EA037351B1 - Способ лечения злокачественных опухолей с использованием комбинации антител против pd-1 и ctl-4 - Google Patents

Способ лечения злокачественных опухолей с использованием комбинации антител против pd-1 и ctl-4 Download PDF

Info

Publication number
EA037351B1
EA037351B1 EA201492105A EA201492105A EA037351B1 EA 037351 B1 EA037351 B1 EA 037351B1 EA 201492105 A EA201492105 A EA 201492105A EA 201492105 A EA201492105 A EA 201492105A EA 037351 B1 EA037351 B1 EA 037351B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
cancer
antibodies
human
tumor
Prior art date
Application number
EA201492105A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201492105A1 (ru
EA037351B8 (ru
Inventor
Джон П. Когсвелл
Стэси М. Голдберг
Ашок К. Гупта
Мария Джуре-Кункел
Си Тао Ван
Джон М. Виггинтон
Original Assignee
Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48577861&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA037351(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Бристол-Майерс Сквибб Компани filed Critical Бристол-Майерс Сквибб Компани
Publication of EA201492105A1 publication Critical patent/EA201492105A1/ru
Publication of EA037351B1 publication Critical patent/EA037351B1/ru
Publication of EA037351B8 publication Critical patent/EA037351B8/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • G01N33/57492—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds localized on the membrane of tumor or cancer cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Описан способ иммунотерапии пациента со злокачественной опухолью, включающий введение пациенту антитела. Более конкретно, заявлен способ лечения субъекта-человека, страдающего злокачественной опухолью, предусматривающий введение субъекту четырех доз комбинации 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4 с интервалом каждые 3 недели при 4 дозах, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 3 мг/кг отдельно при частоте введения дозы один раз каждые 2 недели.

Description

По заявке на данное изобретение испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на выдачу патента США № 61/647442, поданной 15 мая 2012 г., и предварительной заявкой на выдачу патента США № 61/790747, поданной 15 марта 2013 г., содержание которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
В настоящем документе различные другие публикации представляют собой ссылки в скобках посредством имени автора и даты или номера патента или публикации патента. Полное название для этих публикаций может быть найдено в конце описания непосредственно перед формулой изобретения. Раскрытие этих публикаций полностью включено в настоящее описание посредством ссылки для того, чтобы более полно описать состояние настоящего уровня техники, известного специалистам в данной области техники по состоянию на дату настоящего изобретения, описанного и заявленного в настоящем документе. Тем не менее, цитата ссылки не должна быть истолкована как признание того, что такая ссылка представляет собой известный уровень техники по настоящему изобретению.
Область техники
Настоящее изобретение относится к способам иммунотерапии пациента со злокачественной опухолью, включающим введение пациенту антител, которые разрушают сигнальный путь PD-1/PD-L1. Биомаркер может быть использован как часть этого лечения для идентификации подходящих пациентов для иммунотерапии и для прогнозирования эффективности анти-PD-1 лечения.
Уровень техники
Злокачественные опухоли человека скрывают многочисленные генетические и эпигенетические изменения, создавая неоантигены, потенциально узнаваемые иммунной системой (Sjoblom et al., 2006). Адаптивная иммунная система, состоящая из Т- и В-лимфоцитов, характеризуется мощным противораковым потенциалом с широкой возможностью и совершенной специфичностью отвечать на различные опухолевые антигены. Кроме того, иммунная система демонстрирует значительную пластичность и компонент памяти. Успешное освоение всех этих атрибутов адаптивной иммунной системы сделает иммунотерапию уникальной среди всех способов лечения злокачественной опухоли. Тем не менее, хотя эндогенный иммунный ответ на злокачественную опухоль наблюдается в доклинических моделях и у пациентов, этот ответ неэффективен, и установленные злокачественные опухоли рассматриваются как собственные и переносятся иммунной системой. Внося вклад в это состояние толерантности, опухоли могут использовать несколько различных механизмов для того, чтобы активно подорвать противоопухолевый иммунитет. Эти механизмы включают в себя дисфункциональную передачу сигналов Т-клетками (Mizoguchi et al., 1992), супрессию регуляторных клеток (Facciabene et al., 2012), а также кооптацию эндогенных иммунных контрольных точек, которые служат для понижающего модулирования интенсивности адаптивных иммунных реакций и защиты нормальных тканей от сопутствующего повреждения опухолями для того, чтобы избежать иммунного разрушения (Topalian et al., 2011; Mellman et al., 2011). До недавнего времени иммунотерапия злокачественных опухолей не сосредотачивала значительные усилия на подходах, которые усиливают противоопухолевые иммунные ответы с помощью адоптивного переноса активированных эффекторных клеток, иммунизации против соответствующих антигенов или обеспечения неспецифических иммунных стимулирующих средств, таких как цитокины. В последнее десятилетие, однако, интенсивные усилия по разработке специфических ингибиторов путей иммунных контрольных точек начали обеспечивать новые иммунотерапевтические подходы для лечения злокачественной опухоли, включающие в себя создание антитела (Ab), ипилимумаба (YERVOY®), который связывает и ингибирует антиген-4 цитотоксического Т-лимфоцита (CTLA-4) для лечения пациентов с прогрессирующей меланомой (Hodi et al., 2010), и, как описано в настоящем документе, разработку антител, которые блокируют ингибиторный путь PD-1.
Programmed Death-1 (PD-1) представляет собой ключевой рецептор иммунной контрольной точки, экспрессируемый активированными Т- и В-клетками и опосредующий иммуносупрессию. PD-1 представляет собой представителя семейства рецепторов CD28, которое включает в себя CD28, CTLA-4, ICOS, PD-1 и BTLA. Были идентифицированы два лиганда гликопротеинов клеточной поверхности для PD-1, Programmed Death Ligand-1 (PD-L1) и Programmed Death Ligand-2 (PD-L2), которые экспрессируются на антигенпрезентирующих клетках, а также на многих злокачественных опухолях человека, и было показано, что они подавляют активацию Т-клеток и секрецию цитокинов после связывания с PD-1 (Freeman et al., 2000; Latchman et al., 2001). В отличие от CTLA-4, PD-1 в первую очередь функционирует в периферических тканях, где активированные Т-клетки могут столкнуться с иммуносупрессирующими лигандами PD-L1 (В7-Н1) и PD-L2 (B7-DC), экспрессируемыми опухолевыми и/или стромальными клетками (Flies et al., 2011; Topalian et al., 2012a). Ингибирование взаимодействия PD-1/PD-L1 опосредует мощную противоопухолевую активность в доклинических моделях (патенты США № 8008449 и 7943743), а также использование антител-ингибиторов взаимодействия PD-1/PD-L1 для лечения злокачественной опухоли вступило в клинические испытания (Brahmer et al., 2010; Topalian et al., 2012b; Brahmer et al., 2012; Flies et al., 2011; Pardoll, 2012; Hamid and Carvajal, 2013).
Перспектива новой области персонализированной медицины представляет собой то, что прогресс в фармакогеномике будет увеличивать использование специально разработанных лечебных средств для определенной субпопуляции и, в конечном счете, отдельных пациентов в целях повышения эффективно- 1 037351 сти и минимизации негативных последствий. Недавние успехи включают в себя, например, разработку иматиниба мезилата (GLEEVEC®), белка-ингибитора тирозинкиназы, который ингибирует тирозинкиназу bcr-abl, для лечения положительного по филадельфийской хромосоме хронического миелолейкоза (CML); кризотиниба (XALKORI®) для лечения 5% пациентов с поздней стадией немелкоклеточного рака легких, которые экспрессируют ген мутантной киназы анапластической лимфомы (ALK), и вемурафениба (ZELBORAF®), ингибитора мутировавшего белка B-RAF (V600E-BRAF), который экспрессируется приблизительно в половине опухолей меланомы. Однако в отличие от клинической разработки низкомолекулярных средств, которые нацелено воздействуют на отдельные активирующие мутации, найденные в некоторых популяциях злокачественных опухолей, особенно актуальной для иммунотерапии злокачественных опухолей представляет собой идентификация механизма на основе прогностических биомаркеров для выбора пациента и направления на контроль лечения. Достижения в проверке экспрессии PD-L1 в качестве биомаркеров для скрининга пациентов для анmи-PD-1 иммунотерапии описаны в настоящем документе.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к способу лечения человека, страдающего злокачественной опухолью, который предусматривает введение четырех доз комбинации 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4 с интервалом каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 3 мг/кг один раз каждые 2 недели.
В одном из вариантов изобретения антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.
В одном из вариантов изобретения антитело к CTLA-4 представляет собой ипилимумаб.
В одном из вариантов изобретения злокачественная опухоль выбрана из рака поджелудочной железы, рака кожи, рака молочной железы, рака легкого, сквамозного немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), несквамозного NSCLC, меланомы, рака почки, почечноклеточной карциномы, рака яичника, рака толстой и прямой кишок, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака желудка и кастрационнорезистентного рака предстательной железы.
В одном из вариантов изобретения злокачественной опухолью является меланома.
В одном из вариантов изобретения злокачественной опухолью является неоперабельная злокачественная опухоль.
В одном из вариантов изобретения злокачественной опухолью является метастатическая опухоль.
В одном из вариантов изобретения злокачественной опухолью является опухоль рецидивная или устойчивая к лечению злокачественная опухоль.
В одном из вариантов изобретения злокачественной опухолью является метастатическая меланома.
В одном из вариантов изобретения способ дополнительно включает в себя химиотерапию, облучение, хирургическое вмешательство, выключения эндокринной функции, введение ингибиторов ангиогенеза или антитела к PD-L1 или его связывающей антиген части или любую их комбинацию.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1А-1С. Перекрестная конкуренция между 5С4 и другими моноклональными антителами к PD-1 HuMab для связывания с PD-1 человека (hPD-1), экспрессированными на клетках CHO.
А: фрагмент Fab 5C4 по существу блокировал связывание самого моноклонального антитела 5С4, а также связывание 2D3 и 7D3;
В: фрагмент Fab 5C4 по существу блокировал связывание моноклонального антитела 4Н1;
С: моноклональное антитело 5С4 по существу блокировало связывание моноклонального антитела 17D8.
Фиг. 2A-2F. Перекрестная конкуренция конъюгированных с FITC человеческих моноклональных антител к hPD-L1 за связывание с PDF-L1 человека (hPD-L1), экспрессированным на клетках CHO.
А: связывание меченого 10H10 частично блокировалось 10А5, 11Е6 и 13G4 и значительно блокировалось само по себе;
В: связывание меченого 3G10 значительно блокировалось каждым из исследуемых антител к PD-L1, за исключением 10Н10;
С: связывание меченого 10А5 значительно блокировалось каждым из исследуемых антител к PD-L1, за исключением 10Н10;
D: связывание меченого 11Е6 значительно блокировалось каждым из исследуемых антител к PD-L1, за исключением 10Н10;
Е: связывание меченого 12А4 значительно блокировалось каждым из исследуемых антител к PDL1, за исключением 10Н10; и
F: связывание меченого 13G4 значительно блокировалось каждым из исследуемых антител к PD-L1, за исключением 10Н10.
Фиг. 3. Перекрестное конкурентное ингибирование связывания биотинилированного моноклонального антитела 12А4 с клетками ES-2 моноклональными антителами к HPD-L1 человека. Флуоресценция связанного биотин-12А4 представлена в зависимости от концентрации немеченных HuMab hPD-L1.
Фиг. 4. Спайдер-диаграмма, показывающая активность моноклонального антитела к PD-1 у пациен
- 2 037351 тов с устойчивой к лечению меланомой (MEL). Репрезентативный график изменений в опухолевой нагрузке с течением времени демонстрирует временной ход изменения в сумме длинных диаметров повреждений-мишеней, по сравнению с исходным уровнем, у 27 пациентов с MEL, подвергавшихся воздействию 5С4 в дозе 1,0 мг/кг. У большинства пациентов, которые достигали объективной реакции (OR), реакции были прочные и очевидны к концу цикла 3 (6 месяцев) лечения (вертикальная пунктирная линия). Опухолевые регрессии после обычных, а также связанных с иммунной системой паттернов ответов, такие как длительное снижение опухолевой нагрузки в присутствии новых очагов.
Фиг. 5. Активность моноклонального антитела к PD-1 у пациента с метастатическим RCC. Показана частичная регрессия метастатического RCC у 57-летнего пациента, получавшего 5С4 в дозе 1 мг/кг. Этот пациент ранее подвергался радикальной операции и характеризовался наличием прогрессирующего заболевания после получения сунитиниба, темсиролимуса, сорафениба и пазопаниба. Стрелки показывают регрессию рецидивной опухоли в операционном поле.
Фиг. 6. Активность моноклонального антитела к PD-1 у пациента с метастатическим MEL. Полный ответ метастатического MEL показан у 62-летнего пациента, получавшего 5С4 в дозе 3 мг/кг, связанного с витилиго. (i) Предварительная компьютерная томография, метастазы паховых лимфатических узлов (стрелка); (ii) после 13 месяцев лечения. Многочисленные метастазы в подкожную ткань и забрюшинное пространство полностью регрессировали (не показано). Витилиго развился после 6 месяцев лечения; фотографии сделаны через 9 месяцев при видимом свете (iii) и ультрафиолетовом свете (iv). Кожные биопсии с иммуногистохимией для ассоциированного с микрофтальмией фактора транскрипции (MITF) показывают меланоциты (стрелки) на эпидермально-дермальном соединении в нормальной коже (v) и небольшое количество (vi) или отсутствие (vii) меланоцитов в коже, частично или полностью зависимое от витилиго.
Фиг. 7. Активность моноклонального антитела к PD-1 у пациента с метастатическим NSCLC. Частичный ответ показан у пациента с метастатическим NSCLC (неплоскоклеточная гистология), получавшего 5С4 в дозе 10 мг/кг. Стрелки показывают первоначальное прогрессирование в легочных поражениях с последующей регрессией (связанный с иммунной системой паттерн ответа).
Фиг. 8А и 8В. Корреляция между опухолевой экспрессией PD-L1 и анти-PD-1 клинической реакцией. Экспрессия на поверхности опухолевых клеток PD-L1 до воздействия, как определено с помощью IHC на фиксированных в формалине залитых в парафин образцах, коррелирует с OR к блокаде PD-1. Исследовали 42 субъекта на поздних стадиях злокачественных опухолей, включающих в себя меланому, немелкоклеточный рак легкого, колоректальный рак, почечноклеточный рак и кастрационнорезистентный рак предстательной железы (N=18, 10, 7, 5 и 2 соответственно).
А: наблюдалась значимая корреляция экспрессии PD-L1 на поверхности опухолевых клеток с объективной клинической реакцией. Ни один из пациентов с PD-L1-отрицательными опухолями не испытал OR;
В: примеры анализа IHC с моноклональным антителом к PD-L1 5Н1 показаны в метастазах в лимфатических узлах меланомы (вверху), образце нефрэктомии почечноклеточного рака (в центре) и метастазах головного мозга аденокарциномы легкого (внизу). Все при 400Х оригинальном увеличении. Стрелки указывают на одну из многих опухолевых клеток в каждом образце с окрашиванием поверхностной мембраны для PD-L1. Звездочка обозначает обычный клубочек в образце нефрэктомии, отрицательный для окрашивания PD-L1.
Фиг. 9. Графическое сравнение связывания моноклональных антител 28-8 и 5Н1 с антигеном PD-L1 в опухолевых тканях с помощью анализа гистологического счета histoscore. Кроличье моноклональное антитело 28-8 показало более высокие показатели, полученные способом гистологического счета в 7 из 10 испытанных образцов.
Фиг. 10A-10D. Спайдер-диаграмма, показывающая активность моноклонального антитела к PD-L1 у пациентов с устойчивыми к лечению MEL и NSCLC. Репрезентативные графики показывают временной ход опухолевой нагрузки поражения-мишени с течением времени у пациентов с MEL, получавших BMS-936559 в дозах 1 (А), 3 (В), 10 мг/кг (С), и у пациентов с NSCLC, получавших дозу 10 мг/кг (D). У большинства пациентов, достигших OR, реакции были прочные и очевидные в конце цикла 2 (3 месяца) лечения, независимо от дозы или типа опухоли. Опухолевые регрессии после обычных, а также связанных с иммунной системой паттернов ответов.
Фиг. 11. Полный ответ у пациента с меланомой, получавшего BMS-936559 в дозе 3 мг/кг. Круги указывают на первоначальное увеличение размера легочных узелков в 6 недель и 3 месяца с последующей полной регрессией в 10 месяцев (связанного с иммунной системой паттерн ответа).
Фиг. 12. Полный ответ у пациента с меланомой, получавшего BMS-936559 в дозе 1 мг/кг. Этот пациент развивал выделенные метастазы в головной мозг через 3 месяца после начала лечения, что было успешно излечено при помощи стереотаксической радиохирургии. Частичный ответ при заболевании органов брюшной полости (в кружке) был отмечено в 8 месяцев, без признаков заболевания - в 15 месяцев.
Фиг. 13. Частичный ответ у пациента с NSCLC (неплоскоклеточная гистология), получавшего BMS-936559 в дозе 10 мг/кг. Обратите внимание на ответ при заболевании в правой легочной плевре и
- 3 037351 печени.
Фиг. 14А и 14В. Клиническая активность пациентов с MEL, получавших в одновременной схеме лечения ниволумаб и ипилимумаб.
А: репрезентативные спайдер-диаграммы показывают изменения по сравнению с исходным уровнем в опухолевой нагрузке, определяемой как сумма произведений перпендикулярных диаметров всех поражений-мишеней у пациентов, которые получали в одновременной схеме лечения 1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб, MTD. Треугольники указывают на первое возникновение нового поражения;
В: репрезентативная каскадная диаграмма показывает максимальный процентный отклик в базовых поражениях-мишених у пациентов, которые получали одновременную схему лечения.
Фиг. 15. Опухолевые регрессии у 52-летнего пациента с MEL, который получал одновременную схему лечения 1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб. Этот пациент проявлял обширную лимфаденопатию шеи, средостению, подмышечную, брюшной полости и малого таза, двусторонние легочные узелки, небольшие метастазы кишечника, перитонеальные имплантаты и диффузные подкожные узелки. Исходная лактатдегидрогеназа (ЛДГ) составляла 2,25х верхнюю границу нормы, гемоглобин составлял 9,7 г/дл, и симптомы включали в себя тошноту и рвоту. В течение 4 недель лечения ЛДГ нормализовалась, симптомы улучшились (аппетит увеличился, тошнота уменьшилась) и поражения кожи регрессировали. Сканирования на 12 неделю показало заметное снижение во всех областях заболевания. Стрелками показано расположение метастазов.
Фиг. 16А-16С. Клиническая активность пациентов с MEL, которые получали различные одновременные схемы лечения ниволумаба и ипилимумаба. Репрезентативные спайдер-диаграммы показывают изменения по сравнению с исходным уровнем в опухолевой нагрузке, определяемой как сумма произведений перпендикулярных диаметров всех поражений-мишеней у пациентов, которые получали одновременную схему лечения 0,3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб (А), 3 мг/кг ниволумаб + 1 мг/кг ипилимумаб (В) или 3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб (С). Треугольники указывают на первое появление нового поражения.
Фиг. 17. Опухолевые регрессии у 61-летнего пациента с MEL, который получал одновременную схему лечения 0,3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб. Пациент со стадией IV (М1с) MEL с неизвестным первичным сайтом, с метастазами в желудок и брыжейку. Лактатдегидрогеназа составляла 225 и гемоглобин составлял 9,6 г/дл после недавнего переливания. Через 12 недель после начала исследуемого лечения КТ показала 86% снижение в нагрузке с массивным поражением.
Фиг. 18А-18С. Клиническая активность пациентов с MEL, которые получали последовательную схему лечения ниволумаба и ипилимумаба. Репрезентативные спайдер-диаграммы показывают изменения по сравнению с исходным уровнем опухолевой нагрузки, определяемой как сумма произведений перпендикулярных диаметров всех поражений-мишеней у больных, которые получали последовательную схему лечения 1 мг/кг ниволумаб (А) или 3 мг/кг ниволумаб (В) после предварительной терапии с ипилимумабом. Треугольники указывают на первое возникновение нового поражения. С: репрезентативная каскадная диаграмма показывает на максимальный процентный отклик в базовых уровнях поражений-мишеней у пациентов, которые получали последовательную схему лечения; * обозначает пациентов, которые характеризовались рентгенологическим прогрессированием после предварительного лечения ипилимумабом.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к способам иммунотерапии субъекта, страдающего от таких заболеваний, как злокачественная опухоль или инфекционное заболевание, причем способы включают введение субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения или средства, которое усиливает эндогенный иммунный ответ, либо стимулируя активацию эндогенной реакции, либо ингибируя супрессию эндогенного ответа. Более конкретно, в настоящем изобретении предусмотрены способы для потенцирования эндогенного иммунного ответа у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, с тем чтобы, таким образом, лечить пациента, способ, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества средства, такого как антитело или его антигенсвязывающий участок, что нарушает или ингибирует передачу сигнала от ингибиторного иммунорегулятора. Согласно некоторым вариантам осуществления ингибиторный иммунорегулятор представляет собой компонент сигнального пути PD-1/PD-L1. Соответственно, некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают способы иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, способы, которые включают введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего участка, что нарушает взаимодействие между рецептором PD-1 и его лигандом, PD-L1. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок специфически связывается с PD-1. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок специфически связывается с PD-L1. Некоторые варианты осуществления включают использование антитела к PD-1 в комбинации с другим противораковым средством, предпочтительно антителом к CTLA-4, для лечения злокачественной опухоли. Согласно некоторым другим вариантам осуществления субъекта выбирают в качестве подходящего для иммунотерапии в способе, включающем измерение поверхностной экспрессии PD-L1 в ис- 4 037351 следуемом образце ткани, полученном от пациента со злокачественной опухолью ткани, например, определение доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, и выбор пациента для иммунотерапии, основанный на оценке того, что PD-L1 экспрессируется на клеточной поверхности в исследуемом образце ткани.
Термины
Для того чтобы настоящее изобретение можно было легче понять, сначала определяются некоторые термины. Как используется в настоящем описании, за исключением случаев, прямо предусмотренных в настоящем документе, каждый из следующих терминов характеризуется изложенным ниже смыслом. Дополнительные определения приведены на протяжении всего описания.
Введение относится к физическому введению содержащей терапевтическое средство композиции субъекту с использованием любого из различных способов и систем доставки, известных специалистам в настоящей области техники. Предпочтительные способы введения для антител согласно настоящему изобретению включают в себя внутривенное, внутримышечное, подкожное, внутрибрюшинное, спинальное или другие парентеральные способы введения, например путем инъекции или инфузии. Используемая в настоящем документе фраза парентеральное введение означает способы введения, отличные от энтерального и местного введения, как правило, путем инъекции, и включает в себя без ограничения внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, внутрилимфатическую, внутриочаговую, интракапсулярную, интраорбитальную, внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и внутригрудинную инъекцию и инфузию, а также электропорацию in vivo. Кроме того, антитело согласно настоящему изобретению может быть введено непарентеральным путем, таким как местный, эпидермальный или путь введения через слизистую, например интраназально, перорально, вагинально, ректально, сублингвально или местно. Введение также может быть выполнено, например, один раз, множество раз и/или в течение одного или нескольких длительных периодов времени.
Используемое в настоящем документе нежелательное явление (AE) представляет собой любой неблагоприятный и в целом непреднамеренный или нежелательный знак (включающий в себя аномальные лабораторные данные), симптом или заболевание, связанное с использованием медицинской помощи. Например, нежелательное явление может быть связано с активацией иммунной системы или расширением клеток иммунной системы (например, Т-клеток) в ответ на лечение. Лечение может характеризоваться одним или несколькими связанными с ним AE, и каждый АЕ может характеризоваться таким же или другим уровнем тяжести. Ссылка на способы, позволяющие изменение нежелательных явлений, означает схему лечения, которая снижает распространенность и/или тяжесть одного или нескольких AE, связанных с использованием другой схемы лечения.
Антитело (Ab) включает в себя без ограничения гликопротеиновый иммуноглобулин, который специфически связывается с антигеном и содержит по меньшей мере две тяжелые (H) цепи и две легкие (L) цепи, соединенные дисульфидными связями, или его антигенсвязывающий участок. Каждая Н-цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно в настоящем документе как VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три константных домена, CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенно в настоящем документе как VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи содержит один константный домен, CL. Области VH и VL могут дополнительно подразделяться на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), перемежающиеся с областями, которые представляют собой более консервативные, называемые каркасными областями (FR). Каждый VH и VL содержит три CDR и четыре FR, расположенные от аминоконца к карбоксиконцу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей содержат связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константные области антител могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями или факторами хозяина, включая в себя различные клетки иммунной системы (например, эффекторные клетки) и первый компонент (C1q) классической системы комплемента. Антитела, как правило, специфически связываются со своим родственным антигеном с высокой аффинностью, отраженной в константе диссоциации (KD) от 10-5 до 10-11 М-1 или меньше. Любая KD больше чем приблизительно 10-4 М-1, как правило, рассматривается как указывающая на неспецифическое связывание. Как используется в настоящем документе, антитело, которое специфически связывается с антигеном, относится к антителу, которое связывается с антигеном и по существу идентичными антигенами с высокой аффинностью, что означает наличие KD, равной 10-7 М или менее, предпочтительно 10-8 М или менее, еще более предпочтительно от 5х10-9 М или менее и наиболее предпочтительно от 10-8 и 10-10 М или менее, но не связывается с высокой аффинностью с неродственными антигенами. Антиген представляет собой по существу идентичное данному антигену, если он проявляет высокую степень идентичности последовательности к данному антигену, например если он проявляет по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95%, более предпочтительно по меньшей мере 97% или даже более предпочтительно по меньшей мере 99% идентичности последовательности по отношению к последовательности данного антигена. В качестве приме- 5 037351 ра антитело, которое специфически связывается с PD-1 человека, может также характеризоваться перекрестной реактивностью с антигенами PD-1 от некоторых приматов, но может перекрестно не реагировать с антигенами PD-1 от некоторых видов грызунов или с антигеном, отличным от PD-1, например, антигеном PD-L1 человека. Иммуноглобулин может происходить от любого из общеизвестных изотипов, включающих в себя без ограничения IgA, секреторные IgA, IgG и IgM. Подклассы IgG также хорошо известны специалистам в настоящей области техники и включают в себя без ограничения человеческие IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Изотип относится к классу или подклассу антитела (например, IgM или IgG1), который кодируется генами константной области тяжелой цепи. Термин антитело включает в себя в качестве примера как природные, так и неприродные антитела; моноклональные и поликлональные антитела; химерные и гуманизированные антитела; человеческие или нечеловеческие антитела; полностью синтетические антитела и одноцепочечные антитела. Нечеловеческое антитело может быть гуманизированным с помощью рекомбинантных способов для уменьшения его иммуногенности у человека. Там, где явно не указано иное и если из контекста не следует иное, термин антитело также включает в себя антигенсвязывающий фрагмент или антигенсвязывающий участок любого из указанных выше иммуноглобулинов и включает в себя одновалентный и двухвалентный фрагмент или участок одноцепочечного антитела. Выделенное антитело относится к антителу, которое по существу не содержит другие антитела, характеризующиеся различными антигенными специфичностями (например, выделенное антитело, которое специфически связывается с PD-1 представляет собой по существу свободное от антител, которые специфически связываются с другими антигенами, отличными от PD-1). Выделенное антитело, которое специфически связывается с PD-1, может, однако, характеризоваться перекрестной реактивностью к другим антигенам, таким как молекулы PD-1 от различных видов. Кроме того, выделенное антитело может быть по существу свободным от другого клеточного материала и/или химических веществ. Для сравнения, выделенная нуклеиновая кислота относится к композиции нуклеиновой кислоты вещества, которое заметно отличается, т.е. характеризуется отличительной химической идентичностью, природой и полезностью, от нуклеиновых кислот, как они существуют в природе. Например, выделенная ДНК, в отличие от нативной ДНК, представляет собой свободно стоящую часть в нативной ДНК, а не неотъемлемую часть более крупного структурного комплекса, хромосомы, встречающейся в природе. Кроме того, выделенная ДНК, в отличие от нативной геномной ДНК, как правило, может быть использована в приложениях или способах, для которых нативная геномная ДНК не подходит, например, в качестве праймера ПНР или гибридизационного зонда, в частности, для измерения экспрессии генов и обнаружения генов биомаркеров или мутаций для диагностики заболевания или оценки эффективности лекарственного средства. Выделенная нуклеиновая кислота может быть очищена так, чтобы быть по существу свободной от других клеточных компонентов или других примесей, например, других клеточных нуклеиновых кислот или белков, с использованием стандартных техник, хорошо известных в настоящей области техники. Примеры отдельных нуклеиновых кислот включают в себя фрагменты геномной ДНК, амплифицированной с помощью ПЦР ДНК, кДНК и РНК.
Термин моноклональное антитело (mAb) относится к препарату молекул антител одной молекулярной композиции, т.е. молекулам антител, чьи первичные последовательности по существу идентичны, и которые проявляют единственную специфичность связывания и аффинность к конкретному эпитопу. Моноклональное антитело представляет собой пример выделенного антитела. Моноклональные антитела могут быть получены с помощью гибридомы, рекомбинантной трансгенной или других техник, известных специалистам в настоящей области техники. Человеческое антитело (HuMAb) относится к антителу, содержащему вариабельные области, в которых обе каркасные области и области CDR выделены из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. Кроме того, если антитело содержит константную область, константную область также получают из последовательностей зародышевой линии иммуноглобулина человека. Антитела человека согласно настоящему изобретению могут включать в себя аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии человека (например, мутации, введенные случайным или сайт-специфическим мутагенезом in vitro или соматической мутацией in vivo). Однако используемый в настоящем документе термин человеческое антитело не предназначен для включения в себя антител, в которых последовательности CDR, полученные из зародышевой линии других видов млекопитающих, таких как мыши, были привиты на последовательности каркасных областей человека. Термины человеческие антитела и полностью человеческие антитела используются как синонимы. Гуманизированное антитело относится к антителу, в котором некоторые, большинство или все аминокислоты за пределами доменов CDR отличного от человеческого антитела замещены соответствующими аминокислотами, полученными из человеческих иммуноглобулинов. Согласно одному варианту осуществления гуманизированной формы антитела некоторые, большинство или все аминокислоты за пределами доменов CDR были замещены аминокислотами из иммуноглобулинов человека, тогда как некоторые, большинство или все аминокислоты в пределах одной или нескольких областей CDR представляют собой неизменные. Небольшие добавки, делеции, вставки, замены или модификации аминокислот представляют собой допустимые до тех пор, пока они не отменяют способность антитела связываться с конкретным антигеном. Гуманизированное антитело сохраняет антигенную специфичность, аналогичную исходному антителу.
- 6 037351
Химерное антитело относится к антителу, в котором вариабельные области получают от одного вида и константные области получают от другого вида, такому как антитело, в котором вариабельные области получают от мышиного антитела и константные области получают от человеческого антитела.
Антигенсвязывающий участок антитела (также называемый антигенсвязывающий фрагмент) относится к одному или нескольким фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном, связанным всем антителом.
Злокачественная опухоль относится широкой группе различных заболеваний, характеризующихся неконтролируемым ростом аномальных клеток в организме. Нерегулируемое клеточное деление и рост приводят к образованию злокачественных опухолей, которые вторгаются в соседние ткани, а также могут метастазировать в отдаленные части организма через лимфатическую систему или кровь.
Иммунный ответ относится к действию клетки иммунной системы (например, Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, клеток натуральных киллеров (NK), макрофагов, эозинофилов, тучных клеток, дендритных клеток и нейтрофилов) и растворимых макромолекул, полученных с помощью любой из этих клеток или печенью (включая в себя антитела, цитокины и комплемент), что приводит к селективному нацеленному воздействию, связыванию, повреждению, уничтожению и/или выведению из организма позвоночных вторгающихся патогенных микроорганизмов, клеток или тканей, инфицированных возбудителями, злокачественными или другими патологическими клетками, или, в случае аутоиммунных заболеваний или патологического воспаления, нормальных человеческих клеток или тканей.
Иммунорегулятор относится к веществу, средству, сигнальному пути или его компоненту, который регулирует иммунный ответ. Регулирование, модифицирование или модуляция иммунного ответа относится к любому изменению в клетке иммунной системы или в активности такой клетки. Такое регулирование включает в себя стимуляцию или супрессию иммунной системы, которая может проявляться увеличением или уменьшением числа различных клеточных типов, увеличением или уменьшением в активности этих клеток или любых других изменений, которые могут произойти в иммунной системе. Были идентифицированы как ингибирующие, так и стимулирующие иммунорегуляторы, некоторые из которых, возможно, характеризуются усовершенствованной функцией в микросреде злокачественной опухоли.
Термин иммунотерапия относится к лечению субъекта, страдающего от или характеризующегося риском заражения или испытания повторения заболевания с помощью способа, включающего индукцию, усиление, подавление или иную модификацию иммунного ответа. Лечение или терапия субъекта относится к любому типу вмешательства или процесса, выполняемых на, или введения активного средства субъекту с целью обращения вспять, облегчения, улучшения, препятствия, замедления или предотвращения возникновения прогрессирования, развития, тяжести или рецидива симптома, осложнения, состояния или биохимического показателя, связанного с заболеванием.
Потенцирование эндогенного иммунного ответа означает повышение эффективности или активности существующего иммунного ответа у субъекта. Это увеличение эффективности и активности может быть достигнуто, например, путем преодоления механизмов, которые супрессируют эндогенный иммунный ответ хозяина или с помощью стимулирующих механизмов, которые повышают эндогенный иммунного ответа хозяина.
Заданное пороговое значение, относящееся к экспрессии PD-L1 на клеточной поверхности, относится к доле клеток в исследуемом образце ткани, содержащем опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки, выше которого образец набирает как положительный на экспрессию PD-L1 на клеточной поверхности. Экспрессию на клеточной поверхности анализировали с помощью IHC с моноклональным антителом 28-8, заданное пороговое значение для клеток, экспрессирующих PD-L1 на клеточной поверхности, составляет по меньшей мере от приблизительно 0,01 до по меньшей мере приблизительно 20% от общего числа клеток. Согласно предпочтительным вариантам осуществления заданное пороговое значение для клеток, экспрессирующих PD-L1 на клеточной поверхности, варьирует в диапазоне по меньшей мере от приблизительно 0,1% до по меньшей мере приблизительно 10% от общего числа клеток. Более предпочтительно заданное пороговое значение составляет по меньшей мере приблизительно 5%. Еще более предпочтительно заданное пороговое значение составляет по меньшей мере приблизительно 1% или находится в интервале 1-5%.
Рецептор Programmed Death-1 (PD-1) относится к иммуноингибиторному рецептору, принадлежащему к семейству CD28. PD-1 экспрессируется преимущественно на предварительно активированных Т-клетках in vivo и связывается с двумя лигандами, PD-L1 и PD-L2. Используемый в настоящем документе термин PD-1 включает в себя PD-1 человека (hPD-1), варианты, изоформы и гомологи видов HPD-1 и аналоги, содержащие по меньшей мере один общий эпитоп с hPD-1. Полную последовательность hPD-1 можно найти в GenBank, номер доступа U64863. Programmed Death Ligand-1 (PD-L1) представляет собой один из двух клеточных поверхностных гликопротеиновых лигандов для PD-1 (другой PD-L2), который подавляет активацию Т-клеток и секрецию цитокинов после связывания с PD-1. Используемый в настоящем документе термин PD-L1 включает в себя PD-L1 человека (hPD-L1), варианты, изоформы и гомологи видов HPD-L1 и аналоги, содержащие по меньшей мере один общий эпитоп с hPD-L1. Полную последовательность hPD-1 можно найти в GenBank, номер доступа Q9NZQ7.
- 7 037351
Путь переноса сигнала или сигнальный путь относится к биохимической связи между различными молекулами-переносчиками сигнала, которые играют важную роль в передаче сигнала от одной части клетки в другую часть клетки. Рецептор клеточной поверхности включает в себя, например, молекулы и комплексы молекул, которые расположены на поверхности клетки и которые способны принимать сигнал и передавать такой сигнал через плазматическую мембрану клетки. Пример рецептора клеточной поверхности согласно настоящему изобретению представляет собой рецептор PD-1, который расположен на поверхности активированных Т-клеток, активированных В-клеток и миелоидных клеток, и передает сигнал, который приводит к уменьшению проникающих в опухоль лимфоцитов и уменьшению пролиферации Т-клеток. Ингибитор передачи сигнала относится к соединению или средству, которое действует как антагонист или уменьшает инициацию, прием или передачу сигнала, при этом сигнал представляет собой стимулирующий или ингибирующий под влиянием какого-либо компонента сигнального пути, такого как рецептор или его лиганд.
Субъект включает в себя любого человека или отличного от человека животного. Термин отличное от человека животное включает в себя без ограничения таких позвоночных, как нечеловекоподобные приматы, овцы, собаки, кошки, кролики и хорьки, таких грызунов, как мыши, крысы и морские свинки, таких птиц, как куры, амфибий и рептилий. Согласно предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой такое млекопитающее, как нечеловекоподобный примат, овца, собака, кошка, кролик, хорек или грызун. Согласно более предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой человека. Термины субъект, пациент и индивидуум используются в настоящем документе как взаимозаменяемые.
Термин терапевтически эффективное количество или терапевтически эффективная доза лекарственного или терапевтического средства, такого как антитело, согласно настоящему изобретению представляет собой любое количество лекарственного средства, которое при использовании отдельно или в сочетании с другим терапевтическим средством, защищает субъекта от появления заболевания или способствует регрессии заболевания, подтверждаемой уменьшением выраженности симптомов заболевания, увеличением частоты и длительности бессимптомных периодов заболевания или предотвращением нарушений или инвалидностью в связи с заболеванием. Способность терапевтического средства содействовать регрессии заболевания может быть оценена с помощью различных способов, известных специалисту в настоящей области техники, таких как у субъектов-людей в ходе клинических испытаний, в животных модельных системах прогнозирования эффективности у людей или путем анализа активности средства в анализах in vitro. В качестве примера противораковое средство способствует регрессии злокачественной опухоли у субъекта. Согласно предпочтительным вариантам осуществления терапевтически эффективное количество лекарственного средства способствует регрессии злокачественной опухоли до точки устранения злокачественной опухоли. Содействие регрессии злокачественной опухоли означает, что введение эффективного количества лекарственного средства, одного или в комбинации с противоопухолевым средством, приводит к снижению роста опухоли или размера, некрозу опухоли, уменьшению тяжести по меньшей мере одного симптома заболевания, увеличению частоты и длительности бессимптомных периодов заболевания или предотвращению нарушений или инвалидности в связи с заболеванием. Кроме того, термины эффективное и эффективность в отношении лечения включают в себя как фармакологическую эффективность, так и физиологическую безопасность. Фармакологическая эффективность относится к способности лекарственного средства содействовать регрессии злокачественной опухоли у пациента. Физиологическая безопасность относится к уровню токсичности или другим неблагоприятным физиологическим эффектам на клеточном, органном и/или организменном уровне (нежелательные явления) в результате приема лекарственного средства.
В качестве примера для лечения опухолей терапевтически эффективное количество лекарственного средства предпочтительно ингибирует рост клеток или рост опухоли по меньшей мере приблизительно на 20%, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно на 40%, еще более предпочтительно по меньшей мере приблизительно на 60% и еще более предпочтительно по меньшей мере приблизительно на 80% по отношению к субъектам без воздействия. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления настоящего изобретения регрессию опухоли можно наблюдать и продолжать в течение по меньшей мере приблизительно 20 дней, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 40 дней или даже более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 60 дней. Несмотря на эти конечные измерения терапевтической эффективности, оценка иммунотерапевтических лекарственных средств должна тоже вносить поправку в связанные с иммунной системой паттерны ответов.
Связанный с иммунной системой паттерн ответа относится к клинической картине ответа, часто наблюдаемой у онкологических пациентов, подвергаемых лечению иммунотерапевтическими средствами, которые производят противоопухолевое действие, индуцируя специфические к злокачественной опухоли иммунные реакции или модифицируя нативные иммунные процессы. Эта картина ответа характеризуется полезным терапевтическим эффектом, который следует после первоначального увеличения опухолевой нагрузки или появления новых поражений, которые в оценке традиционных химиотерапевтических средств могут быть классифицированы как прогрессирование заболевания и будут синонимом отказа от лекарственных средств. Соответственно, правильная оценки иммунотерапевтических средств
- 8 037351 может потребовать долгосрочного мониторинга эффектов этих средств в отношении нацеленного воздействия на заболевание.
Терапевтически эффективное количество лекарственного средства включает в себя профилактически эффективное количество, которое представляет собой любое количество лекарственного средства, которое при введении по отдельности или в комбинации с противоопухолевым средством субъекту с риском развития злокачественной опухоли (например, субъекту, характеризующемуся предварительным злокачественным состоянием) или страдающему рецидивом злокачественной опухоли ингибирует развитие или рецидив злокачественной опухоли. Согласно предпочтительным вариантам осуществления профилактически эффективное количество предотвращает развитие или рецидив злокачественной опухоли полностью. Ингибирование развития или рецидива злокачественной опухоли означает либо уменьшение вероятности развития злокачественной опухоли или рецидива, либо предотвращение развития или рецидива злокачественной опухоли полностью. Проникающие в опухоль воспалительные клетки представляет собой любой тип клеток, которые, как правило, принимают участие в воспалительной реакции у субъекта и которые проникают в опухолевую ткань. Такие клетки включают в себя проникающие в опухоль лимфоциты (TIL), макрофаги, моноциты, эозинофилы, гистиоциты и дендритные клетки.
Использование альтернативы (например, или) следует понимать как означающее либо один, два, либо любую их комбинацию из альтернатив. Используемые в настоящем документе термины в форме единственного числа следует понимать как ссылку на один или несколько любого указанного или пронумерованного компонента. Термины приблизительно или содержащий по существу относятся к значению или композиции, которая находится в пределах приемлемого диапазона ошибок для конкретного значения или композиции, как определено любым специалистом в настоящей области техники, который будет зависеть отчасти от того, как значение или композиция измеряется или определяется, т.е. ограничений системы измерения. Например, приблизительно или содержащий по существу может означать в одном или более одном стандартном отклонении в практике в настоящей области техники. Кроме того, приблизительно или содержащий по существу может означать диапазон до 20%. Кроме того, в частности, по отношению к биологическим системам и процессам термины могут означать вплоть до порядка величины или до 5-кратного значения. Когда конкретные значения или композиции предусмотрены в приложении и в формуле изобретения, если не указано иное, значение приблизительно или содержащий по существу следует считать в пределах приемлемого диапазона ошибок для данного значения или композиции.
Как описано в настоящем документе, должно быть понятно, что любой диапазон концентраций, диапазон процентов, диапазон отношений или диапазон целого числа включает в себя значение любого целого числа в пределах указанного диапазона и, при необходимости, их фракции (например, одной десятой и одной сотой целого числа), если не указано иное.
Различные аспекты настоящего изобретения будут описаны более подробно в следующих подразделах.
Антитела согласно настоящему изобретению.
Антитела согласно настоящему изобретению включают в себя различные антитела, характеризующиеся описанными в настоящем документе структурными и функциональными свойствами, включающими в себя высокую аффинность связывания с PD-1 или PD-L1 соответственно. Эти антитела могут быть использованы, например, в качестве терапевтических антител для лечения пациентов, страдающих от заболевания, или в качестве реагентов в диагностических анализах для обнаружения их родственных антигенов. Человеческие моноклональные антитела (HuMAb), которые специфически связываются с PD-1 (например, связываются с PD-1 человека и, возможно, перекрестно реагируют с PD-1 от других видов, таких как макаки) с высокой аффинностью, были раскрыты в патенте США № 8008449, и HuMAb, которые специфически связываются с PD-L1 с высокой аффинностью, были раскрыты в патенте США № 7943743. Антитела согласно настоящему изобретению включают в себя без ограничения все антитела к PD-1 и к PD-L1, раскрытые в патентах США № 8008449 и 7943743 соответственно. Другие моноклональные антитела к PD-1 были описаны, например, в патентах США № 6808710, 7488802 и 8168757, а также в публикации согласно PCT № WO 2012/145493, и моноклональные антитела к PD-L1 были описаны, например, в патентах США № 7635757 и 8217149, публикации США № 2009/0317368 и публикации согласно PCT № WO 2011/066389 и WO 2012/145493. В случаях, когда эти моноклональные антитела к PD-1 и к PD-L1 демонстрируют структурные и функциональные свойства, описанные в настоящем документе для антител согласно настоящему изобретению, они также включаются в качестве антител согласно настоящему изобретению.
Антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению.
Было показано, что каждый из человеческих моноклональных антител к PD-1, описанных в патенте США № 8008449, обладает одной или несколькими из следующих характеристик:
(a) связывается с PD-1 человека с KD, составляющей 1х10-7 М или менее, как определено с помощью поверхностного плазмонного резонанса с использованием системы биосенсора Biacore;
(b) по существу, не связывается с CD28, CTLA-4 или ICOS человека;
(с) увеличивает пролиферацию Т-клеток в анализе смешанной реакции лимфоцитов (MLR);
- 9 037351 (d) увеличивает производство интерферона γ в анализе MLR;
(е) увеличивает секрецию ИЛ-2 в анализе MLR; (f) связывается с PD-1 человека и PD-1 макака;
(g) ингибирует связывание PD-L1 и/или PD-L2 с PD-1;
(h) стимулирует антигенспецифические реакции памяти;
(i) стимулирует ответы антител и (j) ингибирует рост опухолевых клеток in vivo.
Антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению включают в себя моноклональные антитела, которые специфически связываются с PD-1 человека и обладают по меньшей мере одной, предпочтительно по меньшей мере пятью из предыдущих характеристик.
В патенте США № 8008449 представлены семь человеческих моноклональных антител к PD-1: 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4 (также называемое в настоящем документе как ниволумаб или BMS-936558), 4A11, 7D3 и 5F4. Выделенные молекулы ДНК, кодирующие вариабельные области тяжелой и легкой цепей этих антител, были секвенированы, из которых были выведены аминокислотные последовательности вариабельных областей. Аминокислотные последовательности VH 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 и 5F4 приведены в настоящем документе как SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7 соответственно. Аминокислотные последовательности VL 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 и 5F4 приведены в настоящем документе как SEQ ID NO: 8, 9, 10, 11, 12, 13 и 14 соответственно.
Предпочтительные антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению включают в себя человеческие моноклональные антитела к PD-1 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 и 5F4. Эти предпочтительные антитела специфически связываются с PD-1 человека и содержат (a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 8;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 9;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 10;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 11;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 12;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 6, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 13; или (g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 14.
Учитывая, что каждое из этих антител может связываться с PD-1, последовательности VH и VL, могут быть смешаны и подобраны, чтобы создать другие антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению. Связывание PD-1 таких смешанных и подобранных антител может быть проверено с использованием анализов связывания, например иммуноферментного анализа (ELISA), вестерн-блоттинга, радиоиммуноанализа и анализа Biacore, который хорошо известен в настоящей области техники (см., например, патент США № 8008449). Предпочтительно, когда цепи VH и VL, смешиваются и подбираются, последовательность VH от конкретного спаривания VH/VL заменяется структурно подобной последовательностью VH. Кроме того, предпочтительно последовательность VL, от конкретного спаривания VH/VL заменяется структурно подобной последовательностью VL. Соответственно, антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению включают в себя выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок, содержащий (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7; и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8, 9, 10, 11, 12, 13 и 14, причем антитело специфически связывается с PD-1,
- 10 037351 предпочтительно PD-1 человека.
Домены CDR указанных антител были очерчены с использованием системы Kabat, и эти антитела также могут быть определены с помощью комбинаций их трех CDR тяжелых цепей и трех CDR легких цепей (см. патент США № 8008449). Поскольку каждое из этих антител может связываться с PD-1 и обеспечивается антигенсвязывающая специфичность, прежде всего, областями CDR1, CDR2 и CDR3, последовательности CDR1, CDR2, CDR3 VH и последовательности CDR1, CDR2, CDR3 VK могут быть смешаны и подобраны (т.е. CDR из разных антител можно смешивать и сочетать, хотя каждое антитело должно содержать CDR1, CDR2, CDR3 VH и CDR1, CDR2, CDR3 VK), чтобы создать другие антитела к PD-1, которые также представляют собой антитела согласно настоящему изобретению. Связывание PD-1 таких смешанных и подобранных антител может быть исследовано с использованием анализов связывания, описанных выше (например, ELISA, вестерн-блоттинга, радиоиммуноанализа и анализа Biacore).
Антитела согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела, которые специфически связываются с PD-1 и содержат вариабельную область тяжелой цепи, полученную из конкретной тяжелой цепи иммуноглобулина зародышевой линии и/или вариабельную область легкой цепи, полученную из конкретной легкой цепи иммуноглобулина зародышевой линии. В частности, согласно некоторым вариантам осуществления антитела настоящего изобретения включают в себя выделенные антитела, содержащие (a) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-33 или 4-39 VH зародышевой линии человека, и/или вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 или L15 VK зародышевой линии человека. Аминокислотные последовательности областей VH и VK, кодируемые генами 3-33 VH, 4-39 VH, L6 VK и L15 VK зародышевой линии, представлены в патенте США № 8008449.
Используемое в настоящем документе антитело может быть идентифицировано как содержащее вариабельную область тяжелой или легкой цепи, которая происходит от конкретного иммуноглобулина зародышевой линии человека путем сравнения аминокислотной последовательности человеческого антитела с аминокислотными последовательностями, кодируемыми генами иммуноглобулина зародышевой линии человека, и выбора последовательности иммуноглобулина зародышевой линии человека, которая находится ближе всего по последовательности (т.е. самый большой процент идентичности последовательности) к последовательности человеческого антитела. Человеческое антитело, которое происходит от конкретного иммуноглобулина зародышевой линии человека, может содержать аминокислотные различия по сравнению с последовательностью зародышевой линии из-за, например, природных соматических мутаций или преднамеренного введения сайт-направленной мутации. Тем не менее выбранное антитело человека по аминокислотной последовательности, как правило, по меньшей мере на 90% идентично аминокислотной последовательности, кодируемой геном иммуноглобулина зародышевой линии человека, и содержит аминокислотные остатки, которые идентифицируют человеческое антитело как человеческое по сравнению с аминокислотными последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии других видов (например, последовательностями зародышевой линии мыши). В некоторых случаях человеческое антитело может быть по меньшей мере на 95% или даже по меньшей мере на 96, 97, 98 или 99% идентично по аминокислотной последовательности аминокислотной последовательности, кодируемой геном иммуноглобулина зародышевой линии. Согласно некоторым вариантам осуществления последовательность человеческого антитела, полученная из конкретной последовательности зародышевой линии человека, будет отображать не более 10 аминокислотных различий от аминокислотной последовательности, кодируемой геном иммуноглобулина зародышевой линии человека. Согласно другим вариантам осуществления человеческое антитело может отображать не более 5 или даже не более чем 4, 3, 2 или 1 аминокислотных различий от аминокислотной последовательности, кодируемой геном иммуноглобулина зародышевой линии.
Предпочтительные антитела согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела или их антигенсвязывающие участки, содержащие:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-33 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека; или (b) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 4-39 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека.
Примеры антител, содержащих VH и VK, полученные из последовательностей 3-33 VH и L6 VK зародышевой линии, соответственно, включают в себя 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4 и 7D3. Примеры антител, содер
- 11 037351 жащих области VH и VK, полученные из последовательностей 4-39 VH и L15 VK зародышевой линии, соответственно включают в себя 4А11 и 5F4. Согласно еще другим вариантам осуществления антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, содержащие аминокислотные последовательности, которые очень похожи или гомологичны аминокислотным последовательностям предпочтительных антител к PD-1, описанных в настоящем документе, причем антитело сохраняет функциональные свойства предпочтительных антител к PD-1 согласно настоящему изобретению. Например, антитела согласно настоящему изобретению включают в себя моноклональные антитела, содержащие вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, причем вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, а вариабельная область легкой цепи содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8, 9, 10, 11, 12, 13 и 14. Согласно другим вариантам осуществления аминокислотные последовательности VH и/или VL могут проявлять по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности по отношению к представленным выше последовательностям.
Используемый в настоящем документе процент идентичности последовательности (также упоминаемый как процент гомологии последовательности) между двумя последовательностями (аминокислотными или нуклеотидными последовательностями) представляет собой функцию числа идентичных положений, общих для последовательностей по отношению к длине сравниваемых последовательностей (т.е. % идентичности = число идентичных положений/общее число сравниваемых положений х 100), принимая во внимание количество любых пробелов и длину каждого такого пробела, введенных для максимизирования степени идентичности последовательности между двумя последовательностями. Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями могут быть осуществлены с использованием математических алгоритмов, которые хорошо известны специалистам с обычной квалификацией в настоящей области техники (см., например, патент США № 8008449). Антитела, характеризующиеся очень сходными аминокислотными последовательностями, вероятно, характеризуются по существу теми же функциональными свойствами, где различия последовательностей представляют собой консервативные модификации. Используемые в настоящем документе консервативные модификации последовательностей относятся к аминокислотным модификациям, которые существенно не влияют на связывающие характеристики антитела, содержащего аминокислотную последовательность. Такие консервативные модификации включают в себя аминокислотные замены, добавления и делеции. Консервативные аминокислотные замены представляют собой замены, в которых аминокислотный остаток замещается аминокислотным остатком, характеризующимся сходной боковой цепью. Так, например, один или несколько аминокислотных остатков в областях CDR антитела согласно настоящему изобретению могут быть заменены другими аминокислотными остатками из того же семейства боковых цепей, и измененное антитело может быть исследовано на сохраняемую функцию с использованием функциональных анализов, которые хорошо известны в настоящей области техники. Соответственно, некоторые варианты осуществлений антител к PD-1 согласно настоящему изобретению содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, каждая из которых содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3, причем одна или несколько из этих областей CDR содержит последовательно связанные аминокислоты, содержащие последовательности, которые представляют собой такие же, как последовательности CDR описанных в настоящем документе предпочтительных антител к PD-1 (например, 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4) или их консервативных модификаций, и причем антитела сохраняют желательные функциональные свойства предпочтительных антител к PD-1 согласно настоящему изобретению.
Кроме того, хорошо известно в настоящей области техники, что CDR3 тяжелой цепи представляет собой первичную детерминанту, определяющую специфичность и аффинность связывания антитела, и что множественные антитела предсказуемо могут быть получены с теми же связывающими характеристиками на основе общей последовательности CDR3 (см., например, Klimka et al., 2000; Beiboer et al., 2000; Rader et al., 1998; Barbas et al., 1994; Barbas et al., 1995; Ditzel et al., 1996; Berezov et al., 2001; Igarashi et al., 1995; Bourgeois et al., 1998; Levi et al., 1993; Polymenis and Stoller, 1994 и Xu and Davis, 2000). Предшествующие публикации показывают, что, в общем, как только определяется последовательность CDR3 тяжелой цепи данного антитела, изменчивость в других пяти последовательностях CDR не сильно влияет на специфичность связывания этого антитела. Таким образом, антитела согласно настоящему изобретению, содержащие шесть CDR, могут быть определены путем указания последовательности домена CDR3 тяжелой цепи.
Антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела, которые специфически связываются с PD-1 человека и перекрестно конкурируют за связывание с PD-1 человека с любым из человеческих моноклональных антител 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 и 5F4. Таким образом, антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению включают в себя выделенные антитела
- 12 037351 или их антигенсвязывающие участки, которые перекрестно конкурируют за связывание с PD-1 с эталонным антителом или с его эталонным антигенсвязывающим участком, содержащим:
(a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 8;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 2, вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 9;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 10;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 11;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 12;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 6, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 13; или (g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 14.
Способность антител перекрестно конкурировать за связывание с антигеном указывает на то, что эти антитела связываются с той же областью эпитопа (т.е. тем же или перекрывающимся или смежным эпитопом) антигена и стерически препятствуют связыванию других перекрестно конкурирующих антител с этой определенной областью эпитопа. Таким образом, способность исследуемого антитела конкурентно ингибировать связывание, например, 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4 с PD-1 человека демонстрирует, что исследуемое антитело связывается с той же областью эпитопа PD-1 человека, что и 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4 соответственно. Все выделенные антитела, которые связываются с той же областью эпитопа PD-1 человека, что и человеческое моноклональное антитело 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4, относятся к числу антител согласно настоящему изобретению. Эти перекрестно конкурирующие антитела, как ожидается, будут характеризоваться очень схожими функциональными свойствами в силу их связывания с той же областью эпитопа PD-1. Например, перекрестно конкурирующие моноклональные антитела к PD-1 5C4, 2D3, 7D3, 4Н1 и 17D8, как было показано, характеризуются аналогичными функциональными свойствами (см. патент США № 8008449, примеры 3-7). Чем выше степень перекрестной конкуренции, тем более схожими будут функциональные свойства. Кроме того, перекрестно конкурирующие антитела могут быть легко идентифицированы на основе их способности перекрестно конкурировать с 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4 в стандартных анализах связывания PD-1. Например, анализ Biacore, ELISA или проточная цитометрия могут быть использованы для демонстрации перекрестной конкуренции с антителами согласно настоящему изобретению (см., например, примеры 1 и 2).
Согласно некоторым вариантам осуществления антитела, которые перекрестно конкурируют за связывание с PD-1 человека или связываются с той же областью эпитопа PD-1 человека, как 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 или 5F4, представляют собой моноклональные антитела. Для введения пациентам-людям эти перекрестно конкурирующие антитела представляют собой предпочтительно химерные антитела или более предпочтительно гуманизированные или человеческие антитела. Такие человеческие моноклональные антитела могут быть получены и выделены, как описано в патенте США № 8008449. Данные, представленные в примере 1, показывают, что 5С4 или Fab-фрагмент перекрестно конкурирует с каждым из 2D3, 7D3, 4Н1 или 17D8 за связывание с hPD-1, экспрессированным на поверхности клетки, указывая на то, что все пять моноклональных антител к PD-1 связываются с той же областью эпитопа hPD-1 (фиг. 1А-1С).
Антитело к PD-1 согласно настоящему изобретению дополнительно может быть получено с использованием антитела, содержащего одну или несколько раскрытых в настоящем документе последовательностей VH и/или VL, в качестве исходного материала для конструирования модифицированного антитела,
- 13 037351 причем модифицированное антитело может характеризоваться измененными свойствами по отношению к начальному антителу. Антитело может быть сконструировано путем модификации одного или нескольких остатков в одной или нескольких вариабельных областях (т.е. VH и/или VL), например в одной или нескольких областях CDR и/или в пределах одной или нескольких каркасных областей. Дополнительно или альтернативно, антитело может быть сконструировано путем модификации остатков в константной области(ях), например, чтобы изменить эффекторную функцию(и) антитела. Специфические модификации в антителах включают в себя прививку CDR, сайт-специфическую мутацию аминокислотных остатков в пределах областей CDR1, CDR2 и/или CDR3 VH и/или VK, чтобы таким образом улучшить одно или несколько связывающих свойств (например, аффинность) антитела, сайт-специфический мутагенез аминокислотных остатков в пределах каркасных областей VH и/или VK, чтобы уменьшить иммуногенность антитела, модификации в пределах области Fc, как правило, чтобы изменить одно или несколько функциональных свойств антитела, такие как время полужизни в сыворотке, фиксацию комплемента, связывание рецептора Fc и/или антигензависимую клеточную цитотоксичность, и химическую модификацию, например пегилирование или изменение в паттерне гликозилирования, чтобы увеличить или уменьшить биологическое (например, в сыворотке) время полужизни антитела. Специфические примеры таких модификаций и способов конструирования антител подробно описаны в патенте США № 8008449. Антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению включают в себя все такие сконструированные антитела, которые специфически связываются с PD-1 человека и получаются путем модификации любого из вышеописанных антител к PD-1.
Антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению также включают в себя антигенсвязывающие фрагменты вышеуказанных антител. Было убедительно показано, что антигенсвязывающая функция антитела может быть осуществлена фрагментами полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, охватываемые термином антигенсвязывающий участок антитела, включают в себя (i) фрагмент Fab, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL, и CH1; (ii) фрагмент F(ab')2, бивалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH1; и (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL, и VH одного плеча антитела. Эти фрагменты, полученные первоначально с помощью протеолиза с такими ферментами, как папаин и пепсин, впоследствии были сконструированы в моновалентные и поливалентные антигенсвязывающие фрагменты. Например, хотя два домена фрагмента Fv, VL и VH, кодируются отдельными генами, они могут быть соединены с использованием рекомбинантных способов, с помощью синтетического линкерного пептида, что дает им возможность быть выполненными в виде одной белковой цепи, в которой области VL, и VH образуют пару для образования одновалентных молекул, известных как одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv). Двухвалентные или бивалентные scFv (ди-scFv или би-scFv) могут быть сконструированы путем объединения scFv в пределах одной пептидной цепи, известной как тандем scFv, который содержит две области VH и две VL. scFv димеры и более высокие мультимеры могут быть также созданы с использованием линкерных пептидов из менее чем 10 аминокислот, которые слишком короткие для того, чтобы две вариабельные области складывались вместе, что заставляет scFv димеризовать и производить диатела или образовывать другие мультимеры. Диатела, как было показано, связываются с их родственным антигеном с гораздо более высокой аффинностью, чем соответствующие scFv, характеризующиеся константами диссоциации до 40 раз ниже, чем значения KD для scFv. Очень короткие линкеры (<3 аминокислот) приводят к образованию трехвалентных триател или четырехвалентных тетрател, которые обладают еще более высокими аффинностями к их антигенам, чем диатела. Другие варианты включают в себя мини-тела, которые представляют собой димеры scFvCH3 и более крупные фрагменты scFv-Fc (димеры scFv-CH2-CH3), и даже выделенная CDR может проявлять антигенсвязывающую функцию. Эти фрагменты антител конструируют с использованием обычных рекомбинантных техник, известных специалистам в настоящей области техники, и фрагменты подвергают скринингу на полезность таким же образом, как и интактные антитела. Все из вышеперечисленных протеолитических и сконструированных фрагментов антител и связанных с ними вариантов (см. Hollinger and Hudson, 2005; Olafsen and Wu, 2010, для получения более подробной информации) предназначены для охвата термином антигенсвязывающий участок антитела.
Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению.
Было продемонстрировано, что каждый из человеческих моноклональных антител к PD-L1, раскрытых в патенте США № 7943743, обладает одной или несколькими из следующих характеристик:
(а) связывается с PD-L1 человека с KD, равной 1 χ 10-7 М или менее;
(b) увеличивает пролиферацию Т-клеток в анализе реакции смешанных лимфоцитов (MLR);
(с) увеличивает производство интерферона-γ в анализе MLR;
(d) увеличивает секрецию IL-2 в анализе MLR;
(е) стимулирует реакции антител;
(f) ингибирует связывание PD-L1 с PD-1 и (g) меняет супрессивный эффект регуляторных Т-клеток на эффекторные Т-клетки и/или дендритные клетки.
- 14 037351
Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению включают в себя моноклональные антитела, которые специфически связываются с PD-L1 человека и обладают по меньшей мере одной, предпочтительно по меньшей мере четырьмя из предыдущих характеристик. В патенте США № 7943743 представлены десять человеческих моноклональных антител к PD-1: 3G10, 12А4 (также упоминаемый в настоящем документе как BMS-936559), 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4. Выделенные молекулы ДНК, кодирующие вариабельные области тяжелой и легкой цепей этих антител, были секвенированы, из которых были выведены аминокислотные последовательности вариабельных областей. Аминокислотные последовательности VH 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4 приведены в SEQ ID NO: 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 и 24 соответственно, в то время как их аминокислотные последовательности VL показаны в SEQ ID NO: 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 и 34 соответственно.
Предпочтительные антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению включают в себя человеческие моноклональные антитела к PD-L1 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4. Эти предпочтительные антитела специфически связываются с PD-L1 человека и содержат:
(a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 15, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 25;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 27;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 28;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 19, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 29;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 20, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 30;
(g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 31;
(h) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 22, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 32;
(i) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 23, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 33; или (j) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 24, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 34.
Учитывая, что каждое из этих антител может связываться с PD-L1, последовательности VH и VL, могут быть смешаны и подобраны, чтобы создать другие антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению. Связывание PD-L1 таких смешанных и подобранных антител может быть проверено с использованием анализов связывания, например ELISA, вестерн-блоттинга, радиоиммуноанализа и анализа Biacore, которые хорошо известны в настоящей области техники (см., например, патент США № 7943743). Предпочтительно, когда цепи VH и VL смешиваются и подбираются, последовательность VH от конкретного спаривания VH/VL замещается структурно подобной последовательностью VH. Кроме того, предпочтительно последовательность VL от конкретного спаривания VH/VL замещается структурно подобной последовательностью VL. Соответственно, антитела согласно настоящему изобретению также
- 15 037351 включают в себя моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в любой из SEQ ID NO: 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 или 24, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в любой из SEQ ID NO: 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 или 34, причем антитело специфически связывается с PD-L1, предпочтительно PD-L1 человека.
Домены CDR указанных антител были очерчены с использованием системы Kabat, и эти антитела также могут быть определены с помощью комбинаций из трех CDR тяжелых цепей и трех CDR легких цепей (см. патент США № 7943743). Поскольку каждое из этих антител может связываться с PD-L1, и антигенсвязывающая специфичность обеспечивается, прежде всего, областями CDR1, CDR2 и CDR3, последовательности CDR1, CDR2, CDR3 VH и последовательности CDR1, CDR2, CDR3 VK могут быть смешаны и подобраны (т.е. CDR из разных антител можно смешивать и сочетать, хотя каждое антитело должно содержать CDR1, CDR2, CDR3 VH и CDR1, CDR2, CDR3 VK), чтобы создать другие антитела к PD-1, которые также представляют собой антитела согласно настоящему изобретению. Связывание PD-L1 таких смешанных и подобранных антител может быть исследовано с использованием анализов связывания, описанных выше (например, ELISA, вестерн-блоттинга, радиоиммуноанализа и анализа Biacore).
Антитела согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела, которые специфически связываются с PD-L1 и содержат вариабельную область тяжелой цепи, полученную из конкретной тяжелой цепи иммуноглобулина зародышевой линии и/или вариабельную область легкой цепи, полученную из конкретной легкой цепи иммуноглобулина зародышевой линии. В частности, согласно некоторым вариантам осуществления антитела настоящего изобретения включают в себя выделенные антитела, содержащие:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-18, 1-69, 1-3 или 3-9 VH зародышевой линии человека; и/или (b) вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6, L15, А27 или L18 VK зародышевой линии человека.
Аминокислотные последовательности областей VH и VK, кодируемые генами 1-18 VH, 1-3 VH, 1-69 VH, 3-9 VH, L6 VK, L15 VK и А27 VK зародышевой линии, представлены в патенте США № 7943743.
Предпочтительные антитела согласно настоящему изобретению включают в себя выделенные антитела или их антигенсвязывающие участки, содержащие:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-18 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека;
(b) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-69 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека;
(с) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-3 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека;
(d) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-69 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности А27 VK зародышевой линии человека;
(е) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-9 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека; или (f) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-9 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные
- 16 037351 аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L18 VK зародышевой линии человека.
Пример антитела, содержащего VH и VK, полученные из последовательностей 1-18 VH и L6 VK зародышевой линии соответственно, представляет собой 3G10. Примеры антител, содержащих области VH и VK, полученные из последовательностей 1-69 VH и L6 VK зародышевой линии соответственно, включают в себя 12А4, 1В12, 7Н1 и 12В7. Пример антитела, содержащего VH и VK, полученные из последовательностей 1-3 VH и L15 VK зародышевой линии соответственно, представляет собой 10А5. Примеры антител, содержащих области VH и VK, полученные из последовательностей 1-69 VH и А27 VK зародышевой линии соответственно, включают в себя 5F8, 11Е6 и 11E6a. Пример антитела, содержащего VH и VK, полученные из последовательностей 3-9 VH и L15 VK зародышевой линии соответственно, представляет собой 10Н10. Пример антитела, содержащего VH и VK, полученные из последовательностей 1-3 VH и L15 VK зародышевой линии соответственно, представляет собой 10А5. Пример антитела, содержащего VH и VK, полученные из последовательностей 3-9 VH и L18 VK зародышевой линии соответственно, представляет собой 13G4.
Согласно некоторым вариантам осуществления антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, содержащие аминокислотные последовательности, которые очень похожи или гомологичны аминокислотным последовательностям предпочтительных антител к PD-L1, описанных в настоящем документе, причем антитело сохраняет функциональные свойства предпочтительных антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению. Например, антитела согласно настоящему изобретению включают в себя моноклональные антитела, содержащие вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, причем вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 и 24, а вариабельная область легкой цепи содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 и 34. Согласно другим вариантам осуществления аминокислотные последовательности VH и/или VL, могут проявлять по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности по отношению к представленным выше последовательностям.
Некоторые варианты осуществления антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, каждая из которых содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3, при этом один или несколько из этих доменов CDR содержат последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностями, которые такие же, как и последовательности CDR предпочтительных антител к PD-L1, описанных в настоящем документе (например, 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4), или их консервативных модификаций, и при этом антитела сохраняют желаемые функциональные свойства предпочтительных антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению.
На основании доказательств того, что CDR3 тяжелой цепи представляет собой первичную детерминанту специфичности и аффинности связывания антитела, как правило, соответствует действительности то, что как только определяется последовательность CDR3 тяжелой цепи данного антитела, изменчивость в других пяти последовательностях CDR не сильно влияет на специфичность связывания этого антитела. Таким образом, антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению включают выделенные антитела, содержащие 6 CDR, причем антитела определяют путем указания последовательности домена CDR3 тяжелой цепи.
Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела, которые специфически связываются с PD-L1 человека и перекрестно конкурируют за связывание с PD-L1 человека с любым из человеческих моноклональных антител 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4. Таким образом, антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению включают в себя выделенные антитела или их антигенсвязывающие участки, которые перекрестно конкурируют за связывание с PD-L1 с эталонным антителом или с эталонным его антигенсвязывающим участком, содержащим:
(a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 15, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 25;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 17, и вариабельную
- 17 037351 область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 27;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 28;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 19, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 29;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 20, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 30;
(g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 31;
(h) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 22, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 32;
(i) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 23, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 33; или (j) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 24, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 34.
Способность антитела перекрестно конкурировать с любым из 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4 за связывание с человеческим PD-L1 показывает, что такое антитело связывается с той же областью эпитопа каждого из 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4 соответственно. Все выделенные антитела, которые связываются с той же областью эпитопа PD-L1 человека, что и человеческое моноклональное антитело 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 или 13G4, относятся к числу антител согласно настоящему изобретению. Эти перекрестно конкурирующие антитела, как ожидается, будут характеризоваться очень похожими функциональными свойствами в силу их связывания с той же областью эпитопа PD-L1. Например, было показано, что перекрестно конкурирующие моноклональные антитела к PD-L1 3G10, 1В12, 13G4, 12А4 (BMS-936559), 10A5, 12В7, 11Е6 и 5F8 характеризуются аналогичными функциональными свойствами (см. патент США № 7943743, примеры 3-11), в то время как моноклональное антитело 10Н10, которое связывается с другой областью эпитопа, ведет себя по-другому (патент США № 7943743, пример 11). Чем выше степень перекрестной конкуренции, тем более похожими будут функциональные свойства. Кроме того, перекрестно конкурирующие антитела могут быть определены в стандартных анализах связывания PD-L1, например, анализе Biacore, ELISA или проточной цитометрии, которые хорошо известны специалистам в настоящей области техники. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитела, которые перекрестно конкурируют за связывание с PD-1 человека или связываются с той же областью эпитопа PD-L1 человека, что и 3G10, 12А4, 10А5, 5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 или 13G4, представляют собой моноклональные антитела, предпочтительно химерные антитела или более предпочтительно гуманизированные или человеческие антитела. Такие моноклональные антитела человека могут быть получены и выделены, как описано в патенте США № 7943743.
Данные, представленные в примере 2, показывают, что каждое из человеческих моноклональных антител к PD-L1 5F8, 7Н1, 1В12, 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4, 12В7 и 13G4, т.е., все из исследованных человеческих моноклональных антител, кроме 10Н10, существенно блокировали связывание моноклональных антител, 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4 и 13G4 с клетками яичника китайского хомячка (СНО), экспрессирующими клетки PD-L1. Человеческое моноклональное антитело 10Н10 существенно блокировало связывание только само по себе с клетками CHO/PD-L1. Эти данные показывают, что 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4 и 13G4 перекрестно конкурируют со всеми исследованными человеческими моноклональными антителами, за исключением 10Н10, за связывание с той же областью эпитопа PD-L1 человека (фиг. 2A2F). Данные, представленные в примере 3, показывают, что связывание человеческого моноклонального антитела 12А4 с клетками карциномы яичника ES-2, экспрессирующими клетки PD-L1, по существу, блокировалось самим 12А4 и 1В12 и 12В7 и блокировалось от умеренной до значительной степени мо- 18 037351 ноклональными антителами 5F8, 10А5, 13G4 и 3G10, но не блокировалось моноклональным антителом 10Н10. Эти данные в значительной степени согласуются с данными в примере 2 и показывают, что само по себе 12А4 и два других человеческих моноклональных антитела, 12В7 и 1В12, по существу, перекрестно конкурируют с 12А4 в связывании с той же областью эпитопа, возможно, с тем же эпитопом PD-L1 человека; 5F8, 10А5, 13G4 и 3G10, проявляют значительный, но более низкий уровень перекрестной конкуренции с 12А4, предполагая, что эти моноклональные антитела могут связываться с эпитопами, которые перекрывают эпитоп 12А4; в то время как 10Н10 не перекрестно конкурирует с 12А4 (фиг. 3), предполагая, что это моноклональное антитело связывается с другой областью эпитопа из 12А4.
Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению также включают в себя антитела, сконструированные, начиная с антител, содержащих одну или несколько последовательностей VH и/или VL, раскрытых в настоящем документе, при этом сконструированные антитела могут изменять свойства исходного антитела. Антитело к PD-L1 может быть сконструировано с помощью различных модификаций, как описано выше для конструирования модифицированного антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению.
Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению также включают в себя выделенные антитела, отобранные за их способность связываться с PD-L1 в фиксированных формалином, заключенных в парафин (FFPE) образцах ткани. Использование образцов FFPE характеризуется важным значением для долгосрочного последующего анализа корреляции между экспрессией PD-L1 в опухолях и прогноза или прогрессирования заболевания. Тем не менее исследования по измерению экспрессии PD-L1 часто проводили на замороженных образцах из-за трудностей в выделении антител к PD-L1 человека, которые могут быть использованы для окрашивания PD-L1 в FFPE образцах с IHC в целом (Hamanishi et al., 2007), и, в частности, антител, которые специфически связываются с мембранными PD-L1 в этих тканях. Использование различных антител для окрашивания PD-L1 в замороженных против FFPE тканей и способность определенных антител отличать мембранные и/или цитоплазматические формы PD-L1 могут объяснить некоторые из разрозненных данных, представленных в литературе, коррелирования экспрессии PD-L1 с прогнозом заболевания (Hamanishi et al., 2007; Gadiot et al., 2011). В этом изобретении предусмотрено несколько кроличьих моноклональных антител, которые специфически связываются с высокой аффинностью с мембранными PD-L1 человека в FFPE образцах тканей, содержащих опухолевые клетки и проникающие в опухоли воспалительные клетки.
Кроличьи и мышиные моноклональные антитела к hPD-L1 получали, как описано в примере 9. Из почти 200 подвергнутых скринингу множественных клонов антител только у 10 кроличьих множественных клонов антител была обнаружена способность специфического обнаружения мембранной формы PD-L1, и первую пятерку множественных клонов (обозначенных № 13, 20, 28, 29 и 49) затем субклонировали. Клон, который производил самое надежное специфическое обнаружение мембранных PD-L1, клон 28-8 кролика, был выбран для анализа IHC. Последовательности вариабельных областей моноклонального антитела 28-8 приведены в SEQ ID NO: 35 и 36 соответственно. Последовательности доменов CDR тяжелой и легкой цепей моноклонального антитела 28-8, как это описано с использованием системы Kabat, изложены в SEQ ID NO: 37-42. Кроличьи клоны 28-1, 28-12, 29-8 и 20-12 были следующими лучшими моноклональными антителами с точки зрения надежного обнаружения мембранных PD-L1 в FFPE тканях. Антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению также включают в себя антигенсвязывающие фрагменты вышеуказанных антител, в том числе Fab, F(ab')2 Fd, Fv и scFv, ди-scFv или биscFv и scFv-Fc фрагменты, диатела, триатела, тетратела и отдельные CDR (см. Hollinger and Hudson, 2005; Olafsen and Wu, 2010, для получения более подробной информации).
Молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитела согласно настоящему изобретению.
Другой аспект настоящего изобретения относится к выделенным молекулам нуклеиновых кислот, которые кодируют любое из антител согласно настоящему изобретению. Эти нуклеиновые кислоты могут присутствовать в целых клетках, в клеточном лизате или в частично очищенной или практически чистой форме. Нуклеиновая кислота согласно настоящему изобретению может представлять собой, например, ДНК или РНК и может или может не содержать интронные последовательности. Согласно предпочтительному варианту осуществления нуклеиновая кислота представляет собой кДНК.
Нуклеиновые кислоты согласно настоящему изобретению могут быть получены с использованием стандартных техник молекулярной биологии. Для антител, экспрессированных с помощью гибридом (например, гибридом, полученных из трансгенных мышей, несущих гены иммуноглобулина человека, как описано ниже), кДНК, кодирующие легкие и тяжелые цепи антитела, сделанные с помощью гибридомы, могут быть получены с помощью стандартной ПЦР-амплификации или техник клонирования к ДНК Нуклеиновые кислоты, кодирующие антитела, полученные из библиотеки генов иммуноглобулина (например, с использованием техник фагового дисплея), могут быть выделены из библиотеки.
Предпочтительные молекулы нуклеиновых кислот согласно настоящему изобретению представляют собой те, которые кодируют последовательности VH и VK человеческих моноклональных антител к PD-1, 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4, 4А11, 7D3 и 5F4 (раскрыты в патенте США № 8008449), и те, которые кодируют последовательности VH и VK человеческих моноклональных антител к PD-L1, 3G10, 12А4, 10А5,
- 19 037351
5F8, 10Н10, 1В12, 7Н1, 11Е6, 12В7 и 13G4 (раскрыты в патенте США № 7943743). Выделенная ДНК, кодирующая область VH, может быть конвертирована в ген полноразмерной тяжелой цепи посредством оперативного связывания кодирующей VH ДНК с другой молекулой ДНК, кодирующей константные области тяжелой цепи (CH1, CH2 и CH3), последовательности которых известны в настоящей области техники и могут быть получены с помощью стандартной ПЦР-амплификации. Константная область тяжелой цепи может представлять собой константную область IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD, но предпочтительно константную область IgG1 или IgG4. Аналогичным образом, выделенная ДНК, кодирующая область VL, может быть конвертирована в ген полноразмерной тяжелой цепи посредством оперативного связывания кодирующей VL, ДНК с другой молекулой ДНК, кодирующей константную область легкой цепи (CL), последовательность которой известна в настоящей области техники и может быть получена с помощью стандартной ПЦР-амплификации. Константная область легкой цепи может представлять собой константную область каппа или лямбда, но наиболее предпочтительно представляет собой константную область каппа.
Фармацевтические композиции.
Антитела согласно настоящему изобретению могут быть составлены в композицию, например в фармацевтическую композицию, содержащую одно антитело или комбинацию антител или его антигенсвязывающий участок (участки) и фармацевтически приемлемый носитель. Используемый в настоящем документе фармацевтически приемлемый носитель включает в себя любой и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические и задерживающие всасывание средства и т.п., которые физиологически совместимы. Предпочтительно носитель пригоден для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, спинального или эпидермального введения (например, путем инъекции или инфузии). Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может включать в себя одну или несколько фармацевтически приемлемых солей, антиоксидант, водные и неводные носители и/или адъюванты, такие как консерванты, смачивающие средства, эмульгаторы и диспергирующие средства.
Схемы лечения устанавливают, чтобы обеспечить оптимальную желаемую реакцию, например терапевтический ответ, или минимальные нежелательные явления. Для введения антитела к PD-1 или к PD-L1 диапазоны доз составляют от приблизительно 0,0001 до приблизительно 100 мг/кг, как правило, от приблизительно 0,001 до приблизительно 20 мг/кг и более обычно от приблизительно 0,01 до приблизительно 10 мг/кг массы тела субъекта. Предпочтительно дозировка составляет в пределах 0,1-10 мг/кг веса тела. Например, дозы могут составлять 0,1, 0,3, 1,3,5 или 10 мг/кг веса тела и более предпочтительно, 0,3, 1, 3 или 10 мг/кг массы тела. Режим дозирования, как правило, разрабатывается для достижения воздействий, которые приводят к длительной занятости рецепторов (RO) на основе типовых фармакокинетических свойств антитела. Иллюстративный режим лечения включает в себя введение один раз в неделю, раз в две недели, раз в три недели, раз в четыре недели, раз в месяц, раз в три месяца или раз в тришесть месяцев. Доза и дозирование могут меняться в течение курса лечения. Например, график дозировки может включать введение антитела (i) один раз в две недели в 6-недельных циклах; (ii) каждые четыре недели в течение шести доз, затем каждые три месяца; (iii) каждые три недели; (iv) 3-10 мг/кг массы тела один раз с последующим 1 мг/кг массы тела каждые 2-3 недели. Учитывая, что антитело IgG4, как правило, характеризуется периодом полужизни, равным 2-3 недели, предпочтительный режим дозирования для антитела к PD-1 или к PD-L1 согласно настоящему изобретению включает 0,3-10 мг/кг веса тела, предпочтительно 3-10 мг/кг веса тела, более предпочтительно от 3 мг/кг массы тела с помощью внутривенного введения, с введением антитела каждые 14 дней в 6- или 12-недельном циклах до полного ответа или подтверждения прогрессирования заболевания. В некоторых способах два или более моноклональных антитела с различными специфичностями связывания вводят одновременно, и в этом случае доза каждого вводимого антитела находится в пределах указанных диапазонов. Антитело обычно вводят по несколько раз. Интервалы между отдельными дозами могут быть, например, еженедельно, каждые 2 недели, каждые 3 недели, ежемесячно, раз в три месяца или раз в год. Интервалы могут также быть нерегулярными, как указано посредством измерения уровней в крови антитела к антигену-мишени у пациента. В некоторых способах дозировка регулируется для достижения концентрации антитела в плазме приблизительно 1-1000 мкг/мл, а в некоторых способах - приблизительно 25-300 мкг/мл. Кроме того, антитело можно вводить в виде композиции с пролонгированным высвобождением, в случае которой требуется менее частое введение. Дозировка и частота изменяются в зависимости от периода полужизни антитела у пациента. Как правило, человеческие антитела демонстрируют самый длинный период полужизни, а затем следуют гуманизированные антитела, химерные антитела и отличные от человеческих антитела. Дозировка и частота приема могут изменяться в зависимости от того, представляет собой лечение профилактическое или терапевтическое. При профилактическом применении относительно низкую дозировку, как правило, вводят относительно редкими интервалами в течение длительного периода времени. Некоторые пациенты продолжают получать лечение всю оставшуюся часть их жизни. При терапевтическом применении иногда требуются относительно высокие дозы при относительно коротких промежутках времени до того, пока прогрессирование заболевания не уменьшается или не прекращается и предпочтительно пока пациент показывает частичное или полное облегчение симптомов заболевания. После этого
- 20 037351 пациенту можно вводить профилактическую схему лечения.
Действительные уровни доз активных ингредиентов в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению могут варьировать так, чтобы получить количество активного ингредиента, которое эффективно для достижения желаемого терапевтического ответа у конкретного пациента, композиции и способа введения без неоправданной токсичности для пациента. Выбранный уровень дозировки будет зависеть от различных фармакокинетических факторов, включающих в себя активность конкретных используемых композиций согласно настоящему изобретению, применяемого пути введения, времени введения, скорости экскреции конкретного используемого соединения, продолжительности лечения, других лекарственных средств, соединений и/или материалов, используемых в сочетании с конкретными композициями, возраста, пола, веса, общего состояния здоровья и предыдущей истории болезни пациента, подвергаемого лечению, и подобных факторов, хорошо известных в области медицины. Композиция согласно настоящему изобретению может быть введена с помощью одного или нескольких способов введения с использованием одного или нескольких из множества способов, хорошо известных в настоящей области техники. Как будет понятно специалисту в настоящей области техники, путь и/или способ введения будет варьировать в зависимости от желаемых результатов.
Применения и способы настоящего изобретения.
Антитела, композиции антител, нуклеиновые кислоты и способы согласно настоящему изобретению характеризуются многочисленными свойствами in vitro и in vivo, включающими в себя, например, способы определения и количественную оценку экспрессии PD-1 или PD-L1, включающие связывание антител с полипептидами-мишенями или измерение количества нуклеиновой кислоты, кодирующей эти полипептиды, и способ иммунотерапии субъекта, пораженного заболеванием, включающий введение субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективное количество терапевтического средства, которое ингибирует передачу сигнала от ингибиторного иммунорегулятора. Согласно предпочтительным вариантам осуществления последнего способа ингибиторный иммунорегулятор представляет собой компонент сигнального пути PD-1/PD-L1, и терапевтическое средство нарушает передачу сигналов от этого пути. Более предпочтительно терапевтическое средство представляет собой антитело, которое препятствует взаимодействию между PD-1 и PD-L1. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления данного способа антитело специфически связывается с PD-1 и блокирует взаимодействие PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления терапевтическое средство представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-L1 и блокирует взаимодействие PD-L1 с PD-1 и/или В7-1 (CD80). Таким образом, настоящее изобретение включает способы для усиления иммунного ответа у субъекта, включающие введение антитела к PD-1 и/или к PD-L1 для нарушения взаимодействия между PD-1 и PD-L1, и способы лечения заболеваний, опосредованных таким усилением иммунного ответа. Когда антитела к PD-1 и PD-L1 вводят вместе, два могут быть введены последовательно в любом порядке или одновременно. Согласно некоторым аспектам в этом изобретении предусмотрены способы модификации иммунного ответа у субъекта, включающие введение субъекту антитела к PD-1 и/или к PD-L1 согласно настоящему изобретению или его антигенсвязывающего участка так, чтобы иммунный ответ у субъекта модифицировался. Предпочтительно иммунный ответ увеличивается, усиливается, стимулируется или повышающе регулируется. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитела согласно настоящему изобретению представляют собой человеческие антитела.
Предпочтительные субъекты включают в себя пациентов-людей, нуждающихся в повышении иммунного ответа. Иммунотерапевтические способы, описанные в настоящем документе, представляют собой особенно подходящие для лечения пациентов-людей с нарушением, которое можно лечить путем усиления опосредованного Т-клетками иммунного ответа. Согласно некоторым вариантам осуществления способы применяются для лечения субъектов, страдающих от заболевания, вызванного инфекционным патогеном. Согласно предпочтительным вариантам осуществления способы применяются для лечения субъектов, страдающих от или подверженных риску злокачественной опухоли.
Иммунотерапия злокачественной опухоли.
Было показано, что блокада взаимодействия PD-1/PD-L1 усиливает иммунные ответы in vitro (патенты США № 8008449 и 7943743; Fife et al., 2009) и опосредует доклиническую противоопухолевую активность (Dong et al., 2002; Iwai et al., 2002). Однако молекулярные взаимодействия, потенциально блокированные этими двумя антителами, не идентичны: антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению нарушают взаимодействия PD-1/PD-L1 и потенциально PD-1/PD-L2; в отличие от этого, в то время как антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению также нарушают взаимодействия PD-1/PD-L1, они не блокируют взаимодействия PD-1/PD-L2, но вместо этого могут нарушать PD-1-независимое взаимодействие PD-L1/CD80, которые также, как было показано, понижающе модулируют Т-клеточные реакции in vitro и in vivo (Park et al., 2010; Paterson et al., 2011; Yang et al., 2011; Butte et al., 2007; Butte et al., 2008). Таким образом, вполне возможно, что среди этих различных пар лиганд-рецептор различные взаимодействия могут доминировать в различных типах злокачественных опухолей, способствуя разнородным профилям активности для двух антител.
Нарушение взаимодействия PD-1/PD-L1 антагонистическими антителами может усиливать иммунный ответ к злокачественным клеткам у пациента. PD-L1 не экспрессируется в нормальных клетках че
- 21 037351 ловека, но в изобилии в различных злокачественных опухолях человека (Dong et al., 2002). Взаимодействие между PD-1 и PD-L1 ухудшает Т-клеточные ответы, что проявляется уменьшением проникающих в опухоль лимфоцитов (TIL) и уменьшением опосредованной рецептором пролиферации Т-клеток, что приводит к толерантности, истощению или апоптозу Т-клеток и иммунному уклонению злокачественных клеток (Zou and Chen, 2008; Blank et al., 2005; Konishi et al., 2004; Dong et al., 2003; Iwai et al., 2002). Иммунная супрессия может быть отменена путем ингибирования локального взаимодействия между PD-L1 и PD-1 с использованием антитела к PD-1 и/или к PD-L1. Эти антитела могут быть использованы отдельно или в комбинации для ингибирования роста раковых опухолей. Кроме того, один или оба из этих антител могут быть использованы в сочетании с другими иммуногенными и/или противораковыми средствами, включающими в себя цитокины, стандартные химиотерапии злокачественных опухолей, вакцины, радиацию, хирургию или другие антитела.
Иммунотерапия пациентов со злокачественными опухолями с использованием антитела к PD-1.
В настоящем изобретении предусмотрен способ иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, который включает введение субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективное количество антитела или его антигенсвязывающего участка, что нарушает взаимодействие PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2. В этом изобретении также предусмотрен способ ингибирования роста опухолевых клеток у субъекта, включающий введение субъекту антитела или его антигенсвязывающего участка, что нарушает взаимодействие PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2, в количестве, эффективном для ингибирования роста опухолевых клеток. Согласно предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой человека.
Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой антитело к PD-1 согласно настоящему изобретению или его антигенсвязывающий участок. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой изотип IgG1 или IgG4. Согласно другим вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок. Согласно другим вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело или его антигенсвязывающий участок. Согласно предпочтительным вариантам осуществления для лечения пациента-человека антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой человеческое антитело или его антигенсвязывающий участок.
Клинические испытания, описанные в примерах, использовали человеческое моноклональное антитело к PD-1, ниволумаб (обозначенный 5С4 в патенте США № 8008449), для лечения злокачественной опухоли. В то время как 5С4 выбирали в качестве ведущего антитела для ввода в клинику, следует отметить, что некоторые антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению разделяют с 5С4 функциональные свойства, которые важны для терапевтической активности 5С4, включающие в себя высокую аффинность специфического связывания с PD-1 человека, увеличение пролиферации Т-клеток, секрецию IL-2 и производство интерферона-γ в анализе MLR, ингибирование связывания PD-L1 и/или PD-L2 с PD-1 и ингибирование роста опухолевых клеток in vivo. Кроме того, некоторые антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению, 17D8, 2D3, 4Н1 и 7D3, структурно связаны с 5С4 в содержащих областях VH и VK, которые содержат последовательности, полученные из последовательностей 3-33 VH и L6 VK зародышевой линии соответственно. Кроме того, 5С4, 2D3, 7D3, 4Н1 и 17D8 все перекрестно конкурируют за связывание с той же областью эпитопа hPD-1 (пример 1). Таким образом, доклиническая характеристика ниволумаба и других человеческих моноклональных антител к PD-1 показывает, что способы лечения злокачественной опухоли, предусмотренные в настоящем документе, могут быть выполнены с использованием различных антител, выбранных из широкого рода антител к PD-1 согласно настоящему изобретению.
Соответственно, некоторые варианты осуществления раскрытых в настоящем документе способов иммунотерапии включают введение пациенту антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего участка, содержащего:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-33 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека; или (b) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 4-39 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека.
Согласно некоторым другим вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок, который вводят пациенту, перекрестно конкурирует за связывание с PD-1 с эталонным антителом или эталонным его антигенсвязывающим участком, содержащим:
- 22 037351 (a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 8;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 9;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 10;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 11;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 12;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 6, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 13; или (g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 14.
Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок перекрестно конкурирует за связывание с PD-1 с ниволумабом.
Согласно некоторым вариантам осуществления способов иммунотерапии, раскрытых в настоящем документе, вводимое пациенту антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий участок содержит:
(a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 8;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 9;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 10;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 11;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 12;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 6, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 13; или (g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 14.
Согласно предпочтительным вариантам осуществления к антитело PD-1 или его антигенсвязывающий участок содержит вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно свя- 23 037351 занные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 11. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящих способов антитело к PD-1 составляют для внутривенного введения. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело вводят внутривенно в дозе 3 мг/кг в течение 60 мин каждые 2 недели. Как правило, лечение продолжается до тех пор, пока наблюдается клиническая польза. или до тех пор, пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
В клинических испытаниях иммунотерапии к PD-1, описанной в приведенных ниже примерах, наблюдались интересные OR с прочными клиническими ответами даже у подвергнутых интенсивному предварительному лечению пациентов при различных видах опухолей, включая в себя значительную долю пациентов с NSCLC, MEL и RCC, и различных участков метастазирования, включающих в себя печень, легкие, лимфатические узлы и кости. MEL и RCC рассматриваются как иммуногенные новообразования, которые, как ранее было показано, отвечают на иммунотерапию злокачественной опухоли, например интерферон-альфа и интерлейкина-2 как в MEL, так и в RCC (Eton et al., 2002; Coppin et al., 2005; McDermott and Atkins, 2006), и антитело к CTLA-4 в MEL (Hodi et al., 2010). У пациентов с MEL значительные ORR наблюдались с ниволумабом при различных дозах, составляющих 0,1, 0,3, 1, 3 или 10 мг/кг, с общим показателем отклика, равным приблизительно 31%, а также сопоставимые ORR, равные приблизительно 30%, наблюдались у пациентов с RCC, получавших ниволумаб в дозах 1 или 10 мг/кг (см. пример 7). В отличие от этого, иммунотерапия исторически характеризовалась минимальным успехом при раке легких. Это отсутствие успеха было связано с NSCLC, представляющим собой неиммуногенный (см., например, Holt and Disis, 2008; Holt et al., 2011). Способность рака легких препятствовать иммунной системе происходит от многих факторов, включающих в себя секрецию иммуносупрессивных цитокинов, потерю главного комплекса гистосовместимости экспрессии антигенов и кооптацию Т-клеточных ингибиторных путей (Dasanu et al., 2012; Marincola et al., 2000; Brahmer et al., 2012).
Несмотря на ограниченную эффективность иммунотерапии, исторически замеченную при раке легких, и разнообразных механизмов, используемых клетками рака легких, чтобы уклониться от атаки иммунной системы, различные вакцины опухолевых клеток (например, belagenpumatucel-L, основанная на целых клетках вакцина, которая блокирует действие TGF-P2) и вакцины на основе антигенов (например, гуморальная вакцина EGF и вакцины, включающие слитый белок MAGE-A3 или его части связанного с опухолями антигена MUC1), которые усиливают антигенспецифический противоопухолевый иммунитет, в настоящее время оцениваются в клинических испытаниях (Holt et al., 2011; Shepherd et al., 2011; Dasanu et al., 2012; Brahmer et al., 2012). Тем не менее, в то время как такие антигенпецифические вакцины показали некоторые надежды на лечение NSCLC, Holt et al. (2011) отметил, что исследованиям с участием неспецифических иммунотерапевтических вмешательств не удалось улучшить результаты при NSCLC, что указывает на необходимость объединить их с антигенспецифическими вакцинами. Эти авторы высказали мнение, что по-настоящему эффективной иммунотерапией NSCLC будет только эффект от реализации стратегий как дополняющего противоопухолевого иммунитета, так и противодействия опосредованной опухолью иммуносупрессии, и пришли к выводу, что существующие или слабые зарождающиеся иммунные реакции у пациентов с NSCLC делают маловероятным то, что неспецифическая стимуляция иммунной системы или удаление иммуносупрессии будет создавать изменения в клинических исходах. Таким образом, приведенные в настоящем документе результаты с NSCLC особенно производят впечатление, неожиданны и удивительны. У пациентов с NSCLC OR наблюдались при дозах ниволумаба, равных 1, 3 или 10 мг/кг, с частотой отклика, составляющей 3, 24 и 20% соответственно (см. пример 7). OR наблюдались в гистологиях NSCLC: 9, ответивших на лечение из 54 плоскоклеточных (17%), и 13, ответивших на лечение из 74 неплоскоклеточных (18%). Этот уровень активности, наблюдавшейся с ниволумабом у пациентов с NSCLC с интенсивной предшествующей терапией (54% с 3-мя линиями предшествующей терапии) и в гистологии, представляет собой беспрецедентный показатель, особенно у пациентов с плоскоклеточной гистологией (см. Gridelli et al., 2008; Miller, 2006), и обеспечивает очень благоприятную динамику польза/риск относительно эффективности и безопасности по сравнению с существующими стандартами лечения.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящих способов иммунотерапии антитело к PD-1 указывается как монотерапия для местного прогрессирующего или метастатического плоскоклеточного или неплоскоклеточного NSCLC после терапии на основе платины (независимо от поддержания) и одного другого лечения. Согласно другим вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для местного прогрессирующего или метастатического плоскоклеточного или неплоскоклеточного NSCLC после потери эффективности терапии на основе платины и одной другой предшествующей химиотерапии. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для местного прогрессирующего или метастатического плоскоклеточного или неплоскоклеточного NSCLC после провала двух линий терапии, одна из которых должна содержать основанную на платине схему лечения. Согласно еще дополнительным вариантам осуществления антитело к
- 24 037351
PD-1 указывается как монотерапия для местного прогрессирующего или метастатического плоскоклеточного или неплоскоклеточного NSCLC после провала по меньшей мере одной предшествующей химиотерапии, после провала по меньшей мере одной предшествующей основанной на платине терапии или после прогрессирования по меньшей мере на одной платиновой дублетной терапии. Во всех раскрытых в настоящем документе способах иммунотерапии лечение может быть продолжено до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или до тех пор, пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
Прочность клинических ответов на антитело к PD-1 у пациентов со злокачественной опухолью с интенсивной предшествующей терапией.
Решающая роль пути PD-1 в подавлении противоопухолевого иммунитета, впервые показанная в лабораторных моделях, в настоящее время подтверждена в клинических исследованиях. Как описано в настоящем документе, монотерапия лекарственными средствами, блокирующими PD-1 (ниволумаб) или его основного лиганда PD-L1 (BMS-936559), может опосредовать регрессию у пациентов с устойчивой к лечению прогрессирующей злокачественной опухолью. Частота объективных ответов (ORR) у пациентов с NSCLC с интенсивной предшествующей терапией, получающих антитело к PD-1, включая в себя пациентов с плоскоклеточной гистологией, удивительна и неожиданна, так как стандартные терапии спасения исторически показывают умеренную пользу у таких пациентов (Scagliotti et al., 2011). Как измеряется стандартным RECIST в настоящем исследовании, OR были долговечны со средними длительностями реакции, равными приблизительно 18 месяцев у 22 из 129 респондентов ((см. пример 7). Кроме того, наблюдались паттерны регрессии опухоли, согласующиеся со связанными с иммунитетом паттернами ответа. Эти данные установили путь PD-1 в качестве нового терапевтического фокуса в онкологии (Pardoll, 2012; Topalian et al., 2012c; Hamid and Carvajal, 2013). В текущем исследовании, в котором у 54% пациентов наблюдалось прогрессирующее заболевание с тремя или более предыдущими системными схемами лечения, предварительный анализ был проведен до марта 2013 г. Этот обновленный анализ был поддержан и подкреплен данными и выводами, полученными и сделанными из более ранних анализов от февраля 2012 г. Таким образом, обычные OR или длительная стабилизация заболевания были зарегистрированы у пациентов с NSCLC (17 и 10% соответственно), MEL (31, 7%) и RCC (29, 27%) во всех испытанных дозах (см. пример 7). Кроме того, 13 пациентов (4%) проявляли необычные связанные с иммунной системой паттерны ответов, как описано выше с анти-CTLA-4 терапией, некоторые из которых были длительными (Sharma et al., 2011).
Долговечность OR при различных видах злокачественных опухолей у пациентов, получавших антитело к PD-1, особенно заметна. Обновленные анализы снова подчеркнули долговечность клинической активности у получавших ниволумаб пациентов, которая, как правило, не наблюдается с химиотерапией или низкомолекулярными ингибиторами на сегодняшний день, но наблюдается у некоторых пациентов с меланомой, получающих иммунотерапию, включающую в себя ипилимумаб и высокие дозы интерлейкина-2 (Topalian et al., 2011; Hodi et al., 2010). Сохранение частичной регрессии опухоли после отмены лекарственного средства предполагает, что блокада PD-1 сбрасывает иммунное равновесие между опухолью и хозяином, и выгода OS в конечном итоге может оказаться значительно большей, чем была измерена на сегодняшний день. Дальнейшее наблюдение необходимо, чтобы определить окончательную прочность регрессии опухоли и стабилизацию заболевания у пациентов, находящихся на этих клинических испытаниях.
Примечательно, что прочная объективная регрессия опухоли и стабилизация заболевания, индуцируемые ниволумабом у пациентов с интенсивной предшествующей терапией с прогрессирующим NSCLC, MEL и RCC, переводятся на результаты выживания, которые превосходят исторические данные для этих групп пациентов, получавших обычную химиотерапию и/или лечение с ингибитором тирозинкиназы (TKI). При NSCLC, 1-й 2-летняя выживаемость была у 42 и 14% соответственно, а средняя OS составляла 9,2 и 10,1 месяцев у пациентов с плоскоклеточным и не плоскоклеточным раком соответственно (см. пример 7). Такой высокий уровень эффективности особенно впечатляет, так как 54% из этих пациентов получали три или более предшествующих курсов лечения. Кроме того, поскольку наблюдение за многими больными раком легких было относительно ограниченным, эти цифры могут измениться при обработке данных. Исторически, химиотерапия 2L рака легких (например, доцетаксел и пеметрексед) добилась средней OS, равной 7,5-8,3 месяцев, и однолетней выживаемости приблизительно у 30% (Shepherd et al., 2000; Hanna et al., 2004). В популяции 2L/3L принимающие эрлотиниб пациенты характеризовались средней выживаемостью, равной 6,7 месяцев, по сравнению с 4,7 месяцами в группе плацебо (Shepherd et al., 2005). Никакой способ лечения в настоящее время не одобрен для использования при раке легких, превышающем 3L, и существуют минимальные данные базового выживания в данной популяции пациентов, за исключением ретроспективных обзоров медианного выживания, составляющего 5,8-6,5 месяцев и 1-летней выживаемости у 25% (Girard et al., 2009; Scartozi et al., 2010).
При лечении ниволумабом пациентов с MEL достигалась медиана OS, составляющая 16,8 месяцев, с выживаемостью, равной 62% (1 год) и 43% (2 года) (см. пример 7). Результаты выживания у пациентов с меланомой с предшествующей терапией поддержали недавние утверждения FDA ипилимумаба и вемурафениба. В недавней фазе 3 испытания у поступивших пациентов с меланомой по меньшей мере с од
- 25 037351 ним предварительным лечением метастатического заболевания ипилимумаб увеличивал среднюю OS от 6,4 до 10,1 месяцев по сравнению с пептидной вакциной gp100 (Hodi et al., 2010). В фазе 2 испытания ипилимумаба у ранее получавших лечение больных двулетняя выживаемость составляла от 24,2-32,8% (Lebbe et al., 2012). Медиана OS у пациентов с предшествующей терапией с BRAF-мутантной меланомой, зарегистрированного на большой фазе 2 вемурафениба, составляла 15,9 месяцев, а однолетняя выживаемость составила 58% (Sosman et al., 2012).
Соответственно, согласно некоторым вариантам осуществления иммунотерапия с антителом к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического MEL после терапии с дакарбазином (независимо от поддерживающего лечения) и одного другого воздействия. Согласно другим вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического MEL после провала основанной на дакарбазине терапии. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического MEL после провала двух линий терапии, одна из которых должна включать в себя основанную на дакарбазине схему лечения. Согласно еще дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического MEL после по меньшей мере одной предшествующей химиотерапии после провала по меньшей мере одной предварительной основанной на дакарбазине терапии или после прогрессирования по меньшей мере на терапии с дакарбазином. Во всех раскрытых в настоящем документе способах иммунотерапии лечение может быть продолжено до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не произойдет неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
У получавших ниволумаб пациентов с RCC, среди которых 45% получили три или более предварительных курса лечения и 71% получили предварительную антиангиогенную терапию, медианная OS была достигнута в 22 месяца (по данным анализа на март 2013 г.). Наблюдались граничные уровни выживаемости 70% (1 год) и 50% (2 года) (см. пример 7). В недавней фазе 3 испытания включенных в исследование пациентов с раком почки, чье заболевание прогрессировало после антиангиогенной терапии, эверолимус сравнивали с плацебо: медианная OS составляла 14,8 против 14,4 месяцев соответственно (Motzer et al., 2008; Motzer et al., 2010). В недавней фазе 3 испытания по сравнению сорафениба с темсиролимусом в популяции пациентов с устойчивым к сунитинибу раком полученная медианная OS составляла 16,6 и 12,3 месяцев соответственно (Hutson et al., 2012). Таким образом, как в случае с NSCLC, так и MEL лечение популяции пациентов с RCC с интенсивной предшествующей терапией ниволумабом давало значительно большую медианную OS (>22 месяцев), чем лечение менее устойчивой популяции стандартной терапией. Контролируемые испытания фазы 3 с перспективными конечными точками выживания ведутся в NSCLC, MEL и RCC (NCT01673 867, NCT01721772, NCT01642004, NCT01668784 и NCT01721746 (см. сайт клинических испытаний, http://www.clinicaltrials.gov). Ожидается, что результаты этих исследований в дальнейшем продемонстрируют высокую эффективность и долговечность ответов на ниволумаб при этих злокачественных опухолях по сравнению со стандартными способами лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления иммунотерапия с антителом к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического RCC после терапии с антиангиогенным TKI или ингибитором mTOR (независимо от поддерживающего лечения) и одного другого воздействия. Согласно другим вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического RCC после провала терапии с антиангиогенным TKI или ингибитором mTOR. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического RCC после провала двух линий терапии, одна из которых должна включать в себя антиангиогенный TKI или ингибитор mTOR. Согласно еще дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 указывается как монотерапия для локального прогрессирующего или метастатического RCC после по меньшей мере одной химиотерапии после провала по меньшей мере одной предварительной основанной на антиангиогенном TKI или ингибиторе mTOR терапии или после прогрессирование на по меньшей мере терапии с антиангиогенным TKI или ингибитором mTOR. Иммунотерапия к PD-1 может быть продолжена до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
Примечательно, что OS у пациентов с раком легких, меланомой и раком почки, получающих ниволумаб, была значительно длиннее, чем PFS. Эти результаты отражают таковые для ипилимумаба (Hodi et al., 2010), а также отражают наблюдение о том, что при раннем опухолевом расширении или появлении новых очагов у некоторых пациентов, получающих блокаду иммунных контрольных точек, может развиваться стабилизация заболевания или регрессия. Эти результаты показывают, что выживаемость без прогрессирования не может быть оптимальной конечной точкой для определения эффективности ниволумаба и других средств в этом классе.
Представленные в настоящем документе данные, демонстрирующие высокую эффективность, прочность и широкую применимость иммунотерапии к PD-1 для лечения злокачественной опухоли, привели к тому, что ниволумаб проходил проверку на дополнительные виды злокачественных опухолей. Например, на основании того, что повышенная экспрессия PD-L1 сообщалась с различными гематологи
- 26 037351 ческими злокачественными новообразованиями и может предотвращать иммунный ответ хозяина от оказания благотворного воздействия на злокачественные клетки, было инициировано испытание, чтобы подтвердить способность ниволумаба опосредовать противоопухолевую активность у пациентов с онкогематологическими заболеваниями (множественная миелома, В-клеточная лимфома, Т-клеточная лимфома, лимфома Ходжкина/первичная медиастинальная В-клеточная лимфома и хронический миелолейкоз) (NCT01592370). Ниволумаб также проходит испытания в качестве монотерапии при прогрессирующей гепатоцеллюлярной карциноме (NCT01658878). В целом, описанные в настоящем документе результаты иммунотерапии к PD-1 замечательны по меньшей мере следующими тремя особенностями.
Во-первых, была показана эффективность αнтu-PD-1, превосходящая исторические данные по эффективности для пациентов на стандартных способах лечения злокачественной опухоли. Примечательно, что подобная эффективность была продемонстрирована у пациента в популяции с интенсивной предшествующей терапией, в которой приблизительно у половины пациентов наблюдалось прогрессирующее заболевание после трех или более предшествующих системных схем лечения. Такие пациенты, страдающие от прогрессирующих, метастатических и/или устойчивых злокачественных опухолей, как известно, трудно поддаются лечению. Соответственно, настоящее изобретение обеспечивает способы для иммунотерапии пациента, страдающего от прогрессирующей, метастатической и/или устойчивой злокачественной опухоли, при этом способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего участка, что нарушает взаимодействие PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2. Согласно некоторым вариантам осуществления любого из описанных в настоящем документе терапевтических способов субъект подвергался предварительному лечению от злокачественной опухоли; например субъект подвергался по меньшей мере одной, двум или трем предшествующим линиям терапии злокачественной опухоли.
Во-вторых, было показано, что настоящие терапевтические способы применимы к широкому роду различных видов злокачественных опухолей. Основываясь на неожиданном открытии того, что даже неиммуногенная злокачественная опухоль, такая как NSCLC (Holt et al., 2011), и такие трудноизлечимые злокачественные опухоли, как яичников и желудка (а также другие виды злокачественных опухолей, включающие в себя MEL, RCC и CRC), поддаются лечению с анти-PD-1 и/или αнти-PD-L1 (см. примеры 7 и 14), это изобретение в целом относится к способам иммунотерапии у пациента, страдающего от практически любой из очень широкого диапазона злокачественных опухолей.
В-третьих, было показано, что лечение с антителом к PD-1 или к PD-L1 производит поразительно прочную клиническую активность у пациентов со злокачественной опухолью. Соответственно, это изобретение включает иммунотерапевтические способы индукции прочного клинического ответа у пациента со злокачественной опухолью, включающие введение пациенту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего участка, что нарушает взаимодействие PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2. Согласно предпочтительным вариантам осуществления любого из описанных в настоящем документе терапевтических способов клинический ответ представляет собой прочный ответ.
Используемый в настоящем документе прочный ответ представляет собой терапевтический или клинический ответ, который превышает предполагаемый медианный уровень OS в популяции пациентов. Предполагаемый медианный уровень OS изменяется с различными видами злокачественных опухолей и в различных группах пациентов. Согласно некоторым вариантам осуществления прочный ответ превышает ожидаемый медианный уровень OS в соответствующей популяции пациентов по меньшей мере на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 20%, более предпочтительно по меньшей мере на 30% и еще более предпочтительно по меньшей мере на 50%. Основным преимуществом основанных на блокаде пути PD-1 иммунотерапевтических подходов может быть функциональное восстановление истощенных Тклеток с долгосрочным поколением Т-клеток памяти, которые могут поддерживать противоопухолевый иммунный надзор и ингибировать рост опухоли в течение длительных периодов, распространяемых на многие годы, даже в отсутствие продолжения терапии (Kim and Ahmed, 2010). Действительно, долгосрочные последующие исследования на пациентах после прекращения терапии с ниволумабом подтвердили, что пациент с CRC испытывал полный ответ, который продолжается через 3 года; пациент с RCC испытывал частичный ответ продолжительностью 3 года после терапии, который преобразовался в полный ответ, который проводился 12 месяцев; и пациент с меланомой достигал частичного ответа, который был стабилен в течение 16 месяцев после лечения, и рецидив заболевания был успешно излечен повторной терапией анти-PD-1 (Lipson et al., 2013).
Связанные с иммунной системой клинические ответы.
Стало очевидно, что обычные критерии ответа не могут адекватно оценить активность иммунотерапевтических средств, поскольку прогрессирующее заболевание (по предварительному рентгенографическому исследованию) необязательно отражает неудачи лечения. Например, было показано, что воздействие антитела к CTLA-4, ипилимумаба, производит четыре различных паттерна отклика, все из которых были связаны с благоприятным выживанием: (a) сжатие в исходных поражениях без новых поражений; (b) прочное стабильное заболевание (у некоторых пациентов после медленного, неуклонного снижения общего бремени опухоли); (с) реакции после увеличения общего бремени опухоли и (d) реакция в присутствии новых поражений. Соответственно, чтобы правильно оценить иммунотерапевтические средст
- 27 037351 ва, долгосрочные эффекты на заболевании-мишени также должны быть захвачены. В связи с этим были предложены систематические критерии связанных с иммунной системой ответов (IRRC), которые делают скидку на раннее увеличение опухолевой нагрузки и/или появление новых очагов и которые стремятся к укреплению характеристики паттернов связанных с иммунной системой ответов (Wolchok et al., 2009). В то время как полный эффект этих нетрадиционных паттернов ответа остается определенным в рандомизированных испытаниях ниволумаба с конечными точками выживания, настоящие наблюдения напоминают результаты с ипилимумабом, в которых наблюдалось значительное расширение OS у подвергнутых лечению пациентов (Hodi et al., 2010; Robert et al., 2011).
Общий профиль риск/польза иммунотерапии к PD-1 также благоприятен с низкой частотой более тяжелых, связанных с лекарственными средствами нежелательных явлений (АЕ; >3-й степени тяжести), конкретные события, наблюдаемые на сегодняшний день, соответствуют другим иммунотерапевтическим средствам. Это говорит о том, что анти-PD-1 иммунотерапия может быть обеспечена в амбулаторных условиях с минимальной поддерживающей терапией.
Широкий спектр злокачественных опухолей, подвергаемых лечению с помощью анти-PD-1 иммунотерапии.
Представленные в настоящем документе клинические данные показывают, что основанная на блокаде PD-1 иммунотерапия не ограничивается только иммуногенными типами опухолей, такими как MEL и RCC, но распространяется на типы опухолей, обычно не рассматриваемые как связанные с иммунной системой, включающие в себя NSCLC. Неожиданные успехи с устойчивой к лечению метастатической NSCLC подчеркивают возможность того, что любые опухоли могут быть иммуногенными в контексте надлежащей иммунной модуляции, и предполагают, что блокада PD-1 как иммунотерапевтический подход широко применима в очень разнообразных типах опухолей. Таким образом, злокачественные опухоли, которые можно лечить с помощью антител к PD-1 согласно настоящему изобретению, также включают в себя злокачественные опухоли, как правило, реагирующие на иммунотерапии, а также злокачественные опухоли, которые традиционно считались неиммуногенными. Не ограничивающие примеры предпочтительных злокачественных опухолей для лечения включают в себя NSCLC, MEL, RCC, CRC, CRPC, HCC, плоскоклеточную карциному головы и шеи, карциному пищевода, яичников, желудочно-кишечного тракта и молочной железы и гематологические злокачественные образования. Хотя NSCLC обычно не рассматривается как отвечающий на иммунотерапию, описанные в настоящем документе данные неожиданно показали, что как плоскоклеточный, так и неплоскоклеточный NSCLC реагируют на лечение с антителом к PD-1. Кроме того, настоящее изобретение включает антитела для лечения устойчивых или рецидивирующих злокачественных образований, чей рост можно ингибировать с использованием антитела к PD-1 согласно настоящему изобретению.
Примеры злокачественных опухолей, которые можно лечить с использованием антитела к PD-1 в способах согласно настоящему изобретению, на основе показаний очень широкой применимости представленной в настоящем документе иммунотерапии к PD-1, включают в себя рак печени, рак костей, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак легких, кожную или внутриглазную злокачественную меланому, рак почки, рак матки, рак яичников, рак толстой и прямой кишок, рака толстой кишки, рак прямой кишки, рак анальной области, рак желудка, рак семенника, рак матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному влагалища, карциному вульвы, неходжкинскую лимфому, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечников, саркому мягких тканей, рак уретры, рак пениса, солидные опухоли у детей, лимфоцитарную лимфому, рак мочевого пузыря, рак почки или мочеточника, карциному почечной лоханки, новообразования центральной нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, ангиогенез опухоли, опухоль оси позвоночника, глиому ствола мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, плоскоклеточный рак, вызванный окружающей средой плоскоклеточный рак, включающий в себя вызванный воздействием асбеста, гематологические злокачественные образования, включающие в себя, например, множественную миелому, В-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина/первичную медиастинальную В-клеточную лимфому, неходжкинские лимфомы, острую миелоидную лимфому, хронический миелоидный лейкоз, хронический лимфоидный лейкоз, фолликулярную лимфому, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, лимфому Беркитта, иммунобластную крупноклеточную лимфому, лимфобластную лимфому предшественников В-клеток, лимфому клеток мантии, острый лимфобластный лейкоз, грибовидный микоз, анапластическую крупноклеточную лимфому, Т-клеточную лимфому и лимфобластную лимфому предшественников Т-клеток, а также любые комбинации указанных видов злокачественных опухолей. Настоящее изобретение также применимо к лечению метастатических видов злокачественных опухолей.
Медицинские применения антител к PD-1.
Один из аспектов настоящего изобретения заключается в использовании любого антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для ингибирования сигналов от пути PD-1/PD-L1 так, чтобы, таким образом, потенцировать эндогенный иммунный ответ у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли. Другой аспект заключается в использовании любого антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего участка согласно на
- 28 037351 стоящему изобретению для получения лекарственного средства для иммунотерапии у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, содержащей нарушение взаимодействия между PD-1 и PD-L1. Эти применения для приготовления лекарственных средств широко применимы к полному диапазону злокачественных опухолей, раскрытых в настоящем документе. Согласно предпочтительным вариантам осуществления этих применений злокачественные опухоли включают в себя плоскоклеточный NSCLC, неплоскоклеточный NSCLC, MEL, RCC, CRC, CRPC, НСС, плоскоклеточный рак головы и шеи и карциномы пищевода, яичников, желудочно-кишечного тракта и молочной железы, а также гематологические злокачественные новообразования. Это изобретение также включает медицинское применение любого антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению, соответствующего всем вариантам осуществления способов лечения, использующих описанное в настоящем документе антитело к PD-1. Настоящее изобретение также включает антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий участок согласно настоящему изобретению для применения в лечении субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающем потенцирование эндогенного иммунного ответа у субъекта путем ингибирования передачи сигналов от пути PD-1/PD-L1. Изобретение дополнительно включает антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий участок согласно настоящему изобретению для применения в иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающей нарушение взаимодействие между PD-1 и PD-L1. Эти антитела могут быть использованы в потенцирования эндогенного иммунного ответа против или в иммунотерапии полного спектра раскрытых в настоящем документе злокачественных опухолей. Согласно предпочтительным вариантам осуществления злокачественные опухоли представляют собой плоскоклеточный NSCLC, неплоскоклеточный NSCLC, MEL, RCC, CRC, CRPC, НСС, плоскоклеточный рак головы и шеи и карциномы пищевода, яичников, желудочнокишечного тракта и молочной железы, а также гематологические злокачественные новообразования.
Комбинированная терапия, включающая в себя антитела к PD-1.
В то время как в настоящем документе было показано, что монотерапия с антителами к PD-1 и к PD-L1 значительно увеличивает выживаемость пациентов с раком легких, меланомой, раком почки и потенциально другими злокачественными опухолями, доклинические данные указывают на то, что комбинации синергетического лечения, основанного на блокаде пути PD-1, могут характеризоваться еще более мощным воздействием. Клиническая оценка ниволумаба в сочетании с ипилимумабом (антиCTLA-4), чей механизм действия похож, но отличается от ниволумаба (Parry et al., 2005; Mellman et al., 2011; Topalian et al., 2012c), продолжается, и результаты испытания фазы 1 приведены в настоящем документе (см. также NCT01024231; NCT01844505; NCT01783938; Wolchok et al., 2013a; Wolchok et al., 2013b; Hodi et al., 2013). Клинические исследования также были начаты с участием введения ниволумаба в комбинации с вакцинами меланомы (NCT01176461, NCT01176474; Weber et al., 2013), с лирилумабом (BMS-986015), IgG4 человека к антителу KIR, у пациентов с прогрессирующими солидными опухолями (NCT01714739; Sanborn et al., 2013), цитокинами, например IL-21, у пациентов с прогрессирующими или метастатическими солидными опухолями (NCT01629758; Chow et al., 2013), с химиотерапевтическими лекарственными средствами, например, с основанным на платине дублетом химиотерапии у химиотерапевтически-наивных пациентов с NSCC (NCT01454102; Rizvi et al., 2013) и низкомолекулярными нацеленно воздействующими лекарственными средствами у пациентов с метастатическим RCC (NCT01472081; Amin et al., 2013).
Согласно некоторым аспектам настоящее изобретение относится к комбинации антитела к PD-1 с различными способами лечения злокачественных опухолей, включающими в себя химиотерапевтические схемы лечения, радиацию, хирургию, гормональную депривацию и ингибиторы ангиогенеза, для лечения различных злокачественных опухолей. Блокада PD-1 может быть эффективна в сочетании с иммуногенным средством, например препаратом злокачественных клеток, очищенными опухолевыми антигенами (включающих в себя рекомбинантные белки, пептиды и молекулы углеводов), антигенпредставляющими клетками, такими как дендритные клетки, несущие ассоциированные с опухолью антигены, клетки, трансфицированные с генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины (Не et al., 2004) и/или другим иммунотерапевтическим антителом (например, антителом к CTLA-4, к PD-L1 и/или к LAG-3). Неограничивающие примеры опухолевых вакцин, которые могут быть использованы, включают в себя пептиды антигенов меланомы, такие как пептиды gp100, антигенов MAGE, Trp-2, MART1 и/или тирозиназы, или опухолевые клетки, трансфицированные для экспрессии цитокина GM-CSF.
Сочетание антител к PD-1 и к CTLA-4 для лечения прогрессирующей меланомы.
Учитывая, что иммунологические контрольные точки не представляют собой избыточные и могут ингибировать активацию Т-клеток, пролиферацию и эффекторную функцию в пределах лимфатических узлов и/или опухолевого микроокружения, и на основании доклинических данных того, что комбинация антител к CTLA-4 и к PD-1 характеризовалась сильным противоопухолевым эффектов в мышиных опухолевых моделях по сравнению с каждым из антител (см. патент США 8008449), гипотеза, которая комбинировала блокаду CTLA-4 и PD-1, могла производить большую противоопухолевую активность, чем одиночные средства, была проверена в клиническом исследовании у пациентов с MEL (пример 15).
Не формально сравниваемый в настоящем исследовании одновременный режим ниволумаба/ипилимумаба содержал достигнутые ORR, которые превышали уровни, достигнутые либо с ниволу
- 29 037351 мабом (пример 7), либо с ипилимумабом в одиночку (Hodi et al., 2010). Самое главное, быстрые и глубокие ответы достигались в значительной части получавших лечение пациентов, глубокий опухолевый ответ в отношении ответа повреждений-мишений характеризовался уменьшением на 80% или более по сравнению с исходными измерениями с помощью радиографической оценки. В настоящем исследовании большинство исследуемых пациентов, включающих в себя некоторые с большими и громоздкими опухолевыми нагрузками, достигали >80% регрессии опухоли во время первоначальной оценки опухоли. Особенно впечатляющим было наблюдение, что 31% пациентов с подлежащими оценке реакциями, получавшие одновременную схему лечения (которая содержит (i) режим дозирования для индукции с комбинированным введением антител к PD-1 и к CTLA-4 с последующим введением одного антитела к PD-1 и (ii) режим дозирования для поддержания, включающий менее частое комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4), демонстрировали >80% регрессии опухоли к 12 неделе. На MTD для одновременной схемы лечения все девять реагирующих пациентов продемонстрировали >80% регрессии опухоли с трем CR. В отличие от этого, в клинической практике на сегодняшний день <3% пациентов с MEL, получавших ниволумаб или ипилимумаб в дозе 3 мг/кг, достигали CR (пример 7; Hodi et al., 2010). Таким образом, общая активность этой комбинации иммунотерапии на этой предварительной фазе 1 испытания сравнений очень выгодно отличается от других средств, утвержденных или разрабатываемых для прогрессирующей меланомы, включая в себя нацеленно воздействующие ингибиторы активированных киназ (Chapman et al., 2011). Дополнительное преимущество такой комбинации представляет собой прочность ответа, как показано в настоящем исследовании, а также долгосрочных испытаний иммунотерапии с ниволумабом (как описано в настоящем документе) и ипилимумабом (Wolchok et al., 2013d).
Эти первоначальные данные свидетельствуют о том, что быстрые ответы большей величины могут быть достигнуты у пациентов с комбинацией ниволумаба/ипилимумаба по сравнению с историческим опытом какого-либо одного средства. Ответы были, как правило, прочными и наблюдались даже у пациентов, лечение которых было прекращено досрочно из-за токсичности. Реагирующие пациенты включали в себя тех, которые были с повышенным ЛДГ, заболеванием М1с и громоздкой многофокусной опухолевой нагрузкой. Сходно с предыдущими докладами, касающимися монотерапии с ипилимумабом или ниволумабом, обычные ORR не могут полностью захватить спектр клинической активности и потенциального преимущества у пациентов, получавших лечение с одновременной схемой лечения ниволумаба/ипилимумаба, в том, что ряд пациентов испытывали либо долгосрочный SD, либо нетрадиционные связанные с иммунной системой паттерны ответа. Действительно, даже среди семи пациентов в одновременной схеме лечения с SD >24 недель или irSD >24 недель, как лучший ответ, шесть продемонстрировали значимую регрессию опухоли по меньшей мере на 19%, а седьмой пациент характеризовался снижением опухолевой нагрузки после длительного SD. До опыта с блокадой контрольной точки монотерапия поддерживает наблюдение, что некоторые пациенты могут выживать в течение длительных периодов времени с SD в качестве лучшей OR, подтверждая гипотезу, что восстановление равновесной фазы иммунного надзора представляет собой желательный результат (Screiber et al., 2011).
Наблюдение того, что пациенты могут достичь OR, когда последовательно получают ниволумаб после предварительного ипилимумаба, указывает на то, что отсутствие реакции на блокаду CTLA-4 не исключает клинический эффект от блокады PD-1 и дополнительно поддерживает статистически неопределенный характер этих совместных путей ингибирования. Примечательно, что описанные в настоящем документе данные (пример 8) указывают на связь между возникновением реакции и экспрессией PD-L1 опухолью у пациентов, получающих ниволумаб, и предыдущие данные свидетельствуют о корреляции между OS и увеличениями в периферическом ALC у пациентов, получавших ипилимумаб (Berman et al., 2009; Ku et al., 2010; Postow et al., 2012; Delyon et al., 2013). В настоящем исследовании комбинации ниволумаба/ипилимумаба клинический ответ наблюдался у пациентов независимо от числа лимфоцитов и базовой экспрессии PD-L1 опухоли (пример 17), предполагая, что иммунный ответ, вызванный комбинированной терапией, характеризуется уникальными особенностями по сравнению с монотерапией, в то время как данные показывают, что базовая экспрессия PD-L1 опухоли и число лимфоцитов могут быть менее актуальными в условиях активной комбинации схем лечения, способной вызывать быструю и отчетливо выраженную регрессию опухоли, также следует отметить, что разные антитела к PD-L1 (кроличье моноклональное антитело 28-8 против мышиного моноклонального антитела 5Н1) были использованы в другом анализе IHC для измерения экспрессии PD-L1 в исследовании комбинированной терапии по сравнению с исследованием монотерапии с ниволумабом. В дополнение к изменениям в анализе IHC и антителе, различные результаты могут также отражать различия в образцах биопсии и неоднородности опухолей. Пригодность экспрессии PD-L1 в качестве биомаркера для эффективности анти-PD-1 будет в дальнейшем оцениваться в перспективе в фазе 3 рандомизированных исследований (см., например, NCT01721772, NCT01668784 и NCT01721746).
Спектр нежелательных явлений, наблюдаемых у пациентов, получавших одновременную схему лечения, был качественно подобен опыту с монотерапией с ниволумабом или ипилимумабом, хотя уровень АЕ был увеличен у пациентов, получавших комбинацию. Степень тяжести 3-4 связанных с лечением АЕ наблюдалась у 53% пациентов, получавших одновременную схему лечения ниволумаба/ипилимумаба, по сравнению с историческими уровнями 20% у пациентов, получавших монотерапию ипилимумаб (Hodi et
- 30 037351 al., 2010), и 17% у пациентов, получавших только ниволумаб (пример 5) в дозе 3 мг/кг. В когорте последовательной схемы лечения 18% пациентов получили 3-4 степень тяжести связанных с лечением АЕ. AE, с которыми сталкивались пациенты с одновременными и последовательными схемами лечения, были управляемыми и/или, как правило, обратимыми, использующими существующие алгоритмы лечения.
В совокупности эти результаты показывают, что ниволумаб и ипилимумаб можно вводить одновременно с управляемым профилем безопасности и приводя к долговечности клинических ответов. Более быстрые и более глубокие клинические опухолевые ответы наблюдались у пациентов, получавших комбинацию, по сравнению с ответами, полученными только с одним средством.
По состоянию на дату прекращения сбора клинических данных, февраль 2013, для исследования, описанного в примере 15, из 52 субъектов на одновременной схеме лечения, анализируемых на ответ, 21 (40%) характеризовались наличием OR по модифицированным критериям Всемирной организации здравоохранения (mWHO) (Wolchok et al., 2009). У дополнительных 2 субъектов (4%) были неподтвержденные OR. В когорте 1 (0,3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб) 3 из 14 оцениваемых субъектов характеризовались наличием OR по mWHO (ORR: 21%, в том числе 1 CR и 2 PR). В когорте 2 (1 мг/кг ниволумаб плюс 3 мг/кг ипилимумаб) 9 из 17 оцениваемых субъектов характеризовались наличием OR по mWHO (ORR: 53%; в том числе 3 CR и 6 PR). В когорте 2а (3 мг/кг ниволумаб плюс 1 мг/кг ипилимумаб) 6 из 15 оцениваемых субъектов характеризовались наличием OR по mWHO (ORR: 40%; в том числе 1 CR и 5 PR). В когорте 3 (3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб) 3 из 6 оцениваемых субъектов характеризовались наличием объективного ответа по mWHO (ORR: 50%, в том числе 3 PR). На основании этих данных раскрытое в настоящем документе изобретение относится к способу лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающему введение субъекту (a) антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывается с и ингибирует PD-1; и (b) антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывается с и ингибирует CTLA-4; каждое антитело, вводимое в дозе от 0,1 до 20,0 мг/кг массы тела в одновременной схеме лечения, включающей (i) режим дозирования для индукции, включающий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования, составляющей по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 10 доз, с последующим введением только антитела к PD-1 с частотой дозирования, составляющей по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 12 доз; с последующим (ii) режимом дозирования для поддержания, включающим комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования, составляющей по меньшей мере один раз в 8, 12 или 16 недель или по меньшей мере один раз в квартал для достижения по меньшей мере 4, 6, 8, 10, 12 или 16 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не возникает неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
Согласно некоторым вариантам осуществления этого способа поддержание режима включает комбинированное введение до 4, 6, 8, 10, 12 или 16 доз антител к PD-1 и к CTLA-4. Согласно другим вариантам осуществления одновременный режим включает (i) режим дозирования для индукции, включающий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования один раз в 2, 3 или 4 недели или один раз месяц для достижения 2, 4, 6 или 8 доз с последующим введением одного антитела к PD-1 с частотой дозирования один раз каждые две, три или четыре недели или один раз в месяц для достижения 2, 4, 6, 8 или 12 доз; затем (ii) режим дозирования для поддержания, включающий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования один раз в 8, 12 или 16 недель или один раз в квартал для достижения 4, 6, 8, 10, 12 или 16 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания. Согласно некоторым другим вариантам осуществления каждое из антител к PD-1 и к CTLA-4 индивидуально вводят в дозе 0,1, 0,3, 0,5, 1, 3, 5, 10 или 20 мг/кг. Согласно дополнительным вариантам осуществления дозировка каждого из антител к PD-1 и к CTLA-4 остается постоянной во время режима дозирования для индукции и режима дозирования для поддержания. Согласно еще другим вариантам осуществления антитела к PD-1 и к CTLA-4 вводят в следующих дозах:
(a) 0,1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(b) 0,3 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(с) 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(d) 3 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(е) 5 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(f) 10 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4;
(g) 0,1 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4;
(h) 0,3 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4;
(i) 1 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4;
(j) 3 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4;
(k) 5 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4 или (l) 10 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4.
В протоколе, описанном в примере 15, режим дозирования 3 мг/кг ниволумаба + 3 мг/кг ипилиму- 31 037351 маба превышал MTD (хотя комбинации с ипилимумабом и другими антителами к PD-1 могут характеризоваться более высоким или более низким MTD), в то время как когорта 2 (ниволумаб в концентрации 1 мг/кг + ипилимумаб в концентрации 3 мг/кг), так и когорта 2а (ниволумаб в концентрации 3 мг/кг + ипилимумаб в концентрации 1 мг/кг) характеризовались аналогичной клинической активностью. Кроме того, большинство ответов на комбинацию ниволумаба и ипилимумаба происходили в течение первых 12 недель. Учитывая неуверенность в том, способствует ли ипилимумаб, вводимый до 12 недели, клинической эффективности, и тот факт, что Администрация США по пищевым продуктам и лекарственным веществам (FDA) и Европейское агентство по лекарственным средствам (ЕМА) утвердили график ипилимумаба каждые 3 недели для достижения в общей сложности четырех доз, согласно предпочтительному варианту осуществления антитело к CTLA-4 вводят во время режима дозирования для индукции один раз в три недели для достижения в общей сложности четырех доз. Было показано, что лечение монотерапией ниволумаба в дозе 3 мг/кг каждые две недели до прогрессирования связано с прочными ответами (примеры 4-7), и было показано, что режим дозирования для поддержания, включающий введение ниволумаба каждые 12 недель, был эффективным (пример 15). Таким образом, начиная с 12 недели, которая следует после завершения четырех доз комбинированных ниволумаба и ипилимумаба, ниволумаб в дозе 3 мг/кг может вводиться через каждые от 2 до по меньшей мере 12 недель до прогрессирования.
Соответственно, согласно предпочтительным вариантам осуществления способа одновременной схемы лечения антитела к PD-1 и к CTLA-4 вводят в дозах: (a) 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4 или (b) 3 мг/кг антитела к PD-1 и 1 мг/кг антитела к CTLA-4, и одновременная схема лечения дополнительно включает (i) режим дозирования для индукции, включающий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 при частоте дозирования один раз в три недели для достижения четырех доз с последующим введением одного антитела к PD-1 с частотой дозирования один раз в три недели до достижения четырех доз с последующим (ii) режимом дозирования для поддержания, включающим комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования один раз в 2-12 и более недель до 8 доз, или до тех пор, пока не будет наблюдаться клинический эффект или пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
Анализ воздействие-отклик монотерапии ниволумаба в диапазоне доз от 1 до 10 мг/кг обнаруживает подобную клиническую активность (пример 7), в то время как анализ воздействие-отклик монотерапии ипилимумаба в дозе 0,3, 3 и 10 мг/кг продемонстрировал увеличение активности с увеличением дозы в фазе 2 испытания (Wolchok et al., 2010). Таким образом, доза 3 мг/кг ипилимумаба (когорта 2) может быть более клинически эффектной, чем отбор 3 мг/кг ниволумаба (когорта 2а). Таким образом, согласно более предпочтительным вариантам осуществления способа одновременной схемы лечения, антитела к PD-1 и к CTLA-4 вводят в дозах 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящих способов антитела к PD-1 и к CTLA-4 составляют для внутривенного введения. Согласно некоторым другим вариантам осуществления, когда антитела к PD-1 и к CTLA-4 вводят в комбинации, их вводят в течение 30 мин друг по отношению к другу. Либо антитело может быть введено первым, т.е., согласно некоторым вариантам осуществления антитело к PD-1 вводят перед антителом к CTLA-4, в то время как согласно другим вариантам осуществления антитело к CTLA-4 вводят перед антителом к PD-1. Как правило, каждое антитело вводят внутривенно в течение 60 мин. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитела к PD-1 и к CTLA-4 вводят одновременно, либо в смеси в виде единой композиции в фармацевтически приемлемом составе для одновременного введения, либо одновременно в виде отдельных композиций с каждым антителом в фармацевтически приемлемом составе.
Данные, описанные в примере 7, показывают, что иммунотерапия с ниволумабом приводила к значительной клинической активности у пациентов с MEL, которые были невосприимчивы к предшествующей терапии с ипилимумабом. Соответственно, в настоящем изобретении предусмотрен способ последовательной схемы для лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, субъекта, который ранее получал антитело к CTLA-4, включающий введение субъекту антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывается и ингибирует PD-1 в диапазоне доз от 0,1 до 20,0 мг/кг массы тела и частотой дозирования по меньшей мере один раз в неделю, по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц до достижения от 6 до 72 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания. Согласно некоторым вариантам осуществления этого способа введение антитела к PD-1 субъекту начинается в течение 1-24 недель после последнего получения антитела к CTLA-4. Согласно другим вариантам осуществления введение антитела к PD-1 субъекту начинается в течение 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 или 24 недель после последнего получения антитела к CTLA-4. Согласно предпочтительным вариантам осуществления введение антитела к PD-1 начинается в течение 4, 8 или 12 недель после последнего получения субъектом антитела к CTLA-4. Некоторые варианты осуществления способа включают введение антитела к PD-1 в дозе 0,1-20 мг/кг, например 0,1, 0,3, 0,5, 1, 3, 5, 10 или 20 мг/кг. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 вводят в дозе 1 или 3 мг/кг. Согласно некоторым вариантам осуществления последовательная схема лечения включает введение антитела к PD-1 субъекту с частотой дозирования один раз в неделю, один раз в 2, 3 или 4 недели или один раз в
- 32 037351 месяц до 6-72 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не происходит неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 вводят в дозе 1 или 3 мг/кг с частотой дозирования один раз в две недели в течение до 48 доз. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 составляют для внутривенного введения. Согласно некоторым аспектам любого из настоящих способов одновременных или последовательных схем лечение производит по меньшей мере один терапевтический эффект, выбранный из уменьшения размера и/или роста опухоли, устранения опухоли, уменьшения числа метастатических очагов с течением времени, полного ответа, частичного ответа и стабилизации заболевания. На основе широкого спектра злокачественных опухолей, в которых ниволумаб показал клинический ответ, настоящие способы комбинированной терапии также применимы к различным злокачественным опухолям. Примеры злокачественных опухолей, которые можно лечить с помощью этих способов, включают в себя рак печени, рак костей, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак легких, кожную или внутриглазную злокачественную меланому, рак почки, рак матки, рак яичников, колоректальный рак, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак анальной области, рак желудка, рак семенника, рак матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному влагалища, карциному вульвы, неходжкинскую лимфому, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечников, саркому мягких тканей, рак уретры, рак пениса, солидные опухоли у детей, лимфоцитарную лимфому, рак мочевого пузыря, рак почки или мочеточника, карциному почечной лоханки, новообразования центральной нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, ангиогенез опухоли, опухоль оси позвоночника, глиому ствола мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, плоскоклеточный рак, вызванный окружающей средой плоскоклеточный рак, включающий в себя вызванный воздействием асбеста, гематологические злокачественные образования, включающие в себя, например, множественную миелому, В-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина/первичную медиастинальную В-клеточную лимфому, неходжкинские лимфомы, острую миелоидную лимфому, хронический миелоидный лейкоз, хронический лимфоидный лейкоз, фолликулярную лимфому, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, лимфому Беркитта, иммунобластную крупноклеточную лимфому, лимфобластную лимфому предшественников В-клеток, лимфому клеток мантии, острый лимфобластный лейкоз, грибовидный микоз, анапластическую крупноклеточную лимфому, Т-клеточную лимфому и лимфобластную лимфому предшественников Т-клеток, а также любые комбинации указанных видов злокачественных опухолей. Настоящее изобретение также применимо к лечению метастатических, устойчивых или повторяющихся злокачественных опухолей. Согласно предпочтительным вариантам осуществления подвергаемую лечению злокачественную опухоль выбирают из MEL, RCC, плоскоклеточного NSCLC, неплоскоклеточного NSCLC, CRC, CRPC, OV, GC, HCC, PC, плоскоклеточного рака головы и шеи, рака пищевода, желудочно-кишечного тракта и молочной железы и гематологических злокачественных новообразований. Согласно более предпочтительным вариантам осуществления злокачественная опухоль представляет собой MEL.
Согласно некоторым вариантам осуществления субъект предварительно получал лечение от злокачественной опухоли. Например, пациент мог получать 1 или 2 или более предыдущих системных схем лечения типа, описанного в настоящем документе в качестве стандартных лекарственных средств. Согласно некоторым другим вариантам осуществления злокачественная опухоль представляет собой прогрессирующую, повторяющуюся, метастатическую и/или устойчивую злокачественную опухоль. Согласно предпочтительным вариантам осуществления одновременная или последовательная схема лечения индуцирует длительный клинический ответ у субъекта. Согласно предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой человека, антитело к PD-1 ингибирует PD-1 человека и антитело к CTLA-4 ингибирует CTLA-4 человека.
Используемое в настоящих способах антитело к PD-1 может представлять собой любое терапевтическое антитело к PD-1 согласно настоящему изобретению. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой моноклональное антитело, которое может представлять собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к PD-1 содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3 в вариабельной области тяжелой цепи и домены CDR1, CDR2 и CDR3 в вариабельной области легкой цепи 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4 (ниволумаб), 4А11, 7D3 или 5F4 соответственно, как описано и охарактеризовано в патенте США № 8008449. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 содержит вариабельные области тяжелой и легкой цепей 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4 (ниволумаб), 4А11, 7D3 или 5F4 соответственно. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой 17D8, 2D3, 4Н1, 5С4 (ниволумаб), 4А11, 7D3 или 5F4. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб. Антитела к CTLA-4 согласно настоящему изобретению связываются с CTLA-4 человека с тем, чтобы нарушить взаимодействие CTLA-4 с рецептором В7 человека. Поскольку взаимодействие CTLA-4 с В7 преобразует сигнал, ведущий к инактивации Т-клеток, несущих рецептор CTLA-4, нарушение взаимодействия эффективно индуцирует, усиливает или пролонгирует активацию таких Т-клеток, таким образом индуцируя, усиливая или продлевая иммунный ответ. Антитела
- 33 037351 к CTLA-4 описаны, например, в патентах США № 6051227, 7034121, в публикации заявки согласно PCT № WO 00/37504 и WO 01/14424. Иллюстративное клиническое антитело к CTLA-4 представляет собой человеческое моноклональное антитело 10D1 (теперь известное как ипилимумаб и продаваемое как YERVOY®), как описано в патенте США № 6984720. Согласно некоторым аспектам любого из существующих методов антитело к CTLA-4 представляет собой моноклональное антитело. Согласно некоторым другим вариантам осуществления антитело к CTLA-4 представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело. Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело к CTLA-4 представляет собой ипилимумаб.
В настоящем изобретении также предусмотрено применение антитела к PD-1 или его антигенсвязывающий участок в сочетании с антителом к CTLA-4 или его антигенсвязывающим участком для получения совместно вводимого лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, в одновременной схеме лечения, причем антитела к PD-1 и к CTLA-4 каждое вводят в диапазоне доз от 0,1 до 20,0 мг/кг веса тела, и, кроме того, причем одновременная схема лечения включает (i) режим дозирования для индукции, содержащий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 12 доз с последующим введением одного антитела к PD-1 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 10 доз; с последующим (ii) режимом дозирования для поддержания, включающим комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 8, 12 или 16 недель или по меньшей мере один раз в квартал для достижения 4, 6, 8, 10, 12 или 16 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не возникает неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания. В настоящем изобретении предусмотрено использование комбинации антител к PD-1 и к CTLA-4 для подготовки совместно вводимых лекарственных средств, соответствующих всем вариантам осуществления способов лечения, применяющих эти описанные в настоящем документе антитела и широко применяемых для полного спектра описанных в настоящем документе злокачественных опухолей.
В настоящем изобретении также предусмотрено антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий участок для использования в комбинации с антителом к CTLA-4 или его антигенсвязывающим участком для лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, в одновременной схеме лечения, причем антитела к PD-1 и к CTLA-4 каждое вводят в диапазоне доз от 0,1 до 20,0 мг/кг веса тела, и, кроме того, причем одновременная схема лечения включает (i) режим дозирования для индукции, включающий комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 12 доз с последующим введением одного антитела к PD-1 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 2, 3 или 4 недели или по меньшей мере один раз в месяц для достижения по меньшей мере 2, 4, 6, 8 или 10 доз; с последующим (ii) режимом дозирования для поддержания, включающим комбинированное введение антител к PD-1 и к CTLA-4 с частотой дозирования по меньшей мере один раз в 8, 12 или 16 недель или по меньшей мере один раз в квартал для достижения 4, 6, 8, 10, 12 или 16 доз, или до тех пор, пока наблюдается клинический эффект или пока не возникает неуправляемая токсичность или прогрессирование заболевания.
Способы для скрининга популяции пациентов и выбора пациента в качестве подходящего для иммунотерапии с комбинацией антител к PD-1 и к CTLA-4 с использованием одновременных или последовательных схем лечения и способы прогнозирования эффективности комбинации антител, основанные на анализе биомаркера PD-L1, выполняются, как описано для анти-PD-1 монотерапии, в тех случаях, когда этот биомаркер применим к комбинированной терапии с антителами к PD-1 и к CTLA-4.
В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен набор для лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, набор, содержащий (a) диапазон доз в пределах от 0,1 до 20,0 мг/кг веса тела антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывает и ингибирует PD-1; (b) диапазон доз в пределах от 0,1 до 20,0 мг/кг веса тела антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывает и ингибирует CTLA-4; и (с) инструкции по использованию комбинации антител к PD-1 и к CTLA-4 в любом из способов одновременной схемы лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления некоторые из доз антител к PD-1 и к CTLA-4 смешивают в одном фармацевтическом составе для одновременного введения. Согласно другим вариантам осуществления дозы антител к PD-1 и к CTLA-4 составляют в виде отдельных композиций с каждым антителом в фармацевтически приемлемом составе.
В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен набор для лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, набор, содержащий (a) диапазон доз в пределах от 0,1 до 20,0 мг/кг веса тела антитела или его антигенсвязывающего участка, которое специфически связывает и ингибирует PD-1; и (b) инструкции по использованию антитела к PD-1 в способах одновременной схемы лечения. Комбинированная блокада PD-1 и CTLA-4 может быть также дополнительно скомбинирована со стандартными способами лечения злокачественных опухолей. Например, комбинированная блокада PD-1 и CTLA-4 может быть эффективна в сочетании с химиотерапевтическими схемами лечения, например до
- 34 037351 полнительная комбинация с дакарбазином или IL-2 для лечения MEL. В этих случаях может быть возможным снижение дозы химиотерапевтического реагента. Научное обоснование комбинированного применения блокады PD-1 и CTLA-4 с химиотерапией представляет собой то, что гибель клеток, которая представляет собой следствие цитотоксического действия большинства химиотерапевтических соединений, должна привести к повышенным уровням опухолевого антигена в антигенпрезентирующем пути. Другие комбинированные препараты, которые могут привести к синергии с комбинированной блокадой PD-1 и CTLA-4 через клеточную гибель, включают в себя радиацию, хирургическое вмешательство или гормональную депривацию. Каждый из этих протоколов создает источник опухолевого антигена в хозяине. Ингибиторы ангиогенеза также могут быть объединены с комбинированной блокадой PD-1 и CTLA-4. Ингибирование ангиогенеза приводит к гибели опухолевых клеток, которые также могут быть источником опухолевого антигена, подаваемого в антигенпрезентирующие пути хозяина.
Иммунотерапия пациентов со злокачественной опухолью с использованием антитела к PD-L1.
PD-L1 представляет собой основной лиганд PD-1, активируемый в солидных опухолях, где он может ингибировать продукцию цитокинов и цитолитическую активность PD-1-положительных, проникающих в опухоли CD4' и CD8+ Т-клеток соответственно (Dong et al., 2002; Hino et al., 2010; Taube et al., 2012). Эти свойства делают PD-L1 перспективной мишенью для иммунотерапии злокачественной опухоли. Клинические испытания анmu-PD-L1 иммунотерапии, описанные в примерах, впервые демонстрируют, что блокада моноклональными антителами иммунного ингибирующего лиганда, PD-L1, производит как прочную регрессию опухоли, так и длительную (>24 недель) стабилизацию заболевания у пациентов с метастатическими NSCLC, MEL, RCC и OV, включающими в себя с интенсивной предшествующей терапией. Человеческое моноклональное антитело к PD-L1, BMS-936559, характеризовалось благоприятным профилем безопасности в целом в дозах до и включая 10 мг/кг, как это видно из низкого количества (9%) случаев, связанных с лекарственными средствами АЕ 3-4 степени тяжести. Эти данные согласуются со средним аутоиммунным фенотипом, обнаруженным у PD-L1-/- мышей (Dong et al., 2004), и более серьезной гиперпролиферацией, обнаруженной у CTLA-4-/- мышей, по отношению к PD-L1-/- мышам (Phan et al., 2003; Tivol et al., 1995; Nishimura et al., 1999). Большинство токсичностей, связанных с введением анти-PD-L1 у пациентов, было связано с иммунной системой, предполагая воздействие на мишень. Спектр и частота нежелательных явлений, представляющих особый интерес (AEOSI), несколько отличаются между анти-PD-L1 и анти-CTLA-4, подчеркивая особую биологию этих путей (Ribas et al., 2005). Реакции инфузии наблюдали с BMS-936559, хотя они были умеренными у большинства пациентов. Тяжелый колит, связанное с лекарственным средствами AE, наблюдаемое у получавших ипилимумаб пациентов (Beck et al., 2006), не часто отмечались с анmu-PD-L1.
Как отмечалось выше для анти-PD-1 иммунотерапии, другая важная особенность анти-PD-L1 терапии представляет собой долговечность ответов при различных видах опухолей. Это особенно заметно, учитывая прогрессирующее заболевание и предварительное лечение пациентов в текущем исследовании. Хотя это и не сравнивают напрямую, эта продолжительность кажется больше, чем наблюдаемая в большинстве химиотерапии и ингибиторов киназ, используемых для лечения этих злокачественных опухолей.
Поскольку периферические Т-клетки крови экспрессируют PD-L1, можно оценить RO in vivo с помощью BMS-963559 в качестве фармакодинамической меры. Медианная RO составляла 65,8, 66,2 и 72,4% для испытанных доз. В то время как эти исследования включают прямую оценку и доказательство поражения мишени у пациентов, получавших BMS-936559, отношения между RO в периферической крови и опухолевой микросредой остаются плохо понятыми.
На основании клинических данных, раскрытых в настоящем документе, это изобретение включает способ иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, который включает введение субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективного количества антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению или его антигенсвязывающего участка. В настоящем изобретение также предусмотрен способ ингибирования роста опухолевых клеток у субъекта, включающий введение субъекту антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению или его антигенсвязывающего участка. Согласно предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой человека. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой изотип IgG1 или IgG4. Согласно другим вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок. Согласно другим вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело или его антигенсвязывающий участок. Согласно предпочтительным вариантам осуществления для лечения пациента-человека антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой человеческое антитело или его антигенсвязывающий участок.
Описанные в примерах клинические испытания использовали человеческое моноклональное антитело к PD-L1 BMS-936559 для лечения злокачественной опухоли. В то время как BMS-936559 (обозначается HuMAb 12A4 в патенте США № 7943743) был выбран в качестве ведущего антитела к PD-L1 для ввода в клинике, следует отметить, что несколько антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению разделяют с 12А4 функциональные свойства, которые имеют важное значение в терапевтической активности 12А4, включающие в себя высокую аффинность связывания, особенно с PD-L1 человека, увеличе
- 35 037351 ние пролиферации Т-клеток, секрецию IL-2 и производство γ-интерферона в анализе MLR, ингибируя связывание PD-L1 с PD-1 и обращая супрессирующий эффект Т-регуляторных клеток на эффекторные Т-клетки и/или дендритные клетки. Кроме того, некоторые из антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению, а именно 1В12, 7Н1 и 12В7, структурно связаны с 12А4 в содержащих областях VH и VK, которые содержат последовательности, полученные из последовательностей 1-69 VH и L6 VK зародышевой линии соответственно. Кроме того, по меньшей мере 12В7, 3G10, 1В12 и 13G4 перекрестно конкурируют с 12А4 за связывание с той же областью эпитопа hPD-L1, в то время как 5F8 и 10А5 могут связываться с такой же или перекрывающейся областью эпитопа 12А4 (примеры 2 и 3). Таким образом, доклиническая характеристика 12А4 и других человеческих моноклональных антител к PD-L1 показывает, что предусмотренные в настоящем документе способы лечения злокачественной опухоли могут быть выполнены с использованием любого из широкого рода антител к PD-L1 согласно настоящему изобретению.
Соответственно, в настоящем изобретении предусмотрены способы иммунотерапии, включающие введение пациенту антитела к PD-L1 или его антигенсвязывающего участка, содержащего:
(а) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-18 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека;
(b) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-69 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L6 VK зародышевой линии человека;
(с) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-3 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека;
(d) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 1-69 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности А27 VK зародышевой линии человека;
(е) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-9 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L15 VK зародышевой линии человека; или (f) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности 3-9 VH зародышевой линии человека, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, полученной из последовательности L18 VK зародышевой линии человека.
Согласно некоторым вариантам осуществления введенное пациенту антитело к PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент перекрестно конкурирует за связывание с PD-L1 с эталонным антителом или его эталонным антигенсвязывающим участком, содержащим:
(a) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 15, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 25;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 27;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризую-
- 36 037351 щиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 28;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 19, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 29;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 20, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 30;
(g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 31;
(h) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 22, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 32;
(i) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 23, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 33; или (j) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 24, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 34.
Согласно предпочтительным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий участок перекрестно конкурирует за связывание с PD-1 с эталонным антителом или его эталонным антигенсвязывающим участком, содержащим вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, и вариабельный участок легкой цепи человека, содержащий последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26.
Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления раскрытых в настоящем документе способов иммунотерапии вводимое субъекту антитело к PD-L1 или его антигенсвязывающий участок содержит:
(a) SEQ ID NO: 16, вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26. вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 15, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 25;
(b) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26;
(с) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 27;
(d) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 28;
(е) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 19, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 29;
(f) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 20, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 30;
(g) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 21, и вариабельную
- 37 037351 область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 31;
(h) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 22, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 32;
(i) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 23, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 33; или (j) вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 24, и вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 34.
Согласно более предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-L1 или его антигенсвязывающий участок содержит вариабельную область тяжелой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 16, вариабельную область легкой цепи человека, содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 26.
Широкий спектр злокачественных опухолей, подвергающихся лечению с помощью антu-PD-L1 иммунотерапии.
Клиническая активность aнтu-PD-L1 у пациентов с прогрессирующим NSCLC, схожая с активностью анти-PD-1 у этих пациентов, была удивительной и неожиданной, так как NSCLC считался плохо реагирующим на основанные на иммунной системе терапии (Holt and Disis, 2008; Holt et al., 2011). Настоящие клинические данные, полученные с BMS-936559, антителом к PD-L1 согласно настоящему изобретению, обосновывают и расширяют данные, полученные с использованием антитела к PD-1, что иммунотерапия на основе блокады PD-1 не применяется только к иммуногенным типам опухолей, таким как MEL и RCC, но также эффективна в широком диапазоне злокачественных опухолей, включающем в себя устойчивые к лечению метастатические NSCLC, которые обычно не рассматриваются как отвечающие на иммунную систему. Предпочтительные злокачественные опухоли, которые можно лечить с использованием антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению, включают в себя MEL (например, метастатическую злокачественную меланому), RCC, плоскоклеточный NSCLC, неплоскоклеточный NSCLC, CRC, рак яичников (OV), рак желудка (GC), рак молочной железы (ВС), карциному поджелудочной железы (PC) и карциному пищевода. Кроме того, настоящее изобретение включает в себя устойчивые или рецидивирующие злокачественные новообразования, чей рост можно ингибировать с использованием антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению. Соответственно, примеры злокачественных опухолей, которые можно лечить с использованием антитела к PD-L1 в способах согласно настоящему изобретению на основе показаний очень широкой применимости предусмотренной в настоящем документе антu-PD-L1 иммунотерапии, включают в себя рак костей, рак кожи, рак головы или шеи, рак молочной железы, рак легких, кожную или внутриглазную злокачественную меланому, рак почки, рак матки, кастрационно-резистентный рак предстательной железы, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак анальной области, рак желудка, рак семенников, рак матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному влагалища, карциному вульвы, карциномы яичников, желудочно-кишечного тракта и молочной железы, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечников, саркому мягких тканей, рак уретры, рак пениса, хронический или острый лейкозы, включающие в себя острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, солидные опухоли у детей, лимфоцитарную лимфому, рак мочевого пузыря, рак почки или мочеточника, карциному почечной лоханки, новообразование центральной нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, опухолевый ангиогенез, опухоль спинной оси, глиому ствола мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, плоскоклеточный рак, Т-клеточную лимфому, множественную миелому, связанные с окружающей средой злокачественные опухоли, включающие в себя те, которые индуцированы асбестом, метастатические злокачественные опухоли и любые комбинации указанных злокачественных опухолей. Настоящее изобретение также применимо к лечению метастатических злокачественных опухолей.
Комбинированная терапия с антителами к PD-L1.
Дополнительно, антитела к PD-L1 могут быть объединены с иммуногенным средством, например препаратом злокачественных клеток, очищенными опухолевыми антигенами (включающими в себя рекомбинантные белки, пептиды и молекулы углеводов), антигенпрезентирующими клетками, такими как дендритные клетки, несущие ассоциированные с опухолью антигены, клетки, трансфицированные с генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины (He et al., 2004). Неограничивающие примеры опухолевых вакцин, которые могут быть использованы, включают в себя пептиды антигенов меланомы,
- 38 037351 такие как пептиды gp100, антигены MAGE, Trp-2, MARTI и/или тирозиназы, или опухолевые клетки, трансфицированные для экспрессии цитокина GM-CSF. Блокада PD-L1 может быть также эффективна в сочетании со стандартными способами лечения злокачественных опухолей, включающими в себя химиотерапевтические схемы лечения, радиацию, хирургию, гормональную депривацию и ингибиторы ангиогенеза, а также другое иммунотерапевтическое антитело (например, антитело к PD-1, к CTLA-4 или к LAG-3).
Использование антител к PD-L1.
В настоящем изобретении предусмотрено использование любого антитела к PD-L1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для ингибирования сигналов от пути PD-1/PD-L1 так, чтобы, таким образом, потенцировать эндогенный иммунный ответ у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли. В настоящем изобретении также предусмотрено использование любого антитела к PD-L1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающей нарушение взаимодействия между PD-1 и PD-L1. В настоящем изобретении предусмотрено медицинское применение любого из антител к PD-L1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению, соответствующего всем вариантам осуществления способов лечения, использующих описанное в настоящем документе антитело к PD-L1.
В настоящем изобретении также предусмотрено антитело к PD-L1 или его антигенсвязывающий участок согласно настоящему изобретению для применения в лечении субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающем потенцирование эндогенного иммунного ответа у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, путем ингибирования передачи сигналов от пути PD-1/PD-L1. В настоящем изобретении дополнительно предусмотрено антитело к PD-L1 или его антигенсвязывающий участок согласно настоящему изобретению для применения в иммунотерапии у субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, содержащей нарушение взаимодействия между PD-1 и PD-L1. Эти антитела могут быть использованы в потенцировании эндогенного иммунного ответа против или в иммунотерапии полного спектра раскрытых в настоящем документе злокачественных опухолей. Согласно предпочтительным вариантам осуществления злокачественные опухоли включают в себя MEL (например, метастатическую злокачественную меланому), RCC, плоскоклеточный NSCLC, неплоскоклеточный NSCLC, CRC, рак яичников (OV), рак желудка (GC), рак молочной железы (ВС), карциному поджелудочной железы (PC) и карциному пищевода.
Проверка иммунотерапии злокачественных опухолей с помощью блокады иммунной контрольной точки.
Важная роль клинической активности блокады иммунной контрольной точки заключается в том, что создаются значительные эндогенные иммунные ответы на опухолевые антигены, и эти ответы могут быть использованы в терапевтических целях для опосредования клинической регрессии опухоли через ингибирование контрольной точки. В самом деле, существует доказательство того, что такие ингибирующие лиганды, как PD-L1, индуцируются в ответ на иммунную атаку, механизм, называемый адаптивной устойчивостью (Gajewski et al., 2010; Taube et al., 2012). Этот потенциальный механизм иммунной устойчивости опухолей предполагает, что PD-1/PD-L1-направленная терапия может быть согласована с другими способами лечения, которые повышают эндогенный противоопухолевый иммунитет. Последующие исследования подтвердили, что пациенты продолжают демонстрировать контроль опухоли после отмены блокады пути PD-1/PD-L1 (Lipson et al., 2013). Такой контроль опухоли может отражать постоянный противоопухолевый иммунный ответ и генерацию эффективной иммунологической памяти с тем, чтобы сделать возможным устойчивый контроль роста опухоли.
Описанные в настоящем документе данные клинических испытаний антител, которые блокируют иммунорегуляторный рецептор, PD-1, а также антитела, которые блокируют один из его родственных лигандов, PD-L1, не имеют аналогов. Эти данные представляют собой крупнейший клинический опыт на сегодняшний день с направленной через путь PD-1 иммунотерапией злокачественной опухоли и первый доклад, специально описывающий безопасность, переносимость и начальную клиническую активность направленного к PD-L1- средства. Эти результаты показывают, что как анти-PD-T, так и aнтu-PD-L1 характеризуются благоприятными профилями общей безопасности и обеспечивают четкие доказательства клинической активности в различных злокачественных опухолях, включающих в себя NSCLC, опухоль, которая исторически не рассматривается как реагирующая на иммунотерапию, а также опухоли, которые, как известно, отвечают на иммунотерапию, включающие в себя MEL, RCC и OV. Таким образом, эти данные прочно проверяют путь PD-1/PD-L1 в качестве важной мишени для терапевтического вмешательства при злокачественной опухоли.
Замечательные сходства, наблюдаемые между паттернами клинической активности, полученными с моноклональными антителами к PD-1 и к PD-L1, и среди типов опухолей, анализируемых на сегодняшний день, проверяют общее значение сигнального пути PD-1/PD-L1 в опухолевой иммунной устойчивости и в качестве мишени для терапевтического вмешательства. Хотя молекулярные взаимодействия, блокируемые этими двумя антителами, не идентичны, было четко показано в настоящем документе, что, независимо от механических деталей, как антитела к PD-1, так и к PD-L1 согласно настоящему изобрете- 39 037351 нию эффективны при лечении пациентов, страдающих от большого разнообразия злокачественных опухолей.
Инфекционные заболевания.
Другие способы согласно настоящему изобретению используются для лечения пациентов, которые подвергались воздействию определенных токсинов или патогенов. Например, согласно одному аспекту настоящего изобретения предусмотрен способ лечения инфекционного заболевания у субъекта, включающий введение субъекту антитела к PD1 или к PD-L1 или его антигенсвязывающего участка согласно настоящему изобретению таким образом, что субъекта лечат от инфекционного заболевания. Предпочтительно антитело представляет собой человеческое антитело к PD-1 или PD-L1 человека (например, любое из описанных в настоящем документе человеческих антител). Альтернативно, антитело представляет собой химерное или гуманизированное антитело.
Сходно с его применением к опухолям, как обсуждалось выше, опосредованная антителом блокада PD-1 или PD-L1 может быть использована отдельно или в качестве адъюванта в сочетании с вакцинами для усиления иммунного ответа на патогены, токсины и/или сами антигены. Примеры патогенов, для которых этот терапевтический подход может быть особенно полезен, включают в себя патогены, для которых в настоящее время нет эффективной вакцины, или патогены, для которых обычные вакцины менее чем полностью эффективны. Они включают в себя без ограничения ВИЧ, гепатит (А, В, и С), грипп, герпес, лямблии, малярию, лейшманию, золотистый стафилококк, синегнойную палочку. Блокада PD-1 и/или PD-L1 особенно применима в отношении установленных инфекций патогенами, такими как ВИЧ, которые представляют измененные антигены в течение инфекции. Новые эпитопы на этих антигенах распознаются как чужеродные во время введения PD-1 или PD-L1 к человеку, таким образом вызывая сильную реакцию Т-клеток, которая не подавляется отрицательными сигналами через путь PD-1/PD-L1.
В указанных выше способах блокада PD-1 или PD-L1 может быть объединена с другими формами иммунотерапии, такими как лечение цитокинами (например, введение интерферонов, GM-CSF, G-CSF или IL-2).
Наборы.
Также в объем настоящего изобретения входят наборы, включающие в себя фармацевтические наборы, содержащие антитело к PD-1 и/или к PD-L1 согласно настоящему изобретению или комбинацию антитела к PD-1 и к CTLA-4, для использования в терапевтических целях, а также диагностические наборы, содержащие антитело к PD-L1 согласно настоящему изобретению, для анализа экспрессии мембранного PD-L1 в качестве биомаркера для скрининга пациентов для иммунотерапии или для прогнозирования эффективности иммунотерапевтического средства. Наборы, как правило, включают в себя этикетку, указывающую на предполагаемое использование содержания набора, и инструкции по применению. Термин этикетка включает в себя любой написанный или записанный материал, поставляемый на или с набором или который в противном случае входит в комплект поставки набора. Согласно некоторым вариантам осуществления фармацевтического набора антитела к PD-1 и/или к PD-L1 могут быть совместно упакованы с другими терапевтическими средствами в стандартной лекарственной форме. Согласно некоторым вариантам осуществления диагностического набора антитело к PD-L1 может быть совместно упаковано с другими реагентами для выполнения анализа для обнаружения и/или количественной оценки экспрессии PD-L1.
Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления фармацевтический набор содержит человеческое моноклональное антитело к PD-1 человека, ниволумаб. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления фармацевтический набор содержит человеческое моноклональное антитело к PD-L1 человека, BMS-936559. Согласно еще другим предпочтительным вариантам осуществления фармацевтический набор содержит человеческое моноклональное антитело к CTLA-4 человека, ипилимумаб. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления диагностический набор содержит кроличье моноклональное антитело к PD-L1 человека, 28-8, содержащий области VH и VK, чьи аминокислотные последовательности приведены в SEQ ID NO: 35 и 36, соответственно. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления диагностический набор содержит мышиное моноклональное антитело к PD-L1 человека, 5Н1 (Dong et al., 2002).
Биомаркер PD-L1 для прогнозирования анτи-PD-1 эффективности.
Особая проблема в иммунотерапии злокачественных опухолей представляет собой идентификацию основанных на механизме прогностических биомаркеров для того, чтобы сделать возможным выбор пациента и направление на процесс лечения. Описанные в приведенных ниже примерах данные показывают, что экспрессия PD-L1 на клеточной поверхности опухолей представляет собой применимый молекулярный маркер для предсказания эффективности и отбора пациентов для иммунотерапии с анти-PD-1 и, возможно, другими ингибиторами иммунных контрольных точек. В литературе существуют противоречивые сообщения о клинических последствиях PD-L1, экспрессированных в опухолях. Несколько исследований позволяют сделать вывод, что экспрессия PD-L1 в опухолях коррелирует с плохим прогнозом для пациента. См., например, Hino et al. (2010) (MEL); Hamanishi et al. (2007) (OV); Thompson et al. (2006) (RCC). Эти данные могут быть рационализированы на том основании, что взаимодействие PD-L1 на опу- 40 037351 холевых клетках и PD-1 на Т-клетках помогает отменить иммунные реакции, направленные против опухоли, приводя к иммунному уклонению от опухолеспецифических Т-клеток (Blank et al., 2005). Тем не менее, в отличие от предыдущих исследований, Gadiot et al. (2011) и Taube et al. (2012) недавно сообщили, что экспрессия PD-L1 в опухолях меланомы коррелирует с тенденцией к лучшей выживаемости. Эти, казалось бы, противоречивые данные могут отражать относительно небольшое число проанализированных пациентов, различные изученные гистологические подтипы или различные использованные методики, например использование различных антител для окрашивания PD-L1, использование замороженного против заключенного в парафин материала для IHC и обнаружение мембранного и/или цитоплазматического окрашивания PD-L1. Taube et al. (2012) отмечают, что PD-L1 представляет собой трансмембранные молекулы типа I, и предполагают что, в то время как цитоплазматическое наличие PD-L1 может представлять внутриклеточные запасы этого полипептида, которые могут быть развернуты на клеточной поверхности при соответствующей стимуляции, существует экспрессия PD-L1 на клеточной поверхности, которая биологически соответствует потенциальному биомаркеру для предсказания клинического ответа на блокаду PD-1. См. также, Brahmer et al. (2010), которые описывают предварительные доказательства, полученные на небольшом размере выборки из всего 9 пациентов, корреляции между мембранной экспрессией PD-L1 и анти-PD-1 эффективностью. Данные, описанные в приведенных ниже примерах, при использовании мембранной экспрессии PD-L1 в качестве биомаркера для анти-PD-1 эффективности, которая была получена из анализа гораздо большего образца, обосновывают гипотезу, что экспрессия PDL1 может быть использована в качестве биомаркера для прогнозирования анти-PD-1 клинического ответа и для скрининга пациентов для идентификации подходящих кандидатов для иммунотерапии с антителом к PD-1. Хотя полезность этого биомаркера была продемонстрирована для скрининга пациентов или предсказания клинического ответа на анти-PD-1 иммунотерапию, экспрессия PD-L1 может также быть потенциально применима в более широком смысле в качестве компаньона биомаркера для других типов ингибиторов ингибиторных иммунорегуляторов. В частности, экспрессию мембранных PD-L1 анализировали с использованием протокола автоматизированного IHC и кроличьего антитела к hPD-L1. Поразительно, в исходном наборе анализируемых данных (см. пример 8) ни один из пациентов с негативными в отношении PD-L1 на клеточной поверхности опухолями (MEL, NSCLC, CRC, RCC и CRPC) не испытывал OR после лечения с антителом к PD-1, ниволумабом. В отличие от этого, экспрессия PD-L1 на клеточной поверхности на опухолевых клетках в биопсии до воздействия может быть связана с повышенной частотой OR среди пациентов, получавших ниволумаб. В то время как экспрессия опухолевыми клетками PD-L1 может быть вызвана конститутивными онкогенными путями, она может также отражать адаптивную иммунную устойчивость в ответ на эндогенный противоопухолевый иммунный ответ, часть воспалительной реакции хозяина, которая может оставаться под контролем, если не развязана блокадой пути PD-1/PD-L1 (Taube et al., 2012). Эта новая концепция адаптивной иммунной устойчивости в иммунологии злокачественной опухоли предполагает, что такие ингибирующие лиганды, как PD-L1, индуцируются в ответ на иммунную атаку (Gajewski et al., 2010; Taube et al., 2012). Основное следствие клинической активности блокады иммунной контрольной точки, как описано в настоящем документе, представляет собой то, что возникают значительные эндогенные иммунные ответы на опухолевые антигены, и эти ответы могут быть использованы терапевтически для опосредования клинической опухолевой регрессии через ингибирование контрольной точки. Этот потенциальный механизм иммунной резистентности опухолями предполагает, что PD-1/PD-L1-направленная терапия может быть согласована с другими способами лечения, которые повышают эндогенный противоопухолевый иммунитет.
Анализ экспрессии PD-L1 на клеточной поверхности с помощью автоматизированной IHC.
Как описано в примерах, способ автоматизированной IHC был разработан для анализа экспрессии PD-L1 на поверхности клеток в образцах ткани FFPE. В настоящем изобретении предусмотрены способы обнаружения присутствия антигена PD-L1 человека в образце исследуемой ткани или количественного определения содержания антигена PD-L1 человека или доли клеток в образце, которые экспрессируют антиген, эти способы включают контактирование исследуемого образца и образца отрицательного контроля с моноклональным антителом, которое специфически связывается с PD-L1 человека в условиях, позволяющих образование комплекса между антителом или его участком и PD-L1 человека. Предпочтительно исследуемые и контрольные образцы тканей представляют собой образцы FFPE. Образование комплекса затем обнаруживается, причем разница в образовании комплекса между исследуемым образцом и образцом отрицательного контроля свидетельствует о присутствии антигена PD-L1 человека в образце. Используются различные способы для количественной оценки экспрессии PD-L1.
Согласно конкретному варианту осуществления способ автоматизированной IHC включает (a) депарафинизацию и регидратацию срезов ткани, установленных в автостейнер; (b) извлечение антигена с использованием decloaking chamber и буфера с pH 6, нагретого до 110°С в течение 10 мин; (с) помещение реагентов на автостейнер и (d) запуск автостейнера для включения стадий нейтрализации эндогенной пероксидазы в образце ткани; блокирования неспецифических связывающих белки сайтов на слайдах; инкубации слайдов с первичным антителом; инкубации с вторичным блокирующим средством; инкубации с полимером NovoLink; добавления субстрата хромогена и развития и контрастного окрашивания гематоксилином. Для оценки экспрессии PD-L1 в образцах опухолевой ткани патолог изучает ряд
- 41 037351 опухолевых клеток мембранными PD-L1' в каждом поле под микроскопом и мысленно оценивает процент клеток, которые позитивны, затем усредняет их для того, чтобы прийти к окончательному проценту. Различные интенсивности окрашивания определяются как 0/отрицательное, 1+/слабое, 2+/умеренное и 3+/сильное. Как правило, значения процентов сначала присваивают 0 и 3+ участкам, а затем рассматриваются промежуточные интенсивности 1+ и 2+. Для сильно неоднородных тканей образец разделяют на зоны, и каждая зона оценивается отдельно, а затем объединяется в единый набор процентных значений. Процент отрицательных и положительных клеток для различных интенсивностей окрашивания определяется из каждой области, и задается среднее значение для каждой зоны. Итоговое процентное значение придается ткани для каждой категории интенсивности окрашивания: отрицательное, 1+, 2+ и 3+. Сумма всех интенсивностей окрашивания должна быть 100%.
Окрашивание также оценивали в проникающих в опухоли воспалительных клетках, таких как макрофаги и лимфоциты. В большинстве случаев макрофаги служат в качестве внутреннего положительного контроля, поскольку окрашивание наблюдается в большом количестве макрофагов. Хотя и не требуется окрашивание с интенсивностью 3+, отсутствие окрашивания макрофагов должно быть принято во внимание, чтобы исключить любой технический сбой. Макрофаги и лимфоциты оценивают по окрашиванию плазматической мембраны, и только записанные для всех образцов как положительные и отрицательные для каждой категории клеток. Окрашивание также характеризуется в соответствии с внешним/внутренним обозначением опухолевых иммунных клеток. Внутренние означают иммунные клетки, которые находятся в пределах опухолевой ткани и/или на границах опухолевой области, не будучи физически интеркалированными среди опухолевых клеток. Внешние означают, что нет никакой физической ассоциации с опухолью, иммунные клетки, обнаруженные на периферии, связаны с соединительной или любой связанной соседней тканью.
Согласно некоторым вариантам осуществления этих способов оценок образцы оцениваются двумя специалистами, работающими независимо друг от друга, и баллы затем объединяют. Согласно некоторым другим вариантам осуществления идентификация положительных и отрицательных клеток оценивается с использованием соответствующего программного обеспечения.
Гистологический счет используется как более количественная мера данных IHC. Гистологический счет рассчитывается следующим образом:
Гистологический счет = [(% опухолей х 1 (низкая интенсивность)) + (% опухолей х 2 (средняя интенсивность)) + (% опухолей х 3 (высокая интенсивность)].
Для определения гистологического счета патолог оценивает процент окрашенных клеток в каждой категории интенсивности в образце. Поскольку экспрессия большинства биомаркеров представляет собой гетерогенную, гистологический счет представляет собой верное представление всей экспрессии. Окончательный гистологический счет находится в диапазоне от 0 (отсутствие экспрессии) до 300 (максимум экспрессии).
Альтернативный способ количественного определения экспрессии PD-L1 в исследуемом образце ткани IHC заключается в определении скорректированной оценки воспаления (AIS), определяемой как оценка плотности воспаления, умноженная на процент экспрессии PD-L1 проникающими в опухоль воспалительными клетками (Taube et al., 2012).
Иммунотерапии злокачественной опухоли с анти-PD-1, содержащей стадию отбора пациентов.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ для иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) выбор субъекта, который представляет собой подходящего кандидата для иммунотерапии, например введения антитела исследуемого образца ткани, полученного к PD-1, выбор, включающий (i) необязательное обеспечение от пациента со злокачественной опухолью ткани, образец исследуемой ткани, содержащей опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки, (ii) оценку доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, и (iii) выбор субъекта в качестве подходящего кандидата на основе оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, превышает заданный пороговый уровень; и (b) введение выбранному субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует передачу сигнала от ингибиторного иммунорегулятора, например, антитела к PD-1. Существует доказательство того, что экспрессия мембранных PD-L1 представляет собой заменитель эндогенного противоопухолевого иммунного ответа, который представляет собой часть воспалительной реакции хозяина (Gajewski et al., 2010; Taube et al., 2012). Соответственно, экспрессия PD-L1 на клеточной поверхности в опухолях и/или воспалительных клетках в опухолевом микроокружении может быть маркером не только для выбора пациентов со злокачественной опухолью, которые будут получать выгоду от лечения с антителом к PD-1, но также и для лечения с антителом к PD-L1, а также воздействия нацеливающих ингибирующих иммунорегуляторных путей, отличных от пути PD-1/PD-L1. Например, экспрессия на клеточной поверхности PD-L1 в опухолях и/или проникающих в опухоль воспалительных клетках может быть использована в качестве маркера для идентификации или выбора подходящих пациентов со злокачественной опухолью, которые будут получать пользу от иммунотерапии со средствами, включающими в себя антитела, которые нацеленно
- 42 037351 воздействуют и нарушают или ингибируют передачу сигналов от иммунных контрольных точек, таких как PD-L1, антиген-4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA-4), аттенюатор В- и Т-лимфоцитов (BTLA), домен-3 муцина и иммуноглобулина Т-клеток (TIM-3), ген-3 активации лимфоцитов (LAG-3), киллерный иммуноглобулин-подобный рецептор (KIR), лектин-подобный рецептор G1 клеток-киллеров (KLRG-1), клеточный рецептор 2В4 натуральных киллеров (CD244) и CD160 (Pardoll, 2012; Baitsch et al., 2012). Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления ингибиторный иммунорегулятор представляет собой компонент сигнального пути PD-1/PD-L1. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления ингибиторный иммунорегулятор представляет собой антитело к PD-1 согласно настоящему изобретению. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления ингибиторный иммунорегулятор представляет собой антитело к PD-L1 согласно настоящему изобретению.
Если какие-либо способы иммунотерапии, включающие анализ экспрессии PD-L1, т.е. использующие биомаркер экспрессии PD-L1, описаны ниже как включающие выбор пациента, который представляет собой или не представляет собой подходящего для анти-PD-1 иммунотерапии или как включающие введение антитела к PD-1 для целей иммунотерапии, следует понимать, что эти способы применяются в более широком смысле к выбору пациента, который представляет собой или не представляет собой подходящего для иммунотерапии или для введения ингибитора ингибиторного иммунорегулятора (например, CTLA-4, BTLA, TIM3, LAG3 или KIR) или их компонента или лиганда. Кроме того, в любом из способов, включающих измерение экспрессии PD-L1 в исследуемом образце ткани, следует понимать, что стадия, включающая обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента, представляет собой необязательную стадию. Т.е. согласно некоторым вариантам осуществления способ включает в себя эту стадию и согласно другим вариантам осуществления эта стадия не включена в способ. Следует также понимать, что согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления стадия оценки для идентификации или определения количества или части клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, выполняется с помощью преобразующего способа анализа экспрессии PD-L1, например, путем выполнения полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) или анализа IHC. Согласно некоторым другим вариантам осуществления преобразовательная стадия не участвует и экспрессия PD-L1 оценивается, например, путем обзора отчета о результатах испытаний из лаборатории. Согласно некоторым вариантам осуществления стадии способов, включая в себя оценку экспрессии PD-L1, обеспечивают промежуточный результат, который может быть предоставлен врачом или другим медицинским работником для использования при выборе подходящего кандидата для иммунотерапии и/или введения иммунотерапевтического средства пациенту. Согласно некоторым вариантам осуществления стадии, которые обеспечивают промежуточный результат, могут быть выполнены врачом или лицом, действующим под руководством врача. Согласно другим вариантам осуществления эти стадии выполняются в независимой лаборатории или независимым лицом, таким как лаборант.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) выбор субъекта, который не подходит для лечения со средством, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например иммунотерапия с антителом к PD-1, выбор, включающий (i) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, образец исследуемой ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки, (ii) оценку доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, и (iii) выбор субъекта в качестве не подходящего для иммунотерапии с ингибитором ингибиторного иммунорегулятора, например антитела к PD-1, на основе оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, меньше, чем заданный пороговый уровень; и (b) введение стандартного лекарственного средства, отличного от ингибитора ингибиторного иммунорегулятора, например, антитела к PD1, выбранному субъекту.
Измерение экспрессии PD-L1.
Согласно некоторым вариантам осуществления любого из существующих способов долю клеток, которые экспрессируют PD-L1, оценивают путем выполнения анализа для определения наличия РНК PD-L1. Согласно другим вариантам осуществления наличие РНК PD-L1 определяется с помощью ОТ-ПЦР, гибридизации in situ или защиты РНКазы. Согласно другим вариантам осуществления соотношение клеток, которые экспрессируют PD-L1, оценивают путем выполнения анализа для определения наличия полипептида PD-L1. Согласно дополнительным вариантам осуществления наличие полипептида PD-L1 определяется с помощью иммуногистохимии (IHC), иммуноферментного анализа (ELISA), визуализации in vivo или проточной цитометрии. Согласно предпочтительным вариантам осуществления экспрессию PD-L1 анализировали с помощью IHC. Проточная цитометрия может быть особенно подходящей для анализа экспрессии PD-L1 в клетках гематологических опухолей. Согласно предпочтительным вариантам осуществления всех этих способов экспрессию PD-L1 на клеточной поверхности анализировали с использованием, например, IHC или визуализации in vivo.
Способы визуализации позволили обеспечить важные инструменты в области научных исследований и лечения злокачественных опухолей. Последние открытия в системах молекулярной визуализации,
- 43 037351 включающей в себя позитронно-эмиссионную томографию (PET), однофотонную эмиссионную компьютерную томографию (SPECT), визуализацию флуоресценцией отражения (FRI), опосредованную флуоресценцией томографию (FMT), биолюминесцентную визуализацию (BLI), лазерную сканирующую конфокальную микроскопию (LSCM) и многофотонную микроскопию (МРМ), скорее всего, будут предвещать даже более широкое использование этих техник в исследовании злокачественных опухолей. Некоторые из этих систем молекулярной визуализации позволяют врачам не только увидеть, где опухоль находится в организме, но и визуализировать экспрессию и активность специфических молекул, клеток и биологических процессов, которые влияют на поведение и/или реакцию опухоли на терапевтические лекарственные средства (Condeelis and Weissleder, 2010). Специфичность к антителам в сочетании с чувствительностью и разрешением PET делает визуализацию immunoPET особенно привлекательной для мониторинга и анализа экспрессии антигенов в образцах тканей (McCabe and Wu, 2010; Olafsen et al., 2010). Согласно некоторым вариантам осуществления любого из существующих способов экспрессию PD-L1 анализируют с помощью визуализации immunoPET.
Согласно некоторым вариантам осуществления любого из существующих способов долю клеток в образце исследуемой ткани, которая экспрессирует PD-L1, оценивают путем выполнения анализа для определения наличия полипептида PD-L1 на поверхности клеток в исследуемом образце ткани. Согласно некоторым вариантам осуществления исследуемый образец ткани представляет собой образец ткани FFPE. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления наличие полипептида PD-L1 определяется с помощью анализа IHC. Согласно дополнительным вариантам осуществления анализ IHC осуществляется с использованием автоматизированного процесса. Согласно дополнительным вариантам осуществления анализ IHC выполняется с использованием моноклонального антитела к PD-L1 для связывания с полипептидом PD-L1.
Антитела, которые специфически связываются с экспрессированными на клеточной поверхности PD-L1 в тканях FFPE.
Антитело может связываться с антигеном в свежих тканях, но полностью не узнает антиген в образце FFPE ткани. Это явление, хорошо известное в настоящей области техники, как полагают, обусловлено главным образом внутри- и межмолекулярным сшиванием полипептидов, индуцированным фиксацией формалином, которая изменяет эпитоп, распознаваемый антителом (Sompuram et al., 2006). Кроме того, несколько факторов, как известно, влияют на окрашивание FFPE ткани, в том числе переменное время фиксации, недостаточный период фиксации, различия в используемых фиксаторах, обработке ткани, клоне антитела и разбавлении, поиск антигена, системы обнаружения и интерпретации результатов, использующих различные пороговые точки, представляют собой важные переменные, которые могут повлиять на антигенность ткани и измерения IHC (Bordeaux et al., 2010). В частности, отсутствие антител к PD-L1 человека, которые окрашивают PD-L1 в FFPE образцах, было отмечено в настоящей области техники (Hamanishi et al., 2007). Taube et al. (2012) и Gadiot et al. (2011) также сообщили о трудностях в идентификации антител к PD-L1, которые специфически связываются с PD-L1 в FFPE тканях, и о непредсказуемых результатах исследований на этих же антителах. Собственный анализ авторов настоящего изобретения пяти серийно выпускаемых антител к HPD-L1 показывает, что эти антитела не различают FFPE клетки, экспрессирующие PD-L1, от клеток, которые не экспрессируют PD-L1 (пример 9, табл. 7). Таким образом, противоречивые результаты, представленные различными группами по сложностям экспрессии PD-L1 для прогнозирования опухоли, могут, в частности, отражать дифференциальные способности антител к PD-L1, используемые для обнаружения полипептида PD-L1 в образцах тканей FFPE. Соответственно, для того, чтобы обнаружить hPD-L1 на клеточной поверхности с использованием анализа IHC на FFPE тканях, существует потребность в антителах к hPD-L1, которые специфически связываются с экспрессированными на клеточной поверхности PD-L1 в образцах тканей FFPE. В настоящем изобретении предусмотрено моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок, который специфически связывается с экспрессированным на клеточной поверхности антигеном PD-L1 в образце FFPE ткани. Согласно предпочтительным вариантам осуществления моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок не связывается с цитоплазматическим полипептидом PD-L1 в образце ткани FFPE или проявляет очень низкий уровень фонового связывания. Согласно некоторым другим вариантам осуществления наличие или отсутствие специфического связывания с экспрессированным на клеточной поверхности или цитоплазматическим полипептидом PD-L1 обнаруживается с помощью иммуногистохимического окрашивания. Согласно некоторым предпочтительным аспектам настоящего изобретения моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок представляет собой кроличье антитело или его участок. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления моноклональное антитело представляет собой кроличье моноклональное антитело, обозначенное 28-8, 28-1, 28-12, 29-8 или 20-12. Согласно более предпочтительным вариантам осуществления моноклональное антитело представляет собой кроличье моноклональное антитело, обозначенное 28-8 или его антигенсвязывающий участок. Согласно другим вариантам осуществления моноклональное антитело представляет собой антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательно связанные аминокислоты, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 35, и вариабельную область легкой цепи (VK), содержащую последовательно связанные аминокислоты, характери- 44 037351 зующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 36. Согласно другим вариантам осуществления моноклональное антитело содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3 в VH, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 35, и домены CDR1, CDR2 и CDR3 в VK, характеризующиеся последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 36.
В настоящей области техники известно, что кроличьи антитела характеризуются определенными преимуществами по сравнению с мышиными антителами. Например, кроличьи антитела, как правило, проявляют более разнообразное узнавание эпитопов, улучшенный иммунный ответ на небольшие эпитопы и более высокую специфичность и аффинность по сравнению с мышиными антителами (см., например, Fischer et al., 2008; Cheang et al., 2006; Rossi et al., 2005). Например, кроличье более низкое иммунное доминирование и больший репертуар В-клеток приводят к большему распознаванию эпитопов по сравнению с мышиными антителами. Кроме того, высокая специфичность и распознавание новых эпитопов кроличьими антителами приводит к успеху с распознаванием посттрансляционных модификаций (Epitomics, 2013). Кроме того, многие белковые мишени, относящиеся к передаче сигнала и заболеванию, представляют собой высококонсервативные между мышами, крысами и человеком и, следовательно, могут быть распознаны в качестве аутоантигенов мышью или крысой хозяином, что делает их менее иммуногенными. Эту проблему избегают созданием антител у кроликов. Кроме того, в приложениях, в которых требуются два антиген-специфических антитела, удобнее работать с антителами, поступающими от двух разных видов. Так, например, легче для мультиплексирования кроличье антитело, такое как 28-8 с другим антителом (скорее всего, мышиным антителом, поскольку лучшие иммунные маркерные антитела представляют собой мышиные антитела), которые могут отмечать иммунные клетки, которые также экспрессируют PD-L1 (например, макрофаги и лимфоциты). Соответственно, кроличьи моноклональные антитела к hPD-L1, например 28-8, особенно подходят для анализов IHC для определения экспрессированного на поверхности PD-L1 в образцах тканей FFPE и потенциально характеризуются различными преимуществами, по сравнению с мышиными антителами, такими как 5Н1.
Как описано в примере 9, большое количество (185) множественных клонов антител как от кроличьей, так и мышиной иммунизации подвергали скринингу, и только десять кроличьих множественных клонов антител, но ни один мышиный множественный клон антитела специфически не обнаруживал мембранную форму HPD-L1. После дальнейшего экстенсивного скрининга с помощью нескольких кругов IHC 15 очищенных кроличьих субклонов отбирали на основе их специфичности и интенсивности окрашивания (см. табл. 5). После дальнейшей характеристики антител для определения их аффинности связывания и перекрестной конкуренции с помощью поверхностного плазмонного резонанса, а также скрининга с помощью IHC на тканях FFPE моноклональное антитело 28-8 был выбрано в качестве антитела с наилучшим сочетанием связывания с мембранным PDF-L1 с высокой аффинностью и специфичностью и низким фоновым окрашиванием.
Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок перекрестно конкурирует с мышиным моноклональным антителом 5Н1 за связывание с PD-L1, что указывает на то, что эти антитела связываются с той же областью эпитопа PD-L1. Согласно некоторым другим аспектам моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок перекрестно не конкурирует с мышиным моноклональным антителом 5Н1 за связывание с PD-L1, указывая на то, что они не связываются с той же областью эпитопа PD-L1.
В настоящем изобретении также предусмотрены нуклеиновые кислоты, кодирующие все кроличьи антитела к hPD-L1 или их участки, раскрытые в настоящем документе.
Иммунотерапевтические способы, включающие измерение экспрессии PD-L1 на клеточной поверхности.
Доступность кроличьих антител, которые связываются с высокой аффинностью специфически с мембранными PD-L1 в образцах тканей FFPE, облегчает способы, включающие стадию обнаружения полипептида PD-L1 на поверхности клеток в образцах ткани FFPE. Соответственно, в настоящем изобретении также предусмотрен способ для иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, при этом способ включает (a) выбор субъекта, который представляет собой подходящего кандидата для иммунотерапии, выбор, включающий (i) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани FFPE, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (ii) оценку доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности с помощью IHC с использованием кроличьего антитела к PD-L1 человека, например моноклонального антитела 28-8, связываться с PD-L1; и (iii) выбор субъекта в качестве подходящего кандидата на основе оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, превышает заданный пороговый уровень; и (b) введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, выбранному субъекту. Согласно некоторым вариантам осуществления способов, использующих IHC для анализа экспрессии PD-L1 в тканях FFPE, используют автоматизированный IHC анализ.
Автоматизированный процесс IHC осуществляется на автостейнере и содержит:
(a) депарафинизацию образца FFPE с ксилолом и регидратацию образца;
- 45 037351 (b) получение антигена с использованием decloaking chamber;
(с) блокирование неспецифических белковых сайтов связывания путем инкубации с белковым блоком;
(d) инкубирование образца с первичным антителом к PD-L1;
(е) добавление полимерного конъюгированного с пероксидазой хрена (HRP) вторичного антитела;
(f) определение связанного вторичного антитела, содержащего окрашивание с хромогеном 3,3'-диаминобензидина (DAB); и/или (g) контрастное окрашивание гематоксилином.
Этот автоматизированный процесс IHC был оптимизирован за счет минимизации количества стадий, оптимизации времени инкубации и выбора первичных антител, блокирования и обнаружения реагентов, которые производят сильное специфическое окрашивание с низким уровнем фонового окрашивания. Согласно предпочтительным вариантам осуществления настоящего автоматизированного IHC анализа первичное антитело к PD-L1 представляет собой кроличье моноклональное антитело 28-8 или мышиное моноклональное антитело 5Н1. Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения этот анализ IHC и любой другой описанный в настоящем документе анализ IHC для измерения экспрессии PD-L1 могут быть использованы как часть способа иммунотерапии. Согласно другим вариантам осуществления любой из описанных в настоящем документе способов IHC используется независимо от любого терапевтического процесса, требующего введения терапевтического средства, т.е. исключительно в качестве диагностического способа для анализа экспрессии PD-L1. Согласно некоторым вариантам осуществления любого из описанных в настоящем документе способов иммунотерапии вводимое выбранному субъекту антитело представляет собой любое антитело к PD-1 или к PD-L1 или его антигенсвязывающий участок согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления субъект представляет собой человека. Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления антитело представляет собой человеческое антитело или его антигенсвязывающий участок. Согласно более предпочтительным вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб и антитело к PD-L1 представляет собой BMS-936559. Согласно некоторым другим вариантам осуществления антитело к PD-1 представляет собой антитело или его антигенсвязывающий участок, который перекрестно конкурирует с ниволумабом за связывание с PD-1, и антитело к PD-L1 представляет собой антитело или его антигенсвязывающий участок, который перекрестно конкурирует с BMS-936559 для связывания с PD-L1. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления подлежащую лечению злокачественную опухоль выбирают из группы, состоящей из MEL, RCC, плоскоклеточного NSCLC, неплоскоклеточного NSCLC, CRC, кастрационно-резистентного рака предстательной железы CRPC, HCC, плоскоклеточной карциномы головы и шеи, карциномы пищевода, яичников, желудочно-кишечного тракта и молочной железы и гематологических злокачественных новообразований.
Согласно некоторым вариантам осуществления описанных способов, заданное пороговое значение основано на доле (а) опухолевых клеток, (b) проникающих в опухоль воспалительных клеток, (c) определенных проникающих в опухоль воспалительных клеток, например TIL или макрофагов, или (d) комбинации опухолевых клеток и проникающих в опухоль воспалительных клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности.
Согласно некоторым вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,001% опухолевых клеток, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC. Согласно другим вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,01%, предпочтительно по меньшей мере 0,1%, более предпочтительно по меньшей мере 1% опухолевых клеток, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно некоторым вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 5% опухолевых клеток, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно некоторым вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,01%, по меньшей мере 0,1%, по меньшей мере 1% или по меньшей мере 5% опухолевых клеток, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC, и/или единственную проникающую в опухоль воспалительную клетку, экспрессирующую мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно некоторым другим вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,01%, по меньшей мере 0,1%, по меньшей мере 1% или по меньшей мере 5% проникающих в опухоль воспалительных клеток, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно некоторым другим вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,01%, по меньшей мере 0,1%, по меньшей мере 1% или по меньшей мере 5% проникающих в опухоль лимфоцитов, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно некоторым другим вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере 0,01%, по меньшей мере 0,1%, по меньшей мере 1% или по меньшей мере 5% проникающих в опухоль макрофагов, экспрессирующих мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC.
Согласно еще другим вариантам осуществления заданный порог составляет по меньшей мере единственную опухолевую клетку или единственную проникающую в опухоль воспалительную клетку, экс- 46 037351 прессирующую мембранные PD-L1, как определено с помощью IHC. Предпочтительно экспрессию
PD-L1 анализировали с помощью автоматизированной IHC с использованием моноклонального антитела
28-8 или 5Н1 в качестве первичного антитела.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) скрининг множества субъектов для идентификации субъекта, который представляет собой не подходящего кандидата для иммунотерапии, включающей введение средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, субъекту, скрининг, включающий (i) необязательное обеспечение исследуемых образцов тканей от множества субъектов, исследуемые образцы тканей, содержащие опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (ii) оценку доли клеток в исследуемых образцах тканей, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; и (iii) выбор субъекта в качестве кандидата, который не подходит для иммунотерапии, основанный на оценке того, что доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности в исследуемом образце ткани субъекта, ниже заданного порогового уровня; и (b) введение стандартных лекарственных средств, отличных от средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, выбранному субъекту.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) скрининг множества субъектов для идентификации субъекта, который представляет собой подходящего кандидата для иммунотерапии, скрининг, включающий (i) необязательное обеспечение исследуемых образцов тканей от множества субъектов, исследуемые образцы тканей, содержащие опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (ii) оценку доли клеток в исследуемых образцах тканей, которые экспрессируют PD-L1 на поверхности клеток; и (iii) выбор субъекта в качестве кандидата, который подходит для иммунотерапии со средством, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антителом к PD-L1, основанный на оценке того, что доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности в образце исследуемой ткани субъекта, превышает заданный пороговый уровень; и (b) введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество указанного средства выбранному субъекту.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) скрининг множества субъектов для идентификации субъекта, который представляет собой подходящего кандидата для лечения, скрининг, включающий (i) необязательное обеспечение исследуемых образцов тканей от множества субъектов, исследуемые образцы тканей, содержащие опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (ii) оценку доли клеток в исследуемых образцах тканей, которые экспрессируют PD-L1 на поверхности клеток, причем субъекта идентифицируют как подходящего кандидата для иммунотерапии с антителом к PD-1, если доля клеток в образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, превышает заданный пороговый уровень, и субъекта идентифицируют в качестве кандидата, который представляет собой не подходящего кандидата для иммунотерапии с антителом к PD-1, если доля клеток в образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, ниже заданного порогового уровня; и (b) введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, субъекту, идентифицированному в качестве подходящего кандидата для иммунотерапии с антителом к PD-1; или (с) введение стандартного лекарственного средства, отличного от указанного средства, субъекту, идентифицированному в качестве не подходящего кандидата для иммунотерапии с антителом к PD-1.
Один аспект настоящего изобретения представляет собой способ для иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, при этом способ включает (a) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) определение того, что доля клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, выше заданного порогового уровня; и (с) на основе этого определения введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, субъекту.
Другой аспект настоящего изобретения представляет собой способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) необязательное получение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) определение того, что часть клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, ниже заданного порогового уровня; и (с) на основе этого определения введение стандартного лекарственного средства, отличного от средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, выбранному субъекту.
Еще один аспект настоящего изобретения представляет собой способ для иммунотерапии субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, при этом способ включает (a) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки;
- 47 037351 (b) определение доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; (с) выбор средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, в качестве лечения для субъекта, основываясь на том, что антитело к PD-1 эффективно у пациентов, чей образец исследуемой ткани содержит долю клеток выше заданного порогового уровня, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; и (d) введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество указанного средства субъекту.
Согласно другому варианту осуществления в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, при этом способ включает (a) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) определение доли клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; (c) отбор стандартного лекарственного средства, отличного от средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитела к PD-1, в качестве лечения для пациента, основываясь на признании того, что указанное средство неэффективно у пациентов, у которых доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на поверхности клеток в исследуемом образце ткани, ниже заданного порогового уровня; и (d) введение стандартного лекарственного средства субъекту.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ выбора иммунотерапии для субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (a) анализ клеток в исследуемом образце ткани, содержащем опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки, чтобы оценить долю клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1; и (b) на основе оценки того, что часть клеток, которые экспрессируют мембранные PD-L1, выше заданного порогового уровня, выбор иммунотерапии, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитело к PD-1, для субъекта.
Изобретение дополнительно включает способ выбора лечения для субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий (а) анализ клеток в исследуемом образце ткани, содержащем опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки, чтобы оценить долю клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют PD-L1; и (b) на основе оценки того, что часть клеток, которые экспрессируют мембранные PD-L1, ниже заданного порогового уровня, выбор стандартного лекарственного средства, отличного от средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитело к PD-1, для субъекта.
Кроме того, в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий введение субъекту композиции, содержащей терапевтически эффективное количество средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитело к PD-1, субъект был отобран на основании того, что доля клеток в исследуемом образце ткани от субъекта, которые экспрессируют PD-L1, определяется как превышающая заданный пороговый уровень, причем исследуемый образец ткани содержит опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительных клеток. В настоящем изобретении также предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественной опухоли, включающий введение субъекту стандартного лекарственного средства, отличного от средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например, антитело к PD-1, субъект был отобран на основании того, что доля клеток в исследуемом образце ткани от субъекта, которые экспрессируют PD-L1, определяется как ниже заданного порогового уровня, причем исследуемый образец ткани содержит опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительных клеток.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ для выбора пациента со злокачественной опухолью для иммунотерапии со средством, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например, антитело к PD-1, включающий (a) необязательное получение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) анализ исследуемого образца ткани для определения в нем доли клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; (с) сравнение доли клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, с заданной пороговой долей; и (d) выбор пациента для иммунотерапии на основании оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани, которые экспрессируют поверхностные PD-L1, выше заданного порогового уровня.
В любом из описанных в настоящем документе способов, включающих стадию оценки экспрессии PD-L1, исследуемый образец ткани может представлять собой образец ткани FFPE, и полипептид PD-L1 на поверхности клеток обнаруживается с помощью IHC с использованием антитела к PD-L1, например моноклонального антитела 28-8 или 5Н1.
Кроме того, в любом способе, в котором иммунотерапию выбирают или вводят на основании оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани от субъекта экспрессирует PD-L1 на уровне выше заданного порогового уровня, следует, что может быть выполнен дополнительный способ лечения, в котором стандартное лечение, отличное от иммунотерапии, выбирают или вводят на основании оценки того, что доля клеток в исследуемом образце ткани от субъекта экспрессирует PD-L1 на уровне ниже заданного порогового уровня.
- 48 037351
В настоящем изобретении также предусмотрен способ для прогнозирования терапевтической эффективности средства, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитело к PD-1, для лечения пациента со злокачественной опухолью, включающий (a) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) анализ исследуемого образца ткани для определения в нем доли клеток, которые экспрессируют PDL1 на клеточной поверхности; (с) сравнение доли клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, с заданным пороговым значением и (d) прогнозирование терапевтической эффективности указанного средства, причем если доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, превышает пороговую долю, то средство, по прогнозам, будет эффективным в лечении пациента, и причем если доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, ниже пороговой доли, то средство, по прогнозам, не будет эффективным при лечении пациента.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ для определения иммунотерапевтической схемы лечения, содержащей средство, которое ингибирует ингибиторный иммунорегулятор, например антитело к PD-1, для лечения пациента со злокачественной опухолью, включающий (a) необязательное обеспечение исследуемого образца ткани, полученного от пациента со злокачественной опухолью ткани, исследуемый образец ткани, содержащий опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки; (b) анализ исследуемого образца ткани для определения в нем доли клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности; (с) сравнение доли клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, с заданным пороговым значением и (d) определение иммунотерапевтической схемы лечения, содержащей указанное средство на основании определения того, что доля клеток, которые экспрессируют PD-L1 на клеточной поверхности, превышает заданную пороговую долю.
Стандартные лекарственные средства.
Некоторые из описанных в настоящем документе способов лечения включают введение стандартного лекарственного средства пациенту. Используемое в настоящем документе терапевтическое средство стандартного лечения представляет собой процесс лечения, включающее в себя лекарственное средство или комбинацию лекарственных средств, лучевой терапии (PT), хирургии или другого медицинского вмешательства, которое признано врачами как необходимое, принятое и/или широко используемое для определенного типа пациента заболевания или клинического обстоятельства. Стандартные терапии для различных типов злокачественных опухолей хорошо известны специалистам в настоящей области техники. Например, Национальная всеобщая онкологическая сеть (NCCN), союз 21 крупного онкологического центра в США, публикует руководство по клинической практике в онкологии NCCN (NCCN GUIDELINES®), которое обеспечивает подробную информацию на сегодняшний день по терапевтическим средствам стандартного лечения для широкого спектра злокачественных опухолей (см. NCCN GUIDELINES®, 2013). В качестве примера стандартное лечение MEL, RCC и NSCLC приведено ниже.
Меланома.
MEL представляет собой злокачественную опухоль меланоцитов, меланин-продуцирующих клеток, находящихся преимущественно в коже. Хотя реже встречающийся, чем другие виды рака кожи, он представляет собой самый опасный из злокачественных опухолей кожи, если не диагностирован на ранней стадии, и вызывает большинство (75%) случаев смерти от рака кожи. Заболеваемость MEL растет во всем мире в кавказских популяциях, особенно там, где народы с низким содержанием пигментации кожи получают чрезмерное воздействие ультрафиолетовым светом от солнца. В Европе показатель заболеваемости составляет <10-20 на 100000 населения; в США 20-30 на 100000 и в Австралии, где наблюдается самый высокий уровень заболеваемости, 50-60 на 100000 (Garbe et al., 2012). На MEL приходится приблизительно 5% всех новых случаев злокачественных опухолей в Соединенных Штатах Америки, и заболеваемость продолжает расти почти на 3% в год, это приводит к 76690 новых случаев в США в 2013 году с 9480, связанными со смертельным исходом (Siegel et al. (2013)).
Для in situ (стадия 0) или ранней стадии MEL (стадии I-II) хирургическое иссечение представляет собой первичное лечение. В целом, прогноз представляет собой отличный для пациентов с локализованным заболеванием и опухолями, составляющими 1,0 мм или менее в толщину, с 5-летней выживаемостью, составляющей более чем 90% (NCCN GUIDELINES®, 2013 - меланома). Там, где хирургическое иссечение не представляется возможным для in situ меланомы из-за сопутствующих заболеваний или косметически чувствительной локализации опухоли, местный имиквимод и лучевая терапия представляют собой лечение, особенно для меланомы типа злокачественного лентиго. Химиотерапевтические средства для лечения MEL включают в себя дакарбазин, темозоломид и иматиниб для меланомы с мутацией c-KIT, высокие дозы интерлейкина-2 и паклитаксел с или без карбоплатины. Тем не менее эти процедуры имеют слабый успех с показателем отклика ниже 20% в ситуации первой линии (1L) и второй линии (2L).
Для пациентов с локализованными меланомами больше чем 1,0 мм в толщину выживаемость колеблется от 50-90%. Вероятность вовлечения региональных лимфоузлов увеличивается с увеличением толщины опухоли. Со стадией III MEL (клинически позитивные узлы и/или заболевание в переходной
- 49 037351 стадии) 5-летняя выживаемость колеблется от 20-70%. До сих пор самая смертоносная является стадия
IV MEL, где долгосрочная выживаемость пациентов с отдаленными метастазами меланомы составляет менее 10% (NCCN GUIDELINES®, 2013 - меланома).
Не существует единого мнения относительно лучшего лечения метастатической MEL, хотя выбор процедур, включающих в себя удаление для очистки края, внутриочаговые инъекции, лазерную абляцию, радиацию и биохимиотерапию (сочетание химиотерапии и биологических средств, таких как интерферон-альфа и IL-2), продолжает исследоваться. В терапевтической перспективе метастатического MEL в последнее время наблюдается значительное улучшение с развитием новых лекарственных средств, таких как вемурафениб и ипилимумаб. Вемурафениб специфически ингибирует передачу сигналов с помощью мутантной внутриклеточной киназы, BRAF, которая присутствует у приблизительно 50% пациентов с метастатической MEL. В клинических испытаниях вемурафениб доставлял по оценкам выживаемости без прогрессирования (PFS) 5,3 месяцев у позитивных по BRAF мутации пациентов по сравнению с приблизительно 1,6 месяцами для дакарбазина, и медианная OS составляла 15,9 месяцев для вемурафениба по сравнению с 5,6-7,8 месяцами для дакарбазина (Chapman et al., 2011; Sosman et al., 2012). Ипилимумаб представляет собой человеческое моноклональное антитело, которое ингибирует рецептор иммунной контрольной точки, CTLA-4 и, таким образом, стимулирует иммунный ответ Т-клеток. Ипилимумаб, с или без пептидной вакцины гликопротеина 100 (gp100), улучшал медианную OS у пациентов с метастатической MEL с предварительным лечением до 10,0-10,1 месяцев по сравнению с 6,4 месяцами среди пациентов, получавших только gp100 (Hodi et al., 2010). Помимо этих двух средств, ни одно другое средство не продемонстрировало преимущества OS в фазе 3 рандомизированного исследования. Дакарбазин утвержден FDA и ЕМА для лечения метастатического MEL с сообщенной частотой объективного ответа, равной 5-20%, и медианной OS, составляющей приблизительно 6,4 месяцев, но эти ответы недолговечны. Другие лекарственные средства, такие как темозоломид и фотемустин, не привели к значительному повышению выживаемости по сравнению с дакарбазином. IL-2 также был одобрен FDA для лечения метастатической MEL, поскольку он связан с частотой ответа, равной 15-20%, включая 4-6% полных ответов, которые могут быть прочными, но он связан со значительными токсичностями, включающими в себя гипотонию, сердечные аритмии и отек легких. Более подробная информация о стандартном лечении меланомы предусмотрена в Garbe et al. (2012) и в NCCN GUIDELINES®, 2013 - меланома. Несмотря на недавнее утверждение ипилимумаб и верумафениб для прогрессирующей MEL, существует все еще большая неудовлетворенная потребность для пациентов, которые продвинулись в терапии с CTLA-4 и ингибитором BRAF (в зависимости от статуса BRAF), или пациентов с ранее не леченой, неоперабельной или метастатической MEL дикого типа BRAF. 5-летняя выживаемость для поздней стадии MEL в настоящее время составляет только 15%.
Почечноклеточная карцинома.
RCC представляет собой наиболее распространенный тип рака почки у взрослых, приходящийся приблизительно на 90% опухолей почек, и 80-90% из них составляют светлоклеточные опухоли (NCCN GUIDELINES®, 2013 - рак почек). Он также представляет собой самый смертоносный из всех опухолей мочеполовых путей. По оценкам, 65150 пациентов будет диагностировано с раком почки и 13680 умрет от этого заболевания в Соединенных Штатах в 2013 году (Siegel et al. (2013)). Для клинически локализованной RCC (стадия IA и IB) хирургическая резекция, включающая в себя радикальную нефрэктомию и органосохраняющую хирургию, представляет собой эффективный способ лечения. Частичная нефрэктомия, как правило, не подходит для пациентов с местно-прогрессирующими опухолями (стадия II и III), в этом случае предпочтительна радикальная нефрэктомия. Если опухоль ограничивается почечной паренхимой, 5-летняя выживаемость составляет 60-70%, но она значительно снижена при заболевании IV стадии, где распространились метастазы. Стадия IV RCC относительно устойчива к RT и химиотерапии, хотя пациенты могут получить выгоду от операции, и циторедуктивная нефрэктомия перед системной терапией рекомендуется для пациентов с потенциально хирургически резектабельной первичной и множественными резектабельными метастазами.
До недавнего времени цитокины IL-2 и IFNa были единственными активными системными способами лечения прогрессирующей или метастатической RCC, оба обеспечивая сообщенные ORR 5-27%. Тем не менее из-за ограниченного клинического эффекта каждого из этих средств и существенного профиля токсичности новые нацеленные средства в значительной степени заменили цитокины в лечении прогрессирующей или метастатической почечноклеточной карциномы. Признание важности сигнализации индуцирующего гипоксию фактора альфа (HIFa) в патогенезе светло-клеточной RCC привело к повсеместному изучению двух классов нацеленно воздействующих терапий, антиангиогенных ингибиторов тирозинкиназы (TKI) и мишени ингибиторов рапамицина у млекопитающих (mTOR) в лечении 1L и 2L (Mulders, 2009). Нацеленное воздействие на ангиогенез рационально, поскольку активация конститутивного HIFa приводит к повышающей регуляции или активации нескольких белков, включающих в себя фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), который может затем приводить к пролиферации опухоли и образованию новых сосудов. Нацеленное воздействие на путь mTOR важно, потому что активация последующего сигнального пути PI3K/Akt/mTOR представляет собой один из способов, с помощью кото- 50 037351 рого происходит активация или повышающая регуляция конститутивного HIFa (Mulders, 2009). Средства, которые нацелено воздействуют на ангиогенез, включают в себя VEGF-рецептор (VEGFr) TKI (например, сорафениб, сунитиниб, пазопаниб, акситиниб и тивозаниб) и VEGF-связывающие моноклональные антитела (например, бевацизумаб), в то время как средства, которые нацелено воздействуют на путь mTOR включают в себя ингибиторы mTOR (например, эверолимус и темсиролимус) (Mulders, 2009; NCCN GUIDELINES®, 2013 - рак почки). Тем не менее большинство пациентов развивают устойчивость, и улучшение OS показано только в одной фазе 3 клинического испытания у пациентов с высоким риском: темсиролимус показал статистически значимое преимущество в OS у пациентов с прогрессирующей RCC по сравнению с IFNa (10,9 месяцев по сравнению с 7,3 месяцами) (Hudes et al., 2007). Эверолимус также продемонстрировал улучшение в 2,1 месяца в медианной PFS по сравнению с плацебо, но без улучшения OS (Motzer et al., 2008). Среди пяти утвержденных антиангиогенных средств (сорафениб, сунитиниб, бевацизумаб, пазопаниб и акситиниб) и двух утвержденных ингибиторов mTOR (темсиролимус, эверолимус) только эверолимус утверждается специально для использования после провала лечения с антиангиогенной терапией. В США эверолимус указывается для лечения прогрессирующей RCC после неудачи лечения с сунитинибом или сорафенибом, в то время как в ЕС эверолимус более широко показан для пациентов с прогрессирующей RCC, чье заболевание прогрессировало или после лечения нацелено воздействующей на VEGF терапией.
Немелкоклеточный рак легких.
NSCLC представляет собой ведущую причину смерти от рака в США и во всем мире, превышая рак молочной железы, толстой кишки и предстательной железы, вместе взятых. По оценкам, 228190 новых случаев заболевания легких и бронхов диагностируется в США, и приблизительно 159480 летальных исходов случится из-за заболевания (Siegel et al., 2013). Большинство пациентов (приблизительно 78%) диагностируют с прогрессирующим/рецидивирующим или метастатическим заболеванием. Метастазы в надпочечники от рака легких представляют собой обычное явление, причем приблизительно 33% пациентов характеризуются наличием таких метастазов. Способы лечения NSCLC постепенно улучшают OS, но преимущество достигает плато (медианная OS для пациентов на последней стадии составляет всего 1 год). Прогрессирование после 1L терапии происходило почти у всех этих субъектов, 5-летняя выживаемость составляет всего 3,6% при устойчивой обстановке. С 2005 по 2009 гг. общая относительная 5-летняя выживаемость при раке легких в США составляла 15,9% (NCCN GUIDELINES®, 2013 - немелкоклеточный рак легких). Хирургия, RT и химиотерапия представляют собой три способа воздействия, обычно используемые для лечения пациентов с NSCLC. Как класс, NSCLC относительно нечувствительны к химиотерапии и RT по сравнению с мелкоклеточной карциномой.
В общем, для пациентов со стадией I или II заболевания хирургическое удаление обеспечивает наилучшие шансы на излечение с химиотерапией, чаще всего используемой как до операции, так и после операции. RT также может быть использована в качестве адъювантной терапии для пациентов с операбельным NSCLC, первичным местным лечением или как паллиативное лечение для пациентов с неизлечимым NSCLC.
Пациенты со стадией IV, у которых наблюдается хороший функциональный статус (PS), получают эффект от химиотерапии. Многие лекарственные средства, включающие в себя лекарственные средства с платиной (например, цисплатин, карбоплатин), таксановые средства (например, паклитаксел, связанный с альбумином паклитаксел, доцетаксел), винорелбин, винбластин, этопозид, пеметрексед и гемцитабин, представляют собой применимые для стадии IV NSCLC. Комбинации, использующие многие из этих лекарственных средств, вызывают однолетнюю выживаемость, составляющую от 30 до 40% и выше для отдельных средств. Специфические нацелено воздействующие способы лечения были разработаны для лечения прогрессирующего рака легких. Например, бевацизумаб (AVASTIN®) представляет собой моноклональное антитело, которое блокирует сосудистый эндотелиальный фактор роста А (VEGF-А). Эрлотиниб (TARCEVA®) представляет собой низкомолекулярный TKI рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). Кризотиниб (XALKORI®) представляет собой низкомолекулярный TKI, который нацелено воздействует на ALK и МЕТ, и используется для лечения NSCLC у пациентов, несущих мутантный ген слияния ALK. Цетуксимаб (ERBITUX®) представляет собой моноклональное антитело, которое нацелено воздействует на EGFR. Существует особенная неудовлетворенная потребность среди пациентов, которые характеризуются наличием плоскоклеточного NSCLC (составляющего до 25% всех NSCLC), поскольку есть несколько вариантов лечения после 1L терапии. Химиотерапия с одним средством представляет собой стандарт лечения после прогрессии с основанной на платине дублетной химиотерапией (Pt-дублет), приводя к медианной OS, равной приблизительно 7 месяцев. Доцетаксел остается базовым лечением в этой линии терапии, хотя эрлотиниб также может быть использован с меньшей частотой. Также было показано, что пеметрексед вызывает клинически эквивалентные результаты по эффективности, но со значительно меньшими нежелательными явлениями по сравнению с доцетакселом при лечении 2L пациентов с NSCLC (Hanna et al., 2004). Никакая терапия в настоящее время не одобрена для использования при раке легких за установкой 3L. Пеметрексед и бевацизумаб не утверждены при плоскоклеточном NSCLC, и молекулярно нацеленные терапии характеризуются ограниченным применением.
- 51 037351
Неудовлетворенная потребность при прогрессирующем раке легких усугубляется недавней неудачей онкотиреона и STIMUVAX® Merck KgaA по улучшению OS в 3 фазе клинического испытания, неспособность ингибитора c-Met киназы ArQule-x и Daiichi Sankyo, тивантиниба, для достижения конечных точек выживаемости, провал ALIMTA® Eli Lilly в сочетании с Avastin® Roche для улучшения OS в поздней стадии исследования и фармацевтический провал Amgen и Takeda для достижения конечных точек выживаемости с низкомолекулярным антагонистом VEGF-R, мотесанибом, в поздней стадии испытаний.
Настоящее изобретение дополнительно иллюстрируется следующими примерами, которые не должны быть истолкованы как дополнительное ограничение. Содержание всех ссылок, приведенных в настоящем описании, включено в настоящий документ посредством ссылки.
Примеры
Пример 1.
Перекрестная конкуренция между человеческими моноклональными антителами к PD за связывание с экспрессирующими PD-1 человека клетками CHO.
Клетки яичника китайского хомячка (CHO), трансфицированные для экспрессии PD-1 человека (CHO/PD-1 клетки), инкубировали с 10 мкг/мл фрагмента Fab человеческого моноклонального антитела к PD-1 5C4 или контрольным антителом изотипа IgG1 человека (hIgG1) в течение 30 мин при 4°С до добавления человеческих моноклональных антител к PD-1 2D3, 7D3 или 4Н1 в концентрации 0,2 мкг/мл. Связывание 4Н1, 2D3 или 7D3 с клетками CHO/PD-1 обнаруживали с помощью конъюгированного с флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) козьего FC-гамма специфического антитела к hIgG. В случае перекрестного конкурентного анализа с 5С4 и 17D8 клетки CHO/PD-1 инкубировали с целой молекулой 5С4 перед добавлением меченого FITC 17D8. Связывание 2D3, 7D3, 4Н1 или 17D8 с клетками CHO/PD-1 измеряли с помощью анализа проточной цитометрии с использованием проточного цитометра FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA).
Результаты представлены на фиг. 1. Данные показывают, что фрагмент Fab 5C4 по существу блокировал связывание самих моноклональных антител 5С4, а также связывание 2D3, 7D3 (фиг. 1 А) и 4Н1 (фиг. 1В), в то время как целое моноклональное антитело 5С4 по существу блокировало связывание 17D8 (фиг. 1С) с клетками CHO/PD-1, как измерено средней интенсивностью флуоресценции (MFI) окрашивания.
Пример 2.
Перекрестная конкуренция между человеческими моноклональными антителами к PD-L1 за связывание с экспрессирующими PD-1 человека клетками CHO.
Клетки СНО, трансфицированные для экспрессии hPD-L1 (CHO/PD-L1 клетки), инкубировали с 10 мкг/мл каждого из десяти неконъюгированных моноклональных антител к PD-L1 человека (5F8, 7Н1, 10Н10, 1В12, 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4, 12В7 и 13G4) или контрольным антителом изотипа IgG1 человека (hIgG1) в течение 20 мин при 4°С. Конъюгированные с FITC 10H10 (A), 3G10 (В), 10А5 (С), 11Е6 (D), 12A4 (Е) или 13G4 (F) добавляли к клеткам до конечной концентрации 0,09 мкг/мл (В, D), 0,27 мкг/мл (А, С), 0,91 мкг/мл (F) или 2,73 мкг/мл (Е) в течение дополнительных 20 мин при 4°С без предварительного отмывания несвязанного неконъюгированного антитела. Различные количества различных конъюгированных с FITC человеческих моноклональных антител использованы из-за различий в эффективности связывания после мечения, и оптимальные количества этих конъюгированных с FITC человеческих моноклональных антител ранее определяли с помощью анализа титрования дозы связывания с клетками CHO/PD-L1. Связывание конъюгированных с FITC 10H10, 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4 или 13G4 с клетками CHO/PD-L1 измеряли с помощью проточной цитометрии.
Результаты показаны на фиг. 2. Связывание меченого 10H10 частично блокировалось 10А5, 11Е6 и 13G4, но по существу блокировалось только самим собой (фиг. 2А). С другой стороны, 10H10 существенно блокировало связывание только самого себя с клетками CHO/PD-L1. Каждое из человеческих моноклональных антител к PD-L1 5F8, 7Н1, 1В12, 3G10, 10А5, 11Е6, 12А4, 12В7 и 13G4 существенно блокировало связывание меченых моноклональных антител 3G10 (фиг. 2В), 10А5 (фиг. 2С), 11Е6 (фиг. 2D), 12А4 (фиг. 2Е) и 13G4 (фиг. 2F) с клетками CHO/PD-L1, как измерено с помощью MFI, хотя моноклональные антитела 5F8 и 13G4 в целом блокировали связывание меченых моноклональных антител в несколько меньшей степени.
Пример 3.
Перекрестная конкуренция между моноклональными антителами к PD-L1 за связывание с экспрессирующими PD-1 человека клетками карциномы яичника.
Человеческие моноклональные антитела к PD-L1 5F8, 12В7, 3G10, 1В12, 13G4, 10Н10, 10А5 и 12А4 и контрольное антитело изотипа IgG1 человека (hIgG1) серийно разводили от 10 мкг/мл и инкубировали с экспрессирующими hPD-L1 клетками карциномы яичника ES-2 в течение 20 мин при 4°С. Без отмывания биотинилированное антитело 12А4 добавляли до конечной концентрации 0,4 мкг/мл в течение дополнительных 20 мин при 4°С. После отмывания связывание биотин-12А4 обнаруживали с использованием флуоресцентного стрептавидин-PE вторичного реагента и измеряли с помощью проточной цито- 52 037351 метрии. На фиг. 3 показана флуоресценция связанного биотин-12А4 в виде зависимости от концентрации немеченных человеческих моноклональных антител hPD-L1. Связывание биотин-12А4 с клетками ES-2 существенно блокировалось самим 12А4 и 1В12 и 12В7 и блокировалось от умеренной до значительной степени моноклональными антителами 5F8, 10А5, 13G4 и 3G10, но не блокировалось моноклональным антителом 10Н10.
Пример 4.
Дизайн фазы 1 клинического исследования антитела к PD-1.
Исследования фазы 1 проводили для оценки безопасности, противоопухолевой активности и фармакокинетики анти-PD-1 у пациентов с выбранными прогрессирующими солидными опухолями. Моноклональное антитело к PD-1 человека, BMS-936558 (также называемое в настоящем документе как ниволумаб и в патенте США № 8008449 как 5С4), вводили в виде внутривенной инфузии каждые 2 недели каждого 8-недельного цикла лечения. Статус опухоли переоценивался после каждого цикла. Пациенты продолжали лечение до 2 лет (12 циклов), пока они не испытали полную ремиссию, неприемлемую токсичность, прогрессирование заболевания или отзывали свое согласие. У пациентов, которые были без учета этого обстоятельства клинически стабильны, исследование лечения было продолжено за рамки видимого исходного прогрессирования заболевания, пока не было отмечено дальнейшего прогрессирования в соответствии с рекомендацией предполагаемых критериев иммунного ответа (Wolchok et al., 2009). Пациенты со стабильным заболеванием (SD) или постоянным объективным ответом (OR: полный ответ [CR] или частичный ответ [PR]) в конце лечения продолжали лечение в течение 1 года, и им было предложено повторное лечение в течение 1 дополнительного года в случае прогрессии.
Повышение дозы.
Пациенты с прогрессирующей меланомой (MEL), немелкоклеточным раком легкого (NSCLC), почечноклеточной карциномой (RCC), кастрационно-резистентным раком предстательной железы (CRPC) и колоректальным раком (CRC) характеризовались возможностью включиться в исследование. Когорты по 3-6 пациентов в дозе включались последовательно при 1,0, 3,0 и 10,0 мг/кг. Повышение дозы происходило, когда минимум 3 пациента завершали период оценки безопасности (56 дней) на данном уровне дозы, с дозолимитирующей токсичностью менее чем у одной трети пациентов. Увеличение дозы у одного и того же пациента не было разрешено.
Расширение когорты.
Максимально переносимая доза (MTD) не была достигнута. Первоначально пять расширенных когорт приблизительно из 16 пациентов каждая включали 10 мг/кг для MEL, NSCLC, RCC, CRPC и CRC. На основании исходных сигналов активности и после 6,5-месячного перерыва для поправки протокола дополнительные расширенные когорты приблизительно из 16 пациентов каждая зарегистрированы для MEL (при 1,0 и 3,0 мг/кг, затем когорты рандомизировали на 0,1, 0,3 или 1,0 мг/кг), NSCLC (когорты с плоскоклеточной или неплоскоклеточной гистологией рандомизировали на 1, 3 или 10 мг/кг) и RCC (по 1,0 мг/кг). Увеличение дозы у одного и того же пациента до 1 мг/кг было разрешено для пациентов с MEL с прогрессирующим заболеванием после получения 0,1 или 0,3 мг/кг.
Пациенты.
Были задокументированы подходящие пациенты с прогрессирующими солидными опухолями; возраст >18 лет; ожидаемая продолжительность жизни >12 недель; функциональный статус Восточной объединенной онкологической группы <2; измеримое заболевание с помощью критерия оценки ответа солидных опухолей (RECIST), v1.0 с модификацией (см. Topalian et al., 2012b); адекватной гематологической, печеночной и почечной функцией; и пациенты получали 1-5 предыдущих системных схем лечения. Пациенты со стабильно обрабатываемыми метастазами в головной мозг были зачислены. Критерии исключения включали в себя историю хронического аутоиммунного заболевания, предшествующий курс лечения с модулирующими Т-клетки антителами (например, к CTLA-4, к PD-1, к PD-L1), условия, требующие иммуносупрессивных препаратов и хронические инфекции (например, ВИЧ, гепатит B или C).
В общей сложности 296 больных с прогрессирующими солидными опухолями, включающими в себя MEL (n=104), NSCLC (n=122), RCC (n=34), CRPC (n=17) и CRC (n=19) подвергали воздействию BMS-936558 в течение 40 месяцев до февраля 2012 г. К марту 2013 г. 306 больных, включая пациентов с немелкоклеточным раком легкого (n=129), меланомой (n=107), RCC (n=34), CRPC (n=17) и CRC (n=19) подвергали воздействию BMS-936558 с октября 2008 г. по январь 2012 г., все минимум с одним годом наблюдения. Два пациента не получили полный цикл воздействия и не рассматривались как пациенты с поддающимися оценке ответами. Средний возраст составил 63 года (диапазон 29-85). Оценка производительности ECOG составляла 0 или 1 у 98% пациентов. Большинство пациентов характеризовались наличием интенсивной предшествующей терапии, 47% получали по меньшей мере три предшествующих курса химиотерапии. Известные предшествующие курсы лечения включали иммунотерапию (64%) и ингибитор B-RAF (8%) у пациентов с MEL; основанную на платине химиотерапию (94%) и ингибиторы тирозинкиназы (TKI, 34%) у пациентов с NSCLC и нефрэктомию (94%), иммунотерапию (59%) и антиангиогенную терапию (74%) у пациентов с RCC. Исходные характеристики общей обработанной популяции (N=306) были аналогичны таковой популяции эффективности (пациентов с поддающимися оценке ответами, N=270). Подробности о предварительном воздействии на пациентов приведены в Topalian et al.
- 53 037351 (2012b).
Статистический анализ.
Исходные характеристики и нежелательные явления для всех подвергающихся воздействию пациентов (N=306) и результаты эффективности для 270 пациентов с раком легких, меланомой и раком почки сообщались в марте 2013 г. Фармакокинетические и молекулярно-маркерные популяции состояли из подвергающихся воздействию пациентов с имеющимися данными по состоянию на февраль 2012 г., дату предварительного анализа. Популяция эффективности состояла из пациентов с поддающимися оценке ответами, начинающими лечение по меньшей мере за 8 месяцев до даты анализа. Измерения опухолей проводили после каждого цикла воздействия (4 дозы) с помощью исследователей. Индивидуальные лучшие объективные ответы, основанные на опухолевых измерениях, оценивались спонсором на модифицированной RECIST v1.0. Объективный ответ подтверждали по меньшей мере с помощью одной последовательной оценки опухоли. Объективный ответ и стабильные темпы заболевания оценивали с доверительными интервалами с использованием способа Клоппера-Пирсона. Конечные точки времени до момента наступления событий, включающие в себя PFS, OS, выживаемость и продолжительности ответа, оценивали по способу Каплана-Мейера. Нежелательные явления были закодированы с использованием медицинского словаря для регуляторной активности (MedDRA), версия 15.1. Отдельные нежелательные явления с потенциальной иммунологической этиологией, также именуемые как связанные с иммунной системой нежелательные явления представляющие особый интерес АЕ (AEOSI), определенные как нежелательные явления, которые требуют более частого контроля и/или уникального вмешательства, определяли с использованием предварительно определенного списка терминов MeDRA. Индивидуальные лучшие OR получали из доложенных исследователями данных, сообщаемых в модифицированной RECIST v1.0. OR подтверждали по меньшей мере одной последовательной оценкой опухоли и рассчитывали скорость OR (ОРР={[CR+PRμN}x100).
Пример 5.
Оценки безопасности на пациентах, получавших антитела к PD-1.
Оценка безопасности, включающая в себя клиническое обследование и лабораторные оценки, проводилась у всех пациентов в начале исследования и через регулярные промежутки времени до 100 дней после последнего введения препарата. Тяжесть нежелательных явлений оценивали на основе общей терминологии критериев нежелательных явлений NCI (NCI CTCAE), v3.0. Компьютерную томографию (КТ) или магнитно-резонансную томографию проводили для оценки опухоли в начале и после каждого цикла лечения.
MTD не был определен в дозах BMS-936558, изученных в этом исследовании, до самой высокой запланированной дозы 10 мг/кг. Относительная интенсивность дозы BMS-936558 90% или выше была достигнута у 87% пациентов (см. Topalian et al., 2012b; Topalian et al., 2013, для более подробной информации). АЕ были закодированы с использованием медицинского словаря для регуляторных активностей (MedDRA), версия 14.1. AEOSI определяли с использованием заранее определенного списка терминов MeDRA. 15 из 296 (5%) пациентов прекратили лечение из-за связанных с BMS-936558 АЕ. По состоянию на февраль 2012 г., даты предварительного анализа, 62 (21%) пациентов умерли, а в марте 2013 г. 195 пациентов (64%) умерли с прогрессированием заболевания, которое было наиболее распространенной причиной смерти (Topalian et al., 2012b; Topalian et al., 2013).
Наиболее частые нежелательные явления, независимо от причинности, включали в себя усталость, снижение аппетита, диарею, тошноту, кашель, одышку, запор, рвоту, сыпь, гипертермию и зуд (Topalian et al., 2012b; Topalian et al., 2013). Общие связанные с BMS-936558 нежелательные явления включали в себя усталость, сыпь, понос, снижение аппетита, тошноту. Большинство явлений были низкой степени тяжести с 3-4 степенью тяжести, связанной с лекарственными средствами AE, наблюдавшихся у 41 из 296 (14%) пациентов. Связанные с лечением AE (любой степени) наблюдались у 230 из 306 пациентов (75%), наиболее распространенные из которых представляют собой усталость, сыпь, диарею и зуд (Topalian et al., 2013). Спектр, частота и тяжесть связанных с BMS-936558 AE были в целом аналогичны в уровнях дозировок, которые исследовались, без четкого отношения к продолжительности лечения. 52 из 306 пациентов (17%) испытывали 3-4 степень тяжести связанных с лечением нежелательных явлений, наиболее распространенные из которых представляет собой усталость (2%), пневмонию, лимфопению, диарею, боль в животе и гипофосфатемию (по 1%). Связанные с лечением серьезные нежелательные явления происходили у 42 из 306 пациентов (14%) (Topalian et al., 2013).
Связанные с лекарственными средствами AEOSI с потенциальными связанными с иммунной системой этиологиями классифицировали по вовлечению органов, чтобы обеспечить более точную оценку частоты, и они включали в себя пневмонию, витилиго, колит, гепатит, гипофизит и тиреоидит и др. Связанные с лечением отдельные нежелательные явления любой степени тяжести наблюдались у 140 из 306 пациентов (46%), наиболее распространенные из которых представляли собой сыпь (15%), диарею (13%) и зуд (11%) (табл. 2). Связанные с лечением отдельные нежелательные явления 3-4 степени тяжести были замечены у 19 пациентов (6%). 52 из 230 пациентов (23%) со связанными с лекарственными средствами нежелательными явлениями требовали сдерживания развития системными глюкокортикоидами и/или другими иммунодепрессантами. Печеночные и желудочно-кишечные AEOSI сдерживали с прерыванием
- 54 037351 на лечение и, при необходимости, введением кортикостероидов. Среди пациентов, получавших лечение до даты, эти AE были обратимы во всех случаях. Эндокринные AEOSI сдерживали заместительной терапией. 32 из 306 пациентов (11%) прекратили лечение из-за связанных с лечением нежелательных явлений. По усмотрению лечащего врача пациенты успешно возобновляли лечение с BMS-936558. 21 (40%) пациент смог возобновить терапию ниволумабом после разрешения токсичности.
Связанный с лекарственными средствами пневмонит (любой степени тяжести) происходил у 12 из 306 (4%) пациентов (Topalian et al., 2013). Клинические проявления варьировались от рентгенологических отклонений у бессимптомных пациентов до прогрессивных, развернутых, диффузных легочных инфильтратов, связанных с симптомами (кашель, лихорадка, одышка). Пневмонит 3-4 степени тяжести развивался у 4 больных (1%), из которых три случая закончились смертельным исходом (два пациента с немелкоклеточным NSCLC, один - CRC). Не было отмечено четкой зависимости между возникновением пневмонита и типом опухоли, уровнем дозы или числом полученных доз. У 9 из 12 пациентов пневмонит носил обратимый характер с прекращением лечения и/или иммуносупрессией (глюкокортикоиды, инфликсимаб, микофенолат). После последней связанной с пневмонитом смерти в ноябре 2011 г. 79 пациентов продолжали получать ниволумаб (медиана 29 недели, диапазон 2-69 недель) при отсутствии других смертей от этой или других причин, связанных с лечением.
Пример 6.
Анализы фармакокинетики/фармакодинамики антитела к PD-1.
Для фармакокинетического (PK) анализа серийные образцы крови собирали и концентрации сыворотки BMS-936558 количественно определяли с использованием ELISA. Для фармакодинамического анализа (PD) мононуклеарные клетки периферической крови выделяли от пациентов на исходном уровне и после цикла 1 для оценки оккупации рецепторов (RO) PD-1 с помощью BMS-936558 на циркулирующих CD3+ Т-клетках с помощью проточной цитометрии (Brahmer et al., 2010). Максимальная концентрация BMS-936558 наблюдалась при медиане Tmax через 1-4 ч после начала инфузии. PK BMS-936558 был линейным при пропорциональном дозе увеличении Cmax и AUC(0-i4d) в диапазоне доз 0,1-10 мг/кг (n=35). PD BMS-936558 оценивали с помощью RO PD-1 на циркулирующих Т-клетках. РВМС от 65 пациентов с MEL, подвергавшихся воздействию одного цикла BMS-936558 на 0,1-10 мг/кг два раза в неделю, продемонстрировали среднюю оккупацию молекул PD-1 на циркулирующих CD3+ Т-клетках путем BMS-936558 в диапазоне 64-70% (см. Topalian et al., 2012b, для более подробной информации).
Пример 7.
Противоопухолевая эффективность, проявляемая антителом к PD-1.
Анализ данных по состоянию на февраль 2012 г.
Клиническую противоопухолевую активность наблюдали во всех испытанных дозах BMS-936558. OR (подтвержденные CR или PR) наблюдались в значительной части пациентов с NSCLC, MEL и RCC (табл. 1 и 2; фиг. 4), а также в различных участках метастазирования заболевания, включающих в себя печень, легкое, лимфатические узлы и кости (фиг. 5-7 и не показано). Наблюдали опухолевые регрессии после обычных, а также связанных с иммунной системой паттернов ответа, такие как длительное снижение бремени опухоли в присутствии новых очагов. Индивидуальные лучшие общие ответы получали от доложенных исследователями данных в соответствии с модифицированной RECIST v1.0. OR подтверждали по меньшей мере одной последовательной оценкой опухоли. Во время анализа данных 2 пациента с NSCLC, которых лечили 10 мг/кг, характеризовались наличием неподтвержденных ответов, и 8 дополнительных пациентов (с MEL, NSCLC или RCC) характеризовались постоянным снижением базовых повреждений-мишеней в присутствии новых поражений (т.е. связанный с иммунной системой паттерн ответов). Ни один из этих пациентов не классифицировался как отвечающий на лечение для целей количественного определения OR. Противоопухолевые ответы и/или длительная стабилизация заболевания наблюдались у пациентов, независимо от предыдущих полученных способов лечения (см. резюме прогрессирования свободного интервала для пациентов с OR и SD в дополнительном приложении 4 Topalian et al., 2012b).
У пациентов с NSCLC 14 OR наблюдались при BMS-936558 в дозах 1, 3 или 10 мг/кг с частотой отклика 6, 32 и 18% соответственно. OR наблюдались с гистологией NSCLC: 6 отвечающих на лечение из 18 плоскоклеточных (33%), 7 отвечающих на лечение из 56 неплоскоклеточного (13%) и 1 из 2 неизвестных. Все 14 пациентов с OR начинали лечение за >24 недель до анализа данных, и из них 8 характеризовались продолжительностью ответа >24 недель (табл. 1). Стабильное заболевание (SD) длительностью >24 недель наблюдалось у 5 (7%) пациентов с NSCLC, все с неплоскоклеточной гистологией. Среди пациентов с MEL 26 OR наблюдались при дозах в пределах 0,1-10 мг/кг с уровнем ответов 19-41% на уровень дозы. При уровне дозы 3 мг/кг OR отмечали у 7 из 17 (41%) пациентов. Из 26 пациентов с MEL, достигших OR, 17 начали лечение за >1 год до анализа данных, и из них 13 пациентов характеризовались продолжительностью OR >1 года. Остальные 8 пациентов с OR были в исследования <1 года и 6 характеризовались ответами в диапазоне 1,9-5,6 месяцев. SD длительностью >24 недель наблюдался у 6 (6%) пациентов. У пациентов с RCC OR происходили у 4 из 17 (24%) пациентов, подвергавшихся воздействию с BMS-936558 в дозе 1 мг/кг, и 5 из 16 (31%) пациентов, получавших 10 мг/кг. Среди 8 пациентов
- 55 037351
RCC с OR, которые начали лечение за >1 год до анализа данных, 5 (63%) характеризовались продолжительностью OR > 1 год. Наблюдался прочный SD >24 недель у дополнительных 9 (27%) больных.
Таблица 1
Клиническая активность BMS-936558 в популяции эффективности* (N=236)t, как оценено до февраля 2012 г.
Тип опухоли Доза (мг/кг) η ORRt Кол-во пациентов(%) [95% С1р SD > 24 нед. Кол-во пациентов(%) [95% CI] PFSR§ в 24 нед (%) [95% CI]
MEL ОД 14 4 (29) [8-58] 1 (7) [0,2-34] 40 [13-66]
1,0 27 8 (30) [14-50] 3 (11) [2-29] 45 [26-65]
з,о 17 7(41) [18-67] 1 (6) [0,1-29] 55 [30-80]
10,0 20 4 (20) [6-44] 0 30 [9-51]
Все MEL 94 26 (28) [19-38] 6(6)[2-13] 41 [30-51]
NSCLC**
Все 1 18 1 (6) [0,1-27] 1 (6) [0,1-27] 16 [0-34]
Плоскоклеточн. 1 5 0 0 0
Неплоскоклет. 1 12 0 1 (8) [0,2-39] 14 [0-37]
Неизвестн. 1 1 1(100) [3-100] 0 1
Все 3 19 6 (32) [13-57] 2 (11) [1-33] 41[18-64]
Плоскоклеточн. 3 6 3 (50) [12-88] 0 50 [10-90]
Неплоскоклет. 3 13 3 (23) [5-54] 2(15) [2-45] 37 [10-64]
Все 10 39 7(18) [8-34] 2 (5) [0,6-17] 24 [11-38]
Плоскоклеточн. 10 7 3 (43) [10-82] 0 43 [6-80]
Неплоскоклет. 10 31 4(13) [4-30] 2(7) [0,8-21] 21 [6-36]
Неизветн. 10 1 0 0 0
Все NSCLC 76 14(18) [11-29] 5 (7)[2-15] 26 [16-36]
Все плоскоклеточн. 18 6 (33) [13-59] 0 33 [12-55]
Все неплоскоклет. 56 7(13) [5-24] 5 (9) [3-20] 22 [ 11-34]
RCC 1 17 4 (24) [7-50] 4 (24) [7-50] 47 [23-71]
10 16 5 (31) [11-59]* 5 (31) [11-59]’ 67 [43-91]
Все RCC 33 9(27) [13-46] 9 (27) [13-46] 56 [39-73
*Популяция эффективности состоит из способных к ответу пациентов, лечение которых было начато по меньшей мере за 8 месяцев до анализа данных в феврале 2012 г., и характеризовались наличием измеримого заболевания на начальном уровне и одним из следующего: по меньшей мере 1 сканированием при лечении или клиническим доказательством прогрессирования заболевания или смерти.
tCR обозначает полный ответ, MEL - меланома, NSCLC - немелкоклеточный рак легкого, ORR - частота объективного ответа, PFSR - выживаемость без прогрессирования, PR - частичный ответ, RCC -почечноклеточный рак, SD - стабильное заболевание, n - количество пациентов.
^Частоты объективных ответов ({[CR+PR]zn}x100) были рассчитаны на основе подтвержденных ответов с доверительными интервалами, рассчитанными с использованием способа Клоппера-Пирсона. Индивидуальные ответы пациентов вынесены в RECIST v1.0 с модификацией (см. Topalian et al., 2012b).
§Выживаемость без прогрессирования представляла собой долю пациентов, которые не прогрессировали и были живы через 24 недели, рассчитанная по методологии Каплан-Мейера с доверительными интервалами с использованием способа Greenwood.
‘Один CR.
**Один пациент с NSCLC, который получал уровень дозы 3 мг/кг, характеризовался начальной оценкой прогрессирования заболевания, впоследствии характеризовался наличием PR и был классифицирован как отвечающий на лечение.
- 56 037351
Таблица 2
Продолжительность объективных ответов на BMS-936558*, что оценено на февраль 2012 г.
Тип опухоли Доза (мг/кг) Кол-во пациентов с OR Продолжительность ответов (месяцы)!
MEL 0,1 4 7,5+, 5,6+, 5,6, 5,6
о,з 3 3,8+, 2,1+, 1,9+
1 8 24,9+, 22,9, 20,3+, 19,3+, 18,4+, 7,6+, 5,6+, 5,3+
3 7 22,4+, 18,3+, 15,2+, 12,9, 11,1, 9,3, 9,2+
10 4 24,6+, 23,9+, 18,0+, 17,0
NSCLC§ 1 1 9,2+
3 6 30,8+, 7,6+, 5,5+, 3,7+, 1,9+, NAJ
10 7 14,8+, 7,6+, 7,3+, 6,7, 4,2, 3,7+, 3,7
RCC 1 4 17,5+, 9,2+, 9,2, 5,6+
10 5 22,3+, 21,7+, 12,9, 12,0, 8,4
*MEL обозначает меланому, NA - не применимый, NSCLC - немелкоклеточный рак легкого, RCC - почечноклеточный рак.
^Время от первого ответа до времени задокументированной прогрессии, летального исхода или для подвергнутых цензуре данных, время до последней оценки опухоли.
Юдин пациент подвергался лечению за пределами первоначальной оценки прогрессирования заболевания и впоследствии характеризовался PR; этот пациент был классифицирован как отвечающий на лечение для целей количественного определения числа ответов с помощью RECIST v1.0, но не рассматривался для количественного определения продолжительности ответа.
Анализ данных по состоянию на март 2013 г.
Объективные ответы наблюдались у пациентов с NSCLC (17%), MEL (31%) и RCC (29%), но не с CRC или CRPC. Ответы были обнаружены во всех исследованных дозах ниволумаба; частота ответа у пациентов с NSCLC, получавших 1 мг/кг, по сравнению с 3 или 10 мг/кг, по-видимому, уменьшалась (3% по сравнению с 24 и 20% соответственно) (табл. 3 и 4). 13 из 270 пациентов (4,8%) с отвечающими гистологиями характеризовались нестандартными паттернами ответа, которые не соответствовали критериям RECIST (например, постоянное снижение в поражениях-мишенях в присутствии новых поражений или регрессии после первоначальной прогрессии) (Wolchok et al., 2009). Дополнительные пациенты проявляли SD на протяжении 24 недель и более (10% NSCLC, 7% MEL, 27% RCC). Устойчивое выживание, отражаемое 1-й 2-летними граничными OS, было отмечено в каждой из отвечающих на лечение популяций следующим образом: NSCLC 42 и 14%; MEL 62 и 43% и RCC 70 и 50% (табл. 3). Наблюдалась средняя OS, равная 9,6 месяцев для рака легкого (9,2 и 10,1 месяцев для плоскоклеточной и неплоскоклеточной гистологии NSCLC соответственно), 16,8 месяцев для MEL и более 22 месяцев для RCC; средняя PFS составляла 2,3 месяца при NSCLC, 3,7 месяца при MEL и 7,3 месяцев при RCC; и средняя продолжительность ответа составляла 74, 104 и 56 недель соответственно (табл. 4). Среди 16 отвечающих на лечение пациентов, прекративших лечение по причинам, отличным от прогрессирования заболевания и по меньшей мере через 24 недели, 13 (81%) оставались в ответе на момент анализа (фиг. 8).
- 57 037351
Таблица 3
Клиническая активность ниволумаба в популяции эффективности (N=306)*, оцененная на март 2013 г.
Тип опухоли ORR' Кол-во пациентов/общее кол-во пациентов(%) [95% CI] Средняя продолжит, ответа^, нед. (диапазон) Стабильное заболевание Кол-во пациентов/общее кол-во пациентов (%) [95% CI] Средняя выживаемость без прогресс., мес (95% CI) Средняя общая выживаемость, мес (95% CI) Уровень общей выживаемости, % (95% CI); пациенты в зоне риска, η
> 24 нед > 48 нед 1 год 2 года
Немелко клеточный рак легкого** 22/129 (17,1) [11,0, 24,7] 74,0 (6,1+, 133,9+) 13/129 (Ю,1) [5,5, 16,6] 6/129 (4,7) [1,7, 9,8] 2,3 (1,9, 3,7) 9,6 (7,8, 12,4) 42 (33,51); 43 14 (4, 24); 5
Плоскоклеточный 9/54 (16,7) [7,9, 29,3] NR§ (16,1, 133,9+) 8/54 (14,8) [6,6, 27,1] 3/54 (5,6) [1,2, 15,4] 3,7 (1,8, 7,2) 9,2 (7,3, 12,5) 39 (25, 53):16 Ψ
Неплоскоклеточн. 13/74 (17,6) [9,7, 28,2] 63,9 (6,1+, 74,0+) 5/74 (6,8) [2,2, 15,1] 3/74 (4,1) [0,8, 11,4] 2,0 (1,8, 3,6) 10,1 (7,2, 13,7) 43 (31, 54):26 Ψ
Меланома11 33/107 (30,8) [22,3, 40,5] 104 (18,4, 117,0+) 7/107 (6,5) [2,7, 13,0] 4/107 (3,7) [1,0, 9,3] 3,7 (1,9, 9,1) 16,8 (12,5, 31,6) 62 (53, 72); 55 43 (32, 53); 26
Рак почки11 10/34 (29,4) [15,1,47,5] 56,1 (36,6, 126,7+) 9/34 (26,5) [12,9, 44,4] 2/34 (5,9) [0,7, 19,7] 7,3 (3,7, 12,9) >22# (13,6, ΝΕΛ) 70 (55, 86); 23 50 (31, 70); 8
* Не было замечено объективных ответов у 19 пациентов с колоректальным раком или 17 пациентов с кастрационно-резистентным раком предстательной железы.
Т Объективные показатели реагирования ({[CR+PR]+N}x100) были рассчитаны на основе подтвержденных ответов с доверительными интервалами, рассчитанными с использованием способа КлопперПирсона. Индивидуальные ответы пациентов были вынесены в RECIST v1.0 с модификацией (см. способы S1 и протокол исследования, NEJM.org).
ί Время от первого ответа до времени задокументированной прогрессии, летального исхода или для подвергнутых цензуре данных (обозначенных +), время до последней оценки опухоли.
* *Среди 129 пациентов с немелкоклеточным раком легких один характеризовался неизвестной гистологией и не показал объективного ответа. Другие характеризовались плоскоклеточной или неплоскоклеточной гистологией, как указано.
§NR, не достигнутый; момент времени, в который вероятность того, что прогресс отвечающих на лечение пациентов падает ниже 50%, не был достигнут из-за недостаточного количества событий и/или продолжения.
^Недостаточный период продолжения.
II один CR был отмечен при меланоме и один CR при раке почки.
# Медиана общей выживаемости не была достигнута на 22 месяце, самый длинный времени до смерти до сих пор у пациентов со злокачественной опухолью почки в этом клиническом исследовании.
ANE, не оцениваемый.
Таблица 4
Клиническая активность ниволумаба от уровня дозы, оцененная до марта 2013 г.
Тип опухоли Доза, мг/кг ORR* Кол-во пациентов/общее кол-во пациентов (%) [95% CI] Средняя продолжитель ность ответа, нед, (диапазон)! Стабильное заболевание Кол-во пациентов/общее кол-во пациентов (%) [95% ci] Средняя выживаемость без прогресс., мес (95% CI) Средняя общая выживаемость, мес (95% CI)
> 24 нед > 48 нед
Немелкоклеточный рак легких Все дозы 22/129(17,1) [11,0, 24,7] 74,0 (6,1+, 133,9+) 13/129(10,1) [5,5, 16,6] 6/129 (4,7) [1,7, 9,8] 2,3 (1,9, 3,7) 9,6 (7,8, 12,4)
1 1/33 (3,0) [0,1, 15,8] 63,9 (63,9, 63,9) 5/33 (15,2) [5,1, 31,9] 2/33 (6,1) [0,7, 20,2] 1,9(1,8,3,6) 9,2 (5,6, 11,1)
3 9/37 (24,3) [11,8,41,2] NRJ (16,1+, 133,9+) 3/37(8,1) [1,7,21,9] 2/37 (5,4) [0,7, 18,2] 1,9(1,7, 7,3) 14,9 (9,5, ΝΕΛ)
10 12/59 (20,3) [11,0, 32,8] 83,1 (6,1+, 117,1+) 5/59 (8,5) [2,8, 18,7] 2/59 (3,4) [0,4, 11,7] 3,6(1,9,3,8) 9,2 (5,2, 12,4)
Плоскоклеточный Все дозы 9/54 (16,7) [7,9, 29,3] NR (16,1, 133,9+) 8/54 (14,8) [6,6, 27,1] 3/54 (5,6) [1,2, 15,4] 3,7 (1,8, 7,2) 9,2 (7,3, 12,5)
1 0 0 4/15 (26,7) [7,8, 55,1] 1/15 (6,7) [0,2, 31,9] 1,9 (1,8, 7,5) 8,0 (2,6, 13,3)
3 4/18(22,2) [6,4, 47,6] NR (16,1, 133,9+) 1/18 (5,6) [0,1, 27,3] 1/18 (5,6) [0,1, 27,3] 3,8(1,7, 14,9) 9,5, (6,7, NE)
- 58 037351
10 5/21 (23,8) [8,2, 47,2] 83,1 (16,1, 117+) 3/21 (14,3) [3,0, 36,3] 1/21 (4,8) [0,1,23,8] 4,1 (1,8, 7,6) 10,5 (7,8, 12,5)
Неплоско- клеточный Все дозы 13/74 (17,6) [9,7, 28,2] 63,9 (6,1+, 74,0+) 5/74 (6,8) [2,2, 15,1] 3/74 (4,1) [0,8, 11,4] 2,0 (1,8, 3,6) 10,1 (7,2, 13,7)
1 1/18(5,6) [0,1,27,3] 63,9 (63,9, 63,9) 1/18 (5,6) [0,1,27,3] 1/18 (5,6) [0,1,27,3] 1,8 (1,7, 3,6) 9,9 (5,6, 22,7)
3 5/19 (26,3) [9,1, 51,2] 74,0 (24,3, 74,0+) 2/19(10,5) [1,3,33,1] 1/19(5,3) [0,1,26,0] 1,8(1,7, 12,5) 18,2(10,3, 18,2)
10 7/37(18,9) [8,0, 35,2] NR (6,1+, 65,7+) 2/37 (5,4) [0,7, 18,2] 1/37 (2,7) [0,1, 14,2] 2,3 (1,9, 3,8) 7,4 (4,6, 12,4)
Меланома^ Все дозы 33/107 (30,8) [22,3, 40,5] 104 (18,4, 117,0+) 7(6,5) [2,7, 13,0] 4(3,7) [1,0, 9,3] 3,7(1,9, 9,1) 16,8(12,5,31,6)
0,Р 6/17(35,3) [14,2, 61,7] NR (24,1,48,7+) 0 0 3,6(1,7, 9,1) 16,2 (8,6, NE)
оу 5/18(27,8) [9,7, 53,5] NR (18,4, 66,3+) 1 (5,6) [0,1,27,3] 0 1,9(1,8, 9,3) 12,5 (7,7, NE)
1 11/35 (31,4) [16,9, 49,3] 104 (32,4, 108,1+) 5/35 (14,3) [4,8, 30,3] 4/35 (11,4) [3,2, 26,7] 9,1 (1,8, 24,7) 25,3 (14,6, NE)
3 7/17 (41,2) [16,9, 67,1] 75,9 (40,1+, 115,4+) 1/17 (5,9) [0,1, 28,7] 0 9,7(1,9, 16,4) 20,3 (8,2, NE)
10 4/20 (20,0) [5,7, 43,7] 112 (73,9, 117+) 0 0 3,7 (1,7, 20,50) 11,7 (7,2,37,8)
Рак почки^ Все дозы 10/34 (29,4) [15,1,47,5] 56,1 (36,6, 126,7+) 9/34 (26,5) [12,9, 44,4] 2/34 (5,9) [0,7, 19,7] 7,3 (3,7, 12,9) >22#(13,6,NE)
1 5/18(27,8) [9,7, 53,5] 56,1 (40,1, 76,1+) 4/18(22,2) [6,4, 47,6] 1/18 (5,6) [0,1, 27,3] 4,7(1,9, 10,9) NR (17,9, NE)
10 5/16(31,3) [11,0, 58,7] 56,1 (36,6, 126,7+) 5/16(31,3) [11,0, 58,7] 1/16 (6,3) [0,2, 30,2] 8,0 (3,7, 14,0) 18,8 (11,6, NE)
*Частоту объективных ответов ({[CR+PR]<N}x 100) рассчитывали на основе подтвержденных ответов с доверительными интервалами, рассчитанными с использованием способа КлопперПирсона. Индивидуальные ответы пациентов были вынесены в RECIST v1.0 с модификацией (см. способы S1 и протокол исследования, NEJM.org).
t Время от первого ответа до времени задокументированной прогрессии, летального исхода или для подвергнутых цензуре данных (обозначенных +), время до последней оценки опухоли.
ί * NR, не достигнутый; момент времени, в который вероятность того, что прогресс отвечающих на лечение пациентов падает ниже 50%, не был достигнут из-за недостаточного количества событий и/или продолжения.
§1 CR был отмечен при меланоме и 1 CR при раке почки.
Ну пяти пациентов с опухолевой прогрессией была эскалация дозы от 0,1 до 1,0 мг/кг, и у шести = от 0,3 до 1,0 мг/кг. Ни один из этих пациентов не ответил на терапию.
#Медиана общей выживаемости не была достигнута на 22 месяце, самый длинный по времени до смерти до сих пор у пациентов с раком почки в этом клиническом исследовании.
ANE, не оцениваемый.
Пример 8.
Корреляция между экспрессией мембранных PD-L1 и анти-PD-1 ответом.
Окрашивание IHC PD-L1 проводили на предварительно обработанных фиксированных в формалине заключенных в парафин (FFPE) опухолевых образцах с использованием мышиного моноклонального антитела 5Н1 к PD-L1 человека (Dong et al., 2002) в соответствии со стандартным протоколом IHC (Taube et al., 2012; сопровожд. материалы). Вкратце, срезы FFPE толщиной 5 мкм, установленные на предметные стекла, депарафинизировали в ксилоле и демаскировку антигена проводили с использованием буфера Трис-ЭДТА, pH 9,0 при 120°С в течение 10 мин в Decloaking Chamber (Biocare Medical). Эндогенную пероксидазу, биотин, белки (система CAS K1500, Dako, набор авидин/биотин блокирования, SP-2001, Vector Laboratories; Serotec Block АСЕ) и первичное антитело 5Н1 добавляли в концентрации 2 мкг/мл и оставляли для инкубации при 4°С в течение 20 ч. Вторичное антитело (биотинилированное к мышиному IgG1, 553441 BD) наносили в концентрации 1 мкг/мл в течение 30 мин при комнатной температуре (RT). Сигнал затем разрабатывали с усилением в соответствии с протоколом производителя (система CAS K1500, Dako). Срезы подвергали контрастному окрашиванию гематоксилином, обезвоживали в этаноле, очищали в ксилоле и наносили покровное стекло.
Процент опухолевых клеток, проявляющих окрашивание клеточной поверхности на PD-L1, оценивали два независимых патолога, которые не были осведомлены о результатах лечения. PD-L1 позитивность определяли в образце по 5% порогу экспрессии (Taube et al., 2012; Thompson et al., 2006), а в случа- 59 037351 ях с несколькими образцами, если какой-либо образец отвечал этому критерию. Точный тест Фишера применяли, чтобы оценить связь между экспрессией PD-L1 и OR, отметив, однако, что этот анализ был основан частично на дополнительных биопсиях от не случайной подгруппы популяции, и тестирование статистических гипотез не было предварительно специфицировано.
предварительно обработанный опухолевый образец от 42 пациентов (18 MEL, 10 NSCLC, 7 CRC, 5 RCC и 2 CRPC) анализировали на экспрессию PD-L1 на поверхности опухолевых клеток (фиг. 8). Биоптаты от 25 из 42 пациентов были положительными на экспрессию PD-L1 с помощью IHC. Точный тест Фишера применяли, чтобы оценить связь между экспрессиям PD-L1 и OR в ретроспективном анализе. Среди 42 пациентов с поверхностным PD-L1+ девять (36%) достигали OR, тогда как среди 17 пациентов с PD-L1 опухолями ни один не достигал OR (фиг. 8А). Таким образом, в подгруппе пациентов с экспрессией PD-L1 на клеточной поверхности на опухолевых клетках в биопсиях с предварительной обработкой было связано с повышенной частотой OR среди пациентов, получавших BMS-936558, в то время как ни один пациент с задокументированными PD-L1-отрицательными опухолями не испытывал OR. Эти данные указывают на то, что экспрессия опухолевых PD-L1 представляет собой молекулярный маркер, который делает возможным отбор пациентов для αнтu-PD-1 иммунотерапии.
Пример 9.
Выделение кроличьих моноклинальных антител, которые обнаруживают мембранный антиген hPD-L1 в FFPE тканях.
Кроличьи антитела против полипептида PD-L1 человека получали с помощью Epitomics, Inc. (Burlingame, CA) путем иммунизации кроликов с использованием рекомбинантного человеческого слитого белка PD-L1. Титры антисыворотки оценивали с использованием стандартного прямого анализа ELISA с антигеном hPD-L1 и клеточный ELISA - с использованием трансфицированных клеток с гиперэкспрессией hPD-L1. Эти антитела также подвергали скринингу на их способность связываться с PD-L1 с помощью анализа IHC срезов ткани FFPE. Кролика с самым высоким титром антител выбирали для спленэктомии. Лимфоциты, выделенные из селезенки, сливали с клетками миеломы в 40 х 96-луночных планшетах и подвергали скринингу с помощью ELISA против иммунизирующего антигена PD-L1 и с помощью клеточного анализа ELISA против клеток со сверхэкспрессией hPD-L1. Положительные клоны расширяли в 24-луночные планшеты и подтверждающие скрины проводили путем прямого анализа ELISA и клеточного анализа ELISA. Супернатанты (sups) клонов, которые были специфичны к скринингу антигена, повторно подвергали скринингу с помощью IHC.
Набор мышиных моноклональных антител к hPD-L1 также получали путем иммунизации мышей с использованием протокола, аналогичного описанному выше для моноклональных антител кролика.
Из в общей сложности 185 множественных подвергнутых скринингу клонов как от кроличьей, так и мышиной иммунизации только десять кроличьих множественных клонов антител специфически обнаруживали мембранную форму hPD-L1. Ни один из очищенных субклонов мыши не обнаруживал специфически hPD-L1 на клеточной поверхности. 60 субклонов от пяти лучших кроличьих множественных клонов (обозначенных № 13, 20, 28, 29 и 49, каждый из которых содержит 12 субклонов) подвергали первоначальному скринингу с помощью IHC на тканевых микрочипах FFPE низкой плотности (ТМА), а затем путем подтверждения и проверкой специфичности в суженных 25 субклонах. Кроличий IgG использовали в качестве отрицательного изотипического контроля, а моноклональное антитело 5Н1 (Dong et al., 2002) использовали в качестве положительного контроля.
Специфичность дополнительно проверяли с помощью преабсорбционного анализа антигенов. Через два раунда IHC следующие 15 очищенных субклонов выбирали в качестве наиболее перспективных антител по специфичности и интенсивности окрашивания: 13-1, 13-3, 13-7, 13-8; 20-5, 20-7, 20-12, 20-6; 28-1, 28-8, 28-12; 29-8; 49-5, 49-7 и 49-9. Данные иммунореактивности по этим выбранным антителам суммированы в табл. 5.
- 60 037351
Таблица 5
Иммунореактивность кроличьих моноклональных антител к hPD-L1
Специфическое окрашивание Неспецифическое окрашивание
Название антитела Позитивн. к негатив, окраш-ю PD-L1 клеток* Диапазон интенсивности на тканях^ (очень высокая, высокая, средняя, низкая) Фоновое окрашивание тканей (высокое, среднее, низкое)
13-1 Позитивное От низкой до очень высокой Нет
13-3 Позитивное От низкой до высокой Нет
13-7 Позитивное От низкой до высокой Нет
13-8 Позитивное От низкой до высокой Нет
20-5 Позитивное От низкой до очень высокой Высокое
20-6 Позитивное От низкой до высокой Среднее
20-7 Позитивное От низкой до высокой Среднее
20-12 Позитивное От низкой до высокой Среднее
28-1 Позитивное От низкой до очень высокой Нет
28-8 Позитивное От средней до очень высокой Нет
28-10 Позитивное От средней до очень высокой Низкое
28-12 Позитивное От низкой до очень высокой Нет
49-5 Позитивное От низкой до высокой Нет
49-7 Позитивное От низкой до высокой Низкое
49-9 Позитивное От низкой до высокой Нет
5Н1 Позитивное От высокой до очень высокой Нет
Rb IgG Негативное Негативное Нет
*PD-L1, стабильно трансфицированные клетки CHO против контрольных CHO-S.
Т PD-Li-позитивные ткани включали в себя плаценту и один немелкоклеточный рак легкого; обнаружение экспрессии до очень высокой предполагает лучшую чувствительность при обнаружении мембранных PD-L1.
Дополнительные анализы проводили для дальнейшей характеристики очищенных клонов антитела, включая в себя определение аффинности связывания и перекрестную конкуренцию среди антител (для идентификации перекрытия по сравнению с разными областями эпитопов) с помощью поверхностного плазмонного резонанса. Все антитела проявляли высокую аффинность связывания (KD<10-9 M). Эти 15 очищенных клонов также повторно подвергали скринингу с помощью IHC на FFPE низкой плотности ТМА или обычных срезах в отношении различных типов клеток и тканей, которые известны как позитивные или негативные на экспрессию PD-L1 на клеточной поверхности. Кроличий IgG использовали в качестве изотипического контроля, а моноклональное антитело 5Н1 использовали в качестве положительного контроля. При высокой концентрации (10 мкг/мл) клоны 28-х и 49-х отображали от низкого до умеренного уровня фонового окрашивания в тканях, в то время как клоны 13-х не обнаруживали фонового окрашивания, что свидетельствует о том, что 13-х клонов характеризуются широким динамическим диапазоном. Клоны 20-х отображали различную степень фонового окрашивания, которое было в первую очередь цитоплазматическим и диффузным. Клон с самым надежным специфическим обнаружением мембранного PD-L1, кроличий клон 28-8 (KD=100 пМ, как определено с помощью SPR), был выбран в качестве ведущего антитела для последующих анализов IHC. Моноклональные антитела 28-1, 28-12, 20-12 и 29-8 характеризовались значением KD 130 пМ, 94 пМ, 160 мкМ и 1200 мкМ соответственно. Последовательности вариабельной области тяжелой цепи (VH) и вариабельной области (VK) легкой (каппа) цепи моноклонального антитела 28-8 приведены в SEQ ID NO: 35 и 36 соответственно. Было показано, что антитело 28-8 распознает различные эпитопы от мышиного моноклонального антитела 5Н1 на основе анализа SPR. Клоны 28-1, 28-12, 29-8 и 20-12 были следующими лучшими антителами по надежности обнаружения мембранных PD-L1 в FFPE тканях. Хотя моноклональное антитело 13-1 характеризовалось лучшей специфичностью в отношении обнаружения мембранного PD-L1, максимальный уровень обнаружения был ниже, чем у других ведущих антител. Вестерн-блоттинг также выполняли с плюс/минус конкуренцией антигена для подтверждения специфичности выбранных антител в отношении PD-L1.
Сравнивали связывание моноклональных антител 5Н1 и 28-8 с мембранным PD-L1 в исследуемых образцах тканей FFPE, содержащих опухолевые клетки и проникающие в опухоль воспалительные клетки из разных типов опухолей. Мембранную экспрессию PD-L1 оценивали с использованием способа гис
- 61 037351 тологического счета, выполненного двумя независимыми патологами. Четыре NSCLC, две MEL и две RCC опухоли окрашивали для антитела 28-8 по 2 мг/мл и для 5Н1 - по 5 мг/мл. Данные приведены в табл. 6, и графически показаны на фиг. 9. Кроличье моноклональное антитело 28-8 показало лучшее обнаружение (более высокие показатели гистологического счета) для 7 из 10 образцов с использованием в 2,5 раза меньшего количества антитела, и только в одном образце был показатель гистологического счета для 5Н1 немного выше, чем для моноклонального антитела 28-8.
Таблица 6
Сравнение моноклональных антител 28-8 и 5Н1 путем анализа гистологического счета
Ткань Номер образца Средний показатель гистологического счета (5Н1) Средний показатель гистологического счета (28-8)
NSCLC 1080754В 245 261
NSCLC 1080766В 103 130
NSCLC 1080790 40 37
NSCLC 1080993В 12 16
Mel Т030668 98 ИЗ
Mel Т980744 98 123
Mel 1168657В 0 0
Mel Т980747 1 9
RCC 1164619В 4 4
RCC 1167809В 108 125
Taube et al. (2012) показали с помощью проточной цитометрии на культивируемых клетках, что моноклональное антитело 5Н1 связывалось с клеточной поверхностью, и специфичность связывания с PD-L1 подтверждали с использованием слитого белка PD-L1 для конкурентного блокирования связывания моноклонального антитела 5Н1 со срезами тканей. Эти авторы также сравнивали 5Н1 с кроличьим поликлональным антителом к HPD-L1, 4059, ранее описанным Gadiot et al. (2011), и обнаружили, что в то время как 5Н1 показывал паттерн окрашивания клеточной поверхности на образцах FFPE, поликлональное антитело 4059 продемонстрировало диффузное окрашивание цитоплазмы. Кроме того, когда 5Н1 сравнивали с поликлональным антителом 4059 с помощью анализа Вестерн-блоттинг, антитело 4059 связывалось с несколькими белками в лизатах клеток меланомы в дополнение к белку 50 кДа, соответствующего ожидаемой массе гликозилированного PD-L1, в отличие от 5Н1, который специфически обнаруживал полосу 50 кДа гликозилированного PD-L1 (Taube et al., 2012). В отличие от результатов Taube et al. (2012) и результатов, описанных в настоящем документе (суммированы в табл. 7), Gadiot et al. (2011) сообщили, что моноклональное антитело 5Н1 производило высокий уровень фонового окрашивания в образцах FFPE тканей, в то время как они обнаружили, что поликлональное антитело 4059 производило удовлетворительное специфическое окрашивание PD-L1 в образцах FFPE. 13 других антител, исследованных Gadiot et al. (2011), либо не окрашивали FFPE ткани, давая высокое фоновое окрашивание, либо не блокировались конкуренцией слитого белка PD-L1, подчеркивая трудности в получении антител к PDL1, которые специфически связываются с PD-L1 в FFPE тканях.
В настоящем исследовании автоматизированный анализ IHC (см. пример 10) использовали для оценки связывания нескольких коммерчески доступных антител к PD-L1 и 5Н1 (Dong et al., 2002) с образцами FFPE ткани, содержащими различные клетки, экспрессирующие PD-L1. Результаты, суммированные в табл. 7, показывают, что ни одно из исследованных коммерчески доступных антител специфически не распознает экспрессию мембранных PD-L1 в тканях человека, известных как экспрессирующие PD-L1, или четко различают клетки СНО, экспрессирующие PD-L1, по сравнению с нетрансфицированными исходными клетками СНО, которые не экспрессируют PD-L1. Неспособность поликлонального антитела (pAb) 4059 специфически связываться с распознанным мембранным PD-L1 согласуется с выводами Taube et al. (2012). Связывание 28-8 было таким же, как 5Н1 в этом анализе, тем не менее анализ гистологического счета показывает, что 28-8 работает лучше, чем 5Н1.
- 62 037351
Таблица 7
Связывание моноклональных антител с образцами FFPE, содержащими экспрессирующие PD-Ll-клетки
Источник Типы антител № клона(моноклон, антитело) /№ в каталоге(поликлон, антитело) Позит. против негат. окраш-е клеток PD-L1* Позитивные ткани человека^
MBL моноклон. антитело 27А2 Провалено Провалено
BioLegend моноклон. антитело 29Е.2АЗ Провалено Провалено
eBiosciences моноклон. антитело М1Н1 Нет окраш-я Нет окраш-я
Collaborator моноклон. антитело 5Н1 Пройдено Пройдено
Pro Sci поликлон. антитело 4059 Провалено Провалено
LifeSpan BioSciences поликлон. антитело LS-B480/0604 Провалено Провалено
Bristol-Myers Squibb моноклон. антитело 28-8 Пройдено Пройдено
*PD-L1, стабильно трансфицированные клетки CHO против исходного отрицательного контроля CHO-S;
t PD-L1-положительные ткани, включенные в миндалины и/или тимус;
моноклон. антитело, мышиное моноклональное антитело; поликлон. антитело, кроличье поликлональное антитело.
Пример 10.
Разработка протокола автоматизированной IHC для оценки экспрессии PD-L1.
Протокол автоматизированной IHC разрабатывали для анализа экспрессии PD-L1 в FFPE образцах. Срезы тканей (4 мкм) устанавливали на стекла, депарафинизировали в autostainer (Leica) путем замачивания дважды в течение 5 мин в ксилоле и повторно гидратировали путем замачивания дважды по 2 мин каждый раз в 100% этаноле, дважды в 95% (об./об.) этаноле, один раз в 70% (об./об.) этаноле и один раз в деионизованной воде (dH2O). Демаскировку антигена проводили с использованием decloaking chamber (Biocare Medical Decloaking Chamber Plus) и буфера Dako pH 6, нагретого до 110°C (P1) в течение 10 мин, а затем переходили к следующей стадии (P2 включенный вентилятор при 98°С; выключенный вентилятор при 90°С). Предметные стекла охлаждали при комнатной температуре (RT) в течение 15 мин и промывали водой в течение приблизительно 1 мин.
Реагенты устанавливали на автостейнер (BioGenex i6000) и область ткани определяли с использованием pap pan. Анализ IHC, проходящий с использованием автостейнера в режиме исследования, содержит следующие стадии:
нейтрализация эндогенной пероксидазы с использованием блока пероксидазы (Leica) в течение 10 мин с последующей промывкой 3 раза промывочным буфером IHC (Dako);
применение блока белка (Leica) к стеклам и инкубирование в течение 10 мин при комнатной температуре с последующим промыванием 3 раза промывочным буфером;
применение первичного антитела к стеклам (2 мкг/мл) и инкубирование в течение 1 ч при комнатной температуре с последующим промыванием 6 раз промывочным буфером;
добавление вторичного блока (NovoLink Kit) к стеклам и инкубирование в течение 30 мин с последующей промывкой 6 раз промывочным буфером;
добавление полимера NovoLink (NovoLink Kit) к стеклам и инкубирование в течение 30 мин с последующим промыванием 6 раз промывочным буфером;
добавление субстратов хромогена DAB (NovoLink Kit) и развитие в течение 3 мин, с последующим ополаскиванием 5 раз с dH2O при комнатной температуре;
контрастное окрашивание гематоксилином (NovoLink Kit) в течение 1 мин при комнатной температуре с последующим промыванием по 3 раза dH2O 5 раз при комнатной температуре.
Первичное антитело выбирали из кроличьих антител к PD-L1, показанных в табл. 4; моноклональное антитело 28-8 было предпочтительным антителом. В качестве отрицательного контроля использова- 63 037351 ли IgG кролика (Dako). Срезы тканей дегидратировали с использованием автостейнера Leica путем промывания один раз в течение 2 мин в 70% этаноле, дважды в течение 2 мин в 95% этанол и трижды в течение 2 мин в 70% этаноле, затем очищали промыванием три раза в течение 5 мин в ксилоле. Срезы постоянно устанавливали на предметное стекло с пермаунтом, покрытое покровным стеклом, и переносили в химический колпак для высушивания.
Пример 11.
Дизайн фазы 1 клинического исследования по антителу к PD-L1.
Дизайн исследования.
Фазу 1 исследования проводили с целью оценки безопасности и переносимости BMS-936559 (также называемым в настоящем документе и в патенте США № 7943743 как 12А4) у пациентов с выбранными прогрессирующими солидными опухолями. Вторичные цели включали в себя первоначальную оценку противоопухолевой активности BMS-936559 и фармакокинетическую оценку. Фармакологические измерения были включены в поисковые задачи. Пациентов лечили в 6-недельных циклах BMS-936559, вводимых в виде 60-минутной внутривенной инфузии каждые 2 недели в дни 1, 15 и 29 из каждого цикла. Пациенты продолжали лечение до 16 циклов, если они не испытали неприемлемой токсичности, прогрессирования заболевания или отзывали свое согласие. У некоторых пациентов, которые были клинически стабильными, лечение за начальным прогрессированием заболевания было разрешено до тех пор, пока дальнейшее прогрессирование не было подтверждено.
Повышение дозы.
Пациенты с прогрессирующими NSCLC, MEL, CRC, RCC, карциномой яичников (OV), желудка (GC), молочной железы (ВС) и поджелудочной железы (PC) имели право быть включены в клиническое исследование. Используя дизайн ускоренного титрования, безопасность оценивали при дозах 0,3, 1, 3 и 10 мг/кг. Одного пациента зачисляли в каждую последующую когорту, пока AE не составлял >2 степени тяжести во время цикла 1. Два дополнительных пациента затем поступили на этом уровне дозы, и исследование перешло к стандартному дизайну 3 + 3. Повышение или снижение дозы у одного и того же пациента не допускалось. Максимально переносимую дозу (MTD) определяли как наиболее высокую дозу, при которой менее чем одна треть пациентов характеризовалась дозолимитирующей токсичностью.
Расширение когорты.
Первоначально пять расширенных когорт (п=16/когорта) были зачислены на 10 мг/кг для пациентов с NSCLC, MEL, RCC, OV и CRC. На основании исходных сигналов активности, дополнительные расширенные когорты (до п=16/когорта) были зарегистрированы для MEL (на 1,0 и 3,0 мг/кг), NSCLC (когорты с плоскоклеточной или не плоскоклеточной гистологией, рандомизированные на 1, 3 или 10 мг/кг) и на 10 мг/кг для PC, ВС и GC.
Пациенты.
Пациенты должны были характеризоваться наличием задокументированных NSCLC, MEL, RCC, OV, CRC, PC, GC или BC и по меньшей мере одним неудачным предшествующим курсом соответствующей опухолевой терапии для прогрессирующего/метастатического заболевания (за исключением пациентов с PC или GC, которые могли быть нелеченными). Другие критерии включения включали в себя возраст >18 лет, ожидаемую продолжительность жизни >12 недель, показатель общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группе <2, измеримое заболевание, как определено RECIST v1.0, и адекватные гематологические, печеночные и почечные функции. Пациентам с подвергнутыми лечению метастазами в головной мозг было разрешено участвовать, если они были стабильны в течение по меньшей мере 8 недель. Основные критерии исключения включали в себя историю аутоиммунного заболевания или другие заболевания, требующие системных стероидов или иммуносупрессоров, до лечения с модулирующими Т-клетки антителами (включающие в себя к PD-1, к PD-L1 и к CTLA-4), истории ВИЧ или активного гепатита В или С.
В настоящем текущем исследовании 207 пациентов с NSCLC (n=75), MEL (n=55), CRC (n=18), RCC (n=17), OV (n=17), PC (n=14), GC (n=7) или ВС (n=4) получали BMS-936559 в течение 34-месячного периода и были включены в данные по безопасности. Эффективность характеризовалась у 160 поддающихся оценке ответа пациентов. Исходные демографические характеристики общей и поддающийся оценке ответа популяций пациентов были очень похожи (Brahmer et al., 2012). Среди подвергнутых лечению пациентов 86% ранее получали химиотерапию и 28% иммунологическую и биологическую терапию. Предшествующее лечение по типу опухоли включало в себя иммунотерапию (56%) и ингибитор B-RAF (9%) у пациентов с MEL; основанную на платине химиотерапию (95%) и ингибиторы тирозинкиназы (TKI; 41%) у пациентов с NSCLC; и нефрэктомию (94%), антиангиогенную терапию (82%) и иммунотерапию (41%) у пациентов с RCC (см. Brahmer et al., 2012, для более подробной информации по предварительному лечению пациентов).
Статистический анализ.
Все 207 пациентов, начинающие лечение по состоянию на дату анализа, были использованы для резюме исходных характеристик и АЕ. Популяция эффективности состояла из 160 пациентов с поддающимися оценке ответами, начавших лечение по меньшей мере за 7 месяцев до даты анализа. AE были зако- 64 037351 дированы с использованием MedDRA v14.1. Индивидуальные лучшие общие ответы получали от измерений рентгенологическим сканированием в соответствии с модифицированной RECIST v1.0. OR подтверждали по меньшей мере одной последовательной оценкой опухоли. Дополнительные подробности, касающиеся статистических способов, представлены в Brahmer et al. (2012).
Пример 12.
Оценки безопасности на пациентах, получавших антитело к PD-L1.
Оценки безопасности (клиническое обследование и лабораторные исследования) проводили на всех пациентах в начале исследования и регулярно (еженедельно в течение цикла 1 и два раза в неделю после этого). Тяжесть AE оценивали на основе NCI CTCAE, v3.0. Оценку заболевания с помощью компьютерной томографии (КТ) или магнитно-резонансной томографии выполняли в начале и до каждого цикла лечения.
MTD не достигло самой высокой исследуемой дозы 10 мг/кг BMS-936559.Средняя продолжительность терапии составила 12 недель (диапазон 2,0-111,1 недель). Относительная интенсивность дозы >90% была достигнута у 86% пациентов. 12 из 207 пациентов (6%) прекратили лечение из-за связанного с BMS-936559 AE (см. Brahmer et al., 2012, для более подробной информации).
АЕ, независимо от причинности (любой степени тяжести), были зарегистрированы у 188 из 207 пациентов. Оцененные исследователем связанные с BMS-936559 AE отмечали у 126 из 207 (61%) пациентов. Наиболее распространенными связанными с лекарственными средствами AE были усталость, инфузионные реакции, диарея, боль в суставах, сыпь, тошнота, зуд и головная боль. Большинство явлений характеризовались низкой степенью тяжести со связанной с BMS-936559 3-4 степенью тяжести, указанной у 19 из 207 (9%) пациентов (Brahmer et al., 2012). Спектр, частота и тяжесть связанных с BMS-936559 AE были похожи по уровням доз, за исключением инфузионных реакций. Связанные с лекарственными средствами AEOSI с потенциальной связанной с иммунной системой этиологией были обнаружены у 81 из 207 (39%) пациентов и включали в себя сыпь, гипотиреоз, гепатит и единичные случаи каждого из саркоидоза, эндофтальмита, сахарного диабета и миастении (Brahmer et al., 2012). Эти AE были преимущественно 1-2 степени тяжести и обычно обратимы с прерыванием лечения или прекращением приема препарата. Примечательно, что 9 пациентов получали лечение кортикостероидами для управления АЕ. AE улучшились или разрешились у всех пациентов. Кроме того, 4 из этих 9 пациентов сохраняли контроль над заболеванием, несмотря на лечение кортикостероидами. На эндокринные AE воздействовали заместительной терапией, и пациенты возобновляли лечение BMS-936559 по усмотрению лечащего врача. Инфузионные реакции наблюдались у 21 из 207 (10%) пациентов, преимущественно в дозе 10 мг/кг. Они были 1-2 степени тяжести, за исключением одного случая 3 степени тяжести при 10 мг/кг. Инфузионные реакции были, как правило, быстро обратимы с антигистаминными и жаропонижающими средствами, а в некоторых случаях кортикостероидами. Профилактическая схема лечения с антигистаминными и жаропонижающими препаратами была реализована в ходе исследования. Пациенты с 1-2 степенями тяжести инфузионных реакций смогли продолжить лечение с BMS-936559 с профилактическими антигистаминными и жаропонижающими средствами и при пониженной скорости инфузии. Связанные с BMS-936559 серьезные AE происходили у 11 из 207 (5%) пациентов. По состоянию на дату анализа данных, 45 пациентов (22%) умерли (Brahmer et al., 2012); не наблюдалось ни одного случая смерти, связанного с лекарственными средствами.
Пример 13.
Анализы фармакокинетики/фармакодинамики антитела к PD-L1.
Для анализа ФК собирали серийные образцы крови и концентрации в сыворотке BMS-936559 количественно определяли с помощью ELISA. Мононуклеарные клетки периферической крови выделяли от пациентов на исходном уровне и после одного цикла лечения для анализа RO PD-L1 с помощью BMS-936559 на циркулирующих CD3-позитивных Т-клетках с помощью проточной цитометрии (Brahmer et al., 2010). Концентрации BMS-936559 в сыворотке увеличивались в зависимости от дозы 1-10 мг/кг (n=131). Средняя геометрическая площадь под кривой (0-14 дней) для 1, 3 и 10 мг/кг уровней доз составляла 2210, 7750 и 36620 мкг/мл-ч (коэффициент вариации [CV] 34-59%) соответственно; геометрические средние пиковые концентрации в этих дозах составляли 27, 83 и 272 мкг/мл (CV 30-34%) соответственно после первой дозы. Период полужизни BMS-936559 оценивали от популяционных фармакокинетических данных, как приблизительно 15 дней. RO PD-L1 на CD3-позитивных лимфоцитах периферической крови оценивали у 29 пациентов с MEL в конце цикла 1 лечения, в дозах BMS-936559 от 1-10 мг/кг. Медиана RO превышала 65% для всех групп (Brahmer et al., 2012).
Пример 14.
Противоопухолевая эффективность, проявляемая антителом к PD-L1.
160 из 207 пациентов, подвергнутых лечению, оценивали на ответ в феврале 2012 г. и включали пациентов с NSCLC, MEL, CRC, RCC, OV и PC, но не пациентов с GC или ВС. Клиническая активность наблюдалась при всех дозах >1 мг/кг (Brahmer et al., 2012). OR (подтвержденный полный [CR] или частичный [PR] ответы) наблюдались у пациентов с MEL, NSCLC, RCC, OV (табл. 8), как показано на репрезентативных спайдер-диаграммах и КТ (фиг. 10-13), и многие OR также были прочными (табл. 9).
- 65 037351
Четыре дополнительных пациента характеризовались стойким снижением повреждений-мишеней в присутствии новых поражений в соответствии со связанными с иммунной системой паттернами ответов; однако для целей расчета доли ответов они не были классифицированы как отвечающие на лечение. Противоопухолевые ответы и/или длительное стабильное заболевание (SD) наблюдались у пациентов с различными предшествующими полученными курсами лечения. OR были обнаружены даже у пациентов с обширным бременем метастатического заболевания.
У пациентов с MEL были 9 OR во всех уровнях доз 1, 3 и 10 мг/кг с частотой отклика 6, 29 и 19% соответственно. Три пациента с MEL достигли CR. Все девть пациентов с MEL, которые испытали OR, начали лечение >1 года до анализа данных; из них пять характеризовались длительностью отклика >1 года. Кроме того, 14 пациентов с MEL (27%) характеризовались SD длительностью >24 недель. У пациентов с NSCLC было 5 OR среди уровней доз 3 и 10 мг/кг с частотой отклика 8 и 16% соответственно. Наблюдались OR у пациентов с неплоскоклеточной (n=4) или плоскоклеточной гистологией (n=1). Все пять отвечающих на лечение пациентов с NSCLC начали лечение длительностью >24 недель до анализа данных; из них три пациента характеризовались наличием ответов продолжительностью >24 недель. Шесть дополнительных пациентов с NSCLC характеризовались наличием SD длительностью >24 недель. Наблюдался 1 PR из 17 пациентов с OV (частота отклика 6%) и три пациента (18%) с SD длительностью >24 недель, все на 10 мг/кг. У пациентов с RCC были OR у 2 из 17 (12%) пациентов, получавших 10 мг/кг, с ответами продолжительностью 4 и 18 месяцев соответственно. Семь дополнительных пациентов с RCC характеризовались SD длительностью >24 недель.
Таблица 8
Клиническая активность BMS-936559 у 160 поддающихся оценке ответа пациентов*
Тип опухоли Доза (мг/кг) η ORR§ Кол-во пациентов(%) [95% CI] SD > 24 нед. Кол-во пациентов(%) [95% CI] PFSR** в 24 нед. (%) [95% CI]
MEL о,з 1 0 [0-98] 0[0-98] N/A
1 18 1 (6) [0,1-27] 6(33)[13-59] 39 [16-61]
3 17 5 (29)т [10-56] 3 (18) [4-43] 47 [21-72]
10 16 3 (19)11 [4_46] 5 (31) [11-59] 44 [19-68]
Все MEL 52 9(17) (8-30) 14 (27) [16-41] 42 [28-56]
NSCLC§ 1 И 0 [0-29] 0[0-29] N/A
Плоскоклеточный 1 1 0 [0-98] 0[0-98] N/A
Неплоскоклеточный 1 10 0 [0-31] 0[0-31] N/A
3 13 1 (8) [0,2-36] 1 (8) [0,2-36] 34 [7-60]
Плоскоклеточный 3 4 0 [0-60] 1 (25) [0,6-81] 50 [1-99]
Неплоскоклеточный 3 9 1 (И) [0,3-48] 0[0-34] 25 [0-55]
10 25 4 (16) [5-36] 5(20)[7-41] 46 [25-67]
Плоскоклеточный 10 8 1 (13) [0,3-53] 2(25) [3-65] 47 [10-83]
Неплоскоклеточный 10 17 3 (18)[4-43] 3 (18) [4-43] 46 [20-72]
BceNCSLC 49 5(10) [3-22] 6(12) [5-25] 31 [17-45]
Все плоскоклет, 13 1 (8) [0,2-36] 3 (23,1)[5-54] 43 [15-71]
Все неплоскоклет, 36 4 (И) [3-26] 3 (8) [2-23] 26 [10-42]
OV 3 1 0[0-98] 0 [0-98] N/A
10 16 1 (6) [0,2-30] 3 (19)[4-46] 25 [4-46]
Все OV 17 1 (6) [0,1-29] 3 (18) [4-43] 22 [2-43]
RCC 10 17 2(12) [2-36] 7 (41)[18-67] 53 [29-77]
CI обозначает доверительные интервалы, MEL - меланома, RCC - почечноклеточная карцинома, NSCLC - немелкоклеточный рак легкого, OV - рак яичников, RCC - почечноклеточная карцинома, N/A - не применимо, ORR - частота объективного ответа (полный ответ + частичный ответ), SD - стабильное заболевание и PFSR - выживаемость без прогрессирования.
*Популяция эффективности состоит из пациентов с поддающимся оценке ответом, начавших лечение по меньшей мере за 7 месяцев до даты анализа и характеризующихся наличием измеримого заболевания на базовой оценке опухоли и по меньшей мере од
- 66 037351 ним из следующего: оценкой опухоли в исследовании, клиническим прогрессированием или смертью.
'Включает в себя два CR.
tt Включает в себя один CR.
§Частота объективных ответов ({[CR+PR]^n}x 100) основана только на подтвержденных ответах с доверительными интервалами, рассчитанными с использованием способа Клоппера-Пирсона.
**Уровень выживаемости без прогрессирования составлял долю пациентов, которые не прогрессировали и были живы в течение 24 недель, рассчитанных по методологии Каплана-Мейера с доверительными интервалами с использованием способа Greenwood. Индивидуальные ответы пациентов были вынесены за RECIST v1.0 с модификацией (см. протокол исследования в Brahmer et al. (2012), N. Engl. J. Med. (представленный) для получения дополнительной информации).
Таблица 9
Продолжительность объективных ответов на BMS-936559*
Тип опухоли Доза (мг/кг) Кол-во пациентов с OR Продолжительность ответа (месяцы)!
MEL 1 1 6,9
3 5 23,5+, 22,9+, 16,2+, 4,1+, 3,5
10 4 24,6+, 23,9+, 18,0+, 17,0
NSCLC 1 0 9,2+
3 1 2,3+
10 4 16,6+, 12,6+, 9,8, 3,5
RCC 10 2 18, 4
OV 10 1 1,3+
*MEL обозначает меланому, NSCLC - немелкоклеточный рак легкого, RCC - почечноклеточный рак, OV - рак яичников.
Т Время от первого ответа до времени задокументированной прогрессии, смерти или подвергнутых цензуре данных (обозначается +), время до последней оценки опухоли.
Пример 15.
Дизайн фазы 1 клинического исследования по анти-PD-1 плюс анти-CTLA-4 при прогрессирующей MEL.
Дизайн исследования.
В этой фазе 1 исследования последующие когорты пациентов лечили увеличивающимися дозами внутривенного ниволумаба и ипилимумаба, вводимыми одновременно (одновременная схема лечения) и отдельно, две когорты пациентов, получавших ранее ипилимумаб, получали только ниволумаб (последовательная схема лечения).
Для одновременной схемы лечения пациенты получали в течение индукционного периода ниволумаб и ипилимумаб каждые 3 недели в течение 4 доз, а затем только ниволумаб каждые 3 недели в течение 4 доз. Комбинированное лечение впоследствии продолжалось в период поддерживающей терапии каждые 12 недель в течение до 8 доз. Когда оба препарата вводили вместе, ниволумаб вводили в первую очередь. В когорте дозы ниволумаба и ипилимумаба оставляли постоянными в течение периодов индукции и поддержания. Период оценки дозолимитирующей токсичности был на 9 неделе. Оценивание опухолей происходило на неделях 12, 18, 24 и 36, а затем каждые 12 недель после этого.
В последовательном режиме пациенты, ранее получавшие ипилимумаб до включения в исследование, получали ниволумаб каждые 2 недели в течение до 48 доз. Терапию с ниволумабом начинали в течение 4-12 недель после монотерапии с ипилимумабом. Оценки опухолей проводили на 8-й неделе, а затем каждые 8 недель после этого. Ответы опухолей на лечение устанавливали с использованием mWHO и связанных с иммунной системой критериев mWHO для обеих схем лечения.
После завершения терапии пациенты без подтвержденного прогрессирования заболевания продолжали до 2,5 лет. Пациенты с CR, PR или SD > 24 недель и последующим прогрессированием заболевания могли быть повторно подвергнуты лечению с оригинальной схемой лечения. Оценку безопасности проводили в соответствии с протоколом.
Тяжесть АЕ оценивали в соответствии с общей терминологией критериев оценки нежелательных явлений Национального института онкологии, версия 3.0. Оценку заболевания с использованием КТ и/или MPT при необходимости проводили в соответствии с протоколом.
- 67 037351
Повышение дозы и расширение когорты.
Исследование изначально планировалось для оценки одновременной схемы лечения с использованием стандартного дизайна 3 + 3 для фазы повышения дозы с последующим расширением когорты в общей сложности до 16 пациентов в максимально переносимой дозе или максимальной введенной дозе. Период оценки дозолимитирующей токсичности (DLT) для повышения дозы составлял 9 недель. Повышение дозы для отдельного пациента не допускалось, и пациенты, у которых наблюдалась DLT, были отстранены от терапии. Пациенты, которые вышли из исследования в течение периода оценки DLT по другим, отличным от связанной с лекарственными средствами токсичности, причинам, могли быть заменены. Протокол был изменен, чтобы позволить расширение любой когорты с одновременной схемой лечения во время повышения дозы для N = до 12 пациентов. Две когорты с последовательной схемой лечения одной (от 6 до 16 пациентов в каждой) были добавлены позже; пациенты получали ниволумаб (1 или 3 мг/кг) после предварительного получения ипилимумаба.
Пациенты.
В исследование включали пациентов в возрасте 18 лет и с диагнозом измеримой, неоперабельной стадии III или IV меланомы; показателем общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группы 0-1, где 0 означает бессимптомное и 1 умеренное симптоматическое; адекватной функцией органов и продолжительностью жизни >4 месяцев. Пациенты с активными, не подвергаемыми лечению метастазами центральной нервной системы; историей аутоиммунных заболеваний; предшествующей терапией с модулирующими Т-клетки антителами (за исключением ипилимумаба для когорт с последовательной схемой лечения); ВИЧ или гепатитом В или С были исключены. В когорте с последовательной схемой лечения пациенты должны были получать три предшествующие дозы ипилимумаба, с последней введенной дозой в течение 4-12 недель от начала ниволумаба. Пациенты с CR, прогрессией с признаками клинического ухудшения или историей AE высокой степени тяжести, связанной с ипилимумабом, были исключены (см. Wolchok et al., 2013a, для подробностей протокола).
пациентов лечили в период с декабря 2009 г. по февраль 2013 г., 53 с одновременной схемой лечения и 33 с последовательной схемой лечения. Исходные характеристики пациентов подробно описаны в Wolchok et al. (2013a). В одновременной и последовательной схемах лечения 38 и 100% пациентов соответственно получали предшествующую системную терапию. Большинство пациентов характеризовались наличием заболевания М1с и >30% характеризовались повышенным уровнем лактатдегидрогеназы (ЛЦГ). Большинство пациентов, включенных в когорты последовательной схемы лечения, продемонстрировали рентгенографическое прогрессирование (73%) с предварительным лечением с ипилимумабом.
Иммуногистохимия PD-L1.
Экспрессию PD-L1 до воздействия измеряли с помощью IHC в опухолевых образцах FFPE с использованием кроличьего моноклонального антитела к PD-L1, 28-8, и автоматизированного анализа, разработанного Dako (Carpinteria, CA). Специфичность антитела оценивали путем вестерн-блоттинга против рекомбинантного белка PD-L1 и лизатов из экспрессирующих и не экспрессирующих PD-L1 клеточных линий. Выполняли анализ IHC с и без конкуренции антигена и оценку паттернов окрашивания в нормальных тканях человека. Проверяли аналитическую чувствительность, специфичность, воспроизводимость, повторяемость и надежность в иммуногистохимическом анализе и выполняли все предварительно определенные критерии приемлемости. Два патолога, не зная результаты, независимо читали и устанавливали баллы для всех клинических образцов. Образец определяли как PD-L1-положuтельный, если 5% опухолевых клеток проявляли окрашивание мембранных PD-L1 любой интенсивности в срезе с 100 подвергнутыми анализу клетками.
Статистический анализ.
Все пациенты (N=86) по состоянию на февраль 2013 г. использовались для описания базовых характеристик, безопасности и абсолютного количества лимфоцитов (ALC), а также анализа окрашивания PD-L1. Популяция эффективности состояла из 82 пациентов с поддающимися оценке ответами, которые получили по меньшей мере одну дозу исследуемой терапии, характеризовались наличием измеримого заболевания исходно и одним из следующих: оценкой опухоли в ходе лечения >1, клиническим прогрессированием или смертью до первой оценки опухоли в ходе лечение. AE были закодированы с использованием MedDRA, версия 15.1. Выбранные AE с потенциальными иммунологическими этиологиями определяли с использованием заранее определенного списка терминов MedDRA. Лучшие общие ответы получали программно из опухолевых измерений, предусмотренных исследовательским сайтом рентгенолога и исследователями в модифицированной WHO (mWHO) или связанных с иммунной системой критериев ответа (Wolchok et al., 2009). Полные и частичные ответы подтверждали по меньшей мере одной последующей оценкой опухоли. Анализ также проводили для оценки масштабов сокращения поражениймишеней радиографической оценкой. Ответ характеризовали как глубокий, если была отмечена редукция на 80% по сравнению с базовыми показателями. Неподтвержденные ответы по состоянию на дату настоящего анализа также включали в оценку совокупной клинической активности.
Пример 16.
Оценки безопасности на пациентах с MEL, получавших анти-PD-1 плюс анти-CTLA-4.
Для одновременной схемы лечения (n=53) AE любой степени тяжести, независимо от определения,
- 68 037351 наблюдались у 98% пациентов. Связанные с лечением AE наблюдались у 93% пациентов, наиболее распространенные из которых представляют собой сыпь (55%), зуд (47%), усталость (38%) и диарею (34%). AE 3-4 степени тяжести, независимо от определения, наблюдались у 72% пациентов, в то время как 3-4 степень тяжести связанных с лечением явлений отмечалась у 53%, при этом наиболее распространенные из которых представляют собой повышение липазы (13%), аспартатаминотрансферазы (13%) и аланинаминотрансферазы (11%). 6 из 28 (21%) пациентов характеризовались степенью тяжести 3-4 дозолимитирующих связанных с лечением событий. Связанные с лечением серьезные AE были зарегистрированы у 49% больных. Общие связанные с лечением выбранные AE 3-4 степени тяжести включали в себя печеночные (15%), желудочно-кишечного тракта (9%) и почечные (6%) события. Единичные случаи пневмонии и увеита наблюдались, в соответствии с историческим опытом монотерапии. 11 (21%) пациентов прекратили участие из-за связанных с лечением АЕ.
Когорта 3 (3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб) превысила MTD (3 из 6 пациентов испытывали бессимптомное повышение липазы 3-4 степени тяжести, которое сохранялось в течение 3 недель). Когорта 2 (1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб) идентифицировалась как MTD (увеит 3 степени тяжести, повышенные АСТ/АЛТ 3 степени тяжести у 1 пациента в каждой).
Для последовательной схемы лечения (n=33) AE любой степени тяжести, независимо от определения, наблюдались у 29 (88%) пациентов. Связанные с лечением AE наблюдались у 24 (73%) больных, причем наиболее общие включали в себя зуд (18%) и повышение липазы (12%). AE 3-4 степени тяжести, независимо от определения, наблюдались у 11 (33%) пациентов, в то время как связанные с лечением AE 3-4 степени тяжести наблюдались у 6 (18%) пациентов с повышением липазы как наиболее общим явлением (6%). Связанные с лечением серьезные AE были зарегистрированы у 7 (21%) пациентов. Эндокринные явления 3-4 степени тяжести отмечались как связанные с лечением отдельные AE у 2 пациентов. Один пациент характеризовался наличием пневмонита 2 степени тяжести. Три (9%) пациента прекратили участие из-за связанных с лечением АЕ.
Как для одновременных, так и последовательных схем лечения связанные с лечением AE были управляемыми и, как правило, обратимыми с иммунодепрессантами и/или заместительной терапией (для эндокринопатий) в более ранних алгоритмах, ранее установленных для ипилимумаба (см. листоквкладыш YERVOY®). Среди 86 пациентов, получавших лечение в исследовании, 28 из 73 пациентов (38%) со связанными с лекарственными средствами нежелательными явлениями, требовали сдерживания системными глюкокортикоидами. Три пациента требовали дополнительной иммуносупрессивной терапии инфликсимабом (2 пациента) или микофенолятмофетилом (1 пациент). Не было отмечено связанных с лечением смертей. Дополнительные сведения о AE и их сдерживания приведены в (Wolchok et al., 2013a).
Пример 17.
Эффективность, проявляемая с помощью комбинации анти-PD-1 и анти-CTLA-4 у пациентов с MEL.
Клиническая активность наблюдалась как с одновременными, так и последовательными схемами лечения (табл. 10 и 11). В когортах одновременной схемы лечения подтвержденные объективные ответы или критерии mWHO наблюдались у 21 из 52 (40%; 95% CI: 27-55) пациентов с поддающимся оценке ответом во всех дозах. После отмеченных нескольких пациентов, которые продемонстрировали основные ответы (приближающийся к CR), оценивали число пациентов по меньшей мере с 80% уменьшением опухоли, эмпирический порог, выбранный потому, что представляет собой уровень регрессии опухоли, который приближается к полному ответу. Эта глубина ответа было редкостью в опубликованных исследованиях блокады контрольной точки (Hodi et al., 2010; Topalian et al., 2012b). 16 пациентов характеризовались >80% уменьшением опухоли через 12 недель, включая в себя 5 CR (табл. 10, фиг. 14А и 15-17). В дополнение к 21 пациенту с OR с помощью критериев mWHO, у четырех пациентов наблюдался объективный ответ с помощью связанных с иммунной системой критериев ответа и у двух пациентов наблюдались неподтвержденные ответы. Эти пациенты не были включены в расчет ORR. Для одновременной схемы лечения общее доказательство клинической активности (обычный, неподтвержденный или связанный с иммунной системой ответ или SD >24 недель) наблюдалось у 65% (95% CI: 51-78, табл. 10) пациентов. Глубокое влияние одновременной комбинации может быть лучше всего оценено в каскадной диаграмме (фиг. 14В). Ответы продолжались среди 19 из 21 пациентов, отвечающих на лечение с длительностью в диапазоне от 6,1+ до 72,1+ недель во время анализа данных (табл. 12). Для пациентов в MTD (когорта 2, 1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб) OR происходила у 9 из 17 (53%; 95% CI: 2877) пациентов, включая в себя 3 CR. Все девять отвечающих на лечение пациентов достигали >80% уменьшения опухоли во время первой запланированной во время лечения оценки (табл. 10 и фиг. 14А). Для пациентов в когортах последовательной схемы лечения 6 из 30 пациентов достигли OR (20%; 95% CI: 8-39), включая в себя 1 CR. Четыре (13%) пациента достигли 80% уменьшения опухоли в 8 недель (табл. 11 и фиг. 18). Дополнительные пациенты характеризовались наличием связанных с иммунной системой (n=3) ответов или неподтвержденными (n=3) ответами.
Когда рассматриваются объективные, связанные с иммунной системой или неподтвержденные от- 69 037351 веты или SD >24 недель, свидетельство о клинической активности для последовательной схемы лечения наблюдалось у 43% (95% CI: 26-63). Каскадная диаграмма показывает, что пациенты, которые не реагировали на предварительный ипилимумаб, могут реагировать на последующий ниволумаб (фиг. 18С).
Таблица 10
Клиническая активность пациентов, получавших одновременную схему лечения с ниволумабом и ипилимумабом*
Кого рта Доза Пациенты с поддающимся оценке ответом η CR η PR η uPR1 η irPR§ η SD >24 нед η irSD§ >24 нед η Частота объективного ответа1 % [95% CI] Частота совокупной клинич. акт-ти11 % [95% CI] 80% редукция опухоли в 12 нед. η (%)
1 0,3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб 14 1 2 0 2 2(14) 0 21 [5-51] 50 [23-77] 4(29)
2 1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб 17 3 6 0 0 0 2(12) 53 [28-77] 65 [38-86] 7 (41)* **
2а 3 мг/кг ниволумаб + 1 мг/кг ипилимумаб 15 1 5 2 1 2(13) 0 40 [16-68] 73 [45-92] 5(33)
3 3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб 6 0 3 0 1 0 1(17) 50 [12-88] 83 [36-100] 0
Все Обычное лечение 52 5 16 2 4 4(8) 3(6) 40 [27-55] 65 [51-78] 16(31)
*CR обозначает полный ответ, PR - частичный ответ, uPR - неподтвержденный частичный ответ, irPR - связанный с иммунной системой частичный ответ, SD - стабильное заболевание, irSD- связанное с иммунной системой стабильное заболевание.
t Пациенты с поддающимся оценке ответом представляют собой тех, которые получали хотя бы одну дозу исследуемого терапии, характеризовались измеримым исходным заболеванием и одним из следующих: 1) по меньшей мере одной оценкой опухоли в исследовании, 2) клиническим прогрессированием или 3) смертью до первой оценки опухоли во время лечения.
^Пациенты, которые характеризовались PR после одной оценки опухоли, но не обладали достаточным последующим временем для подтверждения первоначального PR.
§Пациенты, которые характеризовались уменьшением опухолевого поражения-мишени в присутствии новых поражений в соответствии со связанными с иммунной системой PR или SD.
1l[(CR+PR)/кол-во пациентов с поддающимся оценке ответом] х 100. Доверительные интервалы рассчитывали по способу Клоппера-Пирсона.
H[(CR+PR+uCR+uPR+irPR+SD>24 недель+irSD>24 недель)/кол-во пациентов с поддающимся оценке ответом]х 100.
**Два дополнительных пациента в когорте 2 достигали >80% уменьшения опухоли во время их первой запланированной оценки, которая была проведена после 12-й недели.
Таблица 11
Клиническая активность пациентов, получавших последовательные схемы лечения ниволумаба и ипилимумаба*
Когор- та Доза Пациенты с поддающи мся оценке ответом1 η CR η PR η uPR1 η irPR§ η SD >24 нед. η irSD§ > 24 нед. η Частота объективно го ответа1 % [95% CI] Частота совокупной клинической активности II % [95% CI] 80% уменьшение опухоли в 8 недель η (%)
6 1 мг/кг ниволумаб + предш. ипилимумаб 16 1 5 2 2 1(6) 0 38 [15-65] 69 [41-89] 4(25)
7 3 мг/кг ниволумаб + предш. ипилимумаб 14 0 0 1 1 0 0 0 14 [2-43] 0
Все Последовательное лечение 30 1 5 3 3 1(3) 0 20 [8-39] 43 [26-63] 4(13)
*CR обозначает полный ответ, PR - частичный ответ, uPR - неподтвержденный частичный ответ, irPR - связанный с иммунной системой частичный ответ, SD = стабильное заболевание, irSD - связанное с иммунной системой стабильное заболевание.
t Пациенты с поддающимся оценке ответом представляют собой тех, которые получали хотя бы одну дозу исследуемого терапии, характеризовались измеримым исходным заболеванием и одним из следующих: 1) по меньшей мере одной оценкой опухоли в исследовании, 2) клиническим прогрессированием или 3) смертью до первой оценки опухоли во время лечения.
i п Пациенты, которые характеризовались PR после одной оценки опухоли, но не обладали достаточным по- 70 037351 следующим временем для подтверждения первоначального PR.
Таблица 12
Продолжительность подтвержденных объективных ответов отдельных пациентов
Когорта Доза Ответ Продолжительность ответа, недели
1 0,3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб CR 48,0+
PR 72,1+, 65,4+
2 1 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб CR 36,1+, 28,9+, 24,7+
PR 54,4+, 52,6, 23+, 18,4+, 14,0+, 11,1+
2а 3 мг/кг ниволумаб + 1 мг/кг ипилимумаб CR 7,7+
PR 18,1+, 12,3, 6,6+, 6,4+, 6,1+
3 3 мг/кг ниволумаб + 3 мг/кг ипилимумаб PR 38,7+, 31,3+, 12,1+
6 1 мг/кг ниволумаб + prior ипилимумаб CR 24,1+
PR 16,1+, 12,1+, 8,7+, 8,4+, 8,1+
7 3 мг/кг ниволумаб + prior ипилимумаб CR ΝΑ*
PR ΝΑ*
*Отсутствует; по состоянию на дату настоящего анализа не зарегистрировано подтвержденных объективных ответов.
Оценка экспрессии опухолевых PD-L1 и абсолютного количества лимфоцитов.
Экспрессию опухолевых PD-L1 и изменения ALC в периферической крови изучали в качестве биомаркеров для монотерапии с ниволумабом и ипилимумабом соответственно (Topalian et al., 2012b; Berman et al., 2009; Ku et al., 2010; Postow et al., 2012; Delyon et al., 2013). Экспрессию опухолевых PD-L1 характеризовали с помощью IHC окрашивания и анализировали фармакодинамические изменения ALC в периферической крови. Использование >5% граничного значения для определения положительности PD-L1, опухолевые образцы 21 из 56 (38%) пациентов были PD-L1-положительными. OR были замечены у пациентов либо с PD-L1-положительными (6/13), либо с PD-L1-отрицательными (9/22) опухолями среди пациентов, получавших одновременную схему лечения (апостериорное P-значение >0,99; точный критерий Фишера). В когортах последовательной схемы лечения численно большее количество общих ответов было замечено у пациентов с PD-L1-положительными образцами опухолей (4/8) по сравнению с пациентами с PD-L1-отрицательными опухолями (1/13), но цифры небольшие.
В отличие от наблюдений с монотерапией с ипилимумабом, соответствующий рост ALC от базового не был обнаружен у пациентов, получавших одновременную комбинацию, или у пациентов, получавших ниволумаб после терапии с ипилимумабом. В когорте одновременной схемы лечения пациентов с низким ALC на неделях от 5 до 7 (<1000 клеток/мкл) (Ku et al., 2010) характеризовались подобными OR (43%) по сравнению с пациентами с нормальной ALC на неделе от 5 до 7 (40%). Кроме того, в когорте последовательной схемы лечения 17% пациентов с низкой ALC характеризовались OR и 23% пациентов с нормальным или высоким ALC характеризовались наличием OR.
Обзор перечня последовательностей
SEQ ID NO: Описание
Аминокислотная последовательность Vh в 17D8
Аминокислотная последовательность Vh в 2D3
Аминокислотная последовательность Vh в 4Н1
Аминокислотная последовательность Vh в 5С4
Аминокислотная последовательность Vh в 4А11
Аминокислотная последовательность Vh в 7D3
Аминокислотная последовательность Vh в 5F4
- 71 037351
8 Аминокислотная последовательность Vl в 17D8
9 Аминокислотная последовательность Vl в 2D3
10 Аминокислотная последовательность Vl в 4Н1
И Аминокислотная последовательность Vl в 5С4
12 Аминокислотная последовательность Vl в 4А11
13 Аминокислотная последовательность Vl в 7D3
14 Аминокислотная последовательность Vl в 5F4
15 Аминокислотная последовательность Vh в 3G10
16 Аминокислотная последовательность Vh в 12А4
17 Аминокислотная последовательность Vh в 10А5
18 Аминокислотная последовательность Vh в 5F8
19 Аминокислотная последовательность Vh в ЮН 10
20 Аминокислотная последовательность Vh в 1В12
21 Аминокислотная последовательность Vh в 7Н1
22 Аминокислотная последовательность Vh в 11Е6
23 Аминокислотная последовательность Vh в 12В7
24 Аминокислотная последовательность Vh в 13G4
25 Аминокислотная последовательность Vl в 3G10
26 Аминокислотная последовательность Vl в 12А4
27 Аминокислотная последовательность Vl в 10А5
28 Аминокислотная последовательность Vl в 5F8
29 Аминокислотная последовательность Vl в 10Н10
30 Аминокислотная последовательность Vl в 1В12
31 Аминокислотная последовательность Vl в 7Н1
32 Аминокислотная последовательность Vl в 11Е6
33 Аминокислотная последовательность Vl в 12В7
34 Аминокислотная последовательность Vl в 13G4
35 Аминокислотная последовательность Vh в 28-8
36 Аминокислотная последовательность Vl в 28-8
37 Последовательность CDR1 тяжелой цепи в 28-8
38 Последовательность CDR2 тяжелой цепи в 28-8
39 Последовательность CDR3 тяжелой цепи в 28-8
40 Последовательность CDR1 легкой цепи в 28-8
41 Последовательность CDR2 легкой цепи в 28-8
42 Последовательность CDR1 легкой цепи в 28-8
- 72 037351
Ссылки
AminAeta/. (2013) Aphase 1 study of nivolumab (anti-PD-1; BMS-936558) in combination with sunitinib, pazopanib or ipilimumab in patients (pts) with metastatic renal cell carcinoma (mRCC). Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Baitsch et al. (2012) PloS One 7(2):e30852.
Barbas et al. (1994) J Am Chem Soc 116:2161-62.
Barbas et al. (1995) Proc Natl Acad Sci USA 92:2529-33.
Beck et al. (2006) J Clin Oncol 24:2283-89.
Beiboer et al. (2000) J Mol Biol 296:833-49.
Berezov et al. (2001) BIAjournal 8 Scientific Review 8.
Blank etal. (2005) Cancer Immunol Immunother 54:307-14.
Bordeaux et al. (2010) BioTechniques 48:197-209.
Bourgeois et al. (1998) J Virol 72:807-10.
Brahmer et al. (2010) J Clin Oncol 28:3167-75.
Brahmer et al. (2012) N Engl J Med 366:2455-65.
Butte et al. (2007) Immunity 27:111 -22.
Butte et al. (2008) Mol Immunol 45:3567-72.
Chapman et al. (2011) N Engl J Med 364:2507-16.
Cheang et al. (2006) J Clin Oncol 24:5637-44.
Chow LQ et al. (2013) Phase 1 dose escalation study of recombinant interleukin-21 (rIL-21; BMS-982470) in combination with nivolumab (anti-PD-1; BMS-936558; ONO-4538) in patients (pts) with advanced or metastatic solid tumors. Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Condeelis and Weissleder (2010) Cold Spring Harb Perspect Biol 2010;2:a003848.
Clinical Trials Website, http://www.clinicaltrials.gov, дата последнего обращения 13 мая 2013 г.
Coppin et al. (2005) Cochrane Database SystRev 1 :CD001425.
Dasanu с/α/. (2012) Expert Opin Biol Ther 12:923-37.
Ditzel et al. (1996) J Immunol 157:739-49.
Dong etal. (2002) Nat Med 8 :793-800.
- 73 037351
Dong et al. (2003) JMol Med 81:281-87.
Dong et al. (2004) Immunity 20:327-36.
Epitomics (2013) http://www.epitomics.eom/services/7point.php#, дата последнего обращения 13 мая 2013 г.
Eton et al. (2002) J Clin Oncol 20:2045-52.
Facciabene et al. (2012) Cancer Res 72:2162-71.
Fife etal. (2009) Nat Immunol 10:1185-92.
Fischer et al. (2008) PloS One 3(12):e4069.
Flies etal. (2011) Yale J Biol Med 84:409-21.
Gadioteta/. (2011) Cancer 117:2192-201.
Garbe etal. (2012) Eur J Cancer 48:2375-90.
Girard et al. (2009) J Thorac Oncol 4:1544-49.
Gridelli et al. (2008) J Thorac OncoX 3:430-40.
Freeman etal. (2000) J Exp Med 192:1027-34.
Gajewski et al. (2010) Cancer J 16:399-403.
Hamanishi etal. (2007) Proc Natl Acad Sci USA 104:3360-65.
Hamid and Carvajal (2013) Expert Opin Biol Ther, Feb 19. [Предпечатная электронная публикация]
Hanna et al. (2004) J Clin Oncol 22:1589-97.
He et al. (2004) J Immunol 173:4919-28.
Hino et al. (2010) Cancer 116:1757-66.
Hodi et al. (2010) mV Engl J Med 363:711-23.
Hodi FS et al. (2013) An open-label, randomized, phase 2 study of nivolumab (anti-PD-1;
BMS-936558) given sequentially with ipilimumab in patients (pts) with advanced or metastatic melanoma (MEL). Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Hollinger and Hudson (2005) Nature Biotech 23(9): 1126-36.
Holt and Disis (2008) Clin Lung Cancer 9 Suppl 1 :S13-19.
Holt et al. (2011) Therapy 8:43-54.
Hudes et al. (2007) A Engl J Med 356(22):2271-81.
Hutson etal. (2012) Дии Oncol23 (Suppl. 9): ixel4, Abstr LBA22 PR.
Igarashi et al. (1995) JBiochem (Tokyo) 117:452-7.
Iwai et al. (2002) Proc Natl Acad Sci USA 99:12293-97.
Kim and Ahmed (2010) Curr Opin Immunol 22:223-30.
Klimka et al. (2000) Br J Cancer 83(2):252-60.
- 74 037351
Konishi et al. (2004) Clin Cancer Res 10:5094-100.
Latchman et al. (2001) Nat Immunol 2:261-8.
Lebbe et al. (2012) Ann Oncol 23 (Suppl 9):ix363, Abstr 116PD.
Levi et al. (1993) Proc Natl Acad Sci USA 90:4374-78.
Lipson et al. (2013) Clin Cancer Res 19:462-68.
Marincola et al. (2012) Adv Immunol 74:181-273.
McCabe and Wu (2010) Cancer Biother Radiopharm 25(3):253-61.
McDermott and Atkins (2006) Semin Oncol 33:583-87.
Mellman et al. (2011) Nature 480:480-489.
Miller (2006) Semin Oncol 33:S25-S31.
Mizoguchi et al. (1992) Science 258:1795-98.
Motzer et al. (2008) Lancet 372:449-56.
Motzer etal. (2010) Cancer 116:4256-65.
Mulders (2009) BJUInt 104:1585-89.
NCCN GUIDELINES® (2013), доступно по адресу:
http://www.nccn.org/professionals/physician gls/f guidelines. asp#site, дата последнего обращения 13 мая 2013 г.
Nishimura et al. (1999) Immunity 11:141-51.
Olafsen and Wu (2010) Semin NuclMed40(3):167-81.
Pardoll (2012) Nat Rev Cancer 12:252-64.
Park et al. (2010) Blood 116:1291-98.
Parry et al. (2005) Mol Cell Biol 25:9543-53.
Paterson etal. (2011) J Immunol 187:1097-105.
Публикация РСТ-заявки № WO 00/37504, опубликовано 29 июня 2000 года Pfizer, Inc и Abgenix, Inc.
Публикация РСТ-заявки № WO 01/14424, опубликовано 1 марта 2001 года Medarex, Inc.
РСТ-Публикация № WO 2011/066389, опубликовано 3 июня 2011 года Medlmmune Ltd.
РСТ-Публикация № WO 2012/145493, опубликовано 26 октября 2012 года Amplimmune, Inc.
Phan et al. (2003) Proc Natl Acad Sci USA 100:8372-77.
Polymenis and Stoller (1994) J Immunol 152:5218-29.
Rader etal. (1998) Proc Natl Acad Sci USA 95:8910-15.
Ribas etal. (2005) J Clin Oncol 23:8968-77.
- 75 037351
Rizvi NA et al. (2013) A phase 1 study of nivolumab (anti-PD-1; BMS-936558, ONO-4538) + platinum-based doublet chemotherapy (PT-doublet) in chemotherapy-naive non-small cell lung cancer (NSCLC) patients (pts). Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Robert et al. (2011) N Engl J Med 364:2517-26.
Rossi et al. (2005) Am J Clin Pathol 124:295-302.
Sanborn R et al. (2013) A phase 1 dose escalation and cohort expansion study of lirilumab (anti-KIR; BMS-986015) administered in combination with nivolumab (anti-PD-1; BMS936558) in advanced refractory solid tumors. Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Scagliotti et al. (2011) J Thorac Oncol 6:64-70.
Scartozi etal. (2010) Lung Cancer 68:433-37.
Screiber et al. (2011) Science 331:1565-70.
Sharma et al. (2011) Nat Rev Cancer 11:805-12.
Shepherd et al. (2000)./ Clin Oncol 18:2095-103.
Shepherd et al. (2011) J Thoracic Oncol 6:1763-73.
Shepherd et al. (2005) N Engl J Med 353:123-32.
Siegel et al. (2013) CA Cancer J Clin 63:11-30.
Sjoblom etal. (2006) Science 314:268-74.
Sosman et al. (2012) N Engl J Med 366:707-14.
Sompuram et al. (2006) Am J Clin Pathol 125:82-90.
Taube et al. (2012) Sci TranslMed4:127ra37.
Thompson etal. (2006) Cancer Res 66:3381-85.
Tivol et al. (1995) Immunity 3:541-47.
Topalian et al. (2011) J Clin Oncol 29:4828-36.
Topalian et al. (2012a) Curr Opin Immunol 24:1-6.
Topalian et al. (2012b) N Engl J Med 366:2443-54.
Topalian et al. (2012c) Curr Opin Immunol 24:207-12.
Topalian SL et al. (2013) Survival and long-term safety in cancer patients receiving the PD-1 antibody nivolumab, N Engl J Med (в печати).
Патент США № 6,051,227, выданный 18 апреля 2000 года Allison etal.
Патент США № 6,808,710, выданный 26 октября 2004 года Wood et al.
Патент США № 6,984,720, выданный 10 января 2006 года Korman et al.
Патент США № 7,034,121, выданный 25 апреля 2006 года Carreno et al.
Патент США № 7,488,802, выданный 10 февраля 2009 года Collins et al.
- 76 037351
Патент США № 7,635,757, выданный 22 декабря 2009 года Freeman et al.
Патент США № 7,943,743, выданный 17 мая 2011 года Korman et al.
Патент США № 8,008,449, выданный 30 августа 2011 года Korman et al.
Патент США № 8,168,757, выданный 1 мая 2012 года Finnefrock et al.
Патент США № 8,217,149, выданный 10 июля 2012 года Irving et al.
Патентная публикация США № 2009/0317368, опубликовано 24 декабря 2009 года Chen et al.
Weber JS et al. (2013) Safety and efficacy of nivolumab with vaccine in ipilimumab-naive or -refractory melanoma (отправлено в журнал).
Wolchok et al. (2009) Clin Cancer Res 15:7412-20.
Wolchok et al. (2010) Lancet Oncol 11:155-64.
Wolchok JD et al. (2013a) Nivolumab (anti-PD-1) plus ipilimumab (anti-CTLA-4) in advanced melanoma. N Engl J Med. (в печати).
Wolchok JD etal. (2013b) Clinical activity and safety of nivolumab (anti-PD-1, BMS936558, ONO-4538) in combination with ipilimumab in patients (pts) with advanced melanoma (MEL). Abstract at American Society of Clinical Oncology (ASCO) Annual
Meeting, May 31-June 4, 2013, Chicago (в печати).
Wolchok JD et al. (2013c) Four-year survival rates for patients with metastatic melanoma who received ipilimumab in phase II clinical trials. Ann Oncol (в печати).
Xu and Davis (2000) Immunity 13: 37-45.
Yang etal. (2011) J Immunol 187:1113-19.
Zou and Chen (2008) Nat Rev Immunol 8:467-77.

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ лечения человека, страдающего злокачественной опухолью, предусматривающий введение четырех доз комбинации 1 мг/кг антитела к PD-1 и 3 мг/кг антитела к CTLA-4 с интервалом каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 3 мг/кг один раз каждые 2 недели.
  2. 2. Способ по п.1, где антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.
  3. 3. Способ по пп.1, 2, где антитело к CTLA-4 представляет собой ипилимумаб.
  4. 4. Способ по любому из пп.1-3, при котором злокачественная опухоль выбрана из рака поджелудочной железы, рака кожи, рака молочной железы, рака легкого, сквамозного немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), несквамозного NSCLC, меланомы, рака почки, почечноклеточной карциномы, рака яичника, рака толстой и прямой кишок, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака желудка и кастрационно-резистентного рака предстательной железы.
  5. 5. Способ по любому из пп.1-4, при котором злокачественной опухолью является меланома.
  6. 6. Способ по любому из пп.1-5, при котором злокачественной опухолью является неоперабельная злокачественная опухоль.
  7. 7. Способ по любому из пп.1-6, при котором злокачественной опухолью является метастатическая опухоль.
  8. 8. Способ по любому из пп.1-7, при котором злокачественной опухолью является опухоль рецидивная или устойчивая к лечению злокачественная опухоль.
  9. 9. Способ по любому из пп.1-8, при котором злокачественной опухолью является метастатическая меланома.
  10. 10. Способ по любому из пп.1-9, дополнительно включающий в себя химиотерапию, облучение, хирургическое вмешательство, выключения эндокринной функции, введение ингибиторов ангиогенеза или антитела к PD-L1 или его антигенсвязывающей части или любую их комбинацию.
EA201492105A 2012-05-15 2013-05-13 Способ лечения злокачественных опухолей с использованием комбинации антител против pd-1 и ctla-4 EA037351B8 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261647442P 2012-05-15 2012-05-15
US201361790747P 2013-03-15 2013-03-15
PCT/US2013/040764 WO2013173223A1 (en) 2012-05-15 2013-05-13 Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EA201492105A1 EA201492105A1 (ru) 2015-06-30
EA037351B1 true EA037351B1 (ru) 2021-03-16
EA037351B8 EA037351B8 (ru) 2021-04-29

Family

ID=48577861

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201492105A EA037351B8 (ru) 2012-05-15 2013-05-13 Способ лечения злокачественных опухолей с использованием комбинации антител против pd-1 и ctla-4

Country Status (14)

Country Link
US (18) US9212224B2 (ru)
EP (3) EP2850102A1 (ru)
JP (4) JP6448533B2 (ru)
KR (3) KR102418979B1 (ru)
CN (3) CN104470949A (ru)
AU (4) AU2013263076B2 (ru)
BR (2) BR112014028826B1 (ru)
CA (2) CA2873402C (ru)
EA (1) EA037351B8 (ru)
HK (1) HK1203971A1 (ru)
IL (3) IL235591A0 (ru)
MX (1) MX368507B (ru)
SG (2) SG11201407190TA (ru)
WO (1) WO2013173223A1 (ru)

Families Citing this family (587)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2206517T (pt) 2002-07-03 2023-11-07 Tasuku Honjo Composições de imunopotenciação contendo anticorpos anti-pd-l1
ES2427646T5 (es) 2005-05-09 2017-08-22 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Anticuerpos monoclonales humanos contra muerte programada 1 (PD1) y métodos para el tratamiento del cáncer mediante el uso de anticuerpos anti-PD-1 solos o combinados con otros agentes inmunoterapéuticos
CA2630157C (en) * 2005-12-07 2018-01-09 Medarex, Inc. Ctla-4 antibody dosage escalation regimens
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
HUE034832T2 (hu) 2008-12-09 2021-12-28 Hoffmann La Roche Anti-PD-L1 antitestek és alkalmazásuk T-sejt-funkció fokozására
DK2488204T3 (en) 2009-10-16 2016-06-06 Oncomed Pharm Inc Therapeutic combination and use of DLL4 antagonist antibodies and blood pressure lowering agents
EP2533806B1 (en) 2010-02-10 2019-09-04 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods and materials for treating cancer
ES2788863T3 (es) 2010-05-14 2020-10-23 Massachusetts Gen Hospital Composiciones de neoantígenos específicos de un tumor para uso en el tratamiento de tumores
CN103517990A (zh) 2010-10-07 2014-01-15 通用医疗公司 癌症生物标志物
JP6240063B2 (ja) 2011-04-28 2017-11-29 ザ ブロード インスティテュート， インコーポレイテッド ヒストンデアセチラーゼ阻害剤
EP2714937B1 (en) 2011-06-03 2018-11-14 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of thyroid and kidney cancer subjects to lenvatinib compounds
EP3485903B1 (en) 2011-09-23 2022-11-16 Mereo BioPharma 5, Inc. Vegf/dll4 binding agents and uses thereof
US9550830B2 (en) 2012-02-15 2017-01-24 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (TREM-1)
US9517258B2 (en) 2012-03-15 2016-12-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
EP2850102A1 (en) 2012-05-15 2015-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
WO2014018979A1 (en) 2012-07-27 2014-01-30 The Broad Institute, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
DK2904111T3 (en) 2012-10-01 2018-03-12 Adaptive Biotechnologies Corp Immune competence evaluation of adaptive immune receptor diversity and clonality characterization
JP6371294B2 (ja) 2012-10-31 2018-08-08 オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｄｌｌ４アンタゴニストによる処置の方法およびモニタリング
JP6329170B2 (ja) 2012-12-07 2018-05-23 ケモセントリックス，インコーポレイティド ジアゾールラクタム
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
MY176706A (en) * 2013-03-15 2020-08-19 Genentech Inc Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions
AR095363A1 (es) * 2013-03-15 2015-10-14 Genentech Inc Biomarcadores y métodos para el tratamiento de condiciones relacionadas con pd-1 y pd-l1
US20160084839A1 (en) 2013-04-02 2016-03-24 Marisa Dolled-Filhart Immunohistochemical assay for detecting expression of programmed death ligand 1 (pd-l1) in tumor tissue
JP6433085B2 (ja) 2013-04-09 2018-12-05 ボストン バイオメディカル， インコーポレイテッド がんの処置に使用するための２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン
CN105339389B (zh) 2013-05-02 2021-04-27 安奈普泰斯生物有限公司 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体
KR20160013049A (ko) 2013-06-03 2016-02-03 노파르티스 아게 항-pd-l1 항체 및 mek 억제제 및/또는 braf 억제제의 조합물
GB2515032A (en) 2013-06-11 2014-12-17 Cilag Gmbh Int Guide for an injection device
GB2515038A (en) 2013-06-11 2014-12-17 Cilag Gmbh Int Injection device
GB2515039B (en) 2013-06-11 2015-05-27 Cilag Gmbh Int Injection Device
GB2517896B (en) 2013-06-11 2015-07-08 Cilag Gmbh Int Injection device
NZ715201A (en) 2013-08-01 2021-12-24 Five Prime Therapeutics Inc Afucosylated anti-fgfr2iiib antibodies
ES2749744T3 (es) * 2013-09-11 2020-03-23 Medimmune Ltd Anticuerpos anti-B7-H1 para tratar tumores
JP6623353B2 (ja) * 2013-09-13 2019-12-25 ベイジーン スウィッツァーランド ゲーエムベーハー 抗ｐｄ−１抗体並びにその治療及び診断のための使用
RS64268B1 (sr) 2013-09-20 2023-07-31 Bristol Myers Squibb Co Kombinacija anti-lag-3 antitela i anti-pd-1 antitela za lečenje tumora
EP3049442A4 (en) 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
AU2014329393B2 (en) * 2013-10-04 2020-04-30 Pin Pharma, Inc. Immunostimulatory HIV Tat derivative polypeptides for use in cancer treatment
EP3060581A4 (en) * 2013-10-25 2017-06-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Anti-pd-l1 monoclonal antibodies and fragments thereof
IL292510A (en) * 2013-11-05 2022-06-01 Cognate Bioservices Inc Combinations of checkpoint inhibitors and cancer drugs
DK3065770T3 (da) * 2013-11-05 2021-01-11 Bavarian Nordic As Kombinationsterapi til behandling af cancer med et poxvirus, der udtrykker et tumorantigen og en antagonist af en immuncheckpoint-inhibitor
US20150164047A1 (en) * 2013-11-07 2015-06-18 Urban Pet Haus, LLC Edible cat toy
US10801070B2 (en) 2013-11-25 2020-10-13 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer
US11725237B2 (en) 2013-12-05 2023-08-15 The Broad Institute Inc. Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data
WO2015088930A1 (en) * 2013-12-10 2015-06-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Immunohistochemical proximity assay for pd-1 positive cells and pd-ligand positive cells in tumor tissue
WO2015088847A1 (en) * 2013-12-11 2015-06-18 Glaxosmithkline Llc Treating cancer with a combination of a pd-1 antagonist and a vegfr inhibitor
CN105026428B (zh) 2013-12-12 2018-01-16 上海恒瑞医药有限公司 PD‑l抗体、其抗原结合片段及其医药用途
KR20240017102A (ko) * 2013-12-17 2024-02-06 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 탁산을 이용한 암 치료 방법
WO2015094996A2 (en) * 2013-12-17 2015-06-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Pd-l1 gene signature biomarkers of tumor response to pd-1 antagonists
EP3084001A4 (en) * 2013-12-17 2017-07-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Gene signature biomarkers of tumor response to pd-1 antagonists
GB201322626D0 (en) 2013-12-19 2014-02-05 Immutep S A Combined preparations for the treatment of cancer
GB201322725D0 (en) * 2013-12-20 2014-02-05 Immodulon Therapeutics Ltd Cancer therapy
CN106456724A (zh) 2013-12-20 2017-02-22 博德研究所 使用新抗原疫苗的联合疗法
WO2015103602A1 (en) * 2014-01-06 2015-07-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Pd1 and pdl1 antibodies and vaccine combinations and use of same for immunotherapy
JP2017503803A (ja) 2014-01-10 2017-02-02 シャンハイ バーディー バイオテック インコーポレイテッド Ｅｇｆｒ発現腫瘍を処置するための化合物及び組成物
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
CA2937655C (en) 2014-01-24 2022-06-28 Lam Therapeutics, Inc. Apilimod compositions for cancer treatment
US20170175197A1 (en) * 2014-01-29 2017-06-22 Caris Mpi, Inc. Molecular profiling of immune modulators
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CA2942039A1 (en) 2014-02-18 2015-08-27 Health Research, Inc. Combination therapy for hepatocellular carcinoma
US10308721B2 (en) * 2014-02-21 2019-06-04 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-DLL3 antibodies and drug conjugates for use in melanoma
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
CN106255510A (zh) 2014-03-05 2016-12-21 百时美施贵宝公司 使用抗pd‑1抗体与另一抗癌剂的组合治疗肾癌
WO2015143221A1 (en) * 2014-03-19 2015-09-24 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
WO2015143223A1 (en) * 2014-03-19 2015-09-24 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
CN103897036B (zh) * 2014-03-24 2016-02-24 郑州大学 一种pd-1蛋白胞外段亲和肽l8及其应用
WO2015157623A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Immune gene signatures in urothelial carcinoma (uc)
CA2947471A1 (en) 2014-05-13 2015-11-19 Medimmune Limited Anti-b7-h1 and anti-ctla-4 antibodies for treating non-small cell lung cancer
KR20170003692A (ko) 2014-05-15 2017-01-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항암제의 조합물을 사용한 폐암의 치료
DK3149042T3 (da) 2014-05-29 2019-11-04 Spring Bioscience Corp PD-L1-antistoffer og anvendelser deraf
EP3149481B1 (en) 2014-05-30 2019-01-09 Ventana Medical Systems, Inc. Multiplex assay for improved scoring of tumor tissues stained for pd-l1
DK3151921T3 (da) 2014-06-06 2019-12-02 Bristol Myers Squibb Co Antistoffer mod glucocorticoid-induceret tumornekrosefaktor- receptorer (gitr) og anvendelser deraf
US20170106067A1 (en) * 2014-06-12 2017-04-20 The Johns Hopkins University Combinatorial immunotherapy for pancreatic cancer treatment
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
EP3164194B1 (en) * 2014-07-03 2021-11-24 Yale University Dickkopf2 (dkk2) inhibition suppresses tumor formation
TWI687438B (zh) * 2014-07-03 2020-03-11 英屬開曼群島商百濟神州生物科技有限公司 抗ｐｄ-ｌ１抗體及其作為治療及診斷之用途
ES2910446T3 (es) 2014-07-09 2022-05-12 Birdie Biopharmaceuticals Inc Combinaciones anti-PD-L1 para tratar tumores
EP3168236B1 (en) * 2014-07-09 2019-09-04 Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. Anti-canine pd-1 antibody or anti-canine pd-l1 antibody
SG11201700207WA (en) * 2014-07-11 2017-02-27 Genentech Inc Anti-pd-l1 antibodies and diagnostic uses thereof
MY178347A (en) 2014-07-17 2020-10-08 Novo Nordisk As Site directed mutagenesis of trem-1 antibodies for decreasing viscosity
US10428146B2 (en) 2014-07-22 2019-10-01 Cb Therapeutics, Inc. Anti PD-1 antibodies
KR102540008B1 (ko) 2014-08-01 2023-06-02 쓰리엠 이노베이티브 프로퍼티즈 캄파니 종양을 치료하기 위한 방법 및 치료적 조합
CN105296433B (zh) 2014-08-01 2018-02-09 中山康方生物医药有限公司 一种ctla4抗体、其药物组合物及其用途
CN110964108B (zh) 2014-08-05 2023-07-07 中美冠科生物技术（太仓）有限公司 抗pd-l1抗体
CN106687124B (zh) * 2014-08-07 2022-03-15 冈村春树 并用il-18与分子靶向抗体的癌治疗药
KR102329681B1 (ko) 2014-08-28 2021-11-23 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 고순도의 퀴놀린 유도체 및 이를 제조하는 방법
JP6707531B2 (ja) 2014-09-09 2020-06-10 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｃｄ３８抗体による併用療法
CN107206071A (zh) 2014-09-13 2017-09-26 诺华股份有限公司 Alk抑制剂的联合疗法
EP3197918A1 (en) 2014-09-25 2017-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lung cancer using an anti-fucosyl-gm1 antibody
UY36351A (es) 2014-10-14 2016-06-01 Novartis Ag Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas
BR112017008914A2 (pt) 2014-10-29 2018-01-16 Five Prime Therapeutics, Inc. método para tratar câncer, composição e uso da composição
AU2015338974B2 (en) 2014-10-31 2021-08-26 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treatment of disease
ES2741399T3 (es) 2014-11-07 2020-02-10 Ai Therapeutics Inc Apilimod para el uso en el tratamiento de cáncer renal
CN113694193A (zh) 2014-11-13 2021-11-26 约翰·霍普金斯大学 检查点阻断和微卫星不稳定性
PT3221346T (pt) 2014-11-21 2020-10-23 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos compreendendo regiões constantes de cadeia pesada modificadas
MX2017006624A (es) 2014-11-21 2017-08-21 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra cd73 y sus usos.
AU2015353573B2 (en) * 2014-11-25 2020-09-03 Bristol-Myers Squibb Company Novel PD-L1 binding polypeptides for imaging
CN107207379B (zh) 2014-11-25 2021-08-10 百时美施贵宝公司 用于生物制品的18f-放射性标记的方法和组合物
JP6802791B2 (ja) 2014-12-04 2020-12-23 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 急性骨髄性白血病の治療のための抗ｃｄ３８抗体
EP3227335A1 (en) 2014-12-04 2017-10-11 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-cs1 and anti-pd1 antibodies to treat cancer (myeloma)
JP2018500332A (ja) * 2014-12-16 2018-01-11 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 中枢神経系新生物における免疫チェックポイント阻害剤の使用
WO2016100975A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Massachsetts Institute Ot Technology Molecular biomarkers for cancer immunotherapy
JP6649953B2 (ja) * 2014-12-19 2020-02-19 スサヴィオン バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド 免疫療法による治療および組成物
US10993997B2 (en) 2014-12-19 2021-05-04 The Broad Institute, Inc. Methods for profiling the t cell repertoire
US20170363614A1 (en) * 2014-12-22 2017-12-21 Enumeral Biomedical Holdings, Inc. Methods For Screening Therapeutic Compounds
MA40662B1 (fr) 2014-12-23 2020-12-31 Bristol Myers Squibb Co Anticorps contre tigit
EP3237003B1 (en) * 2014-12-24 2021-08-11 NexImmune, Inc Nanoparticle compositions and methods for immunotherapy
EP3240908A2 (en) * 2014-12-30 2017-11-08 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and compositions for prognosis and treatment of cancers
GB201500374D0 (en) * 2015-01-09 2015-02-25 Immutep S A Combined preparations for the treatment of cancer
GB201500319D0 (en) 2015-01-09 2015-02-25 Agency Science Tech & Res Anti-PD-L1 antibodies
US10632151B2 (en) 2015-01-22 2020-04-28 University Of Massachusetts Cancer immunotherapy
MA41460A (fr) 2015-02-03 2017-12-12 Oncomed Pharm Inc Agents de liaison à la tnfrsf et leurs utilisations
DK3254110T3 (da) * 2015-02-03 2020-05-18 Ventana Med Syst Inc Histokemisk test til vurdering af ekspression af programmeret død-ligand 1 (pd-l1)
US10983128B2 (en) 2015-02-05 2021-04-20 Bristol-Myers Squibb Company CXCL11 and SMICA as predictive biomarkers for efficacy of anti-CTLA4 immunotherapy
EP3256161A1 (en) * 2015-02-09 2017-12-20 Synta Pharmaceuticals Corp. Combination therapy of hsp90 inhibitors and pd-1 inhibitors for treating cancer
WO2016138182A1 (en) * 2015-02-24 2016-09-01 Nodality, Inc. Methods and compositions for immunomodulation
CA2976325C (en) 2015-02-25 2023-07-04 Eisai R&D Management Co., Ltd. Method for suppressing bitterness of quinoline derivative
NZ733854A (en) * 2015-02-26 2022-07-01 Merck Patent Gmbh Pd-1 / pd-l1 inhibitors for the treatment of cancer
KR20240064733A (ko) * 2015-03-04 2024-05-13 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 암을 치료하기 위한 pd-1 길항제 및 vegfr/fgfr/ret 티로신 키나제 억제제의 조합
AU2016231061B2 (en) 2015-03-11 2020-11-26 Cellectis Methods for engineering allogeneic T cell to increase their persistence and/or engraftment into patients
CA2979404A1 (en) * 2015-03-12 2016-09-15 Health Research, Inc. Combination of .beta.-adrenergic receptor antagonists and check point inhibitors for improved efficacy against cancer
AU2016233495B2 (en) 2015-03-13 2022-02-24 Cytomx Therapeutics, Inc Anti-PDL1 antibodies, activatable anti-PDL1 antibodies, and methods of use thereof
WO2016149387A1 (en) * 2015-03-18 2016-09-22 The Johns Hopkins University Androgen deprivation with immune checkpoint blockade delays the development of castration resistant prostate cancer
PE20171790A1 (es) 2015-03-23 2017-12-28 Bayer Pharma AG Anticuerpos anti-ceacam6 y sus usos
US20180071413A1 (en) * 2015-04-07 2018-03-15 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Non-invasive imaging of tumor pd-l1 expression
US20180064825A1 (en) * 2015-04-07 2018-03-08 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-pd-l1 immunotoxin for use in therapy
CA2987730C (en) 2015-04-08 2020-02-18 Nantomics, Llc Cancer neoepitopes
MX2017013178A (es) 2015-04-13 2018-03-01 Five Prime Therapeutics Inc Terapia de combinacion para cancer.
WO2016168150A2 (en) * 2015-04-13 2016-10-20 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Treatment for cancer metastasis
SG11201708223QA (en) 2015-04-17 2017-11-29 Bristol Myers Squibb Co Compositions comprising a combination of an anti-pd-1 antibody and another antibody
JP7236216B2 (ja) 2015-04-23 2023-03-09 ナントミクス，エルエルシー がんのネオエピトープ
KR20170140316A (ko) * 2015-04-28 2017-12-20 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체를 사용한 pd-l1-양성 흑색종의 치료
JP2018514550A (ja) * 2015-04-28 2018-06-07 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｐｄ−１抗体および抗ｃｔｌａ−４抗体を使用するｐｄ−ｌ１陰性黒色腫の処置
IL283877B (en) 2015-05-06 2022-07-01 Snipr Tech Ltd Changing bacterial populations and microbiota adaptation
TWI806815B (zh) 2015-05-20 2023-07-01 美商博德研究所有限公司 共有之ｇａｔａ３相關之腫瘤特異性新抗原
CR20170526A (es) 2015-05-20 2018-04-03 Janssen Biotech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD38 PARA EL TRATAMIENTO DE AMILOIDOSIS DE CADENA LIGERA y OTRAS ENFERMEDADES MALIGNAS HEMATOLÓGICAS POSITIVAS PARA CD38
CN104931690A (zh) * 2015-05-22 2015-09-23 华中科技大学同济医学院附属协和医院 一种pd-1抗体检测试剂盒及其应用
US20180155429A1 (en) * 2015-05-28 2018-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1 positive lung cancer using an anti-pd-1 antibody
CA2987410A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against ox40 and uses thereof
EP3303394B1 (en) 2015-05-29 2020-04-08 Agenus Inc. Anti-ctla-4 antibodies and methods of use thereof
EP3708681A1 (en) 2015-05-29 2020-09-16 F. Hoffmann-La Roche AG Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2016196389A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cell carcinoma
CA2987115C (en) 2015-06-01 2024-02-20 Peter C. Brooks Enhancing the therapeutic activity of an immune checkpoint inhibitor
TW201717935A (zh) * 2015-06-03 2017-06-01 波士頓生醫公司 用於治療癌症的組成物和方法
WO2016197067A1 (en) * 2015-06-05 2016-12-08 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Gm-csf/cd40l vaccine and checkpoint inhibitor combination therapy
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
CN106243225B (zh) * 2015-06-11 2021-01-19 智翔（上海）医药科技有限公司 新型抗-pd-l1抗体
US20180179282A1 (en) 2015-06-12 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of cancer by combined blockade of the pd-1 and cxcr4 signaling pathways
RU2729936C2 (ru) 2015-06-16 2020-08-13 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Противораковое средство
WO2016205277A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Merck Patent Gmbh Pd-l1 antagonist combination treatments
CA2986263A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Genentech, Inc. Methods of treating locally advanced or metastatic breast cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes
CA2990406A1 (en) 2015-06-22 2016-12-29 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for heme malignancies with anti-cd38 antibodies and survivin inhibitors
DK3313441T3 (da) * 2015-06-24 2024-04-15 Janssen Biotech Inc Immunmodulering og behandling af faste tumorer med antistoffer, der specifikt binder cd38
US20170044265A1 (en) * 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
WO2016207646A1 (en) * 2015-06-24 2016-12-29 Immodulon Therapeutics Limited A checkpoint inhibitor and a whole cell mycobacterium for use in cancer therapy
AU2016282986A1 (en) 2015-06-26 2018-02-01 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Cancer therapy targeting tetraspanin 33 (tspan33) in myeloid derived suppressor cells
KR20180021833A (ko) 2015-06-29 2018-03-05 더 락커펠러 유니버시티 증진된 효능제 활성을 갖는 cd40에 대한 항체
US9861621B2 (en) 2015-06-29 2018-01-09 Biomed Valley Discoveries, Inc. LPT-723 and immune checkpoint inhibitor combinations and methods of treatment
US20180153863A1 (en) * 2015-06-29 2018-06-07 Abraxis Bioscience, Llc Methods of treating solid tumors using nanoparticle mtor inhibitor combination therapy
KR102606071B1 (ko) 2015-06-29 2023-11-27 아브락시스 바이오사이언스, 엘엘씨 상피양 세포 종양을 치료하는 방법
WO2017004421A1 (en) * 2015-06-30 2017-01-05 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Resiquimod topical and injectable compositions for the treatment of neoplastic skin conditions
CN112710723A (zh) 2015-07-13 2021-04-27 佰欧迪塞克斯公司 受益于pd-1抗体药物的肺癌患者的预测性测试和分类器开发方法
KR20180040138A (ko) * 2015-07-13 2018-04-19 싸이톰스 테라퓨틱스, 인크. 항pd-1 항체, 활성화 가능한 항pd-1 항체, 및 이들의 사용 방법
RS61532B1 (sr) 2015-07-14 2021-04-29 Bristol Myers Squibb Co Postupak lečenja kancera primenom inhibitora imunološke kontrolne tačke; antitelo koje se vezuje za receptor programirane smrti-1 (pd-1) ili ligand programirane smrti-1 (pd-l1)
MX2018000619A (es) 2015-07-16 2019-03-06 Bioxcel Therapeutics Inc Nuevo enfoque para tratar el cancer mediante el uso de la inmunomodulacion.
DK3328419T3 (da) 2015-07-30 2021-10-11 Macrogenics Inc Pd-1-bindingsmolekyler og fremgangsmåder til anvendelse deraf
CN106397592A (zh) * 2015-07-31 2017-02-15 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 针对程序性死亡配体(pd-l1)的单域抗体及其衍生蛋白
WO2017023753A1 (en) 2015-07-31 2017-02-09 University Of Florida Research Foundation, Inc. Hematopoietic stem cells in combinatorial therapy with immune checkpoint inhibitors against cancer
JP6883579B2 (ja) 2015-08-11 2021-06-09 ウーシー バイオロジクス（ケイマン）インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１抗体
EA201890630A1 (ru) 2015-09-01 2018-10-31 Эйдженус Инк. Антитела против pd-1 и способы их применения
US20180231554A1 (en) * 2015-09-04 2018-08-16 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Programmed cell death (pd-1) inhibitor therapy for patients with pd-1-expressing cancers
JP2018527377A (ja) 2015-09-16 2018-09-20 ボード・オブ・リージエンツ，ザ・ユニバーシテイ・オブ・テキサス・システム 癌の処置におけるトポイソメラーゼ−ｉ阻害剤と免疫療法との組み合わせ
CN109071644B (zh) 2015-09-23 2023-09-19 昂考梅德药品有限公司 治疗癌症的方法和组合物
US20210284734A1 (en) * 2015-10-02 2021-09-16 Symphogen A/S Anti-pd-1 antibodies and compositions
JP2018532736A (ja) * 2015-10-12 2018-11-08 ナントミクス，エルエルシー チェックポイント阻害物質への感受性を予測するｍｓｉおよびネオエピトープの探索のための系、組成物、および方法
CN108884139A (zh) 2015-11-02 2018-11-23 戊瑞治疗有限公司 Cd80胞外域多肽及其在癌症治疗中的用途
MD3827845T2 (ro) 2015-11-03 2022-09-30 Janssen Biotech Inc Formulări subcutanate de anticorpi anti-CD38 și utilizări ale acestora
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
PL3370768T3 (pl) 2015-11-03 2022-06-13 Janssen Biotech, Inc. Przeciwciała specyficznie wiążące pd-1 i ich zastosowania
US11684656B2 (en) * 2015-11-04 2023-06-27 Taipei Veterans General Hospital Combination therapy for malignant diseases
WO2017077382A1 (en) 2015-11-06 2017-05-11 Orionis Biosciences Nv Bi-functional chimeric proteins and uses thereof
KR20180071376A (ko) 2015-11-17 2018-06-27 쑤저우 선카디아 바이오파마수티컬즈 컴퍼니 리미티드 Pd-l1 항체, 이의 항원-결합 단편 및 이의 약제학적 용도
TW202408573A (zh) 2015-11-18 2024-03-01 美商必治妥施貴寶公司 使用抗ｐｄ－１抗體與抗ｃｔｌａ－４抗體之組合以治療肺癌
AU2016356780A1 (en) 2015-11-19 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
TWI730013B (zh) * 2015-11-20 2021-06-11 生華生物科技股份有限公司 用於治療癌症的四環喹諾酮類似物組合療法
JP6832930B2 (ja) * 2015-11-22 2021-02-24 ヴェンタナ メディカル システムズ， インク． Ｐｄ−ｌ１陽性腫瘍組織における免疫細胞を同定する方法
SG10201913538VA (en) * 2015-11-23 2020-02-27 Five Prime Therapeutics Inc Fgfr2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
WO2017096248A1 (en) * 2015-12-02 2017-06-08 Clearlight Diagnostics Llc Methods for preparing and analyzing tumor tissue samples for detection and monitoring of cancers
NZ738202A (en) 2015-12-03 2019-07-26 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Cyclic purine dinucleotides as modulators of sting
WO2017098421A1 (en) 2015-12-08 2017-06-15 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Benzothiadiazine compounds
MY196756A (en) * 2015-12-14 2023-05-03 Macrogenics Inc Bispecific molecules having immunoreactivity with pd-1 and ctla-4, and methods of use thereof
US10392442B2 (en) 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
KR102378298B1 (ko) * 2015-12-18 2022-03-23 인스티튜트 구스타브 루시 Ｐｄ-1/ｐｄｌ-1 표적화 약물에 대한 반응의 평가 방법
ES2919552T3 (es) 2015-12-23 2022-07-27 Modernatx Inc Procedimientos de utilización de polinucleotidos codificadores de ligando ox40
CN106943597A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合
CN115554406A (zh) 2016-01-07 2023-01-03 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-cd20组合
JP2019504071A (ja) * 2016-01-15 2019-02-14 ザ・ウイスター・インステイテユート・オブ・アナトミー・アンド・バイオロジー がんを処置するための方法及び組成物
CN105717298A (zh) * 2016-01-29 2016-06-29 浙江数问生物技术有限公司 Pd-l1免疫组化试剂盒
WO2017136139A1 (en) 2016-02-01 2017-08-10 Biodesix, Inc. Predictive test for melanoma patient benefit from interleukin-2 (il2) therapy
EP3411397A1 (en) 2016-02-05 2018-12-12 Orionis Biosciences NV Cd8 binding agents
WO2017139755A1 (en) * 2016-02-12 2017-08-17 Rekoske Brian T Cancer therapy
US10906977B2 (en) * 2016-02-18 2021-02-02 Maine Medical Center Research Institute Enhancing the therapeutic activity of immune checkpoint inhibitor
KR102068600B1 (ko) 2016-03-04 2020-01-21 쓰촨 케룬-바이오테크 바이오파마수티컬 컴퍼니 리미티드 Pdl-1 항체, 그 약학적 조성물 및 그 용도
CN109476740A (zh) 2016-03-04 2019-03-15 百时美施贵宝公司 利用抗cd73抗体的联合治疗
WO2017156152A1 (en) * 2016-03-08 2017-09-14 Bioxcel Corporation Immunomodulation therapies for cancer
WO2017153952A1 (en) 2016-03-10 2017-09-14 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited 5-sulfamoyl-2-hydroxybenzamide derivatives
EP3433277A4 (en) 2016-03-23 2020-06-17 Mabspace Biosciences (Suzhou) Co., Ltd NEW ANTIBODIES AGAINST PD-L1
CN109310757A (zh) * 2016-03-31 2019-02-05 爱西里斯药物技术有限公司 硝羟喹啉和其类似物与化学疗法和免疫疗法在癌症治疗中的组合用途
US11209441B2 (en) 2016-04-05 2021-12-28 Bristol-Myers Squibb Company Cytokine profiling analysis
SG11201808708RA (en) 2016-04-07 2018-11-29 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Heterocyclic amides useful as protein modulators
JP6746712B2 (ja) 2016-04-07 2020-08-26 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ タンパク質調節因子として有用な複素環式アミド
JP2019510832A (ja) 2016-04-07 2019-04-18 ケモセントリクス，インコーポレーテッド Ｐｄ−１阻害剤又はｐｄ−ｌ１阻害剤と組み合わせてｃｃｒ１アンタゴニストを投与することによる腫瘍負荷の低減
WO2017176565A1 (en) 2016-04-07 2017-10-12 Eli Lilly And Company Combinations of an anti-b7-h1 antibody and a cxcr4 peptide antagonist for treating a solid tumor
US11104739B2 (en) 2016-04-14 2021-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy using an anti-fucosyl-GM1 antibody and an anti-CD137 antibody
WO2017181073A1 (en) * 2016-04-14 2017-10-19 Creatv Microtech, Inc. Methods of using pd-l1 expression in treatment decisions for cancer therapy
JP7038064B2 (ja) 2016-04-18 2022-03-17 セルデックス セラピューティクス インコーポレイテッド ヒトｃｄ４０に結合するアゴニスト抗体およびその使用
WO2017189526A1 (en) * 2016-04-25 2017-11-02 Musc Foundation For Research Development Activated cd26-high immune cells and cd26-negative immune cells and uses thereof
CR20180521A (es) 2016-05-05 2019-01-15 Glaxosmithkline Ip No 2 Ltd Inhibidores del potenciador del homólogo zeste 2
US11753463B2 (en) 2016-05-13 2023-09-12 Orionis Biosciences BV Therapeutic targeting of non-cellular structures
TW202408578A (zh) 2016-05-13 2024-03-01 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
CA3023883A1 (en) 2016-05-13 2017-11-16 Orionis Biosciences Nv Targeted mutant interferon-beta and uses thereof
CA3024917A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Modernatx, Inc. Combinations of mrnas encoding immune modulating polypeptides and uses thereof
RS63912B1 (sr) 2016-05-18 2023-02-28 Modernatx Inc Polinukleotidi koji kodiraju interleukin-12 (il12) i njihove upotrebe
AU2017268399B2 (en) 2016-05-18 2023-01-12 Modernatx, Inc. mRNA combination therapy for the treatment of cancer
RS62935B1 (sr) 2016-05-20 2022-03-31 Biohaven Therapeutics Ltd Primena riluzola, prolekova riluzola ili analoga riluzola sa imunoterapijama za lečenje kancera
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
WO2017205801A1 (en) * 2016-05-27 2017-11-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Combination of immunotherapy agents and spleen tyrosine kinase inhibitors
JP7121660B2 (ja) 2016-06-01 2022-08-18 エピザイム，インコーポレイティド 癌を処置するためのｅｚｈ２阻害剤の使用
CN109562195A (zh) 2016-06-01 2019-04-02 百时美施贵宝公司 用pd-l1结合多肽进行pet成像
US10994033B2 (en) 2016-06-01 2021-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Imaging methods using 18F-radiolabeled biologics
US11083790B2 (en) * 2016-06-02 2021-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of Hodgkin lymphoma using an anti-PD-1 antibody
EP4248989A3 (en) 2016-06-02 2023-12-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of an anti-pd-1 antibody in combination with an anti-cd30 antibody in lymphoma treatment
JP2019517512A (ja) 2016-06-03 2019-06-24 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 結腸直腸癌を有する患者の処置における抗ｐｄ−１抗体の使用
CN109476753A (zh) * 2016-06-03 2019-03-15 百时美施贵宝公司 用于治疗肿瘤的方法的抗-pd-1抗体
KR20190015407A (ko) 2016-06-03 2019-02-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 재발성 소세포 폐암의 치료 방법에 사용하기 위한 항-pd-1 항체
GB201609811D0 (en) 2016-06-05 2016-07-20 Snipr Technologies Ltd Methods, cells, systems, arrays, RNA and kits
WO2017214182A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
RU2018146946A (ru) 2016-06-08 2020-07-10 Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед Химические соединения
WO2017212425A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Chemical compounds as atf4 pathway inhibitors
CN107488229B (zh) * 2016-06-13 2020-11-17 天境生物科技(上海)有限公司 Pd-l1抗体及其用途
WO2018029474A2 (en) 2016-08-09 2018-02-15 Kymab Limited Anti-icos antibodies
US9567399B1 (en) 2016-06-20 2017-02-14 Kymab Limited Antibodies and immunocytokines
JP7261379B2 (ja) 2016-06-20 2023-04-20 カイマブ・リミテッド 抗ｐｄ－ｌ１抗体
AU2017290803A1 (en) 2016-06-30 2019-01-24 Nant Holdings Ip, Llc Nant cancer vaccine
EP3481393B1 (en) 2016-07-05 2021-04-14 Beigene, Ltd. Combination of a pd-1 antagonist and a raf inhibitor for treating cancer
CN117683135A (zh) 2016-07-14 2024-03-12 百时美施贵宝公司 针对tim3的抗体及其用途
WO2018015879A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Isoquinoline derivatives as perk inhibitors
EP3494140A1 (en) * 2016-08-04 2019-06-12 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd Anti-icos and anti-pd-1 antibody combination therapy
CN116640214A (zh) 2016-08-09 2023-08-25 科马布有限公司 分离抗体及其应用
KR101966496B1 (ko) 2016-08-18 2019-04-08 울산대학교 산학협력단 기계식 잠금 방식을 적용한 usb 보안잠금장치 및 그 usb 보안잠금장치를 이용한 usb 기계식 보안잠금방법
TWI739887B (zh) 2016-08-19 2021-09-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 使用包含btk抑制劑的組合產品治療癌症
WO2018035710A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Akeso Biopharma, Inc. Anti-ctla4 antibodies
US10350280B2 (en) 2016-08-31 2019-07-16 Medgenome Inc. Methods to analyze genetic alterations in cancer to identify therapeutic peptide vaccines and kits therefore
EP4177271A1 (en) * 2016-09-01 2023-05-10 Mayo Foundation for Medical Education and Research Carrier-pd-l1 binding agent compositions for treating cancers
EP3510378A4 (en) * 2016-09-06 2020-07-08 IncellDx, Inc. METHOD FOR DETECTION OF PD-L1 EXPRESSION BY CELL AND USES THEREOF
US11726089B2 (en) 2016-09-06 2023-08-15 Incelldx, Inc. Methods of assaying neoplastic and neoplasia-related cells and uses thereof
AU2017322501A1 (en) 2016-09-09 2019-03-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combination of an anti-CD20 antibody, PI3 kinase-delta inhibitor, and anti-PD-1 or anti-PD-L1 antibody for treating hematological cancers
WO2018048975A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Use of an anti-pd-1 antibody in combination with an anti-mesothelin antibody in cancer treatment
JP7262774B2 (ja) * 2016-09-13 2023-04-24 ノース カロライナ ステート ユニバーシティ 治療剤送達のための血小板組成物及び方法
CA3037230A1 (en) * 2016-09-20 2018-03-29 Merck Patent Gmbh Diagnostic anti-pd-l1 antibody and use thereof
CN109843324A (zh) 2016-10-06 2019-06-04 辉瑞公司 用于治疗癌症的avelumab用药方案
CR20190181A (es) 2016-10-14 2019-08-21 Prec Biosciences Inc Meganucleasas diseñadas específicamente para el reconocimiento de secuencias en el genoma del virus de la hepatitis b.
US10597454B2 (en) 2016-10-15 2020-03-24 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd PD-1 antibodies
JP7204643B2 (ja) 2016-10-24 2023-01-16 オリオニス バイオサイエンシズ ビーブイ 標的変異インターフェロン－ガンマおよびその使用
EP3532504A1 (en) 2016-10-28 2019-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating urothelial carcinoma using an anti-pd-1 antibody
EP3532638A4 (en) 2016-10-31 2020-07-29 University of Massachusetts TARGETING MICROARN-101-3 P IN CARCINOTHERAPY
MX2019005117A (es) 2016-11-01 2019-10-21 Anaptysbio Inc Anticuerpos dirigidos contra la muerte programada 1 (pd-1).
CA3039992A1 (en) 2016-11-02 2018-05-11 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to pd-1 and uses thereof
JP7267914B2 (ja) 2016-11-02 2023-05-02 エンクマフ エスアーエールエル Ｂｃｍａ及びｃｄ３に対する二重特異性抗体、及び多発性骨髄腫を治療するために併用して使用される免疫療法薬
MX2019004775A (es) 2016-11-03 2019-08-05 Squibb Bristol Myers Co Anticuerpos anti antigeno 4 del linfocito t citotoxico (ctla-4) activables y sus usos.
WO2018083248A1 (en) 2016-11-03 2018-05-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
US11672771B2 (en) * 2016-11-04 2023-06-13 Aximmune, Inc. Beta-alethine, immune modulators, and uses thereof
WO2018089688A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Jinjun Shi Restoration of tumor suppression using mrna-based delivery system
CA3043691C (en) * 2016-11-14 2022-11-29 Dinona Antibody binding specifically to cd66c and use thereof
WO2018098352A2 (en) 2016-11-22 2018-05-31 Jun Oishi Targeting kras induced immune checkpoint expression
WO2018102427A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
TW201825119A (zh) 2016-11-30 2018-07-16 日商協和醱酵麒麟有限公司 使用抗ccr4抗體及抗pd-1抗體治療癌症之方法
EP3548069A1 (en) * 2016-12-01 2019-10-09 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Combination therapy
CA3045243A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination therapy
AU2017373944B2 (en) 2016-12-07 2022-02-03 Agenus Inc. Anti-CTLA-4 antibodies and methods of use thereof
CN110300599A (zh) 2016-12-07 2019-10-01 艾吉纳斯公司 抗体和其使用方法
CN110225770B (zh) 2016-12-14 2022-04-26 杨森生物科技公司 结合cd8a的纤连蛋白iii型结构域
US10597438B2 (en) 2016-12-14 2020-03-24 Janssen Biotech, Inc. PD-L1 binding fibronectin type III domains
WO2018111978A1 (en) 2016-12-14 2018-06-21 Janssen Biotech, Inc. Cd137 binding fibronectin type iii domains
CN106519034B (zh) 2016-12-22 2020-09-18 鲁南制药集团股份有限公司 抗pd-1抗体及其用途
US11150238B2 (en) 2017-01-05 2021-10-19 Biodesix, Inc. Method for identification of cancer patients with durable benefit from immunotherapy in overall poor prognosis subgroups
KR102606252B1 (ko) 2017-01-09 2023-11-23 테사로, 인코포레이티드 항-pd-1 항체로 암을 치료하는 방법
EP3574116A1 (en) 2017-01-24 2019-12-04 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide
CN110461847B (zh) 2017-01-25 2022-06-07 百济神州有限公司 (S)-7-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的结晶形式、其制备及用途
CN110546160A (zh) 2017-02-06 2019-12-06 奥里尼斯生物科学公司 靶向嵌合蛋白及其用途
WO2018144999A1 (en) 2017-02-06 2018-08-09 Orionis Biosciences, Inc. Targeted engineered interferon and uses thereof
US11325976B2 (en) 2017-02-16 2022-05-10 Ying Zhang Anti-programmed death-ligand 1 (PD-L1) antibodies and therapeutic uses thereof
TWI674261B (zh) 2017-02-17 2019-10-11 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 Nlrp3 調節劑
BR112019017738A2 (pt) 2017-02-27 2020-04-07 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd combinação, composição farmacêutica, uso de uma combinação ou composição farmacêutica, método para tratar câncer em um humano, e, composto
EP3366703B1 (en) 2017-02-28 2019-04-03 Ralf Kleef Immune checkpoint therapy with hyperthermia
WO2018162944A1 (en) 2017-03-04 2018-09-13 Shenzhen Runshin Bioscience Recombinant antibodies to programmed death 1 (pd-1) and uses therefor
WO2018162749A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 Genmab A/S Antibodies against pd-l1
CA3057687A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Five Prime Therapeutics, Inc. Combination therapy for cancer using anti-gitr antibodies
SG11201908396PA (en) 2017-03-31 2019-10-30 Bristol Myers Squibb Co Methods of treating tumor
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
WO2018200430A1 (en) 2017-04-26 2018-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of antibody production that minimize disulfide bond reduction
CN108794467A (zh) 2017-04-27 2018-11-13 博笛生物科技有限公司 2-氨基-喹啉衍生物
CA3060935A1 (en) * 2017-05-01 2018-11-08 The Children's Medical Center Coporation Methods and compositions relating to anti-pd1 antibody reagents
US11591403B2 (en) * 2017-05-02 2023-02-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. IL-23R antagonists to reprogram intratumoral T regulatory cells into effector cells
AU2018265856B2 (en) 2017-05-12 2023-04-27 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
JP7274426B2 (ja) 2017-05-16 2023-05-16 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗ｇｉｔｒアゴニスト抗体での癌の処置
SG10202112636SA (en) 2017-05-16 2021-12-30 Five Prime Therapeutics Inc Anti-fgfr2 antibodies in combination with chemotherapy agents in cancer treatment
WO2018213424A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
EP3625246A1 (en) 2017-05-18 2020-03-25 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
KR20220167342A (ko) 2017-05-25 2022-12-20 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 변형된 중쇄 불변 영역을 포함하는 항체
EP4306542A3 (en) * 2017-05-30 2024-04-17 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lag-3 positive tumors
CA3060989A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent
MX2019012076A (es) 2017-05-30 2019-12-09 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden un anticuerpo anti gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) o un anticuerpo anti-lag-3 y un anticuerpo anti muerte celular programada 1 (pd-1) o anti ligando 1 de muerte celular programada (pd-l1).
KR20200014363A (ko) 2017-06-01 2020-02-10 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체를 사용하여 종양을 치료하는 방법
US11168144B2 (en) 2017-06-01 2021-11-09 Cytomx Therapeutics, Inc. Activatable anti-PDL1 antibodies, and methods of use thereof
WO2018223030A1 (en) * 2017-06-02 2018-12-06 Epizyme, Inc. Use of ezh2 inhibitors for treating cancer
WO2018225093A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Chemical compounds as atf4 pathway inhibitors
BR112019025325A2 (pt) 2017-06-09 2020-06-23 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Métodos para tratar câncer, para fabricar um anticorpo anti-icos ou porção de ligação a antígeno do mesmo, para fabricar um anticorpo anti-pd1 ou porção de ligação a antígeno do mesmo, para fabricar um anticorpo anti-pdl1 ou porção de ligação a antígeno do mesmo, anticorpo anti-icos ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo e um anticorpo anti-pd1 ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo, anticorpo anti-icos ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo e um anticorpo anti-pd-l1 ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo, uso de um anticorpo anti-icos ou porção de ligação a antígeno do mesmo e um anticorpo anti-pd1 ou porção de ligação a antígeno do mesmo, polinucleotídeo, vetor, e, célula hospedeira
GB201709808D0 (en) 2017-06-20 2017-08-02 Kymab Ltd Antibodies
WO2018232725A1 (en) 2017-06-23 2018-12-27 Birdie Biopharmaceuticals, Inc. PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
CN110799543A (zh) * 2017-06-26 2020-02-14 百济神州有限公司 肝细胞癌的免疫治疗
AU2018291081A1 (en) 2017-06-27 2020-01-16 Neuracle Science Co., Ltd. Use of anti-FAM19A5 antibodies for treating cancers
CN110896634A (zh) 2017-07-03 2020-03-20 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 作为atf4抑制剂用于治疗癌症和其它疾病的2-(4-氯苯氧基)-n-((1-(2-(4-氯苯氧基)乙炔氮杂环丁烷-3-基)甲基)乙酰胺衍生物和相关化合物
JP2020525513A (ja) 2017-07-03 2020-08-27 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ 癌および他の疾患を治療するためのａｔｆ４阻害剤としてのｎ−（３−（２−（４−クロロフェノキシ）アセトアミドビシクロ［１．１．１］ペンタン−１−イル）−２−シクロブタン−１−カルボキサミド誘導体および関連化合物
CN111094977B (zh) * 2017-07-13 2024-02-13 古斯塔夫·鲁西研究所 监测抗pd-1/pd-l1治疗的肿瘤患者中肿瘤淋巴细胞浸润和预后的基于影像组学的成像工具
CA3069524A1 (en) 2017-07-14 2019-01-17 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
WO2019021208A1 (en) 2017-07-27 2019-01-31 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited USEFUL INDAZOLE DERIVATIVES AS PERK INHIBITORS
WO2019023624A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company PREDICTIVE PERIPHERAL BLOOD BIOMARKER FOR INHIBITORS OF CONTROL POINTS
AU2018309339A1 (en) 2017-08-04 2020-02-20 BioNTech SE Binding agents binding to PD-L1 and CD137 and use thereof
WO2019036043A2 (en) * 2017-08-16 2019-02-21 Medgenome Inc. METHOD FOR GENERATING A COCKTAIL OF PERSONALIZED ANTICANCER VACCINES FROM TUMOR DERIVED GENETIC MODIFICATIONS FOR THE TREATMENT OF CANCER
WO2019035985A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Tragara Pharmaceuticals, Inc. POLYMORPHIC FORM OF TG02
WO2019046321A1 (en) * 2017-08-28 2019-03-07 Bristol-Myers Squibb Company TIM-3 ANTAGONISTS FOR THE TREATMENT AND DIAGNOSIS OF CANCERS
UY37866A (es) 2017-09-07 2019-03-29 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Nuevos compuestos derivados de benzoimidazol sustituidos que reducen la proteína myc (c-myc) en las células e inhiben la histona acetiltransferasa de p300/cbp.
AU2018330180A1 (en) 2017-09-07 2020-03-19 Augusta University Research Institute, Inc. Antibodies to programmed cell death protein 1
WO2019053617A1 (en) 2017-09-12 2019-03-21 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited CHEMICAL COMPOUNDS
EP3681535A1 (en) 2017-09-13 2020-07-22 Five Prime Therapeutics, Inc. Combination anti-csf1r and anti-pd-1 antibody combination therapy for pancreatic cancer
US11304952B2 (en) 2017-09-25 2022-04-19 Chemocentryx, Inc. Combination therapy using a chemokine receptor 2 (CCR2) antagonist and a PD-1/PD-L1 inhibitor
EP3692033A1 (en) 2017-10-05 2020-08-12 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Modulators of stimulator of interferon genes (sting) useful in treating hiv
CN111417630B (zh) 2017-10-05 2023-06-06 葛兰素史克知识产权开发有限公司 干扰素基因刺激因子(sting)的调节剂
US11230601B2 (en) 2017-10-10 2022-01-25 Tilos Therapeutics, Inc. Methods of using anti-lap antibodies
SG11202003341UA (en) 2017-10-13 2020-05-28 Harpoon Therapeutics Inc B cell maturation antigen binding proteins
EP3694884A1 (en) 2017-10-15 2020-08-19 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
KR20200079293A (ko) 2017-10-31 2020-07-02 얀센 바이오테크 인코포레이티드 고위험 다발성 골수종을 치료하는 방법
US11718679B2 (en) 2017-10-31 2023-08-08 Compass Therapeutics Llc CD137 antibodies and PD-1 antagonists and uses thereof
WO2019089921A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Immunostimulatory agonistic antibodies for use in treating cancer
DE102017125780B3 (de) * 2017-11-05 2018-12-13 Dimo Dietrich Verfahren zur Bestimmung des Ansprechens einer malignen Erkrankung auf eine Immuntherapie
JP2021502344A (ja) 2017-11-06 2021-01-28 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 腫瘍を処置する方法
CN111373261B (zh) * 2017-11-20 2024-06-14 尤利乌斯·马克西米利安维尔茨堡大学 Cd19 cart细胞可清除表达极低水平cd19的骨髓瘤细胞
US11786529B2 (en) 2017-11-29 2023-10-17 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of indolent or aggressive B-cell lymphomas using a combination comprising BTK inhibitors
CN107973854B (zh) * 2017-12-11 2021-05-04 苏州银河生物医药有限公司 Pdl1单克隆抗体及其应用
WO2019126186A1 (en) 2017-12-18 2019-06-27 Neon Therapeutics, Inc. Neoantigens and uses thereof
GB201721338D0 (en) 2017-12-19 2018-01-31 Kymab Ltd Anti-icos Antibodies
US11629189B2 (en) 2017-12-19 2023-04-18 Kymab Limited Bispecific antibody for ICOS and PD-L1
JP7098748B2 (ja) 2017-12-20 2022-07-11 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． Ｓｔｉｎｇアダプタータンパク質を活性化するホスホン酸結合を有する２’３’環状ジヌクレオチド
AU2018392213B2 (en) 2017-12-20 2021-03-04 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
CN109970857B (zh) * 2017-12-27 2022-09-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
CN111788227A (zh) 2017-12-27 2020-10-16 百时美施贵宝公司 抗cd40抗体及其用途
CA3082036A1 (en) 2017-12-29 2019-07-04 Ap Biosciences, Inc. Monospecific and bispecific proteins with immune checkpoint regulation for cancer therapy
US20200385478A1 (en) * 2018-01-05 2020-12-10 Biograph 55, Inc. Compositions and methods for cancer immunotherapy
US20190269664A1 (en) 2018-01-08 2019-09-05 Chemocentryx, Inc. Methods of treating solid tumors with ccr2 antagonists
US11154556B2 (en) 2018-01-08 2021-10-26 Chemocentryx, Inc. Methods of treating solid tumors with CCR2 antagonists
KR20200108306A (ko) 2018-01-10 2020-09-17 지앙수 헨그루이 메디슨 컴퍼니 리미티드 Pd-l1 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 및 이의 약학적 용도
WO2019140229A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
JP2021510733A (ja) 2018-01-12 2021-04-30 ケーディーエーシー セラピューティクス，インコーポレーテッドＫｄａｃ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． がんの処置のための選択的ヒストンデアセチラーゼ３（ｈｄａｃ３）インヒビターと免疫治療剤との組み合わせ
EP3737696A1 (en) 2018-01-12 2020-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-il-8 antibodies and anti-pd-1 antibodies for treating cancer
US20210363242A1 (en) 2018-01-16 2021-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cancer with antibodies against tim3
US20210038559A1 (en) 2018-01-22 2021-02-11 Thomas Richard Gadek Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
MX2020007526A (es) 2018-01-22 2020-09-09 Bristol Myers Squibb Co Composiciones y metodos para tratar el cancer.
US11814623B2 (en) 2018-01-30 2023-11-14 University Of Massachusetts Methods of treating a wound using epigenetic regulation
US20210069246A1 (en) 2018-01-31 2021-03-11 Celgene Corporation Combination therapy using adoptive cell therapy and checkpoint inhibitor
AU2019215440A1 (en) 2018-02-05 2020-08-27 Orionis Biosciences, Inc. Fibroblast binding agents and use thereof
CN112533613A (zh) 2018-02-06 2021-03-19 通用医疗公司 作为肿瘤免疫应答的生物标志物的重复rna
US20200405806A1 (en) 2018-02-08 2020-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination of a tetanus toxoid, anti-ox40 antibody and/or anti-pd-1 antibody to treat tumors
KR20200131251A (ko) 2018-02-15 2020-11-23 센화 바이오사이언시즈 인코포레이티드 퀴놀론 유사체 및 이의 염, 조성물, 및 이들의 사용 방법
WO2019169162A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Compositions and methods for treating cancer
JP7037218B2 (ja) 2018-03-14 2022-03-16 サーフィス オンコロジー インコーポレイテッド Ｃｄ３９と結合する抗体及びその使用
KR102043468B1 (ko) 2018-03-14 2019-11-11 경북대학교 산학협력단 엡스타인 바 바이러스 연관 위암의 재발 가능성 예측을 위한 정보제공 방법
WO2019175328A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Imba - Institut Für Molekulare Biotechnologie Gmbh Bh4pathwayactivationandusethereoffortreatingcancer
CA3092589A1 (en) 2018-03-21 2019-09-26 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to vista at acidic ph
CA3093740A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 Surface Oncology, Inc. Anti-il-27 antibodies and uses thereof
WO2019183551A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against mica and/or micb and uses thereof
US10760075B2 (en) 2018-04-30 2020-09-01 Snipr Biome Aps Treating and preventing microbial infections
JP2021519771A (ja) 2018-03-30 2021-08-12 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 腫瘍を処置する方法
WO2019190327A2 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Merus N.V. Multivalent antibody
US20210155703A1 (en) 2018-04-04 2021-05-27 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd27 antibodies and uses thereof
WO2019195658A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Sting levels as a biomarker for cancer immunotherapy
WO2019193540A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heteroaryl derivatives of formula (i) as atf4 inhibitors
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
WO2019193541A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Bicyclic aromatic ring derivatives of formula (i) as atf4 inhibitors
BR112020020792A2 (pt) 2018-04-09 2021-01-12 Eisai R&D Management Co., Ltd. Certos compostos de pladienolida e métodos de uso
CA3096674A1 (en) 2018-04-12 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Anticancer combination therapy with cd73 antagonist antibody and pd-1/pd-l1 axis antagonist antibody
SG11202009907XA (en) 2018-04-12 2020-11-27 Eisai R&D Man Co Ltd Pladienolide derivatives as spliceosome targeting agents for treating cancer
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
WO2019204743A1 (en) 2018-04-19 2019-10-24 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Synthetic rig-i-like receptor agonists
PE20210160A1 (es) 2018-04-25 2021-01-26 Innate Tumor Immunity Inc Moduladores de nlrp3
EP3814379A4 (en) 2018-05-07 2022-03-30 Genmab A/S METHOD OF TREATMENT OF CANCER WITH A COMBINATION OF AN ANTI-PD-1 ANTIBODY AND AN ANTI-TISSUE FACTOR ANTIBODY-DRUG CONJUGATE
IL307925A (en) 2018-05-07 2023-12-01 Genmab As Combination of an antibody against 1-PD and conjugation of a drug with an antibody against TF for use in the treatment of cancer
GB201807924D0 (en) 2018-05-16 2018-06-27 Ctxt Pty Ltd Compounds
AU2019279012A1 (en) 2018-06-01 2020-12-24 Eisai R&D Management Co., Ltd. Methods of using splicing modulators
WO2019232449A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Eisai R&D Management Co., Ltd. Splicing modulator antibody-drug conjugates and methods of use
WO2019234576A1 (en) 2018-06-03 2019-12-12 Lamkap Bio Beta Ltd. Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
BR112021000332A2 (pt) 2018-07-09 2021-04-06 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Compostos químicos
CN112513077A (zh) * 2018-07-09 2021-03-16 上海岸迈生物科技有限公司 高效表达的egfr和pd-l1双特异性结合蛋白
PE20211604A1 (es) 2018-07-09 2021-08-23 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos de union a ilt4
KR20210031722A (ko) 2018-07-11 2021-03-22 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 산성 pH에서 VISTA에 결합하는 항체
WO2020014583A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Bristol-Myers Squibb Company Ox-40 agonist, pd-1 pathway inhibitor and ctla-4 inhibitor combination for use in a mehtod of treating a cancer or a solid tumor
SG11202100373VA (en) 2018-07-20 2021-02-25 Surface Oncology Inc Anti-cd112r compositions and methods
US20210238287A1 (en) * 2018-07-26 2021-08-05 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 Combination Therapy for the Treatment of Cancer
US20210292851A1 (en) * 2018-07-27 2021-09-23 Roche Sequencing Solutions, Inc. Method of monitoring effectiveness of immunotherapy of cancer patients
WO2020031107A1 (en) 2018-08-08 2020-02-13 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Chemical compounds
SG11202101486RA (en) 2018-08-16 2021-03-30 Innate Tumor Immunity Inc Substitued 4-amino-1h-imidazo[4,5-c]quinoline compounds and improved methods for their preparation
CN112996567A (zh) 2018-08-16 2021-06-18 先天肿瘤免疫公司 咪唑并[4,5-c]喹啉衍生的nlrp3-调节剂
WO2020037091A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 Innate Tumor Immunity, Inc. Imidazo[4,5-c]quinoline derived nlrp3-modulators
WO2020044206A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as kinase inhibitors for use in the treatment cancer
WO2020061060A1 (en) * 2018-09-19 2020-03-26 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
US10815311B2 (en) 2018-09-25 2020-10-27 Harpoon Therapeutics, Inc. DLL3 binding proteins and methods of use
CN112839962A (zh) 2018-10-09 2021-05-25 百时美施贵宝公司 用于治疗癌症的抗mertk抗体
TW202035445A (zh) 2018-10-10 2020-10-01 美商帝洛斯療法股份有限公司 抗lap抗體變異體及其用途
US11851663B2 (en) 2018-10-14 2023-12-26 Snipr Biome Aps Single-vector type I vectors
CN113286611A (zh) 2018-10-19 2021-08-20 百时美施贵宝公司 用于黑色素瘤的组合疗法
MX2021004603A (es) 2018-10-22 2021-09-08 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Dosificacion.
JP2022505647A (ja) 2018-10-23 2022-01-14 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍の処置方法
KR20210086671A (ko) 2018-10-30 2021-07-08 젠맵 에이/에스 항-vegf 항체 및 항-조직 인자 항체-약물 접합체의 조합을 사용하여 암을 치료하는 방법
WO2020089432A1 (en) * 2018-11-02 2020-05-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New prognostic method of pancreatic cancer
MA54139A (fr) 2018-11-06 2021-09-15 BioNTech SE Formulation d'anticorps
US20220001026A1 (en) 2018-11-08 2022-01-06 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
WO2020099230A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Bayer Aktiengesellschaft Pharmaceutical combination of anti-ceacam6 and either anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibodies for the treatment of cancer
MX2021005708A (es) 2018-11-16 2021-09-21 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti grupo 2a del receptor inhibidor de células asesinas naturales (anti-nkg2a) y usos de los mismos.
JP2022507495A (ja) 2018-11-16 2022-01-18 アーキュール・インコーポレイテッド 癌治療のための医薬の組合せ
JP2022507606A (ja) 2018-11-16 2022-01-18 ネオイミューンテック， インコーポレイテッド Ｉｌ－７タンパク質と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせで腫瘍を治療する方法
EP3887397A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
EP4342473A3 (en) 2018-11-30 2024-05-15 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Compounds useful in hiv therapy
KR20210098504A (ko) 2018-12-04 2021-08-10 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 다중 동위원소체 반응 모니터링에 의한 샘플내 보정 곡선을 사용한 분석 방법
EP3893937A2 (en) 2018-12-13 2021-10-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Herboxidiene antibody-drug conjugates and methods of use
WO2020136235A1 (en) 2018-12-28 2020-07-02 Transgene Sa M2-defective poxvirus
CN113286787A (zh) 2019-01-14 2021-08-20 先天肿瘤免疫公司 Nlrp3调节剂
JP7335341B2 (ja) 2019-01-14 2023-08-29 イネイト・テューマー・イミュニティ・インコーポレイテッド Ｎｌｒｐ３モジュレーター
WO2020150113A1 (en) 2019-01-14 2020-07-23 Innate Tumor Immunity, Inc. Substituted quinazolines as nlrp3 modulators, for use in the treatment of cancer
CN113301962A (zh) 2019-01-14 2021-08-24 先天肿瘤免疫公司 用于治疗癌症的杂环nlrp3调节剂
WO2020156509A1 (zh) 2019-02-03 2020-08-06 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗pd-1抗体、其抗原结合片段及医药用途
WO2020163589A1 (en) * 2019-02-08 2020-08-13 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
EP3924521A4 (en) * 2019-02-15 2023-03-29 IncellDx, Inc. BLADDER-ASSOCIATED SPECIMEN ASSAY, IDENTIFICATION AND TREATMENT OF BLADDER-ASSOCIATED NEOPLASIA, AND KITS FOR USE THEREOF
MX2021011753A (es) 2019-03-26 2022-01-31 Univ Michigan Regents Degradadores de moleculas peque?as de stat3.
JP2022527177A (ja) 2019-03-28 2022-05-31 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置する方法
EP3946628A1 (en) 2019-03-28 2022-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3947403A1 (en) 2019-03-29 2022-02-09 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
SG11202109441UA (en) 2019-04-12 2021-09-29 Vascular Biogenics Ltd Methods of anti-tumor therapy
WO2020232375A1 (en) 2019-05-16 2020-11-19 Silicon Swat, Inc. Oxoacridinyl acetic acid derivatives and methods of use
JP2022533194A (ja) 2019-05-16 2022-07-21 スティングセラ インコーポレイテッド ベンゾ［ｂ］［１，８］ナフチリジン酢酸誘導体および使用方法
KR20220010525A (ko) 2019-05-20 2022-01-25 메사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 보론산 에스테르 전구약물 및 그의 용도
WO2020236850A1 (en) * 2019-05-20 2020-11-26 Immunovalent Therapeutics Inc. Solid phase devices and methods of use for purifying and quantifying tissue-specific leukocytes
AU2020281535A1 (en) 2019-05-24 2022-01-27 Merck Patent Gmbh Combination therapies using CDK inhibitors
KR20220016155A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역-종양학 (i-o) 요법에 적합한 대상체를 확인하는 방법
US20220233691A1 (en) 2019-05-30 2022-07-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
US20220306683A1 (en) * 2019-06-07 2022-09-29 The Trustees Of Princeton University Proximity-based labeling systems and applications thereof
WO2020252353A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Vanderbilt University Amino acid transport inhibitors and the uses thereof
CN114269715A (zh) 2019-06-12 2022-04-01 范德比尔特大学 作为氨基酸转运抑制剂的二苄基胺
CN110684844B (zh) * 2019-06-27 2023-01-24 中山大学肿瘤防治中心（中山大学附属肿瘤医院、中山大学肿瘤研究所） RBPJL基因的p.P476S突变作为PD-1抗体用药指导标志物中的应用
US20220356255A1 (en) 2019-07-15 2022-11-10 Capella Bioscience Ltd Anti-pd-l1 antibodies
CN114127073B (zh) 2019-07-16 2024-05-31 密歇根大学董事会 作为eed抑制剂的咪唑并嘧啶和其用途
GB201910305D0 (en) 2019-07-18 2019-09-04 Ctxt Pty Ltd Compounds
GB201910304D0 (en) 2019-07-18 2019-09-04 Ctxt Pty Ltd Compounds
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
US11851490B2 (en) 2019-08-15 2023-12-26 Northwestern University Methods and compositions for treating, inhibiting, and/or preventing heterotopic ossification
GB201912107D0 (en) 2019-08-22 2019-10-09 Amazentis Sa Combination
WO2021041532A1 (en) 2019-08-26 2021-03-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of heparin to promote type 1 interferon signaling
AU2020336381A1 (en) 2019-08-27 2022-03-03 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon E3 ligase inhibitors
KR20220012856A (ko) * 2019-08-29 2022-02-04 레메젠 코, 리미티드 항 ｐｄ―ｌ１ 항체 및 그의 용도
KR20220062500A (ko) 2019-09-16 2022-05-17 서피스 온콜로지, 인크. 항-cd39 항체 조성물 및 방법
RS65480B1 (sr) 2019-09-18 2024-05-31 Lamkap Bio Alpha AG Bispecifična antitela protiv ceacam5 i cd3
AU2020348849A1 (en) 2019-09-19 2022-04-07 The Regents Of The University Of Michigan Spirocyclic androgen receptor protein degraders
AU2020350689A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
EP4031873A1 (en) 2019-09-22 2022-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy
JP7122354B2 (ja) 2019-09-24 2022-08-19 財團法人工業技術研究院 抗ｔｉｇｉｔ抗体および使用方法
KR20220066346A (ko) 2019-09-25 2022-05-24 서피스 온콜로지, 인크. 항-il-27 항체 및 이의 용도
CA3152263A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Julia SANTUCCI PEREIRA DEL BUONO Composite biomarker for cancer therapy
CA3151928A1 (en) * 2019-09-26 2021-04-01 Nikolai Kley Pd-l1 targeted chimeric proteins and uses thereof
AU2020355614A1 (en) 2019-09-27 2022-04-14 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Antigen binding proteins
CN114786682A (zh) 2019-10-14 2022-07-22 Aro生物疗法公司 结合cd71的纤维粘连蛋白iii型结构域
US11781138B2 (en) 2019-10-14 2023-10-10 Aro Biotherapeutics Company FN3 domain-siRNA conjugates and uses thereof
WO2021074683A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Avacta Life Sciences Limited Bispecific anti-pd-l1 and anti-fcrn polypeptides
AU2020372478A1 (en) 2019-10-23 2022-06-02 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Synthetic RIG-I-like receptor agonists
KR102325962B1 (ko) * 2019-10-28 2021-11-12 경북대학교 산학협력단 칼슘 채널 차단제에 의한 엑소좀 분비 억제 또는 pd-l1 발현 억제 용도
JP2022554356A (ja) 2019-11-04 2022-12-28 シージェン インコーポレイテッド 抗ｃｄ３０抗体薬物コンジュゲート及びｈｉｖ感染の処置のためのその使用
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
CN115052890A (zh) 2019-11-07 2022-09-13 展马博联合股份有限公司 使用抗pd-1抗体与抗组织因子抗体-药物偶联物的组合以治疗癌症的方法
MX2022005474A (es) 2019-11-08 2022-06-02 Bristol Myers Squibb Co Tratamiento de melanoma con antagonistas del gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3).
WO2021097256A1 (en) 2019-11-14 2021-05-20 Cohbar, Inc. Cxcr4 antagonist peptides
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
JP2023510108A (ja) 2019-12-19 2023-03-13 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｄｇｋ阻害剤およびチェックポイントアンタゴニストの組み合わせ
CN115244052A (zh) 2020-01-10 2022-10-25 先天肿瘤免疫公司 Nlrp3调节剂
IL294368A (en) 2020-01-29 2022-08-01 Merus Nv Means and method for modulating mixed effects in immune cells
US20230086099A1 (en) 2020-01-30 2023-03-23 Ona Therapeutics, S.L. Combination therapy for treatment of cancer and cancer metastasis
EP4100426A1 (en) 2020-02-06 2022-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Il-10 and uses thereof
EP4110407A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Radiolabeled fibronectin based scaffolds and antibodies and theranostic uses thereof
AU2021230575A1 (en) 2020-03-06 2022-10-20 Celgene Quanticel Research, Inc. Combination of an LSD-1 inhibitor and nivolumab for use in treating SCLC or sqNSCLC
KR20220151195A (ko) 2020-03-06 2022-11-14 오엔에이 테라퓨틱스 에스.엘. 항-cd36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도
JP2023516459A (ja) 2020-03-09 2023-04-19 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 増強されたアゴニスト活性を有するｃｄ４０に対する抗体
IL296673A (en) 2020-03-23 2022-11-01 Bristol Myers Squibb Co Anti-ccr8 antibodies for cancer treatment
US20230159573A1 (en) 2020-03-26 2023-05-25 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule stat protein degraders
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
EP4136105A1 (en) 2020-04-14 2023-02-22 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Combination treatment for cancer based upon an icos antibody and a pd-l1 antibody tgf-beta-receptor fusion protein
CN116589581A (zh) 2020-05-01 2023-08-15 恩格姆生物制药公司 Ilt结合剂和其使用方法
WO2021231732A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
EP4157319A1 (en) 2020-05-28 2023-04-05 Modernatx, Inc. Use of mrnas encoding ox40l, il-23 and il-36gamma for treating cancer
CN116234568A (zh) 2020-07-07 2023-06-06 生物技术公司 用于hpv阳性癌症的治疗性rna
WO2022011205A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
WO2022011204A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
TW202221031A (zh) 2020-07-30 2022-06-01 英商阿法克塔生命科學有限公司 血清半衰期延長之pd-l1抑制多肽
KR20230050389A (ko) 2020-08-13 2023-04-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Il-2를 관심 표적 세포로 재지시하는 방법
EP4204095A1 (en) 2020-08-28 2023-07-05 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma
JP2023538955A (ja) 2020-08-31 2023-09-12 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在シグネチャーおよび免疫療法
US20230374064A1 (en) 2020-10-05 2023-11-23 Bristol-Myers Squibb Company Methods for concentrating proteins
WO2022076596A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6
KR20230093282A (ko) 2020-10-23 2023-06-27 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 폐암에 대한 lag-3 길항제 요법
EP4236960A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Ikena Oncology, Inc. Combination of an ahr inhibitor with a pdx inhibitor or doxorubicine
CA3200671A1 (en) 2020-11-17 2022-05-27 Seagen Inc. Methods of treating cancer with a combination of tucatinib and an anti-pd-1/anti-pd-l1 antibody
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
KR20230121772A (ko) 2020-12-18 2023-08-21 람카프 바이오 베타 엘티디. Ceacam5 및 cd47에 대한 이중특이적 항체
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135457A1 (zh) * 2020-12-23 2022-06-30 广东菲鹏制药股份有限公司 一种抗pd-l1抗体及其应用
IL303648A (en) 2020-12-28 2023-08-01 Bristol Myers Squibb Co Antibody preparations and methods of using them
JP2024501029A (ja) 2020-12-28 2024-01-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１抗体の皮下投与
WO2022148736A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Transgene Vectorization of muc1 t cell engager
CN116745322A (zh) 2021-01-08 2023-09-12 百时美施贵宝公司 使用抗岩藻糖基-gm1抗体的组合疗法
EP4282413A1 (en) 2021-01-21 2023-11-29 Natural Medicine Institute Of Zhejiang Yangshengtang Co., Ltd. Composition and method for treating tumors
AU2022230795A1 (en) 2021-03-02 2023-09-21 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Substituted pyridines as dnmt1 inhibitors
WO2022187419A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
US20240166647A1 (en) 2021-03-03 2024-05-23 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon Ligands
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
US20240181052A1 (en) 2021-03-29 2024-06-06 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and treatment with a combination of a checkpoint inhibitor therapy and a car t cell therapy
EP4314060A1 (en) 2021-03-31 2024-02-07 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Antigen binding proteins and combinations thereof
JP2024514530A (ja) 2021-04-02 2024-04-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 切断型ｃｄｃｐ１に対する抗体およびその使用
CN113087801B (zh) * 2021-04-07 2022-07-05 深圳市核子基因科技有限公司 一种用核酸和抗体联合检测肺癌的试剂盒
CA3215856A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Alison O'neill Anti-il-27 antibodies and uses thereof
CA3219336A1 (en) 2021-05-18 2022-11-24 Kymab Limited Uses of anti-icos antibodies
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
WO2022262959A1 (en) 2021-06-15 2022-12-22 Astellas Pharma Europe Bv Bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3
US20230034659A1 (en) * 2021-06-17 2023-02-02 Sparx Bioscience Limited Anti-pdl1 antibodies and uses thereof
KR20240046323A (ko) 2021-07-13 2024-04-08 비온테크 에스이 암에 대한 병용 요법에 있어서 cd40 및 cd137에 대한 다중특이 결합제
KR20240042476A (ko) 2021-07-30 2024-04-02 오엔에이 테라퓨틱스 에스.엘. 항-cd36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도
CN118043352A (zh) 2021-09-02 2024-05-14 德国癌症研究中心公共法律基金会 副作用减少的抗cecam6抗体
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
WO2023057882A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Pfizer Inc. Combinations of azalactam compounds with a pd-1 axis binding antagonist for the treatment of cancer
CA3234647A1 (en) 2021-10-06 2023-04-13 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination therapy
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
AU2022377637A1 (en) 2021-10-28 2024-05-02 Lyell Immunopharma, Inc. Methods for culturing immune cells
WO2023076989A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Seagen Inc. Methods of treating cancer with a combination of an anti-pd-1 antibody and an anti-cd30 antibody-drug conjugate
CA3224890A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023079428A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Pfizer Inc. Combination therapies using tlr7/8 agonist
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
WO2023091951A1 (en) * 2021-11-16 2023-05-25 The Regents Of The University Of California Methods to enhance therapeutic efficacy in melanoma via modulation of tumor cell surface pd-l1/l2
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023161453A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Amazentis Sa Uses of urolithins
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023178192A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023192946A1 (en) * 2022-03-31 2023-10-05 Ventana Medical Systems, Inc. Methods and systems for predicting response to pd-1 axis directed therapeutics in colorectal tumors with deficient mismatch repair
WO2023192478A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-il-8 antibodies and anti-pd-1 antibodies for treating cancer
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2023196988A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Modernatx, Inc. Methods of use of mrnas encoding il-12
US20230326022A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine Learning Identification, Classification, and Quantification of Tertiary Lymphoid Structures
WO2023218046A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023222854A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 Kymab Limited Uses of anti-icos antibodies
WO2023230473A1 (en) 2022-05-24 2023-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies that bind to human ccr8
WO2023230541A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Viiv Healthcare Company Piperazine derivatives useful in hiv therapy
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023242351A1 (en) 2022-06-16 2023-12-21 Lamkap Bio Beta Ag Combination therapy of bispecific antibodies against ceacam5 and cd47 and bispecific antibodies against ceacam5 and cd3
WO2024015803A2 (en) 2022-07-11 2024-01-18 Autonomous Therapeutics, Inc. Encrypted rna and methods of its use
WO2024023740A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Astrazeneca Ab Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2024040175A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Pulmatrix Operating Company, Inc. Methods for treating cancer using inhaled angiogenesis inhibitor
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024069009A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
WO2024116140A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Medimmune Limited Combination therapy for treatment of cancer comprising anti-pd-l1 and anti-cd73 antibodies
WO2024115725A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 BioNTech SE Multispecific antibody against cd40 and cd137 in combination therapy with anti-pd1 ab and chemotherapy

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004056875A1 (en) * 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
WO2006121168A1 (en) * 2005-05-09 2006-11-16 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
WO2007005874A2 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
US20100015642A1 (en) * 2006-01-05 2010-01-21 Kwon Eugene D B7-h1 and survivin in cancer
WO2012006589A2 (en) * 2010-07-08 2012-01-12 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for identification, assessment and treatment of cancers associated with hedgehog signaling

Family Cites Families (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6051227A (en) 1995-07-25 2000-04-18 The Regents Of The University Of California, Office Of Technology Transfer Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
RS51309B (sr) 1998-12-23 2010-12-31 Pfizer Inc. Humana monoklonalna antitela za ctla-4
WO2001014557A1 (en) 1999-08-23 2001-03-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
DE60033293D1 (de) * 1999-08-23 2007-03-22 Dana Farber Cancer Inst Inc Neue b7-4 moleküle und deren verwendungen
CN1371416B (zh) 1999-08-24 2012-10-10 梅达里克斯公司 人ctla-4抗体及其应用
AU7602400A (en) 1999-09-20 2001-04-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Secreted proteins and uses thereof
US6803192B1 (en) 1999-11-30 2004-10-12 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1, a novel immunoregulatory molecule
CA3016482A1 (en) 1999-11-30 2001-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1, a novel immunoregulatory molecule
EP1261376A1 (en) 2000-01-27 2002-12-04 Genetics Institute, LLC Antibodies against ctla4(cd152), conjugates comprising same, and uses thereof
MXPA03008959A (es) 2001-04-02 2004-10-15 Wyeth Corp Pd-1, un receptor para b7-4 y sus usos.
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
AU2002258941A1 (en) 2001-04-20 2002-11-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of enhancing cell responsiveness
EP1456652A4 (en) 2001-11-13 2005-11-02 Dana Farber Cancer Inst Inc IMMUNOCELL ACTIVATION MODULATING SUBSTANCES AND USE METHOD THEREFOR
CA2478012C (en) * 2002-03-01 2012-06-19 Immunomedics, Inc. Internalizing anti-cd74 antibodies and methods of use
PT2206517T (pt) 2002-07-03 2023-11-07 Tasuku Honjo Composições de imunopotenciação contendo anticorpos anti-pd-l1
EP1591527B1 (en) 2003-01-23 2015-08-26 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Substance specific to human pd-1
WO2006042237A2 (en) * 2004-10-06 2006-04-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1 and methods of diagnosis, prognosis, and treatment of cancer
AU2006227880A1 (en) 2005-03-23 2006-09-28 Pfizer Products Inc. Anti-CTLA4 antibody and indolinone combination therapy for treatment of cancer
CN101405403B (zh) 2005-04-13 2013-07-10 科学研究高等机关 鉴定用于癌症治疗的化合物的体外方法
GB0509748D0 (en) 2005-05-13 2005-06-22 Univ Glasgow Materials and methods relating to cell based therapies
KR101600225B1 (ko) 2005-06-08 2016-03-04 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 예정 세포사 1(ｐｄ-1) 경로를 억제함으로써 지속 감염 및 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
EP2061504A4 (en) * 2006-09-20 2010-01-27 Univ Johns Hopkins COMBINATION THERAPY FOR CANCER AND INFECTION DISEASES WITH ANTI-B7-H1 ANTIBODIES
CN101215329B (zh) 2008-01-04 2011-02-02 中国人民解放军第四军医大学 可溶性人程序性死亡蛋白-1-IgV及其制备方法
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
PL2342226T3 (pl) * 2008-09-26 2017-01-31 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Ludzkie przeciwciała anty-PD-1, PD-L1 i PD-L2 oraz ich zastosowania
US8603477B2 (en) 2008-10-31 2013-12-10 Abbvie Biotherapeutics Inc. Use of anti-CS1 antibodies for treatment of rare lymphomas
US8420089B2 (en) * 2008-11-25 2013-04-16 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
HUE034832T2 (hu) 2008-12-09 2021-12-28 Hoffmann La Roche Anti-PD-L1 antitestek és alkalmazásuk T-sejt-funkció fokozására
US10928398B2 (en) 2008-12-17 2021-02-23 Cornell University Method for double staining colocalized nuclear-markers in histological lymphoid or bone marrow tissue sample
ES2646863T3 (es) 2009-11-24 2017-12-18 Medimmune Limited Agentes de unión específica contra B7-H1
US20130022629A1 (en) * 2010-01-04 2013-01-24 Sharpe Arlene H Modulators of Immunoinhibitory Receptor PD-1, and Methods of Use Thereof
MX338353B (es) 2011-04-20 2016-04-13 Medimmune Llc Anticuerpos y otras moleculas que se unen a b7 - h1 y pd - 1.
JP5447877B2 (ja) 2011-06-16 2014-03-19 コニカミノルタ株式会社 画像形成装置
TWI496886B (zh) 2011-06-24 2015-08-21 Taipei Veteran General Hospital 提升感染性與惡性疾病之治療之免疫反應
EP2850102A1 (en) 2012-05-15 2015-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
ES2643887T3 (es) 2012-10-02 2017-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Combinación de anticuerpos anti-KIR y anticuerpos anti-PD-1 para tratar el cáncer
DK2970473T3 (da) * 2013-03-14 2017-11-27 Bristol Myers Squibb Co Kombination af dr5-agonist og anti-pd-1-antagonist og fremgangsmåder til anvendelse heraf
CN106255510A (zh) * 2014-03-05 2016-12-21 百时美施贵宝公司 使用抗pd‑1抗体与另一抗癌剂的组合治疗肾癌
KR20170003692A (ko) * 2014-05-15 2017-01-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항암제의 조합물을 사용한 폐암의 치료
CA2955612C (en) 2014-07-18 2022-05-17 Advaxis, Inc. Combination of a pd-1 antagonist and a listeria-based vaccine for treating prostate cancer
WO2016029073A2 (en) * 2014-08-22 2016-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of cancer using a combination of an anti-pd-1 antibody and an anti-cd137 antibody
BR112017008914A2 (pt) * 2014-10-29 2018-01-16 Five Prime Therapeutics, Inc. método para tratar câncer, composição e uso da composição
KR20170140316A (ko) * 2015-04-28 2017-12-20 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체를 사용한 pd-l1-양성 흑색종의 치료
JP2018514550A (ja) * 2015-04-28 2018-06-07 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｐｄ−１抗体および抗ｃｔｌａ−４抗体を使用するｐｄ−ｌ１陰性黒色腫の処置
US20180155429A1 (en) * 2015-05-28 2018-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1 positive lung cancer using an anti-pd-1 antibody
WO2016196389A1 (en) * 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cell carcinoma
US20180179282A1 (en) * 2015-06-12 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of cancer by combined blockade of the pd-1 and cxcr4 signaling pathways
TW201709929A (zh) * 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
JP7320944B2 (ja) * 2015-10-08 2023-08-04 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｂ７‐ｈ３に特異的に結合する分子及びｐｄ‐１に特異的に結合する分子
TW202408573A (zh) * 2015-11-18 2024-03-01 美商必治妥施貴寶公司 使用抗ｐｄ－１抗體與抗ｃｔｌａ－４抗體之組合以治療肺癌
US10392442B2 (en) * 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
KR20190015407A (ko) * 2016-06-03 2019-02-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 재발성 소세포 폐암의 치료 방법에 사용하기 위한 항-pd-1 항체
TWI788340B (zh) * 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
KR20200014363A (ko) * 2017-06-01 2020-02-10 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체를 사용하여 종양을 치료하는 방법

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004056875A1 (en) * 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
WO2006121168A1 (en) * 2005-05-09 2006-11-16 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
WO2007005874A2 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
US20100015642A1 (en) * 2006-01-05 2010-01-21 Kwon Eugene D B7-h1 and survivin in cancer
WO2012006589A2 (en) * 2010-07-08 2012-01-12 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for identification, assessment and treatment of cancers associated with hedgehog signaling

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DAVID J. ANDORSKY, REIKO E. YAMADA, JONATHAN SAID, GERALDINE S. PINKUS, DAVID J. BETTING, JOHN M. TIMMERMAN: "Programmed Death Ligand 1 Is Expressed by Non-Hodgkin Lymphomas and Inhibits the Activity of Tumor-Associated T Cells", CLINICAL CANCER RESEARCH, AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, US, vol. 17, no. 4232, 1 July 2011 (2011-07-01), US, pages 1 - 34, XP002703661, ISSN: 1078-0432, DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-10-2660 *
HIRANO FUMIYA ET AL: "Blockade of B7-H1 and PD-1 by monoclonal antibodies potentiates cancer therapeutic immunity.", CANCER RESEARCH, AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, US, vol. 65, no. 3, 1 February 2005 (2005-02-01), US, pages 1089 - 1096, XP002419626, ISSN: 0008-5472 *
KIRKWOOD JOHN M. ET AL. Immunotherapy of Cancer in 2012. CA Cancer J. Clin., 2012, vol. 62, no. 5, p. 309-335, Epub 10.05.2012, DOI: 10.3322/caac.20132, особенно с. 310, 319-320, 326-327 *
LINDZY F DODSON​‌, WILLIAM G HAWKINS​‌, PETER GOEDEGEBUURE​: "Potential targets for pancreatic cancer immunotherapeutics", JOURNAL OF IMMUNOTHERAPY, LIPPINCOTT WILLIAMS & WILKINS, US, vol. 3, no. 4, 1 April 2011 (2011-04-01), US, pages 517 - 537, XP002703660, ISSN: 1524-9557, DOI: 10.2217/IMT.11.10 *

Also Published As

Publication number Publication date
US10072082B2 (en) 2018-09-11
US9212224B2 (en) 2015-12-15
BR112014028826A2 (pt) 2017-06-27
US20180282414A1 (en) 2018-10-04
EP3309175A1 (en) 2018-04-18
CA3213528A1 (en) 2013-11-21
SG11201407190TA (en) 2014-12-30
EP4166567A1 (en) 2023-04-19
US20180282413A1 (en) 2018-10-04
CN108969763B (zh) 2023-11-14
JP6448533B2 (ja) 2019-01-09
JP2018095649A (ja) 2018-06-21
US10316090B2 (en) 2019-06-11
US10266596B1 (en) 2019-04-23
US20190092863A1 (en) 2019-03-28
BR122022015975B1 (pt) 2024-01-02
US20190100589A1 (en) 2019-04-04
US20190153099A1 (en) 2019-05-23
US10308714B2 (en) 2019-06-04
US20130309250A1 (en) 2013-11-21
JP6672343B2 (ja) 2020-03-25
US20150125463A1 (en) 2015-05-07
US20180273624A1 (en) 2018-09-27
US20200308282A1 (en) 2020-10-01
US10316091B2 (en) 2019-06-11
KR102193343B1 (ko) 2020-12-22
AU2013263076A1 (en) 2015-01-22
EA201492105A1 (ru) 2015-06-30
US10266595B2 (en) 2019-04-23
MX2014013565A (es) 2015-02-12
KR20200143509A (ko) 2020-12-23
CA2873402C (en) 2023-10-24
KR20220101010A (ko) 2022-07-18
US10577423B2 (en) 2020-03-03
US20180319887A1 (en) 2018-11-08
AU2013263076B2 (en) 2017-08-31
CN113967253A (zh) 2022-01-25
HK1203971A1 (en) 2015-11-06
CA2873402A1 (en) 2013-11-21
JP2020105204A (ja) 2020-07-09
US10323093B2 (en) 2019-06-18
AU2019202416A1 (en) 2019-05-02
US10138299B2 (en) 2018-11-27
WO2013173223A1 (en) 2013-11-21
US20190112376A1 (en) 2019-04-18
US10266594B1 (en) 2019-04-23
BR112014028826A8 (pt) 2021-07-20
CN104470949A (zh) 2015-03-25
SG10201700698WA (en) 2017-02-27
US10323092B2 (en) 2019-06-18
US20240034793A1 (en) 2024-02-01
KR20150020189A (ko) 2015-02-25
US10604575B2 (en) 2020-03-31
MX368507B (es) 2019-10-07
IL258051B (en) 2022-02-01
BR112014028826B1 (pt) 2024-04-30
US20190112377A1 (en) 2019-04-18
US20160090417A1 (en) 2016-03-31
AU2017213489A1 (en) 2017-08-31
US20240002512A1 (en) 2024-01-04
EA037351B8 (ru) 2021-04-29
US10584170B2 (en) 2020-03-10
US20190135920A1 (en) 2019-05-09
IL235591A0 (en) 2015-01-29
EP2850102A1 (en) 2015-03-25
CN108969763A (zh) 2018-12-11
KR102418979B1 (ko) 2022-07-11
JP2015518826A (ja) 2015-07-06
US20180312590A1 (en) 2018-11-01
IL258051A (en) 2018-05-31
JP2022071038A (ja) 2022-05-13
IL289750A (en) 2022-03-01
AU2020289725A1 (en) 2021-01-21
US20190100590A1 (en) 2019-04-04
US9856320B2 (en) 2018-01-02
AU2019202416B2 (en) 2020-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240034793A1 (en) Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
EA045764B1 (ru) Иммунотерапия злокачественных опухолей путем нарушения передачи сигналов pd-1/pd-l1
BR122024000362A2 (pt) Anticorpos monoclonais, kit para o tratamento de um indivíduo afligido com um câncer, processo para medir pd-l1 membranoso em células tumorais isoladas e uso do anticorpo ou uma porção que se liga ao antígeno do mesmo

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM