RU2326171C2 - Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты (варианты) и способ культивирования микроорганизмов, продуцирующих эти липиды - Google Patents
Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты (варианты) и способ культивирования микроорганизмов, продуцирующих эти липиды Download PDFInfo
- Publication number
- RU2326171C2 RU2326171C2 RU2002120481/13A RU2002120481A RU2326171C2 RU 2326171 C2 RU2326171 C2 RU 2326171C2 RU 2002120481/13 A RU2002120481/13 A RU 2002120481/13A RU 2002120481 A RU2002120481 A RU 2002120481A RU 2326171 C2 RU2326171 C2 RU 2326171C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- source
- lipids
- fatty acids
- polyunsaturated fatty
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 178
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 165
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 131
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 title claims abstract description 36
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 53
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 title 1
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 90
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 86
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 80
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 69
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 68
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 68
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 59
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 57
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 claims abstract description 57
- 241001467333 Thraustochytriaceae Species 0.000 claims abstract description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 16
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims description 119
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 30
- 241000233671 Schizochytrium Species 0.000 claims description 28
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 241000233675 Thraustochytrium Species 0.000 claims description 16
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 15
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 claims description 14
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 claims description 14
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 12
- -1 salts acids Chemical class 0.000 claims description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 7
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 6
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 4
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000012035 limiting reagent Substances 0.000 claims description 3
- 230000035699 permeability Effects 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 2
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 claims description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 80
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 80
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 57
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 50
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 50
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 45
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 29
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 29
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 29
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 27
- 150000004291 polyenes Chemical class 0.000 description 21
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 17
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 208000016444 Benign adult familial myoclonic epilepsy Diseases 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 208000016427 familial adult myoclonic epilepsy Diseases 0.000 description 12
- ZGNITFSDLCMLGI-UHFFFAOYSA-N flubendiamide Chemical compound CC1=CC(C(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC(I)=C1C(=O)NC(C)(C)CS(C)(=O)=O ZGNITFSDLCMLGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 11
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 10
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 108010030975 Polyketide Synthases Proteins 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 8
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 7
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000598397 Schizochytrium sp. Species 0.000 description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 5
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 5
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 5
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 description 5
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 5
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000080590 Niso Species 0.000 description 4
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 4
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2,7, Chemical compound [Co+3].N#[C-].C1([C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)[N-]\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 4
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 4
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 4
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 4
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 3
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 3
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 3
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 3
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000003735 xanthophylls Chemical class 0.000 description 3
- 235000008210 xanthophylls Nutrition 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical class Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241001466451 Stramenopiles Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical class OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001491678 Ulkenia Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010953 base metal Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L calcium D-pantothenic acid Chemical compound [Ca+2].OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O.OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L 0.000 description 2
- 229960002079 calcium pantothenate Drugs 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 2
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 2
- RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M cyanocobalamin Chemical compound N#C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M 0.000 description 2
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 229940014662 pantothenate Drugs 0.000 description 2
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 2
- 229930001119 polyketide Natural products 0.000 description 2
- 125000000830 polyketide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 2
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- 229910021654 trace metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 150000003669 ubiquinones Chemical class 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- YXYPSYDCUBSOOB-LUAWRHEFSA-N (Z)-N-hydroxy-11-methyldodec-2-enamide Chemical compound CC(C)CCCCCCC\C=C/C(=O)NO YXYPSYDCUBSOOB-LUAWRHEFSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 description 1
- 241000384555 Chromulinales Species 0.000 description 1
- 241000534675 Chrysomeridales Species 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 241000146404 Developayella Species 0.000 description 1
- 241001494734 Dictyochales Species 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102000015303 Fatty Acid Synthases Human genes 0.000 description 1
- 108010039731 Fatty Acid Synthases Proteins 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241001466486 Hibberdiales Species 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 241001149691 Lipomyces starkeyi Species 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000233654 Oomycetes Species 0.000 description 1
- 241001494726 Pedinellales Species 0.000 description 1
- 241001494897 Pelagomonas Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001518925 Raphidophyceae Species 0.000 description 1
- 241000520590 Reticulosphaera Species 0.000 description 1
- 241000223252 Rhodotorula Species 0.000 description 1
- 241000193082 Sarcinochrysidales Species 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical class N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000011217 control strategy Methods 0.000 description 1
- 229960002104 cyanocobalamin Drugs 0.000 description 1
- 235000000639 cyanocobalamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011666 cyanocobalamin Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 125000004050 enoyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- UKFXDFUAPNAMPJ-UHFFFAOYSA-N ethylmalonic acid Chemical compound CCC(C(O)=O)C(O)=O UKFXDFUAPNAMPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000008723 osmotic stress Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 235000002378 plant sterols Nutrition 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N sodium oxide Chemical compound [O-2].[Na+].[Na+] KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001948 sodium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
- A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
- C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Birds (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Способы предусматривают культивирование микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов. Микроорганизмы культивируют в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ. Неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено. При этом концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения. Изобретение позволяет получить липиды с повышенным содержанием полиненасыщенных жирных кислот. 7 н. и 58 з.п. ф-лы, 1 ил., 9 табл.
Description
Область применения настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к новому процессу выращивания микроорганизмов и извлечения липидов микроорганизмов. В частности, настоящее изобретение относится к способу получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, и способу культивирования микроорганизмов, продуцирующих эти липиды.
Предпосылки настоящего изобретения
Считалось общепринятым, что эукариотным микроорганизмам для продуцирования жирных кислот на основе полиенов (жирных кислот, содержащих две или большее число ненасыщенных связи углерод-углерод) необходимо присутствие молекулярного кислорода (а именно, аэробные условия). Это вызвано тем, что предполагалось, что двойная цис-связь, образующаяся в жирных кислотах всех непаразитных эукариотных микроорганизмов, включает непосредственную, зависимую от кислорода реакцию десатурации (окислительные системы десатуразы микроорганизмов). Другие липиды эукариотных микроорганизмов, которые, как известно, нуждаются в молекулярном кислороде, включают: стерины грибов и растительные стерины, оксикаротеноиды (например, ксантофиллы), убихиноны и соединения, построенные из любых таких липидов (а именно, вторичные метаболиты).
Было показано, что определенные эукариотные микроорганизмы (типа водорослей; грибов, включая дрожжи; и простейших одноклеточных микроорганизмов) являются хорошими продуцентами кислот на основе полиенов в ферментерах. Однако культивирование при очень высокой плотности процесса (более чем приблизительно 100 г/л биомассы микроорганизмов, особенно в промышленных масштабах) может привести к снижению содержания жирных кислот на основе полиенов, а следовательно, к снижению продуктивности указанных жирных кислот. Это может быть частично обусловлено несколькими факторами, включая трудность поддержания высоких концентраций растворенного кислорода, связанной с необходимостью его большого объема, что вызвано высокой концентрацией микроорганизмов в ферментационном бульоне. Способы поддержания более высоких концентраций кислорода включают увеличение скорости аэрации и/или использование для аэрации вместо воздуха чистого кислорода, и/или увеличение скорости взбалтывания в ферментере. Такие решения, как правило, увеличивают стоимость продуцирования липида и капитальные затраты на ферментационное оборудование, а также они могут создать дополнительные проблемы. Например, рост аэрации при высокой плотности клеток легко может вызвать серьезные проблемы, связанные с образованием пены в ферментере, а усиленное перемешивание может привести к разрушению клеток микроорганизмов из-за выросших в ферментационном бульоне усилий сдвига (эти усилия вызывают высвобождение липидов в ферментационный бульон, в котором, под действием энзимов, возможно их окисление и/или разрушение). Для клеток, испытавших ограничение азота или азотное обеднение, индуцирование образования липидов представляет собой усиливающуюся проблему, это приводит к ослаблению стенок клеток и к разрушению клеток микроорганизмов.
Поэтому, если продуцирующие липиды эукариотные микроорганизмы росли при очень высокой концентрации клеток, то их липиды обычно содержат только очень небольшие количества жирных кислот на основе полиенов. Например, плотность дрожжей Lipomyces starkeyi, которые росли в течение 140 ч при использовании в качестве источника углерода спирта, составляла 153 г/л при результирующей концентрации липида в 83 г/л. Однако при концентрации дрожжей выше 100 г/л среднее содержание жирных кислот на основе полиенов составляет только 4,2% общего содержания жирных кислот (снизившись с величины 11,5% при плотности клеток в 20-30 г/л) Yamauchi et al., Ferment. Technol., 1983, 61, 275-280. В результате концентрация жирных кислот на основе полиенов составляет приблизительно только 3,5 г/л, а средняя продуктивность жирных кислот на основе полиенов - приблизительно только 0,025 г/л/ч. Кроме того, сообщается о присутствии в липидах дрожжей единственной жирной кислоты на основе полиенов, ею является кислота С 18:2.
Было показано, что другие дрожжи, Rhodotorula glutinus, обладают средней продуктивностью липидов, составляющей приблизительно 0,49 г/л/ч, но их липиды также имеют общее низкое содержание жирных кислот на основе полиенов (общее содержание жирных кислот 15,8%; 14,7% С18:2 и 1,2% С18:3), что дает продуктивность жирных кислот на основе полиенов, составляющую лишь 0,047 г/л/ч в подпитываемой культуре, и 0,077 г/л/ч в непрерывной культуре.
Ранее одним из настоящих заявителей было показано, что отдельные морские водоросли подкласса Thraustochytriales могут быть отличными продуцентами жирных кислот на основе полиенов в ферментерах, особенно при выращивании в условиях низкой минерализации, и особенно при очень низких концентрациях хлорида. Другие исследователи описали Thraustochytriads, которая, при росте в течение 120 ч до плотности клеток в 59 г/л, продемонстрировала среднюю продуктивность жирной кислоты на основе полиенов (докозагексаеновой кислоты или ДГК, С22:6n-3; и ДПК, С22:5n-6), составляющую приблизительно 0,158 г/л/ч. Однако такая продуктивность достигается лишь при степени минерализации, равной приблизительно 50% минерализации морской воды, т.е. при такой концентрации, которая должна вызвать серьезную коррозию стандартных ферментеров из нержавеющей стали.
Стоимость продуцирования липидов микроорганизмов, содержащих жирные кислоты на основе полиенов, и главным образом сильно ненасыщенные жирные кислоты (типа С18:4n-3, С20:4n-6, С20:5n-3, С22:5n- 3, С22:5n-6 и С22:6n-3) оставалась высокой. Это объясняется частично ограниченными плотностями, до которых культивируется присутствующая в эукариотных микроорганизмах жирная кислота на основе полиенов, и ограниченной доступностью кислорода, который необходим для достижения высокой продуктивности, и при такой высокой концентрации клеток, и при более высоких температурах.
Следовательно, необходим процесс для выращивания микроорганизмов при высокой концентрации, которая, тем не менее, способствует усиленному продуцированию липидов, содержащих жирные кислоты на основе полиенов.
Краткое изложение настоящего изобретения
В основу изобретения поставлена задача разработать способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов, обеспечивающего высокую продуктивность процесса. Предпочтительно, чтобы указанные липиды содержали одну жирную кислоту на основе полиенов или большее их число.
Задача решена тем, что в заявляемом способе получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающем культивирование микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, в указанную среду добавляют не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения. Способ может представлять собой процесс с подпиткой или непрерывный процесс.
Когда плотность биомассы среды составляет, по меньшей мере, приблизительно 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, добавляют источник углерода без дополнительного источника лимитирующих питательных веществ или с небольшим количеством лимитирующих питательных веществ для индуцирования условий лимитирования питательного вещества, что индуцирует продуцирование липидов.
Предпочтительно достигать плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Заявляемый процесс проводят в течение по меньшей мере 90 ч, причем в течение первых 24 ч концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне, приблизительно составляющем 8%, в течение от 24-го часа до 40-го часа - на уровне, приблизительно составляющем 4%, а с 40-го часа вплоть до завершения указанного процесса - на уровне, составляющем приблизительно 0,5% или ниже. Указанный не спиртовой источник углерода предпочтительно включает углевод, а указанный источник лимитирующих питательных веществ включает источник питательных веществ, выбранный из группы, содержащей источники азота, источники углерода, источники фосфата, источники витаминов, источники металлов микроэлементов, источники металлов - макроэлементов, источники кремния, а также их смеси.
Указанный источник лимитирующих питательных веществ может включать источник питательных веществ, выбранный из группы, содержащей источник металлов- микроэлементов, а также источник металлов-макроэлементов, выбранных из группы, включающей соли серной и хлористоводородной кислоты указанных металлов, а также их смеси.
Более предпочтительно, чтобы указанный источник лимитирующих питательных веществ включал источник азота или неорганическую соль или гидроксид аммония. С помощью указанного источника лимитирующих веществ регулируют рН среды. Культивирование предпочтительно проводят при температуре по меньшей мере 20°С.
Способ продуцирует полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами. Полиненасыщенные жирные кислоты предпочтительно представлены докозагексаноевой кислотой. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, и по меньшей мере 15% указанных липидов представляют собой полиненасыщенные жирные кислоты. Предпочтительными вариантами осуществления способа могут быть, если скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, и по меньшей мере 20% указанных липидов составляет суммарное количество омега-3 и омега-6 полиненасыщенных жирных кислот или, если скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, и по меньшей мере 25% указанных липидов составляет докозагексаноевая кислота. Указанные микроорганизмы способны продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты в аэробных условиях. Указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси.
При культивировании возможно осуществлять регулирование количества растворенного кислорода. Регулирование растворенного кислорода осуществляют, контролируя количество кислорода в верхней части ферментера, или контролируя контроль скорости перемешивания среды.
Концентрацию растворенного кислорода предпочтительно поддерживать менее чем 2% от насыщения и более предпочтительно менее, чем 1% от насыщения. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
Способ может включать: (а) удаление воды из указанной среды с получением сухих микроорганизмов и (б) выделение липидов из указанных сухих микроорганизмов.
Способ дополнительно может включать: (а) обработку, приводящую к нарушению проницаемости мембран клеток микроорганизмов, растворению или разрушению указанных клеток, и (б) извлечение липидов с помощью гравитационного разделения, с помощью средства, способствующего разрушению эмульсии липид/вода, или без его помощи.
В способе получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать по меньшей мере 20% от биомассы липидов, включающем культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, указанный источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду в процессе с подпиткой до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем подачу источника лимитирующих питательных веществ ограничивают или прекращают и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
Предпочтительно достигать плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч. Предпочтительно указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
В способе получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать липидов по меньшей мере 20% от биомассы, включающем культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток; затем подачу источника лимитирующих питательных веществ ограничивают или прекращают и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения. Способ представляет собой процесс с подпиткой. Предпочтительно достигают плотность биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч. Указанные микроорганизмы предпочтительно выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytnum, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
В способе получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающем культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, указанный источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в процессе с подпиткой до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
Предпочтительно достигают плотность биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч. Указанные микроорганизмы предпочтительно выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
Изобретением также является способ культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales. В заявляемом способе культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать липидов по меньшей мере 20% от биомассы, включающем культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей источник не спиртового углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере до 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток; затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения, скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч и по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых микроорганизмами, представляют собой полиненасыщенные жирные кислоты. Способ представляет собой процесс с подпиткой.
Предпочтительно достигают плотность биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Указанные микроорганизмы предпочтительно выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
В способе культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать по меньшей мере 20% от биомассы липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, включающем культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения. Способ представляет собой процесс с подпиткой. Предпочтительно достигают плотность биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухи клеток. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч. Указанные микроорганизмы предпочтительно выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
В заявляемом способе получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающем культивирование микроорганизмов в среде, содержащей не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, согласно изобретению, в указанную среду добавляют не спиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения, после завершения культивирования, полученные липиды выделяют. Способ представляет собой процесс с подпиткой.
Предпочтительно достигают плотность биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток. Скорость продуцирования липидов предпочтительно составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч. Указанные микроорганизмы предпочтительно выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, а также их смеси. В указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
Краткое описание чертежей
На чертеже представлена таблица и график различных параметров продуцирования микроорганизмов в зависимости от количества растворенного в ферментационной среде кислорода.
Подробное описание настоящего изобретения
Настоящее изобретение обеспечивает процесс выращивания микроорганизмов, таких как, например, водоросли, грибы (включая дрожжи), простейшие одноклеточные организмы и бактерии. Предпочтительно, чтобы микроорганизмы выбирали их группы, включающей водоросли, простейшие одноклеточные организмы и их смеси. Более предпочтительными микроорганизмами являются водоросли. Кроме того, процесс по настоящему изобретению можно использовать для получения разнообразных липидных соединений, в частности ненасыщенных липидов, предпочтительно полиненасыщенных липидов (а именно, липидов, содержащих по крайней мере две ненасыщенные связи углерод-углерод, например двойные связи), а более предпочтительны сильно ненасыщенные липиды (а именно, липиды, содержащие четыре ненасыщенные связи углерод-углерод, или большее их количество), типа омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенных жирных кислот, включая докозагексаеновую кислоту (а именно, ДГК); а также другие природные ненасыщенные, полиненасыщенные и сильно ненасыщенные соединения. Термин «липид», используемый здесь, включает фосфолипиды; свободные жирные кислоты; эфиры жирных кислот; триглицерины; стерины и сложные эфиры стеринов; каротеноиды; ксантофиллы (например, оксикаротеноиды); углеводы; соединения, являющиеся производными изопреноида, а также другие липиды, которые известны людям, обладающим стандартными навыками в данной технологии.
Более конкретно процессы по настоящему изобретению пригодны для продуцирования жирных кислот на основе полиенов эукариотных микроорганизмов, каротеноидов, стеринов грибов, фитостеринов, ксантофиллов, убихинонов и других соединений, являющихся производными изопреноида, которым, как обычно полагают, для формирования ненасыщенных связей углерод-углерод необходим кислород (а именно, аэробные условия), а также их вторичных метаболитов. В частности, процессы по настоящему изобретению пригодны для культивирования микроорганизмов, которые продуцируют жирную кислоту на основе полиенов (кислоты), а также для продуцирования микроорганизмами жирной кислоты (кислот) на основе полиенов.
Хотя процессы по настоящему изобретению можно использовать для культивирования широкого спектра микроорганизмов, а также для получения полиненасыщенных липидов, содержащих соединения, продуцируемых теми же микроорганизмами, для краткости, удобства и иллюстрации в подробном описании настоящего изобретения будут обсуждаться процессы роста микроорганизмов, способных продуцировать липиды, включая омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, в частности микроорганизмы, способные продуцировать ДГК (докозагексаеновую кислоту) или такие родственные ей соединения, как ЭПК (эйкозапентаеновая кислота), ДПК (докозапентаеновая кислота) или ARA. Предпочтительные микроорганизмы включают микроводоросли, грибы (включая дрожжи), простейшие одноклеточные организмы и бактерии. Одна группа предпочтительных микроорганизмов является членом группы микроорганизмов, называемых Stramenopiles, в которую входят микроводоросли и микроорганизмы, подобные водорослям. Stramenopiles включает следующие группы микроорганизмов: Hamatores, Proteromonads, Opalines, Developayella, Labrinthulids, Thraustochytrids, Biosecids, Oomycetes, Hypochytridiomycetes, Commation, Reticulosphaera, Pelagomonas, Pelagococcus, Ollicola, Aureococcus, Parmales, Diatoms, Xanthophytes, Phaeophytes (коричневые водоросли), Eustigmatophytes, Raphidophytes, Synurids, Axodines (включая Rhizochromulinaales, Pedinellales, Dictyochales), Chrysomeridales, Sarcinochrysidales, Hydruuales, Hibberdiales и Chromulinales. Другие предпочтительные группы микроводорослей включают членов группы зеленых водорослей и диножгутиконосцев, включая членов рода Chrypthecodium. Более конкретно предпочтительные воплощения настоящего изобретения будут обсуждаться со ссылкой на процесс выращивания морских микроорганизмов, в частности водорослей, таких как Thraustochytrids из подкласса Thraustochytriales рода Thraustochytrium и Schizochytrium, включая Thraustochytriales; процесс раскрывается в патентах США No.5340594 и No.5340742 (оба принадлежащих Barclay), на них здесь сделаны полные ссылки. Следует отметить, что многие эксперты согласны с тем, что Ulkenia не представляет собой отдельный род, а на самом деле является частью рода Schizochytrium. Согласно использованию здесь в род Schizochytrium должен входить Ulkenia.
Предпочтительными микроорганизмами являются такие микроорганизмы, которые с помощью систем поликетидсинтазы продуцируют целевые соединения. Такие микроорганизмы включают микроорганизмы с эндогенной системой поликетидсинтазы и микроорганизмы, в которых система поликетидсинтазы получена методом генной инженерии. Поликетиды представляют собой структурные производные природных продуктов, обладающих широким диапазоном биологических активностей, включая антибиотические и фармакологические свойства. Поликетидсинтаза катализирует биосинтез основной углеродной цепи поликетидов. Поликетидсинтаза, также как структурно и механистически родственная ей жирная кислота синтетазы, катализирует повторяющиеся декарбоксилирующие конденсации ациловых тиоэфиров, которые одновременно удлиняют основную углеродную цепь на два атома углерода. Однако поликетидсинтазы, в отличие от жирной кислоты синтетазы, могут обеспечивать значительную структурную вариабельность конечного продукта. Отдельные системы поликетидсинтазы могут осуществлять это, используя исходные звенья, отличные от ацетата, и применяя в качестве «удлинителя звена» метил- или этилмалонат, а также варьируя циклы кето-восстановления, дегидрирования и еноил-восстановления по образующейся после каждой конденсации β-кето-группе. Особый интерес здесь представляет то, что в конечном продукте можно сохранить двойные связи углерод-углерод, вводимые на стадии дегидрирования. Кроме того, хотя эти двойные связи первоначально имеют транс-конфигурацию, с помощью ферментной изомеризации их можно превратить в цис-конфигурацию, которую находят в ДГК (и других представляющих интерес жирных кислот на основе полиенов). Как реакция дегидразы, так и реакция изомеризации могут происходить в отсутствии молекулярного кислорода.
Предпочтительно, чтобы для продуцирования продуктов и микроорганизмов по настоящему изобретению был обеспечен гетеротрофный процесс. Этот процесс предпочтительно включает культивирование микроорганизмов в питательной среде, причем указанные микроорганизмы содержат систему поликетидсинтазы. Предпочтительно, чтобы концентрация растворенного кислорода поддерживалась на уровне меньше чем приблизительно 8%, предпочтительно меньше чем приблизительно 4%, более предпочтительно меньше чем приблизительно 3% и более предпочтительно менее чем приблизительно 1%.
Следует понимать, однако, что в целом настоящее изобретение не предназначено для такого ограничения, и что квалифицированный в данной технологии человек признает, что в соответствии с обсуждаемыми здесь методиками идея настоящего изобретения приложима к другим микроорганизмам, продуцирующим многообразие других соединений, включая другие липидные составы.
Предполагая, что скорость продуцирования липидов водорослями относительно постоянна, легко станет очевидным, что более высокая плотность биомассы должна обеспечить большее общее количество липидов, продуцируемых единицей объема. Стандартные современные процессы ферментации при выращивании водорослей обеспечивают плотность биомассы от приблизительно 50 до приблизительно 80 г/л или менее. Настоящие заявители установили, что при использовании процесса по настоящему изобретению можно получить плотность биомассы значительно более высокую, чем это известно в настоящее время. Предпочтительно, чтобы процессы по настоящему изобретению обеспечивали плотность биомассы по крайней мере приблизительно 100 г/л, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 130 г/л, еще более предпочтительно по крайней мере приблизительно 150 г/л, еще более предпочтительно по крайней мере приблизительно 170 г/л, а наиболее предпочтительно выше 200 г/л. Таким образом, при столь высокой плотности биомассы, даже если скорость продуцирования липидов водорослями немного снижается, но общая скорость продуцирования липидов на единицу объема будет значительно выше, чем для процессов, известных в настоящее время.
Процессы по настоящему изобретению для культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales включают добавление в ферментационную среду, содержащую указанные микроорганизмы, источника углерода и источника ключевых питательных веществ; причем это введение проводят со скоростью, достаточной для того, чтобы плотность биомассы ферментационной среды увеличилась до описанных выше значений. Используемый здесь термин «источник ключевых питательных веществ» относится к источнику питательных веществ (включая само питательное вещество), важность которого для роста микроорганизма заключается в том, что если в питательной среде указанный источник ключевых питательных веществ исчерпан, то его отсутствие существенно ограничивает дальнейший рост или воспроизведение. Однако, т.к. по- прежнему имеется изобилие остальных питательных веществ, то организм способен производить и аккумулировать внутриклеточные и/или внеклеточные продукты. Подбирая определенное ключевое питательное вещество, можно контролировать тип аккумулируемых продуктов. Таким образом, обеспечение источника ключевых питательных веществ до определенной степени позволяет контролировать как скорость роста микроорганизмов, так и продуцирование или аккумулирование целевых продуктов (например, липидов). Ферментационный процесс, при котором один или более субстратов (например, источник углерода и источник ключевых питательных веществ) вводят в виде добавок, обычно называют ферментационным процессом с подпитыванием. Было обнаружено, что когда субстрат вводят в ферментационный процесс с подпитыванием, то присутствие большого количества источника углерода (например, приблизительно 200 г/л или более на 60 г/л плотности биомассы) оказывает пагубное воздействие на микроорганизмы. Без взаимосвязи с какой-либо теорией предполагается, что такое большое количество источника углерода оказывает пагубное воздействие на микроорганизмы (включая осмотическое напряжение) и подавляет их исходную продуктивность. Процессы по настоящему изобретению устраняют этот нежелательный пагубный эффект, обеспечивая при этом такое количество субстрата, которое достаточно для получения указанной выше плотности биомассы микроорганизмов.
Процессы для культивирования микроорганизмов по настоящему изобретению могут включать стадию увеличения плотности биомассы. Основной целью процесса ферментации на стадии увеличения плотности биомассы является увеличение плотности биомассы в ферментационной среде в целях получения описанной выше плотности биомассы. Обычно скорость введения источника углерода поддерживают на таком уровне или в таком диапазоне, которые не оказывают значительного нежелательного воздействия на продуктивность микроорганизмов или на их жизнеспособность, вызванного недостаточной мощностью ферментационного оборудования по отводу тепла и по передачи газов к жидкому бульону и от него. Допустимый диапазон количества источника углерода, необходимый для определенного микроорганизма в течение всего ферментационного процесса, хорошо известен людям, имеющим стандартные навыки в этой технологии. Предпочтительно, чтобы источником углерода по настоящему изобретению являлся неспиртовой источник углерода, а именно такой источник углерода, который не содержит спирта. Используемый здесь термин «спирт» относится к соединениям, имеющим 4 или менее атомов углерода с одной гидрокси-группой, например метанол, этанол и изопропанол, но в целях настоящего изобретения не включены такие гидроксиорганические кислоты, как молочная кислота и аналогичные соединения. Более предпочтительно, чтобы источником углерода по настоящему изобретения являлся углевод, включая (но ими не ограничиваясь): фруктозу, глюкозу, сахарозу, мелассу и крахмал. Другие пригодные простые и сложные источники углерода и источники азота раскрываются в вышеупомянутых патентах. Однако обычно в качестве исходного источника углерода используют углевод, предпочтительно кукурузный сироп. Источниками углерода могут также служить жирные кислоты в форме гидроксижирных кислот, триглицеридов, а также ди- и моноглицериды.
Особенно предпочтительными источниками азота являются: мочевина, нитрат, нитрит, соевый белок, аминокислоты, белок, раствор кукурузного экстракта, дрожжевой экстракт, субпродукты животного происхождения, неорганические соли аммония, предпочтительно сульфаты аммония, гидроксид аммония; гидроксид аммония наиболее предпочтителен. Другие ключевые источники питательных веществ включают источники углерода (указанные выше), источники фосфора, источники витаминов (таких, как источники витамина В12, источники пантотената, источники тиамина), металлы-источники микроэлементов (такие, как источники цинка, источники меди, источники кобальта, источники никеля, источники железа, источники марганца, источники молибдена) и источники основных металлов (такие, как источники магния, источники кальция, источники натрия, источники калия и источники кремния и т.д.) Металлы-источники микроэлементов и источники основных металлов могут включать сульфаты и хлориды этих металлов (например, таких как MgSO4 7Н2О; MnCl2 4Н2О; ZnSO4 7Н2О; CoCl2 6Н2O; Na2MoO4 2H2O; CuSO4 5H2O; NiSO4 6Н2О; FeSO4 7H2O; CaCl2; K2SO4; KCl и Na2SO4).
При использовании в качестве источника азота аммониевых солей ферментационная среда становится кислой, если ее не регулируют добавками оснований или буферов. Если в качестве исходного источника азота используют гидроксид аммония, то возможно также его применение и для контроля рН. Микроорганизмы подкласса Thraustochytriales, в частности Thraustochytriales рода Thraustochytrium и Schizochytrium, будут расти в широком диапазоне рН, например от рН со значением приблизительно 5 до рН со значением приблизительно 11. Точный диапазон рН для ферментации каждого конкретного микроорганизма находится в пределах компетенции квалифицированных в данной технологии людей.
Процессы культивирования микроорганизмов по настоящему изобретению могут также включать стадию продуцирования. На этой стадии первичное использование микроорганизмами субстрата не увеличивает плотность биомассы, скорее субстрат используется для продуцирования липидов. Следует понимать, что липиды также продуцируются микроорганизмами на стадии увеличения плотности биомассы; однако, как это отмечалось выше, главной целью стадии увеличения плотности биомассы является рост плотности биомассы. Обычно на стадии продуцирования добавки ключевого источника питательных веществ снижаются или предпочтительно прерываются.
Обычно раньше полагали, что присутствие в ферментационной среде растворенного кислорода представляет собой решающий момент для продуцирования эукариотными микроорганизмами полиненасыщенных соединений, включая омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты. Внезапно и неожиданно настоящими заявителями было обнаружено, что скорость продуцирования липидов поразительно увеличилась, когда на стадии продуцирования снизилась концентрация растворенного кислорода. Таким образом, в то время как концентрация растворенного кислорода в ферментационной среде на стадии увеличения плотности биомассы составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 8% насыщения, а предпочтительно по крайней мере приблизительно 4% насыщения, концентрация растворенного кислорода на стадии продуцирования в ферментационной среде снижается до приблизительно 3% насыщения или ниже, предпочтительно до приблизительно 1% насыщения или ниже, а более предпочтительно до приблизительно 0% насыщения. В начале ферментации количество растворенного кислорода может быть близким к состоянию насыщения, а по мере роста микроорганизмов допускается его снижение до таких низких значений. В одном варианте настоящего изобретения концентрация растворенного кислорода в ферментационной среде меняется на протяжении всего процесса ферментации. Например, в ферментационном процессе с общим времени ферментации от приблизительно 90 ч до приблизительно 100 ч концентрация растворенного кислорода в ферментационной среде в течение первых 24 ч поддерживается на уровне приблизительно 8%, в период от приблизительно 24-го часа до приблизительно 40-го часа - на уровне приблизительно 4% и в период от 40-го часа до конца процесса ферментации - на уровне приблизительно 0,5% или ниже.
Количество растворенного кислорода, присутствующего в ферментационной среде, можно регулировать, контролируя количество кислорода в верхней части объема ферментера, или предпочтительно контролируя ту скорость, с которой встряхивается (или перемешивается) ферментационная среда. Например, встряхивание (или перемешивание) с большой скоростью обеспечивает количество растворенного кислорода в ферментационной среде большее, чем встряхивание с низкой скоростью. Например, для получения указанной выше концентрации растворенного кислорода в ферментере объемом приблизительно 14000 галлонов в течение первых 12 ч скорость встряхивания устанавливают равной от приблизительно 50 об/мин до приблизительно 70 об/мин, в интервале от приблизительного 12-го ч до приблизительно 18-го ч скорость встряхивания устанавливают от приблизительно 55 об/мин до приблизительно 80 об/мин, а в интервале от приблизительного 18-го ч до окончания процесса ферментации скорость встряхивания устанавливают от приблизительно 70 об/мин до приблизительно 90 об/мин; при этом общая продолжительность ферментационного процесса составляла от приблизительно 90 ч до приблизительно 100 ч. Люди, квалифицированные в данной технологии, могут легко установить такой диапазон скоростей встряхивания, который необходим для получения определенного количества растворенного кислорода.
Предпочтительная температура процесса по настоящему изобретению составляет по крайней мере приблизительно 20°С, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 25°С, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 30°С. Необходимо принимать во внимание, что холодная вода способна удерживать большее количество растворенного кислорода, чем теплая вода. Таким образом, более высокая температура ферментационной среды дает дополнительное преимущество, состоящее в том, что количество растворенного кислорода при этом снижается, что, как было указано выше, крайне желательно.
Конкретным микроорганизмам может потребоваться присутствие в ферментационной среде определенного количества солесодержащих минералов. Такие солесодержащие минералы, в частности ионы хлора, могут вызывать коррозию ферментера и другого расположенного после него технологического оборудования. Для того чтобы предотвратить или уменьшить нежелательное воздействие, вызванное относительно большим количеством ионов хлора, присутствующих в ферментационной среде, в процессах по настоящему изобретению в ферментационной среде возможно использование в качестве источника натрия не содержащих хлора натриевых солей, предпочтительно сульфата натрия. В частности, значительная часть требуемого для ферментации натрия поставляется в виде не содержащих хлора натриевых солей. Например, менее чем приблизительно 75% натрия в ферментационной среде поставляется в виде хлорида натрия, более предпочтительно меньше чем приблизительно 50% и более предпочтительно меньше чем приблизительно 25%. Микроорганизмы по настоящему изобретению способны к росту при концентрации хлора меньше чем приблизительно 3 г/л, более предпочтительно меньше чем приблизительно 500 мг/л, более предпочтительно меньше чем приблизительно 250 мг/л, а наиболее предпочтительно - от приблизительно 60 мг/л до приблизительно 120 мг/л.
Не содержащие хлора натриевые соли могут включать кальцинированную соду (смесь карбоната натрия и оксида натрия), карбонат натрия, бикарбонат натрия, сульфат натрия и их смеси, а предпочтительным является включение сульфата натрия. Кальцинированная сода, карбонат натрия и бикарбонат натрия имеют тенденцию увеличивать рН ферментационной среды, поэтому, чтобы поддерживать нужное значение рН указанной среды, необходимы стадии контроля. Концентрация сульфата натрия эффективна для того, чтобы соответствовать требованиям микроорганизмов относительно степени минерализации, предпочтительная концентрация натрия (выраженная как г/л Na) составляет приблизительно 1 г/л, более предпочтителен диапазон от приблизительно 1 г/л до приблизительно 50 г/л, а более предпочтителен диапазон от приблизительно 2 г/л до приблизительно 25 г/л.
Различные параметры ферментации для инокулирования, культивирования и извлечения микроорганизмов детально обсуждаются в патенте США No.5130242, ссылка на который приведена здесь полностью.
Для выделения микроорганизмов из ферментационной среды можно использовать любой из известных в настоящее время способов выделения, включая центрифугирование, фильтрацию, ультрафильтрацию, декантацию и выпаривание растворителя. Настоящими заявителями было обнаружено, что если для извлечения микроорганизмов используют центрифугу, то, из-за высокой плотности биомассы, получаемой в процессах по настоящему изобретению, ферментационную среду предпочтительно разбавлять водой, это снижает плотность биомассы, позволяя тем самым проводить более эффективное отделение микроорганизмов от ферментационной среды.
Крайне высокая плотность биомассы, получаемая по настоящему изобретению, также способствует извлечению липидов микроорганизмов без помощи растворителя. Предпочтительные процессы извлечения липидов, когда в ферментере (допускающем разрушение липидной эмульсии и извлечение фракции, богатой содержанием липидов) происходит разрушение клеток, их лизис или нарушение проницаемости клеточной мембраны, включают процессы обезжиривания. В этом процессе в эмульсию масло/вода для ее разрушения добавляют растворимое в воде соединение (например, спирт или ацетон), а полученную в результате смесь подвергают гравитационному разделению (например, центрифугированию). Этот процесс также возможно модифицировать, чтобы для разрушения указанной эмульсии можно было использовать другие средства (растворимые в воде и/или липиде).
Или же микроорганизмы из ферментационной среды извлекают, выпаривая из указанной среды воду, например, путем контактирования этой среды непосредственно (а именно, без предварительного концентрирования, например, с помощью центрифугирования) с сушилкой, типа барабанной сушилки, то есть при непосредственном извлечении с помощью барабанной сушилки. При применении для выделения микроорганизмов непосредственного процесса извлечения с помощью барабанной сушилки обычно применяют барабанную сушилку с паровым подогревателем. Кроме этого при использовании непосредственного процесса извлечения с помощью барабанной сушилки плотность биомассы ферментационной среды составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 130 г/л, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 150 г/л, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 180 г/л. Такая высокая плотность биомассы обычно желательна для непосредственного извлечения с помощью барабанной сушилки, поскольку при меньшей плотности биомассы в ферментационной среде содержится количество воды, достаточное для существенного охлаждения указанной сушилки, а это приводит к неполному высушиванию микроорганизмов. Людям, квалифицированным в этой технологии, хорошо известны другие способы высушивания клеток, включая распылительную сушку.
Процессы по настоящему изобретению обеспечивают среднюю скорость продуцирования липидов, составляющую по крайней мере приблизительно 0,5 г/л/ч, предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,7 г/л/ч, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,9 г/л/ч, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 1,0 г/л/ч. Помимо этого липиды, полученные с помощью процессов по настоящему изобретению, содержат полиненасыщенные липиды, их количество выше, чем приблизительно 15%, предпочтительно выше, чем приблизительно 20%, более предпочтительно выше, чем приблизительно 25%, еще более предпочтительно выше, чем приблизительно 30%, а наиболее предпочтительно выше, чем приблизительно 35%. Липиды можно извлекать или из высушенных микроорганизмов, или из микроорганизмов в ферментационной среде. Обычно по крайней мере приблизительно 20% липидов, продуцируемых микроорганизмами в процессах по настоящему изобретению, представляют собой омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты; предпочтительно по крайней мере приблизительно 30% липидов являются омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенными жирными кислотами, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 40% липидов являются омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенными жирными кислотами, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 50% липидов являются омега-3 и/или омега-6 полиненасыщенными жирными кислотами. Или же процессы по настоящему изобретению обеспечивают среднюю скорость продуцирования омега-3 жирной кислоты (например, ДГК), составляющую по крайней мере приблизительно 0,2 г омега-3 жирной кислоты (например, ДГК)/л/ч, предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,3 г омега-3 жирной кислоты (например, ДГК)/л/ч, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,4 г омега-3 жирной кислоты (например, ДГК)/л/ч, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,5 г омега-3 жирной кислоты (например, ДГК)/л/ч. Или же процессы по настоящему изобретению обеспечивают среднюю скорость продуцирования омега-6 жирной кислоты (например, ДПКn-6), составляющую по крайней мере приблизительно 0,07 г омега-6 жирной кислоты (например, ДПКn-6)/л/ч, предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,1 г омега-6 жирной кислоты (например, ДПКn-6)/л/ч, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,13 г омега-6 жирной кислоты (например, ДПКn-6)/л/ч, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 0,17 г омега-6 жирной кислоты (например, ДПКn-6)/л/ч. Или же по крайней мере приблизительно 25% липида представляет собой ДГК (на основе полного метилового эфира жирной кислоты, или МЭЖК), предпочтительно по крайней мере приблизительно 30%, более предпочтительно по крайней мере приблизительно 35%, а наиболее предпочтительно по крайней мере приблизительно 40%.
Микроорганизмы, из которых экстрагируют липиды, остающуюся после экстракции липидов биомассу, или их комбинацию можно непосредственно использовать в качестве пищевого ингредиента, как составную часть напитков, соусов, молочных продуктов (таких как молоко, йогурт, сыр и мороженое) и выпечки; в качестве питательной добавки (в форме капсул или таблеток); как корм или как кормовую добавку для любых животных, мясо или другие продукты которых употребляет человек; как пищевую добавку, включая пищевые добавки для младенцев и детей; а также как фармацевтические составы (как прямую или дополнительную терапию). Термином «животное» обозначен любой организм, принадлежащий к царству животных и включающий, без ограничений, любое животное, от которого получают мясо домашней птицы, морские продукты, говядину, свинину или баранину. Морские продукты получают, без ограничений, от рыб, креветок и ракообразных. Термин «продукты» включает любой продукт, полученный от животных и отличный от мяса, в него включены, без ограничений, яйца, молоко или другие продукты. Полиненасыщенные липиды, которыми кормят таких животных, могут входить в состав мяса, яиц или иных продуктов, получаемых от таких животных, чтобы увеличить содержание в них липидов.
Другие цели, преимущества и новые характеристики настоящего изобретения станут очевидны квалифицированным в данной технологии людям при изучении приведенных далее примеров настоящего изобретения, которые не следует считать ограничительными.
ПРИМЕРЫ
Штамм Schizochytrium, используемый в этих примерах, в разнообразных условиях ферментации продуцирует две основные кислоты на основе полисное ДГКn-3 и ДПКn-6 при их соотношении приблизительно 3:1, а также небольшие количества других кислот на основе полиенов, таких как ЭПК и С20:3. Таким образом, поскольку в приведенных далее примерах указаны лишь количества ДГК, то, используя указанное выше соотношение, легко подсчитать количество продуцируемой DPA(n-6).
ПРИМЕР 1
Этот пример иллюстрирует влияние содержания кислорода в ферментационной среде на продуктивность липида.
Были оценены результаты ферментации Schizochytrium ATCC No. 20888 при различных концентрациях растворенного кислорода. Полученные результаты приведены на чертеже, на котором ОКС представляет собой остаточную концентрацию сахара, а МСК - массу клеток в сухом состоянии.
ПРИМЕР 2
Этот пример также иллюстрирует влияние низких концентраций кислорода в ферментационной среде на содержание ДГК (% массы в сухом состоянии) в биомассе конечного продукта.
Эксперимент был проведен в 250 мл колбах Эрленмейера в уменьшенном масштабе в целях имитации влияния низкой концентрации кислорода в ферментационной среде на содержание ДГК в клетках Schizochytrium sp., культивированных в крупномасштабных ферментерах. Культивирование Schizochytrium sp. ATCC No.20888 проводили в среде О4-4. Эта культуральная среда содержит следующие компоненты (в пересчете на 1 л основы, растворенной в деионизированной воде): Na2SO4 12,61 г; MgSO4 7H2O 1,2 г; KCl 0,25 г; CaCl2 0,05 г; глютамат натрия 7,0 г; глюкоза 10 г; KH2PO4 0,5 г; NaHCO3 0,1 г; экстракт дрожжей 0,1 г; смесь витаминов 1,0 мл; смесь металлов PII 1,00 мл. Смесь металлов PII содержит (в 1 л): 6,0 г Na2 EDTA; 0,29 г FeCl3 6H2O; 6,84 г Н3ВО3; 0,86 г MnCl2 4Н2О; 0,06 г ZnCl2; 0,026 г CoCl2 6Н2O; 0,052 г NiSO4 Н2О; 0,002 г CuSO4 Н2О и 0,005 г Na2MoO4 2H2O. Смесь витаминов содержит (в 1л): 100 мг тиамина, 0,5 мг биотина и 0,5 мг цианокобаламина. Значение рН культуральной среды довели до величины 7,0, после чего смесь простерилизовали на фильтре.
После этого план эксперимента в уменьшенном масштабе состоял в культивировании клетки во встряхиваемых колбах с разным объемом культуральной среды в них; почти полные колбы (например, 200 мл в 250 мл встряхиваемой колбе) не будут нормально перемешиваться на станковом шейкере, и, следовательно, по мере роста клеток будут создаваться условия с низким содержанием растворенного кислорода. Поэтому в ходе этого эксперимента осуществили 4 технологических обработки, каждую из которых дублировали: (1) колбы на 250 мл были заполнены 50 мл культуральной среды; (2) колбы на 250 мл были заполнены 100 мл культуральной среды; (3) колбы на 250 мл были заполнены 150 мл культуральной среды; и (4) колбы на 250 мл были заполнены 200 мл культуральной среды. Каждую из 8 колб инокулировали клетками 48 часовой культуры Schizochytrium в среде О4-4 при соблюдении условий обработки (1), и на станковом шейкере при 28°С и 220 об/мин. Все 8 колб на станковом шейкере (220 об/мин) поместили в инкубатор (28°С), где в течение 48 ч в темноте проходило культивирование. По окончании эксперимента с помощью измерителя растворенного кислорода YSI измерили концентрацию растворенного кислорода (РК) в каждой колбе. Были определены также рН культуральной среды, масса клеток в сухом состоянии и содержание в них жирных кислот. Полученные результаты приведены в таблице 1.
| Таблица 1. Результаты эксперимента в уменьшенном масштабе по определению влияния низких концентраций растворенного кислорода на содержание сильно ненасыщенных жирных кислот с длинной цепью (масса ДГК в сухом состоянии, %) в Schizochytrium sp. |
|||||
| Среда, мл | Метиловый эфир жирной кислоты (% TFA) | ДГК(% массы в сухом состоянии) | Биомасса (г/л) | Конечное значение рН | РК (% насыщения) |
| 50 | 16,5 | 7,4 | 4,2 | 7,4 | 31 |
| 100 | 17,0 | 6,5 | 3,9 | 7.2 | 29 |
| 150 | 22,4 | 9,2 | 2,7 | 7,0 | 11 |
| 200 | 35,9 | 14,5 | 1,8 | 6,9 | 3 |
Полученные результаты показывают, что содержание липида (в % в виде метилового эфира жирной кислоты, МЭЖК) и содержание ДГК (% массы по сухому состоянию) выше для клеток, культивированных при низких концентрациях растворенного кислорода; чем ниже концентрация растворенного кислорода, тем выше содержание липида и ДГК. Это оказалось неожиданным, поскольку обычно полагали, что для формирования ненасыщенных (двойных) связей необходим кислород. Было неожиданно, что при столь низкой концентрации растворенного кислорода образовалось такое большое количество ДГК, так как она представляет собой одну из наиболее ненасыщенных жирных кислот. Несмотря на то, что с понижением концентрации растворенного кислорода выход биомассы уменьшился, содержание ДГК увеличилось. Поэтому предпочтительно, чтобы в период фазы роста в целях максимального увеличения образования биомассы концентрации растворенного кислорода были более высокими, а затем для максимального продуцирования жирной кислоты с длинной цепью, чтобы эти концентрации снизились.
ПРИМЕР 3
Этот пример иллюстрирует воспроизводимость процессов по настоящему изобретению.
Микроорганизмы продуцировали, используя ферментеры с номинальным объемом в 1200 галлонов. Получившийся ферментационный бульон сконцентрировали, а микроорганизмы высушили с помощью барабанной сушилки. Липиды из аликвот полученных микроорганизмов экстрагировали и очистили для того, чтобы получить рафинированное, отбеленное и дезодорированное масло. До проведения анализа липидов, в качестве питательной добавки был дополнительно введен d-1-α-токоферилацетат, его количество составило приблизительно 3000×10-6.
Было осуществлено 9 ферментации Schizochytrium sp. ATCC No.20888, результаты их приведены в таблице 2. В течение первых 24 ч концентрация растворенного кислорода составляла приблизительно 8%, а затем приблизительно 4%.
| Таблица 2. Результаты ферментации с подпитыванием по продуцированию ДГК из Schizochytrium sp. |
|||||
| Позиция | Возраст (ч) | Выход1 (г/л) | ДГК2 (%) | МЭЖК3 (%) | Продуктивность4 |
| 1 | 100,3 | 160,7 | 17,8 | 49,5 | 0,285 |
| 2 | 99,8 | 172,4 | 19,4 | 51,3 | 0,335 |
| 3 | 84,7 | 148,7 | 14,4 | 41,4 | 0,253 |
| 4 | 90,2 | 169,5 | 19,7 | 53,9 | 0,370 |
| 5 | 99,0 | 164,1 | 12,5 | 38,9 | 0,207 |
| 6 | 113,0 | 187,1 | 19,7 | 47,2 | 0,326 |
| 7 | 97,0 | 153,5 | 13,7 | 41,0 | 0,217 |
| 8 | 92,8 | 174,8 | 16,4 | 48,6 | 0,309 |
| Сред.5 | 97,1 | 166,4 | 16,7 | 46,5 | 0,288 |
| Ст. откл.6 | 8,4 | 12,3 | 2,9 | 5,4 | 0,058 |
| К.в.7(%) | 8,7 | 7,4 | 17,3 | 11,7 | 20,2 |
| 1Реальный выход по плотности биомассы 2Содержание ДГК в % от массы клеток в сухом состоянии 3Общее содержание жирной кислоты в % от массы клеток в сухом состоянии (измеренное в виде метилового эфира) 4(г ДГК)/л/ч 5Среднее 6Стандартное отклонение 7Коэффициент вариации. Значение коэффициента вариации ниже 5% означает, что процесс имеет превосходную воспроизводимость, значения коэффициента вариации от 5% до 10% означают хорошую воспроизводимость процесса, а значения коэффициента вариации от 10% до 20% означают, что процесс имеет удовлетворительную воспроизводимость. |
|||||
Подачу кукурузного сиропа проводили до тех пор, пока объем содержимого ферментера не достиг приблизительно 1200 галлонов, после чего введение кукурузного сиропа прекратили. Ферментационный процесс был прерван, когда остаточная концентрация сахара упала до значения, меньшего чем 5 г/л. Обычная продолжительность процесса от инокулирования до окончания составляла приблизительно 100 ч.
Ферментационный бульон, а именно ферментационную среду, разбавили водой в соотношении приблизительно 2:1; это сделали для того, чтобы содержание золы в конечном продукте снизить, и чтобы на стадии центрифугирования облегчить разделение фаз. Концентрированную пасту клеток нагрели до 160°F (приблизительно 71°С) и высушили на двойной барабанной сушилке Blaw Knox (42"×36"). Предпочтительно, однако, чтобы высушивание микроорганизмов проводили непосредственно, без предварительного центрифугирования.
Результаты анализа липидов, экстрагированных из аликвот каждой позиций, указанной в таблице 2, обобщены в таблице 3.
| Таблица 3. Анализ биомассы микроорганизмов, полученной в результате ферментации с подпитыванием, приведенных в таблице 2 |
||
| Позиция | ДГК, % относительно МЭЖК1 | Всего липидов в весовых % |
| 1 | 36,0 | 72,3 |
| 2 | 37,8 | 70,3 |
| 3 | 34,8 | 61,5 |
| 4 | 36,5 | 74,8 |
| 5 | 32,1 | 52,8 |
| 6 | 41,7 | 67,7 |
| 7 | 33,4 | 49,9 |
| 8 | 33,7 | 61,4 |
| Среднее | 35,8 | 63,8 |
| Ст.откл.3 | 3,0 | 9,1 |
| К.в4 (%) | 8,5 | 14,2 |
| 1 См. таблицу 2 См. обсуждение выше 3 Стандартное отклонение 4 Коэффициент вариации. Значение коэффициента вариации ниже 5% означает, что процесс имеет превосходную воспроизводимость, значения коэффициента вариации от 5% до 10% означают хорошую воспроизводимость процесса, а значения коэффициента вариации от 10% до 20% означают, что процесс имеет удовлетворительную воспроизводимость. |
||
Если иного не оговорено, то в состав ферментационной среды раздела «Примеры» были включены указанные далее ингредиенты; причем первое число обозначает номинальную величину целевой концентрации, а числа, приведенные в скобках, обозначают допустимый диапазон концентраций: сульфат натрия 12 г/л (11-13); KCl 0,5 г/л (0,45-0,55); MgSO4 7Н2О 2 г/л (1,8-2,2);противопенная добавка Hodag K-60 0,35 г/л (0,3-0,4); K2SO4 0,65 г/л (0,60-0,70); KH2PO4 1 г/л (0,9-1,1); (NH4)2SO4 1 г/л (0,95-1,1); CaCl2 2Н2О 0,17 г/л (0,15-0,19); кукурузный сироп 95 DE (на основе твердых частиц) 4,5 г/л (2-10); MnCl2 4Н2О 3 мг/л (2,7-3,3); ZnSO4 7Н2О 3 мг/л (2,7-3,3); CoCl2 6Н2О 0,04 мг/л (0,035-0,045); Na2MoO4 2Н2O 0,04 мг/л (0-0,045); CuSO4 5Н2О 2 мг/л (1,8-2,2); NiSO4 6Н2О 2 мг/л (1,8-2,2); FeSO4 7H2O 10 мг/л (9-11); тиамин 9,5 мг/л (4-15); витамин B12 0.15 мг/л (0,05-0,25) и пантотенат кальция 3,2 мг/л (1,3-5,1). Кроме того, в качестве источника азота используют 28% NH4OH.
Содержание золы в сухих микроорганизмах составляет приблизительно 6% по весу.
ПРИМЕР 4
Этот пример иллюстрирует влияние уменьшенной концентрации кислорода, растворенного в ферментационной среде, на продуктивность микроорганизмов в дозаторе на 14000 галлонов.
Используя методику, описанную в примере 3, в номинальном объеме на 14000 галлонов была осуществлена ферментация натурального штамма Schizochytrium, который был получен с использованием процессов выделения, описанных в упомянутых выше патентах США No.5340594 и No.5340742. Концентрация растворенного кислорода в ферментационной среде в течение первых 24 ч составляла приблизительно 8%, в период от 24-го часа до 40-го часа - приблизительно 4%, и в период от 40-го часа до конца процесса ферментации - приблизительно 0,5%. Результаты ферментации при такой сниженной концентрации кислорода, растворенного в ферментационной среде, показаны в таблице 4.
| Таблица 4. Результаты ферментации Schizochylrium с подпитыванием, проводимые в 14000 галлоном дозаторе при сниженной концентрации кислорода |
||||||
| Позиция | Возраст (ч) | Выход (г/л) | ДГК, % | МЭЖК, % | ДГК, % относительно МЭЖК | Продуктивность ДГК (г ДГК/л/ч) |
| 1 | 82,0 | 179,3 | 21,7 | 52,4 | 41,4 | 0,474 |
| 2 | 99,0 | 183,1 | 22,3 | 55,0 | 40,5 | 0,412 |
| 3 | 72,0 | 159,3 | - | - | 40,9 | - |
| 4 | 77,0 | 161,3 | - | - | 43,2 | - |
| 5 | 100,0 | 173,0 | 23,9 | 53,3 | 44,9 | 0,413 |
| 6 | 102,0 | 183,3 | 21,6 | 50,8 | 42,6 | 0,388 |
| 7 | 104,0 | 185,1 | 23,7 | 55,0 | 43,1 | 0,422 |
| 8 | 88,0 | 179,3 | 22,3 | 52,6 | 42,4 | 0,454 |
| 9 | 100,0 | 166,4 | 22,5 | 53,5 | 42,1 | 0,374 |
| 10 | 97,0 | 182,6 | 22,8 | 51,6 | 44,1 | 0,429 |
| 11 | 87,5 | 176,5 | 19,8 | 45,6 | 43,5 | 0,399 |
| 12 | 67,0 | 170,8 | 18,8 | 48,1 | 39,1 | 0,479 |
| 13 | 97,0 | 184,9 | 23,2 | 52,7 | 44,0 | 0,442 |
| 14 | 102,0 | 181,9 | 23,6 | 52,9 | 44,6 | 0,421 |
| 15 | 102,0 | 186,9 | 19,9 | 47,8 | 41,8 | 0,365 |
| 16 | 97,0 | 184,4 | 19,6 | 45,5 | 43,0 | 0,373 |
| 17 | 98,0 | 174,7 | 19,7 | 45,1 | 43,7 | 0,351 |
| 18 | 103,5 | 178,8 | 18,3 | 44,5 | 41,2 | 0,316 |
| 19 | 102,0 | 173,7 | 15,8 | 43,1 | 36,7 | 0,269 |
| 20 | 94,0 | 190,4 | 19,3 | 46,9 | 41,1 | 0,391 |
| 21 | 72,0 | 172,5 | 22,8 | 52,8 | 43,2 | 0,546 |
| 22 | 75,0 | 173,1 | 21,0 | 51,7 | 40,8 | 0,485 |
| 23 | 75,0 | 152,7 | 20,3 | 50,3 | 40,4 | 0,413 |
| 24 | 75,5 | 172,5 | 21,9 | 51,7 | 42,3 | 0,500 |
| 25 | 61,0 | 156,4 | 17,3 | 45,7 | 37,8 | 0,444 |
| 26 | 74,5 | 150,6 | 20,2 | 50,1 | 40,2 | 0,408 |
| 27 | 70,5 | 134,3 | 14,8 | 40,6 | 36,6 | 0,282 |
| 28 | 75,5 | 146,1 | 21,3 | 49,7 | 42,8 | 0,412 |
| 29 | 82,0 | 174,3 | 21,4 | 50,4 | 42,5 | 0,455 |
| 30 | 105,0 | 182,3 | 21,7 | 50,7 | 42,8 | 0,377 |
| 31 | 66,0 | 146,2 | 16,4 | 44,6 | 36,7 | 0,363 |
| Среднее | 87,2 | 171,5 | 20,6 | 49,5 | 41,6 | 0,409 |
| Ст. отклонение | 13,9 | 14,1 | 2,4 | 3,8 | 2,3 | 0,061 |
| Коэффициент вариации | 16,0% | 8,2% | 11,6% | 7,7% | 5,5% | 15,0% |
ПРИМЕР 5
Этот пример иллюстрирует влияние уменьшенной концентрации растворенного в ферментационной среде кислорода на продуктивность микроорганизмов в дозаторе на 41000 галлонов.
Использовались те же методики, что и в примере 4, за исключением того, что ферментацию проводили в ферментере на 41000 галлонов. Объемы культуральной среды были увеличены, для того чтобы в указанном дозаторе поддерживать концентрации целевых соединений. Полученные результаты приведены в таблице 5.
| Таблица 5. Ферментация Schizochytrium, проводимые в 41000 галлоном дозаторе |
||||||
| Позиция | Возраст (ч) | Выход (г/л) | ДГК, % | МЭЖК, % | ДГК, % относительно МЭЖК | Продуктивность ДГК (г ДГК/л/ч) |
| 1 | 75,0 | 116,1 | 17,3 | 46,1 | 37,4 | 0,268 |
| 2 | 99,0 | 159,3 | 17,4 | 47,0 | 37,1 | 0,280 |
| 3 | 103,0 | 152,6 | 16,0 | 47,2 | 33,8 | 0,237 |
| 4 | 68,0 | 136,8 | 17,9 | 45,9 | 39,1 | 0,360 |
| 5 | 84,0 | 142,0 | 17,5 | 47,0 | 37,2 | 0,296 |
| Среднее | 85,8 | 141,4 | 17,2 | 46,6 | 36,9 | 0,288 |
| Ст. отклонение | 15,1 | 16,6 | 0,7 | 0,6 | 1,9 | 0,046 |
| Коэффициент вариации | 17,5% | 11,8 | 4,2% | 1,3% | 5,2% | 15,8% |
ПРИМЕР 6
Этот пример иллюстрирует влияние избыточного азота на процесс ферментации по настоящему изобретению.
Было проведено 4 серии экспериментов с подпитыванием в объеме 250 л, при этом использовалась методика, аналогичная методике из примера 4. Было сделано 2 контрольных эксперимента и 2 эксперимента с избыточным азотом (превышение нормального количества в 1,15 раз ив 1,25 раза). Полученные результаты показаны в таблице 6.
| Таблица 6. Влияние избытка аммония на ферментацию Schizochytrium |
|||||||||||
| Возраст (ч) | Выход (г/л) | Продуктивность биомассы | Эффективность конверсии | Содержание ДГК | Содержание МЭЖК | Продуктивность ДГК | |||||
| Сахарная мишень: 7 г/л. контрольная точка рН по основанию: 5,5; контрольная точка | |||||||||||
| рН по кислоте 7,3; 1,0X NH3 | |||||||||||
| 48 | 178 | 3,71 г/л/ч | 51,5% | 10,7% | 37,8% | 0,40 г/л/ч | |||||
| 60 | 185 | 3,08 г/л/ч | 46,9% | 16,3% | 47,2% | 0,50 г/л/ч | |||||
| 72 | 205 | 2,85 г/л/ч | 45,2% | 17,4% | 47,4% | 0,50 г/л/ч | |||||
| 84 | 219 | 2,61 г/л/ч | 43,8% | 17,1% | 45,5% | 0,45 г/л/ч | |||||
| 90 | 221 | 2,46 г л/ч | 44,1% | 18,4% | 48,9% | 0,45 г/л/ч | |||||
| Сахарная мишень: 7 г/л, контрольная точка рН по основанию: 5,5; контрольная точка рН по кислоте 7,3; 1,0X NH3 | |||||||||||
| 48 | 171 | 3,56 г/л/ч | 55,6% | 12,0% | 36,3% | 0,43 г/л/ч | |||||
| 60 | 197 | 3,28 г/л/ч | 54,6% | 9,4% | 38,4% | 0,31 г/л/ч | |||||
| 72 | 191 | 2,65 г/л/ч | 52,8% | 9,4% | 40,0% | 0,25 г/л/ч | |||||
| 84 | 190 | 2,26 г/л/ч | 52,5% | 10,0% | 42,5% | 0,23 г/л/ч | |||||
| 90 | 189 | 2,10 г/л/ч | 52,2% | 9,29% | 43,3% | 0,19 г/л/ч | |||||
| Сахарная мишень: 7 г/л, контрольная точка рН по основанию: 5,5; контрольная точка рН по кислоте 7,3; 1,0X NH3 | |||||||||||
| 48 | 178 | 3,71 г/л/ч | 56.4% | 11,5% | 33,7% | 0,43 г/л/ч | |||||
| 60 | 179 | 2,98 г/л/ч | 48,6% | 10,3% | 36,0% | 0,31 г/л/ч | |||||
| 72 | 180 | 2,50 г/л/ч | 48,8% | 12,0% | 37,6% | 0,30 г/л/ч | |||||
| 84 | 181 | 2,15 г/л/ч | 46,1% | 13,6% | 40,1% | 0,29 г/л/ч | |||||
| 90 | 185 | 2,06 г/л/ч | 45,7% | 12,6% | 40,7% | 0,26 г/л/ч | |||||
| Сахарная мишень: 7 г/л, контрольная точка рН по основанию: 5,5; контрольная точка рН по кислоте 7,3; 1,0Х NH3 | |||||||||||
| 48 | 158 | 3,29 г/л/ч | 55,7% | 13,1% | 36,5% | 0,43 г/л/ч | |||||
| 60 | 174 | 2,90 г/л/ч | 48,9% | 17,9% | 39,2% | 0,52 г/л/ч | |||||
| 72 | 189 | 2,63 г/л/ч | 45,7% | 21,0% | 39,4% | 0,55 г/л/ч | |||||
| 84 | 196 | 2,33 г/л/ч | 44,1% | 22,4% | 40,1% | 0,52 г/л/ч | |||||
| 90 | 206 | 2,29 г/л/ч | 44,8% | 22,1% | 40,3% | 0,51 г/л/ч | |||||
В целом избыток азота оказывал негативное воздействие на осуществление ферментации, поскольку в тех двух партиях, в которые добавляли избыток азота, наблюдалось значительное снижение продуктивности ДГК. Как показано в таблице 6, конечная концентрация ДГК в контрольных партиях составила 18,4% и 22,1% от общей массы клеток в сухом состоянии по сравнению с 9,2% (1,15-кратный избыток аммония) и 12,6% (1,25-кратный избыток аммония) в партиях с избыточным азотом.
ПРИМЕР 7
Этот пример демонстрирует кинетический профиль ферментационного процесса по настоящему изобретению. Используя методику, аналогичную методике из примера 4, эксперимент проводили в 1000 галлоновом дозаторе. Кинетический профиль ферментационного процесса показан в таблице 7.
| Таблица 7. Кинетический профиль ферментации подпитываемой культуры Schizochytrium в 1000 галлоновом дозаторе |
||||||
| Возраст (ч) | Выход (г/л) | Продуктивность биомассы | Эффективность конверсии | Содержание ДГК,% | Содержание МЭЖК,% | Продуктивность ДГК |
| 24 | 118 | 4,92 г/л/ч | 78,2% | 7,4 | 18,8 | 0,36 г/л ч |
| 30 | 138 | 4,60 г/л/ч | 60,3% | 10,6 | 30,9 | 0,49 г/л/ч |
| 36 | 138 | 3,83 г/л/ч | 46,6% | 11,6 | 36,5 | 0,44 г/л/ч |
| 42 | 175 | 4,17 г/л/ч | 49,8% | 13,4 | 41,7 | 0,56 г/л/ч |
| 48 | 178 | 3,71 г/л/ч | 45,1% | 18,7 | 52,8 | 0,69 г/л/ч |
| 48* | 164 | 3,42 г/л/ч | 41,5% | 15,3 | 33,1 | 0,52 г/л/ч |
| 54 | 196 | 3,63 г/л/ч | 45,7% | 16,6 | 51,2 | 0,60 г/л/ч |
| 60 | 190 | 3,17 г/л/ч | 41,7% | 16,9 | 33,9 | 0,54 г/л/ч |
| 72 | 189 | 2,62 г/л/ч | 39,1% | 15,6 | 31,8 | 0,41 г/л/ч |
| 84 | 195 | 2,32 г/л/ч | 38,5% | 16,4 | 32,7 | 0,38 г/л/ч |
| 90 | 200 | 2,22 г/л/ч | 39,0% | 18,8 | 33,3 | 0,42 г/л/ч |
| 90 | 171 | 1,90 г/л/ч | 33,3% | 22,2 | 61,6 | 0,42 г/л/ч** |
| * Анализировали два разных образца с возрастом в 48 ч. ** Значение для промытых образцов сухих клеток (масса клеток в сухом состоянии, МСК). Остальные значения относятся к непромытым образцам. |
||||||
ПРИМЕР 8
Этот пример иллюстрирует влияние количества углерода на продуктивность.
С применением различных источников углерода провели три разных ферментационных процесса, используя процесс из примера 4. Полученные результаты приведены в таблице 8.
| Таблица 8. Результаты разных количеств источника углерода на ферментацию Schizochytrium |
||||||
| Возраст (ч) | Выход (г/л) | Доза углерода | Эффективность конверсии | Содержание ДГК, % | Содержание МЭЖК, % | Продуктивность (г/л/ч) |
| 90 | 171 | 51,3% | 33,3% | 22,2 | 61,6 | 0,42 |
| 94 | 122 | 40,5% | 30,1% | 19,1 | 57,3 | 0,25 |
| 59 | 73 | 20,0% | 36,5% | 11,9 | 40,8 | 0,15 |
ПРИМЕР 9
Этот пример иллюстрирует влияние ключевых питательных веществ на эффективность конверсии углерода в биомассу, липид, а именно в ДГК.
Для исследования влияния ключевых питательных веществ на непрерывную культуру провели эксперимент по культивированию Schizochytrium ATCC No. 20888. Эксперимент проводили в 2 л ферментере Applikon в базальной питательной среде (ICM-2), содержащей перечисленные далее соединения (номинальные концентрации): ингредиенты группы I: Na2SO4 (18,54 г/л), MgSO4 7H2O (2,0 г/л) и KCl (0,572 г/л); ингредиенты группы II (каждый готовится отдельно): глюкоза (43,81 г/л), KH2PO4 (1,28 г/л), CaCl2 2H2O (0,025 г/л) и (NH4)2SO4 (6,538 г/л); ингредиенты группы III: Na2EDTA (6,0 мг/л), FeCl3 6Н2О (0,29 мг/л), Н2ВО3 (6,84 мг/л), MnCl2 4H2O (0,86 мг/л), ZnSO4 7Н2О (0,237 мг/л), CoCl2 2H2O (0,026 мг/л), Na2MoO4 2Н2О (0,005 мг/л), CuSO4 5Н2О (0,002 мг/л) и NiSO4 6Н2O (0,052 мг/л) и ингредиенты группы IV: тиамин HCl (0,2 мг/л), витамин В12 (0,005 мг/л), пантотенат кальция (0,2 мг/л). Перед добавлением в ферментер ингредиенты из групп I и II стерилизовали в автоклаве, а ингредиенты групп III и IV стерилизовали на фильтре. Затем питательную среду инокулировали Schizochytrium и культивировали при контролируемых условиях, которые включали 30°С, рН 5,5 и количество растворенного кислорода, соответствующее 20% насыщению; процесс проводили до тех пор, пока не получили максимальную плотность клеток.
Затем установили непрерывный операционный режим. Его осуществили одновременным закачиванием внутрь ферментера питательной среды ICM-2 и удалением бульона, содержащего клетки Schizochytrium со скоростью, достаточной для поддержания степени разбавления 0,06 ч-1; процедуру осуществляли до тех пор, пока не был достигнут стационарный режим. Чтобы изучить влияние ключевого питательного вещества, содержание соединения, включающего этот специфический нутриент в питательной среде ICM-2, снижали таким образом, чтобы его количество в выходящем бульоне, содержащем клетки, было резко уменьшено, и чтобы рост этих клеток был лимитирован отсутствием этого необходимого питательного вещества. Когда стационарный режим был достигнут для каждого состояния, то измерили сухую биомассу конечного бульона, остаточное количество глюкозы, концентрацию ключевых питательных веществ, содержание липида в клетках и содержание в них ДГК. Эффективность конверсии глюкозы в биомассу подсчитывали делением общего количества потребленной глюкозы на общее количество образовавшейся сухой биомассы, полученную при этом величину выразили в процентах.
Влияние каждого отдельного питательного вещества на ограничение роста изучали путем повторений этого эксперимента для каждого из нутриентов, приведенных далее в таблице. В ней суммированы конечные результаты.
| Таблица 9. Влияние ключевых питательных веществ на выход биомассы, эффективность конверсии (глюкоза → биомасса), содержание липида и содержания ДГК для Schizochytrium sp. |
|||||
| Ключевое питательное | Биомасса1 (г/л) | Коэффициент выхода2 | ОКГ3 (г/л) | Содержание липида4, % | Содержание ДГК5, % |
| вещество | |||||
| Глюкоза | 18,7 | 46,8 | 0,0 | 19,8 | 7,3 |
| Азот | 14,5 | 36,3 | 0,6 | 47,5 | 10,3 |
| Фосфат | 17,8 | 44,5 | 0,8 | 37,0 | 8,2 |
| Тиамин | 7,5 | 18,8 | 7,7 | 11,1 | 4,0 |
| Цинк | 16,0 | 40,0 | 1,3 | 27,8 | 7,2 |
| Медь | 14,0 | 35,0 | 10,4 | 13,8 | 5,3 |
| Кобальт | 14,5 | 36,3 | 0,0 | 22,2 | 6,9 |
| Никель | 17,8 | 44,5 | 0,0 | 21,9 | 8,0 |
| Железо | 15,9 | 39,8 | 3,5 | 18,5 | 7,2 |
| Марганец | 12,5 | 31,3 | 3,4 | 26,1 | 8,0 |
| Магний | 13,9 | 34,8 | 5,3 | 18,7 | 6,4 |
| Кальций | 16,7 | 41,8 | 4,3 | 18,7 | 6,4 |
| Витамин B12 | 19,6 | 49,0 | 0,0 | 17,5 | 6,3 |
| Молибден | 18,9 | 47,3 | 0,0 | 19,3 | 7,0 |
| Пантотенат | 19,2 | 48,0 | 0,0 | 20,4 | 6,7 |
| Натрий | 17,9 | 44,8 | 1,8 | 21,8 | 8,2 |
| Калий | 13,0 | 32,5 | 8,8 | 14,1 | 5,3 |
| 1 Концентрация сухой биомассы (г/л) 2 Коэффициент выхода (% продуцированной биомассы потребленная глюкоза) 3 Остаточная концентрация глюкозы в бульоне (г/л) 4 Содержание липида в сухой биомассе (г липида (в виде МЭЖК)/г сухой биомассы) 5 Содержание ДГК в сухой биомассе (г ДГК/г сухой биомассы) |
|||||
Из приведенной таблицы ясно, что из ключевых питательных веществ самое высокое аккумулированию ДГК в клетках дает азот, за ним следует фосфат, натрий, никель, марганец, глюкоза (углерод), цинк и железо. Эту информацию можно использовать в промышленных целях, подавая одно (или более) из указанных питательных веществ в ферментацию с подпитыванием со скоростью, достаточной для ограничения роста клеток. В наиболее предпочтительном случае для того, чтобы обеспечить максимум содержания ДГК в клетках, в ферментацию с подпитыванием подают азот с ограничениями. Другие питательные вещества (или их смеси) можно подавать с ограничениями в целях обеспечения максимального продуцирования биомассы или других полезных продуктов. В такой стратегии контроля за ферментацией можно также в качестве ключевых использовать другие необходимые биологически элементы или питательные вещества, количество которых не было установлено (такие как сера).
Настоящее изобретение в своих различных вариантах включает компоненты, способы, процессы, системы и/или устройства, в значительной степени изображенные и описанные здесь, включая их различные варианты, сочетания и подгруппы. Квалифицированным в этой технологии людям должно стать ясно каким образом, после осмысления раскрытия настоящего изобретения, можно его реализовать и использовать. Настоящее изобретение в своих различных вариантах включает обеспечение устройств и процессов при отсутствии объектов, не изображенных или не описанных здесь, или в их различных вариантах, включая отсутствие таких объектов, которые могли быть использованы в более ранних устройствах или процессах (например, для увеличения эксплуатационных характеристик, достижения легкости реализации и/или для снижения ее стоимости).
Приведенное выше обсуждение сделано для описания и иллюстрации настоящего изобретения. Оно не предназначено для ограничения настоящего изобретения по форме или формам, раскрываемым здесь. Хотя описание настоящего изобретения включает описание одного его варианта или большего их числа, а также определенных изменений и модификаций, в границы настоящего изобретения входят другие изменения и модификации, например те, которые находятся в пределах навыков и знаний в данной технологии после осмысления раскрытия настоящего изобретения. Это описание предназначено для приобретения прав на альтернативные до допустимой степени варианты, включая, помимо заявляемых, противоположные, взаимозаменяемые и/или эквивалентные структуры, функции, диапазоны или стадии, вне зависимости от того, раскрываются ли в этом описании указанные противоположные, взаимозаменяемые и/или эквивалентные структуры, функции, диапазоны или стадии; при этом описание не предназначено для публичного раскрытия какого-либо патентоспособного объекта.
Claims (65)
1. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающий культивирование микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что в указанную среду добавляют неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ до достижения плотности биомассы, по меньшей мере, 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что представляет собой процесс с подпиткой или непрерывный процесс.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что когда плотность биомассы среды составляет, по меньшей мере, 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, добавляют источник углерода без дополнительного источника лимитирующих питательных веществ или с небольшим количеством источника лимитирующих питательных веществ для индуцирования условий лимитирования питательного вещества, что индуцирует продуцирование липидов.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что достигают плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный процесс проводят в течение по меньшей мере 90 ч, причем в течение первых 24 ч концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне, приблизительно составляющем 8%, в течение от 24-го часа до 40-го часа - на уровне, приблизительно составляющем 4%, а с 40-го часа вплоть до завершения указанного процесса - на уровне, составляющем приблизительно 0,5% или ниже.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный неспиртовой источник углерода включает углевод.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный источник лимитирующих питательных веществ включает источник питательных веществ, выбранный из группы, содержащей источники азота, источники углерода, источники фосфата, источники витаминов, источники металлов - микроэлементов, источники металлов - макроэлементов, источники кремния, а также их смеси.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный источник лимитирующих питательных веществ включает источник питательных веществ, выбранный из группы, содержащей источник металлов-микроэлементов, а также источник металлов-макроэлементов, выбранных из группы, включающей соли серной и хлористо-водородной кислоты указанных металлов, а также их смеси.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный источник лимитирующих питательных веществ включает источник азота.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный источник лимитирующих питательных веществ включает неорганическую соль аммония.
11. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный источник азота включает гидроксид аммония.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что рН среды регулируют с помощью указанного источника лимитирующих веществ.
13. Способ по п.1, отличающийся тем, что культивирование проводят при температуре по меньшей мере 20°С.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы продуцируют полиненасыщенные жирные кислоты, по меньшей мере 15% от общего количества липидов.
15. Способ по п.1, отличающийся тем, что полиненасыщенные жирные кислоты представлены докозагексаноевой кислотой.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, а также тем, что по меньшей мере 15% указанных липидов представляют собой полиненасыщенные жирные кислоты.
18. Способ по п.1, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, а также тем, что по меньшей мере 20% указанных липидов составляет суммарное количество омега-3 и омега-6 полиненасыщенных жирных кислот.
19. Способ по п.1, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч, а также тем, что по меньшей мере 25% указанных липидов составляет докозагексаноевая кислота.
20. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы способны продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты в аэробных условиях.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы продуцируют полиненасыщенные жирные кислоты в аэробных условиях.
22. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы способны продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты в аэробных условиях, а также тем, что указанные микроорганизмы культивируют в процессе с подпиткой.
23. Способ по п.22, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы продуцируют полиненасыщенные жирные кислоты в аэробных условиях.
24. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
25. Способ по п.1, отличающийся тем, что при культивировании осуществляют регулирование количества растворенного кислорода.
26. Способ по п.25, отличающийся тем, что регулирование растворенного кислорода осуществляют, контролируя количество кислорода в верхней части ферментера, или контролируя скорость перемешивания среды.
27. Способ по п.1, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что по меньшей мере 15% липидов составляет докозагексаноевая кислота.
29. Способ по п.1, отличающийся тем, что включает (а) удаление воды из указанной среды с получением сухих микроорганизмов и (б) выделение липидов из указанных сухих микроорганизмов.
30. Способ по п.1, отличающийся тем, что дополнительно включает (а) обработку, приводящую к нарушению проницаемости мембран клеток микроорганизмов, растворению или разрушению указанных клеток, и (б) извлечение липидов с помощью гравитационного разделения с помощью средства, способствующего разрушению эмульсии липид/вода, или без его помощи.
31. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрацию растворенного кислорода поддерживают менее чем 2% от насыщения.
32. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрацию растворенного кислорода поддерживают менее чем 1% от насыщения.
33. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать по меньшей мере 20% от биомассы липидов, включающий культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что указанный неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду в процессе с подпиткой до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем подачу источника лимитирующих питательных веществ ограничивают или прекращают и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
34. Способ по п.33, отличающийся тем, что достигают плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
35. Способ по п.33, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
36. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
37. Способ по п.33, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
38. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать липиды по меньшей мере 20% от биомассы, включающий культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем подачу источника лимитирующих питательных веществ ограничивают или прекращают и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
39. Способ по п.38, отличающийся тем, что представляет собой процесс с подпиткой.
40. Способ по п.38, отличающийся тем, что достигают плотности биомассы по меньшей мере приблизительно 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
41. Способ по п.38, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
42. Способ по п.38, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
43. Способ по п.38, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
44. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающий культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что указанный источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в процессе с подпиткой до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
45. Способ по п.44, отличающийся тем, что достигают плотности биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
46. Способ по п.44, отличающийся тем, что скорость продуцирования составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
47. Способ по п.44, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
48. Способ по п.44, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
49. Способ культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать липиды по меньшей мере 20% от биомассы, включающий культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере до 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток; затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения, при этом скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч и по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых микроорганизмами, представляют собой полиненасыщенные жирные кислоты.
50. Способ по п.49, отличающийся тем, что представляет собой процесс с подпиткой.
51. Способ по п.49, отличающийся тем, что достигают плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
52. Способ по п.49, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
53. Способ по п.49, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
54. Способ культивирования микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать по меньшей мере 20% от биомассы липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, включающий культивирование указанных микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ добавляют в среду до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения.
55. Способ по п.54, отличающийся тем, что представляет собой процесс с подпиткой.
56. Способ по п.54, отличающийся тем, что достигают плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
57. Способ по п.54, отличающийся тем, что скорость продуцирования липидов составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
58. Способ по п.54, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
59. Способ по п.54, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
60. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов подкласса Thraustochytriales, способных продуцировать полиненасыщенные жирные кислоты по меньшей мере 15% от общего количества липидов, продуцируемых указанными микроорганизмами, включающий культивирование микроорганизмов в среде, содержащей неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ, отличающийся тем, что в указанную среду добавляют неспиртовой источник углерода и источник лимитирующих питательных веществ до достижения плотности биомассы по меньшей мере 100 г/л в пересчете на массу сухих клеток, затем процесс проводят, обеспечивая условия, при которых лимитирующее вещество ограничено, и концентрацию растворенного кислорода поддерживают на уровне не выше 3% от насыщения, после завершения культивирования полученные липиды выделяют.
61. Способ по п.60, отличающийся тем, что представляет собой процесс с подпиткой.
62. Способ по п.60, отличающийся тем, что достигают плотность биомассы по меньшей мере 150 г/л в пересчете на массу сухих клеток.
63. Способ по п.60, отличающийся тем, что скорость продуцирования составляет по меньшей мере 0,5 г/л/ч.
64. Способ по п.60, отличающийся тем, что указанные микроорганизмы выбирают из группы, включающей Thraustochytrium, Schizochytrium, a также их смеси.
65. Способ по п.60, отличающийся тем, что в указанном процессе микроорганизмы продуцируют по меньшей мере 0,2 г/л/ч докозагексаноевой кислоты.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US17858800P | 2000-01-28 | 2000-01-28 | |
| US60/178,588 | 2000-01-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002120481A RU2002120481A (ru) | 2004-02-20 |
| RU2326171C2 true RU2326171C2 (ru) | 2008-06-10 |
Family
ID=22653135
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002120481/13A RU2326171C2 (ru) | 2000-01-28 | 2001-01-26 | Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты (варианты) и способ культивирования микроорганизмов, продуцирующих эти липиды |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (18) | US6607900B2 (ru) |
| EP (7) | EP2341127B1 (ru) |
| JP (9) | JP2004501603A (ru) |
| KR (6) | KR101293135B1 (ru) |
| CN (8) | CN101519678B (ru) |
| AT (1) | ATE374531T1 (ru) |
| AU (4) | AU785124B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0107832B1 (ru) |
| CA (3) | CA2760879C (ru) |
| CY (1) | CY1107114T1 (ru) |
| CZ (1) | CZ301130B6 (ru) |
| DE (2) | DE01903376T1 (ru) |
| DK (1) | DK1251744T4 (ru) |
| ES (4) | ES2545492T3 (ru) |
| HK (1) | HK1050611A1 (ru) |
| HU (1) | HUP0301794A3 (ru) |
| IL (3) | IL150770A0 (ru) |
| MX (2) | MXPA02007321A (ru) |
| NO (1) | NO20023588L (ru) |
| NZ (1) | NZ520420A (ru) |
| PL (1) | PL362620A1 (ru) |
| PT (1) | PT1251744E (ru) |
| RU (1) | RU2326171C2 (ru) |
| TR (1) | TR200302163T3 (ru) |
| TW (3) | TWI354702B (ru) |
| WO (1) | WO2001054510A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200205957B (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2539766C2 (ru) * | 2012-08-03 | 2015-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | ШТАММ Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu T/05-117 - ПРОДУЦЕНТ ЛИПИДОСОДЕРЖАЩЕЙ БИОМАССЫ |
| RU2744913C2 (ru) * | 2016-12-27 | 2021-03-17 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Способ выделения липидов из липидсодержащей биомассы |
| RU2776914C1 (ru) * | 2018-11-09 | 2022-07-28 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Способ получения биомассы, которая может легко расщепляться и которая характеризуется повышенным содержанием полиненасыщенных жирных кислот |
Families Citing this family (179)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
| US6451567B1 (en) * | 1988-09-07 | 2002-09-17 | Omegatech, Inc. | Fermentation process for producing long chain omega-3 fatty acids with euryhaline microorganisms |
| US20060094089A1 (en) * | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| EP0823475B1 (en) | 1995-04-17 | 2009-06-17 | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology | Novel microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms |
| US20080175953A1 (en) * | 1995-06-07 | 2008-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Process for the Heterotrophic Production of Microbial Products with High Concentrations of Omega-3 Highly Unsaturated Fatty Acids |
| EP2341127B1 (en) | 2000-01-28 | 2015-05-27 | DSM IP Assets B.V. | Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors |
| US7390391B2 (en) * | 2001-09-14 | 2008-06-24 | Arkray, Inc. | Concentration measuring method, concentration test instrument, and concentration measuring apparatus |
| US7560123B2 (en) * | 2004-08-12 | 2009-07-14 | Everett Laboratories, Inc. | Compositions and methods for nutrition supplementation |
| CA2484334C (en) * | 2002-05-03 | 2013-01-22 | Martek Biosciences Corporation | High-quality lipids and methods for producing by enzymatic liberation from biomass |
| US8617617B2 (en) * | 2002-12-10 | 2013-12-31 | Everett Laboratories, Inc. | Methods and kits for co-administration of nutritional supplements |
| US6814983B2 (en) * | 2002-12-10 | 2004-11-09 | Everett Laboratories, Inc. | Compositions and methods for nutrition supplementation |
| US20050019880A1 (en) * | 2003-03-31 | 2005-01-27 | Council Of Scientific And Industrial Research | Method of enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists |
| US20060263403A1 (en) * | 2003-04-24 | 2006-11-23 | Essam Enan | Compositions and methods for controlling insects involving the tyramine receptor |
| RU2388225C2 (ru) | 2003-04-24 | 2010-05-10 | "ТАЙРАТЕК, ЛЛСи" | Композиции и способы борьбы с насекомыми |
| US7622269B2 (en) * | 2004-03-19 | 2009-11-24 | Tyratech, Inc. | Methods of screening tyramine- and octopamine-expressing cells for compounds and compositions having potential insect control activity |
| AU2003902794A0 (en) * | 2003-06-03 | 2003-06-19 | Agresearch Limited | Improvements in grass endophytes |
| US7267976B2 (en) * | 2003-07-02 | 2007-09-11 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Acyltransferases for alteration of polyunsaturated fatty acids and oil content in oleaginous yeasts |
| EP1660639A1 (en) * | 2003-09-01 | 2006-05-31 | Novozymes A/S | Method for increasing yield of biomass of and/or components of biomass from marine microorganisms |
| EP1702073B1 (en) | 2003-10-02 | 2014-01-01 | DSM IP Assets B.V. | Production of high levels of dha in microalgae using modified amounts of chloride and potassium |
| WO2005047480A2 (en) * | 2003-11-12 | 2005-05-26 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Delta-15 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous plants and yeast |
| EP2251429B1 (en) * | 2003-12-30 | 2017-03-01 | DSM IP Assets B.V. | Deaeration process |
| US8101587B2 (en) | 2004-08-12 | 2012-01-24 | Everett Laboratories, Inc. | Kits for nutrition supplementation |
| US8241868B2 (en) | 2005-02-08 | 2012-08-14 | Nippon Suisan Kaisha, Ltd. | Production of polyunsaturated fatty acids using cell treatment method |
| JP4849806B2 (ja) * | 2005-02-08 | 2012-01-11 | 日本水産株式会社 | 新規な菌体処理方法を用いた高度不飽和脂肪酸の製造方法 |
| JP5886511B2 (ja) | 2005-06-07 | 2016-03-16 | ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲーＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ＡＧ | 脂質および抗酸化剤の製造のための真核微生物 |
| CA2614095A1 (en) | 2005-07-01 | 2007-01-11 | Martek Biosciences Corporation | Polyunsaturated fatty acid-containing oil product and uses and production thereof |
| US8177262B2 (en) * | 2005-07-28 | 2012-05-15 | Hydril Company Lp | Mid-seal for expandable connections |
| WO2007074479A1 (en) * | 2005-12-29 | 2007-07-05 | Abl Biotechnologies Ltd | Novel strain of schizochytrium limacinum useful in the production of lipids and extracellular polysaccharides and process thereof |
| MX2008016453A (es) | 2006-06-27 | 2009-05-15 | Tyratech Inc | Composiciones y metodos para tratar infecciones parasitas. |
| MX2009000548A (es) * | 2006-07-17 | 2009-05-28 | Tyratech Inc | Composiciones y metodos para controlar insectos. |
| WO2008129358A2 (en) * | 2006-08-01 | 2008-10-30 | Ocean Nutrition Canada Ltd. | Oil producing microbes and methods of modification thereof |
| US9637714B2 (en) * | 2006-12-28 | 2017-05-02 | Colorado State University Research Foundation | Diffuse light extended surface area water-supported photobioreactor |
| WO2008088827A2 (en) * | 2007-01-16 | 2008-07-24 | Tyratech, Inc. | Pest control compositions and methods |
| CN101820743A (zh) * | 2007-06-14 | 2010-09-01 | 尼古拉斯·米特罗普洛斯 | 用于生物燃料的藻类生长 |
| WO2008155410A1 (en) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Novozymes A/S | Production of lipids containing poly-unsaturated fatty acids |
| EP2173699A4 (en) * | 2007-06-29 | 2014-04-16 | Dsm Ip Assets Bv | PRODUCTION AND PURIFICATION OF POLYUNSATURATED FATTY ACID ESTERS |
| GB0713121D0 (en) * | 2007-07-06 | 2007-08-15 | Univ Keele | Refrigerated gas equilibration device |
| US20090064567A1 (en) * | 2007-09-12 | 2009-03-12 | Martek Biosciences Corporation | Biological oils and production and uses Thereof |
| ITMI20072343A1 (it) | 2007-12-14 | 2009-06-15 | Eni Spa | Processo per la produzione di biomassa algale ad alto contenuto lipidico |
| US7989195B2 (en) * | 2008-02-20 | 2011-08-02 | Washington State University Research Foundation | Heterotrophic algal high cell density production method and system |
| ES2326022B1 (es) * | 2008-03-25 | 2010-06-07 | Neuron Biopharma, S.A. | Procedimiento mejorado para la produccion de biodiesel. |
| RU2542374C2 (ru) * | 2008-04-09 | 2015-02-20 | Солазим, Инк. | Способ химической модификации липидов микроводорослей, способ получения мыла и мыло, включающее соли жирных кислот омыленных липидов микроводорослей |
| JP5171422B2 (ja) * | 2008-06-19 | 2013-03-27 | ルネサスエレクトロニクス株式会社 | 感光性組成物、これを用いたパターン形成方法、半導体素子の製造方法 |
| US20100050502A1 (en) * | 2008-08-21 | 2010-03-04 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for hydrothermal conversion of algae into biofuel |
| US20100236137A1 (en) * | 2008-09-23 | 2010-09-23 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for producing eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid from algae |
| JP2012503476A (ja) * | 2008-09-23 | 2012-02-09 | ライブフュエルズ， インコーポレイテッド | 藻類からバイオ燃料を製造するシステムおよび方法 |
| US20100077654A1 (en) * | 2008-09-23 | 2010-04-01 | LiveFuels, Inc. | Systems and methods for producing biofuels from algae |
| MX352984B (es) | 2008-10-14 | 2017-12-15 | Terravia Holdings Inc | Composiciones alimenticias a partir de biomasa de microalgas. |
| US8809037B2 (en) | 2008-10-24 | 2014-08-19 | Bioprocessh20 Llc | Systems, apparatuses and methods for treating wastewater |
| US20110239318A1 (en) * | 2008-11-18 | 2011-09-29 | LiveFuels, Inc. | Methods for producing fish with high lipid content |
| CA2746700A1 (en) * | 2008-12-19 | 2010-07-15 | Alpha-J Research Limited Partnership | Optimization of algal product production through uncoupling cell proliferation and algal product production |
| WO2010097809A2 (en) * | 2009-02-25 | 2010-09-02 | V.B. Medicare Pvt. Ltd. | Improved methods for fermentative production of docosahexaenoic acid |
| US8207363B2 (en) | 2009-03-19 | 2012-06-26 | Martek Biosciences Corporation | Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| KR101899933B1 (ko) | 2009-04-14 | 2018-09-19 | 테라비아 홀딩스 인코포레이티드 | 신규의 미세 조류 식품 조성물 |
| WO2010121094A1 (en) | 2009-04-17 | 2010-10-21 | Livefuels. Inc. | Systems and methods for culturing algae with bivalves |
| CA2760921A1 (en) | 2009-05-04 | 2010-11-11 | Primafuel, Inc. | Improved recovery of desired co-products from fermentation stillage streams |
| CN101899481A (zh) * | 2009-05-25 | 2010-12-01 | 华盛顿州立大学 | 异养海藻高密度生产的方法和系统 |
| IN2012DN02479A (ru) | 2009-09-18 | 2015-08-21 | Phycoil Biotechnology International Inc | |
| KR20150013667A (ko) | 2010-01-19 | 2015-02-05 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 에이코사펜타엔산 생산 미생물, 지방산 조성물 및 이의 제조방법 및 용도 |
| CA2791986A1 (en) | 2010-03-11 | 2011-09-15 | BP Biofuels UK Limited | Methods, biological oils, biofuels, units, and organisms related to use in compression engines |
| CN102933701A (zh) | 2010-03-12 | 2013-02-13 | Solix生物系统公司 | 用于定位挠性漂浮式光生物反应器的系统和方法 |
| US8617857B2 (en) | 2010-05-04 | 2013-12-31 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Thraustochytrid-based microalgae, and method for preparing bio-oil by using same |
| KR101147450B1 (ko) | 2010-05-04 | 2012-05-21 | 한국생명공학연구원 | 신규 유지성 미세조류 ｋｒｓ１０１ 균주 및 이를 이용한 바이오오일의 제조방법 |
| AU2011261455B2 (en) | 2010-06-01 | 2016-03-24 | Dsm Ip Assets B.V. | Extraction of lipid from cells and products therefrom |
| MY163938A (en) | 2010-06-14 | 2017-11-15 | Io-Mega Holding Corp | Method for the production of algae derived oils |
| US10479969B2 (en) | 2010-10-11 | 2019-11-19 | Phycoil Biotechnology International. Inc. | Utilization of wastewater for microalgal cultivation |
| CN102485898A (zh) * | 2010-12-02 | 2012-06-06 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 微生物发酵生产脂质的方法 |
| WO2012109375A2 (en) * | 2011-02-08 | 2012-08-16 | Phycal Inc. | Methods for improved mixed trophic algal culture |
| CN103649313B (zh) | 2011-03-07 | 2017-10-24 | Dsm营养产品股份公司 | 工程化破囊壶菌属微生物 |
| US9487716B2 (en) | 2011-05-06 | 2016-11-08 | LiveFuels, Inc. | Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems |
| JP6297489B2 (ja) | 2011-06-23 | 2018-03-20 | ロー リニューアブルズ， インコーポレイテッド | 芳香族分子の組換え生成系 |
| US8183227B1 (en) | 2011-07-07 | 2012-05-22 | Chemo S. A. France | Compositions, kits and methods for nutrition supplementation |
| MX344443B (es) * | 2011-07-13 | 2016-12-15 | Alltech Inc | Composiciones de lipidos algales y metodos para prepararlas y utilizarlas. |
| ES2774778T3 (es) * | 2011-07-21 | 2020-07-22 | Dsm Ip Assets Bv | Microorganismos productores de ácido eicosapentaenoico, composiciones de ácidos grasos y métodos de elaboración y usos de los mismos |
| CA2842272C (en) | 2011-07-21 | 2020-04-28 | Dsm Ip Assets B.V. | Fatty acid compositions |
| WO2013032333A1 (en) * | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Algae Biotech S.L. | Oral dosage units containing astaxanthin, phospholipids and omega-3 fatty acids |
| US8168611B1 (en) | 2011-09-29 | 2012-05-01 | Chemo S.A. France | Compositions, kits and methods for nutrition supplementation |
| JP2015512653A (ja) | 2012-04-09 | 2015-04-30 | ビーピー・バイオフューエルズ・ユーケイ・リミテッド | バイオ燃料及び他の再生可能な材料の産生のための低多糖微生物 |
| US10100338B2 (en) * | 2012-05-22 | 2018-10-16 | Ineos Bio S.A. | Method of operation of a syngas fermentation process |
| CN102864111B (zh) * | 2012-10-10 | 2013-07-17 | 江南大学 | 一株产二十二碳六烯酸的裂殖壶菌菌株 |
| EP2908661B1 (en) | 2012-10-17 | 2019-11-20 | Corbion Biotech, Inc. | Microalgal flour granules and process for preparation thereof |
| EP2724625A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-04-30 | Roquette Freres | Microalgal flour granules and process for preparation thereof |
| US9394505B2 (en) | 2012-12-04 | 2016-07-19 | Flint Hills Resources, Lp | Recovery of co-products from fermentation stillage streams |
| ES2762618T3 (es) * | 2013-01-18 | 2020-05-25 | Kyowa Hakko Bio Co Ltd | Microorganismos que producen ácido docosahexaenoico y utilización de los mismos |
| EP2762009A1 (de) | 2013-02-05 | 2014-08-06 | Evonik Industries AG | Verbesserung der Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen |
| EP2953480B1 (de) | 2013-02-05 | 2020-06-03 | Evonik Operations GmbH | Verbesserung der bioverfügbarkeit von wertstoffen aus mikroorganismen |
| DE102013201978A1 (de) | 2013-02-07 | 2014-08-07 | Evonik Industries Ag | Verbesserte Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen |
| EP2762008A1 (de) | 2013-02-05 | 2014-08-06 | Evonik Industries AG | Verbesserung der Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen durch Verwendung eines Rotor-Stator Systems für den Zellaufschluss |
| EP2968568A2 (en) * | 2013-03-11 | 2016-01-20 | Life Science Nutrition AS | Natural lipids containing non-oxidizable fatty acids |
| CN105189740B (zh) | 2013-03-13 | 2019-01-15 | 帝斯曼营养品股份公司 | 工程化微生物 |
| EP2777400A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-17 | Roquette Freres | Microalgal flour granules and process for preparation thereof |
| ES2656337T3 (es) | 2013-03-29 | 2018-02-26 | Roquette Frères | Procedimiento de enriquecimiento en proteínas de la biomasa de microalgas |
| EP2826384A1 (de) | 2013-07-16 | 2015-01-21 | Evonik Industries AG | Verfahren zur Trocknung von Biomasse |
| FR3008581B1 (fr) * | 2013-07-19 | 2016-11-04 | Roquette Freres | Farine de microalgues riches en lipides et procede de preparation |
| CN105636456A (zh) | 2013-10-18 | 2016-06-01 | 罗盖特公司 | 用于使微藻生物质有质感的方法 |
| WO2015071726A1 (en) | 2013-11-12 | 2015-05-21 | Makam Roshan Viswanath | A process of production and extra-cellular secretion of lipids |
| KR101541521B1 (ko) | 2013-11-28 | 2015-08-03 | 롯데케미칼 주식회사 | 미세조류를 이용한 도코사헥사엔산 생산방법 |
| MX2016006762A (es) | 2013-11-29 | 2016-10-03 | Roquette Freres | Granulos de harina de biomasa microalgacea rica en proteinas y metodo para preparar los mismos. |
| US20160376544A1 (en) | 2013-11-29 | 2016-12-29 | Roquette Freres | Process for enrichment of microalgal biomass with carotenoids and with proteins |
| FR3015516B1 (fr) * | 2013-12-19 | 2016-01-22 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement en dha de la biomasse de microalgues du genre thraustochytrium |
| EP2958982B1 (en) | 2013-12-20 | 2019-10-02 | Mara Renewables Corporation | Methods of recovering oil from microorganisms |
| US11124736B2 (en) | 2013-12-20 | 2021-09-21 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
| KR102435268B1 (ko) | 2013-12-20 | 2022-08-22 | 디에스엠 뉴트리셔널 프라덕츠 아게 | 미생물로부터 오일을 회수하는 방법 |
| CN105960235B (zh) | 2013-12-20 | 2021-01-08 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 用于从微生物细胞获得微生物油的方法 |
| SG11201605052XA (en) | 2013-12-20 | 2016-07-28 | Dsm Ip Assets Bv | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
| MX370606B (es) | 2013-12-20 | 2019-12-18 | Dsm Ip Assets Bv | Procedimientos para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas. |
| EP3097201B1 (fr) | 2014-01-20 | 2018-11-28 | Corbion Biotech, Inc. | Procédé d'enrichissement en protéines de la biomasse de microalgues |
| DK3110930T3 (da) * | 2014-02-28 | 2020-06-08 | Delft Advanced Biofuels B V | Fremgangsmåde til genvinding af lipider eller carbonhydrider |
| CN106795539B (zh) | 2014-05-22 | 2021-06-22 | 玛拉可再生能源公司 | 在微生物中产生油的方法 |
| WO2015191449A2 (en) | 2014-06-08 | 2015-12-17 | Solazyme, Inc. | Personal care products containing microalgae or extracts thereof |
| CN110835606B (zh) * | 2014-07-03 | 2020-12-22 | 可持续生物制品公司 | 嗜酸性尖镰孢菌株及其生产和使用方法 |
| EP3200604B1 (de) | 2014-10-02 | 2021-11-03 | Evonik Operations GmbH | Verfahren zur herstellung eines futtermittels |
| EP3200603A1 (de) | 2014-10-02 | 2017-08-09 | Evonik Degussa GmbH | Pufas enthaltendes futtermittel mit hoher abriebfestigkeit und hoher wasserstabilität |
| CA2958457C (en) | 2014-10-02 | 2022-10-25 | Evonik Industries Ag | Process for producing a pufa-containing biomass which has high cell stability |
| US10619175B2 (en) * | 2014-10-02 | 2020-04-14 | Evonik Operations Gmbh | Process for producing a PUFA-containing feedstuff by extruding a PUFA-containing biomass |
| JP6806297B2 (ja) | 2014-10-16 | 2021-01-06 | マラ リニューアブルズ コーポレーション | 半連続培養法 |
| JP6773301B2 (ja) | 2014-10-16 | 2020-10-21 | マラ リニューアブルズ コーポレーション | 反復フェドバッチ培養方法 |
| US10570427B2 (en) * | 2014-10-31 | 2020-02-25 | Lanzatech New Zealand Limited | Fermentation process for the production of lipids |
| JP6711278B2 (ja) * | 2014-11-28 | 2020-06-17 | 味の素株式会社 | イソプレノイド化合物の製造方法 |
| FR3030191B1 (fr) | 2014-12-18 | 2018-03-23 | Corbion Biotech, Inc. | Composition pour produit frit allege en matiere grasse et procede de fabrication |
| US9890402B2 (en) | 2015-01-24 | 2018-02-13 | Indian Oil Corporation Limited | Thraustochytrid based process for treating waste effluents |
| FR3031984B1 (fr) * | 2015-01-27 | 2019-05-24 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement de la biomasse de microalgues du genre traustochytrium en dha et en acides amines arg et glu |
| DK3274430T3 (da) | 2015-03-24 | 2022-10-03 | Corbion Biotech Inc | Mikroalgesammensætninger og deres anvendelser |
| AR104042A1 (es) * | 2015-03-26 | 2017-06-21 | Mara Renewables Corp | Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto |
| MX2018000502A (es) | 2015-07-13 | 2018-09-07 | Mara Renewables Corp | Mejora del metabolismo de microalga de xilosa. |
| CN104974944B (zh) * | 2015-07-15 | 2018-05-25 | 南京工业大学 | 一种产dha的裂殖壶菌基因工程菌及其构建方法和应用 |
| ITUB20152958A1 (it) | 2015-08-06 | 2017-02-06 | Eni Spa | Metodo per concentrare una sospensione cellulare comprendente una biomassa mucillaginosa di lieviti oleaginosi. |
| CN105018539B (zh) * | 2015-08-24 | 2019-02-12 | 青岛旭能生物工程有限责任公司 | 一种培养裂殖壶菌高产dha的方法 |
| CN105002227B (zh) * | 2015-08-24 | 2018-09-07 | 青岛旭能生物工程有限责任公司 | 一种通过流加策略提高摇瓶发酵裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法 |
| CN105420122A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-23 | 通威股份有限公司 | 可高密度培养的裂殖壶菌及其生产富含dha的油脂的方法 |
| WO2017131188A1 (ja) * | 2016-01-28 | 2017-08-03 | 日本水産株式会社 | 高度不飽和脂肪酸を含む油脂の製造方法 |
| AU2017227612C1 (en) | 2016-03-01 | 2023-02-16 | The Fynder Group, Inc. | Filamentous fungal biomats, methods of their production and methods of their use |
| US10851395B2 (en) * | 2016-06-10 | 2020-12-01 | MARA Renewables Corporation | Method of making lipids with improved cold flow properties |
| CA3030471C (en) | 2016-07-13 | 2023-06-20 | Evonik Degussa Gmbh | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| US11946017B2 (en) | 2016-07-13 | 2024-04-02 | Evonik Operations Gmbh | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| AU2017297752B2 (en) | 2016-07-13 | 2021-09-23 | Dsm Ip Assets B.V. | Method for isolating lipids from lipid-containing cells |
| CN109415654A (zh) | 2016-07-20 | 2019-03-01 | 玛拉可再生能源公司 | 用于对油进行冬化的两步分馏方法 |
| PT3487970T (pt) | 2016-07-20 | 2023-05-03 | Mara Renewables Corp | Método de produção de óleo microbiano não refinado fluido |
| CN106359930A (zh) * | 2016-08-29 | 2017-02-01 | 界首市任寨乡天佑家庭农场 | 一种用于生产epa、dpa含量高的功能性牛肉饲料 |
| WO2018122057A1 (en) | 2016-12-27 | 2018-07-05 | Evonik Degussa Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| CN109777606B (zh) * | 2016-12-30 | 2022-09-23 | 内蒙古金达威药业有限公司 | 一种提取dha毛油的方法 |
| TWI661780B (zh) * | 2017-02-10 | 2019-06-11 | 台原藥股份有限公司 | 含不飽和脂肪酸的素食組合物 |
| BR112020000421A2 (pt) | 2017-07-12 | 2020-09-01 | Bunge Global Innovation Llc | processo de extração de óleo a partir de biomassa de algas |
| WO2019034354A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Evonik Degussa Gmbh | ENHANCED PRODUCTION OF LIPIDS BY LIMITING AT LEAST TWO SOURCES OF NUTRIENT LIMITING |
| US11814665B2 (en) | 2017-08-17 | 2023-11-14 | Evonik Operations Gmbh | Enhanced production of lipids by limitation of at least two limiting nutrient sources |
| JP2020532297A (ja) | 2017-08-30 | 2020-11-12 | ザ・フィンダー・グループ・インコーポレイテッドＴｈｅ Ｆｙｎｄｅｒ Ｇｒｏｕｐ， Ｉｎｃ． | 糸状菌を含む食用組成物およびその栽培のためのバイオリアクターシステム |
| EP3470502A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-17 | Evonik Degussa GmbH | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| WO2019048327A1 (en) | 2017-09-05 | 2019-03-14 | Evonik Degussa Gmbh | METHOD FOR SEPARATING LIPIDS IN A BIOMASS CONTAINING LYDE LIPIDS |
| EP3527664A1 (en) | 2018-02-15 | 2019-08-21 | Evonik Degussa GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| WO2019121752A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Evonik Degussa Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| WO2019122030A1 (en) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | Dsm Ip Assets B.V. | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
| WO2019185938A2 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols with extended lipophilic side chains |
| EP3818136A1 (en) | 2018-03-29 | 2021-05-12 | DSM IP Assets B.V. | Novel use of substituted 2h-chromens and their derivatives |
| WO2019185888A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of tocopherols |
| WO2019185910A2 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted 2h-chromens and their derivatives |
| WO2019185889A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of carnosic acid |
| WO2019185939A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of twin-chromanols as antioxidants in oil |
| WO2019185942A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of tocotrienols as antioxidants |
| WO2019185891A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols |
| PE20210446A1 (es) | 2018-03-29 | 2021-03-08 | Dsm Ip Assets Bv | Nuevo uso de croman-6-oles sustituidos |
| PE20211495A1 (es) | 2018-03-29 | 2021-08-11 | Dsm Ip Assets Bv | Uso novedoso de cromanoles gemelos |
| WO2019185941A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Novel use of substituted chroman-6-ols with extended lipophilic side chains |
| WO2019185904A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Chroman-6-ols with an extended lipophilic side chain in position 2, their manufacture and use |
| WO2019219443A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Evonik Operations Gmbh | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass with aid of hydrophobic silica |
| US11976253B2 (en) | 2018-05-15 | 2024-05-07 | Evonik Operations Gmbh | Method of isolating lipids from a lysed lipids containing biomass by emulsion inversion |
| CN109022284B (zh) * | 2018-09-03 | 2021-05-21 | 杭州园泰生物科技有限公司 | 提高球等鞭金藻生物量以及dha产量的方法 |
| FR3085962B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-06-18 | Fermentalg | Procede d'extracton d'une huile riche en pufa |
| FR3085825B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-07-16 | Fermentalg | Huile de microorganismes riche en acide docosahexaenoique |
| US20220017929A1 (en) | 2018-11-09 | 2022-01-20 | Evonik Operations Gmbh | Method for producing a biomass with an increased content of polyunsaturated fatty acids |
| BR112021008853A2 (pt) * | 2018-11-09 | 2021-08-17 | Evonik Operations Gmbh | método para produzir uma biomassa que pode ser facilmente rompida e que tem um teor aumentado de ácidos graxos poliinsaturados |
| KR102286636B1 (ko) * | 2019-01-31 | 2021-08-05 | 한국생명공학연구원 | 로리오라이드 생산성이 높은 신규 미세조류 |
| EP4309505A3 (en) | 2019-02-27 | 2024-05-29 | The Fynder Group, Inc. | Food materials comprising filamentous fungal particles and membrane bioreactor design |
| US20220325232A1 (en) | 2019-06-18 | 2022-10-13 | The Fynder Group, Inc. | Fungal textile materials and leather analogs |
| EP3933016A1 (en) | 2020-06-30 | 2022-01-05 | Evonik Operations GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
| TWI766669B (zh) * | 2021-04-29 | 2022-06-01 | 大自然環保科技有限公司 | 有機液體生物醱酵槽裝置 |
| WO2022228687A1 (en) | 2021-04-29 | 2022-11-03 | S2B Gmbh & Co. Kg | Biotechnological production of terpenes |
| EP4180513A1 (en) | 2021-11-15 | 2023-05-17 | Indian Oil Corporation Limited | An improved process for production of enriched algal biomass |
| EP4198136A3 (en) | 2021-12-16 | 2023-08-30 | Indian Oil Corporation Limited | Methods and formulations for enhancing high value lipids |
| WO2023144707A1 (en) | 2022-01-25 | 2023-08-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Media refinement and nutrient feeding approaches to increase polyunsaturated fatty acid production |
Family Cites Families (140)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2879162A (en) * | 1956-10-04 | 1959-03-24 | Du Pont | Augmenting poultry feed |
| US2890989A (en) | 1957-07-01 | 1959-06-16 | Ralph F Anderson | Method for the production of carotenes |
| GB857161A (en) | 1958-01-07 | 1960-12-29 | Boots Pure Drug Co Ltd | Improvements in the propagation of fungi |
| US3108402A (en) | 1961-03-16 | 1963-10-29 | Grain Processing Corp | Production of carotenoid pigments |
| US3444647A (en) * | 1961-08-08 | 1969-05-20 | Masahito Takahashi | Process of cultivating algae |
| US3142135A (en) | 1962-02-13 | 1964-07-28 | Grain Processing Corp | Production of carotenoids by the cultivation of algae |
| US3282794A (en) * | 1963-09-19 | 1966-11-01 | Ajinomoto Kk | Method of producing citrulline by bacterial fermentation |
| US3296079A (en) | 1963-12-09 | 1967-01-03 | Pfizer & Co C | Products sweetened without sugar and characterized by freedom from aftertaste |
| US3316674A (en) * | 1964-09-11 | 1967-05-02 | Yakult Honsha Kk | Method of new industrial cultivation of unicellular green algae such as chlorella |
| GB1143405A (en) | 1965-02-25 | 1969-02-19 | Unilever Ltd | Processing of foodstuffs and the like |
| GB1123884A (en) | 1966-05-23 | 1968-08-14 | Pfizer & Co C | Animal feed compositions |
| FR1557635A (ru) | 1967-04-20 | 1969-02-21 | ||
| US3661663A (en) | 1968-08-21 | 1972-05-09 | Owens Corning Fiberglass Corp | Method of producing siliceous fiber corrosion inhibiting composites |
| DE1901980A1 (de) * | 1969-01-16 | 1970-09-03 | Wunder Kg Heinrich | Sicherheits-Skibindung mit ausschwenkbarem Andrueckbacken |
| IL33732A (en) | 1969-02-06 | 1973-05-31 | Meiji Seika Kaisha | The new antibiotics sf-837,sf-837-a2,sf-837-a3 and sf-837-a4 and their production |
| US3617299A (en) | 1969-09-15 | 1971-11-02 | Abbott Lab | Animal feed premix resistant to static charge and method of making same |
| US3647482A (en) * | 1970-03-04 | 1972-03-07 | Gen Mills Inc | Reduction and modification of the unpleasant aftertaste of saccharin |
| GB1401956A (en) | 1971-09-11 | 1975-08-06 | Marmite Ltd | Growing of yeast and other microorganisms |
| US3924017A (en) | 1972-07-28 | 1975-12-02 | Gen Foods Corp | Sweetness inducer |
| JPS564233B2 (ru) * | 1973-03-30 | 1981-01-29 | ||
| US3908026A (en) | 1973-04-19 | 1975-09-23 | Procter & Gamble | Culinary composition containing paramethoxycinnamaldehyde as a flavoring agent and sweetener |
| US3908028A (en) | 1973-04-19 | 1975-09-23 | Procter & Gamble | Soft drink composition containing paramethoxycinnamaldehyde as a flavoring agent and sweetner |
| GB1466853A (en) | 1973-05-22 | 1977-03-09 | Simon Rosedowns Ltd | Extraction |
| US3879890A (en) * | 1974-02-06 | 1975-04-29 | Canadian Patents Dev | Algal polysaccharide production |
| US4162324A (en) | 1975-11-21 | 1979-07-24 | Merck & Co., Inc. | Antibiotics 890A1 and 890A3 |
| IT1109471B (it) | 1976-08-17 | 1985-12-16 | Deral Sa | Procedimento e prodotto per la conservazione e la valorizzazione di vegetali a verde e dei sotto prodotti umidi delle industrie agro alimentari |
| JPS5944020B2 (ja) | 1978-01-27 | 1984-10-26 | 協和醗酵工業株式会社 | 油脂酵母による海産魚類の飼育方法 |
| US4229544A (en) | 1978-08-08 | 1980-10-21 | Payfer Laboratories Inc. | Living organism packaging |
| US4304794A (en) | 1978-12-14 | 1981-12-08 | Chimicasa Gmbh | Artificial-sweetener composition and process of preparing and using same |
| US4232122A (en) | 1979-01-17 | 1980-11-04 | Z-L Limited Partnership | Antioxidants, antioxidant compositions and methods of preparing and using same |
| JPS55111794A (en) * | 1979-02-19 | 1980-08-28 | Agency Of Ind Science & Technol | Production of lipid having high linolic acid content |
| US4405649A (en) * | 1979-05-07 | 1983-09-20 | Marvin Dudley | Process for producing premium quality fish meal from whole fish |
| IL57712A (en) | 1979-07-03 | 1984-02-29 | Yissum Res Dev Co | Cultivation of halophilic algae of the dunaliella species for the production of fuel-like product |
| DE3011185A1 (de) | 1980-03-22 | 1981-10-01 | Kali-Chemie Pharma Gmbh, 3000 Hannover | Verfahren zur gewinnung von fuer physiologische zwecke direkt verwendbarem rin(paragraph)lecithin |
| GB2098065A (en) | 1981-04-14 | 1982-11-17 | Nippon Suisan Kaisha Ltd | Antithrombotic compositions containing docosahexaenoic acid |
| US4426396A (en) * | 1981-06-11 | 1984-01-17 | Union Oil Company Of California | Preservation of harvested crops and animal feedstuffs |
| IL63734A (en) | 1981-09-04 | 1985-07-31 | Yeda Res & Dev | Lipid fraction,its preparation and pharmaceutical compositions containing same |
| BR8207915A (pt) | 1981-10-07 | 1983-09-13 | Commw Scient Ind Res Org | Metodo para colheita de algas |
| US4383038A (en) | 1981-12-10 | 1983-05-10 | Ethyl Corporation | Process for the preparation of L-proline by cultivating algae |
| EP0092076B1 (fr) * | 1982-04-16 | 1986-12-17 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Composition lipidique destinée à l'alimentation orale, entérale ou parentérale |
| JPS58196068A (ja) | 1982-05-12 | 1983-11-15 | Nec Corp | 電歪効果素子 |
| JPS58213613A (ja) | 1982-06-03 | 1983-12-12 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 球型活性炭の製造方法 |
| US4670285A (en) * | 1982-08-06 | 1987-06-02 | The University Of Toronto Innovations Foundation | Infant formula |
| US4425396A (en) * | 1982-09-28 | 1984-01-10 | The B. F. Goodrich Company | Insulative panel |
| US4588600A (en) * | 1983-04-18 | 1986-05-13 | Scm Corporation | Dry premix composition for imparting a fried appearance to baked foods |
| JPS6087798A (ja) | 1983-10-21 | 1985-05-17 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 藻類によるエイコサペンタエン酸の生産方法 |
| JPS60105471A (ja) | 1983-11-14 | 1985-06-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 健康食品卵の生産方法 |
| JPS60133094A (ja) | 1983-12-21 | 1985-07-16 | 日清製油株式会社 | 高純度エイコサペンタエン酸の製造法 |
| EP0155420B1 (en) * | 1984-02-09 | 1988-03-23 | The Agency of Industrial Science and Technology | A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom |
| JPS61170366A (ja) | 1985-01-21 | 1986-08-01 | Nisshin Kararingu Kk | 多価不飽和脂肪酸含有魚類を主成分とする食品の製造方法 |
| IL74497A (en) | 1985-03-05 | 1990-02-09 | Proterra Ag | Pharmaceutical compositions containing phenyl carbamate derivatives and certain phenyl carbamate derivatives |
| US4634533A (en) * | 1985-04-26 | 1987-01-06 | Somerville Robert L | Method of converting brines to useful products |
| US4792418A (en) | 1985-08-14 | 1988-12-20 | Century Laboratories, Inc. | Method of extraction and purification of polyunsaturated fatty acids from natural sources |
| US4749522A (en) | 1985-10-31 | 1988-06-07 | Angio-Medical Corporation | Supercritical fluid extraction of animal derived materials |
| DE3603000A1 (de) | 1986-01-31 | 1987-08-06 | Milupa Ag | Neue polyensaeure-reiche fettmischung und deren verwendung bei der herstellung von saeuglingsnahrungen |
| JPS6340711A (ja) | 1986-08-06 | 1988-02-22 | Ngk Insulators Ltd | β型窒化珪素の製造法 |
| US4758438A (en) * | 1986-10-14 | 1988-07-19 | Stroz John J | Sweetener composition |
| US4804555A (en) | 1986-10-21 | 1989-02-14 | General Mills, Inc. | Physical process for simultaneous deodorization and cholesterol reduction of fats and oils |
| US4957748A (en) * | 1987-03-23 | 1990-09-18 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Ruminant feed, method of making and method of using |
| US5023091A (en) * | 1987-03-23 | 1991-06-11 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Ruminant feed method of making and method of using |
| US5064665A (en) | 1987-03-23 | 1991-11-12 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Method of making and using a ruminant feed |
| JPS63237745A (ja) | 1987-03-27 | 1988-10-04 | Harumi Okuyama | α−リノレン酸系脂肪酸の含有率が高められた動物性食品の生産方法 |
| US4764392A (en) * | 1987-04-01 | 1988-08-16 | Q.P. Corporation | Margarine containing fish oil |
| US4918104A (en) | 1987-06-16 | 1990-04-17 | Weiss Howard S | Method and composition for increasing the concentration of omega-3 polyunsaturated fatty acids in poultry and poultry eggs and poultry and eggs resulting therefrom |
| WO1989000606A1 (en) * | 1987-07-20 | 1989-01-26 | Maricultura, Incorporated | Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids |
| CA1263270A (en) * | 1987-08-19 | 1989-11-28 | Bruce J. Holub | Animal feed supplement |
| US4871551A (en) | 1988-02-08 | 1989-10-03 | Microbio Resources, Inc. | Pigmentation supplements for animal feed compositions |
| JPH01218573A (ja) | 1988-02-25 | 1989-08-31 | Yoshio Tanaka | ドナリエラ藻体含有固形状食品の製造法 |
| JP2723243B2 (ja) | 1988-02-25 | 1998-03-09 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸添加動物飼料 |
| US4822500A (en) * | 1988-02-29 | 1989-04-18 | Texas United Chemical Corporation | Saturated brine well treating fluids and additives therefore |
| US4874629A (en) | 1988-05-02 | 1989-10-17 | Chang Stephen S | Purification of fish oil |
| US5340594A (en) | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Food product having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5985348A (en) | 1995-06-07 | 1999-11-16 | Omegatech, Inc. | Milk products having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
| US6451567B1 (en) * | 1988-09-07 | 2002-09-17 | Omegatech, Inc. | Fermentation process for producing long chain omega-3 fatty acids with euryhaline microorganisms |
| US5698244A (en) | 1988-09-07 | 1997-12-16 | Omegatech Inc. | Method for raising animals having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US6977167B2 (en) | 1988-09-07 | 2005-12-20 | Martek Biosciences Corporation | Mixtures of omega-3 and omega-6 highly unsaturated fatty acids from euryhaline microorganisms |
| US5130242A (en) | 1988-09-07 | 1992-07-14 | Phycotech, Inc. | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US20060094089A1 (en) * | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US7033584B2 (en) * | 1988-09-07 | 2006-04-25 | Omegatech, Inc. | Feeding Thraustochytriales to poultry for increasing omega-3 highly unsaturated fatty acids in eggs |
| US5012761A (en) * | 1988-11-17 | 1991-05-07 | Oh Suk Y | Chicken egg having relatively high percentage of long chain fatty acids and method of reducing heart related disease in humans using such eggs |
| JP2664452B2 (ja) | 1988-12-23 | 1997-10-15 | サントリー株式会社 | 魚貝類用餌料 |
| DE3920679A1 (de) | 1989-06-23 | 1991-01-10 | Milupa Ag | Fettmischung zur herstellung von nahrungen, insbesondere saeuglingsnahrungen |
| US5272085A (en) | 1989-10-31 | 1993-12-21 | Queen's University | Sodium tolerance genes derived from schizosaccharomyces pombe |
| US5407957A (en) * | 1990-02-13 | 1995-04-18 | Martek Corporation | Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates |
| US5244921A (en) * | 1990-03-21 | 1993-09-14 | Martek Corporation | Eicosapentaenoic acids and methods for their production |
| JPH0458847A (ja) | 1990-06-23 | 1992-02-25 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | 抗肥満症油脂および抗肥満症食品 |
| US5297625A (en) | 1990-08-24 | 1994-03-29 | Associated Universities, Inc. | Biochemically enhanced oil recovery and oil treatment |
| JP3102645B2 (ja) | 1990-10-15 | 2000-10-23 | 雪印乳業株式会社 | 栄養補給用栄養組成物 |
| US5133963A (en) | 1990-12-21 | 1992-07-28 | Shuntaro Ise | Method of producing commercially useful poultry products with increased concentrations of Omega-3 polyunsaturated fatty acids |
| ZA92452B (en) * | 1991-01-24 | 1992-10-28 | Martek Corp | Microbial oil mixtures and uses thereof |
| DE4101976C2 (de) | 1991-01-24 | 1995-09-21 | Adatomed Pharma Chiron | Behandlungssystem für Netzhautentfaltung |
| US5658767A (en) | 1991-01-24 | 1997-08-19 | Martek Corporation | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
| PH11992043811B1 (en) * | 1991-01-24 | 2002-08-22 | Martek Corp | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
| JPH0728677B2 (ja) | 1991-01-25 | 1995-04-05 | 理研ビタミン株式会社 | 養魚飼料用油脂組成物及びこれを用いた養魚飼料 |
| JPH04271754A (ja) | 1991-02-26 | 1992-09-28 | Nippon Nousan Kogyo Kk | 家畜、家禽用飼料および畜肉の生産方法 |
| KR940005180B1 (ko) * | 1991-08-20 | 1994-06-13 | 주식회사 우방랜드 | n-3 지방산이 축적된 돈육 생산용 사료 조성물 |
| FR2686619B1 (fr) | 1992-01-28 | 1995-07-13 | Commissariat Energie Atomique | Procede de production selective de lipides poly-insatures a partir d'une culture de micro-algues du type porphyridium et cuve utilisee dans ce procede. |
| GB2266652B (en) | 1992-05-06 | 1995-11-22 | Woobang Land Company Ltd | Feed composition for a broiler |
| US6410281B1 (en) | 1992-07-10 | 2002-06-25 | Omegatech, Inc. | Reducing corrosion in a fermentor by providing sodium with a non-chloride sodium salt |
| KR940007396A (ko) | 1992-09-30 | 1994-04-27 | 스마 요시츠기 | 교차 홈 타입의 등속회전 조인트 |
| JP2558050B2 (ja) | 1993-02-18 | 1996-11-27 | イセ食品株式会社 | 鶏用飼料 |
| JPH078215A (ja) | 1993-04-30 | 1995-01-13 | Kawasaki Steel Corp | ドコサヘキサエン酸含有海洋性微細藻類食品素材およびその製造方法 |
| JPH07255387A (ja) | 1994-03-24 | 1995-10-09 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 食用家禽用飼料及び該飼料を用いる食用家禽の飼養方 法 |
| WO1996005278A1 (de) | 1994-08-16 | 1996-02-22 | Dr. Frische Gmbh | Verfahren zur gewinnung von nicht wasserlöslichen, nativen produkten aus nativen stoffgemengen mit hilfe der zentrifugalkraft |
| JP2764572B2 (ja) * | 1995-04-17 | 1998-06-11 | 工業技術院長 | ドコサヘキサエン酸生産能を有する新規微生物及びそれを用いたドコサヘキサエン酸の製造方法 |
| EP0823475B1 (en) * | 1995-04-17 | 2009-06-17 | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology | Novel microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms |
| JPH08322475A (ja) | 1995-05-29 | 1996-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 家禽類用飼料 |
| ATE303726T1 (de) | 1995-05-30 | 2005-09-15 | Suntory Ltd | Hühnereier mit einem hohen anteil an mehrfach ungesättigten fettsäuren, verfahren für deren herstellung und die verwendung derselben |
| US20080175953A1 (en) | 1995-06-07 | 2008-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Process for the Heterotrophic Production of Microbial Products with High Concentrations of Omega-3 Highly Unsaturated Fatty Acids |
| JPH0965871A (ja) * | 1995-09-04 | 1997-03-11 | Kawasaki Steel Corp | 海洋性微細藻類の培養方法 |
| JPH0965971A (ja) * | 1995-09-04 | 1997-03-11 | Mitsuo Fukushige | 加熱調理容器 |
| JPH0984590A (ja) | 1995-09-21 | 1997-03-31 | Itouen:Kk | α−リノレン酸の製造法 |
| JPH09110888A (ja) | 1995-10-17 | 1997-04-28 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | リン脂質組成物 |
| US6255505B1 (en) * | 1996-03-28 | 2001-07-03 | Gist-Brocades, B.V. | Microbial polyunsaturated fatty acid containing oil from pasteurised biomass |
| EP0821068A3 (en) * | 1996-03-29 | 1999-06-02 | Rohm And Haas Company | Novel sphingolipids and a process thereto |
| EE04063B1 (et) | 1996-07-23 | 2003-06-16 | Nagase Biochemicals, Ltd. | Meetod dokosaheksaeenhappe ning dokosapentaeenhappe valmistamiseks |
| FI964692A0 (fi) * | 1996-11-25 | 1996-11-25 | Primalco Ltd | Foerbaettrad cellulassammansaettning foer bioefterbehandling av textilmaterial som innehaoller cellulosa |
| PT970236E (pt) | 1997-02-20 | 2006-08-31 | Dsm Ip Assets Bv | Producao fermentativa de compostos valiosos a escala industrial utilizando meios quimicamente definidos |
| IN1998CH01219A (en) † | 1997-06-04 | 2005-03-04 | Calgene Llc | Production of polyunsaturated fatty acid by expression of polyketide-like synthesis genes in plants |
| US6566583B1 (en) | 1997-06-04 | 2003-05-20 | Daniel Facciotti | Schizochytrium PKS genes |
| BR9812276B1 (pt) | 1997-08-14 | 2013-10-29 | Método para aumentar a quantidade de um ácido graxo altamente insaturado (hufa) ômega-3 na carne de aves, e produto alimentício | |
| DE19749413A1 (de) | 1997-11-07 | 1999-05-12 | Hoechst Ag | Neuartige Sophoroselipide, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung |
| DE19838011C2 (de) * | 1998-08-21 | 2000-01-13 | Christoph Syldatk | Verfahren zur biotechnischen Herstellung von Fettsäuremethylestern ("Biodiesel") auf Molkebasis |
| US7271315B2 (en) | 1999-01-14 | 2007-09-18 | Martek Biosciences Corporation | PUFA polyketide synthase systems and uses thereof |
| US7247461B2 (en) | 1999-01-14 | 2007-07-24 | Martek Biosciences Corporation | Nucleic acid molecule encoding ORFA of a PUFA polyketide synthase system and uses thereof |
| DE19903095C2 (de) | 1999-01-27 | 2003-05-22 | Nutrinova Gmbh | Gewinnung von gamma-Linolensäure aus Protozoen der Gattung Colpidium |
| CA2362515C (en) | 1999-03-04 | 2008-07-15 | Suntory Limited | Utilization of material containing docosapentaenoic acid |
| EP2341127B1 (en) | 2000-01-28 | 2015-05-27 | DSM IP Assets B.V. | Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors |
| US6338866B1 (en) | 2000-02-15 | 2002-01-15 | Applied Food Biotechnology, Inc. | Pet foods using algal or fungal waste containing fatty acids |
| TWI337619B (en) | 2001-04-16 | 2011-02-21 | Martek Biosciences Corp | Pufa polyketide synthase systems and uses thereof |
| MXPA05010214A (es) | 2003-03-26 | 2005-12-14 | Martek Biosciences Corp | Sistemas de sintasa de poliquetida pufa y uso de los mismos. |
| US7208160B2 (en) * | 2003-08-26 | 2007-04-24 | Sol Katzen | Process of treating sea algae and halophytic plants |
| DE102004017370A1 (de) | 2004-04-08 | 2005-10-27 | Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh | PUFA-PKS Gene aus Ulkenia |
| JP4821409B2 (ja) * | 2006-03-31 | 2011-11-24 | アイシン・エィ・ダブリュ株式会社 | 自動変速機の油圧制御装置 |
| US8585552B2 (en) * | 2006-08-01 | 2013-11-19 | GM Global Technology Operations LLC | Torque converter clutch lock on method and low slip regulation |
| US7485073B2 (en) * | 2006-08-02 | 2009-02-03 | Horng-Jiun Chang | Muscle exerciser |
| CN101874085B (zh) * | 2007-09-25 | 2014-04-16 | 孟山都技术公司 | 具有高浓度多不饱和脂肪酸的油在塑料和表面涂料中的用途 |
| TWI600762B (zh) | 2009-03-19 | 2017-10-01 | Ｄｓｍ智慧財產有限公司 | 多不飽和脂肪酸合成酶核酸分子及多肽，組成物，以及其製造方法與用途 |
| FR3015516B1 (fr) | 2013-12-19 | 2016-01-22 | Roquette Freres | Procede d'enrichissement en dha de la biomasse de microalgues du genre thraustochytrium |
-
2001
- 2001-01-26 EP EP10012187.0A patent/EP2341127B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 HU HU0301794A patent/HUP0301794A3/hu unknown
- 2001-01-26 CN CN2009101330807A patent/CN101519678B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-26 EP EP10012186A patent/EP2341126A3/en not_active Withdrawn
- 2001-01-26 ES ES10012187.0T patent/ES2545492T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 DE DE0001251744T patent/DE01903376T1/de active Pending
- 2001-01-26 AU AU31201/01A patent/AU785124B2/en not_active Ceased
- 2001-01-26 EP EP06076087A patent/EP1707055A3/en not_active Withdrawn
- 2001-01-26 MX MXPA02007321A patent/MXPA02007321A/es active IP Right Grant
- 2001-01-26 CA CA2760879A patent/CA2760879C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 KR KR1020117026787A patent/KR101293135B1/ko active IP Right Grant
- 2001-01-26 BR BRPI0107832-1A patent/BRPI0107832B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 EP EP10012184.7A patent/EP2338974B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 ES ES10012184.7T patent/ES2653545T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CN CNA2009101330794A patent/CN101519677A/zh active Pending
- 2001-01-26 ES ES10012185.4T patent/ES2654384T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 DE DE60130737.2T patent/DE60130737T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 EP EP10012185.4A patent/EP2341125B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 EP EP15177618.4A patent/EP2960325B1/en not_active Revoked
- 2001-01-26 KR KR1020077013916A patent/KR20070073986A/ko active Search and Examination
- 2001-01-26 DK DK01903376.0T patent/DK1251744T4/en active
- 2001-01-26 CZ CZ20022508A patent/CZ301130B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 CN CNA2006101148088A patent/CN101003821A/zh active Pending
- 2001-01-26 TR TR2003/02163T patent/TR200302163T3/xx unknown
- 2001-01-26 JP JP2001555499A patent/JP2004501603A/ja not_active Withdrawn
- 2001-01-26 PT PT01903376T patent/PT1251744E/pt unknown
- 2001-01-26 AT AT01903376T patent/ATE374531T1/de active
- 2001-01-26 CN CN2009101330826A patent/CN101519680B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 PL PL01362620A patent/PL362620A1/xx unknown
- 2001-01-26 IL IL15077001A patent/IL150770A0/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 US US09/771,352 patent/US6607900B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 RU RU2002120481/13A patent/RU2326171C2/ru not_active Application Discontinuation
- 2001-01-26 KR KR1020107022453A patent/KR20100116233A/ko not_active Application Discontinuation
- 2001-01-26 CN CN201510471712.6A patent/CN105112463A/zh active Pending
- 2001-01-26 KR KR1020097010713A patent/KR20090064603A/ko active Application Filing
- 2001-01-26 EP EP01903376.0A patent/EP1251744B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CA CA2396691A patent/CA2396691C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 CN CNB018064515A patent/CN100491519C/zh not_active Ceased
- 2001-01-26 WO PCT/US2001/002715 patent/WO2001054510A1/en active IP Right Grant
- 2001-01-26 NZ NZ520420A patent/NZ520420A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-01-26 ES ES01903376.0T patent/ES2208141T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-26 KR KR1020087021437A patent/KR100938945B1/ko active IP Right Review Request
- 2001-01-26 CN CN201610022191.0A patent/CN105567752A/zh active Pending
- 2001-01-26 CA CA2786722A patent/CA2786722A1/en not_active Abandoned
- 2001-01-26 MX MX2012006312A patent/MX345559B/es unknown
- 2001-01-26 CN CN2009101330811A patent/CN101519679B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-26 KR KR1020027009661A patent/KR100925290B1/ko active IP Right Review Request
- 2001-04-10 TW TW097131119A patent/TWI354702B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-04-10 TW TW090101664A patent/TWI301509B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-04-10 TW TW093139784A patent/TWI310788B/zh not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-07-25 ZA ZA200205957A patent/ZA200205957B/en unknown
- 2002-07-26 NO NO20023588A patent/NO20023588L/no not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-02-21 US US10/371,394 patent/US20030180898A1/en not_active Abandoned
- 2003-04-15 HK HK03102739A patent/HK1050611A1/xx unknown
-
2005
- 2005-05-19 JP JP2005146665A patent/JP2005270115A/ja not_active Withdrawn
- 2005-10-12 IL IL171408A patent/IL171408A/en not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-02-10 US US11/352,421 patent/US7579174B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-04-05 US US11/399,588 patent/US7732170B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-09-05 AU AU2006207882A patent/AU2006207882B2/en not_active Expired
-
2007
- 2007-05-08 US US11/745,490 patent/US8216812B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,533 patent/US8187846B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,531 patent/US8187845B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,511 patent/US8124385B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,500 patent/US8288134B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,513 patent/US8206956B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,498 patent/US8288133B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-08 US US11/745,502 patent/US20080032381A1/en not_active Abandoned
- 2007-05-08 US US11/745,526 patent/US8133706B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-08 US US11/745,506 patent/US8124384B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-28 CY CY20071101639T patent/CY1107114T1/el unknown
-
2009
- 2009-01-28 IL IL196776A patent/IL196776A/en not_active IP Right Cessation
- 2009-09-11 AU AU2009213103A patent/AU2009213103B2/en not_active Ceased
- 2009-12-14 JP JP2009282393A patent/JP2010057508A/ja not_active Withdrawn
-
2011
- 2011-11-04 JP JP2011242309A patent/JP2012019802A/ja not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-01-03 US US13/342,623 patent/US9848623B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-12-17 JP JP2012274394A patent/JP6134136B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-03-04 JP JP2013041515A patent/JP2013099366A/ja not_active Withdrawn
- 2013-05-16 AU AU2013205894A patent/AU2013205894B2/en not_active Expired
-
2014
- 2014-02-17 JP JP2014027674A patent/JP2014087375A/ja not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-05-14 US US14/711,979 patent/US20150320084A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-09-12 JP JP2016177205A patent/JP6534156B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2016-11-07 US US15/344,948 patent/US20170049131A1/en not_active Abandoned
- 2016-11-07 US US15/344,960 patent/US20170049132A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-02-13 JP JP2019023432A patent/JP2019088319A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2539766C2 (ru) * | 2012-08-03 | 2015-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | ШТАММ Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu T/05-117 - ПРОДУЦЕНТ ЛИПИДОСОДЕРЖАЩЕЙ БИОМАССЫ |
| RU2744913C2 (ru) * | 2016-12-27 | 2021-03-17 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Способ выделения липидов из липидсодержащей биомассы |
| RU2781629C2 (ru) * | 2018-10-12 | 2022-10-17 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Корм для животных для улучшения характеристик роста |
| RU2776914C1 (ru) * | 2018-11-09 | 2022-07-28 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Способ получения биомассы, которая может легко расщепляться и которая характеризуется повышенным содержанием полиненасыщенных жирных кислот |
| RU2779882C1 (ru) * | 2018-11-09 | 2022-09-14 | Эвоник Оперейшенс ГмбХ | Способ получения биомассы с повышенным содержанием полиненасыщенных жирных кислот |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2326171C2 (ru) | Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты (варианты) и способ культивирования микроорганизмов, продуцирующих эти липиды |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20051108 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20060713 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20130717 |