CZ304512B6 - Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití - Google Patents

Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití Download PDF

Info

Publication number
CZ304512B6
CZ304512B6 CZ2012-537A CZ2012537A CZ304512B6 CZ 304512 B6 CZ304512 B6 CZ 304512B6 CZ 2012537 A CZ2012537 A CZ 2012537A CZ 304512 B6 CZ304512 B6 CZ 304512B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
hyaluronic acid
aldehyde
water
hyaluronan
derivative
Prior art date
Application number
CZ2012-537A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2012537A3 (cs
Inventor
Radovan Buffa
Petra Šedová
Lucie Wolfová
Ivana Basarabová
Robert Pospíšil
Martina Hašová
Kristina Nešporová
Vladimír Velebný
Original Assignee
Contipro Biotech S.R.O.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Contipro Biotech S.R.O. filed Critical Contipro Biotech S.R.O.
Priority to CZ2012-537A priority Critical patent/CZ304512B6/cs
Priority to PL13762380T priority patent/PL2882779T3/pl
Priority to ES13762380.7T priority patent/ES2595755T3/es
Priority to HUE13762380A priority patent/HUE031496T2/en
Priority to PCT/CZ2013/000091 priority patent/WO2014023272A1/en
Priority to DK13762380.7T priority patent/DK2882779T3/en
Priority to BR112015002755-5A priority patent/BR112015002755B1/pt
Priority to US14/420,012 priority patent/US9522966B2/en
Priority to KR1020157005050A priority patent/KR102060026B1/ko
Priority to JP2015525734A priority patent/JP2015525820A/ja
Priority to RU2015107312A priority patent/RU2647859C2/ru
Priority to EP13762380.7A priority patent/EP2882779B1/en
Publication of CZ2012537A3 publication Critical patent/CZ2012537A3/cs
Publication of CZ304512B6 publication Critical patent/CZ304512B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
    • C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
    • C07K17/10—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier the carrier being a carbohydrate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/02—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques
    • C08J3/03—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques in aqueous media
    • C08J3/075—Macromolecular gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/28—Compounds containing heavy metals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G81/00—Macromolecular compounds obtained by interreacting polymers in the absence of monomers, e.g. block polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Řešení se týká přípravy a použití .alfa.,.beta.-nenasyceného aldehydu hyaluronanu s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 a aldehydickou skupinou v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu podle strukturního vzorce X nebo jeho hydratované formy podle strukturního vzorce Y. Způsob přípravy je založen na dehydrataci hyaluronanu s aldehydickou skupinou v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu. Byly popsány dvě metody, a to dehydratace v roztoku, anebo zahřátí v suchém stavu bez přítomnosti rozpouštědel, bází nebo jiných aditiv. Tento derivát umožňuje stabilizovat konjugáty hyaluronanu s aminosloučeninami pomocí násobné vazby ze strany aldehydu, takže na takto modifikovaný hyaluronan je možné efektivně imobilizovat ve fyziologických podmínkách prakticky jakoukoliv sloučeninu obsahující amino skupinu. V případě použití diaminu nebo sloučenin případně polymerů s obsahem tří nebo víc aminoskupin, je možné připravit síťované deriváty hyaluronanu. Popsané řešení dává významnou výhodu nejenom v oblasti nosičů biologicky aktivních látek, ale také ve tkáňovém inženýrství, kde je síťování s biologicky akceptovatelnými amino sloučeninami ve fyziologických podmínkách velmi žádané.

Description

Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
Oblast techniky
Vynález se týká přípravy a použití nového derivátu kyseliny hyaluronové s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 glukosaminové části polysacharidu a aldehydickou skupinou v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu podle vzorce X, nebo jeho hydratované formy s geminálním diolem v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu a zachovanou dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 glukosaminové části polysacharidu podle vzorce ¥.
kde R může být vodík, libovolný kation kovu nebo organický kation.
Tento nenasycený derivát aldehydu hyaluronanu je vhodný na vázání sloučenin obsahujících amino skupinu, a to ve fyziologických podmínkách. V případě, že vázaná sloučenina obsahuje dvě nebo víc amino skupin, lze připravit síťované materiály.
Dosavadní stav techniky
Kyselina hyaluronová je glykosaminoglykan složený ze dvou opakujících se jednotek β—(1,3)— D-glukuronové kyseliny a β-( 1,4j-/V-acetyl-D-glukosaminu.
Schéma 1 Kyselina hyaluronová
Vyznačuje se velkou molekulovou hmotností 5.104 až 5.106 g.mof1, která závisí na způsobu izolace a výchozím materiálu. Tento značně hydrofilní polysacharid je ve vodě rozpustný ve formě soli v celé šíři pH. Tvoří součást pojivových tkání, kůže, synoviální tekutiny kloubů, hraje významnou roli v řadě biologických procesů jako hydratace, organizace proteoglykanů, diferenciace buněk, proliferace a angiogenese. Protože je tento polymer tělu vlastní a tudíž biodegradovatelný, stává se vhodným substrátem pro tkáňové inženýrství, nebo jako nosič biologicky aktivních látek.
Modifikace kyseliny hyaluronové na HA-aldehyd
HA-aldehyd se nejčastěji připravuje selektivní oxidací nativního hyaluronanu. Oxidace polysacharidů je proces, ve kterém dochází ke změně oxidačního stupně funkčních skupin polysacharidu. V případě vzniku aldehydu, dochází ke zvýšení oxidačního stavu formálně o jeden stupeň. Často dochází také ke vzniku karboxylových kyselin (oxidace o dva stupně), které mohou být
-1 CZ 304512 B6 vedlejším produktem oxidace na aldehyd. V případě kyseliny hyaluronové je známo několik přístupů k přípravě hyaluronanu s navázanou aldehydickou skupinou (HA-aldehyd). Tyto deriváty hyaluronanu jsou jedním z nejvíce využívaných prekurzorů pro přípravu bio materiálů z chemicky modifikovaného hyaluronanu. Hlavním důvodem je, že aldehydické skupiny jsou stabilní ve fyziologických podmínkách, ale přitom ještě dost reaktivní pro rychlou a efektivní chemickou reakci například s aminy.
Hlavní způsoby přípravy HA-aldehydů popisuje následující schéma 2.
Schéma 2
Zdaleka nejčastějším způsobem zavedení aldehydické skupiny na hyaluronan je oxidace pomocí NaIO4 ve vodě (Schéma 2, struktura 1) (Spiro Robert a kol.: WO 99/01 143, Aeschlimann Daniel, Bulpitt Paul: WO 2007/01 49 441). Tato modifikace vede k otevření sacharidického cyklu za vzniku dvou aldehydických skupin.
Další metodou je oxidace primární hydroxylové skupiny v poloze 6-glukosaminové části polysacharidu na aldehyd (Schéma 2, struktura 2) pomocí systému NaClO/TEMPO ve vodě (Buffa R., Kettou S., Velebný V. a kol. WO 2011/069 475) nebo pomocí Dess-Martin periodátu v DMSO (Buffa R., Kettou S., Velebný V. a kol. WO 2011/069 474). Na rozdíl od struktury 1, aldehydická skupina v této poloze zachovává rigiditu polymemího řetězce.
Zajímavým způsobem zavedení aldehydické skupiny na hyaluronan je možnost navázat tuto skupinu přes linker (Schéma 2, struktura 3). Zde jsou možné různé přístupy, například zavedení vicinálního diolu na karboxylovou skupinu hyaluronanu přes amid a následná oxidace diolu s NaIO4, která dává aldehyd vázaný přes linker (Hilbom J. a kol: WO 2010/138 074). Tato strategie může mít výhodu v tom, že aldehydická skupina je stericky přístupnější pro případné další modifikace.
V další přihlášce vynálezu (Aeschlimann Daniel a Bulpitt Paul: WO 200701 49 441) byla zmíněná možnost připravit HA-aldehyd pomocí redukce karboxylové skupiny hyaluronanu s použitím činidla 9-BBN (9-borabicyclo[3,3,l]nonan). Výsledkem je hyaluronan s aldehydickou skupinou v poloze 6 glukuronové části polysacharidu (Schéma 2, struktura 4).
-2CZ 304512 B6
Kondenzace HA-aldehydu s N-nukleofily
Hlavní aplikační výhodou kondenzace HA-aldehydů s V-nukleofily (aminy) je, že může být uskutečněna ve fyziologických podmínkách. Obecně tuto reakci popisuje následující schéma 3:
Schéma 3
H2N—X
HA - CHO -► HA - CH = N - X
Hydrolytická stabilita vzniklého iminového -CH=N- spojení je do značné míry závislá na charakteru skupiny X. Pokud je X atom, kteiý nanese volný elektronový pár, například -CH2- skupina, vzniklá hydrolyticky velmi nestabilní imin HA-CH=N-CH2-. Pokud je X atom, který nese volný elektronový pár, vzniká hydrolyticky stabilnější konjugát (oxim HA-CH=N-O-, hydrazon HA-Ť3H=N-NH-, semikarbazon HA CH=N NH C() a podobně), kde je iminová vazba CH=N- stabilizována konjugací s volným elektronovým párem atomu X. Je známo mnoho patentů popisujících vázání aminů obecného vzorce NH2-X-, kde X je dusík nebo kyslík, na hyaluronan oxidovaný na aldehyd, a kde finální materiály vznikají při fyziologicky akceptovatelných podmínkách, takže jsou použitelné na širokou škálu biomedicínských aplikací. Z novějších lze zmínit patent (Bergman K., a kol: WO 2009/108 100), kde se obecně nárokují materiály na bázi kyseliny hyaluronové modifikované elektrofilními skupinami jako je aldehyd, maleinimid, akrylát, akrylamid, metakrylát, metakrylamid, vinylsulfon a aziridin. Jako síťovací nukleofily jsou zmíněny hydrazidy, semikarbazidy, thiosemikarbazidy, aminooxy, thiolové a β-aminothiolové skupiny. Podobná je další přihláška vynálezu (Hilbom J. a kol: WO 2010/138 074) popisující vázání N, S nebo současně N a S nukleofilů přímo na hyaluronan oxidovaný na aldehyd pomocí oxidace s jodistanem sodným.
Pokud je X alifatický uhlík (Schéma 3), je obecně známo, že vzniklé iminy nejsou hydrolyticky stabilní (vazba -C=N- nemá partnera na konjugaci) a vratně přecházejí na výchozí aldehyd a amin (Buffa R., Kettou S., Velebný V. a kol. WO 2011/069 474). Situaci popisuje Schéma 4.
Schéma 4
Další možností, jak stabilizovat zmíněné iminy, je rozšířit konjugaci z opačné strany, čili ze strany aldehydu, to znamená poskytnout vzniklému iminu konjugaci s násobnou -C=C- vazbou. Obecnou reakci popisuje Schéma 5.
Schéma 5
HA - C=C - CHO
H2N—X
-►
HA-C=C-CH = N-X
-3CZ 304512 B6
Tento přístup je v literatuře zmíněn jen velmi zřídka, a to například pro reakce aromatických aldehydů s aminy za vzniku tzv. Schiffových bází, kde je stabilita podpořena konjugací s aromatickým cyklem Ar-CHO + H2N-R —> Ar-CH=N-R. V případě polysacharidů nebo polymerů obecně však nebyl nalezen analogický příklad. U této modifikace polymerů by bylo nutné zavést na aldehyd aromatickou skupinu nebo obecně nějaké konjugované násobné vazby přes linker, což je technologická komplikace a není zaručena biokompatibilita materiálu. Tento způsob však otevírá i další potenciální komplikaci. V případě přítomnosti aromatického systému nebo více konjugovaných násobných vazeb už může materiál absorbovat ve viditelné oblasti, takže látka bude barevná, což obecně není žádoucí (možná fotosenzitivita, komplikace v analytice při in vitro studiích).
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je kyselina hyaluronová strukturního vzorce X nebo Y, která má modifikované některé glukosaminové cykly polysacharidů s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5, a současně je přítomna aldehydická skupina, respektive geminální diol (struktura Y) v poloze 6 glukosaminové části polysacharidů
kde R může být vodík, libovolný kation kovu nebo organický kation. Neomezujícím příkladem R je například kation sodíku, draslíku, vápníku nebo organický kation typu tetrabutylamonium nebo protonizovaný triethylamin. Tento derivát má s výhodou molekulovou hmotnost v rozsahu lxlO3 až 5x105 g.moT1.
Toto řešení umožňuje stabilizovat konjugáty hyaluronanu s aminoslouěeninami pomocí násobné vazby ze strany aldehydu, takže na takto modifikovaný hyaluronan je možné vázat ve fyziologických podmínkách prakticky jakoukoliv sloučeninu obsahující amino skupinu.
Toto je významný rozdíl oproti nasyceným aldehydům hyaluronanu, které dokážou ve fyziologických podmínkách pevně vázat sloučeniny obecného vzorce H2N-X-, kde X je atom nesoucí volný elektronový pár, obyčejně kyslík nebo dusík. Jelikož jen málo přírodních látek obsahuje seskupení H2N-X-, dává řešení popsané v tomto vynálezu velkou výhodu nejenom jako potenciální nosič biologicky aktivních látek, ale taky v tkáňovém inženýrství, kde se velmi často používají deriváty hyaluronanu síťované ve fyziologických podmínkách s biologicky akceptovatelnými amino sloučeninami.
Dále se vynález týká způsobu přípravy derivátu strukturního vzorce X nebo Y, kde se nejprve oxiduje kyselina hyaluronová na HA-aldehyd v poloze 6 glukosaminové části (dále v textu ozna-4CZ 304512 B6 čováno jako Krok 1), a potom se HA-aldehyd dehydratuje buď v roztoku, nebo jednoduchým zahřátím bez přítomnosti rozpouštědel, bází nebo jiných aditiv (dále v textu označováno jako Krok 2). Tyto dva kroky jsou detailněji rozebrány níže:
Krok 1:
Selektivní oxidace primární hydroxylové skupiny kyseliny hyaluronové v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu na aldehyd. Reakce lze provést například použitím oxidačního systému 2,2,6,6-tetramethyl-l-piperidinyloxyl radikálu R‘-TEMPO / NaClO ve vodě, kde R1 je vodík nebo skupina V-acetyl:
oxidace
H2O
Tento krok probíhá s výhodou ve vodě při teplotě -5 až 10 °C, molámí množství NaClO je v rozmezí 0,05 až 0,7 eq. a molámí množství R'-TEMPO je v rozmezí 0,005 až 0,2 eq. vzhledem k dimeru kyseliny hyaluronové. Výchozí kyselina hyaluronová může mít molekulovou hmotnost v rozsahu 1 xl04 až óxlO”6 g.moT1.
Krok 2:
možnost 1: Dehydratace HA-aldehydu v polárním aprotickém rozpouštědle a vodě při teplotě 30 až 80 °C, s výhodou při 50 až 60 °C, nebo možnost 2: Zahřátí čistého nasyceného HA-aldehydu v suchém stavu na teplotu 50 až 100 °C, s výhodou na 70 až 80 °C.
První možnost je dehydratace ve vodně-organickém prostředí, kde organické rozpouštědlo je mísitelné s vodou a objemový poměr rozpouštědlo/voda je v rozsahu 3/1 až 1/2. S výhodou lze v tomto kroku použít báze s omezenými nukleofilními vlastnostmi, například organické báze, např. triethylamin nebo V-diisopropyl-V-ethylamin, nebo anorganické báze, např. Ca(OH)2. Množství báze v reakci je 0,01-20 ekvivalentů přepočteno na dimer hyaluronanu, s výhodou 5 až 10 ekvivalentů. Báze může podporovat eliminaci tím, že odštěpí proton v alfa poloze aldehydu (poloha 5 cyklu) a vzniklý karbanion eliminuje hydroxy skupinu v poloze 4 za vzniku násobné vazby. Jako organická rozpouštědla je možné použít aprotická polární rozpouštědla mísitelná s vodou, s výhodou DMSO nebo sulfolan. Reakce s výhodou probíhá 12 až 150 hodin.
Druhá, technologicky velmi atraktivní možnost, jak uskutečnit krok 2, je zahřívat výchozí nasycený aldehyd v suchém stavu bez přítomnosti jakýchkoliv aditiv na vyšší teplotu, s výhodou na teplotu 70 až 80 °C po dobu 12 hodin až 10 dnů, s výhodou 4 až 5 dnů.
Vynález se dále týká použití nenasyceného HA-aldehydu pro vázání aminů. Konkrétněji se vynález týká způsobu modifikace derivátu kyseliny hyaluronové, podle vzorce X nebo Y, kde derivát reaguje s aminem obecného vzorce H2N-R2, kde R2 je alkylový, aromatický, heteroaromatický,
-5CZ 304512 B6 lineární nebo rozvětvený řetězec Ci - C30, volitelně s obsahem N, S nebo O atomů. Uvedeným aminem může být například aminokyselina, peptid nebo polymer, který obsahuje volnou amino skupinu, přičemž takovým polymerem může být například deacetylovaná kyselina hyaluronová, kyselina hyaluronová s navázanou amino skupinou přes linker, nebo želatina, nebo jiný biologicky akceptovatelný polymer. Množství aminu, aminokyseliny, peptidu nebo volných amino skupin polymeruje s výhodou v rozmezí 0,05 až 2 ekvivalenty vzhledem k dimeru hyaluronanu.
Na přípravu těchto konjugátů nejsou nutné žádné specifické podmínky. Reakce může probíhat ve vodě, ve fosfátovém pufřu nebo v systému voda-organické rozpouštědlo při teplotě v rozmezí 20 až 60 °C po dobu 10 minut až 150 h. Organické rozpouštědlo může být vybráno ze skupiny zahrnující s vodou mísitelné alkoholy, zejména isopropanol nebo etanol, a s vodou mísitelná polární aprotická rozpouštědla, zejména dimethylsulfoxid, přičemž obsah vody ve směsi je minimálně 50 % objemových. Reakce běží hladce ve fyziologických podmínkách, například ve fosfátovém pufřu při pH = 7,4 a teplotě 37 °C, se širokou škálou různých aminů, počínaje jednoduchými aminokyselinami a složitými peptidy konče. V těchto podmínkách je také možné bez problémů vázat hydraziny, hydroxylaminy, hydrazidy, semikarbazidy nebo tiosemikarbazidy. Pokud jsou vázány sloučeniny obsahující dvě nebo více aminoskupin, je možné připravit nerozpustné síťované deriváty se širokou škálou viskoelastických vlastností.
o
COONa //
ch3co
Vyšší stabilita vazby aminu a nenasyceného HA-aldehydu v porovnání s jeho nasyceným analogem umožňuje připravit stabilnější a lépe prosíťované nerozpustné biomateriály založené na hyaluronanu. Podrobněji je toto tvrzení popsáno v části Příklady provedení vynálezu, příklad 21, kde se porovnává nasycený a nenasycený derivát HA-aldehydu s podobným stupněm substituce a molekulovou hmotností z hlediska finálních Teologických vlastností po síťování s deacetylovaným hyaluronanem.
Oproti analogům zmíněným v části „Dosavadní stav techniky“ je navržený způsob modifikace výhodnější v tom, že umožňuje pevněji vázat na kyselinu hyaluronovou ve fyziologických podmínkách podstatně širší škálu sloučenin obsahujících aminoskupinu. Tato skutečnost je velkou výhodou pro aplikaci hlavně v tkáňovém inženýrství, kde lze použít mnoho biokompatibilních síťovacích amino-linkerů ve fyziologických podmínkách i v přítomnosti živých buněk. Modifikované deriváty lze použít například pro přípravu síťovaných materiálů a hydrogelů, pro přípravu materiálů pro tkáňové inženýrství nebo pro biomedicínské aplikace. Na síťování lze použít i polysacharidy nebo obecně polymery, které obsahují amino skupiny. Také v oblasti nosičů biologicky aktivních látek lze popsaný vynález s výhodou použít. Navržený způsob umožňuje imobilizovat na hyaluronan širší škálu biologicky aktivních aminů (např. peptidů), které pak mohou být přirozeně uvolněny v nativní (aktivní) podobě. Bylo zjištěno, že při nižším pH je vazba amin nenasycený HA-aldehyd hydrolyticky méně stabilní, takže lze připravené konjugáty využít také jako pH responsivní biomateriály (nosiče, gely ...). Bylo prokázáno, že samotný nenasycený HAaldehyd není cytotoxický, takže jeho konjugáty jsou vhodným kandidátem pro různé biomedicínské aplikace. Ačkoli byl odborník v oboru mohl očekávat, že konjugace ze strany aldehydu s C=C- násobnou vazbou povede ke zvýšené toxicitě, protože například akrolein CH2=CH-CHO je silně toxická a dráždivá látka, není tomu tak. Derivát podle vynálezu má dvojnou vazbu přímo
-6CZ 304512 B6 ve skeletu polymeru (bez linkeru) a výsledný substrát nevykázal toxické vlastnosti. Deriváty podle vzorce X nebo Y lze použít pro přípravu materiálů s antirakovinovým účinkem, jako nosičů biologicky aktivních látek v kosmetice a farmacii nebo jako nosičů biologicky aktivních látek s kontrolou uvolňování pomocí změny hodnoty pH.
Realizace řešení popsaného v tomto vynálezu není technologicky komplikovaná a nevyžaduje použití drahých chemikálií, rozpouštědel nebo izolačních postupů.
Přehled obrázku na výkrese
Obrázek 1 znázorňuje elastický materiál připravený podle příkladu 20.
Příklady provedení vynálezu
DS = stupeň substituce = 100 % * (molámí množství navázaného substituentu nebo modifikovaného dimeru) / (molámí množství všech dimerů polysacharidů)
Zde používaný výraz ekvivalent (eq) se vztahuje na dimer kyseliny hyaluronové, není-li uvedeno jinak. Procenta se uvádějí jako hmotnostní procenta, pokud není uvedeno jinak.
Molekulová hmotnost výchozí kyseliny hyaluronové (zdroj: CPN spol. sr.o., Dolní Dobrouč, (ČR) je hmotnostně střední a byla stanovena metodou SEC-MALLS.
Příklad 1 Příprava HA-aldehydu oxidovaného v poloze 6-glukosaminové části.
Oxidace kyseliny hyaluronové
Do jednoprocentního vodného roztoku hyaluronanu (1 g, 2xl05 g.mol1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,01 eq) a NaHCO3 (20 eq.), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,5 eq) pod dusíkem. Směs se míchala 12 h při teplotě -5 °C, pak se přidal 0,1 g etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2 % a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCO3) 3-krát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě 7-krát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 10 % (stanoveno z NMR) *H NMR (D2O) δ 5,26 (s, IH, polymer-CH(OH)2)
HSQC (D2O) cross signál 5,26 ppm ('H) - 90ppm(13C) (polymer-C7/(OH)2)
Příklad 2 Dehydratace HA-aldehydu
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 6,7 ml DMSO a báze DIPEA (5 eq). Směs se míchala 72 h při teplotě 40 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 6 % (stanoveno z NMR), Mw = 1 lxl 04 g.mol“1 (stanoveno SEC MALLS)
Ή NMR (D2O) δ 9,24 (s, IH, -CH=O), 6,32 (m, IH, -C//=C-CH=O)
UV-Vis (D2O) 252 nm, π- π* přechod α,β-nenasycený aldehyd
-7CZ 304512 B6
Příklad 3 Dehydratace HA-aldehydu
Do čtyřprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 7,5 ml DMSO a báze DIPEA (5 eq). Směs se míchala 72 h při teplotě 50 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 4 Dehydratace HA-aldehydu
Do dvouprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 2,5 ml DMSO a báze DIPEA (5 eq). Směs se míchala 72 h při teplotě 50 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 5 Dehydratace HA-aldehydu
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 6,7 ml sulfolanu. Směs se míchala 72 h při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 1 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 6 Dehydratace HA-aldehydu
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 6,7 ml sulfolanu a báze Et3N (5 eq). Směs se míchala 72 h při teplotě 50 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 7 Dehydratace HA-aldehydu
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 6,7 ml sulfolanu a báze DIPEA (2 eq). Směs se míchala 12 h při teplotě 80 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 8 Dehydratace HA-aldehydu
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) ve vodě se přidalo 6,7 ml sulfolanu a báze Ca(OH)2 (1 eq). Směs se míchala 150 h při teplotě 30 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 9 Dehydratace HA-aldehydu
HA-aldehyd (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) se zahříval v tuhém stavu 5 dnů při 80 °C. Pak byl analyzován pomocí NMR.
DS 3 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
-8CZ 304512 B6
PříkladlO Dehydratace HA-aldehydu
HA-aldehyd (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) se zahříval 12 h tuhém stavu při 10 °C. Pak byl analyzován pomocí NMR.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 11 Dehydratace HA-aldehydu
HA-aldehyd (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 1) se zahříval v tuhém stavu 10 dnů při 50 °C. Pak byl analyzován pomocí NMR.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 2)
Příklad 12 Vázání aminů na α,β-nenasycený HA-aldehyd
Do jednoprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,lM vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal n-butylamin (2 eq). Směs se míchala 5 h při teplotě 37 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR) *H NMR (D2O) δ 7,74 (s, 1H, -CH=N-Bu), 5,68 (m, 1H, -C//=C-CH=N-Bu)
HSQC (D2O) cross signál 7,74 ppm (' H) - 158 ppm (13C) -CH=N-Bu cross signál 5,68 ppm (*H) - 112 ppm (13C) -C7f=C-CH=N-Bu
Příklad 13 Vázání aminů na α,β-nenasycený HA-aldehyd
Do jednoprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,1 M vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal n-butylamin (0,05 eq). Směs se míchala 150 h při teplotě 20 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 2 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 12)
Příklad 14 Vázání aminů na α,β-nenasycený HA—aldehyd
Do jednoprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6%, příklad 2) ve vodě se přidal n-butylamin (0,3 eq). Směs se míchala 10 min při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR, podrobně příklad 12)
Příklad 15 Vázání lysinu na α,β-nenasycený HA-aldehyd
Do jednoprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6%, příklad 2) v 0,1 M vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal lysin (0,3 eq). Směs se míchala 24 h při teplotě 20 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR)
Ή NMR (D2O) δ 7,76 (s, 1H, -Ctf=N-lysin), 5,65 (m, 1H, -C7/=C-CH=N-lysin)
-9CZ 304512 B6
Příklad 16 Vázání pentapeptidu pal-KTTKS (palmytoyl-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser) na α,βnenasycený HA-aldehyd
Do jednoprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,1 M vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidalo 5 ml IPA a pak roztok substituovaného pentapeptidu pal-KTTKS (0,1 eq) v 5 ml isopropylalkoholu. Směs se míchala 72 h při teplotě 20 °C. Výsledný roztok byl odpařen na rotační vakuové odparce na třetinu objemu a pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 1 % (stanoveno z NMR) 'HNMR (D2O) δ 7,75 (s, IH, -Ctf=N-peptid), 5,66 (m, IH, -C//=C-CH=N-peptid)
Příklad 17 Síťování α,β-nenasyceného HA-aldehydu lysinem
Do pětiprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,1 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,lM vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal jednoprocentní roztok lysinu ve vodě (0,1 eq). Směs se míchala 24 h při teplotě 20 °C. Byl pozorován nárůst viskozity výsledného roztoku.
Příklad 18 Síťování α,β-nenasyceného HA-aldehydu dihydrazidadipatem
Do pětiprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,015 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,1 M vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal jednoprocentní roztok dihydrazidadipátu ve vodě (0,1 eq). Směs se míchala 24 h při teplotě 20 °C. Byl pozorován nárůst viskozity výsledného roztoku.
Příklad 19 Příprava deacetylovaného hyaluronanu
Do tříprocentního roztoku hyaluronanu (lg, 83xl04 g-mol1) v hydrazin hydrátu s obsahem 30 g hydrazin sulfátu se přidalo 65 ml sulfolanu a směs se zahřívala 48 hodin při 70 °C. Výsledný roztok je zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCCE) 3-krát 5 litrů (lx denně) a oproti destilované vodě 7-krát 5 litrů (2x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 32 % (stanoveno z NMR), Mw 37x103 g.moT1 (Stanoveno SEC-MALLS) 'H NMR (1% NaOD v D2O) δ 2,75 (s, IH, -C7T-NH2)
Příklad 20 Síťování α,β-nenasyceného HA-aldehydu pomocí deacetylovaného hyaluronanu
Do tříprocentního roztoku nenasyceného HA-aldehydu (0,025 g, stupeň substituce DS=6 %, příklad 2) v 0,1 M vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 se přidal tříprocentní roztok deacetylovaného hyaluronanu (0,015 g, příklad 19) νΟ,ΙΜ vodném fosfátovém pufru při pH 7,4 (0,1 eq). Směs se míchala 24 h při teplotě 20 °C. Byl pozorován výrazný nárůst viskozity výsledného roztoku.
Příklad 21 Porovnání mechanických a viskoelastických vlastností hydrogelů na bázi síťovaného α,β-nenasyceného HA-aldehydu a síťovaného nasyceného HA-aldehydu.
- síťování s deacetylovaným hyaluronanem
-10CZ 304512 B6
Materiál 1: Nenasycený HA-aldehyd (0,06 g, DS = 6 %, Mw =11 xlO4 g.mol \ příklad 2) 3% roztok v PBS pH 7,4 + deacetylovaný hyaluronan (0,02 g, příklad 19) 3% roztok v PBS pH 7,4.
Materiál 2: Nasycený HA-aldehyd (0,06 g, DS = 7 %, Mw = lxlO5 g.mol-1) 3% roztok v PBS pH 7,4 + deacetylovaný hyaluronan (0,02 g, příklad 19) 3% roztok v PBS pH 7,4.
Z výše popsaných materiálů byly připraveny vzorky hydrogelů, a to smícháním a důkladnou homogenizací jejich obou složek (3% roztoku nenasyceného HA-aldehydu v PBS / 3% roztok nasyceného HA-aldehydu a 3% roztoku deacetylovaného hyaluronanu v PBS). Vzorky byly vždy ponechány po dobu 240 minut dozrát při laboratorní teplotě, kdy poté dochází ke vzniku homogenního transparentního gelu. Všechny vzorky měly stejné rozměry a byly proměřovány za konstantních laboratorních podmínek (teplota, tlak, vlhkost).
U vzorků byly stanovovány jejich mechanické vlastnosti. Konkrétně se jednalo o Youngův modul pružnosti v kompresi udávající tvrdost / pružnost materiálu, houževnatost udávající pevnost vzorku a jakou energii je materiál schopný absorbovat, aniž by došlo kjeho trvalé deformaci. Dále mezi pevnosti v kompresi udávající, jaké maximální zatížení je materiál schopný absorbovat, aniž by došlo kjeho trvalé deformaci, a v rámci viskoelastických vlastností modul pružnosti ve smyku a ztrátový úhel.
Materiál j Youngův modul i Mez pevnosti 1 Houževnatost Modul j Ztrátový úhel
číslo pružnosti v kompresi (kPa) (kPa) j (J/m3) pružnosti ) δ(°) ve smyku ! ! (Pa)
l 0,844 I 382,06 | 29690 160 2,36
2 0,482 j ............309,29 1........ 19488 “55“ 10,3
Dosažené výsledky uvedené v rámci tohoto příkladu ukazují výhodnost použití nenasyceného HA-aldehydu oproti nasycenému HA-aldehydu z pohledu přípravy tužších a houževnatějších (lépe prosíťovaných) materiálů vhodných pro tkáňové inženýrství.

Claims (15)

PATENTOVÉ NÁROKY
1. Derivát kyseliny hyaluronové, modifikovaný dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 glukosaminové části polysacharidu a současně oxidovaný na aldehyd v poloze 6 glukosaminové části polysacharidu, podle strukturního vzorce X, nebo jeho hydrátovaná forma podle strukturního vzorce Y /
CH3CO kde R je vodík, libovolný kation kovu nebo organický kation vybraný ze skupiny obsahující organický kation typu tetrabutylamonium nebo protonizovaný triethylamin.
2. Derivát kyseliny hyaluronové podle nároku 1, vyznačující se tím, že má molekulovou hmotnost v rozmezí 1 až 5 xlO5 g.mol“1 a Rje kation sodíku, draslíku, vápníku nebo organický kation typu tetrabutylamonium nebo protonizovaný triethylamin.
3. Způsob přípravy derivátu kyseliny hyaluronové definovaného v nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová v prvém kroku oxiduje v poloze 6 glukosaminové části s výhodou pomocí systému R’-TEMPO/NaClO, kde R1 je vodík nebo skupina Nacetyl, ve vodě při teplotě -5 až 10 °C, molámí množství NaClO je v rozmezí 0,05 až 0,7 ekvivalentu a molámí množství R]-TEMPO je v rozmezí 0,005 až 0,2 ekvivalentu vzhledem k dimeru kyseliny hyaluronové, načež se oxidovaná kyselina hyaluronová ve druhém kroku dehydratuje v polohách 4 a 5 glukosaminové části ve směsi voda/polámí aprotické rozpouštědlo při teplotě 30 až 80 °C, s výhodou při teplotě 50 až 60 °C.
4. Způsob přípravy podle nároku 3, vyznačující se tím, že směs dále obsahuje bázi v množství 0,01 až 20 ekvivalentů, s výhodou 5 až 10 ekvivalentů, vzhledem k dimeru kyseliny hyaluronové, přičemž báze je vybrána ze skupiny zahrnující organické báze, například triethyl amin nebo diisopropylethylamin, nebo anorganické báze, například Ca(OH)2.
5. Způsob přípravy podle nároku 3, vyznačující se tím, že aprotické rozpouštědlo je mísitelné s vodou a zahrnuje například DMSO nebo sulfolan, a objemový poměr rozpouštědlo/voda je v rozsahu 3/1 až 1/2.
6. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 3až5, vyznačující se tím, že reakce probíhá po dobu 12 až 150 hodin.
7. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 3až6, vyznačující se tím, že oxidovaná kyselina hyaluronová ve druhém kroku dehydratuje v pevné fázi bez použití rozpouštědel nebo jiných aditiv zahřátím na teplotu 50 až 100 °C, s výhodou 70 až 80 °C po dobu 12 hodin až 10 dnů, s výhodou 4 až 5 dnů.
8. Způsob přípravy podle kteréhokoliv z nároků 3 až 7, vyznačující se tím, že výchozí kyselina hyaluronová má molekulovou hmotnost v rozsahu lx 104 g.mol“1 až 5x 106 g.mol'1.
9. Způsob modifikace derivátu kyseliny hyaluronové definovaného v nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že derivát reaguje s aminem obecného vzorce H2N-R2, kde R2 je alkylový, aromatický, heteroaromatický, lineární nebo rozvětvený řetězec Ci až C30, volitelně s obsahem N, S nebo O atomů.
10. Způsob modifikace derivátu kyseliny hyaluronové podle nároku 9, vyznačující se tím, že derivát reaguje s aminokyselinou nebo s peptidem.
11. Způsob modifikace derivátu kyseliny hyaluronové podle nároku 9, vyznačující se tím, že derivát reaguje s polymerem, který obsahuje volnou amino skupinu.
-11 CZ 304512 B6
12. Způsob modifikace derivátu kyseliny hyaluronové podle nároku 11, vyznačující se tím, že polymerem je například deacetylovaná kyselina hyaluronová, kyselina hyaluronová s navázanou amino skupinou přes linker, nebo želatina, nebo jiný biologicky akceptovatelný polymer.
13. Způsob modifikace podle kteréhokoli z nároků 9 až 12, vyznačující se tím, že množství aminu, aminokyseliny, peptidu nebo volných amino skupin polymeru je v rozmezí 0,05 až 2 ekvivalentů vzhledem k dimeru kyseliny hyaluronové.
- 12CZ 304512 B6
14. Způsob modifikace podle kteréhokoli z nároků 9 až 13, vyznačující se tím, že reakce s aminem, aminokyselinou, peptidem nebo polymerem obsahujícím volnou amino skupinu probíhá ve vodě, ve fosfátovém pufru nebo v systému voda-organické rozpouštědlo při teplotě v rozmezí 20 až 60 °C po dobu 10 minut až 150 h.
15. Způsob modifikace podle nároku 14, vyznačující se tím, že organické rozpouštědlo je vybráno ze skupiny zahrnující s vodou mísitelné alkoholy, zejména isopropanol nebo ethanol, a s vodou mísitelná polární aprotická rozpouštědla, zejména dimethylsulfoxid, přičemž obsah vody ve směsi je minimálně 50 % objemových.
16. Použití derivátů definovaných v kterémkoli z nároků 1 a 2 jako nosičů biologicky aktivních látek v kosmetice a farmacii nebo jako nosičů biologicky aktivních látek s kontrolou uvolňování pomocí změny hodnoty pH.
15 17. Použití derivátů připravených způsobem definovaným v kterémkoli z nároků 9 až 15 pro přípravu síťovaných materiálů a hydrogelů, pro přípravu materiálů pro tkáňové inženýrství nebo pro biomedicínské aplikace.
CZ2012-537A 2012-08-08 2012-08-08 Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití CZ304512B6 (cs)

Priority Applications (12)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2012-537A CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2012-08-08 Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
PL13762380T PL2882779T3 (pl) 2012-08-08 2013-08-05 Pochodna kwasu hialuronowego, sposób jej wytwarzania, sposób jej modyfikacji i jej zastosowanie
ES13762380.7T ES2595755T3 (es) 2012-08-08 2013-08-05 Derivado de ácido hialurónico, método de preparación del mismo, método de modificación del mismo y utilización del mismo
HUE13762380A HUE031496T2 (en) 2012-08-08 2013-08-05 Hyaluronic acid derivative, a process for its preparation, a method for its modification and its use
PCT/CZ2013/000091 WO2014023272A1 (en) 2012-08-08 2013-08-05 Hyaluronic acid derivative, method of preparation thereof, method of modification thereof and use thereof
DK13762380.7T DK2882779T3 (en) 2012-08-08 2013-08-05 Hyaluronic Acid Derivative, Process for Preparation thereof, Process for Modification and Use thereof
BR112015002755-5A BR112015002755B1 (pt) 2012-08-08 2013-08-05 Derivado de ácido hialurônico, método de preparação de derivado de ácido hialurônico e uso de derivados
US14/420,012 US9522966B2 (en) 2012-08-08 2013-08-05 Hyaluronic acid derivative, method of preparation thereof, method of modification thereof and use thereof
KR1020157005050A KR102060026B1 (ko) 2012-08-08 2013-08-05 히알루론산 유도체, 이의 제조 방법, 이의 변형 방법, 및 이의 용도
JP2015525734A JP2015525820A (ja) 2012-08-08 2013-08-05 ヒアルロン酸誘導体，その調製方法，修飾方法及び使用
RU2015107312A RU2647859C2 (ru) 2012-08-08 2013-08-05 Производное гиалуроновой кислоты, способ его получения, способ его модификации и его применение
EP13762380.7A EP2882779B1 (en) 2012-08-08 2013-08-05 Hyaluronic acid derivative, method of preparation thereof, method of modification thereof and use thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2012-537A CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2012-08-08 Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2012537A3 CZ2012537A3 (cs) 2014-03-19
CZ304512B6 true CZ304512B6 (cs) 2014-06-11

Family

ID=49170512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2012-537A CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2012-08-08 Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití

Country Status (12)

Country Link
US (1) US9522966B2 (cs)
EP (1) EP2882779B1 (cs)
JP (1) JP2015525820A (cs)
KR (1) KR102060026B1 (cs)
BR (1) BR112015002755B1 (cs)
CZ (1) CZ304512B6 (cs)
DK (1) DK2882779T3 (cs)
ES (1) ES2595755T3 (cs)
HU (1) HUE031496T2 (cs)
PL (1) PL2882779T3 (cs)
RU (1) RU2647859C2 (cs)
WO (1) WO2014023272A1 (cs)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ305153B6 (cs) * 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
WO2016202314A1 (en) 2015-06-15 2016-12-22 Contipro A.S. Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups
WO2016206661A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Contipro A.S. Derivatives of sulfated polysaccharides, method of preparation, modification and use thereof
US10617711B2 (en) 2014-06-30 2020-04-14 Contipro A.S. Antitumor composition based on hyaluronic acid and inorganic nanoparticles, method of preparation thereof and use thereof
US10618984B2 (en) 2016-06-27 2020-04-14 Contipro A.S. Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof
US10689464B2 (en) 2015-03-09 2020-06-23 Contipro A.S. Self-supporting, biodegradable film based on hydrophobized hyaluronic acid, method of preparation and use thereof

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ2009836A3 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ302503B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace
CZ303879B6 (cs) 2012-02-28 2013-06-05 Contipro Biotech S.R.O. Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití
CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
CZ2012842A3 (cs) 2012-11-27 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití
PL3397651T3 (pl) * 2015-12-29 2021-02-08 Galderma S.A. Węglowodanowy środek sieciujący
AR111190A1 (es) 2017-03-22 2019-06-12 Genentech Inc Composiciones en hidrogel de prodrogas entrecruzadas de ácido hialurónico y métodos relacionados
DE102018124022A1 (de) 2018-09-28 2020-04-02 Rheinisch-Westfälische Technische Hochschule (Rwth) Aachen Hyaluronsäurestabilisator
KR102225971B1 (ko) * 2020-05-19 2021-03-10 주식회사 차메디텍 펩타이드 가교제를 이용한 히알루론산 기반의 하이드로겔 및 이의 제조 방법
CN112030566B (zh) * 2020-09-30 2022-10-21 山东华熙海御生物医药有限公司 一种依克多因缓释微囊及其制备方法和应用
CN112851966A (zh) * 2020-12-31 2021-05-28 深圳市光韵达增材制造研究院 双改性化合物及其制备方法、生物胶水及其制备方法
CN113087819A (zh) * 2021-03-12 2021-07-09 深圳市光韵达增材制造研究院 一种双改性化合物及其制备方法和应用
CN115636884B (zh) * 2022-12-23 2023-03-28 北京格林意锐医药科技有限责任公司 一种透明质酸钠衍生物制备方法及交联透明质酸钠和用途
CN117304368B (zh) * 2023-11-29 2024-03-01 杭州湃肽生化科技有限公司 一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999057158A1 (en) * 1998-05-07 1999-11-11 Nederlandse Organisatie Voor Toegepast Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno Process for selective oxidation of primary alcohols
US20070149441A1 (en) * 1998-09-18 2007-06-28 Orthogene Llc Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same
CZ302504B6 (cs) * 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ302503B6 (cs) * 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace

Family Cites Families (117)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3720662A (en) 1971-09-13 1973-03-13 Nat Starch Chem Corp Preparation of starch esters
US3728223A (en) 1971-10-08 1973-04-17 Amano Pharma Co Ltd Production of hyaluronidase from a strain of streptomyces
CH628088A5 (en) 1975-09-17 1982-02-15 Dresden Arzneimittel Process for obtaining streptococcal metabolic products
US4205025A (en) 1975-12-22 1980-05-27 Champion International Corporation Synthetic polymeric fibrids, fibrid products and process for their production
JPS6033474B2 (ja) 1978-05-11 1985-08-02 藤沢薬品工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｂｍｐ−８２３１およびその製造法
US4716224A (en) 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
US4713448A (en) 1985-03-12 1987-12-15 Biomatrix, Inc. Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues
US4851521A (en) 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
GB8519416D0 (en) 1985-08-01 1985-09-04 Unilever Plc Oligosaccharides
JPS62104579A (ja) 1985-10-30 1987-05-15 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd ヒアルロニダ−ゼの製造法
JPH0751064B2 (ja) 1986-08-13 1995-06-05 生化学工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｓｄ−６７８およびその製造法
IT1219587B (it) 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
JPH0214019A (ja) 1988-06-30 1990-01-18 Tonen Corp 繊維状成形物及びその製造方法
US5824335A (en) 1991-12-18 1998-10-20 Dorigatti; Franco Non-woven fabric material comprising auto-crosslinked hyaluronic acid derivatives
IT1254704B (it) 1991-12-18 1995-10-09 Mini Ricerca Scient Tecnolog Tessuto non tessuto essenzialmente costituito da derivati dell'acido ialuronico
JP2855307B2 (ja) 1992-02-05 1999-02-10 生化学工業株式会社 光反応性グリコサミノグリカン、架橋グリコサミノグリカン及びそれらの製造方法
FR2689131B1 (fr) 1992-03-30 1994-05-20 Oreal Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire.
JPH0625306A (ja) 1992-04-21 1994-02-01 Shiseido Co Ltd 溶媒不溶化ヒアルロン酸及びその製造方法
IT1263316B (it) 1993-02-12 1996-08-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Tessuto non tessuto multistrato in cui uno degli strati e' costituito essenzialmente da esteri dell'acido ialuronico
NL9700003A (nl) 1993-09-28 1997-07-01 House Foods Corp Werkwijze voor het inoculeren van Fistulina hepatica.
US5616568A (en) 1993-11-30 1997-04-01 The Research Foundation Of State University Of New York Functionalized derivatives of hyaluronic acid
AU697739B2 (en) 1994-03-14 1998-10-15 Seikagaku Corporation Material to be worn on the eyeball
US5455349A (en) 1994-05-13 1995-10-03 Polaroid Corporation Vinylbenzyl thymine monomers
US6025444A (en) 1994-11-17 2000-02-15 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Cinnamic acid derivative
US5690961A (en) 1994-12-22 1997-11-25 Hercules Incorporated Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses
ATE220691T1 (de) 1995-03-07 2002-08-15 Novartis Erfind Verwalt Gmbh Fotochemisch vernetzte polysaccharidderivate zur chromatographischen trennung von enantiomeren
IL123500A (en) 1995-08-29 2003-06-24 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composite biomaterials for preventing post-surgical adhesions of tissues
US5789462A (en) 1995-09-13 1998-08-04 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Photocured crosslinked-hyaluronic acid contact lens
DE19604706A1 (de) 1996-02-09 1997-08-14 Merck Patent Gmbh Vernetzungsprodukte von Aminogruppen-haltigen Biopolymeren
DE19616010C2 (de) 1996-04-23 1998-07-09 Seitz Filter Werke Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung von Fibrets (Fibriden) aus Zellulosederivaten
US6632802B2 (en) 1996-08-29 2003-10-14 Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. Hyaluronic acid esters, threads and biomaterials containing them, and their use in surgery
IT1287698B1 (it) 1996-08-29 1998-08-18 Fidia Advanced Biopolymers Srl Fili da sutura essenzialmente costituiti da derivati esterei dello acido ialuronico
JP4247846B2 (ja) 1997-07-03 2009-04-02 デュピュイ・スパイン・インコーポレーテッド 架橋ポリサッカリド薬物キャリア
AU758575C (en) 1998-04-30 2003-11-20 Maruha Corporation Compounds having glucuronic acid derivative and glucosamine derivative in structure thereof, method for producing the compounds, and uses of the compounds
IT1302534B1 (it) 1998-12-21 2000-09-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composizioni iniettabili, biocompatibili e biodegradabili comprendentialmeno un derivato dell'acido ialuronico, cellule condrogeniche, per
ES2203230T3 (es) 1998-12-23 2004-04-01 Esparma Gmbh Hialuronatoliasa como promotor de penetracion en agentes topicos.
DE19917614C2 (de) 1999-04-19 2001-07-05 Thueringisches Inst Textil Verfahren zur Herstellung von cellulosischen Formkörpern mit hohem Adsorptionsvermögen
US6288043B1 (en) 1999-06-18 2001-09-11 Orquest, Inc. Injectable hyaluronate-sulfated polysaccharide conjugates
US6592794B1 (en) 1999-09-28 2003-07-15 Organogenesis Inc. Process of making bioengineered collagen fibrils
WO2001034657A1 (en) 1999-11-08 2001-05-17 Sca Hygiene Products Zeist B.V. Process of oxidising primary alcohols
DE10003397A1 (de) 2000-01-27 2001-08-09 Hartmann Paul Ag Polyelektrolyt-Feststoffsystem, Verfahren zur Herstellung desselben sowie Wundverband
IT1317359B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e
IT1317358B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico.
US6498269B1 (en) 2000-10-17 2002-12-24 The University Of Connecticut Method for the oxidation of aldehydes, hemiacetals and primary alcohols
WO2002048197A1 (en) 2000-12-13 2002-06-20 Sca Hygiene Products Zeist B.V. Process for oxidising primary alcohols
EP1217008B1 (en) 2000-12-19 2006-03-01 Seikagaku Corporation Photocurable hyaluronic acid derivative and process for producing the same, and photocured crosslinked hyaluronic acid derivative and medical material using the same
FR2819808B1 (fr) 2001-01-19 2003-04-18 Simafex Compositions stabilisees d'acide o-iodoxybenzoique et leur procede de preparation
CA2435491C (en) 2001-01-31 2010-02-02 Seikagaku Corporation Crosslinked polysaccharide sponge
US6902548B1 (en) 2001-03-19 2005-06-07 Ed Schuler Use of Streptomyces hyalurolyticus enzyme in ophthalmic treatments
US6673919B2 (en) 2001-03-30 2004-01-06 Chisso Cororation Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof
US6946284B2 (en) 2001-11-16 2005-09-20 University Of Massachusetts Solubilizing cross-linked polymers with photolyase
CA2412012C (en) * 2001-11-20 2011-08-02 Ed. Geistlich Soehne Ag Fuer Chemische Industrie Resorbable extracellular matrix containing collagen i and collagen ii for reconstruction of cartilage
US20060189516A1 (en) 2002-02-19 2006-08-24 Industrial Technology Research Institute Method for producing cross-linked hyaluronic acid-protein bio-composites
JP3975267B2 (ja) 2002-06-03 2007-09-12 独立行政法人産業技術総合研究所 多糖物質のアシル化方法
US20040101546A1 (en) 2002-11-26 2004-05-27 Gorman Anne Jessica Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents
US7550136B2 (en) 2002-12-20 2009-06-23 University Of Massachusetts Photo-reactive polymers and devices for use in hair treatments
US7465766B2 (en) 2004-01-08 2008-12-16 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
US6982298B2 (en) 2003-01-10 2006-01-03 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
FR2852012B1 (fr) 2003-03-04 2006-06-23 Oreal Procede de preparation de derives o-acyles du glucose
EP1607405B1 (en) 2003-03-11 2011-05-04 Seikagaku Corporation Photocrosslinked polysaccharide composition and process for producing the same
DE10331342B4 (de) 2003-07-11 2009-03-12 Thüringisches Institut für Textil- und Kunststoff-Forschung e.V. Thermostabile Form- oder Spinnmasse
CA2538793C (en) 2003-09-19 2011-01-11 Colorado State University Research Foundation (Csurf) Hyaluronan (ha) esterification via acylation technique for moldable devices
US20100330143A1 (en) 2003-12-04 2010-12-30 University Of Utah Research Foundation Modified macromolecules and methods of making and using thereof
US8313765B2 (en) 2003-12-04 2012-11-20 Industrial Technology Research Institute Biodegradable hyaluronic acid derivative, biodegradable polymeric micelle composition and pharmaceutical or bioactive composition
GB2408741B (en) 2003-12-04 2008-06-18 Ind Tech Res Inst Hyaluronic acid derivative with urethane linkage
JP2008505716A (ja) 2004-07-09 2008-02-28 ザ クリーヴランド クリニック ファウンデーション ヒドロキシフェニル架橋高分子ネットワーク及びその用途
US7323425B2 (en) 2004-08-27 2008-01-29 Stony Brook Technology And Applied Research Crosslinking of hyaluronan solutions and nanofiberous membranes made therefrom
DK1817347T3 (en) 2004-11-24 2017-08-14 Albumedix As Process for Crosslinking Hyaluronic Acid with Divinyl Sulfone
US7214759B2 (en) 2004-11-24 2007-05-08 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Biologically absorbable coatings for implantable devices based on polyesters and methods for fabricating the same
US7680038B1 (en) 2005-04-25 2010-03-16 Electronic Arts, Inc. Dynamic bandwidth detection and response for online games
GB0513552D0 (en) 2005-07-01 2005-08-10 Bristol Myers Squibb Co Bandage
WO2007004675A1 (ja) 2005-07-06 2007-01-11 Seikagaku Corporation 薬剤導入光架橋ヒアルロン酸誘導体ゲル
ITPD20050206A1 (it) 2005-07-07 2007-01-08 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali in forma di fibra da impiegarsi come dispositivi medici nel trattamento delle ferite e loro processi di produzione
ITMI20051415A1 (it) 2005-07-22 2007-01-23 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali a base di corbossimetilcellulosa salificata con zinco associata a derivati dell'acido ialuronico da impiegarsi come dispositivi medici con attivita' antimicrobica ed antifungina e loro processo di produzione
ITMI20051521A1 (it) 2005-08-03 2007-02-04 Stucchi Spa Elemento femmina per raccordo ad accoppiamento rapido per tubazioni
US7993678B2 (en) 2005-09-26 2011-08-09 Novozymes Biopolymer A/S Hyaluronic acid derivatives
EP1968499A1 (en) 2005-12-14 2008-09-17 Anika Therapeutics Inc. Bioabsorbable implant of hyaluronic acid derivative for treatment of osteochondral and chondral defects
EP1826274A1 (en) 2006-02-24 2007-08-29 Kikkoman Corporation Enzyme composition, low molecular weight hyaluronan and process for preparing the same
JP4892679B2 (ja) 2006-03-27 2012-03-07 国立大学法人弘前大学 ゲル紡糸によるヒアルロン酸繊維およびその製造方法
KR20070118730A (ko) 2006-06-13 2007-12-18 주식회사 코오롱 보습성이 우수한 창상피복재 및 그의 제조방법
US20080124395A1 (en) 2006-06-22 2008-05-29 Weiliam Chen Formulations and devices for treatment or prevention of neural ischemic damage
US20080063617A1 (en) 2006-09-07 2008-03-13 Abrahams John M Cosmetics formulations
ITMI20061726A1 (it) 2006-09-11 2008-03-12 Fidia Farmaceutici Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry
CZ302856B6 (cs) 2006-09-27 2011-12-14 Cpn Spol. S R. O. Zpusob prípravy derivátu polysacharidu
RU2432181C2 (ru) 2006-12-22 2011-10-27 Кромафарма Гезельшафт М.Б.Х. Применение полимеров
KR20080062092A (ko) 2006-12-29 2008-07-03 주식회사 핸슨바이오텍 세포전달체로서의 히알루론산 유도체 및 이의 제조 방법
JP5329767B2 (ja) 2007-02-26 2013-10-30 帝人株式会社 芳香族コポリアミド繊維の製造装置
CZ2007299A3 (cs) 2007-04-24 2009-02-04 Cpn Spol. S R. O. Príprava nanovláken z polysacharidu a jejich smesí s polyvinylalkoholem
JP5165281B2 (ja) 2007-06-01 2013-03-21 株式会社バイオベルデ ２反応剤型の医療用含水ゲル形成剤、及び、これより得られるヒアルロン酸ゲル
RU2471867C2 (ru) 2007-06-19 2013-01-10 Тамара П. Уваркина Гиалуронидаза и способ ее применения
FR2921675B1 (fr) 2007-09-28 2010-03-19 Univ Claude Bernard Lyon Filament a base d'acide hyaluronique et son procede d'obtention.
BRPI0908352A2 (pt) 2008-02-11 2015-07-28 Basf Se Processo para produzir estruturas porosas, estrutura porosa, e, uso da mesma
WO2009108100A1 (en) 2008-02-29 2009-09-03 Ipr-Systems Sweden Ab Composition for the formation of gels
JP5563563B2 (ja) 2008-06-05 2014-07-30 エージェンシー フォー サイエンス， テクノロジー アンド リサーチ ペルオキシダーゼおよび低濃度の過酸化水素の存在下でのヒドロゲルの形成方法
FR2934999B1 (fr) 2008-08-13 2011-07-29 Adocia Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane
US9228027B2 (en) 2008-09-02 2016-01-05 Allergan Holdings France S.A.S. Threads of Hyaluronic acid and/or derivatives thereof, methods of making thereof and uses thereof
CZ301555B6 (cs) 2008-11-06 2010-04-14 Cpn S. R. O. Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
ITRM20080636A1 (it) 2008-11-28 2010-05-29 Univ Palermo Procedimento per la produzione di derivati funzionalizzati dell acido ialuronico e relativi idrogeli.
JP2010138276A (ja) 2008-12-11 2010-06-24 Nipro Corp ヒアルロン酸単糸の製造方法
AU2010215199B2 (en) 2009-02-21 2015-01-15 Sofradim Production Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers
US9273191B2 (en) 2009-02-21 2016-03-01 Sofradim Production Medical devices with an activated coating
WO2010095049A1 (en) 2009-02-21 2010-08-26 Sofradim Production Crosslinked fibers and method of making same by extrusion
CZ2009168A3 (cs) 2009-03-17 2010-07-21 Contipro C, A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu
US8551378B2 (en) 2009-03-24 2013-10-08 North Carolina State University Nanospinning of polymer fibers from sheared solutions
US20120219554A2 (en) 2009-05-14 2012-08-30 Fidia Farmaceutici S.P.A. Extracellular yaluronidase from streptomyces koganeiensis
WO2010138074A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Hilborn Joens Hyaluronic acid based delivery systems
SG178146A1 (en) 2009-07-30 2012-03-29 Carbylan Biosurgery Inc Modified hyaluronic acid polymer compositions and related methods
KR101103423B1 (ko) 2009-09-04 2012-01-06 아주대학교산학협력단 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도
US9132201B2 (en) 2009-11-11 2015-09-15 University Of Twente, Institute For Biomedical And Technical Medicine (Mira) Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers
EP2498830B1 (en) 2009-11-11 2016-09-21 University of Twente, Institute for Biomedical Technology and Technical Medicine (MIRA) Dextran-hyaluronic acid based hydrogels
US8197849B2 (en) 2010-02-12 2012-06-12 National Health Research Institutes Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute
CN101897976A (zh) 2010-07-16 2010-12-01 沈阳药科大学 一种药物增溶载体及其制备方法和应用
CZ302994B6 (cs) 2010-12-31 2012-02-08 Cpn S.R.O. Hyaluronová vlákna, zpusob jejich prípravy a použití
CZ304072B6 (cs) 2011-04-26 2013-09-25 Contipro Biotech S.R.O. Amfoterní materiál na bázi sítované kyseliny hyaluronové, zpusob jeho prípravy, materiály obsahující aktivní cinidla uzavrené v síti hyaluronanu, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití
CN102154738B (zh) 2011-05-10 2012-08-01 青岛大学 一种红藻琼胶纤维的制备方法
BR112014009292B1 (pt) 2011-10-18 2021-06-15 Heiq Pty Ltd Processo para a preparação de fibras
CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999057158A1 (en) * 1998-05-07 1999-11-11 Nederlandse Organisatie Voor Toegepast Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno Process for selective oxidation of primary alcohols
US20070149441A1 (en) * 1998-09-18 2007-06-28 Orthogene Llc Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same
CZ302504B6 (cs) * 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ302503B6 (cs) * 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bin Ding a kol.: TEMPO-mediated selective oxidation of substituted polysaccharides-an efficient approach for determination of the degree of substitution at C-6, Carbohydrate Research 343 (2008), str.3112-3116 *
Bo Jiang a kol.: Study on TEMPO-mediated selective oxidation of hyaluronan and the effects of salt on the reaction kinetics, Carbohydrate Research 327 (2000), str.155-461 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ305153B6 (cs) * 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
US10023658B2 (en) 2014-03-11 2018-07-17 Contipro A.S. Conjugates of oligomer of hyaluronic acid or of a salt thereof, method of preparation thereof and use thereof
US10617711B2 (en) 2014-06-30 2020-04-14 Contipro A.S. Antitumor composition based on hyaluronic acid and inorganic nanoparticles, method of preparation thereof and use thereof
US10689464B2 (en) 2015-03-09 2020-06-23 Contipro A.S. Self-supporting, biodegradable film based on hydrophobized hyaluronic acid, method of preparation and use thereof
WO2016202314A1 (en) 2015-06-15 2016-12-22 Contipro A.S. Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups
CZ306479B6 (cs) * 2015-06-15 2017-02-08 Contipro A.S. Způsob síťování polysacharidů s využitím fotolabilních chránicích skupin
WO2016206661A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Contipro A.S. Derivatives of sulfated polysaccharides, method of preparation, modification and use thereof
US10414832B2 (en) 2015-06-26 2019-09-17 Contipro A.S Derivatives of sulfated polysaccharides, method of preparation, modification and use thereof
US10618984B2 (en) 2016-06-27 2020-04-14 Contipro A.S. Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
BR112015002755B1 (pt) 2022-09-27
US9522966B2 (en) 2016-12-20
KR102060026B1 (ko) 2019-12-27
PL2882779T3 (pl) 2017-02-28
RU2015107312A (ru) 2016-09-27
CZ2012537A3 (cs) 2014-03-19
DK2882779T3 (en) 2016-10-10
WO2014023272A1 (en) 2014-02-13
KR20150040966A (ko) 2015-04-15
BR112015002755A2 (pt) 2017-07-04
HUE031496T2 (en) 2017-07-28
EP2882779A1 (en) 2015-06-17
RU2647859C2 (ru) 2018-03-21
ES2595755T3 (es) 2017-01-03
EP2882779B1 (en) 2016-08-31
US20150175717A1 (en) 2015-06-25
BR112015002755A8 (pt) 2018-04-03
JP2015525820A (ja) 2015-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ304512B6 (cs) Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
JP5945504B2 (ja) ヒアルロン酸の酸化誘導体，その調製方法及びその修飾方法
KR101766693B1 (ko) 히알루론산의 산화된 유도체의 제조 방법 및 이의 변형 방법
KR100977788B1 (ko) 포스포릴콜린기 함유 다당류 및 그 제조 방법
US5874417A (en) Functionalized derivatives of hyaluronic acid
CA2817176C (fr) Derives de polysaccharides comprenant un motif alcene et reaction de couplage par chimie thio-clic
CN103381273B (zh) 阿霉素前药及其制备方法和可注射的组合物
RU2708327C2 (ru) Производные сульфатированных полисахаридов, их способ получения, модификация и применение
Wen et al. Preparation and characterization of aminoethyl hydroxypropyl starch modified with collagen peptide
FR2967678A1 (fr) Derives de polysaccharides comprenant un motif maleimide et reaction de couplage par chimie thio-clic