KR20240042476A - 항-cd36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도 - Google Patents

항-cd36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도 Download PDF

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베니타 살바도르 아즈나르
발레리 반후렌
프리아스 산체스 머스 드
아르미센 베아트리츠 모란초
바간 살바도르 구아르디올라
헤일 지오프리
이안 윌킨슨
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오엔에이 테라퓨틱스 에스.엘.
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Abstract

본 발명은 지방산 수용체 CD36의 표적화를 통한 암 치료에 관한 것이다. 본 발명은 또한 CD36 표적화를 통한 암 전이의 치료에 관한 것이다. 본 발명은 개체에서 암 및/또는 전이성 암을 치료 또는 예방하기 위한 CD36 활성의 차단제 또는 저해제로서 항-CD36 항체의 용도를 수반한다.

Description

항-CD36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도
관련 출원에 대한 교차-참조
본 PCT 출원은 2021년 7월 30일자 미국 가출원번호 63/227,806에 대해 우선권 혜택을 청구하며, 이는 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
EFS WEB을 통해 전자 제출된 서열목록에 대한 언급
본 출원시 전자 제출된 서열목록의 내용은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다 (4427_011PC01_Seqlisting_ST26.xml; 크기: 352,642 bytes; 생성일: 2022년 7월 29일).
기술분야
본 개시내용은 암, 특히 암 전이의 치료, 및 이들 질환에 대한 방제에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 암을 치료하기 위한 항-CD36 항체의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 원발성 암, 암 전이 또는 이 둘다를 치료하기 위한 항-CD36 항체의 용도에 관한 것이다. 치료는 전장 항체 및 이의 단편 둘다의 이용과 관련있다.
CD36 (HGNC:1663, EntrezGene:948, Ensembl:ENSG00000135218, OMIM: 173510, UniProtKB: P16671)은 이를 지칭하는 여러가지 다른 명칭으로 표시되는 바와 같이 몇가지 다양한 기능들이 알려져 있는 수용체 단백질이다: 그 중에서도 클러스터 결정인자 36 (cluster determinant 36), 트롬보스폰딘 수용체, I형 콜라겐 수용체, 백혈구 분화 항원 CD36, 혈소판 당단백질 4 또는 지방산 트랜스로카제 (fatty acid translocase)로 알려져 있다. GeneCards (http://www.genecards.org/cgi-bin/carddisp.pl?gene=CD36)에 요약 기술된 바와 같이, CD36 유전자에 대한 Entrez Gene 및 UniProt/SwissProt 개요는 혈소판 및 다양한 세포주에서 트롬보스폰딘에 대한 수용체로서 작용하는 혈소판 표면 상의 4번째로 주요한 단백질인 것으로 기술되어 있다. 트롬보스폰딘은 다양한 부착 과정에 참여하는 널리 분포된 단백질이므로, 이 단백질은 세포 부착 분자로서 암시된다. 이는 콜라겐 및 트롬보스폰딘에 결합해 항-신생혈관 효과를 매개할 뿐 아니라 음이온성 인지질 및 산화된 LDL에도 결합한다. 이것은 열대열원충이 기생하는 적혈구의 세포부착을 직접 매개하고, 장쇄 지방산에 결합한다. 이것은 단구/대식세포에서 염증을 촉진하는 TLR4-TLR6 헤테로다이머에 대한 공동-수용체이다. CD36에 산화된 LDL ("oxLDL") 또는 아밀로이드-β 42와 같은 리간드가 결합하면, CD36은 TLR4 및 TLR6의 헤테로다이머 형성을 빠르게 유도한다. TLR4-TLR6 헤테로다이머는 내부로 유입되고, (MYD88 신호전달 경로를 통한) NF-κB-의존적인 CXCL1, CXCL2 및 CCL9 사이토카인의 생산, (TICAM1 신호전달 경로를 통한) CCL5 사이토카인의 생산 및 IL1b 분비를 유발하는, 염증 반응을 촉발한다. CD36은 또한 세포외 환경으로부터 지질을 흡수해 β-산화를 촉발함으로써 APT 형태로 에너지를 수득하는 신호전달 캐스케이드의 상류에 위치한다 (Coburn, C.T. et al., J. Biol. Chem. 275(42):32523-9 (2000); Ibrahimi, A. et al., J. Biol. Chem. 274(38):26761-6 (1999); Pepino, M.Y. et al., Annu. Rev. Nutr. 34:281-303 (2014)).
CD36은 기존에 암과 연관된 바 있지만, 이와 관련한 요법 및 작용 기전은 명확하지 않다. WO 03/032813에는 CD36이 신장 세포 암종에서 상향 조절되는 유전자들 중 하나임을 밝히는 분석이 개시되어 있다. 편평 세포 암종 (SCC)이 CD36 항체 또는 안티센스 RNA와 같은 길항제를 이용한 치료가 이용될 수 있는 가능성있는 암 타입들 중 하나로 언급되어 있지만, SCC에서 CD36 발현 변화에 대한 어떠한 증거도, 특히 원발성 종양 또는 전이의 예방 또는 치료에 있어 CD36 항체 또는 기타 길항제의 효능에 대한 어떠한 증거도 없는 실정이다. 자발적인 동물 종양에서 WO 03/032813에 언급된 분석에 따라 신장 세포 암종에서 과다 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체의 효능 검사가 제안되어 있으며, 고도로 침습적이고 악성인 종양이라는 점을 감안해 고양이 구강 SCC (feline oral SCC)가 적합한 모델인 것으로 제안된 바 있다. 그러나, 재차 이러한 제안은 이러한 방식에 대한 실제적으로 유용한 예가 아니며, 또한 신장 세포 암종에서 과다 발현되는 임의의 유전자가 또한 고양이 구강 SCC에서 과다 발현된다는 어떠한 증거도 없이 제안된 것이며, 특히 고양이 구강 SCC에서 CD36의 발현 수준 변화 (증가 또는 감소)에 대한 어떠한 데이터도, 임의 타입의 암에서 전이 개시, 진행 또는 전파에 CD36의 참여 가능성에 대한 어떠한 증거도, 제시되어 있지 않다. 아울러, 고양이 구강 SCC가 전이 발생율이 낮은 것으로 언급되어 있지만, 이는 이 종양을 가진 고양이의 생존 시간이 짧기 때문일 수도 있다는 점 역시 언급되어 있다.
전이와 관련하여, (활성을 중화하는 항체 또는 shRNA에 의한) CD36의 저해가 전이 개시 및 진행에 대해 극적인 효과를 보이며, 검사한 모든 세포주와 환자-유래 종양에서 전이 침투 및 증식을 감소시키는 것으로, 기존에 밝혀진 바 있다. 미국 특허 공개번호 2019-0106503을 참조하며, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 아울러, 암 및 암 전이 치료에 이용가능한 항-CD36 항체가 PCT/IB2021/051881에서 개시된 바 있으며, 이는 그 전체가 원용에 의해 본원에 통합된다. 본 발명은 새로운 개선된 항-CD36 항체 및 암 치료 및 암 전이 예방/치료에서의 이러한 항체의 이용 방법을 제공한다.
본 출원의 개시내용은 항-CD36 항체 및 이러한 항체의 암 치료 용도에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 암 전이를 치료하기 위해 이용된다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 원발성 종양 및 암 전이를 둘다 치료하기 위해 이용한다.
일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 하나 이상의 상보성 결정 영역 (CDR) 서열을 포함하는 단리된 항체이다. 일부 구현예에서, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85-105로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106-132 및 248로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133-158로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159-172로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173-185 및 246으로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186-206 및 247로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 서열번호 85-206 및 246-248로부터 선택되는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표 2에 열거된 CDR 서열들의 특정 조합들로부터 선택되는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 키메라 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간화 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 완전 인간 항체 (fully human antibody)이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 항체이다. 일부 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 13-44, 241 및 243 중 하나 이상의 아미노산과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가진다. 일부 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 45-78, 240, 242, 244 및 245 중 하나 이상의 아미노산과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가진다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 상기한 구현예들에 기술된 바와 같은 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 항체이다. 일부 구현예에서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열번호 13 및 45, 서열번호 14 및 46, 서열번호 15 및 47, 서열번호 16 및 48, 서열번호 17 및 49, 서열번호 18 및 50, 서열번호 19 및 51, 서열번호 20 및 52, 서열번호 21 및 53, 서열번호 22 및 54, 서열번호 23 및 55, 서열번호 24 및 56, 서열번호 25 및 57, 서열번호 26 및 58, 서열번호 26 및 59, 서열번호 27 및 60, 서열번호 28 및 61, 서열번호 29 및 62, 서열번호 30 및 63, 서열번호 31 및 64, 서열번호 32 및 65, 서열번호 33 및 66, 서열번호 34 및 67, 서열번호 35 및 68, 서열번호 36 및 69 서열번호 37 및 70, 서열번호 38 및 71, 서열번호 39 및 72, 서열번호 40 및 73, 서열번호 40 및 74, 서열번호 41 및 75, 서열번호 42 및 76, 서열번호 43 및 77, 및 서열번호 44 및 78이다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 CD36에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 CD36에 특이적으로 결합한다. 다른 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 CD36 및 비-인간 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 항체는 인간 CD36 및 인간을 제외한 영장류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 인간을 제외한 영장류 CD36은 시노몰구스 (cynomolgus) 원숭이 CD36 또는 레서스 마카큐 (rhesus macaque) CD36이다. 일부 구현예에서, 설치류 CD36은 랫 CD36 또는 마우스 CD36이다.
일부 구현예에서, 항체는 145A, 146S, 147H, 148I, 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 157I, 158L, 159N, 160S, 185P, 186F, 187L, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 197T, 198V, 199G 및 398K, 399I, 400Q, 401V, 402L, 403K, 404N, 405L, 406K, 407R, 408N, 409Y, 410I, 411V, 412P, 413I 및 414L로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 다른 구현예에서, 항체는 인간 CD36에서의 이들 아미노산들을 모두 포함하거나 또는 이들로 구성된 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 다른 구현예에서, 항체는 280E, 281S, 282D, 283V, 284N, 285L, 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 293F, 294V, 295L, 296P, 297S, 298K, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S, 351P, 352D,353V, 354S, 355E, 356P, 357I, 358D, 359G, 360L, 361N 362P, 363N, 364E, 365E로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 다른 구현예에서, 항체는 인간 CD36에서의 이들 아미노산들을 모두 포함하거나 또는 이들로 구성된 에피토프에 결합한다. 특정 에피토프에 대한 결합은 예를 들어 알라닌 스캐닝 돌연변이 유발과 같은 기법을 이용함으로써 확인할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 400Q, 401V, 402L, 403K로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 아미노산들을 모두 포함하거나 또는 이로 구성된, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q 및 156M을 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T 및 196T를 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 400Q, 401V, 402L 및 403K를 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다. 다른 구현예에서, 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A 및 350S로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 아미노산들을 모두 포함하거나 또는 이로 구성된, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y 및 292R로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 아미노산들을 모두 포함하거나 또는 이로 구성된, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 상기 전술한 임의 구현예에서 정의된 바와 같은 인간 CD36의 에피토프에 결합하며, 이러한 에피토프는 수소-중수소 교환 질량 분광 측정 (hydrogen-deuterium exchange mass spectrometry)에 의해 식별된다.
일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 20 nM보다 높은 친화성으로 인간 CD36에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 10 nM보다 높은 친화성으로 인간 CD36에 결합한다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 항체는 IgA 또는 IgG의 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 인간 면역글로불린 IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중쇄 불변 영역들로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 아미노산 위치 E233, L234, L235, G236, N297, P331 및 P329에 하나 이상의 돌연변이를 가진 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 아미노산 위치 234 및 235에 루신에서 알라닌으로의 치환으로 구성된 LALA 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 아미노산 위치 L234, L235 및/또는 G236에 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235S 및 G236R; L234G, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234S, L235G 및 G236R; L234S, L235T 및 G236R; L234S, L235V 및 G236R; L234T, L235Q 및 G236R; L234T, L235S 및 G236R; L234T, L235T 및 G236R; L234A 및 L235A; L234A, L235A 및 P329G; G236R 및 L328R; L234A 및 G237A; L234A, L235A 및 G237A; L234A 및 L235E; L235V, F243L, R292P, Y300L 및 P396L; D265A 및 P329A; L234A, L235A 및 K322A; L234F, L235E 및 P331S; L234F, L235Q 및 K322Q; L234A, L235A, G237A, P238S, H268A, A330S 및 P331S; E233P, L234V, L235A, G236, A327G, A330S 및 P331S; L235A 및 G236R; L235S 및 G236R; G236R; L234Q 및 L235S; L235G 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q 및 L235S; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S, G236R, M252Y, S254T 및 T256E; 및 L234Q, L235S, G236R, T250Q 및 M428L로 이루어진 군으로부터 선택되는 돌연변이 세트를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234G, L235S 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235T 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235V 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235Q 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235T 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235S 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235G 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235S 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A 및 L235A 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235A 및 P329G 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 불변 영역을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 경쇄 불변 영역은 인간 면역글로불린 카파 (κ) 및 람다(λ) 경쇄 불변 영역들로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 항체는 중쇄 불변 영역이 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이고; 경쇄 불변 영역이 인간 κ 경쇄 불변 영역인, 중쇄 불변 영역 및 경쇄 불변 영역을 포함한다.
특정 구현예에서, 항체는 항원 결합 단편이다. 일부 구현예에서, 항원 결합 단편은 Fab, Fab', F(ab')2, 단쇄 Fv (scFv), 이황화 연결된 Fv, V-NAR 도메인, IgNar, 인트라바디 (intrabody), IgGΔCH2, 미니바디 (minibody), F(ab')3, 테트라바디, 디아아바디, 단일-도메인 항체, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2 또는 scFv-Fc를 포함한다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 2중 특이 항체 (bispecific antibody)이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 2중 특이 항체는 포유류 CD36, 예를 들어, 인간 CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과, 제2 항원에 특이적으로 결한하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 항원은 인간 면역 세포 항원 또는 종양-특이 항원이다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 CD36 상의 적어도 2개의 구분되는 에피토프에 결합하는 바이파라토프 항체 (biparatopic antibody)이다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 CD36의 제1 에피토프 및 제2 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 CD36의 제1 에피토프에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 CD36의 제2 에피토프에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 바이파라토프 항체는 1G04의 항원-결합 도메인과 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 또는 30G04의 항원-결합 도메인을 포함한다. 특정 구현예에서, 바이파라토프 항체는 1G04의 에피토프와 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 또는 30G04의 에피토프에 결합한다.
특정 구현예는 본원에 기술된 항-CD36 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물이다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물 내 항체의 적어도 95%가 비-푸코시화된다 (afucosylated). 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 하나 이상의 다른 치료학적 물질을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 PD-1 저해제를 추가로 포함한다. 적절한 PD-1 저해제로는 항-PD-1 항체 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙 등이 있다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 항-PD-L1 항체로서 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559와 같은 PD-L1 저해제를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 항-CTLA-4 항체로서 이필리무맙과 같은 CTLA-4 저해제를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 시스플라틴과 같은 화학치료제를 추가로 포함한다.
특정 구현예는 항-CD36 항체를 투여하는 방법 및 본원에 기술된 항-CD36 항체를 함유한 약학적 조성물이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 FACS 분석에 의한 측정시 250 nM 미만, 200 nM 미만, 150 nM 미만, 100 nM 미만, 50 nM 미만, 20 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 2 nM 미만 또는 1 nM 미만의 IC50으로, CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 지방산 흡수를 저해한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포로의 형광단 (예, DiI) 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 250 nM 미만, 200 nM 미만, 150 nM 미만, 100 nM 미만, 50 nM 미만, 20 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 2 nM 미만 또는 1 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해한다. 일부 구현예들은 본원에 개시된 항체를 치료학적 유효량으로 또는 본원에 개시된 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는 환자에서 암 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 암은 구강 편평 세포암, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 예를 들어, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종이다. 일부 구현예들은 본원에 개시된 항체를 치료학적 유효량으로 또는 본원에 개시된 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양의 치료 방법이다. 관련 구현예는 암 치료 방법에 이용하기 위한 본원에 개시된 항체에 관한 것이다. 추가의 관련 구현예는 암 치료용 의약제의 제조에서 본원에 개시된 항체의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 전이성 종양은 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 예를 들어, 지방육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종이다. 일부 구현예에서, 전이성 종양은 경부 림프절 (cervical lymph node), 간, 폐, 비장, 신장 또는 복막 벽에 위치한다. 일부 구현예에서, 치료는 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의해 측정된 바와 같이 전이성 종양의 크기를 감소시킨다. 일부 구현예에서, 치료는 경부 림프절, 간, 폐, 비장, 신장 또는 복막 벽에서 전이성 종양의 크기를 감소시킨다. 일부 구현예에서, 치료는 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의해 측정된 바와 같이 전이성 종양의 형성 또는 진행을 방지 또는 저해한다. 일부 구현예에서, 치료는 경부 림프절, 간, 폐, 비장, 신장 또는 복막 벽에서 전이성 종양의 형성 또는 진행을 방지 또는 저해한다. 일부 구현예에서, 치료는 전이성 종양의 수를 감소시킨다. 일부 구현예에서, 환자는 인간 환자이다. 일부 구현예에서, 치료는 원발성 종양 및 전이성 종양을 모두 치료하는데 효과적이다.
특정 구현예에서, 본 방법은 전장 항체, 단쇄 항체, scFv, Fab 단편 또는 F(ab')2 단편으로서 항-CD36 항체의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 방법은 전장 항체로서 항-CD36 항체의 투여를 포함한다.
특정 구현예에서, 암을 가진 개체를 치료하는 방법은 인간 CD36에 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 PD-1, PD-L1, CTLA-4, CD3, LAG3, OX40, CD28, B7H3, CD47, TIM3, ICOS, LGR5, 4-1BB, CD40, CD40-L 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택되는 인간 면역 세포 항원에 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는, 2중 특이 항체를 투여하는 것을 포함한다.
특정 구현예에서, 암을 가진 개체를 치료하는 방법은 인간 CD36에 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 HER2, HER3, EGFR, VEGF, IGF-1, IGF-2, ANG2, DLL1, IGF-1R, cMET, DLL4, FAP, DR5, IL15, IL15Ra, CD3, CEA, EpCAM, PSMA, PMEL 및 GPC3으로 이루어진 군으로부터 선택되는 인간 종양 항원에 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는, 2중 특이 항체를 투여하는 것을 포함한다.
특정 구현예에서, 본 방법은 항-CD36 항체와 더불어 제2 요법을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 투여하는 제2 요법은 면역요법이다. 일부 구현예에서, 투여하는 면역요법은 항-PD-1 항체로서 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙과 같은 PD-1 저해제이다. 일부 구현예에서, 투여하는 면역요법은 항-PD-L1 항체로서 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559와 같은 PD-L1 저해제이다. 일부 구현예에서, 투여하는 면역요법은 항-CTLA-4 항체로서 이필리무맙과 같은 CTLA-4 저해제이다. 일부 구현예에서, 제2 요법은 화학치료제이다. 일부 구현예에서, 투여하는 화학치료제는 시스플라틴이다.
특정 구현예에서, 전이가 개체에서 감소 또는 저해된다. 일부 구현예에서, 경부 림프절, 간, 폐, 비장, 신장 또는 복막 벽으로의 전이가 개체에서 감소 또는 저해된다. 방법이 항-CD36 항체와 더불어 제2 요법의 투여를 수반하는 일부 구현예에서, 2가지 요법은 순차적으로 투여된다. 방법이 항-CD36 항체와 더불어 제2 요법의 투여를 수반하는 일부 구현예에서, 2가지 요법은 동시에 투여된다.
특정 구현예는 본원에 개시된 항체를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드이다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리뉴클레오티드는 서열번호 226, 228, 230, 232, 234, 236, 250, 257 및 258로 이루어진 군으로부터 선택되는 중쇄를 코딩한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리뉴클레오티드는 서열번호 227, 229, 231, 233, 235, 237, 249 및 253-256으로 이루어진 군으로부터 선택되는 경쇄를 코딩한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리뉴클레오티드는 서열번호 226 및 227, 서열번호 228 및 229, 서열번호 230 및 231, 서열번호 232 및 233, 서열번호 234 및 235, 서열번호 236 및 237, 서열번호 253 및 257, 서열번호 253 및 258, 서열번호 254 및 257, 서열번호 254 및 258, 서열번호 255 및 257, 서열번호 255 및 258, 서열번호 256 및 257, 또는 서열번호 256 및 258을 포함한다.
특정 구현예는 본원에 개시된 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터이다. 다른 특정 구현예는 본원에 개시된 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 벡터를 포함하는 세포이다. 일부 구현예에서, 세포는 E. coli, 슈도모나스, 바실러스, 스트렙토마이세스, 효모, CHO, YB/20, NS0, PER-C6, HEK 293, HEK 293T, NIH 3T3, HeLa, BHK, Hep G2, SP2/0, R1.1, B-W, L-M, COS1, COS7, BSC1, BSC40, BMT10 세포, 식물 세포, 곤충 세포 및 조직 배양물의 인간 세포로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 세포는 기능성 α-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자 (FUT8)가 결핍되어 있다.
특정 구현예는 본원에 개시된 항체의 제조 방법이다. 일부 구현예에서, 항체 제조 방법은 본원에 개시된 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 벡터를 포함하는 세포를 이용하여 항체를 발현하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 제조 방법은 본원에 개시된 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 벡터를 포함하는 세포를 항체 발현에 적합한 조건에서 배양한 다음 발현된 항체를 단리하는 것을 포함한다.
도 1A는 Detroit-562 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에서 시스플라틴과 함께 또는 시스플라틴 없이 시판 항-CD36 항체의 효능 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 1B는 실험에서 검사한 실험 군, 특히 치료제 및 각 군에 제공된 용량을 나타낸다.
도 2A-2C는 Detroit-562 마우스 구강 암 전이 모델에서 원발성 종양에 대한 항-CD36 항체 및/또는 시스플라틴의 효능과 관련한 결과를 제시한 것이다. 도 2A는 항-CD36 항체 및/또는 시스플라틴의 치료 코스 동안 원발성 종양을 IVIS 이미징에 의해 정량한 결과를 나타낸 것이다. 도 2B는 정위-주사한 마우스의 혀에서 H&E 염색한 원발성 종양의 대표적인 사진을 나타낸 것이다. 도 2C는 치료 용법 종료시 원발성 종양의 표면적을 나타낸 것이다. 이들 도는 검사한 항-CD36 Ab가 구강 암에서 원발성 종양의 증식을 억제하는데 시스플라틴과 적어도 상가적인 (additive) 항-종양 활성을 발휘함을, 보여준다.
도 3은 Detroit-562 마우스 구강 암 전이 모델에서 항-CD36 항체 및/또는 시스플라틴 치료 코스 종료시 H&E 염색한 대표적인 폐 전이 사진을 도시한다. 도는, 시스플라틴 (상단 우측), 항-CD36 항체 (하단 좌측) 또는 시스플라틴 + 항-CD36 항체 (하단 우측) 처리 마우스가 대조군 처리 마우스 (상단 좌측)보다 전이가 더 적고 작음을 보여준다.
도 4A 및 4B는 Detroit-562 마우스 구강 암 전이 모델에서 폐 전이 수 및 크기를 각각 정량한 결과를 도시한다. 도는, 항-CD36 항체 단독 처리 마우스가 대조군 마우스보다 전이 크기가 더 작고 전이 수가 더 적음을, 보여준다. 시스플라틴 단독 처리 마우스는, 시스플라틴이 전이 종양의 크기를 감소시켰음에도 불구하고, 대조군 마우스에서와 전이 수가 비슷하였다. 항-CD36 항체 및 시스플라틴을 둘다 처리한 경우에는 마우스에서 항-CD36 항체 단독 처리한 경우와 전이 수가 비슷하였다. 그러나, 항-CD36 항체 및 시스플라틴을 둘다 처리한 경우, 항-CD36 항체 또는 시스플라틴 단독과 비교해 전이성 종양의 크기 감소 수준이 더 높았다.
도 5A는 FaDu 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에서 단독으로 또는 시스플라틴과 함께 사용하는 경우에 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험에 대한 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 5B는 실험에서 검사한 실험 군, 특히 치료제 및 각 군에 제공된 용량을 나타낸다.
도 6A 및 6B는 FaDu 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에서 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험에서 수득한 원발성 종양에 대한 IVIS 이미징 (도 6A) 및 H&E 염색 (도 6B) 결과를 도시한다. 이들 분석에서, 시스플라틴은 종양 증식을 저해하였지만, ONA-0-v1의 투여 용량은 이 모델에서 이소형 대조군 항체를 처리한 경우와 비교해 원발성 종양에 대해 통계학적으로 유의한 효과를 발휘하진 않았다.
도 7A 및 7B는 FaDu 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에 대한 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험으로부터 수득한 IVIS 이미징에 따른 전이 결과를 도시한다. 이들 결과는 ONA-0-v1 처리가 전이의 생장을 저해할 수 있음을 보여준다.
도 8 및 도 9는 FaDu 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에서 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험으로부터 수득한 IVIS 이미징에 따른 림프절 전이 결과를 도시한다. ONA-0-v1 항체 처리는 IgA 이소형 대조군에 비해 전이성 종양의 생장을 50% 이상으로 저해하였으며, 시스플라틴에 ONA-0-v1 추가시 시스플라틴의 전이성 종양 생장의 저해 능력이 강화되었다.
도 10은 FaDu 세포를 이용한 마우스 구강 암 전이 모델에서 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험으로부터 수득한 IVIS 이미징에 따른 림프절 전이 결과를 도시한다. 시스플라틴 또는 ONA-0-v1 처리는 림프절 전이를 감소시켰으며, ONA-0-v1의 침투 저해는 시스플라틴과 함께 상승적으로 작용하였다.
도 11A 및 도 11B는 ONA-0-v1 및/또는 시스플라틴 치료 코스 중의 체중 및 혈소판 수치 측정값을 도시한다. 이들 데이터는, ONA-0-v1 처리 단독이 시스플라틴과 달리 이소형 대조군-처리 마우스와 비교해 마우스 체중 또는 혈소판 수치에 어떠한 영향도 미치지 않음을, 보여준다.
도 12A는 OVCAR-3 세포를 이용한 마우스 난소암 모델에서 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 효능 실험의 실험 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 12B는 이 모델에서 검사한 마우스에서 적출한 원발성 종양 사진으로, 상단 열은 비히클-주사한 마우스의 종양이고, 하단 열은 ONA-0-v1을 주사한 마우스의 종양이다. 도 12C는 이들 원발성 종양의 무게를 정량한 결과를 나타낸 것으로, ONA-0-v1 처리시 원발성 종양의 무게가 상대적으로 감소되는 것으로 확인된다 (**는 비-대응 t 검정에서 p=0.033임). 도 12D 및 도 12E는 OVCAR-3 원발성 종양에서 괴사 % 및 섬유증/콜라겐 각각에 대한 조직학적 분석 결과를 나타낸 것이다 (*는 비-대응 t 검정에서 p=0.0287임). 도 12D 및 12E는, ONA-0-v1 처리가 괴사를 증가시키고, 분석 종양에서 섬유증이 생김을, 보여준다.
도 13A 및 13B는 OVCAR-3 세포를 이용한 마우스 난소암 모델에서 발생한 대표적인 전이 사진을 도시한 것이다. 도 13A는 복막 벽 전이 예를 도시한 것이고, 도 13B는 간 전이 예를 도시한 것이다. 각 사진에는 척도를 위해 cm 눈금자가 포함되어 있으며, 백색 화살표는 전이를 표시한다.
도 14A-14C는 마우스 OVCAR-3 난소암 모델의 대조군 처리 마우스 및 ONA-0-v1 처리 마우스에서 전이 수 및 전이 크기를 정량한 결과를 도시한다. 도 14A는 대조군 ("비히클") 마우스 (전체 비히클 마우스의 총합; n = 9) 및 ONA-0-v1 처리 마우스 (전체 처리 마우스의 총합; n = 8)에서 임의 장기에서 관찰된 거시적 전이의 총수를 나타낸 것으로, ONA-0-v1 처리시 전이 개수가 50% 이상 감소 되었음을 보여준다. 도 14B 및 14C는 복막 벽 및 간 각각에서 전이 크기에 대한 거시적인 정량 결과를 도시한다. 종합적으로, 도 14A, 14B 및 14C는 OVCAR-3 난소암 마우스 모델에서 ONA-0-v1 처리가 전이 크기 및 전이 수를 감소시킴을 보여준다.
도 15A-15G는 마우스의 OVCAR-3 난소암 모델에서 대조군-처리 마우스 대비 ONA-0-v1 및 1G04 항-CD36 항체의 효능을 검사한 결과를 도시한 것이다. 도 15A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 15B는 처리 마우스의 경시적인 체중 변화를 도시한 것이다. 도 15C-15G는 ONA-0-v1 및 1G04 둘다 처리 마우스에서 전이 수 및 크기를 모두 감소시킴을 보여준다.
도 16A-16G는 마우스 대장암 모델에서 생체외 루시퍼라제 발광 분석에 따른 측정시 특정 장기 (즉, 전이)에서 소정의 수의 HCT-116 세포에 대한 1G04 처리 효과를 도시한 것이다. 도 16A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 16B는 처리 마우스의 경시적인 체중 변화를 도시한 것이다. 도 16C는 1G04가 처리 마우스에서 전체 암 세포 부담을 감소시킴을 도시하고, 도 16D-16G는 ONA-0-v1 처리가 간 (도 16D), 폐 (도 16E), 비장 (도 16F) 및 신장 (도 16G)에서 발광을 감소시킴을 도시한다.
도 17A-17E는 A549 전이성 폐암 모델에서 비히클-처리 마우스 대비 1G04 항-CD36 항체의 처리 결과를 보여준다. 도 17A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 17B는 실험에서 검사한 실험 군, 특히 치료제 및 각 군에 제공된 용량을 나타낸다. 도 17C는 발광 측정에 따라 1G04가 처리 마우스에서 전반적인 암 세포 부담을 감소시킴을 보여준다. 도 17D 및 17E는 폐 무게 및 생체외 폐 발광성이 각각 1G04 처리 후 감소됨을 보여준다.
도 18A-18E는 MC38 동계 대장암 모델에서 1G04 처리 효과를 도시한 것이다. 도 18A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 18B는 실험에서 검사한 실험 군, 특히 치료제 및 각 군에 제공된 용량을 나타낸다. 도 18C는 발광 측정에 따라 1G04가 처리 마우스에서 전반적인 암 세포 부담을 감소시킴을 보여준다. 도 18D는 1G04 처리 후 간에서의 발광성이 감소됨을 보여주며, 이는 간 전이 수준의 감소를 의미한다. 마찬가지로, 도 18E는 폐에서의 발광성이 1G04 처리 후 감소됨을 보여주며, 이는 폐 전이 수준의 감소를 의미한다.
도 19A-19C는 4T1 유방암 마우스에 대한 1G04 항-CD36 항체 처리 효과를 도시한 것이다. 도 19A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 도시한 것이다. 도 19B는 실험에서 검사한 실험 군, 특히 치료제 및 각 군에 제공된 용량을 나타낸다. 도 19C는 1G04 처리 후 비히클 처리와 비교해 폐에서의 발광성이 감소됨을 보여주며, 이는 폐 전이 수준의 감소를 의미한다.
도 20은 항-CD36 항체가 CD36-매개 지방산 흡수에 미치는 능력을 검사한, SCC25 세포에서의 분석 결과를 도시한 것이다. 검사한 각 항-CD36 항체는 이소형 대조군 항체로 처리한 후 관찰된 흡수와 비교해 지방산의 흡수를 저해하였다.
도 21A-21J는 항-CD36 항체가 형광단 (BODIPY FL C16) 연결된 팔미트산의 CD36-매개 흡수를 저해하는 능력을 검사한, HEK 293 세포 분석을 도시한다. 기본적인 실험 프로토콜은 도 21A에 제공한다. 분석의 결과는 도 21B-21J에 도표로 도시하며, 이는 6G04 (도 21D), 7G04 (도 21E), 9G04 (도 21F), 11G04 (도 21G), 13G04 (도 21H), 14G04 (도 21I) 및 28G04 (도 21J)가 각각 이소형 대조군 (도 21B) 또는 1G04 (도 21C)와 비교해 더 효율적으로 팔미트산 흡수를 저해함을 보여준다.
도 22A 및 22B는 항-CD36 항체가 여러가지 항체 농도 범위에서 CD36-매개 oxLDL 흡수를 저해하는 능력을 검사한 실험을 도시한다. 기본적인 실험 프로토콜은 도 22A에 제공한다. 도 22B는 1G04, 6G04, 7G04, 11G04, 13G04, 14G04 및 28G04 각각의 타이트레이션 곡선을 도시한 것으로, 이들 항체는 모두 SCC25 세포의 oxLDL 흡수를 저해하는 능력이 비슷함을 보여준다.
도 23A 및 23B는 SPR 경쟁 실험에서 항-CD36 항체가 CD36과 TSP1 간의 상호작용을 간섭하는지에 대한 검사를 도시한 것이다. 1G04를 이용해 주석이 달린 프로토콜 단계에 따라 수득한 예시적인 데이터 도표를 도 23A에 제시한다. 도 23B에 나타낸 바와 같이, 검사 항체 어느 것도 TSP-1/CD36 상호작용에 유의한 영향을 미치지 않았다.
도 24A-24D는 각각 서로 다른 Fc 침묵화 변이 (silencing alteration)를 함유한 다양한 불변 영역을 가지도록 조작된 항체에 대한 검사 결과를 도시한다. 도 24A 및 24B는 Fc 변이 어느 것도 인간 CD36 (도 24A) 또는 마우스 CD36 (도 24B)에의 결합을 방해하지 않음을 보여주는 ELISA 분석을 도시한다. 도 24C는 여러가지 Fc-포맷의 항-CD36 항체들이 FACS 분석에서 인간 CD36 (서열번호 1)을 안정적으로 발현하는 SCC25 세포에 동등하게 결합함을 보여준다. 도 24D는 여러가지 Fc 변이체들 각각이 SCC25 세포에의 팔미트산 흡수를 비슷한 수준에서 저해함을 보여준다.
도 25A는 Fc 침묵화 돌연변이를 가진 항-CD36 항체가 다양한 FcγR에 결합하는 능력을 확인하기 위한 검사를 도시한 것으로, 검사한 Fc 변이들이 인간 및 시노몰구스 FcγR와의 상호작용을 감소시킴을 보여준다. 도 25B-25D는 Fc 침묵화 돌연변이를 가진 항-CD36 항체가 ADCC, ADCP 또는 CDC 보체 반응을 유도하지 않음을 보여준다.
도 26은 Fc 침묵화 돌연변이를 가진 항-CD36 항체가 FcRn에 결합하는 능력을 확인하기 위한 검사를 도시한 것으로, 검사한 Fc 변이들은 FcRn 결합에 영향을 미치지 않는 것으로 확인된다.
도 27은 Fc 침묵화 돌연변이를 가진 항-CD36 항체가 보체 C1q 단백질에 결합하는 결합성을 검사한 ELISA 분석을 도시한 것으로, 임의의 Fc-조작된 샘플에 의한 결합은 검출되지 않았다.
도 28A 및 28B는 여러가지 Fc-포맷의 항-CD36 항체를 검사한 시험관내 인간 혈소판 응집 분석을 도시한 것으로, Fc 변이는 혈소판 응집 작용제 ADP와 함께 또는 단독으로 항체-유도된 혈소판 응집을 제거하는 것으로 확인된다.
도 29A는 인간 CD36 서열 (서열번호 1)을 도시한 것으로, 수소-중수소 교환 실험에서 식별된 바에 따라 주요 1G04 결합 에피토프를 구성하는 것으로 식별된 잔기들은 진하게 밑줄 표시한다. 도 29B는 CD36 구조의 공간-충진 (space-filling) 모델 및 리본 모델을 도시한 것으로, (비결합 상태와 결합 상태 간의 중수소화 차이가 > 0.5 D인 CD36 펩타이드에 의해 정의된 바와 같이) 1G04 에피토프를 형성하는 잔기는 적색으로 강조 표시하였다.
도 30은 CD36 서열 (서열번호 1)에 따른 펩타이드 선별에서 차등 중수소 흡수 도표 (ΔD)를 도시한 것이다. 비결합 상태 대 항체-결합된 단백질 상태 간의 중수소 병합 비교를 통해 표적 단백질에서 1G04와의 결합에 참여하는 부위를 식별할 수 있다.
도 31A는 인간 CD36 서열 (서열번호 1)을 도시한 것으로, 수소-중수소 교환 실험에서 식별된 바에 따라 주요 11G04 결합 에피토프를 구성하는 것으로 식별된 잔기는 진하게 밑줄 표시하였다. 도 31B는 CD36 구조의 공간-충진 모델 및 리본 모델을 도시한 것으로, (비결합 상태와 결합 상태 간의 중수소화 차이가 > 0.5 D인 CD36 펩타이드에 의해 정의된 바와 같이) 11G04 에피토프를 형성하는 잔기들은 적색으로 강조 표시하였다. 도 31C는 CD36 서열 (서열번호 1)에 따른 펩타이드 선별에서 차등 중수소 흡수 도표 (ΔD)를 도시한 것이다. 비결합 대 항체-결합된 단백질 상태 간의 중수소 병합 비교를 통해 표적 단백질에서 11G04와의 결합에 참여하는 부위를 식별할 수 있다.
도 32A-32C는 HCT-116의 전이성 결장직장 모델에서 비히클-처리 마우스와 비교해 항-CD36 항체를 검사한 결과를 도시한다. 도 32A는 본 실험의 실험적인 개괄을 개략적으로 나타내고, 실험에서 검사한 실험군, 특히 각 군에 제공된 치료제와 용량을 상세히 기술한다. 도 32B는 항-CD36 항체가 발광성에 의해 측정한 바와 같이 처리 마우스에서 전체 암 세포 부담을 낮춤을 보여준다. 도 32C는 생체외 간 발광성이 항-CD36 항체로 처리한 후 감소함을 보여준다.
본 개시내용은 항-CD36 항체, 항-CD36 항체를 코딩하는 뉴클레오티드, 항-CD36 항체를 포함하는 약학적 조성물 및 항-CD36 항체를 이용한 암, 특히 암 전이의 치료 (예, 감소 및/또는 저해) 방법에 관한 것이다. 본원에 개시된 항-CD36 항체는 본원에 개시된 암 치료 방법에 효과적인 IgA 및 IgG 항체를 둘다 망라한다. 본원에 개시된 항-CD36 항체는 원발성 종양, 전이성 암, 또는 원발성 종양과 전이성 암 모두 치료하는데 효과적이다.
일반 용어 및 표현에 대한 정의
본 발명의 내용을 더 쉽게 이해할 수 있도록, 먼저 일부 용어들을 정의한다. 본원에 사용된 바와 같이, 본원에서 달리 명시적으로 제시된 경우를 제외하고는, 각각의 하기 용어들은 후술한 의미를 가질 것이다. 추가적인 정의들 역시 본 명세서 전체에서 언급된다.
용어 "항체"는 단백질, 폴리펩타이드, 펩타이드, 탄수화물, 폴리뉴클레오티드, 지질 또는 또는 이들의 조합과 같은 표적을 인지하여 특이적으로 결합하는 면역글로불린 분자를 의미한다. 본원에서, 용어 "항체"는 요망하는 생물학적 활성, 예를 들어 항원 결합성을 나타내는 한, 다클론 항체, 단일클론 항체, 키메라 항체, 인간화된 항체, 완전 인간 항체, 재조합 항체, 이중 특이성 항체, 바이파라토프 항체, 전장 항체 또는 이의 단편을 포함하는 융합 단백질, 이러한 항체의 항원-결합성 단편, 및 임의의 기타 변형된 면역글로불린 분자들을 망라한다. 항체는, 각각 α, δ, ε, γ 및 μ로 지칭되는 중쇄 불변 도메인의 실체를 기반으로, 면역글로불린의 주요 클래스 5종: IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM, 또는 이들의 서브클래스 (이소형)(예, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 중 어느 것일 수 있다. 서로 다른 클래스의 면역글로불린들은 서로 다른 잘 알려진 서브유닛 구조 및 3차원 입체구조를 가지고 있다. 항체는 네이키드 (naked) 형태이거나, 또는 독소, 방사성 동위원소 등과 같은 다른 분자와 접합될 수 있다.
용어 "항체 단편"은 무손상 항체 (intact antibody)의 일부분을 지칭한다. "항원 결합 단편", "항원-결합 도메인", 또는 "항원-결합 영역"은 항원에 결합하는 무손상 항체의 일부분을 지칭한다. 항원 결합 단편은 무손상 항체의 항원 결정 영역 (예를 들어, 상보성 결정 영역 (CDR))을 함유할 수 있다. 항체의 항원 결합 단편에 대한 예로는, 비-제한적으로, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편, 선형 항체, 및 단쇄 항체 등이 있다. 항체의 항원 결합 단편은 설치류 (예를 들어, 마우스, 랫 또는 햄스터) 및 인간과 같은 임의 동물 종으로부터 유래하거나, 또는 인공적으로 제작할 수 있다.
용어 "항-CD36 항체", "CD36 항체" 및 "CD36에 결합하는 항체"는 항체가 CD36을 표적으로 하는 진단학적 및/또는 치료학적 물질로서 유용하도록 충분한 친화성으로, CD36, 예를 들어 인간 CD36에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 지칭한다. 무관한 비-CD36 단백질에 대한 항-CD36 항체의 결합 정도는 예를 들어, 방사성면역분석 (RIA)에 의해 측정된 바와 같이 CD36에 대한 항체 결합성의 약 10% 미만일 수 있다.
용어 "항-PD-1 항체", "PD-1 항체" 및 "PD-1에 결합하는 항체"는 항체가 PD-1을 표적으로 하는 진단학적 및/또는 치료학적 물질로서 유용하도록 충분한 친화성으로 PD-1에 결합할 수 있는 항체를 지칭한다. 무관한 비-PD-1 단백질에 대한 항-PD-1 항체의 결합 정도는 예를 들어, 방사성면역분석 (RIA)에 의해 측정된 바와 같이 PD-1에 대한 항체 결합성의 약 10% 미만일 수 있다.
"단리된 항체"는 단일한 항체 종들로 구성된 항체 집단을 의미한다. 예를 들어, 특정한 단리된 항-CD36 항체는 단일한 CD36 에피토프에 결합하는 단일한 중쇄 아미노산 서열과 단일한 경쇄 아미노산 서열을 가진, 항체 집단으로 구성된다. CD36에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 다른 종으로부터 유래한 CD36 분자와 같은 다른 항원에 대해서도 교차-반응성을 가진다. 또한, 다른 항체 종이 소량 함유된 경우에도, 항체 집단은 여전히 "단리된 항체"일 수 있다. 구체적으로, 단리된 항체는 다른 항체 종을 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만으로 함유하거나 또는 전혀 함유하지 않을 수도 있다.
"단일클론 항체"는 단일한 항원 결정기 또는 에피토프에 고도로 특이적으로 인지 및 결합하는데 참여하는 균질한 항체 또는 항원 결합 단편 집단을 지칭한다. 이는, 전형적으로 다른 항원 결정기를 겨냥하는 다른 항체를 포함하는 다클론 항체와는 대비된다. 용어 "단일클론" 항체는 무손상의 전장 단일클론 항체뿐 아니라 항체 단편 (예, Fab, Fab', F(ab')2, Fv), 단쇄 (scFv) 돌연변이, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 및 항원 인지부를 포함하는 기타 변형된 면역글로불린 분자들을 망라한다. 아울러, "단일클론" 항체는, 비-제한적으로 하이브리도마, 파지 선별, 재조합 발현 및 형절전환 동물에 의해서 등의, 임의의 여러가지 방식으로 생산된 항체 및 이의 항원 결합 단편을 지칭한다.
본원에서, 용어 "가변 영역" 또는 "가변성 도메인"은 상호 호환적으로 사용되며, 당해 기술 분야에서 일반적이다. 가변 영역은 전형적으로 항체들 간에 서열 상 광범위하게 다르고 특정 항체의 특정 항원에 대한 결합성 및 결합에 이용되는, 항체의 일부분, 일반적으로 경쇄 또는 중쇄의 일부분, 전형적으로 성숙한 중쇄의 경우 아미노-말단 아미노산 약 110-120개 또는 110-125개, 및 성숙한 경쇄의 경우 아미노산 약 90-115개를 지칭한다. 서열 가변성은 상보성 결정 영역 (CDR)으로 지칭되는 영역에 집중되어 있으며, 가변성 도메인에서 보다 고도로 보존된 영역은 프래임워크 영역 (FR)이라 칭한다. 임의의 특정 기전 또는 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 경쇄 및 중쇄의 CDR은 항체와 항원 간의 상호작용 및 특이성을 주로 담당하는 것으로 간주된다. 특정 구현예에서, 가변 영역은 인간 가변 영역이다. 특정 구현예에서, 가변 영역은 설치류 또는 뮤라인 CDR 및 인간 프래임워크 영역 (FR)을 포함한다. 특정 구현예에서, 가변 영역은 영장류 (예를 들어, 인간을 제외한 영장류) 가변 영역이다. 특정 구현예에서, 가변 영역은 설치류 또는 뮤라인 CDR 및 영장류 (예를 들어, 인간을 제외한 영장류) 프래임워크 영역 (FR)을 포함한다.
용어 "VL" 및 "VL 도메인"은 상호 호환적으로 항체의 경쇄 가변 영역을 지칭하기 위해 사용된다.
용어 "VH" 및 "VH 도메인"은 상호 호환적으로 항체의 중쇄 가변 영역을 지칭하기 위해 사용된다.
용어 "Kabat 번호 지정" 및 유사 용어는 당해 기술 분야에서 인지되며, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 내 아미노산 잔기의 번호를 지정하는 체계를 지칭한다. 특정 측면에서, CDR은 Kabat 번호 지정 체계에 따라 결정할 수 있다 (예를 들어, Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 및 Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health 및 Human Services, NIH Publication No. 91-3242). Kabat 번호 지정 체계를 이용해, 항체 중쇄 분자 내 CDR은 전형적으로 선택적으로 35번 다음에 부가적인 아미노산 1 또는 2개 (Kabat 번호 지정 체계에 따라 35A 및 35B로 지칭됨)가 존재할 수 있는 아미노산 위치 31-35 (CDR1), 아미노산 위치 50-65 (CDR2), 및 아미노산 위치 95-102 (CDR3)에 존재한다. Kabat 번호 지정 체계를 이용해, 항체 경쇄 분자 내 CDR은 전형적으로 아미노산 위치 24-34 (CDR1), 아미노산 위치 50-56 (CDR2), 및 아미노산 위치 89-97 (CDR3)에 존재한다. 특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체의 CDR들은 Kabat 번호 지정 체계에 따라 결정된 것이다.
Chothia는 대신 구조적인 루프의 위치를 지칭한다 (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Kabat 번호 지정 관례에 따라 번호를 지정할 경우 Chothia CDR-H1 루프의 끝은 루프의 길이에 따라 H32 내지 H34로 다양하다 (그 이유는 Kabat 번호 지정 체계에서 H35A 및 H35B에 삽입이 존재하기 때문이며; 35A 또는 35B도 존재하지 않을 경우 루프는 32번에서 끝나고; 35A만 존재할 경우 루프는 33에서 끝나고; 35A 및 35B 둘다 존재할 경우 루프는 34에서 끝난다).
AbM 과가변 영역은 Kabat CDR과 Chothia 루프 구조를 절충한 것으로, Oxford Molecular의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 지정된다. 특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체의 CDR들은 Chothia 번호 지정 체계 또는 AbM 번호 지정 체계에 따라 결정된다.
표 1- CDR 번호 지정
루프 Kabat AbM Chothia
L1 L24-L34 L24-L34 L24-L34
L2 L50-L56 L50-L56 L50-L56
L3 L89-L97 L89-L97 L89-L97
H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32..34
(Kabat 번호 지정)
H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32
(Chothia 번호 지정)
H2 H50-H65 H50-H58 H52-H56
H3 H95-H102 H95-H102 H95-H102
일부 측면에서, CDR 영역들 CDR은 IMGT 번호 지정 체계에 따라 결정할 수 있다 (예를 들어, Guidicelli et al., Nucl. Acids Res. 34:D781-D784 (2006) 참조). 이러한 번호 지정 체계는 항체 람다 및 카파 경쇄, 중쇄 및 T 세포 수용체 쇄 전반에 걸친 번호 지정 체계를 통합한다.
본원에서, 용어 "불변 영역" 및 "불변 도메인"은 상호 호환적이며, 당해 기술 분야에서의 통상적인 의미를 가진다. 불변 영역은 항체의 일부분, 예를 들어 항체가 항원에 결합하는데 직접 참여하진 않지만 Fc 수용체와의 상호작용과 같은 다양한 작동자 기능을 발휘할 수 있는, 경쇄 및/또는 중쇄의 카르복시 말단 부분이다. 면역글로불린 분자의 불변 영역은 일반적으로 면역글로불린 가변성 도메인에 비해 아미노산 서열이 더 잘 보존되어 있다. 특정 측면에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 항체-의존적인 세포-매개 세포독성 (ADCC)에 충분한 불변 영역 또는 이의 일부를 포함한다.
본원에서, 용어 "중쇄"는 항체에 대해 사용되는 경우, 불변 도메인의 아미노산 서열을 토대로, 임의의 개별 타입, 예를 들어, IgG의 서브클래스 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4) 및 IgA의 서브클래스 (예를 들어, IgA1 및 IgA2) 등의, 항체의 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM 클래스를 형성하는, 알파 (α), 델타 (δ), 엡실론 (ε), 감마 (γ) 및 뮤 (μ)를 지칭할 수 있다. 중쇄 아미노산 서열은 당해 기술 분야에 잘 공지되어 있다. 구체적인 구현예에서, 중쇄는 인간 중쇄이다.
본원에서, 용어 "경쇄"는 항체에 대해 사용되는 경우, 임의의 개별 타입, 예를 들어 불변 도메인의 아미노산 서열을 토대로 카파 (κ) 또는 람다 (λ)를 지칭할 수 있다. 경쇄 아미노산 서열은 당해 기술 분야에서 잘 공지되어 있다. 구체적인 구현예들에서, 경쇄는 인간 경쇄이다.
용어 "키메라 항체"는 아미노산 서열이 2종 이상의 종으로부터 유래한 전장 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다. 전형적으로, 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은 원하는 특이성, 친화성 및 능력을 가진 포유류 (예, 마우스, 랫, 토끼 등) 한 종으로부터 유래한 항체의 가변 영역에 해당하고, 불변 영역은 그 종에서 면역 반응 유발을 회피하기 위해 다른 종 (통상적으로 인간)으로부터 유래한 서열에 대해 상동적이다.
"인간화 항체"는 비-인간 CDR로부터 유래한 아미노산 잔기와 인간 프래임워크 영역 및 불변 영역로부터 유래한 아미노산 잔기를 포함하는, 키메라 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다. 특정 구현예에서, 인간화 항체는, 모든 또는 실질적으로 모든 CDR들이 비-인간 항체의 것에 해당하고 모든 또는 실질적으로 모든 FR들이 인간 항체의 것에 해당하는, 가변성 도메인 하나 이상, 전형적으로 2개를 실질적으로 모두 포함할 것이다. 인간화 항체는 선택적으로 인간 항체로부터 유래한 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 항체, 예를 들어, 비-인간 항체의 "인간화된 형태"는 인간화 과정이 이행된 항체를 지칭한다. 전형적으로, 인간화된 항체는, CDR로부터 유래한 잔기가 원하는 특이성, 친화성 및 능력을 가진 비-인간 종 (예, 마우스, 랫, 토끼, 햄스터)의 CDR들로부터 유래한 잔기에 의해 치환된 인간 면역글로불린이다 (Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)). 이에, 인간화된 항체는 또한 "CDR 이식된 (CDR grafted)" 항체를 지칭한다. 인간화된 항체를 제조하기 위해 사용되는 방법의 예는 미국 특허 5,225,539; Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994), 및 Roguska et al., Protein Eng. 9(10):895-904 (1996)에 기술되어 있다.
"인간 항체"는 FR과 CDR이 둘다 인간 생식계열의 면역글로불린 서열로부터 유래한 가변 영역을 가진 전장 항체 또는 그 단편을 지칭한다. 아울러, 만일 항체가 불변 영역을 함유한다면, 불변 영역 역시 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래한다. 본 발명에서 인간 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 서열에 의해 코딩되지 않는 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내 랜덤 또는 부위-특이적인 돌연변이 유발 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 함유할 수 있다. 그러나, 본원에서, 용어 "인간 항체"는 마우스와 같은 다른 포유류 종의 생식계열로부터 유래한 CDR 서열들이 인간 프래임워크 서열에 이식된 항체를 포괄하는 것으로 의도되진 않는다. 용어 "인간 항체" 및 "완전 인간 항체"는 동의어로 사용된다.
"비-푸코실화 (afucosylated)" 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 "푸코스가 결핍된" 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 항체 집단의 적어도 50%가 불변 영역 당화부에 임의의 푸코스 잔기가 결핍된 IgG1 또는 IgG3 이소형 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다. 인간 IgG1 또는 IgG3의 당화는 Asn297에서 말단에 Gal 잔기를 최대 2개 가진 코어 푸코실화된 바이안테나 복합체 올리고당 당화로서 이루어진다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화 항체는 Asn297에서 푸코스가 결핍된다. 이들 구조는 말단 Gal 잔기의 양에 따라 G0, G1 (a 1,6 또는 1,3), 또는 G2 글리칸 잔기로 명명된다. 예를 들어, Raju, T. S., BioProcess Int. 1: 44-53 (2003)을 참조한다. CHO 타입의 항체 Fc의 당화는 예를 들어, Routier, F. FL, Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997)에 기술되어 있다.
푸코스 측정 방법은 당해 기술 분야에 공지된 임의의 방법을 포함한다. 본 발명의 목적에서, 푸코스는 WO2015/017600의 실시예 1에 기술된 방법에 따라 검출할 수 있으며, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 간략하게는, 글리칸 분석은 항체로부터 (예를 들어, 효소적 해리에 의해) 글리칸을 분해하고, 글리칸을 안트라닐산 (2-AA)으로 표지한 다음 표지된 글리칸을 정제함으로써 수행할 수 있다. 정상 상 HPLC와 형광 검출을 이용해 글리칸을 분리하고, 항체 내 각 글리칸의 상대적인 양을 측정한다. 글리칸은 질량 분광 측정에 의해 푸코스 결핍 또는 함유로서 명확하게 식별할 수 있다. 일부 구현예에서, 푸코스는 비-푸코실화 항체 여러개를 포함한 조성물에서는 검출 불가하다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화 항체는 강화된 ADCC 활성을 가지며, 이는 본원의 실시예 12에 제공된 분석으로 측정할 수 있다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화 항체는 Fcγ RIIIA에 대해 강화된 친화성을 가진다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화 항체는 Fcγ RIIIA(V158)에 대해 강화된 친화성을 가진다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화 항체는 Fcγ RIIIA(F158)에 대해 강화된 친화성을 가진다. Fcγ RIIIA 또는 이의 대립유전자에 대한 친화성은 본 발명의 실시예 13에 제공된 분석으로 측정할 수 있다.
"Fc 침묵화 돌연변이"는 항체의 Fc 도메인에서 하나 이상의 세포 표면 Fcγ 수용체에 결합하는 것을 일부 또는 완전히 낮춰, ADCC, ADCP 및 CDC 보체 반응과 같은 하나 이상의 Fc-매개 항체 작동자 기능을 감소 또는 약화시키고, 일부 구현예에서 실질적으로 완전히 없애는, 돌연변이를 지칭한다 (예를 들어, Kang and Jung, Experimental & Molecular Medicine (2019) 51:138 참조). 위치 E233, L234, L235, G236, N297, P331 및 P329 중 하나 이상에서의 아미노산 치환을 포함한 Fc 침묵화 돌연변이가 당해 기술 분야에서 언급된 바 있다 (예를 들어 미국 특허 6,737,056, 7,332,581; WO 2004/056312, WO2021/234402 (이들 각각의 내용은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합됨) 및 Shields, R. L. et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604 참조).
"결합 친화성"은 일반적으로 분자 (예를 들어, 항체)의 단일 결합부와 이의 결합 파트너 (예를 들어, 항원) 간의 비-공유적 상호작용을 모두 종합한 강도를 지칭한다. 달리 언급되지 않은 한, 본원에서, "결합 친화성"은 결합 쌍의 구성원들 (예, 항체 및 항원) 간의 1:1 상호작용을 나타내는 고유한 결합 친화성을 지칭한다. 분자 X의 파트너 Y에 대한 친화성은 일반적으로 해리 상수 (KD)로 나타낼 수 있다. 친화성은, 비-제한적으로, 평형 해리 상수 (KD) 및 평형 결합 상수 (KA) 등의, 당해 기술 분야에서 공지된 여러가지 방식으로 측정 및/또는 나타낼 수 있다. KD는 koff/kon 값 (quotient)으로부터 계산하고, KA는 kon/koff 값으로부터 계산한다. kon은 예를 들어 항원에 대한 항체의 결합 속도 상수이고, koff는 예를 들어 항원에 대한 항체의 해리 속도 상수이다. kon 및 koff는 BIAcore® 또는 KinExA와 같은 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 기법에 의해 결정할 수 있다.
본원에서, "에피토프"는 항체, 예를 들어 본원에 언급된 항-CD36 항체가 특이적으로 결합하는 항원, 예를 들언 인간 CD36의 국소 영역을 지칭한다. 에피토프는, 예를 들어, 폴리펩타이드에서 인접한 아미노산들 (선형 또는 인접 에피토프)이거나, 또는 에티토프는 예를 들어 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드들의 2 이상의 비-인접 영역들이 함께 형성할 수 있다 (입체형태, 비-선형, 불-연속 또는 비-인접 에피토프). 특정 구현예에서, 항체가 결합하는 에피토프는, 예를 들어, 컴퓨터 도킹 방법 (computational docking method), NMR 분광학, X-선 회절 결정학 연구, ELISA 분석, 질량 분광 측정 (예를 들어, 액체 크로마토그래피 전기분무 질량 분광 측정)과 커플링된 수소/중수소 교환, 어레이-기반의 올리고-펩타이드 스캐닝 분석, 및/또는 돌연변이 유발 맵핑 (예를 들어, 알라닌 스캐닝 돌연변이 유발 맵핑과 같은 부위-특이적인 돌연변이 유발 맵핑)에 의해 측정할 수 있다. 컴퓨터 도킹-기반의 에피토프 분석은 당해 기술 분야에 공지된 방법을 이용해 달성할 수 있다 (예를 들어, Bourquard T et al., J. Immunol. 201(10):3096-3105 (2018); Weitzner BD et al., Nat. Protocols 12(2):401-416 (2017)). X-선 결정학의 경우, 결정화는 당해 기술 분야에 공지된 임의 방법을 이용해 달성할 수 있다 (예를 들어, Giege R et al., (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350; McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274; McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303). 항원과 결합하는 항체의 확인은 잘 알려진 X선 회절 기법을 이용해 조사할 수 있으며, X-PLOR과 같은 컴퓨터 소프트웨어를 이용해 세밀하게 조사할 수 있다 (Yale University, 1992, distributed by Molecular Simulations, Inc.; 예를 들어, Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; U.S. 2004/0014194), 및 BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, ed Carter CW; Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323). 돌연변이 유발 맵핑 실험은 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 임의 방법을 이용해 달성할 수 있다. 예를 들어, 알라닌 스캐닝 돌연변이 유발 기법에 대한 내용은 Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 및 Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085를 참조한다.
기준 CD36 항체와 "동일한 에피토프에 결합하는" CD36 항체는 기준 CD36 항체와 동일한 CD36 아미노산 잔기에 결합하는 항체를 지칭한다. 기준 CD36 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 CD36 항체의 결합력은 경쟁 분석 (예를 들어, Bembenek ME et al., Analytical Bioch. 408(2):321-327 (2011)에 개시된 AlphaScreen® 분석)에서 에피토프 비닝 (epitope binning), 본원에서 또한 수소-중수소 교환 분석 (Coales et al., Rapid Commun. Mass Spectrom. 2009; 23: 639-647)으로도 언급되는 질량 분광 측정과 연계된 수소-중수소 교환, 알라닌 스캐닝과 연합된 FACS 분석, 가교-커플링된 질량 분광 측정 (XL-MS), 펩타이드 스캐닝 또는 돌연변이 유발에 의해 측정할 수 있다.
본원에서, 용어 "면역 특이적으로 결합한다", "면역 특이적으로 인지한다", "특이적으로 결합한다" 및 "특이적으로 인지한다"는 항체 측면에서 유사한 용어이다. 이들 용어는, 항체가 자신의 항원-결합 도메인을 통해 에피토프에 결합하고, 결합에 항원 결합 도메인과 에피토프 간의 일부 상보성이 수반되는 것을 의미한다. 이에, 인간 CD36 (서열번호 1)에 "특이적으로 결합"하는 항체는 다른 종 (예를 들어, 인간을 제외한 영장류, 마우스 및/또는 랫 CD36)으로부터 유래한 CD36, 및/또는 기타 인간 대립유전자로부터 만들어지는 CD36 단백질에도 결합할 수 있지만, 무관한 비-CD36 단백질에 대한 결합 정도는 예를 들어 방사성면역분석 (RIA)에 의해 측정시 CD36에 대한 항체 결합성의 약 10% 미만이다.
특정 구현예에서, 본 발명은 인간, 시노몰구스 원숭이, 레서스 마카큐, 마우스 및 랫의 CD36에 결합하는 항체를 제공한다.
항체가 에피토프 또는 중첩성 에피토프에 기준 항체가 에피토프에 결합하는 것을 어느 정도 차단하는 정도로 선호적으로 결합한다면, 그 항체는 주어진 에피토프에 대한 기준 항체의 결합을 "경쟁적으로 저해"하는 것으로 언급된다. 경쟁적인 저해는 당해 기술 분야에 공지된 임의 방법에 의해, 예를 들어, 경쟁적인 ELISA 분석 또는 경쟁적인 FACS에 의해 측정할 수 있다. 항체는 주어진 에피토프에 대한 기준 항체의 결합을 적어도 90%, 적어도 80%, 적어도 70%, 적어도 60% 또는 적어도 50%로 경쟁적으로 저해하는 것으로 언급할 수 있다.
본원에서, 물질이 "실질적으로 결여된다"는 특징은 그 물질이 거의 완전히 또는 완전히 결핍된 것을 의미한다. 예를 들어, 특정 항체 종이 실질적으로 결여된 약학적 조성물은 대상 약학적 조성물에 그 항체 종이 거의 완전히 또는 완전히 결핍되어 있다. 이러한 맥락에서, 실질적인 결여는 약학적 조성물 내 항체들 중 대상 항체 종이 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만이거나 또는 전혀 없는 것을 의미할 수 있다. 아울러, 오염 물질이 "실질적으로 결여"된 것은 다른 세포성 물질 및/또는 화합물이 거의 함유되지 않도록 (예를 들어, 다른 세포성 물질 및/또는 화합물이 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만이거나 또는 전혀 없음) 정제된 것을 의미할 수 있다.
용어 "폴리펩타이드", "펩타이드" 및 "단백질"은 본원에서 상호 호환적으로 임의 길이의 아미노산들로 된 폴리머를 지칭한다. 폴리머는 선형 또는 분지형일 수 있으며, 변형된 아미노산을 포함할 수 있으며, 비-아미노산이 삽입되어 있을 수 있다. 이 용어는 또한 천연적으로 변형된 또는 삽입된; 예를 들어, 이황화 결합 형성, 당화, 지질화, 아세틸화, 인산화 또는 표지 성분과의 접합 등의 임의의 기타 조작 또는 변형에 의해 변형된 아미노산 폴리머를 망라한다. 또한, 이 정의에는, 예를 들어, 하나 이상의 아미노산 유사체 (예, 비-천연 아미노산 등) 뿐 아니라 당해 기술 분야에 공지된 기타 변형을 가진 폴리펩타이드가 포함된다. 본 발명의 폴리펩타이드는 항체를 기반으로 하므로, 특정 구현예에서, 폴리펩타이드는 단쇄로 또는 연합된 쇄들로 만들어질 수 있는 것으로, 이해된다.
"동일성 %"는 서열 (예를 들어, 아미노산 서열 또는 핵산 서열) 2종 간의 동일성 정도를 나타낸다. 동일성 %는 서열 2종을 정렬하고, 서열 간의 동일성을 최대화하기 위해 갭을 도입함으로써 결정할 수 있다. 정렬은 당해 기술 분야에 공지된 프로그램을 이용해 구현할 수 있다. 본 발명의 목적에서, 뉴클레오티드 서열들의 정렬은 디폴트 매개변수에서 blastn 프로그램 세트를 이용해 수행할 수 있으며, 아미노산 서열들의 정렬은 blastp 세트를 디폴트 매개변수로 이용해 수행할 수 있다 (National Center for Biotechnology Information (NCBI) on the worldwide web, ncbi.nlm.nih.gov).
본원에서, 용어 "숙주 세포"는 임의 타입의 세포, 예를 들어, 일차 세포, 배양 세포 또는 세포주 유래 세포일 수 있다. 구체적인 구현예들에서, 용어 "숙주 세포"는 핵산 세포로 형질감염된 세포 및 이들 세포의 자손 또는 잠재적인 자손을 지칭한다. 이러한 세포의 자손은, 예를 들어, 숙주 세포 게놈에 핵산 분자를 삽입시 또는 연속 세대에서 발생할 수 있는 돌연변이 또는 환경적인 영향으로 인해, 핵산 분자로 형질감염된 모 세포와 동일하지 않을 수도 있다.
용어 "약학적 조성물" 및 "약학적 제형"은 활성 성분의 생물학적 활성이 치료학적으로 유효하게 만들기 위한 형태이며, 조성물 또는 제형이 투여될 개체에 허용 불가하게 독성인 부가적인 성분을 함유하지 않는, 제제를 지칭한다. 조성물 또는 제형은 무균성일 수 있다.
본원에서, 용어 "투여한다", "투여하는", "투여" 등은 약물, 예를 들어, 항-CD36 항체를 원하는 생물학적 작용 부위로 전달할 수 있도록 이용할 수 있는 방법을 지칭한다. 본원에 기술된 물질 및 방법과 함께 이용할 수 있는 투여 기법들은 예를 들어, Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, current edition, Pergamon; 및 Remington's, Pharmaceutical Sciences, current edition, Mack Publishing Co., Easton, Pa에서 확인할 수 있다. 투여는 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 다양한 임의의 방법 및 전달 시스템을 이용해 치료학적 물질을 포함하는 조성물을 개체에 물리적으로 투입하는 것을 지칭한다. 본원에 개시된 조성물에 대한 바람직한 투여 경로로는 예를 들어, 주사 또는 주입에 의한, 정맥내, 근육내, 피하, 복막내, 척추 또는 기타 비경구 투여 경로 등이 있다. 본원에서, 표현 "비경구 투여"는 장 및 국소 투여 이외의 다른 투여 방식, 통상적으로 주사에 의한 방식을 의미하며, 비-제한적으로, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 림프내, 병소내, 관절낭내, 안와내, 심장내, 진피내, 복막내, 경기관내, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 경막외 및 흉골내 주사 및 주입 뿐 아니라 생체내 전기천공 등을 망라한다. 일부 구현예에서, 제형은 비경구가 아닌 경로, 바람직하게는 경구를 통해 투여된다. 비경구가 아닌 기타 경로로는 국소, 표피 또는 점막 투여 경로, 예를 들어, 비강내, 질, 직장, 설하 또는 국소 등이 있다. 투여는 또한 예를 들어 1회, 수회 및/또는 수회 장기간 수행할 수 있다.
하나 이상의 추가의 치료학적 물질"과 조합" 투여는 동시 (병행) 또는 임의 순서의 연속적인 투여를 포함한다.
조합 요법은 "상승적인 작용"을 제공할 수 있으며, 즉 활성 물질들을 함께 사용하였을 경우에 달성되는 효과가 활성 물질 각각을 이용할 경우에 달성되는 효과들의 합보다 크다. 상승적인 효과는 활성 물질들을 (1) 공동-제형화하고, 단위 투약 제형화로 조합하여 동시에 투여 또는 전달하는 경우; (2) 개별 제형들로서 연이어, 교대로 또는 병행하여 전달하는 경우; 또는 (3) 일부 다른 용법에 의한 경우에 달성될 수 있다. 교차 요법 (alternation therapy)으로 전달하는 경우, 상승적인 효과는 예를 들어, 개별 주사기를 이용한 각각의 주사에 의해 활성 물질들의 순차적인 투여 또는 전달시 달성될 수 있다. "상승적인 조합"은 조합물의 개개 활성 물질의 효과를 합한 것보다 우수한 효과를 발생시킨다.
조합 요법은 "상가적인" 효과를 제공할 수 있으며, 즉 활성 물질들을 함께 사용하였을 때 달성되는 효과가 활성 물질을 각각 이용한 경우의 결과를 합한 효과와 동일하다.
본원에서, 용어 "개체" 및 "환자"는 상호 호환적으로 사용된다. 개체는 동물일 수 있다. 일부 구현예에서, 개체는 비-인간 동물 (예를 들어, 소, 돼지, 말, 고양이, 개, 랫, 마우스, 원숭이 또는 기타 영장류 등)과 같은 포유류이다. 일부 구현예에서, 개체는 시노몰구스 원숭이이다. 일부 구현예에서, 개체는 인간이다.
용어 "치료학적 유효량"은 원하는 치료학적 또는 예방학적 결과를 달성하는데 유효한 약물, 예를 들어 항-CD36 항체의 양을 의미한다. 일부 경우에, 원하는 결과는 개체에서 질환 또는 장애의 치료이다. 암의 경우, 약물의 치료학적 유효량은 암 세포 수를 줄일 수 있거나; 종양 크기 또는 부담을 줄이거나; 암 세포의 말초 장기로의 침윤을 저해 (즉, 어느 정도 서행, 일부 구현예에서, 정지)하거나; 종양 전이를 저해 (즉, 어느 정도 서행, 일부 구현예에서, 정지)하거나; 종양 증식을 어느 정도 저해하거나; 암과 관련한 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화하거나; 및/또는 무진행 생존 (PFS) 증가, 무질환 생존 (DFS) 증가 또는 전체 생존 (OS) 증가, 완전 반응 (CR), 부분 반응 (PR) 또는 일부 경우에는 안정형 질환 (SD), 진행성 질환 (PD)의 저하, 진행 시간 단축 (TTP)과 같은 유익한 반응을 달성하거나, 또는 이들의 임의 조합일 수 있다. 약물은 존재하는 암 세포의 증식을 방지하거나 및/또는 사멸시키는 정도의 세포증식 억제 및/또는 세포독성일 수 있다.
"치료하는" 또는 "치료" 또는 "치료하기 위한" 또는 "완화" 또는 "완화하기 위한"과 같은 용어들은, 진단된 병리학적 병태 또는 장애를 치유하거나, 늦추거나, 증상을 약화시키거나 및/또는 진행을 정지시키는 치료학적 조치를 지칭한다. 따라서, 치료가 필요한 대상은 이미 장애가 진단되었거나 또는 의심되는 대상을 포괄한다. 특정 구현예에서, 환자가 암 세포의 수적 감소 또는 완전한 부재; 종양 크기 감소; 암 세포의 말초 장기로의 침윤 저해 또는 부재, 예를 들는 부재; 종양 전이의 저해 또는 부재; 종양 증식의 저해 또는 부재; 특정 암과 관련한 한가지 이상의 증상의 완화; 이환율 및 사망율 저하; 삶의 질 개선; 종양의 종양원성, 종양원성 빈도 또는 종양원성 역량의 저하; 종양에서 암 줄기 세포의 수적 또는 빈도의 감소; 종양원성 세포에서 비-종양원성 상태로의 분화; 무진행 생존 (PFS) 증가, 무질환 생존 (DFS) 증가 또는 전체 생존 (OS) 증가, 완전 반응 (CR), 부분 반응 (PR), 안정형 질환 (SD), 진행성 질환 (PD)의 저하, 진행 시간 단축 (TTP) 또는 이들의 임의 조합 중 하나 이상을 나타낸다면, 그 개체는 본 발명의 방법에 따라 암에 대해 성공적으로 "치료된" 것이다. 전이성 암의 경우, 치료는 또한 새로운 전이성 종양의 발생 예방, 전이성 종양의 크기 감소, 또는 기존 전이성 종양의 소거를 의미한다.
"암"은 신체에서 비-정상적인 세포의 통제되지 않은 증식을 특징으로 하는 다양한 질환들로 구성된 광범위한 군을 지칭한다. "암" 또는 "암 조직"은 종양을 포함할 수 있다. 통제되지 않은 세포 분열 및 증식으로 이웃 조직을 침범하는 악성 종양이 형성되게 되며, 또한 림프계 또는 혈류를 통해 신체의 원위 부위로 전이될 수도 있다. 전이 후, 원위 종양은 전-전이 종양으로부터 "유래"된 것으로 지칭할 수 있다. 이러한 원위 종양은 또한 "전이성 종양" 또는 "전이"로도 지칭할 수 있다.
달리 정의되지 않은 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어들은 본 발명과 관련한 당해 기술 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 의미와 동일한 의미를 가진다. 예를 들어, the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; 및 the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press는, 본 발명에 사용된 여러가지 용어들에 대한 일반적인 사전을 당업자에게 제공해준다.
단위, 접두사 및 기호는 국제 단위 시스템 (SI) 허용 형식으로 표시된다. 수치 범위는 범위를 지정하는 숫자를 포함한다. 본원에 제공된 제목은 본원의 다양한 측면들을 제한하고자 하는 것은 아니며, 전체로서 본 명세서를 참조함으로써 행해질 수 있다. 따라서, 바로 아래에 정의된 용어들은 본 명세서에 그 전체를 참조함으로써 보다 완전히 정의된다.
본원 및 청구항에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태 ("a", "an", 및 "the")는 문맥상 명확하게 달리 명시되지 않은 한 복수의 언급을 포괄한다.
구현예들이 "포함하는"이라는 표현으로 본원에 기술된 경우, "로 이루어지는" 및/또는 "로 필수적으로 이루어지는" 용어로 기술된 유사한 구현예들 역시 제시하는 것으로 이해된다. 이러한 기술에서, "포함한다", "포함하는", "함유하는" 및 "가지는" 등은 미국 특허법에 의거하여 부여된 의미를 가질 수 있으며, "등이 있다", "를 비롯하여" 등을 의미할 수 있으며; "로 필수적으로 이루어진" 또는 "필수적으로 이루어진다" 역시 미국 특허법에 의거하여 부여된 의미를 가지며, 이 용어는 개방적인 의미로, 언급된 기본적인 또는 새로운 특징들이 언급된 것 이외의 함유에 의해 달라지지 않은 한 언급된 것 이외의 다른 것을 망라하는 것을 허용하지만, 선행 기술의 구현예는 제외된다.
명확하게 언급되지 않거나 또는 내용상 자명하지 않은 한, 본원에서, 용어 "또는"은 포괄적인 것으로 이해된다. 본원에서 "A 및/또는 B"와 같은 표현으로 사용된 용어 "및/또는"은 "A 및 B" 둘다, "A 또는 B", "A", 및 "B"를 포함하는 것으로 의도된다. 마찬가지로, "A, B, 및/또는 C"와 같은 표현으로 사용된 용어 "및/또는"은 다음과 같은 구현예들을 각각 망라하는 것으로 의도된다: A, B 및 C; A, B 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A (단독); B (단독); 및 C (단독).
용어 "약" 또는 "로 필수적으로 구성되는"은, 수치 또는 조성을 측정 또는 결정하는 방법, 즉 측정 시스템의 한계에 부분적으로 의존할 수 있는, 당해 기술 분야의 당업자에 의해 확인되는 바와 같이, 특정 수치 또는 조성에 대해 허용가능한 오차 범위 내에 해당하는 수치 또는 조성을 의미한다. 예를 들어, "약" 또는 "로 필수적으로 구성되는"은 당해 기술 분야의 관행에 따라 표준 편차 1 또는 1보다 높은 수준 이내를 의미할 수 있다. 대안적으로, "약" 또는 "로 필수적으로 구성되는"은 최대 20% 범위를 의미할 수 있다. 아울러, 특히 생물학적 시스템 또는 공정과 관련하여, 이들 용어는 수치에 대해 최대 한자리수 또는 최대 5배를 의미할 수 있다. 본 명세서 및 청구항에 특정 수치 또는 조성이 제시된 경우, 달리 언급되지 않은 한, "약" 또는 "로 필수적으로 구성되는"의 의미는 구체적인 수치 또는 조성에 대해 허용가능한 오차 범위 내인 것으로 추정하여야 한다.
본원에 제공된 임의의 조성물 또는 방법은 본원에 제공된 다른 임의의 조성물 및 방법 하나 이상과 조합할 수 있다.
항-CD36 항체
구체적인 측면에서, 본 발명은 CD36 (예를 들어, 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36)에 특이적으로 결합하는 전장 항체 (예를 들어, 단일클론 항체, 예를 들어 키메라, 인간화된 또는 인간 항체) 및 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 인간, 시노몰구스 원숭이, 레서스 마카크, 뮤라인 및 랫 CD36에 대한 아미노산 서열들은 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 또한 아래 나타낸 바와 같이 서열번호 1-4로 본원에 제공된다.
인간 CD36 (서열번호 1; UNIPROT P16671):
MGCDRNCGLIAGAVIGAVLAVFGGILMPVGDLLIQKTIKKQVVLEEGTIAFKNWVKTGTEVYRQFWIFDVQNPQEVMMNSSNIQVKQRGPYTYRVRFLAKENVTQDAEDNTVSFLQPNGAIFEPSLSVGTEADNFTVLNLAVAAASHIYQNQFVQMILNSLINKSKSSMFQVRTLRELLWGYRDPFLSLVPYPVTTTVGLFYPYNNTADGVYKVFNGKDNISKVAIIDTYKGKRNLSYWESHCDMINGTDAASFPPFVEKSQVLQFFSSDICRSIYAVFESDVNLKGIPVYRFVLPSKAFASPVENPDNYCFCTEKIISKNCTSYGVLDISKCKEGRPVYISLPHFLYASPDVSEPIDGLNPNEEEHRTYLDIEPITGFTLQFAKRLQVNLLVKPSEKIQVLKNLKRNYIVPILWLNETGTIGDEKANMFRSQVTGKINLLGLIEMILLSVGVVMFVAFMISYCACRSKTIK
시노몰구스 원숭이/레서스 마카큐 CD36 (서열번호 2; 각각 UNIPROT Q4R6B4 및 Q6J512):
MGCDRNCGLITGAVIGAVLAVFGGILMPVGDMLIQKTIKKEVVLEEGTIAFKNWVKTGTEIYRQFWIFDVQNPQEVMMNSSNIQVKQRGPYTYRVRFLAKENITQDPKDNTVSFLQPNGAIFEPSLSVGTEADNFTVLNLAVAAASHIYPNPFVQVVLNSLINKSKSSMFQVRTLRELLWGYTDPFLSLVPYPVSTRVGMFYPYNNTADGVYKVFNGKDSISKVAIIDTYKGKRNLSYWESYCDMINGTDAASFPPFVEKSQVLQFFSSDICRSIYAVFESDVNLKGIPVYRFVLPSKAFASPVQNPDNHCFCTEKIISKNCTSYGVLDISKCKEGKPVYISLPHFLYASPDVSETIDGLNPNEEEHRTYLDIEPITGFTLQFAKRLQVNLLVKPSNKIQVLKRLKRNYIVPILWLNETGTIGDEKAKMFRSQVTGKINLLGLIEMILLSVGVVMFVAFMISYCACRSKTIK
뮤라인 CD36 (서열번호 3; UNIPROT Q08857):
MGCDRNCGLIAGAVIGAVLAVFGGILMPVGDMLIEKTIKREVVLEEGTTAFKNWVKTGTTVYRQFWIFDVQNPDDVAKNSSKIKVKQRGPYTYRVRYLAKENITQDPEDHTVSFVQPNGAIFEPSLSVGTEDDNFTVLNLAVAAAPHIYQNSFVQVVLNSLIKKSKSSMFQTRSLKELLWGYKDPFLSLVPYPISTTVGVFYPYNDTVDGVYKVFNGKDNISKVAIIESYKGKRNLSYWPSYCDMINGTDAASFPPFVEKSRTLRFFSSDICRSIYAVFGSEIDLKGIPVYRFVLPANAFASPLQNPDNHCFCTEKVISNNCTSYGVLDIGKCKEGKPVYISLPHFLHASPDVSEPIEGLHPNEDEHRTYLDVEPITGFTLQFAKRLQVNILVKPARKIEALKNLKRPYIVPILWLNETGTIGDEKAEMFKTQVTGKIKLLGMVEMALLGIGVVMFVAFMISYCACKSKNGK
랫 CD36 (서열번호 4; UNIPROT Q07969):
MGCDRNCGLITGAVIGAVLAVFGGILMPVGDLLIEKTIKREVVLEEGTIAFKNWVKTGTTVYRQFWIFDVQNPEEVAKNSSKIKVKQRGPYTYRVRYLAKENITQDPKDSTVSFVQPNGAIFEPSLSVGTENDNFTVLNLAVAAAPHIYTNSFVQGVLNSLIKKSKSSMFQTRSLKELLWGYKDPFLSLVPYPISTTVGVFYPYNNTVDGVYKVFNGKDNISKVAIIDTYKGKRNLSYWESYCDMINGTDAASFPPFVEKSQTLRFFSSDICRSIYAVFESEVNLKGIPVYRFVLPANAFASPLQNPDNHCFCTEKVISNNCTSYGVLDIGKCKEGKPVYISLPHFLHASPDVSEPIEGLNPNEDEHRTYLDVEPITGFTLQFAKRLQVNILVKPARKIEALKNLKRPYIVPILWLNETGTIGDEKAEMFRNQVTGKIKLLGLVEMVLLGVGVVMFVAFMISYCACRSKNGK
특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체는 인간 CD36에 결합한다. 특정 구현예에서, 항체는 인간 CD36 및 시노몰구스 원숭이 CD36에 결합한다. 특정 구현예에서, 항체는 인간 CD36 및 뮤라인 CD36에 결합한다. 특정 구현예에서, 항체는 인간 CD36, 뮤라인 CD36 및 랫 CD36에 결합한다. 특정 구현예에서, 항체는 인간 CD36, 시노몰구스 원숭이 CD36, 레서스 마카큐 CD36, 뮤라인 CD36 및 랫 CD36에 결합한다.
일부 구현예에서, 본원에 언급된 항체는 인간 CD36 및 비-인간 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 항체는 인간 CD36 및 인간을 제외한 영장류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 항체는 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 15G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 26G04, 27G04, 28G04, 29G04, 30G04, 31G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 CDR 6종 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다. 일부 구현예에서, 인간을 제외한 영장류 CD36은 시노몰구스 원숭이 CD36 또는 레서스 마카큐 CD36이다. 일부 구현예에서, 인간을 제외한 영장류 CD36은 시노몰구스 원숭이 CD36이다. 일부 구현예에서, 항체는 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 15G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 27G04, 28G04, 29G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 CDR 6종 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다. 일부 구현예에서, 인간을 제외한 영장류 CD36은 레서스 마카큐 CD36이다.
일부 구현예에서, 항체는 인간 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다. 일부 구현예에서, 항체는 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 28G04, 29G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 CDR 6종 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다. 일부 구현예에서, 설치류 CD36은 마우스 CD36이다. 바람직한 구현예에서, 항체는 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 28G04, 29G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 CDR 6종 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다. 일부 구현예에서, 설치류 CD36은 랫 CD36이다.
일부 구현예에서, 항체는 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진다 (예를 들어, 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 28G04, 29G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04). 다른 구현예에서, 항체는 인간 CD36에 대해 특이성을 가진다.
본 발명의 항-CD36 항체는 전장 항체, 단쇄 항체 및 scFv, Fab 또는 F(ab')2 단편을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD-36 항체는 전장 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간화 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 ONA-0-v1, 1G03, 1G04, 1G05, 1G06, 1G07, 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 15G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 26G04, 27G04, 28G04, 29G04, 30G04, 31G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04, 38G04, 73G06, 74G06, 75G06, 76G06, 77G06, 78G06, 79G06 또는 80G06이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 ONA-0-v1, 1G03, 1G04, 1G05, 1G06, 1G07, 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 15G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 26G04, 27G04, 28G04, 29G04, 30G04, 31G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04, 38G04, 73G06, 74G06, 75G06, 76G06, 77G06, 78G06, 79G06 또는 80G06로부터 선택되는 CDR 서열 하나 이상을 함유한 항체이다.
본 발명의 구현예는 또한 비-제한적으로, Fab, Fab', F(ab')2, 단쇄 Fv (scFv), 이황화 결합된 Fv, V-NAR 도메인, IgNar, 인트라바디, IgGΔCH2, 미니바디, F(ab')3, 테트라바디, 트리아바디, 다이아바디, 단일-도메인 항체, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2 또는 scFv-Fc 등의, 본원에 개시된 항-CD36 항체로부터 유래한 항체 단편을 포함한다. 항체 단편은 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 임의 기법에 의해 만들어질 수 있다. 항체 단편은 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 임의 기법에 의해 제조할 수 있다. 특정 구현예에서, 항체 단편은 생체내 항체 반감기를 연장하는 모이어티를 추가로 포함한다. 이 모이어티는 또한 "반감기 연장 모이어티"로도 지칭된다. 당해 기술 분야에 공지된 항체의 반감기를 연장하는 임의의 모이어티가 이용될 수도 있다. 예를 들어, 반감기 연장 모이어티는 Fc 영역, 폴리머, 알부민 또는 알부민 결합 단백질 또는 화합물을 포함할 수 있다. 폴리머는, 천연 또는 합성의, 선택적으로 치환된, 직쇄 또는 분지쇄의 폴리알킬렌, 폴리알케닐렌, 폴리옥실알킬렌, 다당류, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리비닐 알코올, 메톡시폴리에틸렌 글리콜, 락토스, 아밀로스, 덱스트란, 글리코겐 또는 이들의 유사체를 망라할 수 있다. 치환기는 하이드록시, 메틸 또는 메톡시 기를 하나 이상 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, Fab, Fab', F(ab')2 또는 scFv는 반감기 연장 모이어티를 부착하기 위해 C-말단 아미노산 하나 이상을 추가함으로써 변형될 수 있다. 특정 구현예에서, 반감기 연장 모이어티는 폴리에틸렌 글리콜 또는 인간 혈청 알부민이다. 특정 구현예에서, Fab, Fab', F(ab')2 또는 scFv가 Fc 영역에 융합된다.
일부 구현예에서, 항체는 Chothia, Kabat 또는 IMGT 항체 번호 지정 체계에 의해 식별되는 바와 같이, 본원에 개시된 항체의 CDR들 중 하나 이상을 포함하는 인간화 항체이다. 본원에 개시된 항체의 (Kabat 번호 지정 체계에 따라 식별된 바에 따른) CDR들 중 하나 이상을 포함하는 항체에 대한 예시적인 구현예는 아래 표 2에 제시된다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표 2에 제시된 CDR 조합들을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표 2에 제시된 CDR 조합들을 포함하는 키메라 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표 2에 제시된 CDR 조합들을 포함하는 인간화 항체이다.
표 2 - 항-CD36 항체들의 CDR
항체 CDR-H1
서열번호 		CDR-H2 서열번호 CDR-H3 서열번호 CDR-L1 서열번호 CDR-L2 서열번호 CDR-L3 서열번호
ONA-0-v1 79 80 81 82 83 84
1G04 79 80 81 82 83 84
1G06 79 80 81 82 83 84
4G04 85 106 133 159 173 186
5G04 86 107 134 160 174 187
6G04 86 108 135 160 174 188
7G04 87 109 136 160 174 187
9G04 88 110 137 160 174 187
10G04 89 111 138 161 175 189
11G04 90 112 139 160 174 190
12G04 91 113 140 160 174 187
13G04 92 114 141 162 176 191
14G04 93 115 142 163 177 192
15G04 94 116 143 164 175 193
16G04 95 117 144 160 174 190
17G04 95 118 145 160 174 187
18G04 95 119 146 160 174 190
19G04 95 119 146 160 174 190
20G04 95 119 146 160 174 190
21G04 96 120 147 159 173 194
22G04 96 121 148 159 173 195
23G04 96 120 147 159 173 186
24G04 96 121 147 159 173 196
25G04 96 121 147 159 173 195
26G04 97 122 149 165 178 197
27G04 97 123 150 165 178 197
28G04 98 124 151 160 174 198
29G04 96 120 147 159 173 195
30G04 91 125 152 160 174 190
31G04 99 126 133 162 176 199
32G04 100 127 153 166 179 200
33G04 101 128 154 167 180 201
34G04 101 128 154 168 181 202
35G04 102 129 155 169 182 203
36G04 103 130 156 170 183 204
37G04 104 131 157 171 184 205
38G04 105 132 158 172 185 206
73G06 90 248 139 160 174 247
74G06 90 248 139 160 174 247
75G06 90 248 139 160 174 247
76G06 90 248 139 160 174 247
77G06 90 248 139 160 246 247
78G06 90 248 139 160 246 247
79G06 90 248 139 160 246 247
80G06 90 248 139 160 246 247
ONA-0-v1은 인간 IgG1 야생형 서열에 상응하는 Fc 영역; 항체 명칭 코드를 가지며: 접두어 (prefix)는 가변 영역을 지칭하고 (예를 들어, 1G04 및 1G06은 ONA-0-v1의 가변 영역을 가짐); 접미어 (suffix)는 Fc 영역을 지칭한다: "G04"로 끝나는 항체는 L234A 및 L235A ("LALA") 변이가 존재하는 인간 IgG1의 Fc 영역을 가진 것이고; "G06"으로 끝나는 항체는 아미노산 돌연변이 L234S, L235T 및 G236R ("STR")이 존재하는 인간 IgG1을 가진 것이다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하고, 여기서 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85-105로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106-132 및 248로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133-158로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159-172로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173-185 및 246으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186-206 및 247로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 이들 CDR 영역들로 된 CDR 조합을 포함하는 키메라 항체이다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 이들 CDR 영역들로 된 조합을 포함하는 인간화 항체이다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 79를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 80을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 81을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 82를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 83을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 84를 포함한다 (예, ONA-0-v1, 1G04, 및 1G06).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186을 포함한다 (예를 들어, 4G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 86을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 107을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 134를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함한다 (예를 들어, 5G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 86을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 108을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 135를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 188을 포함한다 (예를 들어, 6G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 87을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 109를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 136을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함한다 (예를 들어, 7G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 88을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 110을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 137을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함한다 (예를 들어, 9G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 89를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 111을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 138을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 161을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 175를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 189를 포함한다 (예를 들어, 10G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 112를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함한다 (예를 들어, 11G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 91을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 113을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 140을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함한다 (예를 들어, 12G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 92를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 114를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 141을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 162를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 176을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 191을 포함한다 (예를 들어, 13G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 93을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 115를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 142를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 163을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 177을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 192를 포함한다 (예를 들어, 14G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 94를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 116을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 143을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 164를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 175를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 193을 포함한다 (예를 들어, 15G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 117을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 144를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함한다 (예를 들어, 16G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 118을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 145를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함한다 (예를 들어, 17G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 119를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 146을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함한다 (예를 들어, 18G04, 19G04 및 20G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 194를 포함한다 (예를 들어, 21G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 148을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함한다 (예를 들어, 22G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186을 포함한다 (예를 들어, 23G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 196을 포함한다 (예를 들어, 24G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함한다 (예를 들어, 25G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 97을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 122를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 149를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 165를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 178을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 197을 포함한다 (예를 들어, 26G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 97을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 123을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 150을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 165를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 178을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 197을 포함한다 (예를 들어, 27G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 98을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 124를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 151을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 198을 포함한다 (예를 들어, 28G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함한다 (예를 들어, 29G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 91을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 125를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 152를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함한다 (예를 들어, 30G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 99를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 126을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 162를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 176을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 199를 포함한다 (예를 들어, 31G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 100을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 127을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 153을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 166을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 179를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 200을 포함한다 (예를 들어, 32G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 101을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 167을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 180을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 201을 포함한다 (예를 들어, 33G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 101을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 168을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 181을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 202를 포함한다 (예를 들어, 34G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 102를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 129를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 155를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 169를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 182를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 203을 포함한다 (예를 들어, 35G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 103을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 130을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 156을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 170을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 183을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 204를 포함한다 (예를 들어, 36G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 104를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 131을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 157을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 171을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 184를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 205를 포함한다 (예를 들어, 37G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 105를 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 132를 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 158을 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 172를 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 185를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 206을 포함한다 (예를 들어, 38G04).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함한다 (예를 들어, 73G06, 74G06, 75G06, 76G06).
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하되, 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고; 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고; 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고; 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고; 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 246을 포함하고; 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함한다 (예를 들어, 77G06, 78G06, 79G06 및 80G06).
특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체는 인간 CD36에 결합하고, 본원에 개시된 항체의 VH 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 서열번호 7, 13-44, 241 및 243 중 하나로 제시된 VH 서열을 포함한다. 특정 구현예에서, 항체는 서열번호 7,13-44, 241 및 243 중 하나의 VH 서열에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 동일성을 가진 VH를 포함한다. 특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체는 인간 CD36에 결합하고, 본원에 개시된 항체의 VL 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 서열번호 8, 45-78, 240, 242, 244 및 245 중 하나로 제시된 VH 서열을 포함한다. 특정 구현예에서, 항체는 서열번호 8, 45-78, 240, 242, 244 및 245 중 하나의 VL 서열에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 동일성을 가진 VL을 포함한다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 본원에 개시된 VH 및 VL을 둘다 포함한다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 VH 및 VL을 포함하되, VH는 서열번호 7, 13-44, 241 및 243 중 하나를 포함하고, VL은 서열번호 8, 45-78, 240, 242, 244 및 245 중 하나를 포함한다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 VH와 VL을 둘다 포함하고, 여기서
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 13을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 45를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 14를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 46을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 15를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 47을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 16을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 48을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 17을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 49를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 18을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 50을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 19를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 51을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 20을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 52를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 21을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 53을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 22를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 54를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 23을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 55를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 24를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 56을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 25를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 57을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 58을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 59를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 27을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 60을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 28을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 61을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 29를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 62를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 30을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 63을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 31을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 64를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 32를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 65를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 33을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 66을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 34를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 67을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 35를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 68을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 36을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 69를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 37을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 70을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 38을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 71을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 39를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 72를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 73을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 74를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 41을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 75를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 42를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 76을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 43을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 77을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 44를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 78을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하거나;
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함하거나; 또는
- 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함한다.
특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 2중 특이 항체이다. 용어 "2중 특이"는 대상 항체가 적어도 2종의 구분되는 에피토프들 또는 항원들에 특이적으로 결합할 수 있는 것을 의미한다. 전형적으로, 2중 특이 항체는 각각 서로 다른 에피토프 또는 항원에 대해 특이적인 항원 결합 부위를 2개 포함한다. 이에, 일부 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 또한 제2 에피토프 또는 항원에 결합한다. 일부 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 제2 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 면역 세포 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다 (예를 들어 Wang, et al. 2021 참조). 일부 구현예에서, 면역 세포 항원은 T-세포 수용체 항원이다. 일부 구현예에서, 면역 세포 항원은 PD-1, PD-L1, CTLA4, CD3, LAG3, OX40, CD28, CD33, B7H3, CD47, TIM3, ICOS, LGR5, 4-1BB, CD40, CD40-L 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 면역 세포 항원은 CD3이다. 일부 구현예에서, 면역 세포 항원은 PD-1이다. 일부 구현예에서, 면역 세포 항원은 PD-L1이다. 일부 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 종양-특이 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 종양-특이 항원은 HER2, HER3, EGFR, VEGF, IGF-1, IGF-2, ANG2, DLL1, IGF-1R, cMET, DLL4, FAP, DR5, IL15, IL15Ra, CD3, CEA, EpCAM, PSMA, PMEL 및 GPC3으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 종양-특이 항원은 CD3이다. 일부 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 서열번호 79-206 및 246-248에 제시된 하나 이상의 CDR을 포함한다. 본 발명의 구현예들은 T 세포를 종양으로 동원하기 위해 이러한 2중 특이 항체를 이용하는 방법을 포함한다. 이러한 방법에 대한 일부 구현예에서, 동원된 T 세포는 종양 세포를 세포용해하면서, 주 조직적합성 복합체를 통한 항원 제시를 우회한다. 2중 특이 항체의 제조 및 이용 방법의 예는 WO　2016/141287 A1에서 찾아볼 수 있으며, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
특정 구현예에서, 2중 특이 항-CD36 항체는 바이파라토프 항체이다. 용어 "바이파라토프"는 대상 항체가 표적 항원의 적어도 2종의 구분되는 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, 2종의 구분되는 에피토프들은 고유하며, 중첩되지 않는다. 전형적으로, 바이파라토프 항체는 각각 동일한 항원 상의 서로 다른 에피토프에 대해 특이적인 항원-결합 부위를 2개 포함한다. 이에, 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 CD36 상의 제1 에피토프 및 제2 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 CD36 상의 제1 에피토프에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인과 CD36 상의 제2 에피토프에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는, 제1 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 및 30G0로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 1G04, 10G04, 19G04, 20G04 및 30G04로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 10G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 제1 CD36 에피토프만 인지하는 항-CD36 항체와 비교해 개선된 특성을 제공한다. 예를 들어, 바이파라토프 항-CD36 항체는 강화된, 상가적인 또는 상승적인 효과를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 단일한 CD36 모노머 상의 에피토프 2종에 결합하다. 다른 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체의 제1 결합-도메인과 바이파라토프 항-CD36 항체의 제2 결합-도메인이 제2 CD36 분자에 결한합다. 일부 구현예에서, 바이파라토프 항-CD36 항체는 서열번호 79-206 및 246-248에 제시된 하나 이상의 CDR을 포함한다. 본 발명의 구현예들은 T 세포를 종양으로 동원하기 위해 이러한 바이파라토프 항체를 이용하는 방법을 포함한다. 이러한 방법의 일부 구현예에서, 동원된 T 세포는 종양 세포를 세포용해하면서, 주 조직적합성 복합체를 통한 항원 제시를 우회한다. 바이파라토프 항체의 제조 및 이용 방법의 예는 Wang, S. et al., EMBO Mol. Med. 13:e14291 (2021)에서 찾아볼 수 있으며, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
특정 구현예에서, 본 발명은 본원에 개시된 임의의 치료 방법, 특히 암 및/또는 암 전이의 치료 방법에 이용하기 위한, 단독으로 또는 하나 이상의 부가적인 치료학적 물질과 조합한 전술한 임의의 구현예에 기술된 항-CD36 항체의 용도에 관한 것이다.
본 발명에 개시된 항-CD36 항체와 관련한 아미노산 서열을 아래 표 3에 제시한다.
표 3 - 아미노산 서열
서열번호 명칭 서열
1 인간 CD36 MGCDRNCGLIAGAVIGAVLAVFGGILMPVGDLLIQKTIKKQVVLEEGTIAFKNWVKTGTEVYRQFWIFDVQNPQEVMMNSSNIQVKQRGPYTYRVRFLAKENVTQDAEDNTVSFLQPNGAIFEPSLSVGTEADNFTVLNLAVAAASHIYQNQFVQMILNSLINKSKSSMFQVRTLRELLWGYRDPFLSLVPYPVTTTVGLFYPYNNTADGVYKVFNGKDNISKVAIIDTYKGKRNLSYWESHCDMINGTDAASFPPFVEKSQVLQFFSSDICRSIYAVFESDVNLKGIPVYRFVLPSKAFASPVENPDNYCFCTEKIISKNCTSYGVLDISKCKEGRPVYISLPHFLYASPDVSEPIDGLNPNEEEHRTYLDIEPITGFTLQFAKRLQVNLLVKPSEKIQVLKNLKRNYIVPILWLNETGTIGDEKANMFRSQVTGKINLLGLIEMILLSVGVVMFVAFMISYCACRSKTIK
2 시노몰구스 원숭이/레서스 마카큐 CD36 MGCDRNCGLITGAVIGAVLAVFGGILMPVGDMLIQKTIKKEVVLEEGTIAFKNWVKTGTEIYRQFWIFDVQNPQEVMMNSSNIQVKQRGPYTYRVRFLAKENITQDPKDNTVSFLQPNGAIFEPSLSVGTEADNFTVLNLAVAAASHIYPNPFVQVVLNSLINKSKSSMFQVRTLRELLWGYTDPFLSLVPYPVSTRVGMFYPYNNTADGVYKVFNGKDSISKVAIIDTYKGKRNLSYWESYCDMINGTDAASFPPFVEKSQVLQFFSSDICRSIYAVFESDVNLKGIPVYRFVLPSKAFASPVQNPDNHCFCTEKIISKNCTSYGVLDISKCKEGKPVYISLPHFLYASPDVSETIDGLNPNEEEHRTYLDIEPITGFTLQFAKRLQVNLLVKPSNKIQVLKRLKRNYIVPILWLNETGTIGDEKAKMFRSQVTGKINLLGLIEMILLSVGVVMFVAFMISYCACRSKTIK
3 뮤라인 CD36 MGCDRNCGLIAGAVIGAVLAVFGGILMPVGDMLIEKTIKREVVLEEGTTAFKNWVKTGTTVYRQFWIFDVQNPDDVAKNSSKIKVKQRGPYTYRVRYLAKENITQDPEDHTVSFVQPNGAIFEPSLSVGTEDDNFTVLNLAVAAAPHIYQNSFVQVVLNSLIKKSKSSMFQTRSLKELLWGYKDPFLSLVPYPISTTVGVFYPYNDTVDGVYKVFNGKDNISKVAIIESYKGKRNLSYWPSYCDMINGTDAASFPPFVEKSRTLRFFSSDICRSIYAVFGSEIDLKGIPVYRFVLPANAFASPLQNPDNHCFCTEKVISNNCTSYGVLDIGKCKEGKPVYISLPHFLHASPDVSEPIEGLHPNEDEHRTYLDVEPITGFTLQFAKRLQVNILVKPARKIEALKNLKRPYIVPILWLNETGTIGDEKAEMFKTQVTGKIKLLGMVEMALLGIGVVMFVAFMISYCACKSKNGK
4 랫 CD36 MGCDRNCGLITGAVIGAVLAVFGGILMPVGDLLIEKTIKREVVLEEGTIAFKNWVKTGTTVYRQFWIFDVQNPEEVAKNSSKIKVKQRGPYTYRVRYLAKENITQDPKDSTVSFVQPNGAIFEPSLSVGTENDNFTVLNLAVAAAPHIYTNSFVQGVLNSLIKKSKSSMFQTRSLKELLWGYKDPFLSLVPYPISTTVGVFYPYNNTVDGVYKVFNGKDNISKVAIIDTYKGKRNLSYWESYCDMINGTDAASFPPFVEKSQTLRFFSSDICRSIYAVFESEVNLKGIPVYRFVLPANAFASPLQNPDNHCFCTEKVISNNCTSYGVLDIGKCKEGKPVYISLPHFLHASPDVSEPIEGLNPNEDEHRTYLDVEPITGFTLQFAKRLQVNILVKPARKIEALKNLKRPYIVPILWLNETGTIGDEKAEMFRNQVTGKIKLLGLVEMVLLGVGVVMFVAFMISYCACRSKNGK
5 ONA-0-v1
중쇄		 QVQLKQSGADLVRPGASVKLSCKASGYTFTDYYINWVKQRPGQGLEWIARIYPGSGNTYYNEKFKGKATLTAEKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARGIGGGFGMDYWGQGTSVTVSSESARNPTIYPLTLPPVLCSDPVIIGCLIHDYFPFGTMNVTWGKSGKDITTVNFPPALASGGRYTMSSQLTLPAVECPEGESVKCSVQHDSNPVQELDVNCSPTPPPPITIPSCQPSLSLQRPALEDLLLGSDASITCTLNGLRNPEGAAFTWEPSTGKDAVQKKAAQNSCGCYSVSSVLPGCAERWNSGASFKCTVTHPESGTLTGTIAKVTVNTFPPQVHLLPPPSEELALNELLSLTCLVRAFNPKEVLVRWLHGNEELSPESYLVFEPLKEPGEGATTYLVTSVLRVSAETWKQGDQYSCMVGHEALPMNFTQKTIDRLSGKPTNVSVSVIMSEGDGICY
6 ONA-0-v1
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7 ONA-0-v1 VH QVQLKQSGADLVRPGASVKLSCKASGYTFTDYYINWVKQRPGQGLEWIARIYPGSGNTYYNEKFKGKATLTAEKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARGIGGGFGMDYWGQGTSVTVSS
8 ONA-0-v1 VL SIVMTQTPKFLLVSAGDRITITCKASQSVSDDVAWYQQKPGQSPKLLIYYASNRYTGVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYSSPLTFGAGTKLEIK
9 1G04
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13 4G04 VH 서열 QVQLQQPGSELRSPGSSVKLSCKDFDSEVFPIAYMTWVRQKPGHGFEWIGDILPSIGGTIYGEKFEDKATLDADTVSNTAYLELNSLTSEDSAIYYCARDYYGSSYGYFDVWGAGTAVTVSS
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24 16G04 VH 서열 EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKTSGYTFTEYTMHWVKQSHGKSLEWIGGINPYNGGTAYNQKFKNKATLTVDISSNTAFMEFRSLTSEDSAVYYCASDYFYGDANPWFAYWGQGTLVTVSA
25 17G04 VH 서열 EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKTSGYTFTEYTMHWVKQSHGKSLEWIGGIYPYNGGTAYNQKFKNKATLTVDISSNTAYMALRSLASDDSAVYYCASDYFYGDGYPWFTYWGQGTLVTVSA
26 18G04 및 19G04 VH 서열 EVQLQQSGPELVKPGASVKISCETSGHTFTEYTMHWVKQSHGKSLEWIGGIYPNNGATKYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCARDRYDVWFAYWGQGTLVTVSA
27 20G04 VH 서열 QIQLVQSGPELVKPGASVKISCETSGHTFTEYTMHWVKQSHGKSLEWIGGIYPNNGATKYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCARDRYDVWFAYWGQGTLVTVSA
28 21G04 VH 서열 QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHTNYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIYYGLDNWGQGTTLTVSS
29 22G04 VH 서열 QVQLQQPGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHANYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIHYGLDNWGQGTTLTVSS
30 23G04 VH 서열 QVQLQQPGTELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHTNYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIYYGLDNWGQGTTLTVSS
31 24G04 VH 서열 QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHANYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIYYGLDNWGQGTTLTVSS
32 25G04 VH 서열 EVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHANYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIYYGLDNWGQGTTLTVSS
33 26G04 VH 서열 QVQMKESGAELMKPGASVKISCKATGYIFSNYWIEWLKERPGHGLEWIGDFLPGSSSANYNEKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCVPFTVEVTDAMDYWGQGTSVTVSS
34 27G04 VH 서열 EVQLQQSGAELLKPGASVKISCKTTGYTFSNYWIEWVKQRPGHGLEWIGEILPGSGSPKYNEKFKGKATLTADTSSNTAFMQLSSLTSEDSAVYYCAPFILENYFDYWGQGTTLTVSS
35 28G04 VH 서열 EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKTSGYTFTEYTIHWVKQSHGKSLEWIGGIIPNNGGSSHKQNFKDKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCARAGDYAFDYWGQGTTLTVSS
36 29G04 VH 서열 QVQLQQSGTELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSHTNYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAPIYYGLDNWGQGTTLTVSS
37 30G04 VH 서열 EVQLVESGGGVVQPGESLKLSCESNEYEFPSHDMSWVRKTPERRLELVAAINSDGAITYYPDTMERRFIISRDNTKKTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHGQTGTWFAYWGQGTLVTVSA
38 31G04 VH 서열 QVQLQQSGSELRSPGSSVKLSCKDFDSEVFPIAYMSWVRQKPGHGFEWIGDILPSIGSTIYGEKFEDKATLDADTVSNTAYLELNSLTSEDSAIYYCARDYYGSSYGYFDVWGAGTTVTVPS
39 32G04 VH 서열 EEKLEESGGGLVQPGGSMKLSCVASGFTFSNYWMNWVRQSPEKGLEWVAEIRLKSNNYATHYAESVKGRFTISRDDSKSSVYLQMNNLRAEDTGIYYCTPLLLRWGQGTTLTVSS
40 33G04 및 34G04 VH 서열 AVTLDESGGGLQTPGGALSLVCKASGFDFSSYAMGWVRQAPGKGLEWVAGKAKDGGGTAYGSAVKGRATISRDNGQSTVRLQLSNLRAEDTGVYYCAKSAYGDWFYGSSGPYADSIDAWGHGTEVIVSS
41 35G04 VH 서열 AVTLDESGGGLQTPGGALSLVCKASGFTFSNYGMGWMRQAPGKGLEFVAKIYKDGGYTGYGAAVDGRATISRDDGQSTVRLQLNDLRAEDTATYFCAKAADSGYLYITDSIDAWGHGTEVIVSS
42 36G04 VH 서열 AVTLDESGGGLQTPGGALSLVCKASGFIFSSYGMGWVRQAPGKGLEYIAAISNDGSKADYGAAVKGRATISRDNGQSTVRLQLNNLRAEDTATYYCAKSADTGYCSWSACIADSIDAWGHGTEVIVSS
43 37G04 VH 서열 AVTLDESGGGLQTPGGALSLVCKASGFTFSDYDMLWVRQAPGKGLEFVAGINAASTYTDYGAAVKGRATISRDNGQSTVRLQVNNLRAEDTGTYYCAKSSYGGGWSDVGSIDAWGHGTEVIVSS
44 38G04 VH 서열 AVTLDESGGGLQTPGRALSLVCKASGFTFSSYNMFWVRQAPGKGLEWVAGIDDDGSFTLYGAAVKGRATISRDNGQSTVRLQLNNLRAEDTGTYYCARDSGAVSIDAWGHGTEVIVSS
45 4G04 VL 서열 DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPYTFGGGTKLEIK
46 5G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIDNMLSEDVADYYCLQSDNLPFTFGSGTKLEIK
47 6G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSVATGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENTLSEDVADYYCLQSDNMPLTFGAGTKLELK
48 7G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPFTFGSGTKLEIK
49 9G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSVATGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPFTFGSGTKLEIK
50 10G04 VL 서열 DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQGSHVPWTFGGGTKLEIK
51 11G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSVATGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGAGTKLELK
52 12G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSTGYGTDFVFSIENMLSEDVADYYCLQSDNLPFTFGSGTKLEIK
53 13G04 VL 서열 DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASESVDSYGNSFMHWYQQKPGQPPKLLIYRASNLESGIPARFSGSGSRTDFTLTINPVEADDVATYYCQQSNEDPWTFGGGTKLEIK
54 14G04 VL 서열 DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCQQYSSYPTFGGGTKLEIK
55 15G04 VL 서열 DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLLHTNVNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPYTFGGGTKLEIK
56 16G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGAGTKLELK
57 17G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSVATGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQRPGEPPNLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENTLSEDVADYYCLQSDNLPFTFGSGTRLEIK
58 18G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENLLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGGGTKLEIK
59 19G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFIFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGAGTKLELK
60 20G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSVATGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSGGYGTDFVFTVENMLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGAGTKLELK
61 21G04 VL 서열 ETTVTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPFTFGSGTKLEIK
62 22G04 VL 서열 DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPLTFGAGTKLELK
63 23G04 VL 서열 DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPYTFGGGTKLEIK
64 24G04 VL 서열 DIVMTQSQKFLSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKVLIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTVSNVQSEDLAEYFCQQYNNYPLTFGAGTKLELK
65 25G04 VL 서열 DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQPEDLAEYFCQQYNSYPLTFGGGTKLEIK
66 26G04 VL 서열 DIVLTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVSTAVAWYQQKPGQSPKLLIYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPRTFGGGTKLEIK
67 27G04 VL 서열 DIQMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVSTAVAWYQQKPGQSPKLLIYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPRTFGGGTKLEIK
68 28G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSGTLPFTFGSGTKLEIK
69 29G04 VL 서열 DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPLTFGAGTKLELK
70 30G04 VL 서열 ETTVTQSPASLSMAIGEKVTIRCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFVFTIENMLSEDVADYYCLQSDNLPLTFGAGTKLELK
71 31G04 VL 서열 DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASESVDSYGNSFMHWYQQKPGQPPKLLIYRASNLESGIPARFSGSGSRTDFTLTINPVEADDVATYYCQQSNEDPYTFGGGTKLEIK
72 32G04 VL 서열 ENVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCRASSSLSSTYLHWYQQKSGASPKLWIYSTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSVEAEDAATYYCQQYSGYPLTFGSGTKLEIK
73 33G04 VL 서열 ALTQPSSVSASPGETVKITCSGSSDSWYGWYQQKSPGSALVTVIYDSTNRPSSIPSRFSGSTSGSTGTLTITGVRADDEAVYFCGSFDSSTDSTAFGAGTTLTVL
74 34G04 VL 서열 ALTQPSSVSANPGETVKITCSGGDNYAGSYYYGWYQQKSPGSAPVTVIYDDTNRPADIPSRFSGSTSGSTNTLTITGVRAEDEAVYFCGGWDSINDRNIFGAGTTLTVL
75 35G04 VL 서열 ALTQPSSVSANPGETVKITCSGGSGSYGWFQQKSPGNAPVTVIYHNDQRPSDIPSRFSGSKSGSTATLTITEVQADDEAVYVCGGYDNDNDAGIFGAGTTLTVL
76 36G04 VL 서열 ALTQPSSVSAIPGETVKITCSGGGSDYGWYQQKSPGSAPVTVIYWSDNRPSNIPSRFSGSESGSTATLTITGVRAEDEAVYFCGGYDSSGSGMFGAGTTLTVL
77 37G04 VL 서열 ALTQPSSVSANPGETVKITCSGDRSYYGYGWYQQKAPGSAPVTVIYWDDKRPSDIPSRFSGSTSGSTATLTITGVQAEDEAVYFCGNMDSSYVGMFGAGTTLTVL
78 38G04 VL 서열 ALTQPSSVSANPGETVKITCSGGDSDYGWYQQKSPGSAPVTVIYQNDKRPSDIPSRFSGSASGSTATFTITGVQAEDEAVYYCGGWDGSYDGAVFGAGTTLTVL
79 ONA-0-v1 HDCR1 DYYIN
80 ONA-0-v1 HDCR2 RIYPGSGNTYYNEKFKG
81 ONA-0-v1 HDCR3 GIGGGFGMDY
82 ONA-0-v1 LDCR1 KASQSVSDDVA
83 ONA-0-v1 LDCR2 YASNRYT
84 ONA-0-v1 LDCR3 QQDYSSPLT
85 HCDR1 PIAYMT
86 HCDR1 DYWMH
87 HCDR1 DYEIQ
88 HCDR1 DYEMH
89 HCDR1 DYNMH
90 HCDR1 DYEMQ
91 HCDR1 SHDMS
92 HCDR1 SYWMN
93 HCDR1 DYYIH
94 HCDR1 TSWMN
95 HCDR1 EYTMH
96 HCDR1 SYWMH
97 HCDR1 NYWIE
98 HCDR1 EYTIH
99 HCDR1 PIAYMS
100 HCDR1 NYWMN
101 HCDR1 SYAMG
102 HCDR1 NYGMG
103 HCDR1 SYGMG
104 HCDR1 DYDML
105 HCDR1 SYNMF
106 HCDR2 DILPSIGGTIYGEKFED
107 HCDR2 AIDTSDSYTSYNQKFKG
108 HCDR2 SIDTSDSYTTYSQKFKG
109 HCDR2 GIHPGSSGIVYNQKFKG
110 HCDR2 TVDPETGGTAFNQKFKD
111 HCDR2 YIYPYNGGTGYNQKFKS
112 HCDR2 GIDPETGGIAYNQKFKV
113 HCDR2 AINSDGGYTYYPDTMER
114 HCDR2 MIDPSDNETHYNQMFKD
115 HCDR2 WIDPENGDTEYAPRFQD
116 HCDR2 RIYPGDGDTNYNGKFKG
117 HCDR2 GINPYNGGTAYNQKFKN
118 HCDR2 GIYPYNGGTAYNQKFKN
119 HCDR2 GIYPNNGATKYNQKFKG
120 HCDR2 EIDPSDSHTNYNQKFKG
121 HCDR2 EIDPSDSHANYNQKFKG
122 HCDR2 DFLPGSSSANYNEKFKG
123 HCDR2 EILPGSGSPKYNEKFKG
124 HCDR2 GIIPNNGGSSHKQNFKD
125 HCDR2 AINSDGAITYYPDTMER
126 HCDR2 DILPSIGSTIYGEKFED
127 HCDR2 EIRLKSNNYATHYAESVKG
128 HCDR2 GKAKDGGGTAYGSAVKG
129 HCDR2 KIYKDGGYTGYGAAVDG
130 HCDR2 AISNDGSKADYGAAVKG
131 HCDR2 GINAASTYTDYGAAVKG
132 HCDR2 GIDDDGSFTLYGAAVKG
133 HCDR3 DYYGSSYGYFDV
134 HCDR3 DYYGSSTAWFAY
135 HCDR3 GEDYEGTWFAY
136 HCDR3 GGGYDGAWFAY
137 HCDR3 GYGNYGAWFAY
138 HCDR3 DGGYDVYFDY
139 HCDR3 KLDFDY
140 HCDR3 HGYDYDEEGAWFAY
141 HCDR3 SDYGNGYSFYLDV
142 HCDR3 WLLSGNGMDY
143 HCDR3 EVYYGGYEDYGMDY
144 HCDR3 DYFYGDANPWFAY
145 HCDR3 DYFYGDGYPWFTY
146 HCDR3 DRYDVWFAY
147 HCDR3 IYYGLDN
148 HCDR3 IHYGLDN
149 HCDR3 FTVEVTDAMDY
150 HCDR3 FILENYFDY
151 HCDR3 AGDYAFDY
152 HCDR3 HGQTGTWFAY
153 HCDR3 LLLR
154 HCDR3 SAYGDWFYGSSGPYADSIDA
155 HCDR3 AADSGYLYITDSIDA
156 HCDR3 SADTGYCSWSACIADSIDA
157 HCDR3 SSYGGGWSDVGSIDA
158 HCDR3 DSGAVSIDA
159 LCDR1 KASQNVGTNVA
160 LCDR1 ITSTDIDDDMN
161 LCDR1 RSSQSLVHSNGNTYLH
162 LCDR1 RASESVDSYGNSFMH
163 LCDR1 KASQDVGTAVA
164 LCDR1 RSSQSLLHTNVNTYLH
165 LCDR1 KASQDVSTAVA
166 LCDR1 RASSSLSSTYLH
167 LCDR1 SGSSDSWYG
168 LCDR1 SGGDNYAGSYYYG
169 LCDR1 SGGSGSYG
170 LCDR1 SGGGSDYG
171 LCDR1 SGDRSYYGYG
172 LCDR1 SGGDSDYG
173 LCDR2 SASYRYS
174 LCDR2 EGNTLRP
175 LCDR2 KVSNRFS
176 LCDR2 RASNLES
177 LCDR2 WASTRHT
178 LCDR2 SASYRYT
179 LCDR2 STSNLAS
180 LCDR2 DSTNRPS
181 LCDR2 DDTNRPA
182 LCDR2 HNDQRPS
183 LCDR2 WSDNRPS
184 LCDR2 WDDKRPS
185 LCDR2 QNDKRPS
186 LCDR3 QQYNSYPYT
187 LCDR3 LQSDNLPFT
188 LCDR3 LQSDNMPLT
189 LCDR3 FQGSHVPWT
190 LCDR3 LQSDNLPLT
191 LCDR3 QQSNEDPWT
192 LCDR3 QQYSSYPT
193 LCDR3 SQSTHVPYT
194 LCDR3 QQYNSYPFT
195 LCDR3 QQYNSYPLT
196 LCDR3 QQYNNYPLT
197 LCDR3 QQHYSTPRT
198 LCDR3 LQSGTLPFT
199 LCDR3 QQSNEDPYT
200 LCDR3 QQYSGYPLT
201 LCDR3 GSFDSSTDSTA
202 LCDR3 GGWDSINDRNI
203 LCDR3 GGYDNDNDAGI
204 LCDR3 GGYDSSGSGM
205 LCDR3 GNMDSSYVGM
206 LCDR3 GGWDGSYDGAV
240 11G06 VL 1 ETTVTQSPAFMSATTGDKVTISCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFTFTINNIESEDAAYYYCLQSDNLPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
241 11G06 VH 1 EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYRFSDYEMQWVRQAPGQGLEWMGGIDPETGGIAYAQKFQGRVTLTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRKLDFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPESTRGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
242 11G06 VL 2 ETTVTQSPAFMSATPGDKVTISCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGNTLRPGVPSRFSSSGYGTDFTFTINNIESEDAAYYYCLQSDNLPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
243 11G06 VH 2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYRFSDYEMQWVRQAPGQGLEWMGGIDPETGGIAYAQKFQGRVTLTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRKLDFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPESTRGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
244 11G06 VL 3 ETTVTQSPAFMSATTGDKVTISCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGSTLRPGVPSRFSSSGYGTDFTFTINNIESEDAAYYYCLQSDNLPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
245 11G06 VL 4 ETTVTQSPAFMSATPGDKVTISCITSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKLLISEGSTLRPGVPSRFSSSGYGTDFTFTINNIESEDAAYYYCLQSDNLPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
246 11G06 VL_3-4 CDR2 EGSTLRP
247 11G06 VL_1-4 CDR3 LQSGNSQES
248 11G06 VH_1-2 CDR2 GIDPETGGIAYAQKFQG
다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체와 동일한 CD36의 에피토프 (예를 들어, 서열번호 1에 제공된 바와 같이, 인간 CD36의 에피토프)에 결합하는 항체를 제공한다. 일부 구현예에서, 에피토프를 포함하는 아미노산들은 알라닌 스캐닝 돌연변이 유발 맵핑에 의해 식별할 수 있다. 일부 구현예에서, 에피토프를 포함하는 아미노산들은 수소-중수소 교환 질량 분광 측정에 의해 식별할 수 있다.
일부 구현예에서, 항체는 145A, 146S, 147H, 148I, 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 157I, 158L, 159N, 160S, 185P, 186F, 187L, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 197T, 198V, 199G, 398K, 399I, 400Q, 401V, 402L, 403K, 404N, 405L, 406K, 407R, 408N, 409Y, 410I, 411V, 412P, 413I 및 414L로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 전체를 포함하거나 또는 이들 전체로 구성되는, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다 (예를 들어, 1G04). 일부 구현예에서, 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 400Q, 401V, 402L 및 403K로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q 및 156M을 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T 및 196T를 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 400Q, 401V, 402L 및 403K를 포함하거나 또는 이로 구성된 에피토프에 결합한다.
일부 구현예에서, 상기 단락에 정의된 바와 같이 인간 CD36의 에피토프에 결합하는 항체는 04G04, 07G04, 09G04, 14G04, 31G04, 13G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 29G04, 15G04, 27G04, 26G04, 28G04, 18G04, 16G04, 17G04, 05G04, 06G04, 12G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 6종의 CDR들 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-CD36 항체는 01G04가 CD36 상의 01G04 에피토프에 결합하는 것을 저해한다. 일 구현예에서, 01G04가 CD36 상의 이의 에피토프에 결합하는 것을 저해하는 항체는 04G04, 07G04, 09G04, 14G04, 31G04, 13G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 29G04, 15G04, 27G04, 26G04, 28G04, 18G04, 16G04, 17G04, 05G04, 06G04, 12G04, 30G04, 32G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 6종의 CDR들 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-CD36 항체는 FA6-152가 이의 CD36 상의 에피토프에 결합하는 것을 저해한다. 일 구현예에서, FA6-152가 이의 CD36 상의 에피토프에 결합하는 것을 저해하는 항체는 04G04, 31G04, 13G04, 24G04, 25G04, 29G04, 15G04, 27G04, 26G04 및 06G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 6종의 CDR들 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-CD36 항체는 11G04가 이의 CD36 상의 에피토프에 결합하는 것을 저해한다. 일 구현예에서, 11G04가 이의 CD36 상의 에피토프에 결합하는 것을 저해하는 항체는 18G04, 19G04, 20G04, 16G04, 30G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 6종의 CDR들 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다.
다른 구현예에서, 항체는 280E, 281S, 282D, 283V, 284N, 285L, 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 293F, 294V, 295L, 296P, 297S, 298K, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S 351P 352D,353V, 354S, 355E, 356P, 357I, 358D, 359G,360L, 361N 362P, 363N, 364E, 365E로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 전체를 포함하거나 또는 구성되는, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다 (예를 들어, 11G04). 일부 구현예에서, 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산을 포함하는, 바람직하게는 이들 전체를 포함하거나 또는 구성되는, 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y 및 292R로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체는 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A 및 350S로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합한다.
일부 구현예에서, 인간 CD36에서 상기 단락에 정의된 바와 같은 에피토프에 결합하는 항체는 18G04, 19G04, 20G04, 16G04, 30G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 이와 동일한 6종의 CDR들 또는 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 항체이다.
경쟁적인 결합 분석을 이용해, 항체 2종이 중첩성 에피토프들에 결합하는지 확인할 수 있다. 경쟁적인 결합은 검사 면역글로불린이 CD36과 같은 공통 항원에 대한 기준 항체의 특이적인 결합을 저해하는 분석으로 확인할 수 있다. 여러가지 유형의 경쟁적인 결합 분석들이 공지되어 있으며, 예를 들어 AlphaScreen® 경쟁 분석에서 에피토프 비닝 (예를 들어, Bembenek ME et al., Analytical Bioch . 408(2):321-327 참조); 경쟁적인 FACS; 고상 직접 또는 간접 방사성 면역분석 (RIA), 고상 직접 또는 간접 효소 면역분석 (EIA), 샌드위치 경쟁 분석 (Stahli C et al., (1983) Methods Enzymol 9: 242-253); 고상 직접 바이오틴-아비딘 EIA (Kirkland TN et al., (1986) J Immunol 137: 3614-9); 고상 직접 표지 분석, 고상 직접 표지 샌드위치 분석 (Harlow E & Lane D, (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press); I-125 표지물을 이용한 고상 직접 표지 RIA (Morel GA et al., (1988) Mol Immunol 25(1): 7-15); 고상 직접 바이오틴-아비딘 EIA (Cheung RC et al., (1990) Virology 176: 546-52); 및 직접 표지된 RIA (Moldenhauer G et al., (1990) Scand J Immunol 32: 77-82)가 있다. 전형적으로, 이러한 분석은 고상 표면에 결합된 정제 항원 (예를 들어, 인간 CD36과 같은 CD36) 또는 비-표지된 검사 면역글로불린 및 표지된 기준 면역글로불린 중 어느 하나를 가진 세포의 활용을 수반한다. 경쟁적인 저해는 검사 면역글로불린의 존재 하에 고상 표면 또는 세포에 결합된 표지물의 양을 확인함으로써 측정할 수 있다. 통상적으로, 검사 면역글로불린은 과량으로 존재한다. 통상적으로, 경쟁 항체가 과량으로 존재하는 경우, 공통 항원에 대한 기준 항체의 특이적인 결합성이 적어도 50-55%, 55-60%, 60-65%, 65-70%, 70-75% 또는 그 이상 저해될 것이다. 경쟁 결합 분석은 표지된 항원 또는 표지된 항체를 이용하여 매우 다양한 여러가지 포맷으로 구성할 수 있다. 이러한 분석의 공통 버전에서 96웰 플레이트에 항원을 고정한다. 표지된 항체가 항원에 결합하는 것을 비표지 항체가 차단하는 능력을 방사능 또는 효소 표지물질을 이용해 측정한다. 추가적인 상세 내용은, 예를 들어, Wagener C et al., (1983) J Immunol 130: 2308-2315; Wagener C et al., (1984) J Immunol Methods 68: 269-274; Kuroki M et al., (1990) Cancer Res 50: 4872-4879; Kuroki M et al., (1992) Immunol Invest 21: 523-538; Kuroki M et al., (1992) Hybridoma 11: 391-407 및 Antibodies: A Laboratory Manual, Ed Harlow E & Lane D editors supra, pp. 386-389를 참조한다.
일 구현예에서, 경쟁 분석은 표면 플라스몬 공명 (BIAcore®)을 이용해, 예를 들어, Abdiche YN et al., (2009) Analytical Biochem 386: 172-180에 기술된 바와 같이 "탠덤 방식"에 의해 수행하며, CD36 항원을 칩 표면, 예를 들어 CM5 센서 칩에 고정한 다음 항-CD36 항체를 칩 위로 흐르게 함으로써, 이루어진다. 항체가 본원에 기술된 항-CD36 항체와 경쟁하는지 확인하기 위해, 먼저 항-CD36 항체를 칩 표면 위로 흐르게 하여 포화시킨 후 잠재적인 경쟁 항체를 첨가한다. 경쟁 항체의 결합성을 확인하고, 비-경쟁 대조군과 비교해 정량한다.
일 구현예에서, 경쟁 분석은 표면 플라스몬 공명 (BIAcore®)을 이용해 수행하여, 항-CD36 항체가 CD36에 결합하는 것으로 알려진 다른 분자 (예를 들어, TSP-1)와 동시에 CD36에 결합할 수 있는 지를 확인한다. 이러한 분석에 대한 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 처음에 칩 표면에 포화되게 흘려준 후 잠재적인 경쟁 분자 (예를 들어, TSP-1)를 첨가한다. 그 후, 반응 유닛에서 달성되는 변화를 조사하여 비-경쟁 대조군과 비교함으로써 경쟁 분자의 결합을 결정할 수 있다.
일 구현예에서, Fortebio Octet 경쟁 결합을 이용해 CD36 항체가 CD36에 다른 CD36 항체가 결합하는 것을 경쟁적으로 저해하는 지를 확인한다.
다른 측면에서, 본 발명은 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 분석 또는 본원에 기술된 분석 (예를 들어, ELISA 경쟁 분석 또는 현탁 어레이 또는 표면 플라스몬 공명 분석)을 이용하여 결정된 바와 같이, CD36 (예를 들어, 인간 CD36)에 대한 결합으로부터 본원에 기술된 항체를 경쟁적으로 (예를 들어, 용량 의존적인 방식으로) 저해하는 항체를 제공한다.
항-CD36 항체가 CD36의 활성을 조절하거나, 이를 길항하거나 또는 차단하는 것이 바람직하다. CD36 활성을 차단 또는 저해하는 항체는 전장 항체일 수 있다. 또한, 단쇄 항체, 단쇄 가변성 도메인 단편 (scFv), F(ab')2 단편 (항체 분자의 펩신 분해를 통해 수득가능), 또는 Fab 단편 (F(ab')2 단편의 이황화 결합을 환원하여 수득가능) 등의 항체의 단편 또는 유사체를 이용하는 것 역시 가능하다. 개체가 인간일 경우 인간화된 항체를 이용할 수 있다.
CD36은 몇가지 공지된 기능을 가지고 있으므로, 항체는 트롬보스폰딘, 콜라겐 및 지방산과의 상호작용 등의 CD36의 모든 공지된 기능들을 저해하도록, 또는 CD36의 특이적인 기능만 저해하도록 (예를 들어, 지방산 및 산화된-LDL 흡수만 차단) 선택할 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 지방산 및/또는 산화된-LDL의 CD36 매개 흡수를 차단한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 바와 같이, CD36-매개 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하면서 TSP-1에 대한 CD36의 결합을 50% 미만으로 차단한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 바와 같이, CD36-매개 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하면서 TSP-1에 대한 CD36의 결합을 25% 미만으로 차단한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 CD36-매개 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 비-처리 대조군과 비교해 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70% 또는 적어도 약 75% 차단한다. 일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 CD36-매개 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 적어도 약 17% 차단한다.
치료할 개체가 인간일 경우, 임의의 공지된 항-CD36 항체를 이용할 수 있거나, 또는 항체는 인간 투여용으로 제작될 수 있다. (본 발명의 분석에서 사용되는 바와 같이) 마우스와 같은 비-인간 면역 시스템에서 구축된 항체의 경우, 인간에 투여할 수 있도록 유해 반응을 회피하기 위해 인간화가 필수적일 수 있다. 인간화된 항체는, 먼저 비-인간 종에서 구축되므로 인간에서 자연적으로 생성되는 항체 변이체에 대해 유사성을 높이도록 단백질 서열을 변형하여, 비-인간 면역글로불린으로부터 유래한 서열이 최소한으로 남겨진, 항체, 통상적으로 단일클론 항체이다. 심지어 인간화 이후에도, 인간화된 항체의 아미노산 서열은 인간에서 자연적으로 생성되는 항체와는 일부 구별된다. 항체 인간화에 대해 당해 기술 분야의 당업자들에게 몇가지 공정들이, 예를 들어 하기를 비롯하여, Almagro and Fransson (2008)에 의해 검토된 바와 같이, 공지되어 있다: 키메라가 Fab 부분의 아미노산 서열의 선택적인 대체에 의해 추가적으로 인간화될 수 있는, 마우스-인간 (인간 Fc로 스플라이싱된 마우스 Fab) 키메라의 생산을 통한 인간화; 포유류 세포 배양 중에 발현될 수 있는 구조체를 구축하기 위해 재조합 DNA 기법을 이용해, 또는 심지어, 말초혈로부터 단리되고 미생물 또는 바이러스에 의해 (파지 디스플레이에서와 같이) 디스플레이된 인간 RNA로부터 또는 심지어 (리보솜 디스플레이에서와 같이) 무세포 추출물로부터 통상적으로 유래한 항체 유전자 라이브러리를 구축함으로써 비-인간 포유류의 이용을 회피함으로써 수행할 수 있는, 인간 항체의 대응되는 세그먼트를 치환함으로써 "도너" (비-인간 항체)의 하나 이상의 CDR 세그먼트의 삽입, 적절한 중간산물 (통상적으로, Fab 또는 scFv와 같은 항체 단편)의 선별 및 예를 들어, 재차 재조합 DNA 기법을 이용한 완전 항체의 수득. 수종의 특허 문헌들이 예를 들어 Genentech 사의 US6054297과 같이 인간화 방법에 초점을 맞추고 있으며; US5225539 및 US4816397 역시 유용한 참조문헌이며, 이들 내용은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
단일클론 항체를 수득하는 방법들은 당해 기술 분야의 당업자들에게 잘 알려져 있다. 일반적으로, CD36 수용체에 대한 항체는, CD36 전체 단백질 또는 이의 단편 또는 에피토프를 치료학적 효과를 달성하고자 하는 포유류와는 다른 숙주 동물에 투여함으로써, 2014년 E.A. Greenfield 편집판 "Antibodies: A Laboratory Manual, Second edition"에서와 같이 고전적인 실험실 매뉴얼에 언급된 방법과 같은 공지된 방법에 따라 구축할 수 있다. 단일클론 항체는 특히 Kohler and Milstein (1975)에 의해 최초로 언급된 하이브리도마 기법, 인간 B 세포 하이브리도마 기법 (Cote et al., 1983) 또는 EBV-하이브리도마 기법 (Cole et al., 1985) 등과 같이, 연속 세포주 배양에 의해 항체 분자를 생산하기 위해 제공되는 임의의 기법에 의해 제조 및 단리할 수 있다. 클론 세포주 및 이에 의해 발현된 단일클론 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제조하기 위한 기타 방법들도 당해 기술 분야에 잘 알려져 있다 (예를 들어, Chapter 11 in: Short Protocols in Molecular Biology, (2002) 5th Ed., Ausubel FM et al., supra). 대안적으로, 전술한 바와 같이, CD36 수용체에 대해 요망하는 특이성을 가진 단편을 신속하게 동정할 수 있도록 Fab 및/또는 scFv 발현 라이브러리를 구축할 수 있다. 본원에 기술된 항체 또는 단편을 제조하기 위해 이용할 수 있는 파지 디스플레이 방법에 대한 예로는 Brinkman U et al., (1995) J Immunol Methods 182: 41-50; Ames RS et al., (1995) J Immunol Methods 184: 177-186; Kettleborough CA et al., (1994) Eur J Immunol 24: 952-958; Persic L et al., (1997) Gene 187: 9-18; Burton DR & Barbas CF (1994) Advan Immunol 57: 191-280; PCT 출원 번호 PCT/GB91/001134; 국제 공개번호 WO 90/02809, WO 91/10737, WO 92/01047, WO 92/18619, WO 93/1 1236, WO 95/15982, WO 95/20401 및 WO 97/13844; 및 미국 특허 5,698,426, 5,223,409, 5,403,484, 5,580,717, 5,427,908, 5,750,753, 5,821,047, 5,571,698, 5,427,908, 5,516,637, 5,780,225, 5,658,727, 5,733,743, 및 5,969,108에 기술된 방법 등이 있다.
특정한 특이성을 가진 항체의 설계에서, 요망하는 경우, 항체를 구축하기 전 표적으로 할 특정 도메인 또는 항체 영역을 면역원으로 선정하기 위해, 주석이 달린 NCBI 기준 서열 (NC_000007.14, 호모 사피엔스 주석 공개: 107, 현재 2015년 9월 29일자 공개) 또는 UniProtKB P16671을 이용하는 것이 유익하다.
치료학적 효과를 달성하기 위해, CD36 활성의 차단제인 항-CD36 항체는 바람직하게는 치료학적 유효량으로 투여될 것이다. 유효량으로 간주될 수 있는 양에 대한 정확한 결정은 환자의 신체 크기, 나이, 암 병기 및 차단제 (예, 발현 구조체, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 항체 또는 그 단편 등)의 특성 등의 각 환자의 개별 인자를 기반으로 할 수 있다. 따라서, 투여량은 본 발명의 내용으로부터 당해 기술 분야의 당업자가 쉽게 결정할 수 있다. 용량을 수회 특정 치료 기간 동안 개체에, 예를 들어, 매일, 매주, 매달, 2달 간격, 3달 간격 또는 6달 간격으로 투여할 수 있다. 치료학적으로 유효한 혈장 수준 역시 매일 다중 용량을 투여함으로써 달성할 수 있다. 일부 투여 일정으로, 처음에는 후속 또는 유지 용량 하나 이상 보다 높은 초기 용량으로 개체에 투여한다. 수일 이상의 기간 동안 반복 투여하는 경우, 상태에 따라, 치료는 일반적으로 원하는 효과가 이루어질 때까지 계속될 것이다. 요법의 진행은 통례적인 기법 및 분석에 의해 쉽게 모니터링한다.
질환의 유형 및 중증도에 따라, 항-CD36 항체 약 1 ㎍/kg 내지 15 mg/kg (예, 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg)이 환자에게 투여하기 위한 초기 후보 투여량일 수 있다. 투여량은, 예를 들어, 1회 이상의 개별 투여에 의해, 또는 연속적인 주입에 의해 투여할 수 있다. 일일 투여량은 약 1 ㎍/kg 내지 100 mg/kg 또는 그 이상의 범위일 수 있다. 항-CD36 항체의 투여량에 대한 일 예는 1회 투여 당 약 0.005 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 범위일 것이다. 다른 예로, 용량은 또한 약 1 ㎍/체중 kg, 약 5 ㎍/체중 kg, 약 10 ㎍/체중 kg, 약 50 ㎍/체중 kg, 약 100 ㎍/체중 kg, 약 200 ㎍/체중 kg, 약 350 ㎍/체중 kg, 약 500 ㎍/체중 kg, 약 1 mg/체중 kg, 약 5 mg/체중 kg, 약 10 mg/체중 kg, 약 50 mg/체중 kg, 약 100 mg/체중 kg, 약 200 mg/체중 kg, 약 350 mg/체중 kg, 약 500 mg/체중 kg, 내지 약 1000 mg/체중 kg, 및 이러한 수치로부터 도출할 수 있는 임의 범위를 포함할 수 있다. 본원에 열거된 수치들로부터 도출할 수 있는 범위에 대한 예로, 약 5 mg/체중 kg 내지 약 100 mg/체중 kg, 약 5 ㎍/체중 kg 내지 약 500 mg/체중 kg 등의 범위 수치에 기반해, 투여할 수 있다. 따라서, 약 0.5 mg/kg, 2.0 mg/kg, 5.0 mg/kg 또는 10 mg/kg (또는 이들의 임의 조합) 용량을 1회 이상 환자에 투여할 수 있다.
전신 투여하는 경우, 치료학적 유효량은 먼저 세포 배양 분석과 같은 시험관내 분석을 통해 추정할 수 있다. 그런 후, 세포 배양물에서 결정된 IC50을 포함하는 순환 농도 범위를 달성하도록 동물 모델에서 용량을 공식화할 수 있다. 이러한 정보를 이용해 인간에서 유용한 용량을 보다 정확하게 결정할 수 있다. 초기 투여량 역시 생체내 데이터, 예를 들어 동물 모델로부터, 당해 기술 분야에 공지된 기법을 이용해 추정할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면 동물 데이터에 기반하여 인간에 대한 투여를 더 쉽게 최적화할 수 있다. 투여량 함량 및 간격은 치료학적 효과를 유지하기에 충분한 혈장 수준으로 항-CD36 항체를 제공하도록 개별적으로 조정할 수 있다. 혈장내 수준은 예를 들어 HPLC에 의해 측정할 수 있다.
항-CD36 항체는 검출가능한 표지 또는 물질과 융합 또는 접합 (예를 들어, 공유 또는 비-공유적 연결)될 수 있다. 검출가능한 표지 또는 물질에 대한 예로는 효소 표지, 예를 들어, 글루코스 옥시다제; 방사성 동위원소, 예를 들어 요오드 (125I, 121I), 탄소 (14C), 황 (35S), 삼중수소 (3H), 인듐 (121In) 및 테크네튬 (99Tc); 발광 표지, 예를 들어 루미놀; 및 형광 표지, 예를 들어 플루오레세인 및 로다민, 및 바이오틴 등이 있다. 이러한 표지된 항체를 이용해 CD36 (예를 들어, 인간 CD36) 단백질을 검출할 수 있다.
푸코스 함유율이 감소된 항체는 예를 들어, FcγRIIIA와 같은 Fc 수용체에 대해 친화성이 증가된 것으로 발표된 바 있다. 이에, 특정 구현예에서, 본원에 기술된 항체는 푸코스 함유율이 감소되거나 또는 푸코스가 결여된 것이다 (즉, "비-푸코실화됨"). 이러한 항체는 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 기술을 이용해 생산할 수 있다. 예를 들어, 이는 푸코실화 능력이 결핍되거나 또는 결함이 있는 세포에서 발현시킬 수 있다. 구체적인 예로, α1,6-푸코실트랜스퍼라제의 양쪽 대립유전자가 넉아웃된 세포주를 이용해 푸코스 함유율이 감소된 항체를 생산할 수 있다. Potelligent® 시스템 (Lonza)은 푸코스 함유율이 감소된 항체를 생산하는데 이용할 수 있는 시스템의 일 예이다. 대안적으로, 푸코스 함유율이 감소된 항체 또는 푸코스를 함유하지 않는 항체는, 예를 들어, (i) 푸코실화를 방지 또는 감소시키는 조건 하에 세포를 배양하거나; (ii) 푸코스를 번역 후 제거하거나 (예를 들어, 푸코시다제 효소에 의해); (iii) 원하는 탄수화물을, 예를 들어 비-당화 당단백질을 재조합 발현한 후 번역 후 부가하거나; 또는 (iv) 푸코실화되지 않은 항체를 선택하도록 당단백질을 정제함으로써, 준비할 수 있다. 예를 들어, 푸코스를 함유하지 않거나 또는 푸코스 함유율이 감소된 항체의 생산 방법은 Longmore GD & Schachter H (1982) Carbohydr Res 100: 365-92 및 Imai-Nishiya H et al., (2007) BMC Biotechnol. 7: 84를 참조한다.
일부 구현예에서, CD36 항체는 아미노산 서열이 동일한 푸코실화된 CD36 항체와 비교해 강화된 시험관내 ADCC 활성을 가진다. 일부 구현예에서, 비-푸코실화된 CD36 항체는 푸코실화된 CD36 항체를 이용한 특이적인 세포용해와 비교해 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70% 또는 적어도 75% 높은 수준으로 특이적인 세포용해를 유발한다.
특정 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 변형을 본원에 제시된 항체의 Fc 영역에 도입하여, Fc 영역 변이체를 구축할 수 있다. Fc 영역 변이체는 하나 이상의 아미노산 위치에 아미노산 변형 (예, 치환)을 가진 인간 Fc 영역 서열 (예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 Fc 수용체, 특히 Fcγ 수용체에 대한 결합성을 낮추는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및/또는 P329G (Kabat EU 인덱스에 따른 번호 식별)를 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234G, L235S 및 G236R을 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234S, L235T 및 G236R을 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234S, L235V 및 G236R을 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234T, L235Q 및 G236R을 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234T, L235T 및 G236R을 가진 인간 IgG1 서브클래스의 것이다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235G 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A 및 L235A가 존재하는 인간 IgG1 서브클래스의 것이다.
Fc 도메인은 본 발명의 항체에, 표적 조직내 양호한 축적에 기여하는 긴 혈청 반감기 및 우호적인 조직-혈액 분포 비율 등의 유익한 약동학적 특성을 부여한다. 그러나, 동시에, 본 발명의 항체가 바람직한 항원-보유 세포보다는 Fc 수용체를 발현하는 세포에 대해 바람직하지 않은 표적화를 유도할 수도 있다. 이에, 특정 구현예에서, 본 발명의 항체의 Fc 도메인은 네이티브 IgG Fc 도메인, 특히 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인과 비교해, Fc 수용체에 대해 감소된 결합 친화성 및/또는 감소된 작동자 기능을 나타낸다. 보다 구체적으로, Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인이다.
구체적인 측면에서, Fc 도메인은 비-조작 Fc 도메인과 비교해 Fc 수용체에 대한 결합 친화성이 감소되거나 및/또는 작동자 기능이 저하되도록 조작된다. 이러한 일 구현예에서, Fc 도메인은, 네이티브 IgG1 Fc 도메인과 비교해 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만, 더 바람직하게는 10% 미만, 가장 바람직하게는 5% 미만으로 Fc 수용체에 대한 결합 친화성을 나타내고, 및/또는 네이티브 IgG1 Fc 도메인과 비교해 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만, 더 바람직하게는 10% 미만, 가장 바람직하게는 5% 미만으로 작동자 기능을 나타낸다. 일 구현예에서, Fc 도메인은 Fc 수용체에 실질적으로 결합하지 않거나 및/또는 작동자 기능을 유도하지 않는다. 특정 구현예에서, Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다. 일 구현예에서, Fc 수용체는 인간 Fc 수용체이다. 일 구현예에서, Fc 수용체는 활성화 Fc 수용체이다. 특정 구현예에서, Fc 수용체는 활성화 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIIa, FcγRI 또는 FcγRIIa, 특히 구체적으로는 인간 FcγRIIIa이다. 일 구현예에서, Fc 수용체는 저해성 Fc 수용체이다. 특정 구현예에서, Fc 수용체는 저해성 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIB이다. 일 구현예에서, 작동자 기능은 CDC, ADCC, ADCP 및 사이토카인 분비 중 하나이다. 특정 구현예에서, 작동자 기능은 ADCC이다. 일 구현예에서, Fc 도메인은 네이티브 IgG1 Fc 도메인과 비교해 신생아 (neonatal) Fc 수용체 (FcRn)에 대해 실질적으로 유사한 결합 친화성을 나타낸다. FcRn에 대해 실질적으로 유사한 결합성은, Fc 도메인이 FcRn에 대한 네이티브 IgG1 Fc 도메인의 결합 친화성을 약 70% 초과, 특히 약 80% 초과, 보다 특히 약 90% 초과로 나타낼 경우에, 달성된다. 일부 구현예에서, 보체 성분에 대한 결합 친화성, 특히 C1q에 대한 결합 친화성 역시 감소된다. 일 측면에서, 신생아 Fc 수용체 (FcRn)에 대한 결합 친화성은 감소되지 않는다.
특정 구현예에서, 본 발명의 항체의 Fc 도메인은 비-조작 Fc 도메인과 비교해 작동자 기능이 저하되도록 조작된다. 작동자 기능의 저하는, 비-제한적으로, 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 보체 의존적인 세포독성 (CDC)의 감소, 항체-의존적인 세포-매개 세포독성 (ADCC)의 감소, 항체-의존적인 세포성 식세포작용 (ADCP)의 감소, 사이토카인 분비의 감소, 항원-제시 세포에 의한 면역 복합체-매개 항원 흡수의 감소, NK 세포에 대한 결합성 감소, 대식세포에 대한 결합성 감소, 단핵구에 대한 결합성 감소, 다형핵 세포에 대한 결합성 감소, 직접 신호전달 유발성 세포자살의 감소, 수지상 세포의 성숙화 감소 또는 T 세포 감작화 감소.
작동자 기능이 저하된 항체는 Fc 영역 잔기 238, 265, 269, 270, 297, 327 및 329 중 하나 이상이 치환된 것을 포함한다 (미국 특허 6,737,056). 이러한 Fc 돌연변이는 265번 및 297번 잔기가 알라닌으로 치환된 소위 "DANA" Fc 돌연변이 (미국 특허 7,332,581) 등의, 아미노산 위치 265, 269, 270, 297 및 327 중 2 이상에 돌연변이를 가진 Fc 돌연변이를 포함한다. FcR에 대한 결합성이 개선되거나 또는 저하된 일부 항체 변이체들이 개시되어 있다 (예, 미국 특허 6,737,056; WO 2004/056312, 및 Shields, R. L. et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604).
본 발명의 일 측면에서, Fc 도메인은 E233, L234, L235, G236, N297, P331 및 P329번 위치들 중 하나 이상의 위치에서 아미노산 치환을 포함한다. 일부 측면에서, Fc 도메인은 L234A, L234G, L234Q, L234S, L234T, L235S, L235G, L235T, L235V, L235Q 및 G236R로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 측면에서, Fc 도메인은 아미노산 치환 L234A 및 L235A ("LALA")를 포함한다. 이러한 일 구현예에서, Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인, 구체적으로 인간 IgG1 Fc 도메인이다. 일 측면에서, Fc 도메인은 P329번 위치에 아미노산 치환을 포함한다. 보다 구체적인 측면에서, 아미노산 치환은 P329A 또는 P329G, 구체적으로 P329G이다. 일 구현예에서, Fc 도메인은 P329번 위치에 아미노산 치환을 포함하며, E233P, L234A, L234G, L324Q, L234S, L234T, L235A, L235E, L235S, L235G, L235T, L235V, L235Q, G236R, N297A, N297D 또는 P331S로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가적인 아미노산 치환을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G ("P329G LALA")를 포함한다. 아미노산 치환 조합 "P329G LALA"는 PCT 특허 출원 WO 2012/130831 A1에 기술된 바와 같이 인간 IgG1 Fc 도메인의 Fcγ 수용체에의 결합성을 거의 완전히 제거한다. 이 문헌에는 또한 이러한 돌연변이 Fc 도메인의 제조 방법 및 Fc 수용체 결합성 또는 작동자 기능과 같이 그 특성을 확인하는 방법도 기술되어 있다. 이러한 항체는 돌연변이 L234A 및 L235A 또는 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G를 가진 IgG1이다 (Kabat et al의 EU 인덱스에 따른 번호 식별, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991).
본 발명의 일부 측면들에서, 중쇄 불변 영역은 아미노산 위치 L234, L235 및/또는 G236에 돌연변이를 가진 IgG 불변 영역을 포함한다. 항-CD36 항체와 함께 이용하기에 특히 유익할 수 있는 돌연변이 세트는, 중쇄 불변 영역이 L234A, L235S 및 G236R; L234G, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234S, L235G 및 G236R; L234S, L235T 및 G236R; L234S, L235V 및 G236R; L234T, L235Q 및 G236R; L234T, L235S 및 G236R; L234T, L235T 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234A 및 L235A; L234A, L235A 및 P329G; G236R 및 L328R; L234A 및 G237A; L234A, L235A 및 G237A; L234A 및 L235E; L235V, F243L, R292P, Y300L, 및 P396L; D265A 및 P329A; L234A, L235A 및 K322A; L234F, L235E, 및 P331S; L234F, L235Q, 및 K322Q; L234A, L235A, G237A, P238S, H268A, A330S, 및 P331S; E233P, L234V, L235A, G236, A327G, A330S, 및 P331S; L235A 및 G236R; L235S 및 G236R; G236R; L234Q 및 L235S; L235G 및 G236R; L234Q, L235S 및 236R; L234Q 및 L235S; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234Q, L235S, G236R, M252Y, S254T, 및 T256E; 및 L234Q, L235S, G236R, T250Q, 및 M428L로 이루어진 군으로부터 선택되는 돌연변이 세트를 가진 IgG 불변 영역을 포함하는 구현예를 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234G, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 돌연변이 L234G, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235T 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235V 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235Q 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235T 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234S, L235G 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234T, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234Q, L235S 및 G236R 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A 및 L235A 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 L234A, L235A 및 P329G 돌연변이를 함유한 IgG 불변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 변이되어 변이체 FC 영역을 생성하는 Fc 영역은 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4로부터 선택될 수 있다 (예를 들어, WO 2021/234402 참조, 이 문헌의 전체 내용은 원용에 의해 본원에 통합됨). 일부 구현예에서, Fc 영역은 IgG1이다. 인간에서, IgG1에서 L234, L235 및 G236 (EU 번호 지정)에 상응하는 야생형 잔기는 IgG2의 경우 V234, A235, D236이고; IgG3의 경우 L234, L235 및 G236이고; IgG4의 경우 F234, L235 및 G236이다. IgG2는 236번 위치에 결손을 가지고 있으며, 이로써 FcRn 결합 감소 및 경태반 수송 (transplacental transport) 저하의 원인이 된다. 일부 구현예에서, 236번 위치에 삽입된 Arg 잔기는 FcRn에의 IgG2 결합을 IgG2와 더 비슷하게 회복시키고, 따라서 순환계에서 IgG2의 반감기를 늘릴 수 있다. 다른 구현예에서, 236번 위치에 결손 유지는 FcRn에의 IgG2 결합 저하를 보존한다.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG1 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: L234A/L235A/G236R, L234A/L235S/G236R , L234A/L235T/G236R, L234D/L235H/G236R, L234D/L235K/G236R, L234D/L235Q/G236R, L234D/L235S/G236R, L234D/L235T/G236R, L234E/L235D/G236R, L234E/L235H/G236R, L234E/L235I/G236R, L234E/L235V/G236R, L234G/L235H/G236R, L234G/L235Q/G236R, L234G/L235S/G236R, L234H/L235I/G236R, L234H/L235S/G236R, L234K/L235Q/G236R, L234K/L235R/G236R, L234K/L235S/G236R, L234K/L235T/G236R, L234K/L235V/G236R, L234Q/L235A/G236R, L234Q/L235D/G236R, L234Q/L235H/G236R, L234Q/L235Q/G236R , L234Q/L235R/G236R, L234Q/L235S/G236R, L234Q/L235T/G236R, L234Q/L235V/G236R, L234R/L235D/G236R, L234R/L235E/G236R, L234R/L235H/G236R, L234R/L235I/G236R, L234R/L235K/G236R, L234R/G236R, L234R/L235Q/G236R, L234 R/L235R/G236R, L234R/L235T/G236R, L234S/L235D/G236R, L234S/L235E/G236R, L234S/L235G/G236R, L234S/L235H/G236R, L234S/L235I/G236R, L234S/G236R, L234S/L235R/G236R, L234S/L235T/G236R, L234S/L235V/G236R, L234T/L235A/G236R, L234T/L235I/G236R, L234T/L235K/G236R, L234T/L235Q/G236R, L234T/L235R/G236R, L234T/L235S/G236R, L234T/L235T/G236R, L234T/L235V/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG1 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: L234A/L235A/G236R, L234A/L235S/G236R, L234A/L235T/G236R, L234D/L235H/G236R, L234D/L235K/G236R, L234D/L235Q/G236R, L234D/L235S/G236R, L234D/L235T/G236R, L234E/L235D/G236R, L234E/L235H/G236R, L234E/L235I/G236R, L234E/L235V/G236R, L234G/L235H/G236R, L234G/L235Q/G236R, L234G/L235S/G236R, L234H/L235I/G236R, L234H/L235S/G236R, L234K/L235Q/G236R, L234K/L235R/G236R, L234K/L235S/G236R, L234K/L235T/G236R, L234K/L235V/G236R, L234Q/L235A/G236R, L234Q/L235D/G236R, L234Q/L235H/G236R, L234Q/L235Q/G236R , L234Q/L235R/G236R, L234Q/L235S/G236R, L234Q/L235T/G236R, L234Q/L235V/G236R, L234R/L235D/G236R, L234R/L235E/G236R, L234R/L235H/G236R, L234R/L235I/G236R, L234R/L235K/G236R, L234R/G236R, L234R/L235Q/G236R, L234R/L235R/G236R, L234R/L235T/G236R, L234S/L235D/G236R, L234S/L235E/G236R, L234S/L235G/G236R, L234S/L235H/G236R, L234S/L235I/G236R, L234S/G236R, L234S/L235R/G236R, L234S/L235T/G236R, L234S/L235V/G236R, L234T/L235A/G236R, L234T/L235I/G236R, L234T/L235K/G236R, L234T/L235Q/G236R, L234T/L235R/G236R, L234T/L235S/G236R, L234T/L235T/G236R, L234T/L235V/G236R, L235T/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG1 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: L234A/L235A/G236R, L234A/L235S/G236R, L234A/L235T/G236R, L234D/L235H/G236R, L234D/L235K/G236R, L234D/L235Q/G236R, L234D/L235S/G236R, L234D/L235T/G236R, L234E/L235D/G236R, L234E/L235H/G236R, L234E/L235I/G236R, L234E/L235V/G236R, L234G/L235Q/G236R, L234G/L235S/G236R, L234Q/L235A/G236R, L234Q/L235D/G236R, L234Q/L235Q/G236R, L234Q/L235S/G236R, L234Q/L235T/G236R, L234Q/L235V/G236R, L234R/L235D/G236R, L234R/L235E/G236R, L234S/L235D/G236R, L234S/L235E/G236R, L234S/L235G/G236R, L234S/L235I/G236R, L234S/G236R, L234S/L235T/G236R, L234S/L235V/G236R, L234T/L235A/G236R, L234T/L235I/G236R, L234T/L235Q/G236R, L234T/L235S/G236R, L234T/L235T/G236R, L234T/L235V/G236R, L235T/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG1 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: L234A/L235A/G236R, L234A/L235S/G236R, L234D/L235K/G236R, L234D/L235S/G236R, L234D/L235T/G236R, L234G/L235S/G236R, L234H/L235S/G236R, L234K/L235Q/G236R, L234K/L235R/G236R, L234K/L235S/G236R, L234K/L235T/G236R, L234K/L235V/G236R, L234Q/L235A/G236R, L234Q/L235D/G236R, L234Q/L235R/G236R, L234Q/L235S/G236R, L234Q/L235T/G236R, L234Q/L235V/G236R, L234R/L235D/G236R, L234R/L235E/G236R, L234R/L235H/G236R, L234R/L235I/G236R, L234R/L235K/G236R, L234R/L235Q/G236R, L234R/L235R/G236R, L234S/L235G/G236R, L234S/L235H/G236R, L234S/L235I/G236R, L234S/L235R/G236R, L234S/L235T/G236R, L234S/L235V/G236R, L234T/L235K/G236R, L234T/L235Q/G236R, L234T/L235R/G236R, L234T/L235S/G236R, L234T/L235T/G236R, L234T/L235V/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A236R, V234A/A235S/A236R, V234A/A235T/A236R, V234D/A235H/A236R, V234D/A235K/A236R, V234D/A235Q/A236R, V234D/A235S/A236R, V234D/A235T/A236R, V234E/A235D/A236R, V234E/A235H/A236R, V234E/A235I/A236R, V234E/A235V/A236R, V234G/A235H/A236R, V234G/A235Q/A236R, V234G/A235S/A236R, V234H/A235I/A236R, V234H/A235S/A236R, V234K/A235Q/A236R, V234K/A235R/A236R, V234K/A235S/A236R, V234K/A235T/A236R, V234K/A235V/A236R, V234Q/A235A/A236R, V234Q/A235D/A236R, V234Q/A235H/A236R, V234Q/A235Q/A236R, V234Q/A235R/A236R, V234Q/A235S/A236R, V234Q/A235T/A236R, V234Q/A235V/A236R, V234R/A235D/A236R, V234R/A235E/A236R, V234R/A235H/A236R, V234R/A235I/A236R, V234R/A235K/A236R, V234R/A235L/A236R, V234R/A235Q/A236R, V234R/A235R/A236R, V234R/A235T/A236R, V234S/A235D/A236R, V234S/A235E/A236R, V234S/A235G/A236R, V234S/A235H/A236R, V234S/A235I/A236R, V234S/A235L/A236R, V234S/A235R/A236R, V234S/A235T/A236R, V234S/A235V/A236R, V234T/A236R, V234T/A235I/A236R, V234T/A235K/A236R, V234T/A235Q/A236R, V234T/A235R/A236R, V234T/A235S/A236R, V234T/A235T/A236R, V234T/A235V/A236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A236R, V234A/A235S/A236R, V234A/A235T/A236R, V234D/A235H/A236R, V234D/A235K/A236R, V234D/A235Q/A236R, V234D/A235S/A236R, V234D/A235T/A236R, V234E/A235D/A236R, V234E/A235H/A236R, V234E/A235I/A236R, V234E/A235V/A236R, V234G/A235H/A236R, V234G/A235Q/A236R, V234G/A235S/A236R, V234H/A235I/A236R, V234H/A235S/A236R, V234K/A235Q/A236R, V234K/A235R/A236R, V234K/A235S/A236R, V234K/A235T/A236R, V234K/A235V/A236R, V234Q/A235A/A236R, V234Q/A235D/A236R, V234Q/A235H/A236R, V234Q/A235Q/A236R, V234Q/A235R/A236R, V234Q/A235S/A236R, V234Q/A235T/A236R, V234Q/A235V/A236R, V234R/A235D/A236R, V234R/A235E/A236R, V234R/A235H/A236R, V234R/A235I/A236R, V234R/A235K/A236R, V234R/A235L/A236R, V234R/A235Q/A236R, V234R/A235R/A236R, V234R/A235T/A236R, V234S/A235D/A236R, V234S/A235E/A236R, V234S/A235G/A236R, V234S/A235H/A236R, V234S/A235I/A236R, V234S/A235L/A236R, V234S/A235R/A236R, V234S/A235T/A236R, V234S/A235V/A236R, V234T/A236R, V234T/A235I/A236R, V234T/A235K/D236R, V234T/A235Q/A236R, V234T/A235R/A236R, V234T/A235S/A236R, V234T/A235T/A236R, V234T/A235V/A236R, A235T/A236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A236R, V234A/A235S/A236R, V234A/A235T/A236R, V234D/A235H/A236R, V234D/A235K/A236R, V234D/A235Q/A236R, V234D/A235S/A236R, V234D/A235T/A236R, V234E/A235D/A236R, V234E/A235H/A236R, V234E/A235I/A236R, V234E/A235V/A236R, V234G/A235Q/A236R, V234G/A235S/A236R, V234Q/A235A/A236R, V234Q/A235D/A236R, V234Q/A235Q/A236R, V234Q/A235S/A236R, V234Q/A235T/A236R, V234Q/A235V/A236R, V234R/A235D/A236R, V234R/A235E/A236R, V234S/A235D/A236R, V234S/A235E/A236R, V234S/A235G/A236R, V234S/A235I/A236R, V234S/A235L/A236R, V234S/A235T/A236R, V234S/A235V/A236R, V234T/A236R, V234T/A235I/A236R, V234T/A235Q/A236R, V234T/A235S/A236R, V234T/A235T/A236R, V234T/A235V/A236R, A235T/A236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A235S, V234A/A235T, V234D/A235H, V234D/A235K, V234D/A235Q, V234D/A235S, V234D/A235T, V234E/A235D, V234E/A235H, V234E/A235I, V234E/A235V, V234G/A235H, V234G/A235Q, V234G/A235S, V234H/A235I, V234H/A235S, V234K/A235Q, V234K/A235R, V234K/A235S, V234K/A235T, V234K/A235V, V234Q/A235A, V234Q/A235D, V234Q/A235H, V234Q/A235Q, V234Q/A235R, V234Q/A235S, V234Q/A235T, V234Q/A235V, V234R/A235D, V234R/A235E, V234R/A235H, V234R/A235I, V234R/A235K, V234R/A235L, V234R/A235Q, V234R/A235R, V234R/A235T, V234S/A235D, V234S/A235E, V234S/A235G, V234S/A235H, V234S/A235I, V234S/A235L, V234S/A235R, V234S/A235T, V234S/A235V, V234T/A235I, V234T/A235K, V234T/A235Q, V234T/A235R, V234T/A235S, V234T/A235T, V234T/A235V.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A235S, V234A/A235T, V234D/A235H, V234D/A235K, V234D/A235Q, V234D/A235S, V234D/A235T, V234E/A235H, V234E/A235I, V234E/A235V, V234G/A235H, V234G/A235Q, V234G/A235S, V234H/A235I, V234H/A235S, V234K/A235Q, V234K/A235S, V234K/A235T, V234K/A235V, V234Q/A235A, V234Q/A235D, V234Q/A235H, V234Q/A235Q, V234Q/A235R, V234Q/A235S, V234Q/A235T, V234Q/A235V, V234R/A235D, V234R/A235E, V234R/A235I, V234R/A235L, V234R/A235Q, V234R/A235T, V234S/A235D, V234S/A235E, V234S/A235G, V234S/A235H, V234S/A235I, V234S/A235L, V234S/A235R, V234S/A235T, V234S/A235V, V234T/A235I, V234T/A235K, V234T/A235Q, V234T/A235R, V234T/A235S, V234T/A235T, V234T/A235V.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234A/A235S, V234A/A235T, V234D/A235H, V234D/A235K, V234D/A235Q, V234D/A235S, V234D/A235T, V234E/A235D, V234E/A235H, V234E/A235I, V234E/A235V, V234G/A235Q, V234G/A235S, V234H/A235I, V234H/A235S, V234K/A235Q, V234K/A235R, V234K/A235S, V234K/A235T, V234K/A235V, V234Q/A235Q, V234Q/A235R, V234Q/A235S, V234Q/A235T, V234R/A235D, V234R/A235E, V234R/A235H, V234R/A235I, V234R/A235K, V234R/A235L, V234R/A235Q, V234R/A235R, V234R/A235T, V234S/A235D, V234S/A235E, V234S/A235G, V234S/A235H, V234S/A235I, V234S/A235L, V234S/A235R, V234S/A235T, V234S/A235V, V234T/A235I, V234T/A235K, V234T/A235Q, V234T/A235R, V234T/A235S, V234T/A235T.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG2 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: V234D/A235K, V234D/A235Q, V234D/A235S, V234D/A235T, V234E/A235I, V234K/A235Q, V234K/A235R, V234K/A235S, V234K/A235T, V234R/A235D, V234R/A235E, V234R/A235I, V234R/A235K, V234R/A235L, V234R/A235Q, V234R/A235R, V234R/A235T, V234S/A235I, V234S/A235L, V234S/A235R, V234S/A235T.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG4 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: F234A/L235A/G236R, F234A/L235S/G236R, F234A/L235T/G236R, F234D/L235H/G236R, F234D/L235K/G236R, F234D/L235Q/G236R, F234D/L235S/G236R, F234D/L235T/G236R, F234E/L235D/G236R, F234E/L235H/G236R, F234E/L235I/G236R, F234E/L235V/G236R, F234G/L235H/G236R, F234G/L235Q/G236R, F234G/L235S/G236R, F234H/L235I/G236R, F234H/L235S/G236R, F234K/L235Q/G236R, F234K/L235R/G236R, F234K/L235S/G236R, F234K/L235T/G236R, F234K/L235V/G236R, F234Q/L235A/G236R, F234Q/L235D/G236R, F234Q/L235H/G236R, F234Q/L235Q/G236R, F234Q/L235R/G236R, F234Q/L235S/G236R, F234Q/L235T/G236R, F234Q/L235V/G236R, F234R/L235D/G236R, F234R/L235E/G236R, F234R/L235H/G236R, F234R/L235I/G236R, F234R/L235K/G236R, F234R/G236R, F234R/L235Q/G236R, F234R/L235R/G236R, F234R/L235T/G236R, F234S/L235D/G236R, F234S/L235E/G236R, F234S/L235G/G236R, F234S/L235H/G236R, F234S/L235I/G236R, F234S/G236R, F234S/L235R/G236R, F234S/L235T/G236R, F234S/L235V/G236R, F234T/L235A/G236R, F234T/L235I/G236R, F234T/L235K/G236R, F234T/L235Q/G236R, F234T/L235R/G236R, F234T/L235S/G236R, F234T/L235T/G236R, F234T/L235V/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG4 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: F234A/L235A/G236R, F234A/L235S/G236R, F234A/L235T/G236R, F234D/L235H/G236R, F234D/L235K/G236R, F234D/L235Q/G236R, F234D/L235S/G236R, F234D/L235T/G236R, F234E/L235D/G236R, F234E/L235H/G236R, F234E/L235I/G236R, F234E/L235V/G236R, F234G/L235H/G236R, F234G/L235Q/G236R, F234G/L235S/G236R, F234H/L235I/G236R, F234H/L235S/G236R, F234K/L235Q/G236R, F234K/L235R/G236R, F234K/L235S/G236R, F234K/L235T/G236R, F234K/L235V/G236R, F234Q/L235A/G236R, F234Q/L235D/G236R, F234Q/L235H/G236R, F234Q/L235Q/G236R, F234Q/L235R/G236R, F234Q/L235S/G236R, F234Q/L235T/G236R, F234Q/L235V/G236R, F234R/L235D/G236R, F234R/L235E/G236R, F234R/L235H/G236R, F234R/L235I/G236R, F234R/L235K/G236R, F234R/G236R, F234R/L235Q/G236R, F234R/L235R/G236R, F234R/L235T/G236R, F234S/L235D/G236R, F234S/L235E/G236R, F234S/L235G/G236R, F234S/L235H/G236R, F234S/L235I/G236R, F234S/G236R, F234S/L235R/G236R, F234S/L235T/G236R, F234S/L235V/G236R, F234T/L235A/G236R, F234T/L235I/G236R, F234T/L235K/G236R, F234T/L235Q/G236R, F234T/L235R/G236R, F234T/L235S/G236R, F234T/L235T/G236R, F234T/L235V/G236R, L235T/G236R.
일부 구현예에서, 다음으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는 인간 IgG4 변이체 Fc 영역을 포함하는 단백질을 제공한다: F234A/L235A/G236R, F234A/L235S/G236R, F234A/L235T/G236R, F234D/L235H/G236R, F234D/L235K/G236R, F234D/L235Q/G236R, F234D/L235S/G236R, F234D/L235T/G236R, F234E/L235D/G236R, F234E/L235H/G236R, F234E/L235I/G236R, F234E/L235V/G236R, F234G/L235Q/G236R, F234G/L235S/G236R, F234Q/L235A/G236R, F234Q/L235D/G236R, F234Q/L235Q/G236R, F234Q/L235S/G236R, F234Q/L235T/G236R, F234Q/L235V/G236R, F234R/L235D/G236R, F234R/L235E/G236R, F234S/L235D/G236R, F234S/L235E/G236R, F234S/L235G/G236R, F234S/L235I/G236R, F234S/G236R, F234S/L235T/G236R, F234S/L235V/G236R, F234T/L235A/G236R, F234T/L235I/G236R, F234T/L235Q/G236R, F234T/L235S/G236R, F234T/L235T/G236R, F234T/L235V/G236R, L235T/G236R.
일 측면에서, 본 발명의 항체는, (모든 위치는 Kabat의 EU 인덱스에 따름) (i) 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A 및 L235A를 가진 인간 IgG1 서브클래스의 호모다이머 Fc-영역, 또는 (ii) 선택적으로 돌연변이 P329G, S228P 및 L235E를 가진 인간 IgG4 서브클래스의 호모다이머 Fc-영역, 또는 (iii) 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A, L235A, I253A, H310A 및 H435A, 또는 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A, L235A, H310A, H433A 및 Y436A를 가진 인간 IgG1 서브클래스의 호모다이머 Fc-영역, 또는 (iv) 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드가 돌연변이 T366W를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드가 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 Y349C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함하는, 헤테로다이머 Fc-영역, 또는 (v) Fc-영역 폴리펩타이드 둘다 돌연변이 P329G, L234A 및 L235A를 포함하고 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 Y349C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함하는, 인간 IgG1 서브클래스의 헤테로다이머 Fc-영역을 포함한다.
일 측면에서, Fc 도메인은 IgG4 Fc 도메인이다. 보다 구체적인 구현예에서, Fc 도메인은 S228 위치에 아미노산 치환 (Kabat 번호 지정), 특히 아미노산 치환 S228P를 포함하는 IgG4 Fc 도메인이다. 더욱 구체적인 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 치환 S228P 및 L235E를 포함하는 IgG4 Fc 도메인이다. 더욱 구체적인 구현예에서, Fc 도메인은 아미노산 치환 L235E 및 S228P 및 P329G를 포함하는 IgG4 Fc 도메인이다. 이러한 아미노산 치환은 IgG4 항체의 생체내 Fab 아암 교환을 낮춘다 (Stubenrauch et al., Drug Metabolism and Disposition 38, 84-91 (2010) 참조). 따라서, 일 측면에서, (모든 위치는 Kabat의 EU 인덱스에 따름) Fc-영역 폴리펩타이드 둘다 돌연변이 S228P 및 L235E 또는 P329G, S228P 및 L235E를 포함하고 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드가 돌연변이 T366W를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 Y349C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고 다른 Fc-영역 폴리펩타이드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함하는, 인간 IgG4 서브클래스의 헤테로다이머 Fc-영역을 포함하는, 항체를 제공한다.
반감기가 연장되고 모계 IgG를 태아로 전달하는 역할을 하는 신생아 Fc 수용체 (FcRn)에 대한 결합성이 개선된 항체가 (Guyer, R. L. et al., J. Immunol. 117 (1976) 587-593, 및 Kim, J. K. et al., J. Immunol. 24 (1994) 2429-2434) US 2005/0014934에 언급되어 있다. 이들 항체는 Fc 영역이 FcRn에 결합하는 결합성을 개선하는 하나 이상의 치환을 가진 Fc 영역을 포함한다. 이러한 Fc 변이체는 Fc 영역 잔기들 중 하나 이상에서 치환을 가진 것을 포함한다: 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 또는 434, 예를 들어, Fc 영역 잔기 434의 치환 (미국 특허 7,371,826). 또한, Fc 영역 변이체에 대한 다른 예들을 다룬 Duncan, A. R. and Winter, G., Nature 322 (1988) 738-740; 미국 특허 5,648,260; 5,624,821; 및 WO 94/29351을 참조한다.
Fc 수용체에 대한 결합은 ELISA 또는 표면 플라스몬 공명 (SPR)에 의해 BIAcore 장치 (GE Healthcare)와 같은 표준 장치를 이용해 쉽게 확인할 수 있으며, Fc 수용체 자체는 재조합 발현에 의해 수득할 수 있다. 적절한 이러한 결합 분석은 본원에 기술되어 있다. 대안적으로, Fc 도메인 또는 Fc 도메인을 포함하는 항체 활성화 세포의 Fc 수용체에 대한 결합 친화성은 FcγIIIa 수용체를 발현하는 인간 NK 세포 등의 특정 Fc 수용체를 발현하는 것으로 알려진 세포주를 이용해 평가할 수 있다. Fc 도메인, 또는 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 항체의 작동자 기능은 당해 기술 분야에 공지된 방법에 의해 측정할 수 있다. ADCC를 측정하기 위한 적절한 분석법은 본원에 기술되어 있다. 대상 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위한 시험관내 분석의 다른 예들은 미국 특허 5,500,362; Hellstrom et al. Proc Natl Acad Sci USA 83, 7059-7063 (1986) 및 Hellstrom et al., Proc Natl Acad Sci USA 82, 1499-1502 (1985); 미국 특허 5,821,337; Bruggemann et al., J Exp Med 166, 1351-1361 (1987)에 기술되어 있다. 대안적으로, 비-방사성 분석 방법도 이용할 수 있다 (예를 들어, 유세포 측정을 위한 ACTI™ 비-방사성 세포독성 분석 (CellTechnology, Inc. Mountain View, Calif.); 및 CytoTox 96® 비-방사성 세포독성 분석 (Promega, Madison, Wis.)). 이러한 분석에 이용가능한 작동자 세포로는 말초혈 단핵 세포 (PBMC) 및 자연 살상 (NK) 세포 등이 있다. 대안적으로, 조작된 Jurkat 안정한 세포주를 작동자 세포 소스로서 이용하는 리포터-기반의 분석을 채택해 ADCC, CDC 및 ADCP (Promega, Madison, Wis.)를 측정할 수 있다. 대안적으로 또는 아울러, 대상 분자의 ADCC 활성은 생체내에서, 예를 들어 Clynes et al., Proc Natl Acad Sci USA 95, 652-656 (1998)에 기술된 바와 같이 동물 모델에서 평가할 수 있다.
항-CD36 항체를 코딩하는 뉴클레오티드
특정 측면에서, 본 발명은 CD36 (예를 들어, 인간 CD36) 항원에 면역 특이적으로 결합하는 본원에 기술된 항체 또는 이의 도메인 (예를 들어, 가변성 경쇄 영역 및/또는 가변성 중쇄 영역)을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, 및 벡터, 예를 들어 숙주 세포 (예를 들어, E. coli 및 포유류 세포)에서 재조합 발현하기 위한 이러한 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터를 제공한다.
구체적인 측면에서, 본 발명은 CD36 폴리펩타이드 (예를 들어, 인간 CD36)에 면역 특이적으로 결합하고 본원에 기술된 아미노산 서열을 포함하는 항체뿐 아니라 CD36 폴리펩타이드에의 결합에 대해 상기한 항체와 (예를 들어, 용량-의존적인 방식으로) 경쟁하거나 또는 상기한 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.
특정 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체의 경쇄 또는 중쇄를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 폴리뉴클레오티드는 본원에 기술된 항체의 VH 또는 CDR을 포함하는 중쇄를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 본원에 기술된 항체의 VL 또는 CDR을 포함하는 경쇄를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체들 중 임의 하나의 VH 쇄 CDR 3종을 포함하는, 예를 들어, VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3을 함유한 항-CD36 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 구체적인 구현예들에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체들 중 임의 하나의 VL 쇄 CDR 3종을 포함하는, 예를 들어, VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3을 함유한 항-CD36 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 구체적인 구현예들에서, 본원에 기술된 항체들 중 임의 하나의 VH 쇄 CDR 3종을 포함하는, 예를 들어, VH CDR1, VH CDR2 및 VH CDR3을 함유하고, 본원에 기술된 항체들 중 임의 하나의 VL 쇄 CDR 3종, 예를 들어, VL CDR1, VL CDR2 및 VL CDR3을 함유한, 항-CD36 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.
특정 구현예에서, 본 발명은 VH 도메인을 포함하고; 예를 들어, FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4를 함유하고; 본원에 기술된 아미노산 서열을 포함하는, 항-CD36 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 구체적인 구현예들에서, 본 발명은 VL 도메인을 포함하고; 예를 들어, FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4를 함유하고; 본원에 기술된 아미노산 서열을 포함하는, 항-CD36 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.
또한, 본 발명은, 예를 들어, 코돈/RNA 최적화, 이종의 신호 서열의 대체 및 mRNA 불안정성 요소의 제거에 의해 최적화된, 본원에 기술된 항-CD36 항체 또는 이의 도메인을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 코돈 변화 (예를 들어, 유전자 코드의 겹침 (degeneracy)으로 인해 동일한 아미노산을 코딩하는 코돈 변화)를 도입하거나 및/또는 mRNA 내 저해성 영역을 제거함으로써 재조합 발현을 위해 항-CD36 항체 또는 이의 도메인 (예를 들어, 중쇄, 경쇄, VH 도메인 또는 VL 도메인)을 코딩하는 최적화된 핵산의 구축 방법은, 예를 들어, 미국 특허 5,965,726; 6,174,666; 6,291,664; 6,414,132; 및 6,794,498에 기술된 최적화 방법을 적용함으로써 수행할 수 있다. 이들 특허들의 각각의 내용은 그 전체가 원용에 의해 본원에 통합된다.
일부 구현예에서, 본 발명은 본원에 기술된 임의의 항체 또는 항체 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 뉴클레오티드 서열의 예들을 아래 표 4에 제시한다.
표 4 - 뉴클레오티드 서열
서열번호 명칭 서열
207 ONA-0 중쇄 CAAGTGCAGCTGAAGCAGTCCGGAGCTGATCTGGTGAGACCCGGAGCCAGCGTGAAGCTGAGCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTCACCGACTACTACATCAACTGGGTGAAGCAGAGGCCCGGCCAAGGACTGGAGTGGATCGCTAGAATCTACCCCGGCTCCGGCAATACATACTACAACGAGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGACCGCCGAGAAGAGCAGCAGCACCGCCTACATGCAGCTGAGCTCTCTGACCTCCGAGGACAGCGCCGTGTACTTTTGCGCCAGAGGCATCGGAGGCGGATTCGGCATGGATTACTGGGGCCAAGGCACCTCCGTGACCGTCTCGAGCGAATCGGCCAGAAACCCCACTATCTACCCTCTGACCCTGCCTCCTGTCCTGTGTTCCGACCCCGTGATCATCGGATGCCTGATCCACGACTACTTCCCTTTCGGCACCATGAACGTGACCTGGGGGAAGTCGGGAAAGGACATTACTACCGTGAACTTCCCACCGGCCCTGGCGTCGGGGGGTCGCTACACCATGTCCAGCCAGCTTACTCTGCCCGCTGTGGAGTGCCCCGAAGGAGAGTCAGTGAAGTGCTCCGTGCAACATGACTCCAACCCGGTCCAGGAATTGGACGTCAATTGCTCCCCGACTCCGCCTCCGCCTATCACGATCCCAAGCTGCCAGCCCTCCCTGAGCCTCCAGCGGCCAGCCCTGGAGGATCTTCTGCTGGGCTCCGACGCCTCCATTACATGCACTCTGAACGGCCTGAGAAACCCGGAAGGGGCGGCCTTTACTTGGGAGCCCTCCACCGGGAAGGATGCGGTCCAGAAGAAGGCAGCCCAAAATTCCTGCGGATGCTACTCAGTGTCTAGCGTGCTGCCTGGTTGTGCCGAACGGTGGAACTCCGGAGCGTCATTCAAGTGTACCGTGACCCACCCTGAGTCCGGAACTCTGACCGGCACCATCGCCAAGGTCACCGTGAACACCTTTCCGCCACAAGTGCACCTCCTGCCGCCGCCGTCGGAGGAACTCGCTCTGAACGAGTTGCTCTCGCTGACTTGTCTCGTGCGCGCCTTCAACCCTAAGGAGGTGCTCGTGCGCTGGCTGCATGGCAACGAAGAACTGTCCCCCGAATCGTACCTGGTGTTCGAACCGCTGAAAGAGCCCGGAGAGGGTGCAACCACCTACCTTGTGACGAGCGTGCTCCGGGTGTCCGCCGAAACCTGGAAGCAGGGCGACCAGTACAGCTGCATGGTCGGCCACGAGGCCCTCCCCATGAACTTCACTCAGAAAACCATTGATAGGTTGTCCGGAAAGCCCACCAACGTGTCAGTGTCCGTGATTATGAGCGAAGGAGATGGAATCTGCTAT
208 ONA-0-v1 경쇄 TCCATCGTGATGACCCAGACCCCCAAGTTTCTGCTGGTGTCCGCCGGAGACAGAATCACCATCACATGCAAGGCCAGCCAGAGCGTGAGCGATGACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAGAGCCCTAAGCTGCTGATCTACTACGCCAGCAATAGATACACCGGAGTGCCCGATAGATTCACCGGCAGCGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACAATCTCCACCGTGCAAGCCGAGGATCTGGCCGTGTACTTCTGTCAGCAAGACTACTCCAGCCCTCTGACCTTCGGAGCCGGCACCAAGCTCGAGATCAAGCGCGCAGATGCTGCTCCTACCGTGAGCATCTTCCCGCCGTCCAGCGAACAACTCACTAGCGGAGGCGCGTCAGTGGTCTGCTTCCTTAACAATTTCTACCCTAAGGACATCAACGTCAAGTGGAAGATTGACGGATCGGAACGCCAGAACGGAGTGCTGAACTCATGGACTGATCAGGATTCCAAAGACTCGACTTACTCCATGTCCAGCACCCTGACCCTGACCAAAGACGAGTACGAAAGGCACAACTCGTACACGTGCGAAGCCACCCACAAGACTTCCACCTCGCCCATCGTGAAGTCCTTCAATCGCAATGAGTGC
209 ONA-0-v1 VH CAAGTGCAGCTGAAGCAGTCCGGAGCTGATCTGGTGAGACCCGGAGCCAGCGTGAAGCTGAGCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTCACCGACTACTACATCAACTGGGTGAAGCAGAGGCCCGGCCAAGGACTGGAGTGGATCGCTAGAATCTACCCCGGCTCCGGCAATACATACTACAACGAGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGACCGCCGAGAAGAGCAGCAGCACCGCCTACATGCAGCTGAGCTCTCTGACCTCCGAGGACAGCGCCGTGTACTTTTGCGCCAGAGGCATCGGAGGCGGATTCGGCATGGATTACTGGGGCCAAGGCACCTCCGTGACCGTCTCGAGC
210 ONA-0-v1 VL TCCATCGTGATGACCCAGACCCCCAAGTTTCTGCTGGTGTCCGCCGGAGACAGAATCACCATCACATGCAAGGCCAGCCAGAGCGTGAGCGATGACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAGAGCCCTAAGCTGCTGATCTACTACGCCAGCAATAGATACACCGGAGTGCCCGATAGATTCACCGGCAGCGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACAATCTCCACCGTGCAAGCCGAGGATCTGGCCGTGTACTTCTGTCAGCAAGACTACTCCAGCCCTCTGACCTTCGGAGCCGGCACCAAGCTCGAGATCAAG
211 1G04 중쇄 CAAGTGCAGCTGAAGCAGTCCGGAGCTGATCTGGTGAGACCCGGAGCCAGCGTGAAGCTGAGCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTCACCGACTACTACATCAACTGGGTGAAGCAGAGGCCCGGCCAAGGACTGGAGTGGATCGCTAGAATCTACCCCGGCTCCGGCAATACATACTACAACGAGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGACCGCCGAGAAGAGCAGCAGCACCGCCTACATGCAGCTGAGCTCTCTGACCTCCGAGGACAGCGCCGTGTACTTTTGCGCCAGAGGCATCGGAGGCGGATTCGGCATGGATTACTGGGGCCAAGGCACCTCCGTGACCGTCTCGAGCGCCAGCACCAAAGGTCCATCCGTGTTTCCGCTCGCCCCGTCCTCAAAGTCGACCTCCGGAGGCACTGCCGCCCTGGGCTGCCTTGTCAAGGACTATTTCCCCGAACCTGTCACGGTGTCCTGGAACAGCGGCGCTCTGACTTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCCGTCCTGCAATCCAGCGGCCTGTACTCACTGTCATCCGTTGTGACTGTCCCGTCGTCCAGCCTGGGAACCCAAACCTACATTTGCAACGTGAATCACAAACCATCGAATACCAAGGTCGATAAGAAAGTCGAGCCGAAGTCATGCGACAAGACTCACACCTGTCCGCCTTGCCCGGCGCCAGAAGCGGCCGGCGGCCCTTCGGTGTTTTTGTTTCCGCCGAAGCCGAAGGACACTCTGATGATCTCACGCACTCCAGAGGTGACTTGCGTGGTGGTCGATGTTTCGCACGAGGACCCGGAAGTGAAATTCAACTGGTATGTCGACGGGGTGGAAGTGCATAATGCCAAGACGAAGCCGAGGGAGGAACAGTACAACTCCACCTACAGAGTGGTTTCAGTCCTTACCGTCCTCCATCAAGATTGGCTGAACGGAAAGGAGTACAAATGTAAGGTGTCGAACAAAGCGTTGCCGGCCCCTATCGAAAAGACTATCAGCAAGGCCAAAGGACAGCCGCGGGAGCCGCAAGTGTACACCCTCCCGCCTTCGCGGGACGAGCTGACCAAGAATCAGGTGTCCCTTACTTGCCTGGTGAAGGGATTCTACCCCTCGGATATCGCAGTCGAATGGGAATCGAATGGACAGCCAGAAAACAACTACAAGACCACTCCCCCGGTGCTCGACTCCGACGGTTCCTTCTTCCTGTACTCGAAGCTGACCGTGGACAAATCACGCTGGCAGCAGGGAAACGTGTTTAGCTGCAGCGTGATGCATGAGGCGCTGCATAATCACTACACCCAGAAGTCACTCTCGCTCAGCCCAGGGAAG
212 1G04 경쇄 TCCATCGTGATGACCCAGACCCCCAAGTTTCTGCTGGTGTCCGCCGGAGACAGAATCACCATCACATGCAAGGCCAGCCAGAGCGTGAGCGATGACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAGAGCCCTAAGCTGCTGATCTACTACGCCAGCAATAGATACACCGGAGTGCCCGATAGATTCACCGGCAGCGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACAATCTCCACCGTGCAAGCCGAGGATCTGGCCGTGTACTTCTGTCAGCAAGACTACTCCAGCCCTCTGACCTTCGGAGCCGGCACCAAGCTCGAGATCAAGAGAACTGTGGCCGCGCCGTCAGTGTTTATCTTCCCTCCATCGGATGAACAGCTTAAGTCCGGCACGGCGTCTGTGGTCTGCCTGCTCAATAACTTTTACCCTAGGGAAGCTAAAGTCCAATGGAAAGTGGATAACGCCCTGCAGTCAGGAAACAGCCAGGAATCGGTTACCGAACAGGACAGCAAGGACAGCACTTACTCCTTGTCGTCGACTCTTACTCTGAGCAAGGCCGATTACGAGAAGCACAAGGTCTACGCCTGCGAGGTCACCCATCAGGGACTCTCGTCCCCGGTGACCAAATCCTTCAATAGAGGCGAATGC
226 6G04 VH CAAGTGCAGCTGCAGCAGAGCGGCGCTGAACTGGTCATGCCCGGCGCTAGCGTGAAGATGAGCTGCAAGGCCAGCGGCTACACTTTCACTGACTACTGGATGCACTGGGTGAAGCAGAGGCCCGGCCAAGGACTGGAGTGGATCGGCAGCATCGACACTTCCGACAGCTACACAACTTACTCCCAGAAATTCAAGGGCAAGGCCACACTGACAGTGGACGAGAGCAGCAGCACAGCCTACATGGAGCTGGCTAGGCTGACTAGCGAGGATAGCGCCATCTACTACTGTGTGAGGGGCGAGGATTACGAGGGAACATGGTTCGCCTACTGGGGCCAAGGCACACTGGTGACTGTGAGCGCC
227 6G04 VL GAGACTACAGTGACTCAGAGCCCAGCCTCTCTGAGCGTCGCTACTGGCGAGAAGGTCACAATTAGGTGCATCACTAGCACAGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCCGAGGGCAACACACTGAGGCCCGGCGTGCCTTCTAGGTTCAGCAGCAGCGGCTACGGCACAGACTTCGTCTTCACTATCGAGAACACTCTGAGCGAGGACGTGGCCGATTACTACTGTCTGCAGAGCGACAACATGCCTCTGACTTTCGGCGCCGGCACAAAGCTGGAGCTGAAA
228 7G04 VH CAAGTGCAGATGAAGGAAAGCGGCGCTGAGCTGGTGAGACCCGGCGCTAGCGTGAAGCTGAGCTGTAAGGCTCTGGGCTACACATTCACAGACTACGAGATCCAGTGGGTGAAGCAGACACCAGTGCACGGACTGGAATGGATCGGAGGCATCCACCCCGGCAGCTCCGGCATCGTGTACAACCAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCACTCTGACTGCTGACAAGTCCAGCAGCACTGCCTACATGGAGCTGAGCTCTCTGACTAGCGAGGATAGCGCCGTGTACTACTGTACAAGGGGCGGCGGCTACGATGGAGCTTGGTTCGCCTATTGGGGACAAGGCTCTCTGGTCACTGTGAGCGCC
229 7G04 VL GAGACAACTGTGACTCAGAGCCCAGCCTCTCTGTCCATGGCTATCGGCGAGAAGGTGACAATTAGGTGCATCACTAGCACAGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAAAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCAGCGAGGGCAATACACTGAGGCCCGGCGTGCCTTCTAGGTTCAGCAGCAGCGGCTACGGCACAGACTTCGTGTTCACTATCGAGAACATGCTGAGCGAGGACGTGGCTGATTACTACTGTCTGCAGAGCGACAATCTGCCTTTCACATTCGGCAGCGGCACAAAGCTGGAGATCAAG
230 11G04 VH GAGGTGCAGCTCCAGCAGAGCGGCGCCGAACTGGTGAGACCCGGCGCCAGCGTGACACTGAGCTGTAAGGCCAGCGGCTATAGGTTCTCCGATTACGAGATGCAGTGGGTGAAGCAGACTCCAGTCCACGGACTGGAATGGATCGGCGGCATCGATCCAGAGACTGGCGGCATCGCCTACAACCAGAAGTTCAAGGTCAAGGCCACTCTCACTGCCGACAAGAGCTCCTCCACAGCCTTCATGGAGCTGAGGTCTCTGACAAGCGAGGATAGCGCCGTCTACTACTGCACTAGGAAGCTGGACTTCGACTACTGGGGCCAAGGCACTACACTGACTGTGAGCAGC
231 11G04 VL GAGACAACTGTGACACAGAGCCCAGCCTCTCTGAGCGTCGCTACTGGCGAGAAGGTGACTATTAGGTGCATCACAAGCACAGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCAGCGAGGGAAACACTCTGAGGCCCGGCGTGCCATCTAGGTTCAGCAGCAGCGGCTACGGCACTGACTTCGTGTTCACAATCGAGAACATGCTGAGCGAGGACGTGGCCGACTACTACTGTCTGCAGAGCGACAATCTGCCTCTGACTTTCGGCGCCGGCACAAAGCTGGAGCTGAAG
232 13G04 VH CAAGTGCAGCTGCAGCAGAGCGGCGCTGAACTGGTGAGACCCGGCGCCAGCGTCAAGCTGAGCTGCAAGGCCTCCGGCTACACTTTCACAAGCTACTGGATGAACTGGGTGAAGCAGAGACCCGGCCAAGGACTGGAGTGGATCGGCATGATCGACCCTAGCGACAACGAGACACACTACAACCAGATGTTCAAGGACAAGGCCACACTGACTGTCGACAAGAGCTCCTCCACAGCCTACATGCAGCTGAGCTCTCTGACTAGCGAGGATAGCGCCGTGTACTACTGCGCTAGGAGCGATTACGGCAACGGCTATAGCTTCTATCTGGACGTCTGGGGCGCTGGCACAACTGTGACTGTGAGCAGC
233 13G04 VL GATATCGTGCTGACACAGAGCCCAGCCTCTCTGGCTGTGTCTCTGGGACAGAGAGCCACAATCAGCTGTAGGGCCAGCGAGAGCGTGGATAGCTACGGCAACTCCTTCATGCACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTATAGGGCCAGCAATCTGGAGAGCGGCATCCCAGCTAGGTTTAGCGGCTCCGGCTCTAGGACTGACTTCACTCTGACTATCAACCCAGTGGAGGCCGACGATGTGGCCACTTACTACTGCCAGCAGAGCAACGAGGATCCTTGGACATTCGGCGGCGGCACTAAGCTGGAGATCAAG
234 14G04 VH CAAGTGCAGCTGCAGCAGAGCGGCGCCGAACTGGTGAGAAGCGGAGCTAGCGTGAGGCTGAGCTGTACAGCCTCCGGCTTCAACATCAAGGACTACTACATCCACTGGGTGAAGCAGAGGCCAGAGCAAGGACTGGAGTGGATCGGCTGGATCGATCCAGAGAATGGCGACACAGAGTACGCTCCAAGGTTCCAAGATAAGGCCACTATGACTGCCGACACTAGCAGCAACACAGCCTATCTGCAGCTGAGCTCTCTGACAAGCGAGGACACAGCTGTGTACTACTGCAATGGCTGGCTGCTGAGCGGCAATGGCATGGATTACTGGGGCCAAGGCACATCCGTGACAGTGAGCTCC
235 14G04 VL GACATCGTGATGACACAGAGCCACAAGTTCATGAGCACAAGCGTGGGCGATAGGGTGAGCATCACTTGCAAGGCTAGCCAAGATGTGGGCACAGCTGTGGCTTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGAGCCCAAAGCTGCTGATCTACTGGGCCAGCACTAGGCACACTGGCGTGCCAGATAGGTTCACTGGCAGCGGCAGCGGCACAGACTTCACTCTGACTATCAGCAACGTGCAGAGCGAGGATCTGGCCGATTACTTCTGCCAGCAGTACTCCAGCTACCCTACATTCGGCGGCGGCACAAAGCTGGAGATCAAG
236 28G04 VH GAGGTGCAGCTGCAGCAGAGCGGACCAGAGCTGGTGAAGCCCGGCGCCAGCGTCAAGATCAGCTGCAAGACTAGCGGCTACACTTTCACTGAGTACACTATCCACTGGGTGAAGCAGAGCCACGGCAAGTCTCTGGAGTGGATCGGCGGCATCATCCCTAACAATGGCGGCAGCAGCCACAAGCAGAACTTCAAGGACAAGGCCACTCTGACAGTGGATAAGAGCAGCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGTCTCTGACAAGCGAGGATTCCGCCGTCTACTACTGTGCTAGGGCCGGCGACTACGCCTTCGATTACTGGGGCCAAGGCACTACACTGACAGTCAGCAGC
237 28G04 VL GAGACAACTGTGACACAGAGCCCAGCTTCTCTGAGCATGGCCATCGGCGAGAAGGTCACAATTAGGTGCATCACTTCCACAGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCAGCGAGGGAAACACTCTGAGGCCCGGCGTGCCATCTAGGTTCAGCAGCAGCGGCTACGGCACAGATTTCGTGTTCACTATCGAGAACATGCTGAGCGAGGACGTGGCCGACTACTACTGTCTGCAGAGCGGAACTCTGCCATTCACTTTCGGCTCCGGCACTAAGCTGGAGATCAAG
249 11G06 VL AAGCTTGCCGCCACCATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCTAGATGCGAGACAACCGTGACTCAGTCCCCTGCCTCTCTGTCTGTGGCTACCGGCGAGAAAGTGACCATCCGGTGCATCACCTCCACCGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCTGAGGGCAACACACTGAGGCCTGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCTCTTCTGGCTACGGCACCGACTTCGTGTTCACCATCGAGAACATGCTGTCCGAGGACGTGGCCGACTACTACTGCCTGCAGTCTGACAACCTGCCTCTGACCTTTGGCGCTGGCACCAAGCTGGAACTGAAGAGAACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCCAAGGCCGATTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGCCTGTCTAGCCCTGTGACCAAGTCTTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
250 11G06 VH AAGCTTGCCGCCACCATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCTGAAGTTCAGTTGCAGCAGTCTGGCGCCGAACTCGTTAGACCTGGCGCTTCTGTGACCCTGTCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCGGTTCTCCGACTACGAGATGCAGTGGGTCAAGCAGACCCCTGTGCATGGCCTGGAATGGATCGGCGGCATCGATCCTGAGACAGGCGGAATCGCCTACAACCAGAAGTTCAAAGTCAAGGCTACCCTGACCGCCGACAAGTCCTCTTCCACCGCCTTCATGGAACTGCGGTCCCTGACCTCTGAGGACTCCGCCGTGTACTACTGCACCCGGAAGCTGGACTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCACACTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGACCCAGCGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGCGGAACAGCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTTCCTGAGCCTGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACATCTGGCGTGCACACCTTTCCAGCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACCGTGCCTTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTACATCTGCAATGTGAACCACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAGTCCACCAGAGGACCCTCCGTGTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGTACATCACCCGCGAGCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCACGAGGACCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTACAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTGCTCCTATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGGGAACCCCAGGTTTACACCTTGCCTCCATCTCGGGACGAGCTGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACATGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCTAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTGTGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTTCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGACAAGTCCAGATGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAATCACTATACCCAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCTGGCAAGTGATGAATTC
253 11G06 VL_v1 AAGCTTGCCGCCACCATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCTAGATGCGAGACAACCGTGACTCAGTCCCCTGCCTTCATGTCTGCTACCACCGGCGACAAAGTGACCATCTCCTGCATCACCTCCACCGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCTGAGGGCAACACACTGAGGCCTGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCTCTTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTACTGCCTGCAGTCTGACAACCTGCCTCTGACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGGACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGCCTGTCTAGCCCTGTGACCAAGTCTTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
254 11G06 VL_v2 AAGCTTGCCGCCACCATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCTAGATGCGAGACAACCGTGACTCAGTCCCCTGCCTTCATGTCTGCTACCCCTGGCGACAAAGTGACCATCTCCTGCATCACCTCCACCGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCTGAGGGCAACACACTGAGGCCTGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCTCTTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTACTGCCTGCAGTCTGACAACCTGCCTCTGACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGGACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGCCTGTCTAGCCCTGTGACCAAGTCTTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
255 11G06 VL_v3 AAGCTTGCCGCCACCATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCTAGATGCGAGACAACCGTGACTCAGTCCCCTGCCTTCATGTCTGCTACCACCGGCGACAAAGTGACCATCTCCTGCATCACCTCCACCGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCTGAGGGCTCTACACTGAGGCCTGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCTCTTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTACTGCCTGCAGTCTGACAACCTGCCTCTGACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGGACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGCCTGTCTAGCCCTGTGACCAAGTCTTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
256 11G06 VL_v4 AAGCTTGCCGCCACCATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCTAGATGCGAGACAACCGTGACTCAGTCCCCTGCCTTCATGTCTGCTACCCCTGGCGACAAAGTGACCATCTCCTGCATCACCTCCACCGACATCGACGACGACATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCGAGCCTCCTAAGCTGCTGATCTCTGAGGGCTCTACACTGAGGCCTGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCTCTTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCTTCACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTACTGCCTGCAGTCTGACAACCTGCCTCTGACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGGACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGCCTGTCTAGCCCTGTGACCAAGTCTTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
257 11G06 VH_v1 AAGCTTGCCGCCACCATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCTGAAGTTCAGCTGGTTCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCTCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCGGTTCTCCGACTACGAGATGCAGTGGGTCCGACAGGCTCCTGGACAAGGCTTGGAATGGATGGGCGGCATCGATCCTGAGACAGGCGGAATCGCTTACGCCCAGAAATTCCAGGGCAGAGTGACCCTGACCGCCGACAAGTCTACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCACCCGGAAGCTGGACTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACAGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGACCCAGCGTGTTCCCTCTGGCTCCTAGCTCTAAGTCCACCTCTGGCGGAACAGCTGCTCTGGGCTGTCTGGTCAAGGACTACTTCCCTGAGCCTGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACATCTGGCGTGCACACCTTTCCAGCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACCGTGCCTTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTACATCTGCAATGTGAACCACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAGTCCACCAGAGGACCCTCCGTGTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGTACATCACCCGCGAGCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCACGAGGACCCAGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTACAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTGCTCCTATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGGGAACCCCAGGTTTACACCTTGCCTCCATCTCGGGACGAGCTGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCTAATGGCCAGCCAGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTGTGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTTCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGACAAGTCCAGATGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAATCACTACACACAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCTGGCAAGTGATGAATTC
258 11G06 VH_v2 AAGCTTGCCGCCACCATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCTCAGGTTCAGTTGGTTCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCCTCTGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACCGGTTCTCCGACTACGAGATGCAGTGGGTCCGACAGGCTCCTGGACAAGGCTTGGAATGGATGGGCGGCATCGATCCTGAGACAGGCGGAATCGCTTACGCCCAGAAATTCCAGGGCAGAGTGACCCTGACCGCCGACAAGTCTACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCACCCGGAAGCTGGACTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACAGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGACCCAGCGTGTTCCCTCTGGCTCCTAGCTCTAAGTCCACCTCTGGCGGAACAGCTGCTCTGGGCTGTCTGGTCAAGGACTACTTCCCTGAGCCTGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACATCTGGCGTGCACACCTTTCCAGCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACCGTGCCTTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTACATCTGCAATGTGAACCACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAGTCCACCAGAGGACCCTCCGTGTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGTACATCACCCGCGAGCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCACGAGGACCCAGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTACAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTGCTCCTATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGGGAACCCCAGGTTTACACCTTGCCTCCATCTCGGGACGAGCTGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCTAATGGCCAGCCAGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTGTGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTTCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGACAAGTCCAGATGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAATCACTACACACAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCTGGCAAGTGATGAATTC
본원에 기술된 항체 또는 이의 도메인을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 적절한 소스 (예를 들어, 하이브리도마)로부터 유래한 핵산으로부터 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법 (예를 들어, PCR 및 기타 분자 클로닝 방법)을 이용해 구축할 수 있다. 예를 들어, 공지된 서열의 3' 말단 및 5' 말단에 혼성가능한 합성 프라이머를 이용한 PCR 증폭을 대상 항체를 생산하는 하이브리도마 세포로부터 수득한 게놈 DNA를 이용해 수행할 수 있다. 이러한 PCR 증폭 방법을 이용해, 항체의 경쇄 및/또는 중쇄를 코딩하는 서열을 포함하는 핵산을 수득할 수 있다. 이러한 PCR 증폭 방법을 이용해, 항체의 가변성 경쇄 영역 및/또는 가변성 중쇄 영역을 코딩하는 서열을 포함하는 핵산을 수득할 수 있다. 증폭된 핵산은 숙주 세포에서 발현시키기 위해, 그리고 추가로 클로닝하기 위해, 예를 들어 키메라 및 인간화된 항체를 구축하기 위해, 벡터에 클로닝할 수 있다.
본원에 제공된 폴리뉴클레오티드는 예를 들어, RNA 형태 또는 DNA 형태일 수 있다. DNA는 cDNA, 게놈 DNA 및 합성 DNA 등일 수 있으며, DNA는 이중 가닥 또는 단일 가닥일 수 있다. 만일 단일 가닥일 경우, DNA는 코딩 가닥 또는 비-코딩 (안티-센스) 가닥일 수 있다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 하나 이상의 내인성 인트론이 결핍된 cDNA 또는 DNA이다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 비-자연 생성 폴리뉴클레오티드이다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 재조합에 의해 생산된다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 단리된다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 실질적으로 순수하다. 특정 구현예에서, 폴리뉴클레오티드는 천연 성분들로부터 정제된다.
항체 생산
CD36 (예를 들어, 인간 CD36)에 면역 특이적으로 결합하는 항체는 전장 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 합성하기 위한 당해 기술 분야에 공지된 임의 방법에 의해, 예를 들어, 화학 합성 또는 재조합 발현 기법에 의해 제조할 수 있다. 본원에 기술된 방법은, 달리 언급되지 않은 한, 분자 생물학, 미생물학, 유전자 분석, 재조합 DNA, 유기 화학, 생화학, PCR, 올리고뉴클레오티드 합성 및 변형, 핵산 혼성화 및 당해 기술 분야의 능력내 관한 분야에서 통례적인 기술을 채택한다. 이러한 기술들은 예를 들어 본원에 인용된 참조문헌에 기술되어 있으며, 문헌들에 충분히 설명되어 있다. 예를 들어, Sambrook J et al., (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel FM et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987, 매년 업데이트); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987, 매년 업데이트) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren B et al., (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press를 참조한다.
특정 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 세포 또는 숙주 세포를 배양하는 것을 포함하는, CD36 (예를 들어, 인간 CD36)에 면역 특이적으로 결합하는 항체의 제조 방법을 제공한다. 특정 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 세포 또는 숙주 세포 (예를 들어, 본원에 기술된 항체를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 세포 또는 숙주 세포)를 이용해 항체를 발현 (예, 재조합 발현)하는 것을 포함하는, CD36 (예를 들어, 인간 CD36)에 면역 특이적으로 결합하는 항체의 제조 방법을 제공한다. 특정 구현예에서, 세포는 단리된 세포이다. 특정한 구현예에서, 외인성 폴리뉴클레오티드는 세포에 도입된 것이다. 특정한 구현예에서, 방법은 세포 또는 숙주 세포로부터 수득한 항체를 정제하는 단계를 추가로 포함한다.
약학적 조성물
본 발명은 생리학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제 중에 원하는 순도의 본원에 기술된 항-CD36 항체를 포함하는 조성물을 제공한다 (Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA). 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용되는 투여량 및 농도에서 수여체에 무독성이다.
다양한 구현예들에서, 항-CD36 항체를 포함하는 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체와의 제형으로 제공된다 (예를 들어, Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 20th ed. (2003); Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th ed., Lippencott Williams and Wilkins (2004); Kibbe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd ed., Pharmaceutical Press (2000) 참조).
본원에 기술된 약학적 조성물은 CD36 활성을 차단하는데 유용할 수 있다. 본원에 기술된 약학적 조성물은 암과 같은 병태를 치료하는데 유용할 수 있다. 본원에 기술된 방법에 따라 치료할 수 있는 암에 대한 예로는, 비-제한적으로, 고형암 및 이의 전이를 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 예를 들어, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 예를 들어, 지방육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 구강 편평 세포암, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 예를 들어, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종으로부터 기원하는 전이 및 원발성 종양을 둘다 치료하는데 유용할 수 있다.
본원에 기술된 약학적 조성물은 일 구현예에서 의약제로서 이용하기 위한 것이다. 본원에 기술된 약학적 조성물은 일 구현예에서 진단제로서 이용하기 위한, 예를 들어 환자 (예를 들어, 인간 환자)에서 수득한 샘플에서 CD36의 존재를 검출하기 위한 것이다.
생체내 투여에 이용되는 조성물은 무균성일 수 있다. 이는 여과를 통해, 예를 들어, 멸균 여과 막을 통한 여과를 통해 쉽게 달성된다.
일부 구현예에서, 약학적 조성물은 단리된 항체를 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물에는 다른 항체가 실질적으로 결여되어 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 항-CD36 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 비-푸코실화된 항-CD36 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
글리칸 모이어티 내 푸코스 함유율이 저하된 Fc 영역을 가진 항체는, Fc 수용체, 예를 들어, FcγRIIIA에 대한 친화성 증가로 인해, 완전히 푸코실화된 항체와 비교해, 더 높은 ADCC 활성을 나타낼 수 있다 (Niwa R et al., Clinical Cancer Research 11(6):2327-36 (2005)). 일부 구현예에서, CD36 항체는 동일한 아미노산 서열을 가진 푸코실화된 CD36 항체와 비교해 시험관내 강화된 ADCC 활성을 가진다. 구체적인 구현예들에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하며, 조성물 내 항체의 적어도 50%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예들에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하며, 여기서 조성물 내 항체의 적어도 60%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 70%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 80%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 85%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 90%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 95%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 96%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 97%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 98%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하고, 조성물 내 항체의 적어도 99%가 비-푸코실화된 것이다. 구체적인 구현예들에서, 이러한 약학적 조성물은 비-푸코실화된 항-CD36 항체를 포함하며, 조성물에서 푸코스가 검출되지 않는다.
본 발명의 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 항-CD36 항체 및 제2 요법의 조합을 이용한 포유류에서 암 치료 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 암은 구강 편평 세포암, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선 암, 육종, 예를 들어, 지방육종, 흑색종, 백혈병 및 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 구현예들에서, 암은 구강 편평 세포암이다. 일부 구현예에서, 암은 난소암이다. 다른 구현예에서, 암은 흑색종이다. 추가적인 구현예에서, 암은 본원에 기술된 임의 암이다. 일부 구현예에서, 암은 전이성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 원발성 종양 및 전이성 암 둘다이다. 일부 구현예에서, 포유류는 인간이다.
일부 구현예에서, 항-CD36 항체는 전장 항체, 단쇄 항체, 또는 scFv, Fab 또는 F(ab')2 단편이다. 일 구현예에서, 항-CD36 항체는 전장 항체이다. 일 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간화 항체이다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 본원에 개시된 항체이다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 항체 JC63.1과 같은 상업적인 항-CD36 항체이다.
일부 구현예에서, 제2 요법은 면역요법이다. 일 구현예에서, 면역요법은 PD-1 저해제이다. 일 구현예에서, PD-1 저해제는 항-PD-1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙 (KEYTRUDA; MK-3475), 피딜리주맙 (CT-011) 또는 니볼루맙 (OPDIVO; BMS-936558)이다. 일 구현예에서, 면역요법은 PD-L1 저해제이다. 일 구현예에서, PD-L1 저해제는 항-PD-L1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙 (Tecentriq 또는 RG7446), 두르발루맙 (Imfinzi 또는 MEDI4736), 아젤루맙 (Bavencio) 또는 BMS-936559이다. 일 구현예에서, 면역요법은 CTLA-4 저해제이다. 일 구현예에서, CTLA-4 저해제는 항-CTLA-4 항체이다. 일 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙 또는 이의 항원 결합 단편이다.
일 구현예에서, 제2 요법은 화학치료제이다. 일 구현예에서, 화학치료제는 시스플라틴이다. 특정 구현예에서, 화학치료제는 표 5에 열거된 항암제 또는 항암제 조합을 포함한다.
표 5 - 화학치료제
아베마시클립 (Abemaciclib) 아비라테론 아세테이트 (Abiraterone Acetate) 아브락산 (Abraxane)(파클리탁셀 알부민-안정화된 나노입자 제형) ABVD
ABVE ABVE-PC AC 아칼라브루티닙 (Acalabrutinib)
AC-T 아크템라 (Actemra)(톡실리주맙 (tocilizumab)) 아드세트리스 (Adcetris)(브렌툭시맙 베도틴 (brentuximab vedotin)) ADE
아도-트라스투주맙 엠탄신 (Ado-trastuzumab Emtansine) 아드리아마이신 (adriamycin)(독소루비신 하이드로클로라이드) 아파티닙 다이말리에이트 (Afatinib Dimaleate) 아피니터 (Afinitor)(에베롤리무스 (everolimus))
아키제오 (Akynzeo)(네투피탄트 (Netupitant) 및 팔로노세트론 하이드로클로라이드 (Palonosetron Hydrochloride)) 알다라 (Aldara)(이미퀴모드 (imiquimod)) 알데스루킨 (aldesleukin) 알레센사 (Alecensa)(알렉티닙 (Alectinib))
알렉티닙 알렘투주맙 (alemtuzumab) 알림타 (Alimta)(페메트렉세드 다이소듐 (Pemetrexed Disodium)) 알리쿠파 (Aliqopa)(코판리십 하이드로클로라이드 (Copanlisib Hydrochloride))
주사용 알케란 (Alkeran)(멜팔란 하이드로클로라이드) 알케란 정제 (멜팔란) 알록시 (Aloxi)(팔로노세트론 하이드로클로라이드) 알룬브리그 (Alunbrig)(브리가티닙 (Brigatinib))
아멜루즈 (Ameluz)(아미노레불린산 (Aminolevulinic Acid)) 아미포스틴 (amifostine) 아미노레불린산 아나스트로졸 (anastrozole)
아팔루타미드 (Apalutamide) 아프레피탄 (Aprepitant) 아라네스프 (Aranesp)(다르베포에틴 알파 (Darbepoetin Alfa)) 아레디아 (Aredia)(파미드로네이트 다이소듐)
아리미덱스 (Arimidex)(아나스트로졸 (anastrozole)) 아로마신 (Aromasin)(엑세메스탄 (exemestane)) 아라논 (Arranon)(넬라라빈 (Nelarabine)) 비소 삼산화물
아르제라 (Arzerra)(오파투무맙 (Ofatumumab)) 아스파라기나제 에르위니아 크리산테미 아테졸리주맙 (Atezolizumab) 아바스틴 (avastin)(베박시주맙 (bevacizumab))
아벨루맙 (Avelumab) 악시캅타겐 실로루셀 (Axicabtagene Ciloleucel) 엑시티닙 (axitinib) 아자시티딘 (azacitidine)
아제드라 (Azedra)(로벤구안 I131 (Iobenguane I 131)) 바벤시오 (Bavencio)(아벨루맙) BEACOPP 벨레오다그 (Beleodaq)(벨리노스타트 (Belinostat))
벨리노스타트 벤다무스틴 하이드로클로라이드 (Bendamustine Hydrochloride) 벤데카 (Bendeka)(벤다무스틴 하이드로클로라이드) BEP
베스폰사 (Besponsa)(이노투주맙 오조가미신 (inotuzumab ozogamicin)) 베박시주맙 (bevacizumab) 벡사로텐 (bexarotene) 바이칼루타미드 (Bicalutamide)
BiCNU (카르무스틴 (carmustine)) 비니메티닙 (Binimetinib) 블레오마이신 (bleomycin) 블리나투모맙 (Blinatumomab)
블린시토 (Blincyto)(블리나투모맙 (Blinatumomab)) 보르테조밉 (bortezomib) 보술리프 (Bosulif)(보수티닙 (Bosutinib)) 보수티닙
브라프토비 (Braftovi)(엔코라페닙 (Encorafenib)) 브렌툭시맙 베도틴 (brentuximab vedotin) 브리가티닙 (Brigatinib) BuMel
부설판 (busulfan) 부설펙스 (Busulfex)(부설판) 카바지탁셀 (Cabazitaxel) 카보메틱스 (Cabometyx)(카보잔티닙-S-말레이트)
카보잔티닙-S-말레이트 CAF 칼퀸스 (Calquence)(아칼라브루티닙 (Acalabrutinib)) 캄패스 (Campath)(알렘투주맙)
캄프토사르 (Camptosar)(이리노테칸 하이드로클로라이드) 카페시타빈 (capecitabine) CAPOX Carac (플루오로우라실--국소)
카르보플라틴 (carboplatin) 카르보플라틴-탁솔 카르필조밉 (carfilzomib) 카르무스틴 (carmustine)
카르무스틴 임플란트 카소덱스 (Casodex)(바이칼루타미드) CEM 세미플리맙 (Cemiplimab)-rwlc
세리티닙 (Ceritinib) 세루비딘 (Cerubidine )(다우노루비신 하이드로클로라이드) 세르바릭스 (Cervarix)(재조합 HPV 2가 백신) 세투시맙 (cetuximab)
CEV 클로람부실 (chlorambucil) 클로람부실-프레드니손 CHOP
시스플라틴 클라드리빈 (cladribine) 클로파라빈 (clofarabine) 클롤러 (Clolar)(클로파라빈)
CMF 코비메티닙 (Cobimetinib) 코메트리그 (Cometriq)(카보잔티닙-S-말레이트) 코판리시닙 하이드로클로라이드 (Copanlisib Hydrochloride)
COPDAC 코피크트라 (Copiktra)(두벨리십 (Duvelisib)) COPP COPP-ABV
코스메겐 (Cosmegen)(닥티노마이신 (dactinomycin)) 코텔릭 (Cotellic)(코비메티닙 (Cobimetinib)) 크리조티닙 (Crizotinib) CVP
사이클로포스파미드 시람자 (Cyramza)(라무시루맙 (Ramucirumab)) 시타라빈 (cytarabine) 시타라빈 리포좀
Cytosar-U (시타라빈) 다브라페닙 (Dabrafenib) 다카르바진 (dacarbazine) 다코겐 (Dacogen)(데시타빈 (decitabine))
다코미티닙 (Dacomitinib) 닥티노마이신 다라투무맙 (Daratumumab) 다르베포에틴 알파 (Darbepetin Alfa)
다르잘렉스 (Darzalex)(다라투무맙) 다사티닙 (dasatinib) 다우노루비신 하이드로클로라이드 다우노루비신 하이드로클로라이드 및 시타라빈 리포좀
데시타빈 (decitabine) 데피브로티드 소듐 (Defibrotide Sodium) 데피텔리오 (Defitelio)(데피브로티드 소듐) 데가렐릭스 (Degarelix)
데니루킨 디프티톡스 (Denileukin diftitox) 데노수맙 (denosumab) DepoCyt (시타라빈 리포좀) 덱사메타손
덱스라족산 하이드로클로라이드 (Dexrazoxane Hydrochloride) 디누툭시맙 (Dinutuximab) 도세탁셀 (docetaxel) 독실 (Doxil)(독소루비신 하이드로클로라이드 리포좀)
독소루비신 하이드로클로라이드 독소루비신 하이드로클로라이드 리포좀 Dox-SL (독소루비신 하이드로클로라이드 리포좀) 두르발루맙 (Durvalumab)
두벨리십 (Duvelisib) 에푸덱스 (Efudex)(플루오로우라실--국소) 엘리가르드 (Eligard)(루프롤라이드 아세테이트) 엘리텍크 (Elitek)(라스부리카제 (rasburicase))
엘렌스 (Ellence)(에피루비신 하이드로클로라이드 (Epirubicin Hydrochloride)) 엘로투주맙 (Elotuzumab) 엘록사틴 (Eloxatin)(옥살리플라틴 (oxaliplatin)) 엘트롬보파그 올라민 (Eltrombopag Olamine)
에멘드 (Emend)(아프레피탄트 (Aprepitant)) 엠플리시티 (Empliciti)(엘로투주맙 (Elotuzumab)) 에나시데닙 메실레이트 (Enasidenib Mesylate) 엔코라페닙 (Encorafenib)
엔잘루타미드 (Enzalutamide) 에피루비신 하이드로클로라이드 EPOCH 에포에틴 (epoetin) Alfa
에포겐 (Epogen)(에포에틴 알파 (epoetin Alfa)) 에르비툭스 (erbitux)(세투시맙 (cetuximab)) 에리불린 메실레이트 (Eribulin Mesylate) 에리베쥐 (Erivedge)(비스모데깁 (Vismodegib))
에를레아다 (Erleada)(아팔루타미드 (Apalutamide)) 에를로티닙 하이드로클로라이드 (Erlotinib Hydrochloride) 에르위나제 (Erwinaze)(아스파라기나제 에르위니아 크리산테미) 에티올 (Ethyol)(아미포스틴 (amifostine))
에토포포스 (Etopophos)(에토포시드 포스페이트) 에토포시드 (etoposide) 에토포시드 포스페이트 에바세트 (Evacet)(독소루비신 하이드로클로라이드 리포좀)
에베롤리무스 (everolimus) 에비스타 (Evista)(랄록시펜 하이드로클로라이드 (Raloxifene Hydrochloride)) 에보멜라 (Evomela)(멜팔란 하이드로클로라이드) 엑세메스탄 (exemestane)
5-FU (플루오로우라실 주사제) 5-FU (플루오로우라실--국소) 파레스톤 (Fareston)(토레미펜 (toremifene)) 파리닥 (Farydak)(파노비노스타트 (Panobinostat))
파슬로덱스 (Faslodex)(풀베스트란트 (fulvestrant)) FEC 페마라 (Femara)(레트로졸 (letrozole)) 필그라스팀 (filgrastim)
피르마곤 (Firmagon)(데가렐릭스) 플루다라빈 포스페이트 (Fludarabine Phosphate) 플루오로플렉스 (Fluoroplex)(플루오로우라실--국소) 플루오로우라실 주사제
플루오로우라실--국소 플루타미드 폴피리 (FOLFIRI) 폴피리-베박시주맙 (BEVACIZUMAB)
폴피리-세투시맙 폴피리녹스 (FOLFIRINOX) 폴폭스 (FOLFOX) 폴로틴 (Folotyn)(프랄라스렉세이트 (Pralatrexate))
포스타마티닙 다이소듐 (Fostamatinib Disodium) FU-LV 풀베스트란트 (fulvestrant) 푸실레브 (Fusilev)(루코보린 칼슘 (Leucovorin Calcium))
가르다실 (gardasil)(재조합 HPV 4가 백신) 가르다실 9 (재조합 HPV 9가 백신) 가지바 (Gazyva)(오비누투주맙 (Obinutuzumab)) 게피티닙 (gefitinib)
겜시타빈 하이드로클로라이드 겜시타빈-시스플라틴 겜시타빈-옥살리플라틴 겜투주맙 오조가미신
겜자르 (겜시타빈 하이드로클로라이드) 길로트리프 (Gilotrif)(아파티닙 다이말리에이트) 글리벡 (gleevec)(이마티닙 메실레이트) 글리아데 와퍼 (Gliadel Wafer)(카르무스틴 임플란트)
글루카르피다제 (Glucarpidase) 고세렐린 아세테이트 (Goserelin Acetate) 그라니세트론 (Granisetron) 그라니세트론 하이드로클로라이드
그라닉스 (Granix)(필그라스팀 (filgrastim)) 할라벤 (Halaven)(에리불린 메실레이트) 헤만게올 (Hemangeol)(프로프라놀롤 하이드로클로라이드) 헤르셉틴 (herceptin)(트라스투주맙 (trastuzumab))
HPV 2가 백신, 재조합 HPV 9가 백신, 재조합 HPV 4가 백신, 재조합 히캄틴 (Hycamtin)(토포테칸 하이드로클로라이드)
히드레아 (Hydrea)(하이드록시우레아) 하이드록시우레아 Hyper-CVAD 이브란스 (Ibrance)(팔보시클립 (Palbociclib))
이브리투모맙 티욱세탄 (Ibritumomab Tiuxetan) 이브루티닙 (ibrutinib) ICE 이클루시그 (Iclusig)(포나티닙 하이드로클로라이드 (Ponatinib Hydrochloride))
이다루비신 하이드로클로라이드 이델랄리십 (idelalisib) 이드히파 (Idhifa)(에나시데닙 메실레이트 (Enasidenib Mesylate)) 이펙스 (Ifex)(이포스파미드 (Ifosfamide))
이포스파미드 IL-2 (알데스루킨) 이마티닙 메실레이트 임브루비카 (Imbruvica)(이브루티닙 (ibrutinib))
임핀지 (Imfinzi)(두르발루맙) 이미퀴모드 (imiquimod) 임라이직 (Imlygic)(탈리모겐 라헤르파렙벡크 (Talimogene Laherparepvec)) 인리타 (Inlyta)(엑시티닙 (axitinib))
이노투주맙 오조가미신 (inotuzumab ozogamicin) 인터페론 Alfa-2b, 재조합 인터루킨-2 (알데스루킨) 인트론 A (재조합 인터페론 Alfa-2b)
로벤구안 I131 (Iobenguane I 131) 이필리무맙 (ipilimumab) 이레사 (iressa)(게피티닙 (gefitinib)) 이리노테칸 하이드로클로라이드 (Irinotecan Hydrochloride)
이리노테칸 하이드로클로라이드 리포좀 이스토닥스 (Istodax)(로미뎁신 (Romidepsin)) 이보시데닙 (Ivosidenib) 익사베필론 (ixabepilone)
익사조밉 사이트레이트 (Ixazomib Citrate) 익셈프라 (Ixempra)(익사베필론) 자카피 (Jakafi)(룩솔리티닙 포스페이트 (Ruxolitinib Phosphate)) JEB
제브타나 (Jevtana)(카바지탁셀 (Cabazitaxel)) 카드실라 (Kadcyla)(아드-트라스투주맙 엠탄신) 케피반스 (Kepivance)(팔리페르민 (Palifermin)) 케이트루다 (Keytruda)(펨브롤리주맙)
키스칼리 (Kisqali)(리보시클립 (Ribociclib)) 킴리아 (Kymriah)(티사겐렉루셀 (Tisagenlecleucel)) 키프롤리스 (Kyprolis)(카르필조밉 (carfilzomib)) 란레오티드 아세테이트
라파티닙 다이토실레이트 (Lapatinib Ditosylate) 라로트렉티닙 설페이트 (Larotrectinib Sulfate) 라르트루보 (Lartruvo)(올라라투맙 (Olaratumab)) 레날리도미드 (lenalidomide)
렌바티닙 메실레이트 (Lenvatinib Mesylate) 렌비마 (Lenvima)(렌바티닙 메실레이트) 레트로졸 (letrozole) 루코보린 칼슘
루케란 (Leukeran)(클로람부실 (chlorambucil)) 루프롤라이드 아세테이트 레불란 케라스틱 (Levulan Kerastik)　(아미노레불린산) 리브타요 (Libtayo)(세미플리맙-rwlc (Cemiplimab-rwlc))
리포독스 (LipoDox)(독소루비신 하이드로클로라이드 리포좀) 로무스틴 (lomustine) 론수르프 (Lonsurf)(트리플루리딘 (Trifluridine) 및 티피라실 하이드로클로라이드 (Tipiracil Hydrochloride)) 로르브레나 (Lorbrena)(로를라티닙 (Lorlatinib))
로를라티닙 루목시티 (Lumoxiti)(목세투모맙 파수도독스-tdfk (Moxetumomab Pasudotox-tdfk)) 루프론 (Lupron)(루프롤라이드 아세테이트) 루프론 데포 (루프롤라이드 아세테이트)
루타테라 (Lutathera)(루테튬 Lu 177-도테테이트) 루테튬 (Lu 177-도테테이트) 린파르자 (Lynparza)(올라파립 (Olaparib)) 마르퀴보 (Marqibo)(빈크리스틴 설페이트 리포좀)
마툴란 (Matulane)(프로카르바진 하이드로클로라이드 (Procarbazine Hydrochloride)) 메클로레타민 하이드로클로라이드 (Mechlorethamine Hydrochloride) 메게스트롤 아세테이트 (Megestrol Acetate) 메티니스트 (Mekinist)(트라메티닙 (Trametinib))
메크토비 (Mektovi)(비니메티닙 (Binimetinib)) 멜팔란 멜팔란 하이드로클로라이드 머캅토퓨린
메스나 (mesna) 메스넥스 (Mesnex)(메스나) 메토트렉세이트 (methotrexate) 메틸날트렉손 브로마이드 (Methylnaltrexone Bromide)
미도스타우린 (Midostaurin) 미토마이신 C (mitomycin C) 미톡산트론 하이드로클로라이드 (Mitoxantrone Hydrochloride) 모가물리주맙-kpkc (Mogamulizumab-kpkc)
모세투모맙 파수도톡스-tdfk (Moxetumomab Pasudotox-tdfk) 모조빌 (Mozobil)(플레리사포르 (Plerixafor)) 무스타르겐 (Mustargen)(메클로레타민 하이드로클로라이드 (Mechlorethamine Hydrochloride)) MVAC
밀레란 (Myleran)(부설판) 밀로타르그 (mylotarg)(겜투주맙 오조가미신) 파클리탁셀 나노입자 (파클리탁셀 알부민-안정화된 나노입자 제형) 나벨빈 (Navelbine)(비노렐빈 타르트레이트 (Vinorelbine Tartrate))
네시투무맙 (Necitumumab) 넬라라빈 (Nelarabine) 네라티닙 말리에이트 (Neratinib Maleate) 네르린스 (Nerlynx)(네라티닙 말리에이트)
네투피탄트 (Netupitant) 및 팔로노세트론 하이드로클로라이드 뉴라스타 (Neulasta)(페그필그라스팀 (Pegfilgrastim)) 뉴포젠 (Neupogen)(필그라스팀) 넥사바르 (nexavar)(소라페닙 토실레이트 (Neratinib Maleate))
닐란드론 (Nilandron)(닐루타미드) 닐로티닙 (nilotinib) 닐루타미드 닌라로 (Ninlaro)(익사조밉 사이트레이트 (Ixazomib Citrate))
니라파립 토실레이트 일수화물 (Niraparib Tosylate Monohydrate) 니볼루맙 (nivolumab) 엔플레이트 (Nplate)(로미플로스팀 (Romiplostim)) 오비누투주맙 (Obinutuzumab)
오돔조 (Odomzo)(소니데깁 (Sonidegib)) OEPA 오파투무맙 (Ofatumumab) OFF
올라파립 (Olaparib) 올라라투맙 (Olaratumab) 오마세탁신 메페숙시네이트 (Omacetaxine Mepesuccinate) 온카스파르 (Oncaspar)(페가스파르가제 (pegaspargase))
온단세트론 하이드로클로라이드 (Ondansetron Hydrochloride) 오니비드 (Onivyde)(이리노테칸 하이드로클로라이드 리포좀) 온타크 (Ontak)(데니루킨 디프티톡스 (Denileukin diftitox)) 오프디보 (Opdivo)(니볼루맙 (nivolumab))
OPPA 오시메르티닙 (osimertinib) 옥살리플라틴 (oxaliplatin) 파클리탁셀
파클리탁셀 알부민-안정화된 나노입자 제형 PAD 팔보시클립 (Palbociclib) 팔리페르민 (Palifermin)
팔로노세트론 하이드로클로라이드 팔로노세트론 하이드로클로라이드 및 네투피탄트 (Netupitant) 파미드로네이트 다이소듐 (Pamidronate Disodium) 파니투무맙 (panitumumab)
파노비노스타트 (Panobinostat) 파조파닙 하이드로클로라이드 (Pazopanib Hydrochloride) PCV PEB
페가스파르가제 (pegaspargase) 페그필그라스팀 (Pegfilgrastim) 페그인터페론 Alfa-2b PEG-인트론 (페그인터페론 Alfa-2b)
펨브롤리주맙 (Pembrolizumab) 페메트렉세드 다이소듐 (Pemetrexed Disodium) 페르제타 (Perjeta)(퍼투주맙 (pertuzumab)) 퍼투주맙 (pertuzumab)
플레릭사포르 (Plerixafor) 포말리도미드 (Pomalidomide) 포말리스트 (Pomalyst)(포말리도미드) 포나티닙 하이드로클로라이드 (Ponatinib Hydrochloride)
포르트라자 (Portrazza)(네시투무맙 (Necitumumab)) 포텔리지오 (Poteligeo)(모가물리주맙-kpkc (Mogamulizumab-kpkc)) 프랄라트렉세이트 (Pralatrexate) 프레드니손 (prednisone)
프로카르바진 하이드로클로라이드 (Procarbazine Hydrochloride) 프로크리트 (Procrit)(에포에틴 알파 (Epoetin Alfa)) 프로루킨 (proleukin)(알데스루킨 (aldesleukin)) 프롤리아 (Prolia)(데노수맙 (denosumab))
프로막타 (Promacta)(엘트롬보파그 올라민 (Eltrombopag Olamine)) 프로프라놀롤 하이드로클로라이드 (Propranolol Hydrochloride) 프로벤즈 (Provenge)(Sipuleucel-T) 퓨린톨 (Purinethol)(머캅토퓨린)
퓨릭산 (Purixan)(머캅토퓨린) 라듐 223 다이클로라이드 랄록시펜 하이드로클로라이드 (Raloxifene Hydrochloride) 라무시루맙 (Ramucirumab)
라스부리카제 (rasburicase) R-CHOP R-CVP 재조합 인간 파필로마바이러스 (HPV) 2가 백신
재조합 인간 파필로마바이러스 (HPV) 9가 백신 재조합 인간 파필로마바이러스 (HPV) 4가 백신 재조합 인터페론 Alfa-2b 레고라페닙 (Regorafenib)
렐리스토르 (Relistor)(메틸날트렉손 브로마이드) R-EPOCH 라타크리트 (Retacrit)(에포에틴 Alfa) 레브리미드 (Revlimid)(레날리도미드)
류마트렉스 (Rheumatrex)(메토트렉세이트) 리보시클릭 (Ribociclib) R-ICE 리툭산 (Rituxan)(리툭시맙 (rituximab))
리툭산 하이셀라 (Rituxan Hycela)(리툭시맙 및 히알루로니다제 인간) 리툭시맙 리툭시맙 및 히알루로니다제 인간 롤라피탄트 하이드로클로라이드 (Rolapitant Hydrochloride)
로미뎁신 (Romidepsin) 로미플로스팀 (Romiplostim) 루비도마이신 (rubidomycin)(다우노루비신 하이드로클로라이드) 루브라카 (Rubraca)(루카파립 캄실레이트 (Rucaparib Camsylate))
루카파립 캄실레이트 (Rucaparib Camsylate) 룩솔리티닙 포스페이트 (Ruxolitinib Phosphate) 리답트 (Rydapt)(미도스타우린 (Midostaurin)) 산쿠소 (Sancuso)(그라니세트론 (Granisetron))
스클레로졸 Sclerosol) 흉막내 에어로졸 (탈크) 실투시맙 (siltuximab) 시풀루셀-T (Sipuleucel-T) 소마툴린 데포 (Somatuline Depot)(란레오티드 아세테이트)
소니데깁 (Sonidegib) 소라페닙 토실레이트 스프리셀 (Sprycel)(다사티닙 (dasatinib)) STANFORD V
멸균 탈크 분말 (탈크) 스테리탈크 (Steritalc)(탈크) 스티바르가 (Stivarga)(레고라페닙 (Regorafenib)) 서니티닙 말레이트 (Sunitinib Malate)
수스톨 (Sustol)(그라니세트론 (Granisetron)) 수텐트 (Sutent)(서니티닙 말레이트) 실라트론 (Sylatron)(페그인터페론 Alfa-2b) 실반트 (Sylvant)(실투시맙 (siltuximab))
신리보 (Synribo)(오마세탁신 메페숙시네이트 (Omacetaxine Mepesuccinate)) 타블로이드 (Tabloid)(티오구아닌) TAC 타핀라르 (Tafinlar)(다브라페닙 (Dabrafenib))
타그리소 (Tagrisso)(오시메르티닙 (osimertinib)) 탈크 탈리모젠 라헤르파렙벡 (Talimogene Laherparepvec) 타목시펜 사이트레이트 (Tamoxifen Citrate)
타라빈 PFS (Tarabine PFS)(시타라빈 (cytarabine)) 타르세바 (tarceva)(에를로티닙 하이드로클로라이드) 타르그레틴 (Targretin)(벡사로텐 (bexarotene)) 타시그나 (Tasigna)(닐로티닙 (nilotinib))
타발리세 (Tavalisse)(포스타마티닙 다이소듐 (Fostamatinib Disodium)) 탁솔 (taxol)(파클리탁셀) 탁소테레 (Taxotere)(도세탁셀 (docetaxel)) 타센트리크 (Tecentriq)(아테졸리주맙 (Atezolizumab))
테모다르 (Temodar)(테모졸로미드) 테모졸로미드 템시롤리무스 (Temsirolimus) 탈리도미드 (thalidomide)
탈로미드 (Thalomid)(탈리도미드) 티오구아닌 티오테파 (Thiotepa) 팁소보 (Tibsovo)(이보시데닙 (Ivosidenib))
티사겐렉루셀 (Tisagenlecleuce)l 톡실리주맙 (tocilizumab) Tolak (플루오로우라실-국소) 토포테칸 하이드로클로라이드
토레미펜 (toremifene) 토리셀 (Torisel)(템시롤리무스) Totect (덱스라족산 하이드로클로라이드 (Dexrazoxane Hydrochloride)) TPF
트라벡테딘 (trabectedin) 트라메티닙 (Trametinib) 트라스투주맙 (trastuzumab) 트레안다 (Treanda)(벤다무스틴 하이드로클로라이드 (Bendamustine Hydrochloride))
트렉살 (Trexall)(메토트렉세이트) 트리플루리딘 (trifl우리딘) 및 티피라실 하이드로클로라이드 (Tipiracil Hydrochloride) 트리세녹스 (Trisenox)(비소 삼산화물) 티케르브 (Tykerb)(라파티닙 다이토실레이트 (Lapatinib Ditosylate))
유니툭신 (Unituxin)(다이누툭시맙 (Dinutuximab)) 우리딘 트리아세테이트 VAC 발루비신 (valrubicin)
발스타르 (Valstar)(발루비신 (valrubicin)) 반데타닙 (vandetanib) VAMP 바루비 (Varubi)(롤라피탄트 하이드로클로라이드 (Rolapitant Hydrochloride))
벡티빅스 (Vectibix)(파니투무맙 (panitumumab)) VeIP 벨케이드 (Velcade)(보르테조밉 (bortezomib)) 베무라페닙 (Vemurafenib)
벤클렉타 (Venclexta)(베네토클락스 (Venetoclax)) 베네토클락스 (Venetoclax) 베르제니오 (Verzenio)(아베마시클립 (Abemaciclib)) 비다자 (Vidaza)(아자시티딘)
빈블라스틴 설페이트 빈크리스틴 설페이트 빈크리스틴 설페이트 리포좀 비노렐빈 타르트레이트 (Vinorelbine Tartrate)
VIP 비스모데깁 (Vismodegib) 비스토가드 (Vistogard)(우리딘 트리아세테이트) 비트라크비 (Vitrakvi)(라로트렉티닙 설페이트 (Larotrectinib Sulfate))
비짐프로 (Vizimpro)(데코미티닙 (Dacomitinib)) 보락사즈 (Voraxaze)(글루카르피다제 (Glucarpidase)) 보리노스타트 (Vorinostat) 보트리엔트 (Votrient)(파조파닙 하이드로클로라이드)
비세오스 (Vyxeos)(다우노루비신 하이드로클로라이드 및 시타라빈 리포좀) 크살코리 (Xalkori)(크리조티닙 (Crizotinib)) 크셀로다 (Xeloda)(카페시타빈 (capecitabine)) XELIRI
XELOX Xgeva (데노수맙 (denosumab)) 제오피고 (Xofigo)(라듐 223 다이클로라이드) 크탄디 (Xtandi)(엔잘루타미드 (Enzalutamide))
여보이 (Yervoy)(이필리무맙 (ipilimumab)) 예스카르타 (Yescarta)(악시캅타젠 실로루셀 (Axicabtagene Ciloleucel)) 욘델리스 (Yondelis)(트라벡테딘 (trabectedin)) 잘트랍 (Zaltrap)(Ziv-아플리베르셉트 (Ziv-Aflibercept))
자르시오 (Zarxio)(필그라스팀) 제줄라 (Zejula)(니라파립 토실레이트 일수화물 (Niraparib Tosylate Monohydrate)) 젤보라프 (Zelboraf)(베무라페닙 (Vemurafenib)) 제발린 (Zevalin)(이브리투모맙 티욱세탄 (Ibritumomab Tiuxetan))
지네카드 (Zinecard)(덱사족산 하이드로클로라이드) Ziv-아플리베르셉트 조프란 (Zofran)(온다세트론 하이드로클로라이드) 졸라덱스 (Zoladex)(고세렐린 아세테이트)
졸레드론산 졸린자 (Zolinza)(보리노스타트 (Vorinostat)) 조메타 (Zometa)(졸레드론산 (Zoledronic Acid)) 지델리그 (Zydelig)(이델랄리십 (idelalisib))
지카디아 (Zykadia)(세리티닙 (Ceritinib)) 지티가 (Zytiga)(아비라테론 아세테이트 (Abiraterone Acetate))
일부 구현예에서, 본 발명은 항-CD36 항체 및 항-PD-1 항체의 조합을 이용한 포유류에서 암 치료 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 암은 구강 편평 세포암, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 예를 들어, 지방육종, 흑색종, 백혈병 및 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 암은 구강 편평 세포암이다. 일부 구현예에서, 암은 난소암이다. 다른 구현예에서, 암은 흑색종이다. 추가적인 구현예에서, 암은 본원에 기술된 임의의 다른 암이다. 일 구현예에서, 암은 전이성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 원발성 종양 및 전이 암 둘다이다. 구현예들에서, 항-CD36 항체는 전장 항체, 단쇄 항체, 또는 scFv, Fab 또는 F(ab')2 단편이다. 일 구현예에서, 항-CD36 항체는 항체이다. 일 구현예에서, 항-CD36 항체는 인간화 항체이다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 본원에 기술된 항체이다. 특정 구현예에서, 항-CD36 항체는 항체 JC63.1과 같은 시판 항-CD36 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙 (KEYTRUDA; MK-3475), 피딜리주맙 (CT-011) 또는 니볼루맙 (OPDIVO; BMS-936558)이다.
본 발명의 방법을 이용해 치료할 수 있는 암 및/또는 악성에 대한 예로는 간암, 간세포암 (HCC), 골암, 췌장암, 피부암, 구강암, 두경부암, 유방암, 폐암, 소 세포성 폐암, NSCLC, 피부 또는 안내 악성 흑색종, 메르켈 세포 암종 (MCC), 피부 편평 세포암 (cSCC), 신장암, 자궁암, 난소암, 결장직장암, 대장암, 직장암, 항문 부위의 암, 위암, 고환암, 자궁암, 자궁관의 암종, 자궁내막의 암종, 경부 암종, 질 암종, 외음부 암종, 두경부의 편평 세포암 (SCCHN), 비-호지킨 림프종, 식도암, 소장암, 내분비계 암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종 (예를 들어, 지방육종), 요도암, 고환암, 어린이의 고형 종양, 림프성 림프종 (lymphocytic lymphoma), 방광암, 오로상피 암종, 신장암, 요관암, 신우 암종, 중추 신경계 (CNS) 신생물, 원발성 CNS 림프종, 종양 혈관신생, 척추 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종, 카포시 육종, 유표피암 (epidermoid cancer), 편평세포암, 석면에 의해 유발되는 등의 환경 유발성 암, 혈액 악성, 예를 들어, 다발성 골수종, B-세포 림프종, 호지킨 림프종/원발성 종격동 B-세포 림프종, 비-호지킨 림프종, 급성 골수성 림프종, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 소포성 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 버킷 림프종, 면역모구성 거대 세포 림프종 (immunoblastic large cell lymphoma), 전구체 B-림프모구성 림프종 (precursor B-lymphoblastic lymphoma), 맨틀 세포 림프종, 급성 림프모구성 백혈병, 균상 식육종, 역형성 거대 세포 림프종, T-세포 림프종, 및 전구체 T-림프모구성 림프종, 및 이들 암의 임의 조합을 포함한다. 본 발명은 전이성 암의 치료에 적용가능하다. 구현예들에서, 암은 구강 편평 세포암이다. 일부 구현예에서, 암은 난소암이다. 다른 구현예에서, 암은 흑색종이다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 치료받은 환자에서 원발성 종양의 크기를 감소시킨다. 원발성 종양의 크기를 측정하기 위해 이용할 수 있는 방법으로는 물리적 측정 (예, 직경, 무게 또는 세포 수), IVIS 이미징 및 면역조직화학 분석의 일부로서 H&E 염색을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 원발성 종양의 크기를 크기로서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 감소시킨다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 치료받은 환자에서 하나 이상의 전이성 종양의 크기를 감소시킨다. 전이성 종양의 크기를 측정하기 위해 이용할 수 있는 방법으로는 물리적 측정 (예, 직경, 무게 또는 세포 수), IVIS 이미징 및 면역조직화학 분석의 일부로서 H&E 염색을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 하나 이상의 전이성 종양의 크기를 크기로서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 감소시킨다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 대조군 치료를 투여받은 환자와 비교해 치료받은 환자에서 원발성 종양의 크기 생장을 방지한다. 원발성 종양의 크기를 측정하기 위해 이용할 수 있는 방법으로는 물리적 측정 (예, 직경, 무게 또는 세포 수), IVIS 이미징 및 면역조직화학 분석의 일부로서 H&E 염색을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 대조군 치료를 투여받은 환자에서의 종양에 대해 원발성 종양의 크기 생장을 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 방지한다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 대조군 치료를 투여받은 환자와 비교해 치료받은 환자에서 하나 이상의 전이성 종양의 크기 생장을 방지한다. 전이성 종양의 크기를 측정하기 위해 이용할 수 있는 방법으로는 물리적 측정 (예, 직경, 무게 또는 세포 수), IVIS 이미징 및 면역조직화학 분석의 일부로서 H&E 염색을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 대조군 치료를 투여받은 환자에서의 전이성 종양에 대해 하나 이상의 전이성 종양의 크기 생장을 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 방지한다. 일부 구현예에서, 본 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에서 단 수개의 세포로 크기가 제한된 전이성 종양의 %에 비해 단 수개의 세포로 크기가 제한된 전이성 종양의 %를 증가시킨다. 일부 구현예에서, 본 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에서 단 수개의 세포로 크기가 제한된 전이성 종양의 %에 비해 단 수개의 세포로 크기가 제한된 전이성 종양의 %를 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 증가시킨다. 일부 구현예에서, 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에서 크거나 또는 중간인 전이성 종양의 %에 비해 크거나 (즉, 직경 > 5 mm) 또는 중간 (즉, 직경 1 내지 2 mm)인 전이성 종양의 %를 감소시킨다. 일부 구현예에서, 본 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에서 크거나 또는 중간인 전이성 종양의 %에 비해 크거나 또는 중간인 전이성 종양의 %를 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 감소시킨다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에 비해 치료받은 환자에서 전이성 종양의 수를 감소시킨다. 전이성 종양의 수를 측정하기 위해 이용할 수 있는 방법으로는 물리적 측정 (예, 종양 개수 계수), IVIS 이미징 및 면역조직화학 분석의 일부로서 H&E 염색을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 대조군 치료제를 투여받은 환자에서의 종양에 비해 전이성 종양의 수를 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90% 감소시킨다.
구현예들에서, 항체는 전신으로, 예를 들어 복막내로 투여할 수 있으며, 물 또는 식염수와 같은 적절한 액체 중의 적절한 현탁물 형태, 예를 들어 수성 현탁액 형태일 수 있다.
항체를 투여하는 경우, 투여량은 약 0.0001 내지 100 mg/kg이며, 보다 일반적으로는 0.01 내지 5 mg/체중 kg이다. 예를 들어, 투여량은 0.3 mg/체중 kg, 1 mg/체중 kg, 3 mg/체중 kg, 5 mg/체중 kg 또는 10 mg/체중 kg일 수 있거나, 또는 1-10 mg/kg 범위일 수 있다. 예시적인 치료 요법은 주당 1회, 2주당 1회, 3주당 1회, 4주당 1회, 1개월당 1회, 3개월당 1회 또는 3-6개월 당 1회 투여를 수반한다. 특정 구현예에서, 항체는 일정한 (flat) 또는 고정된 용량으로 투여된다. 구현예들에서, 항체는 당해 기술 분야에서 항체에 대해 언급된 임의 투여량으로 투여된다.
항-PD-1 및 항-PD-L1 항체
본원에서, 용어 "프로그래밍된 사멸 1 (Programmed Death 1)", "프로그래밍된 세포 사멸 1 (Programmed Cell Death 1)", "단백질 PD-1", "PD-1", "PD1", "PDCD1", "hPD-1" 및 "hPD-I"은 상호 호환적으로 사용되며, 인간 PD-1의 변이체, 이소형, 종 상동체, 및 PD-1과 하나 이상의 공통 에피토프를 가진 유사체를 망라한다. 완전한 PD-1 서열은 GenBank 등재 번호 U64863에서 찾아볼 수 있다.
프로그래밍된 세포 사멸 1 (PD-1)은 T 세포 활성화 및 관용을 조절하는데 결정적인 역할을 담당하는 세포 표면 신호전달 수용체이다 (Keir M.E., et al., Annu. Rev. Immunol. 2008; 26:677-704). 이것은 I형 막관통 단백질이며, BTLA, CTLA-4, ICOS 및 CD28과 함께 T 세포 공동-자극성 수용체로 구성된 CD28 패밀리를 포함한다. PD-1은 주로 활성화된 T 세포, B 세포 및 골수 세포 상에서 발현된다 (Dong H., et al., Nat. Med. 1999; 5:1365-1369; Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr. Opin. Immunol. 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J Immunol 170:711-8). 이는 자연 살상 (NK) 세포 상에서도 발현된다 (Terme M., et al., Cancer Res. 2011; 71:5393-5399). PD-1에 이의 리간드 PD-L1 및 PD-L2가 결합하면, 근위 세포내 면역 수용체 티로신 저해 도메인에서 티로신의 인산화가 이루어지고, 그 후 포스파타제 SHP-2가 동원되어, 궁극적으로 T 세포 활성화가 하향 조절된다. PD-1의 중요한 한가지 역할은 말초 조직에서 감염에 대한 염증 반응 시점에 T 세포의 활성을 제한하여, 자가면역의 발현을 제한하는 것이다 (Pardoll D.M., Nat. Rev. Cancer 2012; 12:252-264). 이러한 저해 방식으로 조절하는 역할의 증거는, PD-1-결핍 마우스에서 관절염 및 신염 등의 루푸스-유사 자가면역 질환이 심근증과 더불어 발생한다는 발견으로부터 비롯한다 (Nishimura H., et al., Immunity, 1999; 11:141-151; 및 Nishimura H., et al., Science, 2001; 291:319-322). 종양 환경에서, 그 결과는 종양 미세환경에서의 면역 저항의 발현이다. PD-1은 종양-침윤성 림프구 상에 고도로 발현되며, 이의 리간드는 다수의 여러가지 종양 세포의 표면에서 상향 조절된다 (Dong H., et al., Nat. Med. 2002; 8:793-800). 복수의 뮤라인 암 모델에서 PD-1에 리간드가 결합하면 면역 회피가 발생하는 것으로 확인되었다. 아울러, 이러한 상호작용을 차단하면 항-종양 활성이 발휘된다 (Topalian S.L., et al. NEJM 2012; 366(26):2443-2454; Hamid O., et al., NEJM 2013; 369:134-144). 또한, PD-1/PD-L1 상호작용의 저해가 전-임상 모델에서 강력한 항-종양 활성을 매개하는 것으로 입증되었다 (미국 특허 번호 8,008,449 및 7,943,743).
PD-1 패밀리의 초기 구성원, CD28 및 ICOS는 단일클론 항체를 첨가한 후 T 세포 증식을 강화하는 기능적인 효과에 의해 발견되었다 (Hutloff et al. Nature (1999); 397:263-266; Hansen et al. Immunogenics (1980); 10:247-260). PD-1은 세포자살성 세포에서 차별적인 발현 스크리닝을 통해 발굴되었다 (Ishida et al. EMBO J (1992); 11:3887-95). 패밀리의 다른 구성원, CTLA-4 및 BTLA는 세포독성 T 림프구 및 TH1 세포 각각에서의 차별적인 발현 스크리닝을 통해 발굴되었다. CD28, ICOS 및 CTLA-4 모두 동형이량화를 허용하는 쌍을 이루지 않은 시스테인 잔기를 가지고 있다. 이와는 반대로, PD-1은 다른 CD28 패밀리 구성원들에서 특징적인 쌍을 이루지 않은 시스테인 잔기가 결여된, 모노머로서 존재하는 것으로 제시되어 있다.
PD-1 유전자는 Ig 유전자 슈퍼패밀리의 일부인 55 kDa의 I 형 막관통 단백질이다 (Agata et al. (1996) Int Immunol 8:765-72). PD-1은 막 근위 면역수용체 티로신 저해성 모티프 (ITIM) 및 막 원위 티로신-기반의 스위치 모티프 (ITSM)를 함유한다 (Thomas, M. L. (1995) J Exp Med 181:1953-6; Vivier, E and Daeron, M (1997) Immunol Today 18:286-91). PD-1은 구조적으로 CTLA-4와 유사하지만, B7-1 및 B7-2 결합에 중요한 MYPPPY 모티프 (서열번호 239)가 없다. PD-1에 대한 리간드 2종, 즉 PD-L1 및 PD-L2가 동정되었으며, 이들은 PD-1에 결합해 T 세포 활성화를 하향 조절하는 것으로 밝혀져 있다 (Freeman et al. (2000) J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al. (2001) Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. (2002) Eur J Immunol 32:634-43). PD-L1 및 PD-L2 둘다 PD-1에 결합하는 B7 상동체이지만, CD29 패밀리의 다른 구성원에는 결합하지 않는다. PD-L1은 다양한 인간 암들에 풍부하게 존재한다 (Dong et al. (2002) Nat. Med. 8:787-9). PD-1과 PD-L1 간의 상호작용시, 종양 침윤성 림프구의 감소, T-세포 수용체 매개 증식의 감소 및 암성 세포에 의한 면역 침입이 달성된다 (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). 면역 억제는 PD-1과 PD-L1의 국지적인 상호작용을 저해함으로써 반전될 수 있으며, 그 효과는 PD-1과 PD-L1의 상호작용이 물론 차단되었을 때 상승한다 (Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66).
PD-1이 CD28 패밀리의 저해성 구성원이라는 사실과 일관적으로, PD-1 결핍 동물은 자가면역 심근증 및 관절염과 신염을 동반한 루푸스-유사 증후군 등의 다양한 자가면역 표현형을 나타낸다 (Nishimura et al. (1999) Immunity 11:141-51; Nishimura et al. (2001) Science 291:319-22). 아울러, PD-1은 자가면역 뇌척수염, 전신성 홍반성 루푸스, 이식편대숙주 질환 (GVHD), I형 당뇨병 및 류마티스 관절염에서 역할을 하는 것으로 밝혀져 있다 (Salama et al. (2003) J Exp Med 198:71-78; Prokunina and Alarcon-Riquelme (2004) Hum Mol Genet 13:R143; Nielsen et al. (2004) Lupus 13:510). 뮤라인 B 세포 종양주에서, PD-1의 ITSM은 BCR-매개 Ca2 +-플럭스 및 하류 작동자 분자의 티로신 인산화를 차단하는데 필연적인 것으로 알려져 있다 (Okazaki et al. (2001) PNAS 98:13866-71).
"프로그래밍된 사멸 리간드-1 (PD-L1)"은 PD-1에 결합시 T 세포 활성화 및 사이토카인 분비를 하향 조절하는 PD-1에 대한 세포 표면 당단백질 리간드 2종 중 하나 (다른 하나는 PD-L2임)이다. 본원에서, 용어 "PD-L1"은 인간 PD-L1 (hPD-L1), hPD-L1의 변이체, 이소형, 및 종 상동체, 및 hPD-L1과 하나 이상의 공통 에티토프를 가진 유사체를 포함한다. 완전한 hPD-L1 서열은 GenBank 등재 번호 Q9NZQ7에서 찾아볼 수 있다.
본 발명의 일부 구현예들은 항-PD-1 항체를 또는 항-PD-L1 항체와 항-CD36 항체의 조합을 포함한다. PD-1은 활성화된 T 세포 및 B 세포에 의해 발현되는 핵심적인 면역 체크포인트 수용체로서, 면역억제를 매개한다. PD-1은 CD28, CTLA-4, ICOS, PD-1 및 BTLA를 포함하는 수용체들의 CD28 수용체에 속한다. PD-1에 대해 세포 표면 당단백질 리간드 2종, 즉 프로그래밍된 사멸 리간드-1 (PD-L1) 및 프로그래밍된 사멸 리간드-2 (PD-L2)가 동정되었으며, 이는 항원-제시 세포뿐 아니라 다수의 인간 암 표면에서 발현되며, PD-1에 결합해 T 세포 활성화와 사이토카인 분비를 하향 조절하는 것으로 입증되었다. PD-1/PD-L1 상호작용의 저해는 전-임상 모델에서 강력한 항-종양 활성을 매개한다.
PD-1에 고 친화성으로 특이적으로 결합하는 인간 단일클론 항체 (HuMAb)들이 미국 특허 번호 8,008,449 및 8,779,105에서 개시된 바 있다. 다른 항-PD-1 mAb들도 예를 들어, 미국 특허 번호 6,808,710, 7,488,802, 8,168,757 및 8,354,509와 PCT 공개번호 WO2012/145493 및 WO2016/168716에서 기술되었다. 미국 특허 번호 8,008,449에 기술된 항-PD-1 HuMAb들은 각각 다음과 같은 특징 하나 이상을 나타내는 것으로 입증되었다: (a) Biacore 바이오센서 시스템을 이용한 표면 플라스몬 공명에 의해 결정된 바와 같이 1 x 10-7 M 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하고; (b) 인간 CD28, CTLA-4 또는 ICOS에 실질적으로 결합하지 않으며; (c) 혼합 림프구 반응 (MLR) 분석에서 T-세포 증식을 증가시키고; (d) MLR 분석에서 인터페론-γ를 증가시키고; (e) MLR 분석에서 IL-2 분비를 증가시키고; (f) 인간 PD-1 및 시노몰구스 원숭이 PD-1에 결합하고; (g) PD-L1 및/또는 PD-L2이 PD-1에 결합하는 것을 저해하고; (h) 항원-특이적인 기억 반응을 자극하고; (i) Ab 반응을 자극하고; (j) 생체내 종양 세포 증식을 저해한다. 본 발명에서 이용가능한 항-PD-1 항체는 인간 PD-1에 특이적으로 결합하며 상기한 특징들 중 한가지 이상, 바람직하게는 적어도 5가지를 발휘하는 mAb를 포함한다.
본 발명에서 이용하기 적합한 항-인간-PD-1 항체 (또는 이로부터 유래한 VH 및/또는 VL 도메인)는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법을 이용해 구축할 수 있다. 대안적으로, 당해 기술 분야에서 인정되는 항-PD-1 항체를 이용할 수 있다. 예를 들어, WO 2006/121168에 기술된, 단일클론 항체 5C4 (본원에서 니볼루맙 또는 BMS-936558로 지칭됨), 17D8, 2D3, 4H1, 4A11, 7D3 및 5F4를 이용할 수 있으며, 이 문헌의 교시 내용은 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 그외 공지된 PD-1 항체로는 WO 2008/156712에 기술된 람브롤리주맙 (lambrolizumab)(MK-3475) 및 WO 2012/145493에 기술된 AMP-514를 포함한다. 추가적으로 공지된 항-PD-1 항체 및 기타 PD-1 저해제로는 WO 2009/014708, WO 03/099196, WO 2009/114335 및 WO 2011/161699에 기술된 것을 포함한다. 다른 공지된 항-PD-1 항체는 피딜리주맙 (CT-011)이다. 이러한 PD-1에 대한 항체와 경쟁하는 항체 또는 PD-1 결합에 대한 저해제 역시 이용할 수도 있다.
일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 니볼루맙 ("OPDIVO®"; BMS-936558로도 지칭됨; 기존에 5C4, BMS-936558, MDX-1106 또는 ONO-4538로도 언급됨)은 PD-1 리간드 (PD-L1 및 PD-L2)와의 상호작용을 선택적으로 방지하여, 항-종양 T-세포 기능의 하향 조절을 차단하는, 완전한 인간 IgG4 (S228P) PD-1 면역 체크포인트 저해제 항체이다 (미국 특허 번호 8,008,449; Wang et al., 2014 Cancer Immunol Res. 2(9):846-56). 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 단편은 니볼루맙과 교차-경쟁한다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 단편은 니볼루맙과 동일한 에피토프에 결합한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙과 동일한 CDR들을 가진다.
다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙은 인간 세포 표면 수용체 PD-1 (프로그래밍된 사멸-1 또는 프로그래밍된 세포 사멸-1)을 겨냥하는 인간화된 단일클론 IgG4 (S228P) 항체이다. 펨브롤리주맙은 예를 들어 미국 특허 번호 8,354,509 및 8,900,587에 기술되어 있다.
다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙과 교차-경쟁한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙과 동일한 에피토프에 결합한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙과 동일한 CDR들을 가진다. 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙 ("KEYTRUDA®", 람브롤리주맙 (lambrolizumab) 및 MK-3475로도 언급됨)은 인간 세포 표면 수용체 PD-1 (프로그래밍된 사멸-1 또는 프로그래밍된 세포 사멸-1)을 겨냥하는 인간화된 단일클론 IgG4 항체이다. 펨브롤리주맙은 예를 들어 미국 특허 번호 8,354,509 및 8,900,587 (이들 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본원에 통합됨)에 기술되어 있으며; 또한, http://www.cancer.gov/drugdictionary?cdrid=695789 (마지막 접속: 2017년 5월 25일)를 참조한다. 펨브롤리주맙은 재발성 또는 난치성 흑색종 치료용으로 FDA로부터 허가받았다.
다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 MEDI0608과 교차-경쟁한다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI0608과 동일한 에피토프에 결합한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 MEDI0608과 동일한 CDR들을 가진다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 단일클론 항체인 MEDI0608 (기존에 AMP-514 지칭됨)이다. MEDI0608은, 예를 들어, 미국 특허 번호 8,609,089 또는 http://www.cancer.gov/drugdictionary?cdrid=756047 (마지막 접속 2017년 5월 25일)에 기술되어 있다.
다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317과 교차-경쟁한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317과 동일한 에피토프에 결합한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317과 동일한 CDR들을 가진다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 인간화된 단일클론 항체로서 BGB-A317이다. BGB-A317은 미국 특허 공개번호 2015/0079109에 기술되어 있다.
개시된 조성물에 이용가능한 항-PD-1 항체는 또한 인간 PD-1에 특이적으로 결합하며 인간 PD-1에의 결합에 대해 니볼루맙과 교차-경쟁한다 (예를 들어, 미국 특허 번호 8,008,449 및 8,779,105; 국제 출원 공개번호 WO 2013/173223을 참조함). 항원 결합에 대해 교차-경쟁하는 항체의 능력은, 이들 항체가 항원의 동일한 에피토프 영역에 결합하여 다른 교차-경쟁하는 항체가 특정한 에피토프 영역에 결합하는 것을 입체적으로 방해하는 것을 의미한다. 이들 교차-경쟁하는 항체는 PD-1의 동일한 에피토프 영역에 결합하므로 니볼루맙의 기능적인 특성과 매우 유사한 기능적인 특성을 가질 것으로 예상된다. 교차-경쟁하는 항체는 Biacore 분석, ELISA 분석 또는 유세포 측정 등의 표준 PD-1 결합 분석에서 니볼루맙과의 교차-경쟁하는 능력을 기반으로 쉽게 파악할 수 있다 (예를 들어, 국제 출원 공개번호 WO 2013/173223 참조).
특정 구현예에서, 니볼루맙과 인간 PD-1에의 결합에 대해 교차-경쟁하거나 또는 인간 PD-1의 동일한 에피토프에 결합하는 항체는 mAb이다. 인간 개체에 투여하는 경우, 이들 교차-경쟁하는 항체는 키메라 항체, 또는 인간화된 또는 인간 항체일 수 있다. 이러한 키메라, 인간화된 또는 인간 mAb는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법으로 제조 및 단리할 수 있다.
본 발명의 조성물에 이용가능한 항-PD-1 항체는 또한 상기한 항체의 항원-결합 영역들을 포함한다. 항체의 항원-결합 기능이 전장 항체의 단편들에 의해 수행될 수 있음은 충분히 입증되어 있다. 항체의 "항원-결합 영역"이라는 용어에 망라되는 결합 단편들에 대한 예로는 (i) Fab 단편, 즉 VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편; (ii) F(ab')2 단편, 즉 힌지부에서 이황화 결합에 의해 연걸된 Fab 단편 2개를 포함하는 2가 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; 및 (iv) 항체의 한쪽 팔의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편을 포함한다.
본 조성물에 이용하기 적합한 항-PD-1 항체는 높은 특이성 및 친화성으로 PD-1에 결합하여, PD-L1 및 PD-L2의 결합을 차단하고, PD-1 신호전달 경로의 면역억제 효과를 저해하는 항체이다. 본원에 개시된 임의의 조성물 또는 방법에서, 항-PD-1 "항체"는 PD-1 수용체에 결합해, 면역 시스템의 상향 조절 및 리간드 결합의 저해 측면에서 완전한 항체의 기능적 특성과 유사한 기능적 특성을 발휘하는, 항원-결합 영역 또는 단편을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 인간 PD-1에의 결합에 대해 니볼루맙과 교차-경쟁한다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 키메라, 인간화된 또는 인간 단일클론 항체 또는 이들의 일부이다. 특정 구현예에서, 항체는 인간화 항체이다. 다른 구현예들에서, 항체는 인간 항체이다. IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 이소형의 항체를 이용할 수 있다.
특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 인간 IgG1 또는 IgG4 이소형의 것인 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체의 IgG4 중쇄 불변 영역의 서열은 힌지부 내 세린 잔기가 IgG1 이소형 항체에서 상응하는 위치에서 정상적으로 발견되는 프롤린 잔기로 치환된 S228P 돌연변이를 가진다. 니볼루맙에 존재하는 이 돌연변이는, 내인성 IgG4 항체와의 Fab 아암 교환을 방지하며, 동시에 야생형 IgG4 항체와 관련한 활성화 Fc 수용체에 대해 낮은 친화성을 유지한다 (Wang et al., 2014). 또 다른 구현예들에서, 항체는 인간 κ 또는 λ 불변 영역인 경쇄 불변 영역을 포함한다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 mAb 또는 이의 항원-결합 영역이다. 항-PD-1 항체를 투여하는 것을 포함하는 본원에 기술된 임의의 치료학적 방법에 대한 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 다른 구현예들에서, 항-PD-1 항체는 미국 특허 번호 8,008,449에 언급된 인간 항체 17D8, 2D3, 4H1, 4A11, 7D3 및 5F4로부터 선택된다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 MEDI0608 (기존에 AMP-514), AMP-224 또는 피딜리주맙 (CT-011)이다. 다른 공지된 PD-1 항체는 예를 들어, WO 2008/156712에 기술된 람브롤리주맙 (MK-3475) 및 예를 들어, WO 2012/145493에 기술된 AMP-514를 포함한다. 추가적으로 공지된 항-PD-1 항체 및 기타 PD-1 저해제는 예를 들어, WO 2009/014708, WO 03/099196, WO 2009/114335 및 WO 2011/161699에 기술된 것을 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 REGN2810이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 PDR001이다. 다른 공지된 항-PD-1 항체는 피딜리주맙 (CT-011)이다. 상기한 참조문헌들은 각각 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 이들 임의의 항체와 경쟁하는 항체 또는 PD-1에의 결합에 대한 저해제도 이용할 수 있다.
다른 항-PD-1 단일클론 항체들이 예를 들어, 미국 특허 번호 6,808,710, 7,488,802, 8,168,757 및 8,354,509, 미국 출원 공개번호 2016/0272708, 및 PCT 공개번호 WO 2012/145493, WO 2008/156712, WO 2015/112900, WO 2012/145493, WO 2015/112800, WO 2014/206107, WO 2015/35606, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2017/020291, WO 2017/020858, WO 2016/197367, WO 2017/024515, WO 2017/025051, WO 2017/123557, WO 2016/106159, WO 2014/194302, WO 2017/040790, WO 2017/133540, WO 2017/132827, WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO 2017/106061, WO 2017/19846, WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO 2017/132825 및 WO 2017/133540에 기술되어 있으며, 이들 문헌들은 각각 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙 (OPDIVO®, 5C4, BMS-936558, MDX-1106 및 ONO-4538로도 지칭됨), 펨브롤리주맙 (Merck; KEYTRUDA®, 람브롤리주맙 및 MK-3475로도 지칭됨; WO2008/156712 참조), PDR001 (Novartis; WO 2015/112900 참조), MEDI-0680 (AstraZeneca; AMP-514로도 지칭됨; WO 2012/145493 참조), 세미플리맙 (cemiplimab)(Regeneron; REGN-2810으로도 지칭됨; WO 2015/112800 참조), JS001 (TAIZHOU JUNSHI PHARMA; Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. 10:136 (2017) 참조), BGB-A317 (Beigene; WO 2015/35606 및 US 2015/0079109 참조), INCSHR1210 (Jiangsu Hengrui Medicine; SHR-1210으로도 지칭됨; WO 2015/085847; Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. 10:136 (2017) 참조), TSR-042 (Tesaro Biopharmaceutical; ANB011로도 공지됨; WO2014/179664 참조), GLS-010 (Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals; WBP3055로도 공지됨; Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. 10:136 (2017) 참조), AM-0001 (Armo), STI-1110 (Sorrento Therapeutics; WO 2014/194302 참조), AGEN2034 (Agenus; WO 2017/040790 참조), MGA012 (Macrogenics, WO 2017/19846 참조), 및 IBI308 (Innovent; WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO 2017/132825 및 WO 2017/133540 참조)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 상기한 문헌들은 각각 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
구현예들에서, 항-PD-1 항체는 2중 특이 항체이다. 구현예들에서, 제2 요법은 PD-1 저해제이다. 구현예들에서, PD-1 저해제는 소형 분자이다.
항-PD-1 항체 및 항-PD-L1 항체가 동일한 신호전달 경로를 표적화하고 다양한 암들에서 비슷한 효능 수준을 발휘하는 것으로 임상 실험에서 입증되었으므로, 항-PD-L1 항체는 본원에 개시된 임의의 치료학적 방법 또는 조성물에서 항-PD-1 항체를 대체할 수 있다.
본 발명에서 이용하기 적합한 항-인간-PD-L1 항체 (또는 이로부터 유래한 VH 및/또는 VL 도메인)는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법을 이용해 구축할 수 있다. 대안적으로, 당해 기술 분야에서 인정되는 항-PD-L1 항체를 이용할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 7,943,743에 기술된 인간 항-PD-L1 항체를 이용할 수 있으며, 이 문헌의 내용은 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 이러한 항-PD-L1 항체로는 3G10, 12A4 (BMS-936559로도 지칭됨), 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7 및 13G4를 포함한다. 이용할 수 있는 그외 당해 기술 분야에서 인정되는 항-PD-L1 항체로는 예를 들어, 미국 특허 번호 7,635,757 및 8,217,149, 미국 출원 공개번호 2009/0317368 및 PCT 공개번호 WO 2011/066389 및 WO 2012/145493에 기술된 것을 포함하며, 각각의 문헌은 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 항-PD-L1 항체에 대한 다른 예로는 아테졸리주맙 (TECENTRIQ; RG7446) 또는 두르발루맙 (IMFINZI; MEDI4736)을 포함한다. 이들 당해 기술 분야에서 인정되는 항체와 경쟁하는 항체 또는 PD-L1에의 결합에 대한 저해제 역시 이용할 수 있다.
본 발명의 방법에서 이용가능한 항-PD-L1 항체에 대한 예로는 미국 특허 9,580,507에 기술된 항체를 포함하며, 이 문헌은 원용에 의해 본 명세서에 통합된다. 미국 특허 번호 9,580,507에 개시된 항-PD-L1 인간 단일클론 항체는 다음과 같은 특징 하나 이상을 나타내는 것으로 입증되어 있다: (a) Biacore 바이오센서 시스템을 이용한 표면 플라스몬 공명에 의해 결정된 바와 같이 1 x 10-7 M 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하고; (b) 혼합 림프구 반응 (MLR) 분석에서 T-세포 증식을 증가시키고; (c) MLR 분석에서 인터페론-γ를 증가시키고; (d) MLR 분석에서 IL-2 분비를 증가시키고; (e) 항체 반응을 자극하고; (f) T 세포 작동자 세포 및/또는 수지상 세포에 대한 T 조절성 세포의 작용을 반전시킨다. 본 발명에서 이용가능한 항-PD-L1 항체는 인간 PD-L1에 특이적으로 결합하며 상기한 특징들 중 한가지 이상, 일부 구현예에서, 적어도 5가지를 발휘하는 단일클론 항체를 포함한다.
특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559 (기존에 12A4 또는 MDX-1105)이다 (예를 들어, 미국 특허 번호 7,943,743; WO 2013/173223 참조). 다른 구현예들에서, 항-PD-L1 항체는 MPDL3280A (RG7446 및 아테졸리주맙으로도 공지됨)(예를 들어, Herbst et al. 2013 J Clin Oncol 31(suppl):3000; 미국 특허 번호 8,217,149 참조), MEDI4736 (Khleif, 2013, In: Proceedings from the European Cancer Congress 2013; September 27-October 1, 2013; Amsterdam, The Netherlands. Abstract 802), 또는 MSB0010718C (아벨루맙으로도 지칭됨; US 2014/0341917 참조)이다. 특정 구현예에서, 전술한 PD-L1 항체에 대해 인간 PD-L1에의 결합에 대해 교차-경쟁하거나 또는 인간 PD-L1의 동일한 에피토프에 결합하는 항체는 mAb이다. 인간 개체에 투여하는 경우, 이들 교차-경쟁하는 항체는 키메라 항체, 또는 인간화된 또는 인간 항체일 수 있다. 이러한 키메라, 인간화된 또는 인간 mAb는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법으로 제조 및 단리할 수 있다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559 (12A4, MDX-1105로도 공지됨; 예를 들어, 미국 특허 번호 7,943,743 및 WO 2013/173223 참조), 아테졸리주맙 (Roche; TECENTRIQ®; MPDL3280A, RG7446로도 공지됨; US 8,217,149 참조; 또한, Herbst et al. (2013) J Clin Oncol 31(suppl):3000 참조), 두르발루맙 (AstraZeneca; IMFINZI™, MEDI-4736으로도 공지됨; 예를 들어, WO 2011/066389 참조), 아벨루맙 (Pfizer; BAVENCIO®, MSB-0010718C로도 공지됨; 예를 들어, WO 2013/079174 참조), STI-1014 (Sorrento; 예를 들어, WO2013/181634 참조), CX-072 (Cytomx; 예를 들어, WO2016/149201 참조), KN035 (3D Med/Alphamab; Zhang et al., Cell Discov. 7:3 (March 2017) 참조), LY3300054 (Eli Lilly Co.; 예를 들어, WO 2017/034916 참조), 및 CK-301 (Checkpoint Therapeutics; Gorelik et al., AACR:Abstract 4606 (Apr 2016) 참조)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 상기한 문헌들은 원용에 의해 본 명세서에 통합된다.
특정 구현예에서, PD-L1 항체는 아테졸리주맙 (TECENTRIQ®)이다. 아테졸리주맙은 완전히 인간화된 IgG1 단일클론 항-PD-L1 항체이다.
특정 구현예에서, PD-L1 항체는 두르발루맙 (IMFINZI™)이다. 두르발루맙은 인간 IgG1 κ 단일클론 항-PD-L1 항체이다.
특정 구현예에서, PD-L1 항체는 아벨루맙 (BAVENCIO®)이다. 아벨루맙은 인간 IgG1 λ 단일클론 항-PD-L1 항체이다.
다른 구현예들에서, 항-PD-L1 단일클론 항체는 28-8, 28-1, 28-12, 29-8, 5H1 및 이들의 임의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원의 방법에서 이용가능한 항-PD-L1 항체는 또한 인간 PD-L1에 특이적으로 결합하며 인간 PD-L1에의 결합에 대해 본원에 기술된 임의의 항-PD-L1 항체, 예를 들어, 아테졸리주맙, 두르발루맙 및/또는 아벨루맙과 교차-경쟁하는 단리된 항체를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 본원에 기술된 임의의 항-PD-L1 항체, 예를 들어, 아테졸리주맙, 두르발루맙 및/또는 아벨루맙과 동일한 에피토프에 결합한다. 항체가 항원에의 결합에 대해 교차-경쟁하는 능력은, 이들 항체가 항원의 동일한 에피토프 영역에 결합하여 다른 교차-경쟁하는 항체가 특정 에피토프 영역에 결합하는 것을 입체적으로 방해하는 것을 의미한다. 이들 교차-경쟁하는 항체는 PD-L1의 동일한 에피토프 영역에 결합하므로 참조 항체, 예를 들어, 아테졸리주맙 및/또는 아벨루맙의 기능적인 특성과 매우 유사한 기능적인 특성을 가질 것으로 예상된다. 교차-경쟁하는 항체는 Biacore 분석, ELISA 분석 또는 유세포 측정 등의 표준 PD-L1 결합 분석에서 아테졸리주맙 및/또는 아벨루맙과의 교차-경쟁하는 능력을 기반으로 쉽게 파악할 수 있다 (예를 들어, WO 2013/173223 참조).
특정 구현예에서, 아테졸리주맙, 두르발루맙 및/또는 아벨루맙과 같은 인간 PD-L1에의 결합에 대해 교차-경쟁하거나 또는 인간 PD-L1의 동일한 에피토프에 결합하는 항체는 단일클론 항체이다. 인간 개체에 투여하는 경우, 이들 교차-경쟁하는 항체는 키메라 항체, 조작된 항체, 또는 인간화된 또는 인간 항체일 수 있다. 이러한 키메라, 조작된, 인간화된 또는 인간 단일클론 항체는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법으로 제조 및 단리할 수 있다.
본 발명의 방법에 이용가능한 항-PD-L1 항체는 또한 상기한 항체의 항원-결합 영역들을 포함한다. 항체의 항원-결합 기능이 전장 항체의 단편들에 의해 수행될 수 있음은 충분히 입증되어 있다.
본원의 조성물 및 방법에 이용하기 적합한 항-PD-L1 항체는 높은 특이성 및 친화성으로 PD-L1에 결합하여, PD-L1의 결합을 차단하고, PD-1 신호전달 경로의 면역억제 효과를 저해하는 항체이다. 본원에 개시된 임의의 조성물 또는 방법에서, 항-PD-L1 "항체"는 PD-L1 수용체에 결합해, 면역 시스템의 상향 조절 및 수용체 결합의 저해 측면에서 완전한 항체의 기능적 특성과 유사한 기능적 특성을 발휘하는, 항원-결합 영역 또는 단편을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 인간 PD-L1에의 결합에 대해 아테졸리주맙, 두르발루맙 및/또는 아벨루맙과 교차-경쟁한다.
항- CTLA -4 항체
특정 구현예에서, 구현예는 항-CTLA-4 항체의 이용을 포함한다. 일 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 CTLA-4에 결합해 이를 저해한다. 일부 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙 (YERVOY), 트레멜리무맙 (티실리무맙; CP-675,206), AGEN-1884 또는 ATOR-1015이다.
추가적인 구현예들
1. 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하는, CD36에 결합하는 단리된 항체로서,
상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85-105로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106-132 또는 248로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133-158로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159-172로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173-185 또는 246으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 및
상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186-206 또는 247로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는, 단리된 항체.
2. 항체가 단리된 키메라 항체인, 구현예 1의 단리된 항체.
3. 항체가 인간화 항체인, 구현예 1의 단리된 항체.
4. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
5. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 86을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 107을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 134를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
6. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 86을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 108을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 135를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 188을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
7. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 87을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 109를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 136을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
8. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 88을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 110을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 137을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
9. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 89를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 111을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 138을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 161을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 175를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 189를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
10. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 112를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
11. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 91을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 113을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 140을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
12. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 92를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 114를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 141을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 191을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
13. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 93을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 115를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 142를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 163을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 177을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 192를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
14. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 94를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 116을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 143을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 164를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 175를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 193을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
15. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 117을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 144를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
16. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 118을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 145를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 187을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
17. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 119를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 146을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
18. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 194를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
19. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 148을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
20. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
21. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 196을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
22. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
23. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 97을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 122를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 149를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 165를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 178을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 197을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
24. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 97을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 123을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 150을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 165를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 178을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 197을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
25. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 98을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 124를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 151을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 198을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
26. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 195를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
27. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 91을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 125를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 152를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 190을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
28. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 99를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 126을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 162를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 176을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 199를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
29. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 100을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 127을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 153을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 166을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 179를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 200을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
30. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 101을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 167을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 180을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 201을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
31. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 101을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 168을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 181을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 202를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
32. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 102를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 129를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 155를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 169를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 182를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 203을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
33. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 103을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 130을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 156을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 170을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 183을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 204를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
34. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 104를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 131을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 157을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 171을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 184를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 205를 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
35. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 105를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 132를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 158을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 172를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 185를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 206을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
36. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
37. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 246을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함하는, 구현예 1-3 중 어느 하나에 따른 항체.
38. 상기 항체가 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 13-44, 241 또는 243 중 하나 이상의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가지고;
상기 경쇄 가변 영역이 서열번호 45-78, 240, 242, 244 또는 245 중 하나 이상의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가지는, 구현예 1 또는 구현예 2에 따른 항체.
39. 상기 항체가 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 13-44, 241 및 243으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고,
상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 45-78, 240, 242, 244 및 245로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는, 구현예 38에 따른 항체.
40. i. 중쇄 가변 영역은 서열번호 13을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 45를 포함하거나;
ii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 14를 포함하고, 가변 영역은 서열번호 46을 포함하거나;
iii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 15를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 47을 포함하거나;
iv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 16을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 48을 포함하거나;
v. 중쇄 가변 영역은 서열번호 17을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 49를 포함하거나;
vi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 18을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 50을 포함하거나;
vii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 19를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 51을 포함하거나;
viii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 20을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 52를 포함하거나;
ix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 21을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 53을 포함하거나;
x. 중쇄 가변 영역은 서열번호 22를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 54를 포함하거나;
xi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 23을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 55를 포함하거나;
xii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 24를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 56을 포함하거나;
xiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 25를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 57을 포함하거나;
xiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 58을 포함하거나;
xv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 59를 포함하거나;
xvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 27을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 60을 포함하거나;
xvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 28을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 61을 포함하거나;
xviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 29를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 62를 포함하거나;
xix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 30을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 63을 포함하거나;
xx. 중쇄 가변 영역은 서열번호 31을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 64를 포함하거나;
xxi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 32를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 65를 포함하거나;
xxii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 33을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 66을 포함하거나;
xxiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 34를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 67을 포함하거나;
xxiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 35를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 68을 포함하거나;
xxv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 36을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 69를 포함하거나;
xxvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 37을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 70을 포함하거나;
xxvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 38을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 71을 포함하거나;
xxviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 39를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 72를 포함하거나;
xxix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 73을 포함하거나;
xxx. 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 74를 포함하거나;
xxxi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 41을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 75를 포함하거나;
xxxii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 42를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 76을 포함하거나;
xxxiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 43을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 77을 포함하거나;
xxxiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 44를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 78을 포함하거나;
xxxv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하거나;
xxxvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하거나;
xxxvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하거나;
xxxviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하거나;
xxxix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하거나;
xl. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하거나;
xli. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함하거나; 또는
xlii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함하는, 구현예 39에 따른 항체.
41. 상기 항체가 인간 CD36에 결합하는, 구현예 1-40 중 어느 하나에 따른 항체.
42. 상기 항체는 인간 CD36에 특이적으로 결합하는, 구현예 41에 따른 항체.
43. 상기 항체는 인간 CD36 및 비-인간 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 41에 따른 항체.
44. 상기 항체는 인간 CD36 및 인간을 제외한 영장류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 43에 따른 항체.
45. 상기 인간을 제외한 영장류 CD36이 시노몰구스 CD36 또는 레서스 마카큐 CD36인, 구현예 44에 따른 항체.
46. 상기 항체는 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 44에 따른 항체.
47. 상기 설치류 CD36이 마우스 CD36 또는 랫 CD36인, 구현예 46에 따른 항체.
48. 상기 항체가 145A, 146S, 147H, 148I, 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 157I, 158L, 159N, 160S, 185P, 186F, 187L, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 197T, 198V, 199G, 398K, 399I, 400Q, 401V, 402L, 403K, 404N, 405L, 406K, 407R, 408N, 409Y, 410I, 411V, 412P, 413I 및 414L로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 41에 따른 항체.
49. 상기 항체가 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 400Q, 401V, 402L 및 403K로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 48에 따른 항체.
50. 상기 항체가 152Q, 192Y 및 406K로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 49에 따른 항체.
51. 상기 항체가 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 및 155Q 및 156M을 포함하는 에피토프에 결합하는, 구현예 49에 따른 항체.
52. 상기 항체가 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T를 포함하는 에피토프에 결합하는, 구현예 48에 따른 항체.
53. 상기 항체가 400Q, 401V, 402L 및 403K를 포함하는 에피토프에 결합하는, 구현예 48에 따른 항체.
54. 상기 항체가 280E, 281S, 282D, 283V, 284N, 285L, 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 293F, 294V, 295L, 296P, 297S, 298K, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S, 351P, 352D, 353V, 354S, 355E, 356P, 357I, 358D, 359G, 360L, 361N, 362P, 363N, 364E 및 365E로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 41에 따른 항체.
55. 상기 항체가 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A 및 350S로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 54에 따른 항체.
56. 상기 항체가 288I, 289P, 290V, 402D, 403V 및 404S로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 55에 따른 항체.
57. 상기 항체가 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y 및 292R로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 54에 따른 항체.
58. 상기 항체가 400S, 401P, 402D 및 403V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 구현예 54에 따른 항체.
59. 상기 항체는 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD 20 nM 미만으로 인간 CD36에 결합하는, 구현예 1-58 중 어느 하나에 따른 항체.
60. 상기 항체는 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD 10 nM 미만으로 인간 CD36에 결합하는, 구현예 59에 따른 항체.
61. 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 구현예 1-60 중 어느 하나에 따른 항체.
62. 상기 중쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중쇄 불변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 61에 따른 항체.
63. IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 구현예 62에 따른 항체.
64. 상기 중쇄 불변 영역은 하나 이상의 아미노산 치환을 가진 IgG 불변 영역을 포함하고, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 하나 이상의 Fcγ 수용체에의 Fc 결합성 감소 및 Fc 작동자 기능 감소를 유발하는, 구현예 63에 따른 항체.
65. 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 아미노산 치환 L234A 및 L235A ("LALA")를 포함하는, 구현예 64에 따른 항체.
66. 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 L234G, L235S 및 G236R; L234S, L235T 및 G236R; L234S, L235V 및 G236R; L234T, L235Q 및 G236R; L234T, L235T 및 G236R; L234A, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234S, L235G 및 G236R; L234T, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234A 및 L235A; 및 L234A, L235A 및 P329G로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는, 구현예 64에 따른 항체.
67. IgG4 중쇄 불변 영역을 포함하는, 구현예 62에 따른 항체.
68. 상기 중쇄 불변 영역이 아미노산 치환 S228P를 가진 IgG 불변 영역을 포함하는, 구현예 66에 따른 항체.
69. 상기 항체가 경쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 구현예 1-68 중 어느 하나에 따른 항체.
70. 상기 경쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 κ 및 λ 경쇄 불변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 69에 따른 항체.
71. 상기 항체는 중쇄 불변 영역과 경쇄 불변 영역을 포함하고, 상기 중쇄 불변 영역은 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이고, 상기 경쇄 불변 영역은 인간 κ 경쇄 불변 영역인, 구현예 1-70 중 어느 하나에 따른 항체.
72. 상기 항체가 2중 특이 항체인, 구현예 1-71 중 어느 하나에 따른 항체.
73. CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 72에 따른 항체.
74. 면역 세포 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 73에 따른 항체.
75. 상기 면역 세포 항원이 PD-1, PD-L1, CTLA4, CD3, LAG3, OX40, CD28, CD33, B7H3, CD47, TIM3, ICOS, LGR5, 4-1BB, CD40, CD40-L 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 74에 따른 항체.
76. 종양-특이 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 73에 따른 항체.
77. 상기 종양-특이 항원이 HER2, HER3, EGFR, VEGF, IGF-1, IGF-2, ANG2, DLL1, IGF-1R, cMET, DLL4, FAP, DR5, IL15, IL15Ra, CD3, CEA, EPCAM, HER3, PSMA, PMEL 및 GPC3으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 76에 따른 항체.
78. 상기 면역 세포 항원 또는 종양-특이 항원이 CD3인, 구현예 74-76 중 어느 하나에 따른 항체.
79. 상기 항체가 바이파라토프 항체인, 구현예 73에 따른 항체.
80. 고유한 비-중첩성 CD36 에피토프에 각각 특이적으로 결합하는 항원 영역을 2개 포함하는, 구현예 79에 따른 항체.
81. 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인을 포함하는, 구현예 80에 따른 항체.
82. 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 및 30G04로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 추가로 포함하는, 구현예 81에 따른 항체.
83. 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는, 구현예 80-82 중 어느 하나에 따른 항체.
84. 항원 결합 단편인, 구현예 1-71 중 어느 하나에 따른 항체.
85. 상기 항원 결합 단편이 Fab, Fab', F(ab')2, 단쇄 Fv (scFv), 이황화 연결된 Fv, V-NAR 도메인, IgNar, 인트라바디, IgGΔCH2, 미니바디, F(ab')3, 테트라바디, 트리아바디, 다이아바디, 단일-도메인 항체, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2, 또는 scFv-Fc를 포함하는, 구현예 84에 따른 항원 결합 단편.
86. 구현예 1-87 중 어느 하나에 따른 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 약학적 조성물.
87. 상기 조성물 내 항체의 95% 이상이 비-푸코실화된, 구현예 86에 따른 약학적 조성물.
88. PD-1 저해제를 더 포함하는, 구현예 86 또는 87에 따른 약학적 조성물.
89. 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 구현예 88에 따른 약학적 조성물.
90. 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 구현예 89에 따른 약학적 조성물.
91. PD-L1 저해제를 더 포함하는, 구현예 86-90 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물.
92. 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 구현예 91에 따른 약학적 조성물.
93. 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 구현예 92에 따른 약학적 조성물.
94. CTLA-4 저해제를 더 포함하는, 구현예 86-93 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물.
95. 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 구현예 94에 따른 약학적 조성물.
96. 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 구현예 95에 따른 약학적 조성물.
97. 상기 조성물이 화학치료제를 더 포함하는, 구현예 86-96 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물.
98. 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 구현예 87에 따른 약학적 조성물.
99. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석으로 측정시 IC50 20 nM 미만으로 지방산의 흡수를 저해하는, 환자에서 암 치료 방법.
100. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 환자에서 암 치료 방법.
101. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 99 또는 구현예 100에 따른 방법.
102. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석으로 측정시 IC50 20 nM 미만으로 지방산의 흡수를 저해하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
103. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
104. 상기 항-CD36 항체가 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체인, 구현예 99-103 중 어느 하나에 따른 방법.
105. 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 구현예 86-98 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 암 치료 방법.
106. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 105에 따른 방법.
107. 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 구현예 86-98 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
108. 상기 전이성 종양이 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종인, 구현예 102 또는 구현예 107에 따른 방법.
109. 상기 치료는 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 99-108 중 어느 하나에 따른 방법.
110. 상기 치료는 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 구현예 99-109 중 어느 하나에 따른 방법.
111. 상기 항-CD36 항체가 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 TSP-1에의 CD36의 결합을 50% 미만으로 차단하면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하는, 구현예 99-110 중 어느 하나에 따른 방법.
112. 상기 환자가 인간 환자인, 구현예 99-111 중 어느 하나에 따른 방법.
113. 상기 항-CD36 항체가 전장 항체, 단쇄 항체, scFv, Fab 단편 또는 F(ab')2 단편인, 구현예 99-112 중 어느 하나에 따른 방법.
114. 상기 항-CD36 항체가 전장 항체인, 구현예 99-113 중 어느 하나에 따른 방법.
115. 상기 항-CD36 항체가 구현예 38-40 중 어느 하나에 따른 항체를 포함하는, 구현예 114에 따른 방법.
116. 상기 방법이 제2 요법의 투여를 추가로 포함하는, 구현예 99-115 중 어느 하나에 따른 방법.
117. 상기 제2 요법이 면역요법인, 구현예 116에 따른 방법.
118. 상기 면역요법이 PD-1 저해제인, 구현예 117에 따른 방법.
119. 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 구현예 118에 따른 방법.
120. 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 구현예 119에 따른 방법.
121. 상기 면역요법이 PD-L1 저해제인, 구현예 117에 따른 방법.
122. 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 구현예 121에 따른 방법.
123. 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 구현예 122에 따른 방법.
124. 상기 면역요법이 CTLA-4 저해제인, 구현예 117에 따른 방법.
125. 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 구현예 124에 따른 방법.
126. 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 구현예 125에 따른 방법.
127. 상기 제2 요법이 화학치료제인, 구현예 116에 따른 방법.
128. 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 구현예 127에 따른 방법.
129. 전이가 개체에서 감소 또는 저해되는, 구현예 99-128 중 어느 하나에 따른 방법.
130. 2 이상의 요법이 순차적으로 투여되는, 구현예 116-129 중 어느 하나에 따른 방법.
131. 2 이상의 요법이 동시에 투여되는, 구현예 116-129 중 어느 하나에 따른 방법.
132. CD36을 발현하는 암을 가진 개체를 치료하는 방법에 이용하기 위한 것이고, 상기 방법이 본 발명에 따른 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 개체에 투여하는 것을 포함하는, 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체.
133. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 132에 따라 이용하기 위한 항체.
134. 상기 암이 전이성 암인, 구현예 132 또는 구현예 133에 따라 이용하기 위한 항체.
135. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 132-134 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
136. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 구현예 132-135 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
137. 상기 항-CD36 항체가 TSP-1에의 CD36 결합에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않으면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL 흡수를 차단하는, 구현예 132-136 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
138. 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석으로 측정시 IC50 20 nM 미만으로 지방산의 흡수를 저해하는, 구현예 132-137 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
139. 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 구현예 132-138 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
140. 제2 요법과 조합하여 사용되는, 구현예 132-139 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
141. 상기 제2 요법이 면역요법인, 구현예 140에 따라 이용하기 위한 항체.
142. 상기 면역요법이 항-PD-1 항체, 항-PL-L1 항체 또는 항-CTLA-4 항체인, 구현예 141에 따라 이용하기 위한 항체.
143. 상기 제2 요법이 화학치료제인, 구현예 140에 따라 이용하기 위한 항체.
144. 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 구현예 143에 따라 이용하기 위한 항체.
145. CD36을 발현하는 암을 가진 개체를 치료하기 위한 의약제의 제조에 있어 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
146. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 145에 따른 항체의 용도.
147. 상기 암이 전이성 암인, 구현예 145 또는 구현예 146에 따른 항체의 용도.
148. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 145-147 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
149. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 구현예 145-148 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
150. 상기 항-CD36 항체가 TSP-1에의 CD36 결합에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않으면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL 흡수를 차단하는, 구현예 145-149 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
151. 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산 흡수를 IC50 미만으로 저해하는, 구현예 145-150 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
152. 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 구현예 145-151 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
153. 제2 요법과 조합하여 사용되는, 구현예 145-152 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
154. 상기 제2 요법이 면역요법인, 구현예 153에 따른 항체의 용도.
155. 상기 면역요법이 항-PD-1 항체, 항-PL-L1 항체 또는 항-CTLA-4 항체인, 구현예 154에 따른 항체의 용도.
156. 상기 제2 요법이 화학치료제인, 구현예 153에 따른 항체의 용도.
157. 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 구현예 156에 따른 항체의 용도.
158. 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
159. 구현예 40의 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역을 코딩하는, 구현예 158에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드.
160. 서열번호 226, 228, 230, 232, 234, 236, 257 및 258로 이루어진 군으로부터 선택되는 중쇄를 코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 구현예 158 또는 159에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드.
161. 서열번호 227, 229, 231, 233, 235, 237 및 253-256으로 이루어진 군으로부터 선택되는 경쇄를 코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 구현예 158-160 중 어느 하나에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드.
162. 단리된 폴리뉴클레오티드가 서열번호 226 및 227, 서열번호 228 및 229, 서열번호 230 및 231, 서열번호 232 및 233, 서열번호 234 및 235, 서열번호 236 및 237, 서열번호 253 및 257, 서열번호 253 및 258, 서열번호 254 및 257, 서열번호 254 및 258, 서열번호 255 및 257, 서열번호 255 및 258, 서열번호 256 및 257, 또는 서열번호 256 및 258을 포함하는, 구현예 158-161 중 어느 하나에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드.
163. 구현예 158-162 중 어느 하나에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
164. 구현예 158-162 중 어느 하나에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 구현예 163에 따른 벡터를 포함하는 세포.
165. E. coli, 슈도모나스, 바실러스, 스트렙토마이세스, 효모, CHO, YB/20, NS0, PER-C6, HEK 293, HEK 293T, NIH 3T3, HeLa, BHK, Hep G2, SP2/0, R1.1, B-W, L-M, COS1, COS7, BSC1, BSC40, BMT10 세포, 식물 세포, 곤충 세포 및 조직 배양물의 인간 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 164에 따른 세포.
166. 상기 세포는 기능성 α-1,6-푸코실트랜스퍼라제 (FUT8) 유전자가 결핍된, 구현예 164 또는 165에 따른 세포.
167. 구현예 164-166 중 어느 하나에 따른 세포를 항체 발현에 적합한 조건에서 배양하고 세포에서 발현된 항체를 단리하는 것을 포함하는, CD36에 특이적으로 결합할 수 있는 항체의 제조 방법.
168. 상기 항체가 세포로부터 방출되고 세포를 배양한 배지로부터 단리되는, 구현예 167에 따른 방법.
169. 약학적 조성물을 제조하기 위한 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체의 용도.
170. 약학적 조성물을 제조하기 위한 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체의 용도.
171. 전이성 종양이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에 존재하는, 구현예 99-131 중 어느 하나에 따른 방법.
172. 전이성 암이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에서의 전이성 종양을 포함하는, 구현예 132-144 중 어느 하나에 따라 이용하기 위한 항체.
173. 전이성 암이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에서의 전이성 종양을 포함하는, 구현예 145-157 중 어느 하나에 따른 항체.
174. 필요한 개체에 구현예 1-85 중 어느 하나에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 구현예 86-98 중 어느 하나에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 원발성 종양 및 전이성 종양을 모두 치료하는 방법.
175. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 174에 따른 방법.
176. 상기 전이성 종양이 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종인, 구현예 174 또는 175에 따른 방법.
177. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 174-176 중 어느 하나에 따른 방법.
178. 상기 치료가 원발성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 174-177 중 어느 하나에 따른 방법.
179. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 구현예 174-178 중 어느 하나에 따른 방법.
180. 상기 항-CD36 항체가 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 TSP-1에의 CD36 결합을 50% 미만으로 차단하면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL 흡수를 차단하는, 구현예 174-179 중 어느 하나에 따른 방법.
181. 상기 항체는 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산 흡수를 IC50 미만으로 저해하는, 구현예 174-180 중 어느 하나에 따른 방법.
182. 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시 IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 구현예 174-181 중 어느 하나에 따른 방법.
183. 상기 환자가 인간 환자인, 구현예 174-182 중 어느 하나에 따른 방법.
184. 상기 항-CD36 항체가 전장 항체, 단쇄 항체, scFv, Fab 단편 또는 F(ab')2 단편인, 구현예 174-183 중 어느 하나에 따른 방법.
185. 상기 항-CD36 항체가 전장 항체인, 구현예 174-184 중 어느 하나에 따른 방법.
186. 상기 항-CD36 항체가 구현예 38-40 중 어느 하나에 따른 항체를 포함하는, 구현예 185에 따른 방법.
187. 상기 방법이 제2 요법의 투여를 추가로 포함하는, 구현예 174-186 중 어느 하나에 따른 방법.
188. 상기 제2 요법이 면역요법인, 구현예 187에 따른 방법.
189. 상기 면역요법이 PD-1 저해제인, 구현예 188에 따른 방법.
190. 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 구현예 189에 따른 방법.
191. 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 구현예 190에 따른 방법.
192. 상기 면역요법이 PD-L1 저해제인, 구현예 188에 따른 방법.
193. 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 구현예 192에 따른 방법.
194. 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 구현예 193에 따른 방법.
195. 상기 면역요법이 CTLA-4 저해제인, 구현예 188에 따른 방법.
196. 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 구현예 195에 따른 방법.
197. 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 구현예 196에 따른 방법.
198. 상기 제2 요법이 화학치료제인, 구현예 187에 따른 방법.
199. 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 구현예 198에 따른 방법.
200. 전이가 개체에서 감소 또는 저해되는, 구현예 174-199 중 어느 하나에 따른 방법.
201. 2가지 요법이 순차적으로 투여되는, 구현예 187-200 중 어느 하나에 따른 방법.
202. 2가지 요법이 동시에 투여되는, 구현예 187-200 중 어느 하나에 따른 방법.
203. 인간 CD36에 결합하는 항체로서, 에피토프가 서열번호 1에 의해 정의된 인간 CD36 내 아미노산 잔기 149-156 및/또는 아미노산 잔기 188-196 및/또는 아미노산 잔기 400-403을; 바람직하게는, 이들 전체를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 더 바람직하게는 에피토프의 결정이 수소-중수소 교환 질량 분광 측정에 의해 수행되는, 항체.
204. 상기 에피토프가 서열번호 1에 의해 정의된 인간 CD36 내 아미노산 잔기 145-160 및/또는 아미노산 잔기 185-199 및/또는 아미노산 잔기 398-414를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 바람직하게는 에피토프가 상기한 아미노산 잔기 전체를 포함하거나 또는 이로 구성되는, 구현예 203에 따른 항체.
205. 인간 CD36에서 항체 1G04와 동일한 에피토프에 결합하거나 또는 인간 CD36에의 결합에 대해 항체 1G04와 경쟁하는, 인간 CD36에 특이적으로 결합하는 항체.
206. 상기 항체가 1G04가 아니거나 또는 상기 항체가 1G06인, 구현예 203-205 중 어느 하나에 따른 항체.
207. 상기 항체가 서열번호 136의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
208. 상기 항체가 하기 항체들 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 207에 따른 항체:
a) 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 87을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 109를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 136을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 중쇄 가변 영역이 서열번호 16을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 48을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는 항체가 7G04인, 항체;
b) 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 88을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 110을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 137을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 중쇄 가변 영역이 서열번호 17을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 49를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는 항체가 09G04인, 항체.
209. 상기 항체가 서열번호 142의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
210. 상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 93을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 115를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 142를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 163을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 177을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 192를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 22를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 54를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는 상기 항체가 14G04인, 구현예 209에 따른 항체.
211. 상기 항체가 서열번호 133의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
212. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 211에 따른 항체:
i. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 85를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 106을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 133을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 186을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 13을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 45를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 04G04인, 항체;
ii. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 99를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 126을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 133을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 162를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 176을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 199를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 38을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 71을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 31G04인, 항체.
213. 상기 항체가 서열번호 141의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
214. 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 92를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 114를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 141을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 162를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 176을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 191을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 21을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 53을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 13G04인, 구현예 213에 따른 항체.
215. 상기 항체가 서열번호 147의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
216. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 215에 따른 항체:
a. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 194를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 28을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 61을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 21G04인, 항체;
b. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 148을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 29를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 62를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 항체가 22G04인, 항체;
c. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 186을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 30을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 63을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 23G04인, 항체;
d. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 196을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 31을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 64를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 24G04인, 항체;
e. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 32를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 65를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 25G04인, 항체;
f. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 36을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 69를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 29G04인, 항체.
217. 상기 항체가 서열번호 143의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
218. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 94를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 116을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 143을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 164를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 175를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 193을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 23을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 55를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 15G04인, 구현예 217에 따른 항체.
219. 상기 항체가 서열번호 150의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
220. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 97을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 123을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 150을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 165를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 178을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 197을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 34를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 67을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 27G04인, 구현예 219에 따른 항체.
221. 상기 항체가 서열번호 149의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
222. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 97을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 122를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 149를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 165를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 178을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 197을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 33을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 66을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 26G04인, 구현예 221에 따른 항체.
223. 상기 항체가 서열번호 151의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
224. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 98을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 124를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 151을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 198을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 35를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 68을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 28G04인, 구현예 223에 따른 항체.
225. 상기 항체가 서열번호 146의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
226. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 119를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 146을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 26을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 58을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 18G04인, 구현예 225에 따른 항체.
227. 상기 항체가 서열번호 144의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
228. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 227에 따른 항체:
a. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 117을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 144를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 24를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 56을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 16G04인, 항체;
b. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 118을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 145를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 25를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 57을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 17G04인, 항체.
229. 상기 항체가 서열번호 134의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
230. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 229에 따른 항체:
a. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 86을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 107을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 134를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 14를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 4를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 05G04인, 항체;
b. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 86을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 108을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 135를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 188을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 15를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 47을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 06G04인, 항체.
231. 상기 항체가 서열번호 140의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
232. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 91을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 113을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 140을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 20을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 52를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 12G04인, 구현예 231에 따른 항체.
233. 상기 항체가 서열번호 152의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
234. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 91을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 125를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 152를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 37을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 70을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 30G04인, 구현예 233에 따른 항체.
235. 상기 항체가 서열번호 153의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
236. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 100을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 127을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 153을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 166을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 179를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 200을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 39를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 72를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 32G04인, 구현예 235에 따른 항체.
237. 상기 항체가 서열번호 154의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
238. 바람직하게는 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 237에 따른 항체:
a. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 128을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 154를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 167을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 180을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 201을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 40을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 73을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 33G04인, 항체;
b. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 128을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 154를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 168을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 181을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 202를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 40을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 74를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 34G04인, 항체.
239. 상기 항체가 서열번호 155의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
240. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 102를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 129를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 155를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 169를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 182를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 203을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 41을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 75를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 35G04인, 구현예 239에 따른 항체.
241. 상기 항체가 서열번호 156의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
242. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 103을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 130을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 156을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 170을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 183을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 204를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 42를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 76을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 36G04인, 구현예 241에 따른 항체.
243. 상기 항체가 서열번호 157의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 203-206 중 어느 하나에 따른 항체.
244. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 104를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 131을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 157을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 171을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 184를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 205를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 43을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 77을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 37G04인, 구현예 243에 따른 항체.
245. 인간 CD36에 결합하는 항체로서, 에피토프가 서열번호 1에 의해 정의된 인간 CD36 내 아미노산 잔기 286-292 및/또는 아미노산 잔기 341-350을, 바람직하게는, 이들 전부 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는 에피토프의 결정이 수소-중수소 교환 질량 분광 측정에 의해 수행되는, 항체.
246. 상기 에피토프가 서열번호 1에 의해 정의된 인간 CD36 내 아미노산 잔기 280-298 및/또는 아미노산 잔기 341-365를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 바람직하게는 이들 아미노산 잔기 전체를 포함하거나 또는 이로 구성되는, 구현예 245에 따른 항체.
247. 인간 CD36에서 항체 11G04와 동일한 에피토프에 결합하거나 또는 인간 CD36에의 결합에 대해 항체 11G04와 경쟁하는, 인간 CD36에 특이적으로 결합하는 항체.
248. 상기 항체가 서열번호 146의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
249. 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 119를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 146을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 248에 따른 항체:
a) 중쇄 가변 영역이 서열번호 26을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 58을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 18G04인, 항체;
b) 중쇄 가변 영역이 서열번호 26을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 59를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 19G04인, 항체;
c) 중쇄 가변 영역이 서열번호 27을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 60을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 20G04인, 항체.
250. 상기 항체가 서열번호 144의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
251. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 117을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 144를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 24를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 56을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 16G04인, 구현예 250에 따른 항체.
252. 상기 항체가 서열번호 152의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
253. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 91을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 125를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 152를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 37을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 70을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 30G04인, 구현예 252에 따른 항체.
254. 상기 항체가 서열번호 154의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
255. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 254에 따른 항체:
a. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 128을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 154를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 167을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 180을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 201을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 40을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 73을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 33G04인, 항체;
b. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 128을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 154를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 168을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 181을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 202를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 40을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 74를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 34G04인, 항체.
256. 상기 항체가 서열번호 155의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
257. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 102를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 129를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 155를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 169를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 182를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 203을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 41을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 75를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 35G04인, 구현예 256에 따른 항체.
258. 상기 항체가 서열번호 156의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
259. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 103을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 130을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 156을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 170을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 183을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 204를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 42를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 76을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 36G04인, 구현예 258에 따른 항체.
260. 상기 항체가 서열번호 157의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
261. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 104를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 131을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 157을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 171을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 184를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 205를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 43을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 77을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 37G04인, 구현예 260에 따른 항체.
262. 상기 항체가 서열번호 158의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
263. 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 105를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 132를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 158을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 172를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 185를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 206을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 44를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 78을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 38G04인, 구현예 262에 따른 항체.
264. 상기 항체가 서열번호 139의 HCDR3을 가지거나 또는 이와 적어도 70% 동일한 HCDR3을 가진 항체인, 구현예 245-247 중 어느 하나에 따른 항체.
265. 상기 항체가 하기 항체들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 262에 따른 항체:
a) 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 112를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 139를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 19를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 51을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 더 바람직하게는, 항체가 11G04 또는 11G06인, 항체;
b) 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 248을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 139를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 247을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항체:
i. 중쇄 가변 영역이 서열번호 241을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 240을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 73G06인, 항체;
ii. 중쇄 가변 영역이 서열번호 243을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 240을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 74G06인, 항체;
iii. 중쇄 가변 영역이 서열번호 241을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 242를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 75G06인, 항체; 및
iv. 중쇄 가변 영역이 서열번호 243을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 242를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 76G06인, 항체;
c) 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 248을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 139를 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 246을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 247을 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항체:
i. 중쇄 가변 영역이 서열번호 241을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 244를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 77G06인, 항체;
ii. 중쇄 가변 영역이 서열번호 243을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 244를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 78G06인, 항체;
iii. 중쇄 가변 영역이 서열번호 241을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 245를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 79G06인, 항체; 및
iv. 중쇄 가변 영역이 서열번호 243을 포함하거나 또는 이로 구성되고, 경쇄 가변 영역이 서열번호 245를 포함하거나 또는 이로 구성되고; 바람직하게는 항체가 80G06인, 항체.
266. 상기 항체가 인간 CD36에 특이적으로 결합하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
267. 상기 항체가 인간 CD36 및 비-인간 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 266에 따른 항체.
268. 상기 항체가 인간 CD36 및 인간을 제외한 영장류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 267에 따른 항체.
269. 상기 인간을 제외한 영장류 CD36이 시노몰구스 CD36 또는 레서스 마카큐 CD36인, 구현예 268에 따른 항체.
270. 상기 항체가 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 구현예 267에 따른 항체.
271. 상기 설치류 CD36이 마우스 CD36 또는 랫 CD36인, 구현예 270에 따른 항체.
272. 상기 항체가 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD 20 nM 미만으로 인간 CD36에 결합하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
273. 상기 항체가 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD 10 nM 미만으로 인간 CD36에 결합하는, 구현예 272에 따른 항체.
274. 상기 항체는 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산 흡수를 IC50 20 nM 미만으로 저해하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
275. 상기 항-CD36 항체는 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시 IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
276. 중쇄 불변 영역을 포함하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
277. 상기 중쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중쇄 불변 영역들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 276에 따른 항체.
278. IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 구현예 277에 따른 항체.
279. 상기 중쇄 불변 영역이 하나 이상의 아미노산 치환을 가진 IgG 불변 영역을 포함하고, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 하나 이상의 Fcγ 수용체에의 Fc 결합성 감소 및 Fc 작동자 기능 감소를 유발하는, 구현예 277 또는 278에 따른 항체.
280. 상기 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 아미노산 치환 L234A 및 L235A ("LALA")를 포함하는, 구현예 277 또는 278에 따른 항체.
281. 상기 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 L234G, L235S 및 G236R; L234S, L235T 및 G236R; L234S, L235V 및 G236R; L234T, L235Q 및 G236R; L234T, L235T 및 G236R; L234A, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234S, L235G 및 G236R; L234T, L235S 및 G236R; L234Q, L235S 및 G236R; L234A 및 L235A; 및 L234A, L235A 및 P329G로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는, 구현예 279에 따른 항체.
282. IgG4 중쇄 불변 영역을 포함하는, 구현예 277에 따른 항체.
283. 상기 중쇄 불변 영역이 아미노산 치환 S228P를 가진 IgG 불변 영역을 포함하고; 바람직하게는 상기 중쇄 불변 영역이 아미노산 치환 S228P 및 L235E를 가진 인간 IgG4 불변 영역을 포함하는, 구현예 281 또는 282에 따른 항체.
284. 상기 항체가 경쇄 불변 영역을 포함하는, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
285. 상기 경쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 κ 및 λ 경쇄 불변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 284에 따른 항체.
286. 상기 항체가 중쇄 불변 영역과 경쇄 불변 영역을 포함하고, 상기 중쇄 불변 영역이 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이고, 상기 경쇄 불변 영역이 인간 κ 경쇄 불변 영역인, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
287. 상기 항체가 2중 특이 항체인, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
288. CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 287에 따른 항체.
289. 면역 세포 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 288에 따른 항체.
290. 상기 면역 세포 항원이 PD-1, PD-L1, CTLA4, CD3, LAG3, OX40, CD28, CD33, B7H3, CD47, TIM3, ICOS, LGR5, 4-1BB, CD40, CD40-L 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 289에 따른 항체.
291. 종양-특이 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 구현예 288에 따른 항체.
292. 상기 종양-특이 항원이 HER2, HER3, EGFR, VEGF, IGF-1, IGF-2, ANG2, DLL1, IGF-1R, cMET, DLL4, FAP, DR5, IL15, IL15Ra, CD3, CEA, EPCAM, HER3, PSMA, PMEL 및 GPC3으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 291에 따른 항체.
293. 상기 면역 세포 항원 또는 종양-특이 항원이 CD3인, 구현예 289-292 중 어느 하나에 따른 항체.
294. 상기 항체가 바이파라토프 항체인, 구현예 288에 따른 항체.
295. 고유한 비-중첩성 CD36 에피토프에 각각 특이적으로 결합하는 항원 영역을 2개 포함하는, 구현예 294에 따른 항체.
296. 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인을 포함하는, 구현예 295에 따른 항체.
297. 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 및 30G04로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 추가로 포함하는, 구현예 296에 따른 항체.
298. 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는, 구현예 294-297 중 어느 하나에 따른 항체.
299. 항원 결합 단편인, 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체.
300. 상기 항원 결합 단편이 Fab, Fab', F(ab')2, 단쇄 Fv (scFv), 이황화 연결된 Fv, V-NAR 도메인, IgNar, 인트라바디, IgGΔCH2, 미니바디, F(ab')3, 테트라바디, 트리아바디, 다이아바디, 단일-도메인 항체, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2, 또는 scFv-Fc를 포함하는, 구현예 299에 따른 항원 결합 단편.
301. 전술한 구현예들 중 어느 하나에 따른 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
302. 상기 조성물 내 항체의 95% 이상이 비-푸코실화된, 구현예 301에 따른 약학적 조성물.
303. 의약제로 이용하기 위한 전술한 구현예들 중 어느 하나에 기술된 항체 또는 약학적 조성물.
304. 본 발명에 기술된 암을, 선택적으로 본원에 기술된 바와 같은 조합 치료로 치료하는 방법에 이용하기 위한 전술한 구현예들 중 어느 하나에 기술된 항체 또는 약학적 조성물.
305. 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 구현예 304에 따른 항체 또는 약학적 조성물.
306. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 구현예 304에 따른 항체 또는 약학적 조성물.
307. 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 구현예 302에 따른 항체 또는 약학적 조성물.
실시예
실시예 1: 동물 실험 재료 및 방법
달리 언급되지 않은 한, 실시예에 기술된 동물 실험은 다음과 같은 재료 및 방법을 이용해 수행하였다.
Charles River에서 NOD scid gamma (NSG) (NOD.Cg-PrkdcscidII2rgtm1Wjl/SzJ) 마우스를 구입하였으며, 실험실에서 교배하였다. 마우스 모두 12h 명/12h 암 사이클 방식으로 SPF 조건 하에 사육하였으며, 모든 절차는 카탈루냐 정부로부터 CEEA (Ethical Committee for Animal Experimentation)에 의해 검토 및 허가받았다. SCC 혀내 주사는 기존에 알려진 바와 같이 수행하였다 (Oskarsson et al., 2014; Nieman et al., 2011). 간략하게는, 마우스는 체중 kg 당 케타민 50 mg 및 메데토미딘 0.5 mg을 복막내 주사하여 마취하고, PBS 30 ㎕에 재현탁한 SCC 세포를 각 마우스 혀에 BD 울트라-파인 6 mm 바늘을 사용해 주사하였다. 마우스에서 주사 직후 (T0)와 이후 매주 1회로 Xenogen IVIS 이미징 시스템-100 (Caliper Life Sciences)을 이용해 루시퍼라제 발광 신호를 모니터링하였다. 간략하게는, 1x PBS에 5 mg/ml로 희석한 D-루시페린 (Promega) 50 ㎕를 마우스에 안와-후방 주사에 의해 주사하였다. 이미징 분석 중에 동물을 계속 마취하기 위해 이소플루란 가스를 계속 투여하였다. 데이터를 리빙 이미지 소프트웨어 버전 4.4 (Caliper Life Sciences)을 이용해 정량하였다. 정량화는 불포화 픽셀을 이용해 계산하였다. 색상 척도 최소 및 최고 값들을 사진에 표시한다.
중화 항-CD36 항체를 이용해 마우스를 생체내 조사하기 위해, 마우스에 중화 단일클론 항-CD36 항체 JC63.1 (CAYMAN, CAY-10009893-500) 5 ㎍, 10 ㎍ 또는 20 ㎍; 중화 단일클론 항-CD36 ONA-0-v1 (IgA 또는 IgG 이소형) 5 ㎍, 10 ㎍ 또는 20 ㎍; 상응하는 대조군 IgA (마우스 IgA, 카파 [S107], Abcam, ab37322) 또는 IgG 항체 5 ㎍, 10 ㎍ 또는 20 ㎍을 함유한 생리학적 혈청 100 ㎕을 복막내 주사하였다. 이들 용량은 각각 0.25, 0.5 및 1 mg/kg에 해당한다. 항체들 모두 보존제 화합물을 첨가하지 않았으며 아지드를 함유하지 않았다.
각 실험에서, 실험군이 승인된 CEEA 프로토콜 (구강 병변 증식으로 인해 마우스에서 체중 감소가 발생하면 곧 정위 주사한 후 4-6주)에 따라 인간 엔드포인트에 도달하면, 동시에 마우스를 희생시키고, 후속적인 세포 분석을 수행하였다.
마우스에서 하대정맥을 통해 전체 혈액 샘플을 채혈한 다음 실험 독성학 및 환경독성학 시설 (PCB)에서 표준 공정에 따라 진행하였다.
동물 조직을 수집해 4% 파라포름알데하이드 (PFA)로 밤새 실온 (RT)에서 고정한 다음 OCT에 포매하여 -80℃에서 냉동하거나 또는 건조한 후 파라핀에 포매하였다. 독성학 실험을 조직병리 시설에서 표준 공정에 따라 수행하였다.
조직학적 분석. 분석하기 위해, 8 ㎛ 냉동- 또는 탈-파라핀화된 항원 회복 단편 (끓고 있는 0.01M 구연산, pH 6.0 중의 10분)을 0.25% Triton X-100/PBS 중에 25분간 투과화한 다음 0.25% 젤라틴/PBS 중에 90분간 차단 처리하였다. 헤마톡실린 및 에오신 (H&E) 염색을 표준 프로토콜에 따라 수행하였다. Nikon E600+Olympus DP72, Leica SPE 및 Leica TCS SP5 공초점 현미경을 이용해 이미지를 획득하였다. 각 사례별 대표적인 사진을 선정하였다.
모든 실험들에서, 적절한 샘플 크기는 파일롯 실험의 결과를 토대로 결정하였다. 샘플 크기를 결정하는데 통계학적 방법은 적용하지 않았다. 실험 공정 중에 적절한 실험 조건을 충족하는 동물들은 모두 분석에 포함시켰다. 파일롯 실험의 결과를 토대로, 8-12주령의 균일한 수컷 및 암컷 및 대조군 한배 동물을 실험에 이용하였다. 주사 후 7일차에 원발성 종양 또는 결부 림프절 전이의 발광 강도를 토대로 동물을 무작위 할당하였다. 데이터는 일반적으로 평균 ± s.e.m.으로 나타낸다. 통계학적 유의성은 Prism 6 소프트웨어 (GraphPad)를 이용해 양측 t-검정, 만-휘트니 U 검정, 피셔 정확 검정 또는 초기하 검정에 의해 분석하였다. P≤0.05은 유의한 것으로 간주하였다.
실시예 2: 마우스 구강암 모델에서 항-CD36 항체를 단독으로 또는 시스플라틴과 함께 이용한 암 치료
항-CD36 항체를 단독으로 및 시스플라틴과 조합한 경우의 효과 실험을 NSG 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 1A에 나타낸다. 암컷 마우스를 이용한 경우에도 유사한 추세가 관찰되었지만 (데이타 기록하지 않음), 본 연구에는 수컷만 포함시켰다. 모든 마우스에, 루시퍼라제 및 푸른 형광 단백질 (Luc-GFP)을 발현하는 레트로바이러스 벡터로 형질전환된 시판 Detroit 562 (ATCC) 암 세포를, 접종하였다. Detroit 562 세포는 인두 암종의 전이성 부위 (즉, 구강 암)로부터 유래하였다. 접종하기 전, Detroit 562 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 EMEM (LONZA)에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, Detroit 562 세포 50,000개를 정위 주사에 의해 접종하였다. 이전 검사에서, 비처리 NSG 마우스의 경우, Detroit 562 세포가 접종된 마우스에서는 100%로 큰 원발성 종양이 발생하였으며, 접종 마우스의 81%에서는 접종 1주일 이내에 림프절 전이가 발생하는 것으로 관찰되었다.
접종 마우스는 암 세포 접종 후 9일차에 치료를 개시하였다. 접종 마우스는 4개의 각 처리 군으로 나누었다. 도 1B에서 알 수 있는 바와 같이, 처리 군은 다음과 같다:
군 1: IgA 이소형 대조군 (1일-23일에는 n = 9; 29일에는 n = 6);
군 2: IgA 이소형 대조군 + 시스플라틴 (n = 5);
군 3: 시판 항-CD36 항체 (JC63.1) (1일-23일에는 n = 6; 29일에는 n = 4);
군 4: 시판 항-CD36 항체 (JC63.1) + 시스플라틴 (n = 5).
항체 처리는 용량 1 mg/kg으로 매일 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하였다. 시스플라틴은 용량 2 mg/kg (군 2 및 군 4)으로 매주 2회로 투여하였다. 시스플라틴 비-투여 마우스 (군 1 및 군 3)에는 대신 PBS를 동일한 부피로 투여하였다. 치료 기간 동안 생체내 이미징 시스템 (IVIS)을 이용해 마우스를 매주 1회 관찰하였다. 또한, 마우스 체중을 매주 2회 측정해, 적절한 투여량 함량을 조정하였다. 마우스의 체중이 윤리적으로 승인된 지침 이하로 감소된 경우에 또는 치료 기간 종료 시점에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 면역조직화학적 분석을 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
도 2A-2C에서 알 수 있는 바와 같이, 검사한 항-CD36 Ab 처리는 구강 암에서 원발성 종양의 증식을 억제하는데 시스플라틴과 적어도 상가적인 항-종양 활성을 가진다. 도 2A는, 대조군 마우스와 비교해 처리 마우스에서 루시퍼라제-유도성 발광의 상대적인 강도에 의해 측정한 바와 같이, 항-CD36 항체 및 시스플라틴 둘다 처리된 마우스가 대조군 항체 (IgA) 및 시스플라틴 처리 마우스보다 종양 증식을 더 잘 억제할 수 있었음을 보여준다. 도 2B는 Detroit 562 세포를 정위 주사한 후 혀에서 발생한 대표적인 원발성 종양 사진을 보여준다. 도 2C는, 항-CD36 항체 및 시스플라틴 처리 마우스 또는 대조군 항체 (IgA) 및 시스플라틴 처리 마우스는 종양 표면적이 감소된 원발성 종양을 가지고 있음을, 보여준다.
도 3은 Detroit 562 암 세포를 접종하여 상기와 같이 처리한 마우스에서의 대표적인 폐 전이 사진을 도시한다. 이들 사진은, 시스플라틴 (상단 우측), 시판 항-CD36 항체 (JC63.1; 하단 좌측) 또는 시스플라틴 및 JC63.1 (하단 우측) 처리 마우스가 대조군 처리 마우스 (상단 좌측)보다 전이 수가 더 적고, 크기가 더 작다는 것을, 보여준다. 나아가, 폐 전이 수 (도 4A) 및 크기 (도 4B)에 대한 정량화는, JC63.1 단독 처리 마우스가 대조군-처리 마우스보다 전이 크기가 더 작고 수가 적다는 것을 보여준다. 시스플라틴 단독 처리 마우스의 경우 시스플라틴이 전이성 종양의 크기를 감소시켰지만, 전이 개수는 대조군 세포와 비슷하였다. 마우스에서 JC63.1 및 시스플라틴 둘다 처리시, JC63.1 단독 처리와 전이 수가 비슷하였다. 그러나, JC63.1 및 시스플라틴 둘다 처리시 JC63.1 또는 시스플라틴 단독과 비교해 전이성 종양의 크기가 더 높은 수준으로 감소하였다. 예를 들어, 항-CD36 항체 처리 단독 및 이소형 대조군 항체와 시스플라틴 조합은, 전이성 종양의 25-40%가 면역조직화학 분석을 이용한 측정에서와 같이 불과 수개의 세포이도록 전이성 종양의 크기를 제한하였다. 항-CD36 항체를 시스플라틴과 조합하여 처리한 경우, 전이성 종양의 80% 이상이 면역조직화학 분석을 이용해 측정한 바와 같이 불과 수개의 세포이도록 전이성 종양의 크기가 제한되었다.
실시예 3: 마우스 구강암 마우스 모델에서 ONA-0-v1 항-CD36 항체를 단독으로 또는 시스플라틴과 함께 이용한 경우의 암 치료
시스플라틴과 ONA-0-v1 항-CD36 항체의 조합 및 ONA-0-v1 항-CD36 항체 단독의 효과 실험들을 NSG 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 이러한 실험의 실험적인 개괄을 도 5A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 및 수컷 마우스 모두 참여시켰다. 모든 마우스에, 루시퍼라제 및 녹색 형광 단백질 (Luc-GFP)을 발현하는 레트로바이러스 벡터가 형질전환된 상업적으로 입수가능한 FaDu (ATCC) 암 세포를 접종하였다. FaDu 세포는 편평 세포암 (즉, 구강 암)으로부터 유래하였다. 접종하기 전, FaDu 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 EMEM (LONZA)에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, FaDu 세포 100,000개를 정위 주사에 의해 접종하였다. 이전 검사에서, 비-처리 NSG 마우스의 경우, FaDu 세포가 접종된 마우스는 100%로 큰 원발성 종양이 발생하였으며, 접종 마우스의 91%에서는 접종 1주일 이내에 림프절 전이가 발생한 것으로 관찰되었다.
접종 마우스는 암 세포 접종 후 9일차에 치료를 개시하였다. 접종 마우스는 4개의 각 처리 군으로 나누었다. 도 5B에서 알 수 있는 바와 같이, 처리 군은 다음과 같다:
군 1: IgA 이소형 대조군 (n = 7);
군 2: IgA 이소형 대조군 + 시스플라틴 (n = 8);
군 3: 항-CD36 항체 ONA-0-v1 (n = 8);
군 4: 항-CD36 항체 ONA-0-v1 + 시스플라틴 (n = 8).
항체 처리는 용량 1 mg/kg으로 매일 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하였다. 시스플라틴은 용량 2 mg/kg (군 2 및 군 4)으로 매주 2회 투여하였다. 시스플라틴 비-투여 마우스 (군 1 및 군 3)에는 대신 PBS를 동일한 부피로 투여하였다. 치료 기간 동안 생체내 이미징 시스템 (IVIS)을 이용해 마우스를 매주 1회 관찰하였다. 또한, 마우스 체중을 매주 2회 측정해, 적절한 투여량 함량을 갱신하였다. 치료 기간 종료 시점에 마우스를 희생시키고, 면역조직화학적 분석을 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
도 6A 및 6B에서 알 수 있는 바와 같이, 항-CD36 항체 ONA-0-v1과 시스플라틴의 조합 처리는 원발성 종양에 대한 IVIS 이미징 및 H&E 염색에 의해 측정한 바와 같이 시스플라틴 단독 처리와 비슷한 효과를 나타내었다. 이 모델에서 ONA-0-v1 단독을 1 mg/kg 용량으로 처리한 경우에는 이소형 대조군 항체 처리와 비교해 원발성 종양에 대해 통계학적으로 유의한 효과를 나타내지 못하였다. 반면, 도 7A 및 7B는, ONA-0-v1 단독 처리가 IVIS 이미징에서 상대적인 강도에 의해 측정한 바와 같이, 림프절 전이의 증식을 저해할 수 있음을, 보여준다. 아울러, ONA-0-v1과 시스플라틴의 조합 처리는 IVIS 이미징에서 상대적인 강도에 의해 측정된 바와 같이 림프절 전이 증식을 거의 완전히 저해하였다.
ONA-0-v1 항체 처리는 림프절 전이 증식을 저해하였다. 도 8은 치료 개시 직전에 FaDu 세포를 정위 주사한 후 7일차에 NSG 접종 마우스의 대표적인 IVIS 사진을 도시한다. 이 마우스에서 관찰된 림프절 전이는 원 구역으로 표시하고, 루시퍼라제 신호전달의 강도는 히트 맵으로 나타내었다. 또한, 도 8은 7일차에 모든 마우스 군에 존재하는 림프절 전이를 정량한 결과를 도시한다. 초기 강도는 모든 군들에서 동일하였다. 치료 종료 시점에 추가적인 IVIS 이미징을 수행하였다. 도 9 (좌측 패널)에 나타낸 바와 같이, ONA-0-v1 항체 처리는 치료 종료 시점과 치료 개시 시점 간의 IVIS 이미징 강도 비율에 의해 측정한 바와 같이, IgA 이소형 대조군에 비해 50% 이상 높은 수준으로 전이성 종양의 증식을 저해하였다. 아울러, 도 9 (우측 패널)에 나타낸 바와 같이, 시스플라틴에 ONA-0-v1 첨가는 시스플라틴의 전이성 종양 증식을 저해하는 저해력을 강화하였다. ONA-0-v1과 시스플라틴의 조합은 종양의 림프절 전이 증식을 거의 완전히 저해하였다.
또한, ONA-0-v1 항체 처리는 도 10에 나타낸 바와 같이 림프절로의 전이 침투를 저해하였다. 대조군 마우스들 모두 림프절 전이가 발생하였다. 시스플라틴 또는 ONA-0-v1 처리는 각각의 해당 처리 군에서 검사한 마우스 8마리들 중 1마리에서 림프절 전이를 방지하였다 (즉, 12.5%). 아울러, 시스플라틴과 ONA-0-v1의 조합이 검사 마우스 8마리 중 5마리에서 임의의 전이를 방지하였으므로, ONA-0-v1의 침투 저해는 시스플라틴과 상승적으로 작용하였다 (즉, 62.5%).
ONA-0-v1 항체 처리는 치료 코스 동안에 NSG 마우스에 충분히 용인성이었다. 도 11A 및 도 11B에서 확인된 바와 같이, ONA-0-v1 처리 단독은 이소형 대조군-처리 마우스와 비교해 마우스 체중 또는 혈소판 수치에 어떠한 영향도 미치지 않았다. 또한, ONA-0-v1 처리는 시스플라틴-매개 체중 감소 또는 시스플라틴-매개 혈소판 수치 감소를 유의하게 강화하지 않았다.
실시예 4: YUMM1.7 세포-유래 흑색종 종양을 가진 C57Bl6/J 마우스에서 PD1 저해제와 항-CD36 항체 조합의 항-종양 효능
YUMM1.7 세포 250,000개를 PBS에 현탁하여, 8-12주령의 C57Bl6/J 마우스 옆구리에 피하 주사하였다. 종양이 평균 체적 50-100 mm3에 도달하면, 마우스를 무작위 할당하여 치료를 개시하였다.
실험 군들은 아래 표 6에 나타낸 바와 같다.
표 6 - 항-CD36 및 항-PD-1 항체로 치료하는 처리군
군 마우스 수 처리
1 10 항-PD1 이소형 대조군 (랫 IgG2a, 클론 2A3 )
2 10 항-마우스 PD-1 (클론 RMP1-14)
3 10 항-CD36 이소형 대조군
4 10 항-CD36
5 10 항-마우스 PD-1 + 항-CD36
모든 항체는 10 mg/kg 농도로 3회/주의 빈도로 IP 주사하였다. 마우스는 주당 3회 체중 및 종양 체적을 모니터링하고, 매일 거동 및 생존성을 확인하였다. 종양이 최대 체적 1.500 mm3에 도달하면, 마우스를 안락사시키고, 조직을 채취하였다. 원발성 종양의 무게를 측정하고, 캘리퍼로 다시 측정하였다. 폐 및 간을 H&E 염색하기 위해 파라핀으로 포매하고, 전이성 병변에 대해 맹검 분석하였다. 실험 결과, 항-CD36 항체 (예를 들어, 1G04) 및 항-PD-1 항체가 YUMM1.7 마우스 흑색종 모델에서 암 치료에 상가적인 효과 또는 상승적인 효과가 있는 것으로, 확인될 것이다.
실시예 5: ONA-0-v1 항-CD36 항체를 이용한 난소암 치료
ONA-0-v1 항-CD36 항체의 난소암에 대한 효과 실험을 NSG 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 12A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에 상업적으로 입수가능한 OVCAR-3 (ATCC) 암 세포를 접종하였다. OVCAR-3 세포는 난소의 인간 진행성 선암종 (즉, 난소암)으로부터 유래하였다. 접종하기 전, OVCAR-3 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신, 0.01 mg/ml 보바인 인슐린 및 20% FBS (GIBCO)가 첨가된 RPMI-1640에서 배양하였다.
각 마우스에 대해 OVCAR-3 이종이식물을 정위 이식하였다. 도 12B에서 확인된 바와 같이, OVCAR-3 세포가 이식된 NSG 마우스에서는 원발성 거대 종양이 발생하였다. OVCAR-3가 이식된 마우스에서는 또한 복막 벽 및 간 둘다로 전이되었다. 이식된 마우스에서의 전이 예를 도 13A 및 13B에 나타낸다.
이식한 마우스에 대한 치료는 OVCAR-3 종양 절편을 이식한 후 23일차에 개시하였다. 접종 마우스는 2가지 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 9) 또는 ONA-0-v1 처리 (n = 9). 항체 처리는 용량 3 mg/kg으로 매일 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하고, 대조군 마우스에는 동일한 일정으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 치료 기간 종료 시점에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 면역조직화학적 분석을 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
도 12B 및 12C에서 알 수 있는 바와 같이, ONA-0-v1 처리시 OVCAR-3 난소암 마우스 모델에서 더 작은 종양이 발생하였다. 도 12C에서 이러한 효과를 정량한 결과, OVCAR-3에 대한 처리시 종양 무게는 평균 1.844g에서 평균 1.058g으로 감소하였으며, 감소율은 43%이었다. 이들 데이터는 ONA-0-v1이 치료 기간 동안 종양 증식을 저해하고 및/또는 종양 세포 파괴를 촉진함을 보여준다.
비히클-처리 및 ONA-0-v1-처리 마우스에서 원발성 종양에 대한 조직학적 분석을 또한 실시하였다. 먼저, 종양을 분석하여, 육안 검사 및 병리학자에 의한 정량화를 통해 괴사 %를 결정하였다. 분석 결과는 도 12D에 나타내며, 여기서 ONA-0-v1이 괴사를 대략 24.4%에서 대략 40.71%로 증가시킨 것으로 확인되었다 (* = p 값 0.0287). 이러한 증가는 처리된 종양에서 세포 사멸이 더 많이 이루어졌음을 의미한다. 처리 및 ONA-0-v1-처리 마우스의 원발성 종양 역시 분석하여, 시리우스 레드 염색에 의해 콜라겐 및 섬유증 면적 %를 결정하였다. 분석 결과는 도 12E에 나타내며, ONA-0-v1이 SR 양성 면적을 16.9%에서 22.5%로 증가시킨 것으로 확인되었다 (*= p 값 0.0457). 이러한 증가는 ONA-0-v1 처리가 섬유증을 증가시킴을 의미하며, 처리된 종양은 괴사 증가와 더불어 크기가 더 작은 뿐만 아니라 더 적은 수의 종양 세포들로 구성됨을 의미한다.
도 14A, 14B 및 14C는 ONA-0-v1 처리 마우스에서 전이성 종양을 정량한 결과를 보여준다. 도 14A는, 전체 전이 개수가 비히클-처리 마우스 대비 ONA-0-v1-처리 마우스에서 50% 이상 감소되었음을, 보여준다. 전체 전이 개수는 장기의 육안 검사를 통해 결정하였다. 도 14B 및 도 14C는 복막 벽 및 간 각각에서 전이 크기를 육안 분석한 결과를 나타낸다. 전이 크기는 육안 검사에 의해 측정하였다. 비히클-처리 군에서, 동물의 48%는 복막 벽에서 전이 크기가 크고 (>5mm), 41%는 전이 크기가 작았으며 (1-2mm), 11%에서는 전이가 없었다. ONA-0-v1 처리 동물의 경우, 큰 크기의 전이는 검출되지 않았으며, 동물의 38%는 전이 크기가 작았으며, 63%는 전이가 없었다. 간 전이되지 않은 마우스의 %는 비히클 군의 경우 22%에서 처리군의 경우 50%까지 증가하였다. 간 전이된 동물들에서, 크기가 큰 전이의 개수는 16%에서 6%로 감소하였고, 작은 전이의 개수는 62%에서 44%로 감소하였다. ONA-0-v1 처리시 복막 벽에서 전이 크기에 변화가 있었으며, 큰 전이는 거의 없었으며, 전혀 복막 벽 전이되지 않은 마우스의 수가 더 많았다 (도 14B). 마찬가지로, ONA-0-v1 처리는 크기가 큰 전이가 거의 관찰되지 않도록 간 전이 크기에 변화를 유발하였으며, 더 많은 수의 마우스들에서 간 전이가 전혀 관찰되지 않았다 (도 14C). 요컨대, 도 14A, 14B 및 14C는 ONA-0-v1이 난소암 형성 및 난소암에 기원한 전이 증식에 효과적임을 보여준다.
실시예 6: ONA-0-v1 및 1G04 항-CD36 항체를 이용한 난소암 치료
난소암에 대한 ONA-0-v1 및 1G04 항-CD36 항체의 효과 실험을 NSG 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 15A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에 상업적으로 입수가능한 OVCAR-3 (ATCC) 암 세포를 접종하였다. OVCAR-3 세포는 난소의 인간 진행성 선암종 (즉, 난소암)으로부터 유래하였다. 각 마우스에 대해, OVCAR-3 이종이식 절편을 정위 이식하였다. 접종하기 전, OVCAR-3 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신, 0.01 mg/ml 보바인 인슐린 및 20% FBS (GIBCO)가 첨가된 RPMI-1640에서 배양하였다.
이식한 마우스에 대한 치료는 OVCAR-3 종양 절편을 이식한 후 7일차에 개시하였다. 접종 마우스는 3가지 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 9), ONA-0-v1 처리 (n = 9) 또는 1G04 처리 (n = 9). ONA-0-v1 항체 처리는 용량 3 mg/kg으로 매일 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하였다. 1G04 항체 처리는 10 mg/kg 용량으로 TIW (매주 3회)로 복막내 주사를 통해 투여하였다. 대조군 마우스에는 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 도 15B에서 알 수 있는 바와 같이, 3종의 처리 군들에서 마우스 체중을 실험 기간 내내 동일하게 유지되었다. 치료 기간 종료 시점에 마우스를 희생시켰다. 희생시 부검 및 조직병리학적 분석을 수행하기 위해 장기 및 조직을 수집하였다.
도 15C-15G는 처리 마우스에서 전이성 종양을 정량한 결과를 도시한다. 도 15C는 각 처리 조건별 총 전이 개수를 나타낸다. 총 전이 개수는 장기를 육안 검사하여 결정하였다. 이러한 분석을 통해, 전이 개수가 비히클-처리 마우스와 비교해 ONA-0-v1-처리 마우스에서 대략 45% 감소된 것으로 드러났다 (비히클에서 전이 수 52개 대 처리 군에서 29개). 또한, 1G04-처리 마우스에서 총 전이 개수 역시 비히클-처리 마우스와 비교해 약 35% 감소하였다 (비히클에서의 전이 개수 52개 대 처리 군에서 34개).
도 15D 및 도 15E는 복막 벽 및 간 각각에서 전이 크기를 육안 분석한 결과를 도시한다. 전이 크기는 육안 검사로 측정하였다. ONA-0-v1 또는 1G04 처리는 관찰되는 전이의 크기를 감소시켜, 큰 크기의 전이 (>5mm)와 중간 크기 (1-2mm)의 전이가 더 적게 관찰되었다. 비히클-처리 동물의 경우, 복막 벽에서 마우스의 25%는 >5mm 전이이고, 39%는 2-5 mm 전이를, 13%는 1-2 mm 전이를 가지고 있는 것으로 나타났다. ONA-0-v1 처리 동물의 경우, 마우스의 19%는 >5 mm 전이를, 19%를 2-5 mm 전이를, 19%는 1-2 mm 전이를 복막 벽에서 가진 것으로 나타났다. 1G04-처리 동물의 경우, 복막 벽에서, 마우스의 7%는 >5 mm 전이를, 11%는 2-5 mm 전이를, 49%는 1-2 mm 전이를 가진 것으로 나타났다. 아울러, 처리 마우스의 간에서도 비슷한 패턴이 확인되었다. 비히클-처리 동물의 경우, 간에서 마우스의 5%는 2-5 mm 전이를, 25%는 1-2 mm 전이를, 25%는 <1 mm 전이를 가진 것으로 나타났다. ONA-0-v1 처리 동물의 경우, 간에서, 마우스의 6%는 2-5 mm 전이를, 17%는 1-2 mm 전이를 가지고 있었으며, <1mm 전이는 없는 것으로 나타났다. 1G04-처리 동물의 경우, 2-5 mm 전이는 없고, 11%는 1-2 mm 전이를 가지고 있으며, <1mm 전이는 없는 것으로 나타났다. 아울러, ONA-0-v1 또는 1G04 처리시, 복막 벽 및 간에서 전이가 없는 동물의 %가 상승하였다. 비히클-처리 마우스 중 22%, ONA-0-v1-처리 마우스 중 44% 및 1G04-처리 마우스 중 33%에서는 복막 벽 전이는 없었다. 비히클-처리 마우스의 44%, ONA-0-v1-처리 마우스의 78% 및 1G04-처리 마우스의 89%에서는 간 전이가 없었다.
도 15F는 폐 전이 %에 대한 현미경 분석 결과를 도시한다. 복막 벽 및 간에서와 같이, ONA-0-v1 또는 1G04 처리시 폐 전이되지 않은 동물의 %가 증가하였다 (비히클에서 33%에서 ONA-0-v1 및 1G04 군에서 각각 44% 및 66%). 아울러, 도 15G에서 정량한 바와 같이, ONA-0-v1 또는 1G04 처리시 마우스 당 폐 전이 개수가 감소하였다 (평균 전이 개수는 비히클-처리 군 3.6, ONA-0-v1 처리 군 1.6 및 1G04 처리 군 1.2).
요컨대, 도 15C-15G는 ONA-0-v1 (뮤라인 IgA 항체) 및 1G04 (키메라 IgG1 항체) 둘다 난소암 발생 및 전이 증식을 감소시키는데 효과적임을 보여준다.
실시예 7: 1G04 항-CD36 항체를 이용한 대장암 치료
대장암에 대한 1G04 항-CD36 항체의 효과 실험을 BALB/c 누드 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 16A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에, 루시퍼라제를 발현하는 레트로바이러스 벡터로 형질전환된 상업적으로 입수가능한 HCT-116 (ATCC) 암 세포를 접종하였다. HCT-116 세포는 인간 결장직장암 (즉, 대장암)으로부터 유래하였다. 접종하기 전, HCT-116 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 McCoy의 5A 배지에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, HCT-116 세포 2x106개를 정위 주사를 통해 접종하였다. 접종 후 및 1주일 후 각 마우스에서 사진을 촬영하였으며, 치료 개시 전 생체외 발광에 의해 간 전이를 검증하였다. 치료는 HCT-116 세포를 접종한 후 12일차에 개시하였다. 접종 마우스는 2종의 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 10) 또는 1G04 처리 (n = 10). 항체 처리는 용량 10 mg/kg으로 주당 3회로 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하고, 대조군 마우스에는 동일한 일정으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 치료 개시 하루 전, 그리고 치료 개시 후 7일, 14일 및 21일차에, 모든 마우스에서 IVIS에 의해 영상 촬영하였다. 치료 기간 종료 시점 (25일)에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 부검, 생체외 IVIS 및 조직병리학적 분석을 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
도 16B에서 알 수 있는 바와 같이, 1G04 처리 마우스는 치료 코스 동안에 체중이 더 잘 유지될 수 있었다. 도 16C는 마우스에서 루시퍼라제-함유 종양 세포의 증식에 대한 판독 결과로서, 경시적인 전체-동물 생발광 이미징 결과를 도시한다. 생발광 이미징은, 1G04가 전체 동물 발광성을 감소시켰으며, 즉 주입된 HCT-116 종양 세포의 증식을 생체내 늦춤을 보여준다.
도 16D, 16E, 16F 및 16G는 1G04 및 비히클 처리 마우스에서 전이성 종양에 대한 정량 결과를 보여준다. 검사 장기를 마우스에서 적출한 후, IVIS를 이용한 생체외 발광성에 의해 간 (도 16D), 폐 (도 16E), 비장 (도 16F) 및 신장 (도 16G)에서 전이성 종양의 발광성을 정량하였다. 각 장기에서, 1G04 처리시 발광성이 감소하였으며, 이는 전이의 크기 및/또는 개수의 감소를 의미한다. 비히클-처리 마우스의 간, 폐, 비장 및 신장에서 관찰된 평균 발광 측정치는 각각 1.69*108, 5.38*106, 2.66*108 및 4.11*107이었다. 1G04-처리 마우스의 간, 폐, 비장 및 신장에서 관찰된 평균 발광 측정치는 각각 1.07*108, 1.68*106, 1.83*107 및 1.46*107이었다. 이들 데이터는 1G04가 대장암에서 전이 전파 및 증식에 대한 강력한 저해제임을 의미한다.
요컨대, 도 16D-16G는 1G04가 대장암으로부터 전이 발생 및 증식을 낮추는데 효과적임을 보여준다.
실시예 8: 1G04 항-CD36 항체를 이용한 폐암 치료
폐암에 대한 1G04 항-CD36 항체의 효과 실험을 NSG 마우스 (면역-결핍)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 17A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에, 루시퍼라제를 발현하는 렌티바이러스 벡터를 안정적으로 형질전환하여 구축한 A549 세포의 변형된 버전인 상업적으로 입수가능한 A549-luc2 (ATCC) 암 세포를 접종하였다. A549 세포는 폐 암종 (즉, 폐암)으로부터 유래하며, 따라서, 이를 마우스 폐암 모델의 일환으로 이용하였다. 접종하기 전, A549 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 F-12K 배지에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, A549 세포 1x106개를 꼬리 정맥 주사를 통해 정맥내 접종하였다. 접종 후 그리고 1주일 후 각 마우스에서 사진을 촬영하였으며, 치료 개시 전 발광에 의해 폐 전이를 검증하였다. 치료는 A549 세포를 접종한 후 8일차에 개시하였다. 도 17B에 상세히 기술한 바와 같이, 접종 마우스는 2종의 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 11) 또는 1G04 처리 (n = 11). 항체 처리는 용량 10 mg/kg으로 주당 3회로 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하고, 대조군 마우스에는 동일한 일정으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 치료 개시하기 하루 전, 그리고 치료 개시 후 매주 1회로, 모든 마우스에서 IVIS에 의해 영상 촬영하였다. 치료 기간 종료 시점 (61일)에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 부검 및 생체외 IVIS를 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
도 17C는 경시적인 전체-동물 생발광성 이미징 결과를 나타낸 것으로, 1G04 처리 마우스에서는 관찰된 형광성이 감소하였다. 이는, 1G04 처리가 주사된 A549 종양 세포의 증식을 생체내에서 감소시켰음을 의미한다 (** = p 값 p=0,0002). 종료 시점에, 1G04 항체로 처리된 마우스의 폐는 대조군 비히클-처리 마우스보다 더 작았는데 (도 17D), 이는 종양 증식 발생이 더 낮음을 의미한다. 관찰된 평균 폐 무게는 비히클-처리 마우스가 0.90 g, 1G04-처리 마우스가 0.72 g (20% 감소)이었다. 또한, 1G04 처리 동물에는 도 17E에 나타낸 바와 같이 종료 시점에 폐에서 발광성이 낮았다 (2.11*108에서 1.39*108). 이러한 결과는 1G04가 폐암에서 전이 증식을 저해함을 의미한다.
실시예 9: 1G04 항-CD36 항체를 이용한 대장암 치료
대장암에 대한 1G04 항-CD36 항체의 효과 실험을 C57BL/6 마우스 (면역-적격)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 18A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에, 루시퍼라제를 발현하는 벡터로 형질전환된 상업적으로 입수가능한 MC-38 암 세포를 접종하였다. MC-38 세포는 마우스 결장 선암종 (즉, 대장암)으로부터 유래하였다. 접종하기 전, MC-38 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 DMEM 배지에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, MC-38 세포 1x106개를 척추내 접종하였다. 4일 후 각 마우스에서 사진을 촬영하였으며, 접종 후 5일차에 치료 개시하기 전 생체외 발광에 의해 간 전이를 검증하였다. 도 18B에 상세히 나타낸 바와 같이, 접종 마우스는 2종의 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 13) 또는 1G04 처리 (n = 13). 항체 처리는 용량 10 mg/kg으로 주당 3회로 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하고, 대조군 마우스에는 동일한 일정으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 치료 개시하기 하루 전, 그리고 치료 개시 후 매주 2회로, 모든 마우스에서 IVIS에 의해 영상 촬영하였다. 치료 기간 종료 시점 (60일)에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 부검 및 생체외 IVIS를 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
실험 중에 전체-동물 생발광 이미징 분석 결과, 1G04-처리는 발광을 감소시켰으며, 이는 종양 증식의 감소를 의미한다 (*= p 값 0.003, 도 18C). 생체외 발광을 분석한 결과, 1G04 처리 마우스는 간 (1.41*109에서 6.67*104; 즉 >99.99% 감소) 및 폐 (7.23*106에서 6.78*104; 즉 >99% 감소) 둘다에서 낮은 발광성을 보였다 (각각 도 18D 및 18E). 결론적으로, 1G04는 대장암에서 전이 크기를 낮추는 효과를 나타내었다.
실시예 10: 1G04 항-CD36 항체를 이용한 유방암 치료
유방암에 대한 1G04 항-CD36 항체의 효과 실험을 BALB/c 마우스 (면역-적격)에서 수행하였다. 본 실험의 실험적인 개괄을 도 19A에 나타낸다. 본 실험에는 암컷 마우스만 참여하였다. 모든 마우스에, 루시퍼라제를 발현하는 벡터로 형질전환된 상업적으로 입수가능한 4T1 암 세포 (ATCC)를 접종하였다. 4T1 세포는 뮤라인 유선 조직 (즉, 유방암)으로부터 유래하였다. 접종하기 전, 4T1 세포는 37℃ 및 5% CO2 하에 가습 인큐베이터에서 배양하였으며, 5 ㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신, 2mM L-글루타민 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 RPMI 배지에서 배양하였다.
각 마우스에 대해, 4T1 세포 4x104개를 유방 지방층에 정위 접종하였다. 치료는 4T1 세포를 접종한 후 5일차에 개시하였다. 마우스는 2종의 처리 군 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 10) 또는 1G04 처리 (n = 10). 항체 처리는 용량 10 mg/kg으로 주당 3회로 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하고, 대조군 마우스에는 동일한 일정으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다 (도 19B). 치료 기간 종료 시점 (22일)에 마우스를 희생시켰다. 희생시, 부검 및 생체외 IVIS를 수행하기 위해 장기와 조직을 수집하였다.
비히클 처리 마우스와 비교해 1G04-처리 마우스에서 폐 발광성이 감소하였으며 (2.49*105-5.96*104, 도 19C), 이는 항-CD36 처리가 전이 크기 및 원위 장기로의 전이 전파를 감소시킴을 의미한다.
실시예 11: 항-CD36 항체 특정화
마우스 또는 닭을 재조합 인간 CD36으로 면역화하여 새로운 항-CD36 항체를 구축하였다. 마우스에 인간 CD36 단백질을 5회 주사한 다음 인간-CD36-발현성 CHO 세포를 6회 주사하여 면역화하였다. 다른 마우스에는 인간-CD36-발현성 CHO 세포를 4회 주사하여 면역화하였다. 닭은 인간 CD36 단백질을 4회 주사하여 면역화하였다. 이러한 면역화로 Fab 단편이 생성되었으며, 이들 Fab 단편으로부터 유래한 가변 영역을 LALA 변이가 존재하는 인간 IgG 스캐폴드에 이식해, 키메라 항체를 제작하였다. 뮤라인 면역화 공정으로 4G04, 5G04, 6G04, 7G04, 9G04, 10G04, 11G04, 12G04, 13G04, 14G04, 15G04, 16G04, 17G04, 18G04, 19G04, 20G04, 21G04, 22G04, 23G04, 24G04, 25G04, 26G04, 27G04, 28G04, 29G04, 30G04, 31G04 및 32G04 키메라 항체를 구축하였다. 닭 면역화 공정으로 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04 및 38G04 키메라 항체를 구축하였다. 11G04의 인간화로 73G06, 74G06, 75G06, 76G06, 77G06, 78G06, 79G06 또는 80G06을 구축하였다. 이들 항체와 관련한 아미노산 서열들은 표 2 및 표 3에 나타낸다.
뮤라인-유래 키메라 항체들에서 인간 CD36 (서열번호 1), 비-인간 영장류 CD36 (서열번호 2) 또는 마우스 CD36 (서열번호 3)을 일시적으로 과다 발현하는 HEK 293 세포에 결합하는 능력에 대해 스크리닝하였다. HEK 293 세포에 CD36 발현 구조체를 일시적으로 형질감염시킨 후, 각 후보 항체로 3배수 연속 희석 (500 nM에서 시작해 10회 희석)하여 세포에 처리하였다. 항체 1G04 (서열번호 9 및 10; PCT/IB2021/051881 참조, 이는 원용에 의해 본원에 포함됨)를 양성 대조군으로 이용하였다. 세포와 함께 인큐베이션한 후, 형광 표지된 항-인간 항체를 세포 배지에 첨가해 추가로 인큐베이션하고, 결합되지 않은 항체는 세포에서 세척 제거하였다. 그 후, 세포에 대해 FACS 분석을 수행해, 세포에 대한 항체 결합을 확인하였다. 그 결과는 시그모이드 타이트레이션 곡선에 피팅하였다. 비-선형 회귀 모델을 이용해 각 항체의 EC50 값을 GeoMFI 및 MFI 값으로부터, GraphPad PRISM에서 X=Log[X]에 따라 변환된 데이터에 대한 log (작용제) 대 반응 (매개변수 4종) 피팅을 이용해 계산하였다. 분석 결과는 각 항체가 HEK 293 세포 상에서 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 (시노몰구스) 및 마우스 CD36에 결합하는 능력에 대한 EC50 값으로서 하기 표 7에 나타내었다. 항체들 모두 인간 CD36에 결합하였지만, 일부는 EC50을 계산하기 위해 이용한 비-선형 회귀 모델을 피팅하는 적절한 타이트레이션 곡선이 제시되지 않아, 확인 안됨 (N.D.)으로 분류하였다. 대부분의 항체는 EC50이 1G04 작용제 인간 CD36과 비슷한 것으로 측정되었다. 항체 2종 (31G04 및 4G04)은 검사한 CD36 3종에 대한 친화성이 낮았으며, 이들 항체의 EC50 값은 비-선형 회귀에 의해 명확하게 계산할 수 없었다. 항체 2종 (26G04 및 31G04)은 비-인간 영장류 CD36에 결합하지 않았지만, 항체 한종 (4G04)은 비-인간 영장류에 다른 항체보다는 현저하게 낮은 친화성으로 결합하였다. 항체 11종은 마우스 CD36에 결합하지 않거나 또는 다른 항체보다 현저하게 낮은 친화성으로 결합하였다.
표 7 - CD36을 과다 발현하는 HEK 293 세포에 대한 항체 결합
항체 인간 CD36 (nM) 인간을 제외한 영장류 CD36 (nM) 마우스 CD36 (nM)
24G04 0.26 0.81 N.D.
23G04 0.30 1.69 N.D.
13G04 0.31 1.06 5.93
12G04 0.31 0.67 1.20
30G04 0.32 1.63 0.96
21G04 0.36 6.38 N.D.
29G04 0.36 0.32 N.D.
11G04 0.45 8.93 11.23
7G04 0.48 4.16 3.73
9G04 0.50 13.92 11.97
6G04 0.53 4.85 1.51
28G04 0.60 7.77 8.50
26G04 0.72 N.D. 158.20
25G04 0.74 2.19 N.D.
10G04 0.77 1.48 15.99
27G04 0.91 0.63 N.D.
32G04 0.94 6.52 5.14
17G04 1.25 4.03 9.31
22G04 1.25 1.68 N.D.
16G04 1.36 5.40 18.16
14G04 1.47 0.88 1.57
19G04 1.92 5.45 22.47
1G04 2.07 1.23 1.994
31G04 N.D. N.D. N.D.
20G04 N.D. 5.03 18.23
18G04 N.D. 6.60 14.66
15G04 N.D. 2.20 N.D.
5G04 N.D. 2.43 5.03
4G04 N.D. 27.69 N.D.
33G04 0.31 0.52 4.33
34G04 0.56 1.40 6.75
35G04 0.63 0.59 2.25
36G04 0.33 0.29 0.66
37G04 0.62 1.45 2.29
38G04 0.35 0.33 0.69
인간화된 항체의 서브세트에서 인간 CD36 (서열번호 1)을 일시적으로 과다 발현하는 HEK 293에 결합하는 능력을 또한 스크리닝하였다. HEK 293 세포를 CD36 발현 구조체로 일시적으로 형질감염시킨 후, 각 후보 항체로 3배수 연속 희석 (500 nM에서 시작해 10회 희석)하여 세포에 처리하였다. 항체 11G04 (서열번호 19 및 51)를 양성 대조군으로 이용하였다. 세포에의 항체 결합을 FACS에 의해 전술한 바와 같이 측정하였다. 분석 결과는 각 항체가 인간 CD36에 결합하는 능력에 대한 EC50 값으로서 하기 표 8에 나타낸다. 검사한 항체들 모두 인간 CD36에 결합하였으며, EC50 값이 인간 CD36에 대한 11G04 및 11G06과 비슷하였다.
표 8 - CD36을 과다 발현하는 HEK293 세포에 대한 인간화 항체 결합
항체 인간 CD36 (nM)
11G04 0.49 ±0.16
11G06 0.76±0.29
73G06 0.87±0.35
74G06 1.10±0.49
75G06 0.98±0.54
76G06 0.88±0.50
77G06 0.81±0.38
78G06 1.15±0.70
79G06 0.65±0.32
80G06 0.65±0.37
뮤라인-유래 키메라 항체의 서브세트에서 인간 CD36 (서열번호 1)을 일시적으로 과다 발현하는 SCC25에 결합하는 능력을 또한 스크리닝하였다. HEK 293 세포에 적용된 바와 같이 동일한 FACS-기반의 타이트레이션 분석을 이용한 결과, 검사한 항체들 모두 SCC25 세포를 이용하였을 경우 HEK 293 세포에서와 EC50이 비슷하였다. 이들 결과는 아래 표 9에 나타낸다.
표 9 - CD36을 과다 발현하는 SCC25 세포에 대한 항체 결합
항체 인간 CD36 (nM)
13G04 0.26
12G04 0.39
30G04 0.22
11G04 0.46
7G04 0.68
9G04 0.41
6G04 0.56
28G04 0.95
10G04 3.30
32G04 1.88
16G04 0.57
14G04 0.41
19G04 0.75
1G04 0.34
기록한 항체의 인간 CD36에 대한 결합 친화성을 또한 Biacore T200을 이용한 표면 플라스몬 공명 (SPR)에 의해 측정하였다. His 포획 키트 (Cytiva # 28-9950-56)에서 제공된 항-히스티딘 항체를 고정 완충제에 50 ㎍/ml로 희석하고, CM5 센서 칩에 표면 아민 커플링에 의해 약 13,000 RU 수준으로 공유 결합시켰다. 각 싱글-사이클 실험에서, 인간 CD36 (His-태그)을 저밀도 (대략 40 RU)로 포획시키고, 항체를 5가지 농도 (전개 완충제에 희석)로 포획된 항원으로 주입한 다음 복합체의 해리를 측정하였다. 항원 비-포획 참조 표면으로부터 수득한 데이터 (fc 1)를 항원-결합된 포획 표면의 데이터에 (fc 2)서 제하는, 이중 참조 방법을 채택하였다. 각 항체 타이트레이션 사이클에서 완충제 블랭크 주입을 진행한 다음 분석물 주입 사이클에서 제하여, 포획 표면 밀도의 소폭 변화에 대해 보정하였다. 사이클 사이에 글리신 pH 1.5를 60 s 간 주사해 표면 재생을 수행하였다. 모든 분석은 HBS-P 전개 완충제 (유속 30 ㎕/min) 중에 20℃에서 수행하였으며, 실험 전개 중에 샘플 랙은 6℃에서 두었다. 카이네틱 및 열역학 결합 상수를 도출하는 2가 분석물 모델에 데이터를 피팅하였다. 이러한 분석으로 수득한 데이터를 아래 표 10에 나타낸다.
표 10 - SPR-측정한 CD36과의 상호작용에 대한 평균 카이네틱 데이터 (2가 모델)
항체 k a1 (1/Ms) k d1 (1/s) K D1 (M)
1G04 2.9E+06 9.4E-03 3.2E-09
6G04 3.9E+05 2.0E-04 5.1E-10
7G04 7.1E+05 3.5E-03 4.9E-09
11G04 1.2E+06 2.2E-02 1.9E-08
13G04 2.4E+06 3.7E-03 1.5E-09
14G04 3.1E+06 7.2E-03 2.3E-09
28G04 8.7E+05 1.3E-02 1.4E-08
항-CD36 항체의 특성을 추가로 조사하기 위해, 항체의 융점 (melting temperature)을 측정하였다. 각 검사 항체를 단백질의 소수성 영역에 결합하였을 때 강한 형광을 발생시키는 염료 (Sypro orange)와 혼합하고, 천천히 100℃까지 가열하였다. 경시적인 형광 그래프에서 단백질이 비-폴딩되어 소수성 영역이 염료에 노출되는 시점을 나타내는 최고 기울기 지점으로서 융점을 식별하였다. 본 분석 결과를 아래 표 11에 나타낸다.
표 11 - 항-CD36 항체의 융점
항체 융점 (℃)
01G04 69.8
04G04 69.5
05G04 70.5
06G04 68.5
07G04 68.8
09G04 70.5
10G04 67.5
11G04 67.0
12G04 67.1
13G04 67.8
14G04 69.5
15G04 67.4
16G04 66.5
17G04 n.d.
18G04 70.1
19G04 66.8
20G04 62.8
21G04 67.5
22G04 69.4
23G04 68.1
24G04 67.7
25G04 70.0
26G04 70.6
27G04 66.7
28G04 70.4
29G04 68.2
30G04 55.9
31G04 56.8
32G04 70.6
항-CD36 항체 세트를, 1G04 항체, FA6-152 항-CD36 항체 (Abcam) 및/또는 11G04 항체와 인간 CD36에의 결합에 대해 경쟁하는 능력을 조사하였다. 이는 AlphaScreen® 비드-기반의 마이크로플레이트 분석을 이용해 수행하였다. 참조 항체 (1G04, FA6-152 또는 11G04)(20 ㎍/mL)를 AlphaLISA® 어셉터 비드에 접합시키고, 정제한 바이오틴-태깅된 인간 CD36 (12.5 nM) 및 검사 항-CD36 항체 (500 nM에서 0.10 nM까지 2배 연속 희석)와 함께 인큐베이션하였다. 그런 다음, AlphaLISA® 스트렙타비딘 도너 비드를 첨가하고, 혼합물을 암 조건 하에 25℃에서 30분간 인큐베이션하였다. 도너 비드에는 680 nm 광에 의한 여기시 산소 (O2)를 여기된 형태, 일중항 산소로 변환하는 광증감제가 함유되어 있다. 일중항 산소 분자는 수명이 짧고 (반감기 4 마이크로초), 바닥 상태로 다시 떨어지기 전 용액에서 약 200 nm 확산할 수 있다. 어셉터 비드가 없을 경우, 일중항 산소 분자는 임의의 광 신호를 발생 없이 바닥 상태로 떨어진다. 어셉터 비드가 200 nm 이내에 있을 경우, 에너지가 일중항 산소에서 비드로 전달되어 615 nm에서 광이 발생된다. 이에, 참조 항체와 CD36 간의 결합 정도는 항-CD36 검사 항체의 존재 하에 관찰한 615 nm에서의 형광 수준으로 측정하였으며, 항체가 결합된 CD36에의 결합에 대해 경쟁함으로써 비드 대 비드 상호작용을 파괴할 수 있을 경우에 예상되는 대조군에 비해 형광이 감소하였다. 경쟁 분석 결과를 아래 표 12에 요약 개시한다. 검사한 항체 대부분이 1G04 (05G04, 17G04, 21G04, 22G04, 23G04, 32G04, 12G04, 7G04, 9G04, 28G04 및 14G04)와 단독으로 경쟁하거나 또는 1G04 및 11G04 (16G04, 18G04, 30G04, 33G04, 34G04, 35G04, 36G04, 37G04, 및 38G04) 둘다와 경쟁하였다. 19G04 및 20G04 항체는 11G04와 단독으로 경쟁하는 것으로 관찰되었다. 4G04, 6G04, 13G04, 15G04, 24G04, 25G04, 26G04, 27G04, 29G04 및 31G04 항체는 1G04 및 FA6-152 둘다와 경쟁하는 것으로 관찰되었다. 10G04 및 11G04 및 19G04 항체는 1G04 또는 FA6-152와 경쟁하지 않았다.
표 12 - 항-CD36 항체 경쟁
항체 1G04와 경쟁 FA6-152와 경쟁 11G04와 경쟁
13G04 O (EC50 = 0.17 nM) O (EC50 = 46.80 nM) N.D.
12G04 O (EC50 = 0.78 nM) × N.D.
11G04 × × N.D.
7G04 O (EC50 = 0.95 nM) × N.D.
9G04 O (EC50 = 2.06 nM) × N.D.
6G04 O (EC50 = 1.15 nM) O (EC50 = 1044 nM) N.D.
28G04 O (EC50 = 4.69 nM) × N.D.
16G04 O (EC50 = 9.19 nM) × O (EC50 = 3.73 nM)
14G04 O (EC50 = 0.31 nM) × N.D.
19G04 × × O (EC50 = 5.23)
04G04 O (EC50 = 0.11 nM) O (EC50 = 9.89 nM) N.D.
05G04 O (EC50 = 0.02 nM) × N.D.
18G04 O (EC50 = 15.61 nM) × O (EC50 = 4.54)
20G04 × × O (EC50 = 4.69)
21G04 O (EC50 = 0.45 nM) × N.D.
22G04 O (EC50 = 0.53 nM) × N.D.
23G04 O (EC50 = 0.28 nM) × N.D.
24G04 O (EC50 = 0.29 nM) O (EC50 = n.d.) N.D.
25G04 O (EC50 = 0.29 nM) O (EC50 = n.d.) N.D.
26G04 O (EC50 = 0.46 nM) O (EC50 = 2.66 nM) N.D.
27G04 O (EC50 = 0.15 nM) O (EC50 = 1.8 nM) N.D.
29G04 O (EC50 = 0.37 nM) O (EC50 = 33.8 nM) N.D.
31G04 O (EC50 = 0.27 nM) O (EC50 = 2.50 nM) N.D.
32G04 O (EC50 = 1.46 nM) × N.D.
08G04 O (EC50 = 0.68 nM) × N.D.
10G04 × × N.D.
15G04 O (EC50 = 0.41 nM) O (EC50 = 5.65 nM) N.D.
17G04 O (EC50 = 0.52 nM) × N.D.
28G04 O (EC50 = 4.69 nM) × N.D.
30G04 O (EC50 = n.d.) × O (EC50 = 0.65 nM)
33G04 O (EC50 = 1.58 nM) N.D. O (EC50 = 3.68 nM)
34G04 O (EC50 = 2.47 nM) N.D. O (EC50 = 4.82 nM)
35G04 O (EC50 = 0.66 nM) N.D. O (EC50 = 1.35 nM)
36G04 O (EC50 = 0.57 nM) N.D. O (EC50 = 1.04 nM)
37G04 O (EC50 = 9.91 nM) N.D. O (EC50 = 3.30 nM)
38G04 O (EC50 = 1.45 nM) N.D. O (EC50 = 1.05 nM)
실시예 12: CD36과 이의 리간드 간의 상호작용에 대한 항-CD36 항체의 효과 검사
항-CD36 항체가 CD36-매개 지방산 흡수에 영향을 미치는 능력을 이전 간행물에서 기인한 수정한 세포-기반의 분석을 이용해 측정하였다. Feng, W. et al., Cell Reports 29(11):3405-3420 (2019); Henkin, A. et al., ACS Chem. Biol. 7(11):1884-91 (2012)을 참조한다. 간략하게는, 루시퍼라제 및 인간 CD36을 과다 발현하도록 SCC25 세포를 조작하여 96웰 플레이트에 접종하였다. 루시페린과 커플링된 팔미트산을 세포 배지에 첨가하여 인큐베이션하고 CD36-매개 흡수 및 루시퍼라제와 이의 기질 루시페린과의 반응을 통해 발광 생성을 유발하였다. 생성된 발광을 세포 배지에 존재하는 항-CD36 항체 또는 대조군 이소형 항체와 함께 인큐베이션한 후 측정하였다. 도 20에 나타낸 바와 같이, 각각의 검사한 항-CD36 항체는 이소형 대조군 항체를 처리한 후 관찰된 흡수와 비교해 지방산의 흡수를 저해하였다. 관찰된 지방산 흡수에 대한 평균 저해 %를 표 13에 또한 나타내었다.
표 13 - 항-CD36 항체의 지방산 흡수 저해
항체 지방산 흡수 저해 %
13G04 52.8
12G04 43.8
30G04 43.5
11G04 41.6
7G04 37.4
9G04 41.1
6G04 35.1
28G04 39.7
16G04 45.2
14G04 45.1
19G04 53.3
1G04 30.5
항-CD36 항체가 CD36-매개 지방산 흡수를 저해하는 능력을 형광단 (BODIPY FL C16) 연결된 팔미트산의 흡수 저해 능력을 통해 또한 측정하였다. 기본적인 실험 프로토콜은 도 21A에 나타낸다. HEK 293 세포를 인간 CD36을 과다 발현하도록 벡터로 안정적으로 형질감염시켜, 지방산 흡수성이 강화된 안정한 세포주 (HEK hCD36 cl48)를 구축하였다. 각 분석에서 비-형질감염 대조군 HEK 293 세포 및 HEK hCD36 cl48 세포를 참조 대조군으로 이용하였다 (도 21B-21J). HEK hCD36 cl48 세포가 수용된 웰의 세포 배지에 항-CD36 항체 또는 이소형 대조군을 첨가하여, 37℃에서 30분간 인큐베이션하였다. Bodipy-표지된 팔미트산을 첨가해 37℃에서 20분간 세포와 함께 인큐베이션하였으며, 이때 FACS 분석을 수행해 세포내 형광을 검출하였다. 각 항체는 0.125 nM - 1000 nM의 농도 범위에서 그 효능을 검사하기 위해 타이트레이션하였다. 분석 결과를 도 21B-21J에서 도표로 작성하였다. 6G04 (도 21D), 7G04 (도 21E), 9G04 (도 21F), 11G04 (도 21G), 13G04 (도 21H), 14G04 (도 21I) 및 28G04 (도 21J)는 각각 이소형 대조군 항체 (도 21B) 처리와 비교해 HEK 293 세포의 팔미트산 흡수를 저해하였다. 아울러, 6G04, 7G04, 9G04, 11G04, 13G04, 14G04 및 28G04는 각각 1G04보다 더 효율적으로 팔미트산의 흡수를 저해하였다 (도 21C). 각 검사 항체의 지방산 흡수 저해 IC50을 표 14에 나타낸다.
표 14 항-CD36의 지방산 흡수 저해 (IC 50 계산)
항체 IC 50 (nM)
001G04 1.0
004G04 483.0
005G04 >1000
006G04 0.1
007G04 1.0
009G04 170.0
010G04 33.0
011G04 0.07
012G04 3.90
013G04 0.20
014G04 0.13
015G04 >1000
016G04 0.15
018G04 2.60
019G04 0.05
023G04 1.00
028G04 0.09
029G04 0.08
030G04 0.80
032G04 42.0
033G04 0.1
034G04 0.2
035G04 0.04
036G04 0.81
037G04 0.3
038G04 0.18
CD36은 지방산의 흡수를 촉진할 뿐 아니라, 산화된 LDL ("oxLDL")의 내재화를 촉진한다. 항-CD36 항체가 CD36-매개 oxLDL 흡수를 저해하는 능력을 형광단 (DiI)이 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 능력에 의해 측정하였다. 기본적인 실험 프로토콜은 도 22A에 나타낸다. 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC25 세포를 접종하고, 항-CD36 항체 또는 이소형 대조군을 세포 배지 중에 처리한 다음 37℃에서 60분간 인큐베이션하였다. 그 후, DiI-표지된 oxLDL을 첨가해 세포와 37℃에서 120분간 인큐베이션하였으며, 이때 FACS 분석을 수행해 세포내 형광을 검출하였다. 각 항체는 335 nM - 0.00067 nM 농도 범위에서 그 효능을 검사하기 위해 타이트레이션하였다. 분석 결과를 도 22B에 도표로 도시하였다. 1G04, 6G04, 7G04, 11G04, 13G04, 14G04 및 28G04는 각각 이소형 대조군 항체 처리와 비교해 SCC25 세포의 oxLDL 흡수를 저해하였다. 각 검사 항체의 oxLDL 흡수 저해 IC50을 표 15에 나타낸다.
표 15. 항-CD36의 oxLDL 흡수 저해
항체 IC 50 (nM)
1G04 0.36
6G04 0.27
7G04 0.27
11G04 1.17
13G04 0.26
14G04 0.35
28G04 1.67
33G04 0.28
34G04 1.06
35G04 0.11
36G04 0.09
37G04 1.14
38G04 0.35
CD36에의 Ab 결합이 CD36과 TSP1과의 상호작용을 간섭하는지를 조사하기 위해, 항-CD36 항체를 SPR 경쟁 실험으로 검사하였다. SPR 표면에 CD36을 고정한 후, 20 nM 항-CD36 항체를 CD36에 결합 포화하도록 주입하였다. 결합 포화에 도달한 후 (약 250초), 200 nM TSP1을 짧은 펄스로 주입하였다. 주석이 달린 프로토콜 단계를 적용해 1G04를 이용해 수득한 데이터에 대한 예시적인 도표를 도 23A에 도시한다. 항-CD36 항체가 TSP-1의 상호작용을 간섭하는지를 확인하기 위해, TSP-1 주입 후 반응 단위 (RU) 변화를 항-CD36 항체가 함유된 주입물 및 완충제 단독 함유 주입물에서 비교하였다 (도 23A 참조). 도 23B에 나타낸 바와 같이, 검사 항체 어느 것도 TSP-1/CD36 상호작용을 >50%로 낮추진 않았다.
실시예 13 - 항-CD36 항체의 Fc 영역 조작
1G04 항-CD36 항체의 가변 영역을 여러가지 Fc 침묵화 변이를 가진 여러가지 불변 영역과 접합하여 클로닝하였다. 검사한 불변 영역은 다음과 같다: (1) 인간 IgG1 야생형 서열; (2) L234A 및 L235A ("LALA") 변이를 가진 인간 IgG1; (3) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G ("P329G LALA")를 가진 인간 IgG1; 아미노산 돌연변이 L234S, L235T 및 G236R ("STR")을 가진 인간 IgG1; 및 아미노산 돌연변이 S228P 및 L235E ("SPLE")를 가진 인간 IgG4. 이런 방식으로 제작한 항체는 1G03 항체 (WT IgG1), 1G05 항체 (IgG1 + P329G LALA); 1G06 항체 (IgG1 + STR); 및 1G07 항체 (IgG4 + SPLE)이다.
1G04로부터 유래한 수득한 키메라 항체들 각각이 인간 CD36 및 마우스 CD36에 결합하는 능력을 조사하였다. 결합은 96웰 ELISA 플레이트를 먼저 인간 CD36 (Sino Biological) 또는 마우스 CD36 단백질로 코팅하는 ELISA 분석을 이용해 검사하였다. 도 24A (인간 CD36에의 결합) 및 도 24B (마우스 CD36에의 결합)에 나타낸 바와 같이, 여러가지 Fc-포맷 항체들에서 결합 차이는 관찰되지 않았다.
여러가지 Fc-포맷 항-CD36 항체를 또한 인간 CD36 (서열번호 1)을 안정적으로 발현하는 SCC25 세포에 결합하는 능력에 대해 조사하였다. 각 항체를 10배 연속 희석 (100 nM에서 시작해 5회 희석)해 SCC25 세포에 처리하였다. 세포와 인큐베이션한 후, 형광 표지된 항-인간 항체를 세포 배지에 첨가해 추가로 인큐베이션하고, 결합되지 않은 항체는 세포에서 세척 제거하였다. 그 후, 세포에 대해 FACS 분석을 수행해 세포에의 항체 결합을 확인하였다. 결과는 시그모이드 타이트레이션 곡선에 피팅하였다. 비-선형 회귀 모델을 이용해 각 항체의 EC50 값을 GeoMFI 및 MFI 값으로부터, GraphPad PRISM에서 X=Log[X]에 따라 변환된 데이터에 대한 log (작용제) 대 반응 (매개변수 4종) 피팅을 이용해 계산하였다. 분석 결과는 아래 표 16에 제시하고, 도 24C에 도표로 도시하였다. 이들 데이터는 Fc 조작이 CD36에의 결합에 영향을 미치지 않는다는 것을 추가로 검증해준다.
표 16 - CD36을 과다 발현하는 SCC25 세포에 대한 항체 결합
항체 EC 50 huCD36 (nM)
1G03 0.38
1G04 0.42
1G05 0.38
1G06 0.38
1G07 0.47
여러가지 Fc-포맷의 항-CD36 항체가 CD36-매개 지방산 흡수에 미치는 영향을 이전 간행물에서 기원한 수정한 세포-기반의 분석을 이용해 측정하였다. Feng et al., Cell Reports 2019; Henkin et al., ACS Chem. Biol. 2012를 참조한다. 간략하게는, 루시퍼라제 및 인간 CD36을 과다 발현하도록 SCC25 세포를 조작하여, 96웰 플레이트에 접종하였다. 루시페린과 커플링된 팔미트산을 세포 배지에 첨가한 다음 인큐베이션하고, CD36-매개 흡수 및 루시퍼라제와 이의 기질 루시페린과의 반응에 의한 발광 발생을 유발하였다. 발생된 발광을 세포 배지에 존재하는 항-CD36 항체 또는 대조군 이소형 항체와 함께 인큐베이션한 후 측정하였다. 도 24D에 나타낸 바와 같이, 여러가지 Fc 변이체들은 각각 비슷한 수준에서 지방산 흡수를 저해하였으며, 즉 Fc 조작은 항-CD36 항체에 의한 CD36-매개 지방산 흡수 저해에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다.
FcγR 및 FcRn에의 여러가지 Fc-포맷의 항-CD36 항체들의 결합을 항체를 경쇄를 통해 고정함으로써 SPR에 의해 측정하였다. 이들 분석의 셋업은 Fc 도메인이 용매-노출되도록 항체를 배향시켜, 용해성 수용체 단백질과의 상호작용을 정량할 수 있다. 결합 특성이 잘-정의된 항체를 분석 전체에 양성/음성 대조군으로 포함시켰다. 도 25A에 나타낸 바와 같이, 검사한 Fc 변이들은 각각 인간 및 시노몰구스 FcγR과의 상호작용을 감소시켰다. LALAPG (1G05) 및 STR 변이를 가진 항체가 인간 및 시노몰구스 FcγR에 대한 활성이 가장 낮았다. 이와는 대조적으로, 도 26에 나타낸 바와 같이, 어느 변이도 pH 5.8에서 인간 FcRn과의 상호작용의 친화성 (KD)을 바꾸지 않았다. 이는 Fc 변이체들 모두 엔도솜 pH에서 FcRn 친화성을 유지하는 반면, 중성 pH에서는 빨리 해리되어, 효율적인 Fc-매개 생체내 Ab 세포내 재이용이 보장됨을 의미한다.
여러가지 Fc-포맷의 항-CD36 항체들을 프로메가의 ADCC, ADCP 및 CDC 리포터 생물분석을 제조사의 지침에 따라 이용해 검사하였다. 도 25B에 나타낸 바와 같이, 1G04, 1G05, 1G06 및 1G07 항체에 노출된 세포에서는 FcγRIIIa-매개 ADCC 반응이 완전히 소멸되었다 (즉, 검출 불가). 마찬가지로, 도 25C에 나타낸 바와 같이, 1G04, 1G05, 1G06 및 1G07 항체에 노출된 세포에서는 FcγRIIa-매개 ADCP 반응이 완전히 소멸되었다 (즉, 검출 불가). 마지막으로, 도 25D에 나타낸 바와 같이, 1G04, 1G05, 1G06 및 1G07 항체에 노출된 세포에서는 CDC 보체 반응이 검출되지 않았다. 이들 분석 각각에서 비-변형된 IgG1 Fc 영역을 가진 1G03 항체에 노출한 이후에는 유의한 반응은 관찰되었다.
96웰 ELISA 플레이트를 검사 항체로 코팅하고 C1q 인간 단백질을 첨가한 (250 ㎍/mL에서 시작해 2.5배 연속 희석) 표준 ELISA 분석을 이용해 보체 C1q 단백질의 결합을 또한 측정하였다. 도 27에 나타낸 바와 같이, Fc-조작된 샘플 어느 것에서도 결합은 관찰되지 않은 반면 야생형 Fc 항체는 C1q 인간 단백질에 대해 결합성을 나타내었다.
여러가지 Fc 포맷의 항-CD36 항체를 또한 시험관내 항체-유도성 혈소판 응집 분석으로 검사하였다. 혈소판 응집 반응은 건강한 지원자 6명의 전혈 샘플로부터 준비한 혈소판 풍부 혈장 (PRP)에서, 특수 응집 측정기 AggRAM (Helena Biosciences)를 사용해, 샘플의 빛 투과 증가로서 빛 투과 응집 측정법 (LTA)으로 측정하였다. 항체는 혈소판 작용제인 아데노신 다이포스페이트 (ADP)의 존재 및 부재 하에 검사하였다. ADP는 전체 지원자들에서 PRP 중에 부분 응집 반응을 생성하도록 타이트레이션하였다 (PRP 샘플의 생존성 검증). FcγRIIa 수용체를 통한 혈소판에 대한 효과가 공지된 항-CD226/DNAM-1 (LeoA1) 항체를 양성 대조군으로 이용하였다. 검사 항체의 잠재적인 직접 및 강화 효과도 차단성 항-CD32 항체 (IV.3)의 존재 하에 평가해, 임의의 관찰된 효과가 FcγRIIa 수용체에 의해 매개되는지를 검증하였다. 각각의 항-CD36 항체는 500 nM 농도에서 검사하였다 (n=6). 도 28A 및 28B에 나타낸 바와 같이, Fc 변이들은 각각 심지어 혈소판 응집 작용제 (ADP)의 존재 하에도 항체-유도성 혈소판 응집을 소거하였다.
실시예 14 - 1G04 및 11G04 항-CD36 항체의 에피토프 분석
중수소 표지하기 위해 1G04 및 11G04 항체를 각각 재조합 인간 CD36과 D2O-표지 용액 중의 최적의 화학량론적 비율 1:1.5로 인큐베이션하고, 막 여과를 통해 10 mg/mL로 농축하였다. 모든 샘플은 PBS pH 7.4에서 완충제 교체하고, 실온에서 다양한 시간 동안 인큐베이션하였다. 샘플 30 ㎕를 미리 냉각한 1 M 트리스(2-카르복시에틸)포스핀 (TCEP)/8 M 구아니딘 클로라이드, pH 2.5 (퀀칭 완충제) 30 ㎕에 첨가해 중수소화를 퀀칭하고, 혼합한 샘플을 2분간 1.0℃에서 인큐베이션하였다. 퀀칭한 샘플에 대해 이후 고정된 펩신/프로테아제 컬럼을 이용해 온라인 절단을 수행하였다. 절단된 펩타이드를 C18 프리컬럼에 0℃에서 포획한 후 9분 농도구배 분리 3-40% 5 (이동상 A: 0.1% 포름산/물; 이동상 B: 0.1% 포름산/아세토니트릴)를 이용한 크로마토그래피 분리를 수행하기 위해 분석용 C18 컬럼으로 용출시켰다. C36 펩타이드를 식별하기 위해 비-중수소화 샘플의 LC/MSE 데이터를 처리하여 인간 CD36을 포함한 데이터베이스에서 검색하였다. CD36 단독 및 CD36 + mAb 하에 각 펩타이드의 중수소 흡수를 트리플리케이트로부터 정렬된 체류 시간 및 고 질량 정확도 (<10 ppm)를 적용해 각 시점에 중심 질량 값 (centroid mass value)을 토대로 계산하였다. mAb 결합시 현저하게 보호된 CD36의 임의 영역을 mAb의 에피토프 구성요소로 정의하였다. 도 30은 1G04 단독 및 mAb와 조합한 경우의 각 CD36 펩타이드의 중수소 흡수를 도시한다. 도 31C는 11G04 단독 및 mAb와 조합한 경우의 각 CD36 펩타이드의 중수소 흡수를 도시한다.
인간 CD36 서열 (서열번호 1)에서 주요 1G04 결합 에피토프를 구성하는 것으로 식별된 잔기들은 도 29A에 진하게 밑줄 표시하였다. CD36이 조합된 리본 및 공간 필링 모델은 도 29B에 나타내었다. 1G04에 대해 주요 결합 에피토프를 구성하는 것으로 수소-중수소 교환 실험에서 식별된 잔기는 진하게 강조 표시하였다 (145A, 146S, 147H, 148I, 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 157I, 158L, 159N, 160S, 185P, 186F, 187L, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 197T, 198V, 199G, 398K, 399I, 400Q, 401V, 402L, 403K, 404N, 405L, 406K, 407R, 408N, 409Y, 410I, 411V, 412P, 413I 및 414L).
인간 CD36 서열 (서열번호 1)에서 주요 11G04 결합 에피토프를 구성하는 것으로 식별된 잔기들은 도 31A에 진하게 밑줄 표시하였다. CD36이 조합된 리본 및 공간 필링 모델은 도 31B에 나타내었다. 11G04에 대해 주요 결합 에피토프를 구성하는 것으로 수소-중수소 교환 실험에서 식별된 잔기는 진하게 강조 표시하였다 (280E, 281S, 282D, 283V, 284N, 285L, 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 293F, 294V, 295L, 296P, 297S, 298K, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S, 351P, 352D, 353V, 354S, 355E, 356P, 357I, 358D, 359G, 360L 361N, 362D, 363N, 364E, 365E).
실시예 15: 항-CD36 항체를 이용한 대장암 치료
대장암에서 항-CD36 항체의 효과 실험을 BALB/c 누드 마우스 (면역 결핍)에서 수행하였다. 이러한 실험의 실험적인 개괄은 도 32A에 나타낸다. 실험에는 마우스 암컷만 참여하였다. 모든 마우스에, 루시퍼라제를 발현하는 레트로바이러스 벡터로 형질전이된 상업적으로 이용가능한 HCT-116 (ATCC) 암 세포를 접종하였다. HCT-116 세포는 인간 결장직장 암종 (즉, 대장암)으로부터 유래하였다. HCT-116 세포는 접종하기 전 가습 인큐베이터에서 37℃ 및 5% CO2 하에 인큐베이션하였으며, 5 ㎍ ml-1 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FBS (GIBCO)가 첨가된 맥코이 5A 배지에서 배양하였다.
각 마우스에서 HCT-116 세포 2x106개를 정위 주사를 통해 접종하였다. 접종한 후, 그리고 1주일 후 각 마우스에서 영상을 촬영하고, 치료 개시 전 생체외 발광에 따라 간 전이를 검증하였다. 치료는 HCT-116 세포를 접종한 후 13일차에 시작하였다. 접종한 마우스는 치료군 7종 중 하나로 할당하였다: 비히클 주사 대조군 (n = 8), 1G04 처리 (n = 8), 11G04 처리 (n = 9), 13G04 처리 (n = 6), 14G04 처리 (n = 7), 28G04 처리 (n = 9) 및 6G04 처리 (n = 8). 항체 처리는 주당 3회로 용량 10 mg/kg으로 복막내 (i.p.) 주사를 통해 투여하였으며, 대조군 마우스에는 동일한 계획으로 비히클을 동일한 부피로 투여하였다. 치료 개시하기 전날, 그리고 치료 개시 후 6일, 13일 및 21일차에, 모든 마우스를 IVIS에 의해 영상을 촬영하였다. 치료 기간이 끝나면 마우스를 희생시켰다 (23일). 희생 후 부검 및 생체외 IVIS를 수행하기 위해 장기 및 조직을 채취하였다.
도 32B는 마우스에서 루시퍼라제-함유 종양 세포의 증식에 대한 판독값으로서 경시적인 전체-동물 생발광 촬영 결과를 도시한다. 생발광 이미징은, 모든 항-CD36 항체들이 전체 동물 발광성을 감소시키고, 즉 주사한 생체내 HCT-116 종양 세포의 증식을 늦춘다는 것을, 보여준다.
마우스에서 간을 채취한 후 간에서 전이성 종양의 발광성을 IVIS를 이용한 생체외 발광에 의해 정량하였다 (도 32C). 비히클-처리 마우스에서 관찰된 평균 발광 값은 1.60*108이었다. 항-CD36 항체 처리 마우스 군들에서 관찰된 평균 발광 값은 3.61*107 (1G04), 6.85*107 (11G04), 8.99*107 (13G04), 6.38*107 (14G04), 4.76*107 (28G04) 및 5.84*107 (6G04)이었다. 즉, 항-CD36 처리는 발광을 감소시켰으며, 이는 전이 크기 및/또는 개수의 감소로 나타났다. 이들 데이터는 검사 항체들 모두 대장암에서 전이 전파 및 증식에 대한 강력한 저해제임을 보여준다.
요컨대, 도 32B 및 32C는 검사한 항-CD36 항체가 대장암에서 기원한 전이 발생 및 증식을 감소시키는데 효과적임을 보여준다.
실시예 16: HCDR3의 유사성에 따른 항체 클러스터링
파라토프에서 주요 과가변성 루프를 구성하는 HCDR3에 걸친 아미노산 서열들 간의 상호 유사성을 기반으로 일부 항-CD36 항체들에 대해 HCDR3 클러스터링을 수행하였다.
그 결과를 아래 표 17에 나타낸다.
표 17 - HCDR3 클러스터링
mAb ID (IgG LALA) HCDR3 (Kabat) HCDR3 nr. HCDR3 클러스터
11G04 KLDFDY 42 1
07G04 GGGYDGAWFAY 27 2
09G04 GYGNYGAWFAY 36 2
14G04 WLLSGNGMDY 55 3
04G04 DYYGSSYGYFDV 15 4
31G04 DYYGSSYGYFDV 15 4
13G04 SDYGNGYSFYLDV 49 5
21G04 IYYGLDN 41 6
22G04 IHYGLDN 40 6
23G04 IYYGLDN 41 6
24G04 IYYGLDN 41 6
25G04 IYYGLDN 41 6
29G04 IYYGLDN 41 6
15G04 EVYYGGYEDYGMDY 18 7
27G04 FILENYFDY 19 8
26G04 FTVEVTDAMDY 20 9
28G04 AGDYAFDY 1 10
18G04 DRYDVWFAY 10 11
19G04 DRYDVWFAY 10 11
20G04 DRYDVWFAY 10 11
16G04 DYFYGDANPWFAY 11 12
17G04 DYFYGDGYPWFTY 12 12
10G04 DGGYDVYFDY 4 13
05G04 DYYGSSTAWFAY 14 14
06G04 GEDYEGTWFAY 23 14
12G04 HGYDYDEEGAWFAY 38 15
30G04 HGQTGTWFAY 37 16
32G04 LLLR 62 17
33G04 SAYGDWFYGSSGPYADSIDA 72 18
34G04 SAYGDWFYGSSGPYADSIDA 72 18
35G04 AADSGYLYITDSIDA 66 19
36G04 SADTGYCSWSACIADSIDA 70 20
37G04 SSYGGGWSDVGSIDA 77 21
38G04 DSGAVSIDA 68 22

Claims (202)

  1. 경쇄 CDR1 영역, 경쇄 CDR2 영역, 경쇄 CDR3 영역, 중쇄 CDR1 영역, 중쇄 CDR2 영역 및 중쇄 CDR3 영역을 포함하는, CD36에 결합하는 단리된 항체로서,
    상기 중쇄 CDR1 영역은 서열번호 85-105로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
    상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 106-132 또는 248로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
    상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 133-158로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
    상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 159-172로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고;
    상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 173-185 또는 246으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 및
    상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 186-206 또는 247로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는, 단리된 항체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 항체가 키메라 항체인, 단리된 항체.
  3. 제1항에 있어서, 상기 항체가 인간화 항체인, 단리된 항체.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 85를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 106을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 133을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 186을 포함하는, 단리된 항체.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 86을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 107을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 134를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하는, 단리된 항체.
  6. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 86을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 108을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 135를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 188을 포함하는, 단리된 항체.
  7. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 87을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 109를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 136을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하는, 단리된 항체.
  8. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 88을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 110을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 137을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하는, 단리된 항체.
  9. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 89를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 111을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 138을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 161을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 175를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 189을 포함하는, 단리된 항체.
  10. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 112를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하는, 단리된 항체.
  11. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 91을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 113을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 140을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하는, 단리된 항체.
  12. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 92를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 114를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 141을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 162를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 176을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 191을 포함하는, 단리된 항체.
  13. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 93을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 115를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 142를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 163을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 177을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 192을 포함하는, 단리된 항체.
  14. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 94를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 116을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 143을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 164를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 175를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 193을 포함하는, 단리된 항체.
  15. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 117을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 144를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하는, 단리된 항체.
  16. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 118을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 145를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 187을 포함하는, 단리된 항체.
  17. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 95를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 119를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 146을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하는, 단리된 항체.
  18. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 194를 포함하는, 단리된 항체.
  19. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 148을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하는, 단리된 항체.
  20. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 186을 포함하는, 단리된 항체.
  21. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 196을 포함하는, 단리된 항체.
  22. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 121을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하는, 단리된 항체.
  23. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 97을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 122를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 149를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 165를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 178을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 197을 포함하는, 단리된 항체.
  24. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 97을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 123을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 150을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 165를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 178을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 197을 포함하는, 단리된 항체.
  25. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 98을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 124를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 151을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 198을 포함하는, 단리된 항체.
  26. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 96을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 120을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 147을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 159를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 173을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 195를 포함하는, 단리된 항체.
  27. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 91을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 125를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 152를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 190을 포함하는, 단리된 항체.
  28. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 99를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 126을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 133을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 162를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 176을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 199을 포함하는, 단리된 항체.
  29. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 100을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역이 서열번호 127을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역이 서열번호 153을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역이 서열번호 166을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역이 서열번호 179를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역이 서열번호 200을 포함하는, 단리된 항체.
  30. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 167을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 180을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 201을 포함하는, 단리된 항체.
  31. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 101을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 128을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 154를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 168을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 181을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 202을 포함하는, 단리된 항체.
  32. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 102를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 129를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 155를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 169를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 182를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 203을 포함하는, 단리된 항체.
  33. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 103을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 130을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 156을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 170을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 183을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 204를 포함하는, 단리된 항체.
  34. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 104를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 131을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 157을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 171을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 184를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 205를 포함하는, 단리된 항체.
  35. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 105를 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 132를 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 158을 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 172를 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 185를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 206을 포함하는, 단리된 항체.
  36. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 174를 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함하는, 단리된 항체.
  37. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 CDR1 영역이 서열번호 90을 포함하고, 상기 중쇄 CDR2 영역은 서열번호 248을 포함하고, 상기 중쇄 CDR3 영역은 서열번호 139를 포함하고, 상기 경쇄 CDR1 영역은 서열번호 160을 포함하고, 상기 경쇄 CDR2 영역은 서열번호 246을 포함하고, 상기 경쇄 CDR3 영역은 서열번호 247을 포함하는, 단리된 항체.
  38. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체는 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하고,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 13-44, 241 또는 243 중 하나 이상의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가지고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 45-78, 240, 242, 244 또는 245 중 하나 이상의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 동일성을 가진, 단리된 항체.
  39. 제38항에 있어서, 상기 항체는 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하고,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 13-44, 241 및 243으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하고; 및
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 45-78, 240, 242, 244 및 245로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는, 단리된 항체.
  40. 제39항에 있어서,
    v. 중쇄 가변 영역은 서열번호 13을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 45를 포함하고;
    vi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 14를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 46을 포함하고;
    vii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 15를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 47을 포함하고;
    viii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 16을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 48을 포함하고;
    ix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 17을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 49를 포함하고;
    x. 중쇄 가변 영역은 서열번호 18을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 50을 포함하고;
    xi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 19를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 51을 포함하고;
    xii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 20을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 52를 포함하고;
    xiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 21을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 53을 포함하고;
    xiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 22를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 54를 포함하고;
    xv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 23을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 55를 포함하고;
    xvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 24를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 56을 포함하고;
    xvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 25를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 57을 포함하고;
    xviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 58을 포함하고;
    xix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 26을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 59를 포함하고;
    xx. 중쇄 가변 영역은 서열번호 27을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 60을 포함하고;
    xxi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 28을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 61을 포함하고;
    xxii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 29를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 62를 포함하고;
    xxiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 30을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 63을 포함하고;
    xxiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 31을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 64를 포함하고;
    xxv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 32를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 65를 포함하고;
    xxvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 33을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 66을 포함하고;
    xxvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 34를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 67을 포함하고;
    xxviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 35를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 68을 포함하고;
    xxix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 36을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 69를 포함하고;
    xxx. 중쇄 가변 영역은 서열번호 37을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 70을 포함하고;
    xxxi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 38을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 71을 포함하고;
    xxxii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 39를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 72를 포함하고;
    xxxiii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 73을 포함하고;
    xxxiv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 40을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 74를 포함하고;
    xxxv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 41을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 75를 포함하고;
    xxxvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 42를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 76을 포함하고;
    xxxvii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 43을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 77을 포함하고;
    xxxviii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 44를 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 78을 포함하고;
    xxxix. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하고;
    xl. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 240을 포함하고;
    xli. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하고;
    xlii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 242를 포함하고;
    xliii. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하고;
    xliv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 244를 포함하고;
    xlv. 중쇄 가변 영역은 서열번호 241을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함하고; 또는
    xlvi. 중쇄 가변 영역은 서열번호 243을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열번호 245를 포함하는, 단리된 항체.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 인간 CD36에 결합하는, 단리된 항체.
  42. 제41항에 있어서, 상기 항체는 인간 CD36에 특이적으로 결합하는, 단리된 항체.
  43. 제41항에 있어서, 상기 항체는 인간 CD36 및 비-인간 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 단리된 항체.
  44. 제43항에 있어서, 상기 항체는 인간 CD36 및 인간을 제외한 영장류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 단리된 항체.
  45. 제44항에 있어서, 상기 인간을 제외한 영장류 CD36이 시노몰구스 CD36 또는 레서스 마카큐 CD36인, 단리된 항체.
  46. 제44항에 있어서, 상기 항체는 인간 CD36, 인간을 제외한 영장류 CD36 및 설치류 CD36에 대해 교차-반응성을 가진, 단리된 항체.
  47. 제46항에 있어서, 상기 설치류 CD36이 마우스 CD36 또는 랫 CD36인, 단리된 항체.
  48. 제41항에 있어서, 상기 항체는 145A, 146S, 147H, 148I, 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M, 157I, 158L, 159N, 160S, 185P, 186F, 187L, 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 197T, 198V, 199G, 398K, 399I, 400Q, 401V, 402L, 403K, 404N, 405L, 406K, 407R, 408N, 409Y, 410I, 411V, 412P, 413I 및 414L로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  49. 제48항에 있어서, 상기 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q, 156M,188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T, 400Q, 401V, 402L, 403K로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  50. 제49항에 있어서, 상기 항체는 152Q, 192Y 및 406K로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  51. 제48항에 있어서, 상기 항체는 149Y, 150Q, 151N, 152Q, 153F, 154V, 155Q 및 156M을 포함하는 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  52. 제48항에 있어서, 상기 항체는 188S, 189L, 190V, 191P, 192Y, 193P, 194V, 195T, 196T를 포함하는 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  53. 제48항에 있어서, 상기 항체는 400Q, 401V, 402L 및 403K를 포함하는 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  54. 제41항에 있어서, 상기 항체는 280E, 281S, 282D, 283V, 284N, 285L, 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y, 292R, 293F, 294V, 295L, 296P, 297S, 298K, 341I, 342S, 343L, 344P, 345H, 346F, 347L, 348Y, 349A, 350S, 351P, 352D, 353V, 354S, 355E, 356P, 357I, 358D, 359G, 360L, 361N, 362P, 363n, 364E, 365E로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  55. 제54항에 있어서, 상기 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 291Y 및 292R로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  56. 제55항에 있어서, 상기 항체는 288I, 289P, 290V, 402D, 403V 및 404S로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  57. 제54항에 있어서, 상기 항체는 286K, 287G, 288I, 289P, 290V, 292Y 및 292R로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  58. 제54항에 있어서, 상기 항체는 399A, 400S, 401P, 402D, 403V, 404S, 405E, 406P 및 407I로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산을 포함하는 인간 CD36의 에피토프에 결합하는, 단리된 항체.
  59. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 인간 CD36에 KD 20 nM 미만으로 결합하는, 단리된 항체.
  60. 제59항에 있어서, 상기 항체가 2가 모델을 이용한 표면 플라스몬 공명으로 측정시 인간 CD36에 KD 10 nM 미만으로 결합하는, 단리된 항체.
  61. 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 단리된 항체.
  62. 제61항에 있어서, 상기 중쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중쇄 불변 영역들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단리된 항체.
  63. 제62항에 있어서, IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  64. 제62항에 있어서, 상기 중쇄 불변 영역은 하나 이상의 아미노산 치환을 가진 IgG 불변 영역을 포함하고, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 하나 이상의 Fcγ 수용체에의 Fc 결합성 감소 및 Fc 작동자 기능 감소를 유발하는, 단리된 항체.
  65. 제64항에 있어서, 상기 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 아미노산 치환 L234A 및 L235A ("LALA")를 포함하는, 단리된 항체.
  66. 제64항에 있어서, 상기 하나 이상의 Fc 침묵화 돌연변이가 L234G, L235S 및 G236R; L234S, L235T 및 G236R; L234S, L235V 및 G236R; L234T, L235Q 및 G236R; L234T, L235T 및 G236R; L234A 및 L235A; 및 L234A, L235A 및 P329G로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함하는, 단리된 항체.
  67. 제62항에 있어서, IgG4 중쇄 불변 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  68. 제66항에 있어서, 상기 중쇄 불변 영역이 아미노산 치환 S228P를 가진 IgG 불변 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  69. 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 경쇄 불변 영역을 더 포함하는, 단리된 항체.
  70. 제69항에 있어서, 상기 경쇄 불변 영역이 인간 면역글로불린 κ 및 λ 경쇄 불변 영역들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단리된 항체.
  71. 제1항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 중쇄 불변 영역과 경쇄 불변 영역을 더욱 포함하고, 상기 중쇄 불변 영역은 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이고, 상기 경쇄 불변 영역은 인간 κ 경쇄 불변 영역인, 단리된 항체.
  72. 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 2중 특이 항체인, 단리된 항체.
  73. 제72항에 있어서, CD36에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  74. 제73항에 있어서, 면역 세포 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  75. 제74항에 있어서, 상기 면역 세포 항원이 PD-1, PD-L1, CTLA4, CD3, LA ICOS, LGR5, 4-1BB, CD40, CD40-L 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단리된 항체.
  76. 제73항에 있어서, 종양-특이 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 영역을 포함하는, 단리된 항체.
  77. 제76항에 있어서, 상기 종양-특이 항원이 HER2, HER3, EGFR, VEGF, IGF-1, IGF-2, ANG2, DLL1, IGF-1R, cMET, DLL4, FAP, DR5, IL15, IL15Ra, CD3, CEA, EPCAM, HER3, PSMA, PMEL 및 GPC3로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단리된 항체.
  78. 제75항 또는 제76항에 있어서, 상기 면역 세포 항원 또는 종양-특이 항원이 CD3인, 단리된 항체.
  79. 제73항에 있어서, 상기 항체가 바이파라토프 항체인, 단리된 항체.
  80. 제79항에 있어서, 고유한 비-중첩성 CD36 에피토프에 각각 특이적으로 결합하는 항원 영역을 2개 포함하는, 단리된 항체.
  81. 제80항에 있어서, 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인을 포함하는, 단리된 항체.
  82. 제81항에 있어서, 10G04, 11G04, 19G04, 20G04 및 30G04로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 추가로 포함하는, 단리된 항체.
  83. 제80항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 1G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제1 항원-결합 도메인과 11G04의 항원-결합 도메인을 포함하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는, 단리된 항체.
  84. 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단편인, 단리된 항체.
  85. 제84항에 있어서, 상기 항원 결합 단편이 Fab, Fab', F(ab')2, 단쇄 Fv (scFv), 이황화 연결된 Fv, V-NAR 도메인, IgNar, 인트라바디, IgGΔCH2, 미니바디, F(ab')3, 테트라바디, 트리아바디, 다이아바디, 단일-도메인 항체, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2 또는 scFv-Fc를 포함하는, 단리된 항체.
  86. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 단리된 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  87. 제86항에 있어서, 상기 조성물 내 항체의 95% 이상이 비-푸코실화된, 약학적 조성물.
  88. 제86항 또는 제87항에 있어서, PD-1 저해제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
  89. 제88항에 있어서, 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 약학적 조성물.
  90. 제89항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 약학적 조성물.
  91. 제86항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, PD-L1 저해제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
  92. 제91항에 있어서, 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 약학적 조성물.
  93. 제92항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 약학적 조성물.
  94. 제86항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, CTLA-4 저해제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
  95. 제94항에 있어서, 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 약학적 조성물.
  96. 제95항에 있어서, 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 약학적 조성물.
  97. 제86항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 화학치료제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
  98. 제87항에 있어서, 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 약학적 조성물.
  99. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석으로 측정시 IC50 20 nM 미만으로 지방산의 흡수를 저해하는, 환자의 암 치료 방법.
  100. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 환자에서 암 치료 방법.
  101. 제99항 또는 제100항에 있어서, 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방 육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 방법.
  102. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석으로 측정시 IC50 20 nM 미만으로 지방산의 흡수를 저해하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
  103. 필요한 개체에 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
  104. 제99항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체인, 방법.
  105. 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 제86항 내지 제98항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 암 치료 방법.
  106. 제105항 있어서, 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 방법.
  107. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 제86항 내지 제98항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 필요한 개체에 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 하나 이상의 전이성 종양을 치료하는 방법.
  108. 제102항 또는 제107항에 있어서, 상기 전이성 종양이 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 전이성 지방육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종인, 방법.
  109. 제99항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 방법.
  110. 제99항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 방법.
  111. 제99항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 TSP-1에의 CD36 결합을 50% 미만으로 차단하면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하는, 방법.
  112. 제99항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 인간 환자인, 방법.
  113. 제99항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 전장 항체, 단쇄 항체, scFv, Fab 단편 또는 F(ab')2 단편인, 방법.
  114. 제99항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 전장 항체인, 방법.
  115. 제114항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 제38항 내지 제40항 중 어느 한 항에 따른 항체를 포함하는, 방법.
  116. 제99항 내지 제115항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법이 제2 요법의 투여를 추가로 포함하는, 방법.
  117. 제116항에 있어서, 상기 제2 요법이 면역요법인, 방법.
  118. 제117항에 있어서, 상기 면역요법이 PD-1 저해제인, 방법.
  119. 제118항에 있어서, 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 방법.
  120. 제119항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 방법.
  121. 제117항에 있어서, 상기 면역요법이 PD-L1 저해제인, 방법.
  122. 제121항에 있어서, 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 방법.
  123. 제122항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 방법.
  124. 제117항에 있어서, 상기 면역요법이 CTLA-4 저해제인, 방법.
  125. 제124항에 있어서, 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 방법.
  126. 제125항에 있어서, 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 방법.
  127. 제116항에 있어서, 상기 제2 요법이 화학치료제인, 방법.
  128. 제127항에 있어서, 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 방법.
  129. 제99항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 전이가 개체에서 감소 또는 저해되는, 방법.
  130. 제116항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 2 이상의 요법이 순차적으로 투여되는, 방법.
  131. 제116항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 2 이상의 요법이 동시에 투여되는, 방법.
  132. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, CD36을 발현하는 암을 가진 개체를 치료하는 방법에 이용하기 위한 것이고, 상기 방법이 본 발명에 따른 항-CD36 항체를 치료학적 유효량으로 개체에 투여하는 것을 포함하는, 항체.
  133. 제132항에 있어서, 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 항체.
  134. 제132항 또는 제133항에 있어서, 상기 암이 전이성 암인, 항체.
  135. 제132항 내지 제134항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 항체.
  136. 제132항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 항체.
  137. 제132항 내지 제136항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 TSP-1에의 CD36 결합에는 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않으면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하는, 방법.
  138. 제132항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산의 흡수를 IC50 20 nM 미만으로 저해하는, 방법.
  139. 제132항 내지 제138항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 방법.
  140. 제132항 내지 제139항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 요법과 조합하여 사용되는, 항체.
  141. 제140항에 있어서, 상기 제2 요법이 면역요법인, 항체.
  142. 제141항에 있어서, 상기 면역요법이 항-PD-1 항체, 항-PL-L1 항체 또는 항-CTLA-4 항체인, 항체.
  143. 제140항에 있어서, 상기 제2 요법이 화학치료제인, 항체.
  144. 제143항에 있어서, 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 항체.
  145. CD36을 발현하는 암을 가진 개체를 치료하기 위한 의약제의 제조에 있어 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체의 용도.
  146. 제145항에 있어서, 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 용도.
  147. 제145항 또는 제146항에 있어서, 상기 암이 전이성 암인, 용도.
  148. 제145항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 용도.
  149. 제145항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 용도.
  150. 제145항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 TSP-1에의 CD36 결합에는 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않으면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하는, 용도.
  151. 제145항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산의 흡수를 IC50 20 nM 미만으로 저해하는, 용도.
  152. 제145항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체는 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시, oxLDL의 흡수를 IC50 10 nM 미만으로 저해하는, 용도.
  153. 제145항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 요법과 조합하여 사용되는, 용도.
  154. 제153항에 있어서, 상기 제2 요법이 면역요법인, 용도.
  155. 제154항에 있어서, 상기 면역요법이 항-PD-1 항체, 항-PL-L1 항체 또는 항-CTLA-4 항체인, 용도.
  156. 제153항에 있어서, 상기 제2 요법이 화학치료제인, 용도.
  157. 제156항에 있어서, 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 용도.
  158. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
  159. 제158항에 있어서, 제40항의 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역을 코딩하는, 단리된 폴리뉴클레오티드.
  160. 제158항 또는 제159항에 있어서, 서열번호 226, 228, 230, 232, 234, 236 및 253-256으로 이루어진 군으로부터 선택되는 중쇄를 코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 단리된 폴리뉴클레오티드.
  161. 제158항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호 227, 229, 231, 233, 235, 237, 257 및 258로 이루어진 군으로부터 선택되는 경쇄를 코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 단리된 폴리뉴클레오티드.
  162. 제158항 내지 제161항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단리된 폴리뉴클레오티드가 서열번호 226 및 227, 서열번호 228 및 229, 서열번호 230 및 231, 서열번호 232 및 233, 서열번호 234 및 235, 서열번호 236 및 237, 서열번호 253 및 257, 서열번호 253 및 258, 서열번호 254 및 257, 서열번호 254 및 258, 서열번호 255 및 257, 서열번호 255 및 258, 서열번호 256 및 257, 또는 서열번호 256 및 258을 포함하는, 단리된 폴리뉴클레오티드.
  163. 제158항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
  164. 제158항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 제163항에 따른 벡터를 포함하는 세포.
  165. 제164항에 있어서, E. coli, 슈도모나스, 바실러스, 스트렙토마이세스, 효모, CHO, YB/20, NS0, PER-C6, HEK 293, HEK 293T, NIH 3T3, HeLa, BHK, Hep G2, SP2/0, R1.1, B-W, L-M, COS1, COS7, BSC1, BSC40, BMT10 세포, 식물 세포, 곤충 세포 및 조직 배양물의 인간 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 세포.
  166. 제164항 또는 제165항에 있어서, 상기 세포는 기능성 α-1,6-푸코실트랜스퍼라제 (FUT8) 유전자가 결핍된, 세포.
  167. 제165항 또는 제166항에 따른 세포를 항체 발현에 적합한 조건에서 배양하고 세포에서 발현된 항체를 단리하는 것을 포함하는, CD36에 특이적으로 결합할 수 있는 항체의 제조 방법.
  168. 제167항에 있어서, 상기 항체는 세포로부터 방출되고, 세포를 배양한 배지로부터 단리되는, 방법.
  169. 약학적 조성물을 제조하기 위한 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체의 용도.
  170. 약학적 조성물을 제조하기 위한 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체 및 약제학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체의 용도.
  171. 제99항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 전이성 종양이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에 존재하는, 방법.
  172. 제132항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 전이성 암이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에 전이성 종양을 포함하는, 항체.
  173. 제144항 내지 제157항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 전이성 암이 간, 폐, 비장, 신장, 경부 림프절 또는 복막 벽 중 하나 이상에 전이성 종양을 포함하는, 용도.
  174. 필요한 개체에 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 따른 항체를 치료학적 유효량으로 또는 제86항 내지 제98항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 원발성 종양 및 전이성 종양을 모두 치료하는 방법.
  175. 제174항에 있어서, 상기 암이 구강 편평 세포 암종, 두경부암, 식도암, 위암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 대장암, 신장암, 전립선암, 육종, 지방육종, 흑색종, 백혈병 또는 림프종인, 방법.
  176. 제174항 또는 제175항에 있어서, 상기 전이성 종양이 전이성 구강 편평 세포 암종, 전이성 두경부암, 전이성 식도암, 전이성 위암, 전이성 난소암, 전이성 자궁경부암, 전이성 폐암, 전이성 유방암, 전이성 대장암, 전이성 신장암, 전이성 전립선암, 전이성 육종, 전이성 지방육종, 전이성 흑색종, 전이성 백혈병 또는 전이성 림프종인, 방법.
  177. 제174항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 크기를 감소시키는, 방법.
  178. 제174항 내지 제177항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 원발성 종양의 크기를 감소시키는, 방법.
  179. 제174항 내지 제178항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 IVIS 이미징 또는 H&E 염색에 의한 측정시 전이성 종양의 형성 또는 진행을 저해하는, 방법.
  180. 제174항 내지 제179항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시 TSP-1에의 CD36 결합을 50% 미만으로 차단하면서 CD36-매개의 지방산 및/또는 oxLDL의 흡수를 차단하는, 방법.
  181. 제174항 내지 제180항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 CD36을 발현하는 HEK 293 세포에서 FACS 분석에 의한 측정시 지방산의 흡수를 IC50 20 nM 미만으로 저해하는, 방법.
  182. 제174항 내지 제181항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 인간 CD36을 안정적으로 발현하는 SCC 세포의 형광단 연결된 oxLDL의 흡수를 저해하는 항-CD36 항체의 능력에 의한 측정시 IC50 10 nM 미만으로 oxLDL의 흡수를 저해하는, 방법.
  183. 제174항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 인간 환자인, 방법.
  184. 제174항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 전장 항체, 단쇄 항체, scFv, Fab 단편 또는 F(ab')2 단편인, 방법.
  185. 제174항 내지 제184항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 전장 항체인, 방법.
  186. 제185항에 있어서, 상기 항-CD36 항체가 제38항 내지 제40항 중 어느 한 항에 따른 항체를 포함하는, 방법.
  187. 제174항 내지 제186항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법이 제2 요법의 투여를 추가로 포함하는, 방법.
  188. 제187항에 있어서, 상기 제2 요법이 면역요법인, 방법.
  189. 제188항에 있어서, 상기 면역요법이 PD-1 저해제인, 방법.
  190. 제189항에 있어서, 상기 PD-1 저해제가 항-PD-1 항체인, 방법.
  191. 제190항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 펨브롤리주맙, 피딜리주맙 또는 니볼루맙인, 방법.
  192. 제188항에 있어서, 상기 면역요법이 PD-L1 저해제인, 방법.
  193. 제192항에 있어서, 상기 PD-L1 저해제가 항-PD-L1 항체인, 방법.
  194. 제193항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS-936559인, 방법.
  195. 제188항에 있어서, 상기 면역요법이 CTLA-4 저해제인, 방법.
  196. 제195항에 있어서, 상기 CTLA-4 저해제가 항-CTLA-4 항체인, 방법.
  197. 제196항에 있어서, 상기 항-CTLA-4 항체가 이필리무맙인, 방법.
  198. 제187항에 있어서, 상기 제2 요법이 화학치료제인, 방법.
  199. 제198항에 있어서, 상기 화학치료제가 시스플라틴인, 방법.
  200. 제174항 내지 제199항 중 어느 한 항에 있어서, 개체에서 전이가 감소 또는 저해되는, 방법.
  201. 제187항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, 2가지 요법이 순차적으로 투여되는, 방법.
  202. 제187항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, 2가지 요법이 동시에 투여되는, 방법.
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Family Cites Families (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
AU600575B2 (en) 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
CA1340288C (en) 1988-09-02 1998-12-29 Robert Charles Ladner Generation and selection of novel binding proteins
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
AU7247191A (en) 1990-01-11 1991-08-05 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
ATE269401T1 (de) 1991-04-10 2004-07-15 Scripps Research Inst Bibliotheken heterodimerer rezeptoren mittels phagemiden
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
ES2206447T3 (es) 1991-06-14 2004-05-16 Genentech, Inc. Anticuerpo humanizado para heregulina.
DE69233745D1 (de) 1991-12-02 2008-10-23 Cambridge Antibody Tech Herstellung von Autoantikörpern auf Phagenoberflächen ausgehend von Antikörpersegmentbibliotheken
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
US6174666B1 (en) 1992-03-27 2001-01-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA
EP0714409A1 (en) 1993-06-16 1996-06-05 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
AU696293B2 (en) 1993-12-08 1998-09-03 Genzyme Corporation Process for generating specific antibodies
EP0744958B1 (en) 1994-01-31 2003-06-25 Trustees Of Boston University Polyclonal antibody libraries
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
GB9601081D0 (en) 1995-10-06 1996-03-20 Cambridge Antibody Tech Specific binding members for human transforming growth factor beta;materials and methods
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
CA2359067C (en) 1999-01-15 2017-03-14 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
CA2383456C (en) 1999-08-23 2016-06-07 Clive Wood Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
NZ530583A (en) 1999-08-23 2005-10-28 Dana Farber Cancer Inst Inc Novel B7-4 molecules and uses therefor
DK1234031T3 (en) 1999-11-30 2017-07-03 Mayo Foundation B7-H1, AN UNKNOWN IMMUNE REGULATORY MOLECULE
JP2005531491A (ja) 2001-10-18 2005-10-20 ジェネンテック・インコーポレーテッド 癌の治療のための組成物と方法
US20040014194A1 (en) 2002-03-27 2004-01-22 Schering Corporation Beta-secretase crystals and methods for preparing and using the same
IL149820A0 (en) 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
HUE035898T2 (en) 2002-12-16 2018-05-28 Genentech Inc Immunoglobulin variants and their applications
CN1753912B (zh) 2002-12-23 2011-11-02 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
RU2406760C3 (ru) 2005-05-09 2017-11-28 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
CA3018525C (en) 2005-07-01 2023-08-01 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
BRPI0812913B8 (pt) 2007-06-18 2021-05-25 Merck Sharp & Dohme anticorpos monoclonais ou fragmento de anticorpo para o receptor de morte programada humano pd-1, polinucleotideo, método para produzir os referidos anticorpos ou fragmentos de anticorpos, composição que os compreende e uso dos mesmos
US20090028857A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
WO2009114335A2 (en) 2008-03-12 2009-09-17 Merck & Co., Inc. Pd-1 binding proteins
US8114845B2 (en) 2008-08-25 2012-02-14 Amplimmune, Inc. Compositions of PD-1 antagonists and methods of use
NZ717213A (en) 2008-12-09 2017-10-27 Genentech Inc Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
PL3279215T3 (pl) 2009-11-24 2020-06-29 Medimmune Limited Ukierunkowane środki wiążące przeciwko B7-H1
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
CA2828289C (en) 2011-03-29 2020-07-21 Roche Glycart Ag Antibody fc variants
WO2012145493A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Amplimmune, Inc. Antibodies and other molecules that bind b7-h1 and pd-1
CN103987405B (zh) 2011-11-28 2017-03-29 默克专利股份公司 抗pd‑l1抗体及其用途
EA037351B8 (ru) 2012-05-15 2021-04-29 Бристол-Майерс Сквибб Компани Способ лечения злокачественных опухолей с использованием комбинации антител против pd-1 и ctla-4
CN115093480A (zh) 2012-05-31 2022-09-23 索伦托药业有限公司 与pd-l1结合的抗原结合蛋白
CA2910278C (en) 2013-05-02 2021-09-28 Anaptysbio, Inc. Antibodies directed against programmed death-1 (pd-1)
CN105683217B (zh) 2013-05-31 2019-12-10 索伦托治疗有限公司 与pd-1结合的抗原结合蛋白
CN104250302B (zh) 2013-06-26 2017-11-14 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd‑1抗体及其应用
PE20210949A1 (es) 2013-08-01 2021-05-24 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos anti-fgfr2iiib afucosilados
JP6623353B2 (ja) 2013-09-13 2019-12-25 ベイジーン スウィッツァーランド ゲーエムベーハー 抗ｐｄ−１抗体並びにその治療及び診断のための使用
KR102256152B1 (ko) 2013-12-12 2021-05-27 샹하이 헨그루이 파마수티컬 컴퍼니 리미티드 Ｐｄ-1 항체, 이의 항원 결합 단편, 및 이의 의약 용도
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
WO2016106159A1 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Enumeral Biomedical Holding, Inc. Anti-pd-1 antibodies
US10041616B2 (en) 2015-03-04 2018-08-07 Fastest, Inc. Wide tolerance fluid connector
MA42971A (fr) 2015-03-13 2018-08-15 Cytomx Therapeutics Inc Anticorps anti-pdl1, anticorps anti-pld1 activables, et leurs procédés d'utilisation
ES2813580T3 (es) 2015-04-17 2021-03-24 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden una combinación de ipilimumab y nivolumab
EP3307777A4 (en) 2015-06-11 2019-02-13 Wuxi Biologics (Shanghai) Co. Ltd. NOVEL ANTI-PD-L1 ANTIBODIES
UA127372C2 (uk) 2015-07-30 2023-08-02 Макродженікс, Інк. Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло
WO2017020291A1 (en) 2015-08-06 2017-02-09 Wuxi Biologics (Shanghai) Co. Ltd. Novel anti-pd-l1 antibodies
WO2017024465A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
EA201890468A1 (ru) 2015-08-11 2018-07-31 Уси Байолоджикс (Кайман) Инк. Новые антитела против белка pd-1
WO2017024515A1 (en) 2015-08-11 2017-02-16 Wuxi Biologics (Cayman) Inc. Novel anti-pd-1 antibodies
AR105654A1 (es) 2015-08-24 2017-10-25 Lilly Co Eli Anticuerpos pd-l1 (ligando 1 de muerte celular programada)
JP6869987B2 (ja) 2015-09-01 2021-05-12 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｐｄ−１抗体及びその使用方法
EP3356412B1 (en) * 2015-09-29 2021-07-07 Fundació Institut de Recerca Biomèdica (IRB Barcelona) Targeting metastasis stem cells through a fatty acid receptor (cd36)
TW202208440A (zh) 2015-12-14 2022-03-01 美商宏觀基因股份有限公司 對於pd-1和ctla-4具有免疫反應性的雙特異性分子及其使用方法
EP3402512A4 (en) 2016-01-11 2019-09-25 Armo Biosciences, Inc. INTERLEUKIN-10 FOR USE IN THE PRODUCTION OF ANTIGEN-SPECIFIC CD8 + T LYMPHOCYTES AND METHODS OF USE THEREOF
WO2017132827A1 (en) 2016-02-02 2017-08-10 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
CN111491361B (zh) 2016-02-02 2023-10-24 华为技术有限公司 确定发射功率的方法、用户设备和基站
MX2022009270A (es) * 2020-01-30 2022-10-27 Ona Therapeutics S L Un inhibidor de cd36 para usarse en una terapia combinada para el tratamiento de cáncer y la metástasis del cáncer.
CA3174442A1 (en) * 2020-03-06 2021-09-10 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
GB2595299B (en) 2020-05-21 2022-08-03 Mabsolve Ltd Modified immunoglobulin FC regions

Also Published As

Publication number Publication date
CA3226281A1 (en) 2023-02-02
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