TW201206479A

TW201206479A - Immunotherapy regimes dependent on ApoE status

Info

Publication number: TW201206479A
Application number: TW100139936A
Authority: TW
Inventors: Ronald Black; Lars Ekman; Ivan Lieberburg; Michael Grundman; James Callaway; Keith M Gregg; Jack Steven Jacobsen; Davinder Gill; Lioudmila Tchistiakova; Angela M Widom
Original assignee: Janssen Alzheimer Immunotherap; Wyeth Llc
Priority date: 2007-10-17
Filing date: 2008-10-17
Publication date: 2012-02-16
Also published as: EA201590833A1; JO3076B1; US9644025B2; DK2207565T3; JP2011501945A; SG10201607589XA; HK1217709A1; ZA201002544B; MY156454A; PA8800801A1; TWI581803B; US20090155256A1; US20100266505A1; EP2207565B1; JP2015145419A; PE20090971A1; CA2702617A1; CN101969988A; AR071732A1; EP2952524A1

Description

201206479 六、發明說明相關申請案之交叉.參考資料於2007年10月17曰和2008年7月25曰分別提出之美國臨時申請案第60/999,423和6 1 /083,827號之全部內容倂入本文以作爲全部用途之參考。【發明所屬之技術領域】本發明提供阿滋海默（Alzheimer)氏症及類似疾病之免疫治療法。【先前技術】 I.槪論阿滋海默氏症（AD)爲造成老年痴呆之漸進式疾病。大致上，見：Selkoe, TINS 1 6: 403 ( 1 993); Hardy et al., WO 92/13069; Selkoe, J.Neuropathol.Exp.Neurol.53: 438 (1 994); Duff et al.,Nature 3 73: 476( 1 995); Games et a/.3 73: 523 ( 1 99 5)。槪括地說，此疾病分成二類 :晚發性（其在老年發病（65 +歲））和早發性（其早在老年期之前（β卩，介於35和60歲之間）即發展出）。在此二種類型之疾病中，其病理學相同，但年輕時發病之病例的異常情況傾向更嚴重和廣泛。此疾病之特徵爲腦中至少有二種類型之損害，神經纖維纏結和老年斑塊。神經纖維纏結爲與微管相關之tau蛋白胞內沈積物（其係由二條彼此成對纏繞的絲狀纖維組成）。老年斑塊（即，澱粉樣斑塊）爲面 -5- 201206479 積至多1 50微米之混亂的神經纖維網（neuropile)，其中心處有胞外澱粉樣沈積橫跨，此可藉由顯微鏡分析腦組織切片見到。腦中堆積澱粉樣斑塊亦與唐氏症及其他認知障礙有關* 斑塊之主要組成爲稱爲八石或沒-澱粉樣肽之肽。八/3 肽爲含有39-43個胺基酸之較大跨膜糖蛋白（稱爲澱粉樣先驅蛋白（ΑΡΡ))的4-kDa內片段。由於ΑΡΡ被不同分泌酶進行蛋白質水解處理，所發現之A0主要爲短型（長度爲 40個胺基酸），以及長型（長度爲42-43個胺基酸）。APP 之疏水性跨膜結構區的一部分係在ΑΘ之羧基端發現，其可能造成ΑΘ在斑塊中聚集，尤其是在長型AyS之情況中。澱粉樣斑塊堆積在腦中最終將造成神經細胞死亡。與此類型之神經退化有關的生理症狀爲阿滋海默氏症的特徵》 APP蛋白內之數種突變已與出現阿滋海默氏症相聯結。見，如：Goate ei 349:704( 1 99 1 )(纈胺酸 717 突變爲異白胺酸）Chartier Harlan a/.JaiMre 3 5 3:844 (1991))(纈胺酸 717 突變爲甘胺酸）；Murrell ei a/.,Science 254:97( 1 99 1 )(纈胺酸717突變爲苯丙胺酸）；Murrell ei Ge”" 1:345( 1 992)(離胺酸 5 9 5 -甲硫胺酸 5 9 6 變成天門冬胺酸5 9 5 _白胺酸596之雙重突變）。這類突變被認爲係經由增加或改換APP改變成A/3之處理（尤其是處理 APP以增加長型A0 (即，A/3 1-42和A/3 1-43)之量）來引發阿滋海默氏症。其他基因（諸如早老基因，PS1和PS2) 中之突變被認爲係間接影響APP之處理作用，以增加長 201206479 型之量（見，Hardy, Γ/WS 20:154 (1997))。載脂蛋白E(ApoE)編碼膽固醇-處理蛋白。該定位在 19ql3.2之基因含有三種對偶基因變異體·· ApoE4' AP〇E3 和Ap〇E2。該基因之ApoE4變異體在一般群體中之頻率不同，但總是少於30%，通常爲8%至1 5% » ApoE3爲最常見之型式，而Ap〇E2最不常見。含有一個E4對偶基因之個人發展出阿滋海默氏症之風險通常增加約2至3倍。含有二個E4對偶基因之個人（通常約爲族群之1%)之風險則增加約9倍。然而，即使是含有二個E4對偶基因之個人亦非一定罹患阿滋海默氏症。罹患晚發型阿滋海默氏之病患中約40%可發現至少一個E4對偶基因。對E4之遺傳篩檢仍未例行執行，因如何將此資訊用於治療攝生法中至今仍然未知。發明摘要本發明提供治療阿滋海默氏症之方法，其包含投服給含有零個ApoE4對偶基因（“非ApoE4攜帶者”）及阿滋海默氏症的病患有效之抗體攝生法，該抗體係特異結合A 冷之N端抗原決定部位。選擇性地，該抗體特異結合在a 召之殘基1 - 7間的抗原決定部位，或A 之殘基1 - 5間的抗原決定部位，或A0之殘基3-7間的抗原決定部位。選擇性地，該抗體係以約〇. 15毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。選擇性地，該劑量係每4至 16週投服。選擇性地，該劑量係每10至14週投服。選 201206479 擇性地’該劑量係每1 3週投服。選擇性地，該劑量爲約 0.5毫克/公斤至約1毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲約 0.5毫克/公斤至約2毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲約2 毫克/公斤。選擇性地’該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該方法亦涉及監控血管源性水腫，及選擇性地，投服給病患皮質類固醇以治療藉由監控偵測到之血管源性水腫〇本發明亦提供減緩含有零個ApoE4對偶基因（“非 Αρ ο E4攜帶者”）之病患認知衰退的方法，其包含在相對於未投服能特異結合A/3之N端抗原決定部位的抗體之對照組病患可有效地減緩病患之認知衰退的攝生法中投服給病患該特異結合A0之N端抗原決定部位的抗體；其中：該非ApoE4攜帶者病患及對照組病患已被診斷爲罹患輕微至中度阿滋海默氏症；且該認知衰退係藉由ADAS-COG 、：NTB、MMSE或CDR-SB測量。選擇性地，該抗體係以約0.15毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。選擇性地’該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該劑量爲約0.5毫克/公斤且該認知衰退係藉由ADAS-COG 測量。選擇性地’該劑量爲約2毫克/公斤且該認知衰退係藉由ADAS-COG測量。選擇性地，該認知衰退係藉由 NTB測量。選擇性地，該劑量爲約〇 · 5毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲約0 · 5毫克/公斤且該認知衰退係藉由 CDR測量。選擇性地，該劑量爲約〇· 5毫克/公斤且該認知衰退係藉由MMSE測量。選擇性地，該劑量爲約2毫

S -8- 201206479 克/公斤且該認知衰退係藉由MMSE測量。本發明亦提供減緩含有零個ApoE4對偶基因之病患（ “非Ap〇E4攜帶者”病患）腦容量減少的方法，其包含在相對於未投服能特異結合AyS之N端抗原決定部位的抗體之對照組病患可有效地減緩非AP〇E4攜帶者病患之腦容量減少的攝生法中投服給病患特異結合A /3之N端抗原決定部位的抗體；其中該非ApoE4攜帶者病患及對照組病患已被診斷爲罹患輕微至中度阿滋海默氏症。選擇性地，該抗體係以約〇· 1 5毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該劑量爲約0.5毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲約2毫克/公斤。選擇性地，該腦容量減少係藉由MRI 測量。本發明亦提供治療阿滋海默氏症之方法，其包含在可有效地維持能特異辨識Ay3之N端區的抗體之平均血清濃度介於約0.1微克/毫升至約60微克/毫升之攝生法中投服該抗體至非Ap〇E4攜帶者病患。選擇性地，該抗體之平均血清濃度範圍係在約0.4微克/毫升至約20微克/毫升。選擇性地，該抗體之平均血清濃度範圍係在約1微克/毫升至約5微克/毫升。選擇性地，病患體內抗體之最高血清濃度係低於約28微克抗體/毫升血清。選擇性地，最高血清濃度係在約4微克/毫升至約18微克/毫升。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。本發明亦提供治療阿滋海默氏症之方法，其包含在在 -9- 201206479 可有效達到至少爲450微微克/毫升之平均血漿A/3濃度的攝生法中投服給非Ap〇E4攜帶者病患能特異辨識A召之N端區的抗體。選擇性地，該平均血漿A々濃度係在約 6〇〇微微克/毫升至約3000微微克/毫升。選擇性地，該平均血漿A/S濃度係在約700微微克/毫升至約2 00 0微微克/ 毫升。選擇性地，該平均血漿A/3濃度係在約800微微克 /毫升至約1000微微克/毫升。 ^

本發明亦提供治療阿滋海默氏症之方法，其包含經由皮下途徑投服給罹患該疾病且含有一或二個ApoE4對偶基因複體之病患有效之抗體攝生法，該抗體能特異結合A 冷之N端抗原決定部位。選擇性地，該方法進一步包含監控血管源性水腫。選擇性地，該抗體之投服劑量爲 0.01-0.6毫克/公斤，投服頻率係介於每週至每個月。選擇性地’該抗體之投服劑量爲〇·〇5-〇.5毫克/公斤。選擇性地’該抗體之投服劑量爲0.05-0.25毫克/公斤。選擇性地’該抗體之投服劑量爲每週至每二週〇〇15_〇2毫克/公斤。選擇性地’該抗體之投服劑量爲每週至每二週〇.〇5_ 0.15毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週 0.05-0.07毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週0_06毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每二週0.1-0.15毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每個月0.1-0.3毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每個月0.2毫克/公斤。選擇性地，該抗體之投服劑量爲1 _4〇毫克且投服頻率係介於每週至每個月。選擇性地

S -10- 201206479 ’該抗體之投服劑量爲5-25毫克。選擇性地，該抗體之投服劑量爲2.5-15毫克。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週至每二週1-12毫克。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週至每二週2.5-10毫克。.選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週2_5-5毫克。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每週4-5毫克。選擇性地，該抗體之投服劑量爲每二週 7-10毫克。選擇性地，該方法進一步包含監控血管源性水腫。 ® 本發明進一步包含一種治療阿滋海默氏症之方法，其包含投服給罹患該疾病且含有一或二個ApoE4對偶基因之病患有效之抗體攝生法，該抗體能特異結合AA之N端抗原決定部位；投服給該病患皮質類固醇以治療因投服該抗體而產生之血管源性水腫。選擇性地，該方法進一步包含監控病患之血管源性水腫。選擇性地，相對於血管源性水腫出現前之投服劑量或頻率，血管源性水腫期間投服之 | 抗體劑量或頻率降低或去除。選擇性地，相對於血管源性水腫出現之前或期間的投服劑量或頻率，血管源性水腫解除後投服之抗體劑量或頻率增加。本發明進一步包含治療或有效預防病患族群特徵爲腦內AyS澱粉樣沈積之澱粉樣病變的方法，其包含：取決於存在於該等病患體內之ApoE的對偶基因型式對該病患族群之不同病患投服給不同之攝生法；其中該等攝生法中至少一者包含投服給病患爲抗A A抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗Α Θ抗體之作用劑。選擇性地，該不同攝生 -11- 201206479 法各別包含投服給病患爲抗A点抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A yS抗體之作用劑；該作用劑之劑量及/或作用劑之投服頻率及/或作用劑誘發澱粉樣沈積之清除反應的能力及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度降低及/或在下列病患中，相對於疾病進展之時間，治療之起始時間較早：（a)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個AP〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（b)相對於含有零個ApoE4對偶基因複體之病患，含有一個AP〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（c)相對於含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早。選擇性地，第一攝生法包含投服爲抗抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A 0抗體之作用劑或，第二攝生法缺少抗A/3抗體或誘發抗ΑΘ抗體之作用劑，且第一攝生法係投服給含有零個ApoE4對偶基因複體之病患，第二攝生法係投服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。選擇性地，第—攝生法包含投服第一抗A/3抗體，第二攝生法包含投服第二抗抗體且相對於第一抗體，該第二抗體與Fcr受體及/或Clq之結合降低，該第一抗體係投服給含有零個AP〇E4對偶基因複體之病患，第二攝生法係投服給含有—或二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。選擇性地，該第二抗體之恆定區中具有一或多個能 •12-

S 201206479 降低與Fcr受體及/或Clq結合之突變，且該突變並不存在於第一抗體中。選擇性地，該一或多個突變係位於重鏈恆定區中選自234、235、236或237(EU編號）之位置。選擇性地，該一或多個突變爲位置234、235及237之突變。選擇性地，該一或多個突變爲L234A、L235A及G237A 。選擇性地，該恆定區之同型爲人IgG 1。選擇性地，該恆定區之同型爲人IgG2或IgG4。選擇性地，該第一抗體爲貝平紐如單抗，且第二抗體爲貝平紐如單抗之L2 3 4A、 L235A、G237A變異體。選擇性地，第一攝生法包含投服第一抗AyS抗體且第二攝生法包含投服第二抗ΑΘ抗體，該第一抗體爲人IgG 1同型且第二抗體爲人IgG4同型，該第一抗體係投服給含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第二抗體係投服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。於某些方法中，該疾病爲阿滋海默氏症。某些方法進 —步包含測定存在於病患體內之ApoE對偶基因型。選擇性地，不同攝生法之差異在於作用劑之投服劑量。選擇性地，該不同攝生法之差異在於作用劑之投服頻率。選擇性地，該不同攝生法之差異在於投服之作用劑類型〇選擇性地，在該作用劑之劑量及/或投服該作用劑之頻率及/或該作用劑誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力對 (a)相對於含有一個ApoE4對偶基因之病患，含有二個 AP〇E4對偶基因之病患；及/或（b)相對於含有零個Ap〇E4 -13- 201206479 對偶基因複體之病患，含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患；及/或（c)相對於含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患係減低。選擇性地，對含有一或二個Ap〇E4對偶基因之病患所投服之作用劑的劑量及/或作用劑之投服頻率係低於對含有零個 Ap〇E4對偶基因之病患。選擇性地，對含有一或二個 Ap〇E4對偶基因之族群病患係投服0.15-1毫克/公斤之與 A冷之殘基1-11間特異結合的抗體劑量，且對含有零個 Ap〇E4對偶基因之族群病患係投服0.5-2毫克/公斤之與A /3之殘基1-11間特異結合的抗體劑量。選擇性地，對含有一或二個AP〇E4對偶基因之族群病患所投服之作用劑劑量係低於對含有零個AP〇E4對偶基因之病患直到出現並消除血管源性水腫，且之後仍投服相同劑量之作用劑。選擇性地，含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患投服作用劑之頻率低於含有零個Ap〇E4對偶基因之病患，直到出現並消除血管源性水腫且之後仍投服相同劑量之作用劑》選擇性地，含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患所投服之抗體相對於貝平紐如單抗於誘發清除澱粉樣沈積之反應上的能力係降低。選擇性地，該方法進一步包含監控族群中至少某些病患之血管源性水腫。選擇性地，該監控係藉由MRI進行。選擇性地，含有零個Ap〇E4對偶基因之族群病患並非藉由MRI進行監控。選擇性地，該作用劑係結合A冷之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體。選擇性地，該抗體

S -14- 201206479 具有人IgGl同型。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地’相對於貝平紐如單抗，該作用劑誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力係降低。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗之L234A、L23 5A、G23 7A變異體。選擇性地，其中含有一或二個ApoE4對偶基因之病患係投服1 -3個人化266抗體劑量，再投服貝平紐如單抗之繼續劑量’而含有零個Ap〇E4對偶基因之病患係投服相同總數之劑量，但全部均爲貝平紐如單抗。於某些方法中，該抗體爲人化266抗體。選擇性地，含有一或二個 Ap〇E4對偶基因之病患係投服人化266抗體，而含有零個 Ap〇E4對偶基因之病患係投服貝平紐如單抗。本發明進一步提供使用爲抗抗體之作用劑或能誘發抗A/3抗體之作用劑監控對特徵爲腦內澱粉樣沈積之疾病進行治療或預防之病患族群之方法，該方法包含：於該族群之不同病患，針對血管源性水腫進行不同之監控攝生法，其中較高之監控頻率係針對：（a)相對於含有零個AP〇E4對偶基因複體之病患，含有二個AP〇E4對偶基因複體之病患；（b)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個ApoE4對偶基因複體之病患；及/或 (c)相對於含有一個AP〇E4對偶基因複體之病患，含有二個 Ap〇E4對偶基因複體之病患。選擇性地，該疾病爲阿滋海默氏症。選擇性地，該方法進一步包含測定存在於族群中各別病患體內之ApoE對偶基因型。選擇性地，該監控係藉由腦部攝影。選擇性地，該監控係藉由MRI。 -15- 201206479 選擇性地，含有一個ApoE4對偶基因之病患被監控之頻率比含有零個ApoE4對偶基因之病患爲高。選擇性地’ 含有二個Ap〇E4對偶基因之病患被監控之頻率比含有一個 ApoE4對偶基因之病患爲高。選擇性地，含有一個 ApoE4對偶基因之病患被監控之頻率比含有零個 ApoE4 對偶基因之病患爲高。選擇性地，含有零個ApoE4對偶基因之病患並非藉由MRI監控血管源性水腫。本發明進一步提供一種治療或有效預防病患之特徵爲腦內A0澱粉樣沈積之疾病之方法，其包含投服給含有至少一個Ap〇E4對偶基因之病患能拮抗A/3之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體的作用劑或能誘發該抗A々抗體之作用劑，以及藉由MRI監控該病患之血管源性水腫。選擇性地，該作用劑爲貝平紐如單抗。選擇性地，該作用劑爲貝平紐如單抗之L234A、L235A、G237A變異體。本發明進一步提供一種治療或有效預防含有至少一個 Ap〇E4對偶基因之病患特徵爲腦內A冷澱粉樣沈積之疾病的方法，其包含在血管源性水腫出現前投服給病患第一攝生法，且在血管源性水腫消除後投服第二攝生法；其中該第一和第二攝生法各別包含投服爲抗AyS抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A /3抗體之作用劑；且相對於第二攝生法，於第一攝生法中，該作用劑之劑量及/或作用劑之投服頻率及/或作用劑清除澱粉樣沈積之能力係降低》選擇性地，該疾病爲阿滋海默氏症。選擇性地，該病患含有一或二個Ap〇E4對偶基因。選擇性地，該第一和第二 201206479 攝生法各別包含投服給病患能特異結合A ^之殘基1 - i i 間的抗原決定部位之抗體，且在血管源性水腫出現前所投服之抗體劑量爲0.15-1毫克/公斤，在血管源性水腫解除後爲0.5-2毫克/公斤。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗之L2 3 4A、L23 5 A、 G23 7A變異體。本發明進一步提供治療或有效預防病患之阿滋海默氏症之方法，其包含投服給含有一或二個ApoE4對偶基因之病患能特異結合A沒之殘基1 -1 1間的抗原決定部位之抗體’其中該抗體係在其中將0.1 5-1毫克/公斤之抗體分成四次經由靜脈內途徑投服的攝生法中投服，或係在可產生相等之平均血清濃度或曲線下面積的投服劑量、頻率及途徑中投服。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該劑量爲0.5毫克/公斤。本發明進一步提供治療或有效預防病患之阿滋海默氏症的方法，其包含投服給含有零個Ap〇E4對偶基因之病患能特異結合Α Θ之殘基1 -1 1間的抗原決定部位之抗體 ’其中該抗體之劑量係分成四次經由靜脈內途徑投服0.5-2毫克/公斤，或爲能產生相等之平均血清濃度或曲線下面積的投服劑量、頻率及途徑。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗之L234A、L23 5A、G237A變異體。本發明進一步提供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症之方法，其包含投服給病患能特異結合病患體內A 召之殘基1 - 1 1間的抗原決定部位之抗體，其中，係對投 -17- 201206479 服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患爲0.15-1 毫克/公斤之能特異結合之殘基1-1 1間的抗體劑量，且投服給含有零個Ap〇E4對偶基因之族群病患爲0.5-2毫克/公斤之能特異結合A /3之殘基1 -1 1間的抗體劑量，且在含有零個Ap〇E4對偶基因之病患中的平均劑量較高。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗之L234A、L235A、G237A變異體。選擇性地，在含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患中的抗體劑量爲0.5毫克/公斤，而在含有零個ApoE4對偶基因之族群病患中的抗體劑量爲2毫克/公斤。本發明進一步提供ApoE複體數測量法之用途係從不同攝生法中選擇可用於治療或預防特徵爲病患腦內澱粉樣沈積之疾病者，其中該等不同攝生法各別包含投服爲抗A 沒抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A /3抗體之作用劑，且該作用劑之劑量及/或作用劑之投服頻率及/或作用劑誘發澱粉樣沈積之清除反應的能力及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度降低及/或在投服給下列病患之攝生法中，治療之起始時間早於疾病之進展：（a) 相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個 Ap〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或 (b)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個AP〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/ 或（c)相對於含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有

S -18- 201206479 二個Ap〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早。本發明進一步提供選擇用於治療或預防特徵爲病患腦內澱粉樣沈積之疾病的攝生法之方法，該方法包含測定存在於病患中之AP〇E4對偶基因的數目；取決於存在於該等病患體內之AP〇E4的對偶基因的數目選擇不同之攝生法，其中該等不同攝生法各別包含投服爲抗ΑΘ抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A万抗體之作用劑且該作用劑之劑量及/或作用劑之投服頻率及/或作用劑誘發澱粉樣沈積之清除反應的能力及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度降低及/或在下列病患中，相對於疾病進展之時間，治療之起始時間較早：（a)相對於含有零個 Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（b)相對於含有零個ApoE4對偶基因複體之病患，含有一個ApoE4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（c)相對於含有 —個ApoE4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早。本發明進一步提供ApoE複體數測量法於製造用於治療阿滋海默氏症之藥物的用途，其中該藥物包含抗A沒抗體或誘發抗A/3抗體之作用劑。本發明進一步提供至少一種爲抗AyS抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗A ^抗體之作用劑於製造用於治療或預防特徵爲病患腦內澱粉樣沈積之疾病的藥物之用途， -19- 201206479 該治療或預防方法係藉由取決於存在於該等病患體內之 ApoE對偶基因的數目而選出之不同攝生法進行，其中該等不同攝生法包含投服給病患作用劑且該作用劑之劑量及 /或作用劑之投服頻率及/或作用劑誘發澱粉樣沈積之清除反應的能力及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度降低及/或在下列病患中，治療之起始時間早於疾病之進展：（a)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（b)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個ApoE4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（c)相對於含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早。本發明進一步提供治療或有效預防病患族群中特徵爲腦內澱粉樣沈積的產澱粉樣沈積疾病之方法，該方法包含取決於存在於該等病患體內之ApoE對偶基因型對該病患群之不同病患投服給不同之攝生法；其中該不同攝生法各別包含投服爲抗Α Θ抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗ΑΘ抗體之作用劑；該作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度在下列病患中降低：（a)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患的濃度降低，及/或（b)相對於含有零個 201206479

ApoE4對偶基因複體之病患’含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患的濃度降低，及/或（c)相對於含有一個Ap〇E4 對偶基因複體之病患，含有二個AP〇E4對偶基因複體之病患的濃度降低。本發明進一步提供治療或有效預防病患群中特徵爲腦內A/3澱粉樣沈積的產澱粉樣沈積疾病之方法，該方法包含：測定病患之ApoE4狀態；取決於存在於該等病患體內之ApoE的對偶基因型對該病患群之不同病患投服給不同之攝生法；其中該等不同攝生法各別包含投服爲抗A沒抗體之作用劑或於投服給病患能誘發抗Α Θ抗體之作用劑 ;且該作用劑之劑量及/或作用劑之投服頻率及/或作用劑誘發澱粉樣沈積之清除反應的能力及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的平均血清濃度及/或作用劑或由該作用劑誘發之抗體的最大血清濃度降低及/或在下列病患中，相對於疾病進展之時間，治療之起始時間較早：（a)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4 對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或（b)相對於含有零個 Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個 AP〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早，及/或 (〇相對於含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患的治療起始時間較早。本發明進一步提供10D5抗體之人化型式，其包含具 L2 34A、L2 35A及G237A突變之人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。選擇性地，該同型爲人IgG 1、 -21- 201206479

IgG2或IgG4，宜爲IgGl。該10D5雜交株係在2003年4 月8日存放於ATCC，編號PTA-5129。ATCC係位於大學大道10801號，馬納薩斯，弗吉尼亞州201 10(10801 University Blvd·，Manassas, VA20110) 〇本發明進一步提供12A11抗體之人化型式，其包含 SEQ ID NO: 10之人化輕鏈可變區及SEQ ID NO: 11之人化重鏈可變區，以及具L234A、L23 5A及G237A突變之人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。選擇性地，該同型爲人IgGl、IgG2或IgG4，宜爲IgGl。本發明進一步提供3 D6抗體之人化型式，其包含具 L2 3 4A、L2 35A及G2 37A突變之人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。該3D6雜交株係在2003年4月 8日存放於ATCC，編號PTA-5130。ATCC係位於大學大道1 0 80 1號，馬納薩斯，弗吉尼亞州201 10。選擇性地，該同型爲人IgGl、IgG2或IgG4，宜爲IgGl。該3D6雜交株係在2003年4月8日存放於ATCC中。本發明進一步提供經分離之人化抗體，其包含SEQ ID NO : 2之成熟輕鏈可變區序列及SEQ ID NO : 3之成熟重鏈可變區序列，以及具L234A、L2 3 5A及G23 7A突變之IgG同型的人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。選擇性地，該同型爲人IgGl同型。本發明進一步提供經分離之12B4抗體的人化型式，其中該12B4抗體之特徵爲SEQ ID NO: 31之成熟輕鏈可變區序列及SEQ ID NO : 32之成熟重鏈可變區序列，以 201206479 及具L23 4A、L23 5A及G23 7A突變之IgG同型的人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。選擇性地，該同型爲人IgGl同型。本發明進一步提供治療或有效預防特徵爲病患腦內A 召澱粉樣沈積的疾病之方法，其包含投服給病患人化抗體之有效攝生法；其中該人化抗體包含SEQ ID NO: 2之成熟輕鏈可變區序列及SEQ ID NO : 3之成熟重鏈可變區序列，以及具L234A、L23 5A及G23 7A突變之IgG同型的人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。選擇性地，該病患含有至少一 ApoE對偶基因。選擇性地，該劑量爲0.15-1毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲0.15-2毫克 /公斤。選擇性地，該方法進一步包含藉由MRI監控血管源性水腫。選擇性地，該方法係用於治療病患群且投服給族群中不同病患之攝生法並非取決於存在於病患體內之 AP〇E4對偶基因的數目。本發明進一步提供有效預防特徵爲病患腦內A/3澱粉樣沈積的疾病之方法，其包含投服爲抗ΑΘ抗體之作用劑或在投服給病患時能誘發抗Α Θ抗體之作用劑的有效攝生法，其中該病患含有至少一個Ap〇E4對偶基因。選擇性地，該病患含有至少二個Ap〇E4對偶基因。選擇性地，該病患無症狀。選擇性地，該病患之簡易心智試驗積分 (mini-mental test score)爲27或更高。選擇性地，該病患之簡易心智試驗積分爲20-26。選擇性地，該病患至少爲 6〇歲。選擇性地，該方法進一步包含測定該病患之 -23- 201206479

ApoE4對偶基因的數目。本發明進一步提供治療或有效預防特徵爲病患腦內A 冷澱粉樣沈積的疾病之方法，該方法包含：投服給病患第 —攝生法，其包含投服爲抗A/3抗體之作用劑或能誘發抗 A冷之抗體的作用劑；監控病患之血管源性水腫；若未出現血管源性水腫的則維持第一攝生法；若出現血管源性水腫則投服給病患第二攝生法，其中該第二攝生法係降低作用劑之劑量及/或降低作用劑之頻率，及/或降低結合f C r 受體及/或Clq之能力的不同作用劑或缺乏抗AyS抗體或誘發抗A0抗體之作用劑；其中至少在血管源性水腫之期間內維持該第二攝生法。選擇性地，第一攝生法中之作用劑爲能特異結合在Α Θ之殘基I · 1 1間的抗原決定部位之抗體。選擇性地，該第一攝生法包含投服第一抗A/3抗體，且第二攝生法包含投服第二抗A/3抗體，相對於第一抗體，第二抗體結合Fcr受體及/或Clq之能力降低。選擇性地，該第一抗體爲貝平紐如單抗，且第二抗體爲貝平紐如單抗之L234A、L23 5A及G23 7A變異體。本發明進一步提供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症之方法，其包含投服一種抗體，該抗體能特異結合 A/3之殘基1-11間的抗原決定部位且在恆定區中具有使其與病患Fc r受體及/或C 1 q之結合能力降低的突變，其中不論病患之AP〇E4對偶基因數目，該投服給各病患之抗體劑量及/或頻率皆相同。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗的L2 34A、L2 35A及G237A變異體。選擇性地，該 201206479 方法進一步包含監控病患之血管源性水腫的步驟》本發明進一步提供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症的方法，其包含：投服爲抗AyS抗體之作用劑或在投服給族群中某些病患時能誘發抗A /3抗體之作用劑，其中該族群中含有零個ApoE4對偶基因之病患接受該作用劑，且族群中含有二個Ap〇E4對偶基因之病患未接受該作用劑。選擇性地，族群中含有一個AP〇E4對偶基因之病患未接受該作用劑。選擇性地，該抗體係以約0.1 5毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。.選擇性地，該劑量爲約 0.5毫克/公斤。選擇性地，該劑量爲約2毫克/公斤。選擇性地，該腦容量減少係藉由MRI測量。本發明進一步提供經分離之抗體，其包含IgGl同型之人重鏈恆定區，其中在位置234、23 5及23 7(EU編號）之胺基酸各爲丙胺酸。選擇性地，人重鏈恆定區中無其他來自位置230-240或315-325之胺基酸被非天然存在於人 IgGl恆定區中該位置處之胺基酸佔據。選擇性地，人重鏈恆定區中除了位置23 4、23 5及23 7外無胺基酸被非天然存在於人IgGl恆定區中該位置處之胺基酸佔據。選擇性地，該人重鏈恆定區包含CH1區、絞鏈區、CH2區及 CH3區。選擇性地，該人重鏈恆定區具有包含SEQ ID NO :66或SEQ ID NO : 67之胺基酸序列或任一此等序列之同種抗原免疫球蛋白。選擇性地，該人重鏈恆定區具有包含SEQ ID NO : 66或SEQ ID NO : 67之胺基酸序列。選 -25- 201206479 擇性地，該抗體爲純人抗體。選擇性地，該抗體爲人化抗體。選擇性地，該抗體爲嵌合型抗體。【發明內容】定義 “免疫球蛋白”或“抗體”（此處交換使用）一詞係指具有由二條重鏈及二條輕鏈所組成之基本的四-多肽鏈構造的抗原結合蛋白，該鏈係，例如：藉由鏈間雙硫鍵（其具有能特異結合抗原之能力）穩定。重鏈及輕鏈二者係摺疊成結構區。“結構區”一詞係指包含肽環（如：包含3 至4個肽環）之重鏈或輕鏈多肽的球形區，該肽環係藉由，例如：打褶薄板及/或鏈間之雙硫鍵穩定。此處進一步稱結構區爲“恆定”或“可變”，此係取決於在“恆定” 結構區之情況中，不同類別成員之結構區內之序列變化相對匮乏，或者，在“可變”結構區之情況中，不同類別成員之結構區內具有明顯之變化。輕鏈上之“恆定”結構區亦可稱爲“輕鏈恆定區”、“輕鏈恆定結構區”、“CL ”區或“ CL ”結構區。重鏈上之“恆定”結構區亦可稱爲“重鏈恆定區”、“重鏈恆定結構區” 、“ CH ”區或 “CH”結構區。重鏈恆定區亦通解爲統指存於全長恆定區中之結構區，在IgG同型抗體之情況中，其爲CH1、絞鏈、CH2及CH3結構區。輕鏈上之“可變”結構區亦可稱爲“輕鏈可變區”、“輕鏈可變結構區”、“ VL”區或“VL"結構區。重鏈上之“可變”結構區亦可稱爲“

S -26- 201206479 重鏈可變區”、“重鏈可變區”、“ VH”區或“ VH”結構區。 ‘‘區’’ 一詞係指抗體鏈之一部分或部份並包括此處所定義之®定或可變結構區，以及該結構區之較不連續部分 •例如：輕鏈可變結構區或區包括散置在如此處所定義之 “框構區”或“ FRs”間的“互補決定區”或“ CDRs” 。提及之抗體或免疫球蛋白包括完整抗體及其結合片段 ^ 。通常’片段與其衍生來源之完整抗體競爭特異結合抗原。片段包括分開之重鏈及輕鏈、Fab、Fab’、F(ab’）2、 Fabc及Fv。分開之鏈包括NANOBODIESTM(即，經分離之來自駱駝或大羊駝（llamas)之抗體重鏈的VH片段，其係經選擇性地人化）。經分離之VH片段亦可自其他來源（諸如人抗體）取得。片段係藉由重組DNA技術製造或經由酶催化性或化學性方法將完整之免疫球蛋白分開來製造。 “抗體” 一詞亦包括一或多個與其他蛋白質經化學結合或 ^ 以融合蛋白之型式表現的免疫球蛋白鏈。“抗體”一詞亦包括雙特異性抗體。雙特異性抗體或雙功能抗體爲具有二種不同重/輕鏈對及二個不同之結合部位的人工雜合抗體。雙特異性抗體可藉由多種不同方法製造，包括雜交株融合或連接 Fab'片段（見，如 Songsivilai & Lachmann，C/i«. EXP. Immunol. 79:3 15-321 (1990); Kostelny et al. ,J. Immunol. 148，1547-1553(1992))。抗體之“特異性結合”意指該抗體對抗原或較佳之抗原決定部位顯示出可察知之親和力，較佳地，不顯示明顯 -27- 201206479

之交叉反應性。可察知或較佳之結合包括以至少1 0δ、1 ο7 、ΙΟ8、Η^ΝΓ1或ΙΟ^ΝΓ1之親和力結合。較ΙΟ7!^1高之親和力（宜高於Ιί^ΝΓ1)更佳。此處所列舉之那些數値中間的數値亦欲包含在本發明之範圍內且較佳之結合親和力可以一範圍之親和力表明，例如：1〇6至ΙΟ^Μ·1，宜爲1〇7 至ΙΟ^ΝΓ1，更宜爲108至ΙΟΗΜ·1。 “不顯示明顯之交叉反應性”的抗體爲不以可被察知之方式結合至不利之實體 (如：不利之蛋白性實體）的抗體。例如：能特異結合A召之抗體將以可察知之方式結合A沒，但不與非A沒蛋白質或肽（如：包含在斑塊中之非A/3蛋白或肽）明顯反應。例如：特異於較佳之抗原決定部位的抗體將不會與位在相同蛋白質或肽上之遠端抗原決定部位明顯交叉反應。特異性結合可根據任何本技藝所認可之用於測定這類結合的方式測定。較佳地，特異性結合係根據Scatchard分析及/或競爭性結合分析測定。

“人化免疫球蛋白”或“人化抗體”一詞係指包括至少一人化免疫球蛋白或抗體鏈（即，至少一人化輕鏈或重鏈）的免疫球蛋白或抗體。“人化免疫球蛋白鏈”或“人化抗體鏈”（即，“人化免疫球蛋白輕鏈”或“人化免疫球蛋白重鏈”）一詞係指具有一可變區及進一步包括恆定區（如：在輕鏈之情況中爲至少一恆定區或其部分，在重鏈之情況中，宜爲三個恆定區）之免疫球蛋白或抗體鏈（即，分別之輕鏈或重鏈），該可變區包括實質上源自人免疫球蛋白或抗體之可變框構區（亦稱爲可變區框構）及實質上 -28-

S 201206479 源自非人免疫球蛋白或抗體（如：齧齒類，選擇性地，老鼠）之互補決定區（CDRs)(如，至少一CDR，宜爲二個 CDRs ’更宜爲三個CDRs)。 “人化可變區”（如：“人化輕鏈可變區”或“人化重鏈可變區”）一詞係指包括實質上源自人免疫球蛋白或抗體之可變框構區（亦稱爲可變區框構）及實質上源自非人免疫球蛋白或抗體之互補決定區 (CDRs)的可變區。 _ “實質上源自人免疫球蛋白或抗體”或“實質上爲人類” 一詞係指當與人免疫球蛋白或抗體胺基酸序列比對以進行比較時，該區與人框構區或恆定區序列共享至少80-9 〇 % (如：至少9 0 %)’宜爲9 0 - 9 5 %，更宜爲9 5 - 9 9 %之同 —性（即’局部序列同一性）以容許，如：保存性取代、— 致序列取代、種系取代、回復突變，等。引入保存性取代、一致序列取代、種系取代、回復突變，等通常稱爲將人化抗體或鏈“最佳化”。“實質上源自非人免疫球蛋白或 φ 抗體”或“實質上爲非人類” 一詞係指具有與非人類有機體（如：非人類哺乳動物）之免疫球蛋白或抗體序列至少爲 80-95%，宜爲 90-95%’ 更宜爲 96%、97%、98%或 99%相 —致的免疫球蛋白或抗體序列。因此’人化免疫球蛋白或抗體，或人化免疫球蛋白或抗體鏈之所有區或殘基（除了可能之CDRs外）實質上與一或多種天然人免疫球蛋白序列之對應區或殘基相一致。“ 對應區”或“對應殘基，，一詞係指當將第一與第二序列理 e 想比對以進行比較時，在第二胺基酸或核苷酸序列上，佔 -29- 201206479 據與第一胺基酸或核苷酸序列上之區或殘基相同（即，相等）位置處的區或殘基。 “人化免疫球蛋白”或“人化抗體”一詞不欲包含如下文中定義之嵌合型免疫球蛋白或抗體。雖然人化之免疫球蛋白或抗體之構造爲嵌合型（即，所包含之區係源自超過一種以上之蛋白質物種）’其包括未在如此處定義之嵌合型免疫球蛋白或抗體中發現之額外特性（即，可變區包含捐贈者CDR殘基及接受者框構區殘基）。 “嵌合型免疫球蛋白或抗體”一詞係指其可變區源自第一物種且其恆定區源自第二物種之免疫球蛋白或抗體。嵌合型免疫球蛋白或抗體可藉由，例如：基因工程，從屬於不同物種之免疫球蛋白基因節段建構》 “抗原”爲抗體所特異結合之實體（如：蛋白性實體或肽）。 “抗原決定部位”或“抗原決定簇”一詞係指在抗原上，免疫球蛋白或抗體（或彼等之抗原結合片段）所特異結合之部位。抗原決定部位可從連續胺基酸或藉由蛋白質之三級摺疊而並列之非連續胺基酸形成。自連續胺基酸形成之抗原決定部位在暴露於變性溶劑時通常被保存，而藉由三級摺疊而形成之抗原決定部位在以變性溶劑處理時通常喪失。抗原決定部位在獨特之空間構形中通常包括至少3 、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14 或 15 個胺基酸。測定抗原決定部位之空間構形的方法包括，例如：X-光結晶學及二維核磁共振。見，如：五; θ -30- 201206479

Protocols in Methods in Molecular Biology, Vo 1.66, G.E. Morris, Ed.(1996) o 辨識相同抗原決定部位之抗體可在能顯示抗體阻斷另一抗體結合標靶抗原之能力的簡單免疫分析中鑑定，即，競爭性結合分析。競爭性結合之測定係在其中該測試之免疫球蛋白可抑制參考抗體特異結合至共通抗原（諸如A冷）的分析中進行。已知多種類型之競爭性結合分析，例如：固相直接或間接放射免疫分析（RIA)、固相直接或間接酶免疫分析（EIA)、三明治競爭分析（見，Stahli ei α/., Me ί A σ 心 ί·η 五9:242(1983));固相直接生物素-抗生物素蛋白 EIA(見，Kirkland ei α/· ，>/. 137: 36 1 4( 1 98 6))、固相直接標記分析、固相直接標記三明治分析（見 ’ Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press(1988))；利用 1-125 標記之固相直接標記RIA(見’ Morel ei α/.，Mo/ /wwwno/. 25 ( 1 ):7( 1 98 8));固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA(見， Cheung ei αΛ，FzVo/og_y 176: 546(1990));及直接標記 RIA(見，Moldenhauer " α/_, *Scani/· */. /mmwno/· 32:77 ( 1 990)。通常，這類分析涉及使用結合在固體表面之純化抗原或攜帶未標記之測試免疫球蛋白或標記之參考免疫球蛋白的細胞。競爭性抑制作用係藉由在測試之免疫球蛋白的存在下測定結合在固體表面或細胞上之標記量來測量。通常，該測試之免疫球蛋白係過量存在。通常，當競爭抗體過量存在時，其將抑制參考抗體與共通抗原之特異結合 -31- 201206479 至少 5 0 - 5 5 %、5 5 - 6 0 %、6 0 - 6 5 %、6 5 - 7 0 %、7 0 - 7 5 % 或更多 ο 亦可藉免疫細胞（例如：Β細胞及/或Τ細胞）辨識抗原決定部位。細胞性辨識抗原決定部位之作用可藉由測量抗原倚賴性增生之玻管內分析測定，如藉由3Η-胸苷之倂入、細胞活素之分泌、抗體之分泌或抗原倚賴性滅殺作用（細胞毒性Τ淋巴球分析）測定。示範之抗原決定部位或抗原決定簇可在人澱粉樣先驅蛋白（ΑΡΡ)中找到，但宜在ΑΡΡ之Α冷肽中找到。ΑΡΡ同型有數種，例如：APP 6 9 5、APP751及APP77Q。APP內之胺基酸係根據APP77·1同型之序列編號（見，如：GenBank編號P05 06 7)。A召肽之序列及其與APP先驅蛋白之關係說明於 Hardy，等，TINS 20，155-158(1997)之第 1 圖中。例如：A石42具下列序列： H2N-Asp-Ala-G!u-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Va!-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-OH (SEQ ID NO: 1). 除非從內容中另外顯明，所指之A /3亦包括上述序列之天然對偶基因變異，尤其是那些與遺傳疾病相關者，諸如極地（Arctic)突變、E693G、APP770 編號。A/3 41、A冷 40及A/339與Α)9 42之差別爲分別從C端省略Ala、

Ala-lie及Ala-Ile-Val。A冷43與A冷42之差別爲C·端存有蘇胺酸殘基。如此處所描述之較佳之抗原決定部位或抗 -32-

S 201206479 原決定簇係位在A/?肽之N端間且包括A/3之胺基酸l-ii 間的殘基，宜爲來自 AyS 42之殘基1-1〇、1-3、1-4、1-5 、1-6、1-7或3-7。其他較佳之抗原決定部位或抗原決定簇包括A/3之殘基2-4、5、6、7或8，AjS之殘基3-5、6 、7、8或9或A；8 42之殘基4-7、8、9或10。其他較佳之抗原決定部位出現在如下述之中央或C端區。 A /3之N端抗原決定部位意指殘基1 - 1 1間的抗原決定部位。C端區內之抗原決定部位意指殘基29-43間之抗原決定部位，中央區內之抗原決定部位意指殘基12-28間的抗原決定部位。

“可溶性”或“分解”之A A係指非聚集或崩解之A /3多肽。 “不可溶性” A 0係指聚集之A沒多肽，如：藉由非共價鍵結合在一起之。咸信，A0 (如：A/3 42)至少部分係由於肽之C端（APP之跨膜結構區的一部分）存在疏水性殘基而聚集。一種製備可溶性A A之方法係以音波處理，將凍乾之肽溶解在純DMSO中。將所產生之溶液離心以去除任何不溶之顆粒。 “ Fc區”一詞係指IgG抗體之C端區，尤其是該 IgG抗體之重鏈C端區。雖然IgG重鏈之Fc區的界限可稍有變化，Fc區通常係定義爲約從胺基酸殘基Cys226橫跨至IgG重鏈的羧基端。 “效應子功能” 一詞係指存在於抗體（如：IgG抗體）之Fc區中的活性，其包括，例如：抗體結合效應子分子（ -33- 201206479 諸如補體及/或Fc受體）之能力，其可控制抗體之數種免疫功能，諸如效應子細胞活性、溶胞作用、補體促成之活性、抗體清除作用及抗體之半衰期。效應子功能亦可被絞鏈區中之突變影響。 “效應子分子”一詞係指可結合抗體（如：IgG抗體）之Fc區的分子，铒括補體蛋白及/或Fc受體。 “效應子細胞”一詞係指通常可經由表現在該效應子細胞表面上之Fc受體而結合抗體（如：IgG抗體）之Fc部分的細胞，包括，但不限於：淋巴球，如：抗原呈現細胞及T細胞。除非另外指明’ “Kabat編號”一詞係定爲如Kabat ，等(Sequences of Proteins of Immunological Interest， 5th Ed.Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda，Md.(1991))(其納爲此文之參考資料）中之殘基編號。 “Fc受體”或“FcR” 一詞係指結合抗體之Fc區的受體。結合抗體（如：IgG抗體）之Fc區的典型Fc受體包括，但不限於：Fc r RI、Fc r RII和Fc r RIII子類別之受體，包括這些受體之對偶基因變異體及這些受體之替換剪接型式。Fc 受體可在 Ravetch and Kinet，Annu.Rev.

Immunol 9:457-92(1 991 ); Capel et al., Immunomethods 4 : 2 5 - 3 4 (1 9 9 4);以及 d e H a as e ί a/.，J . L ab. C1 i n . M ed. 126:330-41(1995)中檢閱。 “佐劑”一詞係指當與抗原一起投服時可擴大及/或

S •34- 201206479 重新導引對抗原之免疫反應，但當單獨投服時不會對抗原產生免疫反應之化合物。佐劑可藉由數種機制擴大免疫反應，包括淋巴球增員、刺激B及/或T細胞以及刺激巨噬細胞。曲線下面積（AUC)爲血漿中藥物濃度對時間繪圖中之曲線下的面積。在個別病患中，曲線下面積代表根據該病患之曲線下面積。在病患族群中。曲線下面積代表族群中不同病患在一段彼此相當之期間內的平均曲線下面積。個別病患中之平均血清濃度代表在一段期間內之抗體 (或由活性劑誘發之抗體）平均濃度。病患族群中之平均血清濃度代表個別病患在一段彼此相當之期間內之平均血清濃度的平均値。個別病患中之最高血清濃度代表在治療期間內之最高抗體（或由活性劑誘發之抗體）濃度。病患族群中之最高血清濃度代表在族群中之個別病患間，該抗體或經誘發之抗體的最高濃度平均値。簡單地說，“ApoE4攜帶者詞有時係指含有一或兩個ApoE4對偶基因之病患，而“Ap〇E4非攜帶者”，Ap〇E4 非-攜帶者“或”非ApoE4攜帶者“係指含有零個ApoE4對偶基因之病患。發明之詳細說明 I.槪論本發明提供阿滋海默氏症及類似疾病之免疫治療法， -35- 201206479 其中該投服給病患之攝生法係取決於病患之ApoE基因型。該方法係部分根據（1)觀察到某些免疫治療攝生法導致含有一個 ApoE4對偶基因（E4)之病患（更常地，含有兩個 E4對偶基因之病患）較缺乏E4對偶基因之病患較常出現血管源性水腫（VE)，及/或（2)初步觀察到：與非ApoE4攜帶者病患相比較時，在Ap〇E4攜帶者病患中之差別療效，或與接受少於6個劑量之病患相比較時，接受至少6個劑量之病患中之差別療效。硏究結果亦顯示血管源性水腫的病例頻率隨著劑量頻率和量之增加而增加。雖然本發明之實行並非依賴於對機制之理解，其係假設血管源性水腫與AP〇E4基因型之關聯可能來自於沉積較多之Αβ澱粉樣沈積，因此，當抗體結合沈積物時可誘發較強之清除反應。清除澱粉樣沉積可能經由數種機制中的任一種或全部而導致血管源性水腫。自血管壁清除澱粉樣（血管澱粉樣）可能會導致血管洩漏；血管周圍空間中較多之澱粉樣可能會導致組織間質液較慢排出及/或從血管內腔淨流入腦實質之澱粉樣流增加可能導致滲透壓梯度。雖然血管源性水腫的作用通常是無症狀且爲可逆性，並且亦不會阻礙進一步之治療，然而，最好調整治療攝生法，以減少發生血管源性水腫之風險。因此，本發明提供其中根據病患之Α ρ ο Ε狀態而改變免疫治療攝生法（例如：調整吞噬反應）之方法。雖然吞噬反應可用於清除澱粉樣沈積，但可選擇性地控制此反應，以避免血管源性水腫。一般而言，含有兩個E4對偶基因

S -36- 201206479 之病患（其最易受血管源性水腫影響）係以較低劑量或較低頻率投服與含有零個E4對偶基因之病患所投服者相同的作用劑，或係投服較不易誘發吞噬反應之不同作用劑或透過替代之投服模式（例如：皮下投服）來接受該作用劑。含有一個E4對偶基因之病患可依含有零或兩個E4對偶基因之病患的相同方式治療，或可爲其定制治療法，其中該投服之劑量及/或頻率係介於投服給含有零或兩個Ap〇E4 對偶基因之病患。

II. · ApoE

人 ApoE 之 UniProtKB/Swiss-Prot 力口入編號爲 P02649 。E2、E3 和 E4 變異體描述於 Genomics 3:373-379(1988)， J. Biol. Chem. 2 5 9 : 5 4 9 5 - 5 4 9 9 ( 1 9 8 4);及 Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.82:3445-3449(1 985)中。E4 型與晚發型阿滋海默氏症的關聯已報導於，例如：Corder，Science 261，921-3( 1 993); Farrer, JAMA, 278，1 3 4 9-56( 1 997);及 Saunders, Neurology 43，1467-72(1 993)中。存在於任何個體中之對偶基因型可藉由多種傳統技術（諸如直接定序、使用 GeneChip®陣列，等、對偶基因特異性探針，單鹼基延伸法、對偶基因特異性延伸）來測定。亦可使用特異於不同之對偶基因表現產物的抗體，藉由ELISA測定蛋白質層級之對偶基因型。用於遺傳和免疫分析之套組可從市場上購得（如：Innogenetics 公司；Graceful Earth 公司）。對偶基因型之測定通常是在體外進行，亦即，在移出且永不回 -37- 201206479 歸至病患體內之樣本上進行。 III.取決於ApoE之不同治療或監控策略 A.不同之治療攝生法 —些用於阿滋海默氏症及其它疾病之免疫療法的免疫治療攝生法已與某些病患腦內之血管源性水腫（VE)聯結。 —般來說，在某些免疫治療攝生法中，Ap〇E4攜帶者之 VE發病率高於非Ap〇E4攜帶者及接受較高劑量之某些作用劑的病患。在核磁共振攝影（MRI)上觀察到之VE爲涉及腦畸形和腦回腫脹之液體衰減反轉恢復（FLAIR)序列上的高信號強度。VE通常係在第一次或第二次投服免疫治療劑後進行觀察，儘管其係在第三次或第四次投藥後被觀察到。MRI上所發現之VE病患大部分無症狀。VE在表現上爲異質性，而特定病患中之MRI發現結果可能隨著時間而改變。該腦回腫脹及某種程度上，FLAIR中所見到之較大的核磁共振（MR)變化可用於區分VE與正常老年人和阿滋海默氏症病患之FLAIRVE上所常見之白質變化 (Hentschel et al., 2 005 ; de Leeu w et al. 200 1)。血管源性水腫（VE)的特徵爲由腦毛細血管內皮細胞對巨分子血清蛋白（如白蛋白）之滲透性增加所造成之胞外液量增加。VE可能係由腦毛細血管參透性增加所造成。當確實出現時，VE病患中所觀察到之臨床症狀爲多種多樣的，且迄今本質上大部分爲輕度。在例行之MRI檢査中所觀察到的VE病例中，大多數病患無症狀。與VE之症 -38-

S 201206479 候病例有關的臨床觀察包括心理狀態改變（例如，困惑增加、嗜睡、方向知覺喪失和幻覺）、嘔吐、頭痛、行走困難、視覺障礙、疲勞、煩躁、共濟失調、食慾降低及腹瀉〇如上文槪述，本發明根據病患是否含有零、一或兩個 E4對偶基因而提供不同之治療攝生法。因此，在經治療之個體族群中，那些含有零個E4對偶基因之病患可以不同於含有兩個對偶基因之病患的方式治療。那些含有一個 E4對偶基因之病患可以不同於含有零個或兩個E4對偶基因之病患的方式（以中間方式）治療或可在任何接下去之攝生法中與含有零個或兩個E4對偶基因之個體同組。接著，含有一個E4對偶基因之個體可以不同於含有零個對偶基因之個體的方式治療及/或含有兩個Ap〇E4對偶基因之個人可以不同於含有一個對偶基因之個體的方式治療。正以某些免疫治療劑取得之經驗表明VE較可能在劑量高於 5毫克/公斤時發生（見PCT/US07/09499)。在某些方法中，Ap〇E4狀態係決定在不同病患中之不同治療攝生法的唯一遺傳標記。在其他方法中，不同之治療攝生法係取決於Ap〇E4和其他與阿滋海默氏症易感性或抗性相關之遺傳標記。受治療之個體族群可選擇性地含有足夠之病患總數和足夠數量之包含不同數量之Ap〇E4對偶基因的次族群，不同之治療攝生法與不同之Ap〇E4對偶基因間的關聯可相對於不同攝生法（具有至少95%之統計信賴）之隨機配置 -39- 201206479 來檢視。例如，受治療之病患可包含至少1 0 0、5 Ο 0或 1 000位個體，其中有10-70%(更常爲3 0-5 0%)含有至少一個ΑροΕ4對偶基因。受治療之族群亦可（即，選擇性地）被視爲以特定製造商所製造之特定藥物治療的全部族群。在下文中所更詳細地討論的某些方法中，含有零個 Ε4對偶基因之個體係在經過設計之攝生法中投服作用劑以達到效果，這些效果係在一或多個臨床目標中評估，諸如，例如認知測量法（如：DAS-cog、ΝΤΒ、DAD、MMSE 、CDR-SB、PI)、生物標記（如：CSF tau)和腦容量（如： BBSI、VBSI)，以及其他參數，諸如，例如：適當的安全性、藥物動力學及藥效學。在一些方法中係投服給含有一或兩個E4對偶基因之個體與含有零個E4對偶基因之個體所投服者相同的作用劑，但降低劑量及/或頻率。這類方法之目標係在一段時間內投遞降低之平均作用劑血清濃度（曲線下面積減少）及/或降低之最大峰値濃度。此可藉由，例如：減少劑量但以相同頻率投藥，或降低頻率但投服相同劑量，或以降低之劑量和頻率投藥來達刻。如果劑量減少，但頻率保持不變，則劑量通常係減少10-90%(通常約3 0-75或40-60%)。若頻率降低，但劑量保持不變，則頻率通常係降低2至5倍。有時，僅係從投服給含有零個 Ap〇E4對偶基因之病患的攝生法中省略一個非經常性劑量或兩個連續劑量來降低頻率。這類劑量可，例如：在病患經歷血管源性水腫期間省略》在其他方法中係以增加之頻率投服給含有一或二個 -40-

S 201206479 E4對偶基因之個體相對於含有零個E4對偶基因之個體降低之劑量。例如：劑量可減半，頻率則增加一倍。在這類方法中，在一段時間內投遞給二個次族群之全部藥物（即曲線下面積）可爲在實驗誤差範圍內之相同量，但在含有二個E4對偶基因之個體中該最高血漿濃度較低。例如，在含有一或二個E4對偶基因之病患中，抗體之最高血清濃度宜低於14微克/毫升，而含有零個對偶基因之病患中，抗體之最高血清濃度宜低於28微克/毫升。在其他方法中係取決於Ap〇E4之狀態’相對於疾病之進展於不同階段投服治療》在這類方法中，相對於含有零個ApoE4對偶基因之病患，含有二個ApoE4對偶基因之病患較早投服治療，或者，相對於含有零個Ap〇E4對偶基因之病患，含有一個Ap〇E4對偶基因之病患較早投服治療及/或相對於含有一個Ap〇E4對偶基因之病患，含有二個ApoE4對偶基因之病患較早投服治療。疾病進展可藉由，例如MMSE量表測量，其積分爲27至20時被視爲正常，20-26分時被視爲輕度之阿滋海默氏症。因此，舉例來說，治療開始時，非ApoE4攜帶者之平均MMSE 積分高於Ap〇E4攜帶者（含有一或二個Ap〇E4對偶基因之病患）。選擇性地，ApoE4攜帶者之治療可在臨床症狀明顯之前先以預防方式開始。這類病患可藉由篩選族群之 Ap〇E4狀態鑑定出。治療可在偵測這類狀態時或其後當病患達到某一發展阿滋海默氏症的高風險年齡（例如5 5、60 或65歲）時開始。雖然對機制之理解對於實踐這類方法並 -41- 201206479 非必要，咸信，Ap〇E4攜帶者之早期治療可能是有益的，因爲ApoE4對偶基因降低修復神經元損傷之能力，及/或因爲此類病患體內之ΑΘ澱粉樣沈積較多。於某些方法中，含有零個ApoE4對偶基因之病患及含有一個ApoE4對偶基因之病患及/或含有二個ApoE4對偶基因之病患係經由不同途徑投服治療。例如，含有零個 ApoE4對偶基因之病患可經靜脈內途徑投服治療，而含有 —成二個對偶基因之病患可經由皮下途徑投服。相對於 Ap〇E4攜帶者病患，這類非Ap〇E4攜帶者病患之投服劑量通常較高及/或投服頻率較低。在一些方法中，ApoE4攜帶者較非ApoE4攜帶者需要花費較長的時間對治療（即，抑制認知衰退或抑制腦容量減少）發展出正面反應。較多的時間可能反映修復神經元的能力降低及/或在這類病患中澱粉樣裝載量較多；及/ 或使用較無效之治療攝生法。在這類方法中，可投服治療至少一年，且可選擇性地在因缺乏效果而停止治療前投服至少2 、3或4年。在一些方法中，所投服之治療爲至少6個季度之投藥。如前述，有時提供之作用劑帶有一忌諱用於 ApoE4 攜帶者之標記。這類作用劑可用於其中僅非Ap〇E4攜帶者接受本發明之作用劑（即，結合Αβ之抗體或誘發這類抗體之作用劑）的治療方法中。在這類方法中，ΑροΕ4攜帶者並未接受該結合ΑΘ之抗體或誘發這類抗體之作用劑本發明之作用劑，但可接受其他治療劑，例如美金剛（memantine)。

S -42- 201206479 其中根據ApoE4來降低投之劑量及/或頻率的方法對於可起始對抗澱粉樣沈積之清除反應的作用劑最有用。一般來說，這類作用劑爲結合AA 1-11間之抗原決定部位的抗體（其具有一Fc區），或誘發這類抗體之Αβ片段（即，在Α/3 1-11間包含一個抗原決定部位）。結合A/S之中央或C端區間之抗原決定部位的抗體通常主要是結合可溶型 Αβ而非澱粉樣沈積，因此，僅起始很少（若有任何時）之澱粉樣沉積清除反應，特別是緻密性或血管沈積。合適之投服劑量範圍及頻率的實例提供於下。投服給具有不同Ε4狀態之病患的不同劑量及/或頻率可選自這類劑量範圍和頻率。例如：含有一或二個Ε4對偶基因之病患可每十三週經由靜脈內注入投服0.1至1毫克/公斤之抗體劑量，含有零個Ε4對偶基因之病患可每十三週投服 1至2毫克/公斤之抗體劑量。選擇性地，每隔十三週令含有二個Ε4對偶基因之病患投服0.15至0.5毫克/公斤之劑量，含有一個Ε4對偶基因之病患投服0.15至1毫克/公斤之劑量（例如：0.5至1毫克/公斤）且含有零個Ε4對偶基因之病患投服0.15至2毫克/公斤之劑量（如：1-2毫克/ 公斤）。在較佳之攝生法中，含有一或二個Ε4對偶基因之病患係投服劑量爲0.5毫克/公斤之結合A 0之殘基1-11 間的抗原決定部位之抗體（例如：貝平紐如單抗 (bapineuzumab))，含有零個E4對偶基因之病患係投服2 毫克/公斤之劑量。該劑量係經由靜脈內注射途徑分成四次投服，直到出現血管源性水腫（若出現時）。血管源性水 -43- 201206479 腫出現後可忽略下一個劑量，之後，病患回復分成四次投服0.1 5毫克/公斤之較低劑量的時間表。若再次出現血管源性水腫則可終止治療。含有零個E4對偶基因之該等病患係投服0.5至2毫克/公斤之劑量，而含有零個E4對偶基因之個別病患係選擇性地接受0.5毫克/公斤、1 ·0毫克/ 公斤、I·5毫克/公斤及2.0毫克/公斤之劑量。另一種實例爲投服給含有二個E4對偶基因之病患 0.5毫克/公斤之第一個劑量和1毫克/公斤之繼續劑量。或者，投服給含有二個E4對偶基因之病患0.5毫克/公斤之第一個劑量、1毫克/公斤之第二和第三個劑量以及2.0 毫克/公斤之繼續劑量。另一個例子爲每週一次經由皮下途徑投服給含有零個 E4對偶基因之病患0.015-0.2毫克/公斤之抗體劑量，而含有二個E4對偶基因之病患可每二週投服一次相同劑量。上述之任何等效攝生法可改變投服之數量或頻率或途徑，以投遞相同之曲線下面積（即，隨時間累積之平均劑量）之抗體至血清。在一些方法中，投服給含有一或二個E4對偶基因之病患作用劑以使一段時間內彼等之平均抗體血清濃度較含有零個E4對偶基因之病患爲低。較低之平均血清濃度維持至少1或3個月，通常爲3個月至1年或無限期。所有這類病患之平均血清濃度宜在2-7微克抗體/毫升之範圍內，而含有一或二個E4對偶基因之病患的平均血清濃度低於含有零個E4對偶基因之病患的平均血清濃度。例如

S •44- 201206479 ，可投藥給含有零個E4對偶基因之病患以取得在4.5-7 微克抗體/毫升範圍內之平均抗體血清濃度，並可投藥給含有一或二個E4對偶基因之病患以取得在2-4.5微克抗體/毫升範圍內之平均抗體血清濃度。在這類方法中，在任何藉由含有二、一或零個E4對偶基因而界定之次族群中的個體通常係投服相同之攝生法。然而，亦可爲次族群中之個人制定攝生法。在此種情況下，含有二個E4對偶基因之個體的次族群中，該作用劑或由作用劑誘發之抗體的平均劑量及/或頻率及/或平均血清濃度及/或最高濃度係低於含有零個E4對偶基因之個體〇在一些方法中含有二個E4對偶基因之病患與含有零個E4對偶基因之病患所投服之作用劑不同。不同作用劑之誘發清除澱粉樣沉積（即，原先存在之沈積）反應的能力通常不同。這類能力可，例如，依US 6,750,324中之描述，在活體外清除分析中測試。簡言之，將抗體和小神經膠質細胞與來自生病之阿滋海默氏症病患或基因轉殖老鼠模型之澱粉樣沈積一起培育，再利用經標示之抗Αβ抗體監測。類似地，活性劑之清除能力可利用由該活性劑誘發之血清（其作爲該分析之抗體來源）測試。被動劑和活性劑二者之清除能力亦可依US 6,750,324中所亦描述者，在基因轉殖小鼠模型中，或藉由MRI監測評估。該清除反應係選擇性地在區分緻密與瀰漫性澱粉樣沈積之分析中測量。某些抗體之清除能力的差異較明顯，或僅在比較清除 -45- 201206479 緻密澱粉樣沈積之能力時顯明。選擇性地，清除反應係從突變抗體相對於其他同一抗體之配適同型而言血管澱粉樣之清除減少的情況進行評估。血管澱粉樣之清除情形可藉由動物模型之族群間的統計顯著性差異或以突變抗體及以其他同一之配適同型抗體（不具突變）治療之人類病患間的統計顯著性差異來評估。此外，或者，在測量清除反應之分析方面，適合用於本發明方法的一些抗體可藉由其與Clq及/或Fq受體之結合降低來辨識。下文中將更詳細的討論重鏈絞鏈區附近之突變可降低結合Clq及/或FcY受體之能力。能力降低可，例如，經由比較突變抗體與缺乏存在於突變抗體中之突變的其他同一抗體之配適同型（BP，含有來自野生型人恆定區之殘基）（例如，貝平紐如單抗對AAB-003)來測定，或比較具有不同同型之其他同一抗體（例如，人IgGl與人IgG4)來測定。相對於配適之同型對照組，具有降低之結合C 1 q及/ 或Fq受體之能力的某些抗體可減少微量出血，但保留至少某些抑制認知衰退及/或清除澱粉樣沉積之活性。在某些抗體中，澱粉樣清除能力降低主要與血管澱粉樣及/或緻密之澱粉樣沈積的清除能力降低有關，與瀰漫性澱粉樣沈積無關。這類抗體提供可能之改良的效力：副作用變化形廓，尤其是可用於ApoE4攜帶者。與Clq及/或FcY受體之結合降低之抗體可用於如上述之差別治療法中。例如，可投服給含有一或二個E4對

S -46- 201206479 偶基因之病患與Clq及/或Fcr受體之結合降低的抗體，而投服給含有零個E4對偶基因之病患不具突變之其他同一抗體。或者，可投服給病患與Clq及/或Fcr受體之結合降低之抗體，不論Ap〇E4對偶基因之數量。有時，帶有突變之恆定區以降低與Clq及/或？(：7受體結合之抗體的投服劑量係高於無突變之其他同一抗體。對於一些這類抗體，可將劑量向上調整以取得同等療效，但將副作用減少。清除能力可同時受抗體（或由活性劑片段誘發的抗體）的抗原決定部位特異性及抗體之效應子功能類型（當存在時）影響，尤其是受Fc區（若存在時）結合Fq受體之能力影響。雖然清除澱粉樣沈積爲一種有用之作用機制，缺乏清除沈積之能力的作用劑可經由其他機制作用，諸如結合可溶性Αβ及/或可溶性寡聚型Αβ。這類結合可降低這類物種之毒性及/或抑制彼等在其他可能的機制中聚集形成沈積。具有誘發這類清除反應之傾向的作用劑包括結合Α冷之殘基1-U間（尤其是1-7間）之抗原決定部位的抗體，尤其是具有人IgGl同型之這類抗體（其與FcY受體之交互作用最強）。含有在殘基1-11間（尤其是1-7間）之抗原決定部位的Αβ片段在誘導清除反應上同樣有效。選擇性地，所提供之可起始清除反應之作用劑可帶有一個令含有一或二個Ε4對偶基因之病患忌諱使用的標示。很少或不傾向誘發清除反應之作用劑包括：具有除人IgGl外之其他同 -47- 201206479 型的抗Αβ抗體、缺乏Fc區之抗體（例如，Fab片段，Fv 片段或奈米抗體），或帶有經由遺傳工程處理產生之突變以降低與Fey受體之交互作用的Fc區之抗體。這類作用劑亦包括能特異結合區內除殘基l-ii外之抗原決定部位（即，結合如上述之中間-抗原決定部位或C端抗原決定部位）的抗體及能特異結合可溶性或寡聚型Αβ，不結合澱粉樣沉積之抗體》這類作用劑亦包括在AyS之殘基1-11 間無抗原決定部位的Αβ片段。在這類方法中係投服一種作用劑，該作用劑在含有二個Ε4對偶基因之個體中誘導吞噬性清除反應的傾向低於在含有零個Ε4對偶基因之個體中。例如，含有零個Ε4對偶基因之個體可投服結合A 召之殘基1-11間之抗原決定部位且具有人IgGl同型的抗體，含有二個E4對偶基因之個體可投服相同抗體，但該抗體爲Fab片段或具有除人IgGl外的同型或具有經遺傳工程處理之Fc區以降低與Fc r受體結合。投服給含有二個E4對偶基因之個體的作用劑亦可爲結合Αβ之中間或C 端抗原決定部位，或來自中間或C端區（即，缺乏Αβ 1 -1 1 間之抗原決定部位）之Αβ片段的抗體。在一些方法中係投服給含有二個E4對偶基因之病患 —或多個在中央或C端區內具有抗原決定部位之抗體的初始劑量，以及在N端區內具有抗原決定部位的抗體之繼續劑量。這類抗體可爲人化266抗體，人化2H6抗體及去糖基化之人2H6抗體或RN1219。這類抗體亦可爲能特異結合Αβ28-40或Αβ33-40間之抗原決定部位的人化抗體

S -48- 201206479 。初始劑量宜包含1、2或3個劑量。含有零個對偶基因之病患可投服在N端區內具有抗原決定部位之抗體❶ 取決於不同病患的E4狀態而投服之不同攝生法可無限期地保持下去。然而，通常不必要如此。現已發現，與 E4對偶基因相關之血管源性水腫副作用通常係在第三個劑量前發生（若發生時）。因此，一旦病患已接受約2-3個治療劑量時，尙未發展出血管源性水腫之含有一或二個 E4對偶基因之病患可能不會再發展出此疾病，且之後（若需要時），可依含有零個E4對偶基因之病患的相同攝生法治療。同樣的，發展出血管源性水腫之含有一或二個E 4 對偶基因之病患（儘有現有之差別治療攝生法通常會解決此狀況）之後可以類似於含有零個E4對偶基因之病患的方式治療（若需要時）。選擇性地，劑量係在從血管源性水腫恢復後，滴定至用於非攜帶者之劑量。血管源性水腫通常自行調解。然而，若需要時可經由投服皮質類固醇來促進調解。作用劑可與標明差別治療程序之標籤一起包裝，該取決於AP〇E4狀態之差別治療程序與上述攝生法或其組合 —致。 B.不同之監控攝生法或者或此外，本發明提供取決於E4狀態之用於病患的不同監控攝生法。血管源性水腫係因血漿滲漏到間質空間而使腦容量增加。一旦溢出，流體保留在脈管構造外， -49- 201206479 主要是在腦之白質。血管源性水腫可藉由腦部攝影監測，尤其是藉由MRI、正子發射斷層攝影（PET攝影）或液體衰減反轉恢復（FLAIR)序列攝影（見，#eMro/og3；， 20(3):241-243; AJNR, 26:825-830; NEJM, 334(8): 494-500;

Pediatr Nephrol, 18:1 161-1 166； Internal Medicine Journal, 35:83-9 0; JNNP, 68:790-79 1 ; AJNR, 2 3:1 03 8- 1 048; Pak J Med Sci, 21 (2):1 49-1 54 及，2 1 :1 1 99- 1 209)進行。血管源性水腫在腦白質中呈現高信號強度。觀察到之血管源性水腫通常無症狀，但亦可伴隨著頭痛、噁心、嘔吐、精神錯亂、癲癇發作、視覺異常、改變之心智運作、共濟失調、額葉症狀、頂葉症狀、昏迷以及局部神經學徵兆。根據目前的方法，含有二個E4對偶基因之病患可較含有零個E4對偶基因之病患更常接受腦部攝影。例如，含有二個E4複體之病患可在開始治療前攝影，之後’按季攝影，然而，含有零個E4對偶基因之病患可在開始治療前攝影，然後每年或每兩年攝影。或者，含有零個E4 對偶基因之病患可完全省略腦部攝影。含有一個E4對偶基因之病患可以介於含有零個與二個E4對偶基因之病患之間的中間頻率攝影，或可與含有零個或二個E4對偶基因之病患同組。因此，含有一個E4對偶基因之病患可以不同於含有零個E4對偶基因之病患的方式監測（例如’更經常地），而含有二個E4對偶基因之病患可以不同於含有 —個E4對偶基因之病患的方式監測（例如，更經常地）。在發展出血管源性水腫之病患中，在血管源性水腫期 -50-

S 201206479 間可持續監測，且持續至症狀解除後約一年。之後，假設無神經系統方面之發現，可選擇性地進行六次每個月或每年之監測。作用劑可與標明差別治療程序之標籤一起包裝，該取決於ApoE4狀態之差別監控程序與上述攝生法或其組合 —致。 g C.全方位治療或監控攝生法雖然ApoE4攜帶者及非ApoE4攜帶者對上述討論之治療可具有不同的反應，有些在AP〇E4攜帶者中爲安全有效之治療攝生法在非Ap〇E4攜帶者中雖然不一定是最優但亦是安全有效，其可用於此兩種類型之病患，不需考慮病患之ApoE狀態。在某些這類攝生法中，該作用劑爲結合Αβ(其恆定區中帶有與FcY受體及/或Clq之結合降低的突變）之N端抗原決定部位之抗體。A AB-003爲這類 φ 抗體之一種實例。於其他攝生法中，經投服或誘發之抗體的劑量及/或頻率及/或最大血清濃度及/或平均血清濃度係限制在如PCT/US2007/009499中所述之範圍內且進一·步歸納如下，以降低血管源性水腫之風險。 IV.作用劑 A·抗體在用於免疫治療阿滋海默氏症之專利和科學文獻中已描述多種不同之抗Αβ抗體，其中有些係在臨床試驗中（見 -51- 201206479 ，如：US 6,750，3 24)。這類抗體能特異結合如上述界定之 N端抗原決定部位、中間（即，中央）_抗原決定部位或c 端抗原決定部位。某些抗體特異於N端（即，這類抗體能特異結合Αβ之N端而不結合APP)。如上述，結合Αβ42 之殘基 1-10、 1-3、 1-4、 1_5、 1-6、 1-7 或 3-7 間，或 Αβ 之殘基2-4、5' 6、7或8間，或Αβ之殘基3-5、6、7、

8或9間，或Α/342之殘基4-7、8、9或10間的抗原決定部位之抗體均可使用。某些抗體係特異於C端（即，能特異結合Α/3之C端而不結合ΑΡΡ)。抗體可爲多株抗體或單株抗體。多株血清通常包含能特異結合全長ΑΡΡ上之數個抗原決定部位的混合之抗體群。然而，多株血清可特異於Αβ之特殊節段（諸如Αβ1-11)，而不會特異結合 Αβ之其他節段》較佳之抗體爲嵌合型、人化抗體（包括經鑲嵌之抗體）（見，Queen N fl/.，iVoda". 86:10029-10033(1 989)及 WO 90/07861 ' US 5,693,762 ' US

5,693,76 1、US 5,585,089、US 5,530,1 0 1 及 Winter, US 5,225,539)或人抗體（Lonberg ei a/.，WO 93/1 2227(1 993); US 5,877,397、US 5,874,299、US 5,814,318、US 5,789,650、US 5,770,429 ' US 5,661,016 ' US 5,633,425 ' US 5,625,126 ' US 5,569,825 、 US 5,545,806 、 Nature 148， 1547-1553(1994) '

Nature Biotechnology 14， 826(1 996) 、 Kucherlapati, WO

91/10741(1991)、 EP 1 48 1 008, Bleek, Bioprocessing Journal 1(9 月 /10 月 2005)， US 2004132066 、 US 2005008625 、 WO 04/072266 、 WO 05/065348 、 WO s -52- 201206479 05/069970 及 WO 06/05 5 77 8)。

3D6抗體、10D5及其變異體爲可使用之抗體的實例。二者均描述於 US 200301 65496、US 20040087777、WO 02/46237 和 WO 04/08041 9、WO 02/088306 及 WO 02/088307 中。10D5抗體亦描述於US 20050142131中。3D6抗體另外描述於 US 20060 1 98 85 1 及 PCT/US05/456 1 4 中。3D6 爲

一種能特異結合位於人β-澱粉樣肽（尤其是殘基1-5)中之 Ν端抗原決定部位的單株抗體（mAb)。相比之下，10D5爲一種能特異結合位於人/3 -澱粉樣肽（特別是殘基3-6)中之 N端抗原決定部位的單株抗體。製造3D6單株抗體（RB 96 3D 6.32.2.4)之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於2003 年4月8日存放在美國典型培養物保藏中心（ATCC)(美國維吉尼亞州，馬納薩斯，20108)，指派之編號爲PTA-5130。製造10D5單株抗體（RB44 10D5.19.21)之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於2003年4月8日存放在ATCC，指派之編號爲PTA-5129。貝平紐如單抗（由世界衛生組織命名之國際非專利名稱）意指包含具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO: 2 之胺基酸序列）之輕鏈及具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO: 3之胺基酸序列）之重鏈的人化3D6抗體（該由世界衛生組織定名爲貝平紐如單抗之抗體的重和輕鏈恆定區分別爲人IgG 1和人κ鏈）。以下，包含可變和恆定區之人化輕鏈定名爲SEQ ID NO : 48，而包含可變及恆定區之人化重鏈定名爲SEQ ID NO: 66或67(相對於SEQ ID NO: -53- 201206479 67，SEQ ID NO: 66具有一額外之C端賴胺酸）。人化3D6輕鏈可變區

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Va 1 Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp

Gin Gly Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys

Val Glu lie Lys(SEQ ID NO: 2) 人化3D6重鏈可變區

Glu Val Gin Leu Leu G1 u Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser lie Arg Ser Gly

Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser (SEQ ID NO: 3) -54- 201206479 下列顯示包含具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO : 4之胺基酸序列）之輕鏈及具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO : 5之胺基酸序列）之重鏈的人化3D6抗體之第二種變體。人化3D6輕鏈可變區

Tyr Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val

Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin

Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Arg Leu lie Tyr

Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val

Glu lie Lys(SEQ ID NO: 4)

人化3D6重鏈可變區

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr •55· 201206479

Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 5) 包含具有定名爲SEQ ID NO : 6之胺基酸序列之輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 7之胺基酸序列之重鏈的人化 3D6抗體之第三種變體描述於2005年4月28日出版之 US 2005/0090648 A1(以 US 7,318,923 核發）（其納爲此處作爲所有目的之參考資料）中。人化3D6輕鏈

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser Pro Arg Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp

Gin Gly Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie

Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser

Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp -56- 201206479

Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys(SEQ ID NO: 6) 人化3D6重鏈

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser lie Arg Ser Gly

Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser

Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr II e Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

Pro G\xx Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val -57- 201206479

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys(SEQ ID NO: 7)· 下列顯示一種包含具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO: 8之胺基酸序列）之輕鏈及具有成熟可變區（具有定名爲SEQ ID NO: 9之胺基酸序列）之重鏈的人化10D 5 抗體的變體。人化10D5輕鏈可變區

Asp Val Leu Met Thr Gin Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly Asp Gin Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Asn lie lie His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp -58- 201206479

Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Lys Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Lys Lys

Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly lie Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu

Leu Glu(SEQ ID NO: 8) 人化10D5重鏈可變區

Gin Ala Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly lie Leu Gin Ser Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe

Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin

Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Tyr Trp

Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Arg Lys Gin Val Phe Leu

Lys lie Thr Ser Val Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

Cys Val Arg Arg Pro lie Thr Pro Val Leu Val Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 9) 12A 11或其嵌合型或人化或奈米型抗體爲較佳抗體。 12A11抗體或其變異體係描述於US 20050118651、US 200601 9885 1、WO 04/ 1 08 89 5 及 WO 06/066089(其全部內容納爲此處所有目的之參考資料）中。 12A11爲一種能特異結合位於人β-澱粉樣肽（具體地說，殘基3-7)中之Ν-端抗原決定部位的單株抗體。製造 -59- 201206479 12A11單株抗體之細胞株係於2005年12月12日存放在 ATCC(美國典型培養物保藏中心美國維吉尼亞州，大學大道 1 080 1號，馬納薩斯，201 1 0-2209)，指派之 ATCC 編號爲PTA-727 1。較佳之人化12A11抗體的變體爲變體1，其包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 11之胺基酸序列的重鏈。人化12A11之變體1描述於2005年6月2日出版之US 20050118651 Al( 其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A1 1輕鏈

Asp Va 1 Va 1 Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Ser

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys(SEQ ID NO: 10) 人化12A11重鏈可變區（變體1)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val

Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly 201206479

Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met S er Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 11) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 12之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體的第2種變體（變體2)係描述於2 005年6 月2日出版之US 20050 1 1 8 65 1 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化UA11重鏈可變區（變體2)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ -61- 201206479 ID NO: 12) 包含具有定名爲 SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 13之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第3種變體（變體2.1)係描述於2005年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體2.1)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Asn Ser Lys A sn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 13) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 14之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第四種變體（變體3)係描述於2005年6 月2日出版之WO 02/088306(其納爲此處所有目的之參考資料）中。

S -62- 201206479 人化12A 11重鏈可變區（變體3)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly

Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 14) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 15之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第5種變體（變體4.1)係描述於2005年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體4.1)

Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr -63- 201206479

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Va 1 Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 15) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 16之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第6種變體（變體4.2)係描述於2005年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體4.2)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 16) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 17之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第7種變體（變體4.3)係描述於2005年 -64- 201206479 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體4.3)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 17) 包含具有定名爲SEQ ID NO : 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 18之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第8種變體（變體4.4)係描述於200 5年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體4.4)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg -65- 201206479

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 18) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 19之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第9種變體（變體5.1)係描述於2005年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體5·1)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp 11 e Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 19) -66- 201206479 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 20之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第10種變體（變體5.2)係描述於2005 年6月2日出版之US 20050118651 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體5.2)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe

Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 20) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 21之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第11種變體（變體5.3)係描述於2005 年6月2日出版之US 20050 1 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體5.3) -67- 201206479

Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe

Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

Val(SEQ ID NO: 21) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 22之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第12種變體（變體5.4)係描述於2005 年6月2日出版之US 20050 1 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體5.4)

Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val -68- 201206479

Tyr T yr C y s Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin G1y Thr Thr Va1 Thr Va1 Ser Ser Val(SEQ ID NO: 22) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 23之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第13種變體（變體5.5)係描述於2005 年6月2日出版之US 200501 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A 11重鏈可變區（變體5.5)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 23) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 24之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第14種變體（變體5.6)係描述於2005 年6月2日出艰之US 20050 1 1 8 65 1 A1(其納爲此處所有 -69- 201206479 目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體5.6)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 24) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 25之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第15種變體（變體6.1)係描述於2005 年6月2日出版之US 200501 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化ΚΑΙ 1重鏈可變區（變體6.1)

Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp 201206479

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe

Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 25)

包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 26之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第16種變體（變體6.2)係描述於2005 年6月2日出版之US 20050 1 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體6.2)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 2 6) 包含具有定名爲SEQ ID NO : 10之胺基酸序列的輕 -71- 201206479 鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 27之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第17種變體（變體6.3)係描述於2005 年6月2日出版之US 200501 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體6.3)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 27) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO: 28之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第18種變體（變體6.4)係描述於2005 年6月2日出版之US 20050 1 1 865 1 A1(其納爲此處所有目的之參考資料）中》人化12A11重鏈可變區（變體6.4)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val -72- s 201206479

Gin Pro G1 y Arg Ser Leu A r g Leu S er Cys Ala P h e S er G1 y

Phe Ser Leu Ser Thr Ser G1 y Met Ser Val Gly Trp He Arg

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 28) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 29之胺基酸序列的重鏈之人化12A1 1抗體之第19種變體（變體7)係描述於2005年 6月2日出版之US 20050118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A1 1重鏈可變區（變體7)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe -73- 201206479

Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 29) 包含具有定名爲SEQ ID NO: 10之胺基酸序列的輕鏈及具有定名爲SEQ ID NO : 30之胺基酸序列的重鏈之人化12A11抗體之第20種變體（變體8)係描述於2005年 6月2日出版之US 2 00 50118651 Al(其納爲此處所有目的之參考資料）中。人化12A11重鏈可變區（變體8)

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr He Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 30) 其他示範之抗體包括如 US 20040082762A1及 WO 03/077858中所描述之12B4抗體或其變異體。12B4爲一種能特異結合位於人β-澱粉樣肽（具體地說，殘基3_7)之 Ν端抗原決定部位之單株抗體。12Β4之輕鏈（SEQ ID NO :31)和重鏈（SEQ ID NO: 32)具有下列可變區（不包括信 201206479 號序列）。

Asp Va 1 Leu Met Thr Gin Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly Asp Gin Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Asn lie Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp

Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Lys Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys(Seq ID NO: 31)

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly lie Leu Gin

Pro Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe

Ser Leu Ser Thr Asn Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin

Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Tyr Trp

Asp Glu Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg

Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Asn Asn Gin Val Phe Leu

Lys lie Thr Asn Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

Cys Ala Arg Arg Arg lie lie Tyr Asp Val Glu Asp Tyr Phe

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser

Ser(SEQ ID NO: 32) 其他示範之抗體爲如US 20060165682及WO 06/06604 中所描述之6C 6抗體或其變異體。6C6爲一種能特異結合位於人Θ -澱粉樣肽（具體地說，殘基3-7)之N端抗原決定部位之單株抗體。製造抗體6C6之細胞株係在布達佩斯條 -75- 201206479 約之規定下，於2005年1 1月1日存放在ATCC，指派之編號爲PTA-7200。其他示範之抗體爲如US 2006025 73 96中所描述之 2H3抗體及其變異體。2H3爲一種能特異結合位於人冷-澱粉樣肽（具體地說，殘基2-7)之N端抗原決定部位之單株抗體。製造抗體2H3之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於2005年12月13日存放在ATCC，指派之編號爲 PTA-7267 。其他示範之抗體包括如US 20060257396中所描述之 3A3抗體及其變異體。3A3爲一種能特異結合位於人冷-澱粉樣肽（具體地說，殘基3-7)之N端抗原決定部位之單株抗體。製造抗體3A3之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於2005年12月13日存放在ATCC，指派之編號爲 PTA-7269 。其他示範之抗體爲2B1、1C2或9G卜製造抗體2B1 、1C2或9G8之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於 2005年1 1月1日存放在ATCC，指派之編號分別爲PTA-7202、PTA-7199 及 PTA-720 1。

另一示範之抗體爲人化266抗體或其變異體。266抗體結合A卢之殘基13-28間的抗原決定部位。製造抗體 266之細胞株係在布達佩斯條約之規定下，於2004年7 月20日存放在ATCC，指派之編號爲PTA-6123。266抗體之人化型描述於 US 20040265308、US 20040241 1 64、 WO 03/016467 及 US 7,195,761 中。266 抗體之輕鏈（SEQ

S -76- 201206479 ID NO: 33)及重鏈（SEQ ID NO: 34)具有下列可變區序列（不包括信號序列）。

Asp Xaa Val Met Thr Gin Xaa Pro Leu Ser Leu Pro Val Xaa Xaa G1 y Gin Pro Ala S er lie S er Cys Arg Ser S er Gin Ser Leu Xaa Tyr Ser Asp Gly Asn Ala Tyr Leu His

Trp Phe Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Xaa Leu Leu lie

Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala G1 u Asp Xaa Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gin Ser Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Xaa Gly Thr Xaa

Xaa Glu lie Lys Arg(SEQ ID NO: 33) 其中：位置2處之Xaa爲Val或lie ;位置7處之 Xaa爲Ser或Thr ;位置14處之Xaa爲Thr或Ser ;位置 15處之Xaa爲Leu或Pro;位置30處之Xaa爲lie或Val ;位置50處之Xaa爲Arg、Gin或Lys;位置88處之 Xaa爲Val或Leu ;位置105處之Xaa爲Gin或Gly ;位置108處之Xaa‘爲Lys或Arg;且位置109處之Xaa爲 V a 1 或 L e u ;及

Xaa Val Gin Leu Val Glu Xaa Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala

Pro Gly Lys Gly Leu Xaa Leu Val Ala Gin lie Asn Ser Val

Gly Asn Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Xaa Val Lys Gly Arg

Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Xaa Xaa Asn Thr Leu Tyr -77- 201206479

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Xaa Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Gly Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Xaa Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 34) 其中：位置1處之Xaa爲Glu或Gin ;位置7處之 Xaa 爲 Ser 或 Leu;位置 46 處之 Xaa 爲 Glu、Val、Asp 或 Ser ;位置63處之Xaa爲Thr或Ser ;位置75處之Xaa 爲 Ala、Ser、Val 或 Thr ;位置 76 處之 Xaa 爲 Lys 或 Arg :位置89處之Xaa爲Glu或Asp;且位置107處之Xaa 爲 Leu 或 Thr。 —種示範之人化266抗體包含下列輕鏈（SEQ ID NO: 3 5)及重鏈（SEQ ID NO: 3 6)序列（不包括信號序列）。

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser

Gin Ser Leu lie Tyr Ser Asp Gly Asn Ala Tyr Leu His Trp

Phe Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Arg Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gin Ser

Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro

Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val

Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val

Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser

Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr -78- 201206479

Ser Leu S er Ser Thr Leu Thr Leu S er Lys Ala Asp T yr G1 u Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe A s n A r g Gly Glu Cys(SEQ ID NO: 35)

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Ser Met Ser Trp Val Ary Gin Ala

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val Ala Gin lie Asn Ser Val

Gly Asn Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe

Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Gly Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe

Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

Va Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp

Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly •79- 201206479

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Ary Glu Pro Gin Val Tyr Thr

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys(SEQ ID NO: 36) 該抗體亦可爲15C11或其人化型式（見US 20060165682) ，此抗體特異結合Αβί 5-24間之抗原決定部位。該抗體亦可爲20C2之人化型式或其變異體。這類抗體描述於，如：US 200708 1 998中。20C2之核心線性抗原決定部位相當於Αβί-42之胺基酸殘基3-8，其帶有取決於來自Αβ殘基17-42間之成分的構造性抗原決定部位。人化20C2抗體（變體1)之輕鏈（SEQ ID NO: 37)及重鏈 (SEQ ID NO: 3 8)具下列可變區序列（不包括信號序列）。

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp 201206479

Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly Ser Leu Val Pro Leu Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys(SEQ ID NO: 37)

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gin Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly

Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Gly Trp lie Arg

Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gin Leu Gly Leu Arg Ser lie Asp

Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

Ser(SEQ ID NO: 38) 一種另外之人化20C2抗體（變體2)包含SEQ ID NO: 37之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 39之重鏈可變區序列（不包括信號序列）。

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gin Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Gly

Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Gly Trp lie Arg

Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His lie Trp

Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser -81 - 201206479

Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gin Leu Gly Leu Arg Ser lie Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser(SEQ ID NO: 39) 另一可根據本發明使用之抗體爲C 70 5或其變異體，其結合包含Ay8肽之胺基酸7-12的抗原決定部位（如WO 05/0285 1 1中之描述）。C705抗體包含SEQ ID NO: 40之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 41之重鏈可變區序列（信號序列下方劃線）。

Met Lys Leu Pro Val Arg Leu Leu Val Leu Met Phe Trp lie Pro Gly Ser Ser Ser Asp Val Met Met Thr Gin Thr

Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly Asp Gin Ala Ser lie

Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn

Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Met Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro

Met Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

Leu Lys lie Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Phe Tyr Cys Phe Gin Gly Ser Arg Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala

Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg(SEQ ID NO: 40)

Met Asp Arg Leu Thr Ser Ser Phe Leu Leu Leu lie Val Pro Ala Tyr Val Leu Ser Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser

Gly Pro Gly lie Leu Gin Pro Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr

Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly -82- 201206479

Val Ser Trp lie Arg Gin Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp

Leu Ala His lie Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro

Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Arg

Asn Gin Val Phe Leu Lys lie Thr Ser Val Asp Thr Thr Asp

Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser lie Val lie Ala Thr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala(SEQ ID NO: 41)

另一可根據本發明使用之抗體爲C706或其變異體，其結合包含A/3肽之胺基酸6-11的抗原決定部位（如WO 05/0 28511中之描述）。C706抗體包含SEQ ID NO:42之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 43之重鏈可變區序列（信號序列下方劃線）。

Met Asp Phe Gin Val Gin lie Phe Ser Phe Leu Leu lie Ser Ala Ser Val lie lie Ser Arg Gly Gin lie Val Leu Thr

Gin Ser Pro Ala lie Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val

Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His

Trp Tyr Gin Gin Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp lie

Tyr Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

Ser Gly Gly Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Pro Thr lie Ser Asn Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gin Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg(SEQ ID NO: 42)

Met Glu Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly Val His Ser Gin Val Gin Leu Gin Gin Ser -83- 201206479 G1 y Pro Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys lie Ser

Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser Trp lie Glu

Trp lie Lys Gin Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp lie Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe Lys Gly Arg Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ala Ser Asn Thr Ala Tyr Met Gin Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn

Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr

Val Ser Ala(SEQ ID NO: 43) 其他可根據本發明使用之抗體包括人化2 2 86抗體及其變異體。這些抗體辨識包含A/3肽之胺基酸28-40的抗原決定部位（如US 20070160616中之描述）。人化2286抗體（變體1)包含SEQ ID NO: 44之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 45之重鏈可變區序列（不包括信號序列）。

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQGISNYLNWYQQKPG

KAPKLLIYYTSSLHSGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIA TYYCQQYRKLPYTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO: 44)

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSRYWMNWVRQA

PGKGLEWVSEINPDSSTINYTPSLKDRFTISRDNAKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCARQMGYWGQGTTLTVSS(SEQ ID NO: 45) 人化2286之另一種變體包含SEQ ID NO: 44之輕鏈可變區及SEQ ID NO: 46之重鏈可變區（不包括信號序列）

S -84- 201206479 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFDFSRYWMNWIRQPP GKGLEWIGEINPDSSTINYTPSLKDRVTISKDTSKNQFSLKL SSVTAADTAVYYCARQMGYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO: 46)

其他可根據本發明使用之抗體爲人化3D6之第4種變體及人化10D5之第2種變體（分別揭示於US 7,318,923 及7,320,790中）。如上述解說，這些抗體結合A/3肽之N 端。人化3D6(變體4)包含SEQ ID NO:71之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO:72之重鏈可變區序列。

Asp V al V al Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu GlyGln Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser Pro Arg Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp

Gin Gly Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

Val Glu lie Lys Arg(SEQ ID NO: 71)

Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu -85- 201206479

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser(SEQ ID NO: 72) 人化10D5抗體（變體2)包含SEQ ID NO: 73之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 74之重鏈可變區序列。

Gin Asn lie lie His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp

Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Arg Leu Leu lie Tyr

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg

Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg(SEQ ID NO: 73)

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly

Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg

Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His lie Tyr

Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gin Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Arg Pro lie Thr Pro Val Leu Val Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser -86- 201206479

Ser(SEQ ID NO: 74) 另一示範之抗體爲人化2E7(揭示於WO 0 7/113172中 )，2E7抗體結合A/3肽之殘基1-12,但不結合殘基2-13) ，或該肽之較長變異體。人化2E7抗體（變體1)包含SEQ ID NO: 75之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO:76之重鏈可變區序列。

DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRVSQSLLHSNGYTYLHWYL QKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVE AEDVGVYYCSQTRHVPYTFGGGTKVEIK(SEQ ID NO: 75) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDNGMAWVRQA PGKGLEWVSFISNLAYSIDYADTVTGRFTISRDNAKNSLYL QMNSLRAEDTAVYYCVSGTWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO: 76) 人化2E7抗體之第二種變體包含SEQ ID NO·· 75之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 77之重鏈可變區序列（見，如：WO 07/1 1 3 1 72)。

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFTFSDNGMAWVRQA PGKGLEWVSFISNLAYSIDYADTVTGRFTISRDNAKNSLYL QMNSLRAEDTAVYYCVSGTWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO: 77)

人化2E7抗體（變體3)包含SEQ ID NO: 75之輕鏈可變區序列及SEQ ID NO: 78之重鏈可變區序列（見，如：WO 07/113172)。

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDNGMAWVRQA -87- 201206479 PGKGLEWISFISNLAYSIDYADTVTGRFTISRDNAKNSLYLQ MNSLRAEDTAVYYCVSGTWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO: 78) 另一可根據本發明使用之抗體包括如wo 06/03629 1 中所描述之人化9TL抗體（ATCC編號PTA-6124及PTA-6125)。重鏈及輕鏈可變區分別顯示爲SEQ ID NO: 79及 SEQ ID NO: 80(無信號序列）。 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYYTEAYYIHWVRQA PGQGLEWMGRIDPATGNTKYAPRLQDRVTMTRDTSTSTVY MELSSLRSEDTAVYYCASLYSLPVYWGQGTTVTVSS(SEQ ID NO: 79) DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKSSQSLLYSDAKTYLNWF QQRPGQSPRRLIYQISRLDPGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRV EAEDVGVYYCLQGTHYPVLFGQGTRLEIKRT(SEQ ID NO: 80) 人化之6G抗體的變體亦可根據本發明使用。重鏈及輕鏈可變區分別顯示爲SEQ ID NO: 81及SEQ ID NO: 82( 無信號序列）。 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYAIHWVRQA PGQGLEWMGFTSPYSGVSNYNQKFKGRVTMTRDTSTSTVY MELSSLRSEDTAVYYCARFDNYDRGYVRDYWGQGTLV(SE Q ID NO: 8 1)

DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVDNDRISFLNWYQ

QKPGQPPKLLIYAATKQGTGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQ 201206479 AED V AVYYCQQSKEFP WSFGGGTKVEIKRT V(SEQ ID NO: 82) 其他可根據本發明使用之抗體爲如WO 06/08 1 1 7中所描述之2.1抗體之人化變體。這些抗體係依賴小鼠2.1 抗體之CDRs及來自人類VKII A19/JK4輕鏈可變框構區之取代殘基。用於取代之重鏈可變框構區大致上是基於 VH 2-70。示範之人化2.1抗體包含分別顯示爲SEQ ID NO: 83及84之重鏈和輕鏈可變區（無信號序列）。 QVTLKESGPALVKPTQTLTLTCTFSGFSLRTSGMGVGWIRQ PPGKALEWLAHIWWDDDKSYNPSLKSQLTISKDTSKNQVVL TMTNMDPVDTATYYCARRNYYYDDYFAYWGQGTLVTVSS( SEQ ID NO: 83) DVLMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQSIVHSNGNTYLEWYL QRPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVE AEDVGVYYCFQGSHVPLTFGAGTKLEIK(SEQ ID NO: 84) 其他可根據本發明使用之抗體包括CW1181及CW1185 抗體。這些抗體特異結合A石肽之二個區（如WO 03/070760 和 US 20050196399中所描述）。第一區包含AEFRHDSGY (SEQ ID NO: 85)或其片段（如：AEFRHD(SEQ ID NO: 86) 、或 EFRHDSG(SEQ ID NO： 87)、EFRHD(SEQ ID NO: 88))，且第二區包含胺基酸序列 YEVHHQKLVFFAEDVG (SEQ ID NO: 89)或其片段（如：VFFA(SEQ ID NO: 90)、或 QKLFFAEDV(SEQ ID NO: 91))。另一可根據本發明使用之抗體爲單株抗體NAB61抗 -89- 201206479 體。NAB61結合Αβ1-1 1，但不結合全長之APP或C99(如 WO 07/062088所揭示者）。類似地，單株抗體82E1可根據本發明使用。82E1結合Αβ肽之N端，但不結合全長APP (如美國20080025988中所揭示者）。本發明之其他抗體爲抗-ADD L抗體。這類抗體已被製造出並選擇其特異結合ADDLs，而不結合Αβ單體或澱粉樣纖維的能力（見，如：WO 04/03 1 400)。其他可使用之抗體包括：（i)催化性抗體ΑΒΡ 102(抗體酶（Abzyme)，來自 Abiogen 製藥）；（ii)ACI-Ol Ab7 C2 (AC 免疫基因技術（AC Immune Genentech)); (iii)AZD-3102(阿斯利康（AstraZeneca)/Dyax) ; (iv)IVIg(Gammagard S/D 免疫球蛋白靜脈注射（Immune Globulin Intravenous)( 人類），來自百特生物（Baxter Bioscience)); (v)BAN 2401 (BioArctic神經科學公司/日本衛材有限公司）；（vi)Ri450( 霍夫曼羅氏（Hoffman-La Roche)/MorphoSys) ; (vii)LY2062430 (禮來（Eli Lilly)); (viii)h3D6(禮來）；（ix)ACU-5A5(來自默克/Acumen之ctADDL單抗）；α-澱粉樣球狀體（ASPD)抗體 (三菱製藥公司）；（xi)源自AN1792病患之PBMCs的抗體 (Neurimmune 治療公司）；（xii)BC05(武田（Takeda)); (xiii) CEN701-CEN706 抗體（Centocor/ 強生公司（Johnson & Johnson));及（xiv)PF-04360365(亦稱爲 RN-1219(h2286) ’來自輝瑞製藥/Rinat神經科學）。所有這些抗體可各根據本發明之任何方法使用》如 US 6,387,674 及 WO 99/06536 中之描述，ABP 102 201206479

抗體分裂聚集之Αβ。如US 200701 663 1 1中之描述ACI-01 Ab7 C2抗體結合至Αβ肽之殘基10-20間。IVIg Gammagard SD免疫球蛋白抗體描述於，例如：Baxter.com之Baxter 生物科學網站。BAN 2401抗體爲一種結合Αβ原纖絲之人化抗體，其描述於，如：WO 05/ 1 23 775中。人R-1450 HuCAL抗體具有雙重 266/3 D6抗原決定部位。人化 LY2062430抗體（IgG)結合至Αβ肽之殘基16-23間且描述於，如：美國專利第7,1 95,76 1號中。人化h3D6抗體結合至 Αβ肽之殘基1 -5間且描述於，如：美國專利第 7,318,923號中。BC05抗體結合Αβ抗原決定部位之C端且描述於 Asami-Odaka ，等（2005)iVewi*odege/ieraiz’ve Dkeaies 2:3 6-43 中。該 CEN7(H-CEN706 抗體描述於，如 WO 05/0285 1 1中。人化PF-04360365抗體結合至Αβ肽之殘基28-40間且描述於，如：WO 04/032868中。

此處所描述之任何抗體或抗體片段可利用標準方法來設計或製備，如：US 20040038304、US 20070020685、 US 200601660184、 US 20060134098、 US 20050255552、 US 20050130266 、 US 2004025363 ' US 20040038317 ' US 20030157579 及 US 7,335,478 中所揭示者。上述之任何抗體可製造成具有不同之同型或突變種同型以控制結合不同Fq受體的程度。缺乏Fc區（例如， Fab片段）之抗體無法結合Fq受體。同型之選擇亦影響與 FcY受體之結合。不同人IgG同型對3種FcY受體， FqRI、FqRII及FqRIII之各別親和力已被測定出。（見 -91- 201206479 ’ Ravetch & Kinet, Annu.Rev.Immunol.9, 457( 1 99 1 ))。 FcyRI爲以單體型式結合igGs的高親和力受體，後兩者爲僅以多聚型式結合IgGs之低親和力受體。一般而言， IgGl和IgG3二者對所有三種受體均具有顯著之結合活性 ’ IgG4僅對FcyRI且IgG2僅對一種類型的Fc^rii(稱爲 IlaLR)具結合活性（見 ’ Parren 等 ’ j.immunol.l48, 695(1 992))。因此，當需要與Fq受體加強結合時通常係選擇人同型IgGl，而較弱之結合通常係選擇igG2。所有同型中，鄰接或接近絞鏈區中之部位的突變（例如：以其他殘基取代殘基234、23 5、236及/或23 7)可降低對Fey受體之親和力，尤其是FcyRI受體（見，如：US 6,624,82 1 )。位置234 、23 6及/或23 7係選擇性地被丙胺酸取代而位置2 3 5被麩醯胺取代。（見，例如·· U S 5,624,821)。人IgG2同型中缺少位置236。人IgG2之位置234、235和237處之示範性胺基酸節段爲Ala Ala Gly 、 V a 1 A1 a A1 a、A1 a A1 a A1 a、V a 1 G1 u A1 a 及 A1 a G1 u Ala。人同型IgGl之突變種的較佳組合爲L234A、L235A 及G237A。特佳之抗體爲具有人同型IgG及此三種Fc區之突變的貝平紐如單抗。其他降低與Fey受體結合之取代爲E2 3 3P突變（尤其是在小鼠IgGl中）和D265A (尤其是在小鼠IgG2a中）。其他降低Fc及/或Clq結合之突變及突變組合之實例描述於實施方式中（E318A/K320A/R322A( 尤其是在小鼠 IgGl 中），L23 5A/E318A/K320A/K322A(尤其是在小鼠IgG2a中））。類似地，人lgG4中之殘基 201206479 241(Ser)可被，如：脯胺酸取代以擾亂Fc結合。恆定區中可製造附加突變以調節效應子活性。例如，可在IgG2a恆定區之A330S、P331S或此二處製造突變。在IgG4方面，可在E233P 、F234V及L23 5A製造突變，並帶有G23 6缺失，或其任何組合。IgG4亦可具有一或兩個下列突變：S228P及L23 5E。使用中斷之恆定區序列來調節效應子功能進一步描述於，例如：WO 06/1 1 8959 和 WO 06/036291 中 ° 人IgG之恆定區中可製造附加突變以調節效應子活性 (見，如：WO 06/03291)。這些包括對人IgGl之下列取代 :(i)A3 27G、A3 30S、P331S ; (ii)E233P、L234V、L23 5A 、G23 6 缺失；（iii)E2 3 3 P、L234V、L235A ; (iv)E23 3P、 L2 34V、 L2 3 5 A、G23 6 缺失、A3 27G、A3 3 0S、P331S ; 及（v)E23 3 P、L2 34V、L2 3 5A、A327G、A3 3 0S、P331S。抗體對FcR之親和力可藉由將重鏈恆定區中之某些殘基進行突變來改變。例如，破壞人IgG 1之糖基化部位可降低FcR結合，從而降低抗體之效應子功能（見，例如 WO 06/03 6 2 9)。該三肽序列NXS、NXT及NXC(其中X爲脯胺酸外之任何胺基酸）爲將N殘基糖基化之酶辨識部位。該三肽胺基酸之任何中斷（尤其是在IgG之CH2區中）將阻止該部位之糖基化。例如，人IgGl之N297的突變阻止糖基化且降低抗體與FcR結合。下列顯示數種示範之人化3D6抗體及其組成部分的序列。人恆定區顯示出在不同個體間具有同種抗原免疫球 -93- 201206479 蛋白變化及異構同種抗原免疫球蛋白（isoallotypes)變化，也就是，該恆定區在不同個體中之一或多個多形性位置處可能不同。異構同種抗原免疫球蛋白不同於同種抗原免疫球蛋白之處在於辨識異構同種抗原免疫球蛋白之血清係結合一或多個其他同型之非多形性區。顯示於下之3D6 (AAB-001)之IgGl恆定區的同種抗原免疫球蛋白爲Glmz ，其在位置356處具Glu，位置358處具Met。顯示於下之κ恆定區的同種抗原免疫球蛋白爲Km3，其在位置153 處具Ala，位置191處具Val»另一不同之同種抗原免疫球蛋白爲Km(l)，其分別在位置153處具Val，位置191 處具Leu。同種抗原免疫球蛋白變異體可在J Immunogen 3: 3 5 7 - 3 6 2 ( 1 9 7 6)及 Loghem,.Monogr Allergy 19: 40-5 1 (1986)中檢閱。其中包含解說之恆定區的其他同種抗原免疫球蛋白及異構同種抗原免疫球蛋白變異體。其中亦包含具有任何佔據天然同種抗原免疫球蛋白中之多形性位置的殘基交換之恆定區。其他重鏈IgGl同種抗原免疫球蛋白之實例包括：Glm(f)、Glm(a)及 G1 m(x)。G1 m(f)與 Glm(z)之不同處在於其在位置214處具有Arg而非Lys。 Glm(a)在位置3 55-35 8處具有胺基酸Arg、Asp、Glu、 Leu ° 人化3D6全長輕鏈（信號序列下方劃線）（貝平紐如單抗及 ΑΑΒ-003)

MDMRVPAQLLGLLMLWVSGSSGDVVMTQSPLSLPVTPGEP

ASISCKSSQSLLDSDGKTYLNWLLQKPGQSPQRLIYLVSKLD 201206479 SGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCWQGTHFPR TFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNN FYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTL TLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO: 47) 人化3D6全長輕鏈，不包括信號序列（貝平紐如單抗及 AAB-003)

DVVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLDSDGKTYLNWL

LQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRV

EAEDVGVYYCWQGTHFPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFP

PSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNS

QESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQG LSSP VTKSFNRGEC(SEQ ID NO: 48) 編碼人化3D6輕鏈編碼序列之DNA(信號序列下方劃線）（貝平紐如單抗及AAB-003)

ATGGACATGCGCGTGCCCGCCCAGCTGCTGGGCCTGCTGA

TGCTGTGGGTGTCCGGCTCCTCCGGCGACGTGGTGATGAC

CCAGTCCCCCCTGTCCCTGCCCGTGACCCCCGGCGAGCCC

GCCTCCATCTCCTGCAAGTCCTCCCAGTCCCTGCTGGACT

CCGACGGCAAGACCTACCTGAACTGGCTGCTGCAGAAGC

CCGGCCAGTCCCCCCAGCGCCTGATCTACCTGGTGTCCAA

GCTGGACTCCGGCGTGCCCGACCGCTTCTCCGGCTCCGGC

TCCGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGCGTGGAGG

CCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTGGCAGGGCACCC -95- 201206479

ACTTCCCCCGCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAGAT

CAAGCGTACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCG

CCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTG

TGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGT

ACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCC

CAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACC

TACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGAC

TACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATC

AGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGG GAGAGTGTTAG(SEQ ID NO: 49)

人重鏈恆定區，IgGl同型，L234A/G237A ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSW NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYIC NVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEALGAPSVF LFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGV EVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK VSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFF LYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP GK(SEQ ID NO: 50) 如下列指出，c-端K殘基可不存在。

ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSW

NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYIC

NVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEALGAPSVF -96- 201206479

LFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGV

EVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK

VSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS

LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFF

LYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP G(SEQ ID NO: 51). 人化3D6全長重鏈（IgGl同型，L2 3 4A/G2 3 7A)，包括

信號序列（下方劃線）

MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC

AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD

NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY

SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAA

LGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL

SS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT

HTCPPCPAPEALGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVD

VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSV

LTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREP

QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP

ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO: 52) 如下列指出，C-端K殘基可不存在。

MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC

AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD

NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY •97- 201206479

SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAA

LGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL

SSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT

HTCPPCPAPEALGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVD

VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSV

LTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREP

QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP

ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO: 53). 人化3D6全長重鏈，不包括信號序列（IgGl同型， L234A/G237A)

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEALGAPSVFLFP

PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEV

HNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS

NKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT

CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCS VMHEALHNHYTQKSLSLSPGK( SEQ ID NO: 54) 如下列指出，C-端K殘基可不存在。 -98- 201206479

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEALGAPSVFLFP

PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEV

HNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS

NKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT

CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY

SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(S EQ ID NO: 55).

人重鏈恆定區，IgG4同型，S241P(Kabat編號）；S228P (EU編號）

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSW

NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTC

NVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN

KGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTC

LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS

RLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(S EQ ID NO: 56) 如下列指出，c-端K殘基可不存在。 -99- 201206479

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSW

NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTC

NVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN

KGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTC

LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS

RLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG(SE Q ID NO: 57) 人化3D6全長重鏈（IgG4同型，S24 1P)，包括信號序列（下方劃線）

MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC

AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD

NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY

SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAAL

GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS

SVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCP

PCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQE

DPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVL

HQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYT

LPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY

KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEAL HNHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO: 58) 如下列指出，c-端K殘基可不存在。 -100- 201206479

MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC

AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD

NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY

SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAAL

GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS

SVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCP

PCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQE

DPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVL

HQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYT

LPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY

KTTPP VLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCS VMHEAL HNHYTQKSLSLSLG(SEQ ID NO: 59). 人化3D6重鏈，不包括信號序列（IgG4同型，S241P)

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPS VFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNV

DHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKP

KDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKG

LPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLV

KGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL

TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQ -101- 201206479 ID NO: 60) 如下列指出，c-端K殘基可不存在。 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCVRYDH YSGSSDYWGQGTLVTVSSAST KGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNV DHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKG LPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLV KGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG(SEQ ID NO: 61).

人重鏈恆定區，IgGl 同型（AAB-003)，L234A/L235A/G237A ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSW NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYIC NVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPSVF LFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGV EVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK VSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFF LYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP GK(SEQ ID NO: 62) 201206479

如下列指出，C-端K殘基可不存在。 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSW

NSGALTSGVHTFPAYLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYIC NVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPS VF LFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGV EVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK VSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFF LYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP G(SEQ ID NO: 63). 人化 3D6全長重鏈，包括信號序列（IgGl同型， L23 4A/L2 3 5 A/G23 7A ): AAB-003

MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC

AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD

NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY

SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAA

LGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL

SSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT

HTCPPCPAPEAAGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVD

VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSV

LTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREP

QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP

ENNYKTTPP VLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO: 64) -103- 201206479 如下列指出，C-端K殘基可不存在。 MEFGLSWLFLVAILKGVQCEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSC AASGFTFSNYGMSWVRQAPGKGLEWVASIRSGGGRTYYSD NVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRYDHY SGSSDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAA LGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT HTCPPCPAPEAAGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVD VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSV LTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPP VLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO: 65). 人化 3D6重鏈，不包括信號序歹IJ (IgGl同型， L234A/L2 3 5A/G23 7A): AAB-003

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPSVFLFP

PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEV

HNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS

NKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT 201206479 CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK( SEQ ID NO: 66) 如下列指出，c -端K殘基可不存在。

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPSVFLFP

PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEV

HNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS

NKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT

CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY

SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(S EQ ID NO: 67). 編碼人化3D6輕鏈編碼區之DNA，包括信號序列（下方劃線）（IgGl 同型，L23 4A/L235A/G23 7A): AAB-003

ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGCTTTTTCTTGTGGCTATTTT

AAAAGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTGCTGGAGTCCGG

CGGCGGCCTGGTGCAGCCCGGCGGCTCCCTGCGCCTGTCC

TGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCAACTACGGCATGT

CCTGGGTGCGCCAGGCCCCCGGCAAGGGCCTGGAGTGGG

TGGCCTCCATCCGCTCCGGCGGCGGCCGCACCTACTACTC -105- 201206479

CGACAACGTGAAGGGCCGCTTCACCATCTCCCGCGACAAC

TCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGCG

CCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGTGCGCTACGACCA

CTACTCCGGCTCCTCCGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTG

GTGACCGTGTCCTCCGCGTCGACCAAGGGCCCATCGGTCT

TCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCAC

AGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAA

CCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCG

GCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACT

CTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGC

TTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGC

CCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAAGTTGAGCCCAAAT

CTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACC

TGAAGCCGCTGGGGCACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCA

AAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGG

TCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTG

AGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGC

ATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACA

GCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCA

GGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTC

CAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCC

AAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACC

CTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTC

AGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACA -106- 201206479

TCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACA

ACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTC

CTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGG

TGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATG

AGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCT GTCCCCGGGTAAATGA(SEQ ID NO: 68)

貝平紐如單抗之全長重鏈，不包括信號序列，IgGl 同型，無Fc突變

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST

KGPS VFPLAPS SKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN

KALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTC

LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS

KLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(S EQ ID NO: 6 9) 如下列指出，C-端K殘基可不存在。

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMSWVRQAP

GKGLEWVASIRSGGGRTYYSDNVKGRFTISRDNSKNTLYLQ

MNSLRAEDTAVYYCVRYDHYSGSSDYWGQGTLVTVSSAST -107- 201206479

KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG

ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN

HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPP

KPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN

KALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTC

LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS

KLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(SE Q ID NO: 70) 在某些抗體中，人IgG重鏈恆定區之位置234、235 及237可分別爲AAA、分別爲LLA、分別爲LAG 、分別爲ALG、分別爲AAG、分別爲ALA、或分別爲LAA。如上所示，AAB-003爲貝平紐如單抗之L234A、L2 3 5A及 G23 7A變異體（即，具有與貝平紐如單抗一致之胺基酸序列，除L234A、L235A及G23 7A突變外，丙胺酸（A)爲變異體胺基酸）。如貝平紐如單抗，A AB-003具有全長之人 κ輕鏈恆定區及全長之人IgG 1重鏈恆定區（在貝平紐如單抗或AAB-003中，C端賴胺酸殘基有時在細胞內裂解，有時從最終產品中遺漏）。雖然AAB-003中之三種突變較接近絞鏈區，而非補體結合區，但相對於貝平紐如單抗，AAB-003與FcY受體及Clq之結合降低。因此’ AAB-003抗體具有降低之誘發吞噬作用及補體串聯反應的能力。此外，AAB-003顯示出與其他具有少於AAB-003中所存在之三個突變的同一 -108- 201206479 抗體（如：在殘基234及23 7處具有取代）相比下，與人 FcRII的結合降低，這表示 AAB-0〇3 Fc區中所有之這三個突變有助於降低效應子功能。重鏈恆定區中減少與Fq 受體或Clq之交互作用的突變可減少小鼠模型中之微量出血，而不會消除有用之活性。小鼠中之微量出血爲一種可能促成人體中出現血管源性水腫的因素。帶有這類突變之抗體保留抑制認知衰退之能力及清除澱粉樣沈積之能力》類似地，重鏈恆定區突變體亦可兼有上述之可變區序列，例如：人化12A1 1和12B4抗體所具者。下表顯示帶有上述抗體之突變的重鏈可變區及重鏈恆定區之示範組合。表中所示之特定抗體（如：12A11)的重鏈可與任何上述之用於該與輕鏈恆定區連接的抗體之輕鏈可變區搭配，例如：如下列之人κ輕鏈恆定區： RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKH KVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO: 85) 或其同種抗原免疫球蛋白或異構同種抗原免疫球蛋白 -109- 201206479 表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恒定區 10D5(變體 1) 9 50 9 51 9 56 9 57 9 62 9 63 12B4 32 50 32 51 32 56 32 57 32 62 32 63 12A11(變體 1) 11 50 11 51 11 56 11 57 11 62 11 63 12A11(變體 2) 12 50 12 51 12 56 12 57 12 62 12 63 12A11(變體 2.1) 13 50 13 51 -110- 201206479

表 1 全長重鏈SEQID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恆定區 13 56 13 57 13 62 13 63 12A11(變體 3) 14 50 14 51 14 56 14 57 14 62 14 63 12A11(變體 4.1) 15 50 15 51 15 56 15 57 15 62 15 63 12A11(變體 4.2) 16 50 16 51 16 56 16 57 16 62 16 63 12A11(變體 4.3) 17 50 17 51 17 56 17 57 17 62 -111- 201206479 表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恆定區 17 63 12A11 (變體 4.4) 18 50 18 51 18 56 18 57 18 62 18 63 12A11(變體 5.1) 19 50 19 51 19 56 19 57 19 62 19 63 12A11 (變體 5.2) 20 50 20 51 20 56 20 57 20 62 20 63 12A11(變體 5.3) 21 50 21 51 21 56 21 57 21 62 21 63 12A11(變體 5.4) 22 50 22 51

-112- 201206479

表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恒定區 22 56 22 57 22 62 22 63 12A11(變體 5.5) 23 50 23 51 23 56 23 57 23 62 23 63 12A11(變體 5.6) 24 50 24 51 24 56 24 57 24 62 24 63 12A11(變體 6.1) 25 50 25 51 25 56 25 57 25 62 25 63 12A11(變體 6.2) 26 50 26 51 26 56 26 57 26 62 -113- 201206479 表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恆定區 26 63 12A11(變體 6.3) 27 50 27 51 27 56 27 57 27 62 27 63 12A11(變體 6.4) 28 50 28 51 28 56 28 57 28 62 28 63 12A11(變體 7) 29 50 29 51 29 56 29 57 29 62 29 63 12A11(變體 8) 30 50 30 51 30 56 30 57 30 62 30 63 12B4 32 50 32 51

-114- 201206479 表 1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯

抗體重鏈重鏈可變區恆定區 32 56 32 57 32 62 32 63 266 34 50 34 51 34 56 34 57 34 62 34 63 2〇C2(變體 1) 38 50 38 51 38 56 38 57 38 62 38 63 20C2(變體 2) 39 50 39 51 39 56 39 57 39 62 39 63 C705 41 50 41 51 41 56 41 57 41 62 -115- 201206479 表 1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恆定區 41 63 C706 43 50 43 51 43 56 43 57 43 62 43 63 2286(變體 1) 45 50 45 51 45 56 45 57 45 62 45 63 2286(變體 2) 46 50 46 51 46 56 46 57 46 62 46 63 3D6(變體4) 72 50 72 51 72 56 72 57 72 62 72 63 10D6(變體 2) 74 50 74 51

-116- 201206479

表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恒定區 74 56 74 57 74 62 74 63 2E7(變體1) 76 50 76 51 76 56 76 57 76 62 76 63 2E7(變體2) 77 50 77 51 77 56 77 57 77 62 77 63 2E7(變體3) 78 50 78 51 78 56 78 57 78 62 78 63 9TL 79 50 79 51 79 56 79 57 79 62 -117- 201206479 表1 全長重鏈SEQ ID NOS與各別可變及恆定區SEQ ID NOS之關聯抗體重鏈重鏈可變區恆定區 79 63 6G 81 50 81 51 81 56 81 57 81 62 81 63 2.1 82 50 82 51 82 56 82 57 82 62 82 63 恆定區中之胺基酸係藉由與人抗體EU比對來編號（見，Cunningham et a 1., J.Biol.Chem., 9， 3161(1970))。亦良卩，抗體之重鏈及輕鏈係與EU之重鏈及輕鏈排列比對以使胺基酸序列同一性達到最高且抗體中之各胺基酸係編派與EU中對應之胺基酸相同的號碼。EU編號系統爲傳統式（大致上’見：Kabat ei fl/·，Segwences 〇/ /Voie/w 〇/ Immunological Interest, NIH Publication No.91-3242, US Department of Health and Human Services( 1991)) 0 抗體對補體成分Clq的親和力可藉由將重鏈之胺基酸殘基318、3 20及322的至少其中之一突變成具有不同側 -118- 201206479 鏈之殘基來改變。其他用於改變（如：降低或終止）抗體對 Clq之特異性結合的合適變動包括將殘基318(Glu)、 320(Lys)及322(Lys)的任何之一改變成Ala。Clq結合活性可藉由以其側鏈上具有不適當官能之殘基替換該三個指明之殘基的任何之一來終止。僅以A1 a取代離子性殘基以終止C 1 q結合是不必要的。亦可使用其他經烷基取代之非離子性殘基（諸如Gly、lie、Leu或Val)、或芳香族非極性殘基（如：Phe、Tyr、Trp及Pro)來取代該三個殘基中之任一個以終止C1 q結合活性。此外，亦可使用極性非離子性殘基（如：Ser、Thr、Cys及Met)取代殘基320及322，但非3 1 8，以終止 Clq結合活性。以極性殘基取代 3 1 8(Glu)可修改但未終止Clq結合活性。以Ala取代殘基 297(Asn)可去除溶解活性，但僅梢微降低（約減弱3倍）對 Clq之親和力。此種改變可破壞糖基化部位及補體活化所需要之碳水化合物之呈現。此部位之任何其他取代亦破壞糖基化部位。可影響Clq結合人IgGl之恆定區的額外突變包括那些描述於，如：W0 06/036291中者。在此情況下，可製造至少一種下列取代來降低Clq結合：D270A、K322A、 P329A及P311S。所有這些突變（包括在殘基297、318及 3 20處之突變）可各自單獨或聯合製造。具有能降低與Fq受體及/或Clq結合之重鏈恆定區突變的抗體可用於本發明之任何方法中。較佳地，此類抗體相對於缺少該突變之其他同一抗體而言，對Fq受體及 -119- 201206479 /或Clq至少一者之結合活性降低至少50%。 Β. Αβ片段許多Αβ片段現已在科學及專利文獻中被描述爲用於主動免疫療法之作用劑（見，例如：US 6,750,324，US 200402 1 3 800; US 20070 1 34762)。一般而言，包括 Αβ 之殘基1-11間之抗原決定部位的片段可誘發結合Fey受體之抗體並誘發對抗澱粉樣沉積之清除反應，然而，缺乏A 冷之殘基1-11間之抗原決定部位的片段所誘發之抗體將優先或專門結合可溶型ΑΘ而非斑塊且誘發很少（若有任何）之對抗澱粉樣沉積的清除反應。用於誘發結合澱粉樣沉積之抗體及誘發清除反應之較佳片段爲從Αβ之殘基1-3開始，在Αβ之殘基7-1 1結束的Ν端片段。示範之Ν端片段包括入01-5、1-6、1-7、1-10、3-7、1-3及1-4，以1-7爲特佳者。一類示範之片段包括從Α/3之殘基1-3間（包含在內）開始，在Α/3之殘基 7-1 1間結束（包含在內）的片段。用於誘發對抗可溶性Α/3之抗體的較佳片段（其誘發很少（若有任何）之對抗澱粉樣沉積的清除反應）包括： Αβ15-21 ' Α β 16-22 > Αβ17-23 ' Αβ18-24 ' Αβ19-25 > Αβ15-22、Αβ16-23、Αβ17-24、Αβ18-25、Αβ15-23、 Αβ16-24、Αβ17-25、Αβ18-26、Αβ15-24、Αβ16-25、 Αβ15-2 5。Αβ16-23特佳，意指包括Αβ之殘基16-23且缺乏Αβ之其他殘基的片段。具有5-10(宜爲7-10)個連續胺 -120- 201206479 基酸之Αβ42或43的C端片段亦爲較佳者。亦可使用 Αβ40或39之類似的C端片段。這些片段可產生誘發終端特異性抗體之抗體反應。片段宜缺乏Τ細胞抗原決定部位 (其將誘導Τ細胞對抗Αβ) » —般而言，Τ細胞抗原決定部位係大於1〇個連續胺基酸。因此，較佳之Α β片段的大小爲5-10(宜爲7-10)個連續胺基酸；即，足夠產生抗體反應而不產生Τ細胞反應之長度。較佳地，不具有Τ細胞抗原決定部位，因爲這些抗原決定部位對片段之免疫活性並不需要且可能會造成病患之次族群中不利的炎症反應。可用於本發明方法中之誘發抗Αβ抗體的作用劑亦包括：⑴ACI-24(AC 免疫）；（ii)Affitopes AD02 及 AD02( Affiris GmbH) ； (iii)極地免疫治療齊!I KLVFFAGDV(Arctic

Immunotherapeutic KL V F F A G D V) (S E Q ID NO: 92 )(Bio Arctic Neuroscience/Eisai) ; (ίν)Αβ1-15-Κ-Κ-Αβ1-15(布里格姆與細女醫院（Brigham & Women’s Hospital)) ; (v)P_VaxTM& Recall-VaxTM(lntellect 神經科學公司（Neurosciences)); (vi)K6-Apl-30(Intellect 神經科學公司 /NYU) ; (vii)V-950( 默克）；（viii)CAD106(諾華（Novartis )/Cytos) ; (ix)A /3 DCtagTM奈米顆粒佐劑（普拉納生物技術 (Prana Biotechnology )/PRIMABi〇Med);(x)PXl 〇6(亦爲 2 A β 1 -1 1 - P A D R E，來自 Phai*mexa/Lundbeck);(xi)結合τ細胞抗原決定部位之Αβ4- 多倫多大學）；及（xii)p3i〇2和ρ3075(聯合生物醫學（ U n i t e d B i 〇 m e d i c a 1))。

ACI-24爲帶有插入脂質體雙層中之Api-15-K-K-16C -121- 201206479 棕櫚酸的Αβ 1-15脂質體構造物。這些化合物描述於US 2004/0242845、WO 05/081872、US 2007/0281006、和 US 2006/0073 1 58 中。Affitopes AD01 及 AD02 爲來自 Αβ 之 Ν端的模擬抗原決定部位（mimotopes)(如WO 06/005707 中之描述）。極地免疫治療劑係衍生自E692G之Αβ22(如 US 20020162129 及 US 20070248606 中所描述者）》八/3 1-15-K-K-Ay3 1-15代表兩個連接之Ν端Αβ片段（如WO 05/01 2330 和 WO 02/0 1 23553 中所描述者）。点-Vax™、 Recall-Vax™& Κ6-Α/3 1-30爲連接Τ細胞抗原決定部位之Αβ片段（如WO 01/42306中所描述者）。V-950爲一種連接多價線性肽之8聚體Αβ肽，其帶有至少有一個間隔子及一多價支鏈型多抗原肽（如WO 00/121656中所描述者 )。CAD106爲連接Αβ肽之Ν端的Qp載體（一種RNA VLP)(如WO 04/0 1 62 82中之描述）。Αβ DCtagTM奈米顆粒佐劑係描述於，如：WO 02/00245中。PX106爲連接T細胞抗原決定部位之Αβ 1-1 1肽，稱爲“泛DR抗原決定部位肽（PADRE)，，（如 US 7 135181 中所描述者）。Ρ3102 及 ρ3 075 爲藉由間隔子連接T細胞抗原決定部位（例如，麻疹抗原決定部位）之 ΑβΙ-14 肽（如 US 20030068325、US 20040247612、US 6906169 和 WO 02/096350 中所描述者）〇片段通常爲天然Αβ肽，但可包含非天然胺基酸或包含在Ν或C端胺基酸之1、2、5、10或甚至所有位置處之修改。例如：在Αβ之位置1及/或7處之天然天門冬胺 -122- 201206479 酸殘基可被異-天門冬胺酸取代。非天然胺基酸之實例爲 D、α、α·二取代之胺基酸、N_烷基胺基酸、乳酸、4_羥基脯胺酸、γ -羧基麩胺酸酯、ε-Ν，Ν，Ν -三甲基賴胺酸、ε-Ν-乙醯基賴胺酸、Ο -磷酸絲胺酸、Ν -乙醯基絲胺酸、Ν -甲醯基甲硫胺酸、3-甲基組胺酸、5-羥基賴胺酸、Ω-Ν-甲基精胺酸、β-丙胺酸、鳥胺酸、正白胺酸、正纈胺酸、羥基脯胺酸、甲狀腺素、γ-胺基丁酸、高絲胺酸、瓜胺酸及異天 g 門冬胺酸。本發明之某些治療劑爲all-D肽類，如：all-DAp或all-DAp片段及all-D肽類似物。可在基因轉殖動物模型中與未處理或安慰劑對照組比較，以篩選片段之預防或治療效能。片段通常係與載體分子結合，該載體分子提供一個T 細胞抗原決定部位，從而促進對抗與該載體結合之片段的免疫反應。單一作用劑可連接至單一載體，一種作用劑之數個複體可連接至單一載體之數個複體，其又彼此連接， φ 一種作用劑之數個複體可連接至單一載體之單一複體，或 —種作用劑之單一複體可連接至單一載體或不同載體之數個複體。合適之載體包括血清白蛋白、鎖孔蟲戚血藍蛋白 (keyhole limpet hemocyanin)、免疫球蛋白分子、甲狀腺球蛋白、卵白蛋白、破傷風類毒素、或來自其他致病菌（諸如白喉（如CRM 197)、大腸桿菌、霍亂、或幽門螺旋桿菌）之類毒素、或減毒毒素衍生物。T細胞抗原決定部位亦爲合適之載體-分子。藉由連接本發明之作用劑與免疫刺激性聚合物分子（例如：三棕櫚醯-S-甘油半胱胺酸 -123- 201206479 (Pam3Cys)、甘露聚醣（甘露糖聚合物）、或葡聚醣（a/3 1—2 聚合物））、細胞活素（如：IL-1、IL-Ια及冷肽，IL-2、r-INF、IL-10、GM-CSF)及趨化因子（例如：ΜΙΡ1-α和召，以及RANTES)可形成某些結合物。致免疫劑亦可連接增強跨越組織之運輸的狀（如O'Mahony，WO 97/17613及 WO 97/1 7614中所描述者）。免疫原可與帶有或不帶有間隔子胺基酸之載體連接（如gly-gly)。其他載體包括病毒樣顆粒。病毒樣顆粒（VLPs)(亦稱爲擬病毒粒子（pseudovirions)或病毒源性顆粒）代表由數個病毒衣殻及/或外套蛋白複體（其可在活體內自行組裝成具有界定好之球形對稱的 VLPs)所組成之次單位構造。 (Powilleit，ei α/.，（2007)尸2(5):e415)。這些粒子被發現可作爲抗原遞送系統。由於其微粒性質及高分子量’ VLPs可大量生產且易於大量純化。VLPs可不需額外施用佐劑來誘發免疫反應。（Ulrich ei fl/., (1 996) /nierviro/og：v 3 9:1 26 - 1 3 2)。作爲VLP抗原遞送系統之示範性嵌合粒子包括那些以下列病毒爲基礎者：B型肝炎病毒、人類免疫不全病毒（HIV)、酵母逆轉位子 (retrotransposon)Ty、酵母整體病毒（totivirus)L-A、細小病毒、流感病毒、諾沃克病毒（Norwalk virus)、輪狀病毒、與腺相關之病毒、藍舌病病毒、A型肝炎病毒、人類乳頭狀瘤病毒、麻疹病毒 '多瘤病毒和RNA噬菌體病毒，以及那些以各種不同之逆轉錄病毒和慢病毒爲基礎者。檢閱時’見：Lechner’ 等。（2002)/wiervi_r〇/〇公_>; 45:212-217 124- 201206479 B型肝炎病毒之核心蛋白（HBcAg)是一種用於攜帶外來抗原之常見的 V L P (見，Κ ο 1 e t z k i e f α /.，卩1 9 9 7彡G e « Hr 78:2049-2053)。簡單地說’ HBcAg可作爲構建呈現延長之外來蛋白節段的VLPs之核心。該方法係使用一種在 C-端截平之HbcAg及包含終止密碼子之外來蛋白質序列間含有連接子序列之構造物。截平之HBcAg/外來蛋白嵌 _ 合物係透過基於卵白密碼子TGA-Trp突變之機制利用閱讀框構表現，以表現在大腸桿菌遏制子菌種中。該由 Koletzki等人所描述的方法可將外來長蛋白質序列納入 VLPs中，以使VLP可攜帶較多種之抗原。 HIV病毒Gag蛋白可作爲抗原載體系統（見，Griffiths et al., (1993)7 Virol. 67(6):3 1 9 1-3 198)。Griffiths 係利用 HIV之V3環（其爲HIV外套之主要中和決定簇）。該Gag :V3融合蛋白在活體內組裝成雜合之Gag粒子，稱爲病 φ 毒源性顆粒（VDPs)。VDPs誘導體液及細胞性應。由於V3 環含有CTL抗原決定部位，以Gag : V3進行免疫可誘導對抗VLP之V3蛋白部分的CLT反應。亦可使用雜交株 HIV: Ty VLP(見，Adams ei α/., (1 987)#fliwre 329(3):68-70)。HIV: Ty VLP 使用酵母轉位子Ty之pi蛋白。pi蛋白之前381個胺基酸足夠形成 VLP。HIV: Ty融合蛋白可在活體內組裝成VLPs並誘導對抗由VLP攜帶之HIV抗原的免疫反應。使用Typl蛋白之VLPs亦可包含融合至整個α2-干擾素（牛乳突瘤狀病 -125- 201206479 毒El和E2基因之產物）之pi及流感血凝素之一部分。這些Ty融合物各自形成VLPs且可誘導對抗非-Ty VLP組成分之抗血清產生。 VLPs亦可從酵母全病毒 L-A之變異體設計（見 Powilleit ei α/· (2007)尸10«5 One 2(5):e415)。L-A 病毒之 Pol基因可以適當之抗原取代以誘導特異性免疫反應，此證明酵母VLPs爲有效的抗原載體。亦可使用重組之非複製性細小病毒樣顆粒作爲抗原載體。（Sedlik，ei 〇/· ( 1 997)尸见94:7503-7508)。這些粒子可允許攜帶之抗原進入細胞質，使其進入第I型MHC限制之免疫途徑，從而刺激由細胞毒性T淋巴細胞（CTL)介導的反應。特別是，Sedlik使用PPV : VLP，其含有小病毒（parvovirus)之VP2衣殼蛋白，而來自淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV)之殘基118-132係插入VP2衣殼蛋白中。該含有LCMV之PPV: VLP可誘發對抗LCMV之免疫反應，以在經預先免疫化之小鼠中引出對抗致命性病毒劑量之免疫保護作用。 VLPs亦可包含缺乏流感NS2基因，無法自行複製之流感病毒（Watanabe，et al. ( 1 996)·/ h.ro/. 7 6(2): 767-773 ) e這些VLPs感染哺乳動物細胞並允許外來蛋白在其中表現。亦可使用以諾沃克病毒（NV)爲基礎的VLPs作爲遞送免疫原之載體。（Ball，ei fl/· ( 1 117: 40-48)。NV基因組具有3個開放閱讀框構（〇RFsl-3)。重 -126- 201206479 組桿狀病毒表現ORFs 2及3時可容許自動組合高產量之重組諾沃克病毒（rNV)VLPs。藉由將本發明之作用劑連接至少一個T細胞抗原決定部位可形成某些結合物。某些T細胞抗原決定部位是雜亂不一致的，而其他T細胞抗原決定部位則是共通一致的。雜亂不一致的T細胞抗原決定部位可在非常多種顯示各種 HLA類型之個體中加強誘導T細胞免疫功能。相對於雜亂不一致的T細胞抗原決定部位，共通一致的T細胞抗原決定部位可在很大比例（例如，至少75%)之顯示不同 HLA分子（由不同HLA-DR對偶基因編碼）的個體中加強誘導T細胞免疫功能。天然產生之T細胞抗原決定部位大量存在，諸如：破傷風類毒素（如：P2和P3 0基因抗原決定部位）、B型肝炎表面抗原、百日咳、破傷風、麻疹病毒F蛋白、沙眼衣原體iracAomfl"·?)主要外膜蛋白、白喉類毒素 (diphtheria toxoid)、惡性瘧原蟲環子孢子 circumsporozoite Τ)、惡性瘧原蟲 CS 抗原 (P/asmoi/ii/m /a/ciparw/w CS antigen)、曼氏血吸蟲隣酸丙 M ^ ^ (Schistosoma mans on i triose phosphate isomerase) ' 大腸桿菌 TraT(£^c/ier/cA/a co/i TraT)及流感病毒血凝素 (HA)。本發明之致免疫肽亦可結合下列文獻中所描述之T 細胞抗原決定部位：Sinigaglia F.ei ci/.，TVaiMre, 336:778-7 80( 1 9 8 8); Chicz R.M.ei al., J.Exp.Med., 1 7 8:27-47( 1 993) ;Hammer J.ei al., Cell 7 4:1 97-203( 1 993); Falk K.et al., -127- 201206479

Im munogenetics y 39:230-242(1994); WO 98/23635;及 Southwood S · e t al. J. Immunology, 160:3363-3373(1998)

O 載體亦包括病毒樣顆粒（見us 20040141984)。片段通常係與藥學上可接受之佐劑一起投服。相對於若該肽係單獨使用的情況，該佐劑可增加經誘發之抗體的效價及/或經誘發之抗體的結合親和力。多種佐劑可與A 冷之致免疫性片段一起使用以引出免疫反應。較佳之佐劑增強對免疫原之內在反應，不會造成免疫原之構形改變而影響反應之品質形式。較佳之佐劑包括氫氧化鋁和磷酸鋁、3去-0-醯化之單磷醯脂質 A(MPLtm)(見GB 22202 1 1 (RIB I ImmunoChem Research Inc., Hamilton, Montana,現爲Corixa之一部分）。StimulonTM QS-21爲自南美洲發現之县樹（Quill aj a Saponari a Molina tree)樹皮分離出的三蔽巷苷或皂素（見 Kensil ei β/·，Facci_”e TAe βι/όΜ/ίίί and Adjuvant App ro ac h(? ov/ ell & Newman, Plenum Press, NY, 1 9 9 5 ); US 5,057,540) ' (Aquila BioPharmaceuticals,

Framingham, MA ;目前 Antigenics，Inc.，New York, NY) 。其他佐劑爲水包油乳劑（諸如角鯊烯或花生油），其選擇性地與免疫興奮劑組合，諸如單磷醯脂質A(見Stoute Μ α/.，J.MecL 3 3 6，8 6-9 1 ( 1 997))、普蘭尼克聚合物 (pluronic polymers)及已被殺死之分枝桿菌。另一種佐劑爲CpG(WO 98/40 1 00)。佐劑可以治療組成物之一種組成分與活性劑一起投服或可在投服治療劑之前、同時或之後 -128- 201206479 與活性劑分開投服》佐劑之較佳類別爲鋁鹽（明礬），諸如氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁。這類佐劑可與或不與其他特異性免疫刺激劑 (諸如MPL或3-DMP、QS-21、聚合或單體胺基酸，諸如聚麩胺酸或聚賴胺酸）一起使用。另一類佐劑爲水包油乳劑調製劑。這類佐劑可與或不與其他特異性免疫刺激劑一起使用，該免疫刺激劑係諸如胞壁醯狀（如：N -乙醯胞壁醯-L-蘇胺醯-D-異魅醯胺（thr-MDP)、N -乙醯-去甲胞壁醯-L-丙胺醯-D-異麩醯胺（nor-MDP)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺醯-D-異麩醯胺基-L-丙胺酸·2-(l’-2·二棕櫚醯-sn-甘油·3-羥基磷醯氧基）-乙胺（MTP-PE)、：^^乙醯葡糖胺基·N-乙醯胞壁醯-L-A1-D-異麩胺酸-L-Ala-二棕櫚醯氧基丙醯胺 (DTP-DPP)(theramideTM)，或其他細菌細胞壁組成分》水包油乳劑包括：（a)MF59(W〇 90/1483 7)，其含有5%角鯊烯、0.5%吐溫80以及0.5%Span 85(選擇性地含有不同量之 MTP-PE)，其係利用微射流機（microfluidizer)(諸如 110Y型微射流機）（Microfluidics，Newton MA)調製成亞微米粒子，（b)SAF，其含有 10%角鯊烯、0.4%吐溫80、5% 經普蘭尼克阻斷之聚合物L121及thr-MDP，這些係經微射流機處理成亞微米乳劑或經震盪混合以產生大粒徑之乳劑，以及（c)RibiTM 輔助劑系統（RAS)(Ribi ImmunoChem， Hamilton, MT)，其含有2%角鯊烯、0.2%吐溫80，以及一或多種來自下列之細菌細胞壁組成分：單磷醯脂質 A(MPL)、海藻糖二黴菌酸酯（TDM)和細胞壁骨架（CWS)’ -129- 201206479 宜爲 MPL + CWS(DetoxTM)。另一類較佳佐劑爲皂素佐劑，如3“|11111〇11^((^-21，Aquila，Framingham，麻州）或由此產生的粒子，諸如 ISCOMs(免疫刺激複合物）及ISCOMATRIX。其他佐劑包括 RC-529、GM-CSF 和弗氏完全佐劑（Complete Freund’s Adjuvant)(CFA以及弗氏不完全佐劑（IFA)。其他佐劑包括細胞活素，諸如介白素（如IL-1 α及/9肽類、IL-2、IL-4 、IL-6、IL-12、IL-13以及IL-15)、巨噬細胞株落刺激因子（M-CSF)、粒細胞-巨噬細胞株落刺激因子（GM-CSF)、腫瘤壞死因子（TNF)、趨化活素（諸如ΜΙΡ1 α和泠）以及 RANTES。另一類佐劑爲醣月旨質類似物，包括Ν-糖基醯胺類、Ν-糖基脲類和Ν-糖基胺基甲酸酯類，其各在糖殘基處被胺基酸取代以作爲免疫調節劑或佐劑（見 US 4,8 5 5,2 83 )。熱休克蛋白，如HSP70及HSP90亦可作爲佐劑。佐劑可與免疫原一起以單一組成物之形式投服，或可在投服免疫原之前、同時或之後投服。免疫原及佐劑可包裝在同一小瓶中一起供應，或可包裝在不同的小瓶中，混合後使用。免疫原及佐劑之包裝通常帶有指示所欲之治療施用的標籤。若免疫原及佐劑係分開包裝，該包裝通常包括使用前混合之指示。佐劑及/或載體之選擇係取決於包含佐劑之致免疫調製劑的穩定性、投服途徑、給藥時間表、用於該接種疫苗之物種的佐劑之效力，且，在人體中，藥學上可接受之佐劑爲已被核准或可被核准之供人類經由 -130- 201206479 相關調節體投服之佐劑。例如’完全弗氏佐劑並不適合用於人類投藥。明礬、MPL以及QS-21較佳。選擇性地，可同時使用二或者多種不同之佐靜j。較佳之組合包括明礬與 MPL、明礬與 QS-21、MPL 與 QS-2 1、MPL 或 RC-529 與GM-CSF以及明礬、QS-21和MPL —起。另外，可使用不完全弗氏佐劑（Chang ei fl/·，Ji/va«ce<i Drwg very 32，173-186(1998))，其可選擇性地與明礬、QS-21 和 MPL 的任何之一組合使用或與其全部組合一起使用 V.對治療反應良好之病患本攝生法可用於治療特徵爲腦內之Α；δ澱粉樣沉積的任何疾病。還有阿滋海默氏病，這類疾病包括唐氏症、帕金森氏症、輕度認知功能障礙及血管澱粉樣疾病。對治療反應良好之病患包括處於疾病之風險中但未顯示症狀之個人以及目前顯示出症狀之病患。在阿滋海默氏症之情況中，幾乎任何人都處於罹患阿滋海默氏症之風險中，只要他或她活得夠久。因此，本方法可預防性地投服給一般族群，而不需要對該病患進行任何風險評估。本方法亦可用於具有已知之阿滋海默氏症的遺傳風險之個人。這類個人包括那些有親屬曾罹患這種疾病，以及那些藉由遺傳或生化標誌分析而測定出其風險的個人。指向阿滋海默氏症之風險的遺傳標記包括APP基因中之突變，尤其是位置717 和位置670和671處之突變（分別稱爲哈迪（Hardy)及瑞典 -131- 201206479 (Swedish)突變）（見Hardy，如上述）。其他風險標誌爲早老基因（PS1和PS2)和ApoE4中之突變，AD、高膽固醇血症或動脈粥樣硬化之家族病史。目前患有阿滋海默氏症之個人可從特徵性癡呆以及出現如上述之風險因子辨識。此外，許多診斷測試可用於鑑定具有AD之個人。這些測試包括測量CSF tau及A /3 42之含量。升高之tau和減少之A 冷42含量表示出現AD。患有阿滋海默氏症之個體亦可藉由實例部分中所所討論之ADRDA標準診斷。在無症狀之病患中，可從任何年齡（例如：1 〇、20、 30)開始治療。然而，在病患達到40、50、60或70歲前通常沒有必要開始治療。治療通常需要在一段時間內投服給數個劑量。治療可藉由分析一段時間內之抗體含量來監控。若反應降低，則給予加強劑量。在可能之唐氏症候群病患的情況中，可在產前將治療劑投服給母親或在嬰兒出生後不久投服給嬰兒來開始治療。對治療反應良好之病患包括_ 50至87歲之病患、患有輕度至中度阿滋海默氏症之病患、MMSE評分爲14-26之病患、根據神經學和溝通障礙以及中風-阿滋海默氏症相關疾病（1^11^€0 8-八0110人）之標準而診斷出可能患有阿滋海默氏症之病患及/或其經羅森修正之哈金斯基缺血評分 (Rosen Modified Hachinski Ischemic score)小於或等於 4 之病患。核磁共振之掃描符合阿滋海默氏症之診斷的病患 (即，MRI上沒有其他可以歸因於其他疾病之異常，例如 :中風、腦外傷、蜘蛛網膜囊腫、腫瘤等）亦對治療反應 -132- 201206479 良好。 VI.治療攝生法在預防性應用中係投服給易罹患或處於阿滋海默氏症之風險中的病患足以消除或降低該疾病之風險、減輕該疾病之嚴重程度或延遲開始該疾病（包括該疾病之生化、組織學及/或行爲症狀）、其倂發症和疾病發展過程期間出現之中間病理學表型之量的作用劑或醫藥組成物或含彼之藥物。在治療性應用中係投服給懷疑或已患有這類疾病之病患足以治愈，或至少部分遏制該疾病之症狀（生化、組織學及/或行爲），包括其倂發症和疾病發展過程期間出現之中間病理學表型之量的組成物或藥物。用於治療上述病況之本發明組成物的有效劑量將根據許多不同因素而有所改變，這些因素包括投服方式、靶的部位、病患之生理狀態（無論病患是人或動物）、其他投服之藥物以及該治療是爲預防性或治療性。可選擇性地投服抗體來使病患體內之投服抗體的平均血清濃度達到0.1-60、0.4-20或1-15微克/毫升。這些範圍架構出在小鼠和人類中經證明有效之濃度，但在測量和個別病患之差異中可有些許誤差。血清濃度可透過實際測量來測定或根據投服之抗體量、投服頻率、投服途徑及抗體半衰期，從標準之藥物動力學（例如：WinNonline 4.0.1 版（Pharsight公司，美國Cary))預測。血清中之平均抗體濃度係選擇性地在1-10、1-5或2- •133- 201206479 4微克/毫升之範圍內。亦可選擇性地將病患之抗體的最高血清濃度保持在低於約28微克抗體/毫升血清以將治療效益相對於可能發生之副作用（尤其是血管源性水腫）最優化。較佳之最高血清濃度係在約4-28微克抗體/毫升血清之範圍內。最有利的爲病患之最高血清濃度低於約28微克抗體/毫升血清且病患之平均抗體血清濃度低於約7微克抗體/毫升血清的組合。選擇性地，該平均濃度係在約2-7 微克抗體/毫升血清之範圍內。投服抗體後血漿中之A/3濃度的變化大致與抗體血清濃度之變化類似。換言之，血漿中之AA濃度在投服抗體劑量後最高，然後隨著各劑量間抗體之濃度下降而下降。投服之抗體劑量及攝生法可加以改變以取得所需之血漿A 冷濃度。在這類方法中，抗體之平均血漿濃度可至少爲 450微微克/毫升或例如：在600-30000微微克/毫升或 700-2000微微克/毫升或800- 1 000微微克/毫升之範圍內〇較佳之抗體劑量範圍係約0.01至5毫克/公斤宿主體重，更常爲0.1至3毫克/公斤宿主體重或0.15-2毫克/公斤宿主體重或0.15-1.5毫克/公斤宿主體重。個體可每曰、隔天、每週、每兩週、每月、每季或根據任何其他經由實證分析決定的時間表投服此等劑量。示範性治療需要在延長之期間內（例如：至少6個月）投服數個劑量。另一示範性治療攝生法需要每兩週投服一次或每月投服一次或每 3至6個月投服一次。 -134- 201206479 在經由靜脈內途徑投服方面，適合按季經由靜脈內途徑投服0.1毫克/公斤至2毫克/公斤之劑量，宜爲〇.5毫克/公斤或1 .5毫克/公斤。用於每月經由靜脈內途徑投服之較佳抗體劑量爲0.1-1.0毫克/公斤之抗體，或宜爲0.5-1·〇毫克/公斤之抗體。在更頻繁之給藥方面（例如：從每週至每個月給藥），皮下投藥爲較佳者。皮下給藥較易於投服，且相對於靜脈 g 內給藥’可降低最高血清濃度。用於皮下給藥之劑量通常爲0.01至0.6毫克/公斤或0.01-0.35毫克/公斤，宜爲 0.05_0.25毫克/公斤。在每週或每兩週給藥方面，該劑量宜爲0.015-0.2毫克/公斤或0.05-0.15毫克/公斤。在每週給藥方面，該劑量宜爲0.05至0.07毫克/公斤（如：約 0.06毫克/公斤）。在每兩週給藥方面，該劑量宜爲至 0.15毫克/公斤。在每月給藥方面，該劑量宜爲01至〇3 毫克/公斤或約0.2毫克/公斤。每月給藥包括根據曆月或 φ 太陰月（即每四週）用藥。如同他處之應用中，此處以毫克/ 公斤表示之劑量可經由乘上典型病患之體重（如70或75 公斤）而轉換爲絕對質量劑量，結果通常係經四捨五入成整數。其他攝生法爲，如PCT/US2〇07/009499中所描述者。該劑量和頻率可依上文所討論，根據病患之ApoE狀態，在這些準則中變化。用於主動投藥之作用劑的量係在每名病患1 -500微克間變化，在人類投藥方面，更常爲每次注射5_ 1〇〇微克。每次注射之示範劑量爲每個人注射3、10、30或90微克 -135- 201206479 。免疫原之質量亦取決於免疫原中之致免疫性抗原決定部位對整體免疫原質量之質量比。通常，每一次免疫原之免疫接種係使用1(Γ3至1〇_5微莫耳之致免疫性抗原決定部位。注射之時間選擇可有很大的差異，從每日一次至1年一次，至10年一次。在任一指定日給予免疫原劑量，若亦投服佐劑時，劑量高於1微克/病患且通常高於1 〇微克 /病患，若無佐劑時則投服高於1 0微克/病患，通常高於 100微克/病患。一種典型之攝生法包含在免疫接種後於間隔時間（間隔6週）投服加強注射。另一種攝生法係在免疫接種後1、2和1 2個月進行加強注射。另一種攝生法需要終生每2個月注射一次。或者，加強注射可依免疫反應之監控指示不規律地進行。劑量和頻率可有所變化以使由主動作用劑誘發之抗體的平均血清濃度如被動投藥般在0.1-60、0.4_2〇或1-15或2-7微克/毫升的範圍內。該劑量和頻率可依上文之討論，根據病患之ApoE狀態，在這些準則中變化。 VII·根據攜帶者狀態之示範性攝生法本發明提供治療罹患阿滋海默氏症（例如，輕度或中度）之非攜帶者病患的方法，其中係投服給這類病患有效之抗體攝生法，該抗體係特異結合之N-端抗原決定部位。例如：該抗體可結合Α0殘基1-11、1-7、 1-5或 3 -7間之抗原決定部位。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。經由靜脈內輸注投服之抗體劑量可在約0.15毫克/公 -136- 201206479 斤至2毫克/公斤之範圍內。選擇性地，該劑量爲約〇.5 毫克/公斤至約1毫克/公斤。該劑量可，例如：每8-16週、每1-14週或每13週投服。本發明亦提供降低已被診斷爲罹患輕度或中度阿滋海默氏症之非攜帶者病患的認知衰退之方法。該方法需要投服給這類病患有效之抗體攝生法，該抗體係特異結合A/5 之N-端抗原決定部位。例如：該抗體可結合a石殘基卜 1 1、1-7、1-5或3-7間之抗原決定部位。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。經由靜脈內輸注投服之抗體劑量可在約0.15毫克/公斤至2毫克/公斤之範圍內。選擇性地，該劑量爲約0.5毫克/公斤至約1毫克/公斤。該劑量可，例如：每8-16週、每1-M週或每13週投服。經由比較正接受治療之病患與亦爲非攜帶者狀態且罹患輕度或中度之阿滋海默氏症的對照組病患族群（如：臨床試驗中之對照族群）的認知衰退可用來測量認知衰退。認知能力可藉由量表，諸如 ADAS-COG、NTB、MMSE 或 CDR-SB 測量。病患中這類量表中之變化速度（一段時間內的點）可依上述內容與對照組病患族群中之平均衰退相比較。本發明亦提供降低已被診斷爲輕度或中度阿滋海默氏症之非攜帶者病患的腦容量減少之方法。該方法需要投服給這類病患有效之抗體攝生法，該抗體係特異結合A/5之 N端抗原決定部位。例如：該抗體可結合A /3殘基1 -1 1、 1-7、1-5或3-7間之抗原決定部位。選擇性地，該抗體爲貝平紐如單抗。經由靜脈內輸注投服之抗體劑量可在約 -137- 201206479 0.15毫克/公斤至2毫克/公斤之範圍內。選擇性地，該劑量爲約0.5毫克/公斤至約1毫克/公斤。該劑量可，例如 :每8-16週、每1-14週或每13週投服。腦容量可藉由 MRI測量。病患之腦容量的變化可與亦爲非攜帶者狀態且罹患輕度或中度之阿滋海默氏症的對照組病患族群（如：臨床試驗中之對照族群）的腦容量平均減少値相比較。本發明亦提供治療罹患阿滋海默氏症（輕度或中度）之非攜帶者病患的方法，其中係投服給這類病患特異結合A 冷之N端抗原決定部位之抗體的攝生法β該攝生法可有效地將抗體之平均血清濃度維持在約0.1微克/毫升至約 60微克/毫升，選擇性地，0.4-20或1-5微克/毫升。此外，或者，投服該攝生法以將Α々平均血漿濃度維持在600-3000微微克/毫升、700-2000微微克/毫升或800-100微微克/毫升。或者，這類方法中之該抗體爲貝平紐如單抗。本發明亦提供治療爲ApoE4攜帶者且患有阿滋海默氏症之病患的方法，其中投服之抗體具有降低與Clq及/ 或和Fc r受體結合之恆定區突變。選擇性地，該抗體爲結合A/3之N端區間的抗原決定部位之抗體。選擇性地，該抗體爲 AAB-003。選擇性地，該病患係按季藉由 MRI 監控血管源性水腫。若發展出血管源性水腫，則可以減少或排除頻率或劑量。血管源性水腫可選擇性地以皮質類固醇治療。在消除血管源性水腫後可恢復投服治療。該劑量可選擇性地隨時間增加。本發明亦提供治療已被診斷可能患有阿滋海默氏症， -138- 201206479 而不論其ApoE4狀態之病患的方法。這類方法中係投服有效之抗體攝生法，該抗體特異結合至A沒之N端區。該抗體具有相對於其他無突變之同一抗體可降低與Clq及/ 或Fcr受體結合之恆定區突變。選擇性地，該抗體爲結合ΑΘ之N端區內的抗原決定部位之抗體。選擇性地，該抗體爲AAB-003。選擇性地，該病患係按季藉由MRI監控血管源性水腫。若發展出血管源性水腫，則可以減少或排除頻率或劑量。血管源性水腫可選擇性地以皮質類固醇治療。在消除血管源性水腫後可恢復投服治療。在消除血管源性水腫後，該劑量可選擇性地隨時間增加。本發明亦提供治療患有阿滋海默氏症之ApoE4攜帶者病患的方法，其包含經由皮下途徑投服給患有該疾病之病患特異結合ΑΘ之N端抗原決定部位之抗體。選擇性地，該抗體係以0.01-0.6毫克/公斤之劑量及介於每週至每個月之頻率投服。選擇性地，該抗體係以0.0 5 - 0 · 5毫克/ 公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係以0.05-0.25毫克/ 公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週至每兩週以 0.015-0.2毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週至每兩週以0·05-0·15毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週以0.05-0.07毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週以0.06毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每兩週以0.1-0.15毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每個月以0.1-0.3毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每個月以0 · 2毫克/公斤之劑 -139- 201206479 量投服。本發明亦提供治療患有阿滋海默氏症之Ap〇E4攜帶者病患的方法，其包含經由皮下途徑投服給患有該疾病之病患特異結合A/3之N端片段之抗體，其中該抗體係以 1-4 0毫克之劑量及介於每週至每個月之頻率投服。選擇性地，該抗體係以545毫克之劑量投服。選擇性地，該抗體係以2 · 5 -1 5毫克之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週至每兩週以1 -1 2毫克之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週至每兩週以2 · 5 -1 0毫克之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週以2.5-5毫克/公斤之劑量投服。選擇性地，該抗體係每週以4-5毫克之劑量投服。選擇性地，該抗體係每兩週以7-10毫克之劑量投服。 VIII.醫藥組成物本發明之作用劑通常係以包含活性治療劑之醫藥組成物的型式（即，加上多種不同之其他藥學上可接受之成分）投月艮。見，Remington's Pharmaceutical Science(第 15 版，Mack出版公司，Easton，賓夕法尼亞州（ 1 980))。較佳型式係取決於所欲之投服模式及治療性應用。根據所需之調製劑，該組成物亦可包含藥學上可接受、非毒性之載體或稀釋劑（其可定義爲常用來調製供動物或人類投服之醫藥組成物的載劑）。選擇之稀釋劑係不會影響組合物之生物活性的稀釋劑。這類稀釋劑之實例爲蒸餾水、磷酸緩衝之生理食鹽水、林格氏液、右旋糖溶液及漢克氏液（Hank’s -140- 201206479 solution)。此外，該醫藥組成物或調製劑亦可包含其他載體、佐劑或無毒性、非治療性、非致免疫性之安定劑，等〇醫藥組成物亦可包含大而經緩慢代謝之大分子，諸如蛋白質、多醣（諸如殼聚醣）、聚乳酸、聚甘醇酸及共聚物 (諸如乳膠官能化之瓊脂糖（Sephar〇Se)(TM)、瓊脂糖 (agarose)、纖維素，等）、聚合之胺基酸、胺基酸共聚物及脂質聚集物（諸如油滴或脂質體）》此外，這些載體可作爲免疫刺激劑（即，佐劑）。作用劑通常係經由腸胃道外途徑投服。抗體通常係經由靜脈內或皮下途徑投服。用於誘發主動免疫反應之作用劑通常係經由皮下或肌肉內途徑投服。在經由腸胃道外途徑投服方面，本發明之作用劑可以在生理上可接受之稀釋劑與藥學載體中之物質的注射溶液或懸浮液劑量型式投服，該藥學載體可爲無菌液體，諸如水油、生理食鹽水、甘油或乙醇》此外，輔助物質，諸如潤濕劑或乳化劑、界面活性劑、pH値緩衝物質，等可存在於組成物中。其他醫藥組成物之組成分爲石油、動物、植物或合成來源之成分，例如：花生油、大豆油及礦物油。一般而言，乙二醇類 (諸如丙二醇或聚乙二醇）爲較佳之液體載體，尤其是可用於注射溶液。抗體可以廸波（depot)注射劑或植入製劑之型式投服，該製劑可以容許活性成分持續釋出之方式調製。 US 20060 1 93850中描述一些較佳之調製劑。較佳之調製劑之pH値爲約5.5至約6.5，其包含：i.至少一種濃 -141- 201206479 度約1毫克/毫升至30毫克/毫升之A0抗體；ii.濃度約爲4%重量/體積之甘露醇或濃度約爲150mM之NaCl ; iii. 約5mM至10mM之組胺酸或琥珀酸化物；及iv.lOmM甲硫胺酸。選擇性地，該調製劑亦包括濃度約0.001 %重量/ 體積至約0.01 %重量/體積之聚山梨醇酯80。選擇性地’ 該調製劑之pH値爲約6.0至約6.5’且包含約10毫克/毫升之A /3抗體、約10 mM之組胺酸和約4%重量/體積之甘露醇以及約0.005%重量/體積之聚山梨醇酯80。選擇性地，該調製劑之pH値爲約6.0至約6.2且包含約20毫克/ 毫升之ΑΘ抗體、約1〇 mM之組胺酸、約4%重量/體積之甘露醇以及約0.005%重量/體積之聚山梨醇酯80。選擇性地，該調製劑之pH値約爲約6.0至約6.2且包含約30毫克/毫升之A/3抗體、約10 mM之組胺酸、約4%重量/體積之甘露醇以及約〇.〇〇 5 %重量/體積之聚山梨醇酯80。通常，組成物係製備成可注射之液體溶液或懸浮液型式；亦可製備成適合在注射之前形成在液體載劑中之溶液或懸浮液的固體形式。該製劑亦可經乳化或包囊在脂質體或微粒（如聚丙交酯、聚乙交酯或共聚物）以增強佐劑效果 (如上文所討論者）（見 Langer，Science 249:1 527(1 990) and Hanes, Advanced Drug Delivery Reviews 2 8 : 9 7 ( 1 9 9 7))。本發明之作用劑可以廸波注射劑或植入製劑之型式投服，該製劑可以容許活性成分持續或脈衝釋出之方式調製。適合用於其他投服模式之其他調製劑包括口腔、鼻內和肺部調製劑、栓劑及透皮敷用劑。在栓劑方面，黏合劑 -142- 201206479 和載體包括’例如：聚烯烴基二醇或甘油三酸脂；這類栓劑可從含有0.5%至10%(宜爲1%-2%)之活性成分的混合物形成。口服調製劑包含賦形劑，諸如製藥級之甘露醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、纖維素和碳酸鎂。這些組成物爲溶液、懸浮液、錠劑、九劑、膠囊、持續釋出之調製劑或粉末之形式且含有1〇%_95%之活性成分，宜爲 2 5%-7 0°/〇 » IX.套組和標籤本發明提供包含結合A/3之N端抗原決定部位之抗體的套組。該抗體通常係在小瓶中以凍乾或溶液形式，選擇性地，以單一劑型提供。在小瓶中之該抗體通常係在 GMP的條件下滅菌及製造。該套組亦可包括稀釋劑、注射器、針頭、靜脈注射或皮下點滴液，等。該套組通常包含使用之指示（例如··包裝仿單或標籤）。在某些套組中， φ 該指示明確指出該抗體係提供給AP〇E4攜帶者或非攜帶者或可提供給雙方。該指示亦可明確指出該抗體並不能提供給 ApoE4攜帶者。在某些套組中，該指示可提供 ApoE4測試之資料或來源。在某些套組中，該指示明確指出投服該抗體可達到的結果。該結果包括抑制認知衰退。該指示亦可包括對照組病患中之認知衰退的測量値（通常是來自這類病患族群之平均値）以供比較。認知衰退可藉，例如：ADAS-C0G、 NTB或CDR-SB測量。同樣地，該指示可提及對腦容量減 -143- 201206479 少之抑制或對心室容積之抑制。該指示亦可包括對照組病患中之腦容量減少或心室容積之抑制的測量値（通常是來自這類病患族群之平均値，以供比較）。在某些套組中，該指示明確指出潛在之副作用，包括血管源性水腫。該指示亦可明確指出監控攝生法，諸如每季、每6個月或每年進行MRI檢查。該指示可明確指出用於如上文討論之非ApoE4攜帶者及攜帶者之不同的監控攝生法。該指示亦可明確指出在出現及/或消除血管源性水腫時改變之給藥時間表和用於血管源性水腫之治療措施，諸如皮質類固醇。該套組亦可包括用於忌諱此治療之病患的指示，這些病患係，諸如先前經歷腦損傷、CVA、腦腫瘤、多發性腔隙（multiple lacunes)、靜脈血栓病（venothrombotic disease)、抗凝血（肝素/可邁丁（coumadin))或心房顫動。該套組亦可提供給藥途徑（如：皮下）、劑量或給藥頻率之指示。 X.具突變之IgGl恆定區的抗體本發明提供一種人IgGl恆定區（其中位置234、235 、236或237(EU編號）之胺基酸各爲丙胺酸）以及含有這類恆定區之經分離的抗體或融合蛋白。這類抗體包括如上述之人抗體，人化抗體及嵌合型抗體。這類抗體之實例包括抗A/3抗體、抗路易斯Y(LeY)抗原和5T4腫瘤抗原之抗體（諸如實例中所描述者）。融合蛋白包括連接恆定區之受體（如：TFT- α受體）的胞外結構區。用於將多肽融合或 -144- 201206479 結合至抗體恆定區之方法描述於，如··美國專利案第5,336,603 ' 5,622,929 ' 5,359,046 ' 5,349,053 ' 5,447,851 > 5,723,125 ' 5,783，181 、 5,908,626 、 5,844,095 ' 5，112,946 號；EP 0 307 434 ；0 3 67 1 66 ； EP 0 3 94 827 中。合倂這些突變之抗體或融合蛋白可提供IgGl同型之利益，包括藥物動力學和易於製造，並且具有相對於缺乏這些突變之其他同一抗體爲降低或排除之效應子功能。效 _ 應子功能通常係在結合一或多個Fcr受體、結合C1Q、抗體依賴性細胞毒性及/或抗體依賴性補體活性上受損。在某些抗體中，所有這些活性均被降低或排除。若具有上述三種突變之抗體與無該等突變之其他同一對照組抗體間之活性並無超過實驗誤差外之可偵測到的差異，則該活性被認爲已被消除。通常，突變之恆定區包括CH1、絞鏈、CH2及CH3 結構區。然而，CH1結構區（尤其是在融合蛋白中）有時被 φ 合成之連接子取代。某些恆定區包含可能除去C端賴胺酸殘基之全長IgGl恆定區。突變之恆定區的示範序列提供於SEQ ID NO : 62及63中。這些序列的不同處在於62 包含一未出現在63中之C端賴胺酸。序列62及63代表人IgGl之Glmz同種抗原免疫球蛋白。其他同種抗原免疫球蛋白之實例已提供於上。同種抗原免疫球蛋白爲人IgG 1恆定區中之天然多形性變異，不同個體間之IgG 1恆定區的多形性位置處彼此相異。 Glmz同種抗原免疫球蛋白在位置3 56具有Glu，在位置 -145- 201206479 3 58 具有 Met。 SEQ ID NO: 62及63之其他同種抗原免疫球蛋白變異體包含在內。在位置23 4、235及237處具有丙胺酸殘基之人IgGl恆定區亦包含任何佔據天然同種抗原免疫球蛋白中之多形性位置的殘基之交換。在位置234、235和237處具有丙胺酸之突變的IgGl 恆定區可存在相對於天然人IgGl恆定區之額外突變。其中可存在額外之突變的實例爲，如US7,3 65，168中之描述，位置234、235及237處之丙胺酸突變可與位置428及/ 或250處之突變組合。位置428和250處之突變可增加半衰期。可與位置234、235及237處之突變組合的額外突變已於與結合ΑΘ之抗體有關之IVA部分中描述過。某些這類恆定區中並不存在額外之突變。某些這類恆定區中並無存在於IgGl恆定區中及圍繞IgGl恆定區之區中的影響 Fc r受體及/或補體結合之額外突變（例如：藉EU編號之殘基230-240和325-325)。藉胞內處理省略C端賴胺酸殘基並不被認爲是一種突變。同樣地，同種抗原免疫球蛋白間彼此相異之佔據多形性位置之天然胺基酸被視爲是天然，而非變種胺基酸。 XI.實驗模型、分析和診斷結論 A.動物模型這類模型包括，例如：攜帶APP之717(APP770編號 )突變之小鼠（Games，等人，如上述）及攜帶 APP之 -146- 201206479 670/67 1 (APP770編號）瑞典突變之小鼠，該瑞典突變描述於 McConlogue ef a/.，US 5,612,486 及 Hsiao a/·，5cie”ce， 274,99(1996); Staufenbiel et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94: 1 3287- 1 3292(1 997)； Sturchler-Pierrat et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94: 1 3287-13292 (1997); Borchelt et al., Neuron, 1 9 :939-945 ( 1 997)); Richards et al., J. Neurosci. 23:

8 98 9-9003，2003; Cheng, Nat Med. 1 0(1 1 ):1 1 90-2, 2004 Hwang et al., E xp N e u r ο 1 · 2 0 0 4 M ar。適合包含在基因轉殖動物中之APP突變包括野生型Val717(APP770編號）密碼子轉換成 lie、Phe、Gly、Tyr、Leu、Ala、Pro、Trp、

Met、Ser、Thr、Asn或Gin之密碼子。Val717之較佳替代爲Phe。另一合適之突變爲極地突變E693G(APP 770編號）。該PSAPP老鼠（其具有澱粉樣先驅蛋白及早老轉殖基因二者）描述於 Takeuchi ei a/·，American Journal of

Pathology.2000;1 5 7:3 3 1 -3 3 9中。具有澱粉樣先驅蛋白、早老基因及tau轉殖基因之三重轉殖基因小鼠描述於 LaFerla，（2003)，Neuron 39，409-42 1 中。另一種有用之基因轉殖小鼠具有APP及TGF- /3二種轉殖基因。轉殖基因中之蛋白質編碼序列係與一或多種用於神經表達之合適的調節要素操作性連接。這類要素包括PDGF、普里昂 (prion)蛋白及Thy-Ι啓動因子。另一種有用之基因轉殖小鼠含有同時帶有瑞典和717突變之APP轉殖基因。另一種有用之基因轉殖小鼠含有帶有極地突變（E693 G)之APP 轉殖基因。 -147- 201206479 B.偵測與澱粉樣相關之病理學的分析情境式恐懼條件反射（Contextual Fear Conditioning) (CFC) 分折。情境式恐懼條件反射（CFC)爲常用之學習型式，其極爲可靠且大部分動物（例如：哺乳動物）可快速習得。測試動物學習害怕先前之中性刺激及/或環境，因其與嫌惡經驗有關（見，如：？311361〇\^，4«^.1(£以„.56；1〇^.18:264-270(1 990); Wehner et al., Nature Genet. 1 7:3 3 1 -3 34. (1 997); Caldarone et al., Nature Ge n e/. 1 7 : 3 3 5 - 3 3 7 ( 1 9 9 7)) 〇情境式恐懼條件反射對測定認知功能或官能障礙及/ 或作用劑之效力（例如：A /3結合劑對認知能力之效力）上特別有用，該認知功能或官能障礙爲，如：由疾病或失調造成者，諸如神經退化性疾病或失調、與A /3有關之疾病或失調、產澱粉樣疾病或失調、出現影響認知功能之不利的遺傳改變（例如：基因突變、基因中斷或不利之基因型）。因此，CFC分析提供獨立測試及/或驗證作用劑於預防或治療認知疾病或失調（尤其是影響大腦之一或多個區，如海馬、海馬支腳、扣帶皮質、前額葉皮質、鼻周圍皮質、感覺皮質和內側顳葉之疾病或失調）的療效之方法（見， US 2008145373) ° C.測定抗體效應子功能之吞噬作用分析抗體可在活體外分析中篩選其清除澱粉樣沉積的能力 -148- 201206479 。將來自罹患阿滋海默氏症之病患腦內或特徵爲阿滋海默氏症病理之動物模型的組織樣品與帶有Fcr受體之吞噬細胞（如小神經膠質細胞）及測試之抗體在玻管內之介質中接觸。吞噬細胞可爲初級培養或細胞株（諸如BV-2、C8-B4或THP-1)。對反應混合物中之澱粉樣沈積的量進一系列測量，從反應進行之前的基線値開始及反應期間之一或多個測試値。抗原可藉由染色偵測，例如：以經螢光標示之對抗A/3或澱粉樣斑塊之其他組成分的抗體染色。反應期間，澱粉樣沉積相對於基線値減少表示所測試之抗體具清除活性。一般而言，加入同型對照組以確保觀察到適當之Fc-Fc r受體交互作用。額外之對照組包括使用非特異性抗體，及/對吞噬細胞上之Fcr受體具已知之親和力的抗體。這類分析可以人類或非人類組織和吞噬細胞，以及人、非人或人化抗體進行。改變活體外吞噬作用分析可排除對含有A沒之組織的需要，但仍可偵測特定抗體與Fc r受體間之交互作用。在此種情況中，該分析係依賴一種塗覆抗體之固體母質。一般而言，該固體母質爲可被吞噬細胞吞噬之形式，如：小珠或顆粒，大小爲奈米至數微米。固體母質可結合一種可偵測之成分（如：螢光分子），從而使粒子可被追踪。用於這類呑噬作用分析之套組和材料可自，例如：貝克曼庫爾特（Beckman Coulter)(加州，Fullerton)及分子探針 (Molecular Probes)(奧勒崗，Eugene)購得。實例部分提供 -149- 201206479 一種這類分析之實例》 D. 補體結合分析抗體效應子功能亦可藉由偵測抗體與補體（尤其是 C 1 q多肽）交互作用之能力來測定（見，如 :Mansouri et al· (1 999)/n/eci./mmw”.67:1461) 〇在Α沒特異性抗體之情況中’可以A0塗覆固體母質（如：多槽盤）並暴露於抗體，再暴露於經標示之Clq中》或者，可將C1q黏附在母質上，加入經標示之抗體。或者，可將抗體黏附在母質上並暴露於Clq中’再偵測Clq。這類玻管中之結合分析在本技藝中很普遍且易於依需要加以修改和最優化。 E. 診斷方法認奶功游矽專?佐工眉。量化癡呆病患之認知和心理功能的工具有多種。這些包括NTB、DAD、ADAS、MMSE 、CDR-SB、NINCDS-ADRDA標準以及RMHI(經羅森修正之哈金斯基缺血）評分。這些工具普遍爲本技藝所知。 NTB(神經心理學測驗系列）包括9項被廣爲接受之記憶和執行功能測試。此測試系列在最近之EMEA導引中被接受。病患通常係定期在下列記億測試中進行評估：韋氏 (Weschsler)記憶量表視覺配對聯想；韋氏記憶量表言語配對聯想；及雷伊（Rey)聽覺言語學習測驗。執行功能測試包括：韋氏記憶量表記憶廣度；經控制之語意聯想試驗；及分類命名試驗。此測試對輕度AD病患之變化及澱粉樣 -150- 201206479 降低劑之臨床效果敏感。發展DAD(癡呆之傷殘評估）測試並經過驗證以測量阿滋海默氏症之病患的功能障礙（Gelinas，等，（1999)v4m ·/ Γ/ier 53:471-81)。照顧者回答有關過去二週病患執行欲進行之日常生活之工具和基本活動之能力的問題。然後，測定並以百分比記錄成功完成那些欲進行之DAD活動的比例。 ADAS-Cog係指阿滋海默氏症評估量表之認知部分（見，Rosen，ei a/. (1 984)/iw •少 1 41:1 356-64·)。該測試包括1 1項工作，其測量記憶、語言、實踐、注意力及其他認知能力之擾亂。 NINCDS-ADRDA(神經與交際疾病以及中風-阿滋海默氏症相關疾病之評估）測量影響阿滋海默氏症之記憶、語言、感知技巧、注意力、建構能力、方位、解決問題及機能性能力的 8 項標準（McKhann ei W· ( 1 984) Wewro/og：)； 34: 939-44) ° MMSE(簡易心智試驗）（Mini Mental State Exam)、 CDR-SOB(臨床癡呆評級-總和分數）及RMHI(經羅森修正之哈金斯基缺血）評分亦爲本技藝所已知（見，如：Folstein ei a l. (l 97 5) J Psych Res 12: 189-198; Morris(1 993) Neurology 43: 2412-2414;及 Rosen e/ a/. (1980)/ww iVewro/· 1 7:486-48 8 )。生物標記。人體中阿滋海默氏症症狀學之生物標記可利用MRI體積、血液和腦脊液蛋白含量，以及PET(正子 -151- 201206479 斷層掃描）測量。例如：藉由PET進行之CSF和血漿，以及澱粉樣斑塊攝影中，提供抗體-A；S結合證據之生物標記包括ΑΘ40& ΑΘ42。指向疾病修改之生物標記包括腦形態（核磁共振）、CSF tau蛋白和磷酸tau含量，以及，澱粉樣斑塊攝影。【實施方式】實例1 :第1期試驗在漸增型複數劑量濃度測試（multiple ascending dose study)(MAD)中投服給111位經診斷可能罹患阿滋海默氏症（輕微至中度）之病患介於0.15至2.0毫克/公斤之劑量的人化抗體貝平紐如單抗。每1 3週經由靜脈內輸注投服抗體直到完成給藥攝生療程。亦將病患根據ApoE4狀態分類。表2顯示硏究中有1 1位病患曾經歷血管源性水腫（藉MRI偵測）。表2亦顯示這些病患中某些人曾經歷之症狀；其他病患之血管源性水腫無症狀。表3顯示出血管源性水腫之風險係由基因型來分級，與劑量無關。缺乏一個 ApoE4對偶基因之病患的風險僅2%，但帶有二個ApoE4 對偶基因之病患的風險爲3 5 %。表4顯示僅最高劑量組（2 毫克/公斤）中有血管源性水腫的風險。具二個ApoE4對偶基因之病患的血管源性水腫之風險爲60%，具一個對偶基因之病患的血管源性水腫之風險爲35%。表5顯示不同劑量下之血管源性水腫的風險。劑量在 0.1 5 - 0.5毫克/公斤間之所有基因型出現血管源性水腫之 -152- 201206479 風險非常低，但具二個E4對偶基因之病患在1毫克/公斤的劑量下風險開始明顯變高，而具一個E4對偶基因之病患在2毫克/公斤的劑量下風險開始明顯變高。這些數據指出血管源性水腫之風險係取決於Ap〇E4基因型和劑量以及病患。表2

測試劑量 (毫克讼斤）劑量 # E4狀態症狀 SAD 5 1 ND — SAD 5 1 ND SAD 5 1 ND 暈眩，困惑 MAD 0.15 2 4/4 異常狀態，困惑 MAD 1 1 4/4 視覺 MAD 1 1 4/4 MAD 1 2 3/4 _ MAD 2 1 4/4 • MAD 2 1 3/4 _ MAD 2 1 4/4 困惑 MAD 2 1 3/4 _ MAD 2 1 3/4 昏睡，困惑 MAD 2 2 3/4 _ PET 2 1 3/4 MAD 2 3 4/4 一 -153- 201206479 表3 ApoE4 基因型 (對偶基因） VE病例基因型/總 VE病例 VE病例之百分比 VE病例/ 暴露之患者暴露之患者的％ 2 6/11 55% 6/17 35% 1 4/11 36% 4/52 8% 0 1/11 9% 1/42 2% 表4 ApoE4 基因型 (對偶基因） VE病例基因型/總 VE病例 VE病例之百分比 VE病例/ 暴露之患者暴露之患者的％ 2 3/7 43% 3/5 60% 1 3/7 43% 3/9 33% 0 1/7 14% 1/14 7% 表5 Ap〇E4複體數〇. 15毫克/公斤 0.5毫克/公斤 1.0毫克/公斤 2.0毫克/公斤 0 13(0) 11(0) 9(0) 14⑴ 1 15(0) 14(0) 14(1) 9(3) 2 3d) 4(0) 5⑵ 5(3) 實例2 :第2期試驗在23 4位任意選自3 1 7位經過篩檢之原始病患群的病患中進行隨機化雙盲安慰劑-對照之漸增型複數劑量濃度硏究。評估病患之Ap〇E4攜帶狀態，但攜帶者（同型合子與異型合子）與非攜帶者接受相同之治療。納入標準爲：可能之AD診斷；年齡50-85歲；MMSE分數爲16-26; 經Rosen修改之Hachinski Ischemic分數S4;住在家裡 -154- 201206479 或與能幹之照護者住在一個社區內；MRI與AD之診斷一致；優質MRI掃描以供容量分析；用於治療非排除之病況的穩定藥物劑量；供篩檢前12〇天使用之穩定的 AchEIs及/或美金剛劑量。主要排除標準爲：當下表現重度精神障礙（如··重鬱症）；當下之系統性疾病似乎可造成病患病況惡化；具有臨床上重要之自體免疫疾病或免疫系統疾病之病史或事證；下列任一疾病病史：臨床上顯明之 _ 中風、臨床上重要頸動脈或椎基底動脈狹窄/斑塊、癲癇、近5年內之癌症、近2年內之酒精/藥物依賴、近2年內之心肌梗塞、可能影響認知之明顯神經性疾病（除了 AD 外）。本發明之套組及其伴隨之標示或包裝仿單可提供符合任何上述排除標準及其任何次組合之病患的排除內容。使用4種水準之劑量（0.15、0_5、1.0、2.0毫克/公斤 )與安慰劑。令I24位病患接受貝平紐如單抗，110位接受安慰劑。在那些病患中，分別分析貝平紐如單抗和安慰劑在 φ 1 22位和1 〇7位病患中之效力。貝平紐如單抗係以在5毫升小玻璃瓶中之無菌水溶液型式供應，該小玻璃瓶中含有： 100毫克之貝平紐如單抗（20毫克/毫升）、lOmM組織胺、 10mM甲硫胺酸、4%甘露醇、0.005%聚山梨酸酯-80(源自蔬菜），pH爲6.0。安慰劑係提供於與含有貝平紐如單抗之小玻璃瓶相配的小玻璃瓶中’該小玻璃瓶中含有除貝平紐如單抗以外之相同構成物。將硏究藥物在生理食鹽水中稀釋並以 100毫升靜脈內（IV)輸注液之型式在i小時內投服。治療期爲1 8個月，共輸注6次，每次間隔1 3週。在 -155- 201206479 投服各劑量後6週進行安全性追蹤訪視（包括MRI掃描）。治療期後，在開放標記硏究中以1年期之安全性追蹤監控各病患以持續治療。該試驗之主要目的係評估貝平紐如單抗在罹患輕度至中度阿滋海默氏症之病患體內的安全性和藥物耐受性。硏究之主要目標爲（阿滋海默氏症評估量表-認知次量表（ADAS-Cog)，痴呆之無行爲能力評估量表（DAD) 以及安全性和藥物耐受性）。相對於ADAS-Cog 11，ADAS-Cog 12包含另一涉及10項文字列表之延緩回憶的試驗。該硏究之第二目標爲評估貝平紐如單抗在罹患輕度至中度阿滋海默氏症之病患體內的效力。其他目標爲神經心理成套測驗（neuropsychological test battery) (NTB)、神經精神症狀問卷（NPI)、多套臨床痴呆總和量表（clinical dementia rating sum of boxes)(CDR-SB)、MRI 腦容量測定及 CSF 測量》全部族群之摘要’下列表中提供以劑量組分類之族群及以攜帶者狀態分類之族群。表6 人口統計資料和病患特徵全部安慰劑 N=l〇7 全部貝平鈕如單抗 N=122 年齡 67.9 70.1 性別(％F) 59.8 50.0 種族淵源(％白種人） 95.3 96.7 發病年數 3.7 3.5 AP〇E4(%攜帶者） 69.8 60.5 篩檢MMSE 20.7 20.9 使用膽鹼脂酶或美金剛之％ 96.3 95.1 -156- 201206479 表7 貝平鈕如單抗平均平均疾病疾病嚴重性 APOE 攜 Con Alz Meds 病患數 MMSE 年齡期間輕度中度帶者之％基線 78週〇. 15毫克/公斤 20 70 4 29% 71% 64% 100% 31 24 安慰劑 20 64 4 33% 65% 46% 96% 26 17 0.5毫克/公斤 21 71 4 48% 51% 58% 91% 33 17 安慰劑 21 69 4 43% 57% 86% 93% 28 21 1.0毫克/公斤 21 69 3 43% 55% 69% 97% 29 25 安慰劑 21 69 4 36% 69% 75% 93% 26 21 2.0毫克/公斤 2 70 3 63% 34% 53% 90% 29 17 安慰劑 21 69 3 56% 44% 70% 100% 27 22 全部貝平鈕如單抗 21 70 4 46% 53% 61% 95% 122 83 全部安慰劑 21 68 4 42% 59% 69% 96% 107 81 表8 攜帶者非攜帶者全部安慰劑 N=74 貝平鈕如單抗 N=72 全部安慰劑 N=32 貝平鈕如單抗 N=47 年齡 68.6 71.2 66.1 69.1 性別(％F) 59.5 48.6 62.5 51.1 種族淵源(％白種人） 97.3 97.2 90.6 95.7 發病年數 3.8 3.7 3.5 3.0 篩檢MMSE 21.0 20.6 19.8 21.4 使用膽鹼脂酶或美金剛之％ 95.9 98.6 96.9 89.4

使用認知衰退之線性模型比較不同劑量群組與安慰劑之ADAS-Cog和DAD積分時，任何劑量群組或組合之劑 -157- 201206479 量群組之比較均未達到統計上有意義。利用非假設線性衰退之統計模型再次分析數據，此係 U)根據所有測定效力之病患及（b)僅根據已接受所有6種劑量（“完成者”）之病患且不包括已因不同理由退出之病患。咸信，非線性模型較準確，因爲認知能力不一定隨著時間呈線性衰退。第1圖中顯示測定效力之所有病患（Ap〇E4攜帶者加上非Ap〇E4攜帶者）利用非線性衰退模型所取得之結果。利用無線性假設的重複測量模型進行MITT(修正型意向性治療）分析。X軸上之長條代表相對於安慰劑較爲有利之結果（即，衰退受到抑制）》雖然無統計上之顯著性，但使用ADAS-Cog和NTB積分可觀察到組合之劑量群組的趨勢（0· 1 2 p 2 0.05)。第2圖顯示完成者族群（AP〇E4攜帶者加上非Ap〇E4 攜帶者）之結果。完成者之定義爲接受所有6次輸注並在第78週做效力評估之病患。軸上之長條指出相對於安慰劑有所改善。組合劑量群組之ADAS-Cog和DAD測量値爲統計上有意義，且NTB測量値可發現正向趨勢（0.12 p 2 0.05)。使用非線性模型分別分析Ap〇E4攜帶者及非Ap〇E4 攜帶者並分別分析（a)測定效力之所有受治療的病患及（b) 完成者。第3圖顯示所有測量效力之Ap〇E4攜帶者病患的結果。任一種認知積分均未發現統計上之顯著性。再次利用 -158- 201206479 無線性假設的重複測量模型進行MITT分析。第4圖顯示如上述定義之AP〇E4攜帶者完成者之分析。再一次，任一種積分（ADAS-Cog、DAD、NTB及CDR-SB)均未發現統計上之顯著性。然而，在ADAS-Cog和DAD測量方面可特別發現有利之指向變化（軸上之長條）。第5和6圖顯示出所有測量效力之非Ap〇E4攜帶者病患的結果。組合之劑量群組的 ADAS-Cog、NTB、 CDR-SB和MMSE測量値均具有統計上之顯著性。軸上之長條指出相對於安慰劑有所改善。第9圖顯示這些參數（ADAS-Cog(左上方）、DAD(右上方）、NTB(左下方）' CDR-SB(右下方））之時間期分析。在ADAS-Cog、NTB及 CDR-SB積分上，受治療之病患在所有時間點之認知效能衰退程度低於安慰劑組。第7和8圖顯示如上述定義之非 ApoE4攜帶者完成者的分析。ADAS-Cog、NTB、CDR-SB 和MMSE之測量再次爲統計上有意義。再一次，軸上之長條指出相對於安慰 ADAS-Cog、NTB、CDR-SB和 MMSE之測量劑組有所改善。在硏究期間，每一病患在各次輸注後的6週至多進行 7次MRI。藉腦容量、腦室容量、腦界限偏移積分及室界限偏移積分來評估腦內變化。用於測量腦容量變化的界限偏移積分（BSI)係衍生自經登記之重複三次元核磁共振掃描。B S I決定指定之腦構造移動之界限的總容量’因此，直接從立體像素灰度測得容量變化。室偏移積分爲室空間變化之類似測量法。這二種參數隨著阿滋海默氏症惡化而 -159- 201206479 增加。因此，這些參數之增加相對於安慰劑受到抑制時顯示出治療之正面（即，所欲）效果。在全部受治療之族群（攜帶者和非攜帶者）中，與安慰劑族群相較時，在78週內藉由腦界限偏移積分測量之腦容量變化或藉由室界限偏移積分測量之腦室空間變化均未發現顯著差異》在受治療之非Ap〇E4攜帶者族群中腦容量衰退程度明顯低於非ApoE4攜帶者安慰劑族群（平均-1 〇.7cc ; 95% CI ; -18.0至- 3.4 ; p = 0.0 0 4)。與安慰劑相比較，室容量之增加亦減少，但變化並未達到統計上有意義。與Ap〇E4 安慰劑族群相比較，腦容量並無明顯變化》然而，與安慰劑相比較，室容量明顯增加（平均2.5cc ; 95% CI ; 0.1至 5.1;ρ = 0·037)° 第10_12圖中顯示全部族群（Αρ〇Ε4攜帶者族群和非 ΑροΕ4攜帶者族群）中之BBSI的變化。第12圖（非ΑροΕ4 攜帶者）顯示受治療之病患和安慰劑病患之線彼此間在統計上顯著分別。相對於安慰劑組，受治療之族群的腦容量在所有測量之時間點之變化皆減少。第10圖（ΑροΕ4攜帶者加上非ΑροΕ4攜帶者）顯示受治療之病患和安慰劑病患之線分開，但結果未達統計上意義。第1 1圖（非Αρ〇Ε4攜帶者）顯示受治療及安慰劑病患之線實際上爲重疊。分析係使用重複之測量模型，以時間作爲分類（根據Αρ〇Ε4攜帶者狀態調整）。基線爲全部腦容量及MMSE階層。在進入試驗52週後，相對於經安慰劑治療之病患， •160- 201206479 在經貝平紐如單抗治療之病患族群可觀察到CSF磷酸-1au 降低之趨勢（第13圖）。磷酸-tau爲與阿滋海默氏症相關之生物記號。在所有經治療之病患和對照組間之C S F t au 水準和Ay342間並無顯著差異。該圖形係基於aNCOVA 分析（根據基線値調整）。0 · 1 5毫克/公斤安慰劑劑量群組中排除一位在曲線外之病患。治療大致上安全且耐受性良好。血管源性水腫（VE)僅出現在經貝平紐如單抗治療之病患中。Α ρ ο E 4攜帶者（1 0 ) 中VE之出現頻率高於非攜帶者（2)，且頻率隨著劑量增加而增加，劑量爲2.0、1.0、0.5和0.15毫克/公斤時分別有8、3、0和1次發作。所有VE發作係出現在第一或第二個劑量。大部分之VE發作僅可藉由M RI偵測且未偵測到臨床症狀。VE發作在數週至數個月內解除。於一位病患中係以類固醇治療VE。除VE及〇· 1 5毫克/公斤群組（其包含較其他群組更多之病情沈重期病患）外，治療組與安慰劑組間的嚴重不良事件類似。不良事件大致上爲輕微至中度、暫時性、被認爲與硏究藥物無關、出現在相當小比例之病患中且顯示出與劑量無關。如第1 4圖中所示，測量不同劑量群組中受治療之病患在一段時間內的貝平紐如單抗的血清濃度和A yS之血漿濃度。在0.15毫克/公斤至2·〇毫克/公斤之不同劑量群組中，血清貝平紐如單抗的Cm ax係在約3.5-50微克/毫升之範圍內。AA之平均血漿濃度的變化形廓反映投服貝平紐如單抗時，血漿ΑΘ濃度上升且當貝平紐如單抗之濃度 -161- 201206479 降低時’ Αβ之血漿濃度隨著降低之平均血清貝平紐如單抗的變化形廓。血漿Ay?之濃度係在約5 00-3 000微微克/ 毫升之範圍內。不同劑量群組間之AyS之血漿濃度的差異顯示出小於劑量間之差異。例如：劑量從〇· 1 5毫克/公斤增加至2毫克/公斤，血漿AyS增加約2倍。下列表9中摘要第一次輸注貝平紐如單抗後之PK參數。表9 劑量 (毫克/ 公斤） Cmax (微克/ 毫升） Cavg (微克/ 毫升） Cmin (微克/ 毫升） Tmax (天） AUCinf (微克•小時/毫升） CL/F (毫升/小時/公斤) Vz/F (毫升/ 公斤） Tl/2 (天） 0.15 4.6 0 o.lt 0.1 1794 0.09 76.2 26.7 0.5* 17.7 3.0 l-lt 0.4 7165 0.07 63.7 26.4 1.0 28.0 5.5 1.8$ 0.1 13499 0.08 75.4 28.4 2.0 56.3 9.5* 1.7ί 0.1 21802* 0.09* 65.8* 20.5* 除非另外指出，N = 6; *n=5 $ -第二次輸注之波谷値；所有數値低於第一次輸注之波谷値的定量限制縮寫：Cavg-13週內之平均濃度；Cmin-最低濃度（“波谷値”）；Tmax-最高濃度之時間；AUC inf-外推至無限之濃度對時間曲線下面積：CLss/F-穩定狀態時之血管外清除 (CLss)與生物可利用性之程度（F)的比例；Vz/F-穩定狀態時之表觀分佈容積（Vz)與F的比例；t 1/2-以天計之排除（或終點）半衰期。 -162- 201206479 結論 1.本試驗提供ApoE4攜帶者與非AP〇E4攜帶者對免疫治療法反應不同的證據。 2 .本試驗提供血管源性水腫在ApoE4攜帶者中和較高劑量下較常發生的證據。 3. 本試驗提供在非Apo E4攜帶者和接受至少6種劑量 _ 之貝平紐如單抗之病患（ApoE4攜帶者和非攜帶者）中之效力的統計上有意義之證據。 4. 本試驗藉由某些測量提供在全部族群（ApoE4攜帶者與非攜帶者）及AP〇E4攜帶者族群中之趨勢或有利之導向變化的證據。統計上之顯著性可能在較大之族群中顯示出。這些族群中之替換的治療攝生法（諸如上述討論者）有可能改良如上述之效力。 5. 本試驗提供該治療大致上安全且耐受良好之證據。實例3 :在阿滋海默氏症病患中皮下投服貝平紐如單抗的臨床硏究皮下注射大致上較容易投藥，其可爲罹患精神障礙和協調功能不良之病患或照護者投藥給不合作之病患時所考量的一種方法。其亦容易在家中執行，較不造成病患之困擾且較不昂貴。最後，皮下投藥通常使病患系統中所產生之組成物的尖峰濃度（Cmax)較經由靜脈內投藥所產生者低。降低之尖峰濃度可降低血管源性水腫之可能性。 -163- 201206479 因此，設計皮下投服貝平紐如單抗之臨床硏究。初始硏究之主要目標爲安全性和生物可利用性。一旦將此設爲皮下投服之主要目標後’執行上述之認知試驗以測定效力〇在初始攝生法中，每1 3週經由皮下途徑投服給病患貝平紐如單抗共24個月，總共9個劑量。所有病患接受一個〇.5毫克/公斤之劑量》篩檢病患並依上述實例中之描述定期監控，如：抗體之血液濃度、心臟功能及血管源性水腫。特 4 例實別差構鐘澧 5H 抗及人型及同鼠於老在性異

It 設之鼠老及化人之變突區定恆或 3 D6抗體之變異體以測試降低效應子功能對澱粉樣沈積清除、認知功能及微量出血的影響。以抗A0蛋白之抗體治療之老鼠通常顯示出腦血管中有微量出血之徵兆，此爲一種可能與接受類似治療之人類病患體內所觀察到之血管源性水腫有關的因子. 第15圖中顯示出人IgGl、IgG2及IgG4與老鼠IgGl 和IgG2a之CH2結構區的比對。該比對強調負責FcR及 Clq結合之殘基。該Clq結合模體（motif)保留在物種及同型中。FcR結合模體保留在人IgGl、IgG4及老鼠IgG2a 中。下表中揭示對重鏈CH2區所做之特殊修改。該胺基酸係藉EU系統編號。該編排爲.野生型殘基、位置、突變 -164- 201206479 種殘基。表10 3D6衍生性抗體

3D6衍生性抗體同型(物種）突變之殘基貝平紐如單抗對照組 AAB-001 IgGl认類）人化 3D6 2m(FcrR) IgGl(人類） L234A7G237A (EU編號）人化 3D6 3m(Fc7R) AAB-03 IgGl(人類） L234A/L235A/G237A (EU編號）人化3D6 lm (絞鏈區） IgG4(人類） S241P (EU編號） 3D6對照組 IgGl(老鼠） 3D6 lm(Fcr R) IgGl(老鼠） E233P 3D6 3m (Clq) IgGl (老鼠） E318A/K320A/R322A 3D6 4m (Clq) IgGl(老鼠） E318A/K320A/R322A/E233P 3 D6 Control IgG2a(老鼠） 3D6 lm(FcrR) IgG2a(老鼠） D265A 3D6 4m (FcrR,Clq) IgG2a(老鼠） L235A/E318A/K320A/K322A 3D6衍生性抗體之抗原決定部位-結合區相同且 A冷結合作用之動力學相當。表1 1揭示Fc受體與列於表1 0 中之3D6衍生性抗體結合之動力學。這些數値係依下述產生。在人化3D6衍生性抗體方面係使用下列分析條件。將經五-His(SEQ ID NO : 93)抗體（Qiagen，目錄編號

34660)塗覆之Biacore 3 000及CM5芯片與加上His標籤之人Fc r RI、Fc r RII和Fc r RIII結構區一起使用（R&D 系統，Cat # 1 2 5 7-Fc，1 3 3 0-CD，1 5 97 -Fc)。藉五-His(SEQ ID -165- 201206479 NO : 93)抗體將各受體分別捕捉在一感應芯片之流動槽中。注射欲測試之抗體溶液以測量與經捕捉之受體的結合速率和解離速率。測量完成後，經由注射PH2 · 5之緩衝液來移除受體和實驗抗體。然後，準備好流動槽以用於下一個周期。各周期係複製二份進行且各樣本使用相同之條件（如：濃度、流速及時間的選擇）。如表1 1中之數値所指，貝平紐如單抗（未經修改之 Fc區）以非常高之親和力與所有人Fc r R受體結合。Fc r RI之KD係在nm之範圍內，而Fc^RII和III之KD係在 μπι之範圍內。在後二者方面，感應譜顯示出典型之快速開始、快速結束動力學。如預期般地，IgG4同型具有類似之與Fc τ RI結合的作用’但並不與Fc 7 RIII結合。二種IgGl衍生物，Hu 3D6 2m及3m並未顯示出可偵測到之與FcrRI或FcrRIII的結合作用。在老鼠3D6衍生性抗體方面，使用類似之方法來測定與老鼠Fc r Ri ' η和in之結合。Fc γ RI及III爲活化受體，而Fc r RII大致上被認爲係抑制性。測試之抗體爲 3D6IgG2a、3D6IgGl 及 IgGl 變異體，3D6 lm、3m 和 4m 。結果係以3D6IgG2a結合之相對百分比表示。如表11 所示，3D6IgG2a爲唯一具有可偵測之Fc r RI結合能力的抗體。3D6IgGl及3D6 3mIgGl具有類似之FcrRII和III 結合變化形廓。 -166- 201206479 表1 1 3D6抗體之Fc受體結合力 3D6衍生性抗體相對結合力*(%) 人 Fey RI** 人 Fey RII** 人 Fc7 RIIP* 貝平紐如單抗對照組 100 100 100 人化3D6 lm 85-95 40-50 0 人化3D6 2m 0 40-50 0 人化3D6 3m AAB-003 0 8-12 0 老鼠 Fcx RI** 老鼠 Fc tRII** 老鼠 FctRIII** 3D6對照組IgG2a 100*** 100 100 3D6對照組IgGl 0 180 70 3D6 lm IgGl 0 15 10 3D6 3m IgGl 0 180 70 3D6 4m IgGl 0 25 15

*界定爲穩定狀態時，相對於IgG2a對照組之結合量的結合量（以RU計）。 **mFcrRI及m FctRDI爲活化之受體，mFcrRII爲抑制性受體。另一種有效之活化受體m Fc 7 RIV無法購得。 ^ ***未達到穩定狀態之結合。動力學配適可引導估算在奈莫耳範圍內之KD。上述結果顯示出Hu 3D6 3m(AAB-003)抗體爲三種經測試之抗體中與Fc r受體之結合降低最多者。在那些經測試之抗體中，3D6 lm IgGl老鼠變種抗體最類似於 AAB-003，因其Fc r R結合作用降低至接近正常之10%。 -167- 201206479 實例5 : 3D6衍生性抗體之老鼠硏究硏究設計依表10中之描述，將一歲大之PDAPP小鼠暴露於以對照組或3D6衍生性抗體進行之治療範例中。陰性對照組爲對抗無關連之非澱粉樣抗原決定部位的老鼠IgG2 a抗體。經由IP途徑每週爲老鼠注射3毫克/公斤之指定抗體〇在整個硏究過程中藉由ELISA測試血清抗體濃度。所有組中之濃度相當。6個月後，殺死老鼠並爲其灌注。根據已知方法製備腦部切片和組織（Johnson-Wood ei α/. {\991)Proc. Natl.Acad Sci. USA 94: 1 550-5 5) < 在基因轉殖老鼠之皮質及海馬區中測量澱粉樣裝載量。表12A和12B中之結果係以具澱粉樣之面積的減少百分比指明（P値指出與IgG2a對照組抗體相比下有意義之差異）。

表12A 皮質澱粉樣裝載量(%減少）對照組 IgG2a 3D6對照組 IgG2a 3D6對照組 IgGl 3D6 lmlgGl (Fc r R) 3D6 3m IgGl (Clq) 中位數％面積 6.25076 0.757259 1.24205 2.06056 1.50084 範圍 0.069-17.073 0-9.646 0-17.799 0-24.531 0-17.069 %變化對照組 IgG2a — 88 p <0.0001 80 p <0.0001 67 p <0.003 76 p <0.0001 %變化 3D6 IgGl --- --- … 165.9 120.8 數目 32 34 36 36 34 -168- 201206479

表12B 海馬區澱粉樣裝載量（％減少）對照組 IgG2a 3D6對照組 IgG2a 3D6對照組 IgGl 3D6 lm IgGl (Fc r R) 3D6 3m IgGl (Clq) 中位數％面積 20.36 8.462 12.29 12.18 8.435 範圍 4.707-35.79 1.467-17.59 0.2449-18.61 0-26.99 0.8445-18.61 %變化對照組 IgG2a … 58 p <0.0001 40 p <0.0001 40 p <0.0001 59 p <0.0001 %變化 3D6 IgGl — … — 0.895 31.4 數目 34 34 37 37 34

上述結果指出相對於陰性對照組，所有3D6抗體 (IgG2a、IgGl及變異體）明顯減少澱粉樣裝載量。經測試之抗體間的差異並非統計上有意義。然後，在血管澱粉樣評級上測試3D6衍生性抗體之效果。表13顯示出具指出之血管澱粉樣評級的老鼠數目及具4或更高評級之動物的百分比（p値表示與3D6 IgG2a 抗體相比下有意義之差異）。表13 具有血管澱粉榜 1之老鼠的百分比無-少數(0-3) 適度(4+) 具適度評級之百分比對照組IgG2a 11 24 69 P <0.0001 3D6對照組IgG2a 27 7 21 ....... 3D6對照組IgGl 12 25 68 p <0.0001 3D6 lm(FcrR)IgGl 15 21 58 p <0.0016 3D6 3m(Clq)IgGl 20 17 46 <0.0434 -169- 201206479 上述數據顯示出相對於無關連之IgG2a抗體，陽性對照組3D6IgG2a明顯減少血管澱粉樣。相對於使用3D6IgGl 、3D6 lm IgGl 及 3D6 3mIgGl，使用 3D6IgG2a 之減少程度亦爲統計上有意義。3D6IgGl、3D6 lm IgGl及3D6 3mIgGl與對照組IgG2a間之差異並非統計上有意義。爲了決定3D6抗體衍生物是否引起老鼠微量出血，檢查以3毫克/公斤抗體治療之老鼠腦部切片中含鐵血黃素（一種微量出血之標記）的濃度。以在2%氫氯酸中之2% 氤亞鐵酸鉀進行染色，再以1 %中性紅染液對比染色。表 14指出具有指出之含鐵血黃素染色濃度的老鼠百分比和絕對數目。結果證明相對於3D6IgG2a，3D6 lm IgGl(Fc rR)及3D6 3mIgGl(Clq)(其於上述中顯示可有效地清除澱粉樣斑塊）可降低微量出血程度。3D6IgGl、3D6 lm IgGl及3D6 3mIgGl間之差異並未達到統計上有意義，雖然3D6 lm IgGl與3D6 IgGl間之差異顯示出傾向。（p値指出與IgG2a抗體相比下有意義之差異）。 -170- 201206479 表1 4 微量出血程度： 0 1 2 3 對照組IgG2a p<0.0001 68%(23) 32%(11) 0%(0) 0%(〇) 3D6 Control IgG2a 9%(3) 42%(14) 27%⑼ 21%(7) 3D6 Control IgGl p <0.0023 38%(14) 46%(17) 3%(1) 13%(5) 3D6 lm IgGl (FcrR)p<〇.〇001 51%(19) 49%(18) 0%(0) 0%(0) 3D6 3m IgGl(Clq) p <0.0001 53%(19) 42%(15) 0%⑼ 5%(2) .實例6 :吞噬作用分析材料和方法活體外斑塊吞噬作用分析：將來自PDAPP小鼠之冷凍腦部切片與3D6IgGl及表10中所描述之效應子功能突變種（3D6 lm(FcT R1)及 3D6 3m(Clq)，二種均爲 IgGl) — 起預先培育。使用3D6IgG2a作爲陽性對照組並使用無關連之IgGl及IgG2a抗體作爲同型對照組。在加入老鼠小 # 神經膠質細胞前，在37°C、5%C02下，以0.3或3微克/ 毫升抗體處理切片30分鐘。第二天萃取該共同培養物。藉由ELISA測量剩餘之A /3 (266抗體用於捕捉，3D6-B 用於報告子）以評估A /3之清除情況。測試老鼠IgG2 a衍生性抗體之吞噬作用。這些實驗包括·· 3D6IgG2a(陽性對照組）；非特異性igG2a(陰性對照組 );3D6 lm(Fc r Rl，IgG2a 同型）；及 3D6 4m(Fc r Rl/Cql)抗體。條件類似於上述者。 -171- 201206479 另外測定人化3D6(Hu 3D6IgGl)及表i〇中所描述之效應子突變體（Hu 3D6 2m IgGl、Hu 3D6 3mIgGl 及 Hu 3D6 4m IgG4)之非斑塊吞噬作用。該陰性對照組爲無關連之人IgG 1抗體。分析及偵測條件相同。玻管內分析：在老鼠抗體之螢光結合小珠之吞噬作用的分析中，在室溫下，以1毫克/毫升之老鼠F(ab'2)、 3D6IgG2a、3 D6IgG 1 或 3D6 Fc^ R 突變體調理（opsonized) ΙΟμΜ螢光球（FluoroSphere)顆粒（5χ10δ)2小時且一邊旋轉。2小時後，以1毫升之PBS清洗小珠3次以去除未經結合之IgG。將經調理之顆粒（1 : 1 0)加入老鼠小神經膠質細胞中以進行老鼠3D6IgG2a(3D62a)之實驗。將小珠與細胞在37t培育90分鐘。以PBS清洗掉未結合之顆粒。以 DiffQuick爲細胞各染色30秒並藉光學顯微鏡目視檢查吞噬作用。此分析之對照組爲未經調理之小珠（未經標示的 )(以偵測非特異性裹吞作用（e n g u 1 f m e n t))且以人F c片段 (3D62a + FC)預先處理之（以封閉FcrRl)。在人化抗體分析方面，條件和偵測法相同。然而，該抗體爲：無抗體（未經標示；陰性對照組）、無關連之人 IgGl(人 IgGl;陽性對照組）、Hu 3D6-IgGl、Hu 3D6 2m IgGl ' Hu 3D6 3mIgGl 及 Hu 3D6 lm IgG4。吞噬細胞爲人THP-1細胞（與PMA區別）。結果活體外斑塊吞噬作用分析：分析老鼠3D6IgGl抗體 -172- 201206479 及其效應子突變體（3D6 lm(FcrRl)及3D6 3m(Clq))’以評估其加速澱粉樣斑塊清除的能力（見，第16圖）。 3D6IgG2a 抗體可刺激較 3 D6IgG 1、3 D6 1 m(Fc r R 1)及 3D6 3m(Clq)所刺激者更強之清除作用。由3D6IgGl、3D6 lm(FcrRl)及3D6 3m(Clq)刺激之呑噬作用較陰性對照組爲強。3D6 IgGl之Fc結構區的突變顯示出並未明顯減弱其在活體外清除分析中刺激清除作用的能力。在IgG2 a 3 D6衍生性抗體方面，由突變體刺激之清除作用與野生型3D6 IgG2a相等且相對於無關連之IgG2同型適配對照組，其清除能力較強（見，第1 7圖）。因此，這些突變種無一可完全抑制A /3呑噬作用。在人化抗體分析中，Hu 3D6-IgGl之效應子區之突變保有相對於陰性對照組顯著之清除活性》Hu 3 D6-IgGl在活體外A/3斑塊清除分析中刺激清除作用，而該效應子區突變體具有適度減弱之功能。Hu 3D6 IgG4誘發與Hu 3D6 IgGl相同程度之吞噬作用，且3D6之IgG4絞鏈區的突變顯示出並未改變其效應子功能。玻管內小珠吞噬作用分析：爲了測定該活體外結果是否特異於A沒清除作用且3D6 IgGl中之Fc突變是否改變其效應子功能，進行非特異性之經Fc促成之小珠吞噬作用分析。在老鼠抗體小珠呑噬作用分析中，3D6 IgG2a同型抗體促成比3D6-IgGl更有效之吞噬作用（見，第19圖）。與陽性對照組3 D 6 I g G 2 a相比較，3 D 6 -1 g G 1中之F c突變並未明顯減弱刺激吞噬作用之能力，此表示3D6-IgGl -173- 201206479 中之Fc突變適度地有效減少吞噬作用。在人化抗體分析中，於活體外斑塊吞噬作用分析中所見到之Fc突變之效果可在由Fc促成之小珠吞噬作用中證實。再次地，人化3D6之Fc部分的突變減弱其促成螢光小珠之吞噬作用的能力且2m和3m突變體間並無顯著差異。再者，學理上無效之IgG4同型促成與IgGl同型相同程度之清除作用（見，第20圖）。3D6之IgG4絞鏈區的突變顯示出並未明顯改變其效應子功能》實例7 :人化3 D6衍生性抗體之C 1 q結合能力測試人化3D6衍生性抗體結合Clq及誘發補體反應之能力。依下述進行標準之C 1 q系列稀釋議定計劃。類似之議定計劃描述於，如：Idusogie ei a/.,(2 000)*/./wwmwo/. 164:4178-4184 中 ° 將純化之 A /3塗覆在ELISA盤上並暴露於下列如第 21圖所指出之濃度的人化3D6抗體中：Hu 3D6 2m(IgGl) 、Hu 3D6 3m(IgGl)、Hu 3D6 lm(IgG4)及未經修改之 Hu 3 D6(IgGl)。清洗ELISA盤，以在PBS中之0.02 %酪蛋白溶液封閉3-24小時並一邊緩慢地攪動。以另一清洗步驟去除封閉溶液。接著，將純化之人 Clq((191391，MP Biomedicals)加入ELISA盤中’以2微克Clq/毫升分析緩衝劑開始2X之系列稀釋。令Clq結合2小時並一邊攪動。另一清洗步驟

後，加入100微升/槽之1 : 200的抗-ciq抗體（與FFTC -174- 201206479 結合之 Rb 抗人 Clq(目錄編號 F010 DBS)(dbiosys.com))l 小時並一邊攪動之。將結果與無抗-Clq抗體之空白對照組相比較。如第21圖所示，人化3D6衍生性抗體並未明顯與 Clq交互作用。此與貝平紐如單抗（其Fc區中不具有突變 )相反。測試衍生性抗體誘發由補體促成之HEK293細胞（其表面表現A/S)的溶胞反應之能力。可使用如Phillips ei α/. (2000) Cancer Res · 60:6977-84;Aprile et al · (19 8 1) Clin. 46··565-76中所描述之標準51Cr釋出分析〇該標靶細胞爲 HEK293細胞（ATCC，CRL- 1 573)，其表面上表現含有可藉 3D6(DAEFR(SEQ ID NO: 94))偵測之AyS抗原決定部位的融合蛋白。將含有A/3之序列插入 pDisplay 載體（因維特金（Invitrogen))中。改變 pDisplay φ 載體以移除HA標籤，取而代之，在領導序列後從含有A yS之肽開始。將穩定之HEK293累積庫進行ADCC分析。爲了進行標示，將1〇7細胞懸浮在2毫升之RPMI 10%FCS 中，加入 250Ci 之 51Cr(NEN 目錄編號#NEZ-030; 在生理食鹽水中之51鉻酸鈉）。將細胞在3 7 °C下培育1小時且不時攪動之。在培育結束時，加入10毫升之帶有 l〇%FCS的RPMI。將細胞離心旋轉沈下以去除上清液，將其再懸浮於10毫升含10%FCS之RPMI中。再次將細胞在室溫下培育1.5小時且不時攪動之，以使過量之51 Cr -175- 201206479 自細胞流出。以10毫升之RPMI清洗標靶細胞3次，最後在10毫升含有10%FCS之RPMI中清洗一次。將細胞再懸浮於含有10%FCS之RPMI中，使濃度爲106細胞/槽〇自人血中收集效應子細胞。簡單地說，以PBS將血液 1 : 1 稀釋並疊層在 Ficoll(Sigma Histopaque 1 077)上。將管柱在20°C，1 200xg下旋轉20分鐘，中間不煞住。收集界面處之細胞：以2-3倍體積之PBS清洗一次，再以含 10%FCS之RPMI清洗二次。以抗CD3和CD56抗體偵測富含NK層。將總體積爲200微升之效應子細胞和標靶細胞以25 :1之比例（效應子：標靶）加入96槽盤中。包括下列對照組樣本：自發性溶解（含有不具效應子之標靶細胞）及全部溶解（槽內清空）。將細胞在3 7 °C培育5小時。就在收成前將100微升之0.1%Triton X-100加入全部溶解樣本中，以釋出51Cr。將反應物收集在具有Skatron收成器 (Molecular Devices)之濾器組件上並偵測全部51Cr。爲了計算％溶解，測定各樣本之平均cpm和標準差。以下式測定最大51 Cr釋出百分比： (實驗-自發性）X100 (全部-自發性）與Clq結合分析之結果一致，人化3D6效應子功能突變體衍生性抗體無法有效誘發表現A/3之HEK293細胞的補體溶解反應（見第22圖）。 -176- 201206479 實例8 :測量老鼠3d6衍生性抗體之Clq結合能力的ELISA 分析材料和方法在4°C下，以1、3或6微克/毫升之在1〇〇微升培養槽塗覆緩衝劑中的不同抗體塗覆96槽螢光盤一整夜。塗覆後’在RT下清洗盤並以200微升之酪蛋白Elisa封閉劑封閉1小時。清洗盤，在室溫下加入100微升之2微克 /毫升在稀釋緩衝劑中之C 1 q 2小時》2小時後，清洗盤並加入經F IT C標示之兔子抗-C 1 q抗體（1 : 1 〇〇〇 ) 1小時。清洗盤—次，並在螢光分析儀（fluorescent plate reader)上，於PBS中讀取494/5 1 7處之數値。測試下列老鼠抗體樣本 :IgG2a、IgG2b ' 3D6 IgG2a、IgGl、3D6IgGl 及 3D6 IgGl Clq突變體。結果：在IgG2a和3D6 IgG2a部分可觀察到最高量之Clq結合（見，第23圖所示）。Clq與IgGl或3D6 IgGl之結合量明顯低於IgG2a»3D6IgGl Clq結合結構區中之突變進一步遏制此結合。實例9:情境式恐懼條件反射（Contextual Fear Conditioning )(CFC)分析在任何試驗前，令Tg25 76基因轉殖小鼠和野生型同 -177- 201206479 窩出生之對照組各別住在籠子裡至少2週，並使其可自由接近食物和水。CFC係在操作隔室（Med Associates公司）中進行，此隔室係由鋁製側壁和PLEXIGLAS天花板、門及後壁構成。各隔室配備樓梯，透過此樓梯可執行足電擊。另外，各隔室具有2種刺激光線、一種室內光線及一電磁鐵。照光、足電擊（US)和電磁鐵（CS)均由 PC運作 MED-PC軟體控制。隔室係位在有紅光存在之隔音室中。訓練小鼠（n = 8-12/基因型/治療）並連續二天測試之。訓練期包括將小鼠置於操作室中，點亮該刺激光和室內光二者並允許小鼠探索2分鐘。2分鐘結束時給予足電擊 (US ; 1.5毫安培）2秒。重複此程序且在第二次足電擊後 3 0秒將小鼠從隔室移出，返回其居住之籠子內。訓練後20小時，令動物返回其先前接受訓練之隔室中。然後，在其接受電擊（“情境”）之相同環境中以1〇秒之間隔在5分鐘內定時採樣（30個樣本點）來記錄僵硬行爲。僵硬之定義爲缺少除了呼吸外之動作。在5分鐘情境試驗後讓小鼠返回其居住之籠子內。在CFC訓練期前24小時經由腹膜內注射投服給約20 週大之野生型小鼠和Tg2576基因轉殖小鼠單一劑量之治療抗體。治療抗體爲：（i)非特異性IgGl抗體；（ii)Hu 3D6 3m(Fc r R)(亦稱爲 A A B · 0 0 3 );及（Π i)貝平紐如單抗（亦稱爲AAB-00 1)。第24圖顯示結果。經對照治療之野生型小鼠顯示出約40%僵硬，相較下，經對照治療之基因轉殖小鼠顯示出 -178- 201206479 情境式記億嚴重不足。當投服30毫克/公斤時，Hu 3 D6 3m抗體可回復認知功能至野生型小鼠水準。再者，效應子功能突變體對情境式記憶之效果與母抗體貝平紐如單抗相同。觀察Hu 3D6 3m抗體對情境式記憶之效果一段時間。第25圖說明以30毫克/公斤之Hu 3D6 3m抗體治療時可在投藥後至少5天提供野生型小鼠水準之認知功能。總言之，上述實例顯示出Hu 3D6 3m抗體產生類似於貝平紐如單抗般之認知改善。儘管該衍生性抗體並未明顯結合Fc受體或Clq，或引發吞噬作用或ADCC活性，此情況依然。實例 1〇:以 3D6 4m(Fcr R/Clq)IgG2a 和 Hu 3D6 3m IgGl (AAB-003)進行老鼠硏究硏究設計

將一歲大之PDAPP小鼠暴露於具對照組之6個月治療範例中；3D6 4m(Fc γ R/C1 q)IgG2a ;或 Hu 3D6 3m IgGl (見表10)。陰性對照組包括對抗無關連之非澱粉樣抗原決定部位的老鼠IgG2a抗體及人IgGl抗體。陽性對照組包括3D6 IgG2a和Hu 3D6 IgGl。將小鼠分至各劑量群組並經由IP途徑爲老鼠每週注射3、30或300毫克/公斤之指定抗體。實驗條件如實例5中之描述。 6個月後，殺死老鼠並依上述收集腦部組織。檢查組織之皮質及海馬區抗體和澱粉樣裝載量、血管澱粉樣和微 -179- 201206479 量出血。實例 11 :以 Hu 3D6 3m IgGl(AAB-003)進行食蟹猴（Cynomolgus monkey)硏究硏究設計以Hu 3D6 3m IgGl(AAB-003)治療食蟹猴。陰性對照組包括對抗無關連之非澱粉樣抗原決定部位的人IgGl抗體。陽性對照組包括Hu 3D6 IgGl(貝平紐如單抗）。將猴子分至各劑量群組接受15、50或150毫克/公斤之指定抗體。將各群組進一步分至IV及SC投服組。每週爲猴子注射，共13週並觀察2個月。硏究結束時，殺死老鼠並收集腦部組織。檢査組織之皮質及海馬區抗體和澱粉樣裝載量、血管澱粉樣和微量出血。實例12:在人體中進行之Hu 3D6 3m(AAB-003)抗體的漸增個別劑量（SAD)硏究將輕微至中度阿滋海默氏症病患（包括Ap〇E4攜帶者和非AP〇E4攜帶者）分至經由靜脈內（IV)或皮下（SC)注射 AAB-003抗體之群組中。給予各群組個別劑量，並追蹤 I2個月，由一獨立之安全性監控委員會監控。本硏究目標係增加在等於至少5毫克/公斤之靜脈內貝平紐如單抗中（除非觀察到血管源性水腫之徵兆）中之暴露。此劑量之貝平紐如單抗下可在1 〇位病患中之3位病患中觀察到V E。 -180- 201206479 sc群組包括至少二種皮下注射之劑量水準。觀察這些病患之抗體生物可利用性及其線性。依實例1之描述篩檢（如：篩檢ApoE狀態）和監控所有病患。在所有群組方面，安全性監控包括MRI監控。將MRI結果與上述實例中所描述之貝平紐如單抗硏究的結果相比較。藉由認知度量學（如：NTB、DAD、ADAS-Cog):血漿水準；澱粉樣、tau及磷酸tau之CSF水準；和澱粉樣攝影測量效力。在硏究期間追蹤各病患體內之某些生物標記。支持A 卢與抗體結合之生物標記包括CSF和血漿中之A沒40和 A泠42，及澱粉樣斑塊攝影（如：藉由PET)。指向疾病改善之生物標記包括MRI、CSF tau及磷酸tau水準，還有澱粉樣斑塊攝影。實例13: Tg2576和野生型小鼠中之Hu 3D6 3m(AAB-003) 之藥物動力學變化形廓經由皮下（SC)或腹膜內（IP)途徑投服給Tg2576基因轉殖小鼠和野生型對照組A AB-003，以測定該抗體之生物可利用性。該變化形廓爲治療性抗體之典型變化形廓。 AAB-003被慢慢排除，tl/2爲66-160小時。其具有低體積分佈（7 1-96)及良好之暴露（藉由AUC測量）。野生型和基因轉殖小鼠間之某些差異明顯。例如：野生型小鼠具有較高之 AUC及11/2。基因轉殖小鼠之抗 ΑΑΒ-003抗體水準稍高。 -181- 201206479 實例14:食蟹猴中之Hu 3D6 3m(AAB-003)之藥物動力學變化形廓 ‘ 將10毫克/公斤之Hu 3D6 3m或貝平紐如單抗經由靜脈內（IV)途徑投服給食蟹猴（3動物/抗體治療），以比較藥物動力學變化形廓並測定該效應子功能突變是否具有任何效果。比較該二種抗體之結果，一般而言，其爲典型之治療性抗體。其具有低清除率（0.1 6±0.06毫升/小時/公斤）、低體積分佈（~62毫升/公斤）及長排除半衰期（309±226小時 )。該三隻動物之一的抗A AB-003抗體測試爲陽性。經由皮下（SC)途徑投服相同之抗體劑量。生物可利用性良好，約69%且半衰期爲2 1 -445小時。該三隻動物中有二隻的抗AAB-003抗體測試爲陽性。實例15:Fc突變對抗路易斯Y(Lewis Y)抗體之效應子功能的影響爲了測定人IgGl之低絞鏈區中的突變對具有不同抗原特異性之抗體的效應子功能的影響，吾人設計抗路易斯 Y(LeY)抗原之抗體。LeY爲與二岩藻糖化之寡醣（其主要表現在表皮癌中，包括乳癌、胰臓癌、結腸癌、卵巢癌、胃癌及肺癌）相關的第2型血型。LeY顯示出不會表現在源自神經外胚層或中胚層之腫瘤。製造具有下列三個重鏈恆定區之一之抗LeY Ab02抗體：（i)野生型人IgGl ; (ii)野生型人IgG4 ;及（iii)具有二 -182- 201206479 種效應子區突變，L2 3 4A及G237A(見SEQ ID NOs: 50和 5 1)之人IgGl。IgG4顯示出在其他系統中效應子功能減弱〇在ADCC(抗體倚賴性補體細胞毒性）分析方面，使用過度表現LeY之N8 7人胃腺癌細胞作爲標靶細胞，並使用新鮮分離之人PBMC作爲效應子細胞。將效應子和標靶細胞以50 : 1之比例接種在96槽盤中。施放不同濃度 (0.1、1及10微克/毫升）之抗體，複製三份且加上介質、效應子和標靶細胞對照組以及抗體對照組。抗路易斯Y Ab02變體之ADCC活性呈現於第26圖中。在CDC(補體倚賴性細胞毒性）分析方面，將LeY陽性腫瘤細胞（A431 LeY)與不同量之抗體（0.1、1及10微克/ 毫升）接種在96槽盤中。將經稀釋之人補體（1: 1〇〇)加入各槽中。加入介質、單獨之細胞、以及抗體和補體對照組，使最終體積成爲100微升/毫升，複製三份進行測試。在3 7°C培育4小時後移出盤，使溫度平衡爲221。在各槽中加入等體積之CytoTox-OneTM並在22°C培育10分鐘。在陽性對照組方面，在每一槽中（複製三份）加入2微升溶解緩衝劑以在對照槽中產生最高LDH(乳酸脫氫酶）釋出。加入5 0微升之終止溶液以終止酶性反應。在激發波長5 60nm及發射波長590nm處記錄所產生之螢光。計算與補體相關之細胞溶解％，記爲總LDH釋出之 %(第27圖）。不管 IgGl中之 L2 3 4A及 G23 7A突變，與野生型 -183- 201206479

IgGl相比較，該變種抗體完全保留其促成對抗表現路易斯Y之腫瘤細胞的ADCC和CDC之能力。實例16 : Fc突變對抗-5 T4抗體之效應子功能的影響爲了進一步硏究人IgGl中Fc突變對具有不同抗原特異性之抗體之效應子功能的影響，吾人設計抗癌胚蛋白 5T4之抗體。5T4爲顯示在不同癌細胞膜上之與腫瘤相關的蛋白質，且爲硏發抗腫瘤疫苗及抗體導向療法之可能的靶的。製造在重鏈恆定區中具有不同突變組合之抗-5T4抗體。所使用之重鏈爲：（i)野生型人IgGl ; (ii)野生型人 IgG4 ； (iii)人 IgGl，L234A 及 L23 5A ; (iv)人 IgGl， L234A 及 G23 7A ； (v)人 IgGl，L23 5A 及 G237A;及（vi) 具有三個效應子區突變，L234A、L23 5A及G237A(見 SEQ ID NO ： 62 和 63)之人 IgGl。使用以5T4抗原穩定轉染之人乳癌細胞株MDAMB435 進行ADCC及CDC分析。依實例15中之描述，使用新鮮分離之人PBMC作爲效應子細胞（效應子：標靶細胞比爲 5〇 : 1)進行抗-5T4抗體之 ADCC分析。使用經 MDAMB43 5-Neo轉染之細胞作爲陰性對照組。ADCC活性之結果（抗體濃度爲10微克/毫升時之最大特異性細胞毒性）摘要於表15中。 -184- 201206479 表15 抗-5T4抗體對抗5T4陽性及陰性人類乳癌細胞株M D A Μ B 4 3 5之A D C C活性抗體 MDAMB345-5T4 %特異性細胞毒性 MDAMB-Neo %特異性細胞毒性 5T4-IgGlwt 81 3 5T4-IgGl L234A/G237A 78 2 5T4-IgGl L234A/L235A 15 2 5T4-IgGl L235A/G237A 27 2 5T4-IgGl L234A/L235A/G237A 2 2 5T4-IgGl N297A 5 3 5T4-IgG4 2 2

爲了評估Fc突變對由補體誘發之細胞毒性的影響，依實例15中之描述，將人類乳癌細胞株MDAMB43 5-5T4 細胞與稀釋之人類補體一起培育。CDC分析之結果呈現 _ 於表1 6中。 -185- 201206479 表16 抗-5T4抗體對抗5T4陽性及陰性人類乳癌細胞株MDAMB43 5之CDC活性抗體 MDAMB345-5T4 %特異性細胞毒性 MDAMB-Neo %特異性細胞毒性 5T4-IgGlwt 90 2 5T4-IgGl L234A/G237A 72 2 5T4-IgGl L234A/L235A 5 2 5T4-IgGl L235A/G237A 19 2 5T4-IgGl L234A/L235A/G237A 1 1 5T4-IgGl N297A 1 1 5T4-IgG4 1 1 在人IgGl之低絞鏈區中以任何試驗組合引入二種突 m (L234A/L23 5 ； L234A/G23 7A ； L 2 3 5 A / G 2 3 7 A )僅有g 部分降低ADCC和CDC活性，L2 3 5A/G23 7A顯示出較高之剩餘的效應子功能之能力。然而，IgG 1低絞鏈區中具三種突變（1^2 3 4八/1^2 3 5八/02 3 7厶）之抗-5丁4抗體顯示出被完全破壞之ADCC和CDC活性。結論實例中提供具有不同抗原特異性之Fc區變種抗體的比較。實例6描述使用在L234A及G2 3 7A處（雙重變種）或在L234A、L235A及G237A處（三重變種）具有IgGl Fc突變之AyS-特異性抗體的ADCC分析。雙重變種和三重變種均 -186- 201206479 具有明顯減弱之功能（見第22圖）。實例15描述使用在 L2WA及G23 7A處具有IgGl突變之LeY-特異性抗體的 ADCC及CDC分析。此案例中，變種抗體保留效應子功能（見第26及27圖）。最後，實例16比較5T4-特異性抗體之 IgGl Fc 變種。各雙重變種（L234A/L235A ; L234A/G237A ; L235A/G23 7A)較三重變種（L234A/L235A/G237A)保留更多之效應子活性（見表15和16)。然而，L234A/L23 5A雙重變種之效應子活性減弱至與三重變種幾乎相同之水準。上述結果證明絞鏈區突變之效巾可取決於數種因子，包括細胞表面上之靶的抗原密度。然而，該數據指出在所有三個位置處之破壞對排除效應子活性是必要的。上述實例僅用於說明而非界定本發明；本技藝之一般技術人士可輕易明白其他變異體。本發明範圍涵蓋在由此生成之任何專利的申請專利範圍內。因此，本發明之範圍不應僅參考上述描述來決定，而應參考核發之申請專利範圍與其同等物之全部範圍來決定。本申請案中所列之所有刊物、參考資料、編號及專利文件之全部內容納爲所有目的之參考資料，其參考程度如同各個別刊物或專利文件被個別提示。【圖式簡單說明】第1圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計模型中，經治療之病患的ADAS-Cog、DAD、NTB及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰 -187- 201206479 劑有所改善。ΜΙΤΤ =修正型意向性治療。第2圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計模型中，完成試驗（“完成者”）的經治療之病患的ADAS-Cog、 DAD、NTB及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰劑有所改善。第3圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計模型中，經治療之ApoE4攜帶者病患的ADAS-Cog、DAD、NTB 及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰劑有所改善。第4圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計模型中，完成試驗的經治療之Ap〇E4攜帶者病患的ADAS-Cog、 DAD、NTB及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰劑有所改善。第5圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計模型中，經治療之非ApoE4攜帶者病患的ADAS-Cog、DAD、 NTB及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰劑有所改善。第6圖提供類似於第5圖之資料，但第6圖顯示出基於MMSE量表之相對於安慰劑的變化。第7圖顯示在利用無線性假設的重複測量統計·模型中，完成試驗的經治療之非ApoE4攜帶者病患的ADAS-Cog 、DAD、NTB及CDR-SB相對於安慰劑病患之變化。零點之上的長條代表相對於安慰劑有所改善》第8圖顯示類似於第7圖之資料，但第8圖顯示出基 -188- 201206479 於MMSE量表之相對於安慰劑的變化。第9圖顯示在非ApoE4攜帶者族群中，經治療之病患的ADAS-Cog、DAD、NTB及CDR-SB在一段時間內相較於安慰劑病患之變化。第10、1 1及12圖顯示全部族群（ApoE4攜帶者和非 ApoE4攜帶者）中，ApoE4攜帶者和非ApoE4攜帶者分別與安慰劑族群相比較之BBSI的變化。第13圖顯示與安慰劑病患（Ap〇E4基因型間並無區分 )相比較，在經治療之病患中的CSF磷酸-tau濃度。第14圖顯示在一段時間內血清中之貝平紐如單抗的血清濃度變化（左邊）及在一段時間內血漿中之AyS濃度的變化。第 15 圖顯示人 IgGl(SEQ ID NO: 95)、IgG2(SEQ ID NO : 96)及 IgG4(SEQ ID NO : 97)與老鼠 IgGl(SEQ ID NO :98)及 IgG2a(SEQ ID NO: 99)之 CH2 結構區的比對。第16圖顯示藉由老鼠3D6 IgGl衍生物之老鼠小神經膠質細胞清除A/3斑塊。MsIgGl及MsIgG2a爲對抗無關連抗原之老鼠抗體。該3D6抗體具有此處所描述之可變區。 3D6/Fc^Rl指出IgGl恒定區之Fc結合區中的單一 E2 33P突變體。3D6/Clq指出Clq結合區中之三重突變體。見，如：實例6和表1 〇。第17圖顯示藉由老鼠3D6 IgG2a衍生物之老鼠小神經膠質細胞清除A沒斑塊。IgG2 a爲對抗無關連抗原之老 -189- 201206479 鼠抗體。其餘抗體和條件描述於，如：實例6和表10中〇第1 8圖顯示藉由人化3 D 6衍生物之老鼠小神經膠質細胞（AAB)清除A/3斑塊》該抗體和條件描述於，如：實例6和表10中。第1 9圖顯示測量老鼠小神經膠質細胞吞噬經塗覆老鼠IgG 1之小珠的玻管內分析的測量結果。條件描述於實例6中。第20圖顯示使用指出之人化抗體的類似分析。條件描述於實例6中。第2 1圖顯示藉由指明之人化抗體測量C 1 q結合之 ELISA分析的結果。見，實例7。第22圖顯示使用指明之人化抗體進行的抗體倚賴性補體細胞毒性分析之結果。結果依實例7中之描述表示。第23圖顯示藉由指明之老鼠抗體測量Clq結合之 ELISA分析的結果。見’實例8。第24-25圖顯示經指明之人化抗體治療之小鼠中情境式恐懼分析之結果。依實例9中之描述比較野生型與 Tg2576小鼠之結果。

第26圖顯示抗路易斯Y(Lewis Y)Ab02抗體之ADCC 活性的結果。見：實例15。第27圖顯示抗路易斯Y Ab02抗體之CDC(補體倚賴性細胞毒性）活性的結果。見：實例1 5。 -190- 201206479 序列表 <11〇>艾倫法瑪國際有限公司衛斯公司 <12〇>取決於ApoE狀態之免疫治療攝生法 <140> 097139941 <141> 2008-10-17 <150> 61/083,827 <151> 2008-07-25

<150> 60/999,423 <151> 2007-10-17 <160> 99 <170> Patentln 3.5版 <210> 1 <211> 42 <212> PRT 現代人 <400> 1

Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gin Lys 15 10 15

Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala lie lie 20 25 30

Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val lie Ala 35 40 <210> 2 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多狀 <400> 2

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80 201206479

Ser Arg Val Glu Ala GIu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly 85 90 95

Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110 <210> 3 <211> 119 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 3

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser He Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 4 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 4

Tyr Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Set Cys Lys Ser Scr Gin Ser Leu Leu Asp Scr 20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 -2- 201206479

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly 85 90 95

Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

<210> 5 <211> 119 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 5

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 6 <211> 219 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 6

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser 35 40 45 201206479

Pro Arg Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly 85 90 95

Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125

Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin 145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glii Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 7 <211> 449 <212> PRT <213>人工序列

<220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 7

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 -4- 201206479

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 . 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175

Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Tht Leu Met lie Ser 245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu -5- 201206479 385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Scr Phe Phc Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

Lys

<210> 8 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列

<220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 8

Asp Val Leu Met Thr Gin Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15

Asp Gin Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Asn lie lie His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Lys Lys Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly lie Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Glu 100 105 110

<210> 9 <211> 123 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之描述:合成之多肽 <400> 9

Gin Ala Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly lie Leu Gin Scr Ser Gin 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 '

Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 -6- 201206479

Trp Leu Ala His He Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr He Ser Lys Asp Thr Ser. Arg Lys Gin Val 65 70 75 80

Phe Leu Lys lie Thr Ser Vai Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Val Arg Arg Pro He Thr Pro Val Leu Val Asp Ala Met Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 10 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 10

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Ser 85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105 110 <210> 11 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 11

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 201206479

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 12 <211> 120 <212> PRT 人1：序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 12

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr He Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 13 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 13 201206479

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Scr 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His He Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210〉 14 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 14

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95·

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 15 <211> 120 9- 201206479 <212〉 PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 15

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Scr Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 16 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400〉 16

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Va] Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110 -10- 201206479

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 17 <211> 120 <212> PRT <213>人；t序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 17

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His He Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 18 <211> 120 <212〉 PRT AX序列 <220〉 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 18

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Scr Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80 -11 - 201206479

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 19 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之描述:合成之多肽 <400> 19

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 20 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 20

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser -12- 201206479 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 21 <211> 121 <212> PRT <213>人工序列

<220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400〉 21

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Val 115 120

<210> 22 <211> 121 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 22

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 -13- 201206479

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr He Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Val 115 120

<210> 23 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 23

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 24 <211> 120 <212> PRT <加> 人工序列人工序列之描述:合成之多肽 -14- 201206479 <400〉 24

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 25 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 25

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Set 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser .115 120 <210> 26 -15- 201206479

<211> 120 <212〉 PRT •人工序列 <220〉 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 26

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 27 <211〉 120 <212> PRT 人工序列 <220>

<223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 27

Gin Val Gin Leu Val Glu Scr Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110 -16- 201206479

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 2S <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 28

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Val Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Phe Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 29 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 29

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Scr Val Gly Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr He Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80 -17- 201206479

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210〉 30 <211> 120 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 30

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Ser Val Gly Trp lie Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Scr Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val 65 70 75 80

Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Thr Thr Thr Ala Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gin 100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 31 <211> 112 <212> PRT •人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 31

Asp Val Leu Met Thr Gin Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gin Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Asn lie Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45 -18- 201206479

Pro Lys Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110

<210> 32 <211> 123 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 32

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly lie Leu Gin Pro Ser Gin 1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Asn 20 25 30

Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Tyr Trp Asp Glu Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Asn Asn Gin Val 65 70 75 80

Phe Leu Lys lie Thr Asn Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Arg lie lie Tyr Asp Val Glu Asp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 33 <211> 113 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述·.合成之多肽 <220> <221> MOD 一RES <222> (2)..(2) <223> Val 或 lie <220> <221> MOD RES <222> (7)7.(7) <223> Ser或 Thr -19- 201206479 <220> <221〉 MOD RES <222> (14)..(14) <223> thr 或 Ser <220> <221> MOD RES <222> (15)..(15) <223> Leu^ Pro <220> <221> MOD RES <222> (30)..(30) <223> he 或 Vai <220> <221> MOD.RES <222> (50)..(50) <223> Arg, Gin 或 Lys <220>

<221> MOD.RES <222> (88)..(88) <223> Vai 或 Leu <220> <221> MOD RES <222> (105)..(105) <223> Gin 或 Gly <220> <221> MOD RES <222> (108)..(108) <223> Arg <220> <221> MOD RES <222> (109)..(109) <223> Val^ Leu <400> 33

Asp Xaa Val Met Thr Gin Xaa Pro Leu Ser Leu Pro Val Xaa Xaa Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser Leu Xaa Tyr Ser 20 25 30

Asp Gly Asn Ala Tyr Leu His Trp Phe Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Xaa Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Scr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Xaa Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gin Ser 85 90 95

Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Xaa Gly Thr Xaa Xaa Glu Me Lys 100 105 110

Arg <210> 34 -20- 201206479

<211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <220>

<221> MOD RES <222> (1)..(1) <223> 6lu 或 όΐη <220> <221> MOD RES <222> (7)..(7) <223> Ser或 Leu <220> <221> MOD RES <222> (46)..(46) <223> 01u， Val, Asp或 Ser

<220> <221> MOD RES <222> (63)..(63) <223> Thr 或 Ser <220> <221> MOD RES <222> (75)..(75) <223> Ala, Ser, Val 或 Thr <220> <221〉 MOD 一RES <222> (76)..(76) <223> Lys 或 Arg <220> <221> MOD RES <222> (89)..(89) <223〉όΐιι 或 Asp <220> <221〉 MOD—RES <222> (107)..(107) <223> Leu ^ Thr <400> 34

Xaa Val Gin Leu Val Glu Xaa Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Xaa Leu Val 35 40 45

Ala Gin lie Asn Ser Val Gly Asn Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Xaa Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Xaa Xaa Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Xaa Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Ser Gly Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Xaa Val Thr Val Ser Ser 100 105 110 -21 - 201206479

<210> 35 <211> 219 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 35

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser Leu lie Tyr Ser 20 25 30

Asp Gly Asn Ala Tyr Leu His Trp Phe Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gin Ser 85 90 95

Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125

Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin 145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 36 <211> 447 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 -22- 201206479 <400> 36

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Are Tyr 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Ala Arg Tyr Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Leu Val Ala Gin lie Asn Ser Val Gly Asn Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp 50 55 60

Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr 65 70 75 80

Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95

Tyr Cys Ala Ser Gly Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110

Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser 115 120 125

Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 130 135 140

Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 145 150 155 160

Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu 165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Val Ala Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190

Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 -23- 201206479

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys 325 330 335

Ala Lys Gly Gin Pro Ala Arg Tyr Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365

Val Lys. Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 37 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> 愁人工序列之描述:合成之多肽 <400> 37

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser He Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Leu His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser Leu Val Pro Leu Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105 110 -24- 201206479

<210> 38 <211> 123 <212> PRT •人工序列 <220>

<223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 3S

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gin 15 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Gly Val Gly Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His He Trp Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Val 65 70 75 80

Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Gin Leu Gly Leu Arg Ser lie Asp Ala Met Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210〉 39 <211> 122 <212> PRT <213> X±MU ' <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 39

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gin 15 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Gly Val Gly Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Val 65 70 75 80

Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Gin Leu Gly Leu Arg Ser lie Asp Ala Met Asp Tyr -25- 201206479 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 115 120 <210> 40 <211> 132 <212> PRT <213>人工序列 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 40

Met Lys Leu Pro Val Arg Leu Leu Val Leu Met Phe Trp lie Pro Gly 1 5 . 10 15

Ser Ser Set Asp Val Met Met Thr Gin Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val 20 25 30

Ser Leu Gly Asp Gin Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser Leu 35 40 45

Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Met Gin Lys Pro 50 55 60

Gly Gin Ser Pro Met Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 65 70 75 80

Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 85 90 95

Leu Lys lie Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Phe Tyr Cys 100 105 110

Phe Gin Gly Ser Arg Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu 115 120 125

Glu Leu Lys Arg 130 <210> 41 <211> 142 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 41

Met Asp Arg Leu Thr Ser Ser Phe Leu Leu Leu lie Val Pro Ala Tyr 15 10 15

Val Leu Ser Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly lie Leu Gin 20 25 30

Pro Ser Gin Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu 35 40 45

Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin Pro Ser Gly Lys 50 55 60 26- 201206479

Gly Leu Glu Trp Leu Ala His lie Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Are Tyr 65 70 75 80

Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr He Ser Lys Asp Thr Ser Arg 85 90 95

Asn Gin Val Phc Leu Lys He Thr Ser Val Asp Thr Thr Asp Thr Ala 100 105 110

Thr Tyr Tyr Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser lie Val lie Ala Thr Gly 115 120 125

Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 130 135 140

<210> 42 <211> 128 <212> PRT 〈犯> 人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 42

Met Asp Phe Gin Val Gin lie Phe Ser Phe Leu Leu lie Ser Ala Ser 15 10 15

Val lie lie Ser Arg Gly Gin lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala lie 20 25 30

Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser 35 40 45

Ser Ser Val Scr Tyr Met His Trp Tyr Gin Gin Lys Ser Gly Thr Ser 50 55 60

Pro Lys Arg Trp lie Tyr Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro 65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Gly Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Pro Thr lie 85 90 95

Ser Asn Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gin Asn Trp 100 105 110

Arg Ser Ser Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg 115 120 125 <210> 43 <211> 138 <212> PRT <213>人工序列 <220> <2挪人工序列之描述:合成之多肽 <400> 43

Met Glu Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 15 10 15 -27- 201206479

Val His Ser Gin Val Gin Leu Gin Gin Ser Gly Pro Glu Leu Met Lys 20 25 30

Pro Gly Ala Ser Val Lys lie Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe 35 40 45

Ser Thr Ser Trp lie Glu Trp lie Lys Gin Arg Pro Gly His Gly Leu 50 55 60

Glu Trp lie Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn 65 70 75 80

Ala Asn Phe Lys Gly Arg Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ala Ser Asn 85 90 95

Thr Ala Tyr Met Gin Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 no

Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp 115 120 125

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 130 135

<210> 44 <211> 108 <212〉 PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述··合成之多肽 <400> 44

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Ser Ala Ser Gin Gly lie Ser Asn Tyr 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr lie Scr Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp lie Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Arg Lys Leu Pro Tyr 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg 100 105

<210〉 45 <211> 113 <212> PRT <213>人土序列 -28- 201206479 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 45 GIu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Arg Tyr 20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Glu lie Asn Pro Asp Ser Ser Thr lie Asn Tyr Thr Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gin Met Gly Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser 100 105 110

Ser

<210> 46 <211> 113 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多狀 <400> 46

Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Asp Phe Ser Arg Tyr 20 25 30

Trp Met Asn Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Glu lie Asn Pro Asp Ser Ser Thr lie Asn Tyr Thr Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser 65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gin Met Gly Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110

Ser -29- 201206479

<210〉 47 <211> 241 <212> PRT •人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 47

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp 15 10 15

Val Ser Gly Ser Ser Gly Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser 20 25 30

Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser 35 40 45

Gin Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu 50 55 60

Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys 65 70 75 80

Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95

Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Va) 100 105 110

Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly 115 120 125

Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie 130 135 140

Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160

Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys 165 170 175

Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190

Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205

Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220

His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240

Cys

-30- 201206479 <210> 48 <211> 219 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 48

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Scr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly 85 90 95

Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125

Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp ^sn Ala Leu Gin 145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215

<210> 49 <211> 726 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多核苷酸 <400> 49 -31 - 201206479 atggacatgc gcgtgcccgc ccagctgctg ggcctgctga tgctgtgggt gtccggctcc 60 tccggcgacg tggtgatgac ccagtccccc ctgtccctgc ccgtgacccc cggcgagccc 120 gcctccatct cctgcaagtc ctcccagtcc ctgctggact ccgacggcaa gacctacctg 180 aactggctgc tgcagaagcc cggccagtcc ccccagcgcc tgatctacct ggtgtccaag 240 ctggactccg gcgtgcccga ccgcttctcc ggctccggct ccggcaccga cttcaccctg 300 aagatctccc gcgtggaggc cgaggacgtg ggcgtgtact actgctggca gggcacccac 360 ttcccccgca ccttcggcca gggcaccaag gtggagatca agcgtactgt ggctgcacca 420 tctgtcttca tcttcccgcc atctgatgag cagttgaaat ctggaactgc ctctgttgtg 480 tgcctgctga ataacttcta tcccagagag gccaaagtac agtggaaggt ggataacgcc 540 ctccaatcgg gtaactccca ggagagtgtc acagagcagg acagcaagga cagcacctac 600 agcctcagca gcaccctgac gctgagcaaa gcagactacg agaaacacaa agtctacgcc 660 tgcgaagtca cccatcaggg cctgagctcg cccgtcacaa agagcttcaa caggggagag 720

tgttag 726 <210> 50 <211> 330 <212> PRT 現代人 <400> 50

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Scr Scr Lys 15 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr 65 70 75 80

Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110

Pro Ala Pro Glu Ala Leu Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 -32- 201206479 GIu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240

Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn 260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn 290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 51 <211> 329 <212> PRT <213>現代人 <400> 51

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 15 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr 65 70 75 80

Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 -33- 201206479

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Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175

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Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 325

<210> 52 <211> 468 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 52

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala lie Leu Lys Gly 15 10 15

Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe -34- 201206479 35 40 45

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Ser Pro Gly Lys 465 <210> 53 <211> 467 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 53

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala lie Leu Lys Gly 15 10 15

Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

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Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 435 440 445

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 450 455 460

Ser Pro Gly 465 <210> 54 <211> 449 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 54

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Scr Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Scr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

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Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160

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Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205 -38- 201206479

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

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Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 245 250 255

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Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 355 360 365

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Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400

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Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

Lys

<210> 55 <211> 448 <212> PRT <加> 人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 55

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly -39- 201206479 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Scr Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser He Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175

Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser ISO 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Leu Gly Ala Pro 225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 245 250 255

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Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 -40- 201206479

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

Thr He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 <210> 56

<211> 327 <212> PRT •現代人 <400> 56

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125

Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val -41 - 201206479 130 135 140

Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe 165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205

Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 210 215 220

Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240

Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325

<210> 57 <211> 326 <212> PRT 現代人 <400> 57

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15 10 IS

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 -42- 201206479

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125

Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140

Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe 165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205

Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 210 215 220

Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Scr Gin Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly 325

<210> 58 <211> 465 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 58 -43- 201206479

Met Glu Phc Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala lie Leu Lys Gly 15 10 15

Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Scr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser 65 70 75 80

Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95

Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110

Tyr Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp 115 120 125

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 130 135 140

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Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 195 200 205

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 210 215 220

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Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 260 265 270

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44- 201206479

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Tlir Tyr Arg Val 305 310 315 320

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser lie Glu Lys 340 345 350

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 355 360 365

Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 370 375 380

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 405 410 415

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430

Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 450 455 460

Lys 465

<210> 59 <211> 464 <212> PRT <213>人工序列 <220> ^ <223〉人工序列之描述:合成之多肽 <400> 59

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala lie Leu Lys Gly 15 10 15

Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Ττρ Val Ala Sex lie Arg Sct Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Set 65 70 75 80

Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn -45- 201206479 85 90 95

Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110

Tyr Tyr Cys Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp 115 120 125

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 130 135 140

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Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 195 200 205

Val Pro Ser Scr Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 210 215 220

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Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 245 250 255

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 260 265 270

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Scr Gin Glu Asp 275 280 285

Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Scr Thr Tyr Arg Val 305 310 315 320

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser lie Glu Lys 340 345 350

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 355 360 365

Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 370 375 380

-46- 201206479

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 405 410 415

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430

Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 450 455 460

<210> 60 <211> 446 <212> PRT

•人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 60

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Atg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyx 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125

Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175

Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 -47- 201206479

Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220

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<210> 61 <211> 445 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 61 -48- 201206479

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Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270

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Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 -49- 201206479

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Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser IU Glu Lys Thr lie Ser 325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350

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Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380

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Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415

Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430

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<210> 62 <211> 330 <212> PRT ⑽現代人 <400> 62

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-50- 201206479

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<210> 63 <211> 329 <212> PRT <213>現代人 <400> 63

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-52- 201206479 <400> 64

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<210> 66 <211> 449 <212> PRT <213>人工序列 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 66

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Lys -57- 201206479

<210> 67 <211> 448 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 67

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

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Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

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Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 245 250 255

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Ala Lys Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser T,r Tyr Arg Val

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

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Cys Leu Val Lys Gly Phe TVr Pro Ser Asp I.e A.a Va. Glu Trp Glu

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Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

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Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Scr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

<210> 68 <211> 1407 <212> DNA <加> 人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多核苷酸 <400> 68 atggagtttg ggctgagctg gctttttctt gtggctattt taaaaggtgt ccagtgtgag 60 gtgcagctgc tggagtccgg cggcggcctg gtgcagcccg gcggctccct gcgcctgtcc 120 tgcgccgcct ccggcttcac cttctccaac tacggcatgt cctgggtgcg ccaggccccc 180 ggcaagggcc tggagtgggt ggcctccatc cgctccggcg gcggccgcac ctactactcc 240 gacaacgtga agggccgctt caccatctcc cgcgacaact ccaagaacac cctgtacctg 300 cagatgaact ccctgcgcgc cgaggacacc gccgtgtact actgcgtgcg ctacgaccac 360 tactccggct cctccgacta ctggggccag ggcaccctgg tgaccgtgtc ctccgcgtcg 420 accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 480 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 540 tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 600 -59- 201206479 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 660 tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct 720 tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aagccgctgg ggcaccgtca 780 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 840 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 900 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 960 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 1020 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1080 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc 1140 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1200 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1260

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Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Scr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

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Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Scr Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

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Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Scr Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140

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Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

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Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

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Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 355 360 365

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Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

Lys -61 - 201206479

<210> 70 <211> 448 <212> PRT 現代人 <400> 70

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Scr Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175

Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Scr 245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 260 265 270

-62- 201206479

Pro Glu Val Lys Phe Asn Ττρ Tyr Val Asp Q\y Val Glu Val His Asn 275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 325 330 335

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 <210> 71 <211> 113 <212> PRT 〈胁人土序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 71

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser He Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Arg Arg Leu lie Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gin Gly 63· 201206479 85 90 95

Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

Arg

<210> 72 <211> 119 <212> PRT •人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 72

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Ser lie Arg Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ser Asp Asn Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Va) Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Arg Tyr Asp His Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Tyr Trp Gly Gin Gly 100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 73 <211> 113 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400〉 73

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Asn lie He His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 -64· 201206479

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val GIu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

Arg <210> 74 <211> 123 <212> PRT <213>人工序列

<220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 74

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu 15 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30

Gly Met Gly Val Ser Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr lie Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gin Val 65 70 75 80

Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Val Arg Arg Pro lie Thr Pro Val Leu Val Asp Ala Met Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 75 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 75

Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Val Ser Gin Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 -65- 201206479

Asn Gly Tyr Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Scr Gly Ser Gly Thr Asp Phc Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gin Thr 85 90 95

Arg His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110

<210> 76 <211> 115 <212> PRT 愚人工序列 <220> <223>人工序列之描述洽成之多肽 <400> 76

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Asn 20 25 30

Gly Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Phe lie Ser Asn Leu Ala Tyr Ser lie Asp Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60

Thr Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Ser Gly Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 77 <211> 115 <212> PRT 人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 77

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 -66- 201206479

Scr Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Asn 20 25 30

Gly Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Phe lie Ser Asn Leu Ala Tyr Ser lie Asp Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60

Thr Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Ser Gly Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115

<210〉 78 <211> 115 <212> PRT <2l3>人工序列人工序列之描述·.合成之多肽 <400> 78

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Asn 20 25 30

Gly Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Ser Phe lie Ser Asn Leu Ala Tyr Ser lie Asp Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60

Thr Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Ser Gly Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115

<210> 79 <211> 116 <212> PRT <2】3>人工序列 <220> -67- 201206479 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 79

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Tyr Thr Glu Ala Tyr 20 25 30

Tyr lie His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Arg lie Asp Pro Ala Thr Gly Asn Thr Lys Tyr Ala Pro Arg Leu 50 55 60

Gin Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Ser Leu Tyr Ser Leu Pro Val Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser 115

<210> 80 <211> 114 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之描述:合成之多肽 <400> 80

Asp Val Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Lys Ser Ser Gin Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30

Asp Ala Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Arg Arg Leu lie Tyr Gin lie Ser Arg Leu Asp Pro Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gin Gly 85 90 95

Thr His Tyr Pro Val Leu Phe Gly Gin Gly Thr Arg Leu Glu lie Lys 100 105 110

Arg Thr -68- 201206479

<210> 81 <211〉 117 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之描述:合成之多肽 <400> 81

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30

Ala lie His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Phe Thr Ser Pro Tyr Ser Gly Val Ser Asn Tyr Asn Gin Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Phe Asp Asn Tyr Asp Arg Gly Tyr Val Arg Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Leu Val 115

<210> 82 <211> 114 <212> PRT <213>人工序列 <220> <2M>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 82

Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr lie Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp 20 25 30

Arg lie Ser Phe Leu Asn Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Pro Pro 35 40 45

Lys Leu Leu lie Tyr Ala Ala Thr Lys Gin Gly Thr Gly Val Pro Asp 50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser 65 70 75 80

Ser Leu Gin Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Ser Lys 85 90 95 -69· 201206479

Glu Phe Pro Trp Ser Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg 100 105 110

Thr Val

<210> 83 <211> 121 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 83

Gin Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gin 1 5 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Arg Thr Ser 20 25 30

Gly Met Gly Val Gly Trp lie Arg Gin Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu 35 40 45

Trp Leu Ala His lie Trp Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr Asn Pro Ser 50 55 60

Leu Lys Ser Gin Leu Thr lie Scr Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gin Val 65 70 75 80

Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95

Cys Ala Arg Arg Asn Tyr Tyr Tyr Asp Asp Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 84 <211> 112 <212> PRT <213>人工序列

<220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 84

Asp Val Leu Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 15 10 15

Gin Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser lie Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gin Arg Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu lie Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Scr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie -70- 201206479 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105 110

<210> 85 <211> 9 <212> PRT 現代人 <400> 85

Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr

<210> 86 <211> 6 <212> PRT 現代人 <400> 86

Ala Glu Phe Arg His Asp <210> 87 <211> 7 <212> PRT <213>現代人 <400> 87

Glu Phe Arg His Asp Ser Gly <210> 88 <211> 5 <212> PRT <213〉現代人 <400> 88

Glu Phe Arg His Asp 1 5

<210> 89 <211> 16 <212> PRT <213>現代人 <400> 89

Tyr Glu Val His His Gin Lys Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly 15 10 15

<210> 90 <211> 4 <212> PRT •現代人 <400> 90 Val Phe Phe Ala 1 <210> 91 <211> 9 <212> PRT <213>現代人 201206479 <400> 91

Gin Lys Leu Phc Phe Ala GIu Asp Val <210> 92 <211> 9 <212> PRT 她人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之肽 <400> 92

Lys Leu Val Phe Phe Ala Gly Asp Val

<210> 93 <211〉 5 <212> PRT 她人工序列 <220> <223>人工序列之描述:合成之5xffis標籤 <400> 93

His His His His His 1 5 <210> 94 <211> 5 <212> PRT <213>人工序列. <220> <223>人工序列之描述:合成之多肽 <400> 94

Asp Ala GIu Phe Arg

<210> 95 <211> 110 <212> PRT

<213>現代人 <400> 95

Ala Pro GIu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 15 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro GIu Val Thr Cys Val 20 25 30

Val Val Asp Val Ser His GIu Asp Pro GIu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 40 45

Val Asp Gly Val GIu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg GIu GIu 50 55 60

Gin Tyr Asn Scr Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80

Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys GIu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95 -72- 201206479

Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys 100 105 110 <210> 96 <211> 109 <212> PRT <213>現代人 <400> 96

Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 15 10 15

Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 20 25 30

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val 35 40 45

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 50 55 60

Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gin 65 70 75 80

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 85 90 95

Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Thr Lys 100 105 <210> 97 <211> 110 <212> PRT <213>現代人 <400> 97

Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 1 5 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

Val Val Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr 35 40 45

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 55 60

Gin Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80

Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95

Gly Leu Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Scr Lys Ala Lys 100 105 110

<210> 98 <211> 107 <212> PRT -73- 201206479 <213>小鼠 <400> 98

Val Pro Glu Val Scr Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 15 10 15

Val Leu Thr lie Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp 20 25 30 lie Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gin Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp 35 40 45

Val Glu Val His Thr Ala Gin Thr Gin Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn 50 55 60

Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro lie Met His Gin Asp Trp 65 70 75 80

Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Sct Ala Ala Phe Pro 85 90 95

Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Thr Lys 100 105 <210> 99 <211> 110 <212> PRT <213〉小鼠 <400〉 99

Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Scr Val Phe lie Phe Pro Pro Lys 15 10 15 lie Lys Asp Val Leu Met lie Ser Leu Ser Pro lie Val Thr Cys Val 20 25 30

Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gin lie Ser Trp Phe 35 40 45

Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gin Thr Gin Thr His Arg Glu 50 55 60

Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro lie Gin His 65 70 75 80

Gin Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys 85 90 95

Asp Leu Pro Ala Pro lie Glu Arg Thr lie Ser Lys Pro Lys 100 105 110 -74-

Claims

201206479 七申請專利範圍 1· 一種特異結合Αβ之N端抗原決定部位的抗體於製造供治療含有零個ΑροΕ4對偶基因（“非ΑροΕ4攜帶者病患”）且罹患阿滋海默氏症之病患之阿滋海默氏症的藥物上之用途。 2 ·如申請專利範圍第1項之用途，其中該抗體係特異結合位於下列殘基間之抗原決定部位： A /3之殘基1-7 ; A /3之殘基1 - 5 ;或 A /3之殘基3-7。 3.如申請專利範圍第1項之用途，其中介於約0.15 毫克/公斤至約2毫克/公斤之抗體劑量係欲藉由靜脈內輸注投服。 4 ·如申請專利範圍第3項之用途，其中該劑量係欲每 4至1 6週； 1 〇至1 4週；或 1 3週投服。 5 _如申請專利範圍第3項之用途，其中該劑量爲約 0.5毫克/公斤至約2毫克/公斤。 6.如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-5130)之人化型式，且重鏈恆定區中之位置234、235及237分別被Ala、 Ala及Ala佔據’其中位置係藉EU編號系統編號。 201206479 7 ·如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗（bapineuzumab)。 8. 如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其進一步包含監控血管源性水腫。 9. 如申請專利範圍第8項之用途，其包含供治療藉由該監控所偵測之血管源性水腫的皮質類固醇。 1〇_如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其進一步包含維持該抗體之平均血清濃度介於約0.1微克/ 毫升至約60微克/毫升。 1 1 ·如申請專利範圍第1 〇項之用途，其中該病患體內的該抗體之最高血清濃度係低於約28微克抗體/毫升血清〇 12. 如申請專利範圍第10項之用途，其中該最高血清濃度係介於約4至28微克抗體/毫升血清。 13. 如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其進一步包含使該病患體內之平均血漿A/3濃度達到至少 450微微克/毫升。 14. 如申請專利範圍第13項之用途，其中該平均血漿 A沒濃度係介於約600微微克/毫升至約3000微微克/毫升〇 15. —種特異結合A/3之N端抗原決定部位的抗體於製造供減緩含有零個Ap〇E4對偶基因（“非ApoE4攜帶者 ”）之病患的認知衰退的藥物上之用途，其中 -2- 201206479 該非 AP〇E4攜帶者病患已被診斷爲罹患輕微至中度阿滋海默氏症；且該認知衰退係藉由 adas-cog、ntb、mmse或 C D R - S B 測量。 16. 如申請專利範圍第15項之用途，其中該抗體係欲以約0.15毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。 17. 如申請專利範圍第15或16項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-5130)之人化型式，且重鏈恆定區中之位置234、235及237分別被Ala、Ala及 Ala佔據，其中位置係藉EU編號系統編號。 18. 如申請專利範圍第15或16項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 19. 一種特異結合AyS之N端抗原決定部位的抗體於製造供降低含有零個AP〇E4對偶基因（“非Ap〇E4攜帶者”）之病患的腦容量減少的藥物上之用途，其中該非AP〇E4攜帶者病患已被診斷爲罹患輕微至中度阿滋海默氏症。 20. 如申請專利範圍第19項之用途，其中該抗體係欲以約0.15毫克/公斤至約2毫克/公斤之劑量藉由靜脈內輸注投服。 21. 如申請專利範圍第19或20項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-5130)之人化型式’且重鏈恆定區中之位置234、23 5及23 7分別被Ala、Ala及 201206479 Ala佔據，其中位置係藉EU編號系統編號。 2 2.如申請專利範圍第19或20項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 23.如申請專利範圍第19項之用途，其中該腦容量減少係藉由MRI測量。 24·—種特異結合A/3之N端抗原決定部位的抗體於製造供治療罹患阿滋海默氏症且含有一或二個AP〇E4對偶基因複體之病患的阿滋海默氏症的藥物上之用途。 25. 如申請專利範圍第24項之用途，其進一步包含監控血管源性水腫。 26. 如申請專利範圍第24項之用途，其中該抗體係欲以0.01至0.6毫克/公斤之劑量及介於每週至每月之頻率經由皮下投服。 27. 如申請專利範圍第24項之用途，其中該抗體係欲以0.05至0.5毫克/公斤之劑量經由皮下投服。 2 8.如申請專利範圍第24項之用途，其中該抗體係欲以1至40毫克之劑量及介於每週至每月之頻率經由皮下投服。 29. 如申請專利範圍第25項之用途，其包含供治療因投服該抗體所引起之血管源性水腫的皮質類固醇。 30. 如申請專利範圍第29項之用途，其中相對於血管源性水腫出現前之該抗體的投服劑量或頻率，於血管源性水腫期間減少或去除所投服之該抗體的劑量或頻率。 3 1.如申請專利範圍第29項之用途，其中相對於血管 -4 - 201206479 源性水腫出現前或期間的該抗體之投服劑量或頻率，於血管源性水腫解除後增加所投服之該抗體的劑量或頻率。 32. —種特異結合AyS之N端抗原決定部位的抗體於製造供治療或有效預防病患族群之特徵爲腦內A/3澱粉樣沈積的澱粉樣生成疾病的藥物上之用途，其中取決於存在於該等病患體內之ApoE的對偶基因型式而欲對該族群之不同病患投服不同之攝生法；其中該等攝生法中至少一者包含投服給病患該抗體。 33. 如申請專利範圍第32項之用途，其中第一攝生法包含投服給病患該抗體，第二攝生法缺少該抗體或誘發抗 A沒抗體之作用劑，且該第一攝生法係被投服給含有零個 AP〇E4對偶基因複體之病患，第二攝生法係被投服給含有 —或二個AP〇E4對偶基因複體之病患。 3 4.如申請專利範圍第32項之用途，其中該不同之攝生法包含第一及第二攝生法，此二種攝生法各別包含投服該抗體；且第二攝生法與第一攝生法之差異係在於下列（i) 至（vi)項中至少一者： (i) 抗體之劑量減少； (ii) 抗體之投服頻率降低； (iii) 抗體誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力降低： (iv) 抗體之平均血清濃度降低； (v) 抗體之最高血清濃度降低； (vi) 相對於疾病進展之時間，治療開始之時間較早；因而投服該第一及第二攝生法係使下列（a)、（b)及（c) 201206479 項中至少一者發生： (a) 該第二攝生法係投服給含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有零個ApoE4對偶基因複體之病患： (b) 該第二攝生法係投服給含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患；及/或 (c) 該第二攝生法係投服給含有二個AP〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患。 3 5.如申請專利範圍第32或34項之用途，其中該第 —攝生法包含投服第一抗AA抗體，且第二攝生法包含投服第二抗A/3抗體，且相對於該第一抗體，該第二抗體與 Fc^受體及/或Clq之結合降低，且該第一抗體係投服給含有零個ApoE4對偶基因複體之病患，且該第二抗體係投服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。 36. 如申請專利範圍第35項之用途，其中該第二抗體之恆定區中具有一或多個能降低與Fcr受體及/或Clq結合之突變，且該等突變並不存在於第一抗體中。 37. 如申請專利範圍第36項之用途，其中該一或多個突變係位於重鏈恆定區中選自234、235、236或237(EU 編號）之位置。 38. 如申請專利範圍第37項之用途，其中該—或多個突變爲位置234、235及237處之突變。 201206479 39. 如申請專利範圍第38項之用途，其中該一或多個突變爲 L234A、 L235A 及 G237A。 40. 如申請專利範圍第36項之用途，其中該恒定區之同型爲人IgGl同型者。 41. 如申請專利範圍第37項之用途，其中該恆定區之同型爲人IgGl同型者。 42. 如申請專利範圍第35項之用途，其中該第一抗體爲貝平紐如單抗，且第二抗體爲貝平紐如單抗之L234A、 L23 5 A、G23 7A 變異體。 43. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中第一攝生法包含投服第一抗ΑΘ抗體且第二攝生法包含投服第二抗A々抗體，該第一抗體爲人IgGl同型者且第二抗體爲人IgG4同型者，且該第一抗體係投服給含有零個 ApoE4對偶基因複體之病患，且第二抗體係投服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。 44. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其中該疾病爲阿滋海默氏症。 45. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其進一步包含測定存在於該病患體內之ApoE對偶基因型。 46. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其中該不同之攝生法之差異係在於抗體之投服劑量。 47. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其中該不同之攝生法之差異係在於抗體之投服頻率° 48. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其中該不 201206479 同之攝生法之差異係在於投服之抗體類型。 49.如申請專利範圍第32或34項之用途，其中在該抗體之劑量及/或投服該抗體之頻率及/或該抗體誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力對（a)相對於含有一個Ap〇E4對偶基因之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因之病患；及/或 (b)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患；及/或（c)相對於含有一個 ApoE4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患係減低。 5 〇 .如申請專利範圍第3 2或3 4項之用途，其中相對於含有零個 Ap〇E4對偶基因之病患，對含有一或二個 Ap〇E4對偶基因之病患，該作用劑之劑量及/或該作用劑之投服頻率及/或該作用劑誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力係減低》 51. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中對含有一或二個ApoE4對偶基因之族群中的病患投服0.15至 1毫克/公斤之與A石之殘基1-11間特異結合的抗體劑量，且對含有零個ApoE4對偶基因之族群中的病患投服0.5 至2毫克/公斤之與A々之殘基1-Π間特異結合的抗體劑量。 52. 如申請專利範圍第32或34項之用途’其中對含有一或二個ApoE4對偶基因之族群中的病患所投服之作用劑劑量係低於對含有零個ApoE4對偶基因之病患所投服者直到出現並消除血管源性水腫’且之後仍投服相同劑 -8- 201206479 量之作用劑。 5 3.如申請專利範圍第32或34項之用途，其中對含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群中的病患所投服之作用劑頻率係低於對含有零個Ap〇E4對偶基因之病患所投服者直到出現並消除血管源性水腫，且之後仍投服相同劑量之作用劑。 54.如申請專利範圍第32或34項之用途，其中對該含有一或二個AP〇E4對偶基因之族群中的病患投服相對於貝平紐如單抗於誘發清除澱粉樣沈積之反應上能力降低之抗體。 5 5.如申請專利範圍第32項之用途，其進一步包含監控該族群中至少某些病患之血管源性水腫。 56.如申請專利範圍第55項之用途，其中係藉由MRI 進行監控。 5 7.如申請專利範圍第55項之用途，其中含有零個 Ap〇E4對偶基因之族群中的病患並非藉由MRI進行監控〇 58. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中該抗體結合A沒之殘基1-11間的抗原決定部位。 59. 如申請專利範圍第58項之用途，其中該抗體具有人I g G 1同型。 60·如申請專利範圍第59項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 61.如申請專利範圍第32或34項之用途，其中該抗 -9 - 201206479 體相對於貝平紐如單抗於誘發清除澱粉樣沈積之反應上的能力係降低。 62. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗之L234A、L23 5A、G23 7A變異體。 63. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中對含有一或二個AP〇E4對偶基因之病患投服人化266抗體之1 至3個劑量，隨後再投服貝平紐如單抗之繼續劑量，且對含有零個Ap〇E4對偶基因之病患投服相同總數之劑量但全部均爲貝平紐如單抗。 64·如申請專利範圍第32或34項之用途，其中對含有一或二個AP〇E4對偶基因之病患投服人化266抗體，且對含有零個ApoE4對偶基因之病患投服貝平紐如單抗〇 65. 如申請專利範圍第32或34項之用途，其中該抗體爲人化266抗體。 66. —種AP〇E4複體數測量法於選擇不同之攝生法以治療或預防特徵爲病患腦內澱粉樣沈積的疾病上之用途，其中第一和第二攝生法中至少一者包含投服抗A0抗體。 67. 如申請專利範圍第66項之用途，其中該不同之攝生法包含第一攝生法和第二攝生法，其中該第一和第二攝生法各別包含投服抗ΑΘ抗體，且該第二攝生法與第一攝生法之差異係在於下列（i)至（vi)項中至少一者： (i)抗體之劑量減少： (U)抗體之投服頻率降低； 201206479 (iii) 抗體作用劑誘發清除澱粉樣沈積之反應的能力降低； (iv) 抗體之平均血清濃度降低； (V)抗體之最高血清濃度降低； (vi)相對於疾病進展之時間，治療開始之時間較早；因而，下列（a)、（b)及（c)項中至少一者發生： (a) 該第二攝生法係投服給含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有零個 Ap〇E4對 ^ 偶基因複體之病患； (b) 該第二攝生法係投服給含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患；及 (c) 該第二攝生法係投服給含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患，且第一攝生法係投服給含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患。 φ 68.—種AP〇E4複體數測量法於製造供治療阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中該藥物包含抗A/3抗體。 69.—種以抗A/3抗體監控對特徵爲腦內A/5澱粉樣沈積之疾病進行治療或預防之病患族群之方法，該方法包含：於該族群之不同病患，針對血管源性水腫進行不同之監控攝生法，其中較高之監控頻率係針對： (a)相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4對偶基因複體之病患； -11 - 201206479 (b) 相對於含有零個Ap〇E4對偶基因複體之病患，含有一個Ap〇E4對偶基因複體之病患；及/或 (c) 相對於含有一個ApoE4對偶基因複體之病患，含有二個Ap〇E4對偶基因複體之病患。 7 0.如申請專利範圍第69項之方法，其中該疾病爲阿滋海默氏症》 71.如申請專利範圍第69項之方法，其進一步包含測定存在於該族群中各個病患體內之ApoE對偶基因型。 7 2.如申請專利範圍第71項之方法，其中該監控係藉由腦部攝影。 7 3.如申請專利範圍第72項之方法，其中該監控係藉由 MRI。 74.如申請專利範圍第69項之方法，其中含有一個 Ap〇E4對偶基因之病患被監控之頻率係高於含有零個 Ap〇E4對偶基因之病患者。 7 5.如申請專利範圍第69項之方法，其中含有二個 ApoE4對偶基因之病患被監控之頻率係高於含有一個 Ap〇E4對偶基因之病患者。 76. 如申請專利範圍第69項之方法，其中含有零個 ApoE4對偶基因之病患並非藉由MRI監控血管源性水腫。 77. —種以誘發抗ΑΘ抗體之作用劑監控對特徵爲腦內澱粉樣沈積之疾病進行治療或預防之病患族群之方法，該方法包含：於該族群之不同病患，針對血管源性水腫進行不同之 -12- 201206479 監控攝生法，其中較高之監控頻率係針對： (a) 相對於含有零個ApoE4對偶基因複體之病患，含有二個ApoE4對偶基因複體之病患； (b) 相對於含有零個ΑροΕ4對偶基因複體之病患，含有一個ΑροΕ4對偶基因複體之病患；及/或 (c) 相對於含有一個ΑροΕ4對偶基因複體之病患，含有二個Αρ〇Ε4對偶基因複體之病患。 78. —種能拮抗Α/3之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體或能誘發該抗ΑΘ抗體之作用劑於製造供治療或有效預防含有至少一個ΑΡ〇Ε4對偶基因之病患的特徵爲腦內 Α冷澱粉樣沈積的疾病的藥物上之用途，其中該病患係藉由MRI監控血管源性水腫。 79. 如申請專利範圍第78項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-5130)之人化型式，且重鏈恆定區中之位置234、235及237分別被Ala、Ala及Ala佔據，其中位置係藉EU編號系統編號。 80. 如申請專利範圍第78項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 81. 如申請專利範圍第78項之用途，其中該抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO: 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A、L23 5A及G237A變異體。 82. —種能拮抗ΑΘ之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體或能誘發該抗ΑΘ抗體之作用劑於製造供治療或有效 -13- 201206479 預防含有至少一個Ap〇E4對偶基因之病患的特徵爲腦內 A召澱粉樣沈積之疾病的藥物上之用途，其中第一攝生法係欲在血管源性水腫出現前投服給病患，且在血管源性水腫消除後投服第二攝生法；其中該第一和第二攝生法各別包含投服該抗體或該作用劑；其中該第一攝生法相對於該第二攝生法之差異係在於下列⑴至（iii)項中至少一者： (i)該抗體或作用劑之劑量減少； (Π)該抗體或作用劑之投服頻率降低； (iii)該抗體或作用劑清除澱粉樣沈積之能力降低》 83. 如申請專利範圍第82項之用途，其中該疾病爲阿滋海默氏症。 84. 如申請專利範圍第82項之用途，其中該病患含有 —或二個ApoE4對偶基因。 85·如申請專利範圍第82項之用途，其中該第一和第二攝生法各別包含投服給病患能特異結合Α Θ之殘基1 -1 1 間的抗原決定部位之抗體，且該抗體之投服劑量在血管源性水腫出現前爲〇. 1 5至1毫克/公斤且在血管源性水腫消除後爲0.5至2毫克/公斤。 8 6 .如申請專利範圍第8 2項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗® 87.如申請專利範圍第82項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗之L23 4A、L23 5A、G23 7A變異體。 88·如申請專利範圍第82項之用途，其中該抗體爲包 -14- 201206479 含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO: 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A、L23 5A、G23 7A變異體。 89.—種能拮抗ΑΘ之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體於製造供治療或有效預防含有一或二個Ap〇E4對偶基因之病患的阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中該抗體係欲在其中將0.15至1毫克/公斤之抗體劑量按季分成四次經由靜脈內投服的攝生法中被投服，或該抗體係在可產生相等之平均血清濃度或曲線下面積的投服劑量、頻率及途徑下被投服。 9 0.如申請專利範圍第89項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-513 0)之人化型式，且重鏈恆定區中之位置234、235及237分別被Ala、Ala及Ala佔據，其中位置係藉EU編號系統編號。 91. 如申請專利範圍第89項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 92. 如申請專利範圍第89項之用途，其中該抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO : 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A、L235A及G237A變異體。 93. 如申請專利範圍第89項之用途，其中該劑量爲 0.5毫克/公斤。 94. 一種能拮抗A/3之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體於製造供治療或有效預防含有零個Ap〇E4對偶基因 -15- 201206479 之病患的阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中該抗體劑量爲按季經由靜脈內分成四次投服之〇·5至2毫克/公斤，或爲可產生相等之血清濃度或曲線下面積的投服劑量、頻率及途徑。 95.如申請專利範圍第94項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號ΡΤΑ-5130)之人化型式’且重鏈恆定區中之位置234、235及237分別被Ala、Ala及Ala佔據，其中位置係藉EU編號系統編號。 9 6.如申請專利範圍第94項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 9 7.如申請專利範圍第94項之用途，其中該抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO: 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A·、L23 5A及G23 7A變異體。 98.—種能拮抗A/3之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體於製造供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中該抗體係以0.15至1毫克/公斤之劑量投服給含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患，並以0.5至2.5毫克/公斤之劑量投服給含有零個Ap〇E4對偶基因之族群病患，且含有零個Ap〇E4對偶基因之病患的平均劑量較高。 9 9.如申請專利範圍第98項之用途，其中該抗體爲小鼠3D6抗體（ATCC編號PTA-5130)之人化型式，且重鏈恆定區中之位置234、23 5及237分別被Ala、Ala及Ala佔 201206479 據，其中位置係藉EU編號系統編號。 100. 如申請專利範圍第98項之用途，其中該抗體爲貝平紐如單抗。 101. 如申請專利範圍第98項之用途，其中該抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO: 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A、L23 5A及G237A變異體〇 102. 如申請專利範圍第98項之用途，其中對含有一或二個Ap〇E4對偶基因之族群病患的投服劑量爲0.5毫克 /公斤，且對含有零個ApoE4對偶基因之族群病患的投服劑量爲2毫克/公斤。 1〇3.—種能拮抗A/S之抗體或能誘發該抗A/3抗體之作用劑於製造供有效預防特徵爲含有至少一個AP〇E4對偶基因之病患腦內AyS澱粉樣沈積之疾病的藥物上之用途〇 104. 如申請專利範圍第103項之用途，其中該病患含有二個Ap〇E4對偶基因。 105. 如申請專利範圍第1〇3項之用途，其中該病患無症狀。 106. 如申請專利範圍第103項之用途，其中該病患之簡易心智試驗積分（mini-mental test score)爲27或高於27 〇 107 ·如申請專利範圍第103項之用途，其中該病患之 -17- 201206479 簡易心智試驗積分爲20-26。 108. 如申請專利範圍第103項之用途，其中該病患年齡爲至少60歲。 109. 如申請專利範圍第103項之用途，其進—步包含測定該病患之ApoE4對偶基因的數目。 110·—種能拮抗Ay3之抗體於製造供治療或有效預防特徵爲病患腦內AA澱粉樣沈積之疾病的藥物上之用途，其包含：投服給病患各別包含投服該抗A/3抗體之第一攝生法和第二攝生法：監控該病患之血管源性水腫；若未出現血管源性水腫，則維持該第一攝生法；及若出現血管源性水腫，則投服第二攝生法，其中該第二攝生法相對於第一攝生法之差異係在於下列⑴至（v)項中至少一者： (i)抗體之劑量減少； (Π)抗體之投服頻率降低； (iii) 具有降低之與FcY受體結合之能力的不同抗體； (iv) 具有降低之與Clq結合之能力的不同抗體； (v) 未投服抗抗體；其中至少在血管源性水腫期間維持該第二攝生法。 1 1 1.如申請專利範圍第1 1 〇項之用途，其中第—攝生法之抗體爲特異結合AyS之殘基1_11間的抗原決定部位之抗體。 -18- 201206479 112. 如申請專利範圍第110項之用途’其中該第一抗體爲貝平紐如單抗，且第二抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO : 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的 L234A、 L235A 及 G237A 變異體。 113. —種能洁抗AA之殘基1-11間的抗原決定部位之抗體於製造供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中該抗體在恆定區內具有減少與病患之 Fcr受體及/或Clq結合之突變，其中不論該病患之 Ap〇E4對偶基因數目，該抗體係欲以相同之劑量及/或頻率投服給每個病患。 114. 如申請專利範圍第113項之用途，其中該抗體爲包含人化輕鏈（其具有包含SEQ ID NO : 48之胺基酸序列）及人化重鏈（其具有包含SEQ ID NO : 66或67之胺基酸序列）之貝平紐如單抗的L234A、L23 5A及G237A變異體〇 115. 如申請專利範圍第113項之用途，其進一步包含監控該病患之血管源性水腫。 Π6.—種能拮抗ΑΘ之抗體或能誘發該抗ΑΘ抗體之作用劑於製造供治療或有效預防病患族群之阿滋海默氏症的藥物上之用途，其中含有零個Ap〇E4對偶基因之族群中的病患接受該抗體或作用劑，而含有二個ApoE4對偶基因之族群中的病患並未接受該抗體或作用劑。 117·如申請專利範圍第116項之用途，其中含有一個 -19- 201206479 AP〇E4對偶基因之族群中的病患並未接受該抗體》 118· -種抗A/3之人化抗體於製造供治療或有效預防特徵爲病患腦內A0沈積之疾病的藥物上之用途，其中該人化抗體包含SEQ ID NO : 2之成熟輕鏈可變區序列和 SEQ ID NO: 3之成熟重鏈可變區序列，及具有L234A、 L23 5A及G23 7A突變之IgG1同型的人重鏈恆定區，其中位置係藉EU編號系統編號。 1 1 9 ·如申請專利範圍第1〗8項之用途，其中該病患含有至少一個ApoE4對偶基因。 12 0.如申請專利範圍第118項之用途，其中該劑量爲〇·15至1毫克/公斤。 1 2 1 .如申請專利範圍第丨丨8項之用途，其中該劑量爲〇· 1 5至2毫克/公斤。 122·如申請專利範圍第118項之用途，其進一步包含藉由MRI監控該病患之血管源性水腫。 1 23 •如申請專利範圍第1 1 8項之用途，其係用於治療病患、族群’其中投服給該族群中不同病患之攝生法並不取決於存在於病患體內之Ap〇E4對偶基因數目。 -20-