KR100211552B1 - 유전자 발현 억제용 화합물 및 방법 - Google Patents

유전자 발현 억제용 화합물 및 방법 Download PDF

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Abstract

본 원은 유전자 발현 억제용 화합물, 조성물 및 방법에 관한 것으로, 본원 화합물은 1) 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 배열(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는) 또는 2) 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지니는 올리고누클레오타이드 배열(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는)을 포함한다.

Description

[발명의 명칭]
유전자 발현 억제용 화합물 및 방법
[발명의 상세한 설명]
본원은 미합중국 출원번호 제 07/562,180호 (1990년 8월 3일자) ; 제 07/582,287호 (1990년 9월 13일자) ; 제 07/582,456호 (1990년 9월 13일자); 제 07/582,457호 (1990년 9월 13일자)의 일부 계속 출원이다.
[기술분야]
본원은 유전자발현 억제용 화합물, 조성물 및 방법에 관한다. 본원 화합물은 1) 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 배열(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는) 또는 2) 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지니는 올리고누클레오타이드 배열(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는)을 포함한다.
안티센스 화합물 (antisense compound)은 핵산(RNA 또는 DNA)내 누클레오티드 배열과 결합(또는 혼성화)하여, 상기 핵산의 기능 또는 합성을 억제하는 화합물을 말한다. 상기 안티센스 화합물은 RNA 및 DNA 양자 모두에 혼성화하는 능력을 지님으로 하여, 전사, RNA 가공 또는 번역 레벨에서의 유전자 발현을 방해할 수 있다.
안티센스 분자들은 게놈 DNA와 혼성화, RNA 폴리머라제의 작용을 직, 간접적으로 억제하는 방법을 통해 특정 유전자의 mRNA로의 전사를 저지토록 고안해 합성할 수 있다. DNA 타겟팅(targeting)의 잇점은 치료효과를 이루어냄에 있어 단지 소량의 안티센스 화합물들만을 필요로한다는데 있다. 그와는 달리, 안티센스 분자들을 RNA와 혼성화, 전사후 수정(RNA가공) 메커니즘 또는 단백질 합성(번역) 메커니즘을 억제토록 고안해 합성할 수도 있다. 전형적인 타겟 RNA들은 전령 RNA(mRNA), 운반 RNA(tRNA), 리보좀 RNA (rRNA) 등이다. 가공 및 번역 메커니즘 예들은 인트론(intron) 제거용 전- mRNA (pre - mRNA) 접합, mRNA의 5' 말단 캡핑(capping), 혼성화 저지(hybridization arrest) 및 누클리아제 매개 mRNA 가수분해를 포함한다.
하지만, 현재, 안티센스 기술의 실질적인 과학 및 치료 분야 응용은 몇몇 기술적 문제로 인해 곤란을 받고 있는 상황에 있다. [Klausner, A., Biotechnology, 8 : 303-304(1990)]. 합성안티센스 분자들은 타겟 세포내에 존재하는 누클리아제에 의해 신속히 분해되는 경향을 보여준다. 예컨데, 안티센스 DNA 또는 RNA를 이루는 올리고누클레오지드 배열들은 이 핵산의 5' 또는 3' 말단 둘중 그 어느하나에 작용하는 엑소누클리아제의 작용을 받아 분해된다. 그뿐아니라, 엔도누클리아제는 개개 누클레오지드간 내부 포스포디에스테르 연쇄(linkage)에서 상기 DNA 또는 RNA를 절단할 수 있다. 그같은 절단의 결과는, 투여된 안티센스 화합물들의 유효반감기를 매우 단축시킴으로서, 다량의 투약량 사용(투약량의 빈번한 투여로 이어지는)을 불가피하게 만든다.
또다른 문제는 반자동 DNA 합성기를 이용한 안티센스 DNA 또는 RNA 생산에 막대한 비용이 든다는데 있다. 안티센스 DNA 1g 생산에는 약 $100,000의 비용이 드는 것으로 최근 추정된바 있다(Armstrong, L., Business Week, March 5, 1990, page 89).
또다른 문제는 체(體) 및 세포내 목적 타겟까지의 안티센스제(ANTISENSE AGENT) 송달과 관련한다. 게놈 DNA를 타겟으로 하는 안티센스제들은 핵에 들어가야만(즉, 세포질막 및 핵막을 투과해 들어가야만) 한다. 하지만, 막투과성(소수성 증대) 증대의 필요성은 혈장(plasma) 및 세포시토졸(cell cytosol)과 같은 체액구획내 수용성(친수성 증대)의 필요성과 균형을 이루는 선에서 고려되어야만 한다.
또다른 문제는 안티센스제들(체내에 유리상태로 존재하는 것이든, 타겟 핵산들에 혼성화된 것이든간에)의 안정성과 관련한다. 안티센스 DNA와 같은 올리고누클레오지드 배열들은 키랄 포스포러스 중심(chiral phosporous center) 주위의 입체 재배열에 민감한 영향을 받는다.
안티센스제를 통한 유전자 타켓팅(Gene targeting)은 인체치료의 필연적 차기방법인 것으로 사료된다(Armstrong, supra at 88). 하지만, 질병치료를 위한 상기 안티센스 기술의 성공적 이용은 전술한 문제들의 해결을 요한다.
안정하고, 누클리아제 저항성을 지니며, 생산비가 저렴한 그리고 신체내 핵산 타켓들에 송달되어서는 이 핵산 타켓들과 혼성화할 수 있는 안티센스 화합물들의 한가지 제조방법은 정상 포스페이트-당 골격구조를 수정한 올리고누클레오지드 배열들을 합성하는 것이다.
대략, 두가지 타입의 올리누클레오지드 배열들(수정된 골격들을 지니는)이 보고되어 있다. 첫 번째 타입은 정상 인터누클레오지드 포스포디에스테르 연쇄의 수정을 포함한다. 두 번째 타입은 포스포디에스테르 연쇄의 비포스페이트(non-phosphate) 인터누클레오지드 연쇄로의 대체를 포함한다[Uhlmann, E. and Peyman, A., Chemical Reviews, 9(4) : 544-584(1990)].
지금까지 보고된 수정된 포스포디에스테르 연쇄들은 포스포로티오에이트들, 알킬포스포디에스테르들, 메틸포스포에이트들 및 알킬포스포아미데이트들이다.
포스포로티오에이트된 포스포디에스테르 연쇄들은 하나 이상의 가교성 산소원자들이 황으로 대체로 포스포디에스테르 결합들을 가리킨다. 하지만, 그같은 연쇄들은 안티센스 화합물용으로는 부적합하다. 상기 키랄 포스포러스 중심 보유는 모노티오에 이트들(monothioates)의 입체변화로 귀결된다. 더구나, 모노- 및 디티오에이트들은 양자모두 배열 특이적 혼성화에 관여치 않으므로하여 혈장으로부터 신속히 소거된다. 유리 및 플라스틱에 대한 포스포로티오에이트들의 높은 친화성은 또한 안티센스 화합물들의 합성을 곤란하고, 비효율적이게 한다.
메틸- 및 에틸포스포트리에스테르들을 포스포디에스테르 연쇄된 올리고누클레오지드들을 무수 메탄올 또는 에탄올과 반응시켜 제조하였다[Miller, P. S. et al., J. Am. Chem. Soc., 93 ; 6657-6665(1971)].
올리고데옥시리보누클레오타이드 에틸포스포트리에스테르들내 트리에스테르 연쇄는 비록 강산 또는 강염기에 의해 가수분해되긴 해도 정상 생리 pH 조건하에서는 안정함을 보여준다. 메틸포스포트리에스테르들은 중성 pH에서 에틸- 및 다른 여타 알킬포스포트리에스테르들보다 다소 덜 안정한 상태(아마도 용매에 의한 트리에스테르 메틸기의 친핵치환에 기인하는 것일 것인)로 존재한다. 올리고데옥시리보누클레오타이트 에틸포스포트리에스테르들은 엑소누클리아제들에 의한 가수분해에 완전 저항성을 지니는 듯이 보이고, 그러므로하여 태아송아지혈청(fetal bovine serum) 또는 인간 혈청에 발견된 누클리아제들 또는 에스테라체들에 의해 가수분해되지 아니한다(상기 논문, Uihlmann).
메틸포스포네이트들은 치료적 잠재성과 관련해 불충분한 수(水) 가용성, 키랄 포스포러스 중심들, 고수율 입체 선택 합성 조절불능, 신속 세포질 소거 및 뇨배출을 포함하는 여러가지 증대한 결점들을 지닌다.
올리고데옥시리보누클레오지드 포스포아미데이트들은 질소-인 결합들을 함유하는 인터누클레오지드 결합들을 지닌다. 이들 핵산 유사화합물들은 포스포아마다이트 중간체들을 사용하여 또는 일차(또는 이차) 아민 존재하에서 H 포스포네이트 중간제들을 산화시켜 제조할 수 있다. H-포스포네이트 유사화합물들의 제조와 산화반응은 상용 DNA 합성기에서 용이하게 행할 수 있다.
카보네이트, 아세테이트, 카바메이트 및 디알킬 - 또는 디아릴실릴-유도체들과 같은 비-포스페이트 인터누클레오지드 연쇄를 함유하는 수종의 비-이온성 올리고누클레오지드 배열들이 합성되어 보고된 바 있다.
비록 카보네이트 연쇄가 산가수분해에 대한 저항성을 지닌다해도, 이 카보네이트 연쇄는 염기로 보다 쉽사리 절단되는 때문에 합성 종료 무렵에서의 보호 그룹(protecting group) 제거시 특별한 주의가 필요로 된다. 안정한 이중나선(duplex)이 카복시메틸 인터누클레오지드 연쇄함유 폴리(dA) 유사화합물들과 폴리(U) 유사화합물들간에 관측되긴했어도, 다른 여타 염기들간의 이중나선에 대해서는 연구된바 없다. 따라서, 다른 여타 염기들과의 이중나선 형성 충실도(fidelity)가 카보네이트 연쇄로 인해 교란받게 될는지 어떨는지는 알 수 없다.
인터누클레오지드 카바메이트들은 다른 여타 인터누클레오지드 가교결합체들보다 더한 수(水) 가용성을 지니는 것으로 보고되어 있다. 하지만, 카바메이트 연쇄들의 유용성은 티민 카바메이트들이 상보 DNA와 혼성체(hybrid)를 형성치아니하고, 시토신 카바메이트들이 구아닌 올리고머들과 혼성화하지 아니하는 까닭에 제한받게 된다.
카보네이트 연쇄와 마찬가지로 카바메이트 연쇄는 생리조건하에서 안정함을 보인다. 하지만, 카베메이트 연쇄는 카보네이트와는 달리, 염기 가수분해에 안정함(이러한 카바메이트 연쇄를 함유하는 올리고머들의 합성을 간단하게 해주는 특성인)을 보여준다. 상기 카바메이트 연쇄는 누클리아제 가수분해에 대한 저항성을 보인다.
상기 카보네이트 및 아세테이트 연쇄들과 마찬가지로, 상기 카바메이트 연쇄는 상기 포스포디에스테르 인터누클레오타이드 결합과는 상이한 외형을 지닌다. 하지만, 분자 모델들은 상기 올리고머가 상보핵산과 수소-결합된 콤플렉스 들은 형성할 수 있는 형태를 취할 수 있도록 허용해야만 함을 암시해 준다. 카바메이트 올라고머들과 상보핵산들에 의해 형성된 이중나선들의 안정성을 둘러싸고 서로 상반된 보고가 있다. 여섯 개의 티미딘 구성단위 함유 카바메이트-연쇄된 올리고머는 A(pA)5또는 dA(pA)5둘중 그 어느것과도 콤플렉스 들을 형성못하나, 여섯 개의 데옥시시토신 구성단위 함유 카바메이트-연쇄된 올리고머는 d-(PG)6및 폴리(dG)와 안정한 컴플렉스들을 형성한다.
디알킬-또는 디페닐실릴올리고머 유사화합물들의 인터누클레오지드 연쇄는 정상 포스포디에스테르 인터누클레오타이드 결합의 정사면체 기하배치형태와 아주 유사한 형태를 지닌다. 상기 올리고머들은 적절히 보호된 누클레오지드-3'-0-디알킬-또는 디페닐실릴 클로라이드 또는 트리플루오로메탄술포닐 유도체를 무수 피리딘내 3'-보호된 누클레오지드와 반응시켜 용액중에서 제조케된다. 적절히 보호된 누클레오지드-3'-0-디알킬-또는 디페닐실릴 클로라이드 또는 트리플루오르메탄술포닐 유도체는 5'-0-트리틸누클레오지드를 디알킬-또는 디페닐디클로로실란과 또는 비스(트리플루오로메탄술포닐)디이소프로필실란과 반응시켜 제조할 수 있다.
상기 디알킬-및 디페닐실릴 연쇄들은 산가수분해에 민감하므로하여, 합성용 보호 그룹 선정에 세심한 주의를 기울여야만 한다. Ogukvue abd / cormier. See. c.g., Ogilvie, K. K. and Cormier, J.F., Tetrahedron Letters, 26(35) : 4159 4162(1985); Cormier J. F. and Ogilvie, K. K., Nucleic Acids Research, 16(10) : 4583-4594(1988)에는 실록산(siloxane) 인터누클레오지드 연쇄들을 지니는 누클레오지드 다이머들과 헥사머들이 그리고 이들의 제조방법이 기재되어 있다.
비록 카보네이트, 카바메이트 및 실릴 연쇄된 올리고누클레오지드 배열들이 안티센스제로서의 매혹적인 후보자격을 얻는데 필수불가결한 누클리아제 저항성을 지님에도 불구하고, 그들이 이러한 자질을 발휘하는 능력을 보여주었다는 보고는 아직 없었다. 더욱이, 배양기내 세포들에 의한 이들 올리고머들의 피흡수능(被吸收能)도 보고된 바 없다. 이들 올리고머들이 지니는 잠재적 결합으로는 이미 보고된 바 있는 수용액내 저기용성을 들 수 있다. 이들 분자들에 친수성기들을 도입시키면, 아마도 이들의 가용성이 증대될 수 있을지도 모를 것이란 견해에도 불구하고, 생물학적 실험들에 효과적으로 사용될 수 있기에 충분한 정도의 농도를 얻을 수 있을지는 분명치 않은 것처럼 보인다.
본원은 올리고누클레오타이드 유사 화합물들, 그 같은 화합물을 포함하는 조성물들, 그 같은 화합물 제조용 중간체들 및 그 같은 신규 올리고누클레오타이드 유사화합물(인정하고, 누클리아제 저항성을 지니며, 타겟 특이적이고, 지용성인) 합성 방법들을 제공해 준다.
[본원 발명의 요약]
본원은 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 배열들(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진)을 포함하는 누클레오타이드 유사화합물들을 제공해 준다. 그 같은 올리고누클레오지드 배열들의 3원자 인터누클레오지드 연쇄는 하기 식을 지닌다.
식중, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D가 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, 올리고누클레오지드 배열들이 아데닌, 시토신, 구아닌 우라실, 티민 및 이들의 수정체들로 이루어진 그룹가운데 선택된 염기들을 포함한다.
좀더 구체적으로, 본원 화합물들은 하기식 I의 올리고누클레오지드 배열들을 포함한다.
식중, W는 -D-D-D를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D가 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여 W 또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체를; J는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
본원 화합물은 임의로 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단)에 다음을 지니는 올리고누클레오타이드 또는 올리고누클레오지드 배열들을 포함한다.
바람직한 디올들은 1,2-디올들(글리콜들)이고, 전형적인 글리콜들은 폴리알킬렌글리콜들(비람직스럽기로는 폴리에틸렌글리콜들 또는 폴리프로필렌글리콜들)이며, 바람직한 글리콜들은 테트라에틸렌글리콜 및 헥사에틸렌글리콜이다. 적합한 디올들은 또한 두개의 하이드록실들을 제외한 모든 하이드록실들이 차단된 폴리올리들을 포함할 수도 있다.
본원 화합물이 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단)에 디올을 지니는 올리고 누클레오지드 배열들인 경우, 본원 화합물들은 하기식 II를 지닌다.
식중, 각각의 Z는 독립하여 R1또는를; 각각 R1은 독립하여 OH, SH, NHR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소, 또는 C1-C6알킬, 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을 각각의 R5는 독립하여 수소 또는 C1-C12알킬을; W, W1, Y, B, j, k 및 q는 각각 상기 정의된 바와 같은 것을; e와 f 각각은 독립하여 최소한 e와 f중 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을; m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고 각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, j+k+q의 합이 약 9개에서 약 50개(좀더 바람직스럽기로는 약 12개에서 약 25개, 가장 바람직스럽기로는 약 15개에서 약 18개)의 염기들이 된다. 이 구체예에서는, 본원 화합물들이 하기식의 올리고누클레오타이드들을 포함한다.
식중, R은 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬, 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을;
R1은 수소 또는 C1-C12알킬을;
올리고(N)은 약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어진 본래의 천연 또는 수정된 올리고누클레오타이드 배열을;
e와 f 각각은 독립하여 e와 f중 최소한 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을;
m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고
각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, 상기 올리고누클레오타이드가 호모중합체 또는 헤테로중합체 배열이 되어 dA, dc, dG, T의 임의 컴비네이션을 함유한다.
상기 글리콜이 폴리에틸렌글리콜인 경우, 본원 구체예의 화합물들을 하기 구조식의 올리고누클레오타이드들을 포함한다:
식중, R은 Oh, SH, NR2R3를 R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을;
올리고(N)은 약 9개에서 약 50개의 염기들로 이루어진 올리고누클레오타이드 배열을;
e와 f 각각은 독립하여 e와 f중 최소한 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을;
m과 n 각각은 독립하여 m과 n중 최소한 하나가 1에서 200일 것을 조건으로 0에서 200을 나타낸다.
본원 올리고누클레오타이드들을 포스포디에스테르, 실릴(silyl)과 같은 공지의 인터누클레오지드 연쇄 그룹들 및 다른 여타 잘 알려진 연쇄 그룹들을 포함 (이들이 유효량의 본원 -D-D-D- 연쇄 그룹들 및/또는 디올 종질 그룹들을 함유한다면) 할 수 있다.
본원은 또한 하기식의 누클레오지드 다이머들에 관한다;
식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를 , R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D가 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체들을; R7는 OH, t-부틸디메틸실릴옥시 또는 포스포아미다이트를; 그리고 R8은 OH, 어떤 보호그룹 또는 t-부틸디메틸실릴옥시를 나타낸다.
본원은 또한 올리고누클레오지드 배열들을 포함하는 화합물들의 누클리아제 분해 억제방법을 제공한다. 이 방법은 화합물의 5'과 3' 들중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 대한 디올 부착을 포함한다. 상기 디올들은 5' 및 또는 3 말단에 상기 올리고누클레오타이드 화합물들을 알콕시트리틸디올시아노포스핀(바람직스럽기로는, 디메톡시트리틸글리콜시아노포스핀 또는 모노메톡시트리틸글리콜시아노포스핀)과 반응시켜 부착시키게 된다.
본원은 또 3원자 인터누클레오지드 연쇄(본원 정의된 상기 구조식 -D-D-D-를 지니는)를 지닌 올리고누클레오지드 배열(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진) 제조를 포함하는 본래의 천연 또는 수정된 누클레오타이드 화합물들의 누클리아제 분해억제 방법을 제공한다.
본원은 또 본원 정의된 3원자 인터누클레오지드 연쇄와 생리학적으로 용인되는 담체를 지닌 올리고누클레오지드 배열(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진)을 함유하고 있는 화합물들을 함유하는 조성물들(유전자 발현 억제용으로 유용한)을 제공한다. 상기 화합물은 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지닌다. 바람직한 디올들은 폴리에틸렌글리콜들이다.
본원은 또 치료시 필요로되는 유효량의 올리고누클레오지드 배열(본원 정의된 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니고, 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는) 포함 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하는 유전자 발현 억제 방법을 제공한다. 상기 화합물들은 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지닌다. 바람직한 디올들은 폴리에틸렌글리콜들이다.
[도면의 간단한 설명]
제1(a)도는 누클레오지드 알데하이드(화합물 I) 제조용 합성경로를 보여준다.
제1(b)도는 포스포니움 아이어다이드(iodide) 누클레오지드(화합물 II) 제조용 합성 경로를 보여준다.
제2도는 알데하이드 누클레오지드(제1(a)도)와 포스포니움 아이어다이드 누클레오지드를 이용하는 누클레오지드 다이머(3탄소 인터누클레오지드 연쇄로 연결된) 제조용 합성 경로를 보여준다.
제3도는 티미딘 알데하이드(화합물 I)와 포스포니옴 아이어다이드 티미딘(화합물 II)를 이용하는 티미딘 다이머 제조용 합성 경로를 보여준다.
제4도는 3'-C-C-N-5' 형태의 2탄소-1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄로 연결되는 누클레오지드 다이머 제조용 합성 경로를 보여준다. 여기에서, 다이머는 알데하이드 (CHO) 함유 누클레오지드와 다관능성아민(amine functionalities)(NH2) 함유 누클레오지드들의 환원조건하 반응을 통해 합성된다.
제5도는 3'-N-C-C-5' 형태의 2 탄소-1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄로 연결되는 누클레오지드 다이머 제조용 합성 경로를 보여준다. 여기에서 다이머는 알데하이드와 다관능성 아민을 지니는 누클레오지드들의 환원조건하 반응을 통해 합성된다.
제6도는 3'-C-C-N-5'의 형태의 2탄소-1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄들 연결되는 티미딘 다이머 제조용 합성 경로를 보여준다. 여기에서, 다이머는 알데하이드(CHO) 함유 티미딘과 다관능성 아민(NH2) 함유 티미딘의 환원 조건하 반응을 통해 합성된다.
제7도는 3'-N-C-C-5' 형태의 2탄소-1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄로 연결되는 티미딘 다이머 제조용 합성 경로를 보여준다. 여기에서, 다이머는 알데하이드와 다관능성 아민함유 티미딘들의 환원조건하 반응을 통해 합성된다.
[본원 발명의 상세한 설명]
본원 화합물들은 대개 누클리아제 분해에 대한 저항성을 갖는 올리고누클레오타이드는 또는 올리고누클레오지드 배열들이다.
본원에 사용된 누클레오지드는 퓨린 또는 피리미딘 염기와 5탄당(펜토즈)의 컴비네이션을 누클레오타이드는 누클레오지드의 인산에스테르를, 올리고누클레오타이드는 포스포디에스테르 인터누클레오지드 연쇄들만을 지니는 폴리누클레오타이드들(예컨대, 천연 DNA 또는 RNA)를 가리킨다.
전형적인 누클레오지드들은 아데노신(A), 구아노신(G), 시티딘(C), 유리딘(U), 데옥시아데노신(dA), 데옥시구아노신(dG), 데옥시시티딘(dG) 및 티미딘(T)이다.
본원 화합물들은 포스포디에스테르 또는 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 배열들(약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진)을 포함한다. 3원자 인터누클레오지드 연쇄(-D-D-D-)는 1) 3 탄소원자들, 2) 2 탄소원자들과 1 산소원자 또는 3) 2 탄소원자들과 1 질소원자를 함유한다.
올리고누클레오지드 배열들은 천연 또는 수정된 누클레오지드들의 배열들이다. 본원에 사용된, 인터누클레오지드 연쇄라는 표현은 하나의 누클레오지드(천연 또는 수정된)의 당성분의 3번 탄소원자와 그같은 누클레오지드에 이웃해 있는 누클레오지드 당성분의 5번 탄소원자 사이에 가교를 형성하는 원자들 및 분자들을 가리킨다. 당성분은 라이보즈 또는 데옥시라이보즈 성분 또는 이들의 유사 화합물 가운데 어느 하나가 될 수 있다. 따라서, 누클레오지드들은 A, C, G, U, dA, dC, dG, T 또는 이들의 수정체들 [예컨대, 5-브로모 또는 5-아이어도우라실, 5-메틸 시토신, 이소시토신(2-아미노-4-옥소피리미딘), 이소구아닌(2-옥소-6-아미노퓨린), 이노신(6-옥소퓨린), 5-비닐우라실 및 5-비닐시토신과 같은]을 포함한다.
3원자 인터누클레오지드 연쇄는 하기 구조식을 지닌다.
식중, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2, 산소를, R6는 하나의 D가 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을 나타낸다.
본원 화합물들은 하기식 I의 올리고누클레오지드 배열들을 포함한다;
[화학식 1]
식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D가 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여 W 또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정를; J는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, j+k+q의 합이 약 9에서 약 50이 된다. 좀더 바람직한 구체예에서는, j+k+q의 합이 약 12에서 약 25(좀더 바람직스럽기로는 약 15에서 약 18)이 된다.
본원 화합물들은 양말단중 어느 한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지닌다. 바람직한 디올들은 1, 2-디올들로 또한 알려진 이웃한 탄소들에 두개의 하이드록실 그룹들을 함유하는 글리콜들이다. 바람직한 글리콜들은 폴리알킬렌글리콜들이다. 본원에 사용된 알킬렌이라는 용어는 본원에 정의된 바와 같이 임의 치환될수도 있는 2개에서 4개의 탄소원자들을 지니는 직쇄 및 분기쇄 라디칼들을 가리킨다. 전형적인 리디칼들로는 에틸렌, 프로필렌, 이소부틸렌등을 들 수 있다. 바람직한 폴리알킬렌글리콜들은 헥사에틸렌글리콜 및 테트라에틸렌글리콜과 같은 폴리에틸렌글리콜들이다. 적합한 디올들을 또한 두개의 하이드록실들을 제외한 모든 하이드록실들이 차단된 폴리올들을 포함할 수도 있다.
디올들은 포스포디에스테르 연쇄들을 통해 올리고누클레오지드의 5' 말단의 3' 말단들중 어느한 말단에 (또는 양말단 모두에) 부착케 된다. 어느한 특정 구체예에서는, 디올들이 올리고누클레오지드 배열의 단지 한 말단에만 부착케 된다.
말단 디올은 하이드록실(OH), 술프히드릴(SH), 아미노(NH2), 알킬아미노(NH-알킬), 디알킬아미노(N(알킬)2) 및 아마이도(NH(아실))로 이루어지는 그룹가운데 선택된 유정 성분과 결합한다.
글리콜들이 양말단중 어느 한 말단 (또는 양말단 모두)에 존재하는 경우, 본원 화합물들은 하기식 II의 올리고누클레오지드 배열들을 포함한다.
[화학식 2]
식중, 각각의 Z는 독립하여 R1또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NHR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬, 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을 각각의 R5는 독립하여 수소 또는 C1-C12알킬을; W, W1, Y, B, j, k 및 q는 각각 상기 정의된 바와 같은 것을; e와 f 각각은 독립하여 e와 f 중 최소한 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을; m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고 각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, m과 n이 독립하여 1에서 6을 나타내고, j+k+q의 합이 약 9에서 약 50이 된다. 좀더 바람직한 구체예에서는, j+k+q의 합이 약 12에서 25(좀더 바람직스럽기로는 약 15에서 약 18)가 된다.
또다른 바람직한 구체예에서는, 본원 화합물들이 양말단중 어느 한 말단 (또는 양말단 모두)에 디올을 지니는 올리고누클레오지드 배열들(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는)을 포함한다. 또다른 바람직한 구체예에서는 본원 화합물들이 본원 (-D-D-D-) 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 배열들(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는)을 포함한다.
바람직한 디올들은 1,2-디올들로 또한 알려진 이웃한 탄소들에 두개의 하이드록실 그룹들을 함유하는 글리콜들이다. 바람직한 글리콜들은 폴리알킬렌글리콜들이다. 본원에 사용된 알킬렌이라는 용어는 본원에 정의된 바와같이 임의 치환될수도 있다. 2개에서 4개의 탄소원자들을 지니는 직쇄 및 분기쇄 라디칼들을 가리킨다. 전형적인 라디칼들로는 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌등을 들 수 있다. 바람직한 폴리알킬엔글리콜들은 폴리에틸엔글리콜들(좀더 바람직스럽기로는 테르라에틸렌글리콜 및 헥사에틸렌글리콜)이다.
디올들은 포스포디에스테르 연쇄들을 통해 올리고누클레오지드의 5 말단과 3 말단들중 어느한 말단에 (또는 양말단 모두에) 부착케 된다. 어느한 특정 구체예에서는 디올들이 올리고누클레오지드 배열의 단지 한 말단에만 부착케된다.
말단 다올은 하이드록실 (OH), 술프히드릴(SH), 아미노(NH2), 알킬아미노(NH-알킬), 디알킬이미노(N[알킬]2) 및 아마이도(NH[아실])로 이루어지는 그룹가운데 선택된 특정 성분과 결합한다. 본원에 사용된 알킬이란 용어는 본원에 정의된 바와 같이 임의 치환될 수도 있는 1개에서 12개의 탄소원자들을 지니는 직쇄 또는 분기쇄 라니칼들을 가리킨다. 전형적인 알킬- 및 디알킬아미노 라디칼들은 메틸-, 에틸-, 프로필-, 부틸-, 펜틸-, 헥실-, 디메틸-, 디에틸-, 디프로필-, 디부틸, 디펜틸 및 디헥실아민등을 포함한다. 본원에 사용된, NH(아실) 또는 아미이도라는 용어는 말단 O=CNH2그룹을 지니고, 1개에서 12개의 탄소원자들을 갖는 직쇄 또는 분기쇄 라디칼들을 가리킨다. 전형적인 아마이도 라디칼들은 메탄아마이드, 에탄아마이드, 프로판아마이드, 부탄아마이드, 펜탄아마이드, 헥산아마이드, 헵탄아마이드, 옥탄아마이드, 노난아마이드, 데칸아마이드, 운데칸아마이드 및 도데칸아마이드를 포함한다.
어느 한 특정 구체예에서는, 본원 화합물들이 하기식의 올리고누클레오타이드들을 포함한다.
식중, R은 OH, SH, NR2R3들, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을;
R1은 수소 또는 C1-C12알킬을;
올리고(N)은 본래의 천연 또는 수정된 올리고누클레오타이드 배열(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어진)을;
e와 f 각각은 독립하여 0에서 50을;
m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고
각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
올리고누클레오타이드 배열은 dA, dC, dG, T 또는 이들 유사화합물들의 임의 컴비네이션을 함유하는 호모중합체 또는 헤테로중합체 배열인 것이 바람직하다.
바람직한 구체예에서는, m과 n이 독립하여 1에서 8을(좀더 바람직스럽기로는 m과 n 양자 모두가 4를) 나타낸다. 바람직한 올리고누클레오지드 배열들은 약 9개에서 약 50개의 염기들을(좀더 바람직스럽기로는 약 12개에서 약 25개의 염기들을, 가장 바람직스럽기로는 약 15개에서 약 18개의 염기들을) 함유한다.
바람직한 구체예에서는, 안티센스 화합물들이 5' 및 3' 양말단 모두에 폴리에틸 알킬렌글리콜을 지니고, 하기 구조식을 갖는다:
식중, R은 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을;
R1은 수소 또는 C1-C12알킬을;
올리고(N)은 본래의 천연 또는 수정된 올리고누클레오타이드 배열(약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어진)을;
e와 f 각각은 독립하여 0에서 50을;
m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고
각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
글리콜이 폴리에틸렌글리콜인 경우, 본원 구체예의 화합물들은 하기식의 올리고누클레오타이드들을 포함한다:
식중, R은 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을;
올리고(N)은 약 9개에서 약 50개의 염기들로 이루어진 올리고누클레오타이드 배열을; 그리고
e, f, m 및 n은 각기 독립하여 1에서 50을 나타낸다.
바람직한 구체예에서는, 올리고누클레오타이드가 호모중합체 또는 헤테로중합체 배열이 되어 dA, dC, dG, T의 임의 컴비네이션을 함유한다.
또다른 바람직한 구체예에서는, 폴리에틸렌글리콜이 테트라에틸렌글리콜(TEG)이고 그리고 m과 n 양자모두가 4(또는 헥사에틸렌글리콜이고 그리고 m과 n 양자모두가 6)가 된다.
본원 화합물은 안티센스제들로 유용하다. 안티센스제들은 타켓 핵산내 상보 누클레오타이드 배열과 혼성화, 이 타켓핵산의 번역 또는 전사기능을 억제한다. 상기 타켓 핵산은 RNA 또는 DNA 둘중 어느 하나가 될 수 있다.
본원 안티센스 화합물들은 아데닌(A), 시토닌(C), 구아닌(G), 우라실(U), 티민(T) 및 이들 염기들의 수정체들로 이루어진 그룹가운데 선택된 염기들을 포함하는 호모중합체 또는 헤테로중합체 배열들을 지니고, 약 6개에서 약 200개의 염기들을 지니고 올리고누클레오지드 배열들을 포함한다. 특수한 배열들은 그들의 목적 타켓을 기초로하여 선택된다. 선택된 배열은 타켓핵산과 혼성화한다. 전형적인 타겟들은 MYC 종양유전자, RAS 종양유전자 및 바이러스 핵산들을 포함한다.
본원 화합물들은 하기 방법을 통해 제조될 수 있다.
[A. 3탄소 인터누크레오지드 연쇄를 지니는 화합물들]
3탄소 인터누클레오지드 연쇄로 연결되는 올리고누클레오지들은 비티히 반응조건(witting condition)하에서 3 위치에 알데하이드를 지니는 누클레오지드와 6' 위치에 다관능성일리드를 지니는 누클레오지드를 반응시켜 합성한다.
상용 화합물들을 이용한 누클레오지드 알데하이드와 포스포니움 아이어다이드 누클레오지드의 합성은 제1(a)도와 제1(b)도에 각각 도해 설명하였다. 알데하이드(제2도 기원의 화합물 Ⅰ)는 공지의 3'-알릴-3'-데옥시-5'-0-터트-부틸디메틸실릴-3'-티미딘(화합물 A, 제1도)을 사용해 합성한다. 알릴 화합물을 조산화제(cooxidant)인 촉매량의 오스뮴 데트록사이드(osmimum tetroxide)와 N-메틸모플린 옥사이드를 사용 부분선택적으로 산화시킨다. 이렇게 하여 결과된 디올(화합물 B, 제12도)을 소듐퍼아이어데이트로 절단시킴으로서 거의 정량적 수율의 알데하이드를 얻는다.
포스포니움 아이어다이드(화합물 Ⅱ, 제16도)는 상용 5'-트리틸레이티드된 누클레오지드(화합물 C, 제1(b)도)를 사용해 합성한다. 트리틸레이티드된 누클레오지드 3' 위치를 터트-부틸디메틸실릴 클로라이드를 사용해 실릴레이트화 시킨 뒤, 트리틸 그룹을 산성조건하에서 고효율로 제거한다. 결과한 1차 하이드록실(화합물 E, 제1(b)도)을 스웬 반응조건(Swern condition)하에서 산화시켜, 알데하이드(화합물 F, 제1(b)도)를 얻는다. 조알데하이드(crude aldehyde)를 곧바로 메틸트리페닐 포스포니움 브로마이드로부터 유도된 일리드와 반응시켜 고수율의 4'-비닐-4'-데옥시-3'-터트-부틸디메틸실릴 누클레오지드를 얻는다. 비닐화합물을 부분선택적으로 하이드로 보레이트화시켜 고수율의 1차 알콜(화합물 G, 제1(b)도)을 얻는다. 다음엔, 1차 알콜을 이미다졸존재하에서 트리페닐포스핀-아이어다인을 사용 당해 아이어다이드(화합물 H, 제1(b)도)까지 고수율로 전환시킨다. 끝으로, 아이어다이드를 아세토니트릴내 트리페닐포스핀을 사용 목적 포스포니움 아이어다이드 누클레오지드로 변환시킨다.
염기로서 포타슘-부톡사이드를 이용 포스포니움 아이어다이드 누클레오지드로부터 일리드(ylide)를 제조한 후, 곧바로 알데하이드를 반응시키는 방법을 사용해 고수율의 비티히 생성물(wittig product)(화합물 1, 제2도)을 얻는다. 수소와 10% Pd-C(10% 탄소성 팔라듐) 비티히 생성물을 대기압하에서 부분선택적으로 수소화시킴으로서 연쇄의 이중결합을 정량적으로 포화시킨다. 이렇게 포화시킨 화합물(화합물 2, 제2도)을 테트라부틸암모늄 플로라이드를 사용 탈실릴레이트화(desilylate) 시킴으로서 디올(화합물 3, 제2도)을 얻는다. 다음엔 디올의 5'-1차 하이드록실을 디메톡시트리틸 클로라이드를 사용해 부분선택적으로 보호시키고, 결과한 3'-하이드록실(화합물 4, 제2도)을 2-시아노에틸-N,N-디이소프로필클로로포스포아미다이트를 사용 포스포 아미다이트(화합물 5, 제2도)로 전환시킨다.
트리알킬실릴옥시 보호그룹을 지니는 누클레오지드 다이머들(또는 그 이상의 올리고머들)을 결합시켜 목적길이의 올리고누클레오타이드들을 만든다. 사슬연장 반응완결직후 표준방법들을 사용 상기 올리고머들을 탈보호(deprotect)시킨다. 고상합성기에서의 또다른 사슬길이 연장(chain length extension)반응 (상기 올리고머들이 포스페이트 연쇄로 연결되는)을 위해, 디메톡시트리틸 클로라이드와, 포스포아미다이트 같은 트리틸화 시약들(tritylating reagents)을 사용 상기 올리고머들의 5'- 및 3-'말단 하이드록실 그룹들을 각각 적절히 관능화시킨다.
[B. 2 탄소-1 산소원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 화합물들]
2 탄소-1 산소원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오타이드 배열들은 3'-실릴레이트화된 5'-톨루엔술포닐 누클레오지드와 5'-보호된 누클레오지드를 반응시켜 합성한다.
당업계의 숙련된 전문가에 이미 공지된 바있는 표준방법을 이용, 상용 3'-아세틸-누클레오지드들로부터 3'-아세틸-5'F알데하이드 누클레오지드를 제조한다. 다음엔, 수정한 비티히 반응(modified wittig reaction)을 사용 상기 3'-아세틸-5'-알데하이드 누클레오지드를 3'-아세틸-5'-카보메톡시메틸렌 누클레오지드로 전환시킨다.
5'-메틸렌측쇄를 알콜(바람직스럽기로 이소프로판올) 내 소듐보로 하이드라이드를 이용해 환원시킨 뒤, 알콜(바람직스럽기로 메탄올) 내 소듐메톡사이드를 이용 3'-아세틸그룹을 탈보호시킨다. 다음엔, 실릴그룹으로 3'-하이드록시를 보호한다. 바람직한 구체예에서는, 상기 실릴그룹이 t-부틸디메틸실릴그룹이게 된다.
다음엔, 3'-실릴-5'-카보메톡시메틸 누클레오지드를 테트라하이드로 퓨란(THF) 내 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드(DIBAL)를 사용해 또한번 환원시키므로 이 누클레오지드의 3'-0-실릴-5'-데옥시-3'-(2-에탄올) 유도체를 얻는다. 5'-에탄올그룹을 피리딘내 p-톨루엔 술포닐 클로라이드를 사용 p-톨루엔술포닐 그룹으로 전환시킨다. 5'-p-톨루엔 술포닐 누클레오지드 염기성분의 외환상 아미노그룹(exocyclic amino group)을 당업계 숙련된 전문가에 자명한 공지방법을 사용 임의 보호한다. 아데닌과 시토신의 외환상 아미노그룹용 바람직한 보호그룹은 벤조일성분(benzoyl moiety)이다. 구아닌의 환상 아미노 그룹용 바람직한 보호그룹은 이소부틸성분이다. 구아닌의 O6위치를 또한 보호시킬 수도 있다.
다음엔, 3'-0-실릴-5'-0-p-톨루엔 술포닐 누클레오지드를 5'-보호된 누클레오지드와 반응시켜 2 탄소-1 산소원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 3'-0-실릴-5'-보호된 누클레오지드 다이머를 만든다. 5'-0-보호그룹은 트리틸 인것이(좀더 바람직스럽기로는 디메톡시트리틸인 것이) 바람직하다. 3'-0-실릴-5'-0-보호된 누클레오지드 염기성분의 외환상 아미노그룹들을 임의 보호한다.
누클레오지드 다이머들을 포스포아미타이트 고상 합성방법을 통해 연쇄 연장시킬 목적으로 이 누클레오지드 다이머들의 3'-탄소원자 위치를 시아노포스핀 시약(바람직스럽기로는 2-시아노에톡시디이소프로필 아미노포스핀)을 사용해 탈보호, 다시 유도체화 시킨다(상기논문, Gait).
트리알킬실릴옥시 보호그룹들을 지니는 누클레오지드 다이머들(또는 그 이상의 올리고머들)을 결합시켜 목적길이의 올리고누클레오지드들을 만든다. 사슬연장반응 완결직후 표준방법들을 사용 상기 올리고머들을 탈보호 시킨다. 고상 합성기에서의 또다른 연쇄길이 연장반응(상기 올리고머들이 포스페이트 연쇄로 연결되는)을 위해, 디메톡시트리틸 클로라이드와 포스포아미다이트 같은 트리틸화 시약들을 사용 상기 올리고머들의 5'- 및 3'-말단 하이드록실 그룹들을 각각 적절히 관능화 시킨다.
[C. 2 탄소- 1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 화합물들]
C-C-N 형태의 2 탄소-1 질소원자-인터누클레오지드 연쇄로 연결되는 올리고 누클레오지드 배열되는 제4도에 예시된 바와같이 알데하이드 함유 누클레오지드와 다관능성아민 함유 누클레오지드를 환원조건하에 반응시켜 합성한다.
알데하이드와 아민화합물 양자 모두는 상용화합물들을 사용해 제조한다.
알데하이드는 3'-알릴-3'-데옥시-5'-0-터트-부틸 디메틸 실릴티미딘을 사용해 제조한다. 알릴 화합물을 조산화제인 촉매량의 오스뮴테트록사이드와 N-메틸 모플린옥사이드를 이용해 부분선택적으로 산화시킴으로서 디올을 얻고 이 디올을 소듐 퍼아이어데이트로 산화시켜 거의 정량적 수율의 알데하이드를 얻는다.
아민 화합물은 상용 누클레오지드들을 사용해 합성한다. 전형적인 방법에서는, 누클레오지드의 1차 하이드록실 그룹을 부분선택적으로 p-톨루엔 술포닐 클로라이드를 사용해 토실레이트 그룹까지 변환시킨 뒤, 아이어다이드까지 전환시킨다. 아이어다이드 중간체의 3'-하이드록시를 터트-부틸디메틸실릴 클로라이드를 사용해 보호시킨 뒤, 여기에 소듐아자이드를 반응시켜 아자이도 그룹을 도입시킨다. 관능성 아자이도를 수소 대기하(hydrogen atmosphere) 10% Pd-C를 이용한 환원을 통해 (또는 라니-니켈 환원조건하에서) 필요로 되는 아민까지 효율적으로 전환시킨다.
아민과 알데하이드를 완충조건하 소듐시아노보로하이드라이드 존재하에서 결합(환원적 아미네이션) 시킨다. 이때 C-C-N 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 올리고누클레오지드 타이머가 고수율로 형성된다. 올리고 누클레오지드의 2차 트리플로로아세트산 무수물-트리에틸 아민을 반응시켜 지방족 질소를 보호한다. 테트라부틸 암모늄 보호된 올리고누클레오지드를 플로라이드를 사용해 탈실레이트화 시킴으로서 디올을 얻고, 이때 얻어진 디올의 1차 하이드록실 그룹을 디메톡시트리틸 클로라이드를 사용해 선택적으로 보호한다. 나머지 2차 하이드록실을 2-시아노에틸-N,N-디이소프로필 클로로포스포아미다이트를 반응시켜 필요로 되는 포스포아미다이트로 변환시킨다.
N-C-C 형태의 2 탄소-1 질소원자 인터누클레오지드 연쇄로 연결된 올리고누클레오지드들은 3' 위치에 알데하이드를 지니는 누클레오지드와 5' 위치에 다관능성 아민을 제5도에 예시한 바와같이 환원조건하에서 반응시켜 합성한다.
아민과 알데하이드 성분들은 상용 화합물들을 사용해 합성한다. 아민은 3-아자이도-3-데옥시티미딘(AZT)를 사용해 합성한다. AZT의 일차 하이드록실 그룹을 디메톡시트리틸 클로라이드로 보호시킨 뒤, 결과된 아자이드를 수소대기하 10% Pd-C를 사용(또는 라니니켈을 사용) 필요로 되는 아민까지 부분선택적으로 변환시킨다.
알데하이드는 상용 5'-0-디메톡시트리틸 티미딘을 사용해 합성한다.
트리틸화된 티민을 터트-부틸 디메틸실릴클로라이드로 실레이화 시킨 뒤, 트리틸 그룹을 산성 조건하에서 제거한다. 결과된 일차 하이드록실 그룹을 스웬 반응조건하에서 산화시킴으로서 알데하이드를 얻는다. 이때 알데하이드를 분리시키지 않고 곧바로(카베톡시 메틸렌) 트리페닐 포스포란과 반응시켜 불포화 에스테르를 얻는다. 불포화 에스테르를 10% Pd-C를 사용 부분선택적으로 수소화시킴으로서 정량적 수율의 포화 에스테르를 얻는다. 다음엔 이 포화에스테르를 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드(DIBAL-H)를 이용한 매우 선택적인 반응을 통해서 필요로되는 알데하이드로 전환시킨다.
완충된 환원적 아미네이션 조건(buffered reductive amination condition)하 소듐 시아노보로하이드라이브 존재에서 아민과 알데하이드를 결합시키는 방법을 통해 고수율의 N-C-C 인터누클레오지드 연쇄를 얻는다. 트리플로로아세트산 무수물과 트리에틸 아민을 사용 올리고누클레오지드의 2차 지방족질소를 보호한다.
보호된 다이머(또는 그 이상의 올리고누클레오지드 배열)를 탈실릴레이트화 시킨 뒤, 여기서 결과된 하이드록실을 2-시아노에틸-N,N-디이소프로필-클로로포스포아미다이트를 사용 포스포아미다이트로 전환시킨다.
트리알킬실릴옥시 보호그룹들을 지니는 누클레오지드 다이머들(또는 그 이상의 올리고머들)을 결합시켜 목적길이의 올리고누클레오지들을 만든다. 사슬연장반응 완결직후 표준방법들을 사용 상기 올리고머들을 탈실레이트화 시킨다. 고상 합성기에서의 또다른 사슬길이 연장반응(상기 올리고머들이 포스페이트 연쇄로 연결되는)을 위해, 디메톡시트리틸클로라이드와 포스포아미다이트같은 트리틸화 시약들을 사용 상기 올리고머의 5'-및-3' 말단 하이드록실-그룹들을 각각 적절히 관능화시킨다.
[D. 양말단중 어느한 말단 (또는 양말단 모두)에 디올을 지니는 화합물들]
필요한 경우, 디올들은 고상포스포 아미다이트법의 수정된 방법을 통해 양말단중 어느 한말단 (또는 양말단 모두)에 부착된다. oligonucleotide synthesis : A pratical Approach, ed. by M. J. Gait, pages 35-81, IRL Press, Washington, D. C.(1984).
디올은 고상방법(solid phase method)을 수정한 본 방법에 따라 (디올이 알콕시트리틸 화합물과 반응 트리틸화된 디올을 형성하는), 올리고누클레오타이드의 어느 한 말단 (또는 양말단 모두)에 도입된다. 디올은 글리콜 인 것이 (좀더 바람직스럽기로는 폴리알킬렌글리콜인 것이) 바람직하다. 알콜시트리틸 시약은 모노메톡시트리틸 클로라이드 또는 디메톡시 트리틸 클로라이드인 것이 (가장 바람직스럽기로는 디메톡시트리틸 클로라이드인 것이) 바람직하다. 다음엔, 트리틸화된 디올들이 시아노포스핀 시약과 반응 본원화합물들의 고상 합성시 포스포아미다이트 시약 (차후 디올 포스포아미다이트 시약이라 칭해질)으로서 사용되는 트리틸 디올시아노 포스핀 화합물을 형성한다.
고상합성의 첫단계는 고상지지체 [바람직스럽기로는 제어된 세공유리(CPG) 지지체]에 대한 누클레오지드의 부착이다. 누클레오지드는 자신의 3'-하이드록실 위치에 존재하는 석시네이트연쇄를 통해 상기 CPG에 바람직하게 부착된다. 고상지지체에 누클레오지들을 부착시키는 또다른 방법은 올리고누클레오타이드 합성분야의 숙련된 전문가에 자명한 이미 공지된 방법을 들 수 있다. 그와는 달리, 디올을 3' 말단에 도입시키기 위해서는, 첫 번째 누클레오지드 첨가전에 디올 포스포아미다이트시약을 고상지지체에 부착시켜야 한다. 디올 포스포아미다이트 시약은 고정지지체에, 누클레오지드 부착에 사용된 방법에 유사한 방식으로, 석시네이트 또는 다른 연쇄들을 통해 부착된다. 상기방법의 변법(디올포스포 아미다이트시약 사용을 위한)은 당업계의 숙련된 전문가들에게 자명한 것이 될 수 있을 것이다.
첫 번째 누클레오지드 첨가에 앞서, 수개의 디올들이 고상지지체에 부착될 수 있다. 바람직스럽기로는 1개에서 약 50개의 디올들이 사용된다. 디올들을 단지 5' 말단에만 부착시키는 경우엔, 디올들을 고상지지체 상에 부착시킬 필요가 없게 된다.
고상지지체에 대한 첫 번째 누클레오지드 또는 디올(들)의 부착뒤엔 5'-하이드록실 보호그룹을(관능화된 트리틸 그룹) 제거하는 단계, 포스포 아미다이트시약 존재하 5'-하이드록실 그룹을 (즉, 5'-트리틸 누클레오지드, 3'-포스포 아미다이트) 활성화시키는 단계, 미반응 누클레오지드를 캡핑시키는 단계 및 포스포러스 연쇄를 산화시키는 단계들로 이루어지는 일련의 연속적 단계들을 통해 사슬연장반응이 진행된다.
부착된 누클레오지드들의 5'-하이드록실 위치에 존재하는 보호그룹은 산(바람직스럽기로는 트리클로로 아세트산)을 사용해 제거한다.
본 방법에 사용될 수 있는 활성화시약들(Activating reagents)은 당업계의 숙련된 전문가에 이미 잘 알려진 것이 될 수 있을 것이다. 바람직한 활성화 시약들은 테트라졸 및 활성제 골드(activator gold) (Beckman Instr. Inc., Palo Alto, CA)이다.
활성화 단계는 부가된 누클레오지드 포스포아미다이트시약 또는 디올 포스포 아미다이트 시약(디올이 폴리누클레오 타이트 말단에 부가되는 경우 전통적 합성방법에 이용되는 누클레오지드 포스포아미다이트시약을 대신하여 사용되는) 존재하에서 진행한다. 미반응된 쇄들은 종결시키거나 또는 무수초산 및 N-메틸 이미다졸과 같은 캡핑시약들(capping reagents) 사용해 캡화(capped) 시킨다.
불안정한 3 가 포스포러스 연쇄는 바람직하기로 아이어다인 사용해 올리고누클레오타이드의 안정한, 5 가 포스포디에스테르 연쇄로 산화시킨다.
목적 올리고누클레오타이드쇄 조립완결후엔, 포스페이트 보호그룹들을 제거, 쇄들을 고상지지체로부터 분리시킨 뒤, 전통적 방법들을 사용해 염기보호그룹들을 제거한다(Gaits, 상기 논문 67-70)
당업계의 숙련된 전문가들은 다른 여타 올리고누클레오타이드 합성방법이 디올-종결된 안티센스 올리고누클레오타이드 생산을 위해 유사방식으로 변형될 수도 있음을 당연히 인식하고 있을 것이다.
본원 화합물들은 유전질환을 지닌(또는 경질된 유전적 발현 메카니즘과 관련한 질병을 지닌) 포유동물 치료에 유용하다. 현재, HIV, 거대세포바이러스, 단순포진, B형간염, 유두종 바이러스 및 피코르나 바이러스와 같은 바이러스성 감염; 폐암, 결장암, 경관암, 유방암 및 난소암; 염증성질환; 및 후천성면역결핍증과 같은 면체체계 관련 질환, 혈액성이상조직발생질환 및 과다증식질환 치료용 안티센스치료법을 개발하려는 시도가 이루어지고 있다(Armstrong, 상기 논문, 89p; Klausner, 상기 논문, 303, 304p).
유전자 발현억제에 유용한 본원조성물들은 1) 본원정의된 구조식 -D-D-D-의 인터누클레오지드 연쇄를 지니고, 임의로 양말단중 어느한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지니며, 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는 올리고누클레오지드 배열 포함 화합물들과 2) 양말단중 어느한 말단(또는 양말단 모두)에 디올을 지니고, 약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는 올리고누클레오지드 배열포함 화합물들 및 생리학적으로 용인되는 담체들을 포함한다.
비경구주사용, 구강투여용(고형 또는 액형으로서), 직장투여용 또는 국소투여용 등으로 사용되는 유전자 발현억제에 유용한 본원조성물들은 하나이상의 비독성이며, 생리학적으로 용인되는 담체들, 보조제들 또는 부형제들(본원에서는 집합적으로 한데모아 담체들이라 칭해지는)과 함께 자신들의 배합에 사용되는 하나이상의 본원 화합물들을 포함한다.
조성물들은 인간들 및 동물들에 구강으로, 직장으로, 비경구적으로(정맥내로, 근육내로 또는 피하로), 질내로, 복막내로, 국소적으로(분체형약, 연고, 점적약을 이용한) 투여되든가 또는 구강이나 비강 분무로서 투여될 수 있다.
비경구적 주사용으로 적합한 조성물들은 생리학적으로 용인되는 살균한 수성 또는 비수성용액, 분산액, 현탄액 또는 유상액 및 살균한 주사용액 또는 현탄액으로 재구성되는 살균한 분체를 포함할 수 있다. 적합한 수성 및 비수성 담체, 희석제, 용제 또는 부형제들의 예들은 수(水), 에탄올, 폴리올(프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 글리세롤 등) 그리고 그들의 적절한 혼합물들, 식물섬유(올리브유와 같은) 및 주사가능 유기에스테르들(에틸 올리에이트와 같은)을 포함한다. 적절한 유동성은, 예컨데, 레시틴과 같은 피복물 사용을 통해, 계면활성제 사용을 통해, 그리고 분산액이 경우에는 필요한 입자크기를 유지시킴으로서 유지시킬 수 있다.
이들 조성물들은 또한 보존제, 습윤제, 유화제 및 분산제와 같은 보조제들을 함유할 수도 있다. 미생물 작용방지는 예컨데 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산 등과 같은 다양한 항균 및 항진균제를 사용해 담보할 수 있다. 예컨데, 당, 염화나트륨과 같은 등장제를 포함하는 것이 또한 바람직할 수도 있다. 상기 주사형(injectable form) 조성물의 연장흡수는 예컨데, 알루미늄, 모노스티어레이트 및 젤라틴과 같은 흡수지연제를 사용해 이룰수 있다.
필요하다면, 그리고 좀더 효과적인 분배를 원하는 경우엔, 상기 화합물들을 서방형(slow release) 또는 특정 타겟지향된 배송시스템들(중합체 마트릭스, 리포좀, 및 미세구체와 같은)에 첨합할 수도 있을 것이다. 이들 화합물들은 예컨데 세균억류 필터를 통한 여과를 통해 또는 살균한 고형조성물 형태(사용하기 바로전에 살균수, 또는 여타 살균 주사매질에 용해되는)에 있어서는 살균제 첨가를 통해 살균될 수 있을 것이다.
구강 투여용 고형투약량 형태들(solid dosage forms)은, 캡슐, 정제환약, 분체형약제 및 과립형약제들을 포함한다. 그같은 고형투약량 형태들에 있어서는, 상기 활성화합물이 최소한 하나의 불활성 종래부형제(또는 담체) (소듐 시트레이트 또는 디칼슘 폰스레이트와 같은) 또는 (a) 충전제들 또는 중량제들(예컨데, 전분, 락토즈, 슈크로즈, 글루코즈, 만니톨 및 실리신산과 같은), (b) 결합제들(예컨데, 카복실메틸 셀룰로즈, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 슈크로즈 및 아카시아와 같은), (c) 연석제들(예컨데, 글리콜과 같은), (d) 붕해제들(예컨데, 아가-아가, 탄산칼슘, 감자 또는 타파오카 전분, 알긴산, 어떤 콤플렉스 실리케이트 및 탄산나트륨과 같은), (e) 용액제지제들(예컨데, 파라핀과 같은), (f) 흡수가족제들(예컨데, 4차 암모늄 화합물과 같은), (g) 습윤제들(예컨데, 쎄틸 알콜 및 글리세롤 모노스티어레이트와 같은), (h) 흡수제들(예컨데, 카올린 및 벤토나이트와 같은), 그리고 (i) 활제들(예컨데, 할크, 칼슘 스티어레이트, 마그네슘 스티어레이트, 고형 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 러릴 술페이트 또는 그들의 혼합물과 같은)과 혼합된다. 캡슐, 정체 및 환약의 경우에 있어서는, 상기 투약량 형태들이 완충제들을 또한 포함할 수도 있다.
연질 및 경질-충전젤라틴 캡슐 [고분자량 폴리에틸렌글리콜 뿐아니라 락토즈(즉, 유당) 등을 부형제로 사용하는]에 있어서는 유사타입의 고형조성물들이 충전제로 또한 사용될 수도 있다.
정제, 당의정, 캡슐, 환약 및 과립형약제들과 같은 고형약량형태들은 장피복물들 및 여타 당업계에 잘알려진 바 있는 것들과 같은 피복물들 및 외피(shell)를 지니는 것으로 제조될 수 있다. 이들 고형투약량 형태들은 불투명제들(opacifying agents)을 함유할 수도 있고, 그리고 또 자신들의 활성화합물(또는 화합물들)을 위장관(intestinal tract) 부위에 지연방식을 통해 방출토록 해주는 조성물들을 지닐 수도 있다. 사용될 수 있는 삽입 조성물들(Embedding Compositions)의 예들로는 고분자 물질들 및 왁스들을 들 수 있다.
적절하다고 판단되면, 상기 활성화합물들을 또한 하나이상의 상기 부형제들을 사용해 마이크로캡슐화 형태(micor-encapsulated form)화 할수도 있을 것이다.
구강투여용 액체투약량 형태들은 생리학적으로 용인되는 유상액, 용액, 현탄액, 시럽 및 엘릭서(elixir)를 포함한다. 액체투약량 형태들은 활성화합물 뿐아니라, 수(水) 또는 다른여타 용제, 가용화제, 유화제[예컨데, 에틸알콜, 이소프로필 알콜, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤진알콜, 벤질벤조에이트, 프로필렌글로콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아마와이드, 오일(특히, 면실유, 땅콩유, 옥수수배아유, 올리브유, 캐스터유 및 참깨유 등과 같은), 글리세롤, 테트라하이드로 퍼퍼릴 알콜(tetrahydro-furfuryl alcohol), 폴리에틸렌글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르 또는 이들 물질들의 혼합물 등의]와 같은 당업계에 일반적으로 사용되는 불활성 희석제들을 함유할 수도 있다.
그같은 불활성 희석제들 외에, 상기 조성물은 습윤제, 유화제 및 부유제, 감미료, 향미제, 방향제와 같은 보조제들은 또한 포함할 수도 있다.
현탄액들은 활성 화합물들 뿐아니라 예컨데 에톡실화된 이소스테아릴 알콜, 폴리 옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미정질 셀룰로즈, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤톤나이트, 아가-아가 그리고 트라가칸트 고무(tragacanth), 또는 이들 물질들의 혼합물들 등과 같은 현탁화제(suspending agents)을 함유할 수도 있다.
직장 투여용 조성물들은 상온에선 고형이나, 체온에선 액형화함으로서 직장 또는 질 체강 내에 융해, 활성성분을 방출하는 좌약 [본원 화합물들과 적합한 비자극성 부형제 또는 담체(코아버터, 폴리에틸렌글리콜 또는 좌약용 왁스와 같은)를 혼합해 제조할 수 있는]인 것이 바람직하다.
본원 화합물로 이루어지는 국소투여용 투약량 형태들은 연고, 분말형 약제, 비말형약제 및 흡입제를 포함한다. 활성성분은 살균조건하에서 생리적으로 용인되는 담체 및 임의의 보존제, 완충액 또는 필요로될 수도 있는 장약(propellant)와 혼합된다. 안약용 조제물, 안연고, 분체형약제 및 용액들 또한 본 발생범주위내 포함 대상으로 고려될 수 있을 것이다.
본원 화합물들은 또한 리포좀(liposome) 형태로 투여될 수 있다. 당 업계에 공지된 바와 같이, 리포좀들은 일반적으로 인지질 또는 다른 여타 지질물질들로부터 유도된다 리포좀들은 단-또는 다-층수화지질결정(mono-or multi-lamellar hydrated liguid cystal) (수정매질에 분산되는)에 의해 형성된다. 리포좀 형성능을 지닌 임의의 비독성이고, 생리학적으로 용인되는 그리고 대사될 수 있는 지질이 사용될 수 있다. 리포좀형태내 본원 조성물들은 본원 리포옥시게나제 억제 화합물들 뿐아니라 안정화제, 보존제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 바람직한 지질들은 천연 및 합성의 인지질 및 포스파티딜 콜린(phosphatidyl choline)(레시틴)이다.
리포좀 제조방법은 당업계에 공지된 바 있다[예컨데, Methods in cell Biology, Ed. by prescott, Volume XIV, Academic press, New Ywork, N.Y., P. 33 et seq., (1976) 참조].
본원 조성물내 활성성분의 실제적인 투약량 레벨은 특별한 조성물 및 투약방법의 바람직한 치료감응을 이끌어내기 효과적인 활성성분양을 얻기 위한 방편으로 달라질 수도 있다. 그러므로 선택되는 투약량 레벨은 바람직한 치료효과, 투약경로, 바람직한 치료기간 및 다른여타 인자들에 좌우된다.
숙주에 투여되는 본원 화합물들의 전체 일일 투약량(단일 투약량으로든 또는 여러차레로 나뉘어 투여되는 투약량으로든)은, 예컨대, 체중 1kg 당 약 1나노몰에서 약 5 마이크로몰이 될 수 있을 것이다. 투약량 단위조성들은 일일투약량 제조에 이용될 수 있는 그같은 양 또는 그 양의 약수(約數)량을 함유할 수도 있다.
하지만, 임의의 어떤 특정환자에 대한 특정투약량 레벨은 체중, 전신건강상태 성, 음식물, 시간 및 투약경로, 흡수 및 분비속도, 다른약과의 혼용여부, 치료대상 특정질병의 위중성등을 포함하는 여러가지 인자들에 좌우될 수 있음을 인식해야 한다.
하기 실시예들은 본원 실행의 최상 모드를 더욱 상세히 예시코져 마련한 것인바, 이 실시예들은 어떤식으로든 본원 명세서 및 청구범위를 한정하는 것으로 이해해서는 아니된다.
[실시예 1]
[5-0'-디메톡시트리틸-3-0'-t-부틸디메틸실릴 티미딘 제조]
디메톡시트리틸 티미딘(5.0g, 9.2mmol)과 이미다졸(1.2g, 18.4mmol)을 15ml 무수 디메틸 포름아마이드(DMF)에 용해시킨 뒤, 터트-부틸디메틸릴린 클로라이드(1.7g, 11.5mmol)를 부가하였다.
상기 반응혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 뒤, 에틸아세테이트로 희석하고, 다시 이를 수(水)로 그리고 뒤이어 포화소듐 클로라이드로 세척한 후에, 소듐 술페이트로 건조시켜, 정량적 수율의 상기 표제화합물을 얻었다.
[실시예 2]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘의 제조]
실시예 1의 방법으로 제조한 5'-0-디메톡시-3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘(0.7g, 1.1mmol)을 실온에서 1시간 동안 13ml의 메틸렌 클로라이드 용액내에 3% 트리클로로 아세트산으로 처리하였다. 다음엔, 상기 반응 혼합물을 5%(w/v)소듐 비카보네이트 용액으로 중화시켰다. 유기층을 소듐술페이트를 건조시켰다. 상기 표제화합물을 메틸렌 클로라이드내 에틸 아세테이트(0에서 30'%의 농도기울기로 존재하는)이용 플래시 크로마토법을 써서 정제하였다. 반응수율은 85%였다.
[실시예 3]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘 4'-알데히이드의 제조]
-78℃의 잘 교반한 건조 메틸렌 클로라이드용액에 옥사릴 클로라이드(oxalyl chloride)(33.0mmol, 2.88ml)를 부가한 후, 여기에, DMSO(3.12ml, 4.4mmol)를 한방울씩 부가하였다. 10분후 CH2Cl220.00ml 내지 실시예 2의 방법으로 만든 알콜(5.6g, 15.7mmol)을 2분간에 걸쳐 부가한뒤, 45분 동안 교반하였다. 다음엔 Et3N(8.1ml, 58.1mmol)을 부가한뒤, 45분 동안 더 교반하였다. 그 다음엔, 상기 반응혼합물이 실온이 되도록 한 후에, 이들 수(水)(2×10 ml)로 그리고 뒤이어 브라인(10ml)으로 세척하고, 소듐 술페이트(Na2SO4)로 건조시켰다. 이렇게 하여 얻은 조알데하이드(crude aldehyde)를 다음 단계용으로 사용하였다.
[실시예 4]ㅁ
[5'-비닐-5'-데옥시-3'-t-부틸디메틸실린 데옥시티미딘의 제조]
0℃의 건조 테트라하이드로 퓨란(THF) 내 메틸트리페닐 포스포니움 브로ㅁ이드 용액(0.7mmol)에 소듐비스(트레메틸 실릴아마이드)(0.6mmol) 용액을 한방울씩 부가하였다. 30분후, 질소하에서, THF내 당해 4'-알데하이드 용액을 한방울씩 부가 하였다. 상기 반응혼합물을 2시간 동안 교반한 뒤, 이를 에틸아세테이트로 희석하고, 다시 수(水)로 그리고 뒤이어 브라인(brine)으로 세척한 후에, 소듐술페이트(Na2SO4)로 건조시켰다. 20% 에틸 아세테이트-헥산이용 플래시 크로마토법을 써서 상기 표제화합물을 정제하였다. 수율은 55-60%였다.
[실시예 5]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-데옥시-5'-하이드록시메틸 티미딘]
0℃의 무수 THF 3㎖내 2M 2-메틸-2-부텐(1.6 당량, 1.5㎖, 3mmol) 용액에 1M 보란-테트라 하이드퓨란 콤플렉스 (3㎖, 2mmol) 1.6 당량을 질소하에서 천천히 부가하였다.
상기 용액을 10분 동안 교반한 후, 5㎖ 무수 THF 내 실시예 4의 방법으로 만든 비닐 티미딘(0.7g, 1.9mmol)을 부가하였다. 이 반응혼합물을 45분 동안 교반한 후, 2일 동안 냉장고에 안치시켜 두었다.
워크엎(workup)은 2M 소듐 하이드록사이드 3.1 당량과 30% 하이드로겐 퍼옥사이드 3.1 당량을 포함하는 수용액(바람직스럽기로 0℃ 수성 소듐 하이드록사이드에 하이드로겐 퍼옥사이드를 한방울씩 부가한 후, 이를 10분 동안 교반한)을 사용해 행하였다. 부가펀넬(addition funnel)을 통해 상기 용액을 상기 반응 혼합물에 천천히 부가한 후, 1시간 동안 교반하고, 이를 빙조(ice bath)로부터 분리, 에틸 아세테이트로트로 건조시켰다. 상기 표제 화합물을 헥산내 에틸 아세테이트(20-80%의 농도기울기로 존재하는) 이용 플래시 크로마토 그라피법을 써서 정제하였다. 수율은 62%였다.
[실시예 6]
[5'-아이어도메틸-5'-데옥시-3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘의 제조]
건조 아세트니트릴(5ml)과 에테르(3.4ml)내 실시예 5의 방법으로 제조한 3'-0-t-부틸디메틸살릴-5'-데옥시-5'-하이드록시 메틸 티미딘 (0.3g, 0.9mmol) 용액에 트리페닐 포스핀(0.7g, 2.8mmol) 3당량, 이미디졸(0.3g, 3.7mmol) 4당량 및 아이어다인(0.5g, 2.8mmol,) 2.2당량을 부가하였다. 이 반응혼합물을 45분 동안 교반한 뒤, 용제를 증발시켜 제거하였다. 잔존물에 에틸 아세테이트를 부가한뒤, 이를 수(水)로 그리고 뒤이어 포화 소듐 클로라이드로 세척하고, 소듐 술페이트로 건조시켰다. 상기 표제 화합물을 헥산내 에틸 아세테이트(농도기울기 30-50%로 존재하는) 이용 플래시 크로마토그라피법을 써서 정제하였다. 수율은 90%였다.
[실시예 7]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-데옥시-5'-티미딜메틸 포스포니움 아이어다이드의 제조]
건조 CH3CN(5ml) 내 실시예 6의 방법으로 제조한 5' -아이어도메틸-5'-데옥시-3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘(480mg, 1mmol) 교반용액에 트리페닐 포스필(1.57g, 6mmol)을 부가한뒤, 이 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 환류시켰다. 반응물을 냉각시킨 뒤, 용제를 제거하였다. 상기 표제화합물을 CH2CH2내 5% MeoH 이용 플래시 크로마트 그래피법을 써서 정제하였다. 95-96% 수율의 생성물이 얻어졌다.
[실시예 8]
[5'-t-부틸디메틸실릴-3'-데옥시-3'-(1, 2-디하이드록시-3-프로필)-티미딘의 제조]
부탄올내 오스뮴 테트라옥사이드(OsO4)(4방울, 2.5w/w%)를 0℃의 5.0㎖ 무수 THF내 4-메틸모폴린-N-옥사이드(53㎎, 0.45mmol)와 J. org. chem. 1989, 54:2767-2769에 C.K. Chu 등이 기술한 방법으로 만든 3'-(2-프로페닐)-3'-데옥시-5'-0-t-부틸 디메틸실릴 티미딘 교반 혼합물에 부가하였다. 다음엔, 상기 반응혼합물을 10% 수성 소듐 메타비스술파이트(2.0㎖)로 급냉시킨 뒤, 20분 동안 교반하고, 이를 다시 실리카 패드상에서 여과한 후, 에틸 아세테이트(25.0㎖)로 희석하였다.
유기상을 수(水) (5.0㎖)로 그리고 뒤이어 브라인으로 세척한 뒤, Na2SO4로 건조시켰다. 용제를 증발건조시켜 제거한 후, 상기 표제화합물을 플래시 크로마토법을 써서 정제하였다.
[실시예 9]
[5'-0-t-부틸디메틸실릴-3'-데옥시-티미드-3'-일-아세트알데하이드의 제조]
THF-H2O[4:1비(ratio), 5.0㎖]내 실시예 2에 방법으로 만든 티미딘 디올(200㎎, 0.5mmol) 교반용액에 소듐 퍼아이어데이트(214㎎, 1mmol)를 부가하여다. 1 시간후, 상기 반응혼합물을 에틸아세테이트(25㎖)로 희석하고, 수(水)(2×5㎖)로 그리고 뒤이어 브라인으로 세척한 후에, 건조시켰다. 상기 표제화합물을 헥산내 70%에틸 아세테이트 이용 플래시 크로마토 그래피법을 써서 정제하였다.
[실시예 10]
[3 탄소 인터누클레오지드 연쇄를 지니는 티미딘 다이머 제조]
제3도에 실시예 10a-10e에 해당하는 반응경로를 예시해 두었다.
10a. 질소하, -78℃의 건조 THF(2.0㎖)내 실시예 7의 방법으로 만든 포스포니움 아이어다이드 화합물(241㎎, 0.32몰) 교반현탁액에 포타슘터트-부톡사이드(0.62㎖, THF 내 1.0M, 0.62mmol)를 부가하였다. 20분후, 실시예 9의 방법에 따라 제조한 3'-아세트 알데하이드 화합물(80㎎, 0.22몰)을 부가하였다. 60분후에, 상기 반응혼합물을 에틸 아세테이트(30㎖)로 희석하고, 다시 이를 수(水)(2×5㎖)로 그리고 뒤이어 브라인(5㎖)으로 세척한 후에, Na2SO4로 건조시켰다. 용제를 증발시켜 제거한 뒤, 올레핀 생성물(화합물 1)을 헥산내 70% 에틸 아세테이트 이용 플래시 크로마토그래피법을 써서 정제하였다. 수율은 55-60% 범위였다.
10b. 수소 1 기압하 25℃의 메탄올(5.0㎖) 내 화합물 1(109㎎) 교반용액에 10% Pd-C(20㎎)을 부가하였다. 4시간후, 촉매를 셀라이트 패드상에서 여과한 후, 용제를 증발시켜 제거하였다. 이렇게 하여 회수한 화합물 2를, 다음엔, 헥산내 80% 에틸 아세테이트 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제하였다.
10c. 테트라부틸 암모늄 플로라이드 약 2.8당량을 0℃의 5.0㎖ THF 내 화합물 2(350㎎) 교반용액에 부가하였다. 3시간후, 용제를 증발건조시켜 제거한 뒤, CH2CL210% 메탄올 이용 플래시 크로마토 그래피법으로 화합물 3을 정제하였다.
10d. 약 0.05당량의 4-디메틸 아미노 피리딘, 1.4당량의 트리에틸아민 및 1.2당량의 4.4'-디메톡시트리틸 클로라이드를 건조 피리딘(4.0㎖)내 화합물 3(0.6mmol) 교반용액에 부가하였다. 2시간후, 2.0㎖의 수로 상기 반응 혼합물을 급냉시킨 뒤, 2.0㎖의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기상을 분리시킨 뒤 포화브라인으로 세척하고, 건조시켰다. 메틸렌 클로라이드내 5% 메탄올 이용 플래시 크로마토그래피법으로 화합물 4를 정제하였다.
10e. 약 2.0당량의 디이소프로필 에틸아민과 1.0㎖의 건조 디클로로메탄(CH2Cl2)을 화합물 4(0.5mmol)의 교반용액에 부가하였다. 30분후, 0.75당량의 2-시아노에틸-N,N-디이소프로필 클로로포스포 아미다이트를 20분간에 걸쳐 한방울씩 부가하고, 1시간 동안 더 교반하였다. 다음엔, 용제를 증발건조시켜 한후, 질소대기하 에틸아세테이트(1% 트리에틸 아민함유) 이용 플래시 크로마토그래피법으로 화합물 5를 정제하였다.
상기 단계 a-d의 반응경로는 3 탄소 모두가 구조식 -CH2-를 지니는 3 탄소 인터누클레오지드 연쇄함유 다이머제조에 사용된다.
탄소들 중 어떤것(또는 모든 탄소들)은 임의로 다음과 같은 제3도에 예시된 반응경로의 수정경로를 통해 하이드록실화 될 수 있다. t-부탄올내 오스뮴 테트라옥사이드 2.5%(w/v)용액 한방울을 0℃의 0.8㎖ THF내 화합물 1과 4-메틸 모폴린 N-옥사이드(9.1㎎) 교반용액에 부가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 0℃로 유지시킨 뒤, 소듐 메타비술파이트 수성용액으로 급냉시키고, 에틸 아세테이트로 희석한 후에, 수(水)로 그리고 뒤이어 브라인으로 세척하였다. 용제를 증발시켜 제거한 뒤, 얻어진 하이드록실화된 다이머를 에틸아세테이트(용리제) 이용 박충크로마트 그래피법으로 정제하였다. 다음엔 하이드록실화된 다이머가 보호되고, 5' 및 3' 말단들이 상기 단계 b-d에서와 같은 방법으로 수정된다.
[실시예 11]
[하이드록실화된 3 탄소 인터누클레오지드 연쇄제조]
단계 a-d에 의해 생산된 티미딘-다이머포스포 아미다이트 화합물들을 표 1의 올리고누클레오지드 배열 제조용 수정된 고상 포스포아미다이트 합성방법에 사용하였다.
올리고 데옥시누클레오타이드들은 3' 말단으로부터 5' 말단으로 합성하였다.
다음엔, 수정된 포스포아미다이트법에 따라 합성을 진행하였다. 부착된 티미딘의 5'-하이드록실 그룹을 트리클로로 아세트산과 반응시켜 5'-하이드록실 그룹을 탈보호시켰다. 이같은 탈보호 단계실행후엔, 상기 부착된 티미딘을 디메톡시트리틸 테트라에틸렌글리콜 시아노포스핀 포함 포스포아미다이트 시약 및 활성화게인 테트라졸과 반응시켰다. 활성화 단계실행후엔, 아세트산 무수물과 N-메틸 이미다졸을 사용, 미반응된 5'-하이드록실 그룹들의 캡핑(capping)을 행하였다.
다음엔, 표준방법에 따라 아이어다인을 사용 포스포러스 연쇄를 산화시켰다. 두 개의 테트라에틸렌글리콜(TEG)을 함유하는 배열 1과 2에서는, 탈보호, 활성화, 캡핑 및 산화단계들을 상기 기술한 바와같이 반복 실행하였다.
다음엔, 사슬연장반응을 실시예 1-9의 방법으로 만든 3-탄소연쇄된 티미딘 다이머가 활성화단계시 쇄내목적장소에 부가되도록 수정시킨 표준연속 단계들(탈보호, 활성화, 캡핑 및 산화순으로 이루어지는)을 통해 진행시켰다.
사슬의 말단에서, 티머딘 올리고머들을 농축 암모늄 하이드록사이드를 사용 CPG 지지체로부터 제거하였다. 다음엔, 용액을 55℃에서 8 내지 15시간 동안 재차처리, 염기들의 외환상아민들에 존재하는 모든 보호그룹들을 제거하였다.
[실시예 12]
[3'-0-아세틸-5'-카보메톡시메틸-5'-데옥시티미딘의 제조]
약 0.39g의 소듐 보로하이드라이드를 95㎖ 이소프로판올내 3.17g 3'-0-아세틸-5'-카보메톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘 저온(얼음조) 교반 혼합물에 부가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 질소대기하 0℃에서 교반한 뒤, 다음엔 실온에서 4시간 30분 동안 더 교반하였다.
상기 냉각혼합물을 20㎖ 메탄올로 그리고 뒤이어 30분 동안에 200㎖ 증류수로 급냉시킨 뒤, 에틸 아세테이트로 여러번 추출하였다. 한데 모든 유기출물들을 브라인으로 처리한 뒤, 무수 마그네슘 술페이트로 건조시켰다. 건조제를 여과시켜 버린 뒤, 용제를 증발시켜, 잔류글래스(residual glass)의 표제화합물 2.7g을 얻었다.
[실시예 13]
[5'-카보메톡시메틸-5'-데옥시티미딘의 제조]
소듐 메톡사이드의 25%(w/v) 메탄올성용액 약 10방울을 건조메탄올(천연 알루미나상을 통과시킨) 약 300㎖내 실시예 12의 방법으로 만든 3'-0-아세틸-6'-카보메톡시메틸-5'-데옥시티미딘(2.22g) 저온 교반용액에 부가하였다. 상기 혼합물을 빙조 재보충없이, 질소대기하에서 약 2시간동안 교반하였다.
소량의 양이온 교환수지(BioRad AG 50wx8)를 부가한 뒤, 상기 반응혼합물을 30분 동안 교반하였다. 용제를 감압하에서 제거, 2.1g의 잔류글래스[온(溫)톨루엔으로 처리된 뒤, 냉각후, 여과를 거쳐, 사이클로헥산으로 세척됨으로서 백색고체의 조생성물 1.64g을 생산케 되는]를 얻었다.
표제 화합물을 에틸 아세테이트(용리제) 이용 실리카 겔상의 크로마토그래피법으로써 소량의 출발물질로부터 정제한 뒤, 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재정출(recrystallization) 해냄으로서 백색결정들을 얻었다.
[실시예 14]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-(2-하이드록시에틸)-티미딘의 제조]
테트라 하이드퓨란(THF)내 1M 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드 약 19㎖를 질소하에서, 40㎖ 무수 THF내 1.88g 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-카보에톡시메틸-5-'-데옥시티미딘 저온(-40℃에서 -30℃) 교반용액에 부가하였다. 다음엔, 반응온도를 -20℃까지 서서히 올렸다.
상기 혼합물을 약 3.5㎖ 메탄올로 급냉시킨 뒤, 반응온도를 -10℃까지 올렸다. 36㎖ THF내 약 18㎖ 수(水)를 온(溫) 혼합물에 부가한 뒤, 온도를 10℃까지 더 올렸다. 감압을 통해 거개의 THF를 제거한 후, 잔류물을 잔류물 부피의 약 2배 되는 수(水)를 사용해 희석하였다. 수성상을 에틸 아세테이트/클로로포름으로 여러번 추출해내었다. 한데모은 추출물들을 저온 2N 염산으로 그리고 뒤이어 브라인으로 세척한 뒤, 무수마그네슘 술페이트로 건조시키고, 여과하였다. 용제를 여액으로 부터 감압하에서 제거, 상기 표제화합물(약 1.6g)을 얻었다.
[실시예 15]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-(2-아이어도에틸)-5-데옥시티미딘의 제조]
약 1g의 p-톨루엔 술포닐 클로라이드를 25에서 30ml 무수피리딘내 실시예 14의 방법으로 만든 1g의 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-(2-하이드록시에틸)-5'-데옥시티미딘 용액에 부가한뒤, 이 혼합물을 약 5℃에서 대략 19시간 동안 밀전(密栓)하여 정치시켜 두었다.
약 200ml의 빙수(ice water)에 상기 혼합물을 부가한 후, 에테르로 여러번 추출해내었다. 한데모은 유기추출물을 저온 2N 염산, 수(水) 그리고 포화 브라인으로 차례대로 세척한 후, 세척한 추출물들을 무수 소듐 술페이트로 건조시키고, 여과하였다. 용제를 여액으로 부터 감압을 통해 제거 잔류글래스의 p-톨루엔술포닐 유도체 1.24g을 얻었다.
약 0.54g의 p-톨루엔 술포닐 유도체와 0.38g의 소듐 아이어다이드를 3일 동안 55 ml 건조아세톤(분자체, 4A를 통과시킨)에 용해시킨뒤, 최종일엔 0.19g의 소듐 아이어다이드를 더 부가하고 교반하였다.
반응 혼합물을 여과한 뒤, 용제를 증발시켜 조생성물을 얻었다.
조생성물을 헥산내 25% 에틸 아세테이트(용리제) 이용 실리카겔(85g)상의 크로마토 그래피법으로 정제하였다. 용제를 증발시켜 목적 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'(2-아이어도에틸)-데옥시티미딘 0.4g을 얻었다.
[실시예 16]
[5'-카보메톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘의 제조]
메탄올내 25% 소듐 메톡사이드 약 10방울을 건조메탄올(천연 알루미나상을 동의시킨) 150 ml 내 1.5g 3'-0-아세틸-5'-카보메톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘 교반용액에 부가하였다. 혼합물을 질소대기하 실온에서 6시간 더 교반하였다.
소량의 양이온 교환수지(Bio-Rad AG-fow-X8)를 상기 혼합물에 10분 동안 교반하면서 부가하였다. 용제를 감압하에서 제거 백색고체 잔류물 1.3g을 얻었다. 잔류물을 온(溫) 톨루엔을 이용 두번 부순뒤, 이를 열(熱) 에탄올에 넣고, 차례로 여과, 냉각, 건조하여 백색결정 생성률의 표제화합물 0.85g을 얻었다.
[실시예 17]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-(2-하이드록에틸렌)-5'-데옥시티미딘의 제조]
296mg 5'-카베톡시메틸렌-5'-테옥시티미딘 용액을 1ml 무수 디메틸 포름아 마이드내 205mg 이미다졸과 227mg t-부틸디메틸실릴 클로라이드 저온(빙수조), 교반용액에 질소대기하에서 한방울씩 부가하였다. 부가완결후, 상기 혼합물을 상기 빙수조로 부터 분리, 주변온도에서 2시간 동안, 다음엔 35℃에서 2시간 동안 더, 그리고 끝으로 40℃에서 30분 동안 교반을 계속하였다.
상기 혼합물을 2ml 메탄올로 그리고 다음엔 이 혼합물의 2-3 배되는 수(水)로 급냉하였다. 수성상을 에틸아세테이트로 여러번 추출해내었다. 한데 모은 유기 추출물들을 수(水), 포화 비카보네이트 용액, 그리고 브라인으로 차례로 세척한뒤, 무수 마그네슘 술페이트로 건조, 여과하였다. 용제를 여액으로 부터 감압하에서 제거, 0.40g의 3'-t-부틸디메틸실릴-5'-카보메톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘을 얻었다.
테트라 하이드로퓨란내 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드 1M 용액 4ml를 30℃ 이하 온도의 10㎖ 무수 테트라 하이드로퓨란내 용해된 0.37g 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-카보메톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘 냉각용액(-30℃에서 -35℃의)의 한방울씩 부가하였다. 부가완결 후, 상기 반응혼합물을 내부온도 약 -30℃에서 약 -20℃ 범위로 유지시키면서 2시간 동안 더 질소대기하에서 교반하였다.
상기 반응혼합물에 메탄올 약 0.8㎖를 부가한 뒤, 테트라하이드로 퓨란(8㎖)내 수(水) 4㎖ 용액을 부가하였다. 감압하에서 거개의 휘발성 테트라 하이드로퓨란을 제거하였다. 수성 잔류물을 이 잔류물의 약 2배되는 수(水)로 희석한 뒤, 에틸 아세테이트로 여러번 추출해 내었다. 한데모은 유기 추출물들을 저온 1N염산, 브라인으로 차례로 세척한 뒤, 무수마그네슘 술페이트로 건조하고, 여과시켰다. 여액을 스트립(strip)시켜 잔류 표제화합물 0.267g을 얻었다.
상기 물질중 일부를 50% 에틸 아세테이트/헥산(용리제) 이용 실리카겔상의 크로마토그래피법으로 분석용 순도(analytical purity)까지 정제하였다.
[실시예 18]
[2 탄소-1 산소원자(3'-0-C-C-5') 인터누클레오지드 연쇄함유 티미딘 다이머들의 제조]
18a. 0℃의 5'-0-트리틸티미딘 교반용액에 염기와 3'-0-t-부틸의 메틸실릴-5'-(2-아이어도에틸)-5'-데옥시티미딘 각각 동일 몰량을 부가하였다. 이 반응 경과를 박층 크로마토그래피법(TLC)으로 모니터하였다. 반응완결후, 목적 다이머를 분리, 플래시 크로마토그래피법으로 정제하였다.
18b. 약 -5℃의 온도로 유지되는 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-(2-하이드록시에틸)-5'-데옥시티미딘 교반용액에 염기 2당량을 부가하고, 용제를 증발건조시켜 제거하였다. 잔류물을 DMF에 다시 용해시킨 뒤, 5'-디메톡시트리틸-2', 3'-사이클로티미딘 1당량을 부가하였다. 반응 혼합물을 약 40가지 가열한뒤, TLC를 통해 목적다이머형성을 조회하였다. 반응완결후, 목적다이머를 분리, 플래시 크로마토그래피법으로 정제하였다.
[실시예 19]
[실시예 18 다이머의 3' 말단 탈보호(Deprotection)]
보호된 다이머들의 3'-t-부틸디메틸실릴 보호그룹은 실시예 18 다이머의 THF 용액을 0에서 2.8 당량 테트라부틸암모늄 플로라이드로 처리하여 제거하였다. 반응완결(통상 약 3시간)후, 용제를 증발시켜 제거하고, 목적다이머를 분리, 플래시 크로마토그래피법으로 정제하였다.
[실시예 20]
[자동합성 (automated synthesis) 용으로 적합한 관능화된 다이머 단위의 제조]
실시예 19의 다이머 생성물을 디클로로메탄에 용해시킨뒤, 디이소프로필에틸아민 고당량을 부가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한뒤, 약 20분간에 걸쳐 2-시아노에틸-N,N-디이소프로필 클로로포스포아미다이트 0.75 당량을 한방울씩 부가하였다. 한시간 더 교반을 계속한뒤, 용제를 증발시켜 제거하고, 결과한 관능화된 다이머를 분리, 불활성 대기하 에틸아세테이트이용 플래시 크로마토그래피 컬럼상에서 정제하였다.
[실시예 21]
[5'-t-부틸디메틸실릴-3'-데옥시-3'-'1,2-디하이드록시-3-프로필)-티미딘의 제조]
부탄올내 오스뮨 테트라옥사이드(OsO4) (4 방울, 2.5% w/v)를 0의 건조 THF 5.0ml 내 4-메틸모플린-N-옥사이드(53mg, 0.45mmol)와 참고문헌의 방법으로 만든 3'-(2-프로페닐)-3'-데옥시-5'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘 (183mg, 0.5mmol)교반혼합물에 부가하였다. 다음엔, 상기 반응혼합물을 10% 수성 소듐 메티 비스술파이트(2.0ml)로 급냉시킨후, 20분 동안 교반하고, 실리카패드상에서 여과한 다음에, 에틸 아세테이트(25.0ml)로 희석하였다. 유기상을 수(水) (5.0ml)로 그리고 뒤이어 브라인으로 세척한뒤, Na2SO4로 건조시켰다. 용제를 증발시켜 제거한후, 플래시 크로마토그래피법으로 표제화합물을 정제하였다.
[실시예 22]
[3'-데옥시-티미드-3-일-아세트알데하이드-5'-0-t-부틸디메틸실릴티미딘의 제조]
소듐 퍼아이어데이트(214mg, 1mmol)를 THF-H2O(4:1 비, 5.0mmol) 내 실시예 21의 방법으로 만든 티미딘 디올(200mg, 0.5mmol)교반용액에 부가하였다. 1시간후, 반응혼합물을 에틸아세테이트(25.0ml)로 희석하고, 수(水) (25.0ml)로 그리고 뒤이어 브라인으로 세한뒤, 건조시켰다. 표제화합물을 헥산내 70% 에틸 아세테이트이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제하였다.
[실시예 23]
[5'-0-(P-톨루엔술포닐) 티미딘의 제조]
질소대기하 0의 건조피리딘(200ml) 내 티미딘(20g, 82.6mmol) 교반용액에 p-톨루엔술포닐 클로라이드(47.2g, 247.6mmol)을 부가하였다. 3시간뒤 반응혼합물을 빙조에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출해 내었다. 용제를 증발시켜 제거한 후, 에틸 아세테이트와 메탄올 혼합물로 부터 생성물을 정출(晶出)해냈다. 표제화합물은 결정질 고체로서 70 - 75% 수율로 얻어졌다.
[실시예 24]
[5'-아이어다이도-5'- 데옥시티미딘의 제조]
건조 아세톤(75ml) 내 실시예 23의 방법으로 제조한 티미딘 토실레이토(10.65g, 26.9mmol) 교반용액에 소듐 아이어다이드(10g, 66.7mmol)을 부가한뒤, 이 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 용제를 증발시켜 제거한뒤, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기상을 수(水) (220ml)로 그리고 뒤이어 브라인(10ml)으로 세척한 후, 소듐 술페이트로 건조시켰다. 표제화합물은 메탄올로 부터 정출된 백색결정질 고체로서 90 -95% 수율로 얻어졌다.
[실시예 25]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-아이어도-5'-데옥시티미딘의 제조]
건조 DMF 내 실시예 24의 방법으로 제조한 티미딘 아이어다이드(8.0g, 24.7mmol) 교반용액에 이미다졸(4.2g, 61.7mmol)을 부가하였다. 5분후, 터트-부틸디메틸 실릴클로라이드(4.47g, 24.64mmol)를 부가하고, 이 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 다음엔, 상기 반응혼합물을 에틸 아세테이트(250ml)로 희석한후, 수(水) (2100ml)로 그리고 뒤이어 브라인(50ml)으로 세척하고, 소듐 술페이트로 건조시켰다. 표제화합물을 헥산내 60% 에틸 아세테이트 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제 92% 수율로 얻었다.
[실시예 26]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-아자이도-5'-데옥시티미딘의 제조]
건조 DMF(50㎖)내 실시예 25의 방법으로 제조한 3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-아이어도-5'-데옥시티미딘(10.8g, 20mmol) 교반용액에 소듐 아자이드(3.9g, 60mmol)를 부가한 뒤, 이 혼합물을 12시간 동안 0℃ 범위로 가열하였다. 다음엔, 이 반응혼합물을 에틸 아세테이트(200㎖)로 희석한 뒤, 수(水)(2×50㎖)로 그리고 뒤이어 브라인(50㎖)으로 세척하고, 소듐 술페이트로 건조하였다. 상기 표제화합물을 헥산내 50% 에틸 아세테이트 이용 플래시 크로마토 그래피법으로 정제 90% 수율로 얻었다.
[실시예 27]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-아미노-'5-데옥시티미딘의 제조]
질소대기하 MeOH내 실시예 26의 방법으로 만든 티미딘 아자이드(5.0g 13.1mmol) 교반용액에 200㎎의 10% Pd-C를 부가하였다. 다음엔, 질소가스를 배기시키고, 수소로 치환시켰다. 배기와 치환절차를 두 번 반복한 후, 수소 1 기압하에서 12시간 동안 교반을 계속하였다. 수소를 제거한 뒤, 셀라이트(celite) 패드상에서 촉매를 여과하고, 감압하에서 용제를 제거하였다. 조생성물을 CH2Cl2내 5-10% MeOH 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 85-87% 수율의 표제화합물을 얻었다.
[실시예 28]
[3'-아자이도-3'-데옥시-5'-0-디메톡시트리틸티미딘의 제조]
건조 피리딘(foml)내 3'-아자이도-3'-데옥시티미딘(2.67g, 10mmol) 교반용액에 4-디메틸아미노피리딘(61㎎, 0.5mmol), 트리에틸아민(1.9㎖, 14mmol) 그리고 4,4'-디메톡시트리틸클로라이드(4.1g, 12mmol)를 연속하여 순차적으로 부가하였다. 3시간후, 수(水)(30㎖)를 부가한 뒤, 에틸 아세테이트(250㎖)로 추출하였다. 유기상을 분리한 후, 브라인(50㎖)으로 세척하고, 소듐 술페이트로 건조시켰다. 메틸렌 클로라이드내 5% 메탄올 이용 플래시 크로마토그래피법을 써서 정제하여, 80-85% 수율의 표제화합물을 얻었다.
[실시예 29]
[3'-아미노-3'-데옥시-5'-0-디메톡시트리틸 티미딘의 제조]
아르곤 대기하 MeOH내 실시예 28의 방법으로 만든 티미딘 아자이드(3.99g, 40mmol) 교반용액에 200㎎의 10% Pd-C를 부가하였다. 아르곤 가스를 감압하여 제거한 뒤, 수소를 도입시켰다. 이 절차를 두 번 반복한 후, 수소 1 기압하에서 12시간 동안 교반을 계속하였다. 다음엔, 수소를 제거한 뒤, 셀라이트 패드상에서 촉매를 여과하고, 감압하에서 용제를 제거하였다. 조생성물을 메틸렌 클로라이드내 5% MeOH 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 90-93% 수율의 표제화합물을 얻었다.
1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 7.61(s, 1H), 7.60-7.21(m, 1H) 6.83-6.87(m, 3H), 6.85(t, J=8.5Hz, 1H), 3.80(s, 6H), 3.81-3.73(m, 2H), 3.53-3.49(m, 1H), 3.38-3.33(m, 1H), 2.36-2.33(m, 1H), 2.25-2.20(m, 1H), 1.51(s, 3H) ; IR neat vmax 3020, 2962, 1697, 1605, 1512, 1246, 1030㎝-1 .
[실시예 30]
[5'-0'-디메톡시트리틸-3-0'-t-부틸디메틸실릴 티미딘의 제조]
15㎖ 무수 디메틸 포름아마이드(DMF)에 디메톡시트리틸 티미딘(5.0g, 9.2mmol)과 이미다졸(1.2g, 18.4mmol)을 용해시킨 뒤, 터트-부틸 디메틸실릴 클로라이드(1.7g, 11.5mmol)을 부가하였다. 반응혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 뒤에. 에틸아세테이트로 희석하고, 수(水)로 그리고 뒤이어 포화 소듐 클로라이드로 세척한 후에, 소듐 술페이트로 건조시켰다. 정량적 수율의 표제화합물을 얻었다.
[실시예 31]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘의 제조]
실시예 30의 방법으로 제조한 5'-0-디메톡시트리틸-3'-0-t-부틸디메틸실릴 티미딘(0.7g, 1.1mmol)을 메틸렌 클로라이드내 트리클로로 아세트산 3% 용액 13로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 다음엔, 상기 반응혼합물을 5%(w/v) 소듐 비카보네이트 용액으로 중화시켰다. 유기층을 소듐 술페이트로 건조시켰다.
메틸렌 클로라이드내 에틸아세테이트(0에서 30%의 농도기울기로 존재하는)이용 플래시 크로마토그래피법을 써서 표제화합물을 정제, 85%의 반응수율을 얻었다.
[실시예 32]
[3'-0-t-부틸디메틸실릴-5'-카베톡시메틸렌-5'-데옥시티미딘의 제조]
잘 교반한 -78의 건조 메틸렌 클로라이드 용액에 옥사릴 클로라이드(33.0mmol)를 부가한뒤, 다음에 DMSO(3.12 ml, 44mmol)를 한방울씩 부가하였다. 10분후, 20.0ml CH2Cl2내 실시예 31의 방법으로 만든 티미딘 알콜(5.6g, 15.7mmol)을 2분간에 걸쳐 한방울씩 부가한뒤, 45분동안 교반을 계속하였다. Et3N(8.1ml, 58.1mmol)을 부가한뒤, 30분동안 더 교반을 계속하였다. 다음엔, 반응혼합물이 30분간에 걸쳐 -23에 이르도록 하였다. 그 다음엔, 카베톡시 메틸렌 트리페닐 포스포란(10.94g, 31.4mmol)을 부가한후, 실온에서 12시간 동안 이 반응혼합물을 교반하였다. 다음엔, 상기 반응혼합물을 수(水) (2X 125ml)로 그리고 뒤어어 브라인(50ml)으로 희석한후, Na2SO4로 건조시켰다. 조생성물을 20% 에틸 아세테이트-헥산40% 에틸 아세테이트-헥산이용 플래시 크로마토 그래피법으로 정제, 표제화합물의 트란스와 시스이성질체 양자모두를 3:1의 비로 얻었다. 총수율은 약 72-76%였다.
[실시예 33]
[3'-o -t-부틸디메틸실릴-5'-카베톡시메틸-5'-데옥시티미딘의 제조]
질소 대기하 EtOAc 내 실시예 32의 방법으로 만든 불포화 티미딘 에스테르(4.24g, 10mmol) 교반용액에 10% Pd - C200mg을 부가하였다. 감압하여 제거한, 수소를 도입시켰다. 이 절차를 두번 반복한후 수소 1기압하에서 16시간 동안 교반을 계속하였다. 다음엔, 셀라이트 패드상에서 촉매를 여과해낸후, 용제를 감압하에서 제거하였다. 헥산과 에틸 아세테이트 혼합물로부터 생성물을 정출시켰다. 95% 수율의 표제화합물을 얻었다.
[실시예 34]
[3'-o-t-부틸디메틸실릴-5'-데옥시-티미드-5-일-아세트알데하이드의 제조]
-78의 건조 CH2Cl260ml 내 실시예 33의 방법으로 제조한 티미딘 에스테르(3.41g, 8mmol) 교반용액에 DiBAC - H(16.4ml, 헥산내 1.0M 용액, 16.4mmol)을 3분간에 걸쳐 한방울씩 부가하였다. 20분뒤, 반응혼합물을 300ml EtoAc로 희석한후, 50ml 포화 소듐 포타슘 타트레이트 용액으로 두번 세척하였다. 유기상을 브라인(25ml)으로 세척한뒤, Na2SO4로 건조하였다. 표제 화합물을 50% - 70% 에틸 아세테이트 - 헥산 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 85-87%의 수율.
[실시예 35]
[3'-C -C-N-5'-인터우클레오지드 연쇄를 지니는 데옥시티미딘 다이머(제3도)의 제조]
[35a]
에탄올 50ml와 수성완충용액 10ml (pH=0.5, NaH2PO4- NaOH) 내 실시예 22의 티미딘 알데하이드(1.38g, 3.6mmol)와 실시예 27의 티미딘아민(1.07g, 3mmol)으로 이루어진 교반용액에 THF 내 NaCNBH3용액(12ml, THF 내 1.0M 용액, 12mmol)을 1시간에 걸쳐 5에서 한방울씩 부가하였다. 반응 혼합물을 4시간 더 교반한후, 2.50ml 에틸아세테이트로 희석하였다. 반응 혼합물을 수(水)(240ml)로 그리고 뒤이어 브라인(25ml)으로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켰다. 화합물 1(제6도)을 처음엔 에틸 아세테이트(용리제)이용 플래시 크로마토그래피법으로, 그리고, 다음엔 5→8% MeOH-CH2Cl2이용 플래시 크로마토그래피 법으로 정제, 62-64%의 수율을 얻었다.
[35b]
화합물 1(제6도) (166mg, 0.23mmol)을 CH2Cl2(5.0ml)내 무수 트리플루오로 아세틸(0.32ml, 2.3mmol)과 트리에틸아민(0.64ml, 4.6mmol)로 이루어지는 교반용액에 부가하였다. 2시간뒤, 반응혼합물을 수성 N2HCO3(5.0ml)로 급냉시킨후, EtOAc(25ml)로 희석하였다. 유기상을 수(水) (210ml)로 그리고 뒤이어 브라인(5ml)으로 세척한뒤, Na2SO4로 건조하였다. 화합물 2(제6도)를 CH2Cl2내 7% MeOH이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 91-93%의 수율을 얻었다.
[35c]
0의 THF(4.0ml) 내 화합물 2(164mg, 0.2mmol) 교반용액에 테트라부틸 암모늄 플루오라이드(0.8mmol)을 부가하였다. 2시간뒤, 용제를 증발시켜 제거한후, 화합물 3(제6도)을 CH2Cl2내 5% - 8% MeOH이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 90%의 수율을 얻었다.
[35d]
건조피리딘(3.0ml)내 화합물 3(151mg, 0.26mmol) 교반용액에 4, 4-디메틸아미노피리딘(1.6mg, 0.0128mmol)과 트리에틸아민(0.057ml, 0.42mmol)을 부가하였다. 5분뒤, 디메톡시트리틸클로라이드(121mg, 0.358mmol)를 부가한후, 교반을 계속하였다. 2시간뒤, 반응혼합물을 에틸 아세테이트(25ml)로 희석한 후, 수(水) (210ml)로 그리고 뒤이어 브라인(5ml)으로 세척하고, Na2SO4로 건조하였다. 조생성물을 CH2Cl2내 7% MeOH 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 85 - 87%의 화합물 4(제3도)를 얻었다.
[35e]
화합물 4(150mg, 0.168mmol)에 건조 디이소프로필 에틸이민(0.15ml, 0.67mmol)을 부가한후, 건조 CH2Cl2(0.5ml)를 부가하였다. 다음엔, 플라스크를 교반, 알콜을 용해시킨후, 2-시아노에틸- N,N-디이소프로필클로로포스포아미다이트(0.056ml, 0.25mmol)를 20초간에 걸쳐 부가하였다. 45분뒤, 반응 혼합물을 CH3OH(1.0ml)로 급냉시킨후, EtOAc(50ml)로 그리고 뒤이어 Et3N(1.0ml) 로 희석하고, 10%수성 K2CO3(25.0ml)로 그리고 뒤이어 브라인(5.0ml)으로 세척한 후에, Na2SO4로 건조시켰다. 조생성물을 EtOAc 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 70 - 75% 수율의 화합물 5(제6도)를 얻었다.
[실시예 36]
[3'-N-C-C-5'-인터누클레오지드 연쇄를 지니는 데옥시티미딘 다이머(제4도)의 제조]
[36a]
에탄올 50ml와 수성완충용액 10ml(pH=5.5, NaH2PO4-NaOH) 내 실시예 34의 알데하이드(2.29g, 6mmol)와 실시예 29의 아민(2.72g, 5mmol)로 이루어진 교반용액에 THF 내 NaCHBH3용액(12ml, THF 내 1.0M 용액. 12mmol)을 1시간에 걸쳐 5에서 한방울씩 부가하였다. 반응혼합물을 4시간 더 교반한후 250ml의 에틸아세테이트로 희석하였다. 반응혼합물을 수(水) (260ml)로 그리고 뒤어어 브라인으로 세척한 후, NaSO4로 건조시켰다. 화합물 1(제7도)을 처음엔 에틸 아세테이트 이용 플래시크로마토그래피법으로, 다음엔 5% MeOH-CH2Cl2이용 플래시크로마토그래피법으로 정제, 72 -74% 수율의 화합물 1(제7도)을 얻었다.
[36b]
CH2Cl2(5.0ml) 내 트리플루오로아세틱 무수물(0.32ml, 2.3mmol)과 트리에틸아민(0.64ml, 4.6mmol)로 이루어진 교반용액에 화합물 1(제7도) (210mg, 0.23mmol)을 부가하였다. 2시간뒤, 반응혼합물을 수성 NaHCO3(5.0ml)로 급냉시킨 후, EtOAc(25ml)로 희석하였다. 유기상을 수(水) (210ml)로 그리고 뒤이어 브라인(5ml)으로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켰다. 화합물 2(제7도)를 CH2Cl2내 7% MeOH 이용 플래시 크로마토그래피법으로 정제, 89 - 91% 수율의 화합물 2를 얻었 다.
[36c]
0의 THF(4.0ml)내 화합물 2(180mg, 0.2mmol)교반용액에 테트라부틸 암모늄 플루오라이드(0.4ml, THF 내 1.0M 용액. 0.4mmol)를 부가하였다. 2시간뒤, 용제를 증발시켜 제거한후, CH2Cl2내 58% MeOH (극성을 증가시키는)이용 플래시 크로마토그래피법으로 생성물을 정제, 89% 수율의 화합물 3(제7도)을 얻었다.
[36d]
화합물 3(150mg, 0.168mmol)에 건조 디이소프로필 에틸 이민(0.15ml, 0.67mmol)을 부가한뒤, 건조 CH2Cl2(0.5ml)를 부가하였다. 다음엔, 플라스크를 교반, 알콜을 용해시킨후, 2-시아노에틸-N, N-디이소프로필클로로포스포아미다이트(0.056ml, 0.25mmol)를 20초간에 걸쳐 부가하였다. 45분후, 반응혼합물을 CH3OH(0.1ml)로 급냉시킨뒤, EtOAc(50ml)로 그리고 뒤이어 Et3N(1.0ml)로 희석하고, 10% 수성 K2CO3(25.0ml)로 그리고 뒤이어 브라인(5.0ml)으로 세척한 후에, Na2SO4로 건조시켰다. EtOAc 이용 플래시 크로마토그래피법으로 생성물을 정제, 70-75% 수율의 화합물 4를 얻었다.
[실시예 37]
[3'-N-C-C-5'-인터누클레오지드 연쇄함유 데옥시티미딘올리고머들의 합성]
상기 a-d의 단계들에 의해 생산된 티미딘-다이머 포스포아미다이트 화합물들을 표 2에 올리고누클레오지드 배열 제조용 수정된 고상(solid phase) 포스포아미다이트 합성 절차에 사용하였다.
올리고데옥시 누클레오지드 배열들은 3' 말단으로부터 5'말단으로 합성하였다. 첫 번째 단계에서는 5'-디메톡시트리틸 데옥시티미딘을 3'-숙시네이트 연쇄를 통해 CPG 지지체에 부착시켰다. 부착된 티미딘의 5'-0-디메톡시트리틸 그룹을 트리클로로아세트산과 반응시켜 5'-하이드록실 그룹을 탈보호시켰다.
연쇄연장반응을 실시예 30-37의 방법으로 만든 -N-C-C-연쇄된 티미딘 다이머가 활성화 단계시 쇄내 목적장소에 부가되도록 수정시킨 표준 연속단계들(탈보호, 활성화, 캡핑 및 산화순으로 이어지는)을 통해 진행시켰다.
사슬의 말단에서, 티머딘 올리고머들을 농축 암모늄 하이드록사이드를 사용해 지지체로부터 제거하였다. 다음엔, 용액은 55℃에서 8 내지 15동안 재차처리, 염기들의 외환상아민들에 존재하는 모든 보호그룹들을 제거하였다.
[실시예 38]
[테트라에틸렌글리콜-종결된 항-RAS 종양유전자 DNA의 제조]
38a. 디메톡시트리틸테트라에틸렌글리콜(DMTTEG)의 제조
과량의 테트라에틸렌 글리콜 TEG(약 100㎖)를 둥근 바닥 플라스크내에서 허니그염기(Hunig's base) 약 7㎖(5.1g, 40mmol)와 혼합하였다. 상기 TEG 혼합물에 약 3.08g(10mmol)의 디메톡시트리틸 클로라이드(DMTC1)을 부가한 뒤, 이 DMTC1-TEG 혼합물을 실온(약 25℃)에서 약 8시간에서 12시간 동안 계속하여 일정하게 교반하므로서 DMTTEG를 얻었다.
38b. 디메톡시트리틸테트라에틸렌-글리콜시아노포스핀(DMTTEGCP)의 제조.
단계(2)로부터 얻은 6g의 DMTTEG를 20㎖의 건조 디클로로메탄과 혼합하였다. 이 혼합물에 약 6.2㎖의 허니그염기를 부가한 후, 클로로포스핀 혼합물을 한방울씩 부가 DMTTEGCP를 얻었다. 클로로포스핀 혼합물은 5㎖의 건조 디클로로메탄에 1.67g의 2-시아노 에틸 N,N-디이소프로필클로로포스포아미다이트를 용해시켜 만들었다.
38c. TEG-종결된 항-RAS 종양유전자 DNA의 제조
표 3의 올리고데옥시 누클레오다이트들을 수정된 고상 포스포아미다이트 방법에 따라 제조하였다(GAIT, 상기논문). 올리고데옥시누크레오타이드들은 3' 말단으로부터 5' 말단으로 합성하였다.
X는 TEG이고, A, C, G 그리고 T는 각각 데옥시누클레오타이들, 즉, 아데닐산, 시티딜산, 구아니딜산, 티미딜산을 나타낸다.
누클레오지드 아데노신(7, 8, 9, 10) 또는 티미딘(11)을 숙시네이트 연쇄를 이용 CPG 고형지지체에 부착시켰다(GAIT, 상기논문). 11의 합성은 표준고상 포스포아미다이트법에 따라 진행하였다. 배열 7, 8, 9 및 10의 합성은 수정된 포스포아미다이트법에 따라 진행하였다. 부착된 아데노신 누클레오지드의 5' 하이드록실 그룹을 트리클로로아세트산과 반응시켜 5'-하이드록실 그룹을 탈보호시켰다. 이같은 탈보호 단계 실행후엔, 상기 부착된 아데노신 누클레오지드를 상기 단계 a 및 b의 방법으로 만든 DMTTEGCP 포함 포스포아미다이트 시약 및 활성화제인 테트라졸과 반응시켰다. 활성화 단계 실행후 엔, 무수아세트산과 N-메틸이미다졸을 사용, 미반응된 5'-하이드록실 그룹들의 캡핑(capping)을 행하였다. 다음엔, 표준방법에 따라 아이어다인을 사용 포스포러스 연쇄를 산화시켰다.
두 개의 TEG 잔기들을 함유하는 배열 8과 9에서는, 탄보호, 활성화, 캡핑 및 산화단계들을 상기 기술한 바와같이 반복실행하였다. 연쇄연장반응을 목적 누클레오지드 포스포아미다이트 시약이 활성화 단계시 DMTTEGCP를 대체토록 수정시킨 상기 연속단계들(탈보호, 활성화, 캡핑 및 산화순으로 이어지는)을 통해 진행시켰다. 마지막 목적 누클레오지드를 부착시킨 후엔, 하나 또는 두 개의 TEG 잔기들을 TEG의 3' 말단부착시 사용한 방법과 유사한 방법을 사용 5' 말단에 부착시켰다.
사슬의 말단에서, DNA 사슬을 농축 암모늄 하이드록사이드를 사용 CPG 지지체로부터 제거하였다. 다음엔, 용액을 55℃에서 8 내지 15시간 동안 재차처리, 염기들의 외환상 아민들에 존재하는 모든 보호그룹들을 제거하였다.
[실시예 39]
[헥사에틸렌글리콜(HEG)-종결된 항-RAS 종양유전자 DNA의 제조]
헥사에틸렌글리콜(HEG) 종결된 항-RAS 종양유전자 DNA를 실시예 38의 방법에 따라 제조하였다. HEG를 DMTCI로 처리 DMTHEG를 얻었다. 다음엔, 이 DMTHEGCP를 실시예 38(c)의 수정된 고상 포스포아미데이트 합성방법에 사용, HEG-종결된 항-RAS 종양유전자 DNA를 얻었다. 이들 올리고누클레오타이들의 배열은 하기 표 4와 같았다.
X는 HEG이고, A, C, G 그리고 T는 각각 데옥시누클레오타이들을, 즉, 아데닐산, 시티딜산, 구아닐산 및 티미딜산을 나타낸다.
[실시예 40]
[TGE-종결된 항-RAS 종양유전자 DNA의 누클리아제 저항성]
표 4의 올리고누클레오타이드들을 수(水)에 용해시켰다. 다음엔, 260nm에서의 샘플 흡광도를 측정(주변온도의 Perkin Elmer Lambda 4C 분광광도계상에서)하고, 계산된 흡광계수(extinction coefficient)를 이용 DNA 농도를 측정하였다[method of Cantor and Warsaw, CRC Hanbook of Biochemistry and Molecular Biology, 3rd. ed. Vol. 1, CRT Press Page 589(1975)].
올리고누클레오타이드들을, RPMI 1640;20 mM N-(2-하이드록시에틸)피페라진-N'-(2-에탄술폰산), pH 7.4; 및 10% 태아 송아지 혈청(FCS)(GIBCO Laboratories, Grand Island, NY)를 함유하는 세포 배양 배지에서, 전체 사슬농도 6 또는 7㎛로 37℃에서 2시간동안 항온배양하였다. FCS는 사용하기 전에 30분동안 56℃로 가열 불활성화시켰다.
다음엔, 샘플들을 얼음에 안치시킨 뒤, 24:1의 클로포름 : 이소아밀 알콜로 5회 추출, 탈단백시켰다. 샘플들을 -20℃로 동결저장 또는 냉장된(4℃) WISP(waters) HPLC 자동 인젝터에 곧바로 주입하였다.
올리고누클레오타이드 가수분해 양을 모화합물의 소멸 양을 측정 정량적으로 측정해내었다. 올리고누클레오타이드들(반응 혼합물로부터 얻어진)을 고정파장디렉터(260nm)와 레코딩 인테그레터(recording integrator)를 장착한 LKB Ultrachrome GTi dual pump 크로마토그래피 시스템상에서 완충액 A(1㎜ EDTA ; 15m 소듐포스페이트, pH 8.5)내 평형 균합된 GenPak FAX(Waters) 음이온 교환 칼럼을 이용 분리하였다. 칼럼 온도는 Waters 칼럼 오븐을 사용 60℃로 유지시켰다. 50마이크로리터의 시료 주입양을 사용하였다. 올리고누클레오타이들을 60분간에 걸쳐 완충 B(0.5M Nacl 함유 완충액 A)선 농도기울기 0%에서 100%를 이용 용리시켰다. 완충액 유속은 분당 1㎖였다.
태아 송아지 혈청-관련된 엑소누클리아제 존재항온 배양(2시간) 뒤, 화합물 7 또는 10의 분해는 전혀 볼 수 없었다(표 5, 주피크의 분해 %를 참조할 것). 유사항온 배양기동안, 9는 87.0%, 8은 82.1% 각각 잔류하였다. 그에 비해, 올리고머 11은 동일 항온 배양기간후 단지 24.7% 만이 잔류하였다.
모두 네 개의 TEG-올리고머들이 FCS-관련된 엑소누클리아제 가수분해 저항성을 지녔다. 비스-디 TEG-올리고머들(7 및 10)은 완전한 가수분해 저항성을 지니는 듯이 보였다. TEG-유도된 올리고데옥시누클레오타이드들은 엑소누클리아제 가수분해 저항성과 관련 비수정된 화합물들보다 상당히 더 뛰어난 저항을 보여주었다.
[실시예 41]
[인간 종양 세포(Human Tumor Cell Lines) 내의 단백질 발현 및 성장과 말초혈액 임파세포의 PHA 자극을 억제하는 TEG-안티센스올리고머들의 능력]
이 분야의 전문가들(Heikkila, R. et al., Nature, 328:445-449, 1987)은 c-myc 종용유전자의 개시 코돈 지역(initiation codon region)에 관한 비수정된 안티센스 올리고누클레오타이드들이 PHA 자극된 말초혈액임파세포(PBL) 내 c-myc 단백질 발현을 억제, 이 세포의 세포사이클(cell cycle) 중 S-상(S-phase)로의 진입을 차단할 수 있음을 실증한 바 있다. c-myc에 관한 안티센스 DNA는 또한 시험관내에서 HL-60인간 적혈백혈병 세포(erythroleukemia cell)의 성장을 억제하였다(Wickstrom, E. L., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85:1028-1032, 1998). 표 6에 보여진 배열들을 실시예 41a와 41b의 방법으로 제조하고 평가하였다.
41a. PHA 자극된 PBL의 세포 싸이클중 S-단계로의 진입에 대한 수정된(TEG로) C-MYC 안티센스 DNA와 비-수정된 C-MYC 안티센스 DNA의 영향비교.
인간의 PBL을 표 6의 안티센스 올리고누클레오타이드 배열 존재 또는 부재에서 48시간동안 PHA로 자극하였다. 표준 유동 혈구 계산법(standard flow cytometric technique)을 이용 세포 싸이클중 S-단계로 진입한 각 처리구내 세포집단%를 비처리구와 비교하여 결정하였다. 표 7은 이 결과를 보여준다.
상기 데이터는 3' 말단과 5' 말단의 TEG 존재가 안티센스 DNA의 억제효과를 변화시키지는 못함을 보여준다.
41b. MOLT-4 인간 T-세포백혈병 세포내 C-MYC 단백질 발현에 대한 수정된(TEG로) C-MYC 안티센스 DNA와 비-수정된 C-MYC 안티센스 DNA의 영향비교.
지수적으로 비동시 성장(Asynchronous growing)하는 Molt-4 세포들을 60㎛ c-myc에 관한 안티센스 DNA 존재 또는 부재하에서 8시간동안 배양하였다. 다음엔, 세포들을 S-메티오닌 존재에서 45분동안 항온배양한 뒤, c-myc 항체 이용 방사선 면역침전법을 사용 c-myc 단백질의 함량을 정량적으로 측정하였다. 이 결과를 표 8에 실었다.
안티센스 DNA 함유 TEG는 비수정된 안티센스 DNA보다 좀더 강력한 효능을 발휘하였다.
41c. 수정된(TEG로) C-MYC 안티센스 DNA와 비수정된 C-MYC 안티센스 DNA의 시험관내 인간 CCRF-CEM T-세포 백혈병 세포성장의 성장억제효과 비교.
지수적으로 비동시 성장하는 CCRF-CEM 세포들을 안티센스 DNA의 존재 또는 부재에서 48시간 동안 배양한 후, 각 처리구내 세포수를 결정하였다. 다음엔, 세포성장을 50%까지 억제하는데 필요로되는 안티센스 DNA의 농도를 결정하였다(IC). 표 5의 수정된 안티센스 DNA와 비수정된 안티센스 DNA는 40㎛의 대략 동당량(IC) 농도를 보여주었다.
이들 데이터는 안티센스 DNA의 3' 말단과 5' 말단의 TEG 존재가 타켓 핵산과 혼성화, 이 타켓 핵산 기능을 억제하는 이 안티센스 DNA의 능력에 아무런 영향도 미치지 아니한다는 사실을 보여준다.
[실시예 42]
[부가적인 엑소누클리아제 안정 올리고누클레오타이이들]
표 9의 엑소누클리아제 안정 올리누클레타이드들은 실시예 38의 방법으로 제조하였다.
본원 취지 및 범주를 벗어남 없이 많은 수정된 방법들이 본원을 토대로하여 이루어질 수 있으리란 것은 당업계 숙련된 전문가들에게 자명한 것으로 사료된다.

Claims (17)

  1. 하기식의 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지니는, 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진 올리고누클레오지드 배열을 포함하는 화합물:
    식중, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을 나타낸다.
  2. 제1항에 있어서, 양말단중 어느 한 말단 또는 양말단 모두에 디올을 지니는 화합물.
  3. 제1항에 있어서, 디올이 테트라에틸렌글리콜 또는 헥사에틸렌글리콜인 화합물.
  4. 하기식의 올리고누클레오지드 배열을 포함하는 화합물:
    식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여 W 또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체를; j는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
  5. 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는 하기식의 올리고누클레오지드 배열을 포함하는 화합물.
    식중, 각각의 Z는 독립하여 R1또는를; W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여 W 또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 R5는 독립하여 수소 또는 C1-C12알킬을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체를; e와 f 각각은 독립하여 최소한 e와 f중 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을; j는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고 각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다. q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
  6. 양말단중 어느 한 말단 또는 양말단 모두에 폴리알킬렌글리콜 라디칼을 지니는 약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는 올리고누클레오타이드 배열을 포함하는 화합물.
  7. 제6항에 있어서, 폴리알킬렌글리콜 라디칼이 헥사에틸렌글리콜 또는 테트라에틸렌글리콜인 화합물.
  8. 하기식의 올리고누클레오타이드를 포함하는 화합물.
    식중 R은 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; R1은 수소 또는 C1-C12알킬을; 올리고(N)은 약 9개에서 약 200개의 염기들로 이루어진 본래의 또는 수정된 올리고누클레오타이드 배열을; e와 f 각각은 독립하여 e와 f중 최소한 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을; m과 n 각각은 독립하여 1에서 200을; 그리고 각각의 p는 독립하여 2에서 4를 나타낸다.
  9. 하기식의 올리고누클레오타이드를 포함하는 화합물.
    식중, R은 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 올리고(N)은 약 9개에서 약 50개의 염기들로 이루어진 올리고누클레오타이드 배열을; e와 f 각각은 독립하여 e와 f중 최소한 하나가 최소한 1일 것을 조건으로 0에서 50을; m과 n 각각은 독립하여 m과 n중 최소한 하나가 1에서 200일 것을 조건으로 0에서 200을 나타낸다.
  10. 하기식의 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 지닌 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어진 올리고누클레오지드 배열을 제조하는 단계를 포함하는 화합물들의 누클리아제 분해 억제 방법.
    식중 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C12알킬을 나타낸다.
  11. 제10항에 있어서, 올리고누클레오지드 배열이 하기식을 지니는 방법.
    식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체를; j는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
  12. 상기 누클레오타이드 또는 올리고누클레오지드 배열의 양말단중 어느 한 말단 또는 양말단 모두에 대한 폴리알킬렌글리콜 라디칼 부착을 포함하는 누클레오타이드 또는 올리고누클레오지드를 안정화시키는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 트리틸디올시아노포스핀이 상기 화합물의 5' 말단 보호용으로 사용되는 방법.
  14. 포스페이트를 함유하지 아니하는 하기식의 3원자 인터누클레오지드 연쇄를 약 6개에서 약 200개의 염기들로 이루어지는 올리고누클레오지드 배열을 포함하는 화합물 및 생리학적으로 용인되는 담체를 포함하는 유전자 발현 억제용으로 유용한 조성물.
    식중, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을 나타낸다.
  15. 제14항에 있어서, 올리고누클레오지드 배열이 하기식을 지니는 조성물.
    식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 W1은 독립하여 W 또는를; 각각의 R1은 독립하여 OH, SH, NR2R3를, R2와 R3는 독립하여 수소 또는 C1-C6알킬 또는 NHR4를, R4는 C1-C12아실을; 각각의 y는 독립하여 수소 또는 OH를; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체를; j는 1에서 약 200까지의 정수를; k는 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를; 그리고 q는 j+k+q의 합이 약 4에서 약 200일 것을 조건으로, 0 또는 1에서 약 197까지의 정수를 나타낸다.
  16. 하기식의 누클레오지드 다이머(dimer)를 포함하는 화합물.
    식중, W는 -D-D-D-를, 각각의 D는 독립하여 CHR, 산소 또는 NR6를, R은 독립하여 수소, OH, SH 또는 NH2를, R6는 하나의 D만이 산소 또는 NR6일 것을 조건으로 수소 또는 C1-C2알킬을; 각각의 B는 독립하여 아데닌, 시토닌, 구아닌, 티민, 우라실 또는 이들의 수정체들을; R7은 OH, t-부틸디메틸실릴옥시 또는 포스포아미다이트를; 그리고 R8은 OH, 어떤 보호그룹 또는 t-부틸디메틸실릴옥시를 나타낸다.
  17. 하기식의 화합물.
    식중, X는 테트라에틸렌글리콜; 그리고 n은 1 또는 2.
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Families Citing this family (867)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5914396A (en) * 1990-01-11 1999-06-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-modified nucleosides and phosphoramidites
US5792844A (en) * 1990-07-27 1998-08-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent nitrogen atoms
US5623070A (en) * 1990-07-27 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US6087482A (en) * 1990-07-27 2000-07-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5602240A (en) * 1990-07-27 1997-02-11 Ciba Geigy Ag. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5386023A (en) * 1990-07-27 1995-01-31 Isis Pharmaceuticals Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling
US5783682A (en) * 1990-07-27 1998-07-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide mimics having nitrogen-containing linkages
US5677437A (en) * 1990-07-27 1997-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5378825A (en) * 1990-07-27 1995-01-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5618704A (en) * 1990-07-27 1997-04-08 Isis Pharmacueticals, Inc. Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
IL113519A (en) * 1990-08-03 1997-11-20 Sterling Winthrop Inc Oligonucleoside sequences of from about 6 to about 200 bases having a three atom internucleoside linkage, their preparation and pharmaceutical compositions for inhibiting gene expression containing said oligonucleosides
US5965722A (en) 1991-05-21 1999-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of ras gene with chimeric and alternating oligonucleotides
US6030954A (en) * 1991-09-05 2000-02-29 University Of Connecticut Targeted delivery of poly- or oligonucleotides to cells
US6335434B1 (en) 1998-06-16 2002-01-01 Isis Pharmaceuticals, Inc., Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates
US8153602B1 (en) 1991-11-19 2012-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods for the pulmonary delivery of nucleic acids
US5817781A (en) 1992-06-01 1998-10-06 Gilead Sciences, Inc. Modified internucleoside linkages (II)
AU685080B2 (en) * 1993-01-07 1998-01-15 Thomas Jefferson University Antisense inhibition of C-MYC to modulate the proliferation of smooth muscle cells
GB9304618D0 (en) * 1993-03-06 1993-04-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
WO1994022893A1 (en) * 1993-03-30 1994-10-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent nitrogen atoms
JPH08508489A (ja) * 1993-03-31 1996-09-10 スターリング ウィンスロップ インコーポレイティド 二官能価ヌクレオシド、それらのオリゴマーならびにそれらの製造方法及び使用方法
WO1994022890A1 (en) * 1993-03-31 1994-10-13 Sterling Winthop Inc. Novel 5'-substituted nucleosides and oligomers produced therefrom
JP3484197B2 (ja) 1993-09-03 2004-01-06 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド アミン誘導化ヌクレオシドおよびオリゴヌクレオシド
US5886177A (en) * 1994-01-11 1999-03-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphate linked oligomers
US6448373B1 (en) 1994-01-11 2002-09-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphate linked oligomers formed of monomeric diols and processes for preparing same
DE69527942T2 (de) * 1994-01-26 2003-03-27 Novartis Ag, Basel Modifizierte oligonukleotide
EP1502950A3 (en) * 1994-02-23 2005-06-22 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Method for purifying chemically modified RNA
FR2733500B1 (fr) * 1995-04-28 1997-07-25 Centre Nat Rech Scient Nouveaux antisens diriges contre ras, preparation et utilisations
US6420549B1 (en) 1995-06-06 2002-07-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide analogs having modified dimers
US5854033A (en) 1995-11-21 1998-12-29 Yale University Rolling circle replication reporter systems
US9096636B2 (en) 1996-06-06 2015-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US20030044941A1 (en) 1996-06-06 2003-03-06 Crooke Stanley T. Human RNase III and compositions and uses thereof
US20040161844A1 (en) * 1996-06-06 2004-08-19 Baker Brenda F. Sugar and backbone-surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US6716625B1 (en) 1997-04-16 2004-04-06 Claude Selitrennikoff Histidine kinases of Aspergillus and other fungal species, related compositions, and methods of use
AU731909B2 (en) 1997-07-01 2001-04-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
US7321828B2 (en) 1998-04-13 2008-01-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. System of components for preparing oligonucleotides
US20040186071A1 (en) 1998-04-13 2004-09-23 Bennett C. Frank Antisense modulation of CD40 expression
EP1080103A4 (en) * 1998-05-21 2003-07-02 Isis Pharmaceuticals Inc PREPARATIONS AND METHOD FOR THE NON-PARENTERAL ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES
AU753270B2 (en) 1998-05-21 2002-10-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for topical delivery of oligonucleotides
US6242589B1 (en) 1998-07-14 2001-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages
US6867294B1 (en) 1998-07-14 2005-03-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages
US6225293B1 (en) 1998-09-02 2001-05-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods and compounds for tracking the biodistribution of macromolecule-carrier combinations
BR9914465A (pt) 1998-09-29 2001-10-09 Gamida Cell Ltd Métodos para controlar a proliferação e a diferenciação de células-tronco e células progenitoras e uma composição farmacêutica para induzir a diferenciação em uma população de células
US6077709A (en) 1998-09-29 2000-06-20 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of Survivin expression
US6300320B1 (en) 1999-01-05 2001-10-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of c-jun using inhibitors of protein kinase C
US6127124A (en) 1999-01-20 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence based nuclease assay
US7098192B2 (en) 1999-04-08 2006-08-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of STAT3 expression
US7534605B2 (en) 1999-06-08 2009-05-19 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem CD44 polypeptides, polynucleotides encoding same, antibodies directed thereagainst and method of using same for diagnosing and treating inflammatory diseases
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
US6593466B1 (en) 1999-07-07 2003-07-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Guanidinium functionalized nucleotides and precursors thereof
US20030190644A1 (en) 1999-10-13 2003-10-09 Andreas Braun Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers
US6261840B1 (en) 2000-01-18 2001-07-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of PTP1B expression
US20020055479A1 (en) 2000-01-18 2002-05-09 Cowsert Lex M. Antisense modulation of PTP1B expression
JP2003530841A (ja) * 2000-04-13 2003-10-21 トーマス エヌ． ワイト， 治療的化合物および方法
US6680172B1 (en) 2000-05-16 2004-01-20 Regents Of The University Of Michigan Treatments and markers for cancers of the central nervous system
US6656700B2 (en) 2000-05-26 2003-12-02 Amersham Plc Isoforms of human pregnancy-associated protein-E
US6686188B2 (en) 2000-05-26 2004-02-03 Amersham Plc Polynucleotide encoding a human myosin-like polypeptide expressed predominantly in heart and muscle
US6958214B2 (en) 2000-07-10 2005-10-25 Sequenom, Inc. Polymorphic kinase anchor proteins and nucleic acids encoding the same
US8568766B2 (en) 2000-08-24 2013-10-29 Gattadahalli M. Anantharamaiah Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease
DE10046184A1 (de) * 2000-09-18 2002-04-04 November Ag Molekulare Medizin Verfahren zum Nachweis mindestens einer Nukleinsäuresequenz
EP1326892A2 (en) 2000-10-12 2003-07-16 University of Rochester Compositions that inhibit proliferation of cancer cells
US7767802B2 (en) 2001-01-09 2010-08-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes
US6573051B2 (en) * 2001-03-09 2003-06-03 Molecular Staging, Inc. Open circle probes with intramolecular stem structures
AU2002257067A1 (en) 2001-03-14 2002-09-24 Myriad Genetics, Inc Tsg101-gag interaction and use thereof
JP2004537534A (ja) 2001-06-20 2004-12-16 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の診断及び治療のための組成物及び方法
US20030199466A1 (en) 2001-06-21 2003-10-23 Fearon Karen L. Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same - ll
EP1404698A4 (en) 2001-06-21 2004-12-22 Isis Pharmaceuticals Inc ANTISENSE MODULATION OF SUPEROXIDE DISISMUTASE 1, EXPRESSION IN SOLUTION
US7785610B2 (en) * 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
EP1499627A2 (en) * 2001-07-03 2005-01-26 ISIS Pharmaceuticals, Inc. Nuclease resistant chimeric oligonucleotides
US6964950B2 (en) 2001-07-25 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of C-reactive protein expression
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US20030096772A1 (en) 2001-07-30 2003-05-22 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression
US7407943B2 (en) 2001-08-01 2008-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US20040096880A1 (en) * 2001-08-07 2004-05-20 Kmiec Eric B. Compositions and methods for the treatment of diseases exhibiting protein misassembly and aggregation
US7227014B2 (en) 2001-08-07 2007-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression
CA2455424A1 (en) * 2001-08-07 2003-02-20 University Of Delaware Compositions and methods for the prevention and treatment of huntington's disease
EP2151244A1 (en) 2001-09-18 2010-02-10 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US7070933B2 (en) * 2001-09-28 2006-07-04 Gen-Probe Incorporated Inversion probes
US6750019B2 (en) 2001-10-09 2004-06-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
NZ566396A (en) 2001-10-09 2009-07-31 Isis Pharmaceuticals Inc Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expressions
US20030228319A1 (en) 2002-04-16 2003-12-11 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
KR100801388B1 (ko) 2002-01-02 2008-02-05 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료 방법 및 이를 위한 조성물
IL152904A0 (en) 2002-01-24 2003-06-24 Gamida Cell Ltd Utilization of retinoid and vitamin d receptor antagonists for expansion of renewable stem cell populations
EP1465982A4 (en) 2002-01-25 2006-06-07 Gamida Cell Ltd PROCESS FOR EXPANSION OF STEM AND PRESERVATIVE CELLS AND EXPANDED CELL POPULATIONS THEREWITH OBTAINED
EP1474432A1 (en) * 2002-02-04 2004-11-10 Biomira Inc. Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides
US7553619B2 (en) 2002-02-08 2009-06-30 Qiagen Gmbh Detection method using dissociated rolling circle amplification
US20030180712A1 (en) 2002-03-20 2003-09-25 Biostratum Ab Inhibition of the beta3 subunit of L-type Ca2+ channels
EP1501863A4 (en) 2002-05-03 2007-01-24 Sequenom Inc KINASE ANCHOR PROTEIN, PEPTIDES AND RELATED METHODS THEREOF
US7176181B2 (en) * 2002-05-21 2007-02-13 Yeda Research And Development Co. Ltd. Compositions and methods of using galectin-8 as an inhibitor of tumor cell growth
US7199107B2 (en) 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
WO2003106617A2 (en) * 2002-06-12 2003-12-24 Tel Aviv Medical Center Research Development Fund Oligonucleotides antibodies and kits including same for treating prostate cancer and determining predisposition thereto
EP1575992A4 (en) 2002-08-05 2007-02-21 Univ Rochester CHEMICAL PROTEINS FROM PROTEIN TRANSDUCATING DOMAIN / DEAMINASE, RELATED COMPOUNDS AND THEIR USES
JP2005538186A (ja) 2002-09-13 2005-12-15 レプリコール インコーポレーティッド 非配列相補性の抗ウイルス性オリゴヌクレオチド
JP2006500030A (ja) * 2002-09-20 2006-01-05 イェール ユニバーシティ リボスイッチ、その使用方法、ならびにリボスイッチとともに用いるための組成物
AU2003278957A1 (en) 2002-09-26 2004-04-23 Amgen, Inc. Modulation of forkhead box o1a expression
US9150605B2 (en) * 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation
CA2504720C (en) 2002-11-05 2013-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US9150606B2 (en) 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation
AU2003295387A1 (en) 2002-11-05 2004-06-03 Isis Parmaceuticals, Inc. Modified oligonucleotides for use in rna interference
CA2505801A1 (en) 2002-11-13 2004-05-27 Rosanne Crooke Antisense modulation of apolipoprotein b expression
ES2420914T3 (es) 2002-11-13 2013-08-27 Genzyme Corporation Modulación antisentido de la expresión de la apolipoproteína B
US20060009378A1 (en) 2002-11-14 2006-01-12 Itshak Golan Novel galectin sequences and compositions and methods utilizing same for treating or diagnosing arthritis and other chronic inflammatory diseases
AU2003295576B2 (en) 2002-11-15 2011-03-17 Eisai, Inc. Methods of generating high-production of antibodies from hybridomas created by in vitro immunization
WO2004045520A2 (en) 2002-11-15 2004-06-03 Musc Foundation For Research Development Complement receptor 2 targeted complement modulators
EP2410332A1 (en) 2002-11-21 2012-01-25 The University Of Utah Method for identifying purinergic modulators of the olfactory system
US7144999B2 (en) 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
US20040110698A1 (en) * 2002-12-10 2004-06-10 Kimron Veterinary Institute Oligonucleotides and methods using same for treating cox-ll associated diseases
US20040115643A1 (en) * 2002-12-12 2004-06-17 Lizardi Paul M. Thermodynamic equilibrium extension of primers
US20040121338A1 (en) * 2002-12-19 2004-06-24 Alsmadi Osama A. Real-time detection of rolling circle amplification products
US9487823B2 (en) 2002-12-20 2016-11-08 Qiagen Gmbh Nucleic acid amplification
EP1583843B1 (en) 2002-12-20 2018-07-18 QIAGEN GmbH Single primer whole genome amplification
US6977153B2 (en) 2002-12-31 2005-12-20 Qiagen Gmbh Rolling circle amplification of RNA
CA2515484C (en) 2003-02-11 2011-09-20 Antisense Therapeutics Ltd Modulation of insulin like growth factor i receptor expression
WO2004076621A2 (en) 2003-02-27 2004-09-10 Yeda Research And Development Co. Ltd. Compositions of nucleic acids for treating and detecting influenza virus
US7803781B2 (en) 2003-02-28 2010-09-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of growth hormone receptor expression and insulin-like growth factor expression
US20040185559A1 (en) 2003-03-21 2004-09-23 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 1 expression
US8043834B2 (en) 2003-03-31 2011-10-25 Qiagen Gmbh Universal reagents for rolling circle amplification and methods of use
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7399853B2 (en) 2003-04-28 2008-07-15 Isis Pharmaceuticals Modulation of glucagon receptor expression
US7276599B2 (en) 2003-06-02 2007-10-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide synthesis with alternative solvents
BRPI0410886A (pt) 2003-06-03 2006-07-04 Isis Pharmaceuticals Inc composto de filamento duplo, composição farmacêutica, sal farmaceuticamente aceitável, métodos de modificação do ácido nucleico que codifica a survivina humana, de inibição da expressão da suvivina em células ou tecidos, e de tratamento de uma condição associada com a expressão ou superexpressão da suvivina, e, oligonucleotìdeo de rnai de filamento único
US20040248103A1 (en) * 2003-06-04 2004-12-09 Feaver William John Proximity-mediated rolling circle amplification
DK3604537T3 (da) 2003-06-13 2022-02-28 Alnylam Europe Ag Dobbeltstrenget ribonukleinsyre med forøget effektivitet i en organisme
CA2533701A1 (en) 2003-07-31 2005-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas
US8969314B2 (en) 2003-07-31 2015-03-03 Regulus Therapeutics, Inc. Methods for use in modulating miR-122a
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
AU2004274021B2 (en) 2003-09-18 2009-08-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4'-thionucleosides and oligomeric compounds
BRPI0413930A (pt) 2003-09-18 2006-10-24 Isis Pharmaceuticals Inc composto oligomérico ou sal farmaceuticamente aceitável deste, composição farmacêutica ou veterinária, métodos para inibir a expressão de eif4e em uma célula, tecido ou órgão, para diminuir a proliferação de uma célula em que eif4e é expressado, e para prevenir ou tratar uma condição ou doença métodos para prevenir ou diminuir a angiogênese, e o crescimento de tumor em um paciente, oligonucleotìdeo de anti-sentido, composição farmacêutica ou veterinária, e, uso de um composto oligomérico ou sal farmaceuticamente aceitável deste
US20050191653A1 (en) 2003-11-03 2005-09-01 Freier Susan M. Modulation of SGLT2 expression
EP2412725A3 (en) 2003-11-17 2012-04-25 Genentech, Inc. Antibodies against CD79b for the treatment of tumor of hematopoeitic origin
JP2007520222A (ja) 2004-01-20 2007-07-26 アイシス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド グルココルチコイドレセプター発現の調節
US8778900B2 (en) 2004-01-22 2014-07-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP1 expression
US7468431B2 (en) 2004-01-22 2008-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP2 expression
US7842459B2 (en) 2004-01-27 2010-11-30 Compugen Ltd. Nucleotide and amino acid sequences, and assays and methods of use thereof for diagnosis
US8569474B2 (en) 2004-03-09 2013-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand
EP2700720A3 (en) 2004-03-15 2015-01-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for optimizing cleavage of RNA by RNASE H
AU2005230684B2 (en) 2004-04-05 2011-10-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Process and reagents for oligonucleotide synthesis and purification
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
WO2006073458A2 (en) 2004-04-30 2006-07-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides comprising a c5-modified pyrimidine
AU2005326817B2 (en) 2004-05-21 2012-04-19 Benaroya Research Institute Variable lymphocyte receptors, related polypeptides and nucleic acids, and uses thereof
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
US7884086B2 (en) 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
WO2006030442A2 (en) 2004-09-16 2006-03-23 Gamida-Cell Ltd. Methods of ex vivo progenitor and stem cell expansion by co-culture with mesenchymal cells
PL1809303T3 (pl) 2004-09-23 2019-11-29 Arc Medical Devices Inc Kompozycje farmaceutyczne i sposoby dotyczące hamowania zrostów włóknistych lub stanów zapalnych przy użyciu fukanów o niskiej zawartości siarczanów
CA2588087A1 (en) * 2004-11-15 2006-05-18 Obe Therapy Biotechnology S.A.S. Methods of reducing body fat
US20080260637A1 (en) 2004-11-17 2008-10-23 Dalia Dickman Methods of Detecting Prostate Cancer
EP1859040A2 (en) * 2005-02-25 2007-11-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to il-4r alpha
AU2006223498A1 (en) 2005-03-10 2006-09-21 Genentech, Inc. Methods and compositions for modulating vascular integrity
US7476733B2 (en) 2005-03-25 2009-01-13 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Development of a real-time PCR assay for detection of pneumococcal DNA and diagnosis of pneumococccal disease
EP1863908B1 (de) 2005-04-01 2010-11-17 Qiagen GmbH Reverse transkription und amplifikation von rna bei simultaner degradierung von dna
EP2298829B1 (en) 2005-05-31 2017-09-20 École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs
WO2006133022A2 (en) 2005-06-03 2006-12-14 The Johns Hopkins University Compositions and methods for decreasing microrna expression for the treatment of neoplasia
WO2006138145A1 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
US8067573B2 (en) * 2005-07-07 2011-11-29 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Nucleic acid agents for downregulating H19 and methods of using same
DE602006017405D1 (de) 2005-08-11 2010-11-18 Synthetic Genomics Inc Verfahren zur in vitro-rekombination
KR20080036646A (ko) 2005-08-17 2008-04-28 메덱시스 에스.에이. Ｃｋ１９ 발현 측정을 위한 조성물 및 방법
EP1931780B1 (en) 2005-08-29 2016-01-06 Regulus Therapeutics Inc. Antisense compounds having enhanced anti-microrna activity
EP1762627A1 (de) 2005-09-09 2007-03-14 Qiagen GmbH Verfahren zur Aktivierung einer Nukleinsäure für eine Polymerase-Reaktion
IL172297A (en) 2005-10-03 2016-03-31 Compugen Ltd Soluble vegfr-1 variants for diagnosis of preeclamsia
EP1934331A4 (en) 2005-10-14 2009-01-21 Musc Found For Res Dev TARGETING PAX2 TO INDUCE CANCER TREATMENT AND TUMOR IMMUNITY INDUCED BY DEFB1
US8080534B2 (en) 2005-10-14 2011-12-20 Phigenix, Inc Targeting PAX2 for the treatment of breast cancer
EP1941059A4 (en) 2005-10-28 2010-11-03 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING THE EXPRESSION OF THE HUNTINGTIN GENE
EP1945270B1 (en) 2005-11-09 2011-05-25 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of factor v leiden mutant gene
EP1966377A2 (en) 2005-11-21 2008-09-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eif4e-bp2 expression
US8846393B2 (en) 2005-11-29 2014-09-30 Gamida-Cell Ltd. Methods of improving stem cell homing and engraftment
US20070270366A1 (en) * 2005-12-20 2007-11-22 Karras James G Double stranded nucleic acid molecules targeted to il-4 receptor alpha
JP2009524411A (ja) * 2005-12-21 2009-07-02 イェール ユニバーシティー リボスイッチの調節に関連した方法および組成物
WO2007087113A2 (en) 2005-12-28 2007-08-02 The Scripps Research Institute Natural antisense and non-coding rna transcripts as drug targets
CA2637267A1 (en) 2006-01-16 2007-07-19 Compugen Ltd. Novel nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof for diagnosis
ES2516815T3 (es) 2006-01-27 2014-10-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos modificados en la posición 6
US7569686B1 (en) 2006-01-27 2009-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs
WO2007090073A2 (en) 2006-01-27 2007-08-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for the use in modulation of micrornas
JP5704741B2 (ja) 2006-03-31 2015-04-22 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． Ｅｇ５遺伝子発現の抑制のための組成物および方法
AU2007245599B2 (en) 2006-05-03 2012-05-10 Baltic Technology Development, Ltd. Antisense agents combining strongly bound base - modified oligonucleotide and artificial nuclease
US8143230B2 (en) 2006-05-05 2012-03-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating expression of PCSK9
US7547684B2 (en) 2006-05-11 2009-06-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5′-modified bicyclic nucleic acid analogs
EP2584047B1 (en) 2006-05-11 2014-11-19 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the PCSK9 gene
US7666854B2 (en) 2006-05-11 2010-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs
CN101489566B (zh) 2006-05-19 2012-04-18 阿尔尼拉姆医药品有限公司 Aha基因的RNAi调控及其治疗性应用
WO2007137220A2 (en) 2006-05-22 2007-11-29 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of ikk-b gene
US8198253B2 (en) 2006-07-19 2012-06-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to HBXIP
US20100137440A1 (en) * 2006-09-11 2010-06-03 Yale University Lysine riboswitches, structure-based compound design with lysine riboswitches, and methods and compositions for use of and with lysine riboswitches
US20090209478A1 (en) 2006-09-21 2009-08-20 Tomoko Nakayama Compositions and methods for inhibiting expression of the hamp gene
CA2848238C (en) 2006-10-03 2016-07-19 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Lipid containing formulations
US20100166743A1 (en) 2006-10-06 2010-07-01 University Of Utah Research Foundation Method of detecting ocular diseases and pathologic conditions and treatment of same
WO2008136852A2 (en) 2006-11-01 2008-11-13 University Of Rochester Methods and compositions related to the structure and function of apobec3g
TW200838551A (en) * 2006-11-27 2008-10-01 Isis Pharmaceuticals Inc Methods for treating hypercholesterolemia
US8093222B2 (en) 2006-11-27 2012-01-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia
EP2104509A4 (en) 2006-12-11 2010-03-24 Univ Utah Res Found COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PATHOLOGICAL ANGIOGENESIS AND VASPERMEABILITY
KR20090098818A (ko) * 2006-12-14 2009-09-17 노파르티스 아게 근육병 및 심혈관병 치료를 위한 조성물 및 방법
EP2097448A4 (en) 2006-12-22 2010-07-21 Univ Utah Res Found PROCEDURE FOR THE EVIDENCE OF EYE DISEASES AND SUFFERINGS AND THEIR TREATMENT
EP2111450A2 (en) * 2007-01-16 2009-10-28 Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Nucleic acid constructs and methods for specific silencing of h19
US20100196403A1 (en) * 2007-01-29 2010-08-05 Jacob Hochman Antibody conjugates for circumventing multi-drug resistance
JP5512285B2 (ja) 2007-02-09 2014-06-04 ノースウェスタン ユニバーシティ 細胞内標的を検出するための粒子
AU2008239495A1 (en) * 2007-02-27 2008-10-23 Northwestern University Molecule attachment to nanoparticles
AU2008227458A1 (en) 2007-03-22 2008-09-25 Yale University Methods and compositions related to riboswitches that control alternative splicing
PE20090064A1 (es) 2007-03-26 2009-03-02 Novartis Ag Acido ribonucleico de doble cadena para inhibir la expresion del gen e6ap humano y composicion farmaceutica que lo comprende
US7759320B2 (en) 2007-03-29 2010-07-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the Ebola
US20110091377A1 (en) 2007-05-11 2011-04-21 The Johns Hopkins University Biomarkers for melanoma
MX2009012773A (es) 2007-05-29 2009-12-16 Univ Yale Ribointerruptores y metodos y composiciones para usarse de y con ribointerruptores.
MX2009012647A (es) * 2007-05-29 2009-12-14 Univ Yale Metodos y composiciones relacionadas con ribointerruptores que controlan la separacion alternativa y proceso de arn.
AU2008260277C1 (en) 2007-05-30 2014-04-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
AU2008259907B2 (en) 2007-05-30 2014-12-04 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
US7807372B2 (en) * 2007-06-04 2010-10-05 Northwestern University Screening sequence selectivity of oligonucleotide-binding molecules using nanoparticle based colorimetric assay
WO2008154401A2 (en) 2007-06-08 2008-12-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
CN101688206B (zh) 2007-07-05 2013-05-15 诺瓦提斯公司 用于治疗病毒感染的dsRNA
EP2176280B2 (en) 2007-07-05 2015-06-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs
JP5572090B2 (ja) 2007-08-15 2014-08-13 アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド テトラヒドロピラン核酸類似体
JP2010538005A (ja) 2007-08-28 2010-12-09 ユーエービー リサーチ ファウンデーション 合成アポリポ蛋白質ｅ模倣ポリペプチドおよび使用方法
AU2008296487A1 (en) 2007-08-28 2009-03-12 The Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use
ES2719728T3 (es) 2007-09-04 2019-07-12 Compugen Ltd Polipéptidos y polinucleótidos, y usos de los mismos como una diana farmacológica para producir fármacos y agentes biológicos
WO2009039466A1 (en) 2007-09-20 2009-03-26 Vanderbilt University Free solution measurement of molecular interactions by backscattering interferometry
US7951785B2 (en) 2007-09-21 2011-05-31 California Institute Of Technology NFIA in glial fate determination, glioma therapy and astrocytoma treatment
EP2205741A2 (en) 2007-10-02 2010-07-14 Amgen Inc. Increasing erythropoietin using nucleic acids hybridizable to micro-rna and precursors thereof
US8097712B2 (en) 2007-11-07 2012-01-17 Beelogics Inc. Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof
ES2641290T3 (es) 2007-11-20 2017-11-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc Modulación de la expresión de CD40
WO2009067647A1 (en) * 2007-11-21 2009-05-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic alpha-l-bicyclic nucleic acid analogs
AU2008335202A1 (en) 2007-12-10 2009-06-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of Factor VII gene
EP3100718B1 (en) 2008-01-02 2019-11-27 Arbutus Biopharma Corporation Improved compositions and methods for the delivery of nucleic acids
WO2009100320A2 (en) 2008-02-07 2009-08-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs
KR101397407B1 (ko) 2008-03-05 2014-06-19 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｅｇ5 및 ＶＥＧＦ 유전자의 발현을 억제하기 위한 조성물 및 방법
WO2009117589A1 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use
MX2010011508A (es) 2008-04-18 2011-05-03 Baxter Int Composicion basada en microesferas para prevenir y/o revertir la nueva presentacion de diabetes autoinmune.
EP2280995A2 (en) * 2008-04-29 2011-02-09 Wyeth LLC Methods for treating inflammation
US20090307669A1 (en) * 2008-06-06 2009-12-10 Garst Jr Gerald Blaine Memory management for closures
CN107083386A (zh) 2008-08-25 2017-08-22 埃克斯雷德制药有限公司 阻止结缔组织生长因子的反义核苷酸及其用途
WO2010028054A1 (en) 2008-09-02 2010-03-11 Alnylam Europe Ag. Compositions and methods for inhibiting expression of mutant egfr gene
EP2356129B1 (en) 2008-09-24 2013-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted alpha-l-bicyclic nucleosides
US8604192B2 (en) 2008-09-24 2013-12-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Cyclohexenyl nucleic acids analogs
AU2009296395A1 (en) 2008-09-25 2010-04-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of Serum Amyloid A gene
AU2009303345B2 (en) 2008-10-09 2015-08-20 Arbutus Biopharma Corporation Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids
RU2535964C2 (ru) 2008-10-15 2014-12-20 АйЭсАйЭс ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК. Модуляция экспрессии фактора 11
IL302142B2 (en) 2008-10-20 2024-07-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compounds and methods for inhibiting transthyretin expression
US8987435B2 (en) 2008-10-24 2015-03-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and methods
CA2741294C (en) 2008-10-24 2018-04-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5' and 2' bis-substituted nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2365803B1 (en) 2008-11-24 2017-11-01 Northwestern University Polyvalent rna-nanoparticle compositions
WO2010061393A1 (en) 2008-11-30 2010-06-03 Compugen Ltd. He4 variant nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof
JP5923306B2 (ja) 2008-12-04 2016-05-24 クルナ・インコーポレーテッド 腫瘍抑制遺伝子に対する天然アンチセンス転写物の抑制による腫瘍抑制遺伝子関連疾患の治療
JP6091752B2 (ja) 2008-12-04 2017-03-08 クルナ・インコーポレーテッド Ｅｐｏに対する天然アンチセンス転写物の抑制によるエリスロポエチン（ｅｐｏ）関連疾患の治療
WO2010065662A2 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Curna, Inc. Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirtuin 1
EP2373301B1 (en) 2008-12-05 2013-11-06 Yeda Research and Development Co. Ltd. Methods of diagnosing motor neuron diseases
NZ593618A (en) 2008-12-10 2013-02-22 Alnylam Pharmaceuticals Inc Gnaq targeted dsrna compositions and methods for inhibiting expression
AU2009335740B2 (en) 2008-12-17 2016-04-21 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense compositions and methods for modulating contact hypersensitivity or contact dermatitis
US20100233270A1 (en) 2009-01-08 2010-09-16 Northwestern University Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles
WO2010088537A2 (en) 2009-01-29 2010-08-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Improved lipid formulation
WO2010090762A1 (en) 2009-02-04 2010-08-12 Rxi Pharmaceuticals Corporation Rna duplexes with single stranded phosphorothioate nucleotide regions for additional functionality
WO2010090969A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydropyran nucleic acid analogs
US20110319476A1 (en) 2009-02-12 2011-12-29 Opko Curna, Llc Treatment of glial cell derived neurotrophic factor (gdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to gdnf
EP3009150B1 (en) 2009-02-12 2019-11-13 CuRNA, Inc. Treatment of brain derived neurotrophic factor (bdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to bdnf
US20120041051A1 (en) 2009-02-26 2012-02-16 Kevin Fitzgerald Compositions And Methods For Inhibiting Expression Of MIG-12 Gene
AU2010221419B2 (en) 2009-03-02 2015-10-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid chemical modifications
CA2754749C (en) 2009-03-04 2019-04-30 Opko Curna, Llc Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirt1
CA2754043A1 (en) 2009-03-12 2010-09-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
EP2408919B1 (en) 2009-03-16 2017-10-18 CuRNA, Inc. Treatment of nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (nrf2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf2
US9708604B2 (en) 2009-03-17 2017-07-18 Curna, Inc. Treatment of delta-like 1 homolog (DLK1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to DLK1
AU2010237001B2 (en) 2009-04-15 2016-07-07 Northwestern University Delivery of oligonucleotide-functionalized nanoparticles
EP3248618A1 (en) 2009-04-22 2017-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
CN102639151B (zh) 2009-05-01 2017-03-22 库尔纳公司 通过针对hbf/hbg的天然反义转录物的抑制治疗血红蛋白（hbf/hbg）相关疾病
WO2010129709A1 (en) 2009-05-05 2010-11-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid compositions
EP3504967A1 (en) 2009-05-05 2019-07-03 Arbutus Biopharma Corporation Methods of delivering oligonucleotides to immune cells
WO2010129746A2 (en) 2009-05-06 2010-11-11 Curna, Inc. Treatment of tristetraproline (ttp) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to ttp
EP2427553A4 (en) 2009-05-06 2012-11-07 Opko Curna Llc TREATMENT OF LIPID TRANSPORT AND METABOLISM-RELATED DISEASES BY INHIBITING THE NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT AGAINST A LIPID TRANSPORT AND METABOLIC TREATMENT
US20120107331A1 (en) 2009-05-15 2012-05-03 Yale University Gemm riboswitches, structure-based compound design with gemm riboswitches, and methods and compositions for use of and with gemm riboswitches
CA2762369C (en) 2009-05-18 2021-12-28 Joseph Collard Treatment of reprogramming factor related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a reprogramming factor
CN102549158B (zh) 2009-05-22 2017-09-26 库尔纳公司 通过抑制针对转录因子e3(tfe3)的天然反义转录物来治疗tfe3和胰岛素受体底物蛋白2(irs2)相关的疾病
CA2764683A1 (en) 2009-05-28 2010-12-02 Joseph Collard Treatment of antiviral gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to an antiviral gene
SMT201800499T1 (it) 2009-06-10 2018-11-09 Arbutus Biopharma Corp Formulazione lipidica migliorata
EP2443237B1 (en) 2009-06-16 2017-02-22 CuRNA, Inc. Treatment of collagen gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a collagen gene
KR101702689B1 (ko) 2009-06-16 2017-02-06 큐알엔에이, 인크. Ｐｏｎ1에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 파라옥소나제 1(ｐｏｎ1) 관련된 질환의 치료
EP2446036B1 (en) 2009-06-24 2017-03-01 CuRNA, Inc. Treatment of tumor necrosis factor receptor 2 (tnfr2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to tnfr2
CA2765815A1 (en) 2009-06-26 2010-12-29 Opko Curna, Llc Treatment of down syndrome gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a down syndrome gene
US9512164B2 (en) * 2009-07-07 2016-12-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide end caps
WO2011005860A2 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5' phosphate mimics
CN102762731B (zh) 2009-08-05 2018-06-22 库尔纳公司 通过抑制针对胰岛素基因(ins)的天然反义转录物来治疗胰岛素基因(ins)相关的疾病
EP2462153B1 (en) 2009-08-06 2015-07-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs
US9029338B2 (en) 2009-08-14 2015-05-12 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the ebola virus
US20120157324A1 (en) 2009-08-17 2012-06-21 Yale University Methylation biomarkers and methods of use
WO2011031482A2 (en) 2009-08-25 2011-03-17 Curna, Inc. Treatment of 'iq motif containing gtpase activating protein' (iqgap) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to iqgap
CA2772715C (en) 2009-09-02 2019-03-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US8962584B2 (en) 2009-10-14 2015-02-24 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. Compositions for controlling Varroa mites in bees
MX353880B (es) 2009-10-14 2018-01-31 Yissum Research Development Company Of The Hebrew Univ Of Jerusalem Ltd Star Composiciones para controlar ácaros varroa en abejas.
MX2012004617A (es) 2009-10-22 2012-05-08 Genentech Inc Metodos y composiciones para modular activacion de hepsina de proteina que estimula macrofago.
WO2011056687A2 (en) 2009-10-27 2011-05-12 Swift Biosciences, Inc. Polynucleotide primers and probes
DK2494075T3 (en) 2009-10-30 2018-07-23 Univ Northwestern TABLE-MANAGED NANOCONJUGATES
KR20120102674A (ko) 2009-11-03 2012-09-18 유니버시티 오브 버지니아 페이턴트 파운데이션 중합체 분석물을 검출하는 다용도의 가시적인 방법
WO2011058555A1 (en) 2009-11-12 2011-05-19 Yeda Research And Development Co. Ltd. A method of editing dna in a cell and constructs capable of same
AU2010319314C1 (en) 2009-11-13 2016-09-01 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense antiviral compound and method for treating influenza viral infection
EP2504450B1 (en) 2009-11-23 2016-07-06 Swift Biosciences, Inc. Devices to extend single stranded target molecules
AU2010324686B2 (en) 2009-11-30 2016-05-19 Genentech, Inc. Antibodies for treating and diagnosing tumors expressing SLC34A2 (TAT211 = SEQID2 )
EP2513310B1 (en) 2009-12-16 2017-11-01 CuRNA, Inc. Treatment of membrane bound transcription factor peptidase, site 1 (mbtps1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to mbtps1
ES2661387T3 (es) 2009-12-23 2018-03-28 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con el factor de crecimiento de hepatocitos (hgf) mediante inhibición del transcrito antisentido natural a hgf
EP2515947B1 (en) 2009-12-23 2021-10-06 CuRNA, Inc. Treatment of uncoupling protein 2 (ucp2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to ucp2
EP2519633B1 (en) 2009-12-29 2017-10-25 CuRNA, Inc. Treatment of nuclear respiratory factor 1 (nrf1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf1
JP5982288B2 (ja) 2009-12-29 2016-08-31 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド 腫瘍タンパク質６３（ｐ６３）に対する天然アンチセンス転写物の阻害による腫瘍タンパク質６３関連疾患の治療
JP5886757B2 (ja) 2010-01-04 2016-03-16 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド インターフェロン調節因子８（ｉｒｆ８）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるインターフェロン調節因子８（ｉｒｆ８）関連疾患の治療
KR101853509B1 (ko) 2010-01-06 2018-04-30 큐알엔에이, 인크. 췌장 발달 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 췌장 발달 유전자와 관련된 질환의 치료
DK2524039T3 (en) 2010-01-11 2018-03-12 Curna Inc TREATMENT OF GENDER HORMON-BINDING GLOBULIN (SHBG) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENCE TRANSCRIPTS TO SHBG
WO2011085102A1 (en) 2010-01-11 2011-07-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US20120321647A1 (en) 2010-01-12 2012-12-20 Yale University Structured rna motifs and compounds and methods for their use
RU2611192C2 (ru) 2010-01-25 2017-02-21 Курна, Инк. ЛЕЧЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С РНКазой Н1, ПУТЕМ ИНГИБИРОВАНИЯ ПРИРОДНОГО АНТИСМЫСЛОВОГО ТРАНСКРИПТА К РНКазе Н1
CA2824843A1 (en) 2010-02-04 2011-08-11 Ico Therapeutics Inc. Dosing regimens for treating and preventing ocular disorders using c-raf antisense
EP2539452B1 (en) 2010-02-22 2016-07-27 CuRNA, Inc. Treatment of pyrroline-5-carboxylate reductase 1 (pycr1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to pycr1
PE20130214A1 (es) 2010-02-23 2013-03-11 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores
WO2011105901A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof
WO2011105902A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof
WO2011105900A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof
WO2011112516A1 (en) 2010-03-08 2011-09-15 Ico Therapeutics Inc. Treating and preventing hepatitis c virus infection using c-raf kinase antisense oligonucleotides
BR112012022570A2 (pt) 2010-03-08 2015-10-06 Monsato Technology Llc moléculas de polinucleotídeo para regulação de gene em plantas.
WO2011112732A2 (en) 2010-03-12 2011-09-15 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Methods of treating vascular inflammatory disorders
US9068185B2 (en) 2010-03-12 2015-06-30 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of nuclear hormone receptors
US20130101512A1 (en) 2010-03-12 2013-04-25 Chad A. Mirkin Crosslinked polynucleotide structure
US9193752B2 (en) 2010-03-17 2015-11-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5′-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8889350B2 (en) 2010-03-26 2014-11-18 Swift Biosciences, Inc. Methods and compositions for isolating polynucleotides
WO2011123468A1 (en) 2010-03-29 2011-10-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Sirna therapy for transthyretin (ttr) related ocular amyloidosis
US9102938B2 (en) 2010-04-01 2015-08-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 2′ and 5′ modified monomers and oligonucleotides
JP2013523162A (ja) 2010-04-06 2013-06-17 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｃｄ２７４／ｐｄ−ｌ１遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法
TWI644675B (zh) 2010-04-09 2018-12-21 可娜公司 藉由抑制纖維母細胞生長因子２１（ｆｇｆ２１）之天然反義轉錄物以治療ｆｇｆ２１相關疾病
US20110269194A1 (en) 2010-04-20 2011-11-03 Swift Biosciences, Inc. Materials and methods for nucleic acid fractionation by solid phase entrapment and enzyme-mediated detachment
WO2011133871A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5'-end derivatives
CN103154014B (zh) 2010-04-28 2015-03-25 Isis制药公司 修饰核苷、其类似物以及由它们制备的寡聚化合物
EP2625186B1 (en) 2010-04-28 2016-07-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
LT2563920T (lt) 2010-04-29 2017-05-25 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Transtiretino raiškos moduliavimas
PE20130460A1 (es) 2010-05-03 2013-04-26 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores
KR101936011B1 (ko) 2010-05-03 2019-01-07 큐알엔에이, 인크. 시르투인 (sirt)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 시르투인 (sirt) 관련된 질환의 치료
CA3090304A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of interleukins 17 and 23 signaling
TWI531370B (zh) 2010-05-14 2016-05-01 可娜公司 藉由抑制ｐａｒ４天然反股轉錄本治療ｐａｒ４相關疾病
KR101857090B1 (ko) 2010-05-26 2018-06-26 큐알엔에이, 인크. 무조(無調)의 동소체 1 (atoh1)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 atoh1 관련된 질환의 치료
WO2011150226A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Landers James P Method for detecting nucleic acids based on aggregate formation
US9944671B2 (en) 2010-06-02 2018-04-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods directed to treating liver fibrosis
WO2011156278A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8846637B2 (en) 2010-06-08 2014-09-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2′-amino and 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2011156713A1 (en) 2010-06-11 2011-12-15 Vanderbilt University Multiplexed interferometric detection system and method
WO2011163466A1 (en) 2010-06-23 2011-12-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Regulation of skin pigmentation by neuregulin-1 (nrg-1)
CN103068399A (zh) 2010-06-30 2013-04-24 卡姆普根有限公司 用于治疗多发性硬化、类风湿性关节炎以及其他自身免疫病症的c1orf32
WO2012021554A1 (en) 2010-08-09 2012-02-16 Yale University Cyclic di-gmp-ii riboswitches, motifs, and compounds, and methods for their use
US20130210901A1 (en) 2010-09-20 2013-08-15 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Method of treating neurodegenerative diseases
AU2011312205B2 (en) 2010-10-05 2015-08-13 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US8993533B2 (en) 2010-10-06 2015-03-31 Curna, Inc. Treatment of sialidase 4 (NEU4) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to NEU4
WO2012048113A2 (en) 2010-10-07 2012-04-12 The General Hospital Corporation Biomarkers of cancer
EP2627766B1 (en) 2010-10-17 2016-05-25 Yeda Research and Development Co. Ltd. Methods and compositions for the treatment of insulin-associated medical conditions
US9222088B2 (en) 2010-10-22 2015-12-29 Curna, Inc. Treatment of alpha-L-iduronidase (IDUA) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to IDUA
CN103201387B (zh) 2010-10-27 2018-02-02 库尔纳公司 通过抑制干扰素相关发育调节因子1(ifrd1)的天然反义转录物而治疗ifrd1相关疾病
JP2012111933A (ja) * 2010-11-02 2012-06-14 Nitto Denko Corp 熱可塑性シリコーン樹脂
CN110123830A (zh) 2010-11-09 2019-08-16 阿尔尼拉姆医药品有限公司 用于抑制Eg5和VEGF基因的表达的脂质配制的组合物和方法
EP3260540A1 (en) 2010-11-12 2017-12-27 The General Hospital Corporation Polycomb-associated non-coding rnas
AU2011329777B2 (en) 2010-11-17 2016-06-09 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of alpha synuclein expression
KR102010598B1 (ko) 2010-11-23 2019-08-13 큐알엔에이, 인크. Nanog에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 nanog 관련된 질환의 치료
US9150926B2 (en) 2010-12-06 2015-10-06 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Diagnosis and treatment of adrenocortical tumors using human microRNA-483
US9127275B2 (en) 2010-12-10 2015-09-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of klf-1 and bcl11a genes
EP2649182A4 (en) 2010-12-10 2015-05-06 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for increasing erythropoietin (epo) production
WO2012097261A2 (en) 2011-01-14 2012-07-19 The General Hospital Corporation Methods targeting mir-128 for regulating cholesterol/lipid metabolism
WO2012106509A1 (en) 2011-02-02 2012-08-09 The Trustees Of Princeton University Sirtuin modulators as virus production modulators
US9173894B2 (en) 2011-02-02 2015-11-03 Excaliard Pharamaceuticals, Inc. Method of treating keloids or hypertrophic scars using antisense compounds targeting connective tissue growth factor (CTGF)
US9562853B2 (en) 2011-02-22 2017-02-07 Vanderbilt University Nonaqueous backscattering interferometric methods
US9175290B2 (en) 2011-03-29 2015-11-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of TMPRSS6 gene
JP2014511694A (ja) 2011-04-03 2014-05-19 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション ドゥーイング ビジネス アズ マサチューセッツ ジェネラル ホスピタル 修飾型ｒｎａ（ｍｏｄ−ｒｎａ）を使用する効率的なインビボタンパク質発現
NZ713461A (en) 2011-04-15 2017-02-24 Compugen Ltd Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof for treatment of immune related disorders and cancer
US20140186844A1 (en) 2011-04-26 2014-07-03 Swift Biosciences, Inc. Polynucleotide primers and probes
WO2012151268A1 (en) 2011-05-02 2012-11-08 University Of Virginia Patent Foundation Method and system for high throughput optical and label free detection of analytes
WO2012151289A2 (en) 2011-05-02 2012-11-08 University Of Virginia Patent Foundation Method and system to detect aggregate formation on a substrate
RU2620980C2 (ru) 2011-06-09 2017-05-30 Курна, Инк. Лечение заболеваний, связанных с фратаксином (fxn), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта fxn
WO2012170347A1 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP3388068A1 (en) 2011-06-21 2018-10-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods for inhibition of expression of protein c (proc) genes
US9315813B2 (en) 2011-06-21 2016-04-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc Compositions and methods for inhibition of expression of apolipoprotein C-III (APOC3) genes
EP4092120A1 (en) 2011-06-21 2022-11-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Angiopoietin-like 3 (anglptl3) irna compositions and methods of use thereof
US20140235693A1 (en) 2011-06-23 2014-08-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serpina1 sirnas: compositions of matter and methods of treatment
WO2013001517A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Compugen Ltd. Polypeptides and uses thereof for treatment of autoimmune disorders and infection
WO2013019857A2 (en) 2011-08-01 2013-02-07 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Method for improving the success rate of hematopoietic stem cell transplants
CN104039960B (zh) 2011-08-04 2017-05-10 耶达研究及发展有限公司 用于治疗和诊断与五羟色胺‑、肾上腺素‑、去甲肾上腺素‑、谷氨酸‑和促肾上腺皮质素释放激素相关的病症的微rna和包含微rna的组合物
CA2848695A1 (en) 2011-09-13 2013-03-21 Monsanto Technology Llc Methods and composition for weed control comprising inhibiting ppg oxidase
CA2848680C (en) 2011-09-13 2020-05-19 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
CN103957697B (zh) 2011-09-13 2017-10-24 孟山都技术公司 用于杂草控制的方法和组合物
WO2013040057A1 (en) 2011-09-13 2013-03-21 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US10760086B2 (en) 2011-09-13 2020-09-01 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US10806146B2 (en) 2011-09-13 2020-10-20 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US10829828B2 (en) 2011-09-13 2020-11-10 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US9840715B1 (en) 2011-09-13 2017-12-12 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for delaying senescence and improving disease tolerance and yield in plants
EP3533873A1 (en) 2011-09-14 2019-09-04 Translate Bio MA, Inc. Multimeric oligonucleotide compounds
US9920326B1 (en) 2011-09-14 2018-03-20 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for increasing invertase activity in plants
WO2013040499A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Northwestern University Nanoconjugates able to cross the blood-brain barrier
US9580713B2 (en) 2011-09-17 2017-02-28 Yale University Fluoride-responsive riboswitches, fluoride transporters, and methods of use
EP2766482B1 (en) 2011-10-11 2016-12-07 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Micrornas in neurodegenerative disorders
KR102102862B1 (ko) 2011-10-14 2020-04-22 제넨테크, 인크. 항-HtrA1 항체 및 사용 방법
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
US9145559B2 (en) 2011-10-27 2015-09-29 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of treating cancer
CA2895077A1 (en) 2011-12-12 2013-06-20 Beverly Packard In vivo delivery of oligonucleotides
WO2013106358A1 (en) 2012-01-10 2013-07-18 Hussain M Mahmood Method of treating hyperlipidemia and atherosclerosis with mir-30c
CA2848985A1 (en) 2012-02-01 2013-08-08 Compugen Ltd. C10rf32 antibodies, and uses thereof for treatment of cancer
US10047345B2 (en) 2012-02-13 2018-08-14 Gamida-Cell Ltd. Culturing of mesenchymal stem cells with FGF4 and nicotinamide
EP3401393B1 (en) 2012-02-22 2020-02-19 Exostem Biotec Ltd Micrornas for the generation of astrocytes
EP2844745A2 (en) 2012-02-22 2015-03-11 Brainstem Biotec Ltd. Generation of neural stem cells and motor neurons
SG11201405669XA (en) 2012-03-13 2014-10-30 Swift Biosciences Inc Methods and compositions for size-controlled homopolymer tailing of substrate polynucleotides by a nucleic acid polymerase
JP2015511494A (ja) 2012-03-15 2015-04-20 キュアナ，インク． 脳由来神経栄養因子（ｂｄｎｆ）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるｂｄｎｆ関連の疾患の処置
EP2639238A1 (en) 2012-03-15 2013-09-18 Universität Bern Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2013154799A1 (en) 2012-04-09 2013-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2013154798A1 (en) 2012-04-09 2013-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleic acid analogs
US9133461B2 (en) 2012-04-10 2015-09-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene
WO2013159091A2 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Aptamir Therapeutics, Inc. Mirna modulators of thermogenesis
US9127274B2 (en) 2012-04-26 2015-09-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serpinc1 iRNA compositions and methods of use thereof
WO2013163628A2 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Duke University Genetic correction of mutated genes
US9273949B2 (en) 2012-05-11 2016-03-01 Vanderbilt University Backscattering interferometric methods
CA2873794A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rana Therapeutics Inc. Compositions and methods for modulating smn gene family expression
US20150133362A1 (en) 2012-05-16 2015-05-14 Rana Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating gene expression
UY34822A (es) 2012-05-24 2013-12-31 Seeds Ltd Ab Composiciones y métodos para silenciar la expresión genética
WO2013184209A1 (en) 2012-06-04 2013-12-12 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Mif for use in methods of treating subjects with a neurodegenerative disorder
US20140038182A1 (en) 2012-07-17 2014-02-06 Dna Logix, Inc. Cooperative primers, probes, and applications thereof
US9175266B2 (en) 2012-07-23 2015-11-03 Gamida Cell Ltd. Enhancement of natural killer (NK) cell proliferation and activity
US9567569B2 (en) 2012-07-23 2017-02-14 Gamida Cell Ltd. Methods of culturing and expanding mesenchymal stem cells
WO2014022852A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Aptamir Therapeutics, Inc. Cell-specific delivery of mirna modulators for the treatment of obesity and related disorders
US9403865B2 (en) 2012-08-15 2016-08-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method of preparing oligomeric compounds using modified capping protocols
HK1208682A1 (en) 2012-08-20 2016-03-11 The Regents Of The University Of California Polynucleotides having bioreversible groups
US9029335B2 (en) 2012-10-16 2015-05-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
BR112015008706A2 (pt) 2012-10-18 2018-02-06 Monsanto Technology Llc métodos e composições para controle de praga de plantas
EP4223770A3 (en) 2012-11-05 2023-10-18 Foundation Medicine, Inc. Novel fusion molecules and uses thereof
HK1214830A1 (zh) 2012-11-05 2016-08-05 Foundation Medicine, Inc. 新型ntrk1融合分子及其应用
US10683505B2 (en) 2013-01-01 2020-06-16 Monsanto Technology Llc Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression
CN105358695B (zh) 2013-01-01 2019-07-12 A.B.种子有限公司 将dsRNA引入植物种子以调节基因表达的方法
AU2014207342C1 (en) 2013-01-18 2019-04-04 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
US10000767B2 (en) 2013-01-28 2018-06-19 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for plant pest control
WO2014120861A2 (en) 2013-01-31 2014-08-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Method of preparing oligomeric compounds using modified coupling protocols
US20150366890A1 (en) 2013-02-25 2015-12-24 Trustees Of Boston University Compositions and methods for treating fungal infections
UA123082C2 (uk) 2013-03-13 2021-02-17 Монсанто Текнолоджи Ллс Спосіб та гербіцидна композиція для боротьби з видами рослин роду sorghum
US10612019B2 (en) 2013-03-13 2020-04-07 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
WO2014160129A2 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof
US10066269B2 (en) 2013-03-14 2018-09-04 Andes Biotechnologies Global, Inc. Methods for detecting and treating multiple myeloma
US20140283211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Monsanto Technology Llc Methods and Compositions for Plant Pest Control
EP2970970B1 (en) 2013-03-14 2018-12-12 Andes Biotechnologies Global, Inc. Antisense oligonucleotides for treatment of cancer stem cells
US10568328B2 (en) 2013-03-15 2020-02-25 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US9828582B2 (en) 2013-03-19 2017-11-28 Duke University Compositions and methods for the induction and tuning of gene expression
EP4286517A3 (en) 2013-04-04 2024-03-13 President and Fellows of Harvard College Therapeutic uses of genome editing with crispr/cas systems
KR20160002977A (ko) 2013-05-01 2016-01-08 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 조성물 및 방법
PT2999785T (pt) 2013-05-22 2018-07-09 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de irna de serpina1 e métodos de uso das mesmas
AU2014268529C1 (en) 2013-05-22 2020-10-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. TMPRSS6 iRNA compositions and methods of use thereof
EP3004396B1 (en) 2013-06-06 2019-10-16 The General Hospital Corporation Compositions for the treatment of cancer
ES2862125T3 (es) 2013-06-13 2021-10-07 Antisense Therapeutics Ltd Terapia combinada para acromegalia
US9850496B2 (en) 2013-07-19 2017-12-26 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling Leptinotarsa
JP6668236B2 (ja) 2013-07-19 2020-03-18 モンサント テクノロジー エルエルシー Ｌｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａ防除用組成物及びその方法
EP3024936B1 (en) 2013-07-25 2019-09-04 Exicure, Inc. Spherical nucleic acid-based constructs as immunostimulatory agents for prophylactic and therapeutic use
LT3041854T (lt) 2013-08-08 2020-03-25 The Scripps Research Institute Nukleorūgščių specifinės vietos žymėjimo fermentais in vitro būdas, įvedant nenatūralius nukleotidus
EP3052626A1 (en) 2013-10-02 2016-08-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the lect2 gene
JP6613227B2 (ja) 2013-10-04 2019-11-27 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ａｌａｓ１遺伝子の発現を阻害する組成物および方法
EP3055426B1 (en) 2013-10-09 2019-06-19 The United States of America as represented by The Secretary Department of Health and Human Services Detection of hepatitis delta virus (hdv) for the diagnosis and treatment of sjögren's syndrome and lymphoma
US11162096B2 (en) 2013-10-14 2021-11-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc Methods for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
US10053692B2 (en) 2013-10-21 2018-08-21 The General Hospital Corporation Methods relating to circulating tumor cell clusters and the treatment of cancer
US9758546B2 (en) 2013-10-21 2017-09-12 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds
WO2015066681A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling arthropod parasite and pest infestations
US10301622B2 (en) 2013-11-04 2019-05-28 Northwestern University Quantification and spatio-temporal tracking of a target using a spherical nucleic acid (SNA)
EP3068440B1 (en) 2013-11-15 2020-01-08 Northwestern University Inhibition of oxidative stress in atrial fibrillation
MX389323B (es) 2013-12-03 2025-03-20 Univ Northwestern Particulas liposomales, metodos para elaborarlas y sus usos.
CA2844640A1 (en) 2013-12-06 2015-06-06 The University Of British Columbia Method for treatment of castration-resistant prostate cancer
WO2015085183A2 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Swift Biosciences, Inc. Cleavable competitor polynucleotides
AU2014363988B2 (en) 2013-12-09 2020-06-11 Baylor College Of Medicine Hippo and dystrophin complex signaling in cardiomyocyte renewal
UA119253C2 (uk) 2013-12-10 2019-05-27 Біолоджикс, Інк. Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл
WO2015089368A2 (en) 2013-12-12 2015-06-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component irna compositions and methods of use thereof
CN106456694B (zh) 2013-12-20 2020-06-30 通用医疗公司 与循环肿瘤细胞相关的方法和测定法
AR099092A1 (es) 2014-01-15 2016-06-29 Monsanto Technology Llc Métodos y composiciones para el control de malezas utilizando polinucleótidos epsps
EP3102197B1 (en) 2014-02-04 2018-08-29 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
CN111733231A (zh) 2014-02-05 2020-10-02 耶达研究及发展有限公司 用于治疗和诊断的微rna和包含所述微rna的组合物
CN118845818A (zh) 2014-02-11 2024-10-29 阿尔尼拉姆医药品有限公司 己酮糖激酶（KHK）iRNA组合物及其使用方法
WO2015142910A1 (en) 2014-03-17 2015-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic carbocyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP3978610A3 (en) 2014-03-19 2022-08-24 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating ataxin 2 expression
WO2015143245A1 (en) 2014-03-19 2015-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating ataxin 2 expression
SI3126499T1 (sl) 2014-04-01 2020-09-30 Biogen Ma Inc. Sestave za moduliranje izražanja SOD-1
CN106413390B (zh) 2014-04-01 2019-09-27 孟山都技术公司 用于控制虫害的组合物和方法
TWI638047B (zh) 2014-04-09 2018-10-11 史基普研究協會 藉由核酸三磷酸酯轉運子將非天然或經修飾的核苷三磷酸酯輸入至細胞中
US10221416B2 (en) 2014-04-24 2019-03-05 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid
EP3811977B1 (en) 2014-05-01 2025-12-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method for synthesis of reactive conjugate clusters
CN110724687B (zh) 2014-05-01 2023-10-13 Ionis制药公司 用于调节补体因子b表达的组合物和方法
TW201607559A (zh) 2014-05-12 2016-03-01 阿尼拉製藥公司 治療ｓｅｒｐｉｎｃ１相關疾患之方法和組成物
CN112852809A (zh) 2014-05-22 2021-05-28 阿尔尼拉姆医药品有限公司 血管紧张素原(AGT)iRNA组合物及其使用方法
KR20170031668A (ko) 2014-06-02 2017-03-21 칠드런'즈 메디컬 센터 코포레이션 면역 조절을 위한 방법 및 조성물
CA2953216C (en) 2014-06-04 2020-12-22 Exicure, Inc. Multivalent delivery of immune modulators by liposomal spherical nucleic acids for prophylactic or therapeutic applications
HRP20220379T1 (hr) 2014-06-10 2022-05-27 Erasmus University Medical Center Rotterdam Antisense oligonukleotidi korisni u liječenju pompeove bolesti
US10988764B2 (en) 2014-06-23 2021-04-27 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for regulating gene expression via RNA interference
EP3760208B1 (en) 2014-06-25 2024-05-29 The General Hospital Corporation Targeting human satellite ii (hsatii)
WO2015200539A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression
CA2951984C (en) 2014-07-15 2023-10-03 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Isolated polypeptides of cd44 and uses thereof
US9951327B1 (en) 2014-07-17 2018-04-24 Integrated Dna Technologies, Inc. Efficient and rapid method for assembling and cloning double-stranded DNA fragments
US10378012B2 (en) 2014-07-29 2019-08-13 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling insect pests
USRE50320E1 (en) 2014-07-31 2025-03-04 Uab Research Foundation APOE mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol
CN106794256B (zh) 2014-08-19 2021-04-30 西北大学 蛋白质/寡核苷酸核-壳纳米颗粒治疗剂
WO2016030899A1 (en) 2014-08-28 2016-03-03 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of treating amyotrophic lateral scleroses
JP2017526367A (ja) 2014-08-29 2017-09-14 チルドレンズ メディカル センター コーポレーション 癌の処置のための方法および組成物
EP4137138A1 (en) 2014-08-29 2023-02-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating transthyretin (ttr) mediated amyloidosis
WO2016033424A1 (en) 2014-08-29 2016-03-03 Genzyme Corporation Methods for the prevention and treatment of major adverse cardiovascular events using compounds that modulate apolipoprotein b
EP3191591A1 (en) 2014-09-12 2017-07-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting complement component c5 and methods of use thereof
WO2016040748A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for detection of smn protein in a subject and treatment of a subject
EP3663403A1 (en) 2014-09-26 2020-06-10 University of Massachusetts Rna-modulating agents
JOP20200115A1 (ar) 2014-10-10 2017-06-16 Alnylam Pharmaceuticals Inc تركيبات وطرق لتثبيط التعبير الجيني عن hao1 (حمض أوكسيداز هيدروكسيلي 1 (أوكسيداز جليكولات))
WO2016061487A1 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting aminolevulinic acid synthase-1 (alas1) and uses thereof
EP3904519A1 (en) 2014-10-30 2021-11-03 Genzyme Corporation Polynucleotide agents targeting serpinc1 (at3) and methods of use thereof
JOP20200092A1 (ar) 2014-11-10 2017-06-16 Alnylam Pharmaceuticals Inc تركيبات iRNA لفيروس الكبد B (HBV) وطرق لاستخدامها
JP2017535552A (ja) 2014-11-17 2017-11-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． アポリポタンパク質Ｃ３（ＡＰＯＣ３）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
AU2015349680A1 (en) 2014-11-21 2017-06-08 Northwestern University The sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates
CN107532162A (zh) 2014-12-12 2018-01-02 托德·M·伍尔夫 用于利用寡核苷酸编辑细胞中核酸的组合物和方法
US9688707B2 (en) 2014-12-30 2017-06-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2016112132A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript
US10538763B2 (en) 2015-01-16 2020-01-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulation of DUX4
JP6942632B2 (ja) 2015-01-22 2021-09-29 モンサント テクノロジー エルエルシー Ｌｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａ防除用組成物及びその方法
EP3247988A4 (en) 2015-01-23 2018-12-19 Vanderbilt University A robust interferometer and methods of using same
US10676726B2 (en) 2015-02-09 2020-06-09 Duke University Compositions and methods for epigenome editing
CA2976445A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof
WO2016134293A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Baylor College Of Medicine p63 INACTIVATION FOR THE TREATMENT OF HEART FAILURE
US10450342B2 (en) 2015-02-23 2019-10-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds
WO2016135559A2 (en) 2015-02-23 2016-09-01 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of human genetic diseases including hemoglobinopathies
US11129844B2 (en) 2015-03-03 2021-09-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating MECP2 expression
US10781445B2 (en) 2015-03-11 2020-09-22 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Decoy oligonucleotides for the treatment of diseases
CA2981068C (en) 2015-03-26 2021-12-14 Women & Infants Hospital Of Rhode Island Therapy for malignant disease comprising the inhibition of human epididymal secretory protein e4 and immune checkpoint inhibitors
EP3273971A4 (en) 2015-03-27 2018-12-05 Yeda Research and Development Co. Ltd. Methods of treating motor neuron diseases
EP4269601A3 (en) 2015-03-27 2024-01-10 President and Fellows of Harvard College Modified t cells and methods of making and using the same
EP3283502A4 (en) 2015-04-07 2019-04-03 The General Hospital Corporation METHOD FOR REACTIVATING GENES ON THE INACTIVE X-CHROMOSOME
WO2016164746A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the lect2 gene
WO2016167780A1 (en) 2015-04-16 2016-10-20 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript
BR112017023754B1 (pt) 2015-05-04 2022-08-09 Beeologics, Inc. Composições inseticidas, e uso de um ácido nucleico
CA2984512A1 (en) 2015-05-06 2016-11-10 Benitec Biopharma Limited Reagents for treatment of hepatitis b virus (hbv) infection and use thereof
EP3294280A1 (en) 2015-05-11 2018-03-21 Yeda Research and Development Co., Ltd. Citrin inhibitors for the treatment of cancer
WO2016196738A1 (en) 2015-06-02 2016-12-08 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant
EP3302030A4 (en) 2015-06-03 2019-04-24 Monsanto Technology LLC METHOD AND COMPOSITIONS FOR INTRODUCING NUCLEIC ACIDS IN PLANTS
WO2016201301A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof
WO2016205323A1 (en) 2015-06-18 2016-12-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotde agents targeting hydroxyacid oxidase (glycolate oxidase, hao1) and methods of use thereof
US20180188257A1 (en) 2015-06-19 2018-07-05 University Of Rochester Septin proteins as novel biomarkers for detection and treatment of müllerian cancers
WO2016209862A1 (en) 2015-06-23 2016-12-29 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Glucokinase (gck) irna compositions and methods of use thereof
AU2016282986A1 (en) 2015-06-26 2018-02-01 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Cancer therapy targeting tetraspanin 33 (tspan33) in myeloid derived suppressor cells
IL318703A (en) 2015-06-29 2025-03-01 Caris Science Inc Therapeutic oligonucleotides
US10494632B2 (en) 2015-07-10 2019-12-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Insulin-like growth factor binding protein, acid labile subunit (IGFALS) compositions and methods of use thereof
AU2016298317B2 (en) 2015-07-28 2021-02-18 Caris Science, Inc. Targeted oligonucleotides
ES2965461T3 (es) 2015-08-03 2024-04-15 Biokine Therapeutics Ltd Inhibidor de CXCR4 para el tratamiento del cáncer
WO2017021961A1 (en) 2015-08-04 2017-02-09 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of screening for riboswitches and attenuators
CN114525280A (zh) 2015-09-02 2022-05-24 阿尔尼拉姆医药品有限公司 程序性细胞死亡1配体1（PD-L1）的iRNA组合物及其使用方法
AU2016339053A1 (en) 2015-09-24 2018-04-12 Crispr Therapeutics Ag Novel family of RNA-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications
WO2017053781A1 (en) 2015-09-25 2017-03-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating ataxin 3 expression
WO2017066497A2 (en) 2015-10-13 2017-04-20 Duke University Genome engineering with type i crispr systems in eukaryotic cells
AU2016344609B2 (en) 2015-10-28 2022-05-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Materials and methods for treatment of duchenne muscular dystrophy
WO2017075212A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Genentech, Inc. Anti-htra1 antibodies and methods of use thereof
EP3370734B1 (en) 2015-11-05 2023-01-04 Children's Hospital Los Angeles Antisense oligo for use in treating acute myeloid leukemia
CN109328231A (zh) 2015-11-06 2019-02-12 克里斯普治疗股份公司 用于治疗1a型糖原贮积病的材料和方法
US11174484B2 (en) 2015-11-10 2021-11-16 B. G. Negev Technologies And Applications Ltd., At Ben- Gurion University Means and methods for reducing tumorigenicity of cancer stem cells
US11001622B2 (en) 2015-11-19 2021-05-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Method of treating autoimmune disease with lymphocyte antigen CD5-like (CD5L) protein
CN109072235B (zh) 2015-11-23 2023-02-28 加利福尼亚大学董事会 通过核递送crispr/cas9追踪并操纵细胞rna
KR20250044471A (ko) 2015-11-30 2025-03-31 듀크 유니버시티 유전자 편집에 의한 인간 디스트로핀 유전자의 교정을 위한 치료용 표적 및 사용 방법
WO2017093804A2 (en) 2015-12-01 2017-06-08 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of alpha-1 antitrypsin deficiency
US11058709B1 (en) 2015-12-04 2021-07-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating breast cancer
KR20180095843A (ko) 2015-12-07 2018-08-28 젠자임 코포레이션 Serpinc1-연관 장애의 치료를 위한 방법 및 조성물
EP3387127A1 (en) 2015-12-07 2018-10-17 Erasmus University Medical Center Rotterdam Enzymatic replacement therapy and antisense therapy for pompe disease
WO2017106767A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 The Scripps Research Institute Production of unnatural nucleotides using a crispr/cas9 system
AU2016376191A1 (en) 2015-12-23 2018-07-12 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis and/or frontal temporal lobular degeneration
WO2017117496A1 (en) 2015-12-31 2017-07-06 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing ataxin-2 expression
EP3400300A4 (en) 2016-01-05 2019-08-07 Ionis Pharmaceuticals, Inc. PROCESS FOR REDUCING LRRK2 EXPRESSION
US10627396B2 (en) 2016-01-29 2020-04-21 Vanderbilt University Free-solution response function interferometry
US20190038771A1 (en) 2016-02-02 2019-02-07 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome
JP2019509721A (ja) 2016-02-04 2019-04-11 キュリス，インコーポレイテッド 突然変異体スムースンド及びその使用方法
WO2017141109A1 (en) 2016-02-18 2017-08-24 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome
PT3419665T (pt) 2016-02-25 2025-01-06 Brigham & Womens Hospital Inc Métodos de tratamento para a fibrose dirigida ao smoc2
WO2017152182A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Rhode Island Hospital Targeting microrna for cancer treatment
US10961271B2 (en) 2016-03-16 2021-03-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods of modulating KEAP1
US11083799B2 (en) 2016-03-16 2021-08-10 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hereditary haemochromatosis
US10577607B2 (en) 2016-03-16 2020-03-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of DYRK1B expression
EP3430137A4 (en) 2016-03-18 2019-11-06 Caris Science, Inc. OLIGONUCLEOTIDE THONES AND USES THEREOF
WO2017180915A2 (en) 2016-04-13 2017-10-19 Duke University Crispr/cas9-based repressors for silencing gene targets in vivo and methods of use
MX2018012545A (es) 2016-04-14 2019-06-10 Benitec Biopharma Ltd Reactivos para el tratamiento de distrofia muscular oculofaríngea (opmd) y su uso.
ES2979222T3 (es) 2016-04-18 2024-09-24 Vertex Pharma Materiales y métodos para el tratamiento de hemoglobinopatías
MA45295A (fr) 2016-04-19 2019-02-27 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composition d'arni de protéine de liaison de lipoprotéines haute densité (hdlbp/vigiline) et procédés pour les utiliser
WO2017191503A1 (en) 2016-05-05 2017-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies
EP3464597B1 (en) 2016-05-25 2022-08-03 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probe selection method and uses thereof
WO2017214518A1 (en) 2016-06-10 2017-12-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. COMPLETMENT COMPONENT C5 iRNA COMPOSTIONS AND METHODS OF USE THEREOF FOR TREATING PAROXYSMAL NOCTURNAL HEMOGLOBINURIA (PNH)
AU2017286811A1 (en) 2016-06-17 2018-11-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of gys1 expression
HUE060123T2 (hu) 2016-06-24 2023-01-28 Scripps Research Inst Új nukleozid-trifoszfát-transzporter és alkalmazásai
US11427838B2 (en) 2016-06-29 2022-08-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Materials and methods for treatment of myotonic dystrophy type 1 (DM1) and other related disorders
EP3478313B1 (en) 2016-06-29 2022-05-04 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) and other related disorders
EP3478828B1 (en) 2016-06-29 2024-09-04 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of friedreich ataxia and other related disorders
CA3029141A1 (en) 2016-07-06 2018-01-11 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of pain related disorders
DK3481856T3 (da) 2016-07-06 2025-11-10 Vertex Pharma Materialer og metoder til behandling af smerterelaterede lidelser
WO2018007871A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of transthyretin amyloidosis
US11253601B2 (en) 2016-07-11 2022-02-22 Translate Bio Ma, Inc. Nucleic acid conjugates and uses thereof
JP7490211B2 (ja) 2016-07-19 2024-05-27 デューク ユニバーシティ Ｃｐｆ１に基づくゲノム編集の治療適用
KR20190031306A (ko) 2016-07-21 2019-03-25 맥스시티 인코포레이티드 게놈 dna를 변경하기 위한 방법 및 조성물
WO2018020323A2 (en) 2016-07-25 2018-02-01 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of fatty acid disorders
NL2017294B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Natural cryptic exon removal by pairs of antisense oligonucleotides.
NL2017295B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Antisense oligomeric compound for Pompe disease
US11364304B2 (en) 2016-08-25 2022-06-21 Northwestern University Crosslinked micellar spherical nucleic acids
PL3506909T3 (pl) 2016-09-02 2022-09-12 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Analogi 4’- fosforanu i zawierające je oligonukleotydy
WO2018067900A1 (en) 2016-10-06 2018-04-12 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method of conjugating oligomeric compounds
WO2018081817A2 (en) 2016-10-31 2018-05-03 University Of Massachusetts Targeting microrna-101-3p in cancer therapy
JOP20190104A1 (ar) 2016-11-10 2019-05-07 Ionis Pharmaceuticals Inc مركبات وطرق لتقليل التعبير عن atxn3
TW202313978A (zh) 2016-11-23 2023-04-01 美商阿尼拉製藥公司 絲胺酸蛋白酶抑制因子Ａ１ ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
EP3330276A1 (en) 2016-11-30 2018-06-06 Universität Bern Novel bicyclic nucleosides and oligomers prepared therefrom
EP3548620A4 (en) 2016-12-02 2020-07-22 Cold Spring Harbor Laboratory MODULATION OF THE EXPRESSION OF LNC05
JP7206214B2 (ja) 2016-12-13 2023-01-17 シアトル チルドレンズ ホスピタル （ディービーエイ シアトル チルドレンズ リサーチ インスティテュート） インビトロ及びインビボで操作された細胞において発現された化学誘導シグナル伝達複合体の外因性薬物活性化の方法
TWI790217B (zh) 2016-12-16 2023-01-21 美商阿尼拉製藥公司 使用甲狀腺素運載蛋白（ＴＴＲ）ｉＲＮＡ組成物於治療或預防ＴＴＲ相關疾病之方法
SG11201906735RA (en) 2017-01-23 2019-08-27 Regeneron Pharma Hydroxysteroid 17-beta dehydrogenase 13 (hsd17b13) variants and uses thereof
EP3585898A1 (en) 2017-02-22 2020-01-01 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 1 (sca1) and other spinocerebellar ataxia type 1 protein (atxn1) gene related conditions or disorders
US20200040061A1 (en) 2017-02-22 2020-02-06 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of early onset parkinson's disease (park1) and other synuclein, alpha (snca) gene related conditions or disorders
US11407997B2 (en) 2017-02-22 2022-08-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of primary hyperoxaluria type 1 (PH1) and other alanine-glyoxylate aminotransferase (AGXT) gene related conditions or disorders
EP3585900B1 (en) 2017-02-22 2022-12-21 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 2 (sca2) and other spinocerebellar ataxia type 2 protein (atxn2) gene related conditions or disorders
CA3054031A1 (en) 2017-02-22 2018-08-30 Crispr Therapeutics Ag Compositions and methods for gene editing
WO2018165564A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Morpholino modified oligomeric compounds
US20180284123A1 (en) 2017-03-30 2018-10-04 California Institute Of Technology Barcoded rapid assay platform useful for efficient analysis of candidate molecules and methods of making and using the platform
WO2018191603A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 University Of Massachusetts Targeting cell tropism receptors to inhibit cytomegalovirus infection
KR102720270B1 (ko) 2017-04-18 2024-10-23 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 B형 간염 바이러스 (hbv)에 감염된 대상체의 치료 방법
US11767520B2 (en) 2017-04-20 2023-09-26 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
US11872239B2 (en) 2017-04-20 2024-01-16 Synthena Ag Modified oligomeric compounds comprising tricyclo-DNA nucleosides and uses thereof
WO2018193428A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Synthena Ag Modified oligomeric compounds comprising tricyclo-dna nucleosides and uses thereof
EP3612232A1 (en) 2017-04-21 2020-02-26 The Broad Institute, Inc. Targeted delivery to beta cells
AU2018265022A1 (en) 2017-05-10 2019-11-21 The Regents Of The University Of California Directed editing of cellular RNA via nuclear delivery of CRISPR/Cas9
CN110914289B (zh) 2017-05-12 2024-05-14 克里斯珀医疗股份公司 用于工程化细胞的材料和方法及其在免疫肿瘤学中的用途
KR20200026960A (ko) 2017-07-10 2020-03-11 젠자임 코포레이션 혈우병을 갖는 대상체에서 출혈 사건을 치료하기 위한 방법 및 조성물
KR20250171416A (ko) 2017-07-11 2025-12-08 신톡스, 인크. 비천연 뉴클레오티드의 도입 및 그의 방법
EP3651774A4 (en) 2017-07-11 2021-07-07 The Scripps Research Institute INTEGRATION OF INNATURAL NUCLEOTIDES AND APPLICATION METHODS IN VIVO
KR20200028997A (ko) 2017-07-13 2020-03-17 노오쓰웨스턴 유니버시티 올리고뉴클레오타이드-작용화된 금속-유기 프레임워크 나노입자를 제조하는 일반적이고 직접적인 방법
CA3069868A1 (en) 2017-07-13 2019-01-17 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Lactate dehydrogenase a (ldha) irna compositions and methods of use thereof
BR112020002272A2 (pt) 2017-08-03 2020-07-28 Synthorx, Inc. conjugados de citocina para o tratamento de doenças autoimunes
US11197884B2 (en) 2017-08-18 2021-12-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of the notch signaling pathway for treatment of respiratory disorders
WO2019051173A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. MODULATORS OF SMAD7 EXPRESSION
WO2019055460A1 (en) 2017-09-13 2019-03-21 The Children's Medical Center Corporation COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF TRANSPOSON-ASSOCIATED DISEASES
KR20250046363A (ko) 2017-09-19 2025-04-02 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 트랜스타이레틴(ttr) 매개 아밀로이드증을 치료하기 위한 조성물 및 방법
KR102728416B1 (ko) 2017-10-17 2024-11-11 크리스퍼 테라퓨틱스 아게 A형 혈우병을 위한 유전자 편집용 조성물 및 방법
MA50849A (fr) 2017-10-26 2020-09-02 Vertex Pharma Substances et procédés pour le traitement d'hémoglobinopathies
EP3704252A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof
TWI809004B (zh) 2017-11-09 2023-07-21 美商Ionis製藥公司 用於降低snca表現之化合物及方法
WO2019092505A1 (en) 2017-11-09 2019-05-16 Casebia Therapeutics Llp Self-inactivating (sin) crispr/cas or crispr/cpf1 systems and uses thereof
US20200385719A1 (en) 2017-11-16 2020-12-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Kisspeptin 1 (kiss1) irna compositions and methods of use thereof
WO2019100039A1 (en) 2017-11-20 2019-05-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serum amyloid p component (apcs) irna compositions and methods of use thereof
MA50877A (fr) 2017-11-21 2020-09-30 Bayer Healthcare Llc Matériaux et méthodes pour le traitement de la rétinite pigmentaire autosomique dominante
EP3714053B1 (en) 2017-11-22 2025-12-31 The University of Chicago CHEMICALLY DEPENDENT PROBE EVALUATION OF PROTEIN ACTIVITY AND ITS USES
CA3084955A1 (en) 2017-12-05 2019-06-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crispr-cas9 modified cd34+ human hematopoietic stem and progenitor cells and uses thereof
CA3084825A1 (en) 2017-12-14 2019-06-20 Crispr Therapeutics Ag Novel rna-programmable endonuclease systems and their use in genome editing and other applications
MX2020006012A (es) 2017-12-18 2020-09-14 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones de arni de la caja 1 del grupo de alta movilidad (hmgb1) y métodos de uso de las mismas.
EP3728595A1 (en) 2017-12-21 2020-10-28 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of usher syndrome type 2a and/or non-syndromic autosomal recessive retinitis pigmentosa (arrp)
CN111836892B (zh) 2017-12-21 2025-03-11 克里斯珀医疗股份公司 用于治疗2a型乌谢尔综合征的材料和方法
WO2019126641A2 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of frataxin expression
CN112105627B (zh) 2017-12-29 2024-07-02 斯克利普斯研究所 非天然碱基对组合物及使用方法
US12178855B2 (en) 2018-01-10 2024-12-31 Translate Bio Ma, Inc. Compositions and methods for facilitating delivery of synthetic nucleic acids to cells
MA51637A (fr) 2018-01-12 2020-11-18 Bayer Healthcare Llc Compositions et méthodes pour l'édition génique par ciblage de la transferrine
KR20200113214A (ko) 2018-01-15 2020-10-06 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 Dnm2 발현의 조절제
JP7652567B2 (ja) 2018-01-19 2025-03-27 シンセナ アーゲー トリシクロ－ｄｎａヌクレオシド前駆体およびそれを調製するためのプロセス
WO2019144061A1 (en) 2018-01-19 2019-07-25 Duke University Genome engineering with crispr-cas systems in eukaryotes
WO2019147743A1 (en) 2018-01-26 2019-08-01 Massachusetts Institute Of Technology Structure-guided chemical modification of guide rna and its applications
MA51788A (fr) 2018-02-05 2020-12-16 Vertex Pharma Substances et méthodes pour traiter des hémoglobinopathies
WO2019150196A1 (en) 2018-02-05 2019-08-08 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies
WO2019155465A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of identifying and using agents for treating diseases associated with intestinal barrier dysfunction
US20210130824A1 (en) 2018-02-16 2021-05-06 Crispr Therapeutics Ag Compositions and methods for gene editing by targeting fibrinogen-alpha
TWI834636B (zh) 2018-02-26 2024-03-11 美商欣爍克斯公司 Il-15結合物及其用途
TWI840345B (zh) 2018-03-02 2024-05-01 美商Ionis製藥公司 Irf4表現之調節劑
EP3759127A4 (en) 2018-03-02 2022-03-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR MODULATING AMYLOID BETA PRECURSOR PROTEIN
JP7417529B2 (ja) 2018-03-07 2024-01-18 サノフイ ヌクレオチド前駆体、ヌクレオチド類似体およびこれを含むオリゴマー化合物
WO2019183150A1 (en) 2018-03-19 2019-09-26 Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership Novel rna-programmable endonuclease systems and uses thereof
US11661601B2 (en) 2018-03-22 2023-05-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating FMR1 expression
EP4051799A2 (en) 2018-03-30 2022-09-07 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Aptamers for targeted activaton of t cell-mediated immunity
US20210155959A1 (en) 2018-04-06 2021-05-27 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for somatic cell reprogramming and modulating imprinting
EP3775204A4 (en) 2018-04-11 2021-12-29 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of ezh2 expression
WO2019204668A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership Compositions and methods for knockdown of apo(a) by gene editing for treatment of cardiovascular disease
EP3784259A4 (en) 2018-04-27 2021-12-29 Seattle Children's Hospital (DBA Seattle Children's Research Institute) Rapamycin resistant cells
BR112020020957B1 (pt) 2018-05-09 2022-05-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc Compostos oligoméricos, população e composição farmacêutica dos mesmos e seus usos
JOP20200283A1 (ar) 2018-05-09 2020-11-08 Ionis Pharmaceuticals Inc مركبات وطرق لتقليل التعبير الوراثي عن atxn3
TWI851574B (zh) 2018-05-14 2024-08-11 美商阿尼拉製藥公司 血管收縮素原（ＡＧＴ）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
JP7557378B2 (ja) 2018-06-14 2024-09-27 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ｓｔｍｎ２発現を増加させるための化合物及び方法
TWI833770B (zh) 2018-06-27 2024-03-01 美商Ionis製藥公司 用於減少 lrrk2 表現之化合物及方法
KR20210027389A (ko) 2018-06-28 2021-03-10 크리스퍼 테라퓨틱스 아게 공여자 폴리뉴클레오티드의 삽입에 의한 게놈 편집을 위한 조성물 및 방법
EP3823725A4 (en) 2018-07-17 2023-05-10 Aronora, Inc. METHODS FOR SAFELY REDUCING THROMBOPOIETIN
AU2019310097A1 (en) 2018-07-25 2021-02-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing ATXN2 expression
WO2020036862A1 (en) 2018-08-13 2020-02-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. HEPATITIS B VIRUS (HBV) dsRNA AGENT COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
AR115960A1 (es) 2018-08-16 2021-03-17 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones y métodos para inhibir la expresión del gen lect2
US12281308B2 (en) 2018-08-29 2025-04-22 University Of Massachusetts Inhibition of protein kinases to treat Friedreich ataxia
JP7535310B2 (ja) 2018-09-14 2024-08-16 ノースウェスタン ユニバーシティ Ｄｎａとのタンパク質重合のプログラミング
CA3105385A1 (en) 2018-09-18 2020-03-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Ketohexokinase (khk) irna compositions and methods of use thereof
CA3292164A1 (en) 2018-09-25 2025-11-29 Co Diagnostics Inc Allele-specific design of cooperative primers for improved nucleic acid variant genotyping
BR112021007403A2 (pt) 2018-10-17 2021-12-07 Bayer Healthcare Llc Composições e métodos para entrega de transgenes
US10913951B2 (en) 2018-10-31 2021-02-09 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Silencing of HNF4A-P2 isoforms with siRNA to improve hepatocyte function in liver failure
TW202031284A (zh) 2018-11-08 2020-09-01 美商新索思股份有限公司 介白素10結合物及其用途
TW202028222A (zh) 2018-11-14 2020-08-01 美商Ionis製藥公司 Foxp3表現之調節劑
AR117094A1 (es) 2018-11-15 2021-07-07 Ionis Pharmaceuticals Inc Moduladores de expresión irf5
JP7455831B2 (ja) 2018-11-21 2024-03-26 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド プリオン発現を低減するための化合物及び方法
IL263184A (en) 2018-11-21 2020-05-31 Yarden Yosef Method of treating cancer and compositions for same
CA3121191A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Crispr Therapeutics Ag Optimized mrna encoding cas9 for use in lnps
EP3894559A4 (en) 2018-12-03 2023-04-05 Triplet Therapeutics, Inc. METHODS OF TREATMENT OF TRINUCLEOTIDE REPEAT EXPANSION DISORDERS RELATED TO MLH3 ACTIVITY
WO2020118259A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Northwestern University Protein crystal engineering through dna hybridization interactions
JP2022515744A (ja) 2018-12-20 2022-02-22 プラクシス プレシジョン メディシンズ， インコーポレイテッド Ｋｃｎｔ１関連障害の治療のための組成物及び方法
RS67553B1 (sr) 2018-12-20 2026-01-30 Humabs Biomed Sa Kombinovana hbv terapija
JP2022517270A (ja) 2019-01-16 2022-03-07 ジェンザイム・コーポレーション Ｓｅｒｐｉｎｃ１ ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
BR112021013369A2 (pt) 2019-01-31 2021-09-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Moduladores de expressão de yap1
US20200246467A1 (en) 2019-02-06 2020-08-06 Synthorx, Inc. Il-2 conjugates and methods of use thereof
SG11202108357PA (en) 2019-02-15 2021-08-30 Crispr Therapeutics Ag Gene editing for hemophilia a with improved factor viii expression
WO2020171889A1 (en) 2019-02-19 2020-08-27 University Of Rochester Blocking lipid accumulation or inflammation in thyroid eye disease
JP2022521010A (ja) 2019-02-21 2022-04-04 イッスム・リサーチ・デベロプメント・カムパニー・オブ・ザ・ヘブリュー・ユニバシティー・オブ・エルサレム リミテッド 薬物誘導性腎毒性を減少させるための方法
WO2020176771A1 (en) 2019-02-27 2020-09-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of malat1 expression
AU2020239225A1 (en) 2019-03-12 2021-09-30 Bayer Healthcare Llc Novel high fidelity RNA-programmable endonuclease systems and uses thereof
EP3947681A1 (en) 2019-03-29 2022-02-09 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of kras associated diseases or disorders
CA3135180A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating ube3a-ats
CN114174532A (zh) 2019-04-05 2022-03-11 德克萨斯大学系统董事会 细胞条形码编码的方法和应用
EP3963072A1 (en) 2019-05-03 2022-03-09 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Double-stranded nucleic acid inhibitor molecules with shortened sense strands
EP3966327A1 (en) 2019-05-08 2022-03-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crispr/cas all-in-two vector systems for treatment of dmd
CN114126628B (zh) 2019-05-13 2025-04-18 维尔生物科技有限公司 用于治疗乙型肝炎病毒(hbv)感染的组合物及方法
JP7728181B2 (ja) 2019-06-14 2025-08-22 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート 半合成生物における複製、転写および翻訳のための試薬ならびに方法
EP3983542A2 (en) 2019-06-17 2022-04-20 CRISPR Therapeutics AG Methods and compositions for improved homology directed repair
EP3956450B1 (en) 2019-07-26 2025-08-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating gfap
WO2021022108A2 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. CARBOXYPEPTIDASE B2 (CPB2) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
WO2021022109A1 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. SERPIN FAMILY F MEMBER 2 (SERPINF2) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
EP4013870A1 (en) 2019-08-13 2022-06-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Small ribosomal protein subunit 25 (rps25) irna agent compositions and methods of use thereof
CN114555621B (zh) 2019-08-15 2025-10-28 Ionis制药公司 键修饰的寡聚化合物及其用途
CA3150163A1 (en) 2019-08-15 2021-02-18 Synthorx, Inc. Immuno oncology combination therapies with il-2 conjugates
BR112022003046A8 (pt) 2019-08-23 2024-02-06 Synthorx Inc Conjugado de il-15, seu método de preparo e seus usos, bem como composição farmacêutica e método in vitro de expansão de uma ou mais das populações de células t
JP7805286B2 (ja) 2019-09-03 2026-01-23 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｌｅｃｔ２遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法
EP4028060A1 (en) 2019-09-10 2022-07-20 Synthorx, Inc. Il-2 conjugates and methods of use to treat autoimmune diseases
US12319711B2 (en) 2019-09-20 2025-06-03 Northwestern University Spherical nucleic acids with tailored and active protein coronae
US12503699B2 (en) 2019-10-04 2025-12-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing UGT1a1 gene expression
EP4045652A1 (en) 2019-10-18 2022-08-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Solute carrier family member irna compositions and methods of use thereof
BR112022007540A2 (pt) 2019-10-22 2022-07-12 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de irna de componente complementar c3 e métodos de uso das mesmas
US12378560B2 (en) 2019-10-29 2025-08-05 Northwestern University Sequence multiplicity within spherical nucleic acids
AR120341A1 (es) 2019-11-01 2022-02-09 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSICIONES DE AGENTES DE ARNi CONTRA LA HUNTINGTINA (HTT) Y SUS MÉTODOS DE USO
EP4051796A1 (en) 2019-11-01 2022-09-07 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing dnajb1-prkaca fusion gene expression
CA3156405A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Synthorx, Inc. Interleukin 10 conjugates and uses thereof
TW202526019A (zh) 2019-11-13 2025-07-01 美商阿尼拉製藥公司 用於治療血管收縮素原相關病症之方法及組成物
EP4061945A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Ataxin3 (atxn3) rnai agent compositions and methods of use thereof
JP7684298B2 (ja) 2019-11-27 2025-05-27 クリスパー・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフト Ｒｎａ分子を合成する方法
BR112022011417A2 (pt) 2019-12-13 2022-08-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições do agente de irna da fase de leitura aberta 72 do cromossomo humano 9 (c9orf72) e métodos de uso das mesmas
WO2021126734A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof
US20230054569A1 (en) 2019-12-18 2023-02-23 Alia Therapeutics Srl Compositions and methods for treating retinitis pigmentosa
CN115298192A (zh) 2020-01-15 2022-11-04 迪克纳制药公司 4′-o-亚甲基膦酸酯核酸及其类似物
US12503695B2 (en) 2020-01-27 2025-12-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services RAB13 and NET1 antisense oligonucleotides to treat metastatic cancer
WO2021154941A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c5 irna compositions for use in the treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als)
WO2021163066A1 (en) 2020-02-10 2021-08-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing vegf-a expression
WO2021167841A1 (en) 2020-02-18 2021-08-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Apolipoprotein c3 (apoc3) irna compositions and methods of use thereof
AR121446A1 (es) 2020-02-28 2022-06-08 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y métodos para modular smn2
EP4114947A1 (en) 2020-03-05 2023-01-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing complement component c3-associated diseases
WO2021178736A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. KETOHEXOKINASE (KHK) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
WO2021188611A1 (en) 2020-03-18 2021-09-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating subjects having a heterozygous alanine-glyoxylate aminotransferase gene (agxt) variant
JP2023519274A (ja) 2020-03-26 2023-05-10 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド コロナウイルスｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
WO2021202443A2 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Alnylam Pharmaceucticals, Inc. Compositions and methods for silencing dnajc15 gene expression
WO2021202902A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. ALPHA-2A ADRENERGIC RECEPTOR (ADRA2A) iRNA AGENT COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
AU2021252545A1 (en) 2020-04-06 2022-11-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing myoc expression
WO2021206917A1 (en) 2020-04-07 2021-10-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. ANGIOTENSIN-CONVERTING ENZYME 2 (ACE2) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
EP4133077A1 (en) 2020-04-07 2023-02-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transmembrane serine protease 2 (tmprss2) irna compositions and methods of use thereof
KR20230008078A (ko) 2020-04-07 2023-01-13 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 Scn9a 발현을 사일런싱하기 위한 조성물 및 방법
BR112022021813A2 (pt) 2020-04-27 2023-01-17 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de agente de apolipoproteína e (apoe) irna e métodos de uso das mesmas
JP2023523790A (ja) 2020-04-30 2023-06-07 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 補体因子Ｂ（ＣＦＢ）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
AU2021264010A1 (en) 2020-05-01 2022-12-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating ATXN1
WO2021231692A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of otoferlin (otof)
WO2021231685A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of transmembrane channel-like protein 1 (tmc1)
EP4150086A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of leucine rich repeat kinase 2 (lrrk2)
EP4150076A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of methyl-cpg binding protein 2 (mecp2)
EP4150078A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate lyase (asl)
WO2021231691A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of retinoschisin 1 (rsi)
CA3162416C (en) 2020-05-15 2023-07-04 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate synthetase (ass1)
WO2021231679A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of gap junction protein beta 2 (gjb2)
WO2021237097A1 (en) 2020-05-21 2021-11-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting marc1 gene expression
WO2021234459A2 (en) 2020-05-22 2021-11-25 Wave Life Sciences Ltd. Double stranded oligonucleotide compositions and methods relating thereto
AR122534A1 (es) 2020-06-03 2022-09-21 Triplet Therapeutics Inc Métodos para el tratamiento de los trastornos de expansión por repetición de nucleótidos asociados con la actividad de msh3
WO2021248052A1 (en) 2020-06-05 2021-12-09 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for treating neoplasia
EP4162050A1 (en) 2020-06-09 2023-04-12 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai compositions and methods of use thereof for delivery by inhalation
EP4649951A2 (en) 2020-06-09 2025-11-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Sirna compositions and methods for silencing gpam (glycerol-3-phosphate acyltransferase 1, mitochondrial) expression
CN116209760A (zh) 2020-06-18 2023-06-02 阿尔尼拉姆医药品有限公司 黄嘌呤脱氢酶(XDH)iRNA组合物及其使用方法
CN116390943A (zh) 2020-06-24 2023-07-04 维尔生物科技有限公司 工程化乙型肝炎病毒中和抗体和其用途
BR112022026236A2 (pt) 2020-06-25 2023-01-17 Synthorx Inc Terapia de combinação de imuno-oncologia com conjugados de il-2 e anticorpos anti-egfr
AU2021299290A1 (en) 2020-06-29 2023-01-05 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating PLP1
KR20230043914A (ko) 2020-07-28 2023-03-31 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 App 발현을 감소시키기 위한 화합물 및 방법
CA3187220A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Systemic delivery of oligonucleotides
CN116322707B (zh) 2020-08-07 2026-02-03 艾欧尼斯制药公司 用于调节scn2a的化合物和方法
EP4217489A1 (en) 2020-09-24 2023-08-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Dipeptidyl peptidase 4 (dpp4) irna compositions and methods of use thereof
WO2022070107A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis
TW202229552A (zh) 2020-10-05 2022-08-01 美商艾拉倫製藥股份有限公司 Ｇ蛋白－偶合受體７５（ＧＰＲ７５）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
EP3978608A1 (en) 2020-10-05 2022-04-06 SQY Therapeutics Oligomeric compound for dystrophin rescue in dmd patients throughout skipping of exon-51
AU2021356693A1 (en) 2020-10-09 2023-06-15 Synthorx, Inc. Immuno oncology combination therapy with il-2 conjugates and pembrolizumab
WO2022076859A1 (en) 2020-10-09 2022-04-14 Synthorx, Inc. Immuno oncology therapies with il-2 conjugates
EP4228637A1 (en) 2020-10-15 2023-08-23 Yeda Research and Development Co. Ltd Method of treating myeloid malignancies
JP2023546199A (ja) 2020-10-20 2023-11-01 サノフイ アシアロ糖タンパク質受容体のための新規リガンド
WO2022087041A1 (en) 2020-10-21 2022-04-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating primary hyperoxaluria
EP4232582A1 (en) 2020-10-23 2023-08-30 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Mucin 5b (muc5b) irna compositions and methods of use thereof
CA3196205A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Floyd E. Romesberg Reverse transcription of polynucleotides comprising unnatural nucleotides
KR20230107625A (ko) 2020-11-13 2023-07-17 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 응고 인자 V(F5) iRNA 조성물 및 이의 사용 방법
EP4488371A3 (en) 2020-11-18 2025-04-09 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating angiotensinogen expression
US11987795B2 (en) 2020-11-24 2024-05-21 The Broad Institute, Inc. Methods of modulating SLC7A11 pre-mRNA transcripts for diseases and conditions associated with expression of SLC7A11
EP4256053A1 (en) 2020-12-01 2023-10-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for inhibition of hao1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression
EP4259795A1 (en) 2020-12-08 2023-10-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Coagulation factor x (f10) irna compositions and methods of use thereof
MX2023007257A (es) 2020-12-18 2023-07-03 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y metodos para modular el factor xii.
CA3206285A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Flagship Pioneering, Inc. Compositions of modified trems and uses thereof
WO2022150260A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. COMPLEMENT COMPONENT 9 (C9) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
WO2022174102A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Synthorx, Inc. Lung cancer combination therapy with il-2 conjugates and an anti-pd-1 antibody or antigen-binding fragment thereof
CA3210763A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Superoxide dismutase 1 (sod1) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing superoxide dismutase 1- (sod1-) associated neurodegenerative diseases
TW202245843A (zh) 2021-02-12 2022-12-01 美商欣爍克斯公司 Ｉｌ－２接合物及西米普利單抗（ｃｅｍｉｐｌｉｍａｂ）之皮膚癌組合療法
WO2022182864A1 (en) 2021-02-25 2022-09-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Prion protein (prnp) irna compositions and methods and methods of use thereof
BR112023016645A2 (pt) 2021-02-26 2023-11-14 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de irna de ceto-hexoquinase (khk) e métodos de uso das mesmas
AU2022231003A1 (en) 2021-03-04 2023-09-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compositions and methods of use thereof
EP4304640A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Northwestern University Antiviral vaccines using spherical nucleic acids
EP4305169A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Glycogen synthase kinase 3 alpha (gsk3a) irna compositions and methods of use thereof
CN117203336A (zh) 2021-03-29 2023-12-08 阿尔尼拉姆医药品有限公司 亨廷顿蛋白(HTT)iRNA药剂组合物以及其使用方法
WO2022212153A1 (en) 2021-04-01 2022-10-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Proline dehydrogenase 2 (prodh2) irna compositions and methods of use thereof
WO2022231999A1 (en) 2021-04-26 2022-11-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transmembrane protease, serine 6 (tmprss6) irna compositions and methods of use thereof
EP4330396A1 (en) 2021-04-29 2024-03-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Signal transducer and activator of transcription factor 6 (stat6) irna compositions and methods of use thereof
EP4334448A1 (en) 2021-05-03 2024-03-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating transthyretin (ttr) mediated amyloidosis
JP2024522068A (ja) 2021-05-18 2024-06-11 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ナトリウム－グルコース共輸送体２（ｓｇｌｔ２）ｉｒｎａ組成物およびその使用方法
EP4341405A1 (en) 2021-05-20 2024-03-27 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for adar-mediated editing
WO2022256283A2 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Korro Bio, Inc. Methods for restoring protein function using adar
JP2024522996A (ja) 2021-06-02 2024-06-25 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド パタチン様ホスホリパーゼドメイン含有３（ＰＮＰＬＡ３）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
WO2022256538A1 (en) 2021-06-03 2022-12-08 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and cetuximab
CN117561334A (zh) 2021-06-04 2024-02-13 阿尔尼拉姆医药品有限公司 人染色体9开放阅读框72（C9ORF72）iRNA药剂组合物和其使用方法
JP2024523000A (ja) 2021-06-08 2024-06-25 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド シュタルガルト病及び／又は網膜結合タンパク質４（ｒｂｐ４）関連障害を治療又は予防するための組成物及び方法
CA3222950A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Bayer Aktiengesellschaft Type v rna programmable endonuclease systems
EP4101928A1 (en) 2021-06-11 2022-12-14 Bayer AG Type v rna programmable endonuclease systems
EP4355759A1 (en) 2021-06-18 2024-04-24 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing ifnar1 expression
US20230194709A9 (en) 2021-06-29 2023-06-22 Seagate Technology Llc Range information detection using coherent pulse sets with selected waveform characteristics
US20250034564A1 (en) 2021-06-29 2025-01-30 Korro Bio, Inc. Methods and Compositions for ADAR-Mediated Editing
JP2024527304A (ja) 2021-06-30 2024-07-24 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド アンジオテンシノーゲン（ａｇｔ）関連障害を治療するための方法および組成物
WO2023285431A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 Alia Therapeutics Srl Compositions and methods for allele specific treatment of retinitis pigmentosa
TW202333748A (zh) 2021-07-19 2023-09-01 美商艾拉倫製藥股份有限公司 用於處置具有或有風險發展非原發性高草酸鹽尿疾病或病症的個體的方法及組成物
TW202325312A (zh) 2021-07-23 2023-07-01 美商艾拉倫製藥股份有限公司 β－鏈蛋白（ＣＴＮＮＢ１）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
WO2023009687A1 (en) 2021-07-29 2023-02-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coa reductase (hmgcr) irna compositions and methods of use thereof
JP2024530018A (ja) 2021-08-03 2024-08-14 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド トランスサイレチン（ＴＴＲ）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
WO2023014765A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. iRNA COMPOSITIONS AND METHODS FOR SILENCING ANGIOTENSINOGEN (AGT)
BR112024001923A2 (pt) 2021-08-13 2024-04-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de irna de fator xii (f12) e métodos de usos das mesmas
IL311030A (en) 2021-08-31 2024-04-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc DFFA-like Cell Death Inducer B (CIDEB) IRNA compositions and methods of using them
EP4144841A1 (en) 2021-09-07 2023-03-08 Bayer AG Novel small rna programmable endonuclease systems with impoved pam specificity and uses thereof
WO2023044370A2 (en) 2021-09-17 2023-03-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Irna compositions and methods for silencing complement component 3 (c3)
CA3232420A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Inhibin subunit beta e (inhbe) modulator compositions and methods of use thereof
KR20240067943A (ko) 2021-09-24 2024-05-17 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 미소관 연관 단백질 타우(MAPT) iRNA 제제 조성물 및 이의 사용 방법
EP4419683A1 (en) 2021-10-22 2024-08-28 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for disrupting nrf2-keap1 protein interaction by adar mediated rna editing
KR20240095325A (ko) 2021-10-29 2024-06-25 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 보체 인자 b (cfb) irna 조성물 및 이의 사용 방법
TW202334418A (zh) 2021-10-29 2023-09-01 美商艾拉倫製藥股份有限公司 杭丁頓（ＨＴＴ）ｉＲＮＡ劑組成物及其使用方法
EP4452327A1 (en) 2021-12-20 2024-10-30 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
EP4453196A1 (en) 2021-12-21 2024-10-30 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
WO2023122750A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Synthorx, Inc. Cancer combination therapy with il-2 conjugates and cetuximab
US20250084391A1 (en) 2021-12-23 2025-03-13 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2023141314A2 (en) 2022-01-24 2023-07-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Heparin sulfate biosynthesis pathway enzyme irna agent compositions and methods of use thereof
CA3245130A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Crispr Therapeutics Ag METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF DISORDERS RELATED TO ANGIOPOIETIN-TYPE PROTEIN 3 (ANGPTL3)
WO2023177866A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Decarboxylative acetoxylation using mn(ii) or mn(iii) reagent for synthesis of 4'-acetoxy- nucleoside and use thereof for synthesis of corresponding 4'-(dimethoxyphosphoryl)methoxy- nucleotide
WO2023194359A1 (en) 2022-04-04 2023-10-12 Alia Therapeutics Srl Compositions and methods for treatment of usher syndrome type 2a
EP4573198A2 (en) 2022-08-18 2025-06-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Universal non-targeting sirna compositions and methods of use thereof
MA71735A (fr) 2022-09-15 2025-05-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions d'arni de 17b-hydroxystéroïde déshydrogénase de type 13 (hsd17b13) et leurs procédés d'utilisation
WO2024056880A2 (en) 2022-09-16 2024-03-21 Alia Therapeutics Srl Enqp type ii cas proteins and applications thereof
WO2024064858A2 (en) 2022-09-23 2024-03-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing mecp2 expression
EP4619535A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
KR20250124839A (ko) 2022-12-13 2025-08-20 바이엘 악티엔게젤샤프트 조작된 제v형 rna 프로그램가능한 엔도뉴클레아제 및 그의 용도
WO2024136899A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Synthorx, Inc. Cancer therapy with il-2 conjugates and chimeric antigen receptor therapies
CN120882867A (zh) 2023-01-11 2025-10-31 阿利亚治疗有限公司 Ii型cas蛋白及其应用
WO2024168010A2 (en) 2023-02-09 2024-08-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Reversir molecules and methods of use thereof
WO2024170778A1 (en) 2023-02-17 2024-08-22 Anjarium Biosciences Ag Methods of making dna molecules and compositions and uses thereof
EP4683671A1 (en) 2023-03-20 2026-01-28 Synthorx, Inc. Cancer therapy with il-2 peg conjugates
WO2024220746A2 (en) 2023-04-21 2024-10-24 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Rnai agents targeting fatty acid synthase and related methods
WO2024226499A1 (en) 2023-04-24 2024-10-31 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for modifying fertility
WO2025003344A1 (en) 2023-06-28 2025-01-02 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
WO2025015335A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Korro Bio, Inc. Rna-editing oligonucleotides and uses thereof
WO2025015338A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Korro Bio, Inc. Rna-editing oligonucleotides and uses thereof
WO2025024334A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 Marrow Therapeutics, Inc. Hematopoietic cell targeting conjugates and related methods
US20250092426A1 (en) 2023-07-25 2025-03-20 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Cas endonucleases and related methods
TW202519653A (zh) 2023-07-25 2025-05-16 美商旗艦先鋒創新有限責任（Ｖｉｉ）公司 Ｃａｓ內切酶及相關方法
WO2025034422A1 (en) 2023-08-04 2025-02-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating ctnnb1-associated disorders
WO2025059113A1 (en) 2023-09-12 2025-03-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Treatments for enhancing immune response to clostridioides difficile infections
WO2025072331A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Cas nucleases and related methods
WO2025072699A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Judo Bio, Inc. Aminoglycosides for delivery of agents to the kidney
WO2025072713A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Judo Bio, Inc. Polymyxins for delivery of agents to the kidney
WO2025072672A2 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Judo Bio, Inc. Slc6a19-targeting modulatory nucleic acid agents
WO2025076031A2 (en) 2023-10-03 2025-04-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Peritoneal macrophages comprising a nanoparticle encapsulating a nucleic acid molecule and methods of use thereof
WO2025076291A1 (en) 2023-10-06 2025-04-10 Bluerock Therapeutics Lp Engineered type v rna programmable endonucleases and their uses
WO2025096809A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Korro Bio, Inc. Oligonucleotides comprising phosphoramidate internucleotide linkages
WO2025117877A2 (en) 2023-12-01 2025-06-05 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Cas nucleases and related methods
WO2025128799A1 (en) 2023-12-12 2025-06-19 Korro Bio, Inc. Double-stranded rna-editing oligonucleotides and uses thereof
WO2025158385A1 (en) 2024-01-25 2025-07-31 Genzyme Corporation Pegylated il-2 for suppressing adaptive immune response to gene therapy
US20250263702A1 (en) 2024-02-19 2025-08-21 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Rnai agents targeting cideb and related methods
US20250313840A1 (en) 2024-03-20 2025-10-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Mucin-5b (muc5b) targeted sirna and antisense oligonucleotides and methods of use thereof
WO2025207517A2 (en) 2024-03-25 2025-10-02 Synthorx, Inc. Synthetic trna synthetases and cells comprising synthetic molecules for production of polypeptides
WO2025210147A1 (en) 2024-04-04 2025-10-09 Alia Therapeutics Srl Type v cas proteins and applications thereof
WO2025217275A2 (en) 2024-04-10 2025-10-16 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Immune cell targeted compositions and related methods
WO2025259747A2 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Dystrophy myotonic protein kinase (dmpk) irna compositions and methods of use thereof
WO2025259743A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Dual conjugate compounds for extrahepatic delivery

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5927900A (ja) * 1982-08-09 1984-02-14 Wakunaga Seiyaku Kk 固定化オリゴヌクレオチド
US4904582A (en) * 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
ATE151467T1 (de) * 1987-11-30 1997-04-15 Univ Iowa Res Found Durch modifikationen an der 3'-terminalen phosphodiesterbindung stabilisierte dna moleküle, ihre verwendung als nukleinsäuresonden sowie als therapeutische mittel zur hemmung der expression spezifischer zielgene
CA2028153A1 (en) * 1989-02-24 1990-08-25 Steven S. Smith Heterologous block oligomers
AU653504B2 (en) * 1989-10-24 1994-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide analogs with novel linkages
US5378825A (en) * 1990-07-27 1995-01-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5489677A (en) * 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
US5223618A (en) * 1990-08-13 1993-06-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4'-desmethyl nucleoside analog compounds
US5138045A (en) * 1990-07-27 1992-08-11 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
IL113519A (en) * 1990-08-03 1997-11-20 Sterling Winthrop Inc Oligonucleoside sequences of from about 6 to about 200 bases having a three atom internucleoside linkage, their preparation and pharmaceutical compositions for inhibiting gene expression containing said oligonucleosides
US5245022A (en) * 1990-08-03 1993-09-14 Sterling Drug, Inc. Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides
US5214134A (en) * 1990-09-12 1993-05-25 Sterling Winthrop Inc. Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US5389023A (en) * 1993-03-22 1995-02-14 Mcintyre; Jonothon M. W. Body surfing board

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