ES2770684T3 - Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos - Google Patents

Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos Download PDF

Info

Publication number
ES2770684T3
ES2770684T3 ES15713290T ES15713290T ES2770684T3 ES 2770684 T3 ES2770684 T3 ES 2770684T3 ES 15713290 T ES15713290 T ES 15713290T ES 15713290 T ES15713290 T ES 15713290T ES 2770684 T3 ES2770684 T3 ES 2770684T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
seq
bap050
amino acid
acid sequence
ser
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES15713290T
Other languages
English (en)
Inventor
Frederic Triebel
Chrystelle Brignone
Walter A Blattler
Jennifer Marie Mataraza
Catherine Anne Sabatos-Peyton
Hwai Wen Chang
Gerhard Johann Frey
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novartis AG
Immutep SAS
Original Assignee
Novartis AG
Immutep SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52780053&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2770684(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novartis AG, Immutep SAS filed Critical Novartis AG
Application granted granted Critical
Publication of ES2770684T3 publication Critical patent/ES2770684T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/54—F(ab')2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)

Abstract

Una molécula de anticuerpo humanizado capaz de unirse al Gen-3 de Activación de Linfocitos humanos (LAG-3) con una constante de disociación (KD) de menos de 0.2 nM según lo determinado por un método Biacore, que comprende: (a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; (b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; en donde la VH comprende cuatro regiones marco (FW): una VHFW1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 187, 190, 194 o 196, una VHFW2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 198, 202, 206 o 208, una VHFW3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 210, 212, 217 o 219, y una VHFW4 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 221; y la VL comprende cuatro regiones marco (FW): una VLFW1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236 o 238, una VLFW2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 240, 244, 246 o 248, una VLFW3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 252, 255, 259, 261, 265, 267 o 269, y una VLFW4 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 271.

Description

DESCRIPCIÓN
Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos
Antecedentes
El Gen-3 de activación de linfocitos, o LAG-3 (también conocida como CD223), es un miembro de la familia de supergenes de inmunoglobulina, y se expresa en las células T activadas (Huard et al. (1994) Immunogenetics 39: 213), células NK (Triebel et al. (1990) J. Exp. Med. 171: 1393-1405), células T reguladoras (Huang et al. (2004) Immunity 21: 503-513; Camisaschi et al. (2010) J Immunol. 184: 6545-6551; Gagliani et al. (2013) Nat Med 19: 739­ 746), y células dendríticas plasmacitoides (DC) (Workman et al. (2009) J Immunol 182: 1885-1891). LAG-3 es una proteína de membrana codificada por un gen ubicado en el cromosoma 12, y está relacionada estructural y genéticamente con CD4.
Similar al CD4, LAG-3 puede interactuar con moléculas de MHC de clase II en la superficie celular (Baixeras et al. (1992) J. Exp. Med. 176: 327-337; Huard et al. (1996) Eur. J. Immunol 26: 1180-1186). Se ha sugerido que la unión directa de lAG-3 a MHC de clase II juega un papel en la subregulación de la estimulación dependiente de antígeno de linfocitos T CD4+ (Huard et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24: 3216-3221) y también se ha demostrado que el bloqueo de LAG-3 revitaliza los linfocitos CD8+ tanto en el tumor como en el autoantígeno (Gross et al. (2007) J Clin Invest.
117: 3383-3392) y modelos virales (Blackburn et al. (2009) Nat. Immunol. 10: 29-37). Además, la región intracitoplasmática de LAG-3 puede interactuar con LAP (proteína asociada a LAG-3), que es una molécula de transducción de señales implicada en la subregulación de la vía de activación de CD3/TCR (Iouzalen et al. (2001) Eur J. Immunol. 31: 2885-2891). Además, se ha demostrado que las células T reguladoras CD4+ CD25+ (Treg) expresan LAG-3 tras la activación, lo que contribuye a la actividad supresora de las células Treg (Huang, C. et al. (2004) Immunity 21: 503-513). El LAG-3 también puede regular negativamente la homeostasis de las células T por las células Treg en mecanismos independientes y dependientes de las células T (Workman, C. J. y Vignali, D. A. (2005) J. Immunol. 174: 688-695). El documento WO-A-2010/019570 describe anticuerpos monoclonales aislados que se unen específicamente a LAG-3 con alta afinidad, métodos para detectar LAG-3 y métodos para tratar respuestas inmunes estimulantes usando un anticuerpo anti-LAG-3 descrito. El documento WO-A-2014/008218 también describe anticuerpos monoclonales aislados que se unen específicamente a LAG-3, métodos para detectar LAG-3 y como métodos para estimular respuestas inmunes usando un anticuerpo anti LAG-3.
Dada la importancia de LAG-3 en la subregulación de una respuesta inmune, existe la necesidad de desarrollar novedosos agentes que modulan su actividad para activar el sistema inmune. Tales agentes pueden usarse, por ejemplo, para la inmunoterapia contra el cáncer y el tratamiento de otras afecciones, tales como la infección crónica.
Resumen
La invención se expone en las reivindicaciones. La invención proporciona moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 humanizado, composiciones farmacéuticas, ácidos nucleicos, vectores de expresión, células huésped, métodos para producir una molécula de anticuerpo humanizado, métodos para detectar LAG-3 y usos médicos, como se define en las reivindicaciones. La molécula de anticuerpo humanizado de la invención es capaz de unirse al Gen-3 de activación de linfocitos humanos (LAG-3) con una constante de disociación (Kd) de menos de 0.2 nM según lo determinado por un método Biacore, y comprende las secuencias marco y de CDR establecidas en la reivindicación 1.
Los aspectos y realizaciones de la divulgación se proporcionan a continuación.
En el presente documento se divulgan moléculas de anticuerpos (por ejemplo, moléculas de anticuerpos humanizados) que se unen al gen-3 de activación de linfocitos (LAG-3) con alta afinidad y especificidad. En una realización, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen una combinación novedosa de regiones marco (por ejemplo, FW1, FW2, FW3 y/o FW4), por ejemplo, novedosas combinaciones de regiones marco de cadena pesada y/o regiones marco de cadena ligera. También se proporcionan moléculas de ácido nucleico que codifican las moléculas de anticuerpo, vectores de expresión, células huésped y métodos para fabricar las moléculas de anticuerpo. También se proporcionan inmunoconjugados, moléculas de anticuerpos multiespecíficos o biespecíficos y composiciones farmacéuticas que comprenden las moléculas de anticuerpos. Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 divulgadas en el presente documento pueden usarse (solas o en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas) para tratar, prevenir y/o diagnosticar trastornos cancerosos (por ejemplo, tumores sólidos y de tejidos blandos), así como enfermedades infecciosas. Por lo tanto, en este documento se divulgan composiciones y métodos para detectar LAG-3, así como métodos para tratar diversos trastornos, que incluyen cáncer y/o enfermedades infecciosas que usan las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3.
Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación presenta una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una molécula de anticuerpo aislada o recombinante) que tiene una o más de las siguientes propiedades:
(i) se une a LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humano, con alta afinidad, por ejemplo, con una constante de afinidad de al menos aproximadamente 107 M-1, típicamente aproximadamente 108 M-1, y más típicamente, aproximadamente 109 M' a 1010 M'1 o más fuerte;
(ii) se une a LAG-3, por ejemplo, un transfectante LAG-3-CHO, con una Kd de menos de: 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2nM, 1 nM, por ejemplo, 1 a 3 nM (por ejemplo, aproximadamente 1.92 nM o aproximadamente 2.3 nM);
(iii) no se une sustancialmente a CD4;
(iv) inhibe la unión de LAG-3 a una molécula de clase II de histocompatibilidad principal (MHC), por ejemplo, muestra una IC50 de aproximadamente 1 a 20 nM, 5 a 15 nM, por ejemplo, 5,5 nM;
(v) se une al dominio D1 de LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humano), por ejemplo, se une al dominio D1, pero no se une a la región de bucle adicional del dominio D1;
(vi) modula (por ejemplo, estimula, mejora o restaura) una respuesta inmune, por ejemplo, una respuesta de células T específica de antígeno o una respuesta antitumoral;
(vii) se une específicamente a un epítopo en LAG-3, por ejemplo, el mismo o similar epítopo que el epítopo reconocido por el anticuerpo monoclonal murino BAP050 o el anticuerpo quimérico BAP050-chi;
(viii) se une a un epítopo diferente en LAG-3 que el reconocido por el anticuerpo BMS-986016;
(ix) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J.
(x) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, como una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de la cadena pesada y una región variable de la cadena ligera) descrita en la Tabla 1;
(xi) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, como una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de la cadena pesada y una región variable de la cadena ligera) que tiene una secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1;
(xii) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, como una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de la cadena pesada y una región variable de la cadena ligera) codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1;
(xiii) inhibe, por ejemplo, inhibe competitivamente, la unión de una segunda molécula de anticuerpo a LAG-3, en donde la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en este documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo seleccionada de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J;
(xiv) une el mismo o un epítopo superpuesto con una segunda molécula de anticuerpo contra LAG-3, en donde la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en este documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo seleccionada de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J;
(xv) compite por la unión, y/o se une al mismo epítopo, con una segunda molécula de anticuerpo contra LAG-3, por ejemplo, medido por un método Biacore, un método FACS, o ambos, en donde la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en este documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo seleccionada de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J;
(xvi) tiene una o más propiedades biológicas de una molécula de anticuerpo descrita en este documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo selecciionada de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J;
(xvii) tiene una o más propiedades farmacocinéticas de una molécula de anticuerpo descrita en este documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo seleccionada de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o
(xviii) inhibe una o más actividades de LAG-3, por ejemplo, da como resultado uno o más de: un aumento en la estimulación dependiente de antígeno de linfocitos T CD4+; un aumento en la proliferación de células T; un aumento en la expresión de un antígeno de activación, por ejemplo, CD25; un aumento en la expresión de una citocina, por ejemplo, interferón-gamma (IFN-y), interleucina-2 (IL-2) o interleucina-4 (IL-4); un aumento en la expresión de una quimiocina, por ejemplo, CCL3, CCL4 o CCL5; una disminución en la actividad supresora de las células Treg; un aumento en la homeostasis de las células T; un aumento de linfocitos infiltrantes de tumores; o una disminución en la evasión inmune por las células cancerosas.
Como se usa en el presente documento, "huBAP050(Ser)" se refiere a una molécula de anticuerpo BAP050 humanizada, por ejemplo, cualquiera de las moléculas de anticuerpo BAP050 humanizadas descritas en este documento, por ejemplo, como se describe en la Tabla 1, que tiene una sustitución Cys a Ser en la posición 84 de la región marco de cadena pesada (VHFW3). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo huBAP050(Ser) se selecciona de BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se une a LAG-3 con alta afinidad, por ejemplo, con una constante de equilibrio de disociación (Kd) que es aproximadamente la misma, o al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% mayor o menor que la Kd de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita aquí. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se une a lAG-3, por ejemplo, un transfectante LAG-3-CHO, con una Kd de menos de: 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2nM, por ejemplo, 1 a 3 nM (por ejemplo, aproximadamente 1.92 nM o aproximadamente 2.3 nM).
En algunas realizaciones, el nivel de expresión de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es aproximadamente igual, mayor o menor, por ejemplo, al menos aproximadamente 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces mayor o menor que el nivel de expresión de una molécula de anticuerpo murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se expresa en células CHO.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 reduce una o más actividades asociadas a LAG-3 con una IC50 (concentración al 50% de inhibición) que es aproximadamente igual, mayor o menor, por ejemplo, al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% más alto o más bajo, que la IC50 de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murino o quimérico descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la actividad asociada a LAG-3 es la unión de una molécula de MHC de clase II a LAG-3. En algunas realizaciones, la actividad asociada a LAG-3 es la unión de LSECtin a LAG-3. En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 tiene una IC50 de aproximadamente 1 a 20 nM, 5 a 15 nM, 5.5 nM (por ejemplo, detectado por inhibición de la unión de MHC de clase II o L-SECtin).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene aproximadamente la misma o mejor estabilidad, por ejemplo, al menos aproximadamente 0,5, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces más estable in vivo o in vitro, que una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita en el presente documento.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizado y tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de 800 a 1200, 850 a 1150, 900 a 1100, 950 a 1050, o una puntuación de riesgo como se describe aquí.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una región de unión a antígeno, por ejemplo, una región variable o un fragmento de unión a antígeno de la misma, de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys a Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1 y 2).
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo , BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de la cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050 -hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum15, BAP050-hum15, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050- hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13- Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon- H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana. En una realización, la IgG4 humana incluye una sustitución en la posición 228 según la numeración EU (por ejemplo, una sustitución Ser a Pro). En todavía otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Asn a Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU, o ambAs (por ejemplo, una sustitución de Asp a Ala en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Pro a Ala en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu a Ala en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Leu a Ala en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la región constante de la cadena pesada comprende una secuencia amino expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana. En una realización, la región constante de la cadena ligera comprende una secuencia amino expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de la cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de amino establecida en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma. En una realización, la región constante es una IgG4 mutada, por ejemplo, una IgG4 humana mutada (por ejemplo, tiene una mutación en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una mutación S228P). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende un conjunto de secuencias amino en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Asn a Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Asp a Ala en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Pro a Ala en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu a Ala en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Leu a Ala en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye un dominio variable de cadena pesada y una región constante, un dominio variable de cadena ligera y una región constante, o ambas, que comprenden la secuencia de aminoácidos de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum1350, BAP050 hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04 -Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera, o ambas, como se muestra en la Tabla 4; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDRs) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050- hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum12, BAP050-hum12, BAP050-hum12 BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03 -Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos o tres CDRs que se muestran en la Tabla 1.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRS (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDRs (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDRs) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050- hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum12, BAP050-hum12, BAP050-hum12 BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03 -Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos o tres CDRs que se muestran en la Tabla 1.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDRs (o colectivamente todas las CDRs) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con el aminoácido que se muestra en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende un aminoácido que se muestra en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDRs (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con los aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs que se muestran en la tabla 1.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDRs (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye las seis CDRs de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, bA p 050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050- hum17 hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06 -Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1, o CDRs estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDRs que son idénticas o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR descrita aquí.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de un región variable de la cadena pesada de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum50, huB Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08 -Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J, o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos o tres CDRs de acuerdo con Kabat que se muestra en la Tabla 1)
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de un región variable de la cadena ligera de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos o tres CDRs de acuerdo con Kabat que se muestra en la Tabla 1.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de la cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-16, BAP050 hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050 -hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs de acuerdo con Kabat et al. se muestra en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR descrita en este documento.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todas las seis CDRs de acuerdo con Kabat (por ejemplo, las seis CDRs de acuerdo con la definición de Kabat tal como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en este documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum -Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con las seis CDRs de acuerdo con Kabat et al. se muestra en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR descrita en este documento.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de un región variable de cadena de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050 -hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J, de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia establecida en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestra en Tabla 1.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de una región variable de la cadena ligera de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050- hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18- Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J,; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestra en Tabla 1.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de la cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en este documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o al menos los aminoácidos de esos bucles hipervariables que entran en contacto con LAG-3. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de Chothia de la Tabla 1.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye los seis bucles hipervariables (por ejemplo, los seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de un anticuerpo descrito en este documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo , BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon-J, o los bucles hipervariables estrechamente relacionados, por ejemplo, bucles hipervariables que son idénticos o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con los seis bucles hipervariables que se muestran en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier bucle hipervariable descrito aquí.
En todavía otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables que tienen las mismas estructuras canónicas que el bucle hipervariable correspondiente de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon-J, por ejemplo, las mismas estructuras canónicas como al menos el bucle 1 y/o bucle 2 de los dominios variables de cadena pesada y/o ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento. Véase, por ejemplo, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227: 799-817; Tomlinson y col., (1992) J. Mol. Biol. 227: 776­ 798 para descripciones de estructuras canónicas de bucle hipervariable. Estas estructuras pueden determinarse mediante la inspección de las tablas descritas en estas referencias.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una combinación de CDRs o bucles hipervariables definidos de acuerdo con Kabat et al. y Chothia et al.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres CDRs o bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se establece en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con una, dos o tres CDRs o bucles hipervariables de acuerdo con Kabat y/o Chothia que se muestra en la Tabla 1.
Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir VH CDR1 de acuerdo con Kabat et al. o el bucle hipervariable 1 de VH de acuerdo con Chothia et al., o una combinación de los mismos, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En una realización, la combinación de Kabat y Chothia CDR de VH CDR1 comprende la secuencia de aminoácidos GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 286), o una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, que tiene al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras)). La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, Vh CDRs 2-3 de acuerdo con Kabat et al. y VL CDR 1-3 de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, las regiones marco se definen con base en una combinación de CDR definidas de acuerdo con Kabat et al. y bucles hipervariables definidos de acuerdo con Chothia et al. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir VH FR1 definido con base en bucle 1 hipervariable de VH de acuerdo con Chothia et al. y VH FR2 definido con base en VH CDRs 1-2 de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, VH FRs 3-4 definidos con base en VH CDR 2-3 de acuerdo con Kabat et al. y VL FRs 1-4 definidos con base en VL CDRs 1-3 de acuerdo con Kabat et al.
La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede contener cualquier combinación de CDRs o bucles hipervariables de acuerdo con las definiciones de Kabat y Chothia. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de la cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDRs de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se establece en la Tabla 1).
En una realización, por ejemplo, una realización que comprende una región variable, CDR (por ejemplo, CDR o CDR de Kabat) u otra secuencia a la que se hace referencia en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 1, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífico, una molécula de anticuerpo biespecífico, o es una molécula de anticuerpo que comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, un medio anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de un medio anticuerpo. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífico que tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, T iM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.
En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 incluye:
(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 seleccionada de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y
(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye:
(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 seleccionada de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID n O: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y
(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 15, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286.
En una realización, el marco variable de la cadena ligera o pesada (por ejemplo, la región que abarca al menos FR1, FR2, FR3 y opcionalmente FR4) de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede seleccionar de: (a) un marco variable de la cadena ligera o pesada que incluye al menos 80%, 85%, 87% 90%, 92%, 93%, 95%, 97%, 98%, o preferiblemente el 100% de los residuos de aminoácidos de un marco variable de cadena ligera o pesada humana, por ejemplo, un residuo de marco variable de cadena ligera o pesada de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana o una secuencia consenso humana; (b) un marco variable de cadena ligera o pesada que incluye de 20% a 80%, 40% a 60%, 60% a 90%, o 70% a 95% de los residuos de aminoácidos de un marco variable de cadena ligera o pesada humana, por ejemplo, un residuo de estructura variable de cadena ligera o pesada de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana o una secuencia consenso humana; (c) un marco no humano (por ejemplo, un marco de roedores); o (d) un marco no humano que se ha modificado, por ejemplo, para eliminar determinantes antigénicos o citotóxicos, por ejemplo, desinmunizado o parcialmente humanizado. En una realización, la región de marco variable de cadena ligera o pesada (particularmente FR1, FR2 y/o FR3) incluye una secuencia de estructura variable de cadena ligera o pesada al menos 70, 75, 80, 85, 87, 88, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98, 99% idénticas o idéntica a los marcos de un segmento VL o VH de un gen de línea germinal humana.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios, por ejemplo, sustituciones 0 deleciones de aminoácidos, de una secuencia de aminoácidos de BAP050-chi-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de la región FR en la región variable completa, por ejemplo, mostrada en las Figuras 9A-9B, o SEQ ID NO: 20 o 22. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E en la posición 1, V en la posición 2, A en la posición 9, V en la posición 11, A en la posición 16, S en la posición 17, L en la posición 18, R en la posición 19, V en la posición 20, V o G en la posición 24, 1 en la posición 37, A o S en la posición 40, R o T en la posición 41, S en la posición 42, Q o R en la posición 43, R en la posición 44, E en la posición 46, I o L en la posición 48, V en la posición 68, V o T en la posición 69, I en la posición 70, A en la posición 72, D en la posición 73, K en la posición 74, V o I en la posición 76, Y en la posición 80, W en la posición 83, C o S en la posición 84, S o T en la posición 85, A en la posición 88, E o S en la posición 89, V o M en la posición 93 o Y en la posición 95 de la secuencia de aminoácidos de BAP050-chi-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de la FR en toda la región variable, por ejemplo, se muestra en las figuras 9A-9B, o SEQ ID NO: 20 o 22.
En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys a Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en la tabla 2).
Alternativamente, o en combinación con las sustituciones de cadena pesada de BAP050-chi-HC descritas aquí, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena ligera que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios de aminoácidos, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, de una secuencia de aminoácidos de BAP050-chi-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos mostrada en las Figuras 10A-10B, o SEQ ID NO: 24 o 26. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E o A en la posición 1, V en la posición 3, L en la posición 4, S en la posición 7, P en la posición 8, A o L o D en la posición 9, T o F en la posición 10, Q en la posición 11, P en la posición 12, V o L en la posición 13, T en la posición 14, V o P en la posición 15, K en la posición 16, Q o E en la posición 17, T o P o K en la posición 18, A en la posición 19, S en la posición 20, L en la posición 21, T en la posición 22, L en la posición 37, G en la posición 41, K o Q en la posición 42, A o S en la posición 43, P en la posición 44, R o Q en la posición 45, L en la posición 46, I en la posición 58, P o D en posición 60, Y en la posición 67, E en la posición 70, F en la posición 71, T en la posición 72, F en la posición 73, N en la posición 76, S o R en la posición 77, I en la posición 78, Q en la posición 79, A o S o P en la posición 80, D en la posición 81, A o F en la posición 83, Y o V en la posición 85, o F en la posición 87 de la secuencia de aminoácidos de BAP050-chi-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos mostrada en las Figuras 10A-10B, o SEQ ID NO: 24 o 26.
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos o nucleótidos VHFW que se muestra en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys a Ser en la posición 84) en la región marco de la cadena pesada 3 (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en la Tabla 2).
En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VLFW que se muestra en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VHFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma; y una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VLFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon-F, or BAP050-Clon-G (por ejemplo, SEQ ID NO: 187). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, or BAP050-hum20, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, or BAP050-Clon J (por ejemplo, SEQ ID NO: 190). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 194). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 196). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idénticA) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, or BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 198). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum20, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum20-Ser, or BAP050-Clon-I (por ejemplo, SEQ ID NO: 202). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum14-Ser, or BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 206). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 208). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum18, BAP050-hum19 o BAP050-hum20 (por ejemplo, SEQ ID NO: 210). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050- hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14- Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 212). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 217). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 219). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena pesada 4 (VHFW4) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19 BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08- Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 221). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada 4 (VHFW4) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum04, BAP050-hum07, BAP050-hum09, BAP050-hum11, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 226). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum03, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum10-Ser o BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 230). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, s Eq ID NO: 232). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum06, BAP050-hum20, BAP050-hum06-Ser o bAp 050-hum20-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 234). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum19, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum15-Ser o BAP050-hum19-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 236). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP050-hum18 o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 238). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de la cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum05, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum01 -Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 240). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP050-hum03, BAP050-hum06, BAP050-hum08, BAP050-hum10, BAP050-hum12, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050- hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 244). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de la cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 246). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de la cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum07-Ser o bA p 050-hum11-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 248). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera 2 (VLFW2) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum01, BAP050-hum03, BAP050-hum05, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, SEQ ID NO: 252). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum02, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 255). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 259). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, SEQ ID NO: 261). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum18, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum15-Ser o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 265). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de la cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 267). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP050-hum20 o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 269). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera 3 (VHLW3) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región marco de cadena ligera 4 (VLFW4) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050 -hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 271). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera 4 (VLFW4) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum18, BAP050-hum19 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum20 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum14 o BAP050-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 194 (VHFW1), SEQ ID NO: 208 (VHFW2) y SEQ ID NO: 217 (VHFW3)) En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 196 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 219 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06 -Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon-F o BAP050-Clon-G (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum09Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon -H, o BAP050-Clon I (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum14-Ser o BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región marco de cadena pesada 4 de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 221). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquier de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tienen una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum01, BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum02, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon -G, BAP050-Clon-H o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum03, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum10-Ser o BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 230 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 246 (VLFW2) y SEQ ID NO: 259 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 232 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum06 o BAP050-hum06-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 234 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 248 (VLFW2), y SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12-Ser o BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y SEQ ID NO: 267 (VLFW3)) En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum18 o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 238 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum19 o BAP050-hum19-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum20 o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 234 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 269 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región marco de cadena pesada 4 de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050- hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050- hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 271). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquier de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tienen una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum01 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum01, BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2) e SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y una de cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum02 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum02-Ser o BAP050-Clon-G (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum02, BAP050-hum02-Ser o BAP050-Clon-G (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum03-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 230 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum04 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum04 (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 246 (VLFW2), y SEQ ID NO: 259 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum05 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 232 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum06-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 234 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum07 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum07-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum07 (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 248 (VLFW2), y SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum08 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum08-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum08 (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum09 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o BAP050-hum09-Ser o BAP050-Clon-H (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum09, BAP050-hum09-Ser o BAP050-Clon-H (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2) e SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum10 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum10-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum10 (por ejemplo, SEQ ID NO: 230 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum11 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o BAP050-hum11-Ser, o BAP050-Clon-I (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum11, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 248 (VLFW2) y SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) o BAP050-hum12-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum12 o BAP050-hum12-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum13, BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum14 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum14 (por ejemplo, SEQ ID NO: 230 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco 1-3 de la cadena pesada de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 194 (VHFW1), SEQ ID NO: 208 (VHFW2) y SEQ ID NO: 217 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum16 (por ejemplo, SEQ iD NO: 236 (VLFW1), SEQ ID No : 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 196 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 219 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum17 (por ejemplo, SEQ ID NO: 226 (VLFW1), SEQ ID No : 240 (VLFW2) y SEQ ID NO: 267 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum18 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum18 (por ejemplo, SEQ ID NO: 238 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2), y SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum19 (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 187 (VHFW1), SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP050-hum19 (por ejemplo, SEQ ID NO: 236 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones marco de cadena pesada 1­ 3 de BAP050-hum20 (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, SEQ ID NO: 190 (VHFW1), SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones marco de la cadena ligera 1-3 de BAP050-hum20 (por ejemplo, s EQ ID NO: 234 (VLFW1), SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y SEQ ID NO: 269 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada y cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una región marco de cadena pesada que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6. En otra realización, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6, y una región marco de cadena ligera que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras. 4 o 6.
En una realización, el dominio variable de la cadena pesada o ligera, o ambos, de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una secuencia de aminoácidos, que es sustancialmente idéntica a un aminoácido divulgado aquí, por ejemplo, al menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica a una región variable de un anticuerpo descrito en este documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050 -hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05- Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o que difiere al menos 1 o 5 residuos, pero menos de 40, 30, 20 o 10 residuos, de una región variable de un anticuerpo descrito aquí.
En una realización, la región variable de la cadena pesada o ligera, o ambas, de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de ácidos nucleicos descrita aquí o un ácido nucleico que se hibrida con una secuencia de ácidos nucleicos descrito en el presente documento (por ejemplo, una secuencia de ácidos nucleicos específica o una secuencia de ácidos nucleicos que codifica una secuencia de aminoácidos descrita en el presente documento, por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1 y 2) o su complemento, por ejemplo, bajo baja rigurosidad, media rigurosidad o alta rigurosidad, u otra condición de hibridación descrita en este documento.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones de unión a antígeno, por ejemplo, regiones variables, que tienen una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 1, 2, 5, 10 o 15 residuos de aminoácidos de las secuencias mostradas en Tabla 1). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye un dominio VH y/o VL codificado por un ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 70%, 75%, 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difieren en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en la Tabla 1).
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de la cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1), o un secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs se definen de acuerdo con Kabat, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En otra realización, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs se definen de acuerdo con Chothia, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDRs y/o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito aquí, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum11, BAP050-hum11, BAP050-hum11, BAP050-hum11, BAP050-hum11 BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-huml1-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo., sustituciones conservadas). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo seleccionado de cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050-hum0, BAP050 -hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05- Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas complementos). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende todas las seis CDRs y/o bucles hipervariables descritos aquí, por ejemplo, descritos en la Tabla 1.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región variable que es idéntica en secuencia, o que difiere en 1, 2, 3 o 4 aminoácidos de una región variable descrita aquí (por ejemplo, una región FR descrita aquí).
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es un anticuerpo completo o un fragmento del mismo (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv o un fragmento Fv de cadena sencilla (scFv)). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es un anticuerpo monoclonal o un anticuerpo con especificidad sencilla. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 también puede ser una molécula de anticuerpo humanizada, quimérica, camélida, de tiburón o generada in vitro. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la misma es una molécula de anticuerpo humanizado. Las cadenas pesadas y ligeras de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo puede incluir al menos una, y preferiblemente dos, cadenas pesadas completas, y al menos una, y preferiblemente dos, cadenas ligeras completas) o puede incluir un fragmento de unión a antígeno (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv, un fragmento Fv de cadena sencilla, un anticuerpo de dominio único, un diacuerpo (dAb), un anticuerpo bivalente o biespecífico o un fragmento del mismo, una variante de dominio único del mismo, o un anticuerpo de camélido).
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 está en forma de una molécula de anticuerpo biespecífica o multiespecífica. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5). En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y CEACAM-1. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a lAG-3 y PD-L1. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y PD-L2. Cualquier combinación de las moléculas mencionadas anteriormente puede hacerse en una molécula de anticuerpo multiespecífico, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a LAG-3, y una segunda y tercera especificidad de unión a uno o más de: PD-1, TIM- 3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con una molécula biespecífica que comprende uno o más de: PD-1, TIM-3, c Ea CAM (por ejemplo, CEACAM-1 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico usada en combinación se une a PD-1 y TIM-3.
En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región constante de cadena pesada (Fc) seleccionada, por ejemplo, de las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; particularmente, seleccionada de, por ejemplo, las regiones constantes de la cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, más particularmente, la región constante de la cadena pesada de IgG1, IgG2 o IgG4 (por ejemplo, IgG1, IgG2 o IgG4 humana). En una realización, la región constante de la cadena pesada es IgG1 humana o IgG4 humana. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región constante de cadena ligera seleccionada, por ejemplo, de las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda, preferiblemente kappa (por ejemplo, kappa humano). En una realización, la región constante se altera, por ejemplo, muta, para modificar las propiedades de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glucosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, función de la célula efectora o función del complemento). Por ejemplo, la región constante está mutada en las posiciones 296 (M a Y), 298 (S a T), 300 (T a E), 477 (H a K) y 478 (N a F) para alterar la unión al receptor Fc (por ejemplo, las posiciones mutadas corresponden a las posiciones 132 (M a Y), 134 (S a T), 136 (T a E), 313 (H a K) y 314 (N a F) de la SEQ ID NO: 212 o 214; o posiciones 135 (M a Y), 137 (S a T), 139 (T a E), 316 (H a K) y 317 (N a F) de la SEQ ID NOs: 215, 216, 217 o 218). En otra realización, la región constante de la cadena pesada de una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, está mutada en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, S a P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 comprenden una IgG4 humana mutada en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, S a P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de la cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En aún otra realización, la región constante de la cadena pesada de una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, está mutada en una o más de la posición 297 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, N a A), posición 265 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, D a A), posición 329 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, P a A), posición 234 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, L a A), o posición 235 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, L a A), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 comprenden una IgG1 humana mutada en una o más de las posiciones mencionadas anteriormente, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es aislada o recombinante.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizado.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de menos de 1200, 1150, 1100, 1050, 1000, 950, 900, 850 u 800.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizado y tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de 800 a 1200, 850 a 1150, 900 a 1100, 950 a 1050, o una puntuación de riesgo como se describe aquí.
La divulgación también presenta una molécula de ácidos nucleicos que comprende una o más secuencias de nucleótidos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, CDRs, bucles hipervariables y/o regiones marco de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, como se describe en el presente documento. En ciertas realizaciones, la secuencia de nucleótidos que codifica la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es codón optimizado. Por ejemplo, la divulgación presenta un primer y segundo ácidos nucleicos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, respectivamente, de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 seleccionada de uno o más de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050 -hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum15, BAP050-hum15, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050- hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13- Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma. Por ejemplo, los ácidos nucleicos pueden comprender una secuencia de nucleótidos como se expone en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias que se muestran en las Tablas 1 y 2.
En otras realizaciones, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada y una región constante de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050 -Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.
En otras realizaciones, los ácidos nucleicos comprende una secuencia de nucleótidos que codifican un dominio variable de la cadena ligera y/o una región constante de la cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.
Las secuencias de nucleótidos mencionadas anteriormente que codifican el dominio variable de la cadena pesada y ligera anti-LAG-3 y las regiones constantes pueden estar presentes en una molécula de ácido nucleico separada, o en la misma molécula de ácido nucleico. En ciertas realizaciones, las moléculas de ácido nucleico comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia líder, por ejemplo, una secuencia líder como se muestra en la Tabla 4, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.
En ciertas realizaciones, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDRs o bucles hipervariables, de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En otra realización, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDRs o bucles hipervariables, de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En aún otra realización, la molécula de ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs o bucles hipervariables, de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En una realización, la molécula de ácido nucleico incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 que incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys a Ser en la posición 84) en la región de marco de cadena pesada 3 (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en las tablas 1 y 2).
En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, cualquiera de VHFW1 (tipo a), VHFW1 (tipo b), VHFW1 (tipo c), VHFW1 (tipo d), VHFW2 (tipo a), VHFW2 (tipo b), VHFW2 (tipo c), VHFW2 (tipo d), VHFW3 (tipo a), VHFW3 (tipo a'), VHFW3 (tipo b), VHFW3 (tipo c) o VHFW4, o cualquier combinación de los mismos, por ejemplo, una combinación de marco como se describe aquí) para cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP049-Clon-F, BAP049-Clon-G, BAP049-Clon-H, BAP049-Clon-I, or BAP049-Clon-J, como se resume en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma. Por ejemplo, la molécula de ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se expone en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma), o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las Tablas 1 y 2).
En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena ligera (por ejemplo, cualquiera de VLFW1 (tipo a), VLFW1 (tipo b), VLFW1 (tipo c), VLFW1 (tipo d), VLFW1 (tipo e), VLFW1 (tipo f), VLFW2 (tipo a), VLFW2 (tipo b), VLFW2 (tipo c), VLFW2 (tipo d), VLFW3 (tipo a), VLFW3 (tipo b), VLFW3 (tipo c), VLFW3 (tipo d), VLFW3 (tipo e), VLFW3 (tipo f), VLFW3 (tipo g) o VLFW4, o cualquier combinación de los mismos, por ejemplo, una combinación marco como se describe aquí) para cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, or BAP050-hum20-Ser), BAP049-Clon-F, BAP049-Clon-G, BAP049-Clon-H, BAP049-Clon-I, or BAP049-Clon-J, como se resume en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma. Por ejemplo, la molécula de ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se expone en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma), o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las Tablas 1 y 2).
En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena pesada y una o más regiones marco de cadena ligera como se describe en el presente documento. Las regiones marco de la cadena pesada y ligera pueden estar presentes en el mismo vector o en vectores separados.
En otro aspecto, la solicitud presenta células huésped y vectores que contienen los ácidos nucleicos descritos aquí. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en un solo vector o en vectores separados presentes en la misma célula huésped o célula huésped separada. La célula huésped puede ser una célula eucariota, por ejemplo, una célula de mamífero, una célula de insecto, una célula de levadura o una célula procariota, por ejemplo, E. coli. Por ejemplo, la célula de mamífero puede ser una célula cultivada o una línea celular. Las células de ejemplo de mamífero incluyen líneas celulares linfocíticas (por ejemplo, NSO), células de ovario de hámster chino (CHO), línea celular humana Per C6 (por ejemplo, Células PER C6 de Crucell), células COS, células de ovocitos y células de un animal transgénico, por ejemplo, células epiteliales mamarias.
En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de anticuerpo descrita aquí. El método incluye: proporcionar un antígeno LAG-3 (por ejemplo, un antígeno que comprende al menos una porción de un epítopo lAG-3); obtener una molécula de anticuerpo que se une específicamente al polipéptido LAG-3; y evaluar si la molécula de anticuerpo se une específicamente al polipéptido LAG-3, o evaluar la eficacia de la molécula de anticuerpo para modular, por ejemplo, inhibir, la actividad del lAG-3. El método puede incluir además administrar la molécula de anticuerpo a un sujeto, por ejemplo, un animal humano o no humano.
En otro aspecto, la invención proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticas, que incluyen un vehículo, excipiente o estabilizador farmacéuticamente aceptable, y al menos una de las moléculas de anticuerpo anti-LAG3 de la invención. En una realización, la composición, por ejemplo, la composición farmacéutica, incluye una combinación de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y uno o más agentes, por ejemplo, un agente terapéutico u otra molécula de anticuerpo, como se describe en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo se conjuga con un marcador o un agente terapéutico.
Las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento pueden inhibir, reducir o neutralizar una o más actividades de LAG-3. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 da como resultado uno o más de: un aumento en la estimulación dependiente de antígeno de linfocitos T CD4+ o linfocitos T CD8+, un aumento en la proliferación de células T; un aumento en la expresión de un antígeno de activación, por ejemplo, CD25; un aumento en la expresión de una citocina, por ejemplo, interferón-gamma (IFN-y), interleucina-2 (IL-2), interleucina-4 (IL-4), quimiocina (motivo CC) ligando 3 (CCL3), quimiocina (motivo CC) ligando 4 (CCL4), o quimiocina (motivo CC) ligando 5 (CCL5); una disminución en la actividad supresora de las células Treg, un aumento en la homeostasis de las células T, un aumento en los linfocitos infiltrantes de tumores o una disminución en la evasión inmune por las células cancerosas. Por lo tanto, tales moléculas de anticuerpos pueden usarse, solas o en combinación, para tratar o prevenir trastornos en los que se desea potenciar una respuesta inmune en un sujeto.
Usos de las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3
Por consiguiente, en otro aspecto de la divulgación, se proporciona un método para modular una respuesta inmune en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento (por ejemplo, una cantidad terapéuticamente efectiva de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3), sola o en combinación con uno o más agentes o procedimientos, de tal manera que la respuesta inmune en el sujeto es modulada En una realización, la molécula de anticuerpo restaura, mejora, estimula o aumenta una respuesta inmune en el sujeto.
El sujeto puede ser un mamífero, por ejemplo, un primate, preferiblemente un primate superior, por ejemplo, un humano (por ejemplo, un paciente que tiene, o está en riesgo de tener, un trastorno descrito aquí). En una realización, el sujeto necesita potenciar una respuesta inmune. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 restaura, mejora o estimula una respuesta de células T específicas de antígeno, por ejemplo, producción de interleucina-2 (IL-2) o interferón-gamma (IFN-y) en una respuesta de células T específicas de antígeno, en el sujeto. En algunas realizaciones, la respuesta inmune es una respuesta antitumoral. En una realización, el sujeto tiene, o está en riesgo de tener, un trastorno descrito aquí, por ejemplo, un cáncer o un trastorno infeccioso como se describe aquí. En ciertas realizaciones, el sujeto está, o está en riesgo de ser inmunocomprometido. Por ejemplo, el sujeto está siendo sometido o ha sido sometido a un tratamiento quimioterapéutico y/o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está, o está en riesgo de ser inmunocomprometido como resultado de una infección.
En un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar (por ejemplo, uno o más de reducir, inhibir o retrasar la progresión) un cáncer o tumor en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, por ejemplo, una cantidad terapéuticamente efectiva de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola, por ejemplo, como monoterapia, o en combinación, por ejemplo, con uno o más agentes o procedimientos. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de una molécula coestimuladora) o un modulador de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor del punto regulador inmune), por ejemplo, como se describe en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor o activador de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un Inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-LI), un modulador TIM-3 (por ejemplo, un activador o inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4).
En ciertas realizaciones, el cáncer tratado con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, solo o en combinación, incluye pero no se limita a, un tumor sólido, un cáncer hematológico (por ejemplo, leucemia, linfoma, mieloma) y una lesión metastásica del mismo. En una realización, el cáncer es un tumor sólido. Ejemplos de tumores sólidos incluyen tumores malignos, por ejemplo, sarcomas y carcinomas (por ejemplo, adenocarcinomas), de los diversos sistemas de órganos, tales como los que afectan los pulmones, mamas, linfoides, gastrointestinales o colorrectales, genitales y el tracto genitourinario (por ejemplo, células renales, uroteliales, vesicales), faringe, CNS (por ejemplo, células cerebrales, neurales o gliales), piel (por ejemplo, melanoma), cabeza y cuello (por ejemplo, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNCC)) y páncreas. Por ejemplo, melanoma, cánceres de colon, cáncer gástrico, cáncer rectal, carcinoma de células renales, cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama que no expresa uno, dos o todos los receptores de estrógeno, receptor de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), cáncer de hígado, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa) o cáncer de pulmón de células pequeñas), cáncer de próstata, cáncer de cabeza o cuello (por ejemplo, HPV+carcinoma de células escamosas), cáncer de intestino delgado y cáncer de esófago. Ejemplos de cáncer hematológico incluyen, pero no se limitan a, leucemia (por ejemplo, leucemia mieloide, leucemia linfoide o leucemia linfocítica crónica (CLL)), linfoma (por ejemplo, Linfoma de Hogdkin (HL), linfoma no Hogdkin (NHL), Linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de células T o linfoma de células del manto (MCL) y mieloma, por ejemplo, mieloma múltiple. El cáncer puede estar en una etapa temprana, intermedia, tardía o metastásica.
En algunas realizaciones, el cáncer se selecciona de un cáncer colorrectal (por ejemplo, CRC), melanoma, por ejemplo, melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2; un cáncer pancreático, por ejemplo, cáncer pancreático avanzado; un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo; un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC); un cáncer de esófago; un carcinoma de células renales (RCC), por ejemplo, carcinoma de células renales claro (ccRCC) o carcinoma de células renales metastásico (MRCC); un cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC); un cáncer cervical; cáncer de vejiga; o un tumor maligno hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica), o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de Hogdkin (Hl ), un linfoma no Hogdkin (NHL), un linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), un linfoma de células del manto (MCL) o una CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recurrente o refractaria).
En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 está sola (por ejemplo, como una monoterapia), o en combinación con uno o más segundos agentes (por ejemplo, un inhibidor de BRAF). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con (por ejemplo, antes o después del tratamiento o simultáneamente con) un inhibidor de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1, un inhibidor de PD-L1, un inhibidor de TIM-3, un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, c Ea CAM1 y/o CEACAM5) o un inhibidor de CTLA4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CLA4, por ejemplo, ipilimumab)) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) para tratar un melanoma. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un PD-1 o inhibidor de PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un melanoma como se describe en este documento.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola, por ejemplo, como una monoterapia, o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un inhibidor de anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un cáncer de cabeza y cuello como se describe aquí.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola, por ejemplo, como una monoterapia, o en combinación con un inhibidor o activador de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un activador o inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CeA c AM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer de pulmón (por ejemplo, un NSCLC). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un cáncer de pulmón (por ejemplo, un NSCLC) como se describe en este documento.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola, por ejemplo, como una monoterapia, o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer gástrico. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un cáncer gástrico como se describe en el presente documento.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola, por ejemplo, como una monoterapia, o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un anti-PD-1). molécula de anticuerpo), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAm (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un linfoma (por ejemplo, linfoma de Hogdkin (HL), linfoma no Hogdkin (NHL), linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de células del manto (MCL) o CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recurrente o refractaria). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o de PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un linfoma como se describe en el presente documento.
En una realización, el microambiente del cáncer tiene un nivel elevado de expresión de PD-L1. Alternativamente, o en combinación, el microambiente del cáncer puede tener una expresión incrementada de IFNy y/o CD8.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola o en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) o un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), para tratar a un sujeto que tiene o se identifica que tiene un tumor que tiene uno o más de alto nivel o expresión de PD-L1, o que es un linfocito infiltrante de tumor (TIL)+ (por ejemplo, que tiene un número incrementado de TlLs), o ambos. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un tumor que tiene un alto nivel o expresión de PD-L1 y que es TIL+. En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar un sujeto basado en tener un tumor que tiene uno o más de alto nivel de PD-L1 o expresión o como TIL+, o ambos. En ciertas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar a un sujeto basado en tener un tumor que tiene un alto nivel o expresión de PD-L1 y que es TIL+. En algunas realizaciones, los tumores que son TIL+ son positivos para CD8 e IFNy. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene o se identifica que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para todos los PD-L1, CD8 e IFNy.
En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar un sujeto basado en tener un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy. En ciertas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar un sujeto basado en tener un alto porcentaje de células que son positivas para todos los PD-L1, CD8 e IFNy. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células escamosas o adenocarcinoma de pulmón; un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer cervical de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de esófago; un cáncer de tiroides; un melanoma y/o un cáncer nasofaríngeo (NPC). En ciertas realizaciones, los métodos descritos en este documento describen adicionalmente la identificación de un sujeto basado en tener uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células escamosas o adenocarcinoma; un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer cervical de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de tiroides; un melanoma y/o un cáncer nasofaríngeo.
Los métodos y composiciones divulgados en el presente documento son útiles para tratar lesiones metastásicas asociadas con los cánceres mencionados anteriormente.
En un aspecto adicional, la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, sola o en combinación con uno o más agentes o procedimientos Se prefieren los anticuerpos de la divulgación para uso en el método, aunque en su lugar pueden usarse otros anticuerpos anti-LAG-3, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos (o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento).
En una realización, la enfermedad infecciosa es hepatitis (por ejemplo, infección por hepatitis B). En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno o vacuna contra la hepatitis B, y opcionalmente en combinación con un adyuvante que contiene aluminio.
En otra realización, la enfermedad infecciosa es la gripe. En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno de gripe o vacuna.
Todavía además, la divulgación proporciona un método para potenciar una respuesta inmune a un antígeno en un sujeto, que comprende administrar al sujeto: (i) el antígeno; y (ii) una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, de tal manera que se potencia una respuesta inmune al antígeno en el sujeto. El antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral, un antígeno viral, un antígeno bacteriano o un antígeno de un patógeno.
La molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación, se puede administrar al sujeto sistémicamente (por ejemplo, oral, parenteral, subcutánea, intravenosa, rectal, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, transdérmica o por inhalación o instalación intracavitaria), tópicamente, o por aplicación a las membranas mucosas, tales como la nariz, la garganta y los tubos bronquiales.
Una persona experta puede determinar las dosificaciones y los regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra mediante inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 10 mg/kg, o aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg o 10 mg/kg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra (por ejemplo, por vía intravenosa) a una dosis de aproximadamente 3 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola a una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 3 a 240 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80 o 240 mg, cuando se combina con un segundo agente o modalidad terapéutica, por ejemplo, un segundo agente o modalidad terapéutica descrita aquí. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.
Las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento se prefieren para usar en los métodos descritos en el presente documento, aunque en su lugar pueden usarse otros anticuerpos anti-LAG-3, o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la invención.
Terapias Combinadas
Los métodos y composiciones descritos en este documento pueden usarse en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas. En una realización, los métodos descritos en el presente documento incluyen administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, en combinación con un agente o procedimiento o modalidad terapéutica, en una cantidad efectiva para tratar o prevenir un trastorno. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente o procedimiento terapéutico o modalidad pueden administrarse simultánea o secuencialmente en cualquier orden. Se puede usar cualquier combinación y secuencia de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 y otros agentes terapéuticos, procedimientos o modalidades (por ejemplo, como se describe aquí). La molécula de anticuerpo y/u otros agentes terapéuticos, procedimientos o modalidades pueden administrarse durante períodos de trastorno activo, o durante un período de remisión o enfermedad menos activa. La molécula de anticuerpo puede administrarse antes del otro tratamiento, simultáneamente con el tratamiento, el postratamiento o durante la remisión del trastorno.
En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpo, quimioterapia, otra terapia anticancerígena (por ejemplo, terapias dirigidas contra el cáncer, terapia génica, terapia viral, terapia de ARN, trasplante de médula ósea, nanoterapia u fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias basadas en el sistema inmune (por ejemplo, citocinas o inmunoterapias basadas en células), procedimientos quirúrgicos (por ejemplo, lumpectomía o mastectomía) y/o procedimientos de radiación, o una combinación de cualquiera de los anteriores. La terapia adicional puede ser en forma de terapia adyuvante o neoadyuvante. En algunas realizaciones, la terapia adicional es un inhibidor enzimático (por ejemplo, inhibidor enzimático de molécula pequeña) o un inhibidor metastásico.
Ejemplos de agentes citotóxicos que se pueden administrar en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una vía de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores de proteosomas y radiación (por ejemplo, irradiación local o de todo el cuerpo (por ejemplo, irradiación gamma). En otras realizaciones, la terapia adicional es cirugía o radiación, o una combinación de las mismas. En otras realizaciones, la terapia adicional es una terapia dirigida a uno o más de la vía PI3K/AKT/mTOR, un inhibidor de HSP90 o un inhibidor de tubulina. Otras moléculas de anticuerpos de ejemplo que se pueden administrar en combinación incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de puntos de regulación (por ejemplo, anti-PD-1, anti-PD-L1); anticuerpos que estimulan una célula inmunitaria (por ejemplo, anticuerpos agonistas GITR o CD137); anticuerpos anticancerígenos (por ejemplo, Rituximab (Rituxan® o MabThera®), trastuzumab (Herceptin®), cetuximab (Erbitux®), entre otros.
Alternativamente, o en combinación con las combinaciones mencionadas anteriormente, los métodos y composiciones descritos en el presente documento pueden administrarse en combinación con uno o más de: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inmunoinhibidora, por ejemplo, una molécula de puntos de regulación inmubitario); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.
Las combinaciones y usos no limitantes de ejemplo de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen los siguientes.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de una molécula coestimuladora) o un modulador de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor del punto regulador inmune)
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, un agonista, de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se selecciona de un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fusión soluble) de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o ligando CD83.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibitoria (o punto regulador inmune) seleccionada de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), y/o TGFR beta. La inhibición de una molécula inhibidora se puede realizar mediante inhibición a nivel de ADN, ARN o proteína. En realizaciones, se puede usar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNip o ARNhc), para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, que se une a la molécula inhibidora. En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-1, PD-L1, PD-L2 o CTLA-4.
Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con un inhibidor de, por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-1, PD-L1, PD-L2 o CTLA-4, para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer seleccionado de: un cáncer colorrectal (por ejemplo, CCR); un melanoma, por ejemplo, melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2; un cáncer de páncreas, por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado; un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo; un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC); un cáncer de esófago; un carcinoma de células renales (RCC), por ejemplo, carcinoma de células renales claro (ccRCC) o carcinoma metastásico de células renales (MRCC); un cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC); un cáncer cervical; un cáncer de vejiga; o una malignidad hematológica, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica), o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de Hogdkin (HL), un linfoma no Hogdkin (NHL), un linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), un linfoma de células del manto (MCL) o una CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recurrente o refractaria).
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3-1 se administra en combinación con (por ejemplo, antes, con o después) tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, Nivolumab o Pembrokizumab) o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 o fragmento de unión a antígeno del mismo. En todavía otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento de unión a antígeno del mismo. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3 (o fragmentos de unión a antígeno del mismo). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-PD-L1 (o fragmentos de unión a antígeno del mismo). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 y un anticuerpo anti-PD-L1 (o fragmentos de unión a antígeno del mismo).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, inhibidor de CEACAM-1 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5.
En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. La combinación de anticuerpos citados en el presente documento puede administrarse por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, o enlazados, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífico o triespecífico. En una realización, se administra un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y uno de: un anticuerpo anti-TIM-3, anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5), anticuerpo anti-PD-L1, o anticuerpo anti-PD-1, o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En ciertas realizaciones, la combinación de anticuerpos que se citan en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido o una malignidad hematológca). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1 para tratar un tumor sólido.
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una citocina. La citocina se puede administrar como una molécula de fusión a la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, o como composiciones separadas. En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una, dos, tres o más citocinas, por ejemplo, como una molécula de fusión o como composiciones separadas. En una realización, la citocina es una interleucina (IL) seleccionada de uno, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a una primera diana (por ejemplo, a LAG-3), una segunda especificidad de unión a una segunda diana (por ejemplo, PD-1, TIM-3 o PD-L1), y está opcionalmente enlazado a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12), por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción del mismo. En ciertas realizaciones, la combinación de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y la citocina descrita en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido).
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer u otras formas de inmunoterapia celular. En una realización, la vacuna está basada en péptidos, basada en ADN, basada en ARN o basada en antígeno, o una combinación de los mismos. En realizaciones, la vacuna comprende uno o más péptidos, ácidos nucleicos (por ejemplo, ADN o ARN), antígenos, o una combinación de los mismos. En ciertas realizaciones, la vacuna contra el cáncer comprende un adyuvante (por ejemplo, fosfato de aluminio o hidróxido de aluminio). En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento se administran en combinación con una o más de la extirpación quirúrgica de un tejido, quimioterapia u otra terapia contra el cáncer y el objetivo primario o único serán lesiones metastásicas, por ejemplo, metástasis en la médula ósea nodos linfáticos.
En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2. En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un péptido antigénico tumoral, por ejemplo, uno o más péptidos HLA-A2, y opcionalmente en combinación con un adyuvante, por ejemplo, Montanide™. Los péptidos tumorales de ejemplo que se pueden administrar en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen una o más de Tirosinasa.A2, MAGE-C2.A2, NY-ESO-1b.A2, MAGE-4.A2, MAGE-3.A2, MAGE-1.A2, NA17.A2 (GnTV) y MAGE-10.A2.
En otra realización, el cáncer es un cáncer pancreático, por ejemplo, cáncer pancreático avanzado. En cierta realización, la molécula de anticuerpo puede administrarse en combinación con un agente quimioterapéutico, por ejemplo, gemcitabina.
En otra realización, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo. En cierta realización, la molécula de anticuerpo puede administrarse en combinación con un agente quimioterapéutico, por ejemplo, paclitaxel.
En otra realización, el cáncer es un carcinoma de células renales, por ejemplo, carcinoma de células claras, avanzado (por ejemplo, estadio IV) o carcinoma de células renales metastásico (MRCC).
En otra realización, el cáncer es un cáncer de cabeza o cuello, por ejemplo, HPV+ carcinoma de células escamosas.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede combinar con un antígeno de hepatitis B (por ejemplo, Engerix B). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno de gripe.
La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede usarse sola en forma no conjugada, o puede unirse a una sustancia, por ejemplo, un agente o unidad estructural citotóxica (por ejemplo, un fármaco terapéutico; un compuesto que emite radiación; moléculas de plantas, hongos o de origen bacteriano, o una proteína biológica (por ejemplo, una toxina proteica) o una partícula (por ejemplo, una partícula viral recombinante, por ejemplo, a través de una proteína de recubrimiento viral). Por ejemplo, el anticuerpo se puede acoplar a un isótopo radiactivo tal como un emisor a-, p o y, o un emisor p y y.
Terapias Combinadas Adicionales
Los métodos y composiciones descritos en el presente documento (por ejemplo, anticuerpos LAG-3 y métodos para usarlos) se pueden usar en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas, por ejemplo, un segundo agente terapéutico seleccionado de uno o más de los agentes listados en la Tabla 7. En una realización, los métodos descritos en el presente documento incluyen administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento (opcionalmente en combinación con uno o más inhibidores de PD-1, PD-L1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), o CTLA-4)), incluyen además la administración de un segundo agente terapéutico seleccionado de uno o más de los agentes listados en la Tabla 7, en una cantidad efectiva para tratar o prevenir un trastorno, por ejemplo, un trastorno como se describe aquí, por ejemplo, un cáncer. Cuando se administra en combinación, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todos, se pueden administrar en una cantidad o dosis mayor, menor o igual que la cantidad o dosificación de cada agente usado individualmente, por ejemplo, como monoterapia. En ciertas realizaciones, la cantidad o dosificación administrada del anticuerpo anti-LAG-3, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todo, es menor (por ejemplo, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40%, o al menos 50%) que la cantidad o dosificación de cada agente utilizado individualmente, por ejemplo, como monoterapia. En otras realizaciones, la cantidad o dosificación del anticuerpo anti-LAG-3, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todo lo que produce un efecto deseado (por ejemplo, tratamiento del cáncer) es menor (por ejemplo, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40% o al menos 50% menos).
En otras realizaciones, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de los agentes listados en la Tabla 7. En una realización, el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa, o un adenocarcinoma de NSCLC), o divulgado en una publicación listada en la Tabla 7. En algunas realizaciones, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de: 1) un inhibidor de la proteína quinasa C (PKC); 2) un inhibidor de la proteína de choque térmico 90 (HSP90); 3) un inhibidor de una fosfoinositida 3-quinasa (PI3K) y/o diana de rapamicina (mTOR); 4) un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17 o un inhibidor de 17alfa-hidroxilasa/C17-20 liasa); 5) un agente quelante de hierro; 6) un inhibidor de aromatasa; 7) un inhibidor de p53, por ejemplo, un inhibidor de una interacción p53/Mdm2; 8) un inductor de apoptosis; 9) un inhibidor de la angiogénesis; 10) un inhibidor de la aldosterona sintasa; 11) un inhibidor del receptor suavizado (SMO); 12) un inhibidor del receptor de prolactina (PRLR); 13) un inhibidor de señalización de Wnt; 14) un inhibidor de CDK4/6; 15) un inhibidor del receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR2)/receptor 4 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR4); 16) un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF); 17) un inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC; 18) un inhibidor de uno o más de VEGFR-2 (por ejemplo, FLK-1/KDR), PDGFRbeta, c-KIT o Raf quinasa C; 19) un agonista de somatostatina y/o un inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento; 20) un inhibidor de la linfoma quinasa anaplásica (ALK); 21) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento 1 similar a la insulina (IGF-1R); 22) un inhibidor de la P-glucoproteína 1; 23) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR); 24) un inhibidor de la BCR-ABL quinasa; 25) un inhibidor de FGFR; 26) un inhibidor de CYP11B2; 27) un inhibidor de HDM2, por ejemplo, un inhibidor de la interacción HDM2-p53; 28) un inhibidor de una tirosina quinasa; 29) un inhibidor de c-MET; 30) un inhibidor de JAK; 31) un inhibidor de DAC; 32) un inhibidor de 11p-hidroxilasa; 33) un inhibidor de IAP; 34) un inhibidor de PIM quinasa; 35) un inhibidor de puercoespín; 36) un inhibidor de BRAF, por ejemplo, BRAF V600E o BRAF de tipo silvestre; 37) un inhibidor de HER3; 38) un inhibidor de MEK; o 39) un inhibidor de una lípido quinasa, por ejemplo, como se describe aquí y en la Tabla 7.
En una realización, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de: Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A27, Compuesto A29, Compuesto A33 y Compuesto A13.
En otras realizaciones, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de: Compuesto A5, Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A29 y Compuesto A40.
En otras realizaciones, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto A21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto 49.
En realizaciones, el segundo agente terapéutico se administra a una dosis terapéutica o inferior a la terapéutica. En ciertas realizaciones, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el segundo agente terapéutico se administra en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 que cuando el segundo agente terapéutico es administrado individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con el segundo agente terapéutico que cuando la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra individualmente. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor que la dosis terapéutica del segundo agente terapéutico como monoterapia, por ejemplo, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% menos. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor que la dosis terapéutica de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 como monoterapia, por ejemplo, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% menos.
Detección
En otro aspecto, la invención presenta métodos para detectar la presencia de LAG-3 en una muestra, por ejemplo, in vitro o in vivo (por ejemplo, una muestra biológica, por ejemplo, suero, semen u orina, o una biopsia de tejido, por ejemplo, de una lesión hiperproliferativa o cancerosa). El método del sujeto puede usarse para evaluar (por ejemplo, monitorizar el tratamiento o la progresión de, diagnosticar y/o estadificar un trastorno descrito en este documento, por ejemplo, un trastorno hiperproliferativo o canceroso, en un sujeto). El método incluye: (i) poner en contacto la muestra con (y opcionalmente, una referencia, por ejemplo, una muestra de control), o administrar al sujeto, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la invención, bajo condiciones que permitan que ocurra la interacción y (ii) detectar la formación de un complejo entre la molécula de anticuerpo y la muestra (y opcionalmente, la referencia, por ejemplo, control, muestra). La formación del complejo es indicativa de la presencia de LAG-3, y puede indicar la idoneidad o la necesidad de un tratamiento descrito aquí. El método puede implicar una inmunohistoquímica, inmunocitoquímica, citometría de flujo (por ejemplo, FACS), perlas magnéticas complejas de moléculas de anticuerpos, ensayos ELISA, técnicas de PCR (por ejemplo, RT-PCR).
Típicamente, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 utilizada en los métodos de diagnóstico in vivo e in vitro se marca directa o indirectamente con una sustancia detectable para facilitar la detección del agente de unión unido o no unido. Las sustancias detectables adecuadas incluyen diversas enzimas biológicamente activas, grupos prostéticos, materiales fluorescentes, materiales luminiscentes, materiales paramagnéticos (por ejemplo, activos por resonancia magnética nuclear) y materiales radiactivos.
Las realizaciones descritas adicionalmente proporcionan un método para tratar un cáncer, que comprende: identificar en una muestra (por ejemplo, la muestra de un sujeto que comprende células cancerosas y opcionalmente células inmunes tales como TlLs) la presencia de uno, dos o la totalidad de PD-L1, CD8 o IFN-y, proporcionando así un valor para uno, dos o todos los PD-L1, CD8 e IFN-y. El método puede incluir además comparar los valores PD-L1, CD8 y/o IFN-y con un valor de referencia, por ejemplo, un valor de control. Si los valores PD-L1, CD8 y/o IFN-y son mayores que el valor de referencia, por ejemplo, los valores de control, administrando una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, un anticuerpo anti-LAG-3 descrito en el presente documento), solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-PD-LI, o ambas, al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más agentes adicionales, se trata así el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito aquí, tal como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, melanoma, cáncer de nasofaringe, o cáncer de mama, por ejemplo, cáncer de mama TN, por ejemplo, cáncer de mama IM-TN. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama ER+ o cáncer pancreático.
También se describe un método para tratar un cáncer, que comprende: analizar una muestra (por ejemplo, la muestra de un sujeto que comprende células cancerosas) para detectar la presencia de PD-L1, identificando así un valor de PD-L1, comparando el valor de PD-L1 con un valor de control, y si el valor PD-L1 es mayor que el valor de control, administrando una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, un anticuerpo anti-LAG-3 descrito aquí), solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-PD-LI, o ambas, al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más agentes, se trata así el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento, tal como cáncer adenocarcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (ACA), carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC o carcinoma hepatocelular (HCC).
En otro aspecto, la divulgación presenta kits de diagnóstico o terapéuticos que incluyen las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 descritas en este documento e instrucciones de uso.
Otras características, objetivos y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción y los dibujos, y de las reivindicaciones.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de cadena ligera (SEQ ID NO: 16) y pesada (SEQ ID NO: 6) de mAb anti-LAG-3 de murino BAP050. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva.
La Figura 2 representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de la cadena ligera (SEQ ID NO: 16) y pesada (SEQ ID NO: 6) de mAb anti-LAG-3 de murino BAP050 alineado con las secuencias de la línea germinal (SEQ ID NOs: 290- 291, respectivamente, en orden de aparición). Las secuencias superior e inferior son las secuencias de línea germinal (GL) y BAP050 (Mu mAb), respectivamente. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva. "-" significa residuo de aminoácido idéntico.
La Figura 3 representa gráficos de barras que muestran los resultados del análisis de unión de FACS para los veinte clones BAP050 humanizados (BAP050-hum01 a BAP050-hum20) y el mAb quimérico (BAP050-chi). Las concentraciones de anticuerpos son 200, 100, 50, 25 y 12.5 ng/ml desde la barra más a la izquierda hasta la barra más a la derecha para cada mAb probado.
La Figura 4 representa el análisis estructural de los clones BAP049 humanizados (a, b, c, d, e, f, g representan diversos tipos de secuencias de la región marco). También se muestran las concentraciones de los mAbs en las muestras.
La Figura 5A-5B representa la afinidad de unión y la especificidad de los mAb humanizados medidos en un ensayo de unión de competición usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los anticuerpos de prueba y células CHO que expresan LAG-3. El experimento se realizó dos veces, y los resultados se muestran en las Figuras 5A y 5B, respectivamente.
La Figura 6 representa la clasificación de los clones BAP050 humanizados con base en los datos de FACS, la unión de competición y el análisis estructural. También se muestran las concentraciones de los mAbs en las muestras.
La Figura 7 representa la afinidad de unión y la especificidad de los clones huBAP050(Ser) medidos en un ensayo de unión de competición usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los anticuerpos de prueba y células CHO que expresan LAG-3. Clones HuBAP050(Ser), tales como BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser y BAP050-hum13- Ser, fueron evaluados. También se incluyeron en los análisis mAb murino BAP050, mAb quimérico BAP050-chi y BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum05, BAP050-hum09, BAP050-hum11, BAP050-hum12 y BAP050-hum13.
La Figura 8 representa el bloqueo de la unión de LAG-3-Ig a las células Daudi por clones huBAP050(Ser). Clones HuBAP050(Ser), tales como BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser y BAP050-hum13- Ser, fueron evaluados. El mAb murino BAP050 y el mAb quimérico BAP050-chi también se incluyeron en los análisis.
Las Figuras 9A-9B representan la alineación de secuencias de dominio variable de cadena pesada para los veinte clones humanizados BAP050 y quimera BAP050 (BAP050-chi). En la Figura 9A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NO: 20, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 64, 64, 64, 64, 64, 68, 72, 72, 76 y 80, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 9B, solo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia del ratón (SEQ ID NOs: 20, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 64, 64, 64, 64, 64, 68, 72, 72, 76 y 80, respectivamente, en orden de aparición).
Las Figuras 10A-10B representan la alineación de secuencias de dominio variable de cadena ligera para los veinte clones humanizados de BAP050 y quimera BAP050 (BAP050-chi). En la Figura 10A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NO: 24, 32, 36, 36, 36, 292, 292, 292, 44, 48, 52, 56, 56, 60, 60, 60, 60, 84, 88, 92 y 96, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 10B, solo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia del ratón (SEQ ID NO: 24, 32, 36, 36, 36, 292, 292, 292, 44, 48, 52, 56, 56, 60, 60, 60, 60, 84, 88, 92 y 96, respectivamente, en orden de aparición).
La Figura 11 muestra cánceres de ejemplo que tienen proporciones relativamente altas de pacientes que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y.
La Figura 12 muestra ejemplos de cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas que tienen proporciones relativamente bajas para pacientes con triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y.
La Figura 13 muestra la proporción de pacientes de ejemplo de cáncer de mama que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y.
La Figura 14 muestra la proporción de pacientes de ejemplo de cáncer de colon que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y.
Breve descripción de las tablas.
La Tabla 1 es un resumen de las secuencias de aminoácidos y nucleótidos para las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 murino, quimérico y humanizado. Las moléculas de anticuerpos incluyen mAb murino BAP050 y mAbs quiméricos BAP050-chi, mAbs humanizados BAP050-hum01 a BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser a BAP050-hum20-Ser y BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDRs de cadena pesada y ligera, las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones variables de cadena pesada y ligera, y las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las cadenas pesada y ligera se muestran en esta Tabla.
La Tabla 2 representa las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones marco de la cadena pesada y ligera para los mAbs humanizados BAP050-hum01 a BAP049-hum20, BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser a BAP050-hum20- Ser, y BAP049-Clon-F a BAP049-Clon-J.
La Tabla 3 representa las secuencias de aminoácidos de la región constante de las cadenas pesadas de IgG humana y la cadena ligera de kappa humana.
La Tabla 4 muestra las secuencias de aminoácidos de las secuencias líderes de la cadena pesada y ligera para mAbs humanizados BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J.
La Tabla 5 es un resumen del rendimiento, título, contenido de monómero y niveles de endotoxina para mAb BAP050 humanizados de ejemplo expresados en células CHO.
La Tabla 6 muestra las isoformas de carga detectadas por el análisis Novex IEF para mAb BAP050 humanizados de ejemplo expresados en células CHO.
La Tabla 7 es un resumen de los agentes terapéuticos seleccionados que se pueden administrar en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3 y otros inmunomoduladores (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora y/o un inhibidor de una molécula de punto regulador inmune) descrita aquí. La Tabla 7 proporciona de izquierda a derecha lo siguiente: la Designación del Compuesto del segundo agente terapéutico, la estructura del Compuesto y las publicaciones de Patentes que divulgan el Compuesto.
Descripción detallada
El sistema inmune tiene la capacidad de reconocer y eliminar las células tumorales; sin embargo, los tumores pueden usar múltiples estrategias para evadir la inmunidad. El bloqueo de los puntos de control inmunitario es una de las metodologías para activar o reactivar la inmunidad antitumoral terapéutica. El gen de activación de linfocitos-3 (LAG-3) se ha descrito como un receptor inhibidor en la sinapsis inmunológica (Chen and Flies (2013) Nat Rev Immunol. 13 (4): 227-42). Por lo tanto, el bloqueo de LAG-3 puede conducir a una mejora de la inmunidad antitumoral.
Varios tipos de células expresan LAG-3. Por ejemplo, LAG-3 se expresa en células T CD4+ y CD8+ activadas, células Treg, células asesinas naturales (NK) y células dendríticas plasmacitoides (DC). LAG-3 se expresa en linfocitos infiltrantes en tumores, por ejemplo, linfocitos infiltrantes en carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC). LAG-3 se expresa en Tregs altamente supresivos inducidos y naturales. Por ejemplo, FoxT3+ nTregsy FoxP3-iTregs altamente supresores son positivos para LAG-3 en melanoma y cáncer colorrectal (Camisaschi et al. (2010) J. Immunol. 184 (11): 6545-6551; Scurr et al. (2014) Mucosal Immunol. 7 (2): 428-439).
LAG-3 regula negativamente la señalización y las funciones de las células T. Los ligandos para LAG-3 incluyen, por ejemplo, MHC Clase II y L-SECtin. Se ha demostrado que anti-LSECtin inhibe el crecimiento de células de melanoma B16 (Xu et al. (2014) Cancer Res. 74 (13): 3418-3428). El bloqueo de LAG-3 puede restaurar las actividades de las células efectoras, atenuar la actividad supresora de Tregs y/o mejorar la actividad antitumoral anti-PD-1.
El LAG-3 es típicamente, aunque no exclusivamente, coexpresado en las células PD-1+ y el bloqueo único puede restaurar las actividades in vitro de las células. El grado de agotamiento de las células T c D8+, por ejemplo, como se muestra en los porcentajes de productores duales de IFN-Y/TNF-a, se correlaciona con el número de receptores inhibidores expresados (Blackburn et al. (2009) Nat. Immunol. 10 (1) : 29-37). La alta expresión de PD-1/LAG-3 se correlaciona con la infiltración de células T en el melanoma. El cobloqueo de LAG-3 con anti-PD-1 o PD-L1 puede dar como resultado actividades supresoras de tumores en modelos preclínicos. Por ejemplo, el bloqueo anti-LAG-3 y anti-PD-1 muestran eficacia en modelos de fibrosarcoma Sa1N y carcinoma de colon MC38 (Woo et al. (2012) Cancer Res. 72 (4): 917-27).
El bloqueo de LAG-3 también es eficaz en un modelo de virus de coriomeningitis linfocítica (LCMV). Por ejemplo, el bloqueo de PD-L1 más LAG-3 durante la infección crónica por LCMV mejora las respuestas antivirales de las células T CD8+ (Blackburn et al. (2009) Nat. Immunol. 10 (1): 29-37).
Por consiguiente, la presente invención proporciona, al menos en parte, moléculas de anticuerpos (por ejemplo, moléculas de anticuerpos humanizados) que se unen al Gen-3 de Activación de Linfocitos (LAG-3) con alta afinidad y especificidad. En una realización, se divulgan anticuerpos humanizados contra LAG-3, que muestran baja inmunogenicidad. Por ejemplo, se encontró que los anticuerpos BAP050 humanizados tenían una puntuación de riesgo inferior a 1200, 1150, 1100, 1050, 1000, 950, 900, 850 u 800, de acuerdo con los ensayos de epítopos de células T descritos en este documento. En otras realizaciones, se demostró que la combinación seleccionada de regiones marco, por ejemplo, como se muestra en las Figuras 4 y 6, tiene distintas eficiencias de producción y propiedades de unión.
Aspectos adicionales de la invención incluyen moléculas de ácido nucleico que codifican las moléculas de anticuerpo, vectores de expresión, células huésped y métodos para fabricar las moléculas de anticuerpo. También se proporcionan inmunoconjugados, moléculas multiespecíficas o biespecíficas y composiciones farmacéuticas que comprenden las moléculas de anticuerpo. Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 divulgadas en el presente documento pueden usarse para tratar, prevenir y/o diagnosticar trastornos cancerosos o malignos (por ejemplo, cánceres tales como melanoma, por ejemplo, melanoma en estadio avanzado; cáncer de páncreas, por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado; tumores sólidos; cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico; carcinoma de células renales, por ejemplo, carcinoma de células renales avanzado o metastásico (MRCC) o carcinoma de células renales de células claras), así como enfermedades infecciosas (por ejemplo, hepatitis, por ejemplo, hepatitis B; influenza). Por lo tanto, los métodos para detectar LAG-3, así como los métodos para tratar diversos trastornos, que incluyen cáncer y enfermedades infecciosas usando las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación, se describen en el presente documento.
El término "Gen-3 de Activación de linfocitos" o "LAG-3" incluye todas las isoformas, mamíferos, por ejemplo, LAG-3 humano, homólogos de especies de LAG-3 humano y análogos que comprenden al menos un epítopo común con LAG-3. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humano, se conocen en la técnica, por ejemplo, Triebel et al. (1990) J. Exp. Medicina. 171: 1393-1405.
Los términos adicionales se definen a continuación y en toda la solicitud.
Como se usa en el presente documento, los artículos "un" y "uno, una" se refieren a uno o más de uno (por ejemplo, al menos uno) del objeto gramatical del artículo.
El término "o" se usa en el presente documento para significar, y se usa indistintamente con el término "y/o", a menos que el contexto indique claramente otra cosa.
"Acerca de" y "aproximadamente" generalmente significará un grado aceptable de error para la cantidad medida dada la naturaleza o precisión de las medidas. Los grados de error de ejemplo están dentro del 20 por ciento (%), típicamente, dentro del 10%, y más típicamente, dentro del 5% de un valor dado o rango de valores.
Las composiciones y métodos de la presente divulgación abarcan polipéptidos y ácidos nucleicos que tienen las secuencias especificadas, o secuencias sustancialmente idénticas o similares a las mismas, por ejemplo, secuencias al menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% idénticas o mayor a la secuencia especificada. En el contexto de una secuencia de aminoácidos, el término "sustancialmente idéntico" se usa en el presente documento para referirse a un primer aminoácido que contiene un número suficiente o mínimo de residuos de aminoácidos que son i) idénticos o ii) sustituciones conservadoras de residuos de aminoácidos alineados en una segunda secuencia de aminoácidos de modo que la primera y la segunda secuencia de aminoácidos pueden tener un dominio estructural común y/o una actividad funcional común. Por ejemplo, secuencias de aminoácidos que contienen un dominio estructural común que tiene al menos aproximadamente 85%, 90%. 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, una secuencia proporcionada en este documento.
En el contexto de la secuencia de nucleótidos, el término "sustancialmente idéntico" se usa en el presente documento para referirse a una primera secuencia de ácidos nucleicos que contiene un número suficiente o mínimo de nucleótidos que son idénticos a los nucleótidos alineados en una segunda secuencia de ácidos nucleicos de tal manera que la primera y segunda secuencias de nucleótidos codifican un polipéptido que tiene actividad funcional común, o codifican un dominio de polipéptido estructural común o una actividad de polipéptido funcional común. Por ejemplo, las secuencias de nucleótidos que tienen al menos aproximadamente 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, un secuencia proporcionada aquí.
El término "variante funcional" se refiere a polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la secuencia de origen natural, o están codificados por una secuencia de nucleótidos sustancialmente idéntica, y son capaces de tener una o más actividades de la secuencia de origen natural.
Los cálculos de homología o identidad de secuencia entre secuencias (los términos se usan indistintamente en el presente documento) se realizan como sigue.
Para determinar el porcentaje de identidad de dos secuencias de aminoácidos, o de dos secuencias de ácido nucleico, las secuencias se alinean para fines de comparación óptimos (por ejemplo, se pueden introducir brechas en una o ambas de una primera y segunda secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos para la alineación óptima y las secuencias no homólogas se pueden descartar para fines de comparación). En una realización preferida, la longitud de una secuencia de referencia alineada para fines de comparación es al menos 30%, preferiblemente al menos 40%, más preferiblemente al menos 50%, 60% e incluso más preferiblemente al menos 70%, 80%, 90 %, 100% de la longitud de la secuencia de referencia. Luego se comparan los residuos de aminoácidos o nucleótidos en las posiciones de aminoácidos o posiciones de nucleótidos correspondientes. Cuando una posición en la primera secuencia está ocupada por el mismo residuo de aminoácido o nucleótido que la posición correspondiente en la segunda secuencia, entonces las moléculas son idénticas en esa posición (como se usa aquí, la "identidad" de aminoácidos o ácidos nucleicos es equivalente a "homología" de aminoácidos o ácidos nucleicos).
El porcentaje de identidad entre las dos secuencias es una función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias, teniendo en cuenta el número de brechas y la longitud de cada brecha, que deben introducirse para una alineación óptima de las dos secuencias.
La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de identidad entre dos secuencias se puede lograr utilizando un algoritmo matemático. En una realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos se determina usando el algoritmo de Needleman y Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48: 444-453) que se ha incorporado al programa GAP en el paquete de software GCG (disponible en http://www.gcg.com), utilizando una matriz Blossum 62 o una matriz PAM250, y un peso de brecha de 16, 14, 12, 10, 8, 6 o 4 y un peso de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. En aún otra realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de nucleótidos se determina usando el programa GAP en el paquete de software GCG (disponible en http://www.gcg.com), utilizando una matriz NWSgapdna.CMP y un peso de brecha de 40, 50, 60, 70 u 80 y un peso de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. Un conjunto de parámetros particularmente preferido (y el que debe usarse a menos que se especifique otra cosa) es una matriz de puntuación Blossum 62 con una penalidad de brecha de 12, una penalidad de extensión de brecha de 4 y una penalidad de brecha de desplazamiento de marco de 5.
El porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos o nucleótidos se puede determinar utilizando el algoritmo de E. Meyers y W. Miller ((1989) CABIOS, 4: 11-17) que se ha incorporado al programa ALIGN (versión 2.0), utilizando una tabla de residuos de peso PAM120, una penalidad de longitud de brecha de 12 y una penalidad de brecha de 4.
Las secuencias de ácido nucleico y proteína descritas en el presente documento pueden usarse como una "secuencia de consulta" para realizar una búsqueda en bases de datos públicas para, por ejemplo, identificar a otros miembros de la familia o secuencias relacionadas. Tales búsquedas se pueden realizar utilizando los programas NBLAST y XBLAST (versión 2.0) de Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10. Las búsquedas de nucleótidos BLAST se pueden realizar con el programa NBLAST, puntuación = 100, longitud de palabra = 12 para obtener secuencias de nucleótidos homólogas a las moléculas de ácido nucleico (SEQ ID NO: 1) de la invención. Las búsquedas de proteínas BLAST se pueden realizar con el programa XBLAST, puntuación = 50, longitud de palabra = 3 para obtener secuencias de aminoácidos homólogas a las moléculas de proteína de la invención. Para obtener alineaciones en brecha para propósitos de comparación, Gapped BLAST puede utilizarse como se describe en Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402. Cuando se utilizan los programas BLAST y Gapped BLAST, se pueden usar los parámetros predeterminados de los respectivos programas (por ejemplo, XBLAST y NBLAST). Véase http://www.ncbi.nlm.nih.gov.
Como se usa en el presente documento, el término "hibrida bajo condiciones de baja rigurosidad, rigurosidad media, alta rigurosidad o muy alta rigurosidad" describe condiciones para hibridación y lavado. Se puede encontrar orientación para realizar reacciones de hibridación en Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6. Los métodos acuosos y no acuosos se describen en esa referencia y se pueden usar. Las condiciones de hibridación específicas a las que se hace referencia en el presente documento son las siguientes: 1) condiciones de hibridación de baja rigurosidad en cloruro de sodio/citrato de sodio 6X (SSC) a aproximadamente 45 °C, seguido de dos lavados en 0.2X SSC, SDS al 0.1% al menos a 50 °C (la temperatura de los lavados se puede aumentar hasta 55 °C para condiciones de baja rigurosidad); 2) condiciones de hibridación de rigurosidad media en 6X SSC a aproximadamente 45 °C, seguido de uno o más lavados en 0.2X SSC, 0.1% SDS a 60 °C; 3) condiciones de hibridación de alta rigurosidad en 6X SSC a aproximadamente 45 °C, seguido de uno o más lavados en 0.2X SSC, 0.1% SDS a 65 °C; y preferiblemente 4) las condiciones de hibridación de muy alta rigurosidad son fosfato de sodio 0.5 M, SDS al 7% a 65 °C, seguido de uno o más lavados a SSC 0.2X, SDS al 1% a 65 °C. Las condiciones de rigurosidad muy alta (4) son las condiciones preferidas y las que deben usarse a menos que se especifique de otra manera.
Se entiende que las moléculas de la presente invención pueden tener sustituciones de aminoácidos conservativas o no esenciales adicionales, que no tienen un efecto sustancial sobre sus funciones.
El término "aminoácido" pretende abarcar todas las moléculas, ya sean naturales o sintéticas, que incluyen tanto una funcionalidad amino como una funcionalidad ácida y que pueden incluirse en un polímero de aminoácidos de origen natural. Los aminoácidos de ejemplo incluyen aminoácidos de origen natural; análogos, derivados y congéneres de los mismos; análogos de aminoácidos que tienen cadenas laterales variantes; y todos los estereoisómeros de cualquiera de los anteriores. Como se usa en el presente documento, el término "aminoácido" incluye los isómeros ópticos D o L y los peptidomiméticos.
Una "sustitución conservadora de aminoácidos" es aquella en la que el residuo de aminoácido se reemplaza con un residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral similar. Las familias de residuos de aminoácidos que tienen cadenas laterales similares se han definido en la técnica. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas laterales ácidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico), cadenas laterales polares sin carga (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadenas laterales no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptófano), cadenas laterales beta-ramificadas (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina).
Los términos "polipéptido", "péptido" y "proteína" (si es de cadena sencilla) se usan indistintamente en el presente documento para referirse a polímeros de aminoácidos de cualquier longitud. El polímero puede ser lineal o ramificado, puede comprender aminoácidos modificados y puede ser interrumpido por no aminoácidos. Los términos también abarcan un polímero de aminoácidos que ha sido modificado; por ejemplo, formación de enlaces disulfuro, glicosilación, lipidación, acetilación, fosforilación o cualquier otra manipulación, tal como la conjugación con un componente de marcado. El polipéptido puede aislarse de fuentes naturales, puede producirse mediante técnicas recombinantes a partir de un huésped eucariota o procariota, o puede ser un producto de procedimientos sintéticos.
Los términos "ácido nucleico", "secuencia de ácidos nucleicos", "secuencia de nucleótidos" o "secuencia de polinucleótidos" y "polinucleótidos" se usan indistintamente. Se refieren a una forma polimérica de nucleótidos de cualquier longitud, ya sea desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos, o análogos de los mismos. El polinucleótido puede ser monocatenario o bicatenario, y si es monocatenario puede ser la cadena codificante o la cadena no codificante (antisentido). Un polinucleótido puede comprender nucleótidos modificados, tales como nucleótidos metilados y análogos de nucleótidos. La secuencia de nucleótidos puede ser interrumpida por componentes no nucleótidos. Un polinucleótido puede modificarse adicionalmente después de la polimerización, tal como mediante conjugación con un componente marcador. El ácido nucleico puede ser un polinucleótido recombinante, o un polinucleótido de origen genómico, ADNc, semisintético o sintético que no se produce en la naturaleza o está unido a otro polinucleótido en una disposición no natural.
El término "aislado", como se usa en el presente documento, se refiere al material que se elimina de su entorno original o nativo (por ejemplo, el entorno natural si es de origen natural). Por ejemplo, un polinucleótido o polipéptido de origen natural presente en un animal vivo no está aislado, pero el mismo polinucleótido o polipéptido, separado por intervención humana de algunos o todos los materiales coexistentes en el sistema natural, está aislado. Tales polinucleótidos podrían ser parte de un vector y/o tales polinucleótidos o polipéptidos podrían ser parte de una composición, y aún estar aislados porque dicho vector o composición no es parte del entorno en el que se encuentra en la naturaleza.
Diversos aspectos de la divulgación se describen con más detalle a continuación. Se establecen definiciones adicionales en toda la especificación.
Moléculas de anticuerpos
En una realización, la molécula de anticuerpo se une a un mamífero, por ejemplo, humano, LAG-3. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo se une específicamente a un epítopo, por ejemplo, un epítopo lineal o conformacional (por ejemplo, un epítopo como se describe aquí) en LAG-3. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se une a uno o más dominios extracelulares similares a Ig de LAG-3, por ejemplo, el primer, segundo, tercer o cuarto dominio extracelular similar a Ig de LAG-3.
Como se usa en el presente documento, el término "molécula de anticuerpo" se refiere a una proteína, por ejemplo, una cadena de inmunoglobina o fragmento de la misma, que comprende al menos una secuencia de dominio variable de inmunoglobulina. El término "molécula de anticuerpo" incluye, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal (que incluye un anticuerpo de longitud completa que tiene una región Fc de inmunoglobulina). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un anticuerpo de longitud completa, o una cadena de inmunoglobina de longitud completa. En una realización, una molécula de anticuerpo comprende una unión a antígeno o fragmento funcional de un anticuerpo de longitud completa, o una cadena de inmunoglobulina de longitud completa.
En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica y se une a un único epítopo. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífico que tiene una pluralidad de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina, cada una de las cuales se une al mismo epítopo.
En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, comprende una pluralidad de secuencias de dominios variables de inmunoglobulina, en donde una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, el primer y el segundo epítopos están en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, el primer y el segundo epítopos se superponen. En una realización, el primer y el segundo epítopos no se superponen. En una realización, el primer y el segundo epítopos están en antígenos diferentes, por ejemplo, las diferentes proteínas (o diferentes subunidades de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico comprende un tercer, cuarto o quinto dominio variable de inmunoglobulina. En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico, una molécula de anticuerpo triespecífico o una molécula de anticuerpo tetraspecífico,
En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico. Un anticuerpo biespecífico tiene especificidad para no más de dos antígenos. Una molécula de anticuerpo biespecífico se caracteriza por una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, el primer y el segundo epítopos están en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, el primer y el segundo epítopos se superponen. En una realización, el primer y el segundo epítopos no se superponen. En una realización, el primer y el segundo epítopos están en antígenos diferentes, por ejemplo, las diferentes proteínas (o diferentes subunidades de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende una secuencia de dominio variable de cadena pesada y una secuencia de dominio variable de cadena ligera que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una secuencia de dominio variable de cadena pesada y una secuencia de dominio variable de cadena ligera que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende un medio anticuerpo que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y un medio anticuerpo que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende un medio anticuerpo, o fragmento del mismo, que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y un medio anticuerpo, o fragmento del mismo, que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende un scFv, o fragmento del mismo, tiene especificidad de unión para un primer epítopo y un scFv, o fragmento del mismo, tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, el primer epítopo está ubicado en LAG-3 y el segundo epítopo está ubicado en un PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD -L2.
En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un diacuerpo y una molécula de cadena sencilla, así como un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo (por ejemplo, Fab, F(ab')2 y Fv). Por ejemplo, una molécula de anticuerpo puede incluir una secuencia de dominio variable de cadena pesada (H) (abreviada aquí como VH) y una secuencia de dominio variable de cadena ligera (L) (abreviada aquí como VL). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende o consiste en una cadena pesada y una cadena ligera (denominada en este documento medio anticuerpo). En otro ejemplo, una molécula de anticuerpo incluye dos secuencias de dominio variable de cadena pesada (H) y dos secuencias de dominio variable de cadena ligera (L), formando así dos sitios de unión a antígeno, tales como Fab, Fab', F(ab')2 , Fc, Fd, Fd', Fv, anticuerpos de cadena única (scFv por ejemplo), anticuerpos de dominio variable único, diacuerpos (Dab) (bivalentes y biespecíficos) y anticuerpos quiméricos (por ejemplo, humanizados), que pueden producirse mediante la modificación de anticuerpos completos o los sintetizados de novo utilizando tecnologías de ADN recombinante. Estos fragmentos de anticuerpos funcionales conservan la capacidad de unirse selectivamente con su respectivo antígeno o receptor. Los anticuerpos y los fragmentos de anticuerpos pueden ser de cualquier clase de anticuerpos, incluidos, pero no limitados a, IgG, IgA, IgM, IgD e IgE, y de cualquier subclase (por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) de anticuerpos. La preparación de moléculas de anticuerpos puede ser monoclonal o policlonal. Una molécula de anticuerpo también puede ser un anticuerpo humano, humanizado, injertado con CDR o generado in vitro. El anticuerpo puede tener una región constante de cadena pesada seleccionada, por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 o IgG4. El anticuerpo también puede tener una cadena ligera seleccionada, por ejemplo, kappa o lambda. El término "inmunoglobulina" (Ig) se usa indistintamente con el término "anticuerpo" en el presente documento.
Ejemplos de fragmentos de unión a antígeno de una molécula de anticuerpo incluyen: (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL y CH1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente disulfuro en la región bisagra; (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento de diacuerpo (dAb), que consiste en un dominio VH; (vi) un dominio variable camélido o camelizado; (vii) una cadena simple Fv (scFv), véase, por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242: 423­ 426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. Estados Unidos 85: 5879-5883); (viii) un anticuerpo de dominio único. Estos fragmentos de anticuerpos se obtienen usando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica, y los fragmentos se seleccionan para su utilidad de la misma manera que los anticuerpos intactos.
El término "anticuerpo" incluye moléculas intactas así como fragmentos funcionales de los mismos. Se pueden alterar regiones constantes de los anticuerpos, por ejemplo, mutar, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glucosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, función de la célula efectora, o función del complemento).
Los anticuerpos de la presente invención también pueden ser anticuerpos de dominio único. Los anticuerpos de dominio único pueden incluir anticuerpos cuyas regiones determinantes complementarias son parte de un polipéptido de dominio único. Ejemplos incluyen, pero no se limitan a, anticuerpos de cadena pesada, anticuerpos naturalmente desprovistos de cadenas ligeras, anticuerpos de dominio único derivados de anticuerpos convencionales de 4 cadenas, anticuerpos modificados por ingeniería genética y andamios de dominio único distintos de los derivados de anticuerpos. Los anticuerpos de dominio único pueden ser cualquiera de la técnica, o cualquier anticuerpo de dominio único futuro. Los anticuerpos de dominio único pueden derivarse de cualquier especie, incluidos, pero no limitados a, ratones, humanos, camellos, llamas, peces, tiburones, cabras, conejos y bovinos. De Acuerdo con otro aspecto de la divulgación, un anticuerpo de dominio único es un anticuerpo de dominio único de origen natural conocido como anticuerpo de cadena pesada desprovisto de cadenas ligeras. Tales anticuerpos de dominio único se describen en el documento WO 94/04678, por ejemplo. Por razones de claridad, este dominio variable derivado de un anticuerpo de cadena pesada naturalmente desprovisto de cadena ligera se conoce aquí como VHH o nanocuerpo para distinguirlo del VH convencional de inmunoglobulinas de cuatro cadenas. Tal molécula de VHH puede derivarse de anticuerpos generados en especies de Camelidae, por ejemplo, en camello, llama, dromedario, alpaca y guanaco. Otras especies además de Camelidae pueden producir anticuerpos de cadena pesada naturalmente desprovistos de cadena ligera; tales VHH están dentro del alcance de la divulgación.
Las regiones VH y VL pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas "regiones determinantes de complementariedad" (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas "regiones marco" (FR o FW). La extensión de la región marco y las CDRs se ha definido con precisión por un número de métodos (véase, Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; y la definición de AbM utilizada por el software de modelado de anticuerpos AbM de Oxford Molecular. Véase, en general, por ejemplo, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. En: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).
Los términos "región determinante de complementariedad" y "CDR", como se usan en el presente documento, se refieren a las secuencias de aminoácidos dentro de regiones variables de anticuerpo que confieren especificidad de antígeno y afinidad de unión. En general, hay tres CDRs en cada región variable de la cadena pesada (HCDR1, HCDR2, Hc DR3) y tres CDRs en cada región variable de la cadena ligera (LCDR1, LCDR2, LCDR3).
Los límites precisos de la secuencia de aminoácidos de una CDR dada se pueden determinar utilizando cualquiera de un número de esquemas bien conocidos, incluidos los descritos por Kabat "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD ("Kabat" numbering scheme), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (esquema de numeración "Chothia"). Como se usa en el presente documento, las CDRs definidas de acuerdo con el esquema de números "Chothia" también se denominan a veces "bucles hipervariables".
Por ejemplo, bajo Kabat, los residuos de aminoácidos CDR en el dominio variable de la cadena pesada (VH) están numerados 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos Cd R en el dominio variable de la cadena ligera (VL) están numerados 24-34 (LCd R1), 50-56 (LCDR2) y 89-97 (LCDR3). Bajo Chothia, los aminoácidos CDR en el VH están numerados 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos en VL están numerados 26-32 (LCDR1), 50-52 (lCd R2) y 91-96 (lCd R3). Al combinar las definiciones de CDR de Kabat y Chothia, las CDRs consisten en residuos de aminoácidos 26-35 (h Cd R1), 50-65 (HCDR2) y 95­ 102 (HCDR3) en VH humano y residuos de aminoácidos 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) y 89-97 (LCDR3) en VL humano.
Generalmente, a menos que se indique específicamente, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 pueden incluir cualquier combinación de uno o más bucles hipervariables de Kabat CDR y/o Chothia, por ejemplo, descritos en la Tabla 1. En una realización, las siguientes definiciones se usan para las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3 descritas en la Tabla 1: HCDR1 de acuerdo con las definiciones combinadas de CDR tanto de Kabat como de Chothia, y HCCDRs 2-3 y LCCDRs 1-3 de acuerdo con la definición de CDR de Kabat. Bajo todas las definiciones, cada VH y VL típicamente incluye tres CDRs y cuatro FRs, dispuestas desde el extremo amino al terminal carboxilo en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Como se usa en el presente documento, una "secuencia de dominio variable de inmunoglobulina" se refiere a una secuencia de aminoácidos que puede formar la estructura de un dominio variable de inmunoglobulina. Por ejemplo, la secuencia puede incluir toda o parte de la secuencia de aminoácidos de un dominio variable de origen natural. Por ejemplo, la secuencia puede incluir o no uno, dos o más aminoácidos N o C-terminales, o puede incluir otras alteraciones que sean compatibles con la formación de la estructura de la proteína.
El término "sitio de unión a antígeno" se refiere a la parte de una molécula de anticuerpo que comprende determinantes que forman una interfaz que se une al polipéptido LAG-3, o un epítopo del mismo. Con respecto a las proteínas (o miméticos de proteínas), el sitio de unión al antígeno típicamente incluye uno o más bucles (de al menos cuatro aminoácidos o imitadores de aminoácidos) que forman una interfaz que se une al polipéptido LAG-3. Típicamente, el sitio de unión a antígeno de una molécula de anticuerpo incluye al menos una o dos CDR y/o bucles hipervariables, o más típicamente al menos tres, cuatro, cinco o seis CDRs y/o bucles hipervariables.
Los términos "competencia" o "competencia cruzada" se usan indistintamente en el presente documento para referirse a la capacidad de una molécula de anticuerpo de interferir con la unión de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 proporcionada en este documento, a un objetivo, por ejemplo, lAG-3 humano. La interferencia con la unión puede ser directa o indirecta (por ejemplo, a través de una modulación alostérica de la molécula de anticuerpo o la diana). El grado en que una molécula de anticuerpo puede interferir con la unión de otra molécula de anticuerpo a la diana y, por lo tanto, si se puede decir que compite, puede determinarse usando un ensayo de unión de competencia, por ejemplo, un ensayo FACS, un ELISA o ensayo BIACORE. En algunas realizaciones, un ensayo de unión de competencia es un ensayo de competencia cuantitativa. En algunas realizaciones, se dice que una primera molécula de anticuerpo anti-LAG-3 compite por unirse a la diana con una segunda molécula de anticuerpo anti-LAG-3 cuando la unión de la primera molécula de anticuerpo a la diana se reduce en un 10% o más por ejemplo, 20% o más, 30% o más, 40% o más, 50% o más, 55% o más, 60% o más, 65% o más, 70% o más, 75% o más, 80% o más, 85% o más, 90% o más, 95% o más, 98% o más, 99% o más en un ensayo de unión de competencia (por ejemplo, un ensayo de competencia descrito aquí).
Como se usa en el presente documento, el término "epítopo" se refiere a las unidades estructurales de un antígeno (por ejemplo, LAG-3 humano) que interactúa específicamente con una molécula de anticuerpo. Tales unidades estructurales, a los que se hace referencia en el presente documento como determinantes epitópicos, típicamente comprenden o son parte de elementos tales como cadenas laterales de aminoácidos o cadenas laterales de azúcar. Un determinante epitópico puede definirse por métodos conocidos en la técnica o divulgados en el presente documento, por ejemplo, por cristalografía o por intercambio de hidrógeno-deuterio. Al menos una o algunas de las unidades estructurales en la molécula de anticuerpos, que interactúan específicamente con un determinante epitópico, se encuentran típicamente en una CDR. Típicamente, un epítopo tiene características estructurales tridimensionales específicas. Típicamente un epítopo tiene características de carga específicas. Algunos epítopos son epítopos lineales, mientras que otros son epítopos conformacionales.
Los términos "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal" tal como se usan en el presente documento se refieren a una preparación de moléculas de anticuerpo de composición molecular única. Una composición de anticuerpo monoclonal muestra una especificidad y afinidad de unión única para un epítopo particular. Un anticuerpo monoclonal puede fabricarse mediante tecnología de hibridoma o mediante métodos que no utilizan tecnología de hibridoma (por ejemplo, métodos recombinantes).
Una proteína "efectivamente humana" es una proteína que no evoca una respuesta de anticuerpos neutralizantes, por ejemplo, la respuesta del anticuerpo anti-murino humano (HAMA). HAMA puede ser problemático en un número de circunstancias, por ejemplo, si la molécula de anticuerpo se administra repetidamente, por ejemplo, en el tratamiento de una enfermedad crónica o recurrente. Una respuesta HAMA puede hacer que la administración repetida de anticuerpos sea potencialmente ineficaz debido a un aumento en la eliminación de anticuerpos del suero (véase, por ejemplo, Saleh et al., Cáncer Immunol. Immunother., 32: 180-190 (1990)) y también debido a reacciones alérgicas potenciales (véase, por ejemplo, LoBuglio et al., Hybridoma, 5: 5117-5123 (1986)).
La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo policlonal o monoclonal. En otras realizaciones, el anticuerpo se puede producir de forma recombinante, por ejemplo, producido por presentación en fagos o por métodos combinatorios.
La presentación de fagos y los métodos combinatorios para generar anticuerpos son conocidos en la técnica (como se describe en, por ejemplo, Ladner et al. Patente U.S. No. 5,223,409; Kang et al. Publicación Internacional No. WO 92/18619; Dower et al. Publicación Internacional No. WO 91/17271; Winter et al. Publicación Internacional WO 92/20791; Markland et al. Publicación Internacional No. WO 92/15679; Breitling et al. Publicación Internacional WO 93/01288; McCafferty et al. Publicación Internacional No. WO 92/01047; Garrard et al. Publicación Internacional No. WO 92/09690; Ladner et al. Publicación Internacional No. WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3:81-85; Huse et al. (1989) Science 246:1275-1281; Griffths et al. (1993) EMBOJ 12:725-734; Hawkins etal. (1992) J Mol Biol 226:889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352:624-628; Gram etal. (1992) PNAS 89:3576-3580; Garrad etal. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377; Hoogenboom etal. (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137; y Barbas et al. (1991) PNAS 88:7978-7982).
En una realización descrita, el anticuerpo es un anticuerpo completamente humano (por ejemplo, un anticuerpo fabricado en un ratón que ha sido genéticamente modificado para producir un anticuerpo a partir de una secuencia de inmunoglobulina humana), o un anticuerpo no humano, por ejemplo, un roedor (ratón o rata), cabra, primate (por ejemplo, mono), anticuerpo de camello. Preferiblemente, el anticuerpo no humano es un roedor (anticuerpo de ratón o rata). Los métodos para producir anticuerpos de roedores son conocidos en la técnica.
Los anticuerpos monoclonales humanos pueden generarse usando ratones transgénicos que llevan los genes de inmunoglobulina humana en lugar del sistema de ratón. Los esplenocitos de estos ratones transgénicos inmunizados con el antígeno de interés se usan para producir hibridomas que secretan mAb humanos con afinidades específicas para epítopos de una proteína humana (véase, por ejemplo, Wood et al. Solicitud internacional WO 91/00906, Kucherlapati et al. publicación PCT WO 91/10741; Lonberg et al. Solicitud internacional WO 92/03918; Kay et al. Solicitud internacional 92/03917; Lonberg, N. et al.1994 Nature 368: 856-859; Green, LL et al.1994 Nature Genet.7: 13-21; Morrison, SL et al.1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855; Bruggeman et al.1993 Year Immunol 7: 33­ 40; Tuaillon et al.1993 PNAS 90 : 3720-3724; Bruggeman et al.1991 Eur J Immunol 21: 1323-1326).
Un anticuerpo puede ser uno en el que la región variable, o una parte de la misma, por ejemplo, las CDRs, se generan en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o un ratón. Los anticuerpos quiméricos, injertados con CDR y humanizados están dentro de la divulgación; Los anticuerpos de la invención son humanizados. Los anticuerpos generados en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o un ratón, y luego modificados, por ejemplo, en el marco variable o región constante, para disminuir la antigenicidad en un humano están dentro de la invención.
Los anticuerpos quiméricos se pueden producir mediante técnicas de ADN recombinante conocidas en la técnica (véase Robinson et al., Publicación de Patente Internacional PCT/US86/02269; Akira, et al., Solicitud de Patente Europea 184,187; Taniguchi, M., Solicitud de Patente Europea 171,496; Morrison et al., Solicitud de patente europea 173,494; Neuberger et al., Solicitud internacional WO 86/01533; Cabilly et al. Patente U.S. No. 4,816,567; Cabilly et al., Solicitud de patente europea 125.023; Better et al. (1988 Science 240 : 1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84: 3 4 3 9 -3 4 4 3 ; Liu et al., 1987, J. Immunol.139: 3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84: 214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47: 999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314: 446-449; y Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80: 1553­ 1559).
Un anticuerpo humanizado o injertado con CDR tendrá al menos una o dos, pero generalmente las tres CDRs receptoras (de cadenas de immuoglobulina pesada o ligera) reemplazadas con una CDR donante. El anticuerpo puede reemplazarse con al menos una porción de una CDR no humana o solo algunas de las CDRs pueden reemplazarse con CDRs no humanas. Solo es necesario reemplazar el número de CDRs requeridas para la unión del anticuerpo humanizado a LAG-3. Preferiblemente, el donante será un anticuerpo de roedor, por ejemplo, un anticuerpo de rata o ratón, y el receptor será un marco humano o un marco de consenso humano. Típicamente, la inmunoglobulina que proporciona las CDRs se denomina "donante" y la inmunoglobulina que proporciona el marco se denomina "aceptor". En una realización, la inmunoglobulina donante es un no humano (por ejemplo, roedor). El marco aceptor es un marco de origen natural (por ejemplo, un humano) o un marco de consenso, o una secuencia de aproximadamente 85% o más, preferiblemente 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma.
Como se usa en el presente documento, el término "secuencia de consenso" se refiere a la secuencia formada a partir de los aminoácidos (o nucleótidos) de aparición más frecuente en una familia de secuencias relacionadas (véase, por ejemplo, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Alemania 1987). En una familia de proteínas, cada posición en la secuencia de consenso está ocupada por el aminoácido de aparición con mayor frecuencia en esa posición en la familia. Si dos aminoácidos de aparición con la misma frecuencia, cualquiera de los dos puede incluirse en la secuencia de consenso. Una “región marco” se refiere a la región marco en la secuencia consenso de inmunoglobulina.
Se puede humanizar un anticuerpo mediante métodos conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Morrison, SL, 1985, Science 229: 1202-1207, de Oi et al., 1986, BioTechniques 4: 214, y de Queen et al. US 5,585,089, US 5.693.761 y US 5.693.762).
Los anticuerpos humanizados o injertados con CDR pueden producirse mediante injerto con CDR o sustitución de CDR, en donde una, dos o todas las CDRs de una cadena de inmunoglobulina pueden reemplazarse. Véase, por ejemplo, la Patente U.S. 5,225,539; Jones et al. 1986 Nature 321: 552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239: 1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141: 4053-4060; Winter US 5,225,539. Winter describe un método de injerto con CDR que puede usarse para preparar los anticuerpos humanizados de la presente invención (solicitud de patente del Reino Unido GB 2188638a , presentada el 26 de marzo de 1987; Winter u S 5,225,539).
También dentro del alcance de la invención están los anticuerpos humanizados en los que se han sustituido, eliminado o agregado aminoácidos específicos. Los criterios para seleccionar aminoácidos del donante se describen en US 5,585,089, por ejemplo, las columnas 12-16 de US 5,585,089, por ejemplo, las columnas 12-16 de US 5,585,089. Otras técnicas para humanizar anticuerpos se describen en Padlan et al. EP 519596 A1, publicado el 23 de diciembre de 1992.
La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo de cadena sencilla. Se puede manipular por ingeniería genética un anticuerpo de cadena sencilla (scFV) (véase, por ejemplo, Colcher, D. et al. (1999) Ann NY Acad Sci 880: 263-80; y Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2: 245-52). El anticuerpo de cadena sencilla se puede dimerizar o multimerizar para generar anticuerpos multivalentes que tienen especificidades para diferentes epítopos de la misma proteína diana.
En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena pesada seleccionada, por ejemplo, de las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; particularmente, seleccionada de, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada (por ejemplo, humana) de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4. En otra realización, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena ligera seleccionada, por ejemplo, de las regiones constantes de cadena ligera (por ejemplo, humana) de kappa o lambda. La región constante se puede alterar, por ejemplo, mutar, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glucosilación del anticuerpo, número de residuos de cisteína, función de la célula efectora y/o función del complemento). En una realización, el anticuerpo tiene: función efectora; y puede arreglar el complemento. En otras realizaciones, el anticuerpo no lo hace; reclutar células efectoras; o arreglar el complemento. En otra realización, el anticuerpo tiene capacidad reducida o nula para unirse a un receptor Fc. Por ejemplo, es un isotipo o subtipo, fragmento u otro mutante, que no admite la unión a un receptor Fc, por ejemplo, tiene una región de unión al receptor Fc mutagenizada o eliminada.
Los métodos para alterar una región constante de anticuerpo son conocidos en la técnica. Los anticuerpos con función alterada, por ejemplo, afinidad alterada por un ligando efector, tal como FcR en una célula, o el componente C1 del complemento pueden producirse reemplazando al menos un residuo de aminoácidos en la porción constante del anticuerpo con un residuo diferente (véanse, por ejemplo, los documentos EP 388,151 A1, Patente U.S. No. 5,624,821 y Patente U.S. No. 5,648,260). Se podrían describir tipos similares de alteraciones que, si se aplican a la inmunoglobulina murina u otras especies, reducirían o eliminarían estas funciones.
Una molécula de anticuerpo puede derivarse o unirse a otra molécula funcional (por ejemplo, otro péptido o proteína). Como se usa en el presente documento, una molécula de anticuerpo "derivada" es una que ha sido modificada. Los métodos de derivación incluyen, pero no se limitan a, la adición de una uniad estructural fluorescente, un radionucleótido, una toxina, una enzima o un ligando de afinidad como la biotina. Por consiguiente, las moléculas de anticuerpo de la invención pretenden incluir formas derivadas y modificadas de otro modo de los anticuerpos descritos en el presente documento, incluidas las moléculas de inmunoadhesión. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo se puede unir funcionalmente (mediante acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente u otro) a una o más entidades moleculares, tal como otro anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo biespecífico o un diacuerpo), un agente detectable, un agente citotóxico, un agente farmacéutico y/o una proteína o péptido que puede mediar la asociación del anticuerpo o la porción de anticuerpo con otra molécula (tal como una región central de estreptavidina o una etiqueta de polihistidina).
Un tipo de molécula de anticuerpo derivado se produce mediante el entrecruzamiento de dos o más anticuerpos (del mismo tipo o de diferentes tipos, por ejemplo, para crear anticuerpos biespecíficos). Los entrecruzadores adecuados incluyen aquellos que son heterobifuncionales, que tienen dos grupos claramente reactivos separados por un espaciador apropiado (por ejemplo, éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida) u homobifuncional (por ejemplo, suberato de disuccinimidilo). Tales enlazadores están disponibles en Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois.
Agentes detectables útiles con los que una molécula de anticuerpo de la invención puede derivarse (o marcarse) para incluir compuestos fluorescentes, diversas enzimas, grupos protésicos, materiales luminiscentes, materiales bioluminiscentes, átomos metálicos emisores fluorescentes, por ejemplo, europio (Eu) y otros antánidos y materiales radiactivos (descritos a continuación). Ejemplos de agentes detectables fluorescentes incluyen fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, cloruro de 5dimetilamina-1-naftalenosulfonilo, ficoeritrina y similares. Un anticuerpo también puede derivarse con enzimas detectables, tales como fosfatasa alcalina, peroxidasa de rábano picante, p-galactosidasa, acetilcolinesterasa, glucosa oxidasa y similares. Cuando un anticuerpo se deriva con una enzima detectable, se detecta mediante la adición de reactivos adicionales que la enzima usa para producir un producto de reacción detectable. Por ejemplo, cuando está presente el agente detectable peroxidasa de rábano picante, la adición de peróxido de hidrógeno y diaminobencidina conduce a un producto de reacción coloreado, que es detectable. Una molécula de anticuerpo también puede derivarse con un grupo protésico (por ejemplo, estreptavidina/biotina y avidina/biotina). Por ejemplo, un anticuerpo puede derivarse con biotina y detectarse mediante medición indirecta de la unión de avidina o estreptavidina. Ejemplos de materiales fluorescentes adecuados incluyen umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, diclorotriazinilamina, fluoresceína, cloruro de dansilo o ficoeritrina; un ejemplo de un material luminiscente incluye luminol; y ejemplos de materiales bioluminiscentes incluyen luciferasa, luciferina y aequorina.
La molécula de anticuerpo marcada puede usarse, por ejemplo, de forma diagnóstica y/o experimental en un número de contextos, que incluyen (i) aislar un antígeno predeterminado mediante técnicas estándar, tales como cromatografía de afinidad o inmunoprecipitación; (ii) detectar un antígeno predeterminado (por ejemplo, en un lisado celular o sobrenadante celular) para evaluar la abundancia y el patrón de expresión de la proteína; (iii) para controlar los niveles de proteína en el tejido como parte de un procedimiento de prueba clínica, por ejemplo, para determinar la eficacia de un régimen de tratamiento dado.
Las moléculas de un anticuerpo pueden conjugarse con otra entidad molecular, típicamente un marcador o un agente o unidad estructural terapéutica (por ejemplo, citotóxico o citostático). Los isótopos radiactivos pueden usarse en aplicaciones de diagnóstico o terapéuticas. Los isótopos radiactivos que se pueden acoplar a los anticuerpos anti-PSMA incluyen, pero no se limitan a, emisores a, p o y, o emisores p y y. Tales isótopos radiactivos incluyen, pero no se limitan a, yodo (131I o 121I), itrio (90Y), lutecio (177Lu), actinio (225Ac), praseodimio, astatina (211At), renio (186Re), bismuto (212Bi o 213Bi), indio (111In), tecnecio (99mTc), fósforo (32P), rodio (188Rh), azufre (35S), carbono (14C), tritio (3h ), cromo (51Cr), cloro (36Cl), cobalto (17Co o 58Co), hierro (59Fe), selenio (75Se) o galio (67Ga). Los radioisótopos útiles como agentes terapéuticos incluyen itrio (90Y), lutecio (177Lu), actinio (225Ac), praseodimio, astatina (211At), renio (186Re), bismuto (212Bi o 213Bi) y rodio (188Rh). Los radioisótopos útiles como marcadores, por ejemplo, para uso en diagnósticos, incluyen yodo (131I o 125I), indio (111In), tecnecio (99mTc), fósforo (32P), carbono (14C) y tritio (3H), o uno o más de los isótopos terapéuticos listados anteriormente.
La divulgación proporciona moléculas de anticuerpos radiomarcados y métodos para marcarlos. En una realización, se describe un método para marcar una molécula de anticuerpo. El método incluye poner en contacto una molécula de anticuerpo, con un agente quelante, para producir de ese modo un anticuerpo conjugado. El anticuerpo conjugado se radiomarca con un radioisótopo, por ejemplo, 111 Indio, 90Itrio y 177Lutecio, para producir así una molécula de anticuerpo marcada.
Como se discutió anteriormente, la molécula de anticuerpo puede conjugarse con un agente terapéutico. Ya se han mencionado los radioisótopos terapéuticamente activos. Ejemplos de otros agentes terapéuticos incluyen taxol, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etopósido, tenoposido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxi antracina diona, mitoxantrona, mitramicina, actinomicina D, 1-deshidrotestosterona, glucocorticoides, procaína, tetracaína, lidocaína, propranolol, puromicina, maytansinoides, por ejemplo, maytansinol (véase la Patente U.S. No. 5,208,020), CC-1065 (véanse las Patentes de Estados Unidos No.
5,475,092, 5,585,499, 5,846, 545) y análogos u homólogos de los mismos. Los agentes terapéuticos incluyen, pero no se limitan a, antimetabolitos (por ejemplo, metotrexato, 6 -mercaptopurina, 6 -tioguanina, citarabina, 5-fluorouracilo decarbazina), agentes alquilantes (por ejemplo, mecloretamina, tioepa clorambucilo, CC-1065, melfalan, carmustina (BSNU) y lomustina (CCNU), ciclofosfamida, busulfano, dibromomannitol, estreptozotocina, mitomicina C y cisdiclorodiamina platino (II) (DDP) cisplatino), antraciclinas (por ejemplo, Daunorubicina (anteriormente daunomicina) y doxorrubicina), antibióticos (por ejemplo dactinomicina (anteriormente actinomicina), bleomicina, mitramicina y antramicina (AMC), y agentes antimitóticos (por ejemplo, vincristina, vinblastina, taxol y maytansinoides).
En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de unión a una diana que se une específicamente a un receptor LAG-3. Por ejemplo, la molécula de unión a la diana es una molécula de anticuerpo. El método incluye: proporcionar una proteína diana que comprende al menos una porción de proteína no humana, siendo la porción homóloga a (al menos 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98% idéntica a) una porción correspondiente de una proteína diana humana, pero que difiere en al menos un aminoácido (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve aminoácidos); obtener una molécula de anticuerpo que se une específicamente al antígeno; y evaluar la eficacia del agente de unión en la actividad de modulación de la proteína diana. El método puede incluir además administrar el agente de unión (por ejemplo, molécula de anticuerpo) o un derivado (por ejemplo, una molécula de anticuerpo humanizado) a un sujeto humano.
Esta invención proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la molécula de anticuerpo de la invención, los vectores y las células huésped de la misma. La molécula de ácido nucleico incluye pero no se limita a ARN, ADN genómico y Ad Nc.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica (por ejemplo, una biespecífica o una triespecífica). Los protocolos para generar moléculas de anticuerpos biespecíficos o heterodiméricos son conocidos en la técnica; incluyendo, pero no limitados a, por ejemplo, la metodología de "botón en ojal" descrita en, por ejemplo, el documento US 5731168; el emparejamiento de Fc con direccionamiento electrostático como se describe en, por ejemplo, WO 09/089004, WO 06/106905 y WO 2010/129304; formación de heterodímero de dominios manipulados genéticamente por intercambio de cadenas (SEED) como se describe en, por ejemplo, WO 07/110205; Intercambio de brazo Fab como se describe en, por ejemplo, WO 08/119353, W o 2011/131746 y WO 2013/060867; conjugado de anticuerpos dobles, por ejemplo, mediante entrecruzamiento de anticuerpos para generar una estructura biespecífica usando un reactivo heterobifuncional que tiene un grupo reactivo con amina y un grupo reactivo con sulfhidrilo como se describe en, por ejemplo, el documento US 4433059; determinantes de anticuerpos biespecíficos generados por la recombinación de medios anticuerpos (pares de cadenas pesadas o ligeras o Fabs) a partir de diferentes anticuerpos a través del ciclo de reducción y oxidación de enlaces disulfuro entre las dos cadenas pesadas, como se describe, por ejemplo, en el documento US 4444878; anticuerpos trifuncionales, por ejemplo, tres fragmentos Fab' entrecruzados a través de grupos reactivos con sulfhidrilo, como se describe en, por ejemplo, el documento US5273743; proteínas de unión biosintéticas, por ejemplo, un par de scFv entrecruzados a través de colas C-terminales preferiblemente a través de entrecruzamiento químico con disulfuro o reactivo con amina, como se describe en, por ejemplo, US5534254; anticuerpos bifuncionales, por ejemplo, fragmentos Fab con diferentes especificidades de unión dimerizadas a través de cremalleras de leucina (por ejemplo, c-fos y c-jun) que han reemplazado el dominio constante, como se describe en, por ejemplo, US5582996; receptores mono y oligovalentes biespecíficos y oligospecíficos, por ejemplo, regiones VH-CH1 de dos anticuerpos (dos fragmentos Fab) unidos a través de un espaciador de polipéptidos entre la región CH1 de un anticuerpo y la región VH del otro anticuerpo típicamente con cadenas ligeras asociadas, como se describe, por ejemplo, en el documento US5591828; conjugados biespecíficos de ADN-anticuerpo, por ejemplo, entrecruzamiento de anticuerpos o fragmentos Fab a través de un fragmento de ADN bicatenario, como se describe, por ejemplo, en el documento US5635602; proteínas de fusión biespecíficas, por ejemplo, un co0nstructo de expresión que contiene dos scFv con un enlazador peptídico helicoidal hidrófilo entre ellos y una región constante completa, como se describe, por ejemplo, en el documento US5637481; proteínas de unión multivalentes y multiespecíficas, por ejemplo, dímero de polipéptidos que tienen primer dominio con región de unión de la región variable de la cadena pesada de Ig, y segundo dominio con región de unión de la región variable de la cadena ligera de Ig, generalmente denominados diacuerpos (las estructuras de orden superior también se abarcan creando moléculas biespecíficas, triespecíficas o tetraspecíficas, como se describe en, por ejemplo, US5837242; constructos de minicuerpos con cadenas VL y VH enlazadas además conectadas con espaciadores peptídicos a una región de bisagra de anticuerpos y una región CH3, que se pueden dimerizar para formar moléculas biespecíficas/multivalentes, como se describe en, por ejemplo, US5837821; dominios VH y VL enlazados con un enlazador peptídico corto (por ejemplo, 5 o 10 aminoácidos) o ningún enlace en ninguna orientación, que puede formar dímeros para formar diacuerpos biespecíficos; trímeros y tetrámeros, como se describe en por ejemplo, US5844094; cadena de dominios VH (o dominios VL en miembros de la familia) conectados por enlaces peptídicos con grupos entrecruzables en el terminal C asociado además con dominios VL para formar una serie de FV (o scFvs), como se describe en, por ejemplo, US5864019; y los polipéptidos de unión de cadena sencilla con un dominio VH y VL unidos a través de un conector peptídico se combinan en estructuras multivalentes a través de entrecruzamiento no covalente o químico para formar, por ejemplo, estructuras homobivalentes, heterobivalentes, trivalentes y tetravalentes utilizando tanto formato de tipo scFV como diacuerpo, como se describe, por ejemplo, en el documento US5869620. Moléculas multiespecíficas y biespecíficas de ejemplo y métodos de fabricación de las mismas se encuentran, por ejemplo en US5910573, u S5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002004587A1, US2002076406A1, US2002103345A1, US2003207346A1, US2003211078A1, US2004219643A1, US2004220388A1, US2004242847A1, US2005003403A1, US2005004352A1, US2005069552A1, US2005079170A1, US2005100543A1, US2005136049A1, US2005136051A1, US2005163782A1, US2005266425A1, US2006083747A1, US2006120960A1, US2006204493A1, US2006263367A1, US2007004909A1, US2007087381A1, US2007128150A1, US2007141049A1, US2007154901A1, US2007274985A1, US2008050370A1, US2008069820A1, US2008152645A1, US2008171855A1, US2008241884A1, US2008254512A1, US2008260738A1, US2009130106A1, US2009148905A1, US2009155275A1, US2009162359A1, US2009162360A1, US2009175851A1, US2009175867A1, US2009232811A1, US2009234105A1, US2009263392A1, US2009274649A1, EP346087A2, WO0006605A2, WO02072635A2, WO04081051A1, WO06020258A2, WO2007044887A2, WO2007095338A2, WO2007137760A2, WO2008119353A1, WO2009021754A2, WO2009068630A1, WO9103493A1, WO9323537A1, WO9409131A1, WO9412625A2, WO9509917A1, WO9637621A2, WO9964460A1. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífica, biespecífica o multiespecífica) está enlazada covalentemente, por ejemplo, fusionada, a otro asociado, por ejemplo, una proteína, por ejemplo, una, dos o más citocinas, por ejemplo, como una molécula de fusión, por ejemplo, una proteína de fusión. En otras realizaciones, la molécula de fusión comprende una o más proteínas, por ejemplo, una, dos o más citocinas. En una realización, la citocina es una interleucina (IL) seleccionada de uno, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a un primer objetivo (por ejemplo, a LAG-3), una segunda especificidad de unión a un segundo objetivo (por ejemplo, PD-1, TIM-3 o PD-L1), y está opcionalmente unido a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12), por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción del mismo.
Una "proteína de fusión" y un "polipéptido de fusión" se refieren a un polipéptido que tiene al menos dos porciones enlazadas covalentemente, donde cada una de las porciones es un polipéptido que tiene una propiedad diferente. La propiedad puede ser una propiedad biológica, tal como actividad in vitro o in vivo. La propiedad también puede ser simple propiedad química o física, tal como la unión a una molécula diana, la catálisis de una reacción, etc. Las dos porciones se pueden enlazar directamente mediante un enlace peptídico único o mediante un enlazador peptídico, pero están en un marco de lectura unos con otros.
Esta invención proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica las moléculas de anticuerpo de la invención, los vectores y las células huésped de los mismos. La molécula de ácido nucleico incluye pero no se limita a ARN, ADN genómico y ADNc.
Moléculas de ejemplo de anticuerpo anti-LAG-3
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:
(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 seleccionada de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y
(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.
En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:
(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 seleccionada de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y
(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 15, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15.
En realizaciones de las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente, la VHCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 1. En otras realizaciones, la VHCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 4. En otras realizaciones más, la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286.
En realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco (FW) que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221, o una secuencia de aminoácidos al menos 90% idéntica a la misma, o que no tenga más de dos sustituciones, inserciones o deleciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221.
En aún otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una secuencia de aminoácidos VHFW1 de la SEQ ID NO: 187, 190, 194 o 196, una secuencia de aminoácidos VHFW2 de la SEQ ID NO: 198, 202, 206 o 208, y un VHFW3 secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 210, 212, 217 o 219, y, opcionalmente, que comprende además una secuencia de aminoácidos VHFW4 de la SEQ ID NO: 221.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271, o una secuencia de aminoácidos al menos 90% idéntica a la misma, o que no tenga más de dos sustituciones, inserciones o deleciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261,265, 267, 269 o 271.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una secuencia de aminoácidos VLFW1 de la SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236 o 2385, una secuencia de aminoácidos VLFW2 de la SEQ ID NO: 240, 244, 246 o 248 y una secuencia de aminoácidos VLFW3 de la SEQ ID NO: 252, 255, 259, 261,265, 267 o 269 y, opcionalmente, que comprende además una secuencia de aminoácidos VLFW4 de la SEQ ID NO: 271. En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 8 , 28, 64, 6 8 , 72, 76, 80, 100, 104, o 108.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8 , 28, 64, 6 8 , 72, 76, 80, 100, 104, o 108.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 8 8 , 92, o 96.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 8 8 , 92, o 96.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 18.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 6 6.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 6 8.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 78.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 100.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 102 o SEQ ID NO: 113.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 104.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 106.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 108.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 110.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 34.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 42.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 54.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 62.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8 6.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8 8.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 90.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 94.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 6 8 o SEQ ID NO: 108; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o SEQ ID NO: 8 ; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o SEQ ID NO: 8 ; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8 8.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 70 o SEQ ID NO: 110; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 78 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8 6.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 94.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se seleccionan de un Fab, F(ab')2 , Fv o un fragmento de Fv de cadena única (scFv).
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada seleccionada de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena ligera seleccionada de las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de la cadena pesada de IgG4 humana con una mutación en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU o la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de la cadena ligera kappa.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación de serina a prolina en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU o la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de la cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Asparagina a Alanina en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU o la posición 180 de la SEQ ID NO: 279 y una región constante de la cadena ligera kappa.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de la cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Aspartato a Alanina en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU o la posición 148, y la mutación Prolina a Alanina en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU o la posición 212 de la SEQ ID NO: 280 y una región constante de cadena ligera kappa.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Leucina a Alanina en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU o la posición 117 y mutación de Leucina a Alanina en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU o la posición 118 de la SEQ ID NO: 281 y una región constante de cadena ligera kappa.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de unirse al LAG-3 humano con una constante de disociación (Kd) de menos de aproximadamente 0.2 nM.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a LAG-3 humano con una Kd de menos de aproximadamente 0.2 nM, 0.15 nM, 0.1 nM, 0.05 nM, o 0.02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.05 nM a 0.15 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.11 nM, por ejemplo, medido por un método Biacore.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen al LAG-3 de cinomolgo con una Kd de menos de aproximadamente 0.2 nM, 0.15 nM, 0.1 nM, 0.05 nM o 0.02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.05 nM a 0.15 nM, por ejemplo, según lo medido por un método Biacore.
En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen tanto a LAG-3 humano como a LAG-3 de cinomolgo con Kd similar, por ejemplo, en el rango nM, por ejemplo, medido por un método Biacore. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a una proteína de fusión LAG-3-Ig humana con una Kd de menos de aproximadamente 0.5 nM, 0.2 nM, 0.1 nM, 0.05 nM, 0.025 nM, o 0.01 nM, por ejemplo, medido por ELISA
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células CHO que expresan LAG-3 humano (por ejemplo, células CHO transfectadas con LAG-3 humano) con una Kd de menos de aproximadamente 4 nM, 2.5 nM, 2 nM, 1.5 nM, 1 nM, 0.75 nM, 0.5 nM, 0.4 nM, 0.3 nM, 0.2 nM, 0.1 nM o 0.05 nM, por ejemplo, aproximadamente 2.3, 1.92 nM o aproximadamente 0.2 nM, por ejemplo, medido por análisis FACS.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células T humanas con una Kd de menos de aproximadamente 0.5 nM, 0.4 nM, 0.3 nM, 0.2 nM, 0.1 nM, or 0.05 nM, por ejemplo, about 0.26 nM, por ejemplo, medido por Análisis FACS.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células que expresan LAG-3 (por ejemplo, células 300.19 que expresan LAG-3 humano) con una Kd de menos de aproximadamente 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 2 nM, o 1 nM, por ejemplo, aproximadamente 13.6 nM, por ejemplo, medido por análisis FACS.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células que expresan LAG-3 de rhesus (por ejemplo, células transfectadas con LAG-3 de rhesus) con una Kd de menos de aproximadamente 15 nM, 10 nM, 9 nM, 8 nM, 6 nM, 5 nM, 2 nM o 1 nM, por ejemplo, aproximadamente 8.03 nM, por ejemplo, medido por análisis FACS.
En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no tienen reacción cruzada con el LAG-3 de ratón. En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente no son reactivos cruzados con LAG-3 de rata. En otras realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente son reactivos cruzados con LAG-3 de rhesus. En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente son reactivos cruzados con LAG-3 de rata. Por ejemplo, la reactividad cruzada se puede medir mediante un método Biacore o un ensayo de unión usando células que expresan LAG-3 (por ejemplo, células 300.19 que expresan LAG-3 humano).
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a un dominio extracelular similar a Ig de LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humano), por ejemplo, cualquiera de Dominio 1 (D1), Dominio 2 (D2), Dominio 3 (D3), o Dominio 4 (D4). En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente unen uno o más residuos de aminoácidos en D1. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no se unen al bucle extra de D1 o un fragmento del mismo (por ejemplo, medido por un método Biacore o un método FACS). En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente no se unen a D2. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen tanto a D1 como a D2. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente unen uno o más residuos de aminoácidos en D1 y/o D2 que se unen a una molécula de MHC de clase II. En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de reducir la unión de LAG-3 a una molécula de clase II de histocompatibilidad principal (MHC), o una célula que expresa una molécula de clase II de MHC. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente reducen (por ejemplo, bloquean) la unión de LAG-3-Ig a una molécula de MHC de clase II, por ejemplo, en células Raji o células Daudi, con una IC50 de menos de aproximadamente 10 nM, 8 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM o 0.5 nM, por ejemplo, entre aproximadamente 8 nM y aproximadamente 10 nM o entre aproximadamente 2 nM y aproximadamente 3 nM, por ejemplo, aproximadamente 5.5 nM o aproximadamente 2.3 nM.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de potenciar una respuesta de células T específica de antígeno.
En realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica o una molécula de anticuerpo biespecífica. En realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACa M-5), PD-L1 o PD- L2 En las realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, medio anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un medio anticuerpo.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas aumentan la expresión de IL-2 a partir de células activadas por enterotoxina B estafilocócica (SEB) (por ejemplo, a 25 pg/ml) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 2 a 3 veces, en comparación con la expresión de IL-2 cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido en un ensayo de activación de células T SEB o un ensayo ex vivo de sangre entera humana.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y a partir de células T estimuladas por anti-CD3 (por ejemplo, a 0.1 pg/ml) en al menos aproximadamente 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6 , 7 u 8 veces, por ejemplo, aproximadamente 0.9 a 5.1 veces, por ejemplo, aproximadamente 3 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido en un ensayo de actividad de IFN -y.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y a partir de células T activadas por SEB (por ejemplo, a 3 pg/ml) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1 .2 a 2 veces, por ejemplo, aproximadamente 1 .6 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido en un ensayo de actividad de IFN-y.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no aumentan la expresión de IL-2 o IFN-y sin la activación del receptor de células T (por ejemplo, en ausencia de SEB).
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y a partir de las células T activadas con un péptido c Mv en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1.1 a 1.7 veces, por ejemplo, aproximadamente 1.4 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido en un ensayo de actividad de IFN-Y. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la proliferación de células T CD8 + activadas con un péptido CMV en al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1.5 veces, en comparación con la proliferación de células T CD8 + cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido por el porcentaje de células T CD8 + que pasaron por al menos n (por ejemplo, n = 2 o 4) divisiones celulares.
En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una Cmáx entre aproximadamente 50 pg/ml y aproximadamente 400 pg/ml, entre aproximadamente 100 pg/ml y aproximadamente 350 pg/ml, entre aproximadamente 150 pg/ml y aproximadamente 300 pg/ml, o entre aproximadamente 200 pg/ml y aproximadamente 250 pg/ml, por ejemplo, aproximadamente 166 pg/ml, por ejemplo, según se mide en un animal.
En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen un T1/2 entre aproximadamente 50 horas y aproximadamente 400 horas, entre aproximadamente 100 horas y aproximadamente 350 horas, entre aproximadamente 150 horas y aproximadamente 300 horas, o entre aproximadamente 200 horas y aproximadamente 250 horas, por ejemplo, aproximadamente 231.9 horas, por ejemplo, según se mide en un animal.
En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a LAG-3 con una Kd más lenta que 5*10'4, 1*10'4, 5*10'5, o 1*10 ' 5 s-1, por ejemplo, aproximadamente 7*10 ' 5 s-1, por ejemplo, medido por un método Biacore. En algunas realizaciones, los anticuerpos antes mencionados se unen a lAG-3 con una Ka más rápida que 1 * 104, 5*104, 1 * 105, 5*105, o 1 * 10 6 M 'V 1, por ejemplo, aproximadamente 6.41*105 M 'V , por ejemplo, según se mide por un método Biacore.
En otro aspecto, la invención proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica cualquiera de las moléculas de anticuerpo de la invención, vectores y células huésped de las mismas.
En una realización, el ácido nucleico aislado codifica la región variable de la cadena pesada del anticuerpo o la región variable de la cadena ligera, o ambas, de cualquiera de las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente.
En una realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDRs de cadena pesada 1-3, en donde dicho ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos de la SEQ ID NO: 140-144, 151-155, 162-166, 173-177, 184-186, o 287.
En otra realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDRs de cadena ligera 1-3, en donde dicho ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos de la SEQ ID NO: 145-150, 156-161, 167-172 o 178-183.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en donde dicha secuencia de nucleótidos es al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NO: 9, 29, 65, 69, 73, 77, 81, 101, 105, 109, 112, 121, 124, 125, 132 o 133.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en el que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NO: 9, 29, 65, 69, 73, 77, 81, 101, 105, 109, 112, 121, 124, 125, 132 o 133.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NO: 19, 31, 67, 71, 75, 79, 83, 103, 107, 111, 114, 123, 126, 127, 135 o 136.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en donde dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NO: 19, 31,67, 71, 75, 79, 83, 103, 107, 111, 114, 123, 126, 127, 135 o 136.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en el que dicha secuencia de nucleótidos es al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NO: 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61, 85, 89, 93, 97, 115, 118, 128, 129 o 137.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en el que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NO: 33, 37, 41,45, 49, 53, 57, 61, 85, 89, 93, 97, 115, 118, 128, 129 o 137.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en donde dicha secuencia de nucleótidos es al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NO: 35, 39, 43, 47, 51, 55, 59, 63, 87, 91, 95, 99, 117, 120, 130, 131, 138 o 139.
En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en donde dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NO: 35, 39, 43, 47, 51, 55, 59, 63, 87, 91, 95, 99, 117, 120, 130, 131, 138 o 139.
En ciertas realizaciones, se proporcionan uno o más vectores de expresión y células huésped que comprenden los ácidos nucleicos mencionados anteriormente.
También se proporciona un método para producir una molécula de anticuerpo o fragmento de la misma, que comprende cultivar la célula huésped como se describe en este documento bajo condiciones adecuadas para la expresión génica.
Composiciones y kits farmacéuticos
En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticamente aceptables, que incluyen una molécula de anticuerpo de la invención, formulada junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Como se usa en el presente documento, "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, agentes isotónicos y retardadores de la absorción, y similares que son fisiológicamente compatibles. El portador puede ser adecuado para administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, rectal, espinal o epidérmica (por ejemplo, por inyección o infusión).
Las composiciones de esta invención pueden estar en una variedad de formas. Estas incluyen, por ejemplo, formas de dosificación líquidas, semisólidas y sólidas, tales como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables y por infusión), dispersiones o suspensiones, liposomas y supositorios. La forma preferida depende del modo de administración previsto y la aplicación terapéutica. Las composiciones preferidas típicas están en forma de soluciones inyectables o por infusión. El modo preferido de administración es parenteral (por ejemplo, intravenoso, subcutáneo, intraperitoneal, intramuscular). En una realización preferida, el anticuerpo se administra por infusión o inyección intravenosa. En otra realización preferida, el anticuerpo se administra por inyección intramuscular o subcutánea.
Las expresiones "administración parenteral" y "administrado parenteralmente", como se usa en el presente documento, significa modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, usualmente mediante inyección, e incluye, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal.
Las composiciones terapéuticas típicamente deberían ser estériles y estables bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición puede formularse como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración de anticuerpos. Las soluciones inyectables estériles se pueden preparar incorporando el compuesto activo (es decir, anticuerpo o porción de anticuerpo) en la cantidad requerida en un disolvente apropiado con uno o una combinación de ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización filtrada. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son el secado al vacío y el secado por congelación que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente adicional deseado de una solución previamente filtrada estéril del mismo. La fluidez adecuada de una solución se puede mantener, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como la lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede lograrse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.
Las moléculas de anticuerpos pueden administrarse mediante una variedad de métodos conocidos en la técnica, aunque para muchas aplicaciones terapéuticas, la ruta/modo de administración preferido es la inyección o infusión intravenosa. En una realización, la molécula de anticuerpo se administra por infusión intravenosa a una tasa de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, preferiblemente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente, de aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En otra realización, la molécula de anticuerpo se administra por infusión intravenosa a una tasa de menos de 10 mg/min; preferiblemente menos de o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, preferiblemente aproximadamente 5 a 50 mg/m2, aproximadamente 7 a 25 mg/m2 y más preferiblemente, aproximadamente 10 mg/m2. Como apreciará el experto en la técnica, la ruta y/o el modo de administración variarán dependiendo de los resultados deseados. En ciertas realizaciones, el compuesto activo puede prepararse con un vehículo que protegerá el compuesto contra la liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, que incluye implantes, parches transdérmicos y sistemas de administración microencapsulados. Se pueden usar polímeros biodegradables y biocompatibles, tales como acetato de etileno y vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de tales formulaciones están patentados o son generalmente conocidos por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1978.
En ciertas realizaciones, una molécula de anticuerpo puede administrarse por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un vehículo comestible asimilable. El compuesto (y otros ingredientes, si se desea) también pueden incluirse en una cápsula de gelatina de cubierta dura o blanda, comprimirse en tabletas o incorporarse directamente a la dieta del sujeto. Para la administración terapéutica oral, los compuestos pueden incorporarse con excipientes y usarse en forma de tabletas ingeribles, tabletas bucales, trocillos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares. Para administrar un compuesto de la invención por otro medio que no sea la administración parenteral, puede ser necesario recubrir el compuesto con, o coadministrar el compuesto con, un material para evitar su inactivación. Las composiciones terapéuticas también se pueden administrar con dispositivos médicos conocidos en la técnica.
Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, se puede administrar un solo bolo, se pueden administrar varias dosis divididas con el tiempo o la dosis se puede reducir o aumentar proporcionalmente según lo indiquen las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de unidad de dosificación para facilitar la administración y la uniformidad de la dosificación. La forma de unidad de dosificación como se usa en el presente documento se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para los sujetos que se van a tratar; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación para las formas de unidad de dosificación de la invención está dictada por y depende directamente de (a) las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico particular que se va a lograr, y (b) las limitaciones inherentes en la técnica de combinar tal compuesto activo para el tratamiento de la sensibilidad en individuos.
Un rango no limitativo de ejemplo para una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de una molécula de anticuerpo es 0.1-30 mg/kg, más preferiblemente 1-25 mg/kg. Una persona con experiencia en la técnica puede determinar las dosis y los regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra mediante inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, 1 a 10 mg/kg, 5 a 15 mg/kg, 10 a 20 mg/kg, 15 a 25 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas. La molécula de anticuerpo puede administrarse por infusión intravenosa a una tasa de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg./m2, preferiblemente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente, de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 En realizaciones, la tasa de infusión de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 alcanza un nivel de aproximadamente 3 mg/kg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra (por ejemplo, por vía intravenosa) a una dosis de aproximadamente 3 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola a una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 3 a 240 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80 o 240 mg, en combinación con un segundo agente o modalidad terapéutica, por ejemplo, un segundo agente o modalidad terapéutica descrita aquí. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.
La molécula de anticuerpo puede administrarse por infusión intravenosa a una tasa de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg./m2, preferiblemente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente, de aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En realizaciones, la tasa de infusión de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 alcanza un nivel de aproximadamente 3 mg/kg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo se administra por infusión intravenosa a una tasa de menos de 10 mg/min, por ejemplo, menor o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, por ejemplo, aproximadamente 5 a 50 mg/m2, aproximadamente 7 a 25 mg/m2, y más preferiblemente, aproximadamente 10 mg/m2. En algunas realizaciones, el anticuerpo se infunde durante un período de aproximadamente 30 minutos.
Cabe señalar que los valores de dosificación pueden variar con el tipo y la gravedad de la afección que se va a aliviar. Debe entenderse además que para cualquier sujeto en particular, los regímenes de dosificación específicos deben ajustarse con el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el criterio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los rangos de dosificación establecidos en este documento son de ejemplo solamente y no están destinados a limitar el alcance o la práctica de la composición reivindicada.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden incluir una "cantidad terapéuticamente efectiva" o una "cantidad profilácticamente efectiva" de un anticuerpo o porción de anticuerpo de la invención. Una "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad efectiva, a las dosificaciones y durante los períodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente efectiva del anticuerpo modificado o fragmento de anticuerpo puede variar de acuerdo con factores tales como el estado de la enfermedad, la edad, el sexo y el peso del individuo, y la capacidad del anticuerpo o la porción de anticuerpo para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente efectiva es también aquella en la que los efectos terapéuticamente beneficiosos compensan los efectos tóxicos o perjudiciales del anticuerpo modificado o fragmento de anticuerpo. Una "dosificación terapéuticamente efectiva" inhibe preferiblemente un parámetro medible, por ejemplo, la tasa de crecimiento tumoral en al menos aproximadamente 2 0 %, más preferiblemente en al menos aproximadamente 40%, incluso más preferiblemente en al menos aproximadamente 60%, y aún más preferiblemente en al menos alrededor del 80% en relación con sujetos no tratados. La capacidad de un compuesto para inhibir un parámetro medible, por ejemplo, cáncer, puede evaluarse en un sistema de modelo animal que predice la eficacia en tumores humanos. Alternativamente, esta propiedad de una composición puede evaluarse examinando la capacidad del compuesto para inhibir, tal inhibición in vitro mediante ensayos conocidos por el experto en la técnica.
Una "cantidad profilácticamente efectiva" se refiere a una cantidad efectiva, a dosificaciones y durante los períodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado profiláctico deseado. Típicamente, dado que se usa una dosis profiláctica en sujetos antes o en una etapa más temprana de la enfermedad, la cantidad profilácticamente efectiva será menor que la cantidad terapéuticamente efectiva.
También se divulga un kit que comprende una molécula de anticuerpo descrita aquí. El kit puede incluir uno o más elementos que incluyen: instrucciones de uso; otros reactivos, por ejemplo, un marcador, un agente terapéutico o un agente útil para quelar, o de otro modo acoplar, un anticuerpo a un marcador o agente terapéutico, o una composición radioprotectora; dispositivos u otros materiales para preparar el anticuerpo para administración; portadores farmacéuticamente aceptables; y dispositivos u otros materiales para la administración a un sujeto.
Usos de las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3
Las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3 descritas en el presente documento tienen diagnósticos in vitro e in vivo, así como utilidades terapéuticas y profilácticas. Por ejemplo, estas moléculas pueden administrarse a células en cultivo, in vitro o ex vivo, o a un sujeto, por ejemplo, un sujeto humano, por ejemplo, in vivo, para mejorar la inmunidad. En una realización, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 potencian una respuesta inmune en un sujeto, por ejemplo, mediante el bloqueo de LAG-3 (por ejemplo, mediante el bloqueo de la unión de LAG-3 a una molécula de MHC u otros ligandos).
Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmune en un sujeto que comprende administrar al sujeto la molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, de tal manera que se modifica la respuesta inmune en el sujeto. En una realización, la respuesta inmune es potenciada, estimulada o sobrerregulada. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 restaura, mejora o estimula una respuesta de células T específica del antígeno, por ejemplo, interleucina-2 (IL-2) o interferón-gamma (IFN-y), producción en una respuesta de células T específicas del antígeno, en el sujeto. En algunas realizaciones, la respuesta inmune es una respuesta antitumoral. Los métodos y composiciones descritos en este documento son adecuados para tratar pacientes humanos que tienen un trastorno que puede tratarse aumentando la respuesta inmune mediada por células T. Por ejemplo, las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3, solas o en combinación, se pueden administrar a un sujeto para tratar, prevenir y/o diagnosticar una variedad de trastornos, tales como cánceres (melanoma o cánceres hepáticos), o un trastorno infeccioso.
Como se usa en el presente documento, el término "sujeto" pretende incluir animales humanos y no humanos. En una realización, el sujeto es un sujeto humano, por ejemplo, un paciente humano que tiene un trastorno o afección caracterizada por un funcionamiento anormal de lAG-3. El término "animales no humanos" de la invención incluye mamíferos y no mamíferos, tales como primates no humanos. En una realización, el sujeto es un humano. En una realización, el sujeto es un paciente humano que necesita potenciación de una respuesta inmune. En una realización, el sujeto tiene, o está en riesgo de tener, un trastorno descrito aquí, por ejemplo, un cáncer o un trastorno infeccioso como se describe aquí. En ciertas realizaciones, el sujeto está o está en riesgo de estar inmunocomprometido. Por ejemplo, el sujeto está siendo sometido o ha sido sometido a un tratamiento quimioterapéutico y/o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está o está en riesgo de estar inmunocomprometido como resultado de una infección. Por ejemplo, los métodos y composiciones descritos en este documento pueden potenciar una serie de actividades inmunes. En una realización, el sujeto ha aumentado el número o la actividad de los linfocitos T infiltrantes de tumores (TlLs). En otra realización, el sujeto ha aumentado la expresión o actividad de interferón-gamma (IFN-y). En aún otra realización, el sujeto ha disminuido la expresión o actividad de PD-L1. Por consiguiente, en ciertas realizaciones, cualquiera (por ejemplo, uno, dos, tres o todos) de TIL, IFN-y, CD8 o PD-L1, se puede usar como biomarcadores para las inmunoterapias anti-LAG-3 descritas en este documento.
Usos terapéuticos
Cáncer
El bloqueo de LAG-3 por anticuerpos puede mejorar la respuesta inmune a las células cancerosas en un sujeto. Similar a CD4, LAG-3 interactúa con moléculas de MHC de clase II pero, a diferencia de CD4, LAG-3 no interactúa con la proteína gp120 del virus de inmunodeficiencia humana (Baixeras et al. (1992) J. Exp. Med. 176: 327-337) Los estudios han demostrado la unión directa y específica de LAG-3 a MHC de clase II en la superficie celular (Huard et al. (1996) Eur. J. Immunol. 26: 1180-1186). La interacción LAG-3/MHC de clase II juega un papel en la subregulación de la estimulación dependiente de antígeno de los linfocitos T CD4+ y CD8 +. La adición de anticuerpos anti-LAG-3 puede dar como resultado una mayor proliferación de células T, una mayor expresión de antígenos de activación tal como CD25 y mayores concentraciones de citocinas tales como interferón-gamma e interleucina-4 (Huard et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24: 3216-3221). La región intracitoplasmática de LAG-3 también puede interactuar con LAP, una molécula de transducción de señales implicada en la subregulación de la vía de activación de CD3/TCR (Iouzalen et al. (2001) Eur. J. Immunol. 31: 2885-2891). Además, LAG-3 contribuye a la actividad supresora de las células T reguladoras CD4+ CD25+ (Treg). Las células Treg expresan LAG-3 tras la activación y los anticuerpos contra LAG-3 inhiben la supresión por las células Treg inducidas (Huang, C. et al. (2004) Immunity 21: 503-513). LAG-3 también puede regular negativamente la homeostasis de las células T mediante las células T reguladoras tanto en mecanismos independientes como dependientes de células T (Workman, C. J. y Vignali, D. A. (2005) J. Immunol. 174: 688-695). Por lo tanto, la inhibición de LAG-3 puede dar como resultado aumentar la respuesta inmune.
Por consiguiente, en un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar (por ejemplo, reducir o inhibir) un cáncer o tumor en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, por ejemplo, una cantidad terapéuticamente efectiva de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación, por ejemplo, con uno o más agentes o procedimientos. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede usarse sola para inhibir el crecimiento de tumores cancerosos. Alternativamente, un anticuerpo anti-LAG-3 puede usarse en combinación con uno o más de: un tratamiento estándar de atención (por ejemplo, para cánceres o trastornos infecciosos), otro anticuerpo, un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular, como se describe a continuación. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de una molécula coestimuladora) o un modulador de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor del punto regulador inmune), por ejemplo, como se describe en el presente documento.
En una realización, los métodos son adecuados para el tratamiento del cáncer in vivo. Para lograr una mejora de la inmunidad específica de antígeno, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar junto con un antígeno de interés. Cuando los anticuerpos contra LAG-3 se administran en combinación con uno o más agentes, la combinación se puede administrar en cualquier orden o simultáneamente.
Tipos de cáncer métodos teranósticos
En ciertas realizaciones de la divulgación, se proporciona un método para tratar a un sujeto, por ejemplo, reducir o mejorar, una afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer), por ejemplo, un tumor sólido, un cáncer hematológico, un tumor de tejidos blandos o una lesión metastásica, en un sujeto. El método incluye administrar al sujeto una o más moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 descritas en este documento, solas o en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas.
Como se usa en el presente documento, el término "cáncer" pretende incluir todos los tipos de crecimientos cancerosos o procesos oncogénicos, tejidos metastásicos o células, tejidos u órganos transformados de forma maligna, independientemente del tipo histopatológico o etapa de invasividad. Ejemplos de trastornos cancerosos incluyen, pero no se limitan a, tumores sólidos, cánceres hematológicos, tumores de tejidos blandos y lesiones metastásicas. Ejemplos de tumores sólidos incluyen tumores malignos, por ejemplo, sarcomas y carcinomas (incluidos adenocarcinomas y carcinomas de células escamosas), de los diversos sistemas de órganos, tales como los que afectan el hígado, pulmón, mama, linfoides, gastrointestinal (por ejemplo, colon), tracto genitourinario (por ejemplo, células renales, uroteliales), próstata y faringe. Los adenocarcinomas incluyen tumores malignos como la mayoría de los cánceres de colon, cáncer rectal, carcinoma de células renales, cáncer de hígado, carcinoma de células no pequeñas de pulmón, cáncer de intestino delgado y cáncer de esófago. Los carcinomas de células escamosas incluyen tumores malignos tales como los que afectan el pulmón, el esófago, la piel, la región de la cabeza y el cuello, la cavidad oral, el ano y el cuello uterino. Las lesiones metastásicas de los cánceres mencionados también pueden tratarse o prevenirse usando las composiciones de la invención.
Los cánceres de ejemplo cuyo crecimiento puede inhibirse usando las moléculas de anticuerpos descritas en el presente documento incluyen cánceres que típicamente responden a la inmunoterapia. Ejemplos no limitantes de cánceres preferidos para el tratamiento incluyen melanoma (por ejemplo, un melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, estadio II-IV) o un melanoma positivo para HLA-A2), cáncer de páncreas (por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado), tumores sólidos, cáncer de mama (por ejemplo, carcinoma de mama metastásico, un cáncer de mama que no expresa uno, dos o todos los receptores de estrógeno, receptor de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo) y carcinoma de células renales (por ejemplo, avanzado (por ejemplo, estadio IV) o carcinoma metastásico de células renales (MRCC). Además, las neoplasias malignas recurrentes o refractarias pueden tratarse usando las moléculas de anticuerpo descritas en este documento.
Eejemplos de otros cánceres que pueden tratarse incluyen, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas), cáncer de colon, cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas), cáncer de hueso, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello (por ejemplo, carcinoma de células escamosas HVP+), melanoma maligno cutáneo o intraocular, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer testicular, cáncer uterino, carcinoma de tubos de Falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma cervical, carcinoma de vagina, carcinoma de vulva, cáncer de células de Merkel, tumores sólidos de la infancia, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o uréter, carcinoma de pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (CNS), angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma pituitario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide o cáncer de células escamosas o una neoplasia hematológica, por ejemplo, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroides, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, leucemias crónicas o agudas, incluida la leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica recurrente o refractaria), tumores sólidos de la infancia, linfoma linfocítico, mieloma múltiple, síndromes mielodisplásicos, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o uréter, carcinoma de pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (CNS), linfoma primario del CNS, angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma pituitario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer de células escamosas, linfoma de células T, cánceres inducidos por el medio ambiente, incluidos los inducidos por asbestos (por ejemplo, mesotelioma) y combinaciones de dichos cánceres. El tratamiento de cánceres metastásicos, por ejemplo, cánceres metastásicos que expresan moléculas de MHC de clase II o LAG-3, se puede efectuar usando las moléculas de anticuerpo descritas en este documento.
Si bien no se desea limitarse a la teoría, en algunas realizaciones, es más probable que un paciente responda al tratamiento con anti-LAG-3, solo o en combinación con moléculas de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 (opcionalmente en combinación con uno o más agentes como se describe aquí) si el paciente tiene un cáncer que expresa altamente PD-L1, y/o el cáncer está infiltrado por células inmunes antitumorales, por ejemplo, TILs. Las células inmunes antitumorales pueden ser positivas para CD8 , PD-L1 y/o IFN-y; así, los niveles de CD8 , PD-L1 y/o IFN-y pueden servir como lectura para los niveles de TILs en el microambiente. En ciertas realizaciones, el microambiente del cáncer se denomina triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y.
Por consiguiente, en ciertos aspectos, esta solicitud proporciona métodos para determinar si una muestra tumoral es positiva para uno o más de PD-L1, CD8 e IFN-y, y si la muestra tumoral es positiva para uno o más, por ejemplo, dos, o los tres, de los marcadores, luego administrando al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una molécula de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más de otros inmunnomoduladores o agentes anticancerígenos.
En las siguientes indicaciones, una gran fracción de pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: cáncer de pulmón (escamoso); cáncer de pulmón (adenocarcinoma); cáncer de cabeza y cuello; cáncer de estómago; NSCLC; HNSCC; cánceres gástricos (por ejemplo, MSIhi y/o EBV+); CRC (por ejemplo, MSIhi); cáncer de nasofaringe (NPC); cáncer cervical (por ejemplo, escamoso); cáncer de tiroides, por ejemplo, tiroides papilar; melanoma; cáncer de mama TN; y DLBCL (linfoma difuso de células B grandes). En el cáncer de mama en general y en el cáncer de colon en general, una fracción moderada de pacientes es triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-Y. En las siguientes indicaciones, una pequeña fracción de pacientes es triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-y: ER+ cáncer de mama y cáncer de páncreas. Estos hallazgos se discuten más a fondo en el Ejemplo 4. Independientemente de si una fracción grande o pequeña de pacientes es triple positiva para estos marcadores, la detección de estos marcadores para los pacientes permite identificar una fracción de pacientes que tiene una probabilidad especialmente alta de responder favorablemente a la terapia con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo bloqueante PD-1), opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-Ll) y/o agentes anticancerígenos, por ejemplo, los listados en la Tabla 7 y divulgados en las publicaciones listadas en la Tabla 7.
En algunas realizaciones, la muestra de cáncer se clasifica como triple positiva para PDL1/CD8/IFN-Y. Esta medición se puede dividir aproximadamente en dos umbrales: si una célula individual se clasifica como positiva y si la muestra en su conjunto se clasifica como positiva. Primero, se puede medir, dentro de una célula individual, el nivel de PD-L1, CD8 y/o IFN-y. En algunas realizaciones, una célula que es positiva para uno o más de estos marcadores es una célula que tiene un nivel más alto del marcador en comparación con una célula de control o un valor de referencia. Por ejemplo, en algunas realizaciones, un nivel alto de PD-L1 en una célula dada es un nivel más alto que el nivel de PD-L1 en un tejido no canceroso correspondiente en el paciente. Como otro ejemplo, en algunas realizaciones, un alto nivel de CD8 o IFN-y en una célula dada es un nivel de esa proteína típicamente visto en un TIL. En segundo lugar, también se puede medir el porcentaje de células en la muestra que son positivas para PD-L1, CD8 y/o IFN-y. (No es necesario que una sola célula exprese los tres marcadores). En algunas realizaciones, una muestra triple positiva es aquella que tiene un alto porcentaje de células, por ejemplo, mayor que un valor de referencia o mayor que una muestra de control, que son positivas para estos marcadores.
En otras realizaciones, se pueden medir los niveles de PD-L1, CD8 y/o IFN-y en general en la muestra. En este caso, un alto nivel de CD8 o IFN-y en la muestra puede ser el nivel de esa proteína que se ve típicamente en un tumor infiltrado con TIL. De manera similar, un alto nivel de PD-L1 puede ser el nivel de esa proteína que se ve típicamente en una muestra tumoral, por ejemplo, un microambiente tumoral.
La identificación de subconjuntos de pacientes que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, como se muestra en el Ejemplo 4 de este documento, revela ciertas subpoblaciones de pacientes que probablemente responden especialmente a la terapia con anticuerpos PD-1. Por ejemplo, muchos pacientes con cáncer de mama IM-TN (inmunomodulador, triple negativo) son triple positivos para PDL1/CD8/IFN-y. El cáncer de mama IM-TN se describe en, por ejemplo, Brian D. Lehmann et al., "Identification of human triple-negative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies", J Clin Invest. Jul 1,20l1; 121(7): 2750-2767. Los cánceres de mama triple negativos son aquellos que no expresan el receptor de estrógeno (ER), el receptor de progesterona (PR) y Her2/neu. Estos cánceres son difíciles de tratar porque típicamente no responden a los agentes que se dirigen a ER, PR y Her2/neu. Los cánceres de mama triple negativos se pueden subdividir en diferentes clases, una de las cuales es inmunomoduladora. Como se describe en Lehmann et al., El cáncer de mama IM-TN está enriquecido por factores involucrados en los procesos de las células inmunes, por ejemplo, una o más de las señales de las células inmunes (por ejemplo, la ruta TH1/TH2, la ruta de las células NK, la ruta de señalización del receptor de las células B, la ruta De y señalización del receptor de células T), señalización de citocinas (por ejemplo, ruta de citoquinas, ruta de IL-12 y ruta IL-7), procesamiento y presentación de antígenos, señalización a través de rutas de transducción de señales inmunes de núcleo (por ejemplo, señalización de NFKB, TNF, y JAK/STAT), genes implicados en la función de las células T, la transcripción inmune, la respuesta al interferón (IFN) y el procesamiento de antígenos. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el cáncer tratado es un cáncer que es, o se determina que es, positivo para uno o más marcadores de cáncer de mama IM-TN, por ejemplo, un factor que promueve una o más señales de células inmunes (por ejemplo, ruta de TH1/TH2, ruta de células NK, ruta de señalización de receptor de células B, ruta de DC y señalización de receptor de células T), señalización de citocinas (por ejemplo, ruta de citocinas, ruta de IL-12 y ruta de IL-7), procesamiento y presentación de antígenos, señalización a través de ruta de transducción de señales inmunes de núcleo (por ejemplo, señalización de NFKB, TNF y JAK/STAT), genes implicados en la función de células T, transcripción inmune, respuesta a interferón (IFN) y procesamiento de antígeno.
Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer de colon que tienen un alto MSI (inestabilidad de microsatélites) también es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo TIM-3 o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer de colon con alto MSI, tratando así el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con alto MSI es una célula que tiene MSI a un nivel más alto que un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.
Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer gástrico que tienen un MSI alto, y/o que es EBV+, también es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo TIM-3 o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer gástrico con alto MSI y/o EBV+, tratando así el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con alto MSI es una célula que tiene MSI a un nivel más alto que un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.
Además, en el presente documento se divulgan métodos para analizar un cáncer para PD-L1, y luego tratar el cáncer con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1. Como se describe en el Ejemplo 5 aquí, una muestra de cáncer puede analizarse para determinar los niveles de proteína PD-L1 o los niveles de ARNm. Una muestra que tiene niveles de PD-L1 (proteína o ARNm) más altos que un valor de referencia o una célula de control (por ejemplo, una célula no cancerosa) puede clasificarse como PD-L1 positiva. Por consiguiente, en algunas realizaciones, se administra un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe aquí, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con uno o más agentes anticancerígenos) a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, un cáncer que es PD-L1 positivo. El cáncer puede ser, por ejemplo, adenocarcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (ACA), carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC o carcinoma hepatocelular (HCC).
En algunas realizaciones, los métodos de la presente invención implican el uso de un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en la presente, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo PD-1, para tratar un cáncer que es (o se identifica como tal) positivo para PD-L1. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer colorrectal (por ejemplo, MSI-alto), cáncer gástrico (por ejemplo, MSI-alto y/o EBV+), NPC, cáncer cervical, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama TN) y cáncer de ovario. En algunas realizaciones, el cáncer es NSCLC, melanoma o HNSCC. En algunas realizaciones, el anticuerpo LAG-3 se administra a una dosis de, por ejemplo, 1, 3, 10 o 2 0 mg/kg.
Con base en, por ejemplo, en el Ejemplo 4 de este documento, se encontró que ciertos cánceres gástricos que son triple positivos para PDL1/CD8/IFN-Y también son positivos para PIK3CA. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un cáncer puede tratarse con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD1 (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1) y un agente que inhibe PIK3CA. Agentes de ejemplo en esta categoría se describen en Stein RC (septiembre de 2001). "Prospects for phosphoinositide 3-kinase inhibition as a cancer treatment". Endocrine-related Cancer 8 (3): 237-48 and Marone R, Cmiljanovic V, Giese B, Wymann MP (January 2008). "Targeting phosphoinositide 3-kinase: moving towards therapy". Biochimica et Biophysica Acta 1784 (1): 159­ 85.
Con base en, por ejemplo, el Ejemplo 4 en el presente documento, CCR, por ejemplo, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un CCR alto en MSI puede tratarse con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se dirige a uno o ambos de RNF43 y BRAF. Por ejemplo, estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3 y un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más agentes terapéuticos que se dirigen a uno o más de RNF43 y BRAF. En realizaciones, el uno o más agentes terapéuticos incluyen un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o una publicación lista en la Tabla 7. Los inhibidores de PD-1, por ejemplo, anticuerpos, se describen en el presente documento. RNF43 puede inhibirse, por ejemplo, con un anticuerpo, molécula pequeña (por ejemplo, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28)), ARNsi o un ligando Rspo o derivado del mismo. Los inhibidores de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) se describen en el presente documento.
Con base en, por ejemplo, el Ejemplo 4 aquí, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de pulmón de células escamosas puede tratarse con una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con un agente terapéutico que se dirige a PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo PD-1, y opcionalmente con uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7, o un agente terapéutico dirigido a TIM-3, por ejemplo, un anticuerpo TIM-3.
Con base en, por ejemplo, el Ejemplo 4 aquí, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de tiroides puede tratarse con una molécula de anticuerpo lAG-3, solo o en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 , opcionalmente en combinación con un agente terapéutico dirigido a BRAF, y opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-Ll. Los inhibidores de BRAf (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) se describen en este documento, por ejemplo, en la Tabla 7 y las publicaciones listadas en la Tabla 7.
En algunas realizaciones, las terapias aquí se pueden usar para tratar a un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer asociado con una infección, por ejemplo, una infección viral o bacteriana. Los cánceres de ejemplo incluyen cáncer cervical, cáncer anal, cáncer de células escamosas de cabeza y cuello asociado a1HPV, papilomas esofágicos asociados al HPV, linfomas asociados al HHV6 , linfomas asociados al EBV (incluido el linfoma de Burkitt), linfoma MALT gástrico, otros linfomas MALT asociados a la infección, HCC, sarcoma de Kaposi. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer hematológico que incluye, pero sin limitación, una leucemia o un linfoma. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede usar para tratar cánceres y neoplasias malignas que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemias agudas que incluyen pero no se limitan a, por ejemplo, leucemia linfoide aguda de células B ("BALL"), Leucemia linfoide aguda de células T ("TALL"), leucemia linfoide aguda (ALL); una o más leucemias crónicas que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemia mielógena crónica (CML), leucemia linfocítica crónica (c Ll ); cánceres hematológicos adicionales o afecciones hematológicas que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemia prolinfocítica de células B, neoplasia de células dendríticas plasmocitoides blásticas, linfoma de Burkitt, linfoma difuso de células B grandes, linfoma folicular, leucemia de células pilosas, linfoma folicular de células pequeñas o células grandes, afecciones linfoproliferativas malignas, linfoma MALT, linfoma de células del manto, linfoma de la zona marginal, mieloma múltiple, mielodisplasia y síndrome mielodisplásico, linfoma no Hodgkin, linfoma plasmablástico, neoplasia de células dendríticas plasmacitoides, macroglobulinemia de Waldenstrom y "preleucemia", que son una colección diversa de afecciones hematológicas unidas por la producción ineficaz (o displasia) de células sanguíneas mieloides y similares.
En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma avanzado. En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra después del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).
Los métodos y composiciones divulgados en el presente documento son útiles para tratar lesiones metastásicas asociadas con los cánceres mencionados anteriormente.
Combinación de anticuerpos anti-LAG-3 con vacunas contra el cáncer.
Las moléculas de anticuerpos contra LAG-3 se pueden combinar con un agente inmunogénico, tal como células cancerosas, antígenos tumorales purificados (incluidas proteínas recombinantes, péptidos (por ejemplo, péptidos HLA-A2) y moléculas de carbohidratos), células y células transfectadas con genes que codifican citocinas inmunoestimulantes (He et al. (2004) J. Immunol. 173: 4919-28). Ejemplos no limitantes de vacunas tumorales que pueden usarse incluyen, por ejemplo, péptidos de antígenos de melanoma, tales como péptidos de gp 1 0 0 , antígenos MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, o células tumorales transfectadas para expresar la citocina GM-CSF, vacunas basadas en ADN, vacunas basadas en ARN y vacunas basadas en transducción viral. La vacuna contra el cáncer puede ser profiláctica o terapéutica.
El bloqueo de LAG-3 se puede combinar con un protocolo de vacunación. Se han ideado muchas estrategias experimentales para la vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D.
2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; véase también Restifo, N. and Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology. Fifth Edition). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna utilizando células tumorales autólogas o alogénicas. Se ha demostrado que estas vacunas celulares son más efectivas cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. Se ha demostrado que GM-CSF es un potente activador de la presentación de antígenos para la vacunación tumoral (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43).
El bloqueo de LAG-3 se puede usar junto con una colección de proteínas recombinantes y/o péptidos expresados en un tumor para generar una respuesta inmune a estas proteínas. Normalmente, el sistema inmunitario considera que estas proteínas son antígenos propios y, por lo tanto, son tolerantes con ellas. El antígeno tumoral también puede incluir la proteína telomerasa, que se requiere para la síntesis de los telómeros de los cromosomas y que se expresa en más del 85% de los cánceres humanos y solo en un número limitado de tejidos somáticos (Kim, N. et al. (1994) Science 266: 2011-2013). (Estos tejidos somáticos pueden protegerse del ataque inmune mediante diversos medios). El antígeno tumoral también puede ser "neo-antígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia de proteínas o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (por ejemplo, bcr-abl en el cromosoma Filadelfia), o idiotipo de tumores de células B.
Otras vacunas tumorales pueden incluir las proteínas de virus implicados en cánceres humanos tales como los virus del papiloma humano (HPV), los virus de la hepatitis (HBV y HCV), el virus de Epstein-Barr (EBV) y el virus del sarcoma de herpes de Kaposi (KHSV). Otra forma de antígeno específico del tumor que se puede usar junto con el bloqueo de LAG-3 son las proteínas de choque térmico (HSP) purificadas aisladas del mismo tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSPs son altamente eficientes en el suministro a las células presentadoras de antígenos para provocar la inmunidad tumoral (Suot, R and Srivastava, P (1995) Science 269: 1585-1588; Tamura, Y. et al. (1997) Science 278: 117-120).
Las células dendríticas (DC) son potentes células presentadoras de antígeno que se pueden usar para preparar respuestas específicas de antígeno. Las DC pueden producirse ex vivo y cargarse con diversos antígenos de proteínas y péptidos, así como extractos de células tumorales (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Las DC también pueden transducirse por medios genéticos para expresar también estos antígenos tumorales. Las DC también se han fusionado directamente a las células tumorales para fines de inmunización (Kugler, A. et al. (2000) Nature Medicine 6 : 332-336). Como método de vacunación, la inmunización de DC puede combinarse efectivamente con el bloqueo de LAG-3 para activar respuestas antitumorales más potentes.
En algunas realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor o activador de un modulador de punto regulador inmune (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un modulador TIM-3 (por ejemplo, un activador o inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4), o cualquier combinación de los mismos.
El bloqueo de LAG-3 también se puede combinar con un tratamiento estándar contra el cáncer. El bloqueo de LAG-3 puede combinarse efectivamente con regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, puede ser posible reducir la dosis de reactivo quimioterapéutico administrado (Mokyr, M. et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpos, quimioterapia, otra terapia anticancerígena (por ejemplo, terapias anticancerígenas dirigidas o fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias basadas en el sistema inmune (por ejemplo, citocinas), procedimientos quirúrgicos y/o de radiación. Ejemplos de agentes citotóxicos que se pueden administrar en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una ruta de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores de proteosomas y radiación (por ejemplo, irradiación local o de todo el cuerpo).
Alternativamente, o en combinación con las combinaciones mencionadas anteriormente, los métodos y composiciones descritos en el presente documento pueden administrarse en combinación con uno o más de: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.
Los ejemplos de combinaciones y usos no limitantes de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen los siguientes.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora o una molécula inhibidora, por ejemplo, un ligando o receptor coinhibidor.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, agonista, de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se selecciona de un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fusión soluble) de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o ligando CD83.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con una molécula coestimuladora, por ejemplo, un agonista asociado con una señal positiva que incluye un dominio coestimulador de CD28, CD27, ICOS y GITR.
Los agonistas GITR de ejemplo incluyen, por ejemplo, proteínas de fusión GITR y anticuerpos anti-GITR (por ejemplo, anticuerpos bivalentes anti-GITR) tales como, por ejemplo, una proteína de fusión GITR descrita en la Patente U.S. No.: 6,111,090, Patente Europea No.: 090505B1, EE. UU. Patente No.: 8,586,023, Publicaciones PCT Nos.: WO 2010/003118 y 2011/090754, o un anticuerpo anti-GITR descrito, por ejemplo, en la Patente U.S. No.: 7,025,962, European Patent No.: 1947183B1, Patente U.S. No.: 7,812,135, Patente U.S. No.: 8,388,967, Patente U.S. No.: 8,591,886, European Patent No.: EP 1866339, Publicación PCT No.: WO 2011/028683, Publicación PCT No.:WO 2013/039954, Publicación PCT No.: WO2005/007190, Publicación PCT No.: WO 2007/133822, Publicación PCT No.: WO2005/055808, Publicación PCT No.: WO 99/40196, Publicación PCT No.: WO 2001/03720, Publicación PCT No.: WO99/20758, Publicación PCT No.: WO2006/083289, Publicación PCT No.: WO 2005/115451, Patente U.S. No.: 7,618,632, y Publicación PCT No.: WO 2011/051726. Un ejemplo de anticuerpo anti-GITR es TRX518.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de una molécula de punto regulador inmune). Los expertos en la técnica entenderán que el término "puntos reguladores inmunes" significa un grupo de moléculas en la superficie celular de las células T CD4 y CD8. Estas moléculas pueden servir efectivamente como "frenos" para submodular o inhibir una respuesta inmune antitumoral. Las moléculas de punto regulador inmune incluyen, pero no se limitan a, la Muerte Programada 1 (PD-1), el antígeno 4 de linfocitos T citotóxicos (CTLA-4), B7H1, B7H4, OX-40, CD137, CD40 y TIM-3, que inhiben directamente las células inmunes, los agentes inmunoterapéuticos que pueden actuar como inhibidores del punto regulador inmune útiles en los métodos de la presente divulgación, incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM -3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), y/o TGFR beta. La inhibición de una molécula inhibidora se puede realizar mediante inhibición a nivel de ADN, ARN o proteína. En realizaciones, se puede usar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNsi o ARNsh), para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, que se une a la molécula inhibidora. Las moléculas de anticuerpo TIM-3 de ejemplo incluyen, pero sin limitación, MBG220, MBG227 y MBG219. Los inhibidores de TIGIT de ejemplo incluyen, pero sin limitación, 10A7 y 1F4 (Roche).
Ejemplos adicionales de moduladores incluyen, pero no se limitan a B7-H5, ENTPD1, ENTPD2, SIGGIR, B7-1, B7-2, VSIG4, TIM-1, CD200, RANKL y P2X7.
En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig o un TIM-3-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-L1, PD-L2 o CTLA4. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab. Los anticuerpos anti-CTLA4 de ejemplo incluyen Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible de Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206); e Ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, también conocido como MDX-010, CAS No.
477202-00-9). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra después del tratamiento, por ejemplo, después del tratamiento de un melanoma, con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib). En una realización, el anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, se administra a una dosis de aproximadamente 3 mg/kg. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación a una dosis de aproximadamente 2 0 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 20, 80, 240 u 800 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1. Las dosis de ejemplo que se pueden usar incluyen una dosis de molécula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 mg/kg, por ejemplo, 3 mg/kg. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación a una dosis de aproximadamente 2 0 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 0 , 80, 240 u 800 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.
Las moléculas inhibidoras inmunitarias, por ejemplo, PD-1 y LAG-3, pueden regular, por ejemplo, sinérgicamente, la función de las células T para promover el escape inmunitario tumoral. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En todavía otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-PD-L1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 y un anticuerpo anti-PD-L1. La combinación de anticuerpos citados en el presente documento puede administrarse por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados, o enlazarse, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífico o triespecífico. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, inhibidor de CEACAM-1 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5. En una realización, se administra un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-PD-1 o anti-LAG-3. En ciertas realizaciones, la combinación de anticuerpos que se menciona aquí se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en este documento (por ejemplo, un tumor sólido). La eficacia de las combinaciones mencionadas puede probarse en modelos animales conocidos en la técnica. Por ejemplo, los modelos animales para probar el efecto sinérgico de anti-LAG-3 y anti-PD-1 se describen, por ejemplo, en Woo et al. (2012) Cancer Res. 72 (4): 917-27). En una realización, el inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEAc Am -1 y/o CEACAM-5) es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. Sin desear estar limitado por la teoría, CEACAM-1 ha sido descrito como un ligando y asociado de TIM-3 (véase, por ejemplo, WO 2014/022332). Se ha detectado un efecto sinérgico in vivo de la combinación de anticuerpos anti-TIM-3 y anti-CEACAM-1 en modelos de cáncer de xenoinjerto (véase, por ejemplo, WO 2014/022332). Se cree que los tumores usan CEACAM-1 o CEACAM-5 para inhibir el sistema inmune, como se describe en, por ejemplo, Markel et al. J Immunol. 2 0 0 2 Mar 15;168(6):2803-10; Markel et al. J Immunol. 2006 Nov 1;177(9):6062-71; Markel et al. Immunology. 2009 Feb;126(2):186-200; Markel et al. Cancer Immunol Immunother. 2010 Feb;59(2):215-30; Ortenberg et al. Mol Cancer Ther. 2012 Jun;11(6): 1300-10; Stern et al. J Immunol. 2005 Jun 1;174(11):6692-701; Zheng et al. PLoS One. 2010 Sep 2;5(9). pii: e12529. Por lo tanto, los inhibidores de CEACAM pueden usarse con los otros inmunomoduladores descritos en este documento (por ejemplo, inhibidores anti-LAG-3, anti-PD-1 o anti-TIM-3) para mejorar una respuesta inmune contra un cáncer, por ejemplo, melanoma, cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC), cáncer de vejiga, colon u ovario u otros cánceres como se describe aquí. En una realización, el inhibidor de CEACAM es un anticuerpo anti-CEACAM-1 como se describe en WO 2010/125571, WO 2013/82366 y WO 2014/022332, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal 34B1, 26H7 y 5F4 o una forma recombinante del mismo., tal como se describe, por ejemplo, en los documentos US 2004/0047858, US 7,132,255 y WO 99/52552. En otras realizaciones, el anticuerpo anti-CEACAM es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5 como se describe, por ejemplo, en WO 2010/125571, WO 2013/054331 y US 2014/0271618.
En algunas realizaciones, las moléculas inhibidoras inmunes LAG-3 y PD-1 (por ejemplo, moléculas de anticuerpos) se administran en combinación entre sí, por ejemplo, para tratar el cáncer. En algunas realizaciones, el paciente es un paciente que progresó (por ejemplo, experimentó un crecimiento tumoral) durante la terapia con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo como se describe aquí) y/o un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo). En algunas realizaciones, se continúa la terapia con la molécula de anticuerpo PD-1 y/o la molécula de anticuerpo PDL1, y se agrega una molécula inhibidora inmunitaria LAG-3 (por ejemplo, anticuerpo) a la terapia. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una citocina, por ejemplo, interleucina-21, interleucina-2 o interleucina 15. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y citocina descrito aquí se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe aquí (por ejemplo, un tumor sólido o melanoma).
Los inmunomoduladores de ejemplo que se pueden usar en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, afutuzumab (disponible de Roche®); pegfilgrastim (Neulasta®); lenalidomida (CC-5013, Revlimid®); talidomida (Thalomid®), actimida (CC4047); y citocinas, por ejemplo, IL-21 o IRX-2 (mezcla de citocinas humanas que incluyen interleucina 1, interleucina 2 e interferón y, CAS 951209-71-5, disponible de IRX Therapeutics).
Otro ejemplo de tal combinación es un anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con decarbazina para el tratamiento del melanoma. Otro ejemplo de tal combinación es una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con interleucina-2 (IL-2) para el tratamiento del melanoma. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede combinar con IL-21. Sin estar limitado por la teoría, el uso combinado del bloqueo de LAG-3 y la quimioterapia es que se cree que la muerte celular se ve facilitada por la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de los compuestos quimioterapéuticos, lo que puede dar como resultado niveles aumentados de antígeno tumoral en la vía de presentación del antígeno. Otras terapias combinadas que pueden dar como resultado sinergia con el bloqueo de LAG-3 a través de la muerte celular son la radiación, la cirugía y la privación de hormonas. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el huésped. Los inhibidores de la angiogénesis también se pueden combinar con el bloqueo de LAG-3. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de las células tumorales que puede alimentar el antígeno tumoral en las rutas de presentación del antígeno del huésped.
Los anticuerpos de bloqueo LAG-3 también se pueden usar en combinación con anticuerpos biespecíficos. Los anticuerpos biespecíficos pueden usarse para direccionar dos antígenos separados. Por ejemplo, se han usado anticuerpos de antígeno de receptor anti-Fc/antitumoral (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a sitios de tumor. Este direccionamiento puede activar más efectivamente las respuestas específicas del tumor. El brazo de células T de estas respuestas aumentaría mediante el uso del bloqueo de LAG-3. Alternativamente, el antígeno puede administrarse directamente a las DC mediante el uso de anticuerpos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y a un marcador de superficie celular específico de células dendríticas.
Los tumores evaden la vigilancia inmune del huésped mediante una gran variedad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden ser superados por la inactivación de proteínas que son expresadas por los tumores y que son inmunosupresoras. Estos incluyen, entre otros, TGF-beta (Kehrl, J. et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard, M. y O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200), y ligando Fas (Hahne, M. et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Los anticuerpos para cada una de estas entidades pueden usarse en combinación con anti-LAG-3 para contrarrestar los efectos del agente inmunosupresor y favorecer las respuestas inmunes tumorales por parte del huésped.
Otros anticuerpos que pueden usarse para activar la respuesta inmune del huésped pueden usarse en combinación con anti-LAG-3. Estos incluyen moléculas en la superficie de las células dendríticas que activan la función DC y la presentación del antígeno. Los anticuerpos anti-CD40 pueden sustituir eficazmente la actividad auxiliar de las células T (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478) y pueden usarse junto con los anticuerpos LAG-3 (Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Anticuerpos activadores de moléculas coestimuladoras de células T tales como CTLA-4 (por ejemplo, Patente U.S. No. 5,811,097), OX-40 (Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero, I. et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997), e ICOS (Hutloff, A. et al. (1999) Nature 397: 262-266) también pueden proporcionar mayores niveles de activación de células T.
Los tratamientos de ejemplo adicionales que pueden usarse en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se describen en la sección titulada "Terapias de combinación" a continuación.
En todos los métodos anteriores, el bloqueo de LAG-3 se puede combinar con otras formas de inmunoterapia tales como el tratamiento con citocinas (por ejemplo, interferones, GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-21), o terapia de anticuerpos biespecíficos, que proporciona una presentación mejorada de antígenos tumorales (véase, por ejemplo, Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak (1994) Estructura 2: 1121-1123).
Los métodos para administrar las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 son conocidos en la técnica y se describen a continuación. Las dosificaciones adecuadas de las moléculas utilizadas dependerán de la edad y el peso del sujeto y del fármaco particular utilizado. Unaa persona con experiencia puede determinar las dosificaciones y los regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra por inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg./kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg, o aproximadamente 10 mg/kg, aproximadamente 20 mg/kg, aproximadamente 30 mg/kg, o aproximadamente 40 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 1-3 mg/kg, o aproximadamente 3-10 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 0.5-2, 2-4, 2-5, 5-15 o 5-20 mg/kg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas.
La molécula de anticuerpo puede usarse en formas no conjugadas o conjugarse con un segundo agente, por ejemplo, un fármaco citotóxico, radioisótopo o una proteína, por ejemplo, una toxina proteica o una proteína viral. Este método incluye: administrar la molécula de anticuerpo, sola o conjugada a un fármaco citotóxico, a un sujeto que requiera dicho tratamiento. La molécula de anticuerpo puede usarse para administrar una variedad de agentes terapéuticos, por ejemplo, una unidad estructural citotóxica, por ejemplo, un fármaco terapéutico, un radioisótopo, moléculas de origen vegetal, fúngico o bacteriano, o proteínas biológicas (por ejemplo, toxinas proteicas) o partículas. (por ejemplo, partículas virales recombinantes, por ejemplo, a través de una proteína de recubrimiento viral), o mezclas de las mismas.
Terapia de combinación adicional
La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede usar en combinación con otras terapias. Por ejemplo, la terapia de combinación puede incluir una composición de la presente invención formulada conjuntamente y/o administrada conjuntamente con uno o más agentes terapéuticos adicionales, por ejemplo, uno o más agentes anticancerígenos, agentes citotóxicos o citostáticos, tratamiento con hormonas, vacunas y/u otras inmunoterapias. En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo se administran en combinación con otras modalidades de tratamiento terapéutico, que incluyen cirugía, radiación, criocirugía y/o termoterapia. Tales terapias de combinación pueden utilizar ventajosamente dosificaciones más bajas de los agentes terapéuticos administrados, evitando así posibles toxicidades o complicaciones asociadas con las diversas monoterapias. En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con las terapias divulgadas en el presente documento a una dosis de aproximadamente 2 0 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 20, 80, 240 u 800 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra semanalmente, cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.
En una realización, las composiciones descritas en el presente documento se administran en combinación con otras moléculas de anticuerpo, por ejemplo, uno o más de: un anticuerpo descrito en el presente documento, un agente quimioterapéutico, un agente citotóxico, procedimientos quirúrgicos y/o de radiación. Ejemplos de agentes quimioterapéuticos y/o citotóxicos que se pueden administrar en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una ruta de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis y la radiación. Ejemplos de otras moléculas de anticuerpos que se pueden administrar en combinación incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de puntos de regulación (por ejemplo, PD-1, PD-L1); anticuerpos que estimulan una célula inmune (por ejemplo, anticuerpos agonistas GITR o CD137); anticuerpos anticancerígenos (por ejemplo, rituximab (Rituxan® o MabThera®), trastuzumab (Herceptin®), cetuximab (Erbitux®), entre otros.
Por "en combinación con", no se pretende implicar que la terapia o los agentes terapéuticos deben administrarse al mismo tiempo y/o formularse para la administración conjunta, aunque estos métodos de administración están dentro del alcance aquí descrito. Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se pueden administrar simultáneamente con, antes o después de una o más terapias o agentes terapéuticos adicionales. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el otro agente o protocolo terapéutico se pueden administrar en cualquier orden. En general, cada agente se administrará a una dosis y/o en un horario determinado para ese agente. Además, se apreciará que el agente terapéutico adicional utilizado en esta combinación puede administrarse junto con en una composición única o administrarse por separado en diferentes composiciones. En general, se espera que los agentes terapéuticos adicionales utilizados en combinación se utilicen en niveles que no excedan los niveles en los que se utilizan individualmente. En algunas realizaciones, los niveles utilizados en combinación serán más bajos que los utilizados individualmente. El efecto de los dos tratamientos puede ser parcialmente aditivo, totalmente aditivo o mayor que aditivo. El suministro puede ser tal que el efecto del primer tratamiento suministrado sea todavía detectable cuando se suministra el segundo.
Las moléculas de anticuerpos se pueden administrar en combinación con una o más de las modalidades existentes para el tratamiento del cáncer, que incluyen, pero no se limitan a: cirugía; radioterapia (por ejemplo, terapia de haz externo que involucra radioterapia conformada tridimensional donde se diseña el campo de radiación.
En ciertas realizaciones, las moléculas anti-LAG-3 descritas en el presente documento se administran en combinación con uno o más inhibidores de PD-1, PD-L1 y/o PD-L2 conocidos en la técnica. El antagonista puede ser un anticuerpo, un fragmento de unión a antígeno del mismo, una inmunoadhesina, una proteína de fusión u oligopéptido.
En algunas realizaciones, el otro anticuerpo anti-PD-1 se selecciona de MDX-1106, Merck 3475 o CT-011.
En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es una inmunoadhesina (por ejemplo, una inmunoadhesina que comprende una porción extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L2 fusionada a una región constante (por ejemplo, una región Fc de una secuencia de inmunoglobulina).
En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 es un anticuerpo anti-PD-Ll. En algunas realizaciones, el antagonista de unión anti-PD-Ll se selecciona de YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C o MDX-1105. MDX-1105, también conocido como BMS-936559, es un anticuerpo anti-PD-Ll descrito en WO2007/005874. El anticuerpo YW243.55.S70 (secuencias de región variable de cadena pesada y ligera mostradas en las SEQ ID Nos 20 y 21, respectivamente) es un anti-PD-Ll descrito en el documento WO 2010/077634.
En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab. Los nombres alternativos para Nivolumab incluyen MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538 o BMS-936558. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab (número de registro CAS: 946414-94-4). El nivolumab (también denominado BMS-936558 o MDX1106; Bristol-Myers Squibb) es un anticuerpo monoclonal IgG4 completamente humano que bloquea específicamente la PD-1. El nivolumab (clon 5C4) y otros anticuerpos monoclonales humanos que se unen específicamente a PD-1 se divulgan en los documentos US 8,008,449, EP2161336 y WO2006/121168.
Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) es un anticuerpo monoclonal IgGlk humanizado que se une a PD-1. Pidilizumab y otros anticuerpos monoclonales anti-PD-1 humanizados se describen en el documento WO2009/101611.
En otras realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab. Pembrolizumab (nombre comercial Keytruda anteriormente lambrolizumab-también conocido como MK-3475) divulgado, por ejemplo, en Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44.
Otros anticuerpos anti-PD-1 incluyen AMP 514 (Amplimmune), LZV178 y LZV181, entre otros, por ejemplo, anticuerpos anti-PD1 descritos en los documentos US 8,609,089, US 2010028330 y/o US 20120114649.
En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-Ll es MSB0010718C. MSB0010718C (también conocido como A09-246-2; Merck Serono) es un anticuerpo monoclonal que se une a PD-L1. El pembrolizumab y otros anticuerpos anti-PD-L1 humanizados se divulgan en el documento WO2013/079174.
MDPL3280A (Genentech/Roche) es un anticuerpo monoclonal IgG1 optimizado para Fc humano que se une a PD-L1. MDPL3280A y otros anticuerpos monoclonales humanos contra PD-L1 se divulgan en la Patente U.S. No.: 7,943,743 y la Publicación U.S. No.: 20120039906. Otros agentes de unión anti-PD-L1 incluyen YW243.55.S70 (se muestran regiones variables de cadena pesada y ligera en SEQ ID NOs 20 y 21 en WO2010/077634) y MDX-1105 (también denominado BMS-936559, y, por ejemplo, agentes de unión anti-PD-L1 descritos en WO2007/005874).
En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es AMP-224. AMP-224 (B7-DCIg; Amplimmune; por ejemplo, descrito en WO2010/027827 y WO2011/066342), es un receptor soluble de fusión a Fc de PD-L2 que bloquea la interacción entre PD1 y B7-H1.
En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es MEDI4736.
Terapias contra el cancer
Las combinaciones de ejemplo de moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 (solas o en combinación con otros agentes estimuladores) y el estándar de cuidado para el cáncer, incluyen al menos lo siguiente. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, se usa en combinación con un agente quimioterapéutico estándar para el tratamiento del cáncer que incluye, pero no se limita a, anastrozol (Arimidex®), bicalutamida (Casodex®), sulfato de bleomicina (Blenoxane®), busulfano (Myleran®), inyección de busulfano (Busulfex®), capecitabina (Xeloda®), N4-pentoxicarbonil-5-desoxi-5-fluorocitidina, carboplatino (Paraplatin®), carmustina (BiCNU®), clorambucilo (Leukeran®), cisplatino (Platinol®), cladribina (Leustatin®), ciclofosfamida (Cytoxan® o Neosar®), citarabina, arabinósido de citosina (Cytosar-U®), inyección de liposomas de citarabina (DepoCyt®), dacarbazina (DTIC-Dome®), dactinomicina (Actinomicina D, Cosmegan), clorhidrato de daunorrubicina (Cerubidine®), inyección de liposoma de citrato de daunorrubicina (DaunoXome®), dexametasona, docetaxel (Taxotere®), clorhidrato de doxorrubicina ((Adriamycin®, Rubex®), etopósido (Vepesid®), fosfato de fludarabina (Fludara®), 5-fluorouracilo (Adrucil®, Efudex®), flutamida (Eulexin®), tezacitibina, Gemcitabina (difluorodeoxicitidina), hidroxiurea (Hydrea®), Idarubicina (Idamycin®), ifosfamida (IFEX®), irinotecán (Camptosar®), L-asparaginasa (ELSPAR®), leucovorina cálcica, melfalan (Alkeran®), 6 -mercaptopurina (Purinethol®), metotrexato (Folex®), mitoxantrona (Novantrone®), mylotarg, paclitaxel (Taxol®), fénix (Yttrium90)/MX-DTPA), pentostatina, polifeprosan 20 con implante de carmustina (Gliadel®), citrato de tamoxifeno (Nolvadex®), tenipósido (Vumon®), 6 -tioguanina, tiotepa, tirapazamina (Tirazone®), clorhidrato de topotecán para inyección (Hycamptin®), vinblastina (Velban®), vincristina (Oncovin®), vinorelbina (Navelbine®), ibrutinib, idelalisib y brentuximab vedotina.
Ejemplos de agentes alquilantes incluyen, sin limitación, mostazas nitrogenadas, derivados de etilenimina, alquil sulfonatos, nitrosoureas y triazenos): mostaza uracilo (Aminouracil Mustard®, Chlorethaminacil®, Demethyldopan®, Desmethyldopan®, Haemanthamine®, Nordopan®, Uracil nitrogen mustard®, Uracillost®, Uracilmostaza®, Uramustin®, Uramustine®), chlormethine (Mustargen®), ciclofosfamida (Cytoxan®, Neosar®, Clafen®, Endoxan®, Procytox®, Revimmune™), ifosfamida (Mitoxana®), melfalan (Alkeran®), Clorambucilo (Leukeran®), pipobromano (Amedel®, Vercyte®), trietilenomelamina (Hemel®, Hexalen®, Hexastat®), trietilentiofosforamina, Temozolomida (Temodar®), tiotepa (Thioplex®), busulfan (Busyleran®), carmustina (BiCNU®), lomustina (CeeNU®), estreptozocina (Zanosar®) y Dacarbazina (DTIC-Dome®). Agentes alquilantes de ejemplo adicionales incluyen, sin limitación, Oxaliplatino (Eloxatin®); Temozolomida (Temodar® y Temodal®); Dactinomicina (también conocida como actinomicina-D, Cosmegen®); Melfalán (también conocido como L-PAM, L-sarcolisina y mostaza fenilalanina, Alkeran®); Altretamina (también conocida como hexametilmelamina (HMM), Hexalen®); Carmustina (BiCNU®); Bendamustina (Treanda®); Busulfan (Busulfex® y Myleran®); Carboplatino (Paraplatin®); Lomustina (también conocida como CCNU, CeeNU®); Cisplatino (también conocido como CDDP, Platinol® y Platinol®-AQ); Clorambucilo (Leukeran®); Ciclofosfamida (Cytoxan® y Neosar®); Dacarbazina (también conocida como DTIC, DIC e imidazol carboxamida, DTIC-Dome®); Altretamina (también conocida como hexametilmelamina (HMM), Hexalen®); Ifosfamida (Ifex®); Prednumustina; Procarbazina (Matulane®); Mecloretamina (también conocida como mostaza nitrogenada, clorhidrato de mustina y mecloroetamina, Mustargen®); Estreptozocina (Zanosar®); Tiotepa (también conocida como tiofosfoamida, TESPA y TSPA, Thioplex®); Ciclofosfamida (Endoxan®, Cytoxan®, Neosar®, Procytox®, Revimmune®); y HCl de bendamustina (Treanda®).
Las antraciclinas de ejemplo incluyen, por ejemplo, doxorrubicina (Adriamycin® y Rubex®); bleomicina (lenoxane®); daunorrubicina (clorhidrato de dauorrubicina, daunomicina y clorhidrato de rubidomicina, Cerubidine®); daunorrubicina liposomal (liposoma de citrato de daunorrubicina, DaunoXome®); mitoxantrona (DHAD, Novantrone®); epirubicina (Ellence™); idarubicina (Idamycin®, Idamycin PFS®); mitomicina C (Mutamycin®); geldanamicina; herbimicina; ravidomicina; y desacetilravidomicina.
Alcaloides de la vinca de ejemplo que se pueden usar en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3) incluyen, pero no se limitan a, tartrato de vinorelbina (Navelbine®), Vincristina (Oncovin®) y Vindesina (Eldisine®)); vinblastina (también conocida como sulfato de vinblastina, vincaleucoblastina y VLB, Alkaban-AQ® y Velban®); y vinorelbina (Navelbine®).
Inhibidores de proteosoma de ejemplo que pueden usarse en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), incluyen, pero no se limitan a, bortezomib (Velcade®); carfilzomib (PX-171-007, (S)-4-Metil-A/-((S)-1-(((S)-4-metil-1-((R)-2-metiloxiran-2-il)-1-oxopentan-2-il)amino)-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-2-((S)-2-(2-morfolinoacetamido)-4-fenilbutanamido)-pentanamida); marizomib (NPI-0052); citrato de ixazomib (MLN-9708); delanzomib (CEP-18770); y O-metil-N-[(2-metil-5-tiazolil)carbonil]-L-seril-O-metil-N-[(1S)-2-[(2R)-2-metil-2-oxiranilo]-2 -oxo-1 -(fenilmetil)etil]-L-serinamida (o Nx -0912).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, un inhibidor del receptor de tirosina quinasa (RTK)). Inhibidores de la tirosina quinasa de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, un inhibidor de la ruta del factor de crecimiento epidérmico (EGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR)), un inhibidor de la ruta del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR) (por ejemplo, un inhibidor de VEGFR-1, un inhibidor de VEGFR-2, un inhibidor de VEGFR-3), un inhibidor de la ruta del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR) (por ejemplo, un inhibidor PDGFR-p)), un inhibidor RAF-1, un inhibidor KIT y un inhibidor RET. En algunas realizaciones, el agente anticancerígeno usado en combinación con el inhibidor de hedgehog se selecciona del grupo que consiste en: axitinib (AG013736), bosutinib (SKI-606), cediranib (RECENTIN™, AZD2171), dasatinib (SPRYCEL®, BMS -354825), erlotinib (TARCEVA®), gefitinib (IRESSA®), imatinib (Gleevec®, CGP57148B, STI-571), lapatinib (TYKERB®, TYVERB®), lestaurtinib (CEP-701), neratinib (HKI-272), nilotinib (TASIGNA®), semaxanib (semaxinib, SU5416), sunitinib (SUTENT®, SU11248), toceranib (PALLADIA®), vandetanib (ZACTIMA®, ZD6474), vatalanib (PTK787, PTK/ZK), trastuzumab (H), bevacizumab (AVASTIN®), rituximab (RITUXAN®), cetuximab (ERBITUX®), panitumumab (VECTIBIX®), ranibizumab (Lucentis®), nilotinib (TASIGNA®), sorafenib (NEXAVAR®), alemtuzumab (CAMPATH®), gemtuzumab ozogamicina (MYLOTM-32, 20, 76, 6 6 , 6 6 , 6 6 , 6 6 , 6 6 , 6 6 , 32, AC220, lactato de dovitinib (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOK™), SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120 (VARGATEF®), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (AV-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647, XL228, AEE788, AG-490, AST-6 , BMS-599626, CUDC-101, PD153035, pelitinib (EKB-569), vandetanib (zactima), WZ3146, WZ4002, WZ8040, ABT-869 (linifanib), AEE788, AP24534 (ponatinib), AV- 951 (tivozanib), axitinib, BAY 73-4506 (regorafenib), alaninato de brivanib (BMS-582664), brivanib (BMS-540215), cediranib (AZD2171), CHIR-258 (dovitinib), CP 673451, CYC116, E7080, K¡875, masitinib (AB1010), MGCD-265, difosfato de motesanib (AMG-706), MP-470, OSI-930, clorhidrato de pazopanib, PD173074, tosilato de sorafenib (Bay 43-9006), SU 5402, TSU- 6 8 (SU6 6 6 8 ), vatalanib, XL880 (GSK1363089, EXEL-2880). Los inhibidores seleccionados de la tirosina quinasa se seleccionan de sunitinib, erlotinib, gefitinib o sorafenib.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-LI o anti-TIM-3,), se usa en combinación con un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), que incluye, pero no se limita a, Bevacizumab (Avastin®), axitinib (Inlyta®); Alaninato de brivanib (BMS-582664, (S)-((R)-1-(4-(4-Fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloxi)-5-metilpirrolo[2,1-t][1,2,4]triazin-6-iloxi)propan-2-il)2-aminopropanoato); Sorafenib (Nexavar®); Pazopanib (Votrient®); Malato de sunitinib (Sutent®); Cediranib (AZD2171, CAS 288383-20-1); Vargatef (BIBF1120, CAS 928326-83-4); Foretinib (GSK1363089); Telatinib (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); Apatinib (YN968D1, CAS 811803-05-1); Imatinib (Gleevec®); Ponatinib (AP24534, CAS 943319-70-8); Tivozanib (AV951, CAS 475108-18-0); Regorafenib (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); Diclorhidrato de vatalanib (PTK787, CAS 212141-51-0); Brivanib (BMS-540215, CAS 649735-46-6); Vandetanib (Caprelsa® o AZD6474); difosfato de Motesanib (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridinacarboxamida, divulgado en la publicación PCT No. WO 02/066470); Ácido diláctico de dovitinib (TKI258, CAS 852433-84-2); Linfanib (ABT869, CAS 796967-16-3); Cabozantinib (XL184, CAS 849217-68­ 1); Lestaurtinib (CAS 111358-88-4); N-[5-[[[5-(1,1-Dimetiletil)-2-oxazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidincarboxamida (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R,4R)-4-Amino-1-((4-((3-metoxifenil)amino)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-5-il)metil)piperidin-3-ol (BMS690514); W-(3,4-Dichloro-2-fluorofenil)-6-metoxi-7-[[(3aa,5p,6aa)-octahidro-2-metilciclopenta[c]pirrol-5-il]metoxi]-4-quinazolinamina (XL647, CAS 781613-23-8); 4-Metil-3-[[1-metil-6-(3-piridinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-il]amino]-W-[3-(trifluorometil)fenil]-benzamida (BHG712, CAS 940310-85-0); y Aflibercept (Eylea®).
Anticuerpos anti-VEGF de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, un anticuerpo monoclonal que se une al mismo epítopo que el anticuerpo monoclonal anti-VEGF A4.6.1 producido por el hibridoma ATCC HB 10709; un anticuerpo monoclonal humanizado recombinante anti-VEGF generado de acuerdo con Presta et al. (1997) Cancer Res. 57: 4593­ 4599. En una realización, el anticuerpo anti-VEGF es Bevacizumab (BV), también conocido como rhuMAb VEGF o AVASTIN®. Comprende regiones marco IgG1 humanas mutadas y regiones determinantes de la complementariedad de unión a antígeno del anticuerpo monoclonal anti-hVEGF murino A.4.6.1 que bloquea la unión de VEGF humano a sus receptores. Bevacizumab y otros anticuerpos anti-VEGF humanizados se describen adicionalmente en la patente U.S. No. 6.884.879 emitida el 26 de febrero de 2005. Los anticuerpos adicionales incluyen los anticuerpos de la serie G6 o B20 (por ejemplo, G6-31, B20-4.1), como se describe en la Publicación PCT No. WO2005/012359, Publicación PCT No. WO2005/044853. Para anticuerpos adicionales, véase la patente U.S. Nos. 7,060,269, 6,582,959, 6,703,020, 6,054,297; WO98/45332; WO 96/30046; WO94/10202; EP 0666868B1; Publicaciones de Solicitud de Patente U.S. Nos. 2006009360, 20050186208, 20030206899, 20030190317, 20030203409 y 20050112126; y Popkov et al., Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004). Otros anticuerpos incluyen aquellos que se unen a un epítopo funcional en VEGF humano que comprende los residuos F17, Ml 8, D19, Y21, Y25, Q89, 191, Kl 01, El 03 y C104 o, alternativamente, que comprenden los residuos F17, Y21, Q22, Y25, D63, 183 y Q89.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de PI3K. En una realización, el inhibidor de PI3K es un inhibidor de las isoformas delta y gamma de PI3K. Inhibidores de ejemplo de PI3K que pueden usarse en combinación se describen en, por ejemplo, WO 2010/036380; WO 2010/006086, WO 09/114870, WO 05/113556. Ejemplos de inhibidores de PI3K que pueden usarse en combinación incluyen, por ejemplo, GSK 2126458, GDC-0980, GDC-0941, Sanofi XL147, XL756, XL147, PF-46915032, BKM 120, CAL-101, CAL 263, SF1126, PX-886 y un inhibidor dual de PI3K (por ejemplo, Novartis BEZ235).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de mTOR, por ejemplo, uno o más inhibidores de mTOR elegidos entre uno o más de rapamicina, temsirolimus (TORISEL®), AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, GSK1059615, KU -0063794, WYE-354, Palomid 529 (P529), PF-04691502 o PKI-587. ridaforolimus (formalmente conocido como deferolimus, (1E,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21E, 23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35E)-1,18-dihidroxi-19,30-dimetoxi-15,17,21,29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-azatricyclo[30.3.1.049]hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoxiciclohexil dimetilfosfnato, también conocido como AP23573 y MK8669, y divulgado en la publicación PCT No. WO 03/064383); everolimus (Afinitor® o RAD001); rapamicina (AY22989, Sirolimus®); simapimod (CAS 164301-51-3); emsirolimus, (5-{2,4-Bis[(3S)-3-metilmoriolin-4-il]pirido[2,3-d]pirimidin-7-il}-2-metoxifenil)metanol (AZD8055); 2-Amino-8-[frans-4-(2-hidrixietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona (PF04691502, CAS 1013101-36­ 4); y W2-[1,4-dioxo-4-[[4-(4-oxo-8-fenil-4H-1-benzopiran-2-il)morfolinio-4-il]metoxi]butil]-L-arginilglicil-L-a-aspartilL-serina-, sal interna (SF1126, CAS 936487-67-1) y XL765.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de BRAF, por ejemplo, GSK2118436, RG7204, PLX4032, GDC-0879, PLX4720 y tosilato de sorafenib (Bay 43-9006).
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de MEK. En algunas realizaciones, la combinación del anticuerpo anti-LAG-3 y el inhibidor de MEK se usa para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer descrito aquí). En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se selecciona de un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una malignidad hematológica o un carcinoma de células renales. En ciertas realizaciones, el cáncer incluye una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600E), un tipo silvestre BRAF, un tipo silvestre KRAS o una mutación KRAS activadora. El cáncer puede estar en una etapa temprana, intermedia o tardía. Cualquier inhibidor de MEK puede usarse en combinación, incluidos, pero no limitados a, ARRY-142886, G02442104 (también conocido como g Sk 1120212), RDEA436, RDEA119/BAY 869766, AS703026, G00039805 (también conocido como AZD6244 orselumetinib), BIX 02188, BIX 02189, CI-1040 (PD-184352), PD0325901, PD98059, U0126, GDC-0973 (Metanona, [3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]fenil][3-hidroxi-3-(25)-2-piperidinil-1 -azetidinil]-), G-38963, G02443714 (también conocido como AS703206), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. Se divulgan ejemplos adicionales de inhibidores de MEK en WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 y WO 2009/085983.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa en combinación con uno, dos o todos de oxaliplatino, leucovorina o 5-FU (por ejemplo, un cotratamiento con FOLFOX). Alternativamente o en combinación, la combinación incluye además un inhibidor de VEGF (por ejemplo, un inhibidor de VEGF como se divulga aquí). En algunas realizaciones, la combinación del anticuerpo anti-LAG-3, el co-tratamiento con FOLFOX y el inhibidor de VEGF se usan para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer descrito aquí). En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se selecciona de un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una malignidad hematológica o un carcinoma de células renales. El cáncer puede estar en una etapa temprana, intermedia o tardía.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti -TIM-3), se usa en combinación con un inhibidor de JAk 2, por ejemplo, CEP-701, INCB18424, CP-690550 (tasocitinib).
En algunas realizaciones, la composición farmacéutica descrita aquí, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa en combinación con paclitaxel o un agente de paclitaxel, por ejemplo, TAXOL®, paclitaxel unido a proteínas (por ejemplo, ABRAXANE®). Agentes de paclitaxel de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, paclitaxel unido a albúmina en nanopartículas (ABRAXANE, comercializado por Abraxis Bioscience), paclitaxel unido a ácido docosahexaenoico (DHA-paclitaxel, Taxoprexina, comercializado por Protarga), paclitaxel unido a poliglutamato (PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, XYOTAX, comercializado por Cell Therapeutico), el profármaco activado por tumor (TAP), ANG105 (Angiopep-2 unido a tres moléculas de paclitaxel, comercializado por ImmunoGen), paclitaxel-EC-1 (unido a paclitaxel al péptido que reconoce erbB2 EC-1; véase Li et al., Biopolymers (2007) 87: 225-230), y paclitaxel conjugado con glucosa (por ejemplo, 2'-paclitaxel metil 2-glucopiranosil succinato, véase Liu et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2007) 17: 617-620).
La radioterapia se puede administrar a través de uno de varios métodos, o una combinación de métodos, que incluyen, sin limitación, radioterapia de haz externo, radioterapia interna, radiación de implante, radiocirugía estereotáctica, radioterapia sistémica, radioterapia y braquiterapia intersticial permanente o temporal. El término "braquiterapia" se refiere a la radioterapia administrada por un material radiactivo espacialmente confinado insertado en el cuerpo en o cerca de un tumor u otro sitio de enfermedad proliferativa del tejido. El término pretende, sin limitación, incluir la exposición a isótopos radiactivos (por ejemplo, At-211, I-131, I-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32, e isótopos radiactivos de Lu). Las fuentes de radiación adecuadas para su uso como acondicionador celular de la presente divulgación incluyen tanto sólidos como líquidos. A modo de ejemplo no limitativo, la fuente de radiación puede ser un radionúclido, tal como 1-125, 1-131, Yb-169, Ir-192 como fuente sólida, I-125 como fuente sólida u otros radionucleidos que emiten fotones, partículas beta, radiación gamma u otros rayos terapéuticos. El material radioactivo también puede ser un fluido hecho de cualquier solución de radionúclidos, por ejemplo, una solución de I-125 o I-131, o se puede producir un fluido radioactivo usando una suspensión de un fluido adecuado que contiene pequeñas partículas de radionucleidos sólido, tales como Au-198, Y-90. Además, los radionúclidos pueden estar incorporados en un gel o microesferas radiactivas.
Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se pueden administrar en combinación con uno o más de las modalidades existentes para el tratamiento del cáncer, que incluyen, pero no se limitan a: cirugía; radioterapia (por ejemplo, terapia de haz externo que implica radioterapia conformada tridimensional donde se diseña el campo de radiación, radiación local (por ejemplo, radiación dirigida a un objetivo u órgano preseleccionado) o radiación focalizada). La radiación enfocada se puede seleccionar del grupo que consiste en radiocirugía estereotáctica, radiocirugía estereotáctica fraccionada y radioterapia de intensidad modulada. La radiación enfocada puede tener una fuente de radiación seleccionada del grupo que consiste en un haz de partículas (protón), cobalto-60 (fotón) y un acelerador lineal (rayos X), por ejemplo, como se describe en el documento WO 2012/177624.
En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa con un anticuerpo contra un receptor similar a la inmunoglobulina de células asesinas (también denominado en el presente documento como un "anticuerpo anti-KIR"), un anticuerpo pan-KIR, un anticuerpo anti-NKG2D y un anticuerpo anti-MICA. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1 y anticuerpo anti-KIR, anticuerpo pan-KIR, anticuerpo anti-MICA o anticuerpo anti-NKG2D descritos en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un tumor sólido avanzado).
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa con una inmunoterapia célular (por ejemplo, Provenge (por ejemplo, Sipuleucel)), y opcionalmente en combinación con ciclofosfamida. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1, Provenge y/o ciclofosfamida se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un cáncer de próstata, por ejemplo, un cáncer de próstata avanzado).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa con una vacuna, por ejemplo, una vacuna contra el carcinoma renal de células dendríticas (DC-RCC). En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1 y/o la vacuna DC-RCC se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un carcinoma renal, por ejemplo, carcinoma metastásico de células renales (RCC).
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa en combinación con quimioterapia para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa con terapia doblete de platino para tratar el cáncer de pulmón.
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa para tratar un cáncer renal, por ejemplo, carcinoma de células renales (RCC) o RCC metastásico. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con uno o más de: una estrategia basada en el sistema inmune (por ejemplo, interleucina-2 o interferón-a), un agente direccionado (por ejemplo, un inhibidor de VEGF tal como un anticuerpo monoclonal a VEGF); un inhibidor de la tirosina quinasa VEGF tal como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib; un inhibidor de ARNi), o un inhibidor de un mediador corriente abajo de la señalización de VEGF, por ejemplo, un inhibidor del objetivo mamífero de rapamicina (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), descrito aquí para el tratamiento del cáncer de páncreas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel (por ejemplo, una formulación de paclitaxel tal como TAXOL, una formulación de paclitaxel de nanopartículas estabilizadas con albúmina (por ejemplo, ABRAXANE) o una formulación liposomal de paclitaxel); gemcitabina (por ejemplo, gemcitabina sola o en combinación con AXP107-11); otros agentes quimioterapéuticos tales como oxaliplatino, 5-fluorouracilo, capecitabina, rubitecán, clorhidrato de epirubicina, NC-6004, cisplatino, docetaxel (por ejemplo, TAXOTERE), mitomicina C, ifosfamida; interferón inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFr (por ejemplo, erlotinib, panitumumab, cetuximab, nimotuzumab); inhibidor del receptor HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab); inhibidor de quinasa dual (por ejemplo, bosutinib, saracatinib, lapatinib, vandetanib); por ejemplo inhibidor de multiquinasa, sorafenib, sunitinib, XL184, pazopanib); inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, AV-951, brivanib); radioinmunoterapia (por ejemplo, XR303); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX, péptido survivina); inhibidor de COX-2 (por ejemplo, celecoxib); Inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, AMG 479, MK-0646); inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus); Inhibidor de IL-6 (por ejemplo, CNTO 328); inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, P276-00, UCN-01); compuesto Dirigido al Metabolismo de Energía Alterada (AEMD) (por ejemplo, CPI-613); inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat); agonista del receptor TRAIL 2 (TR-2) (por ejemplo, conatumumab); inhibidor de MEK (por ejemplo, AS703026, selumetinib, GSK1120212); inhibidor de la quinasa dual Raf/MEK (por ejemplo, RO5126766); inhibidor de señalización de muesca (por ejemplo, MK0752); proteína de fusión anticuerpo-anticuerpo monoclonal (por ejemplo, L19IL2); curcumina, Inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090); rIL-2; denileukin diftitox; inhibidor de topoisomerasa 1 (por ejemplo, irinotecan, PEP0 2 ); estatina (por ejemplo, simvastatina); inhibidor del factor VIIa (por ejemplo, PCI-27483); inhibidor de AKT (por ejemplo, RX-0201); profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, TH-302); clorhidrato de metformina, inhibidor de la gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097); inhibidor de ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP); inmunotoxina (por ejemplo, HuC242-DM4); Inhibidor de PARP (por ejemplo, KU-0059436, veliparib); Inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, CP-675,206, ipilimumab); terapia con AdV-tk; inhibidor de proteasoma (por ejemplo, bortezomib (Velcade), NPI-0052); tiazolidinediona (por ejemplo, pioglitazona); NPC-1C; inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, R763/AS703569), inhibidor de CTg F (por ejemplo, FG-3019); siG12D LODER; y radioterapia (por ejemplo, tomoterapia, radiación estereotáctica, terapia de protones), cirugía y una combinación de las mismas. En ciertas realizaciones, se puede usar una combinación de paclitaxel o un agente de paclitaxel y gemcitabina con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en este documento.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-LI o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, etopósido, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, irinotecán, topotecán, gemcitabina, SN-38 liposomal, bendamustina, temozolomida, belotecán, NK012, FR901228, flavopiridol); inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab); inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib); inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, vandetanib); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX); inhibidor de Bcl- 2 (por ejemplo, Oblimersen sódico, ABT-263); inhibidor del proteasoma (por ejemplo, Bortezomib (Velcade), NPI-0052), paclitaxel o un agente de paclitaxel; docetaxel; inhibidor del receptor IGF-1 (por ejemplo, Am G 479); Inhibidor de HGF/SF (por ejemplo, AMG 102, MK-0646); cloroquina; inhibidor de la Aurora quinasa (por ejemplo, MLN8237); radioinmunoterapia (por ejemplo, TF2); inhibidor de HSP90 (por ejemplo, Tanespimicina, STA-9090); inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus); Anticuerpo biespecífico de Ep-CAM-/CD3 (por ejemplo, MT110); inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945); inhibidor de HDAC (por ejemplo, Belinostat); antagonista de SMO (por ejemplo, BMS 833923); vacuna contra el cáncer de péptidos, y radioterapia (por ejemplo, radioterapia de intensidad modulada (IMRT), radioterapia hipofraccionada, radioterapia guiada por hipoxia), cirugía y sus combinaciones.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, vinorelbina, cisplatino, docetaxel, pemetrexed disódico, etopósido, gemcitabina, carboplatino, SN-38 liposomal, TLK286, temozolomida, topotecán, pemetrexed disódico, azacitidina, irinotecán, tegafur-gimeracil-oteracil potasio, sapacitabina); inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab, necitumumab, PF-00299804, nimotuzumab, RO5083945), inhibidor de MET (por ejemplo, PF-02341066, ARQ 197), inhibidor de PI3K (por ejemplo, XL7, GDC-0941), inhibidor de la quinasa dual Raf/MEK (por ejemplo, RO5126766), inhibidor de quinasa dual PI3K/mTOR (por ejemplo, XL765), inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor dual (por ejemplo, BIBW 2992, GSK1363089, Zd 6474, AZD0530, AG-013736, lapatinib, Me Hd 7945A, linifanib), inhibidor de multiquinasa sorafenib, sunitinib, pazopanib, AMG 706, XL184, MGCD265, BMS-690514, R935788), inhibidor de VEGF (por ejemplo, endostar, endostatin, bevacizumab, cediranib, BIBF 1120, axitinib, tivozanib, AZD2171), vacuna contra el cáncer (por ejemplo vacuna de liposoma BLP25, GVAX, ADN recombinante y adenovirus que expresa la proteína L523S), inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, oblimersen sódico), inhibidor de proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, NPI-0052, MLN9708), paclitaxel o un agente de paclitaxel, docetaxel, inhibidor del receptor IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab, MK-0646, OSI 906, CP-751,871, BIIB022), hidroxicloroquina, inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus, ridaforolimus), anticuerpo biespecífico de Ep-CAM-/CD3 (por ejemplo, m T110), inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945), inhibidor de HdAC (por ejemplo, Ms 275, LBH589, vorinostat, ácido valproico, FR901228), inhibidor de DHFR (por ejemplo, pralatrexato), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, tretinoína), conjugado de anticuerpo-fármaco (por ejemplo, SGN-15), bisfosfonato (por ejemplo, ácido zoledrónico), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, belagenpumatucel-L), heparina de bajo peso molecular (LMWH) (por ejemplo, tinzaparina, enoxaparina), GSK1572932A, melatonina, talactoferrina, dimesna, inhibidor de la topoisomerasa (por ejemplo, amrubicina, etopósido, karenitecina), nelfinavir, cilengitida, inhibidor de ErbB3 (por ejemplo, MM-121, U3-1287), inhibidor de survivina (por ejemplo, y M155, LY2181308), mesilato de eribulina, inhibidor de COX-2 (por ejemplo, celecoxib), pegfilgrast, inhibidor de la quinasa 1 tipo polo (por ejemplo, BI 6727), agonista del receptor 2 TRAIL (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), conjugado de péptido CNGRC (SeQ ID NO: 293)-TNF alfa, dicloroacetato (Dc A), inhibidor de HGF (por ejemplo, SCH 900105), SAR240550, agonista de PPAR-gamma (por ejemplo, CS-7017), inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), terapia epigenética (por ejemplo, 5-azacitidina), nitroglicerina, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), colesterol-Fusl, agente antitubulina (por ejemplo, E7389), inhibidor de farnesil-OH-transferasa (por ejemplo, lonafarnib), inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901, SS1 (dsFv) PE38), fondaparinux, agente disruptor vascular (por ejemplo, a Ve 8062), inhibidor de Pd -L1 (por ejemplo, MDX-1105, MDX-1106), beta-glucano, NGR-hTNF, EMD 521873, Inhibidor de MEK (por ejemplo, GSK1120212), análogo de epotilona (por ejemplo, Ixabepilona), inhibidor del huso de la quinesina (por ejemplo, 4SC-205), agente de direccionamiento de los telómeros (por ejemplo, KML-001), inhibidor de la ruta P70 (por ejemplo, LY2584702), inhibidor de AKT (por ejemplo, MK-2206), inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), inhibidor de la señalización de la muesca (por ejemplo, OMP-21M18), radioterapia, cirugía y combinaciones de los mismos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de ovario incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel; docetaxel; carboplatino; gemcitabina; doxorrubicina; topotecán; cisplatino; irinotecán, TLK286, ifosfamida, olaparib, oxaliplatino, melfalan, pemetrexed disódico, SJG-136, ciclofosfamida, etopósido, decitabina); antagonista de la grelina (por ejemplo, AEZS-130), inmunoterapia (por ejemplo, APC8024, oregovomab, OPT-821), inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib), inhibidor dual (por ejemplo, E7080), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, AZD0530, JI-101, sorafenib, sunitinib, pazopanib), ON 01910.Na), inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, BIBF 1120, cediranib, AZD2171), inhibidor de PDGFR (por ejemplo, IMC-3G3), paclitaxel, inhibidor de la topoisomerasa (por ejemplo, karenitecina, irinotecán), inhibidor de HDAC (por ejemplo, valproato, vorinostat), inhibidor del receptor de folato (por ejemplo, farletuzumab), inhibidor de angiopoyetina (por ejemplo, AMG 386), análogo de epotilona (por ejemplo, ixabepilona), inhibidor de proteasoma (por ejemplo, carfilzomib), inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, OSI 906, AMG 479), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib, AG014699, iniparib, MK-4827), inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, MLN8237, ENMD-2076), inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), inhibidor de DHFR (por ejemplo, pralatrexato), agnet radioinmunoterapéutico (por ejemplo, Hu3S193), estatina (por ejemplo, lovastatina), inhibidor de topoisomerasa 1 (por ejemplo, NKTR-102), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, vacuna de péptidos largos sintéticos p53, vacuna autóloga OC-DC), inhibidor de mTOR (por ejemplo, temsirolimus, everolimus), inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib), antagonista del receptor ET-A (por ejemplo, ZD4054), agonista del receptor 2 TRAIL (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), inhibidor de HGF/s F (por ejemplo, AMG 102), EGEN-001, inhibidor de la quinasa 1 tipo polo (por ejemplo, BI 6727), inhibidor de la gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), inhibidor de Wee-1 (por ejemplo, MK-1775), agente antitubulina (por ejemplo, Vinorelbina, E7389), inmunotoxina (por ejemplo, Denileucina diftitox), SB-485232, agente disruptor vascular (por ejemplo, AVE8062), inhibidor de la integrina (por ejemplo, EMD 525797), inhibidor del huso de la kinesina (por ejemplo, 4SC-205), revlimid, inhibidor de HER2 (por ejemplo, MGAH22), inhibidor de ErrB3 (por ejemplo, MM-121), radioterapia; y combinaciones de los mismos.
En una realización de ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa para tratar un mieloma, solo o en combinación con uno o más de: quimioterapia u otros agentes anticancerígenos (por ejemplo, análogos de talidomida, por ejemplo, lenalidomida), HSCT (Cook, R. (2008) J Manag Care Pharm. 14 (7 Suppl) : 19­ 25), un anticuerpo anti-TIM3 (Hallett, WHD et al. (2011) J de American Society for Blood and Marrow Transplantation 17 (8): 1133-145), células dendríticas pulsadas por antígeno tumoral, fusiones (por ejemplo, electrofusiones) de células tumorales y células dendríticas, o vacunación con idiotipo de inmunoglobulina producida por células plasmáticas malignas (revisado en Yi, Q. (2009) Cancer J. 15 (6): 502-10).
En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3), se usa para tratar un cáncer renal, por ejemplo, carcinoma de células renales (RCC) o RCC metastásico. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse en combinación con uno o más de: una estrategia basada en el sistema inmune (por ejemplo, interleucina-2 o interferón-a), un agente direccionado (por ejemplo, un inhibidor de VEGF tal como un anticuerpo monoclonal a VEGF, por ejemplo, bevacizumab (Rini, BI et al. (2010) J. Clin. Oncol. 28 (13): 2137-2143)); un inhibidor de la tirosina quinasa VEGF tal como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib (revisado en Pal. S.K. et al. (2014) Clin. Advances in Hematology & Oncology 12 (2): 90-99)); un inhibidor de ARNi), o un inhibidor de un mediador corriente abajo de la señalización de VEGF, por ejemplo, un inhibidor del objetivo mamífero de rapamicina (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus (Hudes, G. et al. (2007) N. Engl. J. Med. 356 (22): 2271-2281, Motzer, r J et al. (2008) Lancet 372: 449-456).
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia mielógena crónica (AML) de acuerdo con la divulgación incluye, pero no se limita a, un quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, hidroxiurea, clofarabina, melfalan, tiotepa, fludarabina, busulfano, etopósido, cordicepina, pentostatina, capecitabina, azacitidina, ciclofosfamida, cladribina, topotecán), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor dual (por ejemplo, dasatinib, bosutinib), inhibidor de multiquinasas (por ejemplo, DCC-2036, ponatinib, sorafenib, sunitinib, RGB-286638)), interferón alfa, esteroides, agente apoptótico (por ejemplo, omacetaxina mepesuccinat), inmunoterapia (por ejemplo, células T alogénicas de memoria CD4 tipo Th1/anti-CD3/anti-CD28 unidos a micropartículas, células asesinas inducidas por citocinas autólogas (CIK), AHN-12), agente de direccionamiento CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), antagonista de Sm O (por ejemplo, BMS 833923), inhibidor de ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), hidroxicloroquina, retinoide (por ejemplo, Fenretinida), inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), Inhibidor de HDa C (por ejemplo, Belinostat, vorinostat, JNJ-26481585), inhibidor de PARP (por ejemplo, Veliparib), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de la Aurora B quinasa (por ejemplo, TAK-901), radioinmunoterapia (por ejemplo, anticuerpo anti-CD33 marcado con actinio-225 HuM195), inhibidor de Hedgehog (por ejemplo, PF-04449913), inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), KB004, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, AG858), trasplante de médula ósea, trasplante de células madre, radioterapia y sus combinaciones.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica (CLL) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, fludarabina, ciclofosfamida, doxorrubicina, vincristina, clorambucil, bendamustina, clorambucilo, busulfano, gemcitabina, melfalan, pentostatina, 5-mitoxan, 5-mitoxan, 5-mitoxan, 5 azacitidina, pemetrexed disódico), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib), inhibidor de BTK (por ejemplo, PCI-32765), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, MGCD265, RGB-286638), agente de direccionamiento a CD-20 (por ejemplo, rituximab, ofatumumab, RO5072759, LFB-R603), agente de direccionamiento a CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), prednisolona, darbepoetina alfa, lenalidomida, inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, ABT-263), inmunoterapia (por ejemplo, células T alogénicas de memoria CD4+ tipo Th1 /anti-CD3/anti-CD28 unidas a micropartículas, células asesinas inducidas por citocina autóloga (CIK)), Inhibidor de HDAC (por ejemplo, Vorinostat, ácido valproico, LBH589, JNJ-26481585, AR-42), inhibidor de XIAP (por ejemplo, AEG35156), agente de direccionamiento a CD-74 (por ejemplo, Milatuzumab), inhibidor de mTOR (por ejemplo, Everolimus), AT-101, inmunotoxina (por ejemplo, CAT-8015, anti-Tac(Fv)-PE38 (LMB-2)), agente de direccionamiento a CD37 (por ejemplo, TRU-016), radioinmunoterapia (por ejemplo, 131-tositumomab), hidroxicloroquina, perifosina, inhibidor de s Rc (por ejemplo, dasatinib), talidomida, inhibidor delta PI3K (por ejemplo, CAL-101), retinoide (por ejemplo, fenretinida), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), plerixafor, inhibidor de la Aurora quinasa (por ejemplo, MLN8237, TAK-901), inhibidor de proteasoma (por ejemplo, bortezomib), agente de direccionamiento a c D-19 (por ejemplo, MEDI-551, MOR208), inhibidor de MEK (por ejemplo, ABT-348), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, TH-302), paclitaxel o un agente de paclitaxel, inhibidor de HSP90, inhibidor de AKT (por ejemplo, MK2206), inhibidor de HMG-CoA (por ejemplo, simvastatina), GNKG186, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda (ALL) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, prednisolona, dexametasona, vincristina, asparaginasa, daunorrubicina, ciclofosfamida, citarabina, etopósido, tioguanina, mercaptopurina, clomalfanrabina, liposufanamina, liposufanamina, lipoaulfancina, liposofanrabina, etopósido, capecitabina, decitabina, azacitidina, topotecán, temozolomida), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor de múltiples quinasas (por ejemplo, sorafenib)), agente de direccionamiento a CD-20 (por ejemplo, rituximab), agente de direccionamiento a CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, rapamicina), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor del receptor HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab), inhibidor del proteasoma (por ejemplo., bortezomib), metotrexato, asparaginasa, agente de direccionamiento a CD-22 (por ejemplo, epratuzumab, inotuzumab), inmunoterapia (por ejemplo, células asesinas inducidas por citocinas autólogas (CIK), a HN-12), blinatumomab, inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), agente de direccionamiento a CD45 (por ejemplo, BC8), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inmunotoxina (por ejemplo, CAT-8015, DT2219ARL), inhibidor de HDAC (por ejemplo, j Nj -26481585), JVRS-100, paclitaxel o un agente de paclitaxel, inhibidor de s Ta T3 (por ejemplo, o Pb-31121), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib), EZN-2285, radioterapia, esteroides, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre o una combinación de los mismos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, daunorrubicina, idarubicina, clofarabina, decitabina, vosaroxina, azacitidina, clofarabina, ribavirina, CPX-351, treosulfán, elacitarabina, azacitidina), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, midostaurina, SU 11248, quizartinib, sorafinib)), inmunotoxina (por ejemplo, gemtuzumab, ozogamicina) proteína de fusión DT388IL3, inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat, LBH589), plerixafor, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, inhibidor de la Aurora quinasa (por ejemplo, BI 811283), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor de la quinasa tipo polo (por ejemplo, B i 6727), cenersen, agente de direccionamiento a c D45 (por ejemplo, BC8), inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), LY573636-sodio, ZRx-101, MLN4924, lenalidomida, inmunoterapia (por ejemplo, AHN-12), diclorhidrato de histamina, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del mieloma múltiple (m M) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, melfalan, amifostina, ciclofosfamida, doxorrubicina, clofarabina, bendamustina, fludarabina, adriamicina, SyB L-0501), talidomida, lenalidomida, dexametasona, prednisona, pomalidomida, inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, MLN9708), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX), agente de direccionamiento a CD-40 (por ejemplo, SGN-40, CHIR-12.12), perifosina, ácido zoledrónico, inmunoterapia (por ejemplo, MAGE-A3, NY-Es O-1, HuMax-CD38), inhibidor de HDAC (por ejemplo, Vorinostat, LBH589, AR-42), aplidina, inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, PD-0332991, dinaciclib), trióxido de arsénico, CB3304, inhibidor de HSP90 (por ejemplo, KW-2478), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, Inhibidor de EGFR (por ejemplo, Cetuximab), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, AT9283)), inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab), plerixafor, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), IPH2101, atorvastatina, inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901), NPI-0052, radioinmunoterapéutico (por ejemplo, itrio Y 90 ibritumomab tiuxetan), inhibidor de STa T3 (por ejemplo, OPB-31121), MLN4924, inhibidor de la Aurora quinasa (por ejemplo, ENMD-2076), IMGN901, ACE-041, inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945), radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de próstata incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, docetaxel, carboplatino, fludarabina), abiraterona, terapia hormonal (por ejemplo, flutamida, bicalutamida, nilutamida, acetato de ciproterona, ketoconazol, aminoglutetimida, abarelix, degarelix, leuprolida, goserelina, triptorelina, buserelina), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de quinasa dual (por ejemplo, lapatanib), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib)), inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab), TAK-700, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, BPX-101, PEP223), lenalidomida, TOK-001, inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab), TRC105, inhibidor de la Aurora A quinasa (por ejemplo, MLN8237), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), OGX-011, radioinmunoterapia (por ejemplo, HuJ591-GS), inhibidor de HDAC (por ejemplo, ácido valproico, SB939, LBH589), hidroxicloroquina, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), lactato de dovitinib, diindolilmetano, efavirenz, OGX-427, genisteína, IMC-3G3, bafetinib, CP-675,206, radioterapia, cirugía o una combinación de estos.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de HNSCC incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A8 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2010/029082) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A8 o compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3k . En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe, EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de PI3K o EGFR en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico alto en MSI y/o EBV+, incluye, pero no se limita a, el Compuesto A8 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2010/029082). En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A8 o compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de PI3K en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico con alto índice de MSI y/o RNF43 inactivado, incluye, pero no se limita a, el Compuesto A28 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2010/101849). En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A28 o compuesto relacionado con A28) es un modulador, por ejemplo, inhibidor, de puercoespín. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de puercoespín en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del tumor del estroma GI (GIST), incluye, pero no se limita a, el Compuesto A16 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854). En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A16 o compuesto relacionado con A16) es un modulador, por ejemplo, inhibidor de una tirosina quinasa. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles elevados o actividad de una tirosina quinasa en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de NSCLC, por ejemplo, escamoso o adenocarcinoma, incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A17 como se describe en este documento (o un compuesto descrito en la Patente U.S. No. 7,767,675 Y 8,420,645) y el Compuesto A23 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A17 o compuesto relacionado con A17) modula, por ejemplo, inhibe, c-MET. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A23 o el compuesto relacionado con A23) modula, por ejemplo, inhibe, Alk. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles elevados o actividad de uno o ambos de c-MET o Alk en comparación con una célula de control o valor de referencia. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene una mutación en EGFR.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A24 como se describe en este documento (o un compuesto descrito en las Patentes U.S. Nos.
8,415,355 y 8,685,980) y el Compuesto A34 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A24 o compuesto relacionado con A24) modula, por ejemplo, inhibe, uno o más de JAK y CDK4/6. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A34 o compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de uno o más de JAK, CDK4/6 y MEK en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A29 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2011/025927) y el Compuesto A34 como se describe en este documento (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A29 o el compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRAF. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A34 o compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de uno o ambos de BRAF y MEK en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del NSCLC escamoso incluye, pero no se limita a, el Compuesto A5 como se describe en este documento (o un compuesto descrito en la Patente U.S. No. 8,552,002). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A5 o compuesto relacionado con A5) modula, por ejemplo, inhibe, FGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de FGFR en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Un ejemplo de agentes terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer colorrectal incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A29 como se describe en este documento (o un compuesto Publicación PCT No. WO2011/025927) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A29 o el compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRAF. En algunas realizaciones, el agente terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene o se identifica que tiene niveles elevados o actividad de BRAF o EGFR en comparación con una célula de control o valor de referencia.
Esta divulgación también proporciona un método para tratar el cáncer con el Compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3). En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con el Compuesto A8 y cetuximab. Este tratamiento continúa durante una cantidad de tiempo, por ejemplo, una cantidad predeterminada de tiempo, por ejemplo, aproximadamente 1,2, 4, 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, se administra la molécula de anticuerpo lAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o molécula de anticuerpo TIM-3). El anticuerpo LAG-3 puede administrarse opcionalmente en combinación con cetuximab.
En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con los tres compuestos A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o molécula de anticuerpo TIM-3). Este tratamiento continúa durante un período de tiempo, por ejemplo, una cantidad predeterminada de tiempo, por ejemplo, aproximadamente 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, el Compuesto A8 y/o cetuximab se puede reducir gradualmente, de modo que la fase de mantenimiento implica el tratamiento con la molécula de anticuerpo LAG-3 (por ejemplo, como monoterapia, o en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o molécula de anticuerpo TIM-3) pero no Compuesto a 8 o cetuximab.
En otras realizaciones, los tres compuestos (Compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3) se administran secuencialmente al comienzo del tratamiento. Por ejemplo, el Compuesto A8 y cetuximab se pueden administrar primero, como se describió anteriormente. A continuación, la molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o molécula de anticuerpo TIM-3) se agrega al régimen. A continuación, el Compuesto A8 y/o cetuximab se pueden reducir según se describe anteriormente.
Las dosis de ejemplo para los tres (o más) regímenes de agente son las siguientes. La molécula de anticuerpo LAG-3 se puede administrar, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. En algunas realizaciones, el Compuesto A8 se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 300-400 o 200-400 mg. En algunas realizaciones, el cetuximab se administra a una dosis inicial de 400 mg/m2 como una infusión intravenosa de 120 minutos seguido de una infusión semanal de 250 mg/m2 durante 60 minutos. En realizaciones, uno o más de la molécula de anticuerpo del Compuesto A8, cetuximab y LAG-3 se administra a una dosis que es más baja que la dosis a la que ese agente se administra típicamente como una monoterapia, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10 -20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% más bajo que la dosis a la que normalmente se administra ese agente como monoterapia. En realizaciones, el uno o más de la molécula de anticuerpo del Compuesto A8, cetuximab y LAG-3 se administra a una dosis que es inferior a la dosis de ese agente mencionada en este párrafo, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10-20 %, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% menor que la dosis de ese agente mencionada en este párrafo. En ciertas realizaciones, la concentración del Compuesto A8 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento es menor cuando el Compuesto A8 se administra en combinación con uno o ambos de la molécula de anticuerpo cetuximab y LAG-3 que cuando el Compuesto A8 se administra individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de cetuximab que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el cetuximab se administra en combinación con uno o ambos del Compuesto A8 y la molécula de anticuerpo LAG-3 que cuando se administra el cetuximab individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de la molécula de anticuerpo LAG-3 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando la molécula de anticuerpo LAG-3 se administra en combinación con uno o ambos de cetuximab y el Compuesto A8 que cuando la molécula de anticuerpo LAG-3 se administra individualmente.
Además se divulga en el presente documento un método para tratar el cáncer con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3) y un agente anticancerígeno direccionado, por ejemplo, un agente que se dirige a una o más proteínas. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (y opcionalmente otros inmunomoduladores se administran primero, y el agente anticancerígeno dirigido se administra en segundo lugar. El período de tiempo entre la administración de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente anticancerígeno dirigido puede ser, por ejemplo, 10, 20 o 30 minutos, 1, 2, 4, 6 o 12 horas, o 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 días, o cualquier lapso dentro de este rango. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra repetidamente durante un período de tiempo (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5 o 6 días, o 1, 2, 4, 8, 12, 16, o 20 semanas, o cualquier lapso dentro de este rango) antes de que se administre el agente anticancerígeno direccionado. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente anticancerígeno direccionado se administran sustancialmente al mismo tiempo.
Enfermedades infecciosas
Otros métodos de la divulgación se usan para tratar pacientes que han sido expuestos a toxinas o agentes patógenos particulares. Por consiguiente, otro aspecto de la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto que comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, de tal manera que el sujeto sea tratado por la enfermedad infecciosa.
En el tratamiento de la infección (por ejemplo, aguda y/o crónica), la administración de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 (solas o en combinación con un anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3 molécula) puede combinarse con tratamientos convencionales además de o en lugar de estimular las defensas inmunes del huésped natural contra la infección. Las defensas inmunes del huésped naturales contra la infección incluyen, pero no se limitan a, inflamación, fiebre, defensa del huésped mediada por anticuerpos, defensas del huésped mediadas por linfocitos T, incluida la secreción de linfocinas y células T citotóxicas (especialmente durante la infección viral), lisis mediada por el complemento y opsonización (fagocitosis facilitada) y fagocitosis. La capacidad de las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3 para reactivar células T disfuncionales sería útil para tratar infecciones crónicas, en particular aquellas en las que la inmunidad celular es importante para la recuperación completa.
Similar a su aplicación a los tumores como se discutió anteriormente, el bloqueo de LAG-3 mediado por anticuerpos se puede usar solo o como un adyuvante, en combinación con vacunas, para estimular la respuesta inmune a los patógenos, toxinas y autoantígenos. Ejemplos de agentes patógenos para los cuales este enfoque terapéutico puede ser particularmente útil, incluyen agentes patógenos para los cuales actualmente no existe una vacuna efectiva, o agentes patógenos para los cuales las vacunas convencionales son menos que completamente efectivas. Estos incluyen, pero no se limitan a, Hepatitis (A, B y C), Influenza, VIH, Herpes, Giardia, Malaria, Leishmania, Staphylococcus aureus, Pseudomonas Aeruginosa. El bloqueo de LAG-3 es particularmente útil contra infecciones establecidas por agentes tales como el VIH que presentan antígenos alterados en el transcurso de las infecciones. Estos novedosos epítopos se reconocen como extraños en el momento de la administración de LAG-3 antihumano, lo que provoca una fuerte respuesta de células T que no se ve atenuada por las señales negativas a través de LAG-3.
Virus
Para infecciones resultantes de causas virales, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 (solas o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) se pueden combinar mediante aplicación simultánea con, antes o después de la aplicación de terapias estándar para el tratamiento de infecciones virales. Tales terapias estándar varían según el tipo de virus, aunque en casi todos los casos, la administración de suero humano que contiene anticuerpos (por ejemplo, IgA, IgG) específicos para el virus puede ser eficaz.
Algunos ejemplos de virus patógenos que causan infecciones tratables por métodos incluyen hepatitis (A, B o C), virus de la influenza (A, B o C), VIH, virus del herpes (por ejemplo, VZV, Hs V-1, HAV-6, HSV -II, CMV, virus Epstein Barr), adenovirus, flavivirus, ecovirus, rinovirus, virus de coxsackie, comovirus, virus respiratorio sincitial, virus de paperas, rotavirus, virus del sarampión, virus de la rubéola, parvovirus, virus vaccinia, virus HTLV, virus del dengue, virus del papiloma, virus del molusco, poliovirus, virus de la rabia, virus JC y virus de la encefalitis arboviral.
En una realización, la infección es una infección de influenza. La infección por influenza puede provocar fiebre, tos, mialgia, dolor de cabeza y malestar general, que a menudo ocurren en epidemias estacionales. La influenza también se asocia con una serie de trastornos postinfecciosos, tales como encefalitis, miopericarditis, síndrome de Goodpasture y síndrome de Reye. La infección por influenza también suprime las defensas antibacterianas pulmonares normales, de tal manera que los pacientes que se recuperan de la influenza tienen un mayor riesgo de desarrollar neumonía bacteriana. Las proteínas de la superficie viral de la influenza muestran una marcada variación antigénica, resultante de la mutación y la recombinación. Por lo tanto, los linfocitos T citolíticos son el principal vehículo del huésped para la eliminación del virus después de la infección. La influenza se clasifica en tres tipos principales: A, B y C. La influenza A es única porque infecta tanto a humanos como a muchos otros animales (por ejemplo, cerdos, caballos, pájaros y focas) y es la causa principal de la influenza pandémica. Además, cuando una célula está infectada por dos cepas diferentes de influenza A, los genomas de ARN segmentados de dos tipos de virus parentales se mezclan durante la replicación para crear un replicante híbrido, lo que resulta en nuevas cepas epidémicas. La influenza B no se replica en animales y, por lo tanto, tiene menos variación genética y la influenza C tiene un solo serotipo.
La mayoría de las terapias convencionales son paliativos de los síntomas resultantes de la infección, mientras que la respuesta inmune del huésped en realidad elimina la enfermedad. Sin embargo, ciertas cepas (por ejemplo, Influenza A) pueden causar enfermedades más graves y la muerte. La influenza A puede tratarse tanto clínica como profilácticamente mediante la administración de inhibidores de aminas cíclicas amantadina y rimantadina, que inhiben la replicación viral. Sin embargo, la utilidad clínica de estos medicamentos es limitada debido a la incidencia relativamente alta de reacciones adversas, su espectro antiviral estrecho (solo influenza A) y la propensión del virus a volverse resistente. La administración de anticuerpos de IgG en suero a las principales proteínas de la superficie de la gripe, la hemaglutinina y la neuraminidasa puede prevenir la infección pulmonar, mientras que se requiere IgA de la mucosa para prevenir la infección del tracto respiratorio superior y la tráquea. El tratamiento actual más efectivo para la influenza es la vacunación con la administración de virus inactivado con formalina o p-propiolactona. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno o vacuna de influenza.
En otra realización, la infección es una infección por hepatitis, por ejemplo, una infección por hepatitis B o C.
El virus de la hepatitis B (HB-V) es el patógeno transmitido por la sangre más infeccioso conocido. Es una causa importante de hepatitis hepática aguda y crónica y carcinoma hepático, así como de infección crónica de por vida. Después de la infección, el virus se replica en los hepatocitos, que también eliminan el antígeno de superficie HBsAg. La detección de niveles excesivos de HBsAg en suero se utiliza como método estándar para diagnosticar una infección por hepatitis B. Una infección aguda puede resolverse o puede convertirse en una infección crónica persistente. Los tratamientos actuales para el VHB crónico incluyen a-interferón, que aumenta la expresión del antígeno leucocitario humano (HLA) de clase I en la superficie de los hepatocitos, lo que facilita su reconocimiento por los linfocitos T citotóxicos. Además, los análogos de nucleósidos ganciclovir, famciclovir y lamivudina también han mostrado cierta eficacia en el tratamiento de la infección por VHB en ensayos clínicos. Los tratamientos adicionales para el VHB incluyen a-interferón pegilado, adenfovir, entecavir y telbivudina. Si bien la inmunidad pasiva puede conferirse a través de la administración parental de anticuerpos séricos anti-HBsAg, la vacunación con HBsAg inactivado o recombinante también confiere resistencia a la infección. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-LI o anti-TIM-3) se puede combinar con tratamientos convencionales para infecciones de hepatitis B para una ventaja terapéutica. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno o vacuna contra la hepatitis B, y opcionalmente en combinación con un adyuvante que contiene aluminio.
La infección por el virus de la hepatitis C (HC-V) puede conducir a una forma crónica de hepatitis, lo que resulta en cirrosis. Si bien los síntomas son similares a las infecciones resultantes de la hepatitis B, en claro contraste con HB-V, los huéspedes infectados pueden ser asintomáticos durante 10-20 años. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar como monoterapia (o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-LI o anti-TIM-3), o todo lo anterior se puede combinar con el estándar de atención para la infección por hepatitis C. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar con uno o más de Sovaldi (sofosbuvir) Olysio (simeprevir), más ribavirina o interferón pegilado. Aunque los regímenes que incluyen Incivek (telaprevir) o Victrelis (boceprevir) más ribavirina e interferón pegilado también están aprobados, están asociados con un aumento de los efectos secundarios y una mayor duración del tratamiento y, por lo tanto, no se consideran regímenes preferidos.
El tratamiento convencional para la infección por HC-V incluye la administración de una combinación de a-interferón y ribavirina. Una terapia potencial prometedora para la infección por HC-V es el inhibidor de la proteasa telaprevir (VX-960). Los tratamientos adicionales incluyen: anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, MDX-1106, Medarex), bavituximab (un anticuerpo que se une a la fosfatidilserina fosfolípida aniónica de una manera dependiente de la glucoproteína I B2, Peregrine Pharmaceuticals), anticuerpos E2 de la proteína de cubrimiento viral anti-HPV (por ejemplo, a Tl 6865-Ab68 Ab65, XTL Pharmaceuticals) y Civacir® (inmunoglobulina humana policlonal anti-VHC). Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se pueden combinar con uno o más de estos tratamientos para las infecciones de hepatitis C para una ventaja terapéutica. Los inhibidores de la proteasa, polimerasa y NS5A que se pueden usar en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-LAG-3 para tratar específicamente la infección por hepatitis C incluyen los descritos en el documento US 2013/0045202.
En otra realización, la infección es un virus de sarampión. Después de una incubación de 9-11 días, los huéspedes infectados con el virus del sarampión desarrollan fiebre, tos, coriza y conjuntivitis. Dentro de 1-2 días, se desarrolla una erupción maculopapular eritematosa, que se extiende rápidamente por todo el cuerpo. Debido a que la infección también suprime la inmunidad celular, el huésped tiene un mayor riesgo de desarrollar superinfecciones bacterianas, que incluyen otitis media, neumonía y encefalomielitis postinfecciosa. La infección aguda se asocia con una morbilidad y mortalidad significativas, especialmente en adolescentes desnutridos.
El tratamiento para el sarampión incluye la administración pasiva de IgG humana agrupada, que puede prevenir la infección en sujetos no inmunes, incluso si se administra hasta una semana después de la exposición. Sin embargo, la inmunización previa con virus vivos atenuados es el tratamiento más efectivo y previene la enfermedad en más del 95% de los inmunizados. Como hay un serotipo de este virus, una sola inmunización o infección generalmente brinda protección de por vida contra la infección posterior.
En una pequeña proporción de huéspedes infectados, el sarampión puede convertirse en SSPE, que es un trastorno neurológico progresivo crónico resultante de una infección persistente del sistema nervioso central. El SSPE es causado por variantes clonales del virus del sarampión con defectos que interfieren con el ensamblaje del virión y la gemación. Para estos pacientes, sería deseable la reactivación de las células T con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 para facilitar la eliminación viral.
En otra realización, la infección es VIH. El VIH ataca a las células CD4+, incluidos los linfocitos T, los monocitosmacrófagos, las células dendríticas foliculares y las células de Langerhan, y las células auxiliares/inductoras CD4+ se agotan. Como resultado, el huésped adquiere un defecto grave en la inmunidad celular. La infección con VIH produce SIDA en al menos el 50% de las personas y se transmite por contacto sexual, administración de sangre o productos sanguíneos infectados, inseminación artificial con semen infectado, exposición a agujas o jeringas que contienen sangre y transmisión de una madre infectada a lactante durante el parto.
Un huésped infectado con VIH puede ser asintomático o puede desarrollar una enfermedad aguda que se asemeja a la mononucleosis: fiebre, dolor de cabeza, dolor de garganta, malestar y erupción cutánea. Los síntomas pueden progresar a una disfunción inmune progresiva, que incluye fiebre persistente, sudores nocturnos, pérdida de peso, diarrea inexplicada, eccema, psoriasis, dermatitis seborreica, herpes zoster, candidiasis oral y leucoplasia vellosa oral. Las infecciones oportunistas por una serie de parásitos son comunes en pacientes cuyas infecciones se convierten en SIDA.
Los tratamientos para el VIH incluyen terapias antivirales que incluyen análogos de nucleósidos, zidovudina (AST) sola o en combinación con didanosina o zalcitabina, didesoxiinosina, didesoxicitidina, lamidvudina, estavudina; inhibidores de la transcripción reversa tales como delavirdina, nevirapina, lovirida e inhibidores de la proteinasa tales como saquinavir, ritonavir, indinavir y nelfinavir. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3) se puede combinar con tratamientos convencionales para infecciones por VIH para una ventaja terapéutica.
En otra realización, la infección es un citomegalovirus (CMV). La infección por CMV a menudo se asocia con infección persistente, latente y recurrente. El CMV infecta y permanece latente en monocitos y células progenitoras de granulocitos-monocitos. Los síntomas clínicos del CMV incluyen síntomas similares a la mononucleosis (es decir, fiebre, glándulas inflamadas, malestar general) y una tendencia a desarrollar erupciones cutáneas alérgicas a los antibióticos. El virus se transmite por contacto directo. El virus se elimina en la orina, la saliva, el semen y, en menor medida, en otros fluidos corporales. La transmisión también puede ocurrir de una madre infectada a su feto o recién nacido y por transfusión de sangre y trasplantes de órganos. La infección por CMV da como resultado un deterioro general de la inmunidad celular, caracterizada por respuestas blastogénicas deterioradas a mitógenos inespecíficos y antígenos específicos de CMV, capacidad citotóxica disminuida y elevación del número de linfocitos CD8 de linfocitos CD4+.
Los tratamientos para la infección por CMV incluyen los antivirales ganciclovir, foscarnet y cidovir, pero estos fármacos típicamente solo se prescriben en pacientes inmunocomprometidos. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) se puede combinar con tratamientos convencionales para infecciones por citomegalovirus para obtener una ventaja terapéutica.
En otra realización, la infección es el virus de Epstein-Barr (EBV). El EBV puede establecer infecciones persistentes y latentes y ataca principalmente a las células B. La infección con EBV da como resultado el estado clínico de la mononucleosis infecciosa, que incluye fiebre, dolor de garganta, a menudo con exudado, linfadenopatía generalizada y esplenomegalia. La hepatitis también está presente, la cual puede convertirse en ictericia.
Si bien los tratamientos típicos para las infecciones por EBV son paliativos de los síntomas, el EBV está asociado con el desarrollo de ciertos tipos de cáncer, tales como el linfoma de Burkitt y el cáncer de nasofaringe. Por lo tanto, la eliminación de la infección viral antes del resultado de estas complicaciones sería de gran beneficio. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) se puede combinar con tratamientos convencionales para las infecciones por el virus de Epstein-Barr para una ventaja terapéutica.
En otra realización, la infección es el virus del herpes simple (HSV). El HSV se transmite por contacto directo con un huésped infectado. Una infección directa puede ser asintomática, pero típicamente produce ampollas que contienen partículas infecciosas. La enfermedad se manifiesta como ciclos de períodos activos de enfermedad, en los que las lesiones aparecen y desaparecen a medida que el virus infecta latentemente el ganglio nervioso para brotes posteriores. Las lesiones pueden ser en la cara, genitales, ojos y/o manos. En algunos casos, una infección también puede causar encefalitis.
Los tratamientos para las infecciones por herpes están dirigidos principalmente a resolver los brotes sintomáticos e incluyen medicamentos antivirales sistémicos tales como: aciclovir (por ejemplo, Zovirax®), valaciclovir, famciclovir, penciclovir y medicamentos tópicos tales como docosanol (Abreva®), tromantadina y zilactina. La eliminación de infecciones latentes de herpes sería de gran beneficio clínico. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3) puede combinarse con tratamientos convencionales para infecciones por virus herpes para obtener una ventaja terapéutica.
En otra realización, la infección es el virus linfotrófico T humano (HTLV-1, HTLV-2). E1HTLV se transmite por contacto sexual, lactancia o exposición a sangre contaminada. El virus activa un subconjunto de células Th llamadas células Th1, lo que resulta en su sobreproliferación y sobreproducción de citocinas relacionadas con Th1 (por ejemplo, IFN-y y TNF-a). Esto a su vez da como resultado una supresión de los linfocitos Th2 y una reducción de la producción de citocinas Th2 (por ejemplo, IL-4, IL-5, IL-10 e IL-13), lo que provoca una reducción en la capacidad de un huésped infectado para montar una adecuada respuesta inmune a organismos invasores que requieren una respuesta dependiente de Th2 para la limpieza (por ejemplo, infecciones parasitarias, producción de anticuerpos mucosos y humorales).
Las infecciones por HTLV causan infecciones oportunistas que resultan en bronquiectasias, dermatitis y superinfecciones con Staphylococcus spp. y Strongyloides spp. dando como resultado la muerte por sepsis polimicrobiana. La infección por HTLV también puede conducir directamente a la leucemia/linfoma de células T en adultos y a la enfermedad de la neurona motora superior desmielinizante progresiva conocida como HAM/TSP. La eliminación de las infecciones latentes por HTLV sería de gran beneficio clínico. Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 (solas o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) se pueden combinar con tratamientos convencionales para infecciones por HTLV para una ventaja terapéutica.
En otra realización, la infección es el virus del papiloma humano (HPV). E1HPV afecta principalmente a los queratinocitos y se presenta en dos formas: cutánea y genital. Transmisión que se cree que ocurre a través del contacto directo y/o actividad sexual. Tanto la infección cutánea como la infección genital por HPV pueden provocar verrugas e infecciones latentes y, a veces, infecciones recurrentes, que están controladas por la inmunidad del huésped que controla los síntomas y bloquea la aparición de verrugas, pero deja al huésped capaz de transmitir la infección a otros.
La infección con el HPV también puede provocar ciertos tipos de cáncer, tales como el cáncer cervical, anal, vulvar, de pene y orofarínico. No se conocen curas para la infección por HPV, pero el tratamiento actual es la aplicación tópica de Imiquimod, que estimula el sistema inmunitario para atacar el área afectada. La eliminación de las infecciones latentes por HPV sería de gran beneficio clínico. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) puede combinarse con tratamientos convencionales para infecciones por HPV para ventaja terapéutica.
Infecciones bacterianas
Algunos ejemplos de bacterias patógenas que causan infecciones tratables por los métodos de la divulgación incluyen sífilis, clamidia, bacterias rickettsiales, micobacterias, estafilococos, estreptococos, neumonococos, meningococos y conococos, klebsiella, proteus, serratia, pseudomonas, legionella, difteria, salmonella, bacilos, cólera, tétanos, botulismo, ántrax, peste, leptospirosis y bacterias de la enfermedad de Lyme. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (sola o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-Ll o anti-TIM-3) puede usarse en combinación con las modalidades de tratamiento existentes para las infecciones mencionadas anteriormente. Por ejemplo, los tratamientos para la sífilis incluyen penicilina (por ejemplo, penicilina G.), tetraciclina, doxiciclina, ceftriaxona y azitromicina.
La enfermedad de Lyme, causada por Borrelia burgdorferi, se transmite a los humanos a través de las picaduras de garrapatas. La enfermedad se manifiesta inicialmente como una erupción localizada, seguida de síntomas similares a la gripe, como malestar general, fiebre, dolor de cabeza, rigidez en el cuello y artralgias. Las manifestaciones posteriores pueden incluir artritis migratoria y poliarticular, afectación neurológica y cardíaca con parálisis de los nervios craneales y radiculopatía, miocarditis y arritmias. Algunos casos de enfermedad de Lyme se vuelven persistentes y provocan daños irreversibles análogos a la sífilis terciaria. La terapia actual para la enfermedad de Lyme incluye principalmente la administración de antibióticos. Las cepas resistentes a los antibióticos se pueden tratar con hidroxicloroquina o metotrexato. Los pacientes resistentes a antibióticos con dolor neuropático pueden ser tratados con gabapentina. La minociclina puede ser útil en la enfermedad de Lyme crónica/tardía con manifestaciones inflamatorias neurológicas u otras.
Otras formas de borreliois, tal como las que resultan de B. recurentis, B. hermsii, B. turicatae, B. parikeri., B. hispanica, B. duttonii y B. persica, así como leptospirosis (por ejemplo, L. interrogans), típicamente se resuelven espontáneamente a menos que los títulos sanguíneos alcancen concentraciones para causar obstrucción intrahepática
Hongos y parásitos
Algunos ejemplos de hongos patógenos que causan infecciones tratables por los métodos de la divulgación incluyen Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, etc.), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, etc.), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizophus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis e Histoplasma capsulatum.
Algunos ejemplos de parásitos patógenos que causan infecciones tratables por los métodos de la divulgación incluyen Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma bruzi, Trypanosoma bruzi, Trypanosoma, Toxoplasma gondi y Nippostrongylus brasiliensis.
Terapias de combinación adicionales
En el presente documento se proporcionan combinaciones de moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 con uno o más segundos agentes terapéuticos. Muchas de las combinaciones en esta sección son útiles para tratar el cáncer, pero también se describen otras indicaciones. Esta sección se centra en combinaciones de moléculas de anticuerpos anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-Ll), con uno o más de los agentes descritos en la Tabla 7. En las combinaciones a continuación en el presente documento, en una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende_ (i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 seleccionada de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o s EQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PKC, Sotrastaurin (Compuesto A1), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de PKC es Sotrastaurina (Compuesto A1) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/039549. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Sotrastaurina (Compuesto A1), o un compuesto como se describe en la Publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un melanoma, un linfoma no Hodgkin, una enfermedad inflamatoria intestinal, rechazo de trasplante, un trastorno oftálmico o psoriasis.
En ciertas realizaciones, Sotrastaurin (Compuesto A1) se administra a una dosis de aproximadamente 20 a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 a aproximadamente 600 mg, aproximadamente 50 mg a aproximadamente 450 mg, aproximadamente 100 mg a 400 mg, aproximadamente 150 mg a 350 mg, o aproximadamente 200 mg a 300 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg o 600 mg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.
En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de BCR-ABL, TASIGNA (Compuesto A2, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/005281, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de BCR-ABL es TASIGNA, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No WO 2004/005281. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con TASIGNA (Compuesto A2), o un compuesto como se describe en la Publicación PCT No. WO 2004/005281, para tratar un trastorno tal como una leucemia linfocítica, enfermedad de Parkinson, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer de cabeza y cuello o hipertensión pulmonar.
En una realización, el inhibidor de BCR-ABL o TASIGNA se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg (por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para Ph+ CML-CP recién diagnóstico), o aproximadamente 400 mg, por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para Ph+ CML-CP y CML-AP resistente o intolerante). El inhibidor de b CR-ABL o un Compuesto A2 se administra a una dosis de aproximadamente 300-400 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de HSP90, tal como 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil) isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de HSP90 es 5-(2,4 dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil) isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil) isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto como se describe en la Publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un linfoma, un cáncer gástrico, cáncer de mama, cáncer digestivo/gastrointestinal, cáncer de páncreas, cáncer colorrectal, tumor sólido o trastorno de hematopoyesis.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K y/o mTOR, Dactolisib (Compuesto A4) u 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometilfenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K y/o mTOR es Dactolisib (Compuesto A4), 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Dactolisib (Compuesto A4), 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 -(4-piperazin-1- il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c] quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer de próstata, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica), un cáncer de mama, un cáncer cerebral, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer renal, un tumor sólido o un cáncer de hígado.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR, 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1-metilurea (Compuesto A5) o un compuesto descrito en la Patente U.S. 8,552,002, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR es 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1-metilurea (Compuesto A5) o un compuesto descrito en la Patente U.S. 8,552,002. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con el Compuesto A5, o un compuesto como se describe en el documento US 8,552,002, para tratar un trastorno tal como un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer hematológico o un tumor sólido.
En una realización, el inhibidor de FGFR o 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6 ((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1 -metilurea (Compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100-125 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 100 mg o aproximadamente 125 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, Buparlisib (Compuesto A6), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de PI3K es Buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con Buparlisib (Compuesto A6), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786, para tratar un trastorno tal como un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer endocrino, una leucemia, un cáncer de ovario, un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer de mama, un cáncer del sistema reproductor femenino, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un sólido tumor, un linfoma no Hodgkin, un trastorno de hematopoyesis o un cáncer de cabeza y cuello.
En una realización, el inhibidor de PI3K o Buparlisib (Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg (por ejemplo, por día).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR, 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4 ((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No WO 2009/141386 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il) quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto descrito en una publicación PCT No. Wo 2009/141386. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4 ((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4 ((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/141386, para tratar un trastorno tal como un cáncer caracterizado por angiogénesis.
En una realización, el inhibidor de FGFR o 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4 ((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (El compuesto A7) se administra a una dosis de, por ejemplo, de aproximadamente 3 mg a aproximadamente 5 g, más preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 1,5 g por persona por día, opcionalmente dividido en 1 a 3 dosis individuales que pueden ser, por ejemplo, del mismo tamaño
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il) tiazol-2-il) pirrolidin-1,2-dicarboxamida (El Compuesto A8) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/029082 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de PI3K es (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidina-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/029082. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il) tiazol-2-il) pirrolidina-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8), o un compuesto divulgado Publicación PCT No. WO 2010/029082, para tratar un trastorno como un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un tumor sólido y un cáncer de cabeza y cuello.
En una realización, el inhibidor de PI3K o (S)-N1-(4-metil-5-(2-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il) tiazol-2-il) pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 150-300, 200-300, 200­ 400 o 300-400 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 200, 300 o 400 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/149755, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de citocromo P450 (por ejemplo, el inhibidor de CYP17) es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/149755. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/149755, para tratar el cáncer de próstata.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de HDM2, (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r,4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3 (4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/076786 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí). En una realización, el inhibidor de HDM2 es (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil (((1r, 4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino) enil)-1,2-dihidroisoquinolin-3 (4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/076786. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r, 4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3 (4H)-ona (Compuesto A10), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/076786, para tratar un trastorno tal como un tumor sólido.
En una realización, el inhibidor de HDM2 o (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r, 4S)-4-(4-metil-))3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg, por ejemplo, se administra tres veces semanalmente, 2 semanas y una semana de descanso. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 400, 500, 600 o 700 mg; aproximadamente 400-500, 500-600 o 600-700 mg, por ejemplo, administrado tres veces por semana.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un agente quelante de hierro, Deferasirox (también conocido como EXJADE; Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el agente quelante de hierro es Deferasirox o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395. En una realización, el agente quelante de hierro es Deferasirox (Compuesto A11). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Deferasirox (Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395, para tratar la sobrecarga de hierro, la hemocromatosis o la mielodisplasia.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de aromatasa, Letrozol (también conocido como FEMARA; Compuesto A12), o un compuesto descrito en el documento US 4,978,672 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de aromatasa es Letrozol (Compuesto A12) o un compuesto descrito en la Patente U.S. 4,978,672. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con Letrozol (Compuesto A12), o un compuesto descrito en la Patente U.S. 4,978,672, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un leiomiosarcoma, un cáncer de endometrio, un cáncer de mama, un cáncer del sistema reproductor femenino o una deficiencia hormonal.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de pan-PI3K, (4S, 5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)[4,5'-bipirimidin] -6-il)-4-(hidroximetil) 5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/124826 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4 '-(trifluorometil) [4,5'-bipirimidin] -6-il)-4 (hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/124826. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (4S, 5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4 '-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidina]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/124826, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un tumor sólido avanzado.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de p53 y/o una interacción p53/Mdm2, (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4 -dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo [3,4-d] imidazol-4 (1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/111105 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de interacción p53 y/o p53/Mdm2 es (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4 -clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/111105. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo [3,4-d] imidazol-4 (1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/111105, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un sarcoma de tejido blando.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4((2(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No WO 2005/073224 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R es 4 ((2(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino) benzo[d]tiazol-6-il) oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N- metilpicolinamida (Compuesto A15) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224, para tratar un trastorno tal como el cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inductor de apoptosis y/o un inhibidor de la angiogénesis, tal como el mesilato de imatinib (también conocido como GLEEVEC; Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inductor de apoptosis y/o un inhibidor de la angiogénesis es el mesilato de imatinib (Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con mesilato de imatinib (Compuesto A16), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón no microcítico, un linfoma, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un cáncer de hígado, un cáncer de cabeza y cuello, asma, esclerosis múltiple, alergia, demencia de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica o artritis reumatoide.
En ciertas realizaciones, el mesilato de imatinib (Compuesto A16) se administra a una dosis de aproximadamente 100 a 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg a 800 mg, aproximadamente 300 mg a 700 mg, o aproximadamente 400 mg a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg o 700 mg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día. En una realización, el mesilato de imatinib se administra a una dosis oral de aproximadamente 100 mg a 600 mg diarios, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, 200 mg, 260 mg, 300 mg, 400 mg o 600 mg diarios.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de JAK, 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo [1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una de sus sales dihidrocloricas, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK es 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4] triazin-2-il) benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclorica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicacion PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil) imidazo[1,2-b][1,2,4] triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclorica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno tal como cáncer colorrectal, leucemia mieloide, cáncer hematológico, enfermedad autoinmune, linfoma no Hodgkin o trombocitemia.
En una realización, el inhibidor de JAK o un 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil) imidazo[1,2-b][1,2,4] triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclorica del mismo se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 400-500 o 500-600 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de JAK, fosfato de Ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de JAK es fosfato de Ruxolitinib (Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con fosfato de Ruxolitinib (Compuesto A18), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno tal como un cáncer de próstata, una leucemia linfocítica, un mieloma múltiple, un linfoma, un cáncer de pulmón, una leucemia, caquexia, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, artritis reumatoide, psoriasis, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, una enfermedad autoinmune, un linfoma no Hodgkin o trombocitemia.
En una realización, el inhibidor de JAK o el fosfato de Ruxolitinib (Compuesto A18) se administra a una dosis de aproximadamente 15-25 mg, por ejemplo, dos veces al día. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 15, 20 o 25 mg, o aproximadamente 15-20 o 20-25 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de DAC es Panobinostat (Compuesto A19) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Panobinostat (Compuesto A19), un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer del sistema respiratorio/torácico, cáncer de próstata, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, cáncer de hueso, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer endocrino, linfoma, cáncer neurológico, leucemia, VIH/SIDA, trastorno inmunitario, rechazo al trasplante, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer pancreático, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, un cáncer renal, un linfoma no Hodgkin, un cáncer de cabeza y cuello, un trastornos de hematopoyesis o cáncer de hígado.
En una realización, el inhibidor de DAC o Panobinostat (Compuesto A19) se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg (por ejemplo, por día).
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más de citocromo P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis, Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de uno o más de citocromo P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis es Osilodrostat (Compuesto A20) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945, para tratar un trastorno tal como el síndrome de Cushing, hipertensión o terapia por insuficiencia cardíaca.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2 ((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazo1-2-il) pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino) propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en el documento US 8,552,003 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de IAP es (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,552,003. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil) tiazol-2-il) pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,552,003, para tratar un trastorno tal como un mieloma múltiple, un cáncer de mama, un cáncer de ovario, un cáncer de páncreas o un trastorno de hematopoyesis.
En una realización, el inhibidor de IAP o (S)-N ((S)-1-ciclohexil-2 ((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil) tiazol-2-il) pirrolidin-1 -il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en el documento US 8,552,003 se administra a una dosis de aproximadamente 1800 mg, por ejemplo, una vez a la semana.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor suavizado (SMO), fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il) pirazin-2-il) propan- 2-ol (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 o WO 2010/007120 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de SMO es fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il)pirazin-2-il) propan-2-ol (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 o Wo 2010/007120. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-ilo))-2-metilpiperazin-1-il) pirazin-2-il) propan-2-ol (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 o W o 2010/007120 para tratar un trastorno tal como un cáncer, un meduloblastoma, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer de próstata, un carcinoma de células basales, un cáncer de páncreas o una inflamación.
En ciertas realizaciones, el fosfato de Sonidegib (Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 20 a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 40 mg a 400 mg, aproximadamente 50 mg a 300 mg, o aproximadamente 100 mg a 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg o 300 mg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de Alk, ceritinib (también conocido como ZYKADIA; Compuesto A23) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de Alk es ceritinib (Compuesto A23) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con ceritinib (Compuesto A23), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201, para tratar un trastorno tal como cáncer de pulmón de células no pequeñas o tumores sólidos.
En una realización, el inhibidor de Alk o ceritinib (Compuesto A23) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg, por ejemplo, una vez al día.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de JAK y/o CDK4/6, 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2 ((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,415,355 o la Patente U.S. 8.685.980 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 es 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2 ((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,415,355 o la Patente U.S. 8,685,980. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2 ((5-(piperazin-1 -il)piridin-2-il)amino)-7H -pirrolo [2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en los documentos US 8,415,355 o US 8,685,980, para tratar un trastorno tal como un linfoma, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer de mama, o un tumor sólido.
En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 o 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2 ((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, 300, 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 200-300, 300-400, 400-500 o 500-600 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor del receptor de prolactina (PRLR), una molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) como se divulga en la Patente U.S. 7,867,493), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PRLR es un anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) divulgado en el documento US 7,867,493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con la molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) descrita en la Patente U.S. 7,867,493 para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer de próstata o un cáncer de mama.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de PIM quinasa, N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida
(Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/026124 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de PIM quinasa es N-(4-((1R,3S, 5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5- fluoropicolinamida (Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la Publicación p Ct No. WO 2010/026124. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/026124, para tratar un trastorno tal como un mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, una leucemia mieloide o un linfoma no Hodgkin.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de señalización de Wnt, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/101849 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en este documento. En una realización, el inhibidor de señalización de Wnt es 2-(2' 3-dimetil- [2,4'-bipiridin]5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-ilo)acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/101849. En una realización, el inhibidor de señalización de Wnt es 2-(2',3-dimetil- [2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-ilo)acetamida (Compuesto A28). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazina-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/101849, para tratar un trastorno tal como un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, cáncer de mama, cáncer de páncreas o cáncer de colon).
En ciertas realizaciones, 2-(2',3-dimetil- [2,4'-bipiridin] -5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 1 a 50 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg a 45 mg, aproximadamente 3 mg a 40 mg, aproximadamente 5 mg a 35 mg, 5 mg a 10 mg, o aproximadamente 10 mg a 30 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg o 40 mg. El horario de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de BRAF, Encorafenib (Compuesto A29), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de BRAF es Encorafenib (Compuesto A29) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con Encorafenib (Compuesto A29), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma o un cáncer colorrectal.
En una realización, el inhibidor de BRAF o Encorafenib (Compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 200-400 o 300-400 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, aproximadamente 300 o aproximadamente 400 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de CDK4/6, 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2 ((5 ((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo [4.2.1] nonan-3-il)piridin-2-ilo)amino)-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de CDK4/6 es 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2 ((5 ((1R, 6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo [4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5 ((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un linfoma de células del manto, un liposarcoma, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma, un cáncer de esófago de células escamosas o un cáncer de mama.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de HER3, el Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2012/022814, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de HER3 es el Compuesto A31 o un compuesto divulgado en la publicación PCT WO 2012/022814. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la publicación PCT WO 2012/022814, para tratar un trastorno tal como un cáncer gástrico, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, un cáncer de estómago, un cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama metastásico) o un cáncer digestivo/gastrointestinal.
En algunas realizaciones, el Compuesto A31 es una molécula de anticuerpo monoclonal humano.
En una realización, el inhibidor de HER3 o el Compuesto A31 se administra a una dosis de aproximadamente 3, 10, 20 o 40 mg/kg, por ejemplo, una vez a la semana (QW). En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 3-10, 10-20 o 20-40 mg/kg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4, Compuesto A32, o un compuesto divulgado en una publicación PCT Publicación No. WO 2014/160160 (por ejemplo, un fármaco de molécula de anticuerpo conjugado contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4 es el Compuesto A32 o un compuesto descrito en una publicación PCT Publication No. WO 2014/160160. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A32, o un compuesto como se describe en la Tabla 7, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un rabdomiosarcoma, un cáncer de hígado, cáncer suprarrenal, cáncer de pulmón, cáncer de esófago, cáncer de colon o cáncer de endometrio.
En algunas realizaciones, el Compuesto A32 es un fármaco de molécula de anticuerpo conjugado contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de M-CSF, Compuesto A33., o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/045532 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o fragmento Fab contra M-CSF), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de M-CSF es el Compuesto A33 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/045532. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con el Compuesto A33, o un compuesto como se describe en la Publicación PCT No. WO 2004/045532, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, o sinovitis villonodular pigmentada (PVNS).
En realizaciones, el Compuesto A33 es una molécula de anticuerpo monoclonal contra M-CSF o un fragmento (por ejemplo, fragmento Fab) del mismo. En realizaciones, el inhibidor de M-CSF o el Compuesto A33 se administra a una dosis promedio de aproximadamente 10 mg/kg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de MEK, Binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/077914 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de MEK es Binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/077914. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/077914, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un trastorno genético multisistémico, un melanoma, un cáncer de ovario, un cáncer digestivo/gastrointestinal, una artritis reumatoide o un cáncer colorrectal.
En una realización, el inhibidor de MEK o Binimetinib (Compuesto A34) se administra a una dosis de aproximadamente 45 mg, por ejemplo, dos veces al día.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más de c -KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC, Midostaurina (Compuesto A35) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/037347 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor es Midostaurina (Compuesto A35) o compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/037347. En una realización, el inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC es Midostaurina. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Midostaurina (Compuesto A35), o compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/037347, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, síndrome mielodisplásico, una degeración mascular relacionada con la edad, una complicación diabética o un trastorno dermatológico.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de TOR (por ejemplo, inhibidor de mTOR), Everolimus (también conocido como AFINITOR; Compuesto A36) o un Compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí). En una realización, el inhibidor de TOR es Everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Everolimus (Compuesto A36) para tratar un trastorno tal como una enfermedad pulmonar intersticial, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer respiratorio/torácico, un cáncer de próstata, un mieloma múltiple, sarcoma, degeneración macular relacionada con la edad, cáncer de huesos, esclerosis tuberosa, cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, linfoma, trastornos neurológicos, astrocitoma, cáncer cervical, cáncer neurológico, una leucemia, trastornos inmunes, rechazo de trasplante, cáncer gástrico, melanoma, epilepsia, cáncer de mama o cáncer de vejiga.
En una realización, el inhibidor de TOR o Everolimusis (Compuesto A36) se administra a una dosis de aproximadamente 2.5-20 mg/día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 2.5, 5, 10 o 20 mg/día, por ejemplo, aproximadamente 2.5-5, 5-10 o 10-20 mg/día.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más de VEGFR -2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C, 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C es 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/030377. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un melanoma o un tumor sólido.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un agonista de somatostatina y/o inhibidor de liberación de la hormona de crecimiento, diaspartato de pasireotida (también conocido como S iGn IFOR; Compuesto A38) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o la patente U.S. No. 7,473,761 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el agonista de somatostatina y/o el inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento es el diaspartato de pasireotida (Compuesto A38) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o la Patente U.S. No. 7,473,761. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con diaspartato de pasireotida (Compuesto A38), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o la Patente U.S. No. 7,473,761, para tratar un trastorno tal como un cáncer de próstata, cáncer endocrino, cáncer nurológico, cáncer de piel (por ejemplo, melanoma), cáncer de páncreas, cáncer de hígado, síndrome de Cushing, trastorno gastrointestinal, acromegalia, trastorno del tracto hepático y biliar o cirrosis hepática.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un modulador de transducción de señal y/o inhibidor de la angiogénesis, Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/115562 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el modulador de la transducción de señales y/o el inhibidor de la angiogénesis es Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/115562. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Dovitinib (Compuesto A39), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/115562, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer del sistema respiratorio/torácico, un mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino o un trastorno genético neurológico.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de EGFR, (R E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de EGFR es (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, para tratar un trastorno tal como un cáncer, por ejemplo, un tumor sólido.
En una realización, el inhibidor de EGFR o (R, E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) se administra a una dosis de 150-250 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 150, 200 o 250 mg, o aproximadamente 150-200 o 200-250 mg.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de ALK, n 6-(2 -isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo [3,4-d] pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2008/073687 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de ALK es N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d] pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2008/073687. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonilo)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2008/073687, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un linfoma de células grandes anaplásico (ALCL), un carcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o un neuroblastoma.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de IGF-1R, 1,1 -dióxido de 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil) piperidin-1 -il)tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il) piperidin-4-ilo)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il) pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44), o 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il) pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A45) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/002655 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inhibidor de IGF-1R es 1,1-dióxido de 3-(4-(4 ((5-cloro-4 ((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil) piperidin-1-il) tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H -piran-4-il) piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il) pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/002655. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 1,1-dióxido de 3-(4-(4 ((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil) piperidin-1 -il)tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il) piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il) pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/002655, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un sarcoma.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de P-Glicoproteína 1, Valspodar. (también conocido como AMDRAY; Compuesto A46) o un compuesto divulgado en EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de la P-glucoproteína 1 es Valspodar (Compuesto A46) o un compuesto divulgado en EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Valspodar (Compuesto A46), o un compuesto divulgado en EP 296122, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un tumor resistente a fármacos.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con uno o más de un inhibidor de VEGFR, succinato de vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de VEGFR es succinato de vatalanib (compuesto A47) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con succinato de vatalanib (compuesto A47), o un compuesto divulgado en EP 296122, para tratar el cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de IDH o un compuesto divulgado en WO2014/141104 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de IDH es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/141104. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en WO2014/141104 para tratar un trastorno tal como un cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor BCL-ABL o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BCL-ABL es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642 para tratar un trastorno tal como un cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de c-RAF o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/151616 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de c-RAF es el Compuesto A50 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/151616. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/151616 para tratar un trastorno tal como un cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor competitivo de ERK1/2 ATP o un compuesto divulgado en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2014/062913 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en este documento. En una realización, el inhibidor competitivo de ERK1/2 ATP es un compuesto divulgado en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2014/062913. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A51 o un compuesto divulgado en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2014/062913 para tratar un trastorno tal como un cáncer.
En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe aquí, sola o en combinación con uno o más inmunomoduladores, se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa, (Compuesto A52) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de tirosina quinasa es 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A52) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 4-((2-(((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A52), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224, para tratar un trastorno tal como un cáncer.
En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anit-LAG-3 se administra en combinación con uno o más agentes seleccionados de, Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A27, Compuesto A29 y Compuesto A33.
En algunas realizaciones, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un agente anticancerígeno que tiene una actividad conocida en un ensayo de células inmunes, por ejemplo, en uno o más de un ensayo de huMLR, un ensayo de proliferación de células T y un ensayo de proliferación de células B. Ensayos de ejemplo se describen a continuación. Con base en el ensayo, se puede calcular una IC50 para cada agente de prueba. En realizaciones, el agente anticancerígeno tiene una IC50 de, por ejemplo, 0-1 jiM, 1-4 jiM, o mayor que 4 jiM, por ejemplo, 4-10 jiM o 4-20 jiM. En realizaciones, el segundo agente terapéutico se selecciona de uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto A21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto 49.
En algunas realizaciones, el Compuesto A28 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 5-10 o 10-30 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A22 (o compuesto relacionado con el Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 200 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A17 (o compuesto relacionado con el Compuesto A17) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A16 (o compuesto relacionado con el Compuesto A16) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg PO qDía. En algunas realizaciones, el Compuesto A29 (o compuesto relacionado con el Compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A24 (o compuesto relacionado con el Compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A23 (ceritinib) (o compuesto relacionado con ceritinib) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg una vez al día. En algunas realizaciones, el Compuesto A8 (o compuesto relacionado con el Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A5 (o compuesto relacionado con el Compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100-125 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A6 (o compuesto relacionado con el Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A6 (o compuesto relacionado con el Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A1 (o compuesto relacionado con el Compuesto A1) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300 o 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A40 (o compuesto relacionado con el Compuesto A40) se administra a una dosis de aproximadamente 150-250 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A10 (o compuesto relacionado con el Compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg, por ejemplo, se administra tres veces por semana, 2 semanas y una semana de descanso. En algunas realizaciones, el inhibidor de BCR-ABL se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg bid-80 mg bid.
A continuación se proporcionan ensayos de ejemplo de huMLR y ensayos de proliferación de células B o T.
Reacción de linfocitos mixtos humanos
La reacción de linfocitos mixtos (MLR) es un ensayo funcional que mide la respuesta proliferativa de los linfocitos de un individuo (el respondedor) a los linfocitos de otro individuo (el estimulador). Para realizar una MLR alogénica, se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de tres donantes, a partir de capas de tipo HLA desconocido (Kantonspital Blutspendezentrum de Berna y Aarau, Suiza). Las células se prepararon a 2x105 en 0.2 ml de medio de cultivo que contenía RPMI 1640 GlutaMAX™ con suero de ternera fetal al 10% (FCS), penicilina 100 U/estreptomicina 100 jig, 2-mercaptoetanol 50 jiM. Las reacciones individuales de 2 vías se prepararon mezclando PBMC de dos donantes diferentes en una relación 1:1 y los cocultivos se realizaron por triplicado en placas de cultivo de tejidos de fondo plano de 96 pocillos durante 6 días a 37 °C, 5% de CO2, en presencia o no de un rango de concentración de 8 puntos de compuestos de prueba. Las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jiCi/0.2 ml) durante las últimas 16 h de cultivo y se utilizó la radiactividad incorporada como una medida de la proliferación celular. La concentración que inhibió el 50% de la respuesta máxima de huMLR (IC50) se calculó para cada compuesto. La ciclosporina se usó como control positivo de la inhibición de huMLR.
Ensayo de proliferación de células B humanas
Las PBMC se aislaron recientemente por gradiente de densidad Ficoll-Paque de sangre humana y se sometieron a aislamiento negativo de células B. Las células B se resuspendieron en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, FCS al 10%, gentamicina 50 jig/ml, 2-mercaptoetanol 50 jiM, 1x ITS (insulina, transferrina y selenito de sodio), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 9.104 por pocillo en una placa de cultivo de 96 pocillos de fondo plano. La estimulación de células B se realizó mediante la molécula de anticuerpo humano anti-IgM (30ug/mL) e IL-4 (75ng/mL) o mediante ligando CD40 (3ug/mL) e IL-4 (75ng/mL) en presencia o no de un rango de concentración de 7 puntos de compuestos de prueba. Después de 72 h de cultivo a 37 °C, 10% de CO2, las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jiCi/pocillo) durante las últimas 6 h de cultivo. Las células B se recolectaron y se midió la incorporación de timidina utilizando un contador de centelleo. De cada tratamiento duplicado, se calculó la media y estos datos se trazaron en XLfit 4 para determinar los valores respectivos de IC50.
Ensayo de proliferación de células T humanas
Las PBMC se aislaron recientemente por gradiente de densidad Ficoll-Paque de sangre humana y se sometieron a aislamiento negativo de células T. Las células T se prepararon en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, FCS al 10%, gentamicina 50 jg/ml, 2-mercaptoetanol 50 jM , 1x ITS (insulina, transferrina y selenito de sodio), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 8.104 por pocillo en una placa de cultivo de 96 pocillos de fondo plano. La estimulación de células T se realizó mediante una molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (10 jg/m l) o mediante una molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (5 jg/m l) y una molécula de anticuerpo anti-CD28 (1 jg/ml) en presencia o no de un rango de concentración de 7 puntos de compuestos de prueba. Después de 72 h de cultivo a 37 °C, 10% de CO2, las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jCi/pocillo) durante las últimas 6 h de cultivo. La proliferación celular se midió mediante la incorporación de timidina permitiendo la determinación de IC50 para cada compuesto probado.
Disminución de una respuesta immune
Los anticuerpos anti-LAG-3 pueden usarse para modular, por ejemplo, provocar y amplificar una respuesta inmune, por ejemplo, una respuesta autoinmune. Por ejemplo, el bloqueo anti-LAG-3 junto con diversas autoproteínas puede usarse para idear protocolos de vacunación para generar de manera eficiente respuestas inmunes contra estas autoproteínas para el tratamiento de enfermedades. De hecho, muchas respuestas antitumorales implican antiautoreactividades (van Elsas et al. (2001) J. Exp. Med. 194: 481-489; Overwijk, et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 2982-2987; Rosenberg y White (1996) J. Immunother Emphasis Tumor Immunol 19 (1): 81-4). Además, la enfermedad de Alzheimer implica una acumulación inadecuada de péptido Ap en depósitos amiloides en el cerebro; Las respuestas de anticuerpos contra amiloide pueden eliminar estos depósitos de amiloide (Schenk et al., (1999) Nature 400: 173-177).
Otras autoproteínas también se pueden utilizar como dianas, tales como la IgE para el tratamiento de la alergia y el asma, y el TNFc para la artritis reumatoide. Las respuestas de anticuerpos a diversas hormonas pueden ser inducidas por el uso de anticuerpos anti-LAG-3. Las respuestas de anticuerpos neutralizantes a las hormonas reproductivas pueden usarse para la anticoncepción. La respuesta de anticuerpos neutralizantes a las hormonas y otros factores solubles que se requieren para el crecimiento de tumores particulares también puede considerarse como objetivos de vacunación candidatos.
Los métodos análogos descritos anteriormente para el uso del anticuerpo anti-LAG-3 pueden usarse para la inducción de respuestas terapéuticas autoinmunes para tratar pacientes que tienen una acumulación inapropiada de otros autoantígenos, tales como depósitos amiloides, incluyendo Ap en la enfermedad de Alzheimer, citocinas tales como TNFa e IgE.
En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se administran a un sujeto junto con (por ejemplo, antes, simultáneamente o después) uno o más de: trasplante de médula ósea, terapia ablativa de células T usando agentes de quimioterapia tales como fludarabina, radioterapia de haz externo (XRT), ciclofosfamida y/o anticuerpos tales como OKT3 o c A m PATH. En una realización, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se administran después de una terapia ablativa de células B tal como agentes que reaccionan con CD20, por ejemplo, Rituxan. Por ejemplo, en una realización, los sujetos pueden someterse a un tratamiento estándar con quimioterapia de dosis alta seguida de trasplante de células madre de sangre periférica. En ciertas realizaciones, después del trasplante, los sujetos reciben las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3. En una realización adicional, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 se administran antes o después de la cirugía.
Usos diagnósticos
En un aspecto, la presente divulgación proporciona un método de diagnósti
proteína LAG-3 in vitro (por ejemplo, en una muestra biológica, tal como una biopsia de tejido, por ejemplo, de un tejido canceroso) o in vivo (por ejemplo, imagen in vivo en un sujeto). El método incluye: (i) poner en contacto la muestra con una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, o administrar al sujeto, la molécula de anticuerpo; (opcionalmente) (ii) poner en contacto una muestra de referencia, por ejemplo, una muestra de control (por ejemplo, una muestra biológica de control, tal como plasma, tejido, biopsia) o un sujeto de control)); y (iii) detectar la formación de un complejo entre la molécula de anticuerpo y la muestra o sujeto, o la muestra o sujeto de control, en donde un cambio, por ejemplo, un cambio estadísticamente significativo, en la formación del complejo en la muestra o sujeto relativo para la muestra o sujeto de control es indicativo de la presencia de LAG-3 en la muestra. La molécula de anticuerpo puede marcarse directa o indirectamente con una sustancia detectable para facilitar la detección del anticuerpo unido o no unido. Las sustancias detectables adecuadas incluyen diversas enzimas, grupos prostéticos, materiales fluorescentes, materiales luminiscentes y materiales radiactivos, como se describe anteriormente y se describe con más detalle a continuación.
El término "muestra", ya que se refiere a muestras utilizadas para detectar polipéptidos, incluye, pero no se limita a, células, lisados celulares, proteínas o extractos de membrana de células, fluidos corporales o muestras de tejido.
La formación compleja entre la molécula de anticuerpo y LAG-3 se puede detectar midiendo o visualizando la molécula de unión unida al antígeno LAG-3 o la molécula de unión no unida. Se pueden usar ensayos de detección convencionales, por ejemplo, ensayos de inmunosorción enzimática (ELISA), un radioinmunoensayo (RIA) o inmunohistoquímica de tejidos. Alternativa al marcado de la molécula de anticuerpo, la presencia de LAG-3 se puede analizar en una muestra mediante un inmunoensayo de competición que utiliza estándares marcados con una sustancia detectable y una molécula de anticuerpo sin marcar. En este ensayo, la muestra biológica, los patrones marcados y la molécula de anticuerpo se combinan y se determina la cantidad de patrón marcado unido a la molécula de unión no marcada. La cantidad de LAG-3 en la muestra es inversamente proporcional a la cantidad de patrón marcado unido a la molécula de anticuerpo.
Ácidos nucleicos
La invención también presenta ácidos nucleicos que comprenden secuencias de nucleótidos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera y CDRs de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 de la invención. Por ejemplo, la invención presenta un primer y segundo ácido nucleico que codifica regiones variables de cadena pesada y ligera, respectivamente, de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la invención. El ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas aquí, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las tablas de este documento.
En ciertas realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica una región variable de la cadena pesada de la invención que tiene una secuencia de aminoácidos como se expone en las tablas aquí, y una secuencia de nucleótidos que codifica una región variable de la cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos de la invención como se expone en las tablas de la presente. En aún otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se expone en las tablas aquí, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia de al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idénticas a las mismos, y/o que tienen una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).
En ciertas realizaciones divulgadas, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de cadena pesada que tiene la secuencia de nucleótidos como se expone en las tablas aquí, una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, un secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridarse bajo las condiciones rigurosas descritas aquí). En otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDRs de una región variable de la cadena ligera que tiene la secuencia de nucleótidos como se expone en las tablas aquí, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridarse bajo las condiciones rigurosas descritas aquí). En aún otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen la secuencia de nucleótidos como se expone en las tablas aquí, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridarse bajo las condiciones rigurosas descritas aquí).
En otro aspecto, la solicitud presenta células huésped y vectores que contienen los ácidos nucleicos descritos aquí. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en un único vector o en vectores separados presentes en la misma célula huésped o célula huésped separada, como se describe con más detalle a continuación.
Vectores
Además se proporcionan en el presente documento vectores que comprenden secuencias de nucleótidos que codifican una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. En una realización, los vectores comprenden nucleótidos que codifican una molécula de anticuerpo descrita aquí. En una realización, los vectores comprenden las secuencias de nucleótidos descritas aquí. Los vectores incluyen, pero no se limitan a, un virus, plásmido, cósmido, fago lambda o un cromosoma artificial de levadura (YAC).
Se pueden emplear numerosos sistemas de vectores. Por ejemplo, una clase de vectores utiliza elementos de ADN que se derivan de virus animales tales como, por ejemplo, virus del papiloma bovino, virus del polioma, adenovirus, virus vaccinia, baculovirus, retrovirus (virus del sarcoma de Rous, MMTV o MOMLV) o virus SV40. Otra clase de vectores utiliza elementos de ARN derivados de virus de ARN tal como el virus Semliki Forest, el virus de la encefalitis equina oriental y los flavivirus.
Además, las células que han integrado establemente el ADN en sus cromosomas pueden seleccionarse introduciendo uno o más marcadores que permitan la selección de células huésped transfectadas. El marcador puede proporcionar, por ejemplo, prototropía a un huésped auxotrófico, resistencia a biocidas (por ejemplo, antibióticos) o resistencia a metales pesados tales como cobre o similares. El gen marcador seleccionable se puede unir directamente a las secuencias de ADN que se van a expresar o introducir en la misma célula por cotransformación. También se pueden necesitar elementos adicionales para una síntesis óptima de ARNm. Estos elementos pueden incluir señales de empalme, así como promotores transcripcionales, potenciadores y señales de terminación.
Una vez que el vector de expresión o la secuencia de ADN que contiene los constructos se ha preparado para la expresión, los vectores de expresión pueden transfectarse o introducirse en una célula huésped apropiada. Se pueden emplear diversas técnicas para lograr esto, tales como, por ejemplo, fusión de protoplastos, precipitación con fosfato de calcio, electroporación, transducción retroviral, transfección viral, pistola génica, transfección basada en lípidos u otras técnicas convencionales. En el caso de la fusión de protoplastos, las células se cultivan en medios y se seleccionan para la actividad apropiada.
Los expertos en la técnica conocen métodos y condiciones para cultivar las células transfectadas resultantes y para recuperar la molécula de anticuerpo producida, y pueden variarse u optimizarse dependiendo del vector de expresión específico y la célula huésped de mamífero empleada, con base en la presente descripción.
Células
La invención también proporciona células huésped que comprenden un ácido nucleico que codifica una molécula de anticuerpo de la invención.
En una realización, las células huésped están modificadas genéticamente para comprender ácidos nucleicos que codifican la molécula de anticuerpo.
En una realización, las células huésped se modifican genéticamente usando un casete de expresión. La frase "casete de expresión" se refiere a secuencias de nucleótidos, que son capaces de afectar la expresión de un gen en hospedadores compatibles con tales secuencias. Tales casetes pueden incluir un promotor, un marco de lectura abierto con o sin intrones y una señal de terminación. También se pueden usar factores adicionales necesarios o útiles para efectuar la expresión, tales como, por ejemplo, un promotor inducible.
La invención también proporciona células huésped que comprenden los vectores de la invención.
La célula puede ser, pero no limitada a, una célula eucariota, una célula bacteriana, una célula de insecto o una célula humana. Las células eucariotas adecuadas incluyen, pero sin limitación, células Vero, células HeLa, células COS, células CHO, células HEK293, células BHK, células MDCKII y línea celular Per C6 (por ejemplo, células PER C6 de Crucell). Las células de insecto adecuadas incluyen, pero no se limitan a, células Sf9.
Tabla 1. Secuencias de aminoácidos y nucleótidos para moléculas de anticuerpos murinos quiméricos y humanizados. Las moléculas de anticuerpo Incluyen mAb murlno BAP050, mAbs quiméricos BAP050-chi, mAbs humanizados BAP050-hum01 a BAB050-hum20, mAbs humanizados BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser a BAP050-hum20-Ser, y mAbs humanizados BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J. Se muestran las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDRs de cadena pesada y ligera, las regiones variables de cadena pesada y ligera, y las cadenas pesadas y ligeras.
Figure imgf000090_0001
Figure imgf000091_0001
Figure imgf000092_0001
Figure imgf000093_0001
Figure imgf000094_0001
Figure imgf000095_0001
Figure imgf000096_0001
Figure imgf000097_0001
Figure imgf000098_0001
Figure imgf000099_0001
Figure imgf000100_0001
Figure imgf000101_0001
Figure imgf000102_0001
Figure imgf000103_0001
Figure imgf000104_0001
Figure imgf000105_0001
Figure imgf000106_0001
Figure imgf000107_0001
Figure imgf000108_0001
Figure imgf000109_0001
Figure imgf000110_0001
Figure imgf000111_0001
Figure imgf000112_0001
Figure imgf000113_0001
Figure imgf000114_0001
Figure imgf000115_0001
Figure imgf000116_0001
Figure imgf000117_0001
Figure imgf000118_0001
Figure imgf000119_0001
Figure imgf000120_0001
Figure imgf000121_0001
Figure imgf000122_0001
Figure imgf000123_0001
Figure imgf000124_0001
Figure imgf000125_0001
Figure imgf000126_0001
Figure imgf000127_0001
Figure imgf000128_0001
Figure imgf000129_0001
Figure imgf000130_0001
Figure imgf000131_0001
Figure imgf000132_0001
Figure imgf000133_0001
Figure imgf000134_0001
Figure imgf000135_0001
Figure imgf000136_0001
Figure imgf000137_0001
Figure imgf000138_0001
Figure imgf000139_0001
Figure imgf000140_0001
Figure imgf000141_0001
Figure imgf000142_0001
Figure imgf000143_0001
Figure imgf000144_0001
Figure imgf000145_0001
Figure imgf000146_0001
Figure imgf000147_0001
Figure imgf000148_0001
Figure imgf000149_0001
Figure imgf000150_0001
Figure imgf000151_0001
Figure imgf000152_0001
Figure imgf000153_0001
Figure imgf000154_0001
Figure imgf000155_0001
Figure imgf000156_0001
Figure imgf000157_0001
Figure imgf000158_0001
Figure imgf000159_0001
Figure imgf000160_0001
Figure imgf000161_0001
Figure imgf000162_0001
Figure imgf000163_0001
Figure imgf000164_0001
Figure imgf000165_0001
Figure imgf000166_0001
Figure imgf000167_0001
Figure imgf000168_0001
Figure imgf000169_0001
Figure imgf000170_0001
Figure imgf000171_0001
Figure imgf000172_0001
Figure imgf000173_0001
Figure imgf000174_0001
Figure imgf000175_0001
Figure imgf000176_0001
Figure imgf000177_0001
CGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCA CAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTC AGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGA GAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATC AGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAAC
Figure imgf000178_0001
AGGGGAGAGTGT
BAP050-Clon-F HC
Figure imgf000178_0002
Figure imgf000178_0003
EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGFTLTNYGMN
V7VRQAPGQGLEvíMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVF SLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYG SEQ ID NO: 100 VH TNNAEAMDYV7GQGTTVTVSS GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAA GAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATCTCCTGCAAGG TGTCCGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAAC TGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATG GATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTA CCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTC TCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCA GATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGT ACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGC ACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCA SEQ ID NO: 112
Figure imgf000178_0004
GGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGFTLTNYGMN OTRQAPGQGLES'rMGHINTDTGEPTYADDFKGRFVF SLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYG TNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCS RSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNV DHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSV FLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLH QDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDXAVE WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKS SEQ ID NO: 113
Figure imgf000178_0005
H RWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAA GAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATCTCCTGCAAGG TGTCCGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAAC TGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATG GATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTA CCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTC TCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCA GATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGT ACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGC ACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCA GGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCA AGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCC SEQ ID NO: 114 DNA HC AGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTG
Figure imgf000179_0001
GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTC TGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTT
Figure imgf000180_0001
Figure imgf000181_0001
Figure imgf000182_0001
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMN WVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVF SLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYG TNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCS RSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNV DHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSV FLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFHSTYRWSVLTVLH QDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSQEEMTKNQVS1TCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKS SEQ ID NO: 122 HC RWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAA GAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGG CCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAAC TGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATG GATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTA CCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTC TCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCA GATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGT ACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGC ACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCA GGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCA AGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCC AGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTG CCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCG TGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTG CACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCT GTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCA GCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTG GACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAG GGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCT GCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTG TTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGAT GATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGG TGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTC AACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGC CAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCA CCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCAC CAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAA GGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAA AGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAG CCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGA GATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGG TGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAG TGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAA GACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCT TCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCC AGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGT GATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGA SEQ ID NO: 123 DNA HC AGAGCCTGAGCC BAP050-Clon-H LC
Figure imgf000183_0001
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
Figure imgf000183_0002
SSSQDISNYLN
SEQ ID NO: 11 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL
Figure imgf000184_0001
Figure imgf000185_0001
Figure imgf000186_0001
GATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGA
Figure imgf000187_0001
CCGAGCAGGACAGCAA.GGACTCCACCTACAGCCTG
AGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGA GAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACC AGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAAC
AGGGGCGAGTGC
GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTC TGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTT CCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGG TATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCT GATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGC CCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAG TTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGA CTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACC TGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAA ATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCAT CTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCA CCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTAC CCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAA CGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCA CCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTG AGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGA GAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACC AGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAAC SEQ ID NO: 131 DMA LC AGGGGCGAGTGC
Figure imgf000188_0001
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAA GAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGG CCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAAC TGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATG GATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTA CCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTC TCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCA SEQ ID NO: 133 DMA VH GATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGT
Figure imgf000189_0001
CCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAAC
TGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATG GATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTA CCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTC TCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCA GATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGT ACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGC ACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCA GGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCA AGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCC AGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTG CCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCG TGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTG CACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCT GTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCA GCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTG GACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAG GGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCT GCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTG TTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGAT GATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGG TGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTC AACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGC CAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCA CCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCAC CAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAA GGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAA AGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAG CCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGA GATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGG TGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAG TGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAA GACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCT TCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCC AGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGT GATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGA AGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC
Figure imgf000190_0001
Figure imgf000190_0002
SSSQDISNYLN
Figure imgf000190_0003
SEQ ID NO: 11 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL
Figure imgf000190_0004
Figure imgf000191_0001
Figure imgf000192_0001
Figure imgf000193_0001
Figure imgf000194_0001
Figure imgf000195_0001
Figure imgf000196_0001
Figure imgf000197_0001
Figure imgf000198_0001
Figure imgf000199_0001
Figure imgf000200_0001
Figure imgf000201_0001
Figure imgf000202_0001
Figure imgf000203_0001
Figure imgf000204_0001
Figure imgf000205_0001
Figure imgf000206_0001
Figure imgf000207_0001
SEQ ID NO: 170 (Chothia) LCDRl AGCCAGGACATCTCCAACTAC
Figure imgf000207_0002
Figure imgf000208_0001
SEQ ID NO: 180 (Kabat) CAGCAGTACTATAACCTGCCCTGGACC
Figure imgf000208_0002
SEQ ID NO: 169 (Kabat)
Figure imgf000208_0003
CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 181 (Chothia) LCDRl
Figure imgf000208_0005
A T A ATAT T TAA TA
Figure imgf000208_0004
CGACGACTTTAAGGGC
TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGC
Figure imgf000209_0001
Figure imgf000210_0001
Figure imgf000211_0001
Figure imgf000212_0001
Figure imgf000213_0001
Figure imgf000214_0001
Figure imgf000215_0001
Figure imgf000216_0001
Tabla 4. Secuencias de aminoácidos de las secuencias líderes de la cadena pesada y ligera para mAbs humanizados BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J
Figure imgf000217_0002
Tabla 5. Véase ejemplos.
Tabla 6. Véase ejemplos.
Tabla 7. Agentes terapéuticos seleccionados que pueden administrarse en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, como un agente único o en combinación con otros inmunomoduladores descritos en este documento.
Figure imgf000217_0001
Figure imgf000218_0001
Figure imgf000219_0001
Figure imgf000220_0001
Figure imgf000221_0001
Figure imgf000222_0001
Figure imgf000223_0001
Figure imgf000224_0001
Figure imgf000225_0001
Figure imgf000226_0001
Figure imgf000227_0001
Figure imgf000228_0001
Figure imgf000229_0001
Figure imgf000230_0001
Figure imgf000231_0001
Ejemplos
Los siguientes ejemplos se exponen para ayudar en la comprensión de la invención.
Ejemplo 1: Humanización del anticuerpo anti-LAG-3, BAP050
Se humanizó un anticuerpo monoclonal anti-LAG-3 murino, BAP050. Se obtuvieron las secuencias y muestras de prueba de veinte clones BAP050 humanizados con secuencias únicas de región variable. Estos clones se analizaron adicionalmente para determinar sus funciones biológicas (por ejemplo, unión a antígeno y bloqueo de ligando), características estructurales y expresión transitoria en células CHO.
Ejemplo 1.1: Tecnología y proceso de humanización
La humanización de BAP050 se realizó utilizando una biblioteca combinatoria de marcos de región variable (FW) de línea germinal humana. La tecnología implica transferir las CDRs murinas en el marco a una biblioteca de regiones variables humanas (VRs) que se habían construido combinando aleatoriamente las secuencias de las líneas germinales humanas FW1, FW2 y FW3. Solo se usa una secuencia FW4, que es WGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 221) para la cadena pesada (h C) (Kabat humano HC subgrupo I, No. 21) y Fg QGt KVEIK (SEQ ID NO: 271) para la cadena ligera (LC) (Kabat humano k subgrupo I, No. 5). La biblioteca de secuencias VR se fusiona con secuencias de región constante humana (CR), IgG4 humana (S228P) de HC y k CR humana de LC, y la biblioteca resultante de IgG entera es expresada en células CHO para el cribado. El cribado se realizó con sobrenadantes de cultivo de tejidos que miden la avidez de unión en células que expresan antígeno en un formato ELISA de células enteras o en FACS.
El proceso de humanización se realizó de forma gradual comenzando con la construcción y expresión del mAb quimérico apropiado (VR murina, IgG4 (S228P), k humano), que puede servir como un comparador para el cribado de los clones humanizados. Las secuencias de aminoácidos de la región constante para la cadena pesada de IgG4 humana (S228P) y la cadena ligera kappa humana se muestran en la Tabla 6.
La humanización de la VR de LC y HC se realizó en dos etpas independientes. La biblioteca de LC humanizado (huLC) se emparejó con el HC quimérico (VR murina, IgG4 (S228P)) y los mAbs "semi humanizados" resultantes se cribaron para determinar la actividad de unión mediante ELISA. Se seleccionó la huLC de clones con actividad de unión adecuada (> unión de mAb quimérico). De manera análoga, la biblioteca de HC humanizado (huHC) se emparejó con la LC quimérica (VR murina, k humana) y se cribó para la actividad de unión mediante ELISA. Se seleccionaron los huHC de clones con actividad de unión apropiada (> unión de mAb quimérico).
Las regiones variables de los huLC y huHC seleccionados se secuenciaron para identificar el huLC y el huHC con secuencias únicas (algunos clones del proceso de selección inicial pueden compartir el mismo LC o HC). Los huLC y huHC únicos se combinaron al azar para formar una pequeña biblioteca de humAbs, que se expresó en células CHO y se cribó en células que expresan antígeno en un formato ELISA y FACS. Los clones con actividades de unión que fueron iguales o mejores que la unión del mAb comparador quimérico son el producto final del proceso de humanización.
Ejemplo 1.2: Secuencia de mAb murino BAP050
Se determinaron las secuencias de región variable LC y HC del mAb anti-LAG-3 murino. Las secuencias obtenidas de dos análisis independientes fueron idénticas y se muestran en la Figura 1.
Se realizó un análisis de línea germinal y parte del resultado se muestra en la Figura 2 como una alineación de secuencia de aminoácidos. Para la cadena ligera, el gen V es 96.88% idéntico a mIGkV10-94 * 01F (279/288 nts) y el gen J es 97.30% idéntico a mIGkJI * 01F (36/37 nts). Para la cadena pesada, el gen V es idéntico en 96.88% a mIGHV9-3-1 * 01F (279/288 nts), el gen J es 86.79% idéntico a mIGHJ4 * 01F y el gen D es mIGHD1-1 * 01F.
Ejemplo 1.3: clones de anticuerpos humanizados
Como se muestra en la Figura 3, el proceso de humanización produjo veinte clones humanizados con afinidades de unión comparables a las del anticuerpo quimérico. Además de los datos de unión, para cada clon, se proporcionaron las secuencias de VR junto con una muestra del mAb. Las muestras se habían preparado mediante transfecciones transitorias de células CHO y eran sobrenadantes de cultivo de tejidos concentrados. Las concentraciones de mAb en las soluciones se determinaron mediante un ELISA específico de IgG4.
Como se muestra en la Figura 4, los veinte clones únicos son combinaciones de seis HC únicos y doce LC únicos. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de los dominios variables de cadena pesada y ligera para los clones BAP050 humanizados se muestran en la Tabla 1. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDRs de cadena pesada y ligera de los clones BAP050 humanizados se muestran en la Tabla 1.
Se obtuvo una diversidad limitada para la región HC FW3 con dieciocho clones que tienen el mismo FWH3, que es de la línea germinal humana IGHV7-4 y tiene un residuo Cys expuesto en la posición 84 de los clones humanizados. Las secuencias de VHFW3 estrechamente relacionadas típicamente tienen un residuo Ser o Ala en esta posición. Por lo tanto, Cys84 fue reemplazado por Ser en clones humanizados seleccionados.
La Figura 4 indica que las muestras variaron en la concentración del mAb, que oscila entre 3.2 pg/ml y 35.8 pg/ml. Estos números fueron representativos de varios experimentos de expresión transitoria.
Ejemplo 1.4: Análisis de los clones humanizados
Ejemplo 1.4.1: Análisis de la actividad de unión y especificidad de unión de clones humanizados
La actividad y especificidad de unión se midieron en un ensayo de unión de competición usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los mAbs de prueba y células CHO que expresan LAG-3. Las incubaciones con las mezclas de mAb que tenían diferentes proporciones de concentración de mAb de prueba con respecto a mAb marcado fueron a 4 °C durante 30 min. El mAb murino marcado unido se cuantificó usando una máquina FACS. El experimento fue llevado a cabo dos veces. Los resultados se muestran en las Figuras 5A-5B.
Dentro de la precisión del experimento, todos los clones humanizados muestran una actividad similar para competir con la unión de mAb murino marcado. La actividad también es comparable a la actividad del mAb murino original y el mAb quimérico. Los MAbs se clasificaron entre sí. Por ejemplo, puede ser un competidor más débil si en ambos experimentos la curva de un cierto clon está a la derecha de la curva de mAb quimérico o puede ser un mejor competidor si la curva de un cierto clon está a la izquierda de la curva de mAb quimérico. Tal sistema de clasificación se utilizó en la Figura 6.
Ejemplo 1.4.2: Análisis de secuencia de clones humanizados.
Con base en las características estructurales, los veinte mAbs humanizados se dividieron en seis grupos y los clasificaron de A a F. Los resultados se muestran en la Figura 6.
Ejemplo 1.4.3: Selección de clones humunizados y generación de nuevas versiones con la mutación C84S La Figura 6 resume los datos que se consideraron para la selección de clones humanizados. Se consideraron los datos de expresión (segunda columna), la diversidad en la composición de las regiones variables (tercera columna), las clasificaciones relativas en los estudios de unión (cuarta y quinta columna) y el análisis estructural (sexta columna). Ciertas características que conducen a la selección de clones individuales están marcadas con campos grises.
Ciertos clones fueron mutados en la posición 84 de VHFW3 de Cys a Ser (véase el Ejemplo 1.3 anterior). Las nuevas versiones se llaman clones Nos. 1S, 2S, 5S, 9S, 11S, 12S y 13S, y juntos clones huBAP050(Ser).
Ejemplo 1.4.4: Análisis de la actividad de unión y especificidad de unión de los clones huBAP050(Ser)
Las nuevas versiones de los clones seleccionados con la mutación C84S en VHFW3 se sometieron a un ensayo análogo de unión competitiva como se describe en el Ejemplo 1.4.1. El experimento incluyó los clones humanizados originales con el residuo Cys84, los nuevos clones humanizados con el residuo Ser84, el mAb quimérico y el mAb murino original. Los resultados se muestran en la Figura 7.
Todas las variantes probadas fueron comparables con el mAb parental murino al bloquear la unión del mAb murino marcado a las células CHO que expresan LAG-3. Se deduce que el comportamiento de los nuevos clones humanizados con el residuo Ser84 no fue diferente del comportamiento de los clones humanizados originales con el residuo Cys84.
Ejemplo 1.4.5: Bloqueo de la unión de LAG-3-Ig a MHC Clase II en células Daudi
LAG-3 se une a MHC clase II, por lo tanto, los clones huBAP050(Ser) seleccionados se analizaron para determinar su capacidad de bloquear la unión de LAG-3-Ig soluble a las células Daudi (una línea celular de linfoma de Burkitt) que expresan MHC clase II. La capacidad de bloqueo de los mAbs se evaluó en un ensayo de unión competitiva usando una concentración constante de proteína de fusión LAG-3-huIgG1 Fc (2 |jg/ml), diluciones en serie de los mAbs a analizar y células Daudi. La incubación fue a 4 °C durante 30 min. La proteína de fusión de ligando unida se detectó con el fragmento F(ab')2 conjugado con PE de IgG antihumana de cabra que no reconoce los mAbs de IgG4 (Southern Biotech 2043-09), y citometría de flujo. Los resultados se muestran en la Figura 8.
Dentro de la precisión de los experimentos, los siete clones huBAP050(Ser), el mAb quimérico y el mAb murino parental demostraron una actividad de bloqueo comparable para LAG-3-Ig.
Ejemplo 1.4.6: análisis de epítopos de células T
Los mAbs humanizados se analizaron para detectar epítopos de células T usando Epibase™. El algoritmo analiza cada péptido posible (cada 10 meros a lo largo de la proteína que avanza por un aminoácido) para unirse a HLA clase II. Estima la energía libre de unión (AGbind) para cada péptido y calcula una Kd putativa (AGbid = RT lnKo). Luego, los péptidos se marcan como S, M o N para los ligantes fuertes, medios y no aglutinantes. Los valores de umbral utilizados para esta clasificación son diferentes para cada alotipo.
Los datos se normalizaron a una puntuación de riesgo. El "puntaje de riesgo" general es la suma de todos los epítopos potenciales a todos los alelos probados, ponderado por las afinidades de los péptidos respectivos, pero dejando de lado todos los epítopos potenciales en las secuencias de la línea germinal (el valor más bajo es por lo tanto "mejor")
Existen aproximadamente tres categorías de mAbs, derivadas de un gran conjunto de mAbs de diferente composición como se describe a continuación.
Puntuación de riesgo de alrededor de 500: mAbs completamente humanos generados a partir de humanos, ratones "humanizados" y bibliotecas de fagos ("los valores por debajo de 500 son realmente buenos incluso para anticuerpos completamente humanos"). Los mAbs humanizados diseñados específicamente (incluso los CDRs) para tener una puntuación baja suelen estar en la categoría de riesgo 500-700.
Puntaje de riesgo de alrededor de 900: anticuerpos típicos injertados con CDR, que tienen CDR completamente murinas con o sin cambios en la región FW ("tecnología Gary Queen"); Los mAbs injertados con CDR aprobados son básicamente todos de esta categoría.
Puntaje de riesgo alrededor de 1500: mAbs quiméricos.
Los resultados para mAbs BAP050 humanizados seleccionados son:
Figure imgf000233_0001
Figure imgf000234_0001
Los puntajes de riesgo de los siete clones humanizados seleccionados están en la categoría típica de mAb injertado con CDR. Por ejemplo, el mAb humano, adalimumab (Humira®), tiene un puntaje de 654, que es relativamente alto para los mAbs humanos (en el extremo superior de la curva de Gauss) pero bajo en comparación con un mAb injertado con CDR típico.
Las puntuaciones provienen de las CDRs murinas, específicamente los residuos Y. Estas son puntuaciones aceptables para anticuerpos para el tratamiento del cáncer. Cambiar la puntuación significaría diseñar las CDRs murinas, eliminando específicamente los residuos Y.
Resumen y conclusiones
El anticuerpo monoclonal anti-LAG-3 murino, BAP050, se humanizó. La tecnología implica la clonación de las CDRs murinas en el marco en una biblioteca ordenada de marcos de regiones variables de la línea germinal humana, expresando la biblioteca de regiones variables clonadas como mAb humanizados IgG4(S228P) intactos en células c Ho , y seleccionando clones que se unen con comparables o mayor afinidad con el objetivo como el mAb padre. Por lo tanto, se pidió a las CDRs murinas que seleccionaran las mejores secuencias marco de la línea germinal humana que preservaran sus conformaciones y, por lo tanto, la afinidad y especificidad de unión del mAb murino original. Se obtuvieron las secuencias y muestras de prueba de veinte versiones humanizadas con secuencias únicas de región variable, que también habían pasado una prueba de unión con células CHO transfectadas con LAG-3. Dieciocho clones contenían la misma secuencia de línea germinal HC FW3, que tiene un Cys raro en la posición 84. En siete clones seleccionados, Cys fue reemplazado por Ser creando nuevos clones de mAbs etiquetados huBAP050(Ser). Estos clones se analizaron adicionalmente para determinar sus funciones biológicas (por ejemplo, unión a antígeno y bloqueo de ligando), características estructurales y expresión transiente en células c Ho .
Ejemplo 2: Expresión del anticuerpo humanizado anti-LAG-3, BAP050
Se seleccionaron cinco clones humanizados descritos en el Ejemplo 1 para la evaluación de la expresión en células de ovario de hámster chino (CHO).
Los vectores de un solo gen (SGV) se construyeron usando los vectores GS Xceed de Lonza (IgG4proAk para la cadena pesada y Kappa para la cadena ligera). Los SGV se amplificaron y se transfectaron transitoriamente en células CHOK1SV GS-Ko para expresión a un volumen de 2.8 L.
Los cultivos de expresión se recolectaron el día 6 después de la transfección y se clarificaron por centrifugación y filtración estéril. El sobrenadante de cultivo celular clarificado se purificó usando cromatografía de proteína A de una sola etapa. El análisis de calidad del producto en forma de SE-HPLC, SDS-PAGE, IEF y LAL se llevó a cabo utilizando material purificado a una concentración de 1 mg/ml, incluyendo un anticuerpo como muestra de control.
Ejemplo 2.1: Construcción de vectores
GeneArt AG sintetizó las secuencias de las regiones codificadoras del dominio variable de la cadena ligera y pesada. Las regiones de codificación del dominio variable de la cadena ligera se subclonaron en pXC-Kappa y las regiones de codificación del dominio variable de la cadena pesada en vectores pXC-IgG4pro AK respectivamente usando el sitio de restricción N-terminal Hind III y los sitios de restricción C-terminal BsiWI (cadena ligera) y Apal (cadena pesada). Los clones positivos se cribaron mediante amplificación por PCR (cebadores 1053: GCTGACAGACTAACAGACTGTTCC (SEQ ID NO: 288) y 1072: CAAATGTGGTATGGCTGA (SEQ ID NO: 289)) y se verificaron mediante digestión de restricción (usando una digestión doble de EcoRI-HF y HindIII-HF) y secuenciación de nucleótidos del gen de interés.
Ejemplo 2.2: amplificación de AND
Se recogió una única colonia bacteriana en 15 ml de medio Luria Bertani (LB) (Caldo LB, Sigma-Aldrich, L7275) que contenía ampicilina 50 pg/ml y se incubó a 37 °C durante la noche con agitación a 220 rpm. El cultivo iniciador resultante se usó para inocular 1 l de medio Luria Bertani (LB) que contenía 50 pg/ml de ampicilina y se incubó a 37°C durante la noche con agitación a 220 rpm. El ADN del vector se aisló usando el sistema Gigaprep QIAGEN Plasmid Plus (QIAGEN, 12991). En todos los casos, la concentración de ADN se midió utilizando un espectrofotómetro Nanodrop 1000 (Thermo-Scientific) y se ajustó a 1 mg/ml con regulador EB (Tris-Cl 10 mM, pH 8.5). La calidad del ADN para los vectores de genes individuales se evaluó midiendo la relación de absorbancia A260/A280. Se encontró que esto estaba entre 1.88 y 1.90.
Ejemplo 2.3: Cultivo de células CHOK1SV GS-KO
Las células CHOK1SV GS-KO se cultivaron en medio CD-CHO (Invitrogen, 10743-029) suplementado con glutamina 6 mM (Invitrogen, 25030-123). Las células se incubaron en una incubadora con agitación a 36.5 °C, 5% de CO2, 85% de humedad, 140 rpm. Las células se subcultivaron rutinariamente cada 3-4 días, sembradas a 2 x 105 células/ml y se propagaron para tener suficientes células disponibles para la transfección. Las células fueron descartadas por el pasaje 20.
Ejemplo 2.4: Transfecciones transitorias de células CHOK1SV GS-KO
Las transfecciones transitorias se realizaron usando células CHOK1SV GS-KO que habían estado en cultivo durante un mínimo de dos semanas. Las células se subcultivaron 24 h antes de la transfección y la viabilidad celular fue> 99% en el momento de la transfección.
Todas las transfecciones se llevaron a cabo mediante electroporación usando un Gene Pulse MXCell (Bio-Rad), un sistema basado en placa para electroporación. Para cada transfección, las células viables se resuspendieron en medios precalentados a 2.86 x 107 células/ml. Se dividieron alícuotas de 80 pg de ADN (relación 1:1 de SGV de cadena pesada y ligera) y 700 pl de suspensión celular en cada cubeta/pocillo. Las células se electroporaron a 300 V, 1300 pF. Las células transfectadas se transfirieron a medios precalentados en matraces Erlenmeyer y las cubetas/pocillos se enjuagaron dos veces con medios precalentados que también se transfirieron a los matraces. Los cultivos celulares transfectados se incubaron en una incubadora con agitación a 36.5 °C, 5% de CO2, 85% de humedad, 140 rpm durante 6 días. La viabilidad celular y las concentraciones celulares viables se midieron en el momento de la recolección utilizando un contador celular automatizado Cedex HiRes (Roche).
Ejemplo 2.5: Cromatografía de afinidad de proteína A
El sobrenadante del cultivo celular se recogió y se aclaró mediante centrifugación a 2000 rpm durante 10 minutos, luego se filtró a través de un filtro de membrana PES de 0.22 pm. El sobrenadante clarificado se purificó usando una columna HiTrap MabSelect SuRE preempaquetada de 5 ml (GE Healthcare, 11-0034-94) en un purificador AKTA (10 ml/min). La columna se equilibró con fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 125 mM, pH 7.0 (regulador de equilibrio) para 5 volúmenes de columna (CVs). Después de cargar la muestra, la columna se lavó con 2 CVs de regulador de equilibrio seguido de 3 CVs de fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 1 M pH 7.0 y un lavado repetido de 2 CV de regulador de equilibrio. El producto se eluyó luego con formiato de sodio 10 mM, pH 3.5 sobre 5 CVs. Las fracciones eluidas que contenían proteínas se ajustaron inmediatamente a un pH de 7.2 y se filtraron a través de un filtro de 0.2 pm.
Se observó un único pico que contiene proteínas durante la fase de elución. Se demostró que este pico contenía el mAb, cuando se analizó por SE-HPLC y SDS-PAGE. El rendimiento de proteína recuperado se muestra en la Tabla 5. Los clones expresados transitoriamente en un intervalo de 21.9 a 29.4 mg/L.
Tabla 5. Resumen de rendimiento, título, contenido de monómero y niveles de endotoxina
Figure imgf000235_0001
Figure imgf000236_0001
Ejemplo 2.6: Análisis SE-HPLC
Las muestras de anticuerpos purificados con proteína A se analizaron por duplicado por SE-HPLC en un sistema HPLC Agilent serie 1200, usando una columna Zorbax GF-250 4 pm 9.4 mm ID x 250 mm (Agilent). Se filtraron alícuotas de muestra a una concentración de 1 mg/ml a través de un filtro de 0.2 pm antes de la inyección. Se inyectaron alícuotas de 80 pl respectivamente y se procesaron a 1 ml/min durante 15 minutos. Los niveles agregados solubles se analizaron utilizando el software Chemstation (Agilent).
Los perfiles de cromatografía con tiempo de retención que muestran el porcentaje de las áreas de pico detectadas en general se obtuvieron para los anticuerpos probados y un anticuerpo IgG4 de control. Los productos muestran un pico de proteína único en aproximadamente 8.59 a 8.61 min comparable al control de anticuerpos IgG4 humanos (aproximadamente 8.64 min) y consistente con un anticuerpo monomérico. Se detectaron pequeñas cantidades (hasta aproximadamente 3-4%) de impurezas de mayor peso molecular, consistentes con agregados solubles, en tiempos de retención de alrededor de 7.90 min.
Ejemplo 2.7: Análisis SDS-PAGE
Las muestras reducidas se prepararon para análisis mezclándolas con regulador de muestra NuPage 4x LDS (Invitrogen, NP0007) y agente reductor de muestra NuPage 10x (Invitrogen, NP0009), y se incubaron a 70 °C, 10 min. Para muestras no reducidas, se omitieron el agente reductor y la incubación térmica. Las muestras se sometieron a electroforesis en 1.5 mm de NuPage 4-12% de geles prefabricados Bis-Tris Novex (Invitrogen, NP0335PK2) con regulador de ejecución NuPage MES SDS BAJO condiciones desnaturalizantes. Se incluyeron en el gel alícuotas de 10 pl de estándar de peso molecular previamente teñido SeeBlue Plus 2 (Invitrogen, LC5925) y un anticuerpo de control IgG4 a 1 mg/ml. Se cargaron 1 pl de cada muestra a 1 mg/ml en el gel. Una vez sometidos a electroforesis, los geles se tiñeron con InstantBlue (TripleRed, ISB01L) durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las imágenes de los geles teñidos se analizaron en un BioSpectrum Imaging System (UVP).
El análisis confirmó la presencia de los productos de anticuerpos y buenos niveles de pureza. Bajo condiciones no reductoras, se observó una banda de proteína predominante cercana a 98 kDa comparable con el anticuerpo de control IgG4. El anticuerpo IgG4 de control y un clon probado muestran una banda más débil adicional que corresponde a un medio anticuerpo de cadena ligera más pesada a aproximadamente 70 kDa bajo condiciones no reductoras. Esto se espera para el anticuerpo de control. Se observaron dos bandas bajo condiciones reductoras consistentes con el tamaño de las cadenas pesadas (cerca de la posición del marcador de 49 kDa) y ligeras (cerca de la posición del marcador de 28 kDa) y comparables con las bandas encontradas para el anticuerpo de control IgG4.
Ejemplo 2.8: Análisis de enfoque isoeléctrico (IEF)
Las muestras no reducidas de anticuerpo purificado con proteína A se sometieron a electroforesis como se describe a continuación.
Se sometieron a electroforesis 5 pg de proteínas purificadas en un gel de gradiente Novex pH 3-10 de 1.0 mm (Invitrogen, EC66552BOX) usando las condiciones de funcionamiento recomendadas por los fabricantes. Se incluyó una alícuota de 10 pl de IEF pH 310 marcadores (Invitrogen, 39212-01) en el gel. Una vez sometidos a electroforesis, los geles se fijaron con solución de TCA al 10% durante 30 minutos y luego se tiñeron con InstantBlue (TripleRed, ISB01L) durante la noche a temperatura ambiente. Las imágenes de los geles teñidos se analizaron en un BioSpectrum Imaging System (UVP).
Como se muestra en la Tabla 6, los clones probados muestran isoformas de carga entre pH 6.0 y 7.45. Las isoformas de carga detectadas son comparables a los pIs calculados teóricamente para estos anticuerpos que se pronosticaron entre 6.35 y 6.82. Los clones F y G tienen un pI predicho de 6.35 y muestran isoformas de carga comparables, lo que también es consistente con que el pI calculado teóricamente sea el mismo para ambos (6.35). El anticuerpo de control IgG4 se comportó como se esperaba.
Tabla 6. Isoformas de carga detectadas por el análisis Novex IEF
Figure imgf000237_0001
Ejemplo 2.9: Análisis de endotoxinas
Los niveles de endotoxina de proteínas purificadas se midieron en concentraciones finales (hasta 3.44 mg/ml) utilizando un instrumento Endosafe-PTS, un método basado en un cartucho basado en el ensayo LAL (Charles River).
Como se muestra en la Tabla 8, se encontró que el contenido de endotoxina variaba de 0.05 a 0.27 EU/mg.
Conclusión
Se construyeron vectores de expresión de un solo gen GS para mAbs anti-LAG-3 humanizados seleccionados y se usaron para transfectar transitoriamente células GS-KO CHOK1SV. Se incubaron 2.6 a 2.8 litros de cultivo de expresión bajo condiciones estándar durante 6 días y el sobrenadante del cultivo celular resultante se purificó usando cromatografía de proteína A. Los títulos posteriores a la purificación se indican en la Tabla 8 y se encontró que oscilaban entre 21.88 y 29.38 mg/L. Los rendimientos recuperados varían de 61.3 a 82.3 mg.
El análisis de SDS-PAGE y SE-HPLC indicó la presencia de una pequeña cantidad (hasta 4.69%) de agregados solubles presentes en los productos que son predominantemente consistentes con el anticuerpo dimérico para el mAb. Los mAbs también mostraron impurezas de mayor peso molecular en tiempos de retención consistentes con los de los anticuerpos triméricos.
El enfoque isoeléctrico detectó una serie de isoformas de carga para todos los mAb. Los mAbs mostraron isoformas generalmente más básicas cuando se basan en pI calculado teóricamente para estas moléculas que indican algún nivel de modificación posterior a la traducción. Se encontró que los mAbs eran comparables a sus valores de pI calculados teóricamente.
Los niveles de endotoxina para todas las muestras se midieron antes del suministro de muestras y se encontraron por debajo de 0.63 EU/mg.
Ejemplo 3: Caracterización de anticuerpos anti-LAG-3 murinos y humanizados
Ejemplo 3.1: Caracterización del anticuerpo anti-LAG-3 murino
Se investigó la afinidad de unión del anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050 a LAG-3. Como se muestra en los análisis FACS, el anticuerpo anti-LAG-3 murino se une a células CHO transfectadas con LAG-3 humano con una Kd de 0.2 nM, a células T humanas con una Kd de 0.26 nM, y a células 300.19 transfectadas con LAG-3 humano con una Kd de 13.6 nM.
La actividad de bloqueo del anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050 se examinó mediante ensayos de unión competitiva. El anticuerpo anti-LAG-3 murino bloqueó la unión de LAG-3-Ig a las moléculas de MHC de clase II en células Raji con una IC50 de 2.3 nM.
Se probó el efecto del anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050 sobre la expresión de interferón gamma (IFN-y). El anticuerpo anti-LAG-3 murino dio como resultado un aumento de 3.0 ± 2.1 veces en la expresión de IFN-y en células estimuladas con anti-CD3 (0.1 pg/mL), 1.6 ± 0.4 veces de aumento en células estimuladas con enterotoxina B estafilocócica (SEB) (3 pg/mL) y un aumento de 1.4 ± 0.3 veces en las células estimuladas con péptidos CMV.
Se examinaron las regiones en LAG-3 que pueden unirse al anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050. Como se muestra por ELISA, el anticuerpo anti-LAG-3 murino se une a una proteína de fusión Ig LAG-3 (sLAG-3 D1-D4Ig) que contiene los cuatro dominios extracelulares similares a Ig (D1-D4), así como una proteína de fusión Ig de LAG- 3 (sLAG-3 DI-D21g) que solo contiene el Dominio 1 (D1) al Dominio 2 (D2). Un análisis adicional muestra que el anticuerpo anti-LAG-3 se une a las células CHO que expresan LAG-3, LAG-3 de longitud completa con deleción D2 (CHO-LAG-3AD2) y LAG-3 con deleción parcial del bucle adicional D1 (CHO-LAG-3AP48A60). Por lo tanto, el anticuerpo anti-LAG-3 se une a D1 de LAG-3.
También se encontró que el anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050 aumenta la secreción de IFN-y en las PBMCs estimuladas con CD3 en comparación con el control de IgG1 de ratón y sin control de anticuerpos. Las veces de aumento varía de 1.4 a 2.9 veces entre cuatro donantes.
Ejemplo 3.2: Caracterización del anticuerpo anti-LAG-3 humanizado
Afinidad y especificidad de unión
La unión de un anticuerpo anti-LAG-3 humanizado de ejemplo en la proteína LAG-3 humana se midió usando el método Biacore. Los resultados son: Ka = 6.41 * 105 M 'V ; Kd = 7.00*10'5 s-1; Kd = 0.109±0.008 nM. El anticuerpo anti-LAG-3 también se une al cynomolgus LAG-3 medido por el método Biacore.
La unión del mismo anticuerpo anti-LAG-3 humanizado en células CHO que expresan LAG-3 humano y células HEK 209 que expresan LAG-3 de mono cynomologous, se midió usando análisis FACS. El resultado muestra que el anticuerpo anti-LAG-3 (IgG4 humano) se une con alta afinidad al LAG-3 humano en comparación con un control de isotipo IgG4 humano. El anticuerpo anti-LAG-3 se une a las células humanas que expresan LAG-3 con una Kd de 1.92 nM y se une a las células que expresan LAG-3 de mono cynomologous con una Kd de 2.3 nM.
También se midió la unión del anticuerpo anti-LAG-3 en células rhesus LAG-3 que expresan 300.19. Los resultados muestran que el anticuerpo anti-LAG-3 se une a rhesus LAG-3 con una Kd de 8.03 nM.
Los análisis de unión adicionales muestran que el anticuerpo anti-LAG-3 humanizado de ejemplo no es reactivo cruzado con LAG-3 de ratón ni reactivo cruzado con la línea celular parental.
Bloqueo de interacciones entre LAG-3 y sus ligandos.
Se examinó la capacidad del anticuerpo anti-LAG-3 humanizado de ejemplo para bloquear las interacciones entre LAG-3 y sus dos ligandos conocidos, las moléculas de MHC de clase II. Los resultados muestran que el anticuerpo anti-LAG-3 bloqueó la interacción entre las moléculas LAG-3 y MHC de clase II en las células Daudi con una IC50 de 5.5 nM, en comparación con un control de isotipo IgG4 humano.
Estimulación LAG-3 de la liberación de citocinas in vitro en ausencia del acoplamiento del receptor de células T
No se espera que el anticuerpo anti-LAG-3 estimule respuestas de citoquinas detectables sin estimulación específica por el receptor de células T. El anticuerpo anti-LAG-3 se inmovilizó y se entrecruzó altamente mediante secado al aire en una placa de cultivo de tejidos y se analizó su capacidad para estimular la producción de citocinas usando un método derivado de Stebbings R., et al. (J Immunol. 2007179 (5): 3325-3331). No se indujo producción de IL-2 o IFN-Y por el anticuerpo anti-LAG-3 o la IgG de control en ausencia de estimulación de enterotoxina B estafilocócica (SEB) de sangre entera.
Ejemplo 4: Selección de pacientes con base en el estatus de PD-L1/CD8/IFN-Y
Para cada uno de varios tipos de cáncer, se analizaron muestras de múltiples pacientes para determinar el estatus de PD-L1/CD8/IFN-Y. Cada muestra se clasificó como: triple negativo para PD-L1/CD8/IFN-Y, simple o doble positivo para estos marcadores, o triple positivo para estos marcadores. La Figura 11 muestra que en este experimento, dentro de una población de pacientes, los siguientes tipos de cáncer son frecuentemente triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y: cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, melanoma y cáncer nasofaríngeo. Los pacientes que tienen estos tipos de cáncer son buenos candidatos para la terapia con anticuerpos anti PD-1 en terapias combinadas como se describe aquí, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3. La probabilidad de un tratamiento exitoso se puede aumentar además determinando qué pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, y tratando a los pacientes triple positivos con anticuerpos anti-PD-1 o anti-pD-L1 y terapias de combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.
La Figura 12 muestra que dentro de una población de pacientes, los siguientes tipos de cáncer rara vez son triple positivos para PD-L1/c D8/IFN-y: cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas. Notablemente, incluso en los cánceres que generalmente no son positivos para PD-L1/CD8/ iFN-y, se puede aumentar la probabilidad de un tratamiento exitoso al determinar qué pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, y tratar a los pacientes triple positivos con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-L1 y terapias combinadas como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.
La Figura 13 muestra la proporción de pacientes con cáncer de mama que son triple positivos para PDL1/CD8/IFN-Y. Considerando el cáncer de mama en general, la proporción de triples positivos es algo baja. Sin embargo, cuando uno se enfoca solo en el cáncer de mama IM-TN, se puede ver que un porcentaje mucho mayor de pacientes es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. El cáncer de mama IM-Tn es particularmente difícil de tratar con terapias convencionales. El descubrimiento de que el cáncer de mama IM-TN a menudo es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y abre nuevas vías de terapia para este cáncer con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-LI y terapias combinadas como se describe en este documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.
La Figura 14 muestra la proporción de pacientes con cáncer de colon que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y. Considerando el cáncer de colon en general, la proporción de triple positivo es algo baja. Sin embargo, cuando uno se enfoca solo en el cáncer de mama con alto índice de MSI (alta inestabilidad de microsatélites), se puede ver que un porcentaje mucho mayor de pacientes es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. Los niveles de MSI se pueden analizar usando, por ejemplo, métodos basados en PCR disponibles comercialmente.
Las muestras de cáncer gástrico se analizaron para determinar los niveles de PD-L1/CD8/IFN-Y (datos no mostrados). Se encontró que en los cánceres gástricos con alto índice de MSI o EBV+, alrededor del 49% fueron positivos para PD-L1, y una alta proporción de las células positivas para PD-L1 fueron triple positivas para PD-L1/CD8/IFN-Y. También se encontró que una proporción de células positivas para PD-L1 y células positivas para PD-L1/CD8/IFN-Y también fueron positivas para P ik 3c A. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un PD-1 o un anticuerpo anti-PD-LI, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico PIK3.
Se probaron muestras de CRC con un nivel de MSI alto para una combinación de marcadores (datos no mostrados). Se descubrió que en las muestras de CRC con un nivel alto de MSI, una alta proporción de las muestras PD-L1/CD8/IFN-Y también son positivas para LAG-3, PD-1 (también llamado PDCD1), RNF43 y BRAF. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se direcciona a uno o más de PD-1, PD-L1, PDCD1, RNF43 y BRAF.
Los cánceres de pulmón de células escamosas se probaron para una combinación de marcadores (datos no mostrados). Se encontró que en las muestras de cáncer de pulmón de células escamosas, una alta proporción de las muestras PD-L1/CD8/IFN-Y también son positivas para LAG-3. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico direccionado a PD-1 o PD-L1, por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 o un anticuerpo anti-PD-L1.
Los cánceres de tiroides papilares se probaron para una combinación de marcadores, incluida la mutación BRAF V600E (datos no mostrados). Se encontró que una alta proporción de muestras de cáncer de tiroides que son positivas para PD-L1 también son positivas para BRAF V600E. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo anti-PD-1 o un anticuerpo anti-PD-L1, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico direccionado a BRAF.
Ejemplo 5: Selección de pacientes con base en el estatus de PD-L1
Para permitir un examen amplio de las indicaciones de cáncer para inmunomodulador (por ejemplo, LAG-3 solo o en combinación con terapias basadas en PD1/PD-L1), se evaluó la expresión de PD-L1 tanto en los niveles de proteína como de ARNm en cánceres humanos, incluyendo tanto tumores de pulmón como hepáticos.
La expresión de la proteína PD-L1 se evaluó en un conjunto de adenocarcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) embebido en parafina y fijado con formalina (ACA), carcinoma de células escamosas (SCC) y carcinoma hepatocelular (HCC) mediante inmunohistoquímica (IHC). La expresión de PD-L1 se puntuó semicuantitativamente mediante una metodología de histo-puntuación manual (puntuación H) basada en la intensidad de tinción y el porcentaje de células tumorales positivas. En este análisis IHC, la positividad PD-L1 (PD-L1+) se definió como un puntaje H > 20. En paralelo, se examinaron los datos de expresión de ARNm PD-L1 del Atlas del Genoma del Cáncer (TCGA) en estas mismas indicaciones (503 NSCLC ACA, 489 NSCLC SCC y 191 HCC) y analizados comparando la expresión en tejidos normales coincidentes del TCGA.
Con el análisis RNAseq, los datos se calcularon como log2 (RPKM+0.1) después de la normalización de RSEM, utilizando tuberías OmicSoft RNASeq a través de indicaciones de tumor TCGA. La expresión de PD-L1 está elevada en NSCLC ACA y SCC, en relación con la de HCC. Al superponer las distribuciones y comparar los niveles de expresión en todas las indicaciones en TCGA, se clasificaron los perfiles de sobreexpresión para PD-L1 y se encontró que la cohorte TCGA HCC tenía niveles de ARNm de PD-L1 muy reducidos, con un nivel medio de -0.8 en comparación con 1.3 para ACA y 1.5 para SCC, lo que equivale a un cambio de más del doble de la expresión de nivel medio. Con RNAseq, nuestro análisis define el 50% de adenocarcinoma de NSCLC, el 54% de carcinoma de células escamosas de NSCLC y el 6% de HCC como expresores altos para PD-L1.
La expresión de la proteína PD-L1 de células tumorales se midió en 45 muestras de adenocarcinoma de pulmón (ACA), 47 muestras de carcinoma de células escamosas de pulmón (SCC) y 36 muestras de carcinoma hepatocelular (HCC). 16/45 (35.6%) ACA pulmonar, 21/47 (44.7%) SCC pulmonar fueron PD-L1 positivos. En contraste, la positividad PD-L1 se observó en solo 2/36 (5.6%) de muestras de HCC.

Claims (19)

REIVINDICACIONES
1. Una molécula de anticuerpo humanizado capaz de unirse al Gen-3 de Activación de Linfocitos humanos (LAG-3) con una constante de disociación (Kd) de menos de 0.2 nM según lo determinado por un método Biacore, que comprende:
(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15;
(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12;
(c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o
(d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12;
en donde la VH comprende cuatro regiones marco (FW): una VHFW1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 187, 190, 194 o 196, una VHFW2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 198, 202, 206 o 208, una VHFW3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 210, 212, 217 o 219, y una VHFW4 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 221; y
la VL comprende cuatro regiones marco (FW): una VLFW1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 226, 230, 232, 234, 236 o 238, una VLFW2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 240, 244, 246 o 248, una VLFW3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 252, 255, 259, 261, 265, 267 o 269, y una VLFW4 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 271.
2. La molécula de anticuerpo humanizado de la reivindicación 1, en donde dicha molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica o una molécula de anticuerpo biespecífica.
3. La molécula de anticuerpo humanizado de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que comprende:
un dominio variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada de la SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 104, o SEQ ID NO: 108; y/o
un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 92 o SEQ ID NO: 96.
4. La molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, que comprende:
una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 106, , SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 122, o SEQ ID NO: 134; y/o
una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 94, o SEQ ID NO: 98.
5. La molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, que comprende:
(a) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32;
(b) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;
(c) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;
(d) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44;
(e) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48;
(f) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52;
(g) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;
(h) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;
(i) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;
(j) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;
(k) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;
(l) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;
(m) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68 o SEQ ID NO: 108; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;
(n) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;
(o) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;
(p) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;
(q) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84;
(r) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88;
(s) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92; o
(t) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.
6. La molécula de anticuerpo humanizado de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que comprende:
(a) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34;
(b) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;
(c) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;
(d) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46;
(e) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50;
(f) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54;
(g) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58;
(h) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;
(i) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;
(j) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;
(k) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58;
(l) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;
(m) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70 o SEQ ID NO: 110; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;
(n) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;
(o) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;
(p) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 78 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;
(q) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 86;
(r) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 94;
(s) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98;
(t) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34;
(u) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;
(v) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;
(w) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58; o
(x) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.
7. La molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, que es un anticuerpo monoclonal, un Fab, F(ab')2, un Fv o un fragmento de Fv de cadena sencilla (scFv); o comprende
una región constante de cadena pesada seleccionada de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, y/o
una región constante de cadena ligera seleccionada de las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda.
8. La molécula de anticuerpo humanizado de la reivindicación 7, que comprende:
(a) una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación en la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa;
(b) una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación de Serina a Prolina en la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa;
(c) una región constante de cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Asparagina a Alanina en la posición 180 de la SEQ ID NO: 279 y una región constante de cadena ligera kappa;
(d) una región constante de la cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Aspartato a Alanina en la posición 148, y una mutación de prolina a Alanina en la posición 212 de la SEQ ID NO: 280 y una región constante de cadena ligera kappa; o
(e) una región constante de cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de Leucina a Alanina en la posición 117 y una mutación de Leucina a Alanina en la posición 118 de la SEQ ID NO: 281 y una región constante de cadena ligera kappa.
9. La molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que:
(a) se une a un dominio extracelular similar a Ig de LAG-3;
(b) es capaz de reducir la unión de LAG-3 a una molécula de clase II de histocompatibilidad mayor (MHC), o una célula que expresa una molécula de clase II de MHC; o
(c) es capaz de potenciar una respuesta de células T específica de antígeno.
10. La molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde dicha molécula de anticuerpo tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, TIM-3, CEACAM opcionalmente CEACAM-1 y/o CEACAM -5, PD-L1 o PD-L2; y/o
en donde dicha molécula de anticuerpo comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, opcionalmente un medio anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un medio anticuerpo.
11. Una composición farmacéutica que comprende la molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-10 y un vehículo, excipiente o estabilizador farmacéuticamente aceptable.
12. Un ácido nucleico que codifica la región variable de la cadena pesada y ligera del anticuerpo de la molécula de anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1-10.
13. Un vector de expresión que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 12.
14. Una célula huésped que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 12.
15. Un método para producir una molécula de anticuerpo o fragmento de la misma, que comprende cultivar la célula huésped de la reivindicación 14 bajo condiciones adecuadas para la expresión génica.
16. Un método para detectar LAG-3 en una muestra biológica, que comprende (i) poner en contacto la muestra o el sujeto (y opcionalmente, una muestra o sujeto de referencia) con una molécula de anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1-10 bajo condiciones que permitan la interacción de la molécula de anticuerpo y el polipéptido a presentarse, y (ii) detectar la formación de un complejo entre la molécula de anticuerpo y la muestra o el sujeto (y opcionalmente, la muestra o sujeto de referencia).
17. Una molécula de anticuerpo humanizado de cualquiera de las reivindicaciones 1-10, o una composición farmacéutica de la reivindicación 11, para uso en un método para estimular una respuesta inmune, o tratar un cáncer o una enfermedad infecciosa en un sujeto.
18. La molécula de anticuerpo humanizado, o composición farmacéutica, para uso de la reivindicación 17, en donde el sujeto tiene, o se identifica que tiene, uno o más de:
(a) un cáncer que expresa PD-L1;
(b) un cáncer que es positivo para uno, dos o todos los PD-L1, CD8 o IFN-y;
(c) un cáncer que es triple positivo para PD-L1, CD8 e IFN-y; o
(d) un cáncer que es positivo para Linfocitos Infiltrantes de Tumores (TIL).
19. La molécula de anticuerpo humanizado, o composición farmacéutica, para uso de la reivindicación 17, en donde la molécula de anticuerpo se administra por inyección a una dosis de 1 a 30 mg/kg, o, de 1 a 5 mg/kg, opcionalmente, en donde la molécula de anticuerpo se administra una vez por semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas o en una dosis de 10 a 20 mg/kg cada dos semanas.
ES15713290T 2014-03-14 2015-03-13 Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos Active ES2770684T3 (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461953536P 2014-03-14 2014-03-14
US201462059690P 2014-10-03 2014-10-03
US201462094889P 2014-12-19 2014-12-19
PCT/US2015/020474 WO2015138920A1 (en) 2014-03-14 2015-03-13 Antibody molecules to lag-3 and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2770684T3 true ES2770684T3 (es) 2020-07-02

Family

ID=52780053

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15713290T Active ES2770684T3 (es) 2014-03-14 2015-03-13 Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos

Country Status (36)

Country Link
US (4) US20150259420A1 (es)
EP (2) EP3116909B1 (es)
JP (3) JP6576962B2 (es)
KR (2) KR20220126813A (es)
CN (2) CN106103484B (es)
AU (2) AU2015229103C9 (es)
BR (2) BR122024001145A2 (es)
CA (1) CA2936962C (es)
CL (2) CL2016002112A1 (es)
CR (1) CR20160425A (es)
CU (1) CU24481B1 (es)
CY (1) CY1122510T1 (es)
DK (1) DK3116909T3 (es)
EA (1) EA201691765A1 (es)
EC (1) ECSP16081503A (es)
ES (1) ES2770684T3 (es)
GT (1) GT201600185A (es)
HR (1) HRP20192346T1 (es)
HU (1) HUE048531T2 (es)
IL (3) IL246781B (es)
JO (1) JOP20150048B1 (es)
LT (1) LT3116909T (es)
ME (1) ME03558B (es)
MX (2) MX2016011993A (es)
MY (1) MY187246A (es)
PE (1) PE20170071A1 (es)
PH (1) PH12016501545A1 (es)
PL (1) PL3116909T3 (es)
PT (1) PT3116909T (es)
RS (1) RS59853B1 (es)
SG (1) SG11201605951YA (es)
SI (1) SI3116909T1 (es)
TW (3) TWI697500B (es)
UY (1) UY36032A (es)
WO (1) WO2015138920A1 (es)
ZA (1) ZA201604740B (es)

Families Citing this family (236)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK3409278T3 (da) 2011-07-21 2020-11-09 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology Inc Heterocykliske proteinkinaseinhibitorer
EP3049442A4 (en) 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
ME03527B (me) 2013-12-12 2020-04-20 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1 antitijelo, njegov fragment koji se vezuje na antigen, i njegova medicinska primjena
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
MX2016011993A (es) 2014-03-14 2016-12-09 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a lag-3 y usos de las mismas.
SI3126383T1 (sl) 2014-04-03 2019-05-31 Igm Biosciences, Inc. Modificirana veriga J
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3925622A1 (en) 2014-09-13 2021-12-22 Novartis AG Combination therapies
CN107106687A (zh) * 2014-10-03 2017-08-29 诺华股份有限公司 组合治疗
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
EP4245376A3 (en) 2014-10-14 2023-12-13 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
WO2016090034A2 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Novartis Ag Methods for b cell preconditioning in car therapy
CA2972048C (en) * 2014-12-22 2023-03-07 The Rockefeller University Anti-mertk agonistic antibodies and uses thereof
WO2016126608A1 (en) 2015-02-02 2016-08-11 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
PT3265575T (pt) 2015-03-04 2021-06-16 Igm Biosciences Inc Molécula de ligação a cd20 e seus usos
BR112017018908A2 (pt) 2015-03-10 2018-04-17 Aduro Biotech, Inc. composições e métodos para ativar a sinalização dependente do "estimulador do gene de interferon
EP3271483B1 (en) * 2015-03-17 2021-07-21 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods and materials for assessing and treating cancer
MA41867A (fr) 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
US20180140602A1 (en) 2015-04-07 2018-05-24 Novartis Ag Combination of chimeric antigen receptor therapy and amino pyrimidine derivatives
EP4234685A3 (en) 2015-04-17 2023-09-06 Novartis AG Methods for improving the efficacy and expansion of chimeric antigen receptor-expressing cells
SG10201913500TA (en) 2015-05-29 2020-03-30 Agenus Inc Anti-ctla-4 antibodies and methods of use thereof
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
JP7146632B2 (ja) 2015-07-21 2022-10-04 ノバルティス アーゲー 免疫細胞の有効性および増大を改善する方法
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
DK3317301T3 (da) * 2015-07-29 2021-06-28 Immutep Sas Kombinationsterapier omfattende antistofmolekyler mod lag-3
HRP20211645T1 (hr) 2015-07-30 2022-02-04 Macrogenics, Inc. Molekule za vezanje pd-1 i postupci za njihovu uporabu
MX2018002610A (es) * 2015-09-02 2018-09-27 Immutep Sas Anticuerpos anti-lag-3.
CN108780084B (zh) 2015-09-03 2022-07-22 诺华股份有限公司 预测细胞因子释放综合征的生物标志物
EP3824903A1 (en) 2015-09-30 2021-05-26 IGM Biosciences Inc. Binding molecules with modified j-chain
CN108463472A (zh) * 2015-09-30 2018-08-28 Igm生物科学有限公司 具有修饰的j-链的结合分子
HUE055407T2 (hu) 2015-10-02 2021-11-29 Hoffmann La Roche PD1-re és TIM3-ra specifikus bispecifikus antitestek
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
US10149887B2 (en) 2015-10-23 2018-12-11 Canbas Co., Ltd. Peptides and peptidomimetics in combination with t cell activating and/or checkpoint inhibiting agents for cancer treatment
EP3973988A1 (en) * 2015-11-04 2022-03-30 Duke University Combination therapy of immunotoxin and checkpoint inhibitor
CA3132021C (en) * 2015-11-18 2024-03-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Pd1 and/or lag3 binders
WO2017087901A2 (en) * 2015-11-19 2017-05-26 Sutro Biopharma, Inc. Anti-lag3 antibodies, compositions comprising anti-lag3 antibodies and methods of making and using anti-lag3 antibodies
BR112018011781A2 (pt) 2015-12-14 2018-12-04 Macrogenics Inc molécula biespecífica possuindo um ou mais sítios de ligação a epítopo capazes de ligação imunoespecífica a (um) epítopo(s) de pd-1 e um ou mais sítios de ligação a epítopo capazes de ligação imunoespecífica a (um) epítopo(s) de ctla-4, e composição farmacêutica
BR112018012352A2 (pt) * 2015-12-16 2018-12-11 Merck Sharp & Dohme Corp. anticorpos anti-lag3 e fragmentos de ligação ao antígeno
MX2018007423A (es) 2015-12-17 2018-11-09 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-1 y usos de las mismas.
EP3402508A4 (en) * 2016-01-11 2019-09-25 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. METHOD AND COMPOSITIONS FOR MODULATING THE THYMUS FUNCTION
JP6993699B2 (ja) 2016-01-11 2022-02-03 ウニヴェルズィテート・ツューリヒ ヒトインターロイキン－２に対する免疫刺激性ヒト化モノクローナル抗体及びその融合タンパク質
US10537633B2 (en) 2016-03-04 2020-01-21 Jn Biosciences Llc Antibodies to TIGIT
CN109153714A (zh) 2016-03-04 2019-01-04 诺华股份有限公司 表达多重嵌合抗原受体(car)分子的细胞及其用途
EP3225253A1 (en) 2016-04-01 2017-10-04 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des Öffentlichen Rechts Cancer therapy with an oncolytic virus combined with a checkpoint inhibitor
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
KR20220103806A (ko) * 2016-05-18 2022-07-22 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 암 치료용 항-pd1 및 항-lag3 항체
EP3858858A1 (en) * 2016-06-20 2021-08-04 F-Star Delta Limited Binding molecules binding pd-l1 and lag-3
SG11201811184UA (en) * 2016-06-20 2019-01-30 F Star Beta Ltd Lag -3 binding members
EP3471753A1 (en) 2016-06-20 2019-04-24 Kymab Limited Anti-pd-l1 and il-2 cytokines
MX2018015393A (es) 2016-06-23 2019-04-29 Jiangsu Hengrui Medicine Co Anticuerpo lag-3, fragmento de union al antigeno del mismo y aplicacion farmaceutica del mismo.
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
GB201612520D0 (en) 2016-07-19 2016-08-31 F-Star Beta Ltd Binding molecules
EA039718B1 (ru) * 2016-07-21 2022-03-03 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Антитела к lag3 и их применения
US20180043011A1 (en) * 2016-08-10 2018-02-15 Wisconsin Alumni Research Foundation PI3-Kinase Inhibition and LAG-3 Checkpoint blockade as a Combination Therapy for Cancer
CN109689870B (zh) * 2016-09-08 2022-11-29 第一三共株式会社 用于治疗自身免疫疾病的抗体
US10537590B2 (en) 2016-09-30 2020-01-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Cyclic dinucleotide compounds
CA3037380A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Agenus Inc. Anti-lag-3 antibodies and methods of use thereof
TN2019000099A1 (en) * 2016-10-13 2020-07-15 Symphogen As ANTI-LAG-3 ANTIBODIES AND COMPOSITIONS
EP3535586A4 (en) 2016-11-01 2020-08-05 AnaptysBio, Inc. ANTIBODIES DIRECTED AGAINST T CELL IMMUNOGUE LOBULIN AND MUCIN PROTEIN 3 (TIM-3)
KR20190101364A (ko) 2016-11-01 2019-08-30 테사로, 인코포레이티드 예정 사멸-1(pd-1)에 대한 항체
TW201829462A (zh) 2016-11-02 2018-08-16 英商葛蘭素史克智慧財產（第二）有限公司 結合蛋白
EP3534933A4 (en) 2016-11-04 2020-06-24 Aximmune, Inc. BETA-ALETHINE, IMMUNE MODULATORS AND USES THEREOF
WO2018094275A1 (en) 2016-11-18 2018-05-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
WO2018102786A1 (en) 2016-12-03 2018-06-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for modulation of car-t cells
WO2018106862A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Agenus Inc. Anti-ctla-4 antibodies and methods of use thereof
DK3565844T3 (da) 2017-01-09 2023-05-01 Tesaro Inc Fremgangsmåder til behandling af cancer med anti-PD-1-antistoffer
JP7118073B2 (ja) 2017-01-09 2022-08-15 テサロ， インコーポレイテッド 抗ｔｉｍ－３抗体を用いてがんを処置する方法
CA3053348A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled anti-lag3 antibodies for immuno-pet imaging
CA3053989A1 (en) 2017-02-22 2018-08-30 I-Mab Anti-lag-3 antibodies and uses thereof
JOP20190218A1 (ar) 2017-03-22 2019-09-22 Boehringer Ingelheim Int مركبات ثنائية النيوكليوتيدات حلقية معدلة
HUE059885T2 (hu) 2017-04-03 2023-01-28 Hoffmann La Roche Anti-PD-1 antitest immunkonjugátumai mutáns il-2-vel vagy il-15-tel
HRP20221141T1 (hr) * 2017-04-05 2022-11-25 F. Hoffmann - La Roche Ag Anti-lag3 protutijela
EA201992350A1 (ru) 2017-04-05 2020-03-23 Симфоген А/С Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3
BR112019021032A2 (pt) 2017-04-05 2020-05-05 Boehringer Ingelheim Int terapia combinada anticâncer
TWI690538B (zh) * 2017-04-05 2020-04-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 特異性結合至pd1至lag3的雙特異性抗體
CA3059468A1 (en) * 2017-04-27 2018-11-01 Tesaro, Inc. Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
WO2018222718A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lag-3 positive tumors
CA3060989A1 (en) * 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent
CA3065304A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising an anti-lag-3 antibody or an anti-lag-3 antibody and an anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
EP3630839A1 (en) 2017-06-01 2020-04-08 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd 123 cd3
CA3065120A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Juno Therapeutics, Inc. Articles of manufacture and methods for treatment using adoptive cell therapy
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
CA3061874A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag IL-1BETA BINDING ANTIBODIES FOR USE IN THE TREATMENT OF CANCER
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
AU2018290237A1 (en) 2017-06-22 2020-01-16 Novartis Ag Antibody molecules to CD73 and uses thereof
CA3066747A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
CN111050545A (zh) 2017-06-29 2020-04-21 朱诺治疗学股份有限公司 评估与免疫疗法相关的毒性的小鼠模型
CN111094350A (zh) * 2017-07-06 2020-05-01 美勒斯公司 调节由细胞表达的生物活性的抗体
CN111163798A (zh) * 2017-07-20 2020-05-15 诺华股份有限公司 用于抗lag-3抗体的给药方案及其用途
EP4364741A2 (en) 2017-08-18 2024-05-08 Cothera Bioscience, Inc. Polymorphic form of tg02
AU2018323955A1 (en) 2017-08-30 2020-03-19 Phanes Therapeutics, Inc. Anti-LAG-3 antibodies and uses thereof
NZ761401A (en) 2017-08-31 2022-11-25 Io Therapeutics Inc Rar selective agonists in combination with immune modulators for cancer immunotherapy
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
WO2019070013A1 (ja) * 2017-10-05 2019-04-11 第一三共株式会社 細胞傷害性ｔ細胞枯渇用組成物
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
US20210093684A1 (en) * 2017-10-31 2021-04-01 KaliVir Immunotherapeutics LLC Platform oncolytic vector for systemic delivery
AU2018360800A1 (en) 2017-11-01 2020-05-14 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for B-cell maturation antigen (BCMA)
US20210132042A1 (en) 2017-11-01 2021-05-06 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
SG11202003501XA (en) 2017-11-01 2020-05-28 Juno Therapeutics Inc Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
CA3082383A1 (en) * 2017-11-08 2019-05-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
US20200277378A1 (en) 2017-11-16 2020-09-03 Novartis Ag Combination therapies
EP3717907A1 (en) 2017-11-30 2020-10-07 Novartis AG Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
MA51184A (fr) 2017-12-15 2020-10-21 Juno Therapeutics Inc Molécules de liaison à l'anti-cct5 et procédés d'utilisation associés
TW201930355A (zh) 2017-12-19 2019-08-01 英商Ｆ星貝塔有限公司 結合物件(三)
KR20200104314A (ko) 2017-12-22 2020-09-03 지앙수 헨그루이 메디슨 컴퍼니 리미티드 Lag-3 항체 약학 조성물 및 이의 용도
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN109970857B (zh) 2017-12-27 2022-09-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
CN109970856B (zh) 2017-12-27 2022-08-23 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
WO2019136432A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Novartis Ag Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
JP2021511793A (ja) 2018-01-31 2021-05-13 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｌａｇ３に結合する抗原結合部位を含む二重特異性抗体
CA3090249A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
US20210069246A1 (en) 2018-01-31 2021-03-11 Celgene Corporation Combination therapy using adoptive cell therapy and checkpoint inhibitor
WO2019152574A1 (en) * 2018-02-01 2019-08-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Methods for treating cancer or infection using a combination of an anti-pd-1 antibody, an anti-lag3 antibody, and an anti-tigit antibody
US20200399383A1 (en) 2018-02-13 2020-12-24 Novartis Ag Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US11795221B2 (en) 2018-02-28 2023-10-24 WuXi Biologics Ireland Limited Monoclonal antibody against human LAG-3, method for preparing the same, and use thereof
JP7438180B2 (ja) * 2018-03-20 2024-02-26 ウーシー バイオロジクス アイルランド リミテッド 新規抗ｌａｇ－３抗体ポリペプチド
CN110305215B (zh) * 2018-03-20 2023-11-03 基石药业 新型抗lag-3抗体多肽
CN111971291A (zh) 2018-03-27 2020-11-20 勃林格殷格翰国际有限公司 用作sting激动剂的含有2-氮杂-次黄嘌呤或6h-吡唑并[1,5-d][1,2,4]三嗪-7-酮的环状二核苷酸化合物
US20210024567A1 (en) 2018-03-27 2021-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Modified cyclic dinucleotide compounds
US11958903B2 (en) * 2018-03-30 2024-04-16 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against LAG-3 and uses thereof
JP7104458B2 (ja) * 2018-04-02 2022-07-21 上海博威生物医薬有限公司 リンパ球活性化遺伝子－３（ｌａｇ－３）結合抗体およびその使用
CN110343178B (zh) * 2018-04-03 2022-07-22 上海开拓者生物医药有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其应用
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
US20190365861A1 (en) 2018-04-18 2019-12-05 Xencor, Inc. Il-15/il-15ra heterodimeric fc fusion proteins and uses thereof
US11524991B2 (en) 2018-04-18 2022-12-13 Xencor, Inc. PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof
AU2019263850A1 (en) * 2018-05-03 2020-11-19 Shanghai Epimab Biotherapeutics Co., Ltd. High affinity antibodies to PD-1 and LAG-3 and bispecific binding proteins made therefrom
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CA3098420A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Novartis Ag Binding molecules against bcma and uses thereof
CA3102256A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that bind cd123 and cd3
EP3806888B1 (en) 2018-06-12 2024-01-31 Obsidian Therapeutics, Inc. Pde5 derived regulatory constructs and methods of use in immunotherapy
CN110606892B (zh) * 2018-06-14 2023-09-26 华博生物医药技术（上海）有限公司 一种高亲和力高生物活性的lag-3抗体及其应用
KR102250234B1 (ko) * 2018-06-29 2021-05-10 주식회사 와이바이오로직스 Lag-3에 특이적으로 결합하는 단클론항체 및 이의 용도
AU2019301944B2 (en) 2018-07-10 2022-02-24 Novartis Ag 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of IKAROS Family Zinc Finger 2 (IKZF2)-dependent diseases
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
PE20210406A1 (es) 2018-07-25 2021-03-02 Novartis Ag Inhibidores de inflamasoma nlrp3
TW202024638A (zh) 2018-09-04 2020-07-01 美商泰沙羅公司 治療癌症之方法
CN112739360A (zh) 2018-09-26 2021-04-30 安斯泰来制药株式会社 基于溶瘤性牛痘病毒与免疫检查点抑制剂的联用的癌症疗法以及其中使用的药物组合物和组合药物
EP3856782A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Novartis AG Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
EP3856779A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Novartis AG Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
CN110960679A (zh) * 2018-09-28 2020-04-07 江苏康缘药业股份有限公司 一种抗肿瘤的药物组合物及其应用
CN113195523A (zh) 2018-10-03 2021-07-30 Xencor股份有限公司 IL-12异源二聚体Fc融合蛋白
EP3864047A2 (en) 2018-10-12 2021-08-18 Xencor, Inc. Pd-1 targeted il-15/il-15ralpha fc fusion proteins and uses in combination therapies thereof
WO2020089811A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
CN113646335A (zh) 2018-11-01 2021-11-12 朱诺治疗学股份有限公司 使用对b细胞成熟抗原具有特异性的嵌合抗原受体的治疗的方法
PE20211058A1 (es) 2018-11-01 2021-06-07 Juno Therapeutics Inc Receptores de antigenos quimericos especificos para el miembro d del grupo 5 de la clase c del receptor acoplado a proteina g (gprc5d)
MX2021005734A (es) 2018-11-16 2021-09-10 Juno Therapeutics Inc Metodos de dosificacion de celulas t modificadas para el tratamiento de malignidades de celulas b.
JP2022513685A (ja) 2018-11-30 2022-02-09 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 養子細胞療法を用いた処置のための方法
JP2022511029A (ja) 2018-12-04 2022-01-28 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド がんの処置のための薬剤としての使用のためのｃｄｋ９インヒビターおよびその多形
CN113271945A (zh) 2018-12-20 2021-08-17 诺华股份有限公司 包含3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物的给药方案和药物组合
EP3897853A1 (en) 2018-12-20 2021-10-27 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric fc fusion proteins containing il-15/il-15ra and nkg2d antigen binding domains
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
KR20210107730A (ko) 2018-12-21 2021-09-01 노파르티스 아게 골수 형성이상 증후군의 치료 또는 예방에서의 il-1 베타 항체의 용도
WO2020128620A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
CA3123996A1 (en) 2018-12-21 2019-12-18 Novartis Ag Antibodies to pmel17 and conjugates thereof
TWI756621B (zh) * 2019-01-25 2022-03-01 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 新型雙特異性抗體分子以及同時結合pd-l1和lag-3的雙特異性抗體
US20220096651A1 (en) 2019-01-29 2022-03-31 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
US11471456B2 (en) 2019-02-12 2022-10-18 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Formulations comprising heterocyclic protein kinase inhibitors
WO2020165833A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
JP2022520448A (ja) 2019-02-15 2022-03-30 ノバルティス アーゲー 置換３－（１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン誘導体及びその使用
US11793802B2 (en) 2019-03-20 2023-10-24 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment of acute myeloid leukemia (AML) with venetoclax failure
CA3133460A1 (en) 2019-03-22 2020-10-01 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising pkm2 modulators and methods of treatment using the same
SG11202110449YA (en) 2019-03-26 2021-10-28 Univ Michigan Regents Small molecule degraders of stat3
WO2020205467A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
CN113727731B (zh) * 2019-04-26 2023-06-02 上海药明生物技术有限公司 靶向pd-1和lag-3的双特异性抗体
AR119731A1 (es) 2019-05-17 2022-01-05 Novartis Ag Inhibidores del inflamasoma nlrp3
US20220226291A1 (en) * 2019-05-29 2022-07-21 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Combination Treatment of Cancer Using Sulfonamide Compound and Immune Regulator
CN115340606B (zh) * 2019-05-31 2023-12-19 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 与人lag-3蛋白结合的抗体及其编码基因和应用
EP3983377A1 (en) 2019-06-12 2022-04-20 Vanderbilt University Dibenzylamines as amino acid transport inhibitors
EP3983450A4 (en) * 2019-06-12 2023-07-05 Nanjing GenScript Biotech Co., Ltd. ANTI-PD-L1/ANTI-LAG-3 PROTEINS WITH MULTIPLE ANTIGEN BINDING AND METHODS FOR THEIR USE
AU2020291464A1 (en) 2019-06-12 2022-02-03 Vanderbilt University Amino acid transport inhibitors and the uses thereof
EP3990499A4 (en) * 2019-06-26 2023-07-05 Amunix Pharmaceuticals, Inc. EGFR ANTIGEN-BINDING FRAGMENTS AND COMPOSITIONS COMPRISING THEM
MX2022000164A (es) 2019-07-03 2022-04-01 Sumitomo Pharma Oncology Inc Inhibidores de tirosina cinasa no receptora 1 (tnk1) y usos de los mismos.
WO2021007160A1 (en) 2019-07-05 2021-01-14 Tambo, Inc. Trans-cyclooctene bioorthogonal agents and uses in cancer and immunotherapy
MX2022000550A (es) 2019-07-16 2022-02-10 Univ Michigan Regents Imidazopirimidinas como inhibidores de eed y uso de estas.
JP2022545735A (ja) 2019-08-27 2022-10-28 ザ リージェンツ オブ ザ ユニヴァシティ オブ ミシガン セレブロンｅ３リガーゼ阻害剤
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
AU2020348849A1 (en) 2019-09-19 2022-04-07 The Regents Of The University Of Michigan Spirocyclic androgen receptor protein degraders
US11851466B2 (en) 2019-10-03 2023-12-26 Xencor, Inc. Targeted IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
CA3158298A1 (en) 2019-10-21 2021-04-29 Novartis Ag Combination therapies with venetoclax and tim-3 inhibitors
KR20220087498A (ko) 2019-10-21 2022-06-24 노파르티스 아게 Tim-3 억제제 및 그의 용도
US20220411499A1 (en) 2019-11-08 2022-12-29 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 Antagonist Therapy for Melanoma
CA3165399A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Novartis Ag Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases
AU2021207348A1 (en) 2020-01-17 2022-08-11 Novartis Ag Combination comprising a TIM-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
WO2021195481A1 (en) 2020-03-26 2021-09-30 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule stat protein degraders
WO2021207689A2 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting b-cell maturation antigen
PE20231078A1 (es) 2020-06-02 2023-07-17 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos anti-tigit
CN111808192B (zh) * 2020-06-05 2022-02-15 北京天广实生物技术股份有限公司 结合lag3的抗体及其用途
IL298262A (en) 2020-06-23 2023-01-01 Novartis Ag A dosage regimen that includes derivatives of 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione
US20230257365A1 (en) 2020-07-10 2023-08-17 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
US20230233690A1 (en) 2020-07-10 2023-07-27 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
WO2022032191A1 (en) 2020-08-07 2022-02-10 Tambo, Inc. Trans-cyclooctene bioorthogonal agents and uses in cancer and immunotherapy
US20230416364A1 (en) 2020-08-13 2023-12-28 Bristol-Myers Squibb Company Methods of redirecting of il-2 to target cells of interest
BR112023003427A2 (pt) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia com antagonista de lag-3 para carcinoma hepatocelular
WO2022043557A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
EP4204020A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Advanced Accelerator Applications International S.A. Method of treating psma-expressing cancers
CA3196496A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Laurence David TOMS Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
EP4240491A1 (en) 2020-11-06 2023-09-13 Novartis AG Cd19 binding molecules and uses thereof
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
JP2024500847A (ja) 2020-12-18 2024-01-10 センチュリー セラピューティクス，インコーポレイテッド 適合可能な受容体特異性を有するキメラ抗原受容体システム
WO2022146948A1 (en) 2020-12-28 2022-07-07 Bristol-Myers Squibb Company Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies
WO2022146947A1 (en) 2020-12-28 2022-07-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2022169825A1 (en) 2021-02-03 2022-08-11 Mozart Therapeutics, Inc. Binding agents and methods of using the same
WO2022187419A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
WO2022187423A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon ligands
EP4313127A1 (en) 2021-03-29 2024-02-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and treatment with a combination of a checkpoint inhibitor therapy and a car t cell therapy
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
TW202309022A (zh) 2021-04-13 2023-03-01 美商努法倫特公司 用於治療具egfr突變之癌症之胺基取代雜環
AU2022258829A1 (en) 2021-04-16 2023-10-26 Novartis Ag Antibody drug conjugates and methods for making thereof
US20220347282A1 (en) * 2021-04-28 2022-11-03 Wisconsin Alumni Research Foundation Anti-tumor dna vaccine with pd-1 and lag-3 pathway blockade
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN115403670A (zh) 2021-05-26 2022-11-29 安徽瀚海博兴生物技术有限公司 抗cd40抗体及其用途
CN115611983A (zh) 2021-07-14 2023-01-17 三优生物医药(上海)有限公司 Cldn18.2结合分子及其用途
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
WO2023077090A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
TW202334218A (zh) * 2021-11-01 2023-09-01 中國大陸商科望（蘇州）生物醫藥科技有限公司 新型抗ｌａｇ３抗體
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
US20240067627A1 (en) 2022-08-03 2024-02-29 Novartis Ag Nlrp3 inflammasome inhibitors
US20240041929A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for gprc5d and bcma

Family Cites Families (324)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4433059A (en) 1981-09-08 1984-02-21 Ortho Diagnostic Systems Inc. Double antibody conjugate
US4444878A (en) 1981-12-21 1984-04-24 Boston Biomedical Research Institute, Inc. Bispecific antibody determinants
GB2116183B (en) 1982-03-03 1985-06-05 Genentech Inc Human antithrombin iii dna sequences therefore expression vehicles and cloning vectors containing such sequences and cell cultures transformed thereby a process for expressing human antithrombin iii and pharmaceutical compositions comprising it
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
US4978672A (en) 1986-03-07 1990-12-18 Ciba-Geigy Corporation Alpha-heterocyclc substituted tolunitriles
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US5869620A (en) 1986-09-02 1999-02-09 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
ATE95193T1 (de) 1987-06-17 1993-10-15 Sandoz Ag Cyclosporine und deren benutzung als arzneimittel.
JPH021556A (ja) 1988-06-09 1990-01-05 Snow Brand Milk Prod Co Ltd ハイブリッド抗体及びその作製方法
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
EP1026240A3 (en) 1988-09-02 2004-04-07 Dyax Corp. Generation and selection of recombinant varied binding proteins
FR2636953B1 (fr) 1988-09-26 1990-12-14 Roussy Inst Gustave Nouveaux polypeptides produits par des lymphocytes humains, genes codant pour ces polypeptides et applications pharmaceutiques et biologiques
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
GB8905669D0 (en) 1989-03-13 1989-04-26 Celltech Ltd Modified antibodies
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
WO1991000906A1 (en) 1989-07-12 1991-01-24 Genetics Institute, Inc. Chimeric and transgenic animals capable of producing human antibodies
WO1991003493A1 (en) 1989-08-29 1991-03-21 The University Of Southampton Bi-or trispecific (fab)3 or (fab)4 conjugates
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
FR2656800B1 (fr) 1990-01-08 1992-05-15 Roussy Inst Gustave Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques.
US5976877A (en) 1990-01-08 1999-11-02 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Proteins produced by human lymphocytes DNA sequence encoding these proteins and their pharmaceutical and biological uses
SG48759A1 (en) 1990-01-12 2002-07-23 Abgenix Inc Generation of xenogenic antibodies
US5273743A (en) 1990-03-09 1993-12-28 Hybritech Incorporated Trifunctional antibody-like compounds as a combined diagnostic and therapeutic agent
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9012995D0 (en) 1990-06-11 1990-08-01 Celltech Ltd Multivalent antigen-binding proteins
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
ATE185601T1 (de) 1990-07-10 1999-10-15 Cambridge Antibody Tech Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern
JPH06506105A (ja) 1990-08-29 1994-07-14 ファーミング　ビーブイ 哺乳動物細胞における相同性組換え
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
US5582996A (en) 1990-12-04 1996-12-10 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Bifunctional antibodies and method of preparing same
WO1992013949A1 (fr) 1991-02-08 1992-08-20 Roussel-Uclaf Sequences nucleotidiques codant pour des regions variables de chaines alpha des recepteurs des lymphocytes humains ainsi que leurs applications
US6596536B1 (en) 1991-02-08 2003-07-22 Aventis Pharma S.A. Nucleotide sequences coding for variable regions of the alpha chains of human T lymphocyte receptors, corresponding peptide segments and the diagnostic and therapeutic uses
CA2079881C (fr) 1991-02-12 2007-11-06 Thierry Hercend Sequences nucleotidiques codant pour des regions variables de chaines .beta. des recepteurs des lymphocytes t humains, segments peptidiques correspondants et les applications diagnostiques et therapeutiques
JP4146512B2 (ja) 1991-03-01 2008-09-10 ダイアックス コープ． 小型タンパク質
US6582959B2 (en) 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
US20030206899A1 (en) 1991-03-29 2003-11-06 Genentech, Inc. Vascular endothelial cell growth factor antagonists
EP0580737B1 (en) 1991-04-10 2004-06-16 The Scripps Research Institute Heterodimeric receptor libraries using phagemids
EP0519596B1 (en) 1991-05-17 2005-02-23 Merck & Co. Inc. A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains
DE4118120A1 (de) 1991-06-03 1992-12-10 Behringwerke Ag Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung
US6511663B1 (en) 1991-06-11 2003-01-28 Celltech R&D Limited Tri- and tetra-valent monospecific antigen-binding proteins
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
WO1993015210A1 (en) 1992-01-23 1993-08-05 Merck Patent Gmbh Monomeric and dimeric antibody-fragment fusion proteins
WO1993016185A2 (en) 1992-02-06 1993-08-19 Creative Biomolecules, Inc. Biosynthetic binding protein for cancer marker
CA2076465C (en) 1992-03-25 2002-11-26 Ravi V. J. Chari Cell binding agent conjugates of analogues and derivatives of cc-1065
CA2135408A1 (en) 1992-05-08 1993-11-25 Peter C. Keck Chimeric multivalent protein analogues and methods of use thereof
PT1498427E (pt) 1992-08-21 2010-03-22 Univ Bruxelles Imunoglobulinas desprovidas de cadeias leves
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
SG41929A1 (en) 1992-09-25 1997-08-15 Commw Scient Ind Res Org Target binding polypeptide
GB9221657D0 (en) 1992-10-15 1992-11-25 Scotgen Ltd Recombinant bispecific antibodies
DE69233803D1 (de) 1992-10-28 2011-03-31 Genentech Inc Verwendung von vaskulären Endothelwachstumsfaktor-Antagonisten
US5837821A (en) 1992-11-04 1998-11-17 City Of Hope Antibody construct
GB9323648D0 (en) 1992-11-23 1994-01-05 Zeneca Ltd Proteins
CA2150262C (en) 1992-12-04 2008-07-08 Kaspar-Philipp Holliger Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
US6476198B1 (en) 1993-07-13 2002-11-05 The Scripps Research Institute Multispecific and multivalent antigen-binding polypeptide molecules
US5635602A (en) 1993-08-13 1997-06-03 The Regents Of The University Of California Design and synthesis of bispecific DNA-antibody conjugates
WO1995009917A1 (en) 1993-10-07 1995-04-13 The Regents Of The University Of California Genetically engineered bispecific tetravalent antibodies
CA2189657C (fr) 1994-05-06 2002-03-12 Florence Faure Fractions polypeptidiques solubles de la proteine lag-3; procede de production; composition therapeutique; anticorps anti-idiotype
WO1996013583A2 (en) 1994-10-20 1996-05-09 Morphosys Gesellschaft Für Proteinoptimierung Mbh Targeted hetero-association of recombinant proteins to multi-functional complexes
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
IL117645A (en) 1995-03-30 2005-08-31 Genentech Inc Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration
DE69633175T2 (de) 1995-05-23 2005-08-11 Morphosys Ag Multimere proteine
DK0843557T3 (da) 1995-07-21 2003-03-10 Inst Nat Sante Rech Med Fremgangsmåder til detektion, identifikation, isolation og selektiv mærkning og målsøgning af Th1-lymfocytter ved hjælp af LAG-3 protein
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
CN1173878A (zh) 1995-10-16 1998-02-18 尤尼利弗公司 双功能或双价抗体片段类似物
US5968511A (en) 1996-03-27 1999-10-19 Genentech, Inc. ErbB3 antibodies
WO1997038102A1 (en) 1996-04-04 1997-10-16 Unilever Plc Multivalent and multispecific antigen-binding protein
TW533205B (en) 1996-06-25 2003-05-21 Novartis Ag Substituted 3,5-diphenyl-l,2,4-triazoles and their pharmaceutical composition
AU4055697A (en) 1996-08-16 1998-03-06 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
IL130123A (en) 1996-11-28 2007-07-24 Roussy Inst Gustave LAG-3 protein mutants, their expression, use and method of production
NZ500077A (en) 1997-04-07 2001-10-26 Genentech Inc Humanized antibodies to vascular endothelial growth factor (VEGF) and methods for their preparation.
US6884879B1 (en) 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
US20020032315A1 (en) 1997-08-06 2002-03-14 Manuel Baca Anti-vegf antibodies
BRPI9809387B8 (pt) 1997-04-07 2021-05-25 Genentech Inc anticorpo humanizado anti-fator de crescimento endotelial vascular humano e composição que o compreende
WO1998049198A1 (en) 1997-04-30 1998-11-05 Enzon, Inc. Single-chain antigen-binding proteins capable of glycosylation, production and uses thereof
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US20030207346A1 (en) 1997-05-02 2003-11-06 William R. Arathoon Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
CA2304254C (en) 1997-06-11 2012-05-22 Hans Christian Thogersen Trimerising module
EP0900841A1 (en) 1997-06-18 1999-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) LAG-3 splice variants
CO4940418A1 (es) 1997-07-18 2000-07-24 Novartis Ag Modificacion de cristal de un derivado de n-fenil-2- pirimidinamina, procesos para su fabricacion y su uso
EP0893507A1 (en) 1997-07-25 1999-01-27 Institut Gustave Roussy Use of MHC class II ligands (CD4 and LAG-3) as adjuvant for vaccination and of LAG-3 in cancer treatment
AU1102399A (en) 1997-10-21 1999-05-10 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins tr11, tr11sv1, and tr11sv2
DE69841562D1 (de) 1997-10-27 2010-04-29 Bac Ip Bv Multivalente antigenbindende proteine
ES2234241T3 (es) 1998-01-23 2005-06-16 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Derivados de anticuerpo de multiples fines.
EP1053321A1 (en) 1998-02-09 2000-11-22 Genentech, Inc. Novel tumor necrosis factor receptor homolog and nucleic acids encoding the same
CZ121599A3 (cs) 1998-04-09 1999-10-13 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Jednořetězcová molekula vázající několik antigenů, způsob její přípravy a léčivo obsahující tuto molekulu
CA2328725A1 (en) 1998-04-15 1999-10-21 Brigham & Women's Hospital, Inc. T cell inhibitory receptor compositions and uses thereof
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
GB9812545D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
ATE251181T1 (de) 1998-07-28 2003-10-15 Micromet Ag Heterominikörper
US6333396B1 (en) 1998-10-20 2001-12-25 Enzon, Inc. Method for targeted delivery of nucleic acids
US6703020B1 (en) 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
US7527787B2 (en) 2005-10-19 2009-05-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies
US7534866B2 (en) 2005-10-19 2009-05-19 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses
GB9911569D0 (en) 1999-05-18 1999-07-21 Oxford Biomedica Ltd Antibodies
WO2001003720A2 (en) 1999-07-12 2001-01-18 Genentech, Inc. Promotion or inhibition of angiogenesis and cardiovascularization by tumor necrosis factor ligand/receptor homologs
US7605238B2 (en) 1999-08-24 2009-10-20 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies and their uses
GB0018891D0 (en) 2000-08-01 2000-09-20 Novartis Ag Organic compounds
IL151853A0 (en) 2000-04-11 2003-04-10 Genentech Inc Multivalent antibodies and uses therefor
WO2001090192A2 (en) 2000-05-24 2001-11-29 Imclone Systems Incorporated Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
ES2609016T3 (es) 2000-06-16 2017-04-18 Human Genome Sciences, Inc. Anticuerpos que se unen inmunoespecíficamente a BLyS
EP1294904A1 (en) 2000-06-30 2003-03-26 Vlaams Interuniversitair Instituut voor Biotechnologie vzw. Heterodimeric fusion proteins
JP2004523205A (ja) 2000-07-25 2004-08-05 イムノメディクス， インコーポレイテッド 多価標的結合タンパク質
EP2351838A1 (en) 2000-10-20 2011-08-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Crosslinking agonistic antibodies
US6995162B2 (en) 2001-01-12 2006-02-07 Amgen Inc. Substituted alkylamine derivatives and methods of use
US7829084B2 (en) 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
CA2438279A1 (en) 2001-02-22 2002-09-26 Institut Pasteur Comparative mycobacterial geneomics as a tool for identifying targets for the diagnosis, prophylaxis or treatment of mycobacterioses
WO2002072635A2 (en) 2001-03-13 2002-09-19 University College London Specific binding members
US20020146753A1 (en) 2001-04-06 2002-10-10 Henrik Ditzel Autoantibodies to glucose-6-phosphate isomerase and their participation in autoimmune disease
JP4303105B2 (ja) 2001-06-28 2009-07-29 ドマンティス リミテッド 二重特異性リガンドとその利用
US6833441B2 (en) 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
EP1293514B1 (en) 2001-09-14 2006-11-29 Affimed Therapeutics AG Multimeric single chain tandem Fv-antibodies
EP1295895B1 (en) 2001-09-19 2011-08-10 Institut Gustave Roussy Peptides and proteins binding to glu-pro motifs, therapeutical compositions containing the same and applications thereof
WO2003025202A2 (en) 2001-09-19 2003-03-27 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Engineered templates and their use in single primer amplification
ATE335490T1 (de) 2001-10-30 2006-09-15 Novartis Pharma Gmbh Staurosporin-derivate als hemmer der flt3- rezeptor-tyrosinkinase-wirkung
US20030211078A1 (en) 2001-12-07 2003-11-13 Heavner George A. Pseudo-antibody constructs
ES2485841T3 (es) 2002-02-01 2014-08-14 Ariad Pharmaceuticals, Inc Compuestos que contienen fósforo y usos de los mismos
CA2476518A1 (en) 2002-02-22 2003-09-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
CA2478011C (en) 2002-03-01 2013-05-21 Immunomedics, Inc. Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance
PT3000810T (pt) 2002-03-13 2017-10-25 Array Biopharma Inc Derivados de benzimidazole alquilado n3 como inibidores de mek
US8030461B2 (en) 2002-04-15 2011-10-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for constructing scDb libraries
CA2481507A1 (en) 2002-04-16 2003-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
ITTO20020602A1 (it) * 2002-07-10 2004-01-12 Infm Istituto Naz Per La Fisi Microscopio ottico atto ad operare una modulazione tridimensionale rapida della posizione del punto di osservazione
US20040047858A1 (en) 2002-09-11 2004-03-11 Blumberg Richard S. Therapeutic anti-BGP(C-CAM1) antibodies and uses thereof
EP2322200A3 (en) 2002-10-29 2011-07-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
EP2287192B1 (en) 2002-11-15 2015-08-26 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Methods for preventing and treating cancer metastasis and bone loss associated with cancer metastasis
CN101899114A (zh) 2002-12-23 2010-12-01 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
GB0230203D0 (en) 2002-12-27 2003-02-05 Domantis Ltd Fc fusion
BRPI0407403B1 (pt) 2003-02-11 2022-07-19 Cancer Research Technology Ltd Compostos de isoxazol e composição farmacêutica
WO2005035732A2 (en) 2003-02-19 2005-04-21 Dyax Corporation Papp-a ligands
ES2439580T3 (es) 2003-02-28 2014-01-23 The Johns Hopkins University Regulación de células T
GB0305702D0 (en) 2003-03-12 2003-04-16 Univ Birmingham Bispecific antibodies
JP2006526408A (ja) 2003-04-22 2006-11-24 アイビーシー、ファーマシューティカルズ 多価タンパク質複合体
NZ543654A (en) 2003-05-23 2009-05-31 Wyeth Corp GITR ligand and GITR ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
ME00425B (me) 2003-05-30 2011-10-10 Genentech Inc Liječenje sa anti-vegf antitijelima
AU2004252171B2 (en) 2003-06-27 2011-04-21 Biogen Ma Inc. Modified binding molecules comprising connecting peptides
KR20060041205A (ko) 2003-07-01 2006-05-11 이뮤노메딕스, 인코오포레이티드 양특이성 항체들의 다가 담체들
US20050048054A1 (en) 2003-07-11 2005-03-03 Shino Hanabuchi Lymphocytes; methods
US7696322B2 (en) 2003-07-28 2010-04-13 Catalent Pharma Solutions, Inc. Fusion antibodies
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US20050106667A1 (en) 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
AU2004279742A1 (en) 2003-10-08 2005-04-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Fused protein composition
AU2004279441B2 (en) 2003-10-08 2010-07-01 The Feinstein Institute For Medical Research Methods and compositions for diagnosis and treatment of B cell chronic lymphocytic leukemia
EP1682103A1 (en) 2003-10-27 2006-07-26 Novartis AG Indolyl-pyrroledione derivatives for the treatment of neurological and vascular disorders related to beta-amyloid generation and/or aggregation
EP1692318A4 (en) 2003-12-02 2008-04-02 Genzyme Corp COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF LUNG CANCER
AU2004308439A1 (en) 2003-12-22 2005-07-14 Centocor, Inc. Methods for generating multimeric molecules
GB0329825D0 (en) 2003-12-23 2004-01-28 Celltech R&D Ltd Biological products
US20050266425A1 (en) 2003-12-31 2005-12-01 Vaccinex, Inc. Methods for producing and identifying multispecific antibodies
AU2005207946A1 (en) 2004-01-23 2005-08-11 Amgen Inc. Quinoline quinazoline pyridine and pyrimidine counds and their use in the treatment of inflammation angiogenesis and cancer
US8383575B2 (en) 2004-01-30 2013-02-26 Paul Scherrer Institut (DI)barnase-barstar complexes
BR122019012028B1 (pt) 2004-04-13 2023-09-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Anticorpos anti-p-selectina, molécula de ácido nucléico, vetor, e composição
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
CN101031569B (zh) 2004-05-13 2011-06-22 艾科斯有限公司 作为人磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的喹唑啉酮
US20060002932A1 (en) 2004-06-04 2006-01-05 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
PL1761528T3 (pl) 2004-06-11 2008-05-30 Japan Tobacco Inc Pochodne 5-amino-2,4,7-triokso-3,4,7,8-tetrahydro-2H-pirydo[2,3-D]pirymidyny i związki pokrewne do leczenia raka
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
US20060009360A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
JP2008512352A (ja) 2004-07-17 2008-04-24 イムクローン システムズ インコーポレイティド 新規な四価の二重特異性抗体
EA014182B1 (ru) 2004-07-20 2010-10-29 Симфоген А/С КОМПОЗИЦИЯ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИ-RhD АНТИТЕЛ, СПОСОБ ЕЁ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ КОМПОЗИЦИИ
JP2008515774A (ja) 2004-08-03 2008-05-15 ダイアックス コーポレイション ｈＫ１結合タンパク質
CA2577082A1 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Genentech, Inc. Heteromultimeric molecules
AU2005292227A1 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Medarex, Inc. Methods of treating CD30 positive lymphomas
ES2657443T3 (es) 2005-03-25 2018-03-05 Gitr, Inc. Anticuerpos anti-GITR y usos de los mismos
JP5620626B2 (ja) 2005-03-31 2014-11-05 中外製薬株式会社 会合制御によるポリペプチド製造方法
CN101484182B (zh) 2005-04-06 2014-06-11 Ibc药品公司 由同二聚体、同四聚体或二聚体的二聚体组成的稳定连接复合体的生产方法及用途
US9296816B2 (en) 2005-04-15 2016-03-29 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
PL2439273T3 (pl) 2005-05-09 2019-08-30 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku programowanej śmierci komórki 1(pd-1) oraz metody leczenia nowotworów z wykorzystaniem przeciwciał anty-pd-1 samodzielnie lub w połączeniu z innymi immunoterapeutykami
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
US20060263367A1 (en) 2005-05-23 2006-11-23 Fey Georg H Bispecific antibody devoid of Fc region and method of treatment using same
RS54271B1 (en) 2005-07-01 2016-02-29 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. HUMAN MONOCLONIC ANTIBODIES FOR LIGAND PROGRAMMED DEATH 1 (PD-L1)
JP4557003B2 (ja) 2005-07-01 2010-10-06 株式会社村田製作所 多層セラミック基板およびその製造方法ならびに多層セラミック基板作製用複合グリーンシート
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
GT200600381A (es) 2005-08-25 2007-03-28 Compuestos organicos
DE602005018477D1 (de) 2005-08-26 2010-02-04 Pls Design Gmbh Bivalente IgY Antikörperkonstrukte für diagnostische und therapeutische Anwendungen
PE20070335A1 (es) 2005-08-30 2007-04-21 Novartis Ag Benzimidazoles sustituidos y metodos para su preparacion
WO2007044887A2 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Transtarget, Inc. Method for producing a population of homogenous tetravalent bispecific antibodies
ES2577292T3 (es) 2005-11-07 2016-07-14 Genentech, Inc. Polipéptidos de unión con secuencias hipervariables de VH/VL diversificadas y consenso
EP1962961B1 (en) 2005-11-29 2013-01-09 The University Of Sydney Demibodies: dimerisation-activated therapeutic agents
JP2009518320A (ja) 2005-12-05 2009-05-07 シュムフォウエン アクティーゼルスカブ 抗オルトポックスウイルス組換えポリクローナル抗体
DK2348023T5 (da) 2005-12-13 2017-05-15 Incyte Holdings Corp Heteroaryl-substituerede pyrrolo[2,3-b]pyridiner og pyrrolo[2,3-b]pyrimidiner som Janus-kinase-inhibitorer
US20110212086A1 (en) 2006-01-19 2011-09-01 Genzyme Corporation GITR Antibodies For The Treatment of Cancer
JO2660B1 (en) 2006-01-20 2012-06-17 نوفارتيس ايه جي Pi-3 inhibitors and methods of use
JP2009526857A (ja) 2006-02-15 2009-07-23 イムクローン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 機能性抗体
SG170750A1 (en) 2006-03-17 2011-05-30 Biogen Idec Inc Stabilized polypeptide compositions
WO2007112362A2 (en) 2006-03-24 2007-10-04 The Regents Of The University Of California Construction of a multivalent scfv through alkyne-azide 1,3-dipolar cycloaddition
CA2646965C (en) 2006-03-24 2016-06-21 Jonathan H. Davis Engineered heterodimeric protein domains
EP2009101B1 (en) 2006-03-31 2017-10-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody modification method for purifying bispecific antibody
WO2007113648A2 (en) 2006-04-05 2007-10-11 Pfizer Products Inc. Ctla4 antibody combination therapy
UA93548C2 (uk) 2006-05-05 2011-02-25 Айерем Елелсі Сполуки та композиції як модулятори хеджхогівського сигнального шляху
ES2469676T3 (es) 2006-05-25 2014-06-18 Bayer Intellectual Property Gmbh Complejos moleculares dim�ricos
US20070274985A1 (en) 2006-05-26 2007-11-29 Stefan Dubel Antibody
CA2654317A1 (en) 2006-06-12 2007-12-21 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Single-chain multivalent binding proteins with effector function
WO2008007648A1 (fr) 2006-07-10 2008-01-17 Institute For Antibodies Co., Ltd. Procédé de classification d'antigène, procédé d'identification d'antigène, procédé d'obtention d' un ensemble d'antigènes ou d'anticorps, procédés de construction d'un panel d'anticorps, anticorps et ens
WO2008008218A1 (en) 2006-07-14 2008-01-17 Pilkington North America, Inc. Vertical drop vehicle slider assembly
PE20110220A1 (es) 2006-08-02 2011-04-11 Novartis Ag DERIVADOS DE 2-OXO-ETIL-AMINO-PROPIONAMIDA-PIRROLIDIN-2-IL-SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DEL ENLACE DE LA PROTEINA Smac AL INHIBIDOR DE LA PROTEINA DE APOPTOSIS
WO2008073160A2 (en) 2006-08-17 2008-06-19 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for converting or inducing protective immunity
TW201441262A (zh) 2006-08-18 2014-11-01 Novartis Ag 催乳激素受體（ｐｒｌｒ）之專一性抗體及其用途
US8497246B2 (en) 2006-08-18 2013-07-30 Armagen Technologies, Inc. Methods for diagnosing and treating CNS disorders by trans-blood-brain barrier delivery of protein compositions
ATE531720T1 (de) 2006-08-21 2011-11-15 Genentech Inc Aza-benzofuranylverbindungen und anwendungsverfahren dafür
US10118970B2 (en) 2006-08-30 2018-11-06 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
US20080254512A1 (en) 2006-11-02 2008-10-16 Capon Daniel J Hybrid immunoglobulins with moving parts
MY188338A (en) 2006-11-22 2021-11-30 Incyte Holdings Corp Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors
CN103641833A (zh) 2006-12-08 2014-03-19 Irm责任有限公司 作为蛋白激酶抑制剂的化合物和组合物
MX2009010282A (es) 2007-03-29 2009-10-12 Genmab As Anticuerpos biespecificos y metodos para su produccion.
EP2144930A1 (en) 2007-04-18 2010-01-20 ZymoGenetics, Inc. Single chain fc, methods of making and methods of treatment
US9244059B2 (en) 2007-04-30 2016-01-26 Immutep Parc Club Orsay Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
ES2776406T3 (es) 2007-07-12 2020-07-30 Gitr Inc Terapias de combinación que emplean moléculas de enlazamiento a GITR
KR20100058509A (ko) 2007-07-31 2010-06-03 메디뮨 엘엘씨 다중특이적 에피토프 결합 단백질 및 이의 용도
CA2696263C (en) 2007-08-15 2017-06-13 Bing Liu Monospecific and multispecific antibodies and method of use
WO2009032256A2 (en) 2007-08-30 2009-03-12 Cell Genesys, Inc. Apc activators in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
AU2008328781A1 (en) 2007-11-27 2009-06-04 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against heterodimeric cytokines and/or their receptors and polypeptides comprising the same
GB2468232B (en) 2007-11-30 2012-10-24 Glaxo Group Ltd Antigen-bindng constructs
PE20091158A1 (es) 2007-12-19 2009-08-28 Genentech Inc 5-anilinoimidazopiridinas y metodos de uso
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
PL2235064T3 (pl) 2008-01-07 2016-06-30 Amgen Inc Sposób otrzymywania cząsteczek przeciwciał z heterodimerycznymi fc z zastosowaniem kierujących efektów elektrostatycznych
HUE034465T2 (en) 2008-02-11 2018-02-28 Cure Tech Ltd Monoclonal antibodies for tumor treatment
WO2009114870A2 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
AR070924A1 (es) 2008-03-19 2010-05-12 Novartis Ag Formas cristalinas y dos formas solvatadas de sales del acido lactico de 4- amino -5- fluoro-3-(5-(4-metilpiperazin-1-il ) -1h- bencimidazol-2-il) quinolin -2-(1h) - ona
EP2300455B1 (en) 2008-05-21 2017-07-19 Incyte Holdings Corporation Salts of 2-fluoro-n-methyl-4-[7-(quinolin-6-yl-methyl)- imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-yl]benzamide and processes related to preparing the same
MX2010012699A (es) 2008-05-23 2010-12-07 Novartis Ag Derivados de quinolinas y quinoxalinas como inhibidores de cinasa de proteina tirosina.
UY31929A (es) 2008-06-25 2010-01-05 Irm Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de cinasa
JP2011526794A (ja) 2008-07-02 2011-10-20 エマージェント プロダクト デベロップメント シアトル， エルエルシー ＴＧＦ−βアンタゴニスト多重標的結合性分子
BRPI0915231A2 (pt) 2008-07-08 2018-06-12 Intellikine Inc compostos inibidores de quinase e métodos de uso
US20100041663A1 (en) 2008-07-18 2010-02-18 Novartis Ag Organic Compounds as Smo Inhibitors
AR072999A1 (es) * 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
US8575427B2 (en) 2008-08-12 2013-11-05 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chorismate mutase gene from the potato cyst nematode Globodera rostochiensis
PL2331547T3 (pl) 2008-08-22 2015-01-30 Novartis Ag Związki pirolopirymidynowe jako inhibitory CDK
KR20110074850A (ko) 2008-08-25 2011-07-04 앰플리뮨, 인크. Ｐｄ-１ 길항제 및 그의 사용 방법
MX2011002252A (es) 2008-08-25 2011-06-24 Amplimmune Inc Composiciones de antagonistas del pd-1 y metodos de uso.
BRPI0918268B1 (pt) 2008-09-02 2021-08-03 Novartis Ag Derivados de picolinamida, seu uso, e composição farmacêutica
UA104147C2 (uk) 2008-09-10 2014-01-10 Новартис Аг Похідна піролідиндикарбонової кислоти та її застосування у лікуванні проліферативних захворювань
US8586023B2 (en) 2008-09-12 2013-11-19 Mie University Cell capable of expressing exogenous GITR ligand
JP5731978B2 (ja) 2008-09-26 2015-06-10 インテリカイン， エルエルシー 複素環キナーゼ阻害剤
US8734795B2 (en) 2008-10-31 2014-05-27 Biogen Idec Ma Inc. Light targeting molecules and uses thereof
PL2370076T3 (pl) 2008-11-28 2017-06-30 Novartis Ag Kombinacja farmaceutyczna zawierająca inhibitor Hsp 90 i inhibitor mTOR
CN114835812A (zh) 2008-12-09 2022-08-02 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-pd-l1抗体及它们用于增强t细胞功能的用途
ES2629337T3 (es) 2009-02-09 2017-08-08 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Anticuerpos contra PD-1 y anticuerpos contra PD-L1 y usos de los mismos
UA103918C2 (en) 2009-03-02 2013-12-10 Айерем Элелси N-(hetero)aryl, 2-(hetero)aryl-substituted acetamides for use as wnt signaling modulators
JP5748653B2 (ja) 2009-04-10 2015-07-15 協和発酵キリン株式会社 抗ｔｉｍ−３抗体を用いた血液腫瘍治療法
WO2010129304A2 (en) 2009-04-27 2010-11-11 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
CN102482354B (zh) 2009-04-30 2015-02-25 特尔汗什莫尔医学基础设施研究和服务公司 抗ceacam1抗体以及使用该抗体的方法
UA105794C2 (uk) 2009-06-26 2014-06-25 Новартіс Аг 1,3-ДИЗАМІЩЕНІ ПОХІДНІ ІМІДАЗОЛІДИН-2-ОНУ ЯК ІНГІБІТОРИ Cyp17
PL2769737T3 (pl) 2009-07-20 2017-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Kombinacja przeciwciała anty-ctla-4 z etopozydem w leczeniu synergicznym chorób proliferacyjnych
JO3002B1 (ar) 2009-08-28 2016-09-05 Irm Llc مركبات و تركيبات كمثبطات كيناز بروتين
IN2012DN01920A (es) 2009-09-03 2015-07-24 Schering Corp
IT1395574B1 (it) 2009-09-14 2012-10-16 Guala Dispensing Spa Dispositivo di erogazione
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
PT2519543T (pt) 2009-12-29 2016-10-07 Emergent Product Dev Seattle Proteínas de ligação de heterodímero e suas utilizações
UY33227A (es) 2010-02-19 2011-09-30 Novartis Ag Compuestos de pirrolopirimidina como inhibidores de la cdk4/6
CN103097417B (zh) 2010-04-20 2019-04-09 根马布股份公司 含异二聚体抗体fc的蛋白及其制备方法
JP2013532153A (ja) 2010-06-18 2013-08-15 ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド 慢性免疫病に対する免疫治療のためのｔｉｍ−３およびｐｄ−１に対する二重特異性抗体
PE20140230A1 (es) 2010-08-20 2014-02-26 Novartis Ag Anticuerpos para el receptor del factor de crecimiento epidermico 3(her3)
WO2012054438A1 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Schering Corporation Anti-pcsk9
DK2699264T3 (en) 2011-04-20 2018-06-25 Medimmune Llc ANTIBODIES AND OTHER MOLECULES BINDING B7-H1 AND PD-1
WO2012177624A2 (en) 2011-06-21 2012-12-27 The Johns Hopkins University Focused radiation for augmenting immune-based therapies against neoplasms
US8841418B2 (en) 2011-07-01 2014-09-23 Cellerant Therapeutics, Inc. Antibodies that specifically bind to TIM3
AU2012290121B2 (en) 2011-08-01 2015-11-26 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using PD-1 axis binding antagonists and MEK inhibitors
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
WO2013054320A1 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. Antibodies to carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule (ceacam)
KR102049803B1 (ko) 2011-10-27 2019-11-29 젠맵 에이/에스 이종이량체 단백질의 생산
PT2780373T (pt) * 2011-11-16 2019-11-27 Boehringer Ingelheim Int Anticorpos anti-il-36r
CN103987405B (zh) 2011-11-28 2017-03-29 默克专利股份公司 抗pd‑l1抗体及其用途
US9556271B2 (en) 2011-12-01 2017-01-31 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Anti-CEACAM1 recombinant antibodies for cancer therapy
UY34591A (es) 2012-01-26 2013-09-02 Novartis Ag Compuestos de imidazopirrolidinona
UY34632A (es) 2012-02-24 2013-05-31 Novartis Ag Compuestos de oxazolidin- 2- ona y usos de los mismos
US9340537B2 (en) 2012-05-15 2016-05-17 Novatis Ag Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
ES2670601T3 (es) 2012-05-15 2018-05-31 Novartis Ag Derivados de benzamida para la inhibición de la actividad de ABL1, ABL2 y BCR-ABL1
WO2013171641A1 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
US9278981B2 (en) 2012-05-15 2016-03-08 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
JO3300B1 (ar) 2012-06-06 2018-09-16 Novartis Ag مركبات وتركيبات لتعديل نشاط egfr
AR091649A1 (es) * 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
CA2916638C (en) 2012-07-31 2021-01-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of the immune response
WO2014028502A1 (en) * 2012-08-13 2014-02-20 ImmunGene Inc. Engineered antibody-interferon fusion molecules for treatment of autoimmune diseases
BR112015010477A2 (pt) 2012-11-08 2017-07-11 Novartis Ag combinação farmacêutica que compreende um inibidor b-raf e um inibidor de histona desacetilase e o uso dos mesmos no tratamento de doenças proliferativas
BR112015012197A8 (pt) 2012-11-28 2019-10-01 Novartis Ag usos de inibidores de cdk mtor, e combinação farmacêutica compreendendo os mesmos
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
PE20151939A1 (es) 2013-03-14 2016-01-08 Novartis Ag 3-pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de idh mutante
US9242969B2 (en) 2013-03-14 2016-01-26 Novartis Ag Biaryl amide compounds as kinase inhibitors
RS64268B1 (sr) * 2013-09-20 2023-07-31 Bristol Myers Squibb Co Kombinacija anti-lag-3 antitela i anti-pd-1 antitela za lečenje tumora
EP3049442A4 (en) 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
SG11201604979WA (en) 2013-12-17 2016-07-28 Genentech Inc Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
NZ721908A (en) 2013-12-20 2022-12-23 Massachusetts Gen Hospital Combination therapy with neoantigen vaccine
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
MX2016009010A (es) 2014-01-28 2017-01-18 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti-gen de activacion de linfocitos (lag-3) para tratar neoplasias hematologicas.
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
MX2016011993A (es) * 2014-03-14 2016-12-09 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a lag-3 y usos de las mismas.
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3925622A1 (en) 2014-09-13 2021-12-22 Novartis AG Combination therapies
CN107106687A (zh) 2014-10-03 2017-08-29 诺华股份有限公司 组合治疗
EP4245376A3 (en) 2014-10-14 2023-12-13 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
WO2016164731A2 (en) * 2015-04-08 2016-10-13 Novartis Ag Cd20 therapies, cd22 therapies, and combination therapies with a cd19 chimeric antigen receptor (car) - expressing cell
DK3317301T3 (da) * 2015-07-29 2021-06-28 Immutep Sas Kombinationsterapier omfattende antistofmolekyler mod lag-3
CN108025051B (zh) 2015-07-29 2021-12-24 诺华股份有限公司 包含抗pd-1抗体分子的联合疗法
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
MX2018005299A (es) * 2015-10-28 2019-03-18 Aduro Biotech Inc Composiciones y métodos para activar la señalización dependiente del "estimulador del gen de interferon".
MX2018007423A (es) 2015-12-17 2018-11-09 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-1 y usos de las mismas.
WO2017112741A1 (en) * 2015-12-22 2017-06-29 Novartis Ag Mesothelin chimeric antigen receptor (car) and antibody against pd-l1 inhibitor for combined use in anticancer therapy
JP6993699B2 (ja) * 2016-01-11 2022-02-03 ウニヴェルズィテート・ツューリヒ ヒトインターロイキン－２に対する免疫刺激性ヒト化モノクローナル抗体及びその融合タンパク質
US9567399B1 (en) * 2016-06-20 2017-02-14 Kymab Limited Antibodies and immunocytokines
EP3507367A4 (en) * 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
KR20190034588A (ko) * 2016-07-28 2019-04-02 노파르티스 아게 키메라 항원 수용체 및 pd-1 억제제의 조합 요법
AU2018290237A1 (en) * 2017-06-22 2020-01-16 Novartis Ag Antibody molecules to CD73 and uses thereof
CA3066747A1 (en) * 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
CN111163798A (zh) * 2017-07-20 2020-05-15 诺华股份有限公司 用于抗lag-3抗体的给药方案及其用途
US20200277378A1 (en) * 2017-11-16 2020-09-03 Novartis Ag Combination therapies

Also Published As

Publication number Publication date
EP3116909A1 (en) 2017-01-18
LT3116909T (lt) 2020-02-10
DK3116909T3 (da) 2020-01-20
CN113583129A (zh) 2021-11-02
US10711060B2 (en) 2020-07-14
US20150259420A1 (en) 2015-09-17
AU2020256466A1 (en) 2020-11-12
EA201691765A1 (ru) 2016-12-30
TW202033561A (zh) 2020-09-16
JOP20150048B1 (ar) 2021-08-17
GT201600185A (es) 2018-11-27
EP3660050A1 (en) 2020-06-03
CL2018002694A1 (es) 2018-11-23
BR122024001145A2 (pt) 2024-02-27
PL3116909T3 (pl) 2020-05-18
TWI777174B (zh) 2022-09-11
AU2015229103C9 (en) 2020-11-26
JP2020005645A (ja) 2020-01-16
ZA201604740B (en) 2022-12-21
IL272488B (en) 2021-12-01
HRP20192346T1 (hr) 2020-03-20
IL272488A (en) 2020-03-31
KR102442436B1 (ko) 2022-09-15
AU2020256466B2 (en) 2024-03-28
AU2015229103C1 (en) 2020-10-22
ECSP16081503A (es) 2018-09-30
MY187246A (en) 2021-09-14
RS59853B1 (sr) 2020-02-28
MX2022001043A (es) 2022-02-10
KR20220126813A (ko) 2022-09-16
UY36032A (es) 2015-10-30
CA2936962C (en) 2024-03-05
WO2015138920A1 (en) 2015-09-17
KR20160134668A (ko) 2016-11-23
TWI697500B (zh) 2020-07-01
JP2022084616A (ja) 2022-06-07
CN106103484B (zh) 2021-08-20
US9908936B2 (en) 2018-03-06
EP3116909B1 (en) 2019-11-13
IL288012A (en) 2022-01-01
CN106103484A (zh) 2016-11-09
US20180086830A1 (en) 2018-03-29
PE20170071A1 (es) 2017-03-17
AU2015229103A1 (en) 2016-08-04
BR112016018408A2 (pt) 2017-12-26
CL2016002112A1 (es) 2017-06-09
US20170210804A1 (en) 2017-07-27
IL246781B (en) 2020-03-31
ME03558B (me) 2020-07-20
TW202321306A (zh) 2023-06-01
JP2017516489A (ja) 2017-06-22
SI3116909T1 (sl) 2020-03-31
IL246781A0 (en) 2016-08-31
CA2936962A1 (en) 2015-09-17
PH12016501545A1 (en) 2016-09-14
CY1122510T1 (el) 2021-01-27
HUE048531T2 (hu) 2020-07-28
MX2016011993A (es) 2016-12-09
SG11201605951YA (en) 2016-10-28
JP6576962B2 (ja) 2019-09-18
CR20160425A (es) 2017-05-26
JP7030750B2 (ja) 2022-03-07
CU24481B1 (es) 2020-03-04
AU2015229103B2 (en) 2020-07-23
US20210009687A1 (en) 2021-01-14
PT3116909T (pt) 2020-01-30
TW201540727A (zh) 2015-11-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2770684T3 (es) Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de los mismos
JP6518370B2 (ja) Ｐｄ−１に対する抗体分子およびその使用
TWI716362B (zh) 針對ｐｄ－ｌ１之抗體分子及其用途
ES2732901T3 (es) Moléculas de anticuerpo para TIM-3 y su uso
EA040295B1 (ru) Молекулы антител против lag-3 и их применения
EA040365B1 (ru) Молекулы антител к tim-3 и их применение