JPH02504163A - 架橋したカルボキシ多糖類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 架橋したカルボキシ多糖類 本発明はカルボキシ官能基を含む酸多糖類の分子間および／または分子内エステ ル類、さらに詳しくは、官能基の一部もしくは全部か、同一分子の、および／ま たは異なる分子の酸多糖類のヒドロキシル基とエステル化してラクトン結合また は分子間エステル結合を形成した酸多糖類に関する。他のアルコール類のＯＨ基 が介在しない上記多糖酸の“内部”エステル類は、単一分子または多分子橋かけ の形成が前記内部エステル化の結果であるという理由で、“自己橋かけ多糖類” と定義することもできる。本発明の新規化合物を、以下この定義に従って呼称す る。“橋かけした（架橋した）”という形容詞は、多糖類分子のカルボキシル基 およびヒドロキシル基の間の交差結合を表わす。

この新規内部エステル体は、カルボキシ官能基の全部または一部だけが上記のよ うにしてエステル化されているか否かにより、全エステルまたは部分エステル体 であることができる。内部部分エステル体において、残カルボキシ官能基の全部 または一部を、更に一価または多価のアルコール類でエステル化して“外部的” エステル基を形成させることができ、また、これら双方のエステル基から成る部 分エステル体において、その非エステル化カルボキシ官能基を遊離型に留めるか 、または金属もしくは有機塩基で塩形成させることができる。

異なる多糖類分子の間のエステル化によりその分子量が増加し、橋かけに関与す る分子数に従って分子量はおよそ倍加するが、または増加することができる。重 合度は、温度、反応時間のような後記製造法で適用する条件に従って変化するが 、前記同様橋かｉｆされる多糖類に依存することができる。２種のタイプのエス テル結合の比を確認することが不可能であっても、分子量に基づいて概略の比を 表わすことができ、これは上記分子間内部エステル結合を有する多糖類集合体の 分子数に比例する。本発明の橋かけ生成物は、２〜３個の多糖類分子を結合させ て得られる生成物が特に重要であって、生成物は前記用語中、特に重合度が異な る。これらの生成物は、たとえば後記実施例で用いた製造法により得ることがで きる。

また本発明は、たとえば生物学的に分解されるプラスチック物質を用いる衛生お よび外科用品製造の分野、化粧品または医薬品の分野、食品工業分野および他の 多くの産業分野における新規内部エステル体の用途に関する。

本発明の新規内部エステル体を製造するための基本的出発物質として有用なカル ホキ／官能基を含む酸多糖類は、動物もしくは植物起源の天然多糖類、およびこ の物質の合成誘導体、特に、ヒアルロン酸、アルギン酸、カルボキシメチルセル ロース、カルボキシメチル澱粉（またカルボ牛ジメチルアミドと呼称される）お よびカルボキシメチルキチンのようなあらゆる公知物質および文献に記載された 物質である。また、酸多糖類たとえばヒアルロン酸およびアルギン酸のような酸 多糖類の外部的部分エステル類も、出発物質として使用することができる。出発 物質として使用することができるカルボ牛／メチルセルロース、カルボキンメチ ル澱粉およびカルボキンメチルキチンの部分エステル体は、イタリア国特許出願 第４７９６３Ａ／８８号（同日出願）に開示されており、これらは欧州特許出願 第８６３０５２３３．８（公開第０２１６４５３号、１９８７年４月１日）に開 示されたカルボキシ多糖類エステル体の一船的製造法により得ることができる。

また出発物質として前記酸性多糖類およびその部分エステル類の分子フラクショ ンを使用することができる。

新規エステル類の具体的な用途は、内部および外部の全体のエステル化度すなわ ちエステル化されたカルホキ／官能基の数、および更に塩形成された基の数、な らびにエステル化の過程に包含される分子の集合度（重合度）に依存して決定す ることかできる。実際これらの数値は、生成物の溶解性およびその粘弾性を決定 する因子である。それ故全エステル体はたとえば水性液体に実質的に不溶性であ って、その分子構造のためプラスチック物質の製造に、およびかかる物質のため の添加物として使用するのに適当である。エステル化度が中程度または低いエス テル体およびその無機塩基もしくは有機塩基との塩類は、いずれであっても水性 条件下に多少可溶性であって、化粧品および医薬品分野、ならびに一般の医療− 衛生分野にお（７る種々の用途を意図したゲル類の製造のために適当である。

本発明の自己橋かけ生成物は、内部エステル型においてすべてのカルボキシ官能 基、またはカルボキシ官能基の一部分のみを占有することができる。これら内部 部分エステル類において、橋かけ％は、酸性多糖類のカルボキシ基の数の１〜６ ０％、特に５〜３０％の範囲であるのが好ましい。

本発明の新規内部エステル類は、活性化を引き起こすことができる物質を添加し てカルボキシ基を活性化することを基本とする独創的な化学的方法を発見したこ とにより利用可能となった。活性化反応で生成した不安定な中間体生成物は、触 媒添加および／または温度を上昇させた後のいずれかの時点で自然に別挙動を取 り、同一のまたは他の多糖類分子のヒドロキシル基と前記のような内部エステル 結合を形成する。所望の内部エステル化度に従って、カルボキシ官能基の全部ま たは一部を活性化する（ここでいう一部は過剰量の活性化物質を用いるか、また ｊ！適当な添加方法により得られる）。

遊離カルボキシ基を含む多糖類を出発物質とするか、好ましくは後記のような塩 たとえば金属塩好ましくはアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、特に、 第四級アンモニウム塩のような塩を形成したカルボキシ基を含む多糖類を出発物 質とすることにより、その内部エステル基に変換すべきカルボキシ基を活性化す ることができる。しかしまた出発物質としてアミン類のような有機塩基との塩類 を使用することができる。

遊離カルボキシ基または塩形成させたカルボキシ基を活性化する方法は、それ自 体特にペプチド合成の分野において公知であって、この分野の技術者は、遊離型 または塩形成型の出発物質を使用するか否かにかかわらず最も適当な方法を容易 に決定することができる。

活性化方法は、それ自体ペプチド合成法のために公知であり、本発明の製造法に 有用であって、たとえばポダンスキー（Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、　Ｍ、　）著：新 規ペプチド合成法を求めて（Ｉｎ　５ｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｎｅｗ　ｒａｅｔｈｏ ｄｓ　ｉｎ　ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）　［Ｉ　ｎｔ、　Ｊ　、　 Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｐ　ｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓ、　２５巻１９８５年４４９〜４７ ４頁二；およびグロス（Ｇ　ｒｏｓｓ、　Ｅ　）ら著：ペプチド類、分析合成、 生物学（Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、＾ｎａｌｙｓｉｓ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、 Ｂｉ。

１ｏｇｙ）［Ａｃａｄｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ、Ｉｎｃ、　　１９７９年コ第１ 巻第２章に記載されている。このような方法によりカルボキシ官能基を活性化す る。

すなわちカルボキシ成分を反応型に変換する。かかる活性化は、典型的に下式に よる酸と活性化剤の反応を包含する：Ｒ−Ｃｏ○Ｈ−−→　Ｒ−Ｃ−Ｘ ［式中、Ｘは電子吸引基を表わす］。それ絞量も活性なカルボン酸誘導体は、混 合無水物であって、また活性化剤として広い意味で酸アジド類および酸クロリド 類（これはアジ化水素酸と塩酸の混合無水物と考えることができる）を包含する 。加うるにカルボキシ基の活性化は、活性化エステル類中間体を形成させること により達成することができる。これらの活性化エステル類は種々のタイプのもの であることができるが、特に有用な活性化エステル類は、ジシクロへキシルカル ボジイミド、ｐ−ニトロフェニルエステル類、）すりＯｃフェニルニスチル類、 ペンタクロコフニニルエステル類、およびヒドロキシルアミン類のＯ−アシル誘 導体、特にＮ−’ヒドロキシスクンンイミドのエステル類を用いて製せられるエ ステル類である。

これら種々のタイプの活性化方法はすべて、本発明の橋かけされたカルボキシ多 糖類の製造に有用であるが、これは、これらの方法カスヘテ、カルボ牛シル基と 活性化剤を反応させてヒドロキシル基との反応を容易にする置換基を形成させ、 それによって本発明の生成物の特徴である内部エステル結合を容易に形成させる 重要な反応に関与することを特徴としているからである。内部エステルに変換さ れるカルボキシ基の数は、活性化されたカルボキン基の数に比例し、この数は使 用する活性化剤の量に依存する。それ故全内部エステル類を得るためには過剰量 の活性化剤を使用すべきてあって、一方部分エステル類の場合においては活性化 剤の量は所望のエステル化度に従ってその分量を決めるべきである。

本発明による橋かけ反応後にもなお遊離型であるがまたは塩形成型であるカルボ キン基は、こ２″Ｌを好都合な塩に変換するか、または前記−価もしくは多価ア ルコール類でエステル化することによ１．）、混合エステル体、部分橋かけおよ び外部部分エステル体を得るここができる。もちろんカルボキン基の一部を活性 化する前にアルコール類で部分エステル化し、引き続き内部エステル体に変換す ることができる。すなわち出発物質として多糖エステル類を使用することができ る。

それ数本発明の橋かけ多糖類の新規製造法は、遊離型または塩型カルボキン基、 および−価または多価アルコール類でエステル化されていることもあるカルボキ シ基を有する多糖類を、所望により中間体としての活性化誘導体の形成を促進さ せる補助剤および／または第三級有機塩基もしくは無機塩基の存在下、カルボキ シ官能基を活性化する試剤で処理し、この混合物を加熱するかまたは（特に紫外 線で）照射し、および必要に応じて多糖類生成物中に残存する遊離型または塩型 カルボキシ基を一価もしくは多価アルコール類でエステル化し、および必要に応 じて遊離カルボキン基を塩型にするかもしくは塩型カルボキン基を遊離型にする ことを特徴とする製造法である。カルボキシ基を活性化することができる物質の うち、たとえばペプチド合成に通常使用する物質は使用することができるが、し かしカルポキンルハライド形成のために使用する物質のような多糖類出発物質の 分子構造を変化または破壊する作用を有する物質は除くものとする。活性エステ ル類を形成させる好ましい物質は、カルボジイミド類、ジシクロへキンル力ルポ ジイミド、ベンジル−イソプロピルカルポジイミド、ベンジル−エチルカルボジ イミド；エトキシアセチレン；ウッドワード試薬（Ｎ−エチル−５−フェニルイ ンオキサシリウム−３゛−スルホネート）、または脂肪族、脂環式もしくは芳香 族炭化水素のハロゲン誘導体、または活性基１個ないしそれ以上を存在させて移 動性にしたハロゲンを有する異項環化合物のハロゲン誘導体たとえばクロロアセ トニトリルおよび特に２−り四ローＮ−メチルビリジンのクロリド体または炭素 数６を越えない低級アルキル基を有する他のアルキル誘導体のクロリド体のよう な２−クロロ−Ｎ−アルキルピリジンの塩などの物質である。クロリド誘導体の 代わりにプロミド誘導体のような他のハロゲン誘導体ももちろん使用することが できる。

この活性化反応は、有機溶媒中、特に非プロトン溶媒たとえばジアルキルスルホ キシド類、レアルキルカルボキシルアミド類、たとえば特に低級アルキルのジア ルキルスルホキシド類（特にジメチルスルホキシド）、ポリメチレンスルホキシ ド（たとえばテトラメチレンスルホキノド）、ジアルキルスルホン酸またはポリ メチレンスルホン酸（たとえばテトラメチレンスルホン）、スルホラン、および 低級脂肪酸の低級アルキル（ここにアルキル基は炭素数最高６を有する）のシア ル牛ルアミド類（たとえばジメチルホルムアミドもしくはジエチルホルムアミド 、またはジメチルアセトアミドもしくはジエチルアセトアミド）のような溶媒中 で行なうことができる。しかし溶媒は常に非プロトン溶媒である必要はなく、他 の溶媒たとえばアルコール類、エーテル類、ケトン類、エステル類、たとえば低 級脂肪族ジアルキルオキシ炭化水素（たとえばジメトキシエタン）、およ、び特 に低沸点の脂肪族もしくは異項環式アルコール類およびケトン類、たとえばＸ− アル牛ルビロリドン類（１ことえばＮ−メチルピロリドンまたはＮ−エチルピロ リドン）、ヘキサフルオロイソプロパツールおよびトリフルオロエタノールのよ うな溶媒も使用することができる。カルボキシル活性化物質としてハロゲン誘導 体を、特にその塩型（たとえば前記２−クロロ−Ｎ−メチルピリジニウムクロリ ド）で使用するとき、多糖類出発物質の金属塩または有機塩基の塩たとえば後記 のような第四級アンモニウム塩（たとえばテトラブチルアンモニウム塩）を使用 するのがより良好である。これらの塩類は、橋かけ反応を最も効果的にする前記 のような有機溶媒に非常に可溶性であるという特別の利点を有し、それ故にすく れた収量が保証される。反応混合物に、酸を除（ことができる物質たとえば有機 塩基、炭酸塩類、炭酸水素塩類または酢酸アルカリ金属塩もしくは酢酸アルカリ 土類金属塩、または有機塩基および特に第三級塩基たとえばピリジンおよびその 類似体（たとえばコリジン）または脂肪族アミン塩基（たとえばトリエチルアミ ンまたはＮ−メチルビペラジン）のような物質を加えるのが好ましい。

第四級アンモニウム塩の使用は、本発明の特に有益な方法を示すものてあって、 本発明の主要な目的の一つを構成する。かかるアンモニウム塩類は良（知られて おり、他の公知塩類と同様の方法で製せられる。これらは好ましくは炭素数１〜 ６のアルキルから誘導される。テトラブチルアンモニウム塩を用いるのが好まし い。第四級アンモニウム塩を使用する本発明の製造法における一変法は、触媒量 の第四級アンモニウム塩たとえばヨウ化テトラブチルアンモニウムの存在下、ア ルカリ金属塩たとえばナトリウム塩またはカリウム塩を反応させることから成る 方法である。

活性化剤に加えてカルボキシ基の活性化を触媒する物質は文献に記載されており 、これらは前記のような塩基が好ましい。たとえばカルボキシ基をイソチアゾリ ン塩類で活性化するとき、反応混合物に少量のトリエチルアミンを加えるのが好 ましい。

活性化中間体たとえば特にエステル類のような中間体の形成反応は文献で推奨さ れる温度で行なわれるが、この温度は状況に応じて変えることができ、この分野 の技術者はそれを容易に決定することができる。内部エステル結合の形成は、か なり広い範囲の温度たとえばＯ〜１５０°、好ましくは室温ないし室温より僅か に高い温度（たとえば２０〜７５°）で行なうことができる。温度を上げること は内部エステル結合の形成には好ましく、適当な波長たとえば紫外線照射するの も同様に好ましい。

多糖類を橋かけ処理した生成物において、遊離カルホキ／量が残存する生成物ま たは塩形の生成物は、これを−価もしくは多価アルコール類で部分エステル化ま たは全エステル化し、一部が内部結合および一部が外部結合を有するエステル体 混合物を得ることができる。このエステル化に用いるアルコール類は後記のよう なアルコールに対応し、これから本発明の新規混合エステル類を誘導する。

ｉｉ離型または塩型カルボキシ塩のエステル化のため、公知常套の方法、たとえ ば酸型イオン交換体のような触媒物質の存在下、カルボキシ塩たとえばナトリウ ム塩とエーテル化剤またはアルコール類自体との反応のような方法を用いること ができる。文献に記載の公知のエーテル化剤、たとえば特に種々の無機酸または 有機スルホン酸、例えば水素酸のような酸のエステル類、すなわち／％ロゲン化 ヒドロカルビルたとえばヨウ化メチルもしくはヨウ化エチル、中性硫酸エステル またはヒドロカルビル酸、あるいは亜硫酸、炭酸、珪酸もしくは亜リン酸のエス テル、またはヒドロカルビルスルホン酸エステル（たとえばメチル−、ベンゾ− もしくはＩ）−トルオロスルホン酸エステルまたはクロロスルホン酸メチルまた はエチル）のようなエステル類を使用することができる。この反応は、適当な溶 媒、たとえばアルコール好ましくはカルボキシ基に導入すべきアルキル基に対応 するアルコール体のような溶媒中で起こるが、ケトン類、エーテル類たとえばジ オキサン、または非プロトン性溶媒たとえばジメチルスルホキシドのような非極 性溶媒中で反応が起こる。塩基として、たとえばアルカリ金属（もしくはアルカ リ土類金属）水和物、または酸化マグネシウム（もしくは銀）、またはこれらの 金属の塩基性塩（たとえば炭酸塩）、有機塩基の塩基性塩、第三窒素原子を含む 塩基（たとえばピリジンもしくはコリジン）を使用することができる。

また塩基の代わりに塩基性イオン交換体を使用することができる。

多糖類の部分エステルの場を出発物質とするとき、これらはアンモニウム塩たと えばアンモニウム塩または置換アンモニウム塩であってもよい。

前記欧州特許出願第８６３０５２３３．８号に開示された化学的に独自な一法に よれば、第四級アンモニウム塩とエーテル化剤を出発物質とし、非プロトン溶媒 、たとえばジアルキルスルホキシド類、ジアルキルカルボキシルアミド類、特に 低級アルキルが炭素数最高６である低級アルキルのジアルキルスルホキシド類（ 特にジメチルスルホキシド）、および低級脂肪酸の低級アルキルのジアルキルア ミド類（たとえばジメチルホルムアミドもしくはジエチルホルムアミド、または ジメチルアセトアミドもしくはジエチルアセトアミド）のような溶媒中、外部エ ステル類を有利に製造することができる。

この反応は、好ましくは約２５〜７５°、たとえば約３０°で進行させるべきで ある。エステル化は、好ましくは前記溶媒のいずれか（たとえばジメチルスルホ キシド）に前記アンモニウム塩を溶解し、これにエーテル化剤をゆっくり加える ことにより行なわれる。

アルキル化剤として、前記アルキル化剤特にハロゲン化アルキルを使用すること ができる。アンモニウム塩を出発物質とするとき、アルキル基は炭素数１〜６で あるのが好ましいので低級テトラアルキルアンモニウム塩を用いるのが好ましい 。テトラブチルアンモニウム塩を使用するのが最もよい。これらの第四級アンモ ニウム塩は、内部部分エステル化した酸性多糖類の金属塩好ましくは前記のよう な塩（特にナトリウム塩またはカリウム塩）を、第四級アンモニウム塩基て塩形 成したスルホン樹脂と水溶液中で反応させることにより製造することができる。

溶出液を凍結乾燥することにより、多糖類エステルのテトラアルキルアンモニウ ム塩基を得ることができる。

これらの塩類出発物質は前記非プロトン溶媒に可溶であり、それ故この方法によ るエステル化は特に容易であって良好な収量が得られる。それ故この方法に従う ことによってのみエステル化すべきカルボキシ基の数を正確に分量することがで きる。

この方法の一変法は、カリウム塩またはナトリウム塩を、適当な溶媒（たとえば ジメチルスルホキシド）に懸濁し、これど適当なアルキル化剤を、触媒量の第四 級アンモニウム塩（たとえばテトラブチルアンモニウムヨージド）の存在下に反 応させることから成る。

この新規方法により得られた内部エステル類において、元のまま残留するカルボ キシ基は、これを有機塩基または無機塩基で塩形成させることができる。かかる 塩形成のための塩基の選択は、所望の生成物の用途に基づく。無機塩はナトリウ ム塩、カリウム塩のようなアルカル金属塩、またはアンモニウム塩、セシウム塩 、アルカリ土類金属塩（たとえばカルシウム塩、マグネシウム塩）またはアンモ ニウム塩のような無機塩が好ましい。

有機塩基の塩は、特に脂肪族、アリール脂肪族、脂環式または異項環式アミン類 の塩基の塩類である。この種類のアンモニウム塩は、治療上受入れられるがそれ 自体不活性なアミン類、または治療活性を有するアミン類から誘導することがで きる。前者のうち、アルキル基が炭素数最高１８である脂肪族アミン類たとえば モノ、ジおよびトリアルキルアミン類、またはアリールアルキルアミン類（この 脂肪族部分の炭素数は上記同様、了り−ルはヒドロキシ基１〜３個て置換されて いることもあるベンゼン基を意味する）に対して特別の考慮を払うべきである。

治療的に許容されるがそれ自体不活性なアミン類として、シクロアミン類たとえ ば炭素４〜６の環、あるいは環中に酸素、硫黄および窒素のような異項原子を有 する異項環（たとえばピペリジン、モルホリンもしくはピペラジン）、または置 換基としてたとえばアミノもしくはヒドロキシ基（アミノエタノール、エチレン ジアミンもしくはコリンのような場合）を有することもある上記同様の環構造を 有するアルキレンアミン類のようなシクロアミン類が非常に好適である。

本発明の橋かけ多糖類を薬理学的または治療的用に向けようとするときには、そ の担体機能を治療活性アミン類のために用いることができく後記）、そのような アミン類の塩を形成させる。それ故これらの塩類は、次に示すようなすべての塩 基性窒素含有薬剤から誘導することができる：アルカロイド類、ペプチド類、フ ェノチアジン類、ベンゾジアゼピン類、チオキサンチン類、ホルモン類、ビタミ ン類、抗けいれん薬（ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓｉｖａｎｔｓ）、精神病治療薬、 鎮吐剤、麻酔薬・催眠薬、食欲減退剤（ａｎｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃｓ）、トラン キライザー、筋肉弛緩剤、冠状血管拡張剤、抗腫傷薬、抗生物質、抗細菌薬、抗 ウィルス薬、抗マラリア薬、炭素アンヒドラーゼ抑制剤、非ステロイド性抗炎症 剤、血管収縮剤、コリン作動薬、コリン拮抗薬、アドレナリン作動薬、アドレナ リン拮抗薬、ナルコチン拮抗薬。

塩類は、この技術分野で自体公知の方法、たとえばいくらかの遊離カルボキシ官 能基が残存する橋かけ多糖類を、計算量の塩基で処理することにより、製造する ことができる。しかし塩類はまた、二重交換反応により製造することができる。

たとえ、ば橋かけ多糖類および／またはその部分エステル体の第四級アンモニウ ム塩の溶液を、塩化アルカリ金属の水溶液で処理し、たとえばケトン（たとえば アセトン）のような適当な溶媒で沈澱させて存在するアルカリ金属塩を単離する ことにより、そのアルカリ金属塩（たとえばナトリウム塩）を得ることができる 。

本発明の橋かけ多糖類は、出発物質として、本発明の製造法のための前記出発物 質に対応する天然多糖類、またはカルボキシ基で置換された合成多糖類を使用す ることができる。本発明：ま、特にヒアルロン酸、アルギン酸、カルホキツメチ ルセルロース、カルボキシメチルアミドおよびカルホキ／メチルキチンから誘導 される橋かけ酸性多糖類に関する。

ヒアルロン酸誘導体は、生物起源の出発基質であってその新規橋かけ生成物が医 薬用、外科手術および一般的薬剤として許容されるので、他の誘導体に比し、非 常に重要である。

ヒアルロン酸基質は、自然度の物質たとえばニワトリのとさかから抽出した酸の ような天然産のものであることが、できる。これらの酸類の製造法は文献に記載 されており、好ましくは精製したヒアルロン酸を使用すべきである。本発明によ れば、有機物質を直接抽出することにより得られた広範囲の分子量を有する分子 フラクションの酸集合体から成るヒアルロン酸（たとえば酸集合体分子量の９０ 〜８０％ないし０．２％、好ましくは５〜０．２％）を使用するのが好ましい。

これらのフラクションは、文献記載の種々の方法、すなわち加水分解、酸化、酵 素的化学物質を用いる方法または物理的方法（たとえば機械的方法もしくは照射 法）により得ることができ、しばしば同様の精製処理の間に原初の抽出物として 得ることができる。

得られた分子フラクションを、分子濾過のような公知方法により分離および精製 する。本発明により使用するのに適当な精製ＨＹフラクシｌンは、たとえば非炎 症性−Ｎ　Ｉ　Ｆ　−ＮａＨＡヒアルロン酸ナトリウム（ｎｏｎｉｎｂｌａ−ｏ ｎ＋ａｔｏｒｙ　　Ｎ　Ｉ　Ｆ−ＮａＨＡ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｙａｌｕｒｏｎａ ｔｅ）として知られたもの［パンフレット（ヒーロンー眼外科における使用案内 −ミラーおよびステグマン編、ジョン・ライレイ・アンド・サンプ）（”Ｈｅａ ｌｏｎ”−Ａｇｕｉｄｅ　ｔｏ　ｉｔｓ　ｕｓｅ　ｉｎ　０ｐｈｔｈａｌａｉｃ 　Ｓ　ｕｒｇｅｒｙ　−Ｄ、Ｍｉｌｌｅｒ　＆　Ｒ，Ｓ　ｔｅｇｍａｎｎ＋　ｅ ｄｓ、　Ｊ　ｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　Ｓ　ｏｎｓ　Ｎ。

Ｙ８１９８３）５頁中、バラズ（Ｂａｌａｚｓ）により記載されている］である 。

また本発明のエステル類のための出発物質として、ヒアルロン酸たとえばニワト リのとさかから抽出したヒアルロン酸から得ることができる２種の精製フラクシ ョン（ヒアラスチン（）（ｙａｌａｓＬｉｎｅ）およびヒアレクチン（）ｌ　ｙ ａｌｅｃｔｉｎ）の名称で知られている）は、特に重要である。フラクンヨンヒ アラスチンは平均分子量約５０．　ＯＯＯ〜１００、○ＯＯ，フラクシ５ンヒア レクチンは平均分子量約５００゜○ＯＯ〜７３０．０００を有する。またこれら ２種のフラグ’／ｇンの混合フラクションが単離され、これは平均分子量約２５ ０，０００〜３５０．　ＯＯＯであった。この混合フラクションは、特定の出発 物質から全ヒアルロン酸を８０％の収率で得ることができ、一方フラクションヒ アレクチンは出発ＨＹの３０％、フラクンヨンヒアラスチンは出発ＨＹの５０％ の収率で得ることができ・る。これらのフラクションの製造は前記欧州特許出願 第０１３８５７２Ａ３号に開示されている。

新規誘導体を製造するために使用するアルギン酸は、種々の天然物質特に褐藻類 （褐藻網（Ｐ　ｈａｅ−ｃｏｐｈｙｃｅａｅ乃から抽出することにより得ること ができる。この多糖はＤ−マンヌロン酸とＬ−グルロン酸の鎖により構成される 。この分子量はその入手源によって非常に変化し、たとえば３０．０００〜２０ ０．０００である。それは使用する藻類のタイプばかりでなく、収穫した季節、 植物の系統および年令に依存する。アルギン酸を得るために使用する褐藻類の主 要な生物種は、たとえばマクロシステス・ビリフェラ（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ 　ｐｙｒｉｆｅｒａン、ラミナリア°クロウストニ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ　Ｃ１ ｏｕｓｔｏｎｉ）、ラミナリア・ヒペルボレア（Ｌ　ａｍｉｎａｒｉａ　ｈｙｐ ｅｒｂｏｒｅａ）、ラミナリア・フレキシカラリス（Ｌａｍｉｒ＋ａｒｉａ　Ｆ 　１ｅｘｉｃａｕｌｉｓ）、ラミナリア・ジギタータ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ　ｄ ｉｇｉｔａｔａ）、アスクフィルム・ノドスム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ　ｎｏ ｄｏｓｕｌｌ）およびフクス・セララス（Ｆ　ｕｃｕｓ　５ｅｒｒａｔｕｓ）で ある。

アルギン酸は、これらの藻類中、細胞膜の拡散成分として、種々のアルカリ金属 塩（このうち特にナトリウム塩）の混合物（これはまたアルギンとして知られて いる）の形で見いだされる。これらの塩類を標準的に水性条件下、炭酸ナトリウ ム溶液で抽出し、この抽出物を酸たとえば塩酸のような鉱酸て沈澱させて直接的 に、または初め不溶性カルンウム塩を形成させて間接的にアルギン酸を得ること ができる。

しかしアルギン酸またはアルギン酸アルカリ金属塩は、微生物的方法、たとえば プソイドモナス・アエルギノーサ（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｒ ＋ｏｓｓ）、プソイドモナス０プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｐｕｔｉｄａ ）、プソイドモナス・フルオレッセンス（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｆ　１ｕ ｏｒｅｓｃｅｎｓ）またはプソイドモナス・メンドシナ（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎ ａｓ　ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）突然変異体の発酵により得ることができる。各種の アルキン酸の製造は文献に記載されている。本発明の目的には、精製アルギン酸 を使用すべきである。

またセルロース、澱粉およびキチンのカルボキシメチル誘導体は本発明に有用で あって、文献に詳細に記載されている。カルボキシ多糖類それ自体とは別に、こ れらの−価もしくは多価アルコール類との部分エステル類を、本発明の新規橋か け生成物の製造のための出発物質として使用することができる。

また−価もしくは多価アルコール類でエステル化されたカルボキシ官能基を有す る本発明の橋かけ多糖類において、前記工程の出発物質中にこれらのカルボキシ 官能基が存在するか、またはこの工程の終時点でそれらが誘導されたかを問わず 、アルコール類は脂肪族、アリール脂肪族、脂環式または異項環系アルコールの いずれに属していてもよい。

以下の記載はこの有用なアルコール類を概観するものであり、これは以下説明の ように、特定の多糖類基質および最終用途に基づいて各種の基とそれぞれの化合 物を選択すべきであるという理解に基づくものである。このようにたとえばこの 分野の技術者は、治療的および衛生的用途に向ける橋かけ生成のためにはどのよ うなアルコールを選択すべきか、および栄養食品分野、香料産業または樹脂およ び織物の分野の用途のための橋かけ生成物には他のどのようなアルコールがより 適当であるかを知っている。

エステル化成分として使用するため脂肪族アルコール類は、たとえば炭素数最高 ３４を有し、飽和または不飽和であることができ、および他の遊離官能基、もし くは官能基で修飾された基で置換されたこともあるアルコール類である。この修 飾基は、たとえばアミノ、ヒドロキシ、アルデヒド、ケト、メルカプト、カルボ キシ、またはこれらから誘導される基たとえばヒドロカルビルまたはジヒドロカ ルビルアミ７基（ここにヒドロカルビルは以下、たとえばＣＩ、Ｈｔ　ｎ　’ｌ 　Ｉで示される一価の炭化水素基ばかりでなく、−Ｃ１）Ｉｔｎ−で示されるア ル牛しン基または＝　Ｃ、、Ｈｔｎで示されるアルキリデン基を意味する）、エ ーテルまたはエステル基、アセタールまたはケタール基、チオエーテルまたはチ オエステル基、およびエステル化されたカルボ牛シ基またはカルバミドおよび置 換カルバミド基（置換基はヒドロカルピル基１〜２個、ニトリル基または）＼ロ ゲンである）のような修飾基を包含する。ヒドロカルビル基を含む上記基のうち 、これらは好ましくは低級脂肪族基たとえば炭素数最高６のアルキルとすべきで ある。かかるアルコール類はその炭素鎖中に酸素、窒素および硫黄のような異項 原子を介在させてもよい。

前記官能基１〜２個で置換されたアルコール類を選ぶのが好ましい。本発明の目 的のために好ましい前記基を有するアルコール類は、炭素数最高１２、特に６を 有し、前記アミノ、エーテル、エステル、チオエーテル、チオエステル、アセタ ール、ケタール基においてヒドロカルビルが炭素数最高４のアルキル基を表わし 、エステル化カルボキシ基または置換カルバミド基またはヒドロカルビル基にお いて炭素数前記同様のアルキル基であり、およびアミノまたはカルバミド基が炭 素数最高８のアルキレンアミン基またはアルキレンカルバミド基であることがで きるアルコール類である。これらのアルコール類のうち、メチル、エチル、プロ ピルまたはイソプロピルアルコール類、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアル コール、ｔｅｒｔ＝ブチルアルコール、アミルアルコール類、ペンチル、ヘキシ ル、オクチル、ノニルおよびドデシルアルコール類、就中ｎ−オクチルおよびｎ −ドデシルアルコール類のような直鎖アルコール類のような飽和および非置換ア ルコール類が特に例示されるべきである。この種の置換アルコール類のうち次の ものが例示されるべきであるユニ価アルコール類たとえばエチレングリコール、 プロピレングリコール、ブチレングリコール、三価アルコール類たとえばグリセ リン、アルデヒドアルコール類たとえばタルトロンアルコール、カルボキンアル コール類たとえば乳酸、たとえばグリコール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、 アミノアルコール類たとえばアミ／エタノール、アミノプロパツール、ｎ−アミ ノプロパツール、ｎ−アミノブタノール、およびこれらのアルコール類のアミン 官能基中のジメチルおよびジエチル置換誘導体、コリン、ピロリジニルエタノー ル、ピペリジニルエタノール、ピペラジニルエタノールおよび対応するｎ−プロ ピルまたはｎ−ブチルアルコール誘導体、モノチオエチレングリコール、および そのアルキル誘導体たとえばそのメルカプト基のエチル誘導体。

高級脂肪族飽和アルコール類のうち、次のものを例示すべきである：セチルアル コールおよびミリシルアルコール。しかし本発明の目的に特に重要なアルコール として、二重結合１〜２個を有する高級不飽和アルコール類たとえば特に多くの 精油中に含まれテルペン類と親和性を有するアルコール類、たとえばシトロネロ ール、ゲラニオール、ネロール、ネロリドール、リナロオール、ファルネソール 、フィトールのようなアルコール類。低級不飽和アルコール類のうち、考慮され るべきものはアリルアルコールおよびプロパルギルアルコールである。

アリール脂肪族アルコール類のうち、特に次のものを例示すべきである：ベンゼ ン部分１個のみを有し、脂肪族鎖か炭素数最高４を有し、ベンゼン部分がメチル またはヒドロキ７基１〜３もしくはハロゲン原子（特に塩素、臭素、ヨウ素）で 置換されていてもよく、脂肪族鎖が遊離アミ７基またはモノもしくはジメチル基 から選ばれる１ないしそれ以上の官能基、あるいはピロリジン基またはピペリジ ン基で置換されたこともあるアルコール類。これらのアルコール類のうち、特に 記載すべきものはベンジルアルコールおよびフェネチルアルコールである。

脂環式または脂肪族脂環式アルコール類は、単環もしくは多環式炭水化物から誘 導されるもの、好ましくは炭素数最高３４を有するもの、置換されていないもの 、脂肪族アルコール類のための前記のような置換基１個ないしそれ以上を含むア ルコール類であることができる。単環−炭水化物から誘導されるアルコール類の うち、特に記載すべきものは、炭素数最高１２のアルコール類、環が好ましは炭 素原子５〜７を有しこの環がたとえばメチル、エチル、プロピルまたはイソプロ ピル基のような低級アルキル基１〜３個で置換されたこともあるアルコール類で ある。この種に特定なアルコール類として、シクロヘキサノール、シクロヘキサ ンジオール、１，２．３−シクロへ牛サントリオールおよび１，３．５−シクロ へ牛サントリオール（フロログルシトール）、イノシトール、ならびにｐ−メン タンから誘導されるアルコール類たとえばカルボメントール、メントール、α− およびγ−テルピネオール、１−テルピネノール、４−テルピネノールおよびピ ペリトール、またはこれらのアルコール類の混合物たとえばテルピネオール、１ ，４−および１，８−テルピンが記載されるべきである。縮合環を有する炭化水 素から誘導されるアルコール類のうち、またたとえばツジャン、ビナンまたはカ ンファン類から誘導されるものとしてツジャノール、サビノール、ピノール木和 物、Ｄ−およびＬ−ボルネオール、ならびにＤ−およびＬ−インボルネオールが 有用である。

本発明のエステル類のために使用される脂肪風−脂環多環式アルコール類は、ス テロール類、コール酸類およびステロイド類たとえば性ホルモン類およびその合 成類似体特にコルチコステロイド類およびこれるの誘導体である。このようにた とえば次のステロイド類を使用することができる：コレステロール、ジヒドロコ レステロール、エビジヒドロコレステロール、コブロマタノール、エピコブロマ タノール、ントステロール、マチグマステロール、エルゴステロール、コール酸 、デオキシフール酸、リドフール酸、エストリオール、エストラジオール、エキ レニン、エキリンおよびこれらのアルキル誘導体、および１７位におけるエチニ ルまたはプロピニル誘導体たとえば１７−α−エチニル−エストラジオールまた は７−α−メチル−１７−α−エチニル−エストラジオールプレグナンジオール 、テストステロンおよびその誘導体たとえば１７−α−メチルテストステロン、 １．２−デヒドロテストステロンおよび・１７−α−メチル−１，２−デヒドロ テストステロン、ならびにテストステロンおよび１，２−デヒドロテストステロ ンの１７位におけるアルキニル誘導体たとえば１７α−エチニルテストステロン 、１７α−プロピニルテストステロン、ノルゲストレル（ｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ ）、ヒドロキシプロゲステロン、フルチコステロン、デオキ／コルチーステロ： ／，１９−ノルテストステロン、１９−／ルー１７α−メチルテストステロンお よび１９−ツルー１７α−エチニルテストステロン、コルチゾン、ヒドロコルチ ゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、フルドロコルチゾン、テキサメタゾン、 ベタメタゾベバラメタゾン、フルメタシン、フルオシノロン、フルプレドニリデ ン、クロベタプール、ベクロメタゾン、アルドステロン、デゾキシフルチコステ ロン、アルファ牛すロン、アルファドロン、ボラステロン。

本発明のエステル類のために有用なエステル化成分は、ゲニン類、心臓刺激性グ リコンド類のくアグリコン類）たとえばジギトキシゲニン、ギトキンゲニン、ジ ゴキシゲニン、ストロフアンチジン、チゴゲニン、サポニン類である。

本発明で使用する他のアルコール類は、ビタミンアルコール類たとえばアキ七ロ フトール、ビタミンＤ！およびり，、アノイリン、ラクトフラビン、アスコルビ ン酸、リボフラビン、チアミン、パントテン酸である。

直鎖もしくは環状鎖中に一〇−、−Ｓ−、−Ｎ−および−ＮＨからなる群から選 ばれる異項原子１個ないしそれ以上たとえば１〜３個を有するもの、これらの中 、不飽和結合１個ないしそれ以上たとえば二重結合特に１〜３個を有することも あり、それ故また芳香族構造を有する異項環化合物を包含するならば、異項環ア ルコール類は、前記の脂環式または脂肪族−脂環式アルコール類の誘導体と考え ることができる。その特に有用な化合物を以下に述べる：フルフリルアルコール 、アルカロイド類および誘導体たとえばアトロビン、スコポラミン、シンコニン 、シンコニジン（ｃｉｎｃｈｏ−ｎｉｄｉｎａ）、キニン、モルフイン、コディ ン、ナロルフイン（ｎａｌｏｒｐｈｉｎｅ）、Ｎ−プチルスコポラアンモニウム ブロミド、アジコマリン：フェニルエチルアミン類たとえばエフェドリン、イソ プロテレノール、エピネフリン；フェノチアジン薬物たとえばベルフェナジン、 ピボチアジン（ｐｉｐｏｔｈｉａｚｉｎｅ）、カルフェナジン（Ｃａｒｐｈｅｎ ａｚｉｎｅ）、ホモフェナジン（ｈｏｍｏｆｅｎａｚｉｎｅ）、アセトフェナジ ン、フルフェナジン（ｆ　ｌｕｐｈｅｎａｚｉｎｅ）、、　Ｎ−ヒドロキシエチ ルプロメタシンクロリド；チオキサンチン薬物たとえばフルベンチゾール（ｆ　 ｌｕｐｅｎｔｈｉｚｏｌ）およびクロベンチキソール（ｃｌｏｐｅｎｔｈｉｘｏ ｌ）　：抗痙９薬たとえばメブロフエンジオール（ｍｅｐｒｏｐｈｅｎｄｉｏｌ ）　；精神病治療薬たとえばオピブラモール（ｏｐｉｐｒａｍ。

ｌ）、鎮吐剤たとえばオキシベンノル（ｏｘｙｐｅｎｄｉｌ）　；鎮痛剤たとえ ばカルベチジン（ｃａｒｂｅｔｉｄｉｎｅ）、フェノベリジン（ｐｈｅｎｏｐｅ ｒｉｄｉｎｅ）およびメタドール（ａｅｔｈａｄｏｌ）　；催眠剤たとえばエト ドロキシジン（ｅｔｏｄｒｏｘｉｚｉｎｅ）　；食欲減退剤たとえばベンズヒド ロールおよびジフエメト牛７′；ン（ｃｌｉｐｈｅｍｅｔｈｏｘｉｄｉｎｅ）　 ：　緩徐トランキライザーたとえばヒドロキノジン（ｈｙｄｒｏｘｙｚｉｎｅ） 　；筋肉弛緩薬たとえばシンナメドリン（ｃｉｎｎａｍｅｄｒｉｎｅ）、ジフイ リン（ｄｉｐｈｙｌ　］　ｉｎｅ）、メフエネシン（ｍｅｐｈｅｎｅｓｉｎ）、 メトガルバモール（ｍｅｔｈｏｃａｒｂａｍｏｌ）、クロールフエネシン（ｅｈ ｌｏｒｐｈｅｎｅｓ　ｉｎ）、２．２−′；エチルー１，３−プロパンジオール 、グアイフエネシン（ｇｕａｉｆｅｎｅｓｉｎ）、イドロシルアミド（ｉｄｒｏ ｃｉｌａｍｉｄｅ）　：冠状血管拡張剤たとえばジピリダモール（ｄｉｐｙｒｉ ｄａｍｏｌｅ）およびオキシフェトリン（ｏｘｙｆｅｄｒｉｎｅ）　；アドレナ リン阻害剤たとえばプロパノロール（ｐｒｏｐａｎｏｌｏｌ）、チモロール（ｔ ｉｍｏｌｏｌ）、ピンドロール（ｐｉｎｄｏｌｏｌ）、ダブラ／ロール（ｂｕｐ ｒａｎｏｌｏｌ）、アテノロール（ａｔｅｎｏｌｏｌ）、メトプロロール（ｍｅ Ｌｏｐｒｏｌｏｌ）、プラクトロール（ｐｒａ＝ｔｏｌｏｌ）　；抗腫瘍剤たと えば６−アザウリジン、シタラビン（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、フロクスリジン （ｆｌｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）　；　抗生物質たとえばクロラムフェニコール、チ アムフエニフール（ｔｈｉａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ）、エリスロマイシン、オレア ンドマイシン、リンコマイシン；抗ウィルス剤たとえばイドクスリジン（ｉｄｏ ｘｕｒｉｄｉｎｅ）　；末梢血管拡張剤たとえばインニコチニルアルコール：炭 素アンヒドラーゼ抑制剤たとえばスロカルビレート（ｓｕｌｏｅａｒｂｉｌａｔ ｅ）　：抗ぜんそく薬および抗炎症剤たとえばチアラミド（ｔｉａｒａｍｉｄｅ ）　；スルファミド剤たとえば２−ｐ−スルファミルアニリノエタノール。酸多 糖類のカルボキシ基を前記各種のアルコール類でエステル化して外部エステル化 のない内部のみの橋かけにより、出発物質と同様の性質を有するが前記利点をも 保持する生成物が得られるので、それ故に生成物のすべての用途分野に使用する ことができる。

カルボキシ基のエステル化で同時に起こる外部エステル化により、アルコール類 自体に特有の性質を多糖類に分与することにおいて有用であることがわかるであ ろう。この場合において橋かけ生成物は、アルコール類の特性の担体として機能 し、このようにして生成物を薬理学的および医療の分野の良好な用途に向けるこ とができる。それ故本発明による橋かけ生成物と治療活性を有する前記のような アルコール類を含む薬剤を製造することができる。この種の薬剤は主としてヒア ルロン酸基質を有するが、また前記のような他の多糖類に基づく薬剤を使用する ことができる。

また塩形成は、塩基性多糖類の固有の性質を利用しうろこと、および塩形成によ る塩基たとえば前記のような治療的活性を有する塩基の性質を生成物に分与しう ろことの双方の特性を有する生成物を製造することにおいて二重の目的を有する 。

しかしまた新規橋かけ生成物を含む薬剤の賦形は、薬剤および／または治療的活 性塩基を多糖類に単に加える（物理的に混合する）ことにより達成される。また それ故本発明は次のものを含む薬剤を包含する。

１、薬理学的活性物質または薬理学的活性物質群の組合わせ物、および ２、本発明による酸性多糖類の橋かげ生成物から成る担体。

ごの種の混合物中に塩類を存在させることができ、成分として次のものを選ぶこ とができる。

（１）有機塩基。特に重要なことはこのタイプは成分の組合わせであって、（２ ）その成分は塩基としてヒアルロン酸またはそのいずれか一つのエステルを有す る橋かけ生成物。

この薬剤は、固体形たとえば成分（１）および（２）の２成分のみを含む凍結乾 燥粉末を混合物として、または別々に包装したような固体形であることができ、 このガレヌス型（ｇａｌｅｎｉｃ　ｆｏｒｍ）は局所用として特に適当である。

実際、かかる薬剤であって処置すべき上皮に固体形で接触する薬剤は、これを特 定の上皮の特性に従ってあらかじめ試験管内で製せられた溶液と同一の特性を有 するより高い濃度またはより低い濃度の溶液として製造し、これは本発明の他の 側面を表わす。かかる溶液は好ましくは蒸留水中または生理的滅菌溶液を使用し 、好ましくは他の薬学的担体を含有しない。かかる溶液の濃度は、別々の２成分 としておよびその混合物としてたとえば０゜０１〜７５％と広範囲に変えること ができる。著しい粘弾性の溶液に対しては薬剤全量または２成分それぞれの１０ 〜１００％の薬剤濃度になるよう選択すべきである。

このようなタイプの薬剤は、無水型（凍結乾燥粉末）または水もしくは食塩水で 濃厚液とするかあるいは希釈し、橋かけしたヒアルロン酸に基づき特に緩衝剤ま たは他の眼科用途として作用する殺菌剤もしくはミネラル塩のような付加物ある いは補助剤を加えた溶液型において特に重要である。

このように、前記タイプの薬剤のうち、この場合がそうできるように適用すべき 用途分野に適当な酸度、すなわち生理学的に許容できるｐＨを有する薬剤を選択 すべきである。ｐＨは、存在させることができる多糖類、その塩類およびそのい ずれかの塩基性もしくは酸性物質の量を規制することによって調節することがで きる。

橋かけ度およびエステル化度は、第一に適用される種々の用途分野で得ようとす る特性、たとえば治療に適用する場合における親油性または親水性の度合の大小 に依存する。通常、高い橋かけ度およびエステル化度は物質の親油性を増加させ 、それ放水溶性は減少する。新規橋かけ生成物を治療に用いるため、基質多糖類 またはその塩類に比較して親油性は良好で改良されていても充分な水溶性の度合 を確保するためエステル化度を規制するのが重要である。本来、エステル化成分 の分子の大きさは、通常水溶性に逆比例的に影響を与えるものと考えるべきであ る。

治療活性を有するアルコール類でエステル化しおよび、／または治療活性を有す る塩基もしくはこれを含む前記薬剤で塩形成させた新規橋かけ生成物は、より治 療的に有効であり、出発薬剤に比較してより大なる薬効および／またはより持続 性のある効果（遅延効果）を有する。特に重要なことは、この薬物がヒアルロン 酸の場合のように生物的環境と高度に両立しうる多糖類に基づくタイプの薬物で あることである。

しかしまたヒアルロン酸は、それ自体の薬理作用に基づき、非常に重要な基質で もあり得る。この多糖類に基づく架橋生成物、および治療的に不活性なアルコー ル類でエステル化されたものは、元のヒアルロン酸自体またはそのエステル自体 に比し改良された安定性を有する。かかる橋かけ生成物は、前記化合物たとえば ヒアルロン酸自体で知られたすべての処方、たとえば潤滑作用を有する関節内注 射剤として使用することができる。新規橋かけ生成物は元の遊離酸およびエステ ル体と比較してヒアルロニダーゼに対してより大なる安定性を有する結果として 、酵素作用を長く引き延ばす。かかるヒアルロン酸の橋かけ生成物をエステル化 するための薬理学的に不活性なアルコール類は、好ましくは炭素数最高８を有す る低級脂肪族アルコール類、特にエタノール、プロピルアルコール、イソプロピ ルアルコールおよびｎ−ブチルアルコールまたはイソブチルアルコールのような 飽和−価アルコール類である。

ヒアルロン酸に基づく橋かけ生成物は化粧品用途に非常に適する。

これらの橋かけ生成物のエステル類のうち、重要なものは治療的不活性のアルコ ール類たとえば飽和もしくは不飽和脂肪族アルコール類たとえば炭素数１〜８の 直鎖または分枝鎖の前記のような種類の非置換アルコール類から誘導されるエス テル類である。ま゛た特に興味のあるアルコール類は、不飽和アルコール類たと えば二重結合１個ないしそれ以上を有するビニルアルコールまたはアリルアルコ ールおよびこれらの縮合誘導物、あるいはグリセリンのような多価アルコール類 である。また脂肪族アルコール類たとえばシクロペンクンまたはシクロへ牛サン 、およびこれらの低級アルキル基たとえば炭素数１〜４のアルキル基特にメチル 基で置換された誘導体は有用である。特に興味あるエステル類は、前記のような テルペン類および治療活性を有するアルコール類から誘導される脂環式および脂 肪属−脂環式アルコール類とのエステル類であって、またこれらは化粧品用とし て有用である。

極めて重要なことは、ヒアルロン酸に基づく橋かけ生成物の衛生材料および外科 材料の製造のための用途である。これらの橋かけ生成物のエステル類は、好まし くは化粧品として使用する前記のようなエステル類である。

ヒアルロン酸系橋かけ生成物の局所使用用薬剤の担体としての用途は、眼科学分 野で特に有用であって、この場合新規物質と角膜上皮の間の特殊な両立性、それ 故感作効果のないすぐれた耐性が注目される。更にこの治療剤を、粘弾性的特性 を有する濃厚溶液型または固体型で使用するとき、完全に透明で粘性を有し、薬 剤の持続的生物有効性を確保しそれ故に遅延効果を有するすぐれた生成物を構成 する均質で安定なフィルムを、角膜上皮上に形成させることができる。かかる眼 科的医療剤は、獣医分野に化学療法的専門家たとえば化学療法成分を含む眼球に 使用する獣医専門家が存在しないことを考慮すれば獣医分野で特に有用である。

結果的にヒトに使用する製剤を正常に使用し、これらが常に特定の範囲の効果が 保証されるとは限らず、また処置を効果的にしなければならない特定の症状に許 容されるとは限らない。これはたとえば感染性角結膜炎、伝染性結膜炎またはＩ ＢＫ、主としてウシ、ヒツジおよびヤギに感染する感染症の場合である。

ヒアルロン酸系の新規橋かけ生成物およびこの生成物を成分（２）として含有す る前記のようなタイプの可能な医療剤は、また他の分野および明らかに皮ふ科お よび粘膜たとえば口腔粘膜の疾患に使用することができる。更に生成物は処置に よる再吸収に寄与する全身的効果たとえば座薬を得るために使用することができ る。これらの適用はすべてヒトおよび獣医用の双方の薬剤に使用可能である。ヒ トの医療において、新規医療剤は特に小児科的使用に適当である。

本発明は特に治療的応用面を包含する。

また本発明の目的は、前記のような橋かけ酸性多糖類生成物１種ないしそれ以上 を含む薬理学的製剤および生成物を前記のように成分（２）として含有する結合 薬剤である。治療活性物質（群）とは別に、かかる薬理学的製剤は通常の賦形剤 を含有し、経口的、直腸的、非経口的、皮下的、局所的または皮ふ内投与の用途 のために使用することができる。それ飲薬剤は固形または半間形たとえば丸薬、 錠剤、ゼラチンカプセル剤、カプセル剤、座薬、軟質ゼラチンカプセル剤である 。非経口的および皮下的用途のため、筋肉内用途に向ける薬剤形、または点滴も しくは静脈内注射に適当な薬剤形を使用することかでき、それ散薬理学的に許容 される賦形剤または希釈剤１種ないしそれ以上と混合して活性化合物の溶液もし くは活性化合物の凍結乾燥粉末として存在させることができ、浸透性が生理的流 体と両立する前記のような用途に適する。局所的用途のため、スプレー型製剤、 たとえば局所用鼻腔スプレー剤、クリーム剤および軟こう、または皮ふ内投与の ための特製はり付けこう薬を考えるべきである。

橋かけ生成物の低沸点有機溶媒中の溶解性は、特にスプレー剤製造のためにそれ を適当にする。

本発明の製剤はヒトおよび動物に投与することができる。これらは溶液、スプレ ー剤、軟こうおよびクリーム剤のために活性成分好ましくは０．０１〜１０％、 固体形振剤のために活性成分１〜１００％、好ましくは１５〜５０％を含有させ る。投与量は、個々の診断結果、所望の効果および選択した投与方法に依存する 。これらの製剤の１日当り投与量は、その成分が発現すべき効果を有する活性主 成分を表すならば、塩基性多糖類（ヒアルロン酸の場合として）の対応する回復 療法たとえばヒトまたはウマの関節炎回復療法の投与量、およびこの製剤中のエ ステルまたは成分（１）の場合におけるアルコール成分の投与量の双方のすでに 投与した量から減することができる。このようにたとえばコルチゾンで部分エス テル化したものであってもエステル化したヒアルロン酸の橋かけ生成物は、この ステロイドの含量に従って、公知薬理学的製剤の通常の投与量と同一の投与量に より投与することができる。

本発明の塩類の製造は、成分（１）および（２）の二成分の水性懸濁液または有 機溶媒溶液、および可能ならば塩基、またはアルカリ金属、アルカリ土類金属、 マグネシウムもしくはアルミニウムの塩基性塩の計算量を接触させ、通常の操作 により無定形無水型の塩を単離する自体公知操作により、行なうことができる。

たとえば最初に成分（１）と（２）の２成分の水性溶液を製し、適当なイオン交 換体を用いてその塩の水溶液からこの２成分を分離し、この２溶液を低い温度た とえばＯ〜２０６で混合し、生成した塩が水に易溶性であったらこれを凍結乾燥 することができ、一方貧溶性塩はこれを遠心分離、濾過または傾斜法により分離 することができ、要すれば引続き乾燥することができる。

またこれらの結合薬剤のための投与量は、活性主成分を単独で用いる投与量に基 づき、それ故この分野の技術者は、対応する公知薬剤のために推奨される投与量 を考慮に入れて容易に決定することができる。本発明による化粧品において、橋 かけ酸性多糖類生成物およびその塩を、この技術分野で通常使用する賦形剤たと えば薬理学的製剤に関する前記賦形剤と混合する。就中、局所用クリーム剤、軟 こう、ローションを用い、この中に橋かけ多糖類またはそのいずれかの塩を化粧 品作用主成分として含有させ、たとえばプレグネノロンまたは前記成分のような 他の化粧用作用主成分を添加することができる。かかる多糖類において、橋かけ に使用されていないカルボキシ基は、好ましくはそのまま遊離とするか、塩形成 させるかまたは薬理学的不活性アルコールたとえば前記低級脂肪族アルコールで エステル化する。しかしまた、化粧品は、アルコール類自体が化粧作用を有する かまたは化粧品に対して補助的な作用を有するたとえば殺菌物質、日光保護物質 、防水、皮ふ再生もしくは防しわ性物質、芳香物質特に香料の作用を有するアル コール類てエステルされた基を含有させることができる。しかしまたかかる物質 は橋かけ多糖類と混合するだけの方法により、前記薬剤の薬理学的活性成分（１ ）を美容術的要素に置き換えた薬剤と類似の化粧用組成物を構成させることがで きる。香料産業における本発明の化粧品製剤の使用は、香料主成分の緩慢、一定 かつ持続的放出を許容するので、この技術分野の大きな発展となる。

本発明の重要な目的は、衛生材料および外科材料を製造する方法およびその用途 により構成される。これらの材料は、たとえば既に公知の材料と類似であって商 業的に入手できるかまたは文献記載の方法で製せられる。本発明の材料はたとえ ばヒアルロン酸基質で製せられた挿入物または眼科レンズである。

特に重要な外科材料および衛生材料は、橋かけ生成物の有機液体中、適当な溶液 から得ることができ、これを器官の重大な傷害たとえば火傷の場合の皮ふまたは 外科における縫合糸のための補助物質もしくは代用物質として外科に使用するフ ィルム、シートおよび縫糸に形成することができる材料である。本発明は、特に これろの用途、および（ａ）橋かけ多糖類またはその塩の有機溶媒溶液を製造し 、（ｂ）この溶液をシートもしくは縫糸形に成形し、（ｃ）有機溶媒を除くこと から成る外科材料および衛生材料の製造法を包含する。

橋かけした多糖類またはその塩の溶液の製造は、適当な有機溶媒たとえばケトン 、エステルまたは非プロトン溶媒たとえばカルボン酸のアミド、特にジアルキル アミド、炭素数１〜５の脂肪酸のアミド、および炭素数１〜６のアルキルの誘導 体、就中、有機スルホキシドからの誘導体すなわち炭素数最高６のアルキルを存 するジアルキルスルホキンドたとえば特にジメチルスルホキノドまたはジエチル スルホキンド、および特に低沸点を有するフルオルレー）（ｆｌｕｏｒｕｒａｔ ｅ）溶媒たとえばヘキサフルオロ−インプロパツール中で行なわれる。

有機溶媒の除去（ｃ）は、この溶媒と混合しなければならない溶媒であって多糖 類エステル体が不溶である他の有機または水性溶媒、特に低級脂肪族アルコール たとえばエチルアルコールと接触させる（縫合糸の湿式紡糸の場合）か、あるい はあまり高くない沸点の溶媒を使用して多糖類誘導体の溶液を製造したときはガ ス流特に適当な加熱窒素流でこの溶媒を除去する（縫合糸の乾式紡糸の場合）こ とにより行なわれる。また乾式−湿式紡糸法を用いてすぐれた結果を得ることが できる。

特に重要なことは、ヒアルロン酸塩基で橋かけした生成物を用いて得られた線状 物は、傷口の治療および外科治療用の衛生綿の製造のために使用することができ ることである。かかる衛生綿の使用は、生体内に自然に存在する酵素によりヒア ルロン酸に生物学的に分解されるという特別の利点を有する。エステル基を含む 橋かけ生成物を使用するとき、この生成物は治療的に許容されるアルフール類か ら誘導されるものから選ばれるべきであって、そうすることにより酵素的切断後 、分解してヒアルロン酸とは別の無害なアルコールたとえばエチルアルコールが 生成スる。

このような衛生材料と外科材料の製造において、その機械的性質の改良たとえば 糸の場合のもつれに対する抵抗性の改良のため、可塑剤の長所を利用することを 包含することができる。かかる可塑剤は、たとえばステアリン酸ナトリウムのよ うな脂肪酸のアルカリ金属塩、炭素数の高い有機酸のエステル類なとであること ができる。

生体内に存在するエステラーゼ類による生物学的分解が起こる場合、ヒアルロン 酸系橋かけ生成物の他の用途は、薬物またはミクロカプセルの移植たとえば皮下 または筋肉内注射法のためのカプセル剤の製造により明らかに説明される。今日 まで緩慢に放出しそれ故放出遅延効実現わすように設計された皮下投与薬物の使 用法について、今日までシリコン物質で製せられたカプセルが使用されていたが 、このカプセルが回収される可能性はなく生体内で移動する傾向があるという欠 点を有する。新規ヒアルロン酸誘導体を用いることによりこの危険は解消する。

非常に重要なことは、今日まで前記のような理由のために非常に制限された用途 に関連する問題点を解消する橋かけヒアルロン酸系生成物に基づくミクロカプセ ルを製造することであって、注射後遅延効果が望ましいどうような場合でもその 広範な使用分野を開拓す橋かけしたヒアルロン酸生成物の他の使用は、現在金属 または合成プラスチック物質で造られて使用されておりどのような場合でもこの 挿入物はある期間後取除くことが予定されているものに代わる種々の固体挿入物 たとえば板状物、円板、シートなどのような物質の製造により明らかに説明され る。天然たん白質である動物コラーゲン基質で造られる医療剤は、しばしば不快 な副作用たとえば炎症または拒否反応を有する。橋かけ処理したヒアルロン酸生 成物の場合に、これらが動物超厚および非ヒト超厚のヒアルロン酸から製せられ るものであっても、種々の動物超厚の多糖類との間に不和合性はないので上記の ような危険性は存在しない。

他の応用は柔組織の損傷を強化し修復する用途に関する。すなわち失われたまた は損傷した柔組織を置換しうる安全でかつ効果的生物物質を求める緊急な要望が 、今日まで長い間存在した。失われた柔組織を修復するため、従来多くの物質た とえばパラフィン、テフロンペースト、シリコーンおよび牛コラーゲンが用いら れた。しかしこれろの物質は、皮ふ中て移動して拒否反応を現わし皮ふ中に好ま しくない恒久的変化を伴う。この理由のため、分解しうる生物物質のための医療 剤に対する不変の要望が存在する。ヒアルロン酸の橋かけ生成物は、柔組織の損 傷たとえばざ癒の傷跡、外科手術後の萎縮性不整、モース（Ｍｏｈｓ’）化学外 科損傷、口びるおよび老令のしわの裂傷傷跡のような損傷を修復するのに安全に 使用することができる。

本発明による新規ヒアルロン酸誘導体の医療および外科の分野における応用部分 は、特に傷また病変の医療のためのスポンジ型の膨張物質から製せられる製品で ある。

ヒアルロン酸ベースの橋かけ生成物の上記のような応用は、一つの方法または他 の方法でヒトもしくは動物の生体内に導入するかあるいは生体に外部から適用す ることを企図した衛生材料または外科材料のための理想溶液により表わされる。

しかしまた本発明による他の橋かけ多糖類たとえば前記のような多糖類特にアル ギン酸基質で製せられた多糖類を用いて上記のような物質を製造することができ る。またこのような場合において、橋かけ処理した生成物は生体内で分解されて 元の多糖類を与え、一般に生体はこれをよく許容し、拒否反応の危険はない。

橋かけしたアルギン酸生成物に関して特に言及すべきことは、産業上および家庭 用の用途と物品ならびに栄養食品およびその用途である。これら特に橋かけ部分 塩、更に不活性アルコール類たとえば特に低級脂肪族アルコール類でエステル化 した生成物の型のものであってゲルを生成物するものは、アイスクリーム類、プ ディング類および他の多くの種類の甘味食品製造のめたの食品産業に広く使用す ることができる。この橋かけ生成物の他の特性は、その保持水の受容力であって 、これによりたとえば多くの凍結食品の保存のために使用することができる。橋 かけ生成物の第三の特性は、その乳化させうる性能およびエマルシリンを安定化 させうる性能である。この観点からまた、アルギン酸橋かけ生成物は食品産業で 重要であって、生成物は香辛料の製造および多くの飲料たとえばビール、果実ジ ュース、ソース類およびシロップ類の安定化に寄与する。アルギン酸橋かけ生成 物は乳化剤として、光沢剤、消泡剤、ラフチフス（Ｉａｃｔｉｃｓ）の製造の際 、および安定化剤として、セラミックスおよび洗浄剤産業で使用することができ る。また生成物は製紙業、接着製品の製造、織物業の捺染および染色に使用する ことができる。

本発明の酸性多糖類橋かけ生成物およびこの生成物を前記アルコール類でエステ ル化したエステル類と、その金属塩のような塩類の間の物理的、薬理学的および 治療的性質、ならびに実質的等価関係に関し、非塩生成物に関する前記のような 事実は塩類に関してもまた真実であることが理解されるべきである。

また本発明は、新規橋かけ生成物とその塩類の製造における修飾された変法を包 含し、この変法は、一つの操作をいずれかの段階で中断する方法、中間体から処 理を始めて残余の操作を行なう方法、または本来の反応処理系内で出発物質を形 成させる方法を包含する。

以下に実施例を挙げ本発明の詳細な説明するが、これらの実施例は本発明を制限 するものではない。

実施例１゜ 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ　）ノｉＱＩ造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１％ナトリウムで塩化されたカルボキ シ基９９％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量１７０，０００の）ＩＹテ トラブチルアンモニウム塩６．２．Ｉ９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８村 ）に溶かし、トリエチルアミン０．０１　ｇ（０，１ｍＥｑ）を加え、得られた 溶液を３０分間撹拌する。

２−り四ロー１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．０２６９（０］　ｍＥｑ） のＤＭＳＯ（６０ｆｆの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ ℃で１５時間維持する。

次いで、水１００１１！ρと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混 合物を撹拌し続けながらアセトン７５０πｇにゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／水（５：　１）１００ｍ（ｌで３回、次いでアセトンＩＯ Ｍで３回洗浄し、最後に３０°Ｃて２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．９７９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎＩｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基５％ナトリウムで塩化されたカルボキ シ基９５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量８５，０００のＨＹテトラ ブチルアンモニウム塩６．２１９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８ｍのに溶 かし、トリエチルアミン０．０５１　ｇ（０，５ｍＥｑ）を加え、得られた溶液 を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ（ｔＪｏ、　１２８ｇ（０゜５　ｍ Ｅｑ）のＤＭＳＯ（６０Ｘｆｆ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合 物を３０’Ｃて１５時間維持する。

次いて、水］００ｆｆｆｆと塩化ナトリウム２．５９との溶液を加え、得られた 混合物を撹拌し続けながらアセトン７．５０ｉｆｆにゆっくり注加する。生成し こ沈澱をろ過し、アセトン／水（５：１）１００πＱて３回、次いでアセトン１ ００ｆｆＱで３回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．９５９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊｏｈｎｆｉｌｌｙ 　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａ ｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ） ”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例３・ 架橋したヒアルロン酸（）（Ｙ）の製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキン基１０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基９０％１．０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量６２０．　ＯＯＯの） （Ｙテトラブチルアンモニウム塩６．２１９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４ ８１ｆｆ）に溶かし、トリエチルアミン０．１０　Ｈｊ（１，０ｍＥｑ）を加え 、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．２５５９（１゜ＯＩ！１Ｅ ｑ）のＤＭＳＯ（６０πｇ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０°Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ｉｆｆと塩化ナトリウム２．５ｇの溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０１２１２にゆっくり注加する。生成した沈 澱をろ過し、アセトン／水（５：１）１００１ｆｆで３回、次いでアセトンＩＯ Ｍで３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．９３９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎＷｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ ｔａｔ　ｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕ ｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例４・ 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ　）ノ製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキン基２５％ナトリウムで塩化されたカルボ キン基７５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子１１７０．０００のＨＹテ トラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８Ｒの に溶かし、トリエチルアミン０．２５３１ｉ（２，５ｍＥｑ）を加え、得られた 溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９ｙ（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｘＱ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０°Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ＪＩ（！と塩化ナトリウム２．５ｆ！の溶液を加え、得られた 混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘ（！にゆっくり注加する。生成した 沈澱をろ過し、アセトン／水（５：１）１００πｌ’３Ｄ、次いでアセトン］○ Ｏπｇで３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

（票記の化合物３．８５ｐを得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎＷｉｌ ｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（ＱｕａｎＬｉ ｔａｔｉ〜゛ｅメ、ｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕ ｐｓ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例５： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基５０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基５０％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量８５．　ＯＯＯのＨＹテ トラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８Ｉ！ ｃ）に溶かし、トリエチルアミン０．５０６ｇ（５，Ｏｎ＋Ｅｑ）を加え、得ら れた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物１　、２８９（５ｍＥｑ）のＤ 　ＭＳ　Ｏ（６０ｘの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０° Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１ｏｏｘｃと塩化ナトリウム２．５ｇとの溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｍ（！にゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／水（５：　１）Ｉ　０Ｏｘ（ｌで３回、次いでアセトン１ ００Ｆｊで３回洗浄し、ＪｆＪに３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．６５ｇを得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｌｉｌｌ ｙ　Ｂｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例６： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）のＷＡ造主生成物関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基７５％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基２５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量１７０．０００のＨＹテ トラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを２５℃においてＤＭＳＯ（’２４８１１ １Ｑ）に溶かし、トリエチルアミン０．７５９ｙ（７，５ｍＥｑ）を加え、得ら れた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化４ｔ＋　１．９２９（７，５ｍＥ ｑ）のＤＭｓｏ（６０ｘ□中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０°Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００Ｒ（ｌと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ＲＱにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：ｌ）Ｌｏｏｍρで３回、次いでアセトン１００ｆｆ １２で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．５４９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊｏｈｎｆｉｌｌｙ 　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ｔ ａｔ　ｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　（ｉｒｏｕ ｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例７： 生成物に関する記載。

内部エステル化に使用されたカルボキシ基１００％１０ｍＥｑモノマ一単位に相 当する分子量７０，０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６．２１ｙを２５ ℃においてＤＭＳＯ（２４８ｇ（）ｌ：溶かし、）　＋）　ｘチルアミ７１．　 Ｏｌ　２９（Ｉ　Ｃ）ｎＥｑ）ヲ加、ｔ、得うれた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物２．５５ｙ（１０ｍＥｑ）のＤ ＭＳＯ（６０ｚの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０″Ｃで １５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｚ（ｌにゆっくり注加する。

生成した沈澱をろ過し、アセトン１００Ｆｆｆて６回洗浄し、最後に３０℃で２ ４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．５２９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、］］６９−１７２頁記のけん化法で行う。

実施例８゜ 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の部分エチルエステルの製造生成物に関する記載 ： エタノールでエステル化されたカルボキシ基２５％；内部エステル化に用いられ たカルボキシ基２５％ ナトリウムで塩化されたカルボキシ基５０％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する 分子１１７０，０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６．２１ｙを２５℃に おいてＤＭＳＯ（２４８叶）に溶かし、ヨウ化エチル０．３９０９（２，５加Ｅ ｑ）を加え、得られた溶液を３０°Ｃで１２時間維持する。トリエチルアミン０ ．２５３ｇ（２，５ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ（ｔＪｏ、　６３９９（２゜５ｍＥ ｑ）のＤＭＳＯ（６０ｘの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０’Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１０Ｍと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物を撹 拌し続けながらアセトン７５０πｇにゆっくり注加する。生成した沈澱をろ過し 、アセトン／水（５・１）１００ｆｆρで３回、次いでアセトン１００ｊｌｆ２ で３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３８４ｇを得る。エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ，Ｈ ，ＣｕｎｄｉｆＴ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法［ Ａｎａｌ。

Ｃｈｅ＋ｎ、　３３．１０２８−１９３０（１９６１）Ｆで行う。全エステル基 の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく 定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕ ｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法 で行う。

実施例９： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の部分エチルエステルの製造生成物に関する記載 ： エタノールでエステル化されたカルボキシ基５０％；内部エステル化に用いられ たカルボキシ基２５％ ナトリウムで塩化されたカルボキシ基２５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する 分子ｊ１８５，０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６．２１９を２５℃に おいてＤＭＳＯ（２４８πｇ）に溶かし、ヨウ化エチル０．７８０９（５，０ｍ Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０°Ｃで１２時間維持する。トリエチルアミン ０．２５３ｇ（２，５ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５ｍＥｑ） のＤＭＳＯ（６０ｄ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０″ Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ｆｆＣと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｉＣにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：１）１００ｉＱで３回、次いでアセトンｉ０Ｍで３ 回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．８７９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンデイノフ（Ｒ， Ｈ，Ｃｕｎｃｌｉｆｆ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方 法［Ａｎａｌ。

Ｃｈｅｗ、　３３．１０２８−１９３０（１９６１）］で行う。全エステル基の 定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づ（定 量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉ！ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｒ ｌｃｔｉｏｒ；ａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化 法で行う。

実施例１ｏ。

架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）のエチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボキシ基７５％；内部エステル化に用いられ たカルボキシ基２５％ １０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子１１７０，０００のＨＹテトラブチルア ンモニウム塩６．２１ｇを２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８にのに溶かし、ヨ ウ化エチル１．１７９（７，５廁Ｅｑ）を加え、得られり溶液を３０’Ｃで１２ 時間維持する。トリエチルアミン０．２５３ｙ（２，５廁Ｅｑ）を加え、溶液を ３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｚ□中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ °Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｉＣにゆっくり注加する。生 成した沈澱をろ過し、アセトン］０Ｏ１ｆｆで５回洗浄し、最後に３０°Ｃで２ ４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．９１９を得る。エトキン基の定量測定を、クンディノフ（Ｒ， Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆ　ｆ）およびマークナス（Ｐ、Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法 ＪＡｎａＩＣｈｅｍ、　３３．１０２８−１９３０（１９６１）ｌで行う。全エ ステル基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基 に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉ ａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）’第４版、＋６９−１７２頁記載の けん化法で行う。

実施例１１： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１％ナトリウムで塩化されたカルボキ シ基９９％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモニ ウム塩（Ｌ　ａｍｉｎａｒｉａ　ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａから得たアルギン酸から ）４．１７９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８ｍｇ）に溶かし、トリエチル アミン０．０１０ｇ＜０．１廁Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する 。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．０２６ｐ（０，］ｍＥｑ） のＤＭＳＯ（６０１１２）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０°Ｃで１５時間維持する。

次いで、水］、０ＯＪｖｆｆと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた 混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘｆｆにゆっくり注加する。生成した 沈澱をろ週し、アセトン／水（５：　１　）１００ｒｌ！テ３Ｄ、次いでアセト ン１００１１２で３回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．９０ｙを得る。全エステル基の定量測定を、Ｊｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１２： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基５％ナトリウムで塩化されたカルボキ シ基９５％ＩＣ）ｎＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモ ニウム塩（Ａｒｅｏｐｈｙｌｌｕｍ　ｍｏｄｏｓｕｍから得たアルギン酸から） ４．１７ｓ＋を２５°ＣにおいてＤＭＳ　Ｏ（２４８１１２）に溶かし、トリエ チルアミン０．０５１９（０，５廁Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌 する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．１２８９（０゜５廁Ｅｑ） のＤＭＳＯ（６０！１１２）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０″Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ｆｆ（と塩化ナトリウム２，５ｇの溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ＭＱにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：１）１００ｚ＋２で３回、次いでアセトン１００１ ０で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．９１９を得る。全エステル基の定量測定を、ＪｏｈｎＶｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　ｉ ｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　′１°ｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｃ ｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１３： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基９０％１０＋ｎＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアン モニウム塩（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　ｐｙｒｉｆｅｒａかろ得たアルギン酸か ら）４．１７９を２５℃においてＤＭＳＯ（２４８ｉｆｆ）に溶がし、トリエチ ルアミン０．１０１？（０，５ｎｌＥｑ）を加え、得られた溶液を３ｏ分間撹拌 する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．２５５ｙ（１゜０　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０１１２）中温液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０°Ｃで１５Ｂ４間維持する。

次いで、水１００πｇと塩化ナトリウム２５ｇの溶液を加え、得られた混合物を 撹拌し続けながらアセトン７５０ｉｆｆにゆっくり注加する。生成した沈澱をろ 過し、アセトン／水（５：　１）１００ｇ（で３回、空乾燥する。

標記の化合物１．９０９を得る。エステル基の定量測定を、ＪｏｈｎＷｉｌｉｙ 　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａ ｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ） ″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１４： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基２５％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基７５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモ ニウム塩（Ｌａｍｉｎａｒｉａ　ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａから得たアルギン酸から ）４．１７９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８９のに溶かし、トリエチルア ミン０．２５３９（２，５ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｆＱ）中温液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０″Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００１１２と塩化ナトリウム２．５ｇの溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘ（！にゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／水（＋：１）１００ｉＱで３回、次いでアセトン１００ｘ １２で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．８０９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊｏｈｎｆｉｌｌｙ 　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ｔ ａｔ　ｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐ ｓ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１５： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基５０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基５０％１０ｍＥｑモ／マ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモ ニウム塩（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　ｐｙｒｉｆｅｒａから得たアルギン酸から ）４．１７９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８πｇ）に溶かし、トリエチル アミン０．５０６９（５，０ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する 。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物］、２８０ｓ＋（５ｍＥｑ）の ＤＭＳＯ（６０πｇ）中温液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０’ Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１０Ｍと塩化ナトリウム２．５ｇの溶液を加え、得られた混合物を撹 拌し続けながらアセトン７５０＋１２にゆっくり注加する。生成した沈澱をろ過 し、アセトン／水（５：　１）１００ｘ（ｌで３回、次いでアセトン１００峠で ３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．７２９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎＷｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法て行う。

実施例１６： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基７５％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基２５％１０＋ｎＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアン モニウム塩（Ａｒｅｏｐｈｙｌｉｕｍ　ｎｏｄｏｓｕｍから得たアルギン酸から ）４．］、７ｙを２５°ＣにおいてＤＭ　Ｓ　Ｏ（２４８πＱ）に溶かし、トリ エチルアミン０、　７５９ｇ（７，５ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間 撹拌する。

２−クロロ−１−メチルビリンニウム・ヨウ化物１．９３２ｙ（７゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｆｆρ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０’Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ＷＣと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０１ｇにゆっくり注加する。生成した沈澱をろ 過し、アセトン／水（５：１）１００ｊ！＜！で３回、次いてアセトン１００Ｕ て３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．５９９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ ｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐ ｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１７： 架橋したアルギン酸の製造 生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１００％１０ｍＥｑモ／マ一単位に相 当するアルギン酸テトラブチルアンモニウム塩（Ｌａｍｉｎａｒｉａ　ｈｙｐｅ ｒｂｏｒｅａから得たアルギン酸から）４．１７９を２５°ＣにおいてＤＭＳ　 Ｏ（２４８１１２）に溶かし、トリエチルアミン１、０１２９（１０＋ｎＥｑ） を加え、得られた溶液を３ｏ分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物２．５５９（１０ｍＥｑ）のＤ ＭＳ　Ｏ（６０ｘＱ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０° Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０＋Ｑにゆっくり注加する。生 成した沈澱をろ過し、アセトン１００ｘ１２で５回洗浄し、最後に３０℃で２４ 時間真空乾燥する。

標記の化合物１５２ｇを得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌｙ 　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、１６９　１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例１８： 架橋したアルギン酸の部分エチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボキン基２５％内部エステル化に用いろれた カルボキシ基２５％ナトリウムで塩化されたカルボキン基５０％］ＯｍＥｑモノ マ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモニウム塩（Ａｒｅｏｐｂｙｌ ｌｕｍ　ｎｏｄｏｓｕａ＋から得たアルギン酸から）４．１７９を２５°Ｃにお いてＤＭＳＯ（２４８１１２）に溶かし、ヨウ化エチル０゜３９０９（２，５ｍ Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃で１２時間維持する。トリエチルアミン０ ．２５３４７（２゜５　ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−り四ロー１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０３１ｇ）中溶液を１時間でゆっ（り滴下して加え、混合物を ３０°Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１１００ｊ１と塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０Ｍ（ｌにゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／水（５二１）１００ｘｆｆで３回、次いでアセトン１００ ｘＩ２で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．８９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ，Ｈ ，ＣｕｎｄｉｆＴ）およびマークナス（Ｐ、ＣｌＭａｒｋｕｎａｓ）の方法［Ａ ｎａｌ、　Ｃｈｅｍ、３３．１０２８−１９３０（１９６１）］で行う。全エス テル基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に 基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ 　Ｆｕｈｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）’″第４版、１６９−１７２頁記載の けん化法で行う。

実施例１９： 架橋したアルギン酸の部分エチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボキン基５０％内部エステル化に用いられた カルボキシ基２５％ナトリウムで塩化されたカルボキシ基２５％１０ｍＥｑモノ マ一単位に相当するアルギン酸テトラブチルアンモニウム塩（Ｌａｍｉｎａｒｉ ａ　ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａから得たアルギン酸から）４．１７ｙを２５℃におい てＤＭＳＯ（２４８ｒ１２）に溶かし、ヨウ化エチル０゜７８ｇ（５，０＋ｎＥ ｑ）を加え、得られた溶液を３０’Ｃで１２時間維持する。トリエチルアミン０ ．２５３９（２，５ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２５ｍＥｑ）の ＤＭＳＯ（６０２の中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０°Ｃ て１５時間維持する。

次いで、水１ｏｏｚｃと塩化ナト１功ム２．５？の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０ｉ（にゆっくり注加する。生成した沈澱をろ 過し、アセトン／水（５：１）１００ｍ（ｌで３回、次いてアセトン１００＋（ で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．７８９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンデイノフ（Ｒ， Ｂ、　Ｃｕｎｄｉｆｆ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方 法［Ａｎａｌ。

ＣｈｅＩｉ、　　３３．１０２８−１９３０（１９６１）Ｅで行う。全エステル 基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づ く定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆ ｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化 法で行う。

実施例２０： 架橋したアルギン酸のエチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボキシ基７５％内部エステル化に用いられた カルボキシ基２５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当するアルギン酸テトラブチル アンモニウム塩（ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　ｐｙｒｉｆｅｒａから得たアルギン 酸から）４．１７９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８ｉｆｆ）に溶かし、ヨ ウ化エチル１゜１７ｇ（７，５ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０’Ｃで１２ 時間維持する。トリエチルアミン０．２５３９（２，５ＩＩＥｑ）を加え、溶液 を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９ｇ（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｆｆの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０℃で１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０３１（にゆっくり注加する。

生成した沈澱をろ過し、アセトン１００１ｆｆで３回洗浄し、最後に３０℃で２ ４時間真空乾燥する。

標記の化合物１．８６９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンディソフ（Ｒ， Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法 ［Ａｎａｌ。

基の定量測定をＪｏｈｎ％１ｄｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく 定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕ ｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法 で行う。

実施例２１・ 架橋したカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキン基１％ナトリウムで塩化されたカルボキ シ基９９％トルシロの方法［Ｔｒｕ３ｉ１１ｏ　、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　 Ｒｅｓ、　　７．４．８３（１９６８）コに従って調製した置換率０．９９のカ ルボキシメチルキチン・ナトリウム塩１０ｗＥｑ（乾燥化合物２．８５ｇ相当） を蒸留水３００２１２に溶かす。次いて、この溶液をテトラブチルアンモニウム の形のスルホン型樹脂（Ｄｏｗｅｘ　５０　Ｘ　８）　１５ｊ１１２を含有する ４°Ｃに調節した恒温カラムに通す。

カルボキシ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシメチルキチン のテトラブチルアンモニウム塩５．　ＯｊＭを２５℃におい７ＤＭＳ○（２４８ ｚ（２）ｔ：溶がし、トリエチルアミン０．０Ｊｙ（０，１ｍＥｑ）を加え、得 られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．０２６ｇ（０゜］　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｇの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ °Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００πｇと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けなからアセトン７５０ｍ２にゆっくり注加する。生成した沈澱をろ 過し、アセトン／水（５：　１）１００＋（ｌで３回、次いでアセトン１０Ｍで ３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．７８９を得る。エステル基の定量測定を、ＪｏｈｎＶｉｎｙ　 ａｎｄ　５ｏｎｓｆｆ１版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｔ　Ｇｒｏｕｐｓ ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２２： 生成物に関する記載 内部エステル化に使用されたカルホキ／基５％ナトリウムで塩化されたカルホキ ７基９５％カルボキシ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシメ チルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５．０５１７を２５℃においてＤＭＳ Ｏ（２４８峠）に溶かし、トリエチルアミン０．０５１ｇ（０゜５ｍＥｑ）を加 え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．１２８ｇ（０゜５ｍＥｑ） のＤＭＳＯ（６０Ｒａ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ °Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００πρと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０Ｈにゆっくり注加する。生成した沈澱をろ過 し、アセトン／水（５：　１　）１００ｘＰＣ’３回、次いでアセトン１００３ ＩＣで３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．７４９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎＹｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、＋６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２３： 架ｌしたカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基９０％カルボ牛シ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシ メチルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５０５ｇを２５℃においてＤＭＳ　 Ｏ（２４８ｔ（１”）に溶かし、トリエチルアミン０．１０１９（１゜ＯｍＥｑ ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．２５５９（１゜ＯｍＥｑ） のＤＭＳＯ（６０１Ｑ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ ’Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００＋Ｃと塩化ナトリウム２．５ｇの溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０＋（にゆっくり注加する。生成した沈澱をろ 過し、アセトン／水（５：　ＩＮ　０ＯｘＱで３回、次いてアセトン１００ＩＣ で３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．７３９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２４； 架橋したカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基２５％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基７５％カルボキシ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシ メチルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５．０５９を２５℃においてＤＭｓ 　Ｏ（２４８ＩＱ）に溶かし、トリエチルアミン０．２５３９（２゜５ＩＩＩＥ ｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｉｆｆ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０℃で１５時間維持する。

次いで、水１００ｘｆｆと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０１ρにゆっ（り注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：　１　）　１００ｘ（ｌテ３回、次いでアセトン１ ００１１２で３回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．６８ｓｒを得る。エステル基の定量測定を、Ｊｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の”官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２５： 架橋したカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボ牛ン基５０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基５０％カルボキシ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０，９９のカルボキシ メチルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５．０５９を２５℃においてＤＭＳ Ｏ（２４８ｊｌＱ）に溶かし、トＩＪ　ｘｆｈ７　ミ７０．５０６ｇ（５゜Ｑ　 ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物１．２８ｙ（５，ＯｍＥｑ）の ＤＭＳＯ（６０＋ｆｆ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０ °Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ｉ１２と塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｔ＋２にゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／水（５：　１）１００１１２で３回、次いでアセトン１０ ０ｚＱで３回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．６１９を得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ ｔａｔ　ｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　ＦＩＪｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏ ｕｐｓ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２６： 架橋したカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基７５％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基２５％カルボキシ基１０ｍＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシ メチルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５．０５９を２５℃においてＤＭＳ Ｏ（２４８！Ｑ）に溶かし、）　＋）　ｘチル７　ミニ、ｙｏ、　７５９ｓｒ（ ７゜５１１１Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化！１．９３２ｇ（７゜５１１１Ｅ ｑ）のＤＭＳＯ（６Ｑｘの中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０℃で１５時間維持する。

次いで、水１００ｆｆ（２と塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混 合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘ（ｌにゆっくり注加する。生成した沈 澱をろ過し、アセトン／水（５：１）１００ｚ（ｌで３回、次いでアセトン１０ ０１ｆ２で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間真空乾燥する。

標記の化合物２．５２ｇを得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づ（定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔ ａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２７： 架橋したカルボキシメチルキチンの製造生成物に関する記載： 内部エステル化に使用されたカルボキシ基１００％カルボキシ基１０ｍＥｑに相 当する、置換率０．９９のカルボキシメチルキチンのテトラブチルアンモニウム 塩５．０５ｓ＋を２５℃においてＤＭＳＯ（２４８村）に溶かし、トリエチルア ミン１．０１９　（１ＯｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物２．５５ｇ（１０ｍＥｑ）のり 、’ｖ４Ｓ○（６０ｘρン中溶液を１時間でゅっ←）滴下して加え、混合物を３ ０°Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘＱにゆっくり注加する。生 成した沈澱をろ過し、アセトンｌｏｏｒｇで５回洗浄し、最後に３０℃で２４時 間真空乾燥する。

標記の化合物２．４２ｇを得る。エステル基の定量測定を、Ｊ　ｏｈｎｆｉｌｌ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔ　１ Ｌａｔ　ｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕ ｐｓ）”第４版、］、　６９−　］　７２頁記載のけん化法で行う。

実施例２８： 架橋したカルボキシメチルキチンのエチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボ牛シ基２５％内部エステル化に用いられた カルボキン基２５％ナトリウムで塩化されたカルボキシ基２５％カルホキ７基１ ｏＩｌｌＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキンメチルキチンのテトラブ チルアンモニウム塩５．０５ｙを２５℃においてＤＭＳＯ（２４８ｍｌり＋：溶 かＬ、Ｅ’）化エチル０．３９ｇ（２，５０ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３ ０’Ｃで１２時間維持する。トリエチルアミン０．２５３９（２，５＋ｎＥｑ） を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｘｆり中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０℃で１５時間維持する。

次いで、水１．０ＯｔＣと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ＲＱにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン］０Ｏｊｔｆｆで５回洗浄し、最後１：３０　’Ｃで２４時間 真空乾燥する。

標記の化合物２．６９９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ， Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法 ［Ａｎａｌ。

Ｃｈｅｍ、３３，１０２８　１９３０（１９６１）］で行う。全エステル基の定 量測定をＪ　ｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定 量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎ ｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で 行う。

実施例２９： 架橋したカルボキシメチルキチンのエチルエステルの製造生成物に関する記載： エタ／−ルでエステル化されたカルボキシ基５０％内部エステル化に用いられた カルボキシ基２５％ナトリウムで塩化されたカルボキシ基２５％カルボ牛シ基１ ０＋ａＥｑに相当する、置換率０．９９のカルボキシメチルキチンのテトラブチ ルアンモニウム塩５．０５ｇを２５℃においてＤＭＳ　Ｏ（２４８ｚＣ）に溶か し、ヨウ化エチル０．７８９（５，０ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃で １２時間維持する。トリエチルアミン０．２５３９（２，５ｍＥｑ）を加え、溶 液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０１１２）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０℃で１５時間維持する。

次いで、水１００ｇ（と塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘ１２にゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン１００ｉｆｆで５回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾 燥する。

標記の化合物２．７１９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ， Ｈ，Ｃｕｎｄ　ｉ　ｆ　ｆ　）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ ）の方法［ＡｎａｌＣｈｅｍ、　　３３．１０２８−１９３０（１９６１）］で 行う。全エステル基の定量測定をＪ　ｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出 版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙ ｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１ ７２頁記載のけん化法で行う。

実施例３０： 架橋したカルボキシメチルキチンのエチルエステルの製造生成物に関する記載： エタノールでエステル化されたカルボキシ基７５％内部エステル化に用いられた カルボキシ基２５％カルボキシ基１０＋Ｅｑに相当する、置換率０．９９のカル ボキシメチルキチンのテトラブチルアンモニウム塩５．０５９を２５℃において ＤＭＳＯ（２４８ｆｆｆｆ）に溶かし、ヨウ化エチルｉ、７１Ｆ（７，５ｍＥｑ ）を加え、得られた溶液を３０°Ｃで１２時間維持する。トリエチルアミン０． ２５３９（２，５ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０１１２）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を ３０℃で１５時間維持する。

次いで、水１０Ｍと塩化ナトリウム２．５？の溶液を加え、得られた混合物を撹 拌し続けながらアセトン７５Ｃ）＋ｇにゆっくり注加する。生成した沈澱をろ過 し、アセトン１００３１ｇで５回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時間真空乾燥す る。

標記の化合物２．７４９を得る。エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ， Ｈ，ＣｕｎｄｉｆＴ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法 ［Ａｎａｌ。

Ｃｈｅｌｌ、　　３３．１０２８−１９３０（１９６１）ｌで行う。全エステル 基の定量測定をＪ　ｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基 づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　 Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん 化法で行う。

実施例３１： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の部分コルチゾン（Ｃ２１）エステルの生成物に 関する記載・ コルチゾンでエステル化されたカルボキシ基２０％；内部エステル化に用いられ たカルボキシ基２５％ ナトリウムで塩化されたカルボキシ基５５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する 分子量７０．０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを２５℃にお いてＤＭＳＯ（２４８峠）に溶かし、２１−ブロモ−４−プレグネン−１７−α −オール−３，１１，２０−トリオン０　、８５　ｆ＋（２ｍＥｑ）を加え、得 られた溶液を３０’Ｃで２４時間維持する。トリエチルアミン０．２５３９（２ ，５ｆｆ、Ｆ、ｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ（ＩＪＩｏ、　６３９１７（２゜５ 　ｍＥｑ）のＤＭＳＯ（６０ｊ＋（り中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、 混合物を３０’Ｃで１５時間維持する。

次いで、水１００ｊＩＱと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘｆｆにゆっくり注加する。生成した沈澱 をろ過し、アセトン／″＊（５・１）１００ｉｆｆで３回、次いでアセトン１０ ０ｚ（ｌで３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物４．５ｇを得る。コルチゾンの定量測定を、Ｂ、　　Ｐ。

に従い、Ｎ　ａｔｃ　Ｏｓのヒドロアルコール溶液による穏やかなアルカリ加水 分解およびクロロホルム抽出によって行う。

全エステル基の定量測定をＪ　ｏｈｎ　Ｗｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“ 官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ 　Ｖｉａ　ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＧｒｏｕｐｓ）”第４版、１６９−１７２頁記 載のけん化法で行う。

実施例３２： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の混合エタノールおよびコルチゾン部分エステル （Ｃ２１）の製造 生成物に関する記載： コルチゾン（Ｃ２１）でエステル化されたカルボキシ基２０％エタノールでエス テル化されたカルボキシ基２５％内部エステル化に用いられたカルボキシ基２５ ％ナトリウムで塩化されたカルボ牛シ基３０％ｌＱｍＥｑモノマ一単位に相当す る分子１８５．０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６．２Ｈを２５℃にお いてＤＭＳＯ（２４８πρ）に溶かし、ヨウ化エチル０．３９９（２，５ｍＥｑ ）を加え、得られた溶液を３０°Ｃで１２時間維持する。２１−ブロモ−４−プ レグネン−１７−α−オール−３，１１，２０−トリオン０　、８５９（２ｍＥ ｑ）を加え、得られた溶液を３０℃で２４時間維持する。トリエチルアミン０． ２５３ｇ（２，５ｍＥｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０次ｌり中溶液を１時間でゆつ（り滴下して加え、混合物を３ ０″Ｃで１５時間維持する。

次いて、水１００ＭＱと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０Ｍｒｌにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：　ＩＮ　０ＯｘＱで３回、次いてアセトン１００１ ｃて３回洗浄二最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物４．４１ｆＩを得る。コルチゾンの定量測定を、Ｂ、　　Ｐ。

に従い、Ｎａ、Ｃｏ、のヒドロアルコール溶液による穏やかなアルカリ加水分解 およびクロロホルム抽出によっテ行う。

エトキシ基の定量測定を、クンディラフ（Ｒ，Ｈ，ＣｕｎｄｉｆＴ）およびマー クナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法［Ａｎａｌ、　Ｃｈｅｍ、　　３ ３、＋０２８−１９３０（１，９６１）コで行う。全エステル基の定量測定をＪ ｏｈｎ　ｆｉｌｌｙａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　、へｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａ ｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例３３： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の混合エタノールおよびコルチゾンエステル（Ｃ ２］、）の製造 生成物に関する記載。

コルチゾンでエステル化されたカルボ牛シ基２０％エタノールでエステル化され たカルボキン基７０％内部エステル化に用いられたカルボキシ基１０％１０ｍ、 Ｅｑモノマ一単位に相当する分子量１７０，０００のＨＹテトラブチルアンモニ ウム塩６．２１ｇを２５℃においてＤＭＳＯ（２４８酎）に溶かし、ヨウ化エチ ル１．０９９（７加Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０’Ｃで１２時間維持する 。２１−ブロモ−４−プレグネン−１７−α−オール−３，１１，２０−トリオ ン○、８５９（２加Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃で２４時間維持する。

トリエチルアミン０、１０１ｉ＋（１，０加Ｅｑ）を加え、溶液を３０分間撹拌 する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．２５５９（１゜Ｑ　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０１ρ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０’Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０１（ｌにゆっくり注加する。

生成した沈澱をろ過し、アセトン１００１１Ｉ２で５回洗浄し、最後に３０℃で ２４時間真空乾燥する。

標記の化合物４．５８ｇを得る。コルチゾンの定量測定を、Ｂ、　　Ｐ。

に従い、ＮａｙＣＣ）＋のヒドロアルコール溶液による穏やかなアルカリ加水分 解およびクロロホルム抽出によって行う。

エトキシ基の定量測定を、クンディ・２′フ（Ｒ，Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ）および マークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法ｒＡｎａ１．　Ｃｈｅｍ、　 　３３．１０２８−１９３０（１９６１）］で行う。全エステル基の定量測定を Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｌｙａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析 （Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＡｎａＩｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａ ｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）”第４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

実施例３４： ヒアルロンＭ（ＨＹ）の部分テトラブチルアンモニウム塩の製造生成物に関する 記載： テトラブチルアンモニウムで塩化されたカルボキシル２５％酸の形のカルボキシ ル７５％ １．０ａＥｑモノマ一単位に相当する分子量１７０，０００のＨＹナトリウム塩 ４．０ｇを蒸留水４００ｘ（ｌに溶かし、Ｈ”形のスルホン型樹脂（Ｄｏｗｅｘ 　５０　ｘ　８）　１５ｚ（ｌを含有する、５℃の恒温カラムに通す。

温度５°Ｃに保持したナトリウム不含溶出液を撹拌し続けながら、０゜１Ｍ水酸 化テトラブチルアンモニウム溶液２５ｘｆｆに加エル。

得られた溶液を凍結し、凍結乾燥する。

実施例３５゜ 架橋したヒアルロン酸とカルテオロールとの塩の製造生成物に関する記載： 内部エステル化に用いられたカルボキン基２５％カルテオロールと塩形成したカ ルボキシ基７５％］ＯｍＥｑモノマ一単位に相当するヒアルロン酸の部分テトラ ブチルアンモニウム塩（２５％）４．３９９を２５℃においてＤＭＳｏ（２４８ １Ｑ）に溶かし、トリエチルアミン０．２５３９（２，５加Ｅｑ）を加え、得ら れた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜５　ｍＥｑ ）のＤＭＳＯ（６０ｆｆ１２）中溶液を１時間でゆっ（り滴下して加え、混合物 を３０°Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０１１２にゆっくり注加する。

生成した沈澱をろ過し、アセトン１００ｘ（で５回洗浄し、最後に３０″Ｃで２ ４時間真空乾燥する。

沈澱物を蒸留水４００ｘρに懸濁し、５°Ｃに冷却する。

塩基性カルテオロール２．１９ｇ（７，５ｍＥｑ）を加え、全体を３０分間撹拌 する。得られた混合物を凍結乾燥する。

標記の化合物５．８９を得る。エステル基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙａ ｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉ ｖｅ　Ａｎａｌｙｓｊｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第 ４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

カルテオロールの分析はチ二の方法［Ｓ　、Ｙ　、　Ｃｈｕ、　　Ｊ　、　Ｐ　 ｈａｒｍａｃ。

Ｓｃｉ、６ユ、１６２３（１９７８）コに従って行う。

実施例３６： 架橋したヒアルロン酸とカナマイシンとの塩の製造生成物に関する記載： 内部エステル化に用いられたカルボキシ基２５％カナマイシンと塩形成したカル ボキシ基７５％】○ｍＥｑモノマ一単位に相当するヒアルロン酸の部分テトラブ チルアンモニウム塩（２５％）４．３９９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８ 灯）に溶かし、トリエチルアミン０．２５３９（２，５ｍＥｑ）を加え、得られ た溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物ｏ、　６３９９（２゜５　ｍＥ ｑ）のＤＭＳＯ（６０ｄ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３ ０’Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０Ｈにゆっくり注加する。生成 した沈澱をろ過し、アセトン１００ｉＣで５回洗浄し、最後に３０°Ｃで２４時 間真空乾燥する。

沈澱を蒸留水４ｏｏｘｃに懸濁し、５°Ｃに冷却した後、カナマイシン硫酸塩１ ．１９（７，５ｍＥｑ＞を蒸留水２５１ρに溶かし、○Ｈ−形の４級アンモニウ ム樹脂（Ｄｏｔｂｅｘ　Ｉ　Ｘ　８）　１５１１Ｑ含有カラムから溶離して得た 溶液を、３０分間撹拌し続けながら加える。得られた混合物を凍結乾燥する。

標記の化合物４，６９を得る。エステル基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙａ ｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉ ｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）”第 ４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

カナマイシンの微生物学的定量を、Ｂ、　５ｕｂｔｉｌｉｓ　６６３３を用い、 カナマイシン標品との比較により行う。

実施例３７： 架橋したヒアルロン酸とアミカシンとの塩の製造生成物に関する記載コ 内部エステル化に用いられたカルボキシ基２５％アミカシンと塩形成したカルボ キシ基７５％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当するヒアルロン酸の部分テトラブチ ルアンモニウム塩（２５％）４．３９９を２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８ｘ Ｑ）に溶かし、トリエチルアミン０．２５３ｆｔ（２，５ｍＥｑ）を加え、得ら れた溶液を３０分間撹拌する。

２−クロロ−１−メチルピリジニウム・ヨウ化物０．６３９９（２゜混合物を３ ０’Ｃで１５時間維持する。

得られた混合物を撹拌し続けながらアセトン７５０ｘＱにゆっくり注加する。生 成した沈澱をろ過し、アセトン１００廣ａで５回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４ 時間真空乾燥する。

沈澱を蒸留水４００３１１）に懸濁し、５℃に冷却する。

３０分間撹拌し続けながら塩基性アミカシン１．１ｇ（７，５ｍＥｑ）を加える 。得られた混合物を凍結乾燥する。

標記の化合物４，８９を得る。エステル基の定量測定をＪｏｈｎ　ｆｉｌｌｙａ ｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉ ｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）”第 ４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

アミカシンの定量分析をＳ、ａｕｒｅｕｓ　２９７３７を用い、アミカシン標品 との比較により微生物学的に行う。

実施例３８： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の部分エチルエステルの製造生成物に関する記載 ； エタノールでエステル化されたカルボキン基５０％内部エステル化に用いられた カルボ牛７基１０％ナトリウムで塩化されたカルボキシ基４０％］ＯｍＥｑモノ マ一単位に相当する分子１１８５，０００のＨＹテトラブチルアンモニウム塩６ ．２１９を２５℃においてＤＭＳＯ（２４８Ｚａ＞に溶かし、ヨ’７化ｘ＋ルｏ 、　７８０ｓ＋（５，０ｍＥｑ）ヲ加、ｔ、溶液ヲ３０°Ｃで１２時間維持する 。塩化ピリジン０．１１８ｇ（１ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０分間撹拌 する。

Ｎ−ベンジル−Ｎ“−エチルカルボジイミド０．１６９＜　１　ｍＥｑ）のＤＭ ＳＯ（２０１０中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０℃で４５ 時間維持する。

次いで、水１００ｆｆｊと塩化ナトリウム２．５９の溶液を加え、得られた混合 物を撹拌し続けながらアセトン７５０１Ｃにゆっくり注加する。生成した沈澱を ろ過し、アセトン／水（５：　Ｌ）　１００ｘＱテ３回、次いでアセトン１００ １ｆ２で３回洗浄し、最後に３０″Ｃで２４時間真空乾燥する。

漂記の化合物３．８５ｇを得る。エト牛／基の定量測定を、クンティノフ（Ｒ， Ｈ，ＣｕｎｄｉｆＴ）およびマークナス（Ｐ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ）の方法 ［Ａｎｉｌ。

Ｃｈｅｍ、　　３３．１０２８−１９３０（１９６１）Ｅで行う。全エステル基 の定量測定をＪ　ｏｈｎ　ｆｉｌｌｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の”官能基に基づ く定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆ ｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第４版、１６９　１７２頁記載のけん化 法で行う。

実施例３９： 架橋したヒアルロン酸（ＨＹ）の１造 生成物に関する記載： 内部エステル化に用いられたカルボキシ基１０％ナトリウムで塩化されたカルボ キシ基９０％１０ｍＥｑモノマ一単位に相当する分子量１７０，０００の）（Ｙ テトラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを２５°ＣにおいてＤＭＳＯ（２４８Ｒ ｏ）に溶かし、塩化ピリジンＯ，］　１８９（］　ｍＥｑ）を加え、得られた溶 液を３０分間撹拌する。

Ｎ−ベンジル−Ｎ゛−エチルカルボジイミド０．１６９（１ｍＥｑ）のＤＭＳＯ （２Ｍ）中溶液を１時間でゆっくり滴下して加え、混合物を３０″Ｃで４５時間 維持する。

次いで、水１００ｊｌＱと塩化ナトリウム２５９の溶液を加え、得られた混合物 を撹拌し続けながらアセトン７５０峠にゆっくり注加する。生成した沈澱をろ過 し、アセトン／水（５：　１）１００ｚ（ｌで３回、次いでアセトン１００１１ Ｉ２で３回洗浄し、最後に３０’Ｃで２４時間真空乾燥する。

標記の化合物３．９９を得る。全エステル基の定量測定をＪｏｈｎＷｉｌｌｙ　 ａｎｄ　５ｏｎｓ出版の“官能基に基づく定量的有機分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔ ｉｖｅ＾ｎａｌｙｓｉｓ　Ｖｉａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ）″第 ４版、１６９−１７２頁記載のけん化法で行う。

上記の製造の実施例は本発明の様々な架橋多糖類（ポリサツカリド）の例示にす ぎない。所望の架橋産物を得るために、適当な他の出発物質および／または反応 物質により置換するだけで、上記の方法に従い、特定の好ましい他の生成物を製 造することができる。例えば、カルボキシメチルセルロースまたはカルボキシメ チル澱粉の架橋誘導体は、上記実施例２１−３０においてカルボキシメチルキチ ンをカルボキンメチルセルロースまたはカルボキシメチル澱粉に基づく他の出発 物質で置換するだけで、これら実施例記載の方法に従って製造することができる 。

既に述べたように、本発明の新規な多糖類エステルは医薬製剤および新規な医療 製品の製造に有用である。以下に本発明の医薬製剤を例示する。

製剤例１　１００ｘＣ中に以下の成分を含有するコルチゾン含有液剤（フリリウ ム）： ヒアルロン酸とコルチゾンおよびエタノールとの部分および混合エステル（実施 例３２）　　　　０．３００ｙｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル　　　　　　　　 　０．０１０９ｐ−ヒドロ牛シ安息香酸メチル　　　　　　　　　０．０５０ｇ 塩化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　０．９００ｙ注射用製剤のた めの水／ｇ、ｂ、ａ、　　　　　　　　１００訳Ｑ夕／−ルとの部分エステルを 含有する２１ノーム。

ヒアルロン酸とエタノールとの部分エステル（実施例９）　　　　　　　　　　 　　　　　　　　０．２ｙポリエチレンングリコール・ モノス＋−ｒレ−）　　４００　　　　　　　　　　１０．０ＯＯ９Ｃｅｔｉｏ ｌ　Ｖ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５．　ＯＯ０９Ｌａｎｅｔｔｅ 　Ｓ　Ｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　２．　ＯＯ０９パラオキシ安息香 酸メチル　　　　　　　　　　　０．０７５９パラオキシ安息香酸プロピル　　 　　　　　　　０．０５０ｇジヒドロ酢酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　 Ｏ，１，ＯＯ９グリセリンＦ、Ｕ、　　　　　　　　　　　　　　　１．５００ ９Ｓｏｒｂｉｔｏｌ　７０　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５００９Ｔ ｅｓｔ　ｃｒｅａｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５０り注射 用製剤のための水／ｇ、ｂ、ａ、　　　　　　　　１００．　ＯＯ９製剤例３　 ］００９ｇに以下の成分を含有するカルホキ／メチルキチンとエチルアルコール との部分エステルを含有するクワーム。

カル丁ヰ／メチルキチンとエチルアル；−ルとの部分エステル（実施例２９）　 　　　　　　　　０．２ｙポリエチレンングリコール・ モノステアレー）　　４００　　　　　　　　　　　］０．０ＯＯ９Ｃｅｔｉｏ ｌ　Ｖ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５．　ＯＯ０９Ｌａｎｅｔｔｅ 　Ｓ　Ｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．　ＯＯ０９バラオキシ安息 香酸メチル　　　　　　　　　　０．０７５ｇバラオキシ安息香酸プロピル　　 　　　　　　　　０．０５０９ジヒドロ酢酸ナトリウム　　　　　　　　　　　 　０．１００９グリセリンＦ、Ｕ、　　　　　　　　　　　　　　　１，５００ ９Ｓ　ｏｒｂｉｔｏｌ　７０　　　　　　　　　　　　　　　１．５００９Ｔｅ ｓｔ　ｃｒｅａｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５０９注射用 製剤ツタメツ水／ｇ、ｂ、ａ、　　　　　　　　１００．００９以下の実施例は 、本発明のアルギン酸エステルを含有する医療製品を例示するものである。

実施例４０： カルボキシメチルセルロースの架橋エステルを用いるフィルムの製架橋したカル ボ牛／メチルセルロースのＮ−プロピルエステルのジメチルスルホキシド溶液を 調製する。ストラティファイアー（ｓｔｒａｔｉｆｉｅｒ）を用いてガラスシー トの上に溶液を薄層に広げる：厚みはフィルムの最終的な厚みの１０倍以上とす る必要がある。ガラスシートをエタノールに浸漬すると、ジメチルスルホキシド は吸収されるがカルボキシメチルセルロースエステルは溶解せず、固化スる。

ガラスシートからフィルムを剥離し、エタ／−ルで繰り返し洗浄し、さらに水洗 した後、再びエタノールで洗浄する。

得られたシートを圧搾機（プレス）内で３０’Ｃにおいて４８時間乾燥する。

実施例４１： カルボキシメチルセルロースの架橋エステルを用いる糸の製造架橋したカルボキ シメチルセルロースのベンジルエステルのジメチルスルホキシド溶液を調製する 。このようにして得られた溶液をポンプにより孔径Ｑ、５ｍｍのスレーダー（ｔ ｈｒｅａｄｅｒ）を通して押し込む。

スレーダーはエタ／−ル／ジメチルスルホ牛シト８０：２０（この濃度比は、エ タノールを追加して一定に保つ）に浸漬する：ジメチルスルホキシド溶液をこの ようにして浸漬すると大部分のジメチルスルホキシドが失われ、糸が固化する。

またジメチルスルホキノドが含まれている間に糸を伸ばし、さらに繰り返し伸ば してエタノールで洗浄する。糸を窒素気流中で乾燥する。

実施例４２： カルホキツメチルキチンの架橋エステルを用いるスポンジ様物質の製造 全カルボキシ基がエステル化されているカルボ牛ジメチルキチンの架橋ベンジル エステルをジメチルスルホキシドに溶かす。調製した溶液各１０ｆｆ（！に３０ ０ｕに相当する顆粒度を有する塩化ナトリウム３１．５ｇ、炭酸水素ナトリウム １．２８９およびクエン酸１ｇの混合物を加え、ミキサーにかけて全体を均質に する。

ペースト状の混合物を様々な方法、例えば、互いに反対方向に回転する、相互の 距離の調節が可能な２個のローラーからなるマンジ（ｍａｎｇｅ）を用いて層状 にする。この距離を調節しながら、形成されルペースト層の支持体として働くシ リコンペーパーの紙片と一緒にペーストをローラー間に通過させる。この層を幅 および長さが所望の寸法になるように切断し、シリコンから離し、ろ紙に包み、 水などの適当な溶媒に浸ける。このようにして得られたスポンジを水などの適当 な溶媒で洗浄し、これをガンマ線で滅菌してもよい。

実施例４３： 実施例４２記載の方法に従い、他のカルボキンメチルキチンエステル類を用いて スポンジ様物質を製造することができる。所望により、ジメチルスルホ牛シトに 代えて、選択したエステルを溶解させる任意の他の溶媒を用いることができる。

塩化す）　ｌ）ラムの代わりに、カルボキシメチルキチンのエステルを、８解さ せるために用いる溶媒には不溶であるか、上記の機械的処理の後のカルボキンメ チルキチンエステルを溶解させるために用いる溶媒には可溶であり、さらに、ス ポンジ様物質に要求される孔の種類を得る上で適正な顆粒性を有する、他の固形 物質を随意用いることができる。

炭酸水素ナトリウムおよびクエン酸の代わりに、カルボキシメチルキチンを溶解 させるために用いる溶媒の懸濁液または溶液中で相互に反応して二酸化炭素など のガスを発生し、低密度の（詰まり過ぎていない）スポンジ様物質を形成させる よう作用する、他の同様な化合物の組合せを用いることができる。即ち、炭酸水 素ナトリウムの代わりに他の炭酸水素塩またはアルカリまたはアルカリ土類の炭 酸塩を、クエン酸の代わりに酒石酸などの他の固形酸を用いることができる。

このように本発明を記載したので、該発明を様々な方法で変化させることができ る。それらの変法は本発明の思想および範囲から逸脱するものとみなされるべき でなく、それら当業者自明の変法は全て以下の請求の範囲に包含されるものとす る。

国際調査報告 Ｉ際調萱報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．多糖のカルボキシ基の少なくとも第１部分が同一の多糖分子のヒドロキシ基 に、および／または別の多糖分子のヒドロキシ基にエステル結合またはうクトン 結合によって架橋している架橋カルボン酸形の多糖。 ２．多糖がヒアルロン酸、アルギン酸、カルボキシメチルセルロース、およびカ ルボキシメチルキチンからなる群から選ばれる請求項１記載の架橋酸形の多糖。 ３．多糖のカルボキシ官能基のすべてがヒドロキシ基にエステル結合している請 求項１または２記載の架橋酸形の多糖。 ４．架橋に関与している第１部分のカルボキシ基の、多糖中のカルボキシ基の全 数に対する割合が１％〜６０％の範囲内である請求項１〜３のいずれかに記載の 架橋酸形の多糖。 ５．架橋の割合が１５％〜３０％の範囲内である請求項４記載の架橋酸形の多糖 。 ６．多糖のカルボキシ基の一部だけがヒドロキシ基に架橋しており、多糖のカル ボキシ基の第２部分が一価または多価アルコールによってエステル化されている 請求項１、２、４または５のいずれかに記載の架橋酸形の多糖。 ７．アルコールが脂肪族、アリール脂肪族、脂環式、および複素環式アルコール からなる群から選ばれるものである請求項６記載の架橋酸形の多糖。 ８．脂肪族系列のアルコールが最大炭素原子数３４のものであり、アミノ、ヒド ロキシ、メルカプト、アルデヒド、ケタール、カルボキシ、ヒドロカルピル、お よびジヒドロカルピルアミノ、エーテル、エステル、チオエステル、アセタール 、ケタール、カルバミド基、または１もしくはそれ以上のアルキル基で置換され たカルバミド基からなる群から選ばれる１または２個の官能基で置換されている こともあり、ここでこれらの基のヒドロカルピル基は最大炭素原子数６の官能基 修飾されたものであり、そして脂肪族系列のアルコールは酸素、硫黄および窒素 からなる群から選ばれる異項原子によって炭素原子鎖が遮断されていることもあ る請求項７記載の架橋酸形の多糖。 ９．アルコールが最大炭素原子数３２のアルコールであり、官能基で置換されて いるアルコールの場合にはアミン基、エーテル、エステル、チオエーテル、チオ エステル、アセタール、ケタールのヒドロカルピル基は最大炭素原子数４のアル キル基であり、エステル化されたカルボキシ基および置換されたカルバミド基に おいてはヒドロカルビル基は同じ炭素原子数のアルキル基であり、そして置換さ れたアミノまたはカルバミド基は最大炭素原子数８のアルキレンアミノまたはア ルキレンカルバミド基であってもよい請求項８記載の架橋酸形の多糖。 １０．アルコールがエチル、プロピル、イソプロピル、Ｎ−ブチル、イソブチル 、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、アミル、ベンチル、へキシル、またはオクチル アルコールである請求項９記載の架橋酸形の多糖。 １１．アルコール成分がエチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレン グリコール、またはグリセリンから導かれる請求項９記載の架橋酸形の多糖。 １２．アルコールがタルトロンアルコール、乳酸、グリコール酸、リンゴ酸、酒 石酸、またはクエン酸である請求項９記載の架橋酸形の多糖。 １３．アリール脂肪族系列のアルコールがベンゼン残基を１個だけ有し、最大炭 素原子数４の脂肪族鎖を有するものであり、ベンゼン残基は１〜３のメチルまた はヒドロキシ基によって、ハロゲン原子によって置換されていてもよく、脂肪族 鎖は遊離のアミノ基またはモノもしくはジエチル基からなる群から選ばれる１ま たは２個の官能基によって、またはピロリジンもしくはピペリジン基によって置 換されていてもよい請求項７記載の架橋酸形の多糖。 １４．脂環式または脂肪族脂環式系列のアルコールが最大炭素原子数３４の単環 式または多環式炭化水素である請求項７記載の架橋酸形の多糖。 １５．複素環式アルコールが窒素、酸素および硫黄からなる群から選ばれる１ま たはそれ以上の異項原子によってその炭素原子鎖または環が遮断されている単環 式もしくは多環式の脂環式アルコールまたは脂肪族脂環式アルコールである請求 項７記載の架橋酸形の多糖。 １６．複素環式アルコールがアルカロイド類、フェニルエチルアミン類、フェノ チアジン薬物、チオキサンテン薬物、抗痙攣薬、抗精神病薬、抗嘔吐薬、鎮痛薬 、催眠薬、食欲抑制薬、精神安定薬、筋弛緩薬、冠状血管拡張薬、アドレナリン 作動性遮断薬、麻酔遮断薬、抗腫瘍薬、抗生物質、抗ウイルス薬、末梢血管拡張 薬、炭酸脱水酵素阻害薬、抗喘息薬、抗炎症薬、およびスルファミディック類か らなる群から選ばれる請求項７記載の架橋酸形の多糖。 １７．アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属、マグネシウム、アルミニウムま たはアミンと、請求項１、２、および４〜１６のいずれかに記載の架橋形の多糖 の塩。 １８．ナトリウムまたはアンモニウムとの請求項１７記載の塩。 １９．アミンが脂肪族、アリール脂肪族、脂環式、または複素環式アミンである 請求項１７記載の塩。 ２０．アミンが治療学的に許容しうる塩基である請求項１９記載の塩。 ２１．アミンが治療学的に活性な塩基である請求項１９記載の塩。 ２２．アミンがアルカロイド類、ペプチド類、フェノチアジン、ベンゾジアゼピ ン、チオキサンテン、ホルモン類、ビタミン類、抗痙攣薬、抗精神病薬、抗嘔吐 薬、麻酔薬、催眠薬、食欲抑制薬、精神安定薬、筋弛緩薬、冠状血管拡張薬、抗 腫瘍薬、抗生物質、抗細菌薬、抗ウイルス薬、抗マラリア薬、炭酸脱水酵素阻害 薬、非ステロイド系抗炎症薬、血管収縮薬、コリン作動性アゴニスト類、コリン 作動性遮断薬、アドレナリン作動性アゴニスト類、アドレナリン作動性遮断薬、 および麻酔遮断薬からなる群から選ばれる請求項２１記載の塩。 ２３．アミンが薬理学的に不活性であり、最大炭素原子数１８のモノ、ジおよび トリアルキルアミン類、脂肪族部分の最大炭素原子数が１８であり、芳香族部分 としてベンゼン基を有し、１〜３のメチル基またはハロゲン原子またはヒドロキ シ基で置換されていることもあるアリールアルキルァミン類、ＯおよびＳからな る群から選ばれる異項原子によって環が遮断されていることもある炭素原子数４ 〜６の環を有するアルキレンアミン類、およびアミノまたはヒドロキシ官能基で 置換されたこれらすべての型のアミン類からなる群から選ばれる請求項１７記載 の塩。 ２４．多糖がヒアルロン酸である請求項１〜２３のいずれかに記載の架橋酸形の 多糖またはその塩。 ２５．多糖がアルギン酸である請求項１〜２３のいずれかに記載の架橋酸形の多 糖またはその塩。 ２６．多糖がカルボキシメチルキチンである請求項１〜２３のいずれかに記載の 架橋酸形の多糖またはその塩。 ２７．部分的に架橋したヒアルロン酸が低級脂肪族アルコールでエステル化した カルボキシ基部分を含み、所望によりアルカリ金属で塩化したカルボキシ基部分 を含んでいる、部分的にまたは完全に架橋したヒアルロン酸である請求項２４記 載の架橋形の多糖。 ２８．（ａ）カルボキシ基の１％程度が架橋し、９９％程度がナトリウムで塩化 されたヒアルロン酸； （ｂ）カルボキシ基の５％程度が架橋し、９５％程度がナトリウムで塩化された ヒアルロン酸； （ｃ）カルボキシ基の１０％程度が架橋し、９０％程度がナトリウムで塩化され たヒアルロン酸； （ｄ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がナトリウムで塩化され たヒアルロン酸； （ｅ）カルボキシ基の５０％程度が架橋し、５０％程度がナトリウムで塩化され たヒアルロン酸； （ｆ）カルボキシ基の７５％程度が架橋し、２５％程度がナトリウムで塩化され たヒアルロン酸； （ｇ）カルボキシ基の１００％が架橋したヒアルロン酸；（ｈ）カルボキシ基の ２５％程度が架橋し、２５％程度がエタノールでエステル化され、５０％程度が ナトリウムで塩化されたヒアルロン酸； （ｉ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、５０％程度がエタノールでエステル 化され、２５％程度がナトリウムで塩化されたヒアルロン酸；および （ｊ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がエタノールでエステル 化されたヒアルロン酸； からなる群から選ばれる請求項２７記載の化合物。 ２９．部分的に架橋したアルギン酸が低級脂肪族アルコールでエステル化したカ ルボキシ基部分を含み、所望によりアルカリ金属で塩化したカルボキシ基部分を 含んでいる、部分的にまたは完全に架橋したアルギン酸である請求項２５記載の 架橋形の多糖。 ３０．（ａ）カルボキシ基の１％程度が架橋し、９９％程度がナトリウムで塩化 されたアルギン酸； （ｂ）カルボキシ基の５％程度が架橋し、９５％程度がナトリウムで塩化された アルギン酸； （ｃ）カルボキシ基の１０％程度が架橋し、９０％程度がナトリウムで塩化され たアルギン酸； （ｄ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がナトリウムで塩化され たアルギン酸； （ｅ）カルボキシ基の５０％程度が架橋し、５０％程度がナトリウムで塩化され たアルギン酸； （ｆ）カルボキシ基の７５％程度が架橋し、２５％程度がナトリウムで塩化され たアルギン酸； （ｇ）カルボキシ基の１００％が架橋したアルギン酸；（ｈ）カルボキシ基の２ ５％程度が架橋し、２５％程度がエタノールでエステル化され、５０％程度がナ トリウムで塩化されたアルギン酸； （ｉ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、５０％程度がエタノールでエステル 化され、２５％程度がナトリウムで塩化されたアルギン酸；および （ｊ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がエタノールでエステル 化されたアルギン酸； からなる群から選ばれる請求項２９記載の化合物。 ３１．部分的に架橋したカルボキシメチルキチンが低級脂肪族アルコールでエス テル化したカルボキン基部分を含み、所望によりアルカリ金属で塩化したカルボ キシ基部分を含んでいる、部分的にまたは完全に架橋したカルボキシメチルキチ ンである請求項２６記載の化合物。 ３２．（ａ）カルボキシ基の１％程度が架橋し、９９％程度がナトリウムで塩化 されたカルボキシメチルキチン；（ｂ）カルボキシ基の５％程度が架橋し、９５ ％程度がナトリウムで塩化されたカルボキシメチルキチン；（ｃ）カルボキシ基 の１０％程度が架橋し、９０％程度がナトリウムで塩化されたカルボキシメチル キチン；（ｄ）カルボキシ基の１０％程度が架橋し、９０％程度がナトリウムで 塩化されたカルボキシメチルキチン；（ｅ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し 、７５％程度がナトリウムで塩化されたカルボキシメチルキチン；（ｆ）カルボ キシ基の５０％程度が架橋し、５０％程度がナトリウムで塩化されたカルボキシ メチルキチン；（ｇ）カルボキシ基の７５％程度が架橋し、２５％程度が塩化さ れたカルボキシメチルキチン；および （ｈ）カルボキシ基の１００％が架橋したカルボキシメチルキチン；からなる群 から選ばれる請求項３１記載の化合物。 ３３．（ａ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、２５％程度がエタノールでエ ステル化され、５０％程度が塩化されたカルボキシメチルキチン； （ｂ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、５０％程度がエタノールでエステル 化され、２５％程度がナトリウムで塩化されたカルボキシメチルキチン；および （ｃ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がエタノールでエステル 化されたカルボキシメチルキチン；からなる群から選ばれる請求項３１記載の化 合物。 ３４．（ａ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、２０％程度がコルチゾンでエ ステル化され、５５％程度がナトリウムで塩化されたヒアルロン酸； （ｂ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、２０％程度がコルチゾンでおよび２ ５％程度がエタノールでエステル化され、３０％程度がナトリウムで塩化された ヒアルロン酸；（ｃ）カルボキシ基の１０％程度が架橋し、２０％程度がコルチ ゾンでおよび７０％程度がエタノールでエステル化されたヒアルロン酸； （ｄ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がカルテオロロで塩化さ れたヒアルロン酸； （ｅ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程度がカナマイシンで塩化さ れたヒアルロン酸；および（ｆ）カルボキシ基の２５％程度が架橋し、７５％程 度がアミカシンで塩化されたヒアルロン酸； からなる群から選ばれる請求項２４記載の化合物。 ３５．活性成分として請求項２１記載の化合物を賦形剤とともに含有する医薬組 成物。 ３６．（１）薬理学的に活性な物質または薬理学的に活性な物質の混合物；およ び （２）請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋形の多糖からなる担体； を含有する医薬。 ３７．成分（１）が経口、非経口または局所用の物質である請求項３６記載の医 薬。 ３８．成分（２）の多糖がヒアルロン酸である請求項３７記載の医薬。 ３９．成分（１）が麻酔薬、鎮痛薬、抗炎症薬、血管収縮薬、抗生物質／抗細菌 薬、または抗ウイルス薬である請求項３６〜３８のいずれかに記載の医薬。 ４０．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖を含有する化粧品。 ４１．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖を含有する衛生または 外科用品。 ４２．酸形の多糖の架橋産物の糸または薄膜からなる請求項４１記載の衛生また は外科用品。 ４３．医薬の皮下移植のためのカプセルを構成する請求項４１記載の衛生または 外科用品。 ４４．皮下、筋肉内、または静脈内注射のためのマイクロカプセルを構成する請 求項４１記載の衛生または外科用品。 ４５．一定時間の後に除去するのに適した固体挿入物を構成する請求項４１記載 の衛生または外科用品。 ４６．損傷および外傷の薬物治療のためのスポンジ様物質を構成する請求項４１ 記載の衛生または外科用品。 ４７．多糖がヒアルロン酸である請求項４１〜４６のいずれかに記載の衛生また は外科用品。 ４８．多糖がアルギン酸である請求項４１〜４６のいずれかに記載の衛生または 外科用品。 ４９．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖の治療における使用。 ５０．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖の産業分野における使 用。 ５１．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖の、食品、化粧品、衛 生および外科分野における、紙、樹脂、染料および家庭用品の製造における使用 。 ５２．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋した多糖の人工皮膚としての皮膚 学における使用。 ５３．多糖がヒアルロン酸またはアルギン酸である請求項１〜３４のいずれかに 記載の架橋した産物の使用。 ５４．請求項１〜３４のいずれかに記載の架橋酸形の多糖の外科手術における縫 合糸としての使用。 ５５．（ａ）架橋酸形の多糖を第１の有機溶媒に溶解し；（ｂ）架橋酸形の多糖 の溶液をシートまたは糸の形状にし；（ｃ）第１の有機溶媒に可溶性である第２ の有機または水性溶媒で処理することによって溶媒を除去すること；からなる架 橋酸形の多糖の糸または薄膜の製造方法。 ５６．第１の有機溶媒としてジメチルスルホキシドを用いる請求項５５記載の方 法。 ５７．第１の有機溶媒としてへキサフルオロイソプロパノールを用い、加熱した 不活性ガスを流す処理によってそれを除去する請求項５５記載の方法。 ５８．（ａ）多糖中のカルボキシ基を活性化するための活性化試薬で酸形の多糖 を処理して中間体である活性化された多糖誘導体を得そして （ｂ）中間体の活性化多糖誘導体を加熱または照射にかけて架橋カルボン酸形の 多糖を得ること； からなる架橋カルボン酸形の多糖の製造方法。 ５９．酸形の多糖中のカルボキシ基の少なくとも一部が塩化されている請求項５ ８記載の方法。 ６０．少なくとも一部のカルボキシ基がアルカリ金属またはアルカリ土類金属で 、または４級アンモニウムで塩化されている請求項５９記載の方法。 ６１．活性化試薬による処理が触媒の存在下で行われる請求項５８記載の方法。 ６２．酸形多糖中のカルボキシ基の一部が一価または多価アルコールでエステル 化されている請求項５８記載の方法。 ６３．活性化試薬がカルボジイミド、エトキシアセチレン、ウッドワード試薬、 またはクロロアセトニトリルである請求項５８〜６２のいずれかに記載の方法。 ６４．活性化試薬が２−ハロゲン−Ｎ−アルキルピリジニゥム塩であり、ここで ハロゲンは塩素および臭素からなる群から選ばれ、アルキルは最大６個の炭素原 子を有するものである請求項５８〜６２のいずれかに記載の方法。 ６５．活性化試薬が２−クロロ−Ｎ−メチルピリジンの塩化物であり、３級アミ ン塩基の存在下で多糖のテトラブチルアンモニウム塩と反応させる請求項６４記 載の方法。 ６６．反応が非プロトン性の有機溶媒中で行われる請求項５８〜６５のいずれか に記載の方法。 ６７．非プロトン性溶媒に含まれる有機溶媒が最大炭素原子数６のアルキルを有 する低級脂肪族アルコールのジアルキルアミドまたはジアルキルスルホキシドで ある請求項６６記載の方法。 ６８．ジメチルスルホキシドが溶媒として用いられる請求項６７記載の方法。 ６９．反応が０°〜１５０°の範囲の温度で行われる請求項５８〜６８のいずれ かに記載の方法。 ７０．反応が室温で行われる請求項６９記載の方法。 ７１．架橋反応に続いて架橋酸形の多糖中のすべての残存遊離カルボキシ基の少 なくとも一部が塩化されるか、または一価もしくは多価アルコールでエステル化 される請求項５８〜７０のいずれかに記載の方法。