ES2924075T3 - Utilización de extractos de plantas en la preparación de una composición para la hidratación de la piel - Google Patents
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Abstract
La presente invención proporciona un método de una composición que contiene extractos de plantas para mejorar el nivel de expresión génica de TGM1, KRT, AQP3, FLG, GBA y HAS. En comparación con un solo extracto de plantas, la combinación de los extractos de plantas de la presente invención puede mejorar el nivel de expresión de los genes hidratantes de la piel. Los extractos de plantas que constituyen la composición incluyen: un extracto de espinaca, arándano, té Pu-erh o té Four Seasons Spring. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Utilización de extractos de plantas en la preparación de una composición para la hidratación de la piel
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
1. Campo de la invención
La presente invención se refiere a una composición que contiene extractos de plantas y su método no terapéutico, y más particularmente al método no terapéutico de la composición que contiene extractos de plantas para promover la hidratación de la piel.
2. Técnica anterior
La capa de la epidermis es la capa más externa de la piel y está formada por el estrato córneo, la capa granular, la capa espinosa y la capa basal que están dispuestas de manera secuencial desde el exterior hacia el interior. La capa epidérmica está formada principalmente por la diferenciación de queratinocitos cilíndricos indiferenciados en la capa basal y el proceso se denomina queratinización. El contenido de agua en los queratinocitos es alto y, a medida que las células se metabolizan y se diferencian, la forma de los queratinocitos se volverá gradualmente plana, y el núcleo y los orgánulos comenzarán a degenerar y encogerse, y se formarán células muertas sin núcleo y orgánulos en el estrato córneo. La función principal de la capa de la epidermis es mantener la hidratación de la piel y formar una barrera cutánea para resistir diversas lesiones externas. La capa más externa de la capa de la epidermis se compone de una membrana de sebo débilmente ácida y un estrato córneo como por ejemplo una estructura de pared de ladrillo, que puede bloquear la humedad y la grasa de la piel, resistir la invasión de bacterias en la superficie de la piel y resistir objetos extraños externos y la luz ultravioleta, que tiene un efecto protector muy importante sobre el cuerpo humano.
En el estrato córneo de la capa de la epidermis, aunque los queratinocitos son células muertas, el componente principal es la queratina, que puede absorber la humedad para mantener la piel húmeda, y los queratinocitos también secretan sustancias como por ejemplo el ácido hialurónico como células intersticiales para mantener la integridad estructural de la barrera epidérmica de la piel con el fin de evitar la pérdida de agua de la piel y formar una protección completa. Cuando la piel se expone a condiciones excesivas de frío o calor y a la luz ultravioleta, hará que los queratinocitos no puedan mantener los ciclos metabólicos normales y dañen la barrera epidérmica de la piel, y a continuación harán que la piel se vuelva áspera, seca y descamada, frágil y susceptible a la irritación, con enrojecimiento sensible y también se reduce la capacidad de hidratación de la piel, por lo que la salud del estrato córneo es muy importante para hidratar la piel y resistir el daño externo.
En resumen, para resolver el problema de la fragilidad, la sensibilidad y la reducción de la capacidad de hidratación de la piel causada por el daño del estrato córneo, es necesario desarrollar una composición que pueda mantener eficazmente la disposición de los queratinocitos, mantener la integridad del estrato córneo, y permitir que los queratinocitos secreten más factores humectantes con el fin de mejorar la barrera y la función humectante de la piel.
Sin embargo, los ingredientes o fármacos utilizados actualmente para este fin son limitados. Si se trata de un determinado extracto de planta, debe administrarse en una dosis relativamente alta y, por lo tanto, existen limitaciones en el costo de uso y efecto. Por lo tanto, si se puede administrar una composición que contiene una pluralidad de extractos de plantas con una pequeña cantidad de cada componente para producir un efecto similar cuando se administra una dosis alta de un solo componente, se puede mejorar mucho el uso de los efectos anteriormente mencionados, y al mismo tiempo, se puede reducir el costo de utilización.
Por ejemplo, en DATABASE GNPD [Online] (MINTEL; 1 de diciembre de 2016 (2016-12-01)), anónimo: "Cream", XP055733342, obtenido de www.gnpd.com, número de acceso a la base de datos. 4459439, se proporciona una crema hidratante para la piel y potenciadora del colágeno que contiene extracto de té verde, arándanos y espinacas.
RESUMEN DE LA INVENCIÓN
Para resolver el problema anterior, un objetivo de la presente invención es proporcionar un método no terapéutico con el fin de promover la hidratación de la piel en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto que lo necesita una composición que comprende una cantidad efectiva de un extracto de planta; en que el extracto de plantas comprende al menos una combinación seleccionada del grupo que consiste en un extracto de té Pu-erh y un extracto de arándano, un extracto de té Pu-erh y un extracto de espinaca, un extracto de té Cuatro estaciones Primavera y un extracto de arándano, y un Extracto de té Cuatro estaciones Primavera y extracto de espinaca.
En una forma de realización de la presente invención, la composición potencia la expresión de los genes de transglutaminasa 1 (TGM1), queratina (KRT), acuaporina 3 (AQP3), filagrina (FLG), glucocerebrosidasa (GBA) y hialurónico sintasa (HAS). En algunas formas de realización, el gen KRT comprende queratina 1 (KRT1), queratina 10 (KRT10) y queratina 14 (KRT14); el gen HAS comprende hialurónico sintasa 2 (HAS2) y hialurónico sintasa 3 (HAS3).
En una forma de realización de la presente invención, el extracto de plantas comprende al menos 0,125 mg/mL del extracto de té Pu-erh y al menos 0,125 mg/mL del extracto de espinaca, al menos 0,125 mg/mL del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y al menos 0,125 mg/mL del extracto de espinaca, al menos 0,25 mg/mL del extracto de té Pu-erh y al menos 0,25 mg/mL del extracto de arándano, o al menos 0,25 mg/mL del extracto de arándano y al menos 0,25 mg/mL del extracto de té Cuatro estaciones Primavera.
En una forma de realización de la presente invención, la composición está en forma de polvo, gránulo, líquido, gel o pasta, y la composición se prepara en forma de producto alimenticio.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Los siguientes dibujos forman parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen aquí para mostrar con mayor detalle algunos aspectos de las formas de realización de la presente descripción, que pueden entenderse mejor con referencia a uno o más de estos dibujos, en combinación con la descripción detallada de las formas de realización aquí presentadas.
La Figura 1 es un diagrama que muestra los resultados de hidratación de diferentes extractos de plantas o combinaciones.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA FORMA DE REALIZACIÓN PREFERENTE
Definición
Tal como se utiliza en este documento, los datos proporcionados representan valores experimentales que pueden variar dentro de un intervalo de ±20 %, preferentemente dentro de ±10 % y más preferentemente dentro de ±5 %.
Ejemplo 1 Preparación de cada extracto de planta
1-1 Preparación de extracto de té Cuatro estaciones Primavera
El extracto de té Cuatro estaciones Primavera se preparó de la siguiente manera: primero, las hojas de la planta de té Cuatro estaciones Primavera se lavaron y secaron, y a continuación se trituró Cuatro estaciones Primavera en forma gruesa con un pulverizador para convertirlo en un material crudo. El material crudo del té Cuatro estaciones Primavera se extrajo utilizando agua como solvente. La relación en peso del disolvente por material crudo fue 5-20: 1-5. La temperatura de extracción fue de 50 a 100 °C, preferentemente de 75 a 95 °C, durante 0,5 a 3 horas para obtener el extracto crudo del té Cuatro estaciones Primavera. Después de la extracción, la extracción bruta se enfrió a temperatura ambiente. La extracción bruta se filtró a través de un filtro de malla 400 para eliminar los sólidos residuales. Además, el filtrado del té Cuatro estaciones Primavera se concentró adicionalmente a presión reducida a 45-70 °C para obtener un producto concentrado y el producto concentrado fue el extracto de té Cuatro estaciones Primavera de la presente invención.
1-2 Preparación del extracto de espinaca
El extracto de espinaca se obtuvo extrayendo espinaca (Spinacia olerácea), y el extracto de espinaca utilizado en el ejemplo se compró en la fábrica de productos agrícolas HONHSIANG.
1-3 Preparación de extracto de arándano
El extracto de arándano se obtuvo extrayendo los frutos de Vaccinium Cyanococcus, y el extracto de arándano utilizado en el ejemplo se adquirió de BIOMED HERBAL RESEARCH CO., LTD.
1-4 Preparación del extracto de té Pu-erh
El extracto de té Pu-erh se obtuvo extrayendo las hojas posfermentadas de Camellia sinensis, y el extracto de té Pu-erh utilizado en el ejemplo se adquirió de Nanjing Zelang Biotechnology Co., Ltd.
Las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos siguientes de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para el diagnóstico).
Ejemplo 2 Efectos de la combinación de los extractos de plantas sobre la mejora del nivel de expresión génica de TGM1, KRT, AQP3, FLG, GBA y HAS
Las formas de realización de la presente descripción realizaron el análisis genético de TGM1, KRT, AQP3, FLG, GBA y HAS mediante queratinocitos epidérmicos primarios humanos (HPEK). Los queratinocitos epidérmicos primarios humanos se adquirieron de CELLnTEC (Suiza) No. HPEK-50, y las células se cultivaron en queratinocitos libres de suero-SFM (Gibco, Inc., #10724-011, EE. UU.).
En primer lugar, se sembraron 1,5 * 105 de HPEK en placas de cultivo de 6 pocillos que contenían 2 ml del medio de cultivo anterior y las células se dividieron en los siguientes 10 grupos con: (1) 0,125 mg/ml del extracto de té Pu-erh , (2) 0,125 mg/mL del extracto de espinaca, (3) 0,125 mg/mL del extracto de té Cuatro estaciones Primavera, (4) 0,125 mg/mL de la combinación del extracto de té Pu-erh y el extracto de espinaca mezclado en una proporción de 1:1, (5) 0,125 mg/mL de la combinación del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y el extracto de espinaca mezclado en una proporción de 1:1, (6) 0,25 mg/mL del extracto de té Pu-erh, (7) 0,25 mg/mL de extracto de arándano, (8) 0,25 mg/mL de extracto de té Cuatro estaciones Primavera, (9) 0,25 mg/mL de la combinación de extracto de té Pu-erh y extracto de arándano mezclado en una proporción de 1:1, y (10) 0,25 mg/mL de la combinación del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y el extracto de arándano mezclado en una proporción de 1:1; en que las células tratadas sin ningún extracto eran como el grupo de control en blanco. Después de añadir los extractos de plantas de los grupos anteriores, las células fueron estimuladas por cada grupo de extractos de plantas a 37 °C. El medio de cultivo de cada grupo se cambió por uno fresco añadido a cada grupo de los extractos de plantas específicos después de 6 y 24 horas de cultivo respectivamente. A continuación, las células se lisaron con tampón de lisis y luego se recogieron los ARN totales de las células de cada uno de los diez grupos mediante el kit de extracción de ARN (adquirido de Geneaid, Taiwán, lote n.° FC24015-G). Seguidamente, 2000 ng de ARN extraídos se sometieron como molde a la transcripción inversa en los productos de ADNc correspondientes de los ARNm específicos con transcriptasa inversa SuperScript® III (adquirida de Invitrogene, EE. UU., número 18080-051). A continuación, los productos de ADNc de estos 10 grupos se usaron como plantilla y se mezclaron con los cebadores del gen objetivo en la Tabla 1 y el nivel de expresión de ARNm de TGM1, KRT1, KRT10, KRT14, AQP3, FLG, GBA, HAS2 y HAS3 de cada grupo se cuantificó mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR) con el sistema ABI StepOnePlus™ Real-Time PCR (Thermo Fisher Scientific, EE. UU.) y los kits kApA SYBR® FAST qPCR (adquiridos en Sigma, EE.UU. N°38220000000) en el que las condiciones de PCR se realizaron tal como se describe a continuación: 40 ciclos de PCR de 95 °C durante 1 segundo y 60 °C durante 20 segundos, en que, el valor cuantitativo se tomó del umbral del ciclo (Ct), y la cantidad relativa de ARNm del gen diana se derivó de la Ecuación 2 'ñCt, en la que ACt=Ct gen objetivo - CtACTB (p-actina). A continuación, se utilizó el método SCORE para cuantificar los resultados de cada nivel de expresión génica en los diez grupos anteriores. Los resultados de cada gen se sumaron como los resultados de hidratación de cada grupo, calculándose el método SCORE utilizando el umbral de bucle del gen ACTB y el gen de referencia (el gen correspondiente en el grupo de control en blanco).
Tabla 1 La secuencia del cebador de PCR
Los resultados de humectación de cada combinación de los extractos de plantas de las formas de realización de la presente descripción se muestran en la Tabla 2 y la FIG. 1; en que, cuanto más altos sean los resultados de hidratación, mejor será la promoción de la hidratación de la piel. Estudios previos han indicado que la transglutaminasa 1 (TGM) forma un fuerte vínculo entre la membrana celular de los queratinocitos y las proteínas estructurales, y a continuación aumenta la resistencia y estabilidad de la capa epidérmica; la queratina (KRT) forma microfilamentos de queratina, y la filagrina (FLG) ayuda a que los microfilamentos de queratina se unan en una red fuerte que proporciona fuerza y elasticidad a la piel; la acuaporina (AQP) aumenta la permeabilidad del agua en los queratinocitos para aumentar el contenido de agua de los queratinocitos; hialurónico sintasa (HAS) promueve la capacidad de los queratinocitos para secretar ácido hialurónico, y a continuación hace que la estructura del estrato córneo quede intacta y mejora la función de barrera de la piel, lo que puede hacer que la piel retenga la hidratación; y la glucocerebrosidasa (GBA) se asocia con el mantenimiento de la integridad de la estructura de la queratina. Los resultados de hidratación obtenidos al tratar los queratinocitos con 0,125 mg/mL del extracto de té Pu-erh, el extracto de té Cuatro estaciones Primavera y el extracto de espinaca solo fueron 2,16, 4,2 y 2,04, respectivamente. Sin embargo, los resultados de hidratación obtenidos al tratar los queratinocitos con 0.125 mg/mL de la combinación del extracto de té Pu-erh y el extracto de espinaca mezclados en una proporción de 1:1; y con 0.125 mg/mL de la combinación del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y el extracto de espinaca mezclados en una proporción de 1:1 fueron 7.2 y 10.2, respectivamente; los resultados de hidratación obtenidos al tratar los queratinocitos con 0,25 mg/mL del extracto de té Pu-erh, el extracto de té Cuatro estaciones Primavera, y el extracto de arándanos fueron 3,5, 3,8 y 4,7, respectivamente; sin embargo, los resultados de hidratación obtenidos al tratar los queratinocitos con 0.25 mg/mL de la combinación del extracto de té Pu-erh y el extracto de arándano mezclados en una proporción de 1:1; y con 0.25 mg/mL de la combinación del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y el extracto de arándano mezclados en una proporción de 1:1
Claims (9)
1. Un método no terapéutico para promover la hidratación de la piel en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto que lo necesita una composición que comprende una cantidad efectiva de un extracto de planta; en que el extracto de plantas comprende al menos una combinación seleccionada del grupo que consiste en un extracto de té Pu-erh y un extracto de arándano, un extracto de té Pu-erh y un extracto de espinaca, un extracto de té Cuatro estaciones Primavera y un extracto de arándano, y un Extracto de té Cuatro estaciones Primavera y un extracto de espinaca.
2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que la composición mejora la expresión de los genes de transglutaminasa 1 (TGMI), queratina (KRT), acuaporina 3 (AQP3), filagrina (FLG), glucocerebrosidasa (GBA) y hialurónico sintasa (HAS) en el sujeto en necesidad de la misma.
3. El método de acuerdo con la reivindicación 2, en que el gen KRT comprende queratina 1 (KRT1), queratina 10 (KRT10) y queratina 14 (KRT14); y el gen HAS comprende hialurónico sintasa 2 (HAS2) y hialurónico sintasa 3 (HAS3).
4. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que el extracto de plantas comprende al menos 0,125 mg/ml del extracto de té Pu-erh y al menos 0,125 mg/ml del extracto de espinaca.
5. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que el extracto de plantas comprende al menos 0,125 mg/ml del extracto de té Cuatro estaciones Primavera y al menos 0,125 mg/ml del extracto de espinaca.
6. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que el extracto de plantas comprende al menos 0,25 mg/ml del extracto de té Pu-erh y al menos 0,25 mg/ml del extracto de arándano.
7. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que el extracto de plantas comprende al menos 0,25 mg/ml del extracto de arándano y al menos 0,25 mg/ml del extracto de té Cuatro estaciones Primavera.
8. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que la composición está en forma de polvo, gránulo, líquido, gel o pasta.
9. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en que la composición se prepara en forma de producto alimenticio.
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