CZ308106B6 - Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití - Google Patents
Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ308106B6 CZ308106B6 CZ2016-375A CZ2016375A CZ308106B6 CZ 308106 B6 CZ308106 B6 CZ 308106B6 CZ 2016375 A CZ2016375 A CZ 2016375A CZ 308106 B6 CZ308106 B6 CZ 308106B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- polysaccharide
- aldehyde
- polysaccharides
- process according
- derivatives
- Prior art date
Links
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 60
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 58
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 36
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 26
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 26
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 3
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims abstract 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 39
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 37
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 36
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 30
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 claims description 18
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 18
- FPJHWYCPAOPVIV-VOZMEZHOSA-N (2R,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-acetamido-2-(hydroxymethyl)-6-methoxy-3-sulfooxyoxan-4-yl]oxy-4,5-dihydroxy-3-methoxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H]([C@@H](OC)[C@H](O)[C@H]2O)C(O)=O)[C@H]1NC(C)=O FPJHWYCPAOPVIV-VOZMEZHOSA-N 0.000 claims description 16
- 229920000288 Keratan sulfate Polymers 0.000 claims description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 14
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 claims description 14
- KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N keratan Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H](O)[C@@H]3O)O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]2O)COS(O)(=O)=O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H]1O KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N 0.000 claims description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 14
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 14
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 claims description 12
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 claims description 10
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 claims description 10
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 10
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 9
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 claims description 9
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 claims description 9
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 claims description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 5
- NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N dess–martin periodinane Chemical compound C1=CC=C2I(OC(=O)C)(OC(C)=O)(OC(C)=O)OC(=O)C2=C1 NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N sulfolane Chemical compound O=S1(=O)CCCC1 HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims 1
- 239000003880 polar aprotic solvent Substances 0.000 claims 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 claims 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 19
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 13
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000235 effect on cancer Effects 0.000 abstract 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 56
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 46
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 41
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 33
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 22
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 22
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 19
- -1 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy group Chemical group 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002585 base Substances 0.000 description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N methyl-cyclopentane Natural products CC1CCCC1 GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 6
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Chemical group O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 3
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical group O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 3
- DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 3
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 102100040606 Dermatan-sulfate epimerase Human genes 0.000 description 2
- 101710127030 Dermatan-sulfate epimerase Proteins 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N Trolox Chemical compound O1C(C)(C(O)=O)CCC2=C1C(C)=C(C)C(O)=C2C GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 238000000914 diffusion-ordered spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 2
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-CLQWQSTFSA-N l-iduronic acid Chemical group O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-CLQWQSTFSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- OEANUJAFZLQYOD-CXAZCLJRSA-N (2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-acetamido-3-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-methoxyoxan-4-yl]oxy-4,5-dihydroxy-3-methoxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](OC)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC)[C@H](C(O)=O)O1 OEANUJAFZLQYOD-CXAZCLJRSA-N 0.000 description 1
- GOWMBYUZXIZENX-CAUSLRQDSA-N 1-[(2r,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-4-(hexadecylamino)pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(NCCCCCCCCCCCCCCCC)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 GOWMBYUZXIZENX-CAUSLRQDSA-N 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002567 Chondroitin Polymers 0.000 description 1
- 238000006646 Dess-Martin oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- BCUVLMCXSDWQQC-KCDKBNATSA-N Galactose 6-sulfate Chemical compound OS(=O)(=O)OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O BCUVLMCXSDWQQC-KCDKBNATSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N L-idopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 102000004896 Sulfotransferases Human genes 0.000 description 1
- 108090001033 Sulfotransferases Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNOZWUKQPJXOIG-XSBHQQIPSA-L [(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[[(1r,3s,4r,5r,8s)-3,4-dihydroxy-2,6-dioxabicyclo[3.2.1]octan-8-yl]oxy]-4-[[(1r,3r,4r,5r,8s)-8-[(2s,3r,4r,5r,6r)-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-sulfonatooxyoxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-2,6-dioxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl]oxy]-5-hydroxy-2-( Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H]2OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H]4OC[C@H]3O[C@H](O)[C@@H]4O)[C@@H]1O)OS([O-])(=O)=O)[C@@H]2O ZNOZWUKQPJXOIG-XSBHQQIPSA-L 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910001420 alkaline earth metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000003705 background correction Methods 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N chondroitin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@H](O)C=C(C(O)=O)O1 DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000006352 cycloaddition reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002084 enol ethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 150000002271 geminal diols Chemical class 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M methacrylate group Chemical group C(C(=C)C)(=O)[O-] CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- RLNWRDKVJSXXPP-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-[(2-bromoanilino)methyl]piperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCCCC1CNC1=CC=CC=C1Br RLNWRDKVJSXXPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/728—Hyaluronic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/731—Carrageenans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/737—Sulfated polysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0036—Galactans; Derivatives thereof
- C08B37/0042—Carragenan or carragen, i.e. D-galactose and 3,6-anhydro-D-galactose, both partially sulfated, e.g. from red algae Chondrus crispus or Gigantia stellata; kappa-Carragenan; iota-Carragenan; lambda-Carragenan; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0069—Chondroitin-4-sulfate, i.e. chondroitin sulfate A; Dermatan sulfate, i.e. chondroitin sulfate B or beta-heparin; Chondroitin-6-sulfate, i.e. chondroitin sulfate C; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Řešení se týká přípravy nových derivátů polysacharidů s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 pyranozového cyklu. Postu přípravy je založen na oxidaci OH skupiny v poloze 6 na aldehyd, následné elmininaci za vzniku dvojné −C=C− vazby v polohách 4 a 5 a finální redukci aldehydické skupiny v poloze 6 na původní alkohol. Takové deriváty polysacharidů vykazují zvýšenou antioxidační aktivitu a některé z nich i selektivní negativní vliv na viabilitu rakovinových buněk.
Description
Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití
Oblast techniky
Vynález se týká derivátů polysacharidů, obsahujících ve struktuře heterocyklus s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 podle strukturního vzorce X, polysgcharíd
OH
R pcrfysacharid (X), kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH.
Dále se vynález týká přípravy derivátů podle vzorce X z výchozího polysacharidů obsahujícího strukturní fragment Y, kde samotná modifikace pak může být zjednodušeně popsána následujícím schématem:
polysBcf.i'··.:' θ ’
OH ,O^ ' V oolysachand r\
-O poiysscharid
'^“polysacíiarid (X) (Y) kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH, a R1 je skupina -SO2-ONa, -SO2-OH, nebo -H, přičemž absolutní konfigurace na uhlíku 4 může být R nebo S.
Dále se vynález týká použití těchto nenasycených derivátů, které oproti nativním polysacharidům vykazují zvýšené antioxidační vlastnosti a některé z nich selektivně inhibují růst rakovinových buněk.
Dosavadní stav techniky
Polysacharidy obecného vzorce Y
Polysacharidy mají v organismech širokou škálu funkcí, například stavební, zásobní nebo i regulační. Mezi polymery přirozeně se vyskytující v organismech patří i polysacharidy obecného vzorce Y
R!O pólyššchariď' .OH
O v\ ,-O *R poíysscharid (Y), kde R je skupina CH3-CO-NH- nebo -OH, a R1 je skupina -SO2-ONa, -SO2-OH, nebo -H. Sem patří například chondroitin sulfát, dermatan sulfát, karagenan, keratan sulfát nebo kyselina hyaluronová.
Chondroitin sulfát je lineární, sulfatovaný a negativně-nabitý glykosaminoglykan složený z opakujících se monomemích jednotek /V-acctyl-D-galaktosaminu a D-glukuronové kyseliny vzájemně propojených β(1 —>3) a β(1^4) O-glykosidickými vazbami (strukturní vzorec chondroitin sulfátu viz níže),
kde
R1 je -H nebo -Na,
R2 je -H, -SO2-ONa nebo -SO2-OH.
Zdrojem chondroitin sulfátu jsou živočišné pojivové tkáně, kde se váže na proteiny a tvoří tak součást proteoglykanů. Sulfatace chondroitinu se uskutečňuje pomocí sulfotransferáz v různých polohách a různém zastoupení. Jedinečný vzorec sulfatace jednotlivých poloh v polymemím řetězci kóduje specifickou biologickou aktivitu chondroitin sulfátu. Chondroitin sulfát je důležitým stavebním blokem chrupavky v kloubech, kterým dodává odolnost v tlaku a obnovuje rovnováhu ve složení kloubového maziva (Baeurle S. A. a kol. Polymer 50, 1805, 2009).
Dermatan sulfát je lineární, sulfatovaný a negativně-nabitý glykosaminoglykan složený z opakujících se monomemích jednotek /V-acctyl-D-galaktosaminu a L-iduronové kyseliny vzájemně propojených β(1 —>3) a β(1^·4) O-glykosidickými vazbami (strukturní vzorec dermatan sulfátu viz níže),
kde
R1 je -H nebo -Na,
R2 je -H, -SO2-OH, nebo -SO2-ONa
Dermatan sulfát se od chondroitin sulfátu odlišuje přítomností L-iduronové kyseliny, která je C5 epimerem D-glukuronové kyseliny. Opačná konfigurace iduronové kyseliny umožňuje lepší flexibilitu řetězců dermatan sulfátu a zabezpečuje jejich specifickou glykosaminoglykanproteinovou interakci v okolním prostoru. Tyto interakce přispívají k regulaci vícero buněčných procesů, jako např. migraci, proliferaci, diferenciaci nebo angiogenezi. Proměna chondroitin sulfátu na dermatan sulfát je zabezpečená pomocí tří enzymů, a to dermatan sulfát epimerázy 1 (DS-epil), dermatan sulfát epimerázy 2 (DS-epi2) a dermatan 4-O-sulfotransferázy (D4ST1) (Thelin M„ a kol. FEBS Journal 280, 2431, 2013).
Keratan sulfát patří do skupiny lineárních sulfatovaných polysacharidů obsahující D-galaktózu, /V-acctylglukosamin a galaktóza-6-sulfát spojených vazbami β( 1 —>3) a β( 1 —>4), který se
-2CZ 308106 B6 stavbou a vazbami podobá chondroitin sulfátu. Nachází se v rohovce, chrupavkách, kostech a pojivové tkáni (strukturní vzorec keratan sulfátu viz níže),
HO
OR2 \ ..,-0 -i
OH \ -ta
NHAc kde R2 je -H, -SO2-OH, nebo -SCE-ONa
Karagenany patří do skupiny lineárních sulfatovaných polysacharidů, které se získávají extrakcí z červených mořských řas. Základními stavebnými jednotkami jsou galaktóza a její 3,6-anhydro derivát, které jsou vzájemně propojeny α(1^·3) nebo β( 1 —>4) O-glykosidickými vazbami. Existují tři základní skupiny karagenanů, které se liší ve stupni sulfatace a rozpustnosti ve vodě. Kappa-karagenan má jednu sulfátovou skupinu v dimeru a tvoří tvrdé gely ve vodném prostředí, lota-karagenan obsahuje dva sulfáty a tvoří měkké gely, přičemž lambda-karagenan se třemi sulfáty nevykazuje gelující vlastnosti.
Kyselina hyaluronová je nesulfatovaný glykosaminoglykan, který je složený ze dvou opakujících se jednotek D-glukuronové kyseliny a /V-acctyl-D-glukosaminu.
OH NHAC kde
R1 je H nebo Na.
Molekulová hmotnost nativní kyseliny hyaluronové se pohybuje v rozsahu 5.104 až 5.106g.mol_1. Tento značně hydrofilní polysacharid tvoří součást pojivových tkání, kůže, synoviální tekutiny kloubů, hraje významnou roli v řadě biologických procesů jako je organizace proteoglykanů, hydratace a diferenciace buněk. Vzhledem k tomu, že se jedná o polymer tělu vlastní a tudíž biodegradovatelný, stává se vhodným substrátem pro tkáňové inženýrství, nebo jako nosič biologicky aktivních látek.
Polysacharidy obsahující násobné vazby
Polysacharidy s -C=C- násobnou vazbou, která je součástí sacharidového cyklu, a přitom není umístěná na konci řetězce, jsou velmi vzácné. Z běžných polysacharidů jsou popsány například 5,6-nenasycené deriváty celulózy známe jako celulozény (Vigo T. L. a kol. Polymers for Advanced Technologies, 10, 6, 311-320, 1999), případně jejich 2,3-nenasycené analogy. Postup přípravy 5,6-nenasycených derivátů je založen na eliminační reakci odstupující skupiny v poloze 6 a vodíku v poloze 5 v bazickém prostředí, přičemž produktem je enol ether (-C=C- násobná vazba v konjugaci s heterocyklickým kyslíkem). Příprava 2,3-nenasycených derivátů celulózy, amylózy nebo xylanu (D. Horton a kol. Carbohydrate Research, 40,2,345-352, 1975) vyžaduje kromě přítomnosti odstupujících skupin i redukční činidlo, nej častěji zinek, přičemž produktem je standardní alken (bez konjugace násobné vazby s kyslíkem).
Využití polysacharidů obsahujících násobné vazby
-3CZ 308106 B6
Aplikace jsou převážně zaměřeny na modifikaci -C=C- násobné vazby, která není přímou součástí sacharidového cyklu. Tyto metody jsou postaveny na připojení nové substance na skelet polymeru, kde dochází k zásadní změně struktury čili ke ztrátě nativního charakteru póly sacharidů. V takových případech se násobná vazba běžně používá v polymerizačních (Bellini D. WO96/37519), adičních (Khetan S. a kol. Soft Matter, 5, 1601-1606, 2009) nebo cykloadičních reakcích (Nimmo Ch. M. a kol. Biomacromolecules, 12, 824—830,2011; Bobula, T. a kol. Carbohydrate. Polymers, 125, 153-160, 2015). Tyto způsoby mohou vést jak k efektivnímu síťování polysacharidů (Collins Μ. N. a kol. Carbohydrate Polymers, 92, 12621279, 2013; Hacker M. C. a kol., Inter. J. of Mol. Sc., 16, 27677-706, 2015), tak k selektivnímu vázaní aktivních substancí na polymer (Mero A. a kol. Polymers, 6, 346-369, 2014). Velmi populární je i možnost využít násobní vazby metakrylátové skupiny pro uskutečnění polymerizační reakce (Granstrom M. a kol. EP2899214).
Existuje jenom několik způsobů, jak zavést násobnou -C=C- vazbu přímo do sacharidového cyklu v polymemím řetězci. Jedním z nich je enzymatické štěpení polymerů pomocí lyáz, kde dvojná vazba vzniká na neredukujícím konci polymeru (Kelly S. J. a kol. Glycobiology, 11,4, 294-304, 2001), v tomto případě kyseliny hyaluronové (viz schéma níže).
lyázs
NaOOC
HOOn _,OH
NaOOC íVoi
NHAc
OH .--O .,OH
ŮHAc
To znamená, že zastoupení takové modifikace je silně závislé na molekulové hmotnosti, například při molekulové hmotnosti 4.104 g.rnol-1 je modifikován jeden disacharid ze sta, v případě molekulové hmotnosti 4.105 g.rnol-1 je modifikován jeden disacharid z tisíce. Je tedy zřejmé, že pokud se nejedná o oligomery polysacharidů, je tento typ modifikace pro vyšší molekulové hmotnosti polymerů nepatrný a výsledný vysokomolekulámí polymer se prakticky neliší od výchozího.
Druhý způsob umožňuje zavést dvojnou vazbu do struktury polysacharidů v poloze 4 a 5 po celé délce řetězce, takže lze efektivně modifikovat i polymery s vyšší molekulovou hmotností (Buffa R. a kol. WO2014/023272, Bobula T. a kol. Carbohydrate Polymers, 136, 1002-1009, 2016). Tento způsob však vytváří -C=C- násobnou vazbu, která je v přímé konjugaci se silně elektronakceptomí aldehydickou skupinou. Tato modifikace výrazně mění chemické vlastnosti polysacharidů, protože umožňuje kovalentní vázání poměrně široké škály nukleofilů, nej častěji aminů. Z výše uvedeného také vyplývá, že takhle modifikovaný polymer má citelně vyšší elektrofilní charakter, tudíž se chemicky výrazně liší od nativního polymeru. Lze ho taky považovat za méně aktivní antioxidant v porovnání s nemodifikovaným polymerem.
Tyto nedostatky odstraňuje řešení popsané v tomto vynálezu, kde modifikovaný polymer oproti nemodifikovanému neobsahuje žádnou reaktivní elektrofilní skupinu. Oproti tomu dvojnou vazbu v konjugaci s heterocyklickým kyslíkem lze považovat za seskupení s nukleofilními (antioxidačními) vlastnostmi.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou deriváty polysacharidů obsahující ve své struktuře heterocyklus s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 podle strukturního vzorce X,
-4CZ 308106 B6 χΟΗ \
^OÁ polysachand - C'V' 'polys^charíd
R (X), kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH.
Deriváty mají molekulovou hmotnost v rozmezí 5.103 až 5.105 g.mol-1 a výchozí polysacharidy pro přípravu derivátů podle vynálezu jsou s výhodou vybrány ze skupiny obsahující chondroitin sulfát, karagenan, dermatan sulfát, kyselinu hyaluronovou nebo keratan sulfát.
Dále se vynález týká způsobu přípravy, který je založen na třech krocích (viz schéma níže):
RÝ ,-0H poíysacharíď poíysacherid .oxidace
poíysadiartó'''
poÍysacharid ii S.eliminace i
3.redukce
kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH, a R1 je skupina -SO2-ONa, -SO2-OH nebo -H
1. Oxidace - zavedení aldehydické skupiny do polohy 6 sacharidového cyklu.
Oxidace primární hydroxylové skupiny v poloze 6 na aldehyd. Reakci lze provést například použitím oxidačního systému 2,2,6,6-tetramethyl-l-piperidinyloxyl radikálu TEMPO / NaClO ve vodě. Tento krok probíhá s výhodou ve vodě při teplotě 0 až 10 °C, molámí množství NaClO je v rozmezí 0,03 až 0,8 ekv. a molámí množství TEMPO je v rozmezí 0,005 až 0,2 ekv. vzhledem k opakující se jednotce póly sacharidů. Výchozí póly sacharid může mít molekulovou hmotnost v rozsahu 5.103 až 5.105 g.mol-1 a použije se s výhodou 0,1 až 8 % hmotn. vodný roztok póly sacharidů. Nakonec se do reakční směsi pro ukončení reakce za účelem likvidace zbytků nezreagovaného činidla (chlornanu) může přidat například etanol, thiosíran sodný aj. Alternativně lze oxidaci provést pomocí systému l,l,l-triacetoxy-l,l-dihydro-l,2benziodoxol-3(lH)-onu (DMP) při teplotě 10 až 50 °C v DMSO, kde množství DMP je v rozmezí 0,05 až 2 ekv. vzhledem k opakující se jednotce póly sacharidů.
2. Eliminace -
2a. pokud R1 = -H, dochází k eliminaci vody (dehydratace).
Je možné ji s výhodou uskutečnit ve vodně-organickém prostředí, kde organické rozpouštědlo je mísitelné s vodou a objemový poměr rozpouštědlo/voda je v rozsahu 3/1 až 1/2. S výhodou lze v tomto kroku použít báze například pyridin, triethylamin nebo /V./V-diisopiopylcthylamin, nebo anorganické báze, např. Ca(OH)2. Množství báze v reakci je 0,01 až 20 ekvivalentů, s výhodou 5 až 10 ekvivalentů přepočteno na opakující se jednotku póly sacharidů. Jako organická
-5CZ 308106 B6 rozpouštědla je možné použít aprotická polární rozpouštědla mísitelná s vodou, s výhodou DMSO nebo sulfolan. Oxidace probíhá 0,1 až 12 hod, s výhodou 1 až 4 hod, druhý krok reakce probíhá 12 až 150 hodin, s výhodu 20 až 40 h, při teplotě 30 až 80 °C, s výhodou 50 až 60 °C.
2b. pokud R1 = -SOz-ONa, resp. -SO2-OH, dochází k eliminaci NaO-SO2-Ona, resp. HO-SO2ONa. Pokud je skupina -OR1 v poloze 4 cyklu v antiperiplanámí pozici k vodíku v poloze 5, probíhá eliminace spontánně bez nutnosti přídavku bází a bez nutnosti navýšení reakční teploty. Doba trvání reakce kroku 1 + 2b je 0,1 až 12 hod, s výhodou 1 až 4 hod. Pokud není skupina OR1 v poloze 4 sacharidového cyklu v antiperiplanámí pozici k vodíku v poloze 5, k efektivní eliminaci lze použít i postup popsaný v části 2a.
3. Redukce - aldehydická skupina je selektivně redukovaná s borohydridy, s výhodou s NaBH4 za vzniku primárního alkoholu -CH2-OH se zachováním násobné vazby v poloze 4 a 5 sacharidového cyklu. Ačkoli by odborník očekával kromě redukce aldehydické skupiny -CHO (resp. geminálního diolu -CH(OH)2) i redukci -C=C- vazby, překvapivě k redukci dvojné vazby —C—C— při způsobu podle vynálezu nedochází. Množství redukčního činidla může být v rozsahu 0,1 až 10 ekvivalentů přepočteno na opakující se jednotku polysacharidů, s výhodou 0,3 až 2 ekvivalentů. Reakci lze provést ve vodě při teplotě 5 až 40 °C při pH 5 až 10, s výhodou při teplotě 15 až 25 °C a pH 6 až 8 v čase 1 až 24 h. Výchozí roztok aldehydu polysacharidů má s výhodou koncentraci 0,1 až 8 % hmotn.
Z uvedeného vyplývá, že pro přípravu derivátů polysacharidů podle způsobu chráněného tímto vynálezem je nezbytné, aby vstupní polysacharid obsahoval strukturu Y, _ 1Λ OH
R O ,z '\.Λ
Γ.Ο.Λ ..--.-A ,Ιθ'·. , . .
poiysachand'U '--v--- -polysachanc (Y) která zahrnuje (1^-3) propojený sacharidový cyklus, dále primární -CH2-OH skupinu v poloze 6 a -OH, -SO2-OH nebo -SO2-ONa skupinu v poloze 4. Skupina v poloze 2 není klíčová pro úspěšný průběh dané modifikace, pro většinu polysacharidů je R = -OH nebo -NH-CO-CH3.
Dále se vynález týká způsobu použití derivátů polysacharidů obecného vzorce X. Jak už bylo zmíněno výše, řešení popsané v tomto vynálezu nabízí nové typy derivátů polysacharidů se zvýšenou nukleofilicitou (antioxidačními vlastnostmi), přitom jenom s nepatrnou změnou primární struktury polysacharidů způsobenou eliminací vodíku z polohy 5 a skupiny -OH, -OSO2-OH nebo -O-SO2-ONa z polohy 4. Antioxidační schopnosti těchto nových derivátů byly prokázány standardním stanovením s 2,2-difenyl-l-pikrylhydrazyl radikálem, kde byl zjištěn významný rozdíl mezi nenasycenými deriváty polysacharidů připravenými podle vynálezu a nasycenými (nemodifikovanými) analogy. Proto lze deriváty podle vynálezu použít například pro přípravu materiálů s antioxidačním účinkem.
Dále bylo zjištěno, že pokud je polysacharidem kyselina hyaluronová, lze nenasycený derivát použít pro přípravu materiálů s antirakovinovým účinkem. Biologické vlastnosti připravených derivátů byly testovány na několika liniích rakovinových buněk, kde byla ve všech případech pozorována snížená viabilita, přičemž růst standardních fibroblastů nebyl potlačen v celém rozsahu testovaných koncentrací.
Termín polysacharid znamená polysacharid obsahující strukturní jednotku Y, jako například kyselinu hyaluronovou, karagenan, dermatan sulfát, keratan sulfát nebo chondroitin sulfát nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl.
-6CZ 308106 B6
Termín farmaceuticky přijatelná sůl znamená soli, jež jsou bezpečné a účinné pro in vivo použití a mají požadovanou biologickou aktivitu. Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují s výhodou ionty alkalických kovů nebo iontů kovů alkalických zemin, výhodněji Na+, K+, Mg+ nebo Li+.
Realizace řešení popsaného v tomto vynálezu není technologicky komplikovaná a nevyžaduje použití drahých chemikálií, rozpouštědel nebo izolačních postupů.
Objasnění výkresů
Obr. 1 - vliv ΔΗΑ připraveného podle Příkladu 25 na viabilitu buněk
Graf zobrazuje průběh inhibice růstu karcinogenních buněk MDA-MB-231 - prsní adenokarcinom, A-549 - plicní adenokarcinom, HEP-G2 - hepatocelulámí karcinom v porovnání s inhibicí NHDF - primárních lidských kožních fibroblastů
Postup je popsán v příkladu 27.
Obr. 2 - antioxidační vlastnosti materiálů AHA a ACS v porovnání s nemodifikovanými polysacharidy HA, CS a standardem Trolox - 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2karboxylová kyselina
HA - kyselina hyaluronová
AHA - kyselina hyaluronová dehydratovaná v poloze 4 a 5 (Příklad 22)
CS - chondroitin sulfát
ACS - chondroitin sulfát dehydratovaný v poloze 4 a 5 (Přiklad 2) testováno pomocí 2,2-difenyl-l-pikrylhydrazylu (DTTH) postupem popsaným v příkladu 23
T-test statistické významnosti - * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001
Příklady uskutečnění vynalezu
DS = stupeň substituce = 100 % * (molámí množství modifikované jednotky polysacharidů) / (molámí množství opakujících se jednotek polysacharidů)
Zde používaný výraz ekvivalent (ekv) se vztahuje na opakující se jednotku příslušného polysacharidů, není-li uvedeno jinak. Procenta se uvádějí jako hmotnostní procenta, pokud není uvedeno jinak.
Molekulová hmotnost výchozích polysacharidů je hmotnostně střední stanovená pomocí metody SECMALLS.
Příklad 1
Oxidace a eliminace chondroitin sulfátu (CS) = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu CS
Do dvouprocentního vodného roztoku CS (200 mg, Mw = 4.104 g.mol-1) vychlazeného na 5 °C s obsahem hydrogenfosfátu sodného dodekahydrátu (2,2 ekv), bromidu sodného (0,8 ekv) a 4AcNH-TEMPO (0,01 ekv.) se postupně přidával vodný roztok chlornanu sodného (0,8 ekv, 11%
-7CZ 308106 B6 aktivního chloru). Směs se míchala 2 h při teplotě 5 °C. Následně byl k reakci přidán etanol (10 ekv) a reakce byla míchána další hodinu při laboratorní teplotě. Produkt byl izolován srážením s IPA a analyzován pomocí NMR.
DS = 23 % (stanoveno z NMR)
Příklad 2
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu CS = Příprava ACS
Byl připraven 2% w/v roztok α,β-nenasyceného aldehydu CS (200 mg, 0,5 mmol) v destilované vodě, roztok byl vychlazen na 5 °C a následně byly k němu přidány 2 ekvivalenty borohydridu sodného. Reakční směs byla míchána 4 h při 5 °C. Produkt byl izolován srážením s izopropanolem a analyzován pomocí NMR,
DS = 25 % (stanoveno z NMR), Mw = 2.104 g.mol-1 (stanoveno SECMALLS)
Spektrální analýza ACS: NMR 'H (500 MHz, D2O, δ ppm): 2,02 a 2,04 (3H; Ac-NH-; bs); 4,03 (2H; H6; bs); 4,22 (1H; H2; bs); 4,26 (1H; H3; bs); 5,06 (1H; Hl; bs); 5,18 (1H; H4; bs); NMR ’H-’H COSY (D2O); krospíky; δ ppm: 4,22-5,06; 4,26-5,18; NMR ’H-13C HSQC (D2O); krospíky; δ ppm: 4,03-61,0; 4,22-50,5; 4,26-73,4; 5,06-98,3; 5,18-98,9; NMR DOSY (D2O); log D ((2,02 and 2,04; Ac-NH-); (4,03; H6); (4,22; H2); (4,26; H3); (5,06; H4); (5,18; Hl)) ~ 10,4 m2s_1; log D (4,72; H2O) ~ -8;6 mV1; IR (KBr; cm1): 1660 (v -C=C- st);
Příklad 3
Oxidace a eliminace dermatan sulfátu (DeS) = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu DeS
Do dvouprocentního vodného roztoku DeS (200 mg, 0,42 mmol) vychlazeného na 5 °C s obsahem hydrogenfosforečnanu sodného dodekahydrátu (2,2 ekv), bromidu sodného (0,8 ekv) a 4-AcNH-TEMPO (0,01 ekv) se postupně přidával vodný roztok chlornanu sodného (0,8 ekv, 11% aktivního chloru), směs se míchala 2 h při teplotě 5 °C. Následně byl k reakci přidán etanol (10 ekv) a reakce byla míchána další hodinu při laboratorní teplotě. Produkt byl izolován srážením s IPA a analyzován pomocí NMR.
DS = 20 % (stanoveno z NMR)
Příklad 4
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu dermatan sulfátu = Příprava ADeS
Byl připraven 2% w/v roztok α,β-nenasyceného aldehydu DeS (200 mg, 0,5 mmol) v destilované vodě. Roztok byl vychlazen na 5 °C a následně byl k němu přidán borohydrid sodný (2 ekvivalenty na disacharid DeS). Reakční směs byla míchána 4 h při 5 °C. Produkt byl izolován srážením s izopropanolem a analyzován pomocí NMR.
DS = 23 % (stanoveno z NMR)
Spektrální analýza ADeS: NMR 'H (500 MHz, D2O, δ ppm): 2,01 (3H, Ac-ΝΗ-, bs), 5,05 (1H, Hl,bs), 5,17 (1H, Hl,bs).
-8CZ 308106 B6
Příklad 5
Oxidace a eliminace karagenanu (KA) = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu KA
Do jednoprocentního vodného roztoku KA (200 mg, 0,31 mmol) vychlazeného na 10 °G s obsahem hydrogenfosforečnanu sodného dodekahydrátu (2,2 ekv), bromidu sodného (0,8 ekv) a 4-AcNH-TEMPO (0,01 ekv) se postupně přidával vodný roztok chlornanu sodného (0,8 ekv, 11% aktivního chloru). Směs se míchala 2 h při teplotě 10 °C. Následně byl k reakci přidán etanol (10 ekv) a reakce byla míchána další hodinu při laboratorní teplotě. Produkt byl izolován srážením s IPA a analyzován pomocí NMR.
DS = 10 % (stanoveno z NMR)
Příklad 6
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu karagenanu = Příprava ΔΚΑ
Byl připraven 2% w/v roztok α,β-nenasyceného aldehydu KA (200 mg, 0,5 mmol) v destilované vodě. Roztok byl vychlazen na 5 °C a následně byl k němu přidán borohydrid sodný (2 ekvivalenty na disacharid KA). Reakční směs byla míchána 4 h při 5 °C. Produkt byl izolován srážením s izopropanolem a analyzován pomocí NMR.
DS = 13 % (stanoveno z NMR)
NMR Ή (500 MHz, D2O, δ ppm): 5,07 (IH, Hl, bs), 5,18 (IH, Hl, bs),
Příklad 7
Oxidace keratan sulfátu (KS) = Příprava KS-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku KS (1 g, 2.104 g.mol-1) s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,01 ekv) a NaHCO; (20 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,3 ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 24 h při teplotě 0 °C, pak se přidal 0,1 g tiosulfátu sodného a směs byla míchaná ještě 10 minut. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCO3) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 3 % (stanoveno z NMR)
Příklad 8
Eliminace KS-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu KS
Do tříprocentního roztoku KS-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=3 %, příklad 7) ve vodě se přidalo 6,7 ml DMSO a báze DIPEA (5 ekv). Směs se míchala 72 h při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 2 % (stanoveno z NMR),
Ή NMR (D2O) δ 9,22 ( s, IH, CH=G), 6,32 (m, IH, -CW=C-CH=O)
Příklad 9
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu KS = Příprava AKS
-9CZ 308106 B6
Do 2% roztoku α,β-nenasyceného aldehydu KS (200 mg, Příklad 8) v destilované vodě, byl přidán borohydrid sodný (2 ekv) při 5 °C. Reakční směs byla míchána 3 h při 5 °C pak srážena s izopropanolem a analyzována pomocí NMR.
DS = 2 % (stanoveno z NMR)
Ή NMR (D2O) 5,05 (1H, Hl, bs), 5,17 (1H, H4, bs)
Příklad 10
Oxidace kyseliny hyaluronové (HA) = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku HA (1 g, 2.105 g.mol-1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,01 ekv.) a NaHCOs (20 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,5 ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 12 h při teplotě 0 °C, pak se přidal 0,5 ml etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1 % NaCl, 0,1% NaHCOs) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 10 % (stanoveno z NMR)
Příklad 11
Oxidace HA = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku HA (1 g, 2.105 g.mol-1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), N-acetylamino-TEMPO (0,01 ekv) a NaHCOs (20 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0, ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 12 h při teplotě 10 °C, pak se přidal 0,1 ml etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCCh) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 9 % (stanoveno z NMR)
Příklad 12
Oxidace HA = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku HA (1 g, 2.105 g.mol-1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,2 ekv) a NaHCOs (10 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,3 ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 48 h při teplotě 5 °C, pak se přidal 0,1 ml etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1 % NaHCOs) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 5 % (stanoveno z NMR)
Příklad 13
Oxidace kyseliny hyaluronová (HA) = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku hyaluronanu (1 g, 2.105 g.mol-1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,01 ekv) a NaHCOs (20 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,7 ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 0,5 h při teplotě 0 °C, pak se přidal 0,1 ml etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a
- 10CZ 308106 B6 dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCCh) třikrát 5 litrů (Ix denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 9 % (stanoveno z NMR)
Příklad 14
Oxidace kyseliny hyaluronová (HA) = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního vodného roztoku HA (1 g, 2.105 g.mol-1), s obsahem NaCl 1%, KBr 1%), TEMPO (0,01 ekv) a NaHCO; (20 ekv), se postupně přidával vodný roztok NaClO (0,5 ekv) pod dusíkem. Směs se míchala 12 h při teplotě 0 °C, pak se přidal 0,1 ml etanolu a směs byla míchaná ještě 1 hodinu. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1% NaCl, 0,1% NaHCOs) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 10 % (stanoveno z NMR)
Příklad 15
Oxidace kyseliny hyaluronová (HA) = Příprava HA-aldehydu
Do jednoprocentního roztoku kyselé formy hyaluronanu (1 g, 1.105 g.mol-1), v bezvodém DMSO, se pňdal 1,2 ekvivalentu l,l,l-triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benziodoxol-3(lH)-onu (Dess-Martin Periodinan) a směs se míchala 5 h při teplotě 20 °C. Výsledný roztok pak byl zředěn destilovanou vodou na 0,2% a dialyzován oproti směsi (0,1 % NaCl, 0,1% NaHCO3) třikrát 5 litrů (1 x denně) a oproti destilované vodě sedmkrát 5 litrů (2 x denně). Výsledný roztok byl pak odpařen a analyzován.
DS 40 % (stanoveno z NMR)
Příklad 16
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=40 %, příklad 15) ve vodě se přidalo 6,7 ml DMSO a báze DIPEA (5 ekv). Směs se míchala 72 h při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 20 % (stanoveno z NMR),
Ή NMR (D2O) δ 9,24 (s, 1H, CH=O, 6,32 (m, 1H, -CH=C-CH=O)
UV-Vis (D2O) 252 nm, π-π* přechod α,β-nenasycený aldehyd
Příklad 17
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10%, příklad 10) ve vodě se přidalo 6,7 ml DMSO a báze triethylaminu (20 ekv). Směs se míchala 150 h při teplotě 30 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR)
- 11 CZ 308106 B6
Příklad 18
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 10) ve vodě se přidalo 6,7 ml DMSO a báze pyridinu (0,01 ekv). Směs se míchala 12 h při teplotě 80 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 3 % (stanoveno z NMR),
Příklad 19
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 10) ve vodě se přidalo 1,7 ml DMSO a báze pyridin (10 ekv). Směs se míchala 48 h při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 4 % (stanoveno z NMR),
Příklad 20
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 10) ve vodě se přidalo 10 ml DMSO a báze DIPEA (5 ekv). Směs se míchala 48 h při teplotě 60 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR),
Příklad 21
Eliminace HA-aldehydu = Příprava α,β-nenasyceného aldehydu HA
Do tříprocentního roztoku HA-aldehydu (0,1 g, stupeň oxidace DS=10 %, příklad 10) ve vodě se přidalo 6,7 ml sulfolanu a báze DIPEA (5 ekv). Směs se míchala 72 h při teplotě 50 °C. Výsledný roztok byl pak srážen směsí isopropanol/hexan a tuhý podíl sušen ve vakuu.
DS 5 % (stanoveno z NMR),
Příklad 22
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu HA = Příprava ΔΗΑ
Do 2% roztoku α,β-nenasyceného aldehydu HA (200 mg, Příklad 16) v destilované vodě, byl přidán borohydrid sodný (10 ekv) při 5 °C. Reakční směs byla míchána 1 h při 5 °C, pak srážena s izopropanolem a analyzována pomocí NMR.
DS = 20 % (stanoveno z NMR)
Ή NMR (D2O) 5,06 (1H, Hl, bs), 5,17 (1H, Hl, bs)
- 12 CZ 308106 B6
Příklad 23
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu HA = Příprava AHA
Do 2% roztoku α,β-nenasyceného aldehydu HA (200 mg, Příklad 17) v destilované vodě, byl přidán borohydrid sodný (0,1 ekv) při 5 °C. Reakční směs byla míchána 20 h při 5 °C, pak srážena s izopropanolem a analyzována pomocí NMR,
DS = 4 % (stanoveno z NMR)
Příklad 24
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu HA = Příprava AHA
Do 2% roztoku α,β-nenasyceného aldehydu HA (200 mg, Příklad 17) v destilované vodě, byl přidán borohydrid sodný (1 ekv) při 40 °C. Reakční směs byla míchána 1 h při 40 °C, pak srážena s izopropanolem a analyzována pomocí NMR,
DS = 5 % (stanoveno z NMR)
Příklad 25
Redukce α,β-nenasyceného aldehydu HA = Příprava AHA
Do 2% roztoku α,β-nenasyceného aldehydu HA (200 mg, Příklad 17) v destilované vodě, byl přidán borohydrid sodný (2 ekv) při 20 °C. Reakční směs byla míchána 4 h při 20 °C, pak srážena s izopropanolem a analyzována pomocí NMR,
DS = 5 % (stanoveno z NMR)
Příklad 26
Stanovení antioxidační aktivity (obrázek 2).
Antioxidační aktivita polysacharidů AHA připraveného podle příkladu 22 a ACS připraveného podle příkladu 2, byla stanovená pomocí stabilního volného radikálu 2,2-difenyl-lpikrylhydrazylu (DPPH). Toto stanovení bylo uskutečněno podle literatury (Brand-Williams W. a kol, LWT - Food Science and Technology, 28, 1, 25-30, 1995) s malou modifikací. Stručně, 100 pl 0,01% roztoku DPPH v metanolu bylo přidáno do 100 μΐ testované substance rozpuštěné v 50 mM Tris pH 7,1. Pokles absorbance byl měřen po 15 min při 515 nm. Trolox (6-Hydroxy2,5,7,8-tetramethylchroman-2-karboxylová kyselina) byl použit jako pozitivní kontrola. Data byla měřena třemi nezávislými experimenty. Pro analýzu statistické významnosti byla data vyhodnocena T-testem * p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001 (obrázek 2).
Příklad 27
Testování cytotoxicity derivátů připravených podle příkladu 25 (obrázek 1)
Bylo porovnáváno cytotoxické působení derivátu HA na nenádorových buňkách - primárních lidských kožních fibroblastech (NHDF) a dále na nádorových liniích prsního karcinomu (MDAMB-231), plicního karcinomu (A-549) a hepatocelulámího karcinomu (HEP-G2). Pro experimenty byly buňky kultivovány za standardních podmínek (37 °C, 5% CCE) v příslušném médiu (10% FBS - fetální bovinní sérum). Při dosažení 80% konfluence byly buňky zpasážované, spočítané pomocí automatického počítadla ČASY TT, Roche a nasazené na 96jamkové panely v hustotě 5000 buněk na jamku v 200 μΐ média. Po 24 hodinách bylo médium
- 13 CZ 308106 B6 vyměněno za roztoky testovaných látek v koncentracích 1000, 500, 100 a 10 pg/ml 10% média.
V čase 24, 48 a 72 hodin po ovlivnění byla měřena viabilita buněk pomocí MTT testu - do každé jamky bylo přidáno 20 pl roztoku MTT (5 mg/ml), následovala 2,5 hodinová inkubace, po které byly buňky lyžovány solubilizačním roztokem (IPA:DMSO 1:1 s 10% Triton X-100 a 9,9% 37% HC1) po dobu 30 minut. Následně se měřila absorbance na přístroji Microplate reader VERSAmax při vlnové délce 570 run a 690 run (korekce pozadí). Viabilita ovlivněných buněk byla při vyhodnocení vztažena k neovlivněné kontrole, která na obrázku 1 odpovídá nulové hodnotě. Hodnoty vyšší, než nula značí aktivaci buněk (žádný cytotoxický efekt derivátů) a naopak hodnoty nižší, než nula ukazují na sníženou viabilitu buněk - tedy cytotoxický efekt derivátů. V případě NHDF je z obrázku č. 1 zřejmé, že testovaný derivát nepůsobil cytotoxický.
V případě nádorových linií (MDA-MB-231, A-549, HEP-G2) byl zaznamenán cytotoxický efekt derivátů. Na základě výsledků uvedených testů lze vyvodit potenciální protinádorový účinek derivátu (Obrázek 1).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (14)
1. Nenasycené deriváty polysacharidů obsahující ve struktuře minimálně jeden heterocyklus s dvojnou vazbou v polohách 4 a 5 podle strukturního vzorce X, .OH (X), kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH a kde póly sacharidy jsou vybrány ze skupiny sestávající z chondroitin sulfátu, karagenanu, dermatan sulfátu, kyseliny hyaluronové nebo keratan sulfátu.
2. Deriváty polysacharidů podle nároku 1, kde molekulová hmotnost derivátů je v rozmezí 5.103 až 5.104 5 g.mol-1.
3. Způsob přípravy derivátů polysacharidů definovaných v nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se výchozí polysacharid obsahující fragment Y
(Y) kde R je skupina -NH-CO-CH3 nebo -OH, a R1 je skupina -SO2-ONa, -SO2-OH nebo -H, v prvém kroku oxiduje na aldehyd v poloze 6, v druhém kroku se eliminuje v polohách 4 a 5 cyklu za vzniku dvojné vazby a ve třetím kroku se selektivně redukuje aldehydická skupina -CHO v poloze 6 na skupinu -CH2OH při současném zachování dvojné vazby v polohách 4 a 5 cyklu.
4. Způsob přípravy podle nároku 3, vyznačující se tím, že výchozím polysacharidem je chondroitin sulfát, karagenan, dermatan sulfát, kyselina hyaluronová nebo keratan sulfát.
- 14CZ 308106 B6
5. Způsob přípravy podle nároku 3 nebo 4, vyznačující se tím, že oxidace v pozici C-6 v prvém kroku probíhá buď pomocí systému 2,2,6,6-tetramethyl-l-piperidinyloxyl radikálu neboli TEMPO-radikálu, nebo R3-TEMP0/NaC10, kde R3 je vodík nebo skupina N-acetyl, ve vodě při teplotě 0 až 10 °C, kde molámí množství NaClO je v rozmezí 0,3 až 0,8 ekv. a molámí množství R3-TEMPO je v rozmezí 0,005 až 0,2 ekv. vzhledem k opakující se jednotce polysacharidů, nebo pomocí l,l,l-triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benziodoxol-3(lH)-onu (DMP) při teplotě 10 až 50 °C v DMSO, kde množství DMP je v rozmezí 0,05 až 2 ekv. vzhledem k opakující se jednotce polysacharidů.
6. Způsob přípravy podle kteréhokoliv z nároků 3 až 5, vyznačující se tím, že výchozím póly sacharidem je kyselina hyaluronová nebo keratan sulfát a že oxidovaný póly sacharid ve druhém kroku podléhá eliminaění reakci ve směsi voda/polámí aprotické rozpouštědlo v přítomnosti báze při teplotě 30 až 80 °C, s výhodou při teplotě 50 až 60 °C.
7. Způsob přípravy podle nároku 6, vyznačující se tím, že množství báze je 0,01 až 20 ekvivalentů, s výhodou 5 až 10 ekvivalentů vzhledem k opakující se jednotce polysacharidů, přičemž báze je vybrána ze skupiny zahrnující organické báze, s výhodou pyridin, triethylamin nebo N-diisopropylethylamin, nebo anorganické báze, s výhodou Ca(OH)2.
8. Způsob přípravy podle nároku 6 nebo 7, vyznačující se tím, že aprotické rozpouštědlo je mísitelné s vodou a zahrnuje s výhodou DMSO nebo sulfolan, a objemový poměr rozpouštědlo/voda je v rozsahu 3/1 až 1/2.
9. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 6 až 8, vyznačující se tím, že druhý krok reakce probíhá po dobu 12 až 150 hodin.
10. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 3 až 5, vyznačující se tím, že výchozím polysacharidem je chondroitin sulfát, karagenan nebo dermatan sulfát a že se oxidovaný polysacharid ve druhém kroku spontánně eliminuje přímo v reakční směsi za vzniku α,βnenasyceného aldehydu a spontánní eliminace probíhá při stejných podmínkách, při kterých proběhl první krok oxidace.
11. Způsob přípravy podle kteréhokoliv z nároků 3 až 10, vyznačující se tím, že výchozí polysacharid má molekulovou hmotnost v rozsahu 5.103 až 5.105 g-mol“1.
12. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 3 až 11, vyznačující se tím, že ve třetím kroku se přidá borohydrid sodný v množství 0,1 až 10 ekvivalentů, s výhodou 0,3 až 2 ekvivalentů přepočteno na opakující se jednotku polysacharidů, ve vodě při teplotě 5 až 40 °C, s výhodou při teplotě 15 až 25 °C, při pH v rozmezí 5 až 10, s výhodou 6 až 8.
13. Použití derivátů definovaných v nároku 1 nebo 2 pro přípravu prostředku se zvýšeným antioxidačním účinkem.
14. Použití derivátů definovaných v nároku 2, kde polysacharidem je kyselina hyaluronová, pro přípravu prostředku s antirakovinovým účinkem.
Priority Applications (12)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ2016-375A CZ308106B6 (cs) | 2016-06-27 | 2016-06-27 | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití |
JP2018566522A JP6982321B2 (ja) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | 多糖類の不飽和誘導体,その調製方法及びその使用 |
PCT/CZ2017/050026 WO2018001394A1 (en) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof |
DK17746370.0T DK3475310T3 (da) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Umættede derivater af polysaccharider, fremgangsmåder til fremstilling deraf og anvendelse deraf |
PL17746370T PL3475310T3 (pl) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Nienasycone pochodne polisacharydów, sposób ich przygotowania i zastosowanie |
US16/311,745 US10618984B2 (en) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof |
EP17746370.0A EP3475310B1 (en) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof |
ES17746370T ES2790837T3 (es) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Derivados insaturados de polisacáridos, método de preparación y uso de los mismos |
BR112018075531-1A BR112018075531B1 (pt) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Derivados de polissacarídeos insaturados, método de preparação dos derivados de polissacarídeos e uso dos mesmos |
RU2018147560A RU2725500C1 (ru) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Ненасыщенные производные полисахаридов, способ их получения и их применения |
KR1020197002226A KR102327939B1 (ko) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | 다당류의 불포화 유도체, 그 제조 방법 및 용도 |
HUE17746370A HUE049730T2 (hu) | 2016-06-27 | 2017-06-26 | Poliszacharidok telítetlen származékai, azok elõállítási eljárása és azok alkalmazása |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ2016-375A CZ308106B6 (cs) | 2016-06-27 | 2016-06-27 | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ2016375A3 CZ2016375A3 (cs) | 2018-01-03 |
CZ308106B6 true CZ308106B6 (cs) | 2020-01-08 |
Family
ID=59506028
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ2016-375A CZ308106B6 (cs) | 2016-06-27 | 2016-06-27 | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10618984B2 (cs) |
EP (1) | EP3475310B1 (cs) |
JP (1) | JP6982321B2 (cs) |
KR (1) | KR102327939B1 (cs) |
BR (1) | BR112018075531B1 (cs) |
CZ (1) | CZ308106B6 (cs) |
DK (1) | DK3475310T3 (cs) |
ES (1) | ES2790837T3 (cs) |
HU (1) | HUE049730T2 (cs) |
PL (1) | PL3475310T3 (cs) |
RU (1) | RU2725500C1 (cs) |
WO (1) | WO2018001394A1 (cs) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11286231B2 (en) * | 2016-10-26 | 2022-03-29 | Wake Forest University Health Sciences | Hydrogen-bonding compounds, compositions comprising the same, and methods of preparing and using the same |
US11629329B2 (en) | 2017-10-11 | 2023-04-18 | Wake Forest University Health Sciences | Bioink compositions and methods of preparing and using the same |
CN116003639B (zh) * | 2023-01-31 | 2024-02-09 | 新疆农业大学 | 一种纤维素醛及其制备方法和应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011069474A2 (en) * | 2009-12-11 | 2011-06-16 | Contipro C A.S. | Oxidized derivative of hyaluronic acid, a method of preparation thereof and a method of modification thereof |
WO2014023272A1 (en) * | 2012-08-08 | 2014-02-13 | Contipro Biotech S.R.O. | Hyaluronic acid derivative, method of preparation thereof, method of modification thereof and use thereof |
Family Cites Families (192)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3075527A (en) | 1960-06-02 | 1963-01-29 | Chemway Corp | Sterile medicated strips |
US3720662A (en) | 1971-09-13 | 1973-03-13 | Nat Starch Chem Corp | Preparation of starch esters |
US3728223A (en) | 1971-10-08 | 1973-04-17 | Amano Pharma Co Ltd | Production of hyaluronidase from a strain of streptomyces |
GB1527592A (en) | 1974-08-05 | 1978-10-04 | Ici Ltd | Wound dressing |
CH628088A5 (en) | 1975-09-17 | 1982-02-15 | Dresden Arzneimittel | Process for obtaining streptococcal metabolic products |
US4205025A (en) | 1975-12-22 | 1980-05-27 | Champion International Corporation | Synthetic polymeric fibrids, fibrid products and process for their production |
JPS6033474B2 (ja) | 1978-05-11 | 1985-08-02 | 藤沢薬品工業株式会社 | 新規なヒアルロニダ−ゼbmp−8231およびその製造法 |
US4716224A (en) | 1984-05-04 | 1987-12-29 | Seikagaku Kogyo Co. Ltd. | Crosslinked hyaluronic acid and its use |
US4713448A (en) | 1985-03-12 | 1987-12-15 | Biomatrix, Inc. | Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues |
US4851521A (en) | 1985-07-08 | 1989-07-25 | Fidia, S.P.A. | Esters of hyaluronic acid |
GB8519416D0 (en) | 1985-08-01 | 1985-09-04 | Unilever Plc | Oligosaccharides |
JPS62104579A (ja) | 1985-10-30 | 1987-05-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | ヒアルロニダ−ゼの製造法 |
JPH0751064B2 (ja) | 1986-08-13 | 1995-06-05 | 生化学工業株式会社 | 新規なヒアルロニダ−ゼsd−678およびその製造法 |
IT1219587B (it) | 1988-05-13 | 1990-05-18 | Fidia Farmaceutici | Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati |
JPH0214019A (ja) | 1988-06-30 | 1990-01-18 | Tonen Corp | 繊維状成形物及びその製造方法 |
JPH0755961B2 (ja) | 1989-04-18 | 1995-06-14 | 工業技術院長 | 新規なヒアルロン酸誘導体及びその製造方法 |
US5522879A (en) | 1991-11-12 | 1996-06-04 | Ethicon, Inc. | Piezoelectric biomedical device |
IT1254704B (it) | 1991-12-18 | 1995-10-09 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Tessuto non tessuto essenzialmente costituito da derivati dell'acido ialuronico |
US5824335A (en) | 1991-12-18 | 1998-10-20 | Dorigatti; Franco | Non-woven fabric material comprising auto-crosslinked hyaluronic acid derivatives |
JP2855307B2 (ja) | 1992-02-05 | 1999-02-10 | 生化学工業株式会社 | 光反応性グリコサミノグリカン、架橋グリコサミノグリカン及びそれらの製造方法 |
FR2689131B1 (fr) | 1992-03-30 | 1994-05-20 | Oreal | Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire. |
JPH0625306A (ja) | 1992-04-21 | 1994-02-01 | Shiseido Co Ltd | 溶媒不溶化ヒアルロン酸及びその製造方法 |
IT1263316B (it) | 1993-02-12 | 1996-08-05 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Tessuto non tessuto multistrato in cui uno degli strati e' costituito essenzialmente da esteri dell'acido ialuronico |
NL9700003A (nl) | 1993-09-28 | 1997-07-01 | House Foods Corp | Werkwijze voor het inoculeren van Fistulina hepatica. |
US5616568A (en) | 1993-11-30 | 1997-04-01 | The Research Foundation Of State University Of New York | Functionalized derivatives of hyaluronic acid |
EP0701704B1 (en) | 1994-03-14 | 1999-12-15 | Seikagaku Corporation | Material to be worn on the eyeball |
US5455349A (en) | 1994-05-13 | 1995-10-03 | Polaroid Corporation | Vinylbenzyl thymine monomers |
ES2139097T3 (es) | 1994-09-27 | 2000-02-01 | Nycomed Imaging As | Agente de contraste. |
JP3308742B2 (ja) | 1994-11-17 | 2002-07-29 | 生化学工業株式会社 | 光架橋性ヒアルロン酸誘導体とその架橋体およびそれらの製造方法 |
US6025444A (en) | 1994-11-17 | 2000-02-15 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Cinnamic acid derivative |
US5690961A (en) | 1994-12-22 | 1997-11-25 | Hercules Incorporated | Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses |
AU708454B2 (en) | 1995-03-07 | 1999-08-05 | Novartis Ag | Photochemically cross-linked polysaccharide derivatives as supports for the chromatographic separation of enantiomers |
IT1281877B1 (it) | 1995-05-10 | 1998-03-03 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Sali di metalli pesanti di succinil derivati dell'acido ialuronico e loro impiego come potenziali agenti terapeutici |
IT1281886B1 (it) | 1995-05-22 | 1998-03-03 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Processo per la preparazione di idrogel ottenuti da derivati chimici dell'acido ialuronico mediante irradiazioni ultraviolette e loro |
PT850074E (pt) | 1995-08-29 | 2005-09-30 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Biomateriais para prevencao de aderencias pos-cirurgicas, constituidos por derivados de acido hialuronico |
DE69625658T2 (de) | 1995-09-13 | 2003-07-17 | Seikagaku Kogyo K.K.(Seikagaku Corp.), Tokio/Tokyo | Kontaktlinse auf Basis photogehärteter Hyaluronsäure |
DE19604706A1 (de) | 1996-02-09 | 1997-08-14 | Merck Patent Gmbh | Vernetzungsprodukte von Aminogruppen-haltigen Biopolymeren |
DE19616010C2 (de) | 1996-04-23 | 1998-07-09 | Seitz Filter Werke | Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung von Fibrets (Fibriden) aus Zellulosederivaten |
IT1287698B1 (it) | 1996-08-29 | 1998-08-18 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Fili da sutura essenzialmente costituiti da derivati esterei dello acido ialuronico |
US6632802B2 (en) | 1996-08-29 | 2003-10-14 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Hyaluronic acid esters, threads and biomaterials containing them, and their use in surgery |
US6162537A (en) | 1996-11-12 | 2000-12-19 | Solutia Inc. | Implantable fibers and medical articles |
CA2294756C (en) | 1997-07-03 | 2008-04-29 | Orquest, Inc. | Cross-linked polysaccharide drug carrier |
ITPD980037A1 (it) | 1998-02-25 | 1999-08-25 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Acido ialuronico solfatato e i suoi derivati legati covalentemente a polimeri sintetici pe la preparazione di biomateriali e per il rivesti |
DE69926876T2 (de) | 1998-04-30 | 2006-06-14 | Maruha Corp | Verbindungen, deren struktur derivate von glukuronsäure und glukosamin enthält, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung |
WO1999057158A1 (en) | 1998-05-07 | 1999-11-11 | Nederlandse Organisatie Voor Toegepast Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno | Process for selective oxidation of primary alcohols |
US6630457B1 (en) | 1998-09-18 | 2003-10-07 | Orthogene Llc | Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same |
US6472541B2 (en) | 1998-11-20 | 2002-10-29 | The Regents Of The University Of California | Protecting groups with increased photosensitivities |
IT1302534B1 (it) | 1998-12-21 | 2000-09-05 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Composizioni iniettabili, biocompatibili e biodegradabili comprendentialmeno un derivato dell'acido ialuronico, cellule condrogeniche, per |
AU1865100A (en) | 1998-12-23 | 2000-07-31 | Esparma Gmbh | Hyaluronate lyase used for promoting penetration in topical agents |
DE19917614C2 (de) | 1999-04-19 | 2001-07-05 | Thueringisches Inst Textil | Verfahren zur Herstellung von cellulosischen Formkörpern mit hohem Adsorptionsvermögen |
US6288043B1 (en) | 1999-06-18 | 2001-09-11 | Orquest, Inc. | Injectable hyaluronate-sulfated polysaccharide conjugates |
US7033603B2 (en) | 1999-08-06 | 2006-04-25 | Board Of Regents The University Of Texas | Drug releasing biodegradable fiber for delivery of therapeutics |
US6592794B1 (en) | 1999-09-28 | 2003-07-15 | Organogenesis Inc. | Process of making bioengineered collagen fibrils |
FR2800074B1 (fr) * | 1999-10-22 | 2001-12-21 | Aventis Pharma Sa | Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
AU1741101A (en) | 1999-11-08 | 2001-06-06 | Sca Hygiene Products Zeist B.V. | Process of oxidising primary alcohols |
US6180087B1 (en) | 2000-01-18 | 2001-01-30 | Mallinckrodt Inc. | Tunable indocyanine dyes for biomedical applications |
DE10003397A1 (de) | 2000-01-27 | 2001-08-09 | Hartmann Paul Ag | Polyelektrolyt-Feststoffsystem, Verfahren zur Herstellung desselben sowie Wundverband |
DE10009996B4 (de) | 2000-03-02 | 2005-10-13 | Cognis Ip Management Gmbh | Feststoffgranulate mit monodisperser Korngrößenverteilung, ein Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung |
IT1317359B1 (it) | 2000-08-31 | 2003-06-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e |
IT1317358B1 (it) | 2000-08-31 | 2003-06-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico. |
US6669926B1 (en) | 2000-10-16 | 2003-12-30 | Mallinckrodt, Inc. | Hydrophilic light absorbing indole compounds for determination of physiological function in critically ill patients |
US6498269B1 (en) | 2000-10-17 | 2002-12-24 | The University Of Connecticut | Method for the oxidation of aldehydes, hemiacetals and primary alcohols |
WO2002048197A1 (en) | 2000-12-13 | 2002-06-20 | Sca Hygiene Products Zeist B.V. | Process for oxidising primary alcohols |
EP1217008B1 (en) | 2000-12-19 | 2006-03-01 | Seikagaku Corporation | Photocurable hyaluronic acid derivative and process for producing the same, and photocured crosslinked hyaluronic acid derivative and medical material using the same |
FR2819808B1 (fr) | 2001-01-19 | 2003-04-18 | Simafex | Compositions stabilisees d'acide o-iodoxybenzoique et leur procede de preparation |
WO2002060971A1 (en) | 2001-01-31 | 2002-08-08 | Seikagaku Corporation | Crosslinked polysaccharide sponge |
US6902548B1 (en) | 2001-03-19 | 2005-06-07 | Ed Schuler | Use of Streptomyces hyalurolyticus enzyme in ophthalmic treatments |
US6673919B2 (en) | 2001-03-30 | 2004-01-06 | Chisso Cororation | Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof |
RU2240329C2 (ru) * | 2001-08-29 | 2004-11-20 | Государственное унитарное предприятие "Северное отделение Полярного научно-исследовательского института морского рыбного хозяйства и океанографии" | Способ получения биологически активного кислого сульфатированного полисахарида из морских водорослей - фукоидана |
US6946284B2 (en) | 2001-11-16 | 2005-09-20 | University Of Massachusetts | Solubilizing cross-linked polymers with photolyase |
FR2833493B1 (fr) | 2001-12-18 | 2005-09-23 | Ioltechnologie Production | Forme galenique solide et soluble pour l'administration occulaire de principes actifs et procede de fabrication d'un insert ophtalmique solide et soluble |
US20060189516A1 (en) | 2002-02-19 | 2006-08-24 | Industrial Technology Research Institute | Method for producing cross-linked hyaluronic acid-protein bio-composites |
ITPD20020064A1 (it) | 2002-03-12 | 2003-09-12 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Derivati esterei dell'acido ialuronico per la preparazione di idrogelda utilizzare in campo biomedico, sanitario e chirurgico e come sistem |
JP3975267B2 (ja) | 2002-06-03 | 2007-09-12 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 多糖物質のアシル化方法 |
US20040101546A1 (en) | 2002-11-26 | 2004-05-27 | Gorman Anne Jessica | Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents |
JP4323148B2 (ja) | 2002-09-30 | 2009-09-02 | チッソ株式会社 | n−アルカノイル化ヒアルロン酸もしくはその塩およびその製造法 |
FR2845686B1 (fr) * | 2002-10-10 | 2013-08-30 | Aventis Pharma Sa | Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
US6965040B1 (en) | 2002-11-04 | 2005-11-15 | Xiaolian Gao | Photogenerated reagents |
US20040116018A1 (en) | 2002-12-17 | 2004-06-17 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Method of making fibers, nonwoven fabrics, porous films and foams that include skin treatment additives |
US7550136B2 (en) | 2002-12-20 | 2009-06-23 | University Of Massachusetts | Photo-reactive polymers and devices for use in hair treatments |
US6982298B2 (en) | 2003-01-10 | 2006-01-03 | The Cleveland Clinic Foundation | Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof |
US7465766B2 (en) | 2004-01-08 | 2008-12-16 | The Cleveland Clinic Foundation | Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof |
US20050126338A1 (en) | 2003-02-24 | 2005-06-16 | Nanoproducts Corporation | Zinc comprising nanoparticles and related nanotechnology |
FR2852012B1 (fr) | 2003-03-04 | 2006-06-23 | Oreal | Procede de preparation de derives o-acyles du glucose |
US7365059B2 (en) | 2003-03-11 | 2008-04-29 | Seikagaku Corporation | Photocrosslinked-polysaccharide composition and production process of the same |
US7947766B2 (en) | 2003-06-06 | 2011-05-24 | The Procter & Gamble Company | Crosslinking systems for hydroxyl polymers |
ES2226567B1 (es) | 2003-06-20 | 2006-07-01 | Universidad De Santiago De Compostela | Nanoparticulas de acido hialuronico. |
DE10331342B4 (de) | 2003-07-11 | 2009-03-12 | Thüringisches Institut für Textil- und Kunststoff-Forschung e.V. | Thermostabile Form- oder Spinnmasse |
WO2005014655A2 (en) | 2003-08-08 | 2005-02-17 | Fresenius Kabi Deutschland Gmbh | Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein |
WO2005016974A1 (en) * | 2003-08-12 | 2005-02-24 | Lipoxen Technologies Limited | Sialic acid derivatives for protein derivatisation and conjugation |
US7235295B2 (en) | 2003-09-10 | 2007-06-26 | Laurencin Cato T | Polymeric nanofibers for tissue engineering and drug delivery |
CA2538793C (en) | 2003-09-19 | 2011-01-11 | Colorado State University Research Foundation (Csurf) | Hyaluronan (ha) esterification via acylation technique for moldable devices |
GB2408741B (en) | 2003-12-04 | 2008-06-18 | Ind Tech Res Inst | Hyaluronic acid derivative with urethane linkage |
US8313765B2 (en) | 2003-12-04 | 2012-11-20 | Industrial Technology Research Institute | Biodegradable hyaluronic acid derivative, biodegradable polymeric micelle composition and pharmaceutical or bioactive composition |
US20100330143A1 (en) | 2003-12-04 | 2010-12-30 | University Of Utah Research Foundation | Modified macromolecules and methods of making and using thereof |
GB0406013D0 (en) | 2004-03-17 | 2004-04-21 | Chiron Srl | Analysis of saccharide vaccines without interference |
EP2329852A1 (en) | 2004-03-26 | 2011-06-08 | SurModics, Inc. | Composition and method for preparing biocompatible surfaces |
ITMI20040605A1 (it) | 2004-03-29 | 2004-06-29 | Coimex S C R L United Companie | Esteri butirrici dell'acido ialuronico a basso grado di sostituzione procedimento per la loro preparazione ed uso |
WO2006010066A2 (en) | 2004-07-09 | 2006-01-26 | The Cleveland Clinic Foundation | Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof |
US7323425B2 (en) | 2004-08-27 | 2008-01-29 | Stony Brook Technology And Applied Research | Crosslinking of hyaluronan solutions and nanofiberous membranes made therefrom |
WO2006028110A1 (ja) | 2004-09-07 | 2006-03-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 水溶性ヒアルロン酸修飾物の製造方法 |
DK1817347T3 (en) | 2004-11-24 | 2017-08-14 | Albumedix As | Process for Crosslinking Hyaluronic Acid with Divinyl Sulfone |
US7214759B2 (en) | 2004-11-24 | 2007-05-08 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Biologically absorbable coatings for implantable devices based on polyesters and methods for fabricating the same |
WO2006078914A1 (en) | 2005-01-21 | 2006-07-27 | Washington University In St. Louis | Compounds having rd targeting motifs |
EP1861055A4 (en) | 2005-03-22 | 2013-01-16 | Covidien Lp | WIDE BIOACTIVE NETWORK |
US7680038B1 (en) | 2005-04-25 | 2010-03-16 | Electronic Arts, Inc. | Dynamic bandwidth detection and response for online games |
GB0513552D0 (en) | 2005-07-01 | 2005-08-10 | Bristol Myers Squibb Co | Bandage |
RU2429018C2 (ru) | 2005-07-06 | 2011-09-20 | Сейкагаку Корпорейшн | Гель, полученный из фотосшитой гиалуроновой кислоты с введенным лекарственным средством |
ITPD20050206A1 (it) | 2005-07-07 | 2007-01-08 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Biomateriali in forma di fibra da impiegarsi come dispositivi medici nel trattamento delle ferite e loro processi di produzione |
ITMI20051415A1 (it) | 2005-07-22 | 2007-01-23 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Biomateriali a base di corbossimetilcellulosa salificata con zinco associata a derivati dell'acido ialuronico da impiegarsi come dispositivi medici con attivita' antimicrobica ed antifungina e loro processo di produzione |
CN101282985B (zh) | 2005-09-21 | 2013-07-10 | 科德生物工程有限公司 | 用透明质酸低聚衍生物覆盖的细胞表面 |
US7993678B2 (en) | 2005-09-26 | 2011-08-09 | Novozymes Biopolymer A/S | Hyaluronic acid derivatives |
US20070202084A1 (en) | 2005-12-14 | 2007-08-30 | Anika Therapeutics, Inc. | Bioabsorbable implant of hyaluronic acid derivative for treatment of osteochondral and chondral defects |
EP1826274A1 (en) | 2006-02-24 | 2007-08-29 | Kikkoman Corporation | Enzyme composition, low molecular weight hyaluronan and process for preparing the same |
JP2009528438A (ja) | 2006-02-28 | 2009-08-06 | ノボザイムス バイオポリマー アクティーゼルスカブ | ヒアルロン酸誘導体 |
JP4892679B2 (ja) | 2006-03-27 | 2012-03-07 | 国立大学法人弘前大学 | ゲル紡糸によるヒアルロン酸繊維およびその製造方法 |
KR20070118730A (ko) | 2006-06-13 | 2007-12-18 | 주식회사 코오롱 | 보습성이 우수한 창상피복재 및 그의 제조방법 |
US20080124395A1 (en) | 2006-06-22 | 2008-05-29 | Weiliam Chen | Formulations and devices for treatment or prevention of neural ischemic damage |
WO2008008481A2 (en) | 2006-07-12 | 2008-01-17 | Georgia Tech Research Corporation | Deprotection of functional groups by multi-photon induced electron transfer |
JP2009545637A (ja) | 2006-08-04 | 2009-12-24 | ノボザイムス バイオファーマ デーコー アクティーゼルスカブ | 分岐ヒアルロン酸及びその製造方法 |
US20080063617A1 (en) | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Abrahams John M | Cosmetics formulations |
ITMI20061726A1 (it) | 2006-09-11 | 2008-03-12 | Fidia Farmaceutici | Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry |
CZ302856B6 (cs) | 2006-09-27 | 2011-12-14 | Cpn Spol. S R. O. | Zpusob prípravy derivátu polysacharidu |
US8979931B2 (en) | 2006-12-08 | 2015-03-17 | DePuy Synthes Products, LLC | Nucleus replacement device and method |
AU2007336692B2 (en) | 2006-12-22 | 2013-12-12 | Croma-Pharma Gesellschaft M.B.H. | Use of polymers |
KR20080062092A (ko) | 2006-12-29 | 2008-07-03 | 주식회사 핸슨바이오텍 | 세포전달체로서의 히알루론산 유도체 및 이의 제조 방법 |
EP1942117A1 (en) | 2006-12-29 | 2008-07-09 | Sigea S.R.L. | Derivatives of acid polysaccharides |
JP5329767B2 (ja) | 2007-02-26 | 2013-10-30 | 帝人株式会社 | 芳香族コポリアミド繊維の製造装置 |
WO2008115799A1 (en) | 2007-03-21 | 2008-09-25 | William Marsh Rice University | Novel gene delivery vectors for human mesenchymal stem cells |
CZ2007299A3 (cs) | 2007-04-24 | 2009-02-04 | Cpn Spol. S R. O. | Príprava nanovláken z polysacharidu a jejich smesí s polyvinylalkoholem |
JP5165281B2 (ja) | 2007-06-01 | 2013-03-21 | 株式会社バイオベルデ | 2反応剤型の医療用含水ゲル形成剤、及び、これより得られるヒアルロン酸ゲル |
WO2009037566A2 (en) | 2007-06-19 | 2009-03-26 | Uvarkina Tamara P | Hyaluronidase and method of use thereof |
KR101226851B1 (ko) | 2007-06-20 | 2013-01-25 | (주)엘지하우시스 | 이중노즐을 이용한 나노섬유의 제조방법 |
WO2009002869A2 (en) | 2007-06-22 | 2008-12-31 | Innovative Surface Technologies, Inc. | Nanofibers containing latent reactive groups |
WO2009012372A1 (en) | 2007-07-18 | 2009-01-22 | Advantageous Systems, Llc | Methods and apparatuses for detecting analytes in biological fluid of an animal |
FR2920786B1 (fr) | 2007-09-07 | 2010-09-10 | Univ Claude Bernard Lyon | Fibres creuses, notamment multi membranaires, leur procede de preparation par filage et dispositif pour la mise en oeuvre dudit procede |
FR2921675B1 (fr) | 2007-09-28 | 2010-03-19 | Univ Claude Bernard Lyon | Filament a base d'acide hyaluronique et son procede d'obtention. |
US20130136784A1 (en) | 2007-10-11 | 2013-05-30 | Robert J. Staab | Methods for delivery of medication using dissolvable devices |
US7976825B2 (en) | 2007-12-06 | 2011-07-12 | Janos Borbely | Cancer cell diagnosis by targeting delivery of nanodevices |
CA2713489A1 (en) | 2008-02-11 | 2009-08-20 | Basf Se | Producing porous structures from synthetic polymers |
CN101952491A (zh) | 2008-02-14 | 2011-01-19 | 博爱科罗温有限公司 | 双组分纤维,纺织片材及其用途 |
US9585987B2 (en) | 2008-02-29 | 2017-03-07 | Pvac Medical Technologies Ltd | Composition for the formation of gels |
AU2009246822B2 (en) | 2008-03-31 | 2012-05-03 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Site specific fluorescence marking and contrast marker for same |
WO2009148405A1 (en) | 2008-06-05 | 2009-12-10 | Agency For Science, Technology And Research | Formation of hydrogel in the presence of peroxidase and low concentration of hydrogen peroxide |
JP2010014784A (ja) | 2008-07-01 | 2010-01-21 | Fuji Xerox Co Ltd | 光書込型表示装置、書込装置、及び光書き込み方法 |
IT1391734B1 (it) | 2008-07-29 | 2012-01-27 | Anika Therapeutics Srl | Nuovi biomateriali, loro preparazione per elettrospinning e loro uso in campo biomedico e chirurgico. |
FR2934999B1 (fr) | 2008-08-13 | 2011-07-29 | Adocia | Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane |
US9228027B2 (en) | 2008-09-02 | 2016-01-05 | Allergan Holdings France S.A.S. | Threads of Hyaluronic acid and/or derivatives thereof, methods of making thereof and uses thereof |
CZ2008705A3 (cs) | 2008-11-06 | 2010-04-14 | Cpn S. R. O. | Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace |
ITRM20080636A1 (it) | 2008-11-28 | 2010-05-29 | Univ Palermo | Procedimento per la produzione di derivati funzionalizzati dell acido ialuronico e relativi idrogeli. |
JP2010138276A (ja) | 2008-12-11 | 2010-06-24 | Nipro Corp | ヒアルロン酸単糸の製造方法 |
CA2753173C (en) | 2009-02-21 | 2017-05-30 | Sofradim Production | Medical devices with an activated coating |
WO2010095049A1 (en) | 2009-02-21 | 2010-08-26 | Sofradim Production | Crosslinked fibers and method of making same by extrusion |
WO2010095052A2 (en) | 2009-02-21 | 2010-08-26 | Sofradim Production | Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers |
CZ301899B6 (cs) | 2009-03-17 | 2010-07-21 | Contipro C, A.S. | Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu |
US8551378B2 (en) | 2009-03-24 | 2013-10-08 | North Carolina State University | Nanospinning of polymer fibers from sheared solutions |
US20120219554A2 (en) | 2009-05-14 | 2012-08-30 | Fidia Farmaceutici S.P.A. | Extracellular yaluronidase from streptomyces koganeiensis |
WO2010138074A1 (en) | 2009-05-29 | 2010-12-02 | Hilborn Joens | Hyaluronic acid based delivery systems |
CA2764635C (en) | 2009-06-09 | 2018-05-22 | Lux Biosciences, Inc. | Topical drug delivery systems for ophthalmic use |
KR101551681B1 (ko) | 2009-07-30 | 2015-09-09 | 카르빌란 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 히알루론산 폴리머 조성물 및 관련방법 |
KR101103423B1 (ko) | 2009-09-04 | 2012-01-06 | 아주대학교산학협력단 | 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도 |
EP3067069B1 (en) | 2009-11-11 | 2023-07-26 | Hy2Care B.V. | Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers |
WO2011059325A2 (en) | 2009-11-11 | 2011-05-19 | University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) | Dextran-hyaluronic acid based hydrogels |
US20110111012A1 (en) | 2009-11-12 | 2011-05-12 | Hemcon Medical Technologies, Inc. | Nanomaterial wound dressing assembly |
CZ2009835A3 (cs) | 2009-12-11 | 2011-06-22 | Contipro C A.S. | Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace |
US8197849B2 (en) | 2010-02-12 | 2012-06-12 | National Health Research Institutes | Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute |
US20110229551A1 (en) | 2010-03-17 | 2011-09-22 | Notus Laboratories, Inc. | Drug delivery compositions and methods using nanofiber webs |
IT1399202B1 (it) | 2010-03-30 | 2013-04-11 | Corbelli | Metodo per la produzione di manufatti elastomerici funzionalizzati e manufatti cosi' ottenuti |
EP2585096B1 (en) | 2010-06-24 | 2021-05-05 | University Of Kansas | Bifunctional conjugate compositions and associated methods |
CN101897976A (zh) | 2010-07-16 | 2010-12-01 | 沈阳药科大学 | 一种药物增溶载体及其制备方法和应用 |
CZ305040B6 (cs) | 2010-09-14 | 2015-04-08 | Contipro Biotech S.R.O. | Způsob přípravy vysoce substituovaných amidů kyseliny hyaluronové |
CZ302994B6 (cs) | 2010-12-31 | 2012-02-08 | Cpn S.R.O. | Hyaluronová vlákna, zpusob jejich prípravy a použití |
US9200271B2 (en) | 2011-02-03 | 2015-12-01 | Empire Technology Development Llc | Selective 3D biopatterning |
KR101201412B1 (ko) | 2011-04-19 | 2012-11-14 | 한양대학교 에리카산학협력단 | 다공성 코어쉘 나노웹의 제조방법 |
CZ304072B6 (cs) | 2011-04-26 | 2013-09-25 | Contipro Biotech S.R.O. | Amfoterní materiál na bázi sítované kyseliny hyaluronové, zpusob jeho prípravy, materiály obsahující aktivní cinidla uzavrené v síti hyaluronanu, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití |
CN102154738B (zh) | 2011-05-10 | 2012-08-01 | 青岛大学 | 一种红藻琼胶纤维的制备方法 |
ITTO20110428A1 (it) | 2011-05-13 | 2012-11-14 | Rottapharm Spa | Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia |
ES2657756T3 (es) | 2011-10-18 | 2018-03-06 | Heiq Pty Ltd | Proceso de formación de fibra y fibras producidas por medio del proceso |
KR20130085294A (ko) | 2012-01-19 | 2013-07-29 | 충남대학교산학협력단 | 림프노드 탐지용 형광 고분자 나노젤 및 이를 이용한 림프노드 확인 방법 |
CZ303879B6 (cs) | 2012-02-28 | 2013-06-05 | Contipro Biotech S.R.O. | Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití |
CZ2012282A3 (cs) | 2012-04-25 | 2013-11-06 | Contipro Biotech S.R.O. | Zesítovaný derivát hyaluronanu, zpusob jeho prípravy, hydrogel a mikrovlákna na jeho bázi |
WO2013171764A2 (en) | 2012-04-30 | 2013-11-21 | Rubicon Research Private Limited | Ophthalmic formulations |
CZ304651B6 (cs) | 2012-05-11 | 2014-08-20 | Contipro Biotech S.R.O. | Způsob přípravy mikrovláken, způsob výroby krytů ran, kryty ran a zařízení pro přípravu polysacharidových vláken |
CZ2012842A3 (cs) | 2012-11-27 | 2014-08-20 | Contipro Biotech S.R.O. | Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití |
CZ2012844A3 (cs) | 2012-11-27 | 2014-02-05 | Contipro Biotech S.R.O. | Fotoreaktivní derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, 3D síťovaný derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy a použití |
CZ304266B6 (cs) | 2012-11-27 | 2014-02-05 | Contipro Biotech S.R.O. | Nekonečná vlákna na bázi hyaluronanu selektivně oxidovaného v poloze 6 N-acetyl-D-glukosaminové části, jejich příprava, použití, nitě, střiže, příze, textilie a způsob jejich úpravy |
CZ304303B6 (cs) | 2012-11-27 | 2014-02-19 | Contipro Biotech S.R.O. | Vlákna založená na hydrofobizovaném hyaluronanu, způsob jejich přípravy a použití, textilie na jejich bázi a použití |
KR101386096B1 (ko) | 2013-02-28 | 2014-04-21 | 강원대학교산학협력단 | 음이온성 단백질 약물 전달을 위한 키토산 나노섬유, 그 제조방법 및 그 키토산 나노섬유를 포함하는 경점막 투여제 |
CN103505736A (zh) | 2013-09-23 | 2014-01-15 | 天津大学 | 基于改性透明质酸的高分子脂质体及其制备方法 |
CN103789874B (zh) | 2014-01-23 | 2016-02-10 | 北京化工大学常州先进材料研究院 | 平行电场诱导相分离法制备核壳结构天然聚电解质纳米纤维 |
EP2899214A1 (en) | 2014-01-27 | 2015-07-29 | Basf Se | Ethylenically unsaturated polysaccharides, method for their production and their use |
CZ305153B6 (cs) | 2014-03-11 | 2015-05-20 | Contipro Biotech S.R.O. | Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití |
-
2016
- 2016-06-27 CZ CZ2016-375A patent/CZ308106B6/cs unknown
-
2017
- 2017-06-26 EP EP17746370.0A patent/EP3475310B1/en active Active
- 2017-06-26 RU RU2018147560A patent/RU2725500C1/ru active
- 2017-06-26 KR KR1020197002226A patent/KR102327939B1/ko active Active
- 2017-06-26 BR BR112018075531-1A patent/BR112018075531B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2017-06-26 JP JP2018566522A patent/JP6982321B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2017-06-26 HU HUE17746370A patent/HUE049730T2/hu unknown
- 2017-06-26 ES ES17746370T patent/ES2790837T3/es active Active
- 2017-06-26 WO PCT/CZ2017/050026 patent/WO2018001394A1/en unknown
- 2017-06-26 DK DK17746370.0T patent/DK3475310T3/da active
- 2017-06-26 US US16/311,745 patent/US10618984B2/en active Active
- 2017-06-26 PL PL17746370T patent/PL3475310T3/pl unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011069474A2 (en) * | 2009-12-11 | 2011-06-16 | Contipro C A.S. | Oxidized derivative of hyaluronic acid, a method of preparation thereof and a method of modification thereof |
WO2014023272A1 (en) * | 2012-08-08 | 2014-02-13 | Contipro Biotech S.R.O. | Hyaluronic acid derivative, method of preparation thereof, method of modification thereof and use thereof |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
A.V.Kühn et al.: "Behaviour of 4,5-unsaturated hyaluronic acid oligosaccharides under electrospray ionisation" Rapid Communication in Mass Spectrometry 18, 733-734 (2004) * |
I. Cumpstey: "Chemical Modification of Polysaccharides" Hindawi Publishing Corporation, ISRN Organic Chemistry, Vol. 2013, Article ID 417672 , http://dx.doi.org/10.1155/2013/417672 * |
J.G. Beeley: "Laboratory Techniques" in Biochemistry and Molecular Biology (P.H.Burdon, O.H. Knippenberg Eds.), Elsevier, Amsterodam 1985 * |
R.D. Guthrie et al. Carbohydrate chemistry - A Specialist Periodical Report, The Chemical Society, London 1969 (SBN 85156 012 5) * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6982321B2 (ja) | 2021-12-17 |
EP3475310B1 (en) | 2020-03-18 |
ES2790837T3 (es) | 2020-10-29 |
WO2018001394A1 (en) | 2018-01-04 |
CZ2016375A3 (cs) | 2018-01-03 |
EP3475310A1 (en) | 2019-05-01 |
KR20190022717A (ko) | 2019-03-06 |
BR112018075531B1 (pt) | 2022-11-16 |
US10618984B2 (en) | 2020-04-14 |
KR102327939B1 (ko) | 2021-11-17 |
BR112018075531A2 (pt) | 2019-03-19 |
JP2019522705A (ja) | 2019-08-15 |
RU2725500C1 (ru) | 2020-07-02 |
HUE049730T2 (hu) | 2020-10-28 |
DK3475310T3 (da) | 2020-04-06 |
US20190169317A1 (en) | 2019-06-06 |
PL3475310T3 (pl) | 2020-11-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ308106B6 (cs) | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití | |
JP6063103B1 (ja) | グリコサミノグリカンの硫酸化方法 | |
JP2017508050A (ja) | ヒアルロン酸オリゴマーの複合体又はその塩,その調製法及びその使用 | |
Bobula et al. | One-pot synthesis of α, β-unsaturated polyaldehyde of chondroitin sulfate | |
HK1254817B (en) | Derivatives of n-desulfated glucosaminoglycans and use as drugs | |
HK1254817A1 (en) | Derivatives of n-desulfated glucosaminoglycans and use as drugs | |
US6482941B1 (en) | Carboxylated polysaccharides 6-substituted | |
ES2660777T3 (es) | Derivados de glicosaminoglicanos carboxilados y su uso como fármacos | |
CZ2015445A3 (cs) | Deriváty sulfatovaných polysacharidů, způsob jejich přípravy, způsob jejich modifikace a použití | |
Jia et al. | Preparation and in vitro activity of β-glucan-rich polysaccharide extracts from Lentinula edodes fruiting bodies. | |
US20200062868A1 (en) | Method of crosslinking glycosaminoglycans | |
HK40004031A (en) | Derivatives of n-desulfated glycosaminoglycans and use as drugs | |
HK1222873B (zh) | N-脱硫酸化糖胺聚糖的衍生物以及作为药物的用途 | |
HK1222797B (zh) | 葡糖胺聚糖的羧基化衍生物以及作爲药物的用途 |