TR201807778T4 - Lipozom bazlı immünoterapi. - Google Patents
Lipozom bazlı immünoterapi. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201807778T4 TR201807778T4 TR2018/07778T TR201807778T TR201807778T4 TR 201807778 T4 TR201807778 T4 TR 201807778T4 TR 2018/07778 T TR2018/07778 T TR 2018/07778T TR 201807778 T TR201807778 T TR 201807778T TR 201807778 T4 TR201807778 T4 TR 201807778T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- liposome
- disease
- autoimmune
- pharmaceutical
- autoantigen
- Prior art date
Links
- 239000002502 liposome Substances 0.000 title claims abstract description 103
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 title description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 28
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 20
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 13
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 12
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 5
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 claims description 4
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 claims description 3
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 claims description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 3
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 claims description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims 6
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims 3
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims 3
- 206010055128 Autoimmune neutropenia Diseases 0.000 claims 2
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 claims 2
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 claims 2
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims 2
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 claims 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 claims 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 abstract description 4
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 36
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 35
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 22
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 21
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 19
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 102000002233 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Human genes 0.000 description 10
- 108010000123 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Proteins 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 8
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 7
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 7
- 230000003614 tolerogenic effect Effects 0.000 description 7
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 6
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 6
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 6
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 6
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 description 5
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 206010037714 Quadriplegia Diseases 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 2
- 206010049680 Quadriparesis Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 210000000182 cd11c+cd123- dc Anatomy 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 2
- 238000000604 cryogenic transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000035780 glucosuria Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- VGIRNWJSIRVFRT-UHFFFAOYSA-N 2',7'-difluorofluorescein Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(F)C(=O)C=C2OC2=CC(O)=C(F)C=C21 VGIRNWJSIRVFRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012118 Alexa Fluor 750 Substances 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000901143 Etia Species 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000005561 Human Isophane Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108010084048 Human Isophane Insulin Proteins 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027926 Monoplegia Diseases 0.000 description 1
- 101001065556 Mus musculus Lymphocyte antigen 6G Proteins 0.000 description 1
- 241001049988 Mycobacterium tuberculosis H37Ra Species 0.000 description 1
- 108010067035 Pancrelipase Proteins 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000599 auto-anti-genic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000010726 hind limb paralysis Diseases 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 108010085650 interferon gamma receptor Proteins 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 208000027906 leg weakness Diseases 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000024664 tolerance induction Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0008—Antigens related to auto-immune diseases; Preparations to induce self-tolerance
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/577—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 tolerising response
Abstract
Mevcut buluş, bir otoantijen kapsülleyen bir lipozom sağlamaktadır, burada lipozom 500 ila 15000 nm arasında bir boyuta sahiptir ve lipozom membranı, toplam membran lipozomal bileşimine göre ağırlıkça %10 ila 40 arasında bir miktarda fosfatidilserin (PS) içermektedir. Aynı zamanda söz konusu lipozomun bir terapötik etkili miktarını içeren farmasötik veya veterinerlik bileşimleri sağlanmaktadır. Ayrıca, buluş, bir ilaç olarak kullanım için, özellikle otoimmün hastalıkların tedavisi için yukarıda açıklandığı gibi lipozomlar ve farmasötik veya veterinerlik bileşimleri sağlamaktadır. Son olarak mevcut buluş, bir otoimmün hastalıktan muzdarip olan bir hastada kendine toleransın geri getirilmesinde kullanım için yukarıda belirtilen lipozomları ve farmasötik veya veterinerlik bileşimleri sağlamaktadır.
Description
TARIFNAME
LIPOZOM BAZLI IMMÜNOTERAPI
Mevcut bulus, tir-11 alanEiIe ilgilidir. Özellikle, mevcut bulus, otoimmün bozukluklar. önlenmesi
veya tedavisi için otoantijen kapsülleme IipozomlarIßaglamaktadlB
ÖNCEKI TEKNIK
Otoimmünite, bir organizmanI kendi bilesen parçalar.. kendinin oldugunu kabul etmedeki
basarEZlglIlE) dolayisiyla, kendi hücrelerine ve dokular. karsEbir immün cevaba neden
olmaktadE Bir anormal immün cevaptan kaynaklanan herhangi bir hastalllg bir otoimmün
hastalilZl olarak adlandlElIIB1aktadlEl Önde gelen örnekler, tip 1 diyabet (T1D), Iupus
eritematozus, romatoid artrit, multipl skleroz (MS), Addison hastalig'lü çölyak hastallgü
dermatomiyozit, Hashimoto tiroidi, miyasteniya gravis, pernisyöz anemi, reaktif artrit,
Sjogren sendromunu içermektedir.
Gelismis ülkelerde nüfusun %7 ila 10'unun, genellikle kronik, zayiflhtlîlßlan ve hayatEliehdit
eden bu hastaI[Elardan muzdarip oldugu hesaplanmaktadlü Otoimmün hastal[lZIar dünya
çapIa arttlEga ve etkili tedaviler mevcut olmadiEça, otoimmün ile iliskili tIi bakIi
maliyetleri artmaya devam etmektedir.
Otoimmün hastaliklar için tedaviler geleneksel olarak, baglglKHglEl basküâylîü anti-
enflamatuvar (steroidler) veya hafifleticidir. Hashimoto tiroidinde veya Tip 1 diyabette
hormon replasmanügibi immünolojik olmayan terapiler, otoagresif cevab. sonuçlarIEliedavi
etmektedir, dolaylîlýla bunlar, hafifletici tedavilerdir. Beslenme yönetimi, çölyak hastallglII
siddetini sIlEliamaktadlEI Steroidal veya NSAID tedavi, birçok hastal[giI enflamatuvar
belirtilerini sIlElbmaktadlE
Istenmeyen immün cevabEl azaltan veya önleyen bagiglKlilZi düzenleyici terapilerin
gelistirilmesinde genis arastlîmalar yaplßilgtlîl Ancak, farkIEbtoimmün hastallElarI karlgIK]
ayrlEtilârII sIlEllühnlasilBiasEbu alandaki ilerlemeyi büyük ölçüde yavaslatmaktadlü Mevcut
stratejiler genel olarak, baglgllmgil baskllânmasII sürdürülmesi amaclsîla, genellikle ömür
boyu tedaviler olan genis etkili baglSIKlllZl baskllâylEEilaçlara dayanmaktadE AyrlEb, genis
etkili baglglKlilZl baskilâylîllârl kullanIilZl tümör, enfeksiyon, nefrotoksisite ve metabolik
bozukluklar gibi, ciddi yan etki riskiyle iliskilendirilmektedir.
Simdiye kadar yapllân çabalara ragmen, hala, etkili olan ve istenmeyen yan etkilerden
yoksun olan otoimmün bozukluklar. tedavi edilmesi için baska terapötik yaklasnlar için
ihtiyaç bulunmaktadlü
BU LUSUN KISA AÇIKLAMASI
Mucitler, otoimmün hastalüîlarl tedavisinde oldukça etkili olan yeni bir otoantijene özel
terapi gelistirmistir. Özellikle, mucitler, bir otoimmün hastalIgEl, özel bir boyuta sahip olan ve
lipozom fosfatidilserin içeren bir lipozomda tedavi edilmesi amaçlanan otoimmün hastallEla
iliskili otoantijen(ler)in kapsüllenmesiyle etkili bir sekilde tedavi edilebildigini bulmustur.
Dolaylîlýla bir ilk yönde mevcut bulus, bir otoantijeni kapsülleyen bir Iipozomla ilgilidir,
burada (I) lipozom, 500 ila 15000 nm arasIa bir boyuta sahiptir ve (ii) lipozom membranü
toplam membran lipozomal bilesimine göre aglEllllZça %10 ila 40 arasIa bir miktarda
fosfatidilserin içermektedir.
Mevcut mucitler, bulusun lipozomunun özel özelliklerinin, örnegin, 500 ila 15000 nm arasIa
bir boyut ve %10 ila 40 PS varllglllEl, antijen sunucu hücreler ile kapsüllenmis otoantijenin
tolerojenik sunumuna olanak tanIiglIEllJulmustur.
Teori ile sIlEllanmakslîlEl, mucitler, mevcut lipozomlarI özel özelliklerinin, dendritik hücreler
tarafIan etkili bir sekilde içerilmesini ve kapsüllenmis otoantijenin, islenmesini ve
tolerojenik sekillerde MHC sILEIII moleküller ile (ekzojen sunum) CD4+ T Ienfositlere ve
CD8+ T Ienfositlere (çapraz sunum) sunulmaslüdolaylîlýla, antijene tolerans saglanmasIEl
ve otoimmün kaskadI durdurulmasIElsaglad[gIIElEl/arsaymaktadlü Aksi durumda, mevcut
bulusun otoantijen kapsülleme lipozomu, otoimmüniteden çok otoantijene toleransa neden
olmaktadü bu otoimmün rahatslîllgil etkili tedavisiyle sonuçlanmaktadß
Bulusun otoantijen kapsülleme lipozomunun tolerojenik etkisi ve otoimmün bozuklugun
tedavisinde, özellikle T1D ve MS'in tedavisindeki saslElllElJetkisi asag-ki örneklerde
gösterilmektedir.
Sekil 2, 3 ve 4'de gösterildigi gibi, PS-lipozom kapsülleyici insülin peptitler, dendritik hücreler
tarafIdan yakalanmaktadlîi bu sekilde bu dendritik hücreler, tolerojenik özellikleri elde
etmektedir: yardIicEluyaran moleküllerin düsük ekspresyonu, uyarliüilg PGEZ üretimi ve
diyabet kapsamlEUa düsük T hücresi çogalmasElSonuçlar, lipozomlarlEl, bir miktar, apoptotik
cisimlere benzer sekilde dendritik hücrelerin (DC'ler) tolerojenligini destekledigini
göstermektedir. Ayrlîa, bir proinflamatuvar uyar-n sonra etki azalmamaktadü bu hesaba
katliîhasljgereken önemli bir özelliktir çünkü otoimmün kaskad devam ettiginde ve pro-
uyaran uyarlîllâr mevcut oldugunda, terapinin etkili oldugunu göstermektedir.
Asaglâbki örneklerde gösterildigi gibi, yukarüiakilerin tümü otoimmün hastallgiI etkili
tedavisiyle sonuçlanmaktadE Sekil 5 ve 6, NOD pre-diyabetik farelerin tedavisinin, bulusun
lipozomlarII tek bir uygulamaslýla elde edildigini gösterirken, Sekil 8A, insülin peptitlerle
yüklü PS-Iipozomlarü, hastaligiI baslang-a uygulandigia NOD farelerinde diyabetin geri
döndürülebildigini göstermektedir. AyrEla, Sekil 9, myelin oligodendrosit glikoprotein (MOG)
peptit içeren PS-IipozomlarI C57BL/6 baglglElilZl kazandlEllliißfarelerde deneysel otoimmün
ensefalomiyelit (EAE) hastaligill gelisimini önleyebildigini göstermektedir. Dolaylgýla,
otoimmün bozukluklar için bilinen baglglKlllZJ sistemini düzenleyici veya anti-enflamatuvar
tedavilerin aksine, mucitler tarafIan gelistirilen lipozom bazlüterapi sürekli olarak
gerekmemektedir. Aksine, tolerans. uzun süren onarIiEleIde edilmektedir, bu, otoimmün
hastaligil etkili önlenmesi veya tedavisiyle sonuçlanmaktadE Bu etki, otoantijen kapsülleme
lipozomlarIan etkili bir miktarda içeren bir farmasötik bilesimin tek bir uygulamasIan
sonra veya alternatif olarak 2 ila 4 uygulamalelda elde edilebilmektedir.
Aynüamanda, Sekil 5, 6 ve 8'de, fareler bos lipozomlar aldlglIa T1D olusumunda etki elde
edilmedigi gözlenebilmektedir. DolayElîla, tedavi yalnlîta, lipozomlar uygun bir otoantijeni
kapsüllediginde etkilidir, bu nanoterapinin antijen özgüllügünü göstermektedir.
Bir antijene özgü terapiyken, bulusun otoantijen kapsülleme lipozomu istenmeyen yan etkiye
sahip olmama avantaj. sahiptir. Yukari bahsedildigi gibi, otoimmün hastalüZlarI tedavisi
için diger baglglKliEl düzenleyici yaklasIiIar, genellikle yüksek enfeksiyon yatkIigiI neden
olan ve bazen tümörler, nefrotoksisite veya metabolik bozukluklarüia destekleyen, bagElEliKi
baskllâyEEr içermektedir.
Bir tolerojenik sunum saglama konusunda, bulusun özel olarak tasarlanmlg lipozomlarIa
otoantijenlerin kapsüllenmesi, bozulma ve toksisitenin azalmaleUan/yoklugundan kargonun
korunmasEhedeniyle oldukça istenen bir hedeftir. Bu, otoantijenin, antijen sunucu hücreler
tarafldan alla kadar lipozomda tutulmasüve sonuç olarak, ters bir immün cevabEl
uyaramamasüiedeniyledir.
Bulusun bir ikinci yönü, diger uygun farmasötik olarak veya veterinerlikle ilgili olarak kabul
edilebilir yardIiclîlmaddeler veya taslýlîllârla birlikte yukarlElla açlKlandiglElgibi otoantijen
kapsülleme lipozomunun terapötik olarak etkili bir miktarIIZIiçeren bir farmasötik veya
veteriner bilesimi saglamaktadlEl
Bulusun lipozom bazlEfarmasötik bilesimi, büyük ölçekli üretimin stabilitesi, birörnekligi ve
kolaylgßç-an birçok avantaja sahiptir.
Ilk olarak, mevcut otoantijen kapsülleme lipozomlarII üretimi, farmasötik sanayisindeki
yaygI reaktifleri ve ekipman Ellüsük bir maliyette kullanarak elde edilebilmektedir.
Bulusun IipozomlarlÇl boyutlarEhedeniyle, topaklasma egiliminde olan ve üretimleri, küçük
gözenek boyutuna sahip olan pahalünembranlardan tekrarlayan kallîitan çekme islemlerini
gerektiren daha küçük lipozomlarI aksine, çözeltide oldukça kararlIlE ve elde edilmesi
kolaydlE
Ayrlîla, büyük endüstriyel üretimin arttlEIlBralelI ekonomik olmaslýla aynüamanda, ürünün
birörnekligi de garantilenebilmektedir.
Bir baska büyük avantaj, mevcut lipozom bazlEfarmasötik bilesimin, istenmeyen kirleticiler
veya yan ürünlerden yoksun, belirli bir bilesim olmasIa yatmaktadlB Otoantijen kapsülleme
veya heterolog hücre bazIElierapiler durumunda oldugu gibi retlere neden olmamaktadE
Tolerojenik etkisi sayesinde, bulusun otoantijen kapsülleme lipozomu, otoimmün hastalllZlarI
etkili önlenmesiyle birlikte (örnegin, otoimmünitenin tetiklenmesinin önlenmesi) hem bir ön-
klinik evresindeki (örnegin, otoimmünitenin halihazlîrlla tetiklendigi ancak doku hasar.. ve
klinik belirtilerin düsük oldugu bir evre) hem de klinik evrede (örnegin, doku hasarII yüksek
oldugu ve klinik belirtilerin açlE oldugu bir ever) otoimmün hastaliglI etkili tedavisini
saglamaktadB
Dolaylglýla, mevcut bulusun bir üçüncü yönü, bir ilaç olarak kullanir için bulusun ilk yönüne
göre bir otoantijen kapsülleme lipozomu saglamaktadlEl Bu yön aynüamanda, bir insan dahil
olmak üzere bu tür bir tedaviye ihtiyaç duyan bir memeliye, bir veya daha fazla uygun
farmasötik olarak kabul edilebilir yardlclîlnadde veya taslîlüîlle birlikte, mevcut bulusun
otoantijen kapsülleme Iipozomundan terapötik olarak etkili bir miktarda uygulamaylîilçeren bir
hastallgiI önlenmesi veya tedavisi için bir yöntem olarak formüle edilebilmektedir.
Dördüncü bir yönde, mevcut bulus, bir otoimmün hastal[g]lEl önlenmesi veya tedavisinde
kullanIi için yukari açiiZlandlglEgibi bir otoantijen kapsülleme lipozomu saglamaktadlü Bu
yön, bir otoimmün hastallgllEl önlenmesi veya tedavisi için bir ilaci üretimi için yukarüla
açilZlandIgEl gibi bir otoantijen kapsülleme Iipozomunun kullanIiEl olarak formüle
edilebilmektedir. Bu yön aynEzamanda, bir insan dahil olmak üzere buna ihtiyaç duyan bir
denege, farmasötik olarak kabul edilebilir yardIicElmaddeler veya taslîlîllâr ile birlikte,
yukari açlElandlgiEgibi bir otoantijen kapsülleme lipozomundan terapötik olarak etkili bir
miktarda uygulamayEIçeren bir otoimmün hastaligi. önlenmesi veya tedavisi için bir yöntem
olarak formüle edilebilmektedir.
Bir besinci yönde, mevcut bulus, bir otoimmün hastallthan muzdarip bir hastada kendine
tolerans geri getirilmesinde kullanIi için yukarüla açilZland[g]l3_qibi bir otoantijen kapsülleme
lipozomu saglamaktadE Bu yön, bir otoimmün hastaI[Etan uzdarip bir hastada kendine
toleransI geri getirilmesi için bir ilaci üretimi için yukar- açilZlandlglEgibi bir otoantijen
kapsülleme Iipozomunun kullanIiEdJIarak formüle edilebilmektedir. Bu yön aynüamanda, bir
insan dahil olmak üzere buna ihtiyaç duyan bir denege, farmasötik olarak kabul edilebilir
yardiclîimaddeler veya tasMEllâr ile birlikte, yukar- açlKland[glügibi bir otoantijen
kapsülleme Iipozomundan terapötik olarak etkili bir miktarda uygulamaylîgeren bir otoimmün
hastallthan muzdarip bir hastada kendine tolerans. geri getirilmesi için bir yöntem olarak
formüle edilebilmektedir.
Son olarak, bulusun diger yönleri, bir otoimmün cevablEl baskllânmasüiçin yukar-
açlEIandlgEgibi bir lipozom veya bir farmasötik veya veterinerlik bilesimi ve bir otoimmün
hastaligi önlenmesi veya tedavisinde kullanl için yukari açllZlandglügibi bir lipozom veya
farmasötik veya veteriner bilesimi saglamaktadlEl burada söz konusu lipozom veya farmasötik
veya veteriner bilesim, kapsüllenmis otoantijene toleranslîglieri getirmektedir.
SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI
SEKIL 1. Insülinden türetilen otoantijenle yüklü PS-lipozomun kriyojenik geçirimli elektron
mikroskopisi (cryo-TEM, JEOL-JEM 1400 microscope) görüntüleri. Bar: 0,2 um.
SEKIL 2. Kontrol DC'Ierinin (A) akglsitometrisi (FACS) analizi, DC'Ier, 30 dakika boyunca
Oregon green ve 37°C'de
(C) birlikte kültürlenmektedir. X-kordinatlarü OG488 PS-Iipo'yu göstermektedir; y-
kordinatlarEGZDllc-PECy7 boyalElDC'leri göstermektedir.
SEKIL 3. DC'Ierde PS-lipozomlarlEl yakalanmalellEl etkileri. Y-kordinatlarü(A) anneksin V
ve 7aad boyanmasüile degerlendirilen DC yasayabilirligini (%), (B) CD40 ve CD86
membran ekspresyonu için floresans siddetinin ortalamasIEl/e (C) olgun olmayan ve
olgun DC'Ier için kültür üst fazlarIa ELISA ile Prostaglandin E2'nin (PGE2) üretiminin
saylgllastlEllIhasIElgöstermektedir. Beyaz semboller, kültürden 24 saat sonra, PS-
yakalanmasIan önce (üçgenler) ve sonra olgun olmayan DC'Ieri göstermektedir. Siyah
semboller, proinflamatuvar uyarlîilârdan (Iipopolisakkarit, LPS) 24 saat sonra, PS-
lipozomlarI (kareler) veya insülin peptit yüklü PS-lipozomlarI (daireler)
yakalanmaleUan önce (üçgenler) ve sonra olgun DC'Ierin yasayabilirligini göstermektedir.
ELISA verileri, pg/ 106 hücre olarak gösterilmektedir.
SEKIL 4, PS-IipozomlarI yakalanmaleUan sonra, hatta proinflamatuvar uyarlEIlârlEtlan
sonra, DC'lerin otolog T hücresi çogalmasIÜJyarmadaki bozulmus yetenegi. Y kordinatü
olgun olmayan DC'Ierin neden oldugu uyarIidan sonra, 7 gün boyunca, PS-lipozomlarI
(beyaz kareler) veya 1:10'luk bir oranda insülin peptit yüklü (20 mg/ml) PS-lipozomlarII
(beyaz daireler) yakalanmaslTiUan önce (beyaz üçgenler) ve sonra, T hücrelerinin otolog
çogalmasIEl göstermektedir (c.p.m. 3H timidin testi için). Siyah semboller, PS-
lipozomlarII (siyah kareler) veya daha önce proinflamatuvar uyarlElIlLPS ile (100 ng/ml)
aktive edilen, insülin peptit yüklü PS-IipozomlarII (siyah daireler) yakalanmasIan önce
(siyah üçgenler) ve sonra olgun DC'Ier taraflEblari tetiklenen çogalmaygöstermektedir.
SEKIL 5, PS-lipozom kapsüllü insülin peptitleri kullanarak immünoterapi T1D olusumunu
azaltmaktadlEI (A) y-kordinatlZlinsülin peptit yüklü PS-lipozomlarla (daireler, n=12), bos
PS-lipozomlarla (kareler, n=18) ve salin çözeltisini alan kontrol grupla (üçgenler, n=16)
islenen NOD farelerinde diyabetin kümülatif olus silZ][glIE(yüzde) göstermektedir. (B) y-
kordinatüinsülin peptit yüklü PS-lipozomlarlýla (daireler, n=12-6), bos PS-lipozomlarla
(kareler, n=18-3) ve salin çözeltisi ile islenen kontrol grubuyla (üçgenler, n=16-2) islenen
farelerde vücut aglEIllglII (g) izlenmesini göstermektedir. X-kordinatlarü haftalarla
farelerin yasllîgiöstermektedir.
SEKIL 6. Insülit skoru, baglgiKIllZi kazandmlgifarelerde daha az ciddidir. NOD farelerinde
insülit üzerinde PS-IipozomlarII etkisi. y-koordinatlarü(A) NOD farelerinin farkliîgruplarü
için insülit skorunu ve (B) farlelOD fareleri gruplarIa bes infiltrasyon kategorilerinin
her birinde sIifIbndlEllân adacliZlarI yüzdesini göstermektedir. Infiitrasyon kategorileri: 0,
insülit yok; 1, peri-insüler; 2, hafif insülit (95 saftlîl ve
trifloroasetik asit (tfa) allErnaktadlB Myelin oligodendrosit glikoproteinden (MOG) türetilen
SEKANS KIMLIK NO: 3 (YR-SPFSRWHLYRNGK)'ün peptidi, Institut cie Recerca Biomedica de
Barcelona, IRBB, Barselona, Ispanya'dan elde edilmektedir.
Lipozomlar, leisMa 1:1:1,33 molar oranIIa PS, PC ve CHOL'den bir lipit karlglmldan ince
film hidrayon yöntemini kullanarak hazlEllanmaktadlEl(HareI-Adar T, 2011). Toplam Iipidin
miktarEBO mM'dir. Lipitler ve lipit konjüge floresan boyalar, kloroformda çözündürülmektedir
ve solvent, vakum ve azot altIa buharlastüna ile allElnaktadlB Lipitler, uygun tampon ile
hidratlanmaktadlE(PBS, PBS'de ayrEIlJir sekilde SEKANS KIMLIK NO: 1 veya SEKANS KIMLIK
NO: 2 veya SEKANS KIMLIK NO: 3'ün peptidinden 0,5 mg/mL çözeltisi) ve bu sekilde elde
edilen Iipozomlar, bir kani-:tan çekme makinesiyle 1 mm'ye homojenlestirilmektedir (Lipex
Biomembranes, Vancouver, Kanada). Kapsüllenmemis peptit, santrifüjleme ile lipozom
formülasyonundan alürnaktadE Parçacilö boyutu dagUIIIlilarü/e IIpozomIarI zeta potansiyeli
(C) olarak ifade edilen stabilite, seyreltilmemis örneklerde Malvern Zetasizer, (Malvern
morfolojisi ve yapraksUJElÇI bir JEOL-JEM 1400 mikroskobunda kriyojenik geçirimli elektron
mikroskopisini (cryo-TEM) kullanarak incelenmektedir.
Yabani tip NOD fareleri, The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME, ABD)'den elde
edilmektedir ve özel patojensiz kosullar aItIa tutulmaktadE Yalnlîta 8 haftallKl disi fareler
kullaniiîhaktadIE
Fareler, Harlan Laboratories (Italya)'den allEtnaktadlEl ve geleneksel kosullar altlEla
yerlestirilmektedir. Yalnlîta 8-10 haftalIEJdisiIer kullanUIhaktadlEl EAE'nin uyarHBiasEibin, sekiz
haftaliEIC57BL/6 disi fareleri (Harlan) her iki yanlarIan, ketamin (50 mg/kg vücut aglîll[gi[)]
ve ksilazin (5 mg/kg vücut aglEllIglm aItIa, 4 mg/ml Mikobakteriyum tüberküloz H37RA
(Difco, Detroit, MI, ABD) içeren tam Freund adjuvantIan (CFA) esit bir hacimde smsllîiü
haline getirilmis, PBS'de 50 mg MOG peptit enjeksiyonlarIlleubkütanöz olarak almaktadlB
AyrlEla, 250 ng Pertussis toksini (Sigma Chemical) intravenöz olarak gün 0 ve 2'de enjekte
edilmektedir.
Bu çallgina, Care and Use of Laboratory Animals of the Generalitat de Catalunya, Catalan
Government için Kllâvuzdaki tavsiyelerle tam uyumla gerçeklestirilmektedir. Protokol, Com-
mittee on the Ethics of Animal Experiments of the Germans Trias i Pujol Research Institute
taraflEUan onaylanmaktadlEl(Ruhsat numarasEDAAM 5157).
Dena'r/'t/'k hücre (DC) o/usumu ve a/Ü deney/eri
DC'Ier, daha önce bildirildigi gibi (Marin-Gallen, Clinical and Experimental Immunology 2010),
GM-CSF (1000 U/ml; Prospec, Rehovot, Israil) içeren kültür ortamIa NOD farelerinin kemik
iligi progenitörlerinden üretilmektedir. DC safllgiÇlaçiEJandlgilZlJibi (Pujol-Autinell I, et al. PLOS
ONE degerlendirilmektedir.
Yasayabilirlik, daha önce belirtildigi gibi anneksin ve 7aad boyanmasEile belirlenmektedir
(Pujol-Autonell I et al. PLOS ONE, 2013) ve hücreler, aklgl sitometrisi ile sayHB'iaktadlEl
(Perfect Count Microspheres, Cytognos, Salamanca, Ispanya). Lipozom yakalanmasüz saat
boyunca Iipozomal mikroparçaclElarIa (bos veya insülin peptitlerle yüklü) DC'Ierin birlikte
kültürlenmesi ile gerçeklestirilmektedir. 100-1000 mM'ye seyreltilen Iipozomal mikroparçacllZl
stok çözeltisi (30 mM), bu deneyler için kullanHB1aktadlEI Kontrol DC'leri, olgun olmayan
DC'Ierin (iDC'Ier) elde edilmesi için bazal kosullarda kültürlenmektedir veya olgun DC'lerin
(mDC'Ier) elde edilmesi Için 24 saat LPS ile (100 ng/ml; Sigma) uyarüßiaktadß DC'Ierle PS-
. Hücre membranlEb baglanan IipozomlarI allEtnasEliçin PBS'de
kapsamllîblarak yiKladüZtan sonra, Iipozom yakalanmasElaklg sitometrisi ile belirlenmektedir
(FACSCanto II, BD Biosciences).
Lipozomun yaka/anmasüian sonra DC'Ierde tolerojenik özellik/er
DC yardIcElJyaran membran moleküllerin (CD4O ve CD86) ekspresyonu, aklg sitometrisi
analizi ile belirlenmektedir (FACSCanto II). DC'Ier, fare monoklonal antikorlarlEa (CD11c/PE-
Cy7, CD40/APC, CD86/PE) (BD Pharmingen) boyanmaktadlîl Izotip kontrol boyamasÇi bir
kontrol olarak kullanilîhaktadß Veri, CeIIQuest yazlIEEliiZ(BD Biosciences) kullanarak analiz
edilmektedir. Apoptotik hücrelerle tolerans uyarIiIa PGE2'nin rolünün önceki sonuçlarlElai
tarafldan PS-Iipozomunun yakalanmasIan sonra PGEZ'nin üretimi, ELISA ile
degerlendirilmektedir (PGEZ EIA Kit-Monoclonal; Cayman Chemicals, Ann Arbor, MI).
Saptama sIlEIEO/o80 B/BO: 15 pg/ml. DuyarliElEl %50 B/BO: 50 pg/ml. Sonuçlar, bir indeks
olarak ifade edilmektedir (pg PGE2/106 hücreleri).
T Hücres/ Çoga/masÜDeneme/er/
DC'Ier, 20ug/ml insülin (Sigma, St Louis, MO, USA) ile 2 saat boyunca 1 mM Iipozom ile (bos
veya insülin peptit yüklü) yüklenmektedir ve sonra T hücresi çogalmasII belirlenmesi için
kullanilîhaktadlü T hücreleri, NOD dalagI mekanik parçalanmasIan sonra elde
CD11c-PECy7 (BD Pharmingen), CD11b-PE (ImmunoTooIs GmbH, Friesoythe, Germany)
antikorlarIleullanarak ve Ly-6G(Gr-1)-eFluor ve siBlama ile
(FACSAria II, BD Biosciences) negatif seçim ile armaktadlü Tek bas. veya bos PS-
lenfositi ile kültürlenmektedir (1:10 oraniEtia). 6 gün sonra, hücreler, bir ilave 16 s, 1 umCi
(3H)-timidin (Perkin Elmer, Waltham, MA, USA) ile doldurulmaktadlü Hücreler,
toplanmaktadlEl(Harvester 96, Tomtec Inc., Hamden, CT, USA) ve bir p-ama sayacEl
kullanarak analiz edilmektedir (1450 Microbeta, TriluxWallac, Turku, Finland). T hücresi
çogalmasÇic.p.m. x 103 hücre olarak ifade edilmektedir.
77'p 1 07yabet Immünoterap/'si (önleme ve feda w)
Prediyabetik NOD farelere (8 haftal[lZ), 200 ul tuz çözeltisinde PS-IipozomlarIan (bos veya
3 mg'lik
tek bir Intraperitoneal doz verilmektedir. Yalnlîta tuz çözeltisini alan bir sahte-kontrol grubu
da eklenmektedir. Toplamda grup baslEb 12-18 hayvan kullanilBIaktadlEl Fareler, Glucocard
seritlerini kullanarak (Menarini, Barcelona, Spain) üre glukozu için günlük ve bir 30 haftalllZi
dönem boyunca vücut aglElllglübin haftalllîlgözlenmektedir. Glukozürili hayvanlarlöl, kan sekeri
seviyesi >300 mg/dl oldugunda diyabetik olduklarülogrulanmaktadlü
Diyabetik NOD fareleri (>25 hafta), hastal[g]I baslang -an sonra gün 1, 5 ve 8'de 200 ul
tuz çözeltisinde PS-IipozomlarIan (bos veya 1:1 oranIa SEKANS KIMLIK NO: 1 ve
SEKANS KIMLIK NO: 2 ile kapsülleme peptidi) 3,5 mg'lilZl3 doz i.p. olarak uygulanmaktadlB
Fareler, bir 30 haftalllö dönem boyunca Glucocard seritlerini (Menarini, Barselona, Ispanya)
kullanarak üre glukozu için günlük izlenmektedir. Glukozürili hayvanlarlEl, diyabetik olduklarlîl
dogrulanmaktadlîlve hastang'llEl baslanglîüardllîlkan sekeri seviyeleri 200 mg/dL'den yüksek
oldugunda veya bir ölçüm 300 mg/dL'den yüksek oldugunda belirlenmektedir. Kan sekeri
seviyeler haftalllZ] izlenmektedir (AccuCheck, Roche Diagnostics, Indianapolis, IN). Günlük
subkünatöz sekilde (s.c.) enjekte edilen insülin (1U, Insulatard Flex-Pen, Novo-Nordisk,
Bagsvaerd, Danimarka), normoglisemi elde edilmezse, hastallgIEl baslang-an itibaren
uygulanmaktadlB Glisemi, 2 saat açllthan sonra, haftada 3 kez izlenmektedir (AccuCheck,
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN).
Lökositlerle -insülit- adaclKl infiltrasyonu derecesi, çallglnanl sonunda belirlenmektedir.
Kgca, her grup için tüm farelerden pankreaslar, bir izopentan/soguk aseton banyosuna
daldlßrak dondurulmaktadB Spm'lik donuk kesitler, 5 örtüsmeyen seviyede elde
edilmektedir. Kesitler, Hematoksilin / Eosin ile boyanmaktadlEJ deney kosullarlEtlan haberdar
olmayan 2 bagIislZl gözlemci tarafIan kodlanmakta ve analiz edilmektedir. Her gözlemci,
hayvan bas. minimum 40 adaciglüllegerlendirmektedir. Insülit, baska yerde açlKlandlglgibi
hafif insülit (%<25 infiltre adacüZD; 3, %25-75 infiltre adacllg 4, toplam adacllZlinfiItrasyonu.
EAE /mmünoterapi
C57BL/6 baglSllZlllZl kazandlîlmîgfareler, MS ile yakIan iliskili olan ve genellikle MS'e karsü
terapilerin ve tedavilerin test edilmesine yarayan, EAE hastallgllîlçin model olarak lelllZJa
kullanllîhaktadIE EAE'nin gelisiminin önlenmesi için, C57BL/6 bagElKlllZl kazandlülînlglfarelere,
baglgllîlamadan sonra gün 5 ve 9'da 100 ul tuz çözeltisinde MOG40-55 yüklü PS-
lipozomlar (PS-lipozomlar) veya PBS (suni) uygulanmaktadE
Tüm hayvanlar tartllIhaktadlElve tedavi edilmis farelerin sagligiEl/e klinik durumu ile birlikte
nörolojik isaretler için günlük olarak incelenmektedir. EAE'nin klinik skoru, asaglEIhki kritere
göre gerçeklestirilmektedir (Espejo C, et al., Exp Neurol 2001): baska yerde de açilZiand[giEl
gibi, 0, asemptomatik; 0.,5, kuytuk tonunun uzak yar-I kaybü 1, tüm kuyruk tonunun
kaybü 1,5, arka bacak zayifilgiüz, arka bacak felci; 2,5, arka bacak yarlîfelci; 3, ön bacak
zayiüiiglü4, kuadriparezi; 4,5, siddetli kuadriparezi; 5, kuadripleji ve 6, ölüm, [Espejo 2001,
supra]. Klinik takip analizi, iki farklügiözlemci tarafIan kör bir sekilde gerçeklestirilmektedir.
i.p. uygulamadan sonra /ipozom/arE/Z/enmesi
Biyogörüntüleme deneyleri için, floresans etiketli PS-lipozomlarEi (Alexa Fluor 750),
prediyabetik NOD farelerine i.p. olarak enjekte edilmektedir ve 3 gün boyunca
gözlenmektedir. Fareler, uygulama anlEUa ve enjeksiyondan 6, 24, 48 ve 72 saat sonra
anestezi aItIa görüntülenmektedir (Pearl Imager, Li-Cor). Floresans sinyali ölçülmektedir.
Deney sonunda, çesitli organlar elde edilmekte, tartiiîhakta ve floresans dagililîliII
belirlenmesi için görüntülenmektedir.
.Istatistikse/ ana/iz
Istatikler, Prism 5.0 yazilIlîliIEkuIlanarak gerçeklestirilmektedir (GraphPad software Inc., San
Diego, CA). Tek esli veri için, bir parametrik olmayan Wilcoxon testi gerçeklestirilmektedir.
Aksi durumda, Mann Whitney testi kullanlßiaktadlîi Bir p- degeri <0,05 anlamIElolarak
degerlendirilmektedir.
Sonudar
InsÜ/m pept/I/er/ kapsül/ayan P5-5unucu Upozom/ar, DC'Ier tara/!Man yaka/anmaktadE
PS-IipozomlarÇl yüzeylerinde `ölüm sinyali'PS'in sunulmasüiçin, 1:1:1,33 molar oranIa
PS:PC:CHOL ile halehnmaktadlE Bos lipozomlar, ile
dendritik hücrelerle verimli bir all için bir optimum boyut olan 1.014 pm'lik bir ortalama
potansiyel ölçümleri, PS-IipozomlarElüzerinde -30,66 mV'lik bir net yüzey yükü ortaya
çiKiarmaktadlEl Diger yandan, PS-lipozomlarlZlInsülinZ faresinden SEKANS KIMLIK NO: 1 veya
SEKANS KIMLIK NO: 2'nin peptitlerini kapsüllediginde, lipozomlar, slßslîzla SEKANS KIMLIK
(Pdl=0,309) bir ortalama çapa sahiptir (Sekil 1). Zeta potansiyeline göre, her iki kapsüllenmis
lipozom da -29,5 mV'lik bir negatif yüzey yüküne sahiptir. % kapsülleme, SEKANS KIMLIK
88,48±3,97'dir (ortalama±SD). SEKANS KIMLIK NO: 3'ün peptitlerini kapsülleyen PS-
lipozomlar, 942,2 nm'lik ortalama çapa ve -33,66 mV'lik zeta potansiyeline sahiptir. SEKANS
KIMLIK NO: 3 için kapsülleme etkinligi, %89,34 ± 4,69'dur. Donuk-TEM analizi ile, çogu
lipozomun (bos veya peptit kapsülleyici), multiveziküler veziküller (MW) oldugu
gözlenmektedir. Ko-kültürden sonra, PS-IipozomlarÇlDC'ler tarafIan allEmaktad E(Sekil 2).
DC7er, yardmcÜuyaran molekül/erin ekspresyonunu düsürme/dedi? ve /hsÜ//n peptit/eri
kapsül/eyer? PS-/Ipozom/arWyaka/anmasßjan sonra PGEZ Üretmekted/r
Dozdan bagslîl bir sekilde bir proinflamatuvar uyar-n sonra bile (Sekil 3A) ko-kültürden
sonra DC'lerin yasayabilirligi her zaman kontrol DC'lerine benzerdir (100-2000mM arallgilEUa,
veri gösterilmemektedir).
Iki yardIicEl uyaran molekülün, CD40 ve CD86, ekspresyonu, DC'lerin yüzeyinde
degerlendirilmektedir (Sekil 38). Hücre membranIa CD40 ve CD86 ekspresyonunun,
lipozom kültüründen sonra artmadlglÇldüsük seviyelerde kald [gllZiiözlenmektedin LPS'e maruz
kaldithan sonra, DC'ler, CD40 ve CD86'yEbüyük oranda arttlEnaktadEve PS-lipozomlarüla
yüklü DC'ler, CD86'yEIbüyük oranda arttlElnaktad lEI(p<0,001) ancak CD40'l3rttlîilnamaktadlEJ
Aksine, PSAB-Iipozomlarüne CD40 ne de CD86 membran ekspresyonunu büyük oranda
arttlElnamaktadE
Önceki sonuçlara dayanarak (PujoI-Autonell, PLOS ONE 2013), DC'lerdeki IipozomlarI
uyard[gl|:lPGE2'nin üretimi incelenmektedir. PGE2'nin yogunlugu, iDC'Ierle klýlaslandlglia
(p<0,05) Iipozomlarla (bos veya insülin peptitlerle yüklü) birlikte kültürlenen DC'lerin üst
fazIa büyük oranda arttlîllîhaktadlîl(Sekil 3C).
çogalmasWi/yarßasûgin DC7er//7 bozulmasÜ
NOD fareleri kemik iligi progenitörlerinden üretilen DC'ler, DC isaretleyicisi CD11c için
boyamaya dayanarak %>80 saftlElve yasayabilirlik her zaman %>90'dlEl T hücresi safllgiü/e
yasayabilirligi her zaman slîasüla %90 ve %95'In üzerindedir (gösterilmeyen veriler). iDC'ler
tarafian PS- veya PSAB-IipozomlarlElB] yakalanmasIlEl, yalnlîta iDC'lerIe klýbslandlglma
otolog T hücresi çogalmasIEbrttlBlnad[gEgözIenmektedir (Sekil 4). LPS uyar-an sonra,
mDC'Ier tarafIan uyarllân T hücresi çogalmasÇIIDC'ler tarafIan uyarllân çogalmadan daha
yüksektir (p<0,05). Aksine, PS- veya PSAB-IIpolearDyüklü DC'ler tarafIan uyarllân T
hücresi çogalmasD bu proinflamatuvar uyarlaßrl etkisinden sonra bile artmamaktadIE
Sonuçlar, PS-IipozomlarEDC'ler tarafIan uyarüân T hücrelerinin çogalmasIlEI, bu
proinflamatuvar uyarlîllârl etkisinden sonra olmasa bile, artmadigllügiöstermektedir.
Insülin peptitleri kapsülleyen PS-/Ipozom/arÜNOD prediyabetik fare/erde TJD'yi etk/ii bir
sek/ide tedavi etmektedir
T1D'nin önlenmesi için IipozomlarI etkinliginin degerlendirilmesi için, NOD farelerine,
prediyabetik dönem boyunca (8 haftallK) immünoterapinin tek bir dozu uygulanmaktadIEI
Beklendigi gibi, suni-kontrol grubundan hayvanlar, 13 haftallthan itibaren ve %81,3'Iük bir
son olus lel[gIEile diyabet gelistirmektedir (n=16) (Sekil 15). Bos PS-IipozomlarEiIe tedavi, 15
haftaliEI baslayan bir %83,3'Iük (n=18) bir hastaliEl olus sllîllgilýla sonuçlanmaktadlB
Otoantijenik insülin peptitlerini kapsülleyen PS-IipozomlarEüe tedavi, yine 15 haftalüîl baslayan
bir %50'lik olus sllZJigiEile (n=12) ile, hastaligll iyilesmesiyle sonuçlanmaktadlEI Suni gruba
veya bos IipozomlarlEl uygulandlglügruba klýlasla, immünoterapiyi alan farelerin vücut
aglEHEgilEtla büyük bir fark bulunmamaktadlEI(SekiI SB).
insa/It insülin peptitleri kapsülleyen PS-/ijoozom/arßßuygulandWare/erde aza/tßaktadß
Insülit, adacllZl Iökosit infiltrasyonu üzerinde tedavinin herhangi bir etkisinin belirlenmesi için
takip döneminin (30 hafta) sonunda her gruptan 3-6 diyabetik olmayan hayvan için
skorlanmaktadlîl(SekiI 6A). Beklendigi gibi, suni gruptaki hayvanlar, yüksek insülit skorlarEl
sergilemektedir (2,34±0,18). Bos LPS-IipozomlarII uygulandigJEfareler, benzeri bir insülit
derecesi sergilemektedir (2,12±0,46). Insülin peptitleri kapsülleyen PS-lipozomlarüile
immünoterapi, suni gruba klýbsla insülit skorunda (1,69±0,58) bir biyolojik ancak büyük
olmayan düsüs sergilemektedir. Ayrlîla, bes infitrasyon kategorisinin her birinde lellfüandlEllân
adacllZlarI yüzdesinin analizi, immünoterapilerin uygulandigiEfarelerde adacllZJarI %47'si,
insülitten yoksun veya peri-insülit kallîlken, suni grupta ve PS-Iipozom grubunda, adaclEIarI
fareler/hde diyabeti geri döndüreb//mekted/r
Insülin peptitlerle yüklü PS-lipozomlar, hastallgll baslang-an sonra uygulandigllda NOD
farelerinde diyabeti geri döndürmektedir (Sekil 8A). Bu fareler, normal glisemi seviyelerine
ulasan, ekzojen insülin uygulamasElolmaks- hayatta kalmaktadlB Aksine, bos PS-
lipozomlarI uyguland[glElfareler, insülinin sürekli uygulanmasi ragmen normoglisemiye
ulasmamaktad lEI(SekiI 88).
MOG peptit kapsül/e yen PS #lipozomlarEAE 'yi MIest/rmekted/r
MOG peptit içeren (MS'de özel otoantijen) PS-lipozomlar hazülanmaktadlü Bu lipozomlar,
C57BL/6 baglglKllElkazandBEhlSlfareler i.p. uygulandlgllEtla, hastalgl gelisimini önlemektedir
(Sekil 9). MOG peptit ile doldurulmus Iipozomlarla tedavi, baglglîlllîl kazandlEllBilgl farelerin
dalaglda, periferik toleransI korunmasi dahil olan bir hücre popülasyonu olan, klasik
düzenleyici T hücrelerinda bir artlgla neden olmaktadlEl(sonuçlar gösterilmemektedir). Bos
lipozomlar etkiye sahip olmad lgllEtlan, hem PS-Iipozomlar hem de peptit kapsülleme terapötik
etki için önemlidir. Dolaylîlýla, MOG peptit kapsülleyici PS-Iipozomlar, EAE'yi
iyilestirebilmektedir, daha az siddetli bir ilk saldlîlüve siddetlenmeden hlZElbir iyilesme
saglamaktadß Sonuç olarak, MOG peptit-kapsülleyici PS-Iipozomlar, MS tedavisi için faydalEl
olabilmektedir.
i.p. uygu/amasüy'an sonra /i'pozom/arE izlenmesi
Lipozomlardan floresan isareti, immün sistemin farkIEl organlara belirlenmektedir.
Beklendigi gibi, lipozomlar pankreatik lenf dügümleri, dalak, pankreas ve mediyastinal veya
paratimik lenf dügümlerine yerlestirilmektedir. (Sekil 7).
BASVURUDA BELIRTILEN REFERANSLAR
Marin-Gallen S, Clemente-Casares X, Planas R, Pujol-Autonell I, Carrascal J, et al.
Alba A, Puertas MC, Carrillo J et al. "IFN beta accelerates autoimmune type 1 diabetes in
nonobese diabetic mice and breaks the tolerance to beta cells in nondiabetes-prone
Pujol-Autonell I, Planas R, Ampudia R, Mari'n-Gallén S, Sanchez A, Carrascal J, , Marin A,
Puig-Domingo M, Pujol-Borrell R, VerdaguerJ, Vives-PI M. "Efferocytosls promotes
suppresive effects in dendritic cells through prostaglandin E2 production in the context of
Ulrich AS. I“Biophysical aspects of using Iiposomes as delivery vehicles". Bioscience
Maurer N. et al., "Developments in liposomal drug delivery Systems", Expert Opin Biol
Waterhouse D. N. et al., "Preparation, characterization, and biological analysis of
Urban P. et al., "Study of the efficacy of antimalarial drugs delivered inside targeted
immunoliposomal nanovectors", Nanoscale Research Letters, 2011, vol. 6, p. 620
Roep BO, Peakman M. "Antigen Targets of Type 1 Diabetes Autoimmunity". Cold Spring
Lernmark A. "Series introduction: Autoimmune diseases: are markers ready for
Espejo C, et al. "Treatment with anti-interferon-gamma monoclonal antibodies modifies
experimental autoimmune encephalomyelitis in Interferon-gamma receptor knockout.
Claims (17)
- ISTEMLER .
- Bir otoantijen kapsülleyen bir Iipozom olup, burada (i) Iipozom 500 ila 15000 nm arasIa bir boyuta sahiptir olmaktadß ve (il) Iipozom membranÇltoplam membran lipozomal bilesimine göre aglElllEça .
- Bir multiveziküler vezikül (MW) olan, Istem 1'e göre Iipozom. .
- PS'nin aglEIlllZça yüzdesinin, toplam membran lipozomal bilesimine göre %22 ila 33 arasIa oldugu, Istemler 1 ila 2'den herhangi birine göre Iipozom. .
- Lipozom membranII ayrlîla fosfatidilkolin (PC) ve kolesterol (CHOL) içerdigi, Istemler 1 ila 3'ten herhangi birine göre Iipozom. oranIa PS, PC ve CHOL içerdigi, Istem 4'e göre Iipozom. .
- Lipozom membranIlIcblusturan Iipidin toplam miktarüle toplam 0t0antijen(ler) miktarEl araleUaki aglEllllZl oranII 20:1 ila 3:1 arasIa oldugu, Istemler 1 ila 5'ten herhangi birine göre Iipozom. .
- Otoantijenin, 5 ila 50 amino asitlik bir boyuta sahip oldugu, Istemler 1 ila 6'dan herhangi birine göre Iipozom. .
- Otoantijenin, tip 1 diyabet (T1D), lupus eritematozus, romatoid artrit, multipl skleroz (MS), Addison hastalig'lü çölyak hastallgÇI dermatomiyozit, Hashimoto tiroidi, miyasteniya gravis, pernisyöz anemi, reaktif artrit, otoimmün hemolitik anemi, otoimmün nötropeni, Graves hastal[glü sedef hastallgllZl psoriatik artrit ve Sjogren sendromundan olusan gruptan seçilen bir otoimmün hastaIlEIa iliskili olan bir peptit oldugu, Istemler 1 ila 7'den herhangi birine göre Iipozom. .
- Otoantijenin, T1D ile iliskili oldugu ve SEKANS KIMLIK NO: 1 ve SEKANS KIMLIK NO: 2'nin peptitlerinden olusan gruptan seçildigi, Istem 8'e göre Iipozom.
- 10. Otonatijenin, MS ile iliskili oldugu ve SEKANS KIMLIK NO: 3'ü içerdigi, Istem 8'e göre lipozom.
- 11. Tüm kapsüllenmis otoantijenlerin ayn Elotoimmün hastalllZIa iliskilendirildigi, diger otoantijenleri kapsülleyen, Istemler 1 ila 10'dan herhangi birine göre lipozom.
- 12. Diger uygun farmasötik olarak veya veterinerlikte kabul edilebilir yardIicljnaddeler veya tasMEDârla birlikte, önceki istemlerden herhangi birine göre lipozomun terapötik olarak etkili bir miktarIEilçeren bir farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
- 13. Bir ilaç olarak kullanl için, Istemler 1 ila 11'den herhangi birine göre bir lipozom veya Istem 12'ye göre farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
- 14. Bir otoimmün hastallglI önlenmesi veya tedavisinde kullan! için, Istemler 1 ila 11'den herhangi birine göre bir lipozom veya Istem 12'ye göre farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
- 15. Bir otoimmün hastallthan muzdarip bir hastada kendine tolerans. onarüßîaslüba kullanIi için, Istemler 1 ila 11'den herhangi birine göre lipozom veya Istem 12'ye göre farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
- 16. Otoimmün hastaliglül; T1D, lupus eritematozus, romatoid artrit, multipl skleroz, Addison hastaligiü çölyak hastallgiü dermatomiyozit, Hashimoto tiroidi, miyasteniya gravis, pernisyöz anemi, reaktif artrit, otoimmün hemolitik anemi, otoimmün nötropeni, Graves hastaligiüsedef hastalgiüpsoriatik artrit ve Sjogren sendromundan olusan gruptan seçildigi, Istemler 14 ila 15'ten herhangi birine göre kullanIi için lipozom veya farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
- 17. Otoimmün hastallgil tip 1 diyabet veya MS oldugu, Istem 16'ya göre kullanIl için lipozom veya farmasötik veya veterinerlik bilesimi.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP14151629 | 2014-01-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201807778T4 true TR201807778T4 (tr) | 2018-06-21 |
Family
ID=49949574
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/07778T TR201807778T4 (tr) | 2014-01-17 | 2015-01-16 | Lipozom bazlı immünoterapi. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20160338953A1 (tr) |
| EP (1) | EP3094345B1 (tr) |
| JP (2) | JP6546195B2 (tr) |
| CN (1) | CN106061502B (tr) |
| AU (1) | AU2015206016B2 (tr) |
| BR (1) | BR112016016356B1 (tr) |
| CA (1) | CA2939435C (tr) |
| ES (1) | ES2672247T3 (tr) |
| MX (1) | MX2016009217A (tr) |
| PL (1) | PL3094345T3 (tr) |
| TR (1) | TR201807778T4 (tr) |
| WO (1) | WO2015107140A1 (tr) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TR201807778T4 (tr) * | 2014-01-17 | 2018-06-21 | Fundacio Inst Catala De Nanociencia I Nanotecnologia | Lipozom bazlı immünoterapi. |
| EP2918262B1 (en) * | 2014-03-10 | 2023-08-09 | PLS-Design GmbH | Induction of antigen-specific tolerance by peripheral phagocytosis |
| JP6827113B2 (ja) | 2017-01-21 | 2021-02-10 | 広州白雲山漢方現代薬業有限公司Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｈａｎｆａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． | シェーグレン症候群の治療におけるペオニフロリン−６’−ｏ−ベンゼンスルホン酸の使用 |
| US11315437B2 (en) * | 2017-02-24 | 2022-04-26 | Rene Ebner-Todd | Nutrition management and kitchen appliance |
| US20220409702A1 (en) * | 2019-11-22 | 2022-12-29 | The Research Foundation For The State University Of New York | Compositions and methods for use in type 1 diabetes |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5542935A (en) * | 1989-12-22 | 1996-08-06 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Therapeutic delivery systems related applications |
| WO1998010748A1 (en) * | 1996-09-13 | 1998-03-19 | The School Of Pharmacy | Liposomes |
| CA2319928A1 (en) * | 2000-09-18 | 2002-03-18 | Vasogen Ireland Limited | Apoptosis-mimicking synthetic entities and use thereof in medical treatments |
| EP1547581A1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-06-29 | Vectron Therapeutics AG | Liposomal vaccine for the treatment of human hematological malignancies |
| JP4889485B2 (ja) * | 2004-06-11 | 2012-03-07 | 独立行政法人理化学研究所 | 調節性細胞リガンドをリポソームに含有させてなる医薬 |
| CN101588813A (zh) * | 2005-04-12 | 2009-11-25 | 杜克大学 | 诱导人类免疫缺陷病毒的中和抗体的方法 |
| WO2007014754A1 (en) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | I.D.M. Immuno-Designed Molecules | Process for the preparation of liposomal formulations |
| JP2011500569A (ja) * | 2007-10-12 | 2011-01-06 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | ワクチンナノテクノロジー |
| US20110111395A1 (en) * | 2008-02-14 | 2011-05-12 | Jean-Marie Saint-Remy | Cd4+cells with cytolytic properties |
| CN101502649B (zh) * | 2008-06-23 | 2011-11-30 | 深圳职业技术学院 | 一种脂质体流感疫苗 |
| WO2011005850A1 (en) * | 2009-07-07 | 2011-01-13 | The Research Foundation Of State University Of New York | Lipidic compositions for induction of immune tolerance |
| ES2634669T3 (es) * | 2011-02-08 | 2017-09-28 | Halozyme, Inc. | Composición y formulación lipídica de una enzima de degradación de hialuronano y uso de la misma para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata |
| EA027410B1 (ru) * | 2011-04-29 | 2017-07-31 | Селекта Байосайенсиз, Инк. | Наноносители, вызывающие иммунную толерантность, для снижения ответной реакции цитотоксических t-лимфоцитов |
| WO2013184976A2 (en) * | 2012-06-06 | 2013-12-12 | Northwestern University | Compositions and methods for antigen-specific tolerance |
| TR201807778T4 (tr) * | 2014-01-17 | 2018-06-21 | Fundacio Inst Catala De Nanociencia I Nanotecnologia | Lipozom bazlı immünoterapi. |
-
2015
- 2015-01-16 TR TR2018/07778T patent/TR201807778T4/tr unknown
- 2015-01-16 CN CN201580007978.3A patent/CN106061502B/zh active Active
- 2015-01-16 EP EP15700478.9A patent/EP3094345B1/en active Active
- 2015-01-16 MX MX2016009217A patent/MX2016009217A/es active IP Right Grant
- 2015-01-16 US US15/111,466 patent/US20160338953A1/en active Pending
- 2015-01-16 CA CA2939435A patent/CA2939435C/en active Active
- 2015-01-16 WO PCT/EP2015/050747 patent/WO2015107140A1/en active Application Filing
- 2015-01-16 BR BR112016016356-7A patent/BR112016016356B1/pt active IP Right Grant
- 2015-01-16 ES ES15700478.9T patent/ES2672247T3/es active Active
- 2015-01-16 PL PL15700478T patent/PL3094345T3/pl unknown
- 2015-01-16 AU AU2015206016A patent/AU2015206016B2/en active Active
- 2015-01-16 JP JP2016564400A patent/JP6546195B2/ja active Active
-
2019
- 2019-06-20 JP JP2019114294A patent/JP2019196363A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112016016356A2 (pt) | 2017-10-03 |
| PL3094345T3 (pl) | 2018-11-30 |
| CN106061502A (zh) | 2016-10-26 |
| EP3094345B1 (en) | 2018-03-14 |
| ES2672247T3 (es) | 2018-06-13 |
| CN106061502B (zh) | 2021-04-13 |
| CA2939435C (en) | 2023-09-19 |
| EP3094345A1 (en) | 2016-11-23 |
| BR112016016356B1 (pt) | 2023-12-26 |
| MX2016009217A (es) | 2017-05-12 |
| CA2939435A1 (en) | 2015-07-23 |
| WO2015107140A1 (en) | 2015-07-23 |
| JP2019196363A (ja) | 2019-11-14 |
| JP2017507171A (ja) | 2017-03-16 |
| JP6546195B2 (ja) | 2019-07-17 |
| AU2015206016B2 (en) | 2020-07-23 |
| US20160338953A1 (en) | 2016-11-24 |
| AU2015206016A1 (en) | 2016-08-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pujol-Autonell et al. | Use of autoantigen-loaded phosphatidylserine-liposomes to arrest autoimmunity in type 1 diabetes | |
| TR201807778T4 (tr) | Lipozom bazlı immünoterapi. | |
| Pujol-Autonell et al. | Liposome-based immunotherapy against autoimmune diseases: therapeutic effect on multiple sclerosis | |
| US20210353770A1 (en) | Delivery of Urea to Cells of the Macula and Retina Using Liposome Constructs | |
| Passerini et al. | Induction of antigen-specific tolerance in T cell mediated diseases | |
| Shi et al. | Targeted regulation of lymphocytic ER stress response with an overall immunosuppression to alleviate allograft rejection | |
| Chen et al. | An IL‐12‐Based Nanocytokine Safely Potentiates Anticancer Immunity through Spatiotemporal Control of Inflammation to Eradicate Advanced Cold Tumors | |
| EP3049103B1 (en) | Compositions and methods for reducing antigen-specific immunogenicity | |
| WO2021231898A2 (en) | Nanoparticle compositions and uses thereof | |
| Tersey et al. | Amelioration of type 1 diabetes following treatment of non-obese diabetic mice with INGAP and lisofylline | |
| US9821035B2 (en) | Preparation for preventing or treating type I diabetes | |
| US11400131B2 (en) | Multi-peptide composition | |
| Plantinga | Brett E. Phillips 1, Yesica Garciafigueroa 1, Carl Engman 1, Wen Liu 1, 2, Yiwei Wang 2, Robert J. Lakomy 1, Wilson S. Meng 2, 3, Massimo Trucco 1 and Nick Giannoukakis | |
| Gammon | Controlled delivery of a glutamate receptor modulator to promote regulatory T cells and restrain autoimmunity |