TWI261056B - Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase - Google Patents

Description

1261056 A7 B7 五、發明説明（1 ) 發明領域 本發明係有關核甞化合物及其特定衍生物，其合成，及 其作為RNA依賴性RNA病毒聚合酶抑制劑之用途。本發明 之化合物係RNA依賴性RNA病毒複製之抑制劑且對於治療 RN A依賴性RN A病毒感染有用。他們作為C型肝炎病毒 (HCV) NS5B聚合S每抑制劑，作為HCV複製抑制劑，及用 於治療C型肝炎感染特別有用。 發明背景 C型肝炎病毒（HCV)感染係一重大之健康問題，其在相 當數目之受感染個體導致慢性肝臟疾病，如肝硬化及肝細 胞癌瘤，據估計佔世界人口之2-15%。根據美國疾病控制 中心之估計，單在美國就有4.5百萬人受感染。根據世界 衛生組織，全球有200百萬以上受感染的個體，且每年有 至少3至4百萬人受到感染。一旦受到感染，約2 0 %的人會 清除該病毒，但其餘的人終其餘生潛伏HCV。百分之十到 二十受到慢性感染的個體最終發展出破壞肝臟之肝硬化或 癌症。該病毒性疾病藉由受污染之血液及血液製品，受污 染之針頭，或性行為由非腸道途徑傳染且由受感染的母親 或帶原之母親垂直傳染給其子代。目前對於HCV感染之治 療限定於以重組干擾素-α單獨或合併核苷類似物核糖病毒 素（ribavirin)之免疫療法，其在臨床上的利益有限。此外 ，尚未建立HCV之疫苗。因此，有迫切需要改良有效對抗 慢性HCV感染之治療劑。HCV感染之最新式治療頃經評論 ，並將以下出版物作為參考文獻·· B.戴默克（Dymock)等人 -6 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1261056 A 7 ________ B7 五、發明説明（2 ) ’ “治療C型肝炎病毒感染之新穎門徑，，，_毒之化學& 1 1: 79-96 (2000) ; H.羅森（R0sen)等人，“C 型 肝炎病毒：目前之瞭解及對於治療之未來遠景”，+日& 5·· 393-399 (1999) ; D·莫拉德波爾（Moradp〇ur)等 人’“目前之C型肝炎療法及其發展，，，歐洲胃腸學及肝臟 iJLiL，11: 1189-1202 (1999) ; R·巴頓史拉吉（Bartens_ chlager) “C型肝炎病毒特異性抗病毒療法之候選標的，，， Interviroj^Y, 40: 378-393 (1997) ; G.M·勞爾（Lauer)及 B_D.渥克（Walker)，“C型肝炎病毒感染，，，盤__英格蘭醫聲期

致，345: 41-52 (2001) ; B.W.戴默克（Dymock)，“浮現之 C 型肝炎病毒感染療法’，，浮現之藥物，6: 13-42 (2001);及 (^克拉博（(：1^1)1))，“哈德-旺旧&1^-冒〇11)氏有關（：型肝炎之 進步燃起之激勵”，科學:506-507 (2001);其全部内容以 參考文獻併入此處。 頃經採取不同的HCV治療門徑，其包括抑制病毒的絲胺 酸蛋白酶（NS3蛋白酶），解螺旋酶，及RNA依賴性尺^^八聚 合酶（NS5B)，及發展疫苗。 HCV病毒粒子係經被膜之有意義股RNA病毒，其為具有 約9 6 0 0個驗基之早一券核糖核菩酸基因組序列，編碼，_約 3,0 10個胺基酸之多聚蛋白。該HCV基因蛋白質產物係由 結構性蛋白質C，E1，及E2，及非結構性蛋白質NS2， NS3，NS4A及NS4B，及NS5A及NS5B所組成。咸信非結 構性（NS)蛋白質提供病毒複製之催化機器。NS3蛋白酶釋 放NS5B，其係來自多聚蛋白鏈之RNA依賴性RNA聚合酶 ----- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（3 ) 。HCV NS5B聚合酶係由單股病毒RNA供作HCV複製循環 中之模板合成雙股RNA時所必需。因此，咸認為NS5B聚 合酶係HCV複製複合體中之一必需組份[參閱K.艾西（Ishi) 等人，“C型肝炎病毒NS5B蛋白質之表現：其RNA聚合酶 活性及與RNA結合之特性描述”，肝臟學，29: 1227-1235 ( 1999)及V.洛曼（Lohmann)等人，“NS5B C型肝炎病毒之 RNA依賴性RNA聚合酶之生化及動力學分析”，病毒學， 249: 108-1 1 8 (199 8)]。抑制HCV NS5B聚合酶防止雙股 HCV RNA形成且因此構成發展HCV特異性抗病毒療法之 吸引人的門徑。 現經本案申請人發現本發明核苷化合物及其特定衍生物 係RNA依賴性RNA病毒複製（且特定言之HCV複製）之強力 抑制劑。這些核苷化合物之5 三磷酸鹽衍生物係RNA依賴 性RNA病毒聚合酶之抑制劑且特定言之係HCV NS5B聚合 酶之抑制劑。本發明之核嘗化合物及其衍生物對於治療 RNA依賴性RNA病毒感染（且特定言之HCV感染）有用。 因此，本發明之一個目的係為提供核苷化合物及其特定 衍生物作為有用之RNA依賴性RNA病毒聚合酶抑制劑且特 定言之作為有用之HCV NS5B聚合酶抑制劑。 本發明之另一目的係為提供核苷化合物及其特定衍生物 作為有用之RNA依賴性RNA病毒複製抑制劑且特定言之作 為有用之C型肝炎病毒複製抑制劑。 本發明之另一目的係為提供於治療RNA依賴性RNA病毒 感染（且特定言之於治療HCV感染）有用之核苷化合物及其 -8- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056 A7 B7 五、發明説明（4 ) 特定衍生物。 本發明之另一目的係提供醫藥組合物，其包含本發明之 核苷化合物聯合醫藥上可接受之載體。 本發明之另一目的係為提供醫藥組合物，其包含本發明 之核甞化合物及其衍生物作為RNA依賴性RNA病毒聚合酶 抑制劑之用途且特定言之作為HCV NS5B聚合酶抑制劑之 用途。 本發明之另一目的係為提供醫藥組合物，其包含本發明 之核甞化合物及其衍生物作為RNA依親性RNA病毒複製抑 制劑之用途且特定言之作為HCV複製抑制劑之用途。 本發明之另一目的係為提供醫藥組合物，其包含本發明 之核苷化合物及其衍生物用於治療RNA依賴性病毒感染且 特定言之用於治療HCV感染。 玎

本發明之另一目的係為提供醫藥組合物，其包含本發明 之核茹化合物及其衍生物組合其他對抗RNA依賴性RNA病 毒且特定言之對抗HCV之活性劑。 本發明之另一目的係為提供抑制RNA依賴性RNA病毒聚 合酶之方法且特定言之提供抑制HCV NS5B聚合酶之方法。 本發明之另一目的係為提供抑制RNA依賴性RNA病毒複 製之方法且特定言之提供抑制HCV複製之方法。 本發明之另一目的係為提供治療RNA依賴性RNA病毒感 染之方法且特定言之提供治療HCV感染之方法。 本發明之另一目的係為提供與其他對抗RNA依賴性RNA 病毒之活性劑組合用於治療RNA依賴性RNA病毒感染之方 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（5 ) 法，且特定言之與其他對抗HVC之活性劑組合用於治療 HCV感染之方法。 本發明之另一目的係為提供核苷化合物及其特定衍生物 及其醫藥組合物用作抑制RNA依賴性RNA病毒複製及/或 治療RNA依賴性病毒感染且特定言之用於抑制HCV複製及 /或治療HCV感染之醫藥品。 本發明之另一目的係為提供本發明之核苷化合物及其特 定衍生物及其醫藥組合物於製造用於抑制RNA依賴性RNA 病毒複製及/或治療RNA依賴性病毒感染且特定言之用於 抑制HCV複製及/或治療HCV感染之醫藥品上之用途。 本發明之上述及其他目的將以如下之詳細說明使其易於 明白。 發明概要 本發明係有關如下指出之立體化學組態結構式I化合物：

R3 R2 或其在醫藥上可接受之鹽； 其中R1係C2_4烯基，C2_4炔基，或CN4烷基，其中烷基係未 經取代的或經以羥基，胺基，CN4烷氧基，CN4烷基硫， 或一至三個氟原子取代的； 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056

係氫，蠢，t # 經基，氫硫基，c〗d煊氯芙，七r ^ 或R1及R2與苴所w^ w烷虱基或Cw烷基； ,„ # 斤附屬之碳原子—起形成3-至6-員飽和單γ 乐統，其視情況 貝靶和早％ R3„ r4, ^ ^ 各有L自〇, S ’及NCo-4烷基之雜原子. 係各自獨立地選自由下列所組成之群··氯，二， 豐氮基，鹵丰，蘇f 鼠基， 橋其r '丁、工土，虱硫基，胺基，Cb4烷氧基，c 婦基，c2_4炔基，为Γ 2·‘ 娘m “烷基’其中烷基係未經取代的或 經U羥基，胺某，r

Cl·4烷虱基，Ci_4烷基硫，或一至二 氟原子取代的； 個 反广氫乂 C1·1。烷基羰基，P3〇9H4，P2〇6H3，或P(〇)R13RU ; R8及？係各自獨立地為氫，曱基，羥基甲基，或氟甲基； R仏氫，cN4烷基，C2_4炔基，鹵素，氰基，羧基，〔μ烷 基氧羰基，疊氮基，胺基，烷基胺基，二（Ci_4烷基）胺 基，羥基，CV0烷氧基，Cl-0烷基硫，Ci_6烷基磺醯基， (C!·4烷基）胺基甲基，或Cu雜環烷基，未經取代的或經 以獨立地選自由下列所組成之群之一至兩個基團取代：自 禾’美里基’胺基，Ci-4烷基，及c1-4烷氧基； R係氫，氰基，硝基，Cu烷基，NHCONH2，CONR12R^2 ，CSNR1V2，COOR12，C(=NH)NH2，μ 基，氧基 ’胺基，CU4烷基胺基，二（Cm烷基）胺基，鹵素，（ι，3_σ号 唾-2-基），（ι，3-賽唑-2-基），或（咪唑-2-基）；其中烷基係 未經取代的或經以獨立地選自由下列所組成之群之一至三 個基團取代··鹵素，胺基，羥基，羧基，及Cl3烷氧基； R1Q及R11係各自獨立地為氫，羥基，鹵素，cN4烷氧基， 胺基’ Cw烷基胺基，二（Cw烷基）胺基，c3_6環烷基胺基 -11 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐）

、裝 -訂

1261056 A7 B7 五、發明説明（7 ) ，二（C3_6環烷基）胺基，或C“雜環烷基，未經取代的或經 以獨立地選自由下列所組成之群之一至兩個基團取代：鹵 素，經基’胺基’ Ci_4烧基’及Ci_4烧氧基； 每個R12係獨立地為氫或Ci_6烷基；且 R13及R14係各自獨立地為羥基，〇CH2CH2SC卜0)(^4烷基 ，〇CH2〇（C = 〇）〇C1·4烷基，NHCHMeC〇2Me，〇CH(C1·4烷 基）0(00)(^-4 烷基，

、裝 ^〇/VsY^S(CH2)i7CH3 〇(CH2)9CH3 或 OC〇(CH2)14CH3 ; 其限制條件為當R1為β-甲基及R4為氫或R4為β-甲基且R1為 氫，R2及R3為α-羥基時，R1G為胺基，且R5，R6，R7，R8 ，及R11為氫時，則R9不能為氰基或C0NH2。 式I化合物作為RNA依賴性RNA病毒聚合酶抑制劑且特

定言之作為HCV NS5B聚合酶抑制劑有用。他們亦係RNA 依賴性RNA病毒複製之抑制劑且特定言之係HCV複製之抑 制劑且對於治療RN A依賴性RN A病毒感染且特定言之用於 % 治療HCV感染有用。 亦包含於本發明之含有該化合物之醫藥組合物係單獨使 用或與其他對抗RN A依賴性RN A病毒（且特定言之對抗 HCV)之活性劑組合，及抑制RNA依賴性RNA病毒複製及 用於治療RN A依賴性RN A病毒感染之方法。 發明之詳細說明 本發明係有關如下指出之立體化學組態結構式I化合物： -12- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056

發明説明

或其在醫藥上可接受之鹽； 其中Rl係C2·4烯基，C2-4炔基，或Cl·4烷基，其中烷基係未 經取代的或經以羥基’胺基，Ci·4烷氧基，Cm烷基硫， 或 至二個氟原子取代的； R、^氫，氟，羥基，氫硫基，Ci·4烷氧基，或cN4烷基； 或R及R-與其所附屬之碳原子一起形成3_至6_員飽和單環 糸統，其視情況地含有選自〇，s，及NC〇_4烷基之雜原子； R及R係各自獨立地選自由下列所組成之群：氫，氰基， 豐氮基，鹵素，羥基，氫硫基，胺基，Cw烷氧基，& ^ 烯基，Cw炔基，及Ci_4烷基，其中烷基係未經取代的或 經以經基，胺基，Cw烷氧基，Cw烷基硫，或—至三個 氟原子取代的； 係氫，C!，烷基羰基，ρ3〇9Η4，P2〇6h3，或p(〇)r13r14 ; R6及R7各自獨立地為氫，甲基，羥基甲基，或氟甲基； R係氫，Cm烷基，c：2·4炔基-，·鹵素，氰基，羧基， 基氧羰基，疊氮基，胺基，烷基胺基，二（CM烷美）胺 基，羥基，C!.6烷氧基，Cw烷基硫，Gy烷基磺醯基女 (c Μ烷基）G_2胺基甲基，或c“雜環烷基，未經取代的戋麫 -13- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1261056 A7 ____ B7 五、發明説明（9 ) 以獨立地選自由下列所組成之群之一至兩個基團取代：鹵 素’羥基，胺基，Cw烷基，及CN4烷氧基； R9係氫，氰基，硝基，Ci.3烷基，NHC〇NH2，C〇NR12R12 ，CSNRPrU，c〇〇R12，C(二 NH)NH2，羥基，Ci.3 烷氧基 私基’ C】·#烧基胺基’二（C!_4烧基）胺基，鹵素，（1，3-口号 唾-2-基），（1，3_賽唑_2_基），或（咪唑_2_基）；其中烷基係 未經取代的或經以獨立地選自由下列所組成之群之一至三 個基團取代：鹵素，胺基，羥基，羧基，及c1-3烷氧基； RlG及R11係各自獨立地為氫，羥基，鹵素，CN4烷氧基， 胺基’ Cw烷基胺基，二（Cw烷基）胺基，c3.6環烷基胺基 ’二（C3·6環烧基）胺基，或C4·6雜環烷基，未經取代的或經 以獨立地選自由下列所組成之群之一至兩個基團取代：鹵 素’經基，胺基，Ci_4烷基，及Cw烷氧基； 每個R12係獨立地為氫或Ci_6烷基；且 R及R14各自獨立地為羥基，〇ch2ch2sc( = o)cN4烧基， 〇CH2〇（C = 〇)〇Cn4烧基，NHCHMeC〇2Me，OCHCCij烧基） CKOCOCw 烷基， ’\〇Αγ^%Η2)11〇Η3 ^〇/NvY^S(CH2)17CH3 〇(CH2)gCH3 或 oc〇(ch2)14ch3 ; 其限制條件為當R1為β-曱基及R4為氫或R4為卜甲基且…為 氫，R2及尺3為α_羥基，Rio為—胺基，且R5，r6，r7，r8， 及Rn為氫時，則R9不能為氰基或C〇nh2。 式I化合物作為RN A依賴性RN A病毒聚合酶抑制劑有用 。他們亦係RNA依賴性RNA病毒複製之抑制劑且對於治療

裝 訂

-14- 1261056 A7 B7 五、發明説明（10 RNA依賴性RNA病毒感染有效。 結構式I化合物之一具體實施例係如下結構式π化合物.

511 或其在醫藥上可接受之鹽； 其中

Rl係烷基，其中烷基係未經取代的或經以羥基，胺基 ’ Cl·3烷氧基，Cw烷基硫，或一至三個氟原子取代的； r2係羥基，氟，或Cw烷氧基； R3係氫，鹵素，羥基，胺基，或cN3烷氧基； .訂 係氫，p3〇9h4，p2o6h3，或 po3h2 ; r8係氫，胺基，或Cw烷基胺基； R9係氫，氰基，曱基，鹵素，或c〇NH2 ;且 線 R1G及R11各自獨立地為氫，鹵素，羥基，胺基，CN4烷基 月女基’二（CU4烧基）胺基，或〇3·6環烧基胺基； 其限制條件為當R1為β-曱基，R2及R3為α-羥基，R1G係胺基 ’且R)，R8，及R11為氫時，則-R9不能為氰基或C〇NH2。 結構式I之第二個具體實施例係結構式II化合物，其中：

Rl係甲基，氟甲基，羥基曱基，二氟甲基，三氟曱基，或 胺基甲基； -15 本紙張尺度適用中關家標準(CNS) M規格(2iQ χ 297公董） J261056 五 、發明説明（11 R—係羥基，氟，或甲氧基； R:係氫，氣’經基，胺基，或甲氧基； R係氩或P3〇9H4 ; R8係氲或胺基； 氯/丨氰基，^基，鹵素，或C0NH2 ;且 R係各自獨立地為氫，氟羥基，或胺基； 了限制5條件為當甲基，r2及R3為β-經基，R1。為胺基 且11，R，及R11為氫時，則R9不能為氛基或⑶肌。 以下係作為RNA依賴性RNA病毒聚合酶抑制劑有用之本 又明結構式I化合物之例證（但非限制性實例）·· 月女基7-(2-C-甲基-β-D-峡喃阿拉伯糖基）π”比咯 嘧啶， 」 心胺基-7-(2心曱基_β|吱喃核糖基卜7;^比口各[2,3_化密啶， 4—曱基胺基-7-(2-C-甲基-β-D-吱喃核糖基）·7Η_ρ比咯[2,3 °密σ定， 4_一曱基胺基-7-(2-C-甲基呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3_ d]嘧啶， ’ 4-環丙基胺基-7-(2-C-甲基呋喃核糖基）_7H_吡咯弘 d]嘧啶， ’ 4-胺基-7-(2-C-乙烯基-β-D-吱喃核糖基）_71^比口各[2,3麵3]口密 ^ —广 山 4-胺基-7-(2-C-羥基甲基呋喃核糖基）_7H_吡咯[2,3_d] 口密口定， 4-胺基-7J2-C-氟甲基-β-D-呋喃核糖基>7]9[_吡咯[2,3^]嘧 -16- ^261056 五、發明説明（12 A7 B7 啶， 4~胺基-5-甲基-7-(2-C-曱 [2,3-d]u密淀， ‘胺基-7-(2-C-甲基-β-D-咕咕从〜 天南核糖基）-7H-吡咯[2,3-dl 啶-5 -幾酸， 4-胺基-5-溴-7-(2-C-甲基 °密σ定， 4-胺基-5-氯-7-(2-C-甲基 嗜σ定， 胺基-5-氟-7-(2-C-曱基 嘧。定， 2,4-二胺基-7-(2，C-甲基 °密σ定， 2-胺基-7-(2-C-曱基+D+南核糖基）n各[2,3斗密咬， 2-胺基-4-環丙基胺基-7-(2{甲基仙_呋。南核糖基)秦吡 口各[2,3-d]嘧啶， 2-胺基-7-(2-C-曱基-β-Ο-呋味 啶-4(3H)-酮， 4-胺基-7-(2-C-乙基-β-D-吱喃核糖基）^各[2,3_化密啶， 4-胺基-7-(2-C，2-0-二曱基n吱喃核糖基卜川士各^ d]嘧啶， —. ’ 7-(2-C-曱基- β-D-呋喃核糖基）_7H-吡咯[2,3_引嘧啶 基ID-呋喃核糖基）_7H-吡咯 嘧 呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d] •呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d] •呋喃核糖基）-7Η—比咯[2,3-d] 呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d] 核糖基）-7H - p比略[2,3-d]嘧 胺基-5-曱基-7-(2-C，2-〇-二曱基 υ· 呋喃核糖基）-7H-p比 -17 -

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咯[2;3-d]嘧啶-4(3H)-酿I， 4-胺基-7-(3-去氧-2-C-曱某R n Α + 丞·卜D·呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]。密咬， 4-胺基- 7- (3 -去氧- 2- C-甲美β η + + 土 β-D-唉喃阿拉伯糖基吡咯 [2,3-d]-。密咬， 4-胺基-2-氟- 7-(2_C -甲基u会志 Ρ υ吠喃核糖基>7Η_<σ各[2 3_d] 嘧啶， 4-fe：基-7-(3-C-甲基-β-D-咳喃秒樯其、 昀孩糖基）-7H-p比口各[2,3-d]。密咬， 4-胺基-7-(3-C-甲基-β-D-呋喃太接其、7U , 尺肉不糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶， 4 - fe 基-7 - (2，4 _ 二-C -甲某 _ β n ni + t丄 土 β-D-呋喃核糖基）-7H_吡咯 3_引 嘧啶，及 心胺基-7-(3-去氧-3-氟-2-C-甲其丄 甲基U-呋喃核糖基）-7Η-吡 咯[2,3-d]嘧啶； 及相對應之5'-三磷酸鹽； 或其在醫藥上可接受之鹽。 本發明之進一步例證係選自由下列化合物所組成之 4-胺基-7-(2心甲基+D-吱喃阿拉伯糖基卜冗‘ · 嘧啶， U’、d] 4-胺基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基）·7Η-吡咯[2,3、d]嘧啶， 4-胺基-7-(2-C-氟曱基- β-D-呋喃核糖基卜7H-吡咯[2,3^ 啶， … · ，』嘧 4-胺基-5-甲基-M2-C-甲基呋喃核糖基）·7η、吡 [2,3-d]嘧啶， 各 4-胺基-5-溴- 7-(2-C-曱基- β-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯「 L ，J、d] >18- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056 A7 B7 五、發明説明（14 ) 。密σ定， 4-胺基-5-氯-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d] σ密σ定， 4-胺基-5-氟-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d] 。密σ定，及 4-胺基-7-(2-C,2-〇-二曱基-β-D-呋喃核糖基）-7Η-口比咯[2,3-d ]。密σ定， 及相對應之5’-三磷酸鹽； 或其在醫藥上可接受之鹽。 在本發明之一具體實施例中，本發明之核甞化合物作為 有意義單股RNA依賴性RNA病毒聚合酶之抑制劑，有意義 單股RNA依賴性RNA病毒複製之抑制劑，及/或對於治療 有意義單股RNA依賴性RNA病毒感染有用。在此具體實施 例之一分類中，該有意義單股RNA依賴性RNA病毒係黃熱 病病毒或細小核糖核酸病毒。在此分類之一亞分類中，該 細小核糖核酸病毒係鼻病毒，脊髓灰質炎病毒，或Α型肝 炎病毒。在此分類之第二個亞分類中，該黃熱病病毒係選 自由下列所組成之群：C型肝炎病毒，黃熱病毒，登革熱 病毒，西尼羅（West Nile)病毒，曰本腦炎病毒，班曰 (Banzi)病毒，及牛病毒性腹萬病毒(BVDV)在此亞分類之 一亞分類中，該黃熱病病毒係型肝炎病毒。 本發明另一方面係有關一種抑制RNA依賴性RNA病毒聚 合酶之方法，一種抑制RNA依賴性RNA病毒複製之方法， 及/或一種在對其有需要之哺乳類動物治療RNA依賴性 -19- _ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（15 ) RNA病毒感染之方法，其包含投用治療有效劑量之結構式 I化合物予該哺乳類動物。 在本發明此方面之一具體實施例中，該RNA依賴性RNA 病毒聚合酶係一有意義單股RNA依賴性RNA病毒聚合酶。 在此具體實施例之一分類中，該有意義單股RNA依賴性 RNA病毒聚合酶係一黃熱病病毒聚合酶或一細小核糖核酸 病毒聚合酶。在此分類之一亞分類中，該細小核糖核酸病 毒聚合酶係鼻病毒聚合酶，脊髓灰質炎病毒聚合酶，或A 型肝炎病毒聚合酶。在此分類之第二個亞分類中，該黃熱 病病毒聚合酶係選自由下列所組成之群：C型肝炎病毒聚 合酶，黃熱病毒聚合酶，登革熱病毒聚合酶，西尼羅 (West Nile)病毒聚合酶，日本腦炎病毒聚合酶，班曰 (B anzi)病毒聚合酶，及牛病毒性腹篇病毒（B VD V)聚合酶 。在此亞分類之一亞分類中，該黃熱病病毒聚合酶係C型 肝炎病毒聚合酶。 在本發明此方面第二個具體實施例中，該RNA依賴性 RNA病毒複製係一種有意義單股RNA依賴性RNA病毒複製 。在此具體實施例之一分類中，該有意義單股RNA依賴性 RNA病毒複製係黃熱病病毒複製或細小核糖核酸病毒複製 。在此分類之一亞分類中，該細小核糖核酸病毒複製係鼻 病毒複製，脊髓灰質炎病毒複·製，或A型肝炎病毒複製。 在此分類之第二個亞分類中，該黃熱病病毒複製係選自由 下列所組成之群：C型肝炎病毒複製，黃熱病毒複製，登 革熱病毒複製，西尼羅病毒複製，曰本腦炎病毒複製，班 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（16 ) 曰病毒複製，及牛病毒性腹濕病毒複製。在此亞分類之一 亞分類中，該黃熱病病毒複製係C型肝炎病毒複製。 在本發明此方面第三個具體實施例中，該RNA依賴性 RNA病毒感染係一種有意義單股RNA依賴性病毒感染。在 此具體實施例之一分類中，該有意義單股RNA依賴性RNA 病毒感染係黃熱病病毒感染或細小核糖核酸病毒感染。在 此分類之一亞分類中，該細小核糖核酸病毒感染係鼻病毒 感染，脊髓灰質炎病毒感染，或A型肝炎病毒感染。在此 分類之第二個亞分類中，該黃熱病病毒感染係選自由下列 所組成之群：C型肝炎病毒感染，黃熱病毒感染，登革熱 病毒感染，西尼羅病毒感染，曰本腦炎病毒感染，班曰病 毒感染，及牛病毒性腹瀉病毒感染。在此亞分類之一亞分 類中，該黃熱病病毒感染係c型肝炎病毒感染。 在整份本案申請書中，以下辭彙具有所指示之意義： 以上所指定之烧基希望包括不論是直鏈或支鏈組態之指 定長度烷基。這類烷基之實施例係曱基，乙基，丙基，異 丙基，丁基，第二丁基，第三丁基，戊基，異戊基，己基 ，異己基，及其類似物。 辭彙“烯基”意指二至六個總碳原子，或在此範圍内任何 碳原子數之直鏈或支鏈烯屬烴（如，乙烯基，丙烯基，丁 烯基，戊烯基等）。 一 辭彙“炔基”意指二至六個總碳原子，或在此範圍内任何 碳原子數之直鏈或支鏈炔屬烴（如，乙炔基，丙炔基，丁 炔基，戊炔基等）。 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7

辭彙“環垸基，，意指三至八個始石户 何碳原子數之燒屬 ：’：：子，或在此乾圍内任 環己基，環庚基或環辛二％丙基’環丁基’環戊基， 辭彙“雜環烷基”希望包 ^ ^ ^ ^ yk ^ ^ 或兩個選自氮，氧及硫之雜 原子之非方香族雜環。 ^ ^ , 貝濰裱烷基之實例包括三亞曱 五胺基，吡咯啶基，喊 ^ 土，嗎啉基，赛嗎啉基，咪唑啶 基，四虱吱喃基，四 其類似物。 飞“基，四氫硫苯基"底啡基’及 辭彙“烷氧基，，意指所沪令*山 ^ ^ νμ 。知所扣疋之碳原子數（如，c丨·4烷氧基） 广 厌原子數之直鏈或支鏈烷氧化物[即 ’甲氧基（MeO-)，乙氧基，異丙氧基，等]。 辭彙“炫基硫，，意指所指定之碳原子數(如，CM烧基硫) 或在此犯圍内之任何碳原子數之直鍵或支鍵硫化烧基[即 ’曱基硫（MeS-)，乙基硫，異丙基硫，等]。 辭彙“烧基胺基，，意指所指定之碳原子數(如，CW基胺 基），或在此範圍内之任何碳原子數之直鏈或支鏈烷胺[即 ，曱基胺基，乙基胺基，^基胺基，t_ 丁基胺基，等]。 u辭彙“烷基磺醯基，，意指所指定之碳原子數（如，Cm烷基 石戸' 醯基），或在此缸圍内之任何碳原子數之直鏈或支鏈烷 基（風）[即，曱基磺醯基（MeS〇2-)，乙基磺醯基，異丙基磺 酸基，等]。 辭彙“烷氧羰基’’意指所指定之碳原子數（如，C Μ烷基氧 羰基）’或在此範圍内之任何碳原子數之本發明叛酸衍生 物之直鏈或支鏈酯[即，曱基氧羰基（Me〇C〇_)，乙基氧羰 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

裝 訂

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發明説明（18 基，或丁基氧羰基]。 辭襄芳香基”同時包括苯基，莕基，及吡啶基。該芳香 土視h况地係纟至以獨立地選自由下列所組成之群之一至三 们基團取代· C1-4烷基，鹵素，氰酸硝基，三氟甲基，CU4 烷氧基，及CN4烷基硫。 辭彙素”希望包括鹵素原子氟，氯，溴及碘。 辭彙“經取代的，，將視之為包括由指名之取代基多重取代 之程度。其中多重取代基部分係經揭示的或經申請之專利 I巳圍’該經取代的化合物可獨立地經以一或多個該經揭示 的或經申請之專利範圍之取代基部分取代，單數地或複數 地。 辭彙5 -二磷酸鹽’’意指本發明核苷化合物之5，_羥基之 三鱗酸酯衍生物，其具有如下結構通式ΠΙ :

其中R^R11係經定義如上。本發明 < 化合物亦希望分別包 括結構式IV及V之三磷酸鹽酯一在醫藥上可接受之鹽及5，·單 磷酸鹽及5’-二磷酸鹽酯衍生物在醫藥上可接受之趟， -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1261056 A7 B7

1261056 A7 __ _ B7 五、發明説明（2〇 ) 成分’及任何直接或間接地由任何兩或多個該成分之結合 ’複合或集’或由一或多個該成分之解離，或由一或多 個該成分之其他類型反應或交互作用所生成之產物。據此 ’本發明之醫藥組合物包含藉由預混合本發明化合物及醫 藥上可接受之載體製作之任何組合物。 應瞭解辭彙“投藥，，及“投用，，化合物意指提供本發明化合 物或本發明化合物之前驅藥物給有需要之個體。 本發明另一方面係有關一種抑制HCV NS5B聚合酶，抑 制HCV複製，或治療HCV感染之方法，其係以本發明化合 物與一或多種對於治療HCV感染有用之作用劑組合。這類 對抗HCV之活性作用劑包括（但不限於）核糖病毒素 (ribavirin)，左旋病毒素（levovirin),病毒脒（viramidine)， 胸腺素阿伐-1，干擾素-a，pegyUted干擾素(peg干擾素_ α)，干擾素-α與核糖病毒素之組合，peg干擾素乂與核糖病 毋素之組合’干擾素-α與左旋病毒素之組合，及干擾 素-α與左旋病毒素之組合。干擾素”包括（但不限於）重組 的干擾素-a2a (如洛法隆（R〇feron)干擾素可獲自霍夫曼 (Hoffmann)-拉羅氏（LaRoche)，諾特利（NuUey)，NJ)， pegylated 干擾素-a2a (PegasysTM)，干擾素 _a2b (如内子·α 干擾素可獲自雪林（Schering)公司’肯尼沃斯（Kenilw〇rth)， NJ)，pegylated干擾素-a2b (PegIntr〇nTM)，重組之共義干 擾素（如干擾素阿伐con-1) ·’及經純化之干擾素^產物。艾 米金氏（AmgenW重組共義干擾素之商標名稱為比“^⑶⑧ 。左旋病毒素係核糖病毒素之1 -鏡像異構物，其經顯示有 -25- l261〇56

A7 B7 五、發明説明（ 21 與核糖病毒素相似之免疫調節活性。病毒脒代表揭示於 W0 〇1/603 79之核糖病毒素類似物（讓予給ICN製藥廠）。根 據本發明之方法，該組合之個別組份可在療程中分別在不 同時間投藥或以分開或單一組合形式同時投藥。因此應瞭 解本發明包含所有這類治療法之同時治療或替代療治，且 據此說明辭彙“投藥”。應瞭解本發明之化合物與其他對於 治療HCV感染有用之作用劑之組合範圍原則上包括與任何 用於治療HCV感染之醫藥組合物之任何組合。當本發明化 合物或其在醫藥上可接受之鹽與另一對抗HCV之活性治療 劑組合時，每種化合物之劑量可與單獨使用該化合物時之 劑量相同或不同。

對於治療HCV感染，本發明化合物亦可與HCV NS3絲胺 酸蛋白酶抑制劑合併投藥。HCV NS3絲胺酸蛋白酶係一種 必要之病毒酵素且頃經說明為抑制HCV複製之極佳標的。 以受質及非受質為基礎之HCV NS3蛋白酶抑制劑均經揭示 於 WO 98/22496，WO 98/46630，WO 99/07733 ’ WO 99/07734，WO 99/3 8888，WO 99/50230，WO 99/64442 ’ WO 00/09543，WO 00/59929，及 GB-2337262。HCV NS3 蛋白酶當做標的用於發展HCV複製抑制劑及用於治療HCV 感染係經討論於B · W.戴默克（Dymock)，“浮現之C型肝炎 病毒感染療法’’，浮現之藥物，_ 13-42 (200 1)。 核糖病毒素，左旋病毒素，及病毒脒可經由抑制胞内酵 素肌甞單磷酸鹽去氫酶（IMPDH)藉調節胞内鳥嘌呤核苷酸 庫發揮其抗-HCV作用。IMPDH於從新生物合成鳥嘌呤核 -26- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（22 ) 甞酸係生物合成途徑之速率限制酵素。核糖病毒素易在胞 内經磷酸化且其單磷酸鹽衍生物係IMPDH抑制劑。因此， 抑制IMPDH代表另一對於發現HCV複製抑制劑之有用標的 。因此，本發明化合物亦可與IMPDH抑制劑，如VX-497 合併投藥，其係經揭示於WO 97/41211及WO 01/00622 (讓 予給Vertex);另一 IMPDH抑制劑，如經揭示於WO 00/25780 (讓予給布里斯托（Bristol)-梅爾史奎布（Myers Squibb))者 :或黴酚酸酯mofetil [參看A.C.艾利森(Allison)及E.M·優 古（Eugui)，作用劑之作用，44-(Suppl.)·· 1 65 ( 1 993)]。 對於治療HCV感染，本發明化合物亦可與抗病毒劑金剛 烷胺（1-胺基三環癸烷）合併投藥[此作用劑之廣泛說明參看 J.克許巴姆（Kirschbaum)，Anal. Profiles Drug Subs. 12: 1 -36 ( 1 983)]。 “醫藥上可接受的”係用以說明載體，稀釋劑，或賦形劑 必須與調配物之其他成分相容且對於其接受者無害。 亦包括於本發明中的醫藥組合物包含本發明之核苷化合 物及其衍生物與合併醫藥上可接受之載體。本發明之另一 實例係由任何上述化合物與醫藥上可接受之載體之組合製 作之醫藥組合物。本發明之另一例證係製作包含任何上述 化合物育與醫藥上可接受之載體組合之醫藥組合物之-方法。 亦包括於本發明内之醫藥組-合物包含對於抑制RNA依賴 性RNA病毒聚合酶（特定言之HCV NS5B聚合酶）有用之有 效量之本發明化合物及醫藥上可接受之載體。本發明亦包 含對於治療RNA依賴性RNA病毒感染（特定言之HCV感染） -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（23 ) 有用之醫藥組合物及抑制RNA依賴性RNA病毒聚合酶（特 定言之HCV NS5B聚合酶）之方法及治療RNA依賴性病毒複 製（且特定言之HCV複製）之方法。此外，本發明係有關一 種醫藥組合物，其包含治療有效劑量之本發明化合物與治 療有效劑量之另一其他對抗RNA依賴性RNA病毒（且特定 言之對抗HCV)之活性劑之組合。對抗HCV之活性作用劑 包括（但不限於）核糖病毒素，左旋病毒素，病毒脒，胸腺 素阿伐-1，HCV NS3絲胺酸蛋白酶抑制劑，干擾素-α， pegylated干擾素-a (peg干擾素-α)，干擾素-α與核糖病毒 素之組合，peg干擾素-α與核糖病毒素之組合，干擾素-α 與左旋病毒素之組合，及peg干擾素-α與左旋病毒素之組 合。干擾素-α包括（但不限於）重組的干擾素-a2a (如洛法隆 干擾素可獲自霍夫曼（Hoffmann)-拉羅氏（LaRoche)，諾特 利（Nutley)，NJ)，干擾素-a2b (如内子-A干擾素可購自雪 林（Schering)公司，肯尼沃斯（Kenilworth)，NJ)，共義干擾 素，及經純化之干擾素-oc產品。關於對核糖病毒素之討論 及其對抗HCV之活行性，參看J.O.桑德斯（Saunders)及S.A. 雷巴克（Raybuck)，“肌甞單磷酸鹽去氫酶··關於其結構， 動力學，及治療潛力 ”，Ann. Rep. Med. Chem. ? 3 5: 20 1-210 (2000)。 - 本發明另一方面提供該核嘗…化合物及其衍生物及其醫藥 組合物在製造用於抑制RNA依賴性RNA病毒複製（特定言 之HCV複製），及/或治療RNA依賴性RNA病毒感染（特定言 之HCV感染）醫藥品之用途。本發明又一方面提供核荅化 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056

合物及其衍生物及其醫藥組合 病毒複製（特定言之)，及P制RNA依賴性RNA RNA病毒感染㈣言之Hcv ^於治療跳依賴性 本發明之醫藥組合物包含一結構式ϋ 分或其在醫藥上可接受之鹽，且亦含有一：物作為活性成 載體且視情況地含有其他醫藥成分。藥上可接受之 二包：經皮下，經肌肉内，及經靜脈)，經眼的，經肺部 的(..〜腔的或經頰的吸入)，—域經鼻腔投藥之組合物 ==特定狀況下最合適之途徑是取決於所要治療之狀 / 〇及厫重性及取決於該活性成分之特性。他們可方 便地以單位劑量形式存在且以在製藥學之製備技藝中為人 所熟知的任何方法。 在實際利用時，可根據習用之醫藥化合物技術將結構式 I化合物作為預混合物中之活性成分與醫藥載體組合。該 載體可採極多種形式，取決於所欲投用之製劑形式，如， 經口或非經口（包括經靜脈的）。在製備用於口服劑量形式 之組合物時，可使用任何平常之醫藥媒介，例如在口服液 體製劑，如在懸浮液，酏劑及溶液使用，水，甘油，油， 酒精’調味劑’防腐劑，著色劑及其類似物；或在口服固 體製劑’如散劑，硬及軟膠囊:及錠劑使用載體如澱粉，糖 ，微晶纖維素，稀釋劑，粒化劑，潤滑劑，結合劑，崩解 劑及其類似物，而固體口服製劑又比液體製劑更佳。 因為其易於投藥，錠劑及膠囊代表最有利之口服劑量單 -29-

本紙張尺度適财國國家標準(CNS) Α—$格( χ 297以1 1261056 A7 B7 五、發明説明（25 ) 位形式，在此狀況下顯然會使用固體醫藥載體。若有必要 ，可以標準水溶液或非水溶液技術塗覆錠劑。這類組合物 及製劑應含有至少百分之〇 . 1之活性化合物。當然，可改 變活性化合物在這些組合物中之百分比且可方便地介於該 單位重量之約百分之2至約百分之60之間。活性化合物在 這類治療有用組合物中之量係能獲得有效劑量。該活性化 合物亦可經由鼻腔投藥，例如，滴液或噴液。 錠劑’樂丸’膠囊，及其類似物亦可含有結合劑如黃 (蓍）膠，阿拉伯膠，玉米澱粉哉明膠；賦形劑如磷酸二鈣 ，崩解劑如玉米澱粉，馬鈐薯澱粉，藻膠酸；潤滑劑如硬 脂酸鎂及甜味劑如蔗糖，乳糖或沙克林（saccharin)。當一 劑量單位形式為膠囊時，其除了上述類型之材料外尚可含 有液態載體如脂肪油。 亦可存在各種其他材料作為塗料或修改該劑量單位之物 理學形式。例如，錠劑可經塗覆以蟲膠，冑或二者。糖漿 或酏劑除了該活性成分外可含有蔗糖作為甜味劑，甲基及 對經基苯甲酸丙㈣為防㈣卜染劑及調味劑如樓桃❹ 橙口味。

條件下， 件下這些2劑含有防腐劑以防止微生物 適於注射用途之醫藥形式包括無菌水溶液 口物。這些活性化 適當地與介面活性 可在甘油，液態聚 一般貯存及利用之 支物生長。 液或分散液及用 本纸張尺度適财®目家標準(CNS) Α4規公釐了 1261056

於fer日守W備益菌注、六 7 “谷液或刀政液之無菌粉末。在所有狀 況下’该形式必項θ — # „ 飞項疋無囷的且必須是流動性達到能易於注 射之^。其必須在製造及貯存條件下安定且必須受到保 生物之污染如細菌及真菌。該載體可為溶劑或分 且含有，例如’水，乙醇，多元醇(如，甘油， 丙二醇及液態聚乙二醇），其合適之混合物，及植物油。 有效劑量之本發明化合物可使用任何合適之投藥途徑供 =哺乳類動物，特別是人類。例#，可使用經Π的’由直 腸的’局部的’非經腸道的；.經眼睛的，經肺部的，經鼻 腔的’及其類似者。劑量形式包括錠劑，片劑，分散液， 懸浮液’溶液’膠囊，乳液，軟膏，氣溶膠，及其類似者 。較佳地’結構式I化合物係經口投藥。 對於經口投藥給人類時，分次給藥之劑量範圍係0 · 01至 1000 rng/kg體重。在一具體實施例中該分次給藥劑量範圍 係〇·1至100 mg/kg體重。在另一具體實施例中該分次給藥 劑$範圍係0.5至20 mg/kg體重。用於經口投藥，該組合 物較佳地以錠劑或膠囊形式提供，其含有1〇至1〇〇〇毫克 該活性成分，特定言之，1，5，10，15，20，25，50，75 ，100 ’ 150 ’ 200 ， 250 ’ 300 ， 400 ， 500 ， 600 ， 750 ， 800 ，900，及1〇〇〇亳克該活性成分，且依所要治療病患之症 狀調整劑量。 一、 可’交化所使用活性成分之有效劑量’取決於所使用之特 殊化合物，投藥模式’所要治療之狀況及所治療狀況之嚴 重性。凡熟習此項技藝者都能容易地確定這類劑量。可調 —---- ~ 31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐）

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整此劑量治療法以提供最適之治療反應。 本七明化合物含有一或多個不對稱中心且因而 旋酸鹽及外消旋混合物， 初早一鏡像異構物，非鏡像異構物 混合物及個別之非鏡俊里 J <升筑像異構物。本發明打算包含呈 結構式所描述五-員咬咕播 八 下 人从 貝夫南糖裱之0七立體化學組態之核苷化 合物’即，里中兮女石 g t ，、甲σ亥五-貝呋喃糖環（：_1及c_4 β-立體化學組鲅（“向上” t A 取代基具有 〜、（白上方向以粗線表示）之核荅化合物。

R 11 ，•、一〜δ啕師性雙鍵，且除非 ，否則均意指同時包括Ε及Ζ幾何異構物。 W指定 此處所述之某些化合物可呈互變異構物如_ 構 互變 異構物存在。個別之互變異構物及其混合勺：蛘互變 式I化合物中。希望包含於本發明化合物中/广二於結 異構物實例係舉例說明如下： δ :^醇

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AT

可藉由，例如，由人、吞 酸…其混合物；二的：:：分結晶’例如曱醇或乙 B ^ 利用有先學活性之固定相經由對掌 法將結構式1化合物分開成個別之非鏡像異構物。 ' ’結構式1化合物之任何立體異構物可利用光學上 之純原料或已知植能夕 、、、心之試劑藉由立體特異性合成獲得。 發明之結構式1呋喃糖環化合物C-2及C-3位置取代基 之^立二化學之表不係以彎彎曲曲的線象徵取代基及丨，r2’ 、 可相互獨立地具有不論是α-(取代基“向下，，）或(取 代基向上）組恶。在呋喃皆環丨及以粗線表示之立 心化學象徵該取代基具有卜組態（取代基“向上，，）。

本發明化合物可以醫藥上可接受之鹽之形式投藥。辭彙 醫藥上可接受之鹽”意指自醫藥上可接受之無毒鹼或酸製 備之鹽’其包括無機或有機鹼及無機或有機酸。包含於辭 彙“醫藥上可接受之鹽”之鹼性化合物之鹽意指本發明化合 物之殊毋之鹽’其製備一般係藉由將游離驗與合適之有機 或無機酸反應。本發明鹼性化合物之代表性鹽類包括（但 不限於）如下鹽類：醋酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重碳 酸鹽，重疏酸鹽，二酒石酸鹽，硼酸鹽，溴化物，樟腦磺 -33- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056

AT B7 五、發明説明（29 ) 酸鹽（camsylate)，碳酸鹽，氯化物，clavulanate，檸檬酸 鹽，氯化二氫，伸乙二胺四乙酸鹽，edisylate，estolate， esylate，反丁烯二酸鹽，gluceptate，葡萄糖酸鹽，麩胺 酸鹽，glycollylarsanilate，己基瑣辛酸鹽（hexylresorcinate) ，醇胺（hydrabamine)，溴化氫，氯化氫，經基莕曱酸鹽， 碘化物，異含硫酸（isothionate)，乳酸鹽，乳糖酸鹽，月 桂酸鹽，蘋果酸鹽，馬來酸鹽，苦杏仁酸鹽，甲磺醯鹽， 溴化曱基，曱基硝酸鹽，曱基硫酸鹽，黏液酸鹽，莕醯酸 鹽（napsylate)，硝酸鹽，N-曱，基還原葡糖胺銨鹽，油酸鹽 ’草酸鹽，pamoate (embonate)，棕福酸鹽，泛酸鹽，石粦 酸鹽/二磷酸鹽’聚半乳糖醛酸鹽，水揚酸鹽，硬脂酸鹽 ，硫酸鹽，次乙酸鹽，琥珀酸鹽，單寧酸鹽，酒石酸鹽， teoclate ’曱苯石黃g篮鹽，triethiodide及戍酸鹽。此外，當 本發明化合物攜帶酸的部分時，其在醫藥上可接受之合適 鹽包括（但不限於）衍生自包括下列無機鹼之鹽：鋁，銨， 鈣，銅，鐵，亞鐵，鋰，鎂，錳，亞錳，鉀，鈉，鋅，及 其類似物。特別較佳的係銨，鈣，鎂，鉀，及鈉鹽。自醫 藥上可接受之有機無毒性鹼衍生之鹽包括一級，二級，及 三級胺，環胺類，及鹼性離子交換樹脂，如精胺酸，甜菜 素，咖啡因，膽鹼，N，N-二苯乙烯二胺，二乙胺，_ 2_二乙 月女基乙醇，2-二甲胺基乙醇，乙醇胺，乙烯二胺，N_乙基 馬林N乙基旅。疋，還原葡糖胺，葡萄糖胺，組胺酸，醇 胺，異丙胺，離安（酸），曱基還原葡糖胺，嗎4 H 哌啶，多元胺樹脂，普魯卡因（procaine)，嘌呤，可可鹼 >34- 1261056 A7 B7

，一乙胺，二甲胺，二丙胺，緩血酸胺之鹽，及其類似物 且，在羧酸（-COOH)或醇基存在本發明化合物之狀、、 ，羧酸衍生物在醫藥上可接受之酯，可使用如甲基，况下 ，或二甲基乙醯基氧甲基，或醯基之醇類衍生物，如 分 或馬來酸鹽。所包括的是在此項技藝中為人所知用以修 用作延遲釋放或前驅藥物調配物之溶解度或水解特性^ 及醯基。 曰 本發明核茹化合物及衍味物之潔_ 本發明之核荅化合物及其衍！物之製備可以如下在核荅 及核甞酸化學之實務上十分確立的合成方法學進行。以下 描述用於製備本發明化合物之合成方法之原文係指定之未 考文獻.：核苷及核菩酸化學”，L.B•湯森德（T〇wnsend)編 輯，卷1-3，普蘭諾（Plenum)出版社，1988，其全部内容以 參考文獻併入此處。 代表性之製備本發明化合物一般方法概述於以下流程！ 中。此流程舉例說明合成本發明之結構式U化合物。其 中該呋喃糖環具有β-D-核糖組態。該原料係結構式ι^之 -經3,5-雙-0保護之烷基呋σ南糖苷，如甲基呋喃糖苷。然 後該C-2羥基經以合適的氧化劑氧化，如以三氧化鉻或鉻 酸鹽試劑，（迪斯-馬丁（Dess-Martin)) peri〇di_e卜或藉由 史旺（swern)氧化作用，以供給'結構式1^之。在合適 的有機溶劑’如四氫呋喃：〕乙基醚，及其類似物中添加 葛林納德（Grignard)試劑，如烷基，烯基，或炔基產化鎂

(例如，MeMgBr，細咖，乙烯基MgBr，烯丙基MgBP -35-

1261056 A7 B7 五、發明説明（31 ) 及以炔基MgBi:)或烷基，嬌美 挪&，或炔基鋰，如MeLi ,穿越 之羰基雙鍵，以供蛉姓谣彳，， 的、，。結構式U之C-2三級醇。然後在 該呋喃糖衍生物之C-1 (變旌显谣 V夂奴呉構的）位置導入一良好之脫 離基（如C 1 Br，及I)，此係藉由在合適的有機溶劑中以 函化氫處理之吱喃糖芬，如溴化氫在乙酸中，以供 給中間物函化吱喃糖基U。亦可在後續反應中以㈡續酸 鹽，這類甲烷磺酸鹽（MeS〇2〇-),三氟甲烷-磺酸鹽 (cF^o-)，或p-甲苯磺酸鹽（_〇Ts)，供作有用的脫離基 以產生醣甞（核茹）鍵聯。核芬鍵聯之構建係藉由以經適者 取代的1H-,比咯[2,3-d]嘴啶u，如經適當取代之4+iH\ 口比洛[2,3-dh密咬’之金屬鹽（如鋰，鈉，或鉀）處理結構式 U之/間物，其可藉由在合適之無水有機溶劑，如乙腈 ，四氫呋喃，1-甲基-2-吡咯啶酮，或N，N_二甲基甲醯胺 (DMF)中以鹼性氫化物（如氫化鈉），鹼性氫氧化物（如氫氧 化鉀），鹼性碳酸鹽（如碳酸鉀），或鹼性六曱基二矽肼（如 NaHMDS)處理就地產生。可利用轉移催化劑，如TDAj* 三乙基苯基-氣化銨，且在二相系統（固相_液相或液相-液 相）中催化該置換反應。然後依照確立之去保護作用方法 學分解經保護之結構式g核：y：之視情況保護基團，如依 照說明於T.W·葛林尼（Greene)及P.G:M.華茲（Wuts)-，‘‘有機 合成中之保護基團’’，第3版，，約翰威利父子公司（J〇hn Wiley & Sons)，1999中之方法學。視情況以適當之胺，如 以醇系氨水或液態氨水處理4-鹵中間物1-6在C-4位置声生 一級胺（-NH2) ’以烧胺在C-4位置產生二級胺（_nhr),或 -36- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（32 ) 以二烷胺在C-4位置產生三級胺（-NRR')，以在吡咯[2,3-d] 嘧啶核心之4-位置導入胺基。7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4(3H)-酮化合物之衍生可藉由以驗性水溶液，如氫氧化納水溶液 ，水解U。醇解（如甲醇解）ϋ供給C-4烷氧化物（-OR)， 而以烷基硫醇化物處理供給C-4烷基硫（-SR)衍生物。要得 到所需之本發明化合物需要後續進行普通熟習有機/醫藥 化學技藝之從業者所熟知之化學操作。 流程1

Pg =保護基團 低碳烧基

R9 X

M = Li, Na, or K X = Cl, Br； or I 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐)

裝 l26l〇56 A7

η 1261056 A7

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夫喃基V7H•吡咯「23』嘧啶 m〇

錢A : 二氯―笨某甲m〇_甲其-α·η-吐 i核复 '二 在室溫下攪拌2-〇_乙醯基-3,5-雙-〇-(2,4-二氯苯基曱基） -1-0-曱基-α-D-呋喃核糖[製備參看：Helv. Chim Ant, 78: 486 (1995)](52·4 g，0.10 mol)在甲醇系 K2C03 (500 mL·， 在室溫下飽和）中之混合物45分鐘且然後在減壓下濃縮之 。將5亥/由性殘餘物懸浮於ch2C12 (500 mL)中，以水（300 mL + 5x200 mL)及濃鹽水（2〇〇 mL)清洗，乾燥（Na2S〇4)，過 濾’並濃縮以產生呈無色油之標題化合物（49 {) g)，其不 經進一步純化而直接利用於以下步驟B中。 iH NMR (DMSO-d6): δ 3.28 (s5 3H，OCH3)，3.53 (d，2H， J5,4=4.5 Hz，H-5a，H-5b)，3·72 (dd5 1H，J34 = 3.6 Hz， J3,2 = 6.6 Hz, H-3), 3.99 (ddd, 1H? J2,i=4.5 Hz, J2,Oh-2 = 9.6 Hz, H-2), 4.07 (m, 1H? H-4)-4.50 (s, 2H, CH2Ph)? 4.52, 4.60 (2d, 2H, Jgem=13.6 Hz, CH2Ph)? 4.54 (d, 1H, OH-2), 4.75 (d，1H，H-l)，7.32-7.45, 7.52-7.57 (2m，l〇H, 2Ph)。 l3C NMR (DMSO-d6): δ 55.40, 69.05, 69.74, 7 1.29, 72.02, -40 -

-裝 訂

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1261056 A7 _____B7 五、發明説明（36 ) 78.41，81.45，103.44，127.83，127.95，129.05，129.28, 131.27，131.30，133.22，133.26，133.55, 133.67, 135.45, 135.92 〇 童靜B : 雙二二氯笨1甲某甲某-a_D_赤- 呋喃戍糠-2-篡棒 在0.5 h期間於且在氬氣（Ar)下於迪斯-馬丁（Dess-Martin) penodmane (50.0 g，118 mmol)在無水 CH2C12 (350 mL)中 之冰冷懸浮液中滴加入來自步驟A之化合物（36.2 g , 75 mmol)在無水CH2C12 (200~-mJL)中之溶液。在〇。〇下攪拌 該反應混合物0.5 h且然後在室溫下攪拌3天。以無水Et2〇 (600 mL)稀釋該混合物並將其倒入Na2S203 · 5H2〇（1 80 g) 在餘和NHC〇3水溶液（1400 mL)中之冰冷混合物中。將 各層分開，且以飽和NaHC03水溶液（600 mL)，水（800 mL) 及濃鹽水（600 mL)清洗有機層，乾燥（MgS04)，過濾及蒸 發以產生呈無色油之標題化合物（34.2 g)，其不經進一步 純化而直接利用於以下步驟C中。 lH NMR (CDC13)： δ 3.50 (s? 3H, OCH3)5 3.79 (dd, 1H? J5a，5b=11.3 Hz, J5a，4 = 3.5 Hz，H-5a)，3.94 (dd，1H，J5b，4 = 2.3 Η z，H - 5 b)，4.2 0 (d d，1H，J 3 ] = 1 · 3 H z，J 3 4 = 8 · 4 Η z, H - 3)， 4.37 (ddd，1H，H-4)，4.58，4.69 (2d，2H，Jgem-W.O Hz， CH2Ph)，4.87 (d，1H，H-l)，4.7—8，5.03 (2d，2H，Jgem=12.5 Hz，CH2Ph)，7.19-7.26，7.31-7.42 (2m，10H，2Ph)。 iJC NMR (DMS〇-d6): δ 55.72, 69.41，69.81，69.98，77.49, 78.00，98.54，127.99，128.06，129.33，129.38，131.36, -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x 297公釐) 1261056 A7 ___B7 五、發明説明（37 ) 131.72, 13^.61, 133.6^, 133.85, 133.97, 134.72, 135.32, 208.21。 c : 一3J--雙-〇二(2,4-二氯苯某甲某）_2-C-甲某-：!-〇-甲 基-α-D-咕喊核棒 於- 55C 之 MeMgBr在無水 Et20 (0.48 Μ，300 mL)中之溶 液中滴加入來自步驟B之化合物（17.40 g，36·2 mm〇1)在無 水Ε^Ο (125 mL)中之溶液。使該反應混合物升溫至_3〇。〔 並在-30°C至-15°C下攪拌7 1χ，然後將其倒入冰冷的水中 (500 mL)並在室溫下劇烈攪拌該混合物〇·5 h。將該混合物 濾過寅式鹽濾墊（10x5 cm)並以Ε^Ο澈底清洗之。乾燥有 機層（MgS〇4) ’過濾並濃縮。溶解殘餘物於己烧中（〜3〇 mL) ’施加至二氧化矽凝膠管柱上（1 〇 X 7 cm，經預包裝於己烷 中）並以己烧及己烧/EtOAc (9/1)溶離以產生呈無色糖漿之 標題化合物（16.7 g)。 lH NMR (CDC13): δ 1.36 (d5 3H? JMe?〇H = 0 9 Hz? 2C-Me), j.33 (q，1H，〇H)，3.41 (d，1H，J3 4 = 3 3 hz)，3.46 (s, 3H， 〇CH3)，3·66 (d，2H，J5,4 = 3.7 Hz，Hoa，H-5b), 4.18 (apparent q，1H，H-4)，4·52 (s，1H，H-l)，4.60 (s，2H, CH2Ph), 4.63, 4.81 (2d? 2H? Jgem=13.2 Hz, CH2Ph)? 7.19-7.26, 7.34-7.43 (2m, 10H，2Ph卜 _ ljC NMR (CDCI3): δ 24.88, 5_5.45, 69.95, 70.24, 70.88, 77.06，82.18，83.01，107.63，127.32，129.36，130.01， 130.32, 133.68, 133.78, 134.1 3, 1 34.1 8, 1 34.45, 1 34.58。 免塾-Q : 4 ：：氯-7 - [3 ,乏二.豐二2^4 - 笨某甲某）_2-C -甲基- -42- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（38 ) 这-D-咬喃核糖幕丄7H-Pi：h p各「?，3-(11°密g定 於〇C之末自步驟C之化合物（942 g，19 mmol)在無水二 氯甲烷（285 mL)中之溶液中滴加入ΗΒγ (5.7 μ in醋酸， 20 mL，114 mmol)。在〇°c下攪拌所產生之溶液丨h且然後 在室溫下攪拌3 h，在真空下蒸發並與無水甲苯（3x4() mL) 共蒸發。將該油性殘餘物溶解於無水乙腈中（5〇 mL)並加 至4-氯-1士吡咯[2,3-〇1]嘧啶之鈉鹽在乙腈中之溶液中[自4_ 氯-ΙΗ-说略[2,3-d]嘧啶[製備參看：J, Chem. Soc.: 131 (1960)](8·76 g, 57 mmol)在'条冰乙腈（1〇〇〇 mL)中之溶液 及NaH (60%在礦物油中，2.28 g，57 mmol)在室溫下劇烈 擾拌4 h後就地產生]。在室溫下攪拌該合併之混合物24 h ’且然後蒸發至乾燥。將該殘餘物懸浮於水（2 5 〇 mL)中並 以EtOAc (2x500 mL)萃取。以濃鹽水（3〇〇 mL)清洗合併之 卒取物’在NazSO4上乾燥，過濾及蒸發。利用乙酸乙酯/ 己燒（1 .j及1:2)作為溶離液在二氧化石夕凝膠管柱（1 〇 cmx 10 cm) 上純化該粗產物。合併含有該產物之溶離份並在真空下蒸 發以產生呈無色泡沫之所需產物（5.05幻。 lH NMR (CDC13): δ 0.93 (s? 3H, CH3)5 3.09 (s? 1H? OH), 3.78 (dd，1H，J5.，5"=l〇.9 Hz，J5,，4 = 2.5 Hz，H-5，)，3.99 (dd， 1H，J5'4 = 2.2 Hz，H-5’’)，4.23-4·34 (m, 2H，H-3L，H-4丨)， 4.63，4·70 (2d，2H，Jgem二 12·7 Hz，CH2Ph)，4.71，4·80 (2d， 2H，Jgem=12.1 Hz，CH2Ph)，6.54 (d，1H，J5,6 = 3.8 Hz，Ho)， 7.23-7.44 (m，10H，2Ph)。 ljC NMR (CDC13): δ 21.31，69.10, 70.41，70.77，79.56, -43- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x 297公釐) 1261056

以快速層析法純化殘餘物以提供呈無色泡沫之所需化合物 U.73 g)，其經以MeCN處理後轉變成非結晶形之固體。 H NMR (DMSO-d6)： δ 0.64 (s, 3H5 CH3), 3.61-3.71 (m, lH，H-5’)，3.79,3.88 (m，lH，H-5”)，3.89-4.01(m，2H，H· 3’，H-4’），5.15-5·23 (m，3H, 2’-〇H，3’-〇H，5'-〇H)，6.24 (s， 1H? Η-Γ), 6.72 (d, 1H? J5,6 = 3.8 Hz,. Ho), 8.13 (dr 1H? H-6)，8.65 (s，1H，H-2)。 … ljC NMR (DMS0-d6)： δ 20.20, 59.95, 72.29, 79.37, 83.16, 91.5j, 100.17, 117.63, 128.86, 151.13, 151.19, 151.45 ° t虹二4:.胺.基甲某-β_咗4核煻某V7H”比咯 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇 X 297公爱） 1261056 A7 B7

五、發明説明（4(3 [~2.3-dl 嘧啶

於來自步驟E之化合物（1.54 g，5·1 mm〇1)中加入甲醇系 氨水（在0°C下飽和；150 mL)。在不鏽鋼殺菌蚤中85。〇下 加熱該混合物14 h ’然後冷卻並在真空下蒸發。以 CH2Cl2/MeOH (9/1)作為溶離液在二氧化石夕凝膠管柱上純 化該粗混合物以產生呈無色泡沫之標題化合物（0.8 g)，其 在與MeCN處理過後以非結晶形之固體分離出’該非結晶 形之固體係自甲醇/乙腈再結晶；m.p. 222°C。 lU NMR (DMSO-d6): δ 0.62-(^ 3H, CH3)5 3.57-3.67 (m5 1H，H-5，），3.75-3.97 (m，3H，H-5，，，H-4’，H-3，），5.00 (s，iH， 2丨-OH)，5.04 (d，1H，J3,〇H3，= 6.8 Hz，3，-0H), 5.06 (t，1H， . 1 Hz? 5'-OH), 6.11 (s5 1H5 H-l5)5 6.54 (d5 1H, J5,6 = 3.6 Hz，H-5)，6.97 (br* s，2H，NH2)，7.44 (d，1H，H-6), 8.02 (s，1H，H-2)。

13C NMR (DMS〇-d6): δ 20.26, 60.42, 72.72, 79.30，82.75, 91.20, 100.13, 103.08, 121.96, 1 50.37, 152.33, 1 58.1 5。 LC-MS :實驗值：279.10 (M-H+);對於 Ci2Hi6N4〇4 + h+之 計算值：279.1 1。 實例3 4-胺某-7“2-C-乙基-β-D-咭嚙核糖某V7H-毗咯「2 ， NH?

-45- :二: 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X297公釐) 1261056 A7 ------- B7 五、發明説明（41S) —' -^ 规A : 曱某 vir-广苓-UO-甲 於-78C之乙醚（3〇〇 mL)中緩緩加入(3〇 M， 16.6 mL)且然後滴加入來自實例2步驟B之化合物。8〇 §， 10.0 mmol)在無水Et2〇 (1〇〇 mL)中之溶液。在_78。〇下攪 拌該反應混合物15分鐘，使其升溫至-1Γ(：並再攪拌2 h， 且然後倒入水（300 mL)與EhO (600 mL)之經攪拌之混合物 中。分離有機相，乾燥（MgSQ4)，並在真空下蒸發之。利 用乙酸乙酯/己烷（1:2)作為溶_離液在二氧化矽凝膠上純化 違粗產物。集合含有該產物之溶離份並在真空下蒸發之以 產生呈無色油之所需產物（3.87 g)。 ：生^1^5-替-0-ί2·4-二氣茉某甲某V2_c_乙某一 核糖某1-7H-咄咯「2,3-dl嘧咜 在0C下於來自步驟A之化合物（1 ·〇2 mg，2.0 mmol)在二 氯甲烷（40 mL)中之溶液中滴加入ηΒγ (5·7 Μ在醋酸中） (1·75 mL，10.0 mm〇l)。在室溫下攪拌所產生之溶液2 h， 在真空下蒸發並自曱苯（1 〇 mL)共蒸發兩次。將油性殘餘 物溶解於乙腈中（1 0 m L)並加至4 -氯-1Η - p比洛[2，3 - d ]。密α定 (307 mg，2.0 mmol)，氫氧化鉀（337 mg，ό·0 mmol)及三 每甲基氮基甲烧[2-(2-甲氧乙氧）乙基]胺（130 mg，0.4 mmol) 在乙腈（1 0 mL)中經劇烈攪拌$混合物中。在室溫下攪掉 所生成之混合物過仪’且然後倒入飽和氯化敍（1 〇 〇 m L )與 乙酸乙酯（100 mL)之經攪拌混合物中。分離有機層，以濃 鹽水（100 mL)清洗之，在MgSCU上乾燥，過濾並在真空下 -46- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056 A7 -----— B7 五、發明説明（42 ) …、^。利用乙酸乙酯/己燒（丨：2)作為溶離液在二氧化石夕凝 膠上純化該粗產物以產生呈無色泡沫之所需產物（307 mg)。 4_亂-7 Ί C -乙幕-β - D - 口夫喃核糖某-7 Η -吨蜂 dl 口密哈 在下於來自步驟b之化合物（3〇7 mg，〇 45 mm〇i)於 一虱曱烷（8 mL)中之溶液中加入三氯化硼（1 M在二氯曱烷 中）（4.50 mL，4.50 mmol)。在_78它下攪拌該混合物工h， 然佼在-10 C下攪拌3 h。加入曱醇/二氯曱烷（1:1)(1〇 mL) 中止該反應，在-15t下攪拌_列分鐘，並加入氫氧化銨水 溶液中和之。在減壓下蒸發該混合物並利用曱醇/二氯甲 烷（1:9)作為溶離液在二氧化矽凝膠上純化所產生之油。集 合含有該產物之溶離份並在真空下蒸發，以產生呈無色泡 沫之所需產物（112 mg)。

「2,3-dl。密咭 步驟D : 於來自步驟C之化合物（50 mg’ 0.16 mm〇1)中加入飽和 氧水於甲醇（4 mL)中之溶液。在75t下於密閉容器中搜掉 該混合物72 h，冷卻並在真空下蒸發之。利用曱醇/二氣甲 烷（1 :9)作為溶離液在二氧化矽凝膠上純化該粗混合物。集 合含有該產物之溶離份並在真空下蒸發以產生呈無色粉Z 之所需產物（29 mg)。 - lH NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 〇.52 (t? 3H)? l.〇2 (m 2H), 4·(Η-3.24 (m，6H)，5.06 (m，1H)，6.0} (s，1H)，6 51 ’ (d，1H)，6.95 (s br，2H)，6.70 (d，1H)，7·99 (s 1H)。 -47- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A 7

LC-MS。實驗值：295 2 (m + h + );對於 Ci3Hi8N4〇4 + H\ 計算值：295.14。 實例4 糖某-7H-毗咯啶- 生(3HV酮 Ο

裴 免驟 A * ^^^1氣-7-「3,5二.4-二翕.芏某甲某 呋喃核J查基1-7H-吡咯「2.3-dl嘧咭 在來自貝例2步驟c之產物（ι·27 g，2.57 mmol)在CH2C12 (30 mL)中之冰冷溶液中滴加入ΗΒγ (5·7 m在醋酸中；3 在至/孤下攪拌該反應混合物2 h，在減壓下濃縮並與甲 笨（2x1d mL)共蒸發。將所產生之油溶解於乙腈（MeCN)中 (1：) mLj亚滴加至胺基_4n峨洛〇d],。定[製備參 看皇座直35· 825 (1993)](433 mg，2.57 mmol)，KOH (85% 三粉末）（0.51 g，7·7 mm〇1)，三羥曱基氮基曱烷吖2_(2_曱 氧乙氧）乙基]胺（I65吣，0W mm〇1)於乙腈〇〇叫中之經 充分攪拌之混合物中。纟室溫了攪拌所生成之混合物i h ，過濾並蒸發之。利用己烷/Ei〇Ac，5/1，3/1及2/1，作 為溶離液在二氧化矽;疑膠管柱上純化該殘餘物以產生呈無 色泡沫之標題化合物（0.65 g)。 -48-

1261056

在-78 C下於來自步驟A之產物（63〇 mg，i 〇 叫在 H2Cl2 (2〇 mL)中之溶液中加入三氣化硼（1 Μ在.CH2C12中） (1'mL，1〇 mm〇l)。在-78°C下攪拌該混合物2 h，然後在 -2〇C 下攪拌 2.5 h。以CH2Cl2/MeOH (1:1)(10 mL)中止該 反應，在-20°C下攪拌〇.5 h，並在〇t下以氨水溶液中和之 。將該固體過濾，以CEbCh/MeOH (1:1)清洗並在真空下 洛發合併之濾液。以CH2C12/N托OH，50/1及20/1，作為溶 離液在二氧化矽凝膠管柱上純化殘餘物以產生呈無色泡泳 之標題化合物（250 mg)。 免驟C — 曱基-β-D-呋喃核嫉其此口各 在回流溫度下加熱來自步驟Β之產物（9〇 mg，〇 3 mm〇1) 在Na〇H水溶液（2 n，9 mL)中之混合物5 h，然後在(TC下 以2 N HC1水溶液中和並經蒸發至乾燥。以CH2Cl2/Me〇H ’ 5 /1 ’作為溶離液在二氧化石夕凝膠管柱上純化之以供給 呈白色固體之標題化合物（7〇 mg)。 1h NMR (200 MHz，CD3〇D): δ 0·86 (s，3H)，3.79 (m，1H)， :).90-4.05 (m，3Η)，6.06 (s, 1Η)，6·42 (d，J = 3.7 Hz 1H), 7·05((1，】 = 3·7Ηζ51Η)。 ， 實例5 2-胺基二4二環丙棊胺基- 7-(2-C -甲某- β-D-咭喃核棒莘）吡 口各2,3 - d 1 口密咬 ____-49- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） l26l〇56 A7 B7 45 ) ^--- 五、發明説明（

在70 C下加熱2 -胺基-4 -氯-7-(2-C-甲基- β-D-吱喃核糖 基）-7Η-吡咯[2,3-d]嘧啶（實例 4，步驟 B)(21 mg，0.07 mmol) 在環丙基胺（0·5 mL)中之溶液-兩天，然後將其蒸發成油狀 殘餘物並以Ct^CL/MeOH，2—0/=!，作為溶離液在二氧化石夕 凝膠管柱上純化之以產生呈白色固體之標題化合物（17 mg)。 NMR (200 MHz, CD3CN): δ 0.61 (m? 2Η)5 0.81 (m5 2Η) 〇·85 (s，3Η)，2.83 (m，1Η)，3.74-3.86 (m，1Η)，3.93-4·〇3’ (m，2H)，4.11 (d，J = 8·9 Hz，1H)，6.02 (s，1H)，6.49 (d，J > 3·7 Hz，1H)，7.00 (d，J = 3·7 Hz，1H)。 實例6 ^1-D-呋喃核糖某朴h 戍

於氣氣 此化合物之製備係依循如下γ·穆瑞（Murai)等人 U3: 391-404 (1992)中所說明之方法。 ___- 50 -

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（46 ) ' - f例7 4-胺基羞♦；〇·呋喃核盤^ )_7H-毗咯「9 1个丨 °定-5 -轉gj脸 〇

此化合物之製備係依循如-下τγ·穆瑞（Murai)等人在㈣ 133 : 391-404 (1992)中所說明-之方法。 實例8 SATE前驅藥物部分之一船锄较 S-酿基-2-硫乙基（SATE)原核：y：酸係經討論於c.r.華格 納（Wagner)，V.V.伊爾（Iyer)，及 E.J·麥可印提（Mclntee)， 原核甘酸·關於抗病毒及抗癌核：y：酸之活體内遞送，’ Med, Res, Rev ? 20: 1-3 5 (2000)，其全部内容以參考文獻 併入此處。核：y：之SATE衍生物亦經揭示於美國專利號碼 5,770,725 ; 5,849,905 ;及 6,020,482，其每篇之全部内容 以參考文獻併入此處。 曹（S -乙酿某-2-銪乙某VN.N-二異丙某phosphoramidite 將2-氫硫基乙醇（5 g，64 mmol)溶解於CH2CI2 (50 mL)中 。於此溶液中加入三乙胺（7.67 mL，57.6 mmol)，並在冰 浴中冷卻該反應混合物至0 °C。在1 〇分鐘内滴加醋酸酐 (4.54 mL，48 mmol)，且在〇°C下攪拌該反應混合物1 h。 -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)

裝 訂

k 1261056 A7 B7 五、發明説明（47 ) 然後經2 h使該反應混合物回溫至室溫。以CH2C12 (5〇 稀釋該反應混合物，以水（75 mL)，5% NaHC〇3水溶液 (75 mL)及濃鹽水（75 mL)清洗。在無水NaiSO4上乾燥有機 相且在真空下濃縮以產生一種油。然後溶解該油於無水 TEE中（40 mL)並加入無水三乙胺（7·76 mL)。於此混合物 中加入經活化之分子篩（4 A)並保持在室溫下1 〇分鐘。在冰 浴中冷卻該反應混合物至0 °C並加入二氯化二異丙基亞鱗 醯胺（6.47 g，32.03 mmol)。在〇°C下攪拌該反應混合物2 h 在惰性]氣壓下。加己烷（40 mt)至該反應混合物中並過遽 所形成之沉殿。濃縮該濾液至.四分之一的體積，裝填至二 氧化矽凝膠層析管柱純化且以含有3 %甲胺及增加量之乙 酸乙酯（0至7%)之己烷溶離‘之以產生呈油狀之標題化合物 (2.36 g) 〇 ]H NMR (CDC13): δ 1.17 (s? 6Η), 1.21 (s? 6H)? 2.36 (s, 6H)，3.14 (t，J - 6.44 Hz)，3.51-3.84 (m，6H); 13C NMR (CDC13): δ 24.47，24.61，30.48，42.85，43.1，61.88，62 23 195.26; 13P NMR (CDC13): δ 146.96 〇 實例9 三碡酸鹽衍生物 本發明之核甞5’-三碌酸鹽係依照說明^chem. R.v 1〇〇: 2047 (2 0 00)中之一般方法製備a 實例1 0 5’-三磷酸鹽衍生物之純化及 利用一）0χ100 mm單Q官柱（Pharmacia)與50 mM三羥曱 -52- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公董) 1261056

基氮基甲烧，pH 8缓衝溶液系統以陰離子交換（Αχ)層析法 純化三磷酸鹽衍生物。溶離梯度典型地係自4〇Μ。 至0.8 M NaCl以二倍管柱體積且以流速65 mL/分鐘進行 。收集來自陰離子交換層析之適當溶離份且藉由逆相（Rp) 層析法利用Luna C 1 8 250x21 mm管柱（Phen〇menex)以流速 1 0 mL/分鐘去鹽。溶離梯度一般而言係在丨4分鐘内於固定 /辰度之5 mM二乙基銨醋酸鹽（teaA)中自1 %至950/〇甲醇。 經純化三填酸鹽質譜測定係利用在Hewleu_packard (Palo Alto，C A) MSD 11 〇〇上右線上HpLc質量光譜測定法 。利用 Phenomenex Luna (C18(2)) , 150x2 mm，加上 3〇χ2 mm防護管柱且3 μηι顆粒大小，於Rp HPLC。順序進 行乙腈在20 mM TEAA (三乙基銨醋酸鹽）（pH 7)中之〇至 鵠 5 0%線性梯度（15分鐘）伴隨在負離子化模型中之質譜偵測 。利用氮氣及空氣噴霧器產生電噴霧。取樣質量範圍15〇_ 900之樣品。分子質量之測定係利用Hp化學站分析套裝軟 體。 經純化三磷酸鹽純度之測定係藉由分析RP及AX HPLC 。典型地以在100 mM TEAA (pH 7)中之2-70%乙腈梯度在 15分鐘内跑具有 Phenomonex Luna或 Jupiter管柱（250x4.6 mm) 且5 μπι顆粒大小之RP HPLC。AX HPLC係在單Q 管柱（Pharmacia)上進行。在固芒濃度之50 mM三羥甲基氮 基甲烷（pH 8)中以梯度0至〇·4 Μ之NaCl溶離三磷酸鹽。一 般而言該三磷酸鹽之純度> 80%。 實例1 1 -53- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056 A7 B7 五、發明説明（49 5〜單碟酸鹽衍 於丁 etrahedr〇n 本發明之核苷T-單磷酸鹽係依照如 卜呪明

Lett· 50: 5065 (1967)中之一般方法製備。 實例1 2 5 Ί鱗酸鹽物質譜之特性描（ 本發明化合物之5’-三磷酸鹽質譜之/ 〆、J疋γ糸如方^每/ 所述。列於下表中的是對於根據實 於貝例1〇中 j y方法製備

•裝 5’-三磷酸鹽之計算及實驗質量―。該等每 代表性 等T-三磷酸鹽之母化合物。' =汽、媽相對應於該 [4-胺某-7-(2-1 口定1-5' -早碟酸靜

nh2

訂

實例 計算值 1 520.0 C 〇 Α Γ\ —值 Δ 3 5 2 0.0 Γ 534.0 -^520^0 sYfTrr~~ 4 「536.0 實例1 3 於來自貫例2步驟F之化合物mg ; 〇〇5 由與吡 啶及數次與曱苯共蒸發乾燥.之）中加入三曱基磷酸鹽（0.5 mL) 。在密封之容器中攪拌該混合物過夜。然後將其冷卻至 0C並乂針肉加入氣化亞礙酸氧（ο·。。？。mL，0.075 mmol) -54- 本紙張尺度適财國s家鮮(His) Αϋ^Χ297;ϋ 1261056 A 7 B7 五、發明説明（5〇 ) 。在0°c下攪拌該混合物3 h ，然後加入四乙基錢重碳酸鹽 (TEAB)(lM)(〇.5mL)及水（5mL)中止反應。純化該反應混 合物並根據實例1 〇中所述之方法分析之。 電子噴霧質譜（ES-MS):實驗值：359.2 (M-H + )，對於 CuH17N4〇7P-H +之計算值：359.1。 實例14 基-7-(2-C-甲某- β-D-口夬喃核糖某V7H-毗咯[mi-嘧 重上5’-二碳S#骧 …

裝 訂

於來自實例2步驟F之化合物（56 mg，0.20 mmol)(藉由與 吡啶及數次與曱苯共蒸發乾燥之）中加入三曱基鱗酸鹽（貯 存於篩子上）（1 ·0 mL)。在密封容器中攪拌該混合物過夜。 然後將其冷卻至0°C並以針筒加入氯化亞磷酸氧（0.023 mL ，0.2 5 mmol)。在0°C下攪拌該混合物2 h，然後加入三丁 基胺（0.238 mL，1·〇〇 mmol)及三丁基銨碳酸鹽（自填酸及 三丁基胺在吡啶中產生，繼而與吡啶及乙腈反覆·共沸蒸 發）（1.0 mmol在3.30 mL乙腈中丄。在〇°c下再攪拌該混合物 3〇分鐘，然後打開該密封之小玻璃瓶並加入TEAB (1 M) (1.0 mL)及水（5 mL)中止反應。純化該反應混合物並根據 實例1 0中所述之方法分析之。 -55- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7

對於 C12H18N4〇10P2-H +之 ES-MS :實驗值：439.0 (M-H + )， 計算值：439.04。 啶1-5^三旙酸鹽 nh2

於來自實例2步驟k化合物（20 mg，〇〇7匪〇1)(藉由與 吡°疋及數次與曱笨共蒸發乾燥之）中加入三甲基磷酸鹽（貯 存在篩子上）（0.4 mL)。在密封容器中攪拌該混合物過夜。 然後將其冷卻至ot：並以針筒加入氣化亞磷酸氧（〇 〇〇7〇 mL ，〇·〇75 mmol)。在(TC下攪拌該混合物3 h，然後加入三丁 胺（0.083 mL，0.35 _〇丨），三丁基銨焦磷酸鹽（i27 mg， 〇·35 mm〇1)及乙腈（貯存在篩子上）（〇·25 mL)。在ye下再攪 掉該混合物30分鐘，打開該密封之小玻璃瓶且加入teab (1 Μ)(0·5 mL)及水（5 mL)中止該反應。純化該反應混合物 並根據實例1 0中所述之方法分析之。 _ ES-MS :實驗值：519·〇 (M-H+r，對於 Gw】彻 i3P3-H +之 計算值：5 1 9.0 1。 實例1 6

-56- 本纸張尺度適财_家標準(CNS) M規格(加.7公爱) 1261056 A7 B7 五、發明説明 〇

於來自實例2步驟E之化合物（59 mg，0.18 mmol)中加入 氫氧化鈉水溶液（1 Μ)。加熱該混合物至逆流溫度1 hr，冷 卻’以HC1水溶液（2 M)中和並在真空下蒸發。利用二氯甲 烧/甲醇（4:1)作為溶離液在二紀化矽凝膠上純化殘餘物。 集合含有該產物之溶離份並在真空下蒸發之以產生呈無色 油之所需產物（53 mg)。 4 NMR (CD3CN): δ 0.70 (s5 3H)，3.34-4.15 (重疊 m，7H), 6.16 (s5 1H)? 6.57 (d5 3.6 Hz, 1H), 7.37 (d? 3.6 Hz, 1H), 8.83 (s, 1H) 〇 實例1 7 4二m-氯曱皋-β-D-咭喃椋糖華、-7H-P比咯「2.3-dl 口密咬

於來自實例2步驟F之化合物（14〇 mg，0.50 mmol)在 DMF (2.5 mL)中之經預冷（0。〇之溶液中滴加入Ν·氯琥珀 -57- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(21〇 X 297公爱） 1261056 A7 ______ B7 五、發明説明（53 ) 酿亞胺（0.075 g ’ 〇·55 mmol)在 DMF (0.5 mL)中之溶液。 在室溫下攪拌該溶液i h且加入甲醇（4 mL)中止該反應並在 真空下蒸發之。利用甲醇/二氯甲烷（1:9)作為溶離液在二 氧化發凝膠上純化粗產物。集合含有該產物之溶離份並在 真空下蒸發之以產生呈無色固體之所需產物（55 mg)。 H NMR (CD3CN)·· δ 0.80 (s，3H)，3.65-4.14 (重疊 m, 7H)， 5.97 (s br，2H)，6.17 (s，1H)，7.51 (s，1H), 8_16 (s，1H)。 ES-MS :實驗值：315 〇 + )，對於Ci2h15cin404 + H + 之計算值：3 15.09。 ' = 實例1 8 1:-¾:幕-5-淳K2-C-曱暮-β-D-咭咗核糖篡V7H-吡咯「2.3-d] 口密咬

於來自貫例2步驟F之化合物（28 mg，〇.1〇 mmol)在DMF (〇·5 mL)中之經預冷之溶液（〇。〇)中滴加入…氯琥珀醯亞胺 (0.018 mg，〇.1〇 111111〇1)在]〇]^1? (〇 5 mL)中之溶液_。在 of 下授掉該溶液20分鐘，然後在塞溫下攪拌丨〇分鐘。加入曱 醇（4 mL)中止该反應並羞空下蒸發之。利用甲醇/二氯曱烧 (1:9)作為溶離液在二氧化矽凝膠上純化粗產物。集合含有 違產物之溶離份並在真空下蒸發之以產生呈無色固體之所 -58- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Μ規格_χ撕公复) 1261056

AT 一____ B7 _ 五、發明説明（54 ) 需產物（13.0 mg)。 iH NMR (CD3CN): δ 0.69 (s，3H)，3.46-4.00 (重疊 πι，7H)， 5.83 (s br，2Η)，6·06 (s5 1Η)，7.45 (s，1Η)，8.05 (s，1Η)。 ES-MS :實驗值：359.1 (M + H + )，對於 Ci2Hl5BrN404 + H +之 計算值：359.04。 實例1 9 基甲某吐咗核糖篡V7H-毗咯「2,341喷__宜

在《^ (氣壓）下且於室溫下攪拌2-胺基-4-氯-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶（實例4，步驟B)(2〇 mg ，0·07 mmol)於 EtOH (1.0 mL)，吡啶（0.1 mL)及 10% Pd/C 以產 (6 mg)中之混合物過夜。將該混合物濾過寅式鹽濾塾並以 Et〇H澈底清洗之。蒸發合併之濾液並以CH2Cl2/Me〇^ 20/1及10/1 ’作為溶離液在二乳化石夕凝膠管挺纟屯化 生呈白色固體之標題化合物（16 mg)。 .82 (m， (s， !H NMR (200 MHz, CD3OD): δ 0.86 (s, 3Η, 2fc^ ^， (dd，J5.4’ = 3.6 Hz，J5,5”=12.7 Hz，1H，H-5，），3 ° •y4 〜（〇3 2H，H-5，，H-4丨），4.10 (d，J3,4;，.8 Hz，1H，H-v、 ^ 6.〇? 1H, H- 1丨），6.41 (d，J5,6 = 3.8 Hz，1H，H-5)，7.39 n 〜

(d，1H 6)，8.43 (s，1H，H-4). ES MS: 281.4 (MH + )。 ， 實例20 -59- --- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056

tfe 某 5 L 基-7-(2二甲基-β-D-A 羞」^糖某 Ό^11ΛζΛ1^ -4Γ3Η^^

雙，0-(2,4:^^ 茉某甲篡 V2_ L·甲基-β-D-d^—糖二某1-5 -甲甚- 7H-毗咯「ΠΗ] 嘧啶 -. 於來自貝例2步驟C之產物（ι·57 g，3.16 mmol)在CH2C12 (50mL)中之冰冷溶液中滴加入ΗΒγ (57M在醋酸中；33mL) 。在0 C下攪拌該反應混合物1 h且然後在室溫下攪拌2 h， 在真空下濃縮並與甲苯（2x20 mL)共蒸發。將所生成之油 溶解於MeCN (20 mL)中並將其滴加至胺基氯巧-曱基_ 1H-吡咯[2,3-d]嘧啶鈉鹽在乙腈中之溶液中[自胺基_心 氣-5-甲基-1Η-<嘻[2,3-d]嘧啶[製備參看Liebigs Ann 1984: 7〇8-721](1.13 g，6.2mm〇1)在無水乙腈（15〇mL) 中之溶液及NaH (60%在礦物油中，248 mg，6·2 mm〇i)在 室溫下劇烈攪拌2 h後就地產生]。在室溫下攪拌合併之該 混合物24 h且然後蒸發至乾燥〈甦該殘餘物懸浮在水（1〇〇mL) 中並以EtOAc (300+1 50 mL)萃取。以濃鹽水（1〇〇 mL)清洗 合併之萃取物，在NhSO4上乾燥，過濾並蒸發。利用乙酸 乙S旨/己烧（0至3 0% EtO Ac且以5%為一階段之梯度）作為溶 -60- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056 A7 B7 五、發明説明（56 ) 離液在二氧化碎凝膠管柱上純化粗產物（5 X 7 cm)。合併含 有該產物之溶離份並在真空下蒸發以產生呈無色泡沫之所 需產物（0.96 g)。 B : 2-胺基-4 -礼- 雙- 二氣笨基甲某 「2.3-dl 嘧症· 於來自步驟A之產物（475 mg，0·7 mmol)在丁 HE (7 mL) 中之冰冷混合物中加入NaH (01%在礦物油中，29 mg)且在 〇°C下攪拌0·5 h。然後加入I^el二(48 pL)且在室溫下攪拌該 反應混合物2 4 h。加入M e Ο H·中止該反應且蒸發該混合物 。利用己烷/乙酸乙酯（9/1 ’ 7/1，5/1及3/1)作為溶離液在 二氧化矽凝膠管柱（5x3.5 cm)上純化粗產物。合併含有該 產物之溶離份並蒸發以產生呈無色泡沫之所需化合物 (200 mg)。 C : 2-胺基-7.-丄^二雙-〇-(2,4-二氣策基甲基）_2-(^.2_^ 〇-二甲基-β.,-D-呋喃核糖某μ5-甲某·7Η-邊^ [2.3-dl嘧啶-4HHV酮 在壓力瓶中且於135 °C下加熱來自步驟B之產物（200 mg ’ 〇·3 mmol)在 1，4,二吟烷（15 mL)及 NaOH水溶液（2 N，15 mL) 中之混合物過仗。然後冷卻該混合物至〇。(3，以2 N H C 1水 溶液中和並蒸發至乾燥。將粗—r產物懸浮於MeOH中，過濾 ，且以MeOH澈底清洗固體 '濃縮合併之濾液，且利用 CH2Cl2/MeOH (40/1，30/1及20/1)作為溶離液在二氧化矽 凝膠管柱上（5x5 cm)純化殘餘物以產生呈無色泡沫之所需 -61 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1261056

化合物（150 mg)。 二曱暮二^^喃核擦 P-7H-吨咯「2.3-dl 嘧啶-4HHV 西ii| 在Parr氫化器上於50 psi且於室溫下氫化來自步驟c之產 物（64 mg，0·1 mmol)在 MeOH (5 mL)及 Et3N (〇2 mL)及 10% Pd/C (24 mg)中之混合物15天，然後濾過寅式鹽濾墊 並以MeOH澈底清洗之。蒸發合併之濾液，以 CH2Cl2/MeOH (30/1，20/1)作溶離液在二氧化矽凝膠管 柱（3 χ4 cm)上純化殘餘物以產每—胺基曱基·7·(5·〇-芊 基-2-C，2-0-二甲基-β-D·呋喃核糖基）-7比吡咯[2,3_引嘧啶_ 4(3H)-酮。該化合物（37 mg)經進一步在EtOH (2 mL)中以 10% Pd/C且在氫氣壓下氫化。在室溫下攪拌2天後，將該 反應混合物濾過寅式鹽，蒸發濾液並以CH2Cl2/Me〇H (30/1，20/1及10/1)作為溶離液在二氧化矽凝膠管柱（lx7cm) 上純化粗產物以在冷凍乾燥後產生標題化合物（12 mg)。 H NMR (200 MHz，CD3OD): δ 0.81 (s，3H，2，C-Me)，2.16 (d，Jh-6, C5-Me=1.3 Ηζ，3Η，C5-Me)，3.41 (s，3Η，2，-〇Me)， 3.67 (dd, J5’4，= 3.4 Hz，J5,5”=12.6 Hz，1H，H一5，)，3.81-3.91 (m，3H，H-5”，H-4’，H-3’），6·10 (s，1H，H-l，），6.66 (d，1H, H-6) 〇 ES MS: 323.3 (M-H)+ - _ 實例2 1 曱基曱皋+D-咕」^核搪I 吡咯 £2,3-dl 嘧咭 -62- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公爱） 1261056 A7 B7 五、發明説明（58 )

^驟&二4-二氮策某甲某V2-C-甲其- 甲某-7H-吡咯「2.3-dl嘧嘧 於來自實例2步驟C之產物（丄j6 g，2.1 mmol)在 CH2C12 (30mL)中之冰冷溶液中滴加入-^^^ (5·7Μ在乙酸中；2.2mL) 。在〇 c下擾摔該反應混合物丨h且然後在室溫下攪拌2匕， 在真二下/辰縮並與曱苯（2χ15 mL)共蒸發。經所生成之油 溶解於MeCN (1〇 mL)中並將其滴加至肛氣_5•曱基_lH-吡 咯[2,3-d]嚅。疋鈉鹽在乙腈中之溶液中[自4_氣·％曱基 口比洛[2,3-d]。密咬[製備參看；Med CheTT1. η: 1984 (1990)] (0·62 g ’ 3·7 mmol)在無水乙腈（7〇 mL)中之溶液及NaH (60A在礦物油中，148 mg，3 ·7 mmol)在室溫下劇烈攪拌2 h 後就地產生]。在室溫下攪拌合併之該混合物24 h且然後 蒸發至乾燥。將殘餘物懸浮於水中（1〇〇 mL)並以Et〇Ac (2)〇+100 mL)萃取。以濃鹽水（50 mL)清洗合併之萃取物 ，在Na2S〇4上乾燥，過濾並蒸發。利用己烷/乙酸乙酯（9/1 ，，3/1)梯度作為溶離液在三氧化矽凝膠管柱（5χ5匚⑷ 上純化該粗產物。合併含有該產物之溶離份且在真空下蒸 發以產生呈無色泡沫之所需產物（〇 87 g)。 步驟B ’ 曱基jiU2-C-甲皋-β_Γ)-咕。I核糖基 -63 - 本紙張尺度itffi t g國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056 A7

土比p各「2.3-dl嘧咭 一於之來自步驟A之化合物（〇·87 g，〇9 mm〇i)在二 虱甲烷（30 mL)中之溶液中滴加入三氯化硼（1 “在二氯甲 烷中，9.0 mL，9.0 mmol)。在―冗它下攪拌該混合物2 5 h 然後在-30°C至-20°C下攪拌3 h。加入甲醇/二氯甲烷 (^1)(9 mL)中止反應並在下攪拌所生成之混合物3〇 刀在里，然後在〇。〇以氨水溶液中和並在室溫下攪拌丨5分鐘 過;慮该固體並以（^2€：12/]\^义11(1/1，5〇1111^)清洗之。蒸 發合併之渡液，且利用CH-2故2-及CHAVMeOH (4〇/1及 3 〇 /1)梯度作為；谷離液在二氧化碎凝膠管柱（5 x 5 c m)上純化 殘餘物以提供呈無色泡沫所需之化合物（0.22 g)。 生^-基-5-曱皋夬喃核糠篡V 7Η-毗咯「2,3-dl嘧咭 於來自步驟B之化合物（0.2 g，0·64 mmol)中加入曱醇系 氨水（在0°C下飽和；40 mL)。於不鏽鋼殺菌釜中在i〇〇°c 下加熱該混合物14 h，然後冷卻並在真空下蒸發之。以 CH2Cl2/MeOH (50/1，30/1，20/1)梯度作為溶離液在二氧 化石夕凝膠管柱（5x5 cm)上轉化該粗混合物以產生呈白色固 體之標題化合物（0.12 g)。 H NMR (DMSO-d6): δ 0.60 (s, 3H, 2fC-Me), 2.26 (s, 3H, 5C-Me)? 3.52-3.61 (m, 1H, 3.70-3.88 (m, 3H, H-5M, H-4’，H-3f)，5.00 (s，1H，2:〇H〇, 4.91—4.99 (m，3H，2，_〇H， 3，-〇H，5，-〇H)，6.04 (s，1H，H-l，)，6.48 (br s，2H，NH2)， 7.12 (s，1H，H-6)，7.94 (s，1H，H-2). ES MS: 295.2 (MH+)。 -64- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) l261〇56

A7 B7 五、發明説明（60 f例22 基-7-(2-C-甲某- β-D- 口去福核糖某）-7Η- ρ比吸[2 羧酸

將貫例6之化合物（〇 · 〇 3 5 g—，U 1 mm ο 1)溶解於氨水溶 (4 mL，30 wt%)與飽和甲醇系/氨水（2 mL)之混合物中，並 加入H2〇2在水（2 mL，35 wt%)中之溶液。在室溫下攪拌該 反應混合物1 8 h。在減壓下除去溶劑，且以HpLc在逆相 管柱（Altech Altima C-18，10x299 mm，八=水，B=乙腈， 10至60% B in 50分鐘，流速2 mL/分鐘）上純化所獲得之殘 餘物以產生呈白色固體之標題化合物（0.015 g，41%)。 lH NMR (CD3OD): δ 0.85 (s? 3H? Me), 3.61 (m, 1H), 3.82 (m，1H)，3.99-4.86 (m，2H)，6.26 (s，1H)，8.10 (s, 2H), 8.22 (s5 1H)，13C NMR (CD3OD): 20.13，61.37，73.79, 80.42，84.01，93.00，102.66， 112.07， 130.07， 151.40, 152.74， 159.12， 169.30 。 _ ?1111\/18(17八8)對於（：131*117：^4〇纟+，計算值 325.1 148，實驗值 325.1143 。 - 實例23 4 -胺基- 7- (2-C -乙你基-β-D-咬喃核糖某卜洛「2.3-(11痛咬 -65- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐Υ 五 發明説明（61 nh2

二氢茉某甲某V2-P-乙嬌某-卜〇_ 咭喃核栲 在、呈預熱之研缽中氣化鈽三水合物（50 g，134.2 mmol) 磨f細粉亚移至裝置有機械攪#-器之圓底燒瓶中。在160°C ° '、工下加熱该燒瓶過贫。在氬氣下釋放真空並冷卻 該燒瓶至室溫。將無水TEF (3GG mL)以導管導至該燒瓶中 。在至/麗下攪拌所生成之懸浮液4 h且然後將其冷卻至-78°C 。在-78 C下加入乙烯基溴化鎂（1 Μ在THF中，120 mL， 120 mmol)並持續攪拌2 h。於此懸浮液中邊授拌邊滴加入 3,5-雙-〇-(2,4-二氯苯基曱基）-；μ〇-曱基4小_赤_呋喃戊糖-2-基糖（14 g，30 mm〇i)[來自實例2之步驟Β]在無水TEF (100 mL)中之溶液中。在_78。〇下攪拌該反應物* h。以飽 和氯化錄溶液中止該反應並使其回溫至室溫。將該混合物 ¥過一寅式鹽濾墊且以Et20 (2x500 mL)清洗殘餘物。分 離有機層並以EhO (2x200 mL)萃取水溶液層。在無水 NaS〇4上乾燥合併之有機層並濃縮成黏性黃油。以快速層 析法（Si〇2，10% EtOAc在乞烷中）纟屯化該油。獲得呈淡黃 色油之標題化合物（6.7 g，13.2 mmol)。 越_B :― 雙二Q,(2d_4-二氣茇基甲某成 -66- 1261056 A7 ----------- B7__ 基福祐糖某1-7H-P比吃f2,3-dl^ σ定 在-20 °C下於來自步驟a之化合物（6.4 g’ 12.6 mmol)在 無水二氯甲烧（150 mL)中之溶液中滴加入HBr (30%溶液在 AcOH 中，20mL，75.6 mmol)。在介於- i〇°c 與 0°C 下攪拌 所生成之溶液4 h，在真空下蒸發並與無水甲苯（3x4〇 mL) 共蒸發。將該油狀殘餘物溶解於無水乙腈中（丨〇〇 mL)並加 至-20°C 之 4-氯-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶鈉鹽（5.8 g，37.8 mmol) 在乙腈中之溶液中（如於實伯以中所述就地產生）。使生成 之混合物回溫至室溫並在室下授拌24 h。然後蒸發該混 合物至乾燥’置入水中並以Et〇Ac (2x300 mL)萃取之。在 NazSCU上乾燥合併之萃取物，過濾並蒸發。以快速層析法 (S i Ο1 2 ’ 1 0 % Et Ο A c在己烧中）純化該粗混合物並純化成呈 白色泡沫之標題化合物（1.7 5 g)。 ±MC ： 生^胺基-7-「3,5-勢-Ο-二氣茉某甲某墙某_ β_- D -咬喃核糖某1 - 7 Η - p比^各f 2，3 - d 1。密。宗 將來自步驟B之化合物（80 mg)溶解於最小量之二4 烷中並置於不鏽鋼彈内。將該彈冷卻至-78 t：並加入液態 氨水。密封該彈並於90°C下加熱24 h。蒸發氨水並濃縮殘 餘物成白色固體，其不經進一步純化而直接利用於下一步 驟。 — 步_驟〇 : 4-胺某-7-(2-C-乙骑…基β-D-咭喃核嫉華；叶匕0各 「2,3-dl 嘧啶 一 在-78 °C下於來自步驟C之化合物（60 mg)在二氣甲烧中 之溶液中滴加入三氯化硼（1 Μ在二氯甲烷中）。在· 78。〇下 1 __善 2 本紙張尺度適财@ g家鮮(CNS) Α4規格(21Q X 297公爱） ----- 五、發明説明（63 ) 攪拌該混合物2.5h，然後nc至—赃下授摔3h。加入 甲醇/一 I f烧（1:1)中止1亥反應並在-15°C下授拌所生成之 混合物〇·5 h，然後在〇。〇下以氨水溶液中和之並在室溫下 攪拌1)分鐘。過濾固體並以曱醇/二氯甲烷（1:1)清洗至之 。条發合併之濾液並以層析法（Si〇2，1〇%甲醇在含有〇 1% 一乙fee之EtO Ac中）純化殘餘物。蒸發含有該產物之溶離份 以產生呈白色固體之標題化合物（1〇 mg)。 lHNMR H.5^3.8 (m5 1H5 H- y’），3·9 (m d，1-H，H-4，），4.3'm H-3’），4.8-5.3 (m，6H， CH = CH2，2’-0H，3、〇H，5、〇H)，6.12 (s，1H，H],)，6.59 (d，1H，H-5)，7·1 (br s，1H, NH2)，7.43 (d，1H，H-6)，8·〇1 (s, 1H, H-2) 〇 ES-MS :實驗值·· 29u (Μ·Η-);對於 Ci3Hi6N4(vH.之計 算值·· 291.2。 貫例24 U 基-7-(2-C-轉幕V7H_成呔「2 3_dl 口密咬 nh2

L:. 4-氯-_2丄3上_雙：〇-(2^^某甲某口心锊I 甲基-β-Ώr咬喃核糖皋-丄：211^比p各「:> 密咬 -68- 1261056 A7 B7 五、發明説明（64 ) —' - 於來自貫例2)步驟B之化合物（300 mg，0.48 mmol)在 1，4-二吟烷（5 mL)中之溶液中加入>1-曱基嗎啉氧化物 (300 mg，2.56 mmol)及四氧化鐵（4%水溶液，〇·3 mL)。避 光攪拌該混合物14 h，將其濾過一寅式鹽塞以除去沉澱物 ’以水稀釋（3x)，並以EtOAc萃取。在Na2S04上乾燥 EtOAc層並在真空下濃縮。將油狀殘餘物置入二氯曱烷 (5 mL)中並在二氧化矽凝膠上之NaI〇4 (3 g，10% NaI〇4) 上攪拌12 h。過濾除去二氧彳夕凝膠且蒸發該殘餘物並將 其置入純酒精（5 mL)中。在冰溶中冷卻該溶液並分次小量 加入侧氫化納（300 mg，8 mmol)。在室溫下攪拌所生成之 混合物4 h且然後以EtO Ac稀釋之。以水（2x20 mL)，濃鹽 水（20 mL)清洗有機層並在Na2S〇4上乾燥。蒸發溶劑並以 快速層析法（Si〇2，2:1己院/EtOAc)純化殘餘物以產生呈 白色薄片之標題化合物（160 mg，0.25 mmol)。 步默生：·.胺基- 雙-0-(2,4 -二氮笑某甲篡鞀 H·基-β-β-呋喃龙糖基1-7H-P比咯「2·3-Μ哺冷 將來自步驟Α之化合物（150 mg，0.23 mmol)溶解於最小 量之1，4-二噚烷（10 mL)中並將其置於不鏽鋼彈内。冷卻該 彈至-7 8°C並加入液態氨水。密封該彈並在90°C下加熱24 h 。蒸發氨水並濃縮殘餘物成白色固體，其不經進^步純化 而直接利用於下一步驟。〃 _ 步.HL_ 4二.胺基-7-C2-：iC-Μ—基曱基-β-D-咬喃核糖暮 吡咯l~2.3-dl嘧啶 將來自步驟B之化合物（120 mg，0.2 mmol)溶解於1:1甲 I -69- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公⑹ ------

1261056 A7 B7 五、發明説明（65 ) 醇/二氯甲烧中，加入10% Pd/C，並在H2氣壓下授拌該懸 浮液12 h。將其濾過一寅式鹽濾墊以除去該觸媒並以大量 曱醇清洗之。在真空下蒸發合併之濾液且以快速層析法 (Si〇2，10%甲醇在含有0·1〇/〇三乙胺之EtOAc中）純化殘餘 物以產生呈白色粉末之標題化合物（50 mg)。 4 NMR (CD30D): δ 3.12 (d，1H，CH2，），3·33 (d，1H， CH2")，3·82 (m，1H，H-5，)，3.99-4.1 (m，2H，H-4，，H-5”)， 4.3 (d，1H，H-3，），6.2 (s，1Η，_Η^1，），6.58 (d，1H，Η·5)，7.45 (d，1H，H-6)，8.05 (s，1H， LC-MS :實驗值：297.2 (M+H+);對於C12H16N4〇5 + H+之 計算值：297.3。 實例25 生1胺基- 7-(2-C -氟曱基-β-D-口去喊核糖某V7H-外[:吃「23-d~|p密哈 NH?

步驟A :生二蝥-0-(2,4-二氣笑其曱芊、二 基-β-D-咭喃核糖某1-7H-吡咯[~2 在I氣下於來自實例24步驟Α·之化合物（63 mg，O.i mmQq 於然水二氣曱烧（5 mL)中之溶液中加入4,二曱基胺基p比咬 (DMAP)(2 mg，0.015 mmol)及三乙胺（62 pL，0.45 mmole) 。在冰浴中冷卻該溶液並加入氣化p-曱笨磺醯基（3〇 ，

1261056 A7 B7 五、發明説明（66 ) 0.15 mmol)。在室溫下攪拌該反應物過夜，以NaHC〇3 (2χ 10 mL)，水（10 mL)，濃鹽水（1〇 mL)清洗，在 Na2S〇4上 乾燥並在真空下將其濃縮成粉紅色固體。將該固體溶解於 無水THF中（5 mL)並在冰浴中冷卻之。加入氯化四丁基銨 (1 Μ在THF中之溶液，1 mL，1 mmol)並在室溫下攪拌該 混合物4 h。在真空下除去溶劑，將殘餘物置入二氯甲烷 中，並以 NaHC03 (2xl〇 mL)，水（10 mL)及濃鹽水（1〇 mL) 清洗之。在無水NazSO4上乾燥〜二氣曱烷層，在真空下濃縮 ，並以快速層析法（si〇2，2:1文己烷/Et0Ac)純化之以供 給呈白色固體之標題化合物（2〇 mg)。 心-_胺基二顧.笑莘.曱篡 1 基-β_-_Ρ-唉喃毗咚「9 3-dl,咬 將來自步驟A之化合物（18 mg，〇 〇3 mm〇1)溶解於最小 量之1，4-二气烷且將其置於不鏽鋼彈中。將該彈冷卻至_78它 並加入液態氨水。密封該彈並在9〇 t加熱24 h。蒸發氨水 並濃縮殘餘物成白色固體，其不經進一步純化而直接利用 於下一步驟。 4·胺基二 咯r2,3-dl嘧咭 將來自步驟B之化合物（16 mg)溶解於1:丨甲醇/二氣甲 ，加入ίο% Pd/c，並在仏氣，色下攪拌該懸浮液12 h。將 濾過一寅式鹽濾墊以除去該觸-媒並以大量甲醇清洗之。 真空下蒸發合併之濾、液並以快速層析法（Si〇？，^〇%曱醇 含有0·1〇/。曱胺之EtOAc中）純化殘餘物以產生呈白色粉末

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-71 - 1261056 A7 B7

標題化合物（8 mg)。 · !H NMR (DMSO-d6): δ 3.6-3.7 (m? 1H? 3 r〜/t， ^ J•卜4.j (m， 5H，Ho”，H-4’，H-3’，CH2) 5.12 (t，1H，5，-0H)，5 35 ㈠， 1H，3，-0H)，5.48 (s，1H，2，-0H)，6.21 (s，iH h ， ’ ， 1 ^ 6.52 (d，1H，H-5)，6.98 (br s，2H，NH2)，7.44 (d，iH，Η·6) 8 (s，1H，H-2)。 ’ · 19F NMR (DMS0-d6): δ-230·2 (t)。 ES-MS :實驗值：299.1 (M+Hi)，對於 C12H15FN4〇4 + h+ 計算值：299.27。 一 ； f例26及27 『2,341嘧咭及4-胺某-7-丨 糖某V7H-毗咯f2.3-dl嘧啶

口南核糖基1 - 7 Η - 口比口各_「2，3 - 〇Π哺味及7 -「3 ·~5 ·聲· d (第三-丁基-一一甲基矽基咭喃核糠某·μ7Η_ρ々 咯「2.3-dl嘧啶 — •2-C- 於殺結核菌素（5.0 g，18.7 mmol)在吡啶（75 mL)及DMF (18.5 mL)混合物中之經攪拌溶液中加入硝酸銀（6.36 g， -72- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） A 7 B7 1261056 五、發明説明（68 •3 8«8 m m ο 1) 〇 宝*、、拉-ττ』组』丨 /J3ZL下攪拌此混合物2 h。在冰浴中冷卻之 並加入THF (37 4 > 、 mL)及虱化第三-丁基二甲基矽烷基（5.6 g 37 mmol)且於室溫下攪拌該混合物2 h。然後將該混合 物濾過貝式鹽亚以THF清洗之。以含小量氯仿之醚稀釋該 ;慮液及洗液。連績以重碳酸鈉及水（3 χ 5 〇 mL)清洗有機層 ’在無水硫酸鈉上乾燥及濃縮。肖甲苯共蒸發以除去吡啶 亚以快速層析法利用5 —7% Me〇H在ch2C12中之溶液作為 溶離液在二氧化矽凝膠上純化_兹餘物；產量3 ·〇 g。 曼酈B ·_- 某二甲篡矽烷某νβ-D-咗咗 曱/氣茉某）笑篡甲某1胺 咬及 7-「3 -0-(第三-丁 基二甲 喃核糖某1-4-「二-(4-曱氫笑篡、 吡咯 f2,3-di嘧啶 於來自步驟A之化合物之混合物（3.0 g，6.0 mmol)在無 水说。定（30 mL)中之溶液中加入氣化4,4，_二曱氧三笨甲基 (2.8 g ’ 8·2 mmol)並在室溫下攪拌該反應混合物過夜。然 後以卩比σ疋水浴液搗碎該混合物並以驗萃取。以水清洗有機 層’在無水硫酸鈉上乾燥並將其濃縮成黃色泡沫（5 6 g)。 以快速層析法利用20-25% EtOAc在己烷中之溶液作為溶 離液在一氧化石夕凝膠上純化殘餘物。收集適當之溶離份並 濃縮之以提供呈無色泡沫之，隻2，，.5，_雙-〇-(第三-丁基二甲 基矽烷基）-及3’，5'-雙-〇-(第三1丁基二甲基矽烷基）保護之 核甞（分別為2.2 g及1.〇 g)。 HC二U2,5-譬-〇-(笫三-丁某二甲某矽烷某V3二ρ—甲策 -73- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

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線 1261056 A7 B7 五、發明説明（69 ) 磺醯基- β-D-咭喃核糖某1-4-「二-(4 -曱氣茉某、苯 某甲某1胺某-7H-吡咯「2.3川1痛咬 於來自步驟B之經2'，5，-雙-〇-(第三-丁基二甲基矽烷基） 保護之核嘗（2.0 g，2·5 mmol)於p比咬（22 mL)中之冰冷溶液 中加入氣化p-曱苯石黃醯基（1.9 g，9.8 mmol)。在室溫下攪 拌該反應混合物四天。然後以吡啶水溶液（5〇%，1 〇 mL)搗 碎之並以含有小量CH2C12 (10 mL)之醚（3x50 mL)萃取之。 以重碳酸鈉及水（3x30 1111〇清_遗有機層。在無水Na2S〇4上 乾燥有機層並濃縮之。與曱-笨=(3x25 mL)共蒸發以除去口比 咬。利用己烷：乙酸乙酯（70:30)作為溶離液將殘留的油濾 過二氧化矽凝膠濾墊；產量1.4 g。 : - 二(4-曱氧苯皋）苯棊甲某1胺某- 743-0-甲笑 磺蘊―基咭喃核糖某-7Η-吡咯哺咜 將來自步驟C之化合物（1 ·〇 g ’ 1 · 1 mmol)及THF (1 0 mL) 之溶液與氯化四丁基銨（1 Μ在THF中之溶液，2.5 mL)授拌 〇.5h。冷卻該混合物並以醚（50mL)稀釋之。以水（3x5〇mL) 清洗該溶液’在無水Na2S〇4上乾燥，並將其濃縮成油。利 用己烷··乙酸乙酯（1:1)作為溶離液藉由使其通過二氧化矽 凝膠墊純化該殘餘物；產量780 mg。 步驟Ε :

7也並_口各12,3-(1]-_^1：:^^4-胺基：2^,去氯-2-0：-甲 基二呋喃阿拉嘧咭

Μ在醚中之溶液，3 〇 mL)在 於此溶液中加入來自步驟D 在冰浴中冷卻CH3MgI (3.0 無水甲苯（3.75 mL)中之溶液。 •74- 1261056 A7 B7 五、發明説明（70

之化合物（500 mg，0·8 mmol)在無水甲苯（3.7 mL)中之溶 液。在室溫下攪拌所產生之混合物3.5 h。冷卻之並以NH4C1 水溶液處理且以醚（50 mL，其含有1〇 mL之CH2C12)萃取之 。分離出有機層並以濃鹽水（2x30 mL)及水（2x25 mL)清洗 之，在無水Na2S〇4上乾燥並將其濃縮成油，以快速層析法 利用4% MeOH在CH/l2中之溶液在二氧化矽凝膠上純化 之以供2-0-β-甲基化合物（149 mg)及2-C-p-甲基化合物 (34 mg)。以80%乙酸分別處理〜這些衍生物並在室溫下授拌 反應混合物2.5 h。反覆與乙商支曱苯共蒸發以除去乙酸。 將殘餘物在氯仿和水之間分溶。以氯仿清洗水溶液層並濃 縮之。利用5-10% MeOH在CHKh中之溶液作為溶離液在 二氧化石夕凝膠上純化經蒸發之殘餘物以提供呈白色固體之 所需化合物。4.二胺基去氧-2-C-曱…基-β-D-咕喃核释某).7Η> 「2,3-d]口密。定（9.0 mg): ]H NMR (DMSO-d6)： δ 0.74 (s5 3H5 CH3)5 1.77 (dd? 1H5 H-3'), 2.08 (t? 1H? H-3ff), 3.59 (m5 1H? H-5r), 3.73 (m? 1H, H- 5”），4.15 (m，1H，H-4f), 5.02 (t，1H，OH-5’），5.33 (s，iH, OH-2，)，6.00 (s，1H，H-l·)，6.54 (d，1H，H-7), 6.95 (br s, 2H，NH2)，7.47 (d，1H，H-8)，8.00 (s，1H5 H-2)rES-MS: 263.1 [M-H]。 — 4二胺基7-(3 -去氧·2-0甲基.二β_D-口夫喃暮7η·叶卜口各 f 2,3 - d 1 口密咬(15 mg) ·中 NMR (DMSO-d6): δ 1.23 (s，3H，CH3)，2·〇8 (ddd, 2H -75- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) ' '—-----

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線 1261056 A7 B7 五、發明説明（71 ) H-3’及 3’’），3.57 (m，2H，H-5’及 5")，4.06 (m，1H, H-4)，5.10 (s，1H，OH-2’），5.24 (t，1H，ΟΗ-5，），6·01 (s，1H，Η-Γ)，6.49 (d，1Η，Η-7)，6.89 (br s，2Η，ΝΗ2)，7·35 (d，1Η，Η-8)，8.01 (s? 1H? H-2) 〇 ES-MS: 265.2 [M+H]。 實例28 L胺基-7-(2,4-C-二曱基-β-D-咗喃核糖基V7H-吡咯f2.3-dl 嘧啶

步驟A · 5 -去氣-1，2-0-亞異丙某-D -咬喃太糖 將1，2-0-亞異丙基-D-吱喃木糖（38.4 g，0.2 mol)，4 -二 曱基胺基吡啶（5 g)，三乙胺（55·7 mL 0·4 mol)溶解於二氯 甲烷（3 00 mL)中。加入氯化p-曱笨磺醯基（38.13 g，0.2 mol)

並在室溫下攪拌該反應混合物2 h。然後將該反應混合物 倒入飽和重碳酸鈉水溶液中（500 mL)並將兩層分離。以棒 檬酸水溶液（2〇%，200 mL)清洗有機層，乾燥（Na2S〇4)並 蒸發之以產生一固體（70.0，匕將該固體溶解於無水丁HF (3 00 mL)並在30分鐘期間分次加'入LiAlH4 (16·0 g，〇 42 mol) 。在室溫下攪拌該混合物15 (分鐘）。在30分鐘期間滴加入 乙酸乙酯（1 00 mL)並將該混合物濾過二氧化石夕凝膠床。：農

1261056 A7 ___ B7 五、發明説明（72""") 縮濾液並在二氧化矽凝膠（EtOAc/己烷1/4)上層析所產生 之油以供給呈固體之產物（32.5 g)。 ： _3,5-雙-0-(2,4-二氦芏某甲某VI甲某-4-甲某-β-D-咕喃核糖 於冰水浴中將氧化絡（50 g，0.5 mol)，醋酸酐（50 mL， 〇·53 mol)及吡啶（100 mL，1.24 mol)添加至二氯甲烷（1L) 中並攪拌該混合物15分鐘。加入5-去氧-1，2-〇-亞異丙基-D-呋喃木糖（32 g，0.18 mol)在^二氣曱烷（200 mL)中之溶液 ，並在相同溫度下擾拌該混合勒-30分鐘。以乙酸乙酯（1 L) 稀釋該反應溶液並將其濾過二氧化矽凝膠床。濃縮該濾液 以產生黃色油。將該油溶解於1，4-二嘮烷（1 L)及甲醛（37% ，200 mL)中。冷卻該溶液至〇°C並加入固態KOH (50 g)。 在至溫下撥掉該混合物過夜且然後以乙酸乙g旨（6 X 2 0 0 m L) 萃取。濃縮後，在二氧化矽凝膠（EtOAc)上層析殘餘物以 供給呈油之產物（1.5 g)。將該油溶解於1-曱基_24比咯啶酮 (20 mL)及氯化2,4 -二氯苯基甲基（4 g，20.5 mmol)中並加 入NaH (60%，〇·8 g)。授拌該混合物過夜並以曱苯（1 〇〇 mL) 稀釋之。然後以飽和重碳酸鈉水溶液（3 X 5 0 mL)清洗該混 合物’乾燥（Na2S04)並蒸發之。將殘餘物溶解於曱醇（5〇 mL) 中並加入HC1於二喝烷（4 M_，2 mL)中之溶液。攪拌該溶 液過夜並蒸發之。在二氧化::石乙凝.膠（Et〇Ac/己烷：1/4)上 層析殘餘物以供給呈油之所需羞物（2.0 1 g)。 步塁g· : - 雙-0-(2,4-二氣笨基曱某 V2.4-二-C-甲 Ο-甲某-β-D-咗嚙核糖 -77- 本紙張尺度適用中國軋家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐)

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l26l〇56 A7 B7 五、發明説明（73 在室溫下攪拌來自步驟B之產物（2.0 g，4,0 mm〇i)與迪 斯-馬丁（Dess-Martin) periodinane (2.0 g)在二氣曱烷（30mL) 中之溶液過夜且然後在減壓下濃縮之。以乙醚（5〇爪“搗 碎殘餘物並過濾之。以Na^O3 · 5H2〇 (2.5 g)在飽和重碳 酸鈉水溶液（50 mL)中之溶液清洗濾液，乾燥（MgS〇4)，過 濾並蒸發之。將殘餘物溶解於無水Et2〇 (20mL)中並在-78T： 下滴加至MeMgBr在Et20 (3 Μ，10 mL)中之溶液中。使該 反應混合物升溫至-3 0 °C並在上。〇至-1 5 °C下攪拌5 h，然 後將其倒入飽和氯化銨水溶-液7中（5〇 mL)，將兩層分離並 乾燥有機層（MgS〇4) ’過濾、並濃縮。於二氧化石夕凝膠上層 析殘餘物（EtOAc/己烷：1/9)以供給呈糖漿之標題化合物 (1.40 g) 〇 1^_-7-「3.5-静-0-(2,4-二氪茉某甲基）-2.4-二-厂-咗梓糖某1-7Η-吡咯f2.3-dl嘧咭 於來自步驟C之化合物中（〇.7〇 g，ι·3 mm〇l)加入HBr (5 ·7 Μ在乙酸中，2 mL)。在室溫下攪拌所生成之溶液1 h ’在真空下蒸發之並與無水甲苯共蒸發（3 x 1〇 mL)。將4- 氣-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶（0.5 g，3.3 mmol)及粉末 KOH (85% ，150 mg , 2·3 mmol)在1-甲基-2-p比咯啶酮（5 mL)中攪拌 3 0分鐘並將該混合物與甲苯（1 0 mL)共蒸發。將所生成之 /合液倒入上述溴糖殘餘物並—1拌該混合物過夜。以曱苯 (50 mL)稀釋該混合物，以水（3x5〇 mL)清洗並在減壓下濃 縮之。在二氧化矽凝膠上以Et〇Ac/己烷（15/85)溶離層析 殘餘物以供給一固體（27〇 mg)。 -78 本纸張尺度適用h國冢標準(CNS)A4規格(2ι〇χ297公爱） 装 訂 線 1261056 A7 ________ B7 五、發明説明（74 ) ： ~ 基-7d2,4-C-二甲某-βϋ 喃核糖某 查丄2_，3-dl嘧琮 在不鏽鋼殺菌釜中將來自步驟D之化合物（270 mg)溶解 於二吟烧（2 mL)中並加入液態氨水（20 g)。在10〇它加熱該 混合物1 5分鐘’然後冷卻並蒸發之。將殘餘物於二氧化石夕 凝膠（EtOAc)層析以供給一固體（2〇〇 mg)。在％下振盪 (30 psi)該固體（150 mg)及 pd/c (1〇% 15〇 mg)在甲醇（20 mL) 中之溶液3 h ’過濾並蒸發之。在^氧化矽凝膠（Me〇H/CH2Cl2 :1/9)上層析殘餘物以供給呈'阳體之所需產物（35 mg)。 NMR (DMS0-d6): δ 0.65 (s，3H)，1.18 (s，3H)，3.43 (m， 2H)，4·06 (d，1H，J 6.3 Hz)，4.87 (s，ih)，5.26 (br，1H)， 5.08 (d，1H，J 6.3 Hz)，5.25 (t，1H，J 3·0 Hz)，6.17 (s，1H)， 6.54 (d，1H，J 3.5 Hz)，6.97 (s，br5 2H)，7.54 (d，1H，J 3_4

Hz), 8.02 (s，1H)。 ljC NMR (DMS0-d6): δ 18.19，21.32，65.38，73.00，79.33, 84.80，90.66，99.09，102.41，121.90，149.58，151.48, 1 57.38 〇 LC-MS :實驗值：295·1 (M + H + );對於 CnH18N4〇4 + H+之 計算值·· 295.1。 實例29 - iz·.胺基-7-(3二去氧-3'氟-2-C-曱皋-JJ)-咕喃核糖某ΜΗ-吡 —" — — 咯「2,3-dl嘧啶 - ___-79- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（75 nh2

h去氯-3-氣-1-0-甲某- 5-0-甲笨甲醯某- β-D-咭 喃核糖 攪拌1,2-0-亞異丙基-〇-呋。南一木糖（9.〇 g，50 mmol)與氯 化P-曱苯曱醯基（7.0 mL，50- iSiriol)在吡啶（50 mL)中之溶 液30分鐘。加入水（1〇 mL)&•在減壓下濃縮該混合物。將 殘餘物溶解於甲苯中（500 mL)並以水（200 mL)及飽和重碳 酸納水溶液（2〇〇 mL)清洗該溶液。將兩層分離並蒸發有機 層。將殘餘物溶解於曱醇（1〇〇 mL)中並加入HC1在二呤烷 (4 Μ ’ 1 〇 mL)中之溶液。在室溫下攪拌該混合物過夜且在 減壓下蒸發之。將所生成之油在二氧化矽凝膠（Et〇Ac/己 烧：1/1)上層析以供給一油（10.1 g)。將該油溶解於二氣曱 燒（100 mL)中並加入氟化二乙胺基硫三（DAST)(5.7 mL)。 授拌該混合物過夜且然後倒入飽和重碳酸鈉水溶液（丨〇〇 mL) 中。以曱笨萃取該混合物（2 X 5 0 mL)並濃縮合併之有機層 。在二氧化矽凝膠（EtOAc/己烷：15/85)上層析免餘物以 供給呈油脂標題化合物（1.5 〇 g):·。 3-去氧-3-氟-2-C-曱基-1-0-甲 甲酿 基-β-D-吃喃核綠 在室溫下攪拌來自步驟A之產物（1·0 g，3.5 mm〇i)及迪 -80- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x 297公釐） 1261056 A7 B7 ^發明説明（76 ) 斯-馬丁（Dess-Martin) pedodinane (2.5 g)在二氯曱烷（20 mL) 中之溶液過夜且然後在減壓下濃縮之。以乙醚（5〇 mL)搗 碎殘餘物並過濾之。以Na2S2〇3 . 5H2〇（12.5 g)在飽和重 碳酸鈉水溶液（100 mL)中之溶液清洗濾液，乾燥（IvIgS〇4) ，過濾並蒸發之。將殘餘物溶解於無水THF (50 mL)中。 在-7 8°C下加入TiCl4 (3 mL)與曱基溴化鎂在乙醚（3 μ，1〇 mL) 中之溶液並在-50至-30°C下攪拌該混合物2 h。將該混合物 倒入飽和重碳酸鈉水溶液（1 〇q_mL)中並將其濾、過寅式鹽。 以-曱苯（100 mL)卒取該濾、液並者發之。將殘餘物在二氧化 石夕/旋膠（EtOAc/己烧· 15/85)上層析以得到呈油狀之標題 化合物（1 50 mg)。 步紙。：L胺基.-7二C3-去氧-3- I· -2-C-甲某-β-D-咗喃核棒 某）-7 Η -外匕略[2 * 3 - d 1 口密口定 將來自步驟B之產物（150 mg，0.5 mmol)溶解於HBr (3 0%)在乙酸（2 mL)中之溶液中。一小時後，在減壓下蒸 發該混合物並將其與曱苯（1 〇 mL)共蒸發。將4-氯-1H-吡洛 [2,3-d]嘧啶（0.5 g，3.3 mmol)與 KOH (85%，150 mg， 2.3 mmol)粉末在DMF (3 mL)中攪拌30分鐘並將該混合物與 曱本（2 mL)共蒸發。將所生成之溶液倒入上述漠糖中並授 拌該混合物過夜。以曱苯（50 mL)稀釋該混合物，以水 (3 X 50 mL)清洗並在減壓下·，濃縮之。在二氧化碎凝膠 (EtOAC/己烷：15/85)上層析殘-餘物以供給一油（6〇 mg)。 於不鏽鋼殺菌釜中將該油溶解於二呤烷（2 mL)中並加入液 態氨水（20 g)。在85°C下加熱該混合物18 h，然後冷卻並 -81 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 771261056 A7 B7 五、發明説明（ 洛發之。在一氧化矽凝膠（甲醇/二氯甲烷：丨/9 )上層析殘 餘物以供給呈固體之標題化合物mg)。 4 NMR (DMSO-d6): δ 0.81 (s，3H)，3.75 (m, 2H)，4.16 (m 1H), 5.09 (dd? 1H? J 53.2, 7.8 Hz), 5.26 (br5 1H)? 5.77 (s 1H)，6.15 (d，1H，J 2.9 Hz)，6.59 (d，1H，J 3.4 Hz)，7.02 (s br，2H)，7·：>9 (d，1H，J 3_4 Hz)，8.06 (s，1H)。 ljC NMR (DMSO-d6): 19·40，59.56，77.24，79·29，9〇.15 91.92, 99.88, 102.39, 121.17，处9.80, 15 1.77，157.47。 19F NMR (DMSO-d6)： δ 14.66-(1^)-0 ES-MS :實驗值：283.1 (M+H+);對於 C12H15FN403 + H+之 計算值：283.1。 裝 實例3 0 安基-7：：12-C，2-Q^二曱某-β-D-哇喃核糖某V7H-此咯 dl嘧啶 NH；

線 免驟 A : 4-氯- -雙-0-(2.4 -二氯茉某甲某 V2-C.2-0- 二"曱基-咬喊核糖某1-7H-P比略[2,3-(3117¾疗 於來自實例2步驟D之化合砀（618 mg，1.0 mmol)在THF (8 mL)中之經預冷（〇°c)溶液中加入碘化曱基（709 mg， 5 ·0 mmol)及 NaH (60%在礦物油中）（44 mg，1.1 mmol) 〇 在 -82- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 ___ B7 五、發明説明（78 ) 至溫下攪拌所生成之混合物過夜且然後倒入飽和氯化銨水 溶液（50 mL)及二氯甲烷（50 mL)之經攪伴混合物。以水 (5〇 mL)清洗有機層’乾燥（MgS〇4)並在真空下蒸發之。利 用乙酸乙酯/己烷作為溶離液在二氧化矽凝膠上純化所生 成之粗產物。集合含有該產物之溶離份且在真空下蒸發以 產生呈無色泡沫之所需產物（735 mg)。 胺基雙-0-(2,4-二氮某 V2_C 2_ Q:—甲幕-β-D-峡喃核糖基1-7H-响p各丄2,3-dlp密。 於來自步驟A之化合物（735· r^g〜，1.16 mmol)中加入甲醇 系氨水（在0°C下飽和）（20 mL)。於不鏽鋼殺菌釜中在8(rc 下加熱該混合物過夜，然後冷卻之並在真空下蒸發該内容 物。利用乙酸乙酯/己烷作為溶離液在二氧化矽凝膠上純 化遠粗混合物。合併含有該產物之溶離份且在真空下蒸發 之以產生溶離液。含並含有該產物之溶離份並在真空下蒸 發之以產生呈無色泡沫之所需產物（504 mg)。 基-M2-c，2_:o-二甲皋核糖某m p比口各Γ 2，3 - d 1 口密咬 在Parr氫化器上於50 psi且於室溫下氫化來自步驟c之產 物（64 mg，0.1 mmol)，Me〇H (5 mol)，Et3N (0.2 mL)及 1 0% Pd/C (6 1 mg)之混合物過夜。將該混合物濾過—寅式鹽 ’在复...空下蒸發並利用2%甲:醇^二氣甲烷中之溶液作為 溶離液將其濾過二氧化矽凝膠〜濾墊。收集所需之產物並在 真工^~蒸發之。將3玄化合物再溶解於甲醇（1 〇 mL)中並加 入10% Pd/C (61 mg)。在Parr氫化器上於55 psi且於室溫下 -83- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056

五、發明説明（79 ) 氫化該混合物兩週。將該混合物濾過寅式鹽，在真空下暮 發並利用1〇%甲醇在二氯甲烷中之溶液作：溶離液：二： 2矽凝膠上純化之。合併含有該產物之溶離份且在盖 条發之以產生呈無色泡珠之所需產物（丨丨〇 mg)。 二 NMR (DMSO-d6): δ 0.68 (s, 3H), 3.40 (s 3H) 3 5, 3.99 (重疊 m，4H)，4.92 (d，lH)，5 〇7(t，iH)，6 26 (’s ih) 6.55(d, 1H), 7.00(s br,2H), 7.46 (d,lH), 8.05(s lH)〇 LC-MS :實驗值：MU (M-t);對於^汨“比山七+之 算值：293.12。 - k曱基胺皋 NHMe

將來自實例2步驟E之化合物（2〇〇 mg，〇67 _〇i)添加 至曱胺（5 mL，經於小型不鏽鋼殺菌釜中濃縮）並在。乞下 加溫48 h，然後冷卻並在真空下蒸發。在二氧化矽凝膠上 純化該粗混合物，用乙醇作:為^離液以產生標題化合物， 其在經以MeCN處理後以非i晶形固體分離出。將該非结 晶形固體溶解於水中並冷;東乾燥以產生無色粉末（i44mg)。 'H NMR (DMSO-d6): δ 0.63 (s, 3H, CH3), 3.32 (s, 3H, N -84- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x297公釐) ------ 1261056 五、發明説明（80

3)， —3.67(m，1H，H-5，），U3.39(m，3H，H_5，，H 算值：294.3 ^H-3 ),5.03 (s, 1Η,2^〇Η), 5.04-5.11 (1H,3^0H 5-〇H), 6.14(s, ΙΗ,Η-Γ), 6.58(d, 1H J. =36H u 7.46 (d,lH, ^)，7.70(brs, 1H,NH),8；U，6(s；1HjZh.2)'^ LC-MS :實驗值：(m_h + );對於C成雜+ 實例3 2 生-一甲.基胺某- 7- Ο- Γ1-田：Μ: β τλ -丄， 糖某、-7Η‘口各. dlp密啶 -二— ~

、裝 線 將來自實例2步驟E之化合物（2〇〇 mg, 〇6? _〇ι)添加 至二甲胺（5 mL，經於小型不鏽鋼殺菌釜中濃縮）並在85它 下加溫48 h，然後冷卻並在蓋t已蒸發。以乙醇作為溶離 液在二氧化矽凝膠上純化該粗混合物以產生標題化合物， 其在以MeCN處理後呈非結晶形固體分離出。將該非結晶 形固體溶解於水中並冷凍乾燥之以產生無色粉末（164 mg)。 !H NMR (DMSO-d6): δ 0.64 (3 3Η, CH3), 3.29 (s5 3H, N CH3)，3.32(s，3H，NCH3)，3.6—0-3.66(m，lH，H-5，），3.77-3.97(m，3H，H-5”，H-4，，H-3，)，5.04(S，lH，2，-〇H)，5.06-5·11 (1H，3，-OH，1H，5，-OH)，6.21 (s，1H，H-l，），6.69 (d, -85- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1261056 五 發明説明（81 A7 B7 1H，J5,6=3.6 Hz，H-5)，7_55 (d，1H，Η-6)，8·13 (s，1H，H-2)。 LC-MS :實驗值：309.3 (Μ-Η + );對於 C14H2〇N404+H+之計 算：308.33。 實例3 3 甲基畦喃核搪1V7H-毗咯p i

HN

將來自實例2步驟E之化合物（200 mg，0.67 mmol)添加 至環丙胺（5 mL，經於小型不鏽鋼殺菌釜中濃縮）並在85〇c 下加溫4 8 h，然後冷卻並在直空下蒸發。以乙醇作為溶離 液在二氧化秒凝膠上純化該粗混合物以產生標題化合物， 其在經以MeCN處理後以非結晶形固體分離出。溶解該非 結晶形固體於水中並冷凍乾燥之以產生無色粉末（148 mg)。 H NMR (DMSO-d6): δ 0.51-0.58 (m，2H)，〇·64 (s，3H CH3)，0.74-0.076 (m，2H)，3.62-3.67 (m，1H，H-5，)，3.79一 3.82 (m，3H, H-5，，），3.92-3.96 (m, H-4，，H-3，），5.03 (s，1H， 2、OH)，5.05-5.10 (1H，3，-〇H^m，5:-OH)，6.15 (s，1H，H_ 1’)，7.48 (d，1H，J5,6 = 3.6 Hz，ΙΪ-5)，7.59 (d，1H，H-6)，8.13 (s, 1H? H-2) 〇 LC-MS :實驗值：321.1 (M-H + );對於 C15H20N4〇4 + H +之計 -86- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 x 297公釐）

'裝 ΤΓ

1261056 A7 B7 五、發明説明（ 算值：320.3。 實例34 生^胺曱皋-β-Ρ:生喃木 毗吹

克驟A ·· · LUHCM第三叮夺^基矽烷某 级ΑΑΐ1:4-「（4-甲氧▲苯基）二茇基甲某1脍其 i比·...H3-dl嘧啶及7-「3·5-彆-0-Γ第三-丁其二甲 基矽烷基）-β-D-咭喃椋糖幕1-4-「（4-曱氫1某、二 笨基曱某1胺基- 7Η-ρ比疼r2.3-dl。密哈 於末自貝例26及27步驟A之化合物（0.32 g，0.65 mmol) 之混合物於無水吡啶（6 mL)中之溶液中加入氣化單曱氧三 苯曱基（0.30 g，0.98 mmol)並在室溫下攪拌該反應混合物 過夜。然後濃縮該混合物且將該殘餘物在CH2C12 (70 mL) 和水（20 mL)之間分溶。以水及濃鹽水清洗該有基層，乾 燥（NazSO4)並濃縮之。利用5 - 13% EtOAc在己烧中之溶液 作為溶離液在二氧化矽凝膠管柱上純化殘餘物。收集適當 之溶離份並濃縮之以提供呈v無色.泡沫之經2,，5，-雙-〇-(第 —廉' 一 三-丁基二甲基矽烷基）-及3，，5r-雙-〇-(第三-丁基二甲基矽 烷基）保護之核答（分別為343 mg及84 mg)。 兔―鄉B : U2,5-等-0-(第三-丁某二甲篡石》抆某νβ-D-赤- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明 甲氫茉某、&笨某甲 基~1 胺皋[~2.3-dl 嘧咜 在 〇C 下於二氧化鉻（9lmg，〇91 mm〇1)在 CH2Ci2 (4 中之經充分攪拌之懸浮液中加入吡啶（147 pL，J 82 mm〇1) λ、、:後加入醋酸野（μ μΕ , 〇·9 1 mm〇i)。在室溫下撥拌該 此合物0.5 h。然後加入來自步驟a之經2，，5、雙_〇·（第三_ 丁基二甲基矽烷基）保護之核苷（343 mg，0.45 mmol)在 CHAl2 (2·5 mL)中之溶液並主室溫下攪拌該混合物2 h。 然後將该混合物倒入冰冷的Et@Ac (1〇 mL)中並利用Et〇Ac 作為溶離液將其濾過二氧化矽凝膠短管柱。蒸發該濾液且 以己烧及己烧/EtOAc (7/1)作為溶離液在二氧化矽凝膠管 柱上、、’屯化w亥殘餘物以產生標題化合物（1 8 〇 m g)。

LlL2,，5-雙-〇-(第三-丁某二甲基矽忮某-甲 基-β-D-呋喃核糖基1_4-f(4-甲1篆某）二笑美甲 基Ί胺皋-·7Η-吡咯「2,3-dl嘧啶及7-C2.5-蝥-〇-(第 士-- 丁基二-曱基石夕烧某V3-C -曱基- β- D-^ p南木糖 基J-心f(4-甲氧苯基）二茉某甲某1胺暮"Η—吡咯 『2,3-dlg密难 在室溫下於MeMgBr (3·0 Μ溶液在醚中；〇·ΐ7 mL，0.5 mmol) 在無水己烷（1.5 mL)中之混合物中滴加入來自步_驟b之化 合物（78 mg，0.1 mmol)在無7匕己垸（0.5 mL)中之溶液。在 室溫下授拌2 h後，將該反應混-合物倒入冰冷的水中（1 〇 mL) 並以EtOAc (20 mL)稀釋，然後將其濾過寅式鹽，並以 EtOAc澈底清洗之。分離該層且以濃鹽水清洗有機層，乾 -88- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 _______B7 五、發明説明（84 ) 燥（NaeCU)並濃縮之。利用8至25% Et〇A(^己烷中之溶液 作為溶離液在二氧化矽凝膠管柱上純化該殘餘物以產生弘 C-曱基木糖-(60 mg)及3-c_甲基核糖_異構物（2〇 mg)。 越·Ρ : 咭喃太糖其m a卞 f 2，3 - d 啼哈 於來自步驟C之3-C-曱基-木糖異構物（6〇 mg，〇.〇8 mm〇1) 在THF (2 mL)中之冰冷溶液中加入tbaF (1 M在THF中； 0.32 mL，0.32 mmol)。在室溫jr攪拌該反應混合物5 h， 然後以CH2C12 (50 mL)稀釋，-.1^水(3x15 mL)清洗，乾燥， 並蒸叙之。將殘餘物溶解於二u号烧（〇·3 mL)中且加入8〇〇/〇 乙酸（3 mL)。在室溫下攪拌該反應混合物丨天且然後蒸發 之。將殘餘物與二嘮烷共蒸發，置入水中（5〇 mL)並以 CHzCh (2x10 mL)清洗之。濃縮水溶液層且然後冷凍乾燥 之。以CH2Cl2/MeOH (20/1及10/1)作為溶離液在二氧化矽 凝膠管柱上純化殘餘物以在冷凍乾燥後產生呈白色絨毛狀 化合物標題化合物（1 0 mg)。 H NMR (CD3CN). δ 1.28 (s? 3H, CH3)? 3.56 (br s5 1H? 〇H)，3.78 (m, 3H，H-4，，H-5，，H-5”），4.10 (bi: s，1H，〇H)， 4·44 (d，1H，Jn’U Hz，H-2’)，5.58 (d，1H，H-l，)，5.85 (br s，2H，NH2)，6.15 (br s，lH，〇H)，6.48 (d，1Η，15 6 = 3·7 Hz，H-5)，7.23 (d，1H，H-6)，(s，1H，h-2)。ES-MS: 281 [MH]+。 ' ~

實例3J 4-胺基-7-(3.:.U基-β-D-呋喃1糖某口比咯f2,3-dl嘧冷― __-89- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)' ' 1261056 A.7 B7 五、發明説明

v •.一 HO bn 利用實例32步驟D中所述之方法去保護來自實例32步驟 C之木糖-異構物（20 mg)以產生標題化合物（4 mg)。 lH NMR (CD3CN): δ 1.43 (s-^3E, CH3)? 3.28 (br s, 1H? 〇H)，3.58 (m，2H，H-5’，H-5”yr3.99 (m，ih，H-4’），4.10 (br s，1H，OH)，4.62 (d5 1H，J2，r = 8.1 Hz，H-2，），5.69 (d， 1H，H-l’），5.88 (br s，3H，〇H，NH2)，6.45 (br s，1H, 〇H)， 6.51 (d，1H，J5 6 = 3.7 Hz，H-5)，7_19 (d，1H，H-6)，8.12 (s， 1H，H-2). ES-MS: 281 [MH]+。 實例36 以-二胺皋心曱皋- 咕喃核糖某m口士咯 口密咬 ΝΗο

於不鏽鋼殺菌釜中且在100。〇-下加熱來自實例4步驟Β之 產物（24 mg)在氨水溶液（30%，10 mL)中之混合物過夜， 然後冷卻並蒸發之。以CH2Ch/Me〇H (1〇/1及〜丨）作為溶 - 90-

1261056 A7 B7 五、發明説明（86 ) 離液在二氧化矽凝膠管柱上純化該殘餘物以供給標題化合 物（1 5 m g) 〇 lH NMR (DMSO-d6): δ 0.68 (s, 3H5 CH3)? 3.48-3.58 (m? lH，H-5，），3.68-3.73 (m，2H，H-5，，，H-4，），3.84(m，lH,H-3，)，4.72 (s，1H，2，-OH)，4.97-5.03 (m，2H, 3，-OH，5，-〇H), 5.45 (br s, 2H，NH2)，6.00 (s，1H，H-l，），6.28 <d，1H，J = 3.7 Hz，H-5)，6.44 (br s5 2H，NH2)，6.92 (d，1H J = 3·7 Hz，H *· 6) 〇 -___、 ES MS: 294.1 (M-H+) 〇 — s 實例37 胺皋-2-氟- 7- (2-C -曱某- β- D-咕咕核糖基V7H -吨哈『2,3-(1~| 口密口定 NH〇

在-3 0°C下於經吡啶（1 mL)稀釋之HF/吡啶（70%，2 mL) 溶液中加入實例36之化合物（60 mg，0.2 mmol)在0.5 mL口比 啶中之溶液，繼而加入第三-丁基亞硝酸鹽（36 pL，（h3 mmol) 。在-25 °C下持續攪拌5分鐘^。一然後將該溶液倒入冰水中 (5 mL) ’以2N NaOH水溶液中-和之，並蒸發至乾燥。以 CH/h/MeOH (2〇/1及10/1)作為溶離液在二氧化石夕凝膠管 柱上純化殘餘物以供給標題化合物。 -91 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公爱） ---〜

•裝 訂

k 1261056 A7 B7 五、發明説明（87 ) 實例3 8 曱某-β-D-咗喃核糖基）-7H-毗咯 f2.3-dl 口密口定 p NH^

”驟 ~~胺基- 7-(2:3^-三-0_ 乙 Si,某-2-C-甲基 _ 核糖某V7Hw比咯「2.3-dl崎咜 於來自實例2步驟F之化合物（280 mg ,丨〇〇 mm〇1)在吡 疋中之溶液中加入醋酸酐（613 mg，6 〇 mm〇l)。在週遭溫 度下攪拌所生成之溶液過夜，在真空下蒸發並利用乙酸乙 醋/己烧作為溶離液在二氧化矽凝膠上純化所生成之粗混 &物。合併含有所需產物之溶離份並在真空下基發之以產 生所需要之產物。 土^-11^胺基-5溴-7-(2,3,5-三-〇-广醯莘-2<-甲 基-β-Q^夫喃核糖某V7H-P比吃「7 3-d~h密咜 於來自步驟A之化合物（460 mg，1·〇〇 mmol)在DMF中之 經預冷之（〇。〇)溶液中加入N-氯琥涵醯亞胺（178 mg，IrO mmol) 在DMF中之溶液。在〇〇c下授」飛_所生求之溶液3〇分鐘然後 在室溫下再攪拌3 0分鐘。加入申醇中止該反應並在^ ^ τ 洛發之。利用乙酸乙酯/己烷作為溶離液在二氧化矽凝膠 上純化所生成之粗混合物。合併含有所需產物之溶離份且 -92- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210Χ 297公釐) 1261056 A7 B7 五、發明説明（88 ) 在真空下蒸發之以產生所需要之產物。 步驟C : 4-胺某-5-氟-7-(2-C -甲某- β-D-咭喃核糖某V7H- 口比口各「2,3-d"|g密咬 於來自步驟B之化合物（5 2 9 mg，1.00 mmol)在THF中之 經預冷（_78°C)之溶液中加入丁基鋰（2 Μ在己烷中）（0.5 mL ，：LOO mmol)。在-7 8°C下攪拌所生成之溶液30分鐘且然後 以N-氟苯磺醯亞胺（3 15 mg，1.00 mmol)在THF中之溶液中 止反應。使所生成之溶液極緩_=慢地回到週遭溫度且然後倒 入經攪拌之飽和氯化銨水溶液i二氯曱烷之混合物中。在 真空下蒸發有機相並在55°C T於一密閉容器中以氫氧化銨 處理過夜。利用二氯曱烷/甲醇作為溶離液在二氧化矽凝 膠上純化所生成之粗混合物。合併含有所需產物之溶離份 並在真空下蒸發之以產生所需要之產物。 生物學分析 測量HCV NS5B聚合酶及HCV複製抑制作用所使用之測 定說明如下。 本發明化合物作為HCV NS5B RNA依賴性RNA聚合酶 (RdRp)抑制劑之效力係於以下測定中測量。 A. HCV NS5B聚合醃抑制作用之測定： 此測定法測量本發明之嘌呤核苷衍生物在雜聚之RNA模 板上抑制C型肝炎病毒（HGV) RNA依賴性RNA聚合酶 (NS5B)酵素活性之能力。 - 方法 ： 測定缓衝溶液條件（5 0 μί -總體積/反應） -93- ：* 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） '裝 訂

1261056 A7 B7 五、發明説明（89 2 0 mM三羥曱基氮基甲烷，pH 7乃 50 μΜ EDTA 5 mM DTT 2 mM MgCl2 80 mM KC1 0.4 U/pL RNAsin (Promega，標準溶液係 40單位 / μ:) 〇·7 5 pg t500 (製作500-nt RNA，利用T7決選轉錄作用且以 來自C型肝炎基因組NS2/3區域^序列） 1·6 pg經純化之c型肝炎NS5B.AlC-端:截短21個胺基酸所 形成） … 1 μΜ A，C，U，GTP (核茹三磷酸鹽混合物）

[阿伐-32P]-GTP 或[阿伐-33P]-GTP 試驗各種濃度之化合物至終濃度高達1 〇 〇 μΜ。 製作包括酵素及模板t 5 0 0之適當體積反應緩衝溶液。將 本發明之核甞衍生物吸量至96-槽培養盤之槽中。製作一 包括經放射性標記GTP之核嘗三磷酸鹽（NTP’s)混合物，並 將其吸量至96-槽培養盤之槽中。加入酵素-模板反應溶液 起始反應且使其在室溫下繼續進行1 —2 h。 加入20 kL 0.5M EDTA，pH 8·0中止反應。將NTPs在加 入反應缓衝溶液前加入中止反應溶液之空白組反應包括在 内。 - — > ~ 50 pL經中止反應之反應物點在DE81濾片（Whatman)並 讓其乾燥30分鐘。以〇.3 Μ曱酸銨，pH 8 (150 mL/每次清 洗’直到將1 mL中之cpm降至1〇〇以下，通常清洗6次）清洗 -94- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)

'裝 訂

1261056 A7 ____B7 五、發明説明（90 ) 該濾片。將該濾片置於5-mL閃爍計數液中並以閃爍計數器 計數之。 抑制百分比之計算係根據如下等式：抑制％ = 試驗組 反應物中之cpm-空白組中之cpm)/(控制組反應物中之cpm_ 空白組中之cpm)]x 1〇〇。 在HCV NS5B聚合酶測定中顯示代表性受試化合物之 IC5〇’s少於100微莫耳濃度。 B·抑制HCV RNA福盤之測定：—、 本發明化合物亦經評價其影I響—在培養之含有亞基因組 HCV複製子之肝癌（HuH-7)細胞中C型肝炎病毒RNA複製之 能力。該測定詳細說明於下。此複製子（則定法係修改在v. 洛曼（Lohmann)，F·柯諾（Korner)，J-0·柯卻（Koch)，U·海 瑞安（Herian)，L.塞爾曼（Theilmann)，及R·巴頓史拉吉 (Bartenschlager)，“在肝癌細胞株中複製亞基因組c型肝炎 病毒RNAs，’，科學285 ·· 1 10 (1999)中所述之方法。 實驗設計： 該測定係一在原位之核糖核酸酶保護作用，以閃爍計數 裝置為基礎之培養盤測定法（SPA)。將10,000-40,000個細 胞培養於含有0.8 mg/mL G418之100-200 pL培養液中in 96-槽 cytostar 培養盤（Amersham)。在 0 至 1 8 h XC 在 1 % DMS Ο中高達1 00 μΜ之各種濃立之化合物加入細胞培養物 中，然後培養24-96 h。固定細胞（20分鐘，10% d福馬林） ，浸透（20分鐘，0.25% Triton X-100/PBS)並以包含於 RNA病毒基因組中且互補於（+ )股NS5B (或其他基因）之單 -95· 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（91 ) 股33P RNA探針雜交（過夜，50°C )。清洗細胞，以RNAse處 理，清洗，加熱至65 °C且在Top-Count計數。係以每分鐘 計數值（cpm)之減少作為抑制複製之讀值。 人類HuH-7肝癌細胞係經選擇含有一亞基因組複製子， 攜帶一由HCV 5’非轉譯區域（NTR)所組成之胞漿RNA，一 可以新黴素選取之標記，一 EMCV IRES (内部核糖體進入 位點），及HCV非結構性蛋白質NS3至NS5B，且其後接著 3’ NTR。 - -— 在該複製測定中代表性受—試it:合物顯示EC5G’s少於100 微莫耳濃度。 本發明之嘌呤核甞衍生物亦經以如下所述之反篩檢 (counterscreens)評價其細胞毒性及抗病毒特異性。 C.反篩檢： 本發明之σ票吟核嘗衍生物抑制人類DNA聚合酶之能力係 以如下測定測量。 a.人類DNΑ聚合酶阿伐及貝塔之抑制： , 反應條件: 50 pL反應體積 反應鍰衝溶液組份·· 20 mM三羥曱基氮基甲烷-HC1，pH 7.5 - 2 00 pg/mL牛血清白蛋白 100 mM KC1 ' 2 mM β-氫硫基乙醇 1 0 mM MgCh -96- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 x 297公釐)

裝 η

1261056 A7 B7 五、發明説明（92 ) 1.6 μΜ dA，dG，dC，dTTP α-33Ρ -dATP 酵素及模板: 0.05 mg/mL有間隙之魚精子DNA模板 0.01 U/pL DNA聚合酶 α或 β 有間隙之魚精子DNA模板之製備： 加 5 pL· 1 M MgCl2至 500 pL活化之魚精子DNA (USB 70076); 升溫至37 °C並加入30 pL.U5 U/pL核酸外切酶III (GibcoBRL 18013-011) ； Ί ' 在37°C下培養5分鐘； …： 加熱至65°C 10分鐘中止反應； 加50-100 μί原液至經以20 mM三羥甲基氮基曱烷-HC1， pH 7.5平衡之 Bio-spin 6層析法管柱上（Bio-Rad 732-6002); 在1,000 Xg離心4分鐘溶離之； 收集溶離液並在波長260 nm測量吸光值以測定濃度。 DNA模板經稀釋於適當體積之20 mM三羥曱基氮基甲 烷-1^1，卩117.5中且酵素經稀釋於適當體積含有2 1111^0-氫硫基乙醇，及100 mM KC1之20 mM三羥曱基氮基曱烷-HC1中。將模板及酵素吸量至微離心管或96槽培養盤中。 亦分別利用酵素稀釋緩衝溶液及試驗化合物溶劑製備排除 酵素之空白組反應及排除試驗化合物之控制組反應。以含 有上列組份之反應緩衝溶液起始反應。該反應在3 7 °C下培 養1小時。加入20 pL 0.5 M EDTA中止反應。將50 pL經中 止反應之反應物點在Whatman DE8 1濾片上且以空氣乾燥 -97- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) '裝 訂

▲ 1261056

AT B7 五、發明説明（93 ) 。反覆以150 mL 0„3 Μ甲酸銨，PH 8清洗濾片，直到1 mL 洗液< 100 cpm。以150 mL純酒精清洗該濾片兩次且以150 mL 無水醚清洗一次，乾燥並在5 mL閃爍計數液中計數。 抑制百分比之計算係根據如下等式：抑制％ = [ 1 -(試驗組 反應物中之cpm-空白組中之Cpm)/(控制組反應物中之cpm-空白組中之cpm)]xl〇〇。 b·人類D N A聚合酶加瑪之抑制： 測量反應物中抑制人類DNA^聚舍酶-加瑪之潛力，其包 括 0.5 ng/pL酵素；10 μΜ dAm —，. dGTP，dCTP，及 TTP ; 2 pCi/反應 〇33P]-dATP，及 0·:4 pg/pL 活化之魚精子 DNA (購自美國生化）於含有20 mM三羥曱基氮基曱烷pH 8, 2mM β-氫硫基乙醇，50 mM KC1，10 mM MgCl2，及 0.1 pg/pL B S A之緩衝溶液中。讓該反應在3 7 下繼續進行i h然後加 入0.5 M EDTA至終濃度為142 mM以中止反應。產物之形 成係以與陰離子交換濾膜之結合及閃爍計數定量。受試之 化合物濃度高達50 μΜ。 抑制百分比之計算係根據如下等式：抑制％ =[丨-(試驗組 反應物中之cpm-空白組中之cpm)/(控制組反應物中之cpm_ 空白組中之cpm)]x 100。

在以下測定法中測量本發明嘌呤核苷衍生物抑制HIV感 染力及HI V擴散之能力。 ： l 感染力測定 測定之進行係以經選擇之低量β-半乳糖荅酶（P_gal)表現 背景且同時表現CXCR4及CCR5之Hela Magi細胞變異體。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇x 297公釐) 1261056 五、發明説明（94 使細胞接文感染48 h，並以化學發光受質（Galactolight

Plus’ Tr〇pix，Bedf〇rd，ma)定量經整合之Ηΐν ]ί LTR啟動 子產生之β-gal。抑制劑經於始於i〇〇 之兩倍連續稀釋 辰又中滴疋（一重複），在每個濃度下計算相關於控制組感 染之抑制百分比。 ΗIV擴散：$；抑制 t發明化合物抑制人類免疫不全病毒（HIV)擴散能力之 測里係藉由說明於美國專利號邊5,413,999 (1^叮9，：1995) 及 J.P·威卡（Vacca)專人，-—Ejg]〇-c· Natl. Acad. Sci·· 91: 4096-4100 (1994)之方法，其全部内容以參考文獻併入此 處。 本發明之核：y：衍生物亦經在一以MTS細胞為基礎之測定 法中4檢其對抗培養之含有亞基因組HCV複製子肝癌 (HuH-7)細胞之細胞毒性，其測定法如以下所述。HuH_7 細胞株係經說明於Η·納卡貝西（Nakabayashi)等人，Cancer Res., 42: 3858 (1982)。 e.細胞毒性測定： 細胞培養物係於適當培養液中以濃度大約為1.5 x丨〇5個 細胞/mL培養3天製備懸浮培養物且以濃度5 . 〇 X 1 〇4個細 胞/mL培養3天製備黏著性培養物。將99 pL細胞培養物移 至96槽組織培養之經處理培養盤中，並加入1 [之100-倍 終濃度之試驗化合物在DMS0中之溶液。將該培養盤培養 於37°C及5% CO,下一段特定時間。在該段培養期後，加 20 μί之Cell Titer 96 Aqueous 〇ne溶液細胞增生測定試劑 -99- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1261056 A7 ____B7 __ 五、發明説明（95 ) (MTS)(Pr〇mega)至每槽且在37 °C及5% CO2下再培養該培 養盤一段長達3 h之時間。搖動該培養盤以充分混合並利 用培養盤計讀器計讀在波長490 nm之吸光值。以已知之細 胞數在即將添加MTS試劑前製備懸浮培養細胞之標準曲線 。有代謝活性之細胞將MTS還原成formazan。Formazan吸 收波長490 nm之光。將在該化合惡存在下於波長490 nm之 吸光值與在未添加任何化合物之細胞之吸光值比較。 垦^文獻：柯瑞（Cory)，等人，“利用水溶性四銼 /formazan測定培養物中細-應^生長之測定法”，Cancer Commun. 3: 207 (1991) ° ——: 使用以下測定法測量本發明化合物對抗其他RNA依賴性 RN A病毒之活性： ^化合物對抗鼻病喜之活體外说疝毒活性測宏（細胞病__變作 用抑制測定）： 測定條件係經說明於塞德維爾（Sidwell)及赫夫曼 (Huffman)之文章，“可拋式微量組織培養盤在抗病毒及干 擾素誘發之研究上之用途”，Appl. Microbiol. 22: 797-801 (1971)中。 病毒： 利用第2型鼻病毒（rv-2)，品系HGP，及KB細胞與培養 液（0.1% NaHC〇3，無抗生-素-)培養之，如於塞德維爾 (Sidwell)及赫夫曼（Huffman)參考文獻中所述。該獲自 ATCC之病毒，係來自一患有溫和急性熱病上呼吸道疾病 之成年男性咽喉拭子。 -100- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1261056 A7 B7 五、發明説明（96""") ^ ^ 第9型鼻病毒（RV-9)，品系211，及第I4型鼻病毒（RV_ 14)，品系Tow，亦係獲自洛克威爾（Rockville，MD)之美國 類型培養物蒐藏品（ATCC)。RV-9係來自人類咽喉洗液且 RV-14係來自一患有上呼吸道疾病年輕成人之咽喉拭子。 利用該等病毒與HeLa Ohio-Ι細胞（福瑞德海登（Fred Hayden)博士，維吉尼亞大學），其係人類頸部類上皮癌瘤 細胞。利用含有5%胎牛血清（FBS)及0.1% NaHC03之MEM (伊葛氏（Eagle’s)最小必須培養L液〇作為生長培養液。 用於該三種病毒類型之抗盛— 毒試驗培養液係含有5〇/〇 FBS，0.1% NaHC03，50 pg慶大徽素 /mL，及 10 mM MgCl22MEM。 2000 gg/mL係用以測定本發明化合物之最高濃度。在加 入試驗化合物後大約5分鐘加病毒至測定培養盤中。亦進 行適當之控制組試驗。將測定盤培養於潮濕空氣及5 〇/。 C〇2中且於37°C下。以顯微鏡觀察控制組細胞形態學變化 監測細胞毒性。迴歸分析病毒CPE數據及毒性之控制組數 據可得到ED50 (50%有效劑量）及CC50 (50%細胞毒性濃度） 。選擇性指數（SI)之計算係藉由公式：SI = CC5 0 —ED50。 物對抗登革熱’班日，及黃熱之活體外抗病毒活 (CPE^p Φ丨沏丨宗、 - 測定之詳細說明係經提供於上述之塞德維爾（Sichvell)及 ，丨丨 ‘· _ 赫夫曼（Huffman)參考文獻。_ 病毒 · 第2型登革熱病毒，新幾内亞品系，係獲自疾病控制中 -101 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） !261〇56 五 發明説明（97 A7 B7

心。利用兩株非洲綠崎臟細胞培養料病毒（v叫及進 =抗病毒試驗（MA-1〇4)。該等黃熱病毒，㈣品系，係自 叉感染的λ!、鼠腦部製備，且班曰病毒，H336品系，純化 自南非一熱病男孩之血清，其係獲自atcc。利用V⑽細 胞培養該等病毒並用於測定。 lg-胞及培基苹： 利用MA-104細胞（拜歐懷塔克（Bi〇 Whittaker)公司，渥 克斯維爾（Walkersville)，MD)j^ Vqro細胞（ATCC)並將其培 養於含有5% FBS及0·1% ΝαΉ总％且不含抗生素之培養液 199。登革熱，黃熱，及班日病毒之測定培養液係ΜΕΜ， 2% FBS，0.18% NaHC03及 5 0 pg慶大黴 f /mL。 本發明化合物之抗病毒試驗係根據塞德維爾（sidwell)及 赫夫曼（Huffman)參考文獻且與上述鼻病毒抗病毒試驗相 似。该寺病毒母個均在5-6天後達適當之細胞病變作用 (CPE)讀值。 g_.化合物對抗西尼羅病毒之活體外抗病毒活測定（CPE抑制 測定） 測定之詳細說明係經提供於以上引用之塞德維爾 (Sidwell)及赫夫曼（Huffman)參考文獻。西尼羅病毒，衍 生自烏鴉腦之紐約隔離群，其係獲自疾病控制中心。Vero 細胞之培養及利用係如以上::％_述.。試驗培養液係MEM ’ 1% FBS，0.1% NaHC03及 5 0 pg慶大黴素/mL。 本發明化合物之抗病毒試驗之進行係依照塞德維爾 (Sidwell)及赫夫曼（Huffman)之方法，其與測定鼻病毒活 -102- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1261056 A7 ----B7五、發明説明（98 ) ' ' 性之方法相似。在5_6天後達適當之細胞病變作用（CPE)讀 值。 祭荃熱、班曰、及西尼羅病 中性红摄取測定） 在進仃上述CPE抑制測定後，利用另一細胞病變偵測方 法’其係經祝明於“干擾素之微量滴定測定：細胞病變作 用之微里刀光光度疋量，，，Appi Environ· Microbiol· 31: 35·38 (1976)。利用型號EL301之微量盤計讀器（Bio-Tek儀 态公司）計讀該測定盤。£D5a，系及-CD50:，S之計算如上。 1藥調配物實例 本發明化合物之口服組合物之一特定士具體實施例係調 製50 mg實例1之化合物與夠細分之乳糖題以提供總量58〇 至5 90 mg填充一 〇型規格之硬明膠膠囊。 雖然本發明已就其特定之具體實施例加以說明及實證， 凡熟習此項技藝者都會認同可對其作各種變化、修改、及 取代而不脫離本發明之精神及範疇。例如，除了本文前述 之較佳劑量外，可根據HCV感染治療的人嚴重度反應之變 化採取合適之有效劑量。同樣地，所觀察到的藥理學反應 會有變化’其係依據且取決於所選擇之特殊活性化合物或 是否存在醫藥載體，及所使用之調配物類型及投藥模式， 且對結果之這類預期變化或差差係涵蓋於根據本發明之目 的及實務中。因此，希望本發明僅限於以下之申請專利範 圍並廣義說明該等合理之申請專利範圍。 -103- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇 x 297公釐)

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k

Claims (1)

1. i26i〇H_93號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(93年6月）D8 A(S B8

   申請專利範圍 1. 一種結構式11之化合物

   或其在醫藥上可接受之鹽； 其中 R1係Ci-3烷基，其中烷基係視情況地經羥基，胺基’ Cl] 烧氧基’ Ci.3燒基硫，或一至三個氟原子所取代’ R2係羥基，氟，或CN4烷氧基； R3係氫，鹵素，羥基，胺基，或Cw烷氧基； R’係氫，Ρ309Η4，P2〇6H3，或 Ρ03Η2 ; R8係氫，胺基，或CN4烷基胺基； R係氫’氰基，甲基，鹵素，或conh2;且 R及R係各自獨立地為鼠’鹵素，經基，胺基，C1 - 4 烷基胺基，二（Cw烷基）胺基，或c3_6環烷基胺基； 其限制條件為當R1為心曱基’ R2及…為卜羥基，Rio為 胺基，且R3，R8，及R1 1為氫時，則R9不能為氰基或 CONH2。 2.根據申清專利範圍第1項之化合物，呈中 R1係基，氟曱基，羥基甲基，二氟甲基，三氟甲基，或 胺基甲基； 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1261056 μ V。 1)8 六、申請專利範圍 R1系經基，氟，或曱氧基； R3係氫，氟，羥基，胺基，或甲氧基； R5係氫或P3〇9H4 ; Rs係氫或胺基； R9係氫，氰基，曱基，鹵素，或C〇NH2 ;且 R1G及R11係各自獨立地為氫，氟，羥基，或胺基； 其限制條件為當R1為/3-甲基，R2且R3為心羥基，R1()為 胺基，且R5，R8，及R11為氫時，則R9不能為氰基或 C〇NH2 〇 3.根據申請專利範圍第1項之化合物，其係選自由下列所 組成之群： 4-胺基-7-(2-C-曱基呋喃阿拉伯糖基）-7H-吡咯[2,3-d ]癌σ定， 4-胺基-7-(2-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d]嘧 σ定， 4-甲基胺基-7-(2-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d ]σ密淀， 4-二曱基胺基-7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]嘧啶， 4-環丙基胺基-7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯 [2,3-d]嘧啶， 4-胺基-7-(2-C-乙烯基呋喃核糖基）-7H”比咯[2,3-d] σ密σ定， 4-胺基- 7-(2-C-羥基曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3- -2- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格（210X 297公釐） 1261056 B<s Dh 六、申請專利範圍 d ]哺σ定， 4-胺基- 7-(2-C -氟甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d] σ密σ定， 4-胺基-5-甲基- 7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]嘧啶， 4-胺基- 7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η，ί：咯[2,3-d]嘧 啶-5-羧酸， 4 -胺基-5->臭-7-(2-C-甲基-/3 - D -咬喃核糖基）-7 Η - ?比口各 [2,3-d]σ密咬， 4-胺基-5-氣-7-(2-C-甲基-/3 - D - 17夫喃核糖基）-7 Η -叶匕0各 [2,3-d] °密咬， 4 -胺基-5-氣-7-(2-C-曱基-0 - D -咬喃核糖基）-7 Η - p比σ各 [2,3 - d] °密 σ定， 2,4-二胺基-7-(2-(>甲基-/3-0-呋喃核糖基）-71{-吡咯[2,3-d ] σ密σ定， 2-胺基-7-(2-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯[2,3-d]嘧 口定， 2-胺基-4-環丙基胺基-7-(2-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）- 7H-口比口各[2,3-d] 口密 口定， 2-胺基-7-(2-C-曱基-&D-呋喃核糖基）-7H^比咯[2,3-d]嘧 啶-4(3H)-酮， 4-胺基- 7-(2-C-乙基-/3-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧 啶， 4-胺基-7-(2-C，2-二甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3- -3-

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   本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1261056 Λβ Β8 C8 D8 申請專利範圍 d ]。密σ定， 7-(2-C-曱基-fD-呋喃核糖基）-7Η-。比咯[2,3-d]嘧啶-4 (3 Η) -嗣， 2 -胺基-5-甲基- 7- (2-C，2-二曱基- /3-D -咬0南核糖基）-7Η-ρ比 咯[2,3-d]嘧啶-4(3Η)-酮， 4-胺基-7-(3-去氧-2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]嘧啶， 4-胺基-7-(3-去氧-2-C-甲基-/3-D-呋喃阿拉伯糖基）-711-叶匕洛[2，3 - d ] °密σ定， 4_胺基-2-氟-7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]嘧啶， 4 -胺基- 7- (3-C -甲基-/3 - D -咬喃核糖基）-7 Η - 口比。各[2，3 - d ]咕 淀， 4-胺基-7-(3-C-曱基-/3-D-呋喃木糖基）-7Η-吡咯[2,3-d]嘧 口定， 4-胺基-7-(2,4-二-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7H-说咯 [2,3-d]嘧啶，及 4-胺基-7-(3-去氧-3氟甲基-|S-D-呋喃核糖基）-7H-叶匕°各[2,3-d] °密σ定； 及其相對應之5 ’ -三磷酸鹽； 或其在醫藥上可接受之鹽。 4.根據申請專利範圍第3項之化合物，其係選自由下列所 组成之群· 4-胺基-7-(2-C-甲基-/3-D-呋喃阿拉伯糖基）-7Η-吡咯[2,3- -4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格（210X297公釐） 1261056 A 8 B8 --____〇8 六利範圍~~~~ ' d ] 口密σ定， 胺基- 7-(2，C -曱基W-D-呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧 啶， 4月女基-7-(2-C -氟曱基-&D-呋喃核糖基>7H-吡咯[2,3-d] σ密咬， 4_月女基-曱基~7-(2-C-甲基W-D-呋喃核糖基）-7Η“比咯 [2，3 - d] °密咬， 胺基_5〃;臭'742-C-曱基H吱喊核糖基）-7H-吡咯 [2,3-d] ^密 σ定， 胺基-5-氟-7_(2-C-曱基-/3-D-呋喃核糖基）-7Η-吡咯 [2,3-d]嘴咬，及 胺基-7-(2-C，2_二甲基呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘴σ定， 及其相對應之5、三磷酸鹽； 或其在醫藥上可接受之鹽。 乂根據申請專利範圍第4項之化合物，其係4-胺基-7-(2-C-甲基呋喃阿拉伯糖基）_7H-吡咯[2,3-d]嘧啶；或其 在醫藥上可接受之鹽。 根據申叫專利乾圍第4項之化合物，其係4·-胺基-7 - (2 - C -曱基-&D-呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶；或其在醫 藥上可接受之鹽。 7.根據申請專利範圍第4項之化合物，其係心胺基-7-(2-C-氟曱基-/3-D-呋喃核糖基）_7H-吡咯[2,3-d]嘧啶；或其在 醫藥上可接受之鹽。 -5- 本紙張尺度適用f _ ?_(CNS) A4規格τ^1〇Χ297公董） 1261056

   申請專利範圍 8. 根據申請專利範圍第4項之化合物，其係4_胺基_5_氣_7_ (2 —甲基呋喃核糖基）-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶；或其 在醫藥上可接受之鹽。 9. 根據申請專利範圍第4項之化合物，其係扣胺基巧·溴 (2-C-甲基-/3-D-呋喃核糖基）比咯[2,3_d]嘧啶；或其 在醫藥上可接受之鹽。 —種抑制RNA依賴型RNA病毒聚合酶及治療RNA依賴型-RNA病毋感染之醫藥組合物，其包含根據申請專利範圍 第1項之化合物及在醫藥上可接受之載體。 11. 根據申租專利範圍第10項之醫藥組合物，其中該rna依 賴型RNA病毒聚合酶係hcv NS5B聚合酶，該RNA依賴 型RNA病毒複製係Hcv複製，且該rNa依賴型rNA病毒 感染係HCV感染。 12. 根據申請專利範圍第丨項之化合物，其係用於治療哺乳 類動物之RNA依賴型RNA病毒感染。 13·根據申請專利範圍第12項之化合物，其中該rNa依賴型 RN A病毒感染係c型肝炎感染。 1 4.根據申請專利範圍第丨項之化合物，其係用於製造治療 哺礼類動物RNA依賴型RNA病毒感染之醫藥品。 1 5,根據申請專利範圍第14項之化合物，其中該rna依賴型 RNA病毒感染係c型肝炎感染。 根據申請專利範圍第3項之化合物，其係2_胺基 甲基-β - D -吱喃核糖基卜7 各[2，3 - d] °密咬-4 (3 Η)-酿I ; 或其在醫藥上可接受之鹽。 -6 - 本紙張尺度適财s S家料(CNS) Α4規格T21QX297公b 1261056 as B8 C8 D8 六、申請專利範圍 17.根據申請專利範圍第4項之化合物，其係4-胺基-5-氟-7-(2-(：-甲基-/3-0-呋喃核糖基）-71吡咯[2,3-(1]嘧啶；或其 在醫藥上可接受之鹽。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐）

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