RU2000131186A - Связывающие молекулы, происходящие от иммуноглобулинов, которые не стимулируют лизис, опосредованный комплементом - Google Patents

Claims (1)

1. Связывающая молекула, которая представляет собой полипептид, содержащий: (i) связывающий домен, способный связываться с молекулой-мишенью, и эффекторный домен, имеющий аминокислотную последовательность, в основном, гомологичную всему константному домену тяжелой цепи иммуноглобулина человека или его части; где указанная связывающая молекула способна связываться с молекулой-мишенью, не стимулируя при этом значительного комплемент-зависимого лизиса или клеточно-опосредованной деструкции мишени, и отличающаяся тем, что указанный эффекторный домен - обладает способностью специфически связываться с FcRn и/или FcγRIIb, и представляет собой химерный эффекторный домен, который происходит от доменов С_н2 тяжелой цепи двух или более иммуноглобулинов человека, включая домен С_н2 тяжелой цепи первого иммуноглобулина человека, в котором 2, 3 или 4 аминокислоты, по крайней мере, в 1 области домена С_н2, были заменены на соответствующие аминокислоты домена С_н2 тяжелой цепи второго, другого иммуноглобулина человека, где указанную область выбирают из 2 дискретных областей, определяемых остатками 233-236 и 327-331 в соответствии с системой нумерации EU, и где, в каждом случае, иммуноглобулин человека выбирают из IgG1, IgG2 и IgG4.

2. Связывающая молекула по п. 1, где указанный первый иммуноглобулин человека выбирают из IgG1, IgG2 и IgG4, а указанный второй иммуноглобулин человека выбирают из IgG2 и IgG4.

3. Связывающая молекула по п. 1 или 2, где 2 аминокислоты в 1 области домена С_н2 заменены на соответствующие аминокислоты домена С_н2 тяжелой цепи второго иммуноглобулина человека.

4. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где, по крайней мере, 2 аминокислоты в каждой из 2 дискретных областей домена С_н2 заменены на соответствующие аминокислоты в соответствующей области домена С_н2 тяжелой цепи второго и третьего иммуноглобулина человека, соответственно.

5. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где указанный эффекторный домен имеет последовательность, которая, по крайней мере, примерно на 90% идентична последовательности домена С_н2 тяжелой цепи первого иммуноглобулина человека.

6. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, включающая домен С_н2 тяжелой цепи иммуноглобулина человека, имеющий одну или несколько из нижеследующих аминокислот или делеций в соответствующих положениях, пронумерованных в соответствии с системой нумерации EU:
Положение - Аминокислота
233 - Р
234 - V
235 - А
236 - (остаток отсутствует) или G
327 - G
330 - S
331 - S
7. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, включающая домен С_н2 тяжелой цепи иммуноглобулина человека, имеющий один или несколько нижеследующих блоков аминокислот или делений в соответствующих положениях, пронумерованных в соответствии с системой нумерации EU: 233P, 234V, 235A и отсутствие остатка в положении 236; или 233P, 234V, 235A и 236G; и/или 327G, 330S и 331S.

8. Связывающая молекула по любому из пп. 5-7, где указанный эффекторный домен выбирают из С1Δаb, С2Δа или GlΔac.

9. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, которая, кроме того, содержит модификации, сообщающие молекуле, в основном, нулевой аллотип.

10. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где указанный эффекторный домен обладает пониженной аффинностью к FcγRI, FcγRIIa или FcγRIII и пониженной способностью опосредовать комплемент-зависимый лизис по сравнению с доменом С_н2 тяжелой цепи первого или второго иммуноглобулина человека.

11. Связывающая молекула по п. 10, где указанный эффекторный домен сохраняет аффинность по отношению к FcγRIIb.
12. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где указанный связывающий домен происходит от другого источника, отличающегося от источника эффекторного домена.

13. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где указанный связывающий домен выбирают из связывающего сайта антитела; фермента; гормона; рецептора; цитокина или антигена; лиганда или адгезивной молекулы.

14. Связывающая молекула по любому из предыдущих пунктов, где указанный связывающий домен способен связываться с любой из следующих молекул: с антигеном RhD эритроцитов; аллоантигеном НРА тромбоцитов; нейтрофильным антигеном; Т-клеточным рецептором; интегрином; коллагеном GMB; Der P1; НРА-la; VAP-1; ламинином; лютераном; гликопротеином VI тромбоцитов; гликопротеином Ia/IIa тромбоцитов.

15. Связывающая молекула по п. 14, где указанный связывающий домен выбирают из САМРАТН-1 и FOG1; ОКТ3; В2 (антитела против HPA-la); VAP-1; мышиного антитела NC1 против α3 (IV); YTH12,5 (CD3); 2С7 (антитела против Der р I); антитела против ламинина; антитела против лютерана.

16. Выделенная нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую эффекторный домен связывающей молекулы по любому из предыдущих пунктов.

17. Нуклеиновая кислота по п. 16, где указанная нуклеотидная последовательность кодирует связывающую молекулу по любому из предыдущих пунктов.

18. Нуклеиновая кислота по п. 16 или 17, которая представляет собой реплицируемый вектор.

19. Нуклеиновая кислота по п. 18, где указанная нуклеотидная последовательность операбельно связана с промотором.

20. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п. 18 или 19, или трансформированная этим вектором.

21. Способ получения связывающей молекулы по любому из пп. 1-15, предусматривающий проведение стадии модификации нуклеотидной последовательности, кодирующей домен С_н2 тяжелой цепи первого иммуноглобулина человека, так, чтобы 2, 3 или 4 аминокислоты, по крайней мере, в 1 области указанного домена С_н2 соответствовали аминокислоте домена С_н2 тяжелой цепи второго иммуноглобулина человека, где указанные области выбирают из 2 дискретных областей, определяемых остатками 233-236 и 327-331, пронумерованными в соответствии с системой нумерации EU, и где, в каждом случае, указанный иммуноглобулин человека выбирают из IgG1, IgG2 и IgG4.

22. Способ по п. 21, где 2 аминокислоты в 1 области домена С_н2 модифицированы так, что они соответствуют аминокислотам домена С_н2 тяжелой цепи второго иммуноглобулина человека.

23. Способ связывания молекулы-мишени, где способ включает использование связывающей молекулы или нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-19.

24. Способ по п. 23, где молекулой-мишенью является FcγRIIb, связывание с которой приводит к ингибированию одного или нескольких эффектов: активации В-клеток; дегрануляции тучных клеток; фагоцитоза.

25. Способ по п. 24 для предупреждения, ингибирования или иного предотвращения каким-либо другим способом связывания второй связывающей молекулы с указанной молекулой-мишенью.

26. Способ по п. 25, где второй связывающей молекулой является антитело.

27. Способ по п. 25 или 26, где молекулу-мишень выбирают из: антигена RhD эритроцитов; аллоантигена НРА тромбоцитов; нейтрофильного антигена; Т-клеточного рецептора; интегрина; коллагена ГБМ; Der P1; HPA-la; VAP-1; ламинина; лютерана; гликопротеина VI тромбоцитов; гликопротеина Ia/IIa тромбоцитов.

28. Способ по любому из пп. 24-27 для лечения пациента от расстройств, выбранных из: реакции "трансплантат против хозяина"; реакции "хозяин против трансплантата"; отторжения трансплантированного органа; отторжения трансплантированного костного мозга; аутоиммунных заболеваний, таких как васкулиты, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунная тромбоцитопения и артрит; аллоиммунных заболеваний, таких как аллоиммунная тромбоцитопения плода/новорожденных; астмы и аллергии; хронических или острых воспалительных заболеваний, таких как болезнь Крона; гемолитической болезни новорожденных; болезни Гудпасчера, серповидно-клеточной анемии, окклюзии коронарной артерии.

29. Способ по любому из пп. 23-28, где связывающую молекулу вводят пациенту, или необязательно, в том случае, когда этим пациентом является неродившийся ребенок, матери этого ребенка.

30. Фармацевтический препарат, содержащий связывающую молекулу по любому из пп. 1-15, или нуклеиновую кислоту по любому из пп. 17-19, а также фармацевтически приемлемый носитель.

31. Олигонуклеотид, выбранный из:
М022ВАСК: 5' ТСТ ССА АСА AAG GCC TCC CGT ССТ ССА TCG AGA ААА 3'
М022: 5' ТТТ ТСТ CGA TGG AGG ACG GGA GGC CTT TGT TGG AGA 3'.

М07ВАСК: 5' TCC TCA GCA ССТ ССА GTC GCG GGG GGA CCG TCA GTC 3'
M021: 5' GAC TGA CGG TCC CGC GAC TGG AGG TGC TGA GGA 3'.