EA023148B1 - Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение - Google Patents

Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение Download PDF

Info

Publication number
EA023148B1
EA023148B1 EA201170373A EA201170373A EA023148B1 EA 023148 B1 EA023148 B1 EA 023148B1 EA 201170373 A EA201170373 A EA 201170373A EA 201170373 A EA201170373 A EA 201170373A EA 023148 B1 EA023148 B1 EA 023148B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cancer
amino acid
polypeptide
specified
binding
Prior art date
Application number
EA201170373A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170373A1 (ru
Inventor
Соломон Ланджерман
Линда Лью
Original Assignee
Эмплиммьюн, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41725778&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA023148(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Эмплиммьюн, Инк. filed Critical Эмплиммьюн, Инк.
Publication of EA201170373A1 publication Critical patent/EA201170373A1/ru
Publication of EA023148B1 publication Critical patent/EA023148B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70532—B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Описаны терапевтические композиции для увеличения Т-клеточного ответа, включающие слитый белок и агент, усиливающий эффективность действия указанного белка, и применение указанных композиций для производства лекарственного средства, увеличивающего Т-клеточный ответ, для лечения заболевания, поддающегося лечению путем увеличенного Т-клеточного ответа. Также раскрыт способ увеличения Т-клеточного ответа у человека, включающий введение указанному человеку слитого белка и агента, усиливающего эффективность действия указанного белка.

Description

Заявка на данное изобретение утверждает приоритет предварительных заявок США № 61/211697, зарегистрированной 2 апреля 2009 г., 61/091694, зарегистрированной 25 августа 2008 г., 61/091709 зарегистрированной 25 августа 2008 г., и 61/091705 зарегистрированной 25 августа 2008 г., раскрытия которых включены посредством ссылки в настоящем описании во всей полноте.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к терапевтическим композициям, содержащим соединение, которое препятствует передаче ингибиторного сигнала на Т-клетки в комбинации с потенцирующими агентами, и к применению указанных компонентов вместе или по отдельности для индукции Т-клеточных ответов, важных для лечения заболевания.
Уровень техники изобретения
Ответ Т-лимфоцитов на болезненные состояния, такие как инфекция и хронические заболевания, подобные раку, является сложным и включает в себя межклеточные взаимодействия и продукцию растворимых медиаторов (называемых цитокинами или лимфокинами). Активация Т-клеток обычно зависит от антигенспецифического сигнала в результате контакта Т-клеточного рецептора (ТСК) с антигенным пептидом, представленным с помощью главного комплекса гистосовместимости (МНС), тогда как степень указанной реакции контролируется положительными и отрицательными антиген-независимыми сигналами, испускаемыми рядом костимуляторных молекул. Указанные молекулы обычно являются членами семейства СЭ28/В7. Напротив, белок программируемой гибели клеток-1 (ΡΌ-1) является членом семейства рецепторов С.Н28. который передает отрицательный иммунный ответ, когда он индуцирован, на Т-клетки. Контакт между ΡΌ-1 и одним из его лигандов (В7-Н1 или В7-ЭС) индуцирует ингибиторный ответ, который уменьшает размножение Т-клеток и/или силу и/или продолжительность Т-клеточного ответа.
Таким образом, Т-лимфоцитарный ответ регулируется различными факторами, включающими в себя молекулы клеточной поверхности, которые работают как рецепторы, где рецепторы включают в себя комплекс ТСК, а также другие молекулы клеточной поверхности.
В целом, антигенспецифический Т-клеточный ответ опосредуется двумя сигналами: 1) взаимодействие ТСК с антигенным пептидом, представленным в окружении НС (сигнал 1); и 2) второй антигеннезависимый сигнал, передаваемый с помощью контакта между различными парами рецептор/лиганд (сигнал 2). Указанный второй сигнал является критическим для определения типа Т-клеточного ответа (активация или толерантность), а также для силы и продолжительности указанного ответа и регулируется положительными и отрицательными сигналами от костимуляторных молекул, таких как семейство белков В7.
Наиболее подробно охарактеризованным Т-клеточным путем является В7-СЭ28, в котором В7-1 (СЭ80) и В7-2 (СЭ86), каждый, могут вовлекать стимулирующий рецептор С.Н28 и ингибирующий рецептор СТЬА-4 (СЭ152). В сочетании с передачей сигнала посредством Т-клеточного рецептора связывание С.Н28 увеличивает антигенспецифическую пролиферацию Т-клетки, увеличивает продукцию цитокинов, стимулирует дифференцировку и эффекторную функцию и способствует выживаемости Т-клетки (Ьепкйоте, е! а1., Аппи. Кеу. 1ттипо1., 14:233-258 (1996); СйатЬегк и АШкоп, Сигг. Ορίη. 1ттипо1., 9:396-404 (1997) и Ка11ипе11 и Тйотркоп, Аппи. Кеу. 1ттипо1., 17:781-828 (1999)). Напротив, полагают, что передача сигнала через СТЬА-4 служит для передачи отрицательного сигнала, который ингибирует Т-клеточную пролиферацию, продукцию 1Ь-2 и развитие клеточного цикла (Кгитте1 и АШкоп, 1. Ехр. Мей., 183:2533-2540 (1996) и Аа1ипах е! а1., 1. Ехр. Мей., 183:2541-2550 (1996)). Другие члены семейства В7 костимуляторных молекул включают в себя В7-Н1 (Эопд, е! а1., Иа!иге Мей., 5:13651369 (1999) и Ргеетап, е! а1., 1. Ехр. Мей., 192:1-9 (2000)), В7-ОС (Ткепд, е! а1., 1. Ехр. Мей., 193:839-846 (2001) и Ьа!сЬтап, е! а1., Иа!иге 1ттипо1., 2:261-268 (2001)), В7-Н2 (^апд, е! а1., В1оой, 96:2808-2813 (2000); §теа11о№, е! а1., 1ттипйу, 11:423-432 (1999) и УокЫпада, е! а1., Иа!иге, 402:827-832 (1999)), В7-Н3 (СЬароуа1, е! а1., Иа!иге 1ттипо1., 2:269-274 (2001)) и В7-Н4 (Сйоц е! а1., 1. 1ттипо1., 171:4650-4654 (2003); §1са, е! а1., 1ттипйу, 18:849-861 (2003); Ргакай, е! а1., 1ттипйу, 18:863-873 (2003) и 2апд, е! а1., Ргос. Иа!1. Асай. 8с1. И.З.А., 100:10388-10392 (2003)). В7-Н5 (описан в АО 2006/012232) является недавно открытым членом семейства В7.
Молекулы семейства В7 имеют мембранный проксимальный 1дС (константный) домен и мембранный дистальный 1дУ (вариабельный) домен. Семейство СЭ28-подобных рецепторов указанных лигандов имеет общий внеклеточный 1дУ-подобный домен. Взаимодействия пар рецептор-лиганд опосредуются, главным образом, через остатки 1дУ-доменов лигандов и рецепторов (Зсйгаги, е! а1., Иа!иге 1ттипо1., 3:427-434 (2002)). В целом, 1дУ-домены, описывают как содержащие два листа, каждый из которых содержит слой β-тяжей (АйЬатк и Вагс1ау, Аппи. Кеу. 1ттипо1., 6:381-405 (1988)). Передний и задний листы СТЬА-4 содержат цепи А'ОРС'С и АВЕОС соответственно (Ок!гоу, е! а1., Зшепсе, 290:816-819 (2000)), тогда как передний и задний листы 1дУ-доменов В7 образованы из цепей АОРССС и ВЕО соответственно (Зсйтаги, е! а1., Иа!иге, 410:604-608 (2001); §!атрег, е! а1., Иа!иге, 410:608-611 (2001) и 1кет17и, е! а1., 1ттипйу, 12:51-60 (2000)). Кристаллографический анализ показал, что поверхность связывания СТЬА-4/В7 имеет решающую роль при взаимодействии СЭК3-аналогичной петли СТЬА-4, состоящей из мотива МУРРРУ, с поверхностью В7, образованной в основном цепями О, Р, С, С' и С
- 1 023148 (5>ο1ι\υ;·ιγΙζ. е1 а1., Ыа1иге, 410:604-608 (2001) и §1атрег, е1 а1., Ыа1иге, 410:608-611 (2001)). Данные, полученные на основе аминокислотной гомологии, изменчивости и компьютерного моделирования, подтверждают концепцию, что указанный мотив также является главным В7-связывающим сайтом для СЭ28 (Вфогабк е1 а1., 1. Мо1. ОгарН. Мобе1., 15:135-139 (1997)). Хотя мотив ΜΥΡΡΡΥ не является консервативным в 1СО8, исследованный рецептор В7-Н2 показал, что родственный мотив, содержащий последовательность ΡΌΡΡΡΡ и расположенный в аналогичном положении, представляет собой главную детерминанту для связывания 1СО8 с В7-Н2 (^аиб, е1 а1., 1. Ехр. Меб., 195:1033-1041 (2002)). В7ГОС (называемый также ΡΌ-Ε2 или СЭ273) является относительно новым членом семейства В7 и обладает аминокислотной последовательностью, которая приблизительно на 34% идентична последовательности В7-Н1 (называемого также ΡΌ-Ы). Ортологи В7-ЭС человека и мыши характеризуются приблизительно 70%ной идентичностью по аминокислотной последовательности. Несмотря на то что транскрипты В7-Н1 и В7-ЭС обнаружены в различных тканях (Понд. е1 а1., №йиге Меб., 5:1365-1369 (1999); Ьа1сЬтаи, е1 а1., №Циге 1ттиио1., 2:261-268 (2001) и Татига, В1ооб, 97:1809-1816 (2001)), профили экспрессии белков совершенно различны. В7-Н1 широко экспрессируется на многих типах тканей и клеток, в то время как экспрессия В7-ЭС ограничивается, главным образом, активированными дендритными клетками (ОС) и макрофагами.
Показано, что В7-Н1 и В7-ЭС связываются с ΡΌ-1 (Ргеетаи, е1 а1., 1. Ехр. Меб., 192:1027-1034 (2000)), отдаленным членом семейства С.П28 с иммунорецепторным тирозиновым ингибирующим мотивом (1Т1М) в цитоплазматическом домене (Ыйба. е1 а1., ЕМВО 1., 11:3887-3895 (1992)). ΡΌ-1, член семейства рецепторов СЭ28, индуцированно экспрессируется на активированных Т-клетках, В-клетках, натуральных киллерных (ΝΚ) клетках, моноцитах, ОС и макрофагах (Кеи, е1 а1., Сигг. Орш. 1ттиио1. 19:309314 (2007)).
Основным результатом связывания ΡΌ-1 с его лигандами является ингибирование передачи сигнала после Т-клеточного рецептора (ТСК). Следовательно, сигнальная трансдукция с помощью ΡΌ-1 обычно предоставляет супрессивный или ингибиторный сигнал Т-клетке, что приводит к уменьшению Т-клеточной пролиферации или другому уменьшению Т-клеточной активации. В7-Н1 является основным лигандом ΡΌ-1, вызывающим передачу ингибиторного сигнала в Т-клетки. Настоящее изобретение решает проблему нежелательного Т-клеточного ингибирования с помощью предоставления агентов, которые связываются с ΡΌ-1 и, таким образом, предотвращают передачу ингибиторного сигнала или иначе связываются с лигандами ΡΌ-1, такими как В7-Н1, тем самым предотвращая связывание лиганда с ΡΌ-1 для передачи ингибиторного сигнала. И в том, и в другом случае стимулируются Т-клеточные ответы, такие как Т-клеточная пролиферация или активация.
В7-Н1 является главным лигандом ΡΌ-1, вероятно, вследствие его более широкого распространения и более высоких уровней экспрессии. Ингибирование ΡΌ-1 происходит, только если ΡΌ-1 и ТСК тесно связаны друг с другом в контексте иммунного синапса. ΡΌ-1 и его лиганды являлись предметом обсуждения нескольких обзорных статей.
Повышенная экспрессия В7-Н1 также наблюдается при многих видах рака (включая рак молочной железы, колоректальный рак, рак пищевода, рак желудка, глиому, лейкемию, рак легких, меланому, множественную миелому, рак яичников, рак поджелудочной железы, почечно-клеточную карциному и рак уротелия), и связана с неблагоприятным прогнозом. В7-Н1 экспрессируется многими линиями опухолевых клеток, в особенности после стимуляции интерфероном гамма (ΙΡΝ-γ), и также активируется на инфильтрирующих опухоль миелоид-зависимых супрессорных клетках (МЭ§С). Например, ΡΌ-1 активируется на опухоль-специфических СЭ8 Т-клетках и ассоциируется с функциональной недостаточностью, анергией, истощением и апоптозом. Повышение экспрессии ΡΌ-1 также ассоциировано с дисфункциональными и/или супрессивными фенотипами дополнительных типов клеток, таких как регуляторные Т-клетки (Т-гед) и натуральные киллерные Т-клетки (№КТ).
Настоящее изобретение использует указанные молекулярные функции путем предоставления схем лечения заболеваний с помощью увеличения Т-клеточной активности, в частности лечения рака и инфекционных заболеваний.
Сущность изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение относится к терапевтической композиции для увеличения Т-клеточного ответа, включающей слитый белок, содержащий первую и вторую пептидные части, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из аминокислотной последовательности 8ЕО ГО NО: 1 полипептида В7ГОС дикого типа, аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 8ЕО ГО NО: 1 и которая конкурирует ίη уйго с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, внеклеточного домена В7ГОС, имеющего 8ЕО ГО NО: 3, или полипептида, отличающегося от него только консервативными аминокислотными заменами и который конкурирует ίη уйго с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела и агент, усиливающий эффективность действия указанного белка, выбранный из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ТООТ^, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин, доксоруби- 2 023148 цин, антагонисты ТЬК4 и антагонисты 1Ь-18, в фармацевтически приемлемом носителе.
В конкретном варианте осуществления указанный агент представляет собой циклофосфамид или аналог циклофосфамида.
Кроме того, в конкретном варианте осуществления композиция может дополнительно включать по меньшей мере один дополнительный агент, выбранный из группы, состоящей из антитела против ΡΌ-1, антитела против СТЬЛ4, ингибитора митоза, ингибитора ароматазы, антагониста Л2ЛК и ингибитора ангиогенеза.
В другом аспекте изобретение относится к композиции, в которой указанный В7-ЭС представляет собой В7-ОС человека.
В конкретном варианте осуществления указанная первая пептидная часть состоит из внеклеточного домена В7-ЭС дикого типа.
В другом конкретном варианте осуществления указанный фрагмент полноразмерного В7ГОС состоит из растворимой части полноразмерного В7-ЭС.
Настоящее изобретение также относится к композиции, в которой указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности 8ЕО ГО N0: 3 или полипептида, отличающегося от него только консервативными аминокислотными заменами.
В конкретном варианте осуществления указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 8Е0 ГО N0: 1, более предпочтительно указанная первая пептидная часть состоит из последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 8Е0 ГО N0: 1.
В другом конкретном варианте осуществления указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 95% идентичности последовательности 8Е0 ГО N0: 9, 10, 12 или 13 и которая конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, предпочтительно указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность 8Е0 ГО N0: 9, 10, 12 или 13.
Также настоящее изобретение относится к композиции, в которой указанный слитый белок представляет собой мономер.
В другом конкретном варианте осуществления указанный слитый белок образует димер, при этом указанный димер может представлять собой гомодимер или гетеродимер.
В еще одном конкретном варианте осуществления указанный слитый белок содержит первую пептидную часть, которая состоит из аминокислот 20-221 8Е0 ГО N0: 1, и вторую пептидную часть, которая состоит из шарнирной области, участков Сц2 и Сн3 Су1 иммуноглобулина человека, при этом указанная вторая пептидная часть предпочтительно содержит аминокислотную последовательность 8Е0 ГО N0: 6.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для увеличения Т-клеточного ответа, включающей слитый белок, содержащий аминокислотную последовательность 8Е0 ГО N0: 13 или её вариант, имеющий 95% идентичности с последовательностью 8Е0 ГО N0: 13 и который конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, фармацевтический приемлемый носитель и циклофосфамид.
В конкретном варианте осуществления композиция содержит циклофосфамид в количестве от около 0,45 до около 4,5 мг.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению указанной композиции для производства лекарственного средства, увеличивающего Т-клеточный ответ, для лечения заболевания, поддающегося лечению путем увеличенного Т-клеточного ответа, в частности инфекционного заболевания или рака.
В конкретном варианте осуществления рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак мозга, рак молочной железы, рак шейки матки, колоректальный рак, рак пищевода, рак почек, рак печени, рак легких, назофарингеальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка, рак матки, рак яичников, рак яичка или гематологический рак.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему указанной композиции.
В конкретном варианте осуществления способа указанная композиция содержит слитый белок в дозе 1-40 мг/кг.
В другом конкретном варианте осуществления указанное заболевание представляет собой инфекционное заболевание.
В еще одном конкретном варианте осуществления указанное заболевание представляет собой рак, в частности рак мочевого пузыря, рак мозга, рак молочной железы, рак шейки матки, колоректальный рак, рак пищевода, рак почек, рак печени, рак легких, назофарингеальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка, рак матки, рак яичников, рак яичка или гематологический рак.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к терапевтической композиции для увеличения Т-клеточного ответа, содержащей слитый белок, включающий первую и вторую пептидные части, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из последовательности внеклеточного домена В7-Н1, его фрагментов и вариантов, отличающиеся только консер- 3 023148 вативными аминокислотными заменами, которые конкурируют ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, и где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела, и агент, усиливающий эффективность действия указанного белка, выбранный из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ΤΟΝΡβ, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин и доксорубицин, в фармацевтически приемлемом носителе.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу увеличения Т-клеточного ответа у человека, включающему введение указанному человеку слитого белка, содержащего первую и вторую пептидные части, где указанная первая часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 §Еф ГО N0: 1 полипептида В7ГОС дикого типа и которая конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1; аминокислотной последовательности фрагмента полноразмерного В7ГОС, которая конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, и аминокислотной последовательности внеклеточного домена В7ГОС или ее варианта, отличающегося от исходной последовательности только консервативными аминокислотными заменами, и где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела; и агента, усиливающего эффективность действия указанного белка, выбранного из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ΤΟΝΕβ, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ΤΕΚ4, и агонисты ГО-18, в фармацевтически приемлемом носителе, где указанный агент вводят перед указанным слитым белком.
В конкретном варианте осуществления указанный агент представляет циклофосфамид или аналог циклофосфамида.
В другом конкретном варианте осуществления указанный агент вводят по меньшей мере за X часов перед введением указанного слитого белка, где X выбирают из 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20, 24 и 30.
В следующем конкретном варианте осуществления изобретения циклофосфамид вводят человеку по меньшей мере за 24 ч перед введением слитого белка.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 показано, что В7ГОС-1д связывается с ΡΌ-1. Меченый В7ГОС-1д инкубировали в различных концентрациях с клетками линии СНО, конститутивно экспрессирующими ΡΌ-1, или с родительскими клетками СНО, которые не экспрессируют ΡΌ-1. Связывание анализировали с помощью проточной цитометрии. Среднее значение интенсивности флуоресценции (МР1) В7ГОС-1д (ось у) представлено в виде функции от концентрации зонда (ось х). В7ГОС-1д связывается с клетками ΟΗΟ.ΡΌ-1 (темный кружок), но не с нетрансфицированными клетками СНО (серый треугольник).
На фиг. 2 показано, что В7ГОС-1д конкурирует с В7-Н1 за связывание с ΡΌ-1. Немеченный В7ГОС-1д в различных концентрациях вначале инкубировали с клетками линии СНО, конститутивно экспрессирующими ΡΌ-1 перед добавлением меченого В7-Н1-1д к клеточной смеси. Среднее значение интенсивности флуоресценции (МР1) В7-Н1-1д (ось у) показано в виде функции от концентрации добавленного конкурента немеченного В7ГОС-1д (ось х). По мере того как возрастает концентрация немеченного В7ГОС-1д, количество меченого В7-Н1-1д, связавшегося с клетками СНО, уменьшается, что показывает, что В7ГОС-1д конкурирует с В7-Н1 за связывание с ΡΌ-1.
На фиг. 3 представлены результаты экспериментов, в которых комбинация циклофосфамида (СТХ или цитоксан) и димерный мышиный В7ГОС-1д вызывали в результате уничтожение привитых опухолей СТ26 (карцинома толстой кишки) у мышей. На графике А показан объем опухоли (мм3) против дней после прививки опухоли у мышей, получавших 100 мг/кг СТХ на 10-й день, тогда как на графике В показан объем опухоли (мм3) против дней после прививания опухоли у мышей, получивших СТХ на 10-й день, на следующий день после первого введения В7ГОС-1д. Каждая линия на каждом графике соответствует одной мыши. Черная стрелка обозначает введение В7ГОС-1д. На графике С показаны средние значения объема опухоли.
На фиг. 4 показаны результаты экспериментов, в которых комбинация СТХ и димерного мышиного В7ГОС-1д уничтожала привитые опухоли СТ26 (карцинома толстой кишки) у мышей и защищала при повторном введении СТ26. Мышам, которые получили СТХ и В7ГОС-1д и у которых не обнаружили опухолевого роста на 44-й день после прививания опухоли, повторно прививали опухоль. Позже мышам вновь проводили повторное введение опухолевых клеток на 70-й день. Ни у одной из мышей не наблюдали опухолевого роста к 100-му дню.
На фиг. 5 показано, что лечение СТХ и В7ГОС-1д приводило к формированию опухольспецифических СТЬ памяти. Мышам с уничтоженными прижившимися подкожными опухолями СТ26 после лечения СТХ и В7ГОС-1д повторно прививали клетки СТ26. Спустя семь дней выделяли спленоциты и активировали либо яичным альбумином, иррелевантным пептидом, либо АН1, СТ26специфическим пептидом. Клетки окрашивали вначале антителом анти-СО8 последующим внутриклеточным окрашиванием антителом анти-ΙΡΝγ перед анализом РАС8.
На фиг. 6 показаны эффекты различных доз В7ГОС-1д в комбинации с СТХ на уничтожение привитых опухолей СТ26 у мышей. Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель прививали подкожно 1 Е05
- 4 023148 клеток СТ26. На 9-й день мышам вводили ΙΡ 100 мг/кг СТХ. Через 24 ч, на 10-й день, мыши получали 30, 100 или 300 мкг В7-НС-1д с последующими 2 инъекциями каждую неделю, всего до 8 введений. Рост опухоли измеряли два раза в неделю.
На фиг. 7 представлены результаты экспериментов, в которых комбинация СТХ и антитела антиΡΌ-1 вызывала уничтожение привитых опухолей СТ26 (карцинома толстой кишки) у мышей. На графике А показан объем опухоли (мм3) в зависимости от дней после прививания опухоли у нелеченых мышей (т.е. мышей, получавших только среду для лекарства), на графике В представлен объем опухоли (мм3) в зависимости от дней после прививания опухоли у мышей, получавших только анти-РН-1, начиная с 11-го дня, по 300 мкг на инъекцию, 3 раза в неделю, до 12 инъекций, и на графике С показан объем опухоли (мм3) в зависимости от дней после прививания опухоли у мышей, получавших СТХ на 11-й день и первое введение анти-РН-1 на 12-й день, по 300 мкг на инъекцию, 3 раза в неделю, до 12 инъекций. Каждая линия на каждом графике обозначает одну мышь. Черная стрелка указывает введение анти-РН-1.
На фиг. 8 представлены результаты экспериментов, в которых комбинация СТХ и антитела антиСТЬА4 приводила к уничтожению привитых опухолей СТ26 (карцинома толстой кишки) у мышей. Здесь на графике А показан объем опухоли (мм3) в зависимости от дней после введения опухоли у мышей, получивших 100 мг/кг СТХ на 11-й день, тогда как на графике В показан объем опухоли (мм3) в зависимости от дней после введения опухоли у мышей, получавших СТХ на 11-й день и анти-СТЬА4 на 12-й день, в дозе 100 мкг на инъекцию, два раза в неделю, всего до 8 инъекций. Каждая линия на каждом графике обозначает одну мышь. Черная стрелка указывает введение анти-СТЬА-4.
На фиг. 9 представлены результаты экспериментов, в которых мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 911 недель прививали 1 х 105 клеток СТ26 подкожно. На 9-й день мышам вводили 100 мг/кг СТХ, ΙΡ. Через 24 ч, на 10-й день, мышам вводили 100 мкг В7-ОС-1д. В эксперименте использовали 5 групп: интактные мыши, которым не вводили каких-либо опухолевых клеток, мыши, которым вводили среду для лекарства, только СТХ, СТХ + В7-ОС-1д или только В7-НС-1д. Две интактные мыши и 4 мыши из других групп были удалены из исследования на 11-й день (2 дня после СТХ) и на 16-й день (7 дней после СТХ) для анализа Т-клеток. Левая панель показывает, что на 11-й день, через 2 дня после инъекции СТХ, количество Т-гед в селезенке мышей, получавших СТХ, было значительно ниже, чем количество Т-гед у мышей, которым прививали опухоль и вводили среду для лекарства. Правая панель показывает, что на 16-й день, через 7 дней после введения СТХ и через 6 дней после введения В7-ОС-1д, В7-ОС-1д существенно уменьшал количество ί'.Ή4' Т-клеток, экспрессирующих высокий уровень РЦ-1. Указанное снижение наблюдали как у мышей, получавших В7-ОС-1д, так и у мышей, получавших СТХ + В7-НС-1д. Предполагали, что мыши с привитыми опухолевыми клетками имели больше РН-1+/СН4+ Т-клеток в дренированном лимфоузле, по сравнению с интактными мышами.
На фиг. 10 представлены результаты экспериментов, в которых комбинация СТХ и В7-ОС-1д приводила к увеличению выживаемости у мышей при введении в хвостовую вену опухолевых клеток линии простаты мышей. Клетки §Р-1 выделяли из легких мышей, у которых развивались метастазы в результате инъекции клеток опухоли простаты ТРАМР. Мышам породы Β10Ό2 сначала вводили 3х105 клеток §Р-1 с помощью инъекции в хвостовую вену. В дни 5, 12 и 19 мышам вводили 50 мг/кг СТХ, где указано. В дни 6, 13 и 20 мышам вводили 5 мг/кг В7-НС-1д, где указано. Здесь ЫТ обозначает не обработан.
Фиг. 11. Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 11-13 недель вводили изолированные печеночные метастазы с помощью инъекции в часть селезенки с ее последующим удалением (НетйрКеп щ)ес!юп 1ес11пк|ие). Селезенки анестезированных мышей делили на две половины и накладывали на половины скобки. Клетки СТ26 (1Е05) вводили в одну половину селезенки и через 30 с указанную половину селезенки удаляли и накладывали скобки на селезеночную дренирующую вену. На 10-й день мыши получали 1 инъекцию СТХ в дозе 50 мг/кг, 1Р. Через 24 ч, на 11-й день, мышам вводили рекомбинантный пептид листерии, несущий АН1, иммунодоминантный эпитоп СТ26, в дозе 0,1 ЬН50 (1х107 КОЕ), затем вводили на 14- и 17-й дни. Мышам также вводили В7-ОС-1д на 11-й день и затем на 18-й день. Наблюдали общую выживаемость мышей.
Определения
Если не указано иначе, все технические и научные термины, используемые в описании, обладают теми же значениями, как обычно понимаемые специалистом в данной области техники, к которой принадлежит раскрытое изобретение. В частности, следующие термины и фразы имеют следующее значение.
Термин передача ингибиторного сигнала предназначен для обозначения любой сигнальной трансдукции, обладающей эффектом отмены, или в других случаях уменьшения Т-клеточных ответов против антигена либо с помощью уменьшения Т-клеточной пролиферации, либо с помощью другого ингибиторного механизма, в результате чего величина или продолжительность иммуногенного Т-клеточного ответа уменьшается. Указанная передача ингибиторного сигнала может происходить вследствие связывания РЦ-1 с природным лигандом, например связывания РЦ-1 с В7-Н1 или некого другого члена указанного класса лигандов, В7-ОС, или может происходить вследствие связывания СТЬА4 с лигандами, такими как В7-1 или В7-2. В целом, соединения изобретения уменьшают указанную передачу ингибиторного сигна- 5 023148 ла и включают в себя, но без ограничения, антагонисты ΡΌ-1 и антагонисты СТЬЛ4.
Термин антагонист ΡΌ-1 обозначает любую молекулу, которая ослабляет передачу ингибиторного сигнала, опосредованного ΡΌ-1, находящегося на поверхности Т-клеток, В-клеток, натуральных киллерных (ΝΚ) клеток, моноцитов, ИС и макрофагов.
Указанный антагонист включает в себя молекулу, которая прерывает любой ингибиторный сигнал, создаваемый молекулой ΡΌ-1 на Т-клетке. В конкретных примерах изобретения антагонист ΡΌ-1 представляет собой молекулу, которая ингибирует, уменьшает, отменяет или иным способом уменьшает передачу ингибиторного сигнала через ΡΌ-1 рецепторный сигнальный путь. Указанное снижение может происходить, в случае если (ί) антагонист ΡΌ-1 изобретения связывается с рецептором ΡΌ-1 без инициирования сигнальной трансдукции для уменьшения или блокирования передачи ингибиторного сигнала; (ίί) антагонист ΡΌ-1 связывается с лигандом (например, с агонистом) рецептора ΡΌ-1, предотвращая его связывание с рецептором (например, в тех случаях, когда указанный агонист представляет собой В7-Н1); (ίίί) антагонист ΡΌ-1 связывается или иным способом ингибирует активность молекулы, которая является частью регуляторной цепи, которая, когда она не ингибирована, в результате стимулирует или иным способом способствует передаче ΡΌ-1 ингибиторного сигнала; или (ίν) антагонист ΡΌ-1 ингибирует экспрессию рецептора ΡΌ-1 или экспрессию его лиганда, в частности, путем уменьшения или отмены экспрессии одного или более генов, кодирующих ΡΌ-1, или одного или более его природных лигандов. Таким образом, антагонист ΡΌ-1 изобретения представляет собой молекулу, которая осуществляет уменьшение передачи ΡΌ-1 ингибиторного сигнала, увеличивая тем самым Т-клеточный ответ на один или более антигенов.
Используемый в описании термин антагонист СТЬЛ4 обозначает соединение, которое уменьшает СТЬЛ4-опосредованное ингибирование Т-клеточных реакций. Например, в Т-клетке СТЬЛ4 доставляет ингибиторный сигнал после связывания лигандов В7, таких как В7-1 и В7-2. Антагонист СТЬА4 представляет собой антагонист, который нарушает связывание указанных лигандов с СТЬА4 на активированных Т-клетках. В одном варианте осуществления антагонист представляет собой антитело анти-СТЬА4, которое связывается с СТЬА4, чтобы предотвратить связывание лиганда.
Используемый в описании термин активный фрагмент относится к части природного полипептида или к полипептиду с высокой гомологией последовательностей (например, по меньшей мере 80, 85, 90, 95, 98 или 99% идентичности аминокислотной последовательности) с натуральным полипептидом и демонстрирует активность антагониста ΡΌ-1, например, при связывании ΡΌ-1 или при связывании с лигандом ΡΌ-1. В предпочтительных воплощениях указанный фрагмент состоит из внеклеточного домена (ЕСИ) белка В7-ИС, который связывается с ΡΌ-1, например, §ЕЦ ГО N0: 3, предпочтительно из его аминокислот 20-221. В случае полипептида ΡΌ-1 активный фрагмент представляет собой часть указанного полипептида, включающего в себя связывающий домен, который связывается с природным лигандом ΡΌ-1 для предотвращения стимуляции ΡΌ-1-опосредованной передачи ингибиторного сигнала с помощью указанного лиганда. Активные фрагменты могут быть идентифицированы по их способности конкурировать с молекулой, из которой они получены, при связывании с природным сайтом связывания. Например, активные фрагменты будут конкурировать с В7-ИС дикого типа за связывание с ΡΌ-1.
В отношении антитела термин активный фрагмент означает антигенсвязывающую часть антитела, которая является меньше, чем цельный иммуноглобулин. Указанные фрагменты включают в себя РаЬ и Р(аЬ')2 фрагменты, способные реагировать или связываться с любым из полипептидов, раскрытых в описании, которые являются рецепторами или лигандами. Указанные фрагменты РаЬ и Р(аЬ')2, лишенные Рсчасти интактного антитела, выводятся более быстро из циркуляции и могут обладать меньшим неспецифическим тканевым связыванием, чем интактное антитело (\УаЬ1 с1 а1., 1. Νικ. Мей. 24:316-325 (1983)). Также включены Ρν-фрагменты (НосЬтап, 1. е1 а1. (1973), ВюсЬет18йу, 12:1130-1135; §Ьагои, 1. е1 а1. (1976), ВюсЬет181гу, 15:1591-1594). Указанные различные фрагменты получают с помощью обычных технологических приемов, таких как протеазное расщепление или химическое расщепление (см., например, Кои88еаих е1 а1., Ме1Ь. Еп/уто1.. 121:663-69 (1986)).
Используемый в описании термин растворимая часть антагониста ΡΌ-1 означает часть полноразмерного полипептида, которая не включает в себя какую-либо часть трансмембранного участка или сегмента. Например, в отношении В7-ИС растворимая часть включает в себя внеклеточную часть (с Ν-терминальной сигнальной последовательностью или без нее), но не включает в себя какую-либо часть трансмембранного участка (или, по меньшей мере, не достаточную, чтобы уменьшить растворимость). Таким образом, ЕСИ В7-ИС человека показана как §ЕЦ ГО N0: 3 и состоит из 1дУ-подобного и 1дС-подобного доменов полноразмерной молекулы (т.е. аминокислоты 20-221 полноразмерной последовательности (8ЕЦ ГО N0: 1).
Используемый в описании костимуляторный полипептид представляет собой полипептид, который при взаимодействии с молекулой клеточной поверхности на Т-клетках модулирует активность Т-клетки. Таким образом, ответ Т-клетки может быть эффекторным (например, СТЬ или антителопродуцирующая В-клетка) ответом, хелперным ответом, обеспечивающим помощь одному или более эффекторным (например, СТЬ или антитело-продуцирующая В-клетка) ответам, или супрессивным ответом.
- 6 023148
Используемый в описании термин схема лечения относится к лечению заболевания или к способу достижения желаемого физиологического изменения, такому как увеличенный или сниженный ответ иммунной системы на антиген или иммуноген, например увеличение или уменьшение числа или активности одной или более клеток или типов клеток, которые вовлечены в указанный ответ, где указанное лечение или способ включают в себя введение животному, такому как млекопитающее, в частности человеку, достаточного количества двух или более химических агентов или компонентов указанной схемы для эффективного лечения заболевания или для получения указанного физиологического изменения, где указанные химические агенты или компоненты вводят вместе как часть одной композиции или вводят отдельно и независимо в то же самое время или в разные моменты времени (т.е. введение каждого агента или компонента отделено ограниченным периодом времени от введения одного или более агентов или компонентов) и где введение указанного одного или более агентов или компонентов обеспечивает результат, больший, чем результат, получаемый при введении любого из указанных агентов или компонентов по отдельности или изолированно.
Используемый в документе термин изолированный предназначен для описания соединения, представляющего интерес, (например, либо полинуклеотида, либо полипептида), которое находится в окружении, которое отличается от окружения, в котором соединение присутствует естественным образом, например, выделенный из своей природной среды, например, с помощью концентрирования полипептида до концентрации, в которой он не встречается в природе. Изолированный предназначен для включения соединений, которые находятся в образцах, которые значительно обогащены изобретением, представляющим интерес, и/или в которых соединение, представляющее интерес, частично или в основном очищают.
Используемый в описании термин полипептид относится к цепи аминокислот любой длины, без учета модификации (например, фосфорилирование или гликозилирование). Полипептид настоящего изобретения может представлять собой рекомбинантный полипептид, природный полипептид или синтетический полипептид, предпочтительно рекомбинантный полипептид.
Используемый в описании вариантный полипептид содержит по меньшей мере одно изменение аминокислотной последовательности по сравнению с аминокислотной последовательностью соответствующего полипептида дикого типа.
Используемое в описание изменение аминокислотной последовательности может представлять собой, например, замену, удаление или вставку одной или более аминокислот.
Используемые в описании термины часть, сегмент и фрагмент, при использовании в отношении полипептидов, относятся к непрерывной последовательности остатков, например аминокислотных остатков, последовательность которых образует часть большей последовательности. Например, если полипептид обрабатывали любой из обычных эндопептидаз, таких как трипсин или химотрипсин, олигопептиды, полученные в результате такой обработки, представляют собой части, сегменты или фрагменты исходного полипептида. Фрагмент полипептида, таким образом, относится к любой части полипептида, которая представляет собой более короткий полипептид полноразмерного белка. В целом, фрагменты будут иметь пять или более аминокислот в длину.
Производное, аналог или гомолог полипептида (или его фрагмента) изобретения могут представлять собой (ί) полипептид, в котором один или более аминокислотных остатков заменены консервативным или неконсервативным аминокислотным остатком (предпочтительно консервативным аминокислотным остатком) и указанный замещенный аминокислотный остаток может представлять собой или может не представлять собой остаток, кодированный генетическим кодом; или (ίί) полипептид, в котором один или более аминокислотных остатков включают в себя замещающую группу; или (ίίί) полипептид, в котором зрелый полипептид соединяют с другим соединением, таким как соединение для увеличения времени полужизни полипептида (например, полиэтиленгликоль); или (ίν) полипептид, в котором дополнительные аминокислоты соединяют со зрелым полипептидом, таким как лидирующая или секреторная последовательность или с последовательностью, которая применяется для очистки зрелого полипептида или пропротеиновой последовательности.
Подразумевается, что указанные производные и аналоги входят в объем знаний специалистов в данной области техники, если исходить из идей настоящего документа.
Используемая в описании валентность относится к числу доступных сайтов связывания в молекуле.
В соответствии с настоящим изобретением термин процентная идентичность или процент идентичности, когда относится к последовательности, означает, что последовательность сравнивают с заявленной или описанной последовательностью после выравнивания последовательности, которую нужно сравнить (сравниваемая последовательность) с описанной или заявленной последовательностью (референсная последовательность). Затем процентную идентичность определяют по следующей формуле:
Процентная идентичность= 100[1 -(С/К)], где С представляет собой число различий между референсной последовательностью и сравниваемой последовательностью на протяжении длины выравнивания между референсной последовательностью и сравниваемой последовательностью, где (ί) каждое основание или аминокислота в референсной
- 7 023148 последовательности, которая не имеет соответствующего выровненного основания или аминокислоты в сравниваемой последовательности, и (ίί) каждый гэп в референсной последовательности, и (ίίί) каждое выровненное основание или каждая выровненная аминокислота в референсной последовательности, которая отличается от выровненного основания или аминокислоты в сравниваемой последовательности, представляет собой отличие;
К является числом оснований или аминокислот в референсной последовательности на протяжении длины выравнивания со сравниваемой последовательностью, с любым гэпом, созданным в референсной последовательности, который также считают основанием или аминокислотой.
Если имеет место выравнивание между сравниваемой последовательностью и референсной последовательностью, для которых процентная идентичность, как рассчитано выше, приблизительно равна или больше, чем установленная минимальная процентная идентичность, в таком случае сравниваемая последовательность обладает установленной минимальной процентной идентичностью к референсной последовательности, даже если могут иметь место выравнивания, в которых вышеуказанная рассчитанная процентная идентичность является меньше, чем установленная процентная идентичность.
Используемый в описании термин консервативная замена аминокислот означает замену, при которой замененная аминокислота обладает сходными структурными или химическими свойствами, и неконсервативная замена аминокислот представляет собой замены, при которых заряд, гидрофобность или объем замененной аминокислоты существенно отличаются. Неконсервативные замены будут более существенно отличаться по их эффекту на сохранение (а) структуры пептидного каркаса в области замены, например конформации листа или спиральной конформации; (Ь) заряда или гидрофобности молекулы в сайте-мишени или (с) объема боковой цепи. Примеры консервативных замен аминокислот включают в себя такие замены, в которых замена происходит в пределах одной из пяти следующих групп: 1) малые алифатические неполярные или слабополярные остатки (А1а 8ет, ТЬг, Рго, О1у); 2) полярные, отрицательно заряженные остатки и их амиды (Акр, Аки, С1и, С1и); полярные, положительные заряженные остатки (Ηίκ, Агд, Ьук); большие алифатические неполярные остатки (МеЦ Ьеи, 11, Уа1, Сук) и большие ароматические остатки (РЬе, Туг, Тгр). Примерами неконсервативных замен аминокислот являются замены, где 1) гидрофильный остаток, например серил или треонил, заменяют на гидрофобный остаток, например лейцил, изолейцил, фенилаланил, валил или аланил; 2) цистеин или пролин заменяют на любой другой остаток; 3) остаток, содержащий положительно заряженную боковую цепь, например лизил, аргинил или гистидил, заменяют на отрицательно заряженный остаток, например глутамил или аспартил; или 4) остаток, содержащий объемную боковую цепь, например фенилаланин, заменяют на остаток, который не содержит боковой цепи, например глицин.
Термины индивид, хозяин, субъект и пациент используют в описании взаимозаменяемо, и они относятся к млекопитающему, включая, но без ограничения, приматов, например человека, а также грызунов, таких как мыши и крысы и другие лабораторные животные.
Используемый в описании термин эффективное количество или терапевтически эффективное количество означает дозу, достаточную для лечения, ингибирования или уменьшения одного или более симптомов болезненного состояния, которое нужно вылечить, или для обеспечения иным способом желаемого фармакологического и/или физиологического эффекта, в частности усиления Т-клеточного ответа к выбранному антигену. Точная доза будет варьировать в соответствии с множеством факторов, таких как субъект-зависимые переменные (например, возраст, состояние иммунной системы и т.д.), заболевание и лечение, которое нужно назначить.
Используемый в описании термин фармацевтически приемлемый носитель включает в себя любые и все растворители, дисперсные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические и задерживающие абсорбцию агенты и т.п. Применение указанных сред и агентов для фармацевтически активных субстанций хорошо известно в данной области техники. Кроме случаев, когда общеупотребительные среды или агент несовместимы с активным соединением, предусматривается их применение в терапевтической композиции. Дополнительные активные соединения также могут быть включены в композиции.
Термин антитело предназначен для включения интактных молекул, а также их фрагментов, которые включают в себя антигенсвязывающий сайт. Структура целого антитела часто предоставляется в виде Н2Ь2 и отражает тот факт, что антитела обычно содержат две легкие (Ь) аминокислотные цепи и две тяжелые (Н) аминокислотные цепи. Обе цепи содержат области, способные к взаимодействию со структурно комплементарной антигенной мишенью. Области, взаимодействующие с мишенью, обозначают как вариабельные или У-области, и они характеризуются отличиями в аминокислотной последовательности от антител другой антигенной специфичности. Вариабельные области Н- или Ь-цепей содержат аминокислотные последовательности, способные к специфическому связыванию с антигенными мишенями. В пределах указанных последовательностей расположены меньшие последовательности, получившие название гипервариабельных благодаря их чрезвычайной вариабельности среди антител с отличающейся специфичностью. Указанные гипервариабельные области также обозначают как определяющие комплементарность области или СЭК-области. Указанные СЭК-области отвечают за основную специфичность антитела в отношении определенной антигенной детерминантной структуры. Облас- 8 023148 ти СЭР представляют собой неконтактирующие участки аминокислот в пределах вариабельных областей, но было обнаружено, что независимо от видов позиционные расположения указанных критических аминокислотных последовательностей в пределах вариабельных областей тяжелых и легких цепей имеют сходные локализации в аминокислотных последовательностях вариабельных цепей.
Вариабельные тяжелые и легкие цепи всех антител, каждая, содержат три СЭР-области. которые не соприкасаются с другими (обозначаемыми Ь1, Ь2, Ь3, Н1, Н2, Н3) для соответствующих легких (Ь) и тяжелых (Н) цепей. Распространенные СЭР-области описаны КаЬа! с1 а1., 1. ΒίοΙ. СЬет. 252:6609-6616 (1977). Антитела, раскрытые в соответствии с изобретением, также могут быть полностью синтетическими, в которых полипептидные цепи антител синтезированы и, возможно, оптимизированы для связывания с полипептидами, раскрытыми в описании в качестве рецепторов. Указанные антитела могут представлять собой химерные или гуманизированные антитела и могут быть полностью тетрамерными по структуре или могут быть димерными и включать в себя только одну тяжелую и одну легкую цепи.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение предоставляет схему лечения или комбинированной терапии для лечения заболевания у млекопитающих, включающую в себя соединение, которое уменьшает или прекращает передачу ингибиторного сигнала в Т-клетки, предпочтительно Т-клетки человека, вводимое в сочетании с потенцирующим агентом для увеличения иммунного ответа.
Способы изобретения также относятся к применению широкого спектра иммуномодуляторов и их композиций. В целом, повышенный Т-клеточный ответ, полученный в результате указанных способов, является выше, чем повышенный Т-клеточный ответ, полученный в результате введения аналогичной дозы указанного антагониста ΡΌ-1 или указанного потенцирующего агента по отдельности.
Раскрытые композиции и схемы являются полезными для стимулирования или усиления иммунных ответов, вовлекающих Т-клетки. Таким образом, способы изобретения наиболее полезны в лечении болезненного состояния, которое может улучшиться при увеличении активности Т-клеток, где повышенный Т-клеточный ответ необходим или достаточен для лечения указанного заболевания, даже если заболевание не вызвано специфически или не отягощено сниженным Т-клеточным ответом. В предпочтительном варианте осуществления тип заболевания, которое нужно вылечить или предотвратить, представляет собой злокачественную опухоль или хроническое инфекционное заболевание, вызванное бактерией, вирусом, простейшим, гельминтом или другим внутриклеточным микробным патогеном, который подвергается атаке цитотоксических Т-лимфоцитов. Активация Т-клеток с использованием раскрытых композиций также полезна для лечения или предотвращения состояний, характеризующихся иммуносупрессией.
В соответствии с настоящим изобретением Т-клеточный ответ может регулироваться молекулами, которые связываются с рецепторами на поверхности Т-клеток и молекулами, которые связываются с лигандами указанных рецепторов. В случае ΡΌ-1 молекулы, которые связывают ΡΌ-1 чтобы уменьшить его ингибиторный эффект, и/или молекулы, которые связывают один или более лигандов ΡΌ-1, чтобы уменьшить их способность связываться с ΡΌ-1, обладают эффектом уменьшения способности ΡΌ-1 ингибировать Т-клеточный ответ, увеличивая, тем самым, указанный ответ и его иммунологические эффекты.
А. Антагонисты рецептора ΡΌ-1.
Предоставляются композиции, содержащие антагонисты рецепторов ΡΌ-1, и они включают в себя соединения или агенты, которые или связываются с лигандом ΡΌ-1 и блокируют его, чтобы препятствовать связыванию лиганда с рецептором ΡΌ-1 или ингибировать указанное связывание, или непосредственно связываются с рецептором ΡΌ-1 и блокируют его, не вызывая передачи ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1. В другом варианте осуществления антагонист рецептора ΡΌ-1 непосредственно связывается с рецептором ΡΌ-1 без инициирования передачи ингибиторного сигнала и также связывается с лигандом рецептора ΡΌ-1, чтобы уменьшить или ингибировать инициирование лигандом сигнальной трансдукции через рецептор ΡΌ-1. При уменьшении числа и/или количества лигандов, которые связываются с рецептором ΡΌ-1 и запускают трансдукцию ингибиторного сигнала, меньшее число клеток ослабляется негативным сигналом, передаваемым с помощью ΡΌ-1-сигнальной трансдукции, и может быть достигнут более сильный иммунный ответ.
В соответствии с настоящим изобретением сигнальная система ΡΌ-1 требует связывания с лигандом ΡΌ-1 (таким как В7-Н1 или В7-ЭС) в непосредственной близости с пептидным антигеном, представленным главным комплексом гистосовместимости (МНС) (см., например, Ртеетаи Ρτοο. Νηΐΐ. Асаб. 8ск ИЗА, 105:10275-10276 (2008)). Следовательно, белки, антитела или малые молекулы, которые предотвращают косвязывание ΡΌ-1 и ТСР на Т-клеточной мембране, являются эффективными антагонистами ΡΌ-1, предусмотренными настоящим изобретением.
Типичные антагонисты рецептора ΡΌ-1 включают в себя, но без ограничения, полипептиды В7-ЭС, включая их гомологи и варианты, а также активные фрагменты любого из вышеперечисленного, и гибридные белки, которые включают в себя любое из вышеперечисленного. В предпочтительном варианте осуществления гибридный белок включает в себя растворимую часть В7-ЭС, соединенную с Рс-частью антитела, такого как 1§С человека, и не содержит весь трансмембранный участок В7-ЭС человека или
- 9 023148 его часть. Антагонисты рецептора ΡΌ-1 также могут представлять собой малые молекулы антагонистов или антитела, которые уменьшают или нарушают ΡΌ-1-рецепторную сигнальную трансдукцию путем связывания с лигандами ΡΌ-1 или с самим ΡΌ-1, в особенности в тех случаях, когда косвязывание ΡΌ-1 с ТСК не наступает после такого связывания, при этом не запускается передача ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1.
Антагонисты рецептора ΡΌ-1, предоставляемые в описании, в целом применимы ίη νίνο и ех νίνο в качестве лекарств, стимулирующих иммунный ответ. В целом, раскрытые композиции антагонистов полезны для лечения субъекта, страдающего от заболевания или нарушения или имеющего предрасположенность к заболеванию или нарушению, где иммунная система субъекта увеличивает иммунный ответ.
1. Полипептиды В7-ЭС.
В определенных воплощениях белки В7-ЭС могут быть использованы в качестве антагонистов рецептора ΡΌ-1. В7-ЭС представляет собой природный лиганд ΡΌ-1 и связывается с ΡΌ-1 с более высокой аффинностью, чем В7-Н1, и может, таким образом, ингибировать взаимодействия Β7-Η1:ΡΌ-1. Подходящие полипептиды В7-ЭС, включая их варианты, гомологи и фрагменты, могут быть получены из следующих полноразмерных полипептидов В7-ЭС человека с эндогенным сигнальным пептидом (8ЕР ГО N0: 1) или без него (δΗΟ ГО N0: 2).
К1РЦШМЦЗЦ КУЕНЦТЗРНН Α8ΥΗΚΙΝΤΗ1 ΚΙ,ΚΡΡΡΟΚΝΡ ГАЬНКрЪСОК (ЗЕО Ю ЕЫЗЪНОГААЬ ΓΤντνΡΚΕ1.Υ ЕЕАТЬЬЕЕОЬ РШЗКАЗРН1Р ΙΙΕΗΟεΝντί, ЕСЦРЦТСЗНУ НЬСАГТАЗиЭ ΟνονΕϋΕΟΟΥ ОСТИУСУАИ ΠΥΚΥΓΊΤΚνΚ АЕУЗМРНУЗУ ΡΑΝΤ3Η5ΚΤΡ ВОЬУОУТЗУЬ 60 120 160 240 273
ЬКУРЕТОЕУБ ΒϋνΡΝΝΊΉνΚ ЬУЗЗКОТТКК N0:1) ЬТСОАТСУРЬ ЕЬТГАЗГМХЗ РУТТТККБУЫ
ЗОМЕРЕТНРТ 3ΑΙ КШН1Р1РРС ΙΙΑΡΙΡΙΑΤν
ЬРТУТУРКБЬ ΥΙΙΕΗΟΒΝνΤ ЬЕСиротезн ТОЬеАГТАЗЪ ΟΚνΕΝϋΤΒΡΗ ЕЕКАТ1АЕЕО во
ЬРЬОКАЗРН! ΡΟνΟνΕΏΕΟΟ γβοιιίγανΑ ИЦУКУЬТЬЮ/ ΚΑ3ΥΕΚΙΝΤΗ ШКУРЕТОЕУ 120
ЕЬТСОАТСУР ΙΑΕν3ΜΡ№/3 νΡΑΝΤ8Η3ΚΤ ΡΕΟΙ,ΥΟνΤδν ЩЦКРРРСКЫ РЗСЧРННТНУ 160
ЕЕЦТ1АЗШЦ ОЗОМЕРЕТНР ТИШН1Р1РР С11АР1Р1АТ УГАЬККОЬСО КЕУЗЗКЦТТК 240
ЙРУГТТКЕБУ Ν5ΑΙ 2Б4
(ЗЕО 10 N0:2)
Семейство молекул В7, включающее в себя В7ГОС, экспрессируется на поверхности клетки с мембранным проксимальным константным доменом 1дС и мембранным дистальным доменом 1дУ. Рецепторы указанных лигандов имеют общий внеклеточный 1дУ-подобный домен. Взаимодействия пар рецептор-лиганд опосредуются главным образом с помощью аминокислотных остатков в доменах 1дУ лигандов и рецепторов. В целом, домены 1дУ описываются, как имеющие два листа, каждый из которых содержит слой β-тяжей. Указанные β-тяжи обозначают как А', В, С, С', С, Ό, Е, Р и С. Структура указанных полипептидов описана в литературе (см. Мо1паг е1 а1., Сгук1а1 51гнс1нге оГ 1йе сотр1ех Ье1\\ееп ргодгаттеб беаШ-1 (ΡΌ-1) и ίΐκ йдапб ΡΌ-Ε2, ΡΝΑδ, νο1. 105, р. 10483-10488 (29 Лбу 2008)).
Трансмембранный белок, В7ГОС, в мономерной форме включает в себя домены 1дУ и 1дС, которые составляют внеклеточную часть молекулы (внеклеточный домен, или ЕСГО). причем 1дУ-подобный домен ответственен целиком или частично за связывание ΡΌ-1, а также за другие функции, перечисленные в способах изобретения. В отношении человеческого белка 1дУ-домен отличается тем, что он обладает соединенными дисульфидной связью тяжами В и Р (как указано выше), что представляется характерным для многих 1§У-доменов, и обладает трехмерной структурой, сходной с доменами 1дУ как В7-1, так и В7-2 (см. Мо1паг е1 а1. (2008), кирга).
В одном варианте осуществления вариантные полипептиды В7ГОС содержат аминокислотные изменения (т.е. замены, делеции или вставки) в пределах одного или более указанных β-тяжей в любой возможной комбинации. В другом варианте осуществления варианты В7ГОС содержат одно или более аминокислотных изменений (т.е. замены, делеции или вставки) в β-тяжах А', С, С', С, Ό, Е, Р или С. В предпочтительном варианте осуществления варианты В7ГОС включают в себя одно или более аминокислотных изменений в β-тяже С. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7ГОС включают в себя домены 1дС и 1дУ В7ГОС. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7ГОС включают в себя 1дУ-домен В7ГОС. Белки В7ГОС человека и мыши содержат короткий внутриклеточный домен, один трансмембранный домен и внеклеточный домен. Внеклеточный домен содержит два 1д-домена; мембранный проксимальный 1дС-домен и мембранный дистальный 1дУ-домен. Используемые фрагменты вариантных полипептидов В7ГОС включают в себя растворимые фрагменты. Растворимые фрагменты В7ГОС представляют собой фрагменты В7ГОС, которые могут быть слущены, секретированы или выделены другим путем из продуцирующих клеток. В одном варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7ГОС включают в себя полный внеклеточный
- 10 023148 домен В7-ЭС. Внеклеточный домен В7-ЭС включает в себя аминокислоты приблизительно 20-221 В7ЭС мыши или человека или их активные фрагменты. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС включают в себя домены 1§С и 1§У В7-ЭС. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС включают в себя домен 1§У В7-ЭС.
Считают, что сигнальная система ΡΌ-1 требует связывания с лигандом ΡΌ-1 (обычно В7-Н1) в непосредственной близости с пептидным антигеном, представленным главным комплексом гистосовместимости (МНС) (Ртеетаи Ргос. Ναΐί. Лсай. δει. И8Л, 105:10275-10276 (2008)). Поэтому белки, антитела или малые молекулы, которые предотвращают совместное связывание ΡΌ-1 и ТСК на Т-клеточной мембране, являются эффективными антагонистами ΡΌ-1, предусмотренными настоящим изобретением.
Антагонист ΡΌ-1, применяемый в способах и композициях изобретения, включает в себя фрагменты белка В7-ЭС, содержащие ЕСЭ. Альтернативно, фрагменты В7-ЭС включают в себя часть внеклеточного домена, которая содержит 1дУ- или 1дУ-подобный домен, предпочтительно аминокислоты 20-221, более предпочтительно 20-121, которые являются достаточными для связывания с рецептором ΡΌ-1, чтобы препятствовать или предотвратить или иным способом уменьшить передачу ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1. В предпочтительном варианте осуществления фрагмент В7-ЭС конкурирует с В7-Н1 за связывание с рецепторами ΡΌ-1.
В одном варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС могут содержать область полипептида, которая является важной для связывания с ΡΌ-1. Указанные полипептидные фрагменты могут быть использованы для конкурирования за связывание с ΡΌ-1 и для предотвращения связывания нативного В7-ЭС с ΡΌ-1. Ввиду конкурирования за связывание с ΡΌ-1 указанные фрагменты могут быть полезны для усиления иммунного ответа, поскольку ингибирующие взаимодействия В7-Н1 и В7-ЭС с ΡΌ-1 ингибируют супрессию иммунных ответов, которая происходила бы в противном случае. Полипептидный фрагмент мышиного или человеческого В7-ЭС, который мог бы конкурентно связаться с ΡΌ-1, может содержать, например, аминокислоты 101-108 или 110-114. Связывание В7-ЭС дикого типа с ΡΌ-1 обычно ингибируется по меньшей мере на 50, на 60, на 70, на 75, на 80, на 90, на 95 или более чем на 95% по сравнению с уровнем связывания В7-ЭС дикого типа с ΡΌ-1 в отсутствие фрагмента указанного В7-ЭС дикого типа. Типичные фрагменты В7-ЭС, используемые в способах и/или композициях изобретения, включают в себя, но не ограничиваются, следующие внеклеточные домены В7-ЭС:
внеклеточный домен (ЕСО)В7-ОС человека:
ЬРТУТУРКБЬ ΥΙΙΕΗΟΒΝνΤ ЬЕСЦЕОТОЗН \ЩЪОА1ТАЗЬ ОКУЕМЦТЗРН НЕКАТЬЬЕЕО 60
ЬРЬСКАЗРН! Ρονονκοκοο ΥΟϋΙΙΙΥΟνΑ ИЦУКУЬТЬКУ ΚΑ3ΥΚΚΙΝΤΗ ΙΧ,ΚνΡΒΤϋΕν 120
ЁЬТСОАТОУР ЦАЕУЗМРВУЗ УРАИТЗНЗКТ РЕОЬУОУТЗУ ЬНЬКРРРОКИ Ρ3ΟνΡΗΝΤΗν 130
РЕЬТЬАЗТШ, 030МЕРЙТНР ТИ 202
(ЗЕО Ю N0:3)
ЕСЭ В7-ЭС мыши:
ЬГТУТАРКЕУ ΥΤνθνθ33ν3 ЬЕСОГПККЕС ТЕЬЕСШАБЬ ΟΚνΕΝΟΤδίΧί ЗЕНАТЬЬЕЕО 60
ЬРЬСКАЬРН! ΡΞνθνΕΌ3Ο<5 УНСЬИТСОАА ΗϋΥΚΥΙ,ΤνΚν ΚΑδΥΜΚΙΓΠΉ 1ЬЕУРСТОЕУ 120
ЦЬТСОАКОУР ΙΑΕνδΗΟΝνδ νΡΑΝΤδΗΙΚΤ РЁСЫОУТЗУ ЩЬКРОРЗКН РЗСМРНКАНМ 180
КЕЬТЗАЦЦР ЬЕКМБРХУРК ТН 202
(ЗЕО Ю N0:4)
ЕСЭ В7-ЭС яванского макака:
ЬРТУТУРКБЬ ΥΙΙΕΗΟΞΝνΤ ЬЕСИГОТСЗН \П1ЬОА1ТАЗЬ ОКУЕИЦТЗРН ЯЕКАТЬЬЕЕО 60
ЬРЬСКАЗГН! ΡΟνονΚΟΕδΟ ΥΟαίΙΙΥΟνΑ ΗΟΥΚΥΤΤυΚν ΚΑ5ΥΚΚΙΝΤΗ ΙΙ,κνΡΕΤΟΕν 120
ЕЬТСОАТОУР ΙΑΕΥδΗΡΝνδ УРАМТЗНЗНТ ΡΕΟΕΥΟντεν ЬЯЬКРРРСЯИ ГЗСТРИМТНУ 130
ЯЕЬТЦАЗХОЬ 030МЕРКТНР ΤΗ 202
(Зеч Ю ΝΟ; 15)
Многочисленные последовательности других приматов, используемые в способах и композициях изобретения, предоставлены в Оп1атооп е1 а1., 1ттиио1оду, νοί. 124, р. 277-293 (2008).
Антагонист ΡΌ-1, используемый в композициях и способах изобретения, также включает в себя гибридный белок (как описано ниже), который включает в себя первую и вторую полипептидные части, где указанный гибридный белок или по меньшей мере его первая полипептидная часть, обладает активностью антагониста ΡΌ-1, в особенности если указанный гибридный белок связывается с ΡΌ-1 и блокирует его или связывается с лигандом ΡΌ-1 и блокирует его. Первая полипептидная часть указанного гибридного белка может включать в себя или состоять из любого из полипептидов-антагонистов ΡΌ-1 или их ΡΌ-1-связывающих фрагментов, перечисленных здесь иным образом, для применения в качестве антагонистов ΡΌ-1 в способах изобретения. В предпочтительном варианте осуществления указанного гибридного белка упомянутая первая полипептидная часть является Ν-концевой по отношению к упомянутой второй полипептидной части. В отдельном варианте осуществления упомянутая первая полипептидная часть соединяется с упомянутой второй полипептидной частью с помощью олигопептида в дополнение к
- 11 023148 аминокислотам, составляющим упомянутые первую и вторую полипептидные части, указанные соединяющие аминокислоты не снижают существенно ΡΌ-1-антагонистическую активность указанного гибридного белка.
В предпочтительном димерном гибридном белке димер получают в результате ковалентного связывания остатков Сук в СН-областях двух тяжелых цепей 1д, которые представляют собой те же остатки Сук, которые соединены дисульфидной связью в димеризованных нормальных тяжелых цепях 1д.
Большое число полипептидных последовательностей, которые обычно используют в качестве связывающих партнеров гибридных белков, хорошо известны в данной области техники. Примеры используемых полипептидных связывающих партнеров включают в себя, но без ограничения, зеленый флуоресцентный белок (ΟΡΡ), глутатион-8-трансферазу (О8Т), полигистидин, туе, гемаглютинин, Р1ад™ !ад (Койак, №\ν Науеп, СТ), мальтоза-связывающий белок Е и протеин А. Другой вариант осуществления предоставляет тетрамерную конструкцию, содержащую субстрат ΒίτΑ, соединенный с внеклеточным доменом вариантного полипептида В7-ЭС. Способы создания тетрамерной конструкции известны в данной области техники (см. Рейоуак, е! а1., 1. Ехр. Мей., 203:2281 (2006)).
Типичные мышиные гибридные белки В7-ЭС содержат аминокислоты 20-221 мышиного В7-ЭС, соединенные с аминокислотами 237-469 мышиного 1дС2а (САА49868). В одном неограничивающем примере человеческие гибридные белки В7-ЭС содержат аминокислоты 20-221 В7-ЭС человека, соединенные с аминокислотами 245-476 1дС] человека (ААА02914). Сигнальные пептиды гибридных белков В7ОС включают в себя эндогенные сигнальные пептиды или любой другой сигнальный пептид, который способствует секреции гибридного белка из хозяина. В другом варианте осуществления первый полипептид включает в себя только 1дУ-домен. Другие варианты осуществления могут включать в себя шарнирный домен и Рс-домен антитела 1дС. такого как 1дС]. причем не представлено ни одного домена вариабельной области. Другие варианты осуществления включают в себя применение шарнирной области и Рс-области 1§О2 или 1дС4, особенно содержащие N2970 или другую мутацию, которая уменьшает эффекторную функцию.
В соответствии со способами и композициями изобретения полипептид, применяемый в качестве антагониста ΡΌ-1, или первая полипептидная часть гибридного белка, применяемого в качестве антагониста ΡΌ-1, включает в себя аминокислотную последовательность, которая обладает по меньшей мере 60% или по меньшей мере 65%, или по меньшей мере 70%, или по меньшей мере 75%, или по меньшей мере 80%, или по меньшей мере 85%, или по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 99%-ной идентичностью с аминокислотами 1-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, предпочтительно с аминокислотами 20-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или с аминокислотами 26-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или с аминокислотами 1-202 8ЕО ГО ΝΟ: 3 или 4, более предпочтительно с аминокислотами 20-121 8ЕО ГО ΝΟ: 1 или с аминокислотами 1-102 8ЕО ГО ΝΟ: 3 или 4.
В одном варианте осуществления полипептид, применяемый в качестве антагониста ΡΌ-1, или первая полипептидная часть гибридного белка, используемого в качестве антагониста ΡΌ-1, состоит из аминокислот 1-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или состоит из аминокислот 20-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или состоит из аминокислот 26-221 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или состоит из аминокислот 1-202 8ЕО ГО ΝΟ: 3 или 4. В одном варианте осуществления (8ЕО ГО ΝΟ: 2), полипептид не включает в себя аминокислоты 1-19 8ЕО ГО ΝΟ: 1.
В других конкретных примерах антагонист полипептида ΡΌ-1 или первая полипептидная часть гибридного белка-антагониста ΡΌ-1 включает в себя аминокислотную последовательность 20-121 8ЕО ГО ΝΟ: 1, где предпочтительно он включает в себя аминокислотную последовательность ХУЭУКУ в положении остатков 110-114 или где он включает в себя аминокислоты 1-102 8ЕО ГО ΝΟ: 3, где предпочтительно он включает в себя аминокислотную последовательность ХУЭУКУ в положении остатков 91-95.
В предпочтительном варианте осуществления указанные процентные идентичности достигаются с помощью применения консервативных аминокислотных замен, как определено в другом месте настоящего описания.
В одном указанном варианте осуществления полипептидный антагонист ΡΌ-1 или первая полипептидная часть гибридного белка-антагониста ΡΌ-1 не включает в себя аминокислоты 1-19 8ЕО ГО ΝΟ: 1, или не включает в себя какую-либо часть трансмембранного домена, особенно указанный полный домен, или не включает в себя какую-либо часть внутриклеточного (или растворимого) домена, особенно указанный полный домен, лиганда ΡΌ-1 или другого белкового антагониста ΡΌ-1. В предпочтительном варианте осуществления указанный антагонист или первая полипептидная часть включает в себя только внеклеточный домен (ЕСЭ) 8ЕО ГО ΝΟ: 1, и, таким образом, включается в состав только растворимая часть полипептида указанной последовательности или фрагмент указанной растворимой части.
В других подобных вариантах осуществления полипептидный антагонист ΡΌ-1 или первая полипептидная часть гибридного белка-антагониста ΡΌ-1 включает в себя 1§У-домен или 1дУ-подобный домен или его ΡΌ-1-связывающий фрагмент лиганда ΡΌ-1 или состоит из 1дУ-домена, или 1дУ-подобного домена, или его ΡΌ-1-связывающего фрагмента лиганда ΡΌ-1. В конкретных примерах указанный лиганд ΡΌ-1 представляет собой молекулу В7ГОС или В7-Н1 дикого типа, предпочтительно молекулу В7ГОС или В7-Н1 дикого типа мыши или примата, предпочтительно человека. В других подобных вариантах
- 12 023148 осуществления полипептидный антагонист ΡΌ-1 или первая полипептидная часть гибридного белкаантагониста ΡΌ-1, ΡΌ-1-связывающий фрагмент 1§У-домена или 1§У-подобного домена, лиганда ΡΌ-1, особенно в случае 1дУ-домена или 1дУ-подобного домена состоит из аминокислот 20-121 8ЕО ГО N0: 1 или аминокислот 1-102 8ЕС ГО N0: 3.
Антагонист ΡΌ-1 изобретения также включает в себя ΡΌ-1-связывающий фрагмент аминокислот 20-121 8Е0 ГО N0: 1 (человеческой полноразмерной) или аминокислот 1-102 8Е0 ГО N0: 3 (внеклеточный домен или ЕСГО).
В конкретных воплощениях полипептид или ΡΌ-1-связывающий фрагмент также включает в себя аминокислоты №ЭУКУ в положении остатков 110-114 8Е0 ГО N0: 1 или №ЭУКУ в положении остатков 91-95 8Е0 ГО N0: 3. В качестве неограничивающих примеров указанный ΡΌ-1-связывающий фрагмент включает в себя по меньшей мере 10, или по меньшей мере 20, или по меньшей мере 30, или по меньшей мере 40, или по меньшей мере 50, или по меньшей мере 60, или по меньшей мере 70, или по меньшей мере 75, или по меньшей мере 80, или по меньшей мере 85, или по меньшей мере 90, или по меньшей мере 95, или по меньшей мере 100 расположенных рядом аминокислот последовательности аминокислот 20-121 8Е0 ГО N0: 1, где в предпочтительном варианте осуществления каждый ΡΌ-1связывающий фрагмент включал бы в себя в качестве подфрагмента аминокислоты №ЭУКУ. находящиеся в положении остатков 110-114 8Е0 ГО N0: 1, или №ЭУКУ в положении остатков 91-95 8ЕС) ГО N0: 3.
Другие предпочтительные полипептиды и ΡΌ-1-связывающие фрагменты, специально предусмотренные изобретением, включают в себя полипептидную последовательность аминокислот 20-121 8Е0 ГО N0: 1 (человеческую полноразмерную) и их ΡΌ-1-связывающие фрагменты, где в указанном полипептиде или ΡΌ-1-связывающем фрагменте цистеин представлен в положении остатков 42 и/или 102, причем цистеин в обеих позициях является предпочтительным, и/или где фенилаланин представлен в положении остатка 21, и/или где глутаминовая кислота представлена в положении остатка 28, и/или где треонин и/или глутамин представлен в положении остатка 60, и/или где глутаминовая кислота представлена в положении остатка 101, и/или где изолейцин представлен в положении остатка 103, и/или где изолейцин представлен в положении остатка 105, и/или где глицин представлен в положении остатка 107, и/или где валин представлен в положении остатка 108, и/или где триптофан представлен в положении остатка 110, и/или где аспарагиновая кислота представлена в положении остатка 111, и/или где тирозин представлен в положении остатка 112, и/или где лизин представлен в положении остатка 113, и/или где тирозин представлен в положении остатка 114, при условии, что в случае ΡΌ-1-связывающих фрагментов указанный фрагмент является достаточно большим, чтобы включать в себя указанные положения аминокислот.
Дополнительные предпочтительные полипептиды и ΡΌ-1-связывающие фрагменты, специально предусмотренные изобретением, включают в себя полипептидую последовательность аминокислот 1-102 8Е0 ГО N0: 3 (ЕСГО человека) или 8Е0 ГО N0: 4 (ЕСГО мыши) и их ΡΌ-1-связывающие фрагменты, где в указанном полипептиде или ΡΌ-1-связывающем фрагменте цистеин представлен в положении остатка 23 и/или 83, причем цистеин в обеих позициях является предпочтительным, и/или где фенилаланин представлен в положении остатка 2, и/или где глутаминовая кислота представлена в положении остатка 9, и/или где треонин или аргинин представлен в положении остатка 37, причем треонин является предпочтительным, и/или где глутамин представлен в положении остатка 41, и/или где аргинин представлен в положении остатка 82, и/или где лейцин представлен в положении остатка 84, и/или где изолейцин представлен в положении остатка 86, и/или где глицин представлен в положении остатка 88, и/или где аланин представлен в положении остатка 89, и/или где триптофан представлен в положении остатка 91, и/или где аспарагиновая кислота представлена в положении остатка 92, и/или где тирозин представлен в положении остатка 93, и/или где лизин представлен в положении остатка 94, и/или где тирозин представлен в положении остатка 95, при условии, что в случае ΡΌ-1-связывающих фрагментов указанный фрагмент является достаточно большим, чтобы включать в себя указанные положения аминокислот.
В дополнительных вариантах осуществления любой из указанных выше полипептидов также может включать в себя части или фрагменты, например, с 1 по 10 расположенных рядом аминокислот, извлеченных из сигнального, трансмембранного или С-концевого доменов полипептида В7ГОС или В7-Н1, например, мыши или примата, предпочтительно человека. Указанные полипептиды и/или ΡΌ-1связывающие фрагменты также могут быть представлены в любом из гибридных белков изобретения, например, где указанный полипептид или ΡΌ-1-связывающий фрагмент представляет собой первый полипептид указанного гибридного белка.
В конкретных примерах молекула, скомбинированная с потенцирующим агентом для применения в схеме лечения изобретения, включает в себя ΡΌ-1-связывающий фрагмент аминокислот 20-221 8ЕС ГО N0: 1. В одном подобном варианте осуществления фрагмент состоит из аминокислот 20-121 8ЕС ГО N0: 1, где предпочтительно фрагмент включает в себя аминокислоты 110-114 8ЕС ГО N0: 1. В некоторых вариантах осуществления представлен более чем один указанный фрагмент (как описано в другом месте настоящего документа) и молекула включает в себя по меньшей мере 2, 3, 4, 5 или более фрагментов белка В7ГОС, в особенности где фрагмент является частью или содержит часть аминокислот
- 13 023148
20-221 δΕΟ ΙΌ N0: 1. В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере один указанный фрагмент состоит из аминокислот 20-121 δΕΟ ΙΌ N0: 1, более предпочтительно по меньшей мере один указанный фрагмент включает в себя аминокислоты 110-114 δΕΟ ΙΌ N0: 1 (т.е. последовательность ΑΌΥΚΥ (δΕΟ ΙΌ N0: 14)). В предпочтительных воплощениях ΡΌ-1-связывающий фрагмент включает в себя по меньшей мере 10, или по меньшей мере 25, или по меньшей мере 50, или по меньшей мере 75, или по меньшей мере 100 расположенных рядом аминокислот.
Эндогенный сигнальный пептид человека имеет следующую последовательность: ΜΙΡΕΕΕΜΕδΕ ΕΕ0ΕΗ0ΙΛΑ (δΕΟ ΙΌ N0: 5) и представляет собой первые 19 аминокислот δΕΟ ΙΌ N0: 1. В определенных воплощениях полипептидные фрагменты В7-0С могут включать в себя 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 расположенных рядом аминокислот эндогенного или гетерологичного сигнального пептида (который может быть использован для получения рекомбинантного полипептида В7-0С путем экспрессии и экспрессии из трансформированной клетки). Также следует понимать, что полезный полипептид В7-0С может включать в себя 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 расположенных рядом аминокислот трансмембранного домена В7-0С и/или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 расположенных рядом аминокислот цитоплазматического домена или их комбинации при условии, что фрагмент В7-0С сохраняет антагонистическую способность в отношении рецептора ΡΌ-1. Фенотипы мышей ΡΌ-1-/- предоставляют прямое доказательство того, что ΡΌ-1 является отрицательным регулятором иммунных ответов ίη νίνο. В отсутствие ΡΌ-1 у мышей на фоне С57ВЬ/6 медленно развивается волчаночно-подобный гломерулонефрит и прогрессирующий артрит (№зЫтцга, с1 а1., ΙιηιηιιηίΙν. 11:141-151 (1999)). У мышей ΡΌ-1-/- на фоне Ва1Ь/с стремительно развивается летальная аутоиммунная дилатационная кардиомиопатия (МзЫтцта, с1 а1., δαακο. 291:319-322 (2001)). Однако важное свидетельство указывает, что В7-0С может функционировать как костимуляционный активатор Т-клеточных ответов. В присутствии субоптимальных сигналов В7-0С ТСК вызывает увеличение пролиферации и продукцию цитокинов ίη νίίτο (Тзепд, с1 а1., ί. Εχρ. Мей. 193:839-846 (2001)). В то же время исследования ίη νίίτο показали отрицательную регуляторную роль В7-0С в Т-клеточных ответах. Представленные, на первый взгляд, противоречивые данные могут быть успешно объяснены экспрессией дополнительных рецепторов для В7-0С на Т-клетках, других, чем ΡΌ-1.
Следовательно, белки В7-0С, их варианты, фрагменты и гибриды могут обладать преимуществом непосредственного усиления Т-клеточных ответов при связывании с неизвестным рецептором, который активирует Т-клетку, в дополнение к усилению Т-клеточных ответов путем предотвращения ΡΌ-1опосредованной передачи ингибиторного сигнала.
2. Полипептиды В7-Н1.
В другом варианте осуществления соединение для применения в комбинации с потенцирующим агентом в схеме лечения изобретения представляет собой или включает в себя фрагмент В7-Н1 млекопитающего, предпочтительно мыши или примата, предпочтительно человека, где указанный фрагмент связывается с ΡΌ-1 и блокирует его, но не вызывает передачи ингибиторного сигнала через ΡΌ-1, и указанный фрагмент представляет собой по длине по меньшей мере 10, или по меньшей мере 20, или по меньшей мере 30, или по меньшей мере 40, или по меньшей мере 50, или по меньшей мере 60, или по меньшей мере 70, или по меньшей мере 80, или по меньшей мере 90, или по меньшей мере 100 расположенных рядом аминокислот. В других воплощениях фрагмент может быть различной длины при условии, что он характеризуется функцией связывания с ΡΌ-1, но не вызывает передачу ингибиторного сигнала, что приводит к уменьшению Т-клеточной пролиферации. Указанные фрагменты В7-Н1 также нашли применение в качестве первой полипептидной части гибридных белков изобретения. Последовательности В7-Н1 являются следующими:
полипептид В7-Н1 человека (δΕΟ ΙΌ N0. 16):
ΜΒΙΡΑΥΡΙΡΜ ТУИНЫЛАРТ УТУРКОЬУУУ ЕУСЗЦМТХЕС КРРУЕКрЬОЦ ААЫУУИЕМЕ
СКНИОРУНС ЕЕОЬКУОНЗЗ УЕ0НАНШКО ОЬ31ХЗМАА1Х) ХТЦУКЩОАС УУКСМ15УОО ΑΟΥΚΚΧΤνκν ΝΑΡΥΝΚΙΝΟΚ ХЬУТОРЧТЗЕ НЕЬТСОАЕОУ РКАЕУГИТЗЗ ОНОУЬЗОКТТ ΤΤΝ3ΚΗΕΕΚΙ. РЦЧТЗТЬЩЦ ТТТМБХРУСТ РККШРЕВНН ТАЕЬУ1РЕЬР 1АНРРМЕНТН хлпизашьс ьсчаьтрхрк ькксеммо'/к ксеюцтазк козотньеет полипептид В7-Н1 мыши (δΕΟ ΙΌ N0: 17):
ΜΗΙΓΑΟΙΙΡΤ АССН1ЛНАРТ ХТАРКЮЬУУУ ЕУОЗМУТМБС КРРУЕКЕШЬ ХАХДЛГУИЕКБ
120
180
240
280
ΟΕΟνίΰΡνΑΟ ЕЕЦЦКРОНЗН РНСНАЗЬРКЦ ОШКСНААЬО ХТЦУКЬОЦАО УУССИЗУСО 120
АЦУКР.ХТЬКУ ΝΑΡΥΚΚΙΝΟΚ 13ТОРАТ5ЕН ЕЫСОАЕОУР ЕАЕУХНТЦЗО НОРУЗСКЕЗ'/ 280
ТТЗНТЕСМЬЬ ЦУТЗЗЬКУЦА ГАГГОУРУСТГ ИЯЗфРСОННТ АЕЫХРБЬРА ТНРРОИЯТНН 240
УЬЬОЗШЬГЬ 1УУ5ТУЬЬРЬ ЕКОУНМЬОУЕ КСОУЕЦТЗЗК ИМТОТОРЕЕТ 2Э0
- 14 023148 полипептид ΡΌ-Ы Масаса ти1айа (8Еф ГО N0: 18):
МКХРАУР1РТ ΙΥΚΗΙΛΝΑΓΤ УТУРКЙЬУУУ БУеЗЙМТ1ЕС ΚΡΡνΕΚΟΙ/31. 60
ТЗЫУУИЕМЕ ШОИЮРУНС БЕЙЬКУОНЗИ УКОКАОЬЬКО ОЬЗЬСЙААЬН 120
хтоукьойас νγκςΜίεγαα аоуккхтуку ναρυνκινοη 1ЬУУХ)РУТ5Е 130
НЕЬТСОАЕСУ РКАЕУ1МТЗЗ ОНОУЪЗСКТТ ТТНЗККЕЕКЬ ьвутетькш 240
ТТАЫЕ1РУС1 РККЬОРЕЕЙН ТАЕЬУХРЕЬР ЬАЬРРЫЕКТН ЬУ1ЬСА1РЬЬ 300
ьсуаьтехгу ьккекммпнк кзсхкутизк коизтоьеет 340
Белки В7-Н1-1д описаны в №0 2001/014557 (опубл. 1 марта 2001 г.) и в №0 2002/079499 (опубл. 10 октября 2002 г.).
3. ΡΌ-1 и другие полипептиды.
Другие полезные полипептиды изобретения включают в себя полипептиды, которые связываются с лигандами рецептора ΡΌ-1. Они включают в себя рецепторный белок ΡΌ-1 или его растворимые фрагменты, которые могут связываться с лигандами ΡΌ-1, такими как В7-Н1 или В7ГОС, и предотвращать связывание с эндогенным рецептором ΡΌ-1, предотвращая, таким образом, передачу ингибиторного сигнала. Также показано, что В7-Н1 связывается с белком В7.1 (Вийе с1 а1., 1ттипйу, νοί. 27, ρ. 111-122, (2007)). Указанные фрагменты также включают в себя растворимую часть ЕСГО белка ΡΌ-1, которая включает в себя мутации, такие как мутация А99Ь, которая увеличивает связывание с природными лигандами (Μο1η;·π е1 а1., Сгуз1а1 ЧгисШге οί 1Не тотр1ех Ьейуееп ргодтаттеб 6еа!й-1 (ΡΌ-1) и Й8 Ндапб ΡΌ-Ε2, ΡΝΑδ, νο1. 105, ρ. 10483-10488 (29 1и1у 2008)). В7-1 или его растворимые фрагменты, которые могут связываться с лигандом В7-Н1 и предотвращать связывание с эндогенным рецептором ΡΌ-1, предотвращая, тем самым, передачу ингибиторного сигнала, также являются полезными.
Полипептиды ΡΌ-1, применяемые в способах изобретения, представляют собой следующие полипептиды:
ΡΌ-1 человека (§Еф ГО N0: 19):
МОХРОАРИРУ УНАУЬОЬСИК рснрьозрок РННРРТРРРА ььуутЕаинА ТРТСЗРЗИТЗ 60
ΕΒΡνωνγκΜ ЗРЗНОТХЖЬА АРРЕОКЗОРС ооскркутсзь РН<ЗКОГНМ5У унАКюгазст 120
УЬССАХЗЬАР ХА01КЕ5ЙКА ЕЬКУТЕЕКАЕ УРТАНР5РЗР КРАЗОРОТЬУ уоуусеьызз 180
ЬУЬЬУИУЬАУ 1С8КААНСТ1 САКЕТООРЬК ЕОР5АУРУР5 УПУСЕЬОРОН КЕКТРЕРРУР 240
СУРЕОТЕУАТ ХУРРЗОМСТЗ ЗРАККОЗАЕКЗ РНЗАОРЬЕРЕ ООНСЗНРЬ 283
ΡΌ-1 яванского макака Суηοтο1ди8 тοηкеу (§Еф ГО N0: 20):
ΜΟΙΡΟΑΡΗΡν УИАУИЗЬОНК РСНРЬЕЗРСК РМЯАРТРЗРА ЬЬЬУТЕСОИА ТГТСЗРЗИАЗ 60
ЕЗРУЬННУВН 3Ρ3Ν0ΤΟΚΙΑ АРРЕЬКЗОРС ООСКРКУТКЬ РНСНСРНМЗУ УКАЯЮТОЗОТ 120
УЬСОАХЗЬАР КАОХКЕЗЬКА ЕЬКУТЕККАЕ УРТАНРЗРЗР КРАООРОТЬУ УСУУССЬЬСЗ 130
ЬУЬЬУИУЬАУ ХСЗКААНСТХ САККТСОРЬК ЕИРЗАУРУРЗ УВУСЕЬОРОИ КЕКТРЕРРУР 240
СУРЕОТЕУАТ ХУРРЗСМаТЗ ЗРАККСЗАОС РНЗАОРЬВРЕ ОСНСЗИРЬ 236
В соответствии с изобретением, поскольку В7-1 и его фрагменты также могут связываться с В7-Н1 и передавать ингибиторную трансдукцию Т-клеткам через В7-Н1, блокирование указанного взаимодействия также может уменьшить передачу ингибиторного сигнала, которая происходит через В7-Н1. Соединения, применяемые в изобретении, включают в себя молекулы, которые блокируют указанный тип взаимодействия. Данные молекулы раскрыты в Вийе е1 а1. (2007) ранее и включают в себя антитела антиВ7-Н1 с двойной специфичностью, которые блокируют взаимодействие В7-Н1:В7-1 и В7-Η1:Ρ^-1, а также антитела, демонстрирующие моноспецифичность, которые блокируют взаимодействие Ρ^-^1:В7-1. Соединения, которые препятствуют указанному взаимодействию путем блокирования В7-1, также являются полезными и включают в себя анти-В7-1 антитела.
4. Вариантные полипептиды.
Полипептиды, используемые в изобретении, как описано, включают в себя полипептиды, которые изменены таким образом, что содержат одну или более аминокислотных замен, делеций или вставок. Способы мутагенеза известны в данной области техники. Мутированные или вариантные полипептиды ингибируют или уменьшают передачу ингибиторного сигнала через рецепторы ΡΌ-1 благодаря связыванию с лигандами ΡΌ-1. Альтернативно, варианты (например, полипептиды В7ГОС) могут связываться с рецептором ΡΌ-1 и ингибировать, уменьшать или блокировать передачу ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1. Вариантные полипептиды могут представлять собой полипептиды, полученные из видов любого происхождения. В одном варианте осуществления вариантный полипептид является полипептидом, полученным из видов млекопитающих. В предпочтительном варианте осуществления вариантный полипептид является по происхождению полипептидом мыши или примата, предпочтительно человека.
В одном варианте осуществления вариантный полипептид представляет собой полипептид В7ГОС, который обладает такой же связывающей способностью в отношении ΡΌ-1, как В7ГОС дикого типа или невариантный В7ГОС, но не обладает или обладает менее чем 10% способностью запускать передачу ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1, по сравнению с немутировавшим полипептидом В7ГОС. В
- 15 023148 других воплощениях вариантный полипептид В7-ЭС обладает связывающей способностью в отношении РЭ-1 большей на 10, 20, 30, 40, 50 или 60%, чем В7-ЭС дикого типа, без инициирования ингибиторной РЭ-1 сигнальной трансдукции.
Вариантный полипептид (например, вариантный полипептид В7-ЭС) включает в себя полипептиды, характеризующиеся любой комбинацией аминокислотных замен, делеций или вставок при условии, что антагонистическая активность в отношении РЭ-1 не уменьшается существенно в сравнении с диким типом. Однако, в случае если указанное уменьшение существует, оно должно составлять не более чем половину значения активности дикого типа, так что указанный вариант характеризуется по меньшей мере 50% антагонистической активностью белка дикого типа в отношении РЭ-1. предпочтительно по меньшей мере 60%, более предпочтительно по меньшей мере 80%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 90 или 95%, при этом по меньшей мере 100% антагонистическая активность является особенно предпочтительной. Повышенные значения такой активности, полученные в результате применения указанного варианта, являются еще больше желательными. В одном варианте осуществления изолированные вариантные полипептиды В7-ЭС имеют аминокислотные изменения, такие что их аминокислотная последовательность характеризуется по меньшей мере 60, 70, 80, 85, 90, 95, 97, 98, 99, 99,5 или 100% идентичностью с аминокислотной последовательностью полипептида В7-ЭС дикого типа, особенно с аминокислотной последовательностью дикого типа млекопитающего, предпочтительно мыши, или примата, предпочтительно человека, полипептида В7-ЭС дикого типа.
Идентичность полипептидной последовательности может быть рассчитана с помощью определения % идентичности, предоставленного выше.
Замены аминокислот в полипептидах могут быть консервативными или неконсервативными.
Молекулы семейства В7, включая В7-ЭС, экспрессируются на клеточной поверхности с мембранным проксимальным константным 1дС-доменом и мембранным дистальным 1дУ-доменом. Рецепторы указанных лигандов содержат общий внеклеточный 1дУ-подобный домен. Взаимодействия пар рецепторлиганд опосредуется главным образом через остатки в 1дУ-доменах лигандов и рецепторов. В целом, 1дУ-домены описывают как содержащие два листа, каждый из которых содержит слой β-тяжей. Указанные β-тяжи обозначают А', В, С, С', С, Ό, Е, Р и О. В одном варианте осуществления вариантные полипептиды В7-ЭС содержат аминокислотные изменения (т.е. замены, делеции или вставки) в одном или более β-тяжей в любой возможной комбинации. В другом варианте осуществления варианты В7-ЭС содержат одно или более аминокислотных изменений (т.е. замен, делеций или вставок) в А', С, С', С, Ό, Е, Р или О β-тяжах. В одном варианте осуществления варианты В7-ЭС содержат одно или более аминокислотных изменений в β-тяже О.
Что касается В7-ЭС мыши или примата, предпочтительно человека, вариантный полипептид В7-ЭС может содержать, без ограничения, замены, делеции или вставки в положениях, которые не уменьшат существенно связывание с РИ-1 по сравнению с немутантным В7-ЭС. Следует понимать, однако, что замены в перечисленных положениях аминокислот могут быть выполнены с применением аминокислоты или аналога аминокислоты. Например, замены в перечисленных положениях могут быть выполнены с помощью одной из встречающихся в природе аминокислот (например, аланин, аспарагиновая кислота, аспарагин, аргинин, цистеин, глицин, глутаминовая кислота, глутамин, гистидин, лейцин, валин, изолейцин, лизин, метионин, пролин, треонин, серии, фенилаланин, триптофан или тирозин).
Несмотря на то что описанные здесь замены, являются заменами в отношении В7-ЭС мыши и примата, предпочтительно человека, указано, что специалист в данной области техники может без труда произвести аналогичные изменения в соответствующих полипептидах других видов (например, крысы, хомяка, морской свинки, песчанки, кролика, собаки, кошки, лошади, свиньи, овцы, коровы или низшего примата).
Предпочтительные фрагменты включают в себя весь или часть внеклеточного домена В7-ЭС, полезного для связывания с РИ-1.
В одном варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС представляют собой фрагменты, которые сохраняют способность связываться с РИ-1 без инициирования передачи РИ-1 ингибиторного сигнала. Один вариант осуществления предоставляет вариантный полипептид В7-ЭС, который является фрагментом полноразмерного В7-ЭС и характеризуются обычно по меньшей мере 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 98, 99, 100 или еще выше чем 100% антагонистической активностью полноразмерного вариантного полипептида В7-ЭС в отношении РИ-1.
Полезные фрагменты вариантных полипептидов В7-ЭС включают в себя растворимые фрагменты. Растворимые фрагменты В7-ЭС представляют собой фрагменты В7-ЭС, которые могут быть слущены с поверхности, секретированы или выделены иным способом из продуцирующих клеток. В одном варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС включают в себя полный внеклеточный домен В7-ЭС. Внеклеточный домен В7-ЭС включает в себя аминокислоты приблизительно от 20 до 221 аминокислоты В7-ЭС мыши или примата, предпочтительно человека. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС включают в себя домены 1дС и 1дУ В7-ЭС. В другом варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС включают в 1дУ-домен В7-ЭС.
- 16 023148
В одном варианте осуществления фрагменты вариантного полипептида В7-ЭС содержат участок полипептида, который является важным для способности связываться с ΡΌ-1. Указанные полипептидные фрагменты являются полезными для связывания и блокирования рецептора ΡΌ-1, чтобы предотвратить связывание природных лигандов с рецептором ΡΌ-1, усиливая, таким образом, иммунный ответ. Ингибирующие взаимодействия нативного В7-Н1 или В7-ЭС с ΡΌ-1 ингибируют супрессию иммунных ответов, которая происходила бы в противоположном случае. Фрагмент полипептида В7-ЭС мыши или примата, предпочтительно человека, который связывается с ΡΌ-1, содержит в качестве неограничивающего примера аминокислоты 101-105 или 111-113. Связывание В7-Н1 с рецептором ΡΌ-1 обычно ингибируется по меньшей мере на 50%, или по меньшей мере 60%, или по меньшей мере на 70%, или по меньшей мере 75%, или по меньшей мере на 80%, или по меньшей мере на 90%, или по меньшей мере на 95% или больше по сравнению с уровнем связывания В7-Н1 с ΡΌ-1 в отсутствие указанного фрагмента.
Мутант А99Ь человеческого ΡΌ-1 связывает В7ГОС и В7-Н1 с более высокой аффинностью, чем немутированный ΡΌ-1 человека (Ъа/аг Мо1паг е! а1. ΡNА§, 105, р. 10483-10488 (2008)). В одном варианте осуществления изобретения соединение, предназначенное для уменьшения передачи ингибиторного сигнала, представляет собой растворимый белок, такой как ЕСГО ΡΌ-1, включающий в себя указанную мутацию.
5. Модифицированные полипептиды.
Полипептиды, применяемые в изобретении, как описано, включая варианты, гомологи и их фрагменты, могут быть модифицированы с помощью химических функциональных групп, которые обнаруживают в ассоциации с полипептидами в нормальной клеточной среде, например, с помощью фосфорилирования, метилирования, амидирования, сульфатирования, ацилирования, гликозилирования, сумоилирования и убиквитинирования полипептида. Указанные полипептиды также могут быть модифицированы с помощью химических функциональных групп, которые обычно не являются частью полипептидов в клеточной среде. Указанные модификации могут быть введены в молекулу путем реакции аминокислотных остатков-мишеней полипептида с органическим агентом, используемым для получения производных, который способен реагировать с выбранными боковыми цепями или с концевыми остатками. Другая полезная модификация представляет собой циклизацию белка. Указанные модификации также включают в себя введение метки, способной обеспечить детектируемый сигнал, прямо или косвенно, включающей в себя, но без ограничения, радиоактивные изотопы и флуоресцентные соединения.
Примеры химических производных полипептидов включают в себя остаток лизина и аминоконцевые остатки, образующие производные с сукциновым ангидридом или с другими ангидридами карбоновых кислот. Получение производных с циклическим карбоксильным ангидридом обладает эффектом изменения заряда остатков лизина. Другие подходящие реагенты для получения производных аминосодержащих остатков включают в себя имидоэфиры, такие как метилпиколинимидат; пиридоксальфосфат; пиридоксаль; хлорборгидрид; тринитробензолсульфоновая кислота; О-метилизомочевина; 2,4-пентандион и реакция с глиоксилатом, катализируемая трансаминазой. Карбоксильные боковые группы, аспартил или глутамил, могут быть выборочно модифицированы с помощью реакции с карбодиимидами (К-К=С=К-К'), такими как 1-циклогексил-3-(2-морфолинил-(4-этил)карбодиимид или 1-этил3-(4-азония-4,4-диметилфенил)карбодиимид. Кроме того, остатки аспартила и глутамила могут быть превращены в остатки аспарагинила и глутаминила с помощью реакции с аммиаком. Полипептиды изобретения также могут включать в себя одну или более Ό-аминокислот, которыми заменяют одну или более Ь-аминокислот.
В других воплощениях потенцирующий агент, такой как СТХ1 сам может быть частью соединения, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала, например, в случае, если потенцирующий агент химически связан с антагонистом ΡΌ-1 изобретения.
6. Гибридные белки.
Также предоставлены гибридные полипептиды, содержащие первый гибридный партнер или полипептидую часть, включающую в себя весь или часть белкового антагониста ΡΌ-1, например полипептид В7-ОС (включая, варианты, гомологи и их фрагменты), соединенный (ί) непосредственно со вторым полипептидом или (ίί) при желании, соединенный с линкерной пептидной последовательностью, которая объединена со вторым полипептидом. Наличие гибридного партнера может изменять, например, растворимость аффинность и/или валентность полипептидного антагониста ΡΌ-1. Раскрытые гибридные белки включают в себя любую комбинацию изменений аминокислот (т.е. замена, делеция или вставка), фрагмента и/или модификации пептидного антагониста ΡΌ-1, как описано выше. В одном варианте осуществления гибридные белки В7-ОС включают в себя внеклеточный домен белка В7-ОС в качестве первого связывающего партнера. В другом варианте осуществления указанные гибридные белки В7-ОС включают в себя домен 1дУ и 1дС белка В7-ОС в качестве первого связывающего партнера. В другом варианте осуществления вариантные гибридные белки В7-ОС включают в себя 1дУ-домен белка В7-ОС в качестве первого связывающего партнера.
Типичные первые гибридные партнеры включают в себя полипептид В7-ОС примата, предпочтительно человека, или мыши, его фрагменты и их варианты, раскрытые выше. Предпочтительные фрагменты включают в себя внеклеточный домен В7-ОС. Как описано, внеклеточный домен может включать
- 17 023148 в себя 1-10 расположенных рядом аминокислот сигнального пептида, трансмембранного домена В7-ЭС или их обоих.
В одном варианте осуществления композиции и/или продукты и/или способы изобретения применяют антагонист рецептора ΡΌ-1, в особенности полипептиды, включая варианты, гомологи и их фрагменты, которые соединяют с другими полипептидами для создания гибридных белков, которые противодействуют рецептору ΡΌ-1 путем связывания лиганда ΡΌ-1, такого как В7-Н1, тем самым ингибируют взаимодействие ингибирующего лиганда с ΡΌ-1. В другом варианте осуществления полипептидные антагонисты рецептора ΡΌ-1 или их варианты соединяют с другими полипептидами для создания гибридных белков, которые оказывают антагонистическое действие на рецептор ΡΌ-1 путем связывания и блокирования рецептора ΡΌ-1 и ингибируют или уменьшают передачу ингибиторного сигнала через ΡΌ-1.
Второй полипептидный связывающий партнер или вторая полипептидная часть могут представлять собой Ν-конец или С-конец относительно полипептидого антагониста ΡΌ-1. В предпочтительном варианте осуществления второй полипептид представляет собой С-конец полипептидного антагониста ΡΌ-1.
В предпочтительном варианте осуществления гибридный белок, предусмотренный для применения в способах и композициях и/или продуктах изобретения, включает в себя по меньшей мере часть антитела. С появлением методов молекулярной биологии и рекомбинантной технологии теперь возможно производить молекулы антител рекомбинантными способами и создавать, таким образом, нуклеотидные последовательности генов, которые кодируют специфические аминокислотные последовательности, обнаруженные в полипептидной структуре антител. Указанные антитела могут быть получены либо с помощью клонирования нуклеотидных последовательностей генов, кодирующих полипептидные цепи указанных антител, либо с помощью прямого синтеза указанных полипептидных цепей со сборкой ίη νίίτο синтезированных цепей для создания активных тетрамерных (Н2Ь2) структур с аффинностью к специфическим эпитопам и антигенным детерминантам. Указанные способы обеспечивают легкое получение антител, имеющих последовательности, типичные для нейтрализующих антител, полученных из различных видов и источников.
Независимо от источника антител или их рекомбинантной конструкции или того, как они синтезированы, ίη νίίτο или ίη νίνο, с использованием трансгенных животных, например коров, коз и овец, с использованием больших клеточных культур лабораторного или коммерческого объема в биореакторах или с помощью прямого химического синтеза без использования живых организмов на какой-либо стадии процесса все антитела обладают сходной общей трехмерной структурой. Указанная структура часто представляется в виде Н2Ь2 и отражает тот факт, что антитела обычно включают в себя две легкие (Ь) аминокислотные цепи и две тяжелые (Н) аминокислотные цепи. Обе цепи содержат области, способные взаимодействовать со структурно комплементарной антигенной мишенью. Области, взаимодействующие с мишенью, обозначают как вариабельные или V области, и они характеризуются отличиями в аминокислотной последовательности от антител другой антигенной специфичности.
В предпочтительных воплощениях полипептидные антагонисты рецептора ΡΌ-1, включая фрагменты, мутанты и другие варианты, имеют первого партнера слияния, имеющего весь или часть белка В7-ЭС, или его варианта, слитого (ί) непосредственно со вторым полипептидом, или (ίί) необязательно слитого с пептидной линкерной последовательностью, которая слита со вторым полипептидом. Присутствие партнера слияния может изменить растворимость, аффинность и/или валентность В7-ЭС полипептида. В более предпочтительных воплощениях полипептиды В7-ЭС соединены с одним или более доменами константной области тяжелой цепи 1§, более предпочтительно с аминокислотной последовательностью, соответствующей шарнирной области, участкам СН2 и СН3 цепи Су1 иммуноглобулина человека, или шарнирной области, участкам СН2 и СН3 цепи Су2а иммуноглобулина мыши. В предпочтительном варианте осуществления константная область предпочтительно включает в себя мутацию (например, N2970). чтобы исключить или уменьшить связывание Рс-рецептора.
Шарнирная область, участки СН2 и СН3 цепи Су1 иммуноглобулина человека, имеют следующую аминокислотную последовательность:
ЕРК5СТЭКТНТ СРРСРАРЕШ ССРЗУРЬРРР КРКПТЬМ13К ΤΡΒντσνννΠ '/ЗНЕЕРСТКг 60
НИУУОСТЕУН ΝΑΚΤΚΡΗΕΕΟ УИЗТУРУУЗУ ЬТУЬН00Н1Л ΟΚΕΥΚΟΚνδΝ ΚΑΙ,ΡΑΡΙΕΚΤ 120
Ι3ΚΑΚ60ΡΚΕ РОУУТЬРРЗК ЕБЬТКИОУЗЬ ТСЬУКСРУРЗ ΒίΑνΕΗΕδΚσ ΟΡΒΝΝΥΚΤΤΡ 180
РУЬОЗЦСЗРР ЬУЗКЬТУЦКЗ ННОООИУРЗС ЗУМНЕАЬНПН УТОКЕЬЗЬЗР ОК 232
(ЗЕО Ю N0:6).
Шарнирная область, участки СН2 и СН3 цепи Су2а иммуноглобулина мыши имеют следующую аминокислотную последовательность:
ЕРКСРТ1КРС РРСКСРАРЛЬ ЬССРЗУПРР рк!коуьм13 υΞΡίντσννν пузёоцроуо 60
ΙδΗΡνΝΝνδν НТАОТОТНЙЕ ОУИЗТЦЯУУЗ АЬРЮНООИМ ЗСКЕГКСКУН НКПЬРАР1ЕН 120
Т13КРКСЗУН ΑΡΟνγνΣΡΡΡ ЕЕЕМТККОУТ ЬТСМУТРРМР ΕϋΙΥνΕΜΤΝΝ ОКТЕШУКЫТ 180
ЕРУЬОЗЦСЗУ ГМУЗКЬКУЕК ЮТИУЕКИЗУЗ СЗУУНБОЫТО ННТТКЗРЗКТ РСК 233
{ЗЕО Ю N0:7)
- 18 023148
Типичные гибридные белки В7ГОС мыши содержат аминокислоты 20-221 мышиного В7-ЭС. соединенного с аминокислотами 237-469 мышиного 1§О2а (САА49868). Гибридные белки В7-ЭС человека могут содержать аминокислоты 20-221 человеческого В7-ЭС, соединенного с аминокислотами 245-476 человеческого 1дС1 (ААА02914). Сигнальные пептиды гибридных белков В7ГОС могут быть эндогенными сигнальными пептидами или любым другим сигнальным пептидом, который способствует секреции гибридного белка из клетки-хозяина.
Репрезентативный гибридный белок В7-ЭС-1д мыши кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты §ЕЦ ГО N0: 8.
Следует понимать, что раскрытые последовательности нуклеиновых кислот могут быть кодоноптимизированными для увеличения уровней экспрессии для синтеза гибридных белков, применяемых в способах и композициях настоящего изобретения. Способы оптимизации кодонов известны в данной области техники.
Мышиный гибридный белок В7ГОС-1д, кодированный §ЕЦ ГО N0: 8, имеет следующую аминокислотную последовательность:
БЬОЪНРУААЬ ΡΤνΤΑΡΚΒνΥ τνπνοδδνδΐ. ЕССРСВВЕСТ ЕЬЕСХЕАЗЬО 60
ΚνΕΝΠΤ3Ε0δ ЕЯМЪЬЕЕОЬ РЪОКАЬРШР δνονκοδοςγ ЕСЬУ1СОЛАН СУКУЬТУКУК 120
Α3ΥΜΚΪΒΤΚΙ ЬТООАВОУРЬ ΑΕνδΜΟΚνδν ΡΑΗΤ5ΗΙΚΤΡ ЕСЬУОУГЗУЬ 180
КЬКРОРЗКЫР ЗСМРИЫАНМК ЕЬТЗАИПРЪ ЗЯМЕРКУРЯТ НЕРКСРТ1КР СРРСКСРАРН 240
ььссрзупр РРКТКПУЬМ! δΐ,δΡίντσνν νΟνδΕΟΡΡϋν 018ИРУМИУЕ УНТАОТОТНК 300
ЗАЬРЩНдОН мзскеркску НЫКОЬРАРТЕ ЯТ13КРКЙ5У КАРОУУУЬРР 360
РЕЕЕМТККОУ ТЬТСМУТОГМ ΡΕΟΙΥνΕΜΓΝ ΝΟΚΤΕΙ4ΝΥΚΝ ТЕРУЬОЗСОЗ УРМУЗКЦКУЕ 420
ΚΚΝΗνΕΜί3Υ ЗСЗ^ТНЕСЬН нннтткзгзв ТРОК 454
(ЗЕО ΙΟ N0:9)
§ЕЦ ГО N0: 10 предоставляет аминокислотную последовательность мышиного гибридного белка В7ГОС-!д без сигнальной последовательности:
ЬРТУТАРКЕУ УТУЭУСЗЗУЗ ЬЕССГОККЕС ТЕЬЕЙ1НАЗЬ ОКУЕТОТЗЬО 5 ЕВАТЫ ЕЕО 60
ЬРЦЙКАЬРН! РЗУ0УКСЗС0 УВСЬУЮСАА ИОУКУЬТУКУ КАЗУМЙ1СТВ 1ЬЕУР6ТЙЕУ 120
ОЬТСОАДйУР ЦАЕУБИОКУЗ УРАНТЗНТКТ РЕСЬУОУТЗУ ЬНЬКРОРЗКИ РЗСМРННАНМ 130
КЕЬТЗАИСР ЬЗКМЕРКУРН ΤΗΕΡΒΟΡΤΙΚ РСРРСКСРАР ИЫЛСРЗУП РРРКТКЕУЬМ 240
18ЬЗР1УТСУ УУОУЗЕЦСРО У01ЙИРУННУ ЕУНТАОТОТН ЙЕСУЫЗТЬКУ ν3ΑΤ,ΡΙ<3Η0ϋ 300
НМЗЙКЕРКСК УНЫКСЬРАРТ ΕΚΤΙ3ΚΡΚ05 УКАРОУУУЬР РРЕЕЕМТККО УТЬТСМУТОР 360
МРЕ01УУЕНТ ИИСКТЕЬЫУК ИТЕРУЬОЗОС ЗУРМУЗКЬКУ БККНИУЕКМЗ УЗСЗУУНЕОЬ 420
НИННТТКЗРЗ КТРСК 435
(ЗЕО Ιϋ N0:10)
В одном варианте осуществления человеческий В7ГОС-1д кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты §ЕЦ ГО N0: 11, кодирующей аминокислотную последовательность В7ГОС-1д человека:
МТРЫЖМЬЗЬ Е1Х}Ш01ААЬ РТУТУРКЕЬУ ИВНСЗНУТЬ ЕСИГОТСЗНУ ИЬОАХТАЗЬО 60 КУЕК0Т5РИК ЕНАТЬЬЕЕОЬ Р1ЛКДЗГН1Р ОУОУКОЕООУ ОСШУСУАИ СУКУЬТЬКУК 120 Α3ΥΚΚΙΝΤΗΙ ЬКУРЕТСЕУЕ ЬТСОАТСУРЬ АЕУЗНРКУЗУ РАМТЗНЗЯТР ЕСЬУО'/ТЗУЬ 1ЭО КЬКРРРСНМР ЗСУРИИТНУК ЕЬТЬАЗЮЬО ЗОМЕРКТНРТ ИЕРКЗССКТН ТСРРСРАРЕЬ 24 0 ЬОСРЗУРЬРР РКРКСТ1Л13 ЕТРЕУТСУУУ СУЗ ИБО РЕУ К ГИИУТОСУБУ ННАКТКРКЕЕ 300 ОУИЗТУЕУУЗ УЬТУЪНОСМЬ ИСКЕУКСКУЗ ВКАЪРАРГЕК ΤΙ5ΚΑΚ0ζ}ΡΕ ЕРОУУТЬРРЗ 360 ИСЕЬТКИОУЗ ЬТСЬУКСРУР ЗИАУЕИЕЗИ 60РЕНИУКТТ РРУЬОЗСЙЗР РЬУЗКЬТУЛК 420 5К»ООСНУРЗ СЗУМНЕЛЬНИ НУТОКЗЬЗСЗ РСК 4 33 (ЗЕО 10 N0:12)
Настоящее изобретение, в частности, предусматривает вариант осуществления, где зрелый гибридный белок, используемый в способах и композициях изобретения, характеризуется удаленной сигнальной последовательностью. В предпочтительном варианте осуществления сигнальная последовательность полностью удалена.
- 19 023148
8Е0 ΙΌ NО: 13 предоставляет аминокислотную последовательность человеческого В7-ЭС-1д без сигнальной последовательности:
ЬРТУТУРКЕЬ ΥΙΙΕΗΕδΝνΤ ЬЕСИРВТСЗН УМЦСА1ТАЗЦ ОКУЕЫОТЗРН КЕКАТЬЬЕЕС) 60
ЬРЬСКАЗГНГ ρονονκοεαο УОСПГУСУА ИОУКУИХКУ ΚΑ8ΥΚΚΙΝΤΗ ιι,κνΡΒτοεν 120
ЕЬТСОАТСУР ЬАЕУЗНРКУЗ νΡΑΝΤ3Η3ΚΤ РЕОЬУОУТЗУ ЬКЬКРРРСКМ гзсуриттну 130
КВ1/ПА31Ш, 050МЕРКТНР тиерхзсихт НТСРРСРАРЕ ШМРЗУРЬР РРКРКИТЬМ! 240
ЭНТРЕУТСУУ ТОУЗНЕОРЕУ КРЦИУУОСУЕ УНМАКТКРКЕ ΕΟΥΝΒΤΥΚνν ЗУЦТУЦИОИМ 300
ьжзкеукску ΒΝΚΑί,ΡΑΡΙΕ КТ13КАКС0Р КЕРОУУТЬРР δΗΟΕΙ,ΤΚΝΟν ЗЦТСЬУКОГУ 360
РЗО1АУЕНЕЗ ΝΟΟΡΕΝΝΥΚΤ ТРРУЬОЗООЗ РРЬУЗКЬТУО КЗЕНОССМУР ЗСЗУИКЕАЬН 420
ИНУТОКЗЬЗЬ ЗРСК 434
(ЗЕО ю N0:13).
Настоящее изобретение, в частности, предусматривает варианты осуществления, где раскрытые гибридные белки В7-ЭС-1д, используемые в раскрытых здесь способах и композициях, обладают последовательностью, идентичной по меньшей мере на 80, 85, 90, 99 или 100% по отношению к 8ЕО ГО NО: 9, 10, 12 или 13.
В другом варианте осуществления изобретения гибридный полипептид может характеризоваться биспецифической функцией, в соответствии с которой первый гибридный партнер связывается с лигандом ΡΌ-1, таким как В7-Н1, и второй гибридный партнер связывается с рецептором ΡΌ-1 без инициации передачи ингибиторного сигнала через рецептор ΡΌ-1.
Несмотря на то что полипептид, применяемый в изобретении, может быть мономерным или димерным, сами гибридные белки могут быть представлены в мономерной или олигомерной форме, предпочтительно в виде димера. В конкретных воплощениях гибридные белки, применяемые в качестве антагонистов ΡΌ-1 в способах и композициях изобретения, могут собираться спонтанно в олигомерные, в частности, димерные формы или могут быть химически связаны для создания указанных олигомеров с помощью способов, хорошо известных в данной области техники. Например, гибридный белок, применяемый в изобретении, может включать в себя часть полипептида В7ГОС, соединенную с частью антитела, и указанные части далее могут быть собраны в димер. В одном примере полипептид для применения в изобретении гибридизируют в виде одной аминокислотной цепи с Рс-областью антитела (например, где указанная конструкция экспрессируется из одного рекомбинантного полипептида), после чего два таких гибридных продукта соединяют друг с другом для создания гомодимера, например, с помощью дисульфидной связи между соответствующими Рс-областями.
Указанные димерные продукты могут представлять собой гомодимеры (где оба мономерных гибридных белка идентичны) или могут представлять собой гетеродимеры (где два различных гибридных белка связаны друг с другом). Отдельные мономеры указанных димеров могут быть связаны способами, известными в данной области техники, например, с помощью ковалентной связи (например, дисульфидная связь) или с помощью нековалентной связи (такой как ионное взаимодействие). В7ГОС-1д, применяемый в примерах изобретения, представлен в форме гомодимера, содержащего две копии 8ЕО ГО NО: 10, связанных вместе дисульфидной связью. Кроме того, гетеродимеры изобретения включают в себя биспецифические белки и гибридные белки, в которых одна мономерная часть связывается с ΡΌ-1 и другая часть связывается с природным лигандом ΡΌ-1. Указанные гетеродимеры создают путем соединения полипептидов и гибридных белков, полностью описанных в другой части настоящего документа.
В другом полезном варианте осуществления изобретения антагонист ΡΌ-1 представляет собой гетеродимер, где, например, два гибридных белка соединены вместе, но они не являются идентичными по аминокислотной последовательности. В конкретном примере каждый мономер может включать в себя Рс-часть антитела, соединенную с активным фрагментом полипептида В7ГОС, где указанные активные фрагменты являются фрагментами из различных частей полипептида В7ГОС или где гибридный белок, включающий в себя Рс-часть антитела, соединенную с полноразмерным нативным В7ГОС полипептидом, связан (например, поперечной связью) с гибридным белком, содержащим Рс-часть антитела и активный фрагмент полноразмерного нативного полипептида ΕΥ-ΌΟ В каждом указанном случае часть антитела, использованная для создания каждого мономерного гибридного белка, может отличаться в двух мономерных единицах. Любая указанная димерная комбинация в частности предусмотрена способами и композициями изобретения.
В предпочтительном димерном гибридном белке димер получают в результате ковалентного связывания Сук-остатков в СН-областях двух тяжелых цепей 1д, которые представляют собой те же самые Сукостатки, которые соединены дисульфидной связью в димеризованных тяжелых цепях обычного 1д.
Другое воплощение предоставляет тетрамерную конструкцию, содержащую субстрат ВйА, соединенный с внеклеточным доменом вариантного полипептида В7ГОС. Способы создания тетрамерных конструкций известны в данной области техники (см. ЕеПоуак. е1 а1., I. Ехр. Меб., 203:2281 (2006)).
- 20 023148
7. Анти-ГИ-! и другие антитела.
Другие антагонисты ΡΌ-1, предусмотренные способами изобретения, включают в себя антитела, которые связываются с ΡΌ-1 или с лигандами ΡΌ-1, и другие антитела.
В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего, который в этом нуждается, включающему в себя назначение указанному млекопитающему эффективной схемы лечения, включающей в себя антитело и потенцирующий агент, где указанная схема лечения является эффективной для увеличения Т-клеточного ответа млекопитающего на указанный антиген.
Антитела :^11^0-1. применяемые в схеме (схемах) лечения изобретения, включают в себя, но без ограничения, антитела, описанные в следующих публикациях:
ΡΟΓ Ш03/00425 (Нагйу е! а1., АО 2003/099196), ΡΟΓ ΙΡ2006/309606 (Когтап е! а1., АО 2006/121168), ЕСТ И82008/008925 (Ы е! а1., АО 2009/014708), ЕСТ ΙΡ03/08420 (Нои)о е! а1., АО 2004/004771), ?СТ 1Ρ04/00549 (Нои)о е! а1., АО 2004/072286), ?СТ 1В2003/006304 (СоШик е! а1., АО 2004/056875), ΡСТ И82007/088851 (АЬтей е! а1., АО 2008/083174), 1’СТ И82006/026046 (Когтаи е! а1., АО 2007/005874), 1’СТ И82008/084923 (Теггей е! а1., АО 2009/073533), Вегдег е! а1., Сйи. Саисег Кек., то1. 14, р. 30443051 (2008).
Конкретным примером антитела анти-Ρ^-1, применяемого в способах изобретения, является МИХ-1106 (см. Кокак, патент США 20070166281 (опубл. 19 июля 2007 г.), абзац 42), человеческое антитело анти-Ρ^-1, предпочтительно вводимое в дозе 3 мг/кг.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего, который в этом нуждается, включающему в себя назначение указанному млекопитающему эффективной схемы лечения, включающей в себя антитело анти-Ρ^-1 лиганда, например антитело анти-В7-Н1, и потенцирующий агент, где указанная схема лечения является эффективной для увеличения Т-клеточного ответа указанного млекопитающего на указанный антиген.
Антитела анти-В7-Н1, применяемые в схеме (схемах) лечения изобретения, включают в себя, но без ограничения, антитела, описанные в следующих публикациях:
1’СТ И806/022423 (АО 2006/133396, опубл. 14 декабря 2006 г.);
1’СТ И807/088851 (АО 2008/083174, опубл. 10 июля 2008 г.);
И8 2006/0110383 (опубл. 25 мая 2006 г.).
Конкретным примером антитела анти-В7-Н1, применяемого в способах изобретения, является МИХ-1105 (АО 2007/005874, опубл. 11 января 2007 г.)), человеческое антитело анти-В7-Н1.
Для антитела анти-В7-ИС см. патентные заявки США 7411051, 7052694, 7390888, 20060099203.
Другой вариант воплощения изобретения включает в себя биспецифическое антитело, которое включает в себя антитело, которое связывается с рецептором ЙИ-Е соединенное мостиковой связью с антителом, которое связывается с лигандом ΡΠ-Ε таким как В7-Н1. В предпочтительном варианте осуществления часть, связывающая ΡΠ-Ε уменьшает или ингибирует сигнальную трансдукцию через рецептор ΡΠ-1.
Антитело для применения в изобретении необязательно должно быть антителом анти-Ρ^-1 или антителом анти-Ρ^-1 лиганда, но может представлять собой другое антитело, используемое в опосредовании эффектов Т-клетки в иммунном ответе. В указанном аспекте настоящее изобретение относится к способу увеличения Т-клеточного ответа на антиген у млекопитающего, который в этом нуждается, включающему в себя введение указанному млекопитающему эффективной схемы лечения, включающей в себя антитело анти-СТЬА4 и потенцирующий агент, где указанная схема лечения является эффективной для увеличения Т-клеточного ответа указанного млекопитающего на указанный антиген. Пример антитела анти-СТЬА4, предусмотренного для применения в способах изобретения, включает в себя антитело, которое описано в ΡСТ И82006/043690 (р1ксЬко£Т е1 а1., АО 2007/056539).
Конкретные примеры антитела анти-СТЬА4, применяемого в способах изобретения представляют собой ипилимумаб, также известный как МИХ-010 или МИХ-101, человеческое антитело анти-СТЬА4, предпочтительно вводимое в дозе 10 мг/кг, и тремелимумаб человеческое антитело анти-СТЬА4, предпочтительно вводимое в дозе 15 мг/кг.
8. Малые молекулы антагонистов Ρϋ-1.
Антагонисты рецептора ΡΠ-1 также могут представлять собой малые молекулярные антагонисты. Термин малая молекула относится к небольшим органическим соединениям с молекулярным весом более 100 и менее 2500 Да, предпочтительно от 100 до 2000 Да, более предпочтительно приблизительно от 100 до 1250 Да, более предпочтительно приблизительно от 100 до 1000Да, более предпочтительно приблизительно от 100 до 750 Да, более предпочтительно от 200 до 500 Да. Малые молекулы часто включают в себя циклический углерод или гетероциклические структуры и/или ароматические или полиароматические структуры, замещенные одной или более функциональными группами. Малые молекулярные антагонисты уменьшают или препятствуют сигнальной трансдукции через рецептор ΡΠ-1 путем связывания с лигандами ΡΠ-Ε такими как В7-Н1 и В7-ИС и предотвращения взаимодействия лиганда с Ρϋ-1 или путем связывания и блокирования непосредственно рецептора ΡΠ-1 без инициирования сигнальной трансдукции через рецептор ΡΠ-1.
- 21 023148
В одном варианте осуществления указанная малая молекула может быть введена в комбинации с другим антагонистом ΡΌ-1 или с антагонистом СТЬА4, таким как антитело, специфичное к ΡΌ-1, или один из его лигандов или как антитело, специфичное к СТЬА4, или один из его лигандов. Таким образом, указанные малые молекулы могут быть введены в качестве соединений в один или более способов изобретения или могут быть введены в комбинации с другими соединениями, применяемыми в способах изобретения. Например, показано, что серии малых органических соединений связываются с лигандом В7-1 для предотвращения связывания с СТЬА4 (см. ЕгЬе е! а1., I. Вю1. СЬет., уо1. 277, р. 7363-7368 (2002). Указанные малые органические соединения могут быть введены отдельно или вместе с антителом анти-СТЬА4, в комбинации с введением СТХ, для уменьшения передачи ингибиторного сигнала Т-клеток.
В одном варианте осуществления антагонисты ΡΌ-1 или антагонисты СТЬА4, предусмотренные для применения в способах изобретения, включают в себя антисмысловые нуклеиновые кислоты, как ДНК, так и РНК, а также молекулы κίΡΌΚ. Указанные антисмысловые молекулы предотвращают экспрессию ΡΌ-1 на Т-клетках, а также продукцию Т-клеточных лигандов, таких как В7-Н1, ΡΌ-Ы и ΡΌ-Ό2. Например, мЬНК (например, длиной приблизительно 21 нуклеотид, которая специфична для гена, кодирующего ΡΌ-1 или кодирующего лиганд ΡΌ-1, и олигонуклеотиды которого могут быть без труда приобретены коммерчески), объединенный с носителями, такими как полиэтиленимин (см. СнЬШок-Рш/ е! а1., I. СНп. 1пуек!. 119(8):2231-2244 (2009), легко поглощается клетками, которые экспрессируют ΡΌ-1, а также лиганды ΡΌ-1 и уменьшает экспрессию указанных рецепторов и лигандов, чтобы обеспечить снижение передачи ингибиторного сигнала в Т-клетки, активируя, тем самым, Т-клетки.
В. Потенцирующие агенты.
В соответствии с изобретением активность антагониста ΡΌ-1 увеличивается, предпочтительно синергически, благодаря присутствию потенцирующего агента. Потенцирующий агент воздействует на увеличение эффективности антагониста рецептора ΡΌ-1, возможно с помощью более чем одного механизма, хотя точный механизм действия не является существенно важным для широкой лечебной практики настоящего изобретения.
В предпочтительном варианте осуществления потенцирующий агент представляет собой циклофосфамид. Циклофосфамид (СТХ, Цитоксан®, или Неосар®) представляет собой лекарство оксазафосфорин и аналоги и включает в себя ифосфамид (1РО, Ифекс), перфосфамид, трофосфамид (трофосфамид; иксотен) и фармацевтически приемлемые соли, сольваты, пролекарства и их метаболиты (патентная заявка США 20070202077, которая включена во всей полноте). Ифосфамид (МИТОКСАНА®) является структурным аналогом циклофосфамида и механизм его действия считают идентичным или в основном сходным с механизмом действия циклофосфамида. Перфосфамид (4-гидропероксициклофосфамид) и трофосфамид также являются алкилирующими агентами, которые структурно связаны с циклофосфамидом. Например, перфосфамид алкилирует ДНК, ингибируя тем самым репликацию ДНК и РНК и синтез белка. Новые производные оксазофосфоринов были созданы и оценены в качестве попытки улучшить селективность и получить ответ с меньшей цитотоксичностью для хозяина (Ыапд I, Ниапд М, Оиап V, Уи ХЦ, 2Ьои 8. Оек1дп оГ пе\у оха/ар1юкр1юппе апЬсапсег йгидк. Сигг Ρίκιπη Оек. 2007; 13(9):963-78. Ре\ае\у). Указанные производные включают в себя мафосфамид (ИЗС 345842), глуфосфамид (Ό19575, бета-О-гликозилизофосфорамид горчицы), 8-(-)-бромофосфамид (СВМ-11), ИЗС 612567 (альдофосфамид пергидротиазин) и ИЗС 613060 (альдофосфамид тиазолидин). Мафосфамид представляет собой аналог оксазафосфорина, который является химически стабильной солью 4-тиоэтансульфоновой кислоты 4-гидрокси-СРА. Г луфосфамид является производным 1РО, в котором изофосфорамид горчицы, алкилирующий метаболит 1РО, связан гликозидной связью с молекулой бета-О-глюкозы.
Дополнительные аналоги циклофосфамида описаны в патенте США 5190929 под названием Аналоги циклофосфамида, применяемые в качестве противоопухолевых агентов, который включен в описание посредством ссылки во всей своей полноте.
В других воплощениях потенцирующий агент представляет собой агент, который уменьшает активность и/или число регуляторных Т-лимфоцитов (Т-гед), предпочтительно сунитиниб (ЗИТЕИТ®), анти-ТОРв или иматиниб (ОЬЕЕУАС®). Описанная схема лечения также может включать в себя введение адъюванта.
Подходящие потенцирующие агенты также включают в себя ингибиторы митоза, такие как паклитаксел, ингибиторы ароматазы (например, летрозол) и ингибиторы ангиогенеза (ингибиторы УЕОР, например авастин, УЕОР-Тгар) (см., например, Όί е! а1., Уакси1аг епйо!ЬеЬа1 дгоМЬ Гас!ог Ь1оскайе гейисек ш1га!итога1 геди1а!огу Т-се11к апй епЬапсек !Ье еГПсасу оГ а ОМ-СЗР-кесгеЬпд сапсег 1ттипо!Ьегару. СЬп Сапсег Кек. 2006 Иоу. 15; 12(22):6808-16.), антрациклины, оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ТЬК4, и антагонисты ТЬ-18.
- 22 023148
С. Фармацевтические композиции.
В одном аспекте изобретение относится к терапевтической композиции, содержащей молекулу, которая предотвращает передачу ингибиторного сигнала через ΡΌ-1, или антагонист СТЬА4, и потенцирующий агент, в фармацевтически приемлемом носителе. Компоненты указанной композиции представлены в количестве, эффективном для увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего. В конкретных воплощениях потенцирующий агент представляет собой циклофосфамид или аналог циклофосфамида, примеры таких аналогов перечислены выше.
В других конкретных примерах потенцирующий агент представляет собой агент, который уменьшает активность регуляторных Т-лимфоцитов (Т-гед), где предпочтительно активность снижается вследствие уменьшения числа указанных Т-гед. В предпочтительных неограничивающих вариантах осуществления, агент представляет собой сунитиниб (δυΤΕΝΤ®), анти-ΤΟΡβ или иматиниб (СЬЕЕУАС®).
Потенцирующий агент, применяемый в составлении композиции изобретения, также включает в себя ингибиторы митоза, такие как паклитаксел, ингибиторы ароматазы (например, летрозол), ингибиторы ангиогенеза (ингибиторы УЕСР, например авастин, УЕСР-Тгар), антрациклины, оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ТЬР4 и антагонисты 1Ь-18.
Терапевтическая композиция изобретения также, по желанию, включает в себя по меньшей мере один дополнительный агент, который может представлять собой одно или более антитело антитело анти-СТЬА4, ингибитор митоза, ингибитор ароматазы, антагонист рецептора аденозина А2а (А2АР) или ингибитор ангиогенеза.
Любая из терапевтических композиций изобретения также может содержать один или более адъювантов, которые описаны в настоящем документе.
Антагонист ΡΌ-1, применяемый в качестве компонента терапевтической композиции изобретения, включает в себя любой из антагонистов ΡΌ-1, перечисленных в описании для применения в любом из способов изобретения. Например, указанный антагонист ΡΌ-1 включает в себя любой из гибридных белков, перечисленных в описании. Указанный антагонист также может представлять собой любой из полипептидов или ΡΌ-1-связывающих фрагментов, перечисленных в описании для применения в качестве первой полипептидной части любого из гибридных белков, описанных для применения в любом из способов изобретения. Такой антагонист может далее представлять собой антитело, такое как любое из известных антител анти-Ρ^-1, анти-137-ЭС или ант-В7-Н1, упомянутых в описании.
Терапевтическая композиция изобретения также включает в себя в дополнение или вместо вышеупомянутого антагониста ΡΌ-1 антитело анти-СТЬА4. Такая композиция, соответственно, содержит указанное антитело анти-СТЬА4 и потенцирующий агент из числа уже описанных здесь.
Терапевтическая композиция изобретения находит применение в любом из способов изобретения, раскрытых в описании. Указанная композиция, несмотря на то что предназначена для применения в качестве активного лечения состояния болезни, также может найти применение в качестве профилактической композиции для предотвращения любого из заболеваний, перечисленных в описании.
В одном аспекте настоящее изобретение предусматривает терапевтическую композицию, содержащую антагонист ΡΌ-1 и потенцирующий агент в фармацевтически приемлемом носителе, где антагонист ΡΌ-1 и потенцирующий агент представлены в количестве, эффективном для увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего.
Терапевтические композиции в объеме изобретения включают в себя композиции, содержащие любую и все комбинации антагонистов ΡΌ-1 и/или антител, раскрытых в описании, с любым из перечисленных потенцирующих агентов. В качестве неограничивающих примеров терапевтическая композиция изобретения включает в себя композицию, содержащую эффективное количество одного или более антагонистов ΡΌ-1, например комбинацию любого или всех полноразмерных полипептидов, приведенных здесь в виде конкретных δΕΟ ГО N0 или их гомологов, вместе с одним или более фрагментами любого из указанных полипептидов, включая комбинации, где любое или все из них соединены с другими белками, например соединены с одним или более иммуноглобулинами, перечисленными здесь, или не соединены, и комбинации содержат один или более потенцирующих агентов, таких как циклофосфамид отдельно, или циклофосфамид плюс один или более его аналогов, только один или более аналогов циклофосфамида, или потенцирующий агент может состоять из циклофосфамида и агента, который уменьшает число Т-гед у млекопитающего, получающего композицию, или может состоять из аналога циклофосфамида плюс агент, который уменьшает число Т-гед, или потенцирующий агент может состоять только из одного или более агентов, которые уменьшают число Т-гед или другую активность Т-гед. Все указанные комбинации предусмотрены изобретением, если только композиция включает в себя по меньшей мере один антагонист ΡΌ-1 и/или антитело, опосредующее Т-клеточную активность, и по меньшей мере один потенцирующий агент.
Композиции изобретения также могут включать в себя дополнительные активные агенты. В предпочтительных воплощениях любой композиции изобретения фармацевтическая или терапевтическая композиция далее включает в себя по меньшей мере один дополнительный агент, выбранный из группы, включающей в себя антитело анти-Ρ^-1, антитело анти-СТЬА4, ингибитор митоза, такой как паклитаксел, ингибитор ароматазы, такой как летрозол, антагонист А2АР, ингибитор ангиогенеза, антрациклины,
- 23 023148 оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ТЬК4 и антагонисты 1Ь-18.
Антагонист ΡΌ-1 и/или потенцирующий агент могут быть введены с помощью любых подходящих средств. В предпочтительном варианте осуществления антагонист ΡΌ-1 и/или потенцирующий агент вводят в водном растворе с помощью парентеральной инъекции. Композиция также может быть в форме суспензии или эмульсии. В целом, предоставляют фармацевтические композиции, включающие в себя эффективные количества пептида или полипептида, и дополнительно включают в себя фармацевтически приемлемые растворители, консерванты, солюбилизаторы, эмульгаторы, адъюванты и/или носители. Указанные композиции включают в себя растворители: стерилизованную воду, забуференный физиологический раствор с различным буферным составом (например, Тт18-НС1, ацетат, фосфат), различными значениями рН и ионной силы; и, по желанию, добавки, такие как детергенты и солюбилизирующий компонент (например, Т№ЕЕН 20, Т№ЕЕН 80, ΡοΙγδοΦαΙο 80), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, матабисульфит натрия) и консерванты (например, тимерсол, бензиловый спирт) и объемообразующие субстанции (например, лактоза, маннитол). Примерами неводных растворителей или сред для лекарства являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло и кукурузное масло, желатин, и органические эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Композиции могут быть лиофилизированы и повторно растворены/ресуспендированы непосредственно перед употреблением. Композиции могут быть простерилизованы, например, путем фильтрования через фильтры, задерживающие бактерии, с включением в композиции стерилизующих агентов, путем облучения композиции или путем нагревания композиции.
Фармацевтические композиции изобретения могут быть введены парентеральным (внутримышечная, внутрибрюшинная, внутривенная (IV) или подкожная инъекция), трансдермальным (либо пассивно, либо с использованием электрофореза или электропорации) или трансмукозальным (назальным, вагинальным, ректальным или сублингвальным) способом введения. Способы изобретения не исключают введение антагониста ΡΌ-1 и потенцирующего агента отдельными и различными путями (например, местно).
Антагонист ΡΌ-1 и потенцирующий агент могут быть введены в одно и то же время или в разные моменты времени, при этом потенцирующий агент вводят до или после введения антагониста ΡΌ-1. В одном варианте осуществления потенцирующий агент вводят как до, так и после введения антагониста ΡΌ-1. В одном таком варианте осуществления один и тот же потенцирующий агент вводят до и после введения антагониста ΡΌ-1. В другом варианте осуществления потенцирующий агент вводят до введения антагониста ΡΌ-1.
Используемый в описании термин эффективное количество или терапевтически эффективное количество означает дозу, достаточную для лечения ингибирования или облегчения одного или более симптомов нарушения, которое лечат, или для предоставления иным образом желаемого фармакологического и/или физиологического эффекта. Точная дозировка будет варьировать в зависимости от ряда факторов, таких как субъект-зависимые переменные (например, возраст, состояние иммунной системы и т.д.), заболевание, и производимое лечение. Терапевтически эффективные количества антагонистов рецепторов ΡΌ-1 и/или антител вместе с потенцирующими агентами вызывают иммунный ответ, который должен быть достигнут или поддержан.
Выбранная доза зависит от желаемого терапевтического эффекта, от пути введения, и от продолжительности требуемого лечения. Обычно уровни доз 0,001-50 мг/кг массы тела вводят млекопитающим ежедневно. Предпочтительно указанная доза составляет 1-50 мг/кг, более предпочтительно 1-40 мг/кг или даже 1-30 мг/кг, при этом доза 2-20 мг/кг является также предпочтительной дозой. Примеры других доз включают в себя 2-15 мг/кг, или 2-10 мг/кг или даже 3-5 мг/кг, при этом доза 4 мг/кг представляет собой конкретный пример.
В схемах лечения с применением потенцирующего агента и антитела, такого как антитело анти-Ρ^-1 или антитело анти-СТЬЛ4, дозы обычно соответствуют интервалу 0,1-100 мг/кг, при этом более узкие интервалы от 1 до 50 мг/кг являются предпочтительными и диапазоны от 10 до 20 мг/кг являются более предпочтительными. Подходящая доза для субъекта человека составляет 5-15 мг/кг, при этом доза антитела 10 мг/кг (например, человеческое антитело анти-Ρ^-1, аналогичное ΜΌΧ-1106) является наиболее предпочтительной (плюс подходящая доза циклофосфамида или другого потенцирующего агента, введенная приблизительно за 24 ч перед введением антитела).
В целом, только в качестве примера лекарственные формы на основе веса тела для любого из антагонистов сигнальной трансдукции, применяемого в способах изобретения, включают в себя дозы в диапазоне 5-300 мг/кг, или 5-290 мг/кг, или 5-280 мг/кг, или 5-270 мг/кг, или 5-260 мг/кг, или 5-250 мг/кг, или 5-240 мг/кг, или 5-230 мг/кг, или 5-220 мг/кг, или 5-210 мг/кг, или 20-180 мг/кг, или 30-170 мг/кг, или 40-160 мг/кг, или 50-150 мг/кг, или 60-140 мг/кг, или 70-130 мг/кг, или 80-120 мг/кг, или 90-110 мг/кг, или 95-105 мг/кг, причем дозы 3, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 30, 50 и 100 мг/кг являются конкретными примерами предпочтительных доз. Указанные дозы, разумеется, могут быть введены повторно. Доза, разумеется, будет коррелировать с видом млекопитающего, получающего указанную дозу. Дозы перечисленных выше интервалов мг/кг являются пригодными для млекопитающих, включая грызунов, таких как мыши и крысы, и для приматов, в особенности для человека, дозы, составляющие приблизительно 5, 10 и
- 24 023148 мг/кг, являются особенно предпочтительными для лечения человека.
В соответствии со схемой лечения изобретения потенцирующий агент, например циклофосфамид, вводят в нетоксических дозах, которые варьируют в зависимости от вида животного. В конкретных воплощениях потенцирующий агент вводят с помощью любого подходящего способа введения, включая парентеральный или пероральный, первый способ из двух упомянутых выше включает в себя системное введение, такое как внутривенное введение. Например, потенцирующий агент, подобный циклофосфамиду, обычно вводят перорально. Указанное введение может происходить в любой удобной дозе, зависящей от потенцирующего агента. Доза в каждом случае может быть основана на массе тела или доза может быть введена в виде единичной дозы.
Несмотря на то что СТХ сам по себе не токсичен, некоторые из его метаболитов являются цитотоксическими алкилирующими агентами, которые индуцируют образование перекрестных связей в ДНК и, в высоких дозах, разрывы цепи. Многие клетки являются устойчивыми к СТХ, потому что они экспрессируют высокие уровни детоксицирующего фермента альдегиддегидрогеназы (АЬИН). СТХ воздействует на пролиферирующие лимфоциты, поскольку лимфоциты (но не гемопоэтические стволовые клетки) экспрессируют низкие уровни АЬИН, и делящиеся клетки являются наиболее чувствительными к ДНКалкилирующим агентам.
Низкие дозы СТХ (<200 мг/кг) могут обладать иммуностимулирующими эффектами, включающими в себя стимуляцию противоопухолевых иммунных ответов в человеческих и мышиных моделях рака (Вгойе & Сооке СтЪ Кеу. 1ттипо1. 28:109-126 (2008)). Указанные низкие дозы являются субтерапевтическими и не обладают непосредственной противоопухолевой активностью. Напротив, высокие дозы СТХ ингибируют противоопухолевый ответ. Роль СТХ в потенцировании противоопухолевого иммунного ответа можно объяснить несколькими механизмами: (а) истощение С^4+С^25+ΡоxΡ3+Т-^ед (и в особенности пролиферирующих Т-гед, которые могут быть особенно супрессивными); (Ь) истощение В-лимфоцитов; (с) индукция оксида азота (ΝΟ), приводящая к супрессии роста опухолевых клеток; (й) мобилизация и размножение СЭ11Ь+Сг-1+ МЭ8С. Указанные первичные эффекты обладают многочисленными вторичными эффектами; например, после истощения Т-гед макрофаги производят большее количество ΙΡΝ-γ и меньшее количество 1Ь-10. Также показано, что СТХ индуцирует экспрессию ΙΡΝ типа I и усиливает гомеостатическую пролиферацию лимфоцитов.
Истощение Т-гед наиболее часто упоминают в качестве механизма, с помощью которого СТХ потенцирует противоопухолевый иммунный ответ. Указанное заключение основано отчасти на результатах экспериментов по адаптивному переносу. В модели с применением опухолевых клеток АВ1-НА обработка СТХ на 9-й день обеспечивала показатель эффективности лечения 75%. Перенос очищенных Т-гед на 12-й день почти полностью ингибировал СТХ-ответ (уап йег Мок! е! а1. Сапсег 1ттипо1. 1ттипо!Ьег. 58:1219-1228 (2009). Сходный результат наблюдали в модели с опухолевыми клетками ННИ2: адаптивный перенос СИ4+СИ25+ Т-гед после предварительной обработки СТХ устранял терапевтический ответ на вакцину (Та1еЬ. I. I. 1ттипо1. 176:2722-2729 (2006)).
Многочисленные клинические испытания с участием людей показали, что СТХ в низкой дозе является безопасным, хорошо переносимым и эффективным агентом для стимулирования противоопухолевых иммунных ответов (Вак, & Мак!гапде1о Сапсег 1ттипо1. 1ттипо1Нег. 47:1-12 (1998)).
Оптимальной дозой СТХ для потенцирования противоопухолевого иммунного ответа является доза, которая понижает в целом количества Т-клеток при снижении уровней Т-гед ниже диапазона нормальных значений, но которая является субтерапевтической дозой (см. МасЫе1к е! а1. Сапсег Кек. 61:3689-3697 (2001)).
В клинических испытаниях с участием людей, где СТХ использовали в качестве иммунопотенцирующего агента, обычно применяли дозу 300 мг/м2. Для человека средней комплекции (6 футов, 170 фунтов (78 кг) с площадъю поверхности тела 1,98 м2), 300 мг/м2 составляет 8 мг/кг, или 624 мг общего белка. В мышиной модели рака эффективность наблюдали в дозах, изменявшихся в диапазоне 15-150 мг/кг, что соответствует 0,45-4,5 мг общего белка у мыши весом 30 г (МасЫе1к е! а1. Сапсег Кек. 61:3689-3697 (2001), Непдк! е! а1. Сапсег Кек. 41:2163-2167 (1981), Непдк! Сапсег Кек. 40:2135-2141 (1980)).
Для более крупных млекопитающих, таких как примат, предпочтительно человек, пациент, могут быть использованы указанные дозы мг/м2, но стандартные дозы, вводимые в течение конечного промежутка, могут быть предпочтительными. Указанные стандартные дозы могут быть введены на ежедневной основе в течение конечного промежутка времени, например вплоть до 3 дней, или вплоть до 5 дней, или вплоть до 7 дней, или вплоть до 10 дней, или вплоть до 15 дней, или вплоть до 20 дней, или вплоть до 25 дней, все специфически предусмотрены изобретением. Аналогичные схемы введения могут быть применены для других потенцирующих агентов, перечисленных в описании.
Все указанные введения могут происходить до или после введения ΡΌ-1-связывающей молекулы изобретения. Альтернативно, одна или более дозы ΡΌ-1-связывающей молекулы изобретения могут быть разнесены во времени с введением потенцирующего агента для формирования однообразного или неоднообразного курса лечения, при котором вводят одну или более дозы потенцирующего агента с последующими одной или более дозами ΡΌ-1-связывающего соединения с последующими одной или более
- 25 023148 дозами потенцирующего агента, согласно графику, выбранному или заданному исследователем или врачом, которые вводят указанные агенты.
В других конкретных вариантах осуществления схема лечения включает в себя многократные введения одного или более антагонистов ΡΌ-1. В некоторых вариантах осуществления указанные многократные введения антагонистов ΡΌ-1 происходят в сочетании с многократными введениями одного и того же или различных потенцирующих агентов.
Как и в других воплощениях изобретения, здесь потенцирующий агент вводят по меньшей мере за 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20, 24 или 30 ч до или после введения антагониста ΡΌ-1.
Фармацевтические композиции, используемые здесь, также содержат фармацевтически приемлемый носитель, включающий в себя любой подходящий растворитель или среду для лекарства, который включает в себя любой фармацевтический агент, который сам не вызывает продукции антител, вредных для субъекта, принимающего композицию, и который может быть введен без неспецифической токсичности. Фармацевтически приемлемые носители включают в себя, но без ограничения, жидкости, такие как вода, физиологический раствор, глицерин и этанол и т.п., включая носители, используемые для создания спреев для назальной доставки и другой доставки через респираторный тракт или для доставки в зрительную систему. Полное обсуждение фармацевтически приемлемых носителей, растворителей и других сред для лекарства представлено в КетшдЮп'к ΡЬа^тасеиί^са1 Заепсек (Маск ΡιιΚ Со., N.1 сиггет ебШоп).
Композиции вакцин (как обсуждается ниже) далее могут включать в себя дополнительные вещества для стабилизации значения рН или для функционирования в качестве адъювантов, увлажняющих агентов или эмульгирующих агентов, которые могут служить для улучшения эффективности вакцины.
Вакцины обычно создают для парентерального введения и вводят либо подкожно, либо внутримышечно. Указанные вакцины также могут быть созданы в виде суппозиториев или для перорального введения с помощью методов, известных в данной области техники, или для введения через назальный или респираторный пути.
Ό. Способы получения.
Изолированный полипептидный антагонист ΡΌ-1, включая варианты, гомологи и их фрагменты, либо дикого типа, либо мутировавшие, и гибридные белки, содержащие любое из указанного, все предусмотрены для включения в изобретение, могут быть получены, например, с помощью химического синтеза или с помощью рекомбинантной продукции в клетке-хозяине. Для рекомбинантного получения костимулирующего полипептида нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, может быть использована, чтобы трансформировать, трансдуцировать или трансфицировать бактериальную или эукариотическую клетку-хозяин (например, клетку насекомого, дрожжей или млекопитающего). Следует понимать, что нуклеотидные последовательности могут быть кодон-оптимизированными для увеличения уровней экспрессии белка в определенном типе клеткихозяина. Способы оптимизации кодонов хорошо известны в данной области техники. В целом, конструкции нуклеиновых кислот включают в себя регуляторную последовательность, функционально связанную с нуклеотидной последовательностью, кодирующей костимуляторный полипептид. Регуляторные последовательности (также обозначаемые здесь как последовательности контроля экспрессии) обычно не кодируют генный продукт, но вместо этого воздействуют на экспрессию последовательностей нуклеиновой кислоты, с которой они функционально связаны. Сигнальные пептиды, используемые, чтобы секретировать белки из клетки, могут быть эндогенными сигнальными пептидами или любым другим сигнальным пептидом, который облегчает секрецию гибридного белка из хозяина.
Для общих молекулярно-биологических процедур, используемых в осуществлении настоящего изобретения, имеется ряд стандартных ссылок, которые содержат процедуры, хорошо известные в области молекулярной биологии и генной инженерии, и нет необходимости описывать указанные процедуры далее в настоящем документе. Полезные ссылки включают в себя 8атЬгоок, е1 а1., Мо1еси1аг С1отпд: А ЬаЬогаЮгу Мапиа1, 8есопб Ебйюп, Со1б Зрппд НагЬог, Ν.Υ., (1989), \Уи е1 а1., Мебюбк ш Оепе Вю1есЬпо1оду (СКС Ριό^. №υ Υо^к, ΝΥ, 1997) и КесотЫпаШ Оепе Ехргеккюп Ρι^^Κ, ш Мебюбк ш Мо1еси1аг Вю1оду, уо1. 62 (Тиап, еб., Нитапа Ριό^. ТоЮ\уа, Νί, 1997), раскрытия которых, таким образом, включены посредством ссылки.
Е. Лечение заболевания.
Заболевания, которые лечат или предотвращают с помощью введения терапевтической комбинации, предоставленной настоящим изобретением, включают в себя злокачественную опухоль или хроническое инфекционное заболевание, вызванное бактерией, вирусом, простейшим, гельминтом или другим микробным патогеном, который проникает внутрь клетки. Указанные заболевания часто лечат с помощью атаки цитотоксических Т-лимфоцитов. Поскольку настоящее изобретение предоставляет комбинированные терапии, полезные для усиления Т-клеточных ответов с помощью увеличения Т-клеточной активности, увеличения Т-клеточной пролиферации и уменьшения Т-клеточных ингибиторных сигналов, комбинированные терапии изобретения обладают уникальным преимуществом в лечении (или даже в предотвращении) указанных заболеваний. В одном варианте осуществления, поскольку вирусные инфекции устраняются, главным образом, Т-клетками, увеличение Т-клеточной активности является тера- 26 023148 певтически целесообразным для усиления выведения инфекционного вирусного агента из организма животного или примата, предпочтительно человека, субъекта. Таким образом, раскрытые соединения изобретения, с активностью антагониста рецептора РИ-1, вместе с потенцирующим агентом действуют в комбинации для лечения местных или системных вирусных инфекций. Инфекции, которые лечат с помощью соединений изобретения, включают в себя, но без ограничения, иммунодефицит (например, Н1У), папиллому (например, НРУ), герпес (например, Н8У), энцефалит, грипп (например, вирус гриппа человека А), гепатит (например, НСУ, НВУ) и простудные (например, риновирус человека) вирусные инфекции. Фармацевтические составы композиций антагонистов рецептора РИ-1 также могут быть введены для лечения системных вирусных заболеваний, включая, но без ограничения, СПИД, грипп, простудные заболевания или энцефалит.
Невирусные инфекции, поддающиеся лечению соединениями изобретения, включают в себя, но без ограничения, инфекции, вызываемые микроорганизмами, включая, но без ограничения:
ЛсСЧлотусеа, АпаЬаепа, ВасШиз, Вас£его1с1ез, ВдеЛоуИзгТо,
ВогсТе£еЛа, ВоггеЛа, СашруТоЬаскег, Саи1оЬас£ег, СМатус11а,
СЪгота Лит, С1оз£г1<Иит, СогупеЬасЛЛит,
Оеапососсиз, ЕзсВеЛсЛа, ЕРапсТзеЛа,
НеЛоЬас£ег, НаеторЪНиз, Нетор/зЛиз 1пР1иепга НурЬотТсгсЫит, ЬедтопеЛа, Ьер£зр1гоз1з,
СЫогоЫит, СуЬорТзада, На1окас£е1:1игп, тип В (НТВ) ,
ЛзЛЛа, МепТпдососсиз МТсгососсиз, МуоЬас£ег1ит, И£гоЪас£ег, 0зсЛ1а£оЛа, ΡΗοάοΕρίΓίΙΙπιπ, Е1ске££Б1а,
А, В и С, Ме£'папсЬас1:еЛит, МусорТазгаа, Мухососсиз, ЫегззегТа, РгосЫогоп, РгоСеиз, РзеисТстопаз,
За1топе11а, ЗЫдеЛа, 5р1гШил1,
5р1ГОсЬае£а, ЗСарВу1ососсиз, 3£гер£ососс\13, 3£гер£отусез, 5и1Во1оЪиз, ТВегторТазта, ШоЬасШиз, Тгеропета, νιΡΐίο, ТесзТпТа, Сгур£ососсиз пеоРогтапз, ЩзкорТазта зр. /например, Шз£ор1азта сарзи1а£шп), СапсНЛа а1Ысапз, СапеИЛа ЛорТсаЛз, Т)осагсИа аз£его1с1ез, К1ске1:£з1а гаскекзИ, ВлскеЛзла курки, Те1зТипап1а, МусорТазша рпешпопТае, СЫатусИа! рзЛкас!, СЫатусИаТ ЛаскюшаИз, РТазтосИшп зр. /например, РТазтосИшп РаТсарагит), Тгурапозота Ьгисе!, ЕпкатоеЪа ЫзкоТуЛса,
ТохорТазта допсШ, ТгТскютопаз уадТпаЛз и ЗсЫзкозота тапзопЛ
В одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет способы и композиции для индуцирования или усиления иммунного ответа хозяина для лечения рака. Типы рака, которые можно лечить предоставляемыми композициями и способами, включают в себя, но без ограничения, следующие: рак мочевого пузыря, рак мозга, рак молочной железы, рак шейки матки, колоректальный рак, рак пищевода, рак почек, рак печени, рак легких, назофарингеальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка, рак матки, рак яичников, рак яичек и гематологический рак.
Злокачественные опухоли, которые могут быть подвергнуты воздействию, классифицируют здесь в соответствии с эмбриональным происхождением ткани, из которой развивается опухоль. Карциномы представляют собой опухоли, возникающие из эндодермальной или эктодермальной тканей, таких как кожа или эпителиальная выстилка внутренних органов и желез. Саркомы, которые возникают реже, происходят из мезодермальных соединительных тканей, таких как кость, жир и хрящ. Лейкемии и лимфомы являются злокачественными опухолями гемопоэтических клеток костного мозга. Лейкемии пролиферируют в виде отдельных клеток, тогда как лимфомы проявляют тенденцию к росту в виде опухолевых масс. Злокачественные опухоли могут выявляться в различных органах и тканях организма при постановке диагноза рака.
В качестве демонстрации полезности схем лечения изобретения мышиный аналог В7-ЭС-1д (в котором мышиный В7-ЭС ЕСИ, который характеризуется 72% идентичности последовательности с белком человека, соединен с Рс-доменом мышиного 1дО2а) тестировали в сингенных мышиных опухолевых моделях колоректального рака, мастоцитомы и других типов опухоли, включающих в себя предварительную обработку циклофосфамидом (СТХ), как описано в настоящем документе.
Результаты показали, что лечение однократной субтерапевтической дозой СТХ, который действует как иммунопотенцирующий агент, с последующим введением мышиного В7-ЭС-1О ликвидирует привитые опухоли СТ26 карциномы толстой кишки у 80% животных. Далее, в исследованиях с повторным введением клеток линии СТ26 карциномы толстой кишки не обнаружили повторного роста опухоли у мышей с ранее уничтоженными опухолями после лечения СТХ + мышиный В7-ЭС-1д. Также показано,
- 27 023148 что указанные мыши характеризовались повышенной популяцией опухоль-специфических СТЬ по сравнению с нативными мышами.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает применение соединения, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала в Т-клетку, как описано в другом разделе настоящего документа, для получения лекарства для увеличения Т-клеточного ответа с помощью комбинированной терапии, где указанное соединение вводят в сочетании с потенцирующим агентом. Далее, соединение, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала в Т-клетку, и указанный потенцирующий агент предоставляют в виде отдельных медикаментов для введения в разные моменты времени, где предпочтительно потенцирующий агент вводят раньше, чем соединение, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала, например, вплоть до 24 ч до введения ингибиторного соединения (или другие интервалы времени, перечисленные в описании). Предпочтительно соединение и потенцирующий агент предназначены для лечения инфекционного заболевания или рака, включая заболевания, вызванные любыми инфекционными агентами или видами рака, перечисленными в настоящем документе. В предпочтительном варианте осуществления соединение, применяемое в указанных способах, представляет собой рекомбинантный белок, состоящий из ЕСГО человека В7ГОС соединенного с Рс-доменом человека 1дСь обозначаемый здесь как В7ГОС-1д.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к медицинскому набору для введения соединения, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала в Т-клетку, как раскрыто в описании, в комбинации с потенцирующим агентом, указанный набор включает в себя:
(a) запас дозы соединения, которое уменьшает передачу ингибиторного сигнала в Т-клетку;
(b) запас потенцирующего агента;
(c) запас фармацевтически приемлемого носителя;
(б) отпечатанные инструкции по введению соединения при применении, как описано выше.
Р. Комбинированное лечение.
Вакцины вызывают сильный Т-клеточный ответ для уничтожения раковых клеток и инфицированных клеток или инфекционных агентов. Антагонисты рецептора ΡΌ-1, описанные в настоящем документе, могут быть введены в виде компонента вакцины вместе с потенцирующим агентом для предоставления костимуляторного сигнала Т-клеткам. Вакцины, раскрытые в описании, включают в себя антигены, антагонист рецептора ΡΌ-1 и дополнительно адъюванты и таргентные молекулы.
Антигены, против которых усиливают Т-клеточный ответ с помощью способов и композиции изобретения, включают в себя пептиды, белки, полисахариды, сахариды, липиды, нуклеиновые кислоты или их комбинации. Антигены в случае заболевания представлены в результате патологического процесса.
Раскрытые композиции антагонистов рецептора ΡΌ-1 могут быть введены в сочетании с профилактическими вакцинами, которые вызывают у субъекта устойчивость к последующему воздействию инфекционных агентов, или в сочетании с терапевтическими вакцинами, которые могут быть использованы, чтобы инициировать или усилить иммунный ответ у субъекта на заданный антиген, такой как опухолевый антиген у субъекта, имеющего рак, или вирусный антиген у субъекта, инфицированного вирусом.
Желаемый результат профилактического, терапевтического или десенсибилизационного иммунного ответа может варьировать в зависимости от заболевания, исходя из принципов, хорошо известных в данной области техники. Например, иммунный ответ против инфекционного агента может полностью предотвратить колонизацию и репликацию инфекционного агента, вызывая стерильный иммунитет и отсутствие симптомов заболевания. Однако вакцина против инфекционных агентов может считаться эффективной, если она уменьшает количество, тяжесть или продолжительность симптомов; если она уменьшает количество субъектов в популяции, имеющих симптомы заболевания; или уменьшает передачу инфекционного агента. Аналогичным образом, иммунные ответы против рака, аллергенов или инфекционных агентов могут полностью вылечить заболевание, могут уменьшить симптомы или могут представлять собой одну грань общего терапевтического воздействия на заболевание. Например, стимуляция иммунного ответа против рака может сочетаться с хирургическим, химиотерапевтическим, радиологическим, гормональным и другими иммунологическими подходами, чтобы воздействовать на лечение.
Способы и продукты изобретения не исключают применение адъюванта в дополнение к потенцирующему агенту. Такой адъювант может быть добавлен, например, вместе с антагонистом ΡΌ-1. Адъюванты, используемые в композициях и способах изобретения, включают в себя, но без ограничения, один или более из следующих: масляные эмульсии (например, адъювант Фрейнда); препараты сапонина; виросомы и вирусоподобные частицы; бактериальные и микробные производные; иммуностимулирующие олигонуклеотиды; АДФ-рибозилирующие токсины и обезвреженные производные; квасцы; ВСС; минералсодержащие композиции (например, минеральные соли, такие как соли алюминия и соли кальция, гидроксиды, фосфаты, сульфаты и т.д.); биоадгезивы и/или мукоадгезивы; микрочастицы; липосомы; композиции эфиров полиоксиэтилена и сложных эфиров полиоксиэтилена; мурамиловые пептиды; полифосфазен; соединения имидазолхинолона; и поверхностно-активные вещества (например, лизолецитин, полиолы плюроника, полианионы, пептиды, масляные эмульсии, гемоцианин лимфы улитки и динитрофенол). Полезные адъюванты также включают в себя иммуномодуляторы, такие как цитокины, интерлейкины (например, 1Ь-1, 1Ь-2, 1Ь-4, 1Ь-5, 1Ь-6, 1Ь-7, 1Ь-12 и т.д.), интерфероны (например, интер- 28 023148 ферон-γ), макрофагальный колониестимулирующий фактор и фактор некроза опухоли.
Нет никаких препятствий для введения раскрытого антагониста рецептора ΡΌ-1, включая полипептиды, фрагменты, варианты, гомологи и гибридные белки, раскрытые здесь, субъекту, который нуждается в них, в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими агентами (в дополнение к потенцирующему агенту). Дополнительные терапевтические агенты выбирают, исходя из состояния, нарушения или заболевания, которое нужно вылечить. Например, антагонисты рецептора ΡΌ-1 могут быть введены совместно с одним или более дополнительными агентами, функцией которых является усиление или способствование развитию иммунного ответа, и которые рассматривают в описании как активные агенты. Указанные агенты включают в себя, но без ограничения, амсакрин, блеомицин, бусульфан, капецитабин, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, клофарабин, кризантаспазу, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доцетаксел, доксорубицин, эпирубицин, этопозид, флударабин, фторурацил, гемцитабин, гидроксикарбамид, идарубицин, ифосфамид, иринотекан, лейковорин, липосомальный доксорубицин, липосомальный даунорубицин, ломустин, мелфалан, меркаптопурин, месну, метотрексат, митомицин, митоксантрон, оксалиплатин, паклитаксел, пеметрексед, пентостатин, прокарбазин, ралтитрексед, сатраплатин, стрептозоцин, тегафур-урацил, темозоломид, тенипозид, тиотепа, тиогуанин, топотекан, треосульфан, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин или их комбинации. Типичные проапоптатические агенты включают в себя, но без ограничения, флударабин, стауроспорин, циклогексимид, актиномицин И, лактозилцерамид, 15ά-ΡΟί(2) и их комбинации.
Виды терапии, предоставляемые способами и композициями настоящего изобретения, также могут быть использованы в сочетании с другими типами терапии, например с лучевой терапией, хирургическим вмешательством и т.п.
С. Анализы активности антагониста.
Настоящее изобретение описывает ряд специфических структур, полезных в осуществлении способов изобретения. Другие соединения, обладающие антагонистической активностью и используемые в способах изобретения, также могут быть идентифицированы с помощью ссылки на хорошо известные методики анализа для идентификации химических структур, которые связываются с ΡΌ-1, СТЬА4, и их лигандов, которые также обладают способностью уменьшать передачу ингибиторного сигнала в Т-клетки. Некоторые указанные анализы представляют собой анализы связывания, применяемые для определения, связывается ли выбранная химическая структура с рецепторами; указанные анализы хорошо известны в данной области техники, и нет необходимости подробно рассматривать их в настоящем документе (см., например, патент США 2008/0274490 (опубл. 6 ноября 2008 г.) и патент США 7105328 (опубл. 12 сентября 2006 г.), в каждом из которых показаны тесты для определения модуляторов сигнальной системы ΡΌ-1, использующих Т-клетки), раскрытия которых, таким образом, включены посредством ссылки во всей своей полноте. Другие тесты используют для определения эффектов агентов изобретения, таких как активные фрагменты, на активацию Т-клеток с помощью увеличения пролиферации и/или продукции цитокинов. Указанные анализы также хорошо известны в данной области техники. Например, повышенная пролиферация клеток может быть продемонстрирована с помощью увеличения захвата 3Н-тимидина (в результате увеличенного синтеза ДНК, необходимого для клеточного размножения) или с помощью ИФА и/или РИА для обнаружения повышенной продукции цитокинов Т-клетками в культуре.
В одном таком эксперименте ΡΌ-1-связывающую активность В7-ИС-1д человека оценивали с помощью ИФА. 96-луночные планшеты для теста ИФА покрывали 100 мкл 0,75 мкг/мл рекомбинантного человеческого ΡΌ-1/Рс (К&И §ук1етк), разведенного в буфере ВирН карбонат/бикарбонат, рН 9,4 (Иегсе) на 2 ч и затем блокировали раствором В8А Цасккои 1ттииоКекеагсЬ) в течение 90-120 мин. Серийные разведения В7-ИС-1д человека (дикий тип, а также мутеин И1118, и мутанты К1138, которые выбрали по причине сниженного связывания с ΡΌ-1), а также изотипа 1дС1 человека в качестве контроля вводили для связывания в течение 90 мин. Связанный В7-ИС-1д обнаруживали с применением 100 мкл 0,5 мкг/мл биотина, конъюгированного с античеловеческим В7-ИС клоном М1Н 18 (Вюкиеисе) с последующим применением НКΡ-стрептавидина в разведении 1:1000 (ВИ Вюкаеисе) и субстрата ТМВ (ВюРХ). Абсорбцию считывали при длине волны 450 нм с применением планшетного ридера (Мо1еси1аг Иеуюек) и данные анализировали с помощью программы §ойМах с применением логического соответствия по четырем параметрам. Данные показали, что человеческий В7-ИС-1д (дикий тип) связывался с ΡΠ-1, но мутанты К1138 и И1118 не связывались ΡΠ -1.
При осуществлении методик настоящего изобретения следует понимать, что ссылки на конкретные буферы, среды, реагенты, клетки, условия культивирования и т.п. не являются ограничивающими, но предназначены для включения всех смежных материалов, которые специалист в данной области техники определит как представляющие интерес или ценность в конкретном контексте, в котором представлено данное обсуждение. Например, часто возможно заменить одну буферную систему или культуральную среду на другую и достичь сходных, если не идеальных, результатов. Специалистам в данной области техники известны указанные системы и методики, чтобы без неоправданных экспериментов произвести указанные замены, которые будут наилучшим образом служить их целям в применении способов и мето- 29 023148 дик, раскрытых в описании.
Изобретение описано более подробно в следующих неограничивающих примерах. Следует понимать, что указанные способы и примеры ни в коей мере не ограничивают изобретение в вариантах осуществления, описанных здесь, и что другие варианты осуществления и применения, без сомнения, могут быть предложены специалистами в данной области техники.
Примеры
Пример 1.
В7-ЭС-1д связывается с клетками СНО, экспрессирующими ΡΌ01.
Вначале конъюгировали В7-ЭС-1д с аллофикоцианином (АРС) и затем инкубировали в различных концентрациях с клетками линии СНО, конститутивно экспрессирующими ΡΌ-1, или с родительскими клетками СНО, которые не экспрессируют ΡΌ-1. Связывание анализировали с помощью проточной цитометрии. На фиг. 1 представлено среднее значение интенсивности флуоресценции (МР1) В7-^С-Iд-АΡС в виде функции от концентрации зонда (ось х). В7-^С-Iд-АΡС связывается с клетками ΟΉΟ.ΡΌ-1 (темный кружок), но не с нетрансфицированными клетками СНО (серый треугольник).
Пример 2.
В7-ЭС-1д конкурирует с В7-Н1 за связывание с ΡΌ-1.
Вначале конъюгировали В7-Н1-1д с аллофикоцианином (АРС). Немеченный В7-ЭС-1д в различных концентрациях вначале инкубировали с клетками линии СНО, конститутивно экспрессирующими ΡΌ-1, перед добавлением В7-Н1-Iд-АΡС к зонду и клеточной смеси. На фиг. 2 среднее значение интенсивности флуоресценции (МР1) В7-НI-РС-АΡС показано в виде функции от концентрации добавленного конкурента немеченного В7-ЭС-1д (ось х). По мере того как возрастает концентрация немеченного В7-ЭС-1д, количество В7-Н1-Iд-АΡС, связавшегося с клетками СНО, уменьшается, что показывает, что В7-ЭС-1д конкурирует с В7-Н1 за связывание с ΡΌ-1.
Пример 3.
Модель опухолевых клеток СТ26.
Клеточную линию колоректальной опухоли мышей, СТ26, получали из АТСС. Маточный банк клеток в пассаже 4 создавали в соответствии с руководством АТСС. Клетки тестировали и подтверждали отсутствие микоплазмы и другого патогенного заражения. Один флакон с опухолевыми клетками размораживали из криоконсервированного стока и выращивали на протяжении двух пассажей перед инокуляцией.
Клетки СТ26 отделяли в 1:5 разведении 30 мл полной среды (ВДМ1 + 10% РВ8, 2 мМ Ь-О1и и 1х Ρ/8) для 2-дневной культуры или в 1:10 разведении 30 мл полной среды для 3-дневной культуры. Клетки СТ26 собирали путем аспирирования среды, промывали флакон 5 мл ΡВ§, добавляли 5 мл трипсина, инкубировали при 37°С в течение 2 мин и затем нейтрализовали 10 мл полной среды. После центрифугирования при 600хд (~1000 об/мин) в течение 5 мин среду отсасывали и клеточный осадок ресуспендировали пипетированием с 10 мл обычной среды КΡМI. Указанную стадию отмывки повторяли три раза.
Количество клеток и жизнеспособность инокулированных клеток определяли с помощью окраски трипановым синим в соответствующем разведении (например, разведение 1:5, 10 мкл клеток + 40 мкл трипановый синий) и подтверждали с помощью клеточного счетчика ИОУА во время последней стадии промывки. Жизнеспособность клеток для инокулирования, как правило, составляла более 95%.
Для начальной инокуляции клетки СТ26 разводили до концентрации 6,7х105 клеток/мл обычной средой КΡМI и хранили на льду. Обычно каждую мышь инокулировали 150 мкл (1х105 клеток). На 9-й день всех мышей, несущих опухоль, вначале помещали в одну клетку и распределяли случайным образом по экспериментальным группам. Раствор СТХ восстанавливали 1х ΡВ§ до концентрации 4 мг/мл. Мышам вводили внутрибрюшинно (ΙΡ) 0,5 мл раствора СТХ, что давало в результате 2 мг для мыши весом 20 г, т.е. 100 мг/кг.
На 10-й день мышам вводили ΙΡ 0,5 мл В7-ЭС-1д (0,2 мг/мл), что давало в результате 0,1 мг для мыши весом 20 г, т.е. 5 мг/кг. Аналогичные дозы вводили 2 раза в неделю в течение 4 недель, всего 8 доз. Опухолевый рост контролировали путем измерения опухоли два раза в неделю, начиная со дня введения В7-ЭС-1д, посредством штангенциркуля с цифровой индикацией. Объем опухоли рассчитывали следующим образом:
Объем опухоли=п(ПкЬоп)2х(О1оп6)/6=~0,52х(ПкЬоп)2х(О1оп6).
Мышей умерщвляли и прекращали исследование, если объем опухоли достигал 2000 мм3 или если в месте инокуляции опухоли наблюдали кожные язвы и инфекции.
Пример 4.
Комбинация циклофосфамида и В7-ЭС-1д может уничтожать привитые опухоли.
Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель имплантировали подкожно 1,0х105 клеток колоректальной опухоли СТ26, как описано выше. На 10-й день после имплантации опухоли мыши получали 100 мг/кг циклофосфамида. Лечение В7-ЭС-1д начинали на 1 день позже, на 11-й день. Мышей лечили 100 мкг В7-ЭС-1д, 2 дозы в неделю, в течение 4 недель и всего 8 доз. У 75% мышей, которые получали схему лечения СТХ + В7-ЭС-1д, привитые опухоли были уничтожены к 44 дню, тогда как все мыши в
- 30 023148 контрольной группе, получавшие только СТХ, погибли в результате опухолевого роста или были подвергнуты эвтаназии, поскольку опухоли превышали размеры, утвержденные 1ЛСИС (результаты представлены на фиг. 3). Указанные результаты демонстрируют эффективность схемы лечения на привитых опухолях и не ограничиваются профилактикой.
Пример 5.
Комбинация циклофосфамида и В7-ЭС-1д может уничтожить привитые опухоли и защитить против повторного опухолевого заражения.
Мышам из описанного выше эксперимента с уничтоженными привитыми колоректальными опухолями СТ26, повторно вводили 1х 105 клеток СТ26 на 44-й день и на 70-й день. Отсутствие опухолевого роста при повторном введении опухолевых клеток позволяет предположить, что у мышей развился долговременный противоопухолевый иммунитет благодаря комбинированному лечению циклофосфамидом и В7-ЭС-1д. У всех мышей контрольной группы, получавших носитель, развились опухоли (результаты представлены на фиг. 4). Результаты демонстрируют эффективность схемы лечения в отношении привитых опухолей и показывают, что комбинированное лечение циклофосфамидом и В7-ЭС-1д приводило в результате к ответам с участием иммунной памяти на опухолевые антигены.
Пример 6.
Комбинация циклофосфамида и В7-ЭС-1д может создать опухоль-специфичные, цитотоксические Т-лимфоциты памяти.
Мышам из описанного выше эксперимента с уничтоженными привитыми колоректальными опухолями СТ26 повторно вводили 2,5х105 клеток линии СТ26 на 44-й день. Через семь дней выделяли селезенки мышей. Мышиные спленоциты стимулировали 5 или 50 мкг/мл яичного альбумина (0УА) или пептидами АН1 в течение 6 ч в присутствии блокатора аппарата Голджи (ВИ Вю8с1епсе). Эффекторные Т-клетки памяти анализировали путем определения СЭ8'/1Р№/' Т-клеток. Результаты на фиг. 5 показывают, что мыши с уничтоженными опухолями СТ26 характеризовались значительным количеством СТ26-специфических Т-эффекторных клеток.
Пример 7. Дозозависимое воздействие В7-ЭС-1д на удаление опухолей.
Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель имплантировали подкожно 1,0х105 клеток линии колоректальной опухоли СТ26. На 9-й день после имплантации опухоли мышам вводили однократную дозу циклофосфамида (100 мг/кг) и на 10-й день начинали лечение 30, 100 или 300 мкг В7-ЭС-1д, 2 дозы в неделю в течение 4 недель, всего 8 доз. На фиг. 6 показано, что при дозе 300 мкг опухоли исчезали у 70% мышей, при дозе 100 мкг опухоли исчезали у 40% мышей и доза 30 мкг вызывала уничтожение 10% опухолей.
Пример 8.
Комбинация циклофосфамида и анти-ΡΟ-! может уничтожать привитые опухоли.
Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель вводили подкожно 1,0х105 клеток колоректальной опухоли СТ26. На 11-й день после введения опухолевых клеток мышам вводили однократную дозу циклофосфамида (100 мг/кг) и начинали лечение антителом анти-ΡΟ-! (250 мкг, клон 04, Ηίταηο Р. с1 а1., 2005, Сапсег КекеатсЬ), которое вводили 3 раза в неделю в течение четырех недель. К 50 дню после введения опухолевых клеток у 70% мышей, которые получали лечение по схеме СТХ + анти-Ρ^-1, исчезли привитые опухоли СТ26, тогда как все мыши контрольной группы и группы, получавшей только антиΡΌ-1, погибли в результате роста опухоли или были подвергнуты эвтаназии, поскольку размеры опухолей превышали размеры, установленные 1АСИС. Результаты свидетельствуют об эффективности схемы лечения в отношении привитых опухолей и не ограничиваются профилактикой. Результаты представлены на фиг. 7.
Пример 9.
Комбинация циклофосфамида и анти-СТЬА4 может ликвидировать привитые опухоли.
Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель вводили подкожно 1,0х105 клеток колоректальной опухоли СТ26. На 11-й день после введения опухолевых клеток мыши получали 100 мг/кг циклофосфамида. Обработку анти-СТЬА4 (антимышиные СТЬА4 антитела из гибридомы хомяка - депозитный номер АТСС ИС10-4Р10-11) начинали на 1 день позже, на 12-й день. Мыши получали 100 мкг анти-СТЬА4, 2 дозы в неделю, в течение 4 недель. 56% мышей, которые получали лечение по схеме СТХ + антиСТЬА4, не имели опухоли на 50-й день после введения опухолевых клеток, тогда как все мыши контрольной группы погибли в результате роста опухоли или были подвергнуты эвтаназии, поскольку размеры опухолей превышали размеры, установленные 1АСИС. Результаты представлены на фиг. 8. Результаты свидетельствуют об эффективности схемы лечения в отношении привитых опухолей и не ограничиваются профилактикой.
Пример 10.
Схема лечения комбинацией циклофосфамида и В7-ЭС-1д приводит к уменьшению Т-гед в микроокружении опухоли.
На фиг. 9 представлены результаты экспериментов, в которых мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 9-11 недель имплантировали 1,0х105 клеток линии СТ26 подкожно. На 9-й день мышам вводили
- 31 023148
100 мг/кг СТХ, ΙΡ. Через 24 ч, на 10-й день, мыши получали 100 мкг В7-ЭС-1д. Выделяли 5 групп: интактные мыши, которым не вводили опухолевые клетки, группа, которой вводили носитель, группа СТХ, группа СТХ + В7-ЭС-1д и группа, получавшая только В7-ЭС-1д. Две интактные мыши и четыре мыши из других групп были выведены из исследования на 11-й день (2 дня после СТХ) и на 16-й день (7 дней после СТХ) для Т-клеточного анализа. На левой панели показано, что на 11-й день, 2 дня после инъекции СТХ, количество Т-гед в селезенке мышей, получавших СТХ, было значительно ниже, чем количество Тгед у мышей с имплантированными опухолями, получавших инъекции носителя. На правой панели показано, что на 16-й день, 7 дней после введения СТХ и 6 дней после введения В7-ЭС-1д, В7-ЭС-1д значительно уменьшал количество СИ4+ Т-клеток, экспрессирующих высокое количество ΡΌ-1. Указанный факт наблюдали как у мышей, получавших В7-ЭС-1д, так и у мышей, получавших СТХ + В7-ЭС-1д. Предполагалось, что мыши с имплантированными опухолевыми клетками должны иметь большее количество ΡΌ-1+/ΟΌ4+ Т-клеток в дренированном ΕΝ по сравнению с интактными мышами.
Пример 11.
Комбинация циклофосфамида и В7-ЭС-1д может повысить выживаемость мышей в модели метастатического рака предстательной железы.
Мышам породы В10.Э2 в возрасте 9-11 недель вводили внутривенно 3,0х105 клеток 8Ρ-1, которые были выделены из легочных метастазов после инъекции родительских клеток ТКΑМΡ. Мыши группы СТХ получали 3 дозы СТХ, 50 мг/кг, на 5-, 12й и 19-й день. Мыши, обработанные В7-ИС-1д, получали 3 дозы В7-ЭС-1д, 5 мг/кг, на 6-, 13- и 20-й день. К 100 дню среди мышей контрольных групп, интактных мышей, мышей, получавших только СТХ, только В7-ЭС-1д, выжили 17%, тогда как среди мышей, получавших комбинацию СТХ и В7-ЭС-1д, выжили 43%. Результаты представлены на фиг. 10.
Пример 12.
Комбинация противораковой вакцины на основе листерии и В7-ЭС-1д может увеличить выживаемость мышей после имплантации клеток линии СТ26 в печень.
Мышам породы Ва1Ь/С в возрасте 11-13 недель имплантировали клетки СТ26 с помощью инъекции в часть селезенки с ее последующим удалением (йет1кр1ееи т]ес1юп (есйпкще) (УокЫтита К. е! а1., 2007, Сапсег Кекеагсй). На 10-й день мыши получали 1 инъекцию СТХ в дозе 50 мг/кг, ΙΡ.
Через 24 ч, на 11-й день, мышам вводили рекомбинантный пептид листерии, несущий АН1, иммунодоминантный эпитоп СТ26, в дозе 0,1 ЙО50 (1х 107 КОЕ), затем вводили на 14- и на 17-й день. Мышам также вводили В7-ЭС-1д на 11-й день и затем на 18-й день. На фиг. 11 показано, что все интактные мыши или мыши, получавшие СТХ и противораковую вакцину на основе листерии, погибли до 45-го дня. Среди мышей, получавших тройную комбинацию СТХ + противораковая вакцина на основе листерии и В7ИС-1д, выжили 60% животных.
- 32 023148
Список литературы
1. Вгобе 8, Сооке А. 1ттипе-ро(епйайпд е#ес(з οί Ше сЬетоШегареиЙс бгид сус1орЬо8рЬаггнбе. СгИ Веу.1ттипо1. 2008;28(2); 109-26
2. уап бег Моз( В©, Сигпе АЗ, МаЬепбгап 5, Ргоззег А, ОагаЫ А, ΒοΡίηεοπ ВУУ, Ν ον/а к АК, Ьаке ВА, Титог егабкайоп айег сус1орЬозрЬатйе берепбз оп сопсиггеп! бер1е(юп οί геди1а(огу Т сеПз: а го1е 1ог сускпд ТЫРВ2-ехрге531пд ейес1ог-зирргеззог Т сеПз ίη Ппгмйпд βίίεοίίνβ сКетоШегару. Сапсег 1ттипо1.1ттипоШег. 2009 Аид;58(8):1219-28
3. ТагеЬ б, СЬари! Ν, ЗсЬагб: Ν, Воих 8, ΝονβιιΙΙ 3, Мепагб С, ОЫппдЬеШ Р, Тегте М, Сагрепйег АР, Саггаззе-Зеге О, е( а1. СЬето(ттипо1Г|егэру οί (итоге: сус)орйозрЬат|бе зупегд/гез ν/ΐΙΗ ехозоте Ьазеб уасс(пез, 3.1ттипо1. 2006 Маг 1; 176(5):2722-9
4. Мас№е1з ЭР, ВеП1у ВТ, Етепз ΙΑ, ЕгсоИт АМ, Ι_βϊ ΒΥ, УУеМгаиЬ ϋ, Окоуе ΡΙ, ЗаЙее ЕМ. Сус1орЬозрЬат1бе, бохогиЬкт, апб расП(ахе1 епЬапсе Ше апй(итог 1ттипе гезропзе οί дгапи1осу(е/тасгорЬадесо1опу зЙти!аЙпд (ас(ог-зесгейпд ν/ήοΙβ-οβΙΙ уассюез ίη ΗΕΒ-2/пеи (о)епгеб тгсе. Сапсег Вез. 2001 Мау 1;61(9):3689-97
5. Вазз КК, Маз1гапде1о М3. 1ттипоро(епНайоп ννίΐή Ιονζ-бозе сус1орЬозрЬат1бе ίη Ше асйуе зреайс 1ттипоШегару οί сапсег. Сапсег 1ттипо1,1ттипоШег. 1998 Зер;47{1):1-12
6. Непдз1 ЗС, Мокуг МВ, Огау 8. Соорегайоп ЬеМееп сус1орЬозрЬапйбе 1итопс1ба1 ас1м1у апб (юз( апМшпог )ттип1(у ίη Ше сиге οί тгсе Ьеаппд (агде МОРС-315 (итогз. Сапсег Вез. 1981 Зип;41(6):2163-7
7. Непдз( ЗС, Мокуг МВ, Огау 8. 1трог(апсе οί йггйпд ίη сус1орЬозрйат1бе Шегару οί МОРС-315 (итог-Ьеаппд тке. Сапсег Вез. 1980 Зи1;40(7):2135-41
8. Тзипд К, Меко ЗВ, Тзипд ΥΙ_, Реркпзк! СВ, Νοτίοη ЗА. 1ттипе гезропзе адашз( 1агде (итогз егабгса(еб Ьу (геа(теп( ννίίΡι сус1орЬозрЬат1бе апб И-12. 3.1ттипок 1998 РеЫ ;160(3):1369-77
9. НопеусЬигсЬ 3, ΘΙβηηϊβ М3, ИНбде ΤΜ. Сус1орПозрЬат1бе ίηίιίΡΚίοη οί апЙ-СО40 топос(опа1 апЙЬобу-Ьазеб Шегару οί В сеП 1утрЬота ί$ берепбепГ оп СО11Ь+ сеПз. Сапсег Вез. 2005 Аид 15:65(16):7493-501
10. УУаба 8, УозЫтига К, Н|рк1зз Е1_, Нагпз Τ3, Уеп НК, Оо1бЬегд М\/, Сгоззо ЗР, Се(пе( ϋ, Оетагго АМ, Νβίίο 03, Апбегз В, РагбоН ОМ, □гаке СС. Сус1ор(юзрЬапгнбе аидтеп(з апй(итог 1ттип1(у: з(иб1ез ίη ап аиШсМЬопоиз ргоз(а(е сапсег тобек Сапсег Вез. 2009 Мау 15;69(10):4309-18.
11. Ргеетап.С.З. 3(гис(игез οί Ρΰ-1 \νί(Κ Йз Ндапбз: 81бе«/ауз апб бапсШд сЬеек (о сЬеек. Ргос. №11. Асаб. Зек и. 8. А 105, 10275-10276 (2008).
12. Вгобе,3. & Сооке,А, 1ттипе-ро(епйайпд еЯес(з οί Ше сйетоШегареийс бгид сус1орЬозрПат1бе. Сп( Ββν. 1ттипо1. 28, 109126 (2008).
- 33 023148
13. уап бег ΜοβΙ,Ρ.Ο. е1 а1. Титог егасйсайоп айег сус1орЬозрЬат1бе берепбз оп сопсиггеШ 6βρΙβ1ίοπ οί геди1а1огу Т сеНз: а го1е (ог сусйпд ТМРР2-ехргеззтд еНес1ог-зирргеззог Т сеНз ίη ИтШпд еЯесЙуе сЬето(Ьегару. Сапсег кптипо!. 1ттипо1Ьег, 58,1219-1228 (2009),
14. ΤβίβΡ,ί. е1 а1. СЬето1ттипо(Кегару οί (итогз: сус1орЬозрЬат1бе зупегд1гез ννϊΙΚ ехозоте Ьазеб уасстез. б. 1ттипо1. 176, 2722-2729 (2006).
15. Вазз.К.К. & Маз1гапде1о,М.З. 1ттипоро1еп(1а1юп ννΐΐίι Ιονχ-бозе сус1орЬозрЬат1бе ίη 1Ье асбуе зресШс 1ттипо1Ьегару οί сапсег. Сапсег 1ттипо1.1ттипо1Ьег. 47,1-12 (1998).
16. МасЬ1е1з,З.Р. е( а1. Сус1орЬозрЬат1бе, бохогиЫап, апб расШахе! епЬапсе (Ье апМитог 1ттипе гезропае οί дгапи1осу1е/тасгорЬадесо1опу зйти1аЬпд (аШог-зесгейпд »Ьо1е-се11 уасстез ϊη ΗΕΡ-2/пеи 1о1епгеб тюе. Сапсег Рез. 61, 3689-3697 (2001).
17. Непдз1,З.С., Мокуг.М.В., & Огау.З. СоорегаЬоп ЬеЪлгееп сус1орЬозрЬат1бе 1итолс1'ба1 асйуйу апб Ьоз1 апШитог |ттип1(у ίη (Ье сиге οί ιτιίοβ Ьеаппд 1агде МОРС-315 (итога. Сапсег Рез. 41, 21632167(1981),
18. Непдз1,З.С., Мокуг.М.В., & Огау.З. 1трог1апсе οί Ьггипд ίη сус1орЬозрЬат1бе (Ьегару οί МОРС-315 (итог-Ьеаппд тюе. Сапсег Рез. 40, 2135-2141 (1980).
19. Тзипд.К., Меко.Л.В., Тзипд.У.Е, ΡβρΙίηβΜ,Ο.Ρ,, & ΝοΠοη,ί.Α. 1ттипе гезропзе адатз1 1агде (итоге егабюа(еб Ьу 1геа1теп1 ууйЬ сус1орЬозрЬат|бе апб И-12. б. 1ттипо1.160,1369-1377 (1998).
20. НопеусЬигсЬ.З., ΟΙβηηίβ,Μ.3., & ПНбде.Т.М. Сус1орЬозрЬат1бе тШЬйюп οί апВ-С040 топос1опа! апКЬобу-Ьазеб (Ьегару οί В сеН )утрЬота Ϊ3 берепбеШ оп СР11Ь+ сеНз. Сапсег Рез. 65, 7493-7501 (2005).
21. ΙΛ/аба 3, УозШтига К, ΗϊρΗ$3 Е1_, Нагпз ТЗ, Уеп НР, Оо1бЬегд МУ, Сгоззо ЗР, Се(пе( О, Оетагго АМ, Νθίίο СЗ, Апбеге Р, РагбоП ОМ, Огаке СС. Сус1орЬо$рЬагтйбе аидтеШз аШПитог 1ттиШ(у: з(иб!ез ίη ап аи(осЬ(Ьопоиз ргоз(а(е сапсег тобек Сапсег Рез. 2009 Мау 15;69(10):4309-18.
- 34 023148
Список последовательностей
<110> Ьапдегтапп, Зо1отоп
<120> КОМПОЗИЦИИ АНТАГОНИСТОВ Ρΰ-1 И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ
<13 0> 21682-7
<14 0>
<141>
<15 0> 61/211,697
<151> 2009-04-02
<150> 61/091,692
<151> 2008-08-25
<150> 61/091,709
<151> 2008-08-25
<150> 61/091,705
<151> 2008-08-25
<160> 20
<17 0> РаГепЫп νθΓΞίοη 3.4
<210> 1
<211> 273
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
<4 0 0> 1
МеС 11е РНе Ьеи Ьеи Ьеи Мег Ьеи Зег Ъеи С1и Ьеи 61п Ъеи ΗΪ5 С1п
10 15
Не А1а А1а Ьеи РЬе ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Рго Ьуз С1и Ьеи Туг 11е 11е 20 25 30
01ч Н1з С1у Зег Азп Уа1 ТЬг Ьеи С1и Суз Азп РНе Азр ТНг С1у Зег 35 40 45
Н1з Уа1 Азп Ьеи С1у А1а 11е ТЬг А1а Зет Ьеи С1п Ьуз Уа! С1и Азп 50 55 60
Азр ТЬг Зег Рго Н1з Агд 61и Агд А1а ТНг Ьеи Ьеи С1и СЬи СЬп Ьеи 65 70 75 80
Рго Ьеи 61у Ьуз А1а Зег РНе ΗΪ3 11е Рго С1п Уа1 С1п Уа1 Агд Азр 85 90 95
СЬи СЬу СЬп Туг СЬп Суз 11е 11е Ые Туг СЬу УаЬ АЬа Тгр Азр Туг 100 105 110
Ьуз Туг Ьеи ТНг Ьеи Ьуз УаЬ Ьуз АЬа Зег Туг Агд Ьуз 11е Аэп ТНг 115 120 125
- 35 023148
НЬз Пе Ьеи Ьуз УаЬ Рго СЬи ТНг Азр СЬи УаЬ СЬи Ьеи ТНг Суз СЬп 130 135 140
АЬа ТНг СЬу Туг Рго Ьеи А1а СЬи УаЬ Зег Тгр Рго Азп УаЬ Зег УаЬ 145 150 155 160
Рго АЬа Азп ТЬг 5ег НЬз Зег Агд ТНг Рго СЬи СЬу Ьеи Туг СЬп УаЬ 165 170 175
ТНг Зег УаЬ Ьеи Агд Ьеи Ьуз Рго Рго Рго 01у Агд Азп РНе Зег Суз 180 185 190
УаЬ РНе Тгр Азп ТЬг НЬз УаЬ Агд О1и Ьеи ТЬг Ьеи АЬа Зег Не Азр 195 200 205
Ьеи СЬп Зег С1п МеС С1и Рго Агд ТЬг НЬз Рго ТНг Тгр Ьеи Ьеи НЬз 210 215 220
11е РНе Не Рго РЬе Суз Не 11е АЬа РНе Не РЬе Пе А1а ТНг УаЬ 225 230 235 240
Пе АЬа Ьеи Агд Ьуз С1п Ьеи Суз СЬп Ьуз Ьеи Туг Зег Зег Ьуз Азр 245 250 255
ТЬг ТНг Ьуз Агд Рго УаЬ ТЬг ТНг ТЬг Ьуз Агд С1и УаЬ Азп Зег А1а 260 265 270
11е <210> 2 <211> 254 <212> РЕТ <213> Ното зарЬепз <400> 2
Ьеи РЬе ТЬг УаЬ ТЬг УаЬ Рго Ьуз СЬи Ьеи Туг 11е 11е 61и НЬз С1у 15 10 15
Зег Азп УаЬ ТНг Ьеи СЬи Суз Азп РНе Азр ТЬг С1у Зег НЬз УаЬ Азп 20 25 30
Ьеи С1у А1а Не ТНг АЬа Зег Ьеи СЬп Ьуз УаЬ СЬи Азп Азр ТЬг Зег 35 40 45
Рго НЬз Агд СЬи Агд АЬа ТЬг Ьеи Ьеи СЬи СЬи СЬп Ьеи Рго Ьеи СЬу 50 55 60
- 36 023148
Ьуэ 65 АЬа Зег РЬе НЬз Ые 70 Рго СЬп УаЬ СЬп УаЬ 75 Агд Азр СЬи СЬу СЬп 80
Туг СЬп Суз Не Ые Ые Туг СЬу УаЬ АЬа Тгр Азр Туг Ьуз Туг Ьеи
85 90 95
ТНг Ьеи Ьуз Уа1 Ъуз АЬа Зег Туг Агд Ьуз Ые Азп ТНг НЬз Ые Ьеи
ЬОО 105 110
Ьуз УаЬ Рго СЬи ТНг Азр СЬи УаЬ СЬи Ьеи ТНг Суз СЬп АЬа ТНг СЬу
115 120 125
Туг Рго Ьеи АЬа СЬи УаЬ Зег Тгр Рго Азп УаЬ Зег УаЬ Рго АЬа Азп
130 135 140
ТНг Зег НЬз Зег Агд ТНг Рго СЬи СЬу Ьеи Туг СЬп УаЬ ТНг Зег 7а1
145 150 155 160
Ьеи Агд Ьеи Ьуз Рго Рго Рго СЬу Агд Азп РНе Зег Суз УаЬ РНе Тгр
165 170 175
Азп ТНг Шз УаЬ Агд СЬи Ьеи ТНг Ьеи АЬа Зег Ые Азр Ьеи СЬп 5ег
180 135 190
СЬп МеЬ СЬи Рго Агд ТНг НЬз Рго ТНг Тгр Ьеи Ьеи НЬз Ые РНе 11е
195 200 205
Рго РЬе Суз ЬЬе 11е А1а РНе Ые РНе Ые АЬа ТНг УаЬ Ые АЬа Ьеи
210 215 220
Агд Ьуз СЬп Ьеи Суз СЬп Ьуз Ьеи Туг Зег Зег Ьуз Азр ТНг ТНг Ъуз
225 230 235 240
Агд Рго УаЬ ТНг ТНг ТНг Ьуз Агд СЬи УаЬ Азп Зег АЬа Ые
245 250
<210> : 3
<2ΐι> : 202
<212> 1 РКТ
<213> 1 Ното заргепз
<400> : 3
Ьеи РНе ТНг ТНг УаЬ Рго Ьуз СЬи Ьеи Туг Ые Ые СЬи НЬз С1у
1 5 10 15
Зег Азп УаЬ ТНг Ьеи СЬи Суз Азп РНе Азр ТНг С1у Зег НЬз УаЬ Азп
25 30
- 37 023148
Ьеи 61у А1а 35 Не ТЬг АЬа Бег Ьеи 40 СЬп Ьуз УзЬ СЬи Азп 45 Азр ТЬг Зег
Рго НЬз Агд СЬи Агд АЬа ТЬг Ьеи Ьеи С1и СЬи СЬп Ьеи Рго Ьеи СЬу
50 55 60
Ьуз А1а 5ег РЬе НЬз Пе Рго СЬп УаЬ СЬп УаЬ Агд Азр СЬи СЬу 61п
65 70 75 80
Туг С1п Суз 11е 11е Пе Туг СЬу УаЬ АЬа Тгр Азр Туг Ьуз Туг Ьеи
85 90 95
ТЬг Ьеи Ьуз УаЬ Ьуз АЬа Зег Туг Агд Ьуз Ые Азп ТЬг НЬз 11е Ьеи
100 105 ЫО
Ьуз УаЬ Рго СЬи ТЬг Азр СЬи УаЬ СЬи Ьеи ТНг Суз СЬп АЬа ТЬг СЬу
115 120 125
Туг Рго Ьеи АЬа СЬи УаЬ Зег Тгр Рго Азп УаЬ Зег УаЬ Рго АЬа Азп
130 135 140
ТНг Бег ΗΪ5 Бег Агд ТЬг Рго СЬи СЬу Ьеи Туг СЬп УаЬ ТЬг Зег УаЬ
145 150 155 160
Ьеи Агд Ьеи Ьуз Рго Рго Рго С1у Агд Азп РЬе Зег Суз УаЬ РЬе Тгр
165 170 175
Азп ТЬг Н1з УаЬ Агд СЬи Ьеи ТЬг Ьеи АЬа Зег Ые Азр Ьеи СЬп Зег
180 185 190
С1п МеЬ й1и Рго Агд ТЬг НЬз Рго ТЬг Тгр
195 200 <210> 4 <2Ы> 202 <212> РКТ <213> тигЬпе <400> 4
Ьеи РЬе ТЬг Уа1 ТЬг АЬа Рго Ьуз СЬи УаЬ Туг ТЬг УаЬ Азр УаЬ СЬу
1 5 10 15
Зег Зег УаЬ Зег Ьеи СЬи Суз Азр РЬе Азр Агд Агд СЬи Суз ТЬг СЬи
20 25 30
Ьеи СЬи СЬу Не Агд АЬа Зег Ьеи СЬп Ьуз УаЬ СЬи Азп Азр ТЬг Зег
35 40 45
Ьеи СЬп Зег С1и Агд АЬа ТЬг Ьеи Ьеи СЬи СЬи СЬп Ьеи Рго Ьеи СЬу
- 38 023148
55 60
Ьуз 65 А1а Ьеи РЬе Шз Не 70 Рго Зег 7а1 С1п Уа1 75 Агд Азр Зег С1у СЬп 80
Туг Агд Суз Ьеи Уа1 Не Суз С1у А1а АЬа Тгр Азр Туг Ьуз Туг Ьеи
Й5 90 95
ТЬг Уа1 Ьуз Уа1 Ьуз А1а Зег Туг МеЬ Агд 11е Азр ТЫ Агд Не Ьеи
100 105 110
С1и Уа1 Рго С1у ТЬг С1у СЬи Уа1 СЬп Ьеи ТЬг Суз СЬп АЬа Агд СЬу
115 120 125
Туг Рго Ьеи А1а С1и Уа1 Зег Тгр СЬп Азп УаЬ Зег Уа1 Рго АЬа Азп
130 135 140
ТЬг Зег Н1з 11е Агд ТЬг Рго С1и С1у Ьеи Туг С1п Уа1 ТЬг Зег νηΐ
145 150 155 160
Ъеи Агд Ьеи Ьуз Рго С1п Рго Зег Агд Азп РЬе Зег Суз МеЬ РЬе Тгр
165 170 175
Азп А1а Шз МеЬ Ьуз С1и Ьеи ТЬг Зег А1а 11е Не Азр Рго Ьеи 5ег
180 185 190
Агд МеЬ С1и Рго Ьуз Уа1 Рго Агд ТЬг Тгр
195 200
<210> 5
<211> 19
<212> РКТ
<213> Ното зар1епз
<400> 5
МеС Не РЬе Ьеи Ьеи Ьеи МеЬ Ьеи Зег Ьеи С1и Ьеи СЬп Ьеи НЬз СЬп
1 5 10 15
Не А1а АЬа
<210> 6
<211> 232
<212> РКТ
<213> Ното зархепз
<400> 6
С1и Рго Ьуз Зег Суз Азр Ьуз ТЬг НЬз ТЬг Сув Рго Рго Суз Рго АЬа
1 5 10 15
- 39 023148
Рго С1и Ьеи Ьеи 20 С1у С1у Рго Зег Уа1 25 РНе Ьеи РНе Рго Рго 30 Ьуз Рго
Ьуз Азр ТНг Ьеи Мер 11е Зег Агд ТЬг Рго С1и Уа1 ТЬг Суз \7а1 17а 1
35 40 45
Уа1 Азр Уа1 Зег Шз С1и Азр Рго 61и 17а 1 Ьуз РНе Азп Тгр Туг Уа1
50 55 60
Азр С1у Уа1 С1и Уа1 НЁз Азп А1а Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд С1и С1и 61п
65 70 75 80
Туг Азп Зег ТНг Туг Агд Уа1 Уа1 Зег 17а 1 Ьеи ТНг 17а1 Ьеи НЁз С1п
85 90 95
Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз 01и Туг Ьуз СУ5 Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз А1а
100 105 110
Ьеи Рго А1а Рго 11е 61и Ьуз ТНг 11е Зес Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго
115 120 125
Агд С1и Рго <31п Уа1 Туг ТНг Ьеи Рго Рго Зег Агд Азр С1и Ьеи ТНг
130 135 140
Ьуз Азп С1п Уа1 Зег Ьеи ТНг Суз Ьеи Уа1 Ьуз С1у РЬе Туг Рго Зег
145 150 155 160
Азр Не А1а Уа1 С1и Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг
165 170 175
Ьуз ТНг ТЬг Рго Рго УаЬ Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Ьеи Туг
180 135 190
Зег Ьуз Ьеи ТЬг Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр 61п С1п С1у Азп Уа1 РЬе
195 200 205
Зег Сув Зег Уа1 МеЬ Низ С1и А1а Ьеи НЁЗ Азп НЁЗ Туг ТНг С1п Ьуз
210 215 220
Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго <31 у Ьуз
225
230
<210> 7
<211> 233
<212> РКТ
<213> МЫШИНЫЙ
<400> 7
- 40 023148
01 г 1 Рго Агд ОЬу Рго 5 ТНг 11е Ьуз Рго Суз 10 Рго Рго Суз Ьуз Суз 15 Рго
А1а Рго Азп Ьеи Ьеи 21у С1у Рго Зег УаЬ РЬе 11е РЬе Рго Рго Ьуз
20 25 30
Не Ьуэ Аэр Уа1 Ьеи Мер 11е Зег Ьеи Зег Рго 11е УаЬ ТЬг Суз 7а1
35 40 45
Уа1 УаЬ Азр УаЬ Зег С1и Азр Азр Рго Азр УаЬ СЬп 11е Зег Тгр РНе
50 55 60
Уа1 Азп Азп УаЬ СЬи Уа1 НЬз ТЬг АЬа СЬп ТЬг СЬп ТЬг НЬз Агд С1и
65 70 75 80
Азр Туг Азп Зег ТЬг Ьеи Агд УаЬ УаЬ Зег АЬа Ьеи Рго 11е СЬп ΗΪ3
85 90 95
εΐη Азр Тгр Мер Зег С1у Ьуз СЬи РЬе Ьуз Суз Ьуз УаЬ Азп Азп Ьуз
100 105 110
Азр Ьеи Рго АЬа Рго 11е С1и Агд ТЬг 11е Зег Ьуз Рго Ьуз С1у Зег
115 120 125
УаЬ Агд А1а Рго С1п Уа1 Туг УаЬ Ьеи Рго Рго Рго СЬи СЬи СЬи Ме£
130 135 140
ТЬг Ьуз Ьуз εΐη Уа1 ТЬг Ьеи ТЬг Суз МеС УаЬ ТЬг Азр РЬе МеЬ Рго
145 150 155 160
С1и Азр 11е Туг Уа1 СЬи Тгр ТНг Азп Азп СЬу Ьуз ТЬг С1и Ьеи Азп
165 170 175
Туг Ьуз Азп ТЬг СЬи Рго УаЬ Ьеи Азр Зег Азр СЬу Зег Туг РЬе Ме£
180 185 190
Туг Зег Ьуз Ьеи Агд Уа1 СЬи Ьуз Ьуз Азп Тгр УаЬ СЬи Агд Азп Зег
195 200 205
Туг Зег Суз Зег Уа1 Уа1 Н1з СЬи ОЬу Ьеи НЬз Азп НЬз НЬз ТЬг ТНг
210 215 220
Ьуз Зег РЬе Зег Агд ТЬг Рго СЬу Ьуз
225 230
<210> 8
<211> 1365
<212> ДНК
<213> искусственный
- 41 023148 <220>
<223> Мышиный В7-0С-1д <400> 8
аЪдс£дсЬсс 1;дсЪдсСда1: ас£даассЪд адс1Дасаас С£са£сс1:д£ адсадсС^а 60
(ЛсассдЬда садссссСаа адаад1:д£ас ассдЬадасд Ссддсадсад ЬдИдадссЬд 120
дадИдсдаСЛ ЪСдассдсад адааСдсасЬ даасСддаад дда1:аададс сад££1:дсад 180
ааддЪадааа аСда^асдСс СсИдсааадС. дааададсса ссс£дс£дда ддадсадсад 240
сссс^дддаа аддс^ССд'С'С; ссасаСсссЬ ад^дСссаад £дадада££с сдддсад^ас 300
сд^ТдссЬдд Ьса^сСдсдд ддссдссИдд дас^асаад! асс£дасдд£ дааадЪсааа 360
дс£1:с71;аса едаддаПада сасСадда1:с с£ддадд£Ьс садд£.асадд ддаддЬдсад 420
сЬЪассЬдсс аддсЬададд ЬЬаЬссссЪа дсадаадСдЬ ссХддсаааа ЬдЪсадЪдЬЪ 480
ссЬдссааса ссадссасаЪ саддассссс дааддссСсИ ассадд1:сас садСдЬЬсЬд 540
сдссИсаадс сЬсадссЬад садааасСИс адс^дса^дИ £с£ддаа1:дс ИсасаИдаад 600
дадсСдасИ: садссаСсаЪ СдасссИсИд адИсддаИдд аасссааадЬ. ссссадаасд 660
£дддадссаа дадд'ЬссСас даЬсаадссс Сдсссдсс1:Ё д£ааа1:дссс адсбссаааС. 720
ЮдсОдддЬд дассдЬсадЬ сЬЬСаЬс^Ьс седссааада ОаааддасдЬ сЬЬдаЬдаЬЬ 780
адтзсСдадсс ссаЬсдТ.дас а£дсд£С.д£д д£ддаЁд£1:£ сададдасда ссссдасд1:д 840
сааа^садЪЪ ддЪЪсдССаа саасдСддад дЪдсаЪассд сЁсааассса дасссасада 900
дадда£11а1:а асадсасссЬ дсдддЬадЬд Сссдссс^дс сда£ссадса ТсаддаТЛдд 960
а^дадсддда аадад££саа дИдСааддИа аасаасааад аЪсСдссадс дссдаЪЬдаа 1020
сдаассаССа дсаадссдаа адддадсд^д сдсдсассСс аддССЬасдС ссСЬссСсса 1090
ссадаададд адаЬдасдаа ааадсадд1;д ассс^дасаЪ дсаСддЬаас гдас1Ы;а£д 1140
ссадаадаЬа ССЁасдИдда аЪддасЬааТ. аасддааада сададсЪсаа ССасаадаас 1200
ас^дадссЛд ССсЬддаССс гдачзддсадс |;асМ;1;а1;д1; ас7ссааа71: дадддГсдад 1260
аадаадааСЛ дддЬсдадад ааасадСЛаИ адЬЪдсИсад ИддИдсаСда дддссЪссаИ 1320
ааЬсаОсаса ссасааадЬс сЬЬсадссда асдсссддда ааЪда 1365
<210> 9 <211> 454 <212> РКТ <213> искусственный <220>
<223> Мышиный В7-0С-1д <400> 9
Ме£ Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Рго 11е Ьеи Азп Ьеи Зег Ьеи С1п Ьеи НЬз Рго 15 10 15
- 42 023148
- 43 023148
Уа1 бег С1и Азр Азр 275 Рго Азр 1/а1 280 С1п 11е Зег Тгр РЬе 285 Уа1 Азп Азп
Уа1 С1и Уз1 Ηΐ3 ТЬг А1а С1п ТЬг СЬп ТЬг Нгз Агд С1и Азр Туг Азп
290 295 300
Зег ТНг Ееи Агд 17а1 Уа1 Зег А1а Ьеи Рго 11е С1п Нгз С1п Азр Тгр
305 310 315 320
МеГ бег С1у Еуз С1и РЬе Ьуз Суз Ьуз Уа1 Азп Азп Еуз Азр Ееи Рго
325 330 335
А1а Рго Не С1и Агд ТЬг Не Зег Ьуз Рго Ьуз С1у Зег Уа1 Агд А1а
340 345 350
Рго С1п Уа1 Туг Уа1 Ьеи Рго Рго Рго О1и 01и С1и МеЕ ТЬг Ьуз Ьуз
355 360 365
С1п Уа1 ТЬг Ьеи ТЬг Суз МеГ ν^ι ТЬг Азр РЬе МеЬ Рго С1и Азр Не
370 375 380
Туг Уа1 С1и Тгр ТЬг Азп Азп С1у Ьуз ТЬг С1и Ееи Азп Туг Ьуз Азп
385 390 395 400
ТЬг С1и Рго 17а 1 Ееи Азр 5ег Азр С1у Зег Туг РЬе МеЕ Туг Зег Ьуз
405 410 415
Ьеи Агд Уа1 С1и Ъув Ьуз Азп Тгр Уа1 С1и Агд Азп Зег Туг Зег Суз
420 425 430
бег Уа1 Уа1 Шз 61и С1у Ьеи ΗΐΞ Азп Нгз Шз ТЬг ТЬг Ьуз бег РЬе
435 440 445
Зег Агд ТЬг Рго С1у Ьуз
450 <210> 10 <211> 435 <212> РКТ <213> искусственный <220 <223> Мышиный гибридный белок В7-РС-1д без сигнальной последовательности <400 10
Ееи РЬе ТЬг Уа1 ТЬг А1а Рго Еуз Я1и Уа1 Туг ТЬг Уа1 Азр Уа1 С1у 15 10 15
- 44 023148
- 45 023148
Нхз ТЬг АЬа СЬп 275 ТНг СЬп ТЬг НЬз Агд СЬи Азр Туг Азп Зег ТНг Ьеи
280 285
Агд УаЬ УаЬ Зег АЬа Ьеи Рго Не 61п НЬз С1п Азр Тгр МеЬ Зег СЬу
290 295 300
Ьуз СЬи РЬе Ьуз Суз Ьуз УаЬ Азп Азп Ьуз Азр Ьеи Рго АЬа Рго ХЬе
305 310 315 320
С1и Агд ТЬг 11е Зег Ьуз Рго Ьуз СЬу Зег УаЬ Агд А1а Рго СЬп Уа1
325 330 335
Туг УаЬ Ьеи Рго Рго Рго СЬи СЬи СЬи МеЬ ТЬг Ьуз Ьуз СЬп УаЬ ТНг
340 345 350
Ьеи ТЬг Суз МеЬ УаЬ ТНг Азр РНе МеЬ Рго СЬи Азр Не Туг УаЬ СХи
355 360 365
Тгр ТНг Азп Азп СЬу Ьуз ТЬг СЬи Ьеи Азп Туг Ьуз Азп ТНг СЬи Рго
370 375 380
УаЬ Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег Туг РНе МеЬ Туг Зег Ьуз Ьеи Агд УаЬ
385 390 395 400
СЬи Ьуз Ьуз Азп Тгр УаЬ СЬи Агд Азп Зег Туг Зег Су5 Зег УаЬ УаЬ
405 410 415
НЬз СЬи СЬу Ьеи НЬз Азп НЬз НЬз ТНг ТЬг Ьуз Зег РЬе Зег Агд ТНг
420 425 430
Рго С1у Ьуз 435 <210> 11 <211> 1362 <212> ДНК <213> искусственный <220>
<223> Человеческий В7-0С-1д <400> 11
аЬдаЬсЬЬСс СЬсЬсЬЬдаЬ дсЬдЕсЬЬЬд дааЬЬдсаас ЬЕсассаааЕ сдсддсссЬс 60
ЬЬЬасЬдСда ссдЬдесааа адаасЬдьаЬ аЬсаЬЬдадс асдддЬсеаа ЬдЬдасссЬс 120
дэаЬдСаасЬ ЬЬдасассдд садссасдЬЬ ааесьддддд ссаЬсасСдс садеЬЬдсаа 180
аэадЬЬдааа эсдасасЬЬс ассЬсассдд дададддсаа сссЬсЬЬдда ддадсаасЬд 240
ссаЬЬдддда аддссЬссЬЬ ЬсаЬаЬсссС саддЕдсадд ЬЬсдддаЬда дддасадЬас 300
- 46 023148
садсдсасса ССаСсСасдд сдСддсССдд даССасаадС аСсСдасссС дааддСдааа 360
дсдСссСаСс ддааазССаа сасСсасаСС сССааддСдс сададасдда сдаддСддаа 420
сСдасаСдсс аадссассдд сСасссдССд дсададдСса дсСддсссаа сдСдадсдСа 480
ссСдсСааса сССсСсаССс Саддасассс дадддссСсС ассаддССас аСссдСдсСс 540
сдссСсааас сдсссссадд ссддааС.ССС адССдсдСдС СССддааЬас ссасдСдсда 600
дадсСдасСс ССдсаСсСаС СдаСсСдсад ссеоадасдд адссасддас Ссасссаасс 660
СдддаассСа ааСсССдсда СаааасСсаС ассСдСсссс сССдсссадс ссссдадсСС 720
сСдддаддСс оеадсдсдсс СсСдСССссс ссаааассСа аддасасасС СаСдаСаСсс 780
сдаасдссдд аадСдасаСд сдСддССдСд дасдСсСсас асдаадассс ддадд^дааа 840
ССсаасСддС асдССдасдд адССдаддСЬ саСаасдсСа адассаадсс садададдад 900
сааСасааСС ссассСаСсд адСддССадС дСасСдассд ССЛСдсасса адасСддсСд 960
ааСддаааад ааСасаадСд сааадСаСеа аасааддсСС СдссСдсасс саСсдадаад 1020
асаассссса аадссааадд дсадсссадд даассдсадд СдСасасасс сссассаСсс 1080
сдсдасдадс Ъдасааадаа СсаадСаСсс сСдассСдсс СддСдааадд сССССассса 1140
ьссдаеассд ссдСддааСд ддаассаааС ддасаассСд адаасаасСа саааассасС 1200
ссассСдСдс ССдасадсда сдддСссССС ССссСдСаса дСаадсСсас СдСсдаСаад 1260
СсСсдсСддс адсадддсаа сдСсССССса СдСадСдСда Сдсасдаадс СсСдсасаас 1320
саССасассс адаадСсСсС дСсасСдадс ссаддСаааС да 1362
<210> 12 <211> 453 <212> РЕТ <21 3> Искусственный <220>
<223> Человеческий Б7-БС-1д <400> 12
МеЬ Ые РНе Ьеи Ьеи Ьеи МеЬ Ьеи Зег Ьеи СЬи Ьеи СЬп Ьеи Ηίε СЬп
1 5 10 15
11е АЬа АЬа Ьеи РНе ТНг УаЬ ТНг Уа1 Рго Ьуз СЬи Ьеи Туг Ые Не
20 25 30
Е1и НЬз СЬу Зег Азп Уа1 ТНг Ьеи СЬи Суз АЗП РНе Азр ТЬг СЬу Зег
35 40 45
Ηίε УаЬ Αεη Ьеи СЬу АЬа Ые ТНг АЬа Зег Ьеи 6Ш Ьуз УаЬ СЬи Азп
50 55 60
Агр ТЬг Зег Рго НЬз Агд СЬи Агд АЬа ТНг Ьеи Ьеи СЬи СХи СЬп Ьеи
- 47 023148
- 48 023148
325 330 335
Рго Ые 61и Ьуз ТНг Пе Зег Ьуз А1а Ьуз СЬу СЬп Рго Агд СЬи Рго
340 345 350
СЬп УаЬ Туг ТНг Ьеи Рго Рго Зег Агд Азр СЬи Ьеи ТНг Ьу5 Азп еьп
355 360 365
Уа1 Зег Ьеи ТНг Суз Ъеи Уа1 Ьуз СЬу РНе Туг Рго Зег Азр ЬЬе АЬа
370 375 380
УаЬ СЬи Тгр СЬи Зег А$п С1у С1п Рго СЬи Азп Азп Туг Ьуз ТНг ТНг
385 390 395 400
Рго Рго УаЬ Ьеи Азр Зег Азр СЬу Зег РНе РНе Ьеи Туг Зег Ьуз Ьеи
405 410 415
ТНг Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр СЬп СЬп 61у Азп УаЬ РНе Зег Суз Зег
420 425 430
УаЬ МеЬ Шз СЬи АЬа Ьеи Ηΐ3 Азп НЬз Туг ТНг СЬп Ьуз Зег Ьеи Зег
435 440 445
Ьеи Зег Рго СЬу Ьуз
450 <210> 13 <211> 434 <212> РКТ <213> Искусствен™ <220>
<223> Человеческий В7-ОС-1д без сигнальной последовательности
<400> : 13
Ьеи РНе 1 ТНг УаЬ ТНг УаЬ Рго Ьу5 СЬи Ьеи Туг ЬЬе ЬЬе СЬи НЬз СЬу 5 10 15
Зег Авп Уа1 ТНг Ьеи СЬи Суз Азп РНе Азр ТНг С1у Зег НЬз УаЬ Азп 20 25 30
Ьеи СЬу АЬа Ые ТНг АЬа Зег Ьеи СЬп Ьуз Уа1 СЬи Азп Азр ТНг Зег 35 40 45
Рго Й13 50 Агд СЬи Агд АЬа ТНг Ьеи Ьеи СЬи СЬи СЬп Ьеи Рго Ьеи СЬу 55 60
Ьуз АЬа 65 Зег РНе НЬэ ЬЬе Рго СЬп УаЬ СЬп УаЬ Агд Азр СЬи СЬу СЬп 70 75 80
- 49 023148
Туг С1п Суз Ые Ые Ые Туг СЬу УаЬ АЬа Тгр Азр Туг Ьуз Туг Ьеи 85 90 95
ТНг Ьеи Ьуз УаЬ Ьуз А1а 5ег Туг Агд Ьуз Ые Азп ТНг Ηΐ3 Ые Ьеи 100 105 110
Ьуз Уа1 РГО СЬи ТНг Азр СЬи УаЬ СЬи Ьеи ТНг Суз СЬп АЬа ТНг С1у 115 120 125
Туг Рго Ьеи А1а СЬи УаЬ Зег Тгр Рго Азп УаЬ Зег Уа1 Рго АЬа Азп 130 135 140
ТЫ Зег НЬз Зег Агд ТНг Рго СЬи СЬу Ьеи Туг СЬп УаЬ ТНг Зег УаЬ 145 150 155 160
Ьеи Агд Ьеи Ьуз Рго Рго Рго СЯу Агд Азп РНе Зег Суз УаЬ РНе Тгр 165 170 175
Азп ТНг Шз УаЬ Агд С1и Ьеи ТНг Ьеи А1а Зег Ые Азр Ьеи СЬп Зег 180 185 190
СЬп МеГ СЬи Рго Агд ТНг НЬз Рго ТНг Тгр СЬи Рго Ьуз Зег Суэ Азр 195 200 205
Ьуз ТНг НЬз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго АЬа Рго СЬи Ьеи Ьеи СЬу СЬу 210 215 220
Рго Зег УаЬ РНе Ьеи РНе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТНг Ьеи МеГ Ые 225 230 235 240
Зег Агд ТЬг Рго СЬи Уа1 ТНг Суз Уа1 УаЬ Уа1 Азр УаЬ Зег НЬз СЬи 245 250 255
Азр Рго СЬи УаЬ Ьуз РНе Азп Тгр Туг УаЬ Азр СЬу УаЬ СЬи УаЬ НЬз 260 265 270
Азп АЬа Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд СЬи СЬи СЬп Туг Азп Зег ТНг Туг Агд 275 280 285
УаЬ УаЬ Зег УаЬ Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи НЬз СЬп Азр Тгр Ьеи Азп СЬу Ьуз 290 295 300
СЬи Туг Ьуз Суз Ьуз УаЬ Зег Азп Ьуз АЬа Ьеи Рго АЬа Рго Ые СЬи 305 310 315 320
Ьуз ТНг Ые Еег Ьуз АЬа Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг 325 330 335
- 50 023148
ТЬг Ьеи Рго Рго 340 Зег Агд Авр СЬи Ьеи ТЬг Ьуа Аап 345 СЬп УаЬ 350 Зег Ьеи
ТЬг Суз Ьеи УаЬ Ьуз СЬу РЬе Туг Рго Зег Аар 11е АЬа УаЬ СЬи Тгр
355 360 365
61и Зег Азп СЬу СЬп Рго СЬи Аап Аап Туг Ьуа ТЬг ТНг Рго Рго УаЬ
370 375 380
Ьеи Азр 5ег Азр СЬу Зег РЬе РЬе Ьеи Туг Зег Ьуа Ьеи ТЬг УаЬ Азр
385 390 395 4 00
Ьуз Зег Агд Тгр СЬп СЬп СЬу Азп УаЬ РЬе Зег Суз Зег УаЬ МеЬ НЬз
405 410 415
СЬи АЬа Ьеи Н1з Авп НЬз Туг ТЬг С1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго
420 425 430
СЬу Ьуз
<210> 14
<211> 5
<212> РВТ
<213> Ното заргепз
<400> 14
Тгр Азр Туг Ьуз Туг
1 5
<210> 15
<211> 202
Х212> РКТ
<213> : Масаса £азс1си1аг1з
<400> 15
Ьеи РЬе ТЬг УаЬ ТЬг 7а1 Рго Ьуз С1и Ьеи Туг 11е 11е СЬи НЬз СЬу
1 5 10 15
5ег Азп νπΐ ТЬг Ьеи СЬи Суа Азп РЬе Аар ТЬг СЬу Зег НЬз УаЬ Азп
20 25 30
Ьеи СЬу АЬа 11е ТЬг А1а Зег Ьеи С1п Ьуз УаЬ СЬи Азп Азр ТЬг Зег
35 40 45
Рго ΗΪ3 Агд СЬи Агд АЬа ТЬг Ьеи Ьеи С1и С1и СЬп Ьеи Рго Ьеи СЬу
50 55 60
Ьуз А1а Зег РЬе ΗΪΞ 11е Рго СЬп УаЬ СЬп УаЬ Агд Азр СЬи СЬу СЬп
- 51 023148
65 70 75 80
Туг С1п Суз Ые 11е Ые Туг С1у УаЬ АЬа Тгр Азр Туг Ьуз Туг Ьеи
85 90 95
ТЬг Ьеи Ьуз Уа1 Ьуз А1а Зег Туг Агд Ьуз 11е Азп ТЬг Н15 Ые Ьеи
100 105 но
Ьуз Уа1 Рго С1и ТЬг Азр СЬи Уа1 СЬи Ьеи ТЬг Суз С1п А1а ТЬг С1у
115 120 125
Туг Рго Ьеи А1а С1и Уа1 Зег Тгр Рго Азп УаЬ Зег Уа1 Рго АЬа Азп
130 135 140
ТЬг 5ег НЬз Зег Агд ТЬг Рго СЬи С1у Ьеи Туг С1п УаЬ ТЬг Зег УаЬ
145 150 155 160
Ьеи Агд Ьеи Ьуз Рго Рго Рго С1у Агд Азп РЬе Зег Суз Уа! РЬе Тгр
165 170 175
Азп ТНг Н1з Уа1 Агд СЬи Ьеи ТЬг Ьеи АЬа Зег Пе Азр Ьеи С1п Зег
180 135 190
СЬп МеС С1и Рго Агд ТЬг НЬз Рго ТЬг Тгр
195 200
<210> 16
<211> 290
<212> РКТ
<213> Ното заргепз
<400> 16
МеЬ Агд Ые РЬе АЬа УаЬ РЬе 11е РЬе МеС ТЬг Туг Тгр ΗΪ3 Ьеи Ьеи
1 5 10 15
Азп А1а РЬе ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Рго Ьуз Азр Ьеи Туг Уа1 Уа1 С1и Туг
20 25 30
С1у Зег Азп МеЬ ТЬг Ые 61и Суз Ьуз РЬе Рго СЬи Ьуз СЬп Ьеи
35 40 45
Азр Ьеи АЬа АЬа Ьеи Пе Уа1 Туг Тгр СЬи МеГ С1и Азр Ьуз Азп Ые
50 55 60
Ые СЬп РЬе Уа1 НЬз С1у СЬи СЬи Азр Ьеи Ьуз Уа1 СЬп ΗΪ5 Зег Зег
65 70 75 80
Туг Агд 61п Агд А1а Агд Ьеи Ьеи Ьуз Азр С1п Ьеи Зег Ьеи С1у Азп
35 90 95
АЬа А1а Ьеи СЬп 100 Не ТЬг Азр УаЬ Ьуз 105 Ьеи С1п Азр АЬа СЬу 110 Уа1 Туг
Агд Суз МеЬ 11е 5ег Туг С1у СЬу А1а Азр Туг Ьуз Агд Пе ТЬг УаЬ
115 120 125
Ьуз Уа1 Азп АЬа Рго Туг Азп Ьуз Пе Азп С1п Агд 11е Ьеи Уа1 УаЬ
130 135 140
Азр Рго УаЬ ТЬг Зег СЬи Ηΐ3 СЬи Ьеи ТНг Суз 61п А1а СЬи С1у Туг
145 150 155 160
Рго Ьуз АЬа СЬи Уа1 Ые Тгр ТНг Зег Зег Азр Нгз С1п УаЬ Ьеи Зег
165 170 175
С1у Ьуз ТЬг ТЬг ТЬг ТНг Азп Зег Ьуз Агд СЬи С1и Ьуз Ьеи РНе Азп
180 185 190
УаЬ ТНг Зег ТНг Ьеи Агд Пе Азп ТЬг ТНг ТНг Азп С1и 11е РЬе Туг
195 200 205
Суз ТНг РЬе Агд Агд Ьеи Азр Рго С1и СЬи Азп Ηΐ3 ТЬг АЬа С1и Ьеи
210 215 220
УаЬ 11е Рго СЬи Ьеи Рго Ьеи АЬа Шз Рго Рго Азп СЬи Агд ТЬг Н13
225 230 235 240
Ьее. ν&1 Не Ьеи С1у АЬа 11е Ьеи Ьеи Суз Ьеи С1у УаЬ АЬа Ьеи ТНг
245 250 255
РЬе Пе РЬе Агд Ьеи Агд Ьуз С1у Агд МеН Ме! Азр УаЬ Ьуз Ьуз Суз
260 265 270
СЬу 11е СЬп Азр ТЬг Азп Зег Ьуз Ьуз СЬп Зег Азр ТНг НЬз Ьеи СЬи
275 280 285
СЬи ТЬг
290
<210 17
<211> 290
<212> РЕТ
<213> 1 Миз тизси1из
<400> 17
МеЬ Агд Пе РЬе АЬа С1у Пе 11е РНе ТЬг А1а Суз Суз Н13 Ьеи Ьеи
1 5 10 15
- 53 023148
- 54 023148
С1у УаЬ СЬи Азр ТНг 275 Зег Зег Ьуз 280 А$п Агд Азп Азр ТНг 285 СЬп РНе СЬи
СЬи ТНг
290
<210> 18
<211> 290
<212> РКТ
<213> Масаса тиЬаГГа
<4оо> ; 18
Мег Агд 11е РНе АЬа Уа1 РНе Ые РЬе ТНг 11е Туг Тгр НЬз Ьеи Ьеи
1 5 10 15
Азп АЬа РНе ТНг УаЬ ТНг Уа1 Рго Ъуз Азр Ьеи Туг УаЬ УаЬ СЬи Туг
20 25 30
СЬу Зег Азп МеГ ТНг Не СЬи Суз Агд РНе Рго νώΐ СЬи Ьуз СЬп Ьеи
35 40 45
СЬу Ьеи ТНг Зег Ьеи 11е УаЬ Туг Тгр СЬи МеЁ С1и Азр Ьуз Азп 11е
50 55 60
Ые СЬп РНе УаЬ НЬз С1у СЬи СЬи Азр Ней Ьуз ν^Ι СЬп НЬз 8ег Азп
65 70 75 30
Туг Агд СЬп Агд АЬа СЬп Ьеи Ьеи Ьуз Азр С1п Ьеи Зег Ьеи СЬу Азп
85 90 95
АЬа АЬа Ьеи Агд 11е ТЬг Азр УаЬ Ьуз Ьеи С1п Азр АЬа СЬу УаЬ Туг
100 105 110
Агд Суз МеГ 11е Зег Туг СЬу СЬу А1а Азр Туг Ьуз Агд 11е ТНг УаЬ
115 120 125
Ьуз УаЬ Азп АЬа Рго Туг Азп Ьуз Не Азп СЬп Агд Ые Ьеи УаЬ УаЬ
130 135 140
Азр Рго УаЬ ТНг Зег СЬи НЬз СЬи Ьеи ТНг Суз С1п АЬа СЬи СЬу Туг
145 150 155 160
Рго Ьуз А1а СЬи Уа1 11е Тгр ТНг Зег Зег Азр ΗΪΞ СЬп УаЬ Ьеи Зег
165 170 175
СЬу Ьуз ТНг ТНг ТНг ТЬг Азп Еег Ьуз Агд СЬи С1и Ьуз Ьеи Ьеи Азп
180 185 190
- 55 023148
Уа1 ТЬг Зег 195 ТНг Ьеи Агд Не Азп 200 ТЬг ТНг А1а Азп С1и 205 Не РЬе Туг
Суз Не РЬе Агд Агд Ьеи С1у Рго СЬи СЬи Азп НЬз ТЬг АЬа СЬи Ьеи
210 215 220
Уа1 11е Рго С1и Ьеи Рго Ьеи АЬа Ьеи Рго Рго Азп СЬи Агд ТНг НЬз
225 230 235 240
Ьеи УаЬ Не Ьеи С1у А1а Не РНе Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 АЬа Ьеи ТЫ
245 250 255
РЬе Не РЬе Туг Ьеи Агд Ьуз 61у Агд МеГ МеГ Азр МеГ Ьуз Ьуз Зег
260 265 27 0
С1у Не Агд 7а1 ТЬг Азп Зег Ьуз Ьуз СЬп Агд Азр ТЬг СЬп Ьеи СЬи
275 280 285
С1и Й1Г
2 90
<210> 19
<211> . 288
<212? РЕТ
<213> 1 Ното зархепз
<400> 19
МеГ СЬп Не Рго С1п А1а Рго Тгр Рго Уа1 Уа1 Тгр АЬа УаЬ Ьеи СЬп
1 5 10 15
Ьеи С1у Тгр Агд Рго С1у Тгр РЬе Ьеи Азр Зег Рго Азр Агд Рго Тгр
20 25 30
Азп Его Рго ТЬг РНе РЬе Рго АЬа Ьеи Ьеи Уа1 УаЬ ТНг СЬи СЬу Азр
35 40 45
Азп А1а ТНг РЬе ТНг Суз Зег РЬе Зег Азп ТНг Зег СХи Зег РЬе УаЬ
50 55 60
Ьеи Азп Тгр Туг Агд МеГ Зег Рго Зег Азп СЬп ТНг Азр Ьуз Ьеи АЬа
65 70 75 80
А1а РЬе Рго С1и Азр Агд Зег 61п Рго С1у С1п Азр Суз Агд РНе Агд
85 90 95
Уа1 ТЬг 61п Ьеи Рго Азп 61 у Агд Азр РНе ΗΪ5 МеГ Зег УаЬ УаЬ Агд
100 105 но
АЬа Агд Агд Азп Азр Зег С1у ТНг Туг Ьеи Суз 61у АЬа Не Зег Ьеи
- 56 023148
115 120 125
А1а Рго 130 Ьуз А1э СЁп Не Ьуз С1и 13Ь Зег Ьеи Агд А1а 140 СЁи Ьеи Агд Уа1
ТЬг С1и Агд Агд А1а С1и 17а 1 Рго ТЬг А1а НЁЗ Рго Зег Рго Зег Рго
145 150 155 160
Агд Рго А1а 01у С1п РЬе <31п ТЬг Ьеи Уа1 17а1 С1у \7а1 1/а1 ЕЁу 61 у
165 170 175
Ьеи Ьеи С1у Зег Ьеи Уа1 Ьеи Ьеи 17а1 Тгр 17а1 Ьеи А1а 17а 1 Не Суз
180 185 190
Зег Агд А1а А1а Агд 61у ТЬг Не С1у А1а Агд Агд ТЬг <31у С1п Рго
195 200 205
Ьеи Ьуз 61и Азр Рго Зег А1а Уа1 Рго Уа1 РЬе Зег Уа1 Азр Туг 61у
210 215 220
51и Ьеи Азр РЬе С1п Тгр Агд С1и Ьуз ТЬг Рго С1и Рго Рго 17а1 Рго
225 230 235 240
Суз УаЬ Рго С1и С1п ТЫ С1и Туг А1а ТЬг Не Уа1 РЬе Рго Зег 61у
245 250 255
МеЬ 61у ТЬг Зег Зег Рго А1а Агд Агд 61у Зег А1а Аар С1у Рго Агд
260 265 270
Зег А1а С1п Рго Ьеи Агд Рго С1и Азр С1у НЁЗ Суз Зег Тгр Рго Ъеи
275 280 285 <210> 20 <2Η> 288 <212> РЕТ <213> Масаса РазсЁси1агЁЗ
<400> 20
МеЬ 61п Не Рго С1п А1а Рго Тгр Рго УаЁ 7а1 Тгр А1а 17а1 Ьеи 61п
1 5 10 15
Ьеи С1у Тгр Агд Рго 61у Тгр РЬе Ьеи С1и Зег Рго Азр Агд Рго Тгр
20 25 30
Азп А1а Рго ТЬг РЬе Зег Рго А1а Ьеи Ьеи Ьеи Уа 1 ТЬг Й1и С1у Азр
35 40 45
Азп А1а ТЬг РЬе ТЬг Суз Зег РЬе Зег Аап А1а Зег С1и Зег РЬе Уа1
50 55 60

Claims (33)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Терапевтическая композиция для увеличения Т-клеточного ответа, включающая слитый белок, содержащий первую и вторую пептидные части, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из аминокислотной последовательности §Еф ГО N0: 1 полипептида В7-ИС дикого типа, аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 §Еф ГО N0: 1 и которая конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, внеклеточного домена В7ГОС, имеющего 8Еф ГО N0: 3, или полипептида, отличающегося от него только консервативными аминокислотными заменами, и который конкурирует ίη νίίτο с В7-ИС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела и агент, усиливающий эффективность действия указанного белка, выбранный из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ТООТв, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ТЬК4 и антагонисты ГО-18, в фармацевтически приемлемом носителе.
  2. 2. Композиция по п.1, где указанный агент представляет собой циклофосфамид или аналог циклофосфамида.
  3. 3. Композиция по п.1, дополнительно включающая по меньшей мере один дополнительный агент, выбранный из группы, состоящей из антитела против ΡΌ-1, антитела против СТЬА4, ингибитора митоза, ингибитора ароматазы, антагониста А2АК и ингибитора ангиогенеза.
  4. 4. Композиция по любому из пп.1-3, где указанный В7-ИС представляет собой В7-ИС человека.
  5. 5. Композиция по любому из пп.1-4, где указанная первая пептидная часть состоит из внеклеточного домена В7-ИС дикого типа.
  6. 6. Композиция по п.5, где указанный внеклеточный домен В7ГОС представляет собой растворимый внеклеточный домен.
  7. 7. Композиция по любому из пп.1-4, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности §Еф ГО N0: 3 или полипептида, отличающегося от него только консервативными аминокислотными заменами.
  8. 8. Композиция по любому из пп.1-4, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 8Еф ГО N0: 1.
  9. 9. Композиция по любому из пп.1-4, где указанная первая пептидная часть состоит из последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 §Еф ГО N0: 1.
  10. 10. Композиция по любому из пп.1-4, где указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 95% идентичности последовательности §Еф ГО N0: 9, 10, 12 или 13, которая конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1.
  11. 11. Композиция по любому из пп.1-4, где указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность §Еф ГО N0: 9, 10, 12 или 13.
  12. 12. Композиция по любому из пп.1-11, где указанный слитый белок представляет собой мономер.
  13. 13. Композиция по любому из пп. 1-11, где указанный слитый белок образует димер.
  14. 14. Композиция по п.13, где указанный димер представляет собой гомодимер.
  15. 15. Композиция по п.13, где указанный димер представляет собой гетеродимер.
  16. 16. Композиция по п.1, где указанный слитый белок содержит первую пептидную часть, которая состоит из аминокислот 20-221 §Еф ГО N0: 1, и вторую пептидную часть, которая состоит из шарнирной области, участков СН2 и СН3 Ογί иммуноглобулина человека.
  17. 17. Композиция по любому из пп.1-16, где указанная вторая пептидная часть содержит аминокислотную последовательность §Еф ГО N0: 6.
  18. 18. Фармацевтическая композиция для увеличения Т-клеточного ответа, включающая слитый белок, содержащий аминокислотную последовательность §Еф ГО N0: 13 или ее вариант, имеющий 95% идентичности с последовательностью 8Еф ГО N0: 13, который конкурирует ίη νίίτο с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, фармацевтический приемлемый носитель и циклофосфамид.
  19. 19. Композиция по пп.1, 2 или 18, содержащая циклофосфамид в количестве от около 0,45 до около 4,5 мг.
  20. 20. Применение композиции по любому из пп.1-19 для производства лекарственного средства, увеличивающего Т-клеточный ответ, для лечения заболевания, поддающегося лечению путем увеличенного Т-клеточного ответа.
  21. 21. Применение по п.20, где указанное заболевание представляет собой инфекционное заболевание.
  22. 22. Применение по п.20, где указанное заболевание представляет собой рак.
  23. 23. Применение по п.22, где указанный рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак мозга, рак молочной железы, рак шейки матки, колоректальный рак, рак пищевода, рак почек, рак печени, рак легких, назофарингеальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка, рак матки, рак яичников, рак яичка или гематологический рак.
    - 59 023148
  24. 24. Способ увеличения Т-клеточного ответа у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему композиции по любому из пп.1-19.
  25. 25. Способ по п.24, где композиция содержит слитый белок в дозе 1-40 мг/кг.
  26. 26. Способ по п.24, где указанное заболевание представляет собой инфекционное заболевание.
  27. 27. Способ по п.24, где указанное заболевание представляет собой рак.
  28. 28. Способ по п.27, где указанный рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак мозга, рак молочной железы, рак шейки матки, колоректальный рак, рак пищевода, рак почек, рак печени, рак легких, назофарингеальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка, рак матки, рак яичников, рак яичка или гематологический рак.
  29. 29. Терапевтическая композиция для увеличения Т-клеточного ответа, содержащая слитый белок, включающий первую и вторую пептидные части, где указанная первая пептидная часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из последовательности внеклеточного домена В7ГОС, его фрагментов и вариантов, отличающиеся только консервативными аминокислотными заменами, которые конкурируют 1п уйго с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, и где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела и агент, усиливающий эффективность действия указанного белка, выбранный из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ТООТв, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин и доксорубицин, в фармацевтически приемлемом носителе.
  30. 30. Способ увеличения Т-клеточного ответа у человека, включающий введение указанному человеку слитого белка, содержащего первую и вторую пептидные части, где указанная первая часть состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности аминокислот 20-221 или 20-121 8ЕЦ ΙΌ ΝΟ: 1 полипептида В7ГОС дикого типа и которая конкурирует ш уйго с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1;
    аминокислотной последовательности фрагмента полноразмерного В7ГОС, которая конкурирует ш уйго с В7ГОС дикого типа за связывание с ΡΌ-1, и аминокислотной последовательности внеклеточного домена В7ГОС или ее варианта, отличающегося от исходной последовательности только консервативными аминокислотными заменами, где указанная вторая пептидная часть содержит Рс-область антитела; и агента, усиливающего эффективность действия указанного белка, выбранного из группы, включающей циклофосфамид, аналог циклофосфамида, сунитиниб, анти-ТООТ^, иматиниб, антрациклины, оксалиплатин, доксорубицин, антагонисты ТЬК4 и антагонисты ΙΕ-18, в фармацевтически приемлемом носителе, где указанный агент вводят перед указанным слитым белком.
  31. 31. Способ по п.1, где указанный агент представляет циклофосфамид или аналог циклофосфамида.
  32. 32. Способ по п.30 или 31, где указанный агент вводят по меньшей мере за X часов перед введением указанного слитого белка, где X выбирают из 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20, 24 и 30.
  33. 33. Способ по п.30 или 31, где циклофосфамид вводят указанному человеку по меньшей мере за 24 ч перед введением слитого белка.
    Связывание В7ГОС4д с клетками СНО, экспрессирующими ΡΌ-01
EA201170373A 2008-08-25 2009-08-25 Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение EA023148B1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9170508P 2008-08-25 2008-08-25
US9169408P 2008-08-25 2008-08-25
US9170908P 2008-08-25 2008-08-25
US21169709P 2009-04-02 2009-04-02
PCT/US2009/004825 WO2010027423A2 (en) 2008-08-25 2009-08-25 Compositions of pd-1 antagonists and methods of use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170373A1 EA201170373A1 (ru) 2011-10-31
EA023148B1 true EA023148B1 (ru) 2016-04-29

Family

ID=41725778

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201500417A EA201500417A1 (ru) 2008-08-25 2009-08-25 Композиции антагонистов pd-1 и способы применения
EA201170373A EA023148B1 (ru) 2008-08-25 2009-08-25 Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201500417A EA201500417A1 (ru) 2008-08-25 2009-08-25 Композиции антагонистов pd-1 и способы применения

Country Status (28)

Country Link
US (4) US8114845B2 (ru)
EP (2) EP2350129B1 (ru)
JP (1) JP5798919B2 (ru)
KR (1) KR20110050529A (ru)
CN (1) CN102203132A (ru)
AU (1) AU2009288730B2 (ru)
CA (1) CA2734908A1 (ru)
CL (1) CL2011000423A1 (ru)
CO (1) CO6341574A2 (ru)
CY (1) CY1116816T1 (ru)
DK (1) DK2350129T3 (ru)
DO (1) DOP2011000059A (ru)
EA (2) EA201500417A1 (ru)
ES (1) ES2545609T3 (ru)
HR (1) HRP20150933T1 (ru)
HU (1) HUE027525T2 (ru)
IL (1) IL211298A0 (ru)
MA (1) MA32646B1 (ru)
MX (1) MX2011002252A (ru)
NZ (1) NZ591130A (ru)
PE (1) PE20110435A1 (ru)
PL (1) PL2350129T3 (ru)
PT (1) PT2350129E (ru)
RS (1) RS54233B1 (ru)
SI (1) SI2350129T1 (ru)
SM (1) SMT201500212B (ru)
WO (1) WO2010027423A2 (ru)
ZA (1) ZA201101120B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2752562C2 (ru) * 2016-09-14 2021-07-29 Эббви Байотерапьютикс Инк. Антитела к pd-1(cd279)

Families Citing this family (545)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT1234031T (pt) 1999-11-30 2017-06-26 Mayo Foundation B7-h1, uma nova molécula imunoregulatória
US7030219B2 (en) 2000-04-28 2006-04-18 Johns Hopkins University B7-DC, Dendritic cell co-stimulatory molecules
US7432351B1 (en) 2002-10-04 2008-10-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 variants
MX2007004176A (es) 2004-10-06 2007-06-15 Mayo Foundation B7-h1 y metodos de diagnosis, prognosis, y tratamiento de cancer.
LT2439273T (lt) * 2005-05-09 2019-05-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Žmogaus monokloniniai antikūnai prieš programuotos mirties 1(pd-1) baltymą, ir vėžio gydymo būdai, naudojant vien tik anti-pd-1 antikūnus arba derinyje su kitais imunoterapiniais vaistais
GEP20135924B (en) 2005-12-02 2013-10-10 The Mount Sinai School Of Medicine Of New York Univ Chimeric viruses presenting non-native surface proteins and usage thereof
WO2007070660A2 (en) 2005-12-13 2007-06-21 President And Fellows Of Harvard College Scaffolds for cell transplantation
US8153595B2 (en) 2007-07-13 2012-04-10 The Johns Hopkins University B7-DC variants immunogenic compositions and methods of use thereof
NZ591130A (en) 2008-08-25 2012-09-28 Amplimmune Inc Compositions comprising a PD-1 antagonists and cyclophosphamide and methods of use thereof
US20110159023A1 (en) * 2008-08-25 2011-06-30 Solomon Langermann Pd-1 antagonists and methods for treating infectious disease
SI2376535T1 (sl) 2008-12-09 2017-07-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa anti-pd-l1 in njihova uporaba za izboljšanje funkcije celic t
JP2013512251A (ja) * 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害
CA3083324A1 (en) 2010-03-05 2011-09-09 The Johns Hopkins University Compositions and methods for targeted immunomodulatory antibodies and fusion proteins
WO2011133636A1 (en) 2010-04-20 2011-10-27 Cedars-Sinai Medical Center COMBINATION THERAPY WITH CD4 LYMPHOCYTE DEPLETION AND mTOR INHIBITORS
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
US9783578B2 (en) 2010-06-25 2017-10-10 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
WO2012018538A2 (en) * 2010-07-26 2012-02-09 Schering Corporation Bioassays for determining pd-1 modulation
PT2624873T (pt) 2010-10-06 2020-03-04 Harvard College Hidrogéis injectáveis formadores de poros para terapias celulares à base de materiais
EP2910572B1 (en) * 2010-11-11 2017-09-06 Versitech Limited Soluble pd-1 variants, fusion constructs, and uses thereof
JP6240063B2 (ja) 2011-04-28 2017-11-29 ザ ブロード インスティテュート， インコーポレイテッド ヒストンデアセチラーゼ阻害剤
CN102298053B (zh) * 2011-05-20 2014-01-29 中山大学肿瘤防治中心 原发性肝细胞肝癌术后复发风险评估的组合抗体试剂盒
US9096642B2 (en) 2011-06-08 2015-08-04 Aurigene Discovery Technologies Limited Therapeutic compounds for immunomodulation
WO2012177788A1 (en) * 2011-06-20 2012-12-27 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Modulators of 4-1bb and immune responses
CN103764665A (zh) 2011-06-28 2014-04-30 怀特黑德生物医学研究所 使用分选酶安装用于蛋白质连接的点击化学柄
TW201840336A (zh) 2011-08-01 2018-11-16 美商建南德克公司 利用pd-1軸結合拮抗劑及mek抑制劑治療癌症之方法
GB201120527D0 (en) * 2011-11-29 2012-01-11 Ucl Business Plc Method
CA2862390A1 (en) 2012-01-25 2013-08-01 Dnatrix, Inc. Biomarkers and combination therapies using oncolytic virus and immunomodulation
JP6378170B2 (ja) 2012-04-12 2018-08-22 イェール ユニバーシティーＹａｌｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 異なる医薬品の制御送達のためのビヒクル
ES2773895T3 (es) 2012-04-16 2020-07-15 Harvard College Composiciones de sílice mesoporosa para modular las respuestas inmunitarias
EP3964567A1 (en) 2012-05-25 2022-03-09 Cellectis Methods for engineering allogeneic and immunosuppressive resistant t cell for immunotherapy
EP3556776A1 (en) * 2012-05-31 2019-10-23 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and vegf antagonists
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
JP6337255B2 (ja) 2012-07-27 2018-06-06 ザ ブロード インスティテュート, インコーポレーテッドThe Broad Institute, Inc. ヒストンデアセチラーゼの阻害剤
WO2014047350A1 (en) * 2012-09-20 2014-03-27 Morningside Technology Ventures Ltd. Oncolytic virus encoding pd-1 binding agents and uses of the same
ES2824024T3 (es) * 2012-10-10 2021-05-11 Sangamo Therapeutics Inc Compuestos modificadores de células T y usos de los mismos
WO2014121085A1 (en) * 2013-01-31 2014-08-07 Thomas Jefferson University Pd-l1 and pd-l2-based fusion proteins and uses thereof
WO2014122271A1 (en) * 2013-02-07 2014-08-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting the survival time of patients suffering from diffuse large b-cell lymphomas
PT2958943T (pt) 2013-02-20 2019-12-17 Novartis Ag Tratamento do cancro usando recetor de antigénios quiméricos anti-egfrviii humanizados
US9573988B2 (en) 2013-02-20 2017-02-21 Novartis Ag Effective targeting of primary human leukemia using anti-CD123 chimeric antigen receptor engineered T cells
EP2958588B1 (en) 2013-02-22 2017-08-23 CureVac AG Combination of vaccination and inhibition of the pd-1 pathway
CN109045289A (zh) * 2013-02-22 2018-12-21 库瑞瓦格股份公司 疫苗接种和抑制pd-1途径的组合
CN105228640B (zh) * 2013-02-26 2018-01-16 王荣福 Phf20和jmjd3组合物及其在肿瘤免疫治疗中的使用方法
US9302005B2 (en) 2013-03-14 2016-04-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
NZ711946A (en) 2013-03-14 2020-05-29 Icahn School Med Mount Sinai Newcastle disease viruses and uses thereof
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
CA2909160C (en) 2013-04-09 2021-05-25 Lixte Biotechnology, Inc. Formulations of oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes
RS61400B1 (sr) 2013-05-02 2021-02-26 Anaptysbio Inc Antitela usmerena protiv programirane smrti-1 (pd-1)
WO2014183066A2 (en) 2013-05-10 2014-11-13 Whitehead Institute For Biomedical Research Protein modification of living cells using sortase
US10471099B2 (en) 2013-05-10 2019-11-12 Whitehead Institute For Biomedical Research In vitro production of red blood cells with proteins comprising sortase recognition motifs
US11077144B2 (en) 2013-05-13 2021-08-03 Cellectis CD19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
US11311575B2 (en) 2013-05-13 2022-04-26 Cellectis Methods for engineering highly active T cell for immunotherapy
WO2014194293A1 (en) 2013-05-30 2014-12-04 Amplimmune, Inc. Improved methods for the selection of patients for pd-1 or b7-h4 targeted therapies, and combination therapies thereof
US9452217B2 (en) * 2013-06-22 2016-09-27 Nitor Therapeutics Methods for potentiating immune response for the treatment of infectious diseases and cancer
JP6649254B2 (ja) 2013-08-08 2020-02-19 サイチューン ファーマ ＩＬ−１５及びＩＬ−１５Ｒαスシドメインに基づくモジュロカイン
WO2015018529A1 (en) 2013-08-08 2015-02-12 Cytune Pharma Combined pharmaceutical composition
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
EP3178849B1 (en) 2013-09-20 2019-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-lag-3 antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat tumors
EP3049442A4 (en) * 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
US10259875B2 (en) 2013-10-01 2019-04-16 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for treating cancer in patients with elevated levels of BIM
CA2987519A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Yale University Delivery vehicles
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
AU2014348657A1 (en) 2013-11-13 2016-05-19 Novartis Ag mTOR inhibitors for enhancing the immune response
WO2015073746A2 (en) 2013-11-13 2015-05-21 Whitehead Institute For Biomedical Research 18f labeling of proteins using sortases
RS59480B1 (sr) 2013-12-12 2019-12-31 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1 antitelo, njegov fragment koji se vezuje na antigen, i njegova medicinska primena
CA2934028A1 (en) * 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
CA3225453A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Novartis Ag Human mesothelin chimeric antigen receptors and uses thereof
WO2015100219A1 (en) * 2013-12-23 2015-07-02 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Immunotherapy with binding agents
EP3092495B1 (en) * 2014-01-06 2020-11-25 Expression Pathology, Inc. Srm assay for pd-l1
US10835595B2 (en) 2014-01-06 2020-11-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania PD1 and PDL1 antibodies and vaccine combinations and use of same for immunotherapy
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CN105979961B (zh) * 2014-02-05 2020-12-18 西达-赛奈医疗中心 用于治疗癌症和感染性疾病的方法和组合物
EP3441084A1 (en) 2014-02-27 2019-02-13 Viralytics Limited Oncolytic virus and immuno-stimulatory agent for combined use in the treatment of cancer
US20170088626A1 (en) 2014-03-05 2017-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cancer using a combination of an anti-pd-1 antibody and another anti-cancer agent
CA2935878C (en) 2014-03-12 2023-05-02 Curevac Ag Combination of vaccination and ox40 agonists
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
JP6903432B2 (ja) 2014-03-12 2021-07-14 イエダ リサーチ アンド ディベロップメント カンパニー リミテッド Ｃｎｓの疾患および傷害を処置するために全身性調節性ｔ細胞のレベルまたは活性を低下させること
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
CN106103484B (zh) 2014-03-14 2021-08-20 诺华股份有限公司 针对lag-3的抗体分子及其用途
EP3593812A3 (en) 2014-03-15 2020-05-27 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
ES2719136T3 (es) 2014-03-24 2019-07-08 Novartis Ag Compuestos orgánicos de monobactam para el tratamiento de infecciones bacterianas
WO2015153514A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists
IL293603B2 (en) 2014-04-07 2024-03-01 Novartis Ag Cancer treatment using chimeric antigen receptor (CAR) against CD19
EP3137105A4 (en) 2014-04-30 2017-12-27 President and Fellows of Harvard College Combination vaccine devices and methods of killing cancer cells
BR112016026559A8 (pt) 2014-05-15 2021-07-13 Bristol Myers Squibb Co uso de um anticorpo anti-pd-1 e outro agente anticâncer em combinação com quimioterapia dupla com base em platina (pt-dc) e kit
US10302653B2 (en) 2014-05-22 2019-05-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Distinguishing antagonistic and agonistic anti B7-H1 antibodies
MA47849A (fr) 2014-05-28 2020-01-29 Agenus Inc Anticorps anti-gitr et leurs procédés d'utilisation
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
AU2015289672A1 (en) 2014-07-15 2017-03-02 Genentech, Inc. Compositions for treating cancer using PD-1 axis binding antagonists and MEK inhibitors
US11542488B2 (en) 2014-07-21 2023-01-03 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
JP2017528433A (ja) 2014-07-21 2017-09-28 ノバルティス アーゲー 低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤とＣＡＲの組み合わせ
CN112481283A (zh) 2014-07-21 2021-03-12 诺华股份有限公司 使用cd33嵌合抗原受体治疗癌症
US10517875B2 (en) 2014-07-23 2019-12-31 Mayo Foundation for Medical Engineering and Research Targeting DNA-PKcs and B7-H1 to treat cancer
US20170209492A1 (en) 2014-07-31 2017-07-27 Novartis Ag Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
EP3177593A1 (en) 2014-08-06 2017-06-14 Novartis AG Quinolone derivatives as antibacterials
US11219672B2 (en) 2014-08-07 2022-01-11 Haruki Okamura Therapeutic agent for cancer which comprises combination of IL-18 and molecule-targeting antibody
US10800830B2 (en) * 2014-08-08 2020-10-13 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University High affinity PD-1 agents and methods of use
WO2016025880A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Novartis Ag Treatment of cancer using gfr alpha-4 chimeric antigen receptor
MY189028A (en) 2014-08-19 2022-01-20 Novartis Ag Anti-cd123 chimeric antigen receptor (car) for use in cancer treatment
US9993551B2 (en) 2014-09-13 2018-06-12 Novartis Ag Combination therapies of EGFR inhibitors
KR20230088521A (ko) * 2014-09-16 2023-06-19 이나뜨 파르마 에스.에이. 림프구에서의 억제 경로의 중화
DK3194443T3 (da) 2014-09-17 2021-09-27 Novartis Ag Målretning af cytotoksiske celler med kimære receptorer i forbindelse med adoptiv immunterapi
US9616114B1 (en) 2014-09-18 2017-04-11 David Gordon Bermudes Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity
US10053683B2 (en) 2014-10-03 2018-08-21 Whitehead Institute For Biomedical Research Intercellular labeling of ligand-receptor interactions
KR20170066546A (ko) 2014-10-03 2017-06-14 노파르티스 아게 조합 요법
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
SG11201702895SA (en) 2014-10-08 2017-05-30 Novartis Ag Biomarkers predictive of therapeutic responsiveness to chimeric antigen receptor therapy and uses thereof
CU20170052A7 (es) 2014-10-14 2017-11-07 Dana Farber Cancer Inst Inc Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1
AU2015335607B2 (en) * 2014-10-24 2020-04-23 Calidi Biotherapeutics, Inc. Combination immunotherapy approach for treatment of cancer
KR102636539B1 (ko) 2014-10-29 2024-02-13 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 암에 대한 조합 요법
JP6887378B2 (ja) * 2014-11-06 2021-06-16 バイオセラ，インク． 腫瘍内微小環境に影響を与えるベータ−グルカン方法と組成物
KR20210069124A (ko) 2014-11-13 2021-06-10 더 존스 홉킨스 유니버시티 관문 차단 및 미소부수체 불안정성
JP6831783B2 (ja) 2014-11-14 2021-02-17 ノバルティス アーゲー 抗体薬物コンジュゲート
SG11201703925VA (en) * 2014-12-02 2017-06-29 Celgene Corp Combination therapies
WO2016090034A2 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Novartis Ag Methods for b cell preconditioning in car therapy
CA2968352A1 (en) 2014-12-08 2016-06-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for upregulating immune responses using combinations of anti-rgmb and anti-pd-1 agents
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
US9549916B2 (en) 2014-12-16 2017-01-24 Novartis Ag Isoxazole hydroxamic acid compounds as LpxC inhibitors
WO2016100561A2 (en) * 2014-12-16 2016-06-23 Bristol-Myers Squibb Company Use of immune checkpoint inhibitors in central nervous systems neoplasms
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
CN105983097B (zh) * 2015-01-28 2021-06-08 华中科技大学同济医学院附属协和医院 一种抗肿瘤制剂及其制备方法
EP3250250A4 (en) * 2015-01-30 2019-05-22 President and Fellows of Harvard College PERITUMORAL AND INTRATUMORAL MATERIALS FOR CANCER THERAPY
WO2016126608A1 (en) 2015-02-02 2016-08-11 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
JP6917902B2 (ja) * 2015-02-13 2021-08-11 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッド Ｃｔｌａ４に結合する抗体医薬
WO2016137985A1 (en) * 2015-02-26 2016-09-01 Merck Patent Gmbh Pd-1 / pd-l1 inhibitors for the treatment of cancer
MY190404A (en) 2015-03-10 2022-04-21 Aduro Biotech Inc Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene"-dependent signalling
LT3274370T (lt) 2015-03-23 2020-02-10 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Antikūnai prieš ceacam6 ir jų panaudojimas
EP3280795B1 (en) 2015-04-07 2021-03-24 Novartis AG Combination of chimeric antigen receptor therapy and amino pyrimidine derivatives
CN107708756A (zh) 2015-04-10 2018-02-16 哈佛学院院长等 免疫细胞捕获装置及其制备和使用方法
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
CN107969128A (zh) 2015-04-17 2018-04-27 高山免疫科学股份有限公司 具有可调的亲和力的免疫调节蛋白
JP7114457B2 (ja) 2015-04-17 2022-08-08 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア キメラ抗原受容体発現細胞の有効性および増殖を改善するための方法
TN2017000440A1 (en) 2015-04-17 2019-04-12 Bristol Myers Squibb Co Compositions comprising a combination of an anti-pd-1 antibody and another antibody
US20180298068A1 (en) 2015-04-23 2018-10-18 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
WO2016176503A1 (en) 2015-04-28 2016-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1-negative melanoma using an anti-pd-1 antibody and an anti-ctla-4 antibody
WO2016176504A1 (en) 2015-04-28 2016-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1-positive melanoma using an anti-pd-1 antibody
US20180155429A1 (en) 2015-05-28 2018-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of pd-l1 positive lung cancer using an anti-pd-1 antibody
SG10201913500TA (en) 2015-05-29 2020-03-30 Agenus Inc Anti-ctla-4 antibodies and methods of use thereof
US11078278B2 (en) 2015-05-29 2021-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cell carcinoma
TW201709929A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
WO2016203432A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
KR20180040138A (ko) 2015-07-13 2018-04-19 싸이톰스 테라퓨틱스, 인크. 항pd-1 항체, 활성화 가능한 항pd-1 항체, 및 이들의 사용 방법
US10544224B2 (en) 2015-07-14 2020-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating cancer using immune checkpoint inhibitor
EP3322431A2 (en) 2015-07-16 2018-05-23 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
EP3322448A4 (en) 2015-07-16 2019-03-06 Bioxcel Therapeutics, Inc. NOVEL METHOD FOR THE TREATMENT OF CANCER WITH IMMUNOMODULATION
AR105433A1 (es) 2015-07-21 2017-10-04 Novartis Ag Métodos para mejorar la eficacia y expansión de las células inmunes
CN108235685A (zh) 2015-07-29 2018-06-29 诺华股份有限公司 Pd-1拮抗剂与egfr抑制剂的组合
EP3316902A1 (en) 2015-07-29 2018-05-09 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
JP6840127B2 (ja) 2015-07-29 2021-03-10 ノバルティス アーゲー がんの治療における抗ｐｄ−１抗体および抗ｍ−ｃｓｆ抗体の併用
SI3317301T1 (sl) 2015-07-29 2021-10-29 Novartis Ag Kombinirane terapije, ki obsegajo molekule protitelesa na LAG-3
KR20180034588A (ko) 2015-07-30 2018-04-04 마크로제닉스, 인크. Pd-1-결합 분자 및 그것의 사용 방법
KR20180029079A (ko) 2015-07-31 2018-03-19 유니버시티 오브 플로리다 리서치 파운데이션, 아이엔씨. 암에 대한 면역 체크포인트 억제제와의 조합 요법에서의 조혈 줄기 세포
US20190010231A1 (en) 2015-08-07 2019-01-10 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptide specific for lag-3 and pd-1
EA201800148A1 (ru) 2015-08-11 2019-01-31 Калиди Биотерапьютикс, Инк. Оспенная вакцина для лечения рака
US10561653B2 (en) 2015-08-11 2020-02-18 Novartis Ag 5-bromo-2,6-di-(1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-4-amine for use in the treatment of cancer
JP6905163B2 (ja) 2015-09-03 2021-07-21 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア サイトカイン放出症候群を予測するバイオマーカー
EP4218833A1 (en) 2015-10-01 2023-08-02 Whitehead Institute for Biomedical Research Labeling of antibodies
KR102146319B1 (ko) 2015-10-02 2020-08-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd1 및 tim3에 특이적인 이중특이성 항체
AU2016329251B2 (en) 2015-10-02 2023-02-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-PD1 antibodies and methods of use
WO2017062619A2 (en) 2015-10-08 2017-04-13 Macrogenics, Inc. Combination therapy for the treatment of cancer
US11207393B2 (en) 2015-10-16 2021-12-28 President And Fellows Of Harvard College Regulatory T cell PD-1 modulation for regulating T cell effector immune responses
JP6954648B2 (ja) 2015-10-19 2021-10-27 シージー オンコロジー， インコーポレイテッド 併用療法による固形腫瘍又はリンパ系腫瘍の治療方法
MA44334A (fr) 2015-10-29 2018-09-05 Novartis Ag Conjugués d'anticorps comprenant un agoniste du récepteur de type toll
US10875923B2 (en) 2015-10-30 2020-12-29 Mayo Foundation For Medical Education And Research Antibodies to B7-H1
TW201722985A (zh) 2015-11-02 2017-07-01 戊瑞治療有限公司 Cd80胞外域多肽及其用於癌症治療
EP3371311B1 (en) 2015-11-06 2021-07-21 Orionis Biosciences BV Bi-functional chimeric proteins and uses thereof
US11072657B2 (en) 2015-11-18 2021-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lung cancer using a combination of an anti-PD-1 antibody and an anti-CTLA-4 antibody
RU2021107536A (ru) 2015-11-23 2021-07-02 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Ингибиторы fgfr2 отдельно или в комбинации с иммуностимулирующими агентами в лечении рака
CN108883173B (zh) 2015-12-02 2022-09-06 阿吉纳斯公司 抗体和其使用方法
US10590169B2 (en) * 2015-12-09 2020-03-17 Virogin Biotech Canada Ltd Compositions and methods for inhibiting CD279 interactions
CR20180318A (es) 2015-12-14 2018-09-19 Macrogenics Inc Moléculas biespecíficas que tienen inmunorreactividad con pd-1 y ctla-4, y métodos de uso de las mismas
CA3007671A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Novartis Ag Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US10392442B2 (en) 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
CA3008102A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
JP7082055B2 (ja) 2015-12-22 2022-06-07 ノバルティス アーゲー 抗癌治療における組み合わせ使用のためのメソテリンキメラ抗原受容体（ｃａｒ）およびｐｄ－ｌ１阻害剤に対する抗体
ES2954153T3 (es) 2015-12-22 2023-11-20 Regeneron Pharma Combinación de anticuerpos anti-PD-1 y anticuerpos biespecíficos anti-CD20/anti-CD3 para tratar el cáncer
DK3394093T3 (da) 2015-12-23 2022-04-19 Modernatx Inc Fremgangsmåder til anvendelse af ox40-ligand-kodende polynukleotider
WO2017122203A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Technion Research & Development Foundation Limited Methods of determining prognosis of sepsis and treating same
KR20180100224A (ko) 2016-01-11 2018-09-07 노바르티스 아게 인간 인터루킨-2에 대한 면역-자극 인간화 단일클론 항체, 및 이의 융합 단백질
JP7166923B2 (ja) 2016-02-05 2022-11-08 オリオニス バイオサイエンシズ ビーブイ 標的療法剤およびその使用
EP3411475A4 (en) 2016-02-06 2019-09-11 President and Fellows of Harvard College REGENERATION OF THE HEMATOPOIETIC NICHE TO RECONSTITUTE IMMUNITY
US20200270265A1 (en) 2016-02-19 2020-08-27 Novartis Ag Tetracyclic pyridone compounds as antivirals
CN109476731A (zh) 2016-02-29 2019-03-15 基础医药有限公司 治疗癌症的方法
EP3423482A1 (en) 2016-03-04 2019-01-09 Novartis AG Cells expressing multiple chimeric antigen receptor (car) molecules and uses therefore
WO2017155981A1 (en) 2016-03-07 2017-09-14 Massachusetts Institute Of Technology Protein-chaperoned t-cell vaccines
WO2017156349A1 (en) 2016-03-10 2017-09-14 Cold Genesys, Inc. Methods of treating solid or lymphatic tumors by combination therapy
JP2019512271A (ja) 2016-03-21 2019-05-16 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド Ｔ細胞疲弊状態特異的遺伝子発現調節因子およびその使用
PT3433257T (pt) 2016-03-24 2023-11-29 Novartis Ag Análogos nucleosídeos de alquinil como inibidores do rinovírus humano
US11209441B2 (en) 2016-04-05 2021-12-28 Bristol-Myers Squibb Company Cytokine profiling analysis
CN117327650A (zh) 2016-04-13 2024-01-02 维维雅生物技术公司 离体bite激活的t细胞
KR20190006495A (ko) 2016-04-15 2019-01-18 알파인 이뮨 사이언시즈, 인코포레이티드 Cd80 변이체 면역조절 단백질 및 그의 용도
TWI822521B (zh) 2016-05-13 2023-11-11 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
US11236141B2 (en) 2016-05-13 2022-02-01 Orionis Biosciences BV Targeted mutant interferon-beta and uses thereof
CN109563141A (zh) 2016-05-13 2019-04-02 奥里尼斯生物科学公司 对非细胞结构的治疗性靶向
MA45037A (fr) 2016-05-18 2019-03-27 Modernatx Inc Polythérapie à base d'arnm pour le traitement du cancer
EP4137509A1 (en) 2016-05-18 2023-02-22 ModernaTX, Inc. Combinations of mrnas encoding immune modulating polypeptides and uses thereof
KR102469450B1 (ko) 2016-05-18 2022-11-22 모더나티엑스, 인크. 인터류킨-12 (il12)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 그의 용도
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
ES2904880T3 (es) 2016-05-20 2022-04-06 Lilly Co Eli Terapia combinada con inhibidores de Notch y de PD-1 o PD-L1
MX2018014387A (es) 2016-05-27 2019-03-14 Agenus Inc Anticuerpos anti proteina inmunoglobulina de linfocitos t y dominio de mucina 3 (tim-3) y métodos para usarlos.
EP3464368B1 (en) 2016-06-02 2023-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Use of an anti-pd-1 antibody in combination with an anti-cd30 antibody in lymphoma treatment
PT3463457T (pt) 2016-06-02 2023-09-07 Bristol Myers Squibb Co Bloqueio de pd-1 com nivolumab em linfoma de hodgkin refratário
US11332529B2 (en) 2016-06-03 2022-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating colorectal cancer
EP3464369A1 (en) 2016-06-03 2019-04-10 Bristol-Myers Squibb Company Anti-pd-1 antibody for use in a method of treating a tumor
EP3463454A1 (en) 2016-06-03 2019-04-10 Bristol-Myers Squibb Company Anti-pd-1 antibody for use in a method of treatment of recurrent small cell lung cancer
US10071973B2 (en) 2016-06-14 2018-09-11 Novartis Ag Crystalline isoxazole hydroxamic acid compounds
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
CN109640999A (zh) 2016-06-24 2019-04-16 无限药品股份有限公司 组合疗法
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
AU2017295704B2 (en) 2016-07-13 2023-07-13 President And Fellows Of Harvard College Antigen-presenting cell-mimetic scaffolds and methods for making and using the same
KR102565885B1 (ko) 2016-07-20 2023-08-09 유니버시티 오브 유타 리서치 파운데이션 Cd229 car t 세포 및 이의 사용 방법
AU2017302668B9 (en) * 2016-07-28 2023-06-22 Novartis Ag Combination therapies of chimeric antigen receptors and PD-1 inhibitors
JP2019525934A (ja) 2016-07-29 2019-09-12 イーライ リリー アンド カンパニー 癌の治療に使用するためのメレスチニブおよび抗ｐｄ−ｌ１または抗ｐｄ−１阻害剤を用いた組み合わせ治療
JP2019527236A (ja) 2016-08-01 2019-09-26 モレキュラー テンプレーツ，インコーポレイティド 癌を治療するための免疫調節剤と組み合わせた低酸素活性化型プロドラッグの投与
JP2019528689A (ja) * 2016-08-11 2019-10-17 ザ カウンシル オブ ザ クイーンズランド インスティテュート オブ メディカル リサーチ 免疫調節化合物
CN109906088A (zh) * 2016-08-26 2019-06-18 奥野哲治 微血管血流减少剂及其应用
WO2018048975A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Use of an anti-pd-1 antibody in combination with an anti-mesothelin antibody in cancer treatment
CA3035976A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Tg Therapeutics, Inc. Combination of an anti-cd20 antibody, pi3 kinase-delta inhibitor, and anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody for treating hematological cancers
TW201811788A (zh) 2016-09-09 2018-04-01 瑞士商諾華公司 作為抗病毒劑之多環吡啶酮化合物
RU2759334C2 (ru) 2016-09-21 2021-11-12 Нексткьюр, Инк. Антитела против siglec-15 и способы их применения
US11077178B2 (en) 2016-09-21 2021-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptor (CAR) that targets chemokine receptor CCR4 and its use
WO2018057955A1 (en) 2016-09-23 2018-03-29 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific antibody molecules comprising lambda and kappa light chains
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
AR110676A1 (es) 2016-10-07 2019-04-24 Novartis Ag Tratamiento del cáncer utilizando receptores de antígenos quiméricos
TW202246349A (zh) 2016-10-11 2022-12-01 美商艾吉納斯公司 抗ｌａｇ－３抗體及其使用方法
WO2018071576A1 (en) 2016-10-14 2018-04-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of tumors by inhibition of cd300f
WO2018073753A1 (en) 2016-10-18 2018-04-26 Novartis Ag Fused tetracyclic pyridone compounds as antivirals
ES2917000T3 (es) 2016-10-24 2022-07-06 Orionis Biosciences BV Interferón-gamma mutante diana y usos del mismo
EP3532487A1 (en) * 2016-10-27 2019-09-04 IO Biotech APS New pdl2 compounds
CA3041684C (en) 2016-11-01 2023-09-26 Anaptysbio, Inc. Antibodies directed against programmed death- 1 (pd-1)
BR112019008426A2 (pt) 2016-11-02 2019-09-03 Engmab Sarl anticorpo biespecífico contra bcma e cd3 e um fármaco imunológico para uso combinado no tratamento de mieloma múltiplo
AU2017355401A1 (en) 2016-11-02 2019-05-02 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to PD-1 and uses thereof
TW201825119A (zh) 2016-11-30 2018-07-16 日商協和醱酵麒麟有限公司 使用抗ccr4抗體及抗pd-1抗體治療癌症之方法
CA3045508A1 (en) 2016-12-03 2018-06-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for modulation of car-t cells
US11180535B1 (en) 2016-12-07 2021-11-23 David Gordon Bermudes Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria
MX2019006340A (es) 2016-12-07 2019-11-07 Agenus Inc Anticuerpos anti antígeno 4 del linfocito t citotóxico (ctla-4) y métodos de uso de los mismos.
CA3046082A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
EP4219563A3 (en) 2017-01-09 2023-10-04 Tesaro, Inc. Methods of treating cancer with anti-pd-1 antibodies
US11613785B2 (en) 2017-01-09 2023-03-28 Onkosxcel Therapeutics, Llc Predictive and diagnostic methods for prostate cancer
KR20190103226A (ko) 2017-01-13 2019-09-04 아게누스 인코포레이티드 Ny-eso-1에 결합하는 t 세포 수용체 및 이의 사용 방법
WO2018134279A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptides specific for lag-3 and pd-1
AR110755A1 (es) 2017-01-20 2019-05-02 Genzyme Corp Anticuerpos dirigidos a hueso
TW202313678A (zh) 2017-01-20 2023-04-01 法商賽諾菲公司 抗TGF-β抗體及其用途
EP3570870A1 (en) 2017-01-20 2019-11-27 Novartis AG Combination therapy for the treatment of cancer
JOP20190187A1 (ar) 2017-02-03 2019-08-01 Novartis Ag مترافقات عقار جسم مضاد لـ ccr7
WO2018141964A1 (en) 2017-02-06 2018-08-09 Orionis Biosciences Nv Targeted chimeric proteins and uses thereof
WO2018144999A1 (en) 2017-02-06 2018-08-09 Orionis Biosciences, Inc. Targeted engineered interferon and uses thereof
US20200291089A1 (en) 2017-02-16 2020-09-17 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
CN110536905B (zh) 2017-02-21 2023-10-27 瑞泽恩制药公司 用于治疗肺癌的抗pd-1抗体
US11459394B2 (en) 2017-02-24 2022-10-04 Macrogenics, Inc. Bispecific binding molecules that are capable of binding CD137 and tumor antigens, and uses thereof
UY37621A (es) 2017-02-28 2018-09-28 Sanofi Sa Arn terapéutico que codifica citoquinas
EP3592868B1 (en) 2017-03-06 2022-11-23 Novartis AG Methods of treatment of cancer with reduced ubb expression
US20200150125A1 (en) 2017-03-12 2020-05-14 Yeda Research And Development Co., Ltd. Methods of diagnosing and prognosing cancer
WO2018167780A1 (en) 2017-03-12 2018-09-20 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods of prognosing and treating cancer
AU2018235838B2 (en) 2017-03-16 2023-12-14 Alpine Immune Sciences, Inc. CD80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
JP2020512357A (ja) 2017-03-31 2020-04-23 ファイブ プライム セラピューティクス， インコーポレイテッド 抗ｇｉｔｒ抗体を使用した癌の併用療法
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
LT3606946T (lt) 2017-04-03 2022-10-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-pd-1 antikūno imunokonjugatai su mutantiniu il-2 arba su il-15
KR102346336B1 (ko) 2017-04-05 2022-01-04 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd1 및 lag3에 특이적으로 결합하는 이중특이적 항체
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
BR112019017241A2 (pt) 2017-04-13 2020-04-14 Agenus Inc anticorpos anti-cd137 e métodos de uso dos mesmos
JP2020517256A (ja) 2017-04-19 2020-06-18 エルスター セラピューティクス， インコーポレイテッド 多重特異性分子およびその使用
AU2018253948A1 (en) 2017-04-20 2019-09-19 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-AXL Antibody-Drug Conjugate
JP7402691B2 (ja) 2017-04-20 2023-12-21 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 抗ｃｄ２５抗体薬物複合体による併用療法
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
WO2018201051A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
WO2018201056A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
EP4328241A2 (en) 2017-04-28 2024-02-28 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific molecules comprising a non-immunoglobulin heterodimerization domain and uses thereof
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
WO2018201014A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Five Prime Therapeutics, Inc. Methods of treatment with cd80 extracellular domain polypeptides
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
EP3618863B1 (en) 2017-05-01 2023-07-26 Agenus Inc. Anti-tigit antibodies and methods of use thereof
AR111658A1 (es) 2017-05-05 2019-08-07 Novartis Ag 2-quinolinonas tricíclicas como agentes antibacteriales
KR102376863B1 (ko) 2017-05-12 2022-03-21 하푼 테라퓨틱스, 인크. 메소텔린 결합 단백질
CN110869392A (zh) 2017-05-16 2020-03-06 百时美施贵宝公司 用抗gitr激动性抗体治疗癌症
WO2018213731A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
US20200270334A1 (en) 2017-05-24 2020-08-27 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
US20200362058A1 (en) 2017-05-24 2020-11-19 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
KR20200010500A (ko) 2017-05-30 2020-01-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-lag-3 항체, pd-1 경로 억제제, 및 면역요법제의 조합을 포함하는 조성물
JP2020522691A (ja) 2017-05-30 2020-07-30 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｌａｇ−３陽性腫瘍の処置
CA3065304A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising an anti-lag-3 antibody or an anti-lag-3 antibody and an anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
WO2018222901A1 (en) 2017-05-31 2018-12-06 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof
EP3630834A1 (en) 2017-05-31 2020-04-08 STCube & Co., Inc. Methods of treating cancer using antibodies and molecules that immunospecifically bind to btn1a1
CA3065929A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Michael Wayne SAVILLE Bispecific antibodies that bind cd123 and cd3
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
EP3630126A4 (en) * 2017-06-02 2021-03-17 The Penn State Research Foundation CERAMIDE NANOLIPOSOMES, COMPOSITIONS AND METHODS OF USE FOR IMMUNOTHERAPY
WO2018223101A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Juno Therapeutics, Inc. Articles of manufacture and methods for treatment using adoptive cell therapy
CN110997724A (zh) 2017-06-06 2020-04-10 斯特库伯株式会社 使用结合btn1a1或btn1a1-配体的抗体和分子治疗癌症的方法
MX2019015042A (es) 2017-06-14 2020-08-06 Adc Therapeutics Sa Regimen de dosificacion.
JP7433910B2 (ja) 2017-06-22 2024-02-20 ノバルティス アーゲー Ｃｄ７３に対する抗体分子及びその使用
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
JP2020526194A (ja) 2017-06-29 2020-08-31 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 免疫療法薬と関連する毒性を評価するためのマウスモデル
US11285149B2 (en) 2017-07-28 2022-03-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Enhanced immunotherapy of cancer using targeted transcriptional modulators
WO2019023624A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company PREDICTIVE PERIPHERAL BLOOD BIOMARKER FOR INHIBITORS OF CONTROL POINTS
AU2018317390A1 (en) * 2017-08-14 2020-04-02 Cytodigm, Inc. Microparticle formulations of adenosine receptor antagonists for treating cancer
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
SG11202001441WA (en) 2017-08-18 2020-03-30 Tragara Pharmaceuticals Inc Polymorphic form of tg02
IL310079A (en) 2017-08-28 2024-03-01 Bristol Myers Squibb Co TIM-3 antagonists for the treatment and diagnosis of cancer
JP7387585B2 (ja) 2017-09-04 2023-11-28 アジェナス インコーポレイテッド 混合系統白血病（ｍｌｌ）特異的ホスホペプチドに結合するｔ細胞受容体およびその使用方法
EP3679070A1 (en) 2017-09-07 2020-07-15 Augusta University Research Institute, Inc. Antibodies to programmed cell death protein 1
CN109662966A (zh) * 2017-10-16 2019-04-23 北京莱科金基因科技有限责任公司 伊曲茶碱在制备用于肿瘤治疗的药物中的用途
WO2019077062A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Vivia Biotech, S.L. C-CELLS ACTIVATED BY BIT
WO2019089858A2 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
KR20200116077A (ko) 2017-11-01 2020-10-08 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 B 세포 성숙 항원에 특이적인 키메라 항원 수용체 및 암호화 폴리뉴클레오타이드
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
JP2021503478A (ja) 2017-11-16 2021-02-12 ノバルティス アーゲー 組み合わせ治療
JP2021503458A (ja) 2017-11-17 2021-02-12 ノバルティス アーゲー 新規のジヒドロイソキサゾール化合物及びｂ型肝炎治療のためのそれらの使用
KR102478433B1 (ko) 2017-11-17 2022-12-15 머크 샤프 앤드 돔 엘엘씨 이뮤노글로불린-유사 전사체 3 (ilt3)에 대해 특이적인 항체 및 그의 용도
KR20200096253A (ko) 2017-11-30 2020-08-11 노파르티스 아게 Bcma-표적화 키메라 항원 수용체, 및 이의 용도
WO2019113464A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules and uses thereof
US11946094B2 (en) 2017-12-10 2024-04-02 Augusta University Research Institute, Inc. Combination therapies and methods of use thereof
EP3724225A1 (en) 2017-12-15 2020-10-21 Juno Therapeutics, Inc. Anti-cct5 binding molecules and methods of use thereof
WO2019123285A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Novartis Ag Fused tricyclic pyrazolo-dihydropyrazinyl-pyridone compounds as antivirals
US11324774B2 (en) 2018-01-05 2022-05-10 Augusta University Research Institute, Inc. Compositions of oral alkaline salts and metabolic acid inducers and uses thereof
WO2019140322A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 KDAc Therapeutics, Inc. Combination of a selective histone deacetylase 3 (hdac3) inhibitor and an immunotherapy agent for the treatment of cancer
CA3084370A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-il-8 antibodies and anti-pd-1 antibodies for treating cancer
CA3096287A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
WO2019147670A1 (en) 2018-01-23 2019-08-01 Nextcure, Inc. B7-h4 antibodies and methods of use thereof
JP7383620B2 (ja) 2018-01-31 2023-11-20 セルジーン コーポレイション 養子細胞療法およびチェックポイント阻害剤を使用する併用療法
WO2019149716A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies comprising an antigen-binding site binding to lag3
US20200405806A1 (en) 2018-02-08 2020-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination of a tetanus toxoid, anti-ox40 antibody and/or anti-pd-1 antibody to treat tumors
US20200407365A1 (en) 2018-02-28 2020-12-31 Novartis Ag Indole-2-carbonyl compounds and their use for the treatment of hepatitis b
US20210002373A1 (en) 2018-03-01 2021-01-07 Nextcure, Inc. KLRG1 Binding Compositions and Methods of Use Thereof
AU2019232625A1 (en) 2018-03-07 2020-09-17 Pfizer Inc. Anti-PD-1 antibody compositions
JP2021517589A (ja) 2018-03-12 2021-07-26 アンセルム（アンスティチュート・ナシオナル・ドゥ・ラ・サンテ・エ・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・メディカル） 癌の治療のための化学免疫療法を増強するためのカロリー制限模倣物の使用
US20210009711A1 (en) 2018-03-14 2021-01-14 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
KR102411489B1 (ko) 2018-03-14 2022-06-23 서피스 온콜로지, 인크. Cd39에 결합하는 항체 및 이의 용도
EP3765517A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
WO2019183036A1 (en) * 2018-03-19 2019-09-26 Innovate Biopharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for potentiating immune checkpoint inhibitor therapy
WO2019195658A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Sting levels as a biomarker for cancer immunotherapy
CA3096674A1 (en) 2018-04-12 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Anticancer combination therapy with cd73 antagonist antibody and pd-1/pd-l1 axis antagonist antibody
EP3782618A4 (en) 2018-04-16 2022-01-26 OnQuality Pharmaceuticals China Ltd. METHOD OF PREVENTING OR TREATING SIDE EFFECTS OF CANCER THERAPY
KR20210011919A (ko) 2018-04-17 2021-02-02 셀덱스 쎄라퓨틱스, 인크. 항-cd27 항체 및 항-pd-l1 항체 및 이중특이적 작제물
IL278090B1 (en) 2018-04-18 2024-03-01 Xencor Inc Proteins from heterodimeric il-15/il-15rα ohi-fc and their uses
CA3097593A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
MA52363A (fr) 2018-04-26 2021-03-03 Agenus Inc Compositions peptidiques de liaison à une protéine de choc thermique (hsp) et leurs méthodes d'utilisation
US20210047405A1 (en) 2018-04-27 2021-02-18 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
WO2019213282A1 (en) 2018-05-01 2019-11-07 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
JP2021524449A (ja) 2018-05-23 2021-09-13 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 分子アジュバント
TW202015726A (zh) 2018-05-30 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
EP3801766A1 (en) 2018-05-31 2021-04-14 Novartis AG Hepatitis b antibodies
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
KR20210016426A (ko) 2018-06-01 2021-02-15 노파르티스 아게 Cd123 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체의 투약
AU2019277029C1 (en) 2018-06-01 2024-01-04 Novartis Ag Binding molecules against BCMA and uses thereof
US20210221908A1 (en) 2018-06-03 2021-07-22 Lamkap Bio Beta Ltd. Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
US11505782B2 (en) 2018-06-04 2022-11-22 Calidi Biotherapeutics, Inc. Cell-based vehicles for potentiation of viral therapy
WO2019241426A1 (en) 2018-06-13 2019-12-19 Novartis Ag Bcma chimeric antigen receptors and uses thereof
TW202005985A (zh) 2018-06-21 2020-02-01 美商再生元醫藥公司 用雙特異性抗ＣＤ３ｘＭＵＣ１６抗體及抗ＰＤ－１抗體治療癌症的方法
AU2019297451A1 (en) 2018-07-03 2021-01-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
RS64759B1 (sr) 2018-07-10 2023-11-30 Novartis Ag 3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion derivati i njihova primena u lečenju bolesti zavisnih od cink prsta 2 (ikzf2) iz porodice ikaros
US20210277135A1 (en) 2018-07-13 2021-09-09 Bristol-Myers Squibb Company Ox-40 agonist, pd-1 pathway inhibitor and ctla-4 inhibitor combination for use in a method of treating a cancer or a solid tumor
WO2020021061A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Humanized anti-pd-1 antibodies and uses thereof
BR112021000511A2 (pt) 2018-07-26 2021-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Terapia de combinação de lag-3 para o tratamento de câncer
AU2019328632A1 (en) 2018-08-27 2021-03-25 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Combination therapies comprising CD137/HER2 bispecific agents and PD-1 axis inhibitors and uses thereof
CN109053895B (zh) * 2018-08-30 2020-06-09 中山康方生物医药有限公司 抗pd-1-抗vegfa的双功能抗体、其药物组合物及其用途
US20210340279A1 (en) 2018-08-31 2021-11-04 Yale University Compositions and methods of using cell-penetrating antibodies in combination with immune checkpoint modulators
WO2020048942A1 (en) 2018-09-04 2020-03-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for enhancing cytotoxic t lymphocyte-dependent immune responses
CN112823167A (zh) 2018-09-07 2021-05-18 辉瑞大药厂 抗-αvβ8抗体和组合物及其用途
WO2020053742A2 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Novartis Ag Anti-hla-hbv peptide antibodies
AU2019339777B2 (en) 2018-09-12 2022-09-01 Novartis Ag Antiviral pyridopyrazinedione compounds
WO2020058372A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of cancers resistant to immune checkpoint therapy
WO2020061376A2 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
JP7425049B2 (ja) 2018-09-25 2024-01-30 ハープーン セラピューティクス，インク． Ｄｌｌ３結合タンパク質および使用方法
AU2019346645A1 (en) 2018-09-27 2021-04-29 Marengo Therapeutics, Inc. CSF1R/CCR2 multispecific antibodies
US20220047633A1 (en) 2018-09-28 2022-02-17 Novartis Ag Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
US20210347851A1 (en) 2018-09-28 2021-11-11 Novartis Ag Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
CA3113379A1 (en) 2018-09-29 2020-04-02 Novartis Ag Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
WO2020070053A1 (en) 2018-10-01 2020-04-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of inhibitors of stress granule formation for targeting the regulation of immune responses
JP2022503959A (ja) 2018-10-03 2022-01-12 ゼンコア インコーポレイテッド Ｉｌ－１２ヘテロ二量体ｆｃ－融合タンパク質
BR112021006783A2 (pt) 2018-10-12 2021-07-13 Xencor, Inc. proteína de fusão fc heterodimérica de il-15/r¿ direcionada, composição de ácido nucleico, composição de vetor de expressão, célula hospedeira, e, métodos de produção da proteína de fusão fc heterodimérica de il-15/r¿ direcionada e de tratamento de um câncer.
AU2019360044A1 (en) 2018-10-17 2021-05-27 Biolinerx Ltd. Treatment of metastatic pancreatic adenocarcinoma
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
WO2020092854A2 (en) 2018-11-01 2020-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for g protein-coupled receptor class c group 5 member d (gprc5d)
WO2020092848A2 (en) 2018-11-01 2020-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
US20220001026A1 (en) 2018-11-08 2022-01-06 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
US20210388091A1 (en) 2018-11-14 2021-12-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Intralesional administration of pd-1 inhibitors for treating skin cancer
CA3119563A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Bayer Aktiengesellschaft Pharmaceutical combination of anti-ceacam6 and either anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibodies for the treatment of cancer
JP2022513062A (ja) 2018-11-16 2022-02-07 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂ細胞悪性腫瘍を処置するために、操作されたｔ細胞を投薬する方法
CA3119341A1 (en) 2018-11-16 2020-05-22 Neoimmunetech, Inc. Method of treating a tumor with a combination of il-7 protein and an immune checkpoint inhibitor
EP3886842A1 (en) 2018-11-26 2021-10-06 Debiopharm International SA Combination treatment of hiv infections
WO2020109355A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and kit for assaying lytic potential of immune effector cells
JP2022513685A (ja) 2018-11-30 2022-02-09 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 養子細胞療法を用いた処置のための方法
EP3891270A1 (en) 2018-12-07 2021-10-13 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Use of cd26 and cd39 as new phenotypic markers for assessing maturation of foxp3+ t cells and uses thereof for diagnostic purposes
WO2020127059A1 (en) 2018-12-17 2020-06-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of sulconazole as a furin inhibitor
AU2019402189B2 (en) 2018-12-20 2023-04-13 Novartis Ag Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
WO2020132646A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric fc fusion proteins containing il-15/il-15ra and nkg2d antigen binding domains
BR112021011900A2 (pt) 2018-12-21 2021-09-08 Novartis Ag Anticorpos para pmel17 e conjugados dos mesmos
US20220054524A1 (en) 2018-12-21 2022-02-24 Onxeo New conjugated nucleic acid molecules and their uses
CA3126741A1 (en) 2019-01-15 2020-07-23 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Mutated interleukin-34 (il-34) polypeptides and uses thereof in therapy
KR20210143718A (ko) 2019-01-17 2021-11-29 조지아 테크 리서치 코포레이션 산화된 콜레스테롤을 함유하는 약물 전달 시스템
BR112021013965A2 (pt) 2019-01-21 2021-09-21 Sanofi Rna terapêutico e anticorpos anti-pd1 para cânceres de tumor sólido em estágio avançado
PE20212198A1 (es) 2019-01-29 2021-11-16 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores quimericos de antigenos especificos para receptor 1 huerfano tipo receptor tirosina-cinasa (ror1)
AU2020222346B2 (en) 2019-02-15 2021-12-09 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20220107320A1 (en) 2019-02-15 2022-04-07 Incelldx, Inc. Assaying Bladder-Associated Samples, Identifying and Treating Bladder-Associated Neoplasia, and Kits for Use Therein
EA202192019A1 (ru) 2019-02-15 2021-11-02 Новартис Аг Производные 3-(1-оксо-5-(пиперидин-4-ил)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона и пути их применения
WO2020169472A2 (en) 2019-02-18 2020-08-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods of inducing phenotypic changes in macrophages
EP3927371A1 (en) 2019-02-22 2021-12-29 Novartis AG Combination therapies of egfrviii chimeric antigen receptors and pd-1 inhibitors
WO2020176699A1 (en) 2019-02-28 2020-09-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Administration of pd-1 inhibitors for treating skin cancer
AU2020231343A1 (en) 2019-03-06 2021-10-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. IL-4/IL-13 pathway inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
SG11202110449YA (en) 2019-03-26 2021-10-28 Univ Michigan Regents Small molecule degraders of stat3
EP3947403A1 (en) 2019-03-29 2022-02-09 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
JP2022520287A (ja) * 2019-04-02 2022-03-29 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 疾患の治療のための転写インヒビターと免疫チェックポイントインヒビターの組み合わせ
US20220177978A1 (en) 2019-04-02 2022-06-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods of predicting and preventing cancer in patients having premalignant lesions
US20220160692A1 (en) 2019-04-09 2022-05-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of sk2 inhibitors in combination with immune checkpoint blockade therapy for the treatment of cancer
EP3956446A1 (en) 2019-04-17 2022-02-23 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treatment of nlrp3 inflammasome mediated il-1beta dependent disorders
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
JP2022532490A (ja) 2019-05-13 2022-07-15 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 癌の治療における有効性の増強のためのｐｄ－１阻害剤とｌａｇ－３阻害剤の組み合わせ
JP2022533791A (ja) 2019-05-20 2022-07-25 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー ボロン酸エステルプロドラッグおよびそれらの使用
EP3976090A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 Pfizer Inc. Combination therapies using cdk inhibitors
CN114222729A (zh) 2019-06-12 2022-03-22 范德比尔特大学 氨基酸转运抑制剂及其用途
CA3141414A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Vanderbilt University Dibenzylamines as amino acid transport inhibitors
WO2020255009A2 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 antibody
CN114630675A (zh) 2019-06-18 2022-06-14 爱尔兰詹森科学公司 乙型肝炎病毒(hbv)疫苗和抗pd-1或抗pd-l1抗体的组合
MX2022000550A (es) 2019-07-16 2022-02-10 Univ Michigan Regents Imidazopirimidinas como inhibidores de eed y uso de estas.
BR112022002013A2 (pt) * 2019-08-02 2022-03-29 Akeso Pharmaceuticals Inc Anticorpo biespecífico anti-ctla4/anti-pd-1 e uso do mesmo
EP4007592A1 (en) 2019-08-02 2022-06-08 LanthioPep B.V. Angiotensin type 2 (at2) receptor agonists for use in the treatment of cancer
EP4013788A1 (en) 2019-08-12 2022-06-22 Purinomia Biotech, Inc. Methods and compositions for promoting and potentiating t-cell mediated immune responses through adcc targeting of cd39 expressing cells
GB201912107D0 (en) 2019-08-22 2019-10-09 Amazentis Sa Combination
WO2021041532A1 (en) 2019-08-26 2021-03-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of heparin to promote type 1 interferon signaling
WO2021041664A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon e3 ligase inhibitors
US11680098B2 (en) 2019-08-30 2023-06-20 Agenus Inc. Antibodies that specifically bind human CD96
WO2021055329A1 (en) 2019-09-16 2021-03-25 Surface Oncology, Inc. Anti-cd39 antibody compositions and methods
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
CN114786776A (zh) 2019-09-18 2022-07-22 拉姆卡普生物阿尔法股份公司 针对ceacam5和cd3的双特异性抗体
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
MX2022003192A (es) 2019-09-18 2022-04-11 Novartis Ag Proteinas de fusion nkg2d y sus usos.
CN115023267A (zh) 2019-09-19 2022-09-06 密歇根大学董事会 螺环雄激素受体蛋白质降解剂
AU2020353672A1 (en) 2019-09-25 2022-03-31 Surface Oncology, LLC Anti-IL-27 antibodies and uses thereof
MX2022003357A (es) 2019-09-25 2022-05-03 Seagen Inc Combinación de anticuerpo anti-cd30 conjugado con un farmaco, anti-pd-1 y quimioterapia para el tratamiento de cánceres hematopoyéticos.
TW202126649A (zh) 2019-09-26 2021-07-16 瑞士商諾華公司 抗病毒吡唑并吡啶酮化合物
EP3800201A1 (en) 2019-10-01 2021-04-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd28h stimulation enhances nk cell killing activities
AU2020358726A1 (en) 2019-10-01 2022-04-07 Silverback Therapeutics, Inc. Combination therapy with immune stimulatory conjugates
US11851466B2 (en) 2019-10-03 2023-12-26 Xencor, Inc. Targeted IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
EP4037710A1 (en) 2019-10-04 2022-08-10 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of ovarian cancer, breast cancer or pancreatic cancer
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
US20220395553A1 (en) 2019-11-14 2022-12-15 Cohbar, Inc. Cxcr4 antagonist peptides
WO2021101271A1 (ko) * 2019-11-20 2021-05-27 주식회사 지아이셀 T 세포 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 t 세포의 배양 방법
JP2023503161A (ja) 2019-11-26 2023-01-26 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９及びｃｄ２２キメラ抗原受容体及びその使用
WO2021108025A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Massachusetts Institute Of Technology Cell-based cancer vaccines and cancer therapies
GB201917254D0 (en) 2019-11-27 2020-01-08 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
EP3920976B1 (en) 2019-12-04 2023-07-19 Orna Therapeutics, Inc. Circular rna compositions and methods
US11897950B2 (en) 2019-12-06 2024-02-13 Augusta University Research Institute, Inc. Osteopontin monoclonal antibodies
MX2022006891A (es) 2019-12-09 2022-09-09 Seagen Inc Terapia combinada con liv1-adc y antagonista de pd-1.
WO2021123996A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Novartis Ag Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases
WO2021138407A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
CN111110655B (zh) * 2020-01-20 2020-12-25 山东大学 一种纳米复合物及其制备方法和应用
CA3165460A1 (en) 2020-01-28 2021-08-05 Genentech, Inc. Il15/il15r alpha heterodimeric fc-fusion proteins for the treatment of cancer
WO2021152548A1 (en) 2020-01-30 2021-08-05 Benitah Salvador Aznar Combination therapy for treatment of cancer and cancer metastasis
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
IL295979A (en) 2020-03-06 2022-10-01 Ona Therapeutics S L Anti-cd36 antibodies and their use for cancer treatment
CN116034114A (zh) 2020-03-20 2023-04-28 奥纳治疗公司 环状rna组合物和方法
US20230159573A1 (en) 2020-03-26 2023-05-25 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule stat protein degraders
KR20230009386A (ko) 2020-04-10 2023-01-17 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｂ-세포 성숙 항원을 표적화하는 키메라 항원 수용체로 조작된 세포 요법 관련 방법 및 용도
US20230181756A1 (en) 2020-04-30 2023-06-15 Novartis Ag Ccr7 antibody drug conjugates for treating cancer
MX2022013466A (es) 2020-05-01 2022-11-16 Ngm Biopharmaceuticals Inc Agentes de union a ilt y metodos para su uso.
AU2021270750A1 (en) 2020-05-13 2022-12-08 Massachusetts Institute Of Technology Compositions of polymeric microdevices and their use in cancer immunotherapy
JP2023528017A (ja) 2020-05-26 2023-07-03 アンセルム（アンスティチュート・ナシオナル・ドゥ・ラ・サンテ・エ・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・メディカル） 重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ｓａｒｓ－ｃｏｖ－２）ポリペプチドおよびワクチン目的でのその使用
CN115666724A (zh) 2020-05-26 2023-01-31 瑞泽恩制药公司 通过施用pd-1抑制剂抗体西米普利单抗来治疗宫颈癌的方法
WO2021243207A1 (en) 2020-05-28 2021-12-02 Modernatx, Inc. Use of mrnas encoding ox40l, il-23 and il-36gamma for treating cancer
US11767353B2 (en) 2020-06-05 2023-09-26 Theraly Fibrosis, Inc. Trail compositions with reduced immunogenicity
EP4165169A1 (en) 2020-06-11 2023-04-19 Novartis AG Zbtb32 inhibitors and uses thereof
TW202214857A (zh) 2020-06-19 2022-04-16 法商昂席歐公司 新型結合核酸分子及其用途
WO2021260528A1 (en) 2020-06-23 2021-12-30 Novartis Ag Dosing regimen comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
US20230293530A1 (en) 2020-06-24 2023-09-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. Agents for sensitizing solid tumors to treatment
WO2022011204A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
US20230233690A1 (en) 2020-07-10 2023-07-27 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
CN116134027A (zh) 2020-08-03 2023-05-16 诺华股份有限公司 杂芳基取代的3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途
KR20230056761A (ko) 2020-08-26 2023-04-27 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Pd-1 저해제의 투여에 의한 암 치료 방법
CN116761818A (zh) 2020-08-26 2023-09-15 马伦戈治疗公司 检测trbc1或trbc2的方法
WO2022049526A1 (en) 2020-09-02 2022-03-10 Pharmabcine Inc. Combination therapy of a pd-1 antagonist and an antagonist for vegfr-2 for treating patients with cancer
IL300975A (en) 2020-09-03 2023-04-01 Regeneron Pharma Methods for treating cancer pain by administering a PD-1 inhibitor
EP4211148A1 (en) * 2020-09-08 2023-07-19 Eutilex Co., Ltd. Pd-1 polypeptide variants
CN116472290A (zh) 2020-09-24 2023-07-21 默沙东有限责任公司 程序性死亡受体1（pd-1）抗体和透明质酸酶变体及其片段的稳定制剂及其使用方法
EP4222171A1 (en) 2020-10-02 2023-08-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of antibodies for treating cancer with reduced cytokine release syndrome
WO2022097060A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
EP4244253A1 (en) 2020-11-12 2023-09-20 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Antibodies conjugated or fused to the receptor-binding domain of the sars-cov-2 spike protein and uses thereof for vaccine purposes
WO2022101463A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of the last c-terminal residues m31/41 of zikv m ectodomain for triggering apoptotic cell death
WO2022118197A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Pfizer Inc. Time to resolution of axitinib-related adverse events
US20240050432A1 (en) 2020-12-08 2024-02-15 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
KR20220082558A (ko) 2020-12-10 2022-06-17 재단법인 의약바이오컨버젼스연구단 면역 증진 활성이 있는 신규 crs 단편 펩타이드 및 이의 용도
EP4055055B1 (en) 2020-12-18 2023-11-22 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
JP2024505049A (ja) 2021-01-29 2024-02-02 ノバルティス アーゲー 抗ｃｄ７３及び抗ｅｎｔｐｄ２抗体のための投与方式並びにその使用
WO2022165403A1 (en) 2021-02-01 2022-08-04 Yale University Chemotherapeutic bioadhesive particles with immunostimulatory molecules for cancer treatment
CN115105600A (zh) 2021-02-10 2022-09-27 同润生物医药(上海)有限公司 一种PI3Kδ/γ的药物组合及其治疗肿瘤的方法
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
WO2022187423A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon ligands
WO2022187419A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
CN117677634A (zh) 2021-03-05 2024-03-08 利达提斯有限公司 三聚体多肽及其在治疗癌症中的用途
WO2022204672A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer in immunosuppressed or immunocompromised patients by administering a pd-1 inhibitor
WO2022212400A1 (en) 2021-03-29 2022-10-06 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and treatment with a combination of a checkpoint inhibitor therapy and a car t cell therapy
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
BR112023020832A2 (pt) 2021-04-08 2023-12-19 Marengo Therapeutics Inc Moléculas multifuncionais ligadas a tcr e seus usos
WO2022219080A1 (en) 2021-04-14 2022-10-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New method to improve nk cells cytotoxicity
WO2022221720A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Novartis Ag Antibody drug conjugates and methods for making thereof
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
EP4342492A1 (en) 2021-05-21 2024-03-27 Tianjin Lipogen Technology Co., Ltd Pharmaceutical combination and use thereof
CN117412767A (zh) 2021-05-25 2024-01-16 雪绒花免疫公司 C-x-c基序趋化因子受体6（cxcr6）结合分子及其使用方法
AU2022280921A1 (en) 2021-05-26 2023-12-07 Centro De Inmunologia Molecular Use of therapeutic compositions for the treatment of patients with tumours of epithelial origin
TW202307210A (zh) 2021-06-01 2023-02-16 瑞士商諾華公司 Ｃｄ１９和ｃｄ２２嵌合抗原受體及其用途
WO2022256538A1 (en) 2021-06-03 2022-12-08 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and cetuximab
WO2023280790A1 (en) 2021-07-05 2023-01-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Gene signatures for predicting survival time in patients suffering from renal cell carcinoma
AU2022314735A1 (en) 2021-07-19 2024-02-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of checkpoint inhibitors and an oncolytic virus for treating cancer
WO2023007472A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
WO2023012147A1 (en) 2021-08-03 2023-02-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies and methods of use
WO2023015198A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Genentech, Inc. Il15/il15r alpha heterodimeric fc-fusion proteins for the expansion of nk cells in the treatment of solid tumours
AU2022340907A1 (en) 2021-09-02 2024-03-07 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Anti-cecam6 antibodies with reduced side-effects
AU2022341239A1 (en) 2021-09-08 2024-03-21 Redona Therapeutics, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
TW202327595A (zh) 2021-10-05 2023-07-16 美商輝瑞大藥廠 用於治療癌症之氮雜內醯胺化合物的組合
CA3234821A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Suman Kumar VODNALA Methods for culturing immune cells
WO2023079428A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Pfizer Inc. Combination therapies using tlr7/8 agonist
WO2023088968A1 (en) 2021-11-17 2023-05-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Universal sarbecovirus vaccines
WO2023111203A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Onxeo New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023122573A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
WO2023130081A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Neoimmunetech, Inc. Method of treating a tumor with a combination of il-7 protein and vegf antagonist
WO2023133280A1 (en) 2022-01-07 2023-07-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating recurrent ovarian cancer with bispecific anti-muc16 x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
CN114432441B (zh) * 2022-01-11 2023-04-25 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 一种pd-1修饰的金复合硒化铜纳米粒子及其在介导光热靶向治疗癌症方面的应用
WO2023154905A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 Gilead Sciences, Inc. Antiviral pyrazolopyridinone compounds
WO2023154799A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Combination immunotherapy for treating cancer
WO2023159102A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combinations of checkpoint inhibitors and oncolytic virus for treating cancer
US20230277669A1 (en) 2022-02-24 2023-09-07 Amazentis Sa Uses of urolithins
WO2023177772A1 (en) 2022-03-17 2023-09-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating recurrent epithelioid sarcoma with bispecific anti-muc16 x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2023192478A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-il-8 antibodies and anti-pd-1 antibodies for treating cancer
WO2023196988A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Modernatx, Inc. Methods of use of mrnas encoding il-12
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
WO2023224912A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating metastatic castration-resistant prostate cancer with bispecific anti-psma x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2023230554A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Pfizer Inc. Combination of a braf inhibitor, an egfr inhibitor, and a pd-1 antagonist for the treatment of braf v600e-mutant, msi-h/dmmr colorectal cancer
WO2023242351A1 (en) 2022-06-16 2023-12-21 Lamkap Bio Beta Ag Combination therapy of bispecific antibodies against ceacam5 and cd47 and bispecific antibodies against ceacam5 and cd3
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
WO2024015803A2 (en) 2022-07-11 2024-01-18 Autonomous Therapeutics, Inc. Encrypted rna and methods of its use
US20240043560A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of Treating Metastatic Castration-Resistant Prostate Cancer with Bispecific Anti-PSMA x Anti-CD28 Antibodies in Combination with Anti-PD-1 Antibodies
WO2024031091A2 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for gprc5d and bcma
WO2024040175A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Pulmatrix Operating Company, Inc. Methods for treating cancer using inhaled angiogenesis inhibitor
WO2024040264A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods for targeting dendritic cell lectins
WO2024052356A1 (en) 2022-09-06 2024-03-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Inhibitors of the ceramide metabolic pathway for overcoming immunotherapy resistance in cancer
WO2024076926A1 (en) 2022-10-03 2024-04-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer with bispecific egfr x cd28 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2024081736A2 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Yale University Compositions and methods of using cell-penetrating antibodies

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060159685A1 (en) * 2000-06-06 2006-07-20 Mikesell Glen E B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
US20060292593A1 (en) * 2000-04-28 2006-12-28 The Johns Hopkins University Dendritic cell co-stimulatory molecules
US20070231344A1 (en) * 2005-10-28 2007-10-04 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Conjugate vaccines for non-proteinaceous antigens

Family Cites Families (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2011464A (en) 1933-03-23 1935-08-13 Winkler Alfred Device for removing from a pile of sheets the sheet lowermost at the time
US4272398A (en) 1978-08-17 1981-06-09 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Microencapsulation process
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4769330A (en) 1981-12-24 1988-09-06 Health Research, Incorporated Modified vaccinia virus and methods for making and using the same
US5155020A (en) 1989-03-08 1992-10-13 Health Research Inc. Recombinant poxvirus host range selection system
US4650764A (en) 1983-04-12 1987-03-17 Wisconsin Alumni Research Foundation Helper cell
US4861719A (en) 1986-04-25 1989-08-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center DNA constructs for retrovirus packaging cell lines
CH671155A5 (ru) 1986-08-18 1989-08-15 Clinical Technologies Ass
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US4980289A (en) 1987-04-27 1990-12-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Promoter deficient retroviral vector
US4861627A (en) 1987-05-01 1989-08-29 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of multiwall polymeric microcapsules
US6699475B1 (en) 1987-09-02 2004-03-02 Therion Biologics Corporation Recombinant pox virus for immunization against tumor-associated antigens
US6018026A (en) 1988-01-22 2000-01-25 Zymogenetics, Inc. Biologically active dimerized and multimerized polypeptide fusions
US5750375A (en) 1988-01-22 1998-05-12 Zymogenetics, Inc. Methods of producing secreted receptor analogs and biologically active dimerized polypeptide fusions
US5567584A (en) 1988-01-22 1996-10-22 Zymogenetics, Inc. Methods of using biologically active dimerized polypeptide fusions to detect PDGF
ES2092468T3 (es) 1988-01-22 1996-12-01 Zymogenetics Inc Metodos para producir analogos de receptores secretados.
US5278056A (en) 1988-02-05 1994-01-11 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Retroviral packaging cell lines and process of using same
US5190929A (en) 1988-05-25 1993-03-02 Research Corporation Technologies, Inc. Cyclophosphamide analogs useful as anti-tumor agents
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
US5124263A (en) 1989-01-12 1992-06-23 Wisconsin Alumni Research Foundation Recombination resistant retroviral helper cell and products produced thereby
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5225336A (en) 1989-03-08 1993-07-06 Health Research Incorporated Recombinant poxvirus host range selection system
US5175099A (en) 1989-05-17 1992-12-29 Research Corporation Technologies, Inc. Retrovirus-mediated secretion of recombinant products
US5240846A (en) 1989-08-22 1993-08-31 The Regents Of The University Of Michigan Gene therapy vector for cystic fibrosis
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5283173A (en) 1990-01-24 1994-02-01 The Research Foundation Of State University Of New York System to detect protein-protein interactions
US5204243A (en) 1990-02-14 1993-04-20 Health Research Incorporated Recombinant poxvirus internal cores
US6641809B1 (en) 1990-03-26 2003-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Method of regulating cellular processes mediated by B7 and CD28
WO1992016192A1 (en) 1991-03-15 1992-10-01 Amgen Inc. Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
AU2880192A (en) * 1991-10-21 1993-05-21 Sphinx Pharmaceuticals Corporation 2-aminopropan-1,3-diol chemotherapeutic agents
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
TW225528B (ru) 1992-04-03 1994-06-21 Ciba Geigy Ag
US5521184A (en) 1992-04-03 1996-05-28 Ciba-Geigy Corporation Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
US5942607A (en) 1993-07-26 1999-08-24 Dana-Farber Cancer Institute B7-2: a CTLA4/CD28 ligand
US5861310A (en) 1993-11-03 1999-01-19 Dana-Farber Cancer Institute Tumor cells modified to express B7-2 with increased immunogenicity and uses therefor
US5451569A (en) 1994-04-19 1995-09-19 Hong Kong University Of Science And Technology R & D Corporation Limited Pulmonary drug delivery system
US5632983A (en) * 1994-11-17 1997-05-27 University Of South Florida Method for treating secondary immunodeficiency
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5675848A (en) 1995-10-18 1997-10-14 Mallinckrodt Medical, Inc. Inflatable blanket having perforations of different sizes
US6750334B1 (en) 1996-02-02 2004-06-15 Repligen Corporation CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor
CA2279547A1 (en) 1997-01-31 1998-08-06 University Of Rochester Chimeric antibody fusion proteins for the recruitment and stimulation of an antitumor immune response
US7411051B2 (en) 1997-03-07 2008-08-12 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies to HDPPA04 polypeptide
US20070224663A1 (en) 1997-03-07 2007-09-27 Human Genome Sciences, Inc. Human Secreted Proteins
US7368531B2 (en) 1997-03-07 2008-05-06 Human Genome Sciences, Inc. Human secreted proteins
US20060223088A1 (en) 1997-03-07 2006-10-05 Rosen Craig A Human secreted proteins
US6468546B1 (en) * 1998-12-17 2002-10-22 Corixa Corporation Compositions and methods for therapy and diagnosis of ovarian cancer
WO2001001137A1 (en) 1999-06-30 2001-01-04 Children's Medical Center Corporation Fusion protein and uses thereof
EP1074617A3 (en) 1999-07-29 2004-04-21 Research Association for Biotechnology Primers for synthesising full-length cDNA and their use
US6808710B1 (en) 1999-08-23 2004-10-26 Genetics Institute, Inc. Downmodulating an immune response with multivalent antibodies to PD-1
US6803192B1 (en) 1999-11-30 2004-10-12 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1, a novel immunoregulatory molecule
CA2399358C (en) 2000-02-15 2006-03-21 Sugen, Inc. Pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors
EP1276849A4 (en) 2000-04-12 2004-06-09 Human Genome Sciences Inc ALBUMIN FUSION PROTEINS
WO2001094413A2 (en) * 2000-06-06 2001-12-13 Bristol-Myers Squibb Company B7-related nucleic acids and polypeptides and their uses for immunomodulation
WO2001097843A2 (en) * 2000-06-22 2001-12-27 University Of Iowa Research Foundation Methods for enhancing antibody-induced cell lysis and treating cancer
WO2002000730A2 (en) * 2000-06-28 2002-01-03 Genetics Institute, Llc. Pd-l2 molecules: novel pd-1 ligands and uses therefor
WO2002002587A1 (en) 2000-06-30 2002-01-10 Human Genome Sciences, Inc. B7-like polynucleotides, polypeptides, and antibodies
US6635750B1 (en) 2000-07-20 2003-10-21 Millennium Pharmaceuticals, Inc. B7-H2 nucleic acids, members of the B7 family
MXPA03002413A (es) * 2000-09-20 2003-06-19 Amgen Inc Moleculas tipo b7 y uso de las mismas.
US7182942B2 (en) 2000-10-27 2007-02-27 Irx Therapeutics, Inc. Vaccine immunotherapy for immune suppressed patients
US7408041B2 (en) 2000-12-08 2008-08-05 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
US6551786B2 (en) 2001-01-04 2003-04-22 Myriad Genetics, Inc. Screen assay for selecting protein-protein interaction modulators
US6743619B1 (en) 2001-01-30 2004-06-01 Nuvelo Nucleic acids and polypeptides
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
WO2002079499A1 (en) 2001-04-02 2002-10-10 Wyeth Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
US20060084794A1 (en) 2001-04-12 2006-04-20 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
AU2002258941A1 (en) 2001-04-20 2002-11-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of enhancing cell responsiveness
GB0121285D0 (en) * 2001-09-03 2001-10-24 Cancer Res Ventures Ltd Anti-cancer combinations
JP2005506073A (ja) 2001-10-19 2005-03-03 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド 二量体化された成長因子及びそれを生成するための材料及び方法
WO2003042402A2 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Agents that modulate immune cell activation and methods of use thereof
US7164500B2 (en) 2002-01-29 2007-01-16 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Method and apparatus for the automatic generation of image capture device control marks
IL149820A0 (en) 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
FI2206517T3 (fi) 2002-07-03 2023-10-19 Ono Pharmaceutical Co Immuunopotentioivia koostumuksia käsittäen anti-PD-L1 -vasta-aineita
US7052694B2 (en) 2002-07-16 2006-05-30 Mayo Foundation For Medical Education And Research Dendritic cell potentiation
NZ538628A (en) 2002-08-12 2008-06-30 Dynavax Tech Corp Immunomodulatory compositions, methods of making, and methods of use thereof
US7432351B1 (en) 2002-10-04 2008-10-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 variants
JP4511943B2 (ja) 2002-12-23 2010-07-28 ワイス エルエルシー Ｐｄ−１に対する抗体およびその使用
ES2729974T3 (es) 2003-01-23 2019-11-07 Ono Pharmaceutical Co Anticuerpo específico de PD-1 y CD3 humanas
CA2516834C (en) 2003-02-27 2013-07-16 Theravision Gmbh Polypeptides and methods for making the same
ES2303132T3 (es) 2003-08-07 2008-08-01 Zymogenetics, Inc. Preparaciones homogeneas de il-29.
EP1732946B1 (en) 2004-03-08 2011-07-27 ZymoGenetics, Inc. Dimeric fusion proteins and materials and methods for producing them
DK1781682T3 (da) 2004-06-24 2013-06-03 Mayo Foundation B7-H5, et kostimulerende polypeptid
US20060099203A1 (en) 2004-11-05 2006-05-11 Pease Larry R B7-DC binding antibody
JP2008507499A (ja) * 2004-07-23 2008-03-13 オーエム ファルマ 併用抗癌療法とその医薬組成物
US20070166281A1 (en) 2004-08-21 2007-07-19 Kosak Kenneth M Chloroquine coupled antibodies and other proteins with methods for their synthesis
MX2007004176A (es) 2004-10-06 2007-06-15 Mayo Foundation B7-h1 y metodos de diagnosis, prognosis, y tratamiento de cancer.
WO2006050172A2 (en) 2004-10-29 2006-05-11 University Of Southern California Combination cancer immunotherapy with co-stimulatory molecules
LT2439273T (lt) * 2005-05-09 2019-05-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Žmogaus monokloniniai antikūnai prieš programuotos mirties 1(pd-1) baltymą, ir vėžio gydymo būdai, naudojant vien tik anti-pd-1 antikūnus arba derinyje su kitais imunoterapiniais vaistais
RU2596491C2 (ru) * 2005-06-08 2016-09-10 Дана-Фарбер Кэнсер Инститьют Способы и композиции для лечения персистирующих инфекций
CN105330741B (zh) * 2005-07-01 2023-01-31 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
GB0519303D0 (en) 2005-09-21 2005-11-02 Oxford Biomedica Ltd Chemo-immunotherapy method
WO2007056539A2 (en) 2005-11-08 2007-05-18 Medarex, Inc. Prophylaxis and treatment of enterocolitis associated with anti-ctla-4 antibody therapy
AU2006320162B2 (en) 2005-12-02 2013-07-25 The Johns Hopkins University Use of high-dose oxazaphosphorine drugs for treating immune disorders
AU2006321593B2 (en) 2005-12-07 2012-10-04 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. CTLA-4 antibody dosage escalation regimens
MX2008007286A (es) 2005-12-08 2008-10-21 Univ Louisville Res Found Ingenieria in vivo de superficie celular.
EP2061504A4 (en) 2006-09-20 2010-01-27 Univ Johns Hopkins COMBINATION THERAPY FOR CANCER AND INFECTION DISEASES WITH ANTI-B7-H1 ANTIBODIES
WO2008037080A1 (en) 2006-09-29 2008-04-03 Universite De Montreal Methods and compositions for immune response modulation and uses thereof
CN101663323A (zh) 2006-12-27 2010-03-03 埃默里大学 用于治疗传染病和肿瘤的组合物和方法
US20100055111A1 (en) * 2007-02-14 2010-03-04 Med. College Of Georgia Research Institute, Inc. Indoleamine 2,3-dioxygenase, pd-1/pd-l pathways, and ctla4 pathways in the activation of regulatory t cells
US8153595B2 (en) 2007-07-13 2012-04-10 The Johns Hopkins University B7-DC variants immunogenic compositions and methods of use thereof
US20090028857A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
WO2009023566A2 (en) 2007-08-09 2009-02-19 Genzyme Corporation Method of treating autoimmune disease with mesenchymal stem cells
JP2011502163A (ja) 2007-10-31 2011-01-20 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート 持続性ウイルス感染を治療するための併用療法
AU2008334063A1 (en) 2007-11-30 2009-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-B7H4 monoclonal antibody-drug conjugate and methods of use
BRPI0907718A2 (pt) 2008-02-11 2017-06-13 Curetech Ltd método para tratar um tumor, método para melhorar a tolerabilidade a pelo menos um agente quimiterápico, método para aumentar a sobrevida de um indivíduo que tem um tumor, método para reduzir ou prevenir recidiva tumoral, uso de um anticorpo monoclonal humanizado ou seu fragmento e anticorpo monoclonal humanizado ou seu fragmento
EP2262531A1 (en) 2008-03-08 2010-12-22 Immungene, Inc. Engineered fusion molecules immunotherapy in cancer and inflammatory diseases
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
SI2113253T1 (sl) 2008-04-30 2010-06-30 Immatics Biotechnologies Gmbh Nove formulacije s tumorjem povezanih peptidov ki se vežejo na molekule humanega levkocitnega antigena HLA razreda I ali II za cepiva
NZ591130A (en) 2008-08-25 2012-09-28 Amplimmune Inc Compositions comprising a PD-1 antagonists and cyclophosphamide and methods of use thereof
US20110159023A1 (en) 2008-08-25 2011-06-30 Solomon Langermann Pd-1 antagonists and methods for treating infectious disease
SI2376535T1 (sl) 2008-12-09 2017-07-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa anti-pd-l1 in njihova uporaba za izboljšanje funkcije celic t
JP2013512251A (ja) 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060292593A1 (en) * 2000-04-28 2006-12-28 The Johns Hopkins University Dendritic cell co-stimulatory molecules
US20060159685A1 (en) * 2000-06-06 2006-07-20 Mikesell Glen E B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
US20070231344A1 (en) * 2005-10-28 2007-10-04 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Conjugate vaccines for non-proteinaceous antigens

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2752562C2 (ru) * 2016-09-14 2021-07-29 Эббви Байотерапьютикс Инк. Антитела к pd-1(cd279)

Also Published As

Publication number Publication date
PT2350129E (pt) 2015-10-02
EP2350129B1 (en) 2015-06-10
CO6341574A2 (es) 2011-11-21
CY1116816T1 (el) 2017-03-15
AU2009288730B2 (en) 2013-06-20
HRP20150933T1 (hr) 2015-10-09
WO2010027423A2 (en) 2010-03-11
US20130230514A1 (en) 2013-09-05
CL2011000423A1 (es) 2012-07-20
US8114845B2 (en) 2012-02-14
CN102203132A (zh) 2011-09-28
MX2011002252A (es) 2011-06-24
EP2927240A1 (en) 2015-10-07
SI2350129T1 (sl) 2015-11-30
EP2350129A4 (en) 2012-04-25
CA2734908A1 (en) 2010-03-11
RS54233B1 (en) 2015-12-31
US20100055102A1 (en) 2010-03-04
SMT201500212B (it) 2015-10-30
EP2350129A2 (en) 2011-08-03
MA32646B1 (fr) 2011-09-01
US20120114649A1 (en) 2012-05-10
PL2350129T3 (pl) 2015-12-31
US8709416B2 (en) 2014-04-29
AU2009288730A1 (en) 2010-03-11
US20120114648A1 (en) 2012-05-10
ZA201101120B (en) 2012-02-29
DOP2011000059A (es) 2011-05-15
ES2545609T3 (es) 2015-09-14
DK2350129T3 (en) 2015-08-31
EA201170373A1 (ru) 2011-10-31
JP5798919B2 (ja) 2015-10-21
WO2010027423A3 (en) 2010-05-06
KR20110050529A (ko) 2011-05-13
EA201500417A1 (ru) 2015-11-30
US8609089B2 (en) 2013-12-17
PE20110435A1 (es) 2011-07-20
HUE027525T2 (en) 2016-11-28
NZ591130A (en) 2012-09-28
JP2012500847A (ja) 2012-01-12
IL211298A0 (en) 2011-04-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA023148B1 (ru) Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение
JP5960597B2 (ja) 癌治療のための併用免疫療法
US20110195068A1 (en) Pd-1 antagonists and methods of use thereof
AU2013240191A1 (en) Methods for treating neoplasia
EA024654B1 (ru) Ингибиторы гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (gm-csf) и интерлейкина-17 (il-17) для терапии
US20230256054A1 (en) Immunity enhancing agent for cancer by allergin-1 antagonist
JP2020508063A5 (ru)
JP2022527643A (ja) がん治療のための免疫療法
US11857601B2 (en) Pharmaceutical composition for cancer treatment comprising fusion protein including IL-2 protein and CD80 protein and anticancer drug
CN110115758B (zh) Pik3ip1蛋白在调节t细胞反应和制备抗肿瘤药物中的应用
RU2812915C2 (ru) Антитела к белку программируемой клеточной смерти 1
US20240058420A1 (en) Pharmaceutical composition for cancer treatment comprising fusion protein including il-2 protein and cd80 protein and anticancer drug
US20230255978A1 (en) Methods for treating glioblastoma
WO2021246757A1 (ko) Il-2 단백질 및 cd80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물
AU2013227994A1 (en) Compositions of PD-1 antagonists and methods of use
JP2022535816A (ja) コラーゲン結合薬物担体を用いてがんを処置するための方法および組成物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU