IT202100032111A1 - Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo - Google Patents
Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo Download PDFInfo
- Publication number
- IT202100032111A1 IT202100032111A1 IT102021000032111A IT202100032111A IT202100032111A1 IT 202100032111 A1 IT202100032111 A1 IT 202100032111A1 IT 102021000032111 A IT102021000032111 A IT 102021000032111A IT 202100032111 A IT202100032111 A IT 202100032111A IT 202100032111 A1 IT202100032111 A1 IT 202100032111A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- hyadd
- hyaluronic acid
- vitreous
- depolymerized
- compositions
- Prior art date
Links
- 210000004127 vitreous body Anatomy 0.000 title claims description 48
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 81
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 75
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 75
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 claims description 65
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 57
- FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 1-Hexadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCN FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- HSEMFIZWXHQJAE-UHFFFAOYSA-N Amide-Hexadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(N)=O HSEMFIZWXHQJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 claims description 27
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 claims description 13
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 claims description 11
- 230000004264 retinal detachment Effects 0.000 claims description 11
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 claims description 9
- 230000009435 amidation Effects 0.000 claims description 9
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 claims description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 8
- 208000001351 Epiretinal Membrane Diseases 0.000 claims description 7
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 6
- 208000031471 Macular fibrosis Diseases 0.000 claims description 5
- 208000034699 Vitreous floaters Diseases 0.000 claims description 5
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 4
- 208000034698 Vitreous haemorrhage Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008719 thickening Effects 0.000 claims description 3
- 230000008733 trauma Effects 0.000 claims description 3
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 33
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 21
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 description 16
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 description 15
- 102000009190 Transthyretin Human genes 0.000 description 15
- 206010057430 Retinal injury Diseases 0.000 description 14
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 12
- 210000000695 crystalline len Anatomy 0.000 description 12
- 206010010726 Conjunctival oedema Diseases 0.000 description 11
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 11
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 11
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 10
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 10
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 9
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 8
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 7
- 210000004240 ciliary body Anatomy 0.000 description 7
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 7
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 7
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 7
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 210000000554 iris Anatomy 0.000 description 6
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 6
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(oxiran-2-ylmethoxy)butoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCCCOCC1CO1 SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 4
- 208000002367 Retinal Perforations Diseases 0.000 description 4
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 4
- 210000003161 choroid Anatomy 0.000 description 4
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 210000001745 uvea Anatomy 0.000 description 4
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 3
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001886 ciliary effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 238000012014 optical coherence tomography Methods 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 3
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N tunicamycin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC=CC(=O)NC1C(O)C(O)C(CC(O)C2OC(C(O)C2O)N3C=CC(=O)NC3=O)OC1OC4OC(CO)C(O)C(O)C4NC(=O)C MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000823183 Alcaligenes faecalis Aralkylamine dehydrogenase heavy chain Proteins 0.000 description 2
- 101000823182 Alcaligenes faecalis Aralkylamine dehydrogenase light chain Proteins 0.000 description 2
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 206010015946 Eye irritation Diseases 0.000 description 2
- -1 HA amides Chemical class 0.000 description 2
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- 206010038897 Retinal tear Diseases 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 231100000013 eye irritation Toxicity 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 229940089982 healon Drugs 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 208000029233 macular holes Diseases 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 2
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000561734 Celosia cristata Species 0.000 description 1
- 208000003556 Dry Eye Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 206010013774 Dry eye Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 201000002287 Keratoconus Diseases 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000001520 comb Anatomy 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical class [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 1
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000002430 laser surgery Methods 0.000 description 1
- 238000013532 laser treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 1
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 1
- 238000005461 lubrication Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000004493 normal intraocular pressure Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical class CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005111 ocular hyperemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 210000003456 pulmonary alveoli Anatomy 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000004218 vascular function Effects 0.000 description 1
- 239000003190 viscoelastic substance Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/20—Polysaccharides
Description
Descrizione del brevetto per invenzione industriale avente per titolo: ?NUOVI SOSTITUTI BIOCOMPATIBILI DELL?UMOR VITREO?
Campo dell?invenzione
Oggetto della presente invenzione sono composizioni a base di esadecilammide dell?acido ialuronico, avente grado di derivatizzazione (ammidazione) compreso nell?intervallo 1-3%, preferibilmente preparato a partire da acido ialuronico di peso molecolare (Mw) compreso nell?intervallo 500-730 kDa (HYADD<?>-4), per uso nel trattamento chirurgico del segmento anteriore e di quello posteriore dell?occhio, preferibilmente nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, ivi compresa la camera vitrea, ancor pi? preferibilmente come sostituto dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia.
Stato della tecnica
La parete dell?occhio umano ? composta, dall?esterno verso l?interno, da tre tonache concentriche: tonaca fibrosa, tonaca vascolare o uvea, e tonaca nervosa.
La tonaca fibrosa svolge primariamente una funzione strutturale e protettiva, ed ? composta da sclera e cornea. La sclera ? la porzione bianca opaca formata da collagene e fibre elastiche che riveste esternamente circa cinque sesti del globo oculare nella parte posteriore, mentre la cornea ? la struttura trasparente multistrato che ne riveste una porzione di circa un sesto posizionata anteriormente.
Le funzioni trofiche e vascolari sono svolte dalla tonaca vascolare o uvea, che comprende iride, corpo ciliare e coroide. L'iride ? il segmento anteriore dell'uvea, caratterizzato da una struttura sottile ad anello, la cui caratteristica pigmentazione definisce il colore degli occhi ed il cui foro centrale ? denominato pupilla. Il corpo ciliare si estende invece dall?iride alla coroide e comprende il muscolo ciliare, principale responsabile della messa a fuoco. Infatti il muscolo ciliare, contraendosi e rilassandosi, ? in grado di determinare una variazione della curvatura, e dunque del potere diottrico, della lente naturale dell?occhio ad esso collegata, il cristallino. La funzione di sostegno e mantenimento della posizione del cristallino ? svolta invece da un sistema di fibre tese tra il cristallino stesso ed il corpo ciliare, denominato zonula ciliare o apparato sospensore del cristallino. La coroide ? invece una struttura estremamente ricca di vasi sanguigni e capillari, che occupa la porzione posteriore dell?uvea costituendo uno strato sottile tra la sclera e la retina. La zona di confine tra corpo ciliare e coroide prende il nome di ora serrata.
Infine, la retina o tonaca nervosa ? la componente dell?occhio sensibile alla luce, ed ? costituita da svariati strati di neuroni interconnessi da sinapsi e da un epitelio pigmentato che fornisce supporto trofico e funzionale. La retina aderisce internamente al terzo posteriore del globo oculare, ed il suo posizionamento ? essenziale a garantire la sua funzione, consentendo di raccogliere gli stimoli luminosi che penetrano nel globo oculare attraverso la pupilla (
1918; Anatomy of the human body, 20th ed. Philadelphia: ).
In oftalmologia assume notevole rilevanza, sia dal punto di vista diagnostico che da quello chirurgico, la separazione dell?occhio in due porzioni distinte: il segmento anteriore ed il segmento posteriore.
Il segmento anteriore comprende la cornea, l'iride e la pupilla, il cristallino con le strutture che lo sostengono, ed il corpo ciliare. Queste strutture individuano due cavit?: la camera anteriore, delimitata dalla faccia posteriore della cornea e dalla faccia anteriore dell?iride, e la camera posteriore, compresa tra l?iride e le formazioni che vincolano il cristallino al corpo ciliare. Queste cavit?, che comunicano attraverso la pupilla, sono occupate dall?umore acqueo, un liquido che si forma per secrezione dal corpo ciliare ed ? prevalentemente costituito da acqua, amminoacidi ed elettroliti. Tale liquido funge da mezzo refrattivo, fornisce nutrienti alla cornea ed al cristallino e contribuisce a mantenere la pressione intraoculare.
Il segmento anteriore ? la porzione dell?occhio pi? esposta alle lesioni traumatiche, ma sono note anche molte patologie che possono affliggerlo, come ad esempio allergie o infezioni a carico della cornea, la sindrome dell?occhio secco ed il cheratocono, i.e. una patologia degenerativa della cornea che ne comporta una progressiva deformazione. La cataratta ? una delle pi? note patologie che interessano il segmento anteriore dell?occhio. La cataratta, caratterizzata dall?opacizzazione del cristallino, ad oggi viene trattata con successo tramite un intervento chirurgico che prevede la sostituzione del cristallino naturale con una lente artificiale intraoculare. La cataratta ? una delle patologie oculari pi? frequenti, e gli interventi chirurgici indirizzati alla risoluzione di questa patologia sono in continuo aumento ( StatPearls 2021 [PMID: 32644679]). In caso di interventi chirurgici a carico del segmento anteriore dell?occhio, sia legati al trattamento della cataratta che ad altra patologia, si rende necessario l?utilizzo di un materiale viscoelastico che fornisca una barriera fisica o cuscino tra gli strumenti chirurgici ed i tessuti, e che sia in grado di mantenere dilatata la cavit? della camera anteriore ed il sacco capsulare durante l?intervento ( Biomaterials 2006, 27:5134-42).
Il segmento posteriore dell?occhio comprende i due terzi posteriori del bulbo oculare e la cavit? compresa tra la faccia posteriore del cristallino e la retina, nota come camera vitrea. Tale camera ? riempita da un gel trasparente denominato umor vitreo, composto principalmente da acqua, zuccheri, sali, acido ialuronico e collagene. L?umor vitreo svolge principalmente una funzione strutturale, mantenendo la forma sferica dell?occhio, ma ? coinvolto anche nella regolazione della pressione intraoculare e, conseguentemente, del mantenimento in sede della retina ( Journal of Ophthalmology 2017, 2017:3172138).
Oltre che da traumi severi che interessino l?intero bulbo oculare e da infezioni a carico della parte interna dell?occhio, il segmento posteriore dell?occhio pu? essere interessato da un gran numero di patologie, tra cui:
? retinopatia diabetica, patologia che insorge a causa dei danni che il diabete mellito provoca ai piccoli vasi sanguigni ed ai neuroni che compongono la retina, e che rappresenta una delle principali cause di cecit? nei Paesi sviluppati;
? distacco di retina, per il quale la retina si stacca dal lato interno del globo oculare a cui normalmente aderisce, perdendo il proprio posizionamento e determinando cos? la perdita della vista;
? rottura (macular hole) o formazione di una membrana epiretinica (epiretinal membrane, nota anche come macular pucker) nella porzione centrale della retina (macula);
? emorragia del vitreo, ossia un sanguinamento intraoculare, generalmente secondario ad altra patologia, come ad esempio retinopatia diabetica o distacco di retina;
? presenza di miodesopsie, o addensamenti, nell?umor vitreo (vitreous floaters);
? complicazioni di interventi a carico del segmento anteriore dell?occhio, come ad esempio in seguito a chirurgia della cataratta, che impattino sul segmento posteriore.
In tutte le situazioni sopra citate pu? rivelarsi necessario intervenire chirurgicamente sul segmento posteriore dell?occhio. La procedura chirurgica pi? frequente a carico del segmento posteriore dell?occhio ? la vitrectomia, ossia la rimozione dell?umor vitreo e la sua sostituzione totale o parziale con un mezzo artificiale analogo, che pu? essere effettuata da sola o in combinazione con altre procedure finalizzate, ad esempio, a riposizionare o riparare la retina.
Data la molteplicit? di situazioni, e dunque l?elevata frequenza, con cui la vitrectomia si rivela necessaria, ? di grande interesse lo sviluppo di mezzi artificiali adatti a fungere da sostituti dell?umor vitreo. Tra le caratteristiche desiderabili per un sostituto dell?umor vitreo, si possono qui evidenziare le seguenti:
? deve presentare caratteristiche reologiche ed indice di rifrazione simili all?umor vitreo naturale;
? deve essere in grado di mantenere la normale pressione intraoculare; ? deve essere facile da manipolare;
? deve essere biocompatibile e non tossico;
? deve essere stabile nella camera vitrea, cos? da permanere in loco per tutto il tempo necessario.
Ad oggi, l?unica sostanza accettata come sostituto a lungo termine dell?umor vitreo ? l?olio di silicone. L?olio di silicone ? un silossano liquido polimerizzato con catene laterali organiche. Si tratta di un polimero idrofobico con un indice di rifrazione simile a quello del vitreo naturale e densit? di poco inferiore a quella dell?acqua, che, pur prestandosi all?utilizzo come sostituto dell?umor vitreo, presenta alcuni importanti svantaggi, tra cui ad esempio:
? deve essere rimosso dopo circa 3 mesi dall?intervento o nel caso in cui insorgano effetti collaterali, quali ad esempio l?emulsione dell?olio o il glaucoma secondario, comportando dunque un secondo intervento chirurgico che in alcuni casi pu? addirittura risultare in un nuovo danno retinico;
? la capacit? tamponante nei confronti della parte inferiore della retina (ossia della porzione di retina posizionata nel quadrante inferiore dell?occhio) ? ridotta a causa della bassa densit? specifica del normale olio di silicone.
Per favorire la riparazione di lesioni alla parte inferiore della retina, si ? tentato di utilizzare una miscela di olio di silicone ed ottano parzialmente fluorurato, a cui ci si riferisce come olio di silicone pesante (heavy silicon oil, HSO) che risulta avere un peso specifico pi? elevato, ma si ? osservato un aumento della pressione intraoculare oltre alla possibile insorgenza di una serie di complicazioni tra cui cataratta, infiammazione ed emulsione dell?olio ( Journal of Ophthalmology 2017, 2017:3172138).
Tra le possibili alternative attualmente in studio, sono di grande interesse i candidati per la sostituzione dell?umor vitreo a base di polimeri artificiali o naturali, modificati chimicamente o derivatizzati. L?acido ialuronico ? uno dei polimeri che maggiormente si prestano allo scopo.
L?acido ialuronico (HA) ? un etero-polisaccaride composto da residui alternati di acido D-glucuronico e N-acetil-D-glucosammina. E? un polimero naturale a catena lineare con peso molecolare che pu? variare tra 50.000 e 13 x 10<6 >Da, a seconda della fonte dalla quale viene ottenuto e dai metodi di preparazione impiegati. E? presente in natura nei gel pericellulari, nella sostanza fondamentale del tessuto connettivo degli organismi vertebrati (dei quali rappresenta uno dei componenti principali), nel fluido sinoviale delle articolazioni e nel cordone ombelicale. L?HA ? altres? una delle principali componenti dell?umor vitreo naturale. L?HA gioca dunque un ruolo importante nell?organismo biologico, soprattutto come supporto meccanico delle cellule di molti tessuti come la pelle, i tendini, i muscoli e la cartilagine.
Inoltre, risulta noto come l?HA, attraverso il suo recettore di membrana CD44, moduli molti e diversi processi relativi alla fisiologia e alla biologia della cellula come, ad esempio, la proliferazione, la migrazione, il differenziamento cellulare e l?angiogenesi, e come svolga altres? altre funzioni come l?idratazione dei tessuti e la lubrificazione delle articolazioni.
Il principale tra i prodotti contenenti HA nativo utilizzati in chirurgia oftalmica ? Healon<?>, a base di HA ad alto peso molecolare (4 x 10<6 >Da). Healon<? >? tuttavia ad oggi indicato solo per l?uso nella chirurgia del segmento anteriore dell?occhio, ma presenta propriet? reologiche non ottimali ed alcuni studi in cui ? stato testato come sostituto dell?umor vitreo hanno evidenziato un significativo aumento della pressione intraoculare e l?insorgenza di effetti collaterali nei pazienti trattati ( Documenta Ophthalmologica 1986, 64:13-17; Folk et al., Ophthalmic Surgery 1986, 17:299-306; Acta Ophthalmol Copenh 1986, 64:169-72). Sulla base di queste e numerose altre evidenze, i sostituti dell?umor vitreo a base di HA nativo non hanno trovato ampio impiego nella pratica chirurgica.
Sono stati descritti numerosi derivati del HA:
? HYAFF<?>: esteri dell?HA (EP216453 B1);
? HYADD<?>: ammidi dell?HA (EP1095064 B1);
? Derivati O-solfatati dell?HA fino al 4? grado di solfatazione (EP702699 B1);
? ACP<?>: esteri interni dell?HA (EP341745 B1);
? Hylan G-F20: HA cross-linkato con formaldeide e divinil-sulfone (US4713448);
? Deacetilati dell?HA: derivano dalla deacetilazione della frazione N-acetil-glucosamina (EP1313772 B1);
? HYOXX<?>: derivati percarbossilati dell?HA (domanda di brevetto EP1339753);
? HA cross-linkato con BDDE (EP0839159 B1).
Per alcuni dei derivati del HA sopra citati, ? stato ipotizzato l?utilizzo in un generico ambito di chirurgia oftalmica, ma nessun derivato ? stato reso eleggibile come prodotto per uso in chirurgia oftalmica. Inoltre non sono disponibili studi che ne accertino la non tossicit? ed il possesso di caratteristiche fisiologiche desiderabili allo scopo.
In letteratura sono descritti numerosi possibili sostituti dell?umor vitreo a base di HA modificato chimicamente, principalmente tramite cross-linking.
E? stato descritto l?uso come sostituto dell?umor vitreo di un idrogel a base di diidrazide di HA ossidato/acido adipico (Oxi-HA/AADH), avente un modulo di conservazione (storage modulus, G?) compreso tra 100 e 150 Pa ( Journal of Biomaterials Science 2011, 22:1777-97). E? stato altres? descritto per il medesimo uso un idrogel a base di HA tiolato, cross-linkato tramite induzione della formazione di ponti disolfuro (HA-tiolo cross-linkato), anch?esso caratterizzato da un modulo di conservazione G? piuttosto elevato, pari a 150,4 Pa (Schnichels et al., PloS 2017, 12:e0172895). Le propriet? reologiche di questi prodotti si distanziano notevolmente da quelle dell?umor vitreo naturale, che presenta un modulo di conservazione (storage modulus, G?) compreso tra 1,86 e 6,35 Pa ( Rheological Acta 2017, 56:377-86).
E? stato inoltre sperimentato come possibile sostituto dell?umor vitreo un idrogel a base di HA cross-linkato con 1,4-butanediolo diglicidil etere (BDDE), nome commerciale Healaflow<? >(US20100069938). E? nota la tossicit? del BDDE, che rende potenzialmente pericoloso l?utilizzo di prodotti in cui potrebbero essere presenti residui di questa sostanza ( Toxicology in Vitro 2021, 70:105034). Inoltre, studi preclinici nei quali Healaflow<? >? stato valutato come sostituto dell?umor vitreo hanno evidenziato la perdita di viscosit? del mezzo nel periodo postoperatorio ed un leggero incremento della pressione intraoculare (IOP), potenzialmente dannoso in particolare per la riparazione di danni alla retina ( Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology 2016, 254:697-703).
Descrizione dell?invenzione
La Richiedente ha sorprendentemente scoperto che composizioni a base di ammide esadecilica dell?acido ialuronico, avente peso molecolare (Mw) pari a 500-730 kDa, con grado di amidazione (o derivatizzazione) compreso nell?intervallo da 1 a 3%, si rivelano particolarmente adatte all?uso nel trattamento chirurgico del segmento anteriore e di quello posteriore dell?occhio, preferibilmente nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, ivi compresa la camera vitrea, ancor pi? preferibilmente come sostituto dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia.
La preparazione dell?ammide esadecilica con grado di ammidazione (derivatizzazione) medio 1-3%, a partire da HA di peso molecolare (Mw) pari a 500-730 kDa, ? descritta in EP2988792; tale derivato, di seguito definito HYADD<?>-4, ? disponibile in commercio alla concentrazione di 8 mg/ml in soluzione salina, con il marchio Hymovis<? >e viene da tempo impiegato esclusivamente per la terapia viscosupplementante intra-articolare dell?osteoartrosi.
I dati riportati di seguito dimostrano che HYADD<?>-4 non ? tossica in tale chirurgia e presenta caratteristiche reologiche pi? vicine a quelle dell?umor vitreo naturale. Inoltre, HYADD<?>-4 ? facilmente estrudibile attraverso una siringa, risultando dunque facile da manipolare e da iniettare in camera vitrea.
Secondo l?invenzione, HYADD<?>-4 ? stata utilizzata tal quale (HYADD<?>-4) o in forma depolimerizzata tramite trattamento termico a 121?C di durata pari o superiore a 25 minuti. Preferibilmente HYADD<?>-4 depolimerizzata ? ottenuta tramite trattamento termico a 121?C per 120 minuti.
Sperimentazioni di seguito riportate, condotte su animali sottoposti a danno retinico e successiva vitrectomia con sostituzione completa del vitreo, hanno permesso di evidenziare che:
? HYADD<?>-4 non determina alcuna anomalia nella IOP postoperatoria, risultando dunque ideale per favorire il mantenimento in posizione e la guarigione della retina;
? HYADD<?>-4 ? biodegradabile, infatti dopo 30 giorni dalla sostituzione completa del vitreo ? presente in quantit? percentuali ridotte rispetto all?iniziale 100%, e non necessita perci? di un secondo intervento di rimozione dalla camera vitrea;
? HYADD<?>-4 ? stabile in camera vitrea, e la sua stabilit? pu? essere modulata attraverso la depolimerizzazione, come evidenziato dalla maggiore stabilit? osservata per HYADD<?>-4 tal quale (non depolimerizzato) rispetto a HYADD<?>-4 depolimerizzata;
? HYADD<?>-4 promuove un miglior recupero dal danno retinico rispetto all?olio di silicone, attualmente in uso nella pratica clinica, come dimostrato dai livelli proteici pi? elevati del biomarcatore di funzionalit? retinica transtiretina (TTR) e dalla riduzione dei livelli di emoglobina intra-vitreale, indice di sanguinamento;
? HYADD<?>-4 determina un miglior decorso post-operatorio rispetto all?olio di silicone in seguito a danno localizzato nel quadrante inferiore della retina, con ridotta presenza di segni di infiammazione oculare quali iperemia o arrossamento, chemosi e secrezioni.
Sulla base di queste evidenze, HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, emerge come un eccellente mezzo viscoelastico per la chirurgia oftalmica, particolarmente adatto come sostituto dell?umor vitreo.
Descrizione dettagliata dell?invenzione
L?invenzione riguarda composizioni a base di esadecilammide dell?acido ialuronico, avente grado di derivatizzazione (ammidazione) compreso nell?intervallo 1-3%, preferibilmente preparata a partire da acido ialuronico di peso molecolare (Mw) compreso nell?intervallo 500-730 kDa (HYADD<?>-4), per uso nel trattamento chirurgico dell?occhio, preferibilmente nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, ivi compresa la camera vitrea. In particolare, risulta particolarmente conveniente l?utilizzo delle composizioni dell?invenzione come sostituti biocompatibili dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia.
L?acido ialuronico (HA) pu? presentare peso molecolare (PM) da 50.000 a 13 x 10<6 >Da. L?HA di partenza utilizzato per la sintesi dell?esadecilammide di HA PM compreso tra 400.000 e 3 x 10<6 >Da, preferibilmente tra 400.000 e 1 x 10<6 >Da, pi? preferibilmente tra 500.000 e 730.000 Da. Per PM si intende il peso molecolare medio ponderale calcolato col metodo della ?intrinsic viscosity? (
Carbohydr Res, 1986, 149:363-377).
Secondo l?invenzione pu? essere utilizzato HA proveniente da qualsiasi fonte, ad esempio, da creste di gallo (EP138572), da fermentazione (da Streptocuccus equi o zooepidemicus, EP0716688), o da biosintesi (da Bacillus, EP2614088, EP2614087). L?HA impiegato nella presente invenzione pu? altres? essere purificato secondo differenti tecniche (EP3491027, EP3655138). Preferibilmente, l?HA di partenza purificato come descritto in EP3491027.
Il derivato di HA che trova applicazione secondo l?invenzione ? l?esadecilammide dell?acido ialuronico con grado di derivatizzazione o ammidazione compreso nell?intervallo 1-3%, preparata a partire da acido ialuronico di peso molecolare (Mw) compreso nell?intervallo 500-730 kDa.
Il grado di derivatizzazione (o ammidazione) di HYADD<?>-4 viene misurato tramite HPLC dopo idrolisi dell?ammide e successiva coniugazione dell?esadecilammina rilasciata con una sostanza fluorofora. L?esadecilammide dell?acido ialuronico con grado di derivatizzazione (o ammidazione) compreso nell?intervallo 1-3% e preparata a partire da acido ialuronico di peso molecolare (Mw) compreso nell?intervallo 500-730 kDa, pu? essere preparata come noto, preferibilmente come descritto in EP2988792.
L?esadecilammide dell?acido ialuronico pu? essere utilizzata tal quale o depolimerizzata. Per esadecilammide dell?acido ialuronico (o HYADD<?>-4) tal quale si intende l?esadecilammide dell?acido ialuronico, avente grado di derivatizzazione o ammidazione misurato tramite HPLC compreso nell?intervallo 1-3%, preparata a partire da acido ialuronico di peso molecolare (Mw) compreso nell?intervallo 500-730 kDa, ottenuta secondo metodi noti e preferibilmente come descritto in EP2988792. Per esadecilammide dell?acido ialuronico (o HYADD<?>-4) depolimerizzata si intende l?esadecilammide dell?acido ialuronico (o HYADD<?>-4) sottoposta a trattamento termico per almeno 25 minuti a 121?C. Preferibilmente, l?esadecilammide dell?acido ialuronico (o HYADD<?>-4) depolimerizzata viene ottenuta sottoponendo l?esadecilammide dell?acido ialuronico (o HYADD<?>-4) ad un trattamento termico per almeno 2 ore a 121?C.
A partire dall?amide esadecilica dell?acido ialuronico avente grado di derivatizzazione compreso nell?intervallo 1-3% (HYADD<?>-4) tal quale o depolimerizzata, pu? essere formulato un idrogel ad una concentrazione pari o inferiore a 12 mg/mL. Preferibilmente, la concentrazione di HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata nell?idrogel dell?invenzione ? pari a 8 mg/mL. HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata pu? essere disciolta in un qualsiasi veicolo adatto, come soluzione fisiologica o tampone fosfato salino, preferibilmente in tampone fosfato salino a pH 7.
Le composizioni comprendenti HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata per uso nel trattamento chirurgico del segmento anteriore e di quello posteriore dell?occhio possono essere formulate con l?eventuale aggiunta di eccipienti farmaceuticamente accettabili.
Secondo l?invenzione, HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata ? particolarmente adatta all?uso nel trattamento chirurgico del segmento anteriore e di quello posteriore dell?occhio, preferibilmente nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, ivi compresa la camera vitrea, ancor pi? preferibilmente come sostituto dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia. A scopo esemplificativo, HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata pu? essere utilizzata nel trattamento chirurgico del segmento anteriore dell?occhio, ed in particolare come mezzo viscoelastico nella chirurgia della cataratta. HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata trova inoltre impiego nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, come sostituto dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia, ove la vitrectomia pu? essersi resa necessaria per qualsiasi motivo. Alcuni esempi di patologie per le quali pu? rendersi necessaria l?esecuzione di una vitrectomia e per le quali pu? risultare vantaggioso l?uso di HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata, sono:
? traumi severi che interessino l?intero bulbo oculare
? infezioni a carico della parte interna dell?occhio:
? retinopatia diabetica;
? distacco di retina;
? rottura (macular hole) o formazione di una membrana epiretinica (epiretinal membrane, nota anche come macular pucker) nella porzione centrale della retina (macula);
? emorragia del vitreo;
? presenza di miodesopsie, o addensamenti, nell?umor vitreo (vitreous floaters);
? complicazioni di interventi a carico del segmento anteriore dell?occhio, come ad esempio in seguito a chirurgia della cataratta, che impattino sul segmento posteriore.
Sperimentazioni di seguito riportate, condotte su animali sottoposti a danno retinico e successiva vitrectomia con sostituzione completa del vitreo, hanno permesso di evidenziare che:
? HYADD<?>-4 non determina alcuna anomalia nella IOP postoperatoria, risultando dunque ideale per favorire il mantenimento in posizione e la guarigione della retina;
? HYADD<?>-4 ? biodegradabile, infatti dopo 30 giorni dalla sostituzione completa del vitreo ? presente in quantit? percentuali ridotte rispetto all?iniziale 100%, e non necessita perci? di un secondo intervento di rimozione dalla camera vitrea;
? HYADD<?>-4 ? stabile in camera vitrea, e la sua stabilit? pu? essere modulata attraverso la depolimerizzazione, come evidenziato dalla maggiore stabilit? osservata per HYADD<?>-4 tal quale (non depolimerizzato) rispetto a HYADD<?>-4 depolimerizzata;
? HYADD<?>-4 promuove un miglior recupero dal danno retinico rispetto all?olio di silicone, attualmente in uso nella pratica clinica, come dimostrato dai livelli proteici pi? elevati del biomarcatore di funzionalit? retinica transtiretina (TTR) e dalla riduzione dei livelli di emoglobina intravitreale, indice di sanguinamento;
? HYADD<?>-4 determina un miglior decorso post-operatorio rispetto all?olio di silicone in seguito a danno localizzato nel quadrante inferiore della retina, con ridotta presenza di segni di infiammazione oculare quali iperemia o arrossamento, chemosi e secrezioni.
Sulla base di queste evidenze, HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata emerge come un eccellente mezzo viscoelastico per la chirurgia oftalmica, particolarmente adatto come sostituto dell?umor vitreo.
Allo scopo di meglio illustrare l?invenzione, vengono forniti i seguenti esempi.
ESEMPIO 1. Preparazione dell?amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) a diversi gradi di depolimerizzazione.
L?amide esadecilica dell?acido ialuronico con grado di derivatizzazione compreso nell?intervallo 1-3% (HYADD<?>-4), preparata a partire da HA con PM compreso tra 500 e 730 kDa come descritto in EP2988792, ? stata sciolta in PBS a pH 7 alla concentrazione finale di 8 mg/mL. La depolimerizzazione ? stata successivamente ottenuta sottoponendo HYADD<?>-4 in PBS a trattamento termico in autoclave, a 121?C per:
? 25 minuti nel caso di HYADD<?>-4 depolimerizzata;
? 120 minuti nel caso di HYADD<?>-4 depolimerizzata.
ESEMPIO 2. Analisi reologica dell?amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4), tal quale e a diversi gradi di depolimerizzazione.
Materiali e Metodi
I seguenti campioni sono stati sottoposti ad analisi reologica:
? HYADD<?>-4 tal quale (t.q.), ossia ammide esadecilica dell?acido ialuronico con grado di derivatizzazione compreso nell?intervallo 1-3%, preparata a partire da HA con PM compreso tra 500 e 730 kDa come descritto in EP2988792, e disciolta in PBS a pH 7 alla concentrazione finale di 8 mg/mL;
? HYADD<?>-4 depolimerizzata (25 min.), ottenuta tramite trattamento termico di HYADD<?>-4 t.q. per 25 minuti a 121?C, come descritto in ESEMPIO 1;
? HYADD<?>-4 depolimerizzata (2 ore), ottenuta tramite trattamento termico di HYADD<?>-4 t.q. per 2 ore a 121?C, come descritto in ESEMPIO 1.
L?analisi reologica ? stata condotta utilizzando un reometro a 37?C. Il modulo di conservazione (storage modulus, G?) ? stato misurato per tutti i campioni a 1 Hz.
Risultati e conclusioni
L?analisi reologica ha permesso di rilevare per i campioni testati i seguenti
valori di G? in Pascal (Pa):
Questi dati supportano fortemente l?utilizzo di HYADD<?>-4, tal quale o
depolimerizzata, come sostituto vitreale. Risulta infatti evidente che HYADD<?>-4
depolimerizzata (2 ore) presenta un G? del tutto sovrapponibile al G? riportato per
l?umor vitreo (G?=1,86-6,35 Pa a 0,1 Hz e 37?C; Rheological Acta 2017,
56:377-86). HYADD<?>-4 tal quale e depolimerizzata (25 minuti) presentano invece
valori di G? del tutto paragonabili a quelli del vitreo naturale, ma soprattutto
decisamente inferiori rispetto al G? (a 0,1 Hz e 37?C) dei noti candidati a base di
HA descritti come sostituti per l?umor vitreo: in tali condizioni Oxi-HA/AADH
presenta G? compreso tra 100 e 150 Pa (Su et al., Journal of Biomaterials Science
2011, 22:1777-97), ed HA-tiolo cross-linkato ? caratterizzato da un modulo di
conservazione G? pari a 150,4 Pa ( PloS 2017, 12:e0172895), come
di seguito riportato.
ESEMPIO 3. Valutazione in vivo della stabilit? e tollerabilit? come
sostituto vitreale dell?amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4), come tale o depolimerizzata, dopo intervento di danno retinico e concomitante vitrectomia con sostituzione completa del vitreo.
Materiali e Metodi
Obiettivo di questo primo studio ? verificare la stabilit? e tollerabilit? in camera vitrea dell?amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4), come tale o depolimerizzata, nella riparazione di un danno retinico. Lo studio ? stato condotto su 10 conigli albini, per ciascuno dei quali sono stati trattati sia l?occhio destro che il sinistro, suddivisi nei seguenti gruppi sperimentali:
1. Gruppo Silicone Oil: 2 animali (4 occhi) trattati con olio di silicone; 2. Gruppo HYADD<?>-4: 3 animali (6 occhi) trattati con HYADD?-4 tal quale;
3. Gruppo depolymerized HYADD<?>-4: 3 animali (6 occhi) trattati con HYADD<?>-4 depolimerizzato, i.e. HYADD<?>-4 sottoposta a trattamento termico per 2 ore a 121?C come da ESEMPIO 1;
4. Gruppo CTRL: 2 animali (4 occhi) non trattati.
I conigli albini appartenenti ai gruppi Silicone Oil, HYADD<?>-4 e depolymerized HYADD<?>-4 sono stati operati in entrambi gli occhi, provocando una rottura retinica tramite iniezione subretinale con fisiologica sterile e successivo taglio con bisturi. I margini della rottura retinica sono stati poi trattati con il laser, ed infine ? stato immesso e il sostituto vitreale per ottenere un riempimento della camera vitrea ed una pessia corioretinica della rottura ad un mese dall?intervento. La pressione intraoculare in ciascun occhio trattato ? stata misurata sia prima dell?intervento che 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 10, 15, 18, 20, 23, 25, 28 o 30 giorni dopo l?intervento. Dopo 30 giorni dall?intervento, gli animali sono stati sacrificati e l?umor vitreo di ciascun occhio ? stato prelevato per le successive analisi.
Il quantitativo di HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata presente in ciascun campione di umor vitreo ? stato determinato dopo idrolisi dell?ammide e successiva coniugazione dell?esadecilammina rilasciata con una sostanza fluorofora.
I livelli di transtiretina (TTR) ed emoglobina (Hb) nei campioni di umor vitreo prelevati sono stati rilevati tramite saggio ELISA, utilizzando appositi kit commerciali e seguendo le istruzioni fornite dal produttore. In breve, sono state distribuite nei pozzetti di una piastra da 96 pozzetti, pre-rivestita con anticorpi in grado di riconoscere l?antigene d?interesse, aliquote di volume costante dei diversi campioni da determinare e degli standard per la quantificazione, ossia di diluizioni seriali di un campione contenente una quantit? nota di antigene d?interesse. Dopo una prima incubazione in assenza di reagenti, ad ogni campione ? stata aggiunta una soluzione comprendente anticorpi in grado di riconoscere l?antigene d?interesse. Tali anticorpi sono coniugati con un enzima in grado di catalizzare una reazione colorimetrica e perci?, incubando i campioni con il substrato di questa reazione colorimetrica, si produce un prodotto colorato in quantit? direttamente proporzionale alla quantit? di antigene d?interesse presente nel campione (
J Gerontol A Biol Sci Med Sci 2008, 63:879-84). L?assorbanza di ciascun pozzetto al termine della reazione colorimetrica ? stata rilevata utilizzando uno spettrofotometro. Il calcolo dell?esatta concentrazione di antigene in ciascun campione ? resa possibile applicando la Legge di Lambert-Beer, per la quale esiste una relazione lineare tra la concentrazione di un cromoforo in soluzione e l?assorbanza della soluzione stessa ( Journal of Biomedical Optics 2021, 26:100901), e costruendo una retta di taratura a partire dalle misure di assorbanza degli standard per la quantificazione. In questo modo ? infatti possibile stabilire il fattore di conversione necessario per calcolare l?esatta concentrazione di antigene a cui corrisponde il valore di assorbanza misurato per ciascun campione. Risultati e Conclusioni
Il monitoraggio della pressione intraoculare, i cui risultati sono rappresentati in FIGURA 1, rivela un calo iniziale in tutte le condizioni testate, verosimilmente dovuto all?intervento chirurgico, che viene recuperato nell?arco dei primi sei giorni dopo l?intervento. In seguito, la IOP si assesta intorno a valori pari a quelli preoperatori e rimane pressoch? costante fino al termine dei 30 giorni di monitoraggio. Dal momento che variazioni della pressione intraoculare sono note interferire con il processo di guarigione a seguito di danno retinico ( Journal of Ophthalmology 2017, 2017:3172138), la totale assenza di alterazioni nella IOP degli animali trattati con HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, ne supporta appieno l?utilizzo come sostituto dell?umor vitreo.
La rilevazione della quantit? residua di HYADD<?>-4 presente nei campioni di umor vitreo prelevati dai conigli trattati ha evidenziato come, a 30 giorni dall?intervento di vitrectomia, persista uno 0.5% di HYADD<?>-4 depolimerizzata (percentuale sul volume totale del campione), ed un 21.9% di HYADD<?>-4 tal quale (anche in questo caso, intesa come percentuale sul volume totale del campione). Questo risultato evidenzia come HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, sia stabile nella camera vitrea, come dimostrato dalla persistenza in sede a 30 giorni dalla sostituzione del vitreo. Nel contempo HYADD<?>-4 risulta inoltre essere completamente biodegradabile, come dimostrato dal fatto che la sua quantit? percentuale rispetto al volume dell?umor vitreo, pari verosimilmente al 100% al momento dell?intervento chirurgico di vitrectomia con sostituzione completa dell?umor vitreo, si riduce drasticamente 30 giorni dopo l?intervento, raggiungendo addirittura valori prossimi a zero nel caso di HYADD<?>-4 depolimerizzata. Questi dati dimostrano altres? come la depolimerizzazione consenta di modularne il tempo di permanenza nella camera vitrea a seconda della necessit?. HYADD<?>-4 tal quale ? infatti in grado di permanere nella camera vitrea sul lungo termine, rappresentando circa il 20% del volume dell?umor vitreo 30 giorni dopo l?intervento chirurgico, mentre HYADD<?>-4 depolimerizzata persiste per un periodo di durata medio-lunga, risultando presente in piccole quantit? a 30 giorni dall?intervento.
I livelli di transtiretina (TTR) sono considerati un ottimo biomarcatore per la funzionalit? retinica, risultando pi? elevati in condizioni di maggior acuit? visiva ( , Br J Ophthalmol 2009, 93:1539-45). Come evidente in FIGURA 2, gli animali sottoposti a danno retinico che hanno ricevuto olio di silicone come sostituto vitreale presentano livelli estremamente bassi di TTR, mediamente pari a 0,4 ng/mL, rispetto ai 3,9 ng/mL di TTR rilevati nei campioni di vitreo prelevati da animali di controllo non trattati. Sorprendentemente, nei campioni di vitreo prelevati da animali trattati con HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata, si rilevano livelli di TTR molto pi? elevati, pari rispettivamente a 1,6 o 1,2 ng/mL, rispetto all?olio di silicone. Dunque HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, utilizzata come sostituto vitreale stimola un aumento dei livelli proteici di TTR rispettivamente pari a 4 o 3 volte quello raggiunto nel vitreo di animali trattati con olio di silicone, il che significa che promuove un miglior recupero della funzionalit? retinica rispetto all?olio di silicone, sostituto vitreale attualmente in uso nella pratica chirurgica.
L?emoglobina ? una proteina normalmente presente nei globuli rossi del sangue, dove svolge il ruolo di trasportare l?ossigeno attraverso il torrente sanguigno, dagli alveoli polmonari dove l?ossigeno viene assorbito ai tessuti periferici che lo utilizzano per il proprio metabolismo. Nell?umor vitreo l?emoglobina pu? essere fisiologicamente presente in quantit? molto ridotta, ma in condizioni patologiche pu? aumentare considerevolmente, come ad esempio in presenza di sanguinamenti e/o danni intraoculari ed in seguito ad interventi chirurgici a livello oftalmico. Come riportato in FIGURA 3, la quantificazione dei livelli proteici di emoglobina nell?umor vitreo dei conigli trattati con olio di silicone ha rivelato come questi siano 3 volte superiori rispetto ai livelli di emoglobina nell?umor vitreo dei conigli non trattati di controllo (0,37 mg/mL nel caso del trattamento con olio di silicone vs 0,13 mg/mL per i controlli). I livelli di emoglobina osservati nell?umor vitreo di animali trattati con HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata sono rispettivamente pari a 0,16 e 0,22 mg/mL, e dunque nettamente inferiori a quelli osservati nel caso dell?olio di silicone, ad indicare un recupero nettamente migliore dall?intervento chirurgico.
In conclusione, HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata si rivela estremamente adatta a fungere da sostituto vitreale. La sperimentazione svolta, e qui descritta, ha infatti evidenziato che:
? HYADD<?>-4 non determina alcuna anomalia nella IOP, risultando dunque ideale per favorire il mantenimento in posizione e la guarigione della retina;
? HYADD<?>-4 ? biodegradabile, infatti dopo 30 giorni dalla sostituzione completa del vitreo ? presente in quantit? percentuali ridotte rispetto all?iniziale 100%, e non necessita perci? di un secondo intervento di rimozione dalla camera vitrea;
? HYADD<?>-4 ? stabile in camera vitrea, e la sua stabilit? pu? essere modulata attraverso la depolimerizzazione, come evidenziato dalla maggiore stabilit? osservata per HYADD?-4 tal quale (non depolimerizzato) rispetto a HYADD?-4 depolimerizzata;
? HYADD<?>-4 promuove un miglior recupero dal danno retinico rispetto all?olio di silicone attualmente in uso nella pratica clinica, come dimostrato dai livelli proteici pi? elevati di TTR e dalla riduzione dei livelli di emoglobina.
ESEMPIO 4. Valutazione in vivo della tollerabilit? e dell?efficacia come sostituto vitreale dell?amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4), come tale o depolimerizzata, dopo intervento di distacco della retina indotto tramite iniezione subretinale nel quadrante inferiore dell?occhio, con successiva vitrectomia e sostituzione completa del vitreo.
Materiali e Metodi
Lo studio ? stato condotto su 9 conigli New Zealand White (NZW), per ciascuno dei quali sono stati trattati sia l?occhio destro che il sinistro, suddivisi nei seguenti gruppi sperimentali:
1. Gruppo HYADD<?>-4: 3 animali (6 occhi) trattati con HYADD?-4 tal quale;
2. Gruppo depolymerized HYADD<?>-4: 3 animali (6 occhi) trattati con HYADD<?>-4 depolimerizzata, i.e. HYADD<?>-4 sottoposta a trattamento termico per 2 ore a 121?C come da ESEMPIO 1;
3. Gruppo Silicone Oil: 3 animali (6 occhi) trattati con olio di silicone. Dopo essere stati adeguatamente anestetizzati ed in seguito ad accurata disinfezione di entrambi gli occhi, i conigli sono stati sottoposti a distacco chirurgico della retina. Il distacco ha interessato una porzione compresa tra 1/4 ed 1/3 dell?intera retina, ed ? stato ottenuto iniettando 200 ?L di Balanced Salt Solution (BSS) attraverso un ago 38G nel quadrante inferiore di ciascun occhio. Successivamente ? stata effettuata una retinotomia nella medesima zona, utilizzando un bisturi, e la retina ? stata riattaccata tramite scambio fluido-aria e trattamento con laser. Infine, immediatamente dopo la chirurgia con laser, gli occhi trattati sono stati sottoposti alla sostituzione dell?umor vitreo con HYADD<?>-4, HYADD<?>-4 depolimerizzata o olio di silicone a seconda del gruppo di appartenenza, utilizzando un apposito strumento per vitrectomia. Dopo la procedura chirurgica, ? stato applicato sugli occhi operati un unguento antibiotico ed i conigli sono stati monitorati sino al risveglio.
Lo stato del distacco retinico ? stato monitorato tramite tomografia a coerenza ottica (Optical Coherence Tomography, OCT), che consente di visualizzare il fondo dell?occhio e dunque la retina stessa, a 1, 7, 14 e 28 giorni dall?intervento.
La tollerabilit? ? stata valutata attraverso l?esame macroscopico degli occhi, orientato alla rilevazione di qualsiasi sintomo evidente di irritazione o infiammazione oculare. Il monitoraggio ? stato effettuato un giorno prima dell?intervento chirurgico (baseline) e dopo 7 o 28 giorni dall?intervento stesso. E? stata prestata particolare attenzione ai seguenti aspetti:
? Iperemia (hyperemia), ossia arrossamento dell?occhio, noto indice di irritazione ed infiammazione;
? Chemosi (chemosis) o edema congiuntivale, ? anch?essa un segno non specifico di irritazione agli occhi, che si manifesta come una protrusione della congiuntiva bulbare rispetto ai tessuti sottostanti dovuta alla formazione di una raccolta edematosa;
? Secrezioni oculari (discharge), che possono essere costituite da muco, pus o un eccesso di lacrime, anch?esse collegate ad uno stato di irritazione e/o infiammazione dell?occhio.
Ciascuno di questi tre aspetti ? stato quantificato per ciascun occhio trattato attraverso l?assegnazione di un punteggio da 0 a 4, dove 0 ? interpretato come totale assenza del sintomo mentre 4 indica che il sintomo ? presente in massimo grado.
Risultati e Conclusioni
Il monitoraggio del distacco retinico tramite OCT ha permesso di rilevare la graduale rimarginazione della retina in tutti i gruppi sperimentali. Entro il giorno 28, la maggior parte dei distacchi di retina sono apparsi in rimarginazione attiva, con poche sezioni di retina distaccate. Questa evidenza supporta l?efficacia di HYADD<?>-4 come tale o depolimerizzata nel coadiuvare la rimarginazione del danno retinico nel quadrante inferiore della retina.
L?osservazione dei sintomi macroscopici di irritazione ed infiammazione dell?occhio, iperemia, chemosi e secrezione oculare, ? stata effettuata allo scopo di valutare la tollerabilit? di HYADD<?>-4 come tale o depolimerizzata nella camera vitrea (Figure 4-6). Un giorno prima dell?intervento chirurgico (baseline) tutti gli animali non hanno mostrato alcun segno di irritazione oculare, ottenendo punteggi medi pari o prossimi a zero per ogni gruppo sperimentale.
A 7 giorni dall?intervento tutti gli animali hanno manifestato iperemia. Il sintomo ? andato riducendosi, ritornando ai livelli basali (pari a 0) a 28 giorni dall?intervento, negli occhi trattati con HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata, mentre nel caso dell?olio di silicone ? stato possibile osservare un marcato peggioramento del sintomo, con il raggiungimento di un punteggio medio superiore a 1,5.
Chemosi e secrezioni oculari si sono occasionalmente presentate a 7 giorni dall?intervento chirurgico negli animali trattati con HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata, raggiungendo punteggi medi sempre inferiori a 0,5, che attestano livelli trascurabili di questi sintomi. Dopo 28 giorni dall?intervento, nessun animale trattato con HYADD<?>-4 tal quale o depolimerizzata ha mostrato segni di chemosi o di secrezioni oculari (punteggio medio pari a 0 per ognuno dei due sintomi), indicando la totale assenza di segni di irritazione o infiammazione oculare. Viceversa, gli animali trattati con olio di silicone hanno manifestato livelli rilevanti di chemosi a 7 giorni dall?intervento, con punteggio medio superiore a 1,5, che non si sono normalizzati nemmeno dopo 28 giorni dall?intervento, attestandosi su un punteggio medio pari a 1,5. In modo simile, livelli costanti di secrezioni oculari con punteggio medio superiore a 0,5 sono stati osservati per gli occhi trattati con olio di silicone sia a 7 che a 28 giorni dall?intervento.
Nel complesso, questi dati dimostrano che HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, determina un miglior decorso post-operatorio rispetto all?olio di silicone in seguito a danno localizzato nel quadrante inferiore della retina. Infatti gli occhi trattati con olio di silicone presentano segni di irritazione/infiammazione, sia a 7 che a 28 giorni dall?intervento, in livelli non trascurabili (come dimostrato dai punteggi medi sempre superiori a 0,5). Viceversa, gli occhi trattati con HYADD<?>-4, tal quale o depolimerizzata, non presentano alcun sintomo di irritazione o infiammazione oculare a 28 giorni (punteggi medi pari a 0 sia per iperemia che per chemosi e secrezioni oculari).
Breve descrizione delle figure
FIG. 1. Monitoraggio della pressione intraoculare (IntraOcular Pressure, IOP), misurata prima (pre) ed a diversi intervalli di tempo (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 10, 15, 18, 20, 23, 25, 28 o 30 giorni) dopo l?intervento di danno retinico con concomitante iniezione di sostituto vitreale scelto tra: olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
FIG. 2. Livelli di transtiretina (TTR), rilevati tramite saggio ELISA, nell?umor vitreo di conigli non trattati (CTRL) o dopo 30 giorni dal danno retinico con concomitante iniezione di sostituto vitreale scelto tra: olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico tal quale (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
FIG. 3. Livelli di emoglobina (Hemoglobin, Hb), rilevati tramite saggio ELISA, nell?umor vitreo di conigli non trattati (CTRL) o dopo 30 giorni dal danno retinico con concomitante iniezione di sostituto vitreale scelto tra: olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
FIG. 4. Valutazione dell?iperemia oculare manifestata da conigli in condizioni normali (Baseline) e dopo 7 (Day 7) o 28 (Day 28) giorni dall?intervento di distacco della retina indotto tramite iniezione subretinale nel quadrante inferiore dell?occhio, con successiva vitrectomia e sostituzione completa del vitreo con olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
FIG. 5. Valutazione della chemosi oculare manifestata da conigli in condizioni normali (Baseline) e dopo 7 (Day 7) o 28 (Day 28) giorni dall?intervento di distacco della retina indotto tramite iniezione subretinale nel quadrante inferiore dell?occhio, con successiva vitrectomia e sostituzione completa del vitreo con olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
FIG. 6. Valutazione della secrezione oculare manifestata da conigli in condizioni normali (Baseline) e dopo 7 (Day 7) o 28 (Day 28) giorni dall?intervento di distacco della retina indotto tramite iniezione subretinale nel quadrante inferiore dell?occhio, con successiva vitrectomia e sostituzione completa del vitreo con olio di silicone (Silicon Oil), amide esadecilica dell?acido ialuronico (HYADD<?>-4) o amide esadecilica dell?acido ialuronico depolimerizzata tramite trattamento al calore (depolymerized HYADD<?>-4).
Claims (10)
1. Composizioni comprendenti esadecilammide dell?acido ialuronico con grado di ammidazione compreso nell?intervallo 1-3%, per uso nel trattamento chirurgico dell?occhio.
2. Composizioni per uso secondo la rivendicazione 1 nel trattamento chirurgico del segmento posteriore dell?occhio, compresa la camera vitrea.
3. Composizioni per uso secondo la rivendicazione 1 come sostituti biocompatibili dell?umor vitreo in seguito a vitrectomia.
4. Composizioni per uso secondo le rivendicazioni da 1 a 3 in cui l?esadecilammide dell?acido ialuronico ? ottenuta per derivatizzazione di acido ialuronico di peso molecolare Mw da 50.000 a 13 x 10<6 >Da.
5. Composizioni per uso secondo la rivendicazione 4 in cui l?esadecilammide dell?acido ialuronico ? ottenuta per derivatizzazione di acido ialuronico di peso molecolare Mw compreso tra 400.000 e 3 x 10<6 >Da, preferibilmente tra 400.000 e 1 x 10<6 >Da, pi? preferibilmente tra 500.000 e 730.000 Da.
6. Composizioni per uso secondo le rivendicazioni 1-5 in cui l?esadecilammide dell?acido ialuronico ? impiegata in forma immodificata.
7. Composizioni per uso secondo le rivendicazioni 1-5 in cui l?esadecilammide dell?acido ialuronico ? depolimerizzata.
8. Composizioni per uso secondo la rivendicazione 6 in cui l?esadecilammide dell?acido ialuronico ? depolimerizzata per trattamento termico a 121?C per almeno 25 minuti, preferibilmente per 2 ore.
9. Composizioni per uso secondo le rivendicazioni 1-8 in forma di idrogel comprendente l?esadecilammide dell?acido ialuronico in concentrazioni non superiori al 12% in peso, preferibilmente in concentrazioni dell?8% in peso.
10. Composizioni per uso secondo le rivendicazioni 1-9 in cui il trattamento chirurgico ? effettuato in caso di traumi severi che interessino l?intero bulbo oculare, infezioni a carico della parte interna dell?occhio, retinopatia diabetica, distacco di retina, rottura o formazione di membrana epiretinica nella porzione centrale della retina, emorragia del vitreo, presenza di miodesopsie, o addensamenti, nell?umor vitreo, complicazioni di interventi a carico del segmento anteriore dell?occhio, ad esempio in seguito a chirurgia della cataratta.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT102021000032111A IT202100032111A1 (it) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo |
| PCT/IB2022/062536 WO2023119152A1 (en) | 2021-12-22 | 2022-12-20 | Novel biocompatible substitutes of the vitreous humor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT102021000032111A IT202100032111A1 (it) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| IT202100032111A1 true IT202100032111A1 (it) | 2023-06-22 |
Family
ID=81327315
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT102021000032111A IT202100032111A1 (it) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| IT (1) | IT202100032111A1 (it) |
| WO (1) | WO2023119152A1 (it) |
Citations (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0013772B1 (de) | 1979-01-24 | 1983-05-25 | BBC Aktiengesellschaft Brown, Boveri & Cie. | Vorrichtung zur Demontage von einer Rotor-Endschaufel |
| EP0138572A2 (en) | 1983-10-11 | 1985-04-24 | FIDIA S.p.A. | Hyaluronic acid fractions having pharmaceutical activity, methods for preparation thereof, and pharmaceutical compositions containing the same |
| US4713448A (en) | 1985-03-12 | 1987-12-15 | Biomatrix, Inc. | Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues |
| EP0341745B1 (en) | 1988-05-13 | 1994-12-14 | FIDIA S.p.A. | Crosslinked carboxy polysaccharides |
| EP0216453B1 (en) | 1985-07-08 | 1996-03-20 | FIDIA S.p.A. | Esters of hyaluronic acid and their salts. |
| EP0716688A1 (en) | 1993-07-30 | 1996-06-19 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Process for the preparation and purification of high molecular weight hyaluronic acid |
| EP0702699B1 (en) | 1994-03-23 | 2000-05-17 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Sulfated hyaluronic acid wherein the number of sulfate groups per repetitive unit is from 0.5 to less than 2 |
| EP0839159B1 (en) | 1995-07-17 | 2001-08-08 | Med Ab Q | Polysaccharide gel composition |
| EP1339753A2 (en) | 2000-08-31 | 2003-09-03 | FIDIA FARMACEUTICI S.p.A. | Percarboxylated polysaccharides, and a process for their preparation |
| EP1095064B1 (en) | 1998-07-06 | 2005-06-08 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Amides of hyaluronic acid and the derivatives thereof and a process for their preparation |
| US20100069938A1 (en) | 2008-09-12 | 2010-03-18 | Anteis Sa | Glaucoma surgery |
| EP2614088A1 (en) | 2010-09-09 | 2013-07-17 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the production of hyaluronic acid in escherichia coli or bacillus subtilis |
| EP2614087A1 (en) | 2010-09-09 | 2013-07-17 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the production of hyaluronic acid in escherichia coli or bacillus megaterium |
| EP2988792A1 (en) | 2013-04-24 | 2016-03-02 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Pharmaceutical compositions containing hyaluronic acid for use in the treatment of black disk disease |
| EP3491027A1 (en) | 2016-07-28 | 2019-06-05 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the preparation and purification of the sodium salt of hyaluronic acid |
| EP3655138A1 (en) | 2017-07-18 | 2020-05-27 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the purification of hyaluronic acid |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE442820B (sv) * | 1984-06-08 | 1986-02-03 | Pharmacia Ab | Gel av tverbunden hyaluronsyra for anvendning som glaskroppssubstitut |
-
2021
- 2021-12-22 IT IT102021000032111A patent/IT202100032111A1/it unknown
-
2022
- 2022-12-20 WO PCT/IB2022/062536 patent/WO2023119152A1/en unknown
Patent Citations (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0013772B1 (de) | 1979-01-24 | 1983-05-25 | BBC Aktiengesellschaft Brown, Boveri & Cie. | Vorrichtung zur Demontage von einer Rotor-Endschaufel |
| EP0138572A2 (en) | 1983-10-11 | 1985-04-24 | FIDIA S.p.A. | Hyaluronic acid fractions having pharmaceutical activity, methods for preparation thereof, and pharmaceutical compositions containing the same |
| US4713448A (en) | 1985-03-12 | 1987-12-15 | Biomatrix, Inc. | Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues |
| EP0216453B1 (en) | 1985-07-08 | 1996-03-20 | FIDIA S.p.A. | Esters of hyaluronic acid and their salts. |
| EP0341745B1 (en) | 1988-05-13 | 1994-12-14 | FIDIA S.p.A. | Crosslinked carboxy polysaccharides |
| EP0716688A1 (en) | 1993-07-30 | 1996-06-19 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Process for the preparation and purification of high molecular weight hyaluronic acid |
| EP0702699B1 (en) | 1994-03-23 | 2000-05-17 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Sulfated hyaluronic acid wherein the number of sulfate groups per repetitive unit is from 0.5 to less than 2 |
| EP0839159B1 (en) | 1995-07-17 | 2001-08-08 | Med Ab Q | Polysaccharide gel composition |
| EP1095064B1 (en) | 1998-07-06 | 2005-06-08 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Amides of hyaluronic acid and the derivatives thereof and a process for their preparation |
| EP1339753A2 (en) | 2000-08-31 | 2003-09-03 | FIDIA FARMACEUTICI S.p.A. | Percarboxylated polysaccharides, and a process for their preparation |
| US7683038B2 (en) * | 2000-08-31 | 2010-03-23 | Fidia Farmaceutici S.P.A. | Percarboxylated polysaccharides, and a process for their preparation |
| US20100069938A1 (en) | 2008-09-12 | 2010-03-18 | Anteis Sa | Glaucoma surgery |
| EP2614088A1 (en) | 2010-09-09 | 2013-07-17 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the production of hyaluronic acid in escherichia coli or bacillus subtilis |
| EP2614087A1 (en) | 2010-09-09 | 2013-07-17 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the production of hyaluronic acid in escherichia coli or bacillus megaterium |
| EP2988792A1 (en) | 2013-04-24 | 2016-03-02 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Pharmaceutical compositions containing hyaluronic acid for use in the treatment of black disk disease |
| US20160067274A1 (en) * | 2013-04-24 | 2016-03-10 | Fidia Farmaceutici S.P.A. | Pharmaceutical compositions containing hyaluronic acid for use in the treatment of black disc disease |
| EP3491027A1 (en) | 2016-07-28 | 2019-06-05 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the preparation and purification of the sodium salt of hyaluronic acid |
| EP3655138A1 (en) | 2017-07-18 | 2020-05-27 | Fidia Farmaceutici S.p.A. | Process for the purification of hyaluronic acid |
Non-Patent Citations (19)
| Title |
|---|
| ALOVISI ET AL., JOURNAL OF OPL7THALMOLOGY, vol. 2017, 2017, pages 3172138 |
| ALOVISI ET AL., JOURNAL OFOPHTHALMOLOGY, vol. 2017, 2017, pages 3172138 |
| ALOVISI ET AL., JOURNALOF0PHTL7ALMOLOGY, vol. 2017, 2017, pages 3172138 |
| BARTH ET AL., GRAEFE'S, vol. 254, 2016, pages 697 - 703 |
| FOLK ET AL., OPHTHALMIC SURGERY, vol. 17, 1986, pages 299 - 306 |
| GRAY H.LEWIS W. H.: "Anatomy of the human body", 1918, LEA & FEBIGER |
| JEONG ET AL., TOXICOLOGY IN VITR0, vol. 70, 2021, pages 105034 |
| KOSTER ET AL., DOCUMENTA OPHTHALMOLOGICA, vol. 64, 1986, pages 13 - 17 |
| LENG ET AL., J GERONTOL A BIOL SCI MED SCI, vol. 63, 2008, pages 879 - 84 |
| MALTESE ET AL., BIOMATERIALS, vol. 27, 2006, pages 5134 - 42 |
| MOSHIRFAR M ET AL., STATPEARLS, 2021 |
| OSHINA ET AL., JOURNAL OF BIOMEDICAL OPTICS, vol. 26, 2021, pages 100901 |
| SCHNICHELS ET AL., PLOS, vol. 12, 2017, pages e0172895 |
| SILVA ET AL., RHEOLOGICAL ACTA, vol. 56, 2017, pages 377 - 86 |
| SU ET AL., JOURNAL OF BIOMATERIALS SCIENCE, vol. 22, 2011, pages 1777 - 97 |
| SU ET AL., JOURNAL OFBIOMATERIALS SCIENCE, vol. 22, 2011, pages 1777 - 97 |
| TERBOJEVICH, CARBOHYDR RES, vol. 149, 1986, pages 363 - 377 |
| VAN AKEN ET AL., BRJ OPHTHALMOL, vol. 93, 2009, pages 1539 - 45 |
| VATNE ET AL., ACTA OPHTHALMOL CO PENH, vol. 64, 1986, pages 169 - 72 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2023119152A1 (en) | 2023-06-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wang et al. | A self-healing and injectable hydrogel based on water-soluble chitosan and hyaluronic acid for vitreous substitute | |
| US6635267B1 (en) | Hyaluronic acid gel, process for the preparation thereof and medical materials containing the same | |
| Alovisi et al. | Vitreous substitutes: old and new materials in vitreoretinal surgery | |
| Kleinberg et al. | Vitreous substitutes: a comprehensive review | |
| Baino | Towards an ideal biomaterial for vitreous replacement: Historical overview and future trends | |
| JP2008526965A (ja) | 網膜修復のためのタンポナーデ組成物および方法 | |
| JPH09511586A (ja) | 眼部装着材 | |
| Xue et al. | Genipin-crosslinked donor sclera for posterior scleral contraction/reinforcement to fight progressive myopia | |
| TW201127425A (en) | Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute | |
| JP4006039B2 (ja) | 光架橋ヒアルロン酸コンタクトレンズ | |
| CN113214505B (zh) | 巯基化甲壳素/壳聚糖衍生物水凝胶及其制备方法和应用 | |
| Schepens et al. | The vitreous and vitreoretinal interface | |
| Wang et al. | In-situ forming PEG-engineering hydrogels with anti-fouling characteristics as an artificial vitreous body | |
| US20210244829A1 (en) | Fluorescence coloring for eye surgery | |
| IT202100032111A1 (it) | Nuovi sostituti biocompatibili dell’umor vitreo | |
| EP4328258A1 (en) | Thiolated polysaccharide derivative hydrogel, preparation method therefor, and application thereof | |
| Ran et al. | Super-fast in situ formation of hydrogels based on multi-arm functional polyethylene glycols as endotamponade substitutes | |
| Shroff | An eye on numbers: A ready reckoner in ophthalmology | |
| Brooks | Phacoemulsification cataract surgery in the horse | |
| KR20040011426A (ko) | 수술용 비흡출 전이성 점탄물 | |
| Suri et al. | Biophysical evaluation of vitreous humor, its constituents and substitutes | |
| RU2286170C1 (ru) | Глазная пленка | |
| Sebag et al. | Development and aging of the vitreous | |
| CN108853598A (zh) | 一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在视网膜手术中的应用 | |
| WO2023091120A2 (en) | A hydrogel formulation used as vitreous substitute and production method thereof |