KR20230158005A - 생물학적 활성 화합물의 내재화된 접합체로부터의 선택적 약물 방출 - Google Patents

생물학적 활성 화합물의 내재화된 접합체로부터의 선택적 약물 방출 Download PDF

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노아 빈드맨
니콜 오클리
피터 센터
디브야 아와스티
비비안 트랑
라이언 리스키
스콧 제프리
루즈베 유세피
브래들리 고슬린
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씨젠 인크.
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Abstract

본 발명은 생물학적 활성 화합물의 접합체에 관한 것으로, 이러한 접합체는 유리 약물의 방출을 위해 종양 조직 균질물에 의한 선택적 절단을 부여하고/거나 동일한 종의 정상 조직 균질물과 비교하여 종양 조직으로의 생체 분포를 향상시키는 트리펩타이드를 함유하는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 정상 조직은 아미노산 서열이 카텝신 B에 의해 선택적으로 절단 가능한 것으로 알려진 디펩타이드인 비교 대상 접합체의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 인간 대상체에게 투여하는 것과 관련된 부작용이 발생한 부위이다.

Description

생물학적 활성 화합물의 내재화된 접합체로부터의 선택적 약물 방출
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/163,017, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/163,012, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/162,653, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/162,660, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/162,773, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/162,776, 2021년 3월 18일 출원된 미국 가출원 63/162,781, 2021년 3월 18일에 출원된 미국 가출원 63/162,786 및 2021년 7월 13일에 출원된 미국 가출원 63/221,295의 우선권의 이익을 주장하며, 이들 모두는 그 전체가 모든 목적을 위해 본 명세서에 참조로 포함된다.
ASCII 텍스트 파일로서의 서열목록 제출
ASCII 텍스트 파일에 대한 다음 제출 내용은 전체가 참조로 본원에 통합된다: 서열 목록의 컴퓨터 판독 가능 양식 (CRF) (파일 이름: 761682005940SEQLIST.TXT, 기록 날짜: 2022년 3월 16일, 크기: 464 KB).
본 발명은 비표적 세포에 비해 표적 세포에 대한 선택성이 개선된 항체 약물 접합체 (ADC)를 포함하는 리간드 약물 접합체 (LDC) 화합물 및 이의 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 약물 및 약물-링커 및 이의 조성물에 관한 것으로서, 이들은 리간드 약물 접합체 화합물의 일부로서 유용하다. 본 발명은 또한 신규한 항-GPNMB, 항-CD228, 항항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 및 항-CD19 항체-약물 접합체 및 이러한 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 및 항-CD19 항체-약물 접합체를 이용하여 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.
전통적인 리간드 약물 접합체는 표적 모이어티에 결합한 다음 결합된 접합체의 내재화에 의해 세포에 진입함으로써 접합체의 리간드 유닛에 의해 인식되는 표적 모이어티를 표시하는, 표적 세포에 대한 생물학적 활성을 나타낸다. 비표적 세포 대비 표적 세포에 대한 선택성은 주로 전통적인 리간드 약물 접합체에 의해 달성되는데, 이는 접합체에 의해 작용하도록 의도되지 않은 세포인 비표적 정상 세포에 비해 표적 세포에 표적 모이어티가 더 많이 존재하는 결과이다. 유리 형태로 세포 독성이 있는 접합 화합물의 조건부 방출이 세포내 프로테아제에 의해 영향을 받는 경우, 결합된 접합체의 내재화에 이어 접합체의 펩타이드 기반 링커 유닛의 효소 처리가 뒤따른다.
전통적인 디펩타이드 기반 리간드 약물 접합체에서 바람직하지 않은 부작용을 일으킬 수 있는 세포 독성 화합물의 조기 방출 감소는 암세포에서 상향 조절되는 것으로 여겨지는 특정 리소좀 프로테아제에 대한 선택성을 최적화함으로써 달성된다. 전통적인 리간드 약물 접합체의 세포내 처리를 담당하는 프로테아제가 모든 세포에 공통적이기 때문에, 표적 세포에 대한 선택성은 주로 표적 암세포와 비표적 정상 세포 내에서 처리 프로테아제의 세포내 활성 수준이 다름에도 불구하고 접합체에 의해 작용하도록 의도된 세포에 표적 모이어티가 더 많기 때문이다. 그러나, 이러한 접근법은 현재 본 발명의 리간드 약물 접합체에 의해 이용되고 있는, 종양과 정상 조직 사이에 방출된 세포 독성 화합물의 가능한 노출 차이를 고려하지 않는다.
따라서, 종양 조직의 암세포에서 상향 조절된 세포내 프로테아제에 의해 선택적으로 작용하도록 설계된 전통적인 리간드 약물 접합체의 디펩타이드 서열은 여전히 정상 조직 내에 갇힌 프로테아제에 의해 작용할 수 있다. 이러한 작용은 정상 조직의 미세 환경 내 또는 정상 조직의 세포 내에서 면역학적으로 특이적 또는 비특이적으로 이들 세포에 흡수된 후 발생할 수 있으며, 각각 표적 또는 표적 외 독성을 초래할 수 있다. 이러한 독성은 세포 독성이 높은 화합물의 표적 전달을 위해 해결해야 할 보다 심각한 문제이다. 따라서 전통적인 디펩타이드 기반 리간드 약물 접합체에 비해 정상 조직에 대한 노출이 적고 그로부터 방출되는 세포 독성 화합물에 대한 노출을 감소시키는 개선된 펩타이드 서열을 가진 리간드 약물 접합체는 이들 전통적인 접합체가 제공하는 효능을 유지하면서 치료에 대한 내약성을 향상시킬 것으로 믿어진다.
또한, 이들 조직에 의한 전통적인 디펩타이드 기반 리간드 약물 접합체의 단백질 분해에 비해 정상 조직에 의한 단백질 분해보다 종양 조직에 의한 단백질 분해에 더 취약한 개선된 펩타이드 서열을 갖는 리간드 약물 접합체는 또한 방출된 세포 독성 화합물에 대한 노출을 감소시킬 것이며, 이는 치료에 대한 내약성 향상에 기여할 것으로 여겨진다. 조직 균질물을 사용하여 이러한 단백질 분해 차이를 결정하는 것은 이들 조직의 미세 환경 및/또는 세포 내재화에 따른 차이를 포착해야 한다.
당업계의 이러한 문제에 대한 해결책을 제공하기 위해, 본원에는 포유류 대상체에서의 암 치료에 있어서 전통적인 디펩타이드 기반 접합체의 효능을 유지하면서 접합체에 대한 내약성이 개선되도록 정상 조직의 세포의 유리 세포독소에 대한 노출과 비교하여 종양 조직의 표적 세포가 접합체로부터 방출된 세포 독성 화합물에 대해 보다 선택적인 노출을 갖도록 하는 서열의 펩타이드 기반 링커 유닛을 갖는 리간드 약물 접합체가 개시된다. 이러한 노출의 차이는 전통적인 디펩타이드 기반 접합체의 단백질 분해와 비교하여 정상 조직 내 단백질 분해보다 종양 조직 내 선택성을 부여하는 펩타이드 서열을 갖는 리간드 약물 접합체의 단백질 분해에 대한 선택성이 더 크기 때문에 발생할 수 있다. 펩타이드 서열을 변경하면 접합체 화합물의 물리화학적 특성에도 영향을 미칠 수 있기 때문에, 정상 조직이 아닌 종양 조직으로의 생체 분포 개선으로 인한 노출 증가 및/또는 일단 이들 조직에 분포된 후 종양 조직에 접합체 화합물이 우선적으로 유지되고/되거나 정상 조직에서 접합체 화합물이 우선적으로 제거되는, 개선된 성질이 각각 발생할 수 있다. 이러한 생체 분포 효과는 생체 내에서 관찰하기 어려울 수 있는 우선적 단백질 분해에 대한 지배적인 요인이 될 수도 있다.
따라서, 정상 조직에 비해 종양 조직에 대해 방출된 유리 세포 독성 화합물의 노출을 향상시키는 펩타이드 서열을 갖는 접합체 화합물은, 펩타이드 서열이 종양의 것과 비교하여 정상 조직 또는 이의 세포 내에서 단백질 분해에 전반적으로 덜 민감하기 때문에 및/또는 정상 조직보다 종양 조직을 선호하는 펩타이드 서열을 포함하는 접합체 화합물에 대한 개선된 약동학적 특성으로부터 감소된 바람직하지 않은 독성을 나타내야 한다.
따라서 본 발명의 리간드 약물 접합체는 비표적 정상 세포에 비해 표적 세포에 대해 두 가지 수준의 선택성을 갖는다: (1) 표적 세포로의 선택적 진입 및 (2) 종양 조직에 비해 정상 조직의 접합체 화합물에 대한 노출 감소. 선택성의 두 번째 수준으로부터, 정상 조직 독성의 감소는 종래의 표적 요법과 관련된 부작용의 감소를 제공할 것으로 예상된다.
당단백질 비전이성 흑색종 단백질 B라고도 하는 GPNMB는 특정 종양 세포의 세포 표면에서 발견되는 막횡단 단백질이다. GPNMB는 흑색종, 연조직 종양, 간세포 암종, 유방암, 위암, 비소세포폐암 (NSCLC), 두경부암, 난소암 및 췌장암을 포함한 여러 암에서 상향 조절된다.
멜라노트랜스페린, MELTF, p97 및 MF12로도 알려진 CD228은 글리코실포스파티딜리노시톨 고정 당단백질이며 악성 흑색종 세포에 대한 97-kDa 세포 표면 마커로 처음 확인되었다. CD228은 대부분의 임상 흑색종 분리주에서 과발현되고, 또한 많은 인간 암종에서 관찰된다. CD228은 다양한 암에서 발현되는 것으로 나타났다.
알파-v 베타-6으로도 알려진 ανβ6은 피브로넥틴과 같은 세포외 기질 단백질에 결합하는 세포 부착 수용체이다. ανβ6은 알파 v 하위 단위와 베타 6 하위 단위로 구성되며, 비소세포폐암 (NSCLC)을 비롯한 다양한 암에서 상향조절된다. NSCLC는 가장 흔한 유형의 폐암이다. 지난 한 해 동안 200,000명이 넘는 사람들이 폐암 진단을 받았으며, 이는 암 사망의 주요 원인이다.
CD30은 다양한 암, 자가면역 및 기타 감염성 질환에서 상향조절되는 막 당단백질이자 TNF 수용체 슈퍼패밀리의 구성원이다. CD30은 호지킨병 및 비호지킨 림프종의 하위 집합인 역형성 대세포 림프종에서 악성 세포의 입증된 마커이다.
LIV1은 아연 수송체 단백질의 LZT (LIV-1-ZIP 아연 수송체) 하위패밀리의 ㄱ구성원이. Taylor 등, Biochim. Biophys. Acta 1611:16-30 (2003). LIV1 단백질의 컴퓨터 분석은 아연 메탈로프로테아제의 촉매 아연 결합 부위 모티프에 대한 합의 서열에 맞는 잠재적인 메탈로프로테아제 모티프를 보여준다. LIV1 mRNA는 주로 유방, 전립선, 뇌하수체 및 뇌 조직에서 발현된다. LIV1 단백질은 또한 유방암 및 전립선암과 같은 특정 암 병태와 관련이 있다. LIV1의 검출은 에스트로겐 수용체-양성 유방암, McClelland 등, Br. J. Cancer 77:1653-1656 (1998), 및 이들 암의 국소 림프절로의 전이성 확산과 관련이 있다. Manning 등, Eur. J. Cancer 30A:675-678 (1994).
CD19는 B 림프구 발달 및 기능을 조절하는 말단 분화를 통해 pre-B 세포 발달의 초기 단계부터 발현되는 pan-B 세포막 당단백질이다. CD19의 발현은 대부분의 림프성 암, 대다수의 비호지킨 림프종 (NHL) 및 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL) 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증 (WM)을 포함하는 백혈병에서 확인되었다.
앞서 언급한 각 질환에 대한 개선된 치료법에 대한 요구가 있다.
특허 출원, 특허 공보 및 과학 문헌을 포함하여, 본원에 인용된 모든 참고문헌은, 마치 각각의 개별 참고문헌이 참조에 의해 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 나타낸 것처럼, 그 전체가 본원에 참고문헌으로 포함된다.
본 발명의 하나의 원칙적 실시양태는 하기 화학식 1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염을 제공하고, 여기서
L은 리간드 유닛이고;
LU는 링커 유닛이고;
D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 약물 유닛 (D)을 나타내고;
아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 숫자이거나 약 4 또는 약 8이고,
여기서 리간드 유닛은 유리 세포 독성 화합물로서 약물 유닛의 후속 방출을 위해 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 항체, 또는 항체의 항원 결합 단편의 것이고,
여기서 조성물의 각각의 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 세포 독성 화합물의 약물 유닛이고;
LB는 공유 결합 리간드 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지에 대한 공유 결합 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이며, B가 없는 경우 A의 하위 단위가 되고,
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 최대 12개 (예를 들어, 3 내지 12개 또는 3 내지 10개)의 아미노산의 연속 서열이고, 여기서 서열은 비교 리간드-약물 접합체 조성물의 리간드-약물 접합체 화합물로부터 방출되는 세포 독성 화합물에 대한 정상 조직에 대한 종양 조직의 노출에 대해 향상된 선택성을 제공하는 선택성 부여 트리펩타이드로 구성되며, 펩타이드 절단 가능 유닛의 펩타이드 서열이 디펩타이드-발린-시트룰린- 또는 -발린-알라닌-이고;
여기서 종양 및 정상 조직은 설치류 종의 것이고 상기 화학식 1의 조성물은 다음과 같이 입증된 상기 개선된 노출 선택성을 제공한다:
상기 비교 리간드-약물 접합체 접합체 조성물에 대해 미리 결정된 동일한 유효량 및 용량 스케쥴로 투여되는 경우, 상기 비교 리간드-약물 접합체 접합체 조성물의 종양 이종이식 모델에서의 효능 유지, 및
종양을 보유하지 않은 설치류에 종양 이종이식 모델과 동일한 유효량 및 용량 스케줄로 투여했을 때, 두 접합체 조성물의 리간드 유닛이 비결합 항체로 대체된 비교 리간드-약물 접합체 조성물의 동등한 (예를 들어, 동일한) 투여에 비해 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물로부터 방출되는 유리 세포 독성 화합물의 혈장 농도가 감소하고/하거나 조직 내 정상 세포의 보존을 나타내는 것을 나타냄,
여기서 종양을 보유하지 않은 설치류의 조직 내 정상 세포와 동일한 유형의 인간 조직 내 세포에 대한 세포 독성이 적어도 부분적으로는 비교 대상 접합체 조성물의 치료적 유효량을 투여한 인간 대상체의 부작용의 원인이 되고;
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 또는 1 내지 3 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이고;
여기서, 상기 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1의 구조를 갖고, 여기서 아래첨자 p는 아래첨자 p'로 대체되고, 여기서 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 4 또는 8이다.
관련된 원칙적 실시양태는 하기 화학식 I의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염, 특히 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공하고, 여기서, LU'는 화학식 1의 L과 LU 사이에 공유 결합을 제공할 수 있으므로 종종 링커 유닛 전구체라고도 하고; D'는 1 내지 4개의 약물 유닛을 나타내며, 여기서 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IA의 구조에 의해 추가로 정의되고:
여기서, LB'는 화학식 1A의 LB로 변형되어 화학식 1의 L에 공유 결합을 형성할 수 있고, 따라서 종종 리간드 공유 결합 전구체 모이어티라고 지칭되기도 하며, 화학식 IA의 나머지 가변기는 화학식 1A에 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 것은 하기 화학식 1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
L은 리간드 유닛이고;
LU는 링커 유닛이고;
D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고;
아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 숫자이거나 약 4 또는 약 8이고,
여기서, 리간드 유닛은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 후속으로 약물 유닛(들)을 유리 약물로 방출할 수 있는 항체 또는 항체의 항원 결합 단편으로부터 유래한 것이고,
여기서 조성물의 각각의 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 약물 유닛이고;
LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이며, B가 없는 경우 A의 하위 단위가 되고,
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하고, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나, 세린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있거나, 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있거나, 프롤린이고,
여기서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 2개의 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아니고;
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이고;
여기서 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 아래첨자 p가 아래첨자 p'로 대체된 화학식 1의 구조를 갖고, 여기서, 아래첨자 p'는 독립적으로 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 4 또는 8이다.
일부 실시양태에서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고; 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고; 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮다.
일부 실시양태에서, 본원은 화학식 1의 리간드 약물 접합체 조성물을 제공하고, 여기서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 1H의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티가 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로, A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타낸다.
전술한 실시양태 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 HE가 -(C=O)인 리간드 약물 접합체 조성물을 제공한다.
전술한 실시양태 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 -Yy-D이 하기 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 조성물을 제공하고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2이다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 D가 세포 독성 약물이고, 여기서 세포 독성 약물은 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이고, 여기서 2차 아민의 질소 원자는 약물 링커 모이어티에 대한 공유결합 부위이고, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 다음 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 조성물을 제공하고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고;
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나,
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타낸다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)인 리간드 약물 접합체 조성물을 제공한다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 아래첨자 q가 1이고, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 하기 화학식 1H-MMAE의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공하고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서:
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타낸다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 펩타이드 절단 가능 유닛이 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이며, 여기서: 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열인 리간드 약물 접합체 조성물을 제공하고; P2 및 P1 아미노산 중 나머지 하나는 류신보다 소수성이 낮은 지방족 측쇄를 가지고 있으며; P2 및 P1 아미노산 중 나머지 하나는 음으로 하전되어 있다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 발린보다 소수성이 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있으며, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이다.
일부 실시양태에서, 본원은 화합물이 다음과 같은 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공하고,
여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 24의 정수이다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 L이 온전한 항체의 항체 리간드 유닛 또는 이의 항원 결합 단편인 리간드 약물 접합체 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 키메라, 인간화 또는 인간 항체이고, 여기서 항체는 암 세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있거나 항체가 비결합 대조 항체이므로 비결합 대조 접합체 조성물을 정의한다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 아래첨자 p가 약 2 내지 약 12, 또는 약 2 내지 약 10, 또는 약 2 내지 약 8의 범위이고, 특히 아래첨자 p는 약 2, 약 4 또는 약 8인 리간드 약물 접합체 조성물을 제공한다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 약학적으로 허용되는 제형을 제공하며, 여기서 제형은 유효량의 리간드 약물 접합체 조성물 또는 본원에 기술된 비결합 대조군 접합체의 동등한 양과 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제는 액체 제형을 제공하는 액체 담체로서, 여기서 액체 제형은 동결건조 또는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하기에 적합하다. 일부 실시양태에서, 제형은 동결건조로부터의 고체 또는 본 명세서에 기술된 액체 제형이며, 여기서, 고체 제형의 적어도 하나의 부형제는 동결건조 방지제이다.
일부 실시양태에서, 본원은 하기 화학식 IA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염을 제공하고, 여기서
D는 약물 유닛이고;
LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛으로, B가 없을 경우 A의 하위 단위가 되고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하고, 여기서 P1, P2 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나 세린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있거나 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮거나, 프롤린이고,
여기서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 남은 2개의 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아니고;
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이다.
일부 실시양태에서, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고 있고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮다.
일부 실시양태에서, 본원은 약물 링커 화합물이 하기 화학식 IH의 구조를 갖고 있는 화학식 IA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염을 제공하고, 여기서:
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 있는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 아래첨자 a'는 A'의 부재 또는 존재를 나타내는 0 또는 1이다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 HE가 -(C=O)인 약물 링커 화합물이다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 -Yy-D가 다음 구조를 갖는 약물 링커 화합물을 제공하고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1에 대한 공유 결합 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2이다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원은 D는 세포 독성 약물이고, 여기서 세포 독성 약물은 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이고, 여기서 2차 아민의 질소 원자는 약물 링커 모이어티에 공유 결합되는 부위이고, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 하기 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖는 약물 링커 화합물을 제공하고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고;
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 결합을 나타낸다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원에서는 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F(MMAF)인 약물 링커 화합물이 제공된다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 결합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원에는 약물 링커 화합물이 하기 화학식 IH-MMAE의 구조를 갖는 약물 링커 화합물:
또는 이의 염이 제공되고, 여기서
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재한다.
전술한 실시양태들 중 임의의 실시양태와 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 본원에서는 펩타이드 절단 가능 유닛이 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고; P2 및 P1 아미노산 중 하나는 류신보다 낮은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며; P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된 약물 링커 화합물이 제공된다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음전하를 띤다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이다.
일부 실시양태에서, 본원에서는 약물 링커 화합물이 다음과 같은 구조를 갖는 약물 링커 화합물:
또는
또는 이의 염이 제공된다.
일부 실시양태에서, 본원에서는 하기 화학식 IA-L의 링커 화합물:
또는 이의 염이 제공되고, 여기서
RG는 반응성 기이고;
LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛으로, B가 없을 경우 A의 하위 단위가 되고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나 세린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖거나 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있거나, 프롤린이고,
여기서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이다.
일부 실시양태에서, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고; 아미노산 P1, P2, P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있다.
일부 실시양태에서, 본원에는 펩타이드 절단 가능 유닛이 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이며, 여기서 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고; P2 및 P1 아미노산 중 하나는 류신보다 낮은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며; P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된 링커 화합물이 제공된다.
일부 실시양태에서, 본원에서는 링커 화합물이 하기 화학식 IA-L-3의 구조를 갖는 링커 화합물:
또는 이의 염이 제공된다.
일부 실시양태에서, 본원에서는 링커 화합물이 다음과 같은 구조를 갖는 링커 화합물:
또는
또는 이의 염이 제공된다.
다른 측면에서, 본원에서 하기 화학식 1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 제공되고, 여기서 L은 리간드 유닛이고; LU는 링커 유닛이고; D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고; 아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 수이거나 약 4 또는 약 8이고, 여기서 리간드 유닛은 항체 또는 항체의 항원 결합 단편으로부터 유래한 것으로서, 여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 약물 유닛(들)을 유리 약물로 후속 방출할 수 있고, 여기서 조성물의 각각의 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고; D는 약물 유닛이고; LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고는 0 또는 1이고; B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고; LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고; A'는 제2 선택적 스트레처 유닛으로, 존재할 경우 B의 부재시 A의 하위 단위가 되고, 아래첨자 a'는 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는 0 또는 1이고, W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서: 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나 세린이고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있거나 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있거나 프롤린이고, 여기서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2 아미노산은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3 아미노산은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고, 단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고; 존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고; 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고; 아래첨자 q는 1 내지 3 또는 1 내지 4 범위의 정수이고, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이고; 여기서 상기 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 아래첨자 p가 아래첨자 p'로 대체된 화학식 1의 구조를 갖고, 여기서, 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 4 또는 8이다. 일부 실시양태에서, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 류신보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 갖고; 아미노산 P1, P2, P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있다. 일부 실시양태에서, W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하고, 여기서 여기서 아미노산 중 하나는 음으로 하전되고, 상기 아미노산 중 다른 아미노산은 류신보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며, 나머지 아미노산은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있다. 일부 실시양태에서 펩타이드 절단 가능 유닛에 대한 프로테아제 작용은 유리 약물로서 D를 방출할 수 있다. 일부 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 염 형태이다.
일부 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 하기 화학식 1H의 약물 링커 모이어티:
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 및 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티가 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서 HE는 가수분해 강화 유닛이고; A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 공유 부착된 부위를 나타낸다. 일부 실시양태에서, HE는 -C(=O)이다. 일부 실시양태에서, -Yy-D는 다음 구조를 갖고:
여기서 각각의 Q는 존재하는 경우, -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고; 아래첨자 m은 0, 1 또는 2이다. 일부 실시양태에서, -Yy-D는 다음 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고; 물결선은 P1에 대한 공유 부착 부위를 나타내고; 점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고; Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고; 각각의 Q는 존재하는 경우, -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고; 아래첨자 m은 0, 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, D는 튜불린 파괴제, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 손상제, 또는 DNA 복제 억제제의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 튜불린의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 오리스타틴의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 안트라사이클린의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 캄프토테신의 구조를 통합하고 있다:
여기서 RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고; RF 및 RF'는 각각 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF' 중 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환된다.
일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서, 단검 모양은 약물 링커 모이어티의 2차 링커에 대한 D의 부착 지점을 나타내고, 원은 5족 또는 6족 질소 헤테로아릴렌을 나타내고, 여기서 상기 헤테로아릴렌에 표시된 필수 치환체는 나머지 위치에서 선택적 치환을 갖는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있고; R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고; R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고; R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된, 임의로 치환된 알킬이고, 하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 하나의 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고, 아래첨자 m'은 0 또는 1이다. 일부 실시양태에서, R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸이다. 일부 실시양태에서, 5-원 헤테로아릴렌은 구조 로 표시되고, 여기서 XB는 O, S, 또는 N-RB이고 여기서 RB는 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, 5-원 헤테로아릴렌은 2가 티아졸 모이어티이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 m'은 1이다.
일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 R7B는 수소 또는 -OH이고, R3은 저급 알킬이고, R2B 및 R2C는 독립적으로 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 아래의 약물 링커 모이어티:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 갖고, 선택적으로, 이러한 화합물 각각에 있는 하나 이상의 약물 링커 모이어티 중 하나 이상은 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 포함하고, 여기서: 아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 공유 결합된 부위를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 다음의 약물 링커 모이어티:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 갖고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서: 아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타낸다.
일부 실시양태에서, D는 세포 독성 약물로서, 세포 독성 약물은 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이고, 여기서 2차 아민의 질소 원자는 약물 링커 모이어티에 대한 공유 부착 부위이고, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 하기 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고; R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고; R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고; R19B은 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는 R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)이다.
일부 실시양태에서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드로서, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서: 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고; P2 및 P1 아미노산 중 하나는 류신보다 낮은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며; P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지고 있고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지고 있으며, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이다.
일부 실시양태에서, 조성물은 다음과 같은 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 화합물:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하고, 여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 12의 정수이다. 일부 실시양태에서, L은 온전한 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 항체 리간드 유닛이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 온전한 키메라, 인간화 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 면역 세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 CD30에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열 번호 1, 2, 3, 4, 5, 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 cAC10이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 LIV1에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 518, 519, 520, 521, 522, 및 523의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호 524의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 525의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 라디라투주맙이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 TROP2와 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 사시투주맙 또는 다토포타맙이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 ALPP에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 IL1RAP에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열 번호 96, 97, 98, 99, 100, 및 101의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체는 니다닐리맙이다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 ASCT2에 선택적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열 번호 794, 795, 796, 797, 798, 및 799의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열 번호 801의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호 802의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호 790의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 791의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호 792의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 793의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 하기 화학식 1H-MMAE의 약물 링커 모이어티:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 갖고, 선택적으로, 이러한 각각의 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티가 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서: 아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 상기 조성물은 다음과 같은 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 화합물
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하고, 여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 12의 정수이다.
일부 실시양태에서, p는 약 2 내지 약 12, 약 2 내지 약 10, 약 2 내지 약 8의 범위이거나 아래첨자 p는 약 2, 약 4 또는 약 8이다.
다른 측면에서, 본원에서 약학적으로 허용되는 제형이 제공되고, 여기서 제형은 본원에 기재된 리간드 약물 접합체 조성물의 유효량 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제는 액체 제형을 제공하는 액체 담체이고, 여기서 액체 제형은 동결건조 또는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하기에 적합하다. 일부 실시양태에서, 제형은 동결건조된 고체 또는 액체 제형이며, 여기서 고체 제형의 적어도 하나의 부형제는 동결보호제이다.
다른 측면에서는, 본원에 기술된 리간드 약물 접합체 조성물 또는 본원에 기술된 임의의 리간드 약물 접합체 조성물의 약학적으로 허용되는 제형의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 대상체에 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법이 제공된다.
다른 측면에서, 본원에서 화학식 IA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염이 제공되고, 여기서 D는 약물 유닛이고; LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고는 0 또는 1이고; B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고; LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 결합 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 결합 부위를 나타내고; A'는 제2 선택적 스트레처 유닛으로, 존재할 경우 B의 부재시 A의 하위 단위가 되고; 아래첨자 a'는 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는 0 또는 1이고, W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서: 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나 세린이고; 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있거나 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고;아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있거나, 프롤린이고, 여기서, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 상기 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고, 단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고; 존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고; 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고; 아래첨자 q는 1 내지 3의 정수이고, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2 또는 3이다. 일부 실시양태에서, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고, 아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 류신보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 갖고; 아미노산 P1, P2, P3 중 제3의 것은 류신보다 낮은 소수성을 갖고 있다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 염 형태이다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IH의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서: HE는 가수분해 강화 유닛이고; A'는 존재할 경우 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는 0 또는 1이다. 일부 실시양태에서, HE는 -C(=O)이다. 일부 실시양태에서, -Yy-D는 다음 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고; 물결선은 P1에 대한 공유 결합 부위를 나타내고; 점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고; Ry는 D’로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬 또는 D’로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고; 각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고; 아래첨자 m은 0, 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, D는 튜불린 파괴제, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 손상제, 또는 DNA 복제 억제제의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 튜불리신의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 오리스타틴의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 안트라사이클린의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 구조를 갖는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있다
여기서 RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고; RF 및 RF'는 각각 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환된다. 일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 D의 부착 지점을 나타내고, 원은 5족 또는 6족 질소 헤테로아릴렌을 나타내며, 여기서 해당 헤테로아릴렌에 표시된 필수 치환체는 나머지 위치에서 선택적 치환을 통해 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있고; R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고; R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고; R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된, 임의로 치환된 알킬이고, 하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 하나의 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고, 아래첨자 m'은 0 또는 1이다. 일부 실시양태에서, R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸이다. 일부 실시양태에서, 5-원 헤테로아릴렌은 구조 로 표시되고 여기서 XB는 O, S, 또는 N-RB이고 여기서 RB는 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, 5-원 헤테로아릴렌은 2가 티아졸 모이어티이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 m'은 1이다.
일부 실시양태에서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 R7B는 수소 또는 -OH이고, R3은 저급 알킬이고, R2B 및 R2C는 독립적으로 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재한다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재한다.
일부 실시양태에서, D는 세포 독성 약물로서, 여기서 세포 독성 약물은 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물이고, 여기서 2차 아민의 질소 원자가 약물 링커 모이티에 대한 공유결합 부위이고, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 하기 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 결합 부위를 나타내고; R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고; R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고; R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는 R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 결합을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)이다.
일부 실시양태에서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드로서, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서: 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고; P2 및 P1 아미노산 중 하나는 류신보다 낮은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지며; P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지고 있고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 발린보다 크지 않은 소수성을 갖는 지방족 측쇄를 가지고 있으며, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖고:
또는 이의 염이다.
다른 측면에서, 본원에는 다음과 같은 구조를 갖는 화합물
또는 이의 염을 제조하는 방법을 제공하고, 이 방법은 a) 또는 이의 염을 4-아미노벤질 알코올과 반응시킨 후 환원시켜 또는 이의 염을 형성하는 단계; b) 또는 이의 염을 또는 이의 염과 반응시킨 후, 환원시켜 또는 이의 염을 형성하는 단계; c) 또는 이의 염을 3-말레이미도프로피온산과 반응시켜 또는 이의 염을 형성하는 단계; 및 d) 또는 이의 염을 화합물 또는 이의 염으로 변환시키는 단계를 포함한다.
다른 측면에서, GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19에 결합하는 항원 결합 단백질 (ABP)이 이들의 항원 결합 단편 (예를 들어, 항체 및 이들의 항원 결합 단편)을 포함하여, 본원에 제공된다. 항원 결합 단백질 및 단편은 인간 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 (예를 들어, 서열번호: 931), 또는 CD19를 포함하여, GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체-약물 접합체 (ADC)는 위에서 설명한 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 ABP가 dLAE-MMAE (본원에서는 mp-dLAE-PABC-MMAE 또는 mp-dLAE-MMAE라고도 함) 약물 링커에 접합된 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이들 항-GPNMB ADC는 흑색종, 폐암, 유방암, 두경부암, 난소암, 육종, 중피종, 자궁경부암과 같은 GPNMB 발현 암을 치료하는 데 사용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이들 항-CD228 ADC는 흑색종, 췌장암, 중피종, 대장암, 폐암, 갑상선암, 유방암, 담관암, 식도암, 및 두경부암과 같은 CD228 발현 암을 치료하는 데 사용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이들 항-ανβ6 ADC는 비소세포폐암 (NSCLC), 두경부암, 식도암, 유방암, 난소암, 방광암, 피부암 (SCC), 난소암, 자궁경부암, 위암, 및 췌장암과 같은 ανβ6 발현 암을 치료하는 데 사용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이들 항-CD30 ADC는 암, 자가면역질환, 및 기타 감염성 질환과 같은 CD30 발현 질환을 치료하는 데 사용할 수 있다. 다른 실시양태에서, 이들 항-CD30 ADC는 고형 및 액체 종양, 및 HIV 및 에이즈와 같은 자가 면역 질환을 치료하는 데 사용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이들 항-LIV1 ADC는 LIV1-발현 암, 예컨대 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 간암, 위암, 신장암, 및 편평상피세포암 (예를 들어, 방광암, 두경부암, 식도암, 폐암, 예를 들어, 비소세포성 폐암); 흑색종과 같은 피부암; 소세포성 폐암종 또는 폐 카르시노이드 또는 비편평 비소세포성 폐암을 치료하는 데 사용할 수 있다. 유방암에는 HER 저 유방암을 포함한 HER2 양성 유방암, 에스트로겐 수용체 양성 유방암과 같은 호르몬 반응성 유방암, 및 삼중 음성 유방암이 포함된다. mp-dLAE-PABC-MMAE LIV1-ADC로 치료하는 다른 암으로는 위암 및 위식도 선암, 거세 저항성 전립선암이 포함된다. 일부 실시양태에서, 이들 항-CD19 ADC는 만성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, B형 급성 림프모구 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 비호지킨 림프종 및 호지킨 림프종, B세포 림프종 또는 미만성 거대 B세포 림프종과 같은 CD19 발현 암을 치료하는 데 사용할 수 있다.
본 발명의 이들 및 다른 실시양태들은 다음의 "본 발명의 상세한 설명" 및 "청구범위"에 보다 상세하게 기재되어 있다.
도 1a, 1b, 1c, 및 1d. 동일한 암세포 항원을 표적으로 하고 mc-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물 링커 모이어티를 갖는 4-로드 ADC의 치료 용량 이하와 비교하여, mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티가 있는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 일련의 4-로드 ADC로 치료 용량 이하에서 치료한 이종 이식 모델에서 종양 부피 대 이식 후 일수. 도 1a의 화합물은 4 mg/kg에서 테스트되었다. 도 1b 및 도 1d의 화합물은 3 mg/kg에서 테스트되었다. 도 1c의 화합물은 6 mg/kg에서 테스트되었다.
도 2a 내지 2c. mc-val-cit-PABC-MMAE 또는 mp-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 4-로드 비결합 접합체와 비교한, mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 일련의 4-로드 비결합 대조군 접합체의 10 mg/Kg 투여 4일 후 (도 2a 및 2b) 또는 최고 내약 용량 투여 8일 및 22일 후 (도 2c)의 호중구 수.
도 3a 내지 3c. mc-val-cit-PABC-MMAE 또는 mp-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 4-로드 비결합 접합체와 비교하여, mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 일련의 4-로드 비결합 접합체를 종양 비보유 동물에 10 mg/Kg 투여한 4일 후 (도 3a 및 3b) 또는 최고 내약 용량 투여 8일 및 22일 후 (도 3c) 래트 혈장 내 망상 적혈구 수.
도 4. mc-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 4-로드 비결합 접합체와 비교하여, 비히클, 또는 mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 4-로드 비결합 접합체 10 mg/Kg을 4일째에 비종양 보유 동물에 투여한 후의 래트 골수의 조직 병리학.
도 5a 및 5b. mc-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표현되는 약물-링커 모이어티를 갖는 4-로드 비결합 접합체와 비교하여, 비종양 보유 동물에 비히클, 및 mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표현되는 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 4-로드 비결합 접합체 10 mg/Kg을 투여한 후 다양한 시점의 래트 혈장 내 유리 MMAE.
도 6a 내지 6d. 호중구 엘라스타제 (도 6a) 또는 카텝신 B (도 6b 및 6c) 또는 췌장암 이종 이식 (도 6d)에 의해 시험관 내에서 mp-val-cit-PABC-MMAE의 화학식으로 표현되는 약물-링커 모이어티를 갖는 4-로드 비표적 접합체와 비교하여, mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시된 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 4-로드 비표적 접합체의 중쇄에서 절단된 약물의 백분율.
도 7a, 7b, 8, 및 9. 래트 혈장 (도 7a 및 7b), 사이노 혈장 (도 8) 또는 인간 혈장 (도 9)에서 96시간 배양 후 mp-P3-P2-P1-PABC-MMAE의 화학식으로 표시되는 약물-링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서 다양한 트리펩타이드 서열을 갖는 일련의 4-로드 비표적 접합체의 응집.
도 10. 다양한 시점의 래트 혈장 내 비표적 MMAF ADC의 응집.
도 11. 96시간 배양 후 래트의 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 래트 혈장 내 ADC 응집의 상관관계.
도 12. 96시간 배양 후 래트의 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 사이노 혈장 내 ADC 응집의 상관관계.
도 13. 96시간 배양 후 래트의 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 인간 혈장 내 ADC 응집의 상관관계.
도 14. 비표적 ADC를 투여한 래트의 세포 외 골수 구획 내 항체 농도.
도 15. 비표적 ADC를 투여한 래트의 골수 세포에서 유리 MMAE의 양.
도 16. 래트에 20 mg/kg 투여 후 비표적 트리펩타이드 ADC에 의한 투여 후 5일 및 8일째 망상 적혈구 고갈.
도 17. 래트에 20 mg/kg 투여 후 비표적 트리펩타이드 ADC에 의한 투여 후 5일 및 8일째의 호중구 고갈.
도 18. 래트에 20 mg/kg 투여한 후 비표적 트리펩타이드 ADC에 의한 투여 후 5일 및 8일째의 뼈 조직학.
도 19. 96시간 배양 후 래트 혈장에서 링커의 cLogP와 상응하는 h00 접합체의 응집 사이의 상관관계 (HMW% = 고분자량 종% 로 표시).
도 20. 96시간 배양 후 래트에서 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 래트 혈장 내 ADC 응집 사이의 상관관계 (HMW% = 고분자량 종%로 표시).
도 21. 96시간 배양 후 래트에서 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 인간 혈장 내 ADC 응집 사이의 상관관계 (HMW% = 고분자량 종%로 표시).
도 22. 96시간 배양 후 래트에서 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 사이노 혈장 내 ADC 응집 간의 상관관계 (HMW% = 고분자량 종%로 표시).
도 23. 선택한 ADC 화합물에 대한 시간 경과에 따른 플램사(plamsa) 응집 결과.
도 24a 및 24b. 선택된 항체 약물 접합체 화합물로 치료한 후 호지킨 림프종 (L428)이 있는 마우스의 종양 크기.
도 25a, 25b, 및 25c. 선택된 항체 약물 접합체 화합물로 치료한 후 DELBVR(ALCL)이 있는 마우스의 종양 크기.
도 26. 선택된 항체 약물 접합체 화합물로 치료한 후 카르파스/카르파스BVR가 있는 마우스의 생존율.
도 27a 및 27b. 선택된 항체 약물 접합체 화합물로 치료한 후 카키(Caki)-1 (신장 세포 암종)가 있는 마우스의 종양 크기.
도 28. cAC10과 비교하여, mp-D-Leu-Ala-Glu-TubM 화학식으로 표시되는 약물 링커 모이어티를 갖는 펩타이드 절단 가능 유닛으로 트리펩타이드 서열 D-Leu-Ala-Glu를 갖는 일련의 4-로드 ADC로 치료한 이종 이식 모델에서 종양 부피 대 이식 후 일수.
도 29는 흑색종 세포 유래 이종이식 모델인 WM266-4, 및 치료하지 않은 마우스 및 3mg/kg의 IgG-mc-vc-PABC-MMAE (4), 3mg/kg의 hCR011-mc-vc-PABC-MMAE (4), 3mg/kg의 IgG-mp-dLAE-PABC-MMAE (4), 및 3mg/kg의 hCR011-mp-dLAE-PABC-MMAE (4)로 치료한 마우스에서 시간에 따른 종양 부피를 나타낸다.
도 30은 흑색종 세포 유래 이종이식 모델인 A2058, 및 치료하지 않은 마우스 및 3 mg/kg의 hL49-mc-vc-PABC-MMAE (4), 1 mg/kg의 hL49-mc-vc-PABC-MMAE (4), 3mg/kg의 hL49-mc-vc-PABC-MMAE (4), 및 1mg/kg의 hL49-mp-dLAE-PABC-MMAE (4)로 치료한 마우스에서 시간에 따른 종양 부피를 나타낸다.
도 31은 누드 마우스에서 디트로이트562 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다. 투여량 및 일정은 도면에 표시되어 있다.
도 32는 누드 마우스에서 BxPC3 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다. 투여량 및 일정은 도면에 표시되어 있다.
도 33은 누드 마우스에서 HPAFII 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다. 투여량 및 일정은 도면에 표시되어 있다.
도 34a 및 34b는 유방암 모델 세포주 MCF7nci를 이용한 마우스 이종이식 실험의 생체 내 결과를 나타낸다. hLIV22 항체를 mc-vc-MMAE 또는 mp-dLAE-MMAE에 접합하여 평가하였다.
도 35a 및 35b는 전립선암 모델 세포주 PC3dsmz를 이용한 마우스 이종이식 실험의 생체 내 결과를 나타낸다. hLIV22 항체를 mc-vc-MMAE 또는 mp-dLAE-MMAE에 접합하여 평가하였다.
도 36a 및 36b는 자궁경부암 모델 세포주 HeLa-J를 이용한 마우스 이종이식 실험의 생체 내 결과를 나타낸다. hLIV22 항체를 mc-vc-MMAE 또는 mp-dLAE-MMAE에 접합하여 평가하였다.
도 37은 ADC 투여에 따른 호중구 및 망상 적혈구 생성의 감소를 나타낸다. hLIV22 항체를 mc-vc-MMAE 또는 mp-dLAE-MMAE에 접합하여 평가하였다.
도 38은 SCID (CB17SC sp/sp) 마우스에서 Raji 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다.
도 39a 내지 39f는 L540cy (39a), 카르파스 299 (39b), DEL (39c), KMH2 (39d), L428 (39e), 및 DELBVR8F9 (39f) 세포주에서 비표적 항체 (h00) 및 유리 MMAE를 함유하는 접합체와 비교하여 cAC10-1006 및 cAC10-7092의 시험관 내 효능 결과를 나타낸다.
도 40은 비표적 항체 (h00)를 함유하는 접합체와 비교하여 인간 골수 골수성 전구세포에 대한 vcMMAE (cAC10-1006) 또는 dLAE-MMAE (cAC10-7092)와 접합된 키메라 항-CD30 항체 cAC10의 생체외 세포 독성을 나타낸다.
도 41a 및 41b는 수용체1-1006, 수용체1-7092, 또는 1006에 접합된 비표적 항체로 24시간 동안 처리한 MIA-PaCa2 세포에서 측정된 ATP 방출 (41a) 및 HMGB1 방출 (41b)을 나타낸다.
도 42a 내지 d는 SCID (CB17SC sp/sp) 마우스(L540cy (42a 및 42b)) 및 NSG (NOD scid 감마) 마우스 (L428 (42c) 및 KMH2 (42d))에서 L540cy 및 L428 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다.
도 43은 SCID (CB17SC sp/sp) 마우스에서 카르파스:카르파스 BVR 세포주에 대한 이종이식 연구 결과를 나타낸다.
도 44a 및 도 44b는 각각 vcMMAE (h00-1006)와 접합된 비표적 항체 및 dLAE-MMAE (h00-7092)와 접합된 비표적 항체로 처리된 신경돌기 배양물을 나타낸다. 도 44c 및 44d는 각각 50% 혈청을 첨가한 경우와 첨가하지 않은 경우의 vcMMAE (h00-1006)와 접합된 비표적 항체 및 dLAE-MMAE (h00-7092)와 접합된 비표적 항체의 데이터를 비교한 것이다.
일반
본 발명은 부분적으로, 종양 조직에서의 프로테아제 활성이 그 접합된 세포 독성 화합물의 조건부 방출을 위해 프로테아제 활성화가능 펩타이드 서열을 갖는 리간드 약물 접합체에 의해 표적화되는 암세포에 대한 추가적인 선택성을 제공하기 위해 비표적 정상 조직과 충분히 다르다는 예상치 못한 발견에 기초하고 있다. 이러한 차이는 본원에 개시된 프로테아제 절단가능 펩타이드 서열에 의해, 이러한 서열이 리간드 약물 접합 화합물의 펩타이드 절단가능 링커 유닛에 통합될 때 이용된다. 일부 경우, 이러한 특성을 갖는 서열은 유리 세포 독성 화합물을 방출하기 위한 단백질 분해에 대한 생체 분포 및/또는 민감도가 정상 조직에 비해 종양 조직에 유리한 접합 화합물을 제공하는 것으로 여겨진다.
본 명세서에 사용된 섹션 제목은 정리 목적으로만 사용되며, 기술된 주제를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
본원에 기술되거나 참조되는 기술 및 절차는 일반적으로 당업자에 의해 잘 이해되고, 예를 들어, Sambrook 등, Molecular Cloning: A Laboratory Manual 4th edition (2012) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor N.Y.; Current Protocols In Molecular Biology (F. M. Ausubel, 등 eds., (2003)); the series METHODS IN ENZYMOLOGY (Academic Press, Inc.); PCR 2: A Practical Approach (M. J. MacPherson, B. D. Hames and G. R. Taylor eds. (1995)); Greenfield, ed. (2013) Antibodies, A Laboratory Manual, 2nd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J. E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R. I. Freshney), ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J. P. Mather and P. E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture Laboratory Procedures (A. Doyle, J. B. Griffiths, and D. G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley and Sons; Handbook of Experimental Immunology (D. M. Weir and C. C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J. M. Miller and M. P. Calos, eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis 등, eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J. E. Coligan 등, eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C. A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: A Practical Approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using Antibodies: A Laboratory Manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995); Cancer: Principles and Practice of Oncology (V. T. DeVita 등, eds., J.B. Lippincott Company, 1993); 및 이들의 업데이트된 버전과 같이 분자 클로닝에 기술된 널리 이용되는 방법론과 같은 종래의 방법론을 사용하여 일반적으로 이용되고 있다. 이 단락의 전술한 각 참조는 그 전체가 참조로 본 문서에 통합된다.
1. 정의
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시와 관련된 당업자에게 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 예를 들어, the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 5th ed., 2013, Academic Press; and the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, 2nd ed., 2006, Oxford University Press는 본 공개에 사용된 많은 용어에 대한 일반 사전을 숙련자에게 제공한다.
문맥에서 달리 요구되거나 명시적으로 표시되지 않는 한, 단수 용어는 복수를 포함하며, 복수 용어는 단수를 포함한다.
본 명세서에 기술된 본 발명의 측면 및 실시양태는 "포함하는", "구성되는" 및/또는 "본질적으로 구성되는" 측면 및 실시양태를 포함한다는 것으로 이해된다.
본 명세서에서 사용되는 "및/또는"이라는 용어는 특정 기능 또는 구성 요소 각각이 다른 기능 또는 구성 요소를 포함하거나 포함하지 않고 구체적으로 개시되는 것으로 간주되어야 한다. 따라서, 본 명세서에서 "A 및/또는 B"와 같은 문구에서 사용되는 "및/또는"이라는 용어는 "A 및 B", "A 또는 B", "A" (단독) 및 "B" (단독)를 포함하도록 의도된다. 마찬가지로, "A, B 및/또는 C"와 같은 문구에서 사용되는 "및/또는"이라는 용어는 다음 각 측면을 포괄하는 것으로 의도된다: A, B 및/또는 C; A, B 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A (단독); B (단독); 및 C (단독).
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어는 아래에 정의된 의미를 갖는다. 예를 들어, 상호 배타적인 요소 또는 옵션을 포함함으로써 달리 금기되거나 암시되지 않는 한, 이러한 정의들 및 본 명세서 전체에서, 용어 "a" 및 "an"은 하나 이상을 의미하고, 용어 "또는"은 문맥에 의해 허용되는 경우 및/또는 이를 의미한다. 따라서, 본 명세서 및 첨부된 청구범위에 제시된 바와 같이, 문맥에서 달리 명시되지 않는 한, 단수 형태인 "a", "an" 및 "the"는 복수의 참조항을 포함한다. 본 개시의 여러 위치에서, 예를 들어, 개시된 실시양태 또는 청구범위에서, 하나 이상의 특정 구성 요소, 요소 또는 단계를 "포함하는" 화합물, 조성물, 또는 방법을 참조한다. 본 발명의 실시양태는 또한 특정 구성 요소, 요소 또는 단계로 구성되거나, 그러한 구성 요소, 요소 또는 단계로 본질적으로 구성되는 화합물, 조성물, 조성물 또는 방법을 구체적으로 포함한다. "포함되는"이라는 용어는 "포함하는"이라는 용어와 상호 교환적으로 사용되며 동등한 용어로 명시된다. 예를 들어, 구성 요소 또는 단계를 "포함하는" 공개된 조성물, 장치, 제조물 또는 방법은 개방형이며, 해당 조성물 또는 방법과 추가 구성 요소(들) 또는 단계(들)를 포함하거나 이에 대한 것으로 읽혀진다. 그러나, 이러한 용어는 개시된 조성물, 장치, 제조물 또는 방법의 의도된 목적을 위한 기능을 파괴할 수 있는 기록되지 않은 요소를 포함하지 않는다. 마찬가지로, 구성 요소 또는 단계로 "구성"되는 개시된 조성물, 장치, 제조물 또는 방법은 폐쇄적이며, 상당한 양의 추가 구성 요소(들) 또는 추가 단계(들)를 갖는 해당 조성물 또는 방법을 포함하거나 이에 대한 것으로 읽히지 않는다. 또한, "본질적으로 구성되는"이라는 용어는 본 명세서에 추가로 정의된 바와 같은 의도된 목적상 개시된 조성물, 장치, 제조물 또는 방법의 기능에 중대한 영향을 미치지 않는 기재되지 않은 요소의 포함을 인정한다. 본 명세서에 사용된 섹션 제목은 조직적인 목적만을 위한 것이며, 기술된 주제를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 달리 명시되지 않는 한, 질량 분석법, NMR, HPLC, 단백질 화학, 생화학, 재조합 DNA 기술 및 약리학의 통상적인 방법이 사용된다.
"약"이라는 용어는 당업자에 의해 결정되는 특정 값 또는 조성물에 대해 허용 가능한 오차 범위 내에 있는 값 또는 조성을 의미하며, 이는 부분적으로 값 또는 조성물이 측정되거나 결정되는 방법, 즉 측정 시스템의 한계에 따라 달라질 것이다. 당업자가 이해할 수 있는 바와 같이, 본 명세서에서 값 또는 파라미터에 대한 "약"의 언급은 해당 값 또는 파라미터 자체에 관한 실시양태를 포함 (및 설명)한다. 예를 들어, "약 X"를 지칭하는 설명에는 "X"에 대한 설명이 포함된다. 문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 화합물 또는 조성물의 특정 특성을 설명하기 위한 수치 또는 값의 범위와 관련하여 본 명세서에서 사용되는 "약"이라는 용어는 특정 특성을 설명하면서 당업자에게 합리적으로 여겨지는 범위까지 그 값 또는 값의 범위의 편차가 있을 수 있음을 나타낸다. 합리적인 편차에는 특정 특성을 측정, 결정 또는 도출하는 데 사용된 기기(들)의 정확도 또는 정밀도 범위 내에 있는 편차가 포함된다. 특히, 이 문맥에서 사용되는 "약"이라는 용어는 특정 특성을 설명하면서 수치 값 또는 값 범위가 인용된 값 또는 값 범위의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.9%, 0.8%, 0.7%, 0.6%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 또는 0.01%, 일반적으로 10% 내지 0.5%, 더 일반적으로 5% 내지 1%까지 달라질 수 있음을 나타낸다.
본 명세서에 추가로 정의된 바와 같이, 리간드 약물 접합체 조성물 내의 약물 링커 모이어티의 평균 수를 나타내는 아래첨자 P와 관련하여, "약"이라는 용어는 크기 배제, HIC 크로마토그래피 또는 HPLC-MS의 표준 방법에 의해 결정되는 해당 조성물 내의 리간드 약물 접합체 화합물의 분포로부터 해당 값을 결정하기 위해 당업자에게 허용되는 불확실성을 반영한다.
본 명세서에서 사용된 "본질적으로 유지한다", "본질적으로 유지하는" 및 이와 유사한 용어는 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 감지 가능하게 변경되지 않았거나 관련 구조의 화합물 또는 조성물 또는 모이어티의 동일한 활성, 특성 또는 속성 결정의 실험적 오차 범위 내에 있는 화합물 또는 그 조성물 또는 모이어티의 속성, 특성, 기능 또는 활성을 지칭한다.
"실질적으로 유지된다", "실질적으로 유지하는" 및 이와 유사한 용어는 문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 문서에서 사용되는 경우 다른 화합물 또는 조성물 또는 관련 구조의 모이어티의 동일한 물리적 속성의 결정과 통계적으로 다를 수 있지만, 그러한 차이가 해당 활성 또는 속성을 평가하기 위한 적절한 생물학적 시험 시스템에서 생물학적 활성 또는 약리학적 속성에서 통계적으로 유의미하거나 의미 있는 차이로 해석되지 않는 (즉, 생물학적 활성 또는 속성이 유지되거나 본질적으로 유지됨) 화합물 또는 조성물 또는 그 모이어티의 물리적 속성 또는 특성의 측정값을 지칭한다. 따라서 "실질적으로 유지된다"는 문구는 화합물 또는 조성물의 물리적 특성 또는 특성이 해당 물리적 속성 또는 특성과 명시적으로 연관된 생화학적 또는 약리학적 속성 또는 생물학적 활성에 미치는 영향을 참조하여 만들어졌다.
"무시할 만한 정도로", "무시할 만한" 및 이와 유사한 용어는 문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, HPLC 분석으로 정량화할 수 있는 수준 이하의 불순물 양을 의미한다. 문맥에 따라 이러한 용어는 측정된 값 또는 결과 간에 통계적으로 유의미한 차이가 관찰되지 않거나 해당 값을 얻는 데 사용된 기기의 실험 오차 범위 내에 있음을 대안적으로 의미할 수도 있다. 실험적으로 결정된 파라미터 값의 미미한 차이가 해당 파라미터를 특징으로 하는 불순물이 미미한 양으로 존재한다는 것을 의미하지는 않는다.
본 명세서에서 사용되는 "주로 함유하는", "주로 갖는" 및 이와 유사한 용어는, 문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 혼합물의 주성분을 지칭한다. 혼합물이 두 가지 구성 요소로 이루어진 경우, 주요 구성 요소는 혼합물의 50 중량% 초과를 나타낸다. 세 가지 이상의 구성 요소가 혼합된 경우 주요 구성 요소는 혼합물에서 가장 많은 양으로 존재하는 구성 요소이고 혼합물 질량의 대부분을 차지할 수도 있고 차지하지 않을 수도 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어인 "전자 인출기"는 문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한 유도적으로 및/또는 공명 중 더 우세한 것 (즉, 작용기 또는 원자는 공명을 통해 전자를 공여할 수 있지만 전반적으로 유도적으로 전자를 인출할 수 있음)을 통해 결합된 원자로부터 전자 밀도를 끌어내는 작용기 또는 전자 음의 원자를 지칭하며, 음이온 또는 전자가 풍부한 모이어티를 안정화시키는 경향이 있다. 전자 인출 효과는 일반적으로 감쇠된 형태이기는 하지만 유도적으로 전자 인출기 (EWG)에 의해 전자가 결핍된 결합 원자에 부착된 다른 원자에 전달되어 더 멀리 떨어진 반응성 중심의 전자 밀도를 감소시킨다.
전자 인출기 (EWG)는 일반적으로 -C(=O)R', -CN, -NO2, -CX3, -X, -C(=O)OR', -C(=O)NH2, -C(=O)N(R')Rop, -C(=O)R', -C(=O)X, -S(=O)2Rop, -S(=O)2OR', -SO3H2, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R')Rop, -PO3H2, -P(=O)(OR')(ORop)2, -NO, -NH2, -N(R')(Rop), -N(Rop)3 +, 및 이들의 염으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 X는 -F, -Br, -Cl, 또는 -I이고, Rop는, 각 발생시, 선택적 치환체에 대해 이전에 설명한 군에서 독립적으로 선택되고 R'은 -H 또는 Rop이고, 여기서 Rop는 앞서 정의된 것이다. 일부 측면에서, 각 Rop는 독립적으로 C1-C12 알킬, C1-C8 알킬, C1-C6 알킬 또는 C1-C4 알킬이거나, 또는 C1-C6 알킬 및 임의로 치환된 페닐로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, R'는 수소이다. EWG는 치환에 따라 아릴 (예를 들어, 페닐) 또는 헤테로아릴일 수도 있고 특정 전자가 결핍된 헤테로아릴기 (예를 들어, 피리딜)일 수도 있다. 따라서, 일부 측면에서, "전자 인출기"는 전자 결핍 C5-C24 헤테로아릴 및 전자 인출 치환체로 치환된 C6-C24 아릴을 추가로 포함한다. 보다 일반적으로, 전자 인출기는 -C(=O)R', -CN, -NO2, -CX3, 및 -X로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, 여기서 X는 -F 및 -Cl로 이루어진 군에서 일반적으로 선택되는 할로겐이고, R'는 H, C1-C6 알킬 또는 C1-C4 알킬이다. 치환체에 따라 임의로 치환된 알킬 모이어티도 전자 인출기일 수 있으며, 이러한 경우 이러한 측면은 전자 인출기라는 용어에 포함될 수 있다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "전자 공여기"는 유도적으로 및/또는 공명 중 더 우세한 것 (즉, 작용기 또는 원자는 유도적으로 전자를 인출할 수 있지만 전체적으로는 공명을 통해 전자를 공여할 수 있음)을 통해 결합된 원자의 전자 밀도를 증가시키는 작용기 또는 전기 양성 원자를 지칭하며, 양이온 또는 전자 빈약 시스템을 안정화시키는 경향이 있다. 전자 공여 효과는 일반적으로 공명을 통해 전자 공여기 (EDG)에 의해 전자가 풍부해진 결합 원자에 부착된 다른 원자에 전달되어 더 멀리 떨어진 반응성 중심의 전자 밀도를 증가시킨다. 전형적으로, 전자 공여기는 -OH, -OR', -NH2, -NHR', 및 N(R')2로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 각 R'은 C1-C12 알킬, 일반적으로 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택된다. 치환체에 따라, C6-C24 아릴, C5-C24 헤테로아릴, 또는 불포화 C1-C12 알킬 모이어티도 전자 공여기일 수 있으며, 일부 측면에서, 이러한 모이어티는 전자 공여기라는 용어에 포함된다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "화합물"은, 문맥에서 그러한 염 형태가 제외되어야 한다는 것이 명확하지 않은 한, 명시적으로 언급되거나 언급되지 않는 것과 상관없이 명명되거나 구조로 표현되는 화합물 자체 및 그 염 형태(들)를 지칭하고 포함한다. 화합물 염에는 양쪽성 이온염 형태 및 유기성 양이온 또는 무기성 양이온을 갖는 산 첨가 및 염기 첨가 염 형태 및 동일하거나 다른 두 개 이상의 양이온을 포함하는 염 형태가 포함된다. 일부 측면에서, 염 형태는 화합물의 약학적으로 허용되는 염 형태이다. "화합물"이라는 용어는 화합물의 카르보닐기가 수화되어 젬-디올을 형성하는 경우와 같이 용매가 화합물과 비공유로 회합되거나 가역적으로 화합물과 공유로 회합되는 화합물의 용매화물 형태를 추가로 포함한다. 용매화물 형태에는 화합물 자체와 그 염 형태(들)가 포함되며 수화물을 포함한 반용매화물, 일용매화물, 이용매화물이 포함되며; 화합물이 둘 이상의 용매 분자와 회합할 수 있는 경우, 둘 이상의 용매 분자는 동일하거나 상이할 수 있다. 경우에 따라, 본 발명의 화합물은 상기 형태 중 하나 이상의 형태, 예를 들어, 염 및 용매화물에 대한 명시적 참조를 포함할 것이며, 이는 화합물의 고체상 형태를 의미하지 않지만, 이러한 언급은 단지 강조를 위한 것이며, 위에서 식별된 다른 형태를 배제하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 또한, 화합물 또는 리간드 약물 접합체 조성물의 염 및/또는 용매화물 형태에 대한 명시적 언급이 없는 경우, 문맥상 그러한 염 및/또는 용매화물 형태가 배제되어야 한다는 것이 명확하지 않은 한, 그러한 누락이 화합물 또는 접합체의 염 및/또는 용매화물 형태(들)를 배제하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "광학 이성질체"는, 동일한 원자 연결성을 갖지만 반대 입체 화학적 배열(들)에서 하나 이상의 키랄 중심에 의해 구조적으로 상이한 참조 화합물과 비교하여 관련 화합물을 지칭한다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "모이어티"는 분자 또는 화합물의 특정 세그먼트, 단편 또는 작용기를 의미한다. 화학 모이어티는 때때로 분자, 화합물 또는 화학식에 포함되거나 (즉, 치환기 또는 가변기에) 부가되는 화학적 실체로 표시된다.
문맥상 달리 명시되지 않거나 암시되지 않는 한, 주어진 탄소 원자 범위에 의해 본 명세서에 기술된 치환기 그룹 또는 모이어티에 대해, 지정된 범위는 임의의 개별 탄소 원자 수가 기술됨을 의미한다. 따라서, 예를 들어, "임의로 치환된 C1-C4 알킬" 또는 "임의로 치환된 C2-C6 알케닐"에 대한 언급은 각각 구체적으로 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환된 1, 2, 3, 또는 4개의 탄소 알킬 모이어티가 존재하거나, 또는 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환된 2, 3, 4, 5, 또는 6 탄소 알케닐 모이어티가 존재함을 의미한다. 이러한 모든 숫자 지정은 개별 탄소 원자 그룹을 모두 명시적으로 개시하기 위한 것이다; 따라서 "임의로 치환된 C1-C4 알킬"은 치환 또는 비치환에 상관없이, 이들의 모든 위치 이성질체를 포함하여 메틸, 에틸, 3-탄소 알킬, 및 4-탄소 알킬을 포함한다. 따라서, 알킬 모이어티가 치환된 경우, 숫자 지정은 치환되지 않은 기본 모이어티를 지칭하며 해당 기본 모이어티의 치환체에 존재할 수 있는 기본 모이어티에 직접 부착되지 않은 탄소 원자를 포함하기 위한 것이 아니다. 주어진 범위의 탄소 원자로 식별되는 본 명세서에 정의된 에스테르, 카르보네이트, 카르바메이트, 및 우레아의 경우, 지정된 범위는 각 해당 작용기의 카르보닐 탄소를 포함한다. 따라서 C1 에스테르는 포르메이트 에스테르를 지칭하고 C2 에스테르는 아세테이트 에스테르를 지칭한다.
본 명세서에 기재된 유기 치환체, 모이어티 및 기, 및 본 명세서에 기재된 기타 임의의 다른 모이어티에 대해, 불안정한 모이어티가 본 명세서에 기술된 하나 이상의 용도에 대해 충분한 화학적 안정성을 갖는 화합물을 제조하기 위해 사용할 수 있는 일시적인 종인 경우를 제외하고, 불안정한 모이어티를 제외한다. 여기에 제공된 정의에 따라 작동하여 5가 탄소를 갖게 되는 치환체, 모이어티 또는 기는 구체적으로 제외된다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어로서, 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, "알킬"은 메틸 또는 인접한 탄소 원자의 집합을 지칭하고, 그 중 하나는 1가이고, 여기서 탄소 원자 중 하나 이상이 포화되어 있으며 (즉, 하나 이상의 sp3 탄소를 포함함)이고 일반, 이차, 3차 또는 사이클릭 배열, 즉 선형, 분지형, 사이클릭 배열 또는 이들의 일부 조합으로 공유적으로 연결되어 있다. 인접한 포화 탄소 원자가 사이클릭 배열에 있는 경우, 이러한 알킬 모이어티는 일부 측면에서 본 명세서에 추가로 정의된 카르보사이클릴로 지칭된다.
알킬 모이어티 또는 기를 알킬 치환체로 지칭하는 경우, 마르쿠시 구조 또는 이와 회합된 다른 유기 모이어티에 대한 알킬 치환체는 메틸 또는 알킬 치환체의 sp3 탄소를 통해 구조 또는 모이어티에 공유적으로 부착된 연속적인 탄소 원자의 사슬이다. 따라서 본 명세서에서 사용되는 알킬 치환체는 적어도 하나의 포화 모이어티를 함유하며, 사이클로알킬 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티 또는 군으로 치환되거나 알케닐 또는 알키닐 모이어티로 치환되어 불포화 알킬을 생성할 수도 있다. 따라서, 임의로 치환된 알킬 치환체는 추가로 1, 2, 3개 이상의 독립적으로 선택된 이중 결합 및/또는 삼중 결합을 함유할 수 있거나, 알케닐 또는 알키닐 모이어티 또는 이들의 일부 조합으로 치환되어 불포화 알킬 치환체를 정의할 수 있으며, 본 명세서에 기술된 바와 같이 적절한 선택적 치환체를 포함하는 다른 모이어티로 치환될 수 있다. 포화 알킬의 탄소 원자 수는 다양할 수 있으며, 일반적으로 1 내지 50, 1 내지 30 또는 1 내지 20, 더 일반적으로 1 내지 8 또는 1 내지 6이고, 불포화 알킬 모이어티 또는 기는 일반적으로 3 내지 50, 3 내지 30 또는 3 내지 20, 더 일반적으로 3 내지 8 사이에서 다양하다.
포화 알킬 모이어티는 포화, 비환 탄소 원자 (즉, 비-사이클릭 SP3 탄소)를 함유하고 SP2 또는 SP 탄소 원자는 함유하지 않지만, 본 명세서에 기술된 선택적 치환체로 치환될 수 있되, 단 선택적 치환체가 본 명세서에 정의된 기본 단위인 경우를 제외하고, 탄소 원자 수에서 치환된 기본 알킬 모이어티의 동일성에 영향을 미칠 수 있기 때문에 그러한 치환은 선택적 치환체의 SP3, SP2 또는 SP 탄소 원자를 통하지 않는다. 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "알킬"이라는 용어는 포화 비-사이클릭 탄화수소 라디칼을 나타내며, 여기서 탄화수소 라디칼은 표시된 수의 공유적으로 연결된 포화 탄소 원자를 가지므로 "C1-C6 알킬" 또는 "C1-C6 알킬"과 같은 용어는 포화 탄소 원자 1개 (즉, 메틸) 또는 2, 3, 4, 5, 6개의 연속적인 비-사이클릭 포화 탄소 원자를 함유하는 알킬 모이어티 또는 기를 의미하며, "C1-C8 알킬"은 1개의 포화 탄소 원자 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개의 연속적인 포화, 비-사이클릭 탄소 원자를 갖는 알킬 모이어티 또는 기를 지칭한다. 일반적으로 포화 알킬은 인접한 탄소 사슬에 sp2 또는 sp 탄소 원자를 함유하지 않는 C1-C6 또는 C1-C4 알킬 모이어티이고, 후자는 때때로 저급 알킬이라고도 하며, 일부 측면에서는 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우 인접한 탄소 사슬에 sp2 또는 sp 탄소 원자를 함유하지 않는 1 내지 8개의 연속적인 비-사이클릭 sp3 탄소 원자를 갖는 포화 C1-C8 알킬 모이어티를 지칭한다. 다른 측면에서, 인접한 탄소 원자의 범위가 "알킬"이라는 용어를 정의하지만 포화 또는 불포화로 지정하지 않을 경우, 해당 용어가 지정된 범위를 가진 포화 알킬과 범위의 하한이 탄소 원자 2개 증가된 불포화 알킬을 포함한다. 예를 들어, '포화 알킬에 국한되지 않는 C1-C8 알킬'이라는 용어는 포화 C1-C8 알킬 및 C3-C8 불포화 알킬을 포함한다.
포화 알킬 치환체, 모이어티 또는 기가 특정될 때, 종은 모 알칸 (즉, 알킬 모이어티는 1가임)에서 수소 원자를 제거하여 유도되는 것을 포함하고 메틸, 에틸, 1-프로필 (n-프로필), 2-프로필 (이소-프로필, -CH(CH3)2), 1-부틸 (n-부틸), 2-메틸-1-프로필 (이소-부틸, -CH2CH(CH3)2), 2-부틸 (sec-부틸, -CH(CH3)CH2CH3), 2-메틸-2-프로필 (t-부틸, -C(CH3)3), 아밀, 이소아밀, sec-아밀 및 다른 선형 및 분지쇄 알킬 모이어티를 포함할 수 있다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 본 명세서에서 사용되는 용어로서 "알킬렌"은 치환 또는 비치환된 포화, 분지 또는 직쇄 탄화수소 이라디칼을 지칭하며, 여기서 탄소 원자 중 하나 이상이 포화 (즉, 하나 이상의 sp3 탄소를 포함함)되고, 1 내지 50 또는 1 내지 30개 범위의 명시된 탄소 원자 수, 전형적으로 1 내지 20 또는 1 내지 12개의 탄소 원자, 더 전형적으로 1 내지 8, 1 내지 6, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖고, 모 알칸의 동일하거나 다른 두 개의 포화 (즉, sp3) 탄소 원자에서 2개의 수소 원자를 제거하여 유도된 2개의 라디칼 중심을 갖는다 (즉, 2가임). 일부 측면에서, 알킬렌 모이어티는 수소 원자가 포화 탄소 중 다른 탄소 또는 알킬 라디칼의 라디칼 탄소로부터 제거되어 디라디칼을 형성하는 본 명세서에 기술된 바와 같은 알킬 라디칼이다. 다른 측면에서, 알킬렌 모이어티는 모 알킬 모이어티의 포화 탄소 원자에서 수소 원자를 제거함으로써 유도되는 2가 모이어티이거나 추가로 포함되며, 제한 없이 메틸렌 (-CH2-), 1,2-에틸렌 (-CH2CH2-), 1,3-프로필렌 (-CH2CH2CH2-), 1,4-부틸렌 (-CH2CH2CH2CH2-), 및 유사한 디라디칼으로 예시된다. 전형적으로, 알킬렌은 sp3 탄소만을 함유하는 분지쇄 또는 직쇄 탄화수소이며 (즉, 라디칼 탄소 원자에도 불구하고 완전히 포화됨), 일부 측면에서는 치환되지 않는다. 다른 측면에서, 알킬렌은 하나 이상의 이중 및/또는 삼중 결합 작용기, 일반적으로 1 또는 2개의 이러한 작용기, 더 일반적으로 1개의 형태로 불포화(들) 내부 부위를 함유하므로, 불포화 알킬렌 모이어티의 말단 탄소는 1가 sp3 탄소 원자이다. 여전히 다른 측면에서, 알킬렌은 선택적 치환체가 여기에 정의된 기본 단위인 경우는 제외하고, 생성된 치환된 알킬렌이 치환되지 않은 알킬렌에 비해 인접한 비방향족 탄소 원자의 수만큼 다를 경우 알킬, 아릴알킬, 알케닐, 알키닐 및 기타 모이어티를 제외하고, 포화 알킬렌 모이어티의 포화 탄소 원자(들) 또는 불포화 알킬렌 모이어티의 포화 및/또는 불포화 탄소 원자(들)에서, 선택적 치환체에 대해 본 명세서에 정의된 바와 같이 1 내지 4, 일반적으로 1 내지 3, 또는 1 내지 2개의 치환체로 치환된다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "카르보사이클릴"은 그 자체 또는 다른 용어의 일부로서 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 트리사이클릭 고리 시스템의 라디칼을 지칭하며, 여기서 고리 시스템을 형성하는 각 원자 (즉, 골격 원자)는 탄소 원자이며, 여기서 사이클릭 고리 시스템의 각 고리에서 이들 탄소 원자 중 하나 이상이 포화 (즉, 하나 이상의 sp3 탄소를 포함함)되어 있다. 따라서 카르보사이클릴은 포화 탄소의 고리형 배열이지만 불포화 탄소 원자(들)를 함유할 수도 있으므로 카르보사이클릴 고리는 포화 또는 부분적으로 불포화되거나 방향족 모이어티와 융합될 수 있고, 여기서, 사이클로알킬 및 방향족 고리에 대한 융합점은 카르보사이클릴 모이어티의 인접한 불포화 탄소 및 방향족 모이어티의 인접한 방향족 탄소 원자에 대한 것이다.
달리 명시되지 않는 한, 카르보사이클릴은 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴 등에 대해 설명된 모이어티로 치환 (즉, 임의로 치환된)되거나 다른 사이클로알킬 모이어티로 치환될 수 있다. 사이클로알킬 모이어티, 기 또는 치환체는 사이클로프로필, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아다만틀리 또는 사이클릭 고리 시스템에 탄소 원자만 있는 다른 사이클릭 모이어티를 포함한다.
카르보사이클릴이 마르쿠시 기 (즉, 치환체)으로 사용될 때, 카르보사이클릴은 카르보사이클릴 모이어티의 카르보사이클릭 고리 시스템에 관여하는 탄소 원자를 통해 회합되는 마르쿠시식 또는 다른 유기 모이어티에 부착되고, 단, 탄소는 방향족 탄소가 아니다. 카르보사이클릴 치환체를 포함하는 알켄 모이어티의 불포화 탄소 원자가 회합되는 마르쿠시식에 부착될 때 카르보사이클릴은 때때로 사이클로알케닐 치환체라고 불린다. 카르보사이클릴 치환체의 탄소 원자 수는 해당 카르보사이클릴 고리 시스템의 총 골격 원자 수에 의해 정의된다. 이 수는 다양할 수 있으며, 달리 명시되지 않는 한, 일반적으로 3 내지 50, 1 내지 30 또는 1 내지 20 범위이며, 더 일반적으로 3 내지 8 또는 3 내지 6 범위이다: 예를 들어, C3-C8 카르보사이클릴은 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 카르보사이클릭 탄소 원자를 함유하는 카르보사이클릴 치환체, 모이어티 또는 기를 의미하고 C3-C6 카르보사이클릴은 3, 4, 5 또는 6개의 카르보사이클릭 탄소 원자를 함유하는 카르보사이클릴 치환체, 모이어티 또는 기를 의미한다. 카르보사이클릴은 모 사이클로알칸 또는 사이클로알켄의 고리 원자에서 하나의 수소 원자를 제거하여 유도될 수 있다. 대표적인 C3-C8 카르보사이클릴은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜타디에닐, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 1,3-사이클로헥사디에닐, 1,4-사이클로헥사디에닐, 사이클로헵틸, 1,3-사이클로헵타디에닐, 1,3,5-사이클로헵타트리에닐, 사이클로옥틸, 및 사이클로옥타디에닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 카르보사이클릴 치환체, 모이어티 또는 기는 전형적으로 3, 4, 5, 6, 7, 8개의 탄소 원자를 가질 수 있고, 엑소 또는 엔도-사이클릭 이중 결합 또는 엔도-사이클릭 삼중 결합 또는 이 둘의 조합을 함유할 수 있으며, 여기서 엔도-사이클릭 이중 결합 또는 삼중 결합 또는 이 둘의 조합은 4n + 2 전자의 사이클릭 공액 시스템을 형성하지 않는다. 바이사이클릭 고리 시스템은 두 개의 탄소 원자를 공유할 수 있고 트리사이클릭 고리 시스템은 총 3개 또는 4개의 탄소 원자를 공유할 수 있다. 일부 측면에서, 카르보사이클릴은 하나 이상, 1 내지 4, 일반적으로 1 내지 3, 또는 1 또는 2개의 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 및 알킬아릴에 대해 본 명세서에 기술된 모이어티, 및/또는 선택적 치환체에 대해 본 명세서에서 기술된 치환체(들)을 포함한 다른 모이어티로 치환 (즉, 임의로 치환)될 수 있는 C3-C8 또는 C3-C6 카르보사이클릴이고, 일부 측면에서는 치환되지 않는다. 다른 측면에서, 사이클로알킬 모이어티, 기 또는 치환체는 사이클로프로필, 사이클로펜틸 및 사이클로헥실로 이루어진 군에서 선택된 C3-C6 사이클로알킬이거나, 또는 해당 기를 포함하고, 사이클릭 고리 시스템에 탄소 원자가 8개 이하인 다른 사이클릭 모이어티를 추가로 포함하는 C3-C8 사이클로알킬이다. 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우 카르보사이클릴 모이어티, 기 또는 치환체는 카르보실릭(carbocylic) 고리 시스템에 3 내지 8개의 탄소 원자를 가지고 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로 본 명세서에서 사용되는 용어로서 "카르보사이클로"는 상기 정의된 바와 같이 임의로 치환된 카르보사이클릴을 지칭하며, 여기서 그 사이클로알킬 고리 시스템의 다른 수소 원자가 제거되고 (즉, 2가임), C3-C50 또는 C3-C30 카르보사이클로, 일반적으로 C3-C20 또는 C3-C12 카르보사이클로, 더 일반적으로 C3-C8 또는 C3-C6 카르보사이클로이고, 일부 측면에서 치환되지 않거나 임의로 치환된 C3, C5 또는 C6 카르보사이클로이다. 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우 카르보사이클로 모이어티, 기 또는 치환체는 카르보실릭(carbocylic) 고리 시스템에 3 내지 8개의 탄소 원자를 가지고 있다.
일부 측면에서, 다른 수소 원자는 사이클로알킬의 1가 탄소 원자에서 제거되어 2가 탄소 원자, 어떤 경우에는, 해당 카르보사이클릭 탄소 원자로 알킬 모이어티를 방해하는 스피로 탄소 원자를 제공한다. 이러한 경우, 스피로 탄소 원자는 방해된 알킬 모이어티의 탄소 원자 수 및 카르보사이클로가 알킬 모이어티에 통합된 것으로 표시된 카르보사이클로 고리 시스템에 기인한다. 이러한 측면에서, 카르보사이클로 모이어티, 기 또는 치환체는 스피로 고리 시스템의 형태인 C3-C6 카르보사이클로이고 사이클로프로프-1,1-디일, 사이클로부틸-1,1-디일, 사이클로펜트-1,1-디일 및 사이클로헥스-1,1-디일로 이루어진 군에서 선택되거나, 또는 해당 기를 포함하며 사이클릭 고리 시스템에 탄소 원자가 8개 이하인 다른 2가 사이클릭 모이어티에 의해 더 포함되는 C3-C8 카르보사이클로이다. 카르보사이클로는 포화 또는 불포화 카르보사이클로일 수 있고/있거나, 카르보사이클릴 모이어티에 대해 설명한 것과 동일한 방식으로 치환 또는 치환되지 않을 수 있다. 불포화인 경우, 카르보사이클로 모이어티의 하나 또는 둘 다의 1가 탄소 원자는 동일하거나 다른 이중 결합 작용기의 sp2 탄소 원자이거나 둘 다의 1가 탄소 원자는 인접하거나 인접하지 않은 sp3 탄소 원자일 수 있다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "알케닐"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 하나 이상의 이중 결합 작용기 (예를 들어, -CH=CH- 모이어티) 또는 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 이상, 일반적으로 그러한 작용기 중 1, 2 또는 3, 더 일반적으로 하나의 작용기를 포함하는 유기 모이어티, 치환체 또는 기를 지칭하고, 일부 측면에서 아릴 모이어티 또는 페닐과 같은 기로 치환 (즉, 임의로 치환됨)되거나, 비방향족 연결된 일반, 2차, 3차 또는 사이클릭 탄소 원자, 즉 알케닐 치환체, 모이어티 또는 기가 비닐 모이어티 (예를 들어 -CH=CH2 모이어티)가 아닌 경우, 기본 모이어티의 일부로서 선형, 분지형, 사이클릭 또는 이들의 임의의 조합을 함유할 수 있다. 복수의 이중 결합을 갖는 알케닐 모이어티, 기 또는 치환체는 이중 결합이 연속적으로 배열되거나 (즉, 1,3-부타디에닐 모이어티) 또는 하나 이상의 개재 포화 탄소 원자 또는 이들의 조합과 비연속적으로 배열될 수 있으며, 단, 이중 결합의 사이클릭, 연속 배열은 4n + 2 전자의 사이클릭 공액 시스템을 형성하지 않는다 (즉, 방향족이 아님).
알케닐 모이어티, 기 또는 치환체는 탄소 원자가 2가이고 회합된 다른 유기 모이어티 또는 마르쿠시 구조에 이중 결합된 적어도 하나의 sp2 탄소 원자를 함유하거나, 또는 sp2 탄소 원자 중 하나가 1가이고 회합된 다른 유기 모이어티 또는 마르쿠시 구조에 단일 결합된, 적어도 두 개의 sp2 탄소 원자가 서로 접합되어 있는 것을 함유한다. 일반적으로 알케닐이 마르쿠시 기로 사용될 때 (즉, 치환체인 경우) 알케닐은 마르쿠시식 또는 알케닐 모이어티의 알켄 작용기의 sp2 탄소를 통해 회합된 다른 유기 모이어티에 단일 결합된다. 일부 측면에서, 알케닐 모이어티가 지정된 경우, 종은 본 명세서에 기술된 임의로 치환된 알킬 또는 카르보사이클릴, 하나 이상의 엔도 이중 결합을 가지며, 그 중 sp2 탄소 원자가 모 알켄 화합물의 sp2 탄소로부터 수소 원자를 제거하여 유도된 1가 및 1가 모이어티인, 기 모이어티 또는 치환체 중 어느 하나에 대응하는 것을 포함한다. 이러한 1가 모이어티는 제한 없이 비닐 (-CH=CH2), 알릴, 1-메틸비닐, 부테닐, 이소-부테닐, 3-메틸-2-부테닐, 1-펜테닐, 사이클로펜테닐, 1-메틸-사이클로펜테닐, 1-헥세닐, 3-헥세닐, 및 사이클로헥세닐로 예시된다. 일부 측면에서, 알케닐이라는 용어는 이들 및/또는 다른 선형, 사이클릭 및 분지쇄의, sp2 탄소 원자 중 하나가 1가인 적어도 하나의 이중 결합 작용기를 함유하는 모든 탄소 함유 모이어티를 포함한다.
알케닐 모이어티 내의 탄소 원자 수는 알케닐 치환체로 정의되는 알켄 작용기(들)의 sp2 탄소 원자 수 및 알케닐 모이어티가 가변기인 다른 모이어티 또는 마르쿠시 구조의 임의의 탄소 원자 및 알케닐 모이어티에 대한 임의의 선택적 치환체의 탄소 원자를 포함하지 않는 이들 각각의 sp2 탄소에 첨가된 비-방향족 탄소 원자의 총 수로 정의된다. 이 수는 이중 결합 작용기가 마르쿠시 구조 (예를 들어, =CH2)에 이중 결합된 경우 탄소 원자가 1 내지 50 또는 1 내지 30, 일반적으로 1 내지 20 또는 1 내지 12, 더 일반적으로 1 내지 8, 1 내지 6 또는 1 내지 4의 범위이거나, 이중 결합 작용기가 마르쿠시 구조 (예를 들어, -CH=CH2)에 단일 결합된 경우 탄소 원자가 2 내지 50, 일반적으로 2 내지 30, 2 내지 20 또는 2 내지 12, 더 일반적으로 2 내지 8, 2 내지 6 또는 2 내지 4의 범위이다. 예를 들어, C2-C8 알케닐 또는 C2-C8 알케닐은 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 함유하는 알케닐 모이어티를 의미하며, 이 중 적어도 2개가 서로 접합된 sp2 탄소 원자이고 이 탄소 원자 중 하나는 1가이고, C2-C6 알케닐 또는 C2-C6 알케닐은 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소 원자를 포함하는 알케닐 모이어티를 의미하며, 이 중 적어도 2개는 서로 접합되어 있고 탄소 원자 중 하나가 1가인 sp2 탄소이다. 일부 측면에서, 알케닐 치환체 또는 기는 이들 탄소 원자 중 하나가 1가이고 서로 접합되어 있는 단 2개의 sp2 탄소만을 갖고, 다른 측면에서는, 알케닐 모이어티가 치환되지 않거나, 치환된 알케닐이 치환되지 않은 알케닐과 비교하여 연속적인 비방향족 탄소 원자의 수만큼 다른 경우 알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, 알케닐, 알키닐 및 다른 모이어티를 제외한 선택적 치환체에 대해 본원에 정의된 치환체를 포함하여, 본 명세서에 개시된 바와 같은 독립적으로 선택된 모이어티 1 내지 4개 이상, 전형적으로 1 내지 3개, 보다 전형적으로 1 내지 2개로 치환되는, C2-C6 또는 C2-C4 알케닐 모이어티이고, 여기서 치환(들)은 존재할 경우, 알케닐 모이어티의 인접한 sp2 탄소 및 sp3 탄소 원자 중 어느 하나에 위치할 수 있다. 일반적으로 알케닐 치환체는 서로 접합되어 있는 단지 2개의 sp2 탄소만 가지고 있는 C2-C6 또는 C2-C4 알케닐 모이어티이다. 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우, 알케닐 모이어티는 2 내지 8개의 탄소 원자를 갖는다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "알케닐렌"은 그 자체 또는 다른 용어의 일부로서, 앞서 알케닐에 대해 설명한 바와 같이, 명시된 수의 탄소 원자의 하나 이상의 이중 결합 모이어티를 포함하는 유기 모이어티, 치환체 또는 기를 지칭하고, 알켄 작용기의 동일하거나 다른 두 개의 sp2 탄소 원자에서 두 개의 수소 원자를 제거하거나 모 알켄의 두 개의 개별 알켄 작용기에서 두 개의 수소 원자를 제거하여 유도된 두 개의 라디칼 중심을 갖는다. 일부 측면에서, 알케닐렌 모이어티는 수소 원자가 알케닐 라디칼의 이중 결합 작용기의 동일하거나 다른 sp2 탄소 원자, 또는 다른 이중 결합 모이어티의 sp2 탄소로부터 제거되어 디라디칼을 제공하는, 본 명세서에 기술된 바와 같은 알케닐 라디칼의 것이다. 일반적으로, 알케닐렌 모이어티는 -C=C- 또는 -C=C-X1-C=C-의 구조를 함유하는 디라디칼을 포함하고, 여기서 X1은 부재하거나 본 명세서에 정의된 바와 같은 임의로 치환된 포화 알킬렌으로, 일반적으로 C1-C6 알킬렌이고, 보다 일반적으로 치환되지 않는다. 알케닐렌 모이어티의 탄소 원자 수는 알케닐렌 모이어티로 정의하는 알켄 작용기(들)의 sp2 탄소 원자 수, 및 알케닐 모이어티가 가변기로 존재하는 다른 모이어티 또는 마르쿠시 구조의 어떤 탄소 원자도 포함하지 않는 각 sp2 탄소에 부가된 인접한 비방향족 탄소 원자의 총 수에 의해 정의된다. 이 숫자는 달리 명시되지 않는 한 2 내지 50 또는 2 내지 30, 일반적으로 2 내지 20 또는 2 내지 12, 더 일반적으로 2 내지 8, 2 내지 6 또는 2 내지 4개의 탄소 원자 범위이다. 예를 들어, C2-C8 알케닐렌 또는 C2-C8 알케닐렌은 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 함유하는 알케닐렌 모이어티를 의미하고, 여기서 적어도 2개는 하나가 2가 탄소이거나 둘 다 1가인, 서로 접합되어 있는 sp2 탄소이고, C2-C6 알케닐렌 또는 C2-C6 알케닐렌은 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소 원자를 함유하는 알케닐 모이어를 의미하고, 여기서 적어도 2개는 sp2 탄소이고, 적어도 2개는 하나가 2가 탄소이거나 둘 다 1가 탄소인, 서로 접합되어 있는 sp2 탄소이다. 일부 측면에서, 알케닐렌 모이어티는 두 개의 sp2 탄소가 서로 접합되어 있고, 두 개의 sp2 탄소 원자가 모두 1가인 C2-C6 또는 C2-C4 알케닐렌이고, 일부 측면에서는 치환되지 않는다. 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우, 알케닐렌 모이어티는 2 내지 8개의 탄소 원자를 갖고 알케닐 모이어티에 대해 설명한 것과 동일한 방식으로 치환되지 않거나 치환된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "알키닐"이라는 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어의 일부로 사용되고, 하나 이상의 삼중 결합 작용기 (예를 들어, -C≡C- 모이어티) 또는 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개 이상, 일반적으로 1, 2, 또는 3개의 그러한 작용기, 더 일반적으로 하나의 그러한 작용기를 포함하는 유기 모이어티, 치환체 또는 기를 지칭하고, 일부 측면에서 페닐과 같은 아릴 모이어티, 또는 알키닐 치환체, 모이어티 또는 기가 -C≡CH가 아니면 알케닐 모이어티 또는 연결된 일반, 2차, 3차 또는 사이클릭 탄소 원자, 즉 선형, 분지형, 사이클릭 또는 이들의 임의의 조합에 의해 치환 (즉, 임의로 치환)될 수 있다. 다수의 삼중 결합을 갖는 알키닐 모이어티, 기 또는 치환체는 삼중 결합이 하나 이상의 개재 포화 또는 불포화 탄소 원자 또는 이들의 조합과 연속적으로 또는 비연속적으로 배열될 수 있고, 단, 삼중 결합의 사이클릭, 연속 배열은 4n + 2 전자의 사이클릭 공액 시스템을 형성하지 않는다 (즉, 방향족이 아님).
알키닐 모이어티, 기 또는 치환체는 탄소 원자가 서로 접합되고, sp 탄소 원자 중 하나가 회합된 다른 유기 모이어티 또는 마르쿠시 구조에 단일 결합된 적어도 2개의 sp 탄소 원자를 함유한다. 알키닐이 마르쿠시기로 사용되는 경우 (즉, 치환체인 경우) 알키닐은 말단 알킨 작용기의 삼중 결합 탄소 (즉, sp 탄소)를 통해 회합된 마르쿠시식 또는 다른 유기 모이어티에 단일 결합된다. 일부 측면에서 알키닐 모이어티, 기 또는 치환체가 지정될 때, 종은 임의로 치환된 알킬 또는 카르보사이클릴, 하나 이상의 엔도 삼중 결합 및 모 알킨 화합물의 sp 탄소에서 수소 원자를 제거하여 유도된 1가 모이어티를 갖는 본 명세서에 기술된 기 모이어티 또는 치환체 중 임의의 것을 포함한다. 이러한 1가 모이어티는 제한 없이 -C≡CH 및 -C≡C-CH3, 및 -C≡C-Ph로 예시된다.
알키닐 치환체의 탄소 원자 수는 알키닐 치환체로 정의하는 알켄 작용기의 sp 탄소 원자 수 및 알케닐 모이어티가 가변기인 다른 모이어티 또는 마르쿠시 구조의 임의의 탄소 원자를 포함하지 않는 각 sp 탄소 원자에 부가된 인접한 비방향족 탄소 원자의 총 수로 정의된다. 삼중 결합 작용기가 마르쿠시 구조 (예를 들어, -CH≡CH)에 단일 결합되어 있는 경우, 이 수는 2 내지 50, 일반적으로 2 내지 30, 2 내지 20 또는 2 내지 12, 더 일반적으로 2 내지 8, 2 내지 6, 또는 2 내지 4 탄소 원자까지 다양할 수 있다. 예를 들어, C2-C8 알키닐 또는 C2-C8 알키닐은 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 함유하는 알키닐 모이어티를 의미하며, 여기서 적어도 2개는 서로 접합된 sp 탄소 원자로서 이 탄소 원자 중 하나는 1가이고, C2-C6 알키닐 또는 C2-C6 알키닐은 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소 원자를 함유하는 알키닐 모이어티를 의미하며, 이 중 적어도 2개는 탄소 원자 중 하나가 1가이고 서로 접합되어 있는 sp 탄소이다. 일부 측면에서알키닐 치환체 또는 기는 탄소 원자 중 하나가 1가이고 서로 접합되어 있는 두 개의 sp 탄소를 갖는 C2-C6 또는 C2-C4 알키닐 모이어티이고, 다른 측면에서는 알키닐 모이어티는 치환되지 않는다. 탄소 원자 수가 표시되지 않은 경우, 알키닐 모이어티, 기 또는 치환체는 2 내지8개의 탄소 원자를 갖는다. 알키닐 모이어티는 1가 sp 탄소에서의 치환은 허용되지 않는다는 점을 제외하고는 알케닐 모이어티에 대해 설명한 것과 동일한 방식으로 치환 또는 치환되지 않을 수 있다.
문맥상 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "아릴"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 고리 헤테로원자가 각각 독립적으로 임의로 치환된 1, 2, 3 또는 4 내지 6개의 방향족 고리를 포함하거나 이들로 구성되지 않은, 일반적으로 1 내지 3개의 방향족 고리, 더 일반적으로 각각 독립적으로 임의로 치환된 1 또는 2개의 방향족 고리로 구성되지 않은, 방향족 또는 융합 방향족 고리 시스템을 갖는 유기 모이어티, 치환체 또는 기를 지칭하고, 여기서 고리는 일반적으로 6, 10 또는 14개의 전자로 구성된 4n + 2 전자 (휴켈 규칙), 일반적으로 6, 10 또는 14개의 순환적으로 접합된 시스템에 참여하는 탄소 원자로만 구성되고, 이 중 일부는 헤테로 원자 (가교 접합된, 예를 들어, 퀴논)와의 엑소사이클릭 접합에 추가로 참여할 수 있다. 아릴 치환체, 모이어티 또는 기는 일반적으로 6개, 8개, 10개 또는 그 이상 최대 24개까지의 연속적인 방향족 탄소 원자로 형성되어 C6-C24 아릴을 포함하고, 일부 측면에서는 C6-C20 또는 C6-C12 아릴이다. 아릴 치환체, 모이어티 또는 기는 임의로 치환되고, 일부 측면에서 치환되지 않거나 다른 아릴 또는 헤테로아릴을 포함하는 본 명세서에 설명된 알킬, 알케닐, 알키닐 또는 다른 모이어티에 대해 정의된 바와 같이, 독립적으로 선택된 치환체 1, 2, 3개 이상, 일반적으로 1 또는 2개로 치환되어, 바이아릴 및 본 명세서에 정의된 다른 선택적 치환체를 형성한다. 다른 측면에서, 아릴은 페닐 및 나프탈레닐, 페난트릴과 같은 C6-C10 아릴이다. 중성 아릴 모이어티의 방향족성은 짝수 또는 전자를 필요로 하므로, 해당 모이어티에 대한 주어진 범위는 방향족 탄소 수가 홀수인 종을 포함하지 않는다는 것을 이해할 수 있다. 아릴이 마르쿠시 기 (즉, 치환체)로 사용되는 경우, 아릴은 마르쿠시 식 또는 아릴 기의 방향족 탄소를 통해 회합된 다른 유기 모이어티에 부착된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어로서 "헤테로사이클릴"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 카르보사이클릴을 지칭하고, 카르보사이클릭 고리 시스템 내에서 수소 원자가 부착된 하나 이상, 그러나 전체는 아닌 골격 탄소 원자는, 허용되는 경우 임의로 치환된, 독립적으로 선택된 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티로 대체되고, N/NH, O, S, Se, B, Si 및 P를 포함하되 이에 국한되지 않고, 둘 이상의 헤테로 원자 또는 헤테로 원자 모이어티, 일반적으로 2개는 서로 인접하거나 동일한 고리 시스템 내에서 하나 이상, 일반적으로 1 내지 3개의 탄소 원자에 의해 분리될 수 있다. 이러한 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티는 일반적으로 N/NH, O 및 S이다. 헤테로사이클릴은 일반적으로 1가 골격 탄소 원자 또는 1가 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티를 함유하며, 총 1 내지 10개의 헤테로원자 및/또는 헤테로원자 모이어티, 일반적으로 총 1 내지 5개, 또는 더 일반적으로 총 1 내지 3개, 또는 1 또는 2개를 갖는데, 단, 헤테로사이클릴 내의 헤테로사이클릭 고리(들) 중 어느 하나에 있는 골격 원자 전부가 헤테로원자 및/또는 헤테로원자 모이어티는 아닌 경우 (즉. 각 고리에서 적어도 하나의 탄소 원자가 고리 중 하나에서 대체된 적어도 하나로 대체되지 않음), 여기서 허용되는 경우 임의로 치환된, 고리(들)의 각 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티는 N/NH, O 및 S로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, 단, 하나의 고리가 인접한 두 개의 O 또는 S 원자를 함유하지 않는다. 예시적인 헤테로사이클릴과 헤테로아릴을 통칭하여 헤테로사이클로 지칭되고, Paquette, Leo A.; "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry" (W. A. Benjamin, New York, 1968), 특히 1, 3, 4, 6, 7, 및 9장; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950부터 현재까지), 특히 Volumes 13, 14, 16, 19, 및 28; 및 J. Am. Chem. Soc. 1960, 82:5545-5473 특히 5566-5573)에 제공된다.
헤테로사이클릴이 마르쿠시 기 (즉, 치환체)로 사용될 때 헤테로사이클릴의 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리가 마르쿠쉬 구조 또는 해당 헤테로사이클릭 고리의 탄소 원자 또는 헤테로원자를 통해 연결된 다른 모이어티에 부착되고, 이러한 부착이 해당 탄소 원자 또는 헤테로원자의 불안정하거나 허용되지 않는 공식적인 산화 상태를 초래하지 않는다. 이런 맥락에서 헤테로사이클릴은 헤테로사이클릴로 정의되는 헤테로사이클릭 고리 시스템의 헤테로사이클릭 고리가 비방향족인 1가 모이어티이지만, 카르보사이클릭, 아릴 또는 헤테로 아릴 고리와 융합될 수 있으며 페닐- (즉, 벤조) 융합된 헤테로사이클릭 모이어티를 포함한다.
헤테로사이클릴은 C3-C50 또는 C3-C30 카르보사이클릴, 전형적으로 C3-C20 또는 C3-C12 카르보사이클릴, 보다 전형적으로 C3-C8 또는 C3-C6 카르보사이클릴이고, 여기서 사이클로알킬 고리 시스템의 탄소의 1, 2 또는 3개 이상, 그러나 전체는 아닌 탄소가 전형적으로 1, 2, 3, 또는 4개, 보다 전형적으로 1 또는 2개의 부착된 수소와 함께 대체되고, N/NH, O 및 S로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, 허용되는 경우 임의로 치환된 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티로 대체되고, 따라서 C3-C50 또는 C3-C30 헤테로사이클릴, 전형적으로 C3-C20 또는 C3-C12 헤테로사이클릴, 보다 전형적으로 C3-C6 또는 C5-C6 헤테로사이클릴이고, 여기서 아래첨자는 헤테로사이클릴의 헤테로사이클릭 고리 시스템(들)의 골격 원자 (탄소 원자 및 헤테로원자 포함)의 총 개수를 나타낸다. 일부 측면에서, 헤테로사이클릴은 헤테로사이클릴의 헤테로사이클릭 고리 시스템에 헤테로원자 중 적어도 하나가 존재하는 경우 임의로 치환된 0 내지 2개의 N, 0 내지 2개의 O 또는 0 내지 1개의 S 골격 헤테로원자 또는 이들의 일부 조합을 함유한다. 헤테로사이클릴은 피롤리딘-2-온에서와 같이 옥소 (=O) 모이어티를 갖는 골격 탄소 원자에서, 및/또는 -N(=O), -S(=O)- 또는 -S(=O)2-에 예시된 바와 같이 산화 헤테로원자를 함유하나 이에 국한되지 않는 하나 또는 2개의 옥소 모이어티를 갖는 골격 헤테로원자에서 포화 또는 부분 불포화 및/또는 치환 또는 치환되지 않을 수 있다. 완전 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴은 알킬, (헤테로)아릴, (헤테로)아릴알킬, 알케닐, 알키닐 또는 본 명세서에 정의된 선택적 치환체 또는 2개, 3개 이상, 전형적으로 1 또는 2개의 그러한 치환체의 조합을 포함하는 본 명세서에 기재된 다른 모이어티로 치환되거나 추가로 치환될 수 있다. 특정 측면에서, 헤테로사이클릴은 피롤리디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐 및 피페라지닐로 이루어진 군에서 선택된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "헤테로사이클로"는 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로, 상기 정의된 바와 같은 헤테로사이클릴 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭하며, 여기서 1가 탄소 원자로부터의 수소 원자, 다른 골격 원자 (후자가 존재하는 경우 탄소 또는 질소 원자)의 수소 원자, 또는 허용되는 경우 골격 질소 원자의 전자가 제거되거나 이미 1가 원자가 아닌 질소 고리 원자의 전자가 제거되어 결합으로 대체된다 (즉, 2가). 일부 측면에서, 대체된 제2 수소는 모 헤테로사이클릴의 1가 탄소 원자의 수소이므로 스피로 탄소 원자를 형성하며, 일부 경우 해당 카르보사이클릭 탄소 원자로 알킬 모이어티를 방해할 수 있다. 이러한 경우, 스피로 탄소 원자는 알킬 모이어티에 통합된 것으로 표시된 헤테로사이클릴로 방해된 알킬 모이어티의 탄소 원자 수에 기인한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "헤테로아릴"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 아릴의 방향족 고리 시스템의 방향족 탄소 중 하나 이상 그러나 전부는 아닌 탄소가 헤테로원자로 대체된 본 명세서에 정의된 아릴 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭한다. 헤테로아릴은 일반적으로 헤테로아릴 고리 시스템의 고리(들)에 총 1 내지 4개의 골격 헤테로원자를 함유하나, 헤테로아릴의 어느 한 고리 시스템의 골격 원자 모두가 헤테로원자는 아니고, 이는 허용되는 경우 임의로 치환되고 0 내지 3개의 N, 1 내지 3개의 N 또는 0 내지 3개의 N 골격 헤테로원자, 전형적으로 0 내지 1개의 O 및/또는 0 내지 1개의 S 골격 헤테로원자를 갖되, 적어도 하나의 골격 헤테로원자는 존재한다. 헤테로아릴은 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭일 수 있다. 폴리사이클릭 헤테로아릴은 일반적으로 C5-C50 또는 C5-C30 헤테로아릴, 더 일반적으로는 C5-C20 또는 C5-C12 헤테로아릴이고, 바이사이클릭 헤테로아릴은 일반적으로 C5-C10 헤테로아릴이고, 모노사이클릭 헤테로아릴은 일반적으로 C5-C6 헤테로아릴이며, 여기서 아래첨자는 헤테로아릴의 방향족 고리 시스템(들)의 골격 원자 (탄소 원자 및 헤테로원자 포함)의 총 개수를 나타낸다. 일부 측면에서, 헤테로아릴은 방향족 고리(들)의 탄소 원자 중 하나 1, 2, 3, 4 또는 그 이상, 일반적으로 1, 2 또는 3개 및 모 바이사이클릭 아릴 모이어티의 부착된 수소 원자가 독립적으로 선택된 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티로 대체된 바이사이클릭 아릴 모이어티, 또는 모노사이클릭 아릴 모이어티로서, 방향족 고리(들)의 탄소 원자 중 하나 1, 2, 3 또는 그 이상, 일반적으로 1 또는 2개 및 모 모노사이클릭 아릴 모이어티의 부착된 수소 원자 중 하나가 독립적으로 선택된 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티로 대체된 모노사이클릭 아릴 모이어티이고, 여기서, 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티는 허용되는 경우 임의로 치환되며, N/NH, O 및 S를 포함하되, 단, 모 아릴 모이어티에 있는 임의의 하나의 방향족 고리 시스템의 골격 원자 모두가 헤테로원자로 대체되지는 않으며, 보다 일반적으로 산소 (-O-), 황 (-S-) 질소 (=N-) 또는 -NR-로 대체되어 질소 헤테로원자가 임의로 치환되며, 여기서 R은 -H, 질소 보호기 또는 임의로 치환된 C1-C20 알킬이거나 또는 임의로 치환된 C6-C24 아릴 또는 C5-C24 헤테로아릴로서 헤테로바이아릴을 형성한다. 다른 측면에서는, 방향족 고리(들)의 탄소 원자 중 1, 2 또는 3개 및 모 아릴 모이어티의 부착된 수소 원자가 사이클릭 접합된 시스템을 유지하는 방식으로 다른 유기 모이어티로 치환된 질소로 대체된다. 또 다른 측면에서, 모 아릴 모이어티의 방향족 탄소 라디칼은 방향족 질소 라디칼로 대체된다. 이러한 측면 중 하나에서 질소, 황 또는 산소 헤테로원자는 고리 시스템에서 인접한 원자와의 파이 결합을 통해 또는 헤테로원자의 한 쌍 중 하나의 전자를 통해 접합 시스템에 참여한다. 또 다른 측면에서, 헤테로아릴은 고리 시스템이 방향족화된 본 명세서에 정의된 헤테로사이클릴의 구조를 갖는다.
전형적으로, 헤테로아릴은 모노사이클릭이고, 일부 측면에서는 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리 시스템을 갖는다. 5원 헤테로아릴은 헤테로방향족 고리 시스템 내에 1 내지 4개의 방향족 탄소 원자 및 필요한 수의 방향족 헤테로원자를 함유하는 모노사이클릭 C5-헤테로아릴이다. 6원 헤테로아릴은 헤테로방향족 고리 시스템 내에 1 내지 5개의 방향족 탄소 원자 및 필요한 수의 방향족 헤테로원자를 함유하는 모노사이클릭 C6 헤테로아릴이다. 5원 헤테로아릴은 4개, 3개, 2개 또는 1개의 방향족 헤테로원자를 갖고, 6원 헤테로아릴은 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개의 방향족 헤테로원자를 갖는 헤테로아릴을 포함한다.
C5-헤테로아릴은 5원 헤테로아릴이라고도 하며, 골격 방향족 탄소로부터 수소 원자, 또는 허용되는 경우, 모 방향족 헤테로사이클 화합물에서의 골격 방향족 헤테로원자로부터 전자를 제거함으로써 유도되는 1가 모이어티이고, 이는 일부 측면은 피롤, 푸란, 티오펜, 옥사졸, 이족사졸, 티아졸, 이소티아졸, 이미다졸, 피라졸, 트리아졸 및 테트라졸로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 측면에서, 모 헤테로사이클은 티아졸, 이미다졸, 옥사졸 및 트리아졸로 이루어진 군에서 선택되며, 일반적으로 티아졸 또는 옥사졸, 더 일반적으로 티아졸이다.
6-원인 C6 헤테로아릴은 방향족 탄소에서 수소 원자를 제거하거나 허용되는 경우, 모 방향족 헤테로사이클 화합물에서의 방향족 헤테로원자에서 전자를 제거하여 유도된 1가 모이어티이고, 특정 측면은 피리딘, 피리다진, 피리미딘 및 트리아진으로 이루어진 군에서 선택된다. 헤테로아릴은 알킬, (헤테로)아릴알킬, 알케닐 또는 알키닐로 또는 아릴 또는 다른 헤테로아릴로 치환 또는 추가 치환되어 바이아릴을 형성할 수 있거나, 또는 본 명세서에 정의된 선택적 치환체를 포함하여 본 명세서에 기술된 다른 모이어티 또는 2개, 3개 이상, 일반적으로 1개 또는 2개의 그러한 치환체의 조합을 포함한다.
용어 "아릴알킬" 또는 "헤테로아릴알킬"은 단독으로 또는 다른 용어의 일부로서 본 명세에서 사용되고, 알킬 모이어티에 결합된 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티, 즉, (아릴)-알킬-을 지칭하고, 여기서 알킬 및 아릴기는 위에서 설명한 것과 같다. 일반적으로, 아릴알킬은 (C6-C24 아릴)-C1-C12 알킬- 모이어티, 기 또는 치환체이고, 헤테로아릴알킬은 (C5-C24 헤테로아릴)-C1-C12 알킬- 모이어티, 기 또는 치환체이다. (헤테로)아릴알킬이 마르쿠시 기 (즉, 치환체)로 사용될 때, (헤테로)아릴알킬의 알킬 모이어티는 알킬 모이어티의 sp3 탄소를 통해 회합된 마르쿠시 식에 부착된다. 일부 측면에서, 아릴알킬은 (C6-C24 아릴)-C1-C12 알킬- 또는 (C6-C20 아릴)-C1-C20 알킬-이고, 일반적으로 (C6-C12 아릴)-C1-C12 알킬- 또는 (C6-C10 아릴)-C1-C12 알킬-이고, 더 일반적으로 비제한적으로C6H5-CH2-, C6H5-CH(CH3)CH2- 및 C6H5-CH2-CH(CH2CH2CH3)-로 예시되는 (C6-C10 아릴)-C1-C6 알킬-이다. (헤테로)아릴알킬은 (헤테로)아릴 및/또는 알킬 모이어티에 대해 설명한 것과 동일한 방식으로 치환되지 않거나 치환될 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "아릴렌" 또는 "헤테로아릴렌"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 본 명세서에서 사용되고, 다른 유기 모이어티 내에서 두 개의 공유 결합을 형성 (즉, 2가)하고 이 결합이 오르토, 메타 또는 파라 배열인 방향족 또는 헤테로아로마틱 디라디칼 모이어티이다. 아릴렌 및 일부 헤테로아릴렌은 여기에 정의된 바와 같은 모 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티, 기 또는 치환체로부터 수소 원자를 제거하여 얻은 2가 종을 포함한다. 다른 헤테로아릴렌은 모 방향족 헤테로사이클의 서로 다른 2개의 방향족 탄소 원자에서 수소 원자가 제거되어 2가 종을 형성하거나, 방향족 탄소 원자 또는 헤테로 원자로부터 수소 원자를 제거하고 모 방향족 헤테로사이클의 다른 방향족 헤테로원자로부터 다른 수소 원자 또는 전자를 제거하여 디라디칼 종을 형성하는 2가 종이고, 여기서 방향족 탄소 원자 1개와 방향족 헤테로원자 1개가1가이거나 서로 다른 방향족 헤테로원자 2개가 각각 1가이다. 헤테로아릴렌은 헤테로원자(들) 및/또는 헤테로원자 모이어티(들)가 모 아릴렌의 방향족 탄소 원자 중 전부는 아니지만 하나 이상을 대체하는 것을 더 포함한다.
나머지 위치에서 임의로 치환되는 비제한적인 예시 아릴렌은 다음 구조에 나타낸 바와 같은 페닐-1,2-엔, 페닐-1,3-엔 및 페닐-1,4-엔이다:
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬"은 본 명세서에서 그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되고, 완전히 포화되거나 1 내지 3도의 불포화도를 함유하고 1 내지 12개의 탄소 원자 및 허용되는 경우 임의로 치환되고 O, N/NH, Si 및 S로 이루어진 군에서 선택되는 1 내지 6개의 헤테로원자, 일반적으로 1 내지 5개의 헤테로원자, 보다 일반적으로 1 또는 2개의 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티를 갖는, 임의로 치환된 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 지칭하고, 각 질소 및 황 원자가 독립적으로 선택적으로 N-산화물, 설폭사이드 또는 설폰으로 산화되거나, 하나 이상의 질소 원자가 임의로 치환되거나 4차화되는 것을 포함한다. 헤테로원자(들) 또는 헤테로원자 모이어티(들) O, N/NH, S 및/또는 Si는 헤테로알킬기의 임의의 내부 위치 또는 헤테로알킬의 임의로 치환된 알킬기의 말단 위치에 배치될 수 있다. 일부 측면에서, 헤테로알킬은 완전히 포화되거나 1도의 불포화도를 포함하고 1 내지 6개의 탄소 원자 및 1 내지 2개의 헤테로원자를 포함하고, 다른 측면에서는 헤테로알킬이 치환되지 않는다. 비제한적인 예로는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -NH-CH2-CH2-NH-C(O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-O-CH3, 및 -CH=CH-N(CH3)-CH3가 있다. 최대 2개의 헤테로원자가 -CH2-NH-OCH3 및 -CH2-O-Si(CH3)3로 예시되는 바와 같이 연속적일 수 있다.
헤테로알킬은 일반적으로 인접한 헤테로원자(들) 및 비방향족 탄소 원자의 수로 표시되며, 이는 달리 (예를 들어, 아미노알킬에 대해 설명된 바와 같이) 명시되지 않는 한 헤테로원자(들)에 부착된 인접한 탄소 원자(들)를 포함한다. 따라서, -CH2-CH2-O-CH3 및 -CH2-CH2-S(O)-CH3은 모두 C4-헤테로알킬이고 -CH2-CH=N-O-CH3, 및 -CH=CH-N(CH3)2은 모두 C5 헤테로알킬이다. 헤테로알킬은 헤테로원자 또는 헤테로원자 성분에서 본 명세서에 정의된 선택적 치환체를 포함하여 본 명세서에 기술된 모이어티 중 어느 하나로, 및/또는 알킬 성분에서 치환된 알케닐이 치환되지 않은 아미노알킬에 비해 인접한 비방향족 탄소 원자의 수만큼 다를 경우 알킬, (헤테로)아릴알킬, 알케닐, 알키, 닐, 다른 헤테로알킬 또는 다른 모이어티를 제외한 본 명세서에 정의된 선택적 치환체(들)를 포함하여,본 명세서에 기술된 바와 같이 1 내지 4 개 이상, 일반적으로 1 내지 3 개 또는 1 내지 2개의 독립적으로 선택된 모이어티로 치환되지 않거나 치환될 수 있다 (즉, 임의로 치환됨).
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "하이드록시알킬"은 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되고, 하나 이상의 수소 원자 대신에 하이드록실 라디칼을 갖는 알킬 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭한다. 일부 측면에서, 하나 또는 두 개의 수소 원자가 하이드록시알킬기에서 하이드록실 치환체로 대체된다. 하이드록시알킬은 일반적으로 알킬 또는 알킬렌 모이어티의 인접한 탄소 원자 수로 표시된다. 따라서, C1 하이드록시알킬은 비제한적으로 -CH2OH로 예시되고, C2 하이드록시알킬은 비제한적으로 -CH2CH2OH 또는 -CH2(OH)CH3로 예시된다.
본 명세서에 정의된 아미노알킬은 알킬 모이어티의 1가 탄소 원자 이외의 말단 탄소 원자가 아미노기로 대체된 예시적인 헤테로알킬이다. 마르쿠시 구조 또는 이와 회합된 다른 유기 모이어티에 치환체로 표시된 경우, 알킬 모이어티의 1가 탄소 원자는 회합되는 다른 유기 모이어티에 부착되는데, 이는 일반적으로 아미노기에 부착된 것과 다른 탄소 원자이다. 아미노알킬은 다른 헤테로알킬과 달리 알킬렌 모이어티의 인접한 탄소 원자 수만 표시하여 번호가 매겨진다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬렌"은 본 명세서에서 용어가 단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되고, 수소 원자 또는 헤테로원자 전자를 제거함으로써 모 헤테로알킬을 형성하여 -CH2-CH2-S-CH2-CH2- 및 -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-로 예시되나 이에 국한되지 않는 2가 모이어티를 제공하는, (전술한 바와 같이) 헤테로알킬로부터 유래된 2가 기을 의미한다. 헤테로알킬렌의 경우, 그 헤테로원자(들)는 임의로 치환된 알킬렌 사슬의 내부에 있거나 말단 중 하나 또는 양쪽에 있을 수 있으므로 이러한 헤테로원자 중 하나 또는 둘은 1가이다. 헤테로알킬렌이 링커 유닛의 구성 요소인 경우, 문맥에 의해 명시되거나 암시되지 않는 한 링커 유닛 내에서 해당 구성 요소의 두 가지 방향이 모두 허용된다. 헤테로알킬렌은 일반적으로 인접한 헤테로원자(들) 및 비방향족 탄소 원자의 수로 표시되며, 여기에는 달리 명시되거나 문맥에 의해 암시되지 않는 한 헤테로원자(들)에 부착된 인접한 탄소 원자(들)가 포함된다. 알킬렌 디아민은 알킬렌의 두 개의 1가 탄소 원자가 아미노기로 대체되어 각 질소 원자가 1가인 헤테로알킬렌이고, 알킬렌 모이어티의 인접한 탄소 원자 수만 표시하여 번호가 매겨진 다른 헤테로알킬렌과 다르다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "아미노알킬"은 본 명세서에서 그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되며, 상기 정의된 바와 같이 알킬렌 모이어티의 하나의 라디칼 말단에 결합된 염기성 질소를 가져 염기성 질소가 더 이상 치환되지 않는 일차 아민을 제공거나, 또는 염기 아민이 상술한 바와 같이 각각 하나 또는 2개의 독립적으로 선택된 선택적으로 치환된 C1-C12 알킬 모이어티로 추가로 치환된 2차 또는 3차 아민을 제공하는 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭한다. 일부 측면에서, 임의로 치환된 알킬은 C1-C8 알킬 또는 C1-C6 알킬이고 다른 측면에서 알킬은 치환되지 않는다. 여전히 다른 측면에서, 염기성 질소는 그의 치환체와 함께 골격 원자로 염기성 질소를 함유하는 임의로 치환된 C3-C8 헤테로사이클릴을, 일반적으로는 임의로 치환된, 질소 함유 C3-C6 또는 C5-C6 헤테로사이클릴의 형태로 정의한다. 아미노알킬이 마르쿠시 구조에 가변기로 사용될 때, 아미노알킬의 알킬렌 모이어티는 일부 측면에서 앞서 언급한 알킬렌의 다른 라디칼 말단인, 해당 모이어티의 sp3 탄소를 통해 회합된 마르쿠시 식에 부착된다. 아미노알킬은 일반적으로 해당 알킬렌 모이어티의 인접한 탄소 원자 수로 표시된다. 따라서, C1 아미노알킬는 비제한적으로 -CH2NH2, -CH2NHCH3 및 -CH2N(CH3)2로 예시되고, C2 아미노 알킬은 비제한적으로 -CH2CH2NH2, -CH2CH2NHCH3 및 -CH2CH2N(CH3)2로 예시된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 "임의로 치환된 알킬", "임의로 치환된 알케닐", "임의로 치환된 알키닐", "임의로 치환된 아릴알킬", "임의로 치환된 헤테로사이클", "임의로 치환된 아릴", "임의로 치환된 헤테로아릴", "임의로 치환된 헤테로아릴알킬" 등의 용어는 본 명세서에 정의되거나 개시된 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴알킬, 헤테로사이클, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 다른 치환체, 모이어티 또는 기를 지칭하고, 여기서 상기 치환체, 모이어티 또는 기의 수소 원자(들)가 선택적으로 다른 모이어티(들) 또는 기(들)로 대체되거나, 또는 해당 치환체, 모이어티 또는 기 중 하나를 포함하는 비환형 탄소 사슬이 해당 사슬의 탄소 원자(들)를 다른 모이어티(들) 또는 기(들)로 대체함으로써 방해받는다. 일부 측면에서, 알켄 작용기는 알킬 모이어티의 라디칼 탄소가 대체되지 않는 한, 알킬 치환체의 연속적인 두 개의 sp3 탄소 원자를 대체하여 임의로 치환된 알킬은 불포화 알킬 치환체가 된다.
전술한 치환체 중 하나에서 수소(들)를 대체하는 선택적 치환체, 모이어티, 또는 기는 C6-C24 아릴, C5-C24 헤테로아릴, 하이드록실, C1-C20 알콕시, C6-C24 아릴옥시, 시아노, 할로겐, 니트로, C1-C20 플루오로알콕시, 및 -NH2 및 모노-, 디-, 및 트리-치환된 아미노기를 포함하는 아미노, 및 이들의 보호된 유도체로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 -X, -OR', -SR', -NH2, -N(R')(Rop), -N(Rop)3, =NR', -CX3, -CN, -NO2, -NR'C(=O)H, -NR'C(=O)Rop, -NR'C(=O)Rop, -C(=O)R', -C(=O)NH2, -C(=O)N(R')Rop , -S(=O)2Rop, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R')Rop, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R')Rop, -S(=O)2OR', -S(=O)Rop, -OP(=O)(OR')(ORop), -OP(OH)3, -P(=O)(OR')(ORop), -PO3H2, -C(=O)R', -C(=S)Rop, -CO2R', -C(=S)ORop, -C(=O)SR', -C(=S)SR', -C(=S)NH2, -C(=S)N(R')(Rop)2, -C(=NR')NH2, -C(=NR')N(R')Rop, 및 이들의 염으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 각 X는 -F, -Cl, -Br, 및 -I로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된 할로겐이고; 여기서 각 Rop는 C1-C20 알킬, C2-C20 알케닐, C2-C20 알키닐, C6-C24 아릴, C3-C24 헤테로사이클릴, C5-C24 헤테로아릴, 보호기, 및 전구 약물 모이어티로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나 또는 Rop 중 2개는 이들이 부착된 헤테로원자와 함께 C3-C24 헤테로사이클릴을 정의하고; R'는 수소 또는 Rop이고, 여기서 Rop는 C1-C20 알킬, C6-C24 아릴, C3-C24 헤테로사이클릴, C5-C24 헤테로아릴, 및 보호기로 이루어진 군에서 선택된다.
일반적으로, 존재하는 선택적 치환체는 -X, -OH, -ORop, -SH, -SRop, -NH2, -NH(Rop), -NR'(Rop)2, -N(Rop)3, =NH, =NRop, -CX3, -CN, -NO2, -NR'C(=O)H, NR'C(=O)Rop, -CO2H, -C(=O)H, -C(=O)Rop, -C(=O)NH2, -C(=O)NR'Rop, -S(=O)2Rop, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R')Rop, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R')(Rop), -S(=O)2OR', -S(=O)Rop, -C(=S)Rop, -C(=S)NH2, -C(=S)N(R')Rop, -C(=NR')N(Rop)2, 및 이들의 염으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 각 X는 -F 및 -Cl로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, 여기서 Rop는 일반적으로 C1-C6 알킬, C6-C10 아릴, C3-C10 헤테로사이클릴, C5-C10 헤테로아릴, 및 보호기로 이루어진 군에서 선택되고; R'는 Rop에서 독립적으로 선택된, 수소, C1-C6 알킬, C6-C10 아릴, C3-C10 헤테로사이클릴, C5-C10 헤테로아릴, 및 보호기로 일반적으로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된다.
보다 일반적으로, 존재하는 선택적 치환체는 -X, -Rop, -OH, -ORop, -NH2, -NH(Rop), -N(Rop)2, -N(Rop)3, -CX3, -NO2, -NHC(=O)H, -NHC(=O)Rop, -C(=O)NH2, -C(=O)NHRop, -C(=O)N(Rop)2, -CO2H, -CO2Rop, -C(=O)H, -C(=O)Rop, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(Rop), -C(=O)N(Rop)2, -C(=NR')NH2, -C(=NR')NH(Rop), -C(=NR')N(Rop)2, 보호기 및 이들의 염으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 각 X는 -F이고, 여기서 Rop는 C1-C6 알킬, C6-C10 아릴, C5-C10 헤테로아릴 및 보호기로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고; R'는 Rop에서 독립적으로 선택된, 수소, C1-C6 알킬 및 보호기로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 측면에서, 존재하는 선택적 알킬 치환체는 -NH2, -NH(Rop), -N(Rop)2, -N(Rop)3, -C(=NR')NH2, -C(=NR')NH(Rop), 및 -C(=NR')N(Rop)2로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 R' 및 Rop는 상기 R' 또는 Rop 기 중 어느 하나에 대해 정의한 바와 같다. 이러한 측면 중 일부에서, R' 및/또는 Rop 치환체는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 Rop는 수소 및 C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 독립적으로 선택될 때와 같이 기본 단위 (BU)의 기본 작용기를 제공한다. 상기 기술된 알킬렌, 카르보사이클릴, 카르보사이클로, 아릴, 아릴렌, 헤테로알킬, 헤테로알킬렌, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴렌 기는 유사하게 치환되거나 치환되지 않으나 예외가 있고, 존재하는 경우에는 이들 모이어티의 정의에 기술되어 있다.
다른 선택적 치환체는 알킬 또는 알킬렌 모이어티, 기 또는 치환체의 비순환 탄소 사슬에서 탄소 원자를 대체하여 C3-C12 헤테로알킬 또는 C3-C12 헤테로알킬렌을 제공하고, 이 목적상, 임의로 치환된, -O-, -C(=O)-, -C(=O)O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -NH-, -NHC(=O)-, -C(=O)NH-, S(=O)2NH-, -NHS(=O)2-, -OC(=O)NH-, 및 -NHC(=O)O로 이루어진 군에서 일반적으로 선택되고, 여기서 -NH-는 수소 원자를 -NH- 선택적 치환체에 대해 앞서 설명한 기에서 독립적으로 선택된 치환체로 대체함으로써 임의로 치환된 헤테로원자 모이어티이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "임의로 치환된 헤테로원자"는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 작용기 또는 다른 유기 모이어티 내의 헤테로원자 또는 헤테로원자 모이어티를 지칭하고, 여기서 헤테로원자는 추가로 치환되지 않거나, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴, 헤테로알킬 및 (헤테로)아릴알킬-을 포함하나 이에 국한되지 않는 1가 탄소 원자를 갖는 전술한 모이어티 중 어느 하나에 의해 치환되거나 또는 하나 또는 두 개의 =O 치환체로 치환되어 산화되어 있다. 일부 측면에서, "임의로 치환된 헤테로원자"는 치환되지 않거나 수소 원자가 전술한 치환체 중 어느 하나에 의해 대체된 방향족 또는 비방향족 -NH- 모이어티를 지칭한다. 다른 측면에서, "임의로 치환된 헤테로원자"는 헤테로아릴의 방향족 골격 질소 원자를 지칭하고, 여기서 해당 헤테로원자의 전자는 전술한 치환체 중 어느 하나에 의해 대체된다. 이 두 가지 측면을 모두 포괄하기 위해 질소 헤테로원자를 임의로 치환된 N/NH라고 부르기도 한다.
따라서, 일부 측면에서, 존재하는 질소 원자의 선택적 치환체는 임의로 치환된, C1-C20 알킬, C2-C20 알케닐, C2-C20 알키닐, C6-C24 아릴, C5-C24 헤테로아릴, (C6-C24 아릴)-C1-C20 알킬-, 및 (C5-C24 헤테로아릴)-C1-C20 알킬-로 이루어진 군에서 선택되고, 해당 용어는 본 명세서에 정의된 바와 같다. 다른 측면에서, 존재하는 질소 원자의 선택적 치환체는 임의로 치환된, C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, C6-C24 아릴, C5-C24 헤테로아릴, (C6-C24 아릴)-C1-C12 알킬-, 및 (C5-C24 헤테로아릴)-C1-C12 알킬-로 이루어진 군에서, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C6-C10 아릴, C5-C10 헤테로아릴, (C6-C10 아릴)-C1-C8 알킬-, 및 (C5-C10 헤테로아릴)-C1-C8 알킬로 이루어진 군에서, 또는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C5-C10 헤테로아릴, (C6-C10 아릴)-C1-C6 알킬-, 및 (C5-C10 헤테로아릴)-C1-C6 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된다.
임의로 치환된 질소 원자가 펩타이드 절단 가능 유닛의 PAB 또는 때때로 J로 지정되기도 하는 자가 용해성 스페이서 유닛의 PAB형 모이어티에 대한 공유 부착 지점인 경우, 치환되지 않은 질소 원자와 비교하여, 존재하는 경우, 상기 질소 원자의 선택적 치환체는 질소 원자의 전자 공여 능력에 악영향을 미치지 않는 1가 sp3 탄소 원자가 부착된 것으로 제한되어, 일단 그 전자 공여 능력이 절단 가능 유닛의 절단에 의해 회복되면, 유리 약물로서 약물 유닛의 방출을 위해 자가 용해를 일으킬 수 있도록 한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "O-연결된 모이어티"는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, O-연결된 모이어티의 산소 원자를 통해 직접 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티에 부착된 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭한다. 1가 산소 연결 모이어티는 1가 산소를 통해 부착되고, 일반적으로 -OH, -OC(=O)Rb (아실옥시)이고, 여기서 Rb는 -H, 임의로 치환된 포화 C1-C20 알킬, 임의로 치환된 불포화 C1-C20 알킬, 임의로 치환된 C3-C20 사이클로알킬이고, 여기서 사이클로알킬 모이어티는 포화 또는 부분적으로 불포화된, 임의로 치환된 C3-C20 알케닐, 임의로 치환된 C2-C20 알키닐, 임의로 치환된 C6-C24 아릴, 임의로 치환된 C5-C24 헤테로아릴 또는 임의로 치환된 C3-C24 헤테로사이클릴이거나, 또는 Rb는 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C3-C12 사이클로알킬, 임의로 치환된 C3-C12 알케닐 또는 임의로 치환된 C2-C12 알키닐이고, 여기서 1가 O-연결된 모이어티는 추가로 임의로 치환된, C1-C12 알킬옥시 (즉, C1-C12 지방족 에테르) 모이어티인 에테르 기를 포함하고, 여기서 상기 알킬 모이어티는 포화 또는 불포화된다.
다른 측면에서, 1가 O-연결된 모이어티는 임의로 치환된 페녹시, 임의로 치환된 C1-C8 알킬옥시 (즉, C1-C8 지방족 에테르) 및 -OC(=O)Rb로 이루어진 군에서 선택된 1가 모이어티이고, 여기서 Rb는 일반적으로 포화된 임의로 치환된 C1-C8 알킬이거나, 또는 임의로 치환된 불포화 C3-C8 알킬이다.
여전히 다른 측면에서, O-연결된 모이어티는 -OH, 및 포화 C1-C6 알킬 에테르, 불포화 C3-C6 알킬 에테르, 임의로 치환된, 및 -OC(=O)Rb로 이루어진 군에서 선택된 1가 모이어티이고, 여기서 Rb는 일반적으로, 임의로 치환된, C1-C6 포화 알킬, C3-C6 불포화 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C2-C6 알케닐, 또는 페닐이거나, 또는 -OH 및/또는 페닐을 제외한 해당 기로부터 선택되거나, 또는 Rb은 임의로 치환된, C1-C6 포화 알킬, C3-C6 불포화 알킬 및 C2-C6 알케닐로 이루어진 군에서 선택되는 1가 모이어티이거나, 또는 1가 O-연결된 모이어티는 포화 C1-C6 알킬 에테르, 불포화 C3-C6 알킬 에테르, 및 -OC(=O)Rb로 이루어진 군에서 선택되는, 치환되지 않은 O-연결된 치환체이고, 여기서 Rb는 치환되지 않은, 포화 C1-C6 알킬 또는 치환되지 않은, 불포화 C3-C6 알킬이다.
다른 예시적인 O-연결된 치환체는 본 명세서에 개시된 바와 같이 카르바메이트, 에테르 및 카르보네이트에 대한 정의에 의해 제공되며, 여기서 카르바메이트, 에테르 또는 카르보네이트 작용기의 1가 산소 원자는 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티에 결합되어 있다.
다른 측면에서, 탄소에 O-연결된 모이어티는 2가이고 =O 및 -X-(CH2)n-Y-를 포함하며, 여기서, X 및 Y는 독립적으로 S 및 O이고 아래첨자 n은 2 또는 3이며, X 및 Y가 모두 부착된 탄소와 스피로 고리 시스템을 형성한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "할로겐"은 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 지칭하며 일반적으로 -F 또는 -Cl이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "보호기"는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 연결된 원자 또는 작용기가 원치 않는 반응에 참여하는 것을 방지하거나 그 능력을 현저히 감소시키는 모이어티를 지칭한다. 원자 또는 작용기에 대한 일반적인 보호기는 Greene (1999), "Protective groups in organic synthesis, 3rd ed.", Wiley Interscience에 나타나 있다. 산소, 황, 및 질소와 같은 헤테로원자에 대한 보호기는 때때로 친전자성 화합물과의 원치 않는 반응을 최소화하거나 피하기 위해 사용된다. 다른 경우 보호기는 비보호 헤테로원자의 핵친화성 및/또는 염기성을 줄이거나 제거하기 위해 사용된다. 보호된 산소의 비제한적인 예는 -ORPR이고, 여기서 RPR은 하이드록실에 대한 보호기이고, 여기서 하이드록실은 일반적으로 에스테르 (예를 들어, 아세테이트, 프로피오네이트 또는 벤조에이트)로서 보호된다. 하이드록실에 대한 다른 보호기는 유기금속 시약 또는 기타 고염기성 시약의 핵친화성과의 간섭을 피하고, 그 목적상 하이드록실은 일반적으로 비제한적으로 알킬 또는 헤테로사이클릴 에테르, (예를 들어, 메틸 또는 테트라하이드로피라닐 에테르), 알콕시메틸 에테르 (예를 들어, 메톡시메틸 또는 에톡시메틸 에테르), 임의로 치환된 아릴 에테르, 및 실릴 에테르 (예를 들어, 트리메틸실릴 (TMS), 트리에틸실릴 (TES), tert-부틸디페닐실릴 (TBDPS), tert-부틸디메틸실릴 (TBS/TBDMS), 트리이소프로필실릴 (TIPS) 및 [2-(트리메틸실릴)에톡시]-메틸실릴 (SEM))을 포함하는 에테르로서 보호된다. 질소 보호기는 -NHRPR 또는 -N(RPR)2에서와 같은 1차 또는 2차 아민을 포함하고, 여기서 RPR 중 적어도 하나는 질소 원자 보호기이거나 또는 RPR 둘 다 함께 질소 원자 보호기를 정의한다.
보호기는 원하지 않는 분자의 다른 곳에서 원하는 화학적 변형(들)을 일으키기 위해 필요한 반응 조건 하에서 및 원하는 경우 새로 형성된 분자의 정제 중에 원하지 않는 부반응 및/또는 보호기의 조기 손실을 방지하거나 실질적으로 피할 수 있고, 새로 형성된 분자의 구조 또는 입체 화학적 완전성에 악영향을 주지 않는 조건 하에서 제거될 수 있을 때 보호하기에 적합하다. 일부 측면에서, 적합한 보호기는 작용기를 보호하기 위한 앞서 설명한 것들이다. 다른 측면에서, 적합한 보호기는 펩타이드 결합 반응에 사용되는 보호기이다. 예를 들어, 비-사이클릭 또는 사이클릭 기본 단위의 염기성 질소 원자에 적합한 보호기는 t-부틸옥시카르보닐 (BOC)과 같은 산-약성 카르바메이트 보호기이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "에스테르" 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 해당 구조의 카르보닐 탄소 원자가 다른 헤테로원자에 직접 연결되지 않고 회합된 유기 모이어티의 수소 또는 다른 탄소 원자에 직접 연결된 에스테르 작용기를 정의하는 -C(=O)-O-의 구조를 갖는 치환체, 모이어티 또는 기를 지칭하고, 여기서 상기 1가 산소 원자는 락톤을 제공하기 위해 다른 탄소 원자에서 동일한 유기 모이어티에 부착되거나 마르쿠시 구조 또는 일부 다른 유기 모이어티에 부착된다. 일반적으로 에스테르 작용기 외에 에스테르는 1 내지 50개의 탄소 원자, 일반적으로 1 내지 20개의 탄소 원자 또는 더 일반적으로 1 내지 8개, 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자, 및 0 내지 10 개의 독립적으로 선택된 헤테로원자 (예를 들어, O, S, N, P, Si, 그러나 일반적으로 O, S 및 N), 일반적으로 0 내지 2개의 헤테로원자를 함유하는 유기 모이어티를 포함하거나 이로 구성되고, 여기서 유기 모이어티는 -C(=O)-O- 구조 (즉, 에스테르 작용기를 통해)에 결합되어 유기 모이어티-C(=O)-O- 또는 -C(=O)-O-유기 모이어티의 화학식을 갖는 구조를 제공한다.
에스테르가 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티의 치환체 또는 가변기인 경우, 해당 치환체는 에스테르 작용기의 1가 산소 원자를 통해 구조 또는 다른 유기 모이어티에 결합되어 이는 때때로 아실옥시라고 지칭되는 1가 O-연결된 치환체가 된다. 이러한 경우, 에스테르 작용기의 카르보닐 탄소에 부착된 유기 모이어티는 일반적으로 C1-C20 알킬, C2-C20 알케닐, C2-C20 알키닐, C6-C24 아릴, C5-C24 헤테로아릴, C3-C24 헤테로사이클릴이거나 또는 예를 들어, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체를 갖는, 이들 중 어느 하나의 치환된 유도체이고, 더 일반적으로는 C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, C6-C10 아릴, C5-C10 헤테로아릴, C3-C10 헤테로사이클릴 또는 예를 들어 1, 2, 또는 3개의 치환체를 갖는, 이들 중 어느 하나의 치환된 유도체이거나 또는 C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, 또는 페닐 또는 예를 들어 1 또는 2개의 치환체를 갖는, 이들 중 어느 하나의 치환된 유도체이고, 여기서 독립적으로 선택된 각 치환체는 선택적 알킬 치환체에 대해 본 명세서에 정의된 바와 같거나, 또는 치환되지 않은 C1-C6 알킬 또는 치환되지 않은 C2-C6 알케닐이다.
예로서 비제한적이고 예시적인 에스테르는 아세테이트, 프로피오네이트, 이소프로피오네이트, 이소부티레이트, 부티레이트, 발레레이트, 이소발레레이트, 카프로에이트, 이소카프로에이트, 헥사노에이트, 헵타노에이트, 옥타노에이트, 페닐아세테이트 에스테르 및 벤조에이트 에스테르이거나 또는 -OC(=O)Rb의 구조를 갖고 여기서 Rb는 아실옥시 O-연결된 치환체에 대해 정의된 바와 같고 일반적으로 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, 2-메틸-프로프-1-일, 2,2-디메틸-프로프-1-일, 프로프-2-엔-1-일, 및 비닐로 이루어진 군에서 선택된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "에테르" 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 카르보닐 모이어티(들)에 결합되지 않은 1, 2, 3, 4개 또는 그 이상의 -O- (즉, 옥시) 모이어티, 일반적으로 1 또는 2개를 포함하는 유기 모이어티, 기 또는 치환체를 지칭하고, 여기서, 두 개의 -O- 모이어티는 서로 바로 인접하지 않는다 (즉, 직접 부착되어 있지 않는다). 일반적으로, 에테르는 -O- 유기 모이어티의 화학식을 함유하며, 여기서 유기 모이어티는 에스테르 작용기에 결합된 유기 모이어티에 대해 설명된 바와 같거나 임의로 치환된 알킬기에 대해 본 명세서에 설명된 바와 같다. 에테르가 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티의 치환체 또는 가변기로서 언급될 때, 에테르 작용기의 산소는 회합된 마르쿠시 식에 부착되며, 때때로 예시적인 O-연결 치환체인 "알콕시" 기로 지정되기도 한다. 일부 측면에서, 에테르 O-연결된 치환체는 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 일반적으로 1, 2 또는 3개로 임의로 치환된, C1-C20 알콕시 또는 C1-C12 알콕시이고, 일부 측면에서는 1 또는 2개의 치환체로 임의로 치환된, C1-C8 알콕시 또는 C1-C6 알콕시이고, 여기서, 각각의 독립적으로 선택된 치환체는 선택적 알킬 치환체에 대해 본 명세서에 정의된 바와 같고, 여전히 다른 측면에서 에테르 O-연결된 치환체는 예로서 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소-프로폭시, 부톡시 및 알릴옥시 (즉, -OCH2CH=CH2)와 같은 치환되지 않은, 포화 또는 불포화 C1-C4 알콕시이고, 이에 한정되지는 않는다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "아미드" 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, 임의로 치환된 작용기가 카르보닐 탄소에 다른 헤테로원자가 직접 부착되어 있지 않은 R-C(=O)N(Rc)- 또는 -C(=O)N(Rc)2의 구조를 갖는 모이어티를 지칭하고, 여기서 각 Rc는 독립적으로 수소, 보호기 또는 독립적으로 선택된 유기 모이어티이고, R은 수소 또는 유기 모이어티이고, 여기서 Rc로부터 독립적으로 선택된 유기 모이어티는 에스테르 작용기에 결합된 유기 모이어티에 대해서 본 명세서에 기재된 바와 같거나 임의로 치환된 알킬기에 대해서 본 명세서에 기재된 바와 같다. 아미드가 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티의 치환체 또는 가변기로서 인용되는 경우, 아미드 작용기의 아미드 질소 원자 또는 카르보닐 탄소 원자는 해당 구조 또는 다른 유기 모어티에 결합된다. 아미드는 일반적으로 염화산과 같은 산 할로겐화물과 1차 또는 2차 아민을 함유하는 분자를 응축하여 제조된다. 대안적으로, 일부 측면에서 카르복실산 함유 분자의 활성화된 에스테르를 통해 진행되는 펩타이드 합성 분야에서 잘 알려진 아미드 커플링 반응이 사용된다. 펩타이드 커플링 방법을 통한 아미드 결합의 예시적인 제조는 Benoiton (2006) "Chemistry of peptide synthesis", CRC Press; Bodansky (1988) "Peptide synthesis: A practical textbook" Springer-Verlag; Frinkin, M. 등 "Peptide Synthesis" Ann. Rev. Biochem. (1974) 43: 419-443에 제공된다. 활성화된 카르복실산 제조에 사용되는 시약은 Han, 등 "Recent development of peptide coupling agents in organic synthesis" Tet. (2004) 60: 2447-2476에 제공된다.
따라서, 일부 측면에서, 아미드는 커플링제 존재하에 카르복실산과 아민을 반응시켜 제조할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "커플링제의 존재 하에서"는 카르복실산을 커플링제와 접촉시켜 산을 활성화된 에스테르 또는 혼합 무수물과 같은 활성화된 유도체로 전환시키고, 산의 생성된 활성화된 유도체를 단리하거나 단리하지 않고, 이후에 또는 동시에 생성된 활성화된 유도체를 아민과 접촉시키는 것을 포함한다. 어떤 경우에는 활성화된 유도체가 그 자리에서 제조된다. 다른 경우에는 활성화된 유도체를 단리하여 원하지 않는 불순물을 제거할 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "카르보네이트" 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고카르보네이트 작용기를 정의하는 -O-C(=O)-O- 구조를 갖는 작용기를 함유하는 치환체, 모이어티 또는 기를 의미한다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용되는 카르보네이트 기는 -O-C(=O)-O- 구조에 결합된 유기 모이어티를 포함하고, 여기서, 유기 모이어티는 에스테르 작용기에 결합된 유기 모이어티, 예를 들어, 유기 모이어티-O-C(=O)-O-에 대해 본 명세서에 기술된 바와 같다. 카르보네이트가 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티의 치환체 또는 가변기로서 인용되는 경우, 카르보네이트 작용기의 1가 산소 원자 중 하나는 해당 구조 또는 유기 모이어티에 부착되고 다른 하나는 에스테르 작용기에 결합된 유기 모이어티에 대해 전술한 바와 같거나 또는 임의로 치환된 알킬기에 대해 본 명세서에 기재된 바와 같은 다른 유기 모이어티의 탄소 원자에 결합된다. 이러한 경우, 카르보네이트는 예시적인 O-연결된 치환체이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "카르바메이트" 용어는 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되고, -O-C(=O)N(Rc)- 또는 -O-C(=O)N(Rc)2, 또는 -O-C(=O)NH(임의로 치환된 알킬)- 또는 -O-C(=O)N(임의로 치환된 알킬)2로 표시되는, 임의로 치환된 카르바메이트 작용기 구조를 함유하는 치환체, 모이어티 또는 기를 의미하고, 여기서 독립적으로 선택된 임의로 치환된 알킬(들)은 예시적인 카르바메이트 작용기 치환체이고, 일반적으로, 임의로 치환된, C1-C12 알킬 또는 C1-C8 알킬이고, 더 일반적으로, 임의로 치환된, C1-C6 알킬 또는 C1-C4 알킬이고, 여기서 각 Rc는 독립적으로 선택되고, 여기서 독립적으로 선택된 Rc는 수소, 보호기 또는 유기 모이어티이고, 여기서, 유기 모이어티는 에스테르 작용기에 결합된 유기 모이어티에 대해 본 명세서에 기술된 바와 같거나 임의로 치환된 알킬기에 대해 본 명세서에 기술된 바와 같다. 일반적으로, 카르바메이트기는 Rc로부터 독립적으로 선택된 유기 모이어티를 추가적으로 포함하고, 여기서 유기 모이어티는 에스테르 작용기에 결합되고, -O-C(=O)-N(Rc)- 구조를 통해 결합된 유기 모이어티에 대해 본 명세서에 기술된 바와 같고, 여기서 결과 구조는 유기 모이어티-O-C(=O)-N(Rc)- 또는 -O-C(=O)-N(Rc)-유기 모이어티의 화학식을 갖는다. 카르바메이트가 회합된 마르쿠시 구조 또는 다른 유기 모이어티의 치환체 또는 가변기로서 인용되는 경우, 카르바메이트 작용기의 1가 산소 (O-연결) 또는 질소 (N-연결)는 회합된 마르쿠시 식에 부착된다. 카르바메이트 치환체의 연결은 이 치환체가 언급되는 문맥에서 명시적으로 언급되거나 (N- 또는 O-연결됨) 암시된다. 본 명세서에 기술된 카르바메이트 치환체는 예시적인 1가 카르바메이트 치환체이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "리간드 약물 접합체" 용어는 본 명세서에서 사용되고, 표적화 약제에 포함하거나 구조가 이에 대응하는 리간드 유닛 (L) 및 유리 약물을 포함하거나 구조가 이에 대응하는 약물 유닛 (D)을 포함하는 작제물을 지칭하고, 여기서 L과 D는 링커 유닛 (LU)을 통해 서로 결합되고, 여기서 상기 리간드 약물 접합체는 표적 세포의 표적 모이어티에 선택적으로 결합할 수 있다. 한 측면에서 리간드 약물 접합체 (LDC)라는 용어는 각 리간드 유닛에 접합된 오리스타틴 약물 유닛의 수 및/또는 약물 유닛이 접합되는 리간드 유닛 상의 위치가 동일하거나 어느 정도 상이한 복수의 개별 접합체 화합물 (즉, 조성물)을 지칭한다. 일부 측면에서 본 용어는 본질적으로 동일한 리간드 유닛, 및 동일한 약물 유닛 및 링커 유닛을 갖는 접합체 화합물의 집합 (즉, 집단 또는 복수)을 지칭하고, 일부 측면에서 각 항체 잔기에 부착된 오리스타틴 약물 링커 모이어티의 로딩 및/또는 분포는 가변적이다 (예를 들어, 복수의 이들 화합물 중 임의의 두 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 유닛의 수는 동일하지만 리간드 유닛에 대한 부착 부위의 위치가 다른 경우와 같이). 이러한 경우, 리간드 약물 접합체는 접합체 화합물의 평균 약물 로딩으로 설명된다.
리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 유닛당 약물 유닛의 평균 수는 리간드 약물 접합체 화합물의 집단에 대한 평균 수이며, 때때로 아래첨자 P로 지정되고, 이는 일부 측면에서, 주로 리간드 유닛에 접합된 약물 유닛의 수 및/또는 이들이 접합된 리간드 유닛 상의 위치에 의해 상이한 이들 화합물의 분포를 반영한다.
본 발명의 리간드 약물 접합체 화합물은, 그 자체로 또는 리간드 약물 접합체 조성물 내에서, 일반적으로 하기 화학식 1의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 일부 측면에서 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 L은 리간드 유닛이고; LU는 링커 유닛이고; 아래첨자 p'는 1 내지 24 범위의 정수이고, D'는 1 내지 4개의 약물 유닛을 나타낸다. 일부 측면에서 리간드 유닛은 항체 또는 항원 결합 단편과 포함되거나 구조적으로 이에 대응하여 항체 리간드 유닛을 정의한다. 이러한 측면에서, 항체 리간드 유닛은 유리 약물의 후속 방출을 위해 표적 세포의 항원에 선택적으로 결합할 수 있으며, 여기서 한 측면에서 표적 항원은 항체 리간드 유닛에 의해 선택적으로 인식되는 암 세포 항원이고, 상기 결합에 따라 결합된 ADC 화합물과 함께 상기 암 세포로 내재화되어 상기 내재화 이후 유리 약물의 세포 내 방출을 개시할 수 있다. 이러한 측면에서 리간드 약물 접합체 화합물의 각 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 일부 측면에서 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 각 약물 링커 모이어티의 D는 약물 유닛이고, 물결선은 L에 대한 공유 결합을 나타내고, LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고; B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고; LO는 제2 링커 모이어티이고; D는 약물 유닛이고, 여기서 약물 유닛은 구조상 유리 약물에 상응하고; 아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
여기서, 리간드 약물 접합체 화합물의 분포 또는 집합을 포함하는 리간드 약물 접합체 조성물은 화학식 1의 구조로 표시되며, 여기서 아래첨자 p'는 아래첨자 p로 대체되고, 여기서, 아래첨자 p는 약 2 내지 약 24 범위의 수이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "리간드 유닛"는 리간드 약물 접합체 조성물 또는 화합물의 동적 표적화된 모이어티에 선택적으로 결합할 수 있고 표적화 약제의 구조를 포함하거나 이에 대응하는 리간드 약물 접합체 조성물 또는 화합물의 표적 모이어티를 지칭한다. 리간드 유닛 (L)은 수용체 리간드, 세포 표면 항원에 대한 항체, 및 수송체 기질로부터의 것을 포함하나 이에 국한되지 않는다. 일부 측면에서, 리간드 약물 접합체 조성물의 접합체 화합물에 결합되는 수용체, 항원 또는 수송체는 정상 세포와 대조적으로 비정상 세포에 더 풍부하게 존재하여, 비접합 형태의 약물 투여와 관련된 하나 이상의 부작용의 잠재적 발생 또는 심각성을 감소시키거나 내약성의 바람직한 개선에 영향을 미친다. 다른 측면에서, 리간드 약물 접합체 화합물의 리간드 유닛에 결합될 수용체, 항원 또는 수송체는 비정상 세포의 부위로부터 멀리 떨어져 있는 정상 세포와 대조적으로 비정상 세포 부근의 정상 세포에 더 풍부하게 존재하여, 근처의 비정상 세포를 유리 약물에 선택적으로 노출시킨다. 항체 리간드 유닛을 포함한 리간드 유닛의 다양한 측면이 본 발명의 실시양태에 의해 추가로 설명된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "표적화 약제"는 표적 모이어티에 선택적으로 결합할 수 있고, 표적 모이어티에 선택적으로 결합할 수 있고, 리간드 약물 접합체에 리간드 유닛으로 통합될 때 그 능력을 실질적으로 유지하는 약제를 지칭한다. 따라서 리간드 약물 접합체의 리간드 유닛은 표적화 약제와 구조적으로 일치하므로 리간드 유닛은 접합체의 표적 모이어티가 된다. 일부 측면에서, 표적화 약제는 비정상 세포의 특징적이거나 정상 세포에 비해, 더 많은 카피 수로 존재하고 이러한 세포가 발견되는 주변 환경에 특이적인 접근 가능한 항원으로서 유리 약물 투여와 비교하여 향상된 내약성을 달성하는 정도로 접근 가능한 항원에 선택적으로 결합하는 항체 또는 그 단편이거나, 이러한 세포가 발견되는 주변 환경에 특이적인 접근 가능한 항원으로서 유리 약물 투여와 비교하여 향상된 내약성을 달성하는 정도에 이른다. 다른 측면에서, 표적화 약제는 비정상 세포의 특징적인 또는 비정상 세포에 더 풍부하게 존재하는 접근 가능한 수용체, 또는 비정상 세포를 둘러싼 환경에 특유한 명목상 정상 세포의 접근 가능한 수용체에 선택적으로 결합하는 수용체 리간드이다. 일반적으로, 표적화 약제는 비정상 포유류 세포의 표적 모이어티, 보다 일반적으로 비정상 인간 세포의 표적 모이어티에 선택적으로 결합하는 본 명세서에 정의된 항체이다.
본 명세서에 정의된 "표적 모이어티"는 표적화 약제에 의해 선택적으로 인식되는 모이어티, 또는 표적화 약제를 포함하거나 구조적으로 이에 대응하는 리간드 유닛인, 리간드 약물 접합체의 표적화 모이어티이다. 일부 측면에서, 표적 모이어티는 비정상 세포의 위, 내부 또는 근처에 존재하며 일반적으로 정상 세포 또는 비정상 세포 부위에서 멀리 떨어진 정상 세포의 환경에 비해 이러한 세포에 더 많은 양 또는 카피 수로 존재하여 유리 약물 투여에 비해 내약성을 개선하거나 해당 투여로 인한 하나 이상의 부작용 가능성을 감소시킨다. 일부 측면에서, 표적 모이어티는 항체에 의해 선택적으로 결합할 수 있는 항원으로서, 이의 항체 약물 접합 조성물 또는 화합물에서 항체 리간드 유닛에 포함되거나 이에 구조적으로 상응하는 예시적인 표적화 약제이다. 다른 측면에서, 표적 모이어티는 세포 외로 접근 가능한 세포막 수용체에 대한 리간드의 모이어티이고, 일부 측면에서, 리간드 약물 접합체 화합물의 리간드 유닛에 의해 동족 표적 모이어티가 결합될 때 내재화되며, 여기서, 리간드 유닛은 수용체 리간드와 통합되거나 구조적으로 상응하고, 다른 측면에서 수용체는 세포 표면 수용체에 결합한 후 리간드 약물 접합체 화합물의 수동적 또는 촉진적 수송이 가능하다. 일부 측면에서, 표적 모이어티는 비정상적인 포유류 세포 또는 그러한 비정상적인 세포의 환경에 특징적인 포유류 세포에 존재한다. 이러한 측면 중 일부에서, 표적 모이어티는 비정상 포유류 세포의 항원이며, 더 일반적으로는 비정상 인간 세포의 표적 모이어티이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "표적 세포"는 비정상 세포의 증식 또는 기타 원치 않는 활성을 억제하기 위해 리간드 약물 접합체가 상호 작용하도록 설계된 의도된 세포이다. 일부 측면에서 표적 세포는 과증식 세포 또는 과활성화된 면역 세포로, 이들은 예시적인 비정상 세포이다. 일반적으로 이러한 비정상 세포는 포유류 세포이며 더 일반적으로는 인간 세포이다. 다른 측면에서, 표적 세포는 비정상 세포의 근처에 있으므로 리간드 약물 접합체가 근처 세포에 작용하면 비정상 세포에 의도된 효과가 있다. 예를 들어, 주변 세포는 종양의 비정상적인 혈관 구조의 특징인 상피 세포일 수 있다. 리간드 약물 접합체 화합물에 의해 이러한 혈관 세포를 표적으로 삼으면 이러한 세포에 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과가 있으며, 이는 종양의 주변 비정상 세포로의 영양분 전달을 억제하는 것으로 여겨진다. 이러한 억제는 간접적으로 비정상 세포에 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과를 가지며, 또한 이러한 세포 근처에서 약물 페이로드를 방출하여 근처의 비정상 세포에 직접적인 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과를 가질 수도 있다.
"항체-약물 접합체" 또는 간단히 "ADC"는 세포 독성 제제 또는 세포 증식 억제제에 접합된 항체를 지칭한다. 항체-약물 접합체는 일반적으로 세포 표면의 표적 항원 (예를 들어, GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19)에 결합한 후, 약물이 방출되는 세포 내로 항체-약물 접합체가 내재화된다. 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "항체 약물 접합체"는 화학식 1의 리간드 약물 접합체의 하위 집합이므로, 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하거나 이에 상응하는 항체 리간드 유닛 (L), 및 생물학적 활성 화합물을 포함하거나 구조적으로 이에 대응하는, 종종 유리 약물이라고도 하는 약물 유닛 (D)을 포함하는 작제물을 지칭하며, 여기서, L과 D가 링커 유닛 (LU)을 통해 서로 결합되어 있으며, 여기서 항체 약물 접합체는 일부 측면에서 암세포와 같은 비정상 세포의 항원인, 표적 세표의 표적 항원에 표적화 항체 리간드 유닛을 통해 선택적으로 결합할 수 있다.
한 측면에서, 항체 약물 접합체 (ADC)라는 용어는 동일하거나, 각각의 항체 리간드 유닛 및/또는 약물 유닛이 접합되는 항체 리간드 유닛 상의 위치에 접합된 약물 유닛의 수만큼 어느 정도 상이한 복수의 개별 접합체 화합물 (즉, 조성물)을 지칭한다. 일부 측면에서 이 용어는 세포 배양으로부터 항체를 생산하는 동안 발생하는 돌연변이 아미노산 변이 및 본원에 기술된 바와 같은 다양한 당화 패턴을 허용하는 동일한 약물-링커 모이어티 및 항체 리간드 유닛을 갖는 접합체 화합물의 분포 또는 집합 (즉, 집단 또는 복수)을 지칭하고, 이는 일부 측면에서 각 항체 잔기에 부착된 약물 링커 모이어티의 로딩 및/또는 분포는 가변적이다 (예를 들어, 복수의 항체 약물 접합체 화합물 중 임의의 두 화합물의 약물 유닛 수는 동일하지만, 표적화 항체 리간드 유닛에 대한 약물 링커 모이어티의 부착 부위의 위치가 상이한 경우에서와 같이). 이러한 경우, 항체 약물 접합체는 접합체 화합물의 평균 약물 로딩으로 설명된다.
링커 유닛이 분지되지 않은 온전한 약물 링커 모이어티를 갖는 항체 약물 접합체 조성물에서, 항체 리간드 유닛 또는 이의 항원 결합 단편당 약물 유닛의 평균 갯수는 항체 약물 접합체 화합물의 집단에 대한 평균 갯수이고, 일부 측면에서는 주로 항체 리간드 유닛에 접합된 약물 유닛의 수 및/또는 그 위치에 따라 상이한 이들 화합물의 분포를 반영한다. 링커 유닛이 분지된 경우 평균 수는 항체 약물 접합체 화합물 집단에 대한 약물 링커 모이어티의 분포를 반영한다. 두 문맥에서 p는 약 2 내지 약 24 또는 약 2 내지 약 20 범위의 숫자이며 일반적으로 약 2, 약 4 또는 약 10 또는 약 8이다. 다른 맥락에서, p는 항체 약물 접합체 화합물의 집단 내에서 항체 약물 접합체의 단일 항체 리간드 유닛에 공유 결합된 약물 유닛의 수를 나타내고, 여기서 해당 집단의 화합물은 주로 약물 유닛 또는 약물 링커 모이어티의 수 및/또는 위치에 따라 일부 측면에서 차이가 있다. 이 문맥에서 p는 p'로 지정되며 1 내지 24 또는 1 내지 20 범위의 정수, 일반적으로 1 내지 12 또는 1 내지 10 범위의 정수, 더 일반적으로 1 내지 8 범위의 정수이다. 다른 측면에서, 본질적으로 항체 표적제의 가용한 모든 반응성 작용기는 약물 링커 모이어티에 공유 결합을 형성하여 최대 수의 약물 링커 모이어티에 부착된 항체 리간드 유닛을 제공하여, 상기 항체 약물 접합체 조성물의 p값이 상기 조성물의 항체 약물 접합체 화합물 각각에 대한 각각의 p' 값과 동일하거나 거의 동일하도록 하고, 따라서, 전기영동, HIC, 역상 HPLC 또는 크기 배제 크로마토그래피와 같은 적절한 크로마토그래피 방법을 사용하여 검출된 것처럼, 존재한다 하더라도, 낮은 p' 값을 갖는 소량의 항체 약물 접합체 화합물만 존재한다.
접합 반응으로부터의 제조에서 항체 리간드 유닛당 약물 유닛 또는 약물 링커 모이어티의 평균 수는 일부 측면에서 질량 분석법 검출과 함께 전술한 바와 같은 종래의 크로마토그래피 수단에 의해 특징지어진다. 다른 측면에서는 p' 값의 관점에서 접합체 화합물의 정량적 분포가 결정된다. 이러한 경우, 다른 약물 유닛 또는 약물 링커 모이어티 로딩을 갖는 것으로부터 항체 약물 접합체 조성물에서 p'가 특정 값인 균질 항체 약물 접합체 화합물의 분리, 정제, 및 특성화는 앞서 언급한 크로마토그래피 방법과 같은 수단으로 달성된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "약물 링커 화합물"은 링커 유닛 전구체 (LU')에 공유적으로 부착된 약물 유닛을 갖고 있는 화합물을 지칭하고, 여기서, LU'는 반응성 또는 활성화 가능한 작용기를 함유하기 때문에 리간드 공유 결합 전구체 (LB') 모이어티라고도 하는 LB'를 포함하고, 여기서 상기 반응성 작용기 또는 활성화 후 활성화 가능한 작용기는 표적화 약제와 반응하여 리간드 공유 결합 모이어티 (LB)와 리간드 유닛 사이에 공유 결합을 형성할 수 있고, 따라서, 화학식 1의 리간드 약물 접합체 화합물에 대한 화학식 1A의 약물 링커 모이어티, 특히 항체를 포함하거나 구조적으로 대응하는 항체 리간드 유닛에 공유 결합을 제공한다,
본 발명의 약물 링커 화합물은 일반적으로 하기 화학식 I의 일반식을 갖거나:
또는 이의 염, 일부 측면에서는 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 LU'는 LU 전구체이고, D'는 1 내지 4개의 약물 유닛을 나타내고, 여기서 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IA의 구조에 의해 추가로 정의되고:
여기서, LB'는 반응성 또는 활성화 가능한 작용기를 포함하고 나머지 가변기는 화학식 1A에 정의된 바와 같다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "세포 독성 제제"는 세포에 세포 독성 효과가 있는 제제를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 "세포 독성 제제"는 시험관 또는 생체 내에서 세포 사멸을 유도하거나 일반적으로 비정상적인 포유류 세포인 세포의 증식 또는 지속적인 생존을 억제할 수 있는 화합물이다. 직접적인 세포 사멸이 아닌 비정상 세포의 증식을 억제하여 주로 치료 효과를 발휘하는 세포 증식 억제제는 세포 독성 제제의 정의에 포함된다. 일부 측면에서 세포 독성 제제는 항체 약물 접합체에서 약물 유닛이 방출되어 생성되는 유리 약물이다.
"세포 독성 효과"는 표적 세포의 고갈, 제거 및/또는 사멸을 지칭한다.
"세포 증식 억제 효과"는 세포 증식의 억제를 지칭한다.
"세포 증식 억제제"는 세포에 대한 세포 증식 억제 효과를 가지며, 따라서 세포의 특정 하위 집합의 성장 및/또는 확장을 억제하는 제제를 지칭한다. 세포 증식 억제제는 항체에 접합되거나 항체와 함께 투여될 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "약물 유닛"은 리간드 약물 접합체 (LDC)의 약물 링커 모이어티에서 링커 유닛 (LU)에 공유적으로 부착되거나 또는 약물 링커 화합물의 링커 유닛 전구체 (LU')에 공유적으로 부착되고, 약물 링커 모이어티 또는 약물 링커 화합물에서 유리 약물로 방출될 수 있는 약물의 잔기를 지칭한다. 유리 약물은 약물 유닛에 직접 통합되거나, 유리 약물의 성분이 LU 또는 LU' 또는 그 중간체에 공유적으로 부착된 후 추가로 정교화되어 약물 유닛의 구조를 완성할 수 있다. 본 명세서에서 단독으로 또는 다른 용어 (예컨대, "약물 유닛")와 관련하여 사용되는 "약물"이라는 용어는 화합물이 의료 또는 수의학적 치료용으로 정부 기관에 의해 승인되었거나 승인될 수 있거나 승인될 예정이라는 것을 암시하는 것은 아니다.
일부 측면에서, 약물 유닛에 통합된 유리 약물은 세포 독성 화합물, 일반적으로 2차 지방족 아민을 접합 손잡이로 갖는 화합물이며, 본 명세서에 정의된 바와 같은 오리스타틴 화합물을 포함한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 "오리스타틴 약물", "오리스타틴 화합물" 및 이와 유사한 용어는 돌라프롤린 및 돌라이솔류신 잔기 또는 이와 관련된 아미노산 잔기를 포함하는 세포 독성, 세포 증식 억제 또는 항염증 활성을 갖는 펩타이드 기반 튜불린 파괴제를 지칭한다.
일부 예시적인 오리스타틴은 하기 DE 또는 DF의 구조를 갖고:
여기서 Z는 -O-, -S-, 또는 -N(R19)-이고, 여기서 R10 내지 R21 오리스타틴 약물 유닛의 실시양태에 정의된 바와 같으며, 표시된 질소 원자 (†)는 2차 아민의 것이다 (예를 들어, R10, R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 -CH3임). 이러한 측면에서 오리스타틴은 해당 질소 원자를 포함하는 카르바메이트 작용기를 통해 약물 유닛으로 통합된다. 상기 카르바메이트 작용기는 예시적인 제2 스페이서 유닛 (Y')으로서 자가 용해가 가능하고, 본 명세서에 기재된 약물 링커 모이어티 중 임의의 하나에서 아래첨자 y가 2가 되도록 PAB 또는 PAB형 스페이서 유닛 (Y)에 차례로 부착된다.
다른 예시적인 오리스타틴으로는 AE, AFP, AEB, AEVB, MMAF, 및 MMAE 및 본 발명의 실시양태에 추가로 설명된 것들을 포함하지만 이에 국한되지 않는다. 오리스타틴의 합성 및 구조는 미국 특허 출원 공개 번호 2003-0083263, 2005-0238649 2005-0009751, 2009-0111756, 및 2011-0020343; 국제 특허 공개 번호 WO 04/010957, 국제 특허 공개 번호 WO 02/088172, 및 미국 특허 번호 7,659,241 및 8,343,928에 기재되어 있다. 여기에 개시된 이들의 구조 및 합성 방법은 본원에 구체적으로 참조되어 통합되어 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "이의 염"은 화합물의 염 형태 (예를 들어, 약물, 약물 링커 화합물 또는 LDC 화합물)를 지칭한다. 화합물의 염 형태는 하나 이상의 내부 염 형태의 것이고/거나 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 기타 반대이온과 같은 다른 분자의 포함을 포함한다. 화합물의 염 형태의 반대이온은 일반적으로 모 화합물의 전하를 안정화시키는 유기 또는 무기 모이어티이다. 화합물의 염 형태는 그 구조에 하나 이상의 하전 원자를 가지고 있다. 여러 개의 하전 원자가 염 형태의 일부인 경우, 여러 개의 반대이온 및/또는 여러 개의 하전된 반대 이온이 존재한다. 따라서, 화합물의 염 형태는 일반적으로 화합물의 비염 형태에 대응하는 하나 이상의 하전 원자 및 하나 이상의 반대이온을 갖는다. 일부 측면에서, 화합물의 비염 형태는 적어도 하나의 아미노기 또는 다른 염기성 모이어티를 함유하며, 따라서 산의 존재 하에서 염기성 모이어티를 갖는 산 부가염이 얻어진다. 다른 측면에서, 화합물의 비염 형태는 적어도 하나의 카르복실산기 또는 다른 산성 모이어티를 함유하며, 따라서 염기의 존재 하에서 카르복실레이트 또는 다른 음이온성 모이어티가 얻어진다.
화합물 염 형태의 예시적인 반대 음이온 및 반대 양이온은 설페이트, 트리플루오로아세테이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 니트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아소코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p 톨루엔설포네이트, 및 파모에이트 (즉, 1,1' 메틸렌 비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하나 이에 국한되지 않는다.
화합물의 염 형태의 선택은 의도된 투여 경로에 따라 다양한 pH 값에서의 적절한 수용성, 유동 특성을 갖는 결정성 및 취급에 적합한 낮은 흡습성 (즉, 수분 흡수 대 상대 습도), 가속 조건에서의 화학적 및 고체 상태 안정성의 결정에 따른 (즉, 40℃ 및 75% 상대 습도에서 보관 시 분해 또는 고체 상태 변화를 결정을 위해) 필요한 보관 수명을 포함하여 약물 제품이 나타내야 하는 특성에 따라 결정된다.
"약학적으로 허용 가능한 염"은 본 명세서에 기술된 바와 같이 대상체에 투여하기에 적합한 화합물의 염 형태이며, 일부 측면에서는 P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zurich:Wiley-VCH/VHCA, 2002에 기술된 바와 같이 반대 양이온 또는 반대 음이온을 포함한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어로서의 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로, 온전한 단일 클론 항체, 다클론 항체, 단일 특이적 항체, 다중 특이적 항체 (예를 들어, 이중 특이적 항체) 및 원하는 수의 약물-링커 모이어티에 부착하기 위해 항체 단편이 필요한 수의 부위를 가지도록 하고 표적 암세포 항원에 특이적이고 선택적으로 결합할 수 있어야 하는, 원하는 생물학적 활성을 나타내는 항체 단편을 포함한다. 항체의 기본 형태는 사량체이며 일반적으로 두 쌍의 동일한 면역글로불린 사슬로 구성되며, 각 쌍은 하나의 경쇄 및 하나의 중쇄를 갖는다. 각 쌍에서 경쇄 및 중쇄 가변 영역 (VL 및 VH)은 주로 항원과의 결합을 담당한다. 경쇄 및 중쇄 가변 도메인은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"이라고도 하는 3개의 초가변 영역에 의해 중단된 프레임워크 영역으로 구성된다. 일부 측면에서, 불변 영역은 면역 체계에 의해 인식되고 면역 체계와 상호 작용하여 (참조, 예를 들어, Janeway 등, 2001, Immunol. Biology, 5th Ed., Garland Publishing, New York) 이펙터 기능을 발휘한다. 항체는 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, 및 IgA) 또는 이의 하위 클래스 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2)를 포함한다. 항체는 모든 적합한 종에서 유래할 수 있다. 일부 측면에서, 항체는 인간 또는 뮤린에서 유래한 것이다. 이러한 항체에는 인간, 인간화 또는 키메라 항체가 포함된다.
"항체"라는 용어는 또한 구체적으로 예를 들어, 아래에 설명된 바와 같이, 단일 클론 항체 (전장 또는 온전한 단일 클론 항체 포함), 다에피토픽 또는 단일에피토픽 특이성을 갖는 항체, 다클론 또는 1가 항체, 다가 항체, 다중 특이성 항체 (예를 들어, 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 이중 특이성 항체), 단일 사슬 항체, 및 전술한 항체들의 단편을 포함한다. 항체는 인간, 인간화, 키메라 및/또는 친화성 성숙뿐만 아니라 다른 종, 예를 들어, 마우스, 토끼 등의 항체일 수 있다. 따라서 "항체"라는 용어는 예를 들어 특정 분자 항원에 결합할 수 있고 두 쌍의 동일한 폴리펩타이드 사슬을 포함하는 면역글로불린 클래스의 폴리펩타이드에 속하는 B 세포의 폴리펩타이드 생성물을 포함하고, 여기서, 각 쌍은 하나의 중쇄 (약 50 내지 70 kDa) 및 하나의 경쇄 (약 25 kDa)를 가지며, 각 사슬의 각 아미노 말단부는 약 100 내지 약 130개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 각 사슬의 각 카르복시 말단부는 불변 영역을 포함한다. 예를 들어, Antibody Engineering (Borrebaeck ed., 2d ed. 1995); 및 Kuby, Immunology (3d ed. 1997) 참조. "항체"라는 용어는 또한 합성 항체, 재조합으로 생성된 항체, 카멜화된 항체, 체내 항체, 항-이디오형 (항-Id) 항체, 및 그 단편이 유래된 항체의 결합 활성의 일부 또는 전부를 보유하는 항체 중쇄 및/또는 경쇄 폴리펩타이드의 일부를 지칭하는, 상기 중 어느 하나의 기능성 단편 (예를 들어, 항원 결합 단편)을 포함하지만 이에 국한되지 않는다. 기능성 단편 (예를 들어, 항원 결합 단편)의 비제한적인 예로는 단일 사슬 Fv (scFv) (예를 들어, 단일 특이적, 이중 특이적 등 포함), Fab 단편, F(ab') 단편, F(ab)2 단편, F(ab')2 단편, 이황화 연결 Fvs (dsFv), Fd 단편, Fv 단편, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 및 미니바디를 포함한다. 특히, 본 명세서에 제공된 항체는 면역 글로불린 분자 및 면역 글로불린 분자의 면역학적 활성 부분, 예를 들어 항원 결합 도메인 또는 항원에 결합하는 항원 결합 부위 (예를 들어, 항체의 하나 이상의 CDR)를 함유하는 분자를 포함한다. 이러한 항체 단편은 예를 들어 Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual (1989); Mol. Biology and Biotechnology: A Comprehensive Desk Reference (Myers ed., 1995); Huston 등, 1993, Cell Biophysics 22:189-224; Pluckthun and Skerra, 1989, Meth. Enzymol. 178:497-515; 및 Day, Advanced Immunochemistry (2d ed. 1990)에서 찾아볼 수 있다.
일부 측면에서, 항체는 항체의 힌지 이황화 결합이 환원을 거친 환원된 형태이다. 그런 다음, 항체는 약물 링커 화합물의 적절한 친전자체와의 환원에 의해 얻어진 하나 이상의 시스테인 티올의 반응에 의해 항체 리간드 유닛으로서 항체 약물 접합체에 통합되어 항체 리간드 유닛에 대한 약물 링커 모이어티의 공유 결합 또는 약물 링커 모이어티로서 최종 형태로 더욱 정교화되는 링커 중간체의 공유 결합을 초래한다.
본 명세서에서 사용되는 "단일 클론 항체"는 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 얻어진 항체, 즉, 집단을 구성하는 개별 항체들이 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이 및/또는 당화 패턴의 차이를 제외하고는 동일한 항체를 지칭한다. 단일 클론 항체는 단일 항원 부위를 대상으로 하는 매우 특이적인 것이다. 서로 다른 결정인자 (에피토프)에 대한 서로 다른 항체를 포함할 수 있는 다클론 항체 제제와 달리, 각 단일 클론 항체는 항원의 단일 결정인자에 대한 것이다. "단일 클론"이라는 수식어는 실질적으로 균질한 항체 집단에서 얻은 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특정 방법으로 항체를 생산해야 하는 것으로 해석해서는 안 된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "선택적 결합" 및 "선택적으로 결합한다"는 다수의 다른 항원이 아닌 동종 암세포 항원과 면역학적으로 선택적이고 특이적인 방식으로 결합할 수 있는 항체, 그 단편, 또는 항체 약물 접합체의 항체 리간드 유닛을 지칭한다. 일반적으로, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 적어도 약 1 x 10-7 M, 바람직하게는 약 1 x 10-8 M 내지 1 x 10-9 M, 1 x 10-10 M, 또는 1 x 10-11 M의 친화도로 표적 암 세포 항원에 결합하고, 밀접하게 관련된 항원 이외의 비특이적 항원 (예를 들어, BSA, 카제인)에 대한 결합에 대한 친화도보다 적어도 2배 큰 친화도를 가진 미리 결정된 상기 항원에 결합하고, 여기서 상기 친화도는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 항체 리간드 유닛으로서 항체 약물 접합체에 대응하거나 이에 통합될 때 실질적으로 유지된다. 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어인 "항원"은 비접합 항체 또는 이의 항원 결합 단편에 의해, 또는 비접합 항체에 통합되거나 구조적으로 이에 대응하는 항체 리간드 유닛을 포함하는 항체 약물 접합체 화합물에 특이적으로 결합할 수 있는 모이어티이다. 일부 측면에서, 항원은 비정상 세포의 부위에서 멀리 떨어진 정상 세포에 비해 비정상 세포에 우선적으로 나타나는 세포 외 접근 가능한 세포 표면 단백질, 당단백질 또는 탄수화물, 특히 단백질 또는 당단백질이다. 이러한 측면에서, 세포 표면 항원은 항체 약물 접합체 조성물의 접합체 화합물에 선택적으로 결합하여 내재화될 수 있다. 내재화 이후, 조성물의 항체 약물 접합체 화합물의 링커 유닛의 세포 내 처리는 그 약물 유닛을 유리 약물로 방출한다. 항체 약물 접합체 화합물에 접근 가능한 세포 표면인 과증식 세포와 관련된 항원은 본 명세서에 기술된 바와 같이 암 특이 항원을 예시적으로 포함하나 이에 국한되지 않는다.
일반적으로, 항원은 암과 관련이 있다. 이러한 측면에서 항원은 비정상 세포로 국소화되지 않는 정상 세포에 비해 암 세포에 의해 우선적으로 나타나며, 특히 항원을 표시하는 암 세포는 포유류 암 세포이다. 다른 측면에서, 암세포 항원은 암세포 부위에서 멀리 떨어진 정상 세포에 비해 암세포의 환경에 특이한 인근 정상 세포에 의해 우선적으로 나타나는 세포 외 접근 가능한 항원이다. 예를 들어, 주변 세포는 종양의 비정상적인 혈관 구조의 특징인 상피 세포일 수 있다. 항체 약물 접합체에 의해 이러한 혈관 세포를 표적으로 삼으면 이러한 세포에 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과가 있으며, 이는 종양의 인근 암 세포로의 영양분 전달을 억제하는 결과로 이어질 것으로 여겨진다. 이러한 억제는 암세포에 간접적으로 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과를 가지며, 항체 약물 접합체 (ADC) 화합물에 의한 면역학적 선택적 결합에 따라 약물 유닛이 유리 약물로 방출된 후 인근 암세포에 직접적인 세포 독성 또는 세포 증식 억제 효과를 가질 수도 있다. 이러한 측면에서 세포 표면 항원은 접합체에서 표적 세포로 방출될 때 유리 약물이 세포 내로 전달될 수 있도록 내재화될 수 있다.
바람직한 내재화 가능한 항원은 세포당 10,000개 이상, 세포당 20,000개 이상 또는 세포당 40,000개 이상의 카피 수를 갖는 암 세포의 표면에 발현되는 항원이다. ADC에 세포 표면 접근 가능하고 내재화 가능한 암 세포와 관련된 항원은 호지킨 림프종 세포, 특히 카르파스 299 세포 및 때때로 Ki-1 림프종으로 지칭되는 고급 림프종의 특정 암 세포로 예시되는 리드-스턴버그 세포의 것을 포함한다. 다른 항원에는 789-O 세포로 예시되는 신장 세포 선암종의 암세포, CHO 세포로 예시되는 비호지킨 림프종, 만성 림프구성 백혈병 (CLL) 및 급성 림프성 백혈병 (ALL)을 포함한 B세포 림프종 또는 백혈병의 암세포, HL-60로 예시되는 급성 골수성 백혈병 (AML)의 암세포, 이들 및 다른 암세포에 편재적으로 발현되는 특정 수송체 수용체를 포함한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어인 "링커 유닛"은 본 명세서에 정의된 바와 같이 약물 유닛와 리간드 유닛 (L) 사이에 개입하여 공유적으로 부착된 리간드 약물 접합체 내의 유기 모이어티, 또는 약물 유닛에 공유적으로 부착되어 있고 표적화 약제와의 상호작용을 위한 반응성 작용기 또는 모이어티를 갖고 있어 표적화 약제에 통합되거나 구조상 이에 대응하는 L과 링커 유닛 (LU) 사이에 공유 결합을 형성하는 약물 링커 화합물 내의 유기 모이어티를 지칭한다. 약물 링커의 링커 유닛은 이러한 결합을 형성할 수 있으므로 리간드 약물 접합체에서 링커 유닛의 전구체로 간주되며 때때로 LU'로 표시된다. 링커 유닛은 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티 내 LR과 D 사이 또는 약물 링커 화합물의 LR과 D 사이에 개입하는 1차 링커 (LR) 및 2차 링커 (LO)를 포함하고, 후자의 경우, 리간드 약물 접합체에서 LR의 전구체임을 명시적으로 나타내기 위해 LR'로 표시될 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어로서, "1차 링커"는 리간드 유닛 및 나머지 LU에 공유적으로 부착되어 있는 리간드 약물 접합체에서 리간드 유닛 (LU)의 필수 구성 요소를 지칭한다. 1차 링커 (LR)의 한 구성 요소는 리간드 약물 접합체 (LDC) 및 본 명세서에 기술된 약물 링커 화합물의 일부 측면에서 자기 안정화 (LSS) 링커를 제공하는 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티이고, 따라서 LSS 일차 링커를 정의하고, LDC의 다른 측면에서는 LSS로부터 유도 가능한 자기 안정화 (LS) 링커를 제공하며, 따라서 LS 1차 링커를 정의하고, 이들 용어는 본 명세서에 추가로 설명된다. 이러한 1차 링커는 선택적으로 분기 유닛 (B) 및 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)을 함유하며, 이는 화학식 1A의 아래첨자 a 및 b의 값에 따라 달라지며, 단 LR이 LSS 또는 LS 1차 링커일 때 A가 존재한다.
LDC 또는 약물 링커 화합물에서 LSS 1차 링커는 각각 염기성 유닛와 근접한 석신이미드 (M2) 또는 말레이미드 (M1) 모이어티를 특징으로 하며, LDC 조성물 또는 그 화합물 내의 LS 1차 링커는 염기성 유닛와 근접한 석신산 아미드 (M3) 모이어티를 특징으로 한다. 본 발명의 LSS 또는 LS 1차 링커는 또한, M1 또는 M2의 말레이미드 또는 석신이미드 고리 시스템의 이미드 질소 또는 M3의 아미드 질소에 결합된 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)이 존재하는 것을 특징으로 하고, 여기서, 일부 측면에서 알킬렌 모이어티는 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환되고 선택적 치환체에 의해 더 치환될 수 있거나, 또는 다른 측면에서는 임의로 치환되고 임의로 치환된 사이클릭 염기성 유닛을 통합한다.
리간드 약물 접합체에서 LSS의 전구체임을 명시적으로 나타내기 위해 때때로 LSS'로 표시되는, 약물 링커 화합물에서 LSS 1차 링커의 리간드 공유 결합 전구체의 말레이미드 (M1) 모이어티는 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자와 반응하여 리간드 약물 접합체의 LSS 1차 링커의 리간드 공유 결합 모이어티에서 티오-치환된 석신이미드 모이어티 (M2)를 생성할 수 있고, 여기서, 티오 치환체는 표적화 약제에 통합되거나 구조적으로 이에 대응하는 리간드 유닛이다. 표적화 약제가 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 측면에서, 항체는 이황화 결합 환원으로부터 유도되거나 유전 공학을 통해 도입된 시스테인 잔기의 황 원자를 통해 M2에 결합된다. 그 결과, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 항체 리간드 유닛으로서 LSS 1차 링커에 공유 결합된다. 이후 LSS 1차 링커에서 M2를 가수분해하면 M2가 석신산 아미드 모이어티 (M3)로 전환되는 LS 1차 링커가 생성된다. 이 링커 모이어티는 석신이미드 고리 시스템의 두 카르보닐기의 가수분해에 대한 상대적 반응성에 따라 두 개의 위치이성질체(regioisomer) (M3A 및 M3B)의 혼합물 형태로 존재할 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "리간드 공유 결합 모이어티"는 본 명세서에서 사용되는 용어로서, 리간드 약물 접합체에서 리간드 유닛 (L)과 나머지 링커 유닛을 상호 연결하고 약물 링커 화합물에서 링커 유닛 전구체 (LU')의 해당 리간드 공유 결합 전구체 (LB') 모이어티와 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 표적화 약제 사이의 반응으로부터 유도되는 링커 유닛 (LU)의 모이어티를 지칭한다. 예를 들어, LB'가 말레이미드 모이어티 (M1)를 포함하는 경우, 해당 모이어티를 표적화 약제의 반응성 티올 작용기와 반응시키면 LB'가 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티로 전환되어 티오 치환된 석신이미드 모이어티를 얻는다. 표적화 약제가 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 경우, 티오 치환체는 항체 리간드 유닛의 황 원자를 포함하며, 이는 일부 측면에서 사슬 간 이황화 결합 환원 또는 유전 공학에 의해 얻어진 시스테인 잔기에 의해 제공된다.
다른 예에서, LB'가 활성화된 카르복실산 작용기를 포함하는 경우, 그 작용기를 표적화 약제의 반응성 아미노기, 예컨대 항체 또는 이의 항원 결합 단편 내의 라이신 잔기의 엡실론 아미노기와 반응시키면, 그 작용기가 아미드로 전환되고, 여기서 그 반응으로 인한 아미드 작용기는 LB와, 항체 또는 항원 결합 단편인 경우 항체 리간드 유닛인, 부착된 리간드 유닛 사이에서 공유된다. 다른 LB 모이어티 및 LB'-함유 모이어티로부터의 이들의 전환은 본 발명의 실시양태에 설명되어 있다. 또 다른 예에서, 반응성 아미노기를 갖는 표적화 약제는 이중 기능성 분자로 유도체화되어 중간체를 제공하고, 이는 일부 경우 반응성 티올 작용기를 생성하며, 이는 LB' 모이어티와 축합된다. 이러한 축합의 결과로 형성된 LB 모이어티는 이중 기능성 분자와 LB'에 기인하는 원자를 갖는다.
"리간드 공유 결합 전구체 모이어티"는 반응성 또는 활성화 가능한 작용기를 포함하는 약물 링커 화합물 또는 그 중간체의 링커 유닛의 모이어티이고, 여기서, 활성화 후 반응성 작용기 또는 활성화 가능한 작용기는 항체 약물 접합체 (ADC)를 포함하는 리간드 약물 접합체 (LDC)의 제조 중에 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 표적화 약제와 공유 결합할 수 있고, 이에 따라 리간드 결합 모이어티 전구체 (LB') 모이어티가 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티로 전환된다. 일부 측면에서, LB' 모이어티는 항체 또는 이의 항원 결합 단편에 고유한 친핵체 또는 친전자체와 반응할 수 있는 작용기를 가지거나, 항체 리간드 유닛으로 전환하기 위해 화학적 변형 또는 유전 공학 (위 참조)에 의해 항체 또는 항원 결합 단편에 도입된다. 이러한 측면 중 일부에서, 친핵체는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄 또는 중쇄의 N-말단 아미노기 또는 해당 경쇄 또는 중쇄의 라이신 잔기의 엡실론 아미노기이다.
다른 측면에서, 친핵체는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄 또는 중쇄에 유전 공학에 의해, 또는 항체 또는 항원 결합 단편의 사슬간 이황화물의 화학적 환원으로 도입된 시스테인 잔기의 설프하이드릴기이다. 여전히 일부 측면에서, 친전자체는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 글리칸 성분에서 탄수화물 모이어티의 선택적 산화에 의해 도입된 알데하이드, 또는 유전자 조작된 tRNA/tRNA 합성효소 쌍을 사용하여 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄 또는 중쇄에 도입된 비천연 아미노산으로부터의 케톤이다. 항체의 접합 부위를 제공하기 위해 반응성 작용기를 도입하는 이들 및 다른 방법은 Behrens와 Liu의 "Methods for site-specific drug conjugation to antibodies" mAB (2014) 6(1): 46-53에 검토되어 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "2차 링커", "2차 링커 모이어티" 및 이와 유사한 용어는 링커 유닛 (LU)의 유기 모이어티를 지칭하고, 여기서, 2차 링커 (LO)는 약물 유닛을 1차 링커 (LR)에 상호 연결하고 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티, 제1 선택적 스트레처 유닛 및/또는 선택적 분기 유닛 (B)를 함유하는 LU의 성분이고, 일부 측면에서 항체 약물 접합체 (ADC)와 같은 리간드 약물 접합체 (LDC), 또는 접합체의 제조에 유용한 약물 링커 화합물의 자기 안정화 (LSS) 1차 링커를 제공하거나, LSS의 가수분해 시 LDC/ADC 화합물의 자기 안정화 (LS) 1차 링커를 제공한다. LR이 LSS 또는 LS인 경우, 제1 선택적 스트레처 유닛이 존재한다. 이러한 측면에서는 LR은 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)의 헤테로원자 또는 작용기를 통해 LO에 부착된다.
리간드 약물 접합체 화합물 또는 약물 링커 화합물의 2차 링커는 일반적으로 다음과 같은 구조를 갖고:
아래첨자 b가 0인 경우, 여기서 A'에 인접한 물결선은 LO가 1차 링커에 공유 부착된 부위를 나타내고; Y에 인접한 물결선은 LO가 약물 유닛에 공유 부착된 부위를 나타내고; A'는 제2 선택적 스페이서 유닛이거나 일부 측면에서 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛의 하위 단위이이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고; Y는 스페이서 유닛이고, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 스페이서 유닛의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내며, W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 정상 조직 균질물의 프로테아제에 비해 종양 조직 균질물의 프로테아제에 대해 전반적으로 더 큰 선택성을 갖는 인식 부위를 제공하고, 여기서 종양 조직은 표적 암세포를 포함하고 정상 조직은 비표적 정상 세포를 포함하며, 리간드 약물 접합체에 의한 비표적 세포 독성이 이를 필요로 하는 포유류 대상체에 치료 유효량을 투여하는 것과 종종 관련된 부작용에 적어도 부분적으로 책임이 있다. 아래첨자 b가 0일 때, A'는 존재할 경우 A의 하위 단위가 되며, 이 경우 2차 링커는 -W-Yy-의 구조를 갖는다. 이들 측면 중 하나에서 W, Y 및 D는 나머지 LU/LU'에 대해 선형 배열로 배열되고, -W-Yy-D로 표시되며, 여기서 W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고 아래첨자 y는 0, 1 또는 2이다. 아래첨자 y가 1 또는 2인 경우, 프로테아제 절단에 이어 W에 부착된 자가분해성 스페이서 유닛이 자가 분해되어 D 또는 Y'-D를 방출하고, 2차 스페이서 유닛 (Y')이 존재할 경우, 분해되어 D가 유리 약물로 완전히 방출된다.
W가 펩타이드 절단 가능 유닛인 LU에 단 하나의 약물 유닛만이 부착된 경우에 예시된 바와 같이, 링커 유닛에서 D에 결합된 이차 링커 (LO)는 일반적으로 다음과 같은 구조로 표시되고
아래첨자 b가 1일 때 , 또는
아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1일 때 A'a'가 제1 선택적 스트레처 유닛의 하위 단위로 취급되기 때문에 이고;
여기서, D는 약물 유닛이고 나머지 가변기는 LO에 대해 본 명세서에 정의된 바와 같고;
및 해당 2차 링커를 포함하는 약물 링커 모이어티 또는 약물 링커 화합물은 일반적으로 각각 하기 화학식 1B 및 화학식 IB의 구조를 갖고:
여기서, LB는 본 명세서에 정의된 바와 같이 리간드 공유 결합 모이어티로서, 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티의 링커 유닛 (LU)의 일차 링커 (LR)의 구성 요소이고; LB'는 본 명세서에 정의된 바와 같은 리간드 공유 결합 모이어티로서, 약물 링커 화합물에서 링커 유닛 (LU')의 1차 링커 (LR')의 구성 요소이며, 약물 링커 화합물이 리간드 약물 접합체의 제조에 사용될 때, 리간드 약물 결합체의 LR, LB 및 LU의 각각에 대해, 리간드 공유 결합 모이어티 전구체, 1차 링커 전구체 및 링커 유닛 전구체라고도 하고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고는 0 또는 1이고; B는 선택적 분기 유닛으로, 아래첨자 b는 0 또는 1로 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내며, 여기서 아래첨자 b가 0, 아래첨자 a가 1, 아래첨자 a' 가 1일 때 A'는 A의 하위 단위이고; 아래첨자 q는 1 내지 4의 범위이고, 존재할 경우 LB/LB' 및 A와 B는 LR/LR'의 구성 요소이되, 단 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2 내지 4의 범위이고, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고; 나머지 가변기는 LO에 대해 본 명세서에 정의된 바와 같다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "말레이미드 모이어티"는 약물 링커 화합물의 일차 링커의 구성 요소를 지칭하고, 이는 일부 측면에서 자기 안정화 링커의 구성 요소이고, 여기서, 상기 1차 링커는 리간드 약물 접합체에서 LR/LSS의 전구체임을 명시적으로 나타내기 위해 종종 LR' 또는 LSS'로 표시되기도 한다. 말레이미드 모이어티 (M1)는 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자에 의해 마이클 첨가 (즉, 1,4-공액 첨가)에 참여하여 티오 치환된 석신이미드 (M2) 모이어티를 제공할 수 있고, 여기서, 티오 치환체는 항체 약물 접합체 조성물 또는 이들의 화합물의 항체 리간드 유닛에 대해 본 명세서에 예시된 바와 같이 표적화 약제를 통합하거나 구조적으로 이에 대응하는 리간드 유닛이다. 약물 링커 화합물의 M1 모이어티는 나머지 1차 링커, 일반적으로 M1 모이어티가 LSS'의 구성 요소이기 때문에 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)에, 또는 A와 B가 모두 부재하는 경우 이미드 질소 원자를 통해 2차 링커 (LO)에 부착된다.
이미드 질소 원자 이외에, M1 모이어티는 일반적으로 치환되지 않지만, 말레이미드 고리 시스템의 사이클릭 이중 결합에서 비대칭적으로 치환될 수 있다. 이러한 치환은 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자를 말레이미드 고리 시스템의 덜 방해받거나 전자적으로 더 결핍된 이중 결합 탄소 원자 (더 우세한 기여도에 따라 다름)에 위치화학적으로 바람직한 공액 첨가를 초래할 수 있다. 이러한 공액 첨가는 표적화 약제가 제공하는 티올 작용기의 황 원자를 통해 리간드 유닛에 의해 티오 치환된 석신이미드 (M2) 모이어티를 생성한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "석신이미드 모이어티"는 1차 링커의 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티의 한 유형을 지칭하고, 이는 다시 리간드 약물 접합체, 예컨대 항체 약물 접합체의 링커 유닛의 구성 요소이며, 약물 링커 화합물에서 리간드 공유 결합 전구체 (LB') 모이어티의 한 유형 또는 이의 M1 함유 중간체인 말레이미드 모이어티 (M1)의 말레이미드 고리 시스템에 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 반응성 티올 작용기의 황 원자(tom)를 마이클 첨가한 결과이다. 따라서 석신이미드 (M2) 모이어티는 이미드 질소 원자가 나머지 1차 링커로 치환된 티오 치환된 석신이미드 고리 시스템을 포함하고, 이는 일반적으로 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)이 될 것이다. 일부 측면에서, 해당 질소 원자는 해당 단위를 구성하는 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 통해 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)에 부착된다. 1차 링커가 자기 안정화 링커인 경우, 해당 알킬렌 모이어티는 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛에 사이클릭 염기성 유닛을 통합하거나 다른 곳에 설명된 대로 비사이클릭 염기성 유닛으로 치환되거나, 그렇지 않으면 임의로 치환되고, M2 모이어티가 석신이미드 고리 시스템에서 M1 전구체에 존재했을 수 있는 치환체(들)로 임의로 치환되어 있다.
따라서, 임의로 치환된 A의 C1-C12 알킬렌 모이어티는 선택적 가수분해 강화 유닛인 [HE]와 선택적으로 결합하여 아래첨자 b가 0인 경우에는 존재하는 선택적 2차 링커 (LO)에 직접 공유적으로 부착되거나, 또는 화학식 1B의 약물 링커 모이어티 또는 화학식 IB의 약물 링커 화합물에서 아래첨자 b가 1인 경우 -[HE]-B-를 통해 LO에 간접적으로 공유적으로 부착된다. 아래첨자 b가 0, 아래첨자 a가 1, 아래첨자 a'가 1인 경우 A는 화학식 -A1[HE]-A2-로 표시되고, 여기서 A1은 A의 제1 하위 단위이고 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티가 HE와 선택적으로 조합되어 포함되며, 이전에 LO의 구성 요소로 표시되었던 A'는 이제 A의 제2 하위 단위인 A2가 된다. 아래첨자 b가 1, 아래첨자 a가 1, 아래첨자 a'가 1인 경우, A'는 제2 링커의 구성 요소이며 A는 [HE]와 선택적으로 조합된 단일 단위이거나 선택적으로 -A[HE]-AO-로 표시되며, 여기서 AO는 A의 선택적 하위 단위인, 두 개의 하위 단위를 포함한다. AO가 존재할 경우, A는 또한 화학식 -A1[HE]-A2-로 표시된다.
리간드 약물 접합체 화합물 내의 자기 안정화 링커 (LSS)에 존재할 때, 비사이클릭 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기의 근접 존재로 인해 pH를 제어할 수 있는, 티오 치환된 석신이미드 (M2) 모이어티의 석신이미드 고리 시스템의 가수분해는 경우에 따라 티오 치환체에 의한 비대칭 치환으로 인해 자기 안정화 링커 (LS)에서 석신산-아미드 (M3) 모이어티의 위치화학적 이성질체를 제공한다. 이러한 이성질체의 상대적인 양은 적어도 부분적으로는 M2의 두 개의 카르보닐 탄소의 반응성 차이에 기인할 것이며, 이는 적어도 부분적으로는 M1 전구체에 존재했던 치환체(들)에 기인할 수 있다. 염기성 유닛을 함유하지 않지만 염기성 유닛이 제공하는 제어된 가수분해에 비해 가변성이 높은 M2 모이어티를 갖는 LR의 경우에도 가수분해가 어느 정도 발생할 것으로 예상된다.
일부 측면에서, M2의 석신이미드 고리 시스템상의 이러한 선택적 치환체는 존재하지 않으며, 제1 선택적 스트레처 유닛이 존재하고, 선택적 가수분해 강화 유닛인, [HE]에 이미드 질소 원자 부착 부위보다 먼 위치에서 선택적으로 부착된 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함한다. 이러한 측면에서 A는 단일 단위이거나 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1일 때 존재하는 A의 선택적 하위 단위인 A'를 추가로 포함하고, 또한 존재하는 [HE]에 부착되어 A가 -A[HE]-A'-의 화학식을 갖거나, 아래첨자 b가 1이고 아래첨자 a'가 1일 때, A'는 2차 링커에 존재하는 구성 요소로 A가 화학식 -A[HE]-AO-로 표시된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "석신산-아미드 모이어티"는 항체 약물 접합체와 같은 리간드 약물 접합체 내의 링커 유닛의 자기 안정화 링커 (LS)의 구성 요소를 지칭하고, 아미드 질소가 LS의 다른 구성 요소로 치환된 석신산 아미드 반산 잔기의 구조를 갖고, 여기서, 그 구성 요소는 일반적으로 제1 선택적 스트레처 유닛 (A) 또는 존재하는 그 하위 단위이고, [HE]에 선택적으로 부착된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함한다. 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a가 0 또는 1일 때 A에 대해 가능한 구조는 -A[HE]-A'a'-의 화학식으로 표시되고, 이 경우, 이전에 제2 링커와 회합되었던 A'가 없어져 아래첨자 a'가 0이 되거나 아래첨자 a'가 1일 때 A'는 A의 하위 단위로 존재한다. 하위 단위가 존재할 때, A는 A1[HE]-A2-의 화학식으로 표시되고, 여기서 A1은 선택적으로 [HE]에 부착된, 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함하는 A의 제1 하위단위이고, A2는 이전에 A'로 표시되었던 A의 제2 하위단위이다. 아래첨자 b가 1이고 아래첨자 a가 1일 때 A에 대해 가능한 구조는 -A[HE]-AO-의 화학식으로 표시되고, 여기서 AO는 존재할 경우 A의 선택적 하위 단위이다. 해당 하위 단위가 없는 경우 A는 단일 개별 단위이고 AO가 존재할 때 A는 A1[HE]-A2-의 화학식으로 표시되고, 여기서 A1은 [HE]에 선택적으로 부착된, 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함하는 A의 제1 하위단위이고, 이전에 AO로 표시된 A2는 A의 제2 하위 단위이다.
일부 측면에서, 상기 알킬렌 모이어티는 사이클릭 염기성 유닛을 포함하고, 다른 측면에서는 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환되고, 어느 측면에서도 임의로 치환되며, 여기서 석신산 아미드 (M3) 모이어티는 L-S-에 의해 추가 치환되고, 여기서, L은 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 표적화 약제를 통합하거나 이에 구조적으로 대응하는 항체 리간드 유닛와 같은 리간드 유닛이고, S는 상기 표적화 약제, 항체 또는 항원 결합 단편으로부터의 황 원자이다. M3 모이어티는 염기성 유닛의 도움을 받는 가수분해에 의해 카르보닐-질소 결합 중 하나가 끊어진 자기 안정화 1차 링커에서 석신이미드 (M2) 모이어티의 티오 치환된 석신이미드 고리 시스템으로부터 생성된다.
따라서, M3 모이어티는 유리 카르복실산 작용기 및 질소 헤테로원자가 나머지 1차 링커에 부착되어 있고 M2 전구체의 가수분해 부위에 따라 해당 카르복실산 또는 아미드 작용기에 알파인 탄소에서 L-S-로 치환되는 아미드 작용기를 갖는다. 이론에 얽매이지 않고, 앞서 언급한 가수분해로 인해 M3 모이어티가 생성되면 티오 치환체를 제거하여 표적화 리간드 유닛 (L)의 접합체에서 조기 손실 가능성이 적은 리간드 약물 접합체 중 링커 유닛 (LU)를 제공할 수 있다고 여겨진다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "자기 안정화 링커"는 M2 함유 구성 요소를 갖는, 항체 약물 접합체와 같은 리간드 약물 접합체에서 링커 유닛 (LU)의 1차 링커 또는 M1 함유 구성 요소를 갖는 약물 링커 화합물에서 링커 유닛 전구체 (LU')의 1차 링커를 지칭하고, 여기서 해당 구성 요소는 LDC에서 LSS의 M2 함유 구성 요소의 전구체임을 나타내기 위해 LSS'로 지정될 수 있다. 이후 자기 안정화 링커는 제어된 가수분해 조건 하에서 해당 자기 안정화 링커 (LS)로 전환된다. 이러한 가수분해는 LSS의 염기성 유닛 구성 요소에 의해 촉진되므로, LSS를 포함하는 LDC/ADC는 이제 LS를 포함하는 링커 유닛 (LU) 덕분에 리간드 유닛의 조기 손실에 더 저항성을 갖는다. LSS 1차 링커는 M1 또는 M2 모이어티 외에도 반드시 있어야 하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)을 추가로 포함하고, 여기서, A는 선택적으로 [HE]와 조합된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함하고, 여기서, 해당 조합은 아래첨자 b가 1일 때 A가 존재하는 선택적 하위 단위 (AO)을 추가로 포함하거나 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1일 때 A는 A'로 추가로 포함할 때 A1으로 지정되기도 하고, 여기서, 아래첨자 b의 값 중 추가로 존재하는 하위 단위는 A2로 지정된다. A가 단일 개별 단위로 존재하거나 두 개의 개별 단위 형태로 존재할 수 있는 경우, 두 가지 가능성은 아래첨자 b가 1일 때 -A[HE]-AO-, 또는 아래첨자 b가 0일 때 A[HE]-A'a'의 화학식으로 표시되고, 아래첨자 b의 두 값은 각각 제2 하위 단위의 유무에 따라 -A[HE]- 또는 -A1[HE]-A2-이 된다. LSS 내에서 A의 변형에서 알킬렌 모이어티는 사이클릭 염기 단위를 포함하거나 비-사이클릭 염기 단위로 치환되며, 그렇지 않으면 임의로 치환된다.
따라서, 약물 링커 화합물의 1차 링커가 리간드 약물 접합체에서 LSS의 전구체임을 나타내기 위해 때때로 LSS'로 표시되기도 하는, LSS인 경우, 상기 1차 링커는, 존재하도록 요구되는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A) 및 표적화 약제가 부착될 말레이미드 (M1) 모이어티를 함유하고, 항체 또는 이의항원 결합 단편의 경우 항체 리간드 유닛을 제공한다. 이러한 측면에서, LSS의 A의 C1-C12 알킬렌 모이어티는 M1의 말레이미드 고리 시스템의 이미드 질소 및 링커 유닛의 나머지 부분에 부착되고, 후자는 AO/A' 및 [HE]의 유무에 따라 아래첨자 b가 1일 때 [HE]-AO-B- 또는 아래첨자 b가 0일 때 [HE]-A'a'-를 통해 선택적으로 발생한다. 이러한 측면 중 일부에서, 가수분해 강화 모이어티인 [HE]는 임의로 치환된 전자 인출 헤테로원자 또는 작용기로 구성되거나 이를 포함하고, 일부 측면에서는 BU에 추가하여 LDC/ADC 화합물의 해당 LSS 모이어티에서 M2 모이어티의 가수분해 속도를 향상시킬 수 있다. 약물 링커 화합물을 LDC/ADC 화합물에 통합한 후, LSS는 이제 리간드 유닛에 의해 티오 치환된 석신이미드 (M2) 모이어티를 함유한다 (즉, 리간드 유닛을 약물 링커 모이어티에 부착하는 것은 M1의 말레이미드 고리 시스템에 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자를 마이클 첨가함으로써 이루어졌다).
일부 측면에서, 순환 염기성 유닛 (cBU)은 해당 단위의 염기 질소에 대한 공식적인 고리화를 통해 비-사이클릭 염기성 유닛에 구조적으로 대응하여 사이클릭 염기성 유닛 구조는 임의로 치환된 스피로 C4-C12 헤테로사이클로로서 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛에 통합된다. 이러한 작제물에서, 스피로 탄소는 M1의 말레이미드 이미드 질소에 부착되고, 따라서 M2의 해당 질소에 부착되며, 화학식 1B의 약물 링커 모이어티 또는 화학식 IB의 약물 링커 화합물에서 -[HE]-AO- 또는 [HE]-Aa'-를 통해 선택적으로 존재하는 앞서 설명한 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)을 포함하는 LSS 1차 링커의 나머지 부분에 추가로 부착된다. 이러한 측면에서 사이클릭 BU는 비-사이클릭 염기 단위와 질적으로 유사한 방식으로 M2의 석신이미드 모이어티를 M3로 표시되는 해당 고리 개방 형태(들)로 가수분해하는 데 도움을 주며, 이는 또한 [HE]에 의해 강화될 수 있다.
일부 측면에서, 화학식 IB의 약물 링커 화합물에서 자기 안정화 (LSS) 1차 링커의 전구체임을 명시적으로 나타내기 위해 LSS'로 표시되기도 하는 LSS 1차 링커의 LB'-A-Bb-는 아래첨자 b가 1일 때 M1-A(BU)-[HE]-AO-B- 또는 아래첨자 b가 0일 때 M1-A(BU)-[HE]-A'a'-의 일반 화학식으로 표시되고, 여기서, M1은 말레이미드 모이어티이고, A는 BU를 통합하거나 이로 치환된 C1-C12 알킬렌이며, 그렇지 않으면 임의로 치환되고, 선택적 가수분해-강화 모이어티인 [HE]와 선택적으로 조합되고, 여기서 해당 화학식은 A가 단일 개별 단위인 경우 M1-A(BU)-[HE]-B- 또는 M1-A(BU)[HE]-가 되고, A가 두 개의 하위 단위인 경우 M1-A1(BU)-[HE]-A2-B- 또는 M1-A1(BU)-[HE]-A2-가 되며, 여기서 A1 및 A2는 A의 하위 단위이다.
다른 측면에서, 화학식 1A의 ADC의 화학식 1B의 약물 링커 모이어티 내의 LSS 1차 링커는 아래첨자 b가 1일 때 -M2-A(BU)-[HE]-AO-B-의 일반 화학식으로 표현되거나, 아래첨자 b가 0일 때 -M2-A(BU)-[HE]-Aa'-로 표시되고, 여기서 M2는 석신이미드 모이어티이고, A는 존재하고 BU를 통합하거나 이로 치환된 C1-C12 알킬렌을 포함하는 제1 선택적 스트레처 유닛이고 그렇지 않으면 임의로 치환되고, 선택적 가수분해-강화 모이어티인 [HE]로 선택적으로 조합되고, AO/A'는 A의 선택적 하위 단위이다. A가 단일 개별 단위인 경우 LSS는 -M2-A(BU)-[HE]-B- 또는 -M2-A(BU)-[HE]-의 화학식으로 표현되며, A가 두 개의 하위 단위인 경우, 아래첨자 b가 각각 0 또는 1일 때 LSS는 -M2-A1(BU)-[HE]-A2- 또는 -M2-A1(BU)-[HE]-A2-B-의 화학식으로 표시된다.
여전히 다른 측면에서, 화학식 1A의 LDC/ADC의 화학식 1B의 약물 링커 모이어티에서 LS 1차 링커는 아래첨자 b가 1일 때 -M3-A(BU)-[HE]-AO-B-, 또는 아래첨자 b가 0일 때 -M3-A(BU)-[HE]-Aa'-의 일반 화학식으로 표시되고, 여기서 M3은 석신이미드 산 아미드 모이어티이고 A는 BU를 통합하거나 이로 치환된 C1-C12 알킬렌이고, 그렇지 않으면 임의로 치환되고, 선택적 가수분해-강화 모이어티인 [HE]와 선택적으로 조합되고, AO/A'는 A의 선택적 하위 단위이고, 여기서 -A(BU)-[HE]-AO- 또는 -A(BU)-[HE]-Aa'-는 A가 단일 신중한 단위인 경우 -A(BU)-[HE]-가 되고, A가 두 개의 하위 단위이거나 이들을 포함하는 경우 -A1(BU)-[HE]-A2-가 된다.
화학식 1의 일부 리간드 약물 접합체에 대한 화학식 1B의 약물 링커 모이어티 내의 LSS 1차 링커를 포함하는 예시적이지만, 제한되지 않는 -LB-A- 구조는 다음과 같이 표시되고:
여기서, 물결선은 리간드 유닛에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 아래첨자 b가 1인 상부 구조에서 파운드 기호(#)는 화학식 1B에서 분기 유닛 (B)에 대한 공유 부착 부위를 나타내거나 아래첨자 b가 0인 하부 구조에서는 존재하는 선택적 2차 링커 (LO)의 W에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서 점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내며, BU가 사이클릭 염기성 유닛인 경우에는 존재하고 BU가 비-사이클릭 염기성 유닛인 경우에는 존재하지 않고, 여기서 [HE]는 선택적 가수분해-강화 모이어티이고, AO/A'는 A의 선택적 하위 단위이고, 아래첨자 z는 0 또는 1 내지 6 범위의 정수이고; 각 Rd1는 수소 및 임의로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 Rd1 중 두 개, 이들이 부착된 탄소 원자 및 임의의 개입 탄소 원자는 임의로 치환된 C3-C8 카르보사이클로를 정의하고, 존재하는 경우 나머지 Rd1는 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6이고; BU가 비-사이클릭 염기성 유닛일 경우 Ra2는 -H 또는 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고, BU가 사이클릭 염기성 유닛일 경우, Ra2는 -H 이외의 것이 되도록 요구되고, BU 및 Ra2가 부착된 탄소 원자와 함께 골격 2차 또는 3차 염기 질소 원자를 갖는, 임의로 치환된 스피로 C4-C12 헤테로사이클로를 정의하여, 비-사이클릭 또는 사이클릭 BU는 표시된 석신이미드 (M2) 모이어티의 가수분해 속도를 증가시켜 상응하는 접합체에 비해 적절한 pH에서 석신산 아미드 (M3) 모이어티를 제공할 수 있고, 여기서 Ra2는 수소이고 BU는 수소로 대체되고, 사이클릭 염기성 유닛의 경우, LDC/ADC의 것에 상응하는 약물 링커 모이어티의 가수분해 속도 증가를 실질적으로 유지하고, 여기서 Ra2는 수소이고 BU는 Ra2가 수소이고 BU가 수소로 대체된 전술한 접합체에 대한 비-사이클릭 BU이다.
리간드 약물 접합체 조성물의 제조에서 중간체로 사용되는 화학식 I의 약물 링커 화합물에 때때로 존재하는 LSS'를 포함하는, 예시적이지만 제한되지 않는, LB'-A- 구조는 다음과 같이 표시되고:
여기서, BU 및 기타 가변기는 LSS 1차 링커를 갖는 LDC/ADC의 LB-A- 구조에 대해 위에서 정의한 바와 같다. 말레이미드 모이어티를 포함하는 자기 안정화 링커 전구체 (LSS')를 갖는 약물 링커 화합물을 LDC/ADC 제조에 사용할 경우, 해당 LSS' 모이어티는 석신이미드 모이어티를 포함하는 LSS 1차 링커로 변환된다. 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 표적화 약제로부터 반응성 티올 작용기와 축합되기 전에, BU의 염기성 질소 원자는 일반적으로 양성자화되거나 산성 불안정성 보호기에 의해 보호된다.
"자기 안정화된 링커"는 제어된 조건에서 가수분해를 거쳐 자기 안정화된 링커 (LS)의 상응하는 M3-모이어티를 제공하는, 항체 약물 접합체와 같은 리간드 약물 접합체에서 자기 안정화 링커 (LSS)의 M2 함유 모이어티에서 유래된 유기 모이어티이고, 여기서, 해당 LU 구성 요소는 원래 M2 함유 LSS 모이어티를 제공한 M1 함유 모이어티와 표적화 모이어티의 축합 반응을 역전시킬 가능성이 적다. M3 모이어티 외에, 자기 안정화된 링커 (LS)는 존재하고 사이클릭 염기성 유닛을 통합하거나 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환되는, 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)을 포함하고, 여기서 A는 M3와 LS 1차 링커 (즉, B)의 나머지 부분에, 또는 B가 없는 경우 2차 링커 (LO)에 공유 부착된다. M3 모이어티는 리간드 약물 접합체에서 LSS'의 석신이미드 모이어티 (M2)를 전환하여 얻고, 여기서, M2 모이어티는 약물 링커 화합물에서 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자를 M1의 말레이미드 고리 시스템에 마이클 첨가하여 생성된 티오-치환된 석신이미드 고리 시스템을 갖고 있고, 여기서 M2 유래 모이어티는 M2의 상응 치환체에 비해 티오 치환체의 제거에 대한 반응성이 감소한다. 이러한 측면에서 M2 유래 모이어티는 M2에 대응하는 석신산-아미드 (M3) 모이어티의 구조를 가지며, 여기서 M2는 석신이미드 고리 시스템의 카르보닐-질소 결합 중 하나가 가수분해되었고, 이러한 부착의 결과로 적절한 근접성으로 인해 BU의 염기 작용기에 의해 도움을 받는다. 따라서 이러한 가수분해의 생성물은 카르복실산 작용기 및 아미드 질소 원자에서 치환된 아미드 작용기를 가지며, 이는 LS에 대한 M2 함유 LSS 전구체의 이미드 질소 원자에 해당하며, 1차 링커의 나머지 부분에 최소한 존재하는 선택적 스트레처 유닛이 포함될 것이다. 일부 측면에서, 염기 작용기는 비-사이클릭 염기성 유닛의 1차, 2차 또는 3차 아민 또는 사이클릭 염기 단위의 2차 또는 3차 아민이다. 다른 측면에서, BU의 염기성 질소는 구아니디노 모이어티에서와 같이 임의로 치환된 염기 작용기의 헤테로원자이다. 두 측면 모두에서 염기 촉매 가수분해에 대한 BU의 염기 작용기의 반응성은 염기성 질소 원자의 양성자화 상태를 감소시킴으로써 pH에 의해 제어된다.
따라서, 자기 안정화된 링커 (LS)는 일반적으로, 존재하고 사이클릭 염기성 유닛을 통합하거나 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환되는 제1 선택적 스트레처 유닛에 공유 결합된 M3 모이어티의 구조를 갖는다. 일부 측면에서, A는 개별 단일 단위이며 다른 측면에서는 두 개 이상의 하위 단위이고, 일반적으로 두 개의 하위 단위가 [HE]와 조합하여 선택적으로 A/A1이 함께 존재하는 경우 A1-A2로 표시된다. 스트레처 유닛 A는 차례로 LS 1차 링커의 B에 공유 결합되거나, 아래첨자 b가 각각 0 또는 1인 - M3-A(BU)-[HE]-A'a'- 또는 M3-A(BU)-[HE]-AO-B-의 일반 화학식으로 표현되는 방식으로 배열되는 M3, A, A'a'/B 및 BU 구성 요소를 사용하여 LO의 W에 공유 결합된다. A가 단일 신중한 단위인 경우 LS는 아래첨자 b가 1일 때, -M3-A(BU)-[HE]-B- 또는 -M3-A(BU)-[HE]-로 표시되고, A가 두 개의 하위 단위인 경우, LS는 -M3-A1(BU)-A2- 또는 -M3-A1(BU)-A2-B-로 표시되고 여기서 아래첨자 b가 각각 0 또는 1이고, 여기서 BU는 염기성 유닛의 둘 중 한 유형을 나타낸다 (사이클릭 또는 비-사이클릭).
LB가 M2 또는 M3인 LDC/ADC용 LSS 및 LS 1차 링커에서 -LB-A-의 예시적인 비제한적 구조; 및 이들 구조 내에서 A(BU)/A1(BU) 및 [HE]는 상기한 방식으로 배열되고, 여기서 BU는 비-사이클릭 염기성 유닛인 구조로 예시적으로 하기 구조로 표시되나 이에 제한되지 않고:
여기서 -CH(CH2NH2)C(=O)- 모이어티는 A이고, A가 단일 신중한 단위이므로 AO/A' 가 A2로 존재하는 경우, AO 또는 A'가 없거나 A가 A1-A2-이고, 여기서 A/A1이 BU로 치환되고, 여기서 BU는 비사이클릭 염기성 유닛으로, 선택적으로 양성자화된 염기성 질소 원자를 갖고 있는 -CH2NH2이고, 해당 모이어티 내에서 -C(=O)-는 존재하는 선택적 가수분해 강화 모이어티 [HE]이고, 여기서 상단 구조의 해시 표시는 B에 대한 공유 부착을 나타내고 하단 구조의 해시 표시는 LO의 W에 대한 공유 부착을 나타낸다. 이러한 예시적인 구조는 각각 석신이미드 (M2) 모이어티 또는 석신산-아미드 (M3) 모이어티를 함유하고, 후자는 LSS를 LS로 전환할 때 -CH2NH2의 도움을 받는 M2의 석신이미드 고리 가수분해로부터 생성된다.
LB가 M2 또는 M3인 LDC/ADC용 LSS 및 LS 1차 링커에서 -LB-A-의 예시적인 비제한적 구조; 및 이들 구조 내에서 A(BU)/A1(BU), AO/A' 및 [HE]가 상기한 방식으로 배열되고, 여기서 BU는 사이클릭 염기성 유닛인 구조로 예시적으로 하기 구조로 표시되나 이에 제한되지 않고:
여기서 이들 -M2-A(BU)-[HE]-AO/A'a'- 및 -M3-A(BU)-[HE]-AO/A'a'- 구조는 AO 가 없거나 또는 아래첨자 a'가 0이어서 A가 단일 신중한 단위인 경우 -M2-A(BU)-[HE]- 및 -M3-A(BU)-[HE]-가 되거나, 또는 AO/A'가 A2로 표시되는 A의 하위 단위로 존재하는 경우 -M2-A1(BU)-[HE]-A2- 및 -M3-A1(BU)-[HE]-A2-이 되고, 여기서, 어느 한 구조에서 BU는 선택적으로 양성화된 아제티딘-3,3-디일 형태의 사이클릭 염기성 유닛이고, 그 구조는 A/A1에 통합된 예시적인 헤테로사이클로 염기성 유닛이다. 해당 헤테로사이클로는 -A1(BU)- 또는 -A(BU)- 모이어티에서 비-사이클릭 염기성 유닛의 아미노알킬에 해당하고, 여기서 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소는 적어도 부분적으로 Ra2를 통해 비-사이클릭 염기성 유닛이 부착된 M2의 석신이미드 질소에 알파인 탄소 원자로 다시 공식적으로 고리화되었다.
상기 각 -LB-A- 구조의 물결선은 구조적으로 대응하는 약물 링커 화합물에서 M1 모이어티 또는 그의 M1 함유 중간체의 말레이미드 고리 시스템에 해당 황 원자가 마이클 첨가될 때 표적화 약제의 반응성 티올 작용기로부터 유래된 리간드 유닛의 황 원자의 공유 부착 부위를 나타낸다. 상단 구조의 해시 마크 (#)는 LSS 또는 LS 1차 링커의 나머지 부분인 B에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 하단 구조의 해시 마크는 LO의 W에 대한 공유 부착 부위를 나타낸다. M2의 석신이미드 고리 시스템은 티오 치환체로 인해 비대칭적으로 치환되기 때문에, 유리된 카르복실산기에 비해 위치가 다른, 본 명세서에 정의된 바와 같은 석신산-아미드 (M3) 모이어티의 위치화학 이성질체는 M2 가수분해를 초래할 수 있다. 상기 구조에서, AO에 인접하여 표시된 카르보닐 작용기는 본 명세서에 정의된 가수분해 증진제 [HE]를 예시한다.
상기 -M3-A(BU)-[HE]-AO/A'a'-, -M3-A(BU)- 및 -M3-A1(BU)-[HE]-A2- 모이어티, 여기서 BU가 비-사이클릭 또는 사이클릭 염기성 유닛은 자기 안정화 링커 (LS) 1차 링커를 포함하는 예시적인 -LB-A- 구조를 나타내는데, 이들 구조는 리간드 유닛의 티오 치환체를 제거할 가능성이 적기 때문에 이와 같이 명명되고, 이들이 유래하는 화학식 -M2-A(BU)-[HE]-AO/A'a'-, -M2-A(BU)- 또는 -M2-A1(BU)-[HE]-A2-를 포함하는 상응하는 LSS 모이어티와 비교하여, 해당 표적화 모이어티의 손실을 유발한다. 이론에 얽매이지 않고, 안정성 증가는 M2에 비해 M3의 더 큰 형태적 유연성에서 비롯된 것으로 여겨지며, 이는 더 이상 E2 제거에 유리한 형태로 티오 치환체를 제약하지 않는다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "염기성 유닛"는 본 명세서에 설명된 바와 같이 자기 안정화 링커 (LSS) 1차 링커 내의 유기 모이어티를 지칭하고, 이는 LSS를 포함하는 M2 모이어티 내에서 석신이미드 고리 시스템의 염기 촉매 가수분해에 참여하는 BU에 의해 상응하는 LS 모이어티로 전달된다 (즉, 석신이미드 카르보닐-질소 결합 중 하나에 물 분자의 첨가를 촉매한다). 일부 측면에서, 염기 촉매 가수분해는 LSS에 부착된 표적화 리간드 유닛에 의해 허용되는 제어된 조건 하에서 개시된다. 다른 측면에서는, 염기 촉매 가수분해는, LSS'를 포함하는 약물 링커 화합물이 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자의 마이클 첨가가 약물 링커 화합물의 LSS'의 M1 모이어티의 가수분해와 경쟁하는 표적화 약제와 접촉함으로써 개시된다. 이론에 얽매이지 않고, 적절한 염기성 유닛을 설계하기 위한 다양한 고려 사항을 다음 측면에서 설명한다. 이러한 측면 중 하나에서, 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기와 M2 구성 요소에 대한 LSS에서의 상대적 위치는 M2의 카르보닐기에 수소 결합하는 BU의 능력에 따라 선택되고, 이는 친전자성을 효과적으로 증가시켜 물의 공격에 대한 취약성을 증가시킨다. 또 다른 측면에서, 이러한 선택은 BU의 염기성 작용기에 대한 수소 결합에 의해 친핵성이 증가되는 물 분자가 M2 카르보닐기로 향하도록 이루어진다. 제3 측면에서, 이들 선택은 양성자화에 대한 염기성 질소가 유도성 전자 인출에 의해 석신이미드 카르보닐의 친전자성를 증가시켜 원치 않는 과량의 약물 링커 화합물로부터 보상이 필요한 조기 가수분해를 촉진하지 않도록 이루어진다. 이러한 추가적 측면에서, 이들 기계적 효과의 일부 조합은 LSS의 LS로의 제어된 가수분해를 위한 촉매 작용에 기여한다.
일반적으로, 상기 기계적 측면 중 어느 하나를 통해 작용할 수 있는 비-사이클릭 염기성 유닛은 1개의 탄소 원자 또는 2 내지 6개의 연속한 탄소 원자, 보다 일반적으로 1개의 탄소 원자 또는 2 내지 3개의 연속한 탄소 원자를 포함하고, 여기서, 상기 탄소 원자(들)는 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 아미노 작용기를 그것이 부착된 LSS 1차 링커의 나머지 부분에 연결한다. 상기 염기성 아민 질소 원자가 석신이미드 (M2) 모이어티의 해당 고리 개방 석신산 아미드 (M3) 모이어티로의 가수분해를 돕는 데 필요한 근접성에 위치하려면, 비-사이클릭 염기성 유닛의 아민-보유 탄소 사슬은 일반적으로 M2의 석신이미드 질소 (따라서 상응하는 M1-A- 구조의 말레이미드 질소)에 대한 A의 부착 부위에 대한 C1-C12 알킬렌의 알파 탄소에서 LSS의 -LB-A- 모이어티의 A에 부착된다. 일반적으로, 비-사이클릭 염기성 유닛의 상기 알파 탄소는 (S) 입체 화학적 배열을 갖거나 L-아미노산의 알파 탄소와 대응하는 배열을 갖는다.
앞서 설명한 대로, 비-사이클릭 형태의 BU 또는 고리화 형태의 BU는 일반적으로 그렇지 않으면 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 통해 LSS의 M1 또는 M2 또는 LS의 M3에 연결되고, 여기서, 이 모이어티는 고리화 염기성 유닛을 포함하거나 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환되어 각각 M1 또는 M2의 말레이미드 또는 석신이미드 질소에 결합되거나, 또는 M3의 아미드 질소 원자에 결합된다. 일부 측면에서, 사이클릭 염기성 유닛을 포함하는 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티는 [HE]에 공유 결합되며, 일반적으로 에테르, 에스테르, 카르보네이트, 우레아, 디설파이드, 아미드 카르바메이트 또는 다른 작용기, 보다 일반적으로는 에테르, 아미드 또는 카르바메이트 작용기를 통해 발생한다. 마찬가지로, 비-사이클릭 형태의 BU는 일반적으로 LB'가 M1인 LB'-A- 또는 LB가 M2 또는 M3인 -LB-A-에서 A의 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌 모이어티를 통해 LSS의 M1 또는 M2 또는 LS의 M3에 연결되고, 즉, M1 또는 M2의 말레이미드 또는 석신이미드 고리 시스템의 이미노 질소 원자 또는 M2의 석신이미드 고리 시스템의 가수분해로 인해 발생하는 M3의 아미드 질소에 부착된 C1-C12 알킬렌 모이어티의 동일한 탄소에서 비-사이클릭 염기성 유닛으로 치환된다.
일부 측면에서, 사이클릭 염기성 유닛은 비-사이클릭 염기성 유닛와 동일한 알파 탄소에 결합된 A/A1의 것에서 독립적으로 선택된 그렇지 않으면 임의로 치환된 C1-C12 알킬 (Ra2)로 공식적으로 고리화시킴으로써 비-사이클릭 BU의 구조를 통합하여, 스피로사이클릭 고리 시스템을 형성하여 사이클릭 염기성 유닛이 BU가 비-사이클릭일 때처럼 A/A1의 치환체가 아니라 A/A1의 구조에 통합되도록 한다. 이러한 측면에서, 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 아민 질소에 대한 공식적인 고리화는 두 알파 탄소 치환체의 상대적인 탄소 사슬 길이에 따라, 임의로 치환된 대칭 또는 비대칭 스피로 C4-C12 헤테로사이클로로서 사이클릭 염기성 유닛을 제공하고, 여기서 염기성 질소는 이제 염기성 골격 헤테로원자가 된다. 사이클릭 염기성 유닛에서 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 특성을 실질적으로 유지하려면 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자가 3차 아민이 아닌 1차 또는 2차 아민의 질소 원자이어야 하는데, 이는 사이클릭 염기성 유닛의 헤테로사이클로에서 4차화된 골격 질소를 초래할 수 있기 때문이다. 비-사이클릭 염기성 유닛을 사이클릭 염기성 유닛으로 공식적으로 고리화시키는 측면에서, LSS를 LS로 전환할 때 M2를 M3로 가수분해하는 것을 돕는 염기성 질소의 능력을 실질적으로 유지하기 위해, 이들 1차 링커에서 사이클릭 염기성 유닛의 결과 구조는 일반적으로 염기성 질소 원자와 스피로 C4-C12 헤테로사이클로 구성 요소의 스피로 탄소 사이에 3개 이하, 및 일반적으로 1 또는 2개의 개재 탄소가 위치하도록 염기성 질소를 갖는다. A/A1에 통합된 사이클릭 염기성 유닛 및 이들을 구성 요소로 갖는 LSS 및 LS 1차 링커는 본 발명의 실시양태에 의해 더 설명된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "가수분해-강화 모이어티"는 LSS 1차 링커 및 그 가수분해 생성물 LS의 LB'-A- 또는 -LB-A-에서 제1 선택적 스트레처 유닛 (A) 내에 선택적으로 존재하는 전자 인출기 또는 모이어티를 지칭한다. A/A1이 M2 모이어티의 이미드 질소에 결합된 LDC/ADC의 약물 링커 모이어티에서 LSS의 A/A1 구성 요소로서 존재하는 경우, 가수분해-강화 [HE] 모이어티는 일부 측면에서 [HE]의 전자 인출 효과로 인한 M2 모이어티와의 근접성에 따라, 해당 모이어티의 석신이미드 카르보닐기의 친전자성을 증가시키거나 최소한의 영향을 미쳐, LS 1차 링커의 M3 모이어티로의 변환을 촉진한다. A/A1의 각각 사이클릭 염기성 유닛 또는 비-사이클릭 염기성 유닛의 통합 또는 치환에 따라, 유도에 의해 M3로의 가수분해 속도를 증가시키기 위한 및와 앞서 언급한 두 가지 유형의 BU의 효과(들)는 화학식 M1-A(BU)-[HE]-AO/A'a'-의 LB'-A- 구조를 포함하는 약물 링커 화합물로부터 리간드 약물 접합체를 제조하는 동안 M1의 조기 가수분해가 상당한 정도로 일어나지 않도록 조정되고, 여기서 두 가지 변형은 M1-A(BU)- 및 M1-A1(BU)-[HE]-A2-의 화학식으로 표시되고, 여기서 A/A1는 [HE]와 조합된다. 대신, 제어된 조건 (염기성 유닛의 양성자화 상태를 감소시키기 위해 pH를 의도적으로 증가시킨 경우와 같이)에서, 리간드 약물 접합체 화합물의, 일반 화학식 -M2-A(BU)-[HE]-AO/A'a'-, 또는 보다 구체적으로 화학식 -M2-A(BU)- 또는 -M2-A1(BU)-A2-의 -LB-A- 구조를 상응하는 -M3-A(BU)-[HE]-AO/A'a'-, -M3-A(BU)- 또는 M3-A1(BU)-[HE]-A2- 화학식로 변환(covert)하는 가수분해를 촉진하는 BU와 [HE]의 조합 효과는 M1 모이어티의 가수분해를 보상하기 위해 약물 링커 화합물의 과도한 몰 과잉이 필요하지 않도록 한다. 따라서, 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자를 M1의 말레이미드 고리 시스템으로 첨가하는 마이클 첨가는 M2의 석신이미드 고리 시스템에 부착된 표적화 리간드 유닛을 제공하는데, 이는 일반적으로 M1 가수분해와 효과적으로 경쟁하는 속도로 발생한다. 이론에 얽매이지 않고, 예를 들어 BU의 염기성 아민이 TFA 염의 형태인 경우와 같이 낮은 pH에서, 약물 링커 생성물에서 M1의 조기 가수분해는 적절한 완충제를 사용하여 염기 촉매에 적합도록 pH를 높일 때보다 훨씬 느리고 약물 링커 화합물의 허용 가능한 몰 과잉은 표적화 약제의 반응성 티올 작용기의 황 원자를 약물 링커 화합물의 M1 모이어티에 추가하는 마이클 첨가가 완료되거나 거의 완료되는 과정에서 발생하는 조기 M1 가수분해로 인한 모든 손실을 적절히 보상할 수 있다.
앞서 설명한 바와 같이, 두 유형의 염기성 유닛에 의한 카르보닐 가수분해의 증진은 해당 작용기의 염기성 및 M1/M2 카르보닐기에 대한 해당 염기성 작용기의 거리에 따라 달라진다. 일반적으로, [HE]는 카르보닐 모이어티, 또는 M2 또는 그로부터 유도된 M3에 결합되고, A2에 또는 B가 부재하고 A가 단일 신중한(discreet) 단위인 경우 존재하는 선택적 2차 링커에 공유 부착을 제공하는 A/A1의 C1-C12 알킬렌 말단에 위치하는 다른 카르보닐 함유 작용기이다. 케톤 이외의 카르보닐 함유 작용기에는 에스테르, 카르바메이트, 카르보네이트 및 우레아가 포함된다. [HE]가 LSS 1차 링커를 갖는 ADC의 약물 링커 모이어티에서 케톤 이외의 카르보닐 함유 작용기인 경우, A/A1과 공유되는 해당 작용기의 카르보닐 모이어티는 일반적으로 [HE]가 -C(=O)-X-일 때와 같이 M2의 이미드 질소 원자 부착 부위 원위에서 달리 임의로 치환된 A/A1의 C1-C12 알킬렌에 결합되며, 여기서 X는 -O- 또는 임의로 치환된 -NH-이다. 일부 측면에서, [HE] 모이어티는 A/A1 중 어느 것이 공유 결합된 이미드 질소로부터 충분히 멀리 떨어져 있어 M2 함유 모이어티의 석신이미드 카르보닐-질소 결합의 가수분해 감도에 눈에 띄지 않거나 사소한 영향이 관찰될 수 있지만, 대신 주로 BU에 의해 구동된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "스트레처 유닛"은 약물 링커 화합물에서 링커 유닛의 1차 또는 2차 링커에 있는 선택적 유기 모이어티, 또는 해당 링커가 존재할 때 존재할 때 표적화 리간드 유닛 (L)을 선택적 2차 링커로부터 물리적으로 분리하는, 항체 약물 접합체와 같이, 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티를 지칭한다. 링커 유닛이 LSS 또는 LS 1차 링커를 포함하는 경우, 이들 유형의 1차 링커에 염기성 유닛을 제공하기 때문에 제1 선택적 스트레처가 존재한다. 약물 유닛을 유리 약물로 방출하기 위한 2차 링커의 효율적인 처리를 허용하는 상기 선택적 스트레처 유닛이 없는 리간드 유닛으로부터의 입체 완화가 불충분한 경우, 모든 유형의 1차 링커에서 LR에 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)이 존재해야 할 수도 있다. 대안적으로, 또는 입체 완화 외에도 약물 링커 화합물 제조 시 합성을 용이하게 하기 위해 이러한 선택적 구성 요소를 포함할 수 있다. 일부 측면에서 아래첨자 b가 1일 때 제1 또는 제2 선택적 스트레처 유닛 (각각 A 또는 A')은 단일 단위이거나 여러 개의 하위 단위를 함유할 수 있다 (A에 -A1-[HE]-A2-로 표시되는 두 개의 하위 단위가 있는 경우와 같이). 다른 측면에서 아래첨자 b가 0일 때 일반적으로 A는 하나의 고유 단위이거나 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1일 때 두 개의 고유한 하위 단위를 갖는다. 또 다른 측면에서 B/A'는 2 내지 4개의 독립적으로 선택된 고유한 하위 단위를 갖는다.
일부 측면에서, LR이 LSS/LS인 경우, 약물 링커 화합물의 M1에 대한 공유 부착 또는 LDC/ADC 화합물의 약물 링커 모이어티의 M2/M3에 대한 공유 부착 외에 A는 분기 유닛 (B), 또는 일반적으로 A-[HE]-AO/Aa'-로 표시되는, A[HE] (AO/A'가 부재) 또는 A1-[HE]-A2 (AO/A'가 존재)에서와 같이 AO/A'a'를 통해 선택적으로 존재하는 선택적 2차 링커 (LO)의 W에 결합되고, 여기서 A2로 존재하는 경우 A/A1 및 AO/Aa'도 LSS/LS의 구성 요소이다.
일부 측면에서, A 또는 A' 또는 이들 스트레처 유닛의 하위 단위는 -LP(PEG)의 화학식을 갖고, 여기서 다른 곳에 정의된 바와 같이, LP는 병렬 커넥터 단위이고 PEG는 PEG 단위이다. 따라서 이들 측면 중 일부에서, 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1인 리간드 약물 접합체 또는 약물 링커 화합물의 링커 모이어티에서 링커 유닛은 -A1-[HE]-LP(PEG)-의 화학식을 함유하고, 여기서 A'는 -LP(PEG)-이고 A2로 존재한다. 아래첨자 b가 1이고 AO가 A2로 존재하는 다른 측면에서, 리간드 약물 접합체 또는 약물 링커 화합물의 약물 링커 모이어티의 링커 유닛은 -A1-[HE]-LP(PEG)-B-의 화학식을 함유한다. 아래첨자 b가 1이고 아래첨자 a'가 1인 또 다른 측면에서, 리간드 약물 접합체 또는 약물 링커 화합물은 -A-[HE]-AO-B-LP(PEG)의 화학식을 함유하며, 여기서 A'는 LP(PEG)이다.
일부 측면에서 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)이 존재하는 아래첨자 a가 1인 경우, 해당 단위는 일반적으로 적어도 하나의 탄소 원자를 갖고, 여기서 해당 원자는 LB/LB'를 [HE]에 연결한다. LB'가 약물 링커 화합물의 LSS'의 1차 링커인 측면 중 일부에서, 해당 스트레처 유닛은 염기성 유닛으로 치환되거나 이를 통합하는 C1-C12 알킬렌 모이어티를 포함하고, 그렇지 않으면 임의로 치환되고, 라디칼 탄소 원자 중 하나는 말레이미드 질소 원자에, 다른 하나는 [HE]에 부착되어 있고, 여기서, [HE]는 존재하는 선택적 가수분해 강화 모이어티이다. 다른 측면에서, LR' 이 LSS' 이외의 것이지만, 그럼에도 불구하고 말레이미드 모이어티 또는 다른 LB' 모이어티를 포함하는 경우, LB'는 일부 측면에서 선택적으로 [HE]와 조합되는 임의로 치환된 C1-C12 알킬렌인 선택적 제1 스트레처 유닛 (A)에 부착된다. 따라서, LR'이 LSS'인 일부 측면에서, 제1 선택적 스트레처 유닛이 존재하고 C1-C12 알킬렌 모이어티, [HE] 및 선택적 하위 단위 (아래첨자 b가 1인 경우 AO 또는 아래첨자 b가 0인 경우 A'a')를 포함하고, 이들 모두는 LR'이 LSS일 때 LR'의 구성요소이며, 여기서 A는 이미드 질소 원자에 대한 C1-C12 알킬렌 모이어티의 부착 부위 원위에서 LR'의 구성 요소인 B 또는 LO의 구성 요소인 W에 부착되어 있다. 다른 측면에서는, 아래첨자 a가 1이고 A가 단일 신중한(discreet) 단위 또는 두 개의 하위 단위로 존재할 때, A는 -A-[HE]-AO/Aa'-의 일반 화학식을 갖고, 여기서 AO/A'a'는 A의 선택적 하위 단위이고, 더 구체적으로는 -A1-[HE]-A2-의 화학식을 갖거나, 또는 보다 구체적으로 AO가 A의 제2 하위 단위로 존재하고 아래첨자 b가 1일 때 또는 아래첨자 a'가 1이고 아래첨자 b가 0이어서 A'가 A의 제2 하위 단위로 존재할 때 -A1-[HE]-A2-의 화학식을 갖는다. 이러한 측면에서, AO/A2 또는 A'/A2는 α-아미노산, β-아미노산 또는 기타 아민 함유 산 잔기이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "분기 유닛"은 링커 유닛 (LU)의 선택적 구성 요소인 삼기능성 또는 다기능성 유기 모이어티를 지칭한다. 분기 유닛 (B)은 복수의 -LO-D 모이어티가 존재하는 경우, 화학식 1A의 LDC/ADC의 화학식 1A의 약물 링커 모이어티의 1차 링커에 존재하고, 단일 약물 링커 모이어티이다. 앞서 설명한 일반화된 화학식을 갖는 LDC/ADC에서, 분기 유닛의 유무는 Bb의 아래첨자 b로 표시되며, 여기서 아래첨자 b는 각각 0 또는 1이다. 분기 유닛은 1차 링커에 통합되기 위해 적어도 삼기능성이다. 화학식 -LU-D의 약물 링커 모이어티당 다수의 -LO-D 모이어티로 인한 분기 유닛을 갖는 약물 링커 또는 LDC/ADC 화합물은 일반적으로 화학식 -A'a'-W-Yy-를 함유하는 각 이차 링커 (LO)를 갖고, 여기서, A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로 각각 A'의 유무를 나타내고; W는 펩타이드 절단 가능 유닛; Y는 스페이서 유닛이고, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로 각각 하나 또는 두 개의 스페이서 유닛의 유무를 나타낸다.
일부 측면에서, 천연 또는 비천연 아미노산 잔기 또는 기능화된 측쇄를 갖는 다른 아민 함유 산 화합물의 잔기는 두 개의 -LO-D 모이어티를 부착하기 위한 삼기능성 분기 유닛으로 작용한다. 이러한 측면 중 일부에서, B는 L- 또는 D-배열의 라이신, 글루탐산 또는 아스파르트산 잔기로서, 여기서 엡실론-아미노, 감마-카르복실산 또는 베타-카르복실산 작용기가 각각 아미노 및 카르복실산 말단과 함께 LU의 나머지 부분 내에서 B를 상호 연결한다. 3 또는 4개의 -LO-D 모이어티를 부착하기 위한 더 큰 기능성의 분기 유닛은 일반적으로 필요한 수의 삼-기능성 하위 단위를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "천연 아미노산"은 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, L 또는 D-배열의, 자연적으로 발생하는 아미노산, 즉 아르기닌, 글루타민, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 라이신, 글리신, 알라닌, 히스티딘, 세린, 프롤린, 글루탐산, 아스파르트산, 트레오닌, 시스테인, 메티오닌, 류신, 아스파라긴, 이소류신, 및 발린 또는 그 잔기를 지칭한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "비천연 아미노산"은 알파-아미노 함유 산 또는 그 잔기를 지칭하고, 이는 천연 아미노산의 골격 구조를 가지지만, 측쇄기가 천연 아미노산에 존재하지 않는 알파 탄소에 부착되어 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "비고전적 아미노산"은 아민 치환체가 카르복실산에 알파 탄소와 결합하지 않아 알파-아미노산이 아닌 아민 함유 산 화합물을 지칭한다. 비고전적 아미노산에는 천연 아미노산 또는 비천연 아미노산에서 카르복실산과 아미노 작용기 사이에 메틸렌이 삽입된 β-아미노산이 포함된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 문서에서 사용되는 "펩타이드"는 한 아미노산의 카르복실산기가 펩타이드 서열에서 다음 아미노산의 알파-아미노기와 아미드 결합을 형성하는 두 개 이상의 아미노산으로 이루어진 중합체를 지칭한다. 폴리펩타이드에서 아미드 결합을 제조하는 방법은 아미드의 정의에 추가로 제공된다. 펩타이드는 L- 또는 D-배열의 자연 발생 아미노산 및/또는 비자연 발생 아미노산 및/또는 비고전적 아미노산을 포함할 수 있다.
본 명세서에 정의된 "프로테아제"는 일반적으로 펩타이드에서 발견되는 아미드 결합과 같은 카르보닐-질소 결합을 효소적으로 절단할 수 있는 단백질을 지칭한다. 프로테아제는 크게 6가지: 세린 프로테아제, 트레오닌 프로테아제, 시스테인 프로테아제, 글루탐산 프로테아제, 아스파르트산 프로테아제, 및 메탈로프로테아제로 분류되며, 주로 기질의 카르보닐-질소 결합을 절단하는 활성 부위의 촉매 잔기에서 이름을 따서 명명한다. 프로테아제는 카르보닐-질소 결합의 N-말단 및/또는 C-말단 쪽에 있는 잔기의 정체성과 다양한 분포 (세포 내 및 세포 외)에 따라 달라지는 다양한 특이성이 특징이다.
조절 프로테아제는 일반적으로 비정상적이거나 기타 원치 않는 세포에서 때때로 비정상적이거나 조절 장애가 발생하는 세포 활동의 조절에 필요한 세포 내 프로테아제이다. 경우에 따라, 펩타이드 절단 가능 유닛이 세포 내에서 우선적으로 분포하는 프로테아제로 향하는 경우, 해당 프로테아제는 세포 유지 또는 증식에 관여하는 조절 프로테아제이다. 이러한 프로테아제에는 카텝신이 포함된다. 카텝신에는 세린 프로테아제인 카텝신 A, 카텝신 G, 아스파르트산 프로테아제인 카텝신 D, 카텝신 E 및 시스테인 프로테아제인 카텝신 B, 카텝신 C, 카텝신 F, 카텝신 H, 카텝신 K, 카텝신 L1, 카텝신 L2, 카텝신 O, 카텝신 S, 카텝신 W 및 카텝신 Z가 포함된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "펩타이드 절단 가능 유닛"은 프로테아제에 대한 인식 부위를 제공하하는 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티 또는 약물 링커 화합물의 2차 링커 내의 유기 모이어티를 지칭하고, 해당 프로테아제의 효소 작용 시 그 접합된 약물 유닛 (D)를 유리 약물로 효소적으로 방출할 수 있다.
프로테아제에 의한 절단에 대한 인식 부위는 때때로 암세포와 같은 비정상 세포에서 발견되는 프로테아제에 의해 인식되거나 주변 비정상 세포의 환경에 특이적인 리간드 약물 접합체에 의해 표적화된 명목상 정상 세포 내에서 인식되는 것으로 제한되지만, 정상 세포에서도 발견될 수 있다. 그 목적을 위해, 펩타이드는 유리 약물 또는 그 전구체의 조기 방출을 최소화하기 위해 일반적으로 순환하는 프로테아제에 저항성이 있으며 그렇지 않으면 해당 약물에 대한 전신 노출로 인해 표적을 벗어난 부작용을 유발할 수 있다. 일부 측면에서, 펩타이드는 이러한 내성을 갖기 위해 하나 이상의 D-아미노산 또는 천연 아미노산 또는 비고전적 아미노산을 가질 것이다. 이들 측면 중 일부에서 서열은 P2' 부위에 D-아미노산을 함유하고 P1' 부위에 L-프롤린을 제외한 20개의 자연 발생 L-아미노산 중 하나를 함유하는 디펩타이드 또는 트리펩타이드를 포함할 것이다.
이들 측면에서, 반응 부위는 표적 항원에 대한 면역학적으로 선택적인 결합에 이어서 효소적으로 작동될 가능성이 더 높다. 이들 측면 중 일부에서, 표적 항원은 비정상 세포에 있고, 따라서 인식 부위는 리간드 약물 접합체 화합물의 표적 비정상 세포로의 세포 내재화에 이어서 효소적으로 작동될 가능성이 더 높다. 결론적으로 이들 비정상 세포는 정상 세포에 비해 표적 항원을 더 많은 카피 수로 나타내야 표적에 대한 부작용을 완화한다. 다른 측면에서는, 표적 항원이, 비정상 세포 내에 있고 비정상 세포의 환경에 특이한 정상 세포에 존재하므로 리간드 약물 접합체 화합물이 이들 표적 정상 세포로 세포 내재화된 후 효소적으로 인식 부위가 작동할 가능성이 더 높다. 결과적으로, 이들 정상 세포는 암세포 부위에서 멀리 떨어진 정상 세포에 비해 표적 항원을 더 높은 카피 수로 나타내야 표적 부작용을 완화한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 인식 부위에 대한 프로테아제 반응성은 정상 조직 균질물에 비해 종양 조직 균질물 내에서 더 크다. 그 더 큰 반응성은 정상 조직의 정상 세포에서의 세포내 프로테아제 활성과 비교하여 종양 조직의 표적 세포 내에서 더 많은 양의 세포내 프로테아제 활성, 및/또는 기존 리간드 약물 접합체의 펩타이드 절단 가능 유닛의 활성과 비교하여 정상 조직의 간질 공간에서 감소된 프로테아제 활성에 기인한다. 이들 측면에서, 세포 내 프로테아제는 조절 프로테아제이고, 펩타이드 절단 가능 유닛의 펩타이드 결합은 정상 조직 균질물의 프로테아제에 비해 종양 조직 균질물의 프로테아제에 의해 선택적으로 절단될 수 있을 뿐만 아니라 혈청 프로테아제에 비해 세포 내 조절 프로테아제에 의해 선택적으로 절단될 수 있다.
펩타이드 절단 가능 유닛을 함유하는 2차 링커는 일반적으로 -A'a'-W-Yy-의 화학식을 갖고, 여기서, A'는 아래첨자 b가 1일 때 제2 선택적 스페이서 유닛이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1이고, W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고; Y는 선택적 스페이서 유닛이고; 아래첨자 y는 0, 1 또는 2이다. 아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a'가 1일 때, A'는 A의 하위 단위가 되어 2차 링커의 화학식은 -W-Yy-가 된다. 2차 링커의 화학식 중 하나에 대해, 펩타이드 절단 가능 유닛을 포함하는 펩타이드 서열에 대한 프로테아제 작용이 아래첨자 y가 0일 때 D의 직접 방출을 초래하거나, 또는 아래첨자 y가 1일 때 유리 약물의 전구체로서 화학식 Y-D의 약물-링커 단편을 초래하고, 여기서 Y는 일반적으로 자가 용해를 거쳐 유리 약물을 제공하거나, 또는 아래첨자 y가 2일 때 화학식 Y-Y'-D의 제1 약물 링커 단편을 초래하고, 여기서 Y는 자가 용해를 거쳐 화학식 Y'-D의 제2 약물 링커 단편을 제공하는 제1 스페이서 유닛이고, 여기서 Y'는 제2 스페이서 유닛으로, 분해되어 유리 약물로서 D를 완전히 방출한다.
일부 측면에서, 2차 링커에 펩타이드 절단 가능 유닛이 함유된 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IC의 구조로 표시되고:
리간드 약물 접합체의 상응 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1D 또는 화학식 1E의 구조로 표시되고:
여기서 W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고 화학식 IC의 -M1-Aa-Bb-, 화학식 1D의 -M2-Aa-Bb- 및 화학식 1E의 -M3-Aa-Bb-는 1차 링커이며, 여기서 M1은 말레이미드 모이어티이고; M2는 석신이미드 모이어티; M3는 석신산 아미드 모이어티이고; Y는 선택적 스페이서 유닛으로서, 아래첨자 y가 0 또는 1이거나 Yy가 -Y-Y'이므로 아래첨자 y가 2이고 Y와 Y'가 각각 제1 및 제2 스페이서 유닛이고, 나머지 가변기는 화학식 IA의 약물 링커 화합물 및 화학식 1A의 약물 링커 모이어티에 대해 정의된 바와 같다. 본 발명의 M1 모이어티를 함유하는 약물 링커 화합물의 LSS' 1차 링커 및 M2 모이어티를 함유하는 일부 LDC/ADC에서 약물 링커 모이어티의 LSS 1차 링커는 A 또는 그 하위 단위가 염기성 유닛으로 치환되거나 이를 포함하는 화학식이다. 다른 1차 링커는 상기 화학식 1C의 M2 함유 LSS 1차 링커로부터 석신이미드 모이어티를 가수분해하여 화학식 1D의 M3 함유 모이어티를 제공함으로써 유도되는 LS 1차 링커이다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 표적 세포에 의해 또는 표적 세포 내에서 생성된 프로테아제에 의해 특이적으로 절단되는 아미드 결합은 스페이서 유닛 (Y) 또는 Y가 없는 경우 약물 유닛의 아미노기에 대한 것이다. 따라서, W의 펩타이드 서열에 대한 프로테아제 작용은 유리 약물 또는 유리 약물을 제공하기 위해 자발적으로 단편화되는 그 전구체 Yy-D로서 D의 방출을 초래한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "스페이서 유닛"은 화학식 -A'a'-W-Yy- 의 2차 링커 (LO)에서 모이어티를 지칭하고, 여기서 아래첨자 y는 1 또는 2이고, 이는 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티의 링커 유닛 내에 1 또는 2개의 스페이서 유닛이 존재함을 나타내고, 여기서, A'는 본 명세서에 기재된 바와 같이 일부 측면에서, 존재하는 제1 선택적 스페이서 유닛의 하위 단위로서 2차 링커가 공유 부착되는 제1 링커의 일부가 되는 제2 선택적 스페이서 유닛이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로서 A'의 유무를 나타내고; Y는 스페이서 유닛이고 W는 화학식 -Pn...[P3]-[P2]-[P1]- 또는 -Pn...[P3]-[P2]-[P1]-[P-1]-의 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서 아래첨자 n은 0 내지 12 범위 (예를 들어, 0 내지 10, 3 내지 12 또는 3 내지 10)이고 P1, P2 및 P3은 본 명세서에 기술된 바와 같이 정상 조직 균질물에 비해 종양 조직 균질물에 의한 프로테아제 절단에 대한 선택성을 부여하는 아미노산 잔기이다. 아래첨자 y가 1일 때, 스페이서 유닛은 W 및 약물 유닛 (D)에 공유 결합되거나, 아래첨자 y가 2일 때, D에 공유 결합된 그러한 다른 모이어티 (Y')에 공유 결합된다. W에 대한 프로테아제 작용은 본 발명의 실시양태에 더 설명된 대로 유리 약물로서 D의 방출을 개시한다.
본 명세서에서 사용되는 "자가 용해성 모이어티"는 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y) 내의 이중 기능 모이어티를 지칭하고, 여기서 자가 용해성 모이어티는 D의 헤테로원자 또는 허용되는 경우 임의로 치환된 Y와 D 사이의 공유 작용기에 공유적으로 부착되어 있고, 다른 임의로 치환된 헤테로원자 (J)를 통해 펩타이드 절단 가능 유닛에도 공유 부착되고, 여기서 J는 -NH- 또는 아미드 작용기 내의 적절히 치환된 질소 원자이며, 따라서 자가 용해성 모이어티는 이들 약물 링커 구성 요소를 활성화되지 않는 한 일반적으로 안정한 삼원 분자로 통합한다.
P1/P-1과 Y 사이의 펩타이드 결합이 절단될 때, D 또는 Y'-D인 제1 약물 링커 단편은 자가 용해성 스페이서 유닛의 자가 용해성 모이어티의 자기 파괴에 의해 삼원 분자로부터 자발적으로 분리된다. 일부 측면에서, Y'-D 또는 D와 W에 결합된 Y의 헤테로원자 J 사이에 개재하는 자가 용해성 모이어티 스페이서 유닛의 구성 요소는 임의로 치환된, -C6-C24 아릴렌-C(R8)(R9)-, -C5-C24 헤테로아릴렌- C(R8)(R9)-, -C6-C24 아릴렌-C(R8)=C(R9)- 또는 -C5-C24 헤테로아릴렌- C(R8)=C(R9)-의 화학식을 갖고, 여기서 R8 및 R9는 본 발명의 실시양태에 설명된 바와 같고, 일반적으로는 C6-C10 아릴렌-CH2- 또는 C5-C10 헤테로아릴렌-CH2-이고, 여기서 (헤테로)아릴렌은 임의로 치환되고, 자가 용해성 모이어티 스페이서 유닛의 구성 요소가 단편화를 거쳐 J와 W 사이의 프로테아제 절단 가능 결합의 절단 시 D 또는 Y'-D의 동시 방출과 함께 1, 4 또는 1,6-제거에 의해 이미노-퀴논 메타이드 또는 관련 구조를 형성할 수 있다. 일부 측면에서, 상기 구성 요소가 J에 결합된 자가 용해성 스페이서 유닛은 임의로 치환된 p-아미노벤질 알코올(PAB) 모이어티, 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈, 또는 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체와 같은 PAB 기와 전자적으로 유사한 (즉, PAB 형) 다른 방향족 화합물 (예를 들어, Hay 등, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2237 참조) 또는 p-아미노벤질 알코올 (PAB) 모이어티의 페닐기가 헤테로아릴렌으로 치환된 것들로 예시된다.
이론에 구속되지 않고, PAB 또는 링커 유닛에 통합된 자가 용해성 스페이서 유닛의 PAB-형 모이어티의 아릴렌 또는 헤테로아릴렌기의 방향족 탄소는 J로 치환되고, 여기서 J의 전자-공여 헤테로원자는 W의 절단 부위에 부착되어 해당 헤테로원자의 전자-공여 용량이 감쇠된다 (즉, 자가 용해성 스페이서 유닛의 자가 용해성 모이어티를 링커 유닛으로 통합함으로써 EDG 능력이 마스킹됨). 헤테로(아릴렌)의 다른 치환체는 D의 임의로 치환된 헤테로원자, Y와 D 사이에 공유된 임의로 치환된 작용기 또는 약물 유닛 (D)에 결합된 제2 스페이서 유닛 (Y')에 부착된 벤질 탄소이고, 여기서, 벤질릭 탄소는 중심 아릴렌 또는 헤테로아릴렌의 다른 방향족 탄소 원자에 부착되어 있고, 여기서, 감쇠된 전자 공여 헤테로원자를 보유한 방향족 탄소는 해당 벤질릭 탄소 원자에 인접 (즉, 1,2-관계) 또는 이로부터 두 개의 추가 위치가 제거 (즉, 1,4-관계)되어 있다. 기능화된 EDG 헤테로원자는 W의 절단 부위를 처리할 때 마스킹된 헤테로원자의 전자 공여 용량이 회복되도록 선택되어 1, 4- 또는 1,6-제거를 통해 벤질릭 치환체로부터 -D를 유리 약물로 배출하거나, Y'-D가 방출될 때 Y'의 후속 자가 용해가 유리 약물을 제공하여 치료 효과를 유도할 수 있다. 예시적인 자가 용해성 모이어티 및 이들 자가 용해성 모이어티를 갖는 자가 용해성 스페이서 유닛이 본 발명의 실시양태에 의해 예시된다.
자가 용해성 기의 다른 예로는, 예를 들어, 2- 아미노이미다졸-5-메탄올 유도체 (예를 들어, Hay 등, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2237 참조) 및 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈과 같이 PAB기와 전자적으로 유사한 방향족 화합물이 포함되지만 이에 국한되지 않는다.　치환 및 치환되지 않은 4-아미노부티르산 아미드 (예를 들어, Rodrigues 등, 1995, Chemistry Biology 2:223 참조), 적절하게 치환된 바이사이클로[2.2.1] 및 바이사이클로[2.2.2] 고리 시스템 (예를 들어, Storm 등, 1972, J. Amer. Chem. Soc. 94:5815 참조) 및 2-아미노페닐프로피온산 아미드 (예를 들어, Amsberry 등, 1990, J. Org. Chem. 55:5867 참조)와 같이 아미드 결합 가수분해 시 고리화를 거치는 스페이서가 사용될 수 있다.　글리신의 a-위치에서 치환되는 아민 함유 약물의 제거 (예를 들어, Kingsbury 등, 1984, J. Med. Chem. 27:1447 참조)도 자가 용해성 기의 예이다. 일 실시양태에서, 스페이서 유닛은 WO 2007/011968에 기술된 바와 같이 분지형 비스(하이드록시메틸)스티렌 (BHMS) 단위이며, 이는 다수의 약물을 통합 및 방출하는 데 사용될 수 있다. 추가적인 자가 용해성 스페이서는 WO 2005/082023에 설명되어 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 문서에서 사용되는 "메틸렌 카르바메이트 단위"는 자가 용해가 가능한 유기 모이어티를 지칭하고, 리간드 약물 접합체 또는 약물 링커 화합물의 링커 유닛 내에서 자가 용해성 스페이서 유닛와 약물 유닛 사이에 개입하며, 예시적인 제2 스페이서 유닛이다.
약물 유닛에 결합된 메틸렌 카르바메이트(MAC) 단위는 하기 화학식 III으로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 물결선은 메틸렌 카르바메이트 단위가 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)에 공유 결합됨을 나타내고; D는 메틸렌 카르바메이트 단위에 통합된 작용기 (예를 들어, 하이드록실, 티올, 아미드 또는 아민 작용기)를 갖는 약물 유닛이고; T*는 산소, 황, 또는 질소를 임의로 치환된 -NH-로 포함하는 상기 작용기의 헤테로원자이다. MAC 단위를 포함하는 링커 유닛이 절단되면, 제2 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y')로서 해당 MAC 단위에 결합된 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)는 단편화를 거쳐 화학식 III의 -Y'-D를 방출한다. 그런 다음, MAC 단위는 자발적으로 분해되어 유리 약물로서 방출 D를 완료하며, 그 추정 메커니즘은 본 발명의 실시양태에 의해 나타나 있다.
본 명세서에서 사용되는 "PEG 단위"는 에틸렌-옥시 하위 단위 (PEG 또는 PEG 하위 단위)가 반복되는 폴리에틸렌 글리콜 모이어티 (PEG)를 포함하는 기를 지칭하고, 하기 화학식을 갖는 에틸렌 글리콜 하위 단위라고도 한다
PEG에는 다분산 PEG, 단분산 PEG 및 개별 PEG가 포함된다. 다분산 PEG는 크기와 분자량이 이질적인 혼합물인 반면, 단분산 PEG는 일반적으로 이질적인 혼합물에서 정제되므로 단일 사슬 길이 및 분자량을 제공한다. 바람직한 PEG 단위는 중합 공정이 아닌 단계별 방식으로 합성되는 화합물인 개별 PEG를 포함한다. 개별 PEG는 중합 공정이 아닌 단계별 방식으로 합성되는 화합물이다. 개별 PEG는 정의되고 지정된 사슬 길이를 가진 단일 분자를 제공한다.
PEG 단위는 적어도 2개의 하위 단위, 적어도 3개의 하위 단위, 적어도 4개의 하위 단위, 적어도 5개의 하위 단위, 최소 6개의 하위 단위, 적어도 7개의 하위 단위, 적어도 8개의 하위 단위, 적어도 9개의 하위 단위, 적어도 10개의 하위 단위, 적어도 11개의 하위 단위, 적어도 12개의 하위 단위, 적어도 13개의 하위 단위, 적어도 14개의 하위 단위, 적어도 15개의 하위 단위, 적어도 16 하위 단위, 적어도 17개의 하위 단위, 적어도 18개의 하위 단위, 적어도 19개의 하위 단위, 적어도 20개의 하위 단위, 적어도 21개의 하위 단위, 적어도 22개의 하위 단위, 적어도 23개의 하위 단위, 또는 적어도 24개의 하위 단위를 포함한다. 일부 PEG 단위는 최대 72개의 하위 단위를 포함한다.
본 명세서에 제공된 PEG 단위는 각각 서로 공유 부착된 하나 이상의 에틸렌옥시 하위 단위를 포함하는 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜 사슬은 예를 들어, 선형, 분지형 또는 별 모양 배열로 서로 연결될 수 있다. 일반적으로, 캄프토테신 접합체에 통합되기 전에 폴리에틸렌 글리콜 사슬 중 적어도 하나가 메틸렌 카르바메이트 단위의 카르바메이트 질소에 공유 부착하기 위해 친전자기로 치환된 알킬 모이어티 (즉, R의 경우를 나타냄)로 한쪽 끝에서 유도체화된다. 일반적으로, 링커 유닛의 나머지 부분에 대한 공유 부착에 관여하지 않는 각 폴리에틸렌 글리콜 사슬의 말단 에틸렌옥시 하위 단위는 PEG 캡핑 유닛, 일반적으로 -CH3, CH2CH3 또는 CH2CH2CO2H와 같은 임의로 치환된 알킬로 변형된다. 바람직한 PEG 단위은 2 내지 24개의 -CH2CH2O- 하위 단위가 직렬로 공유 부착되고 한쪽 끝이 PEG 캡핑 유닛로 종단되는 단일 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 갖는다.
본 명세서에서 사용되는 "PEG 캡핑 유닛"는 명목상 비반응성 유기 모이어티 또는 PEG 단위의 유리 및 비결합 말단을 종결하고 일부 측면에서는 수소가 아닌 작용기이다. 이들 측면에서 PEG 캡핑 유닛은 메톡시, 에톡시 또는 다른 C1-C6 에테르이거나 -CH2-CO2H 또는 기타 적합한 모이어티이다. 따라서 에테르, -CH2-CO2H, -CH2CH2CO2H, 또는 다른 적합한 유기 모이어티는 PEG 단위의 말단 PEG 하위 단위에 대한 "캡"으로 작용한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "병렬 커넥터 단위"는 약물 링커 화합물의 유기 모이어티 또는 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티를 지칭하고, 이는 일반적으로 링커 유닛에 제1 또는 제2 스트레처 유닛의 하위 단위로 존재하고, 여기서, 병렬 커넥터 단위 (LP)는 적어도 부분적으로 그 약물 유닛의 소수성을 감소시키기 위해, 이하에서, 소수성 약물 유닛으로 지칭하는 소수성인 약물 유닛에 대해 부착된 PEG 단위을 병렬 방향으로 배향할 수 있다. LP 및 관련 PEG 단위 및 PEG 캡핑 유닛의 구조는 본 명세서에 구체적으로 참조로 통합된 WO 2015/5057699에 기술되어 있으며, 일부 측면에서 LP는 삼기능성 α-아미노산, β-아미노산 또는 다른 삼기능성 아민 함유 산 잔기이다.
본 명세서에서 사용되는 "세포 내 절단된", "세포 내 절단" 및 이와 유사한 용어는 리간드 약물 접합체 등에서 발생하는 표적 세포 내의 대사 과정 또는 반응을 지칭하고, 이에 따라 접합체의 약물 유닛와 리간드 유닛 사이의 링커 유닛을 통한 공유 부착이 파괴되어 표적 세포 내에서 D가 유리 약물로서 방출된다. 본 명세서에 기술된 바와 같이, 일부 실시양태에서 D는 초기에 하나 이상의 자가 용해성 스페이서를 갖는 약물 유닛의 부가물로서 방출되고, 자가 용해성 스페이서는 이후 약물 유닛으로부터 자발적으로 분리되어 D를 유리 약물로서 방출한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "혈액학적 악성 종양"은 림프성 또는 골수성 기원의 세포로부터 유래하는 혈액 세포 종양을 지칭하고, "액체 종양"이라는 용어와 동의어이다. 혈액 악성 종양은 온순한 종양, 중간 정도의 공격성 종양 또는 매우 공격적인 종양으로 분류할 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "림프종"은 일반적으로 림프성 기원의 과증식 세포에서 발생하는 혈액학적 악성 종양을 지칭한다. 림프종은 크게 두 가지 유형으로 분류되기도 한다: 호지킨 림프종 (HL) 및 비호지킨 림프종 (NHL). 또한 림프종은 표현형, 분자 또는 세포 발생 마커에 따라 암세포와 가장 유사한 정상 세포 유형에 따라 분류할 수도 있다. 이 분류에 따른 림프종 아형에는 성숙 B 세포 신생물, 성숙 T 세포 및 자연살해 (NK) 세포 신생물, 호지킨 림프종 및 면역 결핍 관련 림프 증식성 장애가 포함되나 이에 국한되지 않는다. 림프종 아형에는 전구 T-세포 림프 모구 림프종 (종종 T-세포 림프 모구가 골수에서 생성되므로 림프 모구 백혈병이라고 함), 여포성 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 맨틀 세포 림프종, B-세포 만성 림프구성 림프종 (종종 말초 혈액 관여로 인해 백혈병이라고 함), MALT 림프종, 버킷 림프종, 진균성 균증 및 더 공격적인 변종 세자리병, 달리 명시되지 않은 말초 T-세포 림프종, 호지킨 림프종의 결절성 경화증, 호지킨 림프종의 혼합 세포성 아형이 포함된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "백혈병"은 일반적으로 골수성 기원의 과증식 세포에서 발생하는 혈액학적 악성 종양을 지칭하고, 급성 림프모구 백혈병 (ALL), 급성 골수성 백혈병 (AML), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML) 및 급성 단핵구 백혈병 (AMoL)을 포함하되 이에 국한되지 않는다. 기타 백혈병으로는 모발 세포 백혈병 (HCL), T세포 림프 백혈병 (T-PLL), 거대 과립 림프구 백혈병 및 성인 T-세포 백혈병이 포함된다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "과증식 세포"는 원치 않는 세포 증식 또는 비정상적으로 높은 세포 분열 속도 또는 지속적인 세포 분열 상태 또는 주변 정상 조직과 관련이 없거나 조정되지 않은 다른 세포 활동을 특징으로 하는 비정상적인 세포를 지칭한다. 일부 측면에서, 과증식 세포는 과증식 포유류 세포이다. 다른 측면에서, 과증식 세포는 본 명세서에 정의된 바와 같이 과자극된 면역 세포로서, 처음에 세포 분열의 변화를 유발했을 수 있는 자극이 중단된 후에도 지속적인 세포 분열 또는 활성화 상태가 발생한다. 다른 측면에서, 과증식 세포는 형질전환된 정상 세포 또는 암 세포이며, 조절되지 않은 진행성 상태의 세포 증식은 양성, 잠재적 악성 (전악성) 또는 명백한 악성의 종양을 초래할 수 있다. 형질전환된 정상 세포 또는 암세포로 인한 과증식 병태에는 전암, 증식, 이형성, 선종, 육종, 모세포종, 암종, 림프종, 백혈병 또는 유두종이 포함되나 이에 국한되지 않는다. 전암은 일반적으로 조직학적 변화를 보이고 암 발생 위험 증가와 관련이 있으며 암을 특징짓는 분자 및 표현형 특성 중 전부가 아닌 일부를 가지고 있는 병변으로 정의된다. 호르몬 관련 또는 호르몬 민감성 전암에는 전립선 상피내 신생물 (PIN), 특히 고등급 PIN (HGPIN), 비정형 소선 증식 (ASAP), 자궁경부 이형성증 및 제자리 유관 암종이 포함되나 이에 국한되지 않는다. 증식증은 일반적으로 장기 또는 조직 내에서 세포가 일반적으로 볼 수 있는 범위를 넘어 증식하여 장기가 크게 비대해지거나 양성 종양 또는 성장을 초래할 수 있는 것을 말한다. 증식증에는 자궁내막 증식증 (자궁내막증), 양성 전립선 증식증 및 관 증식증이 포함되나 이에 국한되지 않는다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 문서에서 사용되는 "정상 세포"는 정상 조직의 세포 완전성 유지 또는 조절된 세포 회전율에 의해 요구되는 순환 림프 또는 혈액 세포의 보충 또는 부상에 의해 필요한 조직 복구, 또는 병원체 노출 또는 기타 세포 손상으로 인한 조절된 면역 또는 염증 반응과 관련된 조정된 세포 분열을 거치는 세포를 지칭하고, 여기서 유발된 세포 분열 또는 면역 반응은 필요한 유지, 보충 또는 병원체 제거가 완료되면 종결된다. 정상 세포에는 정상 증식 세포, 정상 휴면 세포 및 정상적으로 활성화된 면역 세포가 포함된다. 정상 세포는 휴지기 Go 상태의 비암 세포로 스트레스나 미토겐에 의해 자극을 받지 않았거나 일적으로 비활성 상태이거나 전염증성 사이토카인 노출에 의해 활성화되지 않은 면역 세포인, 정상 휴면 세포를 포함한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "비정상 세포"는 외부 자극에 대한 불균형적인 반응 또는 자발적인 세포 내 활동을 적절히 조절하지 못하여 기능 장애가 발생한 정상 세포를 지칭하고, 일부 경우 돌연변이 기원을 갖는다. 비정상 세포에는 과증식 세포 및 과자극 면역 세포가 포함되며, 이들 용어는 다른 곳에서 정의되어 있다. 이들 세포는 일반적으로 유기체에 존재할 때 그렇지 않으면 정상인 세포의 기능을 방해하여 유기체에 해를 끼치며 시간이 지남에 따라 파괴 용량이 증가한다. 비정상 세포에는 암세포, 과활성화 면역 세포 및 유기체의 기타 원치 않는 세포가 포함된다. 비정상 세포는 외형상 비정상 세포의 환경에 있지만 그럼에도 불구하고 종양 세포와 같은 다른 비정상 세포의 증식 및/또는 생존을 지원하는 명목상 정상 세포를 지칭할 수도 있으므로 명목상 정상 세포를 표적으로 삼으면 종양 세포의 증식 및/또는 생존을 간접적으로 억제한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 "과자극 면역 세포"는 처음에 증식 또는 자극의 변화를 유발했을 수 있는 자극이 중단된 후 발생하거나 외부 자극이 없는 상태에서 발생하는 비정상적으로 지속적인 증식 또는 부적절한 자극 상태를 특징으로 하는 선천성 또는 적응성 면역에 관여하는 세포를 지칭한다. 종종 지속적인 증식 또는 부적절한 자극 상태는 질병 상태 또는 병태의 특징적인 만성 염증 상태를 초래한다. 일부 경우에는 처음에 증식이나 자극의 변화를 유발했을 수 있는 자극이 외부의 자극에 의한 것이 아니라 자가 면역 질환에서와 같이 내부에서 비롯된 것이다. 일부 측면에서, 과자극 면역세포는 만성적인 전염증성 사이토카인 노출을 통해 과도하게 활성화된 전염증성 면역세포이다.
본 발명의 일부 측면, 리간드 약물 접합체 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 비정상적으로 증식하거나 부적절하게 또는 지속적으로 활성화되는 전 염증성 면역 세포에 의해 우선적으로 표시되는 항원에 결합한다. 이들 면역 세포는 대식세포 및 CD8+ T 세포 활성화에 관여하는 사이토카인인, 인터페론 감마 (INF-γ), 인터루킨-2 (IL-2), 인터루킨-10 (IL-10), 종양 괴사인자-베타 (TNF-β)를 생성하는 고전적으로 활성화된 대식세포 또는 제1형 T 헬퍼 (Th1) 세포를 포함한다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "생체이용률"은 환자에게 투여된 주어진 양의 약물의 전신 가용성 (즉, 피/혈장 수준)을 지칭한다. 생체이용률은 투여된 제형에서 일반 순환계에 도달하는 약물의 시간 (속도) 및 총량 (범위)을 모두 측정하는 절대적인 용어이다.
본 명세서에서 "개체", "대상체" 또는 환자라는 용어는 동물, 예를 들어, 포유류를 지칭하기 위해 상호 교환적으로 사용된다. 일부 실시양태에서, 인간, 설치류, 유인원, 고양이, 개, 말, 소, 돼지, 양과류, 염소, 포유류 실험 동물, 포유류 농장 동물, 포유류 스포츠 동물 및 포유류 애완 동물을 포함하되 이에 국한되지 않는 포유류를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 예에서, "개체" 또는 "대상체"는 인간이다. 일부 예에서 "개체" 또는 "대상체"는 질병 또는 장애에 대한 치료가 필요한 개체 또는 대상체 (예를 들어, 인간)을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "대상체"는 과증식, 염증 또는 면역 장애 또는 비정상 세포로 인한 기타 장애가 있거나 그러한 장애가 발생하기 쉬운 인간, 비인간 영장류 또는 포유류를 지칭하며, 효과적인 양의 리간드 약물 접합체를 투여함으로써 혜택을 받을 수 있다. 대상체의 비제한적 예로는 인간, 래트, 마우스, 기니피그, 원숭이, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이, 새, 및 가금류가 포함된다. 일반적으로 대상체는 인간, 비인간 영장류, 래트, 마우스 또는 개이다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "담체"는 화합물과 함께 투여되는 희석제, 보조제 또는 부형제를 지칭한다. 이러한 제약 담체는 석유, 동물성, 땅콩유, 대두유, 미네랄 오일, 참기름과 같은 식물성 또는 합성 기원을 포함하여, 물 및 오일과 같은 액체일 수 있다. 담체는 식염수, 아카시아 껌, 젤라틴, 전분 페이스트, 활석, 케라틴, 콜로이드 실리카, 우레아일 수 있다. 또한 보조, 안정화, 증점, 윤활 및 착색제를 사용할 수 있다. 일 실시양태에서, 대상체에 투여될 때, 화합물 또는 조성물 및 약학적으로 허용되는 담체는 멸균된다. 물은 화합물을 정맥으로 투여할 때 예시적인 담체이다. 식염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액도 액체 담체, 특히 주사제 용액에 사용할 수 있다. 적합한 제약 담체는 또한 전분, 포도당, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀, 초크, 실리카겔, 나트륨 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물 및 에탄올과 같은 부형제를 포함한다. 본 조성물은 원하는 경우 소량의 습윤제 또는 유화제 또는 pH 완충제를 함유할 수도 있다.
본 명세서에서 사용되는 "염 형태"는 문맥상 달리 명시되지 않는 한, 전체적으로 중성 종을 형성하기 위해 반대양이온(들) 및/또는 반대음이온과 이온적으로 회합된 하전된 화합물을 지칭한다. 일부 측면에서, 화합물의 염 형태는 모 화합물의 염기성 또는 산 작용기와 각각 외부 산 또는 염기의 상호 작용을 통해 발생한다. 다른 측면에서는 질소 원자가 4차화될 때처럼 모 화합물의 구조적 완전성을 변경하지 않고는 신경 종에 대한 자발적인 해리가 일어날 수 없다는 의미에서 반대음이온과 회합된 화합물의 하전 원자는 영구적이다. 따라서, 화합물의 염 형태는 해당 화합물 내의 4차화 질소 원자 및/또는 해당 화합물의 양성자화된 형태의 염기성 작용기 및/또는 이온화된 카르복실산을 포함할 수 있으며, 이들 각각은 반대음이온과 이온적 회합을 이룬다.
일부 측면에서 염 형태는 동일한 화합물 내에서 염기성 작용기와 이온화된 산 작용기의 상호작용으로 인해 발생하거나 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 다른 반대음이온과 같이 음전하를 띤 분자의 포함이 관여될 수 있다. 따라서 염 형태의 화합물은 그 구조에 하나 초과의 하전 원자를 가질 수 있다. 모 화합물의 여러 하전 원자가 염 형태의 일부인 경우, 해당 염은 여러 개의 반대 이온을 가질 수 있으므로 화합물의 염 형태는 하나 이상의 하전 원자 및/또는 하나 이상의 반대이온을 가질 수 있다. 반대이온은 모 화합물에서 반대 전하를 안정화시키는 임의의 하전된 유기 또는 무기 모이어티일 수 있다.
화합물의 양성자 염 형태는 일반적으로 1차, 2차 또는 3차 아민 또는 다른 염기성 아민 작용기와 같은 화합물의 염기성 작용기가 염기성 작용기의 양성자화를 위해 적절한 pKa의 유기산 또는 무기산과 상호 작용하는 경우, 또는 카르복실산과 같이 적절한 pKa를 갖는 화합물의 산 작용기가 산 작용기의 탈양성자화를 위해 NaOH 또는 KOH와 같은 수산화염 또는 트리에틸아민과 같은 적절한 강도의 유기 염기와 상호 작용하는 경우에 얻어진다. 일부 측면에서, 염 형태의 화합물은 적어도 하나의 염기성 아민 작용기를 함유하며, 따라서 이 아민기로 산 부가염을 형성할 수 있고, 이는 사이클릭 또는 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 아민 작용기를 포함한다. 약물 링커 화합물의 맥락에서 적합한 염 형태는 리간드 약물 접합체를 제공하는 표적화 약제와 약물 링커 화합물 사이의 축합 반응을 부당하게 방해하지 않는 것이다.
본 명세서에서 사용된 "약학적으로 허용되는 염"은 문맥상 달리 명시되지 않는 한, 화합물의 염 형태를 지칭하는데, 이의 반대이온이 이 염 형태를 의도된 대상체에게 투여하는 것이 허용되고 무기 및 유기 반대양이온 및 반대음이온을 포함한다. 사이클릭 또는 비-사이클릭 염기성 유닛에서의 것과 같이, 염기성 아민 작용기에 대한 예시적인 약학적으로 허용되는 반대음이온은 설페이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 니트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아소코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 메실레이트, 베실레이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 및 파모에이트 (즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하나 이들로 제한되지 않는다.
일반적으로, 약학적으로 허용되는 염은 P. H. Stahl 및 C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zurich:Wiley-VCH/VHCA, 2002에 설명된 염 중에서 선택된다. 염 선택은 의도된 투여 경로에 따라 다양한 pH 값에서 적절한 수용성, 유동 특성을 가진 결정성, 취급에 적합한 낮은 흡습성 (즉, 상대 습도 대비 수분 흡수), 가속 조건에서 동결 건조된 제형에서와 같이 화학적 및 고체 상태 안정성을 결정하여 필요한 유통 기한 (즉, 40℃ 및 75% 상대 습도에서 보관 시 분해 또는 고체 상태 변화 결정)을 포함하여, 약물 제품이 나타내야 하는 특성에 따라 다르다.
일부 실시양태에서, 본 명세서에서 사용되는 "약학적으로 허용되는 염"이라는 문구는 본 발명의 화합물의 약학적으로 허용되는 유기 또는 무기 염을 지칭한다. 예시적인 염은 설페이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 니트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아소코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트 "메실레이트", 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 파모에이트 (즉, 4,4'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염, 알칼리 금속 (예를 들어, 나트륨 및 칼륨) 염, 알칼리 토금속 (예를 들어, 마그네슘) 염, 및 암모늄 염을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 약학적으로 허용되는 염은 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 기타 반대 이온과 같은 다른 분자의 포함이 관여될 수 있다. 반대 이온은 모 화합물의 전하를 안정화시키는 임의의 유기 또는 무기 모이어티일 수 있다. 또한, 약학적으로 허용되는 염은 그 구조에 하나 초과의 하전 원자를 가질 수 있다. 여러 개의 하전 원자가 약학적으로 허용되는 염의 일부인 경우 여러 개의 반대 이온을 가질 수 있다. 따라서, 약학적으로 허용되는 염은 하나 이상의 하전 원자 및/또는 하나 이상의 반대 이온을 가질 수 있다.
문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, "억제하다", "억제" 및 이와 유사한 용어는 측정 가능한 양만큼 감소시키거나 원치 않는 활성 또는 결과를 완전히 방지하는 것을 의미한다. 일부 측면에서, 원치 않는 결과 또는 활성은 비정상적인 세포와 관련이 있으며 과증식, 과자극 또는 질병 상태의 기저에 있는 기타 조절 장애 세포 활성을 포함한다. 리간드 약물 접합체에 의한 이러한 조절 장애 세포 활성의 억제는 일반적으로 세포 배양 (시험관 내) 또는 이종 이식 모델 (생체 내)과 같은 적절한 테스트 시스템에서 처리되지 않은 세포 (비히클로 처리된 가짜)와 비교하여 결정된다. 일반적으로, 관심 있는 비정상 세포에 존재하지 않거나 카피 수가 적거나 임의의 알려진 항원을 인식하지 못하도록 유전적으로 조작된 항원을 표적으로 하는 리간드 약물 접합체는 음성 대조군으로 사용된다.
"치료하다", "치료" 및 이와 유사한 용어는 문맥상 달리 명시되지 않는 한 재발 방지를 위한 예방 조치를 포함한 치료적 처리를 의미하며, 여기서 그 목적은 암의 발생 또는 확산 또는 만성 염증으로 인한 조직 손상과 같은 원치 않는 생리적 변화 또는 장애를 억제하거나 늦추 (완화)는 것이다. 일반적으로, 이러한 치료적 처리의 유익하거나 바람직한 임상적 혜택에는 검출 가능 여부와 관계없이, 증상의 완화, 질병 정도의 감소, 질병 상태의 안정화 (즉, 악화되지 않음), 질병 진행의 지연 또는 둔화, 질병 상태의 개선 또는 완화, 관해 (부분적 또는 전체적)가 포함되나 이에 국한되지 않는다. "치료"는 또한 치료를 받지 않을 경우 예상되는 생존 기간 또는 삶의 질과 비교하여 생존 기간 또는 삶의 질을 연장하는 것을 의미할 수도 있다. 치료가 필요한 대상체에는 이미 해당 병태 또는 장애를 앓고 있는 대상체뿐만 아니라 해당 병태 또는 장애를 앓을 가능성이 있는 대상체도 포함된다.
일부 실시양태에서, 본 명세서에서 사용되는 "치료"는 유익하거나 바람직한 임상 결과를 얻기 위한 접근법이다. 본 명세서에서 사용되는 "치료"는 인간을 포함한 포유류의 질병에 대한 치료제의 모든 투여 또는 적용을 포함한다. 유익하거나 바람직한 임상 결과에는 다음 중 하나 이상이 포함되나 이에 국한되지 않는다: 하나 이상의 증상의 완화, 질병의 정도 감소, 질병의 확산 (예를 들어, 폐 또는 림프절로의 전이) 방지 또는 지연, 질병의 재발 방지 또는 지연, 질병 진행의 지연 또는 둔화, 질병 상태의 개선, 질병 또는 질병의 진행 억제, 질병 또는 질병의 진행 억제 또는 둔화, 질병의 진행 중지 및 관해 (부분적 또는 전체적). 또한 "치료"에는 증식성 질병의 병리학적인 결과의 감소도 포함된다.
암과 관련하여 "치료하는"라는 용어에는 암세포의 성장 억제, 암세포의 복제 억제, 암세포 수 감소, 암세포의 말초 장기로의 침윤 감소, 종양 전이 속도 또는 정도 감소, 전반적인 종양 부하 감소, 및 암과 관련된 하나 이상의 증상 개선 중 일부 또는 전부가 포함된다.
암과 관련하여, "치료하는"이라는 용어는 종양 세포, 암세포 또는 종양의 성장을 억제하는 것; 종양 세포 또는 암 세포의 복제 억제, 종양 세포 또는 암 세포의 확산 억제, 전체 종양 부하 감소 또는 암성 세포 수 감소, 또는 암과 관련된 하나 이상의 증상 완화 중 일부 또는 전부를 포함한다. 문맥에 의해 달리 명시되거나 암시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "치료적 유효량"은 포유동물의 질병 또는 장애를 치료하는데 유효한 유리 약물로서 방출되는 약물 유닛을 갖는 유리 약물 또는 리간드 약물 접합체의 양을 지칭한다. 암의 경우, 유리 약물 또는 리간드 약물 접합체의 치료적 유효량은 암세포의 수를 감소시킬 수 있거나; 종양 크기를 감소시킬 수 있거나, 말초 기관으로의 암 세포 침윤을 억제 (즉, 어느 정도 늦추고 바람직하게 중단)할 수 있거나, 종양 전이를 억제 (즉, 어느 정도 늦추고 바람직하게는 중단)할 수 있거나, 종양 성장을 어느 정도 억제할 수 있고/있거나 암과 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화할 수 있다. 유리 약물 또는 리간드 약물 접합체는 기존 암 세포의 성장을 억제하거나 죽일 수 있는 정도까지, 그것은 세포증식억제 또는 세포 독성일 수 있다. 암 요법의 경우, 효능은 예를 들어 반응률 (RR) 및/또는 전체 생존률 (OS)을 결정하는 질병 진행까지의 시간 (TTP)을 평가함으로써 측정될 수 있다.
과자극된 면역 세포로 인한 면역 장애의 경우, 치료 유효량의 약물은 과자극된 면역 세포의 수, 이들의 자극 정도 및/또는 그렇지 않으면 정상 조직으로의 침윤을 감소시킬 수 있고/거나 과도하게 자극된 면역 세포로 인해 조절 장애가 있는 면역 체계와 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화할 수 있다. 과자극된 면역 세포에 기인한 면역 장애의 경우, 효능은 예를 들어 IL-1β, TNFα, INFγ 및 MCP-1에 대한 것과 같은 하나 이상의 사이토카인 수준을 포함하는 하나 이상의 염증성 대용물, 또는 고전적으로 활성화된 대식세포의 수를 평가함으로써 측정할 수 있다.
본 발명의 일부 측면에서, 리간드 약물 접합체 화합물은 표적 세포의 표면 상의 항원 (즉, 과증식 세포 또는 과자극 면역 세포와 같은 비정상 세포)과 회합하고, 접합체 화합물은 수용체 매개 엔도사이토시스를 통해 표적 세포 내부로 흡수된다. 일단 세포 내부로 들어가면, 접합체의 링커 유닛 내에 있는 하나 이상의 절단 단위가 절단되어, 약물 유닛 (D)가 유리 약물로서 방출된다. 이렇게 방출된 유리 약물은 이어서 세포질 내로 이동하여 세포 독성 또는 세포증식 억제 활성을 유도할 수 있거나, 또는 과자극된 면역 세포의 경우 대안적으로 전염증성 신호 전달을 억제할 수 있다. 본 발명의 다른 측면에서, 약물 유닛 (D)는 리간드 약물 접합체 화합물로부터 표적 세포 밖이지만 표적 세포 근처 내로 방출되어, 그 방출로부터 생성된 유리 약물이 원하는 작용 부위에 국소화되고, 원위 부위에서 조기에 방출되기보다는 후속적으로 세포에 침투할 수 있다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 임의의 농도 범위, 백분율 범위, 비율 범위, 또는 정수 범위는 달리 나타내지 않는 한, 인용된 범위 내의 임의의 정수의 값 및 적절한 경우 이의 분수 (예를 들어, 정수의 1/10 및 1/100)를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
상표명이 본원에서 사용되는 경우, 문맥에 의해 달리 나타내지 않는 한, 상표명에 대한 언급은 상표명 제품의 제형, 제네릭 약물 및 활성 약학적 성분(들)도 지칭한다.
GPNMB, 당단백질 비-전이성 흑색종 단백질 B, 당단백질 NMB, 및 PLCA3는 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 명시되지 않는 한, 인간 GPNMB의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 GPNMB 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 GPNMB를 포함한다. 예시적인 인간 GPNMB의 아미노산 서열은 Uniprot #Q14956에 제공된다.
용어 CD228, 멜라노트랜스페린, MELTF, p97 및 MF12는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 특정되지 않는 한, 인간 CD228의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및 척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 CD228 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 CD228을 포함한다. 예시적인 인간 CD228의 아미노산 서열은 Uniprot # P08582에 제공된다.
용어 "ανβ6", "avb6", "알파-ν 베타-6" 또는 "β6"은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 특정되지 않는 한, 인간 ανβ6의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및 척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 ανβ6 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 ανβ6을 포함한다. 예시적인 β6 인간 서열에는 GenBank 수탁 번호 AAA36122가 할당된다. 예시적인 αν 인간 서열에는 NCBI NP_002201.1이 할당된다.
용어 CD30, TNF 수용체 슈퍼패밀리 구성원 8, TNFRSF8, 및 D1S166E는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 특정되지 않는 한, 인간 CD30의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및 척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 CD30 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 CD30을 포함한다. 예시적인 인간 CD30의 아미노산 서열은 Uniprot#P28908 (TNR8_HUMAN)에 제공된다. 성숙한 인간 CD30 단백질의 한 구체적인 예의 아미노산 서열은 NP_001234.3에 제시되어 있다.
용어 LIV1, LIV-1, LIV 1, BCR4, BCR 4, BCR-4, ZIP6, ZIP-6, ZIP 6 or SLC39A6은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 특정되지 않는 한, 인간 LIV1의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및 척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 LIV1 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 LIV1을 포함한다. 예시적인 인간 LIV1의 아미노산 서열은 Uniprot #Q13433에 제공된다. 성숙한 인간 LIV1 단백직의 한 구체적인 예의 아미노산 서열은 서열번호: 931에 제시되어 있다. 용어 CD19, B-림프구 표면 항원 B4, 및 CVID3은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 달리 특정되지 않는 한, 인간 CD19의 임의의 자연 발생 변이체 (예를 들어, 스플라이스 변이체, 대립유전자 변이체), 이소형, 및 척추동물 종 상동체를 포함한다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 CD19 및 세포 내에서 처리되어 발생하는 임의의 형태의 CD19를 포함한다. 예시적인 인간 CD19의 아미노산 서열은 Uniprot #Q71UW0에 제공된다.
본원에 사용된 "항원 결합 단백질" ("ABP")은 자연 발생 동족 리간드(들) 또는 특정 항원에 결합하는 그러한 리간드(들)의 단편 이외의 특정 표적 항원에 결합하는 임의의 단백질을 의미한다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 GPNMB 또는 GPNMB의 단편이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 CD228 또는 CD228의 단편이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 ανβ6 또는 ανβ6의 단편이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 CD30 또는 CD30의 단편이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 LIV1 또는 LIV1의 단편이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, 특정 표적 항원은 CD19 또는 CD19의 단편이다. ανβ6ανβ6 "항원 결합 단백질"은 적어도 하나의 항원 결합 영역 또는 도메인 (예를 들어, 본원에 정의된 바와 같이 적어도 하나의 초가변 영역 (HVR) 또는 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함하는 단백질을 포함한다). 일부 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 본원에 기술된 바와 같이 하나 이상의 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개) HVR(들) 또는 CDR(들)이 삽입 및/또는 결합되는 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드들과 같은 스캐폴드를 포함한다. 일부 항원 결합 단백질에서, HVR 또는 CDR은 CDR(들)의 적절한 항원 결합 특성이 달성되도록 HVR(들) 또는 CDR(들)을 배향시키는 "프레임워크" 영역에 삽입된다. 일부 항원 결합 단백질의 경우, 스캐폴드는 항체 또는 그 단편의 면역글로불린 중쇄 및/또는 경쇄이다. 스캐폴드의 추가적인 예는 인간 피브로넥틴 (예를 들어, 인간 피브로넥틴 III의 10번째 세포외 도메인), 네오카르지노스타틴 CBM4-2, 리포칼린으로부터 유래된 안티칼린, 설계된 안키린 반복 도메인 (DARPins), 단백질-A 도메인(단백질 Z), Kunitz 도메인, Im9, TPR 단백질, 징크 핑거 도메인, pVIII, GC4, 트랜스페린, SPA의 B-도메인, Sac7d, A-도메인, Fyn 키나아제의 SH3 도메인, 및 C형 렉틴 유사 도메인 (예를 들어, Gebauer and Skerra (2009) Curr. Opin. Chem. Biol., 13:245-255; Binz 등 (2005) Nat. Biotech. 23:1257-1268; 및 Yu 등 (2017) Annu Rev Anal Chem 10:293-320 참조, 이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 따라서, 항원 결합 단백질은 모노클로날 항체, 이중특이성 항체, 미니바디, Nanobodies®와 같은 도메인 항체, 합성 항체(때때로 본원에서 "항체 모방체"로 지칭됨), 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 항체 융합체, 및 각각의 부분 또는 단편을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 경우에, 항원 결합 단백질은 완전한 항체(예를 들어, Fab, Fab', F(ab')2, scFv, 도메인 항체 또는 미니바디)의 기능적 단편이다. 펩티바디는 항원 결합 단백질의 또 다른 예이다. 일부 실시양태에서, 용어 "항원 결합 단백질"은 유도체, 예를 들어 화학적으로 변형된 항원 결합 단백질, 예를 들어 라벨 또는 세포 독성제 또는 세포증식억제제와 같은 다른 제제에 연결된 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 약물 접합체와 같은 항원 결합 단백질 접합체)과 같은 유도체를 포함한다.
본원에 사용된 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체)의 "항원 결합 단편"(또는 간단히 "단편") 또는 "항원 결합 도메인"은 획득 또는 합성 방법에 관계없이 전체 항원 결합 단백질에 의해 결합된 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체)의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체 단편의 예로는 Fv; Fab; Fab'; Fab'-SH; F(ab')2; 디아바디; 선형 항체; 단일 사슬 항체 분자 (예를 들어, scFv); 및 항체 단편으로부터 형성된 다중 특이적 항체가 포함되나 이에 국한되지는 않는다. "Fv" 단편은 하나의 중쇄 가변 도메인 및 하나의 경쇄 가변 도메인의 비공유 연결된 이량체를 포함한다. "Fab" 단편은 Fv 단편의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인 외에 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 제1 불변 도메인 (CH1)을 포함한다. "F(ab')2" 단편은 힌지 영역 근처에서 이황화 결합에 의해 결합된 두 개의 Fab 단편을 포함한다.
"폴리펩타이드" 및 "단백질"이라는 용어는 아미노산 잔기의 중합체를 지칭하기 위해 상호 교환적으로 사용되며 최소 길이에 제한되지 않는다. 이러한 아미노산 잔기의 중합체는 천연 또는 비천연 아미노산 잔기를 함유할 수 있으며, 아미노산 잔기의 이량체, 삼량체, 펩타이드, 올리고펩타이드, 및 다량체를 포함하나 이에 국한되지 않는다. 전장 단백질 및 그 단편 모두 이 정의에 포함된다. 이 용어는 또한 폴리펩타이드의 발현 후 변형, 예를 들어, 글리코실화, 시알릴화, 아세틸화, 인산화 등을 포함한다. 또한 "폴리펩타이드"라는 용어는 단백질이 원하는 활성을 유지하는 한 천연 서열에 대한 결실, 추가 및 치환 (일반적으로 자연적으로 보수적임)과 같은 변형을 포함하는 단백질을 지칭한다. "폴리펩타이드" 및 "단백질"이라는 용어는 항원 결합 단백질의 하나 이상의 아미노산이 결실, 추가 및/또는 치환된 항체, 항체 단편 또는 서열을 포함하는 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 및 CD19 항원 결합 단백질을 포함한다.
"천연 서열" 또는 "자연 발생" 폴리펩타이드는 자연에서 발견되는 폴리펩타이드와 동일한 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다. 따라서, 천연 서열 폴리펩타이드는 임의의 포유류에서 자연적으로 발생하는 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 가질 수 있다. 이러한 천연 서열 폴리펩타이드는 자연에서 단리하거나 재조합 또는 합성 방법으로 생산할 수 있다. "천연 서열" 폴리펩타이드라는 용어는 특히 폴리펩타이드의 자연 발생적 절단 또는 분비 형태 (예를 들어, 세포 외 도메인 서열), 자연 발생적 변이 형태 (예를 들어, 대안적으로 접합된 형태) 및 폴리펩타이드의 자연 발생적 대립 유전자 변이체를 포함한다.
폴리펩타이드 "변이체"는 서열을 정렬한 후 네이티브 또는 참조 서열 폴리펩타이드와 적어도 약 70%, 80%, 또는 90% 아미노산 서열 동일성을 갖고, 필요한 경우, 갭을 도입하여 최대 퍼센트 서열 동일성을 달성하고, 서열 동일성의 일부로서 임의의 보존적 치환을 고려하지 않는 생물학적 활성 폴리펩타이드 (예를 들어, 항원 결합 단백질 또는 항체)를 의미한다. 이러한 변이체는 예를 들어 폴리펩타이드의 N- 또는 C- 말단에 하나 이상의 아미노산 잔기가 부가되거나 결실되는 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 변이체는 적어도 약 80% 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 일부 실시양태에서, 변이체는 적어도 약 90% 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 일부 실시양태에서, 변이체는 천연 서열 폴리펩타이드와 적어도 약 95% 아미노산 서열 동일성을 갖는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체) 서열에 대한 "퍼센트(%) 아미노산 서열 동일성" 및 "상동성"은 서열을 정렬하고, 필요한 경우, 갭을 도입하여 최대 퍼센트 서열 동일성을 달성한 후 특정 펩타이드 또는 폴리펩타이드 서열의 아미노산 잔기와 동일하고, 서열 동일성의 일부로서 임의의 보존적 치환을 고려하지 않는 후보 서열의 아미노산 잔기의 백분율로 정의된다. 아미노산 서열 동일성 백분율을 결정하기 위한 정렬은 당업자의 기술 범위 내에 있는 다양한 방법으로 달성할 수 있으며, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 MEGALIGNTM (DNASTAR) 소프트웨어와 같은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용할 수 있다. 당업자는 비교 대상 서열의 전체 길이에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여 정렬 측정을 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다. 예를 들어, 주어진 아미노산 서열 A와 주어진 아미노산 서열 B의 % 서열 동일성 (이는 대안적으로 주어진 아미노산 서열 A가 주어진 아미노산 서열 B와 특정 % 서열 동일성을 갖거나 포함하는 것으로 표현할 수 있음)은 다음과 같이 계산되고:
분수 X/Y의 100배
여기서 X는 해당 프로그램에서 A와 B의 정렬에서 서열에 의해 동일 일치로 점수화된 아미노산 잔기의 수이고, Y는 B의 아미노산 잔기의 총 수이다. 구체적으로 달리 명시되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 아미노산 서열 동일성 % 값은 ALIGN-2 컴퓨터 프로그램을 사용하여 이 식에 따라 계산된다. 아미노산 서열 A의 길이가 아미노산 서열 B의 길이와 같지 않은 경우, A 대 B의 서열 동일성 %는 B 대 A의 서열 동일성 %와 같지 않을 것임을 알 것이다.
"리더 서열"이라는 용어는 포유류 세포에서 폴리펩타이드의 분비를 촉진하는 폴리펩타이드의 N-말단에 위치한 아미노산 잔기의 서열을 지칭한다. 리더 서열은 포유류 세포에서 폴리펩타이드를 내보낼 때 절단되어 성숙한 단백질을 형성할 수 있다. 리더 서열은 천연 또는 합성일 수 있으며, 리더 서열이 부착된 단백질과 이종 또는 상동일 수 있다.
"면역글로불린"이라는 용어는 두 쌍의 폴리펩타이드 사슬, 한 쌍의 경 (L) 저분자량 사슬, 한 쌍의 중 (H) 사슬로 구성된 구조적으로 관련된 당단백질의 한 종류를 지칭하며, 이 네 가지 사슬은 모두 이황화 결합으로 상호 연결되어 있다. 면역글로불린의 구조는 잘 특성화되어 있다. 예를 들어, Fundamental Immunology (Paul, W., ed., 7th ed. Raven Press, N .Y. (2013)) 참조. 간단히 말해서, 각 중쇄는 일반적으로 중쇄 가변 영역 (본 명세서에서는 VH 또는 VH로 약칭)과 중쇄 불변 영역 (CH 또는 CH)을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 일반적으로 CH1, CH2, CH3의 세 가지 도메인을 포함한다. 중쇄는 일반적으로 소위 "힌지 영역"에서 이황화 결합을 통해 상호 연결된다. 각 경쇄는 일반적으로 경쇄 가변 영역 (본 명세서에서는 VL 또는 VL로 약칭)과 경쇄 불변 영역 (CL 또는 CL)을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 일반적으로 하나의 도메인, CL을 포함한다. CL은 κ (카파) 또는 λ (람다) 이소형일 수 있다. 용어 "불변 도메인" 및 "불변 영역"은 본원에서 상호 교환적으로 사용된다. 면역글로불린은 IgA, 분비성 IgA, IgG 및 IgM을 포함하나 이에 국한되지 않는, 일반적으로 알려진 모든 이소형으로부터 유래할 수 있다. IgG 서브 클래스도 당업자에게 공지되어 있으며 인간 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하나 이에 국한되지 않는다. "이소형"은 중쇄 불변 영역 유전자에 의해 암호화되는 항체 클래스 또는 서브 클래스 (예를 들어, IgM 또는 IgG1)를 지칭한다.
본원에서 사용되는 "초가변 영역" 또는 "HVR"이라는 용어는 서열에서 초가변인 항체 가변 도메인의 각 영역을 지칭한다. HVR은 구조적으로 정의된 루프 ("초과변 루프")를 형성할 수 있다. 일반적으로 네이티브 4사슬 항체는 VH에 3개 (H1, H2, H3), 및 VL에 3개 (L1, L2, L3)로 6개의 HVR을 포함한다. 네이티브 항체에서 H3와 L3는 6개의 HVR 중 가장 다양성을 나타내며, 특히 H3는 항체에 대해 미세한 특이성을 부여하는 데 고유한 역할을 하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, Xu 등, Immunity 13:37-45 (2000); Johnson and Wu, in Methods in Molecular Biology 248:1 -25 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003) 참조. 실제로 중쇄로만 구성된 자연 발생 카멜리드 항체는 경쇄가 없이 기능적이고 안정적이다. 예를 들어, Hamers-Casterman 등, Nature 363:446-448 (1993); Sheriff 등, Nature Struct. Biol. 3:733-736 (1996) 참조.
HVR은 일반적으로 초가변 루프 및/또는 "상보성 결정 영역" (CDR)의 아미노산 잔기를 포함하고, CDR은 서열 가변성이 가장 높고/거나 항원 인식에 관여한다. 주어진 CDR의 경계를 정의하기 위한 다양한 체계가 당업자에게 알려져 있다. 예를 들어, Kabat 상보성 결정 영역 (CDR)은 서열 가변성을 기반으로 하며 가장 흔하게 사용된다 (Kabat et at., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991 )). Chothia는 대신 구조적 루프의 위치를 참조한다 (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). AbM CDR은 Kabat CDR과 Chothia 구조 루프 사이의 절충안을 나타내며 Oxford Molecular의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에서 사용된다. "접촉" CDR은 사용 가능한 복잡한 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. 전술한 체계 및 기타 번호 매기기 규칙에 대한 자세한 내용은 다음 참고 문헌에 제공되어 있다: Al-Lazikani 등, (1997) J. Mol. Biol. 273: 927-948 ("Chothia" numbering scheme); MacCallum 등, ( 1996) J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), (Contact" numbering scheme); Lefranc M-P., 등, (2003) Dev. Comp. Immunol. 27:55-77 ("IMGT" numbering scheme); 및 Honegger A. & Pluckthun A. (2001) J. Mol/ Biol. 309:657-70, (AHo numbering scheme).
일부 실시양태에서, HVR 영역 및 관련 서열은 전술한 번호 매기기 규칙 중 하나에 기초하여 CDR 영역 및 관련 서열과 동일하다. 따라서, 예시적인 HVR 및/또는 CDR에 대한 잔기는 아래 표 A에 요약되어 있다.
일부 실시양태에서, HVR은 다음과 같이 확장 HVR을 포함할 수 있다: VL의 경우 24-36 또는 24-34 (L1), 46-56 또는 50-56 (L2), 89-97 또는 89-96 (L3), 및 VH의 경우 26-35 (H1), 50-65 또는 49-65 (H2), 및 93-102, 94-102, 또는 95-102 (H3). 가변 도메인 잔기는 이러한 각 정의에 대해 Kabat 외, 상동에 따라 번호가 매겨진다.
달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 그의 영역, 예컨대 가변 영역의 "CDR" 및 "상보성 결정 영역"이라는 용어뿐만 아니라 항체 또는 그 영역의 개별 CDR (예를 들어, "CDR-H1, CDR-H2)은 상기 본원에 기술한 공지된 체계에 의해 정의되는 상보성 결정 영역을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 경우, 특정 CDR 또는 CDR, 예컨대, IMGT, Kabat, AbM, Chothia, 또는 접촉 방법에 의해 정의된 CDR을 식별하기 위한 체계가 특정된다. 다른 경우에는 CDR의 특정 아미노산 서열이 주어진다.
따라서, 일부 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 IMGT 시스템에 의해 정의된 바와 같은 CDR 및/또는 HVR을 포함한다. 다른 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 Kabat 시스템에 의해 정의된 바와 같은 CDR 또는 HVR을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 AbM 시스템에 의해 정의된 바와 같은 CDR 또는 HVR을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 Chothia 시스템에 의해 정의된 바와 같은 CDR 또는 HVR을 포함한다. 다른 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 IMGT 시스템에 의해 정의된 바와 같은 CDR 또는 HVR을 포함한다.
"가변 영역" 또는 "가변 도메인"이라는 용어는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체)을 항원에 결합시키는 데 관여하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체) 중쇄 또는 경쇄의 도메인을 지칭한다. 항체와 같은 항원 결합 단백질의 중쇄 및 경쇄 (각각 VH 및 VL)의 가변 영역 또는 도메인은 예컨대, 더 많이 보존되는 영역, 즉 프레임워크 영역 (FR)으로 불리는 영역이 산재되어 있는, 초가변 영역 (HVR) 또는 상보성 결정 영역 (CDR)과 같은, 초가변성 영역 (또는 서열 및/또는 구조적으로 정의된 루프의 형태가 초가변적일 수 있는 초가변 영역)으로 더 세분화될 수 있다. 일반적으로 각 중쇄 가변 영역에 3개의 HVR (HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3) 또는 CDR(CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3)이 있고, 각 경쇄 가변 영역에 3개의 HVR (HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3) 또는 CDR (CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3)이 있다. "프레임워크 영역" 및 "FR"은 당업자에게 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 비-HVR 또는 비-CDR 부분을 지칭하는 것으로 알려져 있다. 일반적으로, 각 전장 중쇄 가변 영역 (FR-H1, FR-H2, FR-H3, 및 FR-H4)에는 4개의 FR이 있고, 각 전장 경쇄 가변 영역 (FR-L1, FR-L2, FR-L3, 및 FR-L4)에는 4개의 FR이 있다. 각 VH 및 VL 내에는 일반적으로 아미노 말단에서 카르복시 말단까지 다음과 같은 순서로 3개의 HVR 또는 CDR 및 4개의 FR이 배열되어 있다: HVR의 경우 FR1, HVR1, FR2, HVR2, FR3, HVR3, FR4, CDR의 경우 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4 (Chothia and Lesk J. Mot. Biol., 195, 901-917 (1987)도 참조). 단일 VH 또는 VL 도메인은 항원 결합 특이성을 부여하기에 충분할 수 있다. 또한 특정 항원과 결합하는 항체는 VH 또는 VL 도메인을 사용하여 상기 항원에 결합하는 항체에서 단리하여 각각 상보성 VL 또는 VH 도메인의 라이브러리를 선별할 수 있다. 예를 들어, Portolano 등 J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson 등, Nature 352:624-628 (1991) 참조.
본 명세서에서 사용되는 "중쇄 가변 영역" (VH)이라는 용어는 중쇄 HVR-H1, FR-H2, HVR-H2, FR-H3 및 HVR-H3을 포함하는 영역을 지칭한다. 예를 들어, 중쇄 가변 영역은 중쇄 CDR-H1, FR-H2, CDR-H2, FR-H3, 및 CDR-H3을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 중쇄 가변 영역은 또한 FR-H1의 적어도 일부 및/또는 FR-H4의 적어도 일부를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "중쇄 불변 영역"이라는 용어는 적어도 3개의 중쇄 불변 도메인, CH1, CH2, 및 CH3을 포함하는 영역을 지칭한다. 비제한적인 예시적인 중쇄 불변 영역은 γ, δ 및 α를 포함한다. 비제한적인 예시 중쇄 불변 영역은 ε 및 μ도 포함한다. 각 중쇄 불변 영역은 항체 이소형에 해당한다. 예를 들어, γ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgG 항체이고, δ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgD 항체이고, α 불변 영역을 포함하는 항체는 IgA 항체이다. 또한, μ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgM 항체이고, ε 불변 영역을 포함하는 항체는 IgE 항체이다. 특정 이소형은 서브클래스로 더 세분화할 수 있다. 예를 들어, IgG 항체는 IgG1 (γ1 불변 영역을 포함), IgG2 (γ2 불변 영역을 포함), IgG3 (γ3 불변 영역을 포함) 및 IgG4 (γ4 불변 영역을 포함) 항체를 포함하되 이에 국한되지 않고; IgA 항체는 IgA1 (α1 불변 영역을 포함) 및 IgA2 (α2 불변 영역을 포함) 항체를 포함하되 이에 국한되지 않고; IgM 항체는 IgM1 및 IgM2를 포함하되 이에 국한되지 않는다.
본 명세서에서 사용되는 "중쇄" (HC)라는 용어는 리더 서열을 포함하거나 포함하지 않는 적어도 중쇄 가변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 중쇄는 적어도 중쇄 불변 영역의 일부를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 "전장 중쇄"라는 용어는 리더 서열을 포함하거나 포함하지 않는 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 "경쇄 가변 영역" (VL)이라는 용어는 경쇄 HVR-L1, FR-L2, HVR-L2, FR-L3, 및 HVR-L3을 포함하는 영역을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 경쇄 가변 영역은 경쇄 CDR-L1, FR-L2, CDR-L2, FR-L3, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 경쇄 가변 영역은 또한 FR-L1 및/또는 FR-L4를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "경쇄 불변 영역"이라는 용어는 경쇄 불변 도메인인 CL을 포함하는 영역을 지칭한다. 비제한적인 예시 경쇄 불변 영역은 λ 및 κ를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "경쇄" (LC)라는 용어는 리더 서열을 포함하거나 포함하지 않는 적어도 경쇄 가변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 경쇄는 경쇄 불변 영역의 적어도 일부를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 "전장 경쇄"라는 용어는 리더 서열을 포함하거나 포함하지 않는 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다.
"EU 넘버링 시스템" 또는 "EU 인덱스"는 일반적으로 면역글로불린 중쇄 불변 영역의 잔기를 지칭할 때 사용된다 (예를 들어, Kabat 등, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991에서 보고된 EU 색인). "Kabat에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다. 본원에 달리 명시되지 않는 한, 항체의 불변 도메인에서 잔기 번호에 대한 언급은 EU 넘버링 시스템에 의한 잔기 넘버링을 의미한다.
본원에서 사용되는 "이중특이적" 항체는 적어도 두 개의 상이한 항원 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 항체를 지칭한다. 일 실시양태에서, 에피토프는 동일한 항원으로부터 유래한다. 다른 실시양태에서, 에피토프는 두 개의 상이한 항원으로부터 유래한다. 이중특이적 항체를 제조하는 방법은 당업자에게 알려져 있다. 예를 들어, 이중특이성 항체는 두 개의 면역글로불린 중쇄/경쇄 쌍의 공동 발현을 사용하여 재조합적으로 생산할 수 있다. 예를 들어, Milstein 등, Nature 305:537-39 (1983) 참조. 대안적으로, 이중특이적 항체는 화학적 연결을 사용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, Brennan, 등, Science 229:81 (1985) 참조. 이중특이적 항체에는 이중특이적 항체 단편이 포함된다. 예를 들어, Hollinger, 등, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-48 (1993), Gruber, 등, J. Immunol. 152:5368 (1994) 참조.
"이중 가변 도메인 면역글로불린" 또는 "DVD-Ig"는 예를 들어, 각각 그 전체가 참조로 통합되는, DiGiammarino 등, Methods Mol. Biol. 899:145-156, 2012; Jakob 등, MABs 5:358-363, 2013; 및 미국 특허 번호 7,612,181; 8,258,268; 8,586,714; 8,716,450; 8,722,855; 8,735,546; 및 8,822,645에 기술되어 있는 다가 및 다중특이적 결합 단백질을 지칭한다.
"이중 친화성 재표적 단백질" 또는 "DART"는 한 항체의 무거운 가변 도메인이 다른 항체의 가벼운 가변 도메인과 연결되고, 두 사슬이 회합하는 이중특이적 항체의 형태이고, 예를 들어, Garber, Nature Reviews Drug Discovery 13:799-801, 2014에 기술되어 있다.
"이중특이적 T세포 인게이저" 또는 BiTE®"는 두 개의 scFv 단편이 유전적으로 융합되어 탠덤 scFv 분자를 생성하는 것이고, 예를 들어, Baeuerle 등, Cancer Res. 69: 4941-4944, 2009에 기술되어 있다.
본원에서 사용되는 "키메라 항체"는 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특정 공급원 또는 종으로부터 유래하고, 중쇄 및/또는 경쇄의 나머지 부분이 다른 공급원 또는 종으로부터 유래되는 항체를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체는 제 1 종 (예컨대, 마우스, 래트, 사이노몰구스 원숭이 등)으로부터의 적어도 하나의 가변 영역 및 제 2 종 (예컨대, 인간, 사이노몰구스 원숭이 등)으로부터의 적어도 하나의 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체는 적어도 하나의 마우스 가변 영역 및 적어도 하나의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체는 적어도 하나의 사이노몰구스 가변 영역 및 적어도 하나의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체의 모든 가변 영역은 제1 종으로부터 유래하고, 키메라 항체의 모든 불변 영역은 제2 종으로부터 유래한다.
본원에서 사용되는 용어 "인간화 항체"는 인간 항체 불변 도메인 및 인간 가변 도메인에 대해 높은 수준의 서열 상동성을 함유하도록 변형된 비인간 가변 도메인을 함유하는 유전자 조작된 비인간 항체를 지칭한다. 이는 6개의 비인간 항체 상보성 결정 영역(CDR)을 상동 인간 수용자 프레임워크 영역(FR)에 이식하여 달성할 수 있다(WO92/22653 및 EP0629240 참조). 모 항체의 결합 친화도 및 특이성을 완전히 재구성하기 위해, 모 항체(즉, 비인간 항체)로부터의 프레임워크 잔기의 인간 프레임워크 영역으로의 치환(역돌연변이)이 필요할 수 있다. 구조 상동성 모델링은 항체의 결합 특성에 중요한 프레임워크 영역의 아미노산 잔기를 확인하는 데 도움이 될 수 있다. 따라서, 인간화 항체는 비인간 CDR 서열, 비인간 아미노산 서열에 대한 하나 이상의 아미노산 역돌연변이를 선택적으로 포함하는 주로 인간 프레임워크 영역, 및 완전 인간 불변 영역을 포함할 수 있다. 임의로, 반드시 역돌연변이가 아닌 추가 아미노산 변형을 적용하여 친화도 및 생화학적 특성과 같은 바람직한 특성을 가진 인간화 항체를 얻을 수 있다.
본원에서 사용되는 "인간 항체"는 인간에서 생산된 항체, 인간 면역글로불린 유전자를 포함하는 비인간 동물에서 생산된 항체, 예컨대, XenoMouse®, 및 파지 디스플레이와 같은 시험관 내 방법을 사용하여 선택된 항체를 말하며, 항체 레퍼토리는 인간 면역글로불린 서열에 기반한다. "인간 항체"는 인간 생식선 면역글로불린 서열에서 유래한 FR과 CDR이 모두 가변 영역을 갖는 것이다. 또한, 항체가 불변 영역을 함유하는 경우, 불변 영역은 또한 인간 생식선 면역 글로불린 서열로부터 유래된다. 본 개시의 인간 항체는 인간 생식선 면역 글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관 내 무작위 또는 부위 특이적 돌연변이 유발 또는 생체 내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나 본원에서 사용되는 "인간 항체"라는 용어는 마우스와 같은 다른 포유류 종의 생식선에서 유래한 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열에 접목된 항체를 포함하는 것으로 의도되지 않는다. "인간 항체" 및 "완전 인간 항체"라는 용어는 동의어로 사용된다.
본원의 목적상 "수용체 인간 프레임워크"는 아래에 정의된 바와 같이 인간 면역글로불린 프레임워크 또는 인간 컨센서스 프레임워크에서 유래된 경쇄 가변 도메인 (VL) 프레임워크 또는 중쇄 가변 도메인 (VH) 프레임워크의 아미노산 서열을 포함하는 프레임워크이다. 인간 면역 글로불린 프레임워크 또는 인간 컨센서스 프레임워크에서 유래된 수용체 인간 프레임워크는 그의 동일한 아미노산 서열을 포함하거나 아미노산 서열 변화를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 아미노산 변화의 개수는 10개 이하, 9개 이하, 8개 이하, 7개 이하, 6개 이하, 5개 이하, 4개 이하, 3개 이하 또는 2개 이하이다. 일부 실시양태에서, VL 수용체 인간 프레임워크는 VL 인간 면역글로불린 프레임워크 서열 또는 인간 컨센서스 프레임워크 서열과 서열이 동일하다.
"친화도 성숙" 항체는 그러한 변경을 갖지 않는 모 항체와 비교하여 하나 이상의 초가변 영역 (HVR)에서 하나 이상의 변경을 갖는 항체를 지칭하고, 그러한 변형은 항원에 대한 항체의 친화도를 향상시키는 결과를 초래한다. 일부 예에서, 친화도 성숙 항체는 그러한 변경을 갖지 않는 모 항체와 비교하여 하나 이상의 상보성 결정 영역 (CDR)에서 하나 이상의 변경을 갖는 항체를 지칭하고, 그러한 변경은 항원에 대한 항체의 친화도를 향상시키는 결과를 초래한다.
"유도체"라는 용어는 아미노산 (또는 핵산)의 삽입, 결실, 또는 치환 이외의 화학적 변형을 포함하는 분자 (예를 들어, 항체 또는 그 단편과 같은 항원 결합 단백질)를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 유도체는 중합체, 지질 또는 기타 유기 또는 무기 모이어티와의 화학 결합을 포함하나 이에 국한되지 않는 공유 변형을 포함한다. 특정 실시양태에서, 특정 항원 결합 단백질의 유도체는 화학적으로 변형되지 않은 항원 결합 단백질보다 더 큰 순환 반감기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 유도체는 원하는 세포, 조직 및/또는 장기에 대한 향상된 표적화 용량을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 항원 결합 단백질의 유도체는 모노메톡시-폴리에틸렌 글리콜, 덱스트란, 셀룰로오스 또는 다른 탄수화물계 중합체, 폴리-(N-비닐 피롤리돈)-폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 단독 중합체, 폴리프로필렌 옥사이드/에틸렌 옥사이드 공중합체, 폴리옥시 에틸화 폴리올 (예를 들어, 글리세롤) 및 폴리비닐 알코올 및 이러한 중합체의 혼합물을 포함하나 이에 국한되지 않는 하나 이상의 중합체를 포함하도록 공유적으로 변형된다. 예를 들어, 미국 특허 번호 4,640,835, 4,496,689, 4,301,144, 4,670,417, 4,791,192 및 4,179,337 참조.
본원에서 사용되는 "에피토프"라는 용어는 해당 항원을 표적으로 하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 그 단편)이 결합하는 항원 (예를 들어, GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19)의 부위를 지칭한다. 에피토프는 아미노산, 폴리펩타이드, 당 측쇄, 포스포릴 또는 설포닐 기 같은 분자의 화학적 활성 표면 기로 종종 구성되고, 특정 3차원 구조적 특성뿐만 아니라 특정 전하 특성을 가지고 있다. 에피토프는 3차 폴딩에 의해 병치되는 항원의 인접 또는 비인접 아미노산으로부터 형성될 수 있다. 인접한 잔기로부터 형성된 에피토프는 일반적으로 변성 용매에 노출되면 유지되는 반면, 3차 폴딩에 의해 형성된 에피토프는 일반적으로 변성 용매로 처리하면 소실된다. 특정 실시양태에서, 에피토프는 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7개의 아미노산을 고유한 공간 배열로 포함할 수 있지만, 이에 국한되지 않는다. 일부 실시양태에서, 에피토프는 고유한 공간적 형태에서 3-5, 4-6 또는 8-10 아미노산을 지칭한다. 다른 실시양태에서, 에피토프는 길이가 20 아미노산 미만, 15 아미노산 미만 또는 12 아미노산 미만, 10 아미노산 미만, 또는 길이가 8 아미노산 미만이다. 에피토프는 결합에 직접 관여하는 아미노산 잔기(에피토프의 면역 지배 성분이라고도 함), 및 항원 결합 분자에 의해 효과적으로 차단되거나 덮여 있는 아미노산 잔기 (즉, 아미노산이 항원 결합 분자의 발자국 내에 있는 아미노산 잔기)를 포함하여, 결합에 직접 관여하지 않는 기타 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 에피토프의 공간적 형태를 결정하는 방법은 예를 들어 x-선 결정학, 2차원 핵자기공명, 및 HDX-MS을 포함한다. (예를 들어, Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66, G.E. Morris, Ed. (1996) 참조). 항원의 원하는 에피토프가 결정되면, 확립된 기술을 사용하여 해당 에피토프에 대한 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 그 단편)을 생성할 수 있다. 그런 다음 경쟁 검정에서 결과 항원 결합 단백질을 스크리닝하여 동일하거나 겹치는 에피토프에 결합하는 항원 결합 단백질을 식별할 수 있다. 교차 경쟁 연구를 기반으로 항체를 비닝하는 방법은 WO 03/48731에 설명되어 있다. hLIV22 항체의 에피토프는 KGAHRPEH (서열번호: 942)이다.
"비선형 에피토프" 또는 "형태적 에피토프"는 에피토프에 특이적인 항체가 결합하는 항원 단백질 내의 비인접 폴리펩타이드, 아미노산 및/또는 당을 포함한다.
"선형 에피토프"는 에피토프에 특이적인 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편)이 결합하는 항원 단백질 내의 인접한 폴리펩타이드, 아미노산, 및/또는 당을 포함한다.
"파라토프" 또는 "항원 결합 부위"는 에피토프에 결합하고, 일반적으로 항체가 결합하면 에피토프에 근접하는 아미노산을 포함하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편) 상의 부위이다 (예를 들어, Sela-Culang 등, 2013, Front Immunol. 4:302 참조).
동일한 에피토프에 대해 경쟁하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편)의 맥락에서 사용될 때 "경쟁하다"라는 용어는 테스트되는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편) (예를 들어, 테스트 항체)은 참조 항원 결합 단백질 (예를 들어, 참조 항체)의 공통 항원 (예를 들어, GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19 또는 이의 단편)에 대한 특이적 결합을 (부분적으로 또는 완전히) 방지하거나 억제하는 검정에 의해 결정되는 항원 결합 단백질들 사이의 경쟁을 의미한다. 표면 플라즈몬 공명 (SPR) 분석과 같은 다양한 라벨 없는 바이오센서 접근법을 포함하여 하나의 항원 결합 단백질이 다른 단백질과 경쟁하는지 여부를 결정하기 위해 다양한 유형의 경쟁적 결합 검정법을 사용할 수 있다. (예를 들어, Abdiche, 등, 2009, Anal. Biochem. 386:172-180; Abdiche, 등, 2012, J. Immunol Methods 382:101-116; 및 Abdiche, 등, 2014 PLoS One 9:e92451 참조. 사용할 수 있는 기타 검정법에는 다음이 포함된다: 고체상 직접 또는 간접 방사선 면역검정 (RIA), 고체상 직접 또는 간접 효소 면역검정 (EIA), 샌드위치 경쟁 검정법 (예를 들어, Stahli 등, 1983, Methods in Enzymology 9:242-253 참조); 고체상 직접 비오틴-아비딘 EIA (예를 들어, Kirkland 등, 1986, J. Immunol. 137:3614-3619 참조) 고체상 직접 표지된 검정법, 고체상 직접 표지된 샌드위치 검정법 (예를 들어, Harlow and Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press 참조); I-125 표지를 사용한 고체상 직접 표지 RIA (예를 들어, Morel 등, 1988, Mol. Immunol. 25:7-15 참조); 고체상 직접 비오틴-아비딘 EIA (예를 들어, Cheung, 등, 1990, Virology 176:546-552 참조); 직접 표지된 RIA (Moldenhauer 등, 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82). 일반적으로, 시험 항원 결합 단백질은 과량 (예를 들어, 2x, 5x, 10x, 20x 또는 100x)으로 존재한다. 일반적으로 경쟁 항원 결합 단백질이 과량으로 존재할 때 참조 항원 결합 단백질이 공통 항원에 특이적으로 결합하는 것을 적어도 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 100% 억제한다. 각각의 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편)이 다른 항원 결합 단백질과 그의 동족 에피토프의 결합을 검출가능하게 억제하는 경우, 동일하거나 더 크거나 더 적은 정도로, 항원 결합 단백질은 각각의 에피토프(들)의 결합을 위해 서로 "교차 경쟁"하거나 서로 "교차 차단"한다고 한다. 일반적으로, 이러한 교차 경쟁 연구는 경쟁 연구에 대해 위에서 설명한 조건과 방법을 사용하여 수행되며 차단 정도는 각 방식으로 적어도 30%, 적어도 40%, 또는 적어도 50%이다.
"친화도"는 분자의 단일 결합 부위 (예를 들어, 항체)와 그의 결합 파트너 (예를 들어, 항원) 사이의 비공유 상호작용의 총합 강도를 지칭한다. 파트너 Y에 대한 분자 X의 친화도는 일반적으로 해리 상수 (Kd)로 나타낼 수 있다. 친화도는 본원에 기재된 것을 포함하여 당업계에 공지된 일반적인 방법에 의해 측정될 수 있다.
"친화도 성숙" 항체는 그러한 변경을 보유하지 않는 모 항체와 비교하여 하나 이상의 초가변 영역 (HVR)에서 하나 이상의 변경을 갖는 항체를 지칭하며, 이러한 변경은 항원에 대한 항체의 친화도의 개선을 초래한다. 일부 예에서, 친화도 성숙 항체는 이러한 변경을 보유하지 않는 모 항체와 비교하여 하나 이상의 상보성 결정 영역 (CDR)에서 하나 이상의 변경을 갖는 항체를 지칭하며, 이러한 변경은 항원에 대한 항체의 친화도의 개선을 초래한다.
본원에 사용된 용어 "특이적으로 결합하다", "결합하는" 또는 단순히 "결합하다" 또는 그의 표적 항원에 대한 항원 결합 단백질의 결합의 맥락에서 다른 관련 용어는 항원 결합 단백질이 비표적 분자에 본질적으로 배경 결합을 나타낸다는 것을 의미한다. 그러나 표적 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질 (예를 들어, GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19)은 다른 종의 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19 단백질과 교차 반응할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "KD" (M)는 특정 항원 결합 단백질-항원 상호작용 (예를 들어, 항체-항원 상호작용)의 해리 평형 상수를 지칭한다. 본원에서 사용되는 친화도 및 KD는 반비례하여, 더 높은 친화도는 더 낮은 KD를 지칭하도록 의도되고, 더 낮은 친화도는 더 높은 KD를 지칭하도록 의도된다.
약어 LAE는 트리펩타이드 링커인 류신-알라닌-글루탐산을 지칭한다. 약어 dLAE는 트리펩타이드 링커 D-류신-알라닌-글루탐산을 지칭하며, 여기서 트리펩타이드 링커의 류신은 D-배열이다.
약어 VKG는 트리펩타이드 링커 발린-라이신-글리신을 지칭한다.
약어 "PABC"는 자가 용해성 스페이서를 지칭한다:
약어 "mc"는 스트레처 말레이미도카프로일을 지칭한다:
약어 "mp"는 스트레처 말레이미도프로피오닐을 지칭한다:
본원에서 용어 "Fc 영역"은 불변 영역의 적어도 일부를 함유하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하기 위해 사용된다. 상기 용어는 천연 서열 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 Cys226, 또는 Pro230으로부터 중쇄의 카르복실-말단까지 연장된다. 그러나, Fc 영역의 C-말단 라이신 (Lys447)은 존재할 수도 있고 존재하지 않을 수도 있다. 본 명세서에서 달리 명시되지 않는 한, Fc 영역 또는 불변 영역에서 아미노산 잔기의 넘버링은 Kabat 등, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991에 기재된 바와 같은, EU 색인이라고도 불리는 EU 넘버링 시스템을 따른다.
"기능적 Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역의 "이펙터 기능"을 갖는다. 예시적인 "이펙터 기능"은 Fc 수용체 결합; C1q 결합; 보체 의존성 세포 독성 (CDC); 항체 의존성 세포 매개 세포 독성 (ADCC); 항체 의존성 세포 식균 작용 (ADCP); 세포 표면 수용체의 하향 조절 (예를 들어, B 세포 수용체; BCR) 등을 포함한다. 이러한 이펙터 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 도메인 (예를 들어, 항체 가변 도메인)과 결합될 것을 요구하며, 다양한 검정을 사용하여 평가할 수 있다.
"천연 서열 Fc 영역"은 자연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 천연 서열 인간 Fc 영역은 천연 서열 인간 IgG1 Fc 영역 (비-A 및 A 동종형); 천연 서열 인간 IgG2 Fc 영역; 천연 서열 인간 IgG3 Fc 영역; 및 천연 서열 인간 IgG4 Fc 영역 및 이의 자연 발생 변이체를 포함한다.
"변이체 Fc 영역"은 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 천연 서열 Fc 영역의 서열과 상이한 아미노산 서열을 포함한다.
"Fc 수용체" 또는 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 기재한다. 일부 실시양태에서, FcγR은 천연 인간 FcR이다. 일부 실시양태에서, FcR은 IgG 항체 (감마 수용체)에 결합하고, 대립유전자 변이체 및 이들 수용체의 대안적으로 스플라이싱된 형태를 포함하는 FcγRI, FcγRII, 및 FcγRIII 서브클래스의 수용체를 포함하는 것이다. FcγRII 수용체는 FcγRIIA ("활성화 수용체") 및 FcγRIIB ("억제 수용체")를 포함하고, 이들은 이의 세포질 도메인에서 주로 상이한 유사한 아미노산 서열을 갖는다. 활성화 수용체 FcγRIIA는 그의 세포질 도메인 내에 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프 (ITAM)를 함유한다 억제 수용체 FcγRIIB는 그의 세포질 도메인 내에 면역수용체 티로신-기반 억제 모티프 (ITIM)를 함유한다. (예를 들어, Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997) 참조). FcR은 예를 들어 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991); Capel 등, Immunomethods 4:25-34 (1994); 및 de Haas 등, J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995) 에서 검토되어 있다. 장래에 확인될 것을 포함하는 다른 FcR은 본원에서 용어 "FcR"에 의해 포함된다. 용어 "Fc 수용체" 또는 "FcR"은 또한 태아에 대한 모체 IgG의 전달 (Guyer 등, J. Immunol. 117:587 (1976) 및 Kim 등, J. Immunol. 24:249 (1994)) 및 면역글로불린의 항상성의 조절을 담당하는 신생아 수용체 FcRn를 포함한다. FcRn에 대한 결합을 측정하는 방법은 공지되어 있다 (예를 들어, Ghetie and Ward., Immunol. Today 18(12):592-598 (1997); Ghetie 등, Nature Biotechnology, 15(7):637-640 (1997); Hinton 등, J. Biol. Chem. 279(8):6213-6216 (2004); WO 2004/92219 (Hinton 등) 참조.
"이펙터 기능"은 항체의 Fc 영역에 기인하는 생물학적 활성을 지칭하며, 이는 항체 이소형에 따라 변한다. 항체 이펙터 기능의 예는 다음을 포함한다: Clq 결합 및 보체 의존성 세포 독성 (CDC); Fc 수용체 결합; 항체 의존성 세포 매개 세포 독성 (ADCC); 항체 의존성 세포 식균 작용 (ADCP); 세포 표면 수용체 (예를 들어, B 세포 수용체)의 하향 조절; 및 B 세포 활성화. 이러한 기능은 예를 들어, 식균 작용 또는 용해 활성을 갖는 면역 세포 상의 Fc 수용체에 대한 Fc 이펙터 도메인(들)의 결합 또는 보체 시스템의 성분에 대한 Fc 이펙터 도메인(들)의 결합에 의해 영향을 받을 수 있다. 일반적으로, Fc 결합 세포 또는 보체 성분에 의해 매개되는 효과(들)는 CD33 표적 세포의 억제 및/또는 고갈을 초래한다. 항체의 Fc 영역은 Fc 수용체 (FcR) 발현 세포를 모집하여 항체 코팅된 표적 세포와 병치할 수 있다. FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32) 및 FcγRIII (CD64)를 포함하는 IgG에 대해 표면 FcR을 발현하는 세포는 IgG-코팅된 세포의 파괴를 위한 이펙터 세포로서 작용할 수 있다. 이러한 이펙터 세포는 단핵구, 대식세포, 자연 살해 (NK) 세포, 호중구 및 호산구를 포함한다. IgG에 의한 FcγR의 결합은 항체 의존성 세포 독성 (ADCC) 또는 항체 의존성 세포 식균 작용 (ADCP)을 활성화시킨다. ADCC는 막 공극 형성 단백질 및 프로테아제의 분비를 통해 CD16+ 이펙터 세포에 의해 매개되는 반면, 식균 작용은 CD32+ 및 CD64+ 이펙터 세포에 의해 매개된다 (예를 들어, Fundamental Immunology, 4th　ed., Paul ed., Lippincott-Raven, N.Y., 1997, Chapters 3, 17 and 30; Uchida 등, 2004, J. Exp. Med. 199:1659-69; Akewanlop 등, 2001, Cancer Res. 61:4061-65; Watanabe 등, 1999, Breast Cancer Res. Treat. 53:199-207 참조.
"인간 이펙터 세포"는 하나 이상의 FcR을 발현하고 이펙터 기능을 수행하는 백혈구이다. 특정 실시양태에서, 세포는 적어도 FcγRIII를 발현하고, ADCC 이펙터 기능(들)을 수행한다. ADCC를 매개하는 인간 백혈구의 예는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 자연 살해 (NK) 세포, 단핵구, 세포 독성 T 세포 및 호중구를 포함한다. 이펙터 세포는 천연 공급원으로부터, 예를 들어, 혈액으로부터 단리될 수 있다.
"항체-의존성 세포-매개 세포 독성" 또는 "ADCC"는 표적 세포의 세포 표면 상의 항원에 결합된 항체의 Fc 영역이 특정 세포 독성 이펙터 세포 (예를 들어, NK 세포, 호중구 및 대식세포) 상에 존재하는 Fc 수용체 (FcR)와 상호작용하는 세포 독성의 메카니즘을 지칭한다. 이러한 상호작용은 이들 세포 독성 이펙터 세포가 후속적으로 세포독소로 표적 세포를 사멸시킬 수 있게 한다. ADCC를 매개하는 일차 세포인 NK 세포는 FcγRIII만을 발현하는 반면, 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII를 발현한다. 조혈 세포에 대한 FcR 발현은 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991)의 464쪽의 표 3에 요약되어 있다. 관심있는 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위해, 미국 특허 번호 5,500,362 또는 5,821,337 또는 미국 특허 번호 6,737,056 (Presta)에 기재된 것과 같은 시험관내 ADCC 검정을 수행할 수 있다. 이러한 검정에 유용한 이펙터 세포는 PBMC 및 NK 세포를 포함한다. 관심있는 분자의 ADCC 활성은 또한 생체내에서, 예를 들어, Clynes 등 Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 95:652-656 (1998)에 개시된 것과 같은 동물 모델에서 평가될 수 있다. 변경된 Fc 영역 아미노산 서열을 갖는 부가적인 폴리펩타이드 변이체 (변이체 Fc 영역을 갖는 폴리펩타이드) 및 증가되거나 감소된 ADCC 활성은 예를 들어, 미국 특허 번호 7,923,538, 및 미국 특허 번호 7,994,290에 기재되어 있다.
"보체 의존성 세포 독성" 또는 "CDC"는 보체의 존재 하에 표적 세포의 용해를 지칭한다. 고전적 보체 경로의 활성화는 보체 시스템(C1q)의 제1 성분이 표적 세포 상의 그들의 동족 항원에 결합되어 있는 (적절한 서브클래스의) 항체의 Fc 영역에 결합함으로써 개시된다. 이 결합은 일련의 효소 반응을 활성화하여 표적 세포막에 구멍이 형성되고 뒤이은 세포 사멸로 절정에 이른다. 보체의 활성화는 또한 백혈구의 보체 수용체 (예를 들어, CR3)와 결합하여 ADCC를 촉진하는 보체 성분이 표적 세포 표면에 침착되는 결과를 초래할 수 있다. 보체 활성화를 평가하기 위해 예를 들너, Gazzano-Santoro 등, J. Immunol. Methods 202:163 (1996)에 기재된 CDC 분석법이 수행될 수 있다. 변경된 Fc 영역 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드 변이체 (변이체 Fc 영역을 갖는 항체와 같은 폴리펩타이드) 및 증가 또는 감소된 C1q 결합 능력은 예를 들어, 미국 특허 번호 6,194,551 B1, 미국 특허 번호 7,923,538, 미국 특허 번호 7,994,290 및 WO 1999/51642에 설명되어 있다. 예를 들어, Idusogie 등, J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)도 참조.
"항체 의존성 세포 식균 작용" 또는 간단히 "ADCP"라는 용어는 항체 코팅된 세포가 Ig의 Fc 영역에 결합하는 식균 면역 세포 (예를 들어, 대식세포, 호중구 및 수지상 세포)에 의해 전체 또는 일부가 내재화되는 과정을 지칭한다.
FcR 결합 친화도 또는 ADCC 활성이 "변경된" 폴리펩타이드 변이체 (예를 들어, 항체)는 모 폴리펩타이드 또는 천연 서열 FC 영역을 포함하는 폴리펩타이드에 비해 FcR 결합 활성 및/또는 ADCC 활성이 향상되거나 감소된 것이다. FcR에 대한 "증가된 결합을 나타내는" 폴리펩타이드 변이체는 적어도 하나의 FcR에 모체 폴리펩타이드보다 더 좋은 친화도로 결합한다. FcR에 대한 "감소된 결합을 나타내는" 폴리펩타이드 변이체는 모체 폴리펩타이드보다 낮은 친화도로 하나의 FcR에 결합한다. 일부 실시양태에서, FcR에 대한 감소된 결합을 나타내는 이러한 변이체는 FcR에 대한 감지할 수 있는 결합을 거의 또는 전혀 갖지 않을 수 있으며, 예를 들어, 천연 서열 IgG Fc 영역과 비교하여 FcR에 대한 0-20% 결합을 갖는다.
용어 "핵산 분자", "핵산" 및 "폴리뉴클레오티드"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며 임의의 길이의 뉴클레오티드 중합체를 지칭한다. 이러한 뉴클레오티드 중합체는 천연 및/또는 비천연 뉴클레오티드를 포함할 수 있으며, DNA, RNA 및 PNA를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "핵산 서열"은 핵산 분자 또는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 뉴클레오티드의 선형 서열을 지칭한다.
용어 "벡터"는 핵산 분자를 숙주 세포로 전달하는 데 사용되는 임의의 분자 또는 정체 (예를 들어, 핵산, 플라스미드, 박테리오파지 또는 바이러스)를 의미한다. 벡터는 일반적으로 숙주 세포에서 전파될 수 있는 관심 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드들을 암호화하는 클로닝된 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드들을 함유하도록 조작된 핵산 분자를 포함한다. 벡터의 예는 플라스미드, 바이러스 벡터 및 발현 벡터, 예를 들어 재조합 발현 벡터를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 벡터는 하기 요소 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 복제 기점, 관심 폴리펩타이드의 발현을 조절하는 하나 이상의 조절 서열 (예를 들어, 프로모터 및/또는 인핸서), 및/또는 하나 이상의 선택 가능한 마커 유전자. 이 용어는 벡터가 도입된 숙주 세포의 게놈에 통합된 벡터뿐만 아니라 자가 복제 핵산 분자인 벡터를 포함한다.
용어 "발현 벡터"는 숙주 세포의 형질전환에 적합하고 숙주 세포에서 관심 폴리펩타이드를 발현하는데 사용될 수 있는 벡터를 지칭한다.
용어 "숙주 세포" 또는 "숙주 세포주"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며 벡터 또는 분리된 폴리뉴클레오티드의 수용자일 수 있거나 수용자였을 수 있는 세포 또는 세포 집단을 지칭한다. 숙주 세포는 원핵 세포 또는 진핵 세포일 수 있다. 예시적인 진핵 세포는 영장류 또는 비-영장류 동물 세포와 같은 포유동물 세포; 효모와 같은 진균 세포; 식물 세포; 및 곤충 세포를 포함한다. 비제한적인 예시 포유동물 세포는 NSO 세포, PER.C6® 세포(Crucell), 및 293 및 CHO 세포, 및 이들의 유도체, 예컨대 각각 293-6E 및 DG44 세포를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 용어는 원래 세포뿐만 아니라 그러한 세포의 자손도 지칭한다. 예를 들어 돌연변이 또는 환경적 영향으로 인해 다음 세대에서 특정 변형이 발생할 수 있다. 이러한 자손도 세포가 원래 세포와 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 한 용어에 포함된다.
"대조군 서열"이라는 용어는, 그것이 결찰된 코딩 서열의 발현 및 처리에 영향을 미칠 수 있는 폴리뉴클레오티드 서열을 지칭한다. 이러한 대조군 서열의 특성은 숙주 유기체에 따라 달라질 수 있다. 특정 실시양태에서, 원핵생물을 위한 대조군 서열은 프로모터, 리보솜 결합 부위, 및 전사 종결 서열을 포함할 수 있다. 진핵생물을 위한 제어 서열은 예를 들어, 전사 인자에 대한 하나 또는 복수의 인식 부위를 포함하는 프로모터, 전사 인핸서 서열, 및 전사 종결 서열을 포함할 수 있다. "대조군 서열"은 리더 서열 및/또는 융합 파트너 서열을 포함할 수 있다.
본원에서 사용되는 "작동 가능하게 연결된"은 용어가 적용되는 구성 요소가 적절한 조건 하에서 고유 기능을 수행할 수 있는 관계에 있음을 의미한다. 예를 들어, 단백질 코딩 서열에 "작동 가능하게 연결된" 벡터 내의 제어 서열은, 제어 서열의 전사 활성과 양립 가능한 조건 하에서 단백질 코딩 서열의 발현이 달성되도록, 그것에 결찰된다. 두 개의 암호화 서열이 작동 가능하게 연결된 경우, 이 문구는 두 개의 DNA 단편 또는 암호화 서열이 결합되어 두 단편에 의해 암호화된 아미노산 서열이 프레임 내에 유지된다는 것을 의미한다.
"형질감염"이라는 용어는 세포가 외부 또는 외인성 DNA를 흡수하는 것을 의미하며, 외인성 DNA가 세포막 내부로 도입되면 세포가 "형질감염"된 것이다. 다수의 형질감염 기술은 당업자에게 잘 알려져 있으며 본원에 개시되어 있다. 예를 들어, Graham 등, 1973, Virology 52:456; Sambrook 등, 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, supra; Davis 등, 1986, Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier; Chu 등, 1981, Gene 13:197 참조. 이러한 기술은 하나 이상의 외인성 DNA 모이어티를 적절한 숙주 세포에 도입하는 데 사용할 수 있다.
"형질전환"은 세포의 유전적 특성의 변화를 지칭하며, 세포가 새로운 DNA 또는 RNA를 함유하도록 변형된 경우 세포가 형질전환된 것이다. 예를 들어, 세포는 형질감염, 형질도입 또는 기타 기술을 통해 새로운 유전 물질을 도입함으로써 원래 상태에서 유전적으로 변형되는 경우 형질전환된다. 형질감염 또는 형질도입 후, 형질전환 DNA는 세포의 염색체에 물리적으로 통합되어 세포의 DNA와 재결합하거나, 복제되지 않고 일시적으로 에피솜 요소로 유지되거나, 플라스미드로서 독립적으로 복제될 수 있다. 형질전환 DNA가 세포의 분열과 함께 복제될 때 세포는 "안정적으로 형질전환"된 것으로 간주된다.
본원에서 사용되는 "단리된"이라는 용어는 일반적으로 자연에서 발견되거나 생산되는 구성 요소 중 적어도 일부로부터 분리된 분자를 지칭한다. 예를 들어, 폴리펩타이드는 그것이 생성된 세포의 구성 요소 중 적어도 일부로부터 분리된 경우 "단리된" 것으로 지칭된다. 폴리펩타이드가 발현 후 세포에 의해 분비되는 경우, 폴리펩타이드가 함유된 상층액을 생산한 세포에서 물리적으로 분리하는 것은 폴리펩타이드를 "단리"하는 것으로 간주한다. 마찬가지로, 폴리뉴클레오타이드는 일반적으로 자연에서 발견되는 더 큰 폴리뉴클레오타이드 (예를 들어, DNA 폴리뉴클레오타이드의 경우, 게놈 DNA 또는 미토콘드리아 DNA)의 일부가 아니거나, 예를 들어 RNA 폴리뉴클레오타이드의 경우와 같이 그것이 생성된 세포의 구성 요소 중 적어도 일부로부터 분리되어 있는 경우 "단리된" 폴리뉴클레오타이드로 지칭한다. 따라서 숙주 세포 내부의 벡터에 함유된 DNA 폴리뉴클레오타이드는 "단리된"이라고 할 수 있다.
본원에서 사용되는 "질환" 또는 "장애"는 치료가 필요한 병태를 지칭한다.
본원에서 사용되는 "암" 및 "종양"은 동물의 비정상적인 세포 또는 조직 성장 또는 증식을 지칭하는 상호교환적인 용어이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "암" 및 "종양"이라는 용어는 고형암 및 혈액/림프암을 포함하고, 또한 악성, 전악성, 및 이형성증과 같은 양성 성장을 포함한다. 고형 종양은 일반적으로 낭종이나 액체 영역을 함유하지 않는 조직의 비정상적인 성장 또는 덩어리이다. 암의 예로는 암종, 림프종, 모세포종, 육종, 및 백혈병이 포함되지만 이에 국한되지 않는다. 이러한 암의 보다 구체적인 비제한적 예로는 편평세포암, 소세포 폐암, 뇌하수체암, 식도암, 성상세포종, 연조직 육종, 비소세포 폐암, 폐 선암, 폐 편평상피암, 복막암, 간세포암, 위장관암, 췌장암, 교모세포종, 자궁경부암, 난소암, 간암, 방광암, 간염, 유방암, 대장암, 결장직장암, 자궁내막암 또는 자궁암, 침샘암종, 신장암(kidney cancer), 신장암(renal cancer), 간암, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간암종, 뇌암, 자궁내막암, 고환암, 담관암종, 담낭암종, 위암, 흑색종, 및 다양한 유형의 두경부암을 포함한다.
"전이성 암" 및 "전이성 질환"이라는 용어는 기원 부위에서 신체의 다른 부위, 예를 들어, 국소 림프절 또는 먼 부위로 전이된 암을 의미한다.
"진행성 암", "국소 진행성 암", "진행성 질환" 및 "국소 진행성 질환"이라는 용어는 관련 조직 캡슐을 통해 확장된 암을 의미한다. 국소 진행성 질환을 가진 환자에게는 일반적으로 수술이 권장되지 않으며, 이들 환자들은 임상적으로 국소화된 (장기에 국한된) 암을 가진 환자에 비해 상당히 덜 유리한 결과를 갖는다.
"억제" 또는 "억제하다"는 용어는 임의의 표현형 특성의 감소 또는 중단 또는 해당 특성의 발생률, 정도, 또는 가능성의 감소 또는 중단을 지칭한다. "감소" 또는 "억제"는 기준과 비교하여 활성, 기능 및/또는 양을 감소(decrease), 감소(reduce) 또는 정지시키는 것이다. 특정 실시양태에서, "감소" 또는 "억제"는 전체적으로 20% 이상의 감소를 유발할 수 있는 능력을 의미한다. 다른 실시양태에서, "감소" 또는 "억제"는 전체적으로 50% 이상의 감소를 유발할 수 있는 능력을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "감소" 또는 "억제"는 전체적으로 75%, 85%, 90%, 95% 또는 그 이상의 감소를 유발할 수 있는 능력을 의미한다.
본원에서 사용되는 "참조"는 비교 목적으로 사용되는 모든 샘플, 표준 또는 수준을 지칭한다. 참조는 건강하고/거나 질환이 없는 샘플로부터 얻을 수 있다. 일부 예에서는 치료되지 않은 샘플에서 참조를 얻을 수 있다. 일부 예에서, 참조는 대상체 개체의 치료되지 않은 비질환 샘플로부터 얻는다. 일부 예에서는, 대상체 또는 환자가 아닌 하나 이상의 건강한 개체로부터 참조를 얻을 수 있다.
본원에서 사용되는 "질환의 발병 지연"이란 질환 (예컨대, 암)의 발병을 지연(defer), 방해, 둔화, 지연(retard), 안정화, 억제 및/또는 지연(postpone)하는 것을 의미한다. 이러한 지연은 질병의 병력 및/또는 치료 중인 개체에 따라 다양한 길이의 시간일 수 있다. 당업자에게 명백한 바와 같이, 충분하거나 상당한 지연은 사실상 개체에서 질환이 발병되지 않는다는 점에서 예방을 포함할 수 있다. 예를 들어, 전이 발생과 같은 말기 암은 지연될 수 있다.
본원에서 사용되는 "예방(preventing)"에는 질병에 걸릴 가능성이 있지만 아직 질병 진단을 받지 않은 대상체에게 질병의 발생 또는 재발과 관련하여 예방(prophylaxis)을 제공하는 것이 포함된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 기능 또는 활성을 "억제"한다는 것은 관심 있는 조건 또는 파라미터를 제외한 다른 동일한 조건과 비교할 때 또는 대안적으로 다른 조건과 비교할 때 기능 또는 활성을 감소시키는 것이다. 예를 들어, 종양 성장을 억제하는 항체는 항체가 없을 때의 종양 성장 속도와 비교하여 종양의 성장 속도를 감소시킨다.
약물 또는 치료제의 "유효량" 또는 "치료적 유효량" 또는 "치료 유효 용량"은 단독으로 또는 다른 치료제와 병용하여 사용할 때 질병 증상의 중증도 감소, 질병 증상 없는 기간의 빈도 및 기간 증가, 또는 질병 고통으로 인한 손상 또는 장애의 예방으로 입증되는 질병의 발병으로부터 대상체를 보호하거나 질병 퇴행을 촉진하는 것과 같은 치료 효과를 제공하는 약물 또는 치료제의 임의의 양이다. 질병 퇴행을 촉진하는 치료제의 능력은 임상시험 중 인간 대상체, 인간에서의 효능을 예측하는 동물 모델 시스템, 또는 시험관 내 검정에서 약제의 활성을 검정하는 것과 같은 숙련된 전문가에게 알려진 다양한 방법을 사용하여 평가할 수 있다.
약물의 치료 유효량은 "예방적 유효량"을 포함하며, 이는 암 발병의 위험에 있는 대상체 (예를 들어, 전악성 병태를 갖고 있는 대상체) 또는 암 재발로 인한 고통을 받고 있는 대상체게 단독으로 또는 항암제와 병용하여 투여될 때, 암의 발병 또는 재발을 억제하는 약물의 임의의 양이다. 일부 실시양태에서, 예방적 유효량은 암의 발병 또는 재발을 완전히 예방한다. 암의 발병 또는 재발을 "억제"한다는 것은 암의 발병 또는 재발 가능성을 줄이거나 암의 발병 또는 재발을 완전히 예방하는 것을 의미한다.
"투여하는" 또는 "투여"는 당업자에게 알려진 다양한 방법 및 전달 시스템 중 임의 것을 사용하여 치료제를 대상체에게 물리적으로 도입하는 것을 지칭한다. 투여의 예시적인 경로에는 정맥, 근육 내, 피하, 복강 내, 척추 또는 기타 비경구 투여 경로, 예를 들어 주사 또는 주입 (예를 들어, 정맥 내 주입)이 포함된다. 투여는 예를 들어, 1회, 복수의 횟수 및/또는 하나 이상의 연장된 기간에 걸쳐 수행될 수도 있다.
본원에서 사용되는 용어 "단일요법"은 본 발명의 항-GPNMB 항체 또는 ADC, 항-CD228 항체 또는 ADC, 항-ανβ6 항체 또는 ADC, CD30 항체 또는 ADC, 항-LIV1 항체 또는 ADC, 또는 항-CD19 항체 또는 ADC가 치료 기간 동안 대상체에게 투여되는 유일한 항암제인 것을 의미한다. 그러나, 다른 치료제가 대상체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 염증, 통증, 체중 감소 및 일반적인 권태감을 포함하는, 그러나 기저 암 자체는 아닌, 암과 관련된 증상을 치료하기 위해 암을 가진 대상체에게 투여되는, 예를 들어, 항 염증제 또는 다른 제제가 단일요법의 기간 동안 투여될 수 있다.
하나 이상의 추가 치료제와 "병용한" 투여는 임의의 순서로 동시 (동시(concurrent)) 및 연속적 또는 순차적 투여를 포함한다.
용어 "동시"는 2개 이상의 치료제의 투여를 지칭하기 위해 본원에서 사용되며, 여기서 투여의 적어도 일부가 시간적으로 중복되거나 또는 하나의 치료제의 투여가 다른 치료제의 투여에 비해 짧은 기간 내에 해당한다. 예를 들어, 2개 이상의 치료제는 동시에 또는 약 60분 이하의 시간 간격으로, 예를 들어 약 30, 15, 10, 5, 또는 1분 중 임의의 시간 이하로 투여된다.
용어 "순차적으로"는 본원에서 하나 이상의 다른 제제(들)의 투여를 중단한 후에 하나 이상의 제제(들)의 투여가 계속되는 2개 이상의 치료제의 투여를 지칭하는 것으로 사용된다. 예를 들어, 2개 이상의 치료제의 투여는 약 15분 초과, 예컨대 약 20, 30, 40, 50, 또는 60분, 1일, 2일, 3일, 1주, 2주, 또는 1개월, 또는 그 이상 중 어느 하나의 시간 간격으로 투여된다.
용어 "화학요법제"는 종양 성장을 억제하는데 효과적인 모든 화학적 화합물을 지칭한다. 화학요법제의 비제한적인 예는 알킬화제 (예를 들어, 질소 머스타드, 에틸렌이민 화합물 및 알킬 설포네이트); 항대사물질 (예를 들어, 엽산, 퓨린 또는 피리미딘 길항제); 유사분열 억제제 (예를 들어, 항-튜불린 제제, 예컨대 빈카 알칼로이드, 오리스타틴 및 포도필로톡신의 유도체); 세포 독성 항생제; DNA 발현 또는 복제를 손상시키거나 방해하는 화합물 (예를 들어, DNA 마이너 홈 결합제); 및 성장 인자 수용체 길항제, 및 세포 독성 또는 세포증식억제제를 포함한다.
어구 "약학적으로 허용가능한"은 물질 또는 조성물이 제형, 및/또는 이것으로 치료되는 대상체을 포함하는 다른 성분과 화학적으로 및/또는 독성학적으로 양립 가능함을 나타낸다.
용어 "약학적 제형" 및 "제약 조성물"은 활성 성분(들)의 생물학적 활성이 효과적일 수 있도록 허용하는 형태이고, 제형이 투여될 대상체에게 허용할 수 없을 정도로 독성인 추가 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다. 이러한 제형은 무균성일 수 있다.
"약학적으로 허용 가능한 담체"는 대상체에게 투여하기 위한 "제약 조성물"을 함께 구성하는 치료제와 함께 사용하기 위해 당업자에게 통상의 무독성 고체, 반고체, 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질, 제형 보조제, 또는 담체를 지칭한다. 약학적으로 허용되는 담체는 사용된 용량과 농도에서 수취인에게 독성이 없으며 제형의 다른 성분과 양립된다. 약학적으로 허용되는 운반체는 사용된 제형에 적합하다.
본 개시의 다양한 측면은 다음 섹션에서 보다 상세하게 설명된다.
2. 실시양태
본 발명의 다양한 실시양태가 아래에 설명된 후, 본 발명의 공정에 유용한 구성 요소, 예를 들어, 기, 시약 및 단계에 대한 보다 상세한 논의가 이어진다. 공정의 구성 요소에 대해 선택된 실시양태 중 어느 것이라도 본 명세서에 기술된 바와 같이 본 발명의 각각 및 모든 측면에 적용될 수 있거나 단일 측면에 관련될 수 있다. 일부 측면에서, 선택된 실시양태들은 소수성 오리스타틴 F 약물 유닛을 갖는 오리스타틴 리간드 약물 접합체, 약물 링커 화합물 또는 이들의 중간체를 설명하는 데 적합한 임의의 조합으로 조합될 수 있다.
2.1 리간드 약물 접합체
본 발명의 리간드 약물 접합체 (LDC) 화합물은 개재 링커 유닛 (LU)를 통해 리간드 유닛에 연결되는 약물 유닛을 갖고 있는 화합물이고, 여기서 LU는 정상 조직 균질물에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해 절단에 더 취약하여 유리 약물로서의 방출 D에 영향을 미치는 펩타이드 절단 가능한 단위를 포함하고, 일반적으로 하기 화학식 1의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 L은 리간드 유닛이고; LU는 링커 유닛이고; D'는 화학식 -LU-(D)'의 각 약물 링커 모이어티에 대한 동일한 유리 약물로 통합되거나 구조적으로 대응하는, 1 내지 4개의 약물 유닛을 나타내고; 아래첨자 p'는 1 내지 24 범위의 정수이고, 여기서 리간드 유닛은 표적 비정상 세포의 항원에 선택적으로 결합할 수 있고, 여기서 표적 항원은 결합된 접합체 화합물과 함께 후속 유리 약물의 세포 내 방출을 위해 내재화가 가능하고, 여기서 리간드 약물 접합체 화합물에서 각 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 화학식 1A 약물 링커 모이어티의 -LB-Aa-Bb- 모이어티는 일반적으로 화학식 1의 링커 유닛 (LU)의 1차 링커 (LR)를 나타내고
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고; LB는 공유 결합 리간드 모이어티이고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고는 0 또는 1이고; B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고; D는 약물 유닛이고; 아래첨자 q는 1 내지 4의 범위의 정수이고; LO는 하기 구조를 가진 제2 링커 모이어티이고:
여기서, A'에 인접한 물결선은 1차 링커에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고; A'는 제2 선택적 스페이서 유닛이고, 아래첨자 a'는 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는 0 또는 1이고, W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고, Y는 스페이서 유닛이고, y는 0, 1 또는 2로 각각 스페이서 유닛의 부재, 또는 1 또는 2개의 존재를 나타낸다.
리간드 약물 접합체 조성물은 리간드 약물 접합체 화합물의 분포 또는 집합체로 구성되며 아래첨자 p'가 아래첨자 p로 대체되는 화학식 1의 구조로 표시되며, 여기서 아래첨자 p는 약 2 내지 약 24 범위의 수이다.
전통적인 리간드 약물 접합체도 화학식 1로 표시되지만, D에 직접 또는 Y를 통해 간접적으로 공유 부착된 디펩타이드를 포함하는 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)를 갖고, 여기서, 디펩타이드는 그 활성이 정상 세포에 비해 비정상 세포에서 상향 조절되는 특정 세포 내 프로테아제에 대해 선택적으로 설계된다. 대조적으로, 본 발명의 접합체는 비정상 세포를 포함하는 조직 내의 전반적인 프로테아제 활성이 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 절단에 저항성을 유지하면서 적절하게 설계된 절단 가능 유닛에 의해 정상 세포를 포함하는 정상 조직 내의 활성과 차별화될 수 있다는 예상치 못한 발견에 기초한다. 특정 트리펩타이드를 통합하는 펩타이드 절단 가능 유닛에 의해 차별화가 달성되는 본 발명의 접합체의 경우, 이들 펩타이드는 비정상 세포를 포함하는 조직 균질체로부터의 프로테아제 활성을 정상 조직 균질체의 것과 비교하는 본원에 기술된 스크리닝 방법에 의해 확인되었고, 여기서, 정상 조직은 치료적 유효량의 전통적인 리간드 약물 접합체를 투여했을 때 포유류 대상체가 경험하는 표적 및/또는 표적외 부작용의 원천으로 알려져 있다.
따라서, 본 발명의 원칙적인 실시양태에서, W는 자유롭게 순환하는 프로테아제와 비교하여 표적 비정상 세포의 하나 이상의 세포 내 프로테아제에 의해 선택적으로 작용하고 또한 정상 조직 균질체 내의 프로테아제와 비교하여 종양 조직 균질체 내의 프로테아제에 의해 선택적으로 작용하는 인식 부위를 제공하는 트리펩타이드를 포함하는 펩타이드 절단 가능 유닛이다. 암 치료를 위해 펩타이드 절단 가능 유닛에 대한 트리펩타이드 서열이 선택되어 전통적 리간드 약물 접합체의 치료적 유효량의 투여로 인한 표적 및/또는 표적외 부작용의 원천으로 알려진 정상 조직의 프로테아제가 종양 조직의 프로테아제보다 해당 트리펩타이드 기반 절단 가능 유닛을 갖는 접합체에 작용할 가능성이 적어 암세포 표적화에 대한 선택성을 높일 수 있다. 이러한 선택은 암 종양 조직의 균질물에 비해 정상 조직의 균질물에서 전반적인 프로테아제 활성이 더 낮다는 것을 기반으로 한다. 본 발명의 개선된 접합체와는 대조적으로, 디펩타이드 절단 가능 유닛을 함유하는 전통적인 리간드 약물 접합체는 암세포에서 활성이 상향 조절되는 세포 내 프로테아제인 카텝신 B에 의해 선택적으로 작용하도록 설계되었으며, 주로 정상 세포보다 암세포를 표적으로 하는 선택성을 위해 면역학적 특이성에 의존하고 있다. 본 발명의 개량된 접합체는 표적 암세포가 존재하는 종양 조직에 비해 정상 조직 내에서 프로테아제 작용을 덜 받음으로써 추가적인 수준의 선택성을 갖는다.
일부 실시양태에서, 화학식 1A의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1B로 표시되는 구조를 가질 것이고:
여기서, LB는 약물 링커 모이어티 또는 약물 링커 화합물의 링커 유닛 (LU)에서 1차 링커 (LR)에 대해 본원에 정의된 바와 같은 리간드 공유 결합 모이어티이고; A 및 B는 각각 LR의 제1 선택적 스트레처 유닛 및 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 q는 1 내지 4 범위이며; 나머지 가변기는 LO에 대해 본원에 정의된 바와 같다.
이들 실시양태 중 일부에서, W는 약물 유닛에 직접 부착되는 트리펩타이드를 함유하며, 따라서 아래첨자 y는 0이다. 아래첨자 y가 1일 때, 트리펩타이드는 자가 용해성 스페이서 유닛에 부착되어 프로테아제에 의한 절단이 화학식 Y-D의 약물 링커 단편을 제공하며, 여기서 Y는 자가 용해되어 유리 약물이 완전히 방출되도록 한다. 아래첨자 y가 2인 경우, 트리펩타이드는 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)에 부착되어 프로테아제에 의한 절단이 화학식 Y-Y'-D의 제1 약물 링커 단편을 제공하고, 여기서 Y'는 제2 스페이서 유닛이고, 유리 약물의 방출을 완료하기 위해 분해되는 화학식 Y'-D의 제2 약물 링커 단편을 제공하도록 제1 스페이서 유닛의 자가 용해가 뒤따른다.
펩타이드 절단 가능 유닛 (W)의 트리펩타이드가 약물 유닛 또는 개재 스페이서 유닛에 직접 부착되는, 화학식 1B의 약물 링커 모이어티를 갖는 예시적인 리간드 약물 접합체 화합물은 하기 반응식 1a의 구조를 갖고, 여기서, P1, P2 및 P3는 트리펩타이드 서열의 아미노산 잔기이고, D는 아래첨자 y가 2인 Yy를 함께 나타내는 카르바메이트 또는 카르보네이트 작용기를 통해 p-아미노 벤질 알코올 잔기에 부착되어 있다. 이러한 예시적인 리간드 약물 접합체 화합물에서, P1에 인접한 아미드 결합의 카르보닐 작용기는 트리펩타이드 서열의 C-말단으로부터 유래하며, 여기서 상기 아미드 결합은 프로테아제 절단 부위(화살표로 표시됨)이고, P3에 인접한 아미드 결합의 아미노기는 트리펩타이드 서열의 N-말단으로부터 유래한다. 아미드 작용기의 P1로의 절단은 반응식 1a에 표시된 구조를 갖는 제1 약물 링커 단편을 초래하고, 이는 자가 용해를 거쳐 CO2의 방출과 함께 자발적으로 분해되어 하이드록시 또는 아민 기를 갖는 화학식 H-T*-D*의 유리 약물로서 D의 방출을 완료하는 제2 약물 링커 단편을 제공하고, 여기서 산소 원자 또는 질소 모이어티 -NH-는 T*로 표시되고, 여기서 D*는 유리 약물의 나머지 부분을 나타낸다.
반응식 1a.
이러한 실시양태에서, P4, P5 등으로 지정된 하나 이상의 아미노산은 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 단백질 분해 및 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해 대비 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 세포 내 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하는 트라이펩타이드를 포함하는 펩타이드 서열의 일부로서 화학식 -LB-A'a'-의 1차 링커와 P3 사이에 존재할 수 있다. 이러한 확장된 펩타이드 서열을 갖는 리간드 약물 결합체로부터의 유리 약물 방출 메커니즘은 반응식 1a의 메커니즘과 유사하다.
다른 실시양태에서, P-1로 지정된 아미노산 잔기는 W의 특이성 부여 트리펩타이드와 D 또는 -Yy-D 사이에 개입하여, 특이성 부여 트리펩타이드에서 프로테아제 작용으로부터 초기에 방출된 D 또는 약물 링커 단편이 해당 아미노산을 포함하고, 따라서 스페이서 유닛(들)의 자가 용해가 일어나도록 하기 위해 세포 내 엔도펩티다아제에 의한 추가 처리가 필요하다. 이러한 실시양태의 경우, 화학식 1B의 약물 링커 모이어티를 갖는 예시적인 리간드 약물 접합체 화합물은 펩타이드 절단 가능 유닛의 특이성 부여 트리펩타이드가 약물 유닛 또는 개재 스페이서 유닛에 직접 부착되지 않는 화학식 1B의 약물 링커 모이어티를 갖는 예시적인 리간드 약물 접합체 화합물은 반응식 1b에 나타된 구조를 갖는다. P1과 P-1 (화살표로 표시) 사이의 감수성 아미드 결합의 프로테아제 절단은 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)가, 카르바메이트 또는 카르보네이트 작용기를 통해 D에 부착된 파라-아미노 벤질 알코올 잔기인, Y의 자가 용해성 모이어티에 부착된 엔도펩티다제의 기질을 제공하는 아미노산 잔류물로서 존재하는 약물 링커 단편을 제공한다. 아미노산-파라-아미노 벤질 알코올 잔기와 카르바메이트 또는 카르보네이트 작용기는 함께 Yy를 나타내고, 여기서 아래첨자 y는 2이다. P-1의 엔도펩티다제 제거 후, 화학식 H-T*-D*의 유리 약물로서 D의 방출을 위해 반응식 1a에서와 같이 자가 용해가 일어난다.
반응식 1b
이전과 마찬가지로, P4, P5 등으로 지정된 하나 이상의 아미노산이 화학식 -LB-A'a'-의 1차 링커와, 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 단백질 분해에 비해 세포 내 단백질 분해에 대한 선택성 및 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하는 트리펩타이드를 포함하는 펩타이드 서열의 일부로서, P3 사이에 존재할 수 있다. 반응식 1b의 P-1은 공식적으로는 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)의 일부이지만, 편의상 이러한 펩타이드 절단 가능 유닛을 설명하는 서열 번호에서 W가 테트라펩타이드가 되도록 트리펩타이드 서열과 회합시킬 것이다. 이들 단위 및 본 발명의 리간드 약물 접합체의 다른 구성 요소는 이하에서 더 논의된다.
2.2.1 리간드 유닛
리간드 약물 접합체의 리간드 유닛 (L)는 표적 모이어티에 선택적으로 결합하는 접합체의 표적화 모이어티이다. 일부 실시양태에서 리간드 유닛은 표적 모이어티 역할을 하는 세포 구성 요소 (세포 결합제) 또는 다른 관심 표적 분자에 선택적으로 결합한다. 리간드 유닛은 D를 유리 약물로 선택적으로 방출하기 위해 리간드 유닛이 상호 작용하는 특정 표적 세포 집단에 리간드 약물치료체의 약물 유닛을 표적화하고 제시하는 역할을 한다. 리간드 유닛을 제공하는 표적제는 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드를 포함하지만 이에 국한되지 않는다. 예시적인 리간드 유닛은 항체, 예를 들어 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편, 인터페론, 림포카인, 호르몬, 성장 인자 및 콜로니 자극 인자와 같은 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드에 의해 제공되는 것을 포함하지만 이에 국한되지 않는다. 다른 적합한 리간드 유닛은 비타민, 영양소 수송 분자 또는 임의의 세포 결합 분자 또는 물질로부터 유래한 것이다. 일부 실시양태에서, 리간드 유닛은 비항체 단백질 표적제로부터 유래한 것이다. 다른 실시양태에서, 리간드 유닛은 항체와 같은 단백질 표적제로부터 유래한다. 바람직한 표적제는 더 큰 분자량의 단백질, 예를 들어, 적어도 약 80 Kd의 분자량을 갖는 세포 결합제이다.
표적화 약제는 약물 링커 화합물의 1차 링커 전구체 (LR')의 리간드 공유 결합 전구체 (LB') 모이어티와 반응하여 화학식 1A의 약물 링커 모이어티의 1차 링커 (LR)의 리간드 공유 결합 (LB) 모이어티에 공유 부착된 리간드 유닛을 형성한다. 표적화 약제는 자연 발생적이든 비자연 발생적이든 (예를 들어, 조작된) 아래첨자 p에 의해 정의되는 필요한 수의 약물-링커 모이어티를 수용하기 위해 적절한 수의 부착 부위를 갖거나 갖도록 변형된다. 예를 들어, 아래첨자 p의 값이 6 내지 14가 되려면 표적화 약제가 6 내지 14개의 약물-링커 모이어티에 대한 결합을 형성할 수 있어야 한다. 부착 부위는 자연적으로 발생하거나 표적화 약제로 조작될 수 있다. 표적화 약제는 표적화 약제의 반응성 또는 활성화 가능한 헤테로원자 또는 헤테로원자 함유 작용기를 통해 약물 링커 화합물의 링커 유닛의 LSS 모이어티에 결합을 형성할 수 있다. 표적화 약제 상에 존재할 수 있는 반응성 또는 활성화 가능한 헤테로원자 또는 헤테로원자 함유 작용기는 황 (일 실시양태에서, 표적화 약제의 티올 작용기로부터), C=O (일 실시양태에서, 표적화 약제의 카르보닐, 카르복실 또는 하이드록실기로부터) 및 질소 (일 실시양태에서, 표적화 약제의 1 차 또는 2 차 아미노기로부터)를 포함한다. 이들 헤테로원자는 자연 발생 항체와 같은 표적화 약제의 자연 상태에서 표적화 약제에 존재할 수 있거나 화학적 변형 또는 유전 조작을 통해 표적화 약제에 도입될 수 있다.
한 실시양태에서, 표적화 약제는 티올 작용기 (예를 들어, 시스테인 잔기의)를 가지며, 그로부터의 리간드 유닛은 티올 작용기의 황 원자를 통해 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티에 부착된다.
또 다른 실시양태에서, 상기 표적화 약제는 약물 링커 화합물의 링커 유닛의 LR의 N-하이드록시석신이미드, 펜타플루오로페닐, 및 p-니트로페닐 에스테르를 포함하나 이에 제한되지 않는 활성화된 에스테르와 반응할 수 있는 라이신 잔기를 갖고, 따라서 리간드 유닛의 질소 원자와 약물 링커 화합물의 링커 유닛의 C=O 작용기 사이에 아미드 결합을 초래한다.
또 다른 실시양태에서, 표적화 약제는 하나 이상의 티올 작용기를 도입하기 위해 화학적으로 변형될 수 있는 하나 이상의 라이신 잔기를 갖는다. 해당 표적화 약제의 리간드 유닛은 도입된 티올 작용기의 황 원자를 통해 링커 유닛에 부착된다. 라이신을 변형시키는 데 사용할 수 있는 시약에는 N-석신이미딜 S-아세틸티오아세테이트 (SATA) 및 2-이미노티올란하이드로클로라이드 (Traut 시약)가 포함되나 이에 국한되지 않는다.
다른 실시양태에서, 표적화 약제는 하나 이상의 티올 작용기를 갖도록 화학적으로 변형될 수 있는 하나 이상의 탄수화물기를 가질 수 있다. 상기 표적화 약제의 리간드 유닛은 도입된 티올 작용기의 황 원자를 통해 링커 유닛에 부착되거나, 또는 표적화 약제는 알데하이드 (-CHO) 기를 제공하기 위해 산화될 수 있는 하나 이상의 탄수화물 기를 가질 수 있다. (예를 들어, Laguzza, 등, 1989, J. Med. Chem. 32(3):548-55 참조). 그런 다음 해당 알데하이드는 친핵성 질소를 갖는 약물 링커 화합물의 LSS 모이어티와 반응할 수 있다. 표적화 약제의 카르보닐기와 반응할 수 있는 LR의 다른 반응 부위에는 히드라진 및 하이드록실아민이 포함되나 이에 국한되지는 않는다. 약물 링커 모이어티의 부착을 위한 단백질 변형에 대한 다른 프로토콜은 Coligan 등, Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley & Sons (2002) (본원에 참조로 포함됨)에 설명되어 있다.
바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물의 LR의 반응성기는 말레이미드 (M1) 모이어티이고 마이클 첨가를 통해 티오 치환된 석신이미드 (M2) 모이어티가 형성되도록 표적화 약제의 티올 작용기를 통해 L과 LR의 공유 부착이 달성된다. 티올 작용기는 표적화 약제의 자연 상태, 예를 들어, 자연적으로 발생하는 잔기로 표적화 약제에 존재하거나 화학적 변형 및/또는 유전 공학을 통해 표적화 약제에 도입될 수 있다.
생체접합체의 경우 약물 접합 부위가 접합 용이성, 약물-링커 안정성, 결과 생체접합체의 생물물리학적 특성에 미치는 영향, 및 시험관 내 세포 독성을 포함하는 다양한 파라미터에 영향을 미칠 수 있는 것으로 관찰되었다. 약물-링커 안정성과 관련하여, 리간드에 대한 약물 링커의 접합 부위는 접합된 약물 링커 모이어티가 제거 반응을 거치고 약물 링커 모이어티가 생체접합체의 리간드 유닛에서 생체접합체의 환경에 존재하는, 예를 들어, 혈장에 있을 때 알부민, 유리 시스테인 또는 글루타티온의 반응성 티올과 같은 대체 반응성 티올로 옮겨지는 능력에 영향을 미칠 수 있다. 이러한 부위는 예를 들어, 선택된 시스테인 조작된 부위뿐만 아니라 사슬 간 이황화물을 포함한다. 본원에 기술된 리간드-약물 접합체는 다른 부위 외에 제거 반응에 덜 민감한 부위 (예를 들어, Kabat에 제시된 EU 색인에 따른 위치 239)에서 티올 잔기에 접합될 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 리간드 유닛 (L)는 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 것으로서, 항체 약물 접합체 (ADC)의 항체 리간드 유닛을 정의하고, 여기서, 상기 항체 리간드 유닛은 유리 약물로서 D의 후속 방출을 위해 암세포의 표적 항원에 선택적으로 결합할 수 있고, 여기서 표적 항원은 유리 약물의 세포 내 방출을 개시하기 위해 상기 결합에 따라 상기 암세포로 내재화될 수 있다.
유용한 항체에는 면역된 동물의 혈청에서 추출한 항체 분자의 이질적인 집단인 다클론 항체가 포함된다. 다른 유용한 항체로는 특정 항원 결정인자(예를 들어, 암세포 항원, 바이러스 항원, 미생물 항원, 단백질, 펩타이드, 탄수화물, 화학물질, 핵산 또는 그 단편)에 대한 균질한 항체 집단인 단일클론 항체가 있다. 관심 항원에 대한 단일 클론 항체(mAb)는 배양 중인 연속 세포주에 의한 항체 분자의 생산을 제공하는 당업자에게 알려진 임의의 기술을 사용하여 제조할 수 있다.
유용한 단일 클론 항체는 인간 단일 클론 항체, 인간화 단일 클론 항체, 또는 키메라 인간-마우스 (또는 다른 종) 단일 클론 항체를 포함하되 이에 국한되지 않는다. 항체는 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 인간 단일 클론 항체는 당업자에게 알려진 수많은 기술 중 어느 것으로든 제조될 수 있다. (예를 들어, Teng 등, 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80:7308-7312; Kozbor 등, 1983, Immunology Today 4:72-79; 및 Olsson 등, 1982, Meth. Enzymol. 92:3-16).
항체는 표적 세포 (예를 들어, 암세포 항원, 바이러스 항원, 또는 미생물 항원)에 면역 특이적으로 결합하는 항체의 기능 활성 단편, 유도체 또는 유사체 또는 종양 세포 또는 매트릭스에 결합하는 다른 항체일 수 있다. 이와 관련하여, "기능적으로 활성"이란 단편, 유도체 또는 유사체가 표적 세포에 면역 특이적으로 결합할 수 있다는 것을 의미한다. 항원과 결합하는 CDR 서열을 결정하기 위해, 해당 CDR 서열을 함유하는 합성 펩타이드는 당업자에게 알려진 임의의 결합 검정 방법 (예를 들어, BIA 코어 검정)에 의해 항원과의 결합 검정에 사용될 수 있다. (예를 들어, Kabat 등, 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md; Kabat E 등, 1980, J. Immunology 125(3):961-969 참조).
다른 유용한 항체에는 F(ab')2 단편, Fab 단편, Fvs, 단일 사슬 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, scFv, scFv-FV, 또는 항체로서 동일한 특이성을 갖는 다른 분자와 같은 항체 단편이 포함되나 이에 국한되지 않는다.
추가로, 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 만들 수 있는 인간 및 비인간 부분을 포함하는 키메라 및 인간화 단일 클론 항체와 같은 재조합 항체는 유용한 항체이다. 키메라 항체는 서로 다른 부분이 서로 다른 동물 종에서 유래된 분자로, 예를 들어 뮤린 단일 클론 및 인간 면역 글로불린 불변 영역에서 유래된 가변 영역을 갖는 것과 같은 것이다. (예를 들어, 본 문서에 전체 참조로 통합된, 미국 특허 번호 4,816,567; 및 미국 특허 번호 4,816,397 참조). 인간화 항체는 비인간 종의 하나 이상의 상보성 결정 영역 (CDR) 및 인간 면역글로불린 분자의 프레임워크 영역을 가진 비인간 종의 항체 분자이다. (예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 통합되는 미국 특허 번호 5,585,089 참조). 이러한 키메라 및 인간화 단일 클론 항체는, 각각이 구체적으로 본원에 참조로 통합되는, 국제공개번호 WO 87/02671, 유럽 특허 공개번호 0 184 187, 유럽 특허 공개번호 0 171 496, 유럽 특허 공개번호 0 173 494, 국제공개번호 WO 86/01533, 미국 특허번호 4,816,567, 유럽 특허 공개번호 012 023; Berter 등, Science (1988) 240:1041-1043; Liu 등, Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) (1987) 84: 3439-3443; Liu 등, J. Immunol. (1987) 139: 3521-3526; Sun 등 Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) (1987) 84: 214-218; Nishimura 등 Cancer. Res. (1987) 47: 999-1005; Wood 등, Nature (1985) 314:446-449; Shaw 등, J. Natl. Cancer Inst. (1988) 80: 1553-1559; Morrison, Science (1985) 229:1202-1207; Oi 등 BioTechniques (1986) 4: 214; 미국 특허 번호 5,225,539; Jones 등, Nature (1986) 321: 552-525; Verhoeyan 등, Science (1988) 239: 1534; 및 Beidler 등, J. Immunol. (1988) 141: 4053-4060에 기재된 바와 같당업자에게 공지된 재조합 DNA 기술에 의해 생산될 수 있다.
완전 인간 항체가 특히 바람직하고, 내인성 면역글로불린 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 없지만 인간 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 있는 형질전환 마우스를 사용하여 생산할 수 있다.
항체는 즉, 그러한 공유 부착이 항체의 항원 결합 면역 특이성을 유지하도록 허용하는 경우, 임의 유형의 분자의 공유 부착에 의해 변형된 유사체 및 유도체를 포함한다. 예를 들어, 항체의 유도체 및 유사체는 예를 들어 글리코실화, 아세틸화, PEG화, 인산화, 아미드화, 알려진 보호/차단 기에 의한 유도체화, 단백질 분해 절단, 세포 항체 단위 또는 다른 단백질과의 연결 등에 의해 추가로 변형된 것을 포함하나 이에 국한되지는 않는다. 특정 화학적 절단, 아세틸화, 포르밀화, 투니카마이신 존재 시 대사 합성 등을 포함하되 이에 국한되지 않는 공지된 기술을 통해 수많은 화학적 변형을 수행할 수 있다. 또한, 유사체 또는 유도체는 하나 이상의 비천연 아미노산을 함유할 수 있다.
항체는 Fc 수용체와 상호 작용하는 아미노산 잔기의 변형 (예를 들어, 치환, 결실 또는 첨가)을 가질 수 있다. 특히, 항체는 항-Fc 도메인과 FcRn 수용체 사이의 상호작용에 관여하는 것으로 확인된 아미노산 잔기의 변형을 가질 수 있다 (예를 들어, 본원에 그 전체가 참조로 통합된 국제 출원번호 WO 97/34631 참조).
특정 실시양태에서, 암 치료를 위한 공지된 항체가 사용된다. 일부 실시양태에서, 항체는 혈액학적 악성 종양의 암 항원에 선택적으로 결합할 것이다.
ADC는 전구 약물 전환 효소에 접합될 수 있다. 전구 약물 전환 효소는 항체에 재조합적으로 융합되거나 공지된 방법을 사용하여 화학적으로 접합될 수 있다. 예시적인 전구 약물 전환 효소는 카르복시펩티다아제 G2, 베타-글루쿠로니다제, 페니실린-V-아미다제, 페니실린-G-아미다제, β-락타마제, β-글루코시다제, 니트로리덕타제 및 카르복시펩티다아제 A이다.
2.2.2 1차 링커
실시양태들의 한 군에서, 리간드 약물 접합체는 화학식 -LR-LO-D의 하나 이상의 약물 링커 모이어티를 포함하고, 여기서, LO는 본원에 기재된 바와 같은 -A'a'-W-Yy-이고, 여기서, LR은 1차 링커이고, A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이고, a'는 0 또는 1로서, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고, Y는 스페이서 유닛이고, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로서, 각각 부재, 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고, D는 약물 유닛이고, W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 최대 12개 (예를 들어, 3 내지 12개 또는 3 내지 10개)의 연속적인 아미노산 서열이고, 여기서, 서열은 유리 약물로서 D의 방출을 개시하는 정상 조직의 균질물에 비해 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해 절단에 더 취약한 트리펩타이드를 포함하고, 여기서, 이들 세포 내 및/또는 이들 세포 부근에서 의도하지 않은 유리 약물의 방출로 인한 정상 조직의 세포에 대한 세포 독성은 펩타이드 절단 가능 유닛의 아미노산 서열이 디펩타이드-발린-시트룰린-인, 비교 리간드 약물 접합체의 유효량을 이를 필요로 하는 대상체에 투여함으로써의 부작용과 관련이 있고/있거든 있고 여기서, 트리펩타이드는 비교 대상 접합체에 비해 정상 조직에 대한 리간드 약물 접합체의 생체이용률을 감소시키면서 리간드 약물 접합체의 생체이용률을 증가시키는 것을 특징으로 한다. 이들 실시양태 중 일부에서, -LR-은 -LB-Aa-Bb-이고, 여기서 LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고, A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고, 아래첨자 a는 0 또는 1로서, 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고고, B는 선택적 분기 유닛이며, 아래첨자 b는 0 또는 1로서 각각 B의 부재 또는 유무를 나타낸다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 모이어티는 하기 구조를 갖거나
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 LR, A', a', Y, y 및 D는 이전 의미를 유지하고, P1, P2 및 P3는 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 펩타이드 절단 가능 유닛의 아미노산 서열이 디펩타이드, -발린-시트룰린-인 비교 리간드 약물 접합체와 비교하여 정상 조직에 해를 끼치는 종양 조직에 대한 증가된 생체 이용률을 제공하고, 여기서, 단백질 분해 절단은 아래첨자 y가 1 또는 2인 경우 P1과 Y 사이의 공유결합에서, 아래첨자 y가 0인 경우 P1과 D 사이의 공유결합에서 발생하고, 여기서 종양과 정상 조직은 같은 종이다.
다른 곳에서 설명한 바와 같이, 다른 실시양태는 P-1로 지정된 아래첨자 y의 값에 따라, P1과 Y 또는 D 사이에 추가적인 아미노산 잔기를 함유하여, 종양 조직 균질물의 단백질 분해 효소(들)에 의한 선택적 엔도펩티다제 작용이 P1과 P-1 사이의 아미드 결합에서 발생하여 화학식 -[P-1]-Yy-D의 약물 링커 단편을 방출하도록 한다. 아래첨자 y가 0인 경우 (즉, Y가 없는 경우) 단백질 분해 효소의 엑소펩티다제 작용으로 인해 해당 단편에서 유리 약물이 방출되어 P-1 아미노산 잔기를 제거하여 유리 약물을 직접 제공할 수 있다.
P1과 Y 또는 D 사이에 추가적인 아미노산 잔기가 존재하는 일부 실시양태에서, 약물 링커 모이어티는 다음과 같은 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, LR, A', a', Y, y 및 D는 이전의 의미를 유지하고, P1, P2 및 P3는 선택적으로 P-1과 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 선택성을 제공하는 아미노산 잔기이고, 여기서 단백질 분해 절단은 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 [P-1]-Yy-D의 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다.
이들 실시양태 중 일부에서, 아래첨자 y가 0일 때 P1 및 P-1 아미노산 사이의 아미드 결합의 엔도펩티다제 절단으로 인한 [P-1]-D 잔기도 세포 독성 활성을 발휘한다. 다른 실시양태에서, 아래첨자 y는 1 또는 2이므로, P-1 아미노산 잔기를 제거하는 엑소펩티다제 작용은 화학식 -Yy-D의 또 다른 약물 링커 단편을 제공하고, 이는 자발적으로 단편화되어 유리 약물을 제공한다.
다른 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 잔기는, 아래첨자 n이 최대 12 범위 (예를 들어, 3 내지 12 또는 3 내지 10)인, P4, P5... Pn으로 지정되고, 일부 실시양태에서 P-1 아미노산 잔기를 함유하는 펩타이드 절단 가능 유닛에 추가로 존재하는, 아래첨자 a'의 값에 따라 P3와 LR 또는 A' 사이에 있다. 두 경우 모두, 추가 P4, P5... Pn 아미노산 잔기는 -Yy-D 또는 -[P-1]-Yy-D 단편을 제공하는 절단 부위를 변경하지 않도록 선택되지만, 대신 응집 감소를 위한 용해도 개선과 같이 리간드 약물 접합체에 원하는 생리화학적 및/또는 약동학적 특성을 부여하도록 선택된다.
P3에 대한 N-말단에 추가적인 잔기(들)가 있거나 P1과 Y 또는 D 사이에 P-1이 추가로 있는 일부 실시양태에서, 약물 링커 모이어티는 다음과 같은 구조를 갖고:
또는
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, LR, A', a', Y, y 및 D는 이전 의미를 유지하고 P-1 및 P1, P2, P3...Pn은 아미노산 잔기이고, 여기서 아래첨자 n은 최대 12 범위 (예를 들어, 3 내지 12 또는 3 내지 10)이고, P1, P2 및 P3은 선택적으로 P-1과 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 Yy-D 사이 또는 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 각각 Yy-D 또는 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출하고, 후자는 이후 엑소펩티다제 분해를 거쳐 Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다. 두 경우 모두 Yy-D 링커 단편은 자발적 분해를 거쳐 유리 약물로서 D의 방출을 완료한다.
이들 실시양태 중 임의의 것에서, 아래첨자 b가 0인 경우, 약물 링커 모이어티의 LR은 -LB-Aa-의 화학식을 가지며, 여기서 LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고 A는 제1 선택적 스트레처 유닛이다. 이러한 실시양태에서, a가 1이고 아래첨자 a' 가 1이면, A'는 A의 하위 단위로 존재하며, 따라서 1차 링커의 구성 요소로 간주된다.
아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a가 1인 일부 바람직한 실시양태에서, 화학식 -LB-A-의 LR이 자가-안정화 링커 (LSS) 모이어티 또는 LSS의 석신이미드 (M2) 모이어티의 제어된 가수분해로부터 얻은 자기 안정화된 링커 (LS) 모이어티이다. 리간드 약물 접합체 조성물의 약물 링커 모이어티의 예시적인 LSS 및 LS 1차 링커, 또는 어느 한 유형의 1차 링커를 갖는 이의 접합체 화합물은 각각 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 물결선은 아래첨자 a'의 값에 따라 A' 또는 W에 공유 부착된 부위를 나타내며, A'는 A의 선택적 하위 단위이고, [HE]는 A가 제공하는 구성 요소인 선택적 가수분해 강화 유닛이고; BU는 염기성 유닛이고; Ra2는 임의로 치환된 C1-C12 알킬기이고; 점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내며, 상기 고리화가 없는 경우, BU는 일차, 이차 또는 삼차 아민 작용기를 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로서 갖는 비-사이클릭 염기성 유닛이거나, 또는 고리화가 있는 경우, BU는 고리화된 염기성 유닛이고, 여기서 Ra2 및 BU는 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께, 2차 또는 3차 아민 작용기의 골격 염기성 질소 원자를 함유하는 임의로 치환된 스피로 C3-C20 헤테로사이클로를 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 정의하고,
여기서 비-사이클릭 염기성 유닛 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자는 염기성 질소 원자의 치환 정도에 따라 선택적으로 질소 보호기에 의해 적합하게 보호되거나 선택적으로 양성자화된다.
아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a가 1인 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 -LB-A- 의 1차 링커는 염기성 유닛을 함유하지 않으며, 이는 다음의 구조로 예시되거나:
또는 이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 가변기는 앞서 LSS 또는 LS 1차 링커에 대해 설명한 것과 같다.
LDC의 리간드 유닛 (L)에 LR이 공유 부착되어 있는 대표적인 L-LR- 구조는 다음과 같고:
및 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염, 및 석신이미드 고리 시스템이 고리 개방 형태로 가수분해되는 구조이고, 여기서 표시된 (#) 황 원자는 리간드 유닛으로부터의 황 원자이고; 여기서 물결선은 접합체 구조의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타낸다.
다른 대표적인 L-LR- 구조는 다음과 같고:
여기서, 표시된 (#) 질소, 탄소 또는 황 원자는 리간드 유닛으로부터의 것이며, 물결선은 나머지 접합체 구조에 대한 공유 부착 부위를 나타낸다.
실시양태의 다른 군에서, 실시양태의 이전 군에서 설명한 바와 같이 리간드 약물 접합체를 제조하는 데 유용한 약물 링커 화합물은 본원에 설명된 바와 같이 LR'-A'a'-W-Yy-D의 화학식을 갖고, 여기서 LR'은 약물 링커 화합물의 1차 링커로서, 해당 약물 링커 화합물이 해당 접합체의 제조에 사용될 때 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티의 1차 링커 LR로 변환되고, A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이고, a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고, 여기서 LR'이 분기 유닛을 함유하지 않고 아래첨자 a'가 1인 경우, A'는 LR'의 구성 요소로 존재하는 A의 하위 단위로서 LR'의 일부로 간주되고, Y는 스페이서 유닛이고, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로 각각 스페이서 유닛의 부재, 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고, D는 약물 유닛이고, W는 정상 조직의 균질물에 비해 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해 절단에 더 취약한 트리펩타이드를 포함하는 펩타이드 분해 가능 단위이고, 여기서, 이들 세포 내 및/또는 이들 세포 부근에서 유리 약물로서 의도하지 않은 D의 방출로 인한 정상 조직의 세포에 대한 세포 독성은 종양 조직의 암세포를 표적화하도록 의도된 리간드 약물 접합체의 투여로 인한 부작용과 연관되어 있다. 이들 실시양태 중 일부에서, LR'-는 LB'-Aa-Bb-이고, 여기서 LB'는 약물 링커 화합물의 1차 링커의 리간드 공유 결합 모이어티이고, 종종 리간드 공유 결합 전구체 모이어티라고도 하는, 이는 약물 링커 화합물이 해당 접합체의 제조에 사용되는 경우 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티의 1차 링커 (LR)의 리간드 공유 결합 모이어티 (LB)의 전구체이기 때문에 리간드 공유 결합 전구체 모이어티라고도 하고, A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고, 아래첨자 a는 0 또는 1로 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고고, B는 선택적 분기 유닛이고, 아래첨자 b는 0 또는 1로 각각 B의 부재 또는 존재를 나타낸다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, LR', A', a', Y, y 및 D는 이전 의미를 유지하고, P1, P2 및 P3는 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해보다 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 함께 제공하는 아미노산 잔기이고, 여기서, 단백질 분해 절단은 아래첨자 y가 1 또는 2인 경우 P1과 Y 사이의 공유결합에서, 아래첨자 y가 0인 경우 P1과 D 사이의 공유결합에서 일어난다.
다른 곳에서 설명한 바와 같이, 다른 실시양태는 P-1로 지정된 아래첨자 y의 값에 따라, P1과 Y 또는 D 사이에 추가적인 아미노산 잔기를 함유하고, 종양 조직 균질물의 단백질 분해 효소(들)에 의한 선택적 엔도펩티다제 작용이 P1과 P-1 사이의 아미드 결합에서 발생하여 화학식 -[P-1]-Yy-D의 약물 링커 단편을 방출한다. 이 단편에서 유리 약물의 방출은 아래첨자 y가 0인 경우 (즉, Y가 없는 경우) 단백질 분해 효소의 엑소펩티다제 작용에 의해 발생하여 P-1 아미노산 잔류물을 제거하여 유리 약물을 직접 제공한다.
P1과 Y 또는 D 사이에 추가적인 아미노산 잔기가 존재하는 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음과 같은 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, LR', A', a', Y, y 및 D는 이전 의미를 유지하고, 선택적으로 P-1과 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해보다 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 선택성을 제공하는 P1, P2 및 P3은 아미노산 잔기이고, 여기서 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 단백질 분해 절단이 발생하여 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다.
아래첨자 y가 0인 실시양태 중 일부에서, P1 및 P-1 아미노산 사이의 아미드 결합의 엔도펩티다제 절단으로 인한 [P-1]-D 잔기도 또한 세포 독성 활성을 발휘한다. 다른 실시양태에서, 아래첨자 y는 1 또는 2이므로, P-1 아미노산 잔기를 제거하는 엑소펩티다제 작용은 화학식 -Yy-D의 또 다른 약물 링커 단편을 제공하고, 이는 자발적으로 단편화되어 유리 약물을 제공한다.
다른 실시양태에서, 아래첨자 n이 최대 12 범위 (예를 들어, 3 내지 12 또는 3 내지 10)인 P4, P5... Pn으로 지정되는 하나 이상의 아미노산 잔기는 아래첨자 a'의 값에 따라 P3과 LR 또는 A' 사이에 있고, 일부 실시양태에서는 P-1 아미노산 잔기를 함유하는 펩타이드 절단 가능 유닛에 추가된다. 어떤 경우이든, 추가 P4, P5... Pn 아미노산 잔기는 -Yy-D 또는 -[P-1]-Yy-D 단편을 제공하는 절단 부위를 변경하지 않도록 선택되지만, 대신 응집 감소를 위한 용해도 개선과 같이 리간드 약물 접합체에 원하는 생리화학적 및/또는 약동학적 특성을 부여하도록 선택된다.
아미노산 잔기(들)가 P3에 N-말단에 추가적으로 존재하거나, P1과 Y 또는 D 사이에 P-1을 추가로 갖는 일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음과 같은 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, LR', A', a', Y, y 및 D는 이전 의미를 유지하고 P-1 및 P1, P2, P3... Pn은 아미노산 잔기이고, 여기서 아래첨자 n은 최대 12 범위 (예를 들어, 3 내지12 또는 3 내지 10)이고, P1, P2 및 P3은 선택적으로 P-1과 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 Yy-D 사이 또는 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 각각 Yy-D 또는 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출하고, 후자는 엑소펩티다제 분해를 거쳐 Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다. 두 경우 모두 Yy-D 링커 단편은 자발적 분해 (자가 용해라고도 함)를 거쳐 유리 약물로서 D를 완전히 방출한다.
이들 실시양태 중 어느 하나에서, 아래첨자 b가 0인 경우, 약물 링커 화합물의 LR'은 LB'-Aa-의 화학식을 갖고, 여기서 LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고 A는 제1 선택적 스트레처 유닛이다. 이러한 실시양태에서, 아래첨자 a가 1이고 아래첨자 a'가 1이면, A'는 A의 하위 단위로 존재하고, 따라서 제1 링커의 구성 요소로 간주된다.
아래첨자 b는 0이고 아래첨자 a는 1인 일부 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물의 화학식 LB'-A-의 LR'은 약물 링커 화합물이 접합체 제조에 사용될 때 리간드 약물 접합체의 자기 안정화 링커 (LSS) 모이어티로 전환되기 때문에 명명된 자기 안정화 링커 전구체 (LSS') 모이어티이다. 약물 링커 화합물의 예시적인 LSS' 1차 링커는 다음과 같은 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 물결선은 아래첨자 a'의 값에 따라 A' 또는 W에 공유 부착된 부위를 나타내고; A'는 A의 선택적 하위 단위이고; [HE]는 A가 제공하는 구성 요소인 선택적 가수분해 강화 유닛이고; BU는 염기성 유닛이고; Ra2는 임의로 치환된 C1-C12 알킬기이고; 점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내며, 상기 고리화가 없는 경우, BU는 1차, 2차 또는 3차 아민 작용기를 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 갖는 비-사이클릭 염기성 유닛이거나, 또는 상기 고리화가 존재할 때, BU는 Ra2 및 BU가 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께, 2차 또는 3차 아민 작용기의 골격 염기성 질소 원자를 함유하는 임의로 치환된 스피로 C3-C20 헤테로사이클을 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 정의하고, 여기서, 비-사이클릭 염기성 유닛 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자는 염기성 질소 원자의 치환 정도에 따라 선택적으로 질소 보호기에 의해 적합하게 보호되거나 선택적으로 양성자화된다.
아래첨자 b가 0이고 아래첨자 a가 1인 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 LB-A-의 제1 링커는 염기성 유닛을 함유하지 않으며, 이는 다음의 구조로 예시되거나:
또는 이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 가변기는 LSS 또는 LS 1차 링커에 대해 앞서 설명한 것과 같다.
약물 링커 화합물의 대표적인 LR'- 구조는 다음이고:
및 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, 물결선은 약물 링커 화합물 구조의 나머지 LU'에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 제2 또는 제3 구조의 염기성 질소 원자는 선택적으로 산 부가염으로서 양성자화되거나 선택적으로 보호된다. 보호되는 경우, 보호기는 바람직하게는 BOC와 같은 산에 불안정한 보호기이다.
2.2.3 펩타이드 절단 가능 유닛
일부 실시양태에서 리간드 약물 접합체의 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)는 D에 직접 또는 하나 또는 두 개의 자가 용해성 스페이서 유닛을 통해 간접적으로 부착된 트리펩타이드를 함유하는 펩타이드 서열이고, 상기 트리펩타이드는 적어도 하나의 세포 내 프로테아제, 바람직하게는 하나 초과의 프로테아제에 의해 인식되고, 여기서 적어도 하나의 프로테아제는 정상 세포와 비교하여 종양 세포에서 상향 조절되고, 정상 조직의 동질체에 비해 리간드 약물 접합체에 의해 표적화되는 종양 세포를 포함하는 종양 조직의 동질체에 의한 단백질 분해에 더 취약하고, 여기서 정상 조직에 대한 세포 독성은 비교 리간드 약물 접합체 투여로 인한 부작용과 연관된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드는 정상 조직에 대한 생체 분포를 저해하는 대신 종양 조직에 대한 접합체의 생체 분포를 개선하고, 이들 실시양태 중 일부에서는 정상 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 대한 선택성에 추가된다. 이들 실시양태 중 어느 하나에서, 정상 조직은 때때로 골수이고 개선되어야 하는 부작용은 호중구 감소증이다. 다른 실시양태에서, 정상 조직은 골수, 간, 신장, 식도, 유방, 또는 각막 조직이고 개선되어야 할 부작용은 호중구 감소증이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D에 직접 부착되거나 하나 또는 두 개의 자가 용해성 스페이서 유닛을 통해 D에 간접적으로 부착된다. 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 바와 같이 트리펩타이드를 포함하는 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)는 D에 직접 부착되거나 트리펩타이드의 일부가 아닌 아미노산을 통해 하나 또는 두 개의 자가 용해성 스페이서 유닛을 통해 D에 간접적으로 부착된다.
비교 대상 접합체의 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)는 일반적으로 자유롭게 순환하는 프로테아제에 비해 암세포에서 상향 조절되는 특정 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 디펩타이드이고, 여기서, 특정 프로테아제는 디펩타이드의 C-말단 아미노산과 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)의 아미노기 사이의 아미드 결합을 절단하여 약물 유닛이 유리 약물로 방출되도록 개시할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 바와 같이 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체는 비교 리간드 약물 접합체와 비교하여 향상된 내약성을 나타내고, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 자유롭게 순환하는 프로테아제에 비해 암 세포에서 상향 조절되는 특정 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 디펩타이드이고, 여기서, 특정 프로테아제는 디펩타이드의 C-말단 아미노산과 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)의 아미노기 사이의 아미드 결합을 절단하여 약물 유닛이 유리 약물로 방출되도록 개시할 수 있다. 일부 실시양태에서, 디펩타이드는 카텝신 B에 의해 선택적으로 절단되는 것으로 알려져 있다. 일부 실시양태에서, 비교 리간드-약물 접합체 중 디펩타이드는 -발린-시트룰린- 또는 -발린-알라닌-이다. 일부 실시양태에서, 비교 리간드-약물 접합체 중 디펩타이드는 -발린-시트룰린-이다. 일부 실시양태에서, 비교 리간드-약물 접합체 중 디펩타이드는 -발린-알라닌-이다. 일부 실시양태에서, 내약성은 리간드-약물 접합체 투여와 관련된 부작용이 환자가 요법의 용량 또는 강도를 준수하는 능력 또는 욕구에 영향을 미치는 정도를 지칭한다. 따라서 부작용의 발생 또는 심각성을 줄임으로써 개선된 내약성이 달성될 수 있다.
이론에 얽매이지 않고, 응집된 리간드 약물 접합체 화합물은 정상 조직 (예를 들어, 골수)에 분포할 가능성이 더 높고, 여기서, 정상 조직은 치료적 유효량의 리간드 약물 접합체를 투여할 때 포유류 대상체가 경험하는 표적 내 및/또는 표적 외 부작용(들)의 원천인 것으로 알려져 있다. 일부 실시양태에서, 개선된 내약성은 비교 리간드 약물 접합체에 비해 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체의 응집률이 감소함으로써 입증된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체와 비교 리간드 약물 접합체의 응집 속도는 접합체를 래트 혈장, 사이노몰구스 원숭이 혈장, 또는 인간 혈장에서 동일한 농도로 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84 또는 96시간 동안 배양한 후에서 배양한 후 고분자량 응집체의 농도를 측정하여 결정된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체의 개선된 내약성은 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체로부터 방출되는 유리 세포 독성 화합물에 대한 노출이 정상 조직에 비해 종양 조직에 대한 선택성이 비교 리간드 약물 접합체로부터 방출되는 세포 독성 화합물에 비해 개선됨으로써 입증된다. 일부 실시양태에서, 종양 조직 및 정상 조직은 설치류 종 (예를 들어, 래트 또는 마우스) 또는 영장류 종 (예를 들어, 사이노몰구스 원숭이 또는 인간)으로부터 유래한다. 일부 실시양태에서, 종양 조직 및 정상 조직이 인간과 다른 종에서 유래한 경우, 정상 조직은 인간에서 동일한 조직 유형이고, 여기서 해당 조직의 세포에 대한 세포 독성은 치료적 유효량의 비교 리간드 약물 접합체를 투여한 인간 대상체의 부작용에 적어도 부분적으로 책임이 있다. 일부 실시양태에서 정상 조직은 골수, 간, 신장, 식도, 유방, 또는 각막 조직이다. 일부 실시양태에서, 정상 조직은 골수이다.
일부 실시양태에서, 개선된 노출 선택성은 접합체가 동일한 용량으로 투여되었을 때 비교 리간드 약물 접합체와 비교하여 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체에서 방출되는 유리 세포 독성 화합물의 혈중 농도가 감소함으로써 입증된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드를 함유하는 리간드 약물 접합체는 비교 리간드-약물 접합체에 대해 이전에 결정된 것과 동일한 유효량 및 용량 스케줄로 투여되었을 때 종양 이종이식 모델에서 효능을 유지한다 (예를 들어, 비교 리간드 약물 접합체와 비교하여 실질적으로 동일한 종양 부피 감소를 달성함).
일부 실시양태에서, 개선된 노출 선택성은 동일한 용량으로 접합체를 투여했을 때 비교 리간드-약물 접합체와 비교하여 비표적 매개 세포 독성이 감소하거나 정상 조직에서 정상 세포가 보존되는 것으로 입증된다. 일부 실시양태에서, 정상 조직은 골수, 간, 신장, 식도, 유방, 또는 각막 조직이다. 일부 실시양태에서 정상 조직은 골수이다. 일부 실시양태에서, 정상 조직에서 비표적 매개 세포 독성 감소 또는 정상 세포의 보존은 골수 조직학 (예를 들어, 단핵 세포의 핵 염색 손실 감소)에 의해 입증된다. 일부 실시양태에서, 비표적 매개 독성 감소 또는 정상 세포의 보존은 호중구 및/또는 망상 적혈구 손실의 감소 및/또는 그러한 손실로부터의 더 빠른 반등에 의해 입증된다. 일부 실시양태에서, 비표적 매개 독성 감소 또는 정상 세포의 보존은 호중구 손실의 감소에 의해 입증된다. 일부 실시양태에서, 비표적 매개 독성 감소 또는 정상 세포의 보존은 망상 적혈구 손실의 감소로 입증된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체는 비교 리간드-약물 결합체에 대해 이전에 결정된 것과 동일한 유효량 및 용량 스케줄로 투여될 때 종양 이종이식 모델에서 효능을 유지한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드를 포함하는 리간드 약물 접합체와 비교 리간드 약물 접합체 사이의 노출 선택성을 비교할 때, 두 접합체의 리간드 유닛은 비결합 항체로 대체된다.
일부 실시양태에서, 비교 리간드 약물 접합체 (예를 들어, -val-cit-을 함유하는 디펩타이드 ADC)보다 생체 내 또는 시험관 내에서 활성이 낮지만 독성도 훨씬 적은 리간드-약물 접합체 (예를 들어, ADC)가 제공된다. 이론에 얽매이지 않고, 리간드-약물 접합체는 활성이 낮고 독성이 적을 경우에도 치료 범위가 여전히 증가할 것이기 때문에 활성일 필요는 없다.
바람직한 실시양태에서, 트리펩타이드의 C-말단 아미노산의 카르복실산과 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)의 아미노기 사이의 아미드 결합은 적어도 하나, 바람직하게는 하나 초과의 세포 내 프로테아제에 의해 절단되어 유리 약물로서 약물 유닛의 방출을 개시한다. 약물 유닛이 MMAE인 경우, 비교 대상 접합체의 약물 링커 모이어티는 mc-val-cit-PABC-MMAE 또는 mp-val-cit-PABC-MMAE의 화학식을 갖고, 이들은 다음의 구조를 갖는다:
다른 실시양태에서, 리간드 약물 접합체의 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)는 D에 직접 부착되거나 적어도 하나의 자가 용해성 스페이서 유닛을 통해 간접적으로 부착된 테트라펩타이드 잔기를 포함하는 펩타이드 서열이고, 여기서, 테트라펩타이드 서열 -P3-P2-P1-[P-1]-은 적어도 하나, 바람직하게는 하나 초과의 세포 내 프로테아제에 의해 인식되고, 여기서 적어도 하나의 세포 내 프로테아제는 정상 세포에 비해 종양 세포 내에서 상향 조절되고, 정상 조직의 균질물에 비해 리간드 약물 접합체에 의해 표적화될 종양 세포를 포함하는 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해에 보다 선택적이고, 여기서 정상 조직에 대한 세포 독성은 비교 리간드 약물 접합체 투여로 인한 부작용과 연관된다. 비교 대상 접합체의 펩타이드 절단 가능 유닛은 자유롭게 순환하는 프로테아제에 대해 특정 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 디펩타이드이다. 이들 테트라펩타이드 실시양태에서, 상기 선택성은 주로 테트라펩타이드의 N-말단 트리펩타이드 서열에 기인한다.
펩타이드 서열이 테트라펩타이드 잔기를 포함하는 바람직한 실시양태에서, C-말단 아미노산의 카르복실산과 해당 테트라펩타이드 서열의 나머지 아미노산 잔기 사이의 아미드 결합은 적어도 하나의 세포 내 프로테아제에 의해 절단 가능하여, 먼저 아미노산-함유 링커 단편을 방출하고 이어서 아미노산 구성 요소의 엑소펩티다제 제거를 거쳐 제2 링커 단편을 제공함으로써 유리 약물의 방출을 개시한다. 따라서, 테트라펩타이드 -P3-P2-P1-[P-1]-의 P1-[P-1] 결합이 절단되어 -[P-1]-Yy-D의 약물 링커 단편이 방출된다. 제2 링커 단편은 D와 W의 테트라펩타이드 사이에 개입된 스페이서 유닛(들)의 자가 용해를 거쳐 D를 유리 약물로 완전히 방출한다.
상기 실시양태 중 어느 하나에서, 표적 암 세포 내에서 상향 조절되는 것이 바람직한 적어도 하나의 프로테아제는, 카텝신 B와 같은 특정 카텝신을 포함한다. 다른 실시양태에서, P1-D, P1-Y- 또는 P1-[P-1] 결합은 표적 암 세포의 비-배설된 세포 내 프로테아제 또는 그러한 세포내 프로테아제의 수집 및 종양 세포의 조직 미세환경과 관련되거나 조직 미세환경 내에서 상향 조절되고 정상 세포의 조직 미세환경에서는 부재하거나 감소된 수준으로 존재하는 하나 이상의 세포외 프로테아제에 의해 절단될 수 있고, 여기서, 이들 정상 세포에 대한 세포 독성은 일반적으로 펩타이드 절단 가능 유닛이 자유롭게 순환하는 프로테아제에 대해 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 디펩타이드인 비교 대상 접합체의 유효량 투여로 인한 부작용과 연관된다. 다른 실시양태에서, P1-D, P1-Y- 또는 P1-[P-1] 결합은 표적 암 세포의 비-분비된 세포 내 프로테아제 또는 그러한 세포 내 프로테아제의 수집에 의해 절단 가능하며, 펩타이드 절단 가능 유닛이 전술한 디펩티드인 비교 대상 접합체에 비해 정상 조직과 관련된 세포 외 프로테아제(들)에 의한 단백질 분해에 덜 민감하다. 이들 실시양태 중 일부에서, 정상 조직 내에서 분비되는 프로테아제는 Neu 엘라스타제, 카텝신 G 및 프로테이아제 3로 이루어진 군에서 선택되는 것과 같은 호중구 프로테아제이다.
다른 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 리간드 약물 접합체 내의 트리펩타이드는 정상 조직의 균질물과 비교하여, 리간드 약물 접합체에 의해 표적화되는 종양 세포를 포함하는 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 글로벌 선택성을 부여하고, 여기서 정상 조직에 대한 세포 독성은 비교 리간드 약물 접합체의 투여로 인한 부작용과 연관된다. 비교 대상 접합체의 약물 링커 모이어티의 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)는 자유롭게 순환하는 프로테아제에 비해 종양 조직의 암 세포에서 상향 조절된 특정 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 전술한 디펩타이드이다. 다른 바람직한 트리펩타이드는 종양 조직으로의 접합체의 생체 분포를 증가시켜 정상 조직으로의 생체 분포를 저해하고, 여기서 정상 조직에 대한 세포 독성은 비교 리간드 약물 접합체 투여로 인한 부작용과 연관되고, 여기서 W는 자유롭게 순환하는 프로테아제에 비해 특정 세포 내 프로테아제에 대한 선택성을 부여하는 디펩타이드이다. 약물 유닛이 MMAE인 경우 비교 대상 접합체의 약물 링커 모이어티는 mc-val-cit-PABC-MMAE 또는 mp-val-cit-PABC-MMAE의 화학식을 갖는다.
특정 3-잔기 아미노산 서열을 함유하는 링커를 갖는 리간드 약물 접합체는 예컨대, 하나 이상의 정상 조직에서의 독성 감소 (이는 차등 단백질 분해에 기인할 수 있음) 및 개선된 생물물리학적 특성 (예를 들어, 응집 감소, 제거 전 체류 시간 연장)과 같은 유리한 특성을 갖는 것으로 결정되었다. 이들 유리한 특성은 3-아미노산 서열을 포함하는 링커를 갖는 리간드 약물 접합체에서 얻을 수 있으며, 3-잔기 서열의 N-말단 아미노산은 D-아미노산이고, 3-잔기 서열의 중심 및 C-말단 잔기는, 어느 순서로든 음으로 하전된 아미노산 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서) 및 극성이거나 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖는 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-아미노산 배열의 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-Leu 또는 D-Ala를 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-Leu를 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-Ala를 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가진 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가진 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 극성 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 세린을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 음으로 하전된 아미노산 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서)을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열에 있다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Leu이다. 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-Ala이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P2 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고 있다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 알라닌이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P2 아미노산은 극성 아미노산이다. 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 세린이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P2 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P1 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있다. 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있다. 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 알라닌이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P1 아미노산은 극성 아미노산이다. 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 세린이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P1 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있고 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P2 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있고 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P1 아미노산은 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있고 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P2 아미노산은 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지며 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P2 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지며 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P1 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P1 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지며 (예를 들어, 발린보다 크지 않음), P2 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 및 -D-Ala-Ala-Glu-로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌, 시트룰린, 프롤린, 이소류신, 류신 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-아미노산 배열의 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-Leu를 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-Ala를 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-아미노산 배열의 아미노산을 함유한다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-류신 및 D-알라닌으로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산을 함유한다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-류신을 함유한다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드는 D-알라닌을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 적어도 하나의 하전된 (예를 들어, 음으로 하전된 혈장 생리학적 pH에서) 치환체 또는 영구 전기 쌍극자 모멘트를 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 및 소수성이 류신보다 크지 않는 하나 또는 두 개의 추가 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 적어도 하나의 하전된 (예를 들어, 음으로 하전된 혈장 생리학적 pH에서) 치환체 또는 영구 전기 쌍극자 모멘트를 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 및 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖는 하나 또는 두 개의 추가 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는영구 전기 쌍극자 모멘트를 가진 적어도 하나의 하전되지 않은 치환기를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 및 류신보다 크지 않은 소수성을 갖는 하나 또는 두 개의 추가 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 영구 전기 쌍극자 모멘트를 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산및 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖는 하나 또는 두 개의 추가 아미노산을 갖는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드의 측쇄는 모두 중성 전하를 띠고 있다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 어떤 이온화 가능 측쇄도 함유하지 않는다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌 또는 발린과 같이 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가진 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌과 같이 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 또는 γ-카르복시-글루탐산과 같은 극성 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 글루탐산, 아스파르트산, 또는 γ-카르복시-글루탐산과 같이, 음으로 하전된 아미노산 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서)을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 적어도 하나의 하전된 치환체 또는 바람직하게는 -C(O)NH2보다 큰 영구 전기 쌍극자 모멘트를 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 적어도 하나의 하전된 치환체 또는 바람직하게는 -NH-C(O)NH2보다 큰 영구 전기 쌍극자 모멘트를 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌, α-아미노부티르산, α-아미노이소부티르산, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 류신, 노르발린 프롤린, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 나프틸알라닌, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프로파르길글리신, 2-아미노부트-3-이노산, 프롤린, 셀레노메티오닌, 세린, 트레오닌, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산을 함유한다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드는 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 류신, 프롤린, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 나프틸알라닌, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 셀레노메티오닌, 세린, 트레오닌, 및 발린로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산을 함유한다. 본원의 임의의 실시양태에서 아미노산은 천연 또는 비천연 아미노산일 수 있음을 이해한다. 예를 들어, 알라닌은 D-알라닌 또는 L-알라닌일 수 있고 류신은 D-류신 또는 L-류신일 수 있다.
일부 실시양태에서, P3은 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 감마-카르복시글루타메이트, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 호모세린, 하이드록시라이신, 하이드록시프롤린, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌, 오르니틴, 페닐알라닌, 프롤린, 사르코신, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린, p-플루오로페닐알라닌, p-플루오로페닐알라닌, 및 o-플루오로페닐알라닌으로 이루어진 군에서 선택되고; P2는 아미노부티르산 (Abu), 2-아미노이소부티르산 (Aib), 노르발린 (Nva), 아미노히푸르산 (Pra), 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 호모세린, 하이드록시라이신, 하이드록시프롤린, 이소류신, 류신, 메티오닌, 오르니틴, 페닐알라닌, 프롤린, 사르코신, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되고; P1은 글루탐산, 메티오닌 설폭사이드, 아스파르트산, 프롤린, 글리신, 세린, 발린, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘, 글루타민, 이소류신, 메티오닌, 및 감마-카르복시글루타메이트로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, P3은 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 감마-카르복시글루타메이트, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 호모세린, 하이드록시라이신, 하이드록시프롤린, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌, 오르니틴, 페닐알라닌, 프롤린, 사르코신, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린, p-플루오로페닐알라닌, p-플루오로페닐알라닌, 및 o-플루오로페닐알라닌으로 이루어진 군에서 선택되고; P2는 아미노부티르산 (Abu), 2-아미노이소부티르산 (Aib), 노르발린 (Nva), 아미노히푸르산 (Pra), 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 호모세린, 하이드록시라이신, 하이드록시프롤린, 이소류신, 류신, 메티오닌, 오르니틴, 페닐알라닌, 프롤린, 사르코신, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되고; P1은 알라닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 글루탐산, 메티오닌 설폭사이드, 아스파르트산, 프롤린, 글리신, 세린, 발린, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘, 글루타민, 이소류신, 메티오닌, 및 감마-카르복시글루타메이트로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서 P3은 D-아미노산이다. 일부 실시양태에서, P3은 D-알라닌, D-아르기닌, D-아스파라긴, D-아스파르트산, D-시스테인, D-감마-카르복시글루타메이트, D-글루타민, D-글리신, D-히스티딘, D-호모세린, D-하이드록시라이신, D-하이드록시프롤린, D-이소류신, D-류신, D-라이신, D-메티오닌, D-오르니틴, D-페닐알라닌, D-프롤린, D-사르코신, D-세린, D-트레오닌, D-트립토판, D-티로신, D-발린, D-p-플루오로페닐알라닌, D-p-플루오로페닐알라닌, 및 D-o-플루오로페닐알라닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, P3은 L-알라닌, L-아르기닌, L-아스파라긴, L-아스파르트산, L-시스테인, L-감마-카르복시글루타메이트, L-글루타민, L-글리신, L-히스티딘, L-호모세린, L-하이드록시라이신, L-하이드록시프롤린, L-이소류신, L-류신, L-라이신, L-메티오닌, L-오르니틴, L-페닐알라닌, L-프롤린, L-사르코신, L-세린, L-트레오닌, L-트립토판, L-티로신, L-발린, L-p-플루오로페닐알라닌, L-p-플루오로페닐알라닌, 및 L-o-플루오로페닐알라닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, P3은 L-페닐알라닌 또는 D-페닐알라닌이다.
선택된 아미노산의 구조는 아래에서 확인할 수 있다:
보다 바람직한 트리펩타이드에서, P3 아미노산은 바람직하게는 D-아미노산 배열의 알라닌, 시트룰린, 프롤린, 이소류신, 류신 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되고, D-Leu가 특히 바람직하다. 다른 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-알라닌, D-류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신이다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-알라닌이다.
다른 바람직한 트리펩타이드에서, P2 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은, 보다 바람직하게는 소수성이 더 낮은 지방족 측쇄를 갖고 P3 측쇄의 소수성이 더 큰 천연 또는 비천연 아미노산이다. 다른 실시양태에서, P2 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖는 천연 또는 비천연 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드에서 P2 아미노산는 알라닌, 발린, 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이다. 일부 실시양태에서, P2는 Asn, Asp, Gln, Glu, Gly, 및 Ser로 이루어진 군에서 선택된다. 이들 바람직한 트리펩타이드 중 일부에서, P2는 Abu, Aib, Ala, Gly, Leu, Nva, Pra, Egl 및 Val로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 비천연 아미노산은 다음과 같은 구조를 갖는다:
P2 아미노산 잔기로서 Abu, Ala, Leu, Nva 및 Pra의 경우, 측쇄는 L-배열이 바람직하다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 극성 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 세린이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다.
또 다른 보다 바람직한 트리펩타이드에서, 상기 P1 아미노산은 적어도 하나의 하전된 치환체 또는 영구 전기 쌍극자 모멘트, 바람직하게는 -C(O)NH2보다 큰 것을 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 천연 또는 비천연 아미노산이다. 다른 실시양태에서, 상기 P1 아미노산은 적어도 하나의 하전된 치환체 또는 영구 전기 쌍극자 모멘트, 바람직하게는 -NH-C(O)NH2보다 큰 것을 갖는 적어도 하나의 하전되지 않은 치환체를 갖는 측쇄를 갖는 천연 또는 비천연 아미노산이다. 이들 바람직한 트리펩타이드 중 일부에서, P1는 Glu, Asp, γ-카르복시-글루탐산, 라이신, Met(O)로 종종 나타내는 메티오닌 설폭사이드, 및 측쇄가 바람직하게는 L-입체화학 배열인 포스포-트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 보다 바람직하게는 Glu, Asp, γ-카르복시-글루탐산 및 Met(O)이고 특히 바람직하게는 Glu이다. 이들 바람직한 트리펩타이드의 일부에서, P1은 Glu, Asp, γ-카르복시-글루탐산, 라이신, 프롤린, Met(O)로 종종 나타내는 메티오닌 설폭사이드, 및 측쇄가 바람직하게는 L-입체화학 배열인 포스포-트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 보다 바람직하게는 Glu, Asp, γ-카르복시-글루탐산 및 Met(O)이고, 특히 바람직하게는 Glu이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 글루탐산이다. 일부 실시양태에서, P1 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은, 보다 바람직하게는 소수성이 더 낮은 지방족 측쇄를 갖고 P3 측쇄의 소수성이 더 큰 천연 또는 비천연 아미노산이다. 다른 실시양태에서, P1 아미노산은 발린보다 소수성이 크지 않은 지방족 측쇄를 가진 천연 또는 비천연 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 발린, 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 극성 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다. 일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 세린이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, 류신, 글루탐산, 라이신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 및 트레오닌으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌, 발린, 류신, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시트룰린, 메티오닌 설폭사이드, 및 γ-카르복시-글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌이다.
다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, γ-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 라이신, 메티오닌 설폭사이드, 및 셀레노메티오닌으로 이루어진 군에서 선택된다. 다른 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 D-류신 또는 D-알라닌이고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 알라닌이고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 아스파르트산 및 글루탐산로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, D-알라닌, D-류신, 글루탐산, L-류신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 트레오닌, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 α-아미노이소부티르산, 알라닌, D-류신, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 류신, 프롤린, 세린, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, 감마-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 및 라이신으로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 트리펩타이드 중 P3 아미노산은 알라닌, D-알라닌, D-류신, 글루탐산, L-류신, O-알릴 티로신, 페닐알라닌, 프롤린, 트레오닌, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P2 아미노산은 α-아미노이소부티르산, 알라닌, D-류신, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 류신, 프롤린, 세린, 및 발린으로 이루어진 군에서 선택되고, 트리펩타이드 중 P1 아미노산은 알라닌, 아스파르트산, 시트룰린, 감마-카르복시-글루탐산, 글루탐산, 글루타민, 류신, 및 라이신으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니다. 본원에 제공된 변형 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아니다.
트리펩타이드의 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 크지 않은 (예를 들어, 발린보다 크지 않은) 지방족 측쇄를 갖고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P2 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 (예를 들어, 발린보다 크지 않은) 지방족 측쇄를 갖고, P1 아미노산은 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고, P1 아미노산은 소수성이 류신보다 크지 않은 (예를 들어, 발린보다 크지 않은) 지방족 측쇄를 갖고, P2 아미노산은 극성 아미노산이거나 음으로 하전된다 (예를 들어, 혈장 생리학적 pH에서). 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 및 -D-Ala-Ala-Glu-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -D-Leu-Asp-Ala-, -D-Leu-Glu-Ala-, -D-Ala-Asp-Ala-, 및 -D-Ala-Glu-Ala-로 이루어진 군에서 선택된다.
다른 특히 바람직한 실시양태에서 -P2-P1-는 두 아미노산 모두의 측쇄가 L-입체 화학 배열인, -Ala-Glu-, -Leu-Glu-, -Ala-Met(O)- 및 -Leu-Met(O)- 로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Ala-Ala-, -Ala-Asp-, -Ala-Cit-, -Ala-(γ-카르복시(carboxsy)-글루탐산)-, -Ala-Glu-, -Ala-Gln-, -Ala-Leu-, -Ala-Lys-, -Ala-Met(O)-, -Ala-셀레노메티오닌-, -D-Leu-Glu-, -Leu-Glu-, -Glu-Ala-, -Glu-Cit-, -Glu-Leu-, -Gly-Glu-, -Leu-Cit-, -Leu-Glu-, -Leu-Lys-, -Leu-Met(O)-, -(나프틸알라닌)-Lys-, -Pro-Cit-, -Ser-Asp-, -Ser-Glu-, -Val-Cit-, 및 -Val-Gln-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Ala-Glu-이다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Ala-Asp-이다. 일부 실시양태에서, -P2-P1-는 -Asn-Asn-, -Asn-Glu-, -Asp-Pro-, -Asp-Ser-, -Gln-Asp-, -Gln-Glu-, -Glu-Pro-, -Gly-Asp-, -Gly-Pro-, -Nal-Lys-, -Ser-Ala-, -Ser-Pro-, 및 -Ser-Ser-로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -Ala-Ser-, -Ala-Ala-, -Leu-Ala-, -Leu-Glu-, -Leu-Gly-, -Leu-Leu-, Leu-Ser-, -Leu-Val-, -Glu-Ala-, -Glu-Leu-, -Glu-Pro-, -Glu-Val-, -Lys-Leu-, -(O-알릴 티로신)-Leu-, -(O-알릴 티로신)-Pro-, -Phe-Ser-, -Pro-Leu-, -Pro-(나프틸알라닌)-, 및 -Thr-Glu-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -Ala-Ser-, -D-Ala-Ala-, -D-Leu-Ala-, -D-Leu-Glu-, -D-Leu-Gly-, -D-Leu-Leu-, D-Leu-Ser-, -D-Leu-Val-, -Glu-Ala-, -Glu-Leu-, -Glu-Pro-, -Glu-Val-, L-Leu-Ala-, -Lys-Leu-, -(O-알릴 티로신)-D-Leu-, -(O-알릴 티로신)-Pro-, -Phe-Ser-, -Pro-Leu-, -Pro-(나프틸알라닌)-, 및 -Thr-Glu-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -D-Leu-Ala- 또는 -L-Leu-Ala-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -D-Leu-Ala-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -D-Ala-Ala-이다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-는 -Ala-Asp-, -Ala-Gln-, -D-Ala-Gln-, -Ala-Glu-, -D-Ala-Ser-, -Asp-Gly-, -Gln-Ser-, -Glu-Ser-, -D-Glu-Ser-, -Phe-Gln-, -Pro-Asp-, -Pro-Gln-, -Pro-Gly-, -Pro-Ser-, -Ser-Asn-, -Ser-Ser-, -D-Ser-Ser-, 및 -Val-Asn-로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -Ala-Ser-Asp-, -Ala-Ser-Glu-, -Ala-Ala-Cit-, -Ala-Ala-Glu-, -Leu-Ala-Ala-, -Leu-Ala-Asp-, -Leu-Ala-Cit-, -Leu-Ala-(γ-카르복시-글루탐산)-, -Leu-Ala-Glu-, -Leu-Ala-Gln-, -Leu-Ala-Leu-, -Leu-Ala-Lys-, -Leu-Ala-Met(O)-, -Leu-Ala-(셀레노메티오닌)-, -Leu-Glu-Ala-, -Leu-Glu-Cit-, -Leu-Gly-Glu-, -Leu-Leu-Cit-, -Leu-Leu-Glu-, -Leu-Leu-Lys-, -Leu-Leu-Met(O)-, Leu-Ser-Glu-, -Leu-Val-Gln-, -Glu-Ala-Leu-, -Glu-Leu-Cit-, -Glu-Pro-Cit-, -Lys-Leu-Cit-, -(O-알릴 티로신)-Leu-Glu-, -(O-알릴 티로신)-Pro-Cit-, -Phe-Ser-Glu-, -Pro-Leu-Glu-, -Pro-(나프틸알라닌)-Lys-, 및 -Thr-Glu-Leu-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -Ala-Ser-Asp-, -Ala-Ser-Glu-, -D-Ala-Ala-Cit-, -D-Ala-Ala-Glu-, -D-Leu-Ala-Ala-, -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Cit-, -D-Leu-Ala-(γ-카르복시-글루탐산)-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Leu-Ala-Gln-, -D-Leu-Ala-Leu-, -D-Leu-Ala-Lys-, -D-Leu-Ala-Met(O)-, -D-Leu-Ala-(셀레노메티오닌)-, -D-Leu-Glu-Ala-, -D-Leu-Glu-Cit-, -D-Leu-Gly-Glu-, -D-Leu-Leu-Cit-, -D-Leu-Leu-Glu-, -D-Leu-Leu-Lys-, -D-Leu-Leu-Met(O)-, -D-Leu-Ser-Glu-, -D-Leu-Val-Gln-, -Glu-Ala-Leu-, -Glu-Leu-Cit-, -Glu-Pro-Cit-, -L-Leu-Ala-Glu-, -Lys-Leu-Cit-, -(O-알릴 티로신)-D-Leu-Glu-, -(O-알릴 티로신)-Pro-Cit-, -Phe-Ser-Glu-, -Pro-Leu-Glu-, -Pro-(나프틸알라닌)-Lys-, 및 -Thr-Glu-Leu-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 Ala-Cit-Cit-, -Cit-Cit-Cit-, -Cit-Glu-Cit-, -Cit-Glu-Glu-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Leu-Ala-Lys-, -D-Leu-Cit-Glu-, -D-Leu-Glu-Lys-, -D-Leu-Leu-Cit-, -D-Leu-Leu-Glu-, -D-Leu-Leu-Lys-, -D-Leu-Leu-Met(O)-, -D-Leu-Phe-Glu-, -Glu-Ala-Glu-, -Glu-Ala-Met(O)-, -Glu-Glu-Cit-, -Leu-(나프틸알라닌)-Lys-, -Lys-Glu-Met(O)-, -Pro-Ala-Cit-, -Pro-Ala-Glu-, -Pro-Cit-Cit-, -Pro-Cit-Glu-, -Pro-Glu-Ala-, -Pro-Glu-Cit-, -Pro-Glu-Glu-, -Pro-Glu-Lys-, -Pro-Lys-Glu-, -Pro-(나프틸알라닌)-Lys-, -Thr-Cit-Cit-, -Pro-Ser-Asp-, -Phe-Ser-Asp-, -Ala-Asp-Pro-, -Ala-Ser-Pro-, -D-Ala-Ser-Asp-, -Pro-Gly-Glu-, -Pro-Asp-Ser-, -D-Ala-Asp-Ser-, 및 -D-Ser-Ser-Asp-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, -P3-P2-P1-는 -Ala-Glu-Pro-, D-Ala-Ser-Glu-, -Asp-Gly-Pro-, -Phe-Gln-Glu-, -Val-Asn-Glu-, -D-Ala-Gln-Glu-, D-Glu-Ser-Glu-, -Ser-Ser-Pro-, -Pro-Ser-Ser-, -Ser-Ser-Glu-, -Pro-Gly-Asp-, -Pro-Gln-Asp-, -Pro-Gln-Glu-, -D-Ser-Ser-Glu-, -Gln-Ser-Ala-, -Glu-Ser-Ala-, 및 -Ser-Asn-Asn-로 이루어진 군에서 선택된다.
리간드 약물 접합체의 펩타이드 절단가능 단위 (W)는 3개 초과의 아미노산을 함유할 수 있는 펩타이드 서열인 것으로 이해된다. 4개 이상의 아미노산을 함유하는 펩타이드 서열에서, 본원에 기재된 트리펩타이드는 서열 내의 임의의 3개의 연속적인 아미노산이다 (즉, 트리펩타이드는 서열의 인접한 세 위치를 차지할 수 있음). 따라서, 본원에 기술된 P1, P2 및 P3에 대한 실시양태는 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)의 세 개의 인접한 아미노산에 대응하는 임의의 위치의 아미노산에 적용될 수 있다. 예를 들어, 세포 내 프로테아제에 의해 인식되는 트리펩타이드가 -P6-P5-P4- 위치에 위치하는 경우, 본원에 기재된 P3에 대한 실시양태는 P6에 적용되고, 본원에 기재된 P2에 대한 실시양태는 P5에 적용되고, 본원에 기재된 P1에 대한 실시양태는 P4에 적용된다. 다른 예에서, 세포 내 프로테아제에 의해 인식되는 트리펩타이드가 -P4-P3-P2- 위치에 위치하는 경우, 본원에 기술된 P3에 대한 실시양태는 P4에 적용되고, 본원에 기술된 P2에 대한 실시양태는 P3에 적용되고, 본원에 기술된 P1에 대한 실시양태는 P2에 적용된다. 트리펩타이드가 -P3-P2-P1- 이외의 위치에 위치하는 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)의 경우, 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)의 P1 아미노산은 예를 들어, 엔도펩티다제 작용에 의해 절단될 수 있는 아미노산이라는 것이 더 이해된다. 일부 실시양태에서 P1 아미노산은 D-배열이 아니다. 일부 실시양태에서, C-말단 아미노산은 γ-카르복시-글루탐산이다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 절단 가능 유닛이 4개 이상의 아미노산을 함유하는 경우, 트리펩타이드에 외재적인 아미노산(들)은 펩타이드 서열의 전반적인 소수성을 증가시키지 않는다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 절단 가능 유닛이 트리펩타이드 외에 아미노산(들)을 함유하는 경우, 추가 아미노산(들)은 소수성 잔기 (예를 들어, 류신보다 더 소수성인 잔기 또는 발린보다 더 소수성인 잔기)를 함유하지 않는다.
서로 다른 화합물의 상대적 소수성을 포함하여 주어진 화합물의 소수성은 당업자에게 알려진 방법에 의해 실험적으로 또는 계산적으로 평가될 수 있다. 소수성은, 예를 들어, 실험적으로 결정되고 logP로 표현될 수 있거나, 계산적으로 결정되고 clogP로 표현될 수 있는 분할 계수 P의 결정에 의해 평가될 수 있다. clogP의 값은 ChemDraw 또는 DataWarrior와 같은 다양한 유형의 상용 소프트웨어를 사용하여 계산할 수 있다. 이러한 방법은 아미노산의 소수성을 평가하거나 서로 다른 아미노산의 상대적 소수성을 평가하는 데 사용될 수 있다. 이러한 방법은 또한 본원에 기술된 바와 같은 약물-링커 화합물의 소수성을 평가하거나 다른 약물-링커 화합물의 상대적 소수성을 평가하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 비교 리간드 약물 접합체 (예를 들어, -val-cit-을 함유하는 디펩타이드 ADC)보다 생체 내 또는 시험관 내에서 활성도가 낮지만 독성도 훨씬 적은 리간드-약물 접합체 (예를 들어, ADC)가 제공된다. 이론에 얽매이지 않고, 리간드-약물 접합체는 활성이 낮고 독성이 적을 경우에도 치료 범위가 여전히 증가할 것이기 때문에 활성일 필요는 없다. 이러한 효과를 나타내는 예시적인 화합물로는 위치 P2에 AIB를 갖는 본원에 기재된 화합물 38 및 39를 포함할 수 있다.
여전히 다른 특히 바람직한 실시양태에서, 트리펩타이드는 다음과 같은 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, 전술한 약물 링커 화합물 및 그로부터 유도된 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티에서 P3로 표시된 트리펩타이드 N-말단 아미노산의 질소 원자에서의 물결선은 W가, 선택성을 부여하는 트리펩타이드가 테트라펩타이드의 C-말단 구성 요소인 테트라펩타이드를 포함하는 경우 P4 아미노산 잔기에 대한, 또는 W가 트리펩타이드로 구성되고 아래첨자 a'가 각각 1 또는 0인 경우 A' 또는 LR/LR'에 대한 아미드 결합으로서 공유 부착 부위를 나타내고, 및 전술한 약물 링커 화합물 및 그로부터 유도된 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티에서 P1로 표시된, 트리펩타이드의 C-말단 아미노산 잔기의 물결은 W가 선택성을 부여하는 트리펩타이드가 테트라펩타이드의 N-말단 성분인 테트라펩타이드를 포함하는 경우 P-1 잔기에 대한, 또는 W가 트리펩타이드로 구성된 경우 -Yy-D에 대한 공유 부착 부위이고; 여기서 R 입체 화학 배열의 R36은 -CH(CH3)2이고, R35는 -CH(CH3)2, 또는 -CH3이고, R34는 -CH2SH, -CH2CH2CH2CH2NH2, -CH(OH)CH3 또는 -CH2CH2CO2H이다.
보다 특히 바람직한 약물 링커 모이어티 및 약물 링커 화합물에서, R36은 R 입체 화학 배열의 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH2CH2CH3이고, R34는 -CH2CH2CO2H이다. 특히 바람직한 실시양태에서, R36은 R 입체 화학 배열의 -CH(CH3)2이고; R35는 -CH3이고 R34는 -CH2CH2CO2H이고, 둘 다 나타낸 바와 같이 S 입체 화학 배열이다.
일부 실시양태에서, 정상 조직 균질물은 골수로부터 유래하고 상기 종양 조직 균질물은 동일한 종의 이종이식 모델의 종양으로부터 유래하며, 여기서 정상 조직 균질물에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성이 val-cit 디펩티드 절단 가능 유닛을 갖는 비교 대상 접합체와 비교하여 더 크다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 절단 가능 유닛이 선택성을 부여하는 트리펩타이드를 포함하는 항체 약물 접합체에 의해 정상 조직에 비해 종양 조직에 대한 더 높은 선택성은 펩타이드 절단 가능 유닛이 val-cit인 항체 약물 접합체를 투여함으로써 얻어진 종양 성장 프로파일의 실질적인 유지에 의해 이종 이식 모델에서 나타나고, 상응하는 트리펩타이드 기반 비결합 대조군 접합체를 투여함으로써, 상응하는 디펩타이드 기반 비결합 대조군과 비교하여 정상 골수에 대한 비표적 매개 세포 독성이 감소됨을 나타내고, 여기서 정상 세포에 대한 이러한 세포 독성은 디펩타이드 기반 ADC를 최대 내약 용량으로 투여하는 것과 관련된 부작용의 원인이 된다. 일부 실시양태에서 정상 조직은 골수, 간, 신장, 식도, 유방 또는 각막이다.
이들 실시양태 중 일부에서, 감소된 비표적 매개 세포 독성은 이종 이식 모델에 사용된 것과 동일하거나 다른 설치류 종의 정상 조직 (예를 들어, 골수, 간, 신장, 식도, 유방, 또는 각막 조직)의 조직학에서 정상 조직에서 표적화 트리펩타이드-기반 항체 약물 접합체에 상응하는 비결합 대조군 접합체 투여 시 디펩타이드 기반 비결합 대조군 투여에 비해 단핵 세포의 핵 염색 손실의 감소로 관찰되어, 트리펩타이드 기반 ADC에 대한 개선된 치료 범위를 제공한다. 일부 실시양태에서, 정상 조직은 골수이다. 바람직한 실시양태에서, 마우스는 이종 이식 연구에 사용되고 골수는 래트로부터 유래하는데, 이는 래트가 마우스보다 MMAE 독성에 더 민감하기 때문이다. 다른 실시양태에서, 내약성의 개선은 호중구 및/또는 망상 적혈구 손실의 감소 및/또는 그러한 손실로부터의 보다 빠른 반등에 의해 나타난다.
2.2.4 스트레처 유닛
상기 및 다음 실시양태에서, 리간드 약물 접합체의 약물 링커 모이어티 내의 1차 링커는 -M2-A(BU)-[HE]-AO-B-, -M2-A(BU)-[HE]-A'a'-, -M2-A-[HE]-AO-B-, -M2-A-[HE]-A'a', -M3-A(BU)-[HE]-AO-B- 또는 -M3-A(BU)-[HE]-A'a'-의 일반 화학식으로 예시될 수 있고, 리간드 약물 접합체의 제조에 사용될 수 있는 약물 링커 화합물의 1차 링커는 M1-A(BU)-[HE]-AO-B-, M1-A(BU)-[HE]-A'a'-, M1-A-[HE]-AO-B-, 또는 M1-A-[HE]-A'a'-의 일반 화학식으로 예시될 수 있고, 여기서 BU는 비-사이클릭 또는 사이클릭 염기성 유닛이고; 존재하는 경우 [HE]는 -바람직하게는 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)에 의해 제공되는 -C(=O)-이고; M2은 석신이미드 모이어티이고; M3은 석신산 아미드 모이어티이고 M1은 말레이미드 모이어티이고, 여기서 A는 단일 신중한(discreet) 단위, 또는A2로 표시되기도 하는 A의 제2 하위 단위로 AO가 존재할 때 A1로 표시되기도 하는 A의 제1 하위 단위를 나타내며, 여기서 A/A2는 분기 유닛 (B)가 없는 이들 1차 링커에서 A'에 공유 부착되고, 아래첨자 a'가 1이 되어 A'가 A의 하위 단위가 되거나, 또는 아래첨자 a'가 0인 경우 W에 공유 부착되거나, 또는 분기 유닛이 함유된 1차 링커에서 B에 공유 부착된다.
이들 실시양태 중 어느 하나에 AO 또는 A'가 존재하는 경우, 제1 스트레처 유닛 (A)의 해당 하위 단위는 A2 로 표시되어 A의 하위 단위임을 나타내고, 여기서, 바람직하게는 AO/A'는 임의로 치환된 아민 함유 산 (예를 들어, 아미노산) 잔기에 독립적으로 구조적으로 대응하고, 여기서, 아민 함유 산의 카르복실산 말단의 잔기는 해당 구성 요소가 존재하는 이들 1차 링커에서 B에, 또는 A2로 존재하는 경우 A'에, 또는 B 및 A'가 존재하지 않는 1차 링커에서 W에 공유 부착되고, 여기서 상기 공유 부착은 아미드 작용기를 통해 이루어지고 아민 말단의 잔기는 A의 나머지 부분에 공유 부착된다. B가 존재하고 AO가 없는 경우, A는 B에 결합된 단일 신중한(discreet) 단위이고, B가 없고 A가 단일 신중한(discreet) 단위인 경우 A는 A가 제공하는 [HE]를 통해 W에 결합되며, 여기서 [HE]는 -C(=O)-이다.
이들 실시양태 중 일부에서, AO/A'는 -LP(PEG)-의 화학식을 가지거나 포함하며, 여기서 LP는 병렬 커넥터 단위이고 PEG는 PEG 단위이다. 이들 실시양태에서, PEG 단위는 총 2 내지 36개의 에틸렌옥시 단량체 단위를 함유하고, LP는 아민 함유 산 잔기, 바람직하게는 아미노산 잔기는 아미드 작용기를 통해 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티의 LU 또는 약물 링커 화합물의 LU' 내에 공유 부착된다. 바람직한 실시양태에서, PEG 단위는 총 4 내지 24개의 연속적인 에틸렌옥시 단량체 단위를 함유한다.
이들 실시양태 중 다른 것에서, AO/A'는 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 아민 함유 산 잔기이고:
여기서, 질소 원자에 인접한 물결선은 A의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 카르보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 B가 존재하는 경우 B에 대한 공유 부착 부위, B가 존재하지 않는 경우 A'/W에 대한 공유 부착 부위를 나타내고; 아래첨자 e 및 f는 독립적으로 0 또는 1이고;
G는 수소, -OH, -ORPR, -CO2H, -CO2RPR 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고, 여기서 선택적 치환체는, 존재하는 경우, -OH, -ORPR, -CO2H, 및 -CO2RPR로 이루어진 군에서 선택되고; 여기서 RPR은 적절한 보호기이거나, 또는
G는 N(RPR)(RPR) 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고, 여기서 선택적 치환체는, 존재하는 경우, N(RPR)(RPR)이고, 여기서 RPR은 독립적으로 보호기이거나 또는 RPR은 함께 적절한 보호기를 형성하거나, 또는
G는 -N(R45)(R46), 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고, 여기서 선택적 치환체는, 존재하는 경우, -N(R45)(R46)이고, 여기서 R45 및 R46 중 하나는 수소 또는 RPR이고, 여기서 RPR은 적절한 보호기이고, 다른 하나는 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R38은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R39 내지 R44는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C6-C20 아릴, 및 임의로 치환된 C5-C20 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되거나, 또는
R39, R40는 둘 다가 부착된 탄소 원자와 함께 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R41 내지 R44는 본원에 정의된 바와 같고,
또는 R43, R44는 둘 다가 부착된 탄소 원자와 함께 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R39 내지 R42는 본원에 정의된 바와 같고,
또는 R40 및 R41, 또는 R40 및 R43, 또는 R41 및 R43은 둘 다가 부착된 탄소 원자 또는 헤테로원자 및 이들 탄소 원자 및/또는 헤테로원자들 사이에 개재된 원자와 함께 C5-C6 카르보사이클로 또는 C5-C6 헤테로사이클로를 정의하고, R39, R44, 및 나머지 R40 내지 R43은 본원에 정의된 바와 같고,
또는 AO/A'는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기이고, 여기서 α-아미노산 잔기의 질소 원자는 A의 나머지 부분에 공유 부착되고, 카르복실산 잔기의 카르보닐 탄소 원자는 B가 존재하는 경우 B에 공유 부착되고, B가 부재하는 경우 W에 공유 부착되며, 여기서 두 부착은 모두 바람직하게는 아미드 작용기를 통해 이루어진다.
2.2.5 스페이서 유닛
스페이서 유닛은 아래 구조로 표시되는 약물 링커 화합물의 2차 링커(LO)의 구성 요소 또는 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티에서 링커 유닛이고:
아래첨자 y가 1 또는 2로 하나 또는 두 개의 스페이서 유닛이 존재함을 나타내어 Yy가 Y 또는 -Y-Y'-가 되고, 여기서 아래첨자 a가 0 또는 1인 경우, A'는 선택적 제1 스트레처 유닛으로 아래첨자 a'가 1이고 LR/LR'에 분기 유닛 (B)가 없는 경우 존재하는 제1 선택적 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위로서 1차 링커 (LR/LR')의 구성요소가 되고; W는 화학식 -[Pn]...[P3]-[P2]-[P1]- 또는 [Pn]...[P3]-[P2]-[P1]-[P-1]-의 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서 아래첨자 n은 0 내지 12 (예를 들어, 0 내지 10, 3 내지 12 또는 3 내지 10)의 범위이고 Pn...P3, P2, P1, P-1은 아미노산 잔기이고, 여기서 P1, P2 및 P3은 본원에 기술된 바와 같이 정상 조직 균질물에 비해 종양 조직 균질물에 의한 프로테아제 절단에 대한 선택성을 부여하고/거나 리간드 약물 접합체의 생체 분포를 변경하여, 펩타이드 절단 가능 유닛이 디펩타이드 val-cit인 비교 펩타이드의 생체 분포와 비교할 때 펩타이드 절단 가능한 단위가 P3-P2-P1 트리펩타이드인 접합체가 정상 조직에 비해 종양 조직에 유리하게 작용할 수 있도록 하는 트리펩타이드 아미노산 잔기이다.
W가 P-1 잔기를 함유하지 않은 경우, LO에 대한 단백질 분해 작용은 아래첨자 y가 1인 경우 화학식 -Y-D의 약물 링커 단편을 방출하거나, 아래첨자 y가 2인 경우 -Y-Y'-D의 약물 링커 단편을 방출하고, 여기서 Y는 제1 스페이서 유닛이고 Y'는 제2 스페이서 유닛으로, 해당 단편의 스페이서 유닛이 자가 용해를 거쳐 D가 유리 약물로 완전히 방출된다. W가 P-1 잔기를 함유하는 경우, LO에 대한 단백질 분해 작용은 화학식 [P-1]-Y-D 또는 [P-1]-Y-Y'-D의 제1 약물 링커 단편을 방출한다. 그러나 편의상 P-1 잔기는 이러한 펩타이드 절단 가능 유닛을 설명하는 서열번호의 서열과 연관될 것이다. 유리 약물의 방출을 완료하려면 엑소펩티다제 작용을 통해 [P-1] 아미노산 잔기를 제거하여 W에 P-1 잔기가 함유되지 않은 경우와 유사하게 제2 약물 링커 단편으로 Y-D 또는 -Y-Y'-D를 제공한다. 그런 다음 -Y-Y'-D 링커 단편은 화학식 Y'-D의 제3 약물 링커 조각으로 진행된다. 두 변이체 모두에서 Y-D 또는 Y'-D는 자발적으로 분해되어 유리 약물로서 D를 완전히 방출한다.
펩타이드 절단 단위 (W)의 P1 또는 P-1에 공유 결합된 자가 용해성 스페이서 유닛 (Y)는 본원에 정의된 자가 용해성 모이어티를 포함하거나 이로 구성되어, W의 효소 처리가 자가 파괴를 위한 Y의 자가 용해성 모이어티를 활성화시켜 유리 약물로서 약물 유닛의 방출을 개시한다. 아래첨자 y가 1인 경우, Y의 자가 용해성 모이어티는 약물 유닛의 임의로 치환된 헤테로원자에 직접 부착된다. 앞서 설명한 바와 같이, 아래첨자 y가 2인 경우, Yy는 -Y-Y'이고, 여기서 Y는 펩타이드 절단 가능 유닛 (W)에 공유 부착된 제1 자가 용해성 스페이서이고 Y'는 제2 자가 용해성 스페이서 유닛으로, 일부 측면에서 Y와 D 사이에 공유되는 카르바메이트 작용기이다. 다른 측면에서, Y'는 메틸렌 카르바메이트 단위이다. 어느 측면에서든 Yy는 약물 유닛 (D)에 결합되어, W를 Y에 공유 부착하는 아미드 결합에 대한 엔도펩티다제 작용 또는 [P-1]-D의 아미드 결합에 대한 엑소펩티다제 작용에 의해 개시된 제1 자가 용해성 스페이서 유닛 Y의 자발적인 자가 파괴가 Y'-D를 방출하고, 그 후 자발적으로 분해되어 유리 약물로 D가 완전히 방출된다.
일부 실시양태에서 Y는 -D 또는 -Y'-D에 결합된 PAB 또는 PAB 관련 자가 용해성 모이어티를 함유하며, 여기서 아래첨자 Y는 각각 1 또는 2이고, 마스킹된 전자 공여기 (EDG)로 치환된 중심 아릴렌 또는 헤테로아릴렌, 및 공유 헤테로원자 또는 작용기를 통해 D에 결합되거나, 또는 개입 제2 스페이서 유닛 (Y')를 통해 간접적으로 D에 결합되는 벤질 탄소를 갖고, 여기서 마스킹된 EDG 및 벤질 탄소 치환체는 서로 오르토 또는 파라 (즉, 1,2 또는 1,4 치환 패턴)이다. 이들 실시양태에서, 제 2 스페이서 유닛 (Y')는 자가 용해 또는 자발적 분해가 가능하거나 부재한다.
중심 (헤테로)아릴렌이 아래첨자 y가 1인 경우 방출 D 또는 [P-1]-D에 대한, 아래첨자 y가 2인 경우 -Y'-D 또는 -[P-1]-Y'-D에 대한 1, 4- 또는 1,6-단편화를 허용하는 필요한 1,2 또는 1,4 치환 패턴을 갖고, 여기서 Y'는 자가 용해 또는 자발적 분해가 가능한 PAB 또는 PAB 관련 자가 용해성 모이어티를 갖는 자가 용해성 스페이서 유닛의 예시적인 구조는 다음과 같이 표시되고:
여기서, J에 인접한 물결선은 선택성을 부여하는 트리펩타이드가 직접 부착된 Y'-D인 경우 P1에 대해, 또는 선택성을 부여하는 트리펩타이드가 해당 아미노산 잔기를 통해 간접적으로 부착된 -Y'-D인 경우 P-1에 대해 공유 부착되는 부위를 나타고, 다른 물결선은 -Y'-D에 대한 공유 부착된 부위를 나타내고, 여기서, J는 허용되는 경우 임의로 치환된 헤테로원자 (즉, 임의로 치환된 -NH-)이고, Y'는 선택적 제2 스페이서 유닛이고, D는 약물 유닛이고, 여기서 Y'가 없을 경우 Y'는 D에서 헤테로원자로 치환되어 D가 약물 유닛의 나머지 부분인 D'가 되고;
여기서 V, Z1, Z2, Z3는 독립적으로 =N 또는 =C(R24)-이고, 여기서 각 R24는 수소 및 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C2-C12 알케닐, 임의로 치환된 C2-C12 알키닐, 임의로 치환된 C6-C20 아릴, 임의로 치환된 (C6-C20 아릴)-C1-C6 알킬-, 임의로 치환된 C5-C20 헤테로아릴 및 임의로 치환된 (C5-C20 헤테로아릴)-C1-C6 알킬-, 및 할로겐 및 전자 인출기로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고; R'는 수소 또는 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C2-C12 알케닐, 임의로 치환된 C2-C12 알키닐, 임의로 치환된 C6-C20 아릴, 임의로 치환된 (C6-C20 아릴)-C1-C6 알킬-, 임의로 치환된 C5-C20 헤테로아릴, 또는 임의로 치환된 C5-C20 헤테로아릴)-C1-C6 알킬-, 또는 전자 공여기이고; R8 및 R9는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C2-C12 알케닐, 임의로 치환된 C2-C12 알키닐, 임의로 치환된 C6-C20 아릴 및 임의로 치환된 C5-C20 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 둘 다 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-C8 카르보사이클로를 정의한다. 바람직한 실시양태에서, V, Z1, Z2 중 하나 이상 또는 V, Z2, Z3 중 하나 이상은 =CH-이다. 다른 바람직한 실시양태에서 R'는 수소 또는 C1-C6 에테르, 예컨대 -OCH3 및 -OCH2CH3을 포함하는 전자 공여기이거나, 또는 R8, R9 중 하나는 수소이고 다른 하나는 수소 또는 C1-C4 알킬이다. 보다 바람직한 실시양태에서 V, Z1 및 Z2 중 둘 이상은 =CH-이거나 V, Z2 및 Z3 중 둘 이상은 =CH-이다. 다른 보다 바람직한 실시양태에서 R8, R9 및 R'은 각각 수소이다.
J에 대한 결합 또는 P1과 P-1 사이의 아미드 결합의 세포 내 절단은 각각 Y'-D 또는 -[P-1]-Y'-D의 방출을 초래하며, 여기서 -[P-1]-Y'-D는 표적 세포의 세포 내 프로테아제의 엑소펩티다제 활성에 의해 -Y'-D로 전환된다.
일부 바람직한 실시양태에서, 아래첨자 y가 2인 -Yy-D는 -Y-Y'-D의 구조를 가지며 다음과 같고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고, 여기서 점선은 Ry에서 D로의 선택적 고리화를 나타내고, 여기서 Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고; -J-는 허용되는 경우 O, S 및 임의로 치환된 -NH-를 포함한 임의로 치환된 헤테로원자이고, 여기서, J 또는 P-1을 포함하는 작용기인 J는 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 단백질 분해에 비해 세포 내 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하고, 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성 및/또는 정상 조직에 대한 생체 분포에 비해 종양 조직에 대한 선택적 생체 분포를 부여하는 트리펩타이드의, 인접한 물결선으로 표시된 바와 같이, P1에 결합되고, 여기서, 상기 결합의 절단은 리간드 약물 접합체 조성물의 화합물로부터 이차 아민 함유 생물학적 활성 화합물로서 D의 방출을 개시하고, 여기서 나머지 가변기는 상기 정의된 바와 같다. 이러한 가변기는 표적 세포 내에서 펩타이드 절단 가능 유닛 W의 처리로 인해 방출될 때 J의 반응성이 PAB 또는 PAB 유형 자가 용해성 모이어티에서 제거된 Y'-D 또는 D의 pKa 및 그 제거로 인한 퀴논-메타이드 유형 중간체의 안정성과 균형을 이룰 수 있도록 선택된다.
이들 실시양태에서, 스페이서 유닛 Y의 D와 PAB의 벤질 탄소 또는 PAB 관련 자가 용해성 모이어티 사이의 개입 모이어티는, 카르바메이트 작용기가 Y와 D 사이에서 공유되도록 -C(R8)(R9)-Y'-D에서 Y'를 나타낸다. 이러한 실시양태에서, Y'-D의 배출과 함께 스페이서 유닛 Y의 단편화는 질소 원자가 PAB 또는 PAB 관련 자가 용해성 모이어티를 포함하는 2차 링커에 결합된 1차 또는 2차 아민을 갖는 생물학적 활성 화합물로서 D의 방출을 위한 CO2의 손실이 뒤따른다.
다른 바람직한 실시양태에서, -Y'-D 또는 -D에 결합된 PAB 또는 PAB 유형 모이어티를 갖는 -Yy-D는 다음과 같은 구조를 갖고:
여기서, 질소 원자에 인접한 물결선은 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 세포 내 단백질 분해와 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해보다 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하는 P-1 또는 W의 트리펩타이드에 대한 공유 부착 지점을 나타내고, 여기서, 해당 결합은 세포 내 단백질 분해에 취약하며, Y'는 선택적 스페이서 유닛으로, 없을 경우 페놀 산소 원자 또는 D로부터의 황 원자로 치환되고, 존재할 경우 질소 원자가 D로부터 온 카르바메이트 작용기이고; R33은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 특히 수소 또는 C1-C4 알킬, 바람직하게는 수소, -CH3 또는 -CH2CH3, 보다 바람직하게는 수소이다. 보다 바람직한 실시양태에서, V, Z1 및 Z2는 각각 =CH-이고 R33은 수소이다.
일부 실시양태에서, -Y'-D 또는 -D에 결합된 PAB 또는 PAB 유형 모이어티를 갖는 -Yy-D는 다음과 같은 구조를 갖고:
여기서, 질소 원자에 인접한 물결선은 자유롭게 순환하는 프로테아제에 의한 단백질 분해보다 세포 내 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하고 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해보다 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 부여하는 P-1 또는 W의 트리펩타이드에 대한 공유 부착 지점을 나타내고, 여기서, 해당 결합은 세포 내 단백질 분해에 취약하며, Y'는 선택적 스페이서 유닛으로, 부재 시 페놀 산소 원자, 4차화된 3차 아민 또는 D의 황 원자로 대체된다. 존재하는 경우, Y'는 질소 원자가 D에서 유래한 카르바메이트 작용기, 알콕시 모이어티의 산소 원자가 D와 공유되는 메틸렌-알콕시-카르바메이트 작용기, 또는 하나의 산소 원자가 D와 공유되는 카르보네이트 작용기이고; R33은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 특히 수소 또는 C1-C4 알킬, 바람직하게는 수소, -CH3 또는 -CH2CH3, 보다 바람직하게는 수소이다. 보다 바람직한 실시양태에서, V, Z1 및 Z2는 각각 =CH-이고 R33은 수소이다.
특히 바람직한 실시양태에서 -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 이전 의미를 갖고 물결선은 P1에 대한 공유 부착을 나타내고; Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 또는 다른 전자 공여기, -할로겐, -니트로 또는 -시아노 또는 다른 전자 인출기 (바람직하게는, Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 또는 시아노임)이고; 아래첨자 m은 0 내지 4 범위의 정수이다 (즉, 중심 아릴렌은 다른 치환체가 없거나 1 내지 4개의 다른 치환체가 있음). 바람직한 실시양태에서, 아래첨자 m은 0, 1 또는 2이고 각 Q는 독립적으로 선택된 전자 공여기이다.
특히 바람직한 실시양태에서, -Yy-은 다음 구조를 갖고:
각각, 여기서 카르보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 D와 Y 사이에 공유되는 카르보네이트 또는 티오카르바메이트 작용기를 형성하도록 D의 산소 또는 황 원자에 공유 부착되고, 여기서 공유 작용기는 Y'이거나, 또는 D와 Y 사이에 공유되는 카르바메이트를 형성하도록 2차 질소 원자에 공유 부착되고, 여기서 공유되는 작용기는 Y'인 공유 부착 부위를 나타내고, 질소 원자에 인접한 물결선은 P1의 카르복실산 잔기에 대한 아미드 결합으로서 공유 부착 부위를 나타낸다.
일부 실시양태에서, -Yy-는 다음 구조를 갖고:
각각, 여기서, 카르보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 D와 Y 사이에 공유되는 카르보네이트, 카르바메이트 또는 티오카르바메이트 작용기를 형성하도록 D의 산소, 질소, 또는 황 원자에 대한 공유 부착되고, 여기서 공유 작용기는 Y'이거나, 또는 질소 원자에 인접한 물결선은 D와 Y 사이에 공유되는 카르바메이트 작용기를 형성하도록 제2 질소 원자에 공유 부착되고, 여기서 공유 작용기는 Y'인 공유 부착 부위를 나타내고, 질소 원자에 인접한 물결선은 P1의 카르복실산 잔기에 대한 아미드 결합으로서 공유 결합 부위를 나타낸다.
일부 실시양태에서, -Yy-는 다음 구조를 갖고:
여기서, 메틸렌 탄소 원자에 인접한 물결선은 약물 유닛을 함유하는 4차화된 3차 아민에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 따라서 -Yy-는 약물 유닛의 일부인 4차화 질소 원자를 통해 약물 유닛에 부착되고, 질소 원자에 인접한 물결선은 P1의 카르복실산 잔기에 대한 아미드 결합으로서 공유 부착 부위를 나타낸다.
일부 실시양태에서, -Yy-는 다음 구조를 갖고:
여기서, 메틸렌 카르바메이트 모이어티의 탄소 원자에 인접한 물결선은 D와 Y 사이에 공유되는 메틸렌 알콕시 카르바메이트 모이어티를 형성하기 위해 D의 산소 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내고, 여기서 해당 공유 작용기는 Y'이며 질소 원자에 인접한 물결선은 P1의 카르복실산 잔기에 대한 아미드 결합으로서 공유 부착 부위를 나타낸다.
Y가 자가 용해성 스페이서 유닛인 일반 화학식 -Y-Y'-의 다른 구조는 PAB 또는 PAB- 유형 자가 용해성 스페이서 유닛 이외의 것이고 다음 약물 링커 모이어티에 예시된다.
이론에 얽매이지 않고, Y가 PAB 자가 용해성 스페이서 유닛이고 Y'가 카르바메이트 작용기인 Y의 순차적 자가 용해는 다음과 같이 예시된다. 리간드 약물 접합체 및 트리펩타이드 펩타이드 절단 가능 유닛을 갖는 약물 링커 화합물의 2차 링커는 다음과 같다:
2.2.6 약물 링커
일반적으로, 화학식 1A의 약물 링커 모이어티는 다음 구조를 갖고:
여기서, 물결선은 리간드 유닛에 대한 LB의 공유 부착을 나타내고, A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로 A의 부재 또는 존재를 나타내고, B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내며, 단, 아래첨자 q가 2 내지 4 범위일 때 아래첨자 b는 1이다.
LO는 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서 A'는 제2 선택적 스트레처 유닛, 아래첨자 a'는 0 또는 1로 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고, Y는 선택적 스페이서 유닛, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로 각각 스페이서 유닛의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고, P1, P2 및 P3은 아미노산 잔기로서, 함께 정상 조직의 균질물에 의한 단백질 분해보다 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해에 선택성을 제공하고/거나 함께 정상 조직에 비해 종양 조직으로의 화학식 1 접합체의 바람직한 생체 분포를 제공하고, 여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드 기반 접합체의 투여와 관련된 부작용에 대한 책임이 있고, 여기서, 단백질 분해 절단은 아래첨자 y가 1 또는 2인 경우 P1과 Y 사이의 공유 결합에서, 또는 아래첨자 y가 0인 경우 P1과 D 사이의 공유 결합에서 발생하거나 또는
LO는 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서, A', a', Y 및 y는 이전 의미를 유지하고 P1, P2 및 P3는 아미노산 잔기이고, 선택적으로 P-1 아미노산과 함께, 이들은 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 함께 정상 조직과 비교하여 종양 조직으로의 화학식 1 접합체의 바람직한 생체 분포를 제공하고여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드 기반 접합체 투여와 관련된 부작용에 대한 책임이 있고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 [P-1]-Yy-D의 구조를 갖는 링커 단편을 방출하거나, 또는
LO는 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서, A', a', Y 및 y는 이전 의미를 유지하고 P-1 및 P1, P2, P3...Pn은 아미노산 잔기이고, 여기서 아래첨자 n은 0 내지 12의 범위 (예를 들어, 0 내지 10, 3 내지 12 또는 3 내지 10)이고 P1, P2 및 P3, 선택적으로 P-1과 함께, 정상 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 함께 약물 링커 화합물로부터 제조된 화학식 1 접합체가 정상 조직과 비교하여 종양 조직으로의 바람직한 생체 분포를 제공하고, 여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드-염기 접합체 투여와 관련된 부작용에 대한 책임이 있고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 Yy-D 사이 또는 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 각각 Yy-D 또는 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출하고, 여기서 후자는 엑소펩티다제 절단을 거쳐 Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다. 두 경우 모두 Yy-D 링커 단편은 자발적 분해를 거쳐 유리 약물로서 D의 방출을 완료한다.
추가 P4, P5...Pn 아미노산 잔기는 -Yy-D 또는 -[P-1]-Yy-D 단편을 제공하는 절단 부위를 변경하지 않도록 선택되지만, 대신에 주로 P1, P2 및 P3 아미노산 잔기에 의해 제공되는 리간드 약물 접합체에 대해 원하는 생리화학적 및/또는 약동학적 특성, 예컨대 종양 조직으로의 접합체의 생체 분포의 증가를 유지하거나, 또는 비교 디펩타이드 기반 접합체에 비해 생리화학적 및/또는 약동학적 특성을 향상시키도록 선택된다.
LO의 이들 실시양태 중 어느 하나에서, 아래첨자 q가 1인 경우, 아래첨자 b는 0이므로 B는 부재하고 A'는 A의 선택적 하위 단위이고, 아래첨자 q가 2, 3 또는 4인 경우, 아래첨자 b는 1이므로 B가 존재하고, A'는 표시된 대로 LO의 구성 요소로 유지되며, A의 선택적 하위 단위는 AO로 표시된다.
일부 실시양태에서, 전반적인 선택성 개선 및/또는 정상 조직에 비해 종양 관련 프로테아제에 유리한 생체 분포의 개선에 추가로, P1, P2 및 P3 아미노산 잔기는 또한 디펩타이드 비교 대상 접합체에 비해 이들 아미노산을 포함하는 아미노산 서열을 통합하는 접합체의 응집을 감소시킨다. 약물 유닛이 MMAE인 일부 실시양태에서, 비교 대상 접합체의 약물 링커 모이어티는 mc-vc-PABC-MMAE의 화학식을 갖는다.
화학식 1A 리간드 약물 접합체 화합물의 -LSS 및 -LS 함유 약물 링커 모이어티의 바람직한 실시양태에서, LSS 및 LS 모이어티는 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛을 함유한다. 아래첨자 q가 1이고 펩타이드 절단 가능 유닛이 트리펩타이드인 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커 모이어티는 화학식 1B, 화학식 1C 및 화학식 1D의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, HE는 선택적인 가수분해 강화 유닛이고, A'는 존재하는 경우 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로서, 각각 A' 의 부재 또는 존재를 나타내고; 아래첨자 P는 1 또는 2이고, 아래첨자 Q는 1 내지 6 범위이며, 바람직하게는 아래첨자 Q는 1 또는 2이고, 더 바람직하게는 아래첨자 Q는 아래첨자 P와 동일한 값을 갖고; 여기서 Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고, RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 염 형태, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되거나, 또는 Ra3은 질소 보호기, 예컨대, 적합한 산-불안정 보호기이고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합을 나타내고; P1, P2 및 P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 임의의 것에 대해 이전에 정의된 바와 같고; 나머지 가변기는 화학식 1A의 약물 링커 모이어티의 실시양태 중 임의의 것에 대해 설명된 바와 같다.
리간드 약물 접합체 화합물의 화학식 1A의 -LSS 및 -LS 함유 약물 링커 모이어티의 다른 바람직한 실시양태에서, LSS 및 LS 모이어티는 비-사이클릭 사이클릭 염기성 유닛을 함유한다. 펩타이드 절단 가능 유닛이 디펩타이드인 이들 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커 모이어티는 화학식 1E, 화학식 1F 및 화학식 1G의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, HE는 선택적 가수분해 강화 유닛이고, A'는 존재하는 경우 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고; 아래첨자 x는 1 또는 2이고; Ra2는 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, -CH3 또는 -CH2CH3이고; Ra3은 각 경우에 독립적으로 질소 보호기, -H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 바람직하게는 -H, 산-불안정 보호기, -CH3 또는 -CH2CH3이거나, 또는 Ra3는 둘 다 이들이 부착된 질소와 함께 질소 보호기 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 상기 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 선택적으로 염 형태, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 양성자화되고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합을 나타내고; P1, P2 및 P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 어느 하나에 대해 이전에 정의된 바와 같고, 나머지 가변기는 화학식 1A의 약물 링커 모이어티의 실시양태 중 어느 하나에 대해 설명된 바와 같다.
다른 바람직한 실시양태에서, 1차 링커는 염기성 유닛을 갖지 않는다. 펩타이드 절단 가능 유닛이 트리펩타이드인 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커 모이어티는 화학식 1H, 화학식 1J 및 화학식 1K의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서, HE는 선택적인 가수분해 강화 유닛이고, A'는 존재하는 경우, 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위 (A2)이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로서, A'의 부재 또는 존재를 나타내고; 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합을 나타내고; P1, P2 및 P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 어느 하나에 대해 이전에 정의된 바와 같고, 나머지 가변기는 화학식 1A의 약물 링커 모이어티의 실시양태 중 어느 하나에 대해 설명된 바와 같다.
링커 유닛에 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛이 있는 보다 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물 내의 리간드 약물 결합 화합물의 대다수는 다음의 구조로 표시되는 약물 링커 모이어티를 선택적으로 염 형태, 특히 약학적으로 허용되는 염 형태로 갖거나:
링커 유닛에 비-사이클릭 염기성 유닛이 있는 보다 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 결합체 조성물 내의 리간드 약물 접합체 화합물의 대다수는 다음의 구조로 표시되는 약물 링커 모이어티를 선택적으로 염 형태, 특히 약학적으로 허용되는 염 형태로 갖거나:
여기서, LSS 및 LS 함유 약물 링커 모이어티의 가변기는 비-사이클릭 또는 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 모이어티에 대해 앞서 설명한 바와 같고,
링커 유닛에 염기성 유닛이 없는 다른 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 우세한 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1H의 구조로 표시되는 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서, 가변기는 해당 화학식의 약물 링커 모이어티에 대해 이전에 설명한 바와 같다.
전술한 약물 링커 모이어티 중 어느 하나에서, HE는 바람직하게는 -C(=O) 로 존재하고/거나 아래첨자 y는 1 또는 2로서, 각각 하나 또는 두 개의 자가 용해성 스페이서 유닛의 존재를 나타낸다.
상기 약물 링커 모이어티 중 어느 하나에서 -[P3]-[P2]-[P1] 트리페티드의 특히 바람직한 실시양태는 D-Leu-Leu-Met(O) 또는 D-Leu-Ala-Glu이고, 여기서 Met(O)는 황 원자가 설폭사이드로 산화된 메티오닌이다.
링커 유닛에 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛이 있는 특히 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 다음 구조로 표시되고 그의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고:
여기서 물결선은 리간드 유닛으로부터 황 원자에 대한 공유 부착을 나타내고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고며, 여기서 A'는 2차 선택적 스트레처 유닛 또는 제1 선택적 스트레처 유닛의 하위 단위에 대해 본원에 설명된 바와 같은 화학식 3a, 4a 또는 5a의 아민 함유 산 잔기이거나, 또는 A'는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기이고; D는 약물 링커 모이어티의 링커 유닛에 대한 부착 부위로 2차 아미노기를 갖는 세포 독성 약물이다.
링커 유닛에 비-사이클릭 염기성 유닛이 있는 다른 특히 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물 내의 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 다음의 구조로 표시되고:
그의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서 가변기는 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 모이어티에 대해 이전에 설명된 바와 같다.
염기성 유닛이 없는 다른 특히 바람직한 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 우세한 리간드 약물 접합체 화합물은 다음의 구조로 표시되는 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 가변기는 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 모이어티에 대해 이전에 기술된 바와 같다. BU가 존재하지 않는 실시양태에서, 우세한 리간드 약물 접합체 화합물을 포함하는 리간드 약물 접합체 조성물은 임의로 석신이미드 고리가 가수분해된 형태인 리간드 약물 접합체 화합물을 추가로 포함한다.
2.2.7 약물 및 약물 유닛
일부 실시양태에서, D는 유리 약물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이며 과증식성 질환 및 장애의 약학적 치료에 유용할 수 있다. 일부 실시양태에서, D는 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에 접합된 약물 유닛이다. 일부 실시양태에서, D는 세포 독성, 세포증식억제, 면역억제, 면역자극, 또는 면역조절 약물이다. 일부 실시양태에서, D는 튜불린 파괴제, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 손상제, 또는 DNA 복제 억제제이다.
세포 독성, 세포 증식 억제, 면역 억제, 면역 자극 또는 면역 조절제의 유용한 클래스는 예를 들면 다음을 포함한다: 항튜불린제 (튜불린 파괴제라고도 함), DNA 마이너 홈 결합제, DNA 복제 억제제, DNA 손상제, 알킬화제, 항생제, 항엽산제, 항대사제, 화학 요법 민감제, 톨 유사 수용체 (TLR) 작용제, 인터페론 유전자 자극제 (STING) 작용제, 레티노산 유도 유전자 I (RIG-I) 작용제, 토포이소머라제 억제제 (토포이소머라제 I 및 II 억제제 포함), 빈카 알칼로이드, 오리스타틴, 캄프토테신, 에네딘, 렉시트롭신, 안트라사이클린, 탁산제 등. 유용한 세포 독성 약제의 유용한 클래스의 특히 례로는 예로는, 예를 들어, DNA 마이너 홈 결합제 (에네딘 및 렉시트롭신), DNA 알킬화제 및 튜불린 억제제가 포함된다. 예를 들어, 안트라사이클린, 오리스타틴 (예를 들어, 오리스타틴 T, 오리스타틴 E, AFP, 모노메틸 오리스타틴 F (MMAF), 친유성 모노메틸 오르스타틴 F, 모노메틸 오리스타틴 E (MMAE)), 캄프토테신, CC-1065 유사체, 칼리세아민, 돌라스타틴 10 유사체, 듀오카마이신, 에토포사이드, 메이탄신 및 메이탄시노이드, 멜팔란, 메토트렉세이트, 미토마이신 C, 탁산 (예를 들어, 파클리탁셀 및 도세탁셀), 니코틴아미드 포스포리보실 트랜스퍼라제 억제제 (NAMPTi), 튜불리신 M, 벤조디아제핀 및 벤조디아제핀 함유 약물 (예를 들어, 피롤로[1,4]-벤조디아제핀 (PBD), 인돌리노벤조디아제핀, 리족신, 팔톡신, 및 옥사졸리디노벤조디아제핀) 및 빈카 알칼로이드. 선택 벤조디아제핀 함유 약물은 WO 2010/091150, WO 2012/112708, WO 2007/085930, 및 WO 2011/023883에 설명되어 있다.
특히 유용한 세포 독성 약제의 클래스는 예를 들어, DNA 마이너 그루브 결합제, DNA 알킬화제, 튜불린 파괴제, 안트라사이클린 및 토포이소머라제 II 억제제를 포함한다. 다른 특히 유용한 세포 독성 약제에는 오리스타틴 (예를 들어, 오리스타틴 T, 오리스타틴 E, AFP, 모노메틸 오리스타틴 F (MMAF)), 모노메틸 오리스타틴 F, 모노메틸 오리스타틴 E (MMAE)의 친유성 유사체 및 캄프토테신 (예를 들어, 캄프토테신, 이리노테칸 및 토포테칸)이 포함된다.
세포 독성제는 예를 들어, 독소루비신, 파클리탁셀, 멜팔란, 빈카 알칼로이드, 메토트렉세이트, 미토마이신 C 또는 에토포사이드와 같은 화학 요법제일 수 있다. 또한 약제는 CC-1065 유사체, 칼리치아미신, 메이탄신, 돌라스타틴 10 유사체, 리족신 또는 팔리톡신일 수 있다.
세포 독성제는 또한 오리스타틴일 수 있다. 오리스타틴은 예를 들어, 오리스타틴 E와 케토산 사이에 형성된 에스테르인 오리스타틴 E 유도체일 수 있다. 예를 들어, 오리스타틴 E는 파라아세틸 벤조산 또는 벤조일발레르산과 반응하여 각각 AEB 및 AEVB를 생성할 수 있다. 다른 대표적인 오리스타틴으로는 오리스타틴 T, AFP, MMAF, 및 MMAE이 있다. 다양한 오리스타틴의 합성 및 구조는 예를 들어 US 2005-0238649 및 US2006-0074008에 설명되어 있다.
세포 독성제는 DNA 마이너 홈 결합제일 수 있다. (예를 들어, 미국 특허 번호 6,130,237 참조.) 예를 들어, 마이너 홈 결합제는 CBI 화합물 또는 에네디인 (예를 들어, 칼리케아미신)일 수 있다.
세포 독성 또는 세포 증식 억제제는 항-튜불린제일 수 있다. 항-튜불린제의 예로는 탁산 (예를 들어, Taxol® (파클리탁셀), Taxotere® (도세탁셀)), T67 (툴라릭), 빈카 알킬로이드 (예를 들어, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신, 및 비노렐빈), 및 오리스타틴 (예를 들어, 오리스타틴 E, AFP, MMAF, MMAE, AEB, AEVB)가 포함된다. 기타 적합한 항튜불린제에는 예를 들어, 바카틴 유도체, 탁산 유사체 (예를 들어, 에포틸론 A 및 B), 노코다졸, 콜히친 및 콜시미드, 에스트라무스틴, 크립토피신, 세마도틴, 메이탄시노이드, 콤브레타스타틴, 디스코더모이드 및 엘레우트로빈이 포함된다.
세포 독성제는 미탄신 또는 항-튜불린제의 다른 그룹인 메이탄시노이드일 수 있다 (예를 들어, DM1, DM2, DM3, DM4). 예를 들어, 메이탄시노이드는 메이탄신 또는 예컨대, DM-1 또는 DM-4와 같은 메이탄신 함유 약물 링커일 수 있다 (ImmunoGen, Inc.; 또한 Chari 등, 1992, Cancer Res. 참조).
일부 실시양태에서, D는 튜불린 파괴제이다. 일부 실시양태에서, D는 오리스타틴 또는 튜불리신이다. 일부 실시양태에서, D는 오리스타틴이다. 일부 실시양태에서, D는 튜불리신이다.
일부 실시양태에서, D는 TLR 작용제이다. 예시적인 TLR 작용제는 TLR1 작용제, TLR2 작용제, TLR3 작용제, TLR4 작용제, TLR5 작용제, TLR6 작용제, TLR7 작용제, TLR8 작용제, TLR7/8 작용제, TLR9 작용제 또는 TLR10 작용제를 포함하지만 이에 국한되지 않는다.
일부 실시양태에서, D는 STING 작용제이다. 예시적인 STING 작용제에는 사이클릭 이중 뉴클레오티드 (CDN) 및 비뉴클레오티드 STING 작용제가 포함되지만 이에 국한되지는 않는다.
리간드 약물 접합체 화합물 또는 약물 링커 화합물의 오리스타틴 약물 유닛은 접합체의 링커 유닛 또는 약물 링커 화합물의 링커 유닛이 다음과 같은 DE 또는 DF의 구조를 갖는 오리스타틴 유리 약물의 2차 아민에 대한 공유 부착을 통해 오리스타틴 약물을 통합하고:
여기서, 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서, 오리스타틴 약물 화합물을 -D로서 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티 중 어느 하나 또는 본원에 기재된 약물 링커 화합물 중 어느 하나에 통합시킬 때, 상기 작용기의 -OC(=O)-는 Y'이고, 따라서 두 유형의 화합물 중 어느 하나에 대해 아래첨자 y는 2이고;
하나의 R10 및 R11은 수소이고 다른 하나는 C1-C8 알킬이고; R12는 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1-C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 또는 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고; R13은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1- C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 및 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고; R14는 수소 또는 메틸이거나, 또는 R13 및 R14는 이들이 부착된 탄소와 함께 취하여 스피로 C3-C8 카르보사이클로를 구성하고; R15는 수소 또는 C1-C8 알킬이고; R16은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -C6-C24-X1-아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 및 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고; R17은 독립적으로 수소, -OH, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴 및 O-(C1-C8 알킬)이고; R18은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고; R19는 -C(R19A)2-C(R19A)2- C6-C24 아릴, -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 헤테로사이클릴) 또는 -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 카르보사이클릴)이고, 여기서 C6-C24 아릴 및 C3-C8 헤테로사이클릴은 임의로 치환되고; R19A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C8 알킬, -OH 또는 임의로 치환된 -O-C1-C8 알킬이고; R20은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C20 알킬, 임의로 치환된 C6-C24 아릴 또는 임의로 치환된 C3-C8 헤테로사이클릴, 또는 -(R47O)m-R48, 또는 -(R47O)m-CH(R49)2이고; R21은 임의로 치환된 -C1-C8 알킬렌-(C6-C24 아릴) 또는 임의로 치환된 -C1-C8 알킬렌-(C5-C24 헤테로아릴), 또는 C1-C8 하이드록실알킬, 또는 임의로 치환된 C3-C8 헤테로사이클릴이고; Z는 O, S, NH, 또는 NR46이고; R46은 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고; 아래첨자 m은 1 내지 1000 범위의 정수이고; R47은 C2-C8 알킬이고; R48은 수소 또는 C1-C8 알킬이고; R49는 독립적으로 -COOH, -(CH2)n-N(R50)2, -(CH2)n-SO3H, 또는 -(CH2)n-SO3-C1-C8 알킬이고; R50은 독립적으로 C1-C8 알킬, 또는 -(CH2)n-COOH이고; 아래첨자 n은 0 내지 6 범위의 정수이고; X1은 C1-C10 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, 오리스타틴 약물 화합물은 하기 화학식 D E-1 , 화학식 D E-2 또는 화학식 D F-1 의 구조를 갖고:
여기서 화학식 D E-1 또는 화학식 D E-2 의 Ar은 C6-C10 아릴 또는 C5-C10 헤테로아릴이고, 화학식 D F-1 에서, Z는 -O-, 또는 -NH-이고; R20은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C6-C10 아릴 또는 임의로 치환된 C5-C10 헤테로아릴이고; R21은 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C6 알킬렌-(C6-C10 아릴) 또는 임의로 치환된 -C1-C6 알킬렌-(C5-C10 헤테로아릴)이다.
화학식 D E , D F , D E-1 , D E-2 또는 D F-1 의 일부 실시양태에서, R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이다.
화학식 D E-1 또는 D E-2 의 일부 실시양태에서, Ar은 페닐 또는 2-피리딜이다.
화학식 D F-1 의 일부 실시양태에서, R21은 X1-S-R21a 또는 X1-Ar이고, 여기서 X1은 C1-C6 알킬렌이고, R21a은 C1-C4 알킬이고 Ar은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴이고/거나 -Z-는 -O-이고 R20은 C1-C4 알킬이거나 Z는 -NH-이고 R20은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴이다.
일부 실시양태에서, 오리스타틴 약물 화합물은 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고; R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고; R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는 R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 결합을 나타낸다.
일부 실시양태에서 -D로 통합되는 오리스타틴 약물 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)이다.
일부 실시양태에서, D는 3차 아민 함유 튜불린 화합물로서, 3차 아민의 질소 원자가 물 링커 모이어티에 공유 부착하는 부위이다. 약물 링커 모이어티에 D를 부착하면 4차 아민이 생성될 수 있다. 일부 실시양태에서, D+는 약물 링커 모이어티 또는 링커 약물 화합물 내의 이러한 4차 아민 함유 약물을 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 또는 약물 유사체(Liker) 화합물 내에 접합된 유리 약물은 아민 함유 튜불린 화합물로서, 여기서 아민의 질소 원자는 리간드 약물 접합체 또는 약물 유사체(Liker) 화합물의 링커 유닛에 공유 부착하는 부위이고 아민 함유 튜불린 화합물은 다음 화학식 D G 또는 D H 의 구조를 갖고:
여기서, 단검 모양은 약물 유닛와 링커 유닛의 공유 부착 지점을 나타내며, 여기서 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서, 표시된 질소 원자는 4차화되고, 원은 5원 또는 6원 질소 헤테로아릴을 나타내며, 여기서 헤테로아릴에 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있으며 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고; R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고; R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고; R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된 임의로 치환된 알킬이고, 하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고, m은 0 또는 1이다. 다른 실시양태에서, 4차화된 약물은 구조 DG로 표시되는 튜불리신이고 여기서 하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, 다른 R7은 독립적으로 선택된 임의로 치환된 알킬이고, 아래첨자 m'은 0 또는 1이고, 여기서 다른 가변기는 이전에 정의한 것과 같다. 일부 실시양태에서, 하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 저급 알킬이고, 다른 R7은 독립적으로 선택된 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고, 아래첨자 m'은 1이고, 여기서 다른 가변기는 이전에 정의한 것과 같다.
일부 실시양태에서, R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-. -CH2-, 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬, R2A는s 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이다.
일부 실시양태에서, R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)- 또는 -(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2A 및 R2B는 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 알킬이거나, 또는 R2는 O-연결된 치환체이다.
일부 실시양태에서D G 또는 D H 중 -N(R7)(R7)는 -N(R7)-CH(R10)(CH2R11)로 대체되어 화학식 D H ' 및 D G '의 튜블리신 화합물을 정의하고:
여기서 단검 모양은 링커 유닛의 공유 부착 지점을 나타내고, 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서, 그렇게 표시된 질소 원자는 4차화되고; R10은 -CO2H 또는 이의 에스테르로 치환된 C1-C6 알킬이고, R7은 수소 또는 R10에서 독립적으로 선택되는 C1-C6 알킬이거나, 또는 R7 및 R10은 이들이 부착된 원자와 함께 5 또는 6-원 헤테로사이클을 정의하고; R11은 독립적으로 할로겐, 저급 알킬, -OH 및 -O-C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 치환체(들)로 임의로 치환된, 아릴 또는 5- 또는 6-원 헤테로아릴이고; 나머지 가변기는 D G 및 D H 에 대해 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, R11은 할로겐, 저급 알킬, -OH 및 -O-C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 또는 2개의 치환체로 치환된다. 일부 실시양태에서, R11은 할로겐, 저급 알킬, -OH 및 -O-C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나의 치환체로 치환된다. 일부 실시양태에서, 할로겐은 F이다. 일부 실시양태에서, -O-C1-C6 알킬은 -OCH3이다. 일부 실시양태에서, 저급 알킬은 -CH3이다.
여전히 다른 실시양태에서, D G 또는 D H 의 -N(R7)(R7)에서 하나의 R7은 수소 또는 C1-C6 알킬이고, 다른 R7은 -CO2H, 또는 이의 에스테르, 또는 임의로 치환된 페닐로 임의로 치환된, 독립적으로 선택된 C1-C6 알킬이다.
D G 및 D H 의 구조의 일부 실시양태에서, 하나의 R7은 수소이고 다른 R7은 아래의 구조를 갖는 임의로 치환된 아릴알킬이고
여기서 R7B는 수소 또는 O-연결된 치환체이고, R8A는 수소 또는 저급 알킬이고; 여기서 물결선은 D G 또는 D H 의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R7B는 수소 또는 파라 위치에 있는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R8A는 메틸이다.
D G 및 D H 의 구조의 일부 실시양태에서, 하나의 R7은 수소이고 다른 R7은 아래의 구조를 갖는 임의로 치환된 아릴알킬이고
여기서 R7B는 -H 또는 -OH이고; 여기서 물결선은 D G 또는 D H 의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타낸다.
D G 및 D H 의 구조의 일부 실시양태에서, 하나의 R7은 수소 또는 저급 알킬이고, 다른 R7은 아래 중 하나의 구조를 갖는 임의로 치환된 아릴알킬이고:
여기서 Z는 임의로 치환된 알킬렌 또는 임의로 치환된 알케닐렌이고, R7B는 수소 또는 O-연결된 치환체이고, R8A는 수소 또는 저급 알킬이고, 아래첨자 n은 0, 1 또는 2이고; 여기서 물결선은 D G 또는 D H 의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 n은 0 또는 1이다. D G 및 D H 의 구조의 여전히 다른 실시양태에서 -N(R7)(R7)은 -NH(C1-C6 알킬)이고 여기서 C1-C6 알킬은 -CO2H 또는 이의 에스테르, 또는 임의로 치환된 페닐로 임의로 치환된다. 일부 실시양태에서 -N(R7)(R7)는 -NH(CH3), -CH2CH2Ph, -CH2-CO2H, -CH2CH2CO2H 및 -CH2CH2CH2CO2H로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 하나의 R7은 수소 또는 메틸이고 다른 R7은 아래 구조를 갖는 임의로 치환된 아릴알킬이고:
여기서 Z는 임의로 치환된 알킬렌 또는 임의로 치환된 알케닐렌이고, R7B는 수소 또는 파라 위치에 있는 -OH이고, R8A는 수소 또는 메틸이고, 아래첨자 n은 0, 1 또는 2이다.
D G ' 및 D H '의 구조의 일부 실시양태에서, R7 및 R10은 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 5 또는 6원 헤테로사이클이고 여기서 -N(R7)-CH(R10)(CH2R11)은 의 구조를 갖고 여기서 물결선은 D G ' 또는 D H '의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 튜불리신 화합물은 다음 화학식으로 표시되며, 표시된 질소 (†)는 그러한 화합물이 4차화된 약물 유닛 (D+)로서 LDC에 통합될 때 4차화되는 부위이고:
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타내며, 여기서 상기 표시된 질소 원자는 4차화되고, 원은 5원 또는 6원 질소-헤테로아릴을 나타내며, 여기서 해당 헤테로아릴에 대한 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있고 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고; R2A는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이거나 또는 R2A는 이것이 부착된 산소 원자와 함께 O-연결된 치환체를 정의하고; R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고; R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된 임의로 치환된 알킬이고; R7A는 임의로 치환된 아릴 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고, R8A는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 아래첨자 m'은 0 또는 1이다.
구조 D G , D G-1 , D H , 또는 D H-1 의 일부 실시양태에서, R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸이다. 구조 D G ' 또는 D H '의 다른 실시양태에서 R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸이다. 다른 실시양태에서, R7A는 임의로 치환된 페닐이다. 일부 실시양태에서 R8A는 (S)-배열의 메틸이다. 다른 실시양태에서, R2A는 이것이 부착된 산소 원자와 함께 -OH 이외에 O-연결된 치환체를 정의한다. 일부 실시양태에서, R2A는 이것이 부착된 산소 원자와 함께 에스테르, 에테르, 또는 O-연결된 카르바메이트를 정의한다. 일부 실시양태에서, 원은 5-원 질소-헤테로아릴렌을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 원은 2가 옥사졸 또는 티아졸 모이어티를 나타낸다. 일부 실시양태에서 R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸이다. 일부 실시양태에서 R7은 임의로 치환된 아릴알킬이고, 여기서 아릴은 페닐이고 R7A는 임의로 치환된 페닐이다.
D G , D G ', D G-1 , D H , D H ' 또는 D H-1 의 다른 실시양태에서, 원은 5-원 질소 헤테로아릴렌을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 5-원 헤테로아릴렌은 구조 로 표시되고 여기서 XB는 O, S, 또는 N-RB이고 여기서 RB는 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, 4차화된 약물은 구조 D G , D G ' 또는 D G-1 로 표시되는 튜불리신이고, 여기서 m은 1이다. 일부 실시양태에서, 튜불리신은 구조 D G 로 표시되고, 여기서 m은 1이고 원은 임의로 치환된 2가 티아졸 모이어티를 나타낸다.
일부 실시양태에서, 튜불리신 화합물은 화학식으로 표시되고 여기서 표시된 질소 원자 (†)는 그러한 화합물이 4차화된 약물 유닛 (D+)로 LDC에 통합될 때 4차화되는 부위이고:
여기서 R2A는 이것이 부착된 산소 원자와 함께 O-연결된 치환체를 정의하고, R3은 저급 알킬 또는 -CH2OC(=O)R3A이고 여기서 R3A은 임의로 치환된 저급 알킬이고, R7B는 수소 또는 O-연결된 치환체이다. 일부 실시양태에서, R2A는 이것이 부착된 산소 원자와 함께 에스테르, 에테르 또는 O-연결된 카르바메이트를 정의한다. 일부 실시양태에서, R7B는 파라 위치에서 O-연결된 치환체이다. 일부 실시양태에서, R3은 메틸이거나 또는 R3A는 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, 이소-부틸 또는 -CH2C=(CH3)2이다. 일부 실시양태에서 R2A는 메틸, 에틸, 프로필 (즉, -OR2A는 에테르임)이거나 또는 -C(=O)R2B (즉, -OR2A는 에스테르임)이고 여기서 R2B는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, R2B는 메틸이다 (즉, -OR2A는 아세테이트임).
일부 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 또는 약물 링커 화합물에 통합된 튜불리신 화합물은 다음 화학식 중 하나의 구조를 갖고:
여기서 R7B는 수소 또는 -OH이고, R3은 저급 알킬이고, R2B 및 R2C는 독립적으로 수소 또는 저급 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 메틸 또는 에틸이다. 구조 D G , D G-1 , D G-2 , D G-3 , D G-4 , D G-5 , D H , D H-1 및 D H-2 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 메틸이거나 또는 -CH2OC(=O)R3A이고, 여기서 R3A는 임의로 치환된 알킬이다. 구조 D G ' 및 D H ' 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 메틸이거나 또는 -CH2OC(=O)R3A이고, 여기서 R3A는 임의로 치환된 알킬이다. 이들 구조 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 -C(R3A)(R3A)C(=O)-XC이고, 여기서 XC는 -OR3B이거나 또는 -N(R3C)(R3C)이고, 여기서 각 R3A, R3B 및 R3C은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬 또는 임의로 치환된 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 -C(R3A)(R3A)C(=O)-N(R3C)(R3C)이고, 각 R3A는 수소이고, 하나의 R3C는 수소이고 다른 R3C는 n-부틸 또는 이소프로필이다.
구조 D G , D G ', D G-1 , D G-2 , D G-3 , D G-4 , D G-5 , D H , D H ', D H-1 및 D H-2 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 에틸 또는 프로필이다.
구조 D G-1 , D G-2 , D G-3 , D G-4 , D G-5 , D G-6 , D H-1 및 D H-2 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, 티아졸 코어 헤테로사이클 은 또는 로 대체된다.
구조 D G , D G-1 , D G-2 , D G-3 , D G-4 , D G-5 , D H , D H-1 , D H-2 , D H-3 및 D H-4 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 메틸이거나 또는 -CH2OC(=O)R3A이고, 여기서 R3A은 임의로 치환된 알킬이다. 이들 구조 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, R3은 -C(R3A)(R3A)C(=O)-XC이고, 여기서 XC은 -OR3B 또는 -N(R3C)(R3C)이고, 여기서 각 R3A, R3B 및 R3C은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬 또는 임의로 치환된 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 -C(R3A)(R3A)C(=O)-N(R3C)(R3C)이고, 각 R3A 수소이고, 하나의 R3C는 수소이고 다른 R3C는 임의로 치환된 알킬 또는 임의로 치환된 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 -C(R3A)(R3A)C(=O)-N(R3C)(R3C)이고, 각 R3A는 수소이고, 하나의 R3C는 수소이고 다른 R3C는 n-부틸 또는 이소프로필이다.
구조 D G-3 , D G-4 , D G-5 , D H-3 및 D H-4 중 어느 하나의 일부 실시양태에서, 티아졸 코어 헤테로사이클 는 또는 로 대체된다.
일부 실시양태에서, 튜불리신은 구조 D G-3 또는 D G-4 를 갖고 여기서 m은 1이고, R3은 임의로 치환된 메틸, 에틸 또는 프로필이다. 일부 실시양태에서, R3은 치환되지 않은 메틸, 에틸 또는 프로필이다.
일부 실시양태에서, 튜불리신 화합물은 구조 D G-3 를 갖고, 여기서 아래첨자 m'은 1이고, R3은 메틸, 에틸 또는 프로필이고, -OC(O)R2B는 임의로 치환된, -O-C(O)H, O-C(O)-C1-C6 알킬, 또는 -OC2-C6 알케닐이다. 일부 실시양태에서, -OC(O)R2B는 -OC(O)CH3, -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH(CH3)2, -OC(O)C(CH3)3, 또는 -OC(O)CH=CH2이다.
일부 실시양태에서, 튜불리신 화합물은 구조 D G-4 를 갖고, 여기서 아래첨자 m'은 1이고, R3은 메틸, 에틸 또는 프로필이고 -OCH2R2B는 -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3 또는 -OCH2OCH3이다.
일부 실시양태에서, 튜불리신은 다음의 구조를 갖고
여기서 R2B는 -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2C(CH3)3이고 표시된 질소 원자 (†)는 그러한 화합물이 4차화된 약물 유닛 (D+)로서 LDC 또는 약물 링커 화합물에 통합될 때 4차화되는 부위이다.
일부 실시양태에서, 튜불리신은 다음의 구조를 갖고
여기서 R2B는 수소, 메틸 또는 -OCH3이다 (즉, -OCH2R2B는 메틸 에틸, 메톡시메틸 에테르 치환체임).
일부 실시양태에서, LDC에 D+로 통합되는 튜불리신은 튜불리신 A, 튜불리신 B, 튜불리신 C, 튜불리신 D, 튜불리신 E, 튜불리신 F, 튜불리신 G, 튜불리신 H, 튜불리신 I, 튜불리신 U, 튜불리신 V, 튜불리신 W, 튜불리신 X 또는 튜불리신 Z을 포함하는 자연 발생 튜불리신이고, 그 구조는 다음과 같은 구조 및 가변기 정의에 의해 주어지며, 표시된 질소 원자 (†)는 그러한 화합물이 4차화된 약물 유닛 (D+)로서 LDC 또는 약물 링커 화합물에 통합될 때 4차화되는 부위이고:
구조 D G-6 의 일부 실시양태에서, LDC 또는 약물 링커 화합물에 4차화된 약물 유닛으로서 통합되는 튜불리신 화합물은 튜불리신 M이고, 여기서 R3은 -CH3이고, R2는 C(=O)CH3이고 R7B는 수소이다.
일부 실시양태에서, D는 DNA 손상제의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 DNA 복제 억제제의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, 그 캄프토테신 화합물은 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고
각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고;
여기서 RB, RC, RF 및 RF' 중 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환된다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT1를 갖고:
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT2를 갖고:
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT3을 갖고:
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT4를 갖고:
여기서, 단검 모양은 화학식 CPT4 화합물이 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛의 형태로 있는 경우 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다. 일부 실시양태에서, D는 엑사테칸의 구조를 통합하고 있다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT5를 갖고:
여기서, 단검 모양은 화학식 CPT5 화합물이 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛의 형태로 있는 경우 링커 유닛에의 부착 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT6을 갖고:
여기서, 단검 모양은 화학식 CPT6 화합물이 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛의 형태로 있는 경우 링커 유닛에의 부착 지점을 나타낸다. 일부 실시양태에서, CPT6는 다음의 구조를 갖고:
여기서, 단검 모양은 화학식 CPT6 화합물이 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛의 형태로 있는 경우 링커 유닛에의 부착 지점을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 표 X에서 선택된다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 그 구조가 다음의 화학식 CPT7을 갖고:
여기서, 단검 모양은 화학식 CPT7 화합물이 약물 유닛의 형태로 있는 경우, 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 링커 유닛에의 부착 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 그 구조가 LDC 또는 약물 링커 화합물에 약물 유닛으로서 통합되어 있는 캄프토테신 화합물은 하기 화학식을 갖고
여기서 R11 중 하나는 n-부틸이고 R12 내지 R14 중 하나는 -NH2이고 다른 하나는 수소이거나, 또는 R12는 -NH2이고 R13 및 R14은 함께 -OCHO-이다.
일부 실시양태에서, RB는 C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 RB의 사이클로알킬 및 페닐 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, OH, -O-C1-C4 알킬, NH2, -NH-C1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2에서 선택되는 0 내지 3개의 치환체로 치환된다. 일부 실시양태에서, RB는 H, C1-C8 알킬, 및 C1-C8 할로알킬로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, RB는 H, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 1-에틸프로필, 또는 헥실이다. 일부 실시양태에서, RB는 클로로메틸 또는 브로모메틸이다. 일부 실시양태에서, RB는 페닐 또는 할로-치환된 페닐이다. 일부 실시양태에서, RB는 페닐 또는 플루오로페닐이다.
일부 실시양태에서, RC는 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RC는 메틸이다. 일부 실시양태에서, RC는 C3-C6 사이클로알킬이다.
일부 실시양태에서, RF 및 RF'는 둘 다 H이다. 일부 실시양태에서, RF 및 RF' 중 적어도 하나는 C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, RF 및 RF' 중 하나는 H이고 다른 하나는 C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, RF 및 RF' 중 하나는 C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 선택되고, 다른 하나는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, RF 및 RF'는 둘다 독립적으로 C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, RF 또는 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 독립적으로 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택되는 0 내지 3개의 치환체로 치환된다.
일부 실시양태에서, RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성한다.
일부 실시양태에서, D는 AMDCPT의 구조를 통합하고 있다:
일부 실시양태에서, D는 엑사테칸의 구조를 통합하고 있다:
일부 실시양태에서, D는 이리노테칸의 구조를 통합하고 있다:
일부 실시양태에서, D는 DNA 마이너 홈 결합제의 구조를 통합하고 있다. 일부 실시양태에서, D는 다음 구조를 갖는 피롤로벤조디아제핀 (PBD) 화합물의 구조를 통합하고 있다:
일부 실시양태에서, D는 DNA 마이너 홈 결합제이고 하기 화학식 X의 일반 구조:
또는 이의 염을 갖는 약물 PBD 이량체를 통합하고 있는 PBD 약물 유닛이고, 여기서: 점선은 호변이성질체 이중 결합을 나타내고; R2"는 화학식 XI의 것이고:
여기서 물결선은 화학식 X 구조의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고; Ar은 임의로 치환된 C5-7 아릴렌이고; Xa은 링커 유닛으로의 접합을 위한 반응성 또는 활성화 가능한 기로부터의 것이고, 여기서 Xa는 -O-, -S-, -C(O)O-, -C(O)-, -NHC(O)-, 및 -N(RN)-를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 RN는 H 또는 C1-C4 알킬, 및 (C2H4O)mCH3이고, 여기서 아래첨자 m은 1, 2 또는 3이고;
(i) Q1은 단일 결합이고; Q2는 단일 결합 또는 -Z-(CH2)n-이고, 여기서 Z는 단일 결합, O, S, 및 NH로 이루어진 군에서 선택되고; 아래첨자 n은 1, 2 또는 3이거나, 또는 (ii) Q1은 -CH=CH-이고, Q2은 단일 결합이고;
R2'는 임의로 치환된 C1-C4 알킬 또는 C5-10 아릴 기로서, 할로, 니트로, 시아노, C1-C6 에테르, C1-C7 알킬, C3-C7 헤테로사이클릴 및 비스-옥시-C1-C3 알킬렌로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 치환체, 특히 하나의 그러한 치환체로 임의로 치환되고, 여기서 점선은 R2'에 대한 단일 결합을 나타내거나, 또는 R2'는 임의로 치환된 C1-C4 알케닐렌이고, 여기서 점선은 R2'에 대한 이중 결합을 나타내고; R6" 및 R9"은 독립적으로 H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', 니트로, Me3Sn 및 할로로 이루어진 군에서 선택되고; R7"은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', 니트로, Me3Sn 및 할로로 이루어진 군에서 선택되고; R 및 R'은 독립적으로 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C3-C20 헤테로사이클릴 및 임의로 치환된 C5-C20 아릴로 이루어진 군에서 선택되고;
(a) R10"은 H이고, R11"은 OH 또는 ORA이고, 여기서 RA는 C1-C4 알킬이고, (b) R10" 및 R11"은 이들이 결합된 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나, 또는 (c) R10"은 H이고 R11"은 SOzM이며, 여기서 아래첨자 z는 2 또는 3이고 M은 1가 약학적으로 허용되는 양이온이거나, 또는 (d) R10', R11' 및 R10"은 각각 H이고 R11"은 SOzM이거나, 또는 R10' 및 R11'은 각각 H이고 R10" 및 R11"은 이들이 결합된 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나, 또는 R10", R11" 및 R10'는 각각 H이고 R11'는 SOzM이거나, 또는 R10" 및 R11"는 각각 H이고 R10' 및 R11'는 이들이 결합된 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하고; 여기서, 아래첨자 z는 2 또는 3이고 M은 1가 약학적으로 허용되는 양이온이고;
R"는 C3-12 알킬렌 기이고, 이의 탄소 사슬은 하나 이상의 헤테로원자, 특히O, S 또는 NRN2 (여기서 RN2는 H 또는 C1-C4 알킬임) 중 하나, 및/또는 방향족 고리, 특히 벤젠 또는 피리딘 중 하나에 의해 선택적으로 방해받고; Y 및 Y'는 O, S, 및 NH로 이루어진 군에서 선택되고; R6', R7', R9'는 각각 R6", R7" 및 R9"과 동일한 군으로부터 선택되고, R10' 및 R11'각각 R10" 및 R11"와 동일하고, 여기서 R11" 및 R11'이 SOzM인 경우, 각 M은 1가의 약학적으로 허용되는 양이온이거나 또는 함께 2가의 약학적으로 허용되는 양이온을 나타낸다.
일부 실시양태에서, PBD 약물 유닛은 DNA 마이너 홈 결합제이고 다음 화학식 XI 또는 XII의 일반 구조를 갖거나:
또는 이의 염인 PBD 이량체를 통합하고, 여기서: 점선은 호변이성질체 이중 결합을 나타내고; Q는 하기 화학식 XIV의 것이고:
여기서 물결선은 어느 방향으로든 Y' 및 Y에 대한 공유 부착 부위를 나타내고; Ar은 Xa로 치환된, 달리 임의로 치환된 C5-7 아릴렌 기이고, 여기서 Xa는 링커 유닛에 대한 접합을 위한 활성화 가능 기로부터의 것이로, 여기서 Xa는 -O-, -S-, -C(O)O-, -C(O)-, -NHC(O)-, 및 -N(RN)-을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 RN은 H 또는 C1-C4 알킬, 및 (C2H4O)mCH3이고, 여기서 아래첨자 m은 1, 2 또는 3이고;
(i) Q1은 단일 결합이고; Q2는 단일 결합 또는 -(CH2)n-이고, 여기서 아래첨자 n은 1, 2 또는 3이거나, 또는 (ii) Q1은 -CH=CH-이고, Q2는 단일 결합 또는 -CH=CH-이고;
R2'는 임의로 치환된 C1-C4 알킬 또는C5-10 아릴 기로, 할로, 니트로, 시아노, C1-C6 에테르, C1-C7 알킬, C3-C7 헤테로사이클릴 및 비스-옥시-C1-C3 알킬렌로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 치환체, 특히 하나의 그러한 치환체로 임의로 치환되고, 여기서 점선은 R2'에 대한 단일 결합을 나타내거나, 또는 R2'는 임의로 치환된 C1-C4 알케닐렌이고, 여기서 점선은 R2'에 대한 이중 결합을 나타내고;
R2"는 임의로 치환된 C1-C4 알킬 또는C5-10 아릴 기로, 할로, 니트로, 시아노, C1-C6 에테르, C1-C7 알킬, C3-C7 헤테로사이클릴 및 비스-옥시-C1-C3 알킬렌로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 치환체, 특히 하나의 그러한 치환체로 임의로 치환되고; R6" 및 R9"은 독립적으로 H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', 니트로, Me3Sn 및 할로로 이루어진 군에서 선택되고; R7"은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', 니트로, Me3Sn 및 할로로 이루어진 군에서 선택되고; R 및 R'은 독립적으로 임의로 치환된 C1-C12 알킬, 임의로 치환된 C3-C20 헤테로사이클릴 및 임의로 치환된 C5-C20 아릴로 이루어진 군에서 선택되고;
(a) R10"은 H이고, R11"은 OH 또는 ORA이고, 여기서 RA은 C1-C4 알킬이거나, 또는 (b) R10" 및 R11"는 이들이 결합한 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나, 또는 (c) R10"는 H이고 R11"는 SOzM이고, 여기서 아래첨자 z는 2 또는 3이고 M은 1가의 약학적으로 허용되는 양이온이거나, 또는 (d) R10', R11' 및 R10"은 각각 H이고 R11"은 SOzM이거나, 또는 R10' 및 R11'은 각각 H이고 R10" 및 R11"은 이들이 결합한 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나, 또는 R10", R11" 및 R10'은 각각 H이고 R11'은 SOzM이거나, 또는 R10" 및 R11"은 각각 H이고 R10' 및 R11'는 이들이 결합한 질소 및 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하고; 여기서 아래첨자 z는 2 또는 3이고 M은 1가의 약학적으로 허용되는 양이온이고;
Y 및 Y'은 O, S, 및 NH로 이루어진 군에서 선택되고; R"은 하나 이상의 선택적 치환체를 나타낸고; R6', R7', R9'은 각각 R6", R7" 및 R9"과 동일한 군에서 선택되고, R10' 및 R11'은 각각 R10" 및 R11"과 동일하고, 여기서 R11" 및 R11'이 SOzM일 경우, 각 M은 1가의 약학적으로 허용되는 양이온이거나 또는 함께 2가의 약학적으로 허용되는 양이온을 나타낸다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X, 화학식 XII 또는 화학식 XIII의 일반 구조를 갖고 여기서 하나의 R7"는 H, OH 및 OR로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 R은 화학식 각각에 대해 앞서 정의한 바와 같거나, 또는 C1-4 알킬옥시 기이고, 특히 R7"은 -OCH3이다. 일부 실시양태에서, Y 및 Y'는 O이고, R9"은 H이거나, 또는 R6"은 H 및 할로로 이루어진 군에서 선택된다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X의 일반 구조를 갖고, 여기서 Ar은 페닐렌이고; Xa는 -O-, -S- 및 -NH-로 이루어진 군에서 선택되고; Q1는 단일 결합이고, 화학식 XII의 일부 실시양태에서 Ar은 페닐렌이고, X는 -O-, -S-, 및 -NH-로 이루어진 군에서 선택되는, Q1 -CH2- 및 Q2는 -CH2-이다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X의 일반 구조를 갖고 여기서 Xa는 NH이다. 일부 실시양태에서, PBD 약물 유닛은 화학식 X의 것이고 여기서 Q1은 단일 결합이고 Q2는 단일 결합이다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X, 화학식 XII 또는 화학식 XIII의 일반 구조를 갖고 여기서 R2는 임의로 치환된 C5-7 아릴 기로 점선은 R2'에 대한 단일 결합을 나타내고, 존재하는 경우 치환체는 독립적으로 할로, 니트로, 시아노, C1-7 알콕시, C5-20 아릴옥시, C3-20 헤테로사이클리옥시, C1-7 알킬, C3-7 헤테로사이클릴 및 비스-옥시-C1-3 알킬렌으로 이루어진 군에서 선택되고, 여기서 C1-7 알콕시 기는 아미노기로 임의로 치환되고, C3-7 헤테로사이클릴 기가 C6 질소 함유 헤테로사이클릴 기일 경우, C1-4 알킬 기로 임의로 치환된다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X, 화학식 XI 또는 화학식 XII의 일반 구조를 갖고 여기서 Ar은 치환되는 경우 1 내지 3개의 그러한 치환체를 갖는 임의로 치환된 페닐이다.
일부 실시양태에서, PBD 이량체는 화학식 X, 화학식 XI 또는 화학식 XII의 일반 구조를 갖고 여기서 R10" 및 R11"은 질소-탄소 이중 결합을 형성하고/거나 R6', R7', R9', 및 Y'은 각각 R6", R7", R9", 및 Y과 동일하다.
일부 실시양태에서, PBD 약물 유닛은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, PBD 약물 유닛은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물에서 약물 유닛이 링커 유닛에 부착되는 지점을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 약물 유닛은 안트라사이클린 화합물의 구조를 통합하고 있다. 이론에 얽매이지 않고, 이들 화합물의 세포 독성은 어느 정도는 토포이소머라제 억제에 기인할 수도 있다. 이들 실시양태 중 일부에서, 안트라사이클린 화합물은 Minotti, G., 등, "Anthracyclins: molecular advances and pharmacologic developments in antitumor activity and cardiotoxicity" Pharmacol Rev. (2004) 56(2): 185-229에 개시된 구조를 갖는다. 일부 실시양태에서, 안트라사이클린 화합물은 독소루비신, 이다루비신, 다우노루비신, 독소루비신 프로필옥사졸린 (DPO), 모르폴리노-독소루비신 또는 시아노모르폴리노-독소루비신이다.
보다 바람직한 실시양태에서 -D로 통합되어 있는 오리스타틴 약물 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)이다.
일부 실시양태에서, 리간드-약물 접합체 조성물은 다음과 같은 구조로 표시되고:
및/또는
여기서 아래첨자 a는 1이므로, A가 존재하고, 여기서 A는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기이고; Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), -RPEG1-O-(CH2CH2O)n'-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고, RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬이고, 아래첨자 n'은 1 내지 36의 범위이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 선택적으로 양성자화되고; R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, 또는 -CH(CO2H)-CH2Ph이고; R34는 이소프로필이고 R35는 메틸 또는 -(CH2)3NH(C=O)NH2이다.
일부 실시양태에서, 리간드-약물 접합체 조성물은 다음과 같은 구조로 표시되고:
및/또는
여기서 아래첨자 a는 1이므로 A는 존재하고, 여기서 A는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기이고; Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), -RPEG1-O-(CH2CH2O)n'-RPEG2이고; RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고; RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬이고; 아래첨자 n'은 1 내지 36이고; 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소 원자는 선택적으로 양성자화되고; R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, 또는 -CH(CO2H)-CH2Ph이고; R34는 이소프로필이고; R35는 메틸 또는 -(CH2)3NH(C=O)NH2이다.
일부 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 화합물은 하기로 표시되거나:
또는 이의 염 (예를 들어, 이의 약학적으로 허용되는 염)이고, 여기서, L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 24의 정수이다. 여기서 L이 항체인 경우, 상기 화학 구조에서 L에 결합된 황 원자 S는 항체의 시스테인 잔기의 측쇄의 황을 나타내는 것으로 이해된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 또는 4 또는 8이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 2, 4, 6, 또는 8이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 2이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 4이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 6이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p'는 8이다. 또한, 상기 나열된 리간드 약물 접합체 화합물 중 임의의 것을 함유하는 리간드 약물 접합체 조성물도 포함되며, 여기서 p'는 본원에 기술된 바와 같이 p로 대체된다.
2.3 약물 링커 화합물
약물 링커 화합물은 하기 화학식 I의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 LU'는 LU 전구체이고; D'는 바람직하게는 서로 동일한, 1 내지 4개의 약물 유닛을 나타내고, 여기서 약물 링커 화합물은 화학식 IA의 구조에 의해 추가로 정의되고:
여기서 LB'는 리간드 공유 결합 모이어티 전구체이고; A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고; 아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고고, B는 선택적 분기 유닛이고; 아래첨자 b는 0 또는 1로 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내되, 단, 아래첨자 q가 2 내지 4에서 선택될 경우, 아래첨자 b는 1이고
LO는 다음 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서 A'는 제2 선택적 스트레처 유닛이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고, Y는 선택적 스페이서 유닛이고, 아래첨자 y는 0, 1 또는 2로 각각 스페이서 유닛의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고, P1, P2 및 P3은 아미노산 잔기로서, 함께 정상 조직의 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직의 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 함께 정상 조직에 비해 종양 조직으로 화학식 IA 약물 링커 화합물로부터 제조된 접합체의 바람직한 생체 분포를 제공하고, 여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드-염기 접합체 투여와 관련된 부작용에 대한 책임이 있고, 여기서, 아래첨자 y가 1 또는 2인 경우 P1과 Y 사이의 공유 결합에서, 아래첨자 y가 0인 경우 P1과 D 사이의 공유 결합에서 단백질 분해 절단이 일어나거나, 또는
LO는 다음 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서, A', a', Y 및 y는 이전 의미를 유지하고, P1, P2 및 P3는 아미노산 잔기이며, 선택적으로 P-1 아미노산과 함께 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 함께 정상 조직에 비해 종양 조직으로 화학식 IA 약물 링커 화합물로부터 제조된 접합체의 바람직한 생체 분포를 제공하고, 여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드-염기 접합체 투여와 관련된 부작용에 대한 원인이 되고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출하거나, 또는
LO는 다음 화학식을 갖거나:
또는
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 2차 링커이고, 여기서 A', a', Y 및 y는 이전 의미를 유지하고 P-1 및 P1, P2, P3...Pn은 인접한 아미노산 잔기이며, 여기서 아래첨자 n은 이들 아미노산 중 최대 12개 (예를 들어, 3 내지 12 또는 3 내지 10개)를 제공하는 정수 값이고, P1, P2 및 P3은 선택적으로 P-1과 함께 정상 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 균질체에 의한 단백질 분해에 대한 선택성을 제공하고/거나 함께 정상 조직에 비해 종양 조직으로 약물 링커 화합물로부터 제조된 접합체의 바람직한 생체 분포를 제공하고, 여기서, 접합체로부터 정상 조직을 향해 방출되는 유리 약물의 세포 독성은 적어도 부분적으로는 일반적으로 치료적 유효량의 비교 디펩타이드-염기 접합체 투여와 관련된 부작용에 대한 책임이 있고, 여기서, 단백질 분해 절단은 P1과 Yy-D 사이 또는 P1과 P-1 사이의 공유 결합에서 발생하여 각각 Yy-D 또는 [P-1]-Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출하고, 여기서 후자는 엑소펩티다제 분해를 거쳐 Yy-D 구조를 갖는 링커 단편을 방출한다. 두 경우 모두 Yy-D 링커 단편은 자발적 분해를 거쳐 유리 약물로서 D의 방출을 완료한다.
추가 P4, P5... Pn 아미노산 잔기는 -Yy-D 또는 -[P-1]-Yy-D 단편을 제공하는 절단 부위를 변경하지 않도록 선택되지만, 대신 화학식 IA 약물 링커 화합물로부터 제조된 리간드 약물 접합체에 대해 원하는 생리화학적 및/또는 약동학적 특성을 유지하도록 선택되고, 여기서, 종양 조직으로의 접합체의 생체 분포가 증가와 같은 원하는 생리화학적 및/또는 약동학적 특성은 주로 P1, P2 및 P3 아미노산 잔기에 의해 제공되고, 이는 정상적인 조직 분포에 해를 끼치거나 비교 디펩타이드-기반 접합체에 비해 생리화학적 및/또는 약동학적 특성을 향상시킨다.
LO의 이들 실시양태 중 어느 하나에서, 아래첨자 q가 1이면, 아래첨자 b는 0이므로 B는 부재하고 A'는 A의 선택적 하위 단위가 되고, 아래첨자 q가 2, 3 또는 4인 경우, 아래첨자 b는 1이므로 B가 존재하고, A'는 표시된 대로 LO의 구성 요소로 남고, A의 선택적 하위 단위는 이후 AO로 표시된다.
약물 링커 화합물은 화학식 1의 리간드 약물 접합체를 제조하는데 특히 유용하므로, LU'는 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티에 대한 LU 전구체이다.
일부 실시양태에서 약물 링커 화합물의 LB'-A-는 아래 구조 중 하나를 갖거나 이를 포함하거나:
또는 이의 염이고, 여기서, LG1은 표적화 약제 친핵체에 의한 친핵성 치환에 적합한 이탈기이고, LG2는 표적화 약제에 대한 아미드 결합 형성에 적합한 이탈기, 또는 표적화 약제에 대한 아미드 결합 형성에 적합한 활성화 가능 카르복실산을 제공하는 -OH이고; 물결선은 약물 링커 화합물 구조의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타낸다.
아래첨자 q가 1인 화학식 IA 약물 링커 화합물의 다른 실시양태에서, LB'-A-는 아래 구조 중 하나를 갖거나 이를 포함하거나:
또는 이의 염이고, 여기서, A'는 해당 하위 단위가 존재하는 경우 A2로 표시되기도 하는, A의 선택적 제2 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고; A'에 인접한 물결선은 A의 다른 하위 단위 또는 펩타이드 절단 가능 유닛에 대한 공유 부착 부위를 나타내고; [HE]는 선택적 가수분해 강화 유닛으로, A 또는 그의 제1 하위 단위가 제공하는 구성 요소이고; [BU]는 염기성 유닛이고; Ra2는 임의로 치환된 C1-C12 알킬 기이고; 점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내며, 상기 고리화가 없는 경우, BU는 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로서 1차, 2차 또는 3차 아민 작용기를 갖는 비-사이클릭 염기성 유닛이거나, 또는 상기 고리화가 존재할 경우, BU는 Ra2 및 BU가 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께, 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 2차 또는 3차 아민 작용기의 골격 염기성 질소 원자를 함유하는 임의로 치환된 스피로 C3-C20 헤테로사이클로를 정의하는 고리화된 염기성 유닛이고,
여기서 비-사이클릭 염기성 유닛 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자는 염기성 질소 원자의 치환 정도에 따라 선택적으로 질소 보호기에 의해 적합하게 보호되거나 선택적으로 양성자화된다.
아래첨자 q가 2, 3 또는 4인 다른 실시양태에서, LB'-A-는 아래 구조 중 하나를 포함하거나:
또는 이의 염이고, 여기서 AO에 인접한 물결선은 B에 대한 공유 결합 부위를 나타내며, AO는 해당 하위 단위가 존재하는 경우, A2로 표시되기도 하는 A의 선택적 하위 단위이고, 나머지 가변기는 아래첨자 q가 1인 화학식 IA 약물 링커 화합물에 정의된 바와 같다.
아래첨자 q가 1인 일부 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물의 LB'-A-는 아래 구조 중 하나를 갖거나 이를 포함하거나:
또는 이의 염, 특히 산 부가염이고, 여기서, A' 및 아래첨자 a'는 앞서 설명한 바와 같다. 이들 LB'-A- 구조는 각각 리간드 약물 접합체 화합물의 LSS 모이어티로 전환될 수 있기 때문에, 때때로 LSS'로 표시되는 예시적인 자기 안정화 전구체 모이어티이다.
다른 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물의 LB'-A-는 아래 구조 중 하나를 갖거나 이를 포함하고:
여기서 A' 및 아래첨자 a'는 아래첨자 q가 1인 화학식 IA 약물 링커 화합물에 대해 앞서 설명한 바와 같다.
LSS'-함유 약물 링커 화합물의 바람직한 실시양태에서, LSS' 모이어티는 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛을 함유한다. 펩타이드 절단 가능 유닛 가 트리펩타이드인 이들 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IB의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서, HE는 선택적 가수분해 강화 유닛이고, A'는 존재하는 경우, 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고; 아래첨자 P는 1 또는 2이고; 아래첨자 Q는 1 내지 6의 범위이고, 바람직하게는 아래첨자 Q는 1 또는 2, 보다 바람직하게는 아래첨자 Q는 아래첨자 P와 동일한 값을 갖고; 여기서 Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고, RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되거나, 또는 Ra3은 적합한 산-불안정 보호기와 같은 질소 보호기이고; P1, P2 및 P3은 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티를 위한 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 어느 하나에 대해 앞서 정의한 바와 같고; 나머지 가변기는 화학식 IA의 약물 링커 화합물에 대해 설명된 바와 같다.
화학식 IA의 LSS'-함유 약물 링커 화합물의 다른 바람직한 실시양태에서, LSS' 모이어티는 비-사이클릭 사이클릭 염기성 유닛을 함유한다. 펩타이드 절단 가능 유닛이 디펩타이드인 해당 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커 화합물은 하기 화학식 IE의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 HE는 선택적 가수분해 강화 유닛이고; A'는 존재하는 경우, 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a’는 0 또는 1로, 각각 A’의 부재 또는 존재를 나타내고; 아래첨자 x는 1 또는 2이고; Ra2는 수소 또는 -CH3 또는 -CH2CH3이고; Ra3은 각 경우에 독립적으로 수소, -CH3 또는 -CH2CH3이거나, 또는Ra3은 둘 다 이들이 부착된 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 여기서 그렇게 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화하고; P1, P2 및 P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 임의의 하나에 대해 이전에 정의된 바와 같고, 나머지 가변기는 화학식 IA의 약물 링커 화합물에 대해 설명된 바와 같다.
다른 바람직한 실시양태에서, 1차 링커는 염기성 유닛을 갖지 않는다. 펩타이드 절단 가능 유닛이 트리펩타이드인 1차 링커를 갖는 예시적인 약물 링커는 화학식 IH의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 HE는 선택적 가수분해 강화 유닛이고; A'는 존재하는 경우, 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a’는 0 또는 1로, A’의 부재 또는 존재를 나타내고; P1, P2 및 P3은 리간드 약물 접합체 화합물의 펩타이드 절단 가능 유닛의 실시양태 중 어느 하나에 대해 이전에 정의된 바와 같고 나머지 가변 기는 화학식 IA의 약물 링커 화합물의 실시양태 중 임의의 것에 대해 설명된 바와 같다.
링커 유닛에 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛이 있는 보다 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 아래의 구조로 표시되거나:
링커 유닛에 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛이 있는 보다 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 아래의 구조로 표시되거나:
선택적으로 염 형태로, 특히 화학적으로 약학적으로 허용되는 염 형태로, 링커 유닛에 비-사이클릭 염기성 유닛이 있는 보다 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 아래의 구조로 표시되거나:
선택적으로 염 형태로, 여기서 LSS' 함유 약물 링커 화합물을 갖는 가변기는 비-사이클릭 또는 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 화합물에 대해 앞서 설명한 바와 같다.
전술한 약물 링커 모이어티 중 임의의 하나에서, HE는 바람직하게는 -C(=O)로서 존재하고/거나 아래첨자 y가 1 또는 2로, 각각 1 또는 2개의 자가 용해성 스페이서 유닛의 존재를 나타낸다.
특히 바람직한 실시양태에서, 상기 약물 링커 화합물 중 어느 하나에서 -[P3]-[P2]-[P1]-트리페타이드는 D-Leu-Leu-Cit, D-Leu-Leu-Lys, D-Leu-Leu-Met(O), D-Leu-Ala-Glu 또는 Pro-Ala(Nap)-Lys이고, 여기서 Met(O)는 황 원자가 산화되어 설폭사이드로 변한 메티오닌, Cit은 시트룰린, Ala(Nap)는 메틸 측쇄가 나프트트-1-일로 치환된 알라닌이다.
링커 유닛 내에 헤테로사이클로 사이클릭 염기성 유닛이 있는 특히 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A’의 부재 또는 존재를 나타내고, 여기서, A'는 제2 선택적 스트레처 유닛 또는 제1 선택적 스트레처 유닛의 하위 단위에 대해 본원에 기술된 화학식 3a, 4a 또는 5a의 아민 함유 산 잔기이거나, A'는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기이고; D는 약물 링커 모이어티의 링커 유닛에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖는 세포 독성 약물이다.
링커 유닛에 비-사이클릭 염기성 유닛이 있는 다른 특히 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서, 가변기는 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 화합물에 대해 앞서 설명한 바와 같다.
염기성 유닛이 없는 다른 특히 바람직한 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서, 가변기는 사이클릭 염기성 유닛을 갖는 약물 링커 화합물에 대해 앞서 설명한 바와 같다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 다음과 같이 표시되거나:
또는 이들의 염이다.
일부 실시양태에서, 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염인 약물 링커 전구체 화합물이 제공되고, 여기서 W, Y, 아래첨자 y, 및 D는 이전 의미를 유지하고, PG는 아민 보호기 또는 수소이다. 일부 실시양태에서, 아민 보호기는 Fmoc이다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 P-1, P1, P2, P3 ... Pn, Y, 아래첨자 y, 및 D은 이들의 이전 의미를 유지하고, PG는 아민 보호기 또는 수소이다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 P1, P2, P3, R8, R9, R33, V, Y', Z1, Z2, 및 D는 이들의 이전 의미를 유지하고, PG는 아민 보호기 또는 수소이다.
본원에 기재된 약물 링커 화합물 중 임의의 것에서, LB'-Aa-Bb-A'a'- 부분은 PG로 대체되어 다음의 구조로 표시되는 약물 링커 전구체 화합물을 형성할 수 있고:
또는 이의 염이고, 여기서 P1, P2, P3, 및 D은 이들의 이전 의미를 유지하고, PG는 아민 보호기 또는 수소이다.
약물 링커 전구체는 항체와 같은 리간드에 부착하기 위한 스트레처 유닛을 사용하여 더 변형될 수 있는 것으로 이해된다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체는 항체의 시스테인 잔기에 부착하기에 적합한 스트레처 유닛와 추가적으로 반응될 수 있다. 항체의 시스테인 잔기에 부착하기 위한 적합한 스트레처 유닛은 말레이미드 모이어티를 포함하는 스트레처 유닛을 포함하여 본원에 설명된 것이다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체는 항체의 라이신 잔기에 부착하기에 적합한 스트레처 유닛와 추가로 반응할 수 있다. 항체의 라이신 잔류물에 부착하기 위한 적합한 스트레처 유닛이 본원에 설명되며, 여기에는 NHS 에스테르 모이어티를 포함하는 스트레처 유닛이 포함된다. 일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체는 약물 링커 화합물의 합성에서 중간체이다.
예를 들어, 리간드 약물 접합체 (LDC) 화합물, 약물 링커 화합물, 약물 링커 모이어티, 펩타이드 절단 가능 유닛, 스페이서 유닛, 및 약물 유닛에 대한 W, P-1, P1, P2, P3 ... Pn,Y, 아래첨자 y, R8, R9, R33, V, Y', Z1, Z2, 및 D에 대해 본원에 설명된 실시양태 중 임의의 것에서, 실시양태는 본원에 설명된 약물 링커 전구체 화합물에 대해서도 적용 가능하다.
일부 실시양태에서, 약물 링커 전구체 화합물은 다음으로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 PG는 아민 보호기 (예를 들어, Fmoc) 또는 수소이다.
2.4 링커 화합물
링커 화합물은 화학식 IA-L의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 LB', A, 아래첨자 a, B, 아래첨자 b, LO, 및 아래첨자 q는 이들의 이전 의미를 유지하고, RG는 반응성 기이다. 일부 실시양태에서, 반응성 기는 4-니트로페녹시 또는 퍼플루오로페녹시이다. 일부 실시양태에서, 반응성 기는 4-니트로페녹시이다.
일부 일부 실시양태에서, 링커 화합물은 화학식 IA-L-1의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 LR', A', 아래첨자 a', P1, P2, P3, Y, 및 아래첨자 y는 이들의 이전 의미를 유지하고, RG는 반응성 기이다.
일부 일부 실시양태에서, 링커 화합물은 화학식 IA-L-2의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 HE, A', 아래첨자 a', P1, P2, P3, Y, 및 아래첨자 y는 이들의 이전 의미를 유지하고, RG는 반응성 기이다.
일부 일부 실시양태에서, 링커 화합물은 화학식 IA-L-3 또는 화학식 IA-L-4의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 P1, P2, 및 P3은 이들의 이전 의미를 유지하고, RG은 반응성 기이다. 일부 실시양태에서, RG는 퍼플루오로페녹시이다. 일부 실시양태에서, RG는 4-니트로페녹시이다.
리간드 약물 접합체 (LDC) 화합물, 1차 링커, 2차 링커, 약물 링커 화합물, 약물 링커 모이어티, 펩타이드 절단 가능 유닛, 스트레처 유닛, 및 스페이서 유닛와 관련하여 LB', A, 아래첨자 a, B, 아래첨자 b, LO, 아래첨자 q, LR', A', 아래첨자 a', P1, P2, P3, Y, 아래첨자 y, 및 HE에 대해 본원에 기술된 실시양태 중 임의의 것에서, 실시양태는 화학식 IA-L, 화학식 IA-L-1, 화학식 IA-L-2, 화학식 IA-L-3, 또는 화학식 IA-L-4의 화합물과 같이 본원에 기술된 링커 화합물에 대해서도 적용 가능하다.
본원에 기술된 약물 링커 화합물 중 임의의 것에서, 약물 유닛 (D)는 적합한 반응성 기 (즉, 약물 유닛 (D)에 대한 부착에 적합한 기)로 대체되어 링커 화합물, 예를 들어, 화학식 IA-L, 화학식 IA-L-1, 화학식 IA-L-2, 화학식 IA-L-3, 또는 화학식 IA-L-4로 표시되는 구조를 형성할 수 있다. 반응성 기는 링커 화합물이 본원에 설명된 오리스타틴 약물 화합물 (예컨대 MMAE 또는 MMAF)과 반응하여 약물 링커 화합물를 형성할 수 있는 기이다.
일부 실시양태에서, 링커 화합물은 다음으로 표시되거나:
또는 이의 염이고, 여기서 RG는 반응성 기이다.
3. 리간드
예시적인 항원이 아래에 제공된다. 표시된 항원에 결합하는 예시적인 항체는 괄호 안에 나타나 있다.
일부 실시양태에서, 항원은 종양 관련 항원이다. 일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 단백질이다: ANTXR1, BAFF-R, CA9 (예시적 항체에는 지렌툭시맙을 포함됨), CD147 (예시적 항체에는 가빌리모맙 및 메투주맙이 포함됨), CD19, CD20 (예시적 항체에는 디보질리맙 및 이브리투모맙 티욱세탄이 포함됨), PD-L1이라고도 하는 CD274 (예시적 항체에는 아데브렐리맙, 아테졸리주맙, 가리불리맙, 두발루맙, 및 아벨루맙이 포함됨), CD30 (예시적 항체에는 이라투무맙 및 브렌툭시맙이 포함됨), CD33 (예시적 항체에는 린투주맙이 포함됨), CD352, CD45 (예시적 항체에는 아파미스타맙이 포함됨), CD47 (예시적 항체에는 레타플리맙 및 마그롤리맙이 포함됨), CLPTM1L, DPP4, EGFR, ERVMER34-1, FASL, FSHR, FZD5, FZD8, GUCY2C (예시적 항체에는 인두사투맙이 포함됨), IFNAR1 (예시적 항체에는 파랄리모맙이 포함됨), IFNAR2, LMP2, MLANA, SIT1, TLR2/4/1 (예시적 항체에는 토마랄리맙이 포함됨), TM4SF5, TMEM132A, TMEM40, UPK1B, VEGF 및 VEFGR2 (예시적 항체에는 겐툭시맙이 포함됨).
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 수송 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 수송 단백질이다: ASCT2 (예시적인 항체에는 이닥타맙이 포함됨), MFSD13A, 민클, NOX1, SLC10A2, SLC12A2, SLC17A2, SLC38A1, SLC39A5, LIV1이라고도 하는 SLC39A6 (예시적인 항체에는 라디라투주맙이 포함됨), SLC44A4, SLC6A15, SLC6A6, SLC7A11, 및 SLC7A5.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 당단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 당단백질이다: CA-125, CA19-9, CAMPATH-1 (예시적인 항체에는 알렘투주맙이 포함됨), 암 배아 항원 (예시적인 항체에는 아씨투모맙, 세르구투주맙, 아무날류킨, 및 라베투주맙이 포함됨), CD112, CD155, CD24, CD247, CD37 (예시적인 항체에는 릴로토맙이 포함됨), CD38 (예시적인 항체에는 펠자르타맙이 포함됨), CD3D, CD3E (예시적인 항체에는 포랄루맙 및 테플리주맙이 포함됨), CD3G, CD96, CDCP1, CDH17, CDH3, CDH6, CEACAM1, CEACAM6, CLDN1, CLDN16, CLDN18.1 (예시적인 항체에는 졸베툭시맙이 포함됨), CLDN18.2 (예시적인 항체에는 졸베툭시맙이 포함됨), CLDN19, CLDN2, CLEC12A (예시적인 항체에는 테포디타맙이 포함됨), DPEP1, DPEP3, DSG2, 엔도시알린 (예시적인 항체에는 온툭시주맙이 포함됨), ENPP1, EPCAM (예시적인 항체에는 아데카투무맙이 포함됨), FN, FN1, Gp100, GPA33, gpNMB (예시적인 항체에는 글렘바투무맙이 포함됨), ICAM1, L1CAM, LAMP1, CD228로도 알려진 멜프, NCAM1, 넥틴-4 (예시적인 항체에는 엔포르투맙이 포함됨), PDPN, PMSA, PROM1, PSCA, PSMA, 시글렉 1-16, SIRPa, SIRPg, TACSTD2, TAG-72, 테나신, TF로도 알려진 조직 인자 (예시적인 항체에는 티소투맙이 포함됨) 및 ULBP1/2/3/4/5/6.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 수용체 키나아제이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 수용체 키나아제이다: ALK, Axl (예시적인 항체에는 틸베스타맙이 포함됨), BMPR2, DCLK1, DDR1, EPHA 수용체, EPHA2, HER2라고도 알려진 ERBB2 (예시적인 항체에는 트라스투주맙, 베바시주맙, 퍼투주맙, 및 마르게툭시맙이 포함됨), ERBB3, FLT3, PDGFR-B (예시적인 항체에는 리누쿠맙이 포함됨), PTK7 (예시적인 항체에는 코페투주맙이 포함됨), RET, ROR1 (예시적인 항체에는 써르투주맙), ROR2, ROS1 및 Tie3.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 관련 또는 막 국소화 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 관련 또는 막 국소화 단백질이다: ALPP, ALPPL2, ANXA1, FOLR1 (예시적인 항체에는 팔레투주맙이 포함됨), IL13Ra2, IL1RAP (예시적인 항체에는 니다닐리맙이 포함됨), NT5E, OX40, Ras 변이체, RGS5, RhoC, SLAMF7 (예시적인 항체에는 엘로투주맙이 포함됨) 및 VSIR.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 G-단백질 결합 수용체(GPCR)이다. 예를 들어, 다음 항원은 GPCR이다: CALCR, CD97, GPR87, 및 KISS1R.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 세포 표면 관련 또는 세포 표면 수용체이다. 예를 들어, 다음 항원은 세포 표면 관련 및/또는 세포 표면 수용체이다: B7-DC, BCMA, CD137, CD 244, CD3 (예시적인 항체는 오텔릭시주맙 및 비실리주맙을 포함), CD48, CD5 (예시적인 항체는 졸리모맙 아리톡스를 포함), CD70 (예시적인 항체는 쿠사투주맙 및 보르세투주맙을 포함), CD74 (예시적 항체는 밀라투주맙 포함), CD79A, CD-262 (예시적 항체는 티가투주맙 포함), DR4 (예시적 항체는 마파투무맙 포함), FAS, FGFR1, FGFR2 (예시적 항체는 아프루투맙 포함), FGFR3 (예시적 항체는 보파타맙 포함), FGFR4, GITR (예시적 항체는 라기필리맙 포함), Gpc3 (예시적 항체는 라기필리맙 포함), HAVCR2, HLA-E, HLA-F, HLA-G, LAG-3 (예시적 항체는 엔셀리맙 포함), LY6G6D, LY9, MICA, MICB, MSLN, MUC1, MUC5AC, NY-ESO-1, OY-TES1, PVRIG, 시알릴-톰센-누보 항원, 정자 단백질 17, TNFRSF12, 및 uPAR.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 케모카인 수용체 또는 사이토카인 수용체이다. 예를 들어, 다음 항원은 케모카인 수용체 또는 사이토카인 수용체이다: CD115 (예시적 항체는 악사틸리맙, 카비랄리주맙, 및 에막투주맙 포함), CD123, CXCR 4 (예시적 항체는 울로쿠플루맙 포함), IL-21R, 및 IL-5R (예시적 항체는 벤랄리주맙 포함).
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 공동 자극, 표면 발현 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 공동 자극, 표면 발현 단백질이다: B7-H3 (예시적 항체는 에노블리투주맙 및 옴부르타맙 포함), B7-H4, B7-H6, 및 B7-H7.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 전사인자 또는 DNA 결합 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 전사인자이다: ETV6-AML, MYCN, PAX3, PAX5 및 WT1. 다음 단백질은 DNA 결합 단백질이다: BORIS.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 통합 막 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 통합 막 단백질이다: SLITRK6 (예시적인 항체는 시트라투맙 포함), UPK2, 및 UPK3B.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 인테그린이다. 예를 들어, 다음과 같은 항원은 인테그린 항원이다: 알파 V 베타 6, ITGAV (예시적인 항체는 아비투주맙 포함), ITGB6, 및 ITGB8.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 당지질이다. 예를 들어, 다음은 당지질 항원이다: FucGM1, GD2 (예시적 항체는 디누툭시맙 포함), GD3 (예시적 항체에는 미투모맙 포함), GloboH, GM2, 및 GM3 (예시적 항체는 라코투모맙 포함).
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 세포 표면 호르몬 수용체이다. 예를 들어, 다음 항원은 세포 표면 호르몬 수용체이다: AMHR2 및 안드로겐 수용체.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 프로테아제이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 프로테아제이다: ADAM12, ADAM9, TMPRSS11D, 및 메탈로프로테아제.
일부 실시양태에서, 종양 관련 항원은 암을 가진 개체에서 비정상적으로 발현된다. 예를 들어, 다음 항원은 암을 가진 개체에서 비정상적으로 발현될 수 있다: AFP, AGR2, AKAP-4, ARTN, BCR-ABL, C5 보체, CCNB1, CSPG4, CYP1B1, De2-7 EGFR, EGF, Fas 관련 항원 1, FBP, G250, GAGE, HAS3, HPV E6 E7, hTERT, IDO1, LCK, 레구마인, LYPD1, MAD-CT-1, MAD-CT-2, MAGEA3, MAGEA4, MAGEC2, MerTk, ML-IAP, NA17, NY-BR-1, p53, p53 돌연변이, PAP, PLAVI, 폴리시알산, PR1, PSA, 육종 전위 중단점, SART3, sLe, SSX2, Survivin, Tn, TRAIL, TRAIL1, TRP-2, 및 XAGE1.
일부 실시양태에서, 항원은 면역 세포 관련 항원이다. 일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 통과 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 단백질이다: BAFF-R, CD163, CD19, CD20 (예시적 항체에는 리툭시맙, 오크렐리주맙, 디보질리맙; 이브리투모맙 티욱세탄이 포함), CD25 (예시적 항체에는 바실릭시맙이 포함), PD-L1이라고도 하는 CD274 (예시적 항체에는 아데브렐리맙, 아테졸리주맙, 가리불리맙, 두르발루맙, 및 아벨루맙이 포함), CD30 (예시적 항체에는 이라투무맙 및 브렌툭시맙이 포함), CD33 (예시적 항체에는 린투주맙이 포함), CD352, CD45 (예시적 항체에는 아파미스타맙이 포함), CD47 (예시적 항체에는 레타플리맙 및 마그롤리맙이 포함), CTLA4 (예시적 항체에는 이필리무맙이 포함), FASL, IFNAR1 (예시적 항체에는 파랄리모맙이 포함), IFNAR2, LAYN, LILRB2, LILRB4, PD-1 (예시적 항체에는 이필리무맙, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 발스틸리맙, 부디갈리맙, 겝타놀리맙, 토리팔리맙, 및 피딜리주맙sf가 포함), SIT1, 및 TLR2/4/1 (예시적 항체에는 토마랄리맙이 포함).
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 통과 수송 단백질이다. 예를 들어, 민클은 막 통과 수송 단백질이다.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 당단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 당단백질이다: CD112, CD155, CD24, CD247, CD28, CD30L, CD37 (예시적인 항체에는 릴로토맙이 포함), CD38 (예시적인 항체에는 펠자르타맙이 포함), CD3D, CD3E (예시적인 항체에는 포랄루맙 및 테플리주맙이 포함), CD3G, CD44, CLEC12A (예시적 항체에는 테포디타맙이 포함), DCIR, DCSIGN, 덱틴 1, 덱틴 2, ICAM1, LAMP1, 시글렉 1-16, SIRPa, SIRPg, 및 ULBP1/2/3/4/5/6.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 수용체 키나아제이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 수용체 키나아제이다: Axl (예시적인 항체에는 틸베스타맙이 포함) 및 FLT3.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 관련 또는 막 국소화 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 관련 또는 막 국소화 단백질이다: CD83, IL1RAP (예시적인 항체에는 니다닐리맙이 포함), OX40, SLAMF7 (예시적인 항체에는 엘로투주맙이 포함), 및 VSIR.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 막 관통 G-단백질 결합 수용체 (GPCR)이다. 예를 들어, 다음 항원은 GPCR이다: CCR4 (예시적인 항체로는 모가물리주맙-kpkc가 포함), CCR8 및 CD97.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 세포 표면 관련 또는 세포 표면 수용체이다. 예를 들어, 다음 항원은 세포 표면 관련 및/또는 세포 표면 수용체이다: B7-DC, BCMA, CD137, CD2 (예시적인 항체는 시플리주맙을 포함), CD 244, CD27 (예시적인 항체는 발릴루맙을 포함), CD278 (예시적인 항체는 펠라딜리맙 및 보프라텔리맙을 포함), CD3 (예시적인 항체는 오텔릭시주맙 및 비실리주맙을 포함), CD40 (예시적 항체에는 다세투주맙 및 루카투무맙을 포함), CD48, CD5 (예시적인 항체에는 졸리모맙 아리톡스를 포함), CD70 (예시적인 항체는 쿠사투주맙 및 보르세투주맙을 포함), CD74 (예시적인 항체는 밀라투주맙을 포함), CD79A, CD-262 (예시적인 항체는 티가투주맙을 포함), DR4 (예시적 항체는 마파투무맙을 포함), GITR (예시적인 항체는 라기필리맙을 포함), HAVCR2, HLA-DR, HLA-E, HLA-F, HLA-G, LAG-3 (예시적인 항체에는 엔셀리맙을 포함), MICA, MICB, MRC1, PVRIG, 시알릴-톰센-누보 항원, TIGIT (예시적인 항체에는 에티길리맙을 포함), Trem2 및 uPAR.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 케모카인 수용체 또는 사이토카인 수용체이다. 예를 들어, 다음 항원은 케모카인 수용체 또는 사이토카인 수용체이다: CD115 (예시적인 항체로는 악사틸리맙, 카비랄리주맙, 및 에막투주맙을 포함), CD123, CXCR4 (예시적인 항체로는 울로쿠플루맙을 포함), IL-21R 및 IL-5R (예시적인 항체로는 벤랄리주맙을 포함).
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 공동 자극, 표면 발현 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 공동 자극, 표면 발현 단백질이다: B7-H 3 (예시적인 항체에는 에노블리투주맙 및 옴부르타맙을 포함), B7-H4, B7-H6 및 B7-H7.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 말초 막 단백질이다. 예를 들어, 다음과 같은 항원은 말초 막 단백질이다: B7-1 (예시적인 항체에는 갈릭시맙이 포함됨) 및 B7-2.
일부 실시양태에서, 면역 세포 관련 항원은 암을 가진 개체에서 비정상적으로 발현된다. 예를 들어, 다음 항원은 암을 가진 개체에서 비정상적으로 발현될 수 있다: C5 보체, IDO1, LCK, MerTk, 및 티롤.
일부 실시양태에서, 항원은 기질 세포 관련 항원이다. 일부 실시양태에서, 기질 세포 관련 항원은 막 통과 또는 막 관련 단백질이다. 예를 들어, 다음 항원은 막 통과 또는 막 관련 단백질이다: FAP (예시적 항체에는 시브로투주맙을 포함), IFNAR1 (예시적 항체에는 파랄리모맙을 포함), 및 IFNAR2.
일부 실시양태에서, 항원은 CD30이다. 일부 실시양태에서, 항체는 국제특허공개번호 WO 02/43661에 기재된 바와 같이 CD30에 결합하는 항체 또는 항원-결합 단편이다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 국제특허공개번호 WO 02/43661에 기재된 바와 같은 cAC10이다. cAC10은 브렌툭시맙으로도 알려져 있다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 cAC10의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, CDR은 카바트 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 코티아 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 IMGT 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 AbM 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5, 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 항-CD30 항체는, 서열 번호: 7의 아미노산 서열과 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 최종 98%, 적어도 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 8의 아미노산 서열과 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 최종 98%, 적어도 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 서열번호: 9 또는 서열번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항원은 CD70이다. 일부 실시양태에서, 상기 항체는 국제특허공개번호 WO 2006/113909에 기재된 바와 같은 CD70에 결합하는 항체 또는 항원-결합 단편이다. 일부 실시양태에서, 항체는 국제특허공개번호 WO 2006/113909에 기재된 바와 같은 h1F6 항-CD70 항체이다. h1F6은 보르세투주맙으로도 알려져 있다. 일부 실시양태에서, 항-CD70 항체는 서열번호:12의 3개의 CDR을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호:13의 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, CDR은 카바트 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 코티아 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 IMGT 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서 CDR은 AbM 번호 체계에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 상기 항-CD70 항체는, 서열 번호: 12의 아미노산 서열과 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 최종 98%, 적어도 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호: 13의 아미노산 서열과 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 최종 98%, 적어도 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 서열번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항원은 인터루킨-1 수용체 보조 단백질 (IL1RAP)이다. IL1RAP는 IL1 수용체 (IL1R1)의 공동 수용체이며 인터루킨-1 (IL1) 신호 전달에 필요하다. IL1은 특정 화학 요법에 대한 내성과 관련이 있다. IL1RAP은 암세포와 종양 미세 환경 모두에서 다양한 고형 종양에서 과발현되지만 정상 세포에서는 발현이 낮다. IL1RAP은 조혈 줄기세포와 전구 세포에서도 과발현되어 만성 골수성 백혈병 (CML)의 표적 치료 후보가 된다. IL1RAP는 급성 골수성 백혈병 (AML)에서도 과발현되는 것으로 나타났다. IL1RAP에 결합하는 항체는 IL-1과 IL-33에서 세포로의 신호 전달을 차단하고 NK 세포가 종양 세포를 인식하여 항체 의존성 세포 독성 (ADCC)에 의해 종양 세포를 죽일 수 있게 한다.
일부 실시양태에서, 항원은 ASCT2이다. ASCT2는 SLC1A5로도 알려져 있다. ASCT2는 유비쿼터스하게 발현되는 광범위한 특이성을 가진 나트륨 의존성 중성 아미노산 교환기이다. ASCT2는 글루타민 수송에 관여한다. ASCT2는 여러 암에서 과발현되며 예후 불량과 밀접한 관련이 있다. ASCT2를 하향 조절하면 세포 내 글루타민 수준 및 글루타티온 생성을 포함한 다운스트림 글루타민 대사를 억제하는 것으로 나타났다. 많은 암에서 높은 발현율로 인해 ASCT2는 잠재적인 치료 표적이 된다. 이러한 효과는 두경부 편평상피세포암 (HNSCC)에서 성장 및 증식을 약화시키고, 세포 사멸 및 자가 포식을 증가시키며, 산화 스트레스 및 mTORC1 경로 억제를 증가시켰다. 또한 ASCT2를 침묵시키면 HNSCC에서 세툭시맙에 대한 반응이 개선되었다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 TROP2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 16, 17, 18, 19, 20, 및 21의 아미노산 서열의을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 사시투주맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 24, 25, 26, 27, 28, 및 29의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 다토포타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 MICA에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 32, 33, 34, 35, 36, 및 37의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 39의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h1D5v11 hIgG1K이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 40, 41, 42, 43, 44 및 45의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 46의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 47의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 MICA.36 hIgG1K G236A이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 48, 49, 50, 51, 52, 및 53의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h3F9 H1L3 hIgG1K이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 56, 57, 58, 59, 60, 및 61의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 62의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 63의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 CM33322 Ab28 hIgG1K이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD24에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 64, 65, 66, 67, 68, 및 69의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 71의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 SWA11이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ITGav에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 72, 73, 74, 75, 76, 및 77의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 78의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 79의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 인테투무맙이다. 일부 실시양태에서, 상기 항체 약물 결합체의 항체는 각각 서열번호: 80, 81, 82, 83, 84, 및 85의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 87의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 아비투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 gpA33에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 88, 89, 90, 91, 92, 및 93의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 94의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 95의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 IL1Rap에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 96, 97, 98, 99, 100, 및 101의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 103의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 니다닐리맙이다.
일부 실시양태에서, 본 명세서에 제공된 항체-약물 접합체는 EpCAM에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 104, 105, 106, 017, 108, 및 109의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 110의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 111의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 아데카투무맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 112, 113, 114, 115, 116 및 117의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 119의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 Ep157305이다. 일부 실시양태에서, 상기 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 120, 121, 122, 123, 124, 및 125의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 126의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 127의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 Ep3-171이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 각각 128, 129, 130, 131, 132, 및 133의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 135의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 Ep3622w94이다. 일부 실시양태에서, 상기 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 136, 137, 138, 139, 140 및 141의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 142의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 143의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 EpING1이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 144, 145, 146, 147, 148, 및 149의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 150의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 151의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 EpAb2-6이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD352에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 152, 153, 154, 155, 156 및 157의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 158의 아미노산 서열 및 서열번호: 159의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h20F3이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CS1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 160, 161, 162, 163, 164, 및 165의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 167의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 엘로투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD38에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 168, 169, 170, 171, 172, 및 173의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 174의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 175의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 다라투무맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD25에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 176, 177, 178, 179, 180, 및 181의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 183의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 다클리주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ADAM9에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 184, 185, 186, 187, 188, 및 189의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 190의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 191의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 chMAbA9-A이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 192, 193, 194, 195, 196, 및 197의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 199의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hMAbA9-A이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD59에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 200, 201, 202, 203, 204, 및 205의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번: 206호의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 207의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD25에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 클론123이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD229에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h8A10이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD19에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 208, 209, 210, 211, 212, 및 213의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역및 서열번호: 215의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hBU12으로도 알려진 데닌투주맙이다. WO2009052431 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD70에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 216, 217, 218, 219, 220, 및 221의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 222의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 223의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 보르세투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 B7H4에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 224, 225, 226, 227, 228, 및 229의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 230의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 231의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 미르조타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD138에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 232, 233, 234, 235, 236, 및 237의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 238의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 239의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 인다툭수맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD166에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 240, 241, 242, 243, 244, 및 245의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 246의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 247의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 프랄루자타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD51에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 248, 249, 250, 251, 252, 및 253의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 254의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 255의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 인테투무맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD56에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 256, 257, 258, 259, 260, 및 261의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 262의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 263의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 로르보투쿠맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD74에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 264, 265, 266, 267, 268, 및 269의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 270의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 271의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 밀라투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CEACAM5에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 272, 273 274, 275, 276, 및 277의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 278의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 279의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 라베투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CanAg에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 280, 281, 282, 283, 284, 및 285의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 286의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 287의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 칸투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 DLL-3에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 288, 289, 290, 291, 292, 및 293의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 295의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 로발피투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 DPEP-3에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 296, 297, 298, 299, 300, 및 301의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 302의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 303의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 탐린타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 EGFR에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 304, 305, 306, 307, 308, 및 309의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 310의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 311의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 라프리툭시맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 312, 313, 314, 315, 316, 및 317의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 318의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 319의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 로사툭시주맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 320, 321, 322, 323, 324, 및 325의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 326의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 327의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 세르클루타맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 328, 329, 330, 331, 332, 및 333의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 334의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 335의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 세툭시맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 FRa에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 336, 337, 338, 339, 340, 및 341의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 342의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 343의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 미르베툭시맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 344, 345, 346, 347, 348, 및 349의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 350의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 351의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 파를레투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 MUC-1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 352, 353, 354, 355, 356, 및 357의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 358의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 359의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 가티포투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 메소텔린에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 360, 361, 362, 363, 364, 및 365의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 366의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 367의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 아네투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ROR-1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 368, 369, 370, 371, 372, 및 373의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 374의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 375의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 질로베르타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ASCT2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 B7H4에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 376, 377, 378, 379, 380, 및 381의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 382의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 383의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 20502이다. WO2019040780 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 B7-H3에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 384, 385, 386, 387, 388, 및 389의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 390의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 391의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 chAb-A (BRCA84D)이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 392, 393, 394, 395, 396, 및 397의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 398의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 399의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hAb-B이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 400, 401, 402, 403, 404, 및 405의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 406의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 407의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hAb-C이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 408, 409, 410, 411, 412, 및 413의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 414의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 415의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hAb-D이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 416, 417, 418, 419, 420, 및 421의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 422의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 423의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 chM30이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 424, 425, 426, 427, 428, 및 429의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 430의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 431의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hM30-H1-L4이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 432, 433, 434, 435, 436, 및 437의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 438의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 439의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 AbV_huAb18-v4이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 440, 441, 442, 443, 444, 및 445의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 446의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 447의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 AbV_huAb3-v6이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 448, 449, 450, 451, 452, 및 453의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 454의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 455의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 AbV_huAb3-v2.6이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 456, 457, 458, 459, 460, 및 461의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 462의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 463의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 AbV_huAb13-v1-CR이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 464, 465, 466, 467, 468, 및 469의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 470의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 471의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 8H9-6m이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 472의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 473의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 m8517이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 474, 475, 476, 477, 478, 및 479의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 480의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 481의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 TPP-5706이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 482의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 483의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 TPP-6642이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 484의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 485의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 TPP-6850이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CDCP1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 10D7이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 HER3에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 486의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 487의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 파트리투맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 488의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 489의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 세리반투맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 490의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 491의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 엘겜투맙이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 492의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 493의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 룸레투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 RON에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 Zt/g4이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 클라우딘-2에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 HLA-G에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 PTK7에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 494, 495, 496, 497, 498, 및 499의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는서열번호: 500의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 501의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 PTK7 맙 1이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 502, 503, 504, 505, 506, 및 507의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 508의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 509의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 PTK7 맙 2이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 510, 511, 512, 513, 514, 및 515의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 516의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 517의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 PTK7 맙 3이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 LIV1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 518, 519, 520, 521, 522, 및 523의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 524의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 525의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hLIV22 및 hglg로도 알려진 라디라투주맙이다. WO2012078668 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 avb6에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 526, 527, 528, 529, 530, 및 531의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 532의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 533의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h2A2이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 534, 535, 536, 537, 538, 및 539의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 540의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 541의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h15H3이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD48에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 542, 543, 544, 545, 546, 및 547의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 548의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 549의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hMEM102이다. WO2016149535 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 PD-L1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 550, 551, 552, 553, 554, 및 555의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 556의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 557의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 SG-559-01 LALA mAb이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 IGF-1R에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 558, 559, 560, 561, 562, 및 563의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 564의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 565의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 식수투무맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 클라우딘-18.2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 566, 567, 568, 569, 570, 및 571의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 572의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 573의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 졸베툭시맙 (175D10)이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 574, 575, 576, 577, 578, 및 579의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 580의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 581의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 163E12이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 넥틴-4에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 582, 583, 584, 585, 586, 및 587의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 588의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 589의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 엔포르투맙이다. WO 2012047724 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 SLTRK6에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 590, 591, 592, 593, 594, 및 595의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 596의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 597의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 시르트라투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD228에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 598, 599, 600, 601, 602, 및 603의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 604의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 605의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hL49이다. WO 2020/163225 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD142 (조직 인자; TF)에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 606, 607, 608, 609, 610, 및 611의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 612의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 613의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 티소투맙이다. WO 2010/066803 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 STn에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 614, 615, 616, 617, 618, 및 619의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 620의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 621의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h2G12이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD20에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 622, 623, 624, 625, 626, 및 627의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 628의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 629의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 리툭시맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 HER2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 630, 631, 632, 633, 634, 및 635의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 636의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 637의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 트라스투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 FLT3에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD46에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 GloboH에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 AG7에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 메소텔린에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 FCRH5에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ETBR에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 Tim-1에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 SLC44A4에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ENPP3에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD37에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CA9에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 Notch3에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 EphA2에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 TRFC에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 PSMA에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 LRRC15에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 5T4에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD79b에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 638, 639, 640, 641, 642, 및 643의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 644의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 645의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 폴라투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 NaPi2B에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 646, 647, 648, 649, 650, 및 651의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 652의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 653의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 리파스투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 Muc16에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 654, 655, 656, 657, 658, 및 659의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 660의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 661의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 소피투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 STEAP1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 662, 663, 664, 665, 666, 및 667의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 668의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 669의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 반도르투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 BCMA에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 670, 671, 672, 673, 674, 및 675의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 676의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 677의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 벨란타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 c-Met에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 678, 679, 680, 681, 682, 및 683의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 684의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 685의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 텔리소투주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 EGFR에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 686, 687, 688, 689, 690, 및 691의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 692의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 693의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 데파툭시주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 SLAMF7에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 694, 695, 696, 697, 698, 및 699의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 700의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 701의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 아진툭시주맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 SLITRK6에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 702, 703, 704, 705, 706, 및 707의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 708의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 709의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 시르트라투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 C4.4a에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 710, 711, 712, 713, 714, 및 715의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 716의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 717의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 루파르투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 GCC에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 718, 719, 720, 721, 722, 및 723의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 724의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 725의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 인두사투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 Axl에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 726, 727, 728, 729, 730, 및 731의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 732의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 733의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 에나포타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 gpNMB에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 734, 735, 736, 737, 738, 및 739의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 740의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 741의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 글렘바투무맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 프로락틴 수용체에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 742, 743, 744, 745, 746, 및 747의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 748의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 749의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 롤린사타맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 FGFR2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 750, 751, 752, 753, 754, 및 755의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 756의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 757의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 아프루투맙이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CDCP1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 758, 759, 760, 761, 762, 및 763의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 764의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 765의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 인간화 CUB4 #135 HC4-H이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 766, 767, 768, 769, 770, 및 771의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 772의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 773의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 CUB4이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 774, 775, 776, 777, 778, 779의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 780의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 781의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 CP13E10-WT이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 782, 783, 784, 785, 786, 및 787의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 788의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 789의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 CP13E10-54HCv13-89LCv1이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 ASCT2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 790의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 791의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 KM8094a이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 792의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 793의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 KM8094b이다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 794, 795, 796, 797, 798, 및 799의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 800의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 801의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 KM4018이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD123에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 802, 803, 804, 805, 806, 및 807의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호의 아미노산 서열: 808을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 809의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h7G3이다. WO 2016201065 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 GPC3에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 810, 811, 812, 813, 814, 및 815의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 816의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 817의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 hGPC3-1이다. WO 2019161174 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 B6A에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 818, 819, 820, 821, 822, 및 823의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 824의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 825의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h2A2이다. PCT/US20/63390 참조. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 826, 827, 828, 829, 830, 및 831의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 832의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 833의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h15H3이다. WO 2013/123152 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 PD-L1에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 834, 835, 836, 837, 838, 및 839의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 840의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 841의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 SG-559-01이다. PCT/US2020/054037 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 TIGIT에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 842, 843, 844, 845, 846, 및 847의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 848의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 849의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 클론 13 (ADI-23674 또는 mAb13로도 알려짐)이다. WO 2020041541 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 STN에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 850, 851, 852, 853, 854, 및 855의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 856의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 857의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 2G12-2B2이다. WO 2017083582 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 CD33에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 858, 859, 860, 861, 862, 및 863의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 864의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 865의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h2H12이다. WO2013173496 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 NTBA (CD352로도 알려짐)에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호: 866, 867, 868, 869, 870, 및 871의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 872의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 873의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 h20F3 HDLD이다. WO 2017004330 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 BCMA에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호 874, 875, 876, 877, 878, 및 879의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 880의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 881의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 SEA-BCMA (hSG16.17로도 알려져 있음)이다. WO 2017/143069 참조.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체-약물 접합체는 조직 인자 (TF라고도 함)에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 각각 서열번호 882, 883, 884, 885, 886, 및 887의 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 서열번호: 888의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 889의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 약물 접합체의 항체는 티소투맙이다. WO 2010/066803 및 US 9,150,658 참조.
4. 제약 조성물
본 발명은 본원에 기술된 리간드 약물 접합체 화합물의 집합체인 LDC 조성물, 및 약학적으로 허용되는 담체와 같은 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제약 조성물은 LDC의 리간드 유닛이 결합하는 표적 모이어티의 발현과 관련된 장애의 치료를 위해 환자에게 LDC 조성물을 투여할 수 있도록 하는 임의의 형태이다. 예를 들어, 제약 조성물은 액체 또는 동결 건조된 고체 형태 일 수 있다. 바람직한 투여 경로는 비경구이다. 비경구 투여에는 피하 주사, 정맥 주사, 근육 내 주사, 및 근육 내 주사 또는 주입 기술이 포함된다. 바람직한 실시양태에서, LDC 조성물을 포함하는 제약 조성물은 액체 용액 형태로 정맥 내로 투여된다.
제약 조성물은 리간드 약물 접합체 화합물이 이를 필요로 하는 환자에게 투여될 때 생체 이용 가능하도록 제형화된다. 이러한 제약 조성물은 하나 이상의 투여 단위의 형태를 취할 수 있으며, 예를 들어, 동결 건조 고체는 용액 또는 현탁액으로 재구성할 때 적절한 액체 담체를 첨가하여 단일 투여 단위를 제공할 수 있다.
제약 조성물의 제조에 사용되는 물질은 사용된 양에 있어서 비독성이 바람직하다. 제약 조성물의 활성 성분(들)의 최적 투여량이 다양한 요인에 따라 달라질 것임이 당업자게는 명백할 것이다. 관련 요인에는 동물의 종류 (예, 인간), 제약 조성물의 특정 형태, 투여 방식, 및 사용된 LDC 조성물이 포함되지만 이에 국한되지 않는다.
일부 실시양태에서 제약 조성물은 액체 형태이다. 이 액체는 주사에 의해 전달하기에 유용하다. 주사 투여용 제약 조성물에서는 계면 활성제, 보존제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 완충제, 안정화제, 등장제 중 하나 이상이 포함된다.
액체 조성물은 이들이 용액, 현탁액 또는 기타 유사한 형태인 지에 관계없이 주사용 수, 식염수 용액, 바람직하게는 생리용 식염수, 링거 용액, 등장성 염화나트륨, 일부 실시양태에서 용매 또는 현탁 매질로서 작용하기도 하는, 합성 모노 또는 디글리세라이드와 같은 고정 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 사이클로덱스트린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 용매; 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤과 같은 항균제; 아스코르브산 또는 중아황산나트륨과 같은 항산화제; 에틸렌디아민테트라아세트산과 같은 킬레이트제; 아미노산, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트 같은 완충제; 비이온성 계면활성제, 폴리올과 같은 세제; 및 염화나트륨 또는 덱스트로스와 같은 장성 조절제로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 비경구 조성물은 앰플, 일회용 주사기 또는 유리, 플라스틱 또는 기타 재료로 만든 다회용 바이알에 담겨있다. 생리용 식염수는 예시적인 보조제이다. 주사가능한 제약 조성물은 바람직하게는 무균이다.
특정 장애 또는 병태의 치료에 효과적인 접합체의 양은 장애 또는 병태의 특성에 따라 달라지며, 표준 임상 기법을 사용하여 결정할 수 있다. 또한, 시험관 내 또는 생체 내 검정은 최적 복용량 범위를 확인하는 데 도움이 되도록 선택적으로 사용된다. 조성물에서 사용할 정확한 복용량은 투여 경로, 질병이나 장애의 중증도에 따라 달라지며, 이는 의사의 판단과 각 환자의 상황에 따라 결정해야 한다.
제약 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하기 위해 적절한 용량을 얻을 수 있도록 하는 유효량의 LDC 조성물을 포함한다. 일반적으로 해당량은 제약 조성물의 적어도 약 0.01 중량%이다.
정맥 투여의 경우, 제약 조성물은 동물의 체중 kg당 약 0.01 내지 약 100mg의 LDC 조성물을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 동물의 체중 kg당 약 1 내지 약 100 mg의 LDC 조성물을 포함한다. 더 바람직한 실시양태에서, 투여량은 체중당 LDC 조성물 약 0.1내지 약 25 mg/kg의 범위일 것이다.
일반적으로, 환자에게 투여되는 LDC 조성물의 용량은 대상체의 체중당 약 0.01mg/kg 내지 약 100 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 0.01 mg/kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 0.1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 0.1 mg/kg 내지 약 20 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 0.1 mg/kg내지 약 5 mg/kg 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 용량은 대상체의 체중당 약 1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 용량은 치료 주기에 걸쳐, 대상체의 체중당 약 0.1 내지 4 mg/kg, 바람직하게는 0.1 내지 3.2 mg/kg, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 2.7 mg/kg이다.
LDC는 상피 또는 점막 라이닝 (예를 들어, 구강 점막, 직장 및 장 점막)을 통한 흡수에 의해 주입 또는 볼러스 주입과 같은 모든 편리한 경로에 의해 투여된다. 투여는 전신이거나 국소적이다. 다양한 전달 시스템, 예를 들어, 리포좀, 마이크로입자, 마이크로캡슐, 캡슐이 알려져 있고 화합물을 투여하는 데에 사용될 수 있다. 특정 실시양태들에서, 하나 이상의 제약 조성물이 환자에게 투여된다.
하나의 실시양태에서, 리간드 약물 접합체 조성물은 동물, 특히 인간에게 정맥 투여하기에 적합한 제약 조성물로서 일상적인 절차에 따라 제형화된다. 일반적으로 정맥 투여를 위한 담체 또는 비히클은 멸균 동위원소 수용 완충 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 또한 가용화제를 포함한다. 정맥 투여용 제약 조성물은 선택적으로 주사 부위의 통증을 완화하기 위해 리그노카인과 같은 국소 마취제를 포함한다. 일반적으로, 성분들은 단위 용량의 형태로 개별적으로, 단위 용량의 형태로, 예를 들어, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 샤셰와 같은 밀폐 용기에 건조 동결된 분말 또는 무수 농축물로서 공급되거나 혼합된다. 리간드 약물 접합체 조성물의 제약 조성물이 주입에 의해 투여되는 경우, 멸균된 약학적 등급의 물 또는 식염수를 함유하는 주입병이 제공되는 것이 바람직하다. 리간드 약물 접합체 조성물의 제약 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우, 투여 전에 성분들이 혼합될 수 있도록 주사용 멸균수 또는 식염수 앰플이 제공될 수 있다.
의약품 조성물은 일반적으로 멸균 상태이며 실질적으로 등장성이며 미국 식품의약국의 모든 모범 제조 관행 (GMP) 규정을 완벽하게 준수한다.
본 발명의 제약 조성물은 본 발명의 LDC 조성물 및 약학적으로 허용되는 담체와 같은 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함한다. 일부 바람직한 실시양태들에 있어서, 상기 제약 조성물에서 LDC 조성물의 LDC 화합물의 전부 또는 실질적으로 전부 또는 50% 초과는 가수분해된 티오-치환된 숙신이미드를 포함한다. 일부 바람직한 실시양태에 있어서, 제약 조성물에 존재하는 리간드 약물 접합체의 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 초과는 가수분해된 티오-치환된 숙신이미드를 포함한다.
5. 고증식 병태의 치료
리간드-약물 접합체는 종양 세포 또는 암 세포의 증식을 억제하거나 종양 또는 암 세포에서 아폽토시스를 유발하는 데 유용하다. 리간드 약물 접합제는 또한 암 치료를 위한 다양한 환경에서 유용하다. 따라서, 리간드 약물 접합체는 종양 세포 또는 암 세포에 약물을 전달하는 데 사용된다. 하나의 실시양태에서, 이론에 의해 얽매이지 않고, 리간드-약물 접합체 화합물의 리간드 유닛은 세포-표면 암 세포-또는 종양 세포 관련 항원 또는 수용체에 결합되거나 관련되고, 결합되면, 리간드-약물 접합체 화합물은 항원-또는 수용체-매개성 엔도사이토시스 또는 다른 내재화 메커니즘을 통해 종양 세포 또는 암 세포 내에서 흡수 (내재화)된다. 다른 실시양태에서, 항원은 종양 세포 또는 암 세포와 연관된 세포 외 기질 단백질이다. 일단 세포 안에 들어가면, 효소적 단백질 분해 메커니즘을 통해, 유리 약물이 세포 안에서 방출된다. 대안적인 실시양태에서, 다른 실시양태에서는 종양 세포 또는 암세포 부근에서 리간드-약물 접합체 화합물로부터 약물 유닛이 절단되고, 그 결과 방출된 유리 약물이 세포에 침투한다.
리간드-약물 접합체 화합물은 접합-특이적 종양 또는 암 약물 표적화를 개선하여 약물의 일반 독성을 감소시킨다. 이러한 개선은 종양 내에서 리간드 약물 접합체 화합물의 트리페타이드(tripetide) 기반 링커 유닛의 절단에 대한 더 큰 선택성에 기인하는데, 일반적으로 디펩타이드 기반 링커 유닛을 갖는 비교 대상 접합체의 투여시 부작용과 관련된 정상 조직 내의 절단과 비교하여 종양의 암 세포에 대한 유리 약물의 세포 내 또는 세포 외 전달에 영향을 미치고/거나 종양 조직에 대한 리간드 약물 접합체 화합물의 생체이용률을 증가시킴으로써, 정상 조직에 대한 생체 이용률을 감소시킨다.
일부 실시양태에서, 펩타이드 기반 링커 유닛은 또한 리간드-약물 접합체 화합물을 혈액 내 세포외 프로테아제에 의한 효소 작용으로 안정화시키지만, 세포 내에서 일단 약물을 방출할 수 있다.
하나의 실시양태에서, 리간드 유닛은 종양 세포 또는 암 세포에 결합한다.
다른 실시양태에서, 리간드 유닛은 종양 세포 또는 암 세포, 즉, 종양 세포 또는 암 세포 항원의 표면에 결합된다.
다른 실시양태에서, 리간드 유닛은 종양 세포 또는 암 세포 항원에 연관된 세포 외 매트릭스 단백질인 종양 세포 또는 암 세포에 결합된다.
특정 종양 세포 또는 암 세포에 대한 리간드 유닛의 특이성은 가장 효과적으로 치료되는 종양 또는 암을 결정하는 데 중요한 고려 사항이다. 예를 들어, BR96 리간드 유닛을 가진 리간드 약물 접합체는 폐, 유방, 대장, 난소 및 췌장의 것을 포함한 항원 양성 암종을 치료하는 데 유용할 수 있다. 항-CD30 또는 항-CD70 결합 리간드 유닛을 갖는 리간드 약물 접합체는 혈액학적 악성 종양을 치료하는 데 유용할 수 있다.
리간드 약물 접합체를 사용하여 치료될 수 있는 다른 특정 유형의 암은 다음과 같은 고형 종양, 혈액 매개 암, 급성 및 만성 백혈병 및 림프종을 포함하나, 이에 국한되지 않는다.
고형종양은 섬유육종, 근육종, 지방육종, 연골육종, 골형성육종, 척색종, 혈관육종, 내피육종, 림프관육종, 림프관내피육종, 활막종, 중피종, 유잉종양, 평활근육종, 횡문근육종, 대장암, 대장직장암, 신장암, 췌장암, 골암, 유방암, 난소암, 전립선암, 식도암, 위암, 구강암, 비강암, 인후암, 편평세포암, 기저세포암, 선암, 땀샘암, 피지선암, 유두암, 유두선암, 방광선암, 수질암, 기관지암, 신세포암, 간종, 담관암, 융모막암, 정상피종, 배아 암, 윌름스 종양, 자궁경부암, 자궁암, 고환암, 소세포폐암, 방광암, 폐암, 상피암, 교모세포종, 다형성 교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 후두종, 송과종, 혈관모세포종, 청신경종, 핍지교종, 수막종, 피부암, 흑색종, 신경모세포종 및 망막아세포종을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
혈액-매개 암은 급성 림프모구 백혈병 "ALL", 급성 림프모구 B세포 백혈병, 급성 림프모구 T세포 백혈병, 급성 골수성 백혈병 "AML", 급성 전골수성 백혈병 "APL", 급성 단핵구 백혈병, 급성 적혈구 백혈병, 급성 거대구성 백혈병, 급성 골수 단핵구 백혈병, 급성 비림프구성 백혈병, 급성 미분화 백혈병, 만성 골수성 백혈병 "CML", 만성 림프구성 백혈병 "CLL", 털세포 백혈병 및 다발성 골수종을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
급성 및 만성 백혈병은 림프모구, 골수성, 림프구 및 골수성 백혈병을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
림프종은 호지킨병, 비호지킨림프종, 다발성 골수종, 발덴스트롬 거대글로불린혈증, 중쇄질환 및 진성적혈구증가증를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
종양, 전이, 또는 과증식 세포를 특징으로 하는 기타 질환 또는 장애를 포함하되 이에 국한되지 않는 암은 일부 실시양태에서 LDC 조성물의 투여에 의해 치료 가능하거나 그 진행이 억제될 수 있다.
다른 실시양태들에서, 유효량의 LDC 조성물 및 화학 요법제를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법이 제공된다. 하나의 실시양태에서, LDC와 병용하여 화학 요법으로 치료되는 암은 화학 요법제에 불응하는 것으로 발견되지 않았다. 다른 실시양태에서, ADC와 병용하여 화학 요법으로 치료되는 암은 화학 요법제에 불응성이다. LDC 조성물은 암 치료로서 수술을 받은 환자에게도 투여될 수 있다.
일부 실시양태들에서, 환자는 또한 방사선 치료와 같은 추가적인 치료를 받는다. 구체적인 실시양태에서, 리간드-약물 접합체는 화학 요법제 또는 방사선 요법과 동시에 투여된다. 다른 구체적인 실시양태에서, 화학 요법제 또는 방사선 요법은 리간드 약물 접합체의 투여 이전 또는 이후에 투여된다.
화학 요법제는 종종 일련의 세션에 걸쳐 투여된다. 치료용 화학요법제(들)의 표준과 같은 화학요법제 중 어느 하나 또는 이들의 조합은 리간드 약물 접합체와 함께 투여될 수 있지만, 화학 요법제(들)는 리간드 약물 접합체 화합물에서 방출되는 유리 약물과는 다른 메커니즘으로 세포 사멸에 영향을 미치는 것이 바람직하다.
또한, 화학 요법 또는 방사선 요법이 너무 독성이 있는 것으로 입증되었거나 입증될 수 있는 경우, 예를 들어, 치료 대상체에게 허용할 수 없거나 견딜 수 없는 부작용을 초래할 수 있는 경우, 화학 요법 또는 방사선 요법의 대안으로서의 리간드-약물 접합체를 사용한 암 치료 방법이 제공된다. 치료 중인 환자는 어떤 치료법이 허용될 수 있고 견딜 수 있는지에 따라, 선택적으로 수술, 방사선 요법 또는 화학 요법과 같은 다른 암 치료법으로 치료될 수 있다.
또한 본 명세서에 기재된 모든 질환 또는 병태, 예컨대 암의 치료를 위한 의약품의 제조를 위한 본원에 기재된 화합물 또는 조성물의 용도가 제공된다.
또한 의료 치료에 사용하기 위해 본원에 상세히 기재된 화합물 또는 조성물이 제공된다. 본원에 기재된 질환 또는 병태, 예컨대 암의 치료에 사용하기 위해 본원에 상세히 기재된 화합물 또는 조성물이 추가로 제공된다.
또한, 본원에 상술된 바와 같은 화합물 또는 조성물의 의학적 치료를 위한 용도가 제공된다. 본 명세서에 기재된 질환 또는 병태, 예컨대 암의 치료를 위한, 본원에 상세히 기재된 화합물 또는 조성물의 용도가 추가로 제공된다.
본원에 상술된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 포함하는 키트가 추가로 제공된다. 일부 실시양태에서, 키트는 본원에 제공된 방법 중 어느 하나에 따른 사용 지침을 포함한다.
다른 측면에서, 본원에 상술된 바와 같은 화합물 또는 조성물의 제조 방법이 제공된다.
6. 항원 결합 단백질 발현 및 생산
A. 항원 결합 단백질을 암호화하는 핵산 분자
본원에 기재된 항원 결합 단백질을 암호화하는 핵산 분자 또는 이의 일부가 또한 제공된다. 이러한 핵산은, 예를 들어, 1) 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 이의 단편)을 암호화하는 것, 또는 이의 유도체 또는 변이체; 2) 중쇄 및/또는 경쇄, VH 및/또는 VL 도메인, 또는 가변 도메인 (예를 들어, VH HVR 또는 CDR의 1, 2, 또는 3개 모두 또는 VL HVR 또는 CDR의 1, 2개 또는 3개 모두) 내에 위치하는 1개 이상의 HVR 또는 CDR을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 3) 이러한 암호화 폴리뉴클레오타이드를 식별, 분석, 돌연변이 또는 증폭하기 위한 혼성화 프로브, PCR 프라이머 또는 시퀀싱 프라이머로 사용하기에 충분한 폴리뉴클레오타이드; 4) 이러한 암호화 폴리뉴클레오타이드의 발현을 억제하기 위한 안티센스 핵산, 및 5) 전술한 바와 같은 상보성 서열이다. 핵산은 임의의 길이일 수 있다. 이들은 예를 들어, 길이가 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 750, 또는1,000 이상의 뉴클레오타이드일 수 있고/거나 하나 이상의 추가적인 서열, 예를 들어 조절 서열을 포함하고/거나 더 큰 핵산, 예를 들어 벡터의 일부일 수 있다. 핵산은 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있다.
핵산 분자는 전체 세포, 세포 용해물, 또는 부분적으로 정제되거나 실질적으로 순수한 형태로 존재할 수 있다. 핵산은 알칼리/SDS 처리, CsCl 밴딩, 컬럼 크로마토그래피, 제한효소, 아가로스겔 전기영동 및 당 업계에 잘 알려진 다른 것들을 포함한 표준 기법에 의해 다른 세포 구성 요소 또는 다른 오염 물질, 예를 들어, 다른 세포 핵산 (예를 들어, 다른 염색체 DNA, 예를 들어, 자연에서 단리된 DNA와 연결된 염색체 DNA) 또는 단백질로부터 정제될 때 "단리"되거나 "실질적으로 순수하게 렌더링"된다. F. Ausubel, 등, ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Green Publishing and Wiley Interscience, New York 참조. 본원에 설명된 핵산은, 예를 들어, DNA 또는 RNA일 수 있으며 인트로닉 서열을 함유하거나 함유하지 않을 수 있다. 특정 실시양태에서, 핵산은 cDNA 분자이다.
따라서, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, LIV1, 또는 항-CD19 항체와 같은 ABP의 하나 이상의 사슬을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 핵산 분자가 제공된다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 ABP의 중쇄 또는 경쇄 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체)를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체)의, 중쇄를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 및 경쇄를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 모두를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 핵산 분자는 중쇄를 암호화하는 제1 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 제2 핵산 분자는 경쇄를 암호화하는 제2 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
하나의 실시양태에서, 핵산 분자는 본원에 제공된 항체 중 하나의 VH를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 다른 실시양태에서, 핵산은 본원에 제공된 항체 중 하나의 VL을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 핵산은 본원에 제공된 항체 중 하나의 VH 및 VL 모두를 암호화한다.
특정 실시양태에서, 핵산은 상기 아미노산 서열 중 하나 이상의 변이체 (예를 들어, 중쇄 및/또는 경쇄 아미노산 서열, 또는 본원에 개시된 VH 및/또는 VL 아미노산 서열)를 암호화하며, 여기서 변이체는 최대 25개의 아미노산 변형, 예컨대 최대 20개, 예컨대 최대 15, 14, 13, 12 또는 11개의 아미노산 변형, 예컨대10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 변형, 예컨대 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환, 예컨대 보존적 치환을 갖는다.
일단 VH 및 VL 세그먼트를 암호화하는 핵산이 획득되면, 이러한 핵산은 표준 재조합 DNA 기법에 의해 추가로 조작되어, 예를 들어, 가변 영역 유전자를 전장 항체 사슬 유전자, Fab 단편 유전자 또는 scFv 유전자로 변환할 수 있다. 이러한 조작에서, VL- 또는 VH-암호화 핵산은 항체 불변 영역 또는 유연한 링커와 같은 다른 폴리펩타이드를 암호화하는 다른 핵산과 작동 가능하게 연결된다.
상기 VH 영역을 암호화하는 단리된 핵산은, 상기 VH 암호화 핵산을 중쇄 불변 영역 (힌지, CH1, CH2 및/또는 CH3)을 암호화하는 다른 핵산 분자에 작동 가능하게 연결함으로써, 전장 중쇄 유전자로 변환될 수 있다. 인간 중쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당 업계에 알려져 있고 (예를 들어, Kabat, E. A., 등 (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 참조) 이들 영역을 포함하는 핵산 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 얻을 수 있다. 상기 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역, 예를 들어 IgG1 영역일 수 있다. Fab 단편 중쇄 유전자의 경우, VH 암호화 핵산은 중쇄 CH1 불변 영역만 암호화하는 다른 핵산 분자와 작동 가능하게 연결될 수 있다.
VL-암호화 핵산 분자를 경쇄 불변 영역, CL을 암호화하는 다른 핵산 분자에 작동 가능하게 연결함으로써, VL 영역을 암호화하는 단리된 핵산 분자는 전장 경쇄 유전자 (Fab 경쇄 유전자처럼)로 변환될 수 있다. 인간 경쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당업계에 알려져 있고 (예를 들어, Kabat, E. A., 등 (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 참조) 이들 영역을 포함하는 핵산 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 얻을 수 있다. 경쇄 불변 영역은 카파 또는 람다 불변 영역일 수 있다.
scFv 유전자를 생성하기 위해, VH- 및 VL-암호화 핵산 단편은 유연한 링커를 암호화, 예를 들어, 아미노산 서열 (Gly4-Ser)3을 암호화하는 다른 단편에 작동 가능하게 연결되어, VH 및 VL 서열이 연속적인 단일 사슬 단백질로 표현되고, VL 및 VH 영역이 유연 링커에 의해 결합될 수 있다 (예를 들어, Bird 등 (1988) Science 242:423-426; Huston 등 (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty 등, (1990) Nature 348:552-554 참조).
다른 측면에서, 핵산 서열의 검출을 위한 프라이머 또는 혼성화 프로브로서 사용하기에 적합한 핵산 분자가 또한 제공된다. 핵산 분자는 전장 폴리펩타이드를 암호화하는 핵산 서열의 일부, 예를 들어 프로브 또는 프라이머로 사용될 수 있는 단편 또는 폴리펩타이드의 활성 부분 (예를 들어, GPNMB 결합 부분, CD228 결합 부분, αvβ6 결합 부분, CD30 결합 부분, LIV1 결합 부분, 또는 CD19 결합 부분)을 암호화하는 단편만을 포함할 수 있다.
핵산의 서열에 기초한 프로브는 핵산 또는 유사한 핵산, 예를 들어 폴리펩타이드를 암호화하는 전사체를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 프로브는 라벨 그룹, 예를 들어, 방사성동위원소, 형광 화합물, 효소, 또는 효소 보조 인자를 포함할 수 있다. 이러한 프로브는 폴리펩타이드를 발현하는 세포를 식별하는 데 사용될 수 있다.
ABP들의 하나 이상의 구성 요소 (예를 들어, VH 및/또는 VL; 및 경쇄 및/또는 중쇄)을 암호화하는 하나 이상의 핵산들을 포함하는 발현 벡터를 포함하는 벡터들도 제공된다. 발현 벡터는 전사, 번역에 영향을 미치거나 제어하는 서열을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않고, 인트론이 있는 경우 작동 가능하게 연결된 코딩 영역의 RNA 스플라이싱에 영향을 미칠 수 있다. 원핵생물에서 발현에 필요한 핵산 서열은 프로모터, 선택적으로 조작자 서열, 리보솜 결합 부위 및 가능한 다른 서열을 포함한다. 진핵 세포는 프로모터, 인핸서, 종료 및 폴리아데닐화 신호를 사용하는 것으로 알려져 있다.
특정 실시양태에서, ABP의 상이한 구성 요소를 암호화하는 핵산은 동일한 발현 벡터에 삽입될 수 있다. 예를 들어, 항-GPNMB 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 항-GPNMB 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 항-CD228 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 항-CD228 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 항-αvβ6 경쇄 또는 가변영역을 암호화하는 핵산은 항αvβ6 항체 중쇄 또는 가변영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 항-CD30 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 항-CD30 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 항-LIV1 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 항-LIV1 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 항-CD19 결합 부분 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 항-CD19 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산과 동일한 벡터로 클로닝될 수 있다. 이러한 실시양태에서, 두 개의 핵산은 내부 리보솜 진입 부위 (IRES)에 의해 분리될 수 있으며, 단일 프로모터의 제어 하에 경쇄 및 중쇄가 동일한 mRNA 전사체로부터 발현될 수 있다. 대안적으로, 두 개의 핵산은 두 개의 개별 mRNA 전사체로부터 경쇄와 중쇄가 발현되도록 두 개의 개별 프로모터의 제어 하에 있을 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-GPNMB 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-GPNMB 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 실시양태에서, 항-CD228 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-CD228 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 실시양태에서, 항-αvβ6 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-αvβ6 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-CD30 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 실시양태에서, 항-LIV1 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-LIV1 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 실시양태에서, 항-CD19 항체 경쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 하나의 발현 벡터로 클로닝되고, 항-CD19 항체 중쇄 또는 가변 영역을 암호화하는 핵산은 제2 발현 벡터로 클로닝된다. 이러한 실시양태들에서, 숙주 세포는 본 발명의 완전한 항체 또는 항원 결합 단편을 생성하기 위해 두 발현 벡터와 함께 공동으로 투과될 수 있다.
B. 숙주 세포
벡터가 구축되고 본원에 기재된 ABP들의 구성 요소를 암호화하는 하나 이상의 핵산 분자가 벡터 또는 벡터들의 적절한 부위(들)에 삽입된 후, 완료된 벡터(들)는 증폭 및/또는 폴리펩타이드 발현을 위해 적합한 숙주 세포에 삽입될 수 있다.
따라서, 다른 측면에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 핵산 분자 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포도 제공된다. 다양한 실시양태에서 ABP 중쇄 및/또는 경쇄는 세균 세포와 같은 원핵 세포, 또는 균류 세포 (예컨대, 효모), 식물 세포, 곤충 세포 및 포유류 세포와 같은 진핵 세포에서 발현될 수 있다. 적절한 숙주 세포의 선택은 원하는 발현 수준, 활성 (예를 들어, 글리코실화 또는 인산화)에 바람직하거나 필요한 폴리펩타이드 변형, 생물학적 활성 분자로의 배수화의 용이성과 같은 다양한 요인에 따라 달라진다.
원하는 숙주 세포에 하나 이상의 핵산을 도입하는 것은 인산칼슘 형질 감염, DEAE-덱스트란 매개 형질 감염, 양이온성 지질 매개 형질 감염, 전기영동, 전사, 감염 등을 포함하나 이들로 제한되는 것은 아닌 임의의 방법에 의해 달성될 수 있다. 비제한적인 예시적인 방법은 예를 들어 Sambrook 등, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001)에 기재되어 있다. 핵산은 임의의 적절한 방법에 따라 원하는 숙주 세포에서 일시적으로 또는 안정적으로 형질 감염될 수 있다.
다양한 포유류 세포주가 숙주로 사용될 수 있으며, CHOK1 세포 (ATCC CCL61), DXB-11, DG-44 및 중국 햄스터 난소 (CHO) 세포/-DHFR (CHO, Urlaub 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216, 1980)를 포함하는 중국 햄스터 난소 (CHO) 세포; SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 주 (COS-7, ATCC CRL 1651); 인간 배아 신장 주 (현탁 배양에서 성장을 위해 서브클론된 293 또는 293 세포, (Graham 등, J. Gen Virol. 36: 59, 1977); 아기 햄스터 신장 세포 (BHK, ATCC CCL 10); 마우스 세르톨리 세포 (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251, 1980); 원숭이 신장 세포 (CV1 ATCC CCL 70); 아프리카 녹색 원숭이 신장 세포 (VERO-76, ATCC CRL-1587); 인간 자궁경부암 세포 (HELA, ATCC CCL 2); 개 신장 세포 (MDCK, ATCC CCL 34); 버팔로 래트 간 세포 (BRL 3A, ATCC CRL 1442), 인간 폐세포 (W138, ATCC CCL 75); 인간 간세포 (Hep G2, HB 8065); 마우스 유방 종양 (MMT 060562, ATCC CCL51); TM 세포 (Mather 등, Annals N.Y Acad. Sci. 383: 44-68, 1982); MRC 5 세포 또는 FS4 세포; 포유류 골수종 세포, 및 기타 여러 세포주를 포함하나 이에 제한되지 않는, 아닌 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC)으로부터 이용 가능한 불멸화 세포주를 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다.
적절한 숙주 세포가 준비되면, 원하는 ABP를 발현하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 추가적인 측면에서, 본원에 설명된 바와 같은 ABP의 제조 방법도 제공된다. 일반적으로, 이러한 방법들은, 상기 하나 이상의 발현 벡터에 의해 암호화된 것으로 상기 ABP의 발현을 허용하는 조건 하에서, 상기 배양 배지에서 본원에 설명된 하나 이상의 발현 벡터들을 포함하는 숙주 세포를 배양하는 단계; 및 상기 배양 배지로부터 상기 ABP를 회수하는 단계를 포함한다.
일부 실시양태들에서, ABP는 무세포 시스템에서 제조된다. 비제한적인 예시적인 무세포 시스템은 예를 들어, Sitaraman 등, Methods Mol. Biol. 498: 229-44 (2009); Spirin, Trends Biotechnol. 22: 538-45 (2004); Endo 등, Biotechnol. Adv. 21: 695-713 (2003)에 설명되어 있다.
7. 항원 결합 단백질 접합체
본원에 제공되는 ABP는 세포 독성 또는 세포정성 모이어티 (그들의 약학적으로 호환 가능한 염을 포함)과 접합하여 ADC (항체 약물 접합체)와 같은 접합체를 형성할 수 있다. ABP (예를 들어, 항체)에 대한 접합에 특히 적합한 모이어티는 세포 독성제 (예를 들어, 화학요법제), 전구약물 변환 효소, 방사성 동위원소 또는 화합물, 또는 독소 (이들 모이어티를 총칭하여 치료제라고 함)이다. 예를 들어, ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체)는 화학요법제와 같은 세포 독성제, 또는 독소 (예를 들어, 아브린, 리신A, 슈도모나스 외독소 또는 디프테리아 독소)와 같은 세포 독성제에 접합될 수 있다. 세포 독성제의 유용한 종류의 예로는, 예를 들어, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 알킬화제, 및 튜불린 억제제를 포함한다. 예시적인 세포 독성제로는, 예를 들어, 오리스타틴, 캄프토테신, 칼리세미신, 듀오카마이신, 에토포시드, 마이탄시노이드 (예를 들어, DM1, DM2, DM3, DM4), 탁산, 벤조디아제핀 (예를 들어, 피롤로[1,4]벤조디아제핀, 인돌리노벤조디아제핀, 및 옥사졸리디노벤조디아제핀) 및 빈카 알카로이드를 포함한다.
하나의 실시양태에서, ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체)는 전구 약물 변환 효소에 접합된다. 전구 약물 변환 효소는 항체에 재조합적으로 융합되거나 공지된 방법을 사용하여 화학적으로 접합될 수 있다. 대표적인 전구약물 변환 효소로는 카르복시펩티다아제 G2, 베타글루쿠로니다아제, 페니실린-V-아미다아제, 페니실린-G-아미다아제, β-락타마아제, β-글루코시다아제, 니트로리덕타아제 및 카르복시펩티다아제 A가 있다.
단백질, 특히 항체에 치료제를 접합하는 기술은 잘 알려져 있다. (예를 들어, Alley 등, Current Opinion in Chemical Biology 2010 14:1-9; Senter, Cancer J., 2008, 14(3):154-169.참조). 치료제는 (예를 들어, 가수분해, 단백질 분해 열화, 또는 절단제에 의해) 항체에서 절단되지 않는 한 활성을 감소시키는 방식으로 접합될 수 있다. 일부 측면에서, 상기 치료제는 GPNMB-발현, CD228-발현, αvβ6-발현, CD30-발현, LIV1-발현 또는 CD19-발현 암세포의 세포내 환경에서 절단에 민감하지만 세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않은 절단 가능한 링커를 갖는 항체에 부착되어, 접합체가 GPNMB 발현, CD228 발현, αvβ6 발현, CD30 발현, LIV1 발현 또는 CD19 발현 암세포 (예를 들어, 엔도솜에서, 또는 pH 민감도 또는 프로테아제 민감도에서, 리소좀 환경 또는 해면체 환경에서 예를 들어, 내시경 검사에서)에 의해 내재화될 때 항체에서 단리된다. 일부 측면에서, 치료제는 또한 절단 불가능한 링커를 갖는 항체에 부착될 수 있다.
일반적으로, ADC는 치료제 및 항-ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 사이의 링커 영역을 포함한다. 링커는 일반적으로 링커의 절단이 치료제를 세포 내 환경 (예를 들어, 리소좀, 엔도솜 또는 카보레아 내)에서 항체로부터 방출하는 세포 내 조건에서 절단할 수 있다. 링커는, 예를 들어, 리소좀 또는 엔도좀 프로테아제를 포함한 세포 내 펩티다아제 또는 프로테아제 효소에 의해 절단되는 펩티딜 링커일 수 있다. 절단제에는 카테프신 B 및 D와 플라스민이 포함될 수 있다 (예를 들어, Dubowchik and Walker, Pharm. Therapeutics 83:67-123, 1999 참조). 가장 대표적인 것은 GPNMB 발현, CD228 발현, αvβ6 발현, CD30 발현, LIV1 발현 또는 CD19 발현 세포에 존재하는 효소에 의해 절단 가능한 펩티딜 링커이다. 예를 들어, 암 조직에서 고도로 발현되는 티올 의존성 프로테아제 카테프신-B에 의해 절단 가능한 펩티딜 링커 (예를 들어, Phe-Leu 또는 Val-Cit 펩타이드를 포함하는 링커)가 사용될 수 있다.
절단 가능한 링커는 pH에 민감할 수 있는데 즉, 특정 pH 값에서 가수분해에 민감할 수 있다. 일반적으로 pH 민감성 링커는 산성 조건에서 가수분해가 가능하다. 예를 들어, 리소좀에서 가수분해가 가능한 산-약 링커 (예를 들어, 히드라존, 세미카르바존, 티오세미카르바존, 시스-아코니트 아미드, 오르토에스테르, 아세탈, 케탈 등)가 사용될 수 있다. (예를 들어, 미국 특허 번호 5,122,368; 5,824,805; 5,622,929; Dubowchik and Walker, Pharm. Therapeutics 83:67-123, 1999; Neville 등, Biol. Chem. 264:14653-14661, 1989). 이러한 링커는 혈액 내의 pH와 같은 중성 pH 조건에서는 비교적 안정적이지만 라이소좀의 대략적인 pH인 pH 5.5 또는 5.0 미만에서는 불안정하다.
다른 링커는 환원 조건 (예를 들어, 디설파이드 링커)에서 절단 가능하다. 디설파이드 링커는 SATA (N-석신이미딜-S-아세틸티오아세테이트), SPDP (N-석신이미딜-3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트), SPDB (N-석신이미딜-3-(2-피리딜디티오) 부티레이트) 및 SMPT (N-석신이미딜-옥시카르보닐-알파-메틸-알파-(2-피리딜-디티오)톨루엔), SPDB 및 SMPT를 사용하여 형성될 수 있다. (예를 들어, Thorpe 등, Cancer Res. 47:5924-5931, 1987; Wawrzynczak 등, In Immunoconjugates: Antibody Conjugates in Radioimagery and Therapy of Cancer (C. W. Vogel ed., Oxford U. Press, 1987. 미국 특허 번호 4,880,935 참조.)
상기 링커는 또한 말로네이트 링커 (Johnson 등, Anticancer Res. 15:1387-93, 1995), 말레이미도벤조일 링커 (Lau 등, Bioorg-Med-Chem. 3:1299-1304, 1995) 또는 3'-N-아미드 유사체 (Lau 등, Bioorg-Med-Chem. 3:1305-12, 1995)일 수 있다.
다른 실시양태들에서, 링커는 치료제에 직접 부착되고 항체의 단백질 분해 열화에 의해 방출되는 말레이미도-알킬렌- 또는 말레이미드-아릴 링커와 같은, 절단 불가능한 링커이다.
일반적으로, 링커는 세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않은데, 즉 약 20% 이하, 일반적으로 약 15% 이하, 더 일반적으로 약 10% 이하, 더 일반적으로 약 5% 이하, 약 3% 이하, 또는 ADC가 세포외 환경 (예를 들어, 혈장)에 존재할 때 ADC 샘플 내 링커의 약 1% 이하가 절단된다. 링커가 세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않은지 여부는 예를 들어, (a) ADC ("ADC 샘플") 및 (b) 동일한 몰 양의 비접합 항체 또는 치료제 ("대조군 샘플")를 미리 정해진 시간 (예를 들어, 2, 4, 8, 16, 또는 24시간) 동안 혈장으로 독립적으로 배양함으로써 결정할 수 있는데, ADC 샘플에 존재하는 비결합 항체 또는 치료제의 양을 예를 들어 고성능 액체 크로마토그래피를 통해 측정된 대군조 샘플에 존재하는 것과 비교한다.
링커는 또한 세포 내재화를 촉진할 수 있다. 링커는 치료제 (즉, 본원에 설명된 바와 같이 ADC 또는 ADC 유도체의 링커-치료제 모이어티의 환경에서)와 접합될 때 세포 내부화를 촉진할 수 있다. 대안적으로, 링커는 치료제 및 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 모두에 결합될 때 (즉, ADC의 환경에서) 세포의 내부화를 촉진할 수 있다.
예시적인 항체-약물 접합체는 약물 성분이 오리스타틴 약물인 것을 의미하는 오리스타틴 기반 항체-약물 접합체를 포함한다. 오리스타틴은 튜불린과 결합하고, 미세관 역학과 핵 및 세포 분열을 방해하며, 항암 활성을 가지고 있는 것으로 나타났다. 전형적으로, 오리스타틴 기반 항체-약물 접합체는 오리스타틴 약물과 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 사이의 링커를 포함한다. 링커는 예를 들어, 절단 가능한 링커 (예를 들어, 펩티딜 링커) 또는 비 절단 가능한 링커 (예를 들어, 항체의 열화에 의해 방출되는 링커)일 수 있다. 오리스타틴은 오리스타틴 E 또는 그 유도체일 수 있다. 상기 오리스타틴은, 예를 들어, 오리스타틴 E와 케토산 사이에 형성된 에스테르일 수 있다. 예를 들어, 오리스타틴 E는 파라아세틸벤조산 또는 벤조일발레르산과 반응하여 각각 AEB 및 AEVB를 생성할 수 있다. 다른 전형적인 오리스타틴은 MMAF 및 MMAE를 포함한다. 예시적인 오리스타틴의 합성 및 구조는 미국 공개 번호 7,659,241, 7,498,298, 2009-0111756, 2009-0018086, 및 7,968,687호에 설명되어 있으며, 각각은 그 전체 및 모든 목적을 위해 참조에 의해 본 명세서에 통합되어 있다.
예시적인 오리스타틴 기반 항체 약물 접합체에는 다음이 포함된다: mc-vc-PABC-MMAE (본원에서 vcMMAE 또는 1006 또는 화합물 1로 지칭되기도 함), mc-vc-PABC-MMAF, mc-MMAF, 및 mp-dLAE-PABC-MMAE (본원에서는 dLAE-MMAE, 또는 mp-dLAE-MMAE 또는 7092 또는 화합물 5로 지칭되기도 함), 아래에 도시된 바와 같은 항체 약물 접합체로서, 여기서 Ab는 ABP (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체) 및 val-cit (vc)는 발린-시트룰린 디펩타이드를 나타내고, dLAE는 D-류신-알라닌-글루탐산 트리펩타이드를 나타냄:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염. 약물 로딩은 항체당 약물-링커 분자의 수인 p로 표시된다. 맥락에 따라 p는 항체 구성에서 항체당 평균 약물-링커 분자의 수를 나타낼 수 있으며, 평균 약물 로딩이라고도 한다. P는 1 내지 20의 범위이고, 바람직하게는 1 내지 8이다. 일부 바람직한 실시양태에서, p가 평균 약물 로딩을 나타낼 때, p의 범위는 약 2에서 약 5이다. 일부 실시양태에서, p는 약 2, 약 3, 약 4 또는 약 5이다. 제제에서 항체당 평균 약물 수는 질량 분석법, HIC, ELISA 검정법 및 HPLC와 같은 통상적인 방법으로 특성화할 수 있다. 일부 측면에서, ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체)는 항체의 시스테인 잔기를 통해 약물-링커에 부착된다. 일부 실시양태에서, 시스테인 잔기는 항체로 조작된 것이다. 다른 양태에서, 시스테인 잔기는 사슬간 이황화 시스테인 잔기이다.
8. 치료적 적용
A. 질병 치료 방법
다른 측면에서, GPNMBc를 발현하는 세포와 관련된 장애, 예를 들어 암을 치료하는 방법이 제공된다. 세포는 관심 장애와 관련이 없는 세포에 비해 높은 수준의 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19를 발현할 수도 있고 그렇지 않을 수도 있다. 따라서, 특정 실시양태는 본원에 설명된 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체)를 네이키드 항체 또는 접합체 (예를 들어, 항체 약물 접합체)로 사용하여 대상체, 예를 들어 암에 걸린 대상체를 치료하는 것이 포함된다. 이러한 실시양태 중 일부에서, 상기 방법은 유효량의 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 또는 ADC (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 ADC), 또는 이러한 ABP 또는 접합체를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 특정 실시양태에서, 방법은 세포, 조직, 장기, 동물 또는 환자의 암 치료를 포함한다. 가장 일반적으로, 치료 방법은 인간의 암을 치료하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서 치료는 단일요법을 포함한다. 다른 방법에서, 항원 결합 단백질은 하나 이상의 다른 치료제, 수술 및/또는 방사선과의 병용 치료의 일부로 투여된다.
암에서 긍정적인 치료 효과는 다양한 방법으로 측정될 수 있다 (예를 들어, W. A. Weber, J. Null. Med. 50:1S-10S (2009); and Eisenhauer 등, Eur. J Cancer 45:228-247 (2009) 참조). 일부 실시양태에서, ABP 또는 접합체를 사용한 치료에 대한 반응은 RECIST 1.1 기준을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 치료적 유효량에 의해 달성되는 치료는 추가 종양 성장의 억제, 종양 회귀의 유도, 부분 반응 (PR), 완전 반응 (CR), 진행 없는 생존 (PFS), 질병 없는 생존 (DFS), 객관적 반응 (OR) 또는 전체 생존 (OS) 중 어느 하나이다. 일부 실시양태에서, 치료는 전이의 시작을 지연시키거나 방지한다. 다양한 방법으로 치료 진행 상황을 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 억제는 종양 크기 감소 및/또는 종양 내 대사 활성 감소를 초래할 수 있다. 예를 들어, 이 두 매개 변수는 MRI 또는 PET 스캔을 통해 측정할 수 있다. 또한 생검을 통해 억제를 모니터링하여 괴사, 종양 세포 사멸 및 종양 내 혈관성 수준을 확인할 수 있다. 암 환자를 치료하는 데 효과적인, 본원에 기재된 요법의 복용량 방식은 환자의 질병 상태, 나이 및 체중, 그리고 대상체의 항암 반응을 유도하는 치료법의 능력과 같은 요소들에 따라 달라질 수 있다. 본 발명의 치료 방법, 의약품 및 용도의 구현이 모든 대상체에서 긍정적인 치료 효과를 달성하는 데 효과적이지 않을 수 있지만, 스튜던트, t-test, chi2-test, Mann과 Whitney에 따른 U-테스트, Kruskal-Wallis 테스트 (H-테스트), Jonckheere-Terpstra-테스트 및 Wilcoxon-테스트와 같이 당 분야에 알려진 통계적 테스트에 의해 결정되는 통계적으로 유의한 수의 대상체에서 그렇게 해야 할 것이다.
여기서 사용되는 "RECIST 1.1 반응 기준"은 반응이 측정되는 상황에 기초하여 적절한 표적 병변 또는 비표적 병변에 대해 Eisenhauer 등, Eur. J Cancer 45:228-247 (2009)에 명시된 정의를 의미한다.
ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체) 또는 ADC (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 ADC)의 유효량은 하나 이상의 투여, 적용 또는 투여량으로 투여될 수 있고, 특정 제형화 또는 투여 경로에 제한이 없는 것으로 의도된다. 일반적으로 치료적 유효량의 활성 성분은 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg 범위, 예를 들어 1 mg/kg 내지 100 mg/kg, 1 mg/kg 내지 10 mg/kg 범위이다.
ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체)에 대한 예시적인 용량은, 예를 들어, 환자의 체중의 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg, 더 일반적으로는 일반적으로 1 mg/kg 내지 30 mg/kg, 1 mg/kg 내지 20 mg/kg, 1 mg/kg 내지 15 mg/kg, 1 mg/kg 내지 12 mg/kg, 또는 1 mg/kg 내지 10 mg/kg1, 또는 2 mg/kg 내지 30 mg/kg, 2 mg/kg 내지 20 mg/kg, 2 mg/kg 내지 15 mg/kg, 2 mg/kg 내지 12 mg/kg, 또는 2 mg/kg 내지 10 mg/kg, 또는 3 mg/kg 내지 30 mg/kg, 3 mg/kg 내지 20 mg/kg, 3 mg/kg 내지 15 mg/kg, 3 mg/kg 내지 12 mg/kg, 또는 3 mg/kg 내지 10 mg/kg이다.
ADC (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 ADC)에 대한 예시적인 투여량은, 예를 들어, 대상체의 체중의 0.01 mg/kg 내지 10 mg/kg, 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg, 0.3 mg/kg 내지 3.0mg/kg, 0.5mg/kg 내지 3mg/kg, 1mg/kg내지 7.5 mg/kg 또는 2mg/kg 내지 7.5 mg/kg또는 3mg/kg 내지 7.5mg/kg, 또는 0.1-20, 또는 0.5-5 mg/체중 kg (예를 들어, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 mg/kg) 또는 고정 용량으로 10-1500 또는 200-1500 mg이다. 일부 방법에서는, 환자에게 적어도 1.5 mg/kg, 적어도 2 mg/kg 또는 적어도 3 mg/kg의 용량을 투여하고 3주 이상마다 한 번씩 투여한다.
투여되는 투여량은 특정 약제의 약리역학적 특성, 투여 방식 및 투여 경로; 수령자의 연령, 건강 및 체중; 치료하는 질병 또는 적응증의 종류 및 범위, 증상의 특성 및 범위, 동시 치료의 종류, 치료 빈도 및 원하는 효과에 따라 달라질 수 있다. 원하는 혈액 수준 또는 조직 수준을 빠르게 달성하기 위해 초기 용량을 상한 수준 이상으로 늘릴 수 있다. 대안적으로 초기 투여량이 최적 용량보다 작을 수 있으며 치료 과정에서 일일 투여량이 점진적으로 증가할 수 있다.
투여 빈도는 다른 요소들 중에서도 혈액순환에서의 ABP 또는 ADC의 반감기, 환자의 상태, 투여 경로에 따라 달라진다. 빈도는 예를 들어, 환장의 병태의 변화 또는 치료 중인 암의 진행에 따라 매일, 매주, 매월, 분기별 또는 불규칙한 간격으로 발생할 수 있다. 정맥 투여의 전형적인 빈도는 연속적인 치료 과정에 걸쳐 일주일에 두 번과 분기마다이며, 다소 자주 또는 덜 자주 투여하는 것도 가능하다. 정맥 투여를 위한 다른 예시적인 빈도는 매주, 격주, 4주 중 3주, 또는 3주마다 지속적인 치료 과정에 걸쳐 있지만, 더 많거나 덜 자주 투여하는 것도 가능하다. 피하 투여의 경우 예시적인 투여 빈도는 매일에서 매월이지만, 다소 자주 또는 덜 자주 투여하는 것도 가능하다.
투여되는 용량의 수는 암의 특성 (예를 들어, 급성 또는 만성 증상을 나타내는지 여부)과 치료에 대한 장애의 반응에 따라 달라진다. 어떤 측면에서는, 급성 질환 또는 만성 질환의 급성 악화의 경우 1 내지 10회 투여로 충분하다. 때로는 선택적으로 분할된 형태의 단일 볼루스 용량으로 급성 질환 또는 만성 질환의 급성 악화에 충분하다. 급성 질환의 재발이나 급성 악화에 대해서는 치료를 반복할 수 있다. 만성 질환의 경우, 항체는 매주, 격주, 매월, 분기별, 최소 1년, 5년 또는 10년 동안 6개월마다 또는 환자의 수명과 같은 일정한 간격으로 투여될 수 있다.
본원에 제공된 항원 결합 단백질 및 ADC를 이용한 치료에 적합한 예시적인 암은 암세포 또는 조직 (즉, "GPNMB-발현, CD228-발현, ανβ6-발현, CD30-발현, LIV1-발현, 또는 CD19-발현 암")에서 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19 발현을 포함하는 것이다. ABP 또는 그 접합체로 치료할 수 있는 암의 예로는 조혈 종양, 고형 종양을 발생시키는 조혈 종양, 고형 종양, 연조직 종양 및 전이 병변이 포함되지만 이에 국한되지 않는다. LIV1- MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체로 치료할 수 있는 예시적인 암에는 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 편평세포암 (예를 들어, 방광, 두경부, 및 폐), 피부암, 예를 들어, 흑색종, 소폐세포암 또는 폐 카르시노이드를 포함한다. 유방암에는 HER2 양성 유방암, 에스트로겐 수용체 양성 유방암과 같은 호르몬 반응성 유방암, 및 삼중 음성 유방암이 포함된다.
본원의 실시양태 중 일부에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체가 LIV1을 발현하는 고형 종양을 치료하기 위해 사용되된다. 고형 종양은 예를 들어, 폐암, 두경부암, 식도암, 위암, 및 위식도 접합암 중에서 선택된다.
본원의 실시양태 중 일부에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 폐암을 치료하기 위해 사용된다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 폐암은 소세포 폐암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 폐암은 비소세포 폐암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 비소세포 폐암은 비편평세포 암종이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 비소세포 폐암은 편평상피세포암이다.
본원의 실시양태 중 일부에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 두경부암 치료에 사용된다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 두경부암은 편평상피세포암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 고형 종양은 식도암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 식도암은 편평상피세포암이다.
본원의 실시양태 중 일부에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 위암을 치료하기 위해 사용되는 것이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 위암은 위암 선암종이다본원의 실시양태 중 일부에서, 고형 종양은 위 식도 접합암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 위식도 접합암은 위 식도 접합부 선암이다.
본원의 실시양태 중 일부에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 진행 단계 암을 치료하기 위해 사용된다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 진행 단계 암은 3기 또는 4기 암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 진행 단계 암은 전이성 암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 암은 재발암이다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 암은 절제할 수 없다. 본원의 실시양태 중 일부에서, 대상체는 암에 대한 치료 표준을 가진 사전 치료를 받았고 사전 치료에 실패했다."
일부 실시양태들에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 전립선암 치료에 사용된다. 일부 실시양태에서, 전립선암은 거세 저항성 전립선암이다.
일부 실시양태들에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 흑색종을 치료하기 위해 사용된다. 일부 실시양태에서, 흑색종은 피부 악성 흑색종이다.
일부 실시양태들에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 흑색종을 치료하기 위해 사용된다. 일부 실시양태에서, 흑색종은 피부 악성 흑색종이다.
고형 종양을 발생시킬 수 있는 조혈 종양의 예로는, 미만성 거대 B세포 림프종 (DLBCL), 여포성 림프종, 골수성형이상 증후군 (MDS), 림프종, 호지킨병, 악성 림프종, 비호지킨 림프종, 버킷 림프종, 다발성 골수종, 리히터 증후군 (리히터의 형질전환) 등을 포함하나 이에 국한되지 않는다.
특정 실시양태에서, 암은 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 급성 골수성 백혈병 (AML), 만성 골수성 백혈병 (CML), 털 세포 백혈병 (HCL), T세포 림프구 백혈병 (T-PLL), 거대 과립구 림프구 백혈병, 성인 T세포 백혈병, 및 급성 단핵구 백혈병 (AMoL) 중에서 선택되지만 이에 한정되는 것은 아니다.
일부 실시양태들에서, 암은 비호지킨 림프종 (예를 들어, 미만성 거대 B 세포 림프종, 맨틀 세포 림프종, B 림프 모구 림프종, 말초 T 세포 림프종 및 버킷 림프종), B 림프 모구 림프종; B 세포 만성 림프구성 백혈병/소 림프구성 림프종; 림프 형질 세포 림프종; 비장 변연 영역 B 세포 림프종 (± 융모 림프구); 형질 세포 골수종/형질 세포종; MALT 유형의 결절외 변연부 B 세포 림프종; 결절 변연부 B 세포 림프종 (± 단핵구 B 세포); 여포성 림프종; 미만성 거대 B 세포 림프종; 버킷 림프종; 전구체 T 림프 모세포 림프종; T 성인 T 세포 림프종 (HTLV 1 양성); 결절외 NK/T 세포 림프종, 비강 유형; 장병증형 T세포 림프종, 간형성 γ-δ T세포 림프종; 피하 공막염 유사 T세포 림프종; 진균증/세자리 증후군; 역형성 대세포 림프종, T/무세포, 원발성 피부 유형; 역형성 대세포 림프종, T-/무세포, 원발성 전신 유형; 달리 특징화 되지 않는 말초 T 세포 림프종; 혈관면역모세포성 T 세포 림프종, 다발성 골수종, 적혈구증가증 또는 골수섬유증, 피부 T 세포 림프종, 소림프구 림프종(SLL), 변연부 림프종, CNS 림프종, 면역모세포성 대세포 림프종, 전구체 B 림포모구 림프종 등을 포함하나 이들로 제한되지는 않는 또 다른 혈액학적 암이다.
치료될 수 있는 예시적인 고형 종양은, 예를 들어, 다양한 장기 계통의 육종 (연조직 육종 및 골육종 포함), 선암, 및 암종, 예컨대, 두경부 (인두 포함), 갑상선, 폐 (소세포 폐암(SCLC) 또는 비소세포 폐암 (NSCLC)), 유방, 림프, 위장관 (예를 들어, 구강, 식도, 위, 간, 췌장, 소장, 결장 및 직장, 항문관), 생식기 및 비뇨생식기 (예를 들어, 신장, 요로, 방광, 난소, 자궁, 자궁경부, 자궁내막, 전립선, 고환), 중추신경계 (예를 들어, 신경 또는 신경교세포, 예를 들어, 신경모세포종 또는 신경교종), 피부(예를 들어, 흑색종) 등에 영향을 미치는 것들을 포함한다. 특정 실시양태에서, 고형 종양은 NMDA 수용체 양성 기형종이다. 다른 실시양태에서, 암은 유방암, 대장암, 췌장암 (예를 들어, 췌장 신경내분비 종양 (PNET) 또는 췌관 선암종 (PDAC)), 위암, 자궁암 및 난소암 중에서 선택된다.
특정 실시양태에서, 암은 복수와 관련된 고형 종양이다. 복수는 많은 종류의 암의 증상이고 진행된 간 질환과 같은 많은 조건들에 의해 야기될 수 있다. 복수를 유발할 가능성이 있는 암의 종류에는 유방암, 폐암, 대장암 (직장암), 위암, 췌장암, 난소암, 자궁암 (자궁내막), 복막암 등이 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 실시양태에서, 복수와 관련된 고형 종양은 유방암, 직장암, 췌장암, 위암, 자궁암 및 난소암 중에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암과 같은 흉막 배출물과 관련이 있다.
특정 실시양태에서, 암은 흑색종, 폐암, 유방암, 두경부암, 난소암, 육종, 중피종 또는 자궁경부암이다.
특정 실시양태에서, 상기 암은 췌장암, 중피종, 결장직장암, 폐암, 갑상선암, 유방암, 담낭암, 식도암 및 두경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 흑색종은 피부 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 피부 흑색종은 표면적으로 퍼지는 흑색종, 결절성 흑색종, 견직성 색소성 흑색종, 렌티고 악성 흑색종 및 탈형성 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 피부 흑색종은 표면적으로 퍼지는 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 피부 흑색종은 결절 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 피부 흑색종은 점액성 색소성 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 견직성 색소성 흑색종은 조갑하 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 피부 흑색종은 견직성 색소성 흑색종이다. 일부 실시양태들에서, 피부 흑색종은 탈형성 흑색종이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 피부 흑색종에 대한 PD-1 또는 PD-L1 억제제를 사용하여 사전 치료를 받았다.
특정 실시양태에서, 상기 암은 비소세포폐암 (NSCLC), 두경부암, 식도암, 유방암, 난소암, 방광암, 피부암 (SCC), 난소암, 자궁경부암, 위암 또는 췌장암이다. 특정 실시양태에서, 암은 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부, 간, 위, 신장 및 편평세포암 (예를 들어, 방광, 머리, 목 및 폐), 피부암, 예를 들어, 흑색종, 소폐세포암 또는 폐암이다. 특정 실시양태에서, 암은 만성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, B형 급성 림프모구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 비호지킨 림프종 및 호지킨 림프종, B세포 림프종 또는 미만성 거대 B세포 림프종이다.
B. 병용요법
본 명세서에 기재된 방법, 항원 결합 단백질 및 ADC는 다른 치료제 및/또는 양식과 함께 사용될 수 있다. 이러한 병용 치료 방법에서, 대상체가 장애를 앓고 있는 동안 두 가지 (또는 그 이상)의 상이한 치료법이 대상체에게 전달되어 환자에 대한 치료의 효과가 한 시점에 겹치게 된다. 특정 실시양태에서, 하나의 치료법의 전달은 제2 치료법의 전달이 시작될 때 여전히 발생하고 있으므로, 투여 측면에서 중복된다. 이를 본원에서는 "동시" 또는 "공동 전달"이라고 부르기도 한다. 다른 실시양태에서, 한 치료법의 전달은 다른 치료법의 전달이 시작되기 전에 종료된다. 두 경우의 일부 실시양태에서는 병용 투여로 인해 치료가 더 효과적이다. 예를 들어, 제2 치료가 더 효과적이다. 예를 들어, 제2 치료가 덜해도 동등한 효과가 나타나거나, 제2 치료가 제1 치료가 없는 상태에서 제2 치료를 시행했을 때보다 증상이 더 크게 감소하거나, 제1 치료에서 유사한 상황이 나타날 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 증상 또는 장애와 관련된 다른 매개변수의 감소가 다른 치료가 없는 상태에서 전달되는 한 가지 치료에서 관찰되는 것보다 더 크다. 두 치료의 효과는 부분적으로 첨가제일 수 있고, 전적으로 첨가제일 수도 있고, 첨가제보다 클 수도 있다(즉, 시너지 반응). 전달은 전달된 제1 치료의 효과가 제2의 것이 전달되었을 때 여전히 감지될 수 있도록 할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체) 또는 ADC (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 ADC), 예를 들어, 조성물 또는 제제를 수술, 방사선 요법, 또는 다른 치료제제의 투여와 같은 하나 이상의 추가 치료와 결합하여 투여하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, ABP는 화학 요법 (예를 들어, 세포 독성제), 표적 요법 (예를 들어, 암 항원에 대한 항체), 혈관 신생 억제제, 및/또는 면역 체크포인트 분자의 억제제와 같은 면역 조절제와 조합된다. 다른 실시양태에서, 추가적인 치료는 항염증제 (예를 들어, 메토트렉세이트) 또는 항섬유화제이다. ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 또는 ADC (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 ADC) 및 추가적인 요법은 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서 LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체와 함께 사용될 수 있는 예시적인 세포 독성제는 카페시타빈, 아테졸리주맙, 이파타세르팁, 베바시주맙, (젬시타빈 + 카프로락틴 또는 에리불린), 셀리크렐루맙, 토실리주맙, Nab-파클리탁셀 및 사시투주맙 고비테칸을 포함한다.
LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체와 함께 사용될 수 있는 다른 제제는 체크포인트 억제제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체, 항CTLA4 항체, B7-DC-Fc, LAG3 또는 TIM3이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 MEDI0680, AMP-224, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, MEDI4736, MPDL3280A, 이필리무맙 및 트레멜리무맙으로 이루어진 군에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 암을 발현하는 LIV1을 치료하기 위해 LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체와 함께 사용되는 것인 펨브롤리주맙이다.
LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 HER2 양성 암, 예를 들어, HER2 양성 유방암, HER2 양성 방광암, HER2 양성 자궁경부암, HER2 양성 담관암종, HER2 양성 직장결장암, HER2 양성 식도 또는 식도 접합부암, HER2 양성 담낭암 또는 HER2 양성 위선암을 치료하기 위해 다른 제제와 조합될 수 있다. LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체와 조합하기 위한 다른 제제는 HER2를 표적으로 하는 항체 또는 ADC, 예를 들어 트라스투주맙 또는 트라스투주맙 데룩스테칸; 또는 키나아제 저해제, 예를 들어, 라파티닙, 네라티닙 또는 투카티닙)를 포함할 수 있다. 투카티닙은 WO2007/059257에 공개되어 있다.
일부 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 유방암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 방광암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 자궁경부암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 담관암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 직장결장암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 식도 또는 식도 위 접합 암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 담낭암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 위암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 암, 예를 들어 HER2 양성 난소암을 치료한다.
다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙과 조합하여 HER2 양성 유방암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙 및 캡시타빈과 조합하여 HER2 양성 유방암을 치료한다. 다른 실시양태에서, LIV1-MC-dLeu-Ala-Glu-PAB-MMAE(4) 접합체는 투카티닙, 트라스투주만브 및 캡시타빈과 결합하여 HER2 양성 유방암을 치료한다.
일부 실시양태에서 ABP와 함께 사용될 수 있는 예시적인 세포 독성제는 항미소관제, 토포이소머레이스 억제제, 항대사물, 단백질 합성 및 분해 억제제, 유사분열 억제제, 알킬화제, 도금제, 핵산 합성 억제제, 히스톤 탈아세틸화효소 억제제 (예를 들어, HDAC 억제제, 예를 들어, 보리노스타트 (SAHA, MK0683), 엔티노스타트 (MS-275), 파노비노스타트 (LBH589), 트리코스타틴 A (TSA), 모세티노스타트 (MGCD0103), 벨리노스타트 (PXD101), 로미뎁신 (FK228, 뎁시펩타이드)), DNA 메틸트란스페라제 억제제, 질소 머스타드, 니트로소우레아, 에틸렌이민, 알킬 설포네이트, 트리아진, 폴레이트 유사제, 뉴클레오시드 유사체, 리보뉴클레오타이드 환원효소 억제제, 빈카 알칼로이드, 택산, 에포틸론, 인터칼레이션제, 신호 전달 경로를 방해할 수 있는 약제, 아폽토시스 및 방사선을 촉진하는 약제, 또는 표면 단백질을 결합하여 독성 물질을 전달하는 항체 분자 접합체를 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본원에 기재된 ABP와 함께 투여될 수 있는 세포 독성제는 백금계 약제 (예를 들어, 시스플라틴), 사이클로포스파미드, 다카르바진, 메토트렉세이트, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 하이드록시유레아, 토포테칸, 이리노테칸, 아자시티딘, 보리노스타트, 익사베필론, 보르테조밉, 탁산 (예를 들어, 파클리탁셀 또는 도세탁셀), 사이토찰라신 B, 그라미시딘 D, 에티듐 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 콜치신, 안트라사이클린 (예를 들어, 독소루비신 또는 에피루비신) 다우노리신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미톡산트론, 미트라마이신, 악티노마이신 D, 아드리아마이신, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 푸로마이신, 리신 또는 마이탄시노이드 이다.
일부 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 CHOP (사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손); CVP (사이클로포스파미드, 빈크리스틴, 및 프레드니손); RCVP (리툭시맙+CVP); RCHOP (리툭시마이드+CHOP); RCHP (리툭시맙, 사이클로포스파미드, 독소루비신, 및 프레드니손); RICE (리툭시맙+이포사미드, 카르보플라틴, 에토포시드); RDHAP, (리툭시맙+덱사메타손, 시타라빈, 시스플라틴); RESHAP (리툭시맙+에토포시드, 메틸프레드니솔론, 시타라빈, 시스플라틴); R-BENDA (리툭시맙 및 벤다무스틴), RGDP (리툭시맙, 젬시타빈, 텍사메타손, 시스플라틴)와 같이 화학 요법의 일부로서 투여된다. 하나의 실시양태에서, CHOP, CVP, RCVP, RCHOP, RCHP, RICE, RDHAP, RESHAP, R-BENDA 및 RGDP 중 하나는 본원에 설명된 바와 같이 항원 결합 단백질 또는 접합체와의 병용 요법으로 투여된다.
특정 실시양태에서 ABP와 조합될 수 있는 표적 치료의 예는 치료 항체의 사용을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 예시적인 항체는 Her2, CDC20, CDC33, 뮤신 유사 당단백질, 및 종양 세포에 존재하는 표피 성장 인자 수용체 (EGFR)와 같은 세포 표면 단백질에 결합하는 것을 포함하나 이에 국한되지 않고, 선택적으로 이러한 단백질을 표시하는 종양 세포에 세포 정지 및/또는 세포 독성 효과를 유도한다. 예시적인 항체는 또한 유방암 및 다른 형태의 암을 치료하는 데 사용될 수 있는 HERCEPTIN® (트라스투주맙), 및 비호지킨 림프종 및 다른 형태의 암을 치료하는 데 사용될 수 있는 RITUXAN® (리툭시맙), ZEVALIN® (이브리투맙 티욱세탄), GLEEVEC® 및 LYMPHOCIDE® (에프라투주맙)도 포함된다. 다른 예시적인 항체로는 파니투맙 (VECTIBIX®), ERBITUX® (IMC-C225), 에르티놀리브 (Iressa); BEXXAR® (요오드131 토시투모맙); KDR (키나아제 도메인 수용체) 억제제; 항VEGF 수용체 항체 및 길항제 (예를 들어, Avastin®, 모테사닙, 및 VEGAF-TRAP); 항 VEGF 수용체 항체 및 항원 결합 영역; 항-Ang-1 및 Ang-2 항체 및 항원 결합 영역; Tie-2 및 기타 Ang-1 및 Ang-2 수용체에 대한 항체; Tie-2 리간드, Tie-2 키나아제 억제제에 대한 항체; Hif-1a 억제제, 및 Campath® (알렘투주맙)이다. 특정 실시양태에서, 암 치료제는 TNF 관련 폴리펩타이드 TRAIL을 포함하지만 이에 한정되지는 않는 종양 세포에서 선택적으로 아폽토시스를 유도하는 폴리펩타이드이다.
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항원 결합 단백질은 혈관신생을 감소시키는 하나 이상의 항혈관신생제와 조합되어 사용된다. 이러한 약제에는 IL-8 길항제, Campath®, B-FGF, FGF 길항제; Tek 길항제 (Cerreti 등, 미국공개 번호2003/0162712; Cerreti 등, 미국특허번호 6,413,932, 및 Cerreti 등, 미국 특허 번호 6,521,424); 항-TWEAK제 (항체 및 항원 결합 영역을 포함하지만 이에 한정되지 않음); 가용성 TWEAK 수용체 길항제 (Wiley, 미국 특허 번호 6,727,225); 리간드에 대한 인테그린의 결합을 길항하기 위한 ADAM 디스틴테그린 도메인 (Fanslow 등, 미국공개 번호 2002/0042368); 항-eph 수용체 및 항-에프린 항체, 항원 결합 영역, 또는 길항제 (미국 특허 번호 5,981,245; 5,728,813; 5,969,110; 6,596,852; 6,232,447; 6,057,124); Avastin® 또는 VEGF-TTM와 같은 항VEGF제 (예를 들어, VEGF, 또는 가용성 VEGF 수용체 또는 이들의 리간드 결합 영역과 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 영역), 및 항 VEGF 수용체 제제 (예를 들어, 여기에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 영역), 파니투맙, IRESSA® (게피티닙), TARCEVA® (에를로티닙), 항Ang-1 및 항Ang-2 제제 (예를 들어,이에 또는 그 수용체에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 영역, 예를 들어, Tie-2/TEK), 및 항-Tie-2 키나아제 억제제 (예를 들어, 간세포 성장 인자 (HGF, 분산 인자라고도 함)의 길항제와 같은 성장 인자의 활성을 특이적으로 결합하고 억제하는 항체 또는 항원 결합 영역 및 그 수용체 "c-met"에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 영역); 항-PDGF-BB 길항제; PDGF-BB 리간드에 대한 항체 및 항원 결합 영역; 및 PDGFR 키나아제 억제제를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
항원 결합 단백질과 함께 사용될 수 있는 다른 항혈관신생제는 MMP-2 (매트릭스-메탈로프로테이나제 2) 억제제, MMP-9 (매트릭스-메탈로프로테이나제 9) 억제제 및 COX-II (사이클로옥시게나제 II) 억제제와 같은 제제를 포함한다. 유용한 COX-II 억제제의 예로는 CELEBREX® (셀레콕시브), 발데콕시브 및 로페콕시브가 있다.
본 명세서에서 사용되는 "면역 체크포인트 분자"는 신호 (자극 분자)를 표시하고/거나 신호 (억제 분자)를 표시하지 않는 면역 체계 내의 분자를 지칭한다. 많은 암들이 T세포 신호전달을 억제함으로써 면역체계를 회피한다. 특정 실시양태에서 ABP와 함께 사용될 수 있는 예시적인 면역 체크포인트 분자는 프로그램된 세포 사멸 단백질 1 (PD-1), 프로그램된 사멸 리간드 1 (PD-L1), PD-L2, 세포 독성 T 림프구 관련 단백질 4 (CTLA-4), 3을 포함하는 T 세포 면역 글로불린 및 뮤신 도메인 (TIM-3), 림프구 활성화 유전자 3 (LAG-3), 암 배아 항원 관련 세포 접착 분자 1 (CEACAM-1), CEACAM-5, T 세포 활성화의 V-도메인 Ig 억제제 (VISTA), B 및 T 림프구 감쇠기 (BTLA), Ig 및 ITIM 도메인 (TIGIT)을 가진 T 세포 면역 수용체, 백혈구 관련 면역글로불린 유사 수용체 1 (LAIR1), CD160, TGFR, 아데노신 2A 수용체 (A2AR), B7-H3 (CD276이라고도 함), B7-H4 (VTCN1이라고도 함), 인돌아민 2,3-디옥게나제 (IDO), 2B4, 킬러 세포 면역 글로불린 유사 수용체 (KIR), OX40, 4-1BB, 4-1BBL, B7-H3, 유도성 T세포 공동 자극제 (ICOS/ICOS-L), CD27/CD70, 글루코코르티코이드 유도 TNF 수용체 (GITR), CD47/신호 조절 단백질 알파 (SIRPα) 및 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO)를 포함하나 이에 국한되지 않는다.
특정 실시양태에서 ABP와 조합하여 사용될 수 있는 면역 체크포인트 억제제의 구체적인 예로는 다음과 같은 단일클론항체: 펨브롤리주맙 (Keytruda®, Merck) 및 니볼루맙 (Opdivo®, Bristol-MyersSquibb)과 같은 PD-1 억제제; 아테졸리주맙 (Tecentriq®, Genentech), 아벨루맙 (Bavencio®, Pfizer), 두라발루맙 (Imfinzi®, AstraZeneca) 같은 PD-L1 억제제; 이필리무맙 (Yervoy®, Bristol-Myers Squibb) 및 트레멜리무맙 (AstraZeneca)과 같은 CTLA-1 억제제를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
9. 진단 적용
다른 측면에서, 본원에 제공된 ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체 또는 이들의 단편), 폴리펩타이드, 및 핵산은 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19 와 관련된 질환, 장애 또는 병태의 검출, 진단 및 모니터링을 하는 방법에 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19와 관련된 장애를 갖고 있는 것으로 의심되는 대상체로부터 얻은 샘플에서 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19의 발현을 검출하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 검출 방법은, 본원에 기재된 바와 같이, 상기 샘플을 항체, 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드와 접촉시키고, 상기 결합의 수준이 기준 또는 비교 샘플과 상이한 지를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이러한 방법들은 본 명세서에 설명된 항체 또는 폴리펩타이드가 대상체에게 적절한 치료제인지를 결정하는 데 유용하다.
예를 들어, 일부 실시양태에서, 세포 또는 세포/조직 용해물은 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체와 접촉하고 항체와 세포 또는 항원 사이의 결합이 결정된다. 테스트 세포가 동일한 조직 유형의 기준 세포와 비교하여 결합 활성을 보일 때, 이는 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19와 관련된 질환 또는 병태의 존재를 나타낼 수 있다. 일부 실시양태에서, 시험 세포는 인간 조직으로부터 유래한다.
당 업계에 공지된 특정 항체-항원 결합을 검출하는 다양한 방법이 사용될 수 있다. 본 발명에 따라 수행될 수 있는 예시적인 면역측정법은 형광분극면역검정법 (FPIA), 형광면역검정법 (FIA), 효소면역검정법 (Enzymonoassay, EIA), 네펠로메트릭 억제면역 검정법 (NIA), 효소 결합 면역 검정법 (ELISA) 및 방사 면역 검정법 (Radioimunoassay, RIA)을 포함한다.
본원에 제공되는 진단 적용은 ABP (GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체 또는 이들의 단편)을 사용하여 GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19의 발현을 검출하고, GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19에 대한 리간드 결합을 검출하는 것을 포함한다. 진단 적용의 경우 일반적으로 ABP에는 탐지 가능한 표지 기로 표지된다. 적합한 표지 기에는 다음을 포함하나 이에 제한되지 않는다: 방사성 동위원소 또는 방사성핵종 (예를 들어, 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I), 형광 기 (예를 들어, FITC, 로다민, 란타나이드 형광체), 효소 기 (예를 들어, 양고추냉이 과산화효소, β-갈락토시다아제, 루시페라아제, 알칼리성 포스파타아제), 화학 발광기, 비오티닐기, 또는 보조 리포터에 의해 인식된 사전 결정된 폴리펩타이드 에피토프 (예를 들어, 류신 지퍼 쌍 서열, 2차 항체의 결합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그). 일부 실시양태에서, 표지 기는 잠재적 입체 장애를 줄이기 위해 다양한 길이의 스페이서 암을 통해 ABP에 결합된다. 단백질을 표지하기 위한 다양한 방법이 당업계에 공지되어 있으며 사용될 수 있다. GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19의 존재 검출에 유용한 방법의 예로는 위에서 설명한 것과 같은 면역검정법이 있다.
또 다른 측면에서, ABP는 GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19를 발현하는 세포 또는 세포들을 식별하기 위해 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 표지기로 표지되고, 표지된 항원 결합 단백질이 GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19에 대한 결합이 검출된다. 추가적인 구체적인 실시양태에서, 항원 결합 단백질의 GPNMB, CD228, αvβ6, CD30, LIV1 또는 CD19에 대한 결합이 생체 내에서 검출된다.
항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체 또는 이들의 단편) 또한 당업계에 공지된 기술을 사용하여 병리학에서 염색 시약으로 사용될 수 있다.
10. 제약 조성물 및 제형
ABP (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-αvβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체 또는 이들의 단편)를 포함하는 제약 조성물이 또한 제공되며, 본원에 개시된 임의의 치료적 적용에 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 함께, 하나 또는 복수의 항원 결합 단백질의 치료적 유효량을 포함한다. 다른 실시양태에서, 제약 조성물은 하나 또는 복수의 항원 결합 단백질의 치료적 유효량, 약학적으로 허용되는 희석제, 담체, 가용화제, 유화제, 보존제 및/또는 보조제를 포함한다. 허용 가능한 제형 재료는 사용된 용량 및 농도에서 수용자에게 독성이 없다. 제약 조성물은 액체, 냉동 또는 동결건조 조성물로 제형화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 예를 들어, pH, 삼투압성, 점도, 선명도, 색상, 등장성, 냄새, 무균성, 안정성, 용해 또는 방출 속도, 조성물의 흡착 또는 침투를 위한 제형화 재료를 함유할 수 있다. 적절한 제형화 재료는 아미노산; 항균제; 항산화제; 완충제; 팽창제; 킬레이트제; 착화제; 필러; 단당류 또는 이당류와 같은 탄수화물; 단백질; 착색제, 향미료 및 희석제; 유화제; 친수성 중합체; 저분자량 폴리펩타이드; 염 형성용 반대이온 (예를 들어, 나트륨); 보존제; 용매 (예를 들어, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜); 당 알코올; 현탁제; 계면활성제 또는 습윤제; 안정성 향상제; 강장성 향상제; 전달 차량; 및/또는 제약 보조제를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 제약 조성물에 통합될 수 있는 적합한 제제에 대한 추가적인 세부 사항 및 옵션은 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 22nd Edition, (Loyd V. Allen, ed.) Pharmaceutical Press (2013); Ansel 등, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th ed., Lippencott Williams and Wilkins (2004); 및 Kibbe 등, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd ed., Pharmaceutical Press (2000)에 제공된다.
제약 조성물의 구성 요소는, 예를 들어, 의도된 투여 경로, 전달 형식 및 원하는 용량에 따라 선택된다. 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 22nd Edition, (Loyd V. Allen, ed.) Pharmaceutical Press (2013) 참조. 조성물은 공개된 항원 결합 단백질의 물리적 상태, 안정성, 생체 내 방출 속도 및 생체 내 클리어런스 속도에 영향을 미치도록 선택된다. 제약 조성물에서 1차 비히클 또는 담체는 본질적으로 수성 또는 비수성일 수 있다. 예를 들어, 적절한 비히클 또는 담체는 주입용 물 또는 생리적 식염수 용액일 수 있다. 특정 실시양태에서, 항원 결합 단백질 조성물은 원하는 정도의 순도를 갖는 선택된 조성물을 동결건조 케이크 또는 수용액의 형태로 선택적 제형화제와 혼합함으로써 보관용으로 제조될 수 있다. 또한, 특정 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 적절한 부형제를 사용하여 동결건조물로 제형화될 수 있다.
특정 제형에서, 해당 항원 결합 단백질 농도는 적어도 2 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, 50 mg/ml, 60 mg/ml, 70 mg/ml, 80 mg/ml, 90 mg/ml, 100 mg/ml, 110 mg/ml, 120 mg/ml, 130 mg/ml, 140 mg/ml 또는 150 mg/ml이다. 다른 실시양태에서, 항원 결합 단백질은 10-20 mg/ml, 20-40 mg/ml, 40-60 mg/ml, 60-80 mg/ml, 또는 80-100 mg/ml의 농도를 갖는다.
일부 조성물은 완충제 또는 pH 조절제를 포함한다. 대표적인 완충제로는: 유기산염 (예를 들어, 시트르산, 아세트산, 아스코르브산, 글루콘산, 탄산, 타르타르산, 석신산, 또는 프탈산); Tris; 포스페이트 완충제; 및, 어떤 경우에는, 아래 설명된 바와 같은 아미노산을 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다. 특정 실시양태에서, 완충제를 사용하여 조성물을 생리적 pH 또는 약간 낮은 pH, 전형적으로 약 5 내지 약 8의 pH 범위 내에서 유지한다. 일부 조성물은 약 5 내지 6, 6 내지 7 또는 7 내지 8의 pH를 갖는다. 다른 실시양태에서, pH는 5.5 내지 6.5, 6.5 내지 7.5, 또는 7.5 내지 8.5이다.
유리 아미노산 또는 단백질은 일부 조성물에서 팽창제, 안정화제 및/또는 항산화제로 사용된다. 예를 들어, 라이신, 프롤린, 세린, 및 알라닌은 제형의 단백질을 안정화하는 데 사용될 수 있다. 글리신은 올바른 케이크 구조와 특성을 보장하기 위해 동결건조에 유용하다. 아르기닌은 액체 및 동결건조 제형 모두에서 단백질 응집을 억제하는 데 유용할 수 있다. 메티오닌은 항산화제로 유용하다. 글루타민 및 아스파라긴이 일부 실시양태에 포함된다. 아미노산은 완충 능력 때문에 일부 제형에 포함된다. 이러한 아미노산으로는 예를 들어 알라닌, 글리신, 아르기닌, 베타인, 히스티딘, 글루탐산, 아스파르트산, 시스테인, 라이신, 류신, 이소류신, 발린, 메티오닌, 페닐알라닌, 아스파르탐 등을 포함한다. 특정 제형은 또한 혈청 알부민 (예를 들어, 인간 혈청 알부민 (HSA) 및 재조합 인간 알부민 (rHA)), 젤라틴, 카제인 등과 같은 단백질 부형제를 포함한다.
일부 조성물은 폴리올을 포함한다. 폴리올은 당 (예를 들어, 만니톨, 수크로스, 트레할로스, 및 소르비톨) 및 예를 들어, 글리세롤 및 프로필렌 글리콜, 및 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)과 같은 다가 알코올 및 관련 물질이 포함된다. 폴리올은 등전성이다. 그것들은 물리적 및 화학적 분해 과정으로부터 단백질을 보호하기 위해 액체 및 동결건조 제형 모두에서 유용한 안정화제이다. 폴리올은 제형의 강장성을 조정하는 데도 유용하다.
만니톨을 포함하는 특정 조성물은 안정제이다. 일반적으로 수크로스와 같은 지질 보호제와 함께 사용된다. 소르비톨과 수크로스는 강장성을 조절하는 데 유용하고, 운송 중 동결-해동 스트레스로부터 보호하거나 제조 공정 중 벌크 제품을 준비하는 데 유용한 안정제로 유용하다. PEG는 단백질의 안정화 및 동결방지제로서 유용하며, 이와 관련하여 본 발명에 사용될 수 있다.
단당류, 디-, 트리-, 테트라- 및 올리고당을 포함하는 당; 알디톨, 알돈산, 에스테르화된 당 등과 같은 유도체화된 당; 및 다당류 또는 당 중합체가 일부 제형에 포함될 수 있다. 예를 들어, 적절한 탄수화물 부형제로는 프룩토스, 말토스, 갈락토스, 포도당, D-만노스, 소르보스 등의 단당류; 락토스, 수크로스, 트레할로스, 셀로비오스 등의 이당류; 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란, 녹말 등의 다당류; 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨 소르비톨 (글루시톨), 미오이노시톨 등과 같은 알디톨을 포함한다.
계면활성제는 특정 제형에 포함될 수 있다. 계면활성제는 일반적으로 공기-액체, 고체-액체, 및 액체-액체 계면에서 표면 및 후속 응집에 대한 단백질 흡착을 방지, 최소화 또는 감소시키고 단백질 입체구조 안정성을 제어하는 데 사용된다. 적합한 계면활성제는 예를 들어 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 소르비탄 에스테르의 다른 지방산 에스테르, 트리톤 계면활성제, 레치틴, 틸록사팔 및 폴록사머 188을 포함한다.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 항산화제가 제약 조성물에 포함된다. 항산화 부형제는 단백질의 산화 분해를 방지하는 데 사용될 수 있다. 이러한 점에서 환원제, 산소/유리 라디칼 스캐빈저 및 킬레이트제는 유용한 항산화제이다. 항산화제는 일반적으로 수용성이며 제품의 유통 기간 동안 활성을 유지한다. EDTA는 또 다른 유용한 항산화제이다.
특정 제형은 단백질 보조 인자이고 단백질 배위 복합체를 형성하는 데 필요한 금속 이온을 포함한다. 금속 이온은 또한 단백질을 분해하는 일부 과정을 억제할 수 있다. 예를 들어, 마그네슘 이온 (10 내지 120 mM)은 아스파르트산을 이소아스파르트산으로 이성질화시키는 것을 억제하는 데 사용될 수 있다.
특정 제형에 강장성 강화제가 또한 포함될 수 있다. 이러한 약제의 실시양태는 알칼리 금속 할로겐화물, 바람직하게는 염화나트륨 또는 염화칼륨, 만니톨, 소르비톨을 포함한다.
하나 이상의 보존제가 특정 제형에 포함될 수 있다. 보존제는 동일한 용기에서 한 개 초과의 추출물을 포함하는 다중 선량 비경구 제형을 개발할 때 필요하다. 그들의 주요 기능은 미생물의 성장을 억제하고 약물 제품의 유통기한 또는 사용기간 동안 제품의 멸균성을 보장하는 것이다. 적절한 보존제로는 페놀, m-크레졸, p-크레졸, o-크레졸, 클로로크레졸, 벤질알코올, 페닐 수은 아질산염, 페녹시에탄올, 페닐알코올, 포름알데하이드, 클로로부탄올, 염화마그네슘 (예를 들어, 육수화물), 알킬파라벤 (메틸, 에틸, 프로필, 부틸 등), 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드, 나트륨 데하이드로아세테이트, 티메로살, 벤조산, 살리실산, 클로르헥시딘, 또는 이들의 혼합물을 수성 희석제에 포함할 수 있다.
제약 조성물은 의도된 투여 경로와 양립하도록 제형화된다. 투여 경로의 예로는 정맥 (IV), 피내, 흡입, 경피, 국소, 점막 및 직장 투여가 있다. 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체)의 바람직한 투여 경로는 IV 주입이다. 또 다른 바람직한 실시양태에서, 상기 제제는 근육 내 또는 피하 주사에 의해 투여된다.
비경구 투여 (예를 들어, 정맥, 피하, 안압, 복강, 근육)에 적합한 제형 구성 요소는 주사용 물과 같은 멸균 희석제, 식염수 용액, 고정 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매; 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤과 같은 항균제; 아스코르브산 또는 중아황산 나트륨과 같은 항산화제; EDTA와 같은 킬레이트제; 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트와 같은 완충제; 염화 나트륨 또는 덱스트로스와 같은 강장성 조절제를 포함한다.
정맥 투여에 적합한 비히클은 생리식염수, 정균수, Cremophor ELTM (BASF, Parsippany, N.J.) 또는 포스페이트 완충 식염수 (PBS)를 포함한다. 담체는 제조 조건에서 안정적이어야 하며 미생물로부터 보호되어야 한다. 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜) 및 이들의 적절한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산매일 수 있다.
예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 22nd Edition, (Loyd V. Allen, ed.) Pharmaceutical Press (2013)에서 제공되는, 전달 형태에 따라 적절한 제형에 대한 추가 지침이 제공된다.
약학적 제형은 무균인 것이 바람직하다. 멸균은 멸균 여과막을 통한 여과와 같은 적절한 방법으로 달성할 수 있다. 조성물이 동결건조된 경우, 동결건조 및 재구성 전후에 필터 멸균을 수행할 수 있다.
11. 키트/제조 물품
본원에 기재된 바와 같은 ABP를 함유하는 키트도 제공된다. 하나의 실시양태에서, 이러한 키트는 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체) 또는 단위 용량 형태 및/또는 제조 물품을 포함하는 하나 이상의 용기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단위 투여량은 하나 이상의 추가적인 약제를 포함하거나 포함하지 않고, 항원 결합 단백질을 포함하는 소정량의 조성물을 포함하는 단위 투여량이 제공되는 것을 특징으로 하는 단위 투여량을 제공한다. 일부 실시양태에서, 이러한 단위 용량은 주사를 위해 1회용 프리필 주사기에 제공된다. 다양한 실시양태에서, 단위 용량에 포함된 조성물은 식염수, 완충제, 기타 제형 성분 및/또는 본 명세서에 설명된 바와 같이 안정적이고 효과적인 pH 범위 내에서 제형화될 수 있다. 대안적으로, 일부 실시양태에서, 조성물은 적절한 액체, 예를 들어 멸균수를 추가할 때 재구성될 수 있는 동결건조 분말로 제공된다.
본원에 제공된 일부 키트는 여기에 설명된 방법 중 하나에 따라 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19와 관련된 질환의 치료에 사용하기 위한 지침을 더 포함한다. 키트에는 치료에 적합한 개체를 선택하거나 식별하는 방법에 대한 설명이 추가로 포함될 수 있다. 본 발명의 키트에 제공되는 지침은 일반적으로 라벨 또는 패키지 인서트 (예를 들어, 키트에 포함된 종이 시트)에 기재된 지침이지만, 기계 판독 가능한 지침 (예를 들어, 자기 또는 광 저장 디스크에 탑재된 지침)도 허용된다. 일부 실시양태에서, 키트는 항원 결합 단백질과 함께 사용하기에 적합한 것으로 전술한 것들과 같은 다른 치료제를 더 포함한다.
또 다른 측면에서, 샘플에서 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19, 또는 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19를 발현하는 세포의 존재를 검출하기 위한 키트가 제공된다. 이러한 키트는 일반적으로 본원에 설명된 항원 결합 단백질과 키트 사용 지침을 포함한다.
예를 들어, 특정 키트는 암 진단용이며, 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체) 및 항원 결합 단백질의 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1, 또는 CD19에 대한 결합을 검출하기 위한 하나 이상의 시약을 더 포함한다. 이러한 시약은 예를 들어 형광 태그, 효소 태그, 또는 기타 검출 가능한 태그를 포함할 수 있다. 시약은 또한 예를 들어, 시각화할 수 있는 생성물을 생성하는 효소 반응에 사용하기 위한 2차 또는 3차 항체 또는 시약을 포함할 수 있다. 일 실시양태에서, 진단 키트는 적절한 용기(들)에 표지된 또는 표지되지 않은 형태의 하나 이상의 항원 결합 단백질, 간접 검정을 위한 배양용 시약, 및 라벨의 특성에 따라 그러한 검정에서 검출을 위한 기질 또는 유도체화제를 포함한다.
본원에 제공된 것과 같은 키트는 현장 검출에 사용될 수 있다. 이러한 키트를 이용하는 일부 방법은 환자로부터 조직학적 표본을 제거한 다음, 표지된 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1, 또는 항-CD19 항체)을 생물학적 표본과 결합하는 단계를 포함한다. 이러한 방법을 사용하면 GPNMB, CD228, ανβ6, CD30, LIV1 또는 CD19 또는 GPNMB-단편, CD228-단편, ανβ6-단편, CD30-단편, LIV1-단편, 또는 CD19-단편의 존재뿐만 아니라 외아민 조직에서 이러한 펩타이드의 분포 (예를 들어, 암세포의 확산을 평가하는 맥락에서)도 확인할 수 있다.
다른 측면에서, 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 항체)에 결합하는 항-이디오타입 항체(Id)가 제공된다. 항-GPNMB, 항-CD228, 항-ανβ6, 항-CD30, 항-LIV1 또는 항-CD19 mAb의 공급원과 동일한 종 및 유전자 유형의 동물을 항-Id가 준비되고 있는 mAb로 면역시킴으로써 Id 항체를 준비할 수 있다. 일반적으로 면역화된 동물은 이러한 이디오 타입 결정인자에 대한 항체 (항-Id 항체)를 생성하여 면역화 항체의 이디오 타입 결정인자를 인식하고 이에 반응할 수 있다.
열거된 실시양태
실시양태 1. 화학식 1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염으로서, 여기서
L은 리간드 유닛이고;
LU는 링커 유닛이고;
D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고;
아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 숫자이거나 약 4 또는 약 8이고,
여기서 리간드 유닛은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 약물 유닛(들)를 유리 약물로 후속 방출할 수 있는, 항체 또는 항체의 항원-결합 단편으로부터 유래하고,
여기서 조성물의 각각의 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 약물 유닛이고;
LB는 공유 결합 리간드 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지에 대한 공유 결합 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛며, B가 없는 경우 A의 하위 단위가 되고,
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로서, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 최대 12개의 아미노산의 연속적인 서열이고, 여기서 서열은 트리펩타이드 펩타이드 절단 가능 유닛의 펩타이드 서열이 디펩타이드-발린-시트룰린- 또는 -발린-알라닌-인 비교 리간드-약물 접합체 조성물의 화합물에 비해 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물로부터 방출되는 유리 세포 독성 화합물에 대해 정상 조직에 비해 종양 조직의 노출에 향상된 선택성을 제공하는 선택성을 부여하는 트리펩타이드를 포함하고;
여기서 종양 및 정상 조직은 설치류 종의 것이고 여기서 화학식 I 조성물이 다음으로 입증되는 상기 개선된 노출 선택성을 제공하고:
비교 대상 접합체 조성물에 대해 이전에 결정된 것과 동일한 유효량 및 용량 스케줄로 투여했을 때 비교 대상 접합체 조성물의 종양 이종이식 모델에서의 효능 유지, 및
종양 이종이식 모델과 동일한 유효량 및 용량 스케줄로 비종양 보유 설치류에 투여했을 때, 접합체 조성물 둘 다의 리간드 유닛이 비결합 항체로 대체된 비교 대상 접합체의 동일 투여와 비교하여, 유리 약물의 혈장 농도 감소 및/또는 조직 내 정상 세포의 보존을 나타냄,
여기서 정상 조직은 인간에서 동일한 조직 유형의 것이며, 여기서 해당 조직의 세포에 대한 세포 독성이 적어도 부분적으로는 치료적 유효량의 비교 대상 접합체 조성물을 투여한 인간 대상체의 부작용에 대한 원인이 되고;
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이고;
여기서 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1의 구조를 갖고, 여기서 아래첨자 p는 아래첨자 p'로 대체되고, 여기서 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 또는 4 또는 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 2. 실시양태 1에 있어서, 이종 이식 모델은 SCID 또는 HPAF-II, Ramos SK-MEL-5 또는 SU-DHL-4 암세포를 이식한 누드 마우스, 특히 HPAF-II 암세포를 이식한 누드 마우스인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 3. 실시양태 1 또는 2에 있어서, 정상 조직이 래트 골수인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 4. 실시양태 1 또는 2에 있어서, 화학식 I 조성물이 동일한 조건에서 배양할 때 균질화된 정상 조직에 의한 비교 대상 접합체의 단백질 분해에 비해 균질화된 종양 이종 이식 조직에 의한 화학식 1 조성물의 단백질 분해 비율이 비교 대상 접합체의 비율에 비해 증가함으로써 추가로 입증된 상기 향상된 노출 선택성을 제공하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 5. 실시양태 4에 있어서, 정상 조직이 래트 또는 인간의 골수에서 유래한 것인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 6. 실시양태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 종양 이종 이식 조직이 HPAF-II 암세포를 이식한 누드 마우스에서 유래한 것인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 7. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 각 약물 링커 모이어티가 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
LR은 화학식 -LB-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단, A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR의 구성 요소이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기이고, 여기서 아래첨자 n은 최대 12개의 이들 잔기를 제공하는 정수 값인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 8. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 각 약물 링커 모이어티가 다음 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 LR은 화학식 -LB-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단, A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR의 구성 요소이고;
여기서 각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 9. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 각 약물 링커 모이어티가 다음 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
LR은 화학식 -LB-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단, A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR의 구성 요소이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기이고, 여기서, 아래첨자 n은 최대 12개의 이들 잔기를 제공하는 정수 값이고;
P1은 생리학적 pH에서 음으로 하전된 측쇄 또는 비양전하를 띤 극성 측쇄를 갖는 L-아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 10. 실시양태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, P1가 글루탐산, 메티오닌-설폭사이드, 아스파르트산, (S)-3-아미노프로판-1,1,3-트리카르복실산 및 포스포-트레오닌로 이루어진 군에서 선택되는 L-아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 11. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 각 약물 링커 모이어티가 다음 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
LR은 화학식 -LB-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단, A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR의 구성 요소이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 12. 실시양태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, P2는 글리신 또는 L-아미노산의 잔기이고, 그 측쇄는 3개 이하의 연속된 탄소 원자를 갖는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 13. 실시양태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, P2 아미노산은 L-알라닌, L-발린 또는 글리신 또는 비천연 아미노산이고, 여기서 비천연 아미노산은 Abu, Aib, Ala, Gly, Leu, Nva 또는 Pra이고, 여기서 Abu, Aib, Nva 및 Pra는 다음의 구조를 갖고:
여기서 Abu, Nva, 및 Pra의 측쇄는 L-아미노산의 동일한 입체 화학 배열인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 14. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 각 약물 링커 모이어티는 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
LR은 화학식 -LB-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단, A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR의 구성 요소이고;
P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 15. 실시양태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, P3는 생리학적 pH에서 측쇄가 하전되지 않은 D-아미노산인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 16. 실시양태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, P3는 D-Leu, L-Leu, L-Cit 또는 L-Pro, 바람직하게는 D-Leu인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 17. 실시양태 1 내지 9에 있어서, 선택성 부여 트리펩타이드인 -[P3]-[P2]-[P1]-가 -D-Leu-Ala-Glu-, 또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 18. 실시양태 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 각 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티에서 -LR-이 다음의 구조 중 하나를 갖거나 포함하고:
여기서 표시된 (#) 질소, 탄소 또는 황 원자가 리간드 유닛에서 유래하고; 여기서, 거기에 인접한 물결선은 리간드 유닛의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 다른 물결선은 약물 링커 모이어티 중 하나의 나머지 부분에 대한 공유 결합 부위를 나타내는 것인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 19. 실시양태 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 LR는 -LB-A-이고,
여기서 각 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티 중 -LB-A-는 주로 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
A'a'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티 중 하나의 펩타이드 절단 가능 유닛의 공유 부착 부위를 나타내고; 다른 물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
[HE]는 가수분해 강화 유닛이고;
BU는 염기성 유닛이고;
Ra2는 임의로 치환된 C1-C12 알킬 기이고;
점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내며, 상기 고리화가 없는 경우, BU는 1차, 2차 또는 3차 아민 작용기를 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로서 갖는 비-사이클릭 염기성 유닛이거나, 상기 사이클릭화가 존재할 경우, BU는 고리화된 염기성 유닛이고 여기서 Ra2 및 BU는 둘 다가 부착된 탄소 원자와 함께, 2차 또는 3차 아민 작용기의 골격 염기성 질소 원자를 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로서 함유하는 임의로 치환된 스피로 C3-C20 헤테로사이클로를 정의하고,
여기서 비-사이클릭 염기성 유닛 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자는 염기성 질소 원자의 치환 정도에 따라 선택적으로 질소 보호기에 의해 적합하게 보호되거나 선택적으로 양성자화되는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 20. 실시양태 19에 있어서, 각 리간드 약물 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티 중 -LB-A-은 주로 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 21. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 A'는 A의 하위 단위로 존재하고, 여기서 A'는 화학식 (3) 또는 화학식 (4)의 구조를 갖는 아민-함유 산 잔기를 포함하거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
질소 원자에 인접한 물결선은 [HE]에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서, [HE]는 -C(=O)-이고 카르보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 A'의 나머지 부분 또는 펩타이드 절단 가능 유닛의 N-말단 아미노산 잔기에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서 두 부착은 모두 아미드 작용기를 통해 이루어지고;
K 및 L'은 독립적으로 C, N, O 또는 S이고, 단 K 또는 L'이 O 또는 S일 경우, R41 및 R42에서 K로, R38 및 G에서 K로, R43및 R44에서 L'로, 및 R39 및 R40에서 L'로는 부재하고, K 또는 L'이 N일 경우, -L'(R43)(R44)의 각 단위에 대해 R41 또는 R42 중 하나에서 K로 및 R38 또는 G 중 하나에서 K로, R43 또는 R44 중 하나에서 L'로, 및 -L'(R39)(R40)의 각 단위에 대해 R39 또는 R40 중 하나에서 L'로는 부재하고, 단 2개의 인접한 L'이 N, O, 또는 S로 독립적으로 선택되지는 않고;
여기서 아래첨자 e 및 f는 0 내지 12 범위의 독립적으로 선택된 정수이고 아래첨자 g는 1 내지 12 범위의 정수이고:
G는 수소, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, -OH 또는 -CO2H이고;
R38은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R39 내지 R44는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 및 임의로 치환된 C5-C10 (헤테로)아릴로 이루어진 군에서 선택되거나,
또는 R39 및 R40 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께, 또는 R41 및 R42는 K가 탄소 원자일 때 둘 다 부착된 K와 함께, C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R39 내지 R44의 나머지 부분은 본원에 정의된 바와 같거나,
또는 R43 및 R44는 L'이 탄소 원자일 때 둘 다 부착된 L'과 함께 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R39 내지 R42는 본원에 정의된 바와 같거나,
또는 R40 및 R41, 또는 R40 및 R43, 또는 R41 및 R43은 둘 다 부착된 탄소 원자 또는 헤테로원자 및 그 탄소 원자 및/또는 헤테로원자 사이에 개입하는 선택적 원자와 함께 C5-C6 카르보사이클로 또는 a C5-C6 헤테로사이클로를 정의하고, R39, R44 및 R40 내지 R43의 나머지 부분은 본원에 정의된 바와 같고,
단, K가 O 또는 S일 경우, R41 및 R42는 부재하고, K이 N일 경우, R41, R42 중 하나는 부재하고, L'이 O 또는 S일 경우, R43 및 R44는 부재하고, L'이 N일 경우, R43, R44 중 하나는 부재하거나, 또는
A'는 알파-아미노, 베타-아미노 또는 다른 아민-함유 산 잔기를 포함하고, 여기서 아미노 질소 원자는 HE의 카르보닐 탄소 원자에 공유 부착되고, 그 카르복실산 카르보닐 탄소 원자는 A'의 나머지 부분 또는 펩타이드 절단 가능 유닛의 N-말단 아미노산에 공유 부착되고, 여기서 두 공유 부착은 모두 아미드 작용기를 통해 이루어지는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 22. 실시양태 21에 있어서, A'는 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 아민-함유 산 잔기이거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
아래첨자 e 및 f는 독립적으로 0 또는 1이고;
R38 내지 R44는 각각 수소이거나;
또는 A'는 α-아미노 또는 β-아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 23. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 A'는 β-아미노산 잔기 또는 -LP(PEG)-를 포함하고,
여기서 PEG은 PEG 단위이고 LP는 화학식 LP-1 또는 LP-2의 구조를 갖는 병렬 커넥터 단위이거나:
또는
여기서 -LP(PEG)- 또는 이의 PEG-함유 하위 단위는 화학식 LP-3 또는 화학식 LP-4의 구조를 갖고:
여기서 아래첨자 v는 1 내지 4 범위의 정수이고;
아래첨자 v'는 0 내지 4 범위의 정수이고;
XLP는 천연 또는 비천연 아미드산 측쇄에 의해 제공되거나, 또는 -O-, -NRLP-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)-, -C(=O)N(RLP)-, -N(RLP)C(=O)N(RLP)-, 및 -N(RLP)C(=NRLP)N(RLP)-는 C3-C8 헤테로사이클로로 이루어진 군에서 선택되고;
여기서 각 RLP는 수소 및 임의로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 RLP 중 2개는 이들이 부착된 탄소 원자 및 이들의 개입 원자와 함께 C5-C6 헤테로사이클로를 정의하고 임의의 나머지 RLP는 앞서 정의된 바와 같고;
Ar은 C6-C10 아릴렌 또는 C5-C10 헤테로아릴렌이고, 이들 각각 임의로 치환되고;
각 RE 및 RF는 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C2-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C6-C10 아릴렌 또는 임의로 치환된 C5-C10 헤테로아릴렌으로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고,
또는 RE 및 RF는 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께 임의로 치환된 스피로 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, 또는 인접한 탄소 원자로부터의 RE 및 RF는 이들 원자 및 임의의 개입 탄소 원자와 함께 임의로 치환된 C5-C6 카르보사이클로를 정의하고, 임의의 나머지 RE 및 RF는 앞서 정의된 바와 같고;
여기서, 물결선 중 하나는 PEG 단위의 공유 부착 지점을 나타내고, 다른 두 개의 물결선은 리간드 약물 접합체 조성물을 나타내는 구조 내에서 화학식 LP-1 또는 화학식 LP-2의 공유 부착을 나타내거나, 또는
LP는 3중 기능성 아민-함유 산 잔기 구조를 가진 병렬 커넥터 단위이거나 또는; 및
PEG는 PEG 단위인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 24. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, A'는 β-아미노산 잔기 또는 -LP(PEG)-를 포함하고, 여기서 PEG는 PEG 단위이고 LP는 병렬 커넥터 단위이고,
여기서 β-아미노산 잔기는 -NHCH2CH2C(=O)-의 구조를 갖고;
여기서 -LP(PEG)-는 다음의 구조를 갖고:
여기서 물결선은 약물 링커 모이어티 내의 공유 부착 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 25. 실시양태 23 또는 24에 있어서, PEG 단위는 다음의 구조를 갖고:
여기서 물결선은 LP에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
R20은 PEG 부착 단위이고, 여기서 PEG 부착 단위은 -C(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -NH-, -C(O)O-, -C(O)C1-C10 알킬, -C(O)C1-C10 알킬-O-, -C(O)C1-C10 알킬-CO2-, -C(O)C1-C10알킬-NH-, -C(O)C1-C10 알킬-S-, -C(O)C1-C10알킬-C(O)-NH-, -C(O)C1-C10알킬-NH-C(O)-, -C1-C10 알킬, -C1-C10알킬-O-, -C1-C10알킬-CO2-, -C1-C10알킬-NH-, -C1-C10 알킬-S-, -C1-C10 알킬-C(O)-NH-, -C1-C10 알킬-NH-C(O)-, -CH2CH2SO2-C1-C10 알킬-, -CH2C(O)-C1-10 알킬-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-O-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-NH-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-CO2-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-S-,
이고;
R21은 PEG 캡핑 유닛이고, 여기서 PEG 캡핑 유닛은 -C1-C10 알킬, -C2-C10 알킬-CO2H, -C2-C10 알킬-OH, -C2-C10 알킬-NH2, C2-C10 알킬-NH(C1-C3 알킬), 또는 C2-C10 알킬-N(C1-C3 알킬)2이고;
R22는 여러 개의 PEG 하위 단위 사슬을 함께 커플링하기 위한 PEG 커플링 단위이고, 여기서 PEG 커플링 단위는 -C1-10 알킬-C(O)-NH-, -C1-10 알킬-NH-C(O)-, -C2-10 알킬-NH-, -C2-C10 알킬-O- , -C1-C10 알킬-S-, 또는 -C2-C10 알킬-NH-이고;
아래첨자 n은 8 내지 72, 10 내지 72 또는 12 내지 72 중에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 e는 2 내지 5에서 선택되고;
각 n'은 적어도 6 내지 72 이하, 바람직하게는 적어도 8 또는 적어도 10 내지 36 이하에서 독립적으로 선택되는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 26. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1C 및 화학식 1D의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
아래첨자 P는 1 또는 2이고; 아래첨자 Q는 1 내지 6의 범위이고, 바람직하게는 아래첨자 Q는 1 또는 2이고, 보다 바람직하게는 아래첨자 Q는 아래첨자 P와 동일한 값을 갖고;
Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고 RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되거나, 또는
Ra3은 적합한 산-불안정 보호기와 같은 질소 보호기이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기이고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 27. 실시양태 1에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1F 및 화학식 1G의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
아래첨자 x는 1 또는 2이고;
Ra2는 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, -CH3 또는 -CH2CH3이고;
Ra3은, 각 경우에, 독립적으로 질소 보호기, -H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 바람직하게는 -H, 산-불안정 보호기, -CH3 또는 -CH2CH3이거나,
또는 두 개의 Ra3 모두 이들이 부착된 질소와 함께 질소 보호기 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 여기서 그렇게 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 28. 실시양태 1에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 1H의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염으로, 선택적으로 소량의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고 이러한 각 화합물에서 약물 링커 모이어티 중 하나 이상이 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 가지고 있고 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 아래첨자 a'는 0 또는 1로, A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 29. 실시양태 26에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 30. 실시양태 28에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 31. 실시양태 26 내지 30 중 어느 하나에 있어서, HE가 -C(=O)인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 32. 실시양태 26 내지 30 중 어느 하나에 있어서, HE는 -C(=O)이고, 아래첨자 a'는 1이고 A'는 실시양태 17의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖거나, 또는 A'는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 33. 실시양태 26 내지 32 중 어느 하나에 있어서, -[P3]-[P2]-[P1]-은 D-Leu-Leu-Met(O), D-Leu-Ala-Glu, L-Leu-Ala-Glu 또는 D-Leu-Ala-Cit이고 여기서 Met(O)은 그 황 원자가 설폭사이드로 산화된 메티오닌이고 Cit는 시트룰린인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 34. 실시양태 1 내지 33 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1 또는 P-1에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는 독립적으로 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 또는 다른 전자 공여기, -할로겐, -니트로 또는 -시아노 또는 다른 전자 인출기이고, 특히 각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2이고, 특히 아래첨자 m은 0 또는 1이고, Q는 존재할 경우 전자 공여기이고, 바람직하게는 아래첨자 m은 0인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 35. 실시양태 1에 있어서, 조성물의 리간드 약물 결합체 화합물의 대부분에서 우세한 약물 링커 모이어티는 다음과 같은 구조로 표시되거나:
이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
물결선은 리간드 유닛에서 황 원자에 대한 공유 부착을 나타내고;
아래첨자 a'은 1로, A'의 존재를 나타내고, 여기서 A'는 실시양태 22의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 아민-함유 산 잔기이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
D는 약물 링커 모이어티에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖고 있는 세포 독성 약물인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 36. 실시양태 1에 있어서, 조성물의 리간드 약물 결합체 화합물의 대부분에서 우세한 약물 링커 모이어티는 다음과 같은 구조로 표시되거나:
이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
물결선은 리간드 유닛에서 황 원자에 대한 공유 부착을 나타내고;
아래첨자 a'은 1로, 각각 A의 존재를 나타내고, 여기서 A'는 실시양태 22의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 아민-함유 산 잔기이거나, 또는α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
D는 약물 링커 모이어티에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖고 있는 세포 독성 약물인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 37. 실시양태 1에 있어서, 조성물의 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물에서 우세한 약물 링커 모이어티는 다음과 같은 구조로 표시되거나:
이의 염, 특히, 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
물결선은 리간드 유닛에서 황 원자에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 약물 링커 모이어티에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖고 있는 세포 독성 약물인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 38. 실시양태 1 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 y'는 2이고, Yy는 -Y-Y'-이고, 여기서, Y는 제1 자가 용해성 스페이서 단위이고 Y'는 -OC(=O)-의 구조를 갖는 제2 자가 용해성 스페이서 단위이고, 세포 독성 약물은 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물로서, 여기서 2차 아민의 질소 원자가 D와 Y'가 공유하는 카르바메이트 작용기를 통해 Y'의 카르보닐 탄소 원자에 대한 공유 부착 부위인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 39. 실시양태 38에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D E 또는 D F 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고,
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 C1-C8 알킬이고, 바람직하게는 R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R12는 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1-C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 또는 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
R13은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1- C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 또는 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
R14는 수소 또는 메틸이거나, 또는
R13 및 R14는 이들이 부착된 탄소와 함께 취하여 스피로 C3-C8 카르보사이클로를 구성하고;
R15는 수소 또는 C1-C8 알킬이고;
R16은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -C6-C24-X1-아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 또는 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
각 R17은 독립적으로 수소, -OH, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴 또는 O-(C1-C8 알킬)이고;
R18은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고;
R19는 -C(R19A)2-C(R19A)2- C6-C24 아릴, -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 헤테로사이클릴) 또는 -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 카르보사이클릴)이고, 여기서 C6-C24 아릴 및 C3-C8 헤테로사이클릴은 임의로 치환되고;
R19A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C8 알킬, -OH 또는 임의로 치환된 -O-C1-C8 알킬이고;
R20은 수소 또는 C1-C20 알킬, C6-C24 아릴 또는 C3-C8 헤테로사이클릴, 임의로 치환된, 또는 -(R47O)m-R48, 또는 -(R47O)m-CH(R49)2이고;
R21은 -C1-C8 알킬렌-(C6-C24 아릴) 또는 -C1-C8 알킬렌-(C5-C24 헤테로아릴), 임의로 치환된, 또는 C1-C8 하이드록실알킬, 또는 임의로 치환된 C3-C8 헤테로사이클릴이고;
Z는 O, S, NH, 또는 NR46이고;
R46은 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고; 아래첨자 m은 1 내지 1000 범위의 정수이고;
R47은 C2-C8 알킬렌이고; R48은 수소 또는 C1-C8 알킬이고;
R49는 독립적으로 -COOH, -(CH2)n-N(R50)2, -(CH2)n-SO3H, 또는 -(CH2)n-SO3-C1-C8 알킬이고;
각 R50은 독립적으로 C1-C8 알킬 또는 -(CH2)n-COOH이고; 아래첨자 n은 0 내지 6 범위의 정수이고; X1은 C1-C10 알킬렌인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 40. 실시양태 39에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D E-1 , 화학식 D E-2 또는 화학식 D F-1 의 구조를 갖고:
여기서 Ar은 C6-C10 아릴 또는 C5-C10 헤테로아릴이고, 바람직하게는 Ar은 페닐 또는 2-피리딜이고;
Z는 -O- 또는 -NH-이고; R20은 수소, C1-C6 알킬, C6-C10 아릴 또는 C5-C10 헤테로아릴이고, 여기서 C1-C6 알킬, C6-C10 아릴 및 C5-C10 헤테로아릴은 임의로 치환되고; R21은 C1-C6 알킬, -C1-C6 알킬렌-(C6-C10 아릴) 또는 -C1-C6 알킬렌-(C5-C10 헤테로아릴)이고, 각각은 임의로 치환된, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 41. 실시양태 40에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D F-1 의 구조를 갖고
여기서 R21은 X1-S-R21a 또는 X1-Ar이고, 여기서 X1은 C1-C6 알킬렌이고, R21a은 C1-C4 알킬이고 Ar은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴이고;
-Z-는 -O-이고 R20은 C1-C4 알킬이거나, 또는
-Z-는 -NH-이고 R20은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 42. 실시양태 40에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식의 구조를 갖고 바람직한 실시양태에서, 오리스타틴 약물 화합물은 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 결합을 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 43. 실시양태 40에 있어서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 44. 실시양태 1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1C-MMAE 및 화학식 1D-MMAE의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 22의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고, RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되거나, 또는
Ra3은 적합한 산-불안정 보호기와 같은 질소 보호기이고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 45. 실시양태 1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 1F-MMAE 및 화학식 1G-MMAE의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인 약물 링커 모이어티를 갖고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 22의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
아래첨자 x는 1 또는 2이고;
Ra3은, 각 경우에, 독립적으로 질소 보호기, -H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 바람직하게는 -H, 산-불안정 보호기, -CH3 또는 -CH2CH3이거나,
또는 두 개의 Ra3 모두 이들이 부착된 질소와 함께 질소 보호기 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 여기서 그렇게 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 염 형태로, 바람직하게는 약학적으로 허용되는 염 형태로 선택적으로 양성자화되고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 46. 실시양태 1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 1H-MMAE의 약물 링커 모이어티:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염을 갖고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 22의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 47. 실시양태 44, 45 또는 46에 있어서, P1는 L-Glu 또는 L-Asp이고, P2는 L-Val 또는 L-Ala이고 P3은 L-Leu 또는 D-Leu인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 48. 실시양태 1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 여기서 조성물의 대부분의 리간드 약물 접합체 화합물에서 우세한 약물 링커 모이어티는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖는, 리간드 약물 접합체 조성물
실시양태 49. 실시양태 1 내지 48 중 어느 하나에 있어서, L은 온전한 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 항체 리간드 유닛인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 50. 실시양태 49에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편이 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 51. 실시양태 49에 있어서, 온전한 항체는 키메라, 인간화 또는 인간 항체이고, 항체가 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있거나 항체가 비결합 대조군 항체이므로 비결합 대조군 접합체 조성물을 정의하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 52. 실시양태 1 내지 51 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 p는 약 2 내지 약 12, 또는 약 2 내지 약 10, 또는 약 2 내지 약 8의 범위이고, 특히 아래첨자 p는 약 2, 약 4 또는 약 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
실시양태 53. 약학적으로 허용되는 제형으로서, 상기 제형은 유효량의 리간드 약물 접합체 조성물 또는 이에 상응하는 양의 실시양태 1 내지 36 중 어느 하나의 비결합 대조군 접합체 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약학적으로 허용되는 제형.
실시양태 54. 실시양태 53에 있어서, 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제는 액체 제형을 제공하는 액체 담체로서, 액체 제형은 동결건조 또는 이를 필요로 하는 대상에게 투여하기에 적합한, 약학적으로 허용되는 제형.
실시양태 55. 실시양태 53에 있어서, 제형은 동결건조로부터의 고체 또는 실시양태 54의 액체 제형이고, 여기서 상기 고체 제형의 적어도 하나의 부형제가 동결보호제인, 약학적으로 허용되는 제형.
실시양태 56. 화학식 IA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염으로서, 여기서
D는 약물 유닛이고;
LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 제2 선택적 스트레처 유닛으로, B가 없는 경우 A의 하위 단위가 되고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛이고, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 최대 12개의 아미노산의 연속적인 서열이고, 서열은 선택성 부여 트리펩타이드를 포함하고, 그 N-말단이 정상 조직의 균질물에 비해, 종양 조직의 균질물에 의해 선택적으로 절단될 수 있는 아미드 연결을 제공하여 유리 약물을 방출하고/거나 실시양태 1의 화학식 1의 리간드 약물 접합체 화합물의 종양 조직에 대한 향상된 생체이용률을 제공하고, 약물 링커 화합물이 펩타이드 절단 가능 유닛의 펩타이드 서열이 디펩타이드-발린-시트룰린-인 비교 대상 리간드-약물 접합체에 비해 정상 조직에 대한 생체이용률을 저해할 정도로 접합체 화합물의 약물 링커 모이어티가 되고, ;
여기서 종양과 정상 조직은 같은 종의 것이고, 여기서 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량으로 투여할 때 비교 대상 리간드-약물 접합체로부터 유리 약물이 방출되는 것과 관련된 부작용이 정상 조직의 세포에 대한 독성 때문이고.
Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4인, 약물 링커 화합물.
실시양태 57. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
LR'은 화학식 LB'-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단 A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR'의 구성 요소이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기이고, 여기서, 아래첨자 n은 최대 12개의 이들 잔기를 제공하는 정수 값이고,
여기서 서열의 -[P3]-[P2]-[P1]-는 선택성 부여 트리펩타이드인, 약물 링커 화합물.
실시양태 58. 실시양태 57에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염이고,
여기서 LR'는 화학식 LB'-Aa-Bb-의 1차 링커이고, 단 A'는 A의 하위 단위이므로 아래첨자 a 및 a'가 각각 1이고 아래첨자 b가 0일 때 A'는 LR'의 구성 요소이고;
여기서 각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기이고, 여기서 서열의 -[P3]-[P2]-[P1]-가 선택성 부여 트리펩타이드인, 약물 링커 화합물.
실시양태 59. 실시양태 58에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 P1이 생리학적 pH에서 음으로 하전된 측쇄 또는 양으로 하전되지 않은 극성 측쇄를 갖는 L-아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 60. 실시양태 56 내지 59 중 어느 하나에 있어서, P1이 글루탐산, 메티오닌-설폭사이드, 아스파르트산, (S)-3-아미노프로판-1,1,3-트리카르복실산 및 포스포-트레오닌로 이루어진 군에서 선택되는 L-아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 61. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서 각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 62. 실시양태 56 내지 61 중 어느 하나에 있어서, P2는 글리신 또는 L-아미노산의 잔기이고, 그 측쇄는 3개 이하의 연속된 탄소 원자를 갖는, 약물 링커 화합물.
실시양태 63. 실시양태 62에 있어서, P2 아미노산은 L-알라닌, L-발린 또는 글리신 또는 비천연 아미노산이고, 여기서 비천연 아미노산은 다음의 구조를 갖는, Abu, Aib, Ala, Gly, Leu, Nva 또는 Pra이고:
여기서 Abu, Nva, 및 Pra의 측쇄는 L-아미노산의 동일한 입체 화학 배열인, 약물 링커 화합물.
실시양태 64. 실시양태 63에 있어서, 약물 링커 화합물이 다음의 화학식을 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 P3은 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 65. 실시양태 56 내지 64 중 어느 하나에 있어서, P3은 생리학적 pH에서 측쇄가 하전되지 않은 D-아미노산인, 약물 링커 화합물.
실시양태 66. 실시양태 56 내지 64 중 어느 하나에 있어서, P3은 D-Leu, L-Leu, L-Cit 또는 L-Pro, 바람직하게는 D-Leu인, 약물 링커 화합물.
실시양태 67. 실시양태 66에 있어서, -[P3]-[P2]-[P1]-가 -D-Leu-Ala-Glu-, 또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염인, 약물 링커 화합물.
실시양태 68. 실시양태 56 내지 67 중 어느 하나에 있어서, LB'는 표적화 모이어티의 티올 작용기와 반응하여 티오 치환된 석신이미드 모이어티를 형성할 수 있는 말레이미드 모이어티인, 약물 링커 화합물.
실시양태 69. 실시양태 56 내지 67 중 어느 하나에 있어서, LB'-A-는 다음의 구조 중 하나를 갖거나 포함하거나:
또는 이의 염이고, 여기서
LG1은 표적화 약제 친핵체에 의한 친핵성 치환에 적합한 이탈기이고;
LG2는 표적화 약제에 대한 아미드 결합 형성에 적합한 이탈기, 또는 표적화 약제에 대한 아미드 결합 형성에 적합한 활성화 가능 카르복실산을 제공하는 -OH이고;
물결선은 약물 링커 화합물 구조의 나머지 부분에 대한 공유 부착 부위를 나타내는, 약물 링커 화합물.
실시양태 70. 실시양태 69에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 LB'-A-는 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
A'a'에 인접한 물결선은 펩타이드 절단 가능 유닛의 공유 부착 부위를 나타내고;
[HE]는 선택적 가수분해 강화 유닛으로, A 또는 그의 제1 하위 단위에 의해 제공되는 구성 요소이고;
BU는 염기성 유닛이고;
Ra2는 임의로 치환된 C1-C12 알킬 기이고;
점선 곡선은 선택적 고리화를 나타내고, 상기 고리화가 없는 경우, BU는 1차, 2차 또는 3차 아민 작용기를 비-사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 갖는 비-사이클릭 염기성 유닛이거나, 또는 고리화가 존재할 경우, BU는 고리화된 염기성 유닛이고, 여기서 Ra2 및 BU은 둘 다가 부착된 탄소 원자와 함께, 2차 또는 3차 아민 작용기의 골격 염기성 질소 원자를 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 작용기로 함유하는, 임의로 치환된 스피로 C3-C20 헤테로사이클로를 정의하고,
여기서 비-사이클릭 염기성 유닛 또는 사이클릭 염기성 유닛의 염기성 질소 원자는 염기성 질소 원자의 치환 정도에 따라 선택적으로 질소 보호기에 의해 적합하게 보호되거나 산 부가염으로 선택적으로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 71. 실시양태 70에 있어서, LB'-A-는 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 산 부가염이거나, 또는 여기서 LB'-A-는 다음의 구조를 갖는, 약물 링커 화합물:
실시양태 72. 실시양태 56 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 A'는 A의 하위 단위로 존재하고, 여기서 A'는 화학식 (3) 또는 화학식 (4)의 구조를 갖는 아민-함유 산 잔기를 포함하고:
또는 이의 염이고, 여기서
질소 원자에 인접한 물결선은 [HE]에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서, [HE]는 -C(=O)-이고 카르보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 A'의 나머지 부분 또는 펩타이드 절단 가능 유닛의 N-말단 아미노산 잔기에 대한 공유 부착 부위를 나타내고, 여기서 두 부착은 모두 아미드 작용기를 통해 이루어지고;
K 및 L'은 독립적으로 C, N, O 또는 S이고, 단 K 또는 L'이 O 또는 S일 경우, R41 및 R42에서 K로 또는 R43 및 R44에서 L'로는 부재하고, K 또는 L'이 N일 경우, R41, R42 중 하나에서 K로 또는 R42, R43 중 하나에서 L'로는 부재하되, 2개의 인접한 L'이 N, O, 또는 S로 독립적으로 선택되지는 않고;
여기서 아래첨자 e 및 f는 0 내지 12 범위의 독립적으로 선택된 정수이고 아래첨자 g는 1 내지 12 범위의 정수이고:
G는 수소, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, -OH 또는 -CO2H이고;
R38은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R39 내지 R44는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 및 임의로 치환된 C5-C10 (헤테로)아릴로 이루어진 군에서 선택되거나, 또는
R39, R40은 둘 다 부착된 탄소 원자와 함께, 또는 R41, R42는 K가 탄소 원자일 때 둘 다 부착된 K와 함께, C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R41 내지 R44는 본원에 정의된 바와 같거나,
또는 R43, R44는 L'이 탄소 원자일 때 둘 다 부착된 L'과 함께 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, R39 내지 R42는 본원에 정의된 바와 같거나,
또는 R40 및 R41, 또는 R40 및 R43, 또는 R41 및 R43은 둘 다 부착된 탄소 원자 또는 헤테로원자 및 그 탄소 원자 및/또는 헤테로원자 사이에 개입하는 원자와 함께 C5-C6 카르보사이클로 또는 C5-C6 헤테로사이클로를 정의하고, R39, R44 및 R40 내지 R43의 나머지 부분은 본원에 정의된 바와 같고,
단, K가 O 또는 S일 경우, R41 및 R42는 부재하고, K가 N일 경우, R41, R42 중 하나가 부재하고, L'이 O 또는 S일 경우, R43 및 R44는 부재이고, L'이 N일 경우, R43, R44 중 하나는 부재하거나, 또는
A'는 알파-아미노, 베타-아미노 또는 다른 아민-함유 산 잔기를 포함하고, 여기서 그 아미노 질소 원자는 HE의 카르보닐 탄소 원자에 공유 부착되고, 그 카르복실산 카르보닐 탄소 원자는 A'의 나머지 부분 또는 펩타이드 절단 가능 유닛의 N-말단 아미노산에 공유 부착되고, 여기서 두 공유 부착은 모두 아미드 작용기를 통해 이루어지는, 약물 링커 화합물.
실시양태 73. 실시양태 72에 있어서, A'는 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖거나:
또는 이의 염인 아민-함유 산 잔기이고, 여기서
아래첨자 e 및 f는 독립적으로 0 또는 1이고;
R38 내지 R44은 각각 수소이고;
또는 A'는 α-아미노 또는 β-아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 74. 실시양태 56 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 A'는 β-아미노산 잔기 또는 -LP(PEG)-를 포함하고,
여기서 LP는 화학식 LP-1 또는 LP-2의 구조를 갖는 병렬 커넥터 단위이거나:
또는
여기서 -LP(PEG)- 또는 이의 PEG-함유 하위 단위는 화학식 LP-3 또는 화학식 LP-4의 구조를 갖고:
여기서 아래첨자 v는 1 내지 4 범위의 정수이고;
아래첨자 v'는 0 내지 4 범위의 정수이고;
XLP는 천연 또는 비천연 아미드산 측쇄에 의해 제공되거나 또는 -O-, -NRLP-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)-, -C(=O)N(RLP)-, -N(RLP)C(=O)N(RLP)-, 및 -N(RLP)C(=NRLP)N(RLP)-, 또는 C3-C8 헤테로사이클로로 이루어진 군에서 선택되고;
여기서 각 RLP는 수소 및 임의로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는 RLP 중 2개는 이들이 부착된 탄소 원자 및 이들의 개입 원자와 함께 C5-C6 헤테로사이클로를 정의하고 임의의 나머지 RLP는 앞서 정의된 바와 같고;
Ar은 임의로 치환된, C6-C10 아릴렌 또는 C5-C10 헤테로아릴렌이고;
각 RE 및 RF는 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C2-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C6-C10 아릴렌 또는 임의로 치환된 C5-C10 헤테로아릴렌으로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고,
또는 RE 및 RF 둘 다가 부착된 탄소 원자와 함께 임의로 치환된 스피로 C3-C6 카르보사이클로를 정의하고, 또는 인접한 탄소 원자로부터의 RE 및 RF와 이들 원자 및 임의의 개입 탄소 원자와 함께 임의로 치환된 C5-C6 카르보사이클로를 정의하고, 나머지 RE 및 RF는 이전에 정의한 바와 같고;
여기서, 물결선 중 하나는 PEG 단위의 공유 부착 지점을 나타내고, 다른 두 개의 물결선은 약물 링커 화합물을 나타내는 구조 내에서 화학식 LP-1 또는 화학식 LP-2의 공유 부착을 나타내거나, 또는
LP는 3중 기능성 아민-함유 산 잔기의 구조를 갖는 병렬 커넥터 단위이고;
PEG는 PEG 단위인, 약물 링커 화합물.
실시양태 75. 실시양태 74에 있어서, A'는 β-아미노산 잔기 또는 -LP(PEG)-를 포함하고,
여기서 β-아미노산 잔기는 -NHCH2CH2C(=O)-의 구조를 갖고;
여기서 -LP(PEG)-은 다음의 구조를 갖고:
여기서 물결선은 약물 링커 모이어티 내의 공유 부착 부위를 나타내는, 약물 링커 화합물.
실시양태 76. 실시양태 74 또는 75에 있어서, PEG 단위는 다음의 구조를 갖고:
여기서 물결선은 LP에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
R20은 PEG 부착 단위이고, 여기서 PEG 부착 단위는 -C(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -NH-, -C(O)O-, -C(O)C1-C10 알킬, -C(O)C1-C10 알킬-O-, -C(O)C1-C10 알킬-CO2-, -C(O)C1-C10알킬-NH-, -C(O)C1-C10 알킬-S-, -C(O)C1-C10알킬-C(O)-NH-, -C(O)C1-C10알킬-NH-C(O)-, -C1-C10 알킬, -C1-C10알킬-O-, -C1-C10알킬-CO2-, -C1-C10알킬-NH-, -C1-C10 알킬-S-, -C1-C10 알킬-C(O)-NH-, -C1-C10 알킬-NH-C(O)-, -CH2CH2SO2-C1-C10 알킬-, -CH2C(O)-C1-10 알킬-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-O-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-NH-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-CO2-, =N-(O 또는 N)-C1-C10 알킬-S-,
이고;
R21은 PEG 캡핑 유닛이고, 여기서 PEG 캡핑 유닛은 -C1-C10 알킬, -C2-C10 알킬-CO2H, -C2-C10 알킬-OH, -C2-C10 알킬-NH2, C2-C10 알킬-NH(C1-C3 알킬), 또는 C2-C10 알킬-N(C1-C3 알킬)2이고;
R22는 여러 개의 PEG 하위 단위 사슬을 함께 커플링하기 위한 PEG 커플링 단위이고, 여기서 PEG 커플링 단위는 -C1-10 알킬-C(O)-NH-, -C1-10 알킬-NH-C(O)-, -C2-10 알킬-NH-, -C2-C10 알킬-O- , -C1-C10 알킬-S-, 또는 -C2-C10 알킬-NH-이고;
아래첨자 n은 8 내지 72, 10 내지 72 또는 12 내지 72에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 e은 2 내지 5에서 선택되고;
각 n'은 적어도 6 내지 72 이하, 바람직하게는 적어도 8 또는 적어도 10 내지 36 이하에서 독립적으로 선택되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 77. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IC의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
아래첨자 P는 1 또는 2이고; 아래첨자 Q는 1 내지 6의 범위이고, 바람직하게는 아래첨자 Q는 1 또는 2이고, 보다 바람직하게는 아래첨자 Q는 아래첨자 P와 동일한 값을 갖고;
Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1는 C1-C4 알킬렌이고 RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합된 염기성 질소는 염 형태로 양성자화되거나, 또는
Ra3은 적합한 질소 보호기, 바람직하게는 적합한 산-불안정 보호기이고;
각 P는 펩타이드 절단 가능 유닛의 연속 아미노산 서열의 아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 78. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IF의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
아래첨자 x는 1 또는 2이고;
Ra2은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, -CH3 또는 -CH2CH3이고;
Ra3은, 각 경우에, 독립적으로 질소 보호기, -H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 바람직하게는 -H, 적합한 산-불안정 보호기, -CH3 또는 -CH2CH3이고, 단 두 Ra3가 모두 질소 보호기가 아닐 때 두 Ra3가 결합된 질소 원자는 염 형태로 양성자화되고,
또는 두 개의 Ra3 모두 이들이 부착된 질소와 함께 질소 보호기 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 여기서 그렇게 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 79. 실시양태 78에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IH의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고,
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, A'의 부재 또는 존재를 나타내는, 약물 링커 화합물.
실시양태 80. 실시양태 77에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 LSS'의 4-원 헤테로사이클로의 질소 원자는 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 81. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서 LSS'의 1차 아민은 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 82. 실시양태 77 내지 81 중 어느 하나에 있어서, HE는 -C(=O)인, 약물 링커 화합물.
실시양태 83. 실시양태 77 내지 81 중 어느 하나에 있어서, HE는 -C(=O)이고, 아래첨자 a'는 1이고, A'는 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 84. 실시양태 77 내지 83 중 어느 하나에 있어서, -[P3]-[P2]-[P1]-는 D-Leu-Leu-Cit, D-Leu-Leu-Lys, D-Leu-Leu-Met(O), Cit-Ala(Nap)-Thr, D-Leu-Ala-Glu 또는 Pro-Ala(Nap)-Lys이고, 여기서 Met(O)는 황 원자가 설폭사이드로 산화된 메티오닌이고 Ala(Nap)은 메틸 측쇄가 나프트트-1-일인 알라닌인, 약물 링커 화합물.
실시양태 85. 실시양태 56 내지 84 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1 또는 P-1에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는 독립적으로 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 또는 다른 전자 공여기, -할로겐, -니트로 또는 -시아노 또는 다른 전자 인출기이고, 특히 각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2이고, 특히 아래첨자 m은 0 또는 1이고 Q는 존재할 경우 전자 공여기이고, 바람직하게는 아래첨자 m은 0인, 약물 링커 화합물.
실시양태 86. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
아래첨자 a'은 1로, A'의 존재를 나타내고, 여기서 A'는 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 아민-함유 산 잔기이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
D는 약물 링커 화합물의 링커 유닛에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖는 세포 독성 약물이고,
여기서 LSS'의 헤테로사이클로의 질소 원자는 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 87. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
아래첨자 a'은 1로, A'의 존재를 나타내고, 여기서 A'는 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 아민-함유 산 잔기이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
D는 약물 링커 화합물의 링커 유닛에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖는 세포 독성 약물이고,
여기서 LSS'의 1차 아민은 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 88. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
D는 약물 링커 화합물의 링커 유닛에 대한 부착 부위로서 2차 아미노기를 갖는 세포 독성 약물인, 약물 링커 화합물.
실시양태 89. 실시양태 56 내지 88 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 y'는 2이고, -Y-Y'-의 Y는 제1 자가 용해성 스페이서 유닛이고 Y'는 -OC(=O)-의 구조를 갖는 제2 자가 용해성 스페이서 유닛이고, 세포 독성 약물은 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물이고 여기서 2차 아민의 질소 원자는 D와 Y' 사이에 공유된 카르바메이트 작용기를 통해 Y'의 카르보닐 탄소에 대한 공유 부착 부위인, 약물 링커 화합물.
실시양태 90. 실시양태 89에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D E 또는 D F 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 부착 부위를 나타내고,
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 C1-C8 알킬이고, 바람직하게는 R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R12는 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1-C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 또는 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
R13은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -X1- C6-C24 아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 및 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
R14는 수소 또는 메틸이거나, 또는
R13 및 R14는 이들이 부착된 탄소와 함께 취하여 스피로 C3-C8 카르보사이클로를 구성하고;
R15는 수소 또는 C1-C8 알킬이고;
R16은 수소, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴, C6-C24 아릴, -C6-C24-X1-아릴, -X1-(C3-C8 카르보사이클릴), C3-C8 헤테로사이클릴 및 -X1-(C3-C8 헤테로사이클릴)이고;
R17은 독립적으로 수소, -OH, C1-C8 알킬, C3-C8 카르보사이클릴 및 O-(C1-C8 알킬)이고;
R18은 수소 또는 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고;
R19는 -C(R19A)2-C(R19A)2- C6-C24 아릴, -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 헤테로사이클릴) 또는 -C(R19A)2-C(R19A)2-(C3-C8 카르보사이클릴)이고, 여기서 C6-C24 아릴 및 C3-C8 헤테로사이클릴은 임의로 치환되고;
R19A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C1-C8 알킬, -OH 또는 임의로 치환된 -O-C1-C8 알킬이고;
R20은 수소 또는 C1-C20 알킬, C6-C24 아릴 또는 C3-C8 헤테로사이클릴, 임의로 치환된, 또는 -(R47O)m-R48, 또는 -(R47O)m-CH(R49)2이고;
R21은 -C1-C8 알킬렌-(C6-C24 아릴) 또는 -C1-C8 알킬렌-(C5-C24 헤테로아릴), 임의로 치환된, 또는 C1-C8 하이드록실알킬, 또는 임의로 치환된 C3-C8 헤테로사이클릴이고;
Z는 O, S, NH, 또는 NR46이고
R46은 임의로 치환된 C1-C8 알킬이고; 아래첨자 m은 1 내지 1000 범위의 정수이고;
R47은 C2-C8 알킬이고; R48은 수소 또는 C1-C8 알킬이고;
R49는 독립적으로 -COOH, -(CH2)n-N(R50)2, -(CH2)n-SO3H, 또는 -(CH2)n-SO3-C1-C8 알킬이고;
R50은 독립적으로 C1-C8 알킬, 또는 -(CH2)n-COOH이고; 아래첨자 n은 0 내지 6 범위의 정수이고; X1은 C1-C10 알킬렌인, 약물 링커 화합물.
실시양태 91. 실시양태 90에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D E-1 , 화학식 D E-2 또는 화학식 D F-1 의 구조를 갖고:
여기서 Ar은 C6-C10 아릴 또는 C5-C10 헤테로아릴이고, 바람직하게는 Ar은 페닐 또는 2-피리딜이고;
Z는 -O-, 또는 -NH-이고; R20은 수소 또는 임의로 치환된, C1-C6 알킬, C6-C10 아릴 또는 C5-C10 헤테로아릴이고; R21은 임의로 치환된, C1-C6 알킬, -C1-C6 알킬렌-(C6-C10 아릴) 또는 -C1-C6 알킬렌-(C5-C10 헤테로아릴)인, 약물 링커 화합물.
실시양태 92. 실시양태 91에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D F-1 의 구조를 갖고
여기서 R21은 X1-S-R21a 또는 X1-Ar이고, 여기서 X1은 C1-C6 알킬렌이고, R21a은 C1-C4 알킬이고 Ar은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴이고;
-Z-는 -O-이고 R20은 C1-C4 알킬이거나, 또는
-Z-는 -NH-이고 R20은 페닐 또는 C5-C6 헤테로아릴인, 약물 링커 화합물.
실시양태 93. 실시양태 91에 있어서, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식의 구조를 갖고, 바람직한 실시양태에서, 오리스타틴 약물 화합물은 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타내는, 약물 링커 화합물.
실시양태 94. 실시양태 91에 있어서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)인, 약물 링커 화합물.
실시양태 95. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IC-MMAE의 구조를 갖거나:
또는 이의 염, 특히 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
Ra3은 -H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 -C1-C4 알킬렌-(C6-C10 아릴), 또는 -RPEG1-O-(CH2CH2O)1-36-RPEG2이고, 여기서 RPEG1은 C1-C4 알킬렌이고, RPEG2는 -H 또는 C1-C4 알킬렌이고, 여기서 Ra3에 결합한 염기성 질소는 염 형태로 양성자화되거나, 또는
Ra3은 적합한 질소 보호기, 바람직하게는 적합한 산-불안정 보호기인, 약물 링커 화합물.
실시양태 96. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IF-MMAE의 화학식의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
아래첨자 x는 1 또는 2이고;
Ra3은, 각 경우에, 독립적으로 적합한 질소 보호기, -H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 바람직하게는 -H, 적합한 산-불안정 보호기, -CH3 또는 -CH2CH3이고, 단, 두 Ra3가 모두 질소 보호기가 아닐 때, 두 Ra3가 결합된 질소 원자는 염 형태로 양성자화되거나,
또는 두 Ra3 모두 이들이 부착된 질소와 함께 질소 보호기 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐 헤테로사이클릴을 정의하고, 여기서 그렇게 정의된 염기성 1차, 2차 또는 3차 아민은 염 형태로 양성자화되는, 약물 링커 화합물.
실시양태 97. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 IH-MMAE의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
A'는 존재하는 경우, 실시양태 73의 화학식 3a, 화학식 4a 또는 화학식 5a의 구조를 갖는 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이거나, 또는 α-아미노산 또는 β-아미노산 잔기, 특히 -NH-CH2CH2-C(=O)-이고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, A'의 부재 또는 존재를 나타내는, 약물 링커 화합물.
실시양태 98. 실시양태 95, 96 또는 97에 있어서, P1은 L-Glu 또는 L-Asp이고, P2는 L-Val 또는 L-Ala이고 P3은 L-Leu 또는 D-Leu인, 약물 링커 화합물.
실시양태 99. 실시양태 56에 있어서, 약물 링커 화합물이 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염인, 약물 링커 화합물.
A1. 하기 화학식 A1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염으로서, 여기서
L은 리간드 유닛이고;
LU는 링커 유닛이고;
D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고;
아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 수이거나 약 4 또는 약 8이고,
여기서 리간드 유닛은 항체 또는 항체의 항원-결합 단편으로부터 유래하고, 여기서 항체 또는 항원-결합 단편은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 약물 유닛(들)를 유리 약물로 후속 방출할 수 있고,
여기서 조성물의 각 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 화학식 A1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고,
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 약물 유닛이고;
LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 존재할 경우, 제2 선택적 스트레스 단위이고 B의 부재시 A의 하위 단위가 되고,
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 3의 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고, 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2 또는 3이고;
여기서 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 A1의 구조를 갖고, 여기서 아래첨자 p는 아래첨자 p'로 대체되고, 여기서 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 또는 4 또는 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A2. 실시양태 A1에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 A1H의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수 분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서
HE는 가수분해 강화 단위이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 단위 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A3. 실시양태 A2에 있어서, HE는 -C(=O)인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A4. 실시양태 A1 내지 A3 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1에 대한 공유 부착 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry은 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는, 존재하는 경우, -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A5. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 튜불린 파괴제, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 손상제, 또는 DNA 복제 억제제의 구조를 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A6. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 튜불리신의 구조를 통합하고 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A7. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A8. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 오리스타틴의 구조를 통합하고 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A9. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 안트라사이클린의 구조를 통합하고 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A10. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택되는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있고
여기서
RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
RF 및 RF'는 각각 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고;
여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환되는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A11. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 단검 모양은 약물 링커 모이어티의 2차 링커에 대한 D의 부착 지점을 나타내고, 원은 5-원 또는 6원 질소 헤테로아릴렌을 나타내고, 해당 헤테로아릴렌에 대한 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있으며, 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고;
R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고;
R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고;
R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된, 임의로 치환된 알킬이고,
하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 하나의 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고,
아래첨자 m'은 0 또는 1인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A12. 실시양태 A1 내지 A4 중 어느 하나에 있어서, D는 세포 독성 약물이고 여기서 세포 독성 약물은 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물이고 여기서 2차 아민의 질소 원자는 약물 링커 모이어티의 공유 부착 부위이고, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 결합 부위를 나타내고;
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 결합을 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A13. 실시양태 A12에 있어서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A14. 실시양태 A1 내지 A13 중 어느 하나에 있어서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-를 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A15. 실시양태 A1 내지 A14 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A16. 실시양태 A1 내지 A15 중 어느 하나에 있어서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A17. 실시양태 A1 내지 A16 중 어느 하나에 있어서, P2 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A18. 실시양태 A1 내지 A17 중 어느 하나에 있어서, -P2-P1-는 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A19. 실시양태 A1 내지 A18 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
A20. 실시양태 A1 내지 A16 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 염.
A21. 실시양태 A1에 있어서, 조성물은 다음의 구조를 갖거나
또는 이의 약학적으로 허용되는 염인 리간드 약물 접합체 화합물을 포함하고,
여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 12의 정수인, 리간드 약물 접합체 화합물 조성물.
A22. 실시양태 A1 내지 A21 중 어느 하나에 있어서, L은 온전한 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 항체 리간드 유닛인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A23. 실시양태 A22에 있어서, 온전한 항체가 온전한 키메라, 인간화 또는 인간 항체인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A24. 실시양태 A22에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A25. 실시양태 A22에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 면역 세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A26. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 CD30에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A27. 실시양태 A26에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 1, 2, 3, 4, 5, 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A28. 실시양태 A26 또는 실시양태 A27에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A29. 실시양태 A26 내지 A28 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체가 cAC10인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A30. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 LIV1에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A31. 실시양태 A30에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 518, 519, 520, 521, 522, 및 523의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A32. 실시양태 A30 또는 실시양태 A31 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 524의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 525의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A33. 실시양태 A30 내지 A32 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체는 라디라투주맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A34. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 TROP2에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A35. 실시양태 A34에 있어서, 온전한 항체는 사시투주맙 또는 다토포타맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A36. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 ALPP에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A37. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 IL1RAP에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A38. 실시양태 A37에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 96, 97, 98, 99, 100, 및 101의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A39. 실시양태 A37 또는 실시양태 A38에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 103의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A40. 실시양태 A37 내지 A39 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체는 니다닐리맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A41. 실시양태 A22 또는 실시양태 A23에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 ASCT2에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A42. 실시양태 A41에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 794, 795, 796, 797, 798, 및 799의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A43. 실시양태 A41 또는 실시양태 A42에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 801의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 802의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A44. 실시양태 A41에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 790의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 791의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A45. 실시양태 A41에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 792의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 793의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A46. 실시양태 A26 내지 A45 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 1H-MMAE의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서:
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 결합 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
A47. 실시양태 A26 내지 A45 중 어느 하나에 있어서, 조성물은 다음 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 화합물을 포함하거나
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 12의 정수인, 리간드 약물 접합체 화합물 조성물.
A48. 실시양태 A1 내지 A48 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 p는 약 2 내지 약 12, 또는 약 2 내지 약 10, 또는 약 2 내지 약 8의 범위이거나, 또는 아래첨자 p는 약 2, 약 4 또는 약 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
A49. 약학적으로 허용되는 제형으로서, 여기서 제형은 유효량의 실시양태 A1 내지 A48 중 어느 하나의 리간드 약물 접합체 조성물 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약학적으로 허용되는 제형.
A50. 실시양태 A49에 있어서, 최소 하나의 약학적으로 허용되는 부형제는 액체 제형을 제공하는 액체 담체이고, 여기서 액체 제형은 동결건조 또는 이를 필요로 하는 대상에 투여하기에 적합한, 약학적으로 허용되는 제형.
A51. 실시양태 A49에 있어서, 제형은 동결건조된 고체 또는 실시양태 A26의 액체 제형이고, 여기서 고체 제형의 적어도 하나의 부형제가 동결보호제인, 약학적으로 허용되는 제형.
A52. 치료적 유효량의 실시양태 A1 내지 A48 중 어느 하나의 리간드 약물 접합체 조성물 또는 실시양태 A49 내지 A51 중 어느 하나의 약학적으로 허용되는 제형을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법.
A53. 화학식 AIA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염으로서, 여기서
D는 약물 유닛이고;
LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 존재할 때 제2 선택적 스트레처 유닛으로서, B가 부재할 때A의 하위 단위가 되고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3 아미노산은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 3의 범위의 정수이고,
단 아래첨자 b가 0 일 때 아래첨자 q는 1이고, 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2 또는 3인, 약물 링커 화합물.
A54. 실시양태 A53에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 AIH의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서:
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는, 약물 링커 화합물.
A55. A54에 있어서, HE는 -C(=O)인, 약물 링커 화합물.
A56. 실시양태 A53 내지 A55 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 -N(Ry)D'는 D를 나타내고, 여기서 D'는 D의 나머지 부분이고;
물결선은 P1에 대한 공유 결합 부위를 나타내고;
점선은 Ry에서 D'로의 선택적 고리화를 나타내고;
Ry는 D'로의 고리화가 없을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나 또는 D'로 고리화되었을 때 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2인, 약물 링커 화합물.
A57. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 튜불린 파괴제, DNA 마이너 홈 결합제, DNA 손상제, 또는 DNA 복제 억제제의 구조를 포함하는, 약물 링커 화합물.
A58. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 튜불리신의 구조를 통합하고 있는, 약물 링커 화합물.
A59. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있는, 약물 링커 화합물.
A60. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 오리스타틴의 구조를 통합하고 있는, 약물 링커 화합물.
A61. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 안트라사이클린의 구조를 통합하고 있는, 약물 링커 화합물.
A62. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택되는 구조를 갖는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있고
여기서
RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
각 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고, 또는
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여, 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고;
여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환되는, 약물 링커 화합물.
A63. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서, 단검 모양은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 D의 부착 지점을 나타내고 원은 5-원 또는 6원 질소 헤테로아릴렌을 나타내고 여기서, 해당 헤테로아릴렌에 대한 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있으며, 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고;
R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고;
R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고;
R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된, 임의로 치환된 알킬이고,
하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 하나의 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고,
아래첨자 m'은 0 또는 1인, 약물 링커 화합물.
A64. 실시양태 A53 내지 A56 중 어느 하나에 있어서, D는 세포 독성 약물이고 여기서 세포 독성 약물은 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물이고 여기서 2차 아민의 질소 원자는 약물 링커 모이어티의 공유 부착 부위이고, 2차 아민-함유 오리스타틴 화합물은 화학식 D F/E-3 의 구조를 갖고:
여기서 단검 모양은 카르바메이트 작용기를 제공하는 질소 원자의 공유 결합 부위를 나타내고;
R10 및 R11 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이고;
R13은 이소프로필 또는 -CH2-CH(CH3)2이고;
R19B는 -CH(CH3)-CH(OH)-Ph, -CH(CO2H)-CH(OH)-CH3, -CH(CO2H)-CH2Ph, -CH(CH2Ph)-2-티아졸릴, -CH(CH2Ph)-2-피리딜, -CH(CH2-p-Cl-Ph), -CH(CO2Me)-CH2Ph, -CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3, -CH(CH2CH2SCH3)C(=O)NH-퀴놀-3-일, -CH(CH2Ph)C(=O)NH-p-Cl-Ph이거나, 또는
R19B는 의 구조를 갖고, 여기서 물결선은 오리스타틴 화합물의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타내는, 약물 링커 화합물.
A65. 실시양태 A64에 있어서, 2차 아민 함유 오리스타틴 화합물은 모노메틸오리스타틴 E (MMAE) 또는 모노메틸오리스타틴 F (MMAF)인, 약물 링커 화합물.
A66. 실시양태 A53 내지 A65 중 어느 하나에 있어서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-를 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 약물 링커 화합물, 또는 이의 염.
A67. 실시양태 A53 내지 A66 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 약물 링커 화합물.
A68. 실시양태 A53 내지 A67 중 어느 하나에 있어서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 약물 링커 화합물.
A69. 실시양태 A53 내지 A68 중 어느 하나에 있어서, P2 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖며, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 약물 링커 화합물.
A70. 실시양태 A53 내지 A69 중 어느 하나에 있어서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-인, 약물 링커 화합물.
A71. 실시양태 A53 내지 A70 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 약물 링커 화합물.
A72. 실시양태 A53 내지 A68 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 약물 링커 화합물.
A73. 실시양태 A53에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염인, 약물 링커 화합물.
A74. 다음의 구조를 갖는 화합물,
또는 이의 염을 제조하는 방법으로서,
a) , 또는 이의 염을 4-아미노벤질 알코올과 반응시킨 후 환원시켜
또는 이의 염을 형성하는 단계;
b) 또는 이의 염을 또는 이의 염과 반응시킨 후 환원시켜 또는 이의 염을 형성하는 단계;
c) 또는 이의 염을 3-말레이미도프로피온산과 반응시켜 또는 이의 염을 형성하는 단계; 및
d) 또는 이의 염을 화합물 또는 이의 염으로 전환시키는 단계를 포함하는, 방법.
B1. 화학식 B1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염으로서, 여기서
L은 리간드 유닛이고;
LU는 링커 유닛이고;
D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고;
아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 수이거나 약 4 또는 약 8이고,
여기서 리간드 유닛은 항체 또는 항체의 항원-결합 단편으로부터 유래하고, 여기서 항체 또는 항원-결합 단편은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 약물 유닛(들)를 유리 약물로 후속 방출할 수 있고
여기서 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 화학식 B1A의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고,
여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
D는 약물 유닛이고, 여기서 약물 유닛은 튜불리신이고;
LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 존재시 제2 선택적 스트레스 단위이고 B의 부재시 A의 하위 단위가 되고,
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4이고;
여기서 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 B1의 구조를 갖고, 여기서 아래첨자 p는 아래첨자 p'로 대체되고, 여기서 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 4 또는 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B2. 실시양태 B1에 있어서, 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 화학식 1H의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B3. 실시양태 B2에 있어서, HE는 -C(=O)인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B4. 실시양태 B1 내지 B3 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B5. 실시양태 B1 내지 B4 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서, 단검 모양은 약물 링커 모이어티에 D가 부착되는 지점을 나타내고, 원은 5원 또는 6원 질소 헤테로아릴렌을 나타내고, 여기서, 해당 헤테로아릴렌에 대한 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있으며, 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고;
R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고, 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고;
R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고;
R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된 임의로 치환된 알킬이고,
하나의 R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고,
아래첨자 m'은 0 또는 1인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B6. 실시양태 B5에 있어서, R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B7. 실시양태 B5 또는 실시양태 B6에 있어서, 5-원 헤테로아릴렌은 구조 로 표시되고, 여기서 XB는 O, S, 또는 N-RB이고 여기서 RB는 수소 또는 저급 알킬인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B8. 실시양태 B5 내지 B-7 중 어느 하나에 있어서, 5-원 헤테로아릴렌이 2가 티아졸 모이어티인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B9. 실시양태 B5 내지 B-8 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 m'이 1인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B10. 실시양태 B5 내지 B-9 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 R7B는 수소 또는 -OH이고, R3은 저급 알킬이고, R2B 및 R2C는 독립적으로 수소 또는 저급 알킬인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B11. 실시양태 B1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 다음의 약물 링커 모이어티를 갖고:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 갖고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서:
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B12. 실시양태 B1에 있어서, 아래첨자 q는 1이고 리간드 약물 접합체 조성물에서 리간드 약물 접합체 화합물은 주로 다음의 약물 링커 모이어티를 갖거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 선택적으로, 이러한 각 화합물에서 하나 이상의 약물 링커 모이어티는 가수분해된 형태의 석신이미드 고리를 갖는 소수의 리간드 약물 접합체 화합물을 갖고, 여기서:
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
물결선은 리간드 유닛의 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B13. 실시양태 B1 내지 B12 중 어느 하나에 있어서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-를 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B14. 실시양태 B1 내지 B13 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B15. 실시양태 B1 내지 B14 중 어느 하나에 있어서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B16. 실시양태 B1 내지 B15 중 어느 하나에 있어서, P2 아미노산은 소수성이 발린보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B17. 실시양태 B1 내지 B16 중 어느 하나에 있어서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B18. 실시양태 B1 내지 B17 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B19. 실시양태 B1 내지 B15 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 리간드 약물 접합체 조성물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B20. 실시양태 B1에 있어서, 조성물은 다음 구조를 갖는 리간드 약물 접합체 화합물을 포함하거나
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서 L은 리간드 유닛이고, 아래첨자 p'는 1 내지 12의 정수인, 리간드 약물 접합체 화합물 조성물.
B21. 실시양태 B1 내지 B20 중 어느 하나에 있어서, L은 온전한 항체 또는 그 항원-결합 단편의 항체 리간드 유닛인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B22. 실시양태 B21에 있어서, 온전한 항체가 온전한 키메라, 인간화 또는 인간 항체인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B23. 실시양태 B21에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 암세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B24. 실시양태 B21에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 면역 세포 항원에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B25. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22에 있어서, 온전한 항체 또는 의 단편은 CD30에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B26. 실시양태 B25에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 1, 2, 3, 4, 5, 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B27. 실시양태 B25 또는 실시양태 B26에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B28. 실시양태 B25 내지 B27 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체가 cAC10인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B29. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 LIV1에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B30. 실시양태 B29에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 518, 519, 520, 521, 522, 및 523의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B31. 실시양태 B29 또는 실시양태 B30에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 524의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 525의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B32. 실시양태 B29 내지 B31 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체는 라디라투주맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B33. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 TROP2에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B34. 실시양태 B33에 있어서, 온전한 항체는 사시투주맙 또는 다토포타맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B35. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 ALPP에 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B36. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22에 있어서, 온전한 항체는 IL1RAP를 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B37. 실시양태 B36에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 96, 97, 98, 99, 100, 및 101의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B38. 실시양태 B36 또는 실시양태 B37에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 103의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B39. 실시양태 B36 내지 B38 중 어느 하나에 있어서, 온전한 항체는 니다닐리맙인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B40. 실시양태 B21 또는 실시양태 B22에 있어서, 온전한 항체는 ASCT2를 선택적으로 결합할 수 있는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B41. 실시양태 B40에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 각각 서열번호: 794, 795, 796, 797, 798, 및 799의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2, 및 CDR-L3을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B42. 실시양태 B40 또는 실시양태 B41에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 801의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 802의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B43. 실시양태 B40에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 790의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호: 791의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B44. 실시양태 B40에 있어서, 온전한 항체 또는 그 단편은 서열번호: 792의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역및 서열번호: 793의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 리간드 약물 접합체 조성물.
B45. 실시양태 B1 내지 B44 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 p는 약 2 내지 약 12, 또는 약 2 내지 약 10, 또는 약 2 내지 약 8의 범위이거나, 또는 아래첨자 p는 약 2, 약 4 또는 약 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
B46. 약학적으로 허용되는 제형으로서, 여기서 제형은 유효량의 실시양태 B1 내지 B45 중 어느 하나의 리간드 약물 접합체 조성물 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약학적으로 허용되는 제형.
B47. 실시양태 B46에 있어서, 최소 하나의 약학적으로 허용되는 부형제는 액체 제형을 제공하는 액체 담체이고, 여기서 액체 제형은 동결건조 또는 이를 필요로 하는 대상에 투여하기에 적합한, 약학적으로 허용되는 제형
B48. 실시양태 B46에 있어서, 제형은 동결건조된 고체 또는 실시양태 B47의 액체 제형이고, 여기서 고체 제형의 적어도 하나의 부형제가 동결보호제인, 약학적으로 허용되는 제형.
B49. 치료적 유효량의 실시양태 B1 내지 B45 중 어느 하나의 리간드 약물 접합체 조성물 또는 실시양태 B46 내지 B48 중 어느 하나의 약학적으로 허용되는 제형을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법.
B50. 화학식 BIA의 약물 링커 화합물:
또는 이의 염으로서, 여기서
D는 약물 유닛이고, 여기서 약물 유닛은 튜불리신이고;
LB'는 리간드 공유 결합 전구체 모이어티이고;
A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
B는 선택적 분기 유닛이고;
아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;
여기서, Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 화합물의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고;
A'는 존재할 경우 제2 선택적 스트레처 유닛으로서, B가 부재할 때A의 하위 단위가 되고;
아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3 아미노산은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
아래첨자 q는 1 내지 4 범위의 정수이고,
단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2, 3 또는 4인, 약물 링커 화합물.
B51. 실시양태 B50에 있어서, 약물 링커 화합물은 화학식 BIH의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서:
HE는 가수분해 강화 유닛이고;
A'는 존재하는 경우, 표시된 제1 스트레처 유닛 (A)의 하위 단위이고; 아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내는, 약물 링커 화합물.
B52. 실시양태 B51에 있어서, HE는 -C(=O)인, 약물 링커 화합물.
B53. 실시양태 B50 내지 B52 중 어느 하나에 있어서, -Yy-D는 다음의 구조를 갖고:
여기서 각 Q는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되고;
아래첨자 m은 0, 1 또는 2인, 약물 링커 화합물.
B54. 실시양태 B50 내지 B53 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서, 단검 모양은 약물 링커 모이어티에 D가 부착되는 지점을 나타내고, 원은 5원 또는 6원 질소 헤테로아릴렌을 나타내고 여기서, 해당 헤테로아릴렌에 대한 표시된 필수 치환체는 서로 1,3- 또는 메타 관계에 있으며, 나머지 위치에서 선택적 치환이 있고;
R2는 XA-R2A이고, 여기서 XA는 -O-, -S-, -N(R2B)-, -CH2-, -(C=O)N(R2B)- 또는 -O(C=O)N(R2B)-이고 여기서 R2B는 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고, R2A는 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 -C(=O)RC이고, 여기서 RC는 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나 또는 R2는 O-연결된 치환체이고;
R3은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고;
R4, R4A, R4B, R5 및 R6은 독립적으로 선택된, 임의로 치환된 알킬이고,
하나의R7은 수소 또는 임의로 치환된 알킬이고 다른 하나의 R7은 임의로 치환된 아릴알킬 또는 임의로 치환된 헤테로아릴알킬이고,
아래첨자 m'은 0 또는 1인, 약물 링커 화합물.
B55. 실시양태 B54에 있어서, R4는 메틸이거나 또는 R4A 및 R4B는 메틸인, 약물 링커 화합물.
B56. 실시양태 B54 또는 실시양태 B55에 있어서, 5-원 헤테로아릴렌은 구조 로 표시되고, 여기서 XB는 O, S, 또는 N-RB이고 여기서 RB는 수소 또는 저급 알킬인, 약물 링커 화합물.
B57. 실시양태 B54 내지 B56 중 어느 하나에 있어서, 5-원 헤테로아릴렌은 2가 티아졸 모이어티인, 약물 링커 화합물.
B58. 실시양태 B54 내지 B57 중 어느 하나에 있어서, 아래첨자 m'은 1인, 약물 링커 화합물.
B59. 실시양태 B54 내지 B58 중 어느 하나에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택된 화학식을 갖고
여기서 R7B는 수소 또는 -OH이고, R3은 저급 알킬이고, R2B 및 R2C는 독립적으로 수소 또는 저급 알킬인, 약물 링커 화합물.
B60. 실시양태 B50에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하는, 약물 링커 화합물.
B61. 실시양태 B50에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염이고, 여기서
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하는, 약물 링커 화합물.
B62. 실시양태 B50 내지 B61중 어느 하나에 있어서, 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-를 갖는 트리펩타이드이고, 여기서 P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 약물 링커 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
B63. 실시양태 B50 내지 B62 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 약물 링커 화합물.
B64. 실시양태 B50 내지 B63 중 어느 하나에 있어서, P2 또는 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 발린보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P2 또는 P1 아미노산 중 다른 하나는 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 약물 링커 화합물.
B65. 실시양태 B50 내지 B64 중 어느 하나에 있어서, P2 아미노산은 발린보다 소수성이 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고, P1 아미노산은 혈장 생리학적 pH에서 음으로 하전된, 약물 링커 화합물.
B66. 실시양태 B50 내지 B65 중 어느 하나에 있어서, -P2-P1-은 -Ala-Glu- 또는 -Ala-Asp-인, 약물 링커 화합물.
B67. 실시양태 B50 내지 B66 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 약물 링커 화합물.
B68. 실시양태 B50 내지 B64 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 약물 링커 화합물.
B69. 실시양태 B50에 있어서, 약물 링커 화합물은 다음의 구조를 갖거나:
또는 이의 염인, 약물 링커 화합물.
C1. GPNMB를 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
C2. 실시양태 C1에 있어서, 아래첨자 nn이 2인, 항체-약물 접합체.
C3. 실시양태 C1 또는 C2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
C4. 실시양태 C1 내지 C3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
C5. 실시양태 C1 내지 C4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
C6. 실시양태 C1 내지 C5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
C7. 실시양태 C1 내지 C6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
C8. 실시양태 C1 내지 C7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
C9. 실시양태 C1 내지 C8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 894의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 895의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 896의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 897의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 898의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 899의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
C10. 실시양태 C1 내지 C9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 892의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 893의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
C11. 실시양태 C1 내지 C10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호:892의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 893의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
C12. 실시양태 C1 내지 C11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 890의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 891의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
C13. 실시양태 C1 내지 C12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
C14. 실시양태 C1 내지 C13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
C15. 실시양태 C1 내지 C14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
C16. 실시양태 C1 내지 C15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
C17. 실시양태 C1 내지 C16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
C18. 유효량의 실시양태 C1 내지 C16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 C17의 제약 조성물을, 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 GPNMB-발현 암을 치료하는 방법.
C19. 실시양태 C18에 있어서, GPNMB-발현 암이 흑색종, 폐암, 유방암, 두경부암, 난소암, 육종, 중피종 또는 자궁경부암인, 방법.
D1. CD228을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
D2. 실시양태 D1에 있어서, 아래첨자 nn은 2인, 항체-약물 접합체.
D3. 실시양태 D1 또는 D2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
D4. 실시양태 D1 내지 D3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
D5. 실시양태 D1 내지 D4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
D6. 실시양태 D1 내지 D5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
D7. 실시양태 D1 내지 D6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
D8. 실시양태 D1 내지 D7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
D9. 실시양태 D1 내지 D8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 900의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 901의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 902의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 903의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 904의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 905의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
D10. 실시양태 D1 내지 D9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 906의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 907의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
D11. 실시양태 D1 내지 D10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 906의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 907의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
D12. 실시양태 D1 내지 D11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 서열번호: 908의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 909의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
D13. 실시양태 D1 내지 D12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
D14. 실시양태 D1 내지 D13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
D15. 실시양태 D1 내지 D14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
D16. 실시양태 D1 내지 D15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
D17. 실시양태 D1 내지 D16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
D18. 유효량의 실시양태 D1 내지 D16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 D17의 제약 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD228-발현 암을 치료하는 방법.
D19. 실시양태 D18에 있어서, CD228-발현 암은 만성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, B형 급성 림프모구 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 비호지킨 림프종 및 호지킨 림프종, B세포 림프종 또는 미만성 거대 B세포 림프종인, 방법.
E1. αvβ6을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 어느 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
E2. 실시양태 E1에 있어서, 아래첨자 nn은 2인, 항체-약물 접합체.
E3. 실시양태 E1 또는 E2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
E4. 실시양태 E1 내지 E3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
E5. 실시양태 E1 내지 E4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
E6. 실시양태 E1 내지 E5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
E7. 실시양태 E1 내지 E6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-는 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
E8. 실시양태 E1 내지 E7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
E9. 실시양태 E1 내지 E8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 914의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 915의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 916의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 917의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 918의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 919의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
E10. 실시양태 E1 내지 E9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 912의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 913의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
E11. 실시양태 E1 내지 E10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 912의 아미노산 서열을 포함하고VL은 서열번호: 913의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
E12. 실시양태 E1 내지 E11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 서열번호: 910의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 911의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
E13. 실시양태 E1 내지 E12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
E14. 실시양태 E1 내지 E13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
E15. 실시양태 E1 내지 E14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
E16. 실시양태 E1 내지 E15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
E17. 실시양태 E1 내지 E16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
E18. 유효량의 실시양태 E1 내지 E16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 E17의 제약 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 αvβ6-발현 암을 치료하는 방법.
E19. 실시양태 E18에 있어서, αvβ6-발현 암은 비소세포폐암 (NSCLC), 두경부암, 식도암, 유방암, 난소암, 방광암, 피부암 (SCC), 난소암, 자궁경부암, 위암, 또는 췌장암인, 방법.
F1. CD30에 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않는 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3 아미노산은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
F2. 실시양태 F1에 있어서, 아래첨자 nn은 2인, 항체-약물 접합체.
F3. 실시양태 F1 또는 F2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
F4. 실시양태 F1 내지 F3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
F5. 실시양태 F1 내지 F4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
F6. 실시양태 F1 내지 F5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
F7. 실시양태 F1 내지 F6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
F8. 실시양태 F1 내지 F7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
F9. 실시양태 F1 내지 F8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 920의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 921의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 922의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 923의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 924의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 925의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
F10. 실시양태 F1 내지 F9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 926의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 927의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
F11. 실시양태 F1 내지 F10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호:926의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 927의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
F12. 실시양태 F1 내지 F11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 928의 아미노산 서열을 포함하는 HC 또는 서열번호: 929 및 서열번호: 930의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
F13. 실시양태 F1 내지 F12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
F14. 실시양태 F1 내지 F13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
F15. 실시양태 F1 내지 F14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
F16. 실시양태 F1 내지 F15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
F17. 실시양태 F1 내지 F16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물
F18. 유효량의 실시양태 F1 내지 F16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 F17의 제약 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD30-발현 질환 또는 병태를 치료하는 방법.
F19. 실시양태 F18에 있어서, CD30-발현 질환 또는 병태가 암인, 방법.
F20. 실시양태 F19에 있어서, 암이 호지킨병 또는 비호지킨 림프종인, 방법.
F21. 실시양태 F18에 있어서, CD30-발현 질환 또는 병태가 자가 면역 질환인, 방법.
F22. 실시양태 F18에 있어서, CD30-발현 질환 또는 병태가 감염성 질환인, 방법.
G1. LIV1을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3 아미노산은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
G2. 실시양태 G1에 있어서, 아래첨자 nn은 2인, 항체-약물 접합체.
G3. 실시양태 G1 또는 G2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
G4. 실시양태 G1 내지 G3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
G5. 실시양태 G1 내지 G4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
G6. 실시양태 G1 내지 G5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
G7. 실시양태 G1 내지 G6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
G8. 실시양태 G1 내지 G7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
G9. 실시양태 G1 내지 G8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 936의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 937의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 938의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 939의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 940의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 941의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
G10. 실시양태 G1 내지 G9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 934의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 935의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
G11. 실시양태 G1 내지 G10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 934의 아미노산 서열을 포함하고VL은 서열번호: 935의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
G12. 실시양태 G1 내지 G11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 932의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 933의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
G13. 실시양태 G1 내지 G12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
G14. 실시양태 G1 내지 G13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
G15. 실시양태 G1 내지 G14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
G16. 실시양태 G1 내지 G15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
G17. 실시양태 G1 내지 G16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
G18. 유효량의 실시양태 G1 내지 G16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 G17의 제약 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 LIV1-발현 암을 치료하는 방법.
G19. 실시양태 G18에 있어서, LIV1-발현 암이 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 간암, 위암, 신장암, 및 편평상피세포암종, 피부암, 소폐세포암 또는 폐 카르시노이드인, 방법.
G20. 실시양태 G19에 있어서, 유방암이 HER2 양성 유방암, 호르몬 반응성 유방암, 또는 삼중 음성 유방암인, 방법.
G21. 실시양태 G19에 있어서, 편평상피세포암종이 방광암, 폐암, 또는 두경부암인, 방법.
G22. 실시양태 G19에 있어서, 피부암이 흑색종인, 방법.
G23. 실시양태 G1에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열 번호: 942에 특이적으로 결합하는, 항체-약물 접합체.
G24. 실시양태 G1에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편은 서열 번호: 934의 아미노산 서열을 포함하는 제2 항체와 결합하기 위해 특이적으로 경쟁하고 VL은 서열번호: 935의 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호:942에 결합하는, 항체-약물 접합체.
H1. CD19를 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체는 다음의 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
H2. 실시양태 H1에 있어서, 아래첨자 nn은 2인, 항체-약물 접합체.
H3. 실시양태 H1 또는 H2에 있어서,
트리펩타이드의 P3 아미노산이 D-아미노산 배열이고;
P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
H4. 실시양태 H1 내지 H3 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
H5. 실시양태 H1 내지 H4 중 어느 하나에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
H6. 실시양태 H1 내지 H5 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
H7. 실시양태 H1 내지 H6 중 어느 하나에 있어서, -P3-P2-P1-이 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
H8. 실시양태 H1 내지 H7 중 어느 하나에 있어서, 항체-약물 접합체는 다음 구조로 표시되거나:
또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
H9. 실시양태 H1 내지 H8 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
서열번호: 944의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
서열번호: 945의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
서열번호: 946의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
서열번호: 948의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
서열번호: 949의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
서열번호: 950의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
H10. 실시양태 H1 내지 H9 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 943의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 947의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
H11. 실시양태 H1 내지 H10 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호:943의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 947의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
H12. 실시양태 H1 내지 H11 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 951의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 952의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
H13. 실시양태 H1 내지 H12 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
H14. 실시양태 H1 내지 H13 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
H15. 실시양태 H1 내지 H14 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
H16. 실시양태 H1 내지 H15 중 어느 하나에 있어서, 단편은 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는, 항체-약물 접합체.
H17. 실시양태 H1 내지 H16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
H18. 유효량의 실시양태 H1 내지 H16 중 어느 하나의 항체-약물 접합체, 또는 실시양태 H17의 제약 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD19-발현 암을 치료하는 방법.
H19. 실시양태 H18에 있어서, CD19-발현 암이 만성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, B형 급성 림프모구 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 비호지킨 림프종 및 호지킨 림프종, B세포 림프종 또는 미만성 거대 B세포 림프종인, 방법.
실시예
실시예 1 내지 19
일반 정보. 다음 정보는 달리 명시되지 않는 한 실시예 1 내지 19에 설명된 합성 절차 및 실험에 적용될 수 있다. 상업적으로 입수 가능한 모든 무수 용매는 추가 정제 없이 사용되었다. 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물의 특성화에 사용된 UPLC-MS 시스템은 Acquity UPLC BEH C18, 130 Å, 1.7μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼 또는 Waters Cortecs UPLC C18, 90 Å, 1.6 μm, 2.1 x 50mm가 장착된 Acquity Ultra Performance LC에 인터페이스된 Waters SQ 질량 검출기로 구성되었다. 산성 이동상 (0.1% 포름산)은 3% 아세토니트릴/97% 물에서 100% 아세토니트릴 (유속 = 0.5mL/min)의 구배로 구성되었다. UPLC-MS 시스템 2는 Acquity UPLC BEH C18 2.1 x 50mm, 1.7 μm 역상 컬럼이 장착된 Waters Acquity H-Class Ultra Performance LC에 인터페이스된 Waters Xevo G2 ToF 질량 분석기로 구성되었다. 분취 HPLC는 Waters 2998 광 다이오드 어레이 검출기가 장착된 Waters 2545 Binary Gradient Module 모듈 또는 Teledyne ISCO ACCQPrep HP150에서 수행되었다. 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물은 C12 Phenomenex SynergiTM 4 μm Max-RP 80 Å, 적절한 직경의 LC 컬럼 250 mm에 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 B)에 용출하여 정제했다. 정제 방법은 일반적으로 90% 수성 용매 A에서 10% 용매 A로 증가하는 용매 A에서 용매 B로의 선형 구배로 구성되었다. 유속은 220 nm에서 모니터링하면서 컬럼 요구 사항에 따라 설정했다. NMR 스펙트럼 데이터는 Varian Mercury 400MHz 스펙트럼계에서 수집되었다. 화학적 이동 (δ)은 TMS를 기준으로 ppm 단위로 주어진다. 결합 상수 (J)는 헤르츠 단위로 보고된다.
시험관 내 세포 독성. 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 세포 독성은 Promega Corp. Technical Bulletin TB288; and Mendoza 등, 2002, Cancer Res. 62:5485-5488)에 기술된 프로토콜을 사용한 세포 증식 검정법으로 측정하였으며, 그 방법은 본원에 구체적으로 참조된다. 간단히 설명하면, 배지에 약 400개의 세포를 함유하는 40 μL의 세포 배양물의 분취액을 384웰의 불투명 벽으로 된 플레이트의 각 웰에 침착시킨다. 10 μL 분취액의 유리 약물 또는 리간드-약물 접합체를 실험 웰에 첨가하고 96시간 동안 배양한 후 약 30분 동안 실온에서 평형을 유지한 다음 각 웰에 존재하는 세포 배양 배지의 부피과 동일한 부피의 CellTiter-GloTM 시약을 첨가한다. 내용물을 궤도 교반기에서 2분간 혼합하여 세포 용해를 유도한 후 실온에서 10분간 배양하여 발광 신호를 안정화시켜 기록한다.
형광 검정. 384 웰 플레이트에 종양 또는 정상 조직 균질물과 시트레이트 완충액 (100 mM, pH 4.5, 9 μL)의 혼합물을 첨가한 후 형광 표지된 라이브러리 화합물 (1 μL, 50% MeCN에 용해)을 첨가했다. 반응물을 37℃에서 배양하고 형광 (330 nm 여기, 450 nm 방출)을 6시간에 걸쳐 여러 번 검출했다. 형광 배율 변화는 각 시점의 형광 값을 균질물을 첨가하지 않았을 때의 배경 형광으로 나누어 결정했다.
접합. 항체는 본원에 구체적으로 참조용으로 통합된 US 2005/0238649의 절차에 따라 적절한 당량의 TCEP을 사용하여 부분적으로 환원되었다. 간단히 말해서, 2 mM EDTA, pH 7.4의 포스페이트 완충 식염수에 있는 항체를 2.1 eq. TCEP로 처리한 다음 37℃에서 약 45분간 배양했다. 환원된 항체를 화합물 1과 반응시키고 소수성 상호 작용 크로마토그래피를 사용하여 로딩을 결정하여 티올/Ab 값을 확인했다.
트리펩타이드 기반 오리스타틴 약물-링커 화합물은 본 출원에 구체적으로 참조되는 US 2005/0238649의 방법을 사용하여 부분적으로 환원된 항체에 접합되었다. 간단히 말해서, DMSO 중 약물-링커 화합물 (50% 과량)을 EDTA와 함께 PBS의 환원된 항체에 첨가하여 총 반응 보조 용매가 10 내지 20%가 되도록 했다. 상온에서 30분 후, 과량의 QuadraSil MPTM을 혼합물에 첨가하여 반응하지 않은 모든 말레이미드 기를 켄칭시켰다. 그런 다음 생성된 항체 약물 접합체를 정제하고 Sephadex G25 수지를 사용하여 PBS 완충액으로 탈염하여 완충액을 교환한 후 추가 사용할 때까지 -80℃에서 보관했다. 생성된 ADC 조성물의 단백질 농도는 280 nm에서 측정했다. 접합체의 약물-항체 비율 (DAR)은 소수성 상호 작용 크로마토그래피 (HIC)로 측정했다.
생체 내 세포 독성. 암세포를 마우스에 이식했다. 종양의 부피가 100 mm3에 도달한 후 환원 항체와 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물로부터 제조한 ADC를 복강 내 주사를 통해 투여했다. 그런 다음 연구가 끝날 때까지 일주일에 두 번씩 종양 크기를 측정했다.
조직 균질화. 마우스 이종 이식에서 얻은 정상 조직 또는 종양 조직을 완충액 (50 mM Tris, 150 mM KCl, pH 7.0)에 현탁하고 매트릭스 D 용해 비드 (mpbio)를 함유하는 튜브에 추가했다. 조직은 PrecellysTM 24 균질화기를 사용하여 균질화했다. 균질화된 샘플을 1000 xg에서 10분간 원심분리하고 그 결과 상층액을 수집한 후 추후 사용할 때까지 -80℃에서 냉동 보관했다.
독성 결정. 각 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물을 감소된 비결합 항체와 반응시켜 비결합 대조군 ADC를 제공하고, 다양한 농도로 암컷 스프라그 다울리 쥐에 정맥 주사했다. 동물은 투여 후 4일 또는 28일째에 안락사되었다.
실시예 1: p-아지도-벤질 알코올 (Az-PABA)의 제조
둥근 바닥 플라스크에 5 M HCl (PABA g당 5 mL)에 현탁된 p-아미노-벤질 알코올 (100 mol%)을 첨가하였다. 플라스크를 4℃로 냉각시킨 후, 수성 NaNO2 (150 mol%; PABA 그램 당 20 mL)을 적가하였다. NaN3를 첨가하고 반응을 실온으로 데우고 16시간 동안 배양하였다. 포화 NaHCO3에 희석하고 EtOAc로 추출했다. 추출물을 MgSO4로 건조하고 농축했다. 이 생성물을 SNAP-KP-Sil Biotage 컬럼과 함께 EtOAc/헥산 구배 (6%-42% EtOAc)을 사용하여 정제하여 표제 화합물을 주황색 물질 (90% 수율)로 수득했다. 1H-NMR (d6-DMSO) δ 7.38-7.35 (C=CH, d, 2H), 7.11-7.07 (C=CH, d, 2H), 5.25-5.22 (OH, m, 1H), 4.50-4.46 (CH2, d, 2H)
실시예 2: p-아지도-벤질 브로마이드의 제조.
둥근 바닥 플라스크에 질소 분위기 하에서 클로로포름에 용해된 Az-PABA (100 mol%)를 첨가하였다. 용액에 PBr3 (120 mol%)를 적가하였다. 반응을 2시간 동안 배양한 후 CHCl3로 희석하고 1 M HCl로 세척한 후 염수로 세척했다. 추출물을 MgSO4로 건조하고 농축했다. 생성물을 SNAP-KP-Sil Biotage 컬럼으로 EtOAc/헥산 구배 (6%-42% EtOAc)를 사용하여 정제하여 75% 수율의 표제 화합물을 제공했다.
실시예 3: 메틸 (2-(7-하이드록시-2-옥소-2H-크로멘-4-일)아세틸)글리시네이트 (HO-Coum-Gly-OMe)의 제조.
섬광 바이알에 DMF에 용해된 H-Gly-OMe (300 mol%) 및 DIPEA (350 mol%)를 첨가하였다. 이 바이알에 2-(6-하이드록시-2-옥소-2H-크로멘-4-일)아세트산 (100 mol %)을 첨가하였다. 그런 다음 두 시약이 완전히 용해될 때까지 DMF를 첨가했다. 그런 다음 HATU (110 mol%)를 첨가한 후 DIPEA (110 mol%)를 첨가하고 45분 동안 교반했다. 그 때, 반응물을 EtOAc로 희석하고 200 mM HCl로 세척했다. 수성층을 EtOAc로 다시 3회 추출했다. 결합된 유기물을 염수로 세척하고 MgSO4로 건조시킨 후 농축하여 타이틀 화합물을 얻었으며, 이를 끓는 이소프로필 알코올에서 80% 수율로 정제했다.
실시예 4: 메틸 (2-(7-((4-아지도벤질)옥시)-2-옥소-2H-크로멘-4-일)아세틸)글리시네이트 (Az-PABE-Coum-Gly-OMe)의 제조
바닥이 둥근 플라스크에 DMF에 현탁된 HO-Coum-Gly-OMe (300 mol%), K2CO3 (150 mol%) 및 18-크라운-6 에테르(200 mol%)를 첨가하였다. 15분 동안 격렬하게 교반한 후 실시예 2에 따라 제조된 Az-PAB-Br (100 mol%)을 4개의 개별 분획으로 천천히 첨가했다. 생성된 용액에 테트라부틸암모늄 요오다이드 (15 mol%)를 첨가한 후 16시간 동안 교반했다. 그 시점에서 반응물을 EtOAc로 희석하고 200 mM HCl과 염수로 세척했다. 분리된 유기층을 MgSO4로 건조하고 농축하여 표제 화합물을 조물질로 제공하였으며, 이 조물질은 추가 정제 없이 사용되었다.
실시예 5: (2-(7-((4-아지도벤질)옥시)-2-옥소-2H-크로멘-4-일)아세틸)글리신 (Az-PABE-Coum-Gly-OH)의 제조
둥근 바닥 플라스크에 THF (500 mg 당 20 mL)에 조 Az-PABE-Coum-Gly-OMe (100 mol%)를 첨가했다. 바이알에 MeOH (500 mg 당 6 mL) 및 H2O (500 mg 당 6 mL)를 첨가했다. 이때 LiOH (200 mol%)를 첨가하고 1시간 동안 교반한 후 반응물을 EtOAc로 희석하고 200 mM HCl로 2번 세척했다. 분리된 유기층을 MgSO4로 건조하고 농축하여 88%의 수율로 표제 화합물을 제공했다. 1H-NMR (d7-DMF) δ 8.80 (NH, t, 1H), 8.03-8.01 (C=CH, d, 1H), 7.80-7.77 (C=CH, d, 2H), 7.38-7.36 (C=CH, d, 2H), 7.25 (C=CH, s, 1H), 7.24-7.20 (C=CH, d, 1H), 6.58 (C=CH, s, 1H), 5.47 (CH2, s, 2H), 4.14 (CH2, d, 2H), 4.08 (CH2, s, 2H).
실시예 6: P1-PABE-Coum-Gly-OH의 제조, 여기서 P1 = Fmoc-Leu-OH, Fmoc-D-Leu-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cit-OH, Fmoc-Nal-OH, Fmoc-Tyr(All)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Lys(Mtt)-OH, Fmoc-Thr(Trt)-OH, Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH, 여기서, Cit는 시트룰린이고, Nal은 메틸 측쇄가 나프트트-1-일로 치환된 알라닌이다.
건조 DCM에 용해시킨 수지 (2-클로로-트리틸 클로라이드 또는 링크 산; 100 mol%)에 건조 DCM에 용해시킨 Az-PABE-Coum-Gly-OH (300 mol%) 및 DIPEA (310 mol%)를 첨가했다. 2시간 동안 혼합한 후 용액을 배출하고 수지를 DCM으로 세척했다. 개방형 둥근 바닥 플라스크에 DMF에 부풀린 Az-PABE-Coum-Gly-O-연결 수지를 첨가한 후 PBu3 (250 mol%) 및 DIPEA (250 mol%)를 첨가했다. 2시간 동안 혼합한 후 용액을 배출하고 수지를 DMF, DCM 및 Et2O로 세척한 후 진공에서 밤새 건조시켰다. 바이알에 DMF에 용해시킨 Fmoc-P1-OH (600 mol%)와 HATU (600 mol%)를 첨가한 후 DIPEA (800 mol%)를 첨가했다. 이 혼합물을 1분간 교반한 다음 DMF에 부은 앞서 합성한 PBu3 활성화된 Az-PABE-Coum-Gly-O-연결 수지 (Fmoc-Lys(Trt)-OH, Fmoc-Thr(Trt)-OH, 및 Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)의 경우 링크산 수지, 다른 모든 아미노산의 경우 2-클로로-트리틸 수지)를 첨가했다. 2시간 동안 혼합한 후 용액을 배출하고 수지를 DMF 및 DCM으로 세척했다. DCM 중 0.2% TFA (링크산 수지의 경우) 또는 DCM 중 5% TFA (2-클로로 트리틸 수지의 경우)를 사용하여 수지로부터 Fmoc-P1-PABE-Coum-Gly-OH를 분리하고 RP-HPLC로 정제했다.
실시예 7: 트리펩타이드 라이브러리의 제조 및 선별.
이전에 개발된 디펩타이드 기반 접합체는 같은 종의 정상 세포에 비해 암세포에서 상향 조절되는 리소좀 프로테아제인 카텝신 B에 의해 절단될 수 있도록 설계되었다. 예시적인 비교 대상 디펩타이드 기반 접합체는 약물 유닛이 다음 구조 중 하나를 가진 MMAE 잔기인 약물 링커 모이어티를 갖고 있다.
여기서 물결선은 리간드 유닛으로부터 황 원자에 대한 공유 부착 부위를 나타내고 화살표는 단백질 분해 절단 부위로 추정되는 곳을 나타낸다. 카텝신 B에 더 특이적이지만, 다른 리소좀 프로테아제들도 여전히 이러한 결합 분해를 할 수 있다. 해당 조직의 정상 세포에 대한 원치 않는 세포 독성이, 표시된 디펩타이드 기반 약물 링커 모이어티를 유효량의 비교 대상 접합체가 가질 경우의 부작용과 연관되어 있는 정상 조직의 프로테아제에 비해 암 조직에서 상향 조절된 프로테아제에 더 특이적인 펩타이드 서열을 발견하기 위해, 형광 켄칭된 트리펩타이드 함유 화합물 라이브러리를 합성했다. 해당 라이브러리의 구성원은 형광 태그가 약물 유닛을 대체하는 접합체 약물 링커 모이어티에 대한 모델이며 다음과 같은 구조로 집합적으로 표시된다:
상기 구조에서, 접합된 쿠마린 모이어티는 비형광이다. 표시된 아미드 결합의 단백질 분해 절단 시, 유리 쿠마린 함유 화합물이 방출되며, 이는 이제 형광을 띤다. 유리 쿠마린 함유 화합물의 Gly-Gly-D-Lys-Gly 모이어티는 라이브러리 구성 방법의 인공물이며, 이는 이후에 설명한다. 아지드는 리간드 유닛에 도입된 적절한 알킨 모이어티와 아지드의 이극성 사이클로 첨가에 의해 리간드 유닛에 부착할 수 있는 손잡이를 제공한다.
라이브러리는 비방향족 소수성 아미노산 Ala, Leu, Pro 및 D-Leu, 하전된 아미노산 Glu 및 Lys, 하전되지 않은 친수성 아미노산 Thr, Met 및 시트룰린, 및 소수성 방향족 아미노산 Phe, Tyr (처음에는 alloc 보호된 아미노산으로서) 및 Nal (나프틸-1-일 알라닌)을 사용하여 구축된다. 따라서 라이브러리는 1,728개의 고유한 구성원을 함유한다. Met가 P1 위치에 있을 때, 측쇄의 메틸 설파이드기는 설폭사이드로 자발적으로 산화되어 P1 위치가 Met(O)에 의해 점유된다. Met이 P2 또는 P3 위치에 있을 때, Met 및 Met(O)를 함유하는 트리펩타이드의 혼합물이 얻어진다.
라이브러리 구성원은 Hilpert, K. 등 "Peptide arrays on cellulose support: SPOT synthesis, a time and cost efficient method for synthesis of large numbers of peptides in a parallel and addressable fashion", Nature Protocols (2007) 2(6): 1333-1349의 방법에 따라 셀룰로오스 지지체 상에서 합성되으며, 이 방법은 본원에 참조로 구체적으로 통합되며, 한 가지 중요한 변형이 포함된다. 이러한 변형은 레이저 천공 셀룰로오스 종이를 사용하여 각 라이브러리 구성원의 합성이 명확하게 정의된 원형 디스크로 이루어지도록 한다. SPOT 합성 후, 개별 라이브러리 구성원을 개별적으로 함유하는 각 원형 영역은 다채널 피펫으로 마이크로타이터 플레이트의 개별 웰에 펀칭된다. 그런 다음 마이크로타이터 플레이트를 암모니아 챔버에 넣어 셀룰로오스 디스크에서 모델 화합물을 함유하는 트리펩타이드를 절단한다. 그런 다음 절단된 화합물을 각각 50% 수성 아세토니트릴에 용해시킨 후 새로운 마이크로타이터 플레이트에 옮겼다. 그런 다음 웰의 내용물의 종양 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 대한 감수성에 대해, 종양 또는 정상 조직 균질물과 접촉한 후 라이브러리의 각 웰에서 발견되는 형광을 측정하고 이를 비교 디펩타이드 함유 약물 링커 화합물의 종양 또는 정상 조직 균질물 절단에서 발견되는 형광으로 나눔으로써 약물 링커 화합물 라이브러리에서 -[P1]-[P2]-[P3]- 트리펩타이드로 대체되는 디펩타이드 val-cit를 갖는 비교 펩타이드 기반 약물 링커 화합물과 비교하여 평가했다.
작업 가정은 정상 조직에 대한 종양 조직 단백질 분해의 비율이 비교 대상 약물 링커 화합물에 대해 얻어진 것보다 더 크다는 것이며, 이는 디펩타이드 함유 약물 링커 화합물에 비해 라이브러리 약물 링커 화합물의 종양 조직에서 더 빠른 분열 또는 정상 조직에서 더 느린 분열을 나타내고, 이는 같은 종의 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해에 비해 종양 조직 단백질 분해에 대한 선택성이 더 높다는 의미로 해석되며, 여기서 상기 화합물을 디펩타이드 기반 약물 링커 모이어티로 갖는 비교 대상 접합체에 의한 조직의 정상 세포에 대한 세포 독성은 유효량의 비교 대상 접합체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것과 관련된 부작용의 원인이 된다. 당업자는 이러한 상관관계가 모든 라이브러리 구성원에게 적용되는 것은 아니며 트리펩타이드-함유 약물 링커 화합물에서 관찰되는 단백질 분해의 증가는 단순히 트리펩타이드가 카텝신 B의 우수한 인식 부위이기 때문이 아니라 적어도 부분적으로는 종양 조직에서 상향 조절되는 다른 프로테아제에 대한 반응성이 개선되었기 때문이라는 것을 이해할 것이다.
FMOC 화학을 사용하여 레이저 천공 셀룰로오스 종이의 셀룰로오스 하이드록실 기가 먼저 글리신 에스테르로 변형된 셀룰로오스 고체 지지체에 공유 부착된 Gly-D-Lys-Gly-Gly 모이어티를 제조했다. 그런 다음 FMOC 기를 제거하여 유리 아민을 제공했으며, 이는 pH 민감도 표시기로 확인되었다. 다음 아미노산을 첨가하고 이 과정을 반복했다. 96웰 마이크로타이터 플레이트와의 호환성을 위해 레이저 천공 디스크의 직경은 6 mm이며, 여기에 1 μL 분취액의 FMOC 보호된 아미노산 용액을 첨가했다.
실시예 6에 따라 제조된 FMOC-P1-PABE-Coum-Gly-OH를 NH2-Gly-Lys-Gly-Gly- (서열번호: 953)잔기의 유리 아미노기에 부착하였다. 실시예 6의 반응 순서에서 핵심 단계는 수지 결합된 아지드 중간체의 환원이며, 이는 처음 들어오는 FMOC-아미노산과의 커플링 반응이 일어나기 위해 자가 용해에 대해 충분히 안정한 이미노포스포란 중간체를 제공한다. 그런 다음 표준 FMOC 화학에 의해 P2 및 P3 아미노산을 추가한 다음 탈보호된 P3 잔기의 유리 아미노기를 아실화하여 수지 결합된 라이브러리 화합물을 제공하고, 이는 암모니아 가스 챔버를 사용하여 수지에서 절단했다. 반응식 1에서, RP1, RP2 및 RP3은 각각 P1, P2 및 P3 아미노산 잔기의 아미노산 측쇄이고, X는 형광 표지된 트리펩타이드를 셀룰로오스 고체 지지체에 묶는 NH2-Gly-Gly-D-Lys-Gly-Gly- 펜타펩타이드의 다른 아미노산을 나타낸다.
반응식 1. 형광 표지된 라이브러리 화합물의 제조
표 1A의 결과는 종양 대 정상 조직 균질물에 의한 단백질 분해로부터의 정규화된 형광 비율이 2.5보다 큰 상위 20개의 트리펩타이드 서열에 대한 것이다.
종양 균질물 단백질 분해에 대한 정규화된 형광 값은 4개의 마우스 이종이식 모델에서 유래한 종양 조직 균질물에 대한 평균값이다. 이러한 정규화된 값의 계산은 다음 표 1A에 설명되어 있다.
정규화된 정상 조직 형광 값은 정상 인간 골수에 의한 단백질 분해로부터의 것이다. 인간 골수는 약물 링커 화합물 mc-val-cit-PABC-MMAE로부터 유래된 약물 링커 모이어티를 갖는 항체 약물 접합체의 유효량을 이를 필요로 하는 인간 대상체로 투여하는 것와 관련된 부작용 (호중구 감소증)이 발생한 부위이기 때문에 정상 조직으로서 선택되었다.
정규화된 형광 값은 조직 균질물의 첨가로부터의 최종 시점 (275 내지 315분)의 형광 값을 조직 균질물이 첨가되지 않았을 때의 형광 값으로 나눔으로써 계산된다. 그런 다음 이 값을 각 균질물의 각 펩타이드에 대해 해당 균질물의 평균값으로 나누어 정규화했다. 예를 들어, 한 트리펩타이드가 균질물이 없는 펩타이드와 비교했을 때 2배 증가했고 해당 균질물에서의 평균 증가율도 2배였다면 해당 트리펩타이드의 정규화 값은 1이다. 그런 다음 표 1의 정규화된 종양 조직 값은 테스트한 4개의 암 균질물 전체에서 각 펩타이드에 대한 정규화된 형광 값의 평균을 구하여 결정했다. 이러한 종양 균질물은 HPAF-II (누드 마우스), 라모스 (SCID 마우스), SK-Mel-5 (누드 마우스) 및 SU-DHL-4 (SCID 마우스)의 이종 이식 모델에서 유래했다. 표 1의 정규화된 정상 조직 값은 균질화된 골수를 사용하여 유사하게 계산되었다. 표 1A의 종양/정상 비율은 정규화된 종양 조직 값을 정규화된 정상 조직 값으로 나누어 결정했다.
표 1A의 트리펩타이드의 대다수가 P3 위치에 부자연스러운 아미노산 또는 프롤린을 가지고 있고, P2 위치가 더 가변적이라는 점을 감안하여, 3개의 트리펩타이드 서열을 선택하였다, 자가 용해성 PABC 스페이서 유닛에 가장 가까운 위치가 해당 트리펩타이드 서열을 함유하는 약물 링커 화합물에서 유래한 리간드 약물 접합체에 대한 생체 내 선택성을 어떻게 변화시키는지 확인하기 위해 P1 위치에서만 변화하는 3개의 트리펩타이드 서열을 선택했다. 이들 트리펩타이드는 D-Leu-Leu-Cit, D-Leu-Leu-Met(O) 및 D-Leu-Leu-Lys이다.
표 1A의 트리펩타이드에 기초하여, 적어도 1.5의 형광비를 가지면서 정상 조직 균질물에 대해 정규화된 형광을 0.7 이하로 나타내는 새로운 종류를 미리 형성하였다. 이 종류에서 상위 10개의 트리펩타이드는 표 1B에 나와 있다. 표 1B의 상위 3개 트리펩타이드 서열인 D-Leu-Leu-Met(O), Pro-Nal-Lys, 및 D-Leu-Ala-Glu는 이들 트리펩타이드 서열을 함유하는 약물 링커 화합물에서 유래한 리간드 약물 접합체에 대한 생체 내 선택성을 결정하기 위해 선택되었다.
표 1A 및 1B로부터 선택된 5개의 개별 트리펩타이드 서열은, 리간드 유닛이 인간 췌장 선암 세포주로부터 세포에 의해 우선적으로 표시되는 내재화 가능한 항원에 선택적으로 결합하는 항체로부터 유래하고, "리간드 유닛"로서의 비결합 대조 항체 및 약물 링커 모이어티가 mc-val-cit-PABC-MMAE인 디펩타이드 절단 가능 유닛을 갖는 비교 대상 접합체에 구조적으로 대응하는 리간드 약물 접합체에 통합되었다. 이들 리간드 약물 접합체의 평균 약물 로딩은 4이다.
파트 B. 약물 링커 화합물의 제조.
MMAE가 약물 유닛이고, 파트 A에서 논의된 리간드 약물 접합체의 선택된 하위 집합을 제조하는 데 사용된 약물 링커 화합물은 다음과 같은 구조로 표시된다.
실시예 8: 수지 결합된 MMAE의 제조:
반응식 2A의 절차에 따라 DHP HM 기능화 수지를 사용하여 수지 결합된 MMAE를 제조했다.
반응식 2A. 수지 결합된 MMAE의 제조
간단히 말해서, 수지 상에서 MMAE를 합성하기 위해 FMOC-노레페드린 및 피리디늄 p-톨루엔설포네이트 (PPTS)를 디클로로에탄에 용해시키고 DHP HM 기능화 수지에 첨가한 후 70℃에서 8시간 동안 배양했다. 탈보호 후 이어서 FMOC-Dap을 HATU 및 DIPEA로 활성화한 다음 노레피네프린 수지 물질에 첨가했다. 이 반응 순서는 FMOC-N-MeVal-Val-Dil로 반복되었으며, 탈보호 후 수지 결합된 MMAE를 제공했다.
실시예 9: 수지 결합된 MMAE의 대안적 제조
수지 결합된 MMAE의 대안적 제조는 반응식 2A의 수지 결합된 Dap-Nor로부터 시작하여 반응식 2B에 도시되어 있다.
반응식 2B. 수지 결합된 Dap-Nor에서 MMAE로의 단계적 정교화
반응식 2B의 반응 순서는 단계 7에서 FMOC 보호된 [14C]-발린을 사용하여 방사성 표지된 MMAE를 제조하는 데에도 유용하다. 수지 결합된 MMAE로부터 약물 링커 화합물의 완성은 반응식 3에 나와 있다.
실시예 10: 트리펩타이드 기반 MMAE 약물 링커 화합물의 제조.
약물 유닛이 MMAE로부터 유래되고 표 1A 및 1B로부터 선택된 트리펩타이드 서열을 갖는 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물은 반응식 3의 절차에 따라 수지 결합된 MMAE로부터 또는 반응식 3A의 절차에 따라 용액상의 MMAE로부터 제조되었다.
반응식 3. 수지 결합된 MMAE로부터 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물의 제조
간단히 말해서, NaN3를 p-아미노벤질 알코올의 디아조늄 염 및 5M HCl 중 NaNO2를 반응시켜 제조한 Az-PAB-OH를 비스(펜타플루오로페닐) 카르보네이트와 반응시켜 수지상의 MMAE에 첨가하였다. 그런 다음 Az-PABC-MMAE의 아지도 기를 PPh2Et를 사용하여 이미노포스포란으로 환원시킨 후 FMOC-P1을 첨가했다. 탈보호 후, 아미노산 P2 및 P3는 기존의 FMOC 펩타이드 화학을 통해 첨가한 후 활성화된 에스테르 3-(말레이미도)프로피온산 N-하이드록시석신이미드 에스테르와 말단 P3 아미노산의 탈보호된 아민을 반응시켰다. DCM 중 TFA를 사용하여 수지에서 절단한 후, 이렇게 얻은 약물 링커 화합물을 역상 HPLC로 정제했다.
반응식 3A. 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물의 용액상 제조
간단히, (((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-D-류신 (1.00 equiv, 50.00 g, 141 mmol)을 자기 교반 막대가 장착된 2 L 원형 바닥 플라스크 (RBF)에 충전하였다. 디클로로메탄 (DCM)(500 ml)을 용기에 넣고 교반하면서 0℃로 냉각한 후 에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드 (EDC-HCl)(1.30 eq, 35.26 g, 184 mmol)를 첨가하고 N-하이드록시석신이미드 (1.20 eq, 19.54 g, 170 mmol)를 반응에 충전했다. 반응을 0℃에서 30분간 교반한 후 rt (실온)로 가온하고 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되면 물을 반응에 첨가하고 (500 ml), 유기층을 분리하고, 염수 (500 ml)로 세척한 후 분리했다. DCM 용액을 감압하에 증발시켜 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 (((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-D-류시네이트를 백색 포말 (65.00 g, 144 mmol, 102% 수율)로 얻었다. 이 물질은 추가 정제 없이 사용하였다.
다음 단계에서, 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 (((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-D-류시네이트 (1.00 equiv, 30.0 g, 66.6 mmol) 및 알라닌 (1.5 equiv, 8.90 g, 99.9 mmol)을 자기 교반 막대가 장착된 1000 ml RBF에 충전했다. 아세토니트릴 (150 ml)및 물 (300 ml)을 용기에 충전하고 0℃로 냉각했다. Hunig 염기를 반응에 한 번에 (2.0 equiv, 17.2 g, 133.2 ml)으로 충전했다. 반응을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후 rt로 가온하고 밤새 교반했다. 완료되면 회전 증발에 의해 용매를 에틸 아세테이트 (EtOAc)로 교체했다. 1M HCl을 첨가하여 pH를 pH=2로 조정했다. 유기층을 분리하고 염수로 세척했다. 반응 혼합물을 회전 증발에 의해 농축하여 백색 고체 (31.29 g)를 얻었다. 고체를 자기 교반기가 장착된 1000 ml RBF에서 EtOAc (120 ml)에 용해시켰다. 1시간에 걸쳐 헵탄 (600 ml)을 적가하여 고체를 침전시켰다. 슬러리를 밤새 교반했다. 고체를 여과하고 헵탄 (300 ml)으로 세척하여 미세한 흰색 고체를 얻었다. 고체를 진공 오븐에서 45℃에서 밤새 건조하여 (((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-D-류실-L-알라닌을 백색 고체 (24.01 g, 85% 수율)로 얻었다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜타노산 (50.0 g, 1.00 equiv, 117.5 mmol), (4-아미노페닐)메탄올(21.7g, 1.5 equiv, 176.3 mmol) 및 HATU (62.9 g, 1.4 equiv, 164.5 mmol)를 자기 교반 바가 장착된 2000 ml RBF에 충전했다. 디메틸 포름아미드 (DMF)(250 ml)를 용기에 충전하고 고체가 용해될 때까지 교반했다. Hunig 염기 (21.26 g, 1.4 equiv, 164.5 mmol)를 반응에 한 번에 충전했다. 반응을 2시간 동안 rt 에서 교반하였다. 완료되면 물 (750 ml)을 30분에 걸쳐 적가했다. 슬러리를 추가로 1시간 동안 rt에서 교반했다. 슬러리를 여과하고 물 (500 ml)로 세척하여 주황색 고체를 얻었다. 고체를 DCM (500 ml)에 재용해하고 물 (500 ml)로 세척했다. 2000 ml RBF 중의 이 용액에 자기 교반기를 첨가했다. 디에틸아민 (25.64 g, 3.0 equiv, 350.54 mmol)을 반응에 충전하고 rt에서 밤새 교반했다 (반응은 밤새 침전됨). 완료되면 헵탄 (620 ml)을 1시간에 걸쳐 반응에 첨가했다. 슬러리를 1시간 동안 교반했다. 슬러리를 여과하고 헤판테 (620 ml)로 세척하여 분홍색 고체를 얻었다. 이 고체를 진공 오븐에서 45℃에서 밤새 건조시켜 tert-부틸 (S)-4-아미노-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트를 갈색 고체 (35.2 g, 98% 수율)로 얻었다.
(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-D-류실-L-알라닌 (8.1 g, 1.00 equiv, 19.08 mmol), tert-부틸 (S)-4-아미노-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (8.82 g, 1.5 equiv, 28.62 mmol) 및 HATU (10.21 g, 1.4 equiv, 26.71 mmol)를 500 ml RBF에 충전했다. DMF (80 ml) 및 Hunig 염기를 용기에 충전하고 2시간 동안 rt에서 교반했다. 반응이 완료되면 1시간에 걸쳐 물 (160 ml)을 적가하여 침전시켜 교반기에 달라붙는 고체를 얻었다. 액체를 디캔팅하고 고체를 물 (80 ml)로 세척했다. 고체를 DCM (80 ml)으로 열 순환으로 재슬러리화하여 적색 용액을 얻었다. 용액을 30분에 걸쳐 헵탄 (80 ml)을 적가하여 침전시켰다. 고체를 여과하여 황색 고체를 얻고 이를 헵탄 (80 ml)으로 세척했다. 이 고체를 진공 오븐에서 45℃에서 밤새 건조시켜 4-아미노벤질 알코올에 연결된 D-Leu-Ala-Glu의 Fmoc 보호된 트리펩타이드를 황색 고체 (12 g, 88% 수율)를 얻었다.
Fmoc-탈보호를 위해 이 트리펩타이드 (1.00 equiv, 26.8 g, 37.49 mmol)를 400 ml EasyMax 반응기에 충전했다. MeCN (10 V, 270 ml)을 용기에 충전하고 25℃에서 200 rpm으로 교반했다 (적색 용액). 디에틸아민을 한 번에 반응에 첨가했다 (2.0 equiv, 5.48 g, 74.98 mmol). 반응을 rt에서 밤새 교반하고 완료되면 회전 증발에 의해 용매를 10 V EtOAc로 교체했다. 슬러리를 가열하여 환류시켜 적색 용액을 얻었다. 슬러리를 15℃로 냉각하고 밤새 교반했다. 슬러리를 여과하고 MTBE (3 x 10 V, 3 x 270 ml)로 세척하여 담갈색 고체를 얻었다. 이 고체를 40℃의 진공 오븐에서 건조하여 tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-아미노-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트를 분홍색 고체 (14.47 g, 78% 수율)로 얻었다.
Tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-아미노-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (1.00 equiv, 9.51 g, 19.31 mmol) 및 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트 (1.0 equiv, 5.14 g, 19.31 mmol)를 200 ml EasyMax 반응기에 충전했다. MeCN (10 V, 100 ml)을 반응기에 첨가하고 25℃에서 200 rpm으로 교반했다. Hunig 염기 (1.0 equiv, 2.50 g, 19.31 mmol)를 반응에 한 번에 첨가했다. 반응을 25℃에서 200 rpm으로 1시간 동안 교반했다 (적색 용액). 완료되면 회전 증발에 의해 용매를 10 V EtOAc로 교체했다. 30분에 걸쳐 헵탄 (10 V, 100 ml)을 첨가하여 생성물을 침전시켰다. 슬러리를 여과하고 MTBE (2 x 10 V, 2 x 100 ml)로 세척했다. 고체를 진공 오븐에서 40℃에서 밤새 건조하여 tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-(3-(2,5-디옥소-2, 5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트를 담갈색 고체 (12.38 g, 99% 수율)로 얻었다.
Tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (2.7 g, 1.00 equiv, 4.19 mmol) 및 4-니트로페닐카르보네이트(2.55 g, 2.0 equiv, 8.39 mmol)를 자기 교반 막대가 장착된 100 ml RBF에 충전했다. DMF (2V, 5 ml) 및 2-MeTHF (8V, 20 ml)를 rt에서 교반하면서 반응에 충전했다. Hunig 염기를 용기에 충전하고 rt에서 밤새 교반했다. 반응이 완료되면 10V 2-MeTHF로 희석했다. 유기층을 20V 5% LiCl, 20V 물, 그리고 나서 10% NaCl로 연속적으로 세척했다. 유기 용액을 15분에 걸쳐 10V MTBE/10V 헵탄에 적가했다. 슬러리를 rt에서 교반하면서 1시간 동안 두었다. 슬러리를 여과하고 5V MTBE/5V 헵탄으로 3회 세척했다. 고체를 진공 오븐에서 35℃에서 밤새 건조하여 담황색 고체 (2.06 g, 61% 수율)를 얻었다.
p-니트로 카르보네이트 활성화 트리펩타이드 (1 equiv, 10 mg, 0.01 mmol), MMAE (1.1 equiv, 9.7 mg, 0.01 mmol) 및 HOBt (0.15 equiv, DMA 중 10 mg/ml 용액 29 μl)를 자기 교반 막대가 장착된 1 dr 바이알에 충전했다. DMA (10 Vol, 200 μl)를 충전하고 40℃에서 반응을 교반했다. 완료되면 반응을 실온으로 냉각했다. 비정질 고체가 형성될 때까지 물을 적가했다. 용매를 디캔팅하고 고체를 10 V DCM에 재용해했다. 유기 용액을 20 V HCl (0.5 M)으로 2회 세척하고 진공에서 농축하여 ter-부틸 보호된 화합물 5를 얻었다.
tert-부틸 보호된 화합물 5 (1.0 g, 1.00 equiv, 0.72 mmol)를 10 mL의 프로피온니트릴에 용해시켰다. 10 mL의 H3PO4를 rxn 혼합물에 rt에서 천천히 첨가했다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반했다. 완료되면 물 15 mL 및 프로피오니트릴 10 mL를 첨가했다. 유기층을 분리하고 프로피오니트릴 10 mL로 수성층을 추출했다. 합한 유기층을 30 mL의 물로 한 번 더 세척했다. 반응물을 농축하고 역상 prep-HPLC로 정제하여 화합물 5를 얻었다.
반응식 2A, 반응식 3, 및 반응식 3A의 반응 순서에 따라 제조된 MMAE 및 MMAF 약물 링커 화합물에 대한 UPLC-MS 데이터는 표 2 및 2A에 도시되어 있고, 여기서 일부 화합물은 표 1A 및 1B에서 선택된 트리펩타이드 서열을 갖고 있다.
UPLC-MS는 아래 표시된 UPLC 방법 (방법 A 내지 D)을 사용하여 Waters AcquityTM UPLC 시스템에 인터페이스된 Waters 단일 쿼드 검출기 질량 분석기에서 수행되었으며, 여기서 용매 A는 0.1% 수성 포름산이고 용매 B는 0.1% 포름산이 포함된 아세토니트릴이다.
표 2의 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물 2 내지 36, 38 내지 40, 45 내지 70 및 표 2A의 화합물 42뿐만 아니라 비교 디펩타이드 기반 약물 링커 화합물 1, 화합물 7, 및 화합물 41의 구조는 다음과 같다:
실시예 11: 트리펩타이드 기반 MMAF 약물 링커 화합물의 제조.
MMAF가 약물 유닛이고 파트 A에서 논의된 리간드 약물 접합체의 유사한 하위 집합을 제조하는 데 사용될 수 있는 약물 링커 화합물은 다음과 같은 구조로 표시되며, 상업적으로 이용 가능한 L-페닐알라닌-2-클로로트리틸 에스테르 중합체 결합으로부터 시작하여 반응식 4의 반응 순서에 따라 제조되었다.
반응식 4. 수지 결합된 MMAF 및 이로부터 유도된 트리펩타이드 기반 약물 링커 화합물의 제조
반응식 3 및 4에서, RP1, RP2 및 RP3은 각각 P1, P2 및 P3 아미노산 잔기의 측쇄이다.
실시예 12: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 시험관 내 세포 독성.
약 4의 약물 항체 비율 (DAR)을 갖는 항체 약물 접합체는 실시예 10의 선택된 트리펩타이드 기반의 MMAE 약물-링커 화합물 및 췌장, 두경부, 폐 및 식도 종양을 포함한 다양한 고형 종양에서 일반적으로 상향 조절되는 상피 항원 (Ag1)에 선택적으로 결합하는 인간화 항체로부터 일반적인 절차를 따라 제조되었다. 표 3은 트리펩타이드 기반 ADC (2 내지 6)와 -val-cit-가 트리펩타이드 절단 가능 유닛을 대체하는 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체 (1)에 대해 Ag1 항원이 상향 조절된 췌장 선암 세포주 세포에 대한 IC50 값을 나타낸다. 표 3a는 트리펩타이드 기반 ADC (8 내지 10, 13, 16 내지 21, 30, 31, 및 38) 및 -val-cit-가 트리펩타이드 절단 가능 유닛을 대체하는 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체 (1)에 대해 Ag1 항원이 상향 조절된 HPAFII 세포주의 세포에 대한 IC50 값을 나타낸다. 표 3b는 트리펩타이드 기반 ADC (7, 15, 22 내지 29, 32 내지 36, 39, 및 42)및 -val-cit-가 트리펩타이드 절단 가능 유닛을 대체하는 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체 (1 및 41)에 대해 Ag1 항원이 상향 조절된 HPAFII 세포주의 세포에 대한 IC50 값을 나타낸다. 표 3, 3a 및 3b의 이탤릭체로 표시된 값은 추가된 약물의 최대 농도에서 96시간 배양 후 남은 세포의 백분율을 나타낸다. 편의상 표 2 및 2A의 라이브러리 구성원에 대한 번호는 표 3, 3a 및 3b의 ADC에 통합된 상응 약물 링커 화합물에 대해 그대로 유지된다.
표 3의 결과는 트리펩타이드 기반 ADC (2 내지 6)가 그 디펩타이드 절단 가능 유닛을 선택된 각각의 트리펩타이드 서열로 대체함으로써 내약성이 개선될 수 있는 디펩타이드 기반 ADC (1)와 동등함을 나타낸다.
표 3a의 결과는 트리펩타이드 기반 ADC 중 일부 (예를 들어, 8 및 30)가 비교 디펩타이드 기반 ADC (1)보다 세포 독성이 낮지만 효능은 비슷하다는 것을 보여준다. 표 3a의 결과는 또한 일부 트리펩타이드 기반 ADC (예를 들어, 38)가 비교 디펩타이드 기반 ADC (1)보다 세포 독성과 효능이 낮지만 쥐 골수에 대한 독성이 적어 비교 디펩타이드 기반 ADC (1)에 비해 치료 범위를 늘릴 수 있다는 것을 보여준다.
표 3b의 결과는 트리펩타이드 기반 ADC 중 일부 (예를 들어, 22, 24, 및 26)가 비교 ADC (1)보다 세포 독성이 낮을 수 있지만 효능은 비슷하다는 것을 보여준다.
실시예 13: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 생체 내 암세포 세포 독성.
표 3의 ADC는 실시예 12의 췌장 선암 세포주의 세포가 누드 마우스에 이식된 이종이식 모델에서 테스트하였다. 각 트리펩타이드 기반 ADC는 효능 차이를 명확히 구분하기 위해 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체에 대해 결정된 것과 동일한 서브커큐레이션 용량 (4 mg/Kg)으로 투여되었다. 도 1a에서 볼 수 있듯이, 대부분의 트리펩타이드 기반 ADC는 적어도 디펩타이드 기반 비교 ADC만큼 효능이 있다.
표 3a의 ADC는 실시예 12의 HPAFII 세포주 세포를 누드 마우스에 이식하는 이종 이식 모델에서 테스트하였다. 각각의 트리펩타이드 기반 ADC는 효능 차이를 명확하게 구별하기 위해 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체에 대해 결정된 것과 동일한 서브커큐레이션 용량 (3 mg/Kg)으로 투여되었다. 도 1b 및 1d에서 볼 수 있듯이, 대부분의 트리펩타이드 기반 ADC는 일반적으로 적어도 디펩타이드 기반 비교 ADC만큼 효능이 있다.
표 3b의 ADC는 실시예 12의 HPAFII 세포주 세포를 누드 마우스에 이식하는 이종이식 모델에서 테스트하였다. 트리펩타이드 기반 ADC Ag1-15 및 비교 디펩타이드 기반 ADC는 둘 다 6 mg/kg으로 테스트한 것을 제외하고, 각 트리펩타이드 기반 ADC는 효능 차이를 명확하게 구분하기 위해 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체에 대해 결정된 것과 동일한 서브커큐레이션 용량 (3 mg/Kg)으로 투여되었다 (도 1c). 도 1c 및 1d에서 볼 수 있듯이, 특정 트리펩타이드 기반 ADC는 적어도 디펩타이드 기반 비교 ADC만큼 효능이 있다.
실시예 14: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 생체 내 골수 독성.
디펩타이드를 대부분의 선택된 트리펩타이드 서열로 대체했을 때 ADC 효능이 적어도 유지되는 것으로 나타났으므로, Ag1 항원을 표적으로 하는 항체를 비결합 대조군 (h00) 항체로 대체하여 정상 골수 조직에 대한 생체 내 세포 독성의 차이를 조사했다. 그런 다음 각각의 비표적화 접합체를 래트에게 10 mg/Kg으로 투여하고 투여 후 5일째에 혈액을 가짜 처리된 동물과 비교하여 골수 독성의 프록로서 호중구 및 망상 적혈구 수를 분석했다. 도 2a에서 볼 수 있듯이 표 3, 3a 및 3b의 트리펩타이드 기반 h00 접합체 중 일부는 디펩타이드 기반 비교 대상 접합체 (h00-1)에 비해 호중구 수가 개선된 것으로 나타났다. 호중구 수와 관련하여 트리펩타이드 기반 비결합 접합체 h00-4 및 h00-5는 h00-1과 비교하여 해당 골수 세포 유형의 유사한 보존을 나타냈다. 그러나 표 3의 표적화 ADC와 유사한 비결합 접합체 중에서 표 3의 트리펩타이드 기반 표적 ADC (Ag1-5)에 상응하는 D-Leu-Ala-Glu 비결합 대조군 접합체 (h00-5)만이 시험 용량에서 비교 대상 접합체에 비해 개선된 망상적혈구 수를 나타냈다. 표 3a 및 3b의 표적화 ADC와 유사한 더 많은 비결합 접합체는 h00-1에 비해 호중구 수의 보존이 개선된 것으로 나타났다. 도 2a와 3a를 비교하면 망상적혈구가 호중구보다 MMAE 비결합 접합체에 더 민감한 것으로 보이며, 이는 표 3의 표적화 ADC와 유사한 다른 트리펩타이드 기반 h00 비결합 접합체 간의 차이를 시험 용량에서 서로 또는 h00-1과 구별할 수 없는 이유인 것으로 생각된다. 표 3a 및 3b의 표적화 ADC와 유사한 더 많은 비결합 접합체는 h00-1에 비해 망상적혈구 수의 보존이 개선된 것으로 나타났다.
도 4에 나타낸 단핵 세포에 대한 IHC를 이용한 골수 조직 병리학에서 트리펩타이드 기반 h00-4 및 h00-5 접합체의 단핵 골수 세포 보존이 디펩타이드 기반 비교약물 h00-1 투여와 비교하여 h00-5 접합체 투여의 결과가 가짜 치료와 거의 구별되지 않는 것을 확인할 수 있다.
도 2a와 3a에는 트리펩타이드 서열이 Leu-Ala-Glu인 h00-7에 대한 데이터가 포함되어 있다. 이 트리펩타이드는 P3 아미노산의 입체 화학 배열이 반전되었다는 점을 제외하고는 h00-5의 트리펩타이드와 동일하다. h00-5와 h00-7은 모두 다른 비결합 대조군 ADC보다 골수에 대한 독성이 덜한 것으로 나타나고, h00-5가 더 민감한 망상적혈구를 보존하는 데 있어 더 우수하다.
골수 고갈에 미치는 영향을 확인하기 위해 비표적화 접합체의 하위 집합을 래트에게 고용량으로 투여했다. 투여한 래트의 혈액을 투여 후 8일째와 22일째에 가짜로 처리한 동물과 비교하여 골수 독성에 대한 프록시로 호중구 (도 2c) 및 망상적혈구 (도 3c) 수를 분석했다. h00-23, h00-68 및 h00-69의 경우, 동물은 40 mg/kg 단일 용량 (n=1)에서 ADC를 내약성을 보였다. h00-45 및 h00-62의 경우, 동물은 시험된 최고 용량인 50 mg/kg에서 내약성을 보였다 (n=1).
도 14는 비표적 ADC (h00-37 및 h00-5)를 투여한 래트의 세포 외 골수 구획 내 항체 농도를 나타낸다.
도 16은 래트에 20 mg/kg 투여 후 h00-5 및 h00-7에 의한 투여 후 5일째 및 8일째의 망상적혈구 고갈을 나타낸다. 도 17은 래트에 20 mg/kg 투여 후 h00-5 및 h00-7에 의한 투여 후 5일째 및 8일째의 호중구 고갈을 나타낸다.
도 18은 래트에 20 mg/kg을 투여한 후 h00-5 및 h00-7에 의한 투여 후 5일째 및 8일째의 뼈의 조직학을 나타낸다.
실시예 15: 트리펩타이드 기반 ADC의 생체 내 대사
ADC에서 유리 약물이 비특이적으로 방출되는 것은 정상 세포에 대한 표적 외 독성에 기여하는 한 가지 메커니즘이다. h00-1 ADC와 비교하여 h00-4 및 h00-5 ADC에서 관찰된 골수의 보존이 트리펩타이드 기반 ADC로부터의 유리 MMAE의 방출 감소에 기인하는지를 결정하기 위해, 실시예 14의 독성 연구에서 나온 혈장을 HPLC-MS로 해당 대사체에 대해 분석하였다.
도 5a에 표시된 바와 같이, h00-4 또는 h00-5 투여 후 유리 MMAE 농도는 독성 연구 기간 내내 h00-1 투여 후 발견되는 것보다 낮게 유지되었으며, h00-5 접합체는 이 점에서 더 우수했다. 또한, 도 5b는 D 입체 화학 배열의 P3 아미노산을 갖는 h00-5 접합체, P3 아미노산이 반대 입체 화학 배열이라는 점을 제외하면 h00-5와 동일한 h00-7보다 비특이적으로 MMAE를 덜 방출한다. 따라서 P3에 비천연 배열을 가진 아미노산이 있으면 트리펩타이드 기반 ADC에 향상된 안정성을 부여하는 것으로 보인다.
도 15는 비표적 ADC (h00-37 및 h00-5)를 투여한 래트의 골수 세포 중 유리 MMAE의 양을 나타낸다.
실시예 16: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 호중구 엘라스타제 검정
8-로드 ADC (5 ug), 완충액 (100 mM tris, 75 mM NaCl, pH 7.5, 최종 농도) 및 호중구 엘라스타제 (100 ng)의 혼합물에 물을 20 uL로 첨가했다. 반응물을 37 C에서 3시간 동안 배양한 후 즉시 QToF 질량 분석기로 분석했다.
도 6a에 표시된 바와 같이, 호중구 엘라스타제에 의해 시험관 내에서 비표적 ADC 5의 중쇄에서 절단된 약물의 백분율은 비표적 ADC 37에서 발견되는 것보다 낮다. 또한, 도 6a는 P3 아미노산이 반대 입체 화학 배열이라는 점을 제외하면 h00-5와 동일한 h00-7에 비해 상당히 낮은 정도로, D 입체 화학 배열의 P3 아미노산을 갖는 h00-5 접합체가 호중구 엘라스타제에 의해 중쇄가 절단되었음을 나타낸다. 실제로 호중구 엘라스타제에 의한 h00-5의 단백질 분해는 관찰되지 않았다. 따라서 P3에서 비천연 배열을 가진 아미노산을 갖는 것이 트리펩타이드 기반 ADC에 향상된 안정성을 부여하는 것으로 보인다.
실시예 17: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 카텝신 B 검정
8-로드 ADC (5 ug), 완충액 (50 mM 시트레이트, 75 mM NaCL, pH 4.5; 최종 농도), 카텝신 B (100 ng) 및 활성화 완충액 (2 mM DTT/1.33 mM EDTA 최종 농도)의 혼합물에 물을 20 uL로 첨가했다. 반응물을 37 C에서 3시간 동안 배양한 후 즉시 QToF 질량 분석기로 분석했다.
도 6b (배치 1) 및 도 6c (배치 2)에 표시된 바와 같이, 시험관 내에서 비표적 ADC 5 및 7의 중쇄에서 카텝신 B에 의해 절단된 약물의 백분율은 비표적 ADC 37에서 발견된 것과 유사하며, 이는 D-Leu-Ala-Glu 비결합 대조군 접합체 (h00-5)가 리소좀 프로테아제에 의해 Val-Cit 비결합 대조군 접합체 (h00-37)와 유사하게 절단됨을 시사한다.
mc-vc-MMAE (항체당 평균 4개 약물)(h2A2-1006) 또는 mp-dLAE-MMAE (항체당 평균 4개 약물) (h2A2-7092)와 접합된 인간화 항-avβ6 항체 2A2의 항-종양 활성 연구에서 HPAFII 종양 중 비접합 MMAE의 양이 입증되었다 (도 6d). 투여 후 3일째에 마우스에서 종양을 절제하고 60%/40% MeCN/MeOH에 현탁시킨 후 PrecellysTM 24 균질화기를 사용하여 균질화했다. 샘플을 16.1k xg에서 15분간 원심분리하고 그 결과 상청액을 N2로 건조하고 재구성 완충액에서 재구성한 후 Waters triple quad 검출기 질량 분석기로 분석했다.
실시예 18: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 시험관 내 혈장 응집 검정
ADC를 Alexa Fluor 488 TFP 에스테르 (분자 프로브)로 표지하고, 탈염하고, 완충액을 PBS, pH 7.4 (Gibco)로 교환하고, 멸균 여과했다. 결과 ADC-AF488 접합체의 농도 및 표지 정도는 -80℃에서 동결하기 전에 UV 흡광도를 통해 결정했다. 실험 당일, AF488-ADC를 혈장에 희석하고 37℃에서 배양했다. 지정된 시점에 형광 검출을 통해 SEC-UPLC로 분취액을 분석했다. 결과 크로마토그램을 분석하여 고분자량 종의 %을 결정했다.
트리펩타이드 MMAF의 응집은 Val-Cit-MMAF보다 낮은 것으로 보인다. MMAE와 관찰된 상관관계에 기초하여, 트리펩타이드 MMAF는 독성이 더 적을 것이다.
도 7a 및 도 7b는 96 동안 래트 혈장에서 배양한 후의 비표적 ADC의 응집을 보여준다.
도 8은 96 동안 사이노 플라즈마에서 배양한 후의 비표적 ADC의 응집을 보여준다.
도 9는 96 동안 인간 혈장에서 배양한 후의 비표적 ADC의 응집을 보여준다.
도 10은 래트 혈장에서 배양한 후의 비표적 MMAF ADC (h00-41 및 h00-42)의 응집을 보여준다.
도 11은 래트에서 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 96시간 배양 후 래트 혈장 내 ADC 응집의 상관관계를 보여준다.
도 12는 래트에서 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 96시간 배양 후 사이노 혈장 내 ADC 응집의 상관관계를 보여준다.
도 13은 래트의 비표적 ADC에 의한 망상 적혈구 고갈과 96시간 배양 후 인간 혈장 내 ADC 응집의 상관관계를 보여준다.
링커의 cLogP와 래트 혈장 내 해당 h00 접합체의 응집 사이의 상관관계를 나타낸 도 19에서, r = 0.715의 상관관계는 HMW의 존재가 clogP와 양의 상관관계가 있음을 나타낸다 (즉, cLogP 값이 낮은 링커가 높은 cLogP를 가진 것보다 응집이 적음). cLogP 값이 낮은 링커는 소수성이 낮으며, 여기에는 극성 아미노산을 가진 링커가 포함된다.
래트의 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 래트 혈장 내 ADC 응집 사이의 상관관계를 나타낸 도 20에서, r = -0.748의 상관관계는 HMW의 존재가 망상 적혈구와 음의 상관관계가 있음을 나타낸다 (즉, HMW %가 높을수록 망상 적혈구의 고갈이 높음).
래트의 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 인간 혈장 내 ADC 응집 사이의 상관관계를 나타낸 도 21에서, r = -0.800의 상관관계는 HMW의 존재가 망상 적혈구와 음의 상관관계가 있음을 나타낸다 (즉, HMW %가 높을수록 망상 적혈구의 고갈이 높음).
래트의 비표적 ADC로 인한 망상 적혈구 고갈과 사이노 혈장 내 ADC 응집 사이의 상관관계를 나타낸 도 22에서, r = -0.755의 상관관계는 HMW의 존재가 망상 적혈구와 음의 상관관계가 있음을 나타낸다 (즉, HMW %가 높을수록 망상 적혈구 고갈이 높음).
실시예 19: MMAE 약물-링커 화합물의 대안적인 제조
546g (2.85 mol, 1.1 eq.) EDC x HCl을 1.7 L THF 및 0.8 L DMF에 현탁하고 1.7 L THF 및 0.8 L DMF 중 688 g (2.59 mol, 1.0 eq.) Z-D-Leu-OH 및 328 g (2.85 mol, 1.1 eq.) NHS의 용액에 실온에서 첨가했다. 약간의 발열 반응(처음에는 IT 30℃로 증가)을 실온에서 밤새 교반했다. 23시간 후에도 반응 혼합물에서 여전히 1.30%의 미반응 Z-D-LeuOH가 검출되었으므로 추가로 25 g (0.13 mol, 0.05 eq.)의 EDC x HCl을 첨가하고 30분 동안 계속 교반하여 혼합물에 0.45%의 Z-D-Leu-OH를 남겼다. 수득된 얇은 현탁액을 IT = 4℃로 냉각시키고, 2.8 L 탈이온수 중 692 g (7.77 mol, 3.0 eq.) H-Ala-OH, 291 g (5.18 mol, 2.0 eq.) 수산화칼륨 및 283 g (2.05 mol, 0.79 eq.) 탄산칼륨의 냉각된 용액 (IT = 4℃)에 첨가하였다. 5분 후, 반응 혼합물의 온도는 19℃로 증가하였다. HPLC에 의해 0.04% Z-D-Leu-OSu, 91.7% Z-D-Leu-AlaOH 및 1.1% Z-D-Leu-OH가 반응 혼합물에서 검출되었다. 6 L EtOAc를 반응 혼합물에 첨가하고, 2.5 L 18% HCl을 사용하여 pH 1로 산성화시켰다. 수성상을 버리고, 유기상을 1.2 L 1 N HCl로 2회, 1.2 L 탈이온수로 1회 및 0.6 L 탈이온수로 3회 세척하였다. 60 mL 및 30 mL 염수를 탈이온수로 마지막 2개의 추출 단계에 첨가하여 상 분리를 개선하였다. 유기상을 감압 (대략 160 mbar) 하에 40℃ 외부 온도에서 약 1.5 L로 농축하였다. 이어서, 6.0 L EtOAc를 첨가하고, 수득된 용액을 다시 약 1.5 L로 농축시시켰다. 다시 6.0 L EtOAc를 첨가하고, 농축시켜 1975 g의 투명한 용액을 얻었다. 이어서, 4.0 L 사이클로헥산을 첨가하고, 얻어진 용액에 8 g의 시딩 결정을 시딩하였다. 2 h 동안 교반한 후, 2 x 2.3 L 사이클로헥산 (추가 2 h 후에 두 번째 첨가)으로 희석하여 진한 현탁액을 수득하였다. 실온에서 23 h 결정화 시간 후, 침전물을 여과에 의해 수집하고, 이어서 5.0 L EtOAc/사이클로헥산 1:9 및 2 x 4.0 L 사이클로헥산으로 세척하였다. 35℃ (외부 온도)에서 24 h 동안 감압 (< 5 mbar)으로 건조시킨 후, 780 g (2.32 mol)의 Z-D-Leu-Ala-OH를 92% 수율 및 99.3% HPLC-순도의 회백색 고체로서 수득하였다. 부피 수율: 4.2%.
반응기에 1012 g (3.00 mol, 1.0 eq.) Z-Glu(OtBu)-OH, 443 g (3.60 mol, 1.2 eq.) 4-아미노벤질 알코올을 넣고, 890 g (3.60 mol, 1.2 eq.) EEDQ 및 5.0 L EtOAc가 첨가하였다. 용해시, 반응 온도는 23℃에서 11℃로 떨어졌다. 2시간 반응 시간 후, HPLC에 의해 반응 혼합물에서 85.7% Z-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 및 1.16% Z-Glu(OtBu)-OH가 발견되었고, 2.5시간 반응 시간 후에 2.1 L 탈이온수를 첨가하였다. 18% HCl 700 mL를 첨가하여 pH를 1로 조정한 후 층을 분리하였다. 유기 상을 3 x 1.0 L 1 N HCl, 3 x 2.0 L 5% Na2CO3/염수 9:1 및 3 x 2.0 L 탈이온수/염수 9:1 (마지막 수성상의 pH: 6-7)로 세척하였다. 얻어진 유기층을 40℃ 외부 온도 및 감압 (155 mbar)에서 증발시켰다. 약 3 L의 증류액을 제거한 후, 5 L 톨루엔을 첨가하고 증발을 계속하여 신속하게 진한 현탁액을 형성하였다. 추가로 4.0 L의 톨루엔을 첨가하고, 5.8 kg의 진한 현탁액이 얻어질 때까지 증발을 계속하였다. 실온에서 밤새 결정화시키고, 잔류물을 여과에 의해 수집하였다 (여과 전의 수분함량: 0.03%). 여과는 느렸고 (초기 여과의 경우 약 2시간) 잔류물을 2 x 4.0 L 및 1 x 5.0 L의 톨루엔 및 1 x 5.0 L IPE/IPA로 세척했다. 목적 생성물을 35℃에서 감압 (< 20 mbar) 하에 건조하여 44% 수율 (587 g) 및 95.7% HPLC-순도 (3.27% 4-아미노벤질 에틸카르보네이트 4가 주 불순물)로 수득하였다. IPE/IPA-세척으로부터의 여과액을 40℃ 외부 온도에서 감압하에 갈색 오일로 농축하고, 2 x 2.0 L EtOAC로 재증발시켜 진한 현탁액을 형성하고, 400 mL EtOAc로 희석하여 1.5 kg 현탁액을 얻었다. 이어서, 2.5 L IPE를 첨가하고, 실온에서 밤새 결정화를 수행하였다. 이어서, 침전물을 여과에 의해 수집하고, 1 x 1.2 L EtOAc/IPE 1:3 및 2 x 1.2 L IPE로 세척하였다. EtOAc/IPE 1:3에서 이 결정화의 여과는 훨씬 더 빠른 것으로 입증되었으며 98.1% HPLC 순도 및 36% 수율로 원하는 생성물을 제공했다. 두 분획에 대한 전체 부피 수율은 10.5%였다. 두 분획을 합하여 Cbz-탈보호를 실시하였다.
Z-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드(1057 g, 2.39 mol)를 실온에서 8.55 L IPA 및 0.35 L 탈이온수에 용해시켰다. 질소를 혼합물을 통해 버블링하여 산소를 제거한 후, 100 mL 탈이온수 중 42 g 촉매 (탄소상 10% Pd, 물 50%, 총 2.1 g Pd)의 현탁액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소로 퍼징한 다음, 소결 유리 필터가 있는 피펫을 사용하여 수소를 반응 혼합물을 통해 버블링하였다. 반응을 HPLC에 의해 모니터링하고, 80분 후에 94.4% 생성물 및 < 0.1% 잔류 출발 물질을 반응 혼합물에서 검출되었다. 반응 혼합물을 다시 질소로 퍼징하고, 소결 유리 필터 깔때기 (공극 크기 약 5-15 μm)를 이용하여 촉매를 여과하였다. 여액을 18% HCl 480 mL를 사용하여 pH ~ 3으로 산성화하고 35 C 외부 온도에서 2.95 kg까지 감압 농축하여 하였다. 5.0 L IPA 및 시딩 결정을 첨가하고, 3.9 kg의 진한 현탁액이 수득될 때까지 증발을 계속하였다. 이 현탁액을 실온에서 1.0 L IPA로 희석하였다. 30분 후, 7.0 L IPE를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 4.0 L IPA/IPE 1:2로 세척한 후, 이어서 2 x 4.0 L IPE로 세척한 다음, 진공 하에서 건조시켜 96% 수율 (7.5% 부피 수율) 및 98.7% HPLC-순도로 HCl-염으로서 원하는 생성물을 수득하였다.
이중 재킷 유리 반응기에서 539 g (1.59 mol, 1.00 eq.) Z-D-Leu-Ala-OH, 588 g (1.59 mol, 1.00 eq., 검정을 위해 보정 [93 %]) H-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl 및 226 g (1.59 mol, 1.00 eq.) 옥시마를 2.7 L ACN에 현탁시켰다. 수득된 진한 현탁액을 IT = 0℃로 냉각하고, 545 mL (3.18 mol, 2.00 eq.) DIPEA를 첨가한 후, 침전물을 서서히 용해시켰다 (용해되지 않은 입자가 거의 남지 않음). 반응 혼합물의 pH가 6 - 7에 불과했기 때문에 추가 29 mL (0.17 mol, 0.10 eq.) DIPEA를 사용하여 pH = 8로 조정했다. 이어서, 396 g (2.07 mol, 1.30 eq.) EDC x HCl을 첨가하고, 반응물을 IT = 0℃에서 교반하고, HPLC에 의해 모니터링하였다. 4.5시간 후, 반응 혼합물에서 2.58%의 잔존 Z-D-LEU-ALA-OH가 검출되었고, 2.7 L의 EtOAc 및 2.7 L의 탈이온수와 염수의 1:1 혼합물이 첨가하였다. 상을 분리한 후, 수성상을 버리고, 유기상을 각각 1.3 L 1 N HCl로 3회 추출하고, 2.7 L EtOAc로 희석하고, 5% Na2CO3와 염수 (9:1)의 혼합물을 각각 1.3 L씩 3회 더 추출하였다. 그 후 유기층을 탈이온수와 염수 (9:1)의 혼합물로 각각 1.3 L로 3회 세척하고 실온에서 밤새 보관하였다. 수득된 용액의 일부 (441 g)를 추가의 결정화 실험에 사용하였고, 나머지 5337 g을 40℃ (외부 온도) 및 160 mbar에서 2843g의 중량까지 농축하였다. 생성된 용액에, 0.7 g 시딩 결정 및 5.0 L EtOAc를 첨가하고, 40℃ (외부 온도) 및 150 mbar에서 3640 g의 중량까지 농축하였다. 수득된 진한 현탁액을 3.2 L IPE로 희석하고, 실온에서 3.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 침전물을 여과하고 (11 μm 공극 크기를 갖는 필터, 여과 시간: < 20 min) 2x 3.4 L EtOAc/IPE 1:1 및 1x 3.4 L IPE로 세척하였다. 35℃에서 16시간 동안 감압 (< 20 mbar)으로 건조시킨 후, 778 g의 Z-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드(84% 수율, 8.1% 부피 수율)를 약간 회백색의 결정으로 얻었다. HPLC 순도: 98.7%
10 L 4구 플라스크에 755 g (1.20 mol)의 Z-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드를 실온에서 6.04 L IPA 및 400 mL 탈이온수에 현탁시키고, 1 시간 동안 교반하여 투명한 용액을 얻었다. 이 용해 동안, 질소의 기류를 혼합물에 통과시켜 산소를 퍼지시켰다. 수득된 맑은 용액을 4℃로 냉각시킨 후, 355 mL 탈이온수에 현탁시킨 탄소 상의 팔라듐 75.5 g (탄소 상의 10% Pd, 50% 물, 총 3.78 g Pd)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소로 10분 동안 퍼징한 다음, 유리 프릿을 사용하여 반응 혼합물을 통해 수소를 버블링함으로써 수소화를 시작하였다. 반응은 HPLC에 의해 모니터링되었다. 60분 후 0.85% 잔여 Z-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 (97.3% H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl)가 검출되었다. 84분 후 수소화를 중지하고 반응 혼합물을 질소로 퍼징하여 잔존하는 수소를 제거하였다. 촉매는 소결 유리 필터 깔때기 (기공 크기 약 5 - 15 μm)를 사용하여 여과하고 2 x 400 mL IPA로 세척했다. 합한 여액 218 mL (1.20 mmol, 1.00 eq.) 18 % 염산을 첨가 (용액의 pH = 2 - 3)하고, 얻은 용액을 40℃ (외부 온도) 및 80 mbar에서 약 4 L까지 농축시켰다. 이어서, 3.0 L IPA를 첨가하고, 용액을 다시 약 4 L까지 농축시켰다. 이 과정을 2회 반복하였다. IPA를 세 번째로 첨가한 후, 수득된 용액에 25 mg의 H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl을 시딩하고, 혼합물을 4℃에서 밤새 보관하여 현탁액을 생성하였다. 다음날 아침, 40℃ (외부 온도) 및 80 mbar에서 3.21 kg까지 농축하였다. 수득된 현탁액에 3.4 L IPE를 20분에 걸쳐 첨가하고, 현탁액을 실온에서 21시간 동안 교반하였다. 그런 다음 침전물을 여과하고 (11 μm 공극 크기의 필터, 여과 시간: 10 min) 3.4 L IPA/IPE 1:1로 1회, 3.4 L IPE로 2회 세척했다. 필터 케이크를 35℃에서 20시간 동안 감압 (< 20 mbar) 하에서 건조시켜 623 g의 H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl (84% 수율, 6.4% 부피 수율, 둘 다 백색 결정으로서 H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl의 검정을 위해 보정됨. HPLC 순도: 99.0% 검정: 86.6% (AgNO3로 적정) 85.6 % (질소 함량, 원소 분석) 팔라듐 함량: 9.1 ppm
10 L 이중 재킷 반응기에서 597 g (982 mmol, 1.00 eq.) H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl (87% 검정) 및 166 g (982 mmol, 1.00 eq.) 3-말레이미도프로피온산을 20℃ (재킷 온도)에서 4.78 L MeTHF 및 1.20 L DMF에 용해시켰다. 10℃ (내부 온도)로 냉각한 후, 347 g (1080 mmol, 1.10 eq.) TBTU 및 266 g (2062 mmol, 2.10 eq.) DIPEA를 첨가하였다 (내부 온도는 13℃로 상승). 반응물을 20℃ (재킷 온도)에서 3시간 동안 교반하였고, HPLC 분석 결과 94.3% 3-말레이미도-프로피오닐-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드, 2.25% H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl을 나타냈다. 반응 혼합물을 5℃로 냉각시키고, 3 내지 6℃ 내부 온도에서 수성 추출 워크업을 수행하였다 (염수, 탈이온수, 1 N HCl, 5% NaHCO3 및 MeTHF는 추출 전에 5℃로 냉각되었다). 먼저, 반응 혼합물을 1.8 L 염수 및 1.8 L 탈이온수의 용액으로 추출하였고 (완전한 상 분리는 7분 걸렸음), 이어서 6 x 1.8 L 1 N HCl로 추출하였다 (2 - 3분 후 완전한 상 분리). 유기층의 부피를 일정하게 유지하기 위해, 1 N HCl를 사용한 1차에 0.8 L MeTHF를 첨가하고 후속 추출 단계 각각에 0.5 L MeTHF를 첨가하였다 (HPLC: 0.65% H-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 x HCl 및 95.1% 3-3-말레이미도-프로피오닐-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드가 6번째 HCl 추출 단계 후에 유기 상에서 검출됨). 이어서, 유기상을 3 x 1.8 L 5% NaHCO3로 추출하였다. 유기층의 부피를 일정하게 유지하기 위해, 5% NaHCO3를 사용한 1차 추출 단계에 1.0 L MeTHF를 첨가하고 2차와 3차 추출 단계 각각에 0.5 L MeTHF를 첨가하였다. 5% NaHCO3를 사용한 2차 추출 단계 후의 상분리가 매우 느렸기 때문에, 5% NaHCO3를 사용한 2차 및 3차 추출에 각각 540 mL 염수를 첨가하였다 (층의 완전한 분리까지의 시간: 10분, 12분 및 11분). 유기상을 1 x 1.8 L 1N HCl 및 3 x 1.8 L 탈이온수로 추출하였다 (0.5 L MeTHF를 각 추출 단계에 첨가하고, 완전한 상 분리에 4-5 분). 얻어진 유기층을 여과하여 고체를 제거 (기공 크기 약 5 내지 15 μm)하고 40℃ (외부 온도) 및 120 mbar에서 농축했다. 얻어진 용액 (1.7 kg)에, 5.75 L MeTHF를 첨가하고, 농축을 계속하여 황갈색 용액 2.504 kg을 수득하였다. 이 용액을 실온에서 23분에 걸쳐 4.3 L 헵탄에 서서히 첨가하여, 회백색 현탁액을 형성하였다. 농축 후 용액의 플라스크를 200 mL MeTHF로 헹구고 헹굼 용액을 현탁액에 천천히 첨가하였다. 현탁액을 추가로 4분 동안 교반하였다. 그런 다음 침전물을 여과하고 (11 μm 공극 크기의 필터, 여과 시간: 4분) 2x 2.1 L MeTHF/헵탄 1:2로 세척했다. 필터 케이크를 감압 하 (< 20 mbar)에서 35℃에서 회전 증발기에서 87시간 동안 건조시켜, 563 g의 약간 회백색 고체 (HPLC-순도: 95.6%)를 수득하였다. 얻어진 생성물 70 g을 재결정 실험에 사용하였고, 나머지(492 g)를 40℃ 및 < 2 mbar에서 19시간 동안 더 건조시키고 (483 g 생성물), 50℃ 및 < 2 mbar에서 16시간 동안 건조하여 480 g의 3-말레이미도-프로피오닐-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드를 회백색 고체로 수득하였다 (85% 수율, 4.9% 부피 수율, 둘 다 3-말레이미도-프로피오닐-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드의 검정을 위해 보정됨). HPLC-순도: 95.7%
1 L 반응기에서, 10V의 MeTHF/DMF 8:2 중의 3-말레이미도-프로피오닐-D-Leu-Ala-Glu(OtBu)-(4-하이드록시메틸)-아닐리드 13.84g (21.50 mmol, 1.0 eq)의 용액에 비스(4-니트로페닐) 카르보네이트 13.08 g (43.0 mmol, 2.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 5.0 분 동안 교반한 다음 DIPEA 7.5 mL (43.0 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 결과 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 20℃로 냉각한 다음, MeTHF (10V)로 희석하고, 1 x 140 mL 10% aq. NaCl 및 2 x 140mL H2O로 세척하였다. 용매는 MeTHF (3x 10V)로 10V (40℃-200mbar)까지 3회 추적하였다. 이어서, 얻어진 용액을 45분에 걸쳐 40V MTBE/헵탄 1:1에 첨가하였다. 슬러리를 RT에서 80분 동안 숙성시킨 다음, 여과하고 3x 세척하였다 (10V MTBE/헵탄 1:1). 얻어진 고체를 30℃의 진공오븐에서 18시간 동안 건조시켜 tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-((4-((((4-니트로페녹시)카르보닐)옥시)메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트를 87% 수율 및 94.9% 순도의 백색 고체로 얻었다.
2L 반응기에,15.40 g (17.70 mmol, 1.00 eq.) tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((R)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-메틸펜탄아미도)-프로판아미도)-5-((4-((((4-니트로페녹시)카르보닐)옥시)메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (93% 검정), 15.40 g (23.0 mmol, 1.3 eq.) (S)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-하이드록시-1-페닐프로판-2-일)아미노)-1-메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)피롤리딘-1-일)-3-메톡시-5-메틸-1-옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-(메틸아미노)부탄아미도)부탄아미드 및 0.306 g (2.66 mmol, 0.15 eq.) NHS를 2V DMA에 용해시켰다. 이 혼합물에 20V DMA/MTBE 7:1을 첨가하였다. 결과 혼합물을 40℃에서 30시간 동안 교반하여 완성에 도달하였다. 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고 10V의 MeTHF및 20V의 H2O로 희석하여 잘 혼합하였다. 두 층이 분리되었다. 수성을 MeTHF (1 x 20V)로 다시 추출하였다. 유기물을 합하고 세척하였다 (1 x 20V 0.5M HCl, 2 x 20V NaHCO3, 2 x 20V H2O). 이어서, 유기층을 MeTHF (3 x 10V)로 추적한 다음, 농축 건조시켰다. 이어서, 잔류물을 ACN/DCM 1:1 (6V)에 용해시켰다. 이어서, 얻어진 용액을 다음 단계로 가져갔다.
2L 반응기에, DCM/ACN 1:1 (6V) 중 tert-부틸 (S)-5-((4-((5S,8S,11S,12R)-11-((S)-sec-부틸)-12-(2-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-하이드록시-1-페닐프로판-2-일)아미노)-1-메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-5,8-디이소프로필-4,10-디메틸-3,6,9-트리옥소-2,13-디옥사-4,7,10-트리아자테트라데실)페닐)아미노)-4-((S)-2-((R)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-메틸펜탄아미도)프로판아미도)-5-옥소펜타노에이트를 ACN (4V)로 희석하고 5℃로 냉각시켰다. 5V의 ACN을 H3PO4 (8V)에 첨가하고, 혼합물을 잘 혼합하고 5℃로 냉각시켰다. H3PO4의 용액을 온도를 10℃ 이하로 유지하면서 반응 혼합물에 천천히 첨가하였다. 결과 혼합물을 20℃에서 4시간 동안 교반하여 완성에 도달하였다.
이어서, 반응 혼합물을 10℃로 냉각시키고, DCM (10V) 및 물 (15V)로 희석하였다. 반응 혼합물을 잘 혼합하고, 2개의 층을 분리하였다. 수성을 10V DCM으로 다시 추출하였다. 유기물을 합하고 pH 5 (4x20V)가 될 때까지 H2O로 세척했다. 얻어진 유기층을 DCM (3x 10V)으로 10V로 내린 다음 DCM 10V로 희석하여 72% 수율 (2단계에 걸쳐) 및 78.0% 순도로 원하는 생성물의 50mg/mL 용액을 얻었다.
이어서, 생성물의 수득된 용액을 DCM 상에서 순상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 71% 수율 (2단계 + 정제에 걸쳐) 및 98.6% 순도를 갖는 백색 고체로서 원하는 생성물 14.4 g을 수득하였다.
실시예 20 내지 26
재료 및 방법. 하기 재료 및 방법은 달리 나타내지 않는 한 실시예 20 내지 26에 기술된 합성 절차 및 실험에 적용가능하다. 상업적으로 이용 가능한 모든 무수 용매는 추가 정제 없이 사용하였다. 출발 물질, 시약 및 용매는 상업적 공급자(SigmaAldrich 및 Fischer)로부터 구입하였다. 생성물은 Biotage Isolera One 플래시 정제 시스템 (Charlotte, NC)을 이용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. UPLC-MS는 Waters Acquity UPLC 시스템에 인터페이스된 Waters 단일 쿼드 검출기 질량분석기에서 수행되었다. UPLC 방법은 아래에 설명되어 있다. 분취 HPLC는 Wasters 2998 PDA 검출기로 구성된 Waters 2454 Binary Gradient Module 용매 전달 시스템에서 수행되었다. 생성물은 달리 명시되지 않는 한, 물 중 0.05% 트리플루오로아세트산 및 아세토니트릴 중의 0.05% 트리플루오로아세트산으로 용출되는 4 μm Synergi 80 Å 250 mm 역상 컬럼의 적절한 직경의 Phenomenex Max-RP 컬럼으로 정제되었다.
일반적인 방법. 컬럼 - Waters CORTECS C18 1.6 μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼
용매 A - 0.1% 수성 포름산
용매 B - 0.1% 포름산을 가진 아세토니트릴
실시예 20: 캄프토테신 약물-링커의 제조
Fmoc-글루타메이트 5-tert-부틸 에스테르 (1.00 eq, 2.00 g, 4.701 mmmol), 파라-아미노벤질알코올 (1.50 eq, 868 mg, 7.051 mmol), 및 자기 교반 막대를 200 ml RBF에 첨가하였다. DMF (10mL)를 플라스크에 넣고, 이어서 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.40 eq, 1.1 mL, 6.58 mmol)을 넣었다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 15 V의 물로 서서히 침전시키고, 1 시간 동안 교반하였다. 슬러리를 여과하고 물로 세척하여 오렌지색 고체를 얻었다. 고체를 45℃의 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 tert-부틸 (4S)-4-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (2.50 g,4.70 mmol, 100.03% 수율)를 얻었다. RT = 2.12분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C31H35N2O6에 대한 계산 531.25, 확인 531.38.
tert-부틸 (4S)-4-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (1.00 eq, 0.60 g, 1.13 mmol)를 DMF 중 20% 피페리딘 (3.7692mL)에 용해시켰다. 반응을 10분간 교반했다. UPLC-MS에 의해 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 진공에서 농축하고 prep-HPLC 30 x 250 mm Synergi Max-RP H2O 중 5-30-95% MeCN 0.05% TFA로 정제했다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체 tert-부틸 (4S)-4-아미노-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (0.32 g,1.03 mmol, 90.77 % 수율)를 얻었다. RT = 0.79 min 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C16H24N2O4에 대한 계산 309.18, 확인 309.43.
(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) (2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노에이트 (1.00 eq, 12.67 g, 28.1 mmol) 및 (2S)-2-아미노프로판산 (1.70 eq, 4260 mg, 47.8 mmol)을 MeCN (126.7mL)에 용해하였다. 물 (63.4 mL) 중 중탄산나트륨 (2.50 eq, 5907 mg, 70.3 mmol)을 반응물에 첨가했다. 반응물을 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 2M HCl로 산성화하고 진공에서 농축하여 MeCN을 제거했다. 수성상을 EtOAc로 추출하고 합한 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하여 원하는 생성물을 무색 고체 (2S)-2-[[(2R)-2-[(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로판산 (7430 mg,17. 5 mmol, 62.23% 수율)을 얻었다. RT = 1.89분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C24H29N2O5에 대한 계산 425.21, 확인 425.45.
tert-부틸 (4S)-4-아미노-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (1.10 eq, 4994 mg, 16.2 mmol)를 DMF (50mL)에 용해시켰다. PPTS (1.10 eq, 4070 mg, 16.2 mmol)를 첨가한 후 (2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로판산(1.00 eq, 6250 mg, 14.7 mmol)을 첨가했다. 반응물을 얼음/수조로 0℃로 냉각시켰다. 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드(1.20 eq, 3387 mg, 17.7 mmol)를 첨가하고 반응을 밤새 교반했다. 15시간 후 완전한 전환이 관찰되었다. 반응물을 1:1:1 EtOAC:THF:2MeTHF (300 mL)로 희석하고, 11% K2CO3 (300 mL)로 세척하고, 19% 구연산 (300 mL)으로 세척하고, 22% K2CO3 (300 mL)으로 세척하고, 18% NaCl (300mL)로 세척했다. 유기층을 건조 MgSO4, 여과하고 진공에서 농축하여 노란색 젤리 고체를 얻음. 컬럼 크로마토그래피 Hex 중 20-80% EtOAc로 정제함. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체 tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (7416 mg,10.4 mmol, 70.46 %% 수율)을 얻었다. RT = 2.13분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C40H51N4O8에 대한 계산 715.37, 확인 715.50.
PFP 탄산염 활성화
tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-(하이드록시메틸)아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (1.00 eq, 1719 mg, 2.40 mmol)를 DMF (8.0157mL)에 용해시켰다. 비스(펜타플루오로페닐) 카르보네이트 (2.00 eq, 1895 mg, 4.81 mmol)를 첨가한 후 N,N-디이소프로필에틸아민 (3.00 eq, 1.3 mL, 7.21 mmol)을 첨가했다. 반응물을 15분 동안 교반한 후 UPLC-MS로 완전한 전환을 관찰했다. 반응물을 EtOAc (150 ml)에 넣고 유기물을 2 x 150 ml 18% K2CO3에 이어서 1 x 150 ml 포화 염수 용액으로 세척했다. 그런 다음 유기물을 분리하고 건조 (MgSO4)한 후 농축하여 건조시켰다. 그런 다음 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피로 헥산 중 10-80%의 EtOAc를 용출하여 정제했다. 원하는 분획을 진공에서 농축 건조하여 무색 고체 tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-옥소-5-[4-[(2,3,4,5,6-펜타플루오로페녹시)카르보닐옥시메틸]아닐리노]펜타노에이트 (1815 mg,1.96 mmol, 81.61 % 수율)를 얻었다. RT = 2.38분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C47 H50F5N4O10에 대한 계산 925.34, 확인 925.41.
약물-링커 형성
AMDCPT의 제조는 국제 공개 WO 2019/195665에 기술되어 있다. (5S)-14-(아미노메틸)-5-에틸-5-하이드록시-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-6,10-디온 (AMDCPT);하이드로브로마이드 (1.00 eq, 878 mg, 1.75 mmol)를 DMSO (2.9135mL) 및 DMF (5.8269mL)에 용해시켰다. tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-옥소-5-[4-[(2,3,4,5,6-펜타플루오로페녹시)카르보닐옥시메틸]아닐리노]펜타노에이트 (1.00 eq, 1617 mg, 1.75 mmol)를 반응에 첨가한 후 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.00 eq, 0.30 mL, 1.75 mmol)을 첨가했다. 반응물을 15분간 교반한 후 UPLC-MS로 완전한 전환을 관찰했다. 반응물을 150 mL의 교반수에 적가했다. 황갈색 슬러리를 15분 동안 교반하고 여과하여 수집한 후 진공 하에 건조하여 원하는 생성물인 황갈색 고체 tert-부틸 (4S)-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-옥소-펜타노에이트 (1815 mg,1.56 mmol, 89.33 %% 수율)를 얻었다. RT = 2.16분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C63H68N7O15에 대한 계산 1162.48, 확인 1162.69.
Fmoc 탈보호
tert-부틸 (4S)-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-옥소-펜타노에이트 (1.00 eq, 727 mg, 0.625 mmol)를 DMF (2.0848mL)에 용해시켰다. 1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운데스-7-엔 (1.00 eq, 0.094 mL, 0.625 mmol)을 첨가하고 반응물을 60분 동안 교반하고 이 시점에서 완전한 전환이 관찰되었다. 반응물을 75 mL의 교반 톨루엔에 적가했다. 갈색 침전물을 여과하여 수집하고 진공 하에서 건조하여 원하는 생성물 tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-아미노-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트;4-메틸벤젠설폰산 (664 mg,0.597 mmol, 95.43 % 수율)을 얻었다. RT = 0.85분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C48H58N7O13에 대한 계산 940.41, 확인 940.84.
MPOSu 커플링
tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-아미노-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트;4-메틸벤젠설폰산 (1.00 eq, 664 mg, 0.597 mmol)을 DMF (3.9789mL)에 용해시켰다. 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트 (1.10 eq, 175 mg, 0.657 mmol)를 반응물에 첨가하고 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.20 eq, 0.12 mL, 0.716 mmol)을 첨가했다. 반응물을 5분간 교반하고, 이 시점에서 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH (0.2 mL)로 산성화하여 75 mL 교반수에 적가했다. 갈색 침전물을 여과하여 수집하고 진공 하에서 건조하여 원하는 생성물 tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[3-(2,5-디옥소피롤-1-일)프로파노일아미노]-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (519 mg,0.476 mmol, 79.76 % 수율)를 얻었다. RT = 1.78분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C55H62N8O16에 대한 계산 1091.44, 확인 1091.58.
Tert-부틸 에스테르 탈보호
tert-부틸 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[3-(2,5-디옥소피롤-1-일)프로파노일아미노]-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-5-옥소-펜타노에이트 (1.00 eq, 519 mg, 0.476 mmol)를 MeCN (2 mL) 및인산 (40.0 eq, 1.2 mL, 19.0 mmol)에 용해시켰다. 반응물을 60분 동안 교반하고, 이 시점에서 완전한 탈보호가 관찰되었다. 반응물을 75 mL의 교반수에 적가가하고 황갈색 슬러리를 10분간 교반했다. 침전물을 여과하여 수집하고 1:1 MeOH:DCM을 사용하여 별도의 플라스크에 용출한 후 진공에서 농축했다. DMSO에 재용해하고 H2O 0.05% TFA에서 20-45-95% 집중 구배 MeCN을 용출하는 prep-HPLC 30x250 mm MaxRP로 정제했다. 원하는 생성물을 포함하는 분획을 진공에서 농축하여 노란색 고체 (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[3-(2,5-디옥소피롤-1-일)프로파노일아미노]-4-메틸-펜타노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-[4-[[(5S)-5-에틸-5-하이드록시-6,10-디옥소-7,18,20-트리옥사-11,24-디아자헥사사이클로[11.11.0.02,11.04,9.015,23.017,21]테트라코사-1(13),2,4(9),14,16,21,23-헵타엔-14-일]메틸카르바모일옥시메틸]아닐리노]-5-옥소-펜탄산 (화합물 43, 276 mg,0.267 mmol, 56.05 % 수율)을 얻었다. RT = 1.43분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C51H54N8O16에 대한 계산 1035.37, 확인 1035.42.
화합물 43a, 43b, 43c은 유사한 방법을 사용하여 만들었다. 결과 및 특성화는 표 4a 및 4b에 나와 있다. 엑사테칸은 Advanced ChemBlock (카탈로그 번호: 10484)에서 구입했다.
실시예 21: Val-Cit 링커를 갖고 있는 AMDCPT의 약물 링커
말레이미도카프로일-L-발린-L-시트룰린-p-아미노벤질 알코올 p-니트로페닐 카르보네이트 (MC-Val-Cit-PABC-PNP)의 제조는 특허 WO 2019108797에 기술되어 있다.
AMDCPT 및 MC-Val-Cit-PABA-PNP를 DMF (0.5mL)에 용해시켰다. DIPEA (4.00 eq, 0.026 mL, 0.149 mmol)를 첨가하고 반응물을 10분 동안 교반 하였다. 반응물을 AcOH로 산성화하고 Prep-HPLC 21x250 mm Synergi Max-RP H2O 중 10-95% MeCN 0.05% TFA로 정제했다. 원하는 생성물을 포함하는 분획을 동결건조하여 원하는 생성물을 황색 고체 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산아미도)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질 (((S)-7-에틸-7-하이드록시-8,11-디옥소-7,8,11,13-테트라하이드로-10H-[1,3]디옥솔로[4,5-g]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-14-일)메틸)카르바메이트 (화합물 44, 2.40 mg, 2.35 μmol, 6.30 % 수율)을 얻었다. RT = 1.59분 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M+H]+ C51H58N9O14에 대한 계산 1020.41, 확인 1020.09.
실시예 22: 리간드-약물 접합체의 제조
완전히 또는 부분적으로 환원된 ADC를 50% 프로필렌 글리콜 (PG) IX PBS 혼합물로 제조했다. PG의 절반 부분을 환원된 mAb에 첨가하고, 절반 PG를 1 mM DMSO 캄프토테신 약물-링커 스톡에 첨가했다. PG/약물-링커 혼합물을 환원된 mAb에 25% 부분으로 첨가했다. 약물-링커 첨가가 완료된 후 활성탄 (mAb 1 mg에 대해 숯 1 mg)으로 처리하여 과량의 약물-링커를 제거했다. 그런 다음 여과를 통해 숯을 제거하고 결과 ADC를 NAP5 또는 PD10 컬럼을 사용하여 1X PBS pH 7.4로 완충액 교환했다.
실시예 23: 시험관 내 ADC 평가.
여러 암 세포주에 대해 시험관 내 효능을 평가했다. 모든 세포주는 IDEXX Bioresearch에서 STR 프로파일링을 통해 인증되었으며, 소생 후 2개월 이내로 배양되었다. 로그상 성장으로 배양된 세포는 20% FBS가 보충된 150 pi RPMI 1640이 함유된 96웰 플레이트에 24시간 동안 시딩되었다. 세포 배양 배지에서 항체-약물 접합체의 연속 희석액을 4배 작동 농도로 제조하고 각 희석액 50 μL를 96웰 플레이트에 추가했다. 시험 물품을 첨가한 후 세포를 37 0℃에서 4일간 시험 물품과 함께 배양했다. 96시간 후, CellTiterGlo®(Promega, Madison, WI)로 성장 억제를 평가하고 플레이트 판독기에서 발광을 측정했다. 삼중으로 측정된 IC50 값은 미처리 대조군과 비교하여 세포 성장을 50% 감소시키는 농도로 정의다.
표 5에서 ADC의 IC50 값은 ng/mL 단위로 표시된다. 세포 생존력은 ADC에 96시간 노출 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정했다. ND = 미결정. 약물-링커 화합물은 표에 표시된 대로 cAC10 또는 Ag2 항체 중 하나에 접합되었다. Ag2는 어디에나 있고 쉽게 내재화할 수 있는 항원을 표적으로 하는 항체이다. 시험한 암 세포주는 신장암 세포 (786-0), 흑색종 세포 (A2058), 췌장암 세포 (BxPC3), (Calu1), (DEL), (DELBVR), (Karpas299), 호지킨 림프종 세포 (L540cy), (Ls174T), 유방암 세포 (MDA-MB-231), 급성 골수성 백혈병 세포 (MOLM-13), B 림프구 암 세포 (SU-DHL4)이다.
실시예 24: 응집 연구
캄프토테신 약물-링커 (DAR = 8)에 대해 ADC 응집 수준을 결정했다. ADC 응집은 크기 배제 크로마토그래피 (SEC)에 의해 결정되었다. 결과는 표 6에 나와 있다.
실시예 25: 혈장 응집 연구
비결합 h00 mAb에 Alex Flour 488 (AF488)을 ~2-3 AF88/mAB의 비율로 표지했다. 캄프토테신 약물-링커를 50% 프로필렌 글리콜 (PG) 1X PBS 혼합물에서 AF88-h00의 완전히 환원된 사슬 간 이황화물에 접합시켰다. 완충액을 20 mM Glu pH 4.5로 교환하고 2 mg/mL로 희석했다. 시험 물품을 완충 래트 혈장 (100 mM KPhos), pH 7.2) 중에 50 ug/mL로 희석하고 37℃에서 배양했다. 결정된 시점에 시험 물품에서 분취액을 샘플링하고 2 내지 8℃로 냉각한 후 중성 pH 완충액을 사용한 형광 검출 용출, 유기 용매가 없는 상태에서 생리학적 이온 강도를 사용하여 크기 배제 크로마토그래피 (SEC)로 즉시 분석했다. 응집된 ADC를 나타내는 고분자량 종의 백분율 (%HMW)을 분석했다. 트리펩타이드 D-Leu-Ala-Glu로 제조된 캄프토테신 ADC (실시예 2.2)의 응집은 Val-Cit으로 제조된 캄프토테신 ADC (실시예 2.3)에 비해 더 낮은 것으로 나타났다. 결과는 표 7에 나와 있다.
화합물에 대한 플라즈마 응집도 시간에 따라 모니터링되었다(도 23).
실시예 26: 생체 내 모델
모든 실험은 실험동물관리평가인증협회(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)의 인증을 받은 시설에서 동물관리 및 사용 위원회의 승인에 따라 수행되었다. 효능 실험은 L428, KMH2, 카르파스/카르파스-BVR, DelBVR 및 Caki-1 이종이식 모델에서 수행되었다. 종양 세포는 세포 현탁액으로 면역력이 저하된 SCID 또는 누드 마우스에 피하 이식되었다. 종양 생착 후, 평균 종양 부피가 약 100 mm3에 도달하면 마우스를 무작위로 연구 그룹 (그룹당 5마리의 마우스)으로 분류했다. ADC 또는 대조군은 복강 내 주사를 통해 1회 투여되었다. 항체에 부착된 평균 약물-링커 수는 ADC 옆 괄호 안에 표시되어 있다 (여기서는 약물-항체 비율 (DAR) 수, 예를 들어, DAR4, DAR8 등이라고도 함). 시간 함수로서의 종양 부피는 화학식 (L x W2)/2를 사용하여 결정했다. 종양 부피가 750 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 지속적인 퇴행을 보이는 마우스는 이식 후 10-12주 후에 희생시켰다.
동물에 L428 세포를 이식했다. 10일 후, 동물들을 평균 종양 크기가 100 mm3 인 그룹으로 분류하고 캄프토테신 ADC cAC10-화합물 43(8), cAC10-화합물 43a(8) 또는 cAC10-화합물 43b(8)를 2 또는 6 mg/kg의 단일 용량으로 처리했다. 연구 기간 동안 동물의 종양 크기와 생체 내 징후를 평가했다. 결과는 도 24a 및 24b에 나와 있다.
동물에 Del-브렌툭시맙 베도틴 내성(DELBVR) 세포를 이식했다. 9일째에, 동물들을 평균 종양 크기가 100mm3인 그룹으로 분류한 다음, 캄프토테신 화합물 43(8), cAC10-화합물 43a(8) 또는 cAC10-화합물 43b(8)를 단일 용량으로 0.3 또는 0.9 mg/kg, 또는 브렌툭시맙 베도틴 3 mg/kg으로 투여했다. 연구 기간 동안 동물의 종양 크기와 생체 내 징후를 평가했다. 결과는 도 25a 내지 c에 나와 있다.
동물에 CD30+ 카르파스299 및 CD30- 카르파스299- 브렌툭시맙 베도틴 내성 (카르파스299-BVR) 세포의 1:1 혼합물을 이식했다. 5일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100mm3인 그룹으로 분류한 다음 캄프토테신 cAC10-화합물 43(8)을 0.5 및 1.5mg/kg으로 또는 cAC10-화합물 43(4)을 1 및 3mg/kg으로 1회 투단일 용량으로 여 처리했다. 연구 기간 동안 동물의 종양 크기와 생체 내 징후를 평가했다. 결과는 도 26에 나와 있다.
동물에 Caki-1 세포를 이식했다. 10일째에, 동물들을 평균 종양 크기가 100mm3인 그룹으로 분류하고 캄프토테신 ADC h1F6-화합물 43(8), h1F6-화합물 43a(8) 또는 h1F6-화합물 43b(8)를 3 또는 10 mg/kg의 단일 용량으로 처리했다. 연구 기간 동안 동물의 종양 크기와 생체 내 징후를 평가했다. 결과는 도 27a와 27b에 나와 있다.
도 24 내지 27의 데이터는 시험된 모델에서 cAC10-화합물 43(8), cAC10-화합물 43a(8), cAC10-화합물 43b(8), h1F6-화합물 43(8), h1F6-화합물 43a(8) 또는 h1F6-화합물 43b(8) ADC가 모두 생체 내 항종양 활동을 나타냈다는 것을 보여준다.
실시예 27: 튜불리신 약물-링커 (화합물 71)의 합성
화합물 71.1 (1mmol), (4-아미노페닐)메탄올(1.5 mmol), HATU(1.4 mmol)를 자기 교반 바가 장착된 50 mL RBF에 충전했다. 디메틸 포름아미드 (DMF)(2 mL)를 용기에 충전하고 고체가 용해될 때까지 교반했다. DIPEA (245 μL, 1.4 mmol)를 반응물에 한 번에 충전했다. 반응을 2시간 동안 rt에서 교반하였다. 완료되면 물 (6 mL)을 30분에 걸쳐 적가하여 첨가했다. 슬러리를 추가로 1시간 동안 rt에서 교반했다. 슬러리를 여과하고 물로 세척하여 주황색 고체를 얻었다. 이 고체를 DCM (5 mL)에 재용해하고 디에틸아민 (309 μL, 3.0 mmol)을 용액에 첨가한 후 rt에서 밤새 교반했다 (반응물은 밤새 침전됨). 완료되면 헥산을 반응에 첨가하고 1시간 동안 교반했다. 여과 후, 고체를 진공 상태에서 밤새 건조하여 갈색 고체 (정량적 수율)로 화합물 71.2를 얻었다.
화합물 71.2 (87 mg, 0.28 mmol), 화합물 71.3 (102 mg, 0.34 mmol) 및 HATU (162 mg, 0.42 mmol)를 RBF에 충전했다. DMF (1 mL) 및 DIPEA (75 μL, 0.42 mmol)를 용기에 충전하고 rt에서 교반했다. 반응이 완료된 후 플라스크에 물을 추가하고 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄으로 추출하고 황산나트륨으로 건조시킨 후 회전식 증발기에 농축했다. 조 혼합물을 역상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 71.4를 백색 고체(수율 63%)로 얻었다.
얼음처럼 차가운 THF (9 mL) 중 화합물 71.4 (0.18 mmol)의 용액에 DIPEA (47 μL)를 첨가한 후 30분에 을걸쳐 삼브화인 (18.5 μL)를 적가했다. 반응은 0℃에서 교반되었다. 완료 후, 반응을 수성 중탄산나트륨으로 켄칭하고 분리 깔때기로 옮겼다. 수성 층을 디클로로메탄으로 추출하고 황산나트륨으로 건조시킨 후 회전식 증발기에 농축했다. 조 혼합물을 에틸 아세테이트와 헥산을 사용하여 순상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 71.5를 백색 고체 (71 % 수율)로 얻었다. 분석 UPLC-MS, m/z (ES+) 계산 656.6 [M+H]+; 확인 656.
압력 용기에 화합물 71.5 (11.3 mg, 17.2 μmol) 및 화합물 71.6 (12 mg, 15.6 μmol)을 무수 2-부타논 (150 μL)에 충전했다. 반응을 N2로 플러시하고 밀봉한 후 80℃에서 12시간 동안 교반했다. 반응물을 실온으로 옮긴 후 농축했다. 조물질은 추가 정제 없이 이월되었다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1342.7 [M]+; 확인 1343.
조질의 고체를 무수 DCM (100 μL)에 용해시킨 후 페닐실란 (19.3 μL, 156 μmol) 및 Pd(PPh3)4 (5.4 mg, 4.6 μmol)를 첨가했다. LCMS는 1시간 후 알릴 에스테르가 완전히 제거되었음을 나타냈다. 반응물을 여과하여 촉매를 제거하고 조질을 앞으로 이동시켰다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1302.7 [M]+; 확인 1303.
조질의 고체 (44 mg)를 무수 DCM (380 μL)에 용해하고 교반하면서 0℃로 냉각시켰다. TFA (125 μL)를 적가하고 반응을 실온으로 가온도록 두었다. LCMS는 1.5시간 후 Boc기가 완전히 제거되었음을 보여 주었으며, 이 시점에서 반응을 감압 하에서 농축하고 역상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 71.7 (12.9 mg, 3 단계에 걸쳐 72 % 수율)을 산출했다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1046.63 [M]+; 확인 1047.3.
N-석신이미딜 3-말레이미도프로피오네이트 (3.3 mg, 12.3 μmol)를 DMF (0.3 mL)에 넣고 화합물 71.7 (12.9 mg, 11.2 μmol)을 함유한 플라스크에 첨가했다. N,N-디이소프로필에틸아민 (12 μL, 67 μmol)을 첨가하고 반응을 N2에서 1 시간 동안 교반했다. 반응을 DMSO에 넣고 분취용 LC로 정제하여 화합물 71 (11 mg, 75 %)을 얻었다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1298.6 [M]+; found 1298.3, RT = 1.73 min.
화합물 71.6은 Hamilton J.Z., 등 Improving Antibody-Tubulysin Conjugates through Linker Chemistry and Site-Specific Conjugation. ChemMedChem 2020.에 기술된 방법을 사용하여 합성했다.
실시예 28: 트리펩타이드 기반 항체 약물 접합체의 생체 내 호지킨 림프종 암세포 세포 독성.
실시예 27의 화합물 71의 일반적인 절차 및 항체 cAC10에 따라 약 4의 약물 항체 비율 (DAR)을 갖는 항체 약물 접합체를 제조했다. ADC는 호지킨스 림프종 L540cy 세포주의 세포를 SCID 마우스에 이식하는 이종 이식 모델에서 시험되었다. ADC는 실시예 13의 절차에 따라 0.4 mg/kg 용량으로 투여하였다. 도 28에 도시된 바와 같이, 화합물 71과 cAC10 항체의 혼합 4-로드 항체 약물 접합체는 적어도 cAC10만큼 효능이 있다. 실시예 29: 튜불리신 약물-링커 (화합물 72)의 합성
화합물 72는 tert-부틸 ((S)-1-(((S)-1-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트로 시작하여 위에서 설명한 일반적인 절차 및 아래의 반응식에 따라 합성했다:
화합물 72.2: 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 456.15 (M+H)+ , 확인 456.10; 화합물 72.4: 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1004.32 (M)+ , 확인 1004.83; 화합물 72: 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1155.4 (M)+ , 확인 1155.2, RT = 1.73 min.
실시예 30: 항-GPNMB 생체 내 연구
재료
다음 실시예에 설명된 WM266-4 세포주는 세포를 획득한 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC)에서 지정한 조건에 따라 배양 상태를 유지했다.
생체 내 활성 연구
세포주 유래 이종 이식 치료 실험의 경우, 25% 매트리젤 HC에 2.5x106 WM266-4 세포 (ATCC)를 5 내지 8마리의 암컷 누드 (nu/nu) 마우스에 피하주사하였다 (Envigo). 마우스를 무작위로 연구 그룹으로 나누고 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험 약물을 투여했다. 종양의 부피가 500 내지 1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 너비)을 사용하여 계산했다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성이 관찰되지 않았다. 모든 동물 절차는 미국실험동물관리평가인증협회 (Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)의 인증을 받은 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 수행되었다.
hCR011 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 인간화 항-GPNMB 항체 hCR011과 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (hCR011-1006) 또는 dLAE-MMAE (hCR011-7092)를 접합한 항종양 활성 (도29)이 입증되었다. 치료하지 않은 마우스에 비해 hCR011-7092 및 hCR011-1006의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다. 이는 비특이적 IgG1 항체가 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물)와 접합된 경우 (hIgG1-1006) 또는 dLAE-MMAE (hIgG1-7092)에서 관찰된 생체 내 항종양 활성의 부족과 대조적이다 (도 29).
실시예 31: 항-CD228 생체 내 연구
재료
다음 실시예에 기술된 A2058 세포주는 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC)으로부터 획득하였고, ATCC가 지정한 조건에 따라 배양을 유지하였다.
생체 내 활성 연구
세포주 유래 이종이식 치료 실험을 위해, 25% 매트리겔 HC에 2.5x105 세포 (ATCC)를 5 내지 8마리의 암컷 누드 (nu/nu) 마우스 (Envigo)에 피하 주사하였다. 마우스를 무작위로 연구 그룹으로 나누고 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험약을 투여했다. 종양의 부피가 500 내지 1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 폭)을 사용하여 계산했다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성은 관찰되지 않았다. 모든 동물 절차는 미국실험동물관리평가인증협회 (Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)의 인증을 받은 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받은 프로토콜에 따라 수행되었다.
hL49 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 인간화 항-CD228 항체 hL49와 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (hL49-1006) 또는 dLAE-MMAE (hL49-7092)를 접합한 항종양 활성 (도 30)이 입증되었다. 치료하지 않은 마우스에 비해 hL49-7092 및 hL49-1006의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다.
실시예 32: 항-ανβ6 생체 내 연구
물질
다음 실시예에 기술된 세포주들은 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC)에 의해 지정된 조건에 따라 배양을 유지하였다. 디트로이트 562 세포주, HPAFII 세포주 및 BxPC3 세포주는 ATCC로부터 입수하였다.
생체 내 활성 연구
세포주 유래 이종 이식의 치료 실험을 위해, 5x106 세포 (ATCC)를 암컷 누드 (nu/nu) 마우스 (Envigo)의 오른쪽 옆구리에 피하 주사하여 BxPC3, 디트로이트 562 및 HPAF-II 연구를 수행하였다. 마우스를 무작위로 연구 그룹 (N=5 내지 8)으로 나눈 후 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험약을 투여했다. BxPC3 및 디트로이트 562 연구의 경우, 동물에게 1주일 간격으로 두 번 추가로 투여했다. 종양의 부피가 750 내지 1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 너비)을 사용하여 계산했다. 지속적인 퇴행을 보인 마우스는 이식 후 약 40 내지 65일에 희생시켰다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성은 관찰되지 않았다. 모든 동물 실험은 미국실험동물관리평가인증협회가 인증한 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 수행되었다.
h2A2 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 인간화 항-ανβ6 항체 2A2와 mc-vc-MMAE (항체당 평균 4개 약물) (h2A2-1006) 또는 mp-dLAE-MMAE (h2A2-7092)를 접합한 항종양 활성은 입증되었다 (도 31 내지 33). 치료하지 않은 마우스에 비해 h2A2-mp-dLAE-MMAE 및 h2A2-mc-vc-MMAE의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다.
실시예 33: 항-LIV1 생체 내 연구
재료
다음 실시예에 기술된 세포주들은 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC), 국립 암 연구소 (NCI) 또는 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany (DMSZ)가 지정한 조건에 따라 배양을 유지하였다.
생체 내 활성 연구
세포주 유래 이종 이식의 치료 실험을 위해, 5x106 세포 (ATCC)를 5 내지 8마리의 암컷 누드 (nu/nu) 마우스 (Envigo)에 피하 주사하여 MCF7, PC3 및 Hela-J 연구를 수행하였다. 마우스를 무작위로 연구 그룹으로 나누고 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험약을 투여했다. 종양의 부피가 500 내지 1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 너비)을 사용하여 계산했다. 지속적인 퇴행을 보인 마우스는 이식 후 40 내지 65일경에 종료되었다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성은 관찰되지 않았다. 모든 동물 실험은 미국실험동물관리평가인증협회가 인증한 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 수행되었다.
hLIV22 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 인간화 항-LIV1 항체 hLIV22와 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (hLIV22-1006) 또는 dLAE-MMAE (hLIV22-7092)를 접합한 항종양 활성 (도 34 내지 36)이 입증되었다. 치료하지 않은 마우스에 비해 hLIV22-7092 및 hLIV22-1006의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다.
hLIV22 ADC와 골수 독성
중국 기원의 순진한 시노몰구스 원숭이 (각각 n=수컷 5마리/암컷 5마리 또는 n=암컷)에 hLIV22-1006 또는 hLIV22-7092(4)를 각각 6 또는 10 mg/kg의 단일 용량으로 투여했다. 연구 기간 내내 (투여 전부터 투여 후 4주까지) 표준 혈액학 평가를 위해 연속적인 혈액 샘플을 수집했다.
도 37은 hLIV22-7092 (또는 LIV1-트리펩타이드, 또는 hLIV22-dLAE-MMAE)를 10 mg/kg 단일 용량으로 투여하는 경우와 hLIV22-1006 (또는 LV, 또는 hLIV22-vcMMAE)을 6 mg/kg으로 투여하는 경우의 호중구 및 망상 적혈구 생성의 감소를 보여준다. 호중구 및 망상 적혈구 생산의 감소는 이러한 각 용량에서 hLIV22-7092 및 hLIV22-1006에서 유사한다.
실시예 34: 항-CD19 생체 내 연구
재료
다음 실시예에 기술된 세포주들은 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC), 미국 국립암연구소 (NCI) 또는 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany (DMSZ)가 지정한 조건에 따라 배양을 유지하였다. 라지 세포주는 ATCC에서 얻었다.
생체 내 활성 연구
세포주 유래 이종 이식의 치료 실험을 위해, 5x106 세포 (ATCC)를 라지 연구를 위해 암컷 SCID (CB17SC sp/sp) 마우스 (Taconic)의 우측 옆구리에 피하 주사했다. 마우스를 무작위로 연구 그룹 (N=5 내지 8)으로 나누어 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험 약물을 투여했다. 종양의 부피가 750 내지 1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 너비)을 사용하여 계산했다. 지속적인 퇴행을 보인 마우스는 이식 후 40 내지 65일경에 희생하였다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성은 관찰되지 않았다. 모든 동물 실험은 미국실험동물관리평가인증협회가 인증한 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 수행되었다.
hBU12 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 인간화 항-CD19 항체 hBU12와 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (hBU12-1006(4)) 또는 dLAE-MMAE (hBU12-7092(4))를 접합한 항종양 활성 (도 38)이 입증되었다. 치료하지 않은 마우스에 비해 hBU12-7092(4) 및 hBU12-1006(4)의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다.
실시예 35: 항-CD30 연구
재료
다음 실시예에 기술된 세포주는 미국 유형 배양 컬렉션 (ATCC), 미국 국립 암 연구소 (NCI) 또는 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany (DMSZ)가 지정한 조건에 따라 배양을 유지하였다. L540cy 세포주는 텍사스 대학교에서 얻었다. L428, DEL, 및 KMH2 세포주는 DSMZ에서, 카르파스 세포주는 유럽 인증 세포 배양 컬렉션을 통해 Sigma Aldrich 에서 얻었다. 카르파스 BVR 및 DEL BVR 세포주는 브렌툭시맙 베도틴 (https://cancerres.aacrjournals.org/content/74/19_Supplement/688)에 노출하여 시험관 내에서 생산되었다.
실시예 35A.
시험관 내 세포 독성 연구
ALCL 및 HL 세포주 (DEL, DELBVR8F9, Karpas, KMH2, L428, 및 L540cy)를 96웰, 투명 바닥, 검은색 벽의 조직 배양 처리된 플레이트 (Corning)에 150 uL 완전 성장 배지에 플레이트했다. 세포가 평형을 이룰 수 있도록 세포 플레이트를 37℃ 및 5% CO2에서 밤새 두었다. ADC를 해동하고 RPMI-1640 +10% 태아 소 혈청 (FBS)에서 4배 8포인트 직렬 희석액을 준비했다. 그런 다음 각 희석액 50 uL를 각 세포 플레이트에 삼중으로 첨가했다. 처리된 세포를 37℃ 및 5% CO2에서 96시간 동안 배양했다. 세포 생존력은 CellTiter-Glo® 시약 (PROMEGA)을 사용하여 검정했다. 원시 데이터는 비선형, 4-파라미터 곡선 적합 모델 [Y=하단 + (상단-하단)/(1+10^((LogEC50-X)*HillSlope)]을 사용하여 Graphpad Prism (샌디에고, CA)에서 분석했다.
cAC10 vcMMAE 및 dLAE ADC의 시험관 내 세포 독성 효능은 유사하다
키메라 항-CD30 항체 cAC10 (본 명세서에서는 브렌툭시맙이라고도 함)과 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (cAC10-1006) 또는 dLAE-MMAE (cAC10-7092)가 접합된 cAC10의 세포 독성 활성은 시험관 내 CD30 발현에 의존하는 것으로 입증되었다. cAC10-1006 및 cAC10-7092로 처리한 CD30 발현 세포주에서 유의미한 세포 사멸이 관찰되었다 (도 39a 내지 e). 또한, 비표적 항체 (h00)는 vcMMAE 또는 dLAE-MMAE에 접합된 경우 이들 세포의 생존에 최소한의 영향을 미쳤다 (도 39a 내지 e). 마지막으로, CD30 발현이 결여된 세포주인 DELBVR의 생존력은 vAC10-1006 또는 cAC10-7092로 처리한 세포와 비표적 ADC로 처리한 세포와 비슷했다 (도 39f). 양성 대조군으로 세포를 유리 MMAE (SGN-1010)로 처리하여 모든 세포주가 방출된 약물에 민감하다는 것을 입증했다. 도 39에서 볼 수 있듯이 이러한 데이터를 종합하면, cAC10-dLAE는 암 세포주에 대해 브렌툭시맙-베도틴 (cAC10-1006)과 유사한 CD30 특이적 효능을 나타내며, 환자에게도 유사한 효능을 나타낼 수 있음을 시사한다.
실시예 35B.
시험관 내 인간 골수 CFU-GM 검정
인간 골수 단핵 세포 샘플을 ReachBio LLC로부터 획득하여 rhIL-3 (10 ng/mL), rhSCF (50 ng/mL) 및 rhGM-CSF (10 ng/mL)를 함유하는 메틸셀룰로스 배지에서 유지했다. 인간 골수 단핵 세포를 ADC와 혼합하여 rhIL-3, rhSCF 및 rhGM-CSF가 함유된 메틸셀룰로오스 배지에 직접 첨가했다. ADC를 100, 30, 10, 3, 1, 0.1, 0.01 및 0.001 μg/mL에서 3중으로 시험했다. 37℃, 5% CO2에서 14 내지 16일 동안 배양한 후 각 플레이트의 콜로니 수를 결정하여 IC50 값을 결정했다.
인간 골수 CFU-GM에 대한 cAC10 ADC의 활성
인간 골수 골수성 전구세포에 대한 vcMMAE (cAC10-1006) 또는 dLAE-MMAE (cAC10-7092)와 접합된 키메라 항-CD30 항체의 시험관 내 세포 독성이 도 40에 입증되었다. cAC10-1006에 비해 cAC10-7092에서 세포 독성의 감소 및 IC50 값에서의 7.5배 증가한 것으로 관찰되었다 (표 8-1). 도 40에 표시된 바와 같이, dLAE-MMAE (h00-7092)에 접합된 비표적 항체는 비표적 vcMMAE ADC (h00-1006)에 비해 골수성 전구세포에 대한 독성이 감소한 것으로 나타났다. 이는 dLAE-MMAE 페이로드가 브렌툭시맙-베도틴 (cAC10-1006)에 비해 골수 독성을 감소시킬 수 있음을 시사한다.
실시예 35C.
면역원성 세포 사멸 검정의 특징
면역원성 세포 사멸을 조사하는 실험의 경우, 시험 물품으로 처리된 MIA-PaCa2 세포로부터의 HMGB1 및 ATP 방출은 ADC에 24시간 노출된 후 측정되었다. 이 검정에서는 12웰 조직 배양 플레이트에서 MIA-PaCa2 세포를 약 50% 합류까지 배양한 다음 1 ug/mL의 시험 물품으로 처리했다. 24시간 후, 상층액을 수집하여 ATP 및 HMGB1 분석을 위해 분리했다. ATP 방출은 수집된 상층액에서 Promega의 CellTiter-Glo 시약을 사용하여 측정했다. 수집된 상청액에서 제조업체의 지침에 따라 TECAN의 HMGB1 express ELISA를 사용하여 HMGB1 방출을 측정했다.
cAC10-7092에 의한 면역원성 세포 사멸 (ICD)의 유도
MIA-PaCa2 세포는 CD30을 발현하지 않기 때문에, 각 접합체당 평균 4개의 약물을 vcMMAE (수용체1-1006) 또는 dLAE-MMAE (수용체1-7092)와 접합된, 발현된 표면 수용체 (수용체-1 Ab)를 표적으로 하는 항체를 사용했다. 면역원성 세포 사멸과 관련된 두 가지 DAMP인 ATP 및 HMGB1의 방출은 수용체1-1006, 수용체1-7092 또는 1006에 접합된 비표적 항체로 24시간 동안 처리한 MIA-PaCa2 세포에서 측정되었다. 수용체1-7092는 ATP 방출을 배경 대비 약 4배 증가시켰고 (도 41a), HMGB1 방출을 배경 대비 약 2배 증가시켰다 (도 41b). 이러한 데이터를 종합하면, vcMMAE와 dLAE-MMAE 페이로드는 모두 면역원성 세포 사멸을 유도하고 환자에서 항종양 면역 반응을 증가시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 35D.
생체 내 항종양 활성 연구
세포주 유래 이종 이식에서 항종양 활성을 평가하기 위해, L540cy 연구 및 카르파스:카르파스 BVR 연구의 경우 암컷 SCID (CB17SC sp/sp) 마우스 (Taconic), 및 L428 및 KMH2 연구의 경우 암컷 NSG (NOD scid 감마) 마우스 (JAX)에 5x106 세포를 오른쪽 옆구리에 피하 주사했다. 마우스를 무작위로 연구 그룹 (N = 5 내지 8)으로 나누어 종양이 약 100 mm3에 도달하면 복강 내 주사를 통해 시험 물품을 투여했다. 종양의 부피가 750-1000 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 종양 부피는 공식식 (부피 = ½ x 길이 x 너비 x 너비)을 사용하여 계산했다. 지속적인 퇴행을 보인 마우스는 이식 후 약 40 내지 65일에 희생시켰다다. 모든 이종 이식 연구에서 시험 물품으로 치료한 마우스에서 체중 감소 또는 치료 관련 독성은 관찰되지 않았다. 모든 동물 실험은 미국실험동물관리평가인증협회가 인증한 시설에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 수행되었다.
cAC10 ADC의 생체 내 항암 활성
생체 내에서 vcMMAE (항체당 평균 4개 약물) (cAC10-1006) 또는 dLAE-MMAE (cAC10-7092)와 접합한 키메라 항-CD30 항체 cAC10 (이하, 브렌툭시맙이라고도 함)의 항종양 활성이 입증되었다 (도 42 및 43). 도 42에 표시된 바와 같이, 치료하지 않은 마우스에 비해 cAC10-7092 및 cAC10-1006의 종양 성장 지연 또는 종양 퇴행이 현저하게 관찰되었다. 이러한 데이터는 cAC10-7092가 림프종 동물 모델에서 브렌툭시맙-베도틴 (cAC10-1006)과 유사한 효능을 보이며 효과적임을 나타낸다.
실시예 35E.
래트에서의 생체 내 장기 독성 연구
매칭 용량 연구에서, Sprague-Dawley 랫트에 차량 대조군 (식염수) 또는 시험용 ADC 10 mg/kg을 1회 정맥 주사했다. 투여 4일 후 완전한 부검을 실시하여 주요 장기를 포르말린에 고정하고 파라핀에 묻은 후 유리 슬라이드에 절편화하여 염색한 후 공인 수의병리학자가 현미경으로 관찰했다. 현미경 소견의 심각도는 (0)=영향 없음, (1)=최소, (2)=경증, (3)=중등도, (4)=중증 척도를 사용하여 점수를 매겼다. MTD에서 각 ADC를 평가하기 위해, 스프래그-도울리 래트에게 차량 대조군(식염수), 15 mg/kg의 h00-1006 또는 30 mg/kg의 h00-7092를 1회 정맥주사했다. 투여 4일 후 완전한 부검을 실시하고 위에서 설명한 대로 장기를 샘플링하여 적출했다.
래트에서 트리펩타이드 ADC의 생체 내 장기 독성 비교 평가.
CD30 표적 항체인 cAC10은 설치류 CD30과 교차 반응하지 않기 때문에, 비결합 대조군 (h00) 항체를 래트의 비표적 독성 평가를 위한 합리적인 대리물로 사용했다. 연구는 10 mg/kg의 일치 용량 또는 각각 최대 내약 용량인 15 mg/kg 또는 30 mg/kg에서 vcMMAE (h00-1006) 또는 dLAE-MMAE (h00-7092)와 접합된 비표적 ADC의 독성을 비교하기 위해 수행되었다. 시험물질에 의해 유발된 변화 (즉, 비히클 대조군과 다른)가 있는 장기는 표 8-2 (일치 용량에서의 래트 독성)에 나와 있다. 시험 물품으로 인한 변화의 중증도 및 발생률은 10 mg/kg H00-1006에 비해 10 mg/kg H00-7092 투여 후 유의하게 감소했다. 또한, h00-1006과 h00-7092의 용량 제한 독성을 최대 내약 용량 (MTD, 사망을 유발하지 않고 투여할 수 있는 최고 용량으로 정의됨)으로 각 ADC를 투여하여 비교했다. 시험물질로 인한 변화 (즉, 비히클 대조군과는 다른)가 있는 장기는 표 8-3 (MTD에서의 래트 독성)에 나와 있다. 시험물질로 인한 변화의 표적 장기, 중증도 및 발생률은 30 mg/kg h00-7092 투여 후 15 mg/kg h00-1006과 유사했으며, 이는 h00-7092의 단일 용량이 h00-1006의 2배 용량에서 내약성을 나타냄을 입증된다.
실시예 35F.
시험관 내 신경돌기 수축 검정
시험관 내 신경돌기 수축 검정의 경우, 20,000 내지 25,000개의 일차 인간 뉴런 세포 (ScienCell Research #1520)를 인간 뉴런 배지 (ScienCell Research #1521)의 96 웰 플레이트에 웰당 플레이트하고 4일 동안 성장하도록 하였다. 신경돌기 배양이 확립된 후, 일반 배지 또는 100% 혈청 (ATB biologics S11550H)에 시험 물품을 추가한다. 그런 다음 72시간 동안 뉴런 배양을 이미지화하고, 처리하지 않은 대조군과 비교하여 신경돌기 길이의 감소로 수축을 측정한다. 세포를 1% 파라포름알데하이드에 고정하고 0.025% Triton-X로 PBS에서 세척한 다음 β-튜불린에 대해 염색한다.
신경돌기 수축은 vcMMAE에 비해 dLAE-MMAE를 사용할 때 감소한다.
vcMMAE (h00-1006)와 접합된 동일한 항체에 비해 dLAE-MMAE (h00-7092)와 접합된 비표적 항체로 처리한 신경돌기 배양은 수축이 감소했다 (도 44a 내지 c). 비특이적 ADC 흡수를 증가시키는 것으로 생각되는 50% 혈청을 추가한 결과, h00-1006의 수축이 증가했다 (도 44d). 대조적으로, 혈청을 검정 배지에 포함시켰을 때 h00-7092 활성은 변하지 않았다 (도 44d). 이러한 데이터는 cAC10-7092가 원발성 신경돌기에 대한 독성을 감소시켰으며, cAC10-7092가 브렌툭시맙-베도틴 (cAC10-1006)에 비해 환자에서 말초 신경병증을 유발할 가능성이 적을 수 있음을 시사한다.
비인간 영장류의 생체 내 내약성 및 장기 독성 연구
사이노몰구스 원숭이를 대상으로 3주마다 10 mg/kg씩 2회 반복 투여하여 cAC10-7092(4)의 독성을 평가하기 위한 연구를 수행했다. 동물은 연구 1일째와 22일째에 투여되었다. 원숭이에 비히클 대조군 (20mM 글루탐산, pH 4.5) 또는 ADC를 투여하고 두 번째 투여 1주일 후 안락사시켰다. 완전한 부검을 실시하고 주요 장기를 포르말린에 고정하고 파라핀에 내장한 후 유리 슬라이드에 절편화하여 염색한 후 공인 수의병리학자가 현미경으로 조사했다. 현미경 소견의 중증도는 다음 척도를 사용하여 점수를 매겼다: (-) = 영향 없음, (1) = 최소, (2) = 경미, (3) = 중등도, (4) = 중증. 제2 연구는 시험물품을 단일 투여한 동물의 호중구에 미치는 영향을 평가하기 위해 수행되었다.
실시예 35G.
비인간 영장류에서 cAC10-7092 ADC의 생체 내 내약성 및 장기 독성 평가
항체당 평균 4개의 약물로 cAC10-7092의 독성을 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 사이노몰구스 원숭이에게 3주 마다 1일째, 22일째 2회에 걸쳐 10 mg/kg을 투여하고 29일차에 안락사시킨 결과, 시험물품 관련 해부학적 병리 소견은 골수 내 성숙 골수 세포의 중등도의 감소, 림프 기관 (림프절, 비장, 및 흉선)의 림프구 최소 내지 중등도의 감소, 난소 난포의 최소 내지 경미한 감소/부재가 관찰되었다. 따라서 3주마다 10 mg/kg의 cAC10-7092(4)를 2회 (q3wx2)에 걸쳐 투여한 결과, 경미에서 중등도의 혈액학적 소견과 함께 내약성을 보였다.
이전 연구에서 사이노몰구스 원숭이에서 cAC10-1006의 최고 비중증 독성 용량 (HNSTD)은 3주마다 투여했을 때 3 mg/kg이었으며, 더 높은 용량 (6 mg/kg)은 내약성이 없는 호중구 감소증을 초래했다. 이와 대조적으로, cAC10-7092에 대해 시험한 최고 용량인 10 mg/kg q3wx2는 경증에서 중등도의 호중구 감소증으로 내약성을 보였다. 이는 cAC10-7092로 치료할 경우 브렌툭시맙-베도틴 (cAC10-1006)에 비해 호중구 감소증이 감소하여 내약성이 더 우수할 수 있음을 시사한다.
실시예 36: 4차 염: mp-트리펩타이드-AE 및 mc-VC-AE
화합물 73 내지 77의 4차 암모늄염 기반 링커의 합성을 위한 일반적인 절차는 아래의 반응식을 따른다:
합성을 위해 0.76 mmol/g의 로딩으로 상업적으로 구입한 H-Glu(OtBu)-2-ClTrt 수지를 사용했다. 수지 (1068 mg, 0.81 mmol)를 프릿 주사기에서 취하고 건조 DMF로 부풀렸다. 바이알에 HATU (3 equiv), Fmoc-Ser(tBu)-OH (3 equiv,) 및 DMF를 첨가한 후 DIPEA (6 equiv)를 첨가했다. 용액을 1분 동안 교반한 후 주사기로 수지에 첨가했다. 주사기를 와류 상태에서 진탕했다. 반응은 수지의 분취액을 꺼내고 DCM 중 5% TFA로 절단하여 모니터링했다. 샘플은 LC-MS로 분석했다. 완료 후, 수지를 DMF로 세척하고 DMF 중 20% 피페리딘으로 Fmoc을 제거 (3 x 3분)한 다음 6 X DMF로 세척했다. 이 단계에서 수지의 절반 (0.4 mmol)이 이월되었다. 다음 아미노산을 첨가하기 위해 바이알에 HATU (3 equiv), Fmoc-Ala-OH (3 equiv), 및 DMF를 첨가한 후 DIPEA (6 equiv)를 첨가했다. 용액을 1분 동안 교반한 후 주사기로 수지에 첨가했다. 주사기를 와류 상태에서 진탕했다. 반응은 수지의 분취액을을 꺼내고 DCM 중 5% TFA로 절단하여 모니터링했다. 샘플은 LC-MS로 분석했다. 완료 후, 수지를 DMF 및 DCM으로 세척했다. DCM 중 20% HFIP를 사용하여 생성물을 30분 동안 3회 절단했다. 각 30분 사이클 후, 절단된 물질을 차가운 에테르에 첨가했다. 이 물질은 추가 정제 없이 이월되었다.
(5S,8S,11S)-11-(3-(tert-부톡시)-3-옥소프로필)-8-(tert-부톡시메틸)-1-(9H-플루오렌-9-일)-5-메틸-3,6,9-트리옥소-2-옥사-4,7,10-트리아자도데칸-12-산 (0. 4 mmol, 조 물질), (4-아미노페닐)메탄올 (1.5 eq) 및 HATU (1.4 eq)를 자기 교반 바가 장착된 20 mL 바이알에 충전했다. 디메틸 포름아미드 (DMF) (1.3 mL)를 용기에 충전하고 고체가 용해될 때까지 교반했다. DIPEA (3 eq)를 반응물에 한 번에 충전했다. 반응물을 2시간 동안 rt 에서 교반했다. 완료되면 물 (6 mL)을 30분 동안 적가했다. 슬러리를 rt에서 1시간 동안 추가로 교반했다. 슬러리를 여과하고 물로 세척하여 고체를 얻었다. 고체를 DCM (5 mL)에 재용해하고 디에틸아민 (124 μL, 3 eq)을 용액에 첨가하고 rt에서 교반했다. LC-MS로 모니터링하여 반응이 완료되면 반응물을 증발기에서 농축했다. 조 물질을 최소량의 DMSO에 용해시킨 다음 C12 Phenomenex SynergiTM 4 μm Max-RP 80 Å, LC 컬럼 21mm x250mm을 장착한 Teledyne ISCO ACCQPrep HP150에서 역상 분취용 LC로 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 B)에 용출하여 정제했다. Tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((S)-2-아미노프로판아미도)-3-(tert-부톡시)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트가 고체로서 단리되었다 (51. 6 mg) 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 523.31 [M+1]+; 확인 = 523.6, 467.5 (-tBu기), 411.4 (-2tBu기).
N-석신이미딜 3-말레이미도프로피오네이트 (26.4 mg, 0.1 mmol)를 DMF (0.3 mL)에 취하고 tert-부틸 (S)-4-((S)-2-((S)-2-아미노프로판아미도)-3-(tert-부톡시)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (52 mg, 0.1 mmol)를 함유한 바이알에 첨가했다. N,N-디이소프로필에틸아민 (173.3 μL, 0.99 mmol)를 첨가하고 반응물을 아르곤 하에서 1시간 동안 교반했다. 반응물을 DMSO에 취하고 분취용 LC로 정제하여 tert-부틸 (S)-4-((S)-3-(tert-butoxy)-2-((S)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)프로판아미도)-5-((4-(하이드록시메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트/mp-Ala-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-PAB-OH (31.6 mg, 47%)를 수득했다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 674.34 [M+1]+; 확인 674.6.
N-메틸-2-피롤리돈 (NMP, 0.33 mL) 중 mp-Ala-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-PAB-OH (31 mg, 0.046 mmol) 용액을 0℃로 냉각시켰다. NMP (10 mL) 중 SOCl2 (6.9 μL, 0.09 mmol) 용액을 적가했다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. 혼합물을 얼음물에 붓고 DCM으로 추출했다. 합한 DCM 층을 황산나트륨 위에서 건조하고 여과하고 농축했다. tert-부틸 (S)-4-((S)-3-(tert-부톡시)-2-((S)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)-5-((4-(클로로메틸)페닐)아미노)-5-옥소펜타노에이트 / mp-Ala-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-paba-Cl을 고체로 얻었다 (19. 8 mg, 수율 62%). 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 692.31 [M+1]+; 확인 692.8.
오리스타틴 E (12.4 mg, 0.017 mmol)를 2- 부타논 (0.6 mL)에 용해시키고 mp-Ala-Ser (tBu)-Glu (OtBu)-paba-Cl (17. 5 mg, 0.025 mmol), 요오드화나트륨 (5 mg, 0.034 mmol) 및 DIPEA (6 μL, 0.034 mmol)를 바이알에 첨가했다. 반응물을 50℃에서 밤새 교반했다. 밤새 반응시킨 후, 반응물 바이알을 증발기에서 농축하고 조 물질을 농축하여 다음 단계로 이월했다.
조 물질에 수성 인산과 아세토니트릴의 1:1 혼합물을 첨가하였다. tert-부틸기의 탈보호는 매우 느린 것으로 관찰되었다. 반응은 LC-MS로 모니터링했다. 반응이 완료되면, 반응 혼합물을 아세토니트릴로 희석하고 C12 Phenomenex SynergiTM 4 μm Max-RP 80 Å, LC 컬럼 250 mm의 적절한 직경을 구비한 Teledyne ISCO ACCQPrep HP150에서 역상 분취용 LC로 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% 트리플루오로아세트산 (용매 B)으로 용출하여 정제했다. 생성물은 백색 고체 (10 mg, 42.5 % 수율)로 얻었다. 분석 UPLC-MS: m/z (ES+) 계산 1276.5 [M]+; 확인 1276.54.
화합물 73 내지76:
화합물 77:
다음 서열은 서열번호 943-952에 해당한다.
SEQUENCE LISTING <110> SEAGEN INC. <120> SELECTIVE DRUG RELEASE FROM INTERNALIZED CONJUGATES OF BIOLOGICALLY ACTIVE COMPOUNDS <130> 76168-20059.40 <140> Not Yet Assigned <141> Concurrently Herewith <150> US 63/221,295 <151> 2021-07-13 <150> US 63/162,786 <151> 2021-03-18 <150> US 63/162,781 <151> 2021-03-18 <150> US 63/162,776 <151> 2021-03-18 <150> US 63/162,773 <151> 2021-03-18 <150> US 63/162,660 <151> 2021-03-18 <150> US 63/162,653 <151> 2021-03-18 <150> US 63/163,012 <151> 2021-03-18 <150> US 63/163,017 <151> 2021-03-18 <160> 953 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Asp Tyr Tyr Ile Thr 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 2 Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 3 Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 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Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 8 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Val Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 9 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 9 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 10 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 10 Gln Ile Gln Leu Gln Gln 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Asn Arg Val 340 345 350 Phe Phe Lys Phe Leu Leu Ser Phe Leu Val Ala Leu Ala Val Gly Thr 355 360 365 Leu Ser Gly Asp Ala Phe Leu His Leu Leu Pro His Ser His Ala Ser 370 375 380 His His His Ser His Ser His Glu Glu Pro Ala Met Glu Met Lys Arg 385 390 395 400 Gly Pro Leu Phe Ser His Leu Ser Ser Gln Asn Ile Glu Glu Ser Ala 405 410 415 Tyr Phe Asp Ser Thr Trp Lys Gly Leu Thr Ala Leu Gly Gly Leu Tyr 420 425 430 Phe Met Phe Leu Val Glu His Val Leu Thr Leu Ile Lys Gln Phe Lys 435 440 445 Asp Lys Lys Lys Lys Asn Gln Lys Lys Pro Glu Asn Asp Asp Asp Val 450 455 460 Glu Ile Lys Lys Gln Leu Ser Lys Tyr Glu Ser Gln Leu Ser Thr Asn 465 470 475 480 Glu Glu Lys Val Asp Thr Asp Asp Arg Thr Glu Gly Tyr Leu Arg Ala 485 490 495 Asp Ser Gln Glu Pro Ser His Phe Asp Ser Gln Gln Pro Ala Val Leu 500 505 510 Glu Glu Glu Glu Val Met Ile Ala His Ala His Pro Gln Glu Val Tyr 515 520 525 Asn Glu Tyr Val Pro Arg Gly Cys Lys Asn Lys Cys His Ser His Phe 530 535 540 His Asp Thr Leu Gly Gln Ser Asp Asp Leu Ile His His His His Asp 545 550 555 560 Tyr His His Ile Leu His His His His His Gln Asn His His Pro His 565 570 575 Ser His Ser Gln Arg Tyr Ser Arg Glu Glu Leu Lys Asp Ala Gly Val 580 585 590 Ala Thr Leu Ala Trp Met Val Ile Met Gly Asp Gly Leu His Asn Phe 595 600 605 Ser Asp Gly Leu Ala Ile Gly Ala Ala Phe Thr Glu Gly Leu Ser Ser 610 615 620 Gly Leu Ser Thr Ser Val Ala Val Phe Cys His Glu Leu Pro His Glu 625 630 635 640 Leu Gly Asp Phe Ala Val Leu Leu Lys Ala Gly Met Thr Val Lys Gln 645 650 655 Ala Val Leu Tyr Asn Ala Leu Ser Ala Met Leu Ala Tyr Leu Gly Met 660 665 670 Ala Thr Gly Ile Phe Ile Gly His Tyr Ala Glu Asn Val Ser Met Trp 675 680 685 Ile Phe Ala Leu Thr Ala Gly Leu Phe Met Tyr Val Ala Leu Val Asp 690 695 700 Met Val Pro Glu Met Leu His Asn Asp Ala Ser Asp His Gly Cys Ser 705 710 715 720 Arg Trp Gly Tyr Phe Phe Leu Gln Asn Ala Gly Met Leu Leu Gly Phe 725 730 735 Gly Ile Met Leu Leu Ile Ser Ile Phe Glu His Lys Ile Val Phe Arg 740 745 750 Ile Asn Phe 755 <210> 932 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 932 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Leu Thr Ile Glu Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Gly Pro Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Val His Asn Ala His Tyr Gly Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly <210> 933 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 933 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Pro Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Thr Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 934 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 934 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Leu Thr Ile Glu Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Gly Pro Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Val His Asn Ala His Tyr Gly Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 935 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 935 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Pro Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Thr Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 936 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 936 Asp Tyr Tyr Met His 1 5 <210> 937 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 937 Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Gly Pro Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 938 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 938 His Asn Ala His Tyr Gly Thr Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 939 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 939 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Glu 1 5 10 15 <210> 940 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 940 Lys Ile Ser Thr Arg Phe Ser 1 5 <210> 941 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 941 Phe Gln Gly Ser His Val Pro Tyr Thr 1 5 <210> 942 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 942 Lys Gly Ala His Arg Pro Glu His 1 5 <210> 943 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 943 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Ile Gly His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ala 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Met Glu Leu Trp Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 944 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 944 Thr Ser Gly Met Gly Val Gly 1 5 <210> 945 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 945 His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ala Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 946 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 946 Met Glu Leu Trp Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 947 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 947 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Val Tyr Pro Phe Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 948 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 948 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His 1 5 10 <210> 949 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 949 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser 1 5 <210> 950 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 950 Phe Gln Gly Ser Val Tyr Pro Phe Thr 1 5 <210> 951 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 951 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Ile Gly His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ala 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Met Glu Leu Trp Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 952 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 952 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Val Tyr Pro Phe Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 953 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 953 Gly Lys Gly Gly

Claims (52)

  1. CD30을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  2. 제1항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 cAC10인, 항체-약물 접합체.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 920의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 921의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 922의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 923의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 924의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 925의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 926의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 927의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 926의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 927의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 928 또는 서열번호: 929의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 930의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  7. GPNMB에 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  8. 제7항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 894의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 895의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 896의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 897의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 898의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 899의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  9. 제7항 또는 제8항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL을 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 892의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 893의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 892의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 893의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  11. 제7항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 890의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 891의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  12. CD228을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  13. 제12항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 900의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 901의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 902의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 903의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 904의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 905의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL을 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 906의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 907의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  15. 제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL을 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 906의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 907의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  16. 제12항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 908의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 909의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  17. αvβ6를 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  18. 제17항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 914의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 915의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 916의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 917의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 918의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 919의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  19. 제17항 또는 제18항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL을 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 912의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 913의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  20. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 912의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 913의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  21. 제17항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 910의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 911의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  22. LIV1을 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  23. 제22항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 936의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 937의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 938의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 939의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 940의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 941의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 934의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 935의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  25. 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 934의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 935의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  26. 제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 932의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 933의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  27. CD19를 결합하는 항원 결합 단백질 또는 그 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 여기서 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고, 여기서:
    Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이며, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내고;
    아래첨자 nn은 1 내지 5의 숫자이고;
    아래첨자 a'는 0이고 A'는 부재하고;
    P1, P2, 및 P3은 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 갖고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단 -P3-P2-P1-는 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-이 아닌, 항체-약물 접합체.
  28. 제27항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 다음 6개의 HVR을 포함하는, 항체-약물 접합체:
    서열번호: 944의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
    서열번호: 945의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2;
    서열번호: 946의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
    서열번호: 948의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
    서열번호: 949의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및
    서열번호: 950의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
  29. 제27항 또는 제28항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 943의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖고 VL은 서열번호: 947의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는, 항체-약물 접합체.
  30. 제27항 내지 제29항에 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 VH 및 VL를 포함하고, 여기서 VH는 서열번호: 943의 아미노산 서열을 포함하고 VL은 서열번호: 947의 아미노산 서열을 포함하는, 항체-약물 접합체.
  31. 제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 서열번호: 951의 아미노산 서열을 포함하는 HC 및 서열번호: 952의 아미노산 서열을 포함하는 LC를 포함하는, 항체-약물 접합체.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 nn이 2인, 항체-약물 접합체.
  33. 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
    트리펩타이드의 P3 아미노산은 D-아미노산 배열이고;
    P2 및 P1 아미노산 중 하나는 소수성이 류신보다 낮은 지방족 측쇄를 갖고;
    P2 및 P1 아미노산 중 다른 하나는 음으로 하전된, 항체-약물 접합체.
  34. 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, P3 아미노산이 D-Leu 또는 D-Ala인, 항체-약물 접합체.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, P3 아미노산은 D-Leu 또는 D-Ala이고, P2 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp이고, P1 아미노산은 Ala, Glu, 또는 Asp인, 항체-약물 접합체.
  36. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, -P3-P2-P1-은 -D-Leu-Ala-Asp-, -D-Leu-Ala-Glu-, -D-Ala-Ala-Asp-, 또는 -D-Ala-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, -P3-P2-P1-이 -D-Leu-Ala-Glu-인, 항체-약물 접합체.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 항체-약물 접합체가 다음의 구조로 표시되거나:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염이고,
    여기서, Ab는 항원 결합 단백질 또는 그 단편이고, p는 1 내지 12의 숫자를 나타내는, 항체-약물 접합체.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 단일 클론 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 키메라 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질 또는 단편이 인간화 항체 또는 그 단편인, 항체-약물 접합체.
  42. 제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 단편이 Fab, Fab', Fv, scFv 또는 (Fab')2 단편으로부터 선택되는 것인, 항체-약물 접합체.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
  44. 유효량의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD30-발현 질환 또는 병태를 치료하는 방법.
  45. 유효량의 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 GPNMB-발현 질환 또는 병태를 치료하는 방법.
  46. 유효량의 제12항 내지 제16항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD228-발현 암을 치료하는 방법.
  47. 유효량의 제17항 내지 제21항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 αvβ6-발현 암을 치료하는 방법.
  48. 유효량의 제22항 내지 제26항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 LIV1-발현 암을 치료하는 방법.
  49. 유효량의 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항의 항체-약물 접합체를 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 CD19-발현 암을 치료하는 방법.
  50. 하기 화학식 1로 표시되는 리간드 약물 접합체 조성물:

    또는 이의 약학적으로 허용되는 염으로서, 여기서
    L은 리간드 유닛이고;
    LU는 링커 유닛이고;
    D'는 화학식 -LU-D'의 각 약물 링커 모이어티에서 1 내지 4개의 약물 유닛 (D)를 나타내고;
    아래첨자 p는 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 숫자이거나 약 4 또는 약 8이고,
    여기서 리간드 유닛은 항체 또는 항체의 항원-결합 단편으로부터 유래하고, 여기서 항체 또는 항원-결합 단편은 종양 조직의 항원에 선택적으로 결합하여 약물 유닛(들)을 유리 약물로 후속 방출할 수 있고,
    여기서 조성물의 각각의 리간드 약물 접합체 화합물에서 화학식 -LU-D'의 약물 링커 모이어티는 하기 화학식 1A의 구조를 갖거나:

    또는 이의 염이고,
    여기서 물결선은 L에 대한 공유 부착을 나타내고;
    D는 약물 유닛이고;
    LB는 리간드 공유 결합 모이어티이고;
    A는 제1 선택적 스트레처 유닛이고;
    아래첨자 a는 0 또는 1로, 각각 A의 부재 또는 존재를 나타내고;
    B는 선택적 분기 유닛이고;
    아래첨자 b는 0 또는 1로, 각각 B의 부재 또는 존재를 나타내고;
    LO는 2차 링커 모이어티이고, 여기서 2차 링커는 하기 화학식을 갖고;

    여기서 Y에 인접한 물결선은 약물 유닛에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고, A'에 인접한 물결선은 약물 링커 모이어티의 나머지 부분에 대한 LO의 공유 부착 부위를 나타내고;
    A'는 존재할 경우 제2 선택적 스트레처 유닛이고 B의 부재시 A의 하위 단위가 되고,
    아래첨자 a'는 0 또는 1로, 각각 A'의 부재 또는 존재를 나타내고,
    W는 펩타이드 절단 가능 유닛으로, 여기서 펩타이드 절단 가능 유닛은 서열 -P3-P2-P1-을 갖는 트리펩타이드를 포함하며, 여기서 P1, P2 및 P3는 각각 아미노산이고, 여기서:
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제1의 것은 음으로 하전되거나, 세린이고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제2의 것은 소수성이 류신보다 크지 않은 지방족 측쇄를 가지고 있거나, 글리신 또는 세린 또는 프롤린이고;
    아미노산 P1, P2 또는 P3 중 제3의 것은 소수성이 류신보다 낮거나, 프롤린이고,
    여기서, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제1의 것은 P1, P2, 또는 P3 중 임의의 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제2의 것은 나머지 두 개의 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 하나에 대응하고, 아미노산 P1, P2, 또는 P3 중 제3의 것은 마지막 남은 아미노산 P1, P2, 또는 P3에 대응하고,
    단, -P3-P2-P1-은 -Glu-Val-Cit- 또는 -Asp-Val-Cit-가 아니고;
    존재할 경우 각 Y는 자가 용해성 스페이서 유닛이고;
    아래첨자 y는 0, 1 또는 2로, 각각 Y의 부재 또는 1 또는 2개의 존재를 나타내고;
    아래첨자 q는 1 내지 3의 범위의 정수이고,
    단, 아래첨자 b가 0일 때 아래첨자 q는 1이고, 아래첨자 b가 1일 때 아래첨자 q는 2 또는 3이고;
    여기서 조성물의 리간드 약물 접합체 화합물은 화학식 A1의 구조를 갖고, 여기서 아래첨자 p는 아래첨자 p'로 대체되고, 여기서 아래첨자 p'는 1 내지 12, 1 내지 10 또는 1 내지 8의 정수이거나 또는 4 또는 8인, 리간드 약물 접합체 조성물.
  51. 제50항에 있어서, D는 다음으로 이루어진 군에서 선택되는 캄프토테신의 구조를 통합하고 있고

    여기서
    　RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 및 페닐-C1-C4 알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
    RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군에서 선택되고;
    각 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 하이드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 하이드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 하이드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 하이드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군에서 독립적으로 선택되거나, 또는
    RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여, 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NH-C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체를 갖는 5-, 6- 또는 7-원 고리를 형성하고;
    여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬, 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군에서 선택된 0 내지 3개의 치환체로 치환되는, 리간드 약물 접합체 조성물.
  52. 다음 구조를 갖는 화합물

    또는 이의 염을 제조하는 방법으로서,
    a) , 또는 이의 염을, 4-아미노벤질 알코올과 반응시킨 후 환원시켜 , 또는 이의 염을 형성하는 단계;
    b) 또는 이의 염을 , 또는 이의 염과 반응시킨 후 환원시켜 , 또는 이의 염을 형성하는 단계;
    c) 또는 이의 염을 3-말레이미도프로피온산과 반응시켜 , 또는 이의 염을 형성하는 단계; 및
    d) 또는 이의 염을 화합물 또는 이의 염으로 변환시키는 단계를 포함하는, 제조 방법.
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