KR20220051355A - Il-15 콘쥬게이트 및 이의 용도 - Google Patents

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KR20220051355A
KR20220051355A KR1020227008357A KR20227008357A KR20220051355A KR 20220051355 A KR20220051355 A KR 20220051355A KR 1020227008357 A KR1020227008357 A KR 1020227008357A KR 20227008357 A KR20227008357 A KR 20227008357A KR 20220051355 A KR20220051355 A KR 20220051355A
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kda
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conjugate
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seq
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KR1020227008357A
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캐롤리나 이. 카파로
제로드 프타신
마르코스 밀라
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신톡스, 인크.
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Abstract

인터류킨(IL)-15 콘쥬게이트 및 하나 이상의 적응증의 치료에서의 용도가 본원에 개시된다. 하나 이상의 IL-15 콘쥬게이트를 포함하는 제약 조성물 및 키트도 본원에 기술된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 내의 적어도 하나의 아미노산 잔기는 본원에 기술된 하기 화학식 I:
[화학식 I]
Figure pct00516
의 구조로 대체된다.

Description

IL-15 콘쥬게이트 및 이의 용도
본 출원은 2019년 8월 23일자로 출원된 미국 가출원 제62/890,741호, 2019년 11월 6일자로 출원된 미국 가출원 제62/931,663호 및 2020년 1월 7일자로 출원된 미국 가출원 제62/958,177호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 이들 각각의 내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.
서론 및 요약
서로 다른 T 세포 집단은 면역 항상성 및 관용을 유지하도록 면역계를 조절한다. 예를 들어, 조절 T(Treg) 세포는 병리학적 자가-반응성을 방지함으로써 면역계에 의한 부적절한 반응을 방지하는 반면, 세포독성 T 세포는 감염된 세포 및/또는 암세포를 표적화하고 파괴한다. 일부 실시 형태에서, 상이한 T 세포 집단의 조절은 질환 또는 적응증의 치료에 대한 옵션을 제공한다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 I]
Figure pct00001
여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00002
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00003
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00004
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00005
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00006
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 I]
Figure pct00007
여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00008
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00009
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00010
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00011
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00012
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00013
이다. 일부 실시 형태에서, Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00014
이다. 일부 실시 형태에서, Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00015
이다. 일부 실시 형태에서, Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00016
이다. 여기에서 그리고 전체적으로, Z 및 Y의 실시 형태는 또한 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 5 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 10 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 15 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 20 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 25 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 35 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 45 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 50 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 55 kDa의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 60 kDa의 평균 분자량을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S83이다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S19이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L26이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E47이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E54이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N78이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S84이다.
서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00017
[화학식 III]
Figure pct00018
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00019
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, [AzK_PEG]는 화학식 II 및 화학식 III의 조합이다. 일부 실시양태에서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00020
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 II의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 17의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 18의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 19의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 20의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 21의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
일부 실시양태에서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00021
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 III의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 17의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 18의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 19의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 20의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 21의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00022
[화학식 III]
Figure pct00023
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00024
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00025
[화학식 III]
Figure pct00026
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00027
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00028
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00029
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 III의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG30]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00030
[화학식 III]
Figure pct00031
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00032
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다.
[화학식 II]
Figure pct00033
[화학식 III]
Figure pct00034
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00035
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00036
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00037
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG40]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00038
[화학식 III]
Figure pct00039
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00040
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00041
[화학식 V]
Figure pct00042
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00043
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 화학식 IV 및 화학식 V의 조합이다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00044
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 IV의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 34의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 35의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 36의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 37의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 38의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 39의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00045
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 V의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 34의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 35의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 36의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 37의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 38의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 39의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [Azk_L1_PEG]는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00046
[화학식 V]
Figure pct00047
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00048
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00049
[화학식 V]
Figure pct00050
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00051
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00052
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00053
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00054
[화학식 V]
Figure pct00055
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00056
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_ PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 IV의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00057
[화학식 V]
Figure pct00058
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00059
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00060
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00061
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG40]는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00062
[화학식 V]
Figure pct00063
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00064
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00065
[화학식 III]
Figure pct00066
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00067
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, [AzK_PEG]는 화학식 II 및 화학식 III의 조합이다.
일부 실시양태에서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00068
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 64의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 65의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 66의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 67의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 68의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 69의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
일부 실시양태에서, [AzK_PEG]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00069
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 64의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 65의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 66의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 67의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 68의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 69의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00070
[화학식 III]
Figure pct00071
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00072
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00073
[화학식 III]
Figure pct00074
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00075
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00076
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG30]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00077
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG30]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00078
[화학식 III]
Figure pct00079
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00080
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다.
[화학식 II]
Figure pct00081
[화학식 III]
Figure pct00082
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00083
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는다:
[화학식 II]
Figure pct00084
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_PEG40]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
[화학식 III]
Figure pct00085
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_PEG40]는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합이다:
[화학식 II]
Figure pct00086
[화학식 III]
Figure pct00087
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00088
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00089
[화학식 V]
Figure pct00090
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00091
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 화학식 IV 및 화학식 V의 조합이다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00092
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 IV의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 82의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 83의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 84의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 85의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 86의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 87의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00093
여기에서 그리고 전체적으로, 화학식 V의 구조는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 82의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 83의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 84의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 85의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 86의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 87의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이다.
서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [Azk_L1_PEG]는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00094
[화학식 V]
Figure pct00095
여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00096
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00097
[화학식 V]
Figure pct00098
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00099
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00100
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00101
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG30]는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00102
[화학식 V]
Figure pct00103
여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00104
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 IV의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00105
[화학식 V]
Figure pct00106
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00107
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
[화학식 IV]
Figure pct00108
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
[화학식 V]
Figure pct00109
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는다.
서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, [AzK_L1_PEG40]는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합이다:
[화학식 IV]
Figure pct00110
[화학식 V]
Figure pct00111
여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00112
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, W는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 선형이다. 일부 실시 형태에서, 메톡시 PEG 기는 분지형이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 VI]
Figure pct00113
[화학식 VII]
Figure pct00114
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00115
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI와 VII의 조합의 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S83이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 VI]
Figure pct00116
[화학식 VII]
Figure pct00117
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00118
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S19이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L26이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E47이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E54이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 N78이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S84이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 VIII]
Figure pct00119
[화학식 IX]
Figure pct00120
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며; X는 하기 구조:
Figure pct00121
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S83이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 VIII]
Figure pct00122
[화학식 IX]
Figure pct00123
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00124
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S19이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L26이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E47이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E54이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 N78이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S84이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 X 또는 XI의 구조, 또는 X과 XI의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 X]
Figure pct00125
[화학식 XI]
Figure pct00126
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
물결선은 대체되지 않은 서열 번호 1 또는 서열 번호 3 내의 아미노산 잔기에 대한 공유 결합을 나타낸다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다.
일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이거나, (R)이 풍부하거나, (S)가 풍부하거나, 실질적으로 (R)이거나, 실질적으로 (S)이거나, (R)이거나 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)가 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 X 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)이다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S83이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S19이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 L26이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 E47이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 E54이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 N78이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 X 또는 XI의 구조의 위치, 또는 X과 XI의 조합의 위치는 S84이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XII 또는 XIII의 구조, 또는 XII와 XIII의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 XII]
Figure pct00127
[화학식 XIII]
Figure pct00128
여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
물결선은 대체되지 않은 서열 번호 1 또는 서열 번호 3 내의 아미노산 잔기에 대한 공유 결합을 나타낸다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다.
일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이거나, (R)이 풍부하거나, (S)가 풍부하거나, 실질적으로 (R)이거나, 실질적으로 (S)이거나, (R)이거나 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XI 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)가 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XII 및 화학식 XIII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)이다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S83이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S19이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 L26이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 E47이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 E54이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 N78이다. 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XII 또는 XIII의 구조의 위치, 또는 XII와 XIII의 조합의 위치는 S84이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 75 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 100 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 200 내지 약 5000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 400 내지 약 800이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 795이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1022이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 1136이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 XIV]
Figure pct00129
[화학식 XV]
Figure pct00130
여기서,
m은 0 내지 20의 정수이며;
p는 0 내지 20의 정수이며;
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
물결선은 대체되지 않은 서열 번호 1 또는 서열 번호 3 내의 아미노산 잔기에 대한 공유 결합을 나타낸다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, m, p, n, 및 물결선의 의미는 상기에 기술된 바와 같다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, m, p, n, 및 물결선의 의미는 상기에 기술된 바와 같다.
일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이거나, (R)이 풍부하거나, (S)가 풍부하거나, 실질적으로 (R)이거나, 실질적으로 (S)이거나, (R)이거나 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)가 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 화학식 XV 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 0 내지 20, 또는 1 내지 18, 또는 1 내지 16, 또는 1 내지 14, 또는 1 내지 12, 또는 1 내지 10, 또는 1 내지 9, 또는 1 내지 8, 또는 1 내지 7, 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 5, 또는 1 내지 4, 또는 1 내지 3, 또는 1 내지 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 3이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 4이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 5이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 6이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 7이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 8이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 9이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 10이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 11이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 12이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 13이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 14이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 15이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 16이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 17이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 18이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 19이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 20이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 1 내지 20, 또는 1 내지 18, 또는 1 내지 16, 또는 1 내지 14, 또는 1 내지 12, 또는 1 내지 10, 또는 1 내지 9, 또는 1 내지 8, 또는 1 내지 7, 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 5, 또는 1 내지 4, 또는 1 내지 3, 또는 1 내지 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 3이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 4이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 5이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 6이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 7이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 8이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 9이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 10이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 11이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 12이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 13이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 14이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 15이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 m은 16이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 17이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 18이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 19이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 p는 20이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 n은 약 5 내지 약 4600, 또는 약 10 내지 약 4000, 또는 약 20 내지 약 3000, 또는 약 100 내지 약 3000, 또는 약 100 내지 약 2900, 또는 약 150 내지 약 2900, 또는 약 125 내지 약 2900, 또는 약 100 내지 약 2500, 또는 약 100 내지 약 2000, 또는 약 100 내지 약 1900, 또는 약 100 내지 약 1850, 또는 약 100 내지 약 1750, 또는 약 100 내지 약 1650, 또는 약 100 내지 약 1500, 또는 약 100 내지 약 1400, 또는 약 100 내지 약 1300, 또는 약 100 내지 약 1250, 또는 약 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 범위이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2 내지 6의 정수이며, p는 2 내지 6의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2 내지 4의 정수이며, p는 2 내지 4의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 1이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 3이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 4이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 5이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 6이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 7이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 8이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 9이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 10이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 11이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 11이며, p는 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 n은 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트가 서열 번호 1을 포함하는 경우, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 및 XV의 구조, 또는 화학식 XIV와 XV의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S18, L25, 및 E46으로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 및 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S18인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 L25인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E46인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 및 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E53인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 N77인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S83인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트가 서열 번호 3을 포함하는 경우, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 및 XV의 구조, 또는 화학식 XIV와 XV의 조합의 위치는
S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S19, L26, E47로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E54, N78, 및 S84로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S19인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 L26인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E47인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 E54인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 N78인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XIV 또는 XV의 구조의 위치, 또는 XIV와 XV의 조합의 위치가 S84인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV의 구조의 양:화학식 XV의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택되고, n은 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 n은 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택되고, n은 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서의 n은 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수이다.
IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV과 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 1,000 Da 약 200,000 Da, 또는 약 2,000 Da 내지 약 150,000 Da, 또는 약 3,000 Da 내지 약 125,000 Da, 또는 약 4,000 Da 내지 약 100,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 100,000 Da, 또는 약 6,000 Da 내지 약 90,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 80,000 Da, 또는 약 8,000 Da 내지 약 70,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 70,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 65,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 60,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 6,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,500 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,500 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 9,500 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,500 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 30,000 Da의 범위가 되도록 하는 정수이다. IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 5,000 Da, 약 7,500 Da, 약 10,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 60,000 Da, 약 70,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 100,000 Da, 약 125,000 Da, 약 150,000 Da, 약 175,000 Da 또는 약 200,000 Da이 되도록 하는 정수이다. IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 5,000 Da, 약 7,500 Da, 약 10,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 또는 약 50,000 Da이 되도록 하는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 L25이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 E61이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 L25이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 E53이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 E53이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 N77이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 N77이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 L26이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 L26이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 E54이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 E54이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 N78이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XIV 또는 XV의 구조, 또는 XIV와 XV의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 N78이고, m은 1 내지 6의 정수이며, p는 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XIV 및 XV의 화합물에서, m은 2이며, p는 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI와 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다:
[화학식 XVI]
Figure pct00131
[화학식 XVII]
Figure pct00132
여기서,
m은 0 내지 20의 정수이며;
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
물결선은 대체되지 않은 서열 번호 1 또는 서열 번호 3 내의 아미노산 잔기에 대한 공유 결합을 나타낸다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물이다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI와 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, m, p, n, 및 물결선의 의미는 상기에 기술된 바와 같다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI와 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, m, p, n, 및 물결선의 의미는 상기에 기술된 바와 같다.
일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이거나, (R)이 풍부하거나, (S)가 풍부하거나, 실질적으로 (R)이거나, 실질적으로 (S)이거나, (R)이거나 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 라세미이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)가 풍부하다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 실질적으로 (S)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (R)이다. 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 화학식 XVII 내의 키랄 중심의 입체화학은 (S)이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 1 내지 20, 또는 1 내지 18, 또는 1 내지 16, 또는 1 내지 14, 또는 1 내지 12, 또는 1 내지 10, 또는 1 내지 9, 또는 1 내지 8, 또는 1 내지 7, 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 5, 또는 1 내지 4, 또는 1 내지 3, 또는 1 내지 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 2이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 3이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 4이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 5이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 6이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 7이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 8이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 9이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 10이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 11이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 12이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 13이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 14이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 15이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 16이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 17이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 18이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 19이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 m은 20이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 약 5 내지 약 4600, 또는 약 10 내지 약 4000, 또는 약 20 내지 약 3000, 또는 약 100 내지 약 3000, 또는 약 100 내지 약 2900, 또는 약 150 내지 약 2900, 또는 약 125 내지 약 2900, 또는 약 100 내지 약 2500, 또는 약 100 내지 약 2000, 또는 약 100 내지 약 1900, 또는 약 100 내지 약 1850, 또는 약 100 내지 약 1750, 또는 약 100 내지 약 1650, 또는 약 100 내지 약 1500, 또는 약 100 내지 약 1400, 또는 약 100 내지 약 1300, 또는 약 100 내지 약 1250, 또는 약 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 범위이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2 내지 6의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2 내지 4의 정수이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 1이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 3이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 4이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 5이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 6이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 7이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 8이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 9이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 10이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 11이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 12이며, n은 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 및 1137로부터 선택되는 정수이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 및 XVII의 구조, 또는 화학식 XVI과 XVII의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택된다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 서열 번호 1의 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 및 XVII의 구조, 또는 화학식 XVI과 XVII의 조합의 위치는 S18, L25, 및 E46으로부터 선택된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 및 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 S18인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 L25인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E46인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 및 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E53인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 N77인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 S83인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI의 구조의 양:화학식 XVII의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 약 1:1이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI의 구조의 양:화학식 XVII의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 초과이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI의 구조의 양:화학식 XVII의 구조의 양(총 IL-15 콘쥬게이트 양을 포함함)의 비는 1:1 미만이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S84로부터 선택되고, n은 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 L25로부터 선택되고, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 및 1249로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 L25로부터 선택되고, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 1에서의 아미노산 잔기는 L25이고, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서의 n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서, 서열 번호 3을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 및 XVII의 구조, 또는 화학식 XVI과 XVII의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 K95, L26, E47로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E54, N78, S84로부터 선택되는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 K95인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 L26인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E47인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 E54인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 N78인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 XVI 또는 XVII의 구조의 위치, 또는 XVI과 XVII의 조합의 위치가 S84인 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 추가로 개시된다.
IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 1,000 Da 약 200,000 Da, 또는 약 2,000 Da 내지 약 150,000 Da, 또는 약 3,000 Da 내지 약 125,000 Da, 또는 약 4,000 Da 내지 약 100,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 100,000 Da, 또는 약 6,000 Da 내지 약 90,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 80,000 Da, 또는 약 8,000 Da 내지 약 70,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 70,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 65,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 60,000 Da, 또는 약 5,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 6,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 7,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,500 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 8,500 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 9,500 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 9,500 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 10,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 15,000 Da 내지 약 30,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 50,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 45,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 40,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 35,000 Da, 또는 약 20,000 Da 내지 약 30,000 Da의 범위가 되도록 하는 정수이다. IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 5,000 Da, 약 7,500 Da, 약 10,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 60,000 Da, 약 70,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 100,000 Da, 약 125,000 Da, 약 150,000 Da, 약 175,000 Da 또는 약 200,000 Da이 되도록 하는 정수이다. IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 1 또는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, n은 PEG 모이어티의 분자량이 약 5,000 Da, 약 7,500 Da, 약 10,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 또는 약 50,000 Da이 되도록 하는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 서열 번호 3에서의에서의 아미노산 잔기는 L26이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 및 1249로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 L26이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 L26이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 서열 번호 3에서의에서의 아미노산 잔기는 E54이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 및 1249로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 E54이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 E54이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 서열 번호 3에서의에서의 아미노산 잔기는 N78이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 및 1249로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 N78이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 화학식 XVI 또는 XVII의 구조, 또는 XVI과 XVII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시되며, 여기서, 대체되는 서열 번호 3에서의 아미노산 잔기는 N78이고, m은 1 내지 6의 정수이며, n은 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909의 정수이다. 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트의 일부 실시 형태에서 화학식 XVI 및 XVII의 화합물에서, m은 2이며, n은 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 및 910으로부터 선택되는 정수이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 500 내지 약 1000이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 550 내지 약 800이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 681이다. 일부 실시 형태에서, n은 약 909이다.
대상체에서 암을 치료하는 방법이 본원에 개시되며, 본 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 암은 고형 종양 암이다. 일부 실시 형태에서, 고형 종양 암은 방광암, 골암, 뇌암, 유방암, 결장직장암, 식도암, 안암, 두경부암, 신장암, 폐암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 또는 전립선암이다. 일부 실시 형태에서, 암은 혈액 악성종양이다. 일부 실시 형태에서, 혈액 악성종양은 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소형 림프구성 림프종(SLL), 소포성 림프종(FL), 미만성 거대 B세포 림프종(DLBCL), 맨틀세포 림프종(MCL), 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 다발성 골수종, 결절외 변연부 B세포 림프종, 결절 변연부 B세포 림프종, 버킷 림프종, 비버킷 고등급 B세포 림프종, 원발성 종격 B세포 림프종(PMBL), 면역모구성 대세포 림프종, 전구체 B-림프모구성 림프종, B세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질세포 골수종, 형질세포종, 종격(흉선) 거대 B세포 림프종, 혈관내 거대 B세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 또는 림프종모양 육아종증이다. 일부 실시 형태에서, 대상체에서의 암은 신장 세포 암종(RCC), 비소세포 폐암(NSCLC), 두경부 편평 세포 암(HNSCC), 고전적 호지킨 림프종(cHL), 원발성 종격동 거대 B 세포 림프종(PMBCL), 요로상피 암종, 현미부수체 불안정 암, 현미부수체 안정 암, 위암, 자궁경부암, 간세포 암종(HCC), 메르켈 세포 암종(MCC), 흑색종, 소세포폐암(SCLC), 식도암, 교모세포종, 중피종, 유방암, 삼중 음성 유방암, 전립선암, 방광암, 난소암, 중등도 내지 저 돌연변이 부담 종양, 피부 편평 세포 암종(CSCC), 편평 세포 피부암(SCSC), 저 발현 내지 비-발현 PD-L1 종양, 해부학적 원발 기원 부위를 넘어 간 및 CNS에 전신적으로 파종된 종양, 및 미만성 거대 B 세포 림프종으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 대상체에서의 암은 신장 세포 암종(RCC), 비소세포 폐암(NSCLC), 요로상피 암종 및 흑색종으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 대상체에서의 암은 비호지킨 림프종(NHL)이다. 일부 실시 형태에서, 대상체에서의 암은 다발성 골수종이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 매주 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 4주에 1회, 5주에 1회, 6주에 1회, 7주에 1회 또는 8주에 1회 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 주 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 또는 4주에 1회 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 주 1회 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 2주에 1회 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 3주에 1회 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 4주에 1회 투여된다.
일부 실시 형태에서, 이러한 양에 상응하는 주어진 제제의 양은 특정 화합물, 질환의 중증도, 치료가 필요한 대상체 또는 숙주의 독자성(예를 들어, 체중)과 같은 인자에 따라 다르지만, 그럼에도 불구하고, 예를 들어 투여되는 특정 제제, 투여 경로, 및 치료받는 대상체 또는 숙주를 비롯한 사례 주변의 특정 상황에 따라 당업계에 알려진 방식으로 통상적으로 결정된다. 일부 경우에, 원하는 용량은 단일 용량으로, 또는 동시에(또는 단기간에 걸쳐) 또는 적절한 간격으로 투여되는 분할 용량으로, 예를 들어 매일 2회, 3회, 4회 이상의 하위용량으로 편리하게 제시된다.
일부 실시 형태에서, 방법들은 IL-15 콘쥬게이트를 이를 필요로 하는 대상체에게 1 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 2 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 4 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 6 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 8 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 10 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 12 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 14 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 16 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 18 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 20 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 22 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 24 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 26 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 28 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 32 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 34 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 36 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 40 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 45 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 50 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 55 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 60 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 65 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 70 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 75 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 80 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 85 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 90 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 95 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 100 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 110 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 120 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 130 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 140 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 150 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 160 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 170 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 180 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 190 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg) 내지 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg)의 범위의 용량으로 투약하는 것을 포함한다. 개별 치료 요법과 관련된 변수의 수가 많고 이러한 권장 값과의 상당한 편차가 드물지는 않기 때문에, 상기 범위는 제안적일 뿐이다. 이러한 투여량은 사용된 화합물의 활성, 치료할 질환 또는 병태, 투여 방식, 개별 대상체의 요건, 치료되는 질환 또는 병태의 중증도, 및 의사의 판단을 비롯한 여러 변수에 따라 달라진다. 일부 실시 형태에서, 이러한 치료 요법의 독성 및 치료 효능은 세포 배양 또는 실험 동물의 표준 제약 절차에 의해 결정된다(LD50(집단의 50%에 치사인 용량) 및 ED50(집단의 50%에 치료 효과적인 용량)의 결정을 포함하나, 이에 한정되지 않음). 독성과 치료 효과 간의 용량비는 치료 지수이며, LD50과 ED50 간의 비로 표시된다. 높은 치료 지수를 나타내는 화합물이 바람직하다. 세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 얻은 데이터는 인간에게 사용하기 위한 투여량의 범위를 정하는 데 사용된다. 이러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 최소 독성으로 ED50을 포함하는 순환 농도의 범위 내에 있다. 투여량은 사용된 투여 형태 및 사용된 투여 경로에 따라 이 범위 내에서 다양하다.
일부 실시 형태에서, 방법들은 IL-15 콘쥬게이트를 이를 필요로 하는 대상체에게 약 1 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 2 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 4 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 6 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 8 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 10 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 12 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 14 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 16 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 18 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 20 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 22 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 24 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 26 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 28 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 30 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 32 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 34 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 36 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 38 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 40 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 42 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 44 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 46 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 48 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 50 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 55 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 60 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 65 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 70 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 75 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 80 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 85 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 90 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 95 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 100 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 110 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 120 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 130 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 140 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 150 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 160 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 170 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 180 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 약 190 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg), 또는 약 200 μg의 IL-15 콘쥬게이트/대상체의 체중(kg)의 용량으로 투약하는 것을 포함한다. 개별 치료 요법과 관련된 변수의 수가 많고 이러한 권장 값과의 상당한 편차가 드물지는 않기 때문에, 상기 양은 제안적일 뿐이다. 이러한 투여량은 사용된 화합물의 활성, 치료할 질환 또는 병태, 투여 방식, 개별 대상체의 요건, 치료되는 질환 또는 병태의 중증도, 및 의사의 판단을 비롯한 여러 변수에 따라 달라진다. 일부 실시 형태에서, 이러한 치료 요법의 독성 및 치료 효능은 세포 배양 또는 실험 동물의 표준 제약 절차에 의해 결정된다(LD50(집단의 50%에 치사인 용량) 및 ED50(집단의 50%에 치료 효과적인 용량)의 결정을 포함하나, 이에 한정되지 않음). 독성과 치료 효과 간의 용량비는 치료 지수이며, LD50과 ED50 간의 비로 표시된다. 높은 치료 지수를 나타내는 화합물이 바람직하다. 세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 얻은 데이터는 인간에게 사용하기 위한 투여량의 범위를 정하는 데 사용된다. 이러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 최소 독성으로 ED50을 포함하는 순환 농도의 범위 내에 있다. 투여량은 사용된 투여 형태 및 사용된 투여 경로에 따라 이 범위 내에서 다양하다.
환자의 상태가 호전되면, 필요에 따라 유지 용량이 투여된다. 이후, 증상에 따라 투여량 또는 투여 빈도, 또는 둘 모두가, 호전된 질환, 장애, 또는 병태가 유지되는 수준으로 감소될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 이러한 양에 상응하는 주어진 제제의 양은 특정 화합물, 질환의 중증도, 치료가 필요한 대상체 또는 숙주의 아이덴티티(예를 들어, 체중)과 같은 인자에 따라 다르지만, 그럼에도 불구하고, 예를 들어 투여되는 특정 제제, 투여 경로, 및 치료받는 대상체 또는 숙주를 비롯한 사례 주변의 특정 상황에 따라 당업계에 알려진 방식으로 통상적으로 결정된다. 일부 경우에, 원하는 용량은 단일 용량으로, 또는 동시에(또는 단기간에 걸쳐) 또는 적절한 간격으로 투여되는 분할 용량으로, 예를 들어 매일 2회, 3회, 4회 이상의 하위용량으로 편리하게 제시된다.
이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포 및 자연 살해(NK) 세포 집단을 확장시키는 방법이 본원에 개시되며, 본 방법은 (a) 세포를 본원에 개시된 IL-5 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계; 및 (b) IL-15를 IL-15Rβ 및 IL-15Rγ 서브유닛과 상호작용시켜 IL-15/IL-15Rβγ 복합체를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서, IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rα 서브유닛에 대한 친화도가 감소하고, IL-15/IL-15Rβγ 복합체는 Teff, Tmem 및 NK 세포의 확장을 자극한다. 일부 실시 형태에서, 세포는 진핵 세포이다. 일부 실시 형태에서, 세포는 포유류 세포이다. 일부 실시 형태에서, 세포는 인간 세포이다.
본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트의 유효량 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물이 본원에 개시된다.
본 발명의 다양한 양태는 첨부된 청구범위에 구체적으로 제시되어 있다. 본 발명의 특징 및 장점은 본 발명의 원리가 이용되는 예시적인 실시 형태를 설명하는 다음의 상세한 설명 및 첨부 도면을 참조하여 더 잘 이해될 것이다.
도 1a 및 도 1b는 천연 IL-15 또는 실시예 2의 IL-15 콘쥬게이트로 처리된 시노몰구스 원숭이 전혈에서의 STAT5 신호전달에 대한 용량 반응(EC50)을 보여준다. 도 1a는 CD8+ T 세포에서의 용량 반응을 보여준다. 도 1b는 NK 세포에서의 용량 반응을 보여준다. (천연 IL-15 = ▲; IL-15_N78[AzK_PEG30] = ●; IL-15_L26[AzK_PEG30] = ◆; IL-15_E54 [AzK_PEG30] =
Figure pct00133
.)
도 2는 실시예 3에서 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]이 투여된 군 2, 3 및 4에서 마우스에 대한 혈장 농도 대 시간 곡선을 예시한다(군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 3은 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 NK 세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다(군 1(비히클 = ○); 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 4는 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 CD8 T-세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 5는 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 Treg 세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 6은 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 NK 세포 집단에서의 %Ki67을 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 7은 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 CD8 T 세포 집단에서의 %Ki67을 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 8은 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 Treg 세포 집단에서의 %Ki67을 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 9는 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 % NK 세포 확장 대 투약 후 일수를 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 10은 실시예 3에 따른 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투여 후 마우스에서의 % 기억 CD8 T-세포 확장 대 투약 후 일수를 예시한다(군 1(비히클) = ○; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■, 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●).
도 11a~도 11b는 실시예 3에 따른 C57BL/6 마우스에서의 1 mg/kg의 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투약 후 5일에서의(도 11b) 및 비히클 투약 후 5일에서의(도 11a) NK 세포 집단(모든 말초 세포에서 게이팅됨)을 보여주는 유세포 분석 플롯을 보여준다.
도 12a~도 12b는 실시예 3에 따른 C57BL/6 마우스에서의 1 mg/kg의 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투약 후 5일에서의(도 12b) 및 비히클 투약 후 5일에서의(도 12a) 기억 CD8+T 집단(CD3+T 세포에서 게이팅됨)을 보여주는 유세포 분석 플롯을 보여준다.
암은 다른 신체 부분으로 침입하거나 퍼질 가능성을 갖는 비정상 세포 성장을 포함하는 복잡한 질환 그룹이다. 암 유발자 및 경로를 표적화하는 방사선 및 화학요법과 같은 암 치료가 성공적일 수 있다. 일부 경우에, 암 세포는 이 치료에 적응될 수 있어서, 이러한 치료의 효능을 제한한다. 면역요법은 수술, 화학요법 또는 방사선과 달리 면역계가 종양 세포를 인식하고 사멸하게 자극한다.
여러 사이토카인은 면역 반응을 촉발하는 이의 능력에 대해 면역요법에 사용된다. 그러나, 사이토카인을 사용하는 현재의 면역요법은 독성 및 비조절된 세포 증식을 포함하는 여러 부작용을 생성한다. 치료를 개선하고 부작용을 감소시키는 특정 T 세포 및 NK 집단을 자극하거나 확장시키는 능력을 갖는 암의 치료에 사용하기 위한 변형된 사이토카인 또는 사이토카인 콘쥬게이트가 본원에 제공된다.
사이토카인은 케모카인, 인터페론, 인터류킨, 림포카인 및 종양 괴사 인자와 같은 세포 신호전달 단백질의 패밀리를 포함한다. 사이토카인은 대식세포, B 림프구, T 림프구 및 비만 세포, 내피 세포, 섬유아세포 및 상이한 기질 세포와 같은 면역 세포에 의해 생산된다. 일부 경우에, 사이토카인은 체액성 면역 반응과 세포계 면역 반응 사이의 균형을 조절한다.
인터류킨은 T 및 B 림프구 및 조혈 세포의 발생 및 분화를 조절하는 신호전달 단백질이다. 인터류킨은 헬퍼 CD4 T 림프구, 단핵구, 대식세포 및 내피 세포에 의해 생산된다. 일부 경우에, 약 15 인터류킨, 인터류킨 1-13, 인터류킨 15 및 인터류킨 17이 있다.
인터류킨-15(IL-15)는 구조가 14 내지 15 kDa 당단백질인 다면발현성 사이토카인이다. IL-15 전사, 번역 및 분비는 다수의 복잡한 기전을 통해 조절된다. IL-15 및 IL-15 수용체 α(IL-15R α, CD215) 단백질은 주로 활성화된 단핵구 및 수지상 세포(DC)에 의해 동시발현된다. 이종이량체 IL-15/IL-15Rα의 전사는 단핵구/DC와 1형 또는 2형 인터페론(IFN) 또는 CD40 라이게이션 또는 NF-kB를 활성화하는 Toll-유사 수용체(TLR)를 통해 작용하는 제제의 상호작용 후에 발생한다. 추가로, IL-15/IL-15Rα 단백질 발현은 주로 번역 및 분비의 수준에서 조절된다.
IL-15는 고유한 α 사슬(IL-15R α), IL-2(CD122)를 갖는 공유된 β 서브유닛(IL-15R β, CD132) 및 여러 사이토카인과 공유된 공통 γ 서브유닛(CD132; IL-15R γ)을 포함하는 이종삼량체성 수용체를 통해 신호전달한다. IL-15Rα는 IL-15에 대한 높은 친화도를 가지며, 이때 Kd는 약 10-11 M이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 T 세포 반응을 조절하기 위해 그리고 후속하여 암의 치료를 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 한정된 이펙터 T-세포 하위집단에서 활성화된 CD4-CD8-, CD4+CD8+, CD4+ 및 CD8+ T 세포의 증식 및 이의 분화를 시뮬레이션하기 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 자연 살해(NK) 세포의 생성 및 증식을 시뮬레이션하기 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 기억 CD8 T 세포, 나이브(
Figure pct00134
) CD8 T 세포 및 NK 세포의 유지 및 생존을 촉진하기 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 기억 CD8 T 세포의 형성을 유도하기 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 NK 세포 표적 특이적 활성화를 프라이밍하기 위해 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 신호전달은 Treg를 확장시키지 않는다.
일부 실시 형태에서, T 세포 반응을 조절하기 위해 그리고 후속하여 암의 치료를 위해 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 개시된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 인터류킨 15 수용체 α(IL-15Rα)와의 결합의 감소를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 결합 친화도의 감소는 야생형 IL-15 폴리펩티드와 IL-15Rα 사이의 결합 친화도에 대비된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 변형된 IL-15 폴리펩티드와 인터류킨 2/인터류킨 15 수용체 βγ(IL-2/IL-15R βγ)의 상호작용에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-15R α 및 IL-15R βγ의 결합 친화도에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는 하나 이상의 변형을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 IL-2/IL-15R βγ와의 결합의 감소를 포함하고, IL-15R α 상호작용은 영향을 받지 않는다.
항종양 반응을 자극하는 능력이 개선된 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 기재된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 안전성 프로파일이 개선된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 반감기를 증가시키기 위한 부위 특이적 페길화를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 부위 특이적 페길화는 반감기를 증가시키고, 생물학적 활성에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 신호전달은 IL-15R βγ에 바이어싱된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 반감기를 증가시키고 독성을 감소시키기 위한 부위 특이적 페길화를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 부위 특이적 페길화는 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 투약을 줄인다. 일부 실시 형태에서, 독성은 IL-15R α 상호작용을 차단하는 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트에 의해 감소한다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 활성은 종양 부위로 제한된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 IL-15의 트랜스-제시(trans-presentation)가 자연 살해(NK) 및 이펙터 세포 증식 및 기능에 필요하지 않도록 부위 특이적 페길화를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 제거가 억제되거나 금지되도록 부위 특이적 페길화를 포함한다.
변형된 IL-15 폴리펩티드 및 IL-15 콘쥬게이트
일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드가 본원에 개시된다. 일부 경우에, 그 변형은 천연 아미노산에 대한 것이다. 일부 경우에, 그 변형은 비천연 아미노산에 대한 것이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 단리되고 변형된 IL-15 폴리펩티드가 본원에 개시된다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 단리되고 정제된 포유류 IL-15, 예를 들어 인간 IL-15 단백질이다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 인간 IL-15 단백질이다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 서열 번호 1, 2, 또는 3에 대해 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 포함한다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 서열 번호 1 또는 2의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 서열 번호 2 또는 3의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 절두된 변이체이다. 일부 경우에, 절두는 N-말단 결실이다. 다른 경우에, 절두는 C-말단 결실이다. 추가의 경우에, 절두는 N-말단 및 C-말단 결실 둘 다를 포함한다. 예를 들어, 절두는 N-말단 또는 C-말단, 또는 말단 둘 다로부터 적어도 또는 약 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 20개 이상의 잔기의 결실일 수 있다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 20개 이상의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 2개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 3개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 4개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 5개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 6개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 7개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 8개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 9개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 또는 약 10개의 잔기의 N-말단 결실을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 기능적 활성 단편이다. 일부 경우에, 기능적 활성 단편은 IL-15 영역 5~114, 10~114, 15~114, 20~114, 1~110, 5~110, 10~110, 15~110, 20~110, 1~105, 5~105, 10~105, 15~105, 20~105, 1~100, 5~100, 10~100, 15~100 또는 20~100을 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에서의 위치를 참조한다. 일부 경우에, 기능적 활성 단편은 IL-15 영역 5~114, 10~114, 15~114 또는 20~114를 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에서의 위치를 참조한다. 일부 경우에, 기능적 활성 단편은 IL-15 영역 1~110, 5~110, 10~110, 15~110 또는 20~110을 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에서의 위치를 참조한다. 일부 경우에, 기능적 활성 단편은 IL-15 영역 1~105, 5~105, 10~105, 15~105 또는 20~105를 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에서의 위치를 참조한다. 일부 경우에, 기능적 활성 단편은 IL-15 영역 1~100, 5~100, 10~100, 15~100 또는 20~100을 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에서의 위치를 참조한다.
일부 실시 형태에서, 기능적 활성 IL-15 단편은 내부 결실을 포함한다. 일부 경우에, 내부 결실은 루프 영역을 포함한다. 일부 경우에, 내부 결실은 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개 이상의 잔기의 결실을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 폴리펩티드는 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, T27, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, A39, K41, L44, L45, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D14, Q17, S18, K41, S51, L52, G55, D56, A57, S58, S75, S76, N77, N79, V80, T81, S83, G84, E92, K94, N95, K97 및 E98로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, N4, S7, D8, K11, D61, T62, E64, N65, I68, L69 및 N72로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V3, I6, K10, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 및 E93으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Y26, E46, V49, E53 및 L25로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V3, K10, S29, D30, H32, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N4, S7, K11 및 D61로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 L25, E53, N77 및 S83로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 L25 및 E53으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53, T24, N4, K11, N65, L69, S18, H20 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46 및 Y26으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Y26이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V49이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 T24이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N4, K11, N65, L69, S18, H20 및 S83으로부터 선택된다. IL-15에 대한 예시적인 아미노산 서열은 하기 표 1에 예시되어 있다.
[표 1]
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Figure pct00137
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Figure pct00139
Figure pct00140
Figure pct00141
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X = 비천연 아미노산을 포함하는 부위.
[AzK] = N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신. 이 화합물은 Chemical Abstracts 등록 번호 1167421-25-1을 갖는다.
[AzK_PEG] = 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 포함하는 화합물을 형성하도록, N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신이 DBCO-매개 클릭 화학을 통하여 PEG에 안정하게 콘쥬게이션된 것. 예를 들어, 명시된 경우, PEG30는 메톡시 기로 캡핑된, 평균 분자량이 30 kDa인 선형 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 나타낸다. 예를 들어, 명시된 경우, PEG40는 메톡시 기로 캡핑된, 평균 분자량이 40 kDa인 분지형 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 나타낸다. 클릭 반응으로부터 생성된 위치이성질체들의 비는 약 1:1 또는 1:1 초과이다. 용어 "DBCO"는 실시예 1의 반응식 1에 예시된 mPEG-DBCO 화합물을 포함하는 것과 같이 디벤조시클로옥틴 기를 포함하는 화학적 모이어티를 의미한다. 메톡시 PEG 기의 예시적인 구조는 실시예 1의 반응식 1 및 2의 mPEG-DBCO 구조에 예시되어 있다.
[AzK_L1_PEG] = 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 포함하는 화합물을 형성하도록 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신이 DBCO-매개 클릭 화학을 통하여 PEG에 안정하게 콘쥬게이션된 것. 예를 들어, 명시된 경우, PEG5kD는 메톡시 기로 캡핑된, 평균 분자량이 30 kDa인 선형 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 나타낸다. 클릭 반응으로부터 생성된 위치이성질체들의 비는 약 1:1 또는 1:1 초과이다. 용어 "DBCO"는 실시예 1의 반응식 1 또는 2에 예시된 mPEG-DBCO 화합물을 포함하는 것과 같이 디벤조시클로옥틴 기를 포함하는 화학적 모이어티를 의미한다.
일부 경우에, 표 1의 서열은 N-말단 메티오닌(Met)을 포함한다. 일부 경우에, 표 1의 서열은 N-말단 메티오닌을 포함하고, 여기서 N-말단 메티오닌은 N-포르밀 메티오닌(fMet)이다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 펩티드의 혼합물을 포함하고, 여기서 상기 혼합물은 N-말단 메티오닌 잔기가 있는 서열 및 이것이 없는 서열 둘 다를 포함한다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 펩티드의 혼합물을 포함하고, 여기서 상기 혼합물은 N-말단 메티오닌 잔기 및 N-포르밀메티오닌 잔기를 갖는 서열 둘 다를 포함한다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 펩티드의 혼합물을 포함하고, 여기서 상기 혼합물은 N-말단, N-포르밀메티오닌 잔기가 있는 서열 및 이것이 없는 서열 둘 다를 포함한다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단에 근접하게 위치한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 근접은 N-말단 잔기로부터 적어도 1개의 잔기만큼 떨어지고 N-말단 잔기로부터 최대 약 50개의 잔기만큼 떨어져 위치한 잔기를 의미한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 10개, 20개, 30개, 40개 또는 50개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 10개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 20개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 30개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 40개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기로부터 처음 50개의 잔기 내에 위치한다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 N-말단 잔기이다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단에 근접하게 위치한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 근접은 C-말단 잔기로부터 적어도 1개의 잔기만큼 떨어지고 C-말단 잔기로부터 최대 약 50개의 잔기만큼 떨어져 위치한 잔기를 의미한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 10개, 20개, 30개, 40개 또는 50개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 10개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 20개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 30개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 40개의 잔기 내에 위치한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기로부터 처음 50개의 잔기 내에 위치한다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 C-말단 잔기이다.
일부 실시 형태에서, 증식성 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하는 방법으로서, 본원에 기술된 콘쥬게이트(예를 들어, IL-15 콘쥬게이트)의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 본원에 기술된다.
본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트의 유효량 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물이 본원에 개시된다.
일부 실시 형태에서, 증식성 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하는 방법으로서, 표 1에 기술된 콘쥬게이트(예를 들어, IL-15 콘쥬게이트)의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 본원에 기술된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 1~99를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 4~99를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 4~9를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 10~15를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16~21을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22~27을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28~33을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 I의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 II의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 III의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 IV의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 V의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 VI의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 VII의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 VIII의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 IX의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 X의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 XI의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 XII의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 화학식 XIII의 구조를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 5를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 6을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 7을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 8를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 9를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 10을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 11을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 12를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 13을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 14를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 15를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 17를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 18를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 19를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 20을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 21을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 34를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 35를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 36을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 37를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 38를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 39를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48을 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 52를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 53를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 54를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 55를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 56를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 57를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 58를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 59를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 60를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 61를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 62를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 63를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 64를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 65를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 66를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 67를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 68를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 69를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 82를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 83를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 84를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 85를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 86를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 87를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 소정 아미노산 위치에서 변형된 IL-15 콘쥬게이트가 본원에 기술된다. 일부 경우에, 변형은 천연 아미노산에 대한 것이다. 일부 경우에, 변형은 비천연 아미노산에 대한 것이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 단리되고 변형된 IL-15 폴리펩티드가 본원에 개시된다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 서열 번호 4 내지 99 중 어느 하나에 대해 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 포함한다.
일부 경우에, PEG 기는 특정 구조로 제한되지는 않는다. 일부 경우에, PEG는 선형(예를 들어, 말단 캡핑된, 예컨대 알콕시 PEG 또는 이작용성 PEG), 분지형 또는 다중 아암형(예를 들어, 포크형 PEG 또는 폴리올 코어에 부착된 PEG), 수지상(또는 별) 구조이고, 각각에는 하나 이상의 분해성 연결이 있거나 없다. 또한, 수용성 중합체의 내부 구조는 다양한 반복 패턴으로 구성될 수 있고, 동종중합체, 교번 공중합체, 랜덤 공중합체, 블록 공중합체, 교번 삼원중합체, 랜덤 삼원중합체, 및 블록 삼원중합체로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
PEG는 전형적으로 다수의 (OCH2CH2) 단량체[또는 PEG의 정의 방법에 따라 (CH2CH2O) 단량체]를 포함할 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 반복 단위의 수는 "(OCH2CH2)n"에서 아래 첨자 "n"에 의해 식별된다. 따라서, (n)의 값은 일반적으로 다음 범위 중 하나 이상에 속한다: 2 내지 약 3400, 약 100 내지 약 2300, 약 100 내지 약 2270, 약 136 내지 약 2050, 약 225 내지 약 1930, 약 450 내지 약 1930, 약 1200 내지 약 1930, 약 568 내지 약 2727, 약 660 내지 약 2730, 약 795 내지 약 2730, 약 795 내지 약 2730, 약 909 내지 약 2730, 및 약 1,200 내지 약 1,900. 분자량이 알려진 임의의 소정 중합체에 대해, 중합체의 총 중량 평균 분자량을 반복 단량체의 분자량으로 나누어 반복 단위의 수(즉, "n")를 결정할 수 있다.
일부 경우에, PEG는 말단 캡핑된 중합체, 즉 저급 C1-6 알콕시기 또는 히드록실기와 같은 비교적 불활성인 기로 캡핑된 적어도 하나의 말단을 갖는 중합체이다. 중합체가 PEG인 경우, 메톡시-PEG(일반적으로 mPEG라고 함)가 사용될 수 있으며, 이는 PEG의 선형 형태로서, 중합체의 하나의 말단은 메톡시(-OCH3) 기이고, 다른 말단은 히드록실기 또는 필요에 따라 화학적으로 변형될 수 있는 다른 작용기이다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 선형 또는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 평균 분자량이 약 100 Da 내지 약 150,000 Da인 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 예시적인 범위는 예를 들어 5,000 Da 초과 내지 약 100,000 Da의 범위, 약 6,000 Da 내지 약 90,000 Da의 범위, 약 10,000 Da 내지 약 85,000 Da의 범위, 10,000 Da 초과 내지 약 85,000 Da의 범위, 약 20,000 Da 내지 약 85,000 Da의 범위, 약 53,000 Da 내지 약 85,000 Da의 범위, 약 25,000 Da 내지 약 120,000 Da의 범위, 약 29,000 Da 내지 약 120,000 Da의 범위, 약 35,000 Da 내지 약 120,000 Da의 범위, 및 약 40,000 Da 내지 약 120,000 Da의 범위의 중량 평균 분자량을 포함한다. PEG 기에 대한 예시적인 중량 평균 분자량은 약 100 Da, 약 200 Da, 약 300 Da, 약 400 Da, 약 500 Da, 약 600 Da, 약 700 Da, 약 750 Da, 약 800 Da, 약 900 Da, 약 1,000 Da, 약 1,500 Da, 약 2,000 Da, 약 2,200 Da, 약 2,500 Da, 약 3,000 Da, 약 4,000 Da, 약 4,400 Da, 약 4,500 Da, 약 5,000 Da, 약 5,500 Da, 약 6,000 Da, 약 7,000 Da, 약 7,500 Da, 약 8,000 Da, 약 9,000 Da, 약 10,000 Da, 약 11,000 Da, 약 12,000 Da, 약 13,000 Da, 약 14,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 22,500 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 55,000 Da, 약 60,000 Da, 약 65,000 Da, 약 70,000 Da, 약 75,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 95,000 Da, 및 약 100,000 Da을 포함한다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 상기에 개시된 바와 같은 평균 분자량을 갖는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 상기에 개시된 바와 같은 평균 분자량을 갖는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 정의된 분자량 ± 10%, 또는 15% 또는 20% 또는 25%를 갖는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 예를 들어, 30,000 Da ± 3000 Da, 또는 30,000 Da ± 4,500 Da, 또는 30,000 Da ± 6,000 Da의 분자량을 갖는 PEG 기를 포함하는 IL-15 콘쥬게이트는 본 발명의 범주 내에 포함된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 평균 분자량이 약 5,000 Da 내지 약 60,000 Da인 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 5,500 Da, 약 6,000 Da, 약 7,000 Da, 약 7,500 Da, 약 8,000 Da, 약 9,000 Da, 약 10,000 Da, 약 11,000 Da, 약 12,000 Da, 약 13,000 Da, 약 14,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 22,500 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 55,000 Da, 약 60,000 Da, 약 65,000 Da, 약 70,000 Da, 약 75,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 95,000 Da, 및 약 100,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 또는 분지형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 PEG 기이다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 평균 분자량이 약 5,000 Da 내지 약 60,000 Da인 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 5,500 Da, 약 6,000 Da, 약 7,000 Da, 약 7,500 Da, 약 8,000 Da, 약 9,000 Da, 약 10,000 Da, 약 11,000 Da, 약 12,000 Da, 약 13,000 Da, 약 14,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 22,500 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 55,000 Da, 약 60,000 Da, 약 65,000 Da, 약 70,000 Da, 약 75,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 95,000 Da, 및 약 100,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 10,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 20,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 30,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 50,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 정의된 분자량 ± 10%, 또는 15% 또는 20% 또는 25%를 갖는 선형 메톡시 PEG 기이다. 예를 들어, 30,000 Da ± 3000 Da, 또는 30,000 Da ± 4,500 Da, 또는 30,000 Da ± 6,000 Da의 분자량을 갖는 선형 메톡시 PEG 기를 포함하는 IL-15 콘쥬게이트는 본 발명의 범주 내에 포함된다.
일부 실시 형태에서, n은 존재하는 경우, 100 내지 약 1150, 또는 약 100 내지 약 1100, 또는 약 100 내지 약 1000, 또는 약 100 내지 약 900, 또는 약 100 내지 약 750, 또는 약 100 내지 약 700, 또는 약 100 내지 약 600, 또는 약 100 내지 약 575, 또는 약 100 내지 약 500, 또는 약 100 내지 약 450, 또는 약 100 내지 약 350, 또는 약 100 내지 약 275, 또는 약 100 내지 약 230, 또는 약 150 내지 약 475, 또는 약 150 내지 약 340, 또는 약 113 내지 약 340, 또는 약 450 내지 약 800, 또는 약 454 내지 약 796, 또는 약 454 내지 약 682, 또는 약 340 내지 약 795, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 568 내지 약 909, 또는 약 227 내지 약 1500, 또는 약 225 내지 약 2280, 또는 약 460 내지 약 2160, 또는 약 460 내지 약 2050, 또는 약 341 내지 약 1820, 또는 약 341 내지 약 1710, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 225 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1250, 또는 약 341 내지 약 1136, 또는 약 341 내지 약 1023, 또는 약 341 내지 약 910, 또는 약 341 내지 약 796, 또는 약 341 내지 약 682, 또는 약 341 내지 약 568, 또는 약 114 내지 약 1000, 또는 약 114 내지 약 950, 또는 약 114 내지 약 910, 또는 약 114 내지 약 800, 또는 약 114 내지 약 690, 또는 약 114 내지 약 575의 정수인 IL-15 콘쥬게이트가 있다. 일부 실시 형태에서, n은 존재하는 경우, 2, 5, 10, 11, 22, 23, 113, 114, 227, 228, 340, 341, 454, 455, 568, 569, 680, 681, 682, 794, 795, 796, 908, 909, 910, 1021, 1022, 1023, 1135, 1136, 1137, 1249, 1250, 1251, 1362, 1363, 1364, 1476, 1477, 1478, 1589, 1590, 1591, 1703, 1704, 1705, 1817, 1818, 1819, 1930, 1931, 1932, 2044, 2045, 2046, 2158, 2159, 2160, 2271, 2272, 2273, 2839, 2840, 2841, 2953, 2954, 2955, 3408, 3409, 3410, 3976, 3977, 3978, 4544, 4545, 및 4546으로부터 선택되는 정수인 IL-15 콘쥬게이트가 있다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 평균 분자량이 약 5,000 Da 내지 약 60,000 Da인 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 5,500 Da, 약 6,000 Da, 약 7,000 Da, 약 7,500 Da, 약 8,000 Da, 약 9,000 Da, 약 10,000 Da, 약 11,000 Da, 약 12,000 Da, 약 13,000 Da, 약 14,000 Da, 약 15,000 Da, 약 20,000 Da, 약 22,500 Da, 약 25,000 Da, 약 30,000 Da, 약 35,000 Da, 약 40,000 Da, 약 45,000 Da, 약 50,000 Da, 약 55,000 Da, 약 60,000 Da, 약 65,000 Da, 약 70,000 Da, 약 75,000 Da, 약 80,000 Da, 약 90,000 Da, 약 95,000 Da, 및 약 100,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da, 약 10,000 Da, 약 20,000 Da, 약 30,000 Da, 약 50,000 Da, 또는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 5,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 10,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 20,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 30,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 50,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, PEG 기는 약 60,000 Da의 평균 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트에 포함된 PEG 기는 정의된 분자량 ± 10%, 또는 15% 또는 20% 또는 25%를 갖는 분지형 메톡시 PEG 기이다. 예를 들어, 30,000 Da ± 3000 Da, 또는 30,000 Da ± 4,500 Da, 또는 30,000 Da ± 6,000 Da의 분자량을 갖는 분지형 메톡시 PEG 기를 포함하는 IL-15 콘쥬게이트는 본 발명의 범주 내에 포함된다.
일부 실시 형태에서, 예시적인 PEG 기는 Quanta Biodesign, Ltd의 선형 또는 분지형 이산 PEG(dPEG); Nektar Therapeutics의 선형, 분지형, 또는 포크형 PEG; 및 JenKem Technology의 Y형 PEG 유도체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 변형된 IL-15 폴리펩티드로서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 IL-15 폴리펩티드와 인터류킨 15 수용체 α(IL-15R α)의 결합 친화도를 선택적으로 감소시키는 잔기 위치에 있다. 일부 실시 형태에서, 결합 친화도의 감소는 야생형 IL-15 폴리펩티드와 IL-15Rα 사이의 결합 친화도에 대비된다. 일부 실시 형태에서, IL-15R α에 대한 변형된 IL-15 폴리펩티드의 결합은 변형된 IL-15 폴리펩티드와 인터류킨 2/ 인터류킨 15 수용체 βγ(IL-2/IL-15R βγ)의 상호작용에 영향을 미치지 않거나, 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-2/IL-15R βγ의 상호작용을 개선한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 및 E93으로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Y26, E46, V49, E53 및 L25로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 A23, T24, E89 및 E93으로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D22, L44, Q48 및 E90으로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Y26이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E46이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V49이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E53이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 PEG를 추가로 포함한다. 일부 경우에, PEG는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 및 E93으로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 증가된 반감기를 위해 PEG를 추가로 포함한다. 일부 경우에, PEG는 증가된 반감기를 위해 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 경우에, PEG는 N71, N72 및 N77로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 경우에, PEG에 콘쥬게이션된 잔기는 천연 아미노산으로 돌연변이된다. 다른 경우에, PEG에 콘쥬게이션된 잔기는 비천연 아미노산으로 돌연변이된다. 추가의 경우에, N71, N72 또는 N77에서의 돌연변이는 CMC 조건(예를 들어, 수율, 순도, 안정성, 응집의 감소, 및/또는 단백질 폴딩의 개선), 효력, 또는 이의 조합을 추가로 개선한다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 변형된 IL-15 폴리펩티드로서, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-2/IL-15R β, IL-15Rγ, 또는 이의 조합의 결합 친화도를 선택적으로 감소시키는 잔기 위치에 있다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15는 IL-15R α와의 상호작용에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E28, S29, D30, V31, H32, P33, D61, T62, E64, N65, I68, L69, N72, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-2/IL-15R β의 결합 친화도를 선택적으로 감소시키는 잔기 위치에 있다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, N4, S7, D8, K11, D61, T62, E64, N65, I68, L69 및 N72로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N4, S7, K11 및 D61로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D8, E64, N65, I68 및 N72로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N1, T62 및 L69로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N4이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S7이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 K11이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D61이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-2/IL-15Rγ의 결합 친화도를 선택적으로 감소시키는 잔기 위치에 있다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V3, I6, K10, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V3, K10, S29, D30, H32, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E28, P33, S102 및 V104로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 I6 및 V31로부터 선택된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V3이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 K10이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S29이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D30이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 H32이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 H105이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Q108이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 M109이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 I111이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N112이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 T113이다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S114이다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 PEG를 추가로 포함한다. 일부 경우에, PEG는 N1, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E28, S29, D30, V31, H32, P33, D61, T62, E64, N65, I68, L69, N72, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 증가된 반감기를 위해 PEG를 추가로 포함한다. 일부 경우에, PEG는 증가된 반감기를 위해 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 경우에, PEG는 N71, N72 및 N77로부터 선택된 잔기 위치에서 콘쥬게이션된다. 일부 경우에, PEG에 콘쥬게이션된 잔기는 천연 아미노산으로 돌연변이된다. 다른 경우에, PEG에 콘쥬게이션된 잔기는 비천연 아미노산으로 돌연변이된다. 추가의 경우에, N71, N72 또는 N77에서의 돌연변이는 CMC 조건(예를 들어, 수율, 순도, 안정성, 응집의 감소, 및/또는 단백질 폴딩의 개선), 효력, 또는 이의 조합을 추가로 개선한다.
일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 변형된 IL-15 폴리펩티드로서, 적어도 하나의 비천연 아미노산은 변형된 IL-15 폴리펩티드와 IL-15R α 및 IL-15R βγ의 결합 친화도에 영향을 미치지 않는 잔기 위치에 있다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 증가된 반감기를 위해 PEG를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15는 생물학적 활성의 변화 없이 PEG를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 잔기는 반감기 연장을 위해 변형된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D14, Q17, S18, K41, S51, L52, G55, D56, A57, S58, S75, S76, N77, N79, V80, T81, S83, G84, E92, K94, N95, K97 및 E98로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E13, L15, M19, H20, K36, V37, T38, S54, H60, I67, N71, G78, K86, E87 및 Q101로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 I21, S34, C35, L44, V63, S73, L74, E82, C85, C88, L91, I96, L100 및 F110으로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N71, N72 및 N77로부터 선택되고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N77 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D14이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 Q17이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S18이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 K41이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S51이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 L52이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 G55이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 D56이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 A57이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S58이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S75이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S76이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N79이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 V80이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 T81이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 S83이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 G84이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E92이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 K94이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 N95이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 K97이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 잔기 위치는 E98이다. 일부 경우에, N71, N72 또는 N77에서의 돌연변이는 천연 아미노산에 대한 돌연변이를 포함한다. 일부 경우에, N71, N72 또는 N77에서의 돌연변이는 CMC 조건(예를 들어, 수율, 순도, 안정성, 응집의 감소, 및/또는 단백질 폴딩의 개선), 효력, 또는 이의 조합을 추가로 개선한다.
일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 폴리펩티드는 IL-15 콘쥬게이트를 생성하기 위해 콘쥬게이팅 모이어티에 추가로 콘쥬게이션된다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 아미노산 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, T27, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, A39, K41, L44, L45, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 또는 S114에 있고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 경우에, 적어도 하나의 비천연 아미노산의 아미노산 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 또는 S114에 있다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 적어도 하나의 비천연 아미노산에 결합된다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 N-말단 또는 C-말단 아미노산 잔기에 결합된다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 적어도 하나의 비천연 아미노산 또는 말단 잔기에 직접적으로 결합된다. 다른 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 하기 기재된 링커를 통해 적어도 하나의 비천연 아미노산 또는 말단 잔기에 간접적으로 결합된다.
일부 실시 형태에서, 야생형 IL-15 폴리펩티드에 비해 IL-15 수용체 α(IL-15Rα) 서브유닛에 대한 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 친화도의 감소는 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 99%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 10%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 20%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 40%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 50%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 60%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 80%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 90%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 95%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 100%이다.
일부 실시 형태에서, 야생형 IL-15 폴리펩티드에 비해 IL-15 수용체 α(IL-15Rα) 서브유닛에 대한 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 친화도의 감소는 약 1배, 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 7배, 8배, 9배, 10배 이상이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 1배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 2배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 4배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 5배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 6배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 8배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 10배이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rα와 상호작용하지 않는다.
일부 실시 형태에서, 야생형 IL-15 폴리펩티드에 비해 IL-2 수용체(IL-2R) 서브유닛에 대한 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 친화도의 감소는 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 99%이다. 일부 실시 형태에서, IL-2R 서브유닛은 IL-2R βγ이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 10%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 20%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 40%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 50%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 60%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 80%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 90%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 95%이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 100%이다.
일부 실시 형태에서, 야생형 IL-15 폴리펩티드에 비해 IL-2 수용체(IL-2R) 서브유닛에 대한 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 친화도의 감소는 약 1배, 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 7배, 8배, 9배, 10배 이상이다. 일부 실시 형태에서, IL-2R 서브유닛은 IL-2R βγ이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 1배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 2배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 4배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 5배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 6배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 8배이다. 일부 실시 형태에서, 친화도의 감소는 약 10배이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 IL-2Rα와 상호작용하지 않는다.
일부 실시 형태에서, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 반감기의 증대를 갖는다. 일부 경우에, 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기와 비교된다.
일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 90분, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 18시간, 24시간, 36시간, 48시간, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 10일, 12일, 14일, 21일, 28일, 30일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 90분 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 2시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 3시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 4시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 5시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 6시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 10시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 12시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 18시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 24시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 36시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 48시간 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 3일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 4일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 5일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 6일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 7일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 10일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 12일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 14일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 21일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 28일 이상 더 길다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기보다 적어도 30일 이상 더 길다.
일부 경우에, IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 반감기의 증대는 야생형 IL-15 단백질 또는 야생형 IL-15 콘쥬게이트의 반감기와 비교하여 약 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 18시간, 24시간, 36시간, 48시간, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 10일, 12일, 14일, 21일, 28일 또는 30일이다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 90분의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 2시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 3시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 4시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 5시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 6시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 7시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 8시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 9시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 10시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 11시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 12시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 18시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 24시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 36시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 48시간의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 3일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 4일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 5일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 6일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 7일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 10일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 12일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 14일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 21일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 28일의 반감기 증대를 갖는다. 일부 경우에, 생물학적 활성 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트는 약 30일의 반감기 증대를 갖는다.
일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 인터류킨 15 수용체 βγ(IL-15Rβγ) 신호전달 복합체와의 상당한 신호전달 효력을 보유한다. 일부 경우에, 신호전달 효력은 야생형 IL-15 폴리펩티드와 IL-15Rβγ 사이의 신호전달 효력과 비교된다. 일부 경우에, 변형된 IL-15/IL-15Rβγ 복합체와 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체 사이의 수용체 신호전달 효력의 차이는 1000배 미만, 500배 미만, 200배 미만, 100배 미만, 50배 미만, 10배 미만, 5배 미만, 4배 미만, 3배 미만, 2배 미만 또는 1배 미만이다. 일부 경우에, 변형된 IL-15/IL-15Rβγ 복합체와 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체 사이의 수용체 신호전달 효력의 차이는 10배 초과, 20배 초과, 30배 초과, 40배 초과, 50배 초과, 100배 초과, 200배 초과, 300배 초과, 400배 초과 또는 500배 초과이다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 부분 작용제, 예를 들어 수용체(예를 들어, IL-15βγ 신호전달 복합체)를 활성화하지만, 완전 작용제에 비해 그 수용체에서 오직 부분 효능을 갖는 작용제이다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 완전 작용제, 예를 들어 최대 반응에서 수용체(예를 들어, IL-15βγ 신호전달 복합체)를 활성화하는 작용제이다.
일부 경우에, 수용체 신호전달 효력은 EC50 값에 의해 측정된다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체의 EC50 값과 1000배 미만, 500배 미만, 200배 미만, 100배 미만, 50배 미만, 10배 미만, 5배 미만, 4배 미만, 3배 미만, 2배 미만 또는 1배 미만으로 상이한 EC50 값을 제공한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체의 EC50 값과 10배 초과, 20배 초과, 30배 초과, 40배 초과, 50배 초과, 100배 초과, 200배 초과, 300배 초과, 400배 초과 또는 500배 초과로 상이한 ED50 값을 제공한다.
일부 경우에, 수용체 신호전달 효력은 ED50 값에 의해 측정된다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체의 ED50 값과 1000배 미만, 500배 미만, 200배 미만, 100배 미만, 50배 미만, 10배 미만, 5배 미만, 4배 미만, 3배 미만, 2배 미만 또는 1배 미만으로 상이한 ED50 값을 제공한다. 일부 경우에, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 야생형 IL-15/IL-15Rβγ 복합체의 ED50 값과 10배 초과, 20배 초과, 30배 초과, 40배 초과, 50배 초과, 100배 초과, 200배 초과, 300배 초과, 400배 초과 또는 500배 초과로 상이한 ED50 값을 제공한다.
일부 실시 형태에서, IL-15 폴리펩티드는 화학합성, 공장생산 및 품질관리(CMC: Chemistry, Manufacturing and Control) 단계 동안 반감기의 연장, 안정성의 개선, 정제 수율의 개선, 순도의 개선, 응집의 감소, 단백질 폴딩의 개선 또는 이들의 조합을 위해 변형(예를 들어, 페길화)된다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 아미노산 위치 N71, N72, 또는 N77에서 변형되며, 여기서, 상기 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 CMC 단계 동안 반감기의 연장, 안정성의 개선, 정제 수율의 개선, 순도의 개선, 응집의 감소, 단백질 폴딩의 개선 또는 이들의 조합을 위해 예를 들어 페길화를 통해 잔기 N77에서 변형된다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 또는 S114의 위치에서 추가로 변형된다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 또는 E93의 위치에서 추가로 변형되고, 여기서 변형은 IL-15Rα와의 상호작용을 손상시킨다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 N1, N4, S7, D8, K11, D61, T62, E64, N65, I68, L69 또는 N72의 위치에서 추가로 변형되고, 여기서 변형은 IL-15Rβ와의 상호작용을 손상시킨다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 V3, I6, K10, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 또는 S114의 위치에서 추가로 변형되고, 여기서 변형은 IL-15Rγ와의 상호작용을 손상시킨다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 또는 F110의 위치에서 추가로 변형되고, 여기서 변형은 반감기 연장을 개선한다. 일부 경우에, IL-15 폴리펩티드는 IL-15Rα와의 상호작용의 손상, IL-15Rβ와의 상호작용의 손상, IL-15Rγ와의 상호작용의 손상, 반감기 연장의 개선, 또는 이들의 조합을 위해 상기 위치 중 하나 이상에서 추가로 변형된다.
IL-15 콘쥬게이트 전구체
변형된 IL-15 폴리펩티드를 포함하는 IL-15 콘쥬게이트 전구체가 본원에 개시되고, 여기서 하나 이상의 아미노산은 야생형 아미노산으로부터 돌연변이된다. 이러한 전구체는 종종, 질환 또는 병태의 치료를 위해 본원에 개시된 방법과 함께 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 전구체는 콘쥬게이션되지 않는다. 이러한 돌연변이는 다양하게 부가, 결실, 또는 치환을 포함한다. 일부 경우에, 부가는 IL-15 폴리펩티드의 N-말단, C-말단, 또는 내부 영역에서 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개 이상의 잔기의 포함을 포함한다. 추가의 경우에, 결실은 IL-15 폴리펩티드의 N-말단, C-말단으로부터, 또는 내부 영역 내에 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개 이상의 잔기의 제거를 포함한다.
천연 아미노산 및 비천연 아미노산
일부 실시 형태에서, (예를 들어, IL-15 폴리펩티드 내의) 본원에 개시된 아미노산 잔기는 콘쥬게이팅 모이어티에 결합하기 전에(또는 이것과 반응하기 전에) 라이신, 시스테인, 히스티딘, 아르기닌, 아스파르트산, 글루탐산, 세린, 트레오닌 또는 티로신으로 돌연변이된다. 예를 들어, 라이신, 시스테인, 히스티딘, 아르기닌, 아스파르트산, 글루탐산, 세린, 트레오닌 또는 티로신의 측쇄는 본원에 개시된 콘쥬게이팅 모이어티에 결합할 수 있다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 시스테인, 라이신 또는 히스티딘으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 시스테인으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 라이신으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 히스티딘으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 티로신으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 트립토판으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 N-말단 또는 C-말단에 근접하게, N-말단 또는 C-말단에, 또는 내부 잔기 위치에 위치한다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 N-말단 또는 C-말단 잔기이고, 돌연변이는 시스테인 또는 라이신으로의 돌연변이이다. 일부 경우에, 아미노산 잔기는 N-말단 또는 C-말단 잔기에 근접하게(예를 들어, N-말단 또는 C-말단 잔기로부터 50개, 40개, 30개, 20개, 또는 10개 잔기 내에) 위치하고, 돌연변이는 시스테인 또는 라이신으로의 돌연변이이다.
일부 경우에, 아미노산 잔기는 N-말단 또는 C-말단 잔기에 부가되고, 즉 IL-15 폴리펩티드는 N-말단 또는 C-말단에서 추가의 아미노산 잔기를 포함하고, 추가의 아미노산 잔기는 시스테인 또는 라이신이다. 일부 경우에, 추가의 아미노산 잔기는 시스테인이다. 일부 경우에, 추가의 아미노산은 콘쥬게이팅 모이어티에 콘쥬게이션된다.
일부 실시 형태에서, (예를 들어, IL-15 폴리펩티드 내의) 본원에 기술된 아미노산 잔기는 비천연 아미노산으로 돌연변이된다. 일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 콘쥬게이팅 모이어티와 콘쥬게이션되지 않는다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 폴리펩티드는 비천연 아미노산을 포함하고, 여기서 IL-15는 상기 단백질에 콘쥬게이션되며, 부착점은 비천연 아미노산이 아니다.
일부 실시 형태에서, (예를 들어, IL-15 폴리펩티드 내의) 본원에 개시된 아미노산 잔기는 콘쥬게이팅 모이어티에 결합하기 전에 비천연 아미노산으로 돌연변이된다. 일부 경우에, 비천연 아미노산으로의 돌연변이는 면역계의 자가-항원 반응을 방지하거나 최소화한다. 본원에 사용된 용어 "비천연 아미노산"은 단백질에서 자연 발생하는 20개 아미노산 이외의 아미노산을 지칭한다. 비천연 아미노산의 비제한적인 예는 p-아세틸-L-페닐알라닌, p-요오도-L-페닐알라닌, p-메톡시페닐알라닌, O-메틸-L-티로신, p-프로파르길옥시페닐알라닌, p-프로파르길-페닐알라닌, L-3-(2-나프틸)알라닌, 3-메틸-페닐알라닌, O-4-알릴-L-티로신, 4-프로필-L-티로신, 트리-O-아세틸-GlcNAcp-세린, L-도파, 플루오르화 페닐알라닌, 이소프로필-L-페닐알라닌, p-아지도-L-페닐알라닌, p-아실-L-페닐알라닌, p-벤조일-L-페닐알라닌, p-보로노페닐알라닌, O-프로파르길티로신, L-포스포세린, 포스포노세린, 포스포노티로신, p-브로모페닐알라닌, 셀레노시스테인, p-아미노-L-페닐알라닌, 이소프로필-L-페닐알라닌, N6-[(2-아지도에톡시)카르보닐]-L-라이신(AzK), 티로신 아미노산의 비천연 유사체; 글루타민 아미노산의 비천연 유사체; 페닐알라닌 아미노산의 비천연 유사체; 세린 아미노산의 비천연 유사체; 트레오닌 아미노산의 비천연 유사체; 알킬, 아릴, 아실, 아지도, 시아노, 할로, 히드라진, 히드라지드, 히드록실, 알케닐, 알키닐, 에테르, 티올, 술포닐, 셀레노, 에스테르, 티오산, 보레이트, 보로네이트, 포스포, 포스포노, 포스핀, 복소환식, 에논, 이민, 알데히드, 히드록실아민, 케토 또는 아미노 치환된 아미노산, 또는 이들의 조합; 광활성화 가교결합제를 갖는 아미노산; 스핀 표지된 아미노산; 형광 아미노산; 금속 결합 아미노산; 금속 함유 아미노산; 방사성 아미노산; 광 케이징된 및/또는 광이성질체화 아미노산; 비오틴 또는 비오틴-유사체 함유 아미노산; 케토 함유 아미노산; 폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리에테르를 포함하는 아미노산; 무거운 원자 치환된 아미노산; 화학적으로 절단 가능한 또는 광 절단 가능한 아미노산; 길쭉한 측쇄를 갖는 아미노산; 독성 기를 함유하는 아미노산; 당 치환된 아미노산; 탄소 연결된 당 함유 아미노산; 산화환원 활성 아미노산; a-히드록시 함유 산; 아미노 티오 산; α,α-이치환된 아미노산; β-아미노산; 프롤린 또는 히스티딘 이외의 환식 아미노산 및 페닐알라닌, 티로신 또는 트립토판 이외의 방향족 아미노산을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 선택적 반응기, 또는 표적 폴리펩티드의 부위 선택적 표지를 위한 반응기를 포함한다. 일부 경우에, 화학은 쌍직교성 반응(예를 들어, 생체적합성 및 선택적 반응)이다. 일부 경우에, 화학은 Cu(I)-촉매 또는 "구리 비함유" 알킨-아지드 트리아졸 형성 반응, Staudinger 라이게이션, 역전자 요구 Diels-Alder(IEDDA) 반응, "포토-클릭" 화학, 또는 금속 매개 공정, 예컨대 올레핀 복분해, 및 Suzuki-Miyaura 또는 Sonogashira 교차-커플링이다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 예를 들어 UV 조사시 가교하는 광반응기를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 광 케이징된 아미노산을 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 파라-치환된, 메타-치환된 또는 오르토-치환된 아미노산 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 p-아세틸-L-페닐알라닌, p-아지도메틸-L-페닐알라닌(pAMF), p-요오도-L-페닐알라닌, O-메틸-L-티로신, p-메톡시페닐알라닌, p-프로파르길옥시페닐알라닌, p-프로파르길-페닐알라닌, L-3-(2-나프틸)알라닌, 3-메틸-페닐알라닌, O-4-알릴-L-티로신, 4-프로필-L-티로신, 트리-O-아세틸-GlcNAcp-세린, L-도파, 플루오르화 페닐알라닌, 이소프로필-L-페닐알라닌, p-아지도-L-페닐알라닌, p-아실-L-페닐알라닌, p-벤조일-L-페닐알라닌, L-포스포세린, 포스포노세린, 포스포노티로신, p-브로모페닐알라닌, p-아미노-L-페닐알라닌 또는 이소프로필-L-페닐알라닌을 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 3-아미노티로신, 3-니트로티로신, 3,4-디히드록시-페닐알라닌 또는 3-요오도티로신이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 페닐셀레노시스테인이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 벤조페논, 케톤, 요오다이드, 메톡시, 아세틸, 벤조일, 또는 아지드 함유 페닐알라닌 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 벤조페논, 케톤, 요오다이드, 메톡시, 아세틸, 벤조일, 또는 아지드 함유 라이신 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 방향족 측쇄를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 방향족 측쇄를 포함하지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 아지도 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 마이클(Michael)-억셉터 기를 포함한다. 일부 경우에, 마이클-억셉터 기는 1,2-부가 반응을 통해 공유 결합을 형성할 수 있는 불포화 모이어티를 포함한다. 일부 경우에, 마이클-억셉터 기는 전자 결핍 알켄 또는 알킨을 포함한다. 일부 경우에, 마이클-억셉터 기는 알파,베타 불포화된 다음의 것을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 케톤, 알데히드, 술폭시드, 술폰, 니트릴, 이민 또는 방향족.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 데히드로알라닌이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 알데히드 또는 케톤 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 알데히드 또는 케톤 기를 포함하는 라이신 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 베타, 감마 또는 델타 위치에서 하나 이상의 O, N, Se 또는 S 원자를 포함하는 라이신 유도체이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 감마 위치에서 O, N, Se 또는 S 원자를 포함하는 라이신 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 엡실론 N 원자가 산소 원자로 대체된 라이신 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 번역 후 변형된 자연 발생 라이신이 아닌 라이신 유도체이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 알파 위치로부터 여섯 번째 원자가 카르보닐기를 포함하는, 측쇄를 포함하는 아미노산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 알파 위치로부터 여섯 번째 원자가 카르보닐 기를 포함하고 알파 위치로부터의 다섯 번째 원자가 질소인, 측쇄를 포함하는 아미노산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 알파 위치로부터 일곱 번째 원자가 산소 원자인, 측쇄를 포함하는 아미노산이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 셀레늄을 포함하는 세린 유도체이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 셀레노세린(2-아미노-3-히드로셀레노프로판산)이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-3-((2-((3-(벤질옥시)-3-옥소프로필)아미노)에틸)셀라닐)프로판산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-3-(페닐셀라닐)프로판산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 셀레늄을 포함하고, 셀레늄의 산화는 알켄을 포함하는 비천연 아미노산을 형성시킨다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 시클로옥티닐 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 트랜스시클로옥테닐 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 노보네닐 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 시클로프로페닐 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 디아지린 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 테트라진 기를 포함한다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 측쇄 질소가 카르바밀화된 라이신 유도체이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 측쇄 질소가 아실화된 라이신 유도체이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(tert-부톡시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(tert-부톡시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-Boc-N6-메틸라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-아세틸라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 피롤라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-트리플루오로아세틸라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(p-요오도벤질옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(p-니트로벤질옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-프롤릴라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(시클로펜틸옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(시클로펜탄카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(테트라히드로푸란-2-카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(3-에티닐테트라히드로푸란-2-카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((프로프-2-인-1-일옥시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(2-아지도시클로펜틸옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-[(2-아지도에톡시)카르보닐]라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-[(2-니트로벤질옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-{[(2-사이클로옥티닐옥시)카르보닐]아미노}헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(2-아미노부트-3-이노일)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-6-((2-아미노부트-3-이노일)옥시)헥산산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(알릴옥시카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(부테닐-4-옥시카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(펜테닐-5-옥시카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((부트-3-인-1-일옥시)카르보닐)-라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((펜트-4-인-1-일옥시)카르보닐)-라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(티아졸리딘-4-카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-8-옥소노난산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-8-옥소옥탄산이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(2-옥소아세틸)라이신이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-프로피오닐라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-부티릴라이신이며, 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(부트-2-에노일)라이신이며, 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((바이시클로[2.2.1]헵트-5-엔-2-일옥시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((스피로[2.3]헥스-1-엔-5-일메톡시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-(((4-(1-(트리플루오로메틸)시클로프로프-2-엔-1-일)벤질)옥시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((바이시클로[2.2.1]헵트-5-엔-2-일메톡시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 시스테이닐라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((1-(6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)에톡시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((2-(3-메틸-3H-디아지린-3-일)에톡시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((3-(3-메틸-3H-디아지린-3-일)프로폭시)카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((메타 니트로베닐옥시)N6-메틸카르보닐)라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((바이시클로[6.1.0]논-4-인-9-일메톡시)카르보닐)-라이신이다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 N6-((시클로헵트-3-엔-1-일옥시)카르보닐)-L-라이신이다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 2-아미노-3-(((((벤질옥시)카르보닐)아미노)메틸)셀라닐)프로판산이다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 재창출된 앰버(amber), 오팔(opal) 또는 오커(ochre) 중지 코돈에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 4-염기 코돈에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 재창출된 희귀 센스 코돈 또는 재창출된 공통 센스 코돈에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 비천연 핵산을 포함하는 합성 코돈에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 직교성 변형된 신테타아제/tRNA 쌍에 의해 IL-15 내에 혼입된다. 이러한 직교성 쌍은, a) 비천연 tRNA에 다른 내인성 아미노산이 차징(charging)되는 것 및 b) 다른 내인성 tRNA에 비천연 아미노산이 차징되는 것을 최소화하면서 비천연 tRNA를 비천연 아미노산으로 차징시킬 수 있는 비천연 신테타아제를 포함한다. 이러한 직교성 쌍은, 내인성 신테타아제에 의해 다른 내인성 아미노산으로 차징되는 것을 피하면서 비천연 신테타아제에 의해 차징될 수 있는 tRNA를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 이러한 쌍은 다양한 유기체, 예컨대 박테리아, 효모, 고세균, 또는 인간 원천으로부터 확인된다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 단일 유기체로부터의 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 두 상이한 유기체로부터의 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 변형 전에 두 상이한 아미노산의 번역을 촉진하는 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 알라닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아르기닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아스파라긴 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아스파르트산 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 시스테인 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 글루타민 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 글루탐산 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 알라닌 글리신이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 히스티딘 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 류신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 이소류신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 라이신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 메티오닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 페닐알라닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 프롤린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 세린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 트레오닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 트립토판 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 티로신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 발린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 포스포세린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 알라닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아르기닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아스파라긴 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아스파르트산 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 시스테인 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 글루타민 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 글루탐산 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 알라닌 글리신이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 히스티딘 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 류신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 이소류신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 라이신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 메티오닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 페닐알라닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 프롤린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 세린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 트레오닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 트립토판 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 티로신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 발린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 포스포세린 tRNA이다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 아미노아실(aaRS 또는 RS)-tRNA 신테타아제-tRNA 쌍에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다. 예시적인 aaRS-tRNA 쌍은 메타노코커스 야나스키(Methanococcus jannaschii)(Mj-Tyr) aaRS/tRNA 쌍, 이. 콜라이(E. coli) TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테아로써모필루스(B. stearothermophilus) tRNACUA 쌍, 이. 콜라이 LeuRS(Ec-Leu)/비. 스테아로써모필루스 tRNACUA 쌍 및 피롤라이실-tRNA 쌍을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 Mj-TyrRS/tRNA 쌍에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드) 내에 혼입된다. Mj-TyrRS/tRNA 쌍에 의해 혼입될 수 있는 예시적인 UAA는 파라-치환 페닐알라닌 유도체, 예컨대 p-아미노페닐알라닌 및 p-메톡시페닐알라닌; 메타-치환 티로신 유도체, 예컨대 3-아미노티로신, 3-니트로티로신, 3,4-디히드록시페닐알라닌, 및 3-요오도티로신; 페닐셀레노시스테인; p-보로노페닐알라닌; 및 o-니트로벤질티로신을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 Ec-Tyr/tRNACUA 또는 Ec-Leu/tRNACUA 쌍에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다. Ec-Tyr/tRNACUA 또는 Ec-Leu/tRNACUA 쌍에 의해 혼입될 수 있는 예시적인 UAA는 벤조페논, 케톤, 요오다이드, 또는 아지드 치환기를 함유하는 페닐알라닌 유도체; O-프로파르길티로신; α-아미노카프릴산, O-메틸 티로신, O-니트로벤질 시스테인; 및 3-(나프탈렌-2-일아미노)-2-아미노-프로판산을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 피롤라이실-tRNA 쌍에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다. 일부 경우에, PylRS는 고세균, 예를 들어 메탄생성 고세균으로부터 얻어진다. 일부 경우에, PylRS는 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei) 또는 메타노사르시나 아세티보란스(Methanosarcina acetivorans)로부터 얻어진다. 피롤라이실-tRNA 쌍에 의해 혼입될 수 있는 예시적인 UAA는 아미드 및 카르바메이트 치환된 라이신, 예컨대 2-아미노-6-((R)-테트라히드로푸란-2-카르복스아미도)헥산산, N-ε-D-프롤릴-L-라이신, 및 N-ε-시클로펜틸옥시카르보닐-L-라이신; N-ε-아크릴로일-L-라이신; N-ε-[(1-(6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)에톡시)카르보닐]-L-라이신; 및 N-ε-(1-메틸시클로프로-2-엔카르복스아미도)라이신을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 US 9,988,619호 및 9,938,516호에 개시된 신테타아제에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다. 이러한 신테타아제에 의해 혼입될 수 있는 예시적인 UAA는 파라-메틸아지도-L-페닐알라닌, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로아랄킬 비천연 아미노산 및 기타를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 이러한 UAA는 피리딜, 피라지닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 티오페닐 또는 다른 복소환을 포함한다. 이러한 아미노산은 일부 실시 형태에서 아지드, 테트라진 또는 커플링 파트너, 예컨대 수용성 모이어티에 콘쥬게이션할 수 있는 다른 화학 기를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 이러한 신테타아제를 발현시키고 사용하여 UAA를 사이토카인 내에 혼입한다(생체 내에서). 일부 실시 형태에서, 이러한 신테타아제는 무세포 번역 시스템을 사용하여 사이토카인 내에 UAA를 혼입하기 위해 사용된다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 자연 발생 신테타아제에 의해 IL-15 폴리펩티드 내에 혼입된다. 일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 하나 이상의 아미노산에 대해 영양요구성인 유기체에 의해 사이토카인 내에 혼입된다. 일부 실시 형태에서, 영양요구성 아미노산에 상응하는 신테타아제는 상응하는 tRNA에 비천연 아미노산을 차징할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 셀레노시스테인 또는 이의 유도체이다. 일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 셀레노메티오닌 또는 이의 유도체이다. 일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 방향족 아미노산이고, 방향족 아미노산은 아릴 할라이드, 예컨대 요오다이드를 포함한다. 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 영양요구성 아미노산과 구조적으로 유사하다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 라이신 또는 페닐알라닌 유도체 또는 유사체를 포함한다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 라이신 유도체 또는 라이신 유사체를 포함한다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 피롤라이신(Pyl)을 포함한다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 페닐알라닌 유도체 또는 페닐알라닌 유사체를 포함한다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 문헌[Wan, et al., “Pyrrolysyl-tRNA synthetase: an ordinary enzyme but an outstanding genetic code expansion tool,” Biochim Biophys Acta 1844(6): 1059-4070 (2014)]에 기술된 비천연 아미노산이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 폴리펩티드내에 혼입된 비천연 아미노산은 US 제9,840,493호; US 제9,682,934호; US 제2017/0260137호; US 제9,938,516호; 또는 US 제2018/0086734호에 개시되어 있다. 이러한 신테타아제에 의해 혼입될 수 있는 예시적인 UAA는 파라-메틸아지도-L-페닐알라닌, 아랄킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아랄킬 및 라이신 유도체 비천연 아미노산을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 이러한 UAA는 피리딜, 피라지닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 티오페닐 또는 다른 복소환을 포함한다. 이러한 아미노산은 일부 실시 형태에서 아지드, 테트라진 또는 커플링 파트너, 예컨대 수용성 모이어티에 콘쥬게이션할 수 있는 다른 화학 기를 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬 링커를 통해 방향족 모이어티에 부착된 아지드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 알킬 링커는 C1-C10 링커이다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬 링커를 통해 방향족 모이어티에 부착된 테트라진을 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 아미노 기를 통해 방향족 모이어티에 부착된 테트라진을 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬아미노 기를 통해 방향족 모이어티에 부착된 테트라진을 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬 사슬을 통해 아미노산 측쇄의 말단 질소(예를 들어, 라이신 유도체의 N6, 또는 더 짧은 알킬 측쇄를 포함하는 유도체의 N5, N4, 또는 N3)에 부착된 아지드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬 사슬을 통해 아미노산 측쇄의 말단 질소에 부착된 테트라진을 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 알킬 링커를 통해 아미드에 부착된 아지드 또는 테트라진을 포함한다. 일부 실시 형태에서, UAA는 3-아미노알라닌, 세린, 라이신, 또는 이의 유도체의 아지드 또는 테트라진 함유 카르바메이트 또는 아미드이다. 일부 실시 형태에서, 이러한 UAA는 생체 내에서 사이토카인 내에 혼입된다. 일부 실시 형태에서, 이러한 UAA는 무세포 시스템에서 사이토카인 내에 혼입된다.
콘쥬게이팅 모이어티
소정의 실시 형태에서, 상기 기술된 하나 이상의 변형된 IL-15 폴리펩티드에 결합된 콘쥬게이팅 모이어티가 본원에 개시된다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15와 이의 수용체의 상호작용을 교란하는 분자이다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15에 결합할 때 IL-15 콘쥬게이트가 면역 반응을 조절하게 하는 임의의 분자이다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 공유 결합을 통해 IL-15에 결합된다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15는 트리아졸 기로 콘쥬게이팅 모이어티에 부착된다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15는 디히드로피리다진 또는 피리다진 기로 콘쥬게이팅 모이어티에 부착된다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 수용성 중합체를 포함한다. 다른 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 단백질 또는 이의 결합 단편을 포함한다. 추가의 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 펩티드를 포함한다. 추가의 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 핵산을 포함한다. 추가의 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 소분자를 포함한다. 추가의 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 바이오콘쥬게이트(예를 들어, TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, 또는 TLR9 작용제와 같은 TLR 작용제; 또는 Pam3Cys, CFA, MALP2, Pam2Cys, FSL-1, Hib-OMPC, 폴리 I:C, 폴리 A:U, AGP, MPL A, RC-529, MDF2β, CFA, 또는 플라젤린과 같은 합성 리간드)를 포함한다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 혈청 반감기를 증가시키고/시키거나, 안정성을 향상시킨다. 일부 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 사이토카인과 하나 이상의 사이토카인 수용체 도메인 또는 서브유닛과의 상호작용을 감소시킨다. 추가의 경우에, 콘쥬게이팅 모이어티는 하나 이상의 IL-15 도메인 또는 서브유닛과 이의 동족 수용체(들)와의 IL-15 상호작용을 차단한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 다수의 콘쥬게이팅 모이어티를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드에서 비천연 아미노산 또는 천연 아미노산에 부착된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 천연 아미노산에 부착된 콘쥬게이팅 모이어티를 포함한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 사이토카인 펩티드에서 비천연 아미노산에 부착된다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드의 N 또는 C 말단 아미노산에 부착된다. 다양한 조합 부위가 본원에 개시되고, 예를 들어 제1 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드에서 비천연 아미노산 또는 천연 아미노산에 부착되고, 제2 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드의 N 또는 C 말단 아미노산에 부착된다. 일부 실시 형태에서, 단일 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드의 다수의 잔기(예를 들어, 스테이플)에 부착된다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 IL-15 폴리펩티드의 N 및 C 말단 아미노산 둘 다에 부착된다.
사용 방법
증식성 질환 또는 병태
일부 실시 형태에서, 치료적 유효량의 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 증식성 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 증식성 질환 또는 병태를 치료하는 방법이 본원에 기술된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드 및 콘쥬게이팅 모이어티를 포함하고, 여기서 IL-15 콘쥬게이트는 야생형 IL-15 폴리펩티드에 비해 IL-15 수용체 α(IL-15Rα) 서브유닛에 대한 친화도가 감소한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드; 및 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, T27, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, A39, K41, L44, L45, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된 아미노산 위치에서 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드에 결합하는 콘쥬게이팅 모이어티를 포함하고, 여기서 아미노산 잔기의 넘버링은 서열 번호 1에 상응한다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드; 및 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된 아미노산 위치에서 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드에 결합하는 콘쥬게이팅 모이어티를 포함한다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 IL-15/IL-15Rβγ 복합체를 형성하기 위해 우선적으로 IL-15Rβ 및 IL-15Rβγ 서브유닛과 상호작용한다. 일부 실시 형태에서, IL-15/IL-15Rβγ 복합체는 Teff 세포(예를 들어, CD8+ Teff 세포) 및/또는 NK 세포의 확장을 자극하고/하거나 향상시킨다. 추가의 경우에, Teff 세포의 확장은 Teff:Treg 비가 Teff 집단 쪽으로 기울어지게 한다.
일부 실시 형태에서, 증식성 질환 또는 병태는 암이다. 일부 실시 형태에서, 암은 고형 종양이다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 고형 종양을 치료하기 위해 고형 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여된다. 이러한 경우에, 대상체는 방광암, 골암, 뇌암, 유방암, 결장직장암, 식도암, 눈암, 두경부암, 신장암, 폐암, 흑색종, 난소암, 췌장암 또는 전립선암을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 방광암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 유방암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 결장직장암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 식도암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 두경부암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 신장암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 폐암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 흑색종의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 난소암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 췌장암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 전립선암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 전이성 암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 추가의 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 재발성 또는 난치성 암의 치료를 위해 대상체에게 투여된다.
일부 실시 형태에서, 암은 혈액 악성종양이다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기재된 IL-15 콘쥬게이트는 혈액 악성종양을 치료하기 위해 이 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, 대상체는 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소형 림프구성 림프종(SLL), 소포성 림프종(FL), 미만성 대형 B 세포 림프종(DLBCL), 외투 세포 림프종(MCL), 발덴스트롬 거대글로불린혈증, 다발성 골수종, 결절외 가장자리 영역 B 세포 림프종, 노드 가장자리 영역 B 세포 림프종, 버킷 림프종, 비버킷 고등급 B 세포 림프종, 원발성 종격 B 세포 림프종(PMBL), 면역아구성 대세포 림프종, 전구체 B-림프아구성 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 형질구성 림프종, 비장 가장자리 영역 림프종, 혈장 세포 골수종, 형질세포종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종 또는 림프종모양 육아종증을 갖는다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 CLL의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 SLL의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 FL의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 DLBCL의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 MCL의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 발덴스트롬 거대글로불린혈증의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 다발성 골수종의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 버킷 림프종의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 전이성 혈액 악성종양의 치료를 위해 대상체에게 투여된다. 추가의 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 재발성 또는 난치성 혈액 악성종양의 치료를 위해 대상체에게 투여된다.
일부 실시 형태에서, 추가의 치료제가 대상체에게 추가로 투여된다. 일부 실시 형태에서, 추가의 치료제는 IL-15 콘쥬게이트와 동시에 투여된다. 다른 경우에, 추가의 치료제 및 IL-15 콘쥬게이트는 순차적으로 투여되고, 예를 들어 IL-15 콘쥬게이트는 추가의 치료제 전에 투여되거나, IL-15 콘쥬게이트는 추가의 치료제의 투여 후에 투여된다.
일부 실시 형태에서, 추가의 치료제는 화학요법제, 면역요법제, 표적화 요법제, 방사선 치료 또는 이들의 조합을 포함한다. 예시적인 추가 치료제는 알트레타민, 부설판, 카보플라틴, 카무스틴, 클로르암부실, 시스플라틴, 시클로포스파미드, 다카바진, 로무스틴, 멜팔란, 옥살라플라틴, 테모졸로마이드, 또는 티오테파와 같은 알킬화제; 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 시타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 히드록시우레아, 메토트렉세이트, 또는 페메트렉시드와 같은 항대사물질; 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 또는 이다루비신과 같은 안트라사이클린; 토포테칸 또는 이리노테칸(CPT-11)과 같은 토포이소머라아제 I 억제제; 에토포시드(VP-16), 테니포시드, 또는 미톡산트론과 같은 토포이소머라아제 II 억제제; 도세탁셀, 에스트라무스틴, 익사베필론, 파클리탁셀, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 또는 비노렐빈과 같은 유사분열 억제제; 또는 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 또는 덱사메타손과 같은 코르티코스테로이드를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 추가의 치료제는 일차 치료(first-line therapy)를 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "일차 치료"는 암을 갖는 대상체에 대한 일차적인 치료를 포함한다. 일부 경우에, 암은 원발성 또는 국소 암이다. 다른 경우에, 암은 전이성 또는 재발성 암이다. 일부 경우에, 일차 치료는 화학요법을 포함한다. 다른 경우에, 일차 치료는 면역요법, 표적화 요법, 또는 방사선 치료를 포함한다. 당업자는 상이한 일차 치료가 상이한 유형의 암에 적용될 수 있음을 쉽게 이해할 것이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 알킬화제, 예컨대 알트레타민, 부술판, 카보플라틴, 카르무스틴, 클로르암부실, 시스플라틴, 시클로포스파미드, 다카르바진, 로무스틴, 멜팔란, 옥살라플라틴, 테모졸로마이드 또는 티오테파; 항대사물질, 예컨대 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 히드록시우레아, 메토트렉세이트 또는 페메트렉세드; 안트라사이클린, 예컨대 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신 또는 이다루비신; 토포아이소머라아제 I 억제제, 예컨대 토포테칸 또는 이리노테칸(CPT-11); 토포아이소머라아제 II 억제제, 예컨대 에토포사이드(VP-16), 테니포사이드 또는 미톡산트론; 유사분열 억제제, 예컨대 도세탁셀, 에스트라무스틴, 익사베필론, 파클리탁셀, 빈블라스틴, 빈크리스틴 또는 비노렐빈; 또는 코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니손, 메틸프레드니솔론 또는 덱사메타손으로부터 선택된 추가의 치료제와 투여된다.
일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 효소 폴리 ADP 리보스 폴리머라아제(PARP)의 억제제와 함께 투여된다. 예시적인 PARP 억제제는 올라파립(AZD-2281, Lynparza®, Astra Zeneca에서 제공), 루카파립(PF-01367338, Rubraca®, Clovis Oncology에서 제공), 니라파립(MK-4827, Zejula®, Tesaro에서 제공), 탈라조파립(BMN-673, BioMarin Pharmaceutical Inc.에서 제공), 벨리파립(ABT-888, AbbVie에서 제공), CK-102(이전 명칭 CEP 9722, Teva Pharmaceutical Industries Ltd.에서 제공), E7016(Eisai에서 제공), 이니파립(BSI 201, Sanofi에서 제공), 및 파미파립(BGB-290, BeiGene에서 제공)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 PARP 억제제, 예컨대 올라파립, 루카파립, 니라파립, 탈라조파립, 벨리파립, CK-102, E7016, 이니파립 또는 파미파립과 조합되어 투여된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 티로신 키나아제 억제제(TKI)와 함께 투여된다. 예시적인 TKI는 아파티닙, 아렉티닙, 악시티닙, 보수티닙, 카보잔티닙, 세리티닙, 코비메티닙, 크리조티닙, 다브라페닙, 다사티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 이브루티닙, 이마티닙, 라파티닙, 렌바티닙, 닐로티닙, 닌테다닙, 오시메르티닙, 파조파닙, 포나티닙, 레고라페닙, 룩솔리티닙, 소라페닙, 수니티닙, 토파시티닙 및 반데타닙을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다.
일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 면역 관문 조절제와 투여된다. 예시적인 관문 조절제는 하기를 포함한다:
PD-L1 조절제, 예컨대 Genentech의 MPDL3280A(RG7446), Merck/Pfizer로부터의 아벨루맙(Bavencio), AstraZeneca로부터의 더발루맙(Imfinzi), BioXcell로부터의 항-마우스 PD-L1 항체 클론 10F.9G2(카탈로그 BE0101호), Bristol-Meyer's Squibb로부터의 항-PD-L1 단일클론 항체 MDX-1105(BMS-936559), BMS-935559 및 BMS-986192, XytomX Therapeutics로부터의 MSB0010718C, 마우스 항-PD-L1 클론 29E.2A3, CX-072, Novartis Pharmaceuticals로부터의 FAZ053, 3D Medicine으로부터의 KN035, Eli Lilly로부터의 LY3300054 및 AstraZeneca의 MEDI4736;
PD-L2 조절제, 예컨대 GlaxoSmithKline의 AMP-224(Amplimmune) 및 rHIgM12B7;
PD-1 조절제, 예컨대 BioXcell로부터의 항-마우스 PD-1 항체 클론 J43(카탈로그 BE0033-2호), BioXcell로부터의 항-마우스 PD-1 항체 클론 RMP1-14(카탈로그 BE0146호), 마우스 항-PD-1 항체 클론 EH12, Merck의 MK-3475 항-마우스 PD-1 항체(Keytruda, 펨브롤리주맙, 람브롤리주맙), ANB011로 공지된 AnaptysBio의 항-PD-1 항체, 항체 MDX-1 106(ONO-4538), Bristol-Myers Squibb의 인간 IgG4 단일클론 항체 니볼루맙(Opdivo®, BMS-936558, MDX1106), AstraZeneca의 AMP-514 및 AMP-224, Eli Lilly/Innovent Biologics로부터의 신틸리맙(IBI-308), Agenus로부터의 AGEN 2034, BeiGene으로부터의 BGB-A317, Boehringer-Ingelheim Pharmaceuticals로부터의 Bl-754091, CBT Pharmaceuticals로부터의 CBT-501(게놀림주맙), Incyte로부터의 INCSHR1210, Janssen Research & Development로부터의 JNJ-63723283, MedImmune으로부터의 MEDI0680, Novartis Pharmaceuticals로부터의 PDR001, Pfizer로부터의 PF-06801591, Regeneron Pharmaceuticals로부터의 REGN2810 및 CureTech Ltd로부터의 피딜리주맙(Pidilizumab)(CT-011);
CTLA-4 조절제, 예컨대 Bristol Meyers Squibb의 항-CTLA-4 항체 이필리무맙(Yervoy®, MDX-010, BMS-734016 및 MDX-101로도 공지됨), Millipore로부터의 항-CTLA4 항체 클론 9H10, Pfizer의 트레멜리무맙(CP-675,206, 티실리무맙), Agenus로부터의 AGEN 1884 및 Abcam으로부터의 항-CTLA4 항체 클론 BNI3;
LAG3 조절제, 예컨대 eBioscience로부터의 항-Lag-3 항체 클론 eBioC9B7W(C9B7W), LifeSpan Biosciences로부터의 항-Lag3 항체 LS-B2237, Novartis Pharmaceuticals로부터의 IMP701 및 LAG525, Immutep으로부터의 IMP321(ImmuFact), Bristol-Myers Squibb로부터의 항-Lag3 항체 BMS-986016, BMS-986016, Regeneron Pharmaceuticals로부터의 REGN3767 및 LAG-3 키메라 항체 A9H12;
B7-H3 조절제, 예컨대 MGA271;
KIR 조절제, 예컨대 Bristol-Myers Squibb로부터의 리릴루맙(Lirilumab)(IPH2101);
CD137 조절제, 예컨대 우렐루맙(BMS-663513, Bristol-Myers Squibb), PF-05082566(항-4-1BB, PF-2566, Pfizer) 또는 XmAb-5592(Xencor);
PS 조절제, 예컨대 바비툭시맙;
OX40 조절제, 예컨대 Bristol-Myers Squibb로부터의 BMS-986178, GlaxoSmithKline으로부터의 GSK3174998, Agenus로부터의 INCAGN1949, MedImmune으로부터의 MEDI0562, Pfizer로부터의 PF-04518600 또는 Genentech로부터의 RG7888;
GITR 조절제, 예컨대 Novartis Pharmaceuticals로부터의 GWN323, Agenus로부터의 INCAGN1876 또는 Leap Therapeutics로부터의 TRX518;
TIM3 조절제, 예컨대 Novartis Pharmaceuticals로부터의 MBG453 또는 TESARO로부터의 TSR-042; 및
조절제, 예컨대 항체 또는 이의 단편(예를 들어, 단일클론 항체, 인간, 인간화 또는 키메라 항체), RNAi 분자, 또는 CD52, CD30, CD20, CD33, CD27, ICOS, BTLA(CD272), CD160, 2B4, LAIR1, TIGHT, LIGHT, DR3, CD226, CD2 또는 SLAM에 대한 소분자.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 트레멜리무맙 또는 이필리무맙과 조합되어 투여된다.
일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 항체, 예컨대 알렘투주맙, 트라스투주맙, 이브리투모맙 티욱세탄, 브렌툭시맙 베도틴, 아도-트라스투주맙 엠탄신 또는 블리나투모맙과 함께 투여된다.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 항-VEGFR 항체로부터 선택된 추가의 치료제와 함께 투여된다. 예시적인 항-VEGFR 항체는 베바시주맙 또는 라무시루맙을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다. 일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 추가의 치료제의 ADCC 효과를 향상시킨다.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 세툭시맙, 임가투주맙, 마투주맙(EMD 72000), 토무조툭시맙 또는 파니투무맙으로부터 선택된 추가의 치료제와 투여된다. 일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 추가의 치료제의 ADCC 효과를 향상시킨다.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 추가의 사이토카인(예를 들어, 자연적 사이토카인 또는 조작된 사이토카인, 예컨대 페길화 및/또는 융합 사이토카인)으로부터 선택된 추가의 치료제와 투여된다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 T 이펙터 세포 확장 및/또는 증식을 향상시키고/시키거나 상승작용시킨다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-18, IL-21 또는 TNFα를 포함한다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 IL-2이다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 IL-21이다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 IL-10이다. 일부 경우에, 추가의 사이토카인은 TNFα이다. 일부 실시 형태에서, IL-2 사이토카인은 알데스류킨, NKTR-214, 또는 THOR-707로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, IL-2 사이토카인은 알데스류킨이다. 일부 실시 형태에서, IL-2 사이토카인은 NKTR-214이다. 일부 실시 형태에서, IL-2 사이토카인은 THOR-707이다.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 수용체 작용제로부터 선택된 추가의 치료제와 함께 투여된다. 일부 경우에, 수용체 작용제는 Toll-유사 수용체(TLR) 리간드를 포함한다. 일부 경우에, TLR 리간드는 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, 또는 TLR9를 포함한다. 일부 경우에, TLR 리간드는 예를 들어 Pam3Cys, CFA, MALP2, Pam2Cys, FSL-1, Hib-OMPC, 폴리 I:C, 폴리 A:U, AGP, MPL A, RC-529, MDF2β, CFA, 또는 플라젤린과 같은 합성 리간드를 포함한다. 일부 경우에, IL-21 콘쥬게이트는 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8 및 TLR9로부터 선택된 하나 이상의 TLR 작용제와 함께 투여된다. 일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 Pam3Cys, CFA, MALP2, Pam2Cys, FSL-1, Hib-OMPC, 폴리 I:C, 폴리 A:U, AGP, MPL A, RC-529, MDF2β, CFA, 및 플라젤린으로부터 선택되는 하나 이상의 TLR 작용제와 함께 투여된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 입양 T 세포 전달(ACT) 치료와 함께 사용된다. 일 실시 형태에서, ACT는 예를 들어 항종양 활성을 갖는 대상체에서 자가유래 T 림프구를 확인하는 단계, 시험관 내에서 자가유래 T 림프구를 확장시키는 단계, 및 확장된 T 림프구를 대상체에 후속 재주입하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, ACT는 예를 들어 항종양 활성을 갖는 동종이계 T 림프구를 사용하는 단계, 시험관 내에서 T 림프구를 확장시키는 단계, 및 확장된 동종이계 T 림프구를 이를 필요로 하는 대상체에 후속 주입하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 ACT 치료의 일부로서 자가유래 T 림프구와 함께 사용된다. 다른 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 ACT 치료의 일부로서 동종이계 T 림프구와 함께 사용된다. 일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 치료를 필요로 하는 대상체에게 ACT 치료와 동시에 투여된다. 다른 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 치료를 필요로 하는 대상체에게 ACT 치료와 순차적으로 투여된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 생체 외 활성화 및/또는 자가유래 및/또는 동종이계 T 세포 전달의 확장에 사용된다. 이러한 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 자가유래 및/또는 동종이계 T 세포를 포함하는 샘플을 활성화하고/하거나 확장시키기 위해 사용되고, IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 샘플을 투여하기 전에 샘플로부터 선택적으로 제거된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 백신과 함께 투여된다. 일부 경우에, IL-21 콘쥬게이트는 종양세포붕괴성 바이러스(oncolytic virus)와 조합되어 사용된다. 이러한 경우에, IL-21 콘쥬게이트는 면역 반응을 조절하는 자극제로서 작용한다. 일부 경우에, IL-21 콘쥬게이트는 아쥬반트 치료의 일부로서 종양세포붕괴성 바이러스와 함께 사용된다. 예시적인 종양세포붕괴성 바이러스는 T-Vec(Amgen), G47Δ(Todo et al.), JX-594(Sillajen), CG0070(Cold Genesys) 및 Reolysin(Oncolytics Biotech)을 포함한다. 일부 경우에, IL-21 콘쥬게이트는 종양세포붕괴성 바이러스, 예컨대 T-Vec, G47Δ, JX-594, CG0070 또는 Reolysin과 조합되어 사용된다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 방사선 치료와 조합되어 투여된다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 항-CD38 단클론 항체와 조합되어 투여된다. 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙(Darzalex)이다.
일부 실시 형태에서, IL-15 콘쥬게이트는 항-CD20 항체와 조합되어 투여된다. 일부 실시 형태에서, 항-CD20 항체는 리툭시맙이다.
세포 집단 확장 방법
일부 실시 형태에서, 림프구 집단, 예를 들어 이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포, 및/또는 자연 살해(NK) 세포 집단을 확장시키는 방법이 본원에 추가로 기술된다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 세포를 본원에 기술된 사이토카인 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계, 및 사이토카인을 사이토카인 수용체와 상호작용시켜 복합체를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서 복합체는 별개의 림프구 집단의 확장을 자극한다.
일부 실시 형태에서, 이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포, 및/또는 자연 살해(NK) 세포 집단을 확장시키는 방법으로서, (a) 세포를 변형된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계; 및 IL-15를 IL-15Rβ 및 IL-15Rγ 서브유닛과 상호작용시켜 IL-15/IL-15Rβγ 복합체를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서 IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rα 서브유닛에 대한 친화도가 감소하고, IL-15/IL-15Rβγ 복합체는 Teff, Tmem 및 NK 세포의 확장을 자극한다. 본원에 기술된 바와 같이, 일부 실시 형태에서, 변형된 IL-15 폴리펩티드는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, T27, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, A39, K41, L44, L45, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된 잔기 위치에서 적어도 하나의 번역 후 변형된 비천연 아미노산을 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 D14, Q17, S18, K41, S51, L52, G55, D56, A57, S58, S75, S76, N77, N79, V80, T81, S83, G84, E92, K94, N95, K97 및 E98로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N1, N4, S7, D8, K11, D61, T62, E64, N65, I68, L69 및 N72로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V3, I6, K10, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 및 E93으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26, E46, V49, E53 및 L25로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V3, K10, S29, D30, H32, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N4, S7, K11 및 D61로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25, E53, N77 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25 및 E53으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53, T24, N4, K11, N65, L69, S18, H20 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46 및 Y26으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V49이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 T24이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 S83이다.
본원에 기술된 바와 같은 이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포, 및/또는 자연 살해(NK) 세포 집단을 확장시키는 방법은 일부 실시 형태에서 세포를 IL-15 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계를 포함한다. 본원에 기술된 바와 같이, 일부 실시 형태에서, 인터류킨 15(IL-15) 콘쥬게이트는 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드; 및 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, T27, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, A39, K41, L44, L45, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된 아미노산 위치에서 단리되고 정제된 IL-15 폴리펩티드에 결합하는 콘쥬게이팅 모이어티를 포함하고, 여기서 잔기 위치는 서열 번호 1에 제시된 위치에 상응한다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N1, W2, V3, N4, I6, S7, D8, K10, K11, E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, D22, A23, T24, L25, Y26, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, E46, Q48, V49, S51, L52, E53, S54, G55, D56, A57, S58, H60, D61, T62, V63, E64, N65, I67, I68, L69, N71, N72, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, E89, E90, L91, E92, E93, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101, S102, V104, H105, Q108, M109, F110, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E13, D14, L15, Q17, S18, M19, H20, I21, S34, C35, K36, V37, T38, K41, L44, S51, L52, S54, G55, D56, A57, S58, H60, V63, I67, N71, S73, L74, S75, S76, N77, G78, N79, V80, T81, E82, S83, G84, C85, K86, E87, C88, L91, E92, K94, N95, I96, K97, E98, L100, Q101 및 F110으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 D14, Q17, S18, K41, S51, L52, G55, D56, A57, S58, S75, S76, N77, N79, V80, T81, S83, G84, E92, K94, N95, K97 및 E98로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N1, N4, S7, D8, K11, D61, T62, E64, N65, I68, L69 및 N72로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V3, I6, K10, E28, S29, D30, V31, H32, P33, S102, V104, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 D22, A23, T24, L25, Y26, L44, E46, Q48, V49, E53, E89, E90 및 E93으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26, E46, V49, E53 및 L25로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V3, K10, S29, D30, H32, H105, Q108, M109, I111, N112, T113 및 S114로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N4, S7, K11 및 D61로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25, E53, N77 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25 및 E53으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53, T24, N4, K11, N65, L69, S18, H20 및 S83으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26, V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V49, E53 및 T24로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46 및 Y26으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E46이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 L25이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 Y26이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 V49이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 E53이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 T24이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 N77이다. 일부 실시 형태에서, 잔기 위치는 S83이다.
콘쥬게이션 화학
다양한 콘쥬게이션 반응을 사용하여 링커, 콘쥬게이션 모이어티, 및 본원에 기술된 사이토카인 펩티드 내에 혼입된 비천연 아미노산을 콘쥬게이팅한다. 이러한 콘쥬게이션 반응은 대개 "생물직교" 반응과 같은 수성 조건에 적합하다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이션 반응은 촉매와 같은 화학 시약; 광; 또는 링커, 콘쥬게이션 모이어티, 또는 비천연 아미노산에서 발견되는 반응성 화학 기에 의해 매개된다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이션 반응은 효소에 의해 매개된다. 일부 실시 형태에서, 본원에 사용된 콘쥬게이션 반응은 문헌[Gong, Y., Pan, L. Tett. Lett. 2015, 56, 2123.]에 기술되어 있다. 일부 실시 형태에서, 본원에 사용된 콘쥬게이션 반응은 문헌[Chen, X.; Wu. Y-W. Org. Biomol. Chem. 2016, 14, 5417.]에 기술되어 있다.
본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 1,3-쌍극 고리화첨가 반응을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 1,3-쌍극 고리화첨가 반응은 아지드와 포스핀의 반응("클릭" 반응)을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이션 반응은 구리에 의해 촉매된다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 트리아졸을 통해 부착된 링커 또는 콘쥬게이션 모이어티를 포함하는 사이토카인 펩티드를 생성한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 아지드와 변형된 올레핀의 반응을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 아지드와 변형된 알킨의 반응을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 아지드와 시클로알킨, 예를 들어 DBCO의 반응을 포함한다.
본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 다음을 포함한다:
Figure pct00144
여기서, X는, 서열 번호 4 내지 9 및 52 내지 57 중 어느 하나에서와 같이, 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트에서의 위치이다. 일부 실시 형태에서, 콘쥬게이팅 모이어티는 수용성 중합체를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 반응기는 알킨 또는 아지드를 포함한다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 다음을 포함한다:
Figure pct00145
여기서, X는, 서열 번호 4 내지 9 및 52 내지 57 중 어느 하나에서와 같이, 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트에서의 위치이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 다음을 포함한다:
Figure pct00146
여기서, X는, 서열 번호 4 내지 9 및 52 내지 57 중 어느 하나에서와 같이, 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트에서의 위치이다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 다음을 포함한다:
Figure pct00147
여기서, X는, 서열 번호 4 내지 9 및 52 내지 57 중 어느 하나에서와 같이, 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트에서의 위치이다.
본원에 기술된 일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 콘쥬게이션 반응은 아지드 모이어티, 예컨대 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)로부터 유도된 아미노산 잔기를 함유하는 단백질에 포함된 것과, 변형된 시클로알킨, 예컨대 디벤조시클로옥틴 기를 포함하는 화학적 모이어티인 DBCO로부터 유도된 것 사이의 고리화첨가 반응이다. DBCO 모이어티를 포함하는 PEG 기는 구매가능하거나, 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.
Figure pct00148
Figure pct00149
본원에 기술된 클릭 반응과 같은 콘쥬게이션 반응은 단일 위치이성질체, 또는 위치이성질체들의 혼합물을 생성할 수 있다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 약 1:1이다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 약 2:1이다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 약 1.5:1이다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 약 1.2:1이다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 약 1.1:1이다. 일부 경우에, 위치이성질체들의 비는 1:1보다 크다.
사이토카인 폴리펩티드 생산
일부 경우에, 천연 아미노산 돌연변이 또는 비천연 아미노산 돌연변이를 포함하는 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는 재조합으로 생성되거나 화학적으로 합성된다. 일부 경우에, 본원에 기술된 IL-15 콘쥬게이트는, 예를 들어 숙주 세포 시스템에 의해 또는 무세포 시스템에서, 재조합으로 생성된다.
일부 경우에, IL-15 콘쥬게이트는 숙주 세포 시스템을 통해 재조합으로 생성된다. 일부 경우에, 숙주 세포는 진핵 세포(예를 들어, 포유류 세포, 곤충 세포, 효모 세포, 또는 식물 세포) 또는 원핵 세포(예를 들어, 그람 양성 박테리아 또는 그람 음성 박테리아)이다. 일부 경우에, 진핵 숙주 세포는 포유류 숙주 세포이다. 일부 경우에, 포유류 숙주 세포는 안정한 세포주이거나, 관심 유전 물질을 자신의 게놈에 통합하고 여러 세대의 세포 분열 후 유전 물질의 산물을 발현하는 능력을 가진 세포주이다. 다른 경우에, 포유류 숙주 세포는 일시적 세포주이거나, 관심 유전 물질을 자신의 게놈에 통합하지 않고 여러 세대의 세포 분열 후 유전 물질의 산물을 발현하는 능력이 없는 세포주이다.
예시적인 포유류 숙주 세포는 293T 세포주, 293A 세포주, 293FT 세포주, 293F 세포, 293 H 세포, A549 세포, MDCK 세포, CHO DG44 세포, CHO-S 세포, CHO-K1 세포, Expi293F™ 세포, Flp-In™ T-REx™ 293 세포주, Flp-In™-293 세포주, Flp-In™-3T3 세포주, Flp-In™-BHK 세포주, Flp-In™-CHO 세포주, Flp-In™-CV-1 세포주, Flp-In™-Jurkat 세포주, FreeStyle™ 293-F 세포, FreeStyle™ CHO-S 세포, GripTite™ 293 MSR 세포주, GS-CHO 세포주, HepaRG™ 세포, T-REx™ Jurkat 세포주, Per.C6 세포, T-REx™-293 세포주, T-REx™-CHO 세포주, 및 T-REx™-HeLa 세포주를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 진핵 숙주 세포는 곤충 숙주 세포이다. 예시적인 곤충 숙주 세포는 드로소필라(Drosophila) S2 세포, Sf9 세포, Sf21 세포, High Five™ 세포 및 expresSF+® 세포를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 진핵 숙주 세포는 효모 숙주 세포이다. 예시적인 효모 숙주 세포는 피치아 파스토리스(Pichia pastoris) 효모 균주, 예컨대 GS115, KM71H, SMD1168, SMD1168H 및 X-33, 및 사카로마이세스 세레비시아에(Saccharomyces cerevisiae) 효모 균주, 예컨대 INVSc1을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 진핵 숙주 세포는 식물 숙주 세포이다. 일부 경우에, 식물 세포는 조류의 세포를 포함한다. 예시적인 식물 세포주는 클라미도모나스 레인하티(Chlamydomonas reinhardtii) 137c 또는 시네초코쿠스 엘롱가투스(Synechococcus elongatus) PPC 7942로부터의 주를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 숙주 세포는 원핵 숙주 세포이다. 예시적인 원핵 숙주 세포는 BL21, Mach1™, DH10B™, TOP10, DH5α, DH10Bac™, OmniMax™, MegaX™, DH12S™, INV110, TOP10F', INVαF, TOP10/P3, ccdB Survival, PIR1, PIR2, Stbl2™, Stbl3™, 또는 Stbl4™를 포함한다.
일부 경우에, 본원에 기술된 IL-2 폴리펩티드의 생산에 적합한 폴리핵산 분자 또는 벡터는 진핵생물 또는 원핵생물 원천으로부터 유래된 임의의 적합한 벡터를 포함한다. 예시적인 다중핵산 분자 또는 벡터는 박테리아(예를 들어, 이. 콜라이), 곤충, 효모(예를 들어, 피치아 파스토리스), 조류 또는 포유류 원천으로부터의 벡터를 포함한다. 박테리아 벡터는 예를 들어 pACYC177, pASK75, pBAD 벡터 시리즈, pBADM 벡터 시리즈, pET 벡터 시리즈, pETM 벡터 시리즈, pGEX 벡터 시리즈, pHAT, pHAT2, pMal-c2, pMal-p2, pQE 벡터 시리즈, pRSET A, pRSET B, pRSET C, pTrcHis2 시리즈, pZA31-Luc, pZE21-MCS-1, pFLAG ATS, pFLAG CTS, pFLAG MAC, pFLAG Shift-12c, pTAC-MAT-1, pFLAG CTC 또는 pTAC-MAT-2를 포함한다.
곤충 벡터는 예를 들어 pFastBac1, pFastBac DUAL, pFastBac ET, pFastBac HTa, pFastBac HTb, pFastBac HTc, pFastBac M30a, pFastBact M30b, pFastBac, M30c, pVL1392, pVL1393, pVL1393 M10, pVL1393 M11, pVL1393 M12, FLAG 벡터, 예컨대 pPolh-FLAG1 또는 pPolh-MAT 2, 또는 MAT 벡터, 예컨대 pPolh-MAT1 또는 pPolh-MAT2를 포함한다.
효모 벡터는 예를 들어 Gateway® pDEST™ 14 벡터, Gateway® pDEST™ 15 벡터, Gateway® pDEST™ 17 벡터, Gateway® pDEST™ 24 벡터, Gateway® pYES-DEST52 벡터, pBAD-DEST49 Gateway® 목표 벡터, pAO815 피치아 벡터, pFLD1 피치 파스토리스 벡터, pGAPZA, B, 및 C 피치아 파스토리스 벡터, pPIC3.5K 피치아 벡터, pPIC6 A, B, 및 C 피치아 벡터, pPIC9K 피치아 벡터, pTEF1/Zeo, pYES2 효모 벡터, pYES2/CT 효모 벡터, pYES2/NT A, B, 및 C 효모 벡터, 또는 pYES3/CT 효모 벡터를 포함한다.
조류 벡터는 예를 들어 pChlamy-4 벡터 또는 MCS 벡터를 포함한다.
포유류 벡터는 예를 들어 일시적 발현 벡터 또는 안정한 발현 벡터를 포함한다. 예시적인 포유류 일시적 발현 벡터는 p3xFLAG-CMV 8, pFLAG-Myc-CMV 19, pFLAG-Myc-CMV 23, pFLAG-CMV 2, pFLAG-CMV 6a,b,c, pFLAG-CMV 5.1, pFLAG-CMV 5a,b,c, p3xFLAG-CMV 7.1, pFLAG-CMV 20, p3xFLAG-Myc-CMV 24, pCMV-FLAG-MAT1, pCMV-FLAG-MAT2, pBICEP-CMV 3 또는 pBICEP-CMV 4를 포함한다. 예시적인 포유류 안정한 발현 벡터는 pFLAG-CMV 3, p3xFLAG-CMV 9, p3xFLAG-CMV 13, pFLAG-Myc-CMV 21, p3xFLAG-Myc-CMV 25, pFLAG-CMV 4, p3xFLAG-CMV 10, p3xFLAG-CMV 14, pFLAG-Myc-CMV 22, p3xFLAG-Myc-CMV 26, pBICEP-CMV 1 또는 pBICEP-CMV 2를 포함한다.
일부 경우에, 본원에 기술된 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드의 생산을 위해 무세포 시스템이 사용된다. 일부 경우에, 무세포 시스템은 세포로부터의 세포질 및/또는 핵 성분의 혼합물을 포함하고, 시험관 내 핵산 합성에 적합하다. 일부 경우에, 무세포 시스템은 원핵 세포 성분을 사용한다. 다른 경우에, 무세포 시스템은 진핵 세포 성분을 사용한다. 핵산 합성은 예를 들어 초파리 세포, 제노프스 알, 고세균, 또는 HeLa 세포에 기초한 무세포 시스템에서 얻어진다. 예시적인 무세포 시스템은 이. 콜라이 S30 추출 시스템, 이. 콜라이 T7 S30 시스템, 또는 PURExpress®, XpressCF, 및 XpressCF+를 포함한다.
비천연 아미노산을 포함하는 사이토카인 폴리펩티드의 생산
직교성 또는 확장된 유전 코드가 본 발명에 사용될 수 있으며, 여기서 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드의 핵산 서열에 존재하는 하나 이상의 특정 코돈은 비천연 아미노산을 코딩하도록 할당되어 직교성 tRNA 신테타아제/tRNA 쌍을 사용하여 사이토카인(예를 들어, IL-15)에 유전적으로 통합될 수 있다. 직교성 tRNA 신테타아제/tRNA 쌍은 tRNA를 비천연 아미노산으로 하전시킬 수 있고, 코돈에 반응하여 비천연 아미노산을 폴리펩티드 사슬에 통합시킬 수 있다.
일부 경우에, 코돈은 코돈 앰버, 오커, 오팔, 또는 쿼드러플렛 코돈이다. 일부 경우에, 코돈은 비천연 아미노산을 운반하는 데 사용될 직교성 tRNA에 해당한다. 일부 경우에, 코돈은 앰버이다. 다른 경우에, 코돈은 직교성 코돈이다.
일부 경우에, 코돈은 직교성 리보솜 리보-Q1에 의해 해독될 수 있는 쿼드러플렛 코돈이다. 일부 경우에, 쿼드러플렛 코돈은 문헌[Neumann, et al., "Encoding multiple unnatural amino acids via evolution of a quadruplet-decoding ribosome," Nature, 464(7287): 441-444 (2010)]에 예시되어 있다.
일부 경우에, 본 발명에 사용되는 코돈은 재코딩된 코돈, 예를 들어 대체 코돈으로 대체된 동의 코돈 또는 희귀 코돈이다. 일부 경우에, 재코딩된 코돈은 문헌[Napolitano, et al., "Emergent rules for codon choice elucidated by editing rare arginine codons in Escherichia coli," PNAS, 113(38): E5588-5597 (2016)]에 기술되어 있다. 일부 경우에, 재코딩된 코돈은 문헌[Ostrov et al., "Design, synthesis, and testing toward a 57-codon genome," Science 353(6301): 819-822 (2016)]에 기술되어 있다.
일부 경우에, 비천연 핵산이 사용되어 하나 이상의 비천연 아미노산이 사이토카인(예를 들어, IL-15)에 통합된다. 예시적인 비천연 핵산은 우라실-5-일, 하이포잔틴-9-일(I), 2-아미노아데닌-9-일, 5-메틸시토신(5-me-C), 5-히드록시메틸 시토신, 잔틴, 하이포잔틴, 2-아미노아데닌, 아데닌 및 구아닌의 6-메틸 및 기타 알킬 유도체, 아데닌 및 구아닌의 2-프로필 및 기타 알킬 유도체, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실 및 시토신, 5-프로피닐 우라실 및 시토신, 6-아조 우라실, 시토신 및 티민, 5-우라실(슈도우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-히드록실 및 기타 8-치환된 아데닌 및 구아닌, 5-할로, 구체적으로 5-브로모, 5-트리플루오로메틸 및 기타 5-치환된 우라실 및 시토신, 7-메틸구아닌 및 7-메틸아데닌, 8-아자구아닌 및 8-아자아데닌, 7-데아자구아닌 및 7-데아자아데닌, 및 3-데아자구아닌 및 3-데아자아데닌을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 특정 비천연 핵산, 예컨대 5-치환된 피리미딘, 6-아자피리미딘 및 N-2 치환된 퓨린, N-6 치환된 퓨린, O-6 치환된 퓨린, 2-아미노프로필아데닌, 5-프로피닐우라실, 5-프로피닐시토신, 5-메틸시토신, 듀플렉스 형성의 안정성을 증가시키는 것, 보편적 핵산, 소수성 핵산, 무차별 핵산, 크기 확대된 핵산, 플루오르화 핵산, 5-치환된 피리미딘, 6-아자피리미딘 및 N-2, N-6 및 0-6 치환된 퓨린, 예를 들어 2-아미노프로필아데닌, 5-프로피닐우라실 및 5-프로피닐시토신. 5-메틸시토신(5-me-C), 5- 히드록시메틸 시토신, 잔틴, 하이포잔틴, 2-아미노아데닌, 아데닌 및 구아닌의 6-메틸, 기타 알킬 유도체, 아데닌 및 구아닌의 2-프로필 및 기타 알킬 유도체, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실, 5-할로시토신, 5-프로피닐(-C≡C-CH3) 우라실, 5-프로피닐 시토신, 피리미딘 핵산의 기타 알키닐 유도체, 6-아조 우라실, 6-아조 시토신, 6-아조 티민, 5-우라실(슈도우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-히드록실 및 기타 8-치환 아데닌 및 구아닌, 5 -할로, 구체적으로 5-브로모, 5-트리플루오로메틸, 기타 5-치환 우라실 및 시토신, 7-메틸구아닌, 7- 메틸아데닌, 2-F-아데닌, 2-아미노-아데닌, 8-아자구아닌, 8-아자아데닌, 7-데아자구아닌, 7- 데아자아데닌, 3-데아자구아닌, 3-데아자아데닌, 삼환식 피리미딘, 페녹사진 시티딘( [5,4-b][l,4]벤족사진-2(3H)-온), 페노티아진 시티딘(1H- 피리미도[5,4-b][l,4]벤조티아진-2(3H)-온), G-클램프, 페녹사진 시티딘(예를 들어 9-(2-아미노에톡시)-H-피리미도[5,4-b][l,4]벤족사진-2(3H)-온), 카르바졸 시티딘(2H-피리미도[4,5- b]인돌-2-온), 피리도인돌 시티딘(H-피리도[3',2':4,5]피롤로[2,3-d]피리미딘-2-온), 퓨린 또는 피리미딘 염기가 다른 복소환으로 대체된 것, 7-데아자-아데닌, 7-데아자구아노신, 2-아미노피리딘, 2-피리돈, 아자시토신, 5-브로모시토신, 브로모우라실, 5-클로로시토신, 염소화 시토신, 시클로시토신, 시토신 아라비노사이드, 5- 플루오로시토신, 플루오로피리미딘, 플루오로우라실, 5,6-디히드로시토신, 5-요오도시토신, 히드록시우레아, 요오도우라실, 5-니트로시토신, 5- 브로모우라실, 5-클로로우라실, 5- 플루오로우라실, 및 5-요오도우라실, 2-아미노-아데닌, 6-티오-구아닌, 2-티오-티민, 4-티오-티민, 5-프로피닐-우라실, 4-티오-우라실, N4-에틸시토신, 7-데아자구아닌, 7-데아자-8- 아자구아닌, 5-히드록시시토신, 2'-데옥시우리딘, 2-아미노-2'-데옥시아데노신, 및 미국 특허 제3,687,808호; 미국 특허 제4,845,205호; 미국 특허 제4,910,300호; 미국 특허 제4,948,882호; 미국 특허 제5,093,232호; 미국 특허 제5,130,302호; 미국 특허 제5,134,066호; 미국 특허 제5,175,273호; 미국 특허 제5,367,066호; 미국 특허 제5,432,272호; 미국 특허 제5,457,187호; 미국 특허 제5,459,255호; 미국 특허 제5,484,908호; 미국 특허 제5,502,177호; 미국 특허 제5,525,711호; 미국 특허 제5,552,540호; 미국 특허 제5,587,469호; 미국 특허 제5,594,121호; 미국 특허 제5,596,091호; 미국 특허 제5,614,617호; 미국 특허 제5,645,985호; 미국 특허 제5,681,941호; 미국 특허 제5,750,692호; 미국 특허 제5,763,588호; 미국 특허 제5,830,653호 및 미국 특허 제6,005,096호; 국제 공개 제99/62923호; 문헌[Kandimalla et al., (2001) Bioorg. Med. Chem. 9:807-813]; 문헌[The Concise Encyclopedia of Polymer Science and Engineering, Kroschwitz, J.I., Ed., John Wiley & Sons, 1990, 858- 859]; 문헌[Englisch et al., Angewandte Chemie, International Edition, 1991, 30, 613]; 및 문헌[Sanghvi, Chapter 15, Antisense Research and Applications, Crooke and Lebleu Eds., CRC Press, 1993, 273-288]에 기술된 것. 추가의 염기 변형은 예를 들어 미국 특허 제 3,687,808호; 문헌[Englisch et al., Angewandte Chemie, International Edition, 1991, 30, 613]; 및 문헌[Sanghvi, Chapter 15, Antisense Research and Applications, pages 289-302, Crooke and Lebleu ed., CRC Press, 1993]에서 발견될 수 있다.
다양한 헤테로시클릭 염기 및 다양한 당 모이어티(및 당 유사체)를 포함하는 비천연 핵산은 당업계에서 이용 가능하고, 일부 경우에 핵산은 자연 발생 핵산의 주요 5가지 염기 성분 이외의 하나 또는 여러 헤테로시클릭 염기를 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에 복소환식 염기는 우라실-5-일, 시토신-5-일, 아데닌-7-일, 아데닌-8-일, 구아닌-7-일, 구아닌-8-일, 4- 아미노피롤로 [2.3-d] 피리미딘-5-일, 2-아미노-4-옥소피롤로 [2, 3-d] 피리미딘-5-일, 2- 아미노-4-옥소피롤로 [2.3-d] 피리미딘-3-일 기를 포함하며, 여기서 퓨린은 9-위치를 통하여, 피리미딘은 1-위치를 통하여, 피롤로피리미딘은 7-위치를 통하여, 그리고 피라졸로피리미딘은 1-위치를 통하여 핵산의 당 모이어티에 부착된다.
일부 실시 형태에서, 뉴클레오티드 유사체는 또한 포스페이트 모이어티에서 변형된다. 변형된 포스페이트 모이어티는 2개의 뉴클레오티드 사이의 연결에서 변형을 갖는 것을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않으며, 예를 들어 포스포로티오에이트, 키랄 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트, 포스포트리에스테르, 아미노알킬포스포트리에스테르, 메틸 및 다른 알킬 포스포네이트, 예를 들어 3'-알킬렌 포스포네이트 및 키랄 포스포네이트, 포스피네이트, 포스포르아미데이트, 예를 들어 3'-아미노 포스포르아미데이트 및 아미노알킬포스포르아미데이트, 티오노포스포르아미데이트, 티오노알킬포스포네이트, 티오노알킬포스포트리에스테르 및 보라노포스페이트를 함유한다. 2개의 뉴클레오티드 사이의 이러한 포스페이트 또는 변형된 포스페이트 연결은 3'-5' 연결 또는 2'-5' 연결을 통한 것이며, 연결은 3'-5'에서 5'-3', 또는 2'-5'에서 5'-2'와 같은 반전 극성을 포함하는 것으로 이해된다. 다양한 염, 혼합염 및 유리산 형태가 또한 포함된다. 다수의 미국 특허는 변형된 포스페이트를 함유하는 뉴클레오티드의 제조 및 사용 방법을 교시하며, 3,687,808호; 4,469,863호; 4,476,301호; 5,023,243호; 5,177,196호; 5,188,897호; 5,264,423호; 5,276,019호; 5,278,302호; 5,286,717호; 5,321,131호; 5,399,676호; 5,405,939호; 5,453,496호; 5,455,233호; 5,466,677호; 5,476,925호; 5,519,126호; 5,536,821호; 5,541,306호; 5,550,111호; 5,563,253호; 5,571,799호; 5,587,361호; 및 5,625,050호를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 실시 형태에서, 비천연 핵산은 2',3'-디데옥시-2',3'-디데히드로-뉴클레오시드(PCT/US2002/006460), 5'-치환된 DNA 및 RNA 유도체(PCT/US2011/033961; 문헌[Saha et al., J. Org Chem., 1995, 60, 788-789]; 문헌[Wang et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 1999, 9, 885-890]; 및 문헌[Mikhailov et al., Nucleosides & Nucleotides, 1991, 10(1-3), 339-343]; 문헌[Leonid et al., 1995, 14(3-5), 901-905]; 및 문헌[Eppacher et al., Helvetica Chimica Acta, 2004, 87, 3004-3020]; PCT/JP2000/004720; PCT/JP2003/002342; PCT/JP2004/013216; PCT/JP2005/020435; PCT/JP2006/315479; PCT/JP2006/324484; PCT/JP2009/056718; PCT/JP2010/067560), 또는 변형된 염기를 갖는 모노포스페이트로서 제조된 5'-치환된 단량체(문헌[Wang et al., Nucleosides Nucleotides & Nucleic Acids, 2004, 23 (1 & 2), 317-337])를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 비천연 핵산은 당 고리의 5'-위치 및 2'-위치에서의 변형(PCT/US94/02993), 예컨대 5'-CH2-치환 2'-O-보호 뉴클레오시드(문헌[Wu et al., Helvetica Chimica Acta, 2000, 83, 1127-1143] 및 문헌[Wu et al., Bioconjugate Chem. 1999, 10, 921-924])를 포함한다. 일부 경우에, 비천연 핵산은 아미드 연결 뉴클레오시드 이량체가 올리고뉴클레오티드 내로의 혼입을 위하여 제조된 것을 포함하며, 여기서, 이량체 중 3' 연결 뉴클레오시드(5'→3')는 2'-OCH3 및 5'-(S)-CH3을 포함한다(문헌[Mesmaeker et al., Synlett, 1997, 1287-1290]). 비천연 핵산은 2'-치환 5'-CH2(또는 O) 변형 뉴클레오시드를 포함할 수 있다(PCT/US92/01020). 비천연 핵산은 5'-메틸렌포스포네이트 DNA 및 RNA 단량체 및 이량체를 포함할 수 있다(문헌[Bohringer et al., Tet. Lett., 1993, 34, 2723-2726]; 문헌[Collingwood et al., Synlett, 1995, 7, 703-705]; 및 문헌[Hutter et al., Helvetica Chimica Acta, 2002, 85, 2777-2806]). 비천연 핵산은 2'-치환을 갖는 5'-포스포네이트 단량체(US2006/0074035) 및 기타 변형된 5'-포스포네이트 단량체(WO1997/35869)를 포함할 수 있다. 비천연 핵산은 5'-변형된 메틸렌포스포네이트 단량체를 포함할 수 있다(EP614907 및 EP629633). 비천연 핵산은 5' 및/또는 6'-위치에 히드록실 기를 포함하는 5' 또는 6'-포스포네이트 리보뉴클레오시드의 유사체를 포함할 수 있다(문헌[Chen et al., Phosphorus, Sulfur and Silicon, 2002, 777, 1783-1786]; 문헌[Jung et al., Bioorg. Med. Chem., 2000, 8, 2501-2509]; 문헌[Gallier et al., Eur. J. Org. Chem., 2007, 925-933]; 및 문헌[Hampton et al., J. Med. Chem., 1976, 19(8), 1029-1033]). 비천연 핵산은 5'-포스페이트 기를 갖는 5'-포스포네이트 데옥시리보뉴클레오시드 단량체 및 이량체를 포함할 수 있다(문헌[Nawrot et al., Oligonucleotides, 2006, 16(1), 68-82]). 비천연 핵산은 6'-포스포네이트 기를 갖는 뉴클레오시드를 포함할 수 있으며, 여기서, 5' 및/또는 6'-위치는 비치환되거나 티오-tert-부틸 기(SC(CH3)3)(및 이의 유사체); 메틸렌아미노 기(CH2NH2)(및 이의 유사체) 또는 시아노 기(CN)(및 이의 유사체)로 치환된다(문헌[Fairhurst et al., Synlett, 2001, 4, 467-472]; 문헌[Kappler et al., J. Med. Chem., 1986, 29, 1030-1038]; 문헌[Kappler et al., J. Med. Chem., 1982, 25, 1179-1184]; 문헌[Vrudhula et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 888-894]; 문헌[Hampton et al., J. Med. Chem., 1976, 19, 1371-1377]; 문헌[Geze et al., J. Am. Chem. Soc, 1983, 105(26), 7638-7640]; 및 문헌[Hampton et al., J. Am. Chem. Soc, 1973, 95(13), 4404-4414]).
일부 실시 형태에서, 비천연 핵산은 또한 당 모이어티의 변형을 포함한다. 일부 경우에, 핵산은 당 기가 변형된 하나 이상의 뉴클레오시드를 함유한다. 이러한 당 변형 뉴클레오시드는 향상된 뉴클레아제 안정성, 증가된 결합 친화성, 또는 일부 다른 유익한 생물학적 특성을 부여할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 핵산은 화학적 변형 리보푸라노스 고리 모이어티를 포함한다. 화학적으로 변형된 리보푸라노스 고리의 예는 치환기(5' 및/또는 2' 치환기 포함)의 부가; 이환식 핵산(BNA)을 형성하기 위한 2개의 고리 원자의 가교; S, N(R), 또는 C(R1)(R2) (R = H, C1-C12 알킬 또는 보호기)에 의한 리보실 고리 산소 원자의 대체; 및 이들의 조합을 제한 없이 포함한다. 화학적으로 변형된 당의 예는 WO2008/101157, US2005/0130923, 및 WO2007/134181에서 확인할 수 있다.
일부 경우에, 변형된 핵산은 변형된 당 또는 당 유사체를 포함한다. 따라서, 리보스 및 데옥시리보스 외에, 당 모이어티는 펜토스, 데옥시펜토스, 헥소스, 데옥시헥소스, 글루코스, 아라비노스, 자일로스, 릭소스, 또는 당 "유사체" 시클로펜틸 기일 수 있다. 당은 피라노실 또는 푸라노실 형태일 수 있다. 당 모이어티는 리보스, 데옥시리보스, 아라비노스 또는 2'-O-알킬리보스의 푸라노시드일 수 있고, 당은 [알파] 또는 [베타] 아노머 입체배치로 각각의 복소환식 염기에 부착될 수 있다. 당 변형은 2'-알콕시-RNA 유사체, 2'-아미노-RNA 유사체, 2'-플루오로-DNA, 및 2'-알콕시- 또는 아미노-RNA/DNA 키메라를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어, 당 변형은 2'-O-메틸-우리딘 또는 2'-O-메틸-시티딘을 포함할 수 있다. 당 변형은 2'-O-알킬-치환 데옥시리보뉴클레오시드 및 2'-O-에틸렌글리콜 유사 리보뉴클레오시드를 포함한다. 이러한 당 또는 당 유사체, 및 이러한 당 또는 유사체가 헤테로시클릭 염기(핵산 염기)에 부착된 각각의 "뉴클레오시드"의 제조는 알려져 있다. 당 변형이 또한 이루어지고 다른 변형과 조합될 수 있다.
당 모이어티에 대한 변형은 리보스 및 데옥시리보스의 천연 변형, 및 비천연 변형을 포함한다. 당 변형은 2' 위치에서의 다음과 같은 변형을 포함하나, 이에 한정되지 않는다 OH; F; O-, S-, 또는 N-알킬; O-, S-, 또는 N-알케닐; O-, S-, 또는 N-알키닐; 또는 O-알킬-O-알킬(알킬, 알케닐, 및 알키닐은 치환 또는 비치환 C1 내지 C10 알킬 또는 C2 내지 C10 알케닐 및 알키닐일 수 있음). 2' 당 변형은 또한 -O[(CH2)nO]mCH3, -O(CH2)nOCH3, -O(CH2)nNH2, -O(CH2)nCH3, -O(CH2)nONH2, 및 -O(CH2)nON[(CH2)nCH3)]2를 포함하나, 이에 한정되지 않는다(n 및 m은 1 내지 약 10임).
2' 위치에서의 다른 변형은 다음을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: C1 내지 C10 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 알카릴, 아랄킬, O-알카릴, O-아랄킬, SH, SCH3, OCN, Cl, Br, CN, CF3, OCF3, SOCH3, SO2 CH3, ONO2, NO2, N3, NH2, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알카릴, 아미노알킬아미노, 폴리알킬아미노, 치환된 실릴, RNA 절단 기, 리포터 기, 인터컬레이터, 올리고뉴클레오티드의 약동학적 특성을 개선하기 위한 기, 또는 올리고뉴클레오티드의 약력학적 특성을 개선하기 위한 기, 및 유사한 특성을 갖는 다른 치환기. 당의 다른 위치, 구체적으로 3' 말단 뉴클레오티드 또는 2'-5' 연결된 올리고뉴클레오티드에서의 당의 3' 위치 및 5' 말단 뉴클레오티드의 5' 위치에서 유사한 변형이 이루어질 수도 있다. 변형된 당은 또한 CH2 및 S와 같은 가교 고리 산소에서의 변형을 포함하는 것들을 포함한다. 뉴클레오티드 당 유사체는 또한, 펜토푸라노실 당 대신 시클로부틸 모이어티와 같은 당 모방체를 가질 수 있다. 이러한 변형된 당 구조의 제조를 교시하고 일련의 염기 변형을 상술하고 기술하는 다수의 미국 특허, 예컨대 미국 특허 제4,981,957호; 제5,118,800호; 제5,319,080호; 제5,359,044호; 제5,393,878호; 제5,446,137호; 제5,466,786호; 제5,514,785호; 제5,519,134호; 제5,567,811호; 제5,576,427호; 제5,591,722호; 제5,597,909호; 제5,610,300호; 제5,627,053호; 제5,639,873호; 제5,646,265호; 제5,658,873호; 제5,670,633호; 제4,845,205호; 제5,130,302호; 제5,134,066호; 제5,175,273호; 제5,367,066호; 제5,432,272호; 제5,457,187호; 제5,459,255호; 제5,484,908호; 제5,502,177호; 제5,525,711호; 제5,552,540호; 제5,587,469호; 제5,594,121호; 제5,596,091호; 제5,614,617호; 제5,681,941호; 및 제5,700,920호가 있으며, 이들 각각은 본원에 그 전체가 참고로 포함된다.
변형된 당 모이어티를 갖는 핵산의 예는 5'-비닐, 5'-메틸(R 또는 S), 4'-S, 2'-F, 2'-OCH3, 및 2'-O(CH2)2OCH3 치환기를 포함하는 핵산을 제한 없이 포함한다. 2' 위치에서의 치환기는 또한 알릴, 아미노, 아지도, 티오, O-알릴, O-(C1-C10 알킬), OCF3, O(CH2)2SCH3, O(CH2)2-O-N(Rm)(Rn), 및 O-CH2-C(=O)-N(Rm)(Rn)으로부터 선택될 수 있다(각각의 Rm 및 Rn은 독립적으로 H 또는 치환 또는 비치환 C1-C10 알킬임).
특정 실시 형태에서, 본원에 기술된 핵산은 하나 이상의 이환식 핵산을 포함한다. 일부 이러한 실시 형태에서, 이환식 핵산은 4' 및 2' 리보실 고리 원자 사이의 가교체를 포함한다. 특정 실시 형태에서, 본원에 제공된 핵산은 하나 이상의 이환식 핵산을 포함하며, 가교체는 4'→2' 이환식 핵산을 포함한다. 이러한 4'→2' 이환식 핵산은 화학식 4'-(CH2)-O-2'(LNA); 4'-(CH2)-S-2'; 4'-(CH2)2-O-2'(ENA); 4'-CH(CH3)-O-2' 및 4'-CH(CH2OCH3)-O-2', 및 이들의 유사체(미국 특허 제7,399,845호 참조); 4'-C(CH3)(CH3)-O-2' 및 이의 유사체(국제 공개 제2009/006478호, 국제 공개 제2008/150729호, 미국 특허 출원 공개 공보 제2004/0171570호, 미국 특허 제7,427,672호, 문헌[Chattopadhyaya et al., J. Org. Chem., 209, 74, 118-134], 및 국제 공개 제2008/154401호 참조) 중 하나를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 또한 예를 들어 다음을 참조한다: 문헌[Singh et al., Chem. Commun., 1998, 4, 455-456]; 문헌[Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630]; 문헌[Wahlestedt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000, 97, 5633-5638]; 문헌[Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222]; 문헌[Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039]; 문헌[Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc., 2007, 129(26) 8362-8379]; 문헌[Elayadi et al., Curr. Opinion Invens. Drugs, 2001, 2, 558-561]; 문헌[Braasch et al., Chem. Biol, 2001, 8, 1-7]; 문헌[Oram et al., Curr. Opinion Mol. Ther., 2001, 3, 239-243]; 미국 특허 제4,849,513호; 미국 특허 제5,015,733호; 미국 특허 제5,118,800호; 미국 특허 제5,118,802호; 미국 특허 제7,053,207호; 미국 특허 제6,268,490호; 미국 특허 제6,770,748호; 미국 특허 제6,794,499호; 미국 특허 제7,034,133호; 미국 특허 제6,525,191호; 미국 특허 제6,670,461호; 및 미국 특허 제7,399,845호; 국제 공개 제2004/106356호, 국제 공개 제1994/14226호, 국제 공개 제2005/021570호, 국제 공개 제2007/090071호, 및 국제 공개 제2007/134181호; 미국 특허 출원 공개 공보 제2004/0171570호, 미국 특허 출원 공개 공보 제2007/0287831호, 및 미국 특허 출원 공개 공보 제2008/0039618호; 미국 가출원 제60/989,574호, 미국 가출원 제61/026,995호, 미국 가출원 제61/026,998호, 미국 가출원 제61/056,564호, 미국 가출원 제61/086,231호, 미국 가출원 제61/097,787호, 및 미국 가출원 제61/099,844호; 및 국제 출원 PCT/US2008/064591, PCT US2008/066154, PCT US2008/068922, 및 PCT/DK98/00393.
특정 실시 형태에서, 핵산은 연결된 핵산을 포함한다. 핵산은 임의의 핵산간 연결을 사용하여 서로 연결될 수 있다. 핵산간 연결기의 두 가지 주요 부류는 인 원자의 존재 또는 부재에 의해 정의된다. 대표적인 인 함유 핵산간 연결은 포스포디에스테르, 포스포트리에스테르, 메틸포스포네이트, 포스포르아미데이트, 및 포스포로티오에이트(P=S)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 대표적인 인 비함유 핵산간 연결기는 메틸렌메틸이미노(-CH2-N(CH3)-O-CH2-), 티오디에스테르(-O-C(O)-S-), 티오노카르바메이트(-O-C(O)(NH)-S-); 실록산(-O-Si(H)2-O-); 및 N,N*-디메틸히드라진(-CH2-N(CH3)-N(CH3))을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 특정 실시 형태에서, 키랄 원자를 갖는 핵산간 연결은 라세미 혼합물, 별개의 거울상이성질체, 예를 들어, 알킬포스포네이트 및 포스포로티오에이트로서 제조될 수 있다. 비천연 핵산은 단일 변형을 포함할 수 있다. 비천연 핵산은 모이어티 중 하나 내에 또는 서로 다른 모이어티 사이에 다수의 변형을 포함할 수 있다.
핵산에 대한 골격 포스페이트 변형은 메틸 포스포네이트, 포스포로티오에이트, 포스포르아미데이트(가교 또는 비가교), 포스포트리에스테르, 포스포로디티오에이트, 포스포디티오에이트, 및 보라노포스페이트를 포함하나, 이에 한정되지 않으며, 임의의 조합으로 사용될 수 있다. 다른 비-포스페이트 연결도 사용될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 골격 변형(예를 들어, 메틸포스포네이트, 포스포로티오에이트, 포스포로아미데이트, 및 포스포로디티오에이트 뉴클레오티드간 연결)은 변형된 핵산에 면역조절 활성을 부여하고/하거나 이의 생체 내 안정성을 향상시킬 수 있다.
일부 경우에, 인 유도체(또는 변형된 포스페이트기)는 당 또는 당 유사체 모이어티에 부착되며, 모노포스페이트, 디포스페이트, 트리포스페이트, 알킬포스포네이트, 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트, 포스포르아미데이트 등일 수 있다. 변형 포스페이트 연결 또는 비-포스페이트 연결을 포함하는 예시적인 폴리뉴클레오티드가 문헌[Peyrottes et al., 1996, Nucleic Acids Res. 24: 1841-1848]; 문헌[Chaturvedi et al., 1996, Nucleic Acids Res. 24:2318-2323]; 및 문헌[Schultz et al., (1996) Nucleic Acids Res. 24:2966-2973]; 문헌[Matteucci, 1997, "Oligonucleotide Analogs: an Overview" in Oligonucleotides as Therapeutic Agents, (Chadwick and Cardew, ed.) John Wiley and Sons, New York, NY]; 문헌[Zon, 1993, "Oligonucleoside Phosphorothioates" in Protocols for Oligonucleotides and Analogs, Synthesis and Properties, Humana Press, pp. 165-190]; 문헌[Miller et al., 1971, JACS 93:6657-6665]; 문헌[Jager et al., 1988, Biochem. 27:7247-7246]; 문헌[Nelson et al., 1997, JOC 62:7278-7287]; 미국 특허 제5,453,496호; 및 문헌[Micklefield, 2001, Curr. Med. Chem. 8: 1157-1179]에서 발견될 수 있다.
일부 경우에, 골격 변형은 포스포디에스테르 연결이 대안적인 모이어티, 예컨대 음이온성, 중성 또는 양이온성 기로 대체된 것을 포함한다. 이러한 변형의 예는 다음을 포함한다: 음이온성 뉴클레오시드간 연결; N3'→P5' 포스포르아미데이트 변형; 보라노포스페이트 DNA; 프로올리고뉴클레오티드; 중성 뉴클레오시드간 연결, 예컨대 메틸포스포네이트; 아미드 연결된 DNA; 메틸렌(메틸이미노) 연결; 포름아세탈 및 티오포름아세탈 연결; 술포닐 기를 함유하는 골격; 모르폴리노 올리고; 펩티드 핵산(PNA); 및 양으로 하전된 데옥시리보핵산 구아니딘(DNG) 올리고(문헌[Micklefield, 2001, Current Medicinal Chemistry 8: 1157-1179]). 변형 핵산은 하나 이상의 변형, 예를 들어 포스페이트 연결들의 조합, 예컨대 포스포디에스테르 및 포스포로티오에이트 연결의 조합을 포함하는 키메라 또는 혼합 골격을 포함할 수 있다.
포스페이트의 치환체는 예를 들어 단쇄 알킬 또는 시클로알킬 뉴클레오시드간 연결, 혼합 헤테로원자 및 알킬 또는 시클로알킬 뉴클레오시드간 연결, 또는 하나 이상의 단쇄 헤테로원자 또는 복소환식 뉴클레오시드간 연결을 포함한다. 이들은 (뉴클레오시드의 당 부분으로부터 부분적으로 형성된) 모르폴리노 연결을 갖는 것; 실록산 골격; 술피드, 술폭시드 및 술폰 골격; 포름아세틸 및 티오포름아세틸 골격; 메틸렌 포름아세틸 및 티오포름아세틸 골격; 알켄 함유 골격; 술파메이트 골격; 메틸렌이미노 및 메틸렌히드라지노 골격; 술포네이트 및 술폰아미드 골격; 아미드 골격; 및 혼합된 N, O, S, 및 CH2 성분 부분을 갖는 그 외의 것들을 포함한다. 다수의 미국 특허는 이러한 유형의 포스페이트 대체물의 제조 및 사용 방법을 개시하며, 미국 특허 5,034,506호; 5,166,315호; 5,185,444호; 5,214,134호; 5,216,141호; 5,235,033호; 5,264,562호; 5,264,564호; 5,405,938호; 5,434,257호; 5,466,677호; 5,470,967호; 5,489,677호; 5,541,307호; 5,561,225호; 5,596,086호; 5,602,240호; 5,610,289호; 5,602,240호; 5,608,046호; 5,610,289호; 5,618,704호; 5,623,070호; 5,663,312호; 5,633,360호; 5,677,437호; 및 5,677,439호를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 또한, 뉴클레오티드 치환에서 뉴클레오티드의 당 및 포스페이트 모이어티 모두가, 예를 들어 아미드 유형 연결(아미노에틸글리신)(PNA)에 의해 대체될 수 있다는 것이 이해된다. 미국 특허 제5,539,082호; 미국 특허 제5,714,331호; 및 미국 특허 제5,719,262호는 PNA 분자의 제조 및 사용 방법을 교시하며, 이들 각각은 본원에 참고로 포함된다. 또한 문헌[Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500]을 참조한다. 다른 유형의 분자(콘쥬게이트)를 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체에 연결하여 예를 들어 세포 흡수를 향상시키는 것이 또한 가능하다. 콘쥬게이트는 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체에 화학적으로 연결될 수 있다. 이러한 콘쥬게이트는 지질 모이어티, 예컨대 콜레스테롤 모이어티(문헌[Letsinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989, 86, 6553-6556]), 콜산(문헌[Manoharan et al., Bioorg. Med. Chem. Let., 1994, 4, 1053-1060]), 티오에테르, 예를 들어, 헥실-S-트리틸티올(문헌[Manoharan et al., Ann. KY. Acad. Sci., 1992, 660, 306-309]; 문헌[Manoharan et al., Bioorg. Med. Chem. Let., 1993, 3, 2765-2770]), 티오콜레스테롤(문헌[Oberhauser et al., Nucl. Acids Res., 1992, 20, 533-538]), 지방족 사슬, 예를 들어, 도데칸디올 또는 운데실 잔기(문헌[Saison-Behmoaras et al., EM5OJ, 1991, 10, 1111-1118]; 문헌[Kabanov et al., FEBS Lett., 1990, 259, 327-330]; 문헌[Svinarchuk et al., Biochimie, 1993, 75, 49-54]), 인지질, 예를 들어, 디-헥사데실-rac-글리세롤 또는 트리에틸암모늄 l-디-O-헥사데실-rac-글리세로-S-H-포스포네이트(문헌[Manoharan et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 3651-3654]; 문헌[Shea et al., Nucl. Acids Res., 1990, 18, 3777-3783]), 폴리아민 또는 폴리에틸렌 글리콜 사슬(문헌[Manoharan et al., Nucleosides & Nucleotides, 1995, 14, 969-973]), 또는 아다만탄 아세트산(문헌[Manoharan et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 3651-3654]), 팔미틸 모이어티(문헌[Mishra et al., Biochem. Biophys. Acta, 1995, 1264, 229-237]), 또는 옥타데실아민 또는 헥실아미노-카르보닐-옥시콜레스테롤 모이어티(문헌[Crooke et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 1996, 277, 923-937])를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 다수의 미국 특허는 이러한 콘쥬게이트의 제조를 교시하며, 다음을 포함하지만 이에 한정되지 않는다: 미국 특허 제4,828,979호; 미국 특허 제4,948,882호; 미국 특허 제5,218,105호; 미국 특허 제5,525,465호; 미국 특허 제5,541,313호; 미국 특허 제5,545,730호; 미국 특허 제5,552,538호; 미국 특허 제5,578,717호, 미국 특허 제5,580,731호; 미국 특허 제5,580,731호; 미국 특허 제5,591,584호; 미국 특허 제5,109,124호; 미국 특허 제5,118,802호; 미국 특허 제5,138,045호; 미국 특허 제5,414,077호; 미국 특허 제5,486,603호; 미국 특허 제5,512,439호; 미국 특허 제5,578,718호; 미국 특허 제5,608,046호; 미국 특허 제4,587,044호; 미국 특허 제4,605,735호; 미국 특허 제4,667,025호; 미국 특허 제4,762,779호; 미국 특허 제4,789,737호; 미국 특허 제4,824,941호; 미국 특허 제4,835,263호; 미국 특허 제4,876,335호; 미국 특허 제4,904,582호; 미국 특허 제4,958,013호; 미국 특허 제5,082,830호; 미국 특허 제5,112,963호; 미국 특허 제5,214,136호; 미국 특허 제5,082,830호; 미국 특허 제5,112,963호; 미국 특허 제5,214,136호; 미국 특허 제5,245,022호; 미국 특허 제5,254,469호; 미국 특허 제5,258,506호; 미국 특허 제5,262,536호; 미국 특허 제5,272,250호; 미국 특허 제5,292,873호; 미국 특허 제5,317,098호; 미국 특허 제5,371,241호, 미국 특허 제5,391,723호; 미국 특허 제5,416,203호, 미국 특허 제5,451,463호; 미국 특허 제5,510,475호; 미국 특허 제5,512,667호; 미국 특허 제5,514,785호; 미국 특허 제5,565,552호; 미국 특허 제5,567,810호; 미국 특허 제5,574,142호; 미국 특허 제5,585,481호; 미국 특허 제5,587,371호; 미국 특허 제5,595,726호; 미국 특허 제5,597,696호; 미국 특허 제5,599,923호; 미국 특허 제5,599,928호 및 미국 특허 제5,688,941호.
일부 경우에, 비천연 핵산은 비천연 염기쌍을 추가로 형성한다. 생체 내 조건 하에서 비천연 DNA 또는 RNA 염기쌍(UBP)을 형성할 수 있는 예시적인 비천연 뉴클레오티드는 TPT3, dTPT3, 5SICS, d5SICS, NaM, dNaM, CNMO, dCNMO, 및 이들의 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 데 사용될 수 있는 비천연 UBP를 형성할 수 있는 비천연 뉴클레오티드의 다른 예는 문헌[Dien et al., J Am Chem Soc., 2018, 140:16115-16123]; 문헌[Feldman et al., J Am Chem Soc, 2017, 139:11427-11433]; 문헌[Ledbetter et al., J Am Chem Soc., 2018, 140:758-765]; 문헌[Dhami et al., Nucleic Acids Res. 2014, 42:10235-10244]; 문헌[Malyshev et al., Nature, 2014, 509:385-388; Betz et al., J Am Chem Soc., 2013, 135:18637-18643]; 문헌[Lavergne et al., J Am Chem Soc. 2013, 135:5408-5419]; 및 문헌[Malyshev et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2012, 109:12005-12010]에서 발견될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 비천연 뉴클레오티드는 다음을 포함한다:
Figure pct00150
Figure pct00151
.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 데 사용될 수 있는 비천연 뉴클레오티드는 하기 화학식의 화합물로부터 유도될 수 있다:
Figure pct00152
식 중 R2는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 메톡시, 메탄티올, 메탄셀레노, 할로겐, 시아노, 및 아지도로 이루어진 군으로부터 선택되고;
물결선은 리보실 또는 2'-데옥시리보실에 대한 결합을 나타내고, 리보실 또는 2'-데옥시리보실 모이어티의 5'-히드록시 기는 유리 형태이거나, 선택적으로 모노포스페이트, 디포스페이트, 또는 트리포스페이트 기에 결합된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 데 사용될 수 있는 비천연 뉴클레오티드는
Figure pct00153
Figure pct00154
, 및
Figure pct00155
로부터 유도될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 데 사용될 수 있는 비천연 뉴클레오티드는
Figure pct00156
Figure pct00157
, 또는 이들의 염을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 비천연 염기쌍은 문헌[Dumas et al., "Designing logical codon reassignment - Expanding the chemistry in biology," Chemical Science, 6: 50-69 (2015)]에 기술된 비천연 아미노산을 생성한다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 비천연 핵산을 포함하는 합성 코돈에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 직교성 변형 신테타아제/tRNA 쌍에 의해 사이토카인에 통합된다. 이러한 직교성 쌍은, a) 비천연 tRNA에 다른 내인성 아미노산이 차징(charging)되는 것 및 b) 다른 내인성 tRNA에 비천연 아미노산이 차징되는 것을 최소화하면서 비천연 tRNA를 비천연 아미노산으로 차징시킬 수 있는 비천연 신테타아제를 포함한다. 이러한 직교성 쌍은, a) 내인성 신테타아제에 의해 다른 내인성 아미노산으로 차징되는 것을 방지하면서 비천연 신테타아제에 의해 차징될 수 있는 tRNA를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 이러한 쌍은 다양한 유기체, 예컨대 박테리아, 효모, 고세균, 또는 인간 원천으로부터 확인된다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 단일 유기체로부터의 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 2개의 상이한 유기체로부터의 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제/tRNA 쌍은 변형 전에 2개의 상이한 아미노산의 번역을 촉진하는 성분을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 알라닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아르기닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아스파라긴 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 아스파르트산 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 시스테인 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 글루타민 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 글루탐산 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 알라닌 글리신이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 히스티딘 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 류신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 이소류신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 라이신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 메티오닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 페닐알라닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 프롤린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 세린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 트레오닌 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 트립토판 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 티로신 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 발린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 신테타아제는 변형된 포스포세린 신테타아제이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 알라닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아르기닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아스파라긴 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 아스파르트산 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 시스테인 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 글루타민 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 글루탐산 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 알라닌 글리신이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 히스티딘 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 류신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 이소류신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 라이신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 메티오닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 페닐알라닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 프롤린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 세린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 트레오닌 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 트립토판 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 티로신 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 발린 tRNA이다. 일부 실시 형태에서, 직교성 tRNA는 변형된 포스포세린 tRNA이다.
일부 실시 형태에서, 비천연 아미노산은 아미노아실(aaRS 또는 RS)-tRNA 신테타아제-tRNA 쌍에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다. 예시적인 aaRS-tRNA 쌍은 메타노코커스 야나스치(Mj-Tyr) aaRS/tRNA 쌍, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테아로써모필루스 tRNACUA 쌍, 이. 콜라이 LeuRS(Ec-Leu)/비. 스테아로써모필루스 tRNACUA 쌍 및 피롤라이실-tRNA 쌍을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 일부 경우에, 비천연 아미노산은 Mj-TyrRS/tRNA 쌍에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다. Mj-TyrRS/tRNA 쌍에 의해 통합될 수 있는 예시적인 UAA는 파라-치환된 페닐알라닌 유도체, 예컨대 p-아미노페닐알라닌 및 p-메톡시페닐알라닌; 메타-치환된 티로신 유도체, 예컨대 3-아미노티로신, 3-니트로티로신, 3,4-디히드록시페닐알라닌 및 3-요오도티로신; 페닐셀레노시스테인; p-보로노페닐알라닌; 및 o-니트로벤질티로신을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 Ec-Tyr/tRNACUA 또는 Ec-Leu/tRNACUA 쌍에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다. Ec-Tyr/tRNACUA 또는 Ec-Leu/tRNACUA 쌍에 의해 통합될 수 있는 예시적인 UAA는 벤조페논, 케톤, 요오다이드, 또는 아지드 치환기를 함유하는 페닐알라닌 유도체; O-프로파르길티로신; α-아미노카프릴산, O-메틸 티로신, O-니트로벤질 시스테인; 및 3-(나프탈렌-2-일아미노)-2-아미노-프로판산을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 피롤라이실-tRNA 쌍에 의해 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다. 일부 경우에, PylRS는 고세균, 예를 들어 메탄생성 고세균으로부터 얻어진다. 일부 경우에, PylRS는 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei) 또는 메타노사르시나 아세티보란스(Methanosarcina acetivorans)로부터 얻어진다. 피롤라이실-tRNA 쌍에 의해 통합될 수 있는 예시적인 UAA는 아미드 및 카르바메이트 치환된 라이신, 예컨대 2-아미노-6-((R)-테트라히드로푸란-2-카르복스아미도)헥산산, N-ε-D-프롤릴-L-라이신, 및 N-ε-시클로펜틸옥시카르보닐-L-라이신; N-ε-아크릴로일-L-라이신; N-ε-[(1-(6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)에톡시)카르보닐]-L-라이신; 및 N-ε-(1-메틸시클로프로-2-엔카복사미도)라이신을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트는 엠. 바르케이 피롤라이실-tRNA 신테타아제(Mb PylRS)에 의해 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)과 같은 비천연 아미노산으로 선택적으로 차징되는 엠. 마제이 tRNA를 사용하여 제조될 수 있다. 문헌[Zhang et al., Nature 2017, 551(7682): 644-647]에 개시된 것과 같은 다른 방법들은 당업자에게 알려져 있다.
일부 경우에, 비천연 아미노산은 US 9,988,619 및 US 9,938,516에 개시된 신테타아제에 의해 본원에 기술된 사이토카인(예를 들어, IL 폴리펩티드)에 통합된다.
본원에 개시된 구축물 또는 벡터가 도입된 숙주 세포는 관심 tRNA, tRNA 신테타아제 및 단백질이 생산되도록 적합한 배지에서 배양되거나 유지된다. 배지는 또한 관심 단백질이 비천연 아미노산(들)을 통합시키도록 비천연 아미노산(들)을 포함한다 . 일부 실시 형태에서, 박테리아, 식물, 또는 조류의 뉴클레오시드 트리포스페이트 수송체(NTT)가 숙주 세포에 또한 존재한다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트는 NTT를 발현하는 숙주 세포를 사용하여 제조된다. 일부 실시 형태에서, 숙주 세포에 사용되는 뉴클레오티드 뉴클레오시드 트리포스페이트 수송체는 TpNTT1, TpNTT2, TpNTT3, TpNTT4, TpNTT5, TpNTT6, TpNTT7, TpNTT8(티. 슈도나나(T. pseudonana)), PtNTT1, PtNTT2, PtNTT3, PtNTT4, PtNTT5, PtNTT6(피. 트리코르누툼(P. tricornutum)), GsNTT(갈디에리아 설퍼라리아(Galdieria sulphuraria)), AtNTT1, AtNTT2(아라비돕시스 탈리아나(Arabidopsis thaliana)), CtNTT1, CtNTT2(클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis)), PamNTT1, PamNTT2(프로토클라미디아 아모에보필라(Protochlamydia amoebophila)), CcNTT(카에디박터 카리오필루스(Caedibacter caryophilus)), RpNTT1(리케챠 프로와제키이(Rickettsia prowazekii))로부터 선택될 수 있다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT1, PtNTT2, PtNTT3, PtNTT4, PtNTT5, 및 PtNTT6으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT1이다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT2이다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT3이다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT4이다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT5이다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT6이다. 사용될 수 있는 다른 NTT는 문헌[Zhang et al., Nature 2017, 551(7682): 644-647]; 문헌[Malyshev et al. Nature 2014 (509(7500), 385-388]; 및 문헌[Zhang et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2017, 114:1317-1322]에 개시되어 있다.
직교성 tRNA 신테타아제/tRNA 쌍은 tRNA를 비천연 아미노산으로 차징하고, 코돈에 반응하여 비천연 아미노산을 폴리펩티드 사슬에 통합시킨다. 예시적인 aaRS-tRNA 쌍은 메타노코커스 야나스치(Mj-Tyr) aaRS/tRNA 쌍, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테아로써모필루스 tRNACUA 쌍, 이. 콜라이 LeuRS(Ec-Leu)/비. 스테아로써모필루스 tRNACUA 쌍 및 피롤라이실-tRNA 쌍을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따라 사용될 수 있는 다른 aaRS-tRNA 쌍은 문헌[Feldman et al., J Am Chem Soc., 2018 140:1447-1454]; 및 문헌[Zhang et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2017, 114:1317-1322]에 기술된 것, 엠. 마제이로부터 유래된 것을 포함한다.
일부 실시 형태에서, NTT 및 tRNA 신테타아제를 발현하는 세포 시스템에서 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 방법이 제공된다. 본원에 기술된 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT1, PtNTT2, PtNTT3, PtNTT4, PtNTT5, 및 PtNTT6으로부터 선택되고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 및 엠. 마제이로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT1이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT2이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT3이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT3이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT4이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT5이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다. 일부 실시 형태에서, NTT는 PtNTT6이고, tRNA 신테타아제는 메타노코커스 야나스치, 이. 콜라이 TyrRS(Ec-Tyr)/비. 스테로써모필루스, 또는 엠. 마제이로부터 유래된다.
일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트는 (a) 뉴클레오티드 트리포스페이트 수송체 PtNTT2(전장 단백질의 처음 65개 아미노산 잔기가 결실된 절단된 변이체 포함), (b) 원하는 아미노산 서열을 갖는 IL-15 변이체를 코딩하고, N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)과 같은 비천연 아미노산이 통합될 원하는 위치에 코돈을 제공하기 위해 제1 비천연 뉴클레오티드 및 제2 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 비천연 염기쌍을 함유하는 이중 가닥 올리고뉴클레오티드를 포함하는 플라스미드, (c) 엠. 마제이로부터 유래된 tRNA를 코딩하고, 천연 서열 대신 (IL-15 변이체의 코돈에 대한) 인식된 안티코돈을 제공하기 위해 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 플라스미드, 및 (d) tRNA를 코딩하는 동일한 플라스미드 또는 상이한 플라스미드일 수 있는, 엠. 바케리 유래 피롤리실-tRNA 신테타아제(Mb PylRS)를 코딩하는 플라스미드를 포함하는, 이. 콜라이와 같은 세포에서 제조될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 세포는 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 데옥시리보 트리포스페이트가 추가로 보충된다. 일부 실시 형태에서, 세포는 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 리보 트리포스페이트가 추가로 보충된다. 일부 실시 형태에서, 세포는 하나 이상의 비천연 아미노산, 예컨대 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)이 추가로 보충된다. 일부 실시 형태에서, 원하는 IL-15 변이체의 아미노산 서열을 코딩하는 이중 가닥 올리고뉴클레오티드는 예를 들어 서열 번호 1을 갖는 단백질을 코딩하는 서열의 위치 18, 25, 46, 53, 77, 또는 83에서, 또는 서열 번호 3을 갖는 단백질을 코딩하는 서열의 위치 19, 26, 47, 54, 78, 또는 84에서 코돈 AXC를 포함하며, 여기서 X는 비천연 뉴클레오티드이다. 일부 실시 형태에서, 세포는 천연 서열 대신 AXC-매칭 안티코돈 GYT를 포함하는 엠. 마제이로부터의 직교성 tRNA를 코딩하는, 단백질 발현 플라스미드 또는 다른 플라스미드일 수 있는 플라스미드를 추가로 포함하고, 여기서 Y는 코돈의 비천연 뉴클레오티드와 동일하거나 상이할 수 있고 상보성인 비천연 뉴클레오티드이다. 일부 실시 형태에서, 코돈의 비천연 뉴클레오티드는 안티코돈의 비천연 뉴클레오티드와 상이하고 상보적이다. 일부 실시 형태에서, 코돈의 비천연 뉴클레오티드는 안티코돈의 비천연 뉴클레오티드와 동일하다. 일부 실시 형태에서, 이중 가닥 올리고뉴클레오티드에 비천연 염기쌍을 포함하는 제1 및 제2 비천연 뉴클레오티드는
Figure pct00158
로부터 유래될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 이중 가닥 올리고뉴클레오티드에 비천연 염기쌍을 포함하는 제1 및 제2 비천연 뉴클레오티드는
Figure pct00159
및
Figure pct00160
로부터 유래될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 제1 및 제2 비천연 뉴클레오티드의 트리포스페이트는
Figure pct00161
Figure pct00162
, 또는 이들의 염을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 제1 및 제2 비천연 뉴클레오티드의 트리포스페이트는
Figure pct00163
, 및
Figure pct00164
, 또는 이들의 염을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 제1 비천연 뉴클레오티드 및 제2 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 mRNA 유래 이중 가닥 올리고뉴클레오티드는
Figure pct00165
로부터 유래된 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 코돈을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 엠. 마제이 tRNA는 mRNA의 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 코돈을 인식하는 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 안티코돈을 포함할 수 있다. 엠. 마제이 tRNA의 안티코돈은
Figure pct00166
로부터 유래된 비천연 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, mRNA는
Figure pct00167
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, mRNA는
Figure pct00168
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, mRNA는
Figure pct00169
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, tRNA는
Figure pct00170
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, tRNA는
Figure pct00171
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, tRNA는
Figure pct00172
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, mRNA는
Figure pct00173
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함하고, tRNA는
Figure pct00174
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, mRNA는
Figure pct00175
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함하고, tRNA는
Figure pct00176
로부터 유도된 비천연 뉴클레오티드를 포함한다. 숙주 세포는 적절한 영양소가 포함된 배지에서 배양되며, (a) 코돈을 포함하는 사이토카인 유전자를 코딩하는 플라스미드(들)의 복제에 필요한 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 데옥시리보뉴클레오시드의 트리포스페이트, (b) (i) 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 코돈을 포함하고 사이토카인의 코딩 서열에 상응하는 mRNA, 및 (ii) 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 안티코돈을 포함하는 tRNA의 전사에 필요한 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 리보뉴클레오시드의 트리포스페이트, 및 (c) 관심 사이토카인의 폴리펩티드 서열에 통합될 비천연 아미노산(들)으로 보충된다. 이어서, 숙주 세포는 관심 단백질의 발현을 허용하는 조건하에서 유지된다.
예를 들어 발현된, 상기 하나 이상의 비천연 아미노산, AzK를 포함하는 생성 단백질은 당업자에게 알려진 방법에 의해 정제될 수 있고, 이어서, 당업자에게 알려진 조건하에서, 본원에 개시된 바와 같은 원하는 평균 분자량을 갖는 PEG 사슬을 포함하는 DBCO와 같은 알킨과 반응하도록 하여 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트를 제공할 수 있다. 문헌[Zhang et al., Nature 2017, 551(7682): 644-647; WO 2015157555; WO 2015021432; WO 2016115168; WO 2017106767; WO 2017223528; WO 2019014262; WO 2019014267; WO 2019028419; 및 WO2019/028425]에 개시된 것과 같은 다른 방법은 당업자에게 알려져 있다.
대안적으로, 비천연 아미노산(들)을 포함하는 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드는, tRNA 및 아미노아실 tRNA 신테타아제를 포함하고 하나 이상의 인-프레임 직교성 (종결) 코돈과 함께 관심 핵산 서열을 포함하는 본원에 기술된 핵산 구축물을 숙주 세포에 도입함으로써 제조된다. 숙주 세포는 적절한 영양소가 포함된 배지에서 배양되며, (a) 새로운 코돈 및 안티코돈을 포함하는 사이토카인 유전자를 코딩하는 플라스미드(들)의 복제에 필요한 하나 이상의 비천연 염기를 포함하는 데옥시리보뉴클레오시드의 트리포스페이트, (b) (i) 코돈을 포함하는 사이토카인 서열, 및 (ii) 안티코돈을 포함하는 직교성 tRNA에 상응하는 mRNA의 전사에 필요한 리보뉴클레오시드의 트리포스페이트, 및 (c) 비천연 아미노산(들)으로 보충된다. 이어서, 숙주 세포는 관심 단백질의 발현을 허용하는 조건 하에서 유지된다. 비천연 아미노산(들)은 비천연 코돈에 반응하여 폴리펩티드 사슬에 통합된다. 예를 들어, 하나 이상의 비천연 아미노산이 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드에 통합된다. 대안적으로, 2개 이상의 비천연 아미노산이 단백질의 2개 이상의 부위에서 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드에 통합될 수 있다.
비천연 아미노산(들)을 포함하는 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드가 숙주 세포에서 생성되면, 효소적, 화학적, 및/또는 삼투적 용해 및 물리적 파괴를 포함하여 당업계에 알려진 다양한 기법에 의해 숙주 세포로부터 추출될 수 있다. 사이토카인(예를 들어, IL-15) 폴리펩티드는 당업계에 알려진 표준 기법, 예컨대 분취 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 또는 당업자에게 알려진 임의의 다른 적합한 기법에 의해 정제될 수 있다.
적합한 숙주 세포는 박테리아 세포(예를 들어, 이. 콜라이, BL21(DE3))를 포함할 수 있지만, 가장 적합하게는 숙주 세포는 진핵 세포, 예를 들어 곤충 세포(예를 들어, 드로소필라 멜라노가스테르(Drosophila melanogaster)와 같은 초파리), 효모 세포, 선충(예를 들어, 씨. 엘레간스(C. elegans)), 마우스(예를 들어, 무스 무스쿨루스(Mus musculus)), 또는 포유류 세포(예컨대, 중국 햄스터 난소 세포(CHO) 또는 COS 세포, 인간 293T 세포, Hela 세포, NIH 3T3 세포, 및 마우스 적백혈병(MEL) 세포) 또는 인간 세포 또는 기타 진핵 세포이다. 다른 적합한 숙주 세포는 당업자에게 알려져 있다. 적합하게는, 숙주 세포는 포유류 세포, 예컨대 인간 세포 또는 곤충 세포이다. 일부 실시 형태에서, 적합한 숙주 세포는 이. 콜라이를 포함한다.
본 발명의 실시 형태에서 일반적으로 사용될 수 있는 다른 적합한 숙주 세포는 실시예 부문에 언급된 것들이다. 벡터 DNA는 통상적인 형질전환 또는 형질감염 기법을 통해 숙주 세포에 도입될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "형질전환" 및 "형질감염"은 인산칼슘 또는 염화칼슘 동시침전, DEAE-덱스트란-매개 형질감염, 리포펙션, 또는 전기천공을 포함하여, 외부 핵산 분자(예를 들어, DNA)를 숙주 세포에 도입하기 위한 잘 알려진 다양한 기법을 의미하는 것이다. 숙주 세포를 형질전환 또는 형질감염하기 위한 적합한 방법은 당해 분야에 잘 알려져 있다.
세포주를 생성할 때, 안정한 세포주가 제조되는 것이 일반적으로 바람직하다. 예를 들어, 포유류 세포의 안정한 형질감염을 위해, 사용된 발현 벡터 및 형질감염 기법에 따라 오직 작은 분획의 세포가 외래 DNA를 이의 게놈으로 통합시킬 수 있다는 것이 알려져 있다. 이 통합체를 확인하고 선택하기 위해, (예를 들어, 항생제에 대한 내성에 대해) 선발 가능한 마커를 코딩하는 유전자는 관심 유전자와 함께 일반적으로 숙주 세포로 도입된다. 바람직한 선발 가능한 마커는 G418, 하이그로마이신 또는 메토트렉세이트와 같은 약물에 내성을 부여하는 것을 포함한다. 선발 가능한 마커를 코딩하는 핵산 분자는 동일한 벡터에서 숙주 세포로 도입될 수 있거나, 별개의 벡터에서 도입될 수 있다. 도입된 핵산 분자로 안정하게 형질감염된 세포는 약물 선택에 의해 확인될 수 있다(예를 들어, 선발 가능한 마커 유전자가 통합된 세포는 생존하는 반면에, 다른 세포는 죽는다).
일 실시 형태에서, 본원에 기술된 구축물은 숙주 세포의 게놈으로 통합된다. 안정한 통합의 장점은 개별 세포 또는 클론 사이의 균일성이 달성된다는 점이다. 다른 장점은 최고의 생산자의 선택이 수행될 수 있다는 점이다. 따라서, 안정한 세포주를 생성하는 것이 바람직하다. 다른 실시 형태에서, 본원에 기술된 구축물은 숙주 세포를 형질감염시킨다. 숙주 세포를 구축물로 형질감염시키는 것의 장점은 단백질 수율이 최대화될 수 있다는 것이다. 일 양태에서, 본원에 기술된 핵산 구축물 또는 벡터를 포함하는 세포가 기술된다.
제약 조성물 및 제형
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 제약 조성물 및 제형은, 비경구, 경구, 또는 경피 투여 경로를 포함하지만 이에 한정되지 않는 다수의 투여 경로에 의해 대상체에게 투여된다. 일부 경우에, 비경구 투여는 정맥내, 피하, 근육내, 뇌내, 비강내, 동맥내, 관절내, 진피내, 유리체내, 골내 주입, 복강내 또는 척수강내 투여를 포함한다. 일부 경우에, 제약 조성물은 국소 투여용으로 제형화된다. 다른 경우에, 제약 조성물은 전신 투여용으로 제형화된다.
일부 실시 형태에서, 제약 제형은 수성 액체 분산액, 자가-유화 분산액, 리포솜 분산액, 에어로졸, 속방형 제형, 제어방출형 제형, 서방형 제형, 지속방출형 제형, 박동방출형 제형, 및 속방 및 제어방출 혼합형 제형을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 실시 형태에서, 제약 제형은 본원에 개시된 조성물과의 상용성 및 원하는 투여 형태의 방출 프로파일 특성에 기초하여 선택된 담체 또는 담체 물질을 포함한다. 예시적인 담체 물질은 예를 들어 결합제, 계면활성제, 가용화제, 안정화제, 활택제, 습윤제, 희석제 등을 포함한다. 약학적 상용성 담체 물질은 아카시아, 젤라틴, 콜로이드성 이산화규소, 칼슘 글리세로포스페이트, 락트산칼슘, 말토덱스트린, 글리세린, 규산마그네슘, 폴리비닐피롤리돈(PVP), 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르, 나트륨 카제이네이트, 대두 레시틴, 타우로콜산, 포스포티딜콜린, 염화나트륨, 인산삼칼슘, 인산이칼륨, 셀룰로스 및 셀룰로스 콘쥬게이트, 당 나트륨 스테아로일 락틸레이트, 카라기난, 모노글리세라이드, 디글리세라이드, 전호화분 녹말 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어, 문헌[Remington : The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995), Hoover, John E., Remington' s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975, Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980, and Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins1999)]을 참조한다.
일부 경우에, 제약 조성물은 리포솜의 지질 이중층에 직접 또는 간접적으로 결합된 복수의 IL-15 콘쥬게이트를 포함하는 면역리포솜으로서 제형화된다. 예시적인 지질은 지방산; 인지질; 스테롤, 예컨대 콜레스테롤; 스핑고지질, 예컨대 스핑고미엘린; 글리코스핑고지질, 예컨대 강글리오사이드, 글로보사이드 및 세레브로사이드; 계면활성제 아민, 예컨대 스테아릴, 올레일 및 리놀레일 아민을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다. 일부 경우에, 지질은 양이온성 지질을 포함한다. 일부 경우에, 지질은 인지질을 포함한다. 예시적인 인지질은 포스파티드산("PA"), 포스파티딜콜린("PC"), 포스파티딜글리세롤("PG"), 포파티딜에탄올아민("PE"), 포파티딜이노시톨("PI"), 및 포스파티딜세린("PS"), 스핑고미엘린(뇌 스핑고미엘린 포함), 레시틴, 리소레시틴, 리소포스파티딜에탄올아민, 세레브로시드, 디아라키도일포스파티딜콜린("DAPC"), 디데카노일-L-알파-포스파티딜콜린("DDPC"), 디엘라이도일포스파티딜콜린("DEPC"), 디라우로일포스파티딜콜린("DLPC"), 디리놀레오일포스파티딜콜린, 디미리스토일포스파티딜콜린("DMPC"), 디올레오일포스파티딜콜린("DOPC"), 디팔미토일포스파티딜콜린("DPPC"), 디스테아로일포스파티딜콜린("DSPC"), 1-팔미토일-2-올레오일-포스파티딜콜린("POPC"), 디아라키도일포스파티딜글리세롤("DAPG"), 디데카노일-L-알파-포스파티딜글리세롤("DDPG"), 디엘라이도일포스파티딜글리세롤("DEPG"), 디라우로일포스파티딜글리세롤("DLPG"), 디리놀레오일포스파티딜글리세롤, 디미리스토일포스파티딜글리세롤("DMPG"), 디올레오일포스파티딜글리세롤("DOPG"), 디팔미토일포스파티딜글리세롤("DPPG"), 디스테아로일포스파티딜글리세롤("DSPG"), 1-팔미토일-2-올레오일-포스파티딜글리세롤("POPG"), 디아라키도일포스파티딜에탄올아민("DAPE"), 디데카노일-L-알파-포스파티딜에탄올아민("DDPE"), 디엘라이도일포스파티딜에탄올아민("DEPE"), 디라우로일포스파티딜에탄올아민("DLPE"), 디리놀레오일포스파티딜에탄올아민, 디미리스토일포스파티딜에탄올아민("DMPE"), 디올레오일포스파티딜에탄올아민("DOPE"), 디팔미토일포스파티딜에탄올아민("DPPE"), 디스테아로일포스파티딜에탄올아민("DSPE"), 1-팔미토일-2-올레오일-포스파티딜에탄올아민("POPE"), 디아라키도일포스파티딜이노시톨("DAPI"), 디데카노일-L-알파-포스파티딜이노시톨("DDPI"), 디엘라이도일포스파티딜이노시톨("DEPI"), 디라우로일포스파티딜이노시톨("DLPI"), 디리놀레오일포스파티딜이노시톨, 디미리스토일포스파티딜이노시톨("DMPI"), 디올레오일포스파티딜이노시톨("DOPI"), 디팔미토일포스파티딜이노시톨("DPPI"), 디스테아로일포스파티딜이노시톨("DSPI"), 1-팔미토일-2-올레오일-포스파티딜이노시톨("POPI"), 디아라키도일포스파티딜세린("DAPS"), 디데카노일-L-알파-포스파티딜세린("DDPS"), 디엘라이도일포스파티딜세린("DEPS"), 디라우로일포스파티딜세린("DLPS"), 디리놀레오일포스파티딜세린, 디미리스토일포스파티딜세린("DMPS"), 디올레오일포스파티딜세린("DOPS"), 디팔미토일포스파티딜세린("DPPS"), 디스테아로일포스파티딜세린("DSPS"), 1-팔미토일-2-올레오일-포스파티딜세린("POPS"), 디아라키도일 스핑고미엘린, 디데카노일 스핑고미엘린, 디엘라이도일 스핑고미엘린, 디라우로일 스핑고미엘린, 디리놀레오일 스핑고미엘린, 디미리스토일 스핑고미엘린, 스핑고미엘린, 디올레오일 스핑고미엘린, 디팔미토일 스핑고미엘린, 디스테아로일 스핑고미엘린, 및 1-팔미토일-2-올레오일-스핑고미엘린을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 실시 형태에서, 제약 제형은 산, 예컨대 아세트산, 붕산, 시트르산, 락트산, 인산 및 염산, 염기, 예컨대 수산화나트륨, 인산나트륨, 붕산나트륨, 시트르산나트륨, 아세트산나트륨, 락트산나트륨 및 트리스-히드록시메틸아미노메탄, 및 완충액, 예컨대 시트레이트/덱스트로스, 중탄산나트륨 및 염화암모늄을 포함하는 pH 조정제 또는 완충제를 추가로 포함한다. 이러한 산, 염기, 및 완충액은 조성물의 pH를 허용 가능한 범위로 유지하는 데 필요한 양으로 포함된다.
일부 경우에, 제약 제형은 조성물의 삼투압 농도를 허용 가능한 범위로 만드는 데 필요한 양의 하나 이상의 염을 포함한다. 이러한 염은 나트륨, 칼륨, 또는 암모늄 양이온 및 클로라이드, 시트레이트, 아스코르베이트, 보레이트, 포스페이트, 바이카르보네이트, 술페이트, 티오술페이트, 또는 바이술파이트 음이온을 갖는 것들을 포함하고, 적합한 염은 염화나트륨, 염화칼륨, 티오황산나트륨, 중아황산나트륨, 및 황산암모늄을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 제약 제형은 폴리펩티드의 용해도 및 생체 내 안정성을 증가시키기 위해 트레할로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 말토스, 글루코스와 같은 당, 또는 인산칼륨, 시트르산나트륨, 황산암모늄과 같은 염 및/또는 다른 제제, 예컨대 헤파린을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다.
일부 경우에, 제약 제형은 보다 안정한 환경을 제공할 수 있으므로 화합물을 안정화시키기 위해 사용되는 희석제를 추가로 포함한다. (pH 제어 또는 유지를 또한 제공할 수 있는) 완충 용액에 용해된 염은 당업계에서 희석제(인산염 완충 식염수 용액을 포함하나, 이에 한정되지 않음)로서 사용된다. 특정한 경우에, 희석제는 압축을 용이하게 하거나 캡슐 충전을 위한 균질한 블렌드를 위한 충분한 벌크를 생성하도록 조성물의 벌크를 증가시킨다. 이러한 화합물은 예를 들어 락토스, 전분, 만니톨, 소르비톨, 덱스트로스, Avicel®과 같은 미정질 셀룰로오스, 인산일수소칼슘, 인산이칼슘 이수화물, 인산삼칼슘, 인산칼슘, 무수 락토스, 분무 건조된 락토스, 전호화 전분, 압축성 당, 예컨대 Di-Pac®(Amstar), 만니톨, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 아세테이트 스테아레이트, 수크로스 기반 희석제, 제과 설탕, 일염기성 황산칼슘 일수화물, 황산칼슘 이수화물, 락트산칼슘 삼수화물, 덱스트레이트, 가수분해된 시리얼 고체, 아밀로스, 분말 셀룰로오스 , 탄산칼슘, 글리신, 카올린, 만니톨, 염화나트륨, 이노시톨, 벤토나이트 등을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 수 있고 히스티딘, 소르비톨 및 폴리소르베이트 80, 또는 안정한 제형을 제공하는 임의의 조합을 포함하는 제약 제형에서 사용될 수 있다. 일 실시 형태에서, 본원에 개시된 IL-15 콘쥬게이트는 다음과 같이 바이알과 같은 적합한 용기에 완제 의약품으로 제공될 수 있다: IL-15 콘쥬게이트(약 2 mg 내지 약 10 mg); L-히스티딘(약 0.5 mg 내지 약 2 mg); L-히스티딘 히드로클로라이드(약 1 mg 내지 약 2 mg); 소르비톨(약 20 mg 내지 약 80 mg); 및 폴리소르베이트 80(약 0.1 mg 내지 약 0.2 mg); 개시된 방법에 사용하기에 적합한 액체 제형을 제공하기에 충분한 양의 주사용 물.
일부 경우에, 제약 제형은 물질의 분해 또는 붕해를 촉진하기 위한 붕해 제제 또는 붕해제를 포함한다. 용어 "붕해하다"는 위액과 접촉하는 경우의 투여 형태의 용해 및 분산 둘 다를 포함한다. 붕해제의 예에는 전분, 예를 들어 천연 전분, 예컨대 옥수수 전분 또는 감자 전분, 전호화 전분, 예컨대 National 1551 또는 Amijel®, 또는 소듐 스타치 글리콜레이트, 예컨대 Promogel® 또는 Explotab®, 셀룰로오스, 예컨대 목재 제품, 메틸크리스탈린 셀룰로오스, 예를 들어 Avicel®, Avicel® PH101, Avicel® PH102, Avicel® PH105, Elcema® P100, Emcocel®, Vivacel®, Ming Tia®, 및 Solka-Floc®, 메틸셀룰로오스, 크로스카르멜로스, 또는 가교결합된 셀룰로오스, 예컨대 가교결합된 소듐 카르복시메틸셀룰로오스(Ac-Di-Sol®), 가교결합된 카르복시메틸셀룰로오스, 또는 가교결합된 크로스카르멜로스, 가교결합된 전분, 예컨대 소듐 스타치 글리콜레이트, 가교결합된 중합체, 예컨대 크로스포비돈, 가교결합된 폴리비닐피롤리돈, 알기네이트, 예컨대 알긴산 또는 알킨산의 염, 예컨대 알긴산나트륨, 점토, 에컨대 Veegum® HV(마그네슘 알루미늄 실리케이트), 검, 예컨대 한천, 구아, 로커스트 빈, 카라야, 펙틴 또는 트래거캔스, 소듐 스타치 글리콜레이트, 벤토나이트, 천연 스폰지, 계면활성제, 수지, 예컨대 양이온 교환 수지, 시트러스 펄프, 소듐 라우릴 술페이트, 소듐 라우릴 술페이트가 전분과 조합된 것 등을 포함한다.
일부 경우에, 제약 제형은 충전제, 예컨대 락토스, 탄산칼슘, 인산칼슘, 이염기성 인산칼슘, 황산칼슘, 미정질 셀룰로오스, 셀룰로오스 분말, 덱스트로스, 덱스트레이트, 덱스트란, 전분, 전호화 전분, 수크로스, 자일리톨, 락티톨, 만니톨, 소르비톨, 염화나트륨, 폴리에틸렌 글리콜 등을 포함한다.
활택제 및 글리단트가 또한 재료의 부착 또는 마찰을 방지, 감소 또는 억제하기 위해 본원에 기술된 제약 제형에 선택적으로 포함된다. 예시적인 활택제는 예를 들어 스테아르산, 수산화칼슘, 활석, 나트륨 스테아릴 푸마레이트, 탄화수소, 에컨대 광유, 또는 수소화 식물유, 예컨대 수소화 대두유(Sterotex®), 고급 지방산 및 이들의 알칼리 금속 및 알칼리 토금속 염, 예컨대 알루미늄, 칼슘, 마그네슘, 아연, 스테아르산, 스테아르산나트륨, 글리세롤, 활석, 왁스, Stearowet®, 붕산, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨, 염화나트륨, 류신, 폴리에틸렌 글리콜(예를 들어 PEG-4000) 또는 메톡시폴리에틸렌글리콜, 에컨대 Carbowax™, 나트륨 올레에이트, 벤조산나트륨, 글리세릴 베헤네이트, 폴리에틸렌 글리콜, 마그네슘 또는 나트륨 라우릴 술페이트, 콜로이드성 실리카, 예컨대 Syloid™, Cab-O-Sil®, 전분, 예컨대 옥수수 전분, 실리콘 오일, 계면활성제 등을 포함한다.
가소제는 미세캡슐화 재료 또는 필름 코팅을 연화하여 이들이 덜 취성이 되게 하는 화합물을 포함한다. 적합한 가소제는 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜, 예컨대 PEG 300, PEG 400, PEG 600, PEG 1450, PEG 3350 및 PEG 800, 스테아르산, 프로필렌 글리콜, 올레산, 트리에틸 셀룰로오스 및 트리아세틴을 포함한다. 가소제는 분산제 또는 습윤제로도 기능할 수 있다.
가용화제는 트리아세틴, 트리에틸시트레이트, 에틸 올레에이트, 에틸 카프릴레이트, 나트륨 라우릴 술페이트, 나트륨 도큐세이트, 비타민 E TPGS, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈, N-히드록시에틸피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 시클로덱스트린, 에탄올, n-부탄올, 이소프로필 알코올, 콜레스테롤, 담즙 염, 폴리에틸렌 글리콜 200~600, 글리코푸롤, 트랜스쿠톨, 프로필렌 글리콜 및 디메틸 이소소르비드 등과 같은 화합물을 포함한다.
안정화제는 임의의 항산화제, 완충액, 산, 보존제 등과 같은 화합물을 포함한다. 예시적인 안정화제는 L-아르기닌 히드로클로라이드, 트로메타민, 알부민(인간), 시트르산, 벤질 알코올, 페놀, 이인산이나트륨 이수화물, 프로필렌 글리콜, 메타크레솔 또는 m-크레솔, 아세트산아연, 폴리소르베이트-20 또는 Tween® 20, 또는 트로메타몰을 포함한다.
현탁제는 폴리비닐피롤리돈, 예를 들어 폴리비닐피롤리돈 K12, 폴리비닐피롤리돈 K17, 폴리비닐피롤리돈 K25 또는 폴리비닐피롤리돈 K30, 비닐 피롤리돈/비닐 아세테이트 공중합체(S630), 폴리에틸렌 글리콜(예를 들어 폴리에틸렌 글리콜은 약 300 내지 약 6000, 또는 약 3350 내지 약 4000, 또는 약 7000 내지 약 5400의 분자량을 가질 수 있음), 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로스, 히드록시메틸셀룰로오스 아세테이트 스테아레이트, 폴리소르베이트-80, 히드록시에틸셀룰로오스, 알긴산나트륨, 검, 예를 들어 검 트래거캔스 및 검 아카시아, 구아 검, 잔탄(잔탄 검 포함), 당, 셀룰로오스계 물질, 예를 들어 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 폴리소르베이트-80, 알긴산나트륨, 폴리에톡실화 소르비탄 모노라우레이트, 폴리에톡실화 소르비탄 모노라우레이트, 포비돈 등과 같은 화합물을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 제약 제형은 보다 안정한 환경을 제공할 수 있으므로 화합물을 안정화시키기 위해 사용되는 희석제를 추가로 포함한다. (pH 제어 또는 유지를 또한 제공할 수 있는) 완충 용액에 용해된 염은 당업계에서 희석제(인산염 완충 식염수 용액을 포함하나, 이에 한정되지 않음)로서 사용된다.
안정화제는 임의의 항산화제, 완충액, 산, 보존제 등과 같은 화합물을 포함한다. 예시적인 안정화제는 L-아르기닌 히드로클로라이드, 트로메타민, 알부민(인간), 시트르산, 벤질 알코올, 페놀, 이인산이나트륨 이수화물, 프로필렌 글리콜, 메타크레솔 또는 m-크레솔, 아세트산아연, 폴리소르베이트-20 또는 Tween® 20, 또는 트로메타몰을 포함한다.
계면활성제는 나트륨 라우릴 술페이트, 도쿠세이트 나트륨, Tween 60 또는 80, 트리아세틴, 비타민 E TPGS, 소르비탄 모노올레에이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트, 폴리소르베이트, 폴록사머, 담즙염, 글리세릴 모노스테아레이트, 에틸렌 옥사이드와 프로필렌 옥사이드의 공중합체, 예를 들어 Pluronic®(BASF) 등과 같은 화합물을 포함한다. 추가의 계면활성제는 폴리옥시에틸렌 지방산 글리세리드 및 식물유, 예를 들어 폴리옥시에틸렌(60) 경화 캐스터 오일, 및 폴리옥시에틸렌 알킬에테르 및 알킬페닐 에테르, 예를 들어 옥톡시놀 10, 옥톡시놀 40을 포함한다. 때때로, 계면활성제는 물리적 안정성을 향상시키기 위해 또는 다른 목적을 위해 포함된다.
치료 요법
일부 실시 형태에서, 본원에 기술된 제약 조성물은 치료 용도로 투여된다. 일부 실시 형태에서, 제약 조성물은 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 이상 투여된다. 제약 조성물은 매일, 일마다, 격일로, 1주 5일, 1주 1회, 격주로, 달마다 2주, 달마다 3주, 달마다 1회, 달마다 2회, 달마다 3회 이상 투여된다. 제약 조성물은 적어도 1달, 2달, 3달, 4달, 5달, 6달, 7달, 8달, 9달, 10달, 11달, 12달, 18달, 2년, 3년 이상 동안 투여된다.
환자의 상태가 호전되는 경우에, 의사의 결정에 의해 조성물의 투여는 연속적으로 주어지고, 대안적으로, 투여되는 조성물의 용량은 소정의 기간(즉, "약물 휴약") 동안 일시적으로 감소하거나 일시적으로 중지된다. 일부 실시 형태에서, 약물 휴약의 길이는 2일 내지 1년, 예를 들어 오직 예로서 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 10일, 12일, 15일, 20일, 28일, 35일, 50일, 70일, 100일, 120일, 150일, 180일, 200일, 250일, 280일, 300일, 320일, 350일 또는 365일 사이로 변한다. 휴약기 동안 용량 감소는 단지 예로서 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100%를 포함하여, 10%~100%이다.
환자의 상태가 호전되면, 필요에 따라 유지 용량이 투여된다. 이후, 증상에 따라 투여량 또는 투여 빈도, 또는 둘 모두가, 호전된 질환, 장애, 또는 병태가 유지되는 수준까지 감소될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 이러한 양에 상응하는 주어진 제제의 양은 특정 화합물, 질환의 중증도, 치료가 필요한 대상체 또는 숙주의 아이덴티티(예를 들어, 체중)과 같은 인자에 따라 다르지만, 그럼에도 불구하고, 예를 들어 투여되는 특정 제제, 투여 경로, 및 치료받는 대상체 또는 숙주를 비롯한 사례 주변의 특정 상황에 따라 당업계에 알려진 방식으로 통상적으로 결정된다. 일부 실시 형태에서, 원하는 용량은 단일 용량으로 또는 동시에(또는 짧은 기간에 걸쳐) 투여되는 분할 용량으로 또는 적절한 간격으로, 예를 들어 매일 2회, 3회, 4회 이상의 하위용량으로 편리하게 제시된다.
개별 치료 요법과 관련된 변수의 수가 많고 이러한 권장 값과의 상당한 편차가 드물지는 않기 때문에, 상기 범위는 제안적일 뿐이다. 이러한 투약량은 비제한적인 예로서 사용된 화합물의 활성, 치료되는 질환 또는 병태, 투여 방식, 개별 대상체의 요건, 치료되는 질환 또는 병태의 중증도, 및 의사의 판단의 다수의 변수에 따라 변경된다.
일부 실시 형태에서, 이러한 치료 요법의 독성 및 치료 효능은 세포 배양 또는 실험 동물의 표준 제약 절차에 의해 결정된다(LD50(집단의 50%에 치사인 용량) 및 ED50(집단의 50%에 치료 효과적인 용량)의 결정을 포함하나, 이에 한정되지 않음). 독성과 치료 효과 간의 용량비는 치료 지수이며, LD50과 ED50 간의 비로 표시된다. 높은 치료 지수를 나타내는 화합물이 바람직하다. 세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 얻은 데이터는 인간에게 사용하기 위한 투여량의 범위를 정하는 데 사용된다. 이러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 최소 독성으로 ED50을 포함하는 순환 농도의 범위 내에 있다. 투여량은 사용된 투여 형태 및 사용된 투여 경로에 따라 이 범위 내에서 다양하다.
키트 /제조 물품
특정 실시 형태에서, 본원에 기술된 하나 이상의 방법 및 조성물과 함께 사용하기 위한 키트 및 제조 물품이 본원에 개시된다. 이러한 키트는 바이알, 튜브 등과 같은 하나 이상의 용기를 수용하도록 구획화된 캐리어, 패키지, 또는 용기를 포함하고, 각각의 용기는 본원에 기술된 방법에 사용될 개별 요소들 중 하나를 포함한다. 적합한 용기는 예를 들어 병, 바이알, 주사기, 및 시험관을 포함한다. 일 실시 형태에서, 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 재료로 형성된다.
본원에 제공된 제조 물품은 패키징 재료를 포함한다. 약학적 패키징 재료의 예는 블리스터 팩, 병, 튜브, 백, 용기, 병, 및 선택된 제형 및 의도된 투여 및 치료 방식에 적합한 임의의 패키징 재료를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
예를 들어, 용기(들)는 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트의 전달을 용이하게 하도록 하나 이상의 본원에 개시된 IL-15 폴리펩티드 또는 IL-15 콘쥬게이트, 및 선택적으로 하나 이상의 본원에 기술된 약학적 부형제를 포함한다. 이러한 키트는 또한 필요에 따라, 본원에 기술된 방법에서의 사용과 관련된 식별 표시 또는 라벨 또는 설명서를 포함한다.
전형적으로 키트는 내용물을 열거한 라벨 및/또는 사용 설명서, 및 사용 설명서가 있는 패키지 인서트를 포함한다. 전형적으로 설명서 세트도 포함될 것이다.
일 실시 형태에서, 라벨은 용기 상에 있거나 용기와 결부되어 있다. 일 실시 형태에서, 라벨을 구성하는 글자, 숫자, 또는 다른 문자가 용기 자체에 부착, 성형, 또는 에칭된 경우 라벨은 용기 상에 있고, 라벨이 예를 들어 패키지 인서트로서, 용기를 또한 수용하는 리셉터클 또는 캐리어 내에 존재하는 경우 라벨은 용기와 결부되어 있다. 일 실시 형태에서, 라벨은 내용물이 특정 치료 용도로 사용될 것임을 나타내기 위해 사용된다. 라벨은 또한, 예컨대 본원에 기술된 방법에서 내용물의 사용 지침을 나타낸다.
특정 실시 형태에서, 제약 조성물은 본원에 제공된 화합물을 함유하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 함유하는 팩 또는 디스펜서 장치 형태로 제공된다. 팩은 예를 들어 금속 또는 플라스틱 호일, 예컨대 블리스터 팩을 함유한다. 일 실시 형태에서, 팩 또는 디스펜서 장치에는 투여 설명서가 함께 제공된다. 일 실시 형태에서, 팩 또는 디스펜서에는 또한 의약품의 제조, 사용, 또는 판매를 규제하는 정부 기관이 정한 형태로 용기와 관련된 안내문이 함께 제공되며, 이 안내문은 인체 또는 수의학적 투여용 약물 형태에 대한 기관의 승인을 반영한다. 이러한 안내문은 예를 들어 미국 식품의약청이 허가한 라벨링 또는 허가된 제품 인서트이다. 일 실시 형태에서, 적합한 약학적 담체에 제형화된 본원에 제공된 화합물을 함유하는 조성물이 또한 제조되고, 적절한 용기에 배치되고, 표시된 병태의 치료에 대해 표지된다.
특정 용어
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 청구된 요지가 속하는 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 상세한 설명은 단지 예시적이고 설명적이며, 청구된 임의의 대상을 제한하는 것이 아님이 이해되어야 한다. 본 출원에서, 단수형의 사용은 구체적으로 달리 진술되지 않는 한 복수형을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 단수형은 달리 문맥에서 명확하게 표시되지 않는 한 복수의 지시어를 포함한다는 것이 주지되어야 한다. 본 출원에서, "또는"의 사용은 달리 진술되지 않는 한 "및/또는"을 의미한다. 더욱이, 용어 "포함하는" 및 다른 형태, 예컨대 "포함하다", "포함하는" 및 "포함된"의 사용은 한정하는 것이 아니다.
본 발명의 다양한 특징이 단일 실시 형태의 맥락에서 기재될 수 있지만, 그 특징은 또한 별개로 또는 임의의 적합한 조합으로 제공될 수 있다. 반대로, 명확성을 위해 별개의 실시 형태의 맥락에서 본 발명이 본원에 기술될 수 있지만, 본 발명은 단일 실시 형태로 구현될 수도 있다.
명세서에서 "일부 실시 형태", "일 실시 형태", "하나의 실시 형태", 또는 "다른 실시 형태"에 대한 언급은 실시 형태와 관련하여 설명된 특정 특징, 구조, 또는 특성이 본 발명의, 반드시 모든 실시 형태에 포함되지는 않지만, 적어도 일부 실시 형태에 포함된다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 범위 및 양은 "대략적인" 특정 값 또는 범위로 표현될 수 있다. 약은 정확한 양도 포함한다. 따라서, "약 5 μL"는 "약 5 μL" 뿐만 아니라 "5 μL"를 의미한다. 일반적으로, 용어 "약"은 실험 오차 내에 있을 것으로 예상되는 양을 포함한다.
본원에 사용된 섹션의 제목들은 단지 구조적 목적을 위한 것으로, 개시된 주제를 한정하는 것으로 해석되어서는 안된다. 참고로 포함된 임의의 자료가 본 발명의 명시적 내용과 모순될 수 있는 경우 명시적 내용이 좌우한다. "또는"은 문맥이 명백히 달리 명시하지 않는 한, 포괄적인 의미로, 즉 "및/또는"과 동등하게 사용된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "개체(들)", "대상체(들)", 및 "환자(들)"는 임의의 포유류를 의미한다. 일부 실시 형태에서, 포유류는 인간이다. 일부 실시 형태에서, 포유류는 비-인간이다. 어떠한 용어도 의료 종사자(예를 들어, 의사, 공인 간호사, 실무 간호사, 의사 보조원, 도우미 또는 호스피스 종사자)의 감독을 특징으로 하는 상황을 요하거나 그러한 상황으로 제한되지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 수용체 결합과 관련하여 용어 "유의한" 및 "유의하게"는 표적 수용체에 대한 IL-15 폴리펩티드의 결합에 영향을 미치기에 충분한 변화를 의미한다. 일부 경우에, 상기 용어는 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 그 이상의 변화를 의미한다. 일부 경우에, 상기 용어는 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 7배, 8배, 9배, 10배, 50배, 100배, 500배, 1000배, 또는 그 이상의 변화를 의미한다.
일부 경우에, 사이토카인 신호전달 복합체를 통한 하나 이상의 세포 집단의 활성화와 관련하여 용어 "유의하게"는 세포 집단을 활성화하기에 충분한 변화를 의미한다. 일부 경우에, 세포 집단을 활성화하기 위한 변화는 수용체 신호전달 효력으로서 측정된다. 이러한 경우에, EC50 값이 제공될 수 있다. 다른 경우에, ED50 값이 제공될 수 있다. 추가의 경우에, 사이토카인의 농도 또는 투여량이 제공될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "효력"은 표적 효과를 생성하는 데 필요한 사이토카인(예를 들어, IL-15 폴리펩티드)의 양을 지칭한다. 일부 경우에, 용어 "효력"은 표적 사이토카인 수용체(예를 들어, IL-15 수용체)를 활성화하는 데 필요한 사이토카인(예를 들어, IL-15 폴리펩타이드)의 양을 지칭한다. 다른 경우에, 용어 "효력"은 표적 세포 집단을 활성화하는 데 필요한 사이토카인(예를 들어, IL-15 폴리펩타이드)의 양을 지칭한다. 일부 경우에, 효력은 ED50(유효 용량 50), 또는 최대 효과의 50%를 생성하는 데 필요한 용량으로서 측정된다. 다른 경우에, 효력은 EC50(유효 농도 50), 또는 집단의 50%에서 표적 효과를 생성하는 데 필요한 용량으로서 측정된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "종양 침윤 면역 세포(들)"는 (예를 들어, 종양 미세환경에서) 종양 세포를 포함하는 영역으로 침윤된 면역 세포를 지칭한다. 일부 경우에, 종양 침윤 면역 세포는 종양 세포 파괴, 종양 세포 증식의 감소, 종양 부담의 감소 또는 이들의 조합과 연관된다. 일부 경우에, 종양 침윤 면역 세포는 종양 침윤 림프구(TIL)를 포함한다. 일부 경우에, 종양 침윤 면역 세포는 T 세포, B 세포, 자연 살해 세포, 대식세포, 호중구, 수지상 세포, 비만 세포, 호산구 또는 호염기구를 포함한다. 일부 경우에, 종양 침윤 면역 세포는 CD4+ 또는 CD8+ T 세포를 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "IL-15 콘쥬게이트"는 콘쥬게이팅 모이어티, 예를 들어 PEG 기를 포함하는 콘쥬게이팅 모이어티에 부착된(예컨대 링커를 통해) IL-15 폴리펩티드이고; IL-15 콘쥬게이트는 제약상 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물의 형태일 수 있지만 반드시 그런 것은 아니다. 본원의 다른 곳에서 상세히 기술된 바와 같이, IL-15 폴리펩티드는 콘쥬게이팅 모이어티에 대한 부착 부위로서 작용할 수 있는 비천연 아미노산을 포함할 수 있다.
넘버링된 실시 형태. 본 발명은 하기 비제한적인 넘버링된 실시 형태를 포함한다:
실시 형태 1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 I]
Figure pct00177
(여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00178
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00179
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00180
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00181
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00182
를 가짐).
실시 형태 1.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 I]
Figure pct00183
(여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00184
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00185
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00186
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00187
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00188
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 2. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 I]
Figure pct00189
(여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00190
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00191
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00192
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00193
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00194
를 가짐).
실시 형태 2.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 I]
Figure pct00195
(여기서,
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00196
이거나;
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00197
이거나;
Z는 CH2이고 Y는
Figure pct00198
이거나; 또는
Y는 CH2이고 Z는
Figure pct00199
이며;
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00200
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 3. Z는 CH2이며, Y는
Figure pct00201
인, 실시 형태 1 내지 2.1 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 4. Y는 CH2이며, Z는
Figure pct00202
인, 실시 형태 1 내지 2.1 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 5. Z는 CH2이며, Y는
Figure pct00203
인, 실시 형태 1 내지 2.1 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 6. Z는 CH2이며, Y는
Figure pct00204
인, 실시 형태 1 내지 2.1 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 7. Y는 CH2이며, Z는
Figure pct00205
인, 실시 형태 1 내지 2.1 중 어느 하나의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 8. PEG 기는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는, 실시 형태 1 내지 7 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 9. PEG 기는 5 kDa의 평균 분자량을 갖는, 실시 형태 8의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 10. PEG 기는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는, 실시 형태 8의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 11. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는, 실시 형태 1 또는 1.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 12. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택되는, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 13. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S18인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 14. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L25인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 15. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E46인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 16. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E53인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 17. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N77인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 18. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S83인, 실시 형태 11의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 19. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택되는, 실시 형태 2 또는 2.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 20. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택되는, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 21. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S19인, 실시 형태 20의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 22. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L26인, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 23. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E47인, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 24. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E54인, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 25. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N78인, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 26. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S84인, 실시 형태 19의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 27. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00206
[화학식 III]
Figure pct00207
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00208
를 가짐).
실시 형태 27.1. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00209
[화학식 III]
Figure pct00210
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00211
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 28. [AzK_PEG]는 화학식 II와 화학식 III의 조합인, 실시 형태 27 또는 27.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 29. [AzK_PEG]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 27 또는 27.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00212
실시 형태 30. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 31. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 30의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 32. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 31의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 33. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 32의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 34. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 32의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 35. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 17의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 36. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 35의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 37. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 36의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 38. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 37의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 39. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 37의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 40. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 18의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 41. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 40의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 42. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 41의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 43. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 42의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 44. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 42의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 45. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 19의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 46. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 45의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 47. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 46의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 48. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 47의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 49. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 47의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 50. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 20의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 51. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 50의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 52. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 51의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 53. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 52의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 54. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 52의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 55. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 21의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 29의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 56. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 55의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 57. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 56의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 58. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 57의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 59. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 57의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 60. [AzK_PEG]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 27 또는 27.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물
[화학식 III]
Figure pct00213
.
실시 형태 61. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 16의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 62. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 61의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 63. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 62의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 64. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 63의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 65. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 63의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 66. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 17의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 67. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 66의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 68. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 67의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 69. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 68의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 70. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 68의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 71. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 18의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 72. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 71의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 73. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 72의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 74. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 73의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 75. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 73의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 76. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 19의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 77. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 76의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 78. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 77의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 79. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 78의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 80. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 78의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 81. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 20의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 82. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 81의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 83. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 82의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 84. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 83의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 85. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 83의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 86. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 21의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 60의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 87. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 86의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 88. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 87의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 89. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 88의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 90. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 88의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 91. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00214
[화학식 III]
Figure pct00215
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00216
를 가짐).
실시 형태 91.1. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00217
[화학식 III]
Figure pct00218
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00219
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 92. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 91 또는 91.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 93. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 91 또는 91.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 94. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 91 또는 91.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 95. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 1 내지 94 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 96. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 1 내지 94 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 97. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 1 내지 94 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 98. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 1 내지 94 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 99. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 98에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 100. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 98에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 101. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 98에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 102. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00220
[화학식 III]
Figure pct00221
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00222
를 가짐).
실시 형태 102.1. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00223
[화학식 III]
Figure pct00224
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00225
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 103. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 104. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 105. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 106. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 107. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 108. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 109. [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00226
.
실시 형태 110. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 111. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 112. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 113. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 114. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 115. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 109의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 116. [AzK_PEG30]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 102 또는 102.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 III]
Figure pct00227
.
실시 형태 117. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 22의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 118. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 23의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 119. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 24의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 120. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 25의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 121. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 26의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 122. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 27의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 116의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 123. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00228
[화학식 III]
Figure pct00229
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00230
를 가짐).
실시 형태 123.1. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00231
[화학식 III]
Figure pct00232
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00233
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 124. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 123 또는 123.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 125. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 123 또는 123.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 126. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 123 또는 123.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 127. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 102 내지 126 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 128. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 102 내지 126 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 129. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 102 내지 126 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 130. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 102 내지 126 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 131. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 130에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 132. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 131에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 133. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 131에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 134. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00234
[화학식 III]
Figure pct00235
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00236
를 가짐).
실시 형태 134.1. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00237
[화학식 III]
Figure pct00238
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00239
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 135. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 136. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 137. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 138. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 139. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 140. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 141. [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 134 또는 134.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00240
.
실시 형태 142. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 143. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 144. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 145. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 146. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 147. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 141의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 148. [AzK_PEG40]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 134의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 III]
Figure pct00241
.
실시 형태 149. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 28의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 150. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 29의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 151. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 30의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 152. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 31의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 153. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 32의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 154. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 33의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 148의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 155. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00242
[화학식 III]
Figure pct00243
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00244
를 가짐).
실시 형태 155.1. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00245
[화학식 III]
Figure pct00246
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00247
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 156. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 155 또는 155.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 157. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 155 또는 155.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 158. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 155 또는 155.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 159. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 134 내지 158 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 160. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 134 내지 158 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 161. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 134 내지 158 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 162. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 134 내지 158 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 163. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 162에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 164. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 163에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 165. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 163에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 166. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00248
[화학식 V]
Figure pct00249
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00250
를 가짐).
실시 형태 166.1. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00251
[화학식 V]
Figure pct00252
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00253
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 167. [AzK_L1_PEG]는 화학식 IV와 V의 조합인, 실시 형태 166 또는 166.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 168. [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 166 또는 166.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00254
.
실시 형태 169. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 34의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 170. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 169의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 171. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 170의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 172. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 171의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 173. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 171의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 174. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 35의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 175. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 174의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 176. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 175의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 177. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 176의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 178. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 176의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 179. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 36의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 180. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 179의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 181. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 180의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 182. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 181의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 183. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 181의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 184. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 37의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 185. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 184의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 186. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 185의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 187. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 186의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 188. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 186의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 189. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 38의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 190. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 189의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 191. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 190의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 192. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 191의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 193. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 191의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 194. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 39의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 168의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 195. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 194의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 196. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 195의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 197. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 196의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 198. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 196의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 199. [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 166의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00255
.
실시 형태 200. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 34의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 201. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 200의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 202. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 201의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 203. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 202의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 204. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 202의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 205. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 35의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 206. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 205의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 207. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 206의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 208. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 207의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 209. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 207의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 210. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 36의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 211. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 210의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 212. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 211의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 213. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 212의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 214. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 212의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 215. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 37의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 216. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 215의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 217. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 216의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 218. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 217의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 219. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 217의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 220. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 38의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 221. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 220의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 222. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 221의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 223. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 222의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 224. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 222의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 225. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 39의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 199의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 226. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 225의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 227. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 226의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 228. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 227의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 229. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 227의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 230. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00256
[화학식 V]
Figure pct00257
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00258
를 가짐).
실시 형태 230.1. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00259
[화학식 V]
Figure pct00260
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00261
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 231. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 230 또는 230.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 232. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 230 또는 230.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 233. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 230 또는 230.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 234. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 166 내지 233 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 235. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 166 내지 233 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 236. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 166 내지 233 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 237. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 166 내지 233 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 238. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 237에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 239. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 238에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 240. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 238에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 241. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00262
[화학식 V]
Figure pct00263
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00264
를 가짐).
실시 형태 241.1. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00265
[화학식 V]
Figure pct00266
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00267
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 242. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 243. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 244. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 245. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 246. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 247. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 248. [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00268
.
실시 형태 249. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 250. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 251. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 252. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 253. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 254. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 248의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 255. [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 241 또는 241.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00269
.
실시 형태 256. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 40의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 257. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 41의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 258. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 42의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 259. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 43의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 260. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 261. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 45의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 255의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 262. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00270
[화학식 V]
Figure pct00271
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00272
를 가짐).
실시 형태 262.1. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00273
[화학식 V]
Figure pct00274
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00275
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 263. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_ PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 262 또는 262.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 264. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 262 또는 262.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 265. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 262 또는 262.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 266. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 241 내지 265 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 267. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 241 내지 265 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 268. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 241 내지 265 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 269. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 241 내지 265 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 270. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 269에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 271. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 270에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 272. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 270에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 273. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00276
[화학식 V]
Figure pct00277
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00278
를 가짐).
실시 형태 273.1. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00279
[화학식 V]
Figure pct00280
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00281
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 274. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 275. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 276. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 277. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 278. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 279. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 280. [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00282
.
실시 형태 281. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 282. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 283. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 284. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 285. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 286. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 280의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 287. [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 273 또는 273.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00283
.
실시 형태 288. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 46의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 289. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 47의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 290. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 48의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 291. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 49의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 292. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 50의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 293. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 51의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 287의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 294. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00284
[화학식 V]
Figure pct00285
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00286
를 가짐).
실시 형태 294.1. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00287
[화학식 V]
Figure pct00288
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00289
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 295. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 294 또는 294.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 296. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 294 또는 294.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 297. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 294 또는 294.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 298. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 273 내지 297 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 299. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 273 내지 297 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 300. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 273 내지 297 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 301. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 273 내지 297 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 302. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 301에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 303. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 302에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 304. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 302에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 305. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00290
[화학식 III]
Figure pct00291
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00292
를 가짐).
실시 형태 305.1. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00293
[화학식 III]
Figure pct00294
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00295
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 306. [AzK_PEG]는 화학식 II와 화학식 III의 조합인, 실시 형태 305 또는 305.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 307. [AzK_PEG]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 305 또는 305.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00296
.
실시 형태 308. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 64의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 309. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 308의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 310. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 309의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 311. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 310의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 312. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 310의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 313. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 65의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 314. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 313의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 315. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 314의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 316. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 315의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 317. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 315의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 318. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 66의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 319. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 318의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 320. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 319의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 321. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 320의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 322. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 320의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 323. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 67의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 324. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 323의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 325. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 324의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 326. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 325의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 327. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 325의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 328. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 68의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 329. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 328의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 330. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 329의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 331. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 330의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 332. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 330의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 333. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 69의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 307의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 334. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 333의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 335. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 334의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 336. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 335의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 337. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 336의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 338. [AzK_PEG]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 305 또는 305.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 III]
Figure pct00297
.
실시 형태 339. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 64의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 340. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 339의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 341. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 340의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 342. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 341의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 343. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 341의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 344. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 65의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 345. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 344의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 346. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 345의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 347. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 346의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 348. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 346의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 349. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 66의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 350. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 349의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 351. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 350의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 352. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 351의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 353. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 351의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 354. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 67의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 355. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 354의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 356. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 355의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 357. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 356의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 358. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 356의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 359. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 68의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 360. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 359의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 361. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 360의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 362. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 361의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 363. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 361의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 364. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 69의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 338의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 365. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 364의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 366. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 365의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 367. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 366의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 368. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 366의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 369. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00298
[화학식 III]
Figure pct00299
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00300
를 가짐).
실시 형태 369.1. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00301
[화학식 III]
Figure pct00302
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00303
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 370. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 369 또는 369.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 371. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 369 또는 369.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 372. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 369 또는 369.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 373. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 305 내지 372 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 374. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 305 내지 372 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 375. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 305 내지 372 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 376. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 305 내지 372 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 377. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 376에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 378. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 377에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 379. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 377에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 380. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00304
[화학식 III]
Figure pct00305
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00306
를 가짐).
실시 형태 380.1. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00307
[화학식 III]
Figure pct00308
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00309
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 381. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 382. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 383. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 384. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 385. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 386. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 387. [AzK_PEG30]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00310
.
실시 형태 388. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 389. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 390. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 391. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 392. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 393. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 387의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 394. [AzK_PEG30]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 380 또는 380.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 III]
Figure pct00311
.
실시 형태 395. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 70의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 396. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 397. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 72의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 398. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 399. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 400. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 75의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 394의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 401. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00312
[화학식 III]
Figure pct00313
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00314
를 가짐).
실시 형태 401.1. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00315
[화학식 III]
Figure pct00316
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00317
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 402. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 401 또는 401.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 403. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 401 또는 401.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 404. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 401 또는 401.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 405. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 380 내지 404 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 406. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 380 내지 404 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 407. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 380 내지 404 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 408. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 380 내지 404 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 409. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 408에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 410. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 409에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 411. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 409에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 412. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00318
[화학식 III]
Figure pct00319
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00320
를 가짐).
실시 형태 412.1. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00321
[화학식 III]
Figure pct00322
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00323
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 413. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 414. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 415. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 416. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 417. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 418. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 419. [AzK_PEG40]는 하기 화학식 II의 구조를 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00324
.
실시 형태 420. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 421. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 422. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 423. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 424. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 425. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 419의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 426. [AzK_PEG40]는 하기 화학식 III의 구조를 갖는, 실시 형태 412 또는 412.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 III]
Figure pct00325
.
실시 형태 427. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 76의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 428. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 77의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 429. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 78의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 430. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 79의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 431. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 80의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 432. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 81의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 426의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 433. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 II]
Figure pct00326
[화학식 III]
Figure pct00327
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00328
를 가짐).
실시 형태 433.1. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 II]
Figure pct00329
[화학식 III]
Figure pct00330
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00331
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 434. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 433 또는 433.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 435. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 433 또는 433.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 436. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 433 또는 433.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 437. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 412 내지 436 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 438. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 412 내지 436 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 439. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 412 내지 436 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 440. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 412 내지 436 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 441. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 440에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 442. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 441에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 443. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 441에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 444. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00332
[화학식 V]
Figure pct00333
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00334
를 가짐).
실시 형태 444.1. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00335
[화학식 V]
Figure pct00336
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00337
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 445. [AzK_L1_PEG]는 화학식 IV와 V의 조합인, 실시 형태 444 또는 444.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 446. [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 444 또는 444.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00338
,
실시 형태 447. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 82의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 448. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 447의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 449. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 448의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 450. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 449의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 451. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 449의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 452. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 83의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 453. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 452의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 454. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 453의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 455. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 454의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 456. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 454의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 457. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 84의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 458. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 457의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 459. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 458의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 460. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 459의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 461. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 459의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 462. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 85의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 463. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 462의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 464. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 463의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 465. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 464의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 466. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 464의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 467. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 86의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 468. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 467의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 469. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 468의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 470. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 469의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 471. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 469의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 472. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 87의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 446의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 473. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 472의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 474. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 473의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 475. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 474의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 476. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 474의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 477. [AzK_L1_PEG]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 444 또는 444.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00339
.
실시 형태 478. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 82의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 479. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 478의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 480. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 479의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 481. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 480의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 482. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 480의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 483. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 83의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 484. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 483의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 485. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 484의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 486. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 485의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 487. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 485의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 488. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 84의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 489. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 488의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 490. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 489의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 491. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 490의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 492. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 490의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 493. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 85의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 494. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 493의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 495. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 494의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 496. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 495의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 497. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 495의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 498. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 86의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 499. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 498의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 500. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 499의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 501. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 500의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 502. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 500의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 503. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 87의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 477의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 504. W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 503의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 505. W는 30 kDa 및 40 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 504의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 506. W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 505의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 507. W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기인, 실시 형태 505의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 508. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00340
[화학식 V]
Figure pct00341
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00342
를 가짐).
실시 형태 508.1. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00343
[화학식 V]
Figure pct00344
(여기서,
W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00345
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 509. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 508 또는 508.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 510. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 508 또는 508.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 511. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 508 또는 508.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 512. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 444 내지 511 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 513. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 444 내지 511 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 514. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 444 내지 511 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 515. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 444 내지 511 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 516. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 515에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 517. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 516에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 518. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 516에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 519. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00346
[화학식 V]
Figure pct00347
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00348
를 가짐).
실시 형태 519.1. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00349
[화학식 V]
Figure pct00350
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00351
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 520. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 521. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 522. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 523. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 524. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 525. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 526. [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00352
.
실시 형태 527. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 528. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 529. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 530. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 531. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 532. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 526의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 533. [AzK_L1_PEG30]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 519 또는 519.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00353
.
실시 형태 534. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 88의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 535. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 89의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 536. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 90의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 537. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 91의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 538. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 92의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 539. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 93의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 533의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 540. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00354
[화학식 V]
Figure pct00355
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00356
를 가짐).
실시 형태 540.1. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00357
[화학식 V]
Figure pct00358
(여기서,
W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00359
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 541. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 540 또는 540.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 542. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 540 또는 540.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 543. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG30] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 540 또는 540.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 544. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 519 내지 543 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 545. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 519 내지 543 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 546. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 519 내지 543 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 547. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 519 내지 543 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 548. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 547에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 549. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 548에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 550. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 548에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 551. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00360
[화학식 V]
Figure pct00361
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00362
를 가짐).
실시 형태 551.1. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00363
[화학식 V]
Figure pct00364
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00365
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 552. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 553. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 554. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 555. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 556. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 557. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 558. [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 IV의 구조를 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00366
.
실시 형태 559. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 560. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 561. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 562. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 563. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 564. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 558의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 565. [AzK_L1_PEG40]는 하기 화학식 V의 구조를 갖는, 실시 형태 551 또는 551.1의 IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 V]
Figure pct00367
.
실시 형태 566. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 94의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 567. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 95의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 568. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 96의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 569. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 97의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 570. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 98의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 571. IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 99의 아미노산 서열을 갖는, 실시 형태 565의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 572. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물:
[화학식 IV]
Figure pct00368
[화학식 V]
Figure pct00369
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00370
를 가짐).
실시 형태 572.1. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 IV]
Figure pct00371
[화학식 V]
Figure pct00372
(여기서,
W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00373
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 573. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, 실시 형태 572 또는 572.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 574. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, 실시 형태 572 또는 572.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 575. IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 IV의 구조의 양:화학식 V의 구조의 양(총 [AzK_L1_PEG40] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, 실시 형태 572 또는 572.1에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 576. W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 551 내지 575 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 577. W는 선형 PEG 기인, 실시 형태 551 내지 575 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 578. W는 분지형 PEG 기인, 실시 형태 551 내지 575 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 579. W는 메톡시 PEG 기인, 실시 형태 551 내지 575 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 580. 메톡시 PEG 기는 선형 또는 분지형인, 실시 형태 579에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 581. 메톡시 PEG 기는 선형인, 실시 형태 580에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 582. 메톡시 PEG 기는 분지형인, 실시 형태 580에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 583. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VI]
Figure pct00374
[화학식 VII]
Figure pct00375
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00376
를 가짐).
실시 형태 583.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VI]
Figure pct00377
[화학식 VII]
Figure pct00378
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
Figure pct00379
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 584. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는, 실시 형태 583 또는 583.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 585. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택되는, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 586. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S18인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 587. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L25인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 588. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E46인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 589. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E53인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 590. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 N77인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 591. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S83인, 실시 형태 584의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 592. n은 약 75 내지 약 1000인, 실시 형태 583 내지 591 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 593. n은 약 100 내지 약 1000인, 실시 형태 583 내지 591 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 594. n은 약 200 내지 약 5000인, 실시 형태 583 내지 591 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 595. n은 약 500 내지 약 1000인, 실시 형태 583 내지 591 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 596. n은 약 400 내지 약 800인, 실시 형태 583 내지 591 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 597. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VI]
Figure pct00380
[화학식 VII]
Figure pct00381
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00382
를 가짐).
실시 형태 597.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VI]
Figure pct00383
[화학식 VII]
Figure pct00384
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
Figure pct00385
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 598. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택되는, 실시 형태 597 또는 597.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 599. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택되는, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 600. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S19인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 601. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 L26인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 602. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E47인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 603. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 E54인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 604. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 N78인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 605. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VI 또는 VII의 구조의 위치, 또는 VI과 VII의 조합의 위치는 S84인, 실시 형태 598의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 606. n은 약 75 내지 약 1000인, 실시 형태 597 내지 605 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 607. n은 약 100 내지 약 1000인, 실시 형태 597 내지 605 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 608. n은 약 200 내지 약 5000인, 실시 형태 597 내지 605 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 609. n은 약 500 내지 약 1000인, 실시 형태 597 내지 605 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 610. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VIII]
Figure pct00386
[화학식 IX]
Figure pct00387
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00388
를 가짐).
실시 형태 610.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VIII]
Figure pct00389
[화학식 IX]
Figure pct00390
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
Figure pct00391
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 611. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는, 실시 형태 610 또는 610.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 612. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L25, E53, 및 N77로부터 선택되는, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 613. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S18인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 614. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L25인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 615. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E46인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 616. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E53인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 617. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 N77인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 618. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S83인, 실시 형태 611의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 619. n은 약 75 내지 약 1000인, 실시 형태 610 내지 618 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 620. n은 약 100 내지 약 1000인, 실시 형태 610 내지 618 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 621. n은 약 200 내지 약 5000인, 실시 형태 610 내지 618 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 622. n은 약 500 내지 약 1000인, 실시 형태 610 내지 618 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 623. n은 약 400 내지 약 800인, 실시 형태 610 내지 618 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 624. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VIII]
Figure pct00392
[화학식 IX]
Figure pct00393
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
X는 하기 구조:
Figure pct00394
를 가짐).
실시 형태 624.1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
[화학식 VIII]
Figure pct00395
[화학식 IX]
Figure pct00396
(여기서,
n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
Figure pct00397
를 가지며;
X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
실시 형태 625. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택되는, 실시 형태 624 또는 624.1의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 626. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L26, E54, 및 N78로부터 선택되는, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 627. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S19인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 628. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 L26인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 629. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E47인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 630. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 E54인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 631. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 N78인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 632. IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 VIII 또는 IX의 구조의 위치, 또는 VIII과 IX의 조합의 위치는 S84인, 실시 형태 625의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 633. n은 약 75 내지 약 1000인, 실시 형태 624 내지 632 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 634. n은 약 100 내지 약 1000인, 실시 형태 624 내지 632 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 635. n은 약 200 내지 약 5000인, 실시 형태 624 내지 632 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 636. n은 약 500 내지 약 1000인, 실시 형태 624 내지 632 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트.
실시 형태 637. 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 대상체에게 실시 형태 1 내지 실시 형태 636 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 638. 암은 고형 종양 암인, 실시 형태 637의 방법.
실시 형태 639. 고형 종양 암은 방광암, 골암, 뇌암, 유방암, 대장암, 식도암, 안암, 두경부암, 신장암, 폐암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 또는 전립선암인, 실시 형태 638의 방법.
실시 형태 640. 암은 혈액 악성종양인, 실시 형태 637의 방법.
실시 형태 641. 혈액 악성종양은 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소형 림프구성 림프종(SLL), 소포성 림프종(FL), 미만성 대형 B 세포 림프종(DLBCL), 외투 세포 림프종(MCL), 발덴스트롬 거대글로불린혈증, 다발성 골수종, 결절외 가장자리 영역 B 세포 림프종, 노드 가장자리 영역 B 세포 림프종, 버킷 림프종, 비버킷 고등급 B 세포 림프종, 원발성 종격 B 세포 림프종(PMBL), 면역아구성 대세포 림프종, 전구체 B-림프아구성 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 형질구성 림프종, 비장 가장자리 영역 림프종, 혈장 세포 골수종, 형질세포종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종 또는 림프종모양 육아종증인, 실시 형태 638의 방법.
실시 형태 642. 대상체에서의 암은 신장 세포 암종(RCC), 비소세포 폐암(NSCLC), 두경부 편평 세포 암(HNSCC), 고전적 호지킨 림프종(cHL), 원발성 종격동 거대 B 세포 림프종(PMBCL), 요로상피 암종, 현미부수체 불안정 암, 현미부수체 안정 암, 위암, 자궁경부암, 간세포 암종(HCC), 메르켈 세포 암종(MCC), 흑색종, 소세포폐암(SCLC), 식도암, 교모세포종, 중피종, 유방암, 삼중 음성 유방암, 전립선암, 방광암, 난소암, 중등도 내지 저 돌연변이 부담 종양, 피부 편평 세포 암종(CSCC), 편평 세포 피부암(SCSC), 저 발현 내지 비-발현 PD-L1 종양, 해부학적 원발 기원 부위를 넘어 간 및 CNS에 전신적으로 파종된 종양, 및 미만성 거대 B 세포 림프종으로부터 선택되는, 실시 형태 637의 방법.
실시 형태 643. 대상체에서의 암은 신장 세포 암종(RCC), 비소세포 폐암(NSCLC), 요로상피 암종 및 흑색종으로부터 선택되는, 실시 형태 642의 방법.
실시 형태 644. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 주 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 4주에 1회, 5주에 1회, 6주에 1회, 7주에 1회 또는 8주에 1회 투여되는, 실시 형태 637 내지 643 중 어느 한 실시 형태에 따른 대상체에서 암을 치료하는 방법.
실시 형태 645. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 주 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 또는 4주에 1회 투여되는, 실시 형태 637 내지 644 중 어느 한 실시 형태의 방법.
실시 형태 646. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 주 1회 투여되는, 실시 형태 645의 방법.
실시 형태 647. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 2주에 1회 투여되는, 실시 형태 645의 방법.
실시 형태 648. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 3주에 1회 투여되는, 실시 형태 645의 방법.
실시 형태 649. IL-15 콘쥬게이트는 이를 필요로 하는 대상체에게 4주에 1회 투여되는, 실시 형태 645의 방법.
실시 형태 650. 이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포 및 자연 살해(NK) 세포 집단을 확장시키는 방법으로서,
세포를 실시 형태 1 내지 636 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계; 및
IL-15를 IL-15Rβ 및 IL-15Rγ 서브유닛과 상호작용시켜 IL-15/IL-15Rβγ 복합체를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서, IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rα 서브유닛에 대한 친화도가 감소하고, IL-15/IL-15Rβγ 복합체는 Teff, Tmem 및 NK 세포의 확장을 자극하는, 방법.
실시 형태 651. 세포는 진핵 세포인, 실시 형태 650의 방법.
실시 형태 652. 세포는 포유류 세포인, 실시 형태 650의 방법.
실시 형태 653. 세포는 인간 세포인, 실시 형태 652의 방법.
실시 형태 654. 실시 형태 1 내지 636 중 어느 한 실시 형태에 따른 IL-15 콘쥬게이트의 유효량 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물.
실시 형태 655. IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 방법으로서,
화학식
Figure pct00398
의 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 폴리펩티드
(여기서, IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 1 또는 3의 아미노산 서열을 포함하며, 위치 X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며, 위치 X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며, 위치 X는 비천연 아미노산으로 치환된 아미노산의 위치를 나타냄)를,
화학식
Figure pct00399
또는
Figure pct00400
의 mPEG-DBCO
(여기서, n은 mPEG-DBCO가 약 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 또는 50 kDa의 분자량을 갖는 PEG를 포함하도록 하는 것임)와 반응시켜 이에 의해 IL-15 콘쥬게이트를 생성하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 656. 위치 X는 서열 번호 1 내의 아미노산 위치를 참조할 경우 S18, L25, E46, E53, N77, 또는 S83인, 실시 형태 655의 방법.
실시 형태 657. IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 실시 형태 655 또는 656의 방법.
실시 형태 658. 위치 X는 서열 번호 3 내의 아미노산 위치를 참조할 경우 S19, L26, E47, E54, N78, 또는 S84인, 실시 형태 655의 방법.
실시 형태 659. IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는, 실시 형태 655 또는 658의 방법.
실시 형태 660. PEG는 약 30 kDa의 분자량을 갖는, 실시 형태 655 내지 659 중 어느 한 실시 형태의 방법.
실시 형태 661. PEG는 약 40 kDa의 분자량을 갖는, 실시 형태 655 내지 659 중 어느 한 실시 형태의 방법.
실시 형태 662. IL-15 콘쥬게이트는 실시 형태 1 내지 636 중 어느 한 실시 형태의 IL-15 콘쥬게이트인, 실시 형태 655의 방법.
실시예
이들 실시예는 예시 목적으로만 제공되고, 본원에 제공된 청구범위를 제한하기 위한 것이 아니다.
실시예 1.
변형된 IL-15 폴리펩티드의 발현
IL-15 콘쥬게이트는 원하는 아미노산 서열을 갖는 단백질을 코딩하는 발현 플라스미드를 제조하는 본원에 개시된 방법을 사용하여 이. 콜라이에서 봉입체로서 발현시켰으며, 이는 (a) 비천연 아미노산 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)이 통합되는 원하는 위치에서의 코돈 및 tRNA에서의 매칭 안티코돈을 제공하기 위한 제1 비천연 뉴클레오티드 및 제2 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 비천연 염기쌍, (b) 엠. 마제이 Pyl로부터 유래되고 천연 서열 대신 매칭 안티코돈을 제공하기 위한 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 tRNA를 코딩하는 플라스미드, (c) 엠. 바르케리 유래 피롤라이실-tRNA 신테타아제(Mb PylRS)를 코딩하는 플라스미드, 및 (d) N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)을 함유하였다. 원하는 IL-15 변이체의 아미노산 서열을 코딩하는 이중 가닥 올리고뉴클레오티드는 예를 들어 서열 번호 1을 갖는 단백질을 코딩하는 서열의 위치 18, 25, 46, 53, 77, 또는 83에서, 또는 서열 번호 3을 갖는 단백질을 코딩하는 서열의 위치 19, 26, 47, 54, 78, 또는 84에서 코돈 AXC를 포함하며, 여기서 X는 본원에 기술된 바와 같은 비천연 뉴클레오티드이다. 일부 실시 형태에서, 세포는 천연 서열 대신 AXC-매칭 안티코돈 GYT를 포함하는 엠. 마제이로부터의 직교성 tRNA 유전자를 코딩하는, 단백질 발현 플라스미드 또는 다른 플라스미드일 수 있는 플라스미드를 추가로 포함하고, 여기서 Y는 본원에 개시된 바와 같은 비천연 뉴클레오티드로서, 이는 코돈의 비천연 뉴클레오티드와 동일하거나 상이할 수 있다. X 및 Y는 본원에 개시된 바와 같이, 비천연 뉴클레오티드인 데옥시리보 TPT3(dTPT3), 데옥시리보 NaM(dNaM), 데옥시리보 CNMO(dCNMO), 리보 TPT3(TPT3), 리보 NaM(NaM), 리보 CNMO(CNMO), 및 각각의 (dTPT3TP, dNaMTP, dCNMOTP, TPT3TP, NaMTP, 및 CNMOTP)의 트리포스페이트로부터 선택되었다(예를 들어, 문헌[Feldman et al., Acc . Chem . Res. 2018, 51, pp. 394 to 403]; 문헌[Zhang et al., Nature 2017, 551 (7682), pp. 644 to 647)]; 및 문헌[Zhang et al., PNAS 2017, 114(6), pp. 1317 to 1322]을 또한 참조).
변형된 IL-15 폴리펩티드를 37℃, 250 rpm 및 5시간 유도에서 성장시켰다. 배지 성분은 표 2에 예시되어 있다.
[표 2]
Figure pct00401
발현 배양물이 0.85 내지 0.9의 OD600에 도달할 때, 배양물에 (250 μM의 최종 농도의) NaM 트리포스페이트(NaMTP), (25 μM의 최종 농도의) TPT3 트리포스페이트(TPT3TP) 및 (15 mM의 최종 농도의) 아지도-라이신을 예비 로딩하였다. 리보뉴클레오티드 및 아미노산을 예비 로딩한지 약 15분 내지 20분 후에, IPTG를 첨가하고, 단백질을 약 5시간 동안 발현시켰다.
봉입체
세포 펠렛 수집 시, 펠렛은 봉입체를 위해 추가로 프로세싱되었다. 간단히 말하면, 1 L 세포 펠렛을 10 mL의 용해 완충액(20 mM 트리스-HCl, pH 8.0; 150 mM NaCl; 1 mM DTT; 및 프로테아제 저해제(1 펠렛/50 mL))에 재현탁시켰다. 재현탁 후, 1 L 펠렛의 부피를 용해 완충액으로 45 mL까지 증가시키고, 미세유동화기(microfluidizer)를 통해 러닝시켰다(2x). 그 후 샘플을 50 mL 원심분리 튜브로 옮기고, 4℃에서 16k rpm에서 20분 동안 원심분리하였다. 다음에, 펠렛을 5 mL의 용해 완충액에 펠렛 재현탁시키고, 총 부피를 용해 완충액으로 30 mL까지 증가시켰다. 약 10% Triton X-100을 0.5%의 최종 농도까지 첨가하였다. 그 후, 용액을 4℃에서 16k rpm에서 20분 동안 원심분리하고, 그 후 펠렛을 수집하고, 30 mL의 용해 완충액으로 3x 세척하였다. 각 세척마다 니들을 갖춘 5 mL의 주사기를 사용하여 완전히 재현탁시켰다. 최종 스핀 후, 상청액을 버리고, 펠렛을 급속 동결시켜 -80℃에서 저장하였다.
가용화 및 재폴딩
약 5 mL의 가용화 완충액을 봉입체 펠렛에 첨가하였다. 재현탁 후, 부피를 가용화 완충액 중에 30 mL까지 증가시켰다. 다음에, 샘플을 30분 내지 60분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 그 후, 샘플을 2 x 50 mL 원심분리 튜브(15 mL/튜브)으로 옮기고, 15 mL의 희석 완충액을 각각의 튜브에 첨가하였다. 그 후, 샘플을 후속하여 4℃에서 하룻밤 완충액 A1, 이어서 A2 투석 완충액, A3 투석 완충액, A4 투석 완충액 및 A5 투석 완충액 중에 투석하였다. 투석 후, 샘플을 4℃에서 30분 동안 4000 rpm에서 원심분리하고, 약 5 mL까지 농축시켰다.
표 3은 가용화 완충액을 예시한다.
[표 3]
Figure pct00402
정제
샘플을 처음에 1x PBS 용리 완충액으로 GE HiLoad 16/600 Superdex 200 pg 겔 여과 컬럼, 이어서 유리 PEG를 제거하도록 GE HiTrapQ 음이온 교환 컬럼, 및 그 후 20 컬럼 부피에서 30% 내지 70% 용리 완충액의 구배 용리로 역상 크로마토그래피에서 정제하였다.
표 4는 음이온 교환 크로마토그래피에 사용된 완충액을 예시한다. 표 5는 역상 크로마토그래피에 사용된 완충액을 예시한다.
[표 4]
Figure pct00403
[표 5]
Figure pct00404
콘쥬게이션
정제 후, AzK 함유 IL-15 생성물을 DBCO 매개 구리 무함유 클릭 화학을 사용하여 부위 특이적으로 페길화하여 안정한 공유 mPEG 모이어티를 AzK에 부착시켰다(반응식 1 및 2).
반응식 1 및 2. AzK_PEG 인터류킨 변이체의 예시적인 합성(여기서 n은 반복되는 PEG 단위의 수를 나타냄). AzK 모이어티와 DBCO 알키닐 모이어티의 반응에 의해 하나의 위치이성질체 생성물 또는 위치이성질체 생성물들의 혼합물을 수득할 수 있다.
[반응식 1]
Figure pct00405
[반응식 2]
Figure pct00406
화합물 IL-15_L26[AzK_PEG30], IL-15_E54[AzK_PEG30], 및 IL-15_N78[AzK_PEG30]을 하기 실시예 2 및 3에서 사용하였다.
화합물 IL-15_L26[AzK_PEG30]은 [AzK_PEG30]이 화학식 II, 화학식 III의 구조 또는 화학식 II와 III의 조합인 서열 번호 71을 갖는 화합물이고, 여기서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 선형, 메톡시 PEG 기이다. 이 화합물은 먼저, 서열 번호 59를 갖는 화합물을 제공하도록 위치 26의 류신 잔기(L26)(여기서, 위치 1은 N-말단 메티오닌 잔기임)가 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)으로 대체된 서열 번호 3을 갖는 단백질을 제조함으로써 제조하였다. 그 후 AzK-함유 단백질을 클릭 화학 조건 하에서 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기를 포함하는 DBCO와 반응시켜 화학식 II, 화학식 III, 또는 화학식 II와 III의 조합을 포함하는 서열 번호 71을 갖는 생성물을 수득 하였으며, 여기서, W는 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기이다. 이 화합물은 또한 위치 26의 류신 잔기(L26)가 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다. 이 화합물은 또한 위치 26의 류신 잔기(L26)가 화학식 X 또는 XI의 구조, 또는 X와 XI의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다.
화합물 IL-15_E54[AzK_PEG30]은 [AzK_PEG30]이 화학식 II, 화학식 III의 구조 또는 화학식 II와 III의 조합인 서열 번호 73을 갖는 화합물이고, 여기서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 선형, 메톡시 PEG 기이다. 이 화합물은 먼저, 서열 번호 61을 갖는 화합물을 제공하도록 위치 54의 글루탐산 잔기(E54)(여기서, 위치 1은 N-말단 메티오닌 잔기임)가 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)으로 대체된 서열 번호 3을 갖는 단백질을 제조함으로써 제조하였다. 그 후 AzK-함유 단백질을 클릭 화학 조건 하에서 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기를 포함하는 DBCO와 반응시켜 화학식 II, 화학식 III, 또는 화학식 II와 III의 조합을 포함하는 서열 번호 73을 갖는 생성물을 수득 하였으며, 여기서, W는 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기이다. 이 화합물은 또한 위치 54의 글루탐산 잔기(E54)가 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다. 이 화합물은 또한 위치 54의 글루탐산(E54)이 화학식 X 또는 XI의 구조, 또는 X와 XI의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다.
화합물 IL-15_N78[AzK_PEG30]은 [AzK_PEG30]이 화학식 II, 화학식 III의 구조 또는 화학식 II와 III의 조합인 서열 번호 74를 갖는 화합물이고, 여기서, W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 선형, 메톡시 PEG 기이다. 이 화합물은 먼저, 서열 번호 62를 갖는 화합물을 제공하도록 위치 78의 아스파라긴 잔기(N78)(여기서, 위치 1은 N-말단 메티오닌 잔기임)가 N6-((2-아지도에톡시)-카르보닐)-L-라이신(AzK)으로 대체된 서열 번호 3을 갖는 단백질을 제조함으로써 제조하였다. 그 후 AzK-함유 단백질을 클릭 화학 조건 하에서 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기를 포함하는 DBCO와 반응시켜 화학식 II, 화학식 III, 또는 화학식 II와 III의 조합을 포함하는 서열 번호 74를 갖는 생성물을 수득 하였으며, 여기서, W는 평균 분자량이 30 kDa인 메톡시, 선형 PEG 기이다. 이 화합물은 또한 위치 78의 아스파라긴 잔기(N78)가 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다. 이 화합물은 또한 위치 78의 아스파라긴 잔기(N78)가 화학식 X 또는 XI의 구조, 또는 X와 XI의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것으로 정의될 수 있으며, 여기서, n은 PEG 기가 약 30 kDa의 분자량을 갖도록 하는 정수이다.
실시예 2
비-인간 영장류( NHP ) 전혈에서의 IL-15 콘쥬게이트의 생체 외 면역 반응 프로파일링
화합물 IL-15_L26[AzK_PEG30], IL-15_E54[AzK_PEG30] 및 IL-15_N78[AzK_PEG30]을 사용한 시노몰구스 원숭이 전혈에서의 STAT5 인산화의 농도-반응 프로파일링을 멀티-컬러 유세포 분석기(PrimityBio LLC, 미국 캘리포니아주 프리몬트 소재)로 수행하여 각각의 콘쥬게이트로 자극 시 1차 면역 세포 하위집단의 활성화의 차이를 결정하였다. 2마리의 공여자로부터의 신선한 원숭이 전혈을 5배 희석 시리즈의 천연 IL-15, IL-15_L26[AzK_PEG30], IL-15_E54[AzK_PEG30] 또는 IL-15_N78[AzK_PEG30]로 처리하였다. IL-15_L26[AzK_PEG30]의 최고 농도는 100 μg/mL인 반면, IL-15_E54[AzK_PEG30] 및 IL-15_N78[AzK_PEG30]의 최고 농도는 각각 30 μg/mL였다. 처리된 세포 집단을 37℃에서 45분 동안 인큐베이션한 후 BD Lyse/Fix 완충액을 첨가하고 표 6에 예시된 형광 항체 패널로 염색하였다. 멀티-컬러 유세포 분석법을 사용하여 상이한 CD8+ T 세포 및 NK 세포 하위세트에서 pSTAT5 활성화를 탐지하고 정량화하였다.
[표 6]
Figure pct00407
NK 및 이펙터 T 세포(CD3+ CD8+) 집단에서, IL-15_N78[AzK_PEG30] 및 IL-15_E54[AzK_PEG30]는 천연 IL-15에 비해 효력을 유지하였고, pSTAT5 생성에 대한 EC50 값은 천연 사이토카인의 2 내지 3배 내이다. 이와는 대조적으로, CD8+ T 및 NK 세포 집단에서 IL-15_L26[AzK_PEG30]에 대한 pSTAT5 유도에 대한 EC50 값은 천연 IL-15와 비교하여 각각 약 164배 및 약 115배 감소하였다. IL-15_L26[AzK_PEG30]에 대한 EC50의 상당한 증가는 이 위치에서의 페길화가 IL-15 수용체의 아고니즘(agonism)을 감소시킨다는 것을 나타낸다. 화합물에 대한 EC50 데이터는 표 7에 예시되어 있고, 플롯은 도 1a 및 도 1b에 예시되어 있다.
[표 7]
Figure pct00408
마우스 비장세포에서의 IL-15 PEG 콘쥬게이트의 생체 외 면역 반응 프로파일링
C57BL6 마우스 비장세포에서의 STAT5 인산화의 농도-반응 프로파일링을 멀티-컬러 유세포 분석법을 사용하여 수행하여, 화합물 IL-15_L26[AzK_PEG30], IL-15_E54[AzK_PEG30] 및 IL-15_N78[AzK_PEG30]로 자극 시 EC50의 차이를 결정하였다. 마우스 비장세포를 표준 방법에 따라 프로세싱하였다. 간단히 말해서, C57BL6 마우스로부터의 비장을 작은 조각으로 자르고, 스트레이너를 통해 프레스하고, 세포를 PBS로 스트레이너를 통해 세척하였다. 원심분리 후, 세포를 펠렛에서 회수하였다. 적혈구(RBC)를 RBC 용해 완충액(Biolegend 420301)을 사용하여 용해시키고, 나머지 세포를 스트레이너에의 통과 후 회수하였다. 원심분리 후, 세포를 1회 세척하고, 비장세포용 완전 RPMI 배지(RPMI(Gibco Cat3 22-400-089), 10% FBS, 1% P/S)에 재현탁시켰다. 신선하게 준비한 비장세포를 37℃에서 45분 동안 5배 희석 시리즈의 천연 IL-15, IL-15_L26[AzK_PEG30], IL-15_E54[AzK_PEG30], 또는 IL-15_N78[AzK_PEG30]로 처리하였다. IL-15_L26[AzK_PEG30] 화합물의 최고 출발 농도는 200 μg/mL였다. IL-15_E54[AzK_PEG30] 및 IL-15_N78[AzK_PEG30] 화합물의 최고 출발 농도는 각각 20 μg/mL였다. 그 후 세포를 Cytofix(BD 554655)로 고정하고, 표 8에 예시된 형광 항체 패널로 염색하였다.
[표 8]
Figure pct00409
CD8+ T 세포 집단에서, 천연 IL-15 및 IL-15_N78[AzK_PEG30] 화합물은 자극되지 않은 세포에서의 IL-15Rα 발현의 비균질 수준과 일치하는 2상 용량-반응 관계를 나타냈다(문헌[Ring AM et al. Nature Immunol 2012]). 나이브 및 이펙터/메모리 CD8+ T 세포에 대해 이 화합물에서 동일한 프로파일이 관찰되었다. IL-15_L26[AzK_PEG30] 및 IL-15_E54[AzK_PEG30] 화합물은 표면 플라즈몬 공명 연구에서 IL15Rα에 대한 감소된 시험관 내 결합을 보유하는 것으로 입증된 비-알파 변이체이다. 이 화합물들은 IL-15Rα의 결합의 결여와 일치하는 단상 용량-반응 곡선을 보여주었다. 자극되지 않은 NK 세포는 매우 낮은 수준의 IL-15Rα를 보유하는 것으로 알려져 있으므로 이 화합물들에 대한 용량-반응 곡선은 IL-15Rβ/IL-2Rβ의 서로 다른 결합을 반영한다.
실시예 3
예시적인 IL-15 콘쥬게이트의 생체 내 연구
화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30](서열 번호 44)을 제조하고, C57BL/6 마우스에서 생체 내 연구에서 테스트하였다. 테스트된 화합물의 샘플은 N-말단 메티오닌 잔기를 포함하는 화합물((IL-15_N78[AzK_L1_PEG30](서열 번호 92))을 또한 포함할 수 있음이 이해되었는데, 이는 연구 결과에 영향을 미치지 않을 것으로 예상되었다. 마우스를 표 9에 나타낸 바와 같이 5개 군으로 나누었다: (a) 군 1에는 비히클을 투여함; (b) 군 2에는 0.1 mg/kg의 용량의 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 단회 정맥내(IV) 용량을 투여함; (c) 군 3에는 0.3 mg/kg의 용량의 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 단회 IV 용량을 투여함; (d) 군 4에는 1 mg/kg의 용량의 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 단회 IV 용량을 투여함; 및 (e) 군 5는 비히클도 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]도 투여 받지 않았다.
[표 9]
Figure pct00410
투여 후 하기 시점에 마우스 전혈을 채취하였다: 8분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 24시간, 48시간, 72시간, 120시간, 168시간, 240시간, 및 288시간. 혈액 샘플을 K3-EDTA 튜브에 넣고, 약 100 μL를 마이크로퓨지 튜브에 넣고, 얼음 위에 두고, 1시간 이내에 혈장에 대해 프로세싱하였다. 혈장으로부터 유래된 샘플 중 테스트 화합물의 농도를 ELISA 분석을 사용하여 결정하였다. 나머지 혈액을 여러 번 뒤집고, 약력학(PD) 바이오마커의 염색을 위해 용해 및 고정하였다. PD 판독은 모든 시점에 대해 세포 내 pSTAT5 모니터링 및 NK, CD8+ T 및 Treg 세포의 표현형분석을 포함하였다.
테스트 화합물의 군 혈장 농도 대 시간 데이터를 IV 볼루스 투여 모델을 사용하여 비구획적 방법으로 분석하였다. 천연(야생형) IL-15에 대한 문헌에서 보고된 반감기(t1/2)는 마우스에서 약 0.64시간으로 보고되었다(문헌[Cytokine. 2011 Dec; 56(3): 804-810. doi: 10.1016/j.cyto.2011.09.028]). 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 추정된 반감기는 각 군의 마우스에 투여된 용량에 따라 7.71시간 내지 14.6시간이었다. 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]에 대한 제거율(Cl_obs)은 5.34 mL/시간/kg 내지 3.97 mL/시간/kg의 범위이고, 분포 용적(Vz_obs)은 58.8 mL/kg 내지 84.2 mL/kg의 범위였다. 군 2, 3 및 4의 마우스에 대한 혈장 농도 대 시간 곡선은 도 2에 예시되어 있다(군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■; 및 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●). 군 2, 3 및 4의 마우스에 대한 평균 약동학(PK) 파라미터는 표 10에 나타낸 바와 같다.
[표 10]
Figure pct00411
STAT5 인산화 및 세포 증식 유도를 각각의 군 2, 3, 4에서 측정하였다. 결과는 C57BL/6 마우스에서 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 단회 IV 용량이 NK, CD8+ 및 Treg 세포에서 STAT5 인산화를 유도하지만 Ki67의 상향 조절은 NK 및 CD8+ T 세포(단회 IV 용량 0.1, 0.3 및 1 mg/kg)에 한정됨을 보여주었다.
도 3 내지 도 5는 상이한 말초 혈액 세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다: 비히클 = ○; 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■; 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲; 및 투약 전 = △. 도 3은 NK 세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다. 도 4는 CD8 T-세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다. 도 5는 Treg 세포 집단에서의 % pSTAT5를 예시한다.
Ki67을 각각의 군 1, 2, 3, 및 4에서 상이한 말초 혈액 세포 집단에서 측정하였으며, 이는 도 6 내지 8에 예시되어 있다(비히클 = ○; 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■; 및 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲). 도 6은 NK 세포 집단에서의 %Ki67을 예시한다. 도 7은 CD8 T 세포에서의 %Ki67을 예시한다. 도 8는 Treg 세포 집단에서의 %Ki67을 예시한다. 이 결과는 Treg 세포가 아니라 CD8+ T, 및 NK 세포에서 초기 증식 분자 마커 Ki67의 발현 증가를 보여주었다.
NK 및 기억 CD8 T-세포 집단의 확장을 각각의 군 1, 2, 3, 및 4에서 측정하였으며, 이는 각각 도 9 및 10에 예시되어 있다(비히클 = ○; 군 2(0.1 mg/kg의 용량) = ●; 군 3(0.3 mg/kg의 용량) = ■; 및 군 4(1 mg/kg의 용량) = ▲). 도 9는 % NK 세포 확장 대 투약 후 일수를 예시한다. 도 10은 % 기억 CD8 T-세포 확장 대 투약 후 일수를 예시한다.
도 11a~도 11b는 C57BL/6 마우스에서의 1 mg/kg의 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투약 후 5일에서의(도 11b) 및 비히클 투약 후 5일에서의(도 11a) NK 세포 집단(모든 말초 세포에서 게이팅됨)을 보여주는 유세포 분석 플롯을 보여준다. 도 12a~도 12b는 C57BL/6 마우스에서의 1 mg/kg의 테스트 화합물 IL-15_N77[AzK_L1_PEG30]의 투약 후 5일에서의(도 12b) 및 비히클 투약 후 5일에서의(도 12a) 기억 CD8+T 집단(CD3+T 세포에서 게이팅됨)을 보여주는 유세포 분석 플롯을 보여준다.
본 발명의 바람직한 실시 형태가 본원에 제시되고 설명되었지만, 이러한 실시 형태가 단지 예로서 제공된다는 것은 당업자에게 명백할 것이다. 본 발명으로부터 벗어나지 않으면서 여러 변형, 변경, 및 대체가 당업자에 의해 이루어질 것이다. 본원에 기술된 본 발명의 실시 형태에 대한 다양한 대안이 본 발명을 실시하는 데 사용될 수 있음을 이해해야 한다. 다음의 청구범위는 본 발명의 범주를 정의하고자 하는 것으로, 이러한 청구범위 내의 방법과 구조 및 그 균등물은 청구범위에 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> SYNTHORX, INC. <120> NOVEL IL-15 CONJUGATES AND USES THEREOF <130> 01183-0074-00PCT <150> US 62/890,741 <151> 2019-08-23 <150> US 62/931,663 <151> 2019-11-06 <150> US 62/958,177 <151> 2020-01-07 <160> 99 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 114 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> misc_feature <223> IL-15 (mature form) <400> 1 Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile 1 5 10 15 Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His 20 25 30 Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln 35 40 45 Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu 50 55 60 Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val 65 70 75 80 Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile 85 90 95 Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn 100 105 110 Thr Ser <210> 2 <211> 136 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> misc_feature <223> IL-15 (precursor) <400> 2 Met Asp 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97 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic: IL-15_E54[AzK_ L1_PEG40] <220> <221> misc_feature <222> (54)..(54) <223> Xaa is [AzK_L1_PEG40] = N6-((2-azidoethoxy)-carbonyl)-L-lysine stably-conjugated to PEG <400> 97 Met Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu 1 5 10 15 Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val 20 25 30 His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu 35 40 45 Gln Val Ile Ser Leu Xaa Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val 50 55 60 Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn 65 70 75 80 Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn 85 90 95 Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile 100 105 110 Asn Thr Ser 115 <210> 98 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic: IL-15_N78[AzK_ L1_PEG40] <220> <221> misc_feature <222> (78)..(78) <223> Xaa is [AzK_L1_PEG40] = N6-((2-azidoethoxy)-carbonyl)-L-lysine stably-conjugated to PEG <400> 98 Met Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu 1 5 10 15 Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val 20 25 30 His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu 35 40 45 Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val 50 55 60 Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Xaa Gly Asn 65 70 75 80 Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn 85 90 95 Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile 100 105 110 Asn Thr Ser 115 <210> 99 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic: IL-15_S84[AzK_ L1_PEG40] <220> <221> misc_feature <222> (84)..(84) <223> Xaa is [AzK_L1_PEG40] = N6-((2-azidoethoxy)-carbonyl)-L-lysine stably-conjugated to PEG <400> 99 Met Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu 1 5 10 15 Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val 20 25 30 His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu 35 40 45 Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val 50 55 60 Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn 65 70 75 80 Val Thr Glu Xaa Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn 85 90 95 Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile 100 105 110 Asn Thr Ser 115

Claims (71)

  1. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 I]
    Figure pct00412

    (여기서,
    Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00413
    이거나;
    Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00414
    이거나;
    Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00415
    이거나; 또는
    Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00416
    이며;
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00417
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  2. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 I의 구조로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 I]
    Figure pct00418

    (여기서,
    Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00419
    이거나;
    Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00420
    이거나;
    Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00421
    이거나; 또는
    Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00422
    이며;
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00423
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00424
    인, IL-15 콘쥬게이트.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00425
    인, IL-15 콘쥬게이트.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00426
    인, IL-15 콘쥬게이트.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, Z는 CH2이고 Y는
    Figure pct00427
    인, IL-15 콘쥬게이트.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, Y는 CH2이고 Z는
    Figure pct00428
    인, IL-15 콘쥬게이트.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, PEG 기는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 및 45 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  9. 제8항에 있어서, PEG 기는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  10. 제1항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S18, L25, E46, E53, N77, 및 S83으로부터 선택되는, IL-15 콘쥬게이트.
  11. 제10항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N77인, IL-15 콘쥬게이트.
  12. 제2항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 S19, L26, E47, E54, N78, 및 S84로부터 선택되는, IL-15 콘쥬게이트.
  13. 제12항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 L26인, IL-15 콘쥬게이트.
  14. 제12항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 E54인, IL-15 콘쥬게이트.
  15. 제12항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트의 아미노산 서열에서의 화학식 I의 구조의 위치는 N78인, IL-15 콘쥬게이트.
  16. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00429

    [화학식 III]
    Figure pct00430

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00431
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  17. 서열 번호 16~21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00432

    [화학식 III]
    Figure pct00433

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00434
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  18. 제17항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 약 1:1인, IL-15 콘쥬게이트.
  19. 제17항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 초과인, IL-15 콘쥬게이트.
  20. 제17항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트 중 화학식 II의 구조의 양:화학식 III의 구조의 양(총 [AzK_PEG] 양을 포함함)의 비는 1:1 미만인, IL-15 콘쥬게이트.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, W는 선형 또는 분지형 PEG 기인, IL-15 콘쥬게이트.
  22. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, W는 메톡시 PEG 기인, IL-15 콘쥬게이트.
  23. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00435

    [화학식 III]
    Figure pct00436

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00437
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  24. 서열 번호 22~27 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00438

    [화학식 III]
    Figure pct00439

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00440
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  25. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00441

    [화학식 III]
    Figure pct00442

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00443
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  26. 서열 번호 28~33 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00444

    [화학식 III]
    Figure pct00445

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00446
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  27. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00447

    [화학식 V]
    Figure pct00448

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00449
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  28. 서열 번호 34~39 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00450

    [화학식 V]
    Figure pct00451

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00452
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  29. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00453

    [화학식 V]
    Figure pct00454

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00455
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  30. 제29항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 44의 아미노산 서열을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  31. 서열 번호 40~45 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00456

    [화학식 V]
    Figure pct00457

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00458
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  32. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00459

    [화학식 V]
    Figure pct00460

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00461
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  33. 서열 번호 46~51 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00462

    [화학식 V]
    Figure pct00463

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00464
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  34. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00465

    [화학식 III]
    Figure pct00466

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00467
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  35. 서열 번호 64~69 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00468

    [화학식 III]
    Figure pct00469

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00470
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  36. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조, 또는 화학식 II와 화학식 III의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00471

    [화학식 III]
    Figure pct00472

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00473
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  37. 제36항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 71의 아미노산 서열을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  38. 제36항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 73의 아미노산 서열을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  39. 제36항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 서열 번호 74의 아미노산 서열을 갖는, IL-15 콘쥬게이트.
  40. 서열 번호 70~75 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG30]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00474

    [화학식 III]
    Figure pct00475

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00476
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  41. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 또는 화학식 III의 구조를 갖거나, 또는 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00477

    [화학식 III]
    Figure pct00478

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00479
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  42. 서열 번호 76~81 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_PEG40]가 하기 화학식 II 및 화학식 III의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 II]
    Figure pct00480

    [화학식 III]
    Figure pct00481

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00482
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  43. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00483

    [화학식 V]
    Figure pct00484

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00485
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  44. 서열 번호 82~87 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00486

    [화학식 V]
    Figure pct00487

    (여기서,
    W는 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 50 kDa, 및 60 kDa으로부터 선택되는 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00488
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  45. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조, 또는 화학식 IV와 화학식 V의 조합을 갖는, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00489

    [화학식 V]
    Figure pct00490

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00491
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  46. 서열 번호 88~93 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG30]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00492

    [화학식 V]
    Figure pct00493

    (여기서,
    W는 30 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00494
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  47. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 또는 화학식 V의 구조를 갖거나, 또는 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00495

    [화학식 V]
    Figure pct00496

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00497
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  48. 서열 번호 94~99 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트로서, [AzK_L1_PEG40]가 하기 화학식 IV 및 화학식 V의 구조의 조합인, IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 IV]
    Figure pct00498

    [화학식 V]
    Figure pct00499

    (여기서,
    W는 40 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG 기이며;
    X는 하기 구조:
    Figure pct00500
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  49. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 VI]
    Figure pct00501

    [화학식 VII]
    Figure pct00502

    (여기서,
    n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
    Figure pct00503
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  50. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VI 또는 VII의 구조, 또는 VI과 VII의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 VI]
    Figure pct00504

    [화학식 VII]
    Figure pct00505

    (여기서,
    n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
    Figure pct00506
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  51. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 VIII]
    Figure pct00507

    [화학식 IX]
    Figure pct00508

    (여기서,
    n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
    Figure pct00509
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  52. IL-15 콘쥬게이트의 하나 이상의 아미노산 잔기가 하기 화학식 VIII 또는 IX의 구조, 또는 VIII과 IX의 조합으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 IL-15 콘쥬게이트:
    [화학식 VIII]
    Figure pct00510

    [화학식 IX]
    Figure pct00511

    (여기서,
    n은 약 2 내지 약 5000의 범위의 정수이며;
    Figure pct00512
    를 가지며;
    X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며;
    X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타냄).
  53. 제1항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 제약상 허용가능한 염, 용매화물, 또는 수화물인, IL-15 콘쥬게이트.
  54. 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 대상체에게 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 IL-15 콘쥬게이트의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  55. 암의 치료에 사용하기 위한 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 IL-15 콘쥬게이트.
  56. 암 치료용 의약의 제조에 있어서의 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 IL-15 콘쥬게이트의 용도.
  57. 암은 혈액 악성종양인, 방법, 이에 대한 사용을 위한 IL-15 콘쥬게이트, 또는 제54항의 용도.
  58. 대상체에서의 암은 신장 세포 암종(RCC), 비소세포 폐암(NSCLC), 두경부 편평 세포 암(HNSCC), 고전적 호지킨 림프종(cHL), 원발성 종격동 거대 B 세포 림프종(PMBCL), 요로상피 암종, 현미부수체 불안정 암, 현미부수체 안정 암, 위암, 자궁경부암, 간세포 암종(HCC), 메르켈 세포 암종(MCC), 흑색종, 소세포폐암(SCLC), 식도암, 교모세포종, 중피종, 유방암, 삼중 음성 유방암, 전립선암, 방광암, 난소암, 중등도 내지 저 돌연변이 부담 종양, 피부 편평 세포 암종(CSCC), 편평 세포 피부암(SCSC), 저 발현 내지 비-발현 PD-L1 종양, 해부학적 원발 기원 부위를 넘어 간 및 CNS에 전신적으로 파종된 종양, 및 미만성 거대 B 세포 림프종으로부터 선택되는, 방법, 이에 대한 사용을 위한 IL-15 콘쥬게이트, 또는 제54항의 용도.
  59. 이펙터 T(Teff) 세포, 기억 T(Tmem) 세포 및 자연 살해(NK) 세포 집단 중 하나 이상을 확장시키는 방법으로서,
    상기 방법은 세포를 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 IL-15 콘쥬게이트와 접촉시키는 단계를 포함하고;
    IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rβ 및 IL-15Rγ 서브유닛과 상호작용하여 IL-15/IL-15Rβγ 복합체를 형성하며, IL-15/IL-15Rβγ 복합체는 Teff, Tmem, 및 NK 세포 중 하나 이상의 확장을 자극하는, 방법.
  60. 제59항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 IL-15Rα 서브유닛에 대해 감소된 친화도를 갖고, 선택적으로, 친화도는 야생형 인간 IL-15에 비해 감소되는 것인, 방법.
  61. 제59항 또는 제60항에 있어서, 세포는 인간 세포인, 방법.
  62. 제59항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 시험관 내 방법인, 방법.
  63. 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 IL-콘쥬게이트의 유효량 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  64. IL-15 콘쥬게이트를 제조하는 방법으로서,
    화학식
    Figure pct00513
    의 비천연 아미노산을 포함하는 IL-15 폴리펩티드
    (여기서, IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드에서의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 1 또는 3의 아미노산 서열을 포함하며, 위치 X-1은 선행하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며, 위치 X+1은 후속하는 아미노산 잔기에 대한 부착점을 나타내며, 위치 X는 비천연 아미노산으로 치환된 아미노산의 위치를 나타냄)를,
    화학식
    Figure pct00514
    또는
    Figure pct00515
    의 mPEG-DBCO
    (여기서, n은 mPEG-DBCO가 약 5 kDa, 10 kDa, 15 kDa, 20 kDa, 25 kDa, 30 kDa, 35 kDa, 40 kDa, 45 kDa, 또는 50 kDa의 분자량을 갖는 PEG를 포함하도록 하는 것임)와 반응시켜 이에 의해 IL-15 콘쥬게이트를 생성하는 단계를 포함하는, 방법.
  65. 제64항에 있어서, 위치 X는 서열 번호 1 내의 아미노산 위치를 참조할 경우 S18, L25, E46, E53, N77, 또는 S83인, 방법.
  66. 제64항 또는 제65항에 있어서, IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
  67. 제64항에 있어서, 위치 X는 서열 번호 3 내의 아미노산 위치를 참조할 경우 S19, L26, E47, E54, N78, 또는 S84인, 방법.
  68. 제64항 또는 제67항에 있어서, IL-15 폴리펩티드는 IL-15 폴리펩티드 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 비천연 아미노산으로 대체된 서열 번호 3의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
  69. 제64항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, PEG는 약 30 kDa의 분자량을 갖는, 방법.
  70. 제64항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, PEG는 약 40 kDa의 분자량을 갖는, 방법.
  71. 제64항에 있어서, IL-15 콘쥬게이트는 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 IL-15 콘쥬게이트인, 방법.
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2018309166B2 (en) 2017-08-03 2022-12-08 Synthorx, Inc. Cytokine conjugates for the treatment of proliferative and infectious diseases
CN114134141B (zh) * 2021-11-03 2024-01-30 杭州嵌化合生医药科技有限公司 一种引入非天然氨基酸的嵌合体苯丙氨酸翻译系统及其构建方法

Family Cites Families (170)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
US4476301A (en) 1982-04-29 1984-10-09 Centre National De La Recherche Scientifique Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon
JPS5927900A (ja) 1982-08-09 1984-02-14 Wakunaga Seiyaku Kk 固定化オリゴヌクレオチド
FR2540122B1 (fr) 1983-01-27 1985-11-29 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application
US4605735A (en) 1983-02-14 1986-08-12 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Oligonucleotide derivatives
US4948882A (en) 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
US4824941A (en) 1983-03-10 1989-04-25 Julian Gordon Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems
US4587044A (en) 1983-09-01 1986-05-06 The Johns Hopkins University Linkage of proteins to nucleic acids
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US5015733A (en) 1983-12-20 1991-05-14 California Institute Of Technology Nucleosides possessing blocked aliphatic amino groups
US5118802A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside
US4849513A (en) 1983-12-20 1989-07-18 California Institute Of Technology Deoxyribonucleoside phosphoramidites in which an aliphatic amino group is attached to the sugar ring and their use for the preparation of oligonucleotides containing aliphatic amino groups
US5550111A (en) 1984-07-11 1996-08-27 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5258506A (en) 1984-10-16 1993-11-02 Chiron Corporation Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains
US5367066A (en) 1984-10-16 1994-11-22 Chiron Corporation Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites
US5430136A (en) 1984-10-16 1995-07-04 Chiron Corporation Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites
US4828979A (en) 1984-11-08 1989-05-09 Life Technologies, Inc. Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection
FR2575751B1 (fr) 1985-01-08 1987-04-03 Pasteur Institut Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques
US5235033A (en) 1985-03-15 1993-08-10 Anti-Gene Development Group Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5405938A (en) 1989-12-20 1995-04-11 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US4762779A (en) 1985-06-13 1988-08-09 Amgen Inc. Compositions and methods for functionalizing nucleic acids
US5093232A (en) 1985-12-11 1992-03-03 Chiron Corporation Nucleic acid probes
US4910300A (en) 1985-12-11 1990-03-20 Chiron Corporation Method for making nucleic acid probes
US5317098A (en) 1986-03-17 1994-05-31 Hiroaki Shizuya Non-radioisotope tagging of fragments
JPS638396A (ja) 1986-06-30 1988-01-14 Wakunaga Pharmaceut Co Ltd ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体
US5276019A (en) 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US5264423A (en) 1987-03-25 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US4904582A (en) 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
AU598946B2 (en) 1987-06-24 1990-07-05 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Nucleoside derivatives
US5585481A (en) 1987-09-21 1996-12-17 Gen-Probe Incorporated Linking reagents for nucleotide probes
US4924624A (en) 1987-10-22 1990-05-15 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof
US5188897A (en) 1987-10-22 1993-02-23 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates
US5525465A (en) 1987-10-28 1996-06-11 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same
DE3738460A1 (de) 1987-11-12 1989-05-24 Max Planck Gesellschaft Modifizierte oligonukleotide
US5082830A (en) 1988-02-26 1992-01-21 Enzo Biochem, Inc. End labeled nucleotide probe
EP0406309A4 (en) 1988-03-25 1992-08-19 The University Of Virginia Alumni Patents Foundation Oligonucleotide n-alkylphosphoramidates
US5278302A (en) 1988-05-26 1994-01-11 University Patents, Inc. Polynucleotide phosphorodithioates
US5109124A (en) 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5216141A (en) 1988-06-06 1993-06-01 Benner Steven A Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages
US5175273A (en) 1988-07-01 1992-12-29 Genentech, Inc. Nucleic acid intercalating agents
US5262536A (en) 1988-09-15 1993-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides
US5512439A (en) 1988-11-21 1996-04-30 Dynal As Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof
US5599923A (en) 1989-03-06 1997-02-04 Board Of Regents, University Of Tx Texaphyrin metal complexes having improved functionalization
US5457183A (en) 1989-03-06 1995-10-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Hydroxylated texaphyrins
US5391723A (en) 1989-05-31 1995-02-21 Neorx Corporation Oligonucleotide conjugates
US4958013A (en) 1989-06-06 1990-09-18 Northwestern University Cholesteryl modified oligonucleotides
US5451463A (en) 1989-08-28 1995-09-19 Clontech Laboratories, Inc. Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides
US5134066A (en) 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
US5254469A (en) 1989-09-12 1993-10-19 Eastman Kodak Company Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures
US5591722A (en) 1989-09-15 1997-01-07 Southern Research Institute 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity
US5399676A (en) 1989-10-23 1995-03-21 Gilead Sciences Oligonucleotides with inverted polarity
US5264562A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs with novel linkages
DE69034150T2 (de) 1989-10-24 2005-08-25 Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad 2'-Modifizierte Oligonukleotide
US5264564A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences Oligonucleotide analogs with novel linkages
US5292873A (en) 1989-11-29 1994-03-08 The Research Foundation Of State University Of New York Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe
US5177198A (en) 1989-11-30 1993-01-05 University Of N.C. At Chapel Hill Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates
US5130302A (en) 1989-12-20 1992-07-14 Boron Bilogicals, Inc. Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same
US5486603A (en) 1990-01-08 1996-01-23 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide having enhanced binding affinity
US5587470A (en) 1990-01-11 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5646265A (en) 1990-01-11 1997-07-08 Isis Pharmceuticals, Inc. Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5578718A (en) 1990-01-11 1996-11-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Thiol-derivatized nucleosides
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5459255A (en) 1990-01-11 1995-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-2 substituted purines
US5670633A (en) 1990-01-11 1997-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
AU7579991A (en) 1990-02-20 1991-09-18 Gilead Sciences, Inc. Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers
US5214136A (en) 1990-02-20 1993-05-25 Gilead Sciences, Inc. Anthraquinone-derivatives oligonucleotides
US5321131A (en) 1990-03-08 1994-06-14 Hybridon, Inc. Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling
US5470967A (en) 1990-04-10 1995-11-28 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages
GB9009980D0 (en) 1990-05-03 1990-06-27 Amersham Int Plc Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides
EP0455905B1 (en) 1990-05-11 1998-06-17 Microprobe Corporation Dipsticks for nucleic acid hybridization assays and methods for covalently immobilizing oligonucleotides
BR9106702A (pt) 1990-07-27 1993-06-08 Isis Pharmaceuticals Inc Analogo de oligonucleotideos e processos para modular a producao de uma proteina por um organismo e para tratar um organismo
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
US5677437A (en) 1990-07-27 1997-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5688941A (en) 1990-07-27 1997-11-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds
US5489677A (en) 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
US5541307A (en) 1990-07-27 1996-07-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof
US5608046A (en) 1990-07-27 1997-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds
US5623070A (en) 1990-07-27 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5618704A (en) 1990-07-27 1997-04-08 Isis Pharmacueticals, Inc. Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling
US5138045A (en) 1990-07-27 1992-08-11 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5218105A (en) 1990-07-27 1993-06-08 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5602240A (en) 1990-07-27 1997-02-11 Ciba Geigy Ag. Backbone modified oligonucleotide analogs
DE69115702T2 (de) 1990-08-03 1996-06-13 Sterling Winthrop Inc Verbindungen und verfahren zur unterdrückung der genexpression
US5245022A (en) 1990-08-03 1993-09-14 Sterling Drug, Inc. Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides
US5177196A (en) 1990-08-16 1993-01-05 Microprobe Corporation Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof
US5512667A (en) 1990-08-28 1996-04-30 Reed; Michael W. Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides
US5214134A (en) 1990-09-12 1993-05-25 Sterling Winthrop Inc. Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US5561225A (en) 1990-09-19 1996-10-01 Southern Research Institute Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages
JPH06505704A (ja) 1990-09-20 1994-06-30 ギリアド　サイエンシズ，インコーポレイテッド 改変ヌクレオシド間結合
US5432272A (en) 1990-10-09 1995-07-11 Benner; Steven A. Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases
KR930702373A (ko) 1990-11-08 1993-09-08 안토니 제이. 페이네 합성 올리고누클레오티드에 대한 다중 리포터(Reporter)그룹의 첨합
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
US5371241A (en) 1991-07-19 1994-12-06 Pharmacia P-L Biochemicals Inc. Fluorescein labelled phosphoramidites
US5571799A (en) 1991-08-12 1996-11-05 Basco, Ltd. (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response
ES2103918T3 (es) 1991-10-17 1997-10-01 Ciba Geigy Ag Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios.
US5594121A (en) 1991-11-07 1997-01-14 Gilead Sciences, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines
TW393513B (en) 1991-11-26 2000-06-11 Isis Pharmaceuticals Inc Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines
AU3222793A (en) 1991-11-26 1993-06-28 Gilead Sciences, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines
US5484908A (en) 1991-11-26 1996-01-16 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
US5595726A (en) 1992-01-21 1997-01-21 Pharmacyclics, Inc. Chromophore probe for detection of nucleic acid
US5565552A (en) 1992-01-21 1996-10-15 Pharmacyclics, Inc. Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis
FR2687679B1 (fr) 1992-02-05 1994-10-28 Centre Nat Rech Scient Oligothionucleotides.
US5633360A (en) 1992-04-14 1997-05-27 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation
US5434257A (en) 1992-06-01 1995-07-18 Gilead Sciences, Inc. Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages
EP0577558A2 (de) 1992-07-01 1994-01-05 Ciba-Geigy Ag Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte
US5272250A (en) 1992-07-10 1993-12-21 Spielvogel Bernard F Boronated phosphoramidate compounds
EP0673559A1 (en) 1992-12-14 1995-09-27 Honeywell Inc. Motor system with individually controlled redundant windings
US5574142A (en) 1992-12-15 1996-11-12 Microprobe Corporation Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery
US5476925A (en) 1993-02-01 1995-12-19 Northwestern University Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups
GB9304618D0 (en) 1993-03-06 1993-04-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
CA2159631A1 (en) 1993-03-30 1994-10-13 Sanofi Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them
WO1994022891A1 (en) 1993-03-31 1994-10-13 Sterling Winthrop Inc. Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages
DE4311944A1 (de) 1993-04-10 1994-10-13 Degussa Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen
GB9311682D0 (en) 1993-06-05 1993-07-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
US5502177A (en) 1993-09-17 1996-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine derivatives for labeled binding partners
US5457187A (en) 1993-12-08 1995-10-10 Board Of Regents University Of Nebraska Oligonucleotides containing 5-fluorouracil
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
US5627053A (en) 1994-03-29 1997-05-06 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid
US5625050A (en) 1994-03-31 1997-04-29 Amgen Inc. Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics
US5525711A (en) 1994-05-18 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes
US5597696A (en) 1994-07-18 1997-01-28 Becton Dickinson And Company Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates
US5580731A (en) 1994-08-25 1996-12-03 Chiron Corporation N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith
US5597909A (en) 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
GB9606158D0 (en) 1996-03-23 1996-05-29 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
US6770748B2 (en) 1997-03-07 2004-08-03 Takeshi Imanishi Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
US6562798B1 (en) 1998-06-05 2003-05-13 Dynavax Technologies Corp. Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof
AU776362B2 (en) 1999-05-04 2004-09-09 Roche Innovation Center Copenhagen A/S L-ribo-LNA analogues
US6525191B1 (en) 1999-05-11 2003-02-25 Kanda S. Ramasamy Conformationally constrained L-nucleosides
US20060074035A1 (en) 2002-04-17 2006-04-06 Zhi Hong Dinucleotide inhibitors of de novo RNA polymerases for treatment or prevention of viral infections
AU2003291755A1 (en) 2002-11-05 2004-06-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use
EP1562971B1 (en) 2002-11-05 2014-02-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
WO2004106356A1 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Syddansk Universitet Functionalized nucleotide derivatives
ES2382807T3 (es) 2003-08-28 2012-06-13 Takeshi Imanishi Nuevos ácidos nucleicos artificiales del tipo de enlace N-O con reticulación
AU2004274021B2 (en) 2003-09-18 2009-08-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4'-thionucleosides and oligomeric compounds
CA2640171C (en) 2006-01-27 2014-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-modified bicyclic nucleic acid analogs
DK2066684T3 (da) 2006-05-11 2012-10-22 Isis Pharmaceuticals Inc 5´-Modificerede bicycliske nukleinsyreanaloge
EP2125852B1 (en) 2007-02-15 2016-04-06 Ionis Pharmaceuticals, Inc. 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2170917B1 (en) 2007-05-30 2012-06-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
EP2173760B2 (en) 2007-06-08 2015-11-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
CA2692579C (en) 2007-07-05 2016-05-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs
US9402993B2 (en) 2011-04-11 2016-08-02 Boston Scientific Neuromodulation Corporation Systems and methods for enhancing paddle lead placement
US9201020B2 (en) 2011-10-25 2015-12-01 Apogee Enterprises, Inc. Specimen viewing device
EP3584255B1 (en) 2012-08-31 2022-02-16 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising an azido group
PT3041854T (pt) 2013-08-08 2020-03-05 Scripps Research Inst Um método para a identificação enzimática específica ao local de ácidos nucleicos in vitro pela incorporação de nucleótidos não-naturais
HUE042421T2 (hu) 2013-10-11 2019-07-29 Sutro Biopharma Inc Nem természetes aminosav tRNS szintetázok a para-metilazid-L-fenilalaninhoz
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
WO2015054590A2 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Sutro Biopharma, Inc. NON-NATURAL AMINO ACID tRNA SYNTHETASES FOR PYRIDYL TETRAZINE
MA39711A (fr) * 2014-04-03 2015-10-08 Nektar Therapeutics Conjugués d'une fraction d'il-15 et d'un polymère
DK3129493T3 (da) 2014-04-09 2021-09-27 Scripps Research Inst Import af unaturlige eller modificerede nukleosidtriphosphater ind i celler via nukleinsyre-triphosphat-transportører
US20170369871A1 (en) 2015-01-12 2017-12-28 Synthorx, Inc. Incorporation of unnatural nucleotides and methods thereof
US11761007B2 (en) 2015-12-18 2023-09-19 The Scripps Research Institute Production of unnatural nucleotides using a CRISPR/Cas9 system
CN108472324A (zh) * 2015-12-21 2018-08-31 阿尔莫生物科技股份有限公司 白介素-15组合物及其用途
ES2929047T3 (es) 2016-06-24 2022-11-24 Scripps Research Inst Transportador de nucleósido trifosfato novedoso y usos del mismo
CA3069321A1 (en) 2017-07-11 2019-01-17 Synthorx, Inc. Incorporation of unnatural nucleotides and methods thereof
EP3651774A4 (en) 2017-07-11 2021-07-07 The Scripps Research Institute INTEGRATION OF INNATURAL NUCLEOTIDES AND APPLICATION METHODS IN VIVO
AU2018309166B2 (en) 2017-08-03 2022-12-08 Synthorx, Inc. Cytokine conjugates for the treatment of proliferative and infectious diseases

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022544817A (ja) 2022-10-21
AU2020337869A1 (en) 2022-03-03
IL290301A (en) 2022-04-01
MX2022002053A (es) 2022-03-17
US20210054040A1 (en) 2021-02-25
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WO2021041206A1 (en) 2021-03-04
EP4017540A1 (en) 2022-06-29
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CN114555632A (zh) 2022-05-27
BR112022003046A2 (pt) 2022-05-17
CO2022001050A2 (es) 2022-03-08

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