CZ305466B6 - Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití - Google Patents

Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití Download PDF

Info

Publication number
CZ305466B6
CZ305466B6 CZ2013-845A CZ2013845A CZ305466B6 CZ 305466 B6 CZ305466 B6 CZ 305466B6 CZ 2013845 A CZ2013845 A CZ 2013845A CZ 305466 B6 CZ305466 B6 CZ 305466B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pyrimidine
pyrrolo
ribofuranosyl
furan
thiophen
Prior art date
Application number
CZ2013-845A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2013845A3 (cs
Inventor
Michal Hocek
Petr Nauš
Olga Caletková
Marian Hajdúch
Petr Džubák
Original Assignee
Ústav organické chemie a biochemie Akademie věd České republiky, v. v. i.
Univerzita Palackého v Olomouci
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ústav organické chemie a biochemie Akademie věd České republiky, v. v. i., Univerzita Palackého v Olomouci filed Critical Ústav organické chemie a biochemie Akademie věd České republiky, v. v. i.
Priority to CZ2013-845A priority Critical patent/CZ305466B6/cs
Publication of CZ2013845A3 publication Critical patent/CZ2013845A3/cs
Publication of CZ305466B6 publication Critical patent/CZ305466B6/cs

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce I, kde R je methylsulfanyl, methoxy-, methylamino- nebo dimethylamino- skupina a R´ je furan-2-yl, furan-3-yl, thiofen-2-yl, thiofen-3-yl, fenyl, benzofuran-2-yl, ethynyl či jód, nebo jejich optický izomer či směs takových optických izomerů, za předpokladu, že pokud R´ je jód, R není methoxyskupina. Sloučeniny podle tohoto řešení vykazují silné cytostatické a cytotoxické účinky na buněčných liniích preferenčně nádorového původu, a to na širokém spektru nemocí zahrnujících nádory různého histogenetického původu.

Description

Oblast techniky
Vynález se týká nového typu látek s protinádorovou aktivitou ajejich terapeutického použití.
Dosavadní stav techniky
Přestože existují a jsou schváleny desítky antiproliferačních léčiv, léčba řady typů leukémií a nádorů má nízkou úspěšnost. Proto je třeba vyvíjet další nové typy protinádorových látek pro terapeutické použití.
Před několika lety byla naší skupinou objevena, patentována a později publikována nová třída cytostatických látek, 7-aryl- a 7-hetaryl-substituované 7-deazaadenosinové nukleosidy (viz níže obecný vzorec A), (Bourderioux, A.; Nauš, P.; Hocek, M., US 61/171.656 (2009), PCT/CZ 2010/000050, WO 2010/121 576 A2; Bourderioux, A.; Nauš, P.; Perlíková, P.; Pohl, R.; Pichová, I.; Votruba, I.; Džubák, P.; Konečný, P.; Hajduch, M.; Stray, K. M.; Wang, T.; Ray, A. S.; Feng, J. Y.; Birkus, G.; Cihlař, T.; Hocek, M., J. Med. Chem. 2011, 54, 5498-5507).
OH OH
R' = aryl, heteroaryl (A)
Uvedené látky vykazovaly nanomolámí cytostatický a cytotoxický efekt proti širokému spektru leukémií a solidních nádorů. Tento typ látek se vyznačoval přítomností aminoskupiny v poloze 6 na 7-deazapurinové bázi, přičemž aminoskupina vystupuje jako donor vodíku při tvorbě vodíkových vazeb s cílovou biologickou strukturou (proteinem) a tím mimikruje vazbu přirozeného nukleosidu adenosinu (Schéma 1).
donor vodíkové vazby
Schéma 1
Známé jsou rovněž slabě cytostatické 7-deazapurinové ribonukleosidy substituované v poloze 6 a nefimkcionalizované v poloze 7, tedy sloučeniny postrádající v poloze 7 pravděpodobný farmakofor nyní testovaných sloučenin (Gerster, J. F.; Carpenter, B.; Robins, R. K.; Townsend, L. B.,
-1 CZ 305466 B6
J. Med. Chem. 1967, 10, 326-331). V předkládané přihlášce vynálezu byly tyto sloučeniny použity jako referenční látky v SAR studiích.
U obdobných 6-substituovaných 7-deazapurinových ribonukleosidů nesoucích v poloze 7 kyanoskupinu (tj. nitrilovou skupinu) byly zjištěny antivirové účinky vůči HCV (Varaprasad, C. V. N. S.; Ramasamy, K. S.; Girardet, J.-L.; Gunic, E.; Lai, V.; Zhong, W.; An, H.; Hong, Z., Bioorg. Chem. 2007, 35, 25-34).
Připraveny byly i 6-methoxy-7-deazapurinové ribonukleosidy, substituované v poloze 7 halogenem (Seela F.; Ming, X., Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861; Zhang, L.; Zhang, Y.; Li, X.; Zhang, L., Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 907-912). Nebyly však testovány vzhledem k možné biologické aktivitě. V předkládané přihlášce vynálezu byl 5-jod-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-/]pyrimidin použit jen jako referenční látka v SAR studii a též jako výchozí sloučenina pro přípravu ostatních 6-methoxy-7-dezapurin ribonukleosidů.
Podstata vynálezu
Tento vynález popisuje nové 6-substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy, které vykazují silné cytostatické a cytotoxické účinky na buněčných liniích preferenčně nádorového původu, a to na širokém spektru nemocí zahrnujících nádory různého histogenetického původu. Od předchozího typu 7-deazaadenosinových derivátů obecného vzorce A se zásadně liší přítomností substituentu v poloze 6 (methoxy, methylsulfanyl, dimethylamino nebo methylamino skupina), majícího charakter akceptoru a nikoli donoru vodíkové vazby (Schéma 2). Proto se u nich předpokládá jiný typ interakce s cílovým biologickým systémem.
akceptor vodíkové vazby
X = O, S, NCH3
Schéma 2
Předmětem vynálezu jsou substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce I
HO
kde
R je methansulfanyl, methoxy-, methylamino- nebo dimethylamino- skupina a
-2CZ 305466 B6
R'je furan-2-yl, furan-3-yl, thiofen-2-yl, thiofen-3-yl, fenyl, benzofuran-2-yl, ethynyl či jód, jejich optické izomery či směs takových optických izomerů, za předpokladu, že pokud je R'je jód, R není methoxyskupina.
Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy mohou tvořit i soli, které jsou v rámci rozumného lékařského úsudku vhodné pro použití v kontaktu s tkáněmi lidí a nižších živočichů bez nežádoucí toxicity, podráždění, alergické reakce a podobně a vykazují přijatelný poměr prospěchu a rizika. Tak zvané farmaceuticky přijatelné soli jsou dobře známé v oboru, například P. H. Stáhl a spoluautoři popsali farmaceuticky přijatelné soli podrobně v „Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use“ (Wiley VCH, Zunch, Switzerland: 2002). Příklady takových solí zahrnují, nikoli výlučně, acetát, adipát, alginát, citrát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, bisulfát, butyrát, kafrát, kafrsulfonát, diglukonát, glycerofosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, flumarát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyethansulfonát (isethionát), laktát, maleát, methansulfonát, nikotinát, 2-nafltalensulfonát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartrát, thiokyanát, fosfát, glutamát, bikarbonát, p-toluensulfonát a undekanoát. Rovněž skupiny obsahující dusíkový atom mohou být kvartemizovány činidly jakými jsou nižší alkylhalogenidy jako methyl-, ethyl-, propyl- a butylchloridy, bromidy a jodidy; dialkylsulfáty jako dimethyl-, diethyl-, dibutyl- a diamylsulfáty, halogenidy s dlouhým řetězcem jako jsou decyl-, lauryl-, myristyl- a stearylchloridy, bromidy a jodidy; arylalkylovými halogenidy jako benzyl a fenethylbromidy a dalšími.
Ve výhodném provedení jsou předmětem vynálezu následující substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce I:
5-(Furan-2-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-í7]pyrimidin,
5-(Furan-3-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-ř/]pyrimidin,
4-Methoxy-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-77/-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin,
4-Methoxy-7-(P-D-ribofiiranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2,3-<y]pyrimidin,
4- Methoxy-5-fenyl-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
5- (Benzofuran-2-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-(7]pyrimidin, 5-Ethynyl—4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin, 5-Jod-4-methylthio-7-((3-E)-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ď]pyrimidin, 5-(Furan-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-<7]pyrimidin, 5-(Furan-3-yl)-4-methylthio-7-(p-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-<7]pyrimidin, 4-Methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin, 4-Methylthio-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-77í-pyrrolo[2,3-(7]pyrimidin,
4- Methylthio-5-fenyl-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pynOlo[2,3-í/]pyrimidin,
5- (Benzofuran-2-yl)-4-methylthio-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin, 5-Ethynyl-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin, 5-Jod-4-methylamino-7-([3-D-ribofuranosyl)-7.řf-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidm, 5-(Furan-2-yl)-4-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-(7]pyrimidin, 5-(Furan-3-yl)-4-methylainino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin, 4-Methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin, 4-Methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-77/-pyrrolo[2,3-í7]pyrimidin,
4— Methylamino—5-fenyl-7—(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidin,
5- (Benzofuran-2-yl)-4-methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin,
-3CZ 305466 B6
5-EthynyM-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin,
4-Dimethylamino-5-jod_7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
4-Dimethylamino-5-(furan-2-yl)-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin,
4-Dimethylamino-5“(furan-3-yl)-7-(P-D-ribofiiranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-<'/]pyrimidin,
4-Dimethylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin,
4-Dimethylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7/7-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin,
4- Dimethylamino-5-fenyl-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin,
5- (Benzofuran-2-yl)-4-dimethylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidin a 4-Dimethylamino-5-ethynyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou dále substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou také substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy o obecném vzorci I pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo pro léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění, spojeného s buněčnou hyperproliferací.
Předmětem vynálezu jsou i substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy o obecném vzorci I pro použití k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících např. nádory epiteliálního, mesenchymálního a neuroektodermálního původu.
Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek obsahující terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo pro léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění, spojeného s buněčnou hyperproliferací.
Termín „terapeuticky účinné množství“, jak se zde používá, se týká takového množství sloučeniny nebo léčiva, které je účinné při „léčení“ onemocnění nebo poruchy u člověka, popřípadě savce. V případě léčby rakoviny může terapeuticky účinné množství léčiva snížit počet rakovinných buněk; snížit velikost nádoru; inhibovat (tj. do určité míry zpomalit a s výhodou zastavit) infiltraci rakovinných buněk do periferních orgánů; inhibovat (tj. zpomalit do určité míry a s výhodou zastavit) tvorbu metastází nádoru, inhibovat, do určité míry, růst nádoru a/nebo zmírnit do určité míry jeden nebo více symptomů spojených s rakovinou. Vzhledem ktomu, léčivo může zabránit růstu a/nebo zabíjet existující rakovinné buňky, může být cytostatické a/nebo cytotoxické.
Výraz „farmaceutický prostředek“ označuje formulaci sloučeniny a média obecně uznávanou v oboru pro dodání biologicky účinné látky savci, např. člověku. Takové médium zahrnuje všechny farmaceuticky přijatelné nosiče, ředidla nebo pomocné látky.
Výraz „farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo plnivo“, jak se zde používá, zahrnuje bez omezení jakoukoliv pomocnou látku, nosič, kluznou látku, sladidlo, konzervant, barvivo, látku zvýrazňující chuť, povrchově aktivní činidlo, dispergační činidlo, suspendační činidlo, stabilizátor, izotonický prostředek, rozpouštědlo, nebo emulgátor, které byly schválené pro použití u lidí nebo domácích zvířat.
Vynález dále zahrnuje sloučeniny vzorce I pro podání ve formě jediné účinné látky farmaceuticky přijatelného prostředku, který může být vyroben pomocí obvyklých postupů, známých v obo-4CZ 305466 B6 ru, například tak, že se účinná látka naváže na farmaceuticky přijatelný, terapeuticky inertní organický a/nebo anorganický nosič či excipient, nebo se s ním smíchá.
Další možností je použití sloučeniny vzorce I jako druhé či další aktivní složky, mající synergický účinek s jinými účinnými látkami ve známých léčivech či podávání sloučenin vzorce I společně s takovými léčivy.
Sloučeniny vzorce I podle tohoto vynálezu lze rovněž používat ve formě prekurzoru (proléčiva) nebo v jiné vhodně upravené formě, která uvolňuje aktivní látku in vivo.
Detailní popis vynálezu
Číslování sloučenin.
Dále je použito následující číslování uváděných sloučenin:
1a-1h
2a-2h
3a-3h
4a-4h
R'=
ΛΛΛΖ a
/vw
II
I
I tAZW
Příprava látek.
Potřebné výchozí 6-substituované 7-jod-7-deazapurinové ribonukleosidy lh, 2h, 3h, 4h byly připraveny reakcí 4-chlor-5-jod-7-(2,3,5-tri-0-benzoyl-|3-D-ribofuranosyl)-7H-pyrrolo[2,3í/lpyrimidinu 5 {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861} s odpovídajícími nukleofilními činidly (Schéma 3). Souběžně s nukleofilní aromatickou substitucí došlo za použitých reakčních podmínek k odstranění benzoylových skupin za vzniku volných ribofuranosidů.
Schéma 3
Nukleofil
1h, R= OMe, 97%, (Lit. Seela 2007) 2h, R= SMe, 94%
3h, R= NHMe, 92%
4h, R= NMe2, 84%
-5CZ 305466 B6
7-(Het)aryl 7-deazapurinové ribonukleosidy 6-methoxy řady la-f, 6-methylthio řady 2a-f, 6methylamino řady 3a-f a 6-dimethylamino řady 4a-f byly připraveny z příslušných jodidů lh, 2h, 3h, 4h Suzukiho reakcí s odpovídajícími boronovými kyselinami (Schéma 4). Palladiem kata5 lyžované reakce byly provedeny ve vodném prostředí za podmínek vyvinutých Shaughnessym {Western, E.C.; Daft, J. R.; Johnson, E. M.; Gannett, P. M.; Shaughnessy, K. Η. E. J. Org. Chem. 2003,65, 6767-6774}.
io Schéma 4
HO'' t)H
1h, R= OMe 2h, R= SMe 3h, R= NHMe 4h, R= NMe2
R’-B(OH)2 Pd(OAc)2, TPPTS Na2CO3, H2O/MeCN
Hď 'bH
1a-1f, R = OMe 2a-2f, R = SMe 3a-2f, R = NHMe 4a-4f, R = NMe2
R' Produkty 1, 2, 3, 4 (výtěžek)
furan-2-yl 1a (75%) 2a (46%) 3a (86%) 4a (49%)
furan-3-yl 1b (73%) 2b (90%) 3b (96%) 4b (44%)
thiofen-2-yl 1c (86%) 2c (67%) 3c (94%) 4c (49%)
thiofen-3-yl 1d (79%) 2d (81%) 3d (98%) 4d (55%)
fenyl 1e (82%) 2e (49%) 3e (95%) 4e (42%)
benzofuran-2-yl 1f (85%) 2f (23%) 3f (64%) 4f (69%)
Ethynyl deriváty lg, 2g, 3g, 4g byly připraveny z příslušných jodidů lh, 2h, 3h, 4h Sonogashi15 rovou reakcí s trimethylsilylacetylenem a následným odstraněním trimethylsilylové chrániči skupiny v zásaditém prostředí (Schéma 5).
Schéma 5
v
HO OH
1. =-TMS PdCI2(PPh3)2 Cul NEt3 DMF
2. K2CO3, MeOH
Hď bH i, R= OMe 19, R = OMe, 88%
2i, R= SMe 2g, R = SMe, 66%
3i, R= NHMe 3g, R = NHMe, 78%
4i, R= NMe2 4g, R = NMe2 81 %
-6CZ 305466 B6
Pokud testované látky vykázaly cytotoxickou/cytostatickou aktivitu, byla prakticky vždy preferenční vůči širokému spektru nádorových linií různého histogenetického původu (mesenchymální i epiteliální nádory), s významně menší aktivitou a tudíž dobrým in vitro terapeutickým indexem (10 až lOOx) vůči liniím normálních lidských fibroblastů (BJ a MRC-5). Hodnoty IC50 často dosahovaly submikromolámích koncentrací. Cytotoxická aktivita vůči nádorovým buňkám nebyla závislá na statusu genu p53, jelikož podobné aktivity jsme pozorovali jak u linií HCT116 (p53 wild type), tak u mutantní linie s deletovaným genem HCT116 (p53 -/-). Řada derivátů však vykazovala sníženou cytotoxicitu na buňkách overexprimujících transportní proteiny (mdr-1 u linie K562-TAX a mrp-1 u linie CEM-DNR).
Příklady uskutečnění vynálezu
Seznam použitých zkratek a symbolů:
ATR metoda zeslabeného vnitřního odrazu bd široký dublet bq široký kvartet bs široký singlet
t.t. teplota tání bt široký triplet btd široký triplet dubletu
Bz benzoyl
C-l 8 chemicky vázaná C-l 8 stacionární chromatografií fáze (reverzní fáze) d dublet dd dublet dubletů ddd dublet dubletů dubletů dm dublet multipletů
DMF dimethylformamid
DMSO dimethylsulfoxid dt dublet tripletů
EtOH ethanol
ESI elektrosprejová ionizace
FT Fourierova transformace gem geminální
HCV virus hepatitidy typu C
HPFC vysokoúčinná flash chromatografie
HPLC vysokoúčinná kapalinová chromatografie
HR vysoké rozlišení i ipso
IR infračervená spektroskopie m multiplet m meta
Me methyl
MeCN acetonitril
MeOH methanol
MeONa methoxid sodný
MeSNa methanthiolát sodný
MS hmotnostní spektrometrie
-7 CZ 305466 B6
v vlnočet
naphth naftalenyl
NMR jaderná magnetická rezonance
0 ortho
P para
Ph fenyl
PPh3 trifenylfosfín
q kvartet
s singlet
SiO2 silikagel jako stacionární chromatografická fáze
t triplet
td triplet dubletu
TPPTS tris(3-sulfofenyl)fosfin trisodná sůl
Obecná experimentální část
NMR spektra naměřena na spektrometrech Bruker AVANCE o pracovních frekvencích 400 MHz ('H při 400 MHz, l3C při 100,6 MHz), nebo 500 MHz ('H při 500 MHz, l3C při 125,7 MHz), nebo 600 MHz ('H při 600 MHz, 13C při 150,9 MHz). Teploty tání byly stanoveny na mikrobo20 dotávku dle Koflera a jsou nekorigované. Optické otáčivosti byly změřeny při 25 °C, hodnoty [a]2°o jsou udány v 10 1 deg cm2 g Hmotnostní spektra s vysokým rozlišením (HR MS) byla získána pomocí elektrosprejové ionizace. Separace vysokoúčinnou flash chromatografií (HPFC) na reverzní fázi byly provedeny na přístroji Biotage SPI, na kolonách KP-C18-HS. Složení mobilní fáze pro HPFC a kolonovou chromatografií je uvedeno v objemových procentech. Vzorky byly nanášeny na kolonu jako roztoky (případně řídké suspenze) nejlépe v čisté vodě, nebo ve směsi voda/DMSO (5:1). Infračervená spektra (FT IR) spektra byla zaznamenána na přístroji Bruker Alpha pomocí metody zeslabeného vnitřního odrazu (ATR). Čistota látek k biologickému testování byla ověřena elementární analýzou, případně pomocí HPLC a byla větší než 95 %.
Tabulka 1: Přehled sloučenin připravených v následujících příkladech
Příklad Látka Struktura Systematický název
1 la w Hď 40H 5-(Furan-2-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7Zř- -pyrrolo[2,3-£/]pyrimidin
-8CZ 305466 B6
2 lb „0^ HO* ’ΐ>Η 5-(Furan-3-yl)-4-methoxy-7-(p-D-ribofuranosyl)-777- _pyrrolo[2,3-cř]pyrimidin
3 lc Cs to / \ HO OH 4-Methoxy-7-(3-i’-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//- ,pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
4 ld o O to «0^0 HO OH 4-Methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//- _pyrrolo[2,3-čflpyrimidin
5 le i? <Ýq HO*' \>H 4-Methoxy-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7H-pyrrolo[2,3- -ťflpyrimidin
6 lf xo Clo to -Z % HO OH 5-(Benzofuran-2-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//- -pyrrolo[2,3-J]pyrimidin
7 Ig Ó5 «0^ / v HO OH 5-Ethynyl-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//- -pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin
8 2h ó3 „o^Q HO* 't>H 5-Jod-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7W-pyrrolo[2,3- -rflpyrimidin
-9CZ 305466 B6
9 2a ''s Co w „σ-y Hcf Uh 5-(Furan-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7H- _pynOlo[2,3-4]pyrimidin
10 2b O w HO* *OH 5-(Furan-3-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7í/- _pyrro]o[2,3N]pyrimidin
11 2c xs Cs w „oM Hď 40H 4-Methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//- ,pyrrolo[2,3-71pyrimidin
12 2d ''S w Hc/~xj HÓ^ %OH 4-Methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7/7- -pyrrolo[2,3-7|pyrinndin
13 2e c? ho-M HO*' *OH 4-Methylthio-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7íř- -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
14 2f '''S Co w HO* %OH 5-(Benzofuran-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)- -7Z/-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
15 2g -W Cj Hcf ’*OH 5-Ethynyl-4-methylthio-7-(P-0-ribofuranosyl)-7£Z- _pyrrolo[2,3-<flpyrimidin
- 10CZ 305466 B6
16 3h ^NH | ho/m HO* ÚH 5-Jod-4-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-777- _pyrrolo[2,3-d]pyriniidin
17 3a ''NH y-o w / \ HO OH 5-(Furan-2-yl)-4-methylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-7//- .pyrrolo[2,3-íflpyriinidin
18 3b - <Tj NH w \ HO OH 5-(Furan-3-yl)-4-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//- -pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin
19 3c ''NH *Vs N itÁ Η(/ \)H 4-Methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7Z/- _pyrrolo[2,3-£/lpyriinidin
20 3d G w ✓ \ HO OH 4-Methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7H- _pyrrolo[2,3-á]pyrimidin
21 3e ''NH w \ HO OH 4-Methylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//- -pyrrolo[2,3-č/]pyriinidin
22 3f ''NH y-o w H0'~'íJ •í' \> HO OH 5-(Benzofuran-2-yl)-4-methylamino-7-(p-D- -ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-£/]pyrimidin
- 11 CZ 305466 B6
23 3g -NH III w -0-¾ ho *oh 5-Ethynyl-4-methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-7/7- -pyrrolo[2,3-fií]pyrimidin
24 4h I 1 w < \ HO* OH 4-Dime±ylamino-5-jod-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//- _pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
25 4a -Ν'' C-O w -=-¾ HO* ΐ>Η 4-Dimethylamino-5-(furan-2-yl)-7-(p-D-ribofuranosyl)- -7//-pyrrolo[2,3-íZ]pyriniidin
26 4b -ν'' w „0^ Hď ’bH 4-Dimethylamino-5-(furan-3-yl)-7-(P-D-ribofuranosyl)- -7//-pyrrolo[2,3-</]pyrimidin
27 4c -N^ C-S N iTÁ -0-¾ Hď *OH 4-Dimethylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)- -7//-pyrrolo[2,3-<flpyrimidin
28 4d „o·^ H</ %OH 4-Dimethylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)- -7//-pyrrolo[2,3-ď]pyriinidin
29 4e -n O Hcf Y)H 4-Dimethylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-777- _pyrrolo[2,3-4]pyrimidin
- 12CZ 305466 B6
30 4f w Hď *OH 5-(Benzofuran-2-yl)-4-dÍmethylamino-7-(p-D- -ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
31 4g Hcř OH 4-Dirnethylamino-5-ethynyl-7-(3-D-ribofLiranosyl)-7Á/- -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
Příklad 1
5-(Furan-2-yl)-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7f/-pyrrolo[2,3-čZ]pyrimidin (1 a)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methoxy-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-</]pyrimidinu lh (794 mg, 1,95 mmol) {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861}, furan2-boronové kyseliny (328 mg, 2,93 mmol), Na2CO3 (620 mg, 5,85 mmol), Pd(OAc)2 (22 mg, 98 pmol) a TPPTS (136 mg, 0,24 mmol) ve směsi voda/MeCN (2:1, 10 ml) byla míchána při 100 °C po dobu 3 h. Po ochlazení byla směs zneutralizována vodnou HC1 (1 mol.l1) a odpařena do sucha za sníženého tlaku. Čištění odparku reverzní HPFC (C-18, 0 až 100% MeOH ve vodě) a následné přečištění sloupcovou chromatografií (SiO2, 2,5% MeOH v chloroformu) poskytlo produkt la (507 mg, 75 %) jako béžovou pevnou látku. Látka byla krystalizována ze směsi voda/MeOH. T.t. 155 až 157 °C. [a]D -78,2° (c 0,317; DMSO). ]H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,58 (dd, 1H, Jgem = 11,9, Hz, Jy^ = 3,6 Hz, H-5'a); 3,65 (dd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5K4 = 3,7 Hz, H-5'b); 3,94 (bq, 1H, J4y4 = = 3,5 Hz, H-4'); 4,11 (s, 3H, CH3O); 4,13 (dd, 1H, J3y =
5,0 Hz, J3,4,= 3,2 Hz, H-3'); 4,44 (bt, 1H, J2-r=J2^= 5,6 Hz, H-2'); 5,14 (bs, 1H, OH-5'); 5,18 (bs, 1H, OH-3'); 5,38 (bs, 1H, OH-2'); 6,22 (d, 1H, Jr,2-= 6,2 Hz, H-l'); 6,57 (dd, 1H, J43 = 3,3 Hz, J4,5 = 1,9 Hz, H-4-furyl); 6,93 (dd, 1H, J3,4 = 3,3 Hz, J3.5 = 0,9 Hz, H-3-furyl); 7,67 (dd, 1H, J5t4 = 1,9 Ht, .T3 = 0,9 Hz, H-5-furyl); 7,98 (s, 1H, H-6); 8,47 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 54,05 (CH3O); 61,65 (CH2-5'); 70,79 (CH-3'); 74,41 (CH-2'); 85,51 (CH-4'); 87,08 (CH-Γ); 101,50 (C-4a); 107,17 (C-5); 107,42 (CH-3-furyl); 111,92 (CH-4furyl); 121,09 (CH-6); 141,81 (CH-5-furyl); 148,27 (CH-2-fuiyl); 151,52 (CH-2); 152,54 (C7a); 162,76 (C^l). MS (ESI) m/z 348 (M+H), 370 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci6HlgN3O6 [M+H] vypočteno: 348,11901; nalezeno: 348,11899. Vypočteno pro Ci6H17N3O6.l/4H2O: C 54,62; H 5,01; N 11,94. Nalezeno: C 54,46; H 4,92; N 11,77.
Příklad 2
5-(Furan-3-yl)-4-methoxy-7-(]3-D-ribofuranosy l)-7/Y-pyrrolo[2,3-<7]pyrim idin (1 b)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 1 z 5-jod-4-methoxy-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//pyrrolo[2,3-ď]pyrimidinu lh (794 mg, 1,95 mmol) a furan-3-boronové kyseliny jako krémová pevná látka (492 mg, 73 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 190 až 192 °C. [a]D -66,8° (c 0,265; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO^f): 3,56 (dd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, •Av = 4,2 Hz, H-5'a); 3,67 (dd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5K4 = 4,2 Hz, H-5'b); 3,92 (btd, 1H, J4ya =
- 13 CZ 305466 B6
Jryh = 4,2 Hz, Jry = 3,4 Hz, H-4'); 4,10 (s, 3H, CH3O); 4,13 (m, 1H, H-3'); 4,44 (m, ΙΗ, 1H, H-2'); 5,10 (bs, 1H, OH-5'); 5,18 (bs, 1H, OH-3'); 5,39 (m, 1H, OH-2'); 6,19 (d, 1H, J,;2- =
6,2 Hz, H-l'); 6,93 (dd, 1H, J4,5 = 1,9 Hz, ./42 = 0,9 Hz, H^l-furyl); 7,72 (t, 1H, J5,4 = J32 = 1,7 Hz, H-5-furyl); 7,94 (s, 1H, H-61); 8,11 (bdd, 1H, J25 = 1,5 Hz, J2 4 = 0,9 Hz, H-2-furyl); 8,45 (s, 1H, H-2). I3C NMR (125,7 MHz, DMSCMJ: 53,93 (CH3O); 61,77 (CH2-5'); 70,64 (CH-3'); 74,02 (CH-2'); 85,32 (CH-4'); 86,96 (CH-1'); 102,72 (C-4a); 107,24 (C-5); 110,25 (CH-4-furyl); 118,51 (C-3-furyl); 121,97 (CH-6); 140,05 (CH-2-furyl); 143,50 (CH-5-furyl); 151,18 (CH-2); 152,71 (C-7a); 162,74 (C^l). MS (ESI) m/z 348 (M+H), 370 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci6Hi8N3O6 [M+H] vypočteno: 348,11901; nalezeno: 348,11897. Vypočteno pro Ci6H17N3O6: C 55,33; H 4,93; N 12,10. Nalezeno: C 55,37; H 4,85; N 11,89.
Příklad 3
4-Methoxy-7-([3-D-ribofuranosyI)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3--</]pyrimidin (1 c)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 1 z 5-jod-4-methoxy-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//pyrrolo[2,3-í/]pyrimidinu lh (797 mg, 1,96 mmol) a thiofen-2-boronové kyseliny ve formě našedlé pevné látky (615 mg, 86 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 140 až 143 °C. [a]D -67,8° (c 0,283; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,57 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Λχοη = 5,8 Hz, J5d4-= 3,7 Hz, H-5'a); 3,67 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, J5t,,oh = 5,2 Hz, •W= 3,8 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, 1H, J4-s-a = J4-53, = J4,3> = 3,6 Hz, H-4'); 4,07 (s, 3H, CH3O); 4,13 (td, 1H, J3-2- = J3,Oh = 5,0 Hz, J3-r= 3,3 Hz, H-3'); 4,44 (td, 1H, J2,,, = J2,OH = 6,2, J2-3- =
5,1 Hz, H-2'); 5,14 (t, 1H, J0H,5-a = J0H,5'b = 5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, JOH,3-= 4,7 Hz, OH-3'); 5,40 (d, 1H, JOH,2’= 6,4 Hz, OH-2'); 6,21 (d, 1H, Jr,2-= 6,1 Hz, H-l'); 7,11 (dd, 1H, J4<5 =
5,1 Hz, J4,a = 3,7 Hz, H-4-thienyl); 7,45 (dd, 1H, J3,4 = 3,7 Hz, J35 = 1,1 Hz, H-3-thienyl); 7,46 (dd, 1H, J5,4 = 5,1 Hz, J33 = 1,1 Hz, H-5-thienyl); 7,96 (s, 1H, H6); 8,48 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 53,88 (CH3O); 61,59 (CH2-5'); 70,64 (CH-3'); 74,28 (CH-2'); 85,45 (CH-4'); 87,13 (CH-1'); 102,59 (C-4a); 109,89 (C-5); 122,52 (CH-6); 124,77 (CH-5-thienyl); 125,997 (CH-3-thienyl); 127,88 (CH-4-thienyl); 135,63 (C-2-thienyl); 151,32 (CH-2); 152,50 (C-7a); 162,81 (C-4). MS (ESI) m/z 364 (M+H), 386 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H18N3O5S [M+H] vypočteno: 364,0962; nalezeno: 364,09608. Vypočteno pro C]6Hi7N3O5S-3/4H2O: C 50,99; H 4,95; N 11,15. Nalezeno: C 50,89; H 4,85; N 10,95.
Příklad 4
4-Methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(Oiiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2.3-í/]pyrimidin (1 d)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 1 z 5-jod-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)—ΊΗpyrrolo[2,3-ť/]pyrimidinu lh (794 mg, 1,95 mmol) a thiofen-3-boronové kyseliny jako bílá pevná látka (561 mg, 79 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 169 až 171 °C. [a]D -62,6° (c 0,254; DMSO). ‘HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,57 (ddd, 1H, Jgera = 11,9 Hz, Jsxoh = 5,8 Hz, J5d4'= 4,1 Hz, H-5'a); 3,67 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5WH = 5,3 Hz, J3t,,4' =
4,1 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, 1H, J4-s-a = J4.5„ = J4-3- = 3,8 Hz, H^l'); 4,09 (s, 3H, CH3O); 4,14 (td, 1H, J3>2' = J3'()H = 5,0 Hz, J3'4'= 3,4 Hz, H-3'); 4,45 (btd, 1H, J2-,- = J2-OH = 6,2, J2-3-= 5,2 Hz, H-2'); 5,11 (t, 1H, J„Hya = J0H,5-b = 5,6 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, J0Hy= 4,9 Hz, OH-3'); 5,39 (d, 1H, Joh.2- 6,4 Hz, OH-2'); 6,21 (d, 1H, JVy = 6,1 Hz, H-l'); 7,52 (dd, 1H, J4,3 = 5,0 Hz, J4,2 =
1,3 Hz, H-4-thienyl); 7,59 (dd, 1H, = 5,0 Hz, J32 = 3,0 Hz, H-5-thienyl); 7,84 (dd, 1H, J2 3 =
3,0 Hz, J24 = 1,3 Hz, H-2-thienyl); 7,99 (s, 1H, H-6); 8,46 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 53,93 (CH3O); 61,72 (CH2-5'); 70,64 (CH-3'); 74,13 (CH-2'); 85,35 (CH-4'); 87,06 (CH-1'); 102,80 (C-4a); 111,67 (C-5); 121,53 (CH-2-thienyl); 122,65 (CH-6); 125,96 (CH-5thienyl); 128,09 (C-4-thienyl); 134,12 (C-3-thienyl); 151,04 (CH-2); 152,62 (C-7a); 162,81
- 14CZ 305466 B6 (C-^l·). MS (ESI) m/z 364 (M+H), 386 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H18N3O5S [M+H] vypočteno: 364,0962; nalezeno: 364,09609. Vypočteno pro Ci6Hi7N3O5SH2O: C 50,39; H 5,02;
N 11,02. Nalezeno: C 50,54; H 4,97; N 10,82.
Příklad 5
4-Methoxy-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-/pyrimidin (1 e)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 1 z 5-jod-4-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//pyrrolo[2,3-</]pyrimidinu lh (794 mg, 1,95 mmol) a fenylboronové kyseliny ve formě bílé pevné látky (573 mg, 82 %). Produkt byl krystalizován z vody. T.t. 117 až 120 °C. [a]D -63,2° (c 0,275; DMSO). 'H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,56 (ddd, 1H, ,/gem = 12,0, Hz, / a/w = 5,8 Hz, J5i,,r = 4,0 Hz, H-5'a); 3,66 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, /wa = 5,3 Hz, = 4,0 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, 1H, J4-5'a = Jr.si, = Ul' = 4,0 Hz, = 3,4 Hz, H^P); 4,02 (s, 3H, CH3O); 4,14 (btd, 1H, J3-r= /w= 5,0 Hz,3,4 Hz, H-3'); 4,47 (td, lH,/2;r=/2:o„ = 6,2,/^= 5,1 Hz, H-2'); 5,11 (t, 1H, J„HXa = JOw = 5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, JOH,3' = 4,9 Hz, OH-3'); 5,40 (d, 1H, JOH,2’ =
6,4 Hz, OH-2'); 6,24 (d, 1H, JV27 = 6,1 Hz, H-l'); 7,30 (m, 1H, H-p-Ph); 7,42 (m, 2H, H-mPh); 7,66 (m, 2H, H-o-Ph); 7,88 (s, 1H, H-6); 8,48 (s, 1H, H-2). I3C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 53,86 (CH3O); 61,71 (CH2-5'); 70,72 (CH-3'); 74,24 (CH-2'); 85,40 (CH-4'); 87,14 (CH-1'); 103,01 (C-4a); 116,62 (C-5); 122,93 (CH-6); 126,68 (CH-^Ph); 128,38 (CH-w-Ph); 128,68 (CH-o-Ph); 133,95 (C-z-Ph); 150,96 (CH-2); 152,79 (C-7a); 162,90 (C-^t). MS (ESI) m/z 358 (M+H), 380 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci8H20N3O5 [M+H] vypočteno: 358,1397; nalezeno: 358,1394 a pro Ci8H[9N3O5Na [M+Na] vypočteno: 380,12169; nalezeno: 380,12168. Vypočteno pro Cl8Hi9N3O5H2O: C 57,59; H 5,64; N 11,19. Nalezeno: C 57,55; H 5,56; N 10,97.
Příklad 6
5-(Benzofuran-2-yi)-4-methoxy-7-(f3-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-/|pyrimidin (1 f)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methoxy-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-/]pyrimidinu lh (794 mg, 1,95 mmol) {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861}, benzofuran-2-boronové kyseliny (475 mg, 2,93 mmol), Na2CO3 (620 mg, 5,85 mmol), Pd(OAc)2 (22 mg, 98 pmol) a TPPTS (136 mg, 0,24 mmol) ve směsi voda/MeCN (2:1, 10 ml) byla míchána při 100 °C po dobu 3 h. Po ochlazení byla ztuhlá reakční směs naředěna vodou (40 ml) a zhomogenizována protřepáním. pH směsi byla upraveno na hodnotu 5 přídavkem vodné HCI (1 mol.E1) a vyloučená sraženina byla odsáta na fritě a promyta vodou. Sraženina byla vysušena několikanásobným spoluodpařením se směsí MeOH/toluen a následně nanesena na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform. Kolonovou chromatografií (SiO2, 2,5% MeOH v chloroformu) byl získán produkt lf (659 mg, 85 %) ve formě bílé pevné látky. Bílé jehlice po krystalizaci z MeOH. T.t. 250 až 251 °C. [ot]D -88,9° (c 0,262; DMSO). 'HNMR
= 3,7 Hz, J4.3· = 3,3 Hz, H^P); 4,16 (td, 1H, J3>2-= J3,Oh = 5,1 Hz, /^=3,2 Hz, H-3'); 4,20 (s, 3H, CH3O); 4,50 (td, 1H, J2,r = J2,OH = 6,3, J2-,r = 5,1 Hz, H-2'); 5,18 (t, 1H, JOH,5’a = Jon,s-b =
5,4 Hz, OH-5'); 5,22 (d, 1H, J()H,3’= 4,8 Hz, OH-3'); 5,43 (d, 1H, JOH,2'= 6,4 Hz, OH-2'); 6,26 (d, 1H, JVy = 6,3 Hz, H-l'); 7,24 (btd, 1H, J36 = 7,4 Hz, J5·, = 1,1 Hz, H-5-benzofuryl); 7,29 (bddd, 1H, J67 = 8,1 Hz, J6i5 = 7,3 Hz, J64 = 1,5 Hz, H-6-benzofuryl); 7,44 (d, 1H, J37 = 1,0 Hz, H-3-benzofuryl); 7,56 (dq, 1H, J76 = 8,1 Hz, J75 = J74 = J73 = 1,0 Hz, H-7-benzofuryl); 7,66 (ddd, 1H, J45 ~ 7,6 Hz, J46 = 1,4 Hz, J47 = 0,7 Hz, H-4-benzofuryl); 8,25 (s, 1H, H-6); 8,54 (s,
1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 54,28 (CH3O); 61,64 (CH2-5'); 70,74 (CH-3');
74,38 (CH-2'); 85,64 (CH-4'); 87,13 (CH-1'); 101,85 (C-4a); 103,44 (CH-3-benzofuryl);
- 15CZ 305466 B6
106,54 (C-5); 110,75 (CH-7-benzofuryl); 121,11 (CH-4-benzofuryl); 123,14 a 123,22 (CH6,CH-5-benzofuryl); 124,31 (CH-6-benzofuryl); 129,44 (C-3a-benzofuryl); 150,67 (C-2benzofuryl); 151,89 (C-2); 153,00 (C-7a); 153,83 (C-7a-benzofuryl); 162,81 (C-4). MS (ESI) m/z 398 (M+H), 420 (M+Na). HRMS (ESI) pro C20Hl9N3O6Na [M+Na] vypočteno: 420,1166; nalezeno: 420,1165. Vypočteno pro C20H]9N3O6 0,35H2O: C 59,51; H 4,92; N 10,41. Nalezeno: C 59,64; H 4,72; N 10,19.
Příklad 7
5-Ethynyl-4-methoxy-7-([3-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-<7]pyrimidin (1 g)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methoxy-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-<7jpyrimidinu lh (407 mg, 1 mmol) {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861}, PdCl2(PPh3)2 (35 mg, 0,05 mmol), Cul (19 mg, 0,1 mmol), trimethylsilylacetylenu (1,4 ml, 10 mmol) a triethylaminu (0,5 ml) byla míchána vDMF (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 16 h. Směs byla odpařena dosucha za sníženého tlaku a zbytek byl několikrát spoluodpařen se směsí EtOH/toluen. Odparek byl zakotven na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform a čištění sloupcovou chromatografií (SiO2, 0—>1,5% MeOH v chloroformu) poskytlo trimethylsilylethynylový derivát kontaminovaný triethylamoniumjodidem. Směs byla přímo odchráněna mícháním s K2CO3 (207 mg, 1,5 mmol) v MeOH (5 ml) při pokojové teplotě po dobu 5 h a následně spoluodpařena se silikagelem. Sloupcovou chromatografií (SiO2, 2,5% MeOH v chloroformu) byl získán produkt lg (268 mg, 88 % ve dvou krocích) jako krémová pevná látka. Hranolky po krystalizací z MeOH. T.t. 205 až 207 °C. [a]D -78,4° (c 0,333; DMSO). ‘HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,56 (ddd, 1H, 7em = 11,9 Hz, 75-o,Oh = 5,7 Hz, J5^=3,7 Hz, H-5'a); 3,65 (ddd, 1H, 7gem = 11,9 Hz, J5WH = 5,3 Hz, J5Kr= 3,9 Hz, H-5'b); 3,92 (td, 1H, JrSa = Jr,5i, = 3,8 Hz, J4.3< = 3,5 Hz, H-4'); 4,06 (s, 3H, CH3O); 4,10 (td, ÍH, J3.2.= J3.OH = 5,0 Hz, 7;9-=3,4 Hz, H-3'); 4,11 (d, 1H,7w.6 = 0,4 Hz, CCH): 4,38 (td, 1H,7:/' = 72W = 6,2 Hz,72:5' = 5,0 Hz, H-2'); 5,12 (t, 1H, J()Hiya = J()H,^ = 5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, JOH,3.= 4,9 Hz, OH3'); 5,41 (d, 1H, J0Hi2.= 6,3 Hz, OH-2'); 6,14 (d, 1H, 7,2'= 6,0 Hz, H-l'); 8,05 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 54,04 (CH3O); 61,55 (CH2-5'); 70,63 (CH-3'); 74,45 (CH-2'); 77,17 (C^CH); 81,80 (C^CH); 85,56 (CH-4'); 87,31 (CH-1'); 94,82 (C-5); 105,16 (C-4a); 130,01 (CH-6); 151,43 (C-7a); 151,93 (CH-2); 162,95 (C-^). MS (ESI) m/z 306 (M+H), 328 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci4H15N3O5Na [M+Na] vypočteno: 328,0904; nalezeno: 328,0892. Vypočteno pro C14H15N3O5· 1/4H2O: C 54,28; H 5,04; N 13,56. Nalezeno: C 54,40; H 4,92; N 13,45.
Příklad 8
5-Jod—4-methylthio-7-(P-D-ribofůranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-<y]pyrimidm (2h)
Směs 4-chlor-5-jod-7-(2,3,5-tri-0-benzoyl-p-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidinu 5 (5,37 g, 7,42 mmol) a methanthiolátu sodného (1,1 g, 15,7 mmol) v EtOH (150 ml) byla míchána při pokojové teplotě po dobu 4 h. Směs byla odpařena dosucha za sníženého tlaku a zbytek byl několikrát spoluodpařen s vodou. Krystalizací odparku z vody byl získán produkt 2h (2,94 g, 94 %) jako bílá pevná látka. T.t. 211 až 221 °C. [a]D -69,8° (c 0,242; DMSO). ’H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,63 (s, 3H, CH3S); 3,55 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Jya,OH = 5,5 Hz, J^ = 4,0 Hz, H-5'a); 3,63 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, JW)H = 5,2 Hz, J5K4-= 4,0 Hz, H-5'b); 3,91 (bq, 1H, JrS'a = Jr.s-b = Jrx = 3,6 Hz, H-4'); 4,09 (m, 1H, H-3'); 4,36 (m, 1H, H-2'); 5,09 (bt, 1H, JoH,5’a = Joh,m = 5,4 Hz, OH-5'); 5,18 (bd, 1H, J(m,3. = 3,9 Hz, OH-3'); 5,40 (bs, 1H, OH-2'); 6,15 (d, 1H, 7-,2- = 6,2 Hz, H-l'); 7,99 (s, 1H, H-6); 8,62 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,13 (CH3S); 53,17 (C-5); 61,56 (CH2-5'); 70,62 (CH-3'); 74,38 (CH-2'); 85,54
- 16CZ 305466 B6 (CHM'); 86,77 (CH-1'); 117,20 (CMa); 130,87 (CH-6); 148,74 (C-7a); 150,86 (CH-2); 161,82 (C-4). IR (ATR): v 3386, 31,32, 1556, 1449, 1220, 1113, 1066, 954, 492 cm'.MS (ESI)w/z424 (M+H), 446 (M+Na). HRMS (ESI) pro C12H15IN3O4S [M+H] vypočteno: 423,98279; nalezeno: 423,98216. Vypočteno pro C12H|4IN3O4S'3/4H2O: C 33,00; H 3,58; N 9,62. Nalezeno: C 33,28; H 3,36; N 9,40.
Příklad 9
5-(Furan-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-(/]pyrimidin (2a)
Argonem propláchnutá směs 5-jodM-methylthio-7-([3-D-ribofuranosyl)-7//-pynOlo[2,3-ť/]pyrimidinu 2h (313 mg, 0,74 mmol, příklad 8), furan-2-boronové kyseliny (124 mg, 1,11 mmol), Na2CO3 (235 mg, 2,22 mmol), Pd(OAc)2 (8 mg, 36 pmol) a TPPTS (53 mg, 93 pmol) ve směsi voda/MeCN (2:1, 4 ml) byla míchána při 100 °C po dobu 1 h. Po ochlazení byla směs zneutralizována vodnou HC1 (1 mol.l“') a odpařena dosucha za sníženého tlaku. Odparek byl nanesen na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform a čištění sloupcovou chromatografií (SiO2, 1 až 3% MeOH v chloroformu). Následné přečištění reverzní HPFC (C-18, 0—>100% MeOH ve vodě) a konečná krystalizace ze směsi voda/MeOH poskytlo produkt 2a (123 mg, 46 %) jako nažloutlou pevnou látku. T.t. 150 až 152 °C. [a]20D -70,5° (c 0,237; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,59 (s, 3H, CH3S); 3,56 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Jya.OH = 5,6 Hz, J5’a,4'= 3,8 Hz, H-5'a); 3,65 (ddd, 1H, ./gcm = 12,0 Hz, J51),oh = 5,3 Hz, J5i,,4' =
3,9 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, IH, JrSa = J4X51, = Jry = 3,6 Hz, HM'); 4,12 (td, 1H, J3'2' = J3',oh = 5,0 Hz, J3xr= 3,3 Hz, H-3'); 4,42 (td, IH, J2:/ = J2W= 6,2 Hz, J2.3.= 5,1 Hz, H-2'); 5,10 (t, IH, JOH.5'a = Joh.51, = 5,4 Hz, OH-5'); 5,19 (d, IH, JOH,3. = 4,8 Hz, OH-3'); 5,42 (d, IH, JOH,2' =
6,3 Hz, OH-2'); 6,23 (d, IH, 7,·2. = 6,1 Hz, H-l'); 6,60 (dd, IH, ./4.3 = 3,3 Hz, J45 = 1,9 Hz, H-4furyl); 6,71 (dd, IH, J34 = 3,3 Hz, J35 = 0,9 Hz, H-3-furyl); 7,78 (dd, IH, J5t4 = 1,9 Hz, J53 = 0,9 Hz, H-5-furyl); 8,01 (s, IH, H-6); 8,68 (s, IH, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,21 (CH3S); 61,58 (CH2-5'); 70,68 (CH-3'); 74,42 (CH-2'); 85,54 (CH-4'); 86,92 (CH-1'); 106,61 (C-5); 109,18 (CH-3-furyl); 111,68 (C-4-furyl); 113,63 (C-4a); 125,13 (CH-6); 142,90 (CH-5-furyl); 146,82 (C-2-furyl); 148,92 (C-7a); 150,91 (CH-2); 161,69 (C-4). IR (ATR): v 3166, 2937, 2903, 1547, 1446, 1062, 1029, 976, 594 cm’1. MS (ESI) m/z 364 (M+H), 386 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci6Hi8N3O5S [M+H] vypočteno: 364,09672; nalezeno: 364,09609.
Příklad 10
5-(Furan-3-yl)-4-methylthio-7-(p-D-ribofuranosyl)-7Á/-pyrrolo[2,3-(/]pyrimidin (2b)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 9 z 5-jod-4-methylthio-7-([3-D-ribofuranosylj7//-pyrrolo[2,3-<7]pyrimidinu 2h (313 mg, 0,74 mmol) a furan-3-boronové kyseliny. Po sloupcové chromatografii (SiO2) byl produkt přečištěn krystalizací ze směsi voda/MeOH. Produkt 2b (242 mg, 90 %) byl získán jako bílá pevná látka. T.t. 121 až 124 °C. [a]20D -57,3° (c 0,218; DMSO). ‘HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,58 (s, 3H, CH3); 3,55 (ddd, IH, Jgem = 11,9 Hz, Jya,oH = 5,7 Hz, = 3,9 Hz, H-5'a); 3,64 (ddd, IH, Jgem = 11,9 Hz, JSK(M = 5,4 Hz, J5K4> =
3,9 Hz, H-5'b); 3,92 (bq, IH, J4.ya = J4,31y = J4,3> = 3,7 Hz, H-4'); 4,12 (td, IH, J3.r = Yoh = 5,0 Hz, J3,4,= 3,3 Hz, H-3'); 4,42 (td, IH, J2:r=J2W= 6,3 Hz, J2:3 = 5,1 Hz, H-2'); 5,07 (t, IH, JoH,5’a = Jon.51, = 5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, IH, JOH.r = 4,9 Hz, OH-3'); 5,39 (d, IH, J0H,2' =
6,4 Hz, OH-2'); 6,22 (d, IH, = 6,2 Hz, H-l'); 6,73 (dd, IH, ./4,5 = 1,8 Hz, J4,2 = 0,9 Hz, H-4furyl); 7,77 (t, IH, J5,4 = J32 = 1,7 Hz, H-5-fuiyl); 7,80 (s, IH, H-6); 7,87 (dd, IH, J2>5 = 1,6 Hz, J2,4 = 0,9 Hz, H-2-furyl); 8,65 (s, IH, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,05 (CH3S); 61,68 (CH2-5'); 70,70 (CH-3'); 74,27 (CH-2'); 85,43 (CH-4'); 86,79 (CH-1'); 107,03 (C-5); 113,13 (CH-3-furyl); 114,57 (C-4a); 117,72 (C-3-furyI); 124,47 (CH-6); 140,97 (CH-2-furyl);
-17CZ 305466 B6
143,27 (CH-5-furyl); 148,99 (C-7a); 150,61 (CH-2); 161,37 (C^). IR (ATR): v 3347, 3156, 2960, 2861, 1555, 1459, 1133, 1063, 784 cm1. MS (ESI) m/z 364 (M+H), 386 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H18N3O5S [M+H] vypočteno: 364,09672; nalezeno: 364,09611.
Příklad 11
4-Methylthio-7-(f3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin (2c)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 9 z 5-jod—t-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidinu 2h (180 mg, 0,43 mmol) a thiofen-2-boronové kyseliny. Produkt po čištění chromatografiemi (SiO2, pak C-l 8 HPFC) byl následně přečištěn krystalizací ze směsi voda/MeOH. Produkt 2c (109 mg, 67 %) byl získán jako bílá pevná látka. T.t. 164 až 167 °C. [a]20D -57,2° (c 0,180; DMSO). ’HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,55 (s, 3H, CH3); 3,55 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Patrn = 5,6 Hz, Jya,4-= 3,8 Hz, H-5'a); 3,64 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, J5Wh = 5,3 Hz,/,^=3,9 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, 1Η,Λ;5ο = Λ;57, = A:r = 3,5 Hz, H^ť); 4,11 (td, 1H, = Poh = 5,0 Hz, Jy4,= 3,3 Hz, H—3'); 4,43 (td, 1H, Ρ;/,= J2',oh = 6,3 Hz, ·Ρ<· = 5,1 Hz, H— 2'); 5,09 (t, 1H, JOH,ya = JOH,Sr= 5,4 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, JOH,y = 4,8 Hz, OH-3'); 5,41 (d, 1H, JOH,2’= 6,4 Hz, OH-2'); 6,23 (d, 1H, Jr>2- = 6,2 Hz, H-l'); 7,16 (dd, 1H, 74j5 = 5,2 Hz, J4.3 =
3,5 Hz, H-4-thienyl); 7,22 (dd, 1H, J34 = 3,5 Hz, J35 = 1,2 Hz, H-3-thienyl); 7,59 (dd, 1H, J54 =
5,2 Hz, J5,3 = 1,2 Hz, H-5-thienyl); 7,91 (s, 1H, H-6); 8,67 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,05 (CH3S); 61,58 (CH2-5'); 70,68 (CH-3'); 74,36 (CH-2'); 85,53 (CH-^l·'); 86,87 (CH-1'); 108,95 (C-5); 114,51 (CNa): 125,60 (CH-6); 126,52 (C-5-thienyl); 127,64 (CH-4thienyl); 128,84 (CH-3-thienyl); 133,93 (C-2-thienyl); 148,75 (C-7a); 150,81 (CH-2); 161,61 (C-4). IR (ATR): v 3399, 2931, 1540, 1332, 1100, 1036, 1024, 711 784 cm1. MS (ESI) m/z 380 (M+H), 402 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16HI8N3O4S2 [M+H] vypočteno: 380,07387; nalezeno: 380,07324.
Příklad 12
4-MethyIthio-7-(P-D-ribofiiranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7/7:-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (2d)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 9 z 5-jod—l-methylthio-7-(f3-D-ribofuranosyl)77ř-pyrrolo[2,3-7]pyrimidinu 2h (313 mg, 0,74 mmol) a thiofen-3-boronové kyseliny. Sloupcovou chromatografií (SiO2) byl získán produkt 2d (228 mg, 81 %) jako bílá pevná látka. Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 192 až 193 °C. [a]20D -54,7° (c 0,225; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,56 (s, 3H, CH3); 3,56 (ddd, 1H, 7gem = 12,0, Hz, Jya,OH = 5,7 Hz, J5-a,4’= 4,0 Hz, H-5'a); 3,64 (ddd, 1H, 7gem = 12,0 Hz, J5K()H = 5,4 Hz, J5t,,4-= 4,0 Hz, H-5'b); 3,92 (bq, 1H, Jyya = Jr.sb = J4'3' = 3,7 Hz, H-4'); 4,12 (td, 1H, J3^ = JyoH = 5,0 Hz, 3,3 Hz, H—3'); 4,43 (td, 1H, Ρ:ι, = Ρ,οη = 6,3 Hz, Ρ,3 ,= 5,1 Hz, H—2'); 5,07 (t, 1H, JoH.s’a = Joh.st, ~
5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, J()H.3' = 4,9 Hz, OH-3'); 5,39 (d, 1H, JOH,2’ = 6,4 Hz, OH-2'); 6,23 (d, 1H, Jvy = 6,2 Hz, H-l'); 7,29 (dd, 1H, ./4,5 = 4,9 Hz, J4,2 = 1,3 Hz, H-4-thienyl); 7,57 (dd, 1H, 72,5 = 3,0 Hz, J24 = 1,3 Hz, H-2-thienyl); 7,63 (dd, 1H, J3A = 4,9 Hz, J32 = 3,0 Hz, H-5thienyl); 7,82 (s, 1H, H-6); 8,66 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,10 (CH3S); 61,66 (CH2-5'); 70,71 (CH-3'); 74,29 (CH-2'); 85,43 (CH-4'); 86,81 (CH-1'); 111,64 (C-5); 114,44 (C-4a); 124,08 (CH-2-thienyl); 124,47 (CH-6); 124,47 (CH-5-thienyl); 125,73 (CH-4thienyl); 133,59 (C-3-thienyl); 148,79 (C-7a); 150,55 (CH-2); 161,37 (C^l). IR (ATR): v 3320, 3093, 2932, 1542, 1113, 1031, 988, 786 cm1. MS (ESI) m/z 380 (M+H), 402 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci6H17N3O4S2 [M+H] vypočteno: 380,07387; nalezeno: 380,07330. Vypočteno pro C16H17N3O4S2· 1/4H2O: C 50,05; H 4,59; N 10,94. Nalezeno: C 50,40; H 4,34; N 10,63.
-18CZ 305466 B6
Příklad 13
4-Methylthio-5-fenyl-7-([3-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin (2e)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 9 z 5-jod-4-methylthio-7-(|3-D-ribofuranosyl)7/í-pyrrolo[2,3-£/]pyrimidinu 2h (313 mg, 0,74 mmol) a fenylboronové kyseliny. Konečné přečištění krystalizaci ze směsi voda/MeOH poskytlo produkt 2e (135 mg, 49 %) jako bílou pevnou látku. T.t. 169 až 170 °C. [a]20D -49,1° (c 0,330; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,54 (s, 3H, CH3); 3,55 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Jya.OH = 5,7 Hz, J5>a,r = 3,9 Hz, H-5'a); 3,64 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5Mh = 5,4 Hz, 15^4’= 4,0 Hz, H-5'b); 3,93 (bq, 1H, JrSa = J4:í1> = J4'3, =
3,6 Hz, H-4'); 4,12 (td, 1H, J3-2'= J3-oh = 5,0 Hz, J3>4-= 3,3 Hz, H-3'); 4,46 (td, 1H, Λυ — Λ,ΟΗ = 6,3 Hz, J2'3>= 5,1 Hz, H-2'); 5,06 (t, 1H, J0'a = J(m^ = 5,5 Hz, OH-5'); 5,18 (d, 1H, JOh,3' =
4,9 Hz, OH-3'); 5,40 (d, 1H, J()H,r = 6,4 Hz, OH-2'); 6,25 (d, 1H, JYy = 6,2 Hz, H-l'); 7,38 (m, 1H, H-p-Ph); 7,44 (m, 2H, H-w-Ph); 7,51 (m, 2H, H-o-Ph); 7,81 (s, 1H, H-6); 8,67 (s, 1H, H2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,16 (CH3S); 61,67 (CH2-5'); 70,73 (CH-3'); 74,30 (CH-2'); 85,44 (CH-4'); 86,88 (CH-1'); 114,30 (C-4a); 117,01 (C-5); 124,43 (CH-6); 127,45 (CH-77-Ph); 128,15 (CH-w-Ph); 130,19 (CH-o-Ph); 133,73 (C-z-Ph); 148,94 (C-7a); 150,52 (CH-2); 161,37 (C-4). IR (ATR): v 3394, 2933, 1552, 1460, 1207, 1109, 1061, 699 cm'1. MS (ESI) m/z 374 (M+H), 396 (M+Na). HRMS (ESI) pro C18H20N3O4S [M+H] vypočteno: 374,11745; nalezeno: 374,11688.
Příklad 14
5-(Benzofuran-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ú(]pyrimidin (2f)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 9 z 5-jod-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)77/-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidinu 2h (313 mg, 0,74 mmol) a benzofuran-2-boronové kyseliny. Produkt po sloupcové chromatografií (SiO2, 3% MeOH v chloroformu) obsahoval výchozí jodid 2h, který byl odstraněn krystalizaci ze směsi voda/DMSO (5:1, 6 ml). Produkt 2f (70 mg, 23 %) byl získán ve formě žlutého prášku. T.t. 218 až 222 °C. [a]20D -65,9° (c 0,317; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-de): 2,62 (s, 3H, CH3); 3,58 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Λα,ο/ζ = 5,6 Hz, =
3,8 Hz, H-5'a); 3,67 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, J3WH = 5,3 Hz, 3,8 Hz, H-5'b); 3,96 (bq, 1H, J4’'5'a = J-m = 3,6 Hz, H—4'); 4,12 (td, 1H, J3'i2,= J3:oh = 5,0 Hz, J3',4>= 3,3 Hz, H—3'); 4,47 (td, 1H, J2.,-= J2V)H = 6,2 Hz, J2^= 5,1 Hz, H-2'); 5,12 (t, 1H, Joh.s* = Joh.^ = 5,4 Hz, OH-5'); 5,22 (d, 1H, = 4,9 Hz, OH-3'); 5,46 (d, 1H, JOH,2^ 6,3 Hz, OH-2'); 6,27 (d, 1H,
Jv? = 6,1 Hz, H-l'); 7,23 (d, 1H, J37 = 1,0 Hz, H-3-benzofuryl); 7,24 - 7,35 (m, 2H, H-5,6benzofuryl); 7,62 (dq, 1H, J76 = 8,1 Hz, J75 = J74 = J73 = 0,9 Hz, H-7-benzofuryl); 7,69 (ddd, 1H, J45 = 7,7 Hz, J46 = 1,4 Hz, J4- = 0,7 Hz, H-4-benzofuryl); 8,27 (s, 1H, H-6); 8,73 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 12,41 (CH3S); 61,54 (CH2-5'); 70,63 (CH-3'); 74,47 (CH-2'); 85,61 (CH-4'); 87,05 (CH-1'); 105,21 (CH-3-benzofuiyl); 106,09 (C-5); 111,16 (CH7-benzofuryl); 113,55 (C-4a); 121,17 (CH-4-benzofuryl); 123,28 (CH-5-benzofuryl); 124,46 (C-6-benzofuryl); 151,13 (CH-2); 154,31 (C-7a-benzofuiyl); 161,90 (C^l). IR (ATR): v 3401, 3223, 1547, 1439, 1258, 1034, 980, 786, 745 cm’1. MS (ESI) m/z 414 (M+H), 436 (M+Na). HRMS (ESI) pro C20H20N3O5S [M+H] vypočteno: 414,11237; nalezeno: 414,11176.
- 19CZ 305466 B6
Příklad 15
5-Ethynyl-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-čf]pyrimidin (2g)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-<7]pyrimidinu 2h (423 mg, 1 mmol, příklad 8), PdCl2(PPh3)2 (35 mg, 0,05 mmol), Cul (19 mg, 0,1 mmol), trimethylsilylacetylu (1,4 ml, 10 mmol) a triethylaminu (0,4 ml) v DMF (1,6 ml) byla míchána při pokojové teplotě po dobu 16 h. Směs byla odpařena dosucha za vakua a zbytek byl několikrát spoluodpařen se směsí EtOH/toluen. Odparek byl zakotven na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform. Kolonová chromatografie (SiO2, 0 až 3% MeOH v chloroformu) poskytla trimethylsilylethynylový derivát kontaminovaný triethylamonium-jodidem. Směs byla přímo odchráněna mícháním s K2CO3 (207 mg, 1,5 mmol) v MeOH (5 ml) při pokojové teplotě po dobu 5 h a spoluodpařena se silikagelem. Sloupcovou chromatografií (3% MeOH v chloroformu) byl získán produkt 2g (212 mg, 66 % ve dvou krocích) jako okrová pevná látka. Produkt byl krystalizován z methanolu. T.t. 139 až 143 °C. [a]20D -78,5° (c 0,223; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,62 (s, 3H, CH3S); 3,56 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, Jya,OH =
5,6 Hz, Js'a,4'= 3,8 Hz, H-5'a); 3,65 (ddd, 1H, ./gcm = 12,0 Hz, Js^.oh = 5,3 Hz, Τ3^,4' = 3,9 Hz, H5'b); 3,92 (bq, 1H, = Jr,y = 3,7 Hz, H-4'); 4,10 (td, 1H, J3^ = J3',Oh = 5,0 Hz, J3.r =
3,4 Hz, H-3'); 4,27 (s, 1H, C=CH); 4,37 (td, 1H, J2-,-= Λ,οη = 6,0 Hz,= 5,1 Hz, H-2'); 5,12 (t, 1H, = = 5,5 Hz, OH-5'); 5,19 (d, 1H, JOH,3>= 4,9 Hz, OH-3'); 5,43 (d,\H,Joh,2'=
6,2 Hz, OH-2'); 6,15 (d, 1H, 7r>2· = 5,9 Hz, H-l'); 8,13 (s, 1H, H-6); 8,65 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-46): í 1,66 (CH3S); 61,49 (CH2-5'); 70,58 (CH-3'); 74,52 (CH-2'); 77,01 (C=CH); 83,58 (OCH); 85,59 (CH-4'); 87,15 (CH-T); 95,34 (C-5); 115,78 (C-fa); 130,94 (CH-6); 147,85 (C-7a); 151,59 (CH-2); 162,53 (C^f). IR (ATR): v 3273, 2933, 1558, 1451, 1236, 1031, 612 cm'1. MS (ESI) m/z 322 (M+H), 344 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci4H16N3O4S [M+H] vypočteno: 322,08615; nalezeno: 322,08560.
Příklad 16
5-Jod-4-methylamino-7-(f3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (3h)
Směs 4-chlor-5-jod-7-(2,3,5-tri-0-benzoyl-p-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-íZ]pyrimidinu 5 (2,4 g, 3,31 mmol) {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861} v methylaminu (33% hm./hm. v absolutním EtOH, 25 ml) byla míchána v tlakové zkumavce při 100 °C po dobu 5 h. Po ochlazení byla směs odpařena dosucha a sloupcová chromatografie zbytku (SiO2, 3% MeOH v chloroformu) poskytla produkt 3h (1,24 g, 92 %) jako bílou pevnou látku. Bezbarvé jehlice po krystalizaci z MeOH. T.t. 218 až 223 °C. [a]20D -61,3° (c 0,419; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,02 (d, 3H, Jch3,nh = 4,7 Hz, CH3); 3,52 (ddd, 1H, 7gem = 12,0, Hz, Jya,OH = 6,1 Hz, Jya,r= 3,8 Hz, H-5'a); 3,61 (ddd, 1H, 7gem = 12,0 Hz, J5KOH = 5,1 Hz, J5Kr= 3,8 Hz, H-5'b); 3,88 (bq, 1H, J4^a = J4^ = J4^ = 3,5 Hz, H-4'); 4,06 (td, 1H, J3>2.= J3-OH = 4,9 Hz, J3;4,= 3,1 Hz, H-3'); 4,35 (td, 1H, 72;/- = J2O„ = 6,4 Hz, 72;3- = 5,1 Hz, H-2'); 5,12 (d, 1H, Joh.x = 4,7 Hz, OH-3'); 5,16 (dd, 1H, Joh.šo = 6,1 Hz, 5,1 Hz, OH-5'); 5,31 (d, 1H, JOH,r =
6,5 Hz, OH-2'); 6,03 (d, 1H, JV2r = 6,3 Hz, H-l'); 6,44 (q, 1H, JNH,CH3 = 4,7 Hz, NH); 7,66 (s, 1H, H-6); 8,19 (s, 1H, H-2). I3C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 27,90 (CH3NH); 51,25 (C-5); 61,74 (CH2-5'); 70,70 (CH-3'); 74,10 (CH-2'); 85,37 (CH-4'); 86,99 (CH-T); 103,73 (CPa); 127,17 (CH-6); 149,70 (CH-7a); 152,07 (CH-2); 156,62 (C-+1). IR (ATR): v 3387, 3323, 1603, 1550, 1305, 1090, 866, 596 cm’1. MS (ESI) m/z 407 (M+H), 429 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci2Hi6lN4O4 [M+H] vypočteno: 407,02162; nalezeno: 407,02111. Vypočteno pro C12H15lN4O4: C 35,48; H 3,72; N 13,79. Nalezeno: C 35,42; H 3,62; N 13,42.
-20CZ 305466 B6
Příklad 17
5-(Furan-2-yl)-4-methylthio-7-(p-D-ribofuranosyl)-7fř-pyrrolo[2,3-</]pyrimidin (3a)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidinu 3h (300 mg, 0,74 mmol, příklad 16), furan-2-boronové kyseliny (124 mg, 1,11 mmol), Na2CO3 (235 mg, 2,22 mmol), Pd(OAc)2 (8 mg, 36 pmol) a TPPTS (53 mg, 0,093 mmol) ve směsi voda/MeCN (2:1, 4 ml) byla míchána při 100 °C po dobu 1 h. Po ochlazení byla směs zneutralizována vodnou HCI (1 M) a odpařena dosucha. Odparek byl zakotven na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform a čištěním sloupcovou chromatografií (SiO2, 1 až 3% MeOH v chloroformu) byl získán produkt 3a (220 mg, 86 %) ve formě bílé pevné látky. Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 114 až 117 °C. [a]20D -70,6° (c 0,299; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,04 (d, 3H, JCH3,NH = 4,8 Hz, CH3); 3,54 (dm, 1H, Jgem = 12,0, Hz, H-5'a); 3,64 (dm, 1H, Jgem = 11,9 Hz, H-5'b); 3,91 (q, 1H, J4-ya = J4;5Í, = J4-3’ =
3,6 Hz, H-4'); 4,10 (td, 1H, Jy2> = Jyon = 4,9 Hz, = 3,3 Hz, H-3'); 4,41 (td, 1H, /2;r =
6,3 Hz, J2'3'= 5,2 Hz, H-2'); 5,18 (d, 1H, J0H,3' = 4,8 Hz, OH-3'); 5,25 (m, 1H, OH-5'); 5,37 (d, 1H, Joh,2'= 6,4 Hz, OH-2'); 6,09 (d, 1H, 6,2 Hz, H-l'); 6,61 (dd, 1H, J4,3 = 3,3 Hz, J4.5 =
1,9 Hz, H-4-furyl); 6,66 (dd, 1H, J3 4 = 3,3 Hz, J3 5 = 0,8 Hz, H-3-furyl); 6,85 (q, 1H, JNh,ch3 =
4,8 Hz, NH); 7,76 (dd, 1H, J5,4 = 1,9 Hz, J5 3 = θ’δ Hz, H-5-furyl); 7,82 (s, 1H, H-6); 8,22 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,24 (CH3NH); 61,92 (CH2-5'); 70,81 (CH-3'); 74,12 (CH-2'); 85,45 (CH-4'); 87,31 (CH-1'); 100,03 (C-4a); 105,59 (CH-3-furyl); 106,35 (C5); 112,20 (CH-4-furyl); 120,52 (CH-6); 142,39 (CH-5-fuiyl); 148,79 (C-2-furyl); 150,34 (C7a); 152,27 (CH-2); 156,84 (C-4). IR (ATR): v 3649, 2934, 1624, 1319, 1021, 585, 564 cm’1. MS (ESI) m/z 347 (M+H), 369 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H19N4O5 [M+H] vypočteno: 347,13554; nalezeno: 347,13496.
Příklad 18
5-(Furan-3-yl)-4-methylthio-7-(f3-D-ribofuranosyl)-7/f-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin (3b)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 17 z 5-jod-4-methylamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidinu 3h (300 mg, 0,74 mmol) a furan-3-boronové kyseliny ve formě nažloutlé pěny (245 mg, 96 %). T.t. 90 až 97 °C. [a]20D -56,5° (c 0,354; DMSO). ]H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,95 (d, 3H, JCH3.nh = 4,7 Hz, CH3); 3,53 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, Hz, J5dOH = 6,3 Hz, Jya,r = 3,9 Hz, H-5'a); 3,62 (ddd, 1H, 7gem = 12,0 Hz, Js^oh = 5,0 Hz, Jsh,4' = 3,8 Hz, H-5'b); 3,89 (bq, 1H, J4.5,a = J4^ = J4,3> = 3,6 Hz, H-4'); 4,09 (td, 1H, J3,2' = J3',oh = 5,0 Hz, J3-,r= 3,2 Hz, H-3'); 4,42 (td, 1H, J2r = J2,0H = 6,4 Hz, J2>3.= 5,1 Hz, H-2'); 5,12 (d, 1H, J0H,3' = 4,8 Hz, OH-3'); 5,20 (m, 1H, JOH.ya = 6,3 Hz, = 5,0 Hz, OH-5'); 5,31 (d, 1H, J0H,2' = 6,5 Hz, OH-2'); 5,82 (q, 1H, JNH,CH3 = 4,7 Hz, NH); 6,08 (d, 1H, J,-2- = 6,3 Hz, H-l'); 6,69 (dd, 1H, J4,s = 1,8 Hz, J4t2 = 0,9 Hz, H-4-furyl); 7,47 (s, 1H, H-6); 7,81 (t, 1H, J5<2 = J5,4 = 1,7 Hz, H-5furyl); 7,83 (dd, 1H, J2J = 1,6 Hz, J2,4 = 0,9 Hz, H-2-furyl); 8,21 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,43 (C-4a); 106,23 (C-5); 111,74 (CH-4-furyl); 118,79 (C-3furyl); 120,94 (CH-6); 139,79 (CH-2-fuiyl); 144,30 (CH-5-furyl); 150,11 (C-7a); 151,83 (CH2); 157,14 (C-4). IR (ATR): v 3128, 2931, 2862, 1600, 1566, 1212, 1073, 1028, 874 cm'1. MS (ESI) m/z 347 (M+H), 369 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H19N4O5 [M+H] vypočteno: 347,13554; nalezeno: 347,1349.
-21 CZ 305466 B6
Příklad 19
4-Methylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7/í-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin (3c)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 17 z 5-jod^-methyiamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidinu 3h (150 mg, 0,37 mmol) a thiofen-2-boronové kyseliny jako bílá pevná látka (126 mg, 94 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 183 až 185 °C. [a]20D -52,1° (c 0,296; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,95 (d, 3H, JCH3.nh =
4,8 Hz, CH3); 3,53 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, Hz, Jya,()H = 5,9 Hz, Jya,y = 3,6 Hz, H-5'a); 3,63 (bdt, 1H, ,/geni = 11,9 Hz, J5WH = Λν = 4,2 Hz, H-5'b); 3,91 (bq, 1H, Jyya = = Jy3' = 3,5 Hz,
H-4'); 4,09 (td, 1H, Jyy = Jy(W = 4,9 Hz, Jyy = 3,2 Hz, H-3'); 4,43 (td, 1H, J2y = JyoH =
6.4 Hz, Jyy = 5,2 Hz, H-2'); 5,14 (d, 1H, 7ťW,š-= 4,7 Hz, OH-3'); 5,21 (bt, 1H, JOH,ya = JOH^ =
5.5 Hz, OH-5'); 5,34 (d, 1H, J(m,2' = 6,5 Hz, OH-2'); 5,83 (q, 1H, JNHyH3 = 4,8 Hz, NH); 6,10 (d, 1H, Jyy = 6,3 Hz, H-l'); 7,14 (dd, 1H, J3,4= 3,5 Hz, J3,3 = 1,2 Hz, H-3-thienyl); 7,18 (dd, 1H, J4,s = 5,2 Hz, J43 = 3,5 Hz, H-4-thienyl); 7,56 (dd, 1H, 75J = 5,2 Hz, J},3 = 1,2 Hz, H-5-thienyl); 7,59 (s, 1H, H-6); 8,24 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,02 (CH3NH); 61,79 (CH2-5'); 70,78 (CH-3'); 74,09 (CH-2'); 85,40 (CH-4'); 87,19 (CH-1'); 101,08 (C^ta); 108,54 (C-5); 122,00 (CH-6); 125,93 (CH-5-thienyl); 126,50 (CH-3-thienyl); 128,61 (CH-4-thienyl); 135,77 (C-2-thienyl); 150,08 (C-7a); 152,09 (CH-2); 156,96 (C^). IR (ATR): v 3152, 2929, 2863, 1610, 1992, 1303, 1061, 1023, 641 cm’1. MS (ESI) m/z 347 (M+H), 363 (M+H). HRMS (ESI) pro C16H19N4O4S [M+H] vypočteno: 363,11270; nalezeno: 363,11204.
Příklad 20
4-Methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (3d)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 17 z 5-jod-4-methylamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidinu 3h (150 mg, 0,74 mmol) a thiofen-3-boronové kyseliny ve formě bílé pevné látky (263 mg, 98 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 135 až 138 °C. [a]20D -52,5° (c 0,402; DMSO). 'H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,94 (d, 3H, JCHs.nh = 4,8 Hz, CH3); 3,53 (dm, 1H, 7gem = 11,9, Hz, H-5'a); 3,63 (dm, 1H, 7gem = 11,9 Hz, H-5'b);
3,90 (q, 1H, Jyya = = Jyy = 3,5 Hz, H-4'); 4,10 (m, 1H, H-3'); 4,43 (btd, 1H, J2r =
6.4 Hz, Jyy = 5,4 Hz, H-2'); 5,13 (d, 1H, JOn,3’ = 4,7 Hz, OH-3'); 5,21 (bs, 1H, OH-5'); 5,32 (d, 1H, Joh.2'= 6,5 Hz, OH-2'); 5,70 (q, 1H, JNHyH3 = 4,8 Hz, NH); 6,10 (d, 1H, Jyy = 6,3 Hz, H1'); 7,27 (dd, 1H, J45= 4,9 Hz, J42 = 1,4 Hz, H-4-thienyl); 7,51 (dd, 1H, J2S = 2,9 Hz, J2,4 =
1.4 Hz, H-2-thienylj; 7,52 (s, 1H, H-6); 7,71 (dd, 1H, J34 = 4,9 Hz, J52 = 2,9 Hz H-5-thienyl); 8,23 (s, 1H, H-2). ,3C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,06 (CH3NH); 61,89 (CH2-5'); 70,82 (CH-3'); 74,02 (CH-2'); 85,31 (CH-4'); 87,20 (CH-1'); 101,22 (C^la); 111,04 (C-5); 121,09 (CH-6); 122,10 (CH-2-thienyl); 127,60 (CH-5-thienyl); 128,62 (CH-4-thienyl); 135,96 (C-3thienyl); 150,02 (C-7a); 151,77 (CH-2); 157,10 (C-4). IR (ATR): v 3152, 2933, 2863, 1608, 1390, 1303, 1061, 785 cm1. MS (ESI) m/z 363 (M+H), 385 (M+Na). HRMS (ESI) pro C16H19N4O4S [M+H] vypočteno: 363,11270; nalezeno: 363,11204.
Příklad 21
4-Methylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-77/-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidin (3e)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 17 z 5-jod-4-methylamino-7-(í4-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-rf]pyrimidinu 3h (300 mg, 0,74 mmol) a fenylboronové kyseliny jako bílá
-22CZ 305466 B6 pevná látka (250 mg, 95 %). Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 149 až 153 °C. [a]20D -53,3° (c 0,304; DMSO). 'H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,92 (d, 3H, JCH3.nh = 4,8 Hz, CH3); 3,54 (bdm, IH, J&m = 11,9, Hz, H-5'a); 3,63 (bdd, IH, Jgem = 11,9 Hz, Js-b,r = 3,6 Hz, H5'b); 3,91 (q, IH, = Jry = 3,5 Hz, H-4'); 4,11 (m, IH, H-3'); 4,46 (bq, IH, J2-,- =
J2-,m = Jy.i'= 5,7 Hz, H-2'); 5,13 (d, IH, JOh,3> = 4,7 Hz, OH-3'); 5,21 (m, IH, OH-5'); 5,33 (d, IH, JOH.2'= 6,5 Hz, OH-2'); 5,58 (q, IH, JNH,cm = 4,8 Hz, NH); 6,13 (d, IH, J,-2- = 6,3 Hz, HT); 7,37 (m, IH, H-p-Ph); 7,44 - 7,51 (m, 4H, H-o,w-Ph); 7,52 (s, IH, H-6); 8,24 (s, IH, H-2). I3C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,12 (CH3NH); 61,88 (CH2-5'); 70,83 (CH-3'); 74,03 (CH2'); 85,32 (CH-4'); 87,26 (CH-T); 100,91 (C^la); 116,38 (C-5); 121,24 (CH-6); 127,05 (CH/?-Ph); 128,55 (CH-o-Ph); 129,27 (CH-w-Ph); 134,69 (C-z-Ph); 150,31 (C-7a); 151,72 (CH2); 157,01 (C-4). IR (ATR): v 3192, 2953, 1604, 1573, 1517, 1111, 1061, 648 cm“1. MS (ESI) m/z 357 (M+H), 379 (M+Na). HRMS (ESI) pro C,8H21N4O4 [M+H] vypočteno: 357,15628; nalezeno: 357,15565.
Příklad 22
5-(Benzofuran-2-yl)-4-methylamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-7H-pyrrolo[2,3-<71pyrimidin (3f)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 17 z 5-jod-4-methylamino-7-([3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-r/]pyrimidinu 3h (300 mg, 0,74 mmol) a benzofuran-2-boronové kyseliny. Produkt po sloupcové chromatografií (SiO2) byl přečištěn krystalizací ze směsi voda/MeOH. Produkt 3f (187 mg, 64 %) byl získán ve formě nahnědlé pevné látky. T.t. 182 až 203 °C. [cc]20D -65,2° (c 0,248; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,09 (d, 3H, Jch3,nh = 4,7 Hz, CH3); 3,58 (bdm, IH, ,7gem = 12,0, Hz, H-5'a); 3,68 (bdt, IH, Jgem = 12,0 Hz, Js-b.oH = Λ-b,4-= 4,5 Hz, H5'b); 3,94 (m, IH, H-4'); 4,14 (m, IH, H-3'); 4,46 (m, IH, H-2'); 5,18 (bd, IH, JOH,3'= 4,9 Hz, OH-3'); 5,24 (bt, IH, JOH.5'a = Jow = 5,7 Hz, OH-5'); 5,41 (bd, IH, 6,4 Hz, OH-2');
6,15 (bd, IH, J,-2-= 6,1 Hz, H-l'); 6,99 (q, IH, JNH,CH3 = 4,7 Hz, NH); 7,12 (d, IH, J3,7 = 0,9 Hz,H-3-benzofuryl); 7,26 - 7,33 (m, 2H, H-5,6-benzofuryl); 7,65 (m, IH, H-4-benzofuryl); 7,73 (m, IH, H-7-benzofuryl); 8,09 (s, IH, H-6); 8,28 (s, IH, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 28,22 (CH3NH); 61,79 (CH2-5'); 70,70 (CH-3'); 74,15 (CH-2'); 85,45 (CH-4'); 87,36 (CH-T); 100,05 (C-4a); 101,82 (CH-3-benzofuryl); 105,57 (C-5); 111,56 (CH-7benzofuryl); 120,77 (CH-4-benzofuryl); 122,68 (CH-6); 123,63 (CH-5-benzofuryl); 123,96 (CH-6-benzofuryl); 129,05 (C-3a-benzofuryl); 150,54 (C-7a); 151,24 (C-2-benzofuryl); 152,41 (CH-2); 154,04 (C-7a-benzofuryl); 156,77 (C-4). IR (ATR): v 3418, 2930, 1621, 1602, 1458, 1201, 1105 cm1. MS (ESI) m/z 397 (M+H), 419 (M+Na). HRMS (ESI) pro C20H20N4O5 l,7H2O: C 56,25; H 5,52; N 13,12. Nalezeno: C 56,52; H 5,16; N 12,74.
Příklad 23
5-Ethynyl-4-methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin (3g)
Argonem propláchnutá směs 5-jod-4-methylamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-</]pyrimidinu 3h (406 mg, 1 mmol, příklad 16), PdCl2(PPh3)2 (35 mg, 0,05 mmol), Cul (19 mg, 0,1 mmol), trimethylsilylacetylenu (1,4 ml, 10 mmol) a triethylaminu (0,4 ml) byla míchána v DMF (1,6 ml) při pokojové teplotě po dobu 12 h. Směs byla odpařena dosucha za vakua, odparek byl několikrát spoluodpařen se směsí EtOH/toluen a nanesen na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform. Sloupcovou chromatografií (SiO2, 0 až 3% MeOH v chloroformu) byl získán trimethylsilylethynylový derivát kontaminovaný triethylamonium-jodidem. Směs byla přímo odchráněna mícháním s K2CO3 (207 mg, 1,5 mmol) v MeOH (5 ml) při pokojové teplotě po dobu 5 h a následně spoluodpařena se silikagelem. Sloupcovou chromatografií (3% MeOH v chloroformu) byl získán produkt 3g (237 mg, 78 % ve dvou krocích) jako okrová pevná látka. Produkt byl krystalizován ze směsi MeOH/chloroform. T.t. 193 až 195 °C. [a]20D -83,4°
-23 CZ 305466 B6 (c 0,248; DMSO). ‘HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,01 (d, 3H, JCH3.nh = 4,8 Hz, CH3); 3,53 (ddd, 1H, 7gem = 12,0, Hz, JyaX)H = 5,6 Hz, JS'a,r = 3,8 Hz, H-5'a); 3,63 (bdt, 1H, 7gem = 12,0 Hz, 757,/w = 4,1 Hz, H—5'b); 3,90 (q, 1H, J4;5'a ~ Jm = J-w = 3,5 Hz, H—4'); 4,08 (bdd, 1H,
7j-2-=4,8 Hz, 7/;/-= 3,5 Hz, H-3'); 4,27 (s, 1H, C=CH); 4,37 (bt, 1H, 727-= 7,-/-= 5,5 Hz, H-2'); 5,14 (bs, 1H, OH-3'); 5,21 (bt, 1H, Johw = Johw= 5,5 Hz, OH-5'); 5,35 (bs, 1H, OH-2'); 6,02 (d, 1H, 7/-2-= 6,1 Hz, H-l'); 6,37 (q, 1H, JNHX-H3 = 4,8 Hz, NH); 7,81 (s, 1H, H-6); 8,21 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 27,83 (CH3NH); 61,70 (CH2-5'); 70,69 (CH-3'); 74,20 (CH-2'); 77,36 (C=CH); 83,50 (C=CH); 85,47 (CH-4'); 87,42 (CH-T); 93,84 (C-5); 102,91 (C4a); 127,53 (CH-6); 148,92 (C-7a); 152,86 (CH-2); 157,04 (CM). IR (ATR): v 3298, 3298, 3273, 2948, 1618, 1516, 1326, 1031, 681, 560 cm1. MS (ESI) m/z 305 (M+H), 327 (M+H). HRMS (ESI) pro Ci4H)7N4O4 [M+H] vypočteno: 305,12498; nalezeno: 364,12438. Vypočteno pro C|4H|6N4O41/4H2O: C 54,45; H 5,39; N 18,14. Nalezeno: C 54,67; H 5,31; N 17,95.
Příklad 24
4-Dimethylamino-5-jod-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (4h)
Směs 4-chlor-5-jod-7-(2,3,5tri-(9-benzoyl-(3-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-7]pyrimidinu 5 (5,79 mg, 8 mmol) {Seela, F.; Ming, X. Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861}, vodného dimethylaminu (40% hm./hm., 10 ml) v dioxanu (10 ml) byla míchána v ocelovém autoklávu při 120 °C po dobu 8 h. Po ochlazení byla směs odpařena dosucha a odparek byl několikrát spoluodpařen s vodou. Krystalizací z vody byl získán produkt 4h (2,84 g, 84 %) ve formě bílých jehlic. T.t. 195 až 197 °C. [ct]20D-39,0° (c 0,290; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,16 (s, 6H, (CH3)2N); 3,54 (ddd, 7gem = 11,9, Hz, JyaX)H = 5,8 Hz, 75-0,4-= 3,8 Hz, H-5'a); 3,62 (ddd, 1H, 7gem = 11,9 Hz, J5WH = 5,2 Hz, J5F4.= 3,9 Hz H-5'b); 3,89 (bq, 1H, J4-5-a = J4y„ = 7/;J- = 3,5 Hz, H4'); 4,07 (td, 1H, 7^- = 7///// = 5,0 Hz, 7/-,-= 3,2 Hz, H-3'); 4,36 (td, 1H, 72;/-= J2,OH = 6,3 Hz, 72;,-= 5,1 Hz, H-2'); 5,13 (t, 1H, J()H,ya = JOhw = 5,5 Hz, OH-5'); 5,13 (d, 1H, 7o„,/-= 4,7 Hz, OH-3'); 5,33 (d, 1H, JOH,r = 6,4 Hz, OH-2'); 6,11 (d, 1H, 7/-2-= 6,3 Hz, H-l'); 7,86 (s, 1H, H6); 8,24 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 43,28 ((CH3)2N); 53,85, (C-5); 61,66 (CH2-5'); 70,76 (CH-3'); 74,12 (CH-2'); 85,36 (CH-4'); 86,77 (CH-T); 106,62 (CM); 129,62 (CH-6); 150,46 (CH-2); 152,13 (C-7a); 160,31 (C-4); MS (ESI) m/z 421 (M+H), 443 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci3H18N4O4I [M+H] vypočteno: 421,03672; nalezeno: 421,03663. Vypočteno pro Ci3HI7N4O4I: C 37,16; H 4,08; N 13,33. Nalezeno: C 37,24; H 4,04; N 13,02.
Příklad 25
4-Dimethylamino-5-(furan-2-yl)-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (4a)
Argonem propláchnutá směs 4-diinethylamino-5-jod-7-((3-D-riboruranosyl)-7//-pyrrolo[2,37]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol, Příklad 24), furan-2-boronové kyseliny (168 mg, 1,5 mmol), Na2CO3 (318 mg, 3 mmol), Pd(OAc)2 (11 mg, 49 pmol) a TPPTS (71 mg, 0,125 mmol) ve směsi voda/MeCN (2:1, 5 ml) byla míchána při 100 °C po dobu 3 h. Po ochlazení byla směs zneutralizována vodnou HC1 (1 mol.T1) a odpařena dosucha za sníženého tlaku. Odparek byl čištěn reverzní HPFC (C-18, 0 až 100% MeOH ve vodě) a následným přečištěním sloupcovou chromatografíí (SiO2, 2,5% MeOH v chloroformu) byl získán produkt 4a (176 mg, 49 %) jako béžová pěna. T.t. 97 až 103 °C. [a]20D -42,8° (c 0,358; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,84 (s, 6H, (CH3)2N); 3,54 (ddd, 7gem = 11,9, Hz, JyaXm = 6,0 Hz, = 3,8 Hz, H-5'a); 3,62 (ddd, 1H, 7gem = 11,9 Hz, 7,-/,//// = 5,1 Hz, J5Kr= 3,8 Hz H-5'b); 3,90 (btd, 1H, J4-ya = J4^ = 3,8 Hz, 7/-/-= 3,2 Hz, H-4'); 4,10 (m, 1H, H-3'); 4,42 (td, 1H, 72J- = 72W = 6,4 Hz, 72-/- = 5,1 H-2'); 5,14 (d, 1H, Joh.3'= = 4,8 Hz, OH-3'); 5,15 (dd, 1H, JOH,ya = 5,9 Hz, J()H,S2> = 5,1 Hz, OH-5'); 5,35 (d, 1H, JOh,2'= 6,5 Hz, OH-2'); 6,17 (d, 1H, 7,-2- = 6,4 Hz, H-l'); 6,51 (dd, 1H, J3,4 = 3,2
-24CZ 305466 B6
Hz, Jj,5 = 0,9 Hz, H-3-furyl); 6,58 (dd, 1H, J43 = 3,2 Hz, J4,5 = 1,9 Hz, H-4-furyl); 7,75 (dd, 1H, J5,4 = 1,9 Hz, J53 = 0,9 Hz, H-5-furyl); 7,75 (s, 1H, H-6); 8,25 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 39,44 ((CH3)2N); 61,73, (CH2-5'); 70,74 (CH-3'); 74,10 (CH-2'); 85,35 (CH-4'); 86,98 (CH-1'); 102,05 (C4a); 106,87 (CH-5); 107,61 (CH-3-furyl); 111,74 (C4-furyl); 122,92 (C-6); 142,56 (CH-5-furyl); 149,33 (C-2-fiiryl); 150,71 (CH-2); 152,01 (C7a); 159,92 (CH-6); 142,56 (CH-5-furyl); 149,33 (C-2-furyl); 150,71 (CH-2); 152,01 (C-7a); 159,64 (C-4). MS (ESI) m/z 361 (M+H), 383 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci7H21N4O5 [M+H] vypočteno: 361,15065; nalezeno: 361,15057.
Příklad 26
4-Dimethylamino-5-{furan-3-yl)-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin (4b)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 25 z 4-dimethylamino-5-jod-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-</]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol) a furan-3-boronové kyseliny jako nažloutlá pevná pěna (159 mg, 44 %) T.t. 94 až 97 °C. [a]20D -29,9° (c 0,304; DMSO). ]H NMR (500 MHz, DMSO-ds): 2,86 (s, 6H, (CH3)2N); 3,53 (dm, 1H, Jgem = 11,9, Hz, H-5'a); 3,62 (dm, 1H, Jgem = 11,9 Hz, H-5'b); 3,90 (td, 1H, = J4^ = 3,9 Hz, Jr,3’= 3,3 Hz, H-4'); 4,10 (m,
1H, H-3'); 4,42 (td, 1H, J2;r = J2.OH = 6,3 Hz, Jry= 5,3 H-2'); 5,13 (m, 1H, OH-5'); 5,14 (d, 1H, Joh,3'= 4,8 Hz, OH-3'); 5,33 (d, 1H, JOH,2'= 6,4 Hz, OH-2'); 6,16 (d, 1H, J/:2- = 6,3 Hz, H1'); 6,66 (dd, 1H, J45 = 1,8 Hz, J4,2 = 0,9 Hz, H-4-furyl); 7,63 (s, 1H, H-6); 7,75 (t, 1H, J5 2 = J5,4 = 1,7 Hz, H-5-furyl); 7,79 (dd, 1H, J25 = 1,6 Hz, J24 = 0,9 Hz, H-2-furyl); 8,27 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 41,11 ((CH3)2N); 61,86, (CH2-5'); 70,78 (CH-3'); 73,96 (CH-2'); 85,27 (CH-4'); 86,85 (CH-1'); 103,41 (C-4a); 107,26 (CH-5); 111,99 (CH-4-furyl); 120,25 (C-3-furyl); 121,73 (C-6); 139,50 (CH-2-furyl); 143,75 (C-5-furyl); 150,331 (CH-2); 152,27 (C-7a); 160,61 (CH-4). MS (ESI) m/z 361 (M+H), 383 (M+Na). HRMS (ESI) pro C17H21N4O5 [M+H] vypočteno: 361,15065; nalezeno: 361,15058.
Příklad 27
4-Dimethylamino-7-((3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-777-pyrrolo[2,3-J]pyrimidin (4c)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 25 z 4-dimethylamino-5-jod-7-((3-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-ď]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol) a thiofen-2-boronové kyseliny jako nahnědlá pevná pěna (183 mg, 49 %) T.t. 92 až 99 °C. [a]20D -36,8° (c 0,231; DMSO). Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,79 (s, 6H, (CH3)2N); 3,54 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5WH = 5,9 Hz, Jya,r= 3,7 Hz, H-5'a); 3,62 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5KOH = 5,1 Hz, /,-^= 3,8 Hz, H-5'b);
3.90 (bq, 1H, J4,Sa = J4.5b = J4'3· = 3,5 Hz, H-4'); 4,09 (td, 1H, J3;2^ = = 4,9 Hz, =
3,1 Hz, H-3'); 4,43 (td, 1H, J2;r = J2,(nr= 6,4 Hz, J2.3- = 5,1 H-2'); 5,14 (d, 1H, J0H.3-= 4,7 Hz, OH-3'); 5,15 (bt, 1H, J0H5'a = Jonst, = 5,5 Hz, OH-5'); 5,35 (d, 1H, JOH,r= 6,5 Hz, OH-2'); 6,17 (d, 1H, Λ;2'= 6,4 Hz, H-l'); 7,07 (dd, 1H, J3,4 = 3,5 Hz, J3,5 = 1,2 Hz, H-3-thienyl); 7,12 (dd, 1H, Λ.5 = 5,1 Hz, J43 = 3,5 Hz, H-4-thienyl); 7,53 (dd, 1H, J5<4 = 5,1 Hz, J5,3 = 1,2 Hz, H-5thienyl); 7,70 (s, 1H, H-6); 8,27 (s, 1H, H-2). I3C NMR (125,7 MHz, DMSO-46): 40,61 ((CH3)2N); 61,74, (CH2-5'); 70,76 (CH-3'); 74,07 (CH-2'); 85,37 (CH-4'); 86,92 (CH-1'); 102,86 (C-4a); 109,55 (CH-5); 122,55 (CH-6); 125,74 (CH-5-thienyl); 126,54 (CH-3-thienyl);
127.90 (CH-4-thienyl); 137,24 (C-2-thienyl); 150,58 (CH-2); 152,12 (C-7a); 160,10 (CH-4). MS (ESI) m/z 377 (M+H), 399 (M+Na). HRMS (ESI) pro C17H21N4O4S [M+H] vypočteno: 377,12780; nalezeno: 377,12776.
-25CZ 305466 B6
Příklad 28
4-Dimethylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7/f-pyrrolo[2,3-ťf]pyrimidin (4d)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 25 z 4-dimethylamino-5-jod-7-((3-D-ribofuranosyl)-7/7-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol) a thiofen-3-boronové kyseliny ve formě bílé pevné pěny (206 mg, 55 %) T.t. 99 až 103 °C. [a]20D -28,8° (c 0,184; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,78 (s, 6H, (CH3)2N); 3,53 (ddd, 1H, ./gem = 11,9, Hz, J5dOH = 6,0 Hz, Jya,r= 4,0 Hz, H-5'a); 3,62 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5K()H = 5,2 Hz, J53),r = 3,8 Hz, H-5'b); 3,90 (td, 1H, Jr^a = Jrji) = = 3,9 Hz, J4X3’ = 3,2 Hz, H—4'); 4,10 (td, 1H, J3'2'= J3’.on =
5,0 Hz, J3<r= 3,2 Hz, H-3'); 4,44 (td, 1H, J2-,> = J2X()H = 6,4 Hz, J2>3>= 5,2 Hz, H-2'); 5,14 (d, 1H, -W= 4,8 Hz, OH-3'); 5,14 (dd, 1H, = 6,0 Hz, JOř35„ = 5,2 Hz, OH-5'); 5,33 (d, 1H,
Joh.2’ = 6,5 Hz, OH-2'); 6,17 (d, 1H, JK2 = 6,4 Hz, H-l'); 7,23 (dd, 1H, J45 = 4,9 Hz, J42 = 1,3 Hz, H-4-thienyl); 7,47 (dd, IH, J23 = 3,0 Hz, J2 4 = 1,3 Hz, H-2-thienyl); 7,62 (dd, 1H, J3 4 =
4,9 Hz, Λ-,2 = 3,0 Hz, H-5-thienyl); 7,66 (s, 1H, H-6); 8,27 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 40,77 ((CH3)2N); 61,85, (CH2-5'); 70,79 (CH-3'); 73,96 (CH-2'); 85,29 (CH-4'); 86,89 (CH-1'); 102,95 (C-4a); 102,02 (C-5); 121,43 (CH-2-thienyl); 121,73 (CH-6); 126,41 (CH-5-thienyl); 128,82 (CH-4-thienyl); 136,19 (C-3-thienyl); 150,35 (CH-2); 152,13 (C-7a); 160,41 (CH-4). MS (ESI) m/z 377 (M+H), 399 (M+Na). HRMS (ESI) pro C17H2,N4O4S [M+H] vypočteno: 377,12780; nalezeno: 377,12770.
Příklad 29
4-Dimethylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7/f-pyrrolo[2,3-ť7]pyrimidin (4e)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 25 z 4-dimethylamino-5-jod-7-([3-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-(/]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol) a fenylboronové kyseliny jako bezbarvá pěna (156 mg, 42 %). [a]D -24,0° (c 0,337; DMSO). *H NMR (500 MHz, DMSO-46): 2,74 (s, 6H, (CH3)2N); 3,54 (ddd, 1H, ,7gen, = 11,9, Hz, J5-a,()H = 5,9 Hz, J5i,,r= 3,9 Hz, H-5'a); 3,63 (ddd, 1H, Jgein = 11,9 Hz, J53,,oh = 5,1 Hz, J54,,4’= 3,8 Hz, H-5'b); 3,91 (td, 1H, J4^a = = 3,8 Hz,
J4’3>= 3,3 Hz, H-4'); 4,11 (m, IH, H-3'); 4,47 (bq, 1H, J2,r = J2>()H = J2^ = 5,6 Hz, H-2'); 5,15 (bt, IH, Jopya = J(>w = 5,5 Hz, OH-5'); 5,15 (m, IH, OH-3'); 5,35 (bd, IH, -W= 6,2 Hz, OH-2'); 6,19 (d, IH, J,>2>= 6,3 Hz, H-l'); 7,32 (m, IH, H-p-Ph); 7,40 - 7,48 (m, 2x2H, H-mPh); 7,66 (s, IH, H-6); 8,28 (s, IH, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 40,84 ((CH3)2N); 61,83, (CH2-5'); 70,80 (CH-3'); 74,00 (CH-2'); 85,31 (CH-4'); 87,00 (CH-1'); 102,29 (C^la); 117,22 (C-5); 121,92 (CH-6); 126,59 (CH-^-Ph); 128,28 (CH-o-Ph); 128,72 (CH-w-Ph); 136,00 (C-z-Ph); 150,37 (CH-2); 152,47 (C-7a); 160,15 (CH^l·). MS (ESI) m/z 371 (M+H), 393 (M+Na). HRMS (ESI) pro C|9H23N4O4 [M+H] vypočteno: 371,17138; nalezeno: 371,17012.
Příklad 30
5-(Benzofuran-2-yl)-4-dimcthylamino-7-([3-D-ribofiiranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-i7]pyrimidin (4f)
Látka byla připravena dle postupu v příkladu 25 z 4-dimethylamino-5-jod-7-((3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-c7]pyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol) a benzofuran-2-boronové kyseliny. Reverzní HPFC byl získán produkt 4f (283 mg, 69 %) ve formě bílé pevné látky (následné přečištění sloupcovou chromatografií nebylo nutné). Produkt byl krystalizován z MeOH. T.t. 156 až 158 °C. [a]D -36,4° (c 0,261; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 2,89 (s, 6H, (CH3)2N);
-26CZ 305466 B6
3,56 (ddd, 1H, 7gem = 12,0, Hz, J5WH = 5,9 Hz, J5^= 3,7 Hz, H-5'a); 3,65 (ddd, 1H, Jgem = 12,0 Hz, J5KOH = 5,2 Hz, J5Kr= 3,8 Hz, H-5'b); 3,94 (q, 1H, JrSa = J4^ = J4'3'= 3,5 Hz, H-4'); 4,13 (td, 1H, J3,2^J3’OH = 5,0 Hz, J3,r= 3,2 Hz, H-3'); 4,46 (td, 1H, J2,,· = J2,OH'= 6,3 Hz, J2,3· = 5,1 Hz, H-2'); 5,17 (dd, 1H, JOH.ya = 5,9 Hz, = 5,2 Hz, OH-5'); 5,17 (d, 1H, -W = 4,8 Hz, OH-3'); 5,40 (d, 1H, Jolu- = 6,4 Hz, OH-2'); 6,21 (d, 1H, Jr,r = 6,2 Hz, H-l'); 7,00 (d, 1H, J3 7 = 1,0 Hz, H-3-benzofuryl); 7,26 (td, 1H, J56 = J54 = 7,3 Hz, J57 = 1,3 Hz, H-5-benzofuryl); 7,30 (bddd, 1H, 7ή,7 = 8,1 Hz, J65 = 7,2 Hz, J6i4 = 1,6 Hz, H-6-benzofuryl); 7,62 (m, 1H, H-7-benzofuryl); 7,66 (m, 1H, H-4-benzofuryl); 8,01 (s, 1H, H-6); 8,31 (s, 1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 39,91 ((CH3)2N); 61,71, (CH2-5'); 70,74 (CH-3'); 74,21 (CH-2'); 85,46 (CH-4'); 87,14 (CH-T); 101,82 (C-4a); 103,72 (C-3-benzofuryl); 106,46 (C-5); 111,15 (CH-7-benzofuryl); 121,01 (CH-4-benzofuryl); 123,28 (CH-5-benzofuryl); 124,13 (CH-6); 124,22 (CH-6-benzofuryl); 129,06 (C-3a-benzofuryl); 159,83 (C-4). MS (ESI) m/z 411 (M+H), 433 (M+Na). HRMS (ESI) pro C2iH23N4O5 [M+H] vypočteno: 411,16630; nalezeno: 411,16492. Vypočteno pro C21H22N4O5: C 61,45; H 5,40; N 13,65. Nalezeno: C 61,30; H 5,35; N 13,44.
Příklad 31
4-Dimethylamino-5-ethynyl-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-7]pyrimidin (4g)
Argonem propláchnutá směs 4-dimethylamino-5-jod-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3úQpyrimidinu 4h (420 mg, 1 mmol, příklad 24), PdCl2(PPh3)2 (35 mg, 0,05 mmol), Cul (19 mg, 0,1 mmol), trimethylsilylacetylenu (1,4 ml, 10 mmol) a triethylaminu (0,5 ml) byla míchána v DMF (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 h. Směs byla odpařena dosucha za vakua, zbytek byl několikrát spoluodpařen se směsí EtOH/toluen a nakonec nanesen na silikagel spoluodpařením z roztoku ve směsi MeOH/chloroform. Sloupcová chromatografie (SiO2, 0 až 2,5% MeOH v chloroformu) poskytla trimethylsilylethynylový derivát kontaminovaný triethylamoniumjodidem. Směs byla přímo odchráněna mícháním s K2CO3 (207 mg, 1,5 mmol) v MeOH (20 ml) při pokojové teplotě po dobu 5 h. Směs byla odpařena dosucha a reverzní HPFC odparku (C-l 8, 0 až 100% MeOH ve vodě) poskytla produkt 4g (257 mg, 81% ve dvou krocích) jako okrovou pevnou látku. Produkt byl krystalizován ze směsi voda/MeOH. T.t. 143 až 145 °C. [a]D -75,5° (c 0,261; DMSO). 'HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 3,27 (s, 6H, (CH3)2N); 3,55 (ddd, 1H, 7geni = 11,9, Hz, J5Wh = 5,8 Hz, J5,a,4>= 3,6 Hz, H-5’a); 3,64 (ddd, 1H, Jgem = 11,9 Hz, J5WH= 5,1 Hz, J5Kr= 3,7 Hz, H-5'b); 3,90 (q, 1H, J4,5,a = J4,5^ = J4,3,= 3,6 Hz, H-4'); 4,09 (td, 1H,73^ = 73W = 5,0 Hz, J3'4'= 3,4 Hz, H-3'); 4,21 (s, 1H, UCH); 4,35 (td, 1H, J2-r = J2>oh’= 6,1 Hz, 72:5' =
5,1 Hz, H-2'); 5,14 (d, 1H, J0H^ = 4,9 Hz, OH-3'); 5,17 (t, 1H, J0H,5’a = Jonsn = 5,5 Hz, OH-5'); 5,36 (d, 1H, J0H.2'= 6,3 Hz, OH-2'); 6,12 (d, 1H, Jr,y = 6,0 Hz, H-T); 7,98 (s, 1H, H-6); 8,21 (s,
1H, H-2). 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 41,00 ((CH3)2N); 61,58, (CH2-5'); 70,59 (CH-3'); 74,24 (CH-2'); 79,87 (UCH); 8282 (C^CH); 85,34 (CH-4'); 87,12 (CH-1'); 95,50 (C-5);
102,91 (C-4a); 129,68 (CH-6); 151,16 (CH-2); 151,31 (C-7a); 158,47 (C-+1). MS (ESI)/w/z319 (M+H), 341 (M+Na). HRMS (ESI) pro Ci5Hi9N4O4 [M+H] vypočteno: 319,14008; nalezeno: 319,13917. Vypočteno pro C15H18N4O4 H2O: C 53,57; H 5,99; N 16,66. Nalezeno: C 53,76; H 5,88; N 16,53.
Příklad 32
In vitro protinádorová aktivita
K hodnocení protinádorově účinnosti nově připravených látek v in vitro podmínkách jsme použili cytotoxického MTT testu na buněčných liniích derivovaných z normálních tkání i nádorů. Konkrétně se jednalo o linii K562 (lidská myeloidní leukémie). K562-Tax (lidská myeloidní leukémie rezistentní na taxol a overexprimující protein mnohočetné lékové rezistence PgP), CEM (Tlymfoblastická leukémie), CEM-DNR-bulk (T-lymfoblastická leukémie rezistentní na doxo-27CZ 305466 B6 rubicin, postrádající expresi cílového genu pro inhibitory topoizomerázy II alfa), linie A549 (lidský adenokarcinom plic), HCT116p53 wt (lidská rakovina tlustého střeva, wild-type), HCT116p53—/—(lidská rakovina tlustého střeva, mutant p53). Expresní charakteristiky, profily vnímavosti na klasická protinádorová léčiva i metodologie cytotoxického MTT testu byly opako5 vaně publikovány (např. Nosková V. et al., Neoplasma 2002, Šarek J. et al., J. Med. Chem., 2003).
Výsledky biologických testů:
ίο V biologických testech byly použity referenční látky RL1, RL2, RL3 a RL4 následujících vzorců:
RL1 RL2 RL3 RL4 (Gerster, J. F.; Carpenter, B.; Robins, R. K.; Townsend, L. B,, J. Med. Chem. 1967, 10, 32615 331).
Látka lh je známa a do testování byla zahrnuta pouze jako referenční (Seela, F.; Ming, X., Tetrahedron 2007, 63, 9850-9861; Zhang, L.; Zhang Y.; Li, X.; Zhang, L., Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 907-912).
Pokud testované látky vykázaly v in vitro cytotoxickém testu aktivitu (tabulka 2), byla prakticky vždy preferenční vůči širokému spektru nádorových linií různého histogenetického původu (mesenchymální i epiteliální nádory), s významně menší aktivitou a tudíž dobrým in vitro terapeutickým indexem (10 až lOOx) vůči liniím normálních lidských fibroblastů (BJ a MRC-5).
Hodnoty IC50 často dosahovaly submikromolárních koncentrací. Cytotoxická aktivita vůči nádorovým buňkám nebyla závislá na statusu genu p53, jelikož podobné aktivity jsme pozorovali jak u linií HCT116 (p53 wild type), tak u mutantní linie s detekovaným genem HCT116 (p53 -/-). Řada derivátů však vykazovala sníženou cytotoxicitu na buňkách overexprimujících transportní proteiny (mdr-1 u linie K562-TAX a mrp-1 u linie CEM-DNR).
-28CZ 305466 B6
Tabulka 2: Sumarizace výsledků protinádorové a cytotoxické aktivity in vitro (IC50 v pmol.l1) u nově syntetizovaných sloučenin
Slouč. č. CCRF- CEM CEM- DNR K562 K562- TAX A549 HCT116 HCT116p53 BJ MRC- 5
la 0,015 0,209 0,058 0,375 0,028 0,037 0,041 0,504 1,7
lb 0,126 >10 0,149 3,5 1,2 0,105 0,153 >10 >10
lc 0,087 >10 0,068 6,2 5,8 0,074 0,453 >10 >10
ld 1,9 7,6 0,093 4,7 5,2 0,127 0,136 >10 >10
le >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
lf 3,6 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
ig >10 3,5 0,355 0,646 8,2 6,1 5,1 >10 >10
lh U >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
RL1 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
2a 0,054 0,199 0,04 0,213 0,047 0,024 0,013 0,259 >10
2b >10 >10 0,056 3,5 1,8 0,04 0,097 >10 >10
2c >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
2d >10 >10 0,794 >10 >10 >10 >10 >10 >10
2e >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
2f >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
2g >10 0,144 0,029 0,073 0,214 0,035 0,095 >10 >10
2h >10 >10 >10 7,7 >10 >10 >10 >10 >10
RL2 >10 2,487 >10 0,124 >10 >10 >10 >10 >10
3a 0,179 >10 0,224 >10 2,6 0,224 0,657 7,2 >10
3b >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
3c >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
3d >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
3e >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
3f >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
3g >10 >10 >10 1,14 >10 >10 >10 >10 >10
3h >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
RL3 >10 5,7 >10 0,979 >10 >10 >10 >10 >10
4a 2,5 3,1 0,134 1,66 4,6 0,228 0,32 >10 >10
4b >10 >10 1,5 >10 >10 >10 >10 >10 >10
4c >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
4d 2,6 >10 0,532 >10 >10 >10 >10 >10 >10
4e >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
4f >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10 >10
4g 0,081 0,239 0,098 0,262 0,39 0,239 0,234 0,803 >10
4h 1,8 0,095 0,072 0,054 0,354 0,119 0,124 >10 >10
RL4 2,3 2,6 9,4 0,885 >10 >10 6,7 >10 >10
-29CZ 305466 B6
Průmyslová využitelnost
Látky uvedené v tomto patentu jsou použitelné jako léčiva nebo složky léčiv proti rakovině nebo leukémiím.
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (7)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce I
    HO kde
    R je methansulfanyl, methoxy- methylamino- nebo dimethylamino- skupina a
    R' je furan-2-yl, furan-3-yl, thiofen-2-yl, thiofen-3-yl, fenyl, benzofuran-2-yl, ethynyl či jód, jejich optické izomery či směs takových optických izomerů, za předpokladu, že pokud je R'je jód, R není methoxyskupina.
  2. 2. Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy obecného vzorce 1 podle nároku 1, kterými jsou:
    5-(Furan-2-yl)-4-methoxy-7-((3-D-rÍbofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-íf]pyrimidin,
    5-(Furan-3-yl)-4-methoxy-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-c/]pyrimidin,
    4-Methoxy-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-77/-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
    4-Methoxy-7-(|3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
    4- Methoxy-5-fenyl-7-(|3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-i/]pyrimidin,
    5- {Benzofuran-2-yl)-4-methoxy-7-(3-D-ribofuranosyl)-7f/-pyrrolo[2,3-60pyrimidin, 5-EthynylM-methoxy-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-(7]pyrimidin, 5-JodM-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-č/)pyrimidin, 5-(Furan-2-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť7]pyrimidin, 5-(Furan-3-yl)-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/|pyrimidin, 4-Methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/|pyrimidin, 4-Methylthio-7-(í3-D-ribofuranosy])-5-(thiofen-3-yl)-7//-pynOlo[2,3-<7]pyrimidin,
    4- Methylthio-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7F/-pyiTolo[2,3-cf]pyrimidin,
    5- (Benzofuran-2-yl)-4-methylthio-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidin,
    -30CZ 305466 B6
    5-Ethynyl-4-methylthio-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
    5-Jod-4-methylamino-7-((3-D_ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-£/]pyrimidin,
    5-(Furan-2-yl)-4-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-č/]pyrimidm,
    5-(Furan-3-yl)-4-methylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin,
    4-Methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-77/-pyrrolo[2,3-ř/]pyrimidin,
    4-Methylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin,
    4- Methylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í7]pyrimidin,
    5- (Benzofuran-2-yl)-4-methylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-í7]pyrimidin, 5-Ethynyl-4-methylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin, 4-Dimethylamino-5-jod-7-(P-D-ribofuranosyl)-7//-pyiTolo[2,3-č/]pyrimidin, 4-Dimethylamino-5-(furan-2-yl)-7-(3-D-ribofuranosyl)-7/f-pyrrolo[2,3-(7]pyrimidin, 4-Dimethylamino-5-(furan-3-yl)-7-(P-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-ť/]pyrimidin, 4-Dimethylamino-7-(P-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-2-yl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidÍn, 4-Dimethylamino-7-(3-D-ribofuranosyl)-5-(thiofen-3-yl)-7//-pyrrolo[2,3-6/]pyrimidin,
    4- Dimethylamino-5-fenyl-7-(P-D-ribofuranosyl)-77/-pyrrolo[2,3-í7]pyrimidin,
    5- (Benzofuran-2-yl)-4-dimethylamino-7-(p-D-ribofuranosyl)-777-pyrrolo[2,3-<7]pyi'imidin a 4-Dimethylamino-5-ethynyl-7-(3-E)-ribofuranosyl)-7//-pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin.
  3. 3. Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy podle nároku 1 nebo 2 pro použití jako léčiva.
  4. 4. Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy podle nároku 1 nebo 2 pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo pro léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění spojeného s buněčnou hyperproliferací.
  5. 5. Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy podle nároku 1 nebo 2 pro použití k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících nádory epiteliálního, mesenchymálního a neuroektodermálního původu.
  6. 6. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce 1 podle nároku 1 a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
  7. 7. Farmaceutický prostředek podle nároku 6 pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu, či pro léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění spojeného s buněčnou hyperproliferací.
    Konec dokumentu
CZ2013-845A 2013-11-04 2013-11-04 Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití CZ305466B6 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2013-845A CZ305466B6 (cs) 2013-11-04 2013-11-04 Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2013-845A CZ305466B6 (cs) 2013-11-04 2013-11-04 Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2013845A3 CZ2013845A3 (cs) 2015-05-13
CZ305466B6 true CZ305466B6 (cs) 2015-10-14

Family

ID=53266892

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2013-845A CZ305466B6 (cs) 2013-11-04 2013-11-04 Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ305466B6 (cs)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ307334B6 (cs) * 2016-08-02 2018-06-13 Ăšstav organickĂ© chemie a biochemie AV ÄŚR, v.v.i. Substituované heteropentadieno-pyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002057287A2 (en) * 2001-01-22 2002-07-25 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
WO2003051899A1 (en) * 2001-12-17 2003-06-26 Ribapharm Inc. Deazapurine nucleoside libraries and compounds
WO2005044835A1 (en) * 2003-10-27 2005-05-19 Genelabs Technologies, Inc. METHODS FOR PREPARING 7-(2'-SUBSTITUTED-ß-D-RIBOFURANOSYL)-4-(NR2R3)-5-(SUBSTITUTED ETHYN-1-YL)-PYRROLO[2,3-D]PYRIMIDINE DERIVATIVES
WO2006075993A2 (en) * 2004-04-08 2006-07-20 Genelabs Technologies, Inc. Nucleoside derivatives for treating hepatitis c virus infection
WO2010121576A2 (en) * 2009-04-22 2010-10-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr,V.V.I. Novel 7-deazapurine nucleosides for therapeutic uses

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002057287A2 (en) * 2001-01-22 2002-07-25 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
WO2003051899A1 (en) * 2001-12-17 2003-06-26 Ribapharm Inc. Deazapurine nucleoside libraries and compounds
WO2005044835A1 (en) * 2003-10-27 2005-05-19 Genelabs Technologies, Inc. METHODS FOR PREPARING 7-(2'-SUBSTITUTED-ß-D-RIBOFURANOSYL)-4-(NR2R3)-5-(SUBSTITUTED ETHYN-1-YL)-PYRROLO[2,3-D]PYRIMIDINE DERIVATIVES
WO2006075993A2 (en) * 2004-04-08 2006-07-20 Genelabs Technologies, Inc. Nucleoside derivatives for treating hepatitis c virus infection
WO2010121576A2 (en) * 2009-04-22 2010-10-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr,V.V.I. Novel 7-deazapurine nucleosides for therapeutic uses

Also Published As

Publication number Publication date
CZ2013845A3 (cs) 2015-05-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8450293B2 (en) Synthesis and characterization of C8 analogs of c-di-GMP
WO2019129059A1 (zh) 一种具有cd73抑制活性的膦酸衍生物、其制备方法和应用
ES2596654T3 (es) Compuestos de purina N-9-sustituida, composiciones y métodos de uso
UA121492C2 (uk) Біциклічні гетероцикли як інгібітори fgfr4
KR20110113210A (ko) 유사분열 진행을 억제하기 위한 화합물
KR20170081708A (ko) 헤테로환형 유도체 및 이의 용도
JP6268276B2 (ja) ＰＥＲＫ阻害剤としての新規なＮ（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）−４−キナゾリンアミン誘導体およびＮ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−４−キナゾリンアミン誘導体
RU2520966C2 (ru) Производное трициклического пиразолопиримидина
Fleuti et al. Synthesis and biological profiling of pyrazolo-fused 7-deazapurine nucleosides
CZ305466B6 (cs) Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití
CA3125505C (en) Fluorine-containing substituted benzothiophene compound, and pharmaceutical composition and application thereof
KR101858421B1 (ko) 면역 질환의 예방 및/또는 치료제
TWI755452B (zh) 吡啶并〔３﹐４-ｄ〕嘧啶衍生物或其溶劑合物之結晶
WO2019052359A1 (zh) 双杂环三氮唑核苷类似物的抗肿瘤作用与应用
EP3765475B1 (en) Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses
US10414788B2 (en) Substituted thienopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use
CA3031049C (en) Substituted heteropentadieno-pyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use
US9586986B2 (en) Substituted 7-deazapurine ribonucleosides for therapeutic uses
Knies et al. Ameliorated or Acquired Cytostatic/Cytotoxic Properties of Nucleosides by Lipophilization
AU2014277740B1 (en) Novel substituted 7-deazapurine ribonucleosides for therapeutic uses
EA041973B1 (ru) Замещенные бициклические гетероциклические соединения в качестве ингибиторов prmt5