CZ2009168A3 - Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu - Google Patents

Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu Download PDF

Info

Publication number
CZ2009168A3
CZ2009168A3 CZ20090168A CZ2009168A CZ2009168A3 CZ 2009168 A3 CZ2009168 A3 CZ 2009168A3 CZ 20090168 A CZ20090168 A CZ 20090168A CZ 2009168 A CZ2009168 A CZ 2009168A CZ 2009168 A3 CZ2009168 A3 CZ 2009168A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
hyaluronic acid
acyl
alkyl
process according
mixture
Prior art date
Application number
CZ20090168A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ301899B6 (cs
Inventor
Buffa@Radovan
Velebný@Vladimír
Pospíšilová@Lucie
Príkopová@Eva
Pravda@Martin
Nikodým@Pavel
Palek@Lukáš
Original Assignee
Contipro C, A.S.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Contipro C, A.S. filed Critical Contipro C, A.S.
Priority to CZ20090168A priority Critical patent/CZ2009168A3/cs
Priority to CA2755520A priority patent/CA2755520A1/en
Priority to EP10723478A priority patent/EP2408823A1/en
Priority to PCT/CZ2010/000030 priority patent/WO2010105582A1/en
Priority to US13/256,966 priority patent/US20120095205A1/en
Priority to RU2011140724/13A priority patent/RU2011140724A/ru
Priority to JP2012500060A priority patent/JP2012520902A/ja
Priority to KR1020117024233A priority patent/KR20110132449A/ko
Publication of CZ301899B6 publication Critical patent/CZ301899B6/cs
Publication of CZ2009168A3 publication Critical patent/CZ2009168A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
    • C07H7/06—Heterocyclic radicals

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Rešení se týká zpusobu prípravy derivátu kyseliny hyaluronové reakcí kyseliny hyaluronové s O-acyl-O´-alkylkarbonátem obecného vzorce R-CO-O-CO-O-R.sup.1.n. v prítomnosti substituovaného pyridinu obecného vzorce R.sup.2.n..sub.5.n. C.sub.5.n.N. Reakce probíhá v DMSO v prítomnosti externí báze za vzniku O-acylovaných produktu. Navrhovaný postup vede oproti známým analogum k vyšším stupnum substituce a kratším reakcním casum. Pokud cinidlo obsahuje dve nebo víc funkcních skupin R(CO-O-CO-O-R.sup.1.n.).sub.n.n., vznikají sítované deriváty kyseliny hyaluronové.

Description

Způsob přípravy derivátů kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O'-alkylkarbonátu v přítomnosti substituovaného pyridinu
Oblast techniky
Vynález se týká nového způsobu modifikace kyseliny hyaluronové za vzniku derivátů, kde dochází k substituci -OH skupiny polysacharidu skupinou -O-CO-R, Modifikace kyseliny hyaluronové je provedena pomocí O-acyl-O'-alkylkarbonátu v přítomnosti substituovanýho pyridinu, které spolu tvoří komplex (O-acyl-O'-alkylkarbonát - substituovaný pyridin), v polárním aprotickém prostředí za přítomnosti organické báze. V případě, že činidlo obsahuje dvě nebo víc acylalkylkarbonátových skupin, vznikají síťované deriváty kyseliny hyaluronové s molekulovou hmotností řádově vyšší v porovnání s výchozím polysacharidem.
Dosavadní stav techniky
Polysachandy jsou polymery složené z jednoduchých monosacharidů (monomemích jednotek) spojených glykosidickou vazbou. Podle počtu opakujících se jednotek rozlišujeme ohgosacharidy (2 až 10 jednotek) a polysacharidy (10 a více jednotek). Význam polysacharidů je značný. Polysacharidy plní funkci nutriční, ochrannou, stavební (celulóza, chitin) nebo zásobní (škrob). Polymery obecně jsou charakterizovány průměrnou molekulovou hmotností, která se běžně pohybuje okolo 16.103 g.mof1 až 16.106 g.mof1. Počet opakujících se jednotek je dán stupněm polymerizace.
X ýznamným polysacharidem je kyselina hyaluronová:
OH
CHjCO^ komponovaná z opakujících se jednotek p-(l,3)-D-glukuronové kyseliny a β-( 1,4)-V-acetylD-glukosaminu. Vyznačuje se velkou molekulovou hmotností 5.104 až 5.106 g.mof1, která závisí na způsobu izolace a výchozím materiálu. Kyselina hyaluronová, respektive její sůl hyaluronan, je nezbytnou součástí pojivových tkání, synoviální tekutiny kloubů, hraje významnou roli v řadě biologických procesů jako je hydratace, organizace proteoglykanů, diferenciace buněk, proliferace a angiogeneze. Tento značně hydrofílní polysacharid je ve vodě rozpustný ve formě soli v celé Šíři pH.
Kyselina hyaluronová je zástupcem skupiny glykosaminoglykanů, která dále zahrnuje chondroitin sulfát, dermatan sulfát, keratan sulfát a heparan sulfát.
Acylace kyseliny hyaluronové
Acylace polysacharidů je nejčastěji využívaná metoda k zavedení alkylového řetězce, který mění vlastnosti převážně hydrofilních látek na látky hydrofobní. Reakce se nejčastěji provádí působením anhydridů příslušných kyselin, chloridů kyselin nebo samotnou kyselinou za přídavku katalyzátorů.
Příprava acyl-derivátů oligomerů kyseliny hyaluronové je patentována Couchmannem a kol. (US patent 4761401; 1988), kde acylace probíhá jak na hydroxylové, tak na amino skupině deacetylovaného hyaluronanu. O-acylace zahrnuje reakci s organickou kyselinou za přídavku kyselého katalyzátoru (minerální kyseliny, organické nebo Lewisovy kyseliny) a aktivačního činidla (W-dicyklohexylcarbodiimid, 2-chlor-l-methyl pyridiniumiodid a N,N-karbonyl diimidazol), nebo používá anhydridů a chloridů kyselin v přítomnosti báze. Michinori a kol. (JP patent 7309902, 1995) připravili acylovanou kyselinu hyaluronovou reakcí s anhydridy karboxylových kyselin nebo jejich acylhalogenidy ve vodném prostředí obsahujícím s vodou mísitelné organické rozpouštědlo v přítomnosti katalyzátoru. Saponifikací acylových skupin kyseliny hyaluronové bylo docíleno derivátů s libovolným počtem acylových skupin. Chlorid kyseliny retinové a anhydrid kyseliny máselné použil k přípravě specifických derivátů hyaluronové kyseliny i Perbellini a kol. (WO 2004/056877 AI). Pro syntézu v prostředí dimethylformamidu byla použita kyselina hyaluronová ve formě tetrabutylamonných solí.
Síťování kyseliny hyaluronové
Síťování neboli „crosslinking“ kyseliny hyaluronové bylo popsáno několika způsoby. Mezi nejjednodušší způsoby patří síťování pomocí POC13 (US 5 783 691). Balasz a kol, síťovali kyselinu hyaluronovou pomocí divinylsulfonu (US 4 582 865). Dalšími reaktivními elektrofily vhodnými pro síťování jsou aldehydy (US 4 713 448). Velmi rozšířenými činidly schopnými reagovat se dvěma polymery jsou epoxidy nebo bisepoxidy (WO 86/00912, WO ’ ' 2007/129828), kde nejznámějším zástupcem této skupiny je epichlorhydrin.
Použitím EDC je možné zvýšit reaktivitu karboxylové skupiny kyseliny hyaluronové, která je pak schopna síťovacích reakcí s polyanionickými sloučeninami (US 4 937 270). Jiným zástupcem polynukleofilních reaktantů jsou polyhydrazidy (WO 2006/001046). Způsob síťování kyseliny hyaluronové pomocí polyanhydridu, poly(alkyloylchloridu).
polyepoxidu, polykarbodiimidu byl shrnut v patentu (WO 00/46252). Při reakci bis karbodiimidu s kyselinou hyaluronovou (WO 2005/067994) dochází k síťování pomoci reaktivního elektrofilního činidla. Možnosti síťovat pomocí redox reakcí je zachycena v patentu (EP 1683812 AI), kde vzniká disulfidické přemostění z thiolových derivátů kyseliny hyaluronové. Zvláštní skupinu síťování tvoří fotochemické reakce. Je známo, že vinylenová skupina skořicové kyseliny nebo její aryl-substituovaný analog je schopný fotochemicky cyklizovat na cyklobutan. Tuto skutečnost využili autoři patentu (EP 1217008 AI), kteří N•deacylovaný derivát hyaluronové kyseliny acylovali na dusíku glucosaminové části polysacharidu s chloridem kyseliny skořicové. Samotné síťování proběhlo ozařováním světlem vlnové délky 280 nm. Kromě skořicové kyseliny je taky možné použít jiné fotoreaktivní skupiny navázané na kyselinu hyaluronovou (WO 97/18224, EP 0763754 A2), které ozářením světlem vhodné vlnové délky dávají síťované deriváty. Patenty, které se věnovaly acylaci a síťování kyseliny hyaluronové v přítomnosti báze nebo v bazickém rozpouštědle, byly publikovány Yui a kol (US 6 673 919), resp. Nguyenem a kol. (US 5690961).
Příprava O-acyl-O'-alkylkarbonátů
Klasickou metodou přípravy acylalkylkarbonátů je reakce karboxylových kyselin s alkylchlorformiáty v přítomnosti báze (nejčastěji terciárního aminu - triethylamin (TEA), pyridin, N-methylmorfolin, N-methylpyridin, diazabicykloundecen (J. Org. Chem. 26(7), 1961; 2161) v prostředí polárního aprotického rozpouštědla (J. Org. Chem.; 1958; 23(8); 1149-1152. Nejčastěji používanými rozpouštědly jsou diethylether (J. Org. Chem.; 1959; 24(6), 774-778), toluen (J. Org. Chem.; 1958; 23(8); 1149*1152.), tetrahydrofuran (J. Org. Chem.; 1960; 25(10); 1703*1707, J. Am. Chem. Soc. 1967, 89(19), 5012-5017), chloroform, dimethylaminofomiamid (European Patent 0700973, J. Am. Chem. Soc. 1952, 74, 676), Nmethylpyrrolidin a Ν,Ν'-dimethylacetamid (US Patenť'5,550,225; Aug 27, 1996). Reakce je často prováděna při snížené teplotě 0°C až -10 °C. Důvodem je nebezpečí rozkladu vznikajících acylalkylkarbonátů.
Tarbell v sérii studií prokázal, že se vesměs jedná o stabilní sloučeniny, které lze v mnoha případech izolovat v čisté formě (J, Org. Chem.; 1957; 22(3); 245-250). V případě izolace acylalkylkarbonátů zahrnuje proces i promytí reakční směsi roztokem NaHCOj, destilovanou vodou a roztokem HCL To ukazuje na velice dobrou odolnost některých acylalkylkarbonátů vůči působení bází a kyselin při laboratorní teplotě. Tarbell ve svých studiích také prokázal, že přípravu acylalkylkarbonátů reakcí alkylchlorformiátu s karboxylovou kyselinou lze provádět za laboratorní teploty, popř. ve vroucím diethyletheru.
Tento tradiční způsob přípravy byl modifikován i pro provedení ve vodném prostředí (patent DE 1,133,727). Příslušná kyselina je rozpuštěna ve vodě a je neutralizována roztokem hydroxidu sodného. K roztoku je přidána báze (N,N^limethylcyklohexylamin, N,Ndimethylaminopyridin, methylamin, NH3) a alkylchloroformiát. Reakce probíhá při 0 °C a reakční pH je udržováno mezi 6 až 7. Nevýhodou tohoto postupu je konkurenční reakce acylalkylkarbonátů se vznikajícím alkoholem. Jako reakční prostředí je výhodné použít inertní rozpouštědlo například chloroform (J. Org. Chem. 1995, 60, 7072-7074).
Acylace hydroxysloučeninpomocí O-acyl-O'-alkylkarbonátů
Acylalkylkarbonáty byly využívány jako acylační činidla při tvorbě amidů od počátku 50. let dvacátého století (J. Am. Chem. Soc.; 1951; 73(7); 3547^547), Protože byly původně považovány za nestabilní sloučeniny, byly generovány in situ během reakce. Podrobnější studium tohoto typu látek ovšem naznačilo, že se může jednat o stabilní sloučeniny, a to zejména v případech, kdy jsou acylalkylkarbonáty odvozeny od karboxylových kyselin s vysokým bodem tání (J. Org. Chem.; 1958; 23(8); 1149^152.). Později byla připravena a izolována celá řada acylalkylkarbonátů s různým typem substituce jak v acylové, tak karbonátové části molekuly. Dále bylo prokázáno, že se v mnoha případech může jednat o velice stabilní sloučeniny. Například k dosažení jejich termického rozkladu často dochází až při teplotách výrazně přesahujících 10Q°C. Toto ovšem platí pouze za předpokladu, že vyloučíme katalytický efekt bází, popřípadě rozpouštědel (J. Org. Chem.; 1959; 24(6); 774-½ 778).
Obecně lze říci, že stabilita acylalkylkarbonátů vykazuje závislost na pKa karboxylové kyseliny. Stabilitě acylalkylkarbonátů byla věnována značná pozornost a na základě mnoha studují byl vypracován model, jímž je popsán mechanismus jejich rozkladu (J. Org. Chem.Volume 26, Number 7, 1961; 2161, J. Org. Chem.; 1958; 23(8); 1149-1152., J. Org. Chem.; 1959; 24(6); 774-778, J. Org. Chem.; 1960; 25(10); 1703-1707., J. Org. Chem.; 1964; 29(5); 1168-1169, J. Org. Chem.; 1967; 32; 2188-2193, J. Org. Chem.Volume 26, Number 7, 1961; 2161, J. Org. Chem.;1958, vol, 23, p. 1152, J. Am. Chem. Soc.; 1962; 84(21); 41134115, J. Org. Chem.; 1958; 23(12); 2044,, J. Org. Chem.; 1964; 29(11); 3422-3423.). K rozkladu acylalkylkarbonátů může docházet dvěma cestami, jež si navzájem konkurují. Přesmyk vede ke vzniku esteru za uvolnění CO2, zatímco disproporciační reakce dává vzniknout kromě CO2 i symetrickému anhydridu a diakylkarbonátu,
Ze struktury acylalkylkarbonátů vyplývá, že v jejich molekule se nacházejí dvě centra, která mohou podléhat nukleofilnímu ataku - karbony! karboxylový a karbony! karbonátový.
Poměr rychlostí průběhu obou konkurenčních reakcí, a tím i poměr, v jakém budou vznikat rozkladné produkty, je určen typem substituce obou center (J. Org. Chem.; 1959; 24(6); 774778, J. Org, Chem,; 1960; 25(10); 1703-1707., J. Org. Chem.Volume 26, Number 7, 1961; 2161). Bylo prokázáno, že tento poměr není ovlivněn zředěním, teplotou ani přítomností báze. Tyto faktory mohou mít vliv jen na rychlost procesu jako celku (J. Org, Chem,; 1960; 25(10); 1703-1707,, J. Org. Chem.Volume 26, Number 7, 1961; 2161).
Naproti tomu na využití acylaikylkarbonátů jako klasických O-acylaČních činidel panují rozporuplné názory. Výraznou nevýhodou pro použití směsných anhydridů v tomto typu reakcí jsou vedlejší reakce probíhající mezi nezreagovaným acylalkylkarbonátem a alkoholem, který je uvolněn rozpadem karbonátu (J. Org. Chem.; 1957; 22(3); 245*250) Tomuto nežádoucímu vlivu lze předcházet použitím vysokého nadbytku alkoholu, jehož ester hodláme připravit (ideální je situace, kdy jej můžeme použít jako rozpouštědlo J. Org. Chem. 1995,60, 7072-7074), nebo použitím takového výchozího acylaikylkarbonátů, který obsahuje sekundární či terciární alkohol.
Přes výše zmíněné nevýhody se v patentové literatuře objevuje řada příkladů, kdy jsou acylalkylkarbonáty využity jako klasická O-acylační činidla. Philipe popisuje ve svém patentu (US Patent '5,550,225) regioselektivní acylaci D-maltózy směsnými anhydridy mastných kyselin za vzniku monoesterů D-maltózy v poloze 6‘. Aktivace kyselin je prováděna nejčastěji triethylaminem, pyridinem, 4-dimethylaminopyridinem, tributylaminem nebo Nmethylmorfolinem, v přítomnosti alkylchlorformiátu (např. isopropylchlorformiátu) v organickém rozpouštědle, např. v tetrahydrofuranu. Samotná acyíace je prováděna vbezvodém pyridinu při laboratorní teplotě. Nevýhodou tohoto řešení je toxicita pyridinu a špatná rozpustnost kyseliny hyaluronové v pyridinu.
V patentové literatuře jsou popsány i postupy acylace polyolů, které jako reakční medium využívají vodu. Lalezari uvádí ve svých patentech (US Patent '5,498,708, WQ 0 91/01322) postup, kdy je reakce prováděna ve směsi led-voda, v níž je rozpuštěna příslušná kyselina, tnethylamin, alkylchloroformiát a sacharid. Tato práce (US Patent 5,498/708) zahrnuje polyalkoholy s uhlíkovým řetězcem s třemi a více navázanými hydroxy skupinami, počínaje jednoduššími trioly jako glycerol a polysacharidy jako škrob, celulóza, amylóza, insulin, agar konče. Substituenty na kyslíku chlormravenčanu mohou být alkyly s počtem uhlíku 2-10 nebo aryly. V experimentální časti je zmíněna příprava samotného smíšeného anhydridů za přítomnosti triethylaminu v ledové vodě. Připravené činidlo je v esterifikační reakci, která probíhá při pokojové teplotě ve vodě, ve 4 až 10-násobném nadbytku oproti esterifíkovanému sacharidu.
Použití acylaikylkarbonátů jako esterifikačních činidel ve vodném prostředí je popsáno i jako cesta přípravy strukturně modifikovaných škrobů (US Patent 3,720,662).
Reakce je prováděna za mírných podmínek (20-40T) a postup vyžaduje udržovat pH reakce v rozmezí 7 - 9,5. Proces může probíhat i v heterogenní fázi (suspenze škrobu) nebo i bez použití rozpouštědla.
PV 2006-605 popisuje způsob modifikace polysacharidů, zejména kyseliny hyaluronové, substituci -OH skupiny polysacharidů skupinou O-CO-R pomocí acylalkylkarbonatů v polárním aprotickém prostředí za přítomnosti organické báze:
R-CO-O-CO-O-R[ + HA-OH -> HA-O-CO-R + CO2 + R,OH (reakce 1). Tato reakce probíhá jen velmi nepatrně, a proto nevýhodou PV 2006-605 je velmi nízký stupen substituce, což má vliv i na vlastnosti konečného produktu, který je modifikován jen nepatrně.
Řešeni uvedená v této části popisují acylace polysacharidů, které obsahují volné hydroxy skupiny, na kterých daná reakce probíhá. Mezi nevýhody těchto řešení patří nízký stupeň substituce polymerů, který je způsoben nestabilitou použitého činidla (acylalkylkarbonátu). Také skutečnost, že některé acylace probíhají v heterogenním systému, neprospívá výraznější modifikaci. Způsob podle vynálezu se zabývá modifikací kyseliny hyaluronové, probíhá v homogenním systému a dává oproti známým analogům výrazně vyšší stupně substituce.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je způsob přípravy derivátů kyseliny hyaluronové reakcí kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O'-alkylkarbonátu v přítomnosti substituovaného pyridinu v aprotickém prostředí. Reakce probíhá v DMSO v přítomnosti externí báze za vzniku O’acylovaných produktů. Ve způsobu podle vynálezu je kyselina hyaluronová s výhodou ve forme volné kyseliny, má molekulovou hmotnost v rozsahu 1.104 až 5.106 g.moF1, s výhodou 105 g.mor', a polydisperzitu v rozsahu 1,02 až 5,0. Zde uváděné molekulové hmotnosti kyseliny hyaluronové a jejích derivátů jsou hmotnostně střední molekulové hmotnosti. Kyselina hyaluronová může být i ve formě solí, např. ve formě sodné, draselné, vápenaté nebo jiné soli. Aprotické prostředí zahrnuje DMSO, jako rozpouštědlo, a bázi. Navrhovaný postup vede oproti známým analogům k vyšším stupňům substituce a kratším reakčním casum. Navázání acylového zbytku esterickou vazbou na polysacharid probíhá při 20 až 80 °C, s výhodou při 20 °C. V případě nepřítomnosti substituovaného pyridinu byly pozorovány výrazně nižší stupně substituce. Příslušná acylace probíhá buď přímo na některé hydroxy skupině, anebo na karboxylátové skupině glukoronové části polysacharidů a následně intramolekulově na hydroxy skupině - viz Schéma 1
. ( RCOOCOOR1- subst. pyridin )
Schéma 1: Detailní schéma modifikace kys. hyaluronové
Ve způsobu podle vynálezu se připraví čistý acylalkyikarbonát pří teplotě -40 až 0 °C, s výhodou při -15 °C v éteru, acetonu nebo dichloromethanu, reakcí příslušné karboxylové kyseliny s alkylchloroformiátem nebo jeho analogem, kde místo halogenu je jiná odstupující skupina (substituovaný chinolin, izochinolin nebo jejich 1,2-dihydro analogy). Kyselina hyaluronová se rozpustí v polárním aprotickém rozpouštědle, s výhodou v DMSO, pak se přidá báze, s výhodou triethylamin, substituovaný pyridin, s výhodou 4-N,Ndialkylaminopyridin a nakonec CŽ-acyl-O^-alkylkarbonáty. Výsledná homogenní směs se pak míchá bez přístupu vzdušné vlhkosti při teplotě 20 až 80 °C, s výhodou pří 20 °C, po dobu 0,1 h až 96 h, s výhodou 1 h.
O-acyl-O'-alkylkarbonáty obecného vzorce R-CO-O-CO-O-R1 zahrnují deriváty, kde R a R1 mají lineární nebo rozvětvený řetězec Cj - C30 volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin. Použité acylalkylkarbonáty jsou svýhodou nejprve zvlášť připraveny a izolovány, a pak přidány v čisté formě do reakční směsi obsahující všechny ostatní reakční komponenty jako DMSO, kyselinu hyaluronovou, bázi a substituovaný pyridin. V analogických postupech se do finální reakce přidává hrubá reakční směs čerstvě připravených acylalkylkarbonátů. Použité báze zahrnují dusíkaté organické báze obecného vzorce R3N, kde R je alkyl C| - C30 s lineárním nebo rozvětveným řetězcem volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin.
Substituovaný pyridin je znám tím, že po přidání k acylalkylkarbonatům výrazně urychluje jejich rozklad na příslušný ester a CO2, a to dokonce i při teplotách kolem 0 °C (reakce 2), přičemž vzniklý ester R-CO-O-R1 už nemůže reagovat jako acylační činidlo (reakce 3):
R-CO-O-CO-O-R1 4- DMAP -» R-CO-O-R1 + CO2 při nízkých teplotách (reakce 2) R-CO-O-R + HA-OH —► HA-O-CO-R nereaguje (reakce 3)
Proto se použití substituovaného pyridinu pro acylaci acylalkylkarbonáty odborníkovi jeví jako nevhodné, protože se předpokládá rychlý rozklad činidla (acylalkylkarbonátu), které tedy nemůže acylovat.
V navrhovaném postupu se podařilo vhodným výběrem experimentálních podmínek (reakce 5) vyhnout rychlému nežádoucímu rozkladu O-acy|-O'-alkylkarbonátů se substituovaným pyridinem na nereaktivní estery, přičemž dosažený stupeň substituce je výrazně vyšší než v analogických příkladech známých v literatuře (reakce 4)
R-CO-O-CO-O-R1 + HA-OH -> HA-O-CO-R reaguje jenom nepatrně (reakce 4)
HA-OH + báze + subst.pyr. + R-CO-O-CO-O-R1 HA-O-CO-R + CO2 + R*OH (reakce 5)
V případě, že činidlo (acylalkylkarbonát) odpovídá obecnému vzorci R(CO-O-CO-O-R )n, kde n > 1, tj. činidlo obsahuje dvě nebo více acylalkylkarbonátových skupin, například R(CO-O-CO-O-R1)2, vznikají síťované deriváty kyseliny hyaluronové polymer-O-CO-R-CO-O-polymer.
Příklady provedení vynálezu
DS - stupeň substituce = 100% . molámí množství navázaného substituentu ! molámí množství všech dimerů polysacharidu
Příklad 1
Příprava 0-ethyl-0 '-palmitoylkarbonátu
Do roztoku kyseliny palmitové (1 g) v etheru (50 ml) byl přidán triethylamin (1,3 eq) a směs se míchala 5 minut při teplotě místnosti. Pak byla ochlazena na -15 °C a 5 minut se přidával ethylchloroformiát (1,3 eq), přičemž teplota nepřesáhla -10 °C. Vzniklá suspenze se míchala 2 h za pomalého zahřátí směsi na -5 °C, pak byla rychle odfiltrována, filtrát odpařen a skladován při -15 °C.
Λ 13C NMR (CDCh) (8168ppm -OO-O-COOEt, 148ppm COO-CO-OEt, 66PPm COO-CH2CH3, 34ppm -CH2-COO-, 23-33ppm -C-CH2-C- ,15ppm COO-CH2-CH3, 14ppm-CH2CHrCHs).
H NMR (CDCh) δ 4.32 (q, 2H, COO-C//2-CH3), 2.46 (t, 2H, -C^-COO-), 1.68 ( m, 2H, C7/2-CH2-COO-), 1.63 (m, 2H, -C//2-CH2-CH2<00-), 1.37 (t, 3H, -COO-CHrC//3), 1.25-1.40 ( m, 22H, -C-C//rC-)( 0.90 (t, 3H, -CH2-CH2-C//3).
Příklad 2
Příprava O-(2-antrachinonkarbonyl)-O '-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny (1 g) 2-antrachinonkarboxylové v acetonu (50 ml) byl přidán tnethylamin (1,3 eq) a směs se míchala 5 minut při teplotě místnosti. Pak byla ochlazena na -15 °C a 5 minut se přidával ethylchlorofbrmiát (1,3 eq), přičemž teplota nepřesáhla -10 °C. Vznikla suspenze se míchala 2 h za pomalého zahřátí směsi na -5 °C, pak byla rychle odfiltrována, filtrát odpařen a skladován při -15 °C.
C NMR (CDC13) (Ó182ppm CAr-CO-CAr, 181ppm CA^CO-CAr, 159ppm CAr-COO-COOEt, 148ppm CAr-COO-COOEt, 135-125ppm-CAt, 62ppm -COO-CH2-CH3, 15ppm COO-CH2<h3).
Příklad 3
Příprava 0-(2-acetoxybenzoyl)-0 '-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny acetylsalicylové (1 g) v etheru (50 ml) byl přidán tnethylamin (1,3 eq) a směs se míchala 5 minut při teplotě místnosti. Pak byla ochlazena na -15 °C a 5 minut se přidával ethylchloroformiát (1,3 eq), přičemž teplota nepřesáhla -10 °C. Vzniklá suspenze se míchala 2 h za pomalého zahřátí směsi na -5 °C, pak byla rychle odfiltrována, filtrát odpařen a skladován při -15 °C.
I3C NMR (CDC13) (8169ppm -CO-O-COOEt, 158ppm CH3-CO-, 15Ippm Car-O-CO-, 149ppm -COO-CO-OEt, 135ppm Car, 132ppm Car, 126ppm Car, 124ppm Car, 120ppm Car, 66ppm -COO-CH2-CH3, 21ppm CH3-CO-, 14ppm -COO-CH2-CH3).
H NMR (CDC13) δ 8.04 ( d, 1H, ArZf-6), 7.64 (t, 1H, Ar/7-4), 7.32 (t, 1H, Ar/f-5), 7.12 ( d, 1H, Ar^-3), 4.38 (q, 2H, -COO-C^-CHa), 2.35 (s, 3H, 1.40 (t, 3H COO-CH2C/f3) ιθ ; ‘ ‘
Příklad 4
Příprava O,O'-bis(etoxykarbonyl)adipátu
Do roztoku kyseliny adipové (i g) v ethem (50 ml) byl přidán triethylamin (2,6 eq) a směs se míchala 30 minut při teplotě místnosti. Pak byla ochlazena na -15 °C a 5 minut se pndaval ethylchloroformiát (2,6 eq), přičemž teplota nepřesáhla -10 °C. Vzniklá suspenze se míchala 2 h za pomalého zahřátí směsi na -5 °C, pak rychle odfiltrována, tuhý podíl byl promyt 3 x 30 ml chladného etheru, filtrát odpařen a skladován při -15 °C.
I!C NMR (CDClj) (δ 167ppm-CO-O-COOEt, 149ppm-COO-CO-OEt, 66ppm COO-CH,CHj, 34ppm -CO-CH2-CH2-, 23ppm -CO-CH2-CH2-, 14ppm -COO-CH.-CHJ
Ή NMR (CDC1,) δ 4.30 (q, 2H, -COO-Cft-CH,). 2.49 (m, 2H, -CO-C/frCH,-), 1.74 (m, 2H, -CO-CH2-C#2- ),1.40 (t, 3H, -COO-CH2-C7A)
Příklad 5
Acylace kyseliny hyaluronovépomocí O-ethyl-O'-palmitoylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10g, 20kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl pndan triethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (0,4 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O-ethyl-O'-palmitoylkarbonat (2 eq, příklad 1) a směs se míchala při teplotě 20 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krat dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,095 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 5% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 8)
Příklad 6
Acylace kyseliny hyaluronovépomocí O-ethyl-O'-palmitoylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10g, 20kDa) vdimethylsulfoxidu (10ml) byl přidán tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O-ethyl-O'-palmitoylkarbonat (2 eq, příklad 1) a směs se míchala při teplotě 20 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,098 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 15% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 8)
Η · ’ ; ’ · .
Příklad 7
Acylace kyseliny hyaluronovépomoci 0-elhyl-0'-palmitoylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 20kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl přidán tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a stněs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O-ethyl-O'-palmitoylkarbonát (2 eq, příklad 1) a směs se míchala při teplotě 60 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát dialyzovaná proti 5 i demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,096 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 10% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 8)
Příklad 8
Acylace kyseliny hyaluronové pomocí O-ethyl-O^palmitoylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 20kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl pndan tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán 0-ethyl-0'-palmitoylkarbonát (2 eq, příklad 1) a směs se míchala při teplotě 20 °C 24h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krat dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,098 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 15% (stanoveno z NMR)
Analytická data hyaluronanu acylovaného kyselinou palmitovou:
H NMR (D2O) δ 4.28 (m, 2H, -COO-C^ polymer), 2.40 (m, 2H, -CflrCOO-), 1.65 ( m, 2H, -C^2-CH2-COO-), 1.60 (m, 2H, Ctt2-CH2-CH2-COO-), 1.25-1.40 (m, 22H, -CC^2-C-), 0.90 (m, 3H, -CH2-CH2-C773).
DOSY NMR (D2O) logD (2.0ppm, C//3-CO-NH-polymer) ~ -11.3m2/s logD (1.65ppm, -C#2-CH2-COO-) ~ -U.5m2/s logD (1.25-1.40ppm, -C-CH2-C-) ~ -11.5m2/s, logD (#2O) ~ ^,6m7s,
IR(KBr) 1735cm'1
Příklad 9
Acylace kyseliny hyaluronovépomocí O,O'-bis(etoxykarbonyl)adipátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 30kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl pndan tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (0,2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán aú'-bis(etoxykarbonyl)adipát (2eq, η , .
příklad 4) a směs se míchala při teplotě 20 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krat diaiyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,1 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 5% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 11)
Příklad 10
Acylace kyseliny hyaluronové pomoci 0,0 '-bis(etoxykarbonyl)adipátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 2000 kDa) v dimethylsulfoxidu (20 ml) byl přidán triethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán aO'-bis(etoxykarbonyl)adipát (2eq, příklad 4) a směs se míchala při teplotě 60 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát diaiyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,11 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 20% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 11)
Přikladli
Acylace kyseliny hyaluronovépomoci O,O'-bis(etoxykarbonyl)adipátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 30 kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl přidán triethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O,O'-bis(etoxykarbonyl)adipát (2 eq, příklad 4) a směs se míchala při teplotě 20 °C 1 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát diaiyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,12 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 50% (stanoveno z NMR)
Analytická data hyaluronanu acyiovaného kyselinou adipovou:
H NMR (D2O) δ 4.27 ( m, 2H, -COO-C//2-polymer), 2.43 ( m, 4H, -CO-C#2-CH2-), 1.68 (m,4H, -CO-CH2-G72-)
DOSY NMR (D2O) logD (2.0ppm, C//3-CO-NH-polymer) ~ -11,0m2/s logD (2.43, -CO-C772CH2-) ~ -11.0m7s logD (1.68, -CO-CH2-C^2-) - -11.0m2/s logD (//2O) ~ -8.6m2/s
IR(KBr) 1738cm'1
GPC SEC-MALLS Mw produktu 1600 kDa (1600 kg.mofl)
Příklad 12
Acylace kyseliny hyaluronové pomocí 0-(2-antrachinonkarbonyl)-0’-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 30 kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl pndan tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O-(2-antrachinonkarbonyl)-O'• ethylkarbonát (2 eq, příklad 2) a směs se míchala při teplotě 20 °C 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát dialyzovaná proti 5L-demineralizované vody. Výsledný roztok by! filtrován a odpařen za vzniku 0,1 g produktu ve formě průhledného filmu. DS 5% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 13)
Příklad 13
Acylace kyseliny hyaluronovépomoci O-(2-antrachinonkarbonyl)-O'-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10g, 200kDa) v dimethylsulfoxidu (10ml) byl přidán tnethylamin (4eq) a 4-dimethylaminopyridin (2eq) a směs se míchala Ih při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán O-(2-antrachinonkarbonyl)-(T’ ethylkarbonátu (2 eq, příklad 2) a směs se míchala při teplotě 20 °C 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,1 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 5% (stanoveno z NMR)
Analytická data hyaluronanu acylovaného kyselinou 2-antrachinonkarboxylovou: ’H NMR (D2O) δ 8.85 (m, 1H, Ar/7-1), 8.50 (m, 1H, Ar//-3), 8.40 (m, 1H, Ar77-4), 8.36 (m, 2H, Artt-5,8), 7.97 ( m, 2H, AiH-6,7), 4.32 (m, 2H, -COO-C//2-poiymer)
IR(KBr) 1738cm'1
GPC SEC-MALLS UV aktivní látka navázána na polymer (UV detektor 280 nm)
Příklad 14
Acylace kyseliny hyaluronovépomocí O-(2-acetoxybenzoyl)-O'-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 30 kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl přidán tnethylamin (4 eq) a 4-dimethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán a(2-acetoxybenzoyl)-O'-ethylkarbonát (2 eq, příklad 3) a směs se míchala při teplotě 20 °C 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované
1.4 : ' : ...
vody a směs byla 7-Wt dialyzovaná proti 5 I damineralizované vody. Výsledný roztok byl bltrován a odpařen za vzniku 0.1 g produktu ve formě průhledného filmu.
OS 10% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 16)
Příklad 15
Acylace kyseliny hyaluronovépomoci O-(2-acetoxybenzoyl)-O'-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 200 kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl přidán triethylamin (4 eq) a 4-diethylaminopyridin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti. Do výsledného roztoku byl pak přidán 0-(2-acetoxybenzoyl)-0'-ethylkarbonát (2 eq, příklad 3) a směs se míchala při teplotě 60 °C 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7-krát dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,1 g produktu ve formě průhledného filmu.
DS 10% (stanoveno z NMR, podrobně příklad 16)
Příklad 16
Acylace kyseliny hyaluronovépomoci O42-acetoxybenzoyl)-O '-ethylkarbonátu
Do roztoku kyseliny hyaluronové (0,10 g, 200 kDa) v dimethylsulfoxidu (10 ml) byl Přidán triethylamin (4 eq) a chinolin (2 eq) a směs se míchala 1 h při teplotě místnosti Do výsledného roztoku byl pak přidán O-(2-acetoxybenzoyl)-O'-ethylkarbonát (2 eq, příklad 3) a směs se míchala při teplotě 60 °C 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Roztok byl pak ochlazen na teplotu místnosti, přidal se dvacetinásobek demineralizované vody a směs byla 7krát dialyzovaná proti 5 1 demineralizované vody. Výsledný roztok byl filtrován a odpařen za vzniku 0,1 g produktu ve formě průhledného filmu,
DS 10% (stanoveno z NMR)
Analytička data hyaluronanu acylovaného kyselinou acetylsalicylovou:
*H NMR (H2O) δ 8.01 ( m, 1H, Ar/7-6), 7.55 ( m, 1H, Ar^-4), 7.28 (m, 1H, Ar/7-5), 7.05 ( m, 1H, ArZf-3), 4.28 (m, 2H, -COO-CWrpolymer)
GPC SEC-MALLS UV aktivní látka navázána na polymer (UV detektor 270 nm) rv ww —
.. · .' ’
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (8)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob přípravy derivátů kyseliny hyaluronové acylací pomocí O-acyl-O'-aIkyíkarbonátu obecného vzorce
    R(CO-O-CO-O-R')n (I), kde n je 1 až 7 a R a R1 představuji lineární nebo rozvětvený řetězec C| - C30 volitelně s obsahem aromatických nebo hetero aromatických skupin, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová reaguje v aprotickém prostředí s O-acyl-O'-alky!karbonátem v přítomnosti substituovaného pyridinu obecného vzorce
    kde R zahrnuje volitelně vodík nebo skupiny alkyloxy, dialkylamino a alkyl, kde alkyl představuje alkylový, lineární nebo rozvětvený řetězec Ci -'C30 volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatickych skupin, a kde alespoň jeden R je jiný než vodík.
  2. 2. Způsob přípravy podle nároku 1, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová je ve formě volné kyseliny nebo soli.
  3. 3. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová má molekulovou hmotnost v rozsahu 1.104 až 5.106 g.moT1 a polydisperzitu v rozsahu 1,02 až 5,0.
  4. 4. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že aprotické prostředí zahrnuje DMSO, jako rozpouštědlo, a bázi.
  5. 5. Způsob přípravy podle nároku 4, vyznačující se tím, že báze zahrnuje dusíkaté organické sloučeniny obecného vzorce R3N, kde R je alkylový lineární nebo rozvětvený řetězec Ci C3o, volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin.
  6. 6. Způsob přípravy podle kteréhokoli z předchozích nároků, vyznačující se tím, že reakce kyseliny hyaluronové s (?-acyl-ť?'-alkylkarbonátem v přítomnosti substituovaného pyridinu probíhá při teplotách 20 °C až 80 °C po dobu nejméně 1 minuty.
  7. 7. Způsob přípravy podle kteréhokoli z předchozích nároků, vyznačující se tím, že se nejprve připraví a izoluje O-acyl-O -alkylkarbonát, následně se zvlášť připraví reakční směs obsahující kyselinu hyaluronovou v aprotickém prostředí obsahujícím rozpouštědlo, bázi a substituovaný pyridin, a pak se k reakční směsi přidá O-acyl-čZ-alkylkarbonát v čisté formě v množství nejméně 0,1 ekvivalentů počítáno na dimer kyseliny hyaluronové.
  8. 8. Způsob přípravy podle kteréhokoli z předchozích nároků, vyznačující se tím, že substituovaný pyridin je zastoupen v reakční směsi v rozsahu 0,01 až 10 ekvivalentů počítáno na dimer kyseliny hyaluronové.
CZ20090168A 2009-03-17 2009-03-17 Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu CZ2009168A3 (cs)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20090168A CZ2009168A3 (cs) 2009-03-17 2009-03-17 Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu
CA2755520A CA2755520A1 (en) 2009-03-17 2010-03-13 A method of modification of hyaluronic acid by means of (o-acyl-o'-alkyl carbonate - substituted pyridine) complex
EP10723478A EP2408823A1 (en) 2009-03-17 2010-03-13 A method of modification of hyaluronic acid by means of (o-acyl-o'-alkyl carbonate - substituted pyridine) complex
PCT/CZ2010/000030 WO2010105582A1 (en) 2009-03-17 2010-03-13 A method of modification of hyaluronic acid by means of (o-acyl-o'-alkyl carbonate - substituted pyridine) complex
US13/256,966 US20120095205A1 (en) 2009-03-17 2010-03-13 Method of Modification of Hyaluronic Acid by Means of (O-ACYL-O'-ALKYL Carbonate-Substituted Pyridine) Complex
RU2011140724/13A RU2011140724A (ru) 2009-03-17 2010-03-13 Способ модификации гиалуроновой кислоты с помощью комплекса (о-ацил-о'-алкилкарбонат - замещенный пиридин)
JP2012500060A JP2012520902A (ja) 2009-03-17 2010-03-13 （ｏ‐アシル‐ｏ’‐アルキルカーボネート‐置換ピリジン）錯体によるヒアルロン酸の修飾方法
KR1020117024233A KR20110132449A (ko) 2009-03-17 2010-03-13 (ｏ-아실-ｏ'-알킬 카보네이트 - 치환된 피리딘) 착물에 의한 히알루론산의 개질 방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20090168A CZ2009168A3 (cs) 2009-03-17 2009-03-17 Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ301899B6 CZ301899B6 (cs) 2010-07-21
CZ2009168A3 true CZ2009168A3 (cs) 2010-07-21

Family

ID=42338101

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20090168A CZ2009168A3 (cs) 2009-03-17 2009-03-17 Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20120095205A1 (cs)
EP (1) EP2408823A1 (cs)
JP (1) JP2012520902A (cs)
KR (1) KR20110132449A (cs)
CA (1) CA2755520A1 (cs)
CZ (1) CZ2009168A3 (cs)
RU (1) RU2011140724A (cs)
WO (1) WO2010105582A1 (cs)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ302503B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace
CZ2009836A3 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ303879B6 (cs) 2012-02-28 2013-06-05 Contipro Biotech S.R.O. Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití
CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
CZ2012842A3 (cs) 2012-11-27 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití
CZ2013914A3 (cs) 2013-11-21 2015-02-25 Contipro Biotech S.R.O. Nanovlákna obsahující fototvrditelný esterový derivát kyseliny hyaluronové nebo její soli, fototvrzená nanovlákna, způsob jejich syntézy, přípravek obsahující fototvrzená nanovlákna a jejich použití
CZ2014150A3 (cs) 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
CZ2014451A3 (cs) 2014-06-30 2016-01-13 Contipro Pharma A.S. Protinádorová kompozice na bázi kyseliny hyaluronové a anorganických nanočástic, způsob její přípravy a použití
CZ309295B6 (cs) 2015-03-09 2022-08-10 Contipro A.S. Samonosný, biodegradabilní film na bázi hydrofobizované kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy a použití
CZ306479B6 (cs) 2015-06-15 2017-02-08 Contipro A.S. Způsob síťování polysacharidů s využitím fotolabilních chránicích skupin
CZ306662B6 (cs) 2015-06-26 2017-04-26 Contipro A.S. Deriváty sulfatovaných polysacharidů, způsob jejich přípravy, způsob jejich modifikace a použití
CZ308106B6 (cs) 2016-06-27 2020-01-08 Contipro A.S. Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití
CZ2016826A3 (cs) 2016-12-22 2018-07-04 Contipro A.S. Léčivý prostředek s nosičem na bázi hyaluronanu a/nebo jeho derivátů, způsob výroby a použití
CZ308064B6 (cs) 2018-08-23 2019-12-04 Contipro As Kompozice obsahující jodid a derivát kyseliny hyaluronové s oxidačním účinkem, způsob její přípravy a použití

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3720662A (en) * 1971-09-13 1973-03-13 Nat Starch Chem Corp Preparation of starch esters
JPS5930163B2 (ja) * 1981-08-13 1984-07-25 工業技術院長 Ｎ−アシル化キトサンの製造方法
GB8519416D0 (en) * 1985-08-01 1985-09-04 Unilever Plc Oligosaccharides
AU600257B2 (en) * 1986-03-21 1990-08-09 International Pharmaceutical Products, Inc. Non-inflammatory hyaluronic acid fraction and process for preparing it
FR2689131B1 (fr) * 1992-03-30 1994-05-20 Oreal Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire.
IL104734A0 (en) * 1993-02-15 1993-06-10 Univ Bar Ilan Bioactive conjugates of cellulose with amino compounds
US6673919B2 (en) * 2001-03-30 2004-01-06 Chisso Cororation Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof
FR2852012B1 (fr) * 2003-03-04 2006-06-23 Oreal Procede de preparation de derives o-acyles du glucose
CZ302856B6 (cs) * 2006-09-27 2011-12-14 Cpn Spol. S R. O. Zpusob prípravy derivátu polysacharidu

Also Published As

Publication number Publication date
CZ301899B6 (cs) 2010-07-21
RU2011140724A (ru) 2013-04-27
CA2755520A1 (en) 2010-09-23
WO2010105582A1 (en) 2010-09-23
US20120095205A1 (en) 2012-04-19
EP2408823A1 (en) 2012-01-25
KR20110132449A (ko) 2011-12-07
JP2012520902A (ja) 2012-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2009168A3 (cs) Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu
Heinze et al. Esterification of polysaccharides
Heinze et al. Unconventional cellulose esters: synthesis, characterization and structure–property relations
US4440926A (en) Heparin esters and processes for their preparation
US5874417A (en) Functionalized derivatives of hyaluronic acid
CA2817176C (fr) Derives de polysaccharides comprenant un motif alcene et reaction de couplage par chimie thio-clic
EP0565863B1 (en) Semi-synthetic glycosaminoglycans with heparin or heparan structure of alpha-L-iduronic-2-0-sulfate acid modified in position 2
US5264425A (en) Glycosaminoglycan salts and pharmaceutical compositions containing them
EP2173775B1 (en) Hyaluronic acid derivatives containing groups able to release no
CZ2006605A3 (cs) Zpusob modifikace polysacharidu
US4443595A (en) Cellulose ester derivatives and a process for the production thereof
AU2020389341B2 (en) Sulfhydryl modified hyaluronic acid, preparation method therefor and use thereof
WO1996035721A1 (en) A dicarboxylic acid hemiester or hemiamide with a pharmacologically active compound and with hyaluronic acid or with a hyaluronic acid ester, a process for its preparation and a controlled release medicament containing this derivative
Heinze et al. Cellulose esters
CZ304977B6 (cs) Nanovlákna obsahující fototvrditelný esterový derivát kyseliny hyaluronové nebo její soli, fototvrzená nanovlákna, způsob jejich syntézy, přípravek obsahující fototvrzená nanovlákna a jejich použití
JPH0616704A (ja) ３位を求核基で置換されたα−Ｌ−ガラクツロン酸を含有する半合成グリコサミノグリカン類
JP3563440B2 (ja) アシル化ヒアルロン酸の製造法
CN116120484B (zh) 一种抗凝血肝素寡糖苯联二聚体及其制备方法与应用
WO2017207564A1 (en) Method for cleaving amide bonds
US5523398A (en) Cellulose derivatives with a low degree of substitution
JPH06298805A (ja) α−Ｌ−イズロン酸−２−Ｏ−硫酸の２位が修飾されたヘパリンまたはヘパラン構造を有する半合成グリコサミノグリカンの合成方法
CN113906055A (zh) 官能化的透明质酸的交联的聚合物及其在炎症状态的治疗中的用途
EP1375524B1 (en) Process for the preparation of esters of heparin
US20050267070A1 (en) Process for the preparation of esters of heparin
JP5004950B2 (ja) Ｌ−イズロナート含有多糖類の生成

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20170317