TWI736754B - 含有植物萃取物之組成物其於促進膠原蛋白增生之用途 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種含有植物萃取物之組成物其於促進膠原蛋白增生之用途，相較於單一成分的萃取物，本發明之萃取物組合能夠有效提升膠原蛋白增生的作用。構成所述組成物之萃取物或組分可包括：葡萄籽、紅茶、綠茶、紅酒、柑橘、菠菜、青咖啡豆、藍莓、普洱茶、或四季春茶的萃取物。

Description

含有植物萃取物之組成物其於促進膠原蛋白增生之用途
本發明係關於一種含有植物萃取物之組成物的用途，尤其是關於一種含有植物萃取物之組成物其於促進膠原蛋白增生之用途。
膠原蛋白是動物體內最主要的一種結構性蛋白質，為細胞外間質及結締組織主要的成分，其廣泛存在於肌腱、骨骼、皮膚及眼角膜等組織中，是動物體內含量最多之蛋白質，約占動物體總蛋白質量的20%~30%及身體總重之6%。
在有充足蛋白質營養及維生素C的情況下，人體能自行合成膠原蛋白，然而隨著年齡增長，膠原蛋白的合成速率減慢且流失率增加，則會產生許多膠原蛋白流失所致之問題，例如皮膚鬆垮或關節容易磨損等。
因此，若能適當提升體內膠原蛋白的分泌量，可使皮膚保持彈性，減緩皺紋的形成，亦能增加關節強度與靈活度，減緩關節磨損及老化的發生。然而，目前可利用於促進膠原蛋白分泌量增加之成分或藥物有限，若為某種植物萃取物，其必須施予相當高的劑量，在使用成本上以及效果上有其侷限，因此，若能施予多種萃取物的少量組分，即可產生單一成分之高劑量效果時，對於前述功效之運用，不但可大幅提升，也同時降低了使用成本。
緣此，本發明之一目的在提供一種促進膠原蛋白增生之組成物，係選自於由紅酒萃取物與藍莓萃取物、柑橘萃取物與藍莓萃取物、柑橘萃取物與四季春茶萃取物、菠菜萃取物與紅茶萃取物、菠菜萃取物與綠茶萃取物、青咖啡萃取物與藍莓萃取物、及青咖啡萃取物與普洱茶萃取物所組成群組中至少任一組之組合所組成。
本發明之一實施例中，該組成物係由下列任一組合所組成：至少0.003906mg/ml之青咖啡萃取物，及至少0.003906mg/ml之藍莓萃取物；至少0.015625mg/ml之青咖啡萃取物，及至少0.015625mg/mL之普洱茶取物；至少0.125mg/ml之藍莓萃取物，及至少0.125mg/ml之紅酒萃取物；至少0.25mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.25mg/ml之綠茶萃取物；至少0.5mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.5mg/ml紅茶萃取物；至少0.5mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.5mg/ml之四季春茶萃取物；或至少4mg/ml柑橘萃取物，及至少4mg/ml之藍莓萃取物。
本發明之又一目的在提供一種促進膠原蛋白增生之醫藥組成物，包含前述組成物，及一藥學上可接受之載劑。
本發明之又一目的在提供一種前述醫藥組成物的用途，且該組成物係用於促進膠原蛋白增生。
本發明之又一目的在提供一種如前述醫藥組成物的用途，且該組成物係用於製備促進膠原蛋白增生之醫藥組成物，該醫藥組成物之劑型係溶液、膠囊或錠劑。
本發明之又一目的在提供一種促進膠原蛋白增生之食品產品，包括如前述組成物，以及一食品成分，該食品成分係一般食品、保健食品、膳食補充品或飲品之成分。
本發明之另一目的在提供一種如前述食品產品的用途，且該組成物係用於製備促進膠原蛋白增生之食品產品。
本發明之含有植物萃取物的組成物及其於促進膠原蛋白增生的用途能有效促進膠原蛋白的增生率，並具有增強皮膚彈性及降低皺紋形成，與改善關節的強度及靈活度的效力。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明，並非用以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1係為本發明之各植物萃取組成物的膠原蛋白增生率的長條圖。
實施例1 植物萃取物的製備方法 實施例1-1 本發明四季春茶萃取物的製備方法
四季春茶(Four Seasons Spring tea)萃取物之製備方法如下：首先，將四季春茶葉(Leaves of Four Seasons Spring tea plant)洗淨並進行乾燥，再以粉碎機將四季春茶葉進行粗碎，接著以水為溶劑對四季春茶葉之粗碎物進行萃取，該溶劑與四季春茶葉粗碎物以液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為50℃~100℃，較佳為75℃~95℃，萃取時間約為0.5~3小時，得到四季春茶之粗萃取物，將該粗萃取物冷卻至室溫後，經由400目之濾網過濾以移除殘餘固體物，再進一步於45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物，即為本發明之四季春茶萃取物。
實施例1-2 本發明綠茶萃取物的製備方法
綠茶(Green tea)萃取物之製備方法如下：首先，將綠茶茶葉(Unfermented leaves of Camellia sinensis)洗淨並進行乾燥，再以粉碎機將綠茶茶 葉進行粗碎，接著以水為溶劑對綠茶葉之粗碎物進行萃取，該溶劑與綠茶葉粗碎物以液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為50℃~100℃，較佳為75℃~95℃，萃取時間約為0.5~3小時，得到綠茶之粗萃取物，將該粗萃取物冷卻至室溫後，經由400目之濾網過濾以移除殘餘固體物，再進一步於45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物，即為本發明之綠茶萃取物。
實施例1-3 本發明紅茶萃取物的製備方法
紅茶(Black tea)萃取物之製備方法如下：首先，將紅茶茶葉(Fermented leaves of Camellia sinensis)洗淨並進行乾燥，再以粉碎機將紅茶茶葉進行粗碎，接著以水為溶劑對紅茶葉粗碎物進行萃取，該溶劑與紅茶葉粗碎物以液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為50℃~100℃，較佳為75℃~95℃，萃取時間約為0.5~3小時，得到紅茶之粗萃取物，將該粗萃取物冷卻至室溫後，經由400目(mesh)之濾網過濾以移除殘餘固體物，再進一步於45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物，即為本發明之紅茶萃取物。
實施例1-4 本發明菠菜萃取物的製備方法
菠菜萃取物係對菠菜(Spinacia oleracea)進行萃取而獲得，本實施例中使用之菠菜萃取物係購自弘祥農產加工廠。
實施例1-5 本發明紅酒萃取物的製備方法
紅酒萃取物係對紅葡萄酒進行萃取而獲得，本實施例中使用之紅酒萃取物係購自上海博優堂生物技術有限公司。
實施例1-6 本發明柑橘萃取物的製備方法
柑橘萃取物係對柑橘(Citrus reticulata)果實進行萃取而獲得，本實施例中使用之柑橘萃取物係購自羅頓貿易有限公司。
實施例1-7 本發明青咖啡萃取物的製備方法
青咖啡豆萃取物係對未經烘焙的咖啡屬植物(Coffea spp.)種子進行萃取而獲得，本實施例中使用之青咖啡豆萃取物係購自ARJUNA NATURAL EXTRACTS有限公司(印度)。
實施例1-8 本發明藍莓萃取物的製備方法
藍莓萃取物係對北美藍莓(Vaccinium Cyanococcus)果實進行萃取而獲得，本實施例中使用之藍莓萃取物係購自元弘草本科研有限公司。
實施例1-9 本發明普洱茶萃取物的製備方法
普洱茶(Puerh tea)萃取物係對普洱茶茶葉(Post-fermented leaves of Camellia sinensis)進行萃取而獲得，本實施例中使用之普洱茶萃取物係購自南京澤朗生物科技有限公司。
實施例1-10 本發明葡萄籽萃取物的製備方法
本實施例中使用之葡萄籽萃取物係購自誠鴻生物科技有限公司。
實施例2 本發明植物萃取物及其組成物促進纖維細胞增生膠原蛋白之效果
本發明以人類皮膚纖維母細胞(Human skin fibroblast,CCD-966sk)進行膠原蛋白增生之分析。該人類皮膚纖維母細胞購自食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(台灣)編號為BCRC 60153，將該細胞培養於含有10%之胎牛血清(Fetal Bovine Serum)以及90%之Minimum Essential Medium(MEM)的培養液(購自Gibco，美國)，其中含有1mM之丙酮酸鈉(Sodium pyruvate)以及1%之青黴素(Penicillins)或鏈黴素(Streptomycin)。
首先，將2×104個人類皮膚纖維母細胞種植於含500μL之上述培養液之24孔培養盤中，並於37℃培養24小時後，以磷酸鹽緩衝溶液(Phosphate buffered saline,PBS)在不擾動細胞之情況下沖洗細胞，接著將細胞分成21組並分別加入溶於500μL不含胎牛血清之MEM：(1)0.003906mg/mL之青咖啡豆萃取物、(2)0.007813mg/mL之四季春茶萃取物、(3)0.5mg/mL之四季春茶萃取物、 (4)0.125mg/mL之藍莓萃取物、(5)4mg/mL之藍莓萃取物、(6)0.125mg/mL之紅酒萃取物、(7)0.25mg/mL之紅酒萃取物、(8)0.25mg/mL之菠菜萃取物、(9)0.5mg/mL之菠菜萃取物、(10)0.5mg/mL之柑橘萃取物、(11)4mg/mL之柑橘萃取物、(12)0.003906mg/mL之葡萄籽萃取物、(13)0.5mg/mL之紅茶萃取物、(14)4mg/mL之菠菜萃取物與藍莓萃取物之組成物、(15)0.003906mg/mL之以1：1比例混合的青咖啡豆萃取物與藍莓萃取物的組成物、(16)0.015625mg/mL之以1：1比例混合的青咖啡豆萃取物與普洱茶萃取物的組成物、(17)0.125mg/mL之以1：1比例混合的藍莓萃取物與紅酒萃取物之組成物、(18)0.25mg/mL之以1：1比例混合的菜萃取物與綠茶萃取物之組成物、(19)0.5mg/mL之以1：1比例混合的菠菜萃取物與紅茶萃取物之組成物、(20)0.5mg/mL之以1：1比例混合的四季春茶萃取物與柑橘萃取物之組成物、及(21)4mg/mL之柑橘萃取物與藍莓萃取物之組成物，並以沒有加入任何萃取物之組別為空白控制組，以及僅含有培養液不含細胞之組別以作為後續讀取吸光值之背景值，於37℃培養48小時後，在不擾動細胞之情況下，每組細胞收集1mL之培養液，並置於1.5mL離心管中，以可溶性膠原蛋白分析套組(SircolTM Soluble Collagen Assay kit,Bicolor Life Science Assays,Notherm Ireland，英國)，檢測皮膚纖維母細胞分泌之膠原蛋白量，首先加入200μL之膠原蛋白分離與濃縮試劑(collagen isolation & concentration reagent)並上下倒置以混合均勻，接著將離心管於4℃放置16-18小時，時間到後取出，避免搖晃到管身，並在4℃下以12000rpm離心十分鐘，離心後小心地移除1mL之上清液，再加入1mL之Sircol染劑(Sircol dye reagent)使膠原蛋白染色，並輕柔地搖晃30分鐘以混合均勻，接著在4℃下以12000rpm離心十分鐘後移除上清液，再加入750μL酸性鹽清洗劑(Acid-salt washing reagent)，以將多餘的染劑清洗掉，並在4℃下以12000rpm離心十分鐘後移除上清液，並小心地以棉球將殘留於管壁及蓋子的液體移除，接著加入250μL之強鹼試劑(alkali reagent)並以試管震盪器使膠原蛋白均勻溶解，最後以酵素免疫分析儀測量此21組及空白控制組之產物於555nm之吸光值，並於扣除背景值後，計算該21組之讀值與空白控制組之差異的百分比，再以Excel軟體進行student t-test以決定變異係數與是否在統計上具有顯著差異(*p值<0.05；**p值<0.01；***p值<0.001)。
本發明實施例之各植物萃取組成物的膠原蛋白增生率如表1及圖1所示，百分比越高代表促進膠原蛋白增生的能力越好。根據表1及圖1，相對於空白控制組，青咖啡豆萃取物、0.125mg/mL之藍莓萃取物、菠菜萃取物、0.5mg/mL之柑橘萃取物、及0.5mg/mL之紅茶萃取物無法顯著促進膠原蛋白的增生，其中有些處理甚至會顯著降低膠原蛋白的增生率，例如青咖啡豆萃取物、0.125mg/mL之藍莓萃取物、0.25mg/mL菠菜萃取物、0.5mg/mL之柑橘萃取物、及0.5mg/mL之紅茶萃取物(請參見比較組)。然而除了菠菜萃取物與藍莓萃取物之組成物之外，青咖啡豆萃取物與藍莓萃取物的組成物、青咖啡豆萃取物與普洱茶萃取物的組成物、紅酒萃取物與藍莓萃取物之組成物、菠菜萃取物與綠茶萃取物之組成物、菠菜萃取物與紅茶萃取物之組成物、柑橘萃取物與四季春茶萃取物之組成物、及柑橘萃取物與藍莓萃取物之組成物之膠原蛋白增生率(請參見實驗組)，皆比相同濃度之單方植物萃取物有較高之膠原蛋白增生率，此結果顯示具有上列特定組合的組成物皆意外地較單一組分簡單相加表現出更高的促進膠原蛋白增生能力，且並非隨意之組合皆能達到此效果。
Figure 107111683-A0305-02-0009-1
綜上所述，本發明之組成物藉由混合特定植物萃取物或混合特定植物萃取物與源自植物的化合物，能顯著提升促進膠原蛋白增生之能力。因此，可利用該些組成物製備相關的醫藥或食品組成物，使施用者或食用者在可增強皮膚彈性及降低皺紋形成，與改善關節的強度及靈活度。
此外，該組成物亦可進一步添加於食品、保健食品、膳食補充品或飲品中。將本發明實施例之促進膠原蛋白增生之組成物製備為醫藥組成物時，該醫藥組成物亦可進一步加入所屬技術領域所熟知之載劑或其他輔劑。醫藥組成物之劑型，可為但不限於溶液、膠囊、或錠劑。

Claims (3)

  1. 一種植物萃取物用於製備一促進膠原蛋白增生之組成物的用途，其中該植物萃取物是柑橘萃取物與藍莓萃取物且柑橘萃取物與藍莓萃取物間之濃度比例為1：1，其中所述柑橘萃取物係購自羅頓貿易有限公司，所述藍莓萃取物係購自元弘草本科研有限公司。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該植物萃取物是4mg/ml柑橘萃取物與4mg/ml藍莓萃取物。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該組成物是一食品產品，該食品產品包括一食品成分，該食品成分係一般食品、保健食品、膳食補充品或飲品之成分。
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