthorchiasis Gaiandféreg fertőzések Eehtnococcus-eysfa betegség: Aíveoiáns Eehinocoocus-oysta betegség Vírusos betegségek;
Kanyaró
Felheveny meszesedést kiváltó panencephaiitis
Kozönséaes nátha
V
Mumps
Rubella (rubeola, rozsammlo)
Roseola (rózsaszínű bőrfolt) ötödik betegség Bárányhimlö Légúti' óriássejfes vírusfertőzés (RSV fertőzés) Group
Bronchiolitis Fertőző mononucleosis Poliomyelitis Herpangma Kéz-, száj- és körömfájás betegség Bornholm-botegség, pleurodynia Genitâlis herpes Genitalis szemölcs Aszeptikus agyhártyagyulladás Myocarditis (szMzomgyuItadas)
Pericarditis (szivburokgyuliadás) Gastroenteritis (gyprnor-béihurut)
Szerzett Immunhiányos szindróma (AIDS)
Reye-szindróma
Kawasaki-szindróma
Influenza Vírusos betegségek
Bronchitis (hörghurut) Vírusos ,,sétálé!í tüdőgyulladás Akut lázas légzőszervi betegség Akut pharyngoconjonctiváiis: láz járványos szaru·' és köfőbártya-gyulladás Herpes Simplex: Virus 1 (HSV-1)
Herpes Simples Virus 2 (HSV-2) Övsömör
Cytomegaíiás zárványtestes betegség
Veszettség Súlyosbodó muítiíoeaiis leukoencephalopathla Kuru
Fatális familiáris rrtszomnia
Creutzfeldt"Jakob~kDr
GerstmanndStraüsster--Scheií]:ker-kéí
Trópusi görcsös részleges bénulás
Nyugati kVericephallfis
Californias encephalitis
St Louis encephalitis Sárgaláz
Dengue
Urnföcitás choriomeningitis
Lassa-láz Vérzéses láz
Hanfuirus pulmonáris szindróma yaröürg-uirus fertőzések Ebofa-vírus fertőzések Himlő 8-12-1. FERTŐZÉSES BETEGSÉGEK TÖBB HATŐAHVASGAt, TÖRTÉNŐ
KEZELÉSE 10282] A jelen találmány körébe tartoznak fertőzéséé betegség kezelésére szolgáló alkalmazások is, amelyek során a kezelésre szerűié állatnak a találmány szerinti; vegyulei és egy másik, fertőzése® betegség elleni terápiás szer hatásos, mennyiségét adagoljuk. Egy megvalósítási mód szerint a fertőzése® betegség elleni szerek közé tartoznak, de nem kizárólag a S. táblázatban felsorolt szerek, 8. TÁBLÁZAT Antiba kterlálls Szerek: β-taktâm Antibiotikumok:
Penicillin G Penicillin V KIöxacHiio
Dikioxadliin
Metlcillin
NafcíiHn
Oxacillin Âmpidifin
Amoxicillin
Bakampiciihn
AziociHin
Karbeniciin IMIeziodli in
Piperacillin
Tikarolin
Aminogiikozidok:
Amikacin
Gentamicin
Ksnsmidn
NeomsCin
Netilmicin
Szirepiomidn loferamidn
Makroibok:
Azltromicin
Klaritromicin
Eritromlcsn
Linkcmdn
Kllndamidn
Tetracikiinek- : Demekfociklln:
Dcxidklin iMinociklin Oxitetfacikl'in Tetracik.fi n
Kinolonoki
Kinoxadn
Nalidixlnsav
Fluorkinoíonok;
Ciprofloxacin
Enoxacin
Grepaííöxacin
Levofloxacin tornefloxadn
Norfloxacin
Ofloxacin
Sparfloxacin
Xrovafioxidn
Polipeptidek:
Bacitracin Köllstin Pöllmixln B
Szulfonamldok: : Szulfizcxazo!
Szulfametoxazo!
Szulfadlazln
Szulfamotkol
Sxukaceiamid Különféle antibakferiálls ágensek:
Tnmetoprirn
Szulfametazol
Klorarnfenlkcl
Vankcmldn
Metronidazol
Rvinuprisztln
Daiiopnsxiin
Rifampin
Speklinomicin
Nitrofurantoin
Antivirális ágensek: Általános antivirális ágensek: Idoxuradlo Vida rabló Tíffiunchn Aelkíow Famddkiovtr Pendklovir Vaiacikiovlr Ganclcikíovlr Roszkamef Ribavirin Amantadin Rimaniadln
Oidofovir
Antiszensz Gligonukteolidök
Immunglobulinok
Inteferonpk
Hatóanyagok HIV fertőzésre:
Zidovudin
Oidanozin
Zafcliabin
Sziavudín
Lamivudin
Nevtrapin
Delayírdín
Szakvsnavir
Ritonavir indinavir
Nelfinsw
5-13. TOVÁBBI IERAPIÁS SZEREK
[0283] Â- jéien alkalmazások terébe tartozik továbbá egy találmány szériái vegyijeinek és egy tovább! terápiás szamok vagy győgyszarészetileg elfogadható sóinak vagy szolvátjainak alkalmazása is. A találmány szerinti vegyöleí és a másik terápiás szer hatása lébe! additiv vagy ^ előnyösebben - szinergikus. Egy előnyös megvaiostási mád esetén egy találmány szerinti vegyüieíeí tartalmazó készltmlnyt párhuzamosan adagolunk egy vagy több további terápiás szer adagolásával amely(ek) képezheii(k} ugyanazon készítmény részét vagy pedig Jelen leheí(nek) a találmány szedni vegyületei tartalmazó készítménytől eltérő készimenyben. Másik megvalósítási mód esetén egy találmány szerint! vegyüleiet a másik terápiás szer(ekj beadása előtt vagy után adagolunk.
[0284] Bak, autoimmun betegség vagy fértözises betegség kezelésére a másik terápiás szer lebet egy hányinger elleni szer, Megfelel# hányinger elleni szerek például de nem kizárólag ; a metoklopromid, domperidon, prokíorperazio, pfornétózíh, kforpromazin, tbmetotenzamld, ondanzefron, granizetron, hMrozizim ácétllleuoín-rhöhoetaholamtn, álizápfid, azazetron, benzkvinamld, bietansutln, bfómoprid, buklizin, kleboprid, crklizin, dimenhidfinái difenídol, dolaszeiren, mékílzin, meiaiíatal metopímazin, nabílon, oxiperndil, pipamazin: szkopoíamin, szulpiríC tetrahidrokannabinolok, tsefilpetazin, tioproperazm és a tropízetron, [Û2SS] További megvalósítási mód szerint a másik terápiás szer lehet egy hematopoíeílkus kolónia stimuláló faktor. Megfelelő hematopoletikus kolónia Stimuláló faktorok, például, de nem kizárólag, fllgrásirlm szargramostim. melgramosbm: és az erltropoietin-alfa.
[0288] Még további megvalositási mód szerint a másik terápiás Szer lehet egy opioid vagy nem-opioíd analgefíkys szer. Megfelelő opioid analgetikus szerek például de nem kizárólag, a morfin, heroin, bidromorfon, hídrokoden, oxímorfon, oxíkodon, metopon, apomorfin, normorfin, éterin, buprenorfin, meperidin, lopermid, aniferidín. A kővetkező példák a Igandum-hatőanyag könjugátumokat szemléltetik. Ezek ismertetése tágabb, mint a jelen találmánynak az igénypontokban meghatározott oltalmi kóré, és a jelen találmányban alkalmazható vegyuletelkel analóg vegyületekre mm^mä információkat is tartalmaz. 1, PÉLDA: 21 képlete vegyidet előállítása
1028¾ Fmpp--^L}'-val-|L}'d!~:PÂB"Dfi'-t (10 képlelü vegyőlet) (14,61 ^ 24,3 mmol, 1,0 ekv,, US-62Í4346 számú szabadalom,. Firestone et al.) hígítottunk MFvféí (120 mi, 0,2 fvi), és ehhez az oldathoz díetiíarnínt (60 mi) adtunk, Ä reakciót HPLC segítségév«! monitoroztuk, és úgy találtok, hogy 2 óra alatt végbement:: A reakciöeiegyet koncaotráituk, és a kapott maradékot efil-acetáial (körülbelül 163 ml), ultrahangos kezelés közben, körülbelül 10 perc alatt kicsaptuk. Étert (200 ml) adtunk hozza, és a csapadékot további 5 percig kezeltük ultrahanggal Az oldatot keverés nélkül 30 percig állni hagytuk, majd szűrtük és nagyvákuumban szárítottuk, Így Mai-eiPPAB-OHd kaptunk, amelyet a következő lépésben további tisztítás nélkül használtunk. Hozam. 8,84 g (96%). A Val - cií-PAB - OHd (8,0 g, 21 mmol) hígítottuk Dív1F~íei (110 ml), és a kapott oldatot MC-OSu-val kezeltük (Witeer et al... Bioconjugate Chem. 4, 521, 1993; 6.5 g, 21 mmol, 1,0 ekv.}. A reakció a HPLC tanúsága szerint 2 óra alatt végbement A reakaóeíegyet koncentráltuk, és a kapott olajai etil-aceiátiál (50 mi) kicsaptuk. 15 percig végzett ultrahangos kezelés után étert (400 ml) adtunk hozzá, és az elegyet tovább kezeltük ultrahanggal amíg az összes nagy szemcse szét nem törött. Ezután az oldatot szűrtök, és a Szilárd anyagot szárítottuk. így 20 képleíö vegyületet kaptunk piszkosfehér szilárd anyag förmájábah. Hozam; 11,63 g (98%), ES-MS m/z 757,0 [8288| 20 képletei vegyülve! Dl/IFAei hígítottunk (120 mii, 0,12 M|, és a kapóit oldathoz bisz{4mitröfenTskarbönálot (8,5 g, 28,0 mmol, 2,0 ekv.) és diizopfopiletiiamint: (3,88 ml 21,0 mmol, 1,5 ekv.) adtunk. A reakció a HPI..C tanúsága szennt 1 éra alatt végbement, A reakelóelegyet koncentráltuk, így olajat kaptunk, amelyet EtDAo segítségével kicsaptunk, ma|d EtGAo alkalmazásit (lÉCtei 25 ml) eldörzsöítünk, Az oldott anyagot tovább kicsaptuk éterrel (körülbelül 208 ml) és 15 percig dörzsöltük. A szilárd anyagot szűrtük is nagyvákuumban szántottuk, így t1 képletű vegyüíetet kaptunk,: amely a HMM tanúsága szerint 9Ä~os tisztaságú volt, és a következő: lépésben: további tisztítás nélkül használtuk. Hozam: 8,7 § #4%|.
2. PÉLDA
27 KÉPLETŰ VEGYÜI..ET ELŐÁLLÍTÁSA
P291] 26 képletű vegyüíetet (2,0 g, 2,31 mmél, 1,0 ekv.) dikíérmeíánna! (30 ml) hígítottunk, és a kapott oldathoz bisz(4mítrofenll)karbonátet (2,72 g, 8,94 mmol, 3,8 ekv.), majd dlzopropiletilamínt (1,04 ml, 5,97 mmol, 2,8 ekv.) adtunk, A reakció a HPLC tanúsága szerint 3 nap alatt ment végbe, A reakcioetegyet koncentráltuk, és a kapott maradékot éterrel eldőrzsöltúk, majd szűrtük és nagyvákuumban szárítottuk, így 27 képletű vegyüíetet kaptunk sárga szilárd anyag tormájában (2,37 g, 97%).
3. PÉLDA 28 KÉPLETÛ ^ö;yÜLET ELŐÁLLÍTJA P2i2
|0293j FßjOQ.piie-lysIPtÖ-'DH-t (24 képletü vegyület) (0,5 g, 0,63 mmol; US·· 6214345 számú ézabadáíöm« Firestone et ai.) diklérrnetanna! 0,5 Μ koecenfriÄa! tiigitottunk, és ehhez sz oldathoz diéfilamint adtak, a 24 kêpietu vegyülel: diklôrrnetànos oldata térfogata körülbelül egyharroadának megfelelő meniiyisegéen. A reákeléelegyeí kevertük és HPLC segítségével monltoroztuk, A HPLC azt mutatta, Hogy a reakció 3 óra alatt végbement. A reakeíoelegyet vákuumban koncentráltuk, és a kapott maradékot ei-aceiátiaí hígítottuk, majd űjrakohcentráltuk. A kapót maradékot éterrel eldörzsöltük és szűrtük. A maradék szilárd anyagot cilklórmetánnal 0,2 M koncentrációra hígítottuk, és a kapót oldathoz ktD-0Sa-í (Ö.20 g, 0,63 mmoi, 1,0 ekv.} és diizoprepiletiiamint (0,12 ml, 0,70 mmoi, 1,1 ekv.) adtunk. A reakdoeiegyet nltrogénafmoszférában 16 éra hosszat kevertük, ezer? idő után a HPLC nagyon kis mennyiségű kiindulási anyagot mutatót ki. A reakoíóelegyei ezután koncentráltuk, és a kapott maradékot éterrel eldôczsplîük, így W képlete vagyű letet kaptak színes szilárd anyag formájában Hozam: 100 mg (21%); ES-44S mii 757,9
4 PÉLDA
ISA KÉPLETÜ VEGYÜLET ELÖÁLUTÁEA
[Ö2941
|029§} 19 képlete vegyületet <1:0 g, 1:88 mmol) DMF-fei (10 ml) hígítottunk, és a kapót oldathoz hlsz(4a^ (1,0 g, 3,3 mmol, 2,0 ekv.) aOtunk.
[02901 A reákeióeíegyet azonnal kezeltük diizopropiletilamínnal (0,43 ni, 2,5 mmoí, 1,5 ekv.) és argonatmoszférában kevertük. A reakció a HPLC szerint 2,5 óra alatt végbement. Ä reakelóeíegyet koncentráltuk, így halvány barna olajat kaptunk, amelyet etikacetáttal (5 ml) kicsaptunk, majd éterrel (körülbelül 100 ml) újra kicsaptunk- A kapói csapadékot 30 percig állni hagytuk, majd szűrtük és nagyvákuumban szántottuk, így 19a képletü vegyületet kaptunk piszkosfehér por Irmájában. Hozam: 1,05 § (83%). ES-MS mte 7672 [M-r-Hj"; UV kína< 215, 2118 tini.
5. PÉLDA
49 KÉPLETÜ VEGYÜLE.]· ELŐÁLLÍTÁSA
[0298] 49 képletü vegyületet a O általános eljárás szerint állottunk elő, trípáptldként Fmos-Me'-val-val-dii-O-TBu (0,40 g, 0 57 mmol, 39 képleiű vegyiket) é| dipeptidkènt Bom-dapmor (0,26 g, 0,62 mmol, 1.1 ekv.: 44 képletü vegyület) felhasználásával. A reakcíóeiegyet gyors oszíopkromatográfia (sziíikagéi oszlop, eiuálószer: 100%: EtOAc) segítségével tisztítottuk. Két Fmoc-iariaimû termékei etuáltunk: a 48 képiéin vegyület Fmoc-származékát fiRi 0,17 100% EfOAc-ban) és egy másikat, amelyről íeüételéztűk, hogy a 49 képletü vegyület TFA-vai képezett aeetápnak Fmoc származéka (R? 0,37). A termékeket egyesítettük, így fehér habot kaptunk, amelyet az U általános epráenak vetettünk all. A reakció 2 óra alatt végbement, 01#széritet távolítottunk el, így olajat kaptunk, amelyet gyors oszíopkromatográfia segítségévéi {eiuálószer: 9:1 diklórmetán --- metanol) tisztítottunk, így 49 képletü vegyüieieï kaptunk.
6 PÉLDA
m KËPt,ETÛ VÉO^SLÉT ELŐÁLLÍTÁSA
P3901 50 képletü vegvületet 42 léptetű tripeptid és 48 képletü ciipepiid reagáttatásával a D általános e|árás szerint állítottunk elő, bázisként jnetilamintj (5,0 ekv.) alkalmaztunk, A makolóelegy koncentrálása után a: kapott maradékot közvetlenül injektáltuk reverz fázisú préparais v-HPLG oszlopra (Varian Dynamax oszlop 21,4 mm * 25 cm, i μ, 100 A, gradiens-futtatás: MeCN és 0,1 M TfA/C0&amp; 2:0 ml/perc, 10%-róí 1DÖ%~ra 40 pere alát, majd 100% bleCN 20 percig), A releváns frakciókat összegyűltötök és koncentráluk, és a kapott maradékot 10 mi diklórmetán - éter (1:1) eíeggyei hígítottuk. Az oldatot 0 °€~ra hütöttük, és 1,0 M éteres HCi-í (körülbelül 10 ekv:) adtunk hozzá cseppenként A kicsapott 5Ô képletü vegyüíetet szűrtök és szárltöttuk, amely a HPLC tanúsága szerint lényegében véve tiszta volt. Hozam. 71 mg (43%); ES-MS míz 731,6 [IVi-rHjL UV Λ215, 238, 290 nm. Elemanaiizis, számított: CioHroNôOgAHiOAHCI: C, 54,84: H, 9,20; H, 9,41; N, 9,82.
7. PÉLDA
§1 KÉFLEÏÜ VEGYüLET ELŐÁLLÍTÁSA
[0302] S1 képlete vegyü letet 41 képietü FmocTnpeptid és 46 képletű dipeptid reagálíafásávat a D általános eljárás szerint állítottunk elő, bázisként trietílamint alkalmazná. A reakeioélegy koncentrálása: után a maradékot közveienüi injektáltuk mmm fázisú preparatív-HFLC oszlopra (Varian Dynamax oszlop 21.4 mm X 25 cm, 5 μ. 100 Â, gradiensTuttatâs: MeCM és 0,1 M TEA/DOs» 20 ml/perc, 10%-röl 100%-m 4D perc alatt, majd 100% M&amp;CN 20 percig). A releváns frakciókat összegyűjtöttük és koncentráltuk, így s^ilarcí loleFfriedleri: kaptuíik, amelyet a következe' lépésben további tisztítás nélkül használtunk. ES-fdS m/z 882,9 899,9 (^eNajy UV hm 218,256 nm. P6Ö3| A fehér szilárd intermedier védöcsoportjának eltávolítását az E általános eljárás szerint végeztük A nyers terméket preparativ-HPLC utján tisztítottuk (Varian Dynamax oszlop 21,4 mm x 25 cm, 5 p, 100 Â, gradiens-futtatás: MeCN és 0,1 y TEA/CÖy, 20 mi/perc, 10%-rél 100%-ra 40 pere alatt, majd 100% MeCM 20 percig).» A releváns frakciókat összegyűjtöttük és koncentráltuk, így 51 képletű vegyületet kaptunk ragadós szilárd anyag formájában. ES-MS m/z 660,1 [M+Hf, 682,5 [M+Na]‘; UV Ám* 215 nm.
8. PÉLDA
AZ 52» VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
[8305| Bee-dolaprolot (0,33 g, 1,14 mmsl| és ( f S; ^-dí^niiettóriaiamipt (0,5 §,, 2,28 mnsL 2,8 ekv.) hígítottunk diklőrmetánnal (10 ml), és a kapott oldathoz triatllamínt (0,32 ml, 2M mmol, 2,0 ekv.}, mafd DEPC-t (0,30 ml, 2,28 mmol, 2,0 ekv.) adtunk 4 óra múlva további DEPC-t (0,39 ml) adtunk hozzá, és a reakcíóelegyet egy éjszakán át kevertük. A reakolöelegyet koneeniráltuk, is a kapott maradiköt preparatív-NPLÜ segítségével tisztítottuk (Varian Dynarnax Cig oszlop 21,4 mm x 23 cm, 5 μ, 180 A, gradiens-futtatás: MeGN és víz, 20 mi/pero, 10%-ról 100%-ra 40 pete alatt, majd 1ÍÖ% MeCM 20 percig). Λ releváns frakciókat összegyűjtöttük és koncentráltuk, így sárga gumíszeru szilárd pepid infermedíert kaptunk, amelyet további tisztítás nélkül használtunk. R; 0,16 (108% EîOAc), ES-td:S mii 482,4 (M-Hjz UV Λ*δ·< 215. 256 nm. POÖII A sárga gumlszerü peptiö intermediert (0,24 g, 0,50 mmol) diklórmeíánnaf hígítotok, és a kapott oldathoz dtoopropiletilaoiíft (0,18 ml, 1,0 mmoi, 2,0 ekv.) és Emeo-CI-t (0,15 g, 0.55 mmol, 1,1 ekv.) adtunk. A reakcíoeíegyef 3 óra hosszat kevertük, ezen idő után a BPEO azt mutatta, hogy a reakció végbement. A reakcíóelegpt olajjá koncentráltuk, és az olajat EtQAc-tal: hígítottuk, is egymás után extraháltuk 10%~os vizes citromsavvaí, vízzel, telített vizes nátrium-Ndroginkarionáttal és sósvízzel. Az ElÖAc-os rétegét szárítotok, szűrtük és konoeof ráltuki és a: kapott maradékot gyors öszlopkrc-matográfia segítségével tisztítottuk (szilikagál 238-400 niésh (0,062-0,037 mm): eíuáíószer-gradiens: 4:1 hexánok: EtOAe - 1:1 hexánok:EtOAc), így 4§ képletű vegyuletet kaptunk féhér szilárd anyag formájában Hozam: 0,3? g (összességében 46%); R? 0,4? (1:1 hexánok-ElöAc): ES-P1S míz T04 ,5 p+Hf. 721,4 (y+NHxf; UV A*** 215, 256 nm. |0307J i2 képletű vegyuteiet 42 képletű fripeptid (94 mg, 0,13 mmof) és ii képleté dipspid (6# ml :0.13 pmolf reagaiatâsàval, a P általános átjárás :WÊMi állítottunk elő (bázisként 3,6 ekv. díizopropiletiiamint használtunk). A reakcioelegy koncentrálása után a kapott maradékot EiOAc-fai hígítottuk és agymás után mostuk lOfl-es vizes oítromsay-öktaiaí, vízzel, telített vizes nátrium» MdrogenkarConiPoldattal és sósvlzzál A starves fázist szárítottuk, szűrtük és koncentráltuk, így fehér szilárd maradékot kaptunk, amelyet dtklirmetánnal hígítottunk, és a vidocsoportot az E általános eljárás szefiCt eliávolltotíuk. A HP LG tanúsága szerint a réakoló 2 óra alatt végbement A reakcióclsgyet olajjá koncentráltuk. Az olajat DMSO-vaí hígítottuk, és a kapotl oldatöt reverz fázisú preparatív-HPLC segítségévei tisztítottuk (Varian Dynamax oszlop 21.4 mm x 25 cm, 5 μ, IDD Â, gradiens-futtatás: teeCN ás 0,1% IFA, 20 ml/perc, 16%»:rdl 1öö%~ rá 46 pere alái, majd 106% fvleCN 20 peréig). Két hasonló UV spektrumot mutató terméket izoláltunk. A fő terméket, 52 képletű vegyütetet piszkosfehér szilárd anyag formájában kaptuk. Hozam, összességében: 24 mg (23%); ES-ÜS miz 793,5 pVteHf; UV 215 nm.
9. PÉLDA
63 KÉPLETŰ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
föléli Boc-feniíaíanint (1,0 g, 3,8 mmoi) adtunk 1,4-dlaminobenzol ·hidrokloríd (3,5 g, 19,0 romol, 5,0 ekv.), trietiamin (1 Cl? ml, 76,0 rnmól, 20 ekv.) és díklór-mefán (50 mi) szuszpenziójához. A kapott oldathoz fecskendővel DEPC-t (3,2 ml, 19,0 mmoi 5,0 ekv.) adtunk. A HPLC 24 óra után nem mutatott ki maradék Boc-phe-t. A roakdóelegyet szűrtük, és a szűrietei koncentráltuk így sötét szilárd anyagot kaptunk. A sötét szilárd maradékot 1:1 arányú EtOAo; és víz között megoszfottuk, is az EtOAc-os réteget egymás után mostok vízzel és sóoldattal
Az EtOAc-os réteget szárítottuk és koncentráltuk, így söiétbarna/vörös maradékét kapunk, amelyet HPLC segítségével tisztítottunk (Varian Dynamax oszlop 414 » X 25 ont, 5 μ* 100 Â, gradiens-futtatás: MeCN és víz, 45 mi/pero, 10¾¾-róí 10ö%-ra 40 perc alatt, majd 100% MeCN 20 percig), A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, így vőrös~sárgásharna szilard intermediert kapunk, Hozam: 1,4 g (100%); E8-MS m/z 355,9 (M+Hf; UV A„sx 215, 265 nm; Ή NMR (CDCb) δ 7.48(1 Η, br s), 7,22-7,3? (δ Η, rn), 7,12 (2 Η, d, J-8,7 Hz), 7,81 (2 H, d, 0-8,.7 Hz), 5,18 (1 H, br s), 4,39-4,48 (1 H, m), 3,48 (2 H, s), 3,13 (2 H, d, J^5,7 Hz), 1,43 (9 H, s).
fÖÓiÖf A. vörös-sárgásbarna szilárd Intermediert (0,5 g, 1,41 mmol) és díizopropííetílamint (0,37 ml, 2,11 mmol, 1,5 ekv ) dskiórmetánnal (10 ml) hígítottuk, és a kapott oldathoz Fmoc-Ci-t (0,38 g, 1,41 mmol) adtunk. A reakcíéelegyet kevertük, és néhány pete múlva fehér szilárd csapadék képződött A reakció a HPLC tanúsága szerint 1 éra alatt végbement. A reakcióelegyet szűrtük, és a szörletet koncentráltuk, így olajat kaptunk. Az olajat EiöAc segítségével kicsaptuk, így vöröses-fehér intermedier terméket kaptunk, amelyet szűréssel összegyűjtöttünk és vákuumban szántottönk. Hozam: 0,75 g (93%); E844S Mz 578,1 P+Hf, 5Í6,ip*MH4iA 10111] A vöröses-fehér intermediert (0,48 g, 0,85 mmoí) 10 ml dikiórmefánnal hígítottuk, majd 5 mí trifluofeoetiavvaí^kezeltük, A reakció a reverz. fázisú HPLC tanúsága szerint 30 perc alatt végbement. A reakcíóeiegyei koncentráltuk, és a kapott maradékot éterrel kicsaptuk, így plszkosfehér szilárd anyagot kaptunk. A piszkostéhér szilárd anyagot szűrtök és szárítottuk, így amorf port kaptunk, amelyet Roc-dap (0,24 g, 0,85 mmol) dikiôrmetànnal (10 mi) készült oldatához adtunk. Ehhez az oldathoz trietllámint (0,35 mk 2,5 mmol. 3:0 ekv.) és PyBrop-t (0,59 g, 1,3 mmol, 1,5 ekv,) adtunk. A reakcióelegyet reverz fázisú HPLC segítségével monitoroztuk. Miután a reakció végbement, a reakcióelegyet koncentráltuk, és a kapott maradékot EtOAotai higitoiuk, maß egymás után mostuk 1084-os vizes dtromsav-oldattal, vízzel, telített vizes náinum-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel és sósvizzel. Az EtOAc-os réteget szárítottuk (MgSGut szűrtük és koncintrálfuk. A kapót maradeköt gyors oszíopkromatögráfía segítségével (szilikagél) tisztítottuk, így 47 képletü vegyülétet kaptunk piszkosfehér por fermájáhan. Hozirh:> 0,5? g (18%); ES-MS m/z 754,7 p+NHJ' ; UV W 215, 285 nm, 1H NME (DMSO-dg) 4 10,0-10,16 (1 H, rn), 9,83 (1 H, br s), 8,42 (1/2 K d J~8,4 Hz). 8,22 :(1/2 H, d, J-8.4 Hz). 7,88 (2 H; d, J-?,2 Hz), 7,73 (2 H d: 3*ÎM Hz;, 7,11-7,55 (13 H. m), 4,694,75 (1 H, m), 4,46 ( 2 H, d; Â| Hz), 4,20 (1 H, % J-6,4 Hz), 3,29 (3 H, s), 2.774,47 (7 H, rn), 2,48-2,50 (3 H, m), 2,25 (2/3 H, dd, ,/-9,6, 7.2 Hz), 1,414,96 (4 H, m), 1,36 (9 H, s), 1,07 (1 H, d, V~8,4 Hz, rotációs izomer), 1,00 (1 H, d, ,/-6,4 HÂ7rdià©ji§i|z^diÉr), p31g| 42 képteiû trfpepikJ vegyüietet (55 mg, 0,71 mmol) és 47 képiétű öl pepiid vegyöíetei (85 rng, 0.11 mmol) reagáltaitunk a D általános eljárás szerint <3,0 ekv. diizopropileHamin alkalmazásával), A reakcíéelegy koncentrálása után a kapott maradékot EtÖAeAal hígítóitok, és egymás után mostuk 10%-os vizes citromsav-oídáítaí, vízzel telített vizes nátnum4ldmgénkarbodáÍ~etdatal és sósvízzeí. Az EIOAoos réteget sziííltottuk, szirtük és koncentráltuk. Így sárga olajat kaptunk. A sárga olajat dikíörmetánnaí (10 ml) hígítottuk, és a védőesoportöt az E általános e|árás szerint eltávolítóitok. A NPLC tanúsága szerint a reákeíé 2 éra álái végbement. A reakcioeíegyet koncentráltuk, így olajat kaptunk. Az olajat DíMSO vaf hígítottuk, és a Ok/tSOeldatoí reverz fázisú ptépáfatív-HPLG segttségévél tisztítottuk (Varian Dynamax oszlop 21,4 mm x 26 dm, 5 p, 108 A, gradiens-fuffatás: MeCN és 0,1% TEA, 20 ml/perc, 10%-rél 1#ö%~ra 40 perc alatt, majd 100% fHeCN 20 páréig). A releváns frakciókat egyesítettük is koncentráltuk, így 53 képletű vegyúletet kaptunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. Összesített hozam. 42 mg (44% összességében) ES-MS mii 837,8 858,5 immtm AW3* 215, 246 nm.
1Ö. PÉLDA
54 KÉPLËTÔ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA patai
P314| 64 képíetu vegyülnie! a következő szakirodáim: helyen ismertetettek szerint ámítottuk eti>: * ^syazakí. ^ a| Chem Pham 8ui!. 1116, 43(1% 1706-18.
11. PÉLDA IS KÉPLETÛ VEÖVÜLET ELÖÄLfJT^SA 103111
pillf Sí képietd vegyületet a2 54 Reptető vegyütettet azonos módon szsnteiizáltunk, de ^ ^tlöö^eVa MDil^tBíu«t (4Ö kép tetű vegyület) alkalmaztunk (33 képlotQ vegyület) helyett kiindulási anyagként.
12. PÉLDA
10 képletű vegyület EiőAitiTÁSA
pltOl Kardaminsa¥'||13ni4azidQn^tip^2-feníietil]~1 J-dlmeliletlLésztert (0,Ii §, 2 mmol; a J, Chem. Research fS);< 1992, 391 szakirodalmi helyen ismertetett módon előállítva) hígítottunk 4 ki dioxános HCI-oidatial (10 ml), és a kapott:oldatot 2 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertük. Ezután :a reakeióeíecjyhez totóit (W mi) adtunk, a reá kcioeiegyet koncentráltuk, és a kapott; maradékot azeotróposan, tokiéi segítségévelA3* 15 ml) vákuumban szárítottuk, Így fehér szilárd intemiedietí kaptunk. ES-MS miz 177,1 |M* Hja fjB#í$| A fehér szilárd intermediert diktormetánnai (5 mi) hígítottuk, és a kapott oldathoz egymás útin l¥~Boe-doíaptoiht (6 J8 g, 1 ekv.), íhetüaminf (780 pt, 3 ®k%). és DEPC-ΐ (4Ö8 pl, 12 ekv.) adtunk, és a reakciőelegyeí 2 óra hosszat szobahőmérsékleten: kevertük, A reakció lefolyását mmtz Mzisu HPtü segítségéve! monitoroztuk. Miután HPLC segítségéve! megállapítottuk, hogy a reakció végbement, a feakcioelegyeí díklórmeiánnaí |3ö mi) hígítottuk, a dikíórmetános réteget egymás után mostuk 10%·· os vizes üiiromsav-oídaital (20 mii telített vizes NaHCÖ3»oidaítaS (20 mi) és vízzel (20 mi) A dlklórmetános rétegét koncentráltuk, és a kapott maradékot gyors oszlopkromatográiás utón lisztrfottukt díklórmetánban 0 - 6% metanol gradiens-lépés alkalmazásával. A releváns frakciókat egyésketiük és koncentráltuk, igy 0,78 § (88%) szilárd intermedíéil kaptunk, ES--MS m/z 446,1 [Μ+ΗΓ. 488.3 [M+Naf'.
[0320] A szilárd intermediert (460 mg, 1 mmol) és 42 képietü thpeptideí (534 mg. 1,1 ekv-3 hígítötöttuk TEA 50%-os dikíórmetános oldatával (10 ml),, és a kapott reakciőelegyeí 2 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertük. A reakclóelegyhez toluojt (10 mi) adtunk, és a feakdőelegyet konoentráltuk. A kapói amin Intermediert toluol alkalmazásával (3*20 ml) azeotróposan, majd egy éjszakán át vákuumban szárítottuk.
[8321] A kapott amin intermediert díklórmetánnal (2 ml) hígítottuk, és a kapott Oldathoz trietllamint (617 pís 4 ekv.), majd DEPC-t (203 pl, 1,4 ekv.) adtunk. A reakslóeíegyet 4 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertük, és a reakció lefolyását HPLC segítségével monitoroztuk. Miután a reakció végbement, a reakolóeíegyet díklórmetánnal (30 ml) hígítottuk, és a dikíórmetános rétegei egymás után mostuk télitel vizes NaHCOroldaial (20 ml) és telített vizes NaCf-oldaiai (20 m|, A dikíórmetános rétégét koncentráltuk, és a kapött maradékot gyors oszlöpkromaíográíiás úton tisztítottuk, diklórmetánban 0 - 5% metanol gradiens-lépés alkalmazásával, A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, és a kapott maradékot díklórmetániexán (1:1) alkalmazásával száriioluk. igy 0,64 g (84%) fehér szilárd intermediert kaptunk. ES-MS mii 757,5 P322] A fehér szilárd: intermediert (536 mg, 0,73 mmol) metanollal hlgríottui és a kapott oldathoz 10% Pd/Ct (100 mg) adtunk. A reakcsóelegyet hidrogén-atmoszférába helyeztük, és aimoSlferítes nyomáson és szobahőmérsékleten 2 óra hosszat kevertük. A reakció, amelynek lefolyását HPLC segitségével monitoroztuk, 2 órai alatt végbement. A reakclóedényi argonnal átöblitettük. és á réakciseléiyel eelit-rétegen szirtik. A oelt-réteget azután metanollal (30 mi) mostuk, és az egyesített szőrieteket koneeefratok, így szürke szilárd inimmâm. kaptunk, amelyet további tisztítás nélkül használtunk. Hozam ~ m® mg (ßi%% ÉS-MS míz 731,6 fM+Hf, mmfmmfn, |Ö323| A szürke szilárd intermedier (100 mg, 0,136 mmol):, AéBoc-á-aminobenzoesav (39 mg, 1,2 ekv.) és trietilamin (90 pl, 4 ekv} elegyét hígítottuk diklórmetánnal (2 ml), és a kapott oldathoz DEFG4 (28 pl, 1,2 ekv.) adtunk. A reakcíoefegyet szobahőmérsékleten 2 óra hosszat kevertük, majd dikiórmeiánnal (30 ml) hígítottuk, A diklórmetános réteget egymás után mostuk telített vizes NaHCös'Oldatíal (20 ml) és telített vizes NaCI-oidattal (20 ml). Ä diklórmetános réteget ezután koncentráltuk, és a kapott maradékot gyors oszíopkmmatográfiá# úton tisztítottuk, dikfórmetánban ö ^ metanol gradlerssdépés alkalmazásévá!. A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, és a kapott maradékot diklormetámhexán (1:1) alkalmazásával szárítottuk, így fehér szilárd intermediert kaptunk. ES-fvIS m/z 950,7 [M+Hf. |0324] A fehér szilárd Intermediert hígítottuk IFA 50% os diklórmetános oldatával, és 2 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertük. A reakcióelegyhez toíuolt (10 ml) adtunk, és a reakeióelegyet koncentrálok, A kapott maradékot szeotrőposán szárítottuk toluol (3*15 ml) alkalmazásával, így sárga olajai; kaptunk, amilyet preparatlv-HPLC segítségével tisztítottunk (Cie*RP Varian Dyhámax oszlop, 5 p:, 100; A, MeCN lineáris gradiense 10%-rói 95%-ra 0,06 IM tneti iammómum-karbonát pufferhén, pB-7,0. 30 perc, 10 ml/perc átfolyási sebesség), A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, és a kapott maradékot azeotróposan szárítottuk MeCN (3*2$· ml) alkalmazásával, így 56 képlete vegyületei kaptunk fehér szilárd anyag formájában: 101 mg (87% két fépéáhen) £A>-íyi3 m/z 850,6 jMvRj*, $72,6
13. PÉLDA
m KÉPLETŰ VEGYÖLET ilóálfJMSA
[0325]
P32$l 4S képietű vegyűíetet (iiöö: m§, 0,141 œo!), 27 képlett) vegyuletet {180 mg, 0,15 mmol, 1,1 ekv.) és NGSf-t (1¾ mg; 0,14 mmöl,. 10 ekv.) hígítottunk DIViF· fel (2 ml). 2 perc múlva plrídint (0,5 ml) adtunk hozzá, és a reakcióelegyet revem: fázisú HRLC-veí monltemztek. 24 óra eltelte után sem 49 képletet vegyüíetet. sem 2? képletei yagyOietet nem detektáltunk. Ä reakcióelegyet koncentráltuk, és a kapott maradékot reverz fázisú preparatív-BPLC segítségével tisztítottuk (Varian öynamáx oszlop .214 mm x 2.5 cm, 5 μ, 100 Λ, gradiens-futtatás: kteCN és Et3N-C02 (pH*?):, 20 mltperc, 10%-rói 1ÖÖ%-ra. 40 perc alatt, majd 100% MeCN 20 percig). A releváns frakciókat ősszegyíf ötÄ és koncentráltuk, így piszkosfehér szilárd Ihtermédiért kaptunk. ES-MS níiz 16Ö8 J
P327] A plszkosfehér szilárd intermedíért hígítottuk MeCUNMt¥A 85:5:10 arányú eíegyéveí A reakcidelegyet HPLC segítségével monitoreztuk, a reakció 3 óra alatt végbement. A reakcióelegyet közvetlenül koncentráltuk, és a kapott maradékot reverz fázisú preparaiív-HPtC segítségével tisztítottuk (Varian Dynamax oszlop 21,4 mm x 25 cm, 5 μ, 100 Â, gradiens-futtatás: MeCH és 0,1% IFA, 20 mlfpérc, 10% 100% 40 perc aiafl, majd 100% MeCN 20 percig). A releváns frakciókat egyésitéttyk és koncentráltuk, így s? képletű vegyüíetet kaptunk píszkosíebér por formájában. Hozam: 46 mg (32% összességében): ES-IVtS mfz 1334,8 ptHf; ÖVÁ* 215, 258 nm.
14 PÉLDA
m KÉPLETÜ VEGYÖLET EliALLlláSA
p320| 49 képietú vegyületet (1,69 g, 2,36 mmol), 21 képietú vagy0tetet (2,6 g 3,62 mmol 1,5 ekv ) és HOBt-t (64 mg, 0,45 mmol, 0,2 ekv.) hígítottunk DM F fel (26 2 perc múlva piridint (6 ml) adtunk hozzá, és a reakciót reveit fázisú HPLC segítségével monitoroztuk, ügy találtuk, hogy a reakció 24 óra alatt végbement A reakeiôelegyet koncertráltufo Így sóiét olajat kaptunk, amelyet 3 ml DMF-fel hígítötfunk, A DMF-es oldatot gyors oszlopkromatográfia segítségével Isztifoiúk (szifíkagél eluálöszer-gradieris: 100% diklórmetánrot 4:1 diklórmetán -metanol elegy re), A releváns frakeiskat egyesítettük és koncentráltuk, így olajat: kaptunk, amely nagyvákuuméen megszilárdult. így 5$ képletű vegyület és az el nem reagált 4S képietö vegyület keverékét kaptuk, piszkos sárga szilárd anyag formájában (Rí 0,40 9:1 diklórmetán ~ metanol oiegyben). A piszkos sárga szilárd anyagot DMF-fel hígítottuk, és reverz fázisú preparaíív-HPLC segítségévei tisztítottuk (Varian Dynamax CUs oszlop 41,4 mm x 25 crn, 8 m, 100 A. gradiens·· futtatás: MeCN és 0,1%-os vizes TFA-oldat, 45 mi/pere, 10%-ról 100%-ra 40 perc alatt, majd 100% MeDN 20 percig), így SS képletei vegyületet kaptunk amorf fehér por formájában (R· 0,40 9:1 dlkíófmétán - metanol eíegyben), amely >95% tisztaságú voit a HPÜD tanúsága szerint, és amely 1%~nái kevesebb 48 képletű vegyületet tartalmazott Hozam: 1,78 g (57%): EB-fvtS míz 1316,7 §M*Hf ; UV Afnsx 215, 248 nm.
15. PÉLDA m képletű viőtölít előállítása
|Ö331j ii képlete vegyidet hidroklodd-scjät (11 mS< ^*2 mmo0 ^ kaptató vegyuietet (11 mg, 15,2 mmol) hígítottunk Im^eti4"pköiíidirmnnai (1 ml), és a kapott oldathoz diízopropifeíííaminí (5,3 ml. 30,3 mmol, 2,0 ekv.) adtunk. Az alanyét argönatmeszférában 3 napig kevertük* HPtO segítségével monitoroztok. Ezen Idő után még sok el nem reagált kiindulási anyag maradt, HOit-t (1,0 ekv ) adtunk hozzá, és a reakcióeiegyet 24 óra hosszat kevertük, ezen ídő után a HPÍG tanúsága szerint nem maradt kiindulási anyag. A reakdóelegyet koncentráltuk, és a kapói maradékot reverz fázisú preparatlv-HPLC segítségével tisztítottuk (Vanan Pynamax C·,.« oszlop 21,4 mm x 25 cm, 5 m, 100 Λ, gradiens·^ futtatás: ÄCN és ¥iz, 20 ml/perc, ionról 10i%-ra 30 perc alatt, mafd 100% MeCM 20 percig). A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, így $0 képlete vegyüieiet Mpimk fehér szilárd anyag formáiéban. Hozam: 13 mg (673% ES-MS mii. 1207,2 [M+Hf, 1304,f ρ*ΜΗ4Γ; UV ,W 215, 248 nm.
16. PÉLDA S0: KÉPLEfÖ VEGYÜLET ÉÜLÔÂL.ÜTÂSA C6331
[03331 53 kêpletü vegyütetet (9 mg, 10,8 pmof) és 28 képletú vegyüfeíet (5,2 mg, 10,8 pmoí) hígítottunk dikiórmeiánnal (1 rní), és a kapott oldathoz HATU-t (6,3 mg, 16,1 pmoí. 1,5 ekv.), majd píridint (1,3 pl, 16,1 mmoí, 1,6 ekv) adtunk. A reakcieelegyet argonateoszféráhan kevertük, miközben HPLU segítségévet monitoroztuk. A reakció i óra alatt végbement. A reakcsóelegyet kohcentráítuk, és a kapott maradékot OfvISO-vaí hígítottuk. A DMSO-öldatot reverz fázisú preparativ-HPLC segítségévet tisztítottuk (Varian Oynamax oszlop 21,4 mm x 26 cm, 5 μ, 100 Ä. gradiens-futtatás. MeCN ès 0,1 % IFA, 20 mí/perc, 10%-róí 100%-ra 30 perc alatt, maid 100% MeCN 20 percig), és a releváns frakciókat egyesltetÄ és konoerárilyk. 1§y pszkosfehér szilárd intermedieit kaptunk, amely >95% tisztaságú volt a HFtC tanúsága szerint.
[Û334J A píszkosfehér szilárd Intermediert dikíőrmetánnal (.2 ml) hígítottuk, és a kapott oídatot TFA-val (0,5 mi) kezeltük. A reakciót HPLC segítségével monitoroztuk, úgy találtuk. Hogy 2 óra alatt végbement. A reakcióelegyei koncentráltuk, és a kapott maradékot DklSO-vai hígítottuk, és a 13. példánál ismertetette! azonos körülmények között tisztítottuk. A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, igy 60 képíetű vegyületet kaptunk piszkosfehér por formájában. Hozam: 14,9 mg (90%); ES-IV1S mii 1304,6 fM+Hf; UV AnSX 215, 275 nm.
17. PÉLDA
61 KÉP LET 0 VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
[03361 képlete vegyülel tnfluoraoetát-séját (0,37 g, 0,39 mmöl., 1,0 ekv.) és 18 képietú vegyületet (0.30 g, 0,58 mpol, 1,5 ékv.) hígitoiunk OMF-fai (5 mt, 0,1 és a kapott oldathoz pirídmf (95 pl, 1,2 mrnol, 3,0 ekv.) adtunk. Ezután HATU-t (0,23 g, 0,58 mrnol, 1,5 ekv.) adtunk hozzá szilárd formában, és a reakelóeiegyet argonatmoszférában kevertük, miközben BF1.C segítségével monítoroztok. A reakció lassan haladt előre, és 4 órával később 1,0 ekv. díízopmpiíetilamínt adagoltunk. A· reakció 1 óra alat végbement. A reakcíóelegyeí vákuumban koncentráltuk, és a kapott maradékot prepacativ-BPLG segítségéül tisztítottuk (Varian Dynamax Cn oszlop 41,4 mm x 25 cm. If, 100 A, gradiens-futtatás-VleCN és 0,1% vizes TFA-cidat 45 ml/perc, 10%-rói IÖÖ%ra 40; pere alatt, map 100% fdéöN 2ö percig), így nagyon halvány rózsaszín szilárd intermediert kaptánk, [0337] A rózsaszín szilárd Intermedien DMF-fel (30 mi) hígítottuk, és a kapói oldathoz dietilamlnt (15 ml) adtunk. A reakció a HPLC tanúsága szerint 2 éra alatt végbement. A reakcióeiegyet koncentráltuk, és a kapott maradikot éterrel kétszer mostuk. A: szilárd Intermediert nagyvákuumban szárítottuk, majd közvetlenül felhasználtuk a kővetkező lépésben.
[0338] ; A szilárd intermediert DívíF-fei (20 mi) hígítottuk, és a kapott oldathoz: MC- OSu-t (0,12 g, 0,39 mmoi, 1,0 ekv.) adtunk. 4 nap muiva a reakcióeiegyet koncentráltuk, így olajat kaptunk, amelyet prep.arativ-HPLC segítségével tisztítottunk (Varian Dynamax C?8 oszlop 41,4 mm x 25 cm, 5 p, 100 A, gradiens-futtatás: MeCN és 0,1% vizes ÍFA-oldat, 45 ml/perc, 10%-róí 100'%-ra 40 perc alatt, majd 100% r\%CN 20 percig), $1 képietö vegyületet izoiáííonk fehér pelyhes szilárd anyag formájában. Hozam; o,2i g (összességében 38%); ES-IVIS mlz 1285,0 P+Hf, 1307,8 UVÁt,,5)i 215, 268 rím.
82 KËELEÏÛ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
llPil FmoolatdlFABOOO-Fnpd (19a képleté vegyület; 0,65 9· Forríol, 11 eq }, m képleté vegyületet (0,55 g, Il77 mmol 10 ekv.) és H08M (21 mg, 0; 15 ΓΠΟΊΟ: 2,0 ekv.) hígítottunk DMF-feí (2:0 ml), és uítrahangkezeiés segítségévei oldötiuok. A kapott oldathoz pirídínt (Cl5 m| aóiunk, és a reakciót HFLC segítségéit monidmztuk. 24 óra mûtes éiz^proptóilamioí (1,0 ekv.) adagoltunk, és a reakcióelegyet 24 óra hosszat keverés nélkül állni hagytuk. A reakolóelégyet: kohoehtráiyk, így olajos maradékot kaptunk. Az olajos maradikot revem fázisé preparatív-HPLC segítségével tisztítottuk (Varian Dynamax oszlop 41,4 mm x 25 cm, 6 μ, 100 Ä, gradiens-futtatás: VeCN és 0,1% IFA, 45 ml/perc: 10%~ről 100%-ra 40 perc alatt, majd 100% OteCN 20 percig). A kívánt frakciókat összegyűjtöttük és koneenfrátiuk, így olajat kaptunk, amelyet éterrel kicsaptunk, Így piszkösíehér szilárd intaonediert kaptunk. Hozam: 0,77 g (74%); ES-VS mii 1345,7 [M+Hf; UV W 215, 254 m [0341J A piszkösíehér szilárd intermedier (körülbelül 85 mg) védőcsoportját dletüamin (1 ml) és l)MF (3 mi) elegyévol eítávoiílottük, 1 óra alatt a reakció végiémtOl A reikcióelegyet koncentráltuk, és a kapott maradékot 1 rnl EíOAc-ban, majd fölösleges mennyiségű éter (körülbelül 20 ml) adagolásával kicsaptuk. Az amin intermediert szűrtük., nagyvákuumhan szárítottuk és további tisztítás nélkül: használtuk a következő lépésben:. P342J Az amin Intermediert (70 mg, 61 pmol, 1.0 ekv.) DMF-ben (10 ml) felvettük,, és a kapott oldathoz egymás után adagoltunk hrómaceíamidö-kaproosavaf (17 mg, 67 pmoi, 1,1 ekv.), PyBropd (32 mg. 67 pmol, 1,1 ekv.) és díizöpropíletilámlnt (16 pl, 92 pmol, 1,6 ekv.). 24 óra múlva további 1,0 ekv. adagoltunk. A reakciót 30 óra mute: leállítottuk, Ä reakcióelegyet olajjá koncentráltuk, és az olajat reverz fázisú preparatfv-HPLC segítségével tisztítottuk (Synórgl tytaxíRP oszlop 21,4 mm x 25 cm, 5 μ, 60 kí: gradiens-futtatás: yeCMés 0,1% TFAS: 20 eií/perc, 1Íi%dFol 10p%*ra.4O. perc alatt, májé 100% kleCN 20 percig). Ä releváns frakciókat összesítettük és köncxmíráfi'uk, így 82 képlete vegyületet kaptunk fehér szilárd anyag formájában. Hozam: 23 mg (27%); ES-fviS mtz 1856,7 UV A.^ 215, 247 nm.
19. PÉLDA
II KÉPLETÜ VEGYÜL ET ELŐÁLLÍTÁSA P343J
P344J Fmoc-vaí-ci?~FAB-OC{OHy1e~vaí-¥aí-öjl-dap~nör (körülbelül 48 mg, a 18. példa szerint előállítva) f moó-óSöpöiljál óíellamln (1 ml) és DMF (3 ml) elegyével tórfénf kezeléssel elávolltoiuk, 1 óra alatt, a reakció végbement, A reakcióelegyet könceptrálfyk:, és a kapott maradékot kicsaptuk 1 ml EtOAc segítségévéi majd fölösleges mennyiségű éter (körülbelül 20 ml) adagolásával Az amin Intermediert szűrtük, nagyvákuumban szárítottuk, és a követkézé lépésben további tisztítás nélkül használtuk.
[0345] Az amin intermediert (35 pmoí, 1,1 ekv.) DMF-fel (2 ml) hígítottuk, és a kapott oldathoz egymás után adagoltunk maíeímido-PEG-savai (Frisch, B.; Boeckler, C.; Schuber, F. ilocönjugate Chem 1998, 7, 180-6; 7,8 mg, 32 prnol, 1,0 eq.), DÉP€-f: (10,7 pl, 04 urnc-l 2,0 ekv.) és diizopropilétilátólnt (11,3 pl, 64 pmol,: 2,0 ekv.) A reakció a HP LG tanúsága szerint 15 perc alatt végbement. A reakcióelegyef koncentráltuk, így olajat kaptunk. Az olajai 1 ml DMSO-val hígítottuk, és reverz fázisú preparativ-HPLC segítségéve! tisztítottuk (Synergi MaxRP Ct2 oszlop 21,4 mm x 25 cm. S μ, 80 Â, gradiens-futtatás: MeGN és 0,1% TFA, 20' ml/pere, 10%-rőí 160%~ra 40 perc alatt, majd 100% WeGN 20 percig). A releváns frakciókat egyesítettük és koncentráltuk, így S3 képletö vegyuletet kaptunk fehér szilárd anyag formájában, |Ú346J Hozam: 16,2 mg (34%); ES-MS m/z 1348,6 p+Hf ; ÜV 215, 247 m. [0347] A 20 - 25, példákban a cBR96 és cAC10 monckionális antitestek hatóanyag-összekötő vegyülni té történő konjugálását ismertetjük. Ezen antitesteket a következő szakirodalmi helyeken ismertetett módon kaptuk: Bowen, et al,, J. Immunol. 1933, 151, 5896: illetve Trail, et al, Science 1993, 261, 212. [0348J A hatóanyag-összekötő maradékok llgandumonkènfl száma egy halóanyag-összekötodígandum: konjugátumban konjugálást reakcióról konjugálás! reakcióra változik, de jellemzően a körülbelül 7 - körülbelül 9 tartományba esik, ha a Hgandum oBR98 vagy cACIO.
20, PÉLDA
64 KÉPLETÖ VEGYÖLET ELŐÁLLÍTÁSA
P368J cBR96 antitestet (24 mg) OTT segítségével redukáltunk az L általános eljárásban ismertetett módon, majd meghatároztuk a tiolcsoportok antitestenként! számát és az antitest-koncentrációt az M általános eljárásban, Illetve az N általános eprásban ismertetett módon, I0351J Eredmény; (Ab] * 4,7 mg/rnl « 29,4 μΜ; [tíolj « 265 μΜ; SH/Ab » 9,0 (jellemző SH/Ab arány körülbelül 7,6 - körülbelül 3,5).
Kon Riga] as |||S2| PBS/DTPA-oldslöf (2,2: ml). ahogyan lén! meghatároztuk, adtunk 4,2 ml redukált antitesthez, és â kapott oldatot jeges fürdő segítségévet 0 °0*rs hűtöttük. Egy másik lombikban ST képiéin vegyület 130.5 pl; torzsoidatát (8,4 mmoi DMSO·· ban, 8,5 mól 67 képieíi vegyület per mot redukált antitest) hígítottuk MeCN~neí (1,48 ml, jeges fürdőben 8 t;'C ra előhötve). Az ST képleté vegyület MeCM-es oldatát gyorsan az antitest-oldalhoz adtuk, és a reakeioelegyef vortex beændezéssel S-18 másodpercig kevertük, visszahelyeztük a jeges fürdőbe, és 8 °C-oh 1 éra hosszat kevertük, ezen idő után 213 μ! císzieín-elöal: ftöö mM. PBifPTPA~ian) adagolásával lefojtottuk a reakciót. 60 μ! lefojtott reakcióelegyet „qmf mirüáként íilretehünk. pÍS$| Miközben á reakció folyt, három PD10 oszlopot (Sephadex G25, beszerezhető a; Sigma-Atdrsch, St Louis, bfo. cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk PBS-sel (amelyet jeges fürdő segítségével 0 °C-ra elöhütöttünk).
[Ö3S4] A lefojtott reakcióelegyet, amely 64 képletü vegyüfetet tartalmazott, 13 mire koncentráltuk uítraoentnfugáiássa!, két ytrafree 4 centrifuga szűrőberendezés segítségével (SOK. molekulatömeg küszöbértéke membrán, Mllílpore Corpk Bedford, MA: a gyártó utasításai szerint alkalmazva), amelyet hűtőszekrényben 4 °C-ra elöhütöttünk, és a koncentrált reakcióelegyet a három előhűtött PD 18 oszlopról eluáltuk. eluálószerként PBS-t (1 ml minden egyes oszlophoz) alkalmaztunk. Az eluál! konjugáfomot összegyűjtöttük oszloponként 1,4 ml térfogatban, 4,2 ml teljes élűéit térfogatban. Az eluál! konjugétum-oldatot steril 8,2 mikronos fecskendoszűrőn szűrtük, 250 pl konjugátum-oldatot félretettünk elemzéshez, a maradék köál^Étorn^tóatof #eif. fiolákban fagyasztottuk. P 3681 A 64 képletü vegyület konceniráaójáf, a hatóanyag-molekulák antiiestenkeüi számát, a lefojtott hatóanyag-összekötő mennyiségét és az aggregátumok százalékát a P, fi O, illetve Û általános eprások szerint határoztuk meg. ¥iisaá Iái eredmények: [6366] [64 képletü vegyület] ~ 3,8 mg/mlg [63$?J Aggregátumé; - nyomokban P&amp;M} Maradék tioi tltráias: maradákiiol-l ^/Ab, Natóanyag/Ab: ~ SÍ — 1,7- 7,3 [0359] Lefojtott hatóanyag-összekötő: nem kimutatható [03501 Hozam: 4,2 ml, 1,6 mg, 68%.
21. PÉLDA
53 KÉPLETÖ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
[03521 cACIO antitestet (24 mg) DT1‘ segítségéve! redukáltunk az L általános eljárásban ismertetett módon, majd meghatároztuk a fiolosoporíök aníiiestenkénti számát és az antitest-koncentrációt az y általános eljárásban, illetve az N általános eljárásban ismertetett módon.
[0353] Eredmény: [AbJ ~ 4.9 mg/mi ~ 30,7 pM: [0354] jtiöl] * 283 pM; 9,2 SH/Ab
Konjugálás: [03831 PBS/DTPA-oidatoí (2,2 ml), ahogyan fent meghatároztuk, adtunk 4,2 mi redukált antitesthez, és a kapott oldatot jeges fürdő segítségével ö 0C-ra Kötöttük, Egy másik lombikban 37 képlett! vegyület 125 pl törzsoldatát (8,4 rnM DMSO-ban, 8,5 moi 87 képlete vegyület per mól redukált antitest) hígítotok MeCN-net (1,48 mi, jeges fürdőben 0 c'C-ra előhütve). Az 37 képletö vegyület MeCN-es oldatát gyorsan az antitest-oldathoz adtuk, és a reakcióeiegyet vortex berendezéssel 6-10 másodpercig kevertük, visszahelyeztük a jeges fürdőbe, és Ö °C~on 1 óra hosszat kevertük, ezen idő után 218 pl olsztein-oldat (100 mM PBS/ÖTPA-ban) adagolásával lefojtottuk a reakciót, 60 pl lefojtott reakcióelegyet „qmr mintaként félretettünk,.
[0353] Miközben a reakció folyt, négy PÖ1Ö oszlopot (Sephadex G25, beszerezhető Sigma-Alórich. St, Louis, Mo. cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk PBS-sel [amelyet jeg:es fürdő segítségével ö elöhütöttünk).
[036?] A lefojtott reakcióelegyet amely 06 képietü vegyütetet tartalmazott, S3 mire koncentráltuk uitraceníriíugálással, két: Ultrafree 4 centrifuga szűrőberendezés segítségével (38K molekulatömeg kuszőhéftékö membrán, Miipore Corp.; Bedford, MA; a gyártó utasításai szerint alkalmazva], amelyet hűtőszekrényben 4 %Lra ©íihűtőttunk, és a koneeníráfi reakeloelegyet a négy előhűtött PIÄ oszlopról eluálíuk, eíuálószerként PBS-t (1 ml minden egyes oszlophoz) alkalmaztunk. Az ©ínéit konjugátumoi összegyűjtöttük oszloponként 1,4 ml térfogatban, 5,8 ml teljes eíuáít térfogaiban, Ezután az eluált konjugáturo-oldafoi steril' 0,2 mikronos feoskeodöszerön szűrtük, 250 pl konjugátum-oidatot félretettünk elemzéshez, a maradék konjugátum-oidatot steril fiolákban fagyasztottuk. P3B8f A 86 képleíü vegyüíet koncentrációját, a hatóanyag-molekulák antltestenkéntí számát, a lefojtott hatóanyag-összekötő mennyiségét és az aggregátumok százalékát a P, N, O, illetve Q általános eljárások szerint határoztuk meg.
Vizsgálati eredmények: [0380] |8S képletű vegyüíet] ~ 2,8 mg/ml j03?0] Aggregátumai e: nyomokban [8371] Maradék tiol titra lás ' maradók #ol~1,8/Ab, Hatoanyag/Ab: - 9,2 ~ 1,8 - 7,6 P372] Nem-kovalensen kötött hatóanyag-összekötő: nem kimutatható [0373] Hozam: 5,8 ml. 15.7 mg, 65%.
22. PÉLDA
88 KÉFiETÖ VEi^ÖiET ELŐÁLLÍTÁSA
[Ö37S] cBR96 ánfilestet (24 mg) DÎT segítségével redukáltunk az L általános eljárásban Ismer letett módon, majd meghatároztuk 3 tíclok antitestenként! számát és az antitest-koncentrációt az M általános eljárásban, illetve az N általános eljárásban ismertetett módon, P3T6J Eredmény: |Ab| -3,7 mg/mf- 23,1 pM; [tiol] - 213 μΜ; 9,4 SH/Ah konjugálás: fó377J PEtS/DTPA-oldatot (2,2 ml), ahogyan fent meghatároztuk, adtunk 4,2 ml redukált antitesthez, és a kapott oldatot Jeges fürdő segítségével 0 °C-ra hűtőtök. Egy másik lombikban SS képlete vegyület 145,5 pl torzsoldatát (8,3 mmoi OMSO·· ban, 0,0 mol SS képlete vegyület per mól redukált antitest) hígítottuk MeCN-nei (1,4S ml, jeges fürdőben 0 °C-ra előíiutve). Az SB képiét« vegyület MeCN-es oldatát gyorsan az antitest-oldathoz adtuk, és a reakcióelegyet vortex berendezéssel β-iű másodpercig; kevertük, majd visszahelyeztük a jeges fürdőbe, és 1 óra; hosszat 0 °C~on kevertük, ezután 249 pl císztein-oldat (100 mM PBS/DTPA-ban) adagolásával lefpjfotlyk a reakciók 60 pl lefojtott reakcióelegyet „qrmM mintaként féireiiiüük, [Ü|78| Miközben a reakció folyt, három PD16 oszlopot (Sephadex G25, beszerezheti a Slgma-Aidrich, St, Louis, Mo. cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk PBS-sei (amelyet Jeges fürdő segítségévei Ö °C-ra elöhutöftünk}. |0I7S1 A lefojtott reákolőeiegpt, amely 68 vegyűléiét tartalmazod, <3 ml-re koncentráltuk ulfracentrifugálással, két U&amp;rafree 4 centrifuga szűrőberendezés segitségévei (SDK molekulatömeg küszöbértéke membrán, Miiiipore Corp,; Bedford, MA; a gyártő utasításai szerint alkalmazva), amelyet hűtőszekrényben 4 sC~ra előhötötfünk, és a koncentrált reakcióelegyet a három előhűtött PD10 oszlopról eluáltuk, elualoszerként PBS4 (i ml minden egyes oszlophoz) alkalmaztunk. Az eluÄ tenfugátumot összegyűjtöttük oszloponként 1,4 ml térfogatban, 4,2 ml teljes eluált térfogatban. Ezután az élűéit konjugátum-oldátoí steril 0,2 mskronos feoskondőszűrön szűrtük, 250 pl konjugátunvoldatot félretettünk elemzéshez, a maradék konjugáíum-oiclatci iteril üolákhan fagyasztottuk. p3tÖ| A SS képíetű vegyület koncentrációját, a hatóanyag-molekulák antitestenkénti számát, a lefojtott hatóanyag-összekötő mennyiségét és az aggregátumok százalékát a P, N, O, illetve Q általános eljárások szerint határoztuk meg.
Vizsgálati eredmények: [0381] [8S képíetű vegyület] ~ 3.0 mg/ml [8382] Aggregátumáé * nyomokban [0383] Maradék tiol tltrálás: maradék tíoíok~Ö,4/Ab. Hafóanyag/Ab: » 9,5 - 0,4 ~ 9,1 P3S4] Nem-kovalensen kötött hatóanyag-összekötő: ö,3% $?~Cys adduktum [0388] Hozam: 5,3 ml, 15,9 mg, 86%,
23, PÉLDA 8? KËPLEÎÜ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA §0388]
P38TJ cACiO antitestet (24 mg) DIT segítségével redukáltuk az L általános eljárásban ismertetett módon, majd meghatároztuk a tíöicsoportok antitestenként! számát és az antitest-koncentrációt az M általános eljárásban, Illetve az N általános eljárásban ismertetett módon, p388] Eredmény: [Ab] ~ 3,9 mg/ml =* 24,5 μbt ftléí]* 22? μΜ; 9,3 SH/Ab [Ö38S] P EJ S / DT F5 A o Id a tot (2:,2 mi), ahogyan fent meghatároztuk,; adtunk 4:2 ml redukál antitesthez, és a kapott gfdaioi: jeges fördi segítségével | ;iC-ra h ütöttük. Egy másik lombikban Si képletű vegyidet 154,4 μΐ törzsoldatát (8,3 mM DM80-ban, 9,0 moi SS képietü vegyulei per mól redukált antitest) hígítottuk MeCN-ne? (1;48 ml, jeges fürdőben 0 °C~ra előhűtve). Az SS képietü vegyidet MeCN-es oldatát gyorsan az antitest-oldathoz adtuk, és a reakclóeiegyet vertex berendezéssel 5-10 másodperéig kevertük, majd yisszaheípziük a jeges fürdőbe, és 1 óra hosszat 0 sC-on kevertük, ezen idő után 249 pl cisztbrn-öihat (1ÖQ r«M: PÖS^iTFA-banJ adagolásival lefojtottuk a reakciót. 80 μί lefojtott reakcioelegyef „gróf mintaként félretettünk, |ÓÍ90| Miközben a reakció folyt, négy PD10 oszlopot pephadeX <325, beszerezhető a Slgma-Aldnch, Bt, louis, Mo. cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk PBlbsel (amelyet jeges fürdő segítségévei 0 °C~ra eiohűtőttünk). P39i| A lefojtott reakcióelsgyet, amely 8? képietü vegyületet tartalmazott, <3 mire koncentráltuk uItracentrifugálássál, két Ultrafree 4 centrifuga szűrőberendezés segítségévet (3.QÍÉ molekulatömeg küszöbértékü membrán, Millípore Oorpy Bedford, MA; a gyártó utasításai szerint alkalmazva), amelyet hűtőszekrényben 4 °C~ra elöhütotfünk, és a koncentrált reakcióelegyet a négy előhűtött PD10 oszlopról etuáttuk, elualöszerként PBS-t (1 ml minden egyes oszlophoz) -atkák máztunk. Az eleéít koryogátymot összegyűjtöttük eszloponként 14 mi térfogatban, SM mi teljes élűéit térfogatban. Ezután az eiuált künjugálum-oldatot steril 0,2 mikronos fecskendőszürön szűrtük, 250 pl konjugátunvoldátot félretettük elemzéshez, a maradék konjugatunvoidatot steril fiolákban fagyasztottuk. 183321 A if képietü vegyület koncentrációját, a hat óanyag ~molekuIák antitestenkénil számát, a lefojtok hatóanyag-összekötő mennyiségét és az aggregátumok százalékát a P, N, O, illetve Q általános eljárások szerint batároztyk meg, fÖ393J (87 képietü vegyület| - 3,0 mg/ml [03941 Aggregáturn% ·« nyomokban p3®§] Maradék hol iífrálás: maradék tíofoknfXSfAb, Hatőanyag/Ab; - 9,5 - 0,5 « ao |®3Í0J Lefojtott hatóanyag-összekötő: 11% 58-Cys adduktum P33?l Hozam: 5:3 ml, 15,9 mg; 66%.
24. PÉLDA
SS KÉPLETŰ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA fPSiJ
[Ö39S] cBR96 antiteste! (24 mg) OTT segítségével redukáltunk az L általános eljárásban Ismertetett módon, majd meghatároztuk a tíolok antitestenként! számit: és az antitest-koncentrációt az :M általános: eljárásban, illetve az N általános é|irásbsn ismertetett módon. P4Í0| Eredmény: [Abj "4,4 mg/mí ~ 27,2 μΜ; pol- 277 pM; 10,2 SH/Ab Konjugálás: |04δ1| A redukált antitestet DMSö~vai hígítottak (1,47 ml, jeges fürdőiben Ö °C~ra elöhütve) úgy, hogy a kapott oldat DKISÖ-ra nézve 20%-os legyen:. Az oldatot 0 vő~on 10 percig kevertük, majd 30 képlett) vegyület 127,8 pl törzsoidatát (7,6 mM-os oldat DMSO-ban, 9 moi #Ö képletű vegyület per moi: antitest) gyorsan hozzáadtuk, A reá keiöefegyet azonnal megkevertük vortex berendezéssel, visszahelyeztük a jeges fürdőbe, és Q °C-on 1 óra hosszat kevertük, ezen idő után 213 pl oiszteln-oídat (100 mM PBS/DTPA~bart} adagolásával lefojtottuk a reakoiót. 00 pl lefojtott reakofőeiegyét,,gfrrf mintaként félretettünk. (04Ö2J Miközben a reakció folyt, négy PDTÖ oszlopot (Sephadex 626, beszerezhető a Sigma-Áldríoh:, St. Louis, Mo. cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk: PBS-sel (amelyet jeges fürdő segítségével Ö °C-ra elöhűtőttünk). |Ö4Ö3J A lefojtott reakoiéelegyet, amely SE képletű vegyületet tartalmazott, <3 ml- re koncentráltuk uitmcentrifugáiissaL két Uirafree 4 centrifuga szűrőberendezés segliségével (SOK mofekdiatömeg küszobériékű membrán: Mllíiporé Corp.: Bedford, MA; a gyárié utasításai szerint alkalmazva), amelyet hűtőszekrényben 4 *C-ta elohutótiunk, és a koncentrált reakclóelegvet a négy előhűtött PD10 oszlopról elyáltük, eloátószerkéní PBi-t (1 ml minden egyes oszlophoz) alkalmaztunk. Af eluáít konjugáturnot összegyűjtőtök; oszloponként 1,4 ml térfogaiért, 5,6 ml teljé|;: eluált térfogatban. Ezután az élűéit kooiugiium-oidatof steril 0# mikronos fécSkendőszűröo szűrtük, 250 pl konjugitüm-öldätot félretettünk elemzéshez, a maradék konjugitunvotdáiot steril fiolákban fagyasztónak.
[0404] A 68 képletű vegyüíet koncentrációját, a hatóanyag-molekulák antitestenként számát, a letöltött hafőanyag-ös^ikőtö mennyiségit és m aggregátumok; százalékát a P, N, Q, illetve Q általános eprisok: szerint határoztuk meg.
[0400] Mivel a 00 képletű vegyulet és az antitest abszohaneiája nagymértékben átfedi egymást, a konjugáium: koneentráokpnak spektrofotometriás meghatározásához az abszorhanoiát 270 nm-nél és 280 nm-nél kell mérni, A konjugátum moláris koncentrációját a következe képlet adja meg: [KonjugátumJ ~ (OD2.«o K 1,0Se* - OD27o x 8,20e6} χ higitási faktor, ahol az 1,08e* és 8,20e* értékeket a hatóanyag és az antitest moláris ezinkoiós koeficienséböJ számitjuk, amelyeknek a becsül értéke a küvetkazi: képletű vegyüíet - 2,08e4%?o eBR98 ~ 1,8?e5 £280 60 képletű vegyulet ~ Iő7e4s2aö eBR98 ~ 2,24e5
Vizsgálati eredmények: P48i| [83 képletű vegyüíet! - 3,2 mg/mí [04071 Aggregátumé; ~ nyomokban P4081 Maradék tiokitráiás: maradék tiotok*1.0/Ab, Hatóanyag/Ab: ~ 10,2-1,0-9,2 [04091 Lefojtott hatóanyag-összekötő; nyomokban |0#0j Hozam: 5,0 ml, 17,9 nig,: 7f%,
25, PÉLDA
09 KÉPLETÖ VEGYULET ELŐÁLLÍTÁSA
|0412J eAC10 antiteste! (24 mg) DTT segítségével redukáltunk az L általános eljárásban ismertetett módén, majd meghatároztuk a tióiok antitestenként! számát és az ardítesbkoneéntráeiőt az M általános eljárásban, Illetve az N általános eljárásban ismertetett módon.
[64131 Eredmény: (Abj « 4,8 mg/ml * 29,8 pM; plot] * 281 pM; 9,4 SH/Ab [0414] Á redukált antitestet DMSÖ~va! hígítottuk (1,47 ml, jeges fürdőben 8 °C-ra előhűtve) úgy. hogy a kapott oldat DMSO-ra nézve 20%~os legyen, Az oldatot 0 0C~on 10 percig kevertük, majd a §6 léptető vagy diet 148 pl törzsoldatát (7,6 mM-os oldat OMSO-han, 6,5 mól 69 képletei vegyülő! per mól antitest) gyorsan hozzáadtuk. A reakelóelagyet azonnal megkevertük vortex berendezéssel, és visszahelyeztük a jeges fürdőbe, és 8 öC~on 1 óra hosszat kevertük, ezen idő után 213 pl cisztein-öldat (188 mi PBS/DTPA-ban) adagolásával lefojtottuk a reakciót. 80 pl lefojtott reakclóelegyet „qrm” mintaként félretettünk. f041 S] Miközben a reakció folyt, négy POÍ8 oszlopot (Sephadex 1326, beszerezhető a Sigma-Aldrich, St. Louis, kló, cégtől) egy hideg szobába helyeztünk és kiegyenlítettünk PBS-sel (amelyet jeges fürdő segítségévei 0 °C-ra eíőhütöttünk). (0418] A lefojtott reakclóelegyet, amely 80 képlete vegyi!letet tartalmazott, <3 mi" re koncentráltuk ultracentrifugálással, két Ultráimé 4 centrifuga szűrőberendezés segítségével (30K molekulatömeg küszőbértékü membrán, IVillpore Corps Bedford, MA; a gyárié utasításai szerint alkalmazva), amelyet hűtőszekrényben 4 °C~ra elöhütottünk, és a koncentrált reakcíóelegyet a négy előhűtött PD10 oszlopról előéltük, etuálószarként PBS4 (1 ml minden egyes oszlophoz) alkalmaztunk. Az élűéit konjugátumot összegyűjtöttük oszloponként 1,4 mi térfogatban, δ,6 ml teles eluáli térfogatban. Ezután az eluáli koniugátem-oldatot steril Ös2 mikronos feeskendoszöron szirtük, 2S6 pl konjugáiem-oldaiot félretettük elemzéshoz, a maradék konjugátum-oldlatot steril fiolákban fagyasztottuk |Ö41?| Ä SÍ kép let ű vegyüíet koncentrációját, a hatóanyag-molekulák antitestenként! számát, a lefojtott hatóanyag-összekötő mennyiségét és az áfgrégiíühfok százalékát a P, M, Öi, Illetve Q általános: eljárások szerint határoztuk meg . f(14181 tdivei a SO képlete vegyüíet és az antitest abszorbanciája nagymértékben itfedf egymást, a konjugátüm köhöenfráeíojának spektrofetornelrlás meghatározásához az abszorbaneiái 27Ö nra-nél és 280 nm-néí kel mérni A konjugátum moláris koncentfáeiopi a következő képlet adja meg: [Konjugátum] ~ {OD280 x 1,08e'5 - 002?o * 8,20e'6} x hígítás! faktor, ahol az 1,08e':' és 8s2Öé§ értékekei a hatóanyag és az antitest moláris exfín kelés koepcíensébőt szimffirk, amelyeknek a Ifoosul értéke a kővetkezői: km képlete vegyüíet zr 2,080^ tm cACIÖ ~ 2,1 öe' €280 80 képleté vegyüíet ~ 1 ,57é* Sgso cACIO ~ 2,53e' igzsgálati eredmények: #4111 Itt képleté vegyüíet] « 3,0 mg/rnl p42ö] Aggregátumig ~ nyomokban #421J Maradék iíöbtítrálás: maradék íío!ok~0,7 /Ab Hatóanyag/Ab: ·~ 9,4··· p422J Lefojtott hatóanyag-összekötő' nyomokban #423J Hozam: 8,8 ml, 48,8 mg, 70%.
26. PÉLDA
76 KÉFLETil ¥EQYULET ELŐÁLLÍTÁSA
[042SJ D ? et H - ( 4 - oitrobe π z è1 )fo S2rfc j π át o f: (1,1 g, 4,02 rnmoí) hígítottunk vízmentes THF-ben (4 mi), Is a kapott elegye! 0 i5C-ra hűtőttük. Nátrium-hidrideí (0,17 g, 4,22 mmot, 105 ekv., 60%-os ásványolajon diszperzió) adtunk hozzá, és a kapott reakcióetegyet 5 percig kevertük. Ezen időpontra leállt a gázfejlődés a reakcióeíegyhö! Ezután a reakoiőeiegyhez fecskendő segítségévei 2;2~cilmetli-1 J-diokáh-lmrit: (0,52 g, 4,02 mmoi) adtunk 1 rnf vízmentes THF-hen, és a mateiőelegyet keverés közben hagytuk szobahőmérsékletre rr?elegedni 30 perc múlva további THF-el: (1 mi) adagoltunk a kapott csapadék hígításának elősegítésére, és a kapói elegye! további 30 percig kevertük, maid áthelyeztük ifÖ&amp;c-t (10 mi) és vizet (10 mi) tartalmazó választótöícsérbe. A szerves fázist összegyűjtöttük, sósvizze! mostuk, és az egyesített vizes extraktumokat etil* acetáiai mostuk (2x). Az egyesített szerves extraktumokat MgSCA fölöd szárítottuk, szűrtük és koncentráltuk, így sötétvörös nyers olajat kaptunk, amelyét gyors kromafográfia segítségével sziíkágél oszlopon (300 x 25 mm) tisztítottunk, eíuálószerként 9:1 hexánok-EtDAc elegye! alkalmaztunk, így halványsarga szilárd Intermediert kaptunk. Hozam: 0,5? g (57%); Rf 0,24 (9:1 hexánok-EtöAc); U¥ 225, 320 nm, 'Ή NMR (CDCb) !> 8 19 (2 H, d, J - 8,4 Hz), 7,24 (2 H, d, J = 8,4 Hz), 6,33 (T H, s), 4,:02 (2 H, s), 4,42 (2 H, s), 1,45 (§ H, S), % UMR (CDCb) * 146,8, 142.7, 141 3, 129,4, 123,9, 121,1, 99,9, 84,4,60,8, 24,1. |Ö42Í| A halványsárga szilárd intermediert (0,28 g, 1,0 mmol) THF-fel (20 ml| hígítottuk, a kapott elegye! 1 N HCMel (10 ml) kezeltük., és -5 percig kevertük. A reakoiőeiegyhez dietilétért (150 ml) és vizet adtunk, és a kapott elegye! választétöíesérbe vittük át. A szerves fázist szárítottuk (MgSCb), szűrtük és koncentráltuk, így olajat kaptunk, A kapott droit azután THF-metanol eíegybén {1 ; 1. mindkettő 4 mi, 0,3 ki) felvettük, majd Raneymikkeit (100 μί, 100 pi/mmol nitrocsoport, 50%-os vizes szuszpenzíó} és hidrazint (74 pl, 1,5 ekv.) adtunk hozzá. Gázképződés kezdődött miközben a reakcIőeSegyet 50 *~ 60 ÍJG~ra melegítettük. 30 perc után és 1 éri után, minden alkalommal 1.5 ekv, hidrazint adagolunk. A sárga elegye! oeíiten szűrtük és metanollal mostuk. A szűrletet kéhCé:ntril|uks így 75 képlete vegyületel: kaptunk olaj formájában, amely később sárga szilárd anyaggá kristályosodott. Hozam: 0,14 g (78%); UV hmíiK 2.15, 280 nm. ’H NMR (DMSO) 6 7,00 (2 H, d. J - 8,4 Hz). 6,61 (2 H, d, J - 8.4 Hz), 8,33 (1 H. s). 8,2:01 (2 H;, bs), 4.64 (2 H, bd), 4,04 (2 H, s). % NMR {DMSO} 8 147,2, 138,!, 129,6, 128,1, 124,6, 113,7, 63.6, 57,5.
27. PÉLDA
W KÉPLETÜ VEGYULET ELŐÁLLÍTÁSA
ä#» ma » < " .. < , ,rví « «ο a λ a a zy? mmni)· 104281 képlete vegyüiet (BBMS, 0,12 g, υ,ο/ mmas; eleggyei (1:2, összesen 4,5 ml) készült keverékéhez Frnoc-VarCít et (ö,3>> g? 0,§< mmol), majd EEDQ-t <0,25 g, 1,0 mmol, 1/5 ekv.) adtunk, es a kapott reakclóeiegyet 15 óra hosszat inert atmoszférában kevertük, Tpvadüä EEDQ-t (Hó akv.) és FmesvVaLOsf-et <1,0 ekv,) adagoltunk az el nem reagált 8HMS jefentlte miatt, és a Hapsi reakciőeíegyet 2 napig kevertük. rna|d koncentráltuk. A kapott maradékot éterrel eldörzsöltük, így sárgásbarna szilárd intermediert kaptunk. ES~ LIS mfz 659 p*Hf, 681 p*Maf : UVA..--;S>; 215, 270 nm. 'H NMR (DklSO) δ 10,04 <1 H, s), 8,10 (1 H. á, J ~ 7,2 m% 7.87 (2 H, cl, J « 7,6 Hz), 7,72 (2 H, % J ~ 7,6 Hz), 7,56 (2 H, d, J « 8.4 Hz), 7,37-7,43: (3 H, ro), 7,30 (2 H, t, J = 7,2 Hz), 7,24 (2 H, éj - 8.4 Hz), 8,47 (1 M, s). 5 96 (1 H. t, J- 5,2 Hz), 5,39 (1 R, s), 4,83 (1 Η, L J «: 5,2 Hz), 4,78 (1 H, t, 2e 5,2 Hz| 4,40 (1 H, dd, J- 5,2, 8,0 Hz). 4,20-4,30 (3 H, m), 4,11 (2 H, d, 2 * 4.4 Hz), 4,84 <2 H, d,,/~ 5,2 Hz), 3,91 (1 H, t, 3 = 7,2 Hz), 2,84-3,06 (2 H, m), 1,91-2,03 (1 H, mi 1,29-1,74 (4 H, m), 0,86 (3 H, d, J « 8,8 Hz), 0,84 (3 H, d, 21-6,3 Hz), P4¾ A sárgásbarna szilárd intermediert PlvtF-fel (10 ml) hígítottuk, és a kapott eíegyet dietílaminnal (5 ml) kezeltük, 1 óra hosszat kevertük és koncentráltuk, így sárgásbarna szilárd anyagot kaptunk, amelyet nagyvákuumban 3 napig szárítottunk. A sárgásbarna szilárd anyagot EíGAe segítségévéi (10 ml) eldörzsöltük, és éterrel <80 ml) kicsaptuk, így nyers maradékot kaptunk amelyet szinterezett üvegtöícséren szűrtünk, és vákuumban száritettunk, így halvány sárgásbarna intermediert kaptunk, ES-MS m/z 436 jyrHf, 468 [MrNaf; UV hmiiX 215, 270 nm.
|0430| A halvány sárgásbarna intermediert DMF-fel (10 mi) hígítottak, és 8~ niaieimidokapronsáyAűdroxislukolbimid-^szterrel (0,15 g, 0,53 mmol, 1 ekvj kezeltük. A reakcioeiegyet 10 óra hosszat kevertük, további díizopmpiSetitanmi (1J ékv.}, majd: további b-nialelrrridokapronsav-bidroxiszukeinímid-észtert (0,i eky ,| iiagoitimk. A kapott reakcíéelegyét 4 óra; hosszat kevertük, ezen idd után a HÍFL0 azt jelezte, hogy a kiindulási anyag elfogyott A reakcioeiegyet koncentráltuk így nyers maradékot kaptunk, amelyet EIOAc fii ml) segítségével eldörzsöitünk, majd éterrel (75 ml) kicsaptunk. A csapadékot egy éjszakán át szárítotuk, így sárgásbárna/haraPPsszínü por formájú intermediert kaptunk. Házain összességében: 0,42 g (kvant). ES-MS m/zf28 651 |y*Naf; UV %s,Mif270nm.
[0431J A sárgásbarna/naranösszinü por formájú intermediert (0,40 g, 0,84 mmol) részben oldottuk DbtEóeh (20 mi), és a kapok eíegyhez hisz(4-nirofenihkarbonátot (úM g, 3,2 mmol, 5,0 ekv.) é&amp; dlizoprdpleiiwilit (0,45 mi, 2,5 mmol, 4,0 ekv.) ádtupk. A kapott reakcióeiegyei körülbelül 4 óra hosszat kevoiiüki, ezen idő után a HPLC monitorozás azt mutatta, hogy nem maradt kiindulási anyag, és hogy a reakcióelegy 2 terméket tartalmazott 3:2 arányban ja kiyánt hjsz- karhonltot és az IsS-diOKárr^-ont): A. reakcioeiegyet koncentráltuk, és a kapott maradékot ËfOAc (10 m| segítségével eldörzsöltük, majd egy-edényes rnódszerrei éter (30 ml) segítségével kicsaptuk. Az EiöAc-éteres eíegyet szűrtük, és a szilárd komponenst szárítottuk. így 79 képlete yegyütétef kaptunk sárgásbarna por formájában, amelyet további tisztítás nélkül használtunk,
28, PÉLDA m KÉPLETU VEQYÜtET ELÙkUâïÂm
[Û433J 4i képlete yegyületét (202 mg, 0,22 mmol, 2ß ekv., 80%-os tisztaságú) és W képleté vegyuieíet ( 180 mg, 0, 11 mmol, 1,0 ekv, 60 %-os tisztaságú) szuszpendáliunk vizmontes DMF-ppo (2 mlf 0,1 y), és a kapóit oldathoz HÖBt-t (3 mg, 22 pmol: 0,2 ekv.}, majd plhdiní (400 pl, % v/v DMF) adtunk. A kapott féákciöolegyet 16 őrá hosszat kevertük, hígítottuk DMSúNmí (2 ml), és a kapott elegye! preparatív'-HPLC segítségével észiitoltuk (Cm-BP oszlop, § p; 100 Λ, lineáris gradiens; tVteQht vízben 10:%···γο! 100%,-ra 40 perc alatt majd 100% 20 percig, átfolyási sebesség: 50 mi/pere}, így 30 képlett! vegyüietet kaptunk fehér szilárd anyag formifibsn. Hozam:. 70 mg (18%). MALOFTÖF MS míz 2138,0 p4-Nlaf, 2164,9 (M+Kf.
29:. PÉLDA
m KÉPLETÜ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
|0A381 31 képleiű vegyuietet az 1, példa szednti módon állítottunk eíü, 13 képiefö vegyidet helyett Fmoc-(D)~vay(L}~c;t~PA80H~t alkalmaztunk
30. PÉLDA
82 KÈPLETÜ VEGYÜLEÎ ELŐÁLLÍTÁSA
P«J
P437] 82 képlete vegyületet az 1. példa szerinti modora állítottunk elő, 19 képletű vegyi) lei helyett Fmoe'Yl|--yal--|D)"CiPPAi©H~t alkalmaztunk.
31. PÉLDA
83 KÉPLETŰ VEGYÖLE? ELŐÁLLÍTÁSA
[04391 §3 Képieíü vegyülalet ai: 1, példa szerinti mMM áintotturik; alő, 1| képfetö yegyüíai helyei Frríoc-(0)^al->:iP|,cil~:^eöH4 alkalmaztunk
32. PÉLDA
m KÉPLEIÖ VEGYÜLBT ELŐÁLLÍTÁSA
P441] 14 képletû vegyületei a 14. példa szénné módon állottunk elő, 21 képletei vegyulet helyett 81 képfetö vegyületet alkalmaztunk.
33. PÉLDA
SS KÉPLITÖ VEGYÜLE? ELŐÁLLÍTÁSA
104431 81 képleté vegyületet a 14. példa szerint? módon állítottunk elöt 21 képleté vágyóiét helyett 82 képletü vegyületet alkalmaztunk.
34. PÉLDA U KÉPLETŰ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA [04441
[044§] ü képletü vegyületet a 14. példa szerinti módon állítottunk elé, 21 képletei vegyütet helyett S3 képleté vegyületet alkalmaztunk
35. PÉLDA m KÉPLETÜ VEGYÜL El előállítása
(8447] 8-Maíeimidokapronsav (1,00 g, 4,62 mmol, 1,0 ekv.), p-aminofeenzi:l· alkohol (1..11 g, 9,04 mmol, 2,0 ekv.) és EEDQ (2,24 g, 9.04 mmol, 2,0 ekv ) keverékét hígítottuk dikíórmetánnal (13 mi). A kapott reakcióeiegyeí: 16 óra hosszat kevertük, majd koncentráltuk és tisztítottuk gyors oszlopkromatográfía segítségével, hexánokban 25 - 100% EtOAc gradiens-lépéssel, így szslárd intermediert kaptunk. Hozam: 1,38 g (98%); ES-MS miz 317,22 338,13 P+Maf; m kmm 215, 248 rm, [0448} A szilárd Intermediert (0,85 rng, 2,69 mmol, 1,0 ekv.} és btsz(4~nítföfenll}-karbonátot: (2,48 g, 8,06 mmoL 3,0 ekv.) hígítottuk DME-fel (18 mii és a kapod elegyhez diizopropiiefiiamint (0,94 ml, 5,37 mmol, 2,0 ekv.) adtunk. A kapott: reakcióé legyet körülbelül 1 éra hosszat kevertük, ezen idő után az RP-HPLC Jelezte, hogy a reakció végbement. A reakeiéelegyei vákuumban koncentráltuk, és a kapott nyers maradékot dleiil-éferrel (körülbelül 250 mi) eidörzsöltOk, így szűrés után fehér szilárd intermedlert kaptunk. Hozam: 1,28 g (98%); U¥ kam 218, 252 nm.
[8449} A fehér szilárd intermediert (258 mg, 0,0538 mmol, 1,0 ekv.), MMAE-t (464 mg, 0,848 mmol, 1,2 ekv.) és HOBt-t (14,6 mg, 0,108 mmol, 0,2 ekv ) hígítottuk pmőm/DMF eleggyel (15,6 ml), és a kapott reáküóeíegyet körűIbelül 10 óra hosszai kevertük, ezen Idő után az. RP-HPLC jelezte, hogy a reakció nem ment végbe teljesen, A reakotőelegyéf koncentráltuk, a kapott nyers maradékot DMF-fei (3 ml) hígítottuk, és a kapói elegyhez díizopropile|tamint p,489 ml, 8,538 mmpi 1,0 ekv.) adtunk* és a kapói reakcióeiegyeí körülbelül 18 óra hosszat kevehűk. A reakciéelegyet közvetlenül tisztítottuk Chromatcttron# (radiais vékonyréteg-kromatográfía) segítségével, gradiens-lépéssel (0 - 5% metanol diklórmetánban), így 87 képletü vegyuletet kaptunk fehér szilárd anyag formájában. Hozam: 217 mg (38%); BS-MS mfz 1882,64 p*Naf ; UV W 215, 248 nrn.
36. PÉLDA m í#fletu vegvület előállítása
|Ö4l1| Fmoc-vai-cit vegyidétől (US-6214345 számú szabadalom, Firestone ^ Ai) siuszpenőanimk diklórmaíánban (50 ml), és a kapott elegye! 33% HBrAa-aimu HöAc-eal (20 ad) kezeltünk, ametyet pipettával kúMMMÍ δ pere alatt ádaföituofc,. Körülbelül 10 peréig végzett keverés után a reakció a HPLC tanúságé végbement. A reakclóeíegyet jéggel (körülbelül 500 ml) hígítottuk, és lassan íenteit vizes nátrto-biórpgénkarbönif'-oldatoí adagoltunk, miközben kevertük, amíg a gázképződés meg nem szent. A kapott kocsonyás masszát szűrtük és desztillált vízzel mostuk, így szilárd anyagot kaptunk, amelyet RgÜg jelenlétében 24 óra hosszai nagyvákuumban szárítottunk. Â kapott sárgásbarna por tormája intermedier (FmööóíáPbiFPA8~&amp;f) HPLC segítségével mérve körülbelül 70%-os tisztaságú volt, és további tisztiás nélkül használtuk. |Ü4S2| A sárgásbarna por formájú intermediert (30 mg, 40,8 pmoi) és 13 képlett) vegyületel (34 mg, 40,6 μηιοΙ) oldottuk ÖMF-ben (1 mi), és a kapott elegvhez diizoprpptletilámínt (21 pl, 0,12 mrnol, 3,0 ekv.) adtunk. A kapott reakoióelegyet β óra hosszat kevertük. DMSO-val (1 ml) hígítottuk, és azonnal tísztítöttűk preparativ HPLC segítségévei (Civ-iRP oszlop, δ μ, 100 Λ, lineáris gradiens: ypCN vízben (amely 0,1% hangyasavat tartalmazott) 10%-ról 100%-ra 40 perc alatt, majd 20 percig 100%. 25 mi/perc átfolyási sebesség), így halvány sárgásbarna por formájú intermediert kaptunk. Hozam: 5 mg (3%); ESMS m/z 142:0 IM+Hf, 1443 (óFHMaf: UV A,,,:s: 205, 258 mm. |Ö453] A halvány sárgásbarna por formájú intermediert (4 mg, g:s pmof) hígítottak DMF fel (1 ml), és a kapott elegyet dietílaminnal (0,5 ml) kezeltük A reakció 1 óra alatt végbement a HPLC tanúsága szerint A reakoióelegyet koncentráltuk, így olajos szilárd maradékot kaptunk, amelyet éterrel (3χ) eidorzsöííünk, így nyers maradékot kaptunk. A nyers maradékot DfvlF~fei (i mi) hfglotfnk, és a kapott elegybez 8-maleimidökapronsav-bidreziszukcíniimióHésztert iß mg, ««oymog amurpi ,/νκοροη Kommemi 18 éra hosszat keverték. Ä reakeioelegyel közvetlenül tlszittöftek prepafativ-HPLC segítségévei (C;rRP «szlop, δ μ, 100 kf lineáris gradiens: MeCN vízben (amely 0,1% hangyasavat fa?1aimazoi| 10%-rói 100%na 48 pere alatt maid 20: ;pereig: 10(1%, 25 mi/perc átfolyási sebességi, így 18 képleté vegyöleiet kaptunk halvány sárgásbarna sziláid anyag támlájában. Házaim %B mg (kvani); EÏ48S mii 1391 p-kHf ; UV kyUxy 205, 250 nm.
37. PÉLDA
m KÉPLETÜ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA P4S4I
BM képhîû veppï/ef eiöéiíMm [04SSJ
P4S1| 89Ä képleté vegyi!letet a 9. példa szerinti midőn átütöttünk elő, 42 képlete tnpeplé vagyaiét intermedier helyett 43 képletö trpeptid vegyötetet alkalmaztunk. W mgyűM eigéíiitása 10457] 89A képlete vegyületet (0,13 g, 0,15 pmol, 1,0 mmol), 21 képleté: vegyületeí (0,12 g, 0,17 mmol, íj ekv ) és HÖBí-t (4 mg, 31 pmet, o,2 ekv.) szyppenaaitunk o&amp;sNpfri«*$3©n ψ mi uierve υ,ο mg. a Kapón reaRcsoesegyeî köre! belül 4 ora hosszat kevertük, majd dlizopropmimmm (27 pi 0;15 mmol 10 ekv.) adtunk hozzá, és a kapott reakaóeíegyet körüfoetül $4 óra hosszat kevertük, majd vákuumban koncentráltuk A kapott nyers olajat PMSQ-vaf hígítottuk, ás prèparatlV-HFL€ segítségével tisztítottuk (C;2-RP oszlop, 5 p, 10$ &amp;x lineáris gradiens; ilfeCM vízben (amely Ds1% hangyasavat tadalmazot§ 1§0%>-íá 40 perc alatt, majd 20 percig 100%, 20 mllpere átfolyást sebesség:), így sárga olajat kaptunk, amelyet minimális mennyiségű diklármetinnai felvettünk és fölösleges mennyiségű éterrel kicsaptunk, így 89 képleti vegyület kaptunk sárgásbarna perform^ában. Hozam; 0,15 mg (08%), ES-M3 mii 1449,14 [fvHHf, UV W 215, 258 nm.
38. PÉLDA S0 KÉPLETÜVEGYÜLËÏ íLÍÁLLITÁSA [04|l|
|04SS| lé-Feniléndlamin-difridröklOfidot (3,06 g, 17 mmol) és di-t.erc-butit-iíkafeanátoí (3,69 g, 17 mmol) higitottunk 30 ml dlkiórmetánnai. A kapott etegyhez düzcprcpiíetilamínf (8,03 ml, 50,7 mmol, 3,0 ekv.) adtunk, és a kapott feakcideiegyet 1 ára hosszat kevertük, A reakcióelegyet átvltük váíasztótöíesérbe, és a szerves fázist vízzel (3X'10 ml) mostuk. A szerves réteget 4 %>οη körülbelül 15 éra hosszat: tároltuk, és a termék kristályosodat. A kristályokat szűréssel összegyűjtöttük és fűdéi díklonnetánsat mostuk, így iS képletü vegyöletet kaptuk kristályos szilárd anyag formájában. (1.2 g, 34%). UV A!Tiax 215, 250 nm. 1H NblR (DltÜSO) δ 8,78 (1 H, bs), 7,04 (2 H, bd, 0 - 7,1 Hz), 6.43 (2 H: d, j* 7,2 Hz), 4,72 (2 H, s), 1,41 (9 H; s).
91 KÉPLETÜ VEGYÜLET ELŐÁLLÍTÁSA
p4if| cACIÖ oldatát (10 mg/m!: 25 mM-os nätnuMität-öyalban, 258 mM nátrium kiorid. 0,02% 60, pH^6,5s eiegyében) pH~7.S értékre állítottuk 0,3 Μ dibázisos nátrium-foszfát adagolásával. Ezen pH-beáiíitott cACIö-oidathoz adtunk 5 mM végső koncentrációig. A cAC 10-oldatot ezután hőmérséklet· szabályozott kamrában 37 í:'C-ra előmelegítettük. Miután a cACIO-oidat hőmémÉkfete 37 öC-ra kiegyenlítődött. DTT-t adtunk hozzá (10 mM törzseidéiből) a DTT'óAOIO mölarány véged körülbelül 3,0 értékének eléréséig m redukciós reakcióban (οΑ€10 esetén 145 500 Da molekulatömegét használtunk). A fédMk rtâkéfôt' óra hosszat hagytuk féföfyni |04S2| Az inkubélási idd végén a redukciós reakoiőelegyet 2 - 8 °C belső hőmérsékletre hütöttük jeges- vizes fürdőben. Az oldat hőmérsékletét a további konjugálás! lépések folyamán 2 ~ 8 °C-on tartottuk. A lehűtött redukciós reakeíöelegyef áHandotérfogatú dlaszürésnek vetettük alá a fölösleges OTT eltávolítására:, 30 kPa membrán alkalmazásával, és a putted kicseréltük foszfáttal pufféról!: sooidate, pH-7,4 (PBS|, A disszirés Ül, a szabad fiel kormentóciójáf: a redukált és diaszürt cACI 0-ben az M általános eljárás szerinti módon határoztuk meg. Ezután konjugálást végeztünk az M általános eljárással meghatározót összes hőihez viszonyított 16% mőiíofdslegben idegeit SS képlet« vegyulet alkalmazásával (13 mg/rn! DMSO-ban készült törzsoidatbői) További DMSO-t adagoltunk a köfíjugátáái: reakcióhoz a DM80 15 % (v/v) végső kenceráráciőjának elérésig:. A konjugálásl reakciót összesen 30 percig folytattuk.
[04®3| A konjugálás! réakoie befejezése után az e! nem reagált fölösleges hatóanyag-összekötő vegyütetet lekötöttük íofösiéges mennyiségi cisztáin adagolásával fűszeres rnölfőlősleg, az összes löt mennyiségéhez viszonyítva, amelyet a redukált és diaszürt cACIO oldaton végzett M általános eljárás segítségével határoztunk meg}., így lefojtott reakcióelegyet kaptunk. A lefojtott reakcióelegyet azután a Wspotefctlájú szennyezésektől megtisztítottunk állandótérfogeté díaszüréssel,: 3Θ: kös membrán alkalmazásával, és a pofért kícserélük PBS-re, pH~7,4, Ä disszűrés után a kodugatumot 0,22 mikronos szűré segítségével sterilre szűrtök, így 01 képlete vegyuietet kaptuk tiszta szintien óidat formájában.
40. PÉLDA 02 KÉFLETŰ VÊ0YÜLET ELŐÁLLÍTÁSA p04|
[0460] 02 képleté vegyi! lelet a 39. példa szerinti módon állítottunk elő, a DTT-t olyan mennyiségben alkalmaztuk (Ti) rnM lorzsokJathol}, amely a redukciós reakcióban körüliéiül i ,5 végső molarányt biztosított a DTTLcACIÖ-re nézve.
8.2. Μ VITRO TOKICITÁSI KÍSÉRLETEK pliSf A következő sejtvonalakat használtuk; H3396 humán emlő-karcinóma (cBR98 antigén pozitív. cACK) antigén negatív), HDT-118 humán vastagbél-végbél kardnéma (cBR98 és cACIÖ antigén negativ) és Karpas humán anaplázlas nagyseiies lymphoma (ALCL) (c8R96 antigén negatív, cACIO antigén pozitív). Ezek a seponaíak bészerezheíők az ATCG-töl. 1540 C-D'30-pozitív Nodgkín-kór (NO) sejtvonalat és Karpas 299 ALCL sejtvonalat a Oestsohe Sammlung von Mikroorganisrn und Zellkulturen GmbH (Braunschweig, Germany) gyűjteményből szereztünk be. I54öcy-tt HD LSÁ0 származékát, amely xenograÉ-növekedéshez van adaptálva, Dr. Phil Thorpe (U of Texas Southwestern Medical Cébter, Dallas, T%) biztosította. A sejtvonalakat 19% szarvasmazhaemhriQ-· szérummal Ntégészltel RPMI-1641 közegben (Life Technologies Inc, Gaithersburg, MD) növesztettük. H3396 sejteket 10% szarvasmarhaembrió- szérummal kiegészített' RRMf közegben íamélyre „középként hivatkozubi] 96-mérőhelyen lemezeken széteshettünk körülbelül 3000 - 10 000 sejt/mérohely mennyiségben, és egy éjszakán át hagytuk megtagadni. A nem tapadó Karpas sejivonaiat körülbelül 10 000 séjténérohely mennyiségben a vizsgálat kezdetekor szélesítettük A. találmány szerinti vegyöíetek szemléltető képviselőit különböző koncentrációkban, három;· párhuzamos formájában adagoltuk, ás az 1-7... ábrán jelölt időpont után a közepi eltávolitoiük, és a sejteket friss közeggel háromszor mostuk. 37 ;,C“On: 96 áfám át végződ inkubálás után Alamar Bíue-t adagoltunk, és 4 éra múlva meghatároztuk a sejtek életképességét a kővetkező szakirodalmi helyen ismertetett módon; Ahmed SA, Gogaí RM Jr, Walsh JE., J. Immunoi.. Methods, 170, 211-224, 1994.
[0487] In vivo ktsérléiékhez C.8.-17 SÓID (Harlan, Indianapolis, IN) egereket használunk.
41 PÉLDA
IÁI VITRO OII'GTOXíCITÁii: ADATOK P46SJ 49 képleiü vegyület és S3 képletű vegyidet H3396 humán emlő-karosnorna sejtekre gyakorolt dioloxikus hatását az 1. ábrán mutatjuk be. Az adatok azt mutatják, hogy 1 óra után az 53 képlete vegyület dtotozikusabb, mini a 49 képleté vegyúlet, egészen 0,01 mM koncentrációig. A vegy öletek lényegében véve azonos ciíoioxíclíási mutatnak 0,01 mM és 1,0 mM koncentráció között.
42, PÉLDA
in viTRocrrmmmwmßmmM
[0469] A I, ábra a S4, SS, 68 és 69 képletű vegyüleiek dtotoxíkus hatását mutatja H3396 human emlo-kamlnorna sejtekre nézve (cBRii antigen pozitív, cAplö antigén negatív). Az adatok azt mutatják, hogy a 64 és 66 képietö vegyúlet hasonló és szignifikáns citotecieitist fejt ki, míg a SS és €9 képletű vegyidet kevésbé hatásos, de mindazonáltal oitotosâkus H3396 sejtekke! szemben ebben az adott vizsgálatban.
43. PÉLDA
ÍN VITRO CiTQTÖXíCiTÁS! ADATOK
[Û47Û] A 3. ábra a 64, 66, 68 és 69 képletű vagy öletek citotovikus hatását rn utalja HÇT416 humán vastagbélo/éghéí kamimrm sejtekre (cBR96 anfjgég pozitív,. cACIÖ antigén negatív). Az adatok azt mutatják, hogy a 64, 66, 68 és 69 képlet# vegyületek egyike sem eitotoxikus az: antigéomegáiy HÜT--116 sejtekre nézve ebben a vizsgálatban.
44. PÉLDA m mRO otöt oxietxfei adatok P47if A 4. ábra a 66 és 68 képleté vegyületek eitotoxikus hatását mutatja H3398 humán emlo-kareinóma sejtekre (cBR66 antigén pozitív). Az adatok azt mutatják, hogy minikét vegyulet nagymértékben toxikus 0,1 mi fölötti koncentrációknál, és hogy a 68 képíety vegyulet nagyobb eiomxiéítást fejt ki, mint a 68 képlet# vegyulet 0,01 rngání és 8,4 mg/mí közötti koncentrációknál.
45. PÉLDA /ív mmmmommm adatok §0471| Az 5. ábra a 86, 88 és 68 vegyületek eitotoxikus hatását mutatja Karpas humán anapíáziás rtagysejfe lyaipboma sejtekre (0ΒΡ98 antigén pozitív, cACIö antigén negatív). Az adatok azt mutatják, hogy a 68 képlet# vegyulet ebben a vizsgálatban dtotoxikusabh volt a Karpas sejtekre, mini a 68 és a 66 képletei vegyületek. Ä 8i képlet# vegyulet szignifikáns citoíoxiertást fejtett ki 0,001 mM fölötti koncentrécíéknál, mig a 66, vegyulet és i 68. vegyulet nem volt eitotoxikus 1,0 mg/mí alati koncentráoiéknél.
46. PÉLDA m^rmomwmmmfPS) adatok §0473] A 6. ábra a 66 és 67 képlet# vegyületek eitotoxikus hatását mutatja H3386 humán emíö-kareínóma sejtekre (cBR96 antigén pozitív, cACIO antigén negatív) 2 óra és 96 óra után. Az adatok azt mutatják, hogy a 86 képlet# vegyület nagymértékben eitotoxikus 100 mg/mi lóícttí keneentrácieknál rövid ideig tartó (2 éra) expozíciónál és 100 mg/mí fölötti konczmtráoóknál hosszú ideig tartó (96 éra) expozíció folyamán. A 67 képlet# vegyulet nem fejtett ki citotoxícitást a H33S8 sejtekre ebben a vizsgalatban egészére 1000 mg/mi koncentrációig. §0474] S általános eljárási Egyes kiválasztott hatóanyag~összekótő*antitest konjugáíumok m vívó tesztelése. Az L2887 humán adenokarcinórna sejk vonalhoz fmuszmentes (8--10 hetes) csupasz egerekbe xenograft turoprofeif vagy tumor Miieket imgfantáitunk, Karpas humán anapláziás négysejtes lymphoma modellhez CB-1? SIÓD egerekbe szubkután Irnplahtálünk 5X'HÁ Sejtet. Mindkét lumonmodelf esetén a terápiát akkor kezdtük, .amikor a tumorok a 100 átlagos térfogatot elérték. Egerek esoporpt négynaponként intravénásán Injektáltuk foszfáttal puieroít sóoldatbád a 66-S9 képletei vegyüietek egyikével, L2987-hofdozo állatok esetén összesed 8 injekcióval és Kafpas-áliatok esetén 2 Injekcióval. A tumor-térfogatot a következő képlet alapjáé számítottuk; ö,5(legho$szabb dimenzió χ merőleges dimenziód. Az egereket éllvölltöttuk a vizsgálatból, ha a; tumor körülbelül 1800 mm3 elért, éttől a ponttól az adott csoport átlagos tumorméretét már nem ábrázoltuk,
47. PÉLDA
/AI VWO TERÁPIÁS HATÉKONYSÁG L2987 TUMOROKON
[0476] A 7. ábra a 88-89 képletű vegyüietek terápiás hatását mutatja ttmuszmentes csupasz egerekbe smpíantál L.2987 humán tüdő adermkarcinöma zéPógraft tumorokon (cBR96 antigén pozitív, CÄG18 antigén negativ), M S általános eljárást követtük szubkután 12987 humán tűdé tumorok alkalmazásával (p vwo passzá Sásból). Az egereknek injekciós úton négynaponta a SS, 67,88 vagy |9 képletű vegyüietek egyikét adagoltuk, összesen 8 injekcióban. Az első injekciót a tumor Impiantálása után 18 nappal adtuk. Az adatok azt mutatják, hogy a 68 képletű vegyöíet és a 88 képletű vegyüíet adagolása jelentősen csökkentette a tumor térfogatát, és további nö^kedés nem volt meofigyeítieto a kezeit egerekben korűfbeiüf 2S napig az utolsó injekoió után. A 8? képfetö vegyüíet és a 69 képietü vegyüíet kévésbe volt hatásos, mindazoniitai gátolta a tumorsejtek szaporodását a kezelt állatokban. A tesztelést leállítottuk a 67 képletű vegyületteí és a 89 keletű vegyüleieí kezelt állatok esetén, ámíkpr a turner térfogata meghaladta az 10Ô0 ims-t
48, PÉLDA
m VIVŐ TERÁPIÁS HATÉKONYSÁG KARPAS TUMOROKON p478] A 8. ábra a 66-89 képletű vegyüietek terápiás hatását mutatja tlmuszmentes csupasz eprekbe implantât Rarpas humán anapiáziás négysejtes lymphoma xenograft; tumórökon (cAC10 antigén pozk'iv.. cBR96 antigén negatív),
Az S általános eljárást követtük Karpas humán anapíáziás nagysejtes lymphoma models alkalmazásával 06-17 SCID egerekbe szubkután δ χ 106 seilet lo^lantáltaek:. Az egereknek intravénásán négynaposra a 88. 67, 68 vagy 80 képietü vegyuletek egyikét adagoltuk, összesen 2 Injekcióban a 8. naptól kezdve. Az adatok azt mutatják hogy a 8? és 88 képletű vegyüíet teljes regressziót indukált, és hogy a tu mór továbbféjMüíí: azokban az állatokban, amelyek: lényegében véve azonos mennyiségi 86 és 88 képiéin vegyületet kaptak.
49. PÉLDA EGYES KIVÁLASZTOTT VEGYULETEK ÖTÖTOXICITÁSANAK M EG HATÁR OZÁSA CD3Q- és CD3Ö+ sejtekben [0477] Fizikai jellemzésük után a 87, 01 és 82 képletű vegyuletek in vitro sitoföxiöjtásái kiértékeltük CD3CL Karpas 299 és CD30' Raji sejteken a fent ismertetett Aíamar Blue vizsgálat segítségével. Az életképes sejtek százalékos értékét ábrázoltuk minden egyes molekula koncentrációjával szemben az !Cs> érték meghatározására (amelyet 50%os sejtpuszíuíást létrehozó mAh-koncentrácidként definiálunk).
[0478] A 67 képletű vegyüíet aktivitást fejtett ki Karpas 299 sejtekkel szemben,, amelynek 10¾ érteke 4 ng/rn! volt. Az 10¾ érték fordítottan volt arányos a hatóanyag-terheléssel mivel az a 87 képletű vegyüíet esetén mért 4 ng/mLrŐI 7 ng/ml-re nőtt â il képletű vegyüíet esetén, 40 ng/ml-re nőtt 82 képietü vegyüíet esetén. A tesztelt vegyuletek szelektivitását az antigén-negaiív Raji sejtvonal alkalmazásával értékeltük ki, amely érzéketlen volt az összes e,AC1 (Martaimé vegyüíetre, a 87, 91 és 92 képietü vegyuletek esetén >1000 ng/ml 10¾ értékkel
50. PÉLDA
EGYES KIVÁLAÉÉTÖTT VEGYÖLÉTÉK CITÖf ΟΧΐϋίΤΑβΑ HO ÉS ALCL XENOGRAFT MODELLBEN
[047¾ A 87, 01 és 92 képletű vegyuletek citotoxicitását szubkután Karpas 299 humán anapíáziás négysejtes lymphoma és L540cy Hodgkin-kór xenograft modelíékheri értékelffik ki C.B.-17 SCID egerekben. A kiértékelést akkor kezdtük meg, amikor a tumorok térfogata átlagosan 59-190 mm3 volt, :Karpas-2f9 hordozó egerek seregét injektáltuk g4dx4 92 képletű vegyilettei, 91 képietü vegyüíettel vagy 87 képletű vegyüíettel, 9,25 mg/kg vagy 0,5 mg/kg dózissal. Ä 0.25 mg/kg dózissá! kezelt állatok egyike esetén sem következed be regresszió, bír késleltetés voit a tumor növekedésében a nem-kezeit kontrollokhoz képest, a 91 képleté vegyulétiéi és a I? képlsfd vegyűiettel kezeit állatok esetén. Â Karpas tumorok 91 MpMí vegyűlet és W képlet! vegyűlet gérlxé-adagolt 0,5 mg/kg dózisával történt kezelés esetén 5/5 teljes regressziót, illetve 4/5 teles regressziót értünk el A tumor növekedésének késíélstésé a nem-kezei állatokhoz képest a §2 képletü vegyűlet esetén a q4dx4-adagolt 0,5 mg/kg dózisnál volt meglgyélheté, de te|es regresszió nem következett be. P48§! A hatékonyságot szintén .teszteltük szybkután Karpas modellhen egyes, egyetlen dózisban adagolt kiválasztott vegyületekkel. A 91 képíetű vegyületet és a 6T képleté vegyületet egyetlen dózisban: injektáltok 0,25, 0,5 és 2,0 mg/kg mennyiségben. A 0,25 mg/kg: dózisnál nem volt tumorellenes aktivitás egyik nsoportbao sem, és az adagos tumortérfogat nem tért e! a nem^kezef kontrolloktél. A tumor növekedésének késleltetése jelentkezett mindkét molekula esetén 5,5 mg/kg dózisnál:, azonban teles regressziót nem: értünk el. Az eprek 2 mpkg §1 képiefű vegyűléiel es 57 képíetű vegyűiettel tértént kezelésével 1ÖÖ% te|es regressziót értőnk el mindkét csoport esetén. |Ö4S1| A 91 képíetű vegyületet és a 67 képletű vegyületet szintén összehasonlítotok· szühkután L540cy humán HD tumort hordozó egerekben, amelyeket q4dx4-adagók 1 és $ mg/kg: 91: képletű vegyűiettel és if képletü vegy öleiéi kezeltünk. 1 mg/kg dózisnál fi képletű vegyűiettel és f? képletü vegyűléiel kezelt egereknél a tűmor növekedésének szignifikáns késleltetése volt megfigyelhető a nem-kezeit állatokhoz képest. Teles regresszió volt megfigyel hété a 3 mg/kg dózisban adagolt mindkét esetben, mind a Sí képletü vegyűiettel, mind a ff lsépletű vegyűiettel kezelt egereknél.

Claims (4)

  1. Szabadalmi igénypontok 1 Gyógyszerkészítmény, amely embereiknek, való intravénás adagoláshoz van adaptálva, és amely tartalmaz la képlete vegyületeket
    vagy azok győgyszerészetiteg elfogadható sóját vagy szolvátfát, ahol L- jelentése monoktonáls antitest, amely inimunspeelfíkusan képes kötni a CD3Ö antigént;: • A- jelentése stretcher egység; mindegyik -W~ jelentése, függetlenül: amínosav-egység; vv jelentése egész szám, amelynek értéke 2-12; -Y- jelentése önfeláldozó távtartó egység; y értéke 1 vagy 2 ; p értéke 1 ~ körülbelül 2Ô, és jelentése a készítményben az -Aa-Ww-Yy-Ö egységek antltestenkénti átlagos száma; és ~D jelentése hatóanyag-egység, ahol az la képlete vegyületek szerkezete
    vagy győgyszerészetííeg elfogadható sója vagy szolvátja.
  2. 2, Az 1 Igénypont szerinti gyógyszerkészitmény, ahol az antitest kiméra AC10 antitest, 3. A 2. ;gényponi szerinti gyógyszerkészítmény, ahoi p értéke 1 ~ kerüíbeíii 5 4. A 2. igénypont szedni! gyégyszerkészkmény, abol p értéke körülbelül 8 ~ körülbelül 5. $. Az 1-4. igénypofitok bármelyike szennti gyógyszerkészítmény, ahol a gyógyszerkészítmény száraz, Nofiiizált por.
  3. 6, Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti gyógyszerkészítmény. ahol a gyógyszerkészítmény folyadék formájában van.
  4. 7, Az 1-6. Igénypontok bármelyike szerinti gyógyszerkészítmény rák kezelésében való alkalmazásra. 8 A 7. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely hematológiai rák kezelésében vajé alkalmazásra szolgál. 9 A 8. igénypont szerinti gyógyszerkészitmény, ahol a hematológiai rák Hodakindimíóroa. w ............
HUE11165210A 2002-07-31 2003-07-31 Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére HUE027549T2 (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40040302P 2002-07-31 2002-07-31

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HUE027549T2 true HUE027549T2 (hu) 2016-10-28

Family

ID=31188683

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HUE11165210A HUE027549T2 (hu) 2002-07-31 2003-07-31 Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére
HUS1300002C HUS1300002I1 (hu) 2002-07-31 2013-01-18 Aurisztatin konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HUS1300002C HUS1300002I1 (hu) 2002-07-31 2013-01-18 Aurisztatin konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére

Country Status (16)

Country Link
US (5) US7659241B2 (hu)
EP (3) EP2357006B1 (hu)
JP (1) JP4741838B2 (hu)
AT (1) ATE516818T1 (hu)
AU (2) AU2003263964C1 (hu)
BE (1) BE2012C047I2 (hu)
CA (2) CA2802205C (hu)
CY (2) CY1111894T1 (hu)
DK (2) DK1545613T3 (hu)
ES (3) ES2556641T3 (hu)
FR (1) FR12C0066I2 (hu)
HU (2) HUE027549T2 (hu)
LU (1) LU92133I2 (hu)
PT (2) PT2357006E (hu)
SI (2) SI1545613T1 (hu)
WO (1) WO2004010957A2 (hu)

Families Citing this family (746)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040141983A1 (en) 1999-03-15 2004-07-22 Protein Design Labs, Inc. Compositions against cancer antigen LIV-1 and uses thereof
US7244827B2 (en) 2000-04-12 2007-07-17 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein entitled 24P4C12 useful in treatment and detection of cancer
US6946129B1 (en) * 1999-06-08 2005-09-20 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD40 antibody and uses thereof
US20040018194A1 (en) * 2000-11-28 2004-01-29 Francisco Joseph A. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
US7256257B2 (en) 2001-04-30 2007-08-14 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US6884869B2 (en) 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
ES2334494T5 (es) 2001-05-11 2013-05-29 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Proteínas de unión específicas y usos de las mismas
US20110313230A1 (en) 2001-05-11 2011-12-22 Terrance Grant Johns Specific binding proteins and uses thereof
AU2002356844C1 (en) 2001-10-23 2010-03-04 Amgen Fremont Inc. PSMA antibodies and protein multimers
US20050215472A1 (en) 2001-10-23 2005-09-29 Psma Development Company, Llc PSMA formulations and uses thereof
PT2357006E (pt) 2002-07-31 2016-01-22 Seattle Genetics Inc Conjugados de fármacos e sua utilização para tratamento do cancro, de uma doença autoimune ou de uma doença infeciosa
WO2004016733A2 (en) * 2002-08-16 2004-02-26 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein entitled 251p5g2 useful in treatment and detection of cancer
WO2004067564A2 (en) 2003-01-29 2004-08-12 Protein Design Labs, Inc. Compositions against cancer antigen liv-1 and uses thereof
JP5356648B2 (ja) * 2003-02-20 2013-12-04 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 抗ｃｄ７０抗体−医薬結合体、ならびに癌および免疫障害の処置のためのそれらの使用
US20080025989A1 (en) * 2003-02-20 2008-01-31 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
US8012681B2 (en) 2003-05-13 2011-09-06 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Methods of modulating metastasis and skeletal related events resulting from metastases
KR101520209B1 (ko) * 2003-11-06 2015-05-13 시애틀 지네틱스, 인크. 리간드에 접합될 수 있는 모노메틸발린 화합물
US20050175619A1 (en) * 2004-02-05 2005-08-11 Robert Duffy Methods of producing antibody conjugates
JP5064037B2 (ja) * 2004-02-23 2012-10-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 複素環式自壊的リンカーおよび結合体
WO2005084390A2 (en) * 2004-03-02 2005-09-15 Seattle Genetics, Inc. Partially loaded antibodies and methods of their conjugation
EP1789391B1 (en) 2004-07-23 2017-06-28 Endocyte, Inc. Bivalent linkers and conjugates thereof
US7641903B2 (en) 2004-10-15 2010-01-05 Seattle Genetics, Inc. Anti-CD70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders
EP1799262A4 (en) * 2004-10-15 2009-10-21 Seattle Genetics Inc ANTI-CD70 ANTIBODIES AND ITS USE FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF CANCER DISORDERS AND IMMUNE DISORDERS
US8337838B2 (en) * 2004-10-15 2012-12-25 Seattle Genetics, Inc. Anti-CD70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders
AU2005332660A1 (en) 2004-11-12 2006-12-14 Seattle Genetics, Inc. Auristatins having an aminobenzoic acid unit at the N terminus
ATE476994T1 (de) 2004-11-30 2010-08-15 Curagen Corp Antikörper gegen gpnmb und ihre verwendungen
WO2006078776A2 (en) 2005-01-19 2006-07-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Inhibitors and methods of treatment of cardiovascular diseases, and methods for identifying inhibitors
CN101203241B (zh) 2005-04-19 2012-02-22 西雅图基因公司 人源化抗-cd70结合物和其应用
PT1912677E (pt) * 2005-06-20 2013-12-23 Psma Dev Company L L C Conjugados de anticorpos contra psma-fármaco
USRE47223E1 (en) 2005-06-20 2019-02-05 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
CA2614436C (en) * 2005-07-07 2016-05-17 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine side-chain modifications at the c-terminus
WO2007008848A2 (en) 2005-07-07 2007-01-18 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine carboxy modifications at the c-terminus
AU2006269382B2 (en) * 2005-07-08 2014-01-16 Biogen Idec Ma Inc. Preparation of polymer conjugates of therapeutic, agricultural, and food additive compounds
CA2616005C (en) 2005-07-18 2015-09-22 Seattle Genetics, Inc. Beta-glucuronide-linker drug conjugates
US8124738B2 (en) 2005-09-26 2012-02-28 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to CD70
AR059900A1 (es) 2006-03-17 2008-05-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-tat226 e inmunoconjugados
CA2651500A1 (en) * 2006-05-22 2007-11-29 Elan Pharmaceuticals, Inc. Preparation of polymer conjugates of therapeutic, agricultural, and food additive compounds
TWI523864B (zh) 2006-05-30 2016-03-01 建南德克公司 抗體及免疫接合物及其用途
US8257706B2 (en) * 2006-08-25 2012-09-04 Seattle Genetics, Inc. CD30 binding agents and uses thereof
PL2502938T3 (pl) 2006-10-27 2015-07-31 Genentech Inc Przeciwciała i immunokoniugaty oraz ich zastosowanie
DK2099823T4 (da) 2006-12-01 2022-05-09 Seagen Inc Målbindingsmiddelvarianter og anvendelser deraf
IN2009KN02404A (hu) * 2006-12-14 2015-08-07 Medarex Inc
CN104013956B (zh) * 2007-01-25 2018-12-18 达娜-法勃肿瘤研究所公司 抗egfr抗体在治疗egfr突变体介导的疾病中的用途
RU2009133784A (ru) 2007-02-09 2011-03-20 Дженентек, Инк. (Us) АНТИ-Robo4-АНТИТЕЛА И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
CA2680854C (en) * 2007-03-15 2017-02-14 Ludwig Institute For Cancer Research Treatment method using egfr antibodies and src inhibitors and related formulations
MX2009009912A (es) 2007-03-27 2010-01-18 Sea Lane Biotechnologies Llc Constructos y colecciones que comprenden secuencias de cadena ligera sustitutas de anticuerpos.
GB0707034D0 (en) 2007-04-12 2007-05-23 St Andrews The Compounds
CL2008001334A1 (es) 2007-05-08 2008-09-22 Genentech Inc Anticuerpo anti-muc16 disenado con cisteina; conjugado que lo comprende; metodo de produccion; formulacion farmaceutica que lo comprende; y su uso para tratar el cancer.
BRPI0812970A2 (pt) 2007-06-25 2019-09-24 Endocyte Inc conjugados contendo espaçadores hidrofílicos
US9877965B2 (en) 2007-06-25 2018-01-30 Endocyte, Inc. Vitamin receptor drug delivery conjugates for treating inflammation
EP2176295B1 (en) 2007-07-16 2014-11-19 Genentech, Inc. Humanized anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
KR101486615B1 (ko) 2007-07-16 2015-01-28 제넨테크, 인크. 항-ｃｄ７９ｂ 항체 및 면역접합체 및 사용 방법
US20090035848A1 (en) * 2007-08-03 2009-02-05 Robert Hickey Moving bed biofilm reactor (mbbr) system for conversion of syngas components to liquid products
ES2609915T3 (es) 2007-08-14 2017-04-25 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Anticuerpo monoclonal 175 direccionado al receptor de EGF y derivados y usos del mismo
EP3831380A3 (en) 2007-08-17 2021-12-01 Purdue Research Foundation Psma binding ligand-linker conjugates and methods for using
ES2908934T3 (es) 2007-10-04 2022-05-04 Zymogenetics Inc ZB7H6 miembro de la familia B7 y composiciones y métodos relacionados
EA020696B1 (ru) 2007-10-12 2015-01-30 Сиэтл Дженетикс, Инк. Способ лечения лимфомы ходжкина с использованием комбинации гемцитабина и конъюгата антитела против cd30 с ауристатином
DK2211904T3 (en) 2007-10-19 2016-10-24 Seattle Genetics Inc Cd19-binding agents and uses thereof
JP5580205B2 (ja) 2007-11-19 2014-08-27 セレラ コーポレーション 肺癌マーカーとその使用
EP2078492A1 (de) * 2008-01-11 2009-07-15 Roche Diagnostics GmbH Bandkassette für ein medizinisches Handgerät und Blutzuckermesssystem
CA2711736A1 (en) 2008-01-18 2009-07-23 Medimmune, Llc Cysteine engineered antibodies for site-specific conjugation
EP3269737B1 (en) 2008-01-31 2024-06-19 Genentech, Inc. Anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
US8609105B2 (en) 2008-03-18 2013-12-17 Seattle Genetics, Inc. Auristatin drug linker conjugates
CN102056626B (zh) 2008-04-11 2016-07-06 西雅图遗传学公司 胰腺癌、卵巢癌和其它癌症的检测和治疗
CN102076717B (zh) 2008-04-30 2016-02-03 伊缪诺金公司 交联剂和它们的用途
US8163551B2 (en) 2008-05-02 2012-04-24 Seattle Genetics, Inc. Methods and compositions for making antibodies and antibody derivatives with reduced core fucosylation
WO2009148623A2 (en) 2008-06-05 2009-12-10 Stc.Unm Methods and related compositions for the treatment of cancer
ES2438495T3 (es) 2008-09-08 2014-01-17 Psma Development Company, L.L.C. Compuestos para exterminar células cancerosas que expresan PSMA, resistentes a taxano
GB0819287D0 (en) 2008-10-22 2008-11-26 Univ Bradford Compounds
UA109633C2 (uk) 2008-12-09 2015-09-25 Антитіло людини проти тканинного фактора
EP3545969B1 (en) 2009-01-09 2023-12-13 Seagen Inc. Dosing regimens for anti-cd30 vc-pab-mmae antibody drug-conjugates
US9238878B2 (en) * 2009-02-17 2016-01-19 Redwood Bioscience, Inc. Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use
CA2754531A1 (en) * 2009-03-06 2010-09-30 Seattle Genetics, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to 24p4c12 proteins
WO2010126551A1 (en) 2009-04-30 2010-11-04 Immunogen, Inc. Potent conjugates and hydrophilic linkers
CA2761681A1 (en) 2009-05-13 2010-11-18 Sea Lane Biotechnologies, Llc Neutralizing molecules to influenza viruses
ME03479B (me) 2009-06-03 2020-01-20 Immunogen Inc Metodi konjugacije
CN102802661B (zh) 2009-06-22 2016-01-13 米迪缪尼有限公司 用于位点特异性偶联的工程改造的Fc区
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
US20110070248A1 (en) * 2009-09-24 2011-03-24 Seattle Genetics, Inc. Dr5 ligand drug conjugates
US20110076232A1 (en) 2009-09-29 2011-03-31 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
CN102573908B (zh) 2009-10-23 2014-12-17 米伦纽姆医药公司 抗gcc抗体分子及其相关组合物和方法
MX338694B (es) 2009-11-30 2016-04-27 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y el tratamiento de tumores.
BR112012013975B8 (pt) 2009-12-09 2021-05-25 Inst Nat Sante Rech Med anticorpo monoclonal isolado, kit de diagnóstico, conjugado de anticorpo-fármaco, composição compreendendo o referido anticorpo, métodos in vitro para diminuir a atividade, para enfraquecer ou inibir o desenvolvimento de células e de detecção de expressão celular de b7h6, usos do anticorpo e do conjugado, e célula de produção de anticorpo
WO2011075185A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Oligasis Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates
UA115517C2 (uk) 2010-02-08 2017-11-27 Ейдженсіс, Інк. Кон'югат антитіло-лікарський засіб (adc), який зв'язується з білком 161p2f10b
CA2787657A1 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US9951324B2 (en) 2010-02-25 2018-04-24 Purdue Research Foundation PSMA binding ligand-linker conjugates and methods for using
EP2542576B1 (en) * 2010-03-02 2016-04-20 Seattle Genetics, Inc. Methods for screening antibodies
WO2011123813A2 (en) 2010-04-02 2011-10-06 Amunix Operating Inc. Binding fusion proteins, binding fusion protein-drug conjugates, xten-drug conjugates and methods of making and using same
DK2558538T3 (da) 2010-04-15 2019-08-05 Kodiak Sciences Inc Zwitterion-holdige polymerer med høj moolekylvægt
BR112012026410B8 (pt) 2010-04-15 2023-01-31 Spirogen Dev Sarl Composto e conjugado de pirrolobenzodiazepinas e usos dos mesmos
AU2011239522B2 (en) 2010-04-15 2014-10-23 Medimmune Limited Targeted pyrrolobenzodiazapine conjugates
RU2613886C2 (ru) 2010-06-03 2017-03-21 Дженентек, Инк. Антитела и иммуноконъюгаты, визуализируемые при помощи иммуно-позитрон-эмиссионной томографии, и способы их применения
MX336540B (es) 2010-06-08 2016-01-22 Genentech Inc Conjugados y anticuerpos manipulados geneticamente con cisteina.
PL2580243T3 (pl) 2010-06-09 2020-05-18 Genmab A/S Przeciwciała przeciwko ludzkiemu CD38
US8722629B2 (en) 2010-06-10 2014-05-13 Seattle Genetics, Inc. Auristatin derivatives and use thereof
PT2582728T (pt) 2010-06-15 2017-11-23 Genmab As Conjugados fármaco-anticorpo humano contra fator tecidual
JP5953303B2 (ja) 2010-07-29 2016-07-20 ゼンコア インコーポレイテッド 改変された等電点を有する抗体
EP2621508B1 (de) 2010-09-29 2015-08-26 Seattle Genetics, Inc. N-carboxyalkyl-auristatine und ihre verwendung
UA110495C2 (en) 2010-09-29 2016-01-12 Agensys Inc Antibody drug conjugates (adc's) that bind to 191p4d12 protein
EP3219731A1 (en) 2010-10-01 2017-09-20 Oxford BioTherapeutics Ltd Anti-ror1 antibodies
WO2012054748A2 (en) * 2010-10-22 2012-04-26 Seattle Genetics, Inc. Synergistic effects between auristatin-based antibody drug conjugates and inhibitors of the pi3k-akt mtor pathway
SI3156420T1 (sl) 2010-12-06 2019-05-31 Seattle Genetics, Inc. Humanizirana protitelesa za LIV-1 in njihova uporaba pri zdravljenju raka
WO2012087962A2 (en) 2010-12-20 2012-06-28 Genentech, Inc. Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
CN103415621A (zh) 2011-01-14 2013-11-27 雷德伍德生物科技股份有限公司 醛标记免疫球蛋白多肽及其使用方法
JP6023097B2 (ja) 2011-03-16 2016-11-09 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド Ｎカルボキシアルキルオーリスタチンおよびその使用
WO2012123755A1 (en) 2011-03-17 2012-09-20 The University Of Birmingham Re-directed immunotherapy
EP2690955A4 (en) 2011-03-30 2014-10-15 Univ Arizona AURISTATINE TYRAMINE PHOSPHATE SALTS AND AURISTATIN AMINOCHINOLINE DERIVATIVES AND PRODRUGS THEREOF
WO2012143523A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Genmab A/S Bispecifc antibodies against her2
EP2699260B1 (en) 2011-04-20 2024-11-20 Genmab A/S Bispecifc antibodies against her2
AR086364A1 (es) 2011-04-21 2013-12-11 Bayer Ip Gmbh Conjugados de principio activo-ligante (adc) y el uso de los mismos
CN103608684B (zh) 2011-05-12 2016-05-04 基因泰克公司 利用框架签名肽检测动物样品中的治疗性抗体的多重反应监测lc-ms/ms方法
EP2710040B1 (en) 2011-05-19 2017-07-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
US9790253B2 (en) 2011-05-19 2017-10-17 President And Fellows Of Harvard College OSW-1 analogs and conjugates, and uses thereof
MX371526B (es) * 2011-05-27 2020-01-31 Ambrx Inc Composiciones que contienen, metodos que incluyen, y usos de derivados de dolastatina enlazados a aminoacidos no naturales.
CA2837586C (en) * 2011-05-27 2018-12-11 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acid linked dolastatin derivatives
JP6263467B2 (ja) 2011-05-27 2018-01-17 グラクソ グループ リミテッドＧｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｉｍｉｔｅｄ Ｂｃｍａ（ｃｄ２６９／ｔｎｆｒｓｆ１７）結合タンパク質
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
US8815226B2 (en) 2011-06-10 2014-08-26 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
MX368966B (es) 2011-06-10 2019-10-23 Mersana Therapeutics Inc Conjugados de proteina-polimero-farmaco.
SG10201605041VA (en) 2011-06-21 2016-08-30 Immunogen Inc Novel maytansinoid derivatives with peptide linker and conjugates thereof
BR112013032899A2 (pt) 2011-06-22 2017-01-24 Inserm Inst Nat De La Santé Et De La Rech Médicale anticorpos anti-axl e utilizações dos mesmos
KR20140104944A (ko) 2011-06-22 2014-08-29 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) 항-ａｘｌ 항체 및 그의 용도
UA117901C2 (uk) 2011-07-06 2018-10-25 Ґенмаб Б.В. Спосіб посилення ефекторної функції вихідного поліпептиду, його варіанти та їх застосування
US9120858B2 (en) 2011-07-22 2015-09-01 The Research Foundation Of State University Of New York Antibodies to the B12-transcobalamin receptor
WO2013015821A1 (en) 2011-07-22 2013-01-31 The Research Foundation Of State University Of New York Antibodies to the b12-transcobalamin receptor
US10300140B2 (en) 2011-07-28 2019-05-28 I2 Pharmaceuticals, Inc. Sur-binding proteins against ERBB3
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
WO2013041606A1 (en) 2011-09-20 2013-03-28 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
CA2848520C (en) 2011-09-29 2019-11-26 Seattle Genetics, Inc. Intact mass determination of protein conjugated agent compounds
JP6310394B2 (ja) 2011-10-10 2018-04-11 ゼンコア インコーポレイテッド 抗体を精製する方法
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
KR101961976B1 (ko) 2011-10-14 2019-03-25 시애틀 지네틱스, 인크. 피롤로벤조디아제핀 및 표적 접합체
CN108164551A (zh) 2011-10-14 2018-06-15 西雅图基因公司 吡咯并苯并二氮杂卓和靶向结合物
US9399073B2 (en) 2011-10-14 2016-07-26 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines
CN103998449A (zh) 2011-10-14 2014-08-20 斯皮罗根有限公司 吡咯并苯并二氮杂卓
AU2012338436B2 (en) 2011-11-17 2015-09-03 Pfizer Inc. Cytotoxic peptides and antibody drug conjugates thereof
EP2793585A4 (en) * 2011-12-05 2015-12-09 Igenica Biotherapeutics Inc Antibody-Agent Conjugates and Related Compounds, Compositions and Methods
US9975956B2 (en) 2011-12-22 2018-05-22 I2 Pharmaceuticals, Inc. Surrogate binding proteins which bind DR4 and/or DR5
CA2858806A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
US11147852B2 (en) 2011-12-23 2021-10-19 Pfizer Inc. Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor
KR102134490B1 (ko) 2012-01-12 2020-07-16 시냅틱스 인코포레이티드 단일층 용량성 이미징 센서들
CA2862292C (en) 2012-01-20 2019-10-08 Sea Lane Biotechnologies, Llc Binding molecule conjugates
CA2864092C (en) 2012-02-10 2021-06-29 Seattle Genetics, Inc. Detection and treatment of cd30+ cancers
US10080805B2 (en) 2012-02-24 2018-09-25 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
GB201203442D0 (en) 2012-02-28 2012-04-11 Univ Birmingham Immunotherapeutic molecules and uses
WO2013130093A1 (en) 2012-03-02 2013-09-06 Genentech, Inc. Biomarkers for treatment with anti-tubulin chemotherapeutic compounds
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
KR20150006000A (ko) 2012-05-01 2015-01-15 제넨테크, 인크. 항-pmel17 항체 및 면역접합체
WO2013173393A1 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Concortis Biosystems, Corp Drug-conjugates, conjugation methods, and uses thereof
US9504756B2 (en) 2012-05-15 2016-11-29 Seattle Genetics, Inc. Self-stabilizing linker conjugates
KR102475777B1 (ko) 2012-05-15 2022-12-09 씨젠 인크. 자가-안정화 링커 접합체
US8822423B2 (en) * 2012-05-17 2014-09-02 Janssen Biotech, Inc. Affinity peptides toward infliximab
US20130309223A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer
MX352581B (es) 2012-05-21 2017-11-29 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados contra ly6e y metodos de uso.
WO2013174783A1 (en) 2012-05-23 2013-11-28 Pieris Ag Lipocalin muteins with binding-affinity for glypican-3 (gpc-3) and use of lipocalin muteins for target-specific delivery to cells expressing gpc-3
CA2875247A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Biogen Idec Ma Inc. Chimeric clotting factors
CN104519897A (zh) 2012-06-08 2015-04-15 比奥根艾迪克Ma公司 促凝血化合物
AU2013270684B2 (en) 2012-06-08 2018-04-19 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
DK2863955T3 (en) 2012-06-26 2017-01-23 Sutro Biopharma Inc MODIFIED FC PROTEINS, INCLUDING LOCATION-SPECIFIC NON-NATURAL AMINO ACID RESIDUES, CONJUGATES THEREOF, METHODS OF PRODUCING ITS AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
EP3632462A1 (en) 2012-07-06 2020-04-08 Genmab B.V. Dimeric protein with triple mutations
CN104736174B (zh) 2012-07-06 2019-06-14 根马布私人有限公司 具有三重突变的二聚体蛋白质
US10132799B2 (en) 2012-07-13 2018-11-20 Innate Pharma Screening of conjugated antibodies
CN112587671A (zh) 2012-07-18 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
DK2692865T3 (en) 2012-07-30 2015-02-16 Nbe Therapeutics Llc Transponeringsmedieret identification of specific binding proteins, or functional
CA2879670A1 (en) 2012-08-02 2014-02-06 Genentech, Inc. Anti-etbr antibodies and immunoconjugates
CN104717979A (zh) 2012-08-02 2015-06-17 基因泰克公司 抗etbr抗体和免疫偶联物
BR112015003751B1 (pt) 2012-08-23 2021-12-07 Agensys, Inc. Conjugados anticorpo-fármaco, uso dos mesmos, composição farmacêutica, vetor, anticorpos ou fragmentos de ligação ao antígeno, método para produzir os mesmos e anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno que se liga a 158p1d7
JP6826367B2 (ja) 2012-08-31 2021-02-03 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド アジド基を含む修飾アミノ酸
EP2906297B1 (en) 2012-10-12 2017-12-06 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
NZ707490A (en) 2012-10-12 2018-09-28 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates
WO2014057113A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sarl Pyrrolobenzodiazepine - anti-psma antibody conjugates
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
HUE052835T2 (hu) 2012-10-12 2021-05-28 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinek és konjugátumaik
ES2680153T3 (es) 2012-10-12 2018-09-04 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos anti-PSMA-pirrolobenzodiazepinas
EP2766048B1 (en) 2012-10-12 2014-12-10 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
AU2013328623B8 (en) 2012-10-12 2017-06-15 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
CA2885305C (en) 2012-10-12 2019-11-12 Spirogen Sarl Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
WO2014062697A2 (en) * 2012-10-16 2014-04-24 Endocyte, Inc. Drug delivery conjugates containing unnatural amino acids and methods for using
JP2016504272A (ja) 2012-10-30 2016-02-12 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ 官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体
WO2014068079A1 (en) 2012-11-01 2014-05-08 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin An antibody that binds cd269 (bcma) suitable for use in the treatment of plasma cell diseases such as multiple myeloma and autoimmune diseases
WO2014068443A1 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Pfizer Inc. Spliceostatin analogs
EP3564259A3 (en) 2012-11-09 2020-02-12 Innate Pharma Recognition tags for tgase-mediated conjugation
EP2919774A4 (en) 2012-11-15 2016-11-09 Endocyte Inc CONJUGATES FOR THE TREATMENT OF DISEASES CAUSED BY PSMA-EXPRESSING CELLS
ES2701076T3 (es) 2012-11-24 2019-02-20 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Enlazadores hidrofílicos y sus usos para la conjugación de fármacos a las moléculas que se unen a las células
US9353150B2 (en) 2012-12-04 2016-05-31 Massachusetts Institute Of Technology Substituted pyrazino[1′,2′:1 ,5]pyrrolo[2,3-b]-indole-1,4-diones for cancer treatment
US10226535B2 (en) 2012-12-10 2019-03-12 Mersana Therapeutics, Inc. Auristatin compounds and conjugates thereof
AU2013359506B2 (en) 2012-12-10 2018-05-24 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
US9872918B2 (en) 2012-12-12 2018-01-23 Mersana Therapeutics, Inc. Hydroxyl-polymer-drug-protein conjugates
KR102272233B1 (ko) 2012-12-12 2021-07-01 프로메가 코포레이션 생체활성 제제의 세포 표적 포획을 위한 조성물 및 방법
WO2014096551A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Glykos Finland Oy Linker-payload molecule conjugates
JP6449777B2 (ja) 2012-12-21 2019-01-09 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 抗ｎｔｂ−ａ抗体ならびに関連する組成物および方法
SG11201504887TA (en) 2012-12-21 2015-07-30 Bioalliance Cv Hydrophilic self-immolative linkers and conjugates thereof
EP2943506B1 (en) 2013-01-10 2024-03-13 Genmab B.V. Human igg1 fc region variants and uses thereof
LT2943511T (lt) 2013-01-14 2019-11-11 Xencor Inc Nauji heterodimeriniai baltymai
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014113510A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
HK1219423A1 (zh) 2013-02-28 2017-04-07 Immunogen, Inc. 包含細胞結合劑及細胞毒素劑的軛合物
EP3566750A3 (en) 2013-02-28 2020-04-08 ImmunoGen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
CA2902865A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Genentech, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates
PT2968440T (pt) 2013-03-15 2019-07-31 Zymeworks Inc Compostos citotóxicos e antimitóticos e métodos de utilização dos mesmos
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10611824B2 (en) 2013-03-15 2020-04-07 Innate Pharma Solid phase TGase-mediated conjugation of antibodies
PL2968588T3 (pl) 2013-03-15 2019-08-30 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Formulacje koniugatów lek-przeciwciało anty-EGFR
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
CN111138543B (zh) 2013-03-15 2024-06-11 Xencor股份有限公司 异二聚体蛋白
AU2014240012A1 (en) 2013-03-15 2015-09-24 Abbvie Inc. Antibody drug conjugate (ADC) purification
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014151282A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Promega Corporation Substrates for covalent tethering of proteins to functional groups or solid surfaces
AU2014232416B2 (en) 2013-03-15 2017-09-28 Xencor, Inc. Modulation of T Cells with Bispecific Antibodies and FC Fusions
US10168323B2 (en) 2013-03-15 2019-01-01 Promega Corporation Compositions and methods for capture of cellular targets of bioactive agents
EP2991683B1 (en) 2013-05-02 2019-09-18 Glykos Finland Oy Conjugates of a glycoprotein or a glycan with a toxic payload
WO2014193722A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Genentech, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
GB201309807D0 (en) 2013-05-31 2013-07-17 Pharma Mar Sau Antibody drug conjugates
JP6469094B2 (ja) 2013-05-31 2019-02-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗細胞壁タイコ酸抗体及びコンジュゲート
WO2014194030A2 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Immunogen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
BR112015030514A2 (pt) 2013-06-04 2017-08-29 Cytomx Therapeutics Inc Composições e métodos para conjugação de anticorpos ativáveis
US10071169B2 (en) 2013-06-20 2018-09-11 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
EP3010548A1 (en) 2013-06-21 2016-04-27 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
ES2658039T3 (es) 2013-07-10 2018-03-08 Sutro Biopharma, Inc. Anticuerpos que comprenden múltiples residuos de aminoácidos no naturales sitio-específicos, métodos para su preparación y métodos de uso
US10208125B2 (en) 2013-07-15 2019-02-19 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Anti-mucin 1 binding agents and uses thereof
AU2014296219A1 (en) * 2013-08-01 2016-02-25 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (ADC) that bind to CD37 proteins
GB2516882A (en) 2013-08-02 2015-02-11 Univ Bradford Tumour-targeted theranostic
US9542023B2 (en) 2013-08-07 2017-01-10 Synaptics Incorporated Capacitive sensing using matrix electrodes driven by routing traces disposed in a source line layer
CA2918139A1 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Genentech, Inc. 1-(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole dimer antibody-drug conjugate compounds, and methods of use and treatment
CN105848671B (zh) 2013-08-28 2019-12-13 艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司 位点特异性抗体缀合方法和组合物
WO2015038984A2 (en) 2013-09-12 2015-03-19 Halozyme, Inc. Modified anti-epidermal growth factor receptor antibodies and methods of use thereof
WO2015042108A1 (en) 2013-09-17 2015-03-26 Genentech, Inc. Methods of using anti-lgr5 antibodies
US20150091842A1 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Synaptics Incorporated Matrix sensor for image touch sensing
US9298325B2 (en) 2013-09-30 2016-03-29 Synaptics Incorporated Processing system for a capacitive sensing device
US10042489B2 (en) 2013-09-30 2018-08-07 Synaptics Incorporated Matrix sensor for image touch sensing
US9459367B2 (en) 2013-10-02 2016-10-04 Synaptics Incorporated Capacitive sensor driving technique that enables hybrid sensing or equalization
HRP20210410T1 (hr) 2013-10-11 2021-04-30 Oxford Bio Therapeutics Limited Konjugirana antitijela prema ly75 za liječenje raka
US9956299B2 (en) 2013-10-11 2018-05-01 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine—antibody conjugates
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2015054658A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
JP6502931B2 (ja) 2013-10-11 2019-04-17 アメリカ合衆国 Ｔｅｍ８抗体およびその使用
EP3054983B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
JP6420331B2 (ja) 2013-10-11 2018-11-07 メルサナ セラピューティクス，インコーポレイティド タンパク質−高分子−薬剤コンジュゲート
MX2016004659A (es) 2013-10-11 2017-08-02 Asana Biosciences Llc Conjugados proteina-polimero-farmaco.
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
SG11201604879QA (en) 2013-10-15 2016-07-28 Sorrento Therapeutics Inc Drug-conjugates with a targeting molecule and two different drugs
NZ758050A (en) * 2013-10-15 2024-03-22 Seagen Inc Pegylated drug-linkers for improved ligand-drug conjugate pharmacokinetics
US9274662B2 (en) 2013-10-18 2016-03-01 Synaptics Incorporated Sensor matrix pad for performing multiple capacitive sensing techniques
EP3415489A1 (en) 2013-10-18 2018-12-19 Deutsches Krebsforschungszentrum Labeled inhibitors of prostate specific membrane antigen (psma), their use as imaging agents and pharmaceutical agents for the treatment of prostate cancer
US9290578B2 (en) 2013-10-21 2016-03-22 Genentech, Inc. Anti-Ly6E antibodies and methods of use
US9495046B2 (en) 2013-10-23 2016-11-15 Synaptics Incorporated Parasitic capacitance filter for single-layer capacitive imaging sensors
US9081457B2 (en) 2013-10-30 2015-07-14 Synaptics Incorporated Single-layer muti-touch capacitive imaging sensor
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
MX2016005854A (es) 2013-11-07 2017-07-28 Inserm (Institut Nat De La Santé Et De La Rech Médicale) Anticuerpo anti-her3 alosterico de la neuregulina.
ES3013992T3 (en) 2013-11-14 2025-04-16 Endocyte Inc Compounds for positron emission tomography
AU2014352824B2 (en) 2013-11-25 2019-07-18 Seagen Inc. Preparing antibodies from CHO cell cultures for conjugation
US10335494B2 (en) 2013-12-06 2019-07-02 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combination of aurora kinase inhibitors and anti-CD30 antibodies
CN110590950A (zh) 2013-12-13 2019-12-20 基因泰克公司 抗cd33抗体和免疫缀合物
EP3082876B1 (en) 2013-12-16 2018-01-17 Genentech, Inc. 1-(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole dimer antibody-drug conjugate compounds, and methods of use and treatment
TWI846009B (zh) 2013-12-19 2024-06-21 美商思進公司 與標的-藥物結合物併用之亞甲基胺基甲酸酯連接物
TWI727919B (zh) 2013-12-19 2021-05-21 美商西雅圖遺傳學公司 與標的-藥物結合物併用之亞甲基胺基甲酸酯連接物
MX384608B (es) 2013-12-27 2025-03-14 Zymeworks Bc Inc Sistemas de enlace que contienen sulfonamida para conjugados de fármacos.
CN106459162A (zh) 2013-12-27 2017-02-22 酵活有限公司 Var2csa‑药物偶联物
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA2936377A1 (en) 2014-01-10 2015-07-16 Shanghai Birdie Biotech, Inc. Compounds and compositions for treating egfr expressing tumors
US10323083B2 (en) 2014-01-15 2019-06-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Agents that specifically bind matrilin-3 and their use
CN106413756A (zh) 2014-01-24 2017-02-15 豪夫迈·罗氏有限公司 使用抗steap1抗体和免疫缀合物的方法
CN105636591B (zh) 2014-01-29 2020-04-07 上海恒瑞医药有限公司 配体-细胞毒性药物偶联物、其制备方法及其应用
FR3017298B1 (fr) 2014-02-07 2016-03-04 Centre Nat Rech Scient Conjugues et pro-drogues pour le traitement du cancer et de maladies inflammatoires
KR102532137B1 (ko) 2014-02-11 2023-05-12 씨젠 인크. 단백질의 선택적 환원
EA201691650A1 (ru) * 2014-02-17 2017-04-28 Сиэтл Дженетикс, Инк. Гидрофильные конъюгаты антитело-лекарственное средство
US10308721B2 (en) 2014-02-21 2019-06-04 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-DLL3 antibodies and drug conjugates for use in melanoma
EP3122757B1 (en) 2014-02-28 2023-09-06 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Charged linkers and their uses for conjugation
US9798429B2 (en) 2014-02-28 2017-10-24 Synaptics Incorporated Guard electrodes in a sensing stack
CN110845616A (zh) 2014-03-21 2020-02-28 艾伯维公司 抗-egfr抗体及抗体药物偶联物
SG10202008629XA (en) 2014-03-28 2020-10-29 Xencor Inc Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
US10133421B2 (en) 2014-04-02 2018-11-20 Synaptics Incorporated Display stackups for matrix sensor
US9260478B2 (en) 2014-04-04 2016-02-16 Shanghui Hu Potent and efficient cytotoxic peptides and antibody-drug conjugates thereof and their synthesis
FR3020063A1 (fr) 2014-04-16 2015-10-23 Gamamabs Pharma Anticorps humain anti-her4
US9927832B2 (en) 2014-04-25 2018-03-27 Synaptics Incorporated Input device having a reduced border region
US9690397B2 (en) 2014-05-20 2017-06-27 Synaptics Incorporated System and method for detecting an active pen with a matrix sensor
EP3154587B1 (en) 2014-06-13 2020-01-15 Tenboron OY Conjugates comprising an anti-egfr1 antibody
WO2015189478A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Glykos Finland Oy Payload-polymer-protein conjugates
WO2015196167A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 Bioalliance C.V. Anti-folate receptor aplha (fra) antibody-drug conjugates and methods of using thereof
WO2015197919A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Glykos Finland Oy Antibody drug conjugates binding to high-mannose n-glycan
CA2954934C (en) 2014-06-30 2023-09-26 Glykos Finland Oy Drug derivative and conjugates
CN105440135A (zh) 2014-09-01 2016-03-30 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
DK3169706T3 (da) 2014-07-11 2020-03-09 Genmab As Antistoffer, der binder axl
WO2016008112A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Medshine Discovery Inc. Linkers and application towards adc thereof
BR112017001403A2 (pt) 2014-07-24 2017-11-21 Genentech Inc métodos para conjugar um agente com uma fração de tiol em uma proteína que contém pelo menos uma ligação trissulfeto
US20160060360A1 (en) 2014-07-24 2016-03-03 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CN107074975A (zh) 2014-08-28 2017-08-18 生物蛋白有限公司 用于修饰的t细胞的条件活性嵌合抗原受体
HUE055539T2 (hu) 2014-09-11 2021-12-28 Seagen Inc Tercier amin-tartalmú hatóanyagok célbajuttatása
MY186334A (en) 2014-09-12 2021-07-12 Genentech Inc Anti-her2 antibodies and immunoconjugates
EA201790569A1 (ru) 2014-09-12 2017-08-31 Дженентек, Инк. Антитела и иммуноконъюгаты против cll-1
CN113698488A (zh) 2014-09-12 2021-11-26 基因泰克公司 抗-b7-h4抗体及免疫缀合物
RU2017107502A (ru) 2014-09-12 2018-10-12 Дженентек, Инк. Антитела и конъюгаты, сконструированные введением цистеина
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CN113416229B (zh) 2014-09-17 2024-12-13 酵活英属哥伦比亚有限公司 细胞毒性和抗有丝分裂化合物、及其使用方法
PT3262071T (pt) 2014-09-23 2020-06-16 H Hoffnabb La Roche Ag Métodos de utilização de imunoconjugados anti-cd79b
GB201416960D0 (en) 2014-09-25 2014-11-12 Antikor Biopharma Ltd Biological materials and uses thereof
GB201419108D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Glythera Ltd Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates
EP3212668B1 (en) 2014-10-31 2020-10-14 AbbVie Biotherapeutics Inc. Anti-cs1 antibodies and antibody drug conjugates
CN107001384A (zh) 2014-11-05 2017-08-01 内尔维阿诺医学科学有限公司 官能化的吗啉基蒽环类衍生物
RU2730668C2 (ru) 2014-11-19 2020-08-24 Аксон Ньюросайенс Се Гуманизированные тау-антитела при болезни альцгеймера
CN104609464B (zh) * 2014-11-21 2017-01-04 中国科学院电工研究所 一种PbS纳米片的制备方法
CA2968447A1 (en) 2014-11-25 2016-06-02 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates and their use to treat neoplasms
LT3223845T (lt) 2014-11-26 2021-08-25 Xencor, Inc. Heterodimeriniai antikūnai, kurie suriša cd3 ir cd20
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
MX2017006918A (es) 2014-11-26 2018-01-25 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen a cd3 y cd38.
RU2731055C2 (ru) 2014-12-03 2020-08-28 Дженентек, Инк. Конъюгаты антитела к staphylococcus aureus с рифамицином и их применение
EP3226908A1 (en) 2014-12-03 2017-10-11 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-staphylococcus aureus antibody rifamycin conjugates and uses thereof
SG11201704710PA (en) 2014-12-09 2017-07-28 Abbvie Inc Bcl xl inhibitory compounds having low cell permeability and antibody drug conjugates including the same
CA2969908A1 (en) 2014-12-09 2016-06-16 Abbvie Inc. Antibody drug conjugates with cell permeable bcl-xl inhibitors
ES2764299T3 (es) 2014-12-09 2020-06-02 Inst Nat Sante Rech Med Anticuerpos monoclonales humanos contra AXL
EP3237449A2 (en) 2014-12-22 2017-11-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
US10175827B2 (en) 2014-12-23 2019-01-08 Synaptics Incorporated Detecting an active pen using a capacitive sensing device
US10795471B2 (en) 2015-01-05 2020-10-06 Synaptics Incorporated Modulating a reference voltage to perform capacitive sensing
US10188759B2 (en) 2015-01-07 2019-01-29 Endocyte, Inc. Conjugates for imaging
MX2017009144A (es) 2015-01-14 2017-11-22 Bristol Myers Squibb Co Dimeros de benzodiazepina unidos con puentes de heteroarileno, conjugados de estos, y sus metodos de preparacion y uso.
MX2017009145A (es) 2015-01-14 2017-11-22 Bristol Myers Squibb Co Dimeros de benzodiazepina, conjugados de estos, y sus metodos de preparacion y uso.
GB201501004D0 (en) 2015-01-21 2015-03-04 Cancer Rec Tech Ltd Inhibitors
EP3250238B1 (en) * 2015-01-28 2022-06-01 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody drug conjugates
JP2018508481A (ja) 2015-02-02 2018-03-29 ザ ユニバーシティ オブ バーミンガム 複数のｔ細胞エピトープを有する標的化部分ペプチドエピトープ複合体
WO2016141230A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
US10751422B2 (en) 2015-03-09 2020-08-25 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (ADC) that bind to FLT3 proteins
CA2976740A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Seattle Genetics, Inc. Cd48 antibodies and conjugates thereof
US9939972B2 (en) 2015-04-06 2018-04-10 Synaptics Incorporated Matrix sensor with via routing
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
CN106188293A (zh) 2015-04-17 2016-12-07 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗c-Met抗体和抗c-Met抗体-细胞毒性药物偶联物及其医药用途
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
US10591465B2 (en) 2015-05-12 2020-03-17 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and kits for labeling, detection and isolation of Foxp3+ regulatory T cells, isolated population of Foxp3+ regulatory T cells thus obtained and uses thereof
EP3298044B1 (en) 2015-05-22 2021-08-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies fragments inhibiting both the cath-d catalytic activity and its binding to the lrp1 receptor
WO2016189091A1 (en) 2015-05-26 2016-12-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions (ntsr1 inhibitors) for the treatment of hepatocellular carcinomas
WO2016189118A1 (en) 2015-05-28 2016-12-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods of prognosis and treatment of patients suffering from acute myeloid leukemia
CA2989347A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Lentigen Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered t-cells
AU2016284340A1 (en) 2015-06-23 2018-02-08 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic benzodiazepine dimers, conjugates thereof, preparation and uses
US9715304B2 (en) 2015-06-30 2017-07-25 Synaptics Incorporated Regular via pattern for sensor-based input device
CN107735105B (zh) 2015-06-30 2022-09-16 西雅图基因公司 抗ntb-a抗体和相关组合物以及方法
US10095948B2 (en) 2015-06-30 2018-10-09 Synaptics Incorporated Modulation scheme for fingerprint sensing
US9720541B2 (en) 2015-06-30 2017-08-01 Synaptics Incorporated Arrangement of sensor pads and display driver pads for input device
ME03772B (me) 2015-07-10 2021-04-20 Genmab As Konjugati antitijela specifičnog za axl i lijeka za liječenje kancera
NZ739830A (en) 2015-07-12 2021-12-24 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Bridge linkers for conjugation of cell-binding molecules
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
SI3325509T1 (sl) 2015-07-22 2021-07-30 Intherys ANTI-TFR protitelesa in njihova uporaba pri zdravljenju proliferativnih in vnetnih motenj
CN205028263U (zh) 2015-09-07 2016-02-10 辛纳普蒂克斯公司 一种电容传感器
US10037112B2 (en) 2015-09-30 2018-07-31 Synaptics Incorporated Sensing an active device'S transmission using timing interleaved with display updates
WO2017058808A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Sirenas Llc Anti-cancer compounds and conjugates thereof
US10392441B2 (en) 2015-10-07 2019-08-27 United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IL-7R-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
CN114181960B (zh) 2015-10-09 2024-08-23 美天施生物科技有限公司 嵌合抗原受体和使用方法
WO2017060397A1 (en) 2015-10-09 2017-04-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting the survival time of subjects suffering from melanoma metastases
EP3362088B1 (en) 2015-10-12 2020-11-25 Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale (INSERM) An agent capable of depleting cd8 t cells for the treatment of myocardial infarction or acute myocardial infarction
MA43354A (fr) 2015-10-16 2018-08-22 Genentech Inc Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré
WO2017067944A1 (en) 2015-10-19 2017-04-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting the survival time of subjects suffering from triple negative breast cancer
TWI660741B (zh) * 2015-11-03 2019-06-01 財團法人工業技術研究院 抗體藥物複合物及其製造方法
EP3377103B2 (en) 2015-11-19 2025-03-12 Revitope Limited Functional antibody fragment complementation for a two-components system for redirected killing of unwanted cells
JP2019501124A (ja) 2015-11-30 2019-01-17 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｈｕＬＲＲＣ１５抗体薬物コンジュゲート及びその使用方法
CA3006596A1 (en) 2015-11-30 2017-06-08 Abbvie Inc. Anti-hulrrc15 antibody drug conjugates and methods for their use
KR20180090290A (ko) 2015-12-04 2018-08-10 시애틀 지네틱스, 인크. 사차화 튜불리신 화합물들의 컨쥬게이트들
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
JP7058219B2 (ja) 2015-12-07 2022-04-21 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｐｓｍａに結合するヘテロ二量体抗体
US10067587B2 (en) 2015-12-29 2018-09-04 Synaptics Incorporated Routing conductors in an integrated display device and sensing device
CN106933400B (zh) 2015-12-31 2021-10-29 辛纳普蒂克斯公司 单层传感器图案和感测方法
IL260289B (en) 2016-01-08 2022-08-01 Bioalliance Cv Tetravalent anti-psgl-1 antibodies and uses thereof
CN109496149B (zh) 2016-01-13 2022-10-14 根马布股份公司 抗体及其药物缀合物的制剂
CA3011815A1 (en) 2016-01-20 2017-07-27 The Scripps Research Institute Ror1 antibody compositions and related methods
NZ744373A (en) * 2016-01-25 2025-03-28 Regeneron Pharma Maytansinoid derivatives, conjugates thereof, and methods of use
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
SG11201806419RA (en) 2016-01-27 2018-08-30 Sutro Biopharma Inc Anti-cd74 antibody conjugates, compositions comprising anti-cd74 antibody conjugates and methods of using anti-cd74 antibody conjugates
RU2740311C2 (ru) 2016-02-05 2021-01-13 Ригшоспиталет НАЦЕЛЕННЫЕ НА uPARAP КОНЪЮГАТЫ АНТИТЕЛО-ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
KR102816905B1 (ko) 2016-02-17 2025-06-10 씨젠 인크. 암 및 면역학적 장애를 치료하기 위한 bcma 항체 및 이의 용도
WO2017147597A1 (en) 2016-02-27 2017-08-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Peptide vaccines comprising self-assembling polymer nanoparticles
EP3791897A1 (en) 2016-02-29 2021-03-17 Madrigal Pharmaceuticals, Inc. Hsp90 inhibitor drug conjugates
RU2021125492A (ru) * 2016-03-02 2022-04-05 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Конъюгаты антитело-лекарственное средство на основе эрибулина и способы применения
EP3423457B1 (en) 2016-03-04 2021-02-17 H. Hoffnabb-La Roche Ag Process for the preparation of an antibody-rifamycin conjugate
MA45324A (fr) 2016-03-15 2019-01-23 Seattle Genetics Inc Polythérapie utilisant un adc-liv1 et un agent chimiothérapeutique
WO2017161206A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Halozyme, Inc. Conjugates containing conditionally active antibodies or antigen-binding fragments thereof, and methods of use
KR102438140B1 (ko) 2016-03-22 2022-08-31 엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔 인간화 항-클라우딘-1 항체 및 이의 용도
CA3017824A1 (en) 2016-03-24 2017-09-28 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Conjugates of tacrolimus, their compositions, and their uses
EA201892040A1 (ru) 2016-03-25 2019-04-30 Сиэтл Дженетикс, Инк. Способ получения пегилированных соединений лекарственный препарат - линкер и их промежуточных соединений
EP3438118B1 (en) 2016-03-29 2023-03-29 Toray Industries, Inc. Peptide derivative and use thereof
MA45328A (fr) 2016-04-01 2019-02-06 Avidity Biosciences Llc Compositions acide nucléique-polypeptide et utilisations de celles-ci
JP2019515677A (ja) 2016-04-26 2019-06-13 アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ エルエルシー 抗体複合体ならびにそれを作製および使用する方法
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017197045A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 Movassaghi Mohammad Convergent and enantioselective total synthesis of communesin analogs
SMT202200432T1 (it) 2016-05-13 2022-11-18 Bioatla Inc Anticorpi, frammenti anticorpali anti-ror2, loro immunoconiugati e loro usi
SI3626273T1 (sl) 2016-05-17 2021-04-30 Abbvie Biotherapeutics Inc. Konjugati protitelesa proti CMET in zdravila ter postopki za njihovo uporabo
US20170370906A1 (en) 2016-05-27 2017-12-28 Genentech, Inc. Bioanalytical analysis of site-specific antibody drug conjugates
WO2017207540A1 (en) 2016-05-30 2017-12-07 Toxinvent Oü Antibody-drug-conjugates comprising novel anthracycline-derivatives for cancer treatment
CN109476648B (zh) 2016-06-06 2022-09-13 豪夫迈·罗氏有限公司 司维司群抗体-药物缀合物和使用方法
PE20190512A1 (es) 2016-06-08 2019-04-10 Abbvie Inc Conjugados de anticuerpo anti-egfr y farmaco
CA3027044A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
AU2017279550A1 (en) 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-B7-H3 antibodies and antibody drug conjugates
CA3027103A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
MX2018015274A (es) 2016-06-08 2019-10-07 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
WO2017214458A2 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
WO2017214233A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-egfr antibody drug conjugates
MX2018015280A (es) 2016-06-08 2019-08-12 Abbvie Inc Conjugados de anticuerpo y farmaco anti-egfr.
AU2017277920A1 (en) 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-CD98 antibodies and antibody drug conjugates
KR20230054508A (ko) 2016-06-14 2023-04-24 젠코어 인코포레이티드 이중특이적 체크포인트 억제제 항체
EP3474901A1 (en) 2016-06-27 2019-05-01 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Cleavable tetrazine used in bio-orthogonal drug activation
CA3029328A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
SG11201900699QA (en) 2016-08-09 2019-02-27 Seattle Genetics Inc Drug conjugates with self-stabilizing linkers having improved physiochemical properties
CN106674347B (zh) * 2016-08-16 2019-12-13 滨州医学院 一种新型耳抑素抗体
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3507304B1 (en) 2016-09-02 2024-04-03 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with duocars
WO2018045245A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
US10517958B2 (en) 2016-10-04 2019-12-31 Zymeworks Inc. Compositions and methods for the treatment of platinum-drug resistant cancer
MY205418A (en) 2016-10-14 2024-10-21 Xencor Inc Bispecific heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ralpha fc-fusion proteins and pd-1 antibody fragments
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
KR20190074292A (ko) 2016-10-18 2019-06-27 시애틀 지네틱스, 인크. 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드의 구제 경로 저해제의 표적화된 전달
CN118359704A (zh) 2016-10-19 2024-07-19 英温拉公司 抗体构建体
US11186635B2 (en) 2016-10-25 2021-11-30 Institut National De La Santé Et De La Recherché Médical (Inserm) Monoclonal antibodies binding to the CD160 transmembrane isoform
US12274745B2 (en) 2016-10-28 2025-04-15 Toray Industries, Inc. Conjugate of CAPRIN-1 antibody linked to immune activator for cancer treatment
CA3041988A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
MX394528B (es) 2016-11-08 2025-03-24 Regeneron Pharma Esteroides y conjugados de proteinas de los mismos.
KR20220147719A (ko) 2016-11-14 2022-11-03 항저우 디에이씨 바이오테크 씨오, 엘티디 결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용
MA46759A (fr) 2016-11-14 2019-09-18 Millennium Pharm Inc Dosage de conjugués anticorps-médicament anti-cd30 pour humain non adulte
US11135307B2 (en) 2016-11-23 2021-10-05 Mersana Therapeutics, Inc. Peptide-containing linkers for antibody-drug conjugates
JP7244987B2 (ja) 2016-12-14 2023-03-23 シージェン インコーポレイテッド 多剤抗体薬物コンジュゲート
US10864279B2 (en) 2016-12-16 2020-12-15 Industrial Technology Research Institute Linker-drug and antibody-drug conjugate (ADC) employing the same
CN110234348B (zh) 2016-12-16 2024-06-25 蓝鳍生物医药公司 抗-含cub结构域蛋白1(cdcp1)抗体、抗体药物缀合物及其使用方法
EA201991204A1 (ru) 2016-12-22 2019-12-30 Университа Дельи Студи Манья Греча Катандзаро Моноклональное антитело против уникального сиалогликозилированного опухолеассоциированного эпитопа cd43
KR102015524B1 (ko) * 2016-12-26 2019-08-29 인터올리고 주식회사 압타머-약물 콘쥬게이트 및 그 용도
CN106854245A (zh) * 2016-12-28 2017-06-16 无锡傲锐东源生物科技有限公司 抗cd30蛋白单克隆抗体及其用途
EP3882265B1 (en) 2017-01-09 2022-11-02 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-mesothelin immunotherapy
NZ754810A (en) 2017-02-08 2023-04-28 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2018146253A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of cancers associated with activation of the mapk pathway
CA3053906A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Sonnet BioTherapeutics, Inc. Albumin binding domain fusion proteins
US20210330801A1 (en) 2017-03-02 2021-10-28 Cadila Healthcare Limited Novel protein drug conjugate formulation
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
MX2019010769A (es) 2017-03-24 2019-12-11 Seattle Genetics Inc Proceso para la preparacion de enlazadores de farmacos de glucuronidos y compuestos intermediarios de los mismos.
WO2018175988A1 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd33 immunotherapy
CN110494452B (zh) 2017-04-03 2023-08-25 豪夫迈·罗氏有限公司 结合steap-1的抗体
CA3056261A1 (en) 2017-04-07 2018-10-11 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells expressing prostate-specific membrane antigen (psma) or a modified form thereof and related methods
MX385017B (es) 2017-04-18 2025-03-14 Medimmune Ltd Conjugados de pirrolobenzodiazepina
CA3064697A1 (en) 2017-04-19 2018-10-25 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
WO2018193102A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
MA51189A (fr) 2017-04-27 2020-03-04 Seattle Genetics Inc Conjugués d'inhibiteur de la voie de récupération du nicotinamide adénine dinucléotide quaternarisé
CN110637036A (zh) 2017-04-28 2019-12-31 味之素株式会社 具有针对可溶性蛋白质的亲和性物质、切割性部分及反应性基团的化合物或其盐
US11932650B2 (en) 2017-05-11 2024-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Potent agelastatin derivatives as modulators for cancer invasion and metastasis
US11666657B2 (en) 2017-05-16 2023-06-06 Universite De Strasbourg Protein-drug conjugates and their use in the treatment of cancers
JP7364471B2 (ja) 2017-05-18 2023-10-18 レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド シクロデキストリンタンパク質薬物コンジュゲート
CN111010867B (zh) 2017-05-30 2023-05-12 俄克拉何马大学董事会 抗双皮层蛋白样激酶1抗体及其使用方法
EP3638373B1 (en) 2017-06-14 2024-09-04 ADC Therapeutics SA Dosage regimes for the administration of an anti-cd19 adc
WO2018233571A1 (zh) * 2017-06-19 2018-12-27 四川百利药业有限责任公司 一种带酸性自稳定接头的抗体-药物偶联物
US20210403573A1 (en) 2017-06-22 2021-12-30 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of fibrosis with agents capable of inhibiting the activation of mucosal-associated invariant t (mait) cells
CN111315414A (zh) 2017-06-22 2020-06-19 梅尔莎纳医疗公司 产生载药聚合物支架和蛋白-聚合物-药物缀合物的方法
CA3067829A1 (en) 2017-06-23 2018-12-27 VelosBio Inc. Ror1 antibody immunoconjugates
WO2019005756A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 The Rockefeller University CONJUGATES AGONIST ANTIBODY ANTI-MERTK-MEDICINE
AU2018291497A1 (en) 2017-06-30 2020-01-16 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra and antigen binding domains
CA3070446A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 Immutics, Inc. Treating cancer by blocking the interaction of tim-3 and its ligand
US20200207859A1 (en) 2017-07-26 2020-07-02 Sutro Biopharma, Inc. Methods of using anti-cd74 antibodies and antibody conjugates in treatment of t-cell lymphoma
US10442867B2 (en) 2017-07-31 2019-10-15 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19/CD20 immunotherapy
EP3664820B1 (en) 2017-08-09 2023-07-19 Juno Therapeutics, Inc. Methods for producing genetically engineered cell compositions and related compositions
CA3070765A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates for the treatment of a proliferative disease
US10501539B2 (en) 2017-09-15 2019-12-10 Lentigen Technology Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19 immunotherapy
WO2019055909A1 (en) 2017-09-18 2019-03-21 Sutro Biopharma, Inc. ALPHA ANTI-FOLATE ANTIBODY-RECEPTOR CONJUGATES AND USES THEREOF
MA50767A (fr) 2017-10-11 2020-08-19 Seattle Genetics Inc Procédés de réduction des effets secondaires d'une thérapie par conjugués de médicament anticorps anti-cd30
US11332527B2 (en) 2017-10-12 2022-05-17 Keio University Anti AQP3 monoclonal antibody specifically binding to extracellular domain of aquaporin 3 (AQP3) and use thereof
US10640508B2 (en) 2017-10-13 2020-05-05 Massachusetts Institute Of Technology Diazene directed modular synthesis of compounds with quaternary carbon centers
ES2958849T3 (es) 2017-10-16 2024-02-15 Lentigen Tech Inc Composiciones y métodos para tratar el cáncer con inmunoterapia anti-CD22
CN107759699A (zh) * 2017-10-18 2018-03-06 银丰生物工程集团有限公司 靶向cd30抗原的转基因t细胞及其制备方法与应用
IL315350A (en) 2017-11-01 2024-11-01 Seagen Inc Methods of reducing side effects of anti-cd30 antibody drug conjugate therapy
CN117756946A (zh) 2017-11-03 2024-03-26 莱蒂恩技术公司 用于用抗ror1免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
WO2019094395A2 (en) 2017-11-07 2019-05-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Hydrophilic linkers for antibody drug conjugates
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3706793A1 (en) 2017-11-08 2020-09-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
WO2019104084A1 (en) * 2017-11-22 2019-05-31 Seattle Genetics, Inc. Acid-mediated assay for analyzing ligand-drug conjugates
JP7165193B2 (ja) 2017-11-27 2022-11-02 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ ヒト組織因子を標的とするヒト化抗体
BR112020010816A2 (pt) * 2017-11-29 2020-11-10 Magenta Therapeutics, Inc. composições e métodos para a depleção de células de cd2+
CN111448213A (zh) 2017-12-01 2020-07-24 西雅图基因公司 Cd47抗体及其用于治疗癌症的用途
EA202091360A1 (ru) 2017-12-01 2020-08-24 Сиэтл Дженетикс, Инк. Гуманизированные анти-liv1 антитела для лечения рака молочной железы
WO2019118793A2 (en) 2017-12-14 2019-06-20 Ezy Biotech Llc Subject-specific tumor inhibiting cells and the use thereof
EP3498293A1 (en) 2017-12-15 2019-06-19 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Treatment of monogenic diseases with an anti-cd45rc antibody
EP3728302A1 (en) 2017-12-19 2020-10-28 Xencor, Inc. Engineered il-2 fc fusion proteins
AU2018388997B2 (en) 2017-12-20 2025-04-03 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating HIV/AIDS with immunotherapy
KR102786381B1 (ko) 2018-01-08 2025-03-26 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 스테로이드 및 이의 항체-접합체
WO2019164987A1 (en) * 2018-02-20 2019-08-29 Seattle Genetics, Inc. Hydrophobic auristatin f compounds and conjugates thereof
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
BR112020018093A2 (pt) 2018-03-07 2020-12-22 Forschungsverbund Berlin E.V. Conjugação quimiosseletiva de tiol com fosfonotiolatos e fosfonatos de alqueno ou alquino
CN112020519A (zh) 2018-03-13 2020-12-01 酵活有限公司 抗her2双互补位抗体-药物偶联物及使用方法
CA3093422A1 (en) 2018-03-19 2019-09-26 Bioventures, Llc Periostin antibodies and methods of using the same
EP3768714A1 (en) 2018-03-23 2021-01-27 Seagen Inc. Use of antibody drug conjugates comprising tubulin disrupting agents to treat solid tumor
CN112469477A (zh) 2018-04-04 2021-03-09 Xencor股份有限公司 与成纤维细胞活化蛋白结合的异源二聚体抗体
EP3552631A1 (en) 2018-04-10 2019-10-16 Inatherys Antibody-drug conjugates and their uses for the treatment of cancer
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CA3097381A1 (en) 2018-04-17 2019-10-24 Endocyte, Inc. Methods of treating cancer
US11505595B2 (en) 2018-04-18 2022-11-22 Xencor, Inc. TIM-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15RA Fc-fusion proteins and TIM-3 antigen binding domains
US11524991B2 (en) 2018-04-18 2022-12-13 Xencor, Inc. PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof
EP3787691A1 (en) 2018-05-04 2021-03-10 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Tetrazines for high click conjugation yield in vivo and high click release yield
US11396497B2 (en) 2018-05-04 2022-07-26 New Mexico Tech University Research Park Corporation Proteasome inhibitors
DK3788032T3 (da) 2018-05-04 2024-04-15 Tagworks Pharmaceuticals B V Forbindelser omfattende en linker til øgning af transcyklooctenstabilitet
JP7519907B2 (ja) 2018-05-07 2024-07-22 ジェンマブ エー／エス 抗ｐｄ－１抗体と抗組織因子抗体－薬物コンジュゲートとの組み合わせを用いるがんの治療方法
AU2019266203A1 (en) 2018-05-07 2020-11-26 Genmab A/S Methods of treating cancer with a combination of an anti-PD-1 antibody and an anti-tissue factor antibody-drug conjugate
CA3098453A1 (en) 2018-05-09 2019-11-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-msr1 antibodies and methods of use thereof
CN118459594A (zh) 2018-06-01 2024-08-09 诺华股份有限公司 针对bcma的结合分子及其用途
JP7653260B2 (ja) 2018-06-05 2025-03-28 キングス・カレッジ・ロンドン 消化管系へのペイロード送達のための、ｂｔｎｌ３／８を標的とする構築物
TWI851577B (zh) 2018-06-07 2024-08-11 美商思進公司 喜樹鹼結合物
CN112262152A (zh) 2018-06-14 2021-01-22 味之素株式会社 具有针对抗体的亲和性物质、切割性部分及反应性基团的化合物或其盐
GB201809746D0 (en) 2018-06-14 2018-08-01 Berlin Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CA3103151A1 (en) 2018-06-14 2019-12-19 Ajinomoto Co., Inc. Compound having affinity substance to antibody and bioorthogonal functional group, or salt thereof
WO2020010079A2 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Amgen Inc. Anti-steap1 antigen-binding protein
EP3829648A1 (en) 2018-07-27 2021-06-09 Promega Corporation Quinone-containing conjugates
CN111212661B (zh) 2018-09-11 2023-09-12 北京泰德制药股份有限公司 白介素-2多肽偶联物及其用途
EP3852811A1 (en) 2018-09-17 2021-07-28 Sutro Biopharma, Inc. Combination therapies with anti-folate receptor antibody conjugates
CN113396160A (zh) 2018-09-19 2021-09-14 国家医疗保健研究所 治疗对免疫检查点疗法具有抗性的癌症的方法和药物组合物
WO2020061498A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd123 immunotherapy
EP3626265A1 (en) 2018-09-21 2020-03-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-human cd45rc antibodies and uses thereof
CN118903456A (zh) 2018-09-26 2024-11-08 江苏恒瑞医药股份有限公司 依喜替康类似物的配体-药物偶联物及其制备方法和应用
CA3114349A1 (en) 2018-09-26 2020-04-02 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd22 immunotherapy
JP2022502508A (ja) 2018-10-01 2022-01-11 シージェン・インコーポレーテッド 抗ｃｄ３０抗体薬物複合体療法を使用して末梢性ｔ細胞リンパ腫を処置する方法
JP7612571B2 (ja) 2018-10-03 2025-01-14 ゼンコア インコーポレイテッド Ｉｌ－１２ヘテロ二量体ｆｃ－融合タンパク質
JP2022512746A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－１０ポリペプチド複合体、その二量体、およびそれらの使用
TWI824043B (zh) 2018-10-25 2023-12-01 西班牙商瑪製藥股份有限公司 藥物抗體共軛物
CN113365664A (zh) 2018-10-29 2021-09-07 梅尔莎纳医疗公司 具有含肽接头的半胱氨酸工程化的抗体-药物缀合物
TWI844571B (zh) 2018-10-30 2024-06-11 丹麥商珍美寶股份有限公司 使用抗血管內皮生長因子（ｖｅｇｆ）抗體與抗組織因子（ｔｆ）抗體－藥物共軛體之組合以治療癌症之方法
EP3882261A4 (en) 2018-10-31 2023-02-08 Ajinomoto Co., Inc. COMPOUND COMPRISING A SUBSTANCE HAVING AN AFFINITY FOR AN ANTIBODY, CLEAVAGE SITE AND CORRESPONDING REACTIVE GROUP OR SALT
EP3647419A1 (en) 2018-11-02 2020-05-06 NBE Therapeutics AG Sortase f and its use in methods for conjugation
WO2020094609A1 (en) 2018-11-06 2020-05-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of acute myeloid leukemia by eradicating leukemic stem cells
CA3119467A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Cornell University Macrocyclic complexes of radionuclides and their use in radiotherapy of cancer
US11103533B2 (en) 2018-11-30 2021-08-31 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD38 immunotherapy
TW202034956A (zh) 2018-12-03 2020-10-01 美商艾澤西公司 包含抗191p4d12抗體藥物結合物之醫藥組合物及其使用方法
BR112021010908A2 (pt) 2018-12-06 2021-08-31 Genentech, Inc. Método para tratamento de linfoma difuso de grandes células b, kit e imunoconjugado
CN113227119A (zh) 2018-12-10 2021-08-06 基因泰克公司 用于与含Fc的蛋白质进行位点特异性缀合的光交联肽
JP7609775B2 (ja) 2018-12-14 2025-01-07 インセルム（インスティチュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ リシェルシェ メディカル） 単離されたＭＨＣ由来ヒトペプチドおよびＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＣｌｏｗＴｒｅｇの抑制機能を刺激し、かつ活性化するためのその使用
EP3898699A1 (en) 2018-12-19 2021-10-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating cancers by immuno-modulation using antibodies against cathespin-d
GB201820864D0 (en) * 2018-12-20 2019-02-06 J A Kemp Antibody-drug conjugates
WO2020127968A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Marino Stephen F Protein-drug conjugate comprising a monomeric form of proteinase 3
IL319265A (en) 2018-12-21 2025-04-01 Avidity Biosciences Inc Anti-transferrin receptor antibodies and their uses
CN116063505B (zh) 2019-01-30 2024-05-03 真和制药有限公司 抗gal3抗体及其用途
KR20210125511A (ko) 2019-02-05 2021-10-18 씨젠 인크. 항-cd228 항체 및 항체-약물 컨쥬게이트
WO2020164561A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Wuxi Biologics (Shanghai) Co. Ltd. Process for preparing antibody-drug conjugates with improved homogeneity
US12109273B2 (en) 2019-02-15 2024-10-08 Wuxi Xdc Singapore Private Limited Process for preparing antibody-drug conjugates with improved homogeneity
CN109652384B (zh) * 2019-02-21 2021-10-26 昆明理工大学 一种体外培养戊型肝炎病毒的方法
EP4378958A3 (en) 2019-02-26 2024-09-04 Inspirna, Inc. High-affinity anti-mertk antibodies and uses thereof
AU2020232605A1 (en) 2019-03-01 2021-10-21 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3
JP7650809B2 (ja) 2019-03-06 2025-03-25 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 自己駆動型キメラ抗原受容体を用いてがんを処置するための組成物および方法
SG11202108900WA (en) 2019-03-15 2021-09-29 Medimmune Ltd Azetidobenzodiazepine dimers and conjugates comprising them for use in the treatment of cancer
CA3133155A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Fundacio Privada Institut D'investigacio Oncologica De Vall Hebron Combination therapy for the treatment for cancer
WO2020191344A1 (en) 2019-03-20 2020-09-24 The Regents Of The University Of California Claudin-6 bispecific antibodies
MX2021011330A (es) 2019-03-20 2021-12-10 Univ California Anticuerpos de claudina-6 y conjugados de fármacos.
WO2020213084A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 Keio University Anti aqp3 monoclonal antibody specifically binding to extracellular domain of aquaporin 3 (aqp3) and use thereof
EP3962951A1 (en) 2019-05-03 2022-03-09 Sutro Biopharma, Inc. Anti-bcma antibody conjugates
WO2020225323A1 (en) 2019-05-06 2020-11-12 Seekyo New therapeutic vectors and prodrugs for treating cancers
TW202108178A (zh) 2019-05-14 2021-03-01 美商建南德克公司 使用抗CD79b免疫結合物治療濾泡性淋巴瘤之方法
EP3972993A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Novartis AG Variant cd58 domains and uses thereof
PH12021552916A1 (en) 2019-05-21 2022-04-04 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
AU2020283027A1 (en) 2019-05-30 2021-12-23 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-BCMA immunotherapy
WO2020247572A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Seattle Genetics, Inc. Masked antibody formulations
WO2020247054A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof
US20220306727A1 (en) 2019-06-05 2022-09-29 Seagen Inc. Methods of Purifying Masked Antibodies
US20230121556A1 (en) 2019-06-17 2023-04-20 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Compounds for fast and efficient click release
IL289094A (en) 2019-06-17 2022-02-01 Tagworks Pharmaceuticals B V Tetrazines for increasing the speed and yield of the "click release" reaction
AU2020299382A1 (en) 2019-07-02 2022-01-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind EGFRvIII and their use
KR20220035486A (ko) 2019-07-22 2022-03-22 씨젠 인크. 암 치료를 위한 인간화 항-liv1 항체
KR20220041915A (ko) 2019-08-06 2022-04-01 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 디벨로프먼트 리미티드 바이오제약 조성물 및 관련 방법
BR112022002067A2 (pt) 2019-08-08 2022-06-14 Regeneron Pharma Formatos de molécula de ligação ao antígeno
BR112022002406A2 (pt) 2019-08-12 2022-07-19 Purinomia Biotech Inc Métodos e composições para promover e potencializar respostas imunes mediadas por célula t através do alvejamento de adcc de células que expressam cd39
JP2022548530A (ja) 2019-09-05 2022-11-21 ファルマ、マール、ソシエダード、アノニマ 薬物抗体コンジュゲート
AU2020347715A1 (en) 2019-09-18 2022-04-07 Systimmune, Inc. Camptothecin derivative and conjugate thereof
AR120079A1 (es) 2019-09-19 2022-02-02 Seattle Genetics Inc Liberación selectiva de fármacos de conjugados internalizados de compuestos biológicamente activos
AU2020351751A1 (en) 2019-09-25 2022-04-21 Seagen Inc. Combination anti-CD30 ADC, anti-PD-1 and chemotherapeutic for treatment of hematopoietic cancers
US20220362397A1 (en) 2019-09-26 2022-11-17 Nof Corporation Heterobifunctional monodispersed polyethylene glycol having peptide linker
JP7668791B2 (ja) 2019-10-04 2025-04-25 シージェン インコーポレイテッド 抗ｐｄ－ｌ１抗体および抗体－薬物コンジュゲート
WO2021064184A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of ovarian cancer, breast cancer or pancreatic cancer
WO2021066869A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 TAE Life Sciences Antibody compositions comprising fc mutations and site-specific conjugation properties
CN114786731A (zh) 2019-10-10 2022-07-22 科达制药股份有限公司 治疗眼部病症的方法
CN114945386A (zh) 2019-10-18 2022-08-26 基因泰克公司 使用抗CD79b免疫缀合物治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤的方法
EP3812008A1 (en) 2019-10-23 2021-04-28 Gamamabs Pharma Amh-competitive antagonist antibody
US20240123081A1 (en) 2019-10-25 2024-04-18 Medimmune, Llc Branched moiety for use in conjugates
CN114786730A (zh) 2019-11-05 2022-07-22 再生元制药公司 N-端scFv多特异性结合分子
TW202131954A (zh) 2019-11-07 2021-09-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 利用鉑類劑與抗組織因子抗體－藥物共軛體之組合來治療癌症之方法
EP4055051A1 (en) 2019-11-07 2022-09-14 Genmab A/S Methods of treating cancer with a combination of an anti-pd-1 antibody and an anti-tissue factor antibody-drug conjugate
EP4247957A1 (en) 2019-11-22 2023-09-27 MedImmune Limited Fusion proteins comprising an e2 ubiquitin or ubiquitin-like conjugating domain and a targeting domain for specific protein degradation
TWI877278B (zh) 2019-12-30 2025-03-21 美商思進公司 以非海藻糖苷化抗－ｃｄ７０抗體治療癌症之方法
CA3164037A1 (en) 2020-01-08 2021-07-15 Synthis Therapeutics, Inc. Alk5 inhibitor conjugates and uses thereof
CN114845739B (zh) 2020-01-22 2024-07-16 上海森辉医药有限公司 艾日布林衍生物的药物偶联物、其制备方法及其在医药上的应用
US20230095053A1 (en) 2020-03-03 2023-03-30 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific glutamine tags, methods of their preparation and methods of their use
JP2023516080A (ja) 2020-03-06 2023-04-17 ジーオー セラピューティクス，インコーポレイテッド 抗グリコｃｄ４４抗体およびその使用
IL296099A (en) 2020-03-11 2022-11-01 Ambrx Inc Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
KR20220156867A (ko) 2020-03-19 2022-11-28 어비디티 바이오사이언시스 인크. 안면견갑상완 근이영양증의 치료용 조성물 및 방법
AU2021243073A1 (en) 2020-03-25 2022-10-13 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising antibody drug conjugate and use thereof
TW202144014A (zh) 2020-03-25 2021-12-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 一種抗體藥物偶聯物的製備方法
US11446387B2 (en) 2020-03-27 2022-09-20 Avidity Biosciences, Inc. Compositions and methods of treating muscle dystrophy
WO2021195513A1 (en) 2020-03-27 2021-09-30 Novartis Ag Bispecific combination therapy for treating proliferative diseases and autoimmune disorders
KR20230008723A (ko) 2020-04-10 2023-01-16 씨젠 인크. 전하 변이체 링커
EP4138923A1 (en) 2020-04-21 2023-03-01 Pharma Mar, S.A. Drug antibody conjugates
CN115916822A (zh) 2020-04-24 2023-04-04 基因泰克公司 使用抗CD79b免疫缀合物的方法
WO2021221927A1 (en) 2020-04-27 2021-11-04 Parsons Corporation Narrowband iq signal obfuscation
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
CA3182333A1 (en) 2020-05-20 2021-11-25 Institut Curie Single domain antibodies and their use in cancer therapies
US12281166B2 (en) 2020-05-26 2025-04-22 Truebinding, Inc. Methods of treating inflammatory diseases by blocking Galectin-3
WO2021245249A1 (en) 2020-06-05 2021-12-09 Tessa Therapeutics Ltd. Treatment of cd30-positive cancer
WO2021251358A1 (ja) 2020-06-09 2021-12-16 味の素株式会社 修飾フェリチンおよびその製造方法
CA3171101A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Dina SCHNEIDER Compositions and methods for treating cancer with tslpr-cd19 or tslpr-cd22 immunotherapy
MX2022015375A (es) 2020-06-29 2023-01-16 Genmab As Conjugados de farmaco-anticuerpo anti-factor de tejido y su uso en el tratamiento de cancer.
US20230323299A1 (en) 2020-08-03 2023-10-12 Inserm (Institut National De La Santé Et De La Recherch Médicale) Population of treg cells functionally committed to exert a regulatory activity and their use for adoptive therapy
AU2021320739A1 (en) 2020-08-04 2023-02-23 Seagen Inc. Anti-CD228 antibodies and antibody-drug conjugates
WO2022040482A1 (en) 2020-08-19 2022-02-24 Xencor, Inc. Anti-cd28 and/or anti-b7h3 compositions
CN112062855B (zh) 2020-08-26 2024-08-30 北京天诺健成医药科技有限公司 一种含有衔接器的药物治疗剂的开发和应用
EP4213943A1 (en) 2020-09-15 2023-07-26 The University Of Montana Compositions and methods targeting filamentous bacteriophage
EP3970752A1 (en) 2020-09-17 2022-03-23 Merck Patent GmbH Molecules with solubility tag and related methods
CA3197158A1 (en) 2020-09-28 2022-03-31 Seagen Inc. Humanized anti-liv1 antibodies for the treatment of cancer
EP4229090A1 (en) 2020-10-16 2023-08-23 Université d'Aix-Marseille Anti-gpc4 single domain antibodies
JP2023548555A (ja) 2020-11-05 2023-11-17 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ１９／ｃｄ２２免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
MX2023004941A (es) 2020-11-08 2023-07-12 Seagen Inc Conjugado de anticuerpo y fármaco para terapia de combinación con inhibidor de células inmunitarias.
CN118878694A (zh) 2020-11-23 2024-11-01 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种双特异性抗体及其用途
CN114573703A (zh) 2020-12-02 2022-06-03 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种t细胞衔接器治疗剂的开发和应用
CN114573702A (zh) 2020-12-02 2022-06-03 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种新型肿瘤衔接器治疗药物的开发和应用
JP2023553157A (ja) 2020-12-10 2023-12-20 ユーティレックス カンパニー リミテッド 抗－ｐｄ－１抗体およびその用途
EP4267193A1 (en) 2020-12-23 2023-11-01 Ludwig-Maximilians-Universität München Improved cd30 targeting antibody drug conjugates and uses thereof
CN114685657B (zh) 2020-12-31 2024-08-16 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种功能增强型抗体阻断剂的开发及其应用
CN114716548B (zh) 2021-01-05 2024-11-05 (株)爱恩德生物 抗-fgfr3抗体及其用途
JP2024505428A (ja) 2021-01-14 2024-02-06 アンスティテュ キュリー Ｈｅｒ２単一ドメイン抗体バリアントおよびそのｃａｒ
WO2022154127A1 (ja) 2021-01-18 2022-07-21 味の素株式会社 化合物またはその塩、およびそれらにより得られる抗体
CA3208296A1 (en) 2021-01-18 2022-07-21 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained by using the same
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022165260A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
WO2022182415A1 (en) 2021-02-24 2022-09-01 Massachusetts Institute Of Technology Himastatin derivatives, and processes of preparation thereof, and uses thereof
EP4297794A2 (en) 2021-02-26 2024-01-03 Forschungsverbund Berlin E.V. Cellular uptake of large biomolecules enabled by cell-surface-reactive cell-penetrating peptide additives
JP2024512324A (ja) 2021-03-05 2024-03-19 ジーオー セラピューティクス，インコーポレイテッド 抗グリコｃｄ４４抗体およびその使用
US11739144B2 (en) 2021-03-09 2023-08-29 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
KR20230154853A (ko) 2021-03-11 2023-11-09 아지노모토 가부시키가이샤 화합물 또는 이의 염, 및 이들에 의해 얻어지는 항체
EP4310096A4 (en) 2021-03-16 2025-06-25 Ajinomoto Co., Inc. Complex or salt thereof, and method for manufacturing same
KR20230158005A (ko) 2021-03-18 2023-11-17 씨젠 인크. 생물학적 활성 화합물의 내재화된 접합체로부터의 선택적 약물 방출
AU2022237791A1 (en) 2021-03-18 2023-09-14 Seagen Inc. Selective drug release from internalized conjugates of biologically active compounds
US20240175873A1 (en) 2021-03-23 2024-05-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
WO2022211075A1 (ja) 2021-03-31 2022-10-06 日本マイクロバイオファーマ株式会社 抗体薬物複合体の製造方法及びそれに用いる酵素
US20240382592A1 (en) 2021-04-09 2024-11-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma
TW202304524A (zh) 2021-04-10 2023-02-01 美商普方生物製藥美國公司 Folr1結合劑、其結合物及使用方法
CA3216410A1 (en) 2021-04-21 2022-10-27 Guy Dipierro Methods of treatment and dosing of natural killer cell compositions
EP4326768A1 (en) 2021-04-23 2024-02-28 Profoundbio Us Co. Anti-cd70 antibodies, conjugates thereof and methods of using the same
CN117545511A (zh) 2021-04-23 2024-02-09 柏林合作研究学会 与不饱和磷(v)化合物的硫醇偶联
CN117529551A (zh) 2021-04-27 2024-02-06 贝勒医学院 表达嵌合抗原受体的病毒特异性免疫细胞
AR125490A1 (es) 2021-04-30 2023-07-19 Celgene Corp Terapias de combinación que utilizan un anticuerpo anti-bcma conjugado a fármaco (adc) en combinación con un inhibidor de gamma secretasa (gsi)
AU2022273063A1 (en) 2021-05-12 2023-11-23 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
US20240254238A1 (en) 2021-05-26 2024-08-01 Oxford Biotherapeutics Ltd Pharmaceutical combination comprising an anti-cd205 antibody and an immune checkpoint inhibitor
TW202320857A (zh) 2021-07-06 2023-06-01 美商普方生物製藥美國公司 連接子、藥物連接子及其結合物及其使用方法
WO2023288252A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 Truebinding, Inc. Methods of preventing protein aggregation
WO2023288236A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Seagen Inc. Antibody masking domains
KR20240040786A (ko) 2021-08-03 2024-03-28 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 디벨로프먼트 리미티드 생물제약 조성물 및 안정한 동위원소 표지 펩티드 맵핑 방법
US20250101126A1 (en) 2021-08-05 2025-03-27 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
CN118355031A (zh) 2021-09-03 2024-07-16 Go医疗股份有限公司 抗糖-lamp1抗体及其用途
WO2023033129A1 (ja) 2021-09-03 2023-03-09 東レ株式会社 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物
CN118354789A (zh) 2021-09-03 2024-07-16 Go医疗股份有限公司 抗糖-cMET抗体及其用途
CN118339280A (zh) 2021-09-06 2024-07-12 维拉克萨生物技术有限责任公司 用于真核生物中遗传密码子扩展的新型氨酰tRNA合成酶变体
FR3126982B1 (fr) 2021-09-14 2023-09-15 Centre Nat Rech Scient Vecteurs ciblant la beta-d-n-acetylglucosaminidase
MX2024003266A (es) 2021-09-16 2024-04-03 Avidity Biosciences Inc Composiciones y metodos de tratamiento de la distrofia muscular facioescapulohumeral.
CA3231944A1 (en) 2021-09-16 2023-03-23 Carole GUILLONNEAU Anti-human cd45rc binding domains and uses thereof
US20240376200A1 (en) 2021-09-24 2024-11-14 Seagen Inc. Improved Antibody Masking Domains
CN115975030B (zh) 2021-09-30 2023-09-26 杭州邦顺制药有限公司 抗cd39抗体-药物偶联物及其用途
CN118119640A (zh) 2021-09-30 2024-05-31 味之素株式会社 抗体和功能性物质的位点选择性的缀合物或其盐、以及其制造中使用的抗体衍生物和化合物或它们的盐
AU2022357933A1 (en) 2021-09-30 2024-04-11 Ajinomoto Co., Inc. Conjugate of antibody and functional substance or salt thereof, and antibody derivative and compound or salts thereof to be used in producing conjugate or salt thereof
TW202321443A (zh) 2021-10-26 2023-06-01 新加坡商泰莎治療有限公司 用於生產編碼car之反轉錄病毒載體的細胞株
CN117980327A (zh) 2021-11-03 2024-05-03 杭州多禧生物科技有限公司 抗体的特异性偶联
EP4429708A1 (en) 2021-11-09 2024-09-18 Tubulis GmbH Conjugates comprising a phosphorus (v) and a drug moiety
EP4429709A1 (en) 2021-11-09 2024-09-18 Tubulis GmbH Conjugates comprising a phosphorus (v) and a camptothecin moiety
CN118524852A (zh) 2021-11-09 2024-08-20 真和制药有限公司 治疗或抑制心血管疾病的方法
US20250073346A1 (en) 2021-11-18 2025-03-06 Oxford Bio Therapeutics Ltd Pharmaceutical combinations
JP2024540536A (ja) 2021-11-19 2024-10-31 アーディアジェン コーポレーション Ｇｐｃ３結合剤、そのコンジュゲートおよびその使用方法
JP2024543916A (ja) 2021-11-25 2024-11-26 ヴェラクサ バイオテック ゲーエムベーハー 遺伝暗号拡張を利用した部位特異的結合によって調製された改良された抗体ペイロード複合体（ａｐｃ）
EP4186529B1 (en) 2021-11-25 2025-07-09 Veraxa Biotech GmbH Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
AU2022404647A1 (en) 2021-12-08 2024-06-13 European Molecular Biology Laboratory Hydrophilic tetrazine-functionalized payloads for preparation of targeting conjugates
WO2023104910A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Tessa Therapeutics Ltd. Treatment of lymphoma
US20250051440A1 (en) 2021-12-14 2025-02-13 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of nk cells for the treatment of adverse post-ischemic cardiac remodeling
JP2025504908A (ja) 2022-01-28 2025-02-19 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド サイトカイン関連腫瘍浸潤リンパ球組成物及び方法
EP4472740A1 (en) 2022-01-31 2024-12-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
DK4314031T3 (da) 2022-02-15 2024-06-17 Tagworks Pharmaceuticals B V Maskeret il12-protein
US11590169B1 (en) 2022-03-02 2023-02-28 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD123 immunotherapy
US20230338424A1 (en) 2022-03-02 2023-10-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and Methods for Treating Cancer with Anti-CD123 Immunotherapy
EP4508432A1 (en) 2022-04-11 2025-02-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t-cell malignancies
EP4507721A1 (en) 2022-04-13 2025-02-19 Tikva allocell Pte. Ltd. Therapeutic t cell product
WO2023198874A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
JP2025515486A (ja) 2022-04-29 2025-05-15 ピュリノミア バイオテック， インコーポレイテッド 好酸球駆動性疾患及び障害を治療するための方法及び組成物
TW202408583A (zh) 2022-05-06 2024-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 使用抗組織因子抗體－藥物共軛體以治療癌症之方法
WO2024001669A1 (zh) 2022-06-27 2024-01-04 昱言科技(北京)有限公司 靶向itga2的抗体和包含此抗体的抗体药物缀合物
KR20250031149A (ko) 2022-06-30 2025-03-06 도레이 카부시키가이샤 암의 치료 및/또는 예방용 의약 조성물
WO2024003310A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of acute lymphoblastic leukemia
TW202408589A (zh) 2022-06-30 2024-03-01 美商舒卓生物製藥公司 抗ror1抗體及抗體結合物、包含抗ror1抗體或抗體結合物之組合物，及製造及使用抗ror1抗體及抗體結合物之方法
EP4554623A1 (en) 2022-07-15 2025-05-21 Pheon Therapeutics Ltd Antibody drug conjugates that bind cdcp1 and uses thereof
WO2024018046A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Garp as a biomarker and biotarget in t-cell malignancies
AU2023313641A1 (en) 2022-07-26 2025-03-13 Aimed Bio Inc. Anti-ror1 antibody and use thereof
WO2024026107A2 (en) 2022-07-28 2024-02-01 Lentigen Technology, Inc. Chimeric antigen receptor therapies for treating solid tumors
WO2024023283A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Lrrc33 as a biomarker and biotarget in cutaneous t-cell lymphomas
CN119325483A (zh) * 2022-08-22 2025-01-17 苏州佰睿壹生物技术有限公司 具有位点特异性修饰的抗体的制备方法
WO2024041543A1 (en) * 2022-08-22 2024-02-29 Suzhou Bioreinno Biotechnology Limited Company A method of preparing an antibody with thiol group site-specific modifications and use of tcep
WO2024044743A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with fully human anti-cd20/cd19 immunotherapy
EP4581035A1 (en) 2022-09-02 2025-07-09 Merck Sharp & Dohme LLC Exatecan-derived topoisomerase-1 inhibitors pharmaceutical compositions, and uses thereof
IL319270A (en) 2022-09-21 2025-04-01 Seagen Inc Antibodies that bind CD228
WO2024079192A1 (en) 2022-10-12 2024-04-18 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd81 as a biomarker and biotarget in t-cell malignancies
WO2024080872A1 (en) 2022-10-12 2024-04-18 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Strained bicyclononenes
WO2024083953A1 (en) 2022-10-18 2024-04-25 Tubulis Gmbh Novel anti-tpbg antibody and antibody-drug-conjugates based thereon, therapeutic methods and uses thereof
KR20250089528A (ko) 2022-10-18 2025-06-18 투불리스 게엠베하 신규한 napi2b 항체를 함유하는 신규한 항체 약물 접합체, 치료 방법 및 이의 용도
IL320396A (en) 2022-10-25 2025-06-01 Merck Sharp & Dohme Llc Charge-linkers of anti-drug conjugates derived from extacan, pharmaceutical compositions, and uses thereof
IL320482A (en) 2022-10-25 2025-06-01 Peptomyc S L Combination therapy for cancer treatment
WO2024097816A1 (en) 2022-11-03 2024-05-10 Seagen Inc. Anti-avb6 antibodies and antibody-drug conjugates and their use in the treatment of cancer
AU2023396827A1 (en) 2022-12-13 2025-06-19 Crinetics Pharmaceuticals, Inc. Somatostatin subtype-2 receptor (sst2r) targeted therapeutics and uses thereof
WO2024129756A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Seagen Inc. Site-specific engineered cysteine antibody drug conjugates
AU2023397331A1 (en) 2022-12-14 2025-06-26 Merck Sharp & Dohme Llc Auristatin linker-payloads, pharmaceutical compositions, and uses thereof
GB202219154D0 (en) 2022-12-19 2023-02-01 Metacurum Biotech Ab Antibodies and uses thereof
US20240269313A1 (en) 2022-12-22 2024-08-15 Tubulis Gmbh Conjugates comprising a phosphorus(v) moiety and a drug
US20240247069A1 (en) 2023-01-13 2024-07-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fgfr3 binding molecules and methods of use thereof
WO2024153789A1 (en) 2023-01-20 2024-07-25 Basf Se Stabilized biopolymer composition, their manufacture and use
WO2024165484A1 (en) 2023-02-06 2024-08-15 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Enrichment of genetically modified hematopoietic stem cells through multiplex base editing
WO2024165045A1 (en) 2023-02-09 2024-08-15 Beigene, Ltd. Self-stabilizing linker conjugates
WO2024170543A1 (en) 2023-02-14 2024-08-22 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cd44 antibodies and uses thereof
WO2024191293A1 (en) 2023-03-10 2024-09-19 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Trans-cyclooctene with improved t-linker
WO2024197151A2 (en) 2023-03-22 2024-09-26 Salubris Biotherapeutics, Inc. Anti-5t4 antigen binding domains, antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2024194851A1 (en) 2023-03-23 2024-09-26 Beigene Switzerland Gmbh Bioactive conjugate, preparation method therefor and use thereof
WO2024206738A1 (en) 2023-03-31 2024-10-03 Immunai Inc. Humanized anti-trem2 antibodies
CN116239513B (zh) * 2023-05-05 2023-08-18 天津凯莱英制药有限公司 Mmae关键中间体的制备方法、mmae的制备方法和抗体偶联药物
WO2024236156A1 (en) 2023-05-17 2024-11-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cathepsin-d antibodies
WO2024251846A1 (en) 2023-06-07 2024-12-12 Fundació Privada Institut D'investigació Oncològica De Vall Hebron Combination therapy with mek inhibitors for the treatment of cancer
EP4473974A1 (en) 2023-06-07 2024-12-11 Peptomyc, S.L. Omomyc and kras inhibitors combination therapy for the treatment of cancer
TW202502371A (zh) 2023-06-07 2025-01-16 瓦爾希伯倫私人腫瘤研究基金會 用於治療癌症的與ｂｒａｆ抑制劑的組合療法
WO2024254455A1 (en) 2023-06-08 2024-12-12 Genentech, Inc. Macrophage signatures for diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
TW202504637A (zh) 2023-06-13 2025-02-01 美商艾德森特克斯治療股份有限公司 與結合至nectin-4蛋白之抗體及抗體藥物結合物(adc)相關之方法及組合物
WO2024258967A1 (en) 2023-06-13 2024-12-19 Synthis Therapeutics, Inc. Anti-cd5 antibodies and their uses
EP4477236A1 (en) 2023-06-14 2024-12-18 Inatherys Combination therapy for treating a tumor using adc comprising anti-cd71 antibodies and bh3 mimetics
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
TW202509219A (zh) 2023-07-13 2025-03-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 編碼細胞介素之慢病毒載體及其用於製備腫瘤浸潤性淋巴球之用途
WO2025021928A1 (en) 2023-07-25 2025-01-30 Merck Patent Gmbh Iduronidase-cleavable compounds
WO2025021929A1 (en) 2023-07-27 2025-01-30 Veraxa Biotech Gmbh Hydrophilic trans-cyclooctene (hytco) compounds, constructs and conjugates containing the same
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
EP4509142A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Ona Therapeutics S.L. Fgfr4 as target in cancer treatment
WO2025056807A1 (en) 2023-09-15 2025-03-20 Basf Se Stabilized biopolymer composition, their manufacture and use
AU2024201132A1 (en) 2023-09-20 2025-04-10 Uci Therapeutics Inc. Anti-mesothelin antibodies and uses thereof
US20250115680A1 (en) 2023-09-26 2025-04-10 Profoundbio Us Co. Ptk7 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
US20250122306A1 (en) 2023-10-13 2025-04-17 Sutro Biopharma, Inc. Anti-tissue factor antibodies and antibody conjugates, compositions comprising anti-tissue factor antibodies or antibody conjugates, and methods of making and using anti-tissue factor antibodies and antibody conjugates
WO2025120015A1 (en) 2023-12-06 2025-06-12 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd5 targeting antibodies with depleting and t or b-cell activation effects
WO2025126157A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Advesya Anti-il-1rap binding domains and antibody-drug conjugates thereof
US12134635B1 (en) 2023-12-29 2024-11-05 Sonnet BioTherapeutics, Inc. Interleukin 18 (IL-18) variants and fusion proteins comprising same

Family Cites Families (122)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3445518A (en) 1966-05-06 1969-05-20 Warner Lambert Pharmaceutical P-acylphenylethylamines
US4414205A (en) 1981-08-28 1983-11-08 University Patents, Inc. Cell growth inhibitory substances
ES521370A0 (es) 1982-04-12 1985-04-16 Hybritech Inc Un procedimiento para obtener un polidoma.
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US6054561A (en) 1984-02-08 2000-04-25 Chiron Corporation Antigen-binding sites of antibody molecules specific for cancer antigens
US5169774A (en) 1984-02-08 1992-12-08 Cetus Oncology Corporation Monoclonal anti-human breast cancer antibodies
US4753894A (en) 1984-02-08 1988-06-28 Cetus Corporation Monoclonal anti-human breast cancer antibodies
US4694778A (en) 1984-05-04 1987-09-22 Anicon, Inc. Chemical vapor deposition wafer boat
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
US4764368A (en) * 1984-08-29 1988-08-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Acid-cleavable compound
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
WO1986005807A1 (en) 1985-04-01 1986-10-09 Celltech Limited Transformed myeloma cell-line and a process for the expression of a gene coding for a eukaryotic polypeptide employing same
CA1282069C (en) 1985-09-12 1991-03-26 Damon L. Meyer Antibody complexes of hapten-modified diagnostic or therapeutic agents
WO1987002671A1 (en) 1985-11-01 1987-05-07 International Genetic Engineering, Inc. Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US4816444A (en) 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
JPH01202700A (ja) 1988-02-09 1989-08-15 Mitsubishi Electric Corp Ｘ線ミラー及びその製造方法
FI102355B1 (fi) 1988-02-11 1998-11-30 Bristol Myers Squibb Co Menetelmä yhdistävän välikappaleen omaavien antrasykliini-immunokonjugaattien valmistamiseksi
US4943628A (en) 1988-06-13 1990-07-24 Ortho Pharmaceutical Corporation HIV peptide-inducted T cell stimulation
EP0648489A1 (en) 1988-08-12 1995-04-19 Fisons Corporation Arylalkylamides having neuroprotective properties
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US4978744A (en) 1989-01-27 1990-12-18 Arizona Board Of Regents Synthesis of dolastatin 10
US4879278A (en) 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
US5286637A (en) 1989-08-07 1994-02-15 Debiopharm, S.A. Biologically active drug polymer derivatives and method for preparing same
US5165923A (en) 1989-11-20 1992-11-24 Imperial Cancer Research Technology Methods and compositions for the treatment of hodgkin's disease
US5767236A (en) 1990-05-09 1998-06-16 Biomeasure, Inc. Linear therapeutic peptides
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
EP0814159B1 (en) 1990-08-29 2005-07-27 GenPharm International, Inc. Transgenic mice capable of producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5698155A (en) 1991-05-31 1997-12-16 Gs Technologies, Inc. Method for the manufacture of pharmaceutical cellulose capsules
DE69233254T2 (de) 1991-06-14 2004-09-16 Genentech, Inc., South San Francisco Humanisierter Heregulin Antikörper
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
EP0598129B1 (en) 1991-08-09 2000-03-22 Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. Novel tetrapeptide derivative
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
US5622929A (en) 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
AU668423B2 (en) 1992-08-17 1996-05-02 Genentech Inc. Bispecific immunoadhesins
US6034065A (en) 1992-12-03 2000-03-07 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of antineoplastic tetrapeptide phenethylamides of dolastatin 10
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
US6569834B1 (en) 1992-12-03 2003-05-27 George R. Pettit Elucidation and synthesis of antineoplastic tetrapeptide w-aminoalkyl-amides
US5410024A (en) 1993-01-21 1995-04-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide amides
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
JPH06234790A (ja) 1993-02-09 1994-08-23 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd 新規テトラペプチドアミド誘導体
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
FR2710536B1 (fr) 1993-09-29 1995-12-22 Transgene Sa Usage anti-cancéreux d'un vecteur viral comportant un gène modulateur de la réponse immunitaire et/ou inflammatoire.
CA2173150C (en) 1993-10-01 2004-11-30 Kyoichi Sakakibara Novel peptide derivatives
US5530097A (en) 1994-08-01 1996-06-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory peptide amides
US5521284A (en) 1994-08-01 1996-05-28 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide amides and esters
US5504191A (en) * 1994-08-01 1996-04-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters
US5554725A (en) 1994-09-14 1996-09-10 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Synthesis of dolastatin 15
US5599902A (en) 1994-11-10 1997-02-04 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Cancer inhibitory peptides
US5663149A (en) 1994-12-13 1997-09-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides
JP3066983B2 (ja) 1995-01-18 2000-07-17 ロシュ ダイアグノスティクス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 膜結合ｃｄ３０抗原の蛋白質分解性開裂及び遊離を防ぐ抗ｃｄ３０抗体
CN1113066C (zh) 1995-04-21 2003-07-02 帝国脏器制药株式会社 新型肽衍生物
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
JPH0977791A (ja) 1995-09-08 1997-03-25 Nippon Kayaku Co Ltd ペプチド誘導体及びその用途
SE9503380D0 (sv) 1995-09-29 1995-09-29 Pharmacia Ab Protein derivatives
ATE279947T1 (de) 1996-03-18 2004-11-15 Univ Texas Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten
US5741892A (en) 1996-07-30 1998-04-21 Basf Aktiengesellschaft Pentapeptides as antitumor agents
WO1998013059A1 (en) 1996-09-27 1998-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Hydrolyzable prodrugs for delivery of anticancer drugs to metastatic cells
JP2002513402A (ja) * 1997-02-25 2002-05-08 アリゾナ ボード オブ リーゼンツ 細胞増殖抑制性の鎖状および環状デプシペプチドであるドラスタチン１６、ドラスタチン１７およびドラスタチン１８の単離と構造決定
US5965537A (en) 1997-03-10 1999-10-12 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus
US6143721A (en) 1997-07-18 2000-11-07 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
ATE284412T1 (de) 1998-01-09 2004-12-15 Univ Arizona State Anti-kryptokokkus peptide
US6162930A (en) 1998-03-06 2000-12-19 Baylor University Anti-mitotic agents which inhibit tubulin polymerization
US5985837A (en) * 1998-07-08 1999-11-16 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
US7425541B2 (en) * 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
DE60040651D1 (de) * 1999-02-12 2008-12-11 Emd Serono Res Ct Inc Methoden zur behandlung von tumoren und metastasen unter verwendung einer anti-angiogenen und immun-therapien
US20040141983A1 (en) 1999-03-15 2004-07-22 Protein Design Labs, Inc. Compositions against cancer antigen LIV-1 and uses thereof
NZ514918A (en) 1999-04-28 2003-11-28 Univ Texas Compositions and methods for cancer treatment by selectively inhibiting VEGF
NZ516491A (en) * 1999-07-12 2004-11-26 Idec Pharmaceuticals Inc Blocking immune response to a foreign antigen using an antagonist which binds to CD20
US6323315B1 (en) 1999-09-10 2001-11-27 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin peptides
US7097840B2 (en) 2000-03-16 2006-08-29 Genentech, Inc. Methods of treatment using anti-ErbB antibody-maytansinoid conjugates
CN100390288C (zh) * 2000-04-11 2008-05-28 杰南技术公司 多价抗体及其应用
US20040018194A1 (en) 2000-11-28 2004-01-29 Francisco Joseph A. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
US20070258987A1 (en) 2000-11-28 2007-11-08 Seattle Genetics, Inc. Recombinant Anti-Cd30 Antibodies and Uses Thereof
US7090843B1 (en) 2000-11-28 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
US6884869B2 (en) * 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US20030083263A1 (en) 2001-04-30 2003-05-01 Svetlana Doronina Pentapeptide compounds and uses related thereto
US20050107595A1 (en) 2001-06-20 2005-05-19 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US7803915B2 (en) 2001-06-20 2010-09-28 Genentech, Inc. Antibody compositions for the diagnosis and treatment of tumor
US6737409B2 (en) 2001-07-19 2004-05-18 Hoffmann-La Roche Inc. Dolastatin 10 derivatives
US20040235068A1 (en) 2001-09-05 2004-11-25 Levinson Arthur D. Methods for the identification of polypeptide antigens associated with disorders involving aberrant cell proliferation and compositions useful for the treatment of such disorders
US7098305B2 (en) 2001-09-06 2006-08-29 Ardana Bioscience Limited Sustained release of microcrystalline peptide suspensions
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
US20050238650A1 (en) 2002-04-17 2005-10-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
AU2002356844C1 (en) 2001-10-23 2010-03-04 Amgen Fremont Inc. PSMA antibodies and protein multimers
JP2005511627A (ja) 2001-11-20 2005-04-28 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド 抗ｃｄ３０抗体を使用する免疫学的疾患の治療
PL373567A1 (en) 2002-03-01 2005-09-05 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Conjugates of therapeutic or cytotoxic agents and biologically active peptides
AU2003252830B2 (en) * 2002-03-08 2008-10-09 Abbvie Biotherapeutics Inc. Antibodies against cancer antigen TMEFF2 and uses thereof
EP1576169B1 (en) 2002-03-19 2016-08-10 Celldex Therapeutics, Inc. Therapeutic polypeptides and methods of use
PT2357006E (pt) 2002-07-31 2016-01-22 Seattle Genetics Inc Conjugados de fármacos e sua utilização para tratamento do cancro, de uma doença autoimune ou de uma doença infeciosa
AU2003294210A1 (en) 2002-07-31 2004-05-04 Seattle Genetics, Inc Anti-cd20 antibody-drug conjugates for the treatment of cancer and immune disorders
WO2004016801A2 (en) 2002-08-16 2004-02-26 Immunogen, Inc. Cross-linkers with high reactivity and solubility and their use in the preparation of conjugates for targeted delivery of small molecule drugs
US7276372B2 (en) 2002-12-20 2007-10-02 Pdl Biopharma, Inc. Antibodies against GPR64 and uses thereof
JP5356648B2 (ja) 2003-02-20 2013-12-04 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 抗ｃｄ７０抗体−医薬結合体、ならびに癌および免疫障害の処置のためのそれらの使用
JP2007525434A (ja) 2003-03-19 2007-09-06 アブジェニックス インコーポレイテッド Ｔ細胞、免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン１（ｔｉｍ−１）抗原に対する抗体およびその使用。
KR101520209B1 (ko) 2003-11-06 2015-05-13 시애틀 지네틱스, 인크. 리간드에 접합될 수 있는 모노메틸발린 화합물
JP5064037B2 (ja) * 2004-02-23 2012-10-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 複素環式自壊的リンカーおよび結合体
WO2005084390A2 (en) 2004-03-02 2005-09-15 Seattle Genetics, Inc. Partially loaded antibodies and methods of their conjugation
US7399469B2 (en) 2004-03-26 2008-07-15 Pdl Biopharma, Inc. Anti-LFL2 antibodies for the diagnosis, prognosis and treatment of cancer
US7442332B2 (en) * 2004-05-04 2008-10-28 Clopay Plastic Products Company, Inc. Method and apparatus for uniformly stretching thermoplastic film and products produced thereby
JP2008501653A (ja) 2004-06-02 2008-01-24 エフ．ホフマン−ラ　ロシュ　アーゲー アミノ−アルコキシ−ヘプタン酸アルキルエステルの合成
TR201808537T4 (tr) 2004-09-23 2018-07-23 Genentech Inc Sistein değiştirilmiş antikorlar ve konjugatlar.
RU2007116973A (ru) 2004-10-05 2008-11-20 Дженентек, Инк. (Us) Терапевтические средства с пониженной токсичностью
ATE476994T1 (de) 2004-11-30 2010-08-15 Curagen Corp Antikörper gegen gpnmb und ihre verwendungen
MX2007006746A (es) 2004-12-13 2007-07-09 Hoffmann La Roche Proceso novedoso para la manufactura de derivados del acido 3-pirrolidin-2-il-propionico.
JP2008537673A (ja) 2005-01-31 2008-09-25 ジェネンテック・インコーポレーテッド 抗ｅｐｈｂ２抗体とその使用方法
JP2008535823A (ja) 2005-03-25 2008-09-04 キュラジェン コーポレイション テネイシンの主要な抗原に対する抗体
PT1912677E (pt) 2005-06-20 2013-12-23 Psma Dev Company L L C Conjugados de anticorpos contra psma-fármaco
AU2006287416A1 (en) 2005-09-07 2007-03-15 Medimmune, Llc Toxin conjugated Eph receptor antibodies
AU2006315580A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Curagen Corporation Method of treating ovarian and renal cancer using antibodies against T cell immunoglobulin domain and mucin domain 1 (TIM-1) antigen
US20100040637A1 (en) 2005-11-23 2010-02-18 Karen Van Orden Methods and Composition for Treating Diseases Targeting Prominin-1 (CD133)
DOP2006000277A (es) 2005-12-12 2007-08-31 Bayer Pharmaceuticals Corp Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización
AR059900A1 (es) 2006-03-17 2008-05-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-tat226 e inmunoconjugados

Also Published As

Publication number Publication date
PT1545613E (pt) 2011-09-27
AU2010201459A1 (en) 2010-05-06
ES2544527T3 (es) 2015-09-01
SI2357006T1 (sl) 2016-01-29
ATE516818T1 (de) 2011-08-15
US7829531B2 (en) 2010-11-09
CY1111894T1 (el) 2015-11-04
CY2013004I1 (el) 2015-11-04
US7851437B2 (en) 2010-12-14
AU2003263964C1 (en) 2010-08-19
EP1545613B1 (en) 2011-07-20
LU92133I9 (hu) 2019-01-04
DK2357006T3 (en) 2015-12-21
US8906376B2 (en) 2014-12-09
AU2003263964A1 (en) 2004-02-16
EP2357006B1 (en) 2015-09-16
US20090324621A1 (en) 2009-12-31
ES2369542T3 (es) 2011-12-01
CY2013004I2 (el) 2017-09-13
EP2353611A2 (en) 2011-08-10
EP2353611B1 (en) 2015-05-13
HUS1300002I1 (hu) 2016-08-29
CA2802205A1 (en) 2004-02-05
EP1545613A4 (en) 2008-10-15
US20060074008A1 (en) 2006-04-06
CA2494105C (en) 2013-04-02
JP2006500333A (ja) 2006-01-05
CA2494105A1 (en) 2004-02-05
US20100062008A1 (en) 2010-03-11
EP1545613A2 (en) 2005-06-29
SI1545613T1 (sl) 2011-11-30
WO2004010957A3 (en) 2004-06-10
EP2357006A3 (en) 2011-10-19
CA2802205C (en) 2016-01-19
ES2556641T3 (es) 2016-01-19
LU92133I2 (fr) 2013-03-18
US20080213289A1 (en) 2008-09-04
AU2003263964B2 (en) 2010-01-14
US7659241B2 (en) 2010-02-09
PT2357006E (pt) 2016-01-22
WO2004010957B1 (en) 2004-08-19
JP4741838B2 (ja) 2011-08-10
EP1545613B9 (en) 2012-01-25
EP2353611A3 (en) 2011-10-19
US20110064753A1 (en) 2011-03-17
DK1545613T3 (da) 2011-11-14
HK1157180A1 (en) 2012-06-29
WO2004010957A2 (en) 2004-02-05
BE2012C047I2 (hu) 2022-08-09
AU2010201459B2 (en) 2012-12-06
EP2357006A2 (en) 2011-08-17
FR12C0066I1 (hu) 2012-12-14
FR12C0066I2 (fr) 2013-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUE027549T2 (hu) Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére
ES2708763T3 (es) Compuestos de monometilvalina que tienen modificaciones de la cadena lateral de fenilalanina en el extremo C
JP6759326B2 (ja) 細胞結合分子の共役のための架橋連結体
JP6817288B2 (ja) 新規な連結体及び生体分子と薬物との特異的共役におけるその使用
KR102345175B1 (ko) 결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용
TWI636793B (zh) 新穎結合劑-藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（二）
ES2456325T3 (es) Compuestos de monometilvalina capaces de conjugación con ligandos
CN115768485A (zh) 包含sting激动剂的抗体药物缀合物
CN109912683A (zh) 一种细胞毒素分子、偶联物及其制备方法和应用
AU2012236511B2 (en) Auristatin tyramine phosphate salts and auristatin aminoquinoline derivatives and prodrugs thereof
CN103764667B (zh) N‑羧烷基耳他汀类及其应用
JP2021529799A (ja) 架橋ピロロベンゾジアゼピン二量体（ｐｂｄ）誘導体及びその共役体
ES2988140T3 (es) Derivados de Exatecán, cargas útiles de ligador, y conjugados de los mismos
RU2723651C2 (ru) Цитотоксические и антимитотические соединения и способы их применения
JP2021066746A (ja) 細胞毒性剤と細胞結合受容体との共役体
WO2025130990A1 (zh) 肿瘤微环境激活的药物偶联物及抗体药物偶联物
TW202508638A (zh) 連結子化合物及配體－藥物接合物、其製備方法及用途
HK1157180B (en) Drug conjugates and their use for treating cancer, an autoimmune disease or an infectious disease