CZ20022508A3 - Zvýšená produkce lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny ve fermentorech kulturami eukaryotických mikrobů s vysokou hustotou ve fermentorech - Google Patents
Zvýšená produkce lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny ve fermentorech kulturami eukaryotických mikrobů s vysokou hustotou ve fermentorech Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20022508A3 CZ20022508A3 CZ20022508A CZ20022508A CZ20022508A3 CZ 20022508 A3 CZ20022508 A3 CZ 20022508A3 CZ 20022508 A CZ20022508 A CZ 20022508A CZ 20022508 A CZ20022508 A CZ 20022508A CZ 20022508 A3 CZ20022508 A3 CZ 20022508A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- lipids
- microorganisms
- sources
- fermentation
- fermentation medium
- Prior art date
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 129
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 title claims abstract description 41
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 title claims abstract description 41
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 title claims abstract description 41
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 43
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 126
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 114
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 27
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 127
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 127
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 72
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 70
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 67
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 64
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N docosahexaenoic acid Natural products CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims description 48
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 48
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 38
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- -1 polyene fatty acids Chemical class 0.000 claims description 34
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 241000233671 Schizochytrium Species 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 14
- 108010030975 Polyketide Synthases Proteins 0.000 claims description 13
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims description 12
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 12
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 9
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 9
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 8
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241001467333 Thraustochytriaceae Species 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 7
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 6
- 229910004616 Na2MoO4.2H2 O Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 241000080590 Niso Species 0.000 claims description 5
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 claims description 5
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 claims description 5
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 5
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 5
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 4
- 230000005484 gravity Effects 0.000 claims description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 4
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 4
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241001466451 Stramenopiles Species 0.000 claims description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 3
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 3
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 3
- DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=CC(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011572 manganese Substances 0.000 claims description 3
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 claims description 3
- 229940014662 pantothenate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000233675 Thraustochytrium Species 0.000 claims description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 46
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 11
- 208000016444 Benign adult familial myoclonic epilepsy Diseases 0.000 description 10
- 208000016427 familial adult myoclonic epilepsy Diseases 0.000 description 10
- ZGNITFSDLCMLGI-UHFFFAOYSA-N flubendiamide Chemical compound CC1=CC(C(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC(I)=C1C(=O)NC(C)(C)CS(C)(=O)=O ZGNITFSDLCMLGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 9
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- AVKOENOBFIYBSA-WMPRHZDHSA-N (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z)-docosa-4,7,10,13,16-pentaenoic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O AVKOENOBFIYBSA-WMPRHZDHSA-N 0.000 description 6
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000598397 Schizochytrium sp. Species 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 description 5
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 5
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 3
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 3
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 3
- 150000003735 xanthophylls Chemical class 0.000 description 3
- 235000008210 xanthophylls Nutrition 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010039731 Fatty Acid Synthases Proteins 0.000 description 2
- 102000015303 Fatty Acid Synthases Human genes 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241001491678 Ulkenia Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- FAPWYRCQGJNNSJ-CTWWJBIBSA-L calcium;3-[[(2s)-2,4-dihydroxy-3,3-dimethylbutanoyl]amino]propanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(C)(C)[C@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O.OCC(C)(C)[C@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O FAPWYRCQGJNNSJ-CTWWJBIBSA-L 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 2
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 229930001119 polyketide Natural products 0.000 description 2
- 125000000830 polyketide group Chemical group 0.000 description 2
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 150000003669 ubiquinones Chemical class 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000178280 Aureococcus Species 0.000 description 1
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 241000146404 Developayella Species 0.000 description 1
- 241000199914 Dinophyceae Species 0.000 description 1
- 241000989765 Diplophrys Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000224472 Eustigmatophyceae Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- 241001149691 Lipomyces starkeyi Species 0.000 description 1
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000233654 Oomycetes Species 0.000 description 1
- 241001494851 Pelagococcus Species 0.000 description 1
- 241001518925 Raphidophyceae Species 0.000 description 1
- 241000520590 Reticulosphaera Species 0.000 description 1
- 241000223252 Rhodotorula Species 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2,7, Chemical compound [Co+3].N#[C-].C1([C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)[N-]\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-IQFXPAJWSA-L cobalt(3+);[5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2s)-1-[3-[(2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2,7,12,17-tetrahyd Chemical compound [Co+3].N#[C-].C1([C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@H](C)OP([O-])(=O)OC3C(C(OC3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)[N-]\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O FDJOLVPMNUYSCM-IQFXPAJWSA-L 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000011217 control strategy Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 125000004050 enoyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- UKFXDFUAPNAMPJ-UHFFFAOYSA-N ethylmalonic acid Chemical compound CCC(C(O)=O)C(O)=O UKFXDFUAPNAMPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 239000006014 omega-3 oil Substances 0.000 description 1
- 230000008723 osmotic stress Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 235000002378 plant sterols Nutrition 0.000 description 1
- 150000004291 polyenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N sodium oxide Chemical compound [O-2].[Na+].[Na+] KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001948 sodium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- FZUJWWOKDIGOKH-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid hydrochloride Chemical class Cl.OS(O)(=O)=O FZUJWWOKDIGOKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 239000003021 water soluble solvent Substances 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
- A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
- C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Description
Předložený vynález se týká nového způsobu pěstování eukaryotických mikroorganismů a isolování mikrobiálních lipidů. Zvláště se předložený vynález týká výroby mikrobiálních polynenasycených lipidů.
Dosavadní stav techniky
O produkci polyenových mastných kyselin (mastných kyselin obsahujících dvě nebo více nenasycených vazeb mezi atomy uhlíku) v eukaryotických mikroorganismech se předpokládalo, že vyžaduje přítomnost molekulárního kyslíku (tj. aerobní podmínky). Je tomu tak proto, že se předpokládá, že cis dvojná vazba vytvořená v mastných kyselinách všech neparazitických eukaryotických mikroorganismů zahrnuje přímou desaturační reakci závislou na kyslíku (oxidační mikrobiální desaturační systémy). Mezi další eukaryotické mikrobiální lipidy, o kterých je známo, že vyžadují molekulární kyslík, patří houbové a rostlinné steroly, oxykarotenoidy (tj. xanthofyly), ubichinony a sloučeniny vyrobené z jakýchkoliv těchto lipidů (tj. sekundární metaboliíy).
Některé eukaryotické mikroby (jako jsou řasy, houby, včetně kvasinek, a protisti) demonstrovaly, že jsou dobrými producenty polyenových mastných kyselin ve fermentorech. Velmi vysoká hustota kultivace (větší než asi 100 g/l mikrobiální biomasy, zvláště v komerčním měřítku) může vést ke sníženým obsahům polyenových mastných kyselin a tudíž ke snížené produktivitě polyenových mastných kyselin. Tomu může být zčásti kvůli některým faktorům, mezi které patří obtížnost udržování vysokých hladin rozpuštěného kyslíku díky vysokému požadavku na kyslík vzhledem k vysoké koncentraci mikrobů ve fermentační živné půdě. Mezi způsoby pro udržování vyšších hladin rozpuštěného kyslíku patří zvýšení rychlosti provzdušňování
a/nebo používání čistého kyslíku místo vzduchu pro provzdušňování a/nebo zvýšení rychlosti míchání ve fermentoru. Tato řešení obvykle zvyšují cenu výroby lipidů a základní cenu fermentačního zařízení a mohou způsobit další problémy. Například zvýšené provzdušňování může snadno vést k intenzívním pěnícím problémům ve fermentoru při vysoké hustotě buněk a zvýšené míchání může vést k rozbití mikrobiálních buněk díky zvýšeným střihovým silám ve fermentačním živném prostředí (toto způsobí, že lipidy se uvolňují do fermentační živné půdy, kde se mohou být oxidovány aTiebo degradovány enzymy). Mikrobiální rozbíjení buněk je zvýšeným problémem u buněk, které podléhají dusíkovému omezení nebo vymizení, aby se indukovala tvorba lipidů, což vede ke slabším buněčným stěnám.
Výsledkem je to, že jestliže eukaryotické mikroby produkující lipidy rostou ve velmi vysokých koncentracích buněk, jejich lipidy obvykle obsahují pouze velmi malá množství polyenových mastných kyselin. Například kvasinky Lipomyces starkeyi byly nechány růst na hustotu 153 g/l s výslednou koncentrací lipidů 83 g/i po 140 hodinách s použitím alkoholu jako zdroje uhlíku. Přesto obsah polyenových mastných kyselin u kvasinek při koncentraci větší než 100 g/l byl průměrně pouze 4,2 % z celkového množství mastných kyselin (při čemž spadl z vysoké hodnoty 11,5 % z celkového množství mastných kyselin při buněčné hustotě 20 až 30 g/l). Yamauchi a spol.: J. Ferment. Technol. 1983, 61, 275 až 280. To vede ke koncentraci polyenové mastné kyseliny pouze asi 3,5 g/l a průměrné produktivitě polyenových mastných kyselin pouze asi 0,025 g/l/h. Dále pak - jedinou polyenovou mastnou kyselinou popsanou v kvasinkových lipidech byla C18:2.
U jiné kvasinky, Rhodotorula glutinus, bylo ukázáno, že má průměrnou produktivitu lipidů asi 0,49 g/l/h, ale také nízký celkový obsah polyenových kyselin ve svých lipidech (15,8 % z celkového množství mastných kyselin, 14,7 % C18:2 a 1,2 %
C18:3), což znamená produktivitu polyenových mastných kyselin v kultuře s dávkovým napájením pouze asi 0,047 g/l/h a 0,077 g/l/h u kontinuální kultury.
• ·· ♦ * ·· • · · · · · · • · · · · · · ··· • · · · · · · · · ♦ · ···
Jeden z autorů předloženého vynálezu již dříve ukázal, že jisté mořské mikrořasy řádu Thraustochytriales mohou být vynikajícími producenty polyenových mastných kyselin ve fermentorech, zvláště tehdy, jestliže rostou v přítomnosti nízkého množství soli a zvláště při velmi nízkých hladinách chloridů. Jiní autoři popsali Thraustochytridy, které vykazují průměrnou produktivitu polyenových mastných kyselin (DHA, C22:6n=3, a DPA, C22:5n=6) asi 0,158 g/l/h, jestliže vyrostou na buněčnou hustotu 59 g/l během 120 hodin. Tato produktivita však byla dosažena pouze při slanosti asi 50 % hodnoty slanosti mořské vody, koncentrace, která by způsobila vážnou korozi v konvenčních fermentorech z nerezavějící oceli.
Ceny produkovaných mikrobiálních lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny, a zvláště vysoce nenasycené mastné kyseliny, jako je C18:4n-3, C20:4n-6, C20:5n-3, C22:5n-3, C22:5n-6 a C22:6n-3, zůstávaly vysoké zčásti díky omezeným hustotám, při nichž eukaryotické mikroby obsahující vysoké polyenové mastné kyseliny rostly za omezené dostupnosti kyslíku jak při těchto vysokých buněčných koncentracích tak vyšších teplotách potřebných pro dosažení vysoké produktivity.
Existuje tedy potřeba způsobu pěstování mikroorganismů při vysoké koncentraci, která ještě usnadňuje zvýšenou produkci lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny.
Podstata vynálezu
Předložený vynález poskytuje způsob růstu eukaryotických mikroorganismů, které jsou schopny produkovat alespoň asi 20 % jejich biomasy jako lipidy, a způsoby výroby těchto lipidů. S výhodou tyto lipidy obsahují jednu nebo více polyenových mastných kyselin. Podle tohoto způsobu se k fermentačnímu mediu obsahujícímu eukaryotické mikroorganismy přidává zdroj uhlíku, s výhodou nealkoholový zdroj uhlíku, a omezený zdroj živin. S výhodou se zdroj uhlíku a omezený zdroj živin přidává takovou rychlostí, která je postačující pro zvýšení hustoty biomasy fermentačního media na alespoň asi 100 g/l.
Podle jednoho aspektu předloženého vynálezu podmínky fermentace zahrnují stupeň zvýšení hustoty biomasy a stupeň produkce lipidů, přičemž uvedený stupeň zvyšování hustoty biomasy zahrnuje přidání zdroje uhlíku a omezeného zdroje živin, a stupeň produkce lipidů zahrnuje přidání zdroje uhlíku bez přidání omezeného zdroje dusíkatých živin pro to, aby se vytvořily podmínky, které indukují produkci lipidů.
Podle jiného aspektu předloženého vynálezu je množství rozpuštěného kyslíku přítomného ve fermentačním mediu během stupně produkce lipidů nižší než množství rozpuštěného kyslíku přítomného ve fermentačním mediu během stupně zvyšování hustoty biomasy.
Podle ještě jiného aspektu předloženého vynálezu jsou uvedené mikroorganismy vybrány ze skupiny sestávající z řas, hub (včetně kvasinek), protist, bakterií a jejich směsi, přičemž uvedené mikroorganismy jsou schopny produkovat polyenové mastné kyseliny nebo jiné lipidy, o kterých se obecně předpokládá, že pro svoji syntézu vyžadují molekulární kyslík. Zvláště užitečné mikroorganismy podle předloženého vynálezu jsou eukaryotické mikroorganismy, které jsou schopny produkovat lipidy ve fermentačním mediu s množstvím kyslíku asi méně než 3 % z nasycenosti.
Podle ještě jiného aspektu podle předloženého vynálezu se mikroorganismy pěstují dávkovým způsobem.
Podle ještě jiného aspektu podle předloženého vynálezu se udržuje množství kyslíku ve fermentačním mediu během druhém poloviny fermentačního procesu na méně než asi 3 % z hodnoty nasycenosti.
Jiné provedení podle předloženého vynálezu poskytuje způsob výroby eukaryotických mikrobiálních lipidů, který se vyznačuje tím, že zahrnuje následující stupně:
a) ve fermentačním mediu se nechají růst eukaryotické mikroorganismy tak, aby se zvýšila hustota biomasy uvedeného fermentačního media na alespoň asi 100 g/i, re · · · «
b) zajistí se takové fermentační podmínky, které jsou postačující pro to, aby umožnily uvedeným mikroorganismům produkovat uvedené lipidy, a
c) isolují se uvedené lipidy, přičemž více než asi 15 % z uvedeného množství lipidů znamená polynenasycené lipidy.
Jiný aspekt podle předloženého vynálezu poskytuje způsob isolace lipidů, který zahrnuje:
d) odstranění vody z fermentačního media, takže se získají suché mikroorganismy, a
e) isolování uvedených lipidů z uvedených suchých mikroorganismů.
S výhodou stupeň odstraňování vody zahrnuje uvedení fermentačního media do kontaktu přímo s bubnovou sušárnou bez předchozího odstřeďování.
Jiný aspekt podle předloženého vynálezu poskytuje způsob isolace lipidů, který zahrnuje:
d) zpracování fermentační živné půdy tak, aby došlo k permeabilizaci, lyžování nebo prasknutí mikrobiálních buněk, a
e) isolování lipidů z fermentační živné půdy gravitačním dělením, s výhodou odstřeďováním, bez pomoci nebo s pomocí rozpouštědla rozpustného ve vodě, které napomáhá rozbití emulze lipidu ve vodě.
S výhodou se mikrobiální buňky zpracovávají ve stupni ad c) ve fermentoru nebo v podobné nádobě.
Podle dalšího aspektu podle předloženého vynálezu se získává způsob obohacení obsahu polyenové mastné kyseliny v mikroorganismu. Tento způsob zahrnuje fermentaci mikroorganismů v růstovém mediu, které obsahuje rozpuštěný kyslík v množstvím menším než je 10 %.
• · · ·
Dalším aspektem tohoto vynálezu je heterotrofní způsob výroby produktů a mikroorganismů. Tento způsob zahrnuje kultivování mikroorganismů obsahujících polyketidové synthasové geny v růstovém mediu a udržování hladiny rozpuštěného kyslíku v kultuře na méně než asi 10 procentech.
Stručný popis obrázků
Obrázek 1 je tabulka a vynesení různých parametrů produkce lipidů mikroorganismy proti množství kyslíku rozpuštěného ve fermentačním mediu.
Podrobný popis vynálezu
Předložený vynález poskytuje způsob růstu mikroorganismů, jako jsou například řasy, houby (včetně kvasinek), protisti a bakterie. Mikroorganismy jsou s výhodou vybrány ze skupiny sestávající z řas, protist a jejich směsí. Výhodněji mikroorganismy znamenají řasy. Navíc, způsob podle předloženého vynálezu se může používat pro výrobu rozmanitých lipidových sloučenin, zvláště nenasycených lipidů, s výhodou polynenasycených lipidů (tj. lipidů obsahujících alespoň dvě nenasycené vazby atom uhlíku-atom uhlíku, např. dvojné vazby) a výhodněji vysoce nenasycené lipidy (tj. lipidy obsahující 4 nebo více nenasycených vazeb atom uhlíku - atom uhlíku), jako jsou omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, mezi které patří dokosahexenová kyselina (tj. DHE), a další přirozeně se vyskytující nenasycené, polynenasycené a vysoce nenasycené sloučeniny. Mezi pojem lipid, jak je zde používán, patří fosfolipidy, volné mastné kyseliny, estery mastných kyselin, triacylglyceroly, steroly a estery sterolů, karotenoidy, xanthofylly (např. oxykarotenoidy), uhlovodíky, sloučeniny odvozené od isoprenoidů a další lipidy známé odborníkovi z oblasti techniky.
Podrobněji - způsoby podle předloženého vynálezu jsou užitečné při výrobě eukaryotických mikrobiálních polyenových mastných kyselin, karotenoidů, houbových sterolů, fytosterolů, xanthofyllů, ubichinonů a dalších sloučenin odvozených od iso» 9
Ί prenoidů, ο kterých se obecně předpokládá, že vyžadují kyslík pro produkci nenasycených vazeb atom uhlíku - atom uhlíku (tj. aerobní podmínky) a jejich sekundárních metabolitů. Konkrétně - způsoby podle předloženého vynálezu jsou zvláště užitečné při pěstování mikroorganismů, které produkují polyenovou mastnou kyselinu (polyenové mastné kyseliny) a pro výrobu mikrobiální polyenové mastné kyseliny (mikrobiálních polyenových mastných kyselin).
I když se způsoby podle předloženého vynálezu mohou používat pro růst rozmanitých mikroorganismů a pro získání sloučenin obsahujících polynenasycené lipidy produkované těmito mikroorganismy, z důvodů stručnosti, konvence a ilustrace, bude tento detailní popis diskutovat způsob pěstování mikroorganismů, které jsou schopny produkovat lipidy obsahující omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, zvláště mikroorganismů, které jsou schopny produkovat DHA (nebo úzce související sloučeniny, jako je DPA, EPA nebo ARA). Mezi výhodné mikroorganismy patří mikrořasy, houby (včetně kvasinek), protisti a bakterie. Jednu skupinu výhodných mikroorganismů tvoří členové mikrobiální skupiny zvané Stramenopily, mezi které patří mikrořasy a mikroorganismy podobající se řasám. Mezi Stramenopily patří následující skupiny mikroorganismů: Hamatory, Proteromonady, Opaliny, Developayella, Diplophrys, Labrinthulidy, Thraustochytridy, Biosecidy, Oomycety, Hypochytridiomycety, Commation, Reticulosphaera, Pelagomony, Pelagococcus, Ollicola, Aureococcus, Parmaley, Diatomy, Xanthofyty, Phaeofyty (hnědé řasy), Eustigmatofyty, Raphidofýty, Synuridy, Axodiny (včetně Rhizochromulinaales, Perdinellales, Dictyochaley), Chrysomeridaley, Sarcinochrysidaley, Hydruraly, Hubberdialy a Chromulinaley. Mezi další výhodné skupiny mikrořas patří členové zelených řas a dinoflagelát, mezi které patří členové rodu Crypthecodíum. Podrobněji - výhodná provedení podle předloženého vynálezu budou diskutována s ohledem na způsob růstu mořských mikroorganismů, zvláště řas, jako jsou Thraustochytridy řády Thraustochytriales, podrobněji Thraustochytriales rodu Thraustochytrales a Schizochytrium, včetně Thraustochytriales, které jsou obecně popsány v USA patentech č. 5 340 594 a 5 340 742, oba Barclayho, které jsou zde zahrnuty celé jako odkazy. Je třeba poznamenat, že mnoho odborníků souhlasí s tím, že Ulkenia není jiný rod, ale že ve skutečnosti je částí rodu Schyzochytrium. Pojem rod Schyzochytríum, jak se zde používá, bude zahrnovat Ulkenia.
Výhodné mikroorganismy jsou ty, které produkují sloučeniny, o které se jedná, systémy polyketidové synthasy. Mezi takové mikroorganismy patří mikroorganismy, které mají endogenní polyketidový synthasový systém, a mikroorganismy, do nichž byl polyketidový synthasový systém geneticky vložen. Polyketidy jsou strukturně různé přírodní produkty, které mají rozmanité biologické aktivity, mezi které patří antibiotické a farmakologické vlastnosti. Biosyntéza základního uhlíkového skeletu polyketidů je katalyzována polyketidovou synthasou. Podobně jako strukturně a mechanisticky příbuzné synthasy mastných kyselin, polyketidové synthasy katalyzují opakované dekarboxy lační kondenzace mezi acylthioestery, čímž po každé prodlouží uhlíkový řetězec o dva atomy uhlíku. Na rozdíl od synthas mastných kyselin, polyketidové synthasy mohou generovat velkou strukturní variabilitu konečného produktu. Jednotlivé polyketidové synthasové systémy to mohou dělat použitím jiných výchozích jednotek než je acetát, použitím methyl- nebo ethyl-malonátu jako prodlužující jednotky a měněním redukčního cyklu ketoredukce, dehydratace a enoylové redukce na beta-ketoskupině vytvořené po každé kondenzaci. Zvláště zajímavé je zde to, že dvojné vazby mezi atomy uhlíku, které jsou zavedeny dehydratačním stupněm, mohou být v konečném produktu zachovány. Dále pak, i když tyto dvojné vazby jsou původně v trans konfiguraci, mohou se převrátit na cis konfiguraci nacházející se v DHA (a dalších polyenových mastných kyselinách, o které se jedná) enzymatickou isomerizací. Jak k reakcím s dehydrasou tak k isomerizačním reakcím může docházet v nepřítomnosti molekulárního kyslíku.
S výhodou se podle předloženého vynálezu získává heterotrofní způsob výroby produktů a mikroorganismů. Tento způsob s výhodou zahrnuje kultivování mikroorganismů v růstovém mediu, přičemž tyto mikroorganismy obsahují polyketidový synthasový systém. S výhodou se množství rozpuštěného kyslíku udržuje na méně než asi 8 procentech, s výhodou na méně než asi 4 procentech, výhodněji na méně než asi 3 procentech a výhodněji na méně než asi 1 procentu.
• ·
Tomu je však třeba rozumět tak, že to je myšleno tak, že vynález jako celek by tím měl být omezen a že zručný odborník z oblasti techniky si uvědomí, že koncept předloženého vynálezu bude aplikovatelný na jiné mikroorganismy produkující rozmanité jiné sloučeniny, včetně dalších lipidových prostředků, v souladu se způsoby zde diskutovanými.
Za předpokladu relativně konstantní rychlosti produkce lipidů řasami se zdá být zřejmé, že vyšší hustota biomasy povede k vyššímu celkovému množství lipidů, které jsou produkovány daným objemem. Běžný konvenční fermentační způsob pro růst řas poskytuje hustotu biomasy od asi 50 do asi 80 nebo méně g/l. Autoři předloženého vynálezu zjistili, že použitím způsobů podle předloženého vynálezu lze dosáhnout významně vyšší hustoty biomasy než je běžně známá hustota biomasy. S výhodou způsoby podle předloženého vynálezu produkují hustotu biomasy alespoň asi 100 g/l, výhodněji alespoň asi 130 g/l, ještě výhodněji alespoň asi 150 g/l, ještě výhodněji alespoň asi 170 g/l a nejvýhodněji větší než 200 g/l. Při tak vysoké hustotě biomasy, i když pomalu klesá rychlost produkce lipidů řasami, je celková rychlost produkce lipidů na objem významně vyšší než u běžně známých způsobů.
Mezi způsoby pěstování mikroorganismů řádu Thraustochytriales podle předloženého vynálezu patří přidávání zdroje uhlíku a zdroje omezených živin k fermentačnímu prostředí, které obsahuje mikroorganismy, takovou rychlostí, která je postačující pro zvýšení hustoty biomasy fermentačního media na shora popsanou hustotu. Pojem omezený zdroj živin, jak se zde tento pojem používá, označuje zdroj živin (zahrnující živinu samotnou) podstatných pro růst mikroorganismu v tom, že jestliže se omezená živina vyčerpá z růstového media, její nepřítomnost podstatně limituje růst nebo replikaci mikroorganismu. Avšak vzhledem k tomu, že stále ještě existuje hojnost dalších živin, organismus může pokračovat při výrobě a hromadění intracelulámích a/nebo extracelulámích produktů. Výběrem specifických omezujících živin lze kontrolovat typy produktů, které jsou akumulovány. Poskytnutí omezeného zdroje živin v jistém množství tedy umožňuje regulovat jak rychlost růstu mikroorganismů tak produkci nebo akumulaci žádaných produktů (např. lipidů). Tento * ·ν «· »· ·»· 9·»· * · * « « 9 · · * · · ·
9 9 9 999 ··<
•· ·· »99 99 99 <*>· způsob fermentace, při kterém se jeden nebo více substrátů (např. zdroj uhlíku a omezený zdroj dusíkových živin) přidává (přidávají) postupně po částech, se obvykle označuje jako způsob fermentace s dávkovým napájením. Bylo zjištěno, že jestliže se substrát přidává do dávkového fermentačního způsobu, velká množství přítomného zdroje uhlíku (např. asi 200 g/l nebo větší hustota biomasy než 60 g/l) mají škodlivý účinek na mikroorganismy. Bez ohledu na teorii se předpokládá, že takové vysoké množství zdroje uhlíku způsobuje škodlivé účinky, mezi které patří osmotický stres, pro mikroorganismy, a inhibuje počáteční produktivitu mikroorganismů. Způsoby podle předloženého vynálezu se těmto nežádoucím škodlivým účinkům vyhýbají, přičemž poskytují dostatečné množství substrátu, aby se dosáhla vysoká shora popsaná hustota biomasy mikroorganismů.
Způsoby podle předloženého vynálezu pěstování mikroorganismů mohou zahrnovat stupeň zvyšování hustoty biomasy. Ve stupni zvyšování hustoty biomasy je primárním předmětem fermentačního procesu zvýšit hustotu biomasy ve fermentačním mediu tak, aby se získala shora popsaná hustota biomasy. Rychlost přidávání zdroje uhlíku se typicky udržuje na příslušné úrovni nebo v příslušném rozmezí, které nezpůsobuje významný škodlivý účinek na produktivitu mikroorganismů nebo na životaschopnost mikroorganismů pocházející z nedostatečných schopností fermentačního zařízení odstraňovat teplo z kapalného živného media a přenášet plyny do a z kapalného živného media. Odborníkovi z oblasti techniky je dobře známo příslušné rozmezí množství zdroje uhlíku potřebné pro příslušný mikroorganismus během fermentačního procesu. Zdrojem uhlíku podle předloženého vynálezu je s výhodou nealkoholový zdroj uhlíku, tj. zdroj uhlíku, který neobsahuje alkohol. Pojem alkohol, jak je zde používán, znamená sloučeninu se 4 nebo méně atomy uhlíku a s jednou hydroxylovou skupinou, např. methanol, ethanol a isopropanol, ale pro účely tohoto vynálezu nezahrnuje organické hydroxykyseliny, jako je kyselina mléčná, a podobné sloučeniny. Zdrojem uhlíku podle předloženého vynálezu je s výhodněji cukr, mezi který patří, ale bez omezení na ně, fruktosa, glukosa, sacharosa, melasa a škrob. Další vhodné jednoduché a složité zdroje uhlíku a zdroje dusíku jsou popsány ve shora uvedených citovaných patentech. Typicky se však jako primární zdroj uhlíku « ·· ·9 *· • * » « * · · • « « · · · »·· «· 9· ·»*· používá cukr, s výhodou kukuřičný sirup. Jako zdroj uhlíku mohou sloužit také mastné kyseliny, ve formě mastných hydroxykyselin, triglyceridy a di- a mono-glyceridy.
Zvláště výhodnými zdroji dusíku jsou močovina, dusičnan, dusitan, sojový protein, aminokyseliny, protein, kukuřičný extrakt zvaný com-steep, kvasinkový extrakt, živočišné vedlejší produkty, anorganické amonné soli, výhodněji amonné soli síranu a hydroxidu a nejvýhodněji hydroxid amonný. Mezi další zdroje omezených živin patří zdroje uhlíku (jak shora uvedeno), fosforečnanové zdroje, vitaminové zdroje (jako jsou zdroje vitaminu Bi2> zdroje pantothenátu a zdroje thiaminu), zdroje stopových prvků (jako jsou zdroje zinku, mědi, kobaltu, niklu, železa, manganu a molybdenu) a zdroje hlavních kovů (jako jsou zdroje manganu, vápníku, sodíku a draslíku, zdroje oxidu křemičitého atd.). Mezi zdroje stopových prvků a zdroje hlavních kovů mohou být zahrnuty síranové a chloridové soli těchto kovů (například, ale bez omezení na ně, MgSO4.7 H2O, MnCI2.4 H2O, ZnSO4.7 H2O, CoCI2.6 H2O, Na2MoO4.2 H2O, CuSO4.5 H2O, NíSO4.6 H2O, FeSO4.7 H2O, CaCI2, K2SO4, KCI a Na2SO4).
Jestliže se jako zdroj dusíku používá amoniak, fermentační medium se stává kyselým, jestliže se prostředí nereguluje přidáváním báze nebo pufrů. Jestliže se používá hydroxid amonný jako primární zdroj dusíku, může sloužit také pro zajištění regulace pH. Mikroorganismy řádu Thraustochytriales, zvláště Thraustochytriales rodu Thraustochytrium a Schizochytrium, budou růst v širokém rozmezí pH, např. od asi pH 5 do asi pH 11. Příslušné rozmezí pH pro fermentaci příslušného mikroorganismu je ve znalostech zručného odborníka z oblasti techniky.
Mezi způsoby pěstování mikroorganismů podle předloženého vynálezu patří produkční stadium. V tomto stadiu primárním použitím substrátu mikroorganismy není zvýšení hustoty biomasy, ale spíše použití substrátu pro produkci lipidů. Je třeba si uvědomit, že lipidy jsou produkovány mikroorganismy během také stadia zvyšování hustoty biomasy; jak však bylo shora uvedeno, primárním cílem ve stupni zvyšování hustoty biomasy je zvýšit hustotu biomasy. Typicky se během produkčního stadia přidávání substrátu omezených živin snižuje nebo se s výhodou zastaví.
Dříve bylo obecně předpokládáno, že přítomnost rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu je rozhodující pro produkci polynenasycených sloučenin, mezi které patří omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, eukaryotickými mikroorganismy. Předpokládá se tedy, že relativně velké množství rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu je výhodné. Překvapivě a neočekávaně však autoři předloženého vynálezu zjistili, že rychlost produkce lipidů se dramaticky zvýší, jestliže je sníženo množství rozpuštěného kyslíku během produkčního stupně. I když tedy množství rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu během stupně zvyšujícího hustotu biomasu je s výhodou alespoň asi 8 % z hodnoty nasycenosti, a s výhodou alespoň asi 4 % z hodnoty nasycenosti, během produkčního stupně se rozpuštěný kyslík (DO) ve fermentačním mediu sníží na asi 3 % nasycenosti nebo na nižší hodnotu, s výhodou na asi 1 nebo méně % z nasycenosti, a výhodněji asi na 0 % nasycenosti. Na počátku fermentace může být DO na hodnotě nasycenosti nebo blízko nasycenosti a jak mikroby rostou, je možné se přesunout na tyto nízké hodnoty DO. V jednom příslušném provedení podle předloženého vynálezu se množství kyslíku rozpuštěného ve fermentačním mediu mění během procesu fermentace. Například u fermentačního procesu s celkovou dobou fermentace od asi 90 hodin do asi 100 hodin se množství kyslíku rozpuštěného ve fermentačním mediu udržuje na asi 8 % během prvních 24 hodin, asi 4 % od asi 24. hodiny do asi 40. hodiny, a asi 0,5 nebo méně % od asi 40. hodiny do konce fermentačního procesu.
Množství rozpuštěného kyslíku přítomného ve fermentačním mediu může být regulováno regulováním množství kyslíku v homí části (hlavě) fermentoru nebo s výhodou regulováním rychlosti, kterou se fermentační medium třepe (nebo míchá). Například vysoká rychlost třepání (nebo míchání) vede k relativně vyššímu množství kyslíku rozpuštěného ve fermentačním mediu než nízká rychlost třepání. Například u fermentoru s objemem asi 63 000 litrů se rychlost třepání nastaví na od asi 50 otáček za minutu do asi 70 otáček za minutu během prvních dvanácti hodin, od asi 55 otáček za minutu do asi 80 otáček za minutu během asi 12. hodiny až asi 18. hodiny a od asi 70 otáček za minutu do asi 90 otáček za minutu od asi 18. hodiny do konce doby fermentačního procesu, čímž se dosáhne shora diskutované množství rozpuštěného kyslíku pro celkovou dobu fermentačního procesu od asi 90 hodin do asi 100 hodin. Příslušné rozmezí rychlostí třepání potřebných pro dosažení příslušného množství kyslíku rozpuštěného ve fermentačním mediu může být snadno stanoveno zručným odborníkem z oblasti techniky.
Výhodnou teplotou pro způsoby podle předloženého vynálezu je alespoň asi 20 °C, výhodněji alespoň asi 25 °C a nejvýhodněji alespoň asi 30 °C. Je třeba si uvědomit, že chladná voda může zadržovat vyšší množství rozpuštěného kyslíku než teplá voda. Vyšší teplota fermentačního media má tedy další příznivý účinek na snížení množství rozpuštěného kyslíku, což je zvláště žádoucí, jak shora popsáno.
Některé mikroorganismy mohou vyžadovat jistá množství solných minerálů ve fermentačním mediu. Tyto solné minerály, zvláště chloridové ionty, mohou způsobovat korozi fermentoru nebo jiného dalšího zařízení pro zpracování. Pro předcházení nebo snížení těchto nežádoucích účinků díky relativně velkému množství chloridových iontů přítomných ve fermentačním mediu, způsoby podle předloženého vynálezu mohou zahrnovat také použití sodných solí neobsahujících chlorid, s výhodou síranu sodného, ve fermentačním prostředí jako zdroj sodíku. Podrobněji - významná část sodíkových požadavků fermentace je dodávána jako sodné soli neobsahující chlorid. Například méně než asi 75 % sodíku ve fermentačním mediu je dodáváno jako chlorid sodný, výhodněji méně než asi 50 % a výhodněji méně než asi 25 %. Mikroorganismy podle předloženého vynálezu mohou růst při koncentracích chloridů menších než asi 3 g/l, výhodněji menších než asi 500 mg/l, výhodněji menších než asi 250 mg/l a výhodněji mezi asi 60 mg/l a asi 120 mg/l.
Mezi sodné soli neobsahující chlorid může patřit bezvodá soda (směs uhličitanu sodného a oxidu sodného), uhličitan sodný, hydrogenuhličitan sodný, síran sodný a jejich směsi, a s výhodou mezi ně patří síran sodný. Bezvodá soda, uhličitan sodný a hydrogenuhličitan sodný mají tendenci zvyšovat pH fermentačního media, takže vyžadují kontrolní stupně, aby se udržovalo příslušné pH media. Koncentrace síranu sodného je účinná pro to, aby vyhovovala požadavkům mikroorganismů na • · • · · · slanost, s výhodou je koncentrace sodíku (vyjádřeno jako g/l sodíku) alespoň asi 1 g/l, výhodněji v rozmezí od asi 1 g/l do asi 50 g/l, a výhodněji v rozmezí od asi 2 g/l doba si 25 g/l.
Různé fermentační parametry pro očkování, růst a isolaci mikroorganismů jsou diskutovány podrobně v USA patentu č. 5 130 242, který je zde celý zahrnut jako odkaz. Pro isolaci mikroorganismů z fermentačního media se mohou používat jakékoliv běžně známé isolační způsoby, mezi které patří odstředování, filtrace, ultrafiltrace, dekantace a odpaření rozpouštědla. Autory předloženého vynálezu bylo zjištěno, že kvůli takové vysoké hustotě biomasy pocházející ze způsobu podle předloženého vynálezu, jestliže se pro isolaci mikroorganismů použije odstřeďování, je výhodné zředit fermentační medium přidáním vody, která snižuje hustotu biomasy, čímž umožní účinnější oddělení mikroorganismů z fermentačního media.
Velice vysoké hustoty biomasy dosažené v předloženém vynálezu také usnadňují způsoby isolace mikrobiálních lipidů bez rozpouštědla. Výhodné způsoby lyžování buněk ve fermentoru jsou popsány v USA patentové přihlášce č. 60/177 125, nazvané Solventless Extraction Process, podané 19. ledna 2000, v USA patentové přihlášce č. , nazvané Solventless Extraction Process, podané 19. ledna
2001, a v PCT patentové přihlášce č. , nazvané Solventless Extraction
Process, podané 19. ledna 2001, které jsou zde celé zahrnuty jako odkazy. Mezi výhodné způsoby isolace lipidů, jakmile jsou buňky ve fermentoru permeabilizovány, rozbity nebo lyžovány (což umožňuje, že lipidová emulze je rozbita a frakce bohatá na lipidy se isoluje) patří způsob odstraňování oleje uvedený ve spisu WO č. 96/05278, který je zde celý zahrnut jako odkaz. Podle tohoto způsobu se sloučenina rozpustná ve vodě, např. alkohol nebo aceton, přidá k emulzi oleje ve vodě, aby se tato emulze rozbila. Výsledná směs se rozdělí gravitačním dělením, např. odstředováním. Tento způsob lze také modifikovat pro použití jiných činidel (voda a/nebo rozpustný olej) pro rozbití emulze.
Alternativně se mikroorganismy z fermentačního media isolují v suché formě odpařením vody z fermentačního media, například uvedením fermentačního media do kontaktu přímo (tj. bez předběžného zahuštění, například odstřeďováním) se sušičkou, jako je například bubnové sušící zařízení, tj. přímým způsobem isolace v bubnové sušičce. Jestliže se pro isolování mikroorganismů používá přímý proces isolace v bubnové sušičce, typicky se používá bubnová sušička vyhřívaná parou. Navíc, jestliže se používá přímý způsob isolace v bubnové sušičce, hustota biomasy fermentačního media je s výhodou alespoň asi 130 g/l, výhodněji alespoň asi 150 g/l, a nejvýhodněji alespoň asi 180 g/l. Tato vysoká hustota biomasy je obecně vyžadována pro přímý způsob isolace v bubnové sušičce, protože při vysoké hustotě biomasy fermentační medium obsahuje dostatečné množství vody pro významné ochlazení bubnu, což vede k neúplnému vysušení mikroorganismů. Další způsoby sušení buněk, včetně sušení rozprašováním, jsou dobře známy zručným odborníkům z oblasti techniky.
Způsoby podle předloženého vynálezu poskytují průměrnou rychlost produkce lipidů alespoň asi 0,5 g/l/h, s výhodou alespoň asi 0,7 g/l/h, výhodněji alespoň asi 0,9 g/l/h, a nejvýhodněji alespoň asi 1,0 g/l/h. Navíc - lipidy produkované způsoby podle předloženého vynálezu obsahují polynenasycené lipidy v množstvím větším než asi 15 %, s výhodou větším než asi 20 %, výhodněji větším než asi 25 %, ještě výhodněji větším než asi 30 %, a nejvýhodněji větším než asi 35 %. Lipidy lze isolovat buď z vysušených mikroorganismů nebo z mikroorganismů ve fermentačním mediu. Obvykle alespoň asi 20 % lipidů produkovaných mikroorganismy podle způsobů podle předloženého vynálezu jsou omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, s výhodou alespoň asi 30 % lipidů jsou omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, výhodněji alespoň asi 40 % lipidů jsou omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny, a nejvýhodněji alespoň asi 50 % lipidů jsou omega-3 a/nebo omega-6 polynenasycené mastné kyseliny. Způsoby podle předloženého vynálezu poskytují také průměrnou rychlost produkce omega-3 mastné kyseliny (např. DHA) alespoň asi 0,2 g omega-3 mastné kyseliny (např. DHA)/l/h, s výhodou alespoň asi 0,3 g omega-3 mastné kyseliny (např. DHA)/l/h, výhodněji alespoň asi 0,4 g • · β ··· · · · ·· ··· ·· · · ···· omega-3 mastné kyseliny (např. DHA)/l/h, a nejvýhodněji alespoň asi 0,5 g omega-3 mastné kyseliny (např. DHA)/l/h. Způsoby podle předloženého vynálezu poskytují také průměrnou rychlost produkce omega-6 mastné kyseliny (např. DPAn-6) alespoň asi 0,07 g omega-6 mastné kyseliny (např. DPAn-6)/l/h, s výhodou alespoň asi 0,1 g omega-6 mastné kyseliny (např. DPAn-6)/l/h, výhodněji alespoň asi 0,13 g omega-6 mastné kyseliny (např. DPAn-6)/l/h, a nejvýhodněji alespoň asi 0,17 g omega-6 mastné kyseliny (např. DPAn-6)/i/h. Nebo ještě jinak - alespoň asi 25 % lipidu znamená DHA (vztaženo na celkový obsah methylesteru mastné kyseliny), s výhodou alespoň asi 30 %, výhodněji alespoň asi 35 % a nejvýhodněji alespoň asi 40 %.
Mikroorganismy, lipidy z nich extrahované, biomasa zbývající po extrakci lipidů nebo jejich kombinace lze používat přímo jako potravinové přísady, jako je například přísada v nápojích, omáčkách, denních základních potravinách (jako je mléko, jogurt, sýr a zmrzlina) a v pečeném zboží, jako výživový doplněk (ve formě tobolek nebo tablet), v potravinách nebo jako potravinový doplněk pro jakéhokoliv živočicha, jehož maso nebo produkty jsou konzumovány lidmi, jako potravinový doplněk, včetně jídla pro děti a kojence, a jako farmaceutické přípravky (při přímé nebo doplňkové terapeutické aplikaci). Pojem zvíře znamená jakýkoliv organismus patřící do oblasti zvířat (Animalia) a patří sem, bez omezení, jakékoliv zvíře, od něhož je odvozeno drůbeží maso, mořská potrava, hovězí, vepřové nebo jehněčí. Mořská potrava je odvozena od, bez omezení, ryb, krabů a měkkýšů. Mezi pojem produkty patří jakýkoliv produkt, jiný než maso, odvozený od takových zvířat, mezi které patří, bez omezení, vejce, mléko nebo další produkty. Jestliže se takoví živočichové krmí, polynenasycené lipidy mohou být zahrnuty do masa, mléka, vajec nebo jiných produktů takových živočichů, aby se v nich zvýšil obsah těchto lipidů.
Další předměty, výhody a nové znaky tohoto vynálezu budou zřejmé odborníkům z oblasti techniky po prozkoumání následujících příkladů, které nejsou zamýšleny jako omezené.
Příklady provedení vynálezu
Kmen Schizochytrium používaný v těchto příkladech produkuje dvě primární polyenové kyseliny, DHAn-3 a DPAn-6 v poměru obvykle asi 3:1, a malá množství dalších polyenových kyselin, jako je EPA a C20:3, za rozmanitých fermentačních podmínek. Zatímco následující příklady uvádějí pouze seznam množství DHA, lze tedy snadno vypočítat množství produkované DPA(N-6) použitím shora popsaného poměru.
Příklad 1
Tento příklad ilustruje vliv obsahu kyslíku ve fermentačním mediu na produktivitu lipidů.
Byly měřeny fermentační výsledky Schizochytrium ATCC č. 20888 při různých množstvích rozpuštěného kyslíku. Výsledky jsou uvedeny na obrázku 1, kde RCS je zbytková koncentrace cukru a DCWje hmotnost suchých buněk.
Příklad 2
Tento příklad také ilustruje vliv nízkého množství kyslíku na obsah DHA (% suché hmotnosti) v konečném produktu biomasy fermentačního media.
Zmenšený typ pokusu byl prováděn ve 250ml Erlenmeyerových baňkách, aby byl napodoben účinek nízkého množství kyslíku na obsah DHA v buňkách Schizochytrium sp. ve fermentorech ve velkém měřítku. Schizochytrium sp. (ATCC 20 888) byl kultivován v mediu 04-4. Toto kultivační medium sestávalo z následujících složek (na jeden litr) rozpuštěných v destilované vodě: 12,61 g Na2SO4, 1,2 g MgSO4.7 H2O, 0,25 g KCI, 0,05 g CaCI2, 7,0 g hydrogenglutamátu sodného, 10 g glukosy, 0,5 g KH2PO4, 0,1 g NaHCO3, 0,1 g kvasinkového extraktu, 1,0 ml vitaminové směsi, 1,00 ml PII kovů. Směs PII kovů obsahuje (v jednom litru): 6,0 g
Na2EDTA, 0,29 g FeCI3.6 H2O, 6,84 g H3BO3, 0,86 g MnCI2.4 H2O, 0,06 g ZnCI2, 0,026 g CoCI2.6 H2O, 0,052 g NiSO4.H2O, 0,002 g CuSO4.H2O a 0,005 g Na2MoO4.2 H2O. Vitaminová směs obsahuje (v jednom litru): 100 mg thiaminu, 0,5 mg biotinu a 0,5 mg kyankobalaminu. Hodnota pH kultivačního media byla upravena na 7,0 a medium bylo pak sterilováno zfiltrováním.
Myšlenka, která vede k tomuto zmenšenému pokusu, byla kultivovat buňky v kultivačních baňkách s různými objemy kultivačního media v baňkách - téměř plná baňka (např. 200 ml ve 250ml kultivační baňce) by se dobře nepromíchala na třepací desce a proto by, jak buňky rostou, bylo dosaženo podmínek s malým množstvím rozpuštěného kyslíku. V každém pokusu byla proto provedena 4 různá uspořádání, přičemž každé z nich bylo provedeno dvakrát: 1) 250ml baňka byla naplněna 50 ml kultivačního media, 2) 250ml baňka byla naplněna 100 ml kultivačního media, 3) 250ml baňka byla naplněna 150 ml kultivačního media a 4) 250ml baňka byla naplněna 200 ml kultivačního media. Každá z těchto osmi baněk byla naočkována buňkami ze 48 hodin staré kultury Schizochytrium kultivované v mediu 04-4 za podmínek uvedených v provedení ad 1), při 28 °C a při 220 otáčkách za minutu na třepací desce. Všech osm baněk pro pokus bylo umístěno na třepací desce (220 otáček za minutu) v inkubátoru (28 °C) a kultivováno 48 hodin ve tmě. Na konci pokusu byla změřena množství rozpuštěného kyslíku v každé baňce měřícím zařízením YSI pro měření rozpuštěného kyslíku, bylo také stanovena pH kultivačního media, suchá hmotnost buněk a rovněž byl změřen obsah jejich mastných kyselin. Výsledky tohoto pokusu jsou uvedeny v tabulce 1.
Tabulka 1
Výsledky zmenšeného pokusu zkoumajícího vliv nízkých koncentrací rozpuštěného kyslíku na obsah vysoce nenasycených mastných kyselin s dlouhým řetězcem (% suché hmotnosti DHA) Schizochytrium sp.).
| ml media | FAME (% TFA) | DHA (% suché hmotn.) | biomasa (g/i) | konečné PH | DO (% nas.) |
| 50 | 16,5 | 7,4 | 4,2 | 7,4 | 31 |
| 100 | 17,0 | 6,5 | 3,9 | 7,2 | 29 |
| 150 | 22,4 | 9,2 | 2,7 | 7,0 | 11 |
| 200 | 35,9 | 14,5 | 1,8 | 6,9 | 3 |
Výsledky ukazují, že obsah lipidů (jako % FAME) a obsah DHA (% suché hmotnosti) byly vyšší u buněk kultivovaných s nízkými množstvími rozpuštěného kyslíku - čím nižší bylo množství rozpuštěného kyslíku, tím vyšší byl obsah lipidů. To je neočekávané, protože o kyslíku se obecně předpokládalo, že je nutný pro vytvoření nenasycených (dvojných) vazeb. Je překvapující, že tak mnoho DHA bylo vytvořeno při nízkém množství rozpuštěného kyslíku, protože DHA je jednou z nejvíce nenasycených mastných kyselin. I když produkce biomasy se snižuje s tím, jak se snižuje množství rozpuštěného kyslíku, obsah DHA se zvyšuje. Je tedy výhodné mít růstovou fázi s vyššími množstvími rozpuštěného kyslíku, aby se maximalizovala tvorba biomasy a potom nižší množství rozpuštěného kyslíku, aby se maximalizovala produkce mastných kyselin s dlouhým řetězcem.
Příklad 3
Tento příklad ilustruje reprodukovatelnost způsobů podle předloženého vynálezu.
• · · • * ···I
Mikroorganismy byly produkovány použitím fermentorů s nominálním pracovním objemem 6300 I. Výsledné fermentační živné medium bylo zahuštěno a mikroorganismy byly vysušeny v bubnové sušárně. Lipidy z podílů získaných mikroorganismů byly extrahovány a vyčištěny. Byl tak vyroben přečištěný, vybělený olej zbavený pachu. Před analýzou bylo přidáno přibližně 3000.101 % d-1-a-tokoferyl-acetátu pro výživové doplňkové účely.
Bylo provedeno devět fermentací Schizochytrium ATCC č. 20 888. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2. Množství rozpuštěného kyslíku bylo asi 8 % během prvních 24 hodin a asi 4 % potom.
Tabulka 2
Výsledky fermentace produkce DHA z Schizochytrium sp. při dávkovém napájení
| vstup | stáří výtěžek1 | DHA2 | FAME3 | produktivita4 |
| (h) | (g/i) | (%) | (%) | |
| 1 | 100,3 160,7 | 17,8 | 49,5 | 0,285 |
| 2 | 99,8 172,4 | 19,4 | 51,3 | 0,335 |
| 3 | 84,7 148,7 | 14,4 | 41,4 | 0,253 |
| 4 | 90,2 169,5 | 19,7 | 53,9 | 0,370 |
| 5 | 99,0 164,1 | 12,5 | 38,9 | 0,207 |
| 6 | 113,0 187,1 | 19,7 | 47,2 | 0,326 |
| 7 | 97,0 153,5 | 13,7 | 41,0 | 0,217 |
| 8 | 92,8 174,8 | 16,4 | 48,6 | 0,309 |
| průměr5 | 97,1 166,4 | 16,7 | 46,5 | 0,288 |
| S.D.6 | 8,4 12,3 | 2,9 | 5,4 | 0,058 |
| C.V.7 (%) | 8,7 7,4 | 17,3 | 11,7 | 20,2 |
skutečný výtěžek hustoty biomasy obsah DHA jako % suché hmotnosti buněk
celkový obsah mastných kyselin jako % suché hmotnosti buněk (měřeno jako methylestery) (gramy DHA)/l/h průměr standardní odchylka koeficient variability; hodnoty koeficientů variability pod 5 % znamenají způsob, který má vynikající reprodukovatelnost, hodnoty mezi 5 % a 10 % znamenají způsob, který má dobrou reprodukovatelnost a hodnoty mezi 10 % a 20 % znamenají způsob, který má rozumnou reprodukovatelnost
Kukuřičný sirup byl přiváděn tak dlouho, dokud objem ve fermentoru nedosáhl
6300 I, v této době byl přívod sirupu zastaven. Fermentační proces byl zastaven, jakmile se koncentrace zbylého sirupu snížila pod 5 g/l. Typické stáří, od naočkování do konce, bylo asi 100 hodin.
Fermentační živná půda, tj. fermentační medium, byla zředěna vodou použitím poměru přibližně 2:1, aby se snížil obsah popela konečného produktu a aby se zlepšila fáze dělení během stupně odstřeďování. Koncentrovaná buněčná pasta byla zahřáta na asi 71 °C a vysušena v sušárně Blaw Knox s dvojím bubnem (106 cm krát 91 cm). S výhodou byly však mikroorganismy sušeny přímo v bubnové sušárně bez předchozího odstřeďování.
Výsledky analýz lipidů extrahovaných z podílů jednotlivých vstupů v tabulce 2 jsou souhrnně uvedeny v tabulce 3.
Tabulka 3
Analýza mikrobiální biomasy produkované ve fermentacích s dávkovým napájením uvedených v tabulce 2 vstup % DHA vzhledem k FAME1 2 celkové % hmotn. lipidů
| 1 | 36,0 | 72,3 |
| 2 | 37,8 | 70,3 |
| 3 | 34,8 | 61,5 |
| 4 | 36,5 | 74,8 |
| 5 | 32,1 | 52,8 |
| 6 | 41,7 | 67,7 |
| 7 | 33,4 | 49,9 |
| 8 | 33,7 | 61,4 |
| průměr | 35,8 | 63,8 |
| stand. odchylka3 | 3,0 | 9,1 |
| koef. var.4 (%) | 8,5 | 14,2 |
viz tabulka 2 viz diskuse shora standardní odchylka koeficient variability; hodnoty koeficientů variability pod 5 % znamenají způsob, který má vynikající reprodukovatelnost, hodnoty mezi 5 % a 10 % znamenají způsob, který má dobrou reprodukovatelnost a hodnoty mezi 10 % a 20 % znamenají způsob, který má rozumnou reprodukovatelnost
Pokud není jinak uvedeno, fermentační medium použité v oddělení příkladů zahrnuje následující složky, kde první číslo znamená nominální cílovou koncentraci a číslo v závorkách znamená přijatelné rozmezí: 12 g/l (11 až 13) síranu sodného, 0,5 g/l KCI (0,45 až 0,55), 2 g/l MgSO4.7 H2O (1,8 až 2,2), 0,35 g/l protipěnícího činidla
Hodag K-60 (0,3 až 0,4), 0,65 g/l K2SO4 (0,60 až 0,70), 1 g/l KH2PO4 (0,9 až 1,1), 1 g/l síranu amonného (0,95 až 1,1), 0,17 g/l CaCI2.2 H2O (0,15 až 0,19), 4,5 g/l kukuřičného sirupu 95 DE (vztaženo na pevnou hmotu) (2 až 10), 3 mg/i MnCI2.4 H2O (2,7 až 3,3), 3 mg/l ZnSO4.7 H2O (2,7 až 3,3), 0,04 mg/l CoCI2.6 H2O (0,035 až 0,045), 0,04 mg/l Na2MoO4.2 H2O (0 až 0,045), 2 mg/l CuSO4.5 H2O (1,8 až 2,2), 2 mg/l NiSO4.6 H2O, 10 mg/l FeSO4.7 H2O (9 až 11), 9,5 mg/l thiaminu (4 až 15), 0,15 mg/l vitaminu B12 (0,05 až 0,25) a 3,2 mg/l pantothenát vápenatý (1,3 až 5,1). Navíc se jako zdroj dusíku používá 28% roztok hydroxidu amonného.
Obsah popela ve vysušených mikroorganismech je asi 6 % hmotnostních.
Příklad 4
Tento příklad ilustruje účinek snížené hladiny rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu na produktivitu mikroorganismů v pracovním měřítku 63 000 litru.
Použitím postupu popsaného v příkladu 3 se provede fermentace o nominálním objem 63 000 litrů použitím přírodního kmene Schizochytrium, který byl získán způsobem isolace, který je popsán ve shora uvedených USA patentech č. 5 340 594 a 5 340 742. Množství rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu bylo asi 8 % během prvních 24 hodin, asi 4 % od 24. hodiny do 40. hodiny a asi 0,5 % od 40. hodiny do konce fermentačního procesu. Výsledky této nízké hladiny rozpuštěného kyslíku v procesech s fermentačním mediem jsou uvedeny v tabulce 4.
• · ·
Tabulka 4
Výsledky fermentací Schizochytrium s dávkovým napájením o velikosti 63 000 litrů při snížených koncentracích rozpuštěného kyslíku vstup stáří výtěžek DHA FAME % DHA produktivita (h) (g/l) (%) (%) vzhledem DHA (g DHA/l/h) kFAME
| 1 | 82,0 | 179,3 | 21,7 | 52,4 | 41,4 | 0,474 |
| 2 | 99,0 | 183,1 | 22,3 | 55,0 | 40,5 | 0,412 |
| 3 | 72,0 | 159,3 | - | - | 40,9 | - |
| 4 | 77,0 | 161,3 | - | - | 43,2 | - |
| 5 | 100,0 | 173,0 | 23,9 | 53,3 | 44,9 | 0,413 |
| 6 | 102,0 | 183,3 | 21,6 | 50,8 | 42,6 | 0,388 |
| 7 | 104,0 | 185,1 | 23,7 | 55,0 | 43,1 | 0,422 |
| 8 | 88,0 | 179,3 | 22,3 | 52,6 | 42,4 | 0,454 |
| 9 | 100,0 | 166,4 | 22,5 | 53,5 | 42,1 | 0,374 |
| 10 | 97,0 | 182,6 | 22,8 | 51,6 | 44,1 | 0,429 |
| 11 | 87,5 | 176,5 | 19,8 | 45,6 | 43,5 | 0,399 |
| 12 | 67,0 | 170,8 | 18,8 | 48,1 | 39,1 | 0,479 |
| 13 | 97,0 | 184,9 | 23,2 | 52,7 | 44,0 | 0,442 |
| 14 | 102,0 | 181,9 | 23,6 | 52,9 | 44,6 | 0,421 |
| 15 | 102,0 | 186,9 | 19,9 | 47,8 | 41,8 | 0,365 |
| 16 | 97,0 | 184,4 | 19,6 | 45,5 | 43,0 | 0,373 |
| 17 | 98,0 | 174,7 | 19,7 | 45,1 | 43,7 | 0,351 |
| 18 | 103,5 | 178,8 | 18,3 | 44,5 | 41,2 | 0,316 |
| 19 | 102,0 | 173,7 | 15,8 | 43,1 | 36,7 | 0,269 |
| 20 | 94,0 | 190,4 | 19,3 | 46,9 | 41,1 | 0,391 |
| 21 | 72,0 | 172,5 | 22,8 | 52,8 | 43,2 | 0,546 |
| 22 | 75,0 | 173,1 | 21,0 | 51,7 | 40,8 | 0,485 |
| 23 | 75,0 | 152,7 | 20,3 | 50,3 | 40,4 | 0,413 |
····«· « »· *· ·· • · · ·«· · · ·· • · · · ··· ··· ·· ··· ·· ·· ····
| 24 | 75,5 | 172,5 | 21,9 | 51,7 | 42,3 | 0,500 |
| 25 | 61,0 | 156,4 | 17,3 | 45,7 | 37,8 | 0,444 |
| 26 | 74,5 | 150,6 | 20,2 | 50,1 | 40,2 | 0,408 |
| 27 | 70,5 | 134,3 | 14,8 | 40,6 | 36,6 | 0,282 |
| 28 | 75,5 | 146,1 | 21,3 | 49,7 | 42,8 | 0,412 |
| 29 | 82,0 | 174,3 | 21,4 | 50,4 | 42,5 | 0,455 |
| 30 | 105,0 | 182,3 | 21,7 | 50,7 | 42,8 | 0,377 |
| 31 | 66,0 | 146,2 | 16,4 | 44,6 | 36,7 | 0,363 |
| pr. | 87,2 | 171,5 | 20,6 | 49,5 | 41,6 | 0,409 |
| S.D. | 13,9 | 14,1 | 2,4 | 3,8 | 2,3 | 0,061 |
| * C.V. | 16,0 | 8,2 | 11,6 | 7,7 | 5,5 | 15,0 |
* C.V. uveden v %
Příklad 5
Tento příklad ilustruje vliv snížené hladiny rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu na produktivitu mikroorganismů při velikosti femnentace 185 000 I.
Byly použity stejné postupy jako v příkladu 4 až na to, že fermentace byla prováděna ve fermentoru o velikosti 185 000 litrů. Objemy kultivačního media byly zvýšeny, aby se udržely koncentrace cílové sloučeniny v tomto měřítku. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 5.
• · ♦ · 9 9 «9 9
99 «99 99 9999
Tabulka 5
Fermentace Schizochytrium o objemu 195 000 litrů
| vstup stáří (h) | výtěžek (g/i) | DHA (%) | FAME (%) | % DHA vzhledem kFAME | produktivita DHA (g DHA/l/h) | |
| 1 | 75,0 | 116,1 | 17,3 | 46,1 | 37,4 | 0,268 |
| 2 | 99,0 | 159,3 | 17,4 | 47,0 | 37,1 | 0,280 |
| 3 | 103,0 | 152,6 | 16,0 | 47,2 | 33,8 | 0,237 |
| 4 | 68,0 | 136,8 | 17,9 | 45,9 | 39,1 | 0,360 |
| 5 | 84,0 | 142,0 | 17,5 | 47,0 | 37,2 | 0,296 |
| pr- | 85,8 | 141,4 | 17,2 | 46,6 | 36,9 | 0,288 |
| S.D. | 15,1 | 16,6 | 0,7 | 0,6 | 1,9 | 0,046 |
| C.V/ | 17,5 | 11,8 | 4,2 | 1,3 | 5,2 | 15,8 |
* C.V. uveden v %
Příklad 6
Tento příklad ilustruje vliv dalšího dusíku na fermentační způsob podle předloženého vynálezu.
Podobným způsobem jako v příkladu 4 byly provedeny čtyři řady pokusů o objemu 250 litrů s dávkovým napájením. Byly provedeny dva kontrolní pokusy a dva pokusy obsahující další množství dusíku (1,15násobné a 1,25násobné množství než je normální množství). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 6.
·» *· 4· • * * *· ·· • · · · · · aaa «β ·· ·»a a
Tabulka 6
Účinky dalšího dusíku na fermentaci Schizochytríum
| stáří výtěžek produkti- | účinnost | obsah | obsah | produkti- | |
| (h) (g/l) | vita | konverze | DHA | FAME | vita DHA |
| biomasy | (%) | (%) | (%) | (g/l/h) |
(g/i) cílový cukr: 7 g/l, základní nastavení pH: 5,5, nastavení kyselého pH: 7,3, 1,0násobek amoniaku
| 48 | 178 | 3,71 | 51,5 | 10,7 | 37,8 | 0,40 |
| 60 | 185 | 3,08 | 46,9 | 16,3 | 47,2 | 0,50 |
| 72 | 205 | 2,85 | 45,2 | 17,4 | 47,4 | 0,50 |
| 84 | 219 | 2,61 | 43,8 | 17,1 | 45,5 | 0,45 |
| 90 | 221 | 2,46 | 44,1 | 18,4 | 48,9 | 0,45 |
cílový cukr: 7 g/l, základní nastavení pH: 5,5, nastavení kyselého pH: 7,3, 1,15násobek amoniaku
| 48 | 171 | 3,56 | 55,6 | 12,0 | 36,3 | 0,43 |
| 60 | 197 | 3,28 | 54,6 | 9,4 | 38,4 | 0,31 |
| 72 | 191 | 2,65 | 52,8 | 9,4 | 40,0 | 0,25 |
| 84 | 190 | 2,26 | 52,5 | 10,0 | 42,5 | 0,23 |
| 90 | 189 | 2,10 | 52,2 | 9,2 | 43,3 | 0,19 |
• · · ··· · « -t · cílový cukr: 7 g/l, základní nastavení pH: 5,5, nastavení kyselého pH: 7,3, 1,25násobek amoniaku
| 48 | 178 | 3,71 | 56,4 | 11,5 | 33,7 | 0,43 |
| 60 | 179 | 2,98 | 48,6 | 10,3 | 36,0 | 0,31 |
| 72 | 180 | 2,50 | 48,8 | 12,0 | 37,6 | 0,30 |
| 84 | 181 | 2,15 | 46,1 | 13,6 | 40,1 | 0,29 |
| 90 | 185 | 2,06 | 45,7 | 12,6 | 40,7 | 0,26 |
cílový cukr: 7 g/l, základní nastavení pH: 5,5, nastavení kyselého pH: 7,3, 1,0násobek amoniaku
| 48 | 158 | 3,29 | 55,7 | 13,1 | 36,5 | 0,43 |
| 60 | 174 | 2,90 | 48,9 | 17,9 | 39,2 | 0,52 |
| 72 | 189 | 2,63 | 45,7 | 21,0 | 39,4 | 0,55 |
| 84 | 196 | 2,33 | 44,1 | 22,4 | 40,1 | 0,52 |
| 90 | 206 | 2,29 | 44,8 | 22,1 | 40,3 | 0,51 |
Obecně platí, že další množství dusíku má negativní vliv na provedení fermentace, jelikož bylo pozorováno významné snížení produktivity DHA u dvou dávek, kde bylo přidáno další množství amoniaku. Jak je uvedeno v tabulce 6, kontrolní dávky vedly ke konečným hladinám DHA 18,4 % a 22,1 % z celkové buněčné suché hmotnosti proti 9,2 % (u 1,15násobku amoniaku) a 12,6 % (u 1,25násobku amoniaku) u dávek s dalším dodaným amoniakem.
Příklad 7
Tento příklad ukazuje kinetický profil fermentačního procesu podle předloženého vynálezu.
Pokus s dávkovým napájením o objemu 4500 litrů byl proveden podobným způsobem jako v příkladu 4. Kinetický profil fermentačního procesu je uveden v tabulce?.
Tabulka 7
Kinetický profil fermentace Schizochytrium s dávkovým napájením o objemu 4500 litrů
| stáří výtěžek | produkti- vita biomasy (g/l/h) | účinnost konverze (%) | obsah DHA (%) | obsah FAME (%) | produktivita DHA (g/l/h) | |
| (h) | (g/i) | |||||
| 24 | 118 | 4,92 | 78,2 | 7,4 | 18,8 | 0,36 |
| 30 | 138 | 4,60 | 60,3 | 10,6 | 30,9 | 0,49 |
| 36 | 138 | 3,83 | 46,6 | 11,6 | 36,5 | 0,44 |
| 42 | 175 | 4,17 | 49,8 | 13,4 | 41,7 | 0,56 |
| 48 | 178 | 3,71 | 45,1 | 18,7 | 52,8 | 0,69 |
| 48 | 164 | 3,42 | 41,5 | 15,3 | 33,1 | 0,52 |
| 54 | 196 | 3,63 | 45,7 | 16,6 | 51,2 | 0,60 |
| 60 | 190 | 3,17 | 41,7 | 16,9 | 33,9 | 0,54 |
| 72 | 189 | 2,62 | 39,1 | 15,6 | 31,8 | 0,41 |
| 84 | 195 | 2,32 | 38,5 | 16,4 | 32,7 | 0,38 |
| 90 | 200 | 2,22 | 39,0 | 18,8 | 33,3 | 0,42 |
| 90 | 171 | 1,90 | 33,3 | 22,2 | 61,6 | ** 0,42 |
Dva oddělené vzorky byly analyzovány po 48 hodinách.
Tento pokus je pro vzorek s hmotností promytých suchých buněk (DCW). Další popsané hodnoty jsou pro nepromyté vzorky.
Příklad 8
Tento příklad ilustruje vliv množství zdroje uhlíku na produktivitu.
Byly provedeny tři různé fermentační procesy použitím způsobu z příkladu 4 s různými množstvími zdroje uhlíku. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 8.
Tabulka 8
Výsledky fermentace s různými množstvími zdroje uhlíku u fermentace Schizochytrium
| stáří (h) | výtěžek (g/i) | náplň uhlíku (%) | účinnost konverze (%) | obsah DHA (%) | obsah FAME (%) | produkti- vita (g/i/h) |
| 90 | 171 | 51,3 | 33,3 | 22,2 | 61,6 | 0,42 |
| 94 | 122 | 40,5 | 30,1 | 19,1 | 57,3 | 0,25 |
| 59 | 73 | 20,0 | 36,5 | 11,9 | 40,8 | 0,15 |
Příklad 9
Tento příklad ilustruje vliv omezení živin na účinnost konverze uhlíku na biomasu, lipid a nejkonkrétněji na DHA.
Kontinuální kultivační pokus pro studium účinku omezených živin byl proveden kultivováním Schizochytrium ATCC č. 20 888 ve dvoulitrovém fermentoru Applikon v základním růstovém mediu (ICM-2) sestávajícím z následujících sloučenin (nominální koncentrace): složky skupiny I: 18,54 g/l síranu sodného, 2,0 g/l MgSO4.7 H2O a 0,572 g/l KCI, složky skupiny II (každá připravena odděleně): 43,81 g/l glukosy, 1,28 • · · · • · « · · · · · · ··· ·· · · ··v · * ·· ··«· g/l KH2PO4, 0,025 g/l CaCI2.2 H2O a 6,538 g/l síranu amonného, složky skupiny III; 6,0 mg/l Na2EDTA, 0,29 mg/l FeCI3.6 H2O, 6,84 mg/l H3BO3, 0,86 mg/l MnCI2.4 H2O, 0,237 mg/l ZnSO4.7 H2O, 0,026 mg/l CoCI2.2 H2O, 0,005 mg/l Na2MoO4.2 H2O, 0,002 mg/l CuSO4.5 H2O a 0,052 mg/l NiSO4.6 H2O, a složky skupiny IV: 0,2 mg/l hydrochloridu thiaminu, 0,005 mg/l vitaminu B12 a 0,2 mg/l pantothenátu vápenatého. Skupiny I a II byly sterilovány v autoklávu, zatímco skupiny III a IV byly sterilovány zfiltrováním před tím, než byly přidány do fermentoru. Růstové medium pak bylo naočkováno Schizochytrium a necháno růst za regulovaných podmínek při 30 °C, pH 5,5 a rozpuštěným kyslíkem v množství 20 % z nasycenosti, a to až do dosažení maximální hustoty buněk.
Potom byl prováděn kontinuální způsob zpracování simultánním čerpáním sterilního ICM-2 napájecího media do fermentoru a odstraňováním živného media obsahujícího buňky Schizochytrium takovým průtokem, aby se udržovalo ředění 0,06h'1, dokud nebyl dosažen stabilní stav. Pro zkoumání účinku omezení živin byla sloučenina obsahující specifickou požadovanou živinu snižována v napájecím mediu ICM-2 tak, až tato živina vymizela při vývodu ze živného media obsahujícího buňky, takže růst buněk je omezen nepřítomností příslušné potřebné živiny. Jakmile byl pro každý stav dosažen stabilní pracovní systém, byla měřena konečná suchá biomasa v živném mediu, zbývající glukosa, koncentrace omezujících živin, obsah lipidu v buňkách a obsah DHA v buňkách. Účinnost konverze glukosy na biomasu byla vypočtena podělením celkové spotřebované glukosy celkovým množstvím vytvořené vysušené biomasy a vyjádřena jako procenta.
Účinky omezeného růstu každé jednotlivé živiny byly studovány opakováním tohoto pokusu pro každou jednotlivou živinu uvedenou v následující tabulce. Konečné výsledky jsou souhrnně uvedeny v následující tabulce.
Tabulka 9
Vliv omezení živin na výtěžek biomasy, účinnost konverze (glukosy na biomasu), obsah lipidů a obsah DHA ve Schizochytrium sp.
| omezená živina | biomasa1 (g/i) | Yx/s2 | RCS3 (g/i) | obsah4 tuku (%) | obsah5 DHA (%) |
| glukosa | 18,7 | 46,8 | 0,0 | 19,8 | 7,3 |
| dusík | 14,5 | 36,3 | 0,6 | 47,5 | 10,3 |
| fosforečnan | 17,8 | 44,5 | 0,8 | 37,0 | 8,2 |
| thiamin | 7,5 | 18,8 | 7,7 | 11,1 | 4,0 |
| zinek | 16,0 | 40,0 | 1,3 | 27,8 | 7,2 |
| měď | 14,0 | 35,0 | 10,4 | 13,8 | 5,3 |
| kobalt | 14,5 | 36,3 | 0,0 | 22,2 | 6,9 |
| nikl | 17,8 | 44,5 | 0,0 | 21,9 | 8,0 |
| železo | 15,9 | 39,8 | 3,5 | 18,5 | 7,2 |
| mangan | 12,5 | 31,3 | 3,4 | 26,1 | 8,0 |
| hořčík | 13,9 | 34,8 | 5,3 | 18,7 | 6,4 |
| vápník | 16,7 | 41,8 | 4,3 | 18,7 | 6,4 |
| vitamin Bi2 | 19,6 | 49,0 | 0,0 | 17,5 | 6,3 |
| molybden | 18,9 | 47,3 | 0,0 | 19,3 | 7,0 |
| pantothenát | 19,2 | 48,0 | 0,0 | 20,4 | 6,7 |
| sodík | 17,9 | 44,8 | 1,8 | 21,8 | 8,2 |
| draslík | 13,0 | 32,5 | 8,8 | 14,1 | 5,3 |
koncentrace suché biomasy (gramy/litr) koeficient výtěžku (% produkované biomasy/spotřebovaná glukosa) koncentrace zbytkové glukosy v živném prostředí (gramy/litr) obsah lipidů ze suché biomasy (g lipidu (jako FAME)/g suché biomasy) obsah DHA v suché biomase (g DHA/g suché biomasy)
Z tabulky je zřejmé, že omezení dusíku vede k nejvyšší akumulaci DHA v buňkách, následuje omezení fosforečnanem, sodíkem, niklem, manganem, glukosou (uhlíkem), zinkem a železem. Tato informace může být použita komerčně napájením jedné nebo více těchto živin do dávkové fermentace takovou rychlostí, která je dostatečná pro to, aby se omezil růst buněk. V nejvýhodnějším případě se dusík napájí omezeným způsobem do dávkové fermentace, aby se maximalizoval obsah DHA v buňkách. Další živiny (nebo jejich směsi) mohou být přiváděny takovým omezujícím způsobem, aby se maximalizovala produkce biomasy nebo jiných cenných produktů. Další biologicky potřebné prvky nebo živiny, které nejsou vyhodnoceny, jako je síra, by se také mohly používat jako omezující živiny v této strategii regulace fermentace.
Předložený vynález, v různých provedeních, zahrnuje složky, způsoby, postupy, systémy a/nebo zařízení v podstatě tak, jak jsou zde navrženy a popsány, včetně různých provedení, subkombinací a jejich podřad. Zruční odborníci z oblasti techniky pochopí jak provádět a používat předložený vynález po pochopení předloženého popisu. Předložený vynález, v různých provedeních, zahrnuje získání zařízení a způsobů v nepřítomnosti položek zde neuvedených a/nebo nepopsaných nebo v jejich různých provedeních, včetně nepřítomnosti takových položek, které mohou být používány v předešlých zařízeních nebo způsobech, např. pro zlepšení provedení, dosažení snadnosti a/nebo snížení ceny provedení.
Předcházející diskuse tohoto vynálezu zde byla presentována pro účely ilustrace a popisu. Předcházející popis není zamýšlen jako omezení vynálezu na formu nebo na formy, které jsou zde popsány. I když popis tohoto vynálezu zahrnuje popis jednoho nebo více provedení a jistých obměn a modifikací, v rozsahu tohoto vynálezu jsou další změny a modifikace, např. takové, které mohou být ve zručnosti a znalosti odborníků z oblasti techniky po porozumění předloženému popisu. Úmyslem je získat práva, která zahrnují alternativní provedení v povoleném rozsahu, včetně alternativních, vzájemně zaměnitelných a/nebo ekvivalentních struktur, funkcí, rozsahů nebo stupňů k těm, které jsou zde nárokovány, ať již jsou zde takové alternativní, vzájemně zaměnitelné a/nebo ekvivalentní struktury, funkce, rozsahy nebo stupně popsány nebo nikoliv, a bez zamýšlení veřejně věnovat jakýkoliv patentovatelný předmět.
Claims (46)
1. Způsob výroby lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny z eukaryotických mikroorganismů schopných produkovat alespoň asi 20 % jejich biomasy jako lipidy, vyznačující se t í m, že se k fermentačnímu mediu obsahujícímu uvedené mikroorganismy přidává nealkoholový zdroj uhlíku a omezený zdroj živin takovou rychlostí, která je postačující pro zvýšení hustoty biomasy uvedeného fermentačního media na alespoň asi 100 g/l.
2. Způsob růstu eukaryotických mikroorganismů schopných produkovat alespoň asi 20 % jejich biomasy jako lipidy, vyznačující se tím, že se k fermentačnímu mediu obsahujícímu uvedené mikroorganismy přidává zdroj uhlíku a omezený zdroj živin takovou rychlostí, která je postačující pro zvýšení hustoty biomasy uvedeného fermentačního media na alespoň asi 100 g/l, přičemž uvedený způsob produkuje alespoň průměrnou rychlost asi 0,5 g/l/h lipidů a alespoň asi 15 % z celkového množství lipidů produkovaných uvedenými organismy znamená polynenasycená lipidy.
3. Způsob růstu eukaryotických mikroorganismů, vyznačující se tím, že se k fermentačnímu mediu obsahujícímu uvedené mikroorganismy přidává zdroj uhlíku a omezený zdroj živin takovou rychlostí, která je postačující pro zvýšení hustoty biomasy uvedeného fermentačního media na alespoň asi 100 g/l, přičemž uvedené mikroorganismy jsou vybrány ze skupiny sestávající z řas, hub (včetně kvasinek), protistů, bakterií a jejich směsí a uvedené mikroorganismy jsou schopny produkovat alespoň asi 20 % jejich biomasy jako lipidy obsahující některé polyenové mastné kyseliny.
4. Způsob výroby eukaryotických mikrobiálních lipidů, vyznačující se t í m. že
a) ve fermentačním mediu se nechají růst eukaryotické mikroorganismy tak, aby zvýšila hustota biomasy uvedeného fermentačního media na alespoň asi 100 g/1,
b) zajistí se takové fermentační podmínky, které jsou postačující pro to, aby umožnily uvedeným mikroorganismům produkovat uvedené lipidy, a
c) isolují se uvedené lipidy, přičemž více než asi 15 % z uvedených lipidů znamená polynenasycené lipidy.
5. Způsob výroby eukaryotických mikrobiálních lipidů, vyznačující se t i m, že
a) k fermentačnímu mediu obsahujícímu uvedené mikroorganismy se přidá nealkoholový zdroj uhlíku a omezený zdroj živin,
b) uvedeným mikroorganismům se poskytují takové podmínky, které jsou postačující pro to, aby uvedené mikroorganismy produkovaly uvedené mikrobiální lipidy, a
c) isolují se uvedené mikrobiální lipidy, přičemž alespoň asi 15 % uvedených mikrobiálních lipidů znamená polynenasycené lipidy.
6. Způsob výroby eukaryotických mikrobiálních lipidů, vyznačující se t i m, že
a) k fermentačnímu mediu, obsahujícímu eukaryotické mikroorganismy a zajišťujícímu takové podmínky, které jsou postačující pro to, aby se množství rozpuštěného kyslíku v uvedeném fermentačním mediu udržovalo na hladině alespoň asi 4 %, se přidá zdroj uhlíku a omezený zdroj živin, takže se produkuje biomasa v hustotě alespoň asi 100 g/l,
b) zajistí se takové podmínky, které jsou postačující pro to, aby se množství rozpuštěného kyslíku v uvedeném fermentačním mediu udržovalo na hladině asi 1 nebo méně % a zajistí se podmínky postačující pro to, aby umožnily uvedeným mikroorganismům produkovat uvedené lipidy, a
c) isolují se uvedené mikrobiální lipidy, přičemž alespoň asi 15 % uvedených mikrobiálních lipidů znamená polynenasycené lipidy.
6. Způsob obohacení obsahu mikroorganismu o polyenové mastné kyseliny, vyznačující se t í m, že se uvedený mikroorganismus fermentuje v růstovém mediu, které má množství rozpuštěného kyslíku menší než 10 %.
7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m, že zahrnuje stupeň zvýšení hustoty biomasy a produkční stupeň, přičemž uvedený stupeň zvyšování hustoty biomasy zahrnuje přidání uvedeného zdroje uhlíku a uvedeného omezeného zdroje živin, a uvedený produkční stupeň zahrnuje přidání uvedeného zdroje uhlíku bez nebo s malým dalším uvedeným omezeným zdrojem živin pro to, aby se indukovaly podmínky omezený živiny, které indukují produkci lipidů.
9. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 4, 5 nebo 8, vyznačující se tím, že množství rozpuštěného kyslíku přítomného v uvedeném fermentačním mediu během uvedeného produkčního stupně nebo stupně produkujícího lipidy je nižší než množství rozpuštěného kyslíku přítomné v uvedeném fermentačním mediu během uvedeného stupně zvyšování hustoty biomasy nebo stupně růstu uvedených mikroorganismů.
10. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 4, 5 nebo 8, vyznačující se tím, že množství rozpuštěného kyslíku, které je přítomno v uvedeném fermentačním mediu během uvedeného stupně zvyšování hustoty biomasy nebo uvedeného stupně růstu mikroorganismů, je alespoň asi 4 %.
11. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 4, 5 nebo 8, vyznačující se tím, že množství rozpuštěného kyslíku, které je přítomno v uvedeném fermentačním mediu během uvedeného produkčního stupně nebo stupně produkujícího uvedený lipid, je alespoň asi 1 %.
12. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 nebo 5, vyznačující se tím, že uvedený nealkoholový zdroj uhlíku obsahuje sacharid.
13. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1, 2, 3, 5 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedený omezený zdroj živin je vybrán ze skupiny sestávající ze zdrojů dusíku, zdrojů uhlíku, zdrojů fosforečnanů, zdrojů vitaminů (jako jsou zdroje vitaminu B12, zdroje pantothenátu a zdroje thiaminu), zdrojů stopových prvků (jako jsou zdroje zinku, zdroje mědi, zdroje kobaltu, zdroje niklu, zdroje železa, zdroje manganu a zdroje molybdenu) a zdrojů hlavních kovů (jako jsou zdroje hořčíku zdroje vápníku, zdroje sodíku a zdroje draslíku), zdrojů oxidu křemičitého a jejich směsí.
14. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1, 2, 3, 5 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedený omezený zdroj živin znamená zdroj stopových prvků nebo zdroj hlavních kovů vybraný ze skupiny sestávající ze síranových a chloridových solí těchto kovů (jako je MgSO4.7 H20, MnCI2.4 H2O, ZnSO4.7 H20, CoCI2.6 H2O, Na2MoO4.2 H2O, CuSO4.5 H2O, NiS04.6 H2O, FeSO4.7 H2O, CaCI2, «2SO4, KCI a Na2SO4) a jejich směsí.
15. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1, 2, 3, 5 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedený omezený zdroj živin obsahuje zdroj dusíku.
16. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1, 2, 3, 5 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedený omezený zdroj živin obsahuje anorganickou amonnou sůl.
17. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1,2,3,5 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedený omezený zdroj živin obsahuje hydroxid amonný.
fc
18. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1, 2, 3, 5 nebo 36, vyznačující se t í m, že pH fermentačního media je uvedeným omezeným zdrojem živin regulováno.
19. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedené fermentační medium nebo růstové medium je při teplotě alespoň asi 20 °C.
20. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se t í m, že uvedený způsob produkuje lipidy průměrnou rychlostí alespoň asi 0,5 g/l/h.
21. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se t í m, že uvedený způsob produkuje lipidy průměrnou rychlostí alespoň asi 0,5 g/l/h, přičemž alespoň asi 15 % uvedených lipidů jsou polynenasycené lipidy.
22. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedený způsob produkuje lipidy při průměrné rychlosti alespoň asi 0,5 g/l/h, přičemž celkové množství omega-3 a omega-6 mastných kyselin je alespoň asi 20 % z uvedených lipidů.
23. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se t í m, že uvedený způsob produkuje lipidy průměrnou rychlostí alespoň asi 0,5 g/l/h, přičemž alespoň asi 25 % z uvedených lipidů znamená dokosahexenovou kyselinu.
24. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se t í m, že uvedené mikroorganismy jsou vybrány ze skupiny sestávající z řas, hub (včetně kvasinek), protist, bakterií a jejich směsí, přičemž uvedené mikroorganismy jsou schopny produkovat polyenové mastné kyseliny nebo jiné lipidy, o kterých se obecně předpokládá, že pro svoji syntézu vyžadují kyslík.
25. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že uvedené mikroorganismy jsou vybrány ze skupiny sestávající z řas, hub (včetně kvasinek), protist, bakterií a jejich směsí, přičemž uvedené mikroorganismy jsou schopny produkovat polyenové mastné kyseliny nebo jiné lipidy, o kterých se obecně předpokládá, že pro svoji syntézu vyžadují kyslík, a uvedené mikroorganismy rostou způsobem s dávkovým napájením.
26. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedené mikroorganismy jsou vybrány ze skupiny sestávající z řas, hub (včetně kvasinek), protist, bakterií a jejich směsí, přičemž uvedené mikroorganismy jsou schopny produkovat polyenové mastné kyseliny nebo jiné lipidy, o kterých se obecně předpokládá, že pro svoji syntézu vyžadují kyslík, a uvedené mikroorganismy rostou způsobem s dávkovým napájením a dále zahrnující udržování hladiny kyslíku v uvedeném fermentačním mediu během produkční fáze uvedeného fermentačního procesu na méně než asi 3 % nasycenosti.
27. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedené mikroorganismy znamenají mikrořasy a mikroorganismy podobné řasám.
28. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se t í m, že uvedené mikroorganismy znamenají Stramenopily.
29. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedené mikroorganismy jsou z řádu Thraustochytriales.
30. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1až7, vyznačující se tím, že uvedené mikroorganismy jsou vybrány ze skupiny Thraustochytrium, Schizochytrium a jejich směsí.
31. Způsob podle nároku 2, v y z n a č u j í c í se t í m, že dále zahrnuje:
• 4 · · · ·
44 44
4 4 4 4 4 4
444 44 44 4444
a) stupeň zvyšování hustoty biomasy, přičemž hladina rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu je alespoň asi 4 %, a
b) stupeň vysoké produkce lipidu, přičemž hladina rozpuštěného kyslíku ve fermentačním mediu je menší než asi 1 %.
32. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 2, 3, 6 nebo 36, vyznačující se t í m, že uvedeným zdrojem uhlíku je nealkoholový zdroj uhlíku.
33. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedeným způsobem se produkuje v průměru alespoň asi 0,2 g/l/h dokosahexenové kyseliny.
34. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že uvedený stupeň isolace lipidů zahrnuje:
d) odstranění vody z uvedeného fermentačního media, takže se získají suché mikroorganismy, a
e) isolování uvedených lipidů z uvedených suchých mikroorganismů.
35. Způsob podle nároku 4, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedený stupeň isolace lipidů zahrnuje:
d) zpracování fermentační živné půdy tak, aby došlo k permeabilizaci, lyžování nebo prasknutí mikrobiálních buněk, a
e) isolování lipidů z fermentační živné půdy gravitačním dělením bez pomoci nebo s pomocí činidla, které napomáhá rozbití emulze lipidu ve vodě.
36. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že uvedený stupeň růstu mikroorganismů zahrnuje přidání zdroje uhlíku a omezený zdroje živin.
37. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 5 nebo 6, vyznačující se tím, že uvedený stupeň isolace lipidů zahrnuje:
• · · · · ·
d) odstranění vody z uvedeného fermentačního media, takže se získají suché mikroorganismy, a
e) isolování uvedených lipidů z uvedených suchých mikroorganismů.
38. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 5 nebo 6, vyznačující se tím, že uvedený stupeň isolace lipidů zahrnuje:
d) odpaření vody z uvedeného fermentačního prostředí bez předchozího odstřeďování, takže se získají suché mikroorganismy, a
e) isolování uvedených lipidů z uvedených suchých mikroorganismů.
39. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 5 nebo 6, vyznačující se tím, že uvedený stupeň isolace lipidů zahrnuje:
d) zpracování fermentační živné půdy tak, aby došlo k permeabilizaci, lyžování nebo prasknutí mikrobiálních buněk, a
e) isolování lipidů z fermentační živné půdy gravitačním dělením bez pomoci nebo s pomocí činidla, které napomáhá rozbití emulze lipidu ve vodě.
40. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 7 nebo 44, vyznačující se tím, že uvedená hladina rozpuštěného kyslíku je menší než 5 %.
41. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 7 nebo 44, vyznačující se tím, že uvedená hladina rozpuštěného kyslíku je menší než 1 %.
42. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že během počáteční fáze růstu je hladina rozpuštěného kyslíku větší než asi 10 procent a během následující produkční fáze je hladina rozpuštěného kyslíku menší než 10 procent.
43. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že uvedený mikroorganismus obsahuje geny polyketidové synthasy.
44. Heterotrofní způsob výroby produktů a mikroorganismů, vyznačující se t im, že
a) uvedené mikroorganismy se kultivují v růstovém mediu, přičemž uvedené mikroorganismy obsahují geny polyketidové synthasy, a
b) množství rozpuštěného kyslíku se udržuje na méně než asi 10 procentech.
45. Způsob podle nároku 44, v y z n a č u j i c i se t i m, že uvedené geny polyketidové synthasy se v uvedených mikroorganismech přirozeně vyskytují.
46. Způsob podle nároku 44, v y z n a č u j i c i se t i m, že uvedené geny polyketidové synthasy se do uvedených mikroorganismů vnášejí geneticky.
47. Způsob podle nároku 44, vyznačující se tím, že během počáteční fáze růstu je množství rozpuštěného kyslíku větší než asi 10 procent a během následující produkční fáze je množství rozpuštěného kyslíku menší než asi 10 procent.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US17858800P | 2000-01-28 | 2000-01-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20022508A3 true CZ20022508A3 (cs) | 2003-02-12 |
| CZ301130B6 CZ301130B6 (cs) | 2009-11-11 |
Family
ID=22653135
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20022508A CZ301130B6 (cs) | 2000-01-28 | 2001-01-26 | Zvýšená produkce lipidu obsahujících polyenové mastné kyseliny ve fermentorech kulturami mikrobu s vysokou hustotou ve fermentorech |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (18) | US6607900B2 (cs) |
| EP (7) | EP2341126A3 (cs) |
| JP (9) | JP2004501603A (cs) |
| KR (6) | KR20100116233A (cs) |
| CN (8) | CN105112463A (cs) |
| AT (1) | ATE374531T1 (cs) |
| AU (4) | AU785124B2 (cs) |
| BR (1) | BRPI0107832B1 (cs) |
| CA (3) | CA2786722A1 (cs) |
| CY (1) | CY1107114T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ301130B6 (cs) |
| DE (2) | DE60130737T3 (cs) |
| DK (1) | DK1251744T4 (cs) |
| ES (4) | ES2653545T3 (cs) |
| HK (1) | HK1050611A1 (cs) |
| HU (1) | HUP0301794A3 (cs) |
| IL (3) | IL150770A0 (cs) |
| MX (2) | MX345559B (cs) |
| NO (1) | NO20023588L (cs) |
| NZ (1) | NZ520420A (cs) |
| PL (1) | PL362620A1 (cs) |
| PT (1) | PT1251744E (cs) |
| RU (1) | RU2326171C2 (cs) |
| TR (1) | TR200302163T3 (cs) |
| TW (3) | TWI310788B (cs) |
| WO (1) | WO2001054510A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200205957B (cs) |
Families Citing this family (181)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
| US20060094089A1 (en) * | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US6451567B1 (en) * | 1988-09-07 | 2002-09-17 | Omegatech, Inc. | Fermentation process for producing long chain omega-3 fatty acids with euryhaline microorganisms |
| WO1996033263A1 (fr) | 1995-04-17 | 1996-10-24 | JAPAN, represented by DIRECTOR-GENERAL OF AGENCY OF INDUSTRIAL SCIENCE AND TECHNOLOGY | Nouveaux micro-organismes capables de produire des acides gras hautement insatures et procede de production d'acides gras hautement insatures utilisant ces micro-organismes |
| US20080175953A1 (en) * | 1995-06-07 | 2008-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Process for the Heterotrophic Production of Microbial Products with High Concentrations of Omega-3 Highly Unsaturated Fatty Acids |
| EP2341126A3 (en) * | 2000-01-28 | 2011-10-05 | Martek Biosciences Corporation | Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors |
| EP1426757B9 (en) * | 2001-09-14 | 2012-01-25 | ARKRAY, Inc. | Method, tool and device for measuring concentration |
| US7560123B2 (en) | 2004-08-12 | 2009-07-14 | Everett Laboratories, Inc. | Compositions and methods for nutrition supplementation |
| EP2266525B1 (en) * | 2002-05-03 | 2012-07-11 | Martek Biosciences Corporation | High quality lipids and methods for producing by enzymatic liberation from biomass |
| US6814983B2 (en) * | 2002-12-10 | 2004-11-09 | Everett Laboratories, Inc. | Compositions and methods for nutrition supplementation |
| US8617617B2 (en) * | 2002-12-10 | 2013-12-31 | Everett Laboratories, Inc. | Methods and kits for co-administration of nutritional supplements |
| US20050019880A1 (en) * | 2003-03-31 | 2005-01-27 | Council Of Scientific And Industrial Research | Method of enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists |
| US7541155B2 (en) | 2003-04-24 | 2009-06-02 | Tyratech, Inc. | Methods of screening compositions for potential insect control activity |
| US7622269B2 (en) * | 2004-03-19 | 2009-11-24 | Tyratech, Inc. | Methods of screening tyramine- and octopamine-expressing cells for compounds and compositions having potential insect control activity |
| US20060263403A1 (en) * | 2003-04-24 | 2006-11-23 | Essam Enan | Compositions and methods for controlling insects involving the tyramine receptor |
| AU2003902794A0 (en) * | 2003-06-03 | 2003-06-19 | Agresearch Limited | Improvements in grass endophytes |
| US7267976B2 (en) | 2003-07-02 | 2007-09-11 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Acyltransferases for alteration of polyunsaturated fatty acids and oil content in oleaginous yeasts |
| US20070015263A1 (en) * | 2003-09-01 | 2007-01-18 | Mogens Wumpelmann | Method for increasing yield of biomass of and/or components of biomass from marine microorganisms |
| AU2004280575B8 (en) | 2003-10-02 | 2010-05-13 | Dsm Ip Assets B.V. | Production of high levels of DHA in microalgae using modified amounts of chloride and potassium |
| WO2005047480A2 (en) * | 2003-11-12 | 2005-05-26 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Delta-15 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous plants and yeast |
| EP2251430B1 (en) | 2003-12-30 | 2015-11-25 | DSM IP Assets B.V. | Deaeration process |
| US8101587B2 (en) | 2004-08-12 | 2012-01-24 | Everett Laboratories, Inc. | Kits for nutrition supplementation |
| JP4849806B2 (ja) * | 2005-02-08 | 2012-01-11 | 日本水産株式会社 | 新規な菌体処理方法を用いた高度不飽和脂肪酸の製造方法 |
| US8241868B2 (en) | 2005-02-08 | 2012-08-14 | Nippon Suisan Kaisha, Ltd. | Production of polyunsaturated fatty acids using cell treatment method |
| EP2447356B1 (en) | 2005-06-07 | 2016-04-20 | DSM Nutritional Products AG | Eukaryotic microorganisms for producing lipids and antioxidants |
| MX300085B (es) | 2005-07-01 | 2012-06-08 | Martek Biosciences Corp | Producto oleoso que contiene acido graso poli-insaturado y usos y produccion del mismo. |
| US8177262B2 (en) * | 2005-07-28 | 2012-05-15 | Hydril Company Lp | Mid-seal for expandable connections |
| DE602006015701D1 (de) * | 2005-12-29 | 2010-09-02 | Abl Biotechnologies Ltd | Neuer schizochytrium-limacinum-stamm, der sich für die produktion von lipiden und extrazellulären polysacchariden eignet, sowie verfahren hierfür |
| EP2043620B1 (en) * | 2006-06-27 | 2017-05-03 | Tyratech, Inc. | Compositions for use in treating a parasitic infections in a mammalian subject |
| CN101489377A (zh) * | 2006-07-17 | 2009-07-22 | 蒂拉德克公司 | 防治昆虫的组合物和方法 |
| MX2009001346A (es) | 2006-08-01 | 2009-04-17 | Ocean Nutrition Canada Ltd | Microbios productores de aceite y metodos de modificacion de los mismos. |
| US9637714B2 (en) * | 2006-12-28 | 2017-05-02 | Colorado State University Research Foundation | Diffuse light extended surface area water-supported photobioreactor |
| MX2009007637A (es) * | 2007-01-16 | 2009-09-28 | Tyratech Inc | Composiciones y metodos para control de pestes. |
| KR20100039846A (ko) * | 2007-06-14 | 2010-04-16 | 닉콜라오스 미트로포울로스 | 바이오연료용 조류의 성장 |
| WO2008155410A1 (en) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Novozymes A/S | Production of lipids containing poly-unsaturated fatty acids |
| AU2008269989B2 (en) * | 2007-06-29 | 2014-02-27 | Dsm Ip Assets B.V. | Production and purification of esters of polyunsaturated fatty acids |
| GB0713121D0 (en) * | 2007-07-06 | 2007-08-15 | Univ Keele | Refrigerated gas equilibration device |
| CN113846129A (zh) | 2007-09-12 | 2021-12-28 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 生物油及其制备与应用 |
| ITMI20072343A1 (it) * | 2007-12-14 | 2009-06-15 | Eni Spa | Processo per la produzione di biomassa algale ad alto contenuto lipidico |
| US7989195B2 (en) * | 2008-02-20 | 2011-08-02 | Washington State University Research Foundation | Heterotrophic algal high cell density production method and system |
| ES2326022B1 (es) | 2008-03-25 | 2010-06-07 | Neuron Biopharma, S.A. | Procedimiento mejorado para la produccion de biodiesel. |
| NZ588586A (en) * | 2008-04-09 | 2012-07-27 | Solazyme Inc | Direct chemical modification of microbial biomass and microbial oils |
| JP5171422B2 (ja) * | 2008-06-19 | 2013-03-27 | ルネサスエレクトロニクス株式会社 | 感光性組成物、これを用いたパターン形成方法、半導体素子の製造方法 |
| US20100050502A1 (en) * | 2008-08-21 | 2010-03-04 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for hydrothermal conversion of algae into biofuel |
| US20100081835A1 (en) * | 2008-09-23 | 2010-04-01 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for producing biofuels from algae |
| US20100236137A1 (en) * | 2008-09-23 | 2010-09-23 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for producing eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid from algae |
| US20100077654A1 (en) * | 2008-09-23 | 2010-04-01 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for producing biofuels from algae |
| US20100239712A1 (en) | 2008-10-14 | 2010-09-23 | Solazyme, Inc. | Food Compositions of Microalgal Biomass |
| US8809037B2 (en) | 2008-10-24 | 2014-08-19 | Bioprocessh20 Llc | Systems, apparatuses and methods for treating wastewater |
| WO2010059598A1 (en) * | 2008-11-18 | 2010-05-27 | LiveFuels, Inc. | Methods for producing fish with high lipid content |
| KR20110097968A (ko) * | 2008-12-19 | 2011-08-31 | 알파-제이 리서치 리미티드 파트너쉽 | 비커플링 세포증식 및 조류 생성물 생성을 통해 조류 생성물 생성을 최적화시키는 방법 |
| US20110306102A1 (en) | 2009-02-25 | 2011-12-15 | V. B. Medicare Pvt. Ltd. | Improved methods for fermentative production of docosahexaenoic acid |
| US8207363B2 (en) * | 2009-03-19 | 2012-06-26 | Martek Biosciences Corporation | Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| EP2418959B1 (en) | 2009-04-14 | 2019-07-24 | Corbion Biotech, Inc. | Novel microalgal food compositions |
| US8753851B2 (en) | 2009-04-17 | 2014-06-17 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for culturing algae with bivalves |
| CA2760921A1 (en) * | 2009-05-04 | 2010-11-11 | Primafuel, Inc. | Improved recovery of desired co-products from fermentation stillage streams |
| CN101899481A (zh) * | 2009-05-25 | 2010-12-01 | 华盛顿州立大学 | 异养海藻高密度生产的方法和系统 |
| CN102656261B (zh) | 2009-09-18 | 2015-07-01 | 菲科尔生物技术国际公司 | 利用控制的光照的微藻发酵 |
| BR112012017831B8 (pt) | 2010-01-19 | 2021-05-25 | Dsm Ip Assets Bv | óleo microbiano, alimento animal e biomassa compreendendo o referido óleo microbiano |
| WO2011112627A1 (en) | 2010-03-11 | 2011-09-15 | BP Biofuels UK Limited | Methods, biological oils, biofuels, units, and organisms related to use in compression engines |
| AU2011226608B2 (en) | 2010-03-12 | 2015-10-29 | Colorado State University Research Foundation | Systems and methods for positioning flexible floating photobioreactors |
| US8617857B2 (en) | 2010-05-04 | 2013-12-31 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Thraustochytrid-based microalgae, and method for preparing bio-oil by using same |
| KR101147450B1 (ko) | 2010-05-04 | 2012-05-21 | 한국생명공학연구원 | 신규 유지성 미세조류 ｋｒｓ１０１ 균주 및 이를 이용한 바이오오일의 제조방법 |
| JP5911479B2 (ja) | 2010-06-01 | 2016-04-27 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． | 細胞からの脂質の抽出およびそれに由来する生産物 |
| WO2011159682A1 (en) | 2010-06-14 | 2011-12-22 | Raveendran Pottathil | Methods for the production of algae derived oils |
| US10479969B2 (en) | 2010-10-11 | 2019-11-19 | Phycoil Biotechnology International. Inc. | Utilization of wastewater for microalgal cultivation |
| CN102485898A (zh) * | 2010-12-02 | 2012-06-06 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 微生物发酵生产脂质的方法 |
| WO2012109375A2 (en) * | 2011-02-08 | 2012-08-16 | Phycal Inc. | Methods for improved mixed trophic algal culture |
| CN107630017A (zh) | 2011-03-07 | 2018-01-26 | Dsm营养产品股份公司 | 工程化破囊壶菌属微生物 |
| US9487716B2 (en) | 2011-05-06 | 2016-11-08 | LiveFuels, Inc. | Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems |
| MX349840B (es) | 2011-06-23 | 2017-08-16 | Rho Renewables Inc | Sistemas de produccion recombinante para moleculas aromaticas. |
| US8183227B1 (en) | 2011-07-07 | 2012-05-22 | Chemo S. A. France | Compositions, kits and methods for nutrition supplementation |
| EA027917B1 (ru) * | 2011-07-13 | 2017-09-29 | Оллтек, Инк. | Липидные композиции из водорослей и способы их получения и применения |
| KR102038715B1 (ko) * | 2011-07-21 | 2019-10-31 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 에이코사펜타엔산-생산 미생물, 지방산 조성물, 및 이의 생산 방법 및 용도 |
| MX342216B (es) | 2011-07-21 | 2016-09-20 | Dsm Ip Assets Bv | Composiciones de acidos grasos. |
| WO2013032333A1 (en) * | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Algae Biotech S.L. | Oral dosage units containing astaxanthin, phospholipids and omega-3 fatty acids |
| US8168611B1 (en) | 2011-09-29 | 2012-05-01 | Chemo S.A. France | Compositions, kits and methods for nutrition supplementation |
| MX2014011979A (es) | 2012-04-09 | 2015-01-16 | Bp Biofuels Uk Ltd | Microorganismos bajos en polisacaridos para la produccion de biocombustibles y otros materiales renovables. |
| US10100338B2 (en) * | 2012-05-22 | 2018-10-16 | Ineos Bio S.A. | Method of operation of a syngas fermentation process |
| RU2539766C2 (ru) * | 2012-08-03 | 2015-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | ШТАММ Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu T/05-117 - ПРОДУЦЕНТ ЛИПИДОСОДЕРЖАЩЕЙ БИОМАССЫ |
| CN102864111B (zh) * | 2012-10-10 | 2013-07-17 | 江南大学 | 一株产二十二碳六烯酸的裂殖壶菌菌株 |
| ES2771373T3 (es) | 2012-10-17 | 2020-07-06 | Corbion Biotech Inc | Granulos de harina microalgal y proceso de preparación de los mismos |
| EP2724625A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-04-30 | Roquette Freres | Microalgal flour granules and process for preparation thereof |
| US9394505B2 (en) | 2012-12-04 | 2016-07-19 | Flint Hills Resources, Lp | Recovery of co-products from fermentation stillage streams |
| WO2014112574A1 (ja) | 2013-01-18 | 2014-07-24 | 協和発酵バイオ株式会社 | ドコサヘキサエン酸を生産する微生物及びその利用 |
| EP2762009A1 (de) | 2013-02-05 | 2014-08-06 | Evonik Industries AG | Verbesserung der Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen |
| EP2953480B1 (de) | 2013-02-05 | 2020-06-03 | Evonik Operations GmbH | Verbesserung der bioverfügbarkeit von wertstoffen aus mikroorganismen |
| DE102013201978A1 (de) | 2013-02-07 | 2014-08-07 | Evonik Industries Ag | Verbesserte Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen |
| EP2762008A1 (de) | 2013-02-05 | 2014-08-06 | Evonik Industries AG | Verbesserung der Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen durch Verwendung eines Rotor-Stator Systems für den Zellaufschluss |
| EP2968568A2 (en) * | 2013-03-11 | 2016-01-20 | Life Science Nutrition AS | Natural lipids containing non-oxidizable fatty acids |
| US9873880B2 (en) | 2013-03-13 | 2018-01-23 | Dsm Nutritional Products Ag | Engineering microorganisms |
| EP2777400A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-17 | Roquette Freres | Microalgal flour granules and process for preparation thereof |
| MX361324B (es) | 2013-03-29 | 2018-11-20 | Corbion Biotech Inc | Metodo de enriquecimiento proteico de la biomasa de microalgas. |
| EP2826384A1 (de) | 2013-07-16 | 2015-01-21 | Evonik Industries AG | Verfahren zur Trocknung von Biomasse |
| FR3008581B1 (fr) | 2013-07-19 | 2016-11-04 | Roquette Freres | Farine de microalgues riches en lipides et procede de preparation |
| CN105636456A (zh) | 2013-10-18 | 2016-06-01 | 罗盖特公司 | 用于使微藻生物质有质感的方法 |
| IN2013CH05134A (cs) | 2013-11-12 | 2015-05-29 | Roshan Viswanath Makam | |
| KR101541521B1 (ko) | 2013-11-28 | 2015-08-03 | 롯데케미칼 주식회사 | 미세조류를 이용한 도코사헥사엔산 생산방법 |
| MX369665B (es) | 2013-11-29 | 2019-11-14 | Corbion Biotech Inc | Proceso para el enriquecimiento de biomasa de microalgas con carotenoides y con proteinas. |
| CN105792668B (zh) | 2013-11-29 | 2024-04-19 | 科比恩生物技术有限公司 | 富含蛋白的微藻生物质粉的颗粒和用于制备它的方法 |
| FR3015516B1 (fr) * | 2013-12-19 | 2016-01-22 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement en dha de la biomasse de microalgues du genre thraustochytrium |
| JP2017501709A (ja) | 2013-12-20 | 2017-01-19 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． | 微生物細胞から微生物油を入手する方法 |
| CN115141859A (zh) | 2013-12-20 | 2022-10-04 | 玛拉可再生能源公司 | 从微生物中回收油的方法 |
| US11124736B2 (en) | 2013-12-20 | 2021-09-21 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
| KR102435268B1 (ko) | 2013-12-20 | 2022-08-22 | 디에스엠 뉴트리셔널 프라덕츠 아게 | 미생물로부터 오일을 회수하는 방법 |
| NZ721417A (en) | 2013-12-20 | 2022-07-01 | Dsm Ip Assets Bv | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
| SG11201605052XA (en) | 2013-12-20 | 2016-07-28 | Dsm Ip Assets Bv | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
| KR20160108339A (ko) | 2014-01-20 | 2016-09-19 | 로께뜨프레르 | 미세조류 바이오매스의 단백질 증량 방법 |
| ES2795325T3 (es) * | 2014-02-28 | 2020-11-23 | Delft Advanced Biofuels B V | Procedimiento para la recuperación de lípidos o hidrocarburos |
| CN106795539B (zh) | 2014-05-22 | 2021-06-22 | 玛拉可再生能源公司 | 在微生物中产生油的方法 |
| US20150352034A1 (en) | 2014-06-08 | 2015-12-10 | Solazyme, Inc. | Personal Care Products Containing Microalgae or Extracts Thereof |
| CN107075532B (zh) * | 2014-07-03 | 2021-07-13 | 芬德集团公司 | 嗜酸性尖镰孢菌株及其生产和使用方法 |
| CA2958460C (en) * | 2014-10-02 | 2022-09-13 | Evonik Industries Ag | Process for producing a pufa-containing feedstuff by extruding a pufa-containing biomass |
| BR112017006833B1 (pt) | 2014-10-02 | 2022-09-13 | Evonik Operations Gmbh | Alimento para animais contendo ácido graxo poli-insaturado e processo para produzir o mesmo |
| EP3200604B1 (de) | 2014-10-02 | 2021-11-03 | Evonik Operations GmbH | Verfahren zur herstellung eines futtermittels |
| CA2958457C (en) | 2014-10-02 | 2022-10-25 | Evonik Industries Ag | Process for producing a pufa-containing biomass which has high cell stability |
| EP3207164B1 (en) | 2014-10-16 | 2021-01-20 | Mara Renewables Corporation | Semi-continuous culture methods |
| BR112017003558B1 (pt) | 2014-10-16 | 2023-10-03 | MARA Renewables Corporation | Método de repetição de batelada alimentada de cultivo de um microorganismo |
| US10570427B2 (en) * | 2014-10-31 | 2020-02-25 | Lanzatech New Zealand Limited | Fermentation process for the production of lipids |
| EP3225691B1 (en) * | 2014-11-28 | 2020-10-28 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing isoprenoid compound |
| FR3030191B1 (fr) | 2014-12-18 | 2018-03-23 | Corbion Biotech, Inc. | Composition pour produit frit allege en matiere grasse et procede de fabrication |
| US9890402B2 (en) | 2015-01-24 | 2018-02-13 | Indian Oil Corporation Limited | Thraustochytrid based process for treating waste effluents |
| FR3031984B1 (fr) * | 2015-01-27 | 2019-05-24 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement de la biomasse de microalgues du genre traustochytrium en dha et en acides amines arg et glu |
| BR112017020483B1 (pt) | 2015-03-24 | 2021-07-06 | Terravia Holdings, Inc | Lubrificante de filme seco ou sólido e método para fornecer lubrificação a uma superfície |
| AR104042A1 (es) | 2015-03-26 | 2017-06-21 | Mara Renewables Corp | Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto |
| JP6977231B2 (ja) | 2015-07-13 | 2021-12-08 | マラ リニューアブルズ コーポレーション | Ｃ５有機炭素の微生物による代謝の増強 |
| CN104974944B (zh) * | 2015-07-15 | 2018-05-25 | 南京工业大学 | 一种产dha的裂殖壶菌基因工程菌及其构建方法和应用 |
| ITUB20152958A1 (it) | 2015-08-06 | 2017-02-06 | Eni Spa | Metodo per concentrare una sospensione cellulare comprendente una biomassa mucillaginosa di lieviti oleaginosi. |
| CN105002227B (zh) * | 2015-08-24 | 2018-09-07 | 青岛旭能生物工程有限责任公司 | 一种通过流加策略提高摇瓶发酵裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法 |
| CN105018539B (zh) * | 2015-08-24 | 2019-02-12 | 青岛旭能生物工程有限责任公司 | 一种培养裂殖壶菌高产dha的方法 |
| CN105420122A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-23 | 通威股份有限公司 | 可高密度培养的裂殖壶菌及其生产富含dha的油脂的方法 |
| WO2017131188A1 (ja) * | 2016-01-28 | 2017-08-03 | 日本水産株式会社 | 高度不飽和脂肪酸を含む油脂の製造方法 |
| SG10201911173UA (en) | 2016-03-01 | 2020-02-27 | Sustainable Bioproducts Inc | Filamentous fungal biomats, methods of their production and methods of their use |
| US10851395B2 (en) | 2016-06-10 | 2020-12-01 | MARA Renewables Corporation | Method of making lipids with improved cold flow properties |
| BR112019000435A2 (pt) | 2016-07-13 | 2019-04-30 | Evonik Degussa Gmbh | método para separar lipídios de uma biomassa contendo lipídios lisados |
| CA3030471C (en) | 2016-07-13 | 2023-06-20 | Evonik Degussa Gmbh | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| AU2017297752B2 (en) | 2016-07-13 | 2021-09-23 | Dsm Ip Assets B.V. | Method for isolating lipids from lipid-containing cells |
| AU2017301024B2 (en) | 2016-07-20 | 2019-10-17 | MARA Renewables Corporation | A two-step fractionation method for winterizing oil. |
| EP3487970B1 (en) | 2016-07-20 | 2023-04-05 | Mara Renewables Corporation | Method of production of flowable crude microbial oil |
| CN106359930A (zh) * | 2016-08-29 | 2017-02-01 | 界首市任寨乡天佑家庭农场 | 一种用于生产epa、dpa含量高的功能性牛肉饲料 |
| WO2018122057A1 (en) | 2016-12-27 | 2018-07-05 | Evonik Degussa Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| EP3562925B1 (en) | 2016-12-27 | 2021-03-10 | Evonik Operations GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| CN106636235B (zh) * | 2016-12-30 | 2020-08-04 | 内蒙古金达威药业有限公司 | 一种利用微生物发酵生产dha的方法 |
| TWI661780B (zh) * | 2017-02-10 | 2019-06-11 | 台原藥股份有限公司 | 含不飽和脂肪酸的素食組合物 |
| WO2019013832A1 (en) | 2017-07-12 | 2019-01-17 | Bunge Global Innovation Llc | METHOD FOR EXTRACTING OIL FROM ALGAE BIOMASS |
| CA3072846A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Evonik Operations Gmbh | Enhanced production of lipids by limitation of at least two limiting nutrient sources |
| AU2018324028B2 (en) | 2017-08-30 | 2021-08-12 | The Fynder Group, Inc. | Edible composition with filamentous fungi and bioreactor system for the cultivation thereof |
| WO2019048327A1 (en) | 2017-09-05 | 2019-03-14 | Evonik Degussa Gmbh | METHOD FOR SEPARATING LIPIDS IN A BIOMASS CONTAINING LYDE LIPIDS |
| EP3470502A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-17 | Evonik Degussa GmbH | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| EA202090440A1 (ru) | 2017-09-21 | 2020-07-17 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Улучшенное получение липидов путем ограничения по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ |
| WO2019121752A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Evonik Degussa Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| EP3527664A1 (en) | 2018-02-15 | 2019-08-21 | Evonik Degussa GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| WO2019122030A1 (en) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | Dsm Ip Assets B.V. | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| WO2019185888A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of tocopherols |
| WO2019185939A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of twin-chromanols as antioxidants in oil |
| WO2019185894A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols |
| WO2019185898A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted 2h-chromens and their derivatives |
| WO2019185940A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of twin-chromanols as antioxidants |
| WO2019185891A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols |
| CN113166090A (zh) | 2018-03-29 | 2021-07-23 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 在位置2具有延伸的亲脂性侧链的色满-6-醇、其制造和用途 |
| WO2019185942A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of tocotrienols as antioxidants |
| WO2019185910A2 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted 2h-chromens and their derivatives |
| WO2019185941A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols with extended lipophilic side chains |
| WO2019185938A2 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols with extended lipophilic side chains |
| WO2019185889A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of carnosic acid |
| WO2019219396A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Evonik Operations Gmbh | Method of isolating lipids from a lysed lipids containing biomass by emulsion inversion |
| WO2019219443A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Evonik Operations Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass with aid of hydrophobic silica |
| CN109022284B (zh) * | 2018-09-03 | 2021-05-21 | 杭州园泰生物科技有限公司 | 提高球等鞭金藻生物量以及dha产量的方法 |
| FR3085962B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-06-18 | Fermentalg | Procede d'extracton d'une huile riche en pufa |
| FR3085825B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-07-16 | Fermentalg | Huile de microorganismes riche en acide docosahexaenoique |
| US20220017929A1 (en) * | 2018-11-09 | 2022-01-20 | Evonik Operations Gmbh | Method for producing a biomass with an increased content of polyunsaturated fatty acids |
| US20220017930A1 (en) | 2018-11-09 | 2022-01-20 | Evonik Operations Gmbh | Method for producing a biomass which can be easily broken down and which has an increased content of polyunsaturated fatty acids |
| KR102286636B1 (ko) * | 2019-01-31 | 2021-08-05 | 한국생명공학연구원 | 로리오라이드 생산성이 높은 신규 미세조류 |
| SG11202108709PA (en) | 2019-02-27 | 2021-09-29 | The Fynder Group Inc | Food materials comprising filamentous fungal particles and membrane bioreactor design |
| CA3143603A1 (en) | 2019-06-18 | 2020-12-24 | The Fynder Group, Inc. | Fungal textile materials and leather analogs |
| EP3933016A1 (en) | 2020-06-30 | 2022-01-05 | Evonik Operations GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| WO2022228687A1 (en) | 2021-04-29 | 2022-11-03 | S2B Gmbh & Co. Kg | Biotechnological production of terpenes |
| TWI766669B (zh) * | 2021-04-29 | 2022-06-01 | 大自然環保科技有限公司 | 有機液體生物醱酵槽裝置 |
| EP4180513A1 (en) | 2021-11-15 | 2023-05-17 | Indian Oil Corporation Limited | An improved process for production of enriched algal biomass |
| EP4198136A3 (en) | 2021-12-16 | 2023-08-30 | Indian Oil Corporation Limited | Methods and formulations for enhancing high value lipids |
| WO2023144707A1 (en) | 2022-01-25 | 2023-08-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Media refinement and nutrient feeding approaches to increase polyunsaturated fatty acid production |
Family Cites Families (140)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2879162A (en) | 1956-10-04 | 1959-03-24 | Du Pont | Augmenting poultry feed |
| US2890989A (en) | 1957-07-01 | 1959-06-16 | Ralph F Anderson | Method for the production of carotenes |
| GB857161A (en) | 1958-01-07 | 1960-12-29 | Boots Pure Drug Co Ltd | Improvements in the propagation of fungi |
| US3108402A (en) * | 1961-03-16 | 1963-10-29 | Grain Processing Corp | Production of carotenoid pigments |
| US3444647A (en) | 1961-08-08 | 1969-05-20 | Masahito Takahashi | Process of cultivating algae |
| US3142135A (en) | 1962-02-13 | 1964-07-28 | Grain Processing Corp | Production of carotenoids by the cultivation of algae |
| US3282794A (en) | 1963-09-19 | 1966-11-01 | Ajinomoto Kk | Method of producing citrulline by bacterial fermentation |
| US3296079A (en) | 1963-12-09 | 1967-01-03 | Pfizer & Co C | Products sweetened without sugar and characterized by freedom from aftertaste |
| US3316674A (en) | 1964-09-11 | 1967-05-02 | Yakult Honsha Kk | Method of new industrial cultivation of unicellular green algae such as chlorella |
| GB1143405A (en) | 1965-02-25 | 1969-02-19 | Unilever Ltd | Processing of foodstuffs and the like |
| GB1123884A (en) | 1966-05-23 | 1968-08-14 | Pfizer & Co C | Animal feed compositions |
| FR1557635A (cs) | 1967-04-20 | 1969-02-21 | ||
| US3661663A (en) * | 1968-08-21 | 1972-05-09 | Owens Corning Fiberglass Corp | Method of producing siliceous fiber corrosion inhibiting composites |
| DE1901980A1 (de) * | 1969-01-16 | 1970-09-03 | Wunder Kg Heinrich | Sicherheits-Skibindung mit ausschwenkbarem Andrueckbacken |
| US3761588A (en) | 1969-02-06 | 1973-09-25 | Meiji Seika Kaisha | Antibiotics and production thereof |
| US3617299A (en) | 1969-09-15 | 1971-11-02 | Abbott Lab | Animal feed premix resistant to static charge and method of making same |
| US3647482A (en) | 1970-03-04 | 1972-03-07 | Gen Mills Inc | Reduction and modification of the unpleasant aftertaste of saccharin |
| GB1401956A (en) | 1971-09-11 | 1975-08-06 | Marmite Ltd | Growing of yeast and other microorganisms |
| US3924017A (en) | 1972-07-28 | 1975-12-02 | Gen Foods Corp | Sweetness inducer |
| JPS564233B2 (cs) | 1973-03-30 | 1981-01-29 | ||
| US3908028A (en) | 1973-04-19 | 1975-09-23 | Procter & Gamble | Soft drink composition containing paramethoxycinnamaldehyde as a flavoring agent and sweetner |
| US3908026A (en) | 1973-04-19 | 1975-09-23 | Procter & Gamble | Culinary composition containing paramethoxycinnamaldehyde as a flavoring agent and sweetener |
| GB1466853A (en) | 1973-05-22 | 1977-03-09 | Simon Rosedowns Ltd | Extraction |
| US3879890A (en) | 1974-02-06 | 1975-04-29 | Canadian Patents Dev | Algal polysaccharide production |
| US4162324A (en) | 1975-11-21 | 1979-07-24 | Merck & Co., Inc. | Antibiotics 890A1 and 890A3 |
| IT1109471B (it) * | 1976-08-17 | 1985-12-16 | Deral Sa | Procedimento e prodotto per la conservazione e la valorizzazione di vegetali a verde e dei sotto prodotti umidi delle industrie agro alimentari |
| JPS5944020B2 (ja) | 1978-01-27 | 1984-10-26 | 協和醗酵工業株式会社 | 油脂酵母による海産魚類の飼育方法 |
| US4229544A (en) | 1978-08-08 | 1980-10-21 | Payfer Laboratories Inc. | Living organism packaging |
| US4304794A (en) | 1978-12-14 | 1981-12-08 | Chimicasa Gmbh | Artificial-sweetener composition and process of preparing and using same |
| US4232122A (en) | 1979-01-17 | 1980-11-04 | Z-L Limited Partnership | Antioxidants, antioxidant compositions and methods of preparing and using same |
| JPS55111794A (en) * | 1979-02-19 | 1980-08-28 | Agency Of Ind Science & Technol | Production of lipid having high linolic acid content |
| US4405649A (en) * | 1979-05-07 | 1983-09-20 | Marvin Dudley | Process for producing premium quality fish meal from whole fish |
| IL57712A (en) * | 1979-07-03 | 1984-02-29 | Yissum Res Dev Co | Cultivation of halophilic algae of the dunaliella species for the production of fuel-like product |
| DE3011185A1 (de) | 1980-03-22 | 1981-10-01 | Kali-Chemie Pharma Gmbh, 3000 Hannover | Verfahren zur gewinnung von fuer physiologische zwecke direkt verwendbarem rin(paragraph)lecithin |
| GB2098065A (en) | 1981-04-14 | 1982-11-17 | Nippon Suisan Kaisha Ltd | Antithrombotic compositions containing docosahexaenoic acid |
| US4426396A (en) | 1981-06-11 | 1984-01-17 | Union Oil Company Of California | Preservation of harvested crops and animal feedstuffs |
| IL63734A (en) | 1981-09-04 | 1985-07-31 | Yeda Res & Dev | Lipid fraction,its preparation and pharmaceutical compositions containing same |
| WO1983001257A1 (en) | 1981-10-07 | 1983-04-14 | Curtain, Cyril, Curtis | Method for harvesting algae |
| US4383038A (en) * | 1981-12-10 | 1983-05-10 | Ethyl Corporation | Process for the preparation of L-proline by cultivating algae |
| ATE24266T1 (de) | 1982-04-16 | 1987-01-15 | Nestle Sa | Lipidhaltige zusammensetzung fuer die orale, enterale oder parenterale ernaehrung. |
| JPS58196068A (ja) | 1982-05-12 | 1983-11-15 | Nec Corp | 電歪効果素子 |
| JPS58213613A (ja) | 1982-06-03 | 1983-12-12 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 球型活性炭の製造方法 |
| US4670285A (en) | 1982-08-06 | 1987-06-02 | The University Of Toronto Innovations Foundation | Infant formula |
| US4425396A (en) | 1982-09-28 | 1984-01-10 | The B. F. Goodrich Company | Insulative panel |
| US4588600A (en) | 1983-04-18 | 1986-05-13 | Scm Corporation | Dry premix composition for imparting a fried appearance to baked foods |
| JPS6087798A (ja) | 1983-10-21 | 1985-05-17 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 藻類によるエイコサペンタエン酸の生産方法 |
| JPS60105471A (ja) | 1983-11-14 | 1985-06-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 健康食品卵の生産方法 |
| JPS60133094A (ja) | 1983-12-21 | 1985-07-16 | 日清製油株式会社 | 高純度エイコサペンタエン酸の製造法 |
| EP0155420B1 (en) | 1984-02-09 | 1988-03-23 | The Agency of Industrial Science and Technology | A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom |
| JPS61170366A (ja) | 1985-01-21 | 1986-08-01 | Nisshin Kararingu Kk | 多価不飽和脂肪酸含有魚類を主成分とする食品の製造方法 |
| IL74497A (en) | 1985-03-05 | 1990-02-09 | Proterra Ag | Pharmaceutical compositions containing phenyl carbamate derivatives and certain phenyl carbamate derivatives |
| US4634533A (en) | 1985-04-26 | 1987-01-06 | Somerville Robert L | Method of converting brines to useful products |
| US4792418A (en) | 1985-08-14 | 1988-12-20 | Century Laboratories, Inc. | Method of extraction and purification of polyunsaturated fatty acids from natural sources |
| US4749522A (en) * | 1985-10-31 | 1988-06-07 | Angio-Medical Corporation | Supercritical fluid extraction of animal derived materials |
| DE3603000A1 (de) | 1986-01-31 | 1987-08-06 | Milupa Ag | Neue polyensaeure-reiche fettmischung und deren verwendung bei der herstellung von saeuglingsnahrungen |
| JPS6340711A (ja) | 1986-08-06 | 1988-02-22 | Ngk Insulators Ltd | β型窒化珪素の製造法 |
| US4758438A (en) | 1986-10-14 | 1988-07-19 | Stroz John J | Sweetener composition |
| US4804555A (en) | 1986-10-21 | 1989-02-14 | General Mills, Inc. | Physical process for simultaneous deodorization and cholesterol reduction of fats and oils |
| US5023091A (en) | 1987-03-23 | 1991-06-11 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Ruminant feed method of making and method of using |
| US5064665A (en) | 1987-03-23 | 1991-11-12 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Method of making and using a ruminant feed |
| US4957748A (en) | 1987-03-23 | 1990-09-18 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Ruminant feed, method of making and method of using |
| JPS63237745A (ja) | 1987-03-27 | 1988-10-04 | Harumi Okuyama | α−リノレン酸系脂肪酸の含有率が高められた動物性食品の生産方法 |
| US4764392A (en) * | 1987-04-01 | 1988-08-16 | Q.P. Corporation | Margarine containing fish oil |
| US4918104A (en) | 1987-06-16 | 1990-04-17 | Weiss Howard S | Method and composition for increasing the concentration of omega-3 polyunsaturated fatty acids in poultry and poultry eggs and poultry and eggs resulting therefrom |
| KR890701751A (ko) * | 1987-07-20 | 1989-12-21 | 원본 미기재 | 오메가-3(n-3) 지질의 미생물 생성물 |
| CA1263270A (en) | 1987-08-19 | 1989-11-28 | Bruce J. Holub | Animal feed supplement |
| US4871551A (en) | 1988-02-08 | 1989-10-03 | Microbio Resources, Inc. | Pigmentation supplements for animal feed compositions |
| JP2723243B2 (ja) | 1988-02-25 | 1998-03-09 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸添加動物飼料 |
| JPH01218573A (ja) | 1988-02-25 | 1989-08-31 | Yoshio Tanaka | ドナリエラ藻体含有固形状食品の製造法 |
| US4822500A (en) | 1988-02-29 | 1989-04-18 | Texas United Chemical Corporation | Saturated brine well treating fluids and additives therefore |
| US4874629A (en) | 1988-05-02 | 1989-10-17 | Chang Stephen S | Purification of fish oil |
| US20060094089A1 (en) | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5985348A (en) | 1995-06-07 | 1999-11-16 | Omegatech, Inc. | Milk products having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US6451567B1 (en) | 1988-09-07 | 2002-09-17 | Omegatech, Inc. | Fermentation process for producing long chain omega-3 fatty acids with euryhaline microorganisms |
| US5698244A (en) * | 1988-09-07 | 1997-12-16 | Omegatech Inc. | Method for raising animals having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5130242A (en) | 1988-09-07 | 1992-07-14 | Phycotech, Inc. | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5340742A (en) | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
| US6977167B2 (en) | 1988-09-07 | 2005-12-20 | Martek Biosciences Corporation | Mixtures of omega-3 and omega-6 highly unsaturated fatty acids from euryhaline microorganisms |
| US5340594A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Food product having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US7033584B2 (en) | 1988-09-07 | 2006-04-25 | Omegatech, Inc. | Feeding Thraustochytriales to poultry for increasing omega-3 highly unsaturated fatty acids in eggs |
| US5012761A (en) | 1988-11-17 | 1991-05-07 | Oh Suk Y | Chicken egg having relatively high percentage of long chain fatty acids and method of reducing heart related disease in humans using such eggs |
| JP2664452B2 (ja) | 1988-12-23 | 1997-10-15 | サントリー株式会社 | 魚貝類用餌料 |
| DE3920679A1 (de) | 1989-06-23 | 1991-01-10 | Milupa Ag | Fettmischung zur herstellung von nahrungen, insbesondere saeuglingsnahrungen |
| US5272085A (en) | 1989-10-31 | 1993-12-21 | Queen's University | Sodium tolerance genes derived from schizosaccharomyces pombe |
| US5407957A (en) | 1990-02-13 | 1995-04-18 | Martek Corporation | Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates |
| US5244921A (en) * | 1990-03-21 | 1993-09-14 | Martek Corporation | Eicosapentaenoic acids and methods for their production |
| JPH0458847A (ja) | 1990-06-23 | 1992-02-25 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | 抗肥満症油脂および抗肥満症食品 |
| US5297625A (en) | 1990-08-24 | 1994-03-29 | Associated Universities, Inc. | Biochemically enhanced oil recovery and oil treatment |
| JP3102645B2 (ja) | 1990-10-15 | 2000-10-23 | 雪印乳業株式会社 | 栄養補給用栄養組成物 |
| US5133963A (en) | 1990-12-21 | 1992-07-28 | Shuntaro Ise | Method of producing commercially useful poultry products with increased concentrations of Omega-3 polyunsaturated fatty acids |
| PH11992043811B1 (en) * | 1991-01-24 | 2002-08-22 | Martek Corp | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
| AU661297B2 (en) * | 1991-01-24 | 1995-07-20 | Martek Corporation | Microbial oil mixtures and uses thereof |
| US5658767A (en) * | 1991-01-24 | 1997-08-19 | Martek Corporation | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
| DE4101976C2 (de) | 1991-01-24 | 1995-09-21 | Adatomed Pharma Chiron | Behandlungssystem für Netzhautentfaltung |
| JPH0728677B2 (ja) | 1991-01-25 | 1995-04-05 | 理研ビタミン株式会社 | 養魚飼料用油脂組成物及びこれを用いた養魚飼料 |
| JPH04271754A (ja) | 1991-02-26 | 1992-09-28 | Nippon Nousan Kogyo Kk | 家畜、家禽用飼料および畜肉の生産方法 |
| KR940005180B1 (ko) | 1991-08-20 | 1994-06-13 | 주식회사 우방랜드 | n-3 지방산이 축적된 돈육 생산용 사료 조성물 |
| FR2686619B1 (fr) | 1992-01-28 | 1995-07-13 | Commissariat Energie Atomique | Procede de production selective de lipides poly-insatures a partir d'une culture de micro-algues du type porphyridium et cuve utilisee dans ce procede. |
| GB2266652B (en) | 1992-05-06 | 1995-11-22 | Woobang Land Company Ltd | Feed composition for a broiler |
| US6410281B1 (en) * | 1992-07-10 | 2002-06-25 | Omegatech, Inc. | Reducing corrosion in a fermentor by providing sodium with a non-chloride sodium salt |
| KR940007396A (ko) | 1992-09-30 | 1994-04-27 | 스마 요시츠기 | 교차 홈 타입의 등속회전 조인트 |
| JP2558050B2 (ja) | 1993-02-18 | 1996-11-27 | イセ食品株式会社 | 鶏用飼料 |
| JPH078215A (ja) | 1993-04-30 | 1995-01-13 | Kawasaki Steel Corp | ドコサヘキサエン酸含有海洋性微細藻類食品素材およびその製造方法 |
| JPH07255387A (ja) | 1994-03-24 | 1995-10-09 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 食用家禽用飼料及び該飼料を用いる食用家禽の飼養方 法 |
| DE59506314D1 (de) | 1994-08-16 | 1999-08-05 | Frische Gmbh | Verfahren zur gewinnung von nicht wasserlöslichen, nativen produkten aus nativen stoffgemengen mit hilfe der zentrifugalkraft |
| WO1996033263A1 (fr) * | 1995-04-17 | 1996-10-24 | JAPAN, represented by DIRECTOR-GENERAL OF AGENCY OF INDUSTRIAL SCIENCE AND TECHNOLOGY | Nouveaux micro-organismes capables de produire des acides gras hautement insatures et procede de production d'acides gras hautement insatures utilisant ces micro-organismes |
| JP2764572B2 (ja) * | 1995-04-17 | 1998-06-11 | 工業技術院長 | ドコサヘキサエン酸生産能を有する新規微生物及びそれを用いたドコサヘキサエン酸の製造方法 |
| JPH08322475A (ja) | 1995-05-29 | 1996-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 家禽類用飼料 |
| TW486365B (en) | 1995-05-30 | 2002-05-11 | Suntory Ltd | The process for producing domestic fowl eggs, lipid and food having a high content of highly unsaturated fatty acid |
| US20080175953A1 (en) * | 1995-06-07 | 2008-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Process for the Heterotrophic Production of Microbial Products with High Concentrations of Omega-3 Highly Unsaturated Fatty Acids |
| JPH0965971A (ja) * | 1995-09-04 | 1997-03-11 | Mitsuo Fukushige | 加熱調理容器 |
| JPH0965871A (ja) * | 1995-09-04 | 1997-03-11 | Kawasaki Steel Corp | 海洋性微細藻類の培養方法 |
| JPH0984590A (ja) | 1995-09-21 | 1997-03-31 | Itouen:Kk | α−リノレン酸の製造法 |
| JPH09110888A (ja) | 1995-10-17 | 1997-04-28 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | リン脂質組成物 |
| US6255505B1 (en) * | 1996-03-28 | 2001-07-03 | Gist-Brocades, B.V. | Microbial polyunsaturated fatty acid containing oil from pasteurised biomass |
| EP0821068A3 (en) * | 1996-03-29 | 1999-06-02 | Rohm And Haas Company | Novel sphingolipids and a process thereto |
| EE04063B1 (et) * | 1996-07-23 | 2003-06-16 | Nagase Biochemicals, Ltd. | Meetod dokosaheksaeenhappe ning dokosapentaeenhappe valmistamiseks |
| FI964692A0 (fi) * | 1996-11-25 | 1996-11-25 | Primalco Ltd | Foerbaettrad cellulassammansaettning foer bioefterbehandling av textilmaterial som innehaoller cellulosa |
| PL335227A1 (en) * | 1997-02-20 | 2000-04-10 | Dsm Nv | Industrial-scale production of valuable compounds by fermentation in a chemically defined medium |
| US6566583B1 (en) | 1997-06-04 | 2003-05-20 | Daniel Facciotti | Schizochytrium PKS genes |
| EP1003869A1 (en) † | 1997-06-04 | 2000-05-31 | Calgene LLC | Production of polyunsaturated fatty acids by expression of polyketide-like synthesis genes in plants |
| EP1021083B1 (en) * | 1997-08-14 | 2003-05-07 | Martek Biosciences Boulder Corporation | A method for increasing incorporation efficiency of omega-3 highly unsaturated fatty acid in poultry meat |
| DE19749413A1 (de) * | 1997-11-07 | 1999-05-12 | Hoechst Ag | Neuartige Sophoroselipide, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung |
| DE19838011C2 (de) * | 1998-08-21 | 2000-01-13 | Christoph Syldatk | Verfahren zur biotechnischen Herstellung von Fettsäuremethylestern ("Biodiesel") auf Molkebasis |
| US7271315B2 (en) | 1999-01-14 | 2007-09-18 | Martek Biosciences Corporation | PUFA polyketide synthase systems and uses thereof |
| US7247461B2 (en) | 1999-01-14 | 2007-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Nucleic acid molecule encoding ORFA of a PUFA polyketide synthase system and uses thereof |
| DE19903095C2 (de) * | 1999-01-27 | 2003-05-22 | Nutrinova Gmbh | Gewinnung von gamma-Linolensäure aus Protozoen der Gattung Colpidium |
| WO2000051444A1 (fr) * | 1999-03-04 | 2000-09-08 | Suntory Limited | Utilisation d'une matiere contenant de l'acide docosapentaenoique |
| EP2341126A3 (en) * | 2000-01-28 | 2011-10-05 | Martek Biosciences Corporation | Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors |
| US6338866B1 (en) | 2000-02-15 | 2002-01-15 | Applied Food Biotechnology, Inc. | Pet foods using algal or fungal waste containing fatty acids |
| TWI426127B (zh) | 2001-04-16 | 2014-02-11 | Dsm Ip Assets Bv | 多不飽和脂肪酸（ｐｕｆａ）聚乙醯合成酶系統及其用途（三） |
| MXPA05010214A (es) | 2003-03-26 | 2005-12-14 | Martek Biosciences Corp | Sistemas de sintasa de poliquetida pufa y uso de los mismos. |
| US7208160B2 (en) | 2003-08-26 | 2007-04-24 | Sol Katzen | Process of treating sea algae and halophytic plants |
| DE102004017370A1 (de) | 2004-04-08 | 2005-10-27 | Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh | PUFA-PKS Gene aus Ulkenia |
| JP4821409B2 (ja) * | 2006-03-31 | 2011-11-24 | アイシン・エィ・ダブリュ株式会社 | 自動変速機の油圧制御装置 |
| US8585552B2 (en) * | 2006-08-01 | 2013-11-19 | GM Global Technology Operations LLC | Torque converter clutch lock on method and low slip regulation |
| US7485073B2 (en) * | 2006-08-02 | 2009-02-03 | Horng-Jiun Chang | Muscle exerciser |
| US8846781B2 (en) | 2007-09-25 | 2014-09-30 | Monsanto Technology Llc | Use of oils with high concentrations of polyunsaturated fatty acids in plastics and surface coatings |
| TWI600762B (zh) | 2009-03-19 | 2017-10-01 | Ｄｓｍ智慧財產有限公司 | 多不飽和脂肪酸合成酶核酸分子及多肽，組成物，以及其製造方法與用途 |
| FR3015516B1 (fr) | 2013-12-19 | 2016-01-22 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement en dha de la biomasse de microalgues du genre thraustochytrium |
-
2001
- 2001-01-26 EP EP10012186A patent/EP2341126A3/en not_active Withdrawn
- 2001-01-26 CN CN201510471712.6A patent/CN105112463A/zh active Pending
- 2001-01-26 KR KR1020107022453A patent/KR20100116233A/ko not_active Application Discontinuation
- 2001-01-26 CN CN2009101330826A patent/CN101519680B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 IL IL15077001A patent/IL150770A0/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 US US09/771,352 patent/US6607900B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 JP JP2001555499A patent/JP2004501603A/ja not_active Withdrawn
- 2001-01-26 CN CNB018064515A patent/CN100491519C/zh not_active Ceased
- 2001-01-26 EP EP10012185.4A patent/EP2341125B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CN CN2009101330807A patent/CN101519678B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-26 KR KR1020117026787A patent/KR101293135B1/ko active IP Right Grant
- 2001-01-26 PL PL01362620A patent/PL362620A1/xx unknown
- 2001-01-26 CA CA2786722A patent/CA2786722A1/en not_active Abandoned
- 2001-01-26 MX MX2012006312A patent/MX345559B/es unknown
- 2001-01-26 ES ES10012184.7T patent/ES2653545T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CN CN201610022191.0A patent/CN105567752A/zh active Pending
- 2001-01-26 PT PT01903376T patent/PT1251744E/pt unknown
- 2001-01-26 CA CA2396691A patent/CA2396691C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 DK DK01903376.0T patent/DK1251744T4/en active
- 2001-01-26 TR TR2003/02163T patent/TR200302163T3/xx unknown
- 2001-01-26 CN CN2009101330811A patent/CN101519679B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-26 AU AU31201/01A patent/AU785124B2/en not_active Ceased
- 2001-01-26 CZ CZ20022508A patent/CZ301130B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 CN CNA2009101330794A patent/CN101519677A/zh active Pending
- 2001-01-26 WO PCT/US2001/002715 patent/WO2001054510A1/en active IP Right Grant
- 2001-01-26 KR KR1020027009661A patent/KR100925290B1/ko active IP Right Review Request
- 2001-01-26 HU HU0301794A patent/HUP0301794A3/hu unknown
- 2001-01-26 DE DE60130737.2T patent/DE60130737T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 AT AT01903376T patent/ATE374531T1/de active
- 2001-01-26 EP EP10012187.0A patent/EP2341127B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 KR KR1020077013916A patent/KR20070073986A/ko active Search and Examination
- 2001-01-26 RU RU2002120481/13A patent/RU2326171C2/ru not_active Application Discontinuation
- 2001-01-26 EP EP10012184.7A patent/EP2338974B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 DE DE0001251744T patent/DE01903376T1/de active Pending
- 2001-01-26 ES ES10012185.4T patent/ES2654384T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 KR KR1020097010713A patent/KR20090064603A/ko active Application Filing
- 2001-01-26 EP EP15177618.4A patent/EP2960325B1/en not_active Revoked
- 2001-01-26 MX MXPA02007321A patent/MXPA02007321A/es active IP Right Grant
- 2001-01-26 ES ES01903376.0T patent/ES2208141T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CN CNA2006101148088A patent/CN101003821A/zh active Pending
- 2001-01-26 BR BRPI0107832-1A patent/BRPI0107832B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 ES ES10012187.0T patent/ES2545492T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 KR KR1020087021437A patent/KR100938945B1/ko active IP Right Review Request
- 2001-01-26 EP EP01903376.0A patent/EP1251744B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 NZ NZ520420A patent/NZ520420A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 CA CA2760879A patent/CA2760879C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 EP EP06076087A patent/EP1707055A3/en not_active Withdrawn
- 2001-04-10 TW TW093139784A patent/TWI310788B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-04-10 TW TW097131119A patent/TWI354702B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-04-10 TW TW090101664A patent/TWI301509B/zh not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-07-25 ZA ZA200205957A patent/ZA200205957B/en unknown
- 2002-07-26 NO NO20023588A patent/NO20023588L/no not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-02-21 US US10/371,394 patent/US20030180898A1/en not_active Abandoned
- 2003-04-15 HK HK03102739A patent/HK1050611A1/xx unknown
-
2005
- 2005-05-19 JP JP2005146665A patent/JP2005270115A/ja not_active Withdrawn
- 2005-10-12 IL IL171408A patent/IL171408A/en not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-02-10 US US11/352,421 patent/US7579174B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-04-05 US US11/399,588 patent/US7732170B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-09-05 AU AU2006207882A patent/AU2006207882B2/en not_active Expired
-
2007
- 2007-05-08 US US11/745,502 patent/US20080032381A1/en not_active Abandoned
- 2007-05-08 US US11/745,490 patent/US8216812B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,531 patent/US8187845B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,513 patent/US8206956B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,506 patent/US8124384B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,498 patent/US8288133B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,533 patent/US8187846B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,500 patent/US8288134B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,511 patent/US8124385B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,526 patent/US8133706B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-28 CY CY20071101639T patent/CY1107114T1/el unknown
-
2009
- 2009-01-28 IL IL196776A patent/IL196776A/en not_active IP Right Cessation
- 2009-09-11 AU AU2009213103A patent/AU2009213103B2/en not_active Ceased
- 2009-12-14 JP JP2009282393A patent/JP2010057508A/ja not_active Withdrawn
-
2011
- 2011-11-04 JP JP2011242309A patent/JP2012019802A/ja not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-01-03 US US13/342,623 patent/US9848623B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-12-17 JP JP2012274394A patent/JP6134136B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-03-04 JP JP2013041515A patent/JP2013099366A/ja not_active Withdrawn
- 2013-05-16 AU AU2013205894A patent/AU2013205894B2/en not_active Expired
-
2014
- 2014-02-17 JP JP2014027674A patent/JP2014087375A/ja not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-05-14 US US14/711,979 patent/US20150320084A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-09-12 JP JP2016177205A patent/JP6534156B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2016-11-07 US US15/344,948 patent/US20170049131A1/en not_active Abandoned
- 2016-11-07 US US15/344,960 patent/US20170049132A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-02-13 JP JP2019023432A patent/JP2019088319A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ20022508A3 (cs) | Zvýšená produkce lipidů obsahujících polyenové mastné kyseliny ve fermentorech kulturami eukaryotických mikrobů s vysokou hustotou ve fermentorech |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20210126 |