BR112013027541B1 - Composição compreendendo nanotransportadores sintéticos tolerogênico - Google Patents

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Christopher J. Roy
Grayson B. Lipford
Roberto A. Maldonado
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Abstract

composição compreendendo nanotransportadores sintéticos tolerogênicos e forma de dosagem que a compreende a presente invenção se destina, pelo menos em parte, a composições compreendendo nanotransportadores sintéticos e imunossupressores que resultam em efeitos imunitários supressores. tais composições também podem compreender o antigênio e fornecer respostas imunitárias tolerogênicas específicas do antigênio.

Description

PEDIDOS RELACIONADOS
[0001] Este pedido reivindica o benefício, ao abrigo do 35 U.S.C. §119 do Pedido de Patente Provisória US No. 61/480,946, depositado em 29 de abril de 2011, 61/513, 514, depositado em 29 de julho de 2011, 61/531,147, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,153, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,164 , depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,168, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,175, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,180, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,194, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,204, depositado em 06 de setembro de 2011, 61/531,209, depositado em 6 de setembro de 2011, 61/531,215, depositado em 6 de setembro de 2011, cujos conteúdos são incorporados na sua totalidade neste documento a título de referência.
CAMPO DA INVENÇÃO
[0002] A presente invenção refere-se, pelo menos em parte, a composições compreendendo nanotransportadores sintéticos e imunossupressores que podem conferir supressão imunitária específica do antígeno específico, de preferência, respostas imunes tolerogênicas.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0003] As estratégias convencionais para gerar a imunossupressão associada com uma resposta imune indesejável são baseadas em medicamentos imunossupressores de ampla atuação. Além disso, de modo a manter a imunossupressão, a terapia do medicamento imunossupressor é, geralmente, uma condição de longa duração. Infelizmente, a utilização de imunossupressores de ampla atuação estão associadas com um risco de efeitos secundários graves, tais como tumores, infecções, nefrotoxicidade e desordens metabólicas. De acordo com esse fato, novas terapias imunossupressoras seriam benéficas.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0004] Em um aspeto, é conferida uma composição compreendendo (i) uma primeira população de nanotransportadores sintéticos acoplado a um imunossupressor, e (ii) um antígeno apresentável por APC. Em uma modalidade, o imunossupressor na composição está em uma quantidade eficaz para gerar uma resposta imunológica tolerogênica ao antígeno apresentável por APC. Em uma modalidade, o antígeno apresentável por APC está acoplado a nanotransportadores sintéticos da primeira população de nanotransportadores sintéticos. Em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC está acoplado a nanotransportadores sintéticos da segunda população de nanotransportadores sintéticos.
[0005] Em uma modalidade de realização, a primeira população e a segunda população são a mesma.
[0006] Em uma modalidade, a média de uma distribuição da dimensão das partículas, obtida usando dispersão dinâmica da luz, dos nanotransportadores sintéticos da primeira e/ou segunda populações é um diâmetro maior do que 100 nm. Em uma outra modalidade, o diâmetro é maior do que 150 nm. Em uma outra modalidade, o diâmetro é maior do que 200 nm. Em uma outra modalidade, o diâmetro é maior do que 250 nm. Em uma outra modalidade, o diâmetro é maior do que 300 nm.
[0007] Em uma modalidade, o imunossupressor compreende uma estatina, um inibidor de mTOR, um agente de sinalização de TGF-β, um corticosteroide, um inibidor da função mitocondrial, um inibidor de P38, um inibidor de NF-Kβ, um agonista de receptor de adenosina, um agonista da prostaglandina E2, um inibidor da fosfodiesterase 4, um inibidor de HDAC ou um inibidor do proteassoma. Em uma outra modalidade, o inibidor de mTOR é rapamicina ou um análogo da mesma.
[0008] Em uma modalidade, o antígeno apresentável por APC compreende um epitopos restrito a MHC de Classe I e/ou restrito a MHC de Classe II e/ou célula B. Em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC é uma proteína. Em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC é um polipeptídeo ou peptídeo compreendendo um epitopos restrito a MHC de Classe I e/ou restrito a MHC de Classe II e/ou célula B. Em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC é um lípido que se liga a CD1d. Em outra modalidade, o antígeno apresentável por APC é uma proteína terapêutica ou uma porção da mesma, um autoantígeno ou um alérgeno, ou está associado a uma doença autoimune, uma doença inflamatória, uma alergia, rejeição de órgão ou tecido ou doença do enxerto contra o hospedeiro.
[0009] Em uma modalidade, a carga de imunossupressor e/ou antígeno apresentável por APC em média ao longo da população dos primeiros e/ou segundos nanotransportadores sintéticos está entre 0,0001% e 50% (peso/peso). Em outra modalidade, a carga de imunossupressor e/ou o antígeno apresentável por APC em média ao longo da população dos primeiros e/ou segundos nanotransportadores sintéticos está entre 0,1% e 10% (peso/peso).
[00010] Em uma modalidade, os nanotransportadores sintéticos da primeira e/ou segunda populações de nanotransportadores sintéticos compreendem nanopartículas lipídicas, nanopartículas poliméricas, nanopartículas metálicas, emulsões à base de tensoativos, dendrímeros, futebolenos, nanofios, partículas do tipo vírus ou partículas peptídicas ou proteicas.
[00011] Em uma modalidade, quando os nanotransportadores sintéticos da primeira e/ou segunda populações de nanotransportadores sintéticos compreende nanopartículas poliméricas, as nanopartículas poliméricas compreendem polímero que é um polímero Pluronic com terminação não metóxi. Em outra modalidade, as nanopartículas poliméricas compreendem um poliéster, um poliéster acoplado a um poliéter, poliaminoácido, policarbonato, poliacetal, policetal, polissaca- rídeo, polietiloxazolina ou polietilenoimina. Em outra modalidade, o poliéster compreende um poli(ácido lático), poli(ácido glicólico), poli(ácido lático-co-glicólico), ou policaprolactona. Em outra modalidade, as nanopartículas poliméricas compreendem um poliéster e um poliéster acoplado a um poliéter. Em outra modalidade, o poliéter compreende polietilenoglicol ou polipropilenoglicol.
[00012] Em outra modalidade, as razões s de aspecto dos nanotransportadores sintéticos da primeira e/ou segunda populações de nanotransportadores sintéticos são maiores do que 1:1, 1:1,2, 1:1,5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7 ou 1:10.
[00013] Em outra modalidade, a composição também compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00014] Em outro aspeto, é fornecida uma forma de dosagem compreendendo qualquer uma das formas composições fornecidas.
[00015] Em outro aspeto, é conferido um método compreendendo a administração de qualquer uma das composições ou formas de dosagem aqui fornecidas a um sujeito. Em uma modalidade, o sujeito está com necessidade de tolerância específica para o antígeno. Em outra modalidade, o sujeito tem uma doença autoimune, uma doença inflamatória, uma alergia, doença enxerto contra o hospedeiro, rejeição de órgão ou de tecido ou sofreu ou irá sofrer transplante. Em uma outra modalidade, o sujeito recebeu, está recebendo ou irá receber uma proteína terapêutica contra a qual experimentou, está experimentando ou é esperado que experimente, uma resposta imune indesejada.
[00016] Em outra modalidade, qualquer das composições ou formas de dosagem fornecidas pode ser administrada em uma quantidade eficaz de modo a resultar em uma resposta imune tolerogênica específica ao antígeno apresentável por APC. Em outra modalidade, a forma de dosagem é administrada ao indivíduo de acordo com um protocolo que foi previamente mostrado que resulta em uma resposta imunológica tolerogênica específica ao apresentável por APC em um ou mais sujeitos testados.
[00017] Em outra modalidade de qualquer das composições ou formas de dosagem fornecidas, a composição pode gerar uma resposta imune desejada ou reduzir uma resposta imune indesejável, por exemplo, em um sujeito.
[00018] Em uma modalidade, o método também compreende o fornecimento ou a identificação do sujeito. Em outra modalidade, o método também compreende a avaliação da geração da resposta imunológica tolerogênica específica ao antígeno apresentável por APC no sujeito.
[00019] Em outra modalidade, a forma de dosagem é administrada por via intravenosa, transmucosa, intraperitoneal, oral, subcutânea, pulmonar, intranasal, intradérmica ou intramuscular. Em outra modalidade, a administração é efetuada por inalação ou administração intravenosa, subcutânea ou transmucosa.
[00020] Em outro aspecto, qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas pode se destinar a utilização em terapia ou profilaxia.
[00021] Em outra modalidade, qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas pode ser para utilização em terapia ou profilaxia em um sujeito que foi submetido, ou será submetido a transplante, ou recebeu, está recebendo ou irá receber, uma proteína terapêutica contra a qual experimentou, está experimentando ou é esperado que experimente, uma resposta imune indesejada.
[00022] Em outro aspecto, qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas pode se destinar a utilização em qualquer um dos métodos conferidos.
[00023] Em outro aspecto, qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas pode se destinar a utilização em um método de indução de uma resposta imunológica tolerogênica.
[00024] Em outro aspeto, qualquer uma das formas de dosagem conferidas pode se destinar a utilização em um método de profilaxia ou tratamento de uma doença autoimune, uma doença inflamatória, uma alergia, doença do enxerto contra hospedeiro ou uma resposta imune indesejada.
[00025] Em outro aspecto, qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas pode se destinar a utilização em um método de terapia ou profilaxia compreendo a administração por qualquer uma das vias conferidas neste documento.
[00026] Em um outro aspecto, é provida uma utilização de qualquer uma das composições ou formas de dosagem conferidas para a fabricação de um medicamento destinado a utilização em qualquer um dos métodos conferidos.
[00027] Em uma modalidade de qualquer das composições e métodos fornecidos neste documento, os antígenos são peptídeos. Esses antígenos, em algumas modalidades, compreendem pelo menos um epitopo, conforme descrito em qualquer localização deste documento, mas também pode compreender aminoácidos adicionais que flanqueiam uma ou ambas as extremidades do epitopo. Em modalidades, os antígenos compreendem uma proteína antigênica completa. Estes antígenos podem ser acoplados a nanotransportadores sintéticos.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[00028] A Fig. 1 confere um exemplo representativo de uma análise por citometria de fluxo das células Treg.
[00029] A Fig. 2 demonstra a indução específica do antígeno FoxP3+ em células Treg CD4+ CD25high por tDC com rapamicina encapsulada com nanotransportador em conjunto com peptídeo livre de ovalbumina (323-339).
[00030] A Fig. 3 mostra a indução específica do antígeno FoxP3+ em células Treg CD4+ CD25high.
[00031] A Fig. 4 mostra um efeito no número de células T efetoras específicas para o antígeno e a percentagem de células FoxP3+ com nanotransportadores sintéticos da invenção compreendendo imunossupressor (rapamicina ou sinvastatina).
[00032] A Fig. 5 mostra uma diminuição no número de células dos nodos linfáticos poplíteos com nanotransportadores sintéticos da invenção compreendendo imunossupressor (rapamicina ou sinvastatina).
[00033] A Fig. 6 demonstra uma redução no CD69, um marcador da ativação das células T, com a entrega do nanotransportador sintético da rapamicina imunossupressora.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[00034] Antes de descrever a presente invenção em detalhe, deve ser entendido que esta invenção não está limitada a materiais ou parâmetros de processo particularmente exemplificados, pois os mesmos podem obviamente variar. Também deve ser entendido que a terminologia usada aqui se destina somente a descrever modalidades particulares da invenção, não sendo pretendido que seja limitadora do uso de terminologia alternativa para descrever a presente invenção.
[00035] Todas as publicações, patentes e pedidos de patente aqui mencionados, quer supra ou infra, são incorporados por referência na sua totalidade, para todos os fins.
[00036] Tal como usado na presente descrição e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "uma" e "o/a" incluem referentes plurais, a menos que o conteúdo claramente dite em contrário. Por exemplo, referência a "um polímero" inclui uma mistura de duas ou mais dessas moléculas ou uma mistura de diferentes pesos moleculares de uma única espécie polimérica, referência a "um nanotransportador sintético" inclui uma mistura de dois ou mais desses nanotranspor-tadores sintéticos ou uma pluralidade desses nanotransportadores sintéticos, referência a "uma molécula de DNA" inclui uma mistura de duas ou mais dessas moléculas de DNA ou uma pluralidade dessas moléculas de DNA, referência a "um imunossupressor" inclui uma mistura de dois ou mais desses materiais ou uma pluralidade de moléculas imunossupressoras, e semelhantes.
[00037] Conforme utilizado neste documento, o termo "compreender" ou suas variações, como "compreende" ou "compreendendo", devem ser lidos como indicando a inclusão de qualquer inteiro (por exemplo, um aspecto, elemento, característica, propriedade, etapa ou limitação do método/processo) ou grupo de inteiros (por exemplo, aspectos, elementos, características, propriedades, etapas ou limitações do método/processo) recitados, mas não a exclusão de qualquer outro inteiro ou grupo de inteiros. Assim, como usado aqui, o termo "compreendendo" é inclusivo e não exclui inteiros ou etapas do método/processo adicionais não recitados.
[00038] Em modalidades de quaisquer das composições e métodos providos aqui, "compreendendo" pode ser substituído por "consistindo essencialmente de" ou "consistindo de". A frase "consistindo essencialmente de" é usada aqui para requerer o(s) inteiro(s) ou etapas especificados, bem como aqueles que materialmente não afetam o caráter ou função da invenção reivindicada. Conforme utilizado neste documento, o termo "consistindo" é usado para indicar a presença do inteiro (por exemplo, um aspecto, elemento, característica, propriedade, etapa ou limitação do método/processo) ou grupo de inteiros (por exemplo, aspectos, elementos, características, propriedades, etapas ou limitações do método/processo) recitados isoladamente.
A. INTRODUÇÃO
[00039] Conforme mencionado anteriormente, os imunossupressores convencionais atuais são de ampla atuação e geralmente resultam em uma regulação sistêmica global para baixo do sistema imune. As composições e métodos conferidos neste documento, permitem efeitos imunitários mais direcionados permitindo, por exemplo, a administração direcionada às células imunitárias de interesse. Desse modo, as composições e métodos podem alcançar imunossupressão de uma forma mais direcionada. Conforme mostrado nos Exemplos, as composições da invenção foram utilizadas com sucesso de modo a resultar na geração de células reguladoras e a reduzir a ativação das células T, conforme evidenciado pela redução de CD69.
[00040] Os inventores verificaram, inesperadamente e surpreendentemente, que os problemas e as limitações acima indicados podem ser superados pela prática da invenção divulgada neste documento. Em particular, os inventores descobriram inesperadamente que é possível fornecer composições e métodos relacionados que conferem supressão imunitária e, em algumas modalidades, efeito tolerogênico específico para o antígeno. As composições descritas neste documento são composições que compreendem 1) uma população de nanotransportadores sintéticos aos quais está acoplado um imunossupressor e 2) um antígeno que apresenta células apresentadoras de antígenos (APC). A absorção efetuada pelas APCs de tais composições é de modo conveniente in vivo e in vitro, de modo a deslocar a resposta imune a favor dos efeitos supressores imunitários (por exemplo, efeitos tolerogênicos), tais como desenvolvimento de células T reguladoras (Treg) específicas para as apresentadoras de antígenos (APC).
[00041] Em uma modalidade, o antígeno apresentável APC está acoplado ao mesmo nanotransportador sintético ao qual o imunossupressor está acoplado. Em outra modalidade, o antígeno apresentável APC está acoplado a um nanotransportador sintético diferente. Em ainda outra modalidade, o antígeno apresentável APC não está acoplado a um nanotransportador sintético. Em outra modalidade, o imunossupressor na composição está em uma quantidade eficaz para gerar uma resposta imunológica tolerogênica ao antígeno apresentável por APC.
[00042] Em ainda outra modalidade, a carga do imunossupressor em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos está entre 0,0001% e 50% (peso/peso). Em ainda outra modalidade, a carga do antígeno apresentável por APC em média ao longo de uma população dos nanotransportadores sintéticos está entre 0,0001% e 50% (peso/peso). De preferência, em algumas modalidades, a carga do imunossupressor, em média, ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos está, entre 0,1% e 10% (peso/peso) e/ou a carga do antígeno apresentável por APC, em média, ao longo de uma população de nanotransportadores sintéticos está entre 0,1% e 10% (peso/peso).
[00043] Em outro aspecto, são conferidas formas de dosagem de qualquer uma das composições aqui apresentadas. Tais formas de dosagem podem ser administradas a um sujeito com necessidade da mesma, tal como a sujeitos com necessidade de tolerância específica para o antígeno. Em uma modalidade, o sujeito é um que tem ou está em risco de vir a ter uma doença autoimune, uma doença inflamatória, rejeição de órgão ou tecido, doença do enxerto contra o hospedeiro ou uma alergia. Em uma outra modalidade, o sujeito é um que tenha sido submetido ou irá ser submetido a um transplante. Ainda em uma outra modalidade, o sujeito é um que tenha sido ou venha a ser tratado com um agente terapêutico que estimule uma resposta imune indesejada.
[00044] A invenção será, agora, descrita abaixo, com maiores detalhes.
B. DEFINIÇÕES
[00045] "Administrar" ou "administração" significa fornecer um material a um sujeito de uma forma que é farmacologicamente útil.
[00046] "Alérgenos" são quaisquer substâncias que possam provocar uma resposta imunológica indesejável (por exemplo, uma hipersensibilidade do Tipo 1) (ou seja, uma resposta ou reação alérgica) em um sujeito. Os alérgenos incluem, mas não estão limitados a, alérgenos de plantas (por exemplo, pólen, alérgeno de tasneira), alérgenos de insetos, alérgenos de picada de inseto (por exemplo, alérgenos de picada de abelha), alérgenos animais (por exemplo, os alérgenos dos animais de estimação, tais como os pelos de animais ou antígeno d 1 do pelo de gato), alérgenos de látex, alérgenos de bolor, alérgenos Fel de fungos, alérgenos de cosméticos, alérgenos de medicamentos, alérgenos alimentares, alérgenos de poeira, veneno de insetos, viroses, bactérias, etc. Os alérgenos alimentares incluem, mas não estão limitados a alérgenos do leite, alérgenos dos ovos, alérgenos dos frutos secos, (por exemplo, alérgenos dos amendoim ou das árvores de frutos secos, etc. (por exemplo, nozes, castanhas, etc.)), alérgenos do peixe, alérgenos de mariscos, alérgenos de soja, alérgenos de leguminosas , alérgenos de sementes e alérgenos do trigo. Os alérgenos da picada de inseto incluem alérgenos que são ou estão associados com picadas de abelhas, picadas de vespa, picadas de zangão, picadas de vespa, etc. Os alérgenos de insetos também incluem os alérgenos dos ácaros da poeira doméstica (ex.: antígeno Der P1) e os alérgenos da barata. Os alérgenos dos medicamentos incluem alérgenos que são ou estão associados com antibióticos, anti- inflamatórios, anestésicos, etc. Os alérgenos do pólen incluem alérgenos da grama, alérgenos das árvores, alérgenos das ervas daninhas, alérgenos das flores, etc. Os sujeitos que desenvolvem ou estão em risco de desenvolverem uma resposta imunológica indesejável para qualquer um dos alérgenos conferidos neste documento podem ser tratados com qualquer uma das composições e métodos aqui fornecidos. Os sujeitos que podem ser tratados por qualquer um dos métodos e composições conferidos também incluem aqueles que têm ou estão em risco de ter uma alergia a qualquer um dos alérgenos conferidos.
[00047] Uma "alergia" também aqui referida como uma "condição alérgica", é qualquer condição onde haja uma resposta imune indesejada (por exemplo uma hipersensibilidade do Tipo 1) (i.e., resposta ou reação alérgica). Tais substâncias são referidas aqui como "alérgenos". As alergias ou condições alérgicas incluem, mas não estão limitadas a, asma alérgica, febre do feno, urticária, eczema, alergias a plantas, alergias à picada da abelha, alergias a animais domésticos, alergia ao látex, alergias ao bolor, alergias a cosméticos, alergias alimentares, rinite alérgica ou coriza, reações alérgicas tópicas, anafilaxia, dermatite atópica, reações de hipersensibilidade e outras condições alérgicas. A reação alérgica pode ser o resultado de uma reação imune a qualquer alérgeno. Em algumas modalidades, a alergia é uma alergia alimentar. As alergias alimentares incluem, mas não estão limitadas a, alergias ao leite, alergias ao ovo, alergias os frutos secos, alergias ao peixe, alergia ao marisco, alergia à soja ou alergia ao trigo.
[00048] "Quantidade eficaz", no contexto de uma composição ou forma de dosagem para administração a um sujeito se refere a uma quantidade da composição ou da forma de dosagem que produz uma ou mais respostas imunes desejadas no sujeito, por exemplo, a geração de uma resposta imune tolerogênica. Em consequência, em algumas modalidades, uma quantidade eficaz é qualquer quantidade de uma composição conferida aqui que produz uma ou mais dessas respostas imunológicas desejadas. Essa quantidade pode se destinar a efeitos in vitro ou in vivo. Para finalidades in vivo, a quantidade pode ser tal que um médico crê poder ter um benefício clínico para um sujeito necessitado de tolerância específica do antígeno. Tais sujeitos incluem aqueles que têm ou estão em risco de ter uma doença inflamatória, uma doença autoimune, uma alergia, rejeição de órgão ou tecido ou doença do enxerto contra o hospedeiro. Tais sujeitos incluem aqueles que foram submetidos ou que irão sofrer um transplante. Tais sujeitos também incluem aqueles que têm experimentado, estão experimentando ou são esperados que experimentem uma resposta imune indesejada contra uma proteína terapêutica.
[00049] Quantidades eficazes podem envolver apenas reduzir o nível de uma resposta imunológica indesejada, apesar de, em algumas modalidades, envolver prevenir toda uma resposta imunológica indesejada. Quantidades eficazes também podem envolver retardar a ocorrência de uma resposta imunológica indesejada. Uma quantidade que é eficaz pode ser também uma quantidade de uma composição aqui conferida que produz um desfecho terapêutico desejado ou um resultado terapêutico desejado. De preferência, quantidades eficazes originam uma resposta imunológica tolerogênica a um antígeno em um sujeito. A obtenção de quaisquer dos anteriores pode ser monitorada por métodos de rotina.
[00050] Em algumas modalidades de qualquer uma das composições e métodos conferidos, a quantidade eficaz é tal que a resposta imunológica desejada persiste no sujeito por pelo menos 1 semana, pelo menos 2 semanas, pelo menos 1 mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 4 meses, pelo menos 5 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 9 meses, pelo menos 1 ano, pelo menos 2 anos, pelo menos 5 anos, ou mais. Em outras modalidades de qualquer uma das composições e métodos conferidos, a quantidade eficaz é tal que produz uma resposta imunológica desejada mensurável, por exemplo, um decréscimo mensurável em uma resposta imunológica (por exemplo, para um antígeno específico), por pelo menos 1 semana, pelo menos 2 semanas, pelo menos 1 mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 4 meses, pelo menos 5 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 9 meses, pelo menos 1 ano, pelo menos 2 anos, pelo menos 5 anos, ou mais.
[00051] Quantidades eficazes irão depender, obviamente, do sujeito particular sendo tratado; da gravidade de uma condição, doença ou distúrbio; dos parâmetros do paciente individual, incluindo a idade, condição física, estatura e peso; da duração do tratamento; da natureza da terapia concorrente (se existir); da via de administração específica e fatores afins, no âmbito do conhecimento e perícia do profissional de saúde. Esses fatores são bem conhecidos para aqueles com competência comum na arte e podem ser abordados com, não mais do que, experimentação de rotina. Geralmente é preferível que uma dose máxima seja utilizada, isto é, a dose máxima segura de acordo com a opinião médica. Os profissionais entenderão, todavia, que um paciente pode insistir em uma dose mais baixa ou dose tolerável por motivos médicos, motivos psicológicos ou virtualmente por qualquer outro motivo.
[00052] Em geral, doses dos imunossupressores e/ou antígenos nas composições da invenção podem variar desde cerca de 10 μg/kg até cerca de 100 000 μg/kg. Em algumas modalidades, as doses podem variar de cerca de 0,1 mg/kg até cerca de 100 mg/kg . Em ainda outras modalidades, as doses podem variar desde cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, cerca de 25 mg/kg até cerca de 50 mg/kg, cerca de 50 mg/kg até cerca de 75 mg/kg ou cerca de 75 mg/kg até cerca de 100 mg/kg. Em alternativa, a dose pode ser administrada com base no número de nanotransportadores sintéticos que proporcionam a quantidade desejada de imunossupressores e/ou antígenos. Por exemplo, as doses úteis incluem mais de 106, 107, 108, 109 ou 1010 nanotransportadores sintéticos por dose. Outros exemplos de doses úteis incluem desde cerca de 1x106 a cerca de 1x1010, cerca de 1x107 a cerca de 1x109 ou cerca de 1x108 a cerca de 1x109 nanotransportadores sintéticos por dose.
[00053] "Antígeno" significa um antígeno de células B ou um antígeno de células T. O termo "tipo(s) de antígeno(s)" significa moléculas que partilham as mesmas, ou substancialmente as mesmas, características antigênicas. Em algumas modalidades, antígenos podem ser proteínas, polipeptídeos, peptídeos, lipoproteínas, glicolípidos, polinucleotídeos, polissacarídeos ou estão contidos ou são expressos em células. Em algumas modalidades, como quando os antígenos não estão bem definidos ou caracterizados, os antígenos podem estar contidos em uma preparação celular ou tecidual, detrito celular, exossomos celulares, meios condicionados, etc. Um antígeno pode ser combinado com os nanotransportadores sintéticos na mesma forma que provoca, em um sujeito exposto à mesma, uma resposta imunológica indesejada, mas também pode ser um respectivo fragmento ou derivado. Todavia, quando se tratar de um fragmento ou derivado, uma resposta imunológica desejada à forma à qual é exposto esse sujeito é o resultado preferível com as composições e métodos conferidos.
[00054] "Antígeno-específica" refere-se a qualquer resposta imunológica que resulta da presença do antígeno, ou sua porção, ou que gera moléculas que reconhecem ou se ligam especificamente ao antígeno. Por exemplo, quando a resposta imunológica consiste em produção de anticorpos específicos para um antígeno, são produzidos anticorpos que se ligam especificamente ao antígeno. Como outro exemplo, quando a resposta imunológica consistir em proliferação e/ou atividade de células B ou células T específicas para antígenos, a proliferação e/ou atividade resulta do reconhecimento do antígeno, ou sua porção, isoladamente ou em complexo com moléculas de MHC, células B, etc.
[00055] "Antígenos associados" com uma doença, distúrbio ou condição, conferidos neste documento, são os antígenos que podem gerar uma resposta imune indesejável contra, como um resultado de, ou em conjugação com a doença, distúrbio ou condição; a causa da doença, o distúrbio ou a condição (ou um sintoma ou efeito do mesmo); e/ou pode gerar uma resposta imune indesejável, que é um sintoma, resultado ou efeito da doença, do distúrbio ou da condição. De preferência, em algumas modalidades, a utilização de um antígeno associado a uma doença, desordem ou condição, etc., nas composições e métodos aqui fornecidos irá conduzir a uma resposta imune tolerogênica contra o antígeno e/ou as células, por, sobre as quais o antígeno é expresso. Os antígenos podem estar na mesma forma conforme expresso em um sujeito com a doença, distúrbio ou condição, mas também podem ser um fragmento ou derivado do mesmo. Todavia, quando se tratar de um fragmento ou derivado, uma resposta imune desejada à forma expressa nesse sujeito é o resultado preferível com as composições e métodos conferidos. Os antígenos associados com uma doença, distúrbio ou condição, etc, em algumas modalidades, compreendem epitopos restritos de MHC de Classe I e/ou epitopos restritos de MHC de Classe II e/ou epitopos de célula B e/ou compreendem um lípido ao qual se ligam e que forma um complexo CD1d.
[00056] Em uma modalidade, o antígeno é um antígeno associado com uma doença inflamatória, doença autoimune, rejeição de órgão ou de tecido ou doença do enxerto contra o hospedeiro. Esses antígenos incluem autoantígenos, tais como a proteína básica de mielina, o colágeno (por exemplo, o colágeno tipo 11), cartilagem humana gp 39, cromogranina A, gp130-RAPS, proteína proteolipídica, fibrilarina, proteínas nucleares, proteínas nucleolares (por exemplo, uma pequena proteína nucleolar), receptor do fator estimulante da tireóide, histonas, glicoproteína gp 70, proteínas ribossomais, acetiltransferase dehidrolipoamida piruvato desidrogenase, antígenos do folículo capilar, isoforma de tropomiosina humana 5, proteínas mitocondriais, proteínas de células pancreáticase, glicoproteína de oligodendrócito de mielina, insulina, descarboxilase do ácido glutâmico (GAD), glúten, e seus fragmentos ou derivados dos mesmos. Outros autoantígenos são conferidos na Tabela 1 abaixo.
[00057] Os antígenos também incluem aqueles que estão associados com a rejeição de órgão ou de tecidos. Exemplos de tais antígenos incluem, mas não estão limitados a, antígenos de células alogênicas, por exemplo, os antígenos de um extrato de células alogênicas e antígenos de outras células, tais como antígenos de células endoteliais.
[00058] Os antígenos também incluem aqueles que estão associados com uma alergia. Tais antígenos incluem os alergênicos descritos em qualquer outra parte deste documento.
[00059] Os antígenos também incluem aqueles que estão associados com um enxerto transplantável. Esses antígenos estão associados com um enxerto transplantável, ou uma resposta imune indesejada em um receptor de um enxerto transplantável que é gerado como um resultado da introdução do enxerto transplantável no receptor, que pode ser apresentado para reconhecimento pelas células do sistema imune e que pode gerar uma resposta imune indesejada. Os antígenos de transplante incluem aqueles que estão associados com a rejeição do órgão ou tecido ou com doença do enxerto contra o hospedeiro. Os antígenos de transplante podem ser obtidos ou derivados a partir de células de um material biológico, ou de informação relacionada com um enxerto transplantável. Os antígenos de transplante geralmente incluem proteínas, polipeptídeos, peptídeos, lipoproteínas, glicolípidos, polinucleotídeos, ou estão contidos ou são expressos em células. Informação relativa a um enxerto transplantável é qualquer informação sobre um enxerto transplantável que pode ser utilizada para obter ou derivar antígenos de transplante. Tal informação inclui informação sobre os antígenos que seria esperado que estivessem presentes no interior ou sobre as células de um enxerto transplantável, tais como, por exemplo, sequência de informação, tipos ou classes de antígenos e/ou as suas MHC de Classe I, MHC de Classe II, ou as restrições da apresentação de células B. Tais informações também podem incluir informações sobre o tipo de enxerto transplantável (por exemplo, autoenxerto, aloenxerto, xenoenxerto), a composição molecular e celular do enxerto, a localização do corpo a partir do qual o enxerto é derivado ou no qual o enxerto irá ser transplantado (por exemplo, órgão total ou parcial, pele, osso, nervos, tendão, neurônios, vasos sanguíneos, gordura, córnea, etc.) .
[00060] Os antígenos também incluem antígenos associados com uma proteína terapêutica, que podem ser apresentados para reconhecimento pelas células do sistema imune e que podem gerar uma resposta imune indesejada contra a proteína terapêutica. Os antígenos das proteínas terapêuticas geralmente incluem proteínas, polipeptídeos, peptídeos, lipoproteínas, ou estão contidos ou expressos em, por ou nas células.
[00061] Os antígenos podem ser antígenos que estão totalmente definidos ou caraterizados. No entanto, em algumas modalidades, um antígeno não está completamente definido e caraterizado. Por isso, os antígenos também incluem, aqueles que estão contidos dentro de uma célula ou preparação de tecido, os detritos celulares, exosome de células ou meios condicionados e podem ser entregues nessa forma em algumas modalidades.
[00062] "Antígeno apresentável por APC" significa um antígeno que pode ser apresentado para reconhecimento pelas células do sistema imune, tal como apresentado por células apresentadoras de antígenos, incluindo, mas não limitados a células dendríticas, células B ou macrófagos. O antígeno apresentável por APC pode ser apresentado para o reconhecimento por, por exemplo, células T. Tais antígenos podem ser reconhecidos por e desencadear uma resposta imune em uma célula T através da apresentação do antígeno ou da porção desse ligada a uma molécula complexa de histocompatibilidade principal (MHC) de Classe I ou Classe II, ou ligados a uma molécula CD1d. O CD1d é uma molécula apresentadoras de antígeno que se liga a auto lipídios e eternos e glicolípidos, e é frequentemente encontrada em células apresentadoras de antígenos. Também é encontrada em células não hematopoiéticas, tais como os hepatócitos. O CD1d contém uma ranhura hidrofóbica que se liga a lípidos hidrófobos, geralmente para apresentação para as células iNKT. De preferência, uma ou mais respostas imunes tolerogênicas específicas para o antígeno apresentável por APC resulta com as composições conferidas neste documento. Tais respostas imunes podem ser afetadas, por exemplo, através da estimulação, produção, indução ou recrutamento das células reguladoras, tais como as células Treg CD4+ e/ou Treg CD8+.
[00063] Os antígenos apresentáveis por APC geralmente incluem peptídeos, polipeptídeos, proteínas inteiras ou lisados de células inteiras. Em uma modalidade, o antígeno apresentável por APC compreende um epitopo restrito de MHC de classe I. Em outra modalidade, o antígeno apresentável por APC compreende um epitopo restrito de MHC de classe II. Em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC compreende um epitopo de célula B. No entanto, em uma outra modalidade, o antígeno apresentável por APC é um lípido que se liga ou forma um complexo CD1d.
[00064] Em outras modalidades, os antígenos apresentáveis por APC nas composições da invenção, são conferidos sob a forma de um ácido nucleico que codifica o peptídeo, o polipeptídeo ou a proteína. O ácido nucleico pode ser DNA ou RNA, como mRNA. Em modalidades, as composições inventivas compreendem um complemento, como um complemento completo, ou um degenerado (devido à degenerescência do código genético) de quaisquer dos ácidos nucleicos providos aqui. Em modalidades, o ácido nucleico é um vetor de expressão que pode ser transcrito quando transfectado em uma linhagem de células. Em modalidades, o vetor de expressão pode compreender um plasmídeo, retrovírus, ou um adenovírus, entre outros.
[00065] Numa modalidade, o antígeno está associado com uma doença, perturbação ou condição descritas neste documento e pode, em combinação com um imunossupressor conduzir a uma resposta imune tolerogênica específica para a doença, distúrbio ou condição.
[00066] "Avaliação de uma resposta imunológica" refere-se a qualquer medição ou determinação do nível, presença ou ausência, redução, aumento, etc., de uma resposta imunológica in vitro ou in vivo. Essas medições ou determinações podem ser efetuadas em uma ou mais amostras obtidas de um sujeito. Essa avaliação pode ser efetuada por qualquer um dos métodos conferidos aqui ou então conhecidos na área.
[00067] Um sujeito "em risco" é um sujeito que o profissional de saúde crê ser possível sofrer de uma doença, distúrbio ou condição médica como conferida aqui ou é um sujeito que o profissional de saúde crê ser possível sofrer de uma resposta imunológica indesejada como conferida aqui.
[00068] Uma "doença autoimune" é qualquer doença em que o sistema imune cria uma resposta imune indesejada contra ele próprio (por exemplo, um ou mais autoantígenos). Em algumas modalidades, uma doença autoimune compreende uma destruição aberrante das células do corpo, como parte de uma resposta imune de autoameaça. Em algumas modalidades, a autodestruição se manifesta no mau funcionamento de um órgão, por exemplo, o cólon ou o pâncreas. Exemplos de doenças autoimunes são descritos noutras partes deste documento. Doenças autoimunes adicionais serão conhecidas para os profissionais, e a invenção não está limitada a esse respeito.
[00069] "Média", como usado aqui, refere-se à média aritmética, a menos que notado em contrário.
[00070] "Antígeno de células B" significa qualquer antígeno que desencadeia uma resposta imunológica em uma célula B (por exemplo, um antígeno que é especificamente reconhecido por uma célula B ou um receptor aí presente). Em algumas modalidades, um antígeno que é um antígeno de células T, também é um antígeno de células B. Em outras modalidades, o antígeno de células T não é também um antígeno de células B. Os antígenos de células B incluem, mas não estão limitados às proteínas, peptídeos, pequenas moléculas e carboidratos. Em algumas modalidades, o antígeno de células B compreende um antígeno não-proteico (i.e., não uma proteína nem um antígeno peptídico). Em algumas modalidades, o antígeno de células B compreende um autoantígeno. Em outras modalidades, o antígeno de células B é obtido ou derivado de um alérgeno, autoantígeno, proteína terapêutica, ou enxerto transplantável.
[00071] "Concomitantemente" significa administrar duas ou mais substâncias a um sujeito de um modo que está correlacionado no tempo, de preferência suficientemente correlacionado no tempo de forma a prover uma modulação de uma resposta imunológica. Em modalidades, pode ocorrer administração concomitante por meio da administração de duas ou mais substâncias na mesma forma de dosagem. Em outras modalidades, administração concomitante pode abranger a administração de duas ou mais substâncias em diferentes formas de dosagem, mas em um período de tempo especificado, de preferência em 1 mês, com mais preferência em 1 semana, ainda com mais preferência em 1 dia, e ainda com mais preferência em 1 hora.
[00072] "Acoplar" ou "Acoplado" ou "Acopla" (e afins) significa a associação química de uma entidade (por exemplo, uma fração) a outra. Em algumas modalidades, o acoplamento é covalente, significando que o acoplamento ocorre no contexto da presença de uma ligação covalente entre as duas entidades. Em modalidades não covalentes, a ligação não covalente é mediada por interações não covalentes incluindo, mas não se limitando às interações de carga, interações de afinidade, coordenação metálica, adsorção física, interações hospedeiro-convidado, interações hidrófobas, interações de empilhamento TT, interações das ligações por hidrogênio, interações de van der Waals, interações magnéticas, interações eletrostáticas, interações dipolo-dipolo, e/ou suas combinações. Em modalidades, o encapsulamento é uma forma de acoplamento.
[00073] "Forma de dosagem" significa um material farmacológica e/ou imunologicamente ativo em um meio, transportador, veículo, ou dispositivo adequado para administração a um sujeito.
[00074] "Encapsular" significa encerrar pelo menos uma porção de uma substância dentro de um nanotransportador sintético. Em algumas modalidades, uma substância é totalmente encerrada dentro de um nanotransportador sintético. Em outras modalidades, a maior parte ou a totalidade de uma substância que é encapsulada não está exposta ao ambiente local externo ao nanotransportador sintético. Em outras modalidades, não mais de 50%, 40%, 30%, 20%, 10% ou 5% (peso/peso) estão expostos ao ambiente local. Encapsulação é diferente de absorção, que coloca a maioria ou a totalidade de uma substância sobre uma superfície de um nanotransportador sintético, e deixa a substância exposta ao ambiente local externo ao nanotransportador sintético.
[00075] "Epitopo", também chamado de determinante antigênico, é a parte de um antígeno que é reconhecida pelo sistema imunológico, especificamente, por exemplo, por anticorpos, células B, ou células T. Como usado aqui, "epitopos restritos a MHC de Classe I" são epitopos que são apresentados a células imunológicas por moléculas de MHC de classe I presentes em células nucleadas. "Epitopos restritos a MHC de Classe II" são epitopos que são apresentados a células imunológicas por moléculas de MHC de classe II presentes em células apresentadoras de antígenos (APCs), por exemplo, em células imunológicas apresentadoras de antígenos profissionais, como em macrófagos, células B, e células dendríticas, ou em células não hematopoiéticas, como hepatócitos. "Epitopos de células B" são estruturas moleculares que são reconhecidas por anticorpos ou células B. Em algumas modalidades, o próprio epitopo é um antígeno.
[00076] Alguns epitopos são conhecidos dos profissionais, e epitopos exemplificativos adequados de acordo com alguns aspectos dessa invenção incluem mas não estão limitados aos listados na Immune Epitope Database (www.immuneepitopo.org, Vita R, Zarebski L, Greenbaum JA, Emami H, Hoof I, Salimi N, Damle R, Sette A, Peters B. "The immune epitope database 2.0". Nucleic Acids Res. janeiro 2010; 38 (Referência da base de dados): D854-62; cuja totalidade do seu conteúdo, bem como todas as entradas da base de dados da IEDB versão 2.4, agosto 2011, e particularmente todos os epitopos aí divulgados, são incorporados aqui por referência). Epitopos também podem ser identificados por algoritmos publicamente disponíveis, por exemplo, os algoritmos descritos em Wang P, Sidney J, Kim Y, Sette A, Lund O, Nielsen M, Peters B. 2010. "Peptide binding predictions for HLA DR, DP and DQ molecules". BMC Bioinformatics 2010, 11:568; Wang P, Sidney J, Dow C, Mothé B, Sette A, Peters B. 2008. "A systematic assessment of MHC class II peptide binding predictions and evaluation of a consensus approach". PLoS Comput Biol. 4(4):e1000048; Nielsen M, Lund O. 2009. "NN-align. An artificial neural network-based alignment algorithm for MHC class II peptide binding prediction". BMC Bioinformatics. 10:296; Nielsen M, Lundegaard C, Lund O. 2007. "Prediction of MHC class II binding affinity using SMM-align, a novel stabilization matrix alignment method". BMC Bioinformatics. 8:238; Bui HH, Sidney J, Peters B, Sathiamurthy M, Sinichi A, Purton KA, Mothé BR, Chisari FV, Watkins DI, Sette A. 2005. Immunogenetics. 57:304314; Sturniolo T, Bono E, Ding J, Raddrizzani L, Tuereci O, Sahin U, Braxenthaler M, Gallazzi F, Protti MP, Sinigaglia F, Hammer J. 1999. "Generation of tissue-specific and promiscuous HLA ligand databases using DNA microarrays and virtual HLA class II matrices". Nat Biotechnol. 17(6):555-561; Nielsen M, Lundegaard C, Worning P, Lauemoller SL, Lamberth K, Buus S, Brunak S, Lund O. 2003. "Reliable prediction of T-cell epitopos using neural networks with novel sequence representations". Protein Sci 12:1007-1017; Bui HH, Sidney J, Peters B, Sathiamurthy M, Sinichi A, Purton KA, Mothe BR, Chisari FV, Watkins DI, Sette A. 2005. "Automated generation and evaluation of specific MHC binding predictive tools: ARB matrix applications". Immunogenetics 57:304-314; Peters B, Sette A. 2005. "Generating quantitative models describing the sequence specificity of biological processes with the stabilized matrix method". BMC Bioinformatics 6:132; Chou PY, Fasman GD. 1978. "Prediction of the secondary structure of proteins from their amino acid sequence". Adv Enzymol Relat Areas Mol Biol 47:45-148; Emini EA, Hughes JV, Perlow DS, Boger J. 1985. "Induction of hepatitis A virus-neutralizing antibody by a virus-specific synthetic peptide". J Virol 55:836-839; Karplus PA, Schulz GE. 1985. "Prediction of chain flexibility in proteins". Naturwissenschaften 72:212213; Kolaskar AS, Tongaonkar PC. 1990. "A semi-empirical method for prediction of antigenic determinants on protein antigens". FEBS Lett276:172-174; Parker JM, Guo D, Hodges RS. 1986. "New hydrophilicity scale derived from high-performance liquid chromatography peptide retention data: correlation of predicted surface residues with antigenicity and X-ray-derived accessible sites". Biochemistry 25:5425-5432; Larsen JE, Lund O, Nielsen M. 2006. "Improved method for predicting linear B-cell epitopes". Immunome Res 2:2; Ponomarenko JV, Bourne PE. 2007. "Antibody-protein interactions: benchmark datasets and prediction tools evaluation". BMC Struct Biol 7:64; Haste Andersen P, Nielsen M, Lund O. 2006. "Prediction of residues in discontinuous B-cell epitopes using protein 3D structures". Protein Sci 15:2558-2567; Ponomarenko JV, Bui H, Li W, Fusseder N, Bourne PE, Sette A, Peters B. 2008. "ElliPro: a new structure-based tool for the prediction of antibody epitopes". BMC Bioinformatics 9:514; Nielsen M, Lundegaard C, Blicher T, Peters B, Sette A, Justesen S, Buus S, e Lund O. 2008. PLoS Comput Biol.4(7)e1000107. "Quantitative predictions of peptide binding to any HLA-DR molecule of known sequence: NetMHCIIpan"; em que a totalidade do conteúdo de cada um é incorporada aqui por referência para divulgação de métodos e algoritmos para a identificação de epitopos.
[00077] Outros exemplos de epitopos que podem ser acoplados a nanotransportadores sintéticos na presente invenção incluem qualquer um dos epitopos de MHC de Classe I restrita, MHC de classe II restrita e células B conforme conferidos como SEQ ID NOs: 1-943. Sem querer estar vinculado por qualquer teoria particular, os epitopos de MHC de classe I restrita incluem aqueles estabelecidos nas SEQ ID NOs: 1-186, epitopos de MHC de Classe II restrita incluem aqueles estabelecidos nas SEQ ID NOs: 187-537, epitopos de célula B incluem aqueles estabelecidos nas SEQ ID NOs: 538-943. Estes epitopos incluem autoantígenos MHC de Classe I-restrita, epitopos MHC de Classe II restrita de alérgenos e epitopos de células B de autoantígenos e alérgenos.
[00078] "Gerar" significa causar a ocorrência de uma ação, tal como uma resposta imunológica (por exemplo, uma resposta imunológica tolerogênica), quer diretamente por si só ou indiretamente, tal como mas não se limitando a uma terceira parte não relacionada que efetua uma ação em função das palavras ou atos de alguém.
[00079] "Identificar" consiste em qualquer ação ou conjunto de ações que permite que um médico reconheça um sujeito como podendo beneficiar dos métodos e composições conferidas aqui. De preferência, o sujeito identificado está necessitado de uma resposta imunológica tolerogênica como conferida aqui. A ação ou conjunto de ações pode ser diretamente por si só ou indiretamente, tal como mas não se limitando a uma terceira parte não relacionada que efetua uma ação em função das palavras ou atos de alguém.
[00080] "Imunossupressor" significa um composto que faz com que uma APC exerça um efeito imunossupressor (por exemplo, efeito tolerogênico). Um efeito imunossupressor refere-se, em geral, à produção ou expressão de citocinas ou outros fatores pela APC que reduz, inibe ou previne uma resposta imunológica indesejada ou que promove uma resposta imunológica desejada. Quando a APC origina um efeito imunossupressor em células imunológicas que reconhecem um antígeno apresentado pela APC, é afirmado que o efeito imunossupressor é específico para o antígeno apresentado. Esse efeito também é aqui chamado de efeito tolerogênico. Sem pretender ficar restringido por qualquer teoria particular, se pensa que o imunossupressor resulta de o imunossupressor ser distribuído à APC, de preferência na presença de um antígeno (por exemplo, um antígeno administrado ou um que já está presente in vivo). Em conformidade, o imunossupressor inclui compostos que proporcionam uma resposta imunológica tolerogênica a um antígeno que pode ou não ser conferido na mesma composição ou em uma composição diferente. Em uma modalidade, o imunossupressor é tal que faz com que uma APC promova um fenótipo regulador em uma ou mais células efetores imunológicas. Por exemplo, o fenótipo regulador pode ser caraterizado pela produção, indução, estimulação ou recrutamento das células imunitárias reguladoras. Isto pode ser o resultado da conversão de células T CD4+ (por exemplo, células Treg CD4+CD25highFoxP3+) para um fenótipo regulador. Isso também pode dever-se a indução de FoxP3 em outras células imunológicas, tais como células T CD8+, macrófagos e células iNKT. Em uma modalidade, o imunossupressor é tal que afeta a resposta da APC depois de processar um antígeno. Em outra modalidade, o imunossupressor é tal que não interfere no processamento do antígeno. Em uma modalidade adicional, o imunossupressor não é uma molécula de sinalização apoptótica. Em outra modalidade, o imunossupressor não é um fosfolípido.
[00081] Imunossupressores incluem mas não estão limitados a estatinas; inibidores de mTOR, como rapamicina ou um análogo da rapamicina; agentes de sinalização de TGF-β; agonistas de receptores de TGF-β; inibidores da histona desacetilase, como Tricostatina A; corticosteroides; inibidores da função mitocondrial, como rotenona; inibidores de P38; inibidores de NF-Kβ, como 6Bio, Dexametasona, TCPA-1, IKK VII; agonistas de receptores de adenosina; agonistas de prostaglandina E2 (PGE2), como Misoprostol; inibidores de fosfodiesterases, como inibidor da fosfodiesterase 4 (PDE4), como Rolipram; inibidores de proteassomos; inibidores de cinases; agonistas de receptores acoplados à proteína G; antagonistas de receptores acoplados à proteína G; glucocorticoides; retinoides; inibidores de citocinas; inibidores de receptores de citocinas; ativadores de receptores de citocinas; antagonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos; agonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos; inibidores da histona desacetilase; inibidores da calcineurina; inibidores de fosfatases; inibidores de PI3KB, como TGX-221; inibidores de autofagia, como 3-Metiladenina; inibidores de receptores de hidrocarbonetos arila; inibidor de proteassomo I (PSI); e ATPs oxidados, como bloqueadores de receptores P2X. Imunossu- pressores também incluem IDO, vitamina D3, ciclosporinas, como ciclosporina A, inibidores de receptores de hidrocarbonetos arila, resveratrol, azatiopurina (Aza), 6-mercaptopurine (6-MP), 6-tioguanina (6-TG), FK506, sangliferina A, salmeterol, micofenolato de mofetil (MMF), aspirina e outros inibidores da COX, ácido niflúmico, estriol e triptolida. Em modalidades, o imunossupressor pode compreender qualquer um dos agentes conferidos aqui.
[00082] O imunossupressor pode ser um composto que proporciona diretamente o efeito imunossupressor (por exemplo, tolerogênico) em APCs ou pode ser um composto que proporciona o efeito imunossupressor (por exemplo, tolerogênico) indiretamente (isto é, depois de ser processado de algum modo após a administração). Assim, imunossupressores incluem formas de pró-fármacos de quaisquer dos compostos conferidos aqui.
[00083] Imunossupressores também incluem ácidos nucleicos que codificam os peptídeos, polipeptídeos ou proteínas conferidos aqui que originam uma resposta imunológica imunossupressora (por exemplo, tolerogênica). Assim, em modalidades, o imunossupressor é um ácido nucleico que codifica um peptídeo, polipeptídeo ou proteína que origina uma resposta imunológica imunossupressora (por exemplo, tolerogênica), e é o ácido nucleico que é acoplado ao nanotransportador sintético.
[00084] O ácido nucleico pode ser DNA ou RNA, como mRNA. Em modalidades, as composições inventivas compreendem um complemento, como um complemento completo, ou um degenerado (devido à degenerescência do código genético) de quaisquer dos ácidos nucleicos providos aqui. Em modalidades, o ácido nucleico é um vetor de expressão que pode ser transcrito quando transfectado em uma linhagem de células. Em modalidades, o vetor de expressão pode compreender um plasmídeo, retrovírus, ou um adenovírus, entre outros. Ácidos nucleicos podem ser isolados ou sintetizados usando abordagens comuns de biologia molecular, por exemplo, usando uma reação em cadeia de polimerase para produzir um fragmento de ácido nucleico, que então é purificado e clonado em um vetor de expressão. Técnicas adicionais úteis na prática dessa invenção podem ser encontradas em "Current Protocols in Molecular Biology" 2007 da John Wiley and Sons, Inc.; "Molecular Cloning: A Laboratory Manual" (Terceira Edição) Joseph Sambrook, Peter MacCallum Cancer Institute, Melbourne, Austrália; David Russell, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, Cold Spring Harbor.
[00085] Em modalidades, os imunossupressores conferidos aqui são acoplados a nanotransportadores sintéticos. Em modalidades preferíveis, o imunossupressor é um elemento que está presente para além do material que constitui a estrutura do nanotransportador sintético. Por exemplo, em uma modalidade, quando o nanotrans- portador sintético é constituído por um ou mais polímeros, o imunossupressor é um composto que está presente para além e acoplado ao um ou mais polímeros. Como outro exemplo, em uma modalidade, quando o nanotransportador sintético é constituído por um ou mais lípidos, o imunossupressor é um composto que está presente para além e acoplado ao um ou mais lípidos. Em modalidades, como quando o material do nanotransportador sintético também origina um efeito imunossupressor (por exemplo, tolerogênico), o imunossupressor é um elemento presente para além do material do nanotransportador sintético que origina um efeito imunossupressor (por exemplo, tolerogênico).
[00086] Outros imunossupressores exemplificativos incluem mas não estão limitados fármacos de moléculas pequenas, produtos naturais, anticorpos (por exemplo, anticorpos contra CD20, CD3, CD4), fármacos de base biológica, fármacos baseados em carboidratos, nanopartículas, lipossomos, RNAi, ácidos nucleicos antissentido, aptâmeros, metotrexato, NSAIDs; fingolimod; natalizumab; alemtuzumab; anti-CD3; tacrolimus (FK506), etc. Outros imunossupressores são conhecidos dos profissionais, e a invenção não está limitada a esse respeito.
[00087] "Doença inflamatória" significa qualquer doença, distúrbio ou condição em que ocorre inflamação indesejada.
[00088] "Carga" do imunossupressor ou antígeno é a quantidade do imunossupressor ou antígeno acoplado a um nanotransportador sintético com base no peso total dos materiais em um nanotransportador sintético completo (peso/peso). Em geral, a carga é calculada na forma de uma média ao longo de uma população de nanotransportadores sintéticos. Em uma modalidade, a carga do imunossupressor em média ao longo da primeira população de nanotransportadores sintéticos está situada entre 0,0001% e 50%. Em outra modalidade, a carga do antígeno em média ao longo da primeira e/ou segunda populações de nanotransportadores sintéticos está situada entre 0,0001% e 50%. Em uma modalidade adicional, a carga do imunossupressor e/ou antígeno está situada entre 0,01% e 20%. Em outra modalidade, a carga do imunossupressor e/ou antígeno está situada entre 0,1% e 10%. Em ainda outra modalidade, a carga do imunossupressor e/ou antígeno está situada entre 1% e 10%. Em uma modalidade adicional, a carga do imunossupressor e/ou do antígeno é pelo menos 0,1%, pelo menos 0,2%, pelo menos 0,3%, pelo menos 0,4%, pelo menos 0,5%, pelo menos 0,6%, pelo menos 0,7%, pelo menos 0,8%, pelo menos 0,9%, pelo menos 1%, pelo menos 2%, pelo menos 3%, pelo menos 4%, pelo menos 5%, pelo menos 6%, pelo menos 7%, pelo menos 8%, pelo menos 9%, pelo menos 10%, pelo menos 11%, pelo menos 12%, pelo menos 13%, pelo menos 14%, pelo menos 15%, pelo menos 16%, pelo menos 17%, pelo menos 18%, pelo menos 19% ou pelo menos 20% em média ao longo de uma população de nanotransportadores sintéticos. Ainda em outra modalidade, a carga do imunossupressor e/ou do antígeno é 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19% ou 20% em média ao longo de uma população de nanotransportadores sintéticos. Em algumas modalidades das modalidades acima, a carga do imunossupressor e/ou do antígeno é não mais do que 25% em média ao longo de uma população de nanotransportadores sintéticos. Em modalidades, a carga é calculada como descrito nos Exemplos.
[00089] Em modalidades de qualquer uma das composições e métodos conferidos, a carga é calculada do modo seguinte: Aproximadamente 3 mg de nanotransportadores sintéticos são coletados e centrifugados, para separar o sobrenadante do pélete de nanotransportadores sintéticos. É adicionado acetonitrilo ao sedimento, e a amostra é sonicada e centrifugada de modo a remover qualquer material insolúvel. O sobrenadante e o sedimento são injetados em RP- HPLC e a absorvância é lida a 278nm. O μg encontrado no sedimento é utilizado para calcular a% retida (carga), o μg no sobrenadante e no sedimento são utilizados para calcular o μg total recuperado.
[00090] "A dose de manutenção" se refere a uma dose que é administrada a um sujeito, depois de uma dose inicial ter resultado em uma resposta imunossupressora (por exemplo, tolerogênico) em um sujeito, de forma a sustentar uma resposta imunossupressora desejada (por exemplo, tolerogênico). Uma dose de manutenção, por exemplo, pode ser uma que mantenha o efeito tolerogênico alcançado depois da dose inicial, de forma a prevenir uma resposta imune indesejada no sujeito, ou impedir que o sujeito se torne um sujeito em risco de sofrer uma resposta imune indesejável, incluindo um nível indesejado de uma resposta imune. Em algumas modalidades, a dose de manutenção é aquela que é suficiente para manter um nível apropriado de uma resposta imune desejada.
[00091] "A dimensão máxima de um nanotransportador sintético" significa a maior dimensão de um nanotransportador medido ao longo de qualquer eixo do nanotransportador sintético. "A dimensão mínima de um nanotransportador sintético" significa a menor dimensão de um nanotransportador sintético medido ao longo de qualquer eixo do nanotransportador sintético. Por exemplo, para um nanotransportador esferoidal sintético, a dimensão máxima e a mínima de um nanotrans- portador sintético seriam substancialmente idênticas, e seriam do tamanho de seu diâmetro. De um modo semelhante, para um nanotransportador sintético cuboidal, a dimensão mínima de um nanotransportador sintético seria a menor da sua altura, largura ou comprimento, enquanto a dimensão máxima de um nanotransportador sintético seria o maior da sua altura, largura ou comprimento. Em uma modalidade de realização, uma dimensão mínima de, pelo menos 75%, de preferência, pelo menos 80%, mais preferencialmente, pelo menos 90%, dos nanotransportadores sintéticos em uma amostra, com base no número total de nanotransportadores sintéticos na amostra, é igual ou superior a 100 nm. Em uma modalidade de realização, uma dimensão máxima de, pelo menos 75%, preferencialmente, pelo menos 80%, mais preferencialmente, pelo menos 90%, dos nanotransportadores sintéticos em uma amostra, com base no número total de nanotransportadores sintéticos na amostra, seja igual ou inferior a 5 μm. Preferencialmente, uma dimensão mínima de, pelo menos 75%, preferencialmente, pelo menos 80%, mais preferencialmente, pelo menos 90%, dos nanotransportadores sintéticos em uma amostra, com base no número total de nanotransportadores sintéticos na amostra, seja superior a 110 nm, mais preferencialmente superior a 120 nm, mais preferencialmente superior a 130 nm, e mais ainda, preferencialmente superior a 150 nm. As razões dos aspetos das dimensões máxima e mínima dos nanotransportadores sintéticos inventivos podem variar, dependendo da modalidade de realização. Por exemplo, as razões de aspeto das dimensões máximas a mínimas dos nanotransportadores sintéticos podem variar entre 1:1 a 1.000.000:1, de preferência de 1:1 a 100.000:1, mais preferencialmente de 1:1 a 10.000: 1, ainda, preferencialmente de 1:1 a 1.000:1, mais preferencialmente de 1:1 a 100:1, e ainda mais preferencialmente de 1:1 a 10:1. Preferencialmente, a máxima dimensão de, pelo menos 75%, preferencialmente, pelo menos 80%, mais preferencialmente, pelo menos 90%, dos nanotransportadores sintéticos em uma amostra, com base no número total de nanotransportadores sintéticos na amostra, é igual ou inferior a 3 μm, mais preferencialmente, igual ou inferior a 2 μm, mais preferencialmente, igual ou inferior a 1 μm, mais preferencialmente, igual ou inferior a 800 nm, mais preferencialmente, igual ou inferior a 600 nm e, mais preferencialmente ainda, igual ou inferior a 500 nm. Em modalidades preferidas, uma dimensão mínima de pelo menos 75%, preferencialmente pelo menos 80%, mais preferencialmente pelo menos 90%, dos nanotransportadores sintéticos em uma amostra, com base no número total de nanotransportadores sintéticos na amostra, é igual ou superior a 100 nm, mais preferencialmente igual ou superior a 120 nm, mais preferencialmente igual ou superior a 130 nm, mais preferencialmente igual ou superior a 140 nm e, mais preferencialmente ainda igual ou superior a 150 nm. A medição de dimensões de nanotransportadores sintéticos (por exemplo, diâmetro) é obtida por meio da suspensão dos nanotransportadores sintéticos em um meio líquido (habitualmente aquoso) e usando dispersão dinâmica da luz (DLS) (por exemplo, usando um instrumento Brookhaven ZetaPALS). Por exemplo, uma suspensão de nanotransportadores sintéticos pode ser diluída a partir de um tampão aquoso para água purificada, para alcançar uma concentração final da suspensão de nanotransportadores sintéticos de aproximadamente 0,01 a 0,1 mg/mL. A suspensão diluída pode ser preparada diretamente dentro de, ou transferida para, uma cuvete adequada para análise de DLS. A cuvete pode então ser colocada no DLS, deixada equilibrar para a temperatura controlada, e então submetida a varredura por um tempo suficiente para adquirir uma distribuição estável e reprodutível com base em entradas apropriadas para a viscosidade do meio e índices de refração da amostra. O diâmetro efetivo, ou média da distribuição, é então relatado. "Dimensão" ou "tamanho" ou "diâmetro" dos nanotransportadores sintéticos significa a média de uma distribuição de tamanho de partícula obtida utilizando a dispersão dinâmica da luz.
[00092] "MHC" se refere ao complexo principal de histocompa- tibilidade, uma ampla região genômica ou família de genes encontradas na maioria dos vertebrados que codificam moléculas MHC que apresentam fragmentos ou epitopos de proteínas processadas sobre a superfície da célula. A apresentação do peptídeo de MHC nas superfícies celulares permite a vigilância das células imunitárias, geralmente uma célula T. Existem duas classes gerais de moléculas MHC: Classe I e Classe II. Geralmente, as moléculas de MHC de Classe I são encontradas nas células nucleadas e apresentar peptídeos para células T citotóxicas. As moléculas de MHC de Classe II são encontradas em certas células imunitárias, principalmente macrófagos, células B e células dendríticas, conhecidas coletivamente como APCs profissionais. Os genes mais conhecidos na região MHC são o subconjunto que codifica as proteínas apresentadoras de antígenos na superfície da célula. Nos seres humanos, estes genes são referidos como antígenos de genes de leucócitos humanos (HLA).
[00093] "Polímero terminado não-metóxi" significa um polímero que tem pelo menos um terminal, que termina com uma fração diferente de metóxi. Em uma modalidade, o polímero tem pelo menos dois terminais que terminam com uma fração diferente de metóxi. Em outras modalidades, o polímero não tem terminais que terminem com metóxi. "Polímero Pluronic terminado não-metóxi" significa um polímero que não seja um polímero Pluronic linear com metóxi em ambos os terminais. Nanopartículas poliméricas tal como conferidas neste documento, podem compreender polímeros terminados não-metóxi ou polímeros de Pluronic terminados não-metóxi.
[00094] "Excipiente farmaceuticamente aceitável" significa um material farmacologicamente inativo usado em conjunto com os nanotransportadores sintéticos recitados para formular as composições inventivas. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis compreendem uma variedade de materiais conhecidos na área, incluindo mas não se limitando a sacarídeos (tais como glucose, lactose, e afins), conservantes, como agentes antimicrobianos, auxiliares da reconstituição, corantes, solução salina (como solução salina tamponada com fosfato), e tampões.
[00095] "Protocolo" se refere a qualquer regime de dosagem de uma ou mais substâncias a um sujeito. Um regime de dosagem pode incluir a quantidade, frequência e/ou modo de administração. Em algumas modalidades, esse protocolo pode ser usado para administrar uma ou mais composições da invenção a um ou mais sujeitos de teste. Respostas imunológicas em esses sujeitos de teste podem então ser avaliadas para determinar se o protocolo foi ou não eficaz na redução de uma resposta imunológica indesejada ou geração de uma resposta imunológica desejada (por exemplo, a promoção de um efeito tolerogênico). Qualquer outro efeito terapêutico e/ou profilático também pode ser avaliado em vez ou para além das respostas imunológicas acima mencionadas. Se um protocolo teve ou não um efeito desejado pode ser determinado usando qualquer um dos métodos conferidos aqui ou então conhecidos na área. Por exemplo, uma população de células pode ser obtida de um sujeito a quem foi administrada uma composição conferida aqui de acordo com um protocolo específico, para determinar se células imunológicas, citocinas, anticorpos específicos, etc., foram ou não reduzidos, gerados, ativados, etc. Métodos úteis para detectar a presença e/ou número de células imunológicas incluem mas não estão limitados a métodos de citometria de fluxo (por exemplo, FACS) e métodos de imunohistoquímica. Anticorpos e outros agentes de ligação para a coloração específica de marcadores de células imunológicas estão disponíveis no mercado. Tais estojos incluem tipicamente reagentes de coloração para múltiplos antígenos que permitem a detecção, separação e/ou quantificação, baseadas em FACS, de uma população celular desejada a partir de uma população heterogênea de células.
[00096] "Proporcionar um sujeito" é uma ação ou conjunto de ações que fazem com que um médico entre em contato com um sujeito e administre ao mesmo uma composição conferida aqui ou implemente no mesmo um método conferido aqui. De preferência, o sujeito está necessitado de uma resposta imunológica tolerogênica como conferida aqui. A ação ou conjunto de ações pode ser diretamente por si só ou indiretamente, tal como mas não se limitando a uma terceira parte não relacionada que efetua uma ação em função das palavras ou atos de alguém.
[00097] "Sujeito" significa animais, incluindo os mamíferos de sangue quente, tais como os humanos e os primatas; aves; animais domésticos ou de quinta como gatos, cães, ovelhas, cabras, gado bovino, cavalos e porcos; animais de laboratório, tais como ratinhos, camundongos e porquinhos-da-índia; peixes; répteis; animais selvagens e de jardim zoológico; e similares.
[00098] O(s) "nanotransportador(es) sintético(s)" significa(m) um objeto discreto que não é encontrado na natureza e que possui, pelo menos, uma dimensão que é inferior ou igual a 5 mícron em tamanho. As nanopartículas de albumina geralmente são incluídas como nanotransportadores sintéticos, no entanto em certas modalidades, os nanotransportadores sintéticos não compreendem as nanopartículas de albumina. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos da invenção não compreendem a quitosana. Em outras modalidades, nanotransportadores sintéticos inventivos não são nanopartículas à base de lípidos. Em modalidades adicionais, nanotransportadores sintéticos inventivos não compreendem um fosfolípido.
[00099] Um nanotransportador sintético pode ser mas não está limitado a uma ou uma pluralidade de nanopartículas à base de lípidos (também aqui chamadas de nanopartículas lipídicas, isto é, nanopartículas em que a maioria do material que compõe a sua estrutura consiste em lípidos), nanopartículas poliméricas, nanopartí- culas metálicas, emulsões baseadas em tensoativos, dendrímeros, futebolenos, nanofios, partículas do tipo vírus (isto é, partículas que são principalmente constituídas por proteínas estruturais virais mas que não são infecciosas ou têm baixa infetividade), partículas à base de peptídeos ou proteínas (também aqui chamadas de partículas proteicas, isto é, partículas em que a maioria dos materiais que compõem a sua estrutura são peptídeos ou proteínas) (tais como nanopartículas de albumina) e/ou nanopartículas que são desenvolvidas utilizando uma combinação de nanomateriais, tais como nanopartículas de lípidos- polímeros. Os nanotransportadores sintéticos podem ser uma variedade de diferentes formas, incluindo, mas não limitando a esferoidais, cuboidais, piramidais, oblongas, cilíndricas, toroidais e similares. Os nanotransportadores sintéticos de acordo com a invenção compreendem uma ou mais superfícies. Os nanotransportadores sintéticos exemplares que podem ser adaptados para utilização na prática da presente invenção compreendem: (1) as nanopartículas biodegradáveis divulgadas na Patente US 5,543,158 concedida a Gref e outros., (2) as nanopartículas poliméricas do Pedido de Patente US Publicado 20060002852 concedido a Saltzman e outros., (3) as nanopartículas construídas de modo litográfico do Pedido de Patente US Publicado 20090028910 concedido a DeSimone e outros., (4) a divulgação de WO 2009/051837 concedida a von Andrian e outros., (5) as nanopartículas divulgadas no Pedido de Patente US Publicado 2008/0145441 concedido a Penades e outros., (6) as nanopartículas proteicas divulgadas no Pedido de Patente US Publicado 20090226525 concedido a de los Rios e outros., (7) as partículas do tipo vírus divulgadas no Pedido de Patente US publicado 20060222652 concedido a Sebbel e outros., (8) as partículas do tipo vírus acopladas a ácidos nucleicos divulgadas no Pedido de Patente US publicado 20060251677 concedido a Bachmann e outros., (9) as partículas do tipo vírus divulgadas em WO2010047839A1 ou WO2009106999A2, (10) as nanopartículas nanoprecipitadas divulgadas em P. Paolicelli e outros., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010), ou (11) células apoptóticas, corpos apoptóticos ou os miméticos sintéticos ou semissintéticos divulgados na Publicação U.S. 2002/0086049. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos podem possuir uma razão de aspecto superior a 1:1, 1:1,2, 1:1,5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7, ou superior a 1:10.
[000100] Os nanotransportadores sintéticos de acordo com a invenção que têm uma dimensão mínima igual ou inferior a cerca de 100 nm, de preferência igual ou inferior a 100 nm, não compreendem uma superfície com grupos hidroxila que ativam o complemento ou em alternativa compreendem uma superfície que consiste essencialmente em porções que não são grupos hidroxila que ativam o complemento. Em uma modalidade preferida, os nanotransportadores sintéticos de acordo com a invenção que têm uma dimensão mínima igual ou inferior a cerca de 100 nm, de preferência igual ou inferior a 100 nm, não compreendem uma superfície que ativa substancialmente o complemento ou em alternativa compreendem uma superfície que consiste essencialmente em porções que não ativam substancialmente o complemento. Em uma modalidade preferida, os nanotransportadores sintéticos de acordo com a invenção que têm uma dimensão mínima igual ou inferior a cerca de 100 nm, de preferência igual ou inferior a 100 nm, não compreendem uma superfície que ativa o complemento ou em alternativa compreendem uma superfície que consiste essencialmente em porções que não ativam o complemento. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos excluem partículas semelhantes a vírus. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos podem possuir uma razão de aspecto superior a 1:1, 1:1,2, 1:1,5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7, ou superior a 1:10.
[000101] "Antígeno de células T" significa um antígeno de células T CD4+, antígeno de células CD8+ ou antígeno restrito de células CD1d. "Antígeno de células T CD4+" significa qualquer antígeno que é reconhecido por uma célula T CD4+ e desencadeia uma resposta imunológica em uma célula T CD4+, por exemplo, um antígeno que é especificamente reconhecido por um receptor de células T em uma célula T CD4+ via apresentação do antígeno, ou sua porção, ligado a uma molécula do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de Classe II. "Antígeno para células T CD8+" significa qualquer antígeno que é reconhecido e desencadeia uma resposta imunológica em uma célula T CD8+, por exemplo, um antígeno que é especificamente reconhecido por um receptor de células T em uma célula T CD8+ via apresentação do antígeno, ou sua porção, ligado a uma molécula do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de Classe I. "Antígeno restrito CD1d" significa um antígeno que compreende um ou mais epitopos que se ligam, se complexam, ou são apresentados por moléculas CD1d. Geralmente, antígenos restritos de células T CD1d são lípidos apresentados às células NKT invariantes. Antígenos restritos de células T CD1d podem compreender um ou mais lípidos, ou glicolípidos, incluindo mas não se limitando a: a-galactosilceramida (a- GalCer), glicoesfingolípidos a-ligados (de Sphingomonas spp.), galactosil diacilgliceróis (de Borrelia burgdorferi), lipofosfoglicana (de Leishmania donovani),β-glucosilceramida endógena ou exógena, e fosfatidilinositol tetramanósido (PIM4) (de Mycobacterium leprae). Para lipídios e/ou gliolípidios adicional úteis como antígenos restritos CD1d, consultar V. Cerundolo e outros., "Harnessing invariant NKT cells in vaccination strategies." Nature Rev Immun, 9:28-38 (2009). Em algumas modalidades, um antígeno que é um antígeno de células T, também é um antígeno de células B. Em outras modalidades, o antígeno de células T não é também um antígeno de células B. Antígenos para células T são, em geral, proteínas ou peptídeos, mas podem ser outras moléculas, como lípidos e glicolípidos.
[000102] Uma "proteína terapêutica" refere-se a qualquer proteína ou terapia de base proteica que pode ser administrada a um sujeito e tem um efeito terapêutico. Essas terapias incluem terapias de substituição proteica e suplementação proteica. Essas terapias também incluem a administração de uma proteína exógena ou estranha, terapias com anticorpos, e terapias com células ou à base de células. Proteínas terapêuticas incluem enzimas, cofatores enzimáticos, hormônios, fatores de coagulação do sangue, citocinas, fatores de crescimento, anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Exemplos de outras proteínas terapêuticas são conferidos aqui em outro local. Proteínas terapêuticas podem ser produzidas em, sobre ou por células e podem ser obtidas dessas células ou administradas na forma dessas células. Em modalidades, a proteína terapêutica é produzida em, sobre ou por células de mamífero, células de inseto, células de levedura, células de bactéria, células de planta, células de animais transgênicos, células de plantas transgênicas, etc. A proteína terapêutica pode ser produzida de modo recombinante em tais células. A proteína terapêutica pode ser produzida em, sobre ou por uma célula viralmente transformada. A proteína terapêutica também pode ser produzida em, sobre ou por células autólogas que foram transfectadas, transduzidas ou então manipuladas para a expressarem. Em alternativa, a proteína terapêutica pode ser administrada na forma de um ácido nucleico ou introduzindo um ácido nucleico em um vírus, VLP, lipossomo, etc. Em alternativa, a proteína terapêutica pode ser obtida de tais formas e administrada como a própria proteína terapêutica. Em consequência, sujeitos incluem qualquer sujeito que tenha recebido, esteja recebendo ou venha a receber quaisquer dos anteriores. Esse sujeito inclui sujeitos que tenham recebido, estejam recebendo ou venham a receber terapia genética; células autólogas que foram transfectadas, transduzidas ou então manipuladas para expressarem uma proteína, polipeptídeo ou peptídeo terapêutico; ou células que expressam uma proteína, polipeptídeo ou peptídeo terapêutico.
[000103] "Antígeno proteico terapêutico" significa um antígeno que está associado com uma proteína terapêutica, que pode ser, ou uma parte do qual pode ser, apresentados para reconhecimento pelas células do sistema imune e pode gerar uma resposta imune indesejável (por exemplo, a produção de anticorpos específicos para as proteínas terapêuticas) contra a proteína terapêutica. Os antígenos de proteína terapêutica incluem geralmente proteínas, polipeptídeos, peptídeos, lipoproteínas, ou estão contidos ou são expressos em, por ou pelas células.
[000104] "Resposta imunológica tolerogênica" significa qualquer resposta imunológica que pode conduzir a supressão imunológica específica para um antígeno ou uma célula, tecido, órgão, etc., que expressa esse antígeno. Essas respostas imunológicas incluem qualquer redução, retardamento ou inibição de uma resposta imunológica indesejada específica para o antígeno ou célula, tecido, órgão, etc., que expressa esse antígeno. Essas respostas imunológicas também incluem qualquer estimulação, produção, indução, promoção ou recrutamento de uma resposta imunológica desejada específica para o antígeno ou célula, tecido, órgão, etc., que expressa esse antígeno. Em consequência, respostas imunológicas tolerogênicas incluem a ausência ou redução de uma resposta imunológica indesejada a um antígeno que pode ser mediada por células reativas com antígenos, bem como a presença ou promoção de células supressoras. Respostas imunológicas tolerogênicas conferidas aqui incluem tolerância imunológica. "Gerar uma resposta imunológica tolerogênica" refere-se à geração de qualquer uma das respostas imunológicas anteriores específicas para um antígeno ou célula, tecido, órgão, etc., que expressa esse antígeno. A resposta imunológica tolerogênica pode dever-se a apresentação restrita a MHC de Classe I e/ou apresentação restrita a MHC de Classe II e/ou apresentação por células B e/ou apresentação por CD1d, etc.
[000105] Respostas imunológicas tolerogênicas incluem qualquer redução, retardamento ou inibição da proliferação e/ou atividade de células T CD4+, células T CD8+ ou células B. Respostas imunológicas tolerogênicas também incluem uma redução da produção de anticorpos específicos para antígenos. Respostas imunológicas tolerogênicas também podem incluir qualquer resposta que conduza à estimulação, indução, produção ou recrutamento de células reguladoras, como células Treg CD4+, células Treg CD8+, células Breg, etc. Em algumas modalidades, a resposta imunológica tolerogênica é tal que leva à conversão em um fenótipo regulador caracterizado pela produção, indução, estimulação ou recrutamento de células reguladoras.
[000106] Respostas imunológicas tolerogênicas também incluem qualquer resposta que conduza à estimulação, produção ou recrutamento de células Treg CD4+ e/ou células Treg CD8+. Células Treg CD4+ podem expressar o fator de transcrição FoxP3 e inibir respostas inflamatórias e doenças inflamatórias autoimunes ("Human regulatory T cells in autoimmune diseases". Cvetanovich GL, Hafler DA. Curr Opin Immunol. dezembro 2010;22(6):753-60. "Regulatory T cells and autoimmunity". Vila J, Isaacs JD, Anderson AE.Curr Opin Hematol. julho 2009;16(4):274-9). Essas células também suprimem o auxílio de células T a células B e induzem tolerância a autoantígenos e antígenos estranhos ("Therapeutic approaches to allergy and autoimmunity based on FoxP3+ regulatory T-cell activation and expansion". Miyara M, Wing K, Sakaguchi S. J Allergy Clin Immunol. abril 2009;123(4):749-55). Células Treg CD4+ reconhecem antígenos quando apresentados por proteínas de Classe II em APCs. Células Treg CD8+, que reconhecem antígenos apresentados pela Classe I (e Qa-1), também podem suprimir o auxílio de células T a células B e levar à ativação de tolerância indutora de supressão antígeno-específica a autoantígenos e antígenos estranhos. Foi mostrado que a destruição da interação de Qa-1 com células Treg CD8+ desregula respostas imunológicas e leva ao desenvolvimento da formação de autoanticorpos e de um lúpus eritematoso sistêmico letal autoimune (Kim e outros., Nature. 16 setembro 2010, 467 (7313): 328-32). Também foi mostrado que células Treg CD8+ inibem modelos de doenças inflamatórias autoimunes, incluindo artrite reumatoide e colite ("CD4+CD25+ regulatory T cells in autoimmune arthritis". Oh S, Rankin AL, Caton AJ. Immunol Rev. janeiro 2010;233(1):97-111. "Regulatory T cells in inflammatory bowel disease". Boden EK, Snapper SB. Curr Opin Gastroenterol. novembro 2008;24(6):733-41). Em algumas modalidades, as composições conferidas podem efetivamente resultar em ambos os tipos de respostas (Treg CD4+ e Treg CD8+). Em outras modalidades, FoxP3 pode ser induzido em outras células imunológicas, como macrófagos, células iNKT, etc., e as composições conferidas aqui também podem resultar em uma ou mais dessas respostas.
[000107] As respostas imunes tolerogênicas também incluem, mas não estão limitadas a, indução de citocinas reguladoras, tais como citocinas Treg; indução de citocinas inibidoras; a inibição de citocinas inflamatórias (e.g., IL-4, IL-1b, IL-5, TNF-α, IL-6, GM-CSF, IFN-y, IL-2, IL-9, IL-12, IL-17, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, M-CSF, proteína reativa C, proteína de fase aguda, quimiocinas (e.g., MCP-1, RANTES, MIP-1α, MIP-1β, MIG, ITAC ou IP-10), a produção de citocinas anti-inflamatórias (e.g., IL-4, IL-13, IL-10, etc.), quimiocinas (e.g., CCL-2, CXCL8), proteases (e.g., MMP-3, MMP-9), leucotrienos (e.g., CysLT-1, CysLT- 2), prostaglandinas (e.g., PGE2) ou histaminas; a inibição da polarização a uma resposta imune de Th17, Th1 ou Th2; a inibição de citocinas específicas de células efetoras: Th17 (por exemplo, IL-17, IL- 25), Th1 (IFN-y), Th2 (por exemplo, IL-4, IL-13); a inibição de fatores de transcrição Th1-, Th2- ou TH17-específicos; a inibição da proliferação de células T efetoras; a indução de apoptose de células T efetoras; a indução de genes específicos para células dendríticas tolerogênicas, a indução da expressão de FoxP3, a inibição da indução de IgE ou respostas imunológicas mediadas por IgE; a inibição de respostas de anticorpos (por exemplo, produção de anticorpos específicos para antígenos); a inibição de respostas de células T auxiliadoras; a produção de TGF-β e/ou IL-10; a inibição da função efetora de autoanticorpos (por exemplo, inibição da depleção de células, danos em células ou tecidos ou ativação do complemento); etc.
[000108] Qualquer uma das anteriores pode ser mensurada in vivo em um ou mais modelos animais, ou pode ser mensurada in vitro. O profissional está familiarizado com tais medições in vivo ou in vitro. Respostas imunológicas indesejadas ou respostas imunológicas tolerogênicas podem ser monitoradas usando, por exemplo, métodos de avaliação do número e/ou função de células imunológicas, análise de tetrâmeros, ELISPOT, análise da expressão de citocinas baseada em citometria de fluxo, secreção de citocinas, estabelecimento do perfil de expressão de citocinas, estabelecimento do perfil de expressão genética, estabelecimento do perfil de expressão de proteínas, análise de marcadores da superfície celular, detecção baseada em PCR da utilização de genes de receptores de células imunológicas (vide T. Clay e outros., "Assays for Monitoring Cellular Immune Response to Active Immunotherapy of Cancer" Clinical Cancer Research 7:1127-1135 (2001)), etc. Respostas imunológicas indesejadas ou respostas imunológicas tolerogênicas também podem ser monitoradas usando, por exemplo, métodos de avaliação de níveis de proteínas em plasma ou soro, proliferação de células imunológicas e/ou ensaios funcionais, etc. Em algumas modalidades, respostas imunológicas tolerogênicas podem ser monitoradas avaliando a indução de FoxP3. Adicionalmente, métodos específicos são descritos em mais detalhe nos Exemplos.
[000109] De preferência, respostas imunológicas tolerogênicas conduzem à inibição do desenvolvimento, progressão ou patologia das doenças, distúrbios ou condições médicas descritos aqui. Se as composições inventivas podem ou não conduzir à inibição do desenvolvimento, progressão ou patologia das doenças, distúrbios ou condições médicas descritos aqui pode ser mensurado com modelos animais de tais doenças, distúrbios ou condições médicas.
[000110] Em algumas modalidades, a redução de uma resposta imunológica indesejada ou geração de uma resposta imunológica tolerogênica pode ser avaliada determinando desfechos clínicos, eficácia clínica, sintomas clínicos, biomarcadores de doença e/ou pontuações clínicas. Respostas imunológicas indesejadas ou respostas imunológicas tolerogênicas também podem ser avaliadas com testes de diagnóstico para averiguar a presença ou ausência de uma doença, distúrbio ou condição médica conferida aqui. Respostas imunológicas indesejadas também podem ser avaliadas por métodos de medição de níveis e/ou função de proteínas terapêuticas em um sujeito. Em modalidades, os métodos para a monitorização ou avaliação das respostas alérgicas indesejadas incluem a avaliação de uma resposta alérgica em um sujeito através da reatividade da pele e/ou da produção de anticorpos específicos para o alérgeno.
[000111] Em algumas modalidades, a monitorização ou a avaliação a geração de uma resposta imunológica indesejada ou de uma resposta imunológica tolerogênica em um sujeito pode anteceder a administração de uma composição de nanotransportadores sintéticos conferida aqui e/ou anteceder a administração de um enxerto transplantável ou uma proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno. Em outras modalidades, avaliar a geração de uma resposta imunológica indesejada ou resposta imunológica tolerogênica pode seguir-se à administração de uma composição de nanotransportadores sintéticos conferida aqui e/ou seguir-se à administração de um enxerto transplantável ou uma proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno. Em algumas modalidades, a avaliação é realizada após a administração da composição de nanotransportadores sintéticos, mas antes da administração de um enxerto transplantável ou uma proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno. Em outras modalidades, a avaliação é realizada após a administração de um enxerto transplantável ou uma proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno, mas antes da administração da composição. Em ainda outras modalidades, a avaliação é realizada antes da administração dos nanotransportadores sintéticos e da administração de um enxerto transplantável ou proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno, enquanto que em ainda outras modalidades a avaliação é efetuada depois de tanto a administração de nanotransportadores sintéticos e a administração de um enxerto transplantável ou proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno. Em modalidades adicionais, a avaliação é realizada antes e após a administração dos nanotransportadores sintéticos e/ou a administração de um enxerto transplantável ou uma proteína terapêutica ou a exposição a um alérgeno. Em ainda outras modalidades, a avaliação é realizada mais do que uma vez no sujeito de forma a determinar se é mantido um estado imunitário desejável no sujeito, tal como um sujeito que tem ou está em risco de ter uma doença inflamatória, uma doença autoimune, uma alergia, rejeição de órgão ou de tecido ou doença de anfitrião versus enxerto. Outros sujeitos incluem aqueles que foram submetidos, ou que se irão submeter a transplante, bem como aqueles que tenham recebido, estejam recebendo ou que irão receber uma proteína terapêutica contra a qual apresentaram, estão apresentando ou se espera que apresentem uma resposta imune indesejada.
[000112] Uma resposta de anticorpos pode ser avaliada determinando um ou mais títulos de anticorpos. "Título de anticorpos" significa um nível mensurável de produção de anticorpos. Os métodos de medição dos títulos do anticorpo são conhecidos na arte e incluem Ensaios Imunoabsorventes de Ligação à Enzima (ELISA). Em modalidades, a resposta de anticorpos pode ser quantificada, por exemplo, como o número de anticorpos, concentração de anticorpos ou título. Os valores podem ser absolutos ou podem ser relativos. Ensaios para quantificar uma resposta de anticorpos incluem ensaios de captura de anticorpos, ensaios imunoabsorventes ligados a enzima (ELISAs), ensaios de inibição da absorção em fase líquida (ILPAAs), ensaios de imunoelectroforese em foguete (RIE) e ensaios de imunoelectroforese em linha (LIE). Quando uma resposta de anticorpos é comparada com outra resposta de anticorpos, é preferivelmente usado o mesmo tipo de valor quantitativo (por exemplo, título) e método de medição (por exemplo, ELISA) para fazer a comparação.
[000113] Um método ELISA para mensurar um título de anticorpos, por exemplo, um ELISA de sanduíche típico, pode consistir das etapas seguintes: (i) preparar um material de revestimento de placas de ELISA de modo que o alvo de anticorpo de interesse seja acoplado a um polímero de substrato, ou outro material adequado, (ii) preparar o material de revestimento em uma solução aquosa (como PBS) e distribuir a solução do material de revestimento nos poços de uma placa de múltiplos poços, para deposição por uma noite do revestimento sobre a placa de múltiplos poços, (iii) lavar extensamente a placa de múltiplos poços com tampão de lavagem (como 0,05 % Tween-20 em PBS), para remover material de revestimento em excesso, (iv) bloquear a placa quanto a ligação inespecífica mediante aplicação de uma solução diluente (como 10 % soro fetal de bovino em PBS), (v) lavar da placa a solução bloqueadora/diluente com tampão de lavagem, (vi) diluir a(s) amostra(s) de soro contendo anticorpos e padrões apropriados (controles positivos) com diluente, consoante o requerido, para se obter uma concentração que satura adequadamente a resposta de ELISA, (vii) diluir em série as amostras de plasma na placa de múltiplos poços de modo a abranger uma gama de concentrações adequadas para gerar uma curva de respostas de ELISA, (viii) incubar a placa de modo a proporcionar a ligação anticorpo-alvo, (ix) lavar a placa com tampão de lavagem para remover anticorpos não ligados a antígeno, (x) adicionar uma concentração apropriada de um anticorpo secundário de detecção no mesmo diluente, como um anticorpo de detecção acoplado a biotina, capaz de ligar-se ao anticorpo primário, (xi) incubar a placa com o anticorpo de detecção aplicado, seguido de lavagem com tampão de lavagem, (xii) adicionar uma enzima, como estreptavidina-HRP (peroxidase de rábano bravo), que irá se ligar à biotina presente em anticorpos biotinilados e incubar, (xiii) lavar a placa de múltiplos poços, (xiv) adicionar substrato(s) (como solução de TMB) à placa, (xv) aplicar uma solução de terminação (como 2 N ácido sulfúrico) depois de completado o desenvolvimento de cor, (xvi) ler a densidade ótica dos poços da placa a um comprimento de onda específico para o substrato (450 nm com subtração de leituras a 570 nm), (xvi) aplicar aos dados um ajustamento da curva multiparamétrico adequado e definir a concentração efetiva semimáxima (EC50) como a concentração na curva à qual é alcançada metade do valor OD máximo para os padrões da placa.
[000114] Um "enxerto transplantável" se refere a um material biológico, tal como células, tecidos e órgãos (no todo ou em parte) que podem ser administrados a um sujeito. Os enxertos transplantáveis podem ser autoenxertos, aloenxertos, ou xenoenxertos de, por exemplo, um material biológico tal como um órgão, tecido, pele, osso, nervos, tendão, neurônios, vasos sanguíneos, gordura, córnea, células pluripotentes, células diferenciadas (obtidas ou derivadas in vivo ou in vitro), etc. Em algumas modalidades, um enxerto transplantável é formado, por exemplo, a partir da cartilagem, osso, matriz extracelular, ou matrizes de colagênio. Enxertos transplantáveis também podem ser células isoladas, suspensões de células e células em tecidos e órgãos que podem ser transplantados. As células transplantáveis tipicamente têm uma função terapêutica, por exemplo, uma função que é inexistente ou reduzida em um sujeito receptor. Alguns exemplos não limitativos de células transplantáveis são célulase, hepatócitos, células estaminais hematopoiéticas, células estaminais neuronais, neurônios, células da glia, ou células mielinizadas. Células transplantáveis podem ser células que não são modificadas, por exemplo, células obtidas a partir de um sujeito doador e utilizáveis no transplante sem quaisquer modificações genéticas ou epigenéticas. Em outras modalidades, as células transplantáveis podem ser células modificadas, por exemplo, células obtidas a partir de um sujeito que tenha um defeito genético, no qual o defeito genético tenha sido corrigido, ou células que são derivadas de células reprogramadas, por exemplo, células derivadas de células diferenciadas obtidas a partir de um sujeito.
[000115] "Transplante" se refere ao processo de transferência (mudança) de um enxerto transplantável para um sujeito recipiente (e.g., de um dador sujeito, de uma fonte in vitro (e.g., células pluripotentes nativas ou induzidas autólogas ou heterólogas diferenciadas)) e/ou de uma localização corporal para outra localização corporal no mesmo sujeito.
[000116] "Resposta imunológica indesejada" refere-se a qualquer resposta imunológica indesejada que resulta da exposição a um antígeno, promove ou exacerba uma doença, distúrbio ou condição médica conferida aqui (ou um seu sintoma), ou é sintomática de uma doença, distúrbio ou condição médica conferida aqui. Tais respostas imunológicas têm geralmente um impacto negativo no estado de saúde de um sujeito ou são sintomáticas de um impacto negativo no estado de saúde de um sujeito.
C. COMPOSIÇÕES INVENTIVAS
[000117] Neste documento são conferidas composições de nanotransportadores sintéticos e imunossupressores que, quando administrados a um sujeito podem resultar em efeitos imunossupressores. De preferência, as composições também compreendem antígeno, e o efeito imunossupressor é específico para o antígeno e, desse modo, um efeito tolerogênico. Tais composições podem resultar em qualquer uma das respostas tolerogênicas conferidas neste documento, tais como a estimulação, a indução, a produção ou o recrutamento de células reguladoras (por exemplo, células Treg CD4+ e/ou células Treg CD8+). Em algumas modalidades, a resposta imune tolerogênica, é aquela que resulta na conversão de um fenótipo regulador caraterizado pela produção, indução estimulação ou recrutamento de células reguladoras (por exemplo, células Treg).
[000118] Como mencionado acima, os nanotransportadores sintéticos são planejados para compreenderem imunossupressores e, em algumas modalidades, antígeno contra o qual é desejado um efeito tolerogênico. Uma larga variedade de nanotransportadores sintéticos pode ser usada de acordo com a invenção. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos são esferas ou esferóides. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos são planos ou em forma de placa. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos são cubos ou cúbicos. Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos são ovais ou elíticos. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos são cilíndricos, cônicos ou piramidais.
[000119] Em algumas modalidades de realização, é desejável a utilização de uma população de nanotransportadores sintéticos que seja relativamente uniforme em termos de tamanho, forma e/ou composição, de modo que cada nanotransportador sintético tenha propriedades semelhantes. Por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 90% ou, pelo menos, 95% dos nanotransportadores sintéticos, com base no número total de nanotransportadores sintéticos, pode ter uma dimensão mínima ou máxima que cai dentro dos 5%, 10%, ou 20% do diâmetro médio ou dimensão média de nanotransportadores sintéticos. Em algumas modalidades de realização, uma população de nano transportadores sintéticos pode ser heterogênea com relação ao tamanho, forma e/ou composição.
[000120] Os nanotransportadores sintéticos podem ser sólidos ou vazios e podem compreender uma ou mais camadas. Em modalidades de realização, cada camada tem uma composição única e propriedades únicas em relação à(s) outra(s) camada(s). Para dar apenas um exemplo, os nanotransportadores sintéticos podem ter uma estrutura central/cobertura, em que o núcleo é uma camada (por exemplo., um núcleo polimérico) e a cobertura é uma segunda camada (por exemplo., uma monocamada ou bicamada lipídica). Os nanotransportadores sintéticos podem compreender uma pluralidade de camadas diferentes.
[000121] Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos podem opcionalmente compreender um ou mais lípidos. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender um lipossoma. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender uma bicamada lipídica. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender uma monocamada lipídica. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender uma micela. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender um núcleo compreendendo uma matriz polimérica rodeada por uma camada lipídica (e.g., bicamadas lipídicas, monocamada lipídica, etc.). Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético pode compreender um núcleo não polimérico (por exemplo., partículas metálicas, partículas quânticas, partículas de cerâmica, partículas de osso, partículas virais, proteínas, ácidos nucléicos, carboidratos, etc.), rodeado por uma camada lipídica (por exemplo., bicamada lipídica, monocamada lipídica, etc.).
[000122] Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos não compreendem um componente polimérico. Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos podem compreender partículas de metal, pontos quânticos, partículas cerâmicas, etc. Em algumas modalidades de realização, um nanotrans- portador sintético não polimérico é um agregado de componentes não poliméricos, como um agregado de átomos metálicos (por exemplo., átomos de ouro).
[000123] Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos podem opcionalmente compreender uma ou mais entidades anfifílicas. Em algumas modalidades de realização, uma entidade anfifílica pode promover a produção de nanotransportadores com estabilidade aumentada, uniformidade melhorada, ou viscosidade aumentada. Em algumas modalidades de realização, as entidades anfifílicas podem ser associadas com a superfície interior de uma membrana lipídica (por exemplo., bicamada lipídica, monocamada lipídica, etc.). Muitas entidades anfifílicas conhecidas na arte são adequadas para utilização no fabrico de nanotransportadores sintéticos de acordo com a presente invenção. Tais entidades anfifílicas incluem, mas não estão limitadas a, fosfoglicerídeos; fosfatidilcolinas; dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC); dioleilfosfatidiletanolamina (DOPE); dioleiloxipropiltrietilamônio (DOTMA); dioleoilfosfatidilcolina; colesterol; éster de colesterol; diacilglicerol; diacilglicerolsuccinato; difosfatidilglicerol (DPPG); hexanodecanol; álcoois gordos tais como o polietilenoglicol (PEG); éter polioxietileno-9-laurílico; um ácido gordo ativo de superfície, tal como o ácido palmítico ou o ácido oleico; ácidos gordos; monoglicerídeos de ácidos gordos; diglicerídeos de ácidos gordos; amidas de ácidos gordos; trioleato de sorbitano (Span® 85) glicocolato; monolaurato de sorbitano (Span® 20); polisorbato 20 (Tween® 20); polisorbato 60 (Tween® 60); polisorbato 65 (Tween® 65); polisorbato 80 (Tween® 80); polisorbato 85 (Tween® 85); monoestearato de polioxietileno; surfactina; um poloxómero; um éster de ácido gordo de sorbitano tal como o trioleato de sorbitano; lecitina; lisolecitina; fosfatidilserina; fosfatidilinositol; esfingomielina; fosfatidiletanolamina (cefalina); cardiolipina; ácido fosfatídico; cerebrosídeos; dicetilfosfato; dipalmitoilfosfatidilglicerol; estearilamina; dodecilamina; hexadecilamina; palmitato de acetila; ricinoleato de glicerol; estearato de hexadecila; miristato de isopropila; tiloxapol; poli(etilenoglicol)5000- fosfatidiletano- lamina; poli(etilenoglicol)400-monoestearato; fosfolípidos; detergentes sintéticos e/ou naturais tendo propriedades tensioativas elevadas; desoxicolatos; ciclodextrinas; sais caotrópicos; agentes de emparelha- mento iônico; e suas combinações. Um componente da entidade anfifílica pode ser uma mistura de entidades anfifílicas diferentes. Os especialistas na arte vão reconhecer que esta é uma lista exemplificativa, não exaustiva, de substâncias com atividade tensioativa. Qualquer entidade anfifílica pode ser utilizada na produção de nanotransportadores sintéticos para ser utilizada de acordo com a presente invenção.
[000124] Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos podem opcionalmente compreender um ou mais carboidratos. Os carboidratos podem ser naturais ou sintéticos. Um carboidrato pode ser um carboidrato natural derivatizado. Em certas modalidades de realização, um carboidrato compreende monossa- carídeos ou dissacarídeos, incluindo, mas não se limitando a glucose, frutose, galactose, ribose, lactose, sacarose, maltose, trealose, celobiose, manose, xilose, arabinose, ácido glucorônico e ácido galactorônico, ácido manurônico, glucosamina, galactosamina e ácido neurâmico. Em certas modalidades de realização, um carboidrato é um polissacarídeo, incluindo, mas não se limitando a pululano, celulose, celulose microcristalina, hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), hidroxice- lulose (HC), metilcelulose (MC), dextrana, ciclodextrana, glicogênio, hidroxietilamido, carragenina, glycon, amilose, quitosana, N,O- carboxilmetilquitosana, algina e ácido algínico, amido, quitina, inulina, konjac, glucomanana, pustulano, heparina, ácido hialurônico, curdlana e xantana. Em modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos da invenção não incluir (ou excluir especificamente) carboidratos, como, por exemplo, um polissacarídeo. Em certas modalidades de realização, o carboidrato pode compreender um derivado do carboidrato tal como um álcool de açúcar, incluindo mas não se limitando ao manitol, sorbitol, xilitol, eritritol, maltitol e lactitol.
[000125] Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos podem compreender um ou mais polímeros. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos compreendem um ou mais polímeros que não são um polímero Pluronic com terminação metóxi. Em algumas modalidades, pelo menos 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, ou 99% (peso/peso) dos polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos são polímeros que não são Pluronic com terminação metóxi. Em algumas modalidades, todos os polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos são polímeros que não são Pluronic com terminação metóxi. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos compreendem um ou mais polímeros que não são um polímero com terminação metóxi. Em algumas modalidades, pelo menos 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, ou 99% (peso/peso) dos polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos são polímeros que não têm terminação metóxi. Em algumas modalidades, todos os polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos são polímeros que não têm terminação metóxi. Em algumas modalidades, os nanotransportadores sintéticos compreendem um ou mais polímeros que não compreendem polímero Pluronic. Em algumas modalidades, pelo menos 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, ou 99% (peso/peso) dos polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos não compreendem polímero Pluronic. Em algumas modalidades, todos os polímeros que constituem os nanotransportadores sintéticos não compreendem polímero Pluronic. Em algumas modalidades, esse polímero pode estar rodeado por uma camada de revestimento (por exemplo, lipossomo, monocamada lipídica, micélio, etc.). Em algumas modalidades de realização, diversos elementos de nanotransportadores sintéticos podem ser acoplados com o polímero.
[000126] Os imunossupressores e/ou antígenos podem ser acoplados aos nanotransportadores sintéticos por meio de alguns métodos. Em geral, o acoplamento pode ser um resultado da ligação entre os imunossupressores e/ou antígenos e os nanotransportadores sintéticos. Essa ligação pode fazer com que os imunossupressores e/ou antígenos fiquem ligados à superfície dos nanotransportadores sintéticos e/ou contidos dentro (encapsulados) dos nanotransportadores sintéticos. Em algumas modalidades, no entanto, os imunossupressores e/ou antígenos são encapsulados pelos nanotransportadores sintéticos devido à estrutura dos nanotransportadores sintéticos e não à ligação aos nanotransportadores sintéticos. Em modalidades preferíveis, os nanotranspo0rtadores sintéticos compreendem um polímero como conferido aqui, e os imunossupressores e/ou antígenos são acoplados ao polímero.
[000127] Quando ocorre acoplamento devido à ligação entre os imunossupressores e/ou antígenos e nanotransportadores sintéticos, o acoplamento pode ocorrer via uma fração de acoplamento. Uma fração de acoplamento pode ser qualquer fração através da qual um imunossupressor e/ou antígeno é ligado a um nanotransportador sintético. Tais frações incluem ligações covalentes, como uma ligação de amida ou ligação de éster, bem como moléculas separadas que ligam (de modo covalente ou não covalente) o imunossupressor e/ou antígeno ao nanotransportador sintético. Tais moléculas incluem ligantes ou polímeros ou uma unidade dos mesmos. Por exemplo, a fração de acoplamento pode compreender um polímero com carga ao qual se liga de modo eletrostático um imunossupressor e/ou antígeno. Como outro exemplo, a fração de acoplamento pode compreender um polímero ou unidade do mesmo ao qual se liga de modo covalente.
[000128] Em modalidades preferidas, os nanotransportadores sintéticos compreendem um polímero como conferido aqui. Esses nanotransportadores sintéticos podem ser totalmente poliméricos ou podem ser uma mistura de polímeros e outros materiais.
[000129] Em algumas modalidades, os polímeros de um nanotransportador sintético associam-se, formando uma matriz polimérica. Em algumas dessas modalidades, um componente, como um imunossupressor ou antígeno, pode ser associado de modo covalente a um ou mais polímeros da matriz polimérica. Em algumas modalidades de realização, a associação covalente é mediada por um ligante. Em algumas modalidades, um componente pode ser associado de modo não covalente a um ou mais polímeros da matriz polimérica. Por exemplo, em algumas modalidades, um componente pode ser encapsulado dentro, rodeado por, e/ou disperso em toda uma matriz polimérica. Em alternativa ou adicionalmente, um componente pode ser associado a um ou mais polímeros de uma matriz polimérica mediante interações hidrofóbicas, interações de carga, forças de van der Waals, etc. É convencionalmente conhecida uma grande variedade de polímeros e métodos de formação de matrizes poliméricas a partir dos mesmos.
[000130] Os polímeros podem ser polímeros naturais ou não naturais (sintéticos). Os polímeros podem ser homopolímeros ou copolímeros compreendendo dois ou mais monômeros. Em termos da sequência, os copolímeros podem ser aleatórios, em bloco, ou compreender uma combinação de sequências aleatórias e em bloco. Tipicamente, os polímeros de acordo com a presente invenção são polímeros orgânicos.
[000131] Em algumas modalidades, o polímero compreende um poliéster, policarbonato, poliamida, ou poliéter, ou unidade dos mesmos. Em outras modalidades, o polímero compreende poli(etileno glicol) (PEG), polipropileno glicol, poli(ácido lático), poli(ácido glicólico), poli(ácido lático-co-glicólico), ou uma policaprolactona, ou unidade dos mesmos. Em algumas modalidades, é preferível que o polímero seja biodegradável. Portanto, em essas modalidades, é preferido que, se o polímero compreender um poliéter, como poli(etileno glicol) ou polipropileno glicol ou unidade do mesmo, o polímero compreenda um copolímero de bloco de um poliéter e um polímero biodegradável, de modo que o polímero seja biodegradável. Em outras modalidades, o polímero não compreende somente um poliéter ou unidade do mesmo, como poli(etileno glicol) ou polipropileno glicol ou unidade dos mesmos.
[000132] Outros exemplos de polímeros adequados para utilização na presente invenção incluem mas não estão limitados a polietilenos, policarbonatos (por exemplo poli(1,3-dioxan-2-ona)), polianidridos (por exemplo poli(anidrido sebácico)), polipropilfumeratos, poliamidas (por exemplo, policaprolactama), poliacetais, poliéteres, poliésteres (por exemplo, poliláctido, poliglicólido, poliláctido-co-glicólido, policapro- lactona, polihidroxiácido (por exemplo, poli(β-hidroxialcanoato)), poli(ortoésteres), policianoacrilatos, álcoois de polivinila, poliuretanos, polifosfazenos, poliacrilatos, polimetacrilatos, poliureias, poliestirenos, e poliaminas, polilisina, copolímeros de polilisina-PEG, e poli(etilenoi- mina), copolímeros de poli(etileno imina)-PEG.
[000133] Em algumas modalidades, polímeros de acordo com a presente invenção incluem polímeros que foram aprovados para utilização em humanos pela U.S. Food and Drug Administration (FDA) ao abrigo de 21 C.F.R. § 177.2600, incluindo mas não se limitando a poliésteres (por exemplo, ácido polilático, poli(ácido lático-co-glicólico), policaprolactona, polivalerolactona, poli(1,3-dioxan-2-ona)); poliani- dridos (por exemplo, poli(anidrido sebácico)); poliéteres (por exemplo, polietileno glicol); poliuretanos; polimetacrilatos; poliacrilatos; e policianoacrilatos.
[000134] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser hidrofílicos. Por exemplo, os polímeros podem compreender grupos aniônicos (por exemplo., grupo fosfato, grupo sulfato, grupo carboxilato); grupos catiônicos (por exemplo., grupo quaternário de amina); ou de grupos polares (e.g., grupo hidroxila, grupo tiol, grupo amina). Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético compreendendo uma matriz polimérica hidrofílica gera um ambiente hidrófilo no nanotransportador sintético. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser hidrófobos. Em algumas modalidades de realização, um nanotransportador sintético compreendendo uma matriz polimérica hidrófoba gera um ambiente hidrófobo no nanotransportador sintético. A seleção da hidrofilicidade ou hidrofobicidade do polímero pode ter um impacto na natureza dos materiais que são incorporados (por exemplo, acoplados) no interior do nanotransportador sintético.
[000135] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser modificados com uma ou mais porções e/ou grupos funcionais. Uma variedade de porções ou grupos funcionais podem ser utilizados de acordo com a presente invenção. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser modificados com polietilenoglicol (PEG), com um carboidrato, e/ou com poliacetais acíclicos derivados de polissacarídeos (Papisov, 2001, ACS Symposium Series, 786:301). Algumas modalidades de realização podem ser feitas utilizando os ensinamentos gerais da Patente US N° 5543158 de Gref e outros., ou a Publicação WO WO2009/051837 por Von Andrian e outros.
[000136] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser modificados com um grupo lipídico ou ácido gordo. Em algumas modalidades de realização, um grupo de ácido gordo pode ser um ou mais de entre o ácido butírico, capróico, caprílico, cáprico, láurico, mirístico, palmítico, esteárico, araquídico, bénico, ou lenhocérico. Em algumas modalidades de realização, um grupo de ácido gordo pode ser um ou mais de entre o ácido palmitoléico, oléico, vacénico, linoléico, alfa-linoléico, gama-linoléico, araquidónico, gadoléico, araquidónico, eicosapentaenóico, docosaexaenóico ou ácido erúcico.
[000137] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser poliésteres, incluindo os copolímeros compreendendo unidades de ácido lático e ácido glicólico, tais como, por exemplo, o poli(ácido lático-co-ácido glicólico) e poli(lactídeo-co-glicólido), coletivamente referidas aqui como "PLGA"; e os homopolímeros compreendendo unidades de ácido glicólico, aqui referidas como "PGA," e unidades de ácido lático, tais como ácido poli-L-lático, ácido poli-D- lático, ácido poli-D,L-lático, poli-L-lactídeo, poli-D-lactídeo e poli-D,L- lactídeo, coletivamente aqui referidos como "PLA." Em algumas modalidades de realização, os poliésteres exemplares incluem, por exemplo, poli-hidroxiácidos; copolímeros PEG e copolímeros do lactídeo e glicólido (por exemplo., copolímeros PLA-PEG, PGA-PEG copolímeros PLGA-PEG copolímeros e seus derivados. Em algumas modalidades de realização, os poliésteres incluem, por exemplo, poli(caprolactona), copolímeros de poli(caprolactona)-PEG, poli(L- lactídeo-co-L-lisina), poli(éster de serina), poli(éster de 4-hidróxi-L- prolina), poli[ácido a-(4-aminobutil)-L-glicólico], e seus derivados.
[000138] Em algumas modalidades de realização, um polímero pode ser PLGA. O PLGA é um co-polímero biocompatível e biodegradável do ácido lático e do ácido glicólico, e várias formas do PLGA são caracterizadas pela proporção do ácido lático:ácido glicólico. O ácido lático pode ser ácido L-lático, ácido D-lático, ou ácido D,L-lático. A taxa de degradação do PLGA pode ser ajustada por alteração da proporção do ácido lático:ácido glicólico. Em algumas modalidades de realização, o PLGA a ser utilizado de acordo com a presente invenção é caracterizado por uma proporção de ácido lático:ácido glicólico de aproximadamente 85:15, aproximadamente 75:25, aproximadamente 60:40, aproximadamente 50:50, aproximadamente 40:60, aproximadamente 25:75, ou aproximadamente 15:85.
[000139] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser um ou mais polímeros acrílicos. Em certas modalidades de realização, os polímeros acrílicos incluem, por exemplo, copolímeros de ácido acrílico e ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metila, metacrilatos de etoxietila, metacrilato de cianoetilo, copolímero de metacrilato de aminoalquila, poli(ácido acrílico), poli(ácido metacrílico), copolímero alquilamida do ácido metacrílico, poli(metacrilato de metila), poli(anidrido do ácido metacrílico), metacrilato de metila, polimetacrilato, copolímero de poli(metacrilato de metila), poliacrilamida, copolímero de metacrilato aminoalquila, copolímeros de metacrilato glicidila, policiano- acrilatos, e combinações compreendendo um ou mais dos polímeros acima mencionados. O polímero acrílico pode compreender os copolímeros completamente polimerizados de ésteres do ácido acrílico e metacrílico com um baixo conteúdo de grupos de amônia quaternária.
[000140] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser polímeros catiônicos. Em geral, os polímeros catiônicos são capazes de condensar e/ou proteger as cadeias negativamente carregadas dos ácidos nucleicos (por exemplo. ADN, ou seus derivados). Polímeros contendo amina, tais como poli(lisina) (Zauner e outros., 1998, Adv. Drug Del. Rev., 30:97; e Kabanov e outros., 1995, Bioconjugate Chem., 6:7), poli(etileno imina) (PEI; Boussif e outros., 1995, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1995, 92:7297), e dendrímeros de poli(amidoamina) (Kukowska-Latallo e outros., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:4897; Tang e outros., 1996, Bioconjugate Chem., 7:703; e Haensler e outros., 1993, Bioconjugate Chem., 4:372) são positivamente carregados a pH fisiológico, formam pares iónicos com ácidos nucléicos e medeiam a transfeção em uma variedade de linhas celulares. Em modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos da invenção podem não compreender (ou podem excluir) polímeros catiônicos.
[000141] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser poliésteres degradáveis comportando cadeias laterais catiônicas (Putnam e outros., 1999, Macromolecules, 32:3658; Barrera e outros., 1993, J. Am. Chem. Soc., 115:11010; Kwon e outros., 1989, Macromolecules, 22:3250; Lim e outros., 1999, J. Am. Chem. Soc., 121:5633; e Zhou e outros., 1990, Macromolecules, 23:3399). Os exemplos destes poliésteres incluem poli(L-lactídeo-co-L-lisina) (Barrera e outros., 1993, J. Am. Chem. Soc., 115:11010), polo(éster de serina) (Zhou e outros., 1990, Macromolecules, 23:3399), poli(éster 4- hidróxi-L-prolina) (Putnam e outros., 1999, Macromolecules, 32:3658; e Lim e outros., 1999, J. Am. Chem. Soc., 121:5633), e poli(éster de 4- hidróxi-L-prolina) (Putnam e outros., 1999, Macromolecules, 32:3658; e Lim e outros., 1999, J. Am. Chem. Soc., 121:5633).
[000142] As propriedades destes e de outros polímeros e métodos de preparação são bem conhecidos na arte (vide, por exemplo, Patentes U.S. 6,123,727; 5,804,178; 5,770,417; 5,736,372; 5,716,404; 6,095,148; 5,837,752; 5,902,599; 5,696,175; 5,514,378; 5,512,600; 5,399,665; 5,019,379; 5,010,167; 4,806,621; 4,638,045; e 4,946,929; Wang e outros., 2001, J. Am. Chem. Soc., 123:9480; Lim e outros., 2001, J. Am. Chem. Soc., 123:2460; Langer, 2000, Acc. Chem. Res., 33:94; Langer, 1999, J. Control. Release, 62:7; e Uhrich e outros., 1999, Chem. Rev., 99:3181). Mais geralmente, uma variedade de métodos para sintetizar certos polímeros adequados são descritos na Enciclopédia Concisa de Ciência de Polímeros e aminas poliméricas e sais de amônio, ed. por Goethals, Pergamon Press, 1980; Principles of Polymerization por Odian, John Wiley & Sons, 4a Edição, 2004; Contemporary Polymer Chemistry por Allcock e outros, Prentice-Hall, 1981; Deming e outros, 1997, Nature, 390:386; e nas U.S. Patents 6,506,577, 6,632,922, 6,686,446, e 6,818,732.
[000143] Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser polímeros lineares ou ramificados. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser dendrímeros. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser substancialmente reticulados um ao outro. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser substancialmente isentos de ligações reticuladas. Em algumas modalidades de realização, os polímeros podem ser utilizados de acordo com a presente invenção sem se submeter a uma etapa de ligação reticulada. Além disso, deve ser entendido que os nanotransportadores sintéticos da invenção podem compreender os copolímeros em bloco, os copolímeros de enxerto, homogenatos, misturas, e/ou adutos de qualquer um dos polímeros acima referidos ou outros polímeros. Aqueles versados na técnica vão reconhecer que os polímeros listados aqui representam uma lista de polímeros exemplar, não compreensiva que pode ser de utilização em conformidade com a presente invenção.
[000144] Composições de acordo com a invenção compreendem nanotransportadores sintéticos em combinação com excipientes farmaceuticamente aceitáveis, tais como conservantes, tampões, solução salina ou solução salina tamponada com fosfato. As composições podem ser preparadas usando técnicas convencionais farmacêuticas de fabricação e composição para se chegar às formas de dosagem úteis. Em uma modalidade de realização, os nanotransportadores sintéticos inventivos são suspensos em solução salina esterilizada para injeção em conjunto com um conservante.
[000145] Em modalidades, na preparação de nanotransportadores sintéticos como transportadores, podem ser úteis métodos de acoplamento dos componentes aos nanotransportadores sintéticos. Se o componente for uma molécula pequena, pode ser vantajoso ligar o componente a um polímero antes da reunião dos nanotransportadores sintéticos. Em modalidades, também pode ser vantajoso preparar os nanotransportadores sintéticos com grupos de superfície que são usados para acoplar os componentes ao nanotransportador sintético através da utilização desses grupos de superfície, em vez de ligar os componentes a um polímero e então usar esse conjugado de polímero na construção de nanotransportadores sintéticos.
[000146] Em certas modalidades de realização, o acoplamento pode ser uma ligação covalente. Em modalidades, peptídeos de acordo com a invenção podem ser acoplados de modo covalente à superfície externa via um ligador de 1,2,3-triazol, formado pela reação de cicloadição 1,3-dipolar de grupos azido na superfície do nanotransportador com antígeno ou imunossupressor contendo um grupo alcino, ou pela reação de cicloadição 1,3-dipolar de alcinos na superfície do nanotransportador com antígenos ou imunossupressores contendo um grupo azido. Essas reações de cicloadição são preferivelmente realizadas na presença de um catalisador de Cu(I) em conjunto com um ligante adequado para Cu(I) e um agente redutor para reduzir o composto Cu(II) no composto Cu(I) ativo catalítico. Esta cicloadição de azida-alcino catalizada por Cu(I) (CuAAC) também pode ser referida como uma reação de clique.
[000147] Adicionalmente, o acoplamento covalente pode compreender um ligante covalente que compreende um ligante amida, um ligante dissulfídico, um ligante tioéter, um ligante hidrazona, um ligante hidrazida, um ligante imina ou oxima, um ligante de uréia ou tiuréia, um ligante amidina, um ligante amina e um ligante sulfonamida.
[000148] Um ligante amida é formado através de uma ligação amida entre uma amina em um componente tal como o antígeno ou o imunossupressor com o grupo ácido carboxílico de um segundo componente, tal como o nanotransportador. A ligação amida no ligador pode ser preparada usando quaisquer das reações convencionais formadoras de ligações amida com aminoácidos adequadamente protegidos e ácido carboxílico ativado, como um éster ativado de N- hidroxissuccinimida.
[000149] Um ligante dissulfídico é feito através da formação de uma ligação dissulfídica (S-S) entre dois átomos de enxofre na forma, por exemplo, R1-S-S-R2. Uma ligação dissulfídica pode ser formada por troca tiol de um antígeno ou imunossupressor contendo um grupo tiol/mercaptano (-SH) com outro grupo tiol ativado em um polímero ou nanotransportador ou um nanotransportador contendo grupos tiol/mercaptano com um antígeno ou imunossupressor contendo o grupo tiol ativado.
[000150] Um ligante triazol, especificamente um 1,2,3-triazol da forma, em que R1 e R2 podem ser qualquer entidade química, em que é feito por reação de cicloadição 1,3-dipolar de uma azida anexada a um primeiro componente como o nanotransportador com um terminal alcino anexado a um segundo componente, como o antígeno e/ou o adjuvante. A reação de cicloadição 1,3-dipolar é realizada com ou sem catalisador, de preferência com catalisador Cu(I), o qual liga os dois componentes através de uma função 1,2,3-triazol. Essa química é descrita em detalhe por Sharpless e outros., Angew. Chem. Int. Ed. 41(14), 2596, (2002) e Meldal, e outros, Chem. Rev., 2008, 108(8), 2952-3015 e é normalmente referida como reação "clique" ou CuAAC.
[000151] Em modalidades de realização, é preparado um polímero contendo um grupo azida ou alcino, terminal para a cadeia do polímero. Este polímero é então usado para preparar um nanotransportador sintético de tal forma que uma pluralidade dos grupos alcino ou azida estão posicionados na superfície desse nanotransportador. Em alternativa, o nanotransportador sintético pode ser preparado por uma outra via, e subsequentemente funcionalizado com grupos alcino ou azida. O componente é preparado com a presença de um grupo alcino (se o polímero contiver uma azida) ou de um grupo azida (se o polímero contiver um alcino). O componente é então deixado reagir com o nanotransportador via a reação de cicloadição 1,3-dipolar, com ou sem um catalisador, que procede ao acoplamento covalente do componente à partícula através do ligador de 1,2,3-triazol 1,4-dissubstituído.
[000152] Um ligante tioéter é feito através da formação de uma ligação enxofre-carbono (tioéter) na forma, por exemplo, de R1-S-R2. Um tioéter pode ser preparado por alquilação de um grupo tiol/mercaptana (-SH) em um componente com um grupo de alquilação, como haleto ou epóxido, em um segundo componente. Os ligadores de tioéter também podem ser formados por meio da adição de Michael de um grupo tiol/mercaptana em um componente a um grupo alceno deficiente em elétrons em um segundo componente contendo um grupo maleimida ou grupo vinil sulfona, como aceitador de Michael. Em um outro modo, ligadores de tioéter podem ser preparados por meio da reação de tiol- eno mediada por radicais de um grupo tiol/mercaptana em um componente com um grupo alceno em um segundo componente.
[000153] Um ligador de hidrazona é preparado pela reação de um grupo hidrazida em um componente com um grupo aldeído/cetona no segundo componente.
[000154] Um ligador de hidrazida é formado pela reação de um grupo hidrazina em um componente com um grupo ácido carboxílico no segundo componente. Tal reação geralmente é realizada usando química semelhante à formação da ligação amida onde o ácido carboxílico é ativado com um reagente ativador.
[000155] Um ligador de imina ou oxima é formado pela reação de um grupo amina ou N-alcoxiamina (ou amino-oxi) em um componente com um grupo aldeído ou cetona no segundo componente.
[000156] Um ligador de ureia ou tioureia é preparado pela reação de um grupo amina em um componente com um grupo isocianato ou tioisocianato no segundo componente.
[000157] Um ligador de amidina é preparado pela reação de um grupo amina em um componente com um grupo imidoéster no segundo componente.
[000158] Um ligador de amina é preparado pela reação de alquilação de um grupo amina em um componente com um grupo de alquilação, como um grupo haleto, epóxido, ou éster de sulfonato, no segundo componente. Em alternativa, um ligador de amina também pode ser preparado por aminação redutora de um grupo amina em um componente com um grupo aldeído ou cetona no segundo componente com um reagente redutor adequado, como cianoborohidreto de sódio ou triacetoxiborohidreto de sódio.
[000159] Um ligador de sulfonamida é preparado pela reação de um grupo amina em um componente com um grupo haleto de sulfonila (como cloreto de sulfonila) no segundo componente.
[000160] Um ligante sulfona é feito por adição de Michael de um nucleófilo a uma vinilsulfonal. A vinil sulfona ou o nucleófilo pode estar presente na superfície do nanotransportador ou ligado a um componente.
[000161] O componente também pode ser conjugado ao nanotransportador via métodos de conjugação não covalentes. Por exemplo, um antígeno ou imunossupressor de carga negativa pode ser conjugado a um nanotransportador com carga positiva através de adsorção eletrostática. Um componente contendo um ligante metálico também pode ser conjugado a um nanotransportador contendo um complexo metálico via um complexo metal-ligante.
[000162] Em modalidades, o componente pode ser ligado a um polímero, por exemplo, ácido polilático-bloco-polietileno glicol, antes da reunião do nanotransportador sintético, ou o nanotransportador sintético pode ser formado com grupos reativos ou ativáveis em sua superfície. No último caso, o componente pode ser preparado com um grupo que é compatível com a química de ligação que é apresentada pela superfície dos nanotransportadores sintéticos. Em outras modalidades, um componente peptídico pode ser ligado a VLPs ou lipossomos usando um ligador adequado. Um ligante é um composto ou reagente que capaz de acoplar duas moléculas em conjunto. Em uma modalidade de realização, o ligante pode ser um reagente homobifuncional ou heterobifuncional como descrito em Hermanson 2008. Por exemplo, um nanotransportador sintético VLP ou lipossomal contendo um grupo carboxílico na superfície, pode ser tratado com um ligante homobifuncional, di-hidrazida adípica (ADH), na presença de EDC para formar um nanotransportador sintético correspondente com o ligante ADH. O nanotransportador sintético ligado a ADH resultante é então conjugado a um componente peptídico contendo um grupo ácido via a outra extremidade do ligador de ADH em NC, para produzir o correspondente conjugado peptídico de VLP ou lipossomo.
[000163] Quanto a descrições detalhadas de métodos de conjugação disponíveis vide Hermanson G T "Bioconjugate Techniques", 2a Edição Publicado pela Academic Press, Inc., 2008. Para além da ligação covalente, o componente pode ser acoplado por adsorção a um nanotransportador sintético pré-formado ou pode ser acoplado por encapsulamento durante a formação do nanotransportador sintético.
[000164] Qualquer imunossupressor conferido aqui pode ser acoplado ao nanotransportador sintético. Imunossupressores incluem mas não estão limitados a estatinas; inibidores de mTOR, como rapamicina ou um análogo da rapamicina; agentes de sinalização de TGF-β; agonistas de receptores de TGF-β; inibidores da histona desacetilase (HDAC); corticosteroides; inibidores da função mitocondrial, como rotenona; inibidores de P38; inibidores de NF-Kβ; agonistas de receptores de adenosina; agonistas de prostaglandina E2; inibidores de fosfodiesterases, como inibidor da fosfodiesterase 4; inibidores de proteassomos; inibidores de cinases; agonistas de receptores acoplados à proteína G; antagonistas de receptores acoplados à proteína G; glucocorticoides; retinoides; inibidores de citocinas; inibidores de receptores de citocinas; ativadores de receptores de citocinas; antagonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos; agonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos; inibidores da calcineurina; inibidores de fosfatases e ATPs oxidados. Os imunossupressores também incluem IDO, vitamina D3, ciclosporina A, inibidores do receptor de hidrocarboneto de arila, resveratrol, azatiopurina, 6-mercaptopurina, aspirina, ácido niflúmico, estriol, tripolida, interleucinas (e.g., IL-1, IL-10), ciclosporina A, siARNs se direcionando para citocinas ou receptores de citosina e similares.
[000165] Exemplos de estatinas incluem atorvastatina (LIPITOR®, TORVAST®), cerivastatina, fluvastatina (LESCOL®, LESCOL® XL), lovastatina (MEVACOR®, ALTOCOR®, ALTOPREV®), mevastatina (COMPACTIN®), pitavastatina (LIVALO®, PIAVA®), rosuvastatina (PRAVACHOL®, SELEKTINE®, LIPOSTAT®), rosuvastatina (CRESTOR®), e simvastatina (ZOCOR®, LIPEX®).
[000166] Exemplos de inibidores de mTOR incluem rapamicina e seus análogos (por exemplo, CCL-779, RAD001, AP23573, C20- metalilrapamicina (C20-Marap), C16-(S)-butilsulfonamidorrapamicina (C16-BSrap), C16-(S)-3-metilindolrapamicina (C16-iRap) (Bayle e outros. Chemistry & Biology 2006, 13:99-107)), AZD8055, BEZ235 (NVP-BEZ235), ácido crisofânico (crisofanol), deforolimus (MK-8669), everolimus (RAD0001), KU-0063794, PI-103, PP242, temsirolimus, e WYE-354 (disponibilizados pela Selleck, Houston, TX, EUA).
[000167] Exemplos de agentes de sinalização de TGF-β incluem ligantes de TGF-β (por exemplo, activina A, GDF1, GDF11, proteínas morfogênicas do osso, nodal, TGF-βs) e seus receptores (por exemplo, ACVR1B, ACVR1C, ACVR2A, ACVR2B, BMPR2, BMPR1A, BMPR1B, TGFβRI, TGFβRII), R-SMADS/co-SMADS (por exemplo, SMAD1, SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD5, SMAD8), e inibidores de ligantes (por exemplo, folistatina, nogina, cordina, DAN, "lefty", LTBP1, THBS1, Decorina).
[000168] Exemplos de inibidores da função mitocondrial incluem atractilosídeo (sal dipotássico), ácido bongkréquico (sal de triamônio), carbonil cianeto de m-clorofenil-hidrazona, carboxyatractilosídeo (por exemplo, deAtractylis gummifera), CGP-37157, (-)-Deguelina (por exemplo, de Mundulea sericea), F16, peptídeo do domínio de ligação de VDAC de hexocinase II, oligomicina, rotenona, Ru360, SFK1, e valinomicina (por exemplo, de Streptomyces fulvissimus) (EMD4Biosciences, EUA).
[000169] Exemplos de inibidores de P38 incluem SB-203580 (4-(4- Fluorofenil)-2-(4-metilsulfinilfenil)-5-(4-piridil)1H-imidazol), SB-239063 (trans-1-(4-hidroxiciclohexil)-4-(fluorofenil)-5-(2-metóxi-pirimidin-4-il) imidazol), SB-220025 (5-(2-amino-4-pirimidinil)-4-(4-fluorofenil)-1-(4- piperidinil)imidazol)), e ARRY-797.
[000170] Exemplos de inibidores de NF (por exemplo, NK-Kβ) incluem IFRD1, 2-(1,8-naftiridin-2-il)-Fenol, ácido 5-aminossalicílico, BAY 117082, BAY 11-7085, CAPE (Éster de Fenetila do Ácido Cafeico), maleato de dietila, Inibidor de IKK-2 IV, IMD 0354, lactacistina, MG-132 [Z-Leu-Leu-Leu-CHO], Inibidor da Ativação de NFKB III, Inibidor da Ativação de NF-KB II, JSH-23, partenolida, Óxido de Fenilarsina (PAO), PPM-18, sal de amônio do ácido pirrolidinoditiocarbâmico, QNZ, RO 106-9920, rocaglamida, rocaglamida AL, rocaglamida C, rocaglamida I, rocaglamida J, rocaglaol, (R)-MG-132, salicilato de sódio, triptolida (PG490), wedelolactona.
[000171] Exemplos de agonistas de receptores de adenosina incluem CGS-21680 e ATL-146e.
[000172] Exemplos de agonistas de prostaglandina E2 incluem E- Prostanoide 2 e E-Prostanoide 4.
[000173] Exemplos de inibidores da fosfodiesterase (inibidores não seletivos e seletivos) incluem cafeína, aminofilina, IBMX (3-isobutil-1- metilxantina), paraxantina, pentoxifilina, teobrometo, tefilina, xantinas metiladas, vinpocetina, EHNA (eritro-9-(2-hidróxi-3-nonil)adenina), anagrelida, enoximona (PERFANTM), milrinona, levosimendona, mesembrina, ibudilast, piclamilast, luteolina, drotaverina, roflumilast (DAXASTM, DALIRESPTM), sildenafil (REVATION®, VIAGRA®), tadalafil (ADCIRCA®, CIALIS®), vardenafil (LEVITRA®, STAXYN®), udenafil, avanafil, icariina, 4-metilpiperazina, e pirazolo pirimidin-7-1.
[000174] Exemplos de inibidores de proteassomos incluem bortezomib, disulfiram, epigalocatequina-3-galato, e salinosporamida A.
[000175] Exemplos de inibidores de cinase incluem bevacizumab, BIBW 2992, cetuximab (ERBITUX®), imatinib (GLEEVEC®), trastuzumab (HERCEPTIN®), gefitinib (IRESSA®), ranibizumab (LUCENTIS®), pegaptanib, sorafenib, dasatinib, sunitinib, erlotinib, nilotinib, lapatinib, panitumumab, vandetanib, E7080, pazopanib, mubritinib.
[000176] Exemplos de glucocorticoides incluem hidrocortisona (cortisol), acetato de cortisona, prednisona, prednisolona, metilprednisolona, dexametasona, betametasona, triancinolona, beclometasona, acetato de fludrocortisona, acetato de desoxicorticosterona (DOCA), e aldosterona.
[000177] Exemplos de retinoides incluem retinol, retinal, tretinoína (ácico retinoico, RETIN-A®), isotretinoína (Accutane®, Amnesteem®, Claravis®, Sotret®), alitretinoína (PANRETIN®), etretinato (TEGISONTM) e seu metabolito acitretina (SORIATANE®), tazaroteno (Tazorac®, Avage®, Zorac®), bexaroteno (TARGRETIN®), e adapaleno (DIFFERIN®).
[000178] Exemplos de inibidores de citocina incluem IL1ra, antagonista do receptor de IL1, IGFBP, TNF-BF, uromodulina, Alfa-2-Macroglobulina, Ciclosporina A, Pentamidina, e Pentoxifilina (Pentopak®, Pentoxil®, Trental®).
[000179] Exemplos de antagonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos incluem GW9662, antagonista de PPARY III, G335, T0070907 (EMD4Biosciences, EUA).
[000180] Exemplos de agonistas de receptores ativados por proliferadores de peroxissomos incluem pioglitazona, ciglitazona, clofibrato, GW1929, GW7647, L-165,041, LY 171883, ativador de PPARY, Fmoc-Leu, troglitazona, e WY-14643 (EMD4Biosciences, EUA).
[000181] Exemplos de inibidores de histona desacetilase incluem ácidos hidroxâmicos (ou hidroxamatos) como tricostatina A, tetrapeptídeos cíclicos (como trapoxina B) e depsipeptídeos, benzamidas, cetonas eletrofílicas, compostos ácidos alifáticos, como butirato de fenila e ácido valproico, ácidos hidroxâmicos como vorinostat (SAHA), belinostat (PXD101), LAQ824, e panobinostat (LBH589), benzamidas como entinostat (MS-275), CI994, e mocetinostat (MGCD0103), nicotinamida, derivados de NAD, di-hidrocumarina, naftopiranona, e 2-hidroxinaftaldeídos.
[000182] Exemplos de inibidores da calcineurina incluem ciclosporina, pimecrolimus, voclosporina, e tacrolimus.
[000183] Exemplos de inibidores de fosfatases incluem cloridrato de BN82002, CP-91149, caliculina A, ácido cantarídico, cantaridina, cipermetrina, etil-3,4-defostatina, sal de sódio de fostriecina, MAZ51, metil-3,4-defostatina, NSC 95397, norcantaridina, sal de amônio do ácido ocadaico de Prorocentrum concavum, ácido ocadaico, sal de potássio do ácido ocadaico, sal de sódio do ácido ocadaico, óxido de fenilarsina, vários coquetéis de inibidores de fosfatases, proteína fosfatase 1C, proteína inibidora da proteína fosfatase 2A, proteína fosfatase 2A1, proteína fosfatase 2A2, ortovanadato de sódio.
[000184] Em algumas modalidades, os antígenos apresentáveis por APC como descrito aqui são também acoplados a nanotransportadores sintéticos. Em algumas modalidades, os antígenos apresentáveis por APC são acoplados a nanotransportadores sintéticos iguais ou diferentes daqueles aos quais são acoplados os imunossupressores. Em outras modalidades, os antígenos apresentáveis por APC não são acoplados a nenhuns nanotransportadores sintéticos. APC antígenos apresentáveis incluem qualquer dos antígenos conferidos neste documento. Tais antígenos incluem antígenos associados com doença inflamatória, autoimune, alergia, doença enxerto contra o hospedeiro, rejeição de órgãos ou tecidos, e antígenos de transplante e antígenos de proteínas terapêuticas.
[000185] Proteínas terapêuticas incluem, mas não estão limitadas a proteínas terapêuticas aptas a serem infundidas, enzimas, cofatores enzimáticos, hormônios, fatores de coagulação do sangue, citocinas e interferons, fatores de crescimento, anticorpos monoclonais, e anticorpos policlonais (por exemplo, que são administrados a um sujeito como terapia de substituição), e proteínas associadas a doença de Pompe (por exemplo, alglucosidase alfa, rhGAA (por exemplo, Myozyme e Lumizyme (Genzyme)). Proteínas terapêuticas também incluem proteínas envolvidas na cascata de coagulação do sangue. Proteínas terapêuticas incluem mas não estão limitadas a Fator VIII, Fator VII, Fator IX, Fator V, Fator de von Willebrand, Fator de von Heldebrant, ativador do plasminogênio em tecidos, insulina, hormônio de crescimento, eritropoietina alfa, VEGF, trombopoietina, lisozima, antitrombina e afins. Proteínas terapêuticas também incluem adipocinas, como leptina e adiponectina. Outros exemplos de proteínas terapêuticas são descritos embaixo e aqui em outro local. Também estão incluídos fragmentos ou derivados de quaisquer das proteínas terapêuticas conferidas como antígeno.
[000186] Exemplos de proteínas terapêuticas usadas em terapia de substituição enzimática de sujeitos com distúrbio de depósito lisossômico incluem, mas não estão limitados a imiglucerase para o tratamento de doença de Gaucher (por exemplo, CEREZYMETM), a- galactosidase A (a-gal A) para o tratamento de doença de Fabry (por exemplo, agalsidase beta, FABRYZYMETM), a-glucosidase ácida (GAA) para o tratamento de doença de Pompe (por exemplo, alglucosidase alfa, LUMIZYMETM, MYOZYMETM), arilsulfatase B para o tratamento de Mucopolissacaridoses (por exemplo, laronidase, ALDURAZYMETM, idursulfase, ELAPRASETM, arilsulfatase B, NAGLAZYMETM).
[000187] Exemplos de enzimas incluem oxidorredutases, transferases, hidrolases, liases, isomerases, e ligases.
[000188] Exemplos de hormônios incluem Melatonina (N-acetil-5- metoxitriptamina), Serotonina, Tiroxina (ou tetraiodotironina) (um hormônio da tireoide), Tri-iodotironina (um hormônio da tireoide), Epinefrina (ou adrenalina), Norepinefrina (ou noradrenalina), Dopamina (ou hormônio inibidor da prolactina), Hormônio antimulleriano (ou fator ou hormônio inibidor mulleriano), Adiponectina, Hormônio adrenocorticotrópico (ou corticotropina), Angiotensinogênio e angiotensina, Hormônio antidiurético (ou vasopressina, arginina vasopressina), Peptídeo atrial-natriurético (ou atriopeptina), Calcitonina, Colecistoquinina, Hormônio de liberação de corticotropina, Eritropoietina, Hormônio estimulante do folículo, Gastrina, Grelina, Glucagon, Peptídeo do tipo glucagon (GLP-1), GIP, Hormônio de liberação de gonadotropina, Hormônio de liberação do hormônio de crescimento, Gonadotropina coriônica humana, Lactogênio placentário humano, Hormônio de crescimento, Inibina, Insulina, Fator de crescimento do tipo insulina (ou somatomedina), Leptina, Hormônio luteinizante, Hormônio estimulante de melanócitos, Orexina, Oxitocina, Hormônio da paratireoide, Prolactina, Relaxina, Secretina, Somatostatina, Trombopoietina, Hormônio estimulante da tireoide (ou tirotropina), Hormônio de liberação de tirotropina, Cortisol, Aldosterona, Testosterona, Desidroepiandrosterona, Androstenodiona, Di- hidrotestosterona, Estradiol, Estrona, Estriol, Progesterona, Calcitriol (1,25-di-hidroxivitamina D3), Calcidiol (25-hidroxivitamina D3), Prostaglandinas, Leucotrienos, Prostaciclina, Tromboxano, Hormônio de liberação de prolactina, Lipotropina, Peptideo natriurético cerebral, Neuropeptídeo Y, Histamina, Endotelina, Polipeptídeo pancreático, Renina, e Encefalina.
[000189] Exemplos de fatores sanguíneos e de coagulação do sangue incluem Fator I (fibrinogênio), Fator II (protrombina), fator tecidual, Fator V (proacelerina, fator instável), Fator VII (fator estável, proconvertina), Fator VIII (globulina antihemofílica), Fator IX (fator de Christmas ou componente de tromboplastina plasmática), Fator X (fator de Stuart- Prower), Fator Xa, Fator XI, Fator XII (fator de Hageman), Fator XIII (fator estabilizador de fibrina), fator de von Willebrand, precalicreína (fator de Fletcher), quininogênio de alto peso molecular (HMWK) (fator de Fitzgerald), fibronectina, fibrina, trombina, antitrombina III, cofator de heparina II, proteína C, proteína S, proteína Z, inibidor de proteases relacionado à proteína Z (ZPI), plasminogênio, alfa 2-antiplasmina, ativador do plasminogênio em tecidos (tPA), urocinase, inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI1), inibidor do ativador do plasminogênio-2 (PAI2), pró-coagulante do câncer, e epoetina alfa (Epogen, Procrit).
[000190] Exemplos de citocinas incluem linfocinas, interleucinas, e quimiocinas, citocinas do tipo 1, como IFN-Y, TGF-β, e citocinas do tipo 2, como IL-4, IL-10, e IL-13.
[000191] Exemplos de fatores de crescimento incluem Adrenomedulina (AM), Angiopoietina (Ang), Fator autócrino de motilidade, Proteínas morfogenéticas do osso (BMPs), Fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), Fator de crescimento epidermal (EGF), Eritropoietina (EPO), Fator de crescimento de fibroblastos (FGF), Fator neurotrófico derivado da linhagem de células gliais (GDNF), Fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF), Fator estimulador de colônias de granulócitos macrófagos (GM-CSF), Fator de diferenciação do crescimento-9 (GDF9), Fator de crescimento de hepatócitos (HGF), Fator de crescimento derivado de hepatoma (HDGF), Fator de crescimento do tipo insulina (IGF), Fator estimulador da migração, Miostatina (GDF-8), Fator de crescimento do nervo (NGF) e outras neurotrofinas, Fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF), Trombopoietina (TPO), Fator de transformação do crescimento alfa (TGF-α), Fator de transformação do crescimento beta (TGF-β), Fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α), Fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), Via de Sinalização da Wnt, fator de crescimento placentário (PlGF), [(Somatotrofina Bovina Fetal)] (FBS), IL-1, IL-2, IL- 3, IL-4, IL-5, IL-6, e IL-7.
[000192] Exemplos de anticorpos monoclonais incluem Abagovomab, Abciximab, Adalimumab, Adecatumumab, Afelimomab, Afutuzumab, Alacizumab pegol, ALD, Alemtuzumab, Altumomab pentetato, Anatumomab mafenatox, Anrukinzumab, Globina antitimócitos, Apolizumab, Arcitumomab, Aselizumab, Atlizumab (tocilizumab), Atorolimumab, Bapineuzumab, Basiliximab, Bavituximab, Bectumomab, Belimumab, Benralizumab, Bertilimumab, Besilesomab, Bevacizumab, Biciromab, Bivatuzumab mertansina, Blinatumomab, Brentuximab vedotina, Briakinumab, Canakinumab, Cantuzumab mertansina, Capromab pendetida, Catumaxomab, Cedelizumab, Certolizumab pegol, Cetuximab, Citatuzumab bogatox, Cixutumumab, Clenoliximab, Clivatuzumab tetraxetano, Conatumumab, Dacetuzumab, Daclizumab, Daratumumab, Denosumab, Detumomab, Dorlimomab aritox, Dorlixizumab, Ecromeximab, Eculizumab, Edobacomab, Edrecolomab, Efalizumab, Efungumab, Elotuzumab, Elsilimomab, Enlimomab pegol, Epitumomab cituxetano, Epratuzumab, Erlizumab, Ertumaxomab, Etaracizumab, Exbivirumab, Fanolesomab, Faralimomab, Farletuzumab, Felvizumab, Fezakinumab, Figitumumab, Fontolizumab, Foravirumab, Fresolimumab, Galiximab, Gantenerumab, Gavilimomab, Gemtuzumab ozogamicina, GC1008, Girentuximab, Glembatumumab vedotina, Golimumab, Gomiliximab, Ibalizumab, Ibritumomab tiuxetano, Igovomab, Imciromab, Infliximab, Intetumumab, Inolimomab, Inotuzumab ozogamicina, Ipilimumab, Iratumumab, Keliximab, Labetuzumab, Lebrikizumab, Lemalesomab, Lerdelimumab, Lexatumumab, Libivirumab, Lintuzumab, Lorvotuzumab mertansina, Lucatumumab, Lumiliximab, Mapatumumab, Maslimomab, Matuzumab, Mepolizumab, Metelimumab, Milatuzumab, Minretumomab, Mitumomab, Morolimumab, Motavizumab, Muromonab-CD3, Nacolomab tafenatox, Naptumomab estafenatox, Natalizumab, Nebacumab, Necitumumab, Nerelimomab, Nimotuzumab, Nofetumomab merpentano, Ocrelizumab, Odulimomab, Ofatumumab, Olaratumab, Omalizumab, Oportuzumab monatox, Oregovomab, Otelixizumab, Pagibaximab, Palivizumab, Panitumumab, Panobacumab, Pascolizumab, Pemtumomab, Pertuzumab, Pexelizumab, Pintumomab, Priliximab, Pritumumab, Rafivirumab, Ramucirumab, Ranibizumab, Raxibacumab, Regavirumab, Reslizumab, Rilotumumab, Rituximab, Robatumumab, Rontalizumab, Rovelizumab, Ruplizumab, Satumomab pendetido, Sevirumab, Sibrotuzumab, Sifalimumab, Siltuximab, Siplizumab, Solanezumab, Sonepcizumab, Sontuzumab, Stamulumab, Sulesomab, Tacatuzumab tetraxetano, Tadocizumab, Talizumab, Tanezumab, Taplitumomab paptox, Tefibazumab, Telimomab aritox, Tenatumomab, Teneliximab, Teplizumab, Ticilimumab (tremelimumab), Tigatuzumab, Tocilizumab (atlizumab), Toralizumab, Tositumomab, Trastuzumab, Tremelimumab, Tucotuzumab celmoleucina, Tuvirumab, Urtoxazumab, Ustekinumab, Vapaliximab, Vedolizumab, Veltuzumab, Vepalimomab, Visilizumab, Volociximab, Votumumab, Zalutumumab, Zanolimumab, Ziralimumab, e Zolimomab aritox.
[000193] Exemplos de proteínas terapêuticas para terapia de infusão ou injetáveis incluem, por exemplo, Tocilizumab (Roche/Actemra®), alfa-1 antitripsina (Kamada/AAT), Hematide® (Affymax e Takeda, peptídeo sintético), albinterferon alfa-2b (Novartis/Zalbin™), Rhucin® (Pharming Group, terapia de substituição de inibidor de C1), tesamorelina (Theratechnologies/Egrifta, fator de liberação de hormônio de crescimento sintético), ocrelizumab (Genentech, Roche e Biogen), belimumab (GlaxoSmithKline/Benlysta®), pegloticase (Savient Pharmaceuticals/Krystexxa™), taliglucerase alfa (Protalix/Uplyso), agalsidase alfa (Shire/Replagal®), velaglucerase alfa (Shire).
[000194] Proteínas terapêuticas adicionais úteis de acordo com aspectos dessa invenção serão claras para os profissionais, e a invenção não está limitada a esse respeito.
[000195] Em algumas modalidades, um componente, como um antígeno ou imunossupressor, pode ser isolado. Isolado significa que o elemento está separado do seu ambiente nativo e está presente em quantidades suficientes para permitir a sua identificação ou utilização. Isso significa, por exemplo, que o elemento pode ser (i) seletivamente produzido por meio de clonagem por expressão ou (ii) purificado, tal como por meio de cromatografia ou eletroforese. Elementos isolados podem ser substancialmente puros, mas tal não é necessário. Uma vez que um elemento isolado pode ser misturado com um excipiente farmaceuticamente aceitável em uma preparação farmacêutica, o elemento pode compreender somente uma pequena porcentagem em peso da preparação. Ainda assim, o elemento está isolado, pois foi separado das substâncias às quais pode estar associado em sistemas vivos, por exemplo, isolado de outros lípidos ou proteínas. Quaisquer dos elementos aqui providos podem estar isolados. Quaisquer dos antigêneos conferidos aqui podem ser incluídos nas composições em forma isolada.
D. MÉTODOS DE FABRICAÇÃO E UTILIZAÇÃO DAS COMPOSIÇÕES INVENTIVAS E MÉTODOS RELACIONADOS
[000196] Os nanotransportadores sintéticos podem ser preparados utilizando uma larga variedade de métodos conhecidos na arte. Por exemplo, os nanotransportadores sintéticos podem ser formados por métodos como a nanoprecipitação, focalização do fluxo canais fluídicos, secagem por vaporização, evaporação do solvente a partir da emulsão simples e dupla, extração do solvente, separação de fases, moagem, procedimentos de microemulsão, microfabricação, nanofabricação, camadas sacrificiais, coacervação simples e complexa, e outros métodos bem conhecidos para os especialistas comuns na arte. Em alternativa ou adicionalmente, as sínteses de solventes aquosos e orgânicos para semicondutores monodispersos, condutivos, magnéticos, orgânicos e outros nanomateriais foram descritos (Pellegrino e outros., 2005, Small, 1:48; Murray e outros., 2000, Ann. Rev. Mat. Sci., 30:545; e Trindade e outros., 2001, Chem. Mat., 13:3843). Métodos adicionais foram descritos na bibliografia (vide, por exemplo., Doubrow, Ed., "Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy," CRC Press, Boca Raton, 1992; Mathiowitz e outros., 1987, J. Control. Release, 5:13; Mathiowitz e outros., 1987, Reactive Polymers, 6:275; e Mathiowitz e outros., 1988, J. Appl. Polymer Sci., 35:755; Patentes US 5578325 e 6007845; P. Paolicelli e outros., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010)).
[000197] Vários materiais podem ser encapsulados em nanotransportadores sintéticos como desejável, usando uma variedade de métodos, incluindo mas não se limitando a, C. Astete e outros., "Synthesis and characterization of PLGA nanoparticles" J. Biomater. Sci. Polymer Edn, Vol. 17, No. 3, pág. 247-289 (2006); K. Avgoustakis "Pegylated Poly(Lactide) e Poly(Lactide-Co-Glycolide) Nanoparticles: Preparation, Properties and Possible Applications in Drug Delivery" Current Drug Delivery 1:321-333 (2004); C. Reis e outros., "Nanoencapsulation I. Methods for preparation of drug-loaded polymeric nanoparticles" Nanomedicine 2:8-21 (2006); P. Paolicelli e outros., "Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles" Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010). Podem ser usados outros métodos adequados para a encapsulação de materiais em nanotransportadores sintéticos, incluindo, sem limitação, métodos divulgados na Patente dos Estados Unidos 6,632,671 atribuída a Unger, 14 de outubro de 2003.
[000198] Em certas modalidades, nanotransportadores sintéticos são preparados por um processo de nanoprecipitação ou secagem por vaporização. As condições utilizadas na preparação dos nanotransportadores sintéticos podem ser alteradas a fim de produzir partículas com um tamanho ou propriedade desejada (por exemplo, hidrofobicidade, hidrofilicidade, morfologia externa, "pegajosidade", forma, etc.). O método de preparação dos nanotransportadores sintéticos e as condições (por exemplo, solvente, temperatura, concentração, taxa do fluxo de ar, etc.) utilizadas podem depender dos materiais a serem acoplados aos nanotransportadores sintéticos e/ou da composição da matriz polimérica.
[000199] Se as partículas preparadas por qualquer um dos métodos acima tiverem um intervalo de tamanhos fora do intervalo desejado, as partículas podem ser dimensionadas, por exemplo, usando um crivo.
[000200] Componentes (isto é, elementos) dos nanotransportadores sintéticos inventivos (como frações das quais é compreendida uma superfície imunoativa, frações de direcionamento, matrizes poliméricas, antígenos, imunossupressores e afins) podem ser acoplados ao nanotransportador sintético global, por exemplo, através de uma ou mais ligações covalentes, ou podem ser acoplados por meio de um ou mais ligadores. Os métodos adicionais de funcionalização dos nanotransportadores sintéticos podem ser adaptados a partir da Publicação do Pedido de Patente US 2006/0002852 de Saltzman e outros., Publicação do Pedido de Patente US 2009/0028910 para DeSimone e outros., ou Publicação do Pedido de Patente Internacional WO/2008/127532 A1 para Murthy e outros.
[000201] Em alternativa ou adicionalmente, os nanotransportadores sintéticos podem ser acoplados a elementos, conforme conferidos neste documento, diretamente ou indiretamente, via interações não covalentes. Em modalidades de realização não covalentes, a ligação não covalente é mediada por interações não covalentes incluindo, mas não se limitando às interações de carga, interações de afinidade, coordenação metálica, adsorção física, interações hospedeiro- convidado, interações hidrófobas, interações de empilhamento TT, interações das ligações por hidrogênio, interações de van der Waals, interações magnéticas, interações eletrostáticas, interações dipolo- dipolo, e/ou suas combinações. Tais acoplamentos podem ser arranjados para ficarem sobre uma superfície externa ou uma superfície interna de um nanotransportador sintético da invenção. Em modalidades de realização, o encapsulamento e/ou a absorção é uma forma de acoplamento. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos inventivos podem ser combinados com um antígeno por meio de mistura no mesmo veículo ou sistema de distribuição.
[000202] As populações de nanotransportadores sintéticos podem ser combinadas para formar formas de dosagem farmacêuticas de acordo com a presente invenção, usando métodos farmacêuticos tradicionais de mistura. Esses incluem mistura líquido-líquido, na qual duas ou mais suspensões, cada uma contendo um ou mais subconjuntos de nanotransportadores, são diretamente combinadas ou são reunidas via um ou mais recipientes contendo diluente. Como os nanotransportadores sintéticos também podem ser produzidos ou armazenados na forma de pó, uma mistura de pó seco-pó poderia ser realizada como o poderia ser a re-suspensão de dois ou mais pós em um meio comum. Dependendo das propriedades dos nanotransportadores e dos seus potenciais de interação, podem haver vantagens atribuídas a uma ou outra via de mistura.
[000203] As composições típicas da invenção que compreendem nanotransportadores sintéticos podem compreender tampões inorgânicos ou orgânicos (por exemplo., sais de sódio ou potássio de fosfato, carbonato, acetato, ou citrato) e agentes de ajuste do pH (por exemplo, ácido clorídrico, hidróxido de sódio ou de potássio, sais de citrato ou acetato, ácidos aminados e seus sais), antioxidantes (por exemplo., ácido ascórbico, alfa-tocoferol), tensioativos (por exemplo., polisorbato 20, polisorbato 80, polioxietileno 9-10 nonilfenol, desoxicolato de sódio), solução e/ou crio/lio estabilizadores (por exemplo., sacarose, lactose, manitol, trealose), agentes de regulação osmótica (por exemplo., sais ou açúcares), agentes antibacterianos (por exemplo., ácido benzóico, fenol, gentamicina), agentes antiespuma (por exemplo., polidimetil- silozona), conservantes (por exemplo., timerosal, 2-fenoxietanol, EDTA), estabilizadores poliméricos e agentes reguladores da viscosidade (por exemplo., polivinilpirrolidona, poloxâmero 488, carboximetil- celulose) e co-solventes (por exemplo., glicerol, polietilenoglicol, etanol).
[000204] As composições de acordo com a invenção compreendem os nanotransportadores sintéticos da invenção em combinação com excipientes farmaceuticamente aceitáveis. As composições podem ser feitas usando técnicas convencionais farmacêuticas de fabricação e composição para se chegar às formas úteis de dosagem. As técnicas adequadas para uso na prática da presente invenção podem ser encontradas no Handbook of Industrial Mixing: Science and Practice, Editato por Edward L. Paul, Victor A. Atiemo-Obeng, e Suzanne M. Kresta, 2004 John Wiley & Sons, Inc.; e Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design, 2a Ed. Editado por M.E. Auten, 2001, Churchill Livingstone. Em uma modalidade de realização, os nanotrans-portadores sintéticos inventivos são suspensos em solução salina esterilizada para injeção em conjunto com um conservante.
[000205] Deve ser entendido que as composições da invenção podem ser feitas em qualquer forma adequada, e a invenção não se limita, de forma alguma a composições que podem ser produzidas utilizando os métodos descritos a seguir. A seleção de um método apropriado pode requerer atenção para as propriedades das porções particulares estando associadas.
[000206] Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos da invenção são fabricados sob condições estéreis ou são esterilizados terminalmente. Isso pode assegurar que as composições resultantes são esterilizadas e não infecciosas, melhorando assim a segurança quando comparadas com composições não esterilizadas. Isso fornece uma medida de segurança valiosa, especialmente quando os indivíduos que recebem nanotransportadores sintéticos têm defeitos imunes, sofrem de infeção e/ou são suscetíveis à infecção. Em algumas modalidades de realização, os nanotransportadores sintéticos da invenção podem ser liofilizados e armazenados em suspensão ou em pó liofilizado dependendo da estratégia de formulação para ficar longos períodos sem perder atividade.
[000207] As composições da invenção podem ser administradas por uma variedade de vias, incluindo ou não se limitando a subcutânea, intranasal, oral, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, transmucosa, sublingual, retal, oftálmica, pulmonar, intradermal, transdermal, transcutânea ou por uma combinação dessas vias. Vias de administração também incluem administração por inalação ou aerossol pulmonar. Técnicas de preparação de sistemas de distribuição de aerossol são bem conhecidas dos profissionais (vide, por exemplo, Sciarra e Cutie, "Aerosols", em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a edição, 1990, páginas 1694-1712; incorporado por referência).
[000208] Os enxertos transplantáveis ou as proteínas terapêuticas conferidas como uma terapia baseada em células da invenção podem ser administradas por administração parenteral, intra-arterial, intranasal ou intravenosa ou por injeção em nódulos linfáticos ou na câmara anterior do olho ou por administração local em um órgão ou tecido de interesse. A administração pode ser efetuada mediante injeção subcutânea, intratecal, intraventricular, intramuscular, intraperitoneal, intracoronária, intrapancreática, intrahepática ou brônquica.
[000209] As composições da invenção podem ser administradas em quantidades eficazes, como as quantidades eficazes aqui descritas em outro local. As doses das formas de dosagem contêm quantidades variáveis de populações de nanotransportadores sintéticos e/ou quantidades variáveis dos antígenos e/ou imunossupressores, de acordo com a invenção. A quantidade de nanotransportadores sintéticos e/ou antígenos e/ou imunossupressores presentes nas formas de dosagem inventivas pode ser variada de acordo com a natureza dos antígenos e/ou imunossupressores, o benefício terapêutico a ser alcançado, e outros parâmetros afins. Em modalidades, podem ser conduzidos estudos de variação de doses para estabelecer a quantidade terapêutica ótima da população de nanotransportadores sintéticos e a quantidade de antígenos e/ou de imunossupressores a estar presente na forma de dosagem. Em modalidades, os nanotransportadores sintéticos e/ou os antígenos e/ou imunossupressores estão presentes na forma de dosagem em uma quantidade eficaz para gerar uma resposta imunológica tolerogênica aos antígenos por administração a um sujeito. Pode ser possível determinar quantidades dos antígenos e/ou imunossupressores eficazes para gerar uma resposta imunológica tolerogênica usando estudos e técnicas convencionais de variação de doses em sujeitos. As formas de dosagem da invenção podem ser administradas em uma variedade de frequências. Em uma modalidade de realização preferida, pelo menos uma administração da forma de dosagem é suficiente para gerar uma resposta farmacologicamente relevante. Em modalidades de realização mais preferidas, pelo menos duas administrações, pelo menos três administrações ou, pelo menos, quatro administrações, da forma de dosagem são utilizadas para garantir uma resposta farmacologicamente relevante.
[000210] A administração profilática das composições inventivas pode ser iniciada antes do surgimento da doença, distúrbio ou condição médica, ou a administração terapêutica pode ser iniciada depois de estabelecido um distúrbio ou condição médica.
[000211] Em algumas modalidades, a administração de nanotransportadores sintéticos é efetuada, por exemplo, antes da administração de uma proteína terapêutica, enxerto transplantável ou exposição a um alérgeno. Em modalidades exemplificativas, nanotransportadores sintéticos são administrados em um ou mais instantes, incluindo mas não se limitando a 30, 25, 20, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, ou 0 dias antes da administração de uma proteína terapêutica, enxerto transplantável ou exposição a um alérgeno. Em adição ou em alterna, os nanotransportadores sintéticos podem ser administrados a um sujeito, depois da administração de uma proteína terapêutica, enxerto transplantável ou à exposição a um alérgeno. Em modalidades exemplificativas, nanotransportadores sintéticos são administrados em um ou mais instantes, incluindo mas não se limitando a 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, etc. dias depois da administração de uma proteína terapêutica, enxerto transplantável ou exposição a um alérgeno.
[000212] Em algumas modalidades, é administrada a um sujeito uma dose de manutenção (por exemplo, de uma composição de nanotransportadores sintéticos conferida aqui) depois de uma administração inicial ter originado uma resposta tolerogênica no sujeito, por exemplo, para manter o efeito tolerogênico alcançado após a dose inicial, para prevenir uma reação imunológica indesejada no sujeito, ou para evitar que o sujeito se torne em um sujeito em risco de sofrer de uma resposta imunológica indesejada ou um nível indesejado de uma resposta imunológica. Em algumas modalidades, a dose de manutenção é uma dose igual à dose inicial que o sujeito recebeu. Em algumas modalidades, a dose de manutenção é uma dose menor do que a dose inicial. Por exemplo, em algumas modalidades, a dose de manutenção é cerca de 3/4, cerca de 2/3, cerca de 1/2, cerca de 1/3, cerca de 1/4, cerca de 1/8, cerca de 1/10, cerca de 1/20, cerca de 1/25, cerca de 1/50, cerca de 1/100, cerca de 1/1.000, cerca de 1/10.000, cerca de 1/100.000, ou cerca de 1/1.000.000 (peso/peso) da dose inicial.
[000213] As composições e métodos descritos aqui podem ser usados para induzir ou intensificar uma resposta imunológica tolerogênica e/ou para suprimir, modular, direcionar ou redirecionar uma resposta imunológica indesejada com a finalidade de obter supressão imunológica. As composições e métodos descritos neste documento podem ser usados no diagnóstico, profilaxia e/ou tratamento de doenças, distúrbios ou condições nas quais a supressão imunológica (por exemplo, resposta imunológica tolerogênica) irá conferir uma vantagem do tratamento. Tais doenças, distúrbios ou condições incluem doenças autoimunes, doenças inflamatórias, alergias, rejeição de órgãos ou tecidos e doença do enxerto contra o hospedeiro. As composições e métodos descritos neste documento também podem ser utilizados em sujeitos que tenham sido submetidos ou que irão ser submetidos a transplante. As composições e métodos descritos neste documento também podem ser usados em sujeitos que tenham recebido, estejam a receber ou irão receber uma proteína terapêutica contra a qual esses geraram ou se espera que gerem uma resposta imune indesejada.
[000214] As doenças autoimunes incluem, mas não estão limitadas a, artrite reumatoide, esclerose múltipla, diabetes mellitus mediada por imune ou do Tipo I, doença inflamatória do intestino (e.g., doença de Crohn ou colite ulcerosa), lúpus eritematoso sistêmico, psoríase, escleroderma, doença autoimune da tiroise, alopecia areata, doença de Grave, síndrome de Guillain-Barré, doença celíaca, síndrome de Sjogren, febre reumática, gastrite, gastrite atrófica autoimune, hepatite autoimune, insulite, ooforite, orquite, uveíte, uveíte facogênica, miastenia grave, mixoedema primário, anemia perniciosa, anemia hemolítica perniciosa, doença de Addison, escleroderma, síndrome de Goodpasture, nefrite, por exemplo, glomerulonefrite, psoríase, pênfigo vulgar, pemfigoide, oftalmia simpatética, púrpura trombocitopênica idiopática, feucopenia idiopática, granulomatose de Wegener e poli/dermatomiosite.
[000215] Alguns autoantígenos exemplares adicionais associados com doenças autoimunitárias e autoanticorpos, que são contemplados para utilização na invenção, são descritos na Tabela 1 abaixo:
[000216] As doenças inflamatórias incluem, mas não estão limitadas a, Alzheimer, artrite, asma, aterosclerose, doença de Crohn, colite, fibrose cística, dermatite, diverticulite, hepatite, síndrome do intestino irritável (IBS), lúpus eritematoso, distrofia muscular, nefrite, Parkinson, zona e colite ulcerosa. As doenças inflamatórias também incluem, por exemplo, doença cardiovascular, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), bronquiectasia, colecistite crônica, tuberculose, tiroidite de Hashimoto, septicemia, sarcoidose, silicose e outras pneumoconioses, e um corpo estranho implatando em uma ferida, mas não estão assim limitadas. Como usado aqui, o termo "septicemia" se refere a uma síndrome clínica bem reconhecida associada a uma resposta inflamatória sistêmica do hospedeiro a invasão microbiana. O termo "septicemia" como usado aqui se refere a uma condição que é tipicamente sinalizada por febre ou hipotermia, taquicardia, e taquipneia, e em casos graves pode progredir para hipotensão, disfunção dos órgãos, e mesmo morte.
[000217] Em algumas modalidades, a doença inflamatória é doença inflamatória do intestino não autoimune, adesões pós-cirúrgicas, doença da artéria coronária, fibrose hepática, síndrome de insuficiência respiratória aguda, pancreatite inflamatória aguda, pancreatite induzida por colangiopancreatografia retrógada endoscópica, queimaduras, aterogênese das artérias coronária, cerebral e periférica, apendicite, colecistite, diverticulite, distúrbios fibróticos viscerais, cicatrização de feridas, distúrbios de cicatrização da pele (celoides, hidradenite supurativa), distúrbios granulomatosos (sarcoidose, cirrose biliar primária), asma, pioderma gangrenoso, síndrome de Sweet, doença de Behcet, clorangite esclerosante primária ou um abcesso. Em algumas modalidades, a doença inflamatória é doença inflamatória do intestino (e.g., doença de Crohn ou colite ulcerosa).
[000218] As doenças inflamatórioas incluem, mas nao estão limitadas a Alzheimer, Espondilite anquilosante, artrite, asma, aterosclerose, doença de Behcet, polirradiculoneuropatia desmielinizante inflamatória crônica, doença de Crohn, doença inflamatória do intestino autoimune, diabetes mellitus dependente da insulina, diabetes mellitus, diabetes juvenil, diabetes autoimune espontânea, gastrite, gastrite atrófica autoimune, hepatite autoimune, tiroidite, tiroidite de Hashimoto, insulite, ooforite, orquite, uveíte, uveíte facogênica, esclerose múltipla, miastenia grave, mixoedema primário, tirotoxicose, anemia perniciosa, anemia hemolítica autoimune, doença de Addison, Espondilite anquilosante, sarcoidose, escleroderma, síndrome de Goodpasture, síndrome de Guillain-Barré, doença de Graves, glomerulonefrite, psoríase, pênfigo vulgar, penfigoide, excema, pênfigo bolhoso, oftalmia simpatética, púrpura trombocitopênica idiopática, feucopenia idiopática, síndrome de Sjogren, esclerose sistêmica, granulomatose de Wegener, poli/dermatomiosite, cirrose biliar primária, colangite esclerosante primária, lúpus ou lúpus eritematoso sistêmico.
[000219] A doença do enxerto contra o hospedeiro (GVHD) é uma complicação que pode ocorrer após um transplante de célula pluripotente (e.g., célula estaminal) ou medula óssea no qual o material recém-transplantado resulta em um ataque no corpo do recipiente que recebeu o transplante. Em alguns casos, a GVHD tem lugar após uma transfusão sanguínea. A doença do enxerto contra o hospedeiro pode ser dividida em formas aguda e crônica. A forma aguda ou fulminante da doença (aGVHD) é normalmente observada dentro dos primeiros 100 dias após o transplante, e é um grande desafio para os transplantes devido às morbidade e mortalidade associadas. A forma crônica da doença do enxerto contra o hospedeiro (cGVHD) ocorre normalmente após 100 dias. O aparecimento de casos moderados a graves de cGVDH influencia adversamente a sobrevivência a longo prazo.
EXEMPLOS Exemplo 1: Nanopartículas de Sílica Mesoporosa com Ibuprofeno Acoplado (Profético)
[000220] Núcleos de nanopartículas de SiO2 mesoporosa são criados através de um processo de sol-gel. Brometo de hexadeciltrimetil-amônio (CTAB) (0,5 g) é dissolvido em água desionizada (500 mL), e depois solução de NaOH aquosa a 2 M (3,5 mL) é adicionada à solução CTAB. A solução é agitada durante 30 min, e depois é adicionado Tetraetoxisilano (TEOS) (2,5 mL) à solução. O gel resultante é agitado durante 3 h a uma temperatura de 80°C. O precipitado branco que se forma é capturado por filtração, seguida de lavagem com água desionizada a secagem à temperatura ambiente. O tensoativo restante é depois extraído das partículas por suspensão em uma solução etanólica de HCl durante a noite. As partículas são lavadas com etanol, centrifugadas, e redispersas sob ultrasonicação. Este procedimento de lavagem é repetido duas vezes adicionais.
[000221] As nanopartículas de SiO2 são depois funcionalizadas com grupos amino usando (3-aminopropil)-trietoxissilano (APTMS). Para esse fim, as partículas são suspensas em etanol (30 mL), e APTMS (50 μL) é adicionado à suspensão. A suspensão é deixada repousar à temperatura ambiente por 2 horas e então entra em ebulição por 4 horas, mantendo o volume constante por adição periódica de etanol. Os reagentes restantes são removidos por cinco ciclos de lavagem por centrifugação e redispersão em etanol puro.
[000222] Em uma reação separada, são criadas sementes de ouro com 1-4 nm de diâmetro. Toda a água usada em esta reação é primeiramente desionizada e depois destilada do vidro. É adicionada água (45,5 mL) a um frasco de fundo redondo de 100 mL. Durante a agitação adiciona-se 0,2 M de NaOH aquoso (1,5 mL), seguido de uma solução aquosa 1% de cloreto de tetraquis(hidroximetil)fosfônio (THPC) (1,0 mL). Dois minutos após a adição de solução de THPC, é adicionada uma solução aquosa de ácido cloroáurico a 10 mg/mL (2 mL), que foi envelhecida pelo menos 15 min. As sementes de ouro são purificadas através de diálise contra água.
[000223] Para formar os nanotransportadores com núcleo-cobertura, as nanopartículas de SiO2 funcionalizadas com amino formadas acima são primeiramente misturadas com as sementes de ouro durante 2 h à temperatura ambiente. As partículas de SiO2 decoradas com ouro são coletadas através de centrifugação e misturadas com uma solução aquosa de ácido cloroáurico e bicarbonato de potássio para formar a cobertura de ouro. As partículas são depois lavadas por centrifugação e redispersas em água. O ibuprofeno é carregado por suspensão das partículas em uma solução de ibuprofeno de sódio (1 mg/L) durante 72 h. O ibuprofeno livre é depois lavado das partículas por centrifugação e redispersão em água.
Exemplo 2: Lipossomas Contendo Ciclosporina A (Profético)
[000224] Os lipossomas são formados usando hidratação de filme fino. 1,2-Dipalmitoíl-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC) (32 μmol), colesterol (32 μmol), e ciclosporina A (6,4 μmol) são dissolvidos em clorofôrmio puro (3 mL). Esta solução lipídica é adicionada a um frasco de fundo redondo de 50 mL, e o solvente é evaporado em um evaporador rotativo a uma temperatura de 60°C. O frasco é depois purgado com gás de nitrogênio para remover o solvente restante. Fosfato salino tamponado (2 mL) e cinco esférulas de vidro são adicionados ao frasco, e o filme lipídico é hidratado por agitação a 60 °C durante 1 h para formar uma suspensão. A suspensão é transferida para um pequeno tubo de pressão e sonicada a 60 °C durante quatro ciclos de pulsos de 30 s com um atraso de 30 s entre cada pulso A suspensão é depois deixada imperturbável à temperatura ambiente durante 2 h. para permitir hidratação completa. Os lipossomas são lavados por centrifugação seguida de ressuspensão em fosfato salino tamponado fresco.
Exemplo 3: Nanotransportador Polimérico Contendo Conjugado de Polímero-Rapamicina (Profético)
[000225] Preparação do conjugado de PLGA-rapamicina:
[000226] Polímero PLGA com grupo terminal ácido (7525 DLG1A, número ácido 0,46 mmol/g, Lakeshore Biomaterials; 5 g, 2,3 mmol, 1,0 eq) é dissolvido em 30 mL de diclorometano (DCM). N,N-Diciclo- hexilcarbodimida (1,2 eq, 2,8 mmol, 0,57 g) é adicionada seguida de rapamicina (1,0 eq, 2,3 mmol, 2,1 g) e 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (2,0 eq, 4,6 mmol, 0,56 g). A mistura é agitada à ta durante 2 dias. A mistura é depois filtrada para remover a diciclohexilureia insolúvel. O filtrado é concentrado até ca. 10 mL em volume e adicionado a 100 mL de álcool de isopropila (IPA) para precipitar o conjugado de PLGA- rapamicina. A camada de IPA é removida e o polímero é depois lavado com 50 mL de IPA e 50 mL de éter de metila e t-butila (MTBE). O polímero é depois seco sob vácuo a 35 °C durante 2 dias para dar PLGA-rapamicina como um sólido branco (ca. 6,5 g).
[000227] Preparação do nanotransportador contendo conjugado de PLGA-rapamicina e peptídeo de ovalbumina (323-339):
[000228] O nanotransportador contendo PLGA-rapamicina é preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 como se segue:
[000229] As soluções para a formação do nanotransportador são preparadas como se segue:
[000230] Solução 1: Peptídeo de ovalbumina 323-339 @ 20 mg/mL em solução aquosa de ácido clorídrico diluída. A solução é preparada por dissolução do peptídeo de ovalbumina em solução de ácido clorídrico a 0,13 M à temperatura ambiente. Solução 2: PLGA- rapamicina @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução é preparada por dissolução de PLGA-rapamicina em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLA-PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução é preparada por dissolução de PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 4: Álcool de polivinila @ 50 mg/mL em tampão fosfato a 100 mM pH 8.
[000231] Uma emulsão água-em-óleo primária é primeiramente preparada. A W1/O1 é preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,75 mL), e solução 3 (0,25 mL) em um pequeno tubo de pressão e sonicação a amplitude de 50% durante 40 segundos usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) é depois preparada por combinação da solução 4 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250. A emulsão W1/O1/W2 é adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores é lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 75.600xg e 4 °C durante 35 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem é repetido, e o pélete é ressuspenso em fosfato salino tamponado até uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
Exemplo 4: Preparação de Nanotransportadores de Ouro (AuNCs) Contendo Rapamicina (Profético)
[000232] Preparação de HS-PEG-rapamicina:
[000233] Uma solução de dissulfeto de ácido de PEG (1,0 eq), rapamicina (2,0-2,5 eq), DCC (2,5 eq) e DMAP (3,0 eq) em DMF seco é agitada à ta durante a noite. A diciclohexilureia insolúvel é removida por filtração e o filtrado é adicionado a álcool de isopropila (IPA) para precipitar o éster de PEG-dissulfeto-di-rapamicina e lavado com IPA e seco. O polímero é depois tratado com hidrocloreto de tris(2- carboxietil)fosfina em DMF para reduzir o dissulfeto de PEG a éster de tiol PEG rapamicina (HS-PEG-rapamicina). O polímero resultante é recuperado por precipitação a partir de IPA e seco como previamente descrito e analisado por H RMN e GPC.
[000234] Formação dos NCs de Ouro (AuNCs):
[000235] Uma solução aquosa de 500 mL de 1 mM HAuCl4 é aquecida para o refluxo por 10 minutos, com agitação vigorosa, em um balão de fundo redondo de 1 L equipado com um condensador. Uma solução de 50 mL de 40 mM de citrato trissódico é então rapidamente adicionada à solução com agitação. A solução cor de vinho escura resultante é mantida no refluxo por 25-30 minutos e o calor é removido e a solução é esfriada para a temperatura ambiente. A solução é então filtrada em um filtro de membrana de 0,8 μm, para prover a solução de AuNCs. Os AuNCs são caracterizados usando espetroscopia visível e microscopia eletrônica de transmissão. Os AuNCs têm um diâmetro de cerca de 20 nm, protegidos por citrato, com absorção de pico a 520 nm.
[000236] Conjugado de AuNCs com HS-PEG-rapamicina:
[000237] Uma solução de 150 μL de HS-PEG-rapamicina (10 μM em 10 mM tampão de carbonato pH 9,0) é adicionada a 1 mL de nanotransportadores de ouro com proteção de citrato com 20 nm de diâmetro (1,16 nM) para produzir uma razão molar de tiol para ouro de 2500:1. A mistura é agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio durante 1 hora para permitir a troca completa de tiol com citrato sobre os nanotransportadores de ouro. Os AuNCs com PEG-rapamicina na superfície são então purificados por centrifugação a 12 000 g durante 30 minutos. O sobrenadante é decantado e o pélete contendo AuNC-S- PEG-rapamicina é então lavado com tampão 1x PBS. Os nanotransportadores de Ouro-PEG-rapamicina são depois ressupensos em tampão adequado para análise e bioensaios adicionais.
Exemplo 5: Resposta Imune de Nanotransportadores Sintéticos com Rapamicina Acoplada com e sem Peptídeo de Ovalbumina (323-339) Materiais
[000238] O peptídeo de ovalbumina 323-339, um peptídeo de 17 aminoácidos conhecido por ser um epitopo de células T e B da proteína Ovalbumina, foi comprado da Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505; Parte # 4065609). A rapamicina foi comprada da TSZ CHEM (185 Wilson Street, Framingham, MA 01702; # Catálogo do Produto R1017). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000239] Solução 1: Peptídeo de ovalbumina 323-339 @ 20 mg/mL em solução aquosa de ácido clorídrico diluída. A solução foi preparada por dissolução do peptídeo de ovalbumina em solução de ácido clorídrico a 0,13 M à temperatura ambiente. Solução 2: Rapamicina @ 50 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução da rapamicina em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 4: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
Método para Preparação de Nanotransportador Sintético Contendo Rapamicina e Ovalbumina (323-339)
[000240] Uma emulsão água-em-óleo primária foi primeiramente preparada. A W1/O1 foi preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,2 mL), e solução 3 (1,0 mL) em um pequeno tubo de pressão e sonicação a amplitude de 50% durante 40 segundos usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) foi depois preparada por combinação da solução 4 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250.
[000241] A emulsão W1/O1/W2 foi adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 21.000xg e 4 °C durante uma hora, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido, e o pélete foi ressuspenso em fosfato salino tamponado até uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000242] As quantidades de peptídeo e rapamicina nos nanotrans-portadores sintéticos foram determinadas por análise de HPLC. A massa seca total de nanotransportadores sintéticos por mL da suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Método para Nanotransportador Sintético Contendo Rapamicina
[000243] Em primeiro lugar foi preparada uma emulsão água-em-óleo primária. A W1/O1 foi preparada por combinação de solução 0,13 M de ácido clorídrico (0,2 mL), solução 2 (0,2 mL), e solução 3 (1,0 mL) em um pequeno tubo sob pressão e sonicação a 50% de amplitude por 40 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) foi depois preparada por combinação da solução 4 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250.
[000244] A emulsão W1/O1/W2 foi adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 21.000xg e 4 °C durante uma hora, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido, e o pélete foi ressuspenso em fosfato salino tamponado até uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000245] A quantidade de rapamicina no nanotransportador sintético foi determinada por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL de suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Método para Medição da Carga de Rapamicina
[000246] Aproximadamente 3 mg de nanotransportadores sintéticos foram coletados e centrifugados para separar o sobrenadante do pélete de nanotransportador sintético. Foi adicionado acetonitrila ao pélete, e a amostra foi sonicada e centrifugada para remover qualquer material insolúvel. O sobrenadante e o pélete foram injetados em RP-HPLC e a absorvância foi lida a 278 nm. Os μg do pélete foram usados para calcular a % encerrada (carga), os μg no sobrenadante e pélete foram usados para calcular os μg totais recuperados.
Método de Medição da Carga de Ovalbumina (323-339)
[000247] Aproximadamente 3 mg de nanotransportadores sintéticos foram coletados e centrifugados para separar o sobrenadante do pélete de nanotransportador sintético. Foi adicionado trifluoroetanol ao pélete e a amostra foi sonicada para dissolver o polímero, foi adicionado ácido trifluoroacético a 0,2% e amostra foi sonicada e depois centrifugada para remover qualquer material insolúvel. O sobrenadante e o pélete foram injetados em RP-HPLC e a absorvância foi lida a 215 nm. Os μg do pélete foram usados para calcular a % encerrada (carga), os μg no sobrenadante e pélete foram usados para calcular os μg totais recuperados.
Atividade de Células Dendríticas Tolerogênicas (tDC) específicas do Antígeno no Desenvolvimento de Células Treg
[000248] O ensaio incluiu a utilização de camundongos OTII que têm um receptor transgênico de células T específico para uma ovalbumina (323-339) imunodominante. De modo a criar tDCs específicos do antígeno, esplenócitos CD11c+ foram isolados, e o peptídeo de albumina (323-339) adicionado in vitro a 1 μg/mL ou nenhum antígeno. Rapamicina solúvel ou encapsulada no nanotransportador foi depois adicionada às DCs durante 2 horas as quais foram depois lavadas extensivamente para remover a rapamicina livre da cultura. Células CD4+CD25- respondedoras purificadas foram isoladas de camundongos OTII e adicionadas a tDC a uma razão 10:1 de T para DC. A mistura de tDC e células T de OTII foi depois cultivada durante 4-5 dias, e a frequência de células Treg (CD4+CD25highFoxP3+) foi analisada por citometria de fluxo como mostrado na Fig. 1. As regiões foram selecionadas com base em controles de isotipo.
Método de Determinação das Dimensões do Nanotransportador
[000249] A medição das dimensões dos nanotransportadores sintéticos foi obtida dispersão dinâmica da luz (DLS). Uma suspensão de nanotransportadores sintéticos foi diluída com água purificada para alcançar uma concentração final da suspensão de nanotransportadores sintéticos de aproximadamente 0,01 a 0,1 mg/mL. A suspensão diluída foi preparada diretamente dentro de uma cuvete adequada para análise de DLS. A cuvete foi depois colocada em um ZetaPALS da Brookhaven Instruments Corp., se permitie que equilibrasse até 25 °C, e depois rastreada durante tempo suficiente para adquirir uma distribuição estável e reprodutível com base em entradas apropriadas para a viscosidade do meio e índices de refração da amostra. O diâmetro efetivo, ou média da distribuição, foi depois relatado.
Resultados
[000250] Para a prova de conceito de experiências, a indução de tolerância do medicamento rapamicina foi usada em combinação com o peptídeo de classe II de ligação a ovalbumina 323-339. A rapamicina é um imunossupressor utilizado para suprimir a rejeição do transplante alogênico e é um inibidor de mTOR, que é um regulador de várias funções celulares, incluindo a APC e o comportamento das células T. Os nanotransportadores sintéticos foram preparados de acordo com os exemplos representativos acima, os quais são descritos em mais detalhes nas tabelas seguintes (Tabelas 2-4). Tabela 2: Nanotransportadores Sintéticos Contendo Tanto Tapamicina como Baixa Concentração de Nível de Ovalbumina (323-339)Tabela 3: Nanotransportadores Sintéticos Contendo Tanto Tapamicina como Elevada Concentração de Nível de Ovalbumina (323-339) Tabela 3: -continuação Tabela 4: Nanotransportadores Sintéticos Contendo Rapamicina
[000251] Os resultados de uma análise de citometria de fluxo representativo mostram um aumento no número de células CD4+CD25highFoxP3+ (Fig. 1) quando as DCs foram tratadas com rapamicina livre e Ovalbumina livre (323-339).
[000252] Rapamicina livre ou nanotransportadores sintéticos contendo rapamicina foram combinados com Ovalbumina solúvel livre (323-339), de modo a avaliar a indução da tDC (Fig. 2). Foi verificado que nanotransportadores contendo rapamicina combinada com ovalbumina livre (323-339) induz o desenvolvimento de Treg. Resumidamente, o antígeno específico tDC foi obtido por isolamento de células dendríticas (esplenócitos CD11c+ ) e cultivando-os em combinação com o peptídeo de Ovalbumina (323-339) mais solúvel ou rapamicina encapsulada com nanotransportador (Nanotransportador Sintético # s 13, 14, 15 e 16) durante 2 horas seguido por lavagem extensa. Células CD4+CD25- respondedoras purificadas foram isoladas a partir de camundongos OTII e adicionadas a tDC. A mistura de tDC e células T de OTII foi depois cultivada durante 4-5 dias, e a frequência de células Treg (CD4+CD25highFoxP3+) foi analisada por citometria de fluxo. Os dados mostram um aumento dependente da dose em CD4+CD25highFoxP3+ tanto para a rapamicina livre como para a rapamicina encapsulada com nanotransportador sugerindo indução de Treg pelo DC tratado com nanotransportador de rapamicina.
[000253] Várias composições de nanotransportadores foram usadas para avaliar a indução de tDC (Fig. 3), e foi demonstrada a indução de Treg. Se verificou que nanotransportadores com rapamicina e peptídeo de Ovalbumina (323-339) co-encapsulados resultou em maior indução de células que expressam FoxP3 (6,5%) do que, quer não estimulados (1,3%) ou do que a rapamicina sozinha (2,7%). De forma interessante, duas composições de nanotransportadores separadas contendo apenas rapamicina (Nanotransportador sintético # s 7 e 8), demonstraram superior indução das células que expressam FoxP3 (22,4% e 27,2%, respetivamente) quando combinadas com uma população de nanotransportadores sintéticos contendo Ovalbumina (323-339) quando em comparação com uma mistura com peptídeo Ovalbumina livre (323-339) (12,7% e 17,7%, respetivamente). De forma geral, os dados mostram um aumento de CD4+CD25highFoxP3+ quando se usa a rapamicina encapsulada com nanotransportador com respostas superiores observada tanyo com o peptídeo de Ovalbumina co-encapsulado (323-339) ou em misturas do peptídeo de Ovalbumina (323-339) contendo nanotransportador.
Exemplo 6: Avaliação da Resposta imune Tolerogênica por células T Através de Análise Fenotípica (Profética)
[000254] Uma composição da invenção é dissolvida em solução salina tamponada com fosfato (PBS) e injetadas em camundongos Lewis fêmeas por via intramuscular em 0,1-0,2 ml contendo 500 μg da composição. Um grupo de controlo de camundongos recebe 0,1-0,2 ml de PBS. Nove a dez dias depois da injeção, os baços e nódulos linfáticos são coletados dos camundongos e são obtidas suspensões de células individuais por maceração dos tecidos através de 40 μm de estripe de célula de nylon. As amostras são coradas em PBS (1% FCS), com a diluição adequada de anticorpos monoclonais relevantes. As células de coloração com iodeto de Propidum são excluídas da análise. São adquiridas amostras em um citômetro de fluxo LSR2 (BD Biosciences, EUA) e analisados usando o software FACS Diva. A expressão dos marcadores CD4 e CD25high e FoxP3 é analisada nas células. A presença de células CD4+CD25highFoxP3+ sugere a indução de células Treg CD4+.
Exemplo 7: Avaliação da Resposta imune Tolerogênica ao Antígeno Apresentável APC In Vivo (Profético)
[000255] Camundongos Balb/c são imunizados com um antígeno apresentável APC em adjuvante incompleto de Freunds para induzir a proliferação de células T (por exemplo, células T CD4+) cujo nível é avaliado. Subsequentemente, uma composição da invenção compreendendo antígeno apresentável APC e um imunossupressor é administrada subcutaneamente de um modo dependente da dose. Os mesmos camundongos são então novamente expostos ao antígeno apresentável APC, e o nível de proliferação de células T é novamente avaliado. Alterações na população de células T são então monitoradas, com uma redução da proliferação de células T por proliferação subsequente com o antígeno apresentável APC indicando uma resposta imunológica tolerogênica.
Exemplo 8: Avaliação de Respostas Imunológicas Tolerogênicas com Nanotransportadores Sintéticos Compreendendo Imunossupressor e Antígeno Apresentável por APC In Vivo Materiais e Métodos para a Produção de Nanotransportadores Sintéticos Nanotransportador 1
[000256] A rapamicina foi comprada da TSZ CHEM (185 Wilson Street, Framingham, MA 01702; # Catálogo do Produto R1017). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). Foram sintetizados copolímero em bloco de PLA-PEG com um bloco PEG de aproximadamente 5.000 Da e bloco PLA de aproximadamente 20.000 Da. O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000257] As soluções foram preparadas como se segue:
[000258] Solução 1: Rapamicina @ 50 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução da rapamicina em cloreto de metileno puro. Solução 2: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLA-PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 4: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000259] Uma emulsão óleo-em-água foi usada para preparar os nanotransportadores. A emulsão O/W foi preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,75 mL), solução 3 (0,25 mL), e solução 4 (3 mL) em um pequeno tubo sob pressão e sonicação a 30% de amplitude por 60 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. A emulsão O/W foi adicionada a um béquer que continha 70 mM de solução tampão de fosfato pH 8 (30 mL) e foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas, para permitir a evaporação do cloreto de metileno e a formação dos nanotransportadores. Uma porção dos nanotrans-portadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 21.000xg e 4 °C durante 45 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000260] O tamanho do nanotransportador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. A quantidade de rapamicina no nanotransportador foi determinada por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Nanotransportador 2
[000261] O peptídeo de ovalbumina 323-339, um peptídeo de 17 aminoácidos conhecido por ser um epitopo de células T e B da proteína Ovalbumina, foi comprado da Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505; Parte # 4065609). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). Foram sintetizados copolímero em bloco de PLA-PEG com um bloco PEG de aproximadamente 5.000 Da e bloco PLA de aproximadamente 20.000 Da. O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000262] As soluções foram preparadas como se segue:
[000263] Solução 1: Peptídeo de ovalbumina 323-339 @ 20 mg/mL em solução aquosa de ácido clorídrico diluída. A solução foi preparada por dissolução do peptídeo de ovalbumina em solução de ácido clorídrico a 0,13 M à temperatura ambiente. Solução 2: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLA-PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 4: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000264] Em primeiro lugar foi preparada uma emulsão água-em-óleo primária. A W1/O1 foi preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,75 mL), e solução 3 (0,25 mL) em um pequeno tubo sob pressão e sonicação a 50% de amplitude por 40 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) foi depois preparada por combinação da solução 4 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250.
[000265] A emulsão W1/O1/W2 foi adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 75.600xg e 4 °C durante 35 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000266] O tamanho do nanotransportador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. A quantidade de peptídeo no nanotransportador foi determinada por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Nanotransportador 3
[000267] Sinvastatina foi adquirida à LKT Laboratories, Inc. (2233 University Avenue West, St. Paul, MN 55114; # Catálogo do Produto S3449). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). Foram sintetizados copolímero em bloco de PLA-PEG com um bloco PEG de aproximadamente 5.000 Da e bloco PLA de aproximadamente 20.000 Da. O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000268] As soluções foram preparadas como se segue:
[000269] Solução 1: Sinvastatina @ 50 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução da sinvastatina em cloreto de metileno puro. Solução 2: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLA-PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 4: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000270] Uma emulsão óleo-em-água foi usada para preparar os nanotransportadores. A emulsão O/W foi preparada por combinação da solução 1 (0,15 mL), solução 2 (0,75 mL), solução 3 (0,25 mL), e solução 4 (3 mL) em um pequeno tubo sob pressão e sonicação a 30% de amplitude por 60 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. A emulsão O/W foi adicionada a um béquer que continha 70 mM de solução tampão de fosfato pH 8 (30 mL) e foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas, para permitir a evaporação do cloreto de metileno e a formação dos nanotransportadores. Uma porção dos nanotranspor-tadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 75.600xg e 4 °C durante 35 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000271] O tamanho do nanotransportador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. A quantidade de sinvastatina no nanotransportador foi determinada por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão foi determinada porum método gravimétrico.
Nanotransportador 4
[000272] O peptídeo de ovalbumina 323-339, um peptídeo de 17 aminoácidos conhecido por ser um epitopo de células T e B da proteína Ovalbumina, foi comprado da Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505; Parte # 4065609). A rapamicina foi comprada da TSZ CHEM (185 Wilson Street, Framingham, MA 01702; # Catálogo do Produto R1017). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). Foram sintetizados copolímero em bloco de PLA- PEG com um bloco PEG de aproximadamente 5.000 Da e bloco PLA de aproximadamente 20.000 Da. O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000273] As soluções foram preparadas como se segue:
[000274] Solução 1: Peptídeo de ovalbumina 323-339 @ 20 mg/mL em solução aquosa de ácido clorídrico diluída. A solução foi preparada por dissolução do peptídeo de ovalbumina em solução de ácido clorídrico a 0,13 M à temperatura ambiente. Solução 2: Rapamicina @ 50 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução da rapamicina em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 4: PLA-PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 5: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000275] Em primeiro lugar foi preparada uma emulsão água-em-óleo primária. A W1/O1 foi preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,2 mL), solução 3 (0,75 mL), e solução 4 (0,25 mL) em um pequeno tubo de pressão e sonicação a 50 % de amplitude por 40 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) foi depois preparada por combinação da solução 5 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250.
[000276] A emulsão W1/O1/W2 foi adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 21.000xg e 4 °C durante 45 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000277] O tamanho do nanotransportador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. A quantidade de peptídeo no nanotransportador foi determinada por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Nanotransportador 5
[000278] O peptídeo de ovalbumina 323-339, um peptídeo de 17 aminoácidos conhecido por ser um epitopo de células T e B da proteína Ovalbumina, foi comprado da Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505; Parte # 4065609). Sinvastatina foi adquirida à LKT Laboratories, Inc. (2233 University Avenue West, St. Paul, MN 55114; # Catálogo do Produto S3449). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 3:1 e uma viscosidade inerente de 0,75 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 7525 DLG 7A). Foram sintetizados copolímero em bloco de PLA-PEG com um bloco PEG de aproximadamente 5.000 Da e bloco PLA de aproximadamente 20.000 Da. O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000279] As soluções foram preparadas como se segue:
[000280] Solução 1: Peptídeo de ovalbumina 323-339 @ 20 mg/mL em solução aquosa de ácido clorídrico diluída. A solução foi preparada por dissolução do peptídeo de ovalbumina em solução de ácido clorídrico a 0,13 M à temperatura ambiente. Solução 2: Sinvastatina @ 50 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução da sinvastatina em cloreto de metileno puro. Solução 3: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 4: PLA- PEG @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLA-PEG em cloreto de metileno puro. Solução 5: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000281] Em primeiro lugar foi preparada uma emulsão água-em-óleo primária. A W1/O1 foi preparada por combinação da solução 1 (0,2 mL), solução 2 (0,15 mL), solução 3 (0,75 mL), e solução 4 (0,25 mL) em um pequeno tubo de pressão e sonicação a 50 % de amplitude por 40 segundos, usando um Sonificador Branson Digital 250. Uma emulsão secundária (W1/O1/W2) foi depois preparada por combinação da solução 5 (3,0 mL) com a emulsão primária W1/O1, uso do vórtex durante 10 s, e sonicação a amplitude de 30% durante 60 segundos usando o Sonificador Branson Digital 250.
[000282] A emulsão W1/O1/W2 foi adicionada a um copo contendo solução de tampão fosfato a 70 mM pH 8 (30 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas para permitir que o cloreto de metileno evapore e para que os nanotransportadores se formem. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 75.600xg e 4 °C durante 35 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL.
[000283] O tamanho do nanotransportador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. As quantidades de peptídeo e sinvastatina no nanotransportador foram determinadas por análise de HPLC. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão foi determinada por um método gravimétrico.
Nanotransportador 5 226 2,7 1,9 Administração 1 In vivo
[000284] Baços de camundongos B6.Cg-Tg(TcraTcrb)425Cbn/J (OTII) e C57BL/6 (B6) foram coletados, mecanicamente dissociados e filtrados separadamente em um crivo de 70 μm para originar uma suspensão de células isoladas. Células CD4+CD25- purificadas foram então extraídas em um processo de 2 etapas. Usando um aparelho de triagem magnética de células Miltenyi Biotec AutoMACS, células do baço foram primeiramente etiquetadas com um estojo de isolamento de células T CD4+ II e a fração não etiquetada foi depletada de células CD25+ com um estojo de depleção de CD25. As células B6 purificadas foram coradas com um corante intracelular, Éster de Succinimidila de Carboxifluoresceína (CFSE), antes de serem misturadas, em concentrações iguais, com as células de OTII purificadas. Então foram injetadas intravenosamente (i.v.) em camundongos receptores B6.SJL- Ptprca/BoyAi (CD45.1).
[000285] No dia seguinte, os camundongos receptores CD45.1 foram tratados com partículas direcionadas de vacina sintética tolerogênica (t2SVP). Foram carregadas com combinações de peptídeo de ovalbumina (323-339) (OVA 323-339), Rapamicina (Rapa) e/ou Sinvastatina (Sinva) e foram administradas subcutaneamente (s.c.).
[000286] A injeção constitui um tratamento tolerogênico, e foi seguida de mais 4 injeções, cada uma com um intervalo de 2 semanas entre si. Depois de completado o calendário do tratamento, os animais receptores CD45.1 foram mortos e seus baços e nódulos linfáticos popliteais foram coletados, mecanicamente dissociados e filtrados separadamente em um crivo de 70 μm para originar uma suspensão de células isoladas. As células do baço foram depletadas de glóbulos vermelhos (GVs) por incubação com tampão de lise de GV (Stem Cell Technologies) e efetuaram-se contagens de células nos baços e nódulos linfáticos.
[000287] Células de baço ou nódulo linfático doram cultivadas em CM (meio completo) suplementado com 10 U/mL de IL-2, foram novamente estimuladas com OPII a 0,3x106células/poço em placas de fundo redondo (RB) de 96 poços e incubadas a 37 °C, 5% CO2. As células foram separadas no Dia 2 e coletadas no Dia 5. Os sobrenadantes foram coletados e glóbulos brancos congelados foram corados para análise fenotípica por citometria de fluxo. As células foram analisadas em um citômetro de fluxo Becton Dickinson FacsCanto.
Administração 2 In vivo
[000288] Baços de camundongos B6.Cg-Tg(TcraTcrb)425Cbn/J (OTII) e C57BL/6 (B6) foram coletados, mecanicamente dissociados e filtrados separadamente em um crivo de 70 μm para originar uma suspensão de células isoladas. Células CD4+CD25- purificadas foram então extraídas em um processo em 2 etapas usando um aparelho de triagem magnética de células Miltenyi Biotec AutoMACS. As células do baço foram etiquetadas usando o estojo de isolamento de células T CD4+ da Miltenyi II. A fração de células T CD4+ não etiquetadas foi então depletada de células CD25+ com um estojo de depleção de CD25. As células CD4 purificadas de camundongos B6 foram então coradas com um corante intracelular, Éster de Succinimidila de Carboxifluoresceína (CFSE), antes de serem misturadas, em concentrações iguais, com as células de OTII purificadas. Então foram injetadas intravenosamente (i.v.) em camundongos receptores B6.SJL-Ptprca/BoyAi (CD45.1).
[000289] No dia seguinte, os camundongos receptores CD45.1 foram tratados com partículas direcionadas de vacina sintética tolerogênica. Compreenderam combinações de peptídeo de ovalbumina (323-339) (OVA 323-339), Rapamicina (Rapa) e Sinvastatina (Sinva) e foram administradas subcutaneamente (s.c.) ou intravenosamente (i.v.).
[000290] Depois de completado o calendário do tratamento, os animais receptores CD45.1 foram mortos e seus baços e nódulos linfáticos popliteais foram coletados, mecanicamente dissociados e filtrados separadamente em um crivo de 70 μm para originar uma suspensão de células isoladas. As células do baço foram depletadas de glóbulos vermelhos (GVs) por incorporação com tampão de lise de GV (Stem Cell Technologies) e efetuaram-se contagens de células nos baços e nódulos linfáticos.
[000291] Células de baço ou nódulo linfático doram cultivadas em CMsuplementado com 10 U/mL de IL-2, foram novamente estimuladas com 1 μM OPII a 0,3x106células/poço em placas de fundo redondo (RB) de 96 poços e incubadas a 37°C, 5% CO2. As células foram separadas no Dia 2 e coletadas no Dia 5. Os sobrenadantes foram coletados e glóbulos brancos congelados foram corados para análise fenotípica por citometria de fluxo. As células foram analisadas em um citômetro de fluxo Becton Dickinson FacsCanto.
Resultados
[000292] Os resultados estão apresentados nas Figs. 4 e 5 (Imunomodulador 1: rapamicina; imunomodulador 2: sinvastatina). As figuras mostram os efeitos in vivo e demonstram que o número de células imunitárias é reduzido por nanotransportadores sintéticos compreendendo antígeno e imunossupressores, quando comparado com o nanotransportador apenas de antígeno. A Fig. 5 demonstra um aumento da percentagem de células imunitárias que expressam FoxP3 com nanotransportadores sintéticos compreendendo antígeno e imunossupressores.
Exemplo 9: Avaliação da Ativação de CD69 com Nanotransportadores Sintéticos Compreendendo Imunossupressores Nanotransportadores
[000293] Foi adquirida Ceramida α-Galatosil (KRN7000) da Avanti Polar Lipids, Inc. (700 industrial Park Drive Alabaster, Alabama 350079105, número de catálogo 867000P). O PLGA com uma razão láctido:glicólido de 1:1 e uma viscosidade inerente de 0,45 dL/g foi comprado da SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211; Código do Produto 5050 DLG 4,5A). O álcool de polivinila (85-89% hidrolisado) foi comprado da EMD Chemicals (Número do Produto 1.41350.1001).
[000294] As soluções foram preparadas como se segue:
[000295] Solução 1: KRN7000 @ 2 mg/mL em dimetilsulfóxido (DMSO). A solução foi preparada por dissolução do lípido seco em DMSO puro. Solução 2: PLGA @ 100 mg/mL em cloreto de metileno. A solução foi preparada por dissolução do PLGA em cloreto de metileno puro. Solução 3: Álcool polivinílico @ 50 mg/mL a 100 mM em tampão fosfatos pH 8.
[000296] Uma emulsão água em óleo (W/O) foi preparada por combinação da solução 1 (1 mL), solução 2 (1 mL), solução 3 (3 mL) em um pequeno tubo de pressão e sonicação a 30% de amplitude por 60 segundos, usando um Sonificador Branson Digital modelo 250, com o tubo de pressão imerso em um banho de água gelada. A emulsão W/O foi então adicionada a um béquer que continha 70 mM de solução tampão de fosfato pH 8 (30 mL) e foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas, para permitir a evaporação do cloreto de metileno e a formação dos nanotransportadores. Uma porção dos nanotransportadores foi lavada por transferência da suspensão de nanotransportadores para um tubo de centrífuga e centrifugação a 75.600xg a 4 °C durante 45 min, remoção do sobrenadante, e ressuspensão do pélete em fosfato salino tamponado. O procedimento de lavagem foi repetido e o sedimento foi ressuspenso em solução salina tampão de fosfatos para uma dispersão final do nanotransportador de cerca de 10 mg/mL. O tamanho do nanotrans- portador foi determinado por dispersão fotodinâmica da luz. A quantidade de KRN7000 no nanotransportador é reportada como a carga teórica visto não ocorrer qualquer perda no processamento. A massa de nanotransportador seco total por mL da suspensão (concentração NP) foi determinada por um método gravimétrico.
Imunização
[000297] Os camundongos foram designados a grupos que receberam apenas PBS, sol aGC+solRAPA, sol aGC+NP RAPA. Os camundongos foram injetados, às 9h00 e às 09h30 receberam BrefeldinA i.v. para impedir a liberação das citocinas intracelulares produzidas. Às 13h00, os camundongos foram sacrificados e o fígado foi perfundido com PBS e processado de modo a obter uma suspensão de célula única enriquecida para linfócitos. As células foram marcadas com marcadores de superfície celular para células iNKT (tetrâmeros CD1d carregados de agc) e receptores de células T (TCRb) e marcador de ativação CD69. As células foram obtidas em um citómetro de fluxo FacsCanto e analisadas por FlowJo.
Resultados
[000298] As células iNKT de camundongos que receberam aGC foram ativadas conforme visto pela produção de citocina e pelo aumento da regulação de CD69 na sua superfície. Tanto a Rapamicina solúvel como do nanotransportador causaram uma significativa diminuição nos níveis de superfície de CD69 nas células iNKT, sugerindo que as células foram menos ativadas depois do tratamento quando comparadas com o tratamento de controlo PBS. Os resultados estão apresentados na Fig. 6
Exemplo 10: Nanotransportadores com Núcleo-cobertura de Sílica Mesoporosa-ouro Contendo Ovalbumina (Profético)
[000299] Núcleos de nanopartículas de SiO2 mesoporosa são criados através de um processo de sol-gel. Brometo de hexadeciltrimetil-amônio (CTAB) (0,5 g) é dissolvido em água desionizada (500 mL), e depois solução de NaOH aquosa a 2 M (3,5 mL) é adicionada à solução CTAB. A solução é agitada durante 30 min, e depois é adicionado Tetraetoxisilano (TEOS) (2,5 mL) à solução. O gel resultante é agitado durante 3 h a uma temperatura de 80°C. O precipitado branco que se forma é capturado por filtração, seguida de lavagem com água desionizada a secagem à temperatura ambiente. O tensoativo restante é depois extraído das partículas por suspensão em uma solução etanólica de HCl durante a noite. As partículas são lavadas com etanol, centrifugadas, e redispersas sob ultrasonicação. Este procedimento de lavagem é repetido duas vezes adicionais.
[000300] As nanopartículas de SiO2 são depois funcionalizadas com grupos amino usando (3-aminopropil)-trietoxissilano (APTMS). Para esse fim, as partículas são suspensas em etanol (30 mL), e APTMS (50 μL) é adicionado à suspensão. A suspensão é deixada repousar à temperatura ambiente por 2 horas e então entra em ebulição por 4 horas, mantendo o volume constante por adição periódica de etanol. Os reagentes restantes são removidos por cinco ciclos de lavagem por centrifugação e redispersão em etanol puro.
[000301] Em uma reação separada, são criadas sementes de ouro com 1-4 nm de diâmetro. Toda a água usada em esta reação é primeiramente desionizada e depois destilada do vidro. É adicionada água (45,5 mL) a um frasco de fundo redondo de 100 mL. Durante a agitação adiciona-se 0,2 M de NaOH aquoso (1,5 mL), seguido de uma solução aquosa 1% de cloreto de tetraquis(hidroximetil)fosfônio (THPC) (1,0 mL). Dois minutos após a adição de solução de THPC, é adicionada uma solução aquosa de ácido cloroáurico a 10 mg/mL (2 mL), que foi envelhecida pelo menos 15 min. As sementes de ouro são purificadas através de diálise contra água.
[000302] Para formar os nanotransportadores com núcleo-cobertura, as nanopartículas de SiO2 funcionalizadas com amino formadas acima são primeiramente misturadas com as sementes de ouro durante 2 h à temperatura ambiente. As partículas de SiO2 decoradas com ouro são coletadas através de centrifugação e misturadas com uma solução aquosa de ácido cloroáurico e bicarbonato de potássio para formar a cobertura de ouro. As partículas são depois lavadas por centrifugação e redispersas em água. Ovalbumina tiolada (feita por tratamento da Ovalbumina com hidrocloreto de 2-iminotiolano) é carregada por suspensão das partículas em uma solução de Ovalbumina tiolada (1 mg/L) durante 72 h. As partículas são depois lavadas com 1x PBS (pH 7,4) para remover a proteína livre. Os nanotransportadores com núcleo- cobertura de sílica-ouro contendo Ovalbumina resultantes são depois ressuspensos em 1x PBS para análise e bioensaios adicionais.
Exemplo 11: Lipossomas Contendo Rapamicina e Ovalbumina (Profético)
[000303] Os lipossomas são formados usando hidratação de filme fino. 1,2-Dipalmitoíl-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC) (32 μmol), colesterol (32 μmol), e rapamicina (6,4 μmol) são dissolvidos em clorofôrmio puro (3 mL). Essa solução lipídica é adicionada a um tubo de vidro de 10 mL e o solvente é removido sob corrente de nitrogênio gasoso, e é dessecada por 6 horas sob vácuo. Vesículas multilamelares são obtidas por hidratação do filme com 2,0 mL de 25 mM tampão MOPS pH 8,5, contendo quantidade em excesso de Ovalbumina. O tubo é submetido a vórtice até o filme lipídico ser descolado da superfície do tubo. Para degradar as vesículas multilamelares em monolamelares são aplicados dez ciclos de congelação (nitrogênio líquido) e descongelação (banho de água a 30 °C). A amostra é então diluída para 1 mL em 25 mM tampão MOPS pH 8,5. A dimensão do lipossomo resultante é homogeneizada mediante extrusão, por passagem da amostra 10 vezes através de filtros de policarbonato com poros de 200 nm. Os lipossomos resultantes são então usados para análise e bioensaios adicionais.
Exemplo 12: Nanotransportadores Poliméricos Compostos por Poliaminoácido Modificado com Ovalbumina Conjugada à Superfície (Profético)
[000304] Etapa-1. Preparação de Poli(ácido y-glutâmico) (y-PGA) modificado com éster de L-fenilalanina de etila (L-PAE): 4,7 unidades mmol de y-PGA (Mn= 300 kD) são dissolvidas em solução aquosa de NaHCO3 a 0,3 N (50 mL). L-PAE (4,7 mmol) e EDC.HCl (4,7 mmol) são adicionados à solução e agitados durante 30 min a 4 °C. A solução é depois mantida à temperatura ambiente com agitação durante 24 h. Os químicos de baixo peso molecular são removidos por diálise usando membrana de diálise MWCO 50 kD. O resultante y-PGA-enxerto-L-PAE é obtido por criodessecação.
[000305] Etapa-2. Preparação de nanopartículas de polímero de y- PGA-enxerto-L-PAE: As nanopartículas compostas por y-PGA-enxerto- L-PAE são preparadas por um método de precipitação e diálise. y-PGA- enxerto-L-PAE (20 mg) foi dissolvido em 2 mL de DMSO seguido da adição de 2 mL de água para formar uma solução translúcida. A solução é depois dialiasada contra água destilada usando tubagem de membrana de celulose (50.000 MWCO) para formar as nanopartículas e para remover os solventes orgânicos durante 72 h à temperatura ambiente. A água destilada é trocada a intervalos de 12 h. A solução de nanopartículas resultante (10 mg/mL em água) é depois usada para conjugação do antígeno.
[000306] Etapa-3. Conjugaçao de ovalbumina a nanopartículas de y- PGA: Grupos de ácido carboxílico da superfície das nanopartículas de y-PGA (10 mg/mL) são primeiramente ativados por EDC e NHS (10 mg/mL cada um em tampão fosfato, pH 5,8) durante 2 h à temperatura ambiente. Após lavagem dos péletes para remover EDC/NHS em excesso, as nanopartículas ativadas são misturadas com 1 mL de Ovalbumina (10 mg/mL) em fosfato salino tamponado (PBS, pH 7,4) e a mistura é incubada a 4-8 °C durante 24 h. As resultantes nanopartículas de y-PGA conjugadas com Ovalbumina são lavadas duas vezes com PBS e ressupensas a 5 mg/mL em PBS para análise e bioensaios adicionais.
Exemplo 13: Nanopartículas de y-PGA encapsuladas em Eritropoietina (EPO) (Profético)
[000307] Para preparar as nanopartículas de y-PGA encapsuladas em EPO, 0,25-4 mg de EPO são dissolvidos em 1 mL de PBS (pH 7,4) e 1 mL do y-PGA-enxerto-L-PAE (10 mg/mL em DMSO) é adicionado à solução de EPO. A solução resultante é centrifugada a 14.000xg durante 15 min e repetidamente enxaguada com PBS. As nanopartículas de y-PGA encapsuladas em EPO resultantes são depois ressupensas em PBS (5 mg/mL) para análise e bioensaios adicionais.
Exemplo 14: Preparação de Nanotransportadores de Ouro (AuNCs) Contendo Ovalbumina (Profético)
[000308] Etapa-1. Formação dos NCs de Ouro (AuNCs): Uma solução aquosa de 500 mL de 1 mM HAuCl4 é aquecida para o refluxo por 10 minutos, com agitação vigorosa, em um balão de fundo redondo de 1 L equipado com um condensador. Uma solução de 50 mL de 40 mM de citrato trissódico é então rapidamente adicionada à solução com agitação. A solução cor de vinho escura resultante é mantida no refluxo por 25-30 minutos e o calor é removido e a solução é esfriada para a temperatura ambiente. A solução é então filtrada em um filtro de membrana de 0,8 μm, para prover a solução de AuNCs. Os AuNCs são caracterizados usando espetroscopia visível e microscopia eletrônica de transmissão. Os AuNCs têm um diâmetro de cerca de 20 nm, protegidos por citrato, com absorção de pico a 520 nm.
[000309] Etapa-2. Conjugação de Ovalbumina a AuNCs: Uma solução de 150 μL de Ovalbumina tiolada (10 μM em tampão de carbonato 10 mM pH 9,0) é adicionada a 1 mL de nanotransportadores de ouro com proteção de citrato com 20 nm de diâmetro (1,16 nM) para produzir uma proporção molar de tiol para ouro de 2500:1. A mistura é agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio durante 1 hora para permitir a troca completa de tiol com citrato sobre os nanotransportadores de ouro. Os AuNCs com Ovalbumina na superfície são então purificados por centrifugação a 12 000 g durante 30 minutos. O sobrenadante é decantado e o pélete contendo AuNC-Ovalbumina é lavado com tampão 1x PBS. Os nanotransportadores purificados de Ouro-Ovalbumina são então ressuspensos em um tampão adequado para análise e bioensaios adicionais. F. REFERÊNCIAS A listagem de qualquer referência deste documento não é uma admissão de que a referência ou os seus ensinamentos é/são técnica anterior. Differential impact of mammalian target of rapamycin inhibition on CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells compared with conventional CD4+ T cells. Zeiser R, Leveson-Gower DB, Zambricki EA, Kambham N, Beilhack A, Loh J, Hou JZ, Negrin RS. Blood. 2008 janeiro 1; 111(1):453-62. Combined administration of a mutant TGF-beta1/Fc and rapamycin promotes induction of regulatory T cells and isle outroslograft tolerance. Zhang W, Zhang D, Shen M, Liu Y, Tian Y, Thomson AW, Lee WP, Zheng XX. J Immunol. 15 outubro 2010; 185(8):4750-9. Delivery of rapamycin by PLGA nanoparticles enhances its suppressive activity on dendritic cells. Haddadi A, Elamanchili P, Lavasanifar A, Das S, Shapiro J, Samuel J. J Biomed Mater Res A. 15 março 2008;84(4):885-98. Delivery of rapamycin-loaded nanoparticle down regulates ICAM-1 expression and maintains an immunosuppressive profile in human CD34+ progenitor-derived dendritic cells. Das S, Haddadi A, Veniamin S, Samuel J. J Biomed Mater Res A. 15 junho 2008;85(4): 983-92. Mammalian target of rapamycin inhibition and alloantigen-specific regulatory T cells synergize to promote long-term graft survival in immunocompetent recipients. Raimondi G, Sumpter TL, Matta BM, Pillai M, Corbitt N, Vodovotz Y, Wang Z, Thomson AW. J Immunol. 15 janeiro 2010; 184(2):624-36. mTOR and GSK-3 shape the CD4+ T-cell stimulatory and differentiation capacity of myeloid DCs after exposure to LPS. Turnquist HR, Cardinal J, Macedo C, Rosborough BR, Sumpter TL, Geller DA, Metes D, Thomson AW. Blood. 10 Junho 2010;115(23): 4758-69. Immunoregulatory functions of mTOR inhibition. Thomson AW, Turnquist HR, Raimondi G. Nat Rev Immunol. Maio 2009; 9(5):324-37. Rapamycin-conditioned donor dendritic cells differentiate CD4CD25Foxp3 T cells in vitro with TGF-beta1 for islet transplantation. Pothoven KL, Kheradmand T, Yang Q, Houlihan JL, Zhang H, Degutes M, Miller SD, Luo X. Am J Transplant. 2010 Aug;10(8):1774-84. Yagüe, C.; Arruebo M.; Santamaria, J. NIR-enhanced drug release from porous Au/SiO2 nanoparticles. Chem. Commun. 46, 7513-7515 (2010). Zeng, W.; Qian, X.; Zhang, Y.; Yin, J.; Zhu, Z. Organic modified mesoporous MCM-41 through solvothermal process as drug delivery system. Mater. Res. Bull. 40, 766-772 (2005). Oldenburg, S.J.; Westcott, S.L.; Averitt, R.D.; Halas, N.J. Surface enhanced Raman scattering in the near infrared using metal nanoshell substrates. J. Chem. Phys. 111, 4729-4735 (1999). Duff, D.G.; Baiker, A. A new hydrosol of gold clusters. 1. Formation and particle size variation. Langmuir 9, 2301-2309 (1993). Gregoriadis, G.; McCormack B.; Obrenovic, M.; Saffie, R.; Brahim, Z.; Perrie, Y. Vaccine entrapment in liposomes. Methods 19, 156-162 (1999). Arulsudar, N.; Subramanian, N.; Mishra, P.; Sharma, R.K.; Murthy, R.S.R. Preparation, characterisation and biodistribution of 99mTc-labeled liposome encapsulated cyclosporine. J. Drug Target. 11, 187-196 (2003).

Claims (12)

1. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) uma população de nanotransportadores sintéticos poliméricos acoplados a um imunossupressor, e (ii) um antígeno apresentável por APC que não está acoplado a quaisquer nanotransportadores sintéticos, em que pelo menos 75% dos nanotransportadores sintéticos poliméricos da população de nanotransportadores sintéticos poliméricos têm uma dimensão mínima, obtida usando dispersão dinâmica da luz, que é maior que 110 nm e uma dimensão máxima, obtida usando dispersão dinâmica da luz, que é igual ou inferior do que 500 nm, em que a carga do imunossupressor em média na população de nanotransportadores sintéticos poliméricos é de pelo menos 4%, mas não mais do que 25% (peso/peso), e em que o imunossupressor compreende rapamicina.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a média de uma distribuição da dimensão das partículas, obtida usando dispersão dinâmica da luz, dos nanotransportadores sintéticos da população é um diâmetro maior do que: (a) 150 nm; (b) 200 nm; (c) 250 nm; ou (d) 300 nm.
3. Composição, de acordo com s reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que (A) a carga do imunossupressor: (a) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é pelo menos 6% (peso/peso); ou (b) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é pelo menos 8% (peso/peso); ou (c) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é de pelo menos 10% (peso/peso); ou (d) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é de pelo menos 12% (peso/peso); ou (e) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é de pelo menos 15% (peso/peso); ou (f) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é de pelo menos 20% (peso/peso); e/ou (g) em média ao longo da população dos nanotransportadores sintéticos é de no máximo 25% (peso/peso);.
4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os nanotransportadores sintéticos da população de nanotransportadores sintéticos compreendem polímero que é um polímero plurônico com terminação não metóxi.
5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que os nanotransportadores sintéticos da população de nanotransportadores sintéticos compreendem um poliéster, um poliéster acoplado a um poliéter, poliaminoácido, policarbonato, poliacetal, policetal, polissacarídeo, polietiloxazolina ou polietilenoimina, opcionalmente em que: 1. ) o poliéster compreende um poli(ácido lático), poli(ácido glicólico), poli(ácido lático-co-glicólico) ou policaprolactona; e/ou (b) as nanopartículas poliméricas compreendem um poliéster e um poliéster acoplado a um poliéter, por exemplo, em que o poliéter compreende polietilenoglicol ou polipropilenoglicol.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que as razões de aspecto dos nanotransportadores sintéticos da população de nanotransportadores sintéticos são maiores do que 1:1, 1:1,2, 1:1,5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7 ou 1:10.
7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a composição compreende ainda um excipiente farmaceuticamente aceitável.
8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que pelo menos 80% dos nanotransportadores sintéticos da população de nanotransportadores sintéticos, com base no número total de nanotransportadores sintéticos, têm uma dimensão mínima ou máxima que cai dentro de 20% da dimensão mínima média ou dimensão máxima média, respectivamente, dos nanotransportadores sintéticos.
9. Composição, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que pelo menos 90% dos nanotransportadores sintéticos têm a dimensão mínima ou dimensão máxima.
10. Composição, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que pelo menos 95% dos nanotransportadores sintéticos têm a dimensão mínima ou dimensão máxima.
11. Composição, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que a dimensão mínima ou dimensão máxima cai dentro de 10% da dimensão mínima média ou da dimensão máxima média, respectivamente, dos nanotransportadores sintéticos.
12. Composição, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que a dimensão mínima ou dimensão máxima cai dentro de 5% da dimensão mínima média ou da dimensão máxima média, respectivamente, dos nanotransportadores sintéticos.
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Families Citing this family (495)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6993506B2 (en) 2000-12-05 2006-01-31 Jgr Acquisition, Inc. Method and device utilizing polymorphic data in e-commerce
US9060770B2 (en) 2003-05-20 2015-06-23 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-driven surgical instrument with E-beam driver
US20070084897A1 (en) 2003-05-20 2007-04-19 Shelton Frederick E Iv Articulating surgical stapling instrument incorporating a two-piece e-beam firing mechanism
US11896225B2 (en) 2004-07-28 2024-02-13 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a pan
US8215531B2 (en) 2004-07-28 2012-07-10 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling instrument having a medical substance dispenser
US9237891B2 (en) 2005-08-31 2016-01-19 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled surgical stapling devices that produce formed staples having different lengths
US7934630B2 (en) 2005-08-31 2011-05-03 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Staple cartridges for forming staples having differing formed staple heights
US11246590B2 (en) 2005-08-31 2022-02-15 Cilag Gmbh International Staple cartridge including staple drivers having different unfired heights
US11484312B2 (en) 2005-08-31 2022-11-01 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a staple driver arrangement
US7669746B2 (en) 2005-08-31 2010-03-02 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Staple cartridges for forming staples having differing formed staple heights
US10159482B2 (en) 2005-08-31 2018-12-25 Ethicon Llc Fastener cartridge assembly comprising a fixed anvil and different staple heights
US20070106317A1 (en) 2005-11-09 2007-05-10 Shelton Frederick E Iv Hydraulically and electrically actuated articulation joints for surgical instruments
SI2347775T1 (sl) 2005-12-13 2020-10-30 President And Fellows Of Harvard College Ogrodja za celično transplantacijo
US20110024477A1 (en) 2009-02-06 2011-02-03 Hall Steven G Driven Surgical Stapler Improvements
US20120292367A1 (en) 2006-01-31 2012-11-22 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled end effector
US8186555B2 (en) 2006-01-31 2012-05-29 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Motor-driven surgical cutting and fastening instrument with mechanical closure system
US11278279B2 (en) 2006-01-31 2022-03-22 Cilag Gmbh International Surgical instrument assembly
US11793518B2 (en) 2006-01-31 2023-10-24 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with firing system lockout arrangements
US8708213B2 (en) 2006-01-31 2014-04-29 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical instrument having a feedback system
US7845537B2 (en) 2006-01-31 2010-12-07 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical instrument having recording capabilities
US7753904B2 (en) 2006-01-31 2010-07-13 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Endoscopic surgical instrument with a handle that can articulate with respect to the shaft
US20110290856A1 (en) 2006-01-31 2011-12-01 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled surgical instrument with force-feedback capabilities
US11224427B2 (en) 2006-01-31 2022-01-18 Cilag Gmbh International Surgical stapling system including a console and retraction assembly
US8820603B2 (en) 2006-01-31 2014-09-02 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Accessing data stored in a memory of a surgical instrument
US8992422B2 (en) 2006-03-23 2015-03-31 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled endoscopic accessory channel
US8322455B2 (en) 2006-06-27 2012-12-04 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Manually driven surgical cutting and fastening instrument
US10568652B2 (en) 2006-09-29 2020-02-25 Ethicon Llc Surgical staples having attached drivers of different heights and stapling instruments for deploying the same
US11980366B2 (en) 2006-10-03 2024-05-14 Cilag Gmbh International Surgical instrument
US8652120B2 (en) 2007-01-10 2014-02-18 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical instrument with wireless communication between control unit and sensor transponders
US8684253B2 (en) 2007-01-10 2014-04-01 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical instrument with wireless communication between a control unit of a robotic system and remote sensor
US11291441B2 (en) 2007-01-10 2022-04-05 Cilag Gmbh International Surgical instrument with wireless communication between control unit and remote sensor
US7434717B2 (en) 2007-01-11 2008-10-14 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Apparatus for closing a curved anvil of a surgical stapling device
US11039836B2 (en) 2007-01-11 2021-06-22 Cilag Gmbh International Staple cartridge for use with a surgical stapling instrument
US7673782B2 (en) 2007-03-15 2010-03-09 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling instrument having a releasable buttress material
US11672531B2 (en) 2007-06-04 2023-06-13 Cilag Gmbh International Rotary drive systems for surgical instruments
US8931682B2 (en) 2007-06-04 2015-01-13 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled shaft based rotary drive systems for surgical instruments
US7753245B2 (en) 2007-06-22 2010-07-13 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling instruments
US11849941B2 (en) 2007-06-29 2023-12-26 Cilag Gmbh International Staple cartridge having staple cavities extending at a transverse angle relative to a longitudinal cartridge axis
CA2715460C (en) 2008-02-13 2020-02-18 President And Fellows Of Harvard College Continuous cell programming devices
JP5410110B2 (ja) 2008-02-14 2014-02-05 エシコン・エンド−サージェリィ・インコーポレイテッド Ｒｆ電極を有する外科用切断・固定器具
US9179912B2 (en) 2008-02-14 2015-11-10 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled motorized surgical cutting and fastening instrument
US8636736B2 (en) 2008-02-14 2014-01-28 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Motorized surgical cutting and fastening instrument
US11986183B2 (en) 2008-02-14 2024-05-21 Cilag Gmbh International Surgical cutting and fastening instrument comprising a plurality of sensors to measure an electrical parameter
US7819298B2 (en) 2008-02-14 2010-10-26 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling apparatus with control features operable with one hand
US8573465B2 (en) 2008-02-14 2013-11-05 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Robotically-controlled surgical end effector system with rotary actuated closure systems
US7866527B2 (en) 2008-02-14 2011-01-11 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling apparatus with interlockable firing system
US9770245B2 (en) 2008-02-15 2017-09-26 Ethicon Llc Layer arrangements for surgical staple cartridges
US11648005B2 (en) 2008-09-23 2023-05-16 Cilag Gmbh International Robotically-controlled motorized surgical instrument with an end effector
US9005230B2 (en) 2008-09-23 2015-04-14 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Motorized surgical instrument
US8210411B2 (en) 2008-09-23 2012-07-03 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Motor-driven surgical cutting instrument
US9386983B2 (en) 2008-09-23 2016-07-12 Ethicon Endo-Surgery, Llc Robotically-controlled motorized surgical instrument
US8608045B2 (en) 2008-10-10 2013-12-17 Ethicon Endo-Sugery, Inc. Powered surgical cutting and stapling apparatus with manually retractable firing system
US8517239B2 (en) 2009-02-05 2013-08-27 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling instrument comprising a magnetic element driver
RU2525225C2 (ru) 2009-02-06 2014-08-10 Этикон Эндо-Серджери, Инк. Усовершенствование приводного хирургического сшивающего инструмента
KR20120022984A (ko) * 2009-04-21 2012-03-12 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. Ｔｈ１ 편향 반응을 제공하는 면역나노치료법
CN102481376B (zh) 2009-05-27 2016-12-21 西莱克塔生物科技公司 免疫调节剂-聚合物化合物
CN107617110A (zh) * 2009-08-26 2018-01-23 西莱克塔生物科技公司 诱导t细胞辅助的组合物
US8851354B2 (en) 2009-12-24 2014-10-07 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical cutting instrument that analyzes tissue thickness
AU2011258156B2 (en) 2010-05-26 2016-11-24 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
WO2012021249A2 (en) 2010-07-12 2012-02-16 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of histidyl-trna synthetases
US8783543B2 (en) 2010-07-30 2014-07-22 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Tissue acquisition arrangements and methods for surgical stapling devices
WO2012019168A2 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US9839420B2 (en) 2010-09-30 2017-12-12 Ethicon Llc Tissue thickness compensator comprising at least one medicament
US11812965B2 (en) 2010-09-30 2023-11-14 Cilag Gmbh International Layer of material for a surgical end effector
US10405854B2 (en) 2010-09-30 2019-09-10 Ethicon Llc Surgical stapling cartridge with layer retention features
US9386988B2 (en) 2010-09-30 2016-07-12 Ethicon End-Surgery, LLC Retainer assembly including a tissue thickness compensator
US11298125B2 (en) 2010-09-30 2022-04-12 Cilag Gmbh International Tissue stapler having a thickness compensator
US10945731B2 (en) 2010-09-30 2021-03-16 Ethicon Llc Tissue thickness compensator comprising controlled release and expansion
US9629814B2 (en) 2010-09-30 2017-04-25 Ethicon Endo-Surgery, Llc Tissue thickness compensator configured to redistribute compressive forces
US8978954B2 (en) 2010-09-30 2015-03-17 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Staple cartridge comprising an adjustable distal portion
US11849952B2 (en) 2010-09-30 2023-12-26 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising staples positioned within a compressible portion thereof
US8695866B2 (en) 2010-10-01 2014-04-15 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical instrument having a power control circuit
DE19177059T1 (de) 2010-10-01 2021-10-07 Modernatx, Inc. N1-methyl-pseudouracile enthältendes ribonucleinsäuren sowie ihre verwendungen
ES2773858T3 (es) 2010-10-06 2020-07-15 Harvard College Hidrogeles formadores de poros inyectables para terapias celulares basadas en materiales
EP2640190A4 (en) 2010-11-05 2016-05-11 Selecta Biosciences Inc MODIFIED NICOTINIC COMPOUNDS AND ASSOCIATED METHODS
MX358598B (es) 2010-11-12 2018-08-27 Cour Pharmaceuticals Dev Company Partículas inmuno-moduladoras modificadas.
DE12722942T1 (de) 2011-03-31 2021-09-30 Modernatx, Inc. Freisetzung und formulierung von manipulierten nukleinsäuren
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
RU2606493C2 (ru) 2011-04-29 2017-01-10 Этикон Эндо-Серджери, Инк. Кассета со скобками, содержащая скобки, расположенные внутри ее сжимаемой части
US9289477B2 (en) 2011-04-29 2016-03-22 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers to reduce cytotoxic T lymphocyte responses
US11207064B2 (en) 2011-05-27 2021-12-28 Cilag Gmbh International Automated end effector component reloading system for use with a robotic system
US9072535B2 (en) 2011-05-27 2015-07-07 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Surgical stapling instruments with rotatable staple deployment arrangements
WO2013019658A2 (en) 2011-07-29 2013-02-07 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers comprising polymers comprising multiple immunomodulatory agents
EP2750662A4 (en) 2011-08-31 2015-06-24 Univ Georgia NANOPARTICLES TARGETING APOPTOSIS
US20140212398A1 (en) 2011-09-08 2014-07-31 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti third party central memory t cells, methods of producing same and use of same in transplantation and disease treatment
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
JP6113737B2 (ja) 2011-10-03 2017-04-12 モデルナティエックス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａＴＸ，Ｉｎｃ． 修飾型のヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸、ならびにそれらの使用方法
EP2591801A1 (en) * 2011-11-14 2013-05-15 Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf Nanoparticle compositions for generation of regulatory T cells and treatment of autoimmune diseases and other chronic inflammatory conditions
MX2014007233A (es) 2011-12-16 2015-02-04 Moderna Therapeutics Inc Composiciones de nucleosidos, nucleotidos y acidos nucleicos modificados.
WO2013119853A1 (en) 2012-02-07 2013-08-15 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Epitopes from allergen proteins and methods and uses for immune response modulation
WO2013123432A2 (en) 2012-02-16 2013-08-22 Atyr Pharma, Inc. Histidyl-trna synthetases for treating autoimmune and inflammatory diseases
ES2669561T3 (es) 2012-02-17 2018-05-28 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Nanopartículas para el transporte mitocondrial de agentes
MX2014011484A (es) * 2012-03-23 2015-09-23 Esteve Labor Dr Metodo para seguir las respuestas de celulas t especificas al vih.
MX358135B (es) 2012-03-28 2018-08-06 Ethicon Endo Surgery Inc Compensador de grosor de tejido que comprende una pluralidad de capas.
BR112014024098B1 (pt) 2012-03-28 2021-05-25 Ethicon Endo-Surgery, Inc. cartucho de grampos
JP6224070B2 (ja) 2012-03-28 2017-11-01 エシコン・エンド−サージェリィ・インコーポレイテッドＥｔｈｉｃｏｎ Ｅｎｄｏ−Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｉｎｃ． 組織厚さコンペンセータを含む保持具アセンブリ
EP2834259A4 (en) 2012-04-02 2016-08-24 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES
CA2868391A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Stephane Bancel Polynucleotides comprising n1-methyl-pseudouridine and methods for preparing the same
US10501512B2 (en) 2012-04-02 2019-12-10 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
ES2773895T3 (es) 2012-04-16 2020-07-15 Harvard College Composiciones de sílice mesoporosa para modular las respuestas inmunitarias
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
WO2013158279A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Abbvie Inc. Protein purification methods to reduce acidic species
WO2013163176A1 (en) 2012-04-23 2013-10-31 Allertein Therapeutics, Llc Nanoparticles for treatment of allergy
US9101358B2 (en) 2012-06-15 2015-08-11 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Articulatable surgical instrument comprising a firing drive
CA2876495C (en) 2012-06-21 2023-10-17 Northwestern University Peptide conjugated particles
US20140001231A1 (en) 2012-06-28 2014-01-02 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Firing system lockout arrangements for surgical instruments
BR112014032776B1 (pt) 2012-06-28 2021-09-08 Ethicon Endo-Surgery, Inc Sistema de instrumento cirúrgico e kit cirúrgico para uso com um sistema de instrumento cirúrgico
CN104487005B (zh) 2012-06-28 2017-09-08 伊西康内外科公司 空夹仓闭锁件
US20140001234A1 (en) 2012-06-28 2014-01-02 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Coupling arrangements for attaching surgical end effectors to drive systems therefor
US11202631B2 (en) 2012-06-28 2021-12-21 Cilag Gmbh International Stapling assembly comprising a firing lockout
US9289256B2 (en) 2012-06-28 2016-03-22 Ethicon Endo-Surgery, Llc Surgical end effectors having angled tissue-contacting surfaces
US9649111B2 (en) 2012-06-28 2017-05-16 Ethicon Endo-Surgery, Llc Replaceable clip cartridge for a clip applier
US9700310B2 (en) 2013-08-23 2017-07-11 Ethicon Llc Firing member retraction devices for powered surgical instruments
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
RU2687164C2 (ru) 2012-10-30 2019-05-07 Аравакс Пти Лтд Новые иммунотерапевтические молекулы и их применения
WO2014069655A1 (ja) * 2012-11-05 2014-05-08 株式会社レグイミューン 免疫寛容誘導剤
CA2892529C (en) 2012-11-26 2023-04-25 Moderna Therapeutics, Inc. Terminally modified rna
BR112015021082B1 (pt) 2013-03-01 2022-05-10 Ethicon Endo-Surgery, Inc Instrumento cirúrgico
MX368026B (es) 2013-03-01 2019-09-12 Ethicon Endo Surgery Inc Instrumento quirúrgico articulable con vías conductoras para la comunicación de la señal.
CA2905010A1 (en) 2013-03-12 2014-09-18 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
KR20210057832A (ko) 2013-03-13 2021-05-21 코어 파마슈티칼스 디벨롭먼트 컴퍼니 인크. 염증 치료용 면역-변형된 입자
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
US9629629B2 (en) 2013-03-14 2017-04-25 Ethicon Endo-Surgey, LLC Control systems for surgical instruments
US9351726B2 (en) 2013-03-14 2016-05-31 Ethicon Endo-Surgery, Llc Articulation control system for articulatable surgical instruments
US9499614B2 (en) 2013-03-14 2016-11-22 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosaccharides
US10258698B2 (en) 2013-03-14 2019-04-16 Modernatx, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
CA2907046C (en) 2013-03-15 2021-04-20 Atyr Pharma, Inc. Histidyl-trna synthetase-fc conjugates
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
US9588115B2 (en) 2013-03-28 2017-03-07 Protagen Ag Method for the diagnosis of neuromyelitis optica
CN105188741A (zh) 2013-04-03 2015-12-23 阿勒丁医疗公司 新型纳米颗粒组合物
US9801626B2 (en) 2013-04-16 2017-10-31 Ethicon Llc Modular motor driven surgical instruments with alignment features for aligning rotary drive shafts with surgical end effector shafts
BR112015026109B1 (pt) 2013-04-16 2022-02-22 Ethicon Endo-Surgery, Inc Instrumento cirúrgico
WO2014179771A1 (en) * 2013-05-03 2014-11-06 Selecta Biosciences, Inc. Dosing combinations for reducing undesired humoral immune responses
EA201592106A3 (ru) * 2013-05-03 2016-08-31 Селекта Байосайенсиз, Инк. Локальное сопутствующее введение толерогенных синтетических наноносителей для снижения гиперчувствительности типа i и гиперчувствительности типа iv
EA201592273A1 (ru) * 2013-06-04 2016-09-30 Селекта Байосайенсиз, Инк. Повторное введение неиммуносупрессивных антигенспецифических иммунотерапевтических средств
EP2813242A1 (en) * 2013-06-13 2014-12-17 PLS-Design GmbH Low molecular weight immune-modulators as adjuvants for specific immunotherapy
FI3033102T4 (fi) 2013-08-13 2024-03-01 Univ Northwestern Peptidikonjugoituja hiukkasia
JP6416260B2 (ja) 2013-08-23 2018-10-31 エシコン エルエルシー 動力付き外科用器具のための発射部材後退装置
EP3041934A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
EP3041938A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
US20160228521A1 (en) * 2013-09-16 2016-08-11 Allertein Therapeutics, Llc Managing immune responses in transplantation
BR112016006813A2 (pt) 2013-09-25 2017-09-19 Aravax Pty Ltd Composição imunoterapêutica nova e seus usos
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
CA2926218A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
WO2015051293A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Abbvie, Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
CA2930973A1 (en) 2013-11-22 2015-05-28 Pal SAERTROM C/ebp alpha short activating rna compositions and methods of use
KR101483378B1 (ko) * 2013-12-24 2015-01-15 이영환 금 나노 입자를 함유하는 물을 이용한 금 나노 입자를 포함하는 달걀 제조방법
TR201807778T4 (tr) * 2014-01-17 2018-06-21 Fundacio Inst Catala De Nanociencia I Nanotecnologia Lipozom bazlı immünoterapi.
US9962161B2 (en) 2014-02-12 2018-05-08 Ethicon Llc Deliverable surgical instrument
EP2918262B1 (en) * 2014-03-10 2023-08-09 PLS-Design GmbH Induction of antigen-specific tolerance by peripheral phagocytosis
WO2015138992A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Mitochondrial delivery of 3-bromopyruvate
US10004497B2 (en) 2014-03-26 2018-06-26 Ethicon Llc Interface systems for use with surgical instruments
US9690362B2 (en) 2014-03-26 2017-06-27 Ethicon Llc Surgical instrument control circuit having a safety processor
BR112016021943B1 (pt) 2014-03-26 2022-06-14 Ethicon Endo-Surgery, Llc Instrumento cirúrgico para uso por um operador em um procedimento cirúrgico
US20150297222A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Fastener cartridges including extensions having different configurations
CN106456176B (zh) 2014-04-16 2019-06-28 伊西康内外科有限责任公司 包括具有不同构型的延伸部的紧固件仓
US9844369B2 (en) 2014-04-16 2017-12-19 Ethicon Llc Surgical end effectors with firing element monitoring arrangements
BR112016023807B1 (pt) 2014-04-16 2022-07-12 Ethicon Endo-Surgery, Llc Conjunto de cartucho de prendedores para uso com um instrumento cirúrgico
CN106456158B (zh) 2014-04-16 2019-02-05 伊西康内外科有限责任公司 包括非一致紧固件的紧固件仓
US10682400B2 (en) 2014-04-30 2020-06-16 President And Fellows Of Harvard College Combination vaccine devices and methods of killing cancer cells
CN104028745A (zh) * 2014-06-11 2014-09-10 浙江大学 一种利用丝素蛋白调控金纳米颗粒自组装的方法
US20150359865A1 (en) * 2014-06-17 2015-12-17 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers for t-cell-mediated autoimmune disease
WO2016014846A1 (en) 2014-07-23 2016-01-28 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of intrabodies
BR112017004361B1 (pt) 2014-09-05 2023-04-11 Ethicon Llc Sistema eletrônico para um instrumento cirúrgico
US11311294B2 (en) 2014-09-05 2022-04-26 Cilag Gmbh International Powered medical device including measurement of closure state of jaws
US20160066913A1 (en) 2014-09-05 2016-03-10 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Local display of tissue parameter stabilization
WO2016037163A1 (en) 2014-09-07 2016-03-10 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuating gene therapy anti-viral transfer vector immune responses
CN107073066B (zh) * 2014-09-11 2021-09-17 加利福尼亚大学董事会 mTORC1抑制剂
US10105142B2 (en) 2014-09-18 2018-10-23 Ethicon Llc Surgical stapler with plurality of cutting elements
MX2017003960A (es) 2014-09-26 2017-12-04 Ethicon Llc Refuerzos de grapas quirúrgicas y materiales auxiliares.
JP2017528511A (ja) 2014-09-26 2017-09-28 セキラス ユーケー リミテッド 免疫低下された被験体のワクチン接種
US11523821B2 (en) 2014-09-26 2022-12-13 Cilag Gmbh International Method for creating a flexible staple line
US9924944B2 (en) 2014-10-16 2018-03-27 Ethicon Llc Staple cartridge comprising an adjunct material
JP2017533238A (ja) 2014-10-28 2017-11-09 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 抗原特異的寛容のための組成物及び方法
US10517594B2 (en) 2014-10-29 2019-12-31 Ethicon Llc Cartridge assemblies for surgical staplers
US11141153B2 (en) 2014-10-29 2021-10-12 Cilag Gmbh International Staple cartridges comprising driver arrangements
PL3215133T3 (pl) * 2014-11-05 2021-06-14 Selecta Biosciences, Inc. Sposoby i kompozycje związane z zastosowaniem związków powierzchniowo czynnych o niskiej hlb do wytwarzania syntetycznych nanonośników zawierających rapalog
US9844376B2 (en) 2014-11-06 2017-12-19 Ethicon Llc Staple cartridge comprising a releasable adjunct material
US10736636B2 (en) 2014-12-10 2020-08-11 Ethicon Llc Articulatable surgical instrument system
RU2703684C2 (ru) 2014-12-18 2019-10-21 ЭТИКОН ЭНДО-СЕРДЖЕРИ, ЭлЭлСи Хирургический инструмент с упором, который выполнен с возможностью избирательного перемещения относительно кассеты со скобами вокруг дискретной неподвижной оси
US10004501B2 (en) 2014-12-18 2018-06-26 Ethicon Llc Surgical instruments with improved closure arrangements
US9987000B2 (en) 2014-12-18 2018-06-05 Ethicon Llc Surgical instrument assembly comprising a flexible articulation system
US9844374B2 (en) 2014-12-18 2017-12-19 Ethicon Llc Surgical instrument systems comprising an articulatable end effector and means for adjusting the firing stroke of a firing member
US9844375B2 (en) 2014-12-18 2017-12-19 Ethicon Llc Drive arrangements for articulatable surgical instruments
US10085748B2 (en) 2014-12-18 2018-10-02 Ethicon Llc Locking arrangements for detachable shaft assemblies with articulatable surgical end effectors
US11786457B2 (en) 2015-01-30 2023-10-17 President And Fellows Of Harvard College Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy
US11154301B2 (en) 2015-02-27 2021-10-26 Cilag Gmbh International Modular stapling assembly
US10245033B2 (en) 2015-03-06 2019-04-02 Ethicon Llc Surgical instrument comprising a lockable battery housing
US10441279B2 (en) 2015-03-06 2019-10-15 Ethicon Llc Multiple level thresholds to modify operation of powered surgical instruments
JP2020121162A (ja) 2015-03-06 2020-08-13 エシコン エルエルシーＥｔｈｉｃｏｎ ＬＬＣ 測定の安定性要素、クリープ要素、及び粘弾性要素を決定するためのセンサデータの時間依存性評価
US10052044B2 (en) 2015-03-06 2018-08-21 Ethicon Llc Time dependent evaluation of sensor data to determine stability, creep, and viscoelastic elements of measures
US9993248B2 (en) 2015-03-06 2018-06-12 Ethicon Endo-Surgery, Llc Smart sensors with local signal processing
US10390825B2 (en) 2015-03-31 2019-08-27 Ethicon Llc Surgical instrument with progressive rotary drive systems
JP7094533B2 (ja) 2015-04-10 2022-07-04 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ 免疫細胞捕捉デバイスおよびその製造および使用方法
CN104758261A (zh) * 2015-04-30 2015-07-08 中国医学科学院生物医学工程研究所 淫羊藿苷plga纳米粒子及制备方法及用途
WO2016196691A2 (en) 2015-06-01 2016-12-08 California Institute Of Technology Compositions and methods for screening t cells with antigens for specific populations
EP3310342A4 (en) * 2015-06-16 2019-03-06 The Trustees of the University of Pennsylvania INORGANIC PARTICLES WITH QUICK-LOAD PROLONGED RELEASE IN DRUG SUBSTANCE
WO2017011685A1 (en) * 2015-07-15 2017-01-19 Celator Pharmaceuticals, Inc. Improved nanoparticle delivery systems
US10933124B2 (en) 2015-07-16 2021-03-02 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of transplantation and disease treatment
US11260027B2 (en) 2015-07-29 2022-03-01 Musc Foundation For Research Development Donor organ pre-treatment formulation
US10835249B2 (en) 2015-08-17 2020-11-17 Ethicon Llc Implantable layers for a surgical instrument
EP3347053B1 (en) 2015-09-13 2022-05-25 The Research Foundation For State University Of New York Functional, segregated, charged telodendrimers and nanocarriers and methods of making and using same
RS63030B1 (sr) 2015-09-17 2022-04-29 Modernatx Inc Jedinjenja i kompozicije za intracelularno isporučivanje terapeutskih sredstava
US10105139B2 (en) 2015-09-23 2018-10-23 Ethicon Llc Surgical stapler having downstream current-based motor control
US10238386B2 (en) 2015-09-23 2019-03-26 Ethicon Llc Surgical stapler having motor control based on an electrical parameter related to a motor current
KR102514116B1 (ko) 2015-09-24 2023-03-23 삼성전자주식회사 반도체 나노결정 입자 및 이를 포함하는 소자
US10299878B2 (en) 2015-09-25 2019-05-28 Ethicon Llc Implantable adjunct systems for determining adjunct skew
US10561420B2 (en) * 2015-09-30 2020-02-18 Ethicon Llc Tubular absorbable constructs
US10285699B2 (en) 2015-09-30 2019-05-14 Ethicon Llc Compressible adjunct
US11890015B2 (en) 2015-09-30 2024-02-06 Cilag Gmbh International Compressible adjunct with crossing spacer fibers
US10980539B2 (en) 2015-09-30 2021-04-20 Ethicon Llc Implantable adjunct comprising bonded layers
WO2017096262A1 (en) * 2015-12-04 2017-06-08 Jomoco, Corp. Compositions and methods to mitigate or prevent an immune response to an immunogenic therapeutic molecule in non-human primates
MD3386484T2 (ro) 2015-12-10 2022-11-30 Modernatx Inc Compoziții și metode de livrare a unor agenți terapeutici
US11433136B2 (en) 2015-12-18 2022-09-06 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
JP7114465B2 (ja) 2015-12-22 2022-08-08 モデルナティエックス インコーポレイテッド 薬剤の細胞内送達のための化合物および組成物
EP3394093B1 (en) 2015-12-23 2022-01-26 Modernatx, Inc. Methods of using ox40 ligand encoding polynucleotides
US10292704B2 (en) 2015-12-30 2019-05-21 Ethicon Llc Mechanisms for compensating for battery pack failure in powered surgical instruments
US10265068B2 (en) 2015-12-30 2019-04-23 Ethicon Llc Surgical instruments with separable motors and motor control circuits
US10368865B2 (en) 2015-12-30 2019-08-06 Ethicon Llc Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments
MA43587A (fr) 2016-01-10 2018-11-14 Modernatx Inc Arnm thérapeutiques codant pour des anticorps anti-ctla-4
CN115487351A (zh) 2016-02-06 2022-12-20 哈佛学院校长同事会 重塑造血巢以重建免疫
US11213293B2 (en) 2016-02-09 2022-01-04 Cilag Gmbh International Articulatable surgical instruments with single articulation link arrangements
BR112018016098B1 (pt) 2016-02-09 2023-02-23 Ethicon Llc Instrumento cirúrgico
US11224426B2 (en) 2016-02-12 2022-01-18 Cilag Gmbh International Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments
US10448948B2 (en) 2016-02-12 2019-10-22 Ethicon Llc Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments
US20170258927A1 (en) * 2016-03-11 2017-09-14 Selecta Biosciences, Inc. Formulations and doses of pegylated uricase
US11607239B2 (en) 2016-04-15 2023-03-21 Cilag Gmbh International Systems and methods for controlling a surgical stapling and cutting instrument
US10335145B2 (en) 2016-04-15 2019-07-02 Ethicon Llc Modular surgical instrument with configurable operating mode
US10828028B2 (en) 2016-04-15 2020-11-10 Ethicon Llc Surgical instrument with multiple program responses during a firing motion
US10426467B2 (en) 2016-04-15 2019-10-01 Ethicon Llc Surgical instrument with detection sensors
US11179150B2 (en) 2016-04-15 2021-11-23 Cilag Gmbh International Systems and methods for controlling a surgical stapling and cutting instrument
US10357247B2 (en) 2016-04-15 2019-07-23 Ethicon Llc Surgical instrument with multiple program responses during a firing motion
US10456137B2 (en) 2016-04-15 2019-10-29 Ethicon Llc Staple formation detection mechanisms
US10492783B2 (en) 2016-04-15 2019-12-03 Ethicon, Llc Surgical instrument with improved stop/start control during a firing motion
US20170296173A1 (en) 2016-04-18 2017-10-19 Ethicon Endo-Surgery, Llc Method for operating a surgical instrument
US11317917B2 (en) 2016-04-18 2022-05-03 Cilag Gmbh International Surgical stapling system comprising a lockable firing assembly
US10426469B2 (en) 2016-04-18 2019-10-01 Ethicon Llc Surgical instrument comprising a primary firing lockout and a secondary firing lockout
EP3251662A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-06 Tolerogenics S.à.r.l. Matrix-embedded tolerance-promotion adjuvants for subcutaneous immunotherapy
NL2017204B1 (en) 2016-06-08 2017-12-18 Kei International Ltd Solid substrate comprising antigens immobilised thereto, biosensor comprising said solid substrate and method for detecting the presence of mycobacterial material in a sample
AU2017283480A1 (en) 2016-06-13 2019-01-24 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
JP2018012694A (ja) * 2016-07-12 2018-01-25 日本化薬株式会社 ラパマイシン類結合ブロック共重合体
JP2019522486A (ja) 2016-07-13 2019-08-15 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ 抗原提示細胞模倣足場およびそれを作製および使用するための方法
US20180092983A1 (en) * 2016-10-05 2018-04-05 Tian Xin Wang Methods and reagents to treat autoimmune diseases and allergy
US20190008900A1 (en) * 2017-07-07 2019-01-10 Tian Xin Wang Methods and reagents to treat autoimmune diseases and allergy
US20210363220A1 (en) * 2016-10-05 2021-11-25 Tianxin Wang Methods and reagents to treat autoimmune diseases and allergy
US10398732B2 (en) 2016-10-13 2019-09-03 Marshall University Research Corporation Compositions and methods for treating striated muscle injury, treating striated muscle atrophy and/or for promoting striated muscle growth
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
WO2018104540A1 (en) 2016-12-08 2018-06-14 Curevac Ag Rnas for wound healing
EP3808380A1 (en) 2016-12-08 2021-04-21 CureVac AG Rna for treatment or prophylaxis of a liver disease
US10537325B2 (en) 2016-12-21 2020-01-21 Ethicon Llc Staple forming pocket arrangement to accommodate different types of staples
JP7010956B2 (ja) 2016-12-21 2022-01-26 エシコン エルエルシー 組織をステープル留めする方法
US11419606B2 (en) 2016-12-21 2022-08-23 Cilag Gmbh International Shaft assembly comprising a clutch configured to adapt the output of a rotary firing member to two different systems
JP6983893B2 (ja) 2016-12-21 2021-12-17 エシコン エルエルシーEthicon LLC 外科用エンドエフェクタ及び交換式ツールアセンブリのためのロックアウト構成
US20180168625A1 (en) 2016-12-21 2018-06-21 Ethicon Endo-Surgery, Llc Surgical stapling instruments with smart staple cartridges
US20180168575A1 (en) 2016-12-21 2018-06-21 Ethicon Endo-Surgery, Llc Surgical stapling systems
US20180168633A1 (en) 2016-12-21 2018-06-21 Ethicon Endo-Surgery, Llc Surgical stapling instruments and staple-forming anvils
US20180168615A1 (en) 2016-12-21 2018-06-21 Ethicon Endo-Surgery, Llc Method of deforming staples from two different types of staple cartridges with the same surgical stapling instrument
US10779823B2 (en) 2016-12-21 2020-09-22 Ethicon Llc Firing member pin angle
US10973516B2 (en) 2016-12-21 2021-04-13 Ethicon Llc Surgical end effectors and adaptable firing members therefor
CN110087565A (zh) 2016-12-21 2019-08-02 爱惜康有限责任公司 外科缝合系统
US10980536B2 (en) 2016-12-21 2021-04-20 Ethicon Llc No-cartridge and spent cartridge lockout arrangements for surgical staplers
US10588631B2 (en) 2016-12-21 2020-03-17 Ethicon Llc Surgical instruments with positive jaw opening features
US10675025B2 (en) 2016-12-21 2020-06-09 Ethicon Llc Shaft assembly comprising separately actuatable and retractable systems
US11134942B2 (en) 2016-12-21 2021-10-05 Cilag Gmbh International Surgical stapling instruments and staple-forming anvils
US10682138B2 (en) 2016-12-21 2020-06-16 Ethicon Llc Bilaterally asymmetric staple forming pocket pairs
US11542316B2 (en) * 2017-01-04 2023-01-03 Worg Pharmaceuticals (Zhejiang) Co., Ltd. S-Arrestin peptides and therapeutic uses thereof
AU2018205496A1 (en) * 2017-01-07 2019-07-25 Selecta Biosciences, Inc. Patterned dosing of immunosuppressants coupled to synthetic nanocarriers
US11555178B2 (en) 2017-01-18 2023-01-17 Yeda Research And Development Co. Ltd. Genetically modified veto cells and use of same in immunotherapy
US10751368B2 (en) 2017-01-18 2020-08-25 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of transplantation and disease treatment
BR112019018748A2 (pt) 2017-03-11 2020-04-07 Selecta Biosciences Inc métodos e composições relacionados ao tratamento combinado com anti-inflamatórios e nanocarreadores sintéticos compreendendo um imunossupressor
JP7332478B2 (ja) 2017-03-15 2023-08-23 モデルナティエックス インコーポレイテッド 脂質ナノ粒子製剤
ES2911186T3 (es) 2017-03-15 2022-05-18 Modernatx Inc Formas cristalinas de aminolípidos
SG11201907916TA (en) 2017-03-15 2019-09-27 Modernatx Inc Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2018187590A1 (en) 2017-04-05 2018-10-11 Modernatx, Inc. Reduction or elimination of immune responses to non-intravenous, e.g., subcutaneously administered therapeutic proteins
CA3060514A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
WO2018232357A1 (en) 2017-06-15 2018-12-20 Modernatx, Inc. Rna formulations
US11382638B2 (en) 2017-06-20 2022-07-12 Cilag Gmbh International Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured time over a specified displacement distance
US10980537B2 (en) 2017-06-20 2021-04-20 Ethicon Llc Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured time over a specified number of shaft rotations
US10779820B2 (en) 2017-06-20 2020-09-22 Ethicon Llc Systems and methods for controlling motor speed according to user input for a surgical instrument
US11071554B2 (en) 2017-06-20 2021-07-27 Cilag Gmbh International Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on magnitude of velocity error measurements
US10307170B2 (en) 2017-06-20 2019-06-04 Ethicon Llc Method for closed loop control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument
US11653914B2 (en) 2017-06-20 2023-05-23 Cilag Gmbh International Systems and methods for controlling motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument according to articulation angle of end effector
US11517325B2 (en) 2017-06-20 2022-12-06 Cilag Gmbh International Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured displacement distance traveled over a specified time interval
US10888321B2 (en) 2017-06-20 2021-01-12 Ethicon Llc Systems and methods for controlling velocity of a displacement member of a surgical stapling and cutting instrument
US10881399B2 (en) 2017-06-20 2021-01-05 Ethicon Llc Techniques for adaptive control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument
US11090046B2 (en) 2017-06-20 2021-08-17 Cilag Gmbh International Systems and methods for controlling displacement member motion of a surgical stapling and cutting instrument
US11266405B2 (en) 2017-06-27 2022-03-08 Cilag Gmbh International Surgical anvil manufacturing methods
US11090049B2 (en) 2017-06-27 2021-08-17 Cilag Gmbh International Staple forming pocket arrangements
US10993716B2 (en) 2017-06-27 2021-05-04 Ethicon Llc Surgical anvil arrangements
US11324503B2 (en) 2017-06-27 2022-05-10 Cilag Gmbh International Surgical firing member arrangements
US11564686B2 (en) 2017-06-28 2023-01-31 Cilag Gmbh International Surgical shaft assemblies with flexible interfaces
US11484310B2 (en) 2017-06-28 2022-11-01 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a shaft including a closure tube profile
US10588633B2 (en) 2017-06-28 2020-03-17 Ethicon Llc Surgical instruments with open and closable jaws and axially movable firing member that is initially parked in close proximity to the jaws prior to firing
USD906355S1 (en) 2017-06-28 2020-12-29 Ethicon Llc Display screen or portion thereof with a graphical user interface for a surgical instrument
EP4070740A1 (en) 2017-06-28 2022-10-12 Cilag GmbH International Surgical instrument comprising selectively actuatable rotatable couplers
US10903685B2 (en) 2017-06-28 2021-01-26 Ethicon Llc Surgical shaft assemblies with slip ring assemblies forming capacitive channels
US10765427B2 (en) 2017-06-28 2020-09-08 Ethicon Llc Method for articulating a surgical instrument
US11259805B2 (en) 2017-06-28 2022-03-01 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising firing member supports
US11246592B2 (en) 2017-06-28 2022-02-15 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an articulation system lockable to a frame
US10932772B2 (en) 2017-06-29 2021-03-02 Ethicon Llc Methods for closed loop velocity control for robotic surgical instrument
US11304695B2 (en) 2017-08-03 2022-04-19 Cilag Gmbh International Surgical system shaft interconnection
US11944300B2 (en) 2017-08-03 2024-04-02 Cilag Gmbh International Method for operating a surgical system bailout
US11974742B2 (en) 2017-08-03 2024-05-07 Cilag Gmbh International Surgical system comprising an articulation bailout
US11471155B2 (en) 2017-08-03 2022-10-18 Cilag Gmbh International Surgical system bailout
EP3675817A1 (en) 2017-08-31 2020-07-08 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
EP3678701A4 (en) 2017-09-05 2021-12-01 Torque Therapeutics, Inc. THERAPEUTIC PROTEIN COMPOSITIONS AND METHOD FOR MANUFACTURING AND USING THEREOF
EP4183882A1 (en) 2017-09-08 2023-05-24 MiNA Therapeutics Limited Stabilized hnf4a sarna compositions and methods of use
US20200208152A1 (en) 2017-09-08 2020-07-02 Mina Therapeutics Limited Stabilized sarna compositions and methods of use
USD907648S1 (en) 2017-09-29 2021-01-12 Ethicon Llc Display screen or portion thereof with animated graphical user interface
US11399829B2 (en) 2017-09-29 2022-08-02 Cilag Gmbh International Systems and methods of initiating a power shutdown mode for a surgical instrument
USD907647S1 (en) 2017-09-29 2021-01-12 Ethicon Llc Display screen or portion thereof with animated graphical user interface
US20220025015A1 (en) * 2017-10-03 2022-01-27 Tianxin Wang Methods, compositions and therapeutical vaccine for autoimmune diseases and allergy treatment
CA3077084A1 (en) * 2017-10-05 2019-04-11 Epivax, Inc. Regulatory t cell epitopes
US11134944B2 (en) 2017-10-30 2021-10-05 Cilag Gmbh International Surgical stapler knife motion controls
US11090075B2 (en) 2017-10-30 2021-08-17 Cilag Gmbh International Articulation features for surgical end effector
US10842490B2 (en) 2017-10-31 2020-11-24 Ethicon Llc Cartridge body design with force reduction based on firing completion
US10869666B2 (en) 2017-12-15 2020-12-22 Ethicon Llc Adapters with control systems for controlling multiple motors of an electromechanical surgical instrument
US11033267B2 (en) 2017-12-15 2021-06-15 Ethicon Llc Systems and methods of controlling a clamping member firing rate of a surgical instrument
US10966718B2 (en) 2017-12-15 2021-04-06 Ethicon Llc Dynamic clamping assemblies with improved wear characteristics for use in connection with electromechanical surgical instruments
US10779826B2 (en) 2017-12-15 2020-09-22 Ethicon Llc Methods of operating surgical end effectors
US10828033B2 (en) 2017-12-15 2020-11-10 Ethicon Llc Handheld electromechanical surgical instruments with improved motor control arrangements for positioning components of an adapter coupled thereto
US10779825B2 (en) 2017-12-15 2020-09-22 Ethicon Llc Adapters with end effector position sensing and control arrangements for use in connection with electromechanical surgical instruments
US11197670B2 (en) 2017-12-15 2021-12-14 Cilag Gmbh International Surgical end effectors with pivotal jaws configured to touch at their respective distal ends when fully closed
US11071543B2 (en) 2017-12-15 2021-07-27 Cilag Gmbh International Surgical end effectors with clamping assemblies configured to increase jaw aperture ranges
USD910847S1 (en) 2017-12-19 2021-02-16 Ethicon Llc Surgical instrument assembly
US11020112B2 (en) 2017-12-19 2021-06-01 Ethicon Llc Surgical tools configured for interchangeable use with different controller interfaces
US10835330B2 (en) 2017-12-19 2020-11-17 Ethicon Llc Method for determining the position of a rotatable jaw of a surgical instrument attachment assembly
US11076853B2 (en) 2017-12-21 2021-08-03 Cilag Gmbh International Systems and methods of displaying a knife position during transection for a surgical instrument
US11129680B2 (en) 2017-12-21 2021-09-28 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a projector
US20190192151A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Ethicon Llc Surgical instrument having a display comprising image layers
US11311290B2 (en) 2017-12-21 2022-04-26 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an end effector dampener
CN112384204B (zh) * 2018-02-26 2023-03-14 安托瑞斯公司 致耐受性脂质体及其使用方法
US11566246B2 (en) 2018-04-12 2023-01-31 Mina Therapeutics Limited SIRT1-saRNA compositions and methods of use
CN108841774B (zh) * 2018-05-02 2021-11-26 南开大学 一种双响应型纳米仿生界面的制备及其在细胞捕获与应需无损释放中的应用
CN108753716A (zh) * 2018-06-14 2018-11-06 杭州启澜生物医学技术有限公司 一种体外扩增人外周血cd3+t细胞的方法
EP3833762A4 (en) 2018-08-09 2022-09-28 Verseau Therapeutics, Inc. OLIGONUCLEOTIDE COMPOSITIONS FOR TARGETING CCR2 AND CSF1R AND THEIR USES
CN110836966A (zh) * 2018-08-15 2020-02-25 王镕 用于抗原特异性t细胞含量检测的检测纳米颗粒、检测方法及试剂盒等
US11039834B2 (en) 2018-08-20 2021-06-22 Cilag Gmbh International Surgical stapler anvils with staple directing protrusions and tissue stability features
US11045192B2 (en) 2018-08-20 2021-06-29 Cilag Gmbh International Fabricating techniques for surgical stapler anvils
USD914878S1 (en) 2018-08-20 2021-03-30 Ethicon Llc Surgical instrument anvil
US11207065B2 (en) 2018-08-20 2021-12-28 Cilag Gmbh International Method for fabricating surgical stapler anvils
US11253256B2 (en) 2018-08-20 2022-02-22 Cilag Gmbh International Articulatable motor powered surgical instruments with dedicated articulation motor arrangements
US11083458B2 (en) 2018-08-20 2021-08-10 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with clutching arrangements to convert linear drive motions to rotary drive motions
US10856870B2 (en) 2018-08-20 2020-12-08 Ethicon Llc Switching arrangements for motor powered articulatable surgical instruments
US11324501B2 (en) 2018-08-20 2022-05-10 Cilag Gmbh International Surgical stapling devices with improved closure members
US11291440B2 (en) 2018-08-20 2022-04-05 Cilag Gmbh International Method for operating a powered articulatable surgical instrument
US10912559B2 (en) 2018-08-20 2021-02-09 Ethicon Llc Reinforced deformable anvil tip for surgical stapler anvil
CN109439626B (zh) * 2018-11-09 2022-10-14 复旦大学附属中山医院 一种有助于体外获得Th22细胞的组合物及其用途
CN111388679A (zh) * 2019-01-03 2020-07-10 北京大学 蛋白质-螺旋聚氨基酸偶联物、其制备方法及用途
CN111574590B (zh) * 2019-02-18 2022-04-22 常州市第一人民医院 一种具有抗肿瘤功能的多肽及其应用
US11172929B2 (en) 2019-03-25 2021-11-16 Cilag Gmbh International Articulation drive arrangements for surgical systems
US11147553B2 (en) 2019-03-25 2021-10-19 Cilag Gmbh International Firing drive arrangements for surgical systems
US11696761B2 (en) 2019-03-25 2023-07-11 Cilag Gmbh International Firing drive arrangements for surgical systems
US11147551B2 (en) 2019-03-25 2021-10-19 Cilag Gmbh International Firing drive arrangements for surgical systems
EP3953473A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 MiNA Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
US11426251B2 (en) 2019-04-30 2022-08-30 Cilag Gmbh International Articulation directional lights on a surgical instrument
US11432816B2 (en) 2019-04-30 2022-09-06 Cilag Gmbh International Articulation pin for a surgical instrument
US11253254B2 (en) 2019-04-30 2022-02-22 Cilag Gmbh International Shaft rotation actuator on a surgical instrument
US11471157B2 (en) 2019-04-30 2022-10-18 Cilag Gmbh International Articulation control mapping for a surgical instrument
US11648009B2 (en) 2019-04-30 2023-05-16 Cilag Gmbh International Rotatable jaw tip for a surgical instrument
US11903581B2 (en) 2019-04-30 2024-02-20 Cilag Gmbh International Methods for stapling tissue using a surgical instrument
US11452528B2 (en) 2019-04-30 2022-09-27 Cilag Gmbh International Articulation actuators for a surgical instrument
AU2020277486A1 (en) * 2019-05-23 2022-01-27 Uti Limited Partnership Nanoparticles comprising non-classical MHC and uses thereof
US11638587B2 (en) 2019-06-28 2023-05-02 Cilag Gmbh International RFID identification systems for surgical instruments
US11478241B2 (en) 2019-06-28 2022-10-25 Cilag Gmbh International Staple cartridge including projections
US11298127B2 (en) 2019-06-28 2022-04-12 Cilag GmbH Interational Surgical stapling system having a lockout mechanism for an incompatible cartridge
US11291451B2 (en) 2019-06-28 2022-04-05 Cilag Gmbh International Surgical instrument with battery compatibility verification functionality
US11051807B2 (en) 2019-06-28 2021-07-06 Cilag Gmbh International Packaging assembly including a particulate trap
US11627959B2 (en) 2019-06-28 2023-04-18 Cilag Gmbh International Surgical instruments including manual and powered system lockouts
US11219455B2 (en) 2019-06-28 2022-01-11 Cilag Gmbh International Surgical instrument including a lockout key
US11376098B2 (en) 2019-06-28 2022-07-05 Cilag Gmbh International Surgical instrument system comprising an RFID system
US11298132B2 (en) 2019-06-28 2022-04-12 Cilag GmbH Inlernational Staple cartridge including a honeycomb extension
US11464601B2 (en) 2019-06-28 2022-10-11 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an RFID system for tracking a movable component
US11553971B2 (en) 2019-06-28 2023-01-17 Cilag Gmbh International Surgical RFID assemblies for display and communication
US11399837B2 (en) 2019-06-28 2022-08-02 Cilag Gmbh International Mechanisms for motor control adjustments of a motorized surgical instrument
US11259803B2 (en) 2019-06-28 2022-03-01 Cilag Gmbh International Surgical stapling system having an information encryption protocol
US11660163B2 (en) 2019-06-28 2023-05-30 Cilag Gmbh International Surgical system with RFID tags for updating motor assembly parameters
US11523822B2 (en) 2019-06-28 2022-12-13 Cilag Gmbh International Battery pack including a circuit interrupter
US11497492B2 (en) 2019-06-28 2022-11-15 Cilag Gmbh International Surgical instrument including an articulation lock
US11224497B2 (en) 2019-06-28 2022-01-18 Cilag Gmbh International Surgical systems with multiple RFID tags
US11426167B2 (en) 2019-06-28 2022-08-30 Cilag Gmbh International Mechanisms for proper anvil attachment surgical stapling head assembly
US11246678B2 (en) 2019-06-28 2022-02-15 Cilag Gmbh International Surgical stapling system having a frangible RFID tag
US11771419B2 (en) 2019-06-28 2023-10-03 Cilag Gmbh International Packaging for a replaceable component of a surgical stapling system
US11684434B2 (en) 2019-06-28 2023-06-27 Cilag Gmbh International Surgical RFID assemblies for instrument operational setting control
US11350938B2 (en) 2019-06-28 2022-06-07 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an aligned rfid sensor
WO2021041991A1 (en) * 2019-08-29 2021-03-04 Diomics Corporation Hydrophilic biopolymer medicament delivery mechanism
WO2021055833A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Modernatx, Inc. Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
EP4048807A1 (en) 2019-09-23 2022-08-31 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating apolipoprotein b (apob) gene expression
CA3147643A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating hepatocyte nuclear factor 4-alpha (hnf4.alpha.) gene expression
JP2022553345A (ja) * 2019-10-21 2022-12-22 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 肝疾患および肝障害を処置するための方法および組成物
US20210206879A1 (en) * 2019-12-06 2021-07-08 Yale University Enhanced targeting platform
US11234698B2 (en) 2019-12-19 2022-02-01 Cilag Gmbh International Stapling system comprising a clamp lockout and a firing lockout
US11607219B2 (en) 2019-12-19 2023-03-21 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a detachable tissue cutting knife
US11701111B2 (en) 2019-12-19 2023-07-18 Cilag Gmbh International Method for operating a surgical stapling instrument
US11559304B2 (en) 2019-12-19 2023-01-24 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a rapid closure mechanism
US11576672B2 (en) 2019-12-19 2023-02-14 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a closure system including a closure member and an opening member driven by a drive screw
US11446029B2 (en) 2019-12-19 2022-09-20 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising projections extending from a curved deck surface
US11464512B2 (en) 2019-12-19 2022-10-11 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a curved deck surface
US11529139B2 (en) 2019-12-19 2022-12-20 Cilag Gmbh International Motor driven surgical instrument
US11911032B2 (en) 2019-12-19 2024-02-27 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a seating cam
US11529137B2 (en) 2019-12-19 2022-12-20 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising driver retention members
US11291447B2 (en) 2019-12-19 2022-04-05 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising independent jaw closing and staple firing systems
US11844520B2 (en) 2019-12-19 2023-12-19 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising driver retention members
US11931033B2 (en) 2019-12-19 2024-03-19 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a latch lockout
US11304696B2 (en) 2019-12-19 2022-04-19 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a powered articulation system
US11504122B2 (en) 2019-12-19 2022-11-22 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a nested firing member
WO2021174013A1 (en) * 2020-02-26 2021-09-02 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions using synthetic nanocarriers comprising immunosuppressant
CA3173528A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating forkhead box p3 (foxp3) gene expression
IL297274A (en) * 2020-04-14 2022-12-01 Selecta Biosciences Inc Methods and compositions for inducing autophagy
USD975278S1 (en) 2020-06-02 2023-01-10 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD975851S1 (en) 2020-06-02 2023-01-17 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD967421S1 (en) 2020-06-02 2022-10-18 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD975850S1 (en) 2020-06-02 2023-01-17 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD976401S1 (en) 2020-06-02 2023-01-24 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD974560S1 (en) 2020-06-02 2023-01-03 Cilag Gmbh International Staple cartridge
USD966512S1 (en) 2020-06-02 2022-10-11 Cilag Gmbh International Staple cartridge
US20220031346A1 (en) 2020-07-28 2022-02-03 Cilag Gmbh International Articulatable surgical instruments with articulation joints comprising flexible exoskeleton arrangements
US11779330B2 (en) 2020-10-29 2023-10-10 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a jaw alignment system
USD1013170S1 (en) 2020-10-29 2024-01-30 Cilag Gmbh International Surgical instrument assembly
US11717289B2 (en) 2020-10-29 2023-08-08 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an indicator which indicates that an articulation drive is actuatable
US11617577B2 (en) 2020-10-29 2023-04-04 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a sensor configured to sense whether an articulation drive of the surgical instrument is actuatable
US11931025B2 (en) 2020-10-29 2024-03-19 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a releasable closure drive lock
US11517390B2 (en) 2020-10-29 2022-12-06 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a limited travel switch
US11452526B2 (en) 2020-10-29 2022-09-27 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a staged voltage regulation start-up system
USD980425S1 (en) 2020-10-29 2023-03-07 Cilag Gmbh International Surgical instrument assembly
US11896217B2 (en) 2020-10-29 2024-02-13 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an articulation lock
US11844518B2 (en) 2020-10-29 2023-12-19 Cilag Gmbh International Method for operating a surgical instrument
US11534259B2 (en) 2020-10-29 2022-12-27 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising an articulation indicator
CN112480244A (zh) * 2020-11-24 2021-03-12 华科同济干细胞基因工程有限公司 一种抗过敏性纳米抗体组合物、抗体测定方法及喷雾剂
US11737751B2 (en) 2020-12-02 2023-08-29 Cilag Gmbh International Devices and methods of managing energy dissipated within sterile barriers of surgical instrument housings
US11944296B2 (en) 2020-12-02 2024-04-02 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with external connectors
US11678882B2 (en) 2020-12-02 2023-06-20 Cilag Gmbh International Surgical instruments with interactive features to remedy incidental sled movements
US11849943B2 (en) 2020-12-02 2023-12-26 Cilag Gmbh International Surgical instrument with cartridge release mechanisms
US11890010B2 (en) 2020-12-02 2024-02-06 Cllag GmbH International Dual-sided reinforced reload for surgical instruments
US11627960B2 (en) 2020-12-02 2023-04-18 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with smart reload with separately attachable exteriorly mounted wiring connections
US11653915B2 (en) 2020-12-02 2023-05-23 Cilag Gmbh International Surgical instruments with sled location detection and adjustment features
US11653920B2 (en) 2020-12-02 2023-05-23 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with communication interfaces through sterile barrier
US11744581B2 (en) 2020-12-02 2023-09-05 Cilag Gmbh International Powered surgical instruments with multi-phase tissue treatment
GB2603454A (en) 2020-12-09 2022-08-10 Ucl Business Ltd Novel therapeutics for the treatment of neurodegenerative disorders
CN112807425A (zh) * 2021-01-14 2021-05-18 南方医科大学深圳医院 一种tTIM融合蛋白疫苗、制备方法及应用
US11524023B2 (en) 2021-02-19 2022-12-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same
US11793514B2 (en) 2021-02-26 2023-10-24 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising sensor array which may be embedded in cartridge body
US11723657B2 (en) 2021-02-26 2023-08-15 Cilag Gmbh International Adjustable communication based on available bandwidth and power capacity
US11701113B2 (en) 2021-02-26 2023-07-18 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising a separate power antenna and a data transfer antenna
US11749877B2 (en) 2021-02-26 2023-09-05 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising a signal antenna
US11730473B2 (en) 2021-02-26 2023-08-22 Cilag Gmbh International Monitoring of manufacturing life-cycle
US11744583B2 (en) 2021-02-26 2023-09-05 Cilag Gmbh International Distal communication array to tune frequency of RF systems
US11925349B2 (en) 2021-02-26 2024-03-12 Cilag Gmbh International Adjustment to transfer parameters to improve available power
US11950779B2 (en) 2021-02-26 2024-04-09 Cilag Gmbh International Method of powering and communicating with a staple cartridge
US11980362B2 (en) 2021-02-26 2024-05-14 Cilag Gmbh International Surgical instrument system comprising a power transfer coil
US11751869B2 (en) 2021-02-26 2023-09-12 Cilag Gmbh International Monitoring of multiple sensors over time to detect moving characteristics of tissue
US11812964B2 (en) 2021-02-26 2023-11-14 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a power management circuit
US11950777B2 (en) 2021-02-26 2024-04-09 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising an information access control system
US11696757B2 (en) 2021-02-26 2023-07-11 Cilag Gmbh International Monitoring of internal systems to detect and track cartridge motion status
US11717291B2 (en) 2021-03-22 2023-08-08 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising staples configured to apply different tissue compression
US11737749B2 (en) 2021-03-22 2023-08-29 Cilag Gmbh International Surgical stapling instrument comprising a retraction system
US11806011B2 (en) 2021-03-22 2023-11-07 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising tissue compression systems
US11759202B2 (en) 2021-03-22 2023-09-19 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising an implantable layer
US11826042B2 (en) 2021-03-22 2023-11-28 Cilag Gmbh International Surgical instrument comprising a firing drive including a selectable leverage mechanism
US11826012B2 (en) 2021-03-22 2023-11-28 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising a pulsed motor-driven firing rack
US11723658B2 (en) 2021-03-22 2023-08-15 Cilag Gmbh International Staple cartridge comprising a firing lockout
US11896219B2 (en) 2021-03-24 2024-02-13 Cilag Gmbh International Mating features between drivers and underside of a cartridge deck
US11896218B2 (en) 2021-03-24 2024-02-13 Cilag Gmbh International Method of using a powered stapling device
US11903582B2 (en) 2021-03-24 2024-02-20 Cilag Gmbh International Leveraging surfaces for cartridge installation
US11786243B2 (en) 2021-03-24 2023-10-17 Cilag Gmbh International Firing members having flexible portions for adapting to a load during a surgical firing stroke
US11832816B2 (en) 2021-03-24 2023-12-05 Cilag Gmbh International Surgical stapling assembly comprising nonplanar staples and planar staples
US11849945B2 (en) 2021-03-24 2023-12-26 Cilag Gmbh International Rotary-driven surgical stapling assembly comprising eccentrically driven firing member
US11744603B2 (en) 2021-03-24 2023-09-05 Cilag Gmbh International Multi-axis pivot joints for surgical instruments and methods for manufacturing same
US11849944B2 (en) 2021-03-24 2023-12-26 Cilag Gmbh International Drivers for fastener cartridge assemblies having rotary drive screws
US11793516B2 (en) 2021-03-24 2023-10-24 Cilag Gmbh International Surgical staple cartridge comprising longitudinal support beam
US11857183B2 (en) 2021-03-24 2024-01-02 Cilag Gmbh International Stapling assembly components having metal substrates and plastic bodies
US11786239B2 (en) 2021-03-24 2023-10-17 Cilag Gmbh International Surgical instrument articulation joint arrangements comprising multiple moving linkage features
US11944336B2 (en) 2021-03-24 2024-04-02 Cilag Gmbh International Joint arrangements for multi-planar alignment and support of operational drive shafts in articulatable surgical instruments
EP4314292A1 (en) 2021-03-26 2024-02-07 MiNA Therapeutics Limited Tmem173 sarna compositions and methods of use
JP2024515626A (ja) 2021-04-16 2024-04-10 アスクレピオス バイオファーマシューティカル， インコーポレイテッド 血液脳関門を横断し低減された液性応答を惹起する合理的ポリプロイドａａｖビリオン
US11918217B2 (en) 2021-05-28 2024-03-05 Cilag Gmbh International Stapling instrument comprising a staple cartridge insertion stop
CN113425702B (zh) * 2021-06-25 2022-08-26 中国药科大学 应用微流控技术制备纳米颗粒、制备方法及装置和用途
EP4367242A2 (en) 2021-07-07 2024-05-15 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating secreted frizzled receptor protein 1 (sfrp1) gene expression
CA3171750A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 Tim SONNTAG Mrnas for treatment or prophylaxis of liver diseases
US11877745B2 (en) 2021-10-18 2024-01-23 Cilag Gmbh International Surgical stapling assembly having longitudinally-repeating staple leg clusters
US11980363B2 (en) 2021-10-18 2024-05-14 Cilag Gmbh International Row-to-row staple array variations
US11957337B2 (en) 2021-10-18 2024-04-16 Cilag Gmbh International Surgical stapling assembly with offset ramped drive surfaces
US11937816B2 (en) 2021-10-28 2024-03-26 Cilag Gmbh International Electrical lead arrangements for surgical instruments
WO2023099884A1 (en) 2021-12-01 2023-06-08 Mina Therapeutics Limited Pax6 sarna compositions and methods of use
GB202117758D0 (en) 2021-12-09 2022-01-26 Ucl Business Ltd Therapeutics for the treatment of neurodegenerative disorders
WO2023144193A1 (en) 2022-01-25 2023-08-03 CureVac SE Mrnas for treatment of hereditary tyrosinemia type i
WO2023161350A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Io Biotech Aps Nucleotide delivery of cancer therapy
WO2023170435A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Mina Therapeutics Limited Il10 sarna compositions and methods of use
CN115475255A (zh) * 2022-06-14 2022-12-16 澳门科技大学 一种酶响应型二氧化硅释纳米制剂、制备方法及应用

Family Cites Families (310)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1995A (en) 1841-03-03 Latch of door and other locks
US934897A (en) 1907-08-08 1909-09-21 Frank Dutcher Fusee-cap.
US927297A (en) 1908-02-24 1909-07-06 Charles Tuckfield Engine.
US4946929A (en) 1983-03-22 1990-08-07 Massachusetts Institute Of Technology Bioerodible articles useful as implants and prostheses having predictable degradation rates
US6309669B1 (en) 1984-03-16 2001-10-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive materials encapsulated within a biodegradable-biocompatible polymeric matrix
US4638045A (en) 1985-02-19 1987-01-20 Massachusetts Institute Of Technology Non-peptide polyamino acid bioerodible polymers
US4806621A (en) 1986-01-21 1989-02-21 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible, bioerodible, hydrophobic, implantable polyimino carbonate article
US5736372A (en) 1986-11-20 1998-04-07 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable synthetic polymeric fibrous matrix containing chondrocyte for in vivo production of a cartilaginous structure
CA1340581C (en) 1986-11-20 1999-06-08 Joseph P. Vacanti Chimeric neomorphogenesis of organs by controlled cellular implantation using artificial matrices
US5759830A (en) 1986-11-20 1998-06-02 Massachusetts Institute Of Technology Three-dimensional fibrous scaffold containing attached cells for producing vascularized tissue in vivo
ATE81467T1 (de) 1987-02-24 1992-10-15 Xoma Corp Immunosuppression bei der auf immunotoxin basierten behandlung von menschen.
US5912017A (en) 1987-05-01 1999-06-15 Massachusetts Institute Of Technology Multiwall polymeric microspheres
US5019379A (en) 1987-07-31 1991-05-28 Massachusetts Institute Of Technology Unsaturated polyanhydrides
JP2670680B2 (ja) 1988-02-24 1997-10-29 株式会社ビーエムジー 生理活性物質含有ポリ乳酸系微小球およびその製造法
US5010167A (en) 1989-03-31 1991-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Poly(amide-and imide-co-anhydride) for biological application
US5268455A (en) * 1989-05-25 1993-12-07 Genentech, Inc. Process for making biologically active polypeptides based on transforming growth factor-βsequences
US5399665A (en) 1992-11-05 1995-03-21 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymers for cell transplantation
US5679347A (en) 1992-12-10 1997-10-21 Brigham And Women's Hospital Methods of isolating CD1-presented antigens, vaccines comprising CD1-presented antigens, and cell lines for use in said methods
US5928647A (en) 1993-01-11 1999-07-27 Dana-Farber Cancer Institute Inducing cytotoxic T lymphocyte responses
US5512600A (en) 1993-01-15 1996-04-30 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of bonded fiber structures for cell implantation
US5514378A (en) 1993-02-01 1996-05-07 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible polymer membranes and methods of preparation of three dimensional membrane structures
WO1995003035A1 (en) 1993-07-23 1995-02-02 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes with enhanced stability for oral delivery
US5565215A (en) 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5468729A (en) 1993-10-26 1995-11-21 Alpha 1 Biomedicals Method for treatment of autoimmune hepatitis
JP2930421B2 (ja) 1994-02-28 1999-08-03 メディノヴァ メディカル コンサルティング ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 薬剤組成物、その製造方法及びその使用方法
WO1995031480A1 (en) 1994-05-18 1995-11-23 S.P.I. Synthetic Peptides Incorporated Heterodimer polypeptide immunogen carrier composition and method
US6007845A (en) 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
EP0804076A4 (en) 1994-10-19 1998-10-21 Genetic Therapy Inc GENTHERAPY THROUGH SIMULTANEOUS AND REPEATED ADMINISTRATION OF ADENOVIRUS AND IMMUNE SUPPRESSIVES
US5716404A (en) 1994-12-16 1998-02-10 Massachusetts Institute Of Technology Breast tissue engineering
DE69630514D1 (de) 1995-01-05 2003-12-04 Univ Michigan Oberflächen-modifizierte nanopartikel und verfahren für ihre herstellung und verwendung
US6251957B1 (en) 1995-02-24 2001-06-26 Trustees Of The University Of Pennsylvania Method of reducing an immune response to a recombinant virus
US6123727A (en) 1995-05-01 2000-09-26 Massachusetts Institute Of Technology Tissue engineered tendons and ligaments
JP3462313B2 (ja) 1995-08-24 2003-11-05 キッコーマン株式会社 変異型ウリカーゼ、変異型ウリカーゼ遺伝子、新規な組み換え体ｄｎａ及び変異型ウリカーゼの製造法
EP0850051A2 (en) 1995-08-31 1998-07-01 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Composition for sustained release of an agent
US6095148A (en) 1995-11-03 2000-08-01 Children's Medical Center Corporation Neuronal stimulation using electrically conducting polymers
US5902599A (en) 1996-02-20 1999-05-11 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymer networks for use in orthopedic and dental applications
WO1998002441A2 (en) 1996-07-12 1998-01-22 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Non immunosuppressive antifungal rapalogs
EP0889954A1 (en) 1996-09-03 1999-01-13 Health Research, Inc. Treatment of antigen presenting cells to modulate antigen presenting cell function
US6368598B1 (en) 1996-09-16 2002-04-09 Jcrt Radiation Oncology Support Services, Inc. Drug complex for treatment of metastatic prostate cancer
US6060082A (en) 1997-04-18 2000-05-09 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes targeted to M cells and useful for oral or mucosal drug delivery
US5837752A (en) 1997-07-17 1998-11-17 Massachusetts Institute Of Technology Semi-interpenetrating polymer networks
DE69840600D1 (de) 1997-09-16 2009-04-09 Univ Oregon Health & Science Rekombinante mhc-moleküle welche nützlich sind für die manipulation von antigen-spezifischen t-zellen
EP1024829B1 (en) 1997-10-30 2008-12-17 Laboratorios LETI, S.L. Tolerogenic fragments of natural allergens
US6018817A (en) 1997-12-03 2000-01-25 International Business Machines Corporation Error correcting code retrofit method and apparatus for multiple memory configurations
US6254890B1 (en) 1997-12-12 2001-07-03 Massachusetts Institute Of Technology Sub-100nm biodegradable polymer spheres capable of transporting and releasing nucleic acids
US6197229B1 (en) 1997-12-12 2001-03-06 Massachusetts Institute Of Technology Method for high supercoiled DNA content microspheres
JP2001526900A (ja) 1997-12-23 2001-12-25 イントロヘーネ ベスローテン フェンノートシャップ 標的細胞の染色体ｄｎａへの外来遺伝子情報の組み込みに有用な、アデノ随伴ウイルスおよびアデノウイルスのキメラ組換えウイルス
WO1999034826A1 (en) 1998-01-09 1999-07-15 Circassia Limited Methods and compositions for desensitisation
FR2775435B1 (fr) 1998-02-27 2000-05-26 Bioalliance Pharma Nanoparticules comprenant au moins un polymere et au moins un compose apte a complexer un ou plusieurs principes actifs
US6506577B1 (en) 1998-03-19 2003-01-14 The Regents Of The University Of California Synthesis and crosslinking of catechol containing copolypeptides
US6632922B1 (en) 1998-03-19 2003-10-14 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6686446B2 (en) 1998-03-19 2004-02-03 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
SE9801288D0 (sv) 1998-04-14 1998-04-14 Astra Ab Vaccine delivery system and metod of production
US6436392B1 (en) 1998-05-20 2002-08-20 University Of Iowa Research Foundation Adeno-associated virus vectors
DE19827164A1 (de) 1998-06-18 1999-12-23 Merck Patent Gmbh Katalytisch Titan(IV)-oxid vermittelte geminale symmetrische Dialkylierung von Carbonsäureamiden
US6306640B1 (en) 1998-10-05 2001-10-23 Genzyme Corporation Melanoma antigenic peptides
DE69918146T2 (de) 1998-10-05 2005-07-07 Pharmexa A/S Verfahren zur therapeutischen impfung
US6759237B1 (en) 1998-11-05 2004-07-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same
WO2000032626A1 (en) 1998-11-25 2000-06-08 Regents Of The University Of Minnesota Methods of using epitope peptides of human pathogens
US6153217A (en) 1999-01-22 2000-11-28 Biodelivery Sciences, Inc. Nanocochleate formulations, process of preparation and method of delivery of pharmaceutical agents
US6558951B1 (en) 1999-02-11 2003-05-06 3M Innovative Properties Company Maturation of dendritic cells with immune response modifying compounds
US7238368B2 (en) 1999-04-23 2007-07-03 Alza Corporation Releasable linkage and compositions containing same
US7390780B2 (en) 1999-04-23 2008-06-24 Alza Corporation Gene delivery mediated by liposome-DNA complex with cleavable peg surface modification
EP1880736A1 (en) 1999-04-23 2008-01-23 Alza Corporation Releasable linkage and composition containing same
US6800296B1 (en) 1999-05-19 2004-10-05 Massachusetts Institute Of Technology Modification of surfaces using biological recognition events
DE19951970A1 (de) * 1999-10-28 2001-05-03 Bionetworks Gmbh Arzneimittel für die Toleranzinduktion
CN1406140A (zh) 2000-02-28 2003-03-26 吉倪塞思公司 纳米胶囊包封系统与方法
US20010055593A1 (en) 2000-03-14 2001-12-27 Joseph Sypek Use of rapamycin and agents that inhibit B7 activity in immunomodulation
WO2001085208A2 (en) 2000-05-05 2001-11-15 Cytos Biotechnology Ag Molecular antigen arrays and vaccines
AU2001265187A1 (en) 2000-05-30 2001-12-11 Baylor College Of Medicine Chimeric viral vectors for gene therapy
EP1290205B1 (en) 2000-06-01 2006-03-01 University Of North Carolina At Chapel Hill Duplexed parvovirus vectors
US20040204379A1 (en) 2000-06-19 2004-10-14 Cheng Seng H. Combination enzyme replacement, gene therapy and small molecule therapy for lysosomal storage diseases
US20020095135A1 (en) 2000-06-19 2002-07-18 David Meeker Combination enzyme replacement, gene therapy and small molecule therapy for lysosomal storage diseases
US20020014242A1 (en) 2000-07-31 2002-02-07 Abraham Scaria Use of rapamycin to inhibit immune response and induce tolerance to gene therapy vector and encoded transgene products
CA2319928A1 (en) 2000-09-18 2002-03-18 Vasogen Ireland Limited Apoptosis-mimicking synthetic entities and use thereof in medical treatments
GB0025414D0 (en) 2000-10-16 2000-11-29 Consejo Superior Investigacion Nanoparticles
US7097837B2 (en) 2001-02-19 2006-08-29 Pharmexa A/S Synthetic vaccine agents
AU2002338571A1 (en) 2001-04-11 2002-11-11 Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for suppressing immune responses
US6913915B2 (en) 2001-08-02 2005-07-05 Phoenix Pharmacologics, Inc. PEG-modified uricase
US6818732B2 (en) 2001-08-30 2004-11-16 The Regents Of The University Of California Transition metal initiators for controlled poly (beta-peptide) synthesis from beta-lactam monomers
CN1294268C (zh) 2001-09-03 2007-01-10 上海三维生物技术有限公司 可在肿瘤细胞内特异性复制并扩散的重组腺病毒载体
PT1436321E (pt) * 2001-10-19 2006-10-31 Isotechnika Inc Sintese de analogos de ciclosporina
ES2602352T3 (es) 2001-12-17 2017-02-20 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Secuencias de serotipo 8 de virus adenoasociado (VAA), vectores que las contienen y usos de las mismas
GB0207440D0 (en) 2002-03-28 2002-05-08 Ppl Therapeutics Scotland Ltd Tolerogenic antigen-presenting cells
US20040038303A1 (en) 2002-04-08 2004-02-26 Unger Gretchen M. Biologic modulations with nanoparticles
US7485314B2 (en) 2002-05-06 2009-02-03 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center Induction of antigen specific immunologic tolerance
AU2003228768B2 (en) 2002-05-22 2009-02-05 The Cleveland Clinic Foundation Induction and maintenance of tolerance to composite tissue allografts
ATE469135T1 (de) 2002-05-30 2010-06-15 Scripps Research Inst Kupferkatalysierte ligierung von aziden und acetylenen
AU2003237416A1 (en) 2002-06-04 2003-12-19 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Novel tolerogenic dendritic cells and therapeutic uses therefor
JP2005532067A (ja) * 2002-07-03 2005-10-27 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 刺激性免疫応答用の核酸組成物
US20060121029A1 (en) * 2002-08-30 2006-06-08 Hiroshi Shiku Method and composition for regulating the activity of regulatory t cells
US9809654B2 (en) 2002-09-27 2017-11-07 Vaccinex, Inc. Targeted CD1d molecules
DK1565183T3 (da) 2002-11-29 2008-12-01 Maria Grazia Roncarolo Rapamycin og IL-10 til behandling af autoimmune sygdomme
WO2004071493A1 (en) 2003-02-17 2004-08-26 Peter Burkhard Peptidic nanoparticles as drug delivery and antigen display systems
US7510872B2 (en) 2003-02-26 2009-03-31 Nationwide Children's Hospital Recombinant adeno-associated virus production
JP4914209B2 (ja) * 2003-03-14 2012-04-11 ワイス ヒトｉｌ−２１受容体に対する抗体および該抗体の使用
AU2004224762B2 (en) 2003-03-26 2009-12-24 Kuros Us Llc Packaging of immunostimulatory oligonucleotides into virus-like particles: method of preparation and use
US7731967B2 (en) 2003-04-30 2010-06-08 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Compositions for inducing immune responses
US7186699B2 (en) 2003-06-03 2007-03-06 Cell Genesys, Inc. Method for treating cancer by vector-mediated delivery of one or more anti-angiogenic or pro-apoptotic genes
US7727969B2 (en) 2003-06-06 2010-06-01 Massachusetts Institute Of Technology Controlled release nanoparticle having bound oligonucleotide for targeted delivery
EP1486567A1 (en) 2003-06-11 2004-12-15 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Improved adeno-associated virus (AAV) vector for gene therapy
US20060251711A1 (en) 2003-08-28 2006-11-09 Vgsk Technologies, Inc. Sterically stabilized carrier for aerosol therapeutics, compositions and methods for treating diseases of the respiratory tract of a mammal
US7943179B2 (en) 2003-09-23 2011-05-17 Massachusetts Institute Of Technology pH triggerable polymeric particles
DE10347710B4 (de) 2003-10-14 2006-03-30 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung
US20080160089A1 (en) 2003-10-14 2008-07-03 Medivas, Llc Vaccine delivery compositions and methods of use
CA2548179A1 (en) 2003-12-02 2005-07-21 Cytimmune Sciences, Inc. Methods and compositions for the production of monoclonal antibodies
WO2005055949A2 (en) 2003-12-09 2005-06-23 The Children's Hospital Of Philadelphia Sustained release preparations composed of biocompatible complex microparticles
MXPA06006738A (es) 2003-12-19 2006-08-31 Univ North Carolina Metodos para fabricar micro- y nano-estructuras aisladas utilizando litografia suave o de impresion.
BRPI0509755A (pt) * 2004-04-08 2007-10-16 Applied Research Systems composição compreendendo um inibidor de jnk e ciclosporina
CA2566506A1 (en) 2004-06-01 2005-12-15 Innogenetics N.V. Peptides for inducing a ctl and/or htl response to hepatitis c virus
US7713550B2 (en) 2004-06-15 2010-05-11 Andrx Corporation Controlled release sodium valproate formulation
US7534448B2 (en) 2004-07-01 2009-05-19 Yale University Methods of treatment with drug loaded polymeric materials
WO2006014579A2 (en) 2004-07-08 2006-02-09 The Regents Of California Enhancing class i antigen presentation with synthetic sequences
FR2874384B1 (fr) 2004-08-17 2010-07-30 Genethon Vecteur viral adeno-associe pour realiser du saut d'exons dans un gene codant une proteine a domaines dispensables
GB0421296D0 (en) 2004-09-24 2004-10-27 Angiogene Pharm Ltd Bioreductively-activated prodrugs
WO2006041890A2 (en) 2004-10-05 2006-04-20 Tanox, Inc. Treatment and prevention of hypersensitivity and/or anaphylaxis with anti-ige antibodies in patients receiving replacement therapy
WO2007001448A2 (en) 2004-11-04 2007-01-04 Massachusetts Institute Of Technology Coated controlled release polymer particles as efficient oral delivery vehicles for biopharmaceuticals
JP2008524239A (ja) 2004-12-15 2008-07-10 エラン ファーマ インターナショナル リミティド ナノ粒子のタクロリムス製剤
US20090028948A1 (en) 2004-12-31 2009-01-29 Iceutica Pty Ltd Nanoparticle composition and methods of synthesis thereof
GB0504206D0 (en) 2005-03-01 2005-04-06 Glaxo Group Ltd Combination therapy
EP1858511A1 (en) 2005-03-08 2007-11-28 LifeCycle Pharma A/S Pharmaceutical compositions comprising sirolimus and/or an analogue thereof
EP1868576A2 (en) 2005-03-17 2007-12-26 Elan Pharma International Limited Injectable compositions of nanoparticulate immunosuppressive compounds
US7884109B2 (en) 2005-04-05 2011-02-08 Wyeth Llc Purine and imidazopyridine derivatives for immunosuppression
US8173167B2 (en) * 2005-04-12 2012-05-08 Wisconsin Alumni Research Foundation Micelle composition of polymer and passenger drug
US20080305161A1 (en) 2005-04-13 2008-12-11 Pfizer Inc Injectable depot formulations and methods for providing sustained release of nanoparticle compositions
WO2006122223A2 (en) 2005-05-10 2006-11-16 Emory University Strategies for delivery of active agents using micelles and particles
TW200711649A (en) 2005-06-17 2007-04-01 Combinatorx Inc Combination therapy for the treatment of immunoinflammatory disorders
MX2007016039A (es) * 2005-06-17 2008-10-27 Univ North Carolina Metodos, sistemas y materiales de fabricacion de nanoparticulas.
WO2007003054A1 (en) 2005-07-06 2007-01-11 Shoichet Molly S Method of biomolecule immobilization on polymers using click-type chemistry
JPWO2007024026A1 (ja) 2005-08-25 2009-03-05 明石　満 Ｔ細胞認識エピトープペプチドを固定化又は内包化した生分解性ナノ粒子
CN1979166A (zh) 2005-11-30 2007-06-13 北京有色金属研究总院 一种制备免疫检测用纳米胶体金的工艺方法及其反应装置
CA2631760A1 (en) 2005-12-02 2007-06-07 Robert A. Brodsky Use of high-dose oxazaphosphorine drugs for treating immune disorders
US20070128289A1 (en) 2005-12-07 2007-06-07 Zhao Jonathon Z Nano-and/or micro-particulate formulations for local injection-based treatment of vascular diseases
MX2008007287A (es) 2005-12-08 2008-10-27 Univ Louisville Res Found Metodos y composiciones para expandir celulas reguladoras t.
AU2006325225B2 (en) 2005-12-14 2013-07-04 Cytos Biotechnology Ag Immunostimulatory nucleic acid packaged particles for the treatment of hypersensitivity
US9267937B2 (en) 2005-12-15 2016-02-23 Massachusetts Institute Of Technology System for screening particles
US20100028450A1 (en) 2006-01-25 2010-02-04 The Board Of Trustees Of The University Of Illinoi S Tolerogenic biodegradable artificial antigen presenting system
DK1984007T3 (en) 2006-02-13 2015-12-07 Oncolytics Biotech Inc Application of Low-dose local immunosuppression for amplification of viral oncolytic therapy
US8021689B2 (en) * 2006-02-21 2011-09-20 Ecole Polytechnique Federale de Lausanne (“EPFL”) Nanoparticles for immunotherapy
AU2007221154A1 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Novartis Ag Microparticles containing biodegradable polymer and cationic polysaccharide for use in immunogenic compositions
US8568487B2 (en) 2006-02-27 2013-10-29 Biomet Manufacturing, Llc Patient-specific hip joint devices
TW200806789A (en) 2006-03-27 2008-02-01 Globeimmune Inc RAS mutation and compositions and methods related thereto
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
US20070254897A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Resolvyx Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of cardiovascular disease
CN101573141B (zh) 2006-05-15 2016-05-04 麻省理工学院 用于功能性颗粒的聚合物
WO2007137117A2 (en) 2006-05-17 2007-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Aptamer-directed drug delivery
MX2008015529A (es) 2006-06-12 2009-01-13 Cytos Biotechnology Ag Procesos para empacar oligonucleotidos en particulas similares a virus de bacteriofagos de arn.
WO2007150030A2 (en) 2006-06-23 2007-12-27 Massachusetts Institute Of Technology Microfluidic synthesis of organic nanoparticles
EP1880729A1 (en) 2006-07-20 2008-01-23 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of soluble CD160 to suppress immunity
WO2008019142A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
US20080171059A1 (en) 2006-08-07 2008-07-17 Shanshan Wu Howland Methods and compositions for increased priming of t-cells through cross-presentation of exogenous antigens
CN101500937A (zh) 2006-08-11 2009-08-05 万能药生物有限公司 用于递送活性成分的粒子及其制备方法和组合物
SI2051987T1 (sl) 2006-08-18 2015-02-27 Argos Therapeutics, Inc. Uporaba cd83 v kombinacijskih terapijah
US20120269774A1 (en) 2006-09-21 2012-10-25 Medistem Laboratories, Inc Allogeneic stem cell transplants in non-conditioned recipients
MX2009003680A (es) 2006-10-05 2009-07-17 Univ Johns Hopkins Formulaciones orales, parenterales y topicas dispersables en agua para farmacos deficientemente solubles en agua con el uso de nanoparticulas polimericas inteligentes.
CN101646418B (zh) * 2006-10-12 2013-07-17 昆士兰大学 调节免疫应答的组合物和方法
EP3590503A1 (en) * 2006-10-12 2020-01-08 The University of Queensland Compositions and methods for modulating immune responses
US20100112077A1 (en) 2006-11-06 2010-05-06 Abraxis Bioscience, Llc Nanoparticles of paclitaxel and albumin in combination with bevacizumab against cancer
WO2008147456A2 (en) 2006-11-20 2008-12-04 Massachusetts Institute Of Technology Drug delivery systems using fc fragments
WO2008064357A2 (en) 2006-11-22 2008-05-29 University Of Florida Research Foundation, Inc. Nanoparticles for protection of cells from oxidative stress
WO2008069942A2 (en) 2006-12-05 2008-06-12 Biogen Idec Ma Inc. Novel methods of enhancing delivery of a gene therapy vector using steroids
WO2008071774A1 (en) 2006-12-14 2008-06-19 Cytos Biotechnology Ag Purification process for coat protein of rna bacteriophages
ES2533566T3 (es) 2006-12-29 2015-04-13 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Diana diagnóstica y terapéutica para enfermedades autoinmunitarias y sus usos
CA2678618C (en) 2007-02-21 2019-03-12 Vaccinex, Inc. Modulation of nkt cell activity with antigen-loaded cd1d molecules
KR20080078204A (ko) 2007-02-22 2008-08-27 크레아젠 주식회사 면역억제능이 증가된 간엽줄기세포-매개 자가유래수지상세포
PT2481409T (pt) 2007-03-07 2018-10-18 Abraxis Bioscience Llc Nanopartícula que compreende rapamicina e albumina como agente anticancerígeno
CN101678090B (zh) 2007-03-07 2012-04-11 乌第有限合伙公司 用于预防和治疗自身免疫病的组合物和方法
CN101730526A (zh) 2007-03-07 2010-06-09 阿布拉科斯生物科学有限公司 作为抗癌剂的包含雷帕霉素和白蛋白的纳米颗粒
EP2144600A4 (en) 2007-04-04 2011-03-16 Massachusetts Inst Technology POLY (AMINIC ACID) TARGET MOLECULES
CA2683415C (en) * 2007-04-04 2020-12-08 Sigmoid Pharma Limited An oral pharmaceutical composition
WO2008124634A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
WO2008124165A2 (en) 2007-04-09 2008-10-16 Chimeros, Inc. Self-assembling nanoparticle drug delivery system
EP2146747A1 (en) 2007-04-12 2010-01-27 Emory University Novel strategies for delivery of active agents using micelles and particles
EP1982729A1 (en) 2007-04-20 2008-10-22 Cytos Biotechnology AG Vaccination Regimen for B-Cell Vaccines
WO2008150868A1 (en) 2007-05-29 2008-12-11 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Methods for inducing therapeutic t cells for immune diseases
US20080311140A1 (en) 2007-05-29 2008-12-18 Baylor College Of Medicine Antigen specific immunosuppression by dendritic cell therapy
EP2757109B1 (en) 2007-05-31 2019-07-10 Academisch Ziekenhuis Leiden h.o.d.n. LUMC Hpv epitopes targeted by t cells infiltrating cervical malignancies for use in vaccines
EA200901621A1 (ru) 2007-06-05 2010-06-30 Новартис Аг Индукция толерогенного фенотипа у зрелых дендритных клеток
US20090004259A1 (en) 2007-06-14 2009-01-01 Consejo Nacional De Investigaciones Cientificas Y Tecnicas (Conicet) Methods of preparing a therapeutic formulation comprising galectin-induced tolerogenic dendritic cells
EA018708B1 (ru) 2007-07-09 2013-10-30 Астразенека Аб ПРОИЗВОДНЫЕ МОРФОЛИНОПИРИМИДИНА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ, СВЯЗАННЫХ С mTOR КИНАЗОЙ И/ИЛИ PI3K
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
SI2083856T1 (sl) 2007-08-15 2011-02-28 Circassia Ltd Peptidi za desenzibilizacijo proti alergijam
WO2009038685A1 (en) 2007-09-18 2009-03-26 The Scripps Research Institute Ligands for copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition reactions
JP2011520769A (ja) 2007-09-21 2011-07-21 サイトイミューン サイエンシズ インコーポレイテッド ナノ治療コロイド金属組成物および方法
EP2620157A3 (en) 2007-10-12 2013-10-16 Massachusetts Institute of Technology Vaccine nanotechnology
WO2009062502A1 (en) 2007-11-13 2009-05-22 Dandrit Biotech A/S Method for generating tolerogenic dendritic cells employing decreased temperature
US20090142318A1 (en) 2007-11-30 2009-06-04 Therakos, Inc. METHOD TO EXPAND nTREG CELLS USING p70 S6 KINASE ANTAGONIST
US8404658B2 (en) 2007-12-31 2013-03-26 Nanocor Therapeutics, Inc. RNA interference for the treatment of heart failure
JP5474831B2 (ja) 2008-02-08 2014-04-16 テルモ株式会社 生理活性物質管腔内制御送達用薬剤送達装置およびその作成方法
WO2009106999A2 (en) 2008-02-28 2009-09-03 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung Des Öffentlichen Rechts Hollow nanoparticles and uses thereof
EP2262480B1 (en) 2008-03-04 2018-02-14 Liquidia Technologies, Inc. Immunomodulator particles
US9669057B2 (en) * 2008-04-25 2017-06-06 Duke University Regulatory B cells and their uses
EP2300102B1 (en) 2008-05-15 2014-01-08 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory sequences containing CpG for use in the treatment of allergic rhinitis
WO2009145238A1 (ja) * 2008-05-27 2009-12-03 国立大学法人名古屋大学 免疫調節剤及びその利用
US20090297621A1 (en) 2008-06-03 2009-12-03 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Microparticles For The Treatment Of Disease
US8613951B2 (en) * 2008-06-16 2013-12-24 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mTor inhibitors and methods of making and using same
JP2012501965A (ja) 2008-06-16 2012-01-26 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 薬剤を装填したポリマーナノ粒子及びその製造方法と使用方法
JP2011530562A (ja) 2008-08-11 2011-12-22 グラクソスミスクライン エルエルシー アレルギー性、炎症性及び感染性疾患治療用のプリン誘導体
UA103195C2 (uk) 2008-08-11 2013-09-25 Глаксосмитклайн Ллк Похідні пурину для застосування у лікуванні алергій, запальних та інфекційних захворювань
WO2010018130A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases
WO2010018132A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Compounds
US20120034157A1 (en) * 2010-08-03 2012-02-09 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Artificial cells
WO2010018384A1 (en) 2008-08-15 2010-02-18 Circassia Limited T-cell antigen peptide from allergen for stimulation of il-10 production
US8323696B2 (en) 2008-08-29 2012-12-04 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Nanoparticles for immunotherapy
EP2341953B1 (en) 2008-09-04 2018-11-21 The General Hospital Corporation Hydrogels for vocal cord and soft tissue augmentation and repair
CN101676291B (zh) 2008-09-18 2012-05-09 上海海和药物研究开发有限公司 一类雷帕霉素碳酸酯类似物、其药物组合物及其制备方法和用途
US8889124B2 (en) 2008-09-25 2014-11-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Tolerogenic populations of dendritic cells
US10369204B2 (en) 2008-10-02 2019-08-06 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
US8343498B2 (en) * 2008-10-12 2013-01-01 Massachusetts Institute Of Technology Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics
US8277812B2 (en) 2008-10-12 2012-10-02 Massachusetts Institute Of Technology Immunonanotherapeutics that provide IgG humoral response without T-cell antigen
US8591905B2 (en) * 2008-10-12 2013-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nicotine immunonanotherapeutics
US8343497B2 (en) * 2008-10-12 2013-01-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Targeting of antigen presenting cells with immunonanotherapeutics
JP5552630B2 (ja) 2008-10-24 2014-07-16 学校法人 聖マリアンナ医科大学 Ｈｔｌｖ−ｉ関連脊髄症を治療または予防するための医薬、およびｈｔｌｖ−ｉ関連脊髄症の患者に対する抗体療法の効果を試験する方法
US20120015899A1 (en) 2008-10-25 2012-01-19 Plant Bioscience, Limited Modified plant virus particles and uses therefor
WO2010056143A1 (en) 2008-11-13 2010-05-20 Instituto De Medicina Molecular The use of adjuvant to facilitate the induction of immune tolerance
JP2012512175A (ja) 2008-12-15 2012-05-31 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
US20100160089A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Tzu-Wei Lin Appapatus and method for providing golfing information
CN102325546A (zh) 2009-01-20 2012-01-18 西北大学 用于诱导抗原-特异性耐受的组合物和方法
EP2620447B1 (en) 2009-02-04 2015-09-09 Universität Leipzig Vector(s) containing an inducible gene encoding a CDK4/CDK6 inhibitor useful for treating neurodegenerative disorders
JP5746053B2 (ja) * 2009-02-05 2015-07-08 サーカッシア リミテッド ワクチン用ペプチド
KR20100099849A (ko) 2009-03-04 2010-09-15 동국대학교 산학협력단 면역억제제와 트랜스글루타미나제 2의 억제제를 함유한 아토피 피부염 치료용 조성물
US8679837B2 (en) 2009-04-02 2014-03-25 University Of Florida Research Foundation, Inc. Inducible system for highly efficient production of recombinant Adeno-associated virus (rAAV) vectors
GB0906159D0 (en) * 2009-04-09 2009-05-20 Summit Corp Plc Drug combination for the treatment of proteostatic diseases
KR20120022984A (ko) 2009-04-21 2012-03-12 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. Ｔｈ１ 편향 반응을 제공하는 면역나노치료법
US20100273220A1 (en) 2009-04-22 2010-10-28 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
EA024697B1 (ru) 2009-04-27 2016-10-31 Иммурон Лимитед Применение композиции, содержащей обогащенный анти-lps-антителами иммуноглобулиновый препарат, для лечения заболеваний печени
CN102481376B (zh) 2009-05-27 2016-12-21 西莱克塔生物科技公司 免疫调节剂-聚合物化合物
PL398781A1 (pl) 2009-06-25 2012-11-19 Savient Pharmaceuticals, Inc. Sposoby i zestawy do prognozowania ryzyka wystapienia reakcji na wlew oraz zaniku odpowiedzi której posrednicza przeciwciala poprzez monitorowanie kwasu moczowego w surowicy podczas terapii z zastosowaniem pegylowanej urykazy
EP3058953A1 (en) 2009-07-07 2016-08-24 The Research Foundation Of State University Of New York Lipidic compositions for induction of immune tolerance
CN107617110A (zh) 2009-08-26 2018-01-23 西莱克塔生物科技公司 诱导t细胞辅助的组合物
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
EP2305277A1 (en) 2009-09-18 2011-04-06 Forskarpatent I Syd AB Use of tolerogenic dendritic cells in treatment and prevention of atherosclerosis
CN101703781A (zh) 2009-10-28 2010-05-12 陕西北美基因股份有限公司 一种免疫抑制剂的磁性载药方法
KR101267813B1 (ko) 2009-12-30 2013-06-04 주식회사 삼양바이오팜 향상된 수용해도를 갖는 라파마이신 함유 고분자나노입자 주사제형 조성물 및 그 제조방법, 및 방사선 요법과 병용하기 위한 항암 조성물
US20110171248A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic virus-like particles conjugated to human papillomavirus capsid peptides for use as vaccines
WO2011097511A1 (en) 2010-02-05 2011-08-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services REGULATORY B CELLS (tBREGS) AND THEIR USE
US20130195919A1 (en) 2010-03-05 2013-08-01 President And Fellows Of Harvard College Induced dendritic cell compositions and uses thereof
US20110262491A1 (en) 2010-04-12 2011-10-27 Selecta Biosciences, Inc. Emulsions and methods of making nanocarriers
US20110272836A1 (en) 2010-04-12 2011-11-10 Selecta Biosciences, Inc. Eccentric vessels
US8927514B2 (en) 2010-04-30 2015-01-06 City Of Hope Recombinant adeno-associated vectors for targeted treatment
JP5904645B2 (ja) 2010-05-07 2016-04-13 ゾーマ （ユーエス） リミテッド ライアビリティ カンパニー ＩＬ−１β関連病態の治療のための方法
AU2011258156B2 (en) 2010-05-26 2016-11-24 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
RU2577278C2 (ru) 2010-06-07 2016-03-10 АБРАКСИС БАЙОСАЙЕНС, ЭлЭлСи Способы комбинированной терапии для лечения пролиферативных заболеваний
EP2600878A4 (en) 2010-08-04 2014-06-11 Univ Duke REGULATORY B-CELLS AND ITS USES
JP6017422B2 (ja) 2010-08-10 2016-11-02 エコール・ポリテクニーク・フェデラル・ドゥ・ローザンヌ（ウペエフエル）Ｅｃｏｌｅ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅ Ｆｅｄｅｒａｌｅ ｄｅ Ｌａｕｓａｎｎｅ （ＥＰＦＬ） 赤血球結合療法
AU2011291522A1 (en) 2010-08-20 2013-01-24 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarrier vaccines comprising peptides obtained or derived from human influenza A virus M2E
KR20130098308A (ko) 2010-08-23 2013-09-04 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 항원에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 표적화 다중 에피토프 투여형
US9636309B2 (en) 2010-09-09 2017-05-02 Micell Technologies, Inc. Macrolide dosage forms
JP2013540162A (ja) 2010-10-22 2013-10-31 ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファンデーション インコーポレーティッド 抗原特異的な寛容を誘導する微粒子およびその使用
EP2640190A4 (en) 2010-11-05 2016-05-11 Selecta Biosciences Inc MODIFIED NICOTINIC COMPOUNDS AND ASSOCIATED METHODS
WO2012092552A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers with reactive groups that release biologically active agents
BR112013020273A2 (pt) 2011-02-08 2016-10-18 Charlotte Mecklenburg Hospital oligonucleotídeos antissenso
US10392632B2 (en) 2011-02-14 2019-08-27 The Children's Hospital Of Philadelphia AAV8 vector with enhanced functional activity and methods of use thereof
US8654487B2 (en) 2011-03-11 2014-02-18 Siemens Industry, Inc. Methods, systems, and apparatus and for detecting parallel electrical arc faults
AU2012236937B2 (en) 2011-03-25 2017-06-08 Selecta Biosciences, Inc. Osmotic mediated release synthetic nanocarriers
US20140155469A1 (en) 2011-04-19 2014-06-05 The Research Foundation Of State University Of New York Adeno-associated-virus rep sequences, vectors and viruses
EP3699286A1 (en) 2011-04-20 2020-08-26 The Trustees of the University of Pennsylvania Regimens and compositions for aav-mediated passive immunization of airborne pathogens
US9289477B2 (en) 2011-04-29 2016-03-22 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers to reduce cytotoxic T lymphocyte responses
MX2013013445A (es) 2011-05-16 2014-07-28 Genzyme Corp Induccion de tolerancia inmunologica utilizando metotrexato.
WO2013019658A2 (en) 2011-07-29 2013-02-07 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers comprising polymers comprising multiple immunomodulatory agents
WO2013036293A1 (en) 2011-09-06 2013-03-14 Selecta Biosciences, Inc. Dendritic cell subsets for generating induced tolerogenic dendritic cells and related compositions and methods
AU2012304313A1 (en) 2011-09-08 2014-03-06 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materials and methods for modulating immune responses
US8865487B2 (en) 2011-09-20 2014-10-21 General Electric Company Large area hermetic encapsulation of an optoelectronic device using vacuum lamination
WO2013058812A1 (en) 2011-10-19 2013-04-25 President And Fellows Of Harvard College Targeted delivery to pancreatic islet endothelial cells
EP2591801A1 (en) 2011-11-14 2013-05-15 Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf Nanoparticle compositions for generation of regulatory T cells and treatment of autoimmune diseases and other chronic inflammatory conditions
AU2012340567B2 (en) 2011-11-22 2017-11-23 The Children's Hospital Of Philadelphia Virus vectors for highly efficient transgene delivery
CN104520428B (zh) 2012-02-17 2018-09-21 费城儿童医院 将基因转移到细胞、器官和组织的aav载体组合物和方法
CN104487579B (zh) 2012-04-18 2022-01-18 费城儿童医院 使用aav衣壳变异体的高度有效的基因转移的组合物和方法
ES2932952T3 (es) 2012-04-24 2023-01-30 Ohio State Innovation Foundation Composiciones y métodos para tratar y prevenir el síndrome reproductivo y respiratorio porcino
CN102871966B (zh) 2012-10-19 2013-11-20 东南大学 用于改善雷帕霉素生物利用度的纳米载药颗粒及其制备方法
BR112015023793A2 (pt) 2013-03-15 2017-07-18 Us Dept Veterans Affairs composições e métodos de terapias para indução de tolerância imune a substituição do fator vii em indivíduos com hemofilia a
CA2909085C (en) 2013-04-08 2023-08-29 University Of Iowa Research Foundation Chimeric adeno-associated virus/ bocavirus parvovirus vector
EA201592106A3 (ru) 2013-05-03 2016-08-31 Селекта Байосайенсиз, Инк. Локальное сопутствующее введение толерогенных синтетических наноносителей для снижения гиперчувствительности типа i и гиперчувствительности типа iv
WO2014179771A1 (en) 2013-05-03 2014-11-06 Selecta Biosciences, Inc. Dosing combinations for reducing undesired humoral immune responses
EA201592273A1 (ru) 2013-06-04 2016-09-30 Селекта Байосайенсиз, Инк. Повторное введение неиммуносупрессивных антигенспецифических иммунотерапевтических средств
CA2926215A1 (en) 2013-10-06 2015-04-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Modified pseudomonas exotoxin a
US9276815B2 (en) 2013-12-27 2016-03-01 Dell Products L.P. N-node virtual link trunking (VLT) systems management plane
EP2916319A1 (en) 2014-03-07 2015-09-09 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Concept for encoding of information
BR122023023004A2 (pt) 2014-03-09 2023-12-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Vetores virais recombinantes, vírus adeno-associado recombinante, composição farmacêutica, bem como uso dos mesmos
GB201407322D0 (en) 2014-04-25 2014-06-11 Ospedale San Raffaele Gene therapy
US20150359865A1 (en) 2014-06-17 2015-12-17 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers for t-cell-mediated autoimmune disease
US20160220501A1 (en) 2015-02-03 2016-08-04 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers to reduce immune responses to therapeutic proteins
EP3160453A1 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment with synthetic nanocarriers and immune checkpoint inhibitors
WO2016037163A1 (en) 2014-09-07 2016-03-10 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuating gene therapy anti-viral transfer vector immune responses
RU2017115772A (ru) 2014-10-06 2018-11-13 Артроджен Б. В. Комбинация для генотерапии
PL3215133T3 (pl) 2014-11-05 2021-06-14 Selecta Biosciences, Inc. Sposoby i kompozycje związane z zastosowaniem związków powierzchniowo czynnych o niskiej hlb do wytwarzania syntetycznych nanonośników zawierających rapalog
WO2017139212A1 (en) 2016-02-08 2017-08-17 Cyta Therapeutics, Inc. Particle delivery of rapamycin to the liver
WO2017138983A1 (en) 2016-02-10 2017-08-17 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles having egfr ligands and methods of making and using same
US20170258927A1 (en) 2016-03-11 2017-09-14 Selecta Biosciences, Inc. Formulations and doses of pegylated uricase
WO2018039465A1 (en) 2016-08-25 2018-03-01 Selecta Biosciences, Inc. Polyester polymer matrices for the delivery of allergens
JP2019533718A (ja) 2016-09-27 2019-11-21 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドＳｅｌｅｃｔａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． がんの処置における使用のための組換え免疫毒素
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
EP3565605A1 (en) 2017-01-03 2019-11-13 ethris GmbH Ornithine transcarbamylase coding polyribonucleotides and formulations thereof
AU2018205496A1 (en) 2017-01-07 2019-07-25 Selecta Biosciences, Inc. Patterned dosing of immunosuppressants coupled to synthetic nanocarriers
BR112019018748A2 (pt) 2017-03-11 2020-04-07 Selecta Biosciences Inc métodos e composições relacionados ao tratamento combinado com anti-inflamatórios e nanocarreadores sintéticos compreendendo um imunossupressor
AU2018347583A1 (en) 2017-10-13 2020-05-21 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuating anti-viral transfer vector IgM responses
KR20200130704A (ko) 2018-02-26 2020-11-19 이슘 리서치 디벨롭먼트 컴퍼니 오브 더 히브루 유니버시티 오브 예루살렘 엘티디. 약물 전달 시스템
US11517628B2 (en) 2018-05-09 2022-12-06 Yale University Particles for spatiotemporal release of agents
MX2021000637A (es) 2018-07-16 2021-06-23 Selecta Biosciences Inc Métodos y composiciones de vectores y constructos ornitina transcarbamilasa (otc).
EP3823676A1 (en) 2018-07-16 2021-05-26 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions of mma constructs and vectors
AU2020265215A1 (en) 2019-04-28 2021-11-18 Selecta Biosciences, Inc. Methods for treatment of subjects with preexisting immunity to viral transfer vectors
WO2020243261A1 (en) 2019-05-28 2020-12-03 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuated anti-viral transfer vector immune response
WO2020247625A1 (en) 2019-06-04 2020-12-10 Selecta Biosciences, Inc. Formulations and doses of pegylated uricase
JP2022553345A (ja) 2019-10-21 2022-12-22 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 肝疾患および肝障害を処置するための方法および組成物
MX2022005506A (es) 2019-11-08 2022-08-10 Selecta Biosciences Inc Formulaciones y dosis de uricasa pegilada.
WO2021174013A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions using synthetic nanocarriers comprising immunosuppressant
EP4117631A1 (en) 2020-03-11 2023-01-18 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions related to synthetic nanocarriers
JP2023548601A (ja) 2020-11-04 2023-11-17 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 免疫グロブリンプロテアーゼに対する免疫応答を低減するための組成物
BR112023020597A2 (pt) 2021-04-09 2023-12-12 Selecta Biosciences Inc Nanocarreadores sintéticos que compreendem um imunossupressante em combinação com agonistas do receptor de il-2 de alta afinidade para aumentar a tolerância imune

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KR20140027361A (ko) 2014-03-06
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CN103501787A (zh) 2014-01-08
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IL228937A0 (en) 2013-12-31
KR102457513B1 (ko) 2022-10-24
US8652487B2 (en) 2014-02-18
AU2020200446B2 (en) 2022-05-19
EP3760201A1 (en) 2021-01-06
EP2704693A1 (en) 2014-03-12
AU2020200254A1 (en) 2020-02-06
JP7242519B2 (ja) 2023-03-20
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