JP2733777B2 - 2′,5′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途 - Google Patents
2′,5′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途Info
- Publication number
- JP2733777B2 JP2733777B2 JP63509144A JP50914488A JP2733777B2 JP 2733777 B2 JP2733777 B2 JP 2733777B2 JP 63509144 A JP63509144 A JP 63509144A JP 50914488 A JP50914488 A JP 50914488A JP 2733777 B2 JP2733777 B2 JP 2733777B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chioadeniriru
- adenosine
- thioadenylyl
- compound
- phosphorothioate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 発明の技術分野 本発明は、インターヌクレオチドホスホジエステル結
合が光学活性のホスホロチオエート基で置換されている
天然産の抗ウィルス2′,5′−オリゴアデニレートの合
成同族体に関するものである。これら化合物は、キラル
燐原子の1個もしくはそれ以上に関する立体配置がSp
配置である向上した代謝安定性を有する。
合が光学活性のホスホロチオエート基で置換されている
天然産の抗ウィルス2′,5′−オリゴアデニレートの合
成同族体に関するものである。これら化合物は、キラル
燐原子の1個もしくはそれ以上に関する立体配置がSp
配置である向上した代謝安定性を有する。
政府認可に関する説明 ここに説明する本発明は、部分的にナショナル・イン
スティチュート・オブ・ヘルス・グラントPOL CA−2954
5およびナショナル・サイエンス・ファウンデーション
・グラントDMB84−15002により支持された研究の過程で
なされたものである。
スティチュート・オブ・ヘルス・グラントPOL CA−2954
5およびナショナル・サイエンス・ファウンデーション
・グラントDMB84−15002により支持された研究の過程で
なされたものである。
発明の背景 本発明における主題の完全名称は極めて長い用語を含
む。オリゴアデニレート同族体および関連する用語を、
これらにつき周知されたように略称することが当業者の
慣例である。これらの一般的かつ慣用の略称を以下で説
明し、かつ本明細書に用いることができる。
む。オリゴアデニレート同族体および関連する用語を、
これらにつき周知されたように略称することが当業者の
慣例である。これらの一般的かつ慣用の略称を以下で説
明し、かつ本明細書に用いることができる。
略称: 2−5A、2′,5′−オリゴアデニレートもしくはp
3An:2′,5′−ホスホジエステル結合と5′−末端トリ
ホスフェート基とを有するアデニル酸のオリゴマー。
3An:2′,5′−ホスホジエステル結合と5′−末端トリ
ホスフェート基とを有するアデニル酸のオリゴマー。
A2、A3およびA4:2′,5′−ホスホジエステル結合を有
するアデニル酸の二量体、三量体および四量体。
するアデニル酸の二量体、三量体および四量体。
pA3、ppA3(もしくはp2A3)、pppA3(もしくはp
3A3):A3の5′−末端モノ−、ジ−およびトリ−ホス
フェート。
3A3):A3の5′−末端モノ−、ジ−およびトリ−ホス
フェート。
AMPS:アデノシン5′−O−ホスホロチオエート。
SVPD:蛇毒ホスホジエステラーゼ。
2′−PDE:2′−ホスホジエステラーゼ。
Rp:ホスホロチオエートインターヌクレオチド結合に
おけるキラル燐原子の周囲のR立体配置。
おけるキラル燐原子の周囲のR立体配置。
Sp:ホスホロチオエートインターヌクレオチド結合に
おけるキラル燐原子の周囲のS立体配置。
おけるキラル燐原子の周囲のS立体配置。
RNアーゼL:2−5A依存性エンドリボヌクレアーゼ。
ARpARpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpARpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ARpASpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpASpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
pARpARpA、ppARpARpA、pppARpARpA、pASpARpA、ppASp
ARpA、pppASpARpA、pARpASpA、ppARpASpA、pppARpA
SpA、pASpARpA、ppASpASpAおよびpppASpASpA:ARpA
RpA、ASpARpA、ARpASpAおよびASpASpAの5′−モノ−、
ジ−およびトリ−ホスフェートである。
ARpA、pppASpARpA、pARpASpA、ppARpASpA、pppARpA
SpA、pASpARpA、ppASpASpAおよびpppASpASpA:ARpA
RpA、ASpARpA、ARpASpAおよびASpASpAの5′−モノ−、
ジ−およびトリ−ホスフェートである。
ARpARpARpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ARpASpARpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ARpARpASpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ARpASpASpA:(Rp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpARpARpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpASpARpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpARpASpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
ASpASpASpA:(Sp)−P−チオアデニリル−(2′
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン。
pARpARpARpA、ppARpARpARpA、pppARpARpARpA、pARpA
SpARpA、ppARpASpARpA、pppARpASpARpA、pARpARpASpA、
ppARpARpASpA、pppARpARpASpA、pARpASpASpA、ppARpASp
ASpA、pppARpASpASpA、pASpARpARpA、ppASpARpARpA、pp
pASpARpARpA、pASpASpARpA、ppASpASpARpA、pppASpASpA
RpA、pASpARpASpA、ppASpARpASpA、pppASpARpASpA、pA
SpASpASpA、ppASpASpASpA、pppASpASpASpA、pppASpASpA
SpA、:上記四量体の5′−モノ−、ジ−およびトリ−
ホスフェートである。
SpARpA、ppARpASpARpA、pppARpASpARpA、pARpARpASpA、
ppARpARpASpA、pppARpARpASpA、pARpASpASpA、ppARpASp
ASpA、pppARpASpASpA、pASpARpARpA、ppASpARpARpA、pp
pASpARpARpA、pASpASpARpA、ppASpASpARpA、pppASpASpA
RpA、pASpARpASpA、ppASpARpASpA、pppASpARpASpA、pA
SpASpASpA、ppASpASpASpA、pppASpASpASpA、pppASpASpA
SpA、:上記四量体の5′−モノ−、ジ−およびトリ−
ホスフェートである。
(Sp)−ATP−α−S:アデノシン5′−O−(S
p)−(1−チオトリホスフェート)。
p)−(1−チオトリホスフェート)。
発明の背景 2−5A系はインタフェロンの抗ウィルス機作にも含ま
れると広く予想され、さらに細胞成長および分化の調整
にも含まれうる。2′,5′−オリゴアデニレートシンセ
ターゼ[ATP:(2′−5′)オリゴ(A)−アデニルト
ランスフェラーゼ(EC2.7.7.19)]によりATPから合成
された2−5Aは、その唯一の公知標的酵素、すなわち独
特な2−5A−依存性エンドリボヌクレアーゼRNアーゼL
(EC3.1.27)に結合してこれを活性化することにより、
その生物学的作用を発揮する。RNアーゼLはウィルスお
よび細胞のmRNAもしくはrRNAを開裂することにより、蛋
白合成を阻止する。ホバネシアン等、ヨーロピアン・ジ
ャーナル・バイオケミストリー、第93巻、第515〜526頁
(1979);ケール等、プロシーディング・ナショナル・
アカデミー・サイエンス・USA、第75巻、第256〜260頁
(1978)。2−5Aは、植物組織をタバコモザイク病ウィ
ルスによる感染から保護すると報告されている。デバシ
ュ等、サイエンス、第216巻、第415頁(1982)。しかし
ながら、2−5Aは代謝的に不安定である。これは細胞
2′−ホスホジエステラーゼおよびホスファターゼによ
り分解される。ナイト等、メソッズ・エンチモロジー、
第79巻、第216〜227頁(1981);ミンクス等、ヌクレイ
ック・アシッズ・リサーチ、第6巻、第767〜780頁(19
79);ウイリアムス等、ヨーロピアン・ジャーナル・バ
イオケミストリー、第92巻、第455〜462頁(1978)。
れると広く予想され、さらに細胞成長および分化の調整
にも含まれうる。2′,5′−オリゴアデニレートシンセ
ターゼ[ATP:(2′−5′)オリゴ(A)−アデニルト
ランスフェラーゼ(EC2.7.7.19)]によりATPから合成
された2−5Aは、その唯一の公知標的酵素、すなわち独
特な2−5A−依存性エンドリボヌクレアーゼRNアーゼL
(EC3.1.27)に結合してこれを活性化することにより、
その生物学的作用を発揮する。RNアーゼLはウィルスお
よび細胞のmRNAもしくはrRNAを開裂することにより、蛋
白合成を阻止する。ホバネシアン等、ヨーロピアン・ジ
ャーナル・バイオケミストリー、第93巻、第515〜526頁
(1979);ケール等、プロシーディング・ナショナル・
アカデミー・サイエンス・USA、第75巻、第256〜260頁
(1978)。2−5Aは、植物組織をタバコモザイク病ウィ
ルスによる感染から保護すると報告されている。デバシ
ュ等、サイエンス、第216巻、第415頁(1982)。しかし
ながら、2−5Aは代謝的に不安定である。これは細胞
2′−ホスホジエステラーゼおよびホスファターゼによ
り分解される。ナイト等、メソッズ・エンチモロジー、
第79巻、第216〜227頁(1981);ミンクス等、ヌクレイ
ック・アシッズ・リサーチ、第6巻、第767〜780頁(19
79);ウイリアムス等、ヨーロピアン・ジャーナル・バ
イオケミストリー、第92巻、第455〜462頁(1978)。
文献には、2−5Aシンセターゼ/RNアーゼL系の生物
学的役割を探求すべく設計されたアデニルもしくはリボ
シル基における改変により構造改変された2−5A分子が
多数示されている。2−5A分子における構造柔軟性に主
たる原因は、3′,5′−結合RNAおよびDNAと同様に骨格
に存在する。スリニバサン等、ヌクレイック・アシッズ
・リサーチ、第13巻、第5707〜5716頁(1985)。しかし
ながら、理論的および実験的分析が示したところでは、
2′,5′−結合ジヌクレオチドおよびポリヌクレオチド
連鎖の構造は3′,5′−結合ヌクレオチドとは顕著に相
違する(同上)。さらに、2−5Aのリボース−ホスフェ
ート骨格は、分子における主たる抗原決定子であること
も示されている。ジョンストン等、バイオケミストリ
ー、第22巻、第3453〜3460頁(1983)。
学的役割を探求すべく設計されたアデニルもしくはリボ
シル基における改変により構造改変された2−5A分子が
多数示されている。2−5A分子における構造柔軟性に主
たる原因は、3′,5′−結合RNAおよびDNAと同様に骨格
に存在する。スリニバサン等、ヌクレイック・アシッズ
・リサーチ、第13巻、第5707〜5716頁(1985)。しかし
ながら、理論的および実験的分析が示したところでは、
2′,5′−結合ジヌクレオチドおよびポリヌクレオチド
連鎖の構造は3′,5′−結合ヌクレオチドとは顕著に相
違する(同上)。さらに、2−5Aのリボース−ホスフェ
ート骨格は、分子における主たる抗原決定子であること
も示されている。ジョンストン等、バイオケミストリ
ー、第22巻、第3453〜3460頁(1983)。
骨格改変を有する2−5A同族体の合成に関し、幾つか
の報告が見られる。メチルホスホネートおよびメチルホ
スホトリエステル基を有するコア同族体が合成されてい
る。エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカル・ケ
ミストリー、第257巻、第13390〜13397頁(1982);ジ
ャガー等、ヌクレイック・アシッズ・リサーチ・シンポ
ジウム・シリーズNo.9、第149〜152頁(1981)。しかし
ながら、「非帯電」メチルホスホトリエステル同族体に
つき、完全な活性喪失が観察された。エプスタイン等
(上記)。3′,5′−結合による2′,5′−ホスホジエ
ステル結合の置換も、生物学的活性の実質的低下をもた
らす。レシアク等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミ
ストリー、第258巻、第13082〜13088頁(1983)。2′,
5′−インターヌクレオチド結合の1個のみの置換が、
少なくとも一次元程度の活性喪失をもたらした。ほぼ完
全な生物学的活性の喪失は、2−5A三量体における両方
の2′,5′−ホスホジエステル結合の3′,5′−結合に
より置換された際に観察された。
の報告が見られる。メチルホスホネートおよびメチルホ
スホトリエステル基を有するコア同族体が合成されてい
る。エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカル・ケ
ミストリー、第257巻、第13390〜13397頁(1982);ジ
ャガー等、ヌクレイック・アシッズ・リサーチ・シンポ
ジウム・シリーズNo.9、第149〜152頁(1981)。しかし
ながら、「非帯電」メチルホスホトリエステル同族体に
つき、完全な活性喪失が観察された。エプスタイン等
(上記)。3′,5′−結合による2′,5′−ホスホジエ
ステル結合の置換も、生物学的活性の実質的低下をもた
らす。レシアク等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミ
ストリー、第258巻、第13082〜13088頁(1983)。2′,
5′−インターヌクレオチド結合の1個のみの置換が、
少なくとも一次元程度の活性喪失をもたらした。ほぼ完
全な生物学的活性の喪失は、2−5A三量体における両方
の2′,5′−ホスホジエステル結合の3′,5′−結合に
より置換された際に観察された。
ハウ等、ヨーロピアン・ジャーナル・バイオケミスト
リー、第132巻、第77〜84頁(1983)は、ネズミL 929細
胞抽出物におけるRNアーゼLに対するpA3の親和性がA3
におけるよりも約1,000倍大であると報告した。
リー、第132巻、第77〜84頁(1983)は、ネズミL 929細
胞抽出物におけるRNアーゼLに対するpA3の親和性がA3
におけるよりも約1,000倍大であると報告した。
ネルソン等、ジャーナル・オーガニック・ケミストリ
ー、第49巻、第2314〜2317頁(1984)は、個々のエナン
チオマーの分割なしにA3のホスホロチオエート同族体の
ジアステレオマー対を記載している。エプスタイン等、
ジャーナル・バイオロジカル・ケミストリー、第261
巻、第5999〜6003頁(1986)は、個々のエナンチオマー
の分割なしに、ARpARpA/ASpARpAおよびARpASpA/ASpA
SpAと称するラセミ混合物の代謝安定性および抗ウィル
ス活性を報告している。
ー、第49巻、第2314〜2317頁(1984)は、個々のエナン
チオマーの分割なしにA3のホスホロチオエート同族体の
ジアステレオマー対を記載している。エプスタイン等、
ジャーナル・バイオロジカル・ケミストリー、第261
巻、第5999〜6003頁(1986)は、個々のエナンチオマー
の分割なしに、ARpARpA/ASpARpAおよびARpASpA/ASpA
SpAと称するラセミ混合物の代謝安定性および抗ウィル
ス活性を報告している。
リーおよびスハドルニク、バイオケミストリー、第24
巻、第551〜555頁(1985)、並びにスハドルニクおよび
リー[2−5A系:インタフェロン調整経路の分子および
臨床面、B.R.G.ウイリアムおよびR.H.シルバーマン編
(1985)、アラン・R・リス・インコーポレーション、
ニューヨーク、第115〜122頁]は(Sp)−ATP−α−
SからのARpARpAおよびARpARpARpAのα−ホスホロチオ
エート5′−トリホスフェートの酵素合成を開示してい
る。これら化合物は代謝的に不安定である。Spインタ
ーヌクレオチドホスホロチオエート結合を有する対応の
立体異性体の製造は基質(Sp)ATP−α−Sに関する
2−5Aシンセターゼの立体特異性により不可能であっ
て、寧ろRp配置の2′,5′−ホスホロチオエートイン
ターヌクレオチド結合を専ら有する三量体および四量体
生成物をもたらす。ヌクレオシドトランスフェラーゼは
専ら、Sp−ATP−α−Sが基質である場合には逆配置
を与えるので、Sp配置のインターヌクレオチドホスホ
ロチオエート基を有する2′,5′−ホスホロチオエート
オリゴアデニレートは酵素的に合成することができな
い。
巻、第551〜555頁(1985)、並びにスハドルニクおよび
リー[2−5A系:インタフェロン調整経路の分子および
臨床面、B.R.G.ウイリアムおよびR.H.シルバーマン編
(1985)、アラン・R・リス・インコーポレーション、
ニューヨーク、第115〜122頁]は(Sp)−ATP−α−
SからのARpARpAおよびARpARpARpAのα−ホスホロチオ
エート5′−トリホスフェートの酵素合成を開示してい
る。これら化合物は代謝的に不安定である。Spインタ
ーヌクレオチドホスホロチオエート結合を有する対応の
立体異性体の製造は基質(Sp)ATP−α−Sに関する
2−5Aシンセターゼの立体特異性により不可能であっ
て、寧ろRp配置の2′,5′−ホスホロチオエートイン
ターヌクレオチド結合を専ら有する三量体および四量体
生成物をもたらす。ヌクレオシドトランスフェラーゼは
専ら、Sp−ATP−α−Sが基質である場合には逆配置
を与えるので、Sp配置のインターヌクレオチドホスホ
ロチオエート基を有する2′,5′−ホスホロチオエート
オリゴアデニレートは酵素的に合成することができな
い。
発明の要点 哺乳動物におけるウィルス感染を阻止するのに有用な
本発明の化合物は、向上した代謝安定性および/または
抗ウィルス活性を有する。
本発明の化合物は、向上した代謝安定性および/または
抗ウィルス活性を有する。
これら化合物は、式: [式中、mは0、1、2もしくは3であり、nは1もし
くは2であり、かつインターヌクレオチドホスホロチオ
エート基 の少なくとも1個はSp配置である] の光学異性体およびその水溶性塩であって、同じ式を有
する他の光学異性体により実質的に汚染されていない。
くは2であり、かつインターヌクレオチドホスホロチオ
エート基 の少なくとも1個はSp配置である] の光学異性体およびその水溶性塩であって、同じ式を有
する他の光学異性体により実質的に汚染されていない。
さらに本発明は、抗ウィルス上有効量の上記式による
化合物またはその水溶性塩、或いはこの種の化合物をキ
ャリヤと共に含有する抗ウィルス組成物を投与すること
による哺乳動物もしくは植物におけるウィルス感染の阻
止方法をも含む。
化合物またはその水溶性塩、或いはこの種の化合物をキ
ャリヤと共に含有する抗ウィルス組成物を投与すること
による哺乳動物もしくは植物におけるウィルス感染の阻
止方法をも含む。
nが2である式による化合物は、細胞内移動のための
巨大分子キャリヤであるポリ(L−リジン)とのオリゴ
アデニレート結合体を形成するために用いることができ
る。この種のポリ(L−リジン)/2′,5′−ホスホロチ
オエートオリゴアデニレート結合体は、式: [式中、qは約60〜約70の整数であり、かつRはランダ
ムにR′であるか或いは式: を有する] を有する。R基の約5〜約10個はR′からなっている。
R′は、mが0、1、2もしくは3である場合には次式
を有する: 好ましくは、ポリ(L−リシン)/2′,5′−ホスホロ
チオエートオリゴアデニレート結合体におけるホスホロ
チオエート基: の少なくとも1個はSp配置である。
巨大分子キャリヤであるポリ(L−リジン)とのオリゴ
アデニレート結合体を形成するために用いることができ
る。この種のポリ(L−リジン)/2′,5′−ホスホロチ
オエートオリゴアデニレート結合体は、式: [式中、qは約60〜約70の整数であり、かつRはランダ
ムにR′であるか或いは式: を有する] を有する。R基の約5〜約10個はR′からなっている。
R′は、mが0、1、2もしくは3である場合には次式
を有する: 好ましくは、ポリ(L−リシン)/2′,5′−ホスホロ
チオエートオリゴアデニレート結合体におけるホスホロ
チオエート基: の少なくとも1個はSp配置である。
図面の説明 第1A図は、2′,5′−ホスホロチオエートアデニレー
ト三量体コアおよび5′−モノホスフェートがL 929細
胞抽出物におけるRNアーゼに対する結合につきp3A4[P
32]−pCpに対し競合する能力を示す、放射線結合分析
の結果を示している。プローブの約60%が、添加オリゴ
ヌクレオチドの不存在下で結合した(全dpm=23,00
0)。曲線は次のように標識した:A3(○);p3A
3(×);pA3(●);ARpARpA(▽);ASpARpA(◇);
ARpASpA(△);ASpASpA(□);pARpARp(▼);pASpA
Rp(◆);pARpASpA(▲);pASpASpA(■)である。
ト三量体コアおよび5′−モノホスフェートがL 929細
胞抽出物におけるRNアーゼに対する結合につきp3A4[P
32]−pCpに対し競合する能力を示す、放射線結合分析
の結果を示している。プローブの約60%が、添加オリゴ
ヌクレオチドの不存在下で結合した(全dpm=23,00
0)。曲線は次のように標識した:A3(○);p3A
3(×);pA3(●);ARpARpA(▽);ASpARpA(◇);
ARpASpA(△);ASpASpA(□);pARpARp(▼);pASpA
Rp(◆);pARpASpA(▲);pASpASpA(■)である。
第1B図は、2′,5′−ホスホロチオエートアデニレー
ト三量体コアおよび5′−モノホスフェートがL−929
細胞抽出物からの部分精製されたRNアーゼLを活性化さ
せて基質ポリ(U)−3′−[P32]pCpを加水分解する
能力を示す、コア−セルロース分析の結果を示してい
る。RNアーゼLの活性化は、ポリ(U)−3′−
[P32]pCpから酸可溶性断片への変換により決定した。
100%は、30,000cpmの標識されたポリ(U)−3′−
[P32]pCpがガラス繊維フィルタに結合したことを示
す。各曲線は第1A図と同様に標識される。
ト三量体コアおよび5′−モノホスフェートがL−929
細胞抽出物からの部分精製されたRNアーゼLを活性化さ
せて基質ポリ(U)−3′−[P32]pCpを加水分解する
能力を示す、コア−セルロース分析の結果を示してい
る。RNアーゼLの活性化は、ポリ(U)−3′−
[P32]pCpから酸可溶性断片への変換により決定した。
100%は、30,000cpmの標識されたポリ(U)−3′−
[P32]pCpがガラス繊維フィルタに結合したことを示
す。各曲線は第1A図と同様に標識される。
発明の詳細な説明 2′,5′−オリゴアデニレート、並びにrRNA,tRNAお
よび細胞もしくはウィルスmRNAのその加水分解による独
特な2−5A−依存性エンドリポヌクレアーゼ、すなわち
RNアーゼLの活性化は、細胞成長のウィルス複製および
調整の阻止に重要である。RNアーゼLは、2−5Aの基質
標的であることが知られている。これは、インタフェロ
ン誘発される生物学的連鎖の主たる機能的酵素の1種で
ある。2−5Aの改変同族体も報告されているが、これら
は代謝的に安定でなく、或いはRNアーゼLを活性化しな
い。2−5Aの2′,5′−インターヌクレオチド結合への
ホスホロチオエート基の導入は、(i)Rp/Spキラル
特性、(ii)pKaの低下、(iii)金属イオンキレート化
の変化、(iv)電荷調整、(v)結合長さの増大、(v
i)水和程度の変化、および(vii)代謝安定性の増大を
包含する2−5A分子の物理的、化学的および生化学的な
改変を誘発する。
よび細胞もしくはウィルスmRNAのその加水分解による独
特な2−5A−依存性エンドリポヌクレアーゼ、すなわち
RNアーゼLの活性化は、細胞成長のウィルス複製および
調整の阻止に重要である。RNアーゼLは、2−5Aの基質
標的であることが知られている。これは、インタフェロ
ン誘発される生物学的連鎖の主たる機能的酵素の1種で
ある。2−5Aの改変同族体も報告されているが、これら
は代謝的に安定でなく、或いはRNアーゼLを活性化しな
い。2−5Aの2′,5′−インターヌクレオチド結合への
ホスホロチオエート基の導入は、(i)Rp/Spキラル
特性、(ii)pKaの低下、(iii)金属イオンキレート化
の変化、(iv)電荷調整、(v)結合長さの増大、(v
i)水和程度の変化、および(vii)代謝安定性の増大を
包含する2−5A分子の物理的、化学的および生化学的な
改変を誘発する。
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートの
代謝安定性は、標準2−5Aよりも大である。この代謝安
定性は、インターヌクレオチドホスホロチオエート
2′,5′−結合の少なくとも1個がSp配置である場合
に著しく増大する。三量体コアのラセミ混合物も報告さ
れているが[ネルソン等、ジャーナル・オーガニック・
ケミストリー、第49巻、第2314〜2317頁(1984)および
エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミス
トリー、第261巻、第5999〜6003頁(1986)]、これら
化合物を分割する努力は失敗している。エプスタイン等
により報告された三量体コアラセミ体の抗ウィルス活性
のレベルは、処理に有する投与量が許容しえないほど毒
性となるようなレベルである。エプスタイン等のいわゆ
るラセミ体の少なくとも1種、すなわちARpASpA/ASpA
SpAラセミ体は殆んど価値がない。何故なら、今回判明
したように、ASpASpA立体異性体はRNアーゼLを選択的
に失活させ、これによりARpASpAがRNアーゼLの活性化
によりその抗ウィルス効果を発揮するのを妨げるからで
ある。このことは、今回判明したように、ARpASpAが4
種の三量体コア立体異性体のうちRNアーゼLを活性化か
つ代謝上安定であるため最も魅力的であるという理由
で、特に望ましくない。
代謝安定性は、標準2−5Aよりも大である。この代謝安
定性は、インターヌクレオチドホスホロチオエート
2′,5′−結合の少なくとも1個がSp配置である場合
に著しく増大する。三量体コアのラセミ混合物も報告さ
れているが[ネルソン等、ジャーナル・オーガニック・
ケミストリー、第49巻、第2314〜2317頁(1984)および
エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミス
トリー、第261巻、第5999〜6003頁(1986)]、これら
化合物を分割する努力は失敗している。エプスタイン等
により報告された三量体コアラセミ体の抗ウィルス活性
のレベルは、処理に有する投与量が許容しえないほど毒
性となるようなレベルである。エプスタイン等のいわゆ
るラセミ体の少なくとも1種、すなわちARpASpA/ASpA
SpAラセミ体は殆んど価値がない。何故なら、今回判明
したように、ASpASpA立体異性体はRNアーゼLを選択的
に失活させ、これによりARpASpAがRNアーゼLの活性化
によりその抗ウィルス効果を発揮するのを妨げるからで
ある。このことは、今回判明したように、ARpASpAが4
種の三量体コア立体異性体のうちRNアーゼLを活性化か
つ代謝上安定であるため最も魅力的であるという理由
で、特に望ましくない。
今回、完全分割された2′,5′−ホスホロチオエート
アデニレート三量体コアを製造し、かくして重要なARpA
SpA立体異性体の実用を可能にすることに成功した。さ
らに、立体特異的化学合成の本発明による方法は、
2′,5′−ホスホロチオエート四量体の8種の異なる立
体異性体の製造をも可能にする。四量体分子の製造は、
2′,5′−オリゴアデニレートおよび同族体を無傷細胞
に導入するための効果的ベクターであることが示された
キャリヤ(ポリ)L−リジンとの結合を可能にする。三
量体分子へのポリ(L−リジン)の結合は、2′−末端
リボシル基の分解およびそれに続く分子の失活のため、
不可能である。ポリ(L−リジン)に対する結合は
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートの効
率的な細胞内移動を可能にすると共に、良好な生物学的
活性に必要と思われる三量体成分を結合体の内部に無傷
で保持する。
アデニレート三量体コアを製造し、かくして重要なARpA
SpA立体異性体の実用を可能にすることに成功した。さ
らに、立体特異的化学合成の本発明による方法は、
2′,5′−ホスホロチオエート四量体の8種の異なる立
体異性体の製造をも可能にする。四量体分子の製造は、
2′,5′−オリゴアデニレートおよび同族体を無傷細胞
に導入するための効果的ベクターであることが示された
キャリヤ(ポリ)L−リジンとの結合を可能にする。三
量体分子へのポリ(L−リジン)の結合は、2′−末端
リボシル基の分解およびそれに続く分子の失活のため、
不可能である。ポリ(L−リジン)に対する結合は
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートの効
率的な細胞内移動を可能にすると共に、良好な生物学的
活性に必要と思われる三量体成分を結合体の内部に無傷
で保持する。
生物学的性質と絶対配置との相関関係は、ここに説明
する完全分割された2′,5′−ホスホロチオエートアデ
ニレート三量体コアの製造についてのみ可能である。し
かしながら、三量体コア化合物は、RNアーゼLのみを僅
かしか結合せず、かつ/または活性化しないことが判明
した。さらに、2′,5′−ホスホロチオエートコア分子
によるRNアーゼL活性化は5′−ホスホリル化により顕
著に向上することも判明した。
する完全分割された2′,5′−ホスホロチオエートアデ
ニレート三量体コアの製造についてのみ可能である。し
かしながら、三量体コア化合物は、RNアーゼLのみを僅
かしか結合せず、かつ/または活性化しないことが判明
した。さらに、2′,5′−ホスホロチオエートコア分子
によるRNアーゼL活性化は5′−ホスホリル化により顕
著に向上することも判明した。
標準2−5AによるRNアーゼLの活性化は、三量体のト
リホスフェート型を必要とする。5′−モノホスフェー
ト型の2−5Aは、トリホスフェートのRNアーゼL活性化
用の活性の強力な阻止剤である。ミヤモト等、ジャーナ
ル・バイオロジカル・ケミストリー、第258巻、第15232
〜15237頁(1983);ブラック等、FEBSレタース、第191
巻、第154〜158頁(1985);トレンス等、プロシーディ
ング・ナショナル・アカデミー・サイエンス・USA、第7
8巻、第5993〜5997頁(1981)。驚くことに今回、2−5
Aの本発明によるホスホロチオエート同族体のコアおよ
びモノホスフェートは標準2−5Aと異なりRNアーゼLを
活性化することが突き止められた。
リホスフェート型を必要とする。5′−モノホスフェー
ト型の2−5Aは、トリホスフェートのRNアーゼL活性化
用の活性の強力な阻止剤である。ミヤモト等、ジャーナ
ル・バイオロジカル・ケミストリー、第258巻、第15232
〜15237頁(1983);ブラック等、FEBSレタース、第191
巻、第154〜158頁(1985);トレンス等、プロシーディ
ング・ナショナル・アカデミー・サイエンス・USA、第7
8巻、第5993〜5997頁(1981)。驚くことに今回、2−5
Aの本発明によるホスホロチオエート同族体のコアおよ
びモノホスフェートは標準2−5Aと異なりRNアーゼLを
活性化することが突き止められた。
ホスホロチオエート三量体コアARpARpA、ASpARpA、A
RpASpAおよびASpASpAはシリカゲルでの調製用薄層クロ
マトグラフィーにより化学合成され、かつ分離される。
4種の三量体コアは、立体特異的合成により6−N−ベ
ンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシリル−5′
−O−モノメトキシトリチルアデノシン−2−O−(p
−ニトロフェニルエチル)−オクタヒドロアゾニノ−ホ
スホロアミダイトから製造され、この合成は完全分割さ
れた保護中間体の分離に続く完全分割された2′,5′−
ホスホロチオエート三量体アデニレートコアを得るため
の全保護基の除去に依存する。
RpASpAおよびASpASpAはシリカゲルでの調製用薄層クロ
マトグラフィーにより化学合成され、かつ分離される。
4種の三量体コアは、立体特異的合成により6−N−ベ
ンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシリル−5′
−O−モノメトキシトリチルアデノシン−2−O−(p
−ニトロフェニルエチル)−オクタヒドロアゾニノ−ホ
スホロアミダイトから製造され、この合成は完全分割さ
れた保護中間体の分離に続く完全分割された2′,5′−
ホスホロチオエート三量体アデニレートコアを得るため
の全保護基の除去に依存する。
三量体コアは下記反応式にしたがって製造され、式中
「BZ」はベンゾイル基を示し、「Si」はt−ブチルジメ
チルシリル基を示し、かつ「MMTr」はモノメトキシトリ
チル基を示す。本発明の部分ではないが、二量体コアエ
ナンチオマARpA(6A)およびASpA(6B)の製造も完全を
期するため含まれる。
「BZ」はベンゾイル基を示し、「Si」はt−ブチルジメ
チルシリル基を示し、かつ「MMTr」はモノメトキシトリ
チル基を示す。本発明の部分ではないが、二量体コアエ
ナンチオマARpA(6A)およびASpA(6B)の製造も完全を
期するため含まれる。
保護基は、完全保護された中間体7A、7B、8Aおよび8B
から除去されて対応の完全分割された三量体コアARpARp
A(9A)、ASpARpA(9B)、ARpASpA(10A)およびASpASp
A(10B)を形成する。
から除去されて対応の完全分割された三量体コアARpARp
A(9A)、ASpARpA(9B)、ARpASpA(10A)およびASpASp
A(10B)を形成する。
本発明の化合物は有利にはナトリウム、アンモニウム
もしくはカリウムの可溶性塩として製造される。製造方
式は6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチ
ルシリル−5′−O−モノメトキシ−トリチルアデノシ
ン(化合物1E)から出発し、これは有利にはフロケルチ
等、リービッヒス・アナーレン・ヘミー、第1568〜1585
頁(1981)の方法にしたがってアデノシンから製造され
る。
もしくはカリウムの可溶性塩として製造される。製造方
式は6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチ
ルシリル−5′−O−モノメトキシ−トリチルアデノシ
ン(化合物1E)から出発し、これは有利にはフロケルチ
等、リービッヒス・アナーレン・ヘミー、第1568〜1585
頁(1981)の方法にしたがってアデノシンから製造され
る。
本発明による化合物の製造については、限定はしない
が後記の実施例を参照して詳細に説明する。これら実施
例に使用する3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール;クロ
ルオクタヒドロアゾニノ−p−ニトロフェニルエトキシ
ホスフェート;2,5−ジクロルフェニルホスホロ−ジクロ
リデート;およびp−ニトロフェニルエタノールは、有
利には公知の方法:すなわちシャトパドハヤ等、ヌクレ
イック・アシッズ・リサーチ、第8巻、第2039〜2053頁
(1980);シュワルツ等、テトラヘドロン・レタース、
第5513〜5516頁(1984);ウルマン等、エルベチカ・ヒ
ミカ・アクタ、第64巻、第1688〜1703頁(1981)の方法
によって製造することができる。これら化合物は米国に
おいて市販もされている。2,5−ジクロルフェニル−ホ
スホロジクロリデートはフルカ・ケミカル・コーポレー
ション社、980 S.第2番街、ロンコンコマ、ニューユー
ク11779から入手することもできる(「カタログNo.15:
ケミカ−バイオケミカ」1986/1987、No.36212)。3−
ニトロ−1,2,4−トリアゾールはアルドリッチ・ケミカ
ル・カンパニー社、私書箱355、ミルウォーキー、WI532
01(1986〜1987、カタログNo.24,179.2)から入手する
ことができる。P−ニトロフェニルエタノールはフルカ
・ケミカル・コーポレーション社から入手できる(カタ
ログNo.73,610)。クロル−オクタヒドロアゾニノ−p
−ニトロフェニルエトキシホスフェートは、下記実施例
1Aにしたがって製造することができる。
が後記の実施例を参照して詳細に説明する。これら実施
例に使用する3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール;クロ
ルオクタヒドロアゾニノ−p−ニトロフェニルエトキシ
ホスフェート;2,5−ジクロルフェニルホスホロ−ジクロ
リデート;およびp−ニトロフェニルエタノールは、有
利には公知の方法:すなわちシャトパドハヤ等、ヌクレ
イック・アシッズ・リサーチ、第8巻、第2039〜2053頁
(1980);シュワルツ等、テトラヘドロン・レタース、
第5513〜5516頁(1984);ウルマン等、エルベチカ・ヒ
ミカ・アクタ、第64巻、第1688〜1703頁(1981)の方法
によって製造することができる。これら化合物は米国に
おいて市販もされている。2,5−ジクロルフェニル−ホ
スホロジクロリデートはフルカ・ケミカル・コーポレー
ション社、980 S.第2番街、ロンコンコマ、ニューユー
ク11779から入手することもできる(「カタログNo.15:
ケミカ−バイオケミカ」1986/1987、No.36212)。3−
ニトロ−1,2,4−トリアゾールはアルドリッチ・ケミカ
ル・カンパニー社、私書箱355、ミルウォーキー、WI532
01(1986〜1987、カタログNo.24,179.2)から入手する
ことができる。P−ニトロフェニルエタノールはフルカ
・ケミカル・コーポレーション社から入手できる(カタ
ログNo.73,610)。クロル−オクタヒドロアゾニノ−p
−ニトロフェニルエトキシホスフェートは、下記実施例
1Aにしたがって製造することができる。
これら実施例で使用するピリジンおよびトリエチルア
ミンはKOH、塩化トシルおよび水素化カルシウム上での
蒸溜により精製した。ジクロルメタンは塩化カルシウム
上で蒸溜し、次いで塩基性アルミナに通過させた。純ア
セトニトリルは、水素化カルシウム上での蒸溜により得
られた。
ミンはKOH、塩化トシルおよび水素化カルシウム上での
蒸溜により精製した。ジクロルメタンは塩化カルシウム
上で蒸溜し、次いで塩基性アルミナに通過させた。純ア
セトニトリルは、水素化カルシウム上での蒸溜により得
られた。
保護ヌクレオチドの精製は、シリカゲル60(0.063〜
0.2メッシュ、メルク社)上での調製用カラムクロマト
グラフィーおよびシリカゲル60PF254(メルク社)上で
の調製用厚層クロマトグラフィーによって達成した。薄
層クロマトグラフィー(「TLC」)は、シュライヒャー
・アンド・ショイル社からの予備被覆された薄層シート
F1500LS 254およびセルロース薄層シートF1440にて行な
った。
0.2メッシュ、メルク社)上での調製用カラムクロマト
グラフィーおよびシリカゲル60PF254(メルク社)上で
の調製用厚層クロマトグラフィーによって達成した。薄
層クロマトグラフィー(「TLC」)は、シュライヒャー
・アンド・ショイル社からの予備被覆された薄層シート
F1500LS 254およびセルロース薄層シートF1440にて行な
った。
出発物質6−N−ベンゾイル−3−O−t−ブチルジ
メチルシリル−5′−O−(4−モノメトキシトリチ
ル)アデノシン(化合物1E)および試薬6−N−ベンゾ
イル−2′,3′−ビス−O−(t−ブチルジメチルシリ
ル)−アデノシン(化合物1G)は、実施例1により製造
される。
メチルシリル−5′−O−(4−モノメトキシトリチ
ル)アデノシン(化合物1E)および試薬6−N−ベンゾ
イル−2′,3′−ビス−O−(t−ブチルジメチルシリ
ル)−アデノシン(化合物1G)は、実施例1により製造
される。
実施例1 a.N6,N6,2′,3′,5′−O−ペンタベンゾイルアデノシ
ン(1A): 乾燥ピリジン100mlにおける5.34g(20ミルモル)のア
デノシン(シグマ社、80℃/10-3トールにて24時間乾
燥)の懸濁物に、33.74g(240ミリモル)の塩化ベンゾ
イルを滴加した。室温(「r.t.」)にて20時間撹拌した
後、混合物を16mlの乾燥MeOHで処理し、次いでCHCl
3(3×250ml)で抽出した。有機相を水(3×250ml)
で洗浄し、Na2SO4で脱水し、かつ蒸発乾固させた。トル
エンと共に最終的な蒸発を行なった。残留物を加熱によ
りCHCl3/MeOH 2/1に溶解させ、かつr.t.まで冷却した後
に、石油エーテル(ジエチルエーテル)を溶液が濁るま
で添加した。0℃にて12時間静置した後、12.18gが得ら
れ、かつ母液から2.66gの生成物がm.p.183〜184℃の無
色針状結晶として単離された。収量14.84g(94%)。
ン(1A): 乾燥ピリジン100mlにおける5.34g(20ミルモル)のア
デノシン(シグマ社、80℃/10-3トールにて24時間乾
燥)の懸濁物に、33.74g(240ミリモル)の塩化ベンゾ
イルを滴加した。室温(「r.t.」)にて20時間撹拌した
後、混合物を16mlの乾燥MeOHで処理し、次いでCHCl
3(3×250ml)で抽出した。有機相を水(3×250ml)
で洗浄し、Na2SO4で脱水し、かつ蒸発乾固させた。トル
エンと共に最終的な蒸発を行なった。残留物を加熱によ
りCHCl3/MeOH 2/1に溶解させ、かつr.t.まで冷却した後
に、石油エーテル(ジエチルエーテル)を溶液が濁るま
で添加した。0℃にて12時間静置した後、12.18gが得ら
れ、かつ母液から2.66gの生成物がm.p.183〜184℃の無
色針状結晶として単離された。収量14.84g(94%)。
b.6−N−ベンゾイルアデノシン(1B): 乾燥ピリジン150mlおよび乾燥MeOH50mlにおける7.88g
(10ミリモル)のペンタベンゾイルアデノシン(1A)の
溶液を50mlの1Mナトリウムメチラート溶液で処理した。
15分間後、この溶液を約20mlの水における110mlのダウ
ェックスイオン交換樹脂50×4(ピリジニウム型)の氷
冷溶液に注ぎ入れた。5時間撹拌した後、pHは5.5〜6.0
となった。イオン交換樹脂から濾過した後、残留物を沸
騰MeOH/水(3/1)で洗浄した。濾液を蒸発乾固させ、か
つMeOH/水 2/1から結晶化させて3.25g(83%)の生成
物を無色針状結晶(m.p.151〜153℃)として得た。
(10ミリモル)のペンタベンゾイルアデノシン(1A)の
溶液を50mlの1Mナトリウムメチラート溶液で処理した。
15分間後、この溶液を約20mlの水における110mlのダウ
ェックスイオン交換樹脂50×4(ピリジニウム型)の氷
冷溶液に注ぎ入れた。5時間撹拌した後、pHは5.5〜6.0
となった。イオン交換樹脂から濾過した後、残留物を沸
騰MeOH/水(3/1)で洗浄した。濾液を蒸発乾固させ、か
つMeOH/水 2/1から結晶化させて3.25g(83%)の生成
物を無色針状結晶(m.p.151〜153℃)として得た。
c.6−N−ベンゾイル−5′−O−(4−メトキシトリ
チル)アデノシン(1C): 17.9g(46ミリモル)の6−N−ベンゾイルアデノシ
ン・H2O(1B)を乾燥ピリジン(3×100ml)と共に蒸発
させ、最後に150mlの乾燥ピリジンおよび21.31g(69ミ
リモル)のp−モノメトキシトリチルクロライドに溶解
させた。この反応溶液を50℃にて14時間撹拌し、かつ乾
燥MeOH(50ml)を添加し、そして室温にした。生成物を
CHCl3(3×400ml)で抽出し、かつ水(3×400ml)で
洗浄した。有機相をNa2SO4で脱水し、蒸発乾固させた。
最後的にトルエンと共に同時蒸発を行なった。シリカゲ
ルカラム(16×2.5cm、メルク社)を用いて精製を行な
い、かつ3lのEtOAc/MeOH 7/3で溶出させて25.6g(87
%)の非晶質粉末を得た。結晶化をアセトン/水で行な
った生成物(m.p.120〜125℃)を得た。
チル)アデノシン(1C): 17.9g(46ミリモル)の6−N−ベンゾイルアデノシ
ン・H2O(1B)を乾燥ピリジン(3×100ml)と共に蒸発
させ、最後に150mlの乾燥ピリジンおよび21.31g(69ミ
リモル)のp−モノメトキシトリチルクロライドに溶解
させた。この反応溶液を50℃にて14時間撹拌し、かつ乾
燥MeOH(50ml)を添加し、そして室温にした。生成物を
CHCl3(3×400ml)で抽出し、かつ水(3×400ml)で
洗浄した。有機相をNa2SO4で脱水し、蒸発乾固させた。
最後的にトルエンと共に同時蒸発を行なった。シリカゲ
ルカラム(16×2.5cm、メルク社)を用いて精製を行な
い、かつ3lのEtOAc/MeOH 7/3で溶出させて25.6g(87
%)の非晶質粉末を得た。結晶化をアセトン/水で行な
った生成物(m.p.120〜125℃)を得た。
d.6−N−ベンゾイル−2′−O−(t−ブチルジメチ
ルシリル)−5′−O−(4−メトキシトリチル)アデ
ノシン(1D); 6−N−ベンゾイル−3′−O−(t−ブチルジメチル
シリル)−5′−O−(4−メトキシトリチル)アデノ
シン(1E); 6−N−ベンゾイル−2′,3′−O−ビス(t−ブチル
ジメチルシリル)−5′−O−(4−メトキシトリチ
ル)アデノシン(1F); 乾燥ピリジン100mlにおける4.05g(26.9ミリモル)の
t−ブチルジメチルシリルクロライド(「TBDMS−C
l」)および3.66g(53.8ミリモル)のイミダゾールの溶
液に、予め乾燥ピリジンと共に同時蒸発された14.42g
(22.4ミリモル)の化合物(1C)を添加した。r.t.にて
15時間撹拌した後、5mlの乾燥MeOHを添加し、混合物を1
/3容量まで蒸発させた。粗生成物をCHCl3(3×250ml)
で抽出し、かつ水洗した。蒸発させた後、粗生成物をシ
リカゲルカラム(15×3cm)によりCH2Cl2/EtOAc(9/1)
を用いて先ず最初に精製し、次いで中圧力クロマトグラ
フィー[8〜10バール圧力におけるCH2Cl2/石油エーテ
ル/EtOAc/EtOHの次の混合物を用いるシリカゲルカラムG
SF−型C(N=9000、VD28ml)のクロマトグラフィー:
第1回100:100:10:0.5(2l);第2回100/100/10/1(3
l);および第3回100/100/31/2(0.5l)]を用いて精
製した。標記化合物を単離した。各化合物に関する最大
ピークの保持時間は次の通りであった:化合物1Fにつき
25分間(収量1.84g、9%);化合物1Dにつき60分間
(収量6.62g、39%);化合物1Eにつき105分間(収量8.
32g、49%)。
ルシリル)−5′−O−(4−メトキシトリチル)アデ
ノシン(1D); 6−N−ベンゾイル−3′−O−(t−ブチルジメチル
シリル)−5′−O−(4−メトキシトリチル)アデノ
シン(1E); 6−N−ベンゾイル−2′,3′−O−ビス(t−ブチル
ジメチルシリル)−5′−O−(4−メトキシトリチ
ル)アデノシン(1F); 乾燥ピリジン100mlにおける4.05g(26.9ミリモル)の
t−ブチルジメチルシリルクロライド(「TBDMS−C
l」)および3.66g(53.8ミリモル)のイミダゾールの溶
液に、予め乾燥ピリジンと共に同時蒸発された14.42g
(22.4ミリモル)の化合物(1C)を添加した。r.t.にて
15時間撹拌した後、5mlの乾燥MeOHを添加し、混合物を1
/3容量まで蒸発させた。粗生成物をCHCl3(3×250ml)
で抽出し、かつ水洗した。蒸発させた後、粗生成物をシ
リカゲルカラム(15×3cm)によりCH2Cl2/EtOAc(9/1)
を用いて先ず最初に精製し、次いで中圧力クロマトグラ
フィー[8〜10バール圧力におけるCH2Cl2/石油エーテ
ル/EtOAc/EtOHの次の混合物を用いるシリカゲルカラムG
SF−型C(N=9000、VD28ml)のクロマトグラフィー:
第1回100:100:10:0.5(2l);第2回100/100/10/1(3
l);および第3回100/100/31/2(0.5l)]を用いて精
製した。標記化合物を単離した。各化合物に関する最大
ピークの保持時間は次の通りであった:化合物1Fにつき
25分間(収量1.84g、9%);化合物1Dにつき60分間
(収量6.62g、39%);化合物1Eにつき105分間(収量8.
32g、49%)。
e.6−N−ベンゾイル−2′,3′−ビス−O−(t−ブ
チルジメチルシリル)アデノシン(1G): 1.74g(2ミリモル)の化合物1Dを20mlの80%酢酸と
共に22℃にて撹拌した。20時間後、モノメトキシトリチ
ル基の開裂が完結した。この反応混合物をCHCl3(3×2
00ml)で抽出し、かつ200mlの1M燐酸塩緩衝液(pH7)で
洗浄した。有機相をNa2SO4で脱水し、かつ蒸発乾固させ
た。シリカゲルカラム(2×10cm)を用いて精製を行な
い、CH2Cl2/MeOH(96/4)で溶出させた。淡黄色の生成
物を5mlのCHCl3に溶解し、かつEt2Oで濁るまで処理し
た。0.982gの純生成物が結晶化した。母液から再び純生
成物が結晶化した(0.11g、m.p.189℃)。全収量は1.09
2g(91%)であった。
チルジメチルシリル)アデノシン(1G): 1.74g(2ミリモル)の化合物1Dを20mlの80%酢酸と
共に22℃にて撹拌した。20時間後、モノメトキシトリチ
ル基の開裂が完結した。この反応混合物をCHCl3(3×2
00ml)で抽出し、かつ200mlの1M燐酸塩緩衝液(pH7)で
洗浄した。有機相をNa2SO4で脱水し、かつ蒸発乾固させ
た。シリカゲルカラム(2×10cm)を用いて精製を行な
い、CH2Cl2/MeOH(96/4)で溶出させた。淡黄色の生成
物を5mlのCHCl3に溶解し、かつEt2Oで濁るまで処理し
た。0.982gの純生成物が結晶化した。母液から再び純生
成物が結晶化した(0.11g、m.p.189℃)。全収量は1.09
2g(91%)であった。
実施例1A クロル−オクタヒドロアゾニノ−p−ニトロフェニルエ
トキシホスフェート a.p−ニトロフェニル燐酸ジクロライド 三塩化燐(フルカ社、N.Y.、No.79690)(28ml、0.31
7モル)に、80mlの無水エーテルを添加した。この混合
物を−30℃まで冷却した。p−ニトロフェニルエタノー
ル(8.35g、50ミリモル)を添加し、次いで1.5時間撹拌
した。エールと過剰のPCl3とを減圧下に除去して、p−
ニトロフェニル燐酸ジクロライドを得た(収率80%)。
トキシホスフェート a.p−ニトロフェニル燐酸ジクロライド 三塩化燐(フルカ社、N.Y.、No.79690)(28ml、0.31
7モル)に、80mlの無水エーテルを添加した。この混合
物を−30℃まで冷却した。p−ニトロフェニルエタノー
ル(8.35g、50ミリモル)を添加し、次いで1.5時間撹拌
した。エールと過剰のPCl3とを減圧下に除去して、p−
ニトロフェニル燐酸ジクロライドを得た(収率80%)。
b.オクタヒドロアゾニン カプリロラクタム(フルカ社、N.Y.、No.21631)(25
g、117ミリモル)を水素化リチウムアルミニウム(10.5
g)とエーテル中で合し、かつ撹拌しながら5時間還元
した。この反応混合物を濾過し、かつエーテルと共に蒸
発させた。生成物はオクタヒドロアゾニンである(収率
90%)。
g、117ミリモル)を水素化リチウムアルミニウム(10.5
g)とエーテル中で合し、かつ撹拌しながら5時間還元
した。この反応混合物を濾過し、かつエーテルと共に蒸
発させた。生成物はオクタヒドロアゾニンである(収率
90%)。
c.1−トリメチルシリルオクタヒドロアゾニン オクタヒドロアゾニン(12.7g、0.1モル)とトリメチ
ルシラン(0.12モル)と0.5モルのヘキセメチルジシラ
ザン+150mgの硫酸アンモニウムとを合することによ
り、オクタヒドロアゾニンのシリルアミンを作成した。
この混合物を90時間にわたり還流させ、かつ減圧蒸溜し
て16.5gの1−トリメチルシリルオクタヒドロアゾニン
を得た(82%)。
ルシラン(0.12モル)と0.5モルのヘキセメチルジシラ
ザン+150mgの硫酸アンモニウムとを合することによ
り、オクタヒドロアゾニンのシリルアミンを作成した。
この混合物を90時間にわたり還流させ、かつ減圧蒸溜し
て16.5gの1−トリメチルシリルオクタヒドロアゾニン
を得た(82%)。
d.クロル−オクタヒドロアゾニノ−p−ニトロフェニル
エトキシ−ホスフェート p−ニトロフェニル燐酸ジクロライド(26.8g、100ミ
リモル)と1−トリメチルシリルオクタヒドロアゾニン
(19.9g、100ミリモル)とを窒素下にて0℃で合した。
この混合物を室温まで加温し、かつ2〜3時間にわたり
撹拌した。トリメチルシリルジクロライドを減圧除去し
た。残留物における生成物はクロル−オクタヒドロアゾ
ニノ−p−ニトロフェニルエトキシホスフェートであっ
た(33.9g、収率94%)。
エトキシ−ホスフェート p−ニトロフェニル燐酸ジクロライド(26.8g、100ミ
リモル)と1−トリメチルシリルオクタヒドロアゾニン
(19.9g、100ミリモル)とを窒素下にて0℃で合した。
この混合物を室温まで加温し、かつ2〜3時間にわたり
撹拌した。トリメチルシリルジクロライドを減圧除去し
た。残留物における生成物はクロル−オクタヒドロアゾ
ニノ−p−ニトロフェニルエトキシホスフェートであっ
た(33.9g、収率94%)。
実施例2 6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシ
リル−5′−O−(4−エトキシトリチル)−アデノシ
ン−2′−O−(p−ニトロフェニルエチル)−オクタ
ヒドロアゾニノ−ホスホロアミダイト(2) 化合物1E(0.758g、1.0ミリモル)とジイソプロピル
エチルアミン(0.52g、4ミリモル)とをジクロルメタ
ン(5ml)に溶解し、かつクロルオクタヒドロアゾニノ
−p−ニトロフェニルエトキシホスファン(0.80g、2.2
2ミリモル)を滴加した。r.t.にて2時間撹拌した後、T
LC分析は反応の完結を示した。この反応混合物を飽和Na
HCO3水溶液(50ml)により分液漏斗に移し、かつ生成物
を酢酸エチル(2×50ml)での抽出により単離した。有
機層を飽和NaClで洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾
固させた。残留物を酢酸エチル−トリエチルアミン(9
5:5 v/v)に溶解し、予め酢酸エチル−トリエチルアミ
ン(9/1)で平衡化したシリカゲルカラム(10×2cm)で
クロマトグラフにかけ、酢酸エチル−トリエチルアミン
(95:5 v/v)で溶出させた。生成物フラクションを集
め、蒸発乾固させ、最後にジクロルメタンと共に蒸発さ
せ、40℃で減圧乾燥させて化合物2(1.05g、97%)を
得た。
リル−5′−O−(4−エトキシトリチル)−アデノシ
ン−2′−O−(p−ニトロフェニルエチル)−オクタ
ヒドロアゾニノ−ホスホロアミダイト(2) 化合物1E(0.758g、1.0ミリモル)とジイソプロピル
エチルアミン(0.52g、4ミリモル)とをジクロルメタ
ン(5ml)に溶解し、かつクロルオクタヒドロアゾニノ
−p−ニトロフェニルエトキシホスファン(0.80g、2.2
2ミリモル)を滴加した。r.t.にて2時間撹拌した後、T
LC分析は反応の完結を示した。この反応混合物を飽和Na
HCO3水溶液(50ml)により分液漏斗に移し、かつ生成物
を酢酸エチル(2×50ml)での抽出により単離した。有
機層を飽和NaClで洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾
固させた。残留物を酢酸エチル−トリエチルアミン(9
5:5 v/v)に溶解し、予め酢酸エチル−トリエチルアミ
ン(9/1)で平衡化したシリカゲルカラム(10×2cm)で
クロマトグラフにかけ、酢酸エチル−トリエチルアミン
(95:5 v/v)で溶出させた。生成物フラクションを集
め、蒸発乾固させ、最後にジクロルメタンと共に蒸発さ
せ、40℃で減圧乾燥させて化合物2(1.05g、97%)を
得た。
[分析:C59H70N7O9PSi・1H2Oの 計算値:C、64.52;H、6.60;N、8.92。
実測値:C、63.93;H、6.85;N、8.62]。
実施例3 6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシ
リル−5′−O−モノエトキシトリチル−p−チオアデ
ニリル−2′−[OP−(p−ニトロフェニルエチル)−
5′]−6−N−ベンゾイル−2′,3′−ジ−O−t−
ブチルジメチルシリルアデノシン(4A+4B) ホスホロアミダイト2(1.12g、1.0ミリモル)と6−
N−ベンゾイル−2′,3′−ジ−t−ブチルジメチルシ
リルアデノシン(3)(0.478g、0.7ミリモル)とを40
℃にて乾燥ピストル内で1晩かけて減圧乾燥した。乾燥
した残留物を次いで乾燥アセトニトリル(6ml)に溶解
し、かつ3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.285g、
2.5ミリモル)を添加し、室温にて3時間撹拌した。ピ
リジン(6ml)および硫黄(0.5g)を添加し、かつ室温
にて20時間撹拌した後、反応混合物をクロロホルム(30
0ml)で抽出した。有機相を飽和NaCl溶液(2×200ml)
で洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾固させた。トル
エンにより最終的な蒸発を行なって、ピリジンを除去し
た。残留物をクロロホルムに溶解し、かつ1のクロロ
ホルムを用いるシリカゲルカラム(15×2.5cm)上での
クロマトグラフにかけてRp異性体とSp異性体との両
者を含有する生成物フラクションを得た。これらジアス
テレオ異性体の分離を調製用シリカゲル板で行ない、そ
の際ジクロルメタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:1
v/v)を用いた。これらシリカゲル板を3回展開させ
た。より高いRf異性体(0.47g、42%、ジクロルメタン
/酢酸エチル/n−ヘキサン1:1:1中のTLC0.54)およびよ
り低いRf異性体(0.31g、28%、ジクロルメタン/酢酸
エチル/n−ヘキサン中のTLC0.46)を、40℃にて減圧乾
燥させた後に無色の非晶質粉末として得た。より高いRf
異性体は化合物4Aであった。
リル−5′−O−モノエトキシトリチル−p−チオアデ
ニリル−2′−[OP−(p−ニトロフェニルエチル)−
5′]−6−N−ベンゾイル−2′,3′−ジ−O−t−
ブチルジメチルシリルアデノシン(4A+4B) ホスホロアミダイト2(1.12g、1.0ミリモル)と6−
N−ベンゾイル−2′,3′−ジ−t−ブチルジメチルシ
リルアデノシン(3)(0.478g、0.7ミリモル)とを40
℃にて乾燥ピストル内で1晩かけて減圧乾燥した。乾燥
した残留物を次いで乾燥アセトニトリル(6ml)に溶解
し、かつ3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.285g、
2.5ミリモル)を添加し、室温にて3時間撹拌した。ピ
リジン(6ml)および硫黄(0.5g)を添加し、かつ室温
にて20時間撹拌した後、反応混合物をクロロホルム(30
0ml)で抽出した。有機相を飽和NaCl溶液(2×200ml)
で洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾固させた。トル
エンにより最終的な蒸発を行なって、ピリジンを除去し
た。残留物をクロロホルムに溶解し、かつ1のクロロ
ホルムを用いるシリカゲルカラム(15×2.5cm)上での
クロマトグラフにかけてRp異性体とSp異性体との両
者を含有する生成物フラクションを得た。これらジアス
テレオ異性体の分離を調製用シリカゲル板で行ない、そ
の際ジクロルメタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:1
v/v)を用いた。これらシリカゲル板を3回展開させ
た。より高いRf異性体(0.47g、42%、ジクロルメタン
/酢酸エチル/n−ヘキサン1:1:1中のTLC0.54)およびよ
り低いRf異性体(0.31g、28%、ジクロルメタン/酢酸
エチル/n−ヘキサン中のTLC0.46)を、40℃にて減圧乾
燥させた後に無色の非晶質粉末として得た。より高いRf
異性体は化合物4Aであった。
[分析:C80H98N10O14PSi3・1H2Oの計算値:C、59.89;
H、6.32;N、9.61。
H、6.32;N、9.61。
実測値:C、59.89;H、6.32;N、9.21]。
P31−NMR(400MHz、CDCl3、85%H3PO4、69.841ppm)。
より低いRf異性体は化合物4Bであった。
より低いRf異性体は化合物4Bであった。
[分析:C80H98N10O14PSi3S・1H2Oの 計算値:C、59.89;H、6.28;N、9.61。
実測値:C、59.91;H、4.61;N、9.28]。
P31−NMR(400MHz、CDCl3、85%H3PO4、69.223ppm)。
実施例4 6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシ
リル−p−チオアデニリル−2′−[OP−(p−ニトロ
フェニルエチル)−5′]−6−N−ベンゾイル−
2′,3′−ジ−O−t−ブチルジメチルシリルアデノシ
ン(5A+5B) 0.258g(0.164ミリモル)の純異性体4Aおよび4Bを、
それぞれジクロルメタン/メタノール(4/1)(3.2ml)
における2%P−トルエンスルホン酸で室温にて約40分
間処理することにより別々に脱トリチル化した。反応混
合物をクロロホルム(50ml)で希釈し、燐酸塩緩衝液
(pH7、2×20ml)で洗浄し、かつ蒸発させてフォーム
を得た。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
(10×2.5cm)により精製した。クロロホルムおよびク
ロロホルム/メタノール(100:0.5から100:1まで)を用
いて化合物5Aおよび5Bをカラム上で分離した。生成物フ
ラクションを集め、かつ蒸発させた後に40℃で減圧乾燥
して化合物5Aの場合には0.198g(92%)、また化合物5B
の場合には0.192g(89%)を得た。化合物5Aはジクロル
メタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:1)にて0.27のR
fを有した [分析:C60H82N11O13PSi3S・1H2Oの 計算値:C、54.15;H、6.36;N、11.57。
リル−p−チオアデニリル−2′−[OP−(p−ニトロ
フェニルエチル)−5′]−6−N−ベンゾイル−
2′,3′−ジ−O−t−ブチルジメチルシリルアデノシ
ン(5A+5B) 0.258g(0.164ミリモル)の純異性体4Aおよび4Bを、
それぞれジクロルメタン/メタノール(4/1)(3.2ml)
における2%P−トルエンスルホン酸で室温にて約40分
間処理することにより別々に脱トリチル化した。反応混
合物をクロロホルム(50ml)で希釈し、燐酸塩緩衝液
(pH7、2×20ml)で洗浄し、かつ蒸発させてフォーム
を得た。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
(10×2.5cm)により精製した。クロロホルムおよびク
ロロホルム/メタノール(100:0.5から100:1まで)を用
いて化合物5Aおよび5Bをカラム上で分離した。生成物フ
ラクションを集め、かつ蒸発させた後に40℃で減圧乾燥
して化合物5Aの場合には0.198g(92%)、また化合物5B
の場合には0.192g(89%)を得た。化合物5Aはジクロル
メタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:1)にて0.27のR
fを有した [分析:C60H82N11O13PSi3S・1H2Oの 計算値:C、54.15;H、6.36;N、11.57。
実測値:C、53.78;H、6.44;N、11.72]。
化合物5Bは同じ溶剤系にて0.30のRfを有した [分析:C60H82N11O13PSi3Sの 計算値:C、54.90;H、6.29;N、11.73。
実測値:C、54.90;H、6.20;N、11.45]。
実施例5 P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン(6A
+6B) それぞれ完全保護された二量体5Aおよび5Bを、次の手
順により別々に保護解除した。それぞれ保護された二量
体(39mg、0.03ミリモル)を0.5Mの1,8−ジアザビシク
ロ[5.4.0]ウンデセ−7−エン(1,5,5)[フルカ社、
カタログNo.33842、「DBU」]によりピリジン(9ml)中
で処理し、さらにr.t.で2時間撹拌した後、1M酢酸(4.
5ml)で中和し、最後に蒸発させた。残留物をテトラヒ
ドロフラン(「THF」)における1Mの弗化テトラブチル
アンモニウム(「Bu4NF」)に溶解させ、再び24時間後
に蒸発乾固させた。濃アンモニア(20ml)での48時間の
処理に続く混合物の蒸発により、脱アセチル化を達成し
た。次いで、残留物を水(50ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×20ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施し、0.001〜0.25MのE
t3NH+HCO3 -(pH7.5)の直線濃度勾配の緩衝液で溶出さ
せた。生成物を0.08〜0.1Mの濃度で溶出させた。蒸発乾
固を続く水(10×10ml)との同時蒸発および最終的なi
−PrOH/濃アンモニア/水(7:1:2 v/v)でのペーパーク
ロマトグラフィーによる精製は化合物6Aの場合には630
O.D.単位(87.5%)を与え、かつ化合物6Bの場合には64
8O.D.単位(90%)を与えた。上記溶剤系を用いるセル
ロースシート上での化合物6AのRfは0.29であった。化合
物6BのRfは0.30であった。
+6B) それぞれ完全保護された二量体5Aおよび5Bを、次の手
順により別々に保護解除した。それぞれ保護された二量
体(39mg、0.03ミリモル)を0.5Mの1,8−ジアザビシク
ロ[5.4.0]ウンデセ−7−エン(1,5,5)[フルカ社、
カタログNo.33842、「DBU」]によりピリジン(9ml)中
で処理し、さらにr.t.で2時間撹拌した後、1M酢酸(4.
5ml)で中和し、最後に蒸発させた。残留物をテトラヒ
ドロフラン(「THF」)における1Mの弗化テトラブチル
アンモニウム(「Bu4NF」)に溶解させ、再び24時間後
に蒸発乾固させた。濃アンモニア(20ml)での48時間の
処理に続く混合物の蒸発により、脱アセチル化を達成し
た。次いで、残留物を水(50ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×20ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施し、0.001〜0.25MのE
t3NH+HCO3 -(pH7.5)の直線濃度勾配の緩衝液で溶出さ
せた。生成物を0.08〜0.1Mの濃度で溶出させた。蒸発乾
固を続く水(10×10ml)との同時蒸発および最終的なi
−PrOH/濃アンモニア/水(7:1:2 v/v)でのペーパーク
ロマトグラフィーによる精製は化合物6Aの場合には630
O.D.単位(87.5%)を与え、かつ化合物6Bの場合には64
8O.D.単位(90%)を与えた。上記溶剤系を用いるセル
ロースシート上での化合物6AのRfは0.29であった。化合
物6BのRfは0.30であった。
実施例6 6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチルシ
リル−5′−O−モノメトキシトリチル−p−チオアデ
ニリル−2′−[Op−(p−ニトロフェニルエチル)−
5′]−N−6−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジ
メチルシリル]−p−チオアデニリル−2′−[Op−
(p−ニトロフェニルエチル)−5′]−6−N−ベン
ゾイル−2′,3′−ビス−O−t−ブチルジメチルシリ
ルアデノシン(7A、7Bおよび8A、8B) ホスフィタミド2(0.449g、0.41ミリモル)を5′−
ヒドロキシ二量体5Aおよび5B(0.0262g、0.2ミリモル)
と別々に3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.114g、
1.0ミリモル)の存在下で乾燥アセトニトリル(3.2ml)
中にて縮合させた。室温にて3時間撹拌した後、ピリジ
ン(0.4ml)中の硫黄(0.2g、6.25ミリモル)を添加し
て酸化させた。室温にてさらに24時間撹拌した後、生成
物をジクロルメタン(50ml)で抽出し、有機相を飽和Na
Cl溶液(2×20ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)、次い
で蒸発乾固させた。トルエンと共に最終的蒸発を行なっ
てピリジンを除去した。粗生成物をシリカゲルカラム
(15×2cm)でクロマトグラフにかけ、かつクロロホル
ム/メタノール(100:2)で溶出させて、化合物5Aと縮
合させた際に異性体混合物7A+7Bを得た。ホスフィタミ
ド2を同様に化合物5Bと縮合させた際には、異性体混合
物8A+8Bが得られた。プレート1枚当り約50mgの異性体
混合物を最適分離のため施した調製用シリカゲル板(20
×20×0.2cm)を用いることにより、各異性体混合物の
ジアステレオマ分離を行なった。これらプレートをジク
ロルメタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:0.5 v/v)
にて3回展開させた。適するバンドを切除し、かつクロ
ロホルム/メタノール(4:1)で溶出させた。化合物5A
から合成された高いRf異性体はジクロメタン/酢酸エチ
ル/n−ヘキサン(1:1:1)にて0.58のRfを有し、かつ48
%(0.218g)の7Aを与えた。
リル−5′−O−モノメトキシトリチル−p−チオアデ
ニリル−2′−[Op−(p−ニトロフェニルエチル)−
5′]−N−6−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジ
メチルシリル]−p−チオアデニリル−2′−[Op−
(p−ニトロフェニルエチル)−5′]−6−N−ベン
ゾイル−2′,3′−ビス−O−t−ブチルジメチルシリ
ルアデノシン(7A、7Bおよび8A、8B) ホスフィタミド2(0.449g、0.41ミリモル)を5′−
ヒドロキシ二量体5Aおよび5B(0.0262g、0.2ミリモル)
と別々に3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.114g、
1.0ミリモル)の存在下で乾燥アセトニトリル(3.2ml)
中にて縮合させた。室温にて3時間撹拌した後、ピリジ
ン(0.4ml)中の硫黄(0.2g、6.25ミリモル)を添加し
て酸化させた。室温にてさらに24時間撹拌した後、生成
物をジクロルメタン(50ml)で抽出し、有機相を飽和Na
Cl溶液(2×20ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)、次い
で蒸発乾固させた。トルエンと共に最終的蒸発を行なっ
てピリジンを除去した。粗生成物をシリカゲルカラム
(15×2cm)でクロマトグラフにかけ、かつクロロホル
ム/メタノール(100:2)で溶出させて、化合物5Aと縮
合させた際に異性体混合物7A+7Bを得た。ホスフィタミ
ド2を同様に化合物5Bと縮合させた際には、異性体混合
物8A+8Bが得られた。プレート1枚当り約50mgの異性体
混合物を最適分離のため施した調製用シリカゲル板(20
×20×0.2cm)を用いることにより、各異性体混合物の
ジアステレオマ分離を行なった。これらプレートをジク
ロルメタン/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:0.5 v/v)
にて3回展開させた。適するバンドを切除し、かつクロ
ロホルム/メタノール(4:1)で溶出させた。化合物5A
から合成された高いRf異性体はジクロメタン/酢酸エチ
ル/n−ヘキサン(1:1:1)にて0.58のRfを有し、かつ48
%(0.218g)の7Aを与えた。
[分析:C111H135N17O22P2Si4S2・1H2Oの計算値:C、57.
56;H、5.96;N、10.28。
56;H、5.96;N、10.28。
実測値:C、57.38;H、5.99;N、10.11]。低いRf異性体は
上記溶剤系にて0.48のRfを有し、かつ34%(0.157g)の
化合物7Bを与えた。
上記溶剤系にて0.48のRfを有し、かつ34%(0.157g)の
化合物7Bを与えた。
[分析:C111H135N17O22P2Si4S2・1H2Oの計算値:C、57.
56;H、5.96;N、10.28。
56;H、5.96;N、10.28。
実測値:C、57.40;H、5.97;N、10.19]。
5′−ヒドロキシ二量体5Bから誘導された異性体混合
物を同様に分離し、かつ高いRf異性体8Aを上記溶剤系に
て0.53のRfを以て41%(0.186g2)で得た。
物を同様に分離し、かつ高いRf異性体8Aを上記溶剤系に
て0.53のRfを以て41%(0.186g2)で得た。
[分析:C111H135N17O22P2Si4S2の 計算値:C、58.02;H、5.92;N、10.36。
実測値:C、58.00;H、5.84;N、10.66]。
低いRf異性体8Bは0.45のRf値を示し、かつ35%(0.16
1g)の収率であった。
1g)の収率であった。
[分析:C111H135N17O22P2Si4S2・1H2Oの計算値:C、57.
56;H、5.96;N、10.28。
56;H、5.96;N、10.28。
実測値:C、57.30;H、5.78;N、10.03]。
実施例7 (Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(9A) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体7Aの
溶液を、1.5mlのジクロメタン/メタノール(4:1)中に
て2%p−トルエンスルホン酸で90分間にわたり脱トリ
チル化した。この混合物をCHCl3に溶解し、燐酸塩緩衝
液(2×15ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)、かつ蒸発
乾固させた。残留物をシリカゲル板(20×20×0.2cm)
でクロマトグラフにかけ、ジクロルメタン/酢酸エチル
/n−ヘキサン(5:5:3 v/v)で展開させた。生成物バン
ド(Rf0.35)を切除し、クロロホルム/メタノール(7:
5)で溶出させ、かつ蒸発させて無色フォームを70〜83
%の収率で得た。次いで、38.5mg(18.9μモル)の生成
物を0.5MのDBUと共にピリジン(7.5ml)中で20時間にわ
たり撹拌し、1M酢酸(3.75ml)で中和し、最終的に蒸発
させた。この蒸発した生成物を、THF(6ml)における1M
Bu4NFでの処理により24時間にわたり脱シリル化した。
この混合物を減圧濃縮した。残留物を濃アンモニア(25
ml)に溶解し、かつr.t.にて48時間撹拌した。溶液を蒸
発させた後、残留物を水(20ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×10ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施し、生成物をEt3NH+H
CO3−緩衝液の直線濃度勾配で溶出させた。生成物フラ
クションを集め、蒸発させ、さらにi−PrOH/濃アンモ
ニア/水(6:1:3)を用いるペーパークロマトグラフィ
ーにより精製して標記化合物を75〜80%収率で得た。
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(9A) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体7Aの
溶液を、1.5mlのジクロメタン/メタノール(4:1)中に
て2%p−トルエンスルホン酸で90分間にわたり脱トリ
チル化した。この混合物をCHCl3に溶解し、燐酸塩緩衝
液(2×15ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)、かつ蒸発
乾固させた。残留物をシリカゲル板(20×20×0.2cm)
でクロマトグラフにかけ、ジクロルメタン/酢酸エチル
/n−ヘキサン(5:5:3 v/v)で展開させた。生成物バン
ド(Rf0.35)を切除し、クロロホルム/メタノール(7:
5)で溶出させ、かつ蒸発させて無色フォームを70〜83
%の収率で得た。次いで、38.5mg(18.9μモル)の生成
物を0.5MのDBUと共にピリジン(7.5ml)中で20時間にわ
たり撹拌し、1M酢酸(3.75ml)で中和し、最終的に蒸発
させた。この蒸発した生成物を、THF(6ml)における1M
Bu4NFでの処理により24時間にわたり脱シリル化した。
この混合物を減圧濃縮した。残留物を濃アンモニア(25
ml)に溶解し、かつr.t.にて48時間撹拌した。溶液を蒸
発させた後、残留物を水(20ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×10ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施し、生成物をEt3NH+H
CO3−緩衝液の直線濃度勾配で溶出させた。生成物フラ
クションを集め、蒸発させ、さらにi−PrOH/濃アンモ
ニア/水(6:1:3)を用いるペーパークロマトグラフィ
ーにより精製して標記化合物を75〜80%収率で得た。
実施例8 (Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(9B) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体7Bの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(9B) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体7Bの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
実施例9 (Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(10A) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体8Aの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(10A) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体8Aの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
実施例10 (Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(10B) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体8Bの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
−p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン
(10B) 0.116g(0.05ミリモル)の完全保護された三量体8Bの
溶液を実施例7の手順にかけた。標記化合物が75〜80%
収率で得られた。
上記で作成した保護単量体、二量体および三量体コア
に関するメチルアルコール中のUV吸収スペクトルおよび
H1−NMRスペクトルを、それぞれ第1表および第2表に
示す。
に関するメチルアルコール中のUV吸収スペクトルおよび
H1−NMRスペクトルを、それぞれ第1表および第2表に
示す。
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート 三量体コアの絶対配置の指定 三量体コアの絶対配置に関する決定を、P31−NMR急速
ボンバード質量分光光度法および酵素切断により行なっ
た。
ボンバード質量分光光度法および酵素切断により行なっ
た。
酵素SVPDはRp−3′,5′−もしくは2′,5′−ホス
ホロチオエート結合を2′/3′−末端から優先的に切断
することが知られている。ネルソン等、ジャーナル・オ
ーガニック・ケミストリー、第49巻、第2314〜2317頁
(1984);エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカ
ル・ケミストリー、第261巻、第5999〜6003頁(198
6);リー等、バイオケミストリー、第24巻、第551〜55
5頁(1985)。化学合成された二量体コアARpAのSVPD加
水分解はそれぞれ1:1のモル比にてアデノシンとAMPSと
を与え、半減期は3時間であった(第3表)。ASpA二量
体コアは、これら条件下でSVPD用の基質でなかった。三
量体コア9Aは、SVPDでの加水分解により決定してRpR
pインターヌクレオチド結合配置を有し、それぞれ1:1
のモル比にてAMPS+ARpAを与えた。同様に、三量体コア
9BのSVPD加水分解はASpAおよびAMPSを与え、三量体コア
9BがSpRpインターヌクレオチド結合配置を有するこ
とを示した(第3表)。三量体コア10Aおよび10BはSVPD
用の基質でなく(第3表)、2′/3′−末端に隣接した
インターヌクレオチド結合におけるSp配置の存在を示
した。
ホロチオエート結合を2′/3′−末端から優先的に切断
することが知られている。ネルソン等、ジャーナル・オ
ーガニック・ケミストリー、第49巻、第2314〜2317頁
(1984);エプスタイン等、ジャーナル・バイオロジカ
ル・ケミストリー、第261巻、第5999〜6003頁(198
6);リー等、バイオケミストリー、第24巻、第551〜55
5頁(1985)。化学合成された二量体コアARpAのSVPD加
水分解はそれぞれ1:1のモル比にてアデノシンとAMPSと
を与え、半減期は3時間であった(第3表)。ASpA二量
体コアは、これら条件下でSVPD用の基質でなかった。三
量体コア9Aは、SVPDでの加水分解により決定してRpR
pインターヌクレオチド結合配置を有し、それぞれ1:1
のモル比にてAMPS+ARpAを与えた。同様に、三量体コア
9BのSVPD加水分解はASpAおよびAMPSを与え、三量体コア
9BがSpRpインターヌクレオチド結合配置を有するこ
とを示した(第3表)。三量体コア10Aおよび10BはSVPD
用の基質でなく(第3表)、2′/3′−末端に隣接した
インターヌクレオチド結合におけるSp配置の存在を示
した。
4種の2,5−ホスホロチオエートアデニレート三量体
コアを、さらに酵素2′−ホスホジエステラーゼ
(「2′−PDE」)、すなわちL細胞抽出物に見られる
エキソリボヌクレアーゼでの加水分解により特性化し
た。この酵素は2′/3′−末端から開裂する。標準A2お
よびA3コアは10分間の半減期にてアデノシンおよびAMP
まで加水分解されたのに対し、二量体コアARpAおよびA
SpAは2′−PDEの基質とならなかった(第3表)。2,5
−ホスホロチオエート二量体コアが2′−PDEの基質と
ならないという事実(標準2−5Aとは異なる)は、
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート三量体コア
の立体配置の指定に極めて役立つ。三量体コア9Aは2′
−PDEの基質となり、加水分解の生成物はARpAおよびAMP
Sであった。三量体コア9BはSVPDの基質であり、ASpAお
よびAMPSを与え;三量体コア10Aは基質となり、ARpAお
よびAMPSを与え;三量体10Bは2′−PDEの基質でなかっ
た。
コアを、さらに酵素2′−ホスホジエステラーゼ
(「2′−PDE」)、すなわちL細胞抽出物に見られる
エキソリボヌクレアーゼでの加水分解により特性化し
た。この酵素は2′/3′−末端から開裂する。標準A2お
よびA3コアは10分間の半減期にてアデノシンおよびAMP
まで加水分解されたのに対し、二量体コアARpAおよびA
SpAは2′−PDEの基質とならなかった(第3表)。2,5
−ホスホロチオエート二量体コアが2′−PDEの基質と
ならないという事実(標準2−5Aとは異なる)は、
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート三量体コア
の立体配置の指定に極めて役立つ。三量体コア9Aは2′
−PDEの基質となり、加水分解の生成物はARpAおよびAMP
Sであった。三量体コア9BはSVPDの基質であり、ASpAお
よびAMPSを与え;三量体コア10Aは基質となり、ARpAお
よびAMPSを与え;三量体10Bは2′−PDEの基質でなかっ
た。
P31−NMR分光光度法は、ホスホロチオエートのSp立
体異性体がRpジアステオマーよりも高いフィールドで
共鳴することを示した。さらに、Spジアステレオマー
は、Rpジアステレオマより長い逆相HPLCにおける保持
時間を有した。ASpA二量体コアはARpAよりも高いフィー
ルドで共鳴する(第3表)。同様にASpASpAにつき観察
された2種のシングレットは、ARpARpAにつき観察され
た2種のシングレットより高いフィールドで共鳴した
(第3表)。三量体コア9A(RpRp)および10B(S
pSp)の絶対配置の指定は、ARpAおよびASpA二量体コ
アにつき観察されたシングレット同じ周波数にて共鳴す
る2種のシングレットに基づく。三量体コア9Bおよび10
Aに関する配置の指定は、酵素分解およびHPLC分析と組
合せて行なった(第3表)。P31−NMRスペクトルは、A
SpARpA三量体コアに関する2種のシングレットの間のδ
ppmが1.2であるのに対し、ARpASpAに関する2種のシク
グレットが0.8のδppmを有することを示した(指定は
2′/3′末端に対し5′である)。
体異性体がRpジアステオマーよりも高いフィールドで
共鳴することを示した。さらに、Spジアステレオマー
は、Rpジアステレオマより長い逆相HPLCにおける保持
時間を有した。ASpA二量体コアはARpAよりも高いフィー
ルドで共鳴する(第3表)。同様にASpASpAにつき観察
された2種のシングレットは、ARpARpAにつき観察され
た2種のシングレットより高いフィールドで共鳴した
(第3表)。三量体コア9A(RpRp)および10B(S
pSp)の絶対配置の指定は、ARpAおよびASpA二量体コ
アにつき観察されたシングレット同じ周波数にて共鳴す
る2種のシングレットに基づく。三量体コア9Bおよび10
Aに関する配置の指定は、酵素分解およびHPLC分析と組
合せて行なった(第3表)。P31−NMRスペクトルは、A
SpARpA三量体コアに関する2種のシングレットの間のδ
ppmが1.2であるのに対し、ARpASpAに関する2種のシク
グレットが0.8のδppmを有することを示した(指定は
2′/3′末端に対し5′である)。
2′,5′−ホスホロチオエート二量体および三量体コ
アの代謝安定性は、標準2−5Aよりも顕著に大である。
3′−エキソヌクレアーゼSVPDによる三量体コアの加水
分解速度は次の安定性の減少程度である: ASpARpA>ARpARpA>>>A3。三量体コアARpASpAおよびA
SpASpAは、SVPDの基質でなかった(第3用)。SVPDによ
る段階的切断の3′−>5′方向はSp配置により阻止
されて、上流の隣接ホスホロチオエート結合の開裂を防
止する。2′−PDEによりARpARpA、ASpARpAおよびARpA
SpA三量体コアは基質となったが、ASpASpA三量体コアは
基質とならなかった。SVPDと2′−PDEとの両者の場
合、二量体コア(ARpAもしくはASpAのいずれか)はARpA
RpA、ASpARpAおよびARpASpA三量体コア加水分解後に蓄
積する。SVPDおよび2′−PDEによる2−5A分子の加水
分解は、2′/3′−末端から進行する。したがって、三
量体コア中へのホスホロチオエート基の導入は、5′−
末端からのARpAもしくはASpA二量体コアの蓄積と2′/
3′末端からのAMPSの蓄積とをもたらす(第3表)。標
準A3の場合には、SVPDもしくは2′−PDEによる加水分
解後にA2の検出しうる蓄積は存在しない。
アの代謝安定性は、標準2−5Aよりも顕著に大である。
3′−エキソヌクレアーゼSVPDによる三量体コアの加水
分解速度は次の安定性の減少程度である: ASpARpA>ARpARpA>>>A3。三量体コアARpASpAおよびA
SpASpAは、SVPDの基質でなかった(第3用)。SVPDによ
る段階的切断の3′−>5′方向はSp配置により阻止
されて、上流の隣接ホスホロチオエート結合の開裂を防
止する。2′−PDEによりARpARpA、ASpARpAおよびARpA
SpA三量体コアは基質となったが、ASpASpA三量体コアは
基質とならなかった。SVPDと2′−PDEとの両者の場
合、二量体コア(ARpAもしくはASpAのいずれか)はARpA
RpA、ASpARpAおよびARpASpA三量体コア加水分解後に蓄
積する。SVPDおよび2′−PDEによる2−5A分子の加水
分解は、2′/3′−末端から進行する。したがって、三
量体コア中へのホスホロチオエート基の導入は、5′−
末端からのARpAもしくはASpA二量体コアの蓄積と2′/
3′末端からのAMPSの蓄積とをもたらす(第3表)。標
準A3の場合には、SVPDもしくは2′−PDEによる加水分
解後にA2の検出しうる蓄積は存在しない。
Sp結合を含む三量体コアは、いずれもSVPDにより開
裂されなかった。L−細胞抽出物による開裂の際のASpA
RpAの半減期(15時間)はARpARpAの半減期(18時間)と
は有意の差が存在しなかったが、ARpASpA三量体の半減
期は顕著に長かった(20日間)。ASpASpAはL−細胞抽
出物により開裂されなかった(第3表)。
裂されなかった。L−細胞抽出物による開裂の際のASpA
RpAの半減期(15時間)はARpARpAの半減期(18時間)と
は有意の差が存在しなかったが、ARpASpA三量体の半減
期は顕著に長かった(20日間)。ASpASpAはL−細胞抽
出物により開裂されなかった(第3表)。
ホスホロチオエート四量体コアの作成 限定はしないが、次の実施例は完全分割された本発明
による四量体コア化合物の作成を示している。
による四量体コア化合物の作成を示している。
実施例11 a.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 立体配置SpSpを有する0.149g(0.065ミリモル)
の完全保護された三量体8Bの溶媒を、2%p−トルエン
スルホン酸により1.5mlのジクロルメタン/メタノール
(4:1)中にて室温で3時間にわたり脱トリチル化し
た。この混合物を50mlのCHCl3で希釈し、燐酸塩緩衝液
(2×15ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾固
させた。残留物をシリカゲル板(20×20×0.2cm)でク
ロマトグラフにかけ、ジクロルメタン/酢酸エチル/n−
ヘキサン(5:5:3 v/v)で展開させた。生成物バンドのR
f0.55を切除し、クロロホルム/メタノール(1:1)で溶
出させ、蒸発に際し0.108g(収率88%)の無色フォーム
を得た。5′−保護解除されたSpSp三量体8B(101m
g、0.05mM)を0.5mlのアセトニトリル中にホスフイタミ
ド2(0.105g、0.1ミリモル)と共に1晩溶解させた。
3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.023g、0.2ミリモ
ル)を添加した。室温にて3時間撹拌した後、ピリジン
(0.084ml)における硫黄(0.042g、1.3ミリモル)を添
加して酸化させた。室温にてさらに24時間撹拌した後、
生成物をジクロルメタン(50ml)で抽出し、有機相を飽
和NaCl溶液(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で脱水し、次
いで蒸発乾固させた。最終的にトルエンと一緒に蒸発さ
せてピリジンを除去した。プレート1枚当り約50mgを最
適分離につき施した調製用シリカゲル板(20×20×0.2c
m)を用いて粗生成物を精製し、その際ジクロルメタン
/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:0.5 v/v)にて3回展
開させた。完全保護されたSpSpSp四量体(Rf0.
3)を含有するバンドおよび完全保護されたRpSpS
p四量体(Rf0.4)を含有するバンドを切除し、かつク
ロロホルム/メタノール(4:1)で溶出させた。完全保
護されたたSpSpSp四量体の収量は43mg(29%)で
あった。完全保護されたRpSpSp化合物の収量は5.
3mg(35.5%)であった。これら2種の異性体(7.3μモ
ル、0.22mg)を、ピリジン(5.0ml)中で0.5MのDBUと共
に20時間撹拌することにより保護解除し、1M酢酸/ピリ
ジン(0.5ml)で中和し、最後に蒸発させた。その後の
脱シリル化は、1M弗化テトラブチルアンモニウムにより
テトラヒドロフラン(3.6ml)中で室温にて48時間行な
った。この混合物を減圧濃縮し、残留物を濃アンモニア
(15ml)に溶解し、かつ室温にて48時間撹拌した。溶液
を蒸発させた後、残留物を5mlの80%酢酸に溶解し、か
つr.t.にて20時間静置した。残留物を約5mlの水に溶解
し、かつDEAEセファデックスA−25カラム(60×1cm)
に施し、生成物をEt3NH+HCO3 -緩衝液(pH7.5)の直線濃
度勾配で溶出させた(濃度勾配0.001〜1M)。生成物フ
ラクションを集め、蒸発させ、さらにi−PrOH/濃アン
モニア/水(6:1:3)を用いるペーパークロマトグラフ
ィーにより精製した。これら四量異性体を水で溶出させ
て、ASpASpASpA(収率72%、Rf0.23)およびARpASpASpA
(収率73%、Rf0.29)をアンモニウム塩として得た。
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 立体配置SpSpを有する0.149g(0.065ミリモル)
の完全保護された三量体8Bの溶媒を、2%p−トルエン
スルホン酸により1.5mlのジクロルメタン/メタノール
(4:1)中にて室温で3時間にわたり脱トリチル化し
た。この混合物を50mlのCHCl3で希釈し、燐酸塩緩衝液
(2×15ml)で洗浄し、脱水し(Na2SO4)かつ蒸発乾固
させた。残留物をシリカゲル板(20×20×0.2cm)でク
ロマトグラフにかけ、ジクロルメタン/酢酸エチル/n−
ヘキサン(5:5:3 v/v)で展開させた。生成物バンドのR
f0.55を切除し、クロロホルム/メタノール(1:1)で溶
出させ、蒸発に際し0.108g(収率88%)の無色フォーム
を得た。5′−保護解除されたSpSp三量体8B(101m
g、0.05mM)を0.5mlのアセトニトリル中にホスフイタミ
ド2(0.105g、0.1ミリモル)と共に1晩溶解させた。
3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(0.023g、0.2ミリモ
ル)を添加した。室温にて3時間撹拌した後、ピリジン
(0.084ml)における硫黄(0.042g、1.3ミリモル)を添
加して酸化させた。室温にてさらに24時間撹拌した後、
生成物をジクロルメタン(50ml)で抽出し、有機相を飽
和NaCl溶液(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で脱水し、次
いで蒸発乾固させた。最終的にトルエンと一緒に蒸発さ
せてピリジンを除去した。プレート1枚当り約50mgを最
適分離につき施した調製用シリカゲル板(20×20×0.2c
m)を用いて粗生成物を精製し、その際ジクロルメタン
/酢酸エチル/n−ヘキサン(1:1:0.5 v/v)にて3回展
開させた。完全保護されたSpSpSp四量体(Rf0.
3)を含有するバンドおよび完全保護されたRpSpS
p四量体(Rf0.4)を含有するバンドを切除し、かつク
ロロホルム/メタノール(4:1)で溶出させた。完全保
護されたたSpSpSp四量体の収量は43mg(29%)で
あった。完全保護されたRpSpSp化合物の収量は5.
3mg(35.5%)であった。これら2種の異性体(7.3μモ
ル、0.22mg)を、ピリジン(5.0ml)中で0.5MのDBUと共
に20時間撹拌することにより保護解除し、1M酢酸/ピリ
ジン(0.5ml)で中和し、最後に蒸発させた。その後の
脱シリル化は、1M弗化テトラブチルアンモニウムにより
テトラヒドロフラン(3.6ml)中で室温にて48時間行な
った。この混合物を減圧濃縮し、残留物を濃アンモニア
(15ml)に溶解し、かつ室温にて48時間撹拌した。溶液
を蒸発させた後、残留物を5mlの80%酢酸に溶解し、か
つr.t.にて20時間静置した。残留物を約5mlの水に溶解
し、かつDEAEセファデックスA−25カラム(60×1cm)
に施し、生成物をEt3NH+HCO3 -緩衝液(pH7.5)の直線濃
度勾配で溶出させた(濃度勾配0.001〜1M)。生成物フ
ラクションを集め、蒸発させ、さらにi−PrOH/濃アン
モニア/水(6:1:3)を用いるペーパークロマトグラフ
ィーにより精製した。これら四量異性体を水で溶出させ
て、ASpASpASpA(収率72%、Rf0.23)およびARpASpASpA
(収率73%、Rf0.29)をアンモニウム塩として得た。
実施例12 a.(Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(R
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(R
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として化合
物8Bの代りに完全保護された三量体7Aを用いて標記化合
物を製造した。
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(R
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として化合
物8Bの代りに完全保護された三量体7Aを用いて標記化合
物を製造した。
実施例13 a.(Rp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として化合
物8Bの代りに完全保護された三量体7Bを用いて標記化合
物を製造した。
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として化合
物8Bの代りに完全保護された三量体7Bを用いて標記化合
物を製造した。
実施例14 a.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として完全
保護された三量体8Aを8Bの代りに用いて標記化合物を製
造した。
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン b.(Sp)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−p−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)−
p−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン 実施例11の手順にしたがったが、出発物質として完全
保護された三量体8Aを8Bの代りに用いて標記化合物を製
造した。
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレート5′
−モノホスフェートの製造 2′,5′−オリゴアデニレートの5′−モノホスフェ
ートは、対応のコア化合物をPOCl3と反応させることに
より容易に製造される。この種の処理は、本発明による
化合物のホスホロチオエートインターヌクレオチド結合
からの硫黄の除去をもたらし、かつ2−5Aの形成を生ぜ
しめる。したがって、ホスホロチオエートオリゴアデニ
レートの5′−モノホスフェートは、5′末端ヌクレオ
チドにおけるモノメトキシトリチル保護基が除去されて
いる対応の完全保護されたコア化合物から製造せねばな
らない。ホスホリル化の条件は、インターヌクレオチド
燐原子におけるp−ニトロフェニルエチル保護基が無傷
で残存するようにせねばならない。
−モノホスフェートの製造 2′,5′−オリゴアデニレートの5′−モノホスフェ
ートは、対応のコア化合物をPOCl3と反応させることに
より容易に製造される。この種の処理は、本発明による
化合物のホスホロチオエートインターヌクレオチド結合
からの硫黄の除去をもたらし、かつ2−5Aの形成を生ぜ
しめる。したがって、ホスホロチオエートオリゴアデニ
レートの5′−モノホスフェートは、5′末端ヌクレオ
チドにおけるモノメトキシトリチル保護基が除去されて
いる対応の完全保護されたコア化合物から製造せねばな
らない。ホスホリル化の条件は、インターヌクレオチド
燐原子におけるp−ニトロフェニルエチル保護基が無傷
で残存するようにせねばならない。
本発明による各分割された三量体コアの5′−モノホ
スフェートを、対応の完全保護された三量体7A、7B、8A
もしくは8Bの5′−ヒドロキシ同族体から作成した。実
施例15にしたがい、中間5′−ホスホトリエステル(11
A、11B、12Aもしくは12B)を作成し、次いで実施例16に
したがい全ての保護基を除去して5′−モノホスフェー
トを得た。実施例15および16の手順を用いて、4種の三
量体コア立体異性体の5′−モノホスフェートを生成さ
せることができる。
スフェートを、対応の完全保護された三量体7A、7B、8A
もしくは8Bの5′−ヒドロキシ同族体から作成した。実
施例15にしたがい、中間5′−ホスホトリエステル(11
A、11B、12Aもしくは12B)を作成し、次いで実施例16に
したがい全ての保護基を除去して5′−モノホスフェー
トを得た。実施例15および16の手順を用いて、4種の三
量体コア立体異性体の5′−モノホスフェートを生成さ
せることができる。
実施例15 5′−O−(2,5−ジクロルフェニル−p−ニトロフエ
ニルエチル)−ホスホリル−6−N−ベンゾイル−3′
−O−t−ブチルジメチルシリル−p−チオアデニリル
−2′−[Op−(p−ニトロフェニルエチル)−5′]
−6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチル
シリル−p−チオアデニリル−2′−[Op−(p−ニト
ロフェニルエチル)−5′]−6−N−ベンゾイル−
2′,3′−ジ−O−t−ブチルジメチルシリルアデノシ
ン(11A、11B、12Aもしくは12B): 乾燥ピリジン(0.5ml)における1,2,4−トリアゾール
(0.011g、0.16ミリモル)および2,5−ジクロルフェニ
ルホスホロジクロリデート(0.022g、0.078ミリモル)
の溶液へ化合物7A、7B、8Aもしくは8Bのいずかの5′−
脱保護同族体(0.1g、0.049ミリモル)(実施例11で中
間体として作成)を添加し、かつ30分間撹拌した後にp
−ニトロフェニルエタノール(0.02g、0.119ミリモル)
を添加し、かつ撹拌を20時間続けた。次いで、溶液をク
ロロホルム(50ml)で抽出し、有機相を水(2×20ml)
で洗浄し、蒸発乾固させ、最後にトルエンと共に蒸発さ
せた。残留物を調製用プレート(20×20×0.2cm)での
シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、その際に
溶剤系ジクロルメタン/n−ヘキサン/酢酸エチル(1:1:
1 v/v)を用いた。生成物バンドをクロロホルム/メタ
ノール(4:1)で溶出させ、かつ減圧蒸発させてそれぞ
れ70〜80%収率にて11A、11B、12Aもしくは12Bを得た。
ニルエチル)−ホスホリル−6−N−ベンゾイル−3′
−O−t−ブチルジメチルシリル−p−チオアデニリル
−2′−[Op−(p−ニトロフェニルエチル)−5′]
−6−N−ベンゾイル−3′−O−t−ブチルジメチル
シリル−p−チオアデニリル−2′−[Op−(p−ニト
ロフェニルエチル)−5′]−6−N−ベンゾイル−
2′,3′−ジ−O−t−ブチルジメチルシリルアデノシ
ン(11A、11B、12Aもしくは12B): 乾燥ピリジン(0.5ml)における1,2,4−トリアゾール
(0.011g、0.16ミリモル)および2,5−ジクロルフェニ
ルホスホロジクロリデート(0.022g、0.078ミリモル)
の溶液へ化合物7A、7B、8Aもしくは8Bのいずかの5′−
脱保護同族体(0.1g、0.049ミリモル)(実施例11で中
間体として作成)を添加し、かつ30分間撹拌した後にp
−ニトロフェニルエタノール(0.02g、0.119ミリモル)
を添加し、かつ撹拌を20時間続けた。次いで、溶液をク
ロロホルム(50ml)で抽出し、有機相を水(2×20ml)
で洗浄し、蒸発乾固させ、最後にトルエンと共に蒸発さ
せた。残留物を調製用プレート(20×20×0.2cm)での
シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、その際に
溶剤系ジクロルメタン/n−ヘキサン/酢酸エチル(1:1:
1 v/v)を用いた。生成物バンドをクロロホルム/メタ
ノール(4:1)で溶出させ、かつ減圧蒸発させてそれぞ
れ70〜80%収率にて11A、11B、12Aもしくは12Bを得た。
実施例16 a.5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(13A) b.5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(13B) c.5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(14A) d.5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(14B) p−ニトロベンズアルドキシム(0.036g、0.216ミリ
モル)をジオキサン/トリエチルアミン/水(それぞれ
0.5ml)中で30分間撹拌し、適する5′−ホスホトリエ
ステル11A、11B、12Aもしくは12B(0.05g、0.02ミリモ
ル)を添加し、かつ混合物を室温にて4時間保った。こ
の溶液を蒸発乾固させ、次いでトルエン(2×5ml)と
共に蒸発させ、さらに残留物をプレート(20×20×0.2c
m)でのクロロホルム/メタノール(95:5)における調
製用TLCで精製した。生成物バンドをクロロホルム/メ
タノール/トリエチルアミン(5:1:1)で溶出させ、か
つ蒸発乾固させた。この物質(0.022g、10μモル)を0.
5MのDBUと共にピリジン(8ml)中で室温にて24時間撹拌
し、溶液を1M酢酸(4ml)で中和し、かつ蒸発乾固させ
た。残留物を1MのBu4NFにてTHF(6ml)中で48時間にわ
たり処理し、かつ蒸発後に濃アンモニア(25ml)での室
温における48時間の処理により脱ベンゾイル化を行なっ
た。溶液を蒸発させた。保護解除された粗製三量体5′
−モノホスフェートを水(25ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×10ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施すと共に、0.001〜1M
のEt3NH+HCO3 -緩衝液の直線濃度勾配で溶出させた。生
成物フラクションを集め、蒸発乾固させ、かつ水と共に
数回蒸発させた後に、さらにi−PrOH/濃アンモニア/
水−溶剤系(55:10:35)を用いるペーパークロマトグラ
フィーにより精製した。生成物バンドを水で溶出させて
凍結乾燥した後に三量体p−チオアデニレート5′−モ
ノホスフェート13A、13B、14Aもしくは14Bを68〜74%収
率でアンモニア塩として得た。
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(13A) b.5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(13B) c.5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(14A) d.5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−アデノシン(14B) p−ニトロベンズアルドキシム(0.036g、0.216ミリ
モル)をジオキサン/トリエチルアミン/水(それぞれ
0.5ml)中で30分間撹拌し、適する5′−ホスホトリエ
ステル11A、11B、12Aもしくは12B(0.05g、0.02ミリモ
ル)を添加し、かつ混合物を室温にて4時間保った。こ
の溶液を蒸発乾固させ、次いでトルエン(2×5ml)と
共に蒸発させ、さらに残留物をプレート(20×20×0.2c
m)でのクロロホルム/メタノール(95:5)における調
製用TLCで精製した。生成物バンドをクロロホルム/メ
タノール/トリエチルアミン(5:1:1)で溶出させ、か
つ蒸発乾固させた。この物質(0.022g、10μモル)を0.
5MのDBUと共にピリジン(8ml)中で室温にて24時間撹拌
し、溶液を1M酢酸(4ml)で中和し、かつ蒸発乾固させ
た。残留物を1MのBu4NFにてTHF(6ml)中で48時間にわ
たり処理し、かつ蒸発後に濃アンモニア(25ml)での室
温における48時間の処理により脱ベンゾイル化を行なっ
た。溶液を蒸発させた。保護解除された粗製三量体5′
−モノホスフェートを水(25ml)に溶解し、かつクロロ
ホルム(2×10ml)で洗浄した。水相をDEAEセファデッ
クスA−25カラム(60×1cm)に施すと共に、0.001〜1M
のEt3NH+HCO3 -緩衝液の直線濃度勾配で溶出させた。生
成物フラクションを集め、蒸発乾固させ、かつ水と共に
数回蒸発させた後に、さらにi−PrOH/濃アンモニア/
水−溶剤系(55:10:35)を用いるペーパークロマトグラ
フィーにより精製した。生成物バンドを水で溶出させて
凍結乾燥した後に三量体p−チオアデニレート5′−モ
ノホスフェート13A、13B、14Aもしくは14Bを68〜74%収
率でアンモニア塩として得た。
5′−モノホスフェートのH1−NMRは次の通りであっ
た: 5′−ホスホトリエステル11A、11B、12Aもしくは12B
を生成させるための5′−保護解除された保護三量体の
モノホスホリル化は高収率70〜80%で進行し、次いでさ
らに高収率(68〜74%)の完全保護解除の工程を行なっ
て三量体5′−モノホスフェート13A、13B、14Aもしく
は14Bを得た。
た: 5′−ホスホトリエステル11A、11B、12Aもしくは12B
を生成させるための5′−保護解除された保護三量体の
モノホスホリル化は高収率70〜80%で進行し、次いでさ
らに高収率(68〜74%)の完全保護解除の工程を行なっ
て三量体5′−モノホスフェート13A、13B、14Aもしく
は14Bを得た。
本発明によるそれぞれ分割された四量体コア化合物の
5−モノホスフェートを同様に作成し、その際実施例15
および16におけると同じモル量を用いたが、ただし合成
用の出発物質は完全保護された三量体の5′−ヒドロキ
シ同族体でなく完全保護された四量体の5′−ヒドロキ
シ同族体とした。次の完全分割された四量体5′−モノ
ホスフェートがかくして製造される: 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレート 5′−ジホスフェートおよび5′−トリホスフェートの
製造 2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートの
5′−ジホスフェートおよび5′−トリホスフェート
は、実施例17の手順にしたがって5′−モノホスフェー
トから製造することができる。
5−モノホスフェートを同様に作成し、その際実施例15
および16におけると同じモル量を用いたが、ただし合成
用の出発物質は完全保護された三量体の5′−ヒドロキ
シ同族体でなく完全保護された四量体の5′−ヒドロキ
シ同族体とした。次の完全分割された四量体5′−モノ
ホスフェートがかくして製造される: 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Sp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 5′−O−ホスホリル−(Rp)−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−チオアデニリル−(2′−
5′)−(Rp)−チオアデニリル−(2′−5′)−ア
デノシン、 2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレート 5′−ジホスフェートおよび5′−トリホスフェートの
製造 2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートの
5′−ジホスフェートおよび5′−トリホスフェート
は、実施例17の手順にしたがって5′−モノホスフェー
トから製造することができる。
実施例17 反応は全て、オーブン乾燥されたガラス容器にて125
℃で18〜24時間にわたり行なった。2′,5′−ホスホロ
チオエートオリゴアデニレート立体異性体(三量体もし
くは四量体、260nmにて400OD単位)を500μlの乾燥ジ
メチルホルムアミド(「DMF」)に溶解し、かつ10mlの
三角フラスコ内で35℃にて減圧乾燥させた。この過程を
3回反復した。乾燥残留物に50μモルのトリフェニルホ
スフィンと100μモルのイミダゾールと50μモルのジピ
リジニルジスルフィドを添加した。この混合物を500μ
lの乾燥DMF+50μlの乾燥ジメチルスルホキシドに溶
解させた。溶液を撹拌棒により室温にて2時間撹拌し
た。2時間後、溶液は均質となった(30分間後、溶液は
黄色に変化し始めた)。この溶液を10mlの1%NaI/乾燥
アセトン(w/v)溶液に移した。生成した透明な白色沈
澱物は、5′−ホスホロイミダゾリデートのナトリウム
塩である。この沈澱物を室温で遠心分離し、上澄液をデ
カントし、かつ沈澱物を10mlの乾燥アセトンで3回洗浄
した。この遠心分離を反復した。沈澱物をP2O5上で2時
間にわたり減圧乾燥させた。沈澱物を200μlの新たに
作成された乾燥DMFにおける0.5Mのピロ燐酸トリブチル
アンモニウムに溶解させた。溶液を室温にて18時間保持
し、次いでDMFを減圧除去した。残留物を0.25Mの重炭酸
トリエチルアンモニウム緩衝液(「TEAB」)(pH7.5)
に溶解させた。5′−ジおよび5′−トリ−ホスフェー
ト生成物をDEAE−セファデックスA−25カラム(HCO3 -
型:1×20cm)により分離し、その際0.25M〜0.75MTEABの
直線濃度勾配を用いた。フラクション(10ml)を集め
た。生成物を254nmにおける紫外分光光度法により観察
した。5′−ジおよび5′−トリ−ホスフェートを含有
するフラクションを別々に集め、かつ減圧乾燥させた。
水の反復添加に続く凍結乾燥により、TEABを除去した。
5′−ジホスフェートの収率は約5%であり、5′−ト
リホスフェートの収率は約60%であった。
℃で18〜24時間にわたり行なった。2′,5′−ホスホロ
チオエートオリゴアデニレート立体異性体(三量体もし
くは四量体、260nmにて400OD単位)を500μlの乾燥ジ
メチルホルムアミド(「DMF」)に溶解し、かつ10mlの
三角フラスコ内で35℃にて減圧乾燥させた。この過程を
3回反復した。乾燥残留物に50μモルのトリフェニルホ
スフィンと100μモルのイミダゾールと50μモルのジピ
リジニルジスルフィドを添加した。この混合物を500μ
lの乾燥DMF+50μlの乾燥ジメチルスルホキシドに溶
解させた。溶液を撹拌棒により室温にて2時間撹拌し
た。2時間後、溶液は均質となった(30分間後、溶液は
黄色に変化し始めた)。この溶液を10mlの1%NaI/乾燥
アセトン(w/v)溶液に移した。生成した透明な白色沈
澱物は、5′−ホスホロイミダゾリデートのナトリウム
塩である。この沈澱物を室温で遠心分離し、上澄液をデ
カントし、かつ沈澱物を10mlの乾燥アセトンで3回洗浄
した。この遠心分離を反復した。沈澱物をP2O5上で2時
間にわたり減圧乾燥させた。沈澱物を200μlの新たに
作成された乾燥DMFにおける0.5Mのピロ燐酸トリブチル
アンモニウムに溶解させた。溶液を室温にて18時間保持
し、次いでDMFを減圧除去した。残留物を0.25Mの重炭酸
トリエチルアンモニウム緩衝液(「TEAB」)(pH7.5)
に溶解させた。5′−ジおよび5′−トリ−ホスフェー
ト生成物をDEAE−セファデックスA−25カラム(HCO3 -
型:1×20cm)により分離し、その際0.25M〜0.75MTEABの
直線濃度勾配を用いた。フラクション(10ml)を集め
た。生成物を254nmにおける紫外分光光度法により観察
した。5′−ジおよび5′−トリ−ホスフェートを含有
するフラクションを別々に集め、かつ減圧乾燥させた。
水の反復添加に続く凍結乾燥により、TEABを除去した。
5′−ジホスフェートの収率は約5%であり、5′−ト
リホスフェートの収率は約60%であった。
2−5AによるRNアーゼLの活性化が、抗ウィルス防御
メカニズムに関し重要であると一般に思われる。インタ
フェロンは酵素2−5Aシンセターゼの転写を誘発して、
二本鎖RNAの活性化に際し2′,5′結合オリゴアデニレ
ートを生成する。2−5Aの唯一の知られた生化学作用は
RNアーゼLの活性化である。この酵素はmRNAおよびrRNA
を加水分解することにより、蛋白合成の阻止をもたら
す。RNアーゼLの活性化は、2−5Aが連続的に合成され
なければ2−5Aが急速に分解するので一時的となる。か
くして、RNアーゼLの活性化は複製を阻止する際に重要
な役割を演じ、したがってウィルスによる感染に対し防
御を与える。
メカニズムに関し重要であると一般に思われる。インタ
フェロンは酵素2−5Aシンセターゼの転写を誘発して、
二本鎖RNAの活性化に際し2′,5′結合オリゴアデニレ
ートを生成する。2−5Aの唯一の知られた生化学作用は
RNアーゼLの活性化である。この酵素はmRNAおよびrRNA
を加水分解することにより、蛋白合成の阻止をもたら
す。RNアーゼLの活性化は、2−5Aが連続的に合成され
なければ2−5Aが急速に分解するので一時的となる。か
くして、RNアーゼLの活性化は複製を阻止する際に重要
な役割を演じ、したがってウィルスによる感染に対し防
御を与える。
本発明によれば、4種の全ての2′,5′−ホスホロチ
オエートアデニレート三量体コアおよびその5′−モノ
ホスフェートは、ナイト等の方法[メソッズ・エンチモ
ロジー、第79巻、第216〜227頁(1981)]にしたがう放
射線結合分析により決定して、RNアーゼLに結合する。
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート三量体コア
および標準A3は、L−929細胞抽出物におけるRNアーゼ
Lからp3A4[p32]pCpプローブを濃度に依存して排除す
ることができた(第1A図)。IC50は2×10-6〜5×10-6
Mの範囲で変化した。しかしながら、5′−モノホスホ
リル化された三量体は、その各コアよりも1000倍高いRN
アーゼLに対する結合親和性を有し、すなわちIC50は2
×10-9〜5×10-9Mの範囲であった(第1A図)。特定の
理論に拘束されるものでないが、この増加は、5′−モ
ノホスフェートがその増大した極性により一層効果的に
分子をRNアーゼLに固定する能力に基因すると思われ
る。
オエートアデニレート三量体コアおよびその5′−モノ
ホスフェートは、ナイト等の方法[メソッズ・エンチモ
ロジー、第79巻、第216〜227頁(1981)]にしたがう放
射線結合分析により決定して、RNアーゼLに結合する。
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート三量体コア
および標準A3は、L−929細胞抽出物におけるRNアーゼ
Lからp3A4[p32]pCpプローブを濃度に依存して排除す
ることができた(第1A図)。IC50は2×10-6〜5×10-6
Mの範囲で変化した。しかしながら、5′−モノホスホ
リル化された三量体は、その各コアよりも1000倍高いRN
アーゼLに対する結合親和性を有し、すなわちIC50は2
×10-9〜5×10-9Mの範囲であった(第1A図)。特定の
理論に拘束されるものでないが、この増加は、5′−モ
ノホスフェートがその増大した極性により一層効果的に
分子をRNアーゼLに固定する能力に基因すると思われ
る。
1つの例外を除き、2′,5′−ホスホロチオエートコ
アは、RNアーゼLを活性化する正確な立体配置を有す
る。2′,5′−ホスホロチオエートによる部分精製され
たRNアーゼLの活性化をシルバーマン、アナリチカル・
バイオケミストリー、第144巻、第450〜460頁(1985)
のコア−セルロース分析にしたがって測定し、これは基
質ポリ(U)−3−[p32]pCpの加水分解に基づく。驚
くことに、4種の2′,5′−ホスホロチオエートアデニ
レートコアのうち3種がRNアーゼLを活性化させて、コ
ア−セルロース分析でポリ(U)−3′−[p32]pCpを
開裂することができた(第1B図)。三量体コアおよび対
応の5′−モノホスフェートの活性化順序は次の通りで
ある:RpRp>SpRp>RpSp(第1B図)。pARp
ARpAはRNアーゼLの最も効率的な活性化剤であったが、
この化合物は代謝的に不安定であり、かつホスホロジエ
ステラーゼにより容易に攻撃を受ける(第3表参照)。
SpSp三量体コアは、10-3Mの濃度でさえRNアーゼL
を活性化しなかった。結合分析で観察されたように(第
1A図)、2′,5′−ホスホロチオエート三量体の5′−
モノホスフェートによるRNアーゼLの活性化は、その各
コアと比較して1000倍増大した。
アは、RNアーゼLを活性化する正確な立体配置を有す
る。2′,5′−ホスホロチオエートによる部分精製され
たRNアーゼLの活性化をシルバーマン、アナリチカル・
バイオケミストリー、第144巻、第450〜460頁(1985)
のコア−セルロース分析にしたがって測定し、これは基
質ポリ(U)−3−[p32]pCpの加水分解に基づく。驚
くことに、4種の2′,5′−ホスホロチオエートアデニ
レートコアのうち3種がRNアーゼLを活性化させて、コ
ア−セルロース分析でポリ(U)−3′−[p32]pCpを
開裂することができた(第1B図)。三量体コアおよび対
応の5′−モノホスフェートの活性化順序は次の通りで
ある:RpRp>SpRp>RpSp(第1B図)。pARp
ARpAはRNアーゼLの最も効率的な活性化剤であったが、
この化合物は代謝的に不安定であり、かつホスホロジエ
ステラーゼにより容易に攻撃を受ける(第3表参照)。
SpSp三量体コアは、10-3Mの濃度でさえRNアーゼL
を活性化しなかった。結合分析で観察されたように(第
1A図)、2′,5′−ホスホロチオエート三量体の5′−
モノホスフェートによるRNアーゼLの活性化は、その各
コアと比較して1000倍増大した。
2′,5′−ホスホロチオエートアデニレート三量体コ
アおよびその5′−モノホスフェートによるRNアーゼL
の活性化についても、L−929細胞抽出物を用いるrRNA
開裂分析にて測定した。ARpARpAおよびASpARpAはRNアー
ゼLを活性化して、28Sおよび18S rRNAを10-5Mにて特定
の開裂生成物まで開裂させた。しかしながら、ARpASpA
およびASpASpAは、10-4M程度の高濃度にてRNアーゼLを
活性化しなかった。rRNA開裂分析は、ARpASpAによるRN
アーゼLの活性化を検出するのに充分な感度でなかつた
と思われる。用いた実験条件下で、標準A3コアも不活性
であり、これは従来の報告[ホウ等、ヨーロピアン・ジ
ャーナル・バイオケミストリー、第132巻、第77〜84頁
(1983)]と一致する。
アおよびその5′−モノホスフェートによるRNアーゼL
の活性化についても、L−929細胞抽出物を用いるrRNA
開裂分析にて測定した。ARpARpAおよびASpARpAはRNアー
ゼLを活性化して、28Sおよび18S rRNAを10-5Mにて特定
の開裂生成物まで開裂させた。しかしながら、ARpASpA
およびASpASpAは、10-4M程度の高濃度にてRNアーゼLを
活性化しなかった。rRNA開裂分析は、ARpASpAによるRN
アーゼLの活性化を検出するのに充分な感度でなかつた
と思われる。用いた実験条件下で、標準A3コアも不活性
であり、これは従来の報告[ホウ等、ヨーロピアン・ジ
ャーナル・バイオケミストリー、第132巻、第77〜84頁
(1983)]と一致する。
対応の5′−モノホスフェートpARpARpA、pASpARpA
(10-8M)およびpARpARpA(10-7M)はRNアーゼLを活性
化して、28Sおよび18S rRNAを開裂した。標準pA3は10-6
Mにて活性であった。10-5M程度の高さの濃度でさえpASp
ASpAとの培養は、検出しうるrRNA分解を与えなかった。
(10-8M)およびpARpARpA(10-7M)はRNアーゼLを活性
化して、28Sおよび18S rRNAを開裂した。標準pA3は10-6
Mにて活性であった。10-5M程度の高さの濃度でさえpASp
ASpAとの培養は、検出しうるrRNA分解を与えなかった。
5′−ホスホリル化三量体コアARpARpAの増大した結
合強度は、比較的代謝安定性であり、かつ高効率のRNア
ーゼL用の活性剤をもたらす。
合強度は、比較的代謝安定性であり、かつ高効率のRNア
ーゼL用の活性剤をもたらす。
ASpASpAおよび対応の5′−モノホスフェートは、コ
ア−セルロースおよびrRNA開裂分析の両者においてRNア
ーゼL活性化を阻止することが観察された。それもに拘
らず、これら化合物はインタフェロン誘発の生物学的連
鎖におけるRNアーゼLの役割を評価する際にプローブと
して極めて有用である。最も重要なことに、pASpASpAは
生理学的濃度にてRNアーゼLの活性化を選択的に阻止
し、かつ特異性および非特異性ホスホジエステラーゼに
対し代謝上安定である。この分子は、RNアーゼL活性化
を選択的に防止する手段を与える。
ア−セルロースおよびrRNA開裂分析の両者においてRNア
ーゼL活性化を阻止することが観察された。それもに拘
らず、これら化合物はインタフェロン誘発の生物学的連
鎖におけるRNアーゼLの役割を評価する際にプローブと
して極めて有用である。最も重要なことに、pASpASpAは
生理学的濃度にてRNアーゼLの活性化を選択的に阻止
し、かつ特異性および非特異性ホスホジエステラーゼに
対し代謝上安定である。この分子は、RNアーゼL活性化
を選択的に防止する手段を与える。
慢性骨髄白血病(「CML」)を有する患者は、新規なr
RNA CML−特異性開裂生成物により証明されるように、
極めて高いRNアーゼL活性を示す。したがって、RNアー
ゼLの代謝上安定な阻止剤であるpASpASpAは、骨髄性白
血病の処置に有用な用途を有する。
RNA CML−特異性開裂生成物により証明されるように、
極めて高いRNアーゼL活性を示す。したがって、RNアー
ゼLの代謝上安定な阻止剤であるpASpASpAは、骨髄性白
血病の処置に有用な用途を有する。
pASpASpAは、現在まで報告されている最も効果的なRN
アーゼLの阻止剤である。さらに、そのRNアーゼL阻止
作用にも拘らず、pASpASpAはHIV逆転写酵素活性および
タバコモザイク病ウィルスの複製を阻止することが観察
された。
アーゼLの阻止剤である。さらに、そのRNアーゼL阻止
作用にも拘らず、pASpASpAはHIV逆転写酵素活性および
タバコモザイク病ウィルスの複製を阻止することが観察
された。
医薬用途のため、本発明による化合物は医薬上許容し
うるキャリヤにて、たとえば溶液、懸濁物、錠剤、カプ
セル、軟膏、エリキシルおよび注射組成物などとして作
成することができる。これらはウィルス感染を受けた患
者に投与される。投与量は感染の性質および程度、病気
の段階、並びに系統的に投与する場合には感染した患者
の体型および体重に依存する。
うるキャリヤにて、たとえば溶液、懸濁物、錠剤、カプ
セル、軟膏、エリキシルおよび注射組成物などとして作
成することができる。これらはウィルス感染を受けた患
者に投与される。投与量は感染の性質および程度、病気
の段階、並びに系統的に投与する場合には感染した患者
の体型および体重に依存する。
一般に、これら化合物は水溶性塩の形態で投与され
る。医薬上許容しうる水溶性塩は、たとえば活性化合物
のナトリウム、カリウムもしくはアンモニウム塩を包含
する。これらは水もしくは塩水溶液に容易に溶解する。
したがって、医薬用途の好適組成物は、塩型における所
望化合物の塩水溶液を含む。この組成物は、さらにたと
えば糖もしくは蛋白のような浸透圧バランスを維持する
薬剤を含有することもできる。酸型の化合物は比較的高
い酸度(約pH3)を有するので、塩型の化合物が好適で
ある。
る。医薬上許容しうる水溶性塩は、たとえば活性化合物
のナトリウム、カリウムもしくはアンモニウム塩を包含
する。これらは水もしくは塩水溶液に容易に溶解する。
したがって、医薬用途の好適組成物は、塩型における所
望化合物の塩水溶液を含む。この組成物は、さらにたと
えば糖もしくは蛋白のような浸透圧バランスを維持する
薬剤を含有することもできる。酸型の化合物は比較的高
い酸度(約pH3)を有するので、塩型の化合物が好適で
ある。
本発明の化合物は、たとえば単純胞疹、リノウィル
ス、エプスタイン・バール・ウィルス、麻疹ウィルス、
多発性硬化症(これはウィルス物質により生じうる)、
および各種のヒト免疫不全症ウィルス(「HIV」)、た
とえばHIV−1(これは皮膚T細胞リンパ腫を生ぜしめ
る)、HIV−2(これはセザリーリンパ腫を生ぜしめ
る)、およびHIV−3(これは後天的免疫不全症候群
(「AIDS」)の原因となる)のようなウィルス感染から
ヒトおよび動物を処置し或いは保護するために使用する
ことができる。本発明の化合物は、HIVの逆転写酵素活
性を阻止する。
ス、エプスタイン・バール・ウィルス、麻疹ウィルス、
多発性硬化症(これはウィルス物質により生じうる)、
および各種のヒト免疫不全症ウィルス(「HIV」)、た
とえばHIV−1(これは皮膚T細胞リンパ腫を生ぜしめ
る)、HIV−2(これはセザリーリンパ腫を生ぜしめ
る)、およびHIV−3(これは後天的免疫不全症候群
(「AIDS」)の原因となる)のようなウィルス感染から
ヒトおよび動物を処置し或いは保護するために使用する
ことができる。本発明の化合物は、HIVの逆転写酵素活
性を阻止する。
これら化合物を局部的に施して照射線、発癌物質もし
くはウィルス物質により生じた皮膚癌を処置することが
できる。この種の皮膚癌は皮膚T−細胞リンパ腫、セザ
ニ−リンパ腫、色素性乾皮症、毛細管拡張失調症、およ
びブルームス症候群を包含する。本発明による化合物を
含有した充分量の製剤を、病巣または感染領域を覆うよ
う施す。活性薬剤の有効濃度は約10-3〜10-5Mであり、1
0-4Mが好適である。
くはウィルス物質により生じた皮膚癌を処置することが
できる。この種の皮膚癌は皮膚T−細胞リンパ腫、セザ
ニ−リンパ腫、色素性乾皮症、毛細管拡張失調症、およ
びブルームス症候群を包含する。本発明による化合物を
含有した充分量の製剤を、病巣または感染領域を覆うよ
う施す。活性薬剤の有効濃度は約10-3〜10-5Mであり、1
0-4Mが好適である。
HIV逆転写酵素活性に対する2′,5′−ホスホロチオエ
ートオリゴアデニレートの作用 HIV逆転写酵素(RNA依存性DNAヌクレオチジル−トラ
ンスフェラーゼ)活性についてはポイエズ等、[B.J.ポ
イエズ、F.W.ラセッチ、A.F.ガズダー、P.S.ブン、J.D.
ミナおよびR.C.ガロ、プロシーディング・ナショナル・
アカデミー・サイエンス・USA、第77巻、第7415〜7419
頁(1980)]の方法の改変により分析した。
ートオリゴアデニレートの作用 HIV逆転写酵素(RNA依存性DNAヌクレオチジル−トラ
ンスフェラーゼ)活性についてはポイエズ等、[B.J.ポ
イエズ、F.W.ラセッチ、A.F.ガズダー、P.S.ブン、J.D.
ミナおよびR.C.ガロ、プロシーディング・ナショナル・
アカデミー・サイエンス・USA、第77巻、第7415〜7419
頁(1980)]の方法の改変により分析した。
培養したH−9細胞を106細胞/mlにてRPMI−1640培地
および20%熱失活した胎児牛血清にて増殖させた。細胞
懸濁物を遠心分離し(1000×g、10min)、かつ上澄液
を除去した。この細胞フリーの上澄液からウィルス粒子
を沈澱させ、この上澄液に0.3mlの4M NaClと3.6mlの30
%(重量/容量)ポリエチレングリコールを添加した。
懸濁物を、15,000×gにて0℃で30分間遠心分離した後
に2時間にわたり氷上に置いた。沈澱物を200μlの50
%グリセリン(容量/容量)/25mMトリス−HCl(pH7.
5)/5mMジチオスレイトール/50mMKCl/0.025%トリトン
X−100に再懸濁させた。ウィルス粒子を、100μlの0.
9%のトリトンX−100/1.5M KClの添加により溶菌させ
た。逆転写酵素分析は、次のものを含有する100μlの
最終反応容積にて溶菌ウィルス溶液10μlを用い37℃に
て1時間行なった:40mMトリス−HCl(pH7.8)、4mMジチ
オスレイトール、45mM KCl、および2.5μgの雛型プラ
イマー[ポリ(A)−dT15、0.5μg/μl](10mMの最
終Mg++濃度)。この時点で、10μlの2′,5′−ホスホ
ロチオエートオリゴアデニレートを200μモルの最終濃
度まで添加した。反応混合物は、さらに4μモルの
[H3]dTTPをも含有する。反応を冷5%トリクロル酢酸
の添加により停止させ、かつニトロセルロース円盤を通
して濾過した。これら円盤を乾燥させ、かつ円盤に結合
した放射能を測定した。逆転写酵素活性は、比較に対す
る%として現す。
および20%熱失活した胎児牛血清にて増殖させた。細胞
懸濁物を遠心分離し(1000×g、10min)、かつ上澄液
を除去した。この細胞フリーの上澄液からウィルス粒子
を沈澱させ、この上澄液に0.3mlの4M NaClと3.6mlの30
%(重量/容量)ポリエチレングリコールを添加した。
懸濁物を、15,000×gにて0℃で30分間遠心分離した後
に2時間にわたり氷上に置いた。沈澱物を200μlの50
%グリセリン(容量/容量)/25mMトリス−HCl(pH7.
5)/5mMジチオスレイトール/50mMKCl/0.025%トリトン
X−100に再懸濁させた。ウィルス粒子を、100μlの0.
9%のトリトンX−100/1.5M KClの添加により溶菌させ
た。逆転写酵素分析は、次のものを含有する100μlの
最終反応容積にて溶菌ウィルス溶液10μlを用い37℃に
て1時間行なった:40mMトリス−HCl(pH7.8)、4mMジチ
オスレイトール、45mM KCl、および2.5μgの雛型プラ
イマー[ポリ(A)−dT15、0.5μg/μl](10mMの最
終Mg++濃度)。この時点で、10μlの2′,5′−ホスホ
ロチオエートオリゴアデニレートを200μモルの最終濃
度まで添加した。反応混合物は、さらに4μモルの
[H3]dTTPをも含有する。反応を冷5%トリクロル酢酸
の添加により停止させ、かつニトロセルロース円盤を通
して濾過した。これら円盤を乾燥させ、かつ円盤に結合
した放射能を測定した。逆転写酵素活性は、比較に対す
る%として現す。
そのデータを第5表に示す。これら化合物を、それぞ
れ別の群の比較を有する2群として上記の方法で分析し
た。反応1〜4の化合物は、187×103cpmとした比較No.
1に対し分析した。反応5〜13に用いた化合物は、273×
103cpmとした比較No.2に対し分析した。
れ別の群の比較を有する2群として上記の方法で分析し
た。反応1〜4の化合物は、187×103cpmとした比較No.
1に対し分析した。反応5〜13に用いた化合物は、273×
103cpmとした比較No.2に対し分析した。
p3A3、pA3およびA3は哺乳動物細胞に存在するが、モ
ノホスフェートのみがHIV逆転写酵素を阻止する。他
方、本発明のコア化合物は、HIV逆転写酵素を阻止する
ことが観察される。本発明の化合物(反応No.5、6、
7、9、10、11、12および13)は全て転写酵素を或る程
度阻止するが、四量体が特に効果的である。
ノホスフェートのみがHIV逆転写酵素を阻止する。他
方、本発明のコア化合物は、HIV逆転写酵素を阻止する
ことが観察される。本発明の化合物(反応No.5、6、
7、9、10、11、12および13)は全て転写酵素を或る程
度阻止するが、四量体が特に効果的である。
本発明の化合物は約10μモル〜約200μモルの量で投
与されて、HIV逆転写酵素を阻止すると共にHIVを処置す
ることができる。
与されて、HIV逆転写酵素を阻止すると共にHIVを処置す
ることができる。
さらに、これら化合物は植物感染ウィルス、特にタバ
コモザイク病ウィルスに対し抗ウィルス活性を有する。
同様な結果がカブ、キウリ、ランなどの植物における壊
死を生ぜしめる他のウィルスに対しても得られる。この
種のウィルスは、限定はしないが、タバコ脈斑病ウィル
ス、小水胞性腔内炎ウィルス、ワクシニアウィルス、カ
ブ壊死ウィルスおよびシンビジュウム・ランウィルスを
包含する。
コモザイク病ウィルスに対し抗ウィルス活性を有する。
同様な結果がカブ、キウリ、ランなどの植物における壊
死を生ぜしめる他のウィルスに対しても得られる。この
種のウィルスは、限定はしないが、タバコ脈斑病ウィル
ス、小水胞性腔内炎ウィルス、ワクシニアウィルス、カ
ブ壊死ウィルスおよびシンビジュウム・ランウィルスを
包含する。
これら化合物は葉表面の擦傷、エアロゾル噴霧、土壌
処理、噴霧もしくは散布による局部施用により植物に対
し効果的に投与することができる。
処理、噴霧もしくは散布による局部施用により植物に対
し効果的に投与することができる。
効果的な抗ウィルス組成物は、1種もしくはそれ以上
の本発明による化合物を適当なキャリヤ材料と組合せて
形成することができる。医薬用途には個々の立体異性体
が好適であるが、1種もしくはそれ以上の立体異性体の
混合物も農業用途に使用することができる。さらに、活
性化合物はウィルスを植物に運ぶ、たとえばアブラ虫、
アザミウマおよびシロバエのような活性ベクターに噴霧
して投与することもできる。投与量は感染の程度に依存
する。
の本発明による化合物を適当なキャリヤ材料と組合せて
形成することができる。医薬用途には個々の立体異性体
が好適であるが、1種もしくはそれ以上の立体異性体の
混合物も農業用途に使用することができる。さらに、活
性化合物はウィルスを植物に運ぶ、たとえばアブラ虫、
アザミウマおよびシロバエのような活性ベクターに噴霧
して投与することもできる。投与量は感染の程度に依存
する。
本発明の化合物は発芽前の植物種子に施して、胚芽プ
ラズマに含有されるウィルスを抑制することができる。
種子を、1種もしくはそれ以上の化合物を含有するポリ
エチレングリコール(「PEG」)の溶液に浸漬すること
ができる。
ラズマに含有されるウィルスを抑制することができる。
種子を、1種もしくはそれ以上の化合物を含有するポリ
エチレングリコール(「PEG」)の溶液に浸漬すること
ができる。
PEGは種子を生理学的活性にして拘束する。PEGに対す
る活性化合物の相対的濃度は、処理する種子の種類に既
存する。
る活性化合物の相対的濃度は、処理する種子の種類に既
存する。
植物は、約10-1〜約10-2M程度の活性成分を含有する
水性組成物で効果的に処理される。本発明の化合物は、
極めて低い濃度で施すことができる。植物表面に対する
活性成分の有効量は約10-8〜約10-12モル/植物表面積
1cm2であり、約10-10〜約10-12モル/cm2が好適であ
る。1,000cm2の典型的なタバコ植物につき、10-5Mの化
合物が有効である。この割合にて、1ポンドの活性成分
は2×108のタバコ植物を処理するのに充分である。
水性組成物で効果的に処理される。本発明の化合物は、
極めて低い濃度で施すことができる。植物表面に対する
活性成分の有効量は約10-8〜約10-12モル/植物表面積
1cm2であり、約10-10〜約10-12モル/cm2が好適であ
る。1,000cm2の典型的なタバコ植物につき、10-5Mの化
合物が有効である。この割合にて、1ポンドの活性成分
は2×108のタバコ植物を処理するのに充分である。
農業用途には、これら化合物は水溶性塩、たとえばア
ンモニウムもしくはカリウム塩として有利に投与され
る。一般に、食用植物を処理するにはナトリウム塩は回
避される。
ンモニウムもしくはカリウム塩として有利に投与され
る。一般に、食用植物を処理するにはナトリウム塩は回
避される。
本発明の化合物は、水中に特に低濃度で容易に溶解す
る。農業用の水性組成物は必要に応じ付着剤および/ま
たはUV−安定剤を含有することができる。この種の薬剤
は当業者に周知されている。脂肪酸(1%)が展延付着
剤として有用である。効果的なUV−安定剤は、たとえば
p−アミノ安息香酸を包含する。
る。農業用の水性組成物は必要に応じ付着剤および/ま
たはUV−安定剤を含有することができる。この種の薬剤
は当業者に周知されている。脂肪酸(1%)が展延付着
剤として有用である。効果的なUV−安定剤は、たとえば
p−アミノ安息香酸を包含する。
無傷タバコ植物におけるタバコモザイク病ウィルス(TM
V)の複製に対する2′,5′−ホスホロチオエートオリ
ゴアデニレートの作用 植物ウィルスに対する2′,5′−ホスホロチオエート
オリゴアデニレートの効果を、無傷ニコチアナ・グルチ
ノーサ(Nicotiana glutinosa)植物につき感染性試験
によって次のように示した。
V)の複製に対する2′,5′−ホスホロチオエートオリ
ゴアデニレートの作用 植物ウィルスに対する2′,5′−ホスホロチオエート
オリゴアデニレートの効果を、無傷ニコチアナ・グルチ
ノーサ(Nicotiana glutinosa)植物につき感染性試験
によって次のように示した。
カーボランダム(400メッシュ)を葉上に軽く振りか
けた。1ml当り0.2μgのTMVと2×10-5Mの2′,5′−ホ
スホロチオエートオリゴアデニレートを燐酸塩緩衝液中
に含有する溶液を、N.グルチノーサの半分の葉に手袋を
はめた指またはピペットで施した。残り半分の葉を比較
(TMVを含有するが活性化合物を含有しない緩衝溶液を
接種)とした。感染を約1500ルックスの連続照射の下で
48時間にわたり進行させ、この時点で局部的なウィルス
病巣が出現した。TMV複製の阻止を、比較の半分の葉に
対比した2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレ
ート処理された半分の葉で生ずる局部的病巣の%として
計算した。そのデータを第6表に示す。
けた。1ml当り0.2μgのTMVと2×10-5Mの2′,5′−ホ
スホロチオエートオリゴアデニレートを燐酸塩緩衝液中
に含有する溶液を、N.グルチノーサの半分の葉に手袋を
はめた指またはピペットで施した。残り半分の葉を比較
(TMVを含有するが活性化合物を含有しない緩衝溶液を
接種)とした。感染を約1500ルックスの連続照射の下で
48時間にわたり進行させ、この時点で局部的なウィルス
病巣が出現した。TMV複製の阻止を、比較の半分の葉に
対比した2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレ
ート処理された半分の葉で生ずる局部的病巣の%として
計算した。そのデータを第6表に示す。
非感染植物を2×10-6Mおよび2×10-5Mの2′,5′−
ホスホロチオエートコアおよび5′−モノホスフェート
同族体で処理した。2週間の試験期間中に、毒性(葉緑
素分解もしくは壊死)は観察されなかった。
ホスホロチオエートコアおよび5′−モノホスフェート
同族体で処理した。2週間の試験期間中に、毒性(葉緑
素分解もしくは壊死)は観察されなかった。
試験した10種のホスホロチオエート三量体および四量
体コア並びに5′−モノホスフェートのうち、SpSp
ホスホロチオエート三量体コアはTMV複製を最大程度(8
0%)で阻止した。同様に、対応の四量体コアSpSp
Spは70%にてTMV複製を阻止した。RpSpSp四量
体コアは80%でTMV複製を阻止した。ASpASpA、ASpASpA
SpAおよびARpASpASpAによる顕著な阻止、並びにARpASpA
による70%阻止は、標準A3による僅か16%の阻止と対比
される。キラル特性、並びに増大した代謝安定性の性質
を導入することにより、2−5Aよりも本発明の化合物に
よるTMV複製の阻止増加が顕著となる。
体コア並びに5′−モノホスフェートのうち、SpSp
ホスホロチオエート三量体コアはTMV複製を最大程度(8
0%)で阻止した。同様に、対応の四量体コアSpSp
Spは70%にてTMV複製を阻止した。RpSpSp四量
体コアは80%でTMV複製を阻止した。ASpASpA、ASpASpA
SpAおよびARpASpASpAによる顕著な阻止、並びにARpASpA
による70%阻止は、標準A3による僅か16%の阻止と対比
される。キラル特性、並びに増大した代謝安定性の性質
を導入することにより、2−5Aよりも本発明の化合物に
よるTMV複製の阻止増加が顕著となる。
慣用のキャリヤにより投与する他、本発明の化合物は
各種の特殊オリゴヌクレオチドもしくは核酸供給技術に
よって投与することができる。2−5Aおよびその同族体
は、単層リポソームに有利にカプセル化してモノクロー
ナル抗体により細胞に供給される[ベイヤード等、ヨー
ロピアン・ジャーナル・バイオケミストリー、第151
巻、第319〜325頁(1985)]。再偏成されたセンダイ・
ウィルス・エンベロプが、RNAおよびDNAを細胞に供給す
るべく有利に使用されている[アラッド等、バイオヒミ
ーク・バイオフィジーク・アクタ、第859巻、第88〜94
頁(1986)]。これらの技術を用いて、本発明による
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートを細
胞中に導入することができる。
各種の特殊オリゴヌクレオチドもしくは核酸供給技術に
よって投与することができる。2−5Aおよびその同族体
は、単層リポソームに有利にカプセル化してモノクロー
ナル抗体により細胞に供給される[ベイヤード等、ヨー
ロピアン・ジャーナル・バイオケミストリー、第151
巻、第319〜325頁(1985)]。再偏成されたセンダイ・
ウィルス・エンベロプが、RNAおよびDNAを細胞に供給す
るべく有利に使用されている[アラッド等、バイオヒミ
ーク・バイオフィジーク・アクタ、第859巻、第88〜94
頁(1986)]。これらの技術を用いて、本発明による
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートを細
胞中に導入することができる。
さらに、本発明の化合物は親油性基がたとえばコア化
合物の5′−末端ヒドロキシル基に結合したプロドラグ
の形態で投与することもできると考えられる。
合物の5′−末端ヒドロキシル基に結合したプロドラグ
の形態で投与することもできると考えられる。
2′,5′−ホスホロチオエート四量体アデニレートの結
合 ポリ(L−リジン)は、2−5Aおよびその他の巨大分
子に対する有用な膜キャリヤとして記載されている[ベ
イヤード等、バイオケミストリー、第25巻、第3730〜37
26頁(1986)]。本発明の四量体コアおよびホスホリル
化四量体は、ポリ(L−リジン)結合体として便利に投
与することができる。結合体は、2個のアルデヒド基を
四量体の2′末端にリボース残基のα−グリコール基の
過沃素酸酸化で導入して形成される。次いで、得られた
アルデヒド基をポリ(L−リジン)におけるリジン残基
のε−アミノ基にシッフ塩基形成によりランダム結合さ
せ、次いでシアノ硼水素化ナトリウムによりpH8.0で還
元する。この手順は2′,3′−末端リボース環をモルホ
リン構造に変換する。ポリ(L−リジン)ペプチドは、
好ましくは約60〜約70個のリジン残基を含有する。約5
〜約10個のリジン残基が、このようにして四量体成分に
結合される。得られる2′,5′−ホスホロチオエート/
ポリ(L−リジン)結合体を、次いでセファデックスG
−50カラムでのゲル濾過クロマトグラフィーにより単離
することができる。
合 ポリ(L−リジン)は、2−5Aおよびその他の巨大分
子に対する有用な膜キャリヤとして記載されている[ベ
イヤード等、バイオケミストリー、第25巻、第3730〜37
26頁(1986)]。本発明の四量体コアおよびホスホリル
化四量体は、ポリ(L−リジン)結合体として便利に投
与することができる。結合体は、2個のアルデヒド基を
四量体の2′末端にリボース残基のα−グリコール基の
過沃素酸酸化で導入して形成される。次いで、得られた
アルデヒド基をポリ(L−リジン)におけるリジン残基
のε−アミノ基にシッフ塩基形成によりランダム結合さ
せ、次いでシアノ硼水素化ナトリウムによりpH8.0で還
元する。この手順は2′,3′−末端リボース環をモルホ
リン構造に変換する。ポリ(L−リジン)ペプチドは、
好ましくは約60〜約70個のリジン残基を含有する。約5
〜約10個のリジン残基が、このようにして四量体成分に
結合される。得られる2′,5′−ホスホロチオエート/
ポリ(L−リジン)結合体を、次いでセファデックスG
−50カラムでのゲル濾過クロマトグラフィーにより単離
することができる。
ポリ(L−リジン)/2′,5′−ホスホロチオエートオ
リゴアデニレート結合体は式: [式中、qは約60〜約70の整数であり、かつRはラン
ダムにR′または式: の基である] を有する。R基の約5〜約10個がR′からなっている。
R′基は次式: [式中、mは0、1、2もしくは3である] を有する。
リゴアデニレート結合体は式: [式中、qは約60〜約70の整数であり、かつRはラン
ダムにR′または式: の基である] を有する。R基の約5〜約10個がR′からなっている。
R′基は次式: [式中、mは0、1、2もしくは3である] を有する。
これら結合体は、ベイヤード等、バイオケミストリ
ー、第25巻、第3730〜3736頁(1986)の方法により有利
に製造することができる。
ー、第25巻、第3730〜3736頁(1986)の方法により有利
に製造することができる。
実施例18 ポリ(L−リジン)/2′,5′−ホスホロチオエートオリ
ゴアデニレート結合体の製造 4μlのメタ過沃素酸ナトリウム(0.1M酢酸ナトリウ
ム緩衝液、pH4.75における0.6μモル)を、蒸溜水400μ
lにおける2′,5′−ホスホロチオエート四量体アデニ
レートの氷冷溶液に添加した。この反応混合物を氷上で
30分間撹拌し、400μlのポリ(L−リジン)(0.2M燐
酸塩緩衝液、pH8.0における0.14μモル)と200μlのシ
アノ硼水素化ナトリウム(0.2M燐酸塩緩衝液、pH8.0に
おける20μモル)とを添加した。混合物を室温にて2時
間培養し、次いで0.1M酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.75)
で平衡化されたセファデックテG−50カラムに加えた。
各フラクションをそのホスホロチオエートオリゴアデニ
レート/ポリ(L−リジン)含有量につき、ラウリー
等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミストリー、第19
3巻、第265〜275頁(1951)に記載された方法、および2
60nmにおける吸光度によって分析した。
ゴアデニレート結合体の製造 4μlのメタ過沃素酸ナトリウム(0.1M酢酸ナトリウ
ム緩衝液、pH4.75における0.6μモル)を、蒸溜水400μ
lにおける2′,5′−ホスホロチオエート四量体アデニ
レートの氷冷溶液に添加した。この反応混合物を氷上で
30分間撹拌し、400μlのポリ(L−リジン)(0.2M燐
酸塩緩衝液、pH8.0における0.14μモル)と200μlのシ
アノ硼水素化ナトリウム(0.2M燐酸塩緩衝液、pH8.0に
おける20μモル)とを添加した。混合物を室温にて2時
間培養し、次いで0.1M酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.75)
で平衡化されたセファデックテG−50カラムに加えた。
各フラクションをそのホスホロチオエートオリゴアデニ
レート/ポリ(L−リジン)含有量につき、ラウリー
等、ジャーナル・バイオロジカル・ケミストリー、第19
3巻、第265〜275頁(1951)に記載された方法、および2
60nmにおける吸光度によって分析した。
ポリ(L−リジン)に対する2′,5′−ホスホロチオ
エート四量体の結合は、最適なRNアーゼL結合および活
性化につき3個の2′,5′−結合ホスホロチオエートア
デニル残基を無傷のまま残した。
エート四量体の結合は、最適なRNアーゼL結合および活
性化につき3個の2′,5′−結合ホスホロチオエートア
デニル残基を無傷のまま残した。
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートのリ
ポソームカプセル化 本発明による化合物のカプセル化は、細胞中へ導入す
るための他の魅力的な非破壊技術である。リポソームカ
プセル化は、コンドロシ等、FEBSレタース、第120巻、
第37〜40頁(1980)に記載された技術にしたがって有利
に行なうことができる。
ポソームカプセル化 本発明による化合物のカプセル化は、細胞中へ導入す
るための他の魅力的な非破壊技術である。リポソームカ
プセル化は、コンドロシ等、FEBSレタース、第120巻、
第37〜40頁(1980)に記載された技術にしたがって有利
に行なうことができる。
実施例19 2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートを充
填した大きい単層小胞(リポソーム)の作成 要するに、牛の脳からの燐脂質混合物(シグマ・ケミ
カル・カンパニー社、80〜85%のホスファチジルセリン
と残部の他の脳リピド15%で構成されたホルヒ・フラク
ションIII、35mg)を5mlの緩衝液A(0.1MのNaCl、2mM
のヒスチジン、2mMのN−トリス(ヒドロキシメチル)
メチル−2−アミノエタンスルホン酸(「TES」)、0.4
mMのEDTA(pH7.4))に回動により懸濁させた。この懸
濁物を窒素下で0℃にて10分間にわたり音波処理した。
さらに懸濁物を800mMのCaClの125μlを添加してCa++の
最終濃度を20mMに調整した後に37℃にて1時間培養し
た。この得られた沈澱物を遠心分離し(2500×g、10mi
n)、回動および100μlの1×10-4Mの2′,5′−ホス
ホロチオエートオリゴアデユレートとの混合により沈降
させ、これを燐酸塩緩衝塩水に溶解させた。次いで、ED
TAの最終濃度を、400μlの緩衝液B(150mMのEDTA(pH
7.4)、0.1MのNaCl、2mMのヒスチジン、2mMのTES)の添
加により120mMに調整した。この混合物を37℃にて30分
間培養した後、リポソームが形成した。過剰のEDTAおよ
び非カプセル化成分を除去し、その際リポソームを燐酸
塩緩衝塩水で平衡化されたセファデックスG−25カラム
に通過させた。2′,5′−ホスホロチオエートオリゴア
デニレートの約10%が、この手順によりリポソーム中に
カプセル化された。このリポソーム懸濁物は、4℃にて
作成後の1週間にわたり安定であった。
填した大きい単層小胞(リポソーム)の作成 要するに、牛の脳からの燐脂質混合物(シグマ・ケミ
カル・カンパニー社、80〜85%のホスファチジルセリン
と残部の他の脳リピド15%で構成されたホルヒ・フラク
ションIII、35mg)を5mlの緩衝液A(0.1MのNaCl、2mM
のヒスチジン、2mMのN−トリス(ヒドロキシメチル)
メチル−2−アミノエタンスルホン酸(「TES」)、0.4
mMのEDTA(pH7.4))に回動により懸濁させた。この懸
濁物を窒素下で0℃にて10分間にわたり音波処理した。
さらに懸濁物を800mMのCaClの125μlを添加してCa++の
最終濃度を20mMに調整した後に37℃にて1時間培養し
た。この得られた沈澱物を遠心分離し(2500×g、10mi
n)、回動および100μlの1×10-4Mの2′,5′−ホス
ホロチオエートオリゴアデユレートとの混合により沈降
させ、これを燐酸塩緩衝塩水に溶解させた。次いで、ED
TAの最終濃度を、400μlの緩衝液B(150mMのEDTA(pH
7.4)、0.1MのNaCl、2mMのヒスチジン、2mMのTES)の添
加により120mMに調整した。この混合物を37℃にて30分
間培養した後、リポソームが形成した。過剰のEDTAおよ
び非カプセル化成分を除去し、その際リポソームを燐酸
塩緩衝塩水で平衡化されたセファデックスG−25カラム
に通過させた。2′,5′−ホスホロチオエートオリゴア
デニレートの約10%が、この手順によりリポソーム中に
カプセル化された。このリポソーム懸濁物は、4℃にて
作成後の1週間にわたり安定であった。
2′,5′−ホスホロチオエートオリゴアデニレートを含
有する再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプの
作成 再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプを、細
胞中にポリヌクレオチドを導入するための効果的ベヒク
ルとして使用することができる。アラッド等、バイオヒ
ミカ・エ・バイオフィジカ・アクタ、第859巻、第88〜9
4頁(1986)は、再編成されたセンダイ・ウィルス・エ
ンベロプを用いた培養細胞中へのポリ(I)・ポリ
(C)の導入を開示している。このように加えられた再
編成センダイ・ウィルス・エンベロプの融合は、受容体
細胞シトプラスム中への包封巨大分子の導入をもたら
す。
有する再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプの
作成 再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプを、細
胞中にポリヌクレオチドを導入するための効果的ベヒク
ルとして使用することができる。アラッド等、バイオヒ
ミカ・エ・バイオフィジカ・アクタ、第859巻、第88〜9
4頁(1986)は、再編成されたセンダイ・ウィルス・エ
ンベロプを用いた培養細胞中へのポリ(I)・ポリ
(C)の導入を開示している。このように加えられた再
編成センダイ・ウィルス・エンベロプの融合は、受容体
細胞シトプラスム中への包封巨大分子の導入をもたら
す。
再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプは無傷
センダイ・ウィルス粒子の洗剤可溶化によって得ること
ができる。再編成エンベロプは、ウィルス・エンベロプ
燐脂質とそのグリコ蛋白とよりなるフソゲニック小胞で
あって、ウィルスゲノムRNAを欠如する。
センダイ・ウィルス粒子の洗剤可溶化によって得ること
ができる。再編成エンベロプは、ウィルス・エンベロプ
燐脂質とそのグリコ蛋白とよりなるフソゲニック小胞で
あって、ウィルスゲノムRNAを欠如する。
融合媒介の微量注射のための再編成センダイ・ウィル
ス・エンベロプ中への本発明による化合物の混入は、ア
ラッド等の方法にしたがって行なうことができる。要す
るに、センダイ・ウィルス粒子(蛋白1.5mg)のペレッ
トを、10%トリトンX−100と100mMのNaClと50mMのトリ
ス−HCl(pH7.4)と0.1mMの弗化アェニルメチルスルホ
ニルとを含有する溶液(トリトンX−100:蛋白の比2:
1、w/w)30μlに溶解させた。遠心分離の後に得られた
透明上澄液に対し、溶液A(160mMのNaCl、20mMのトリ
ス−HCl(pH7.4))に溶解された2′,5′−ホスホロチ
オエートオリゴアデニレートを、5〜20mg/mlの活性成
分の最終濃度および150μlの最終容積を与えるよう添
加した。トリトンX−100を、40mgのSM−2ビオ−ビー
ズの直接添加により上澄液から除去した。得られた濁り
懸濁物(再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプ
を含有する)を100,000×gにて1時間遠心分離した。
約10%の初期ウィルス蛋白を含有するペレットを、次い
で25μg/mlの最終蛋白濃度を与えるよう溶液Aに懸濁さ
せた。
ス・エンベロプ中への本発明による化合物の混入は、ア
ラッド等の方法にしたがって行なうことができる。要す
るに、センダイ・ウィルス粒子(蛋白1.5mg)のペレッ
トを、10%トリトンX−100と100mMのNaClと50mMのトリ
ス−HCl(pH7.4)と0.1mMの弗化アェニルメチルスルホ
ニルとを含有する溶液(トリトンX−100:蛋白の比2:
1、w/w)30μlに溶解させた。遠心分離の後に得られた
透明上澄液に対し、溶液A(160mMのNaCl、20mMのトリ
ス−HCl(pH7.4))に溶解された2′,5′−ホスホロチ
オエートオリゴアデニレートを、5〜20mg/mlの活性成
分の最終濃度および150μlの最終容積を与えるよう添
加した。トリトンX−100を、40mgのSM−2ビオ−ビー
ズの直接添加により上澄液から除去した。得られた濁り
懸濁物(再編成されたセンダイ・ウィルス・エンベロプ
を含有する)を100,000×gにて1時間遠心分離した。
約10%の初期ウィルス蛋白を含有するペレットを、次い
で25μg/mlの最終蛋白濃度を与えるよう溶液Aに懸濁さ
せた。
本発明はその本質的思想および範囲を逸脱することな
く他の形態で実施することもでき、したがって本発明の
範囲は上記説明のみでなく後記請求の範囲を参照すべき
である。
く他の形態で実施することもでき、したがって本発明の
範囲は上記説明のみでなく後記請求の範囲を参照すべき
である。
Claims (35)
- 【請求項1】式: [式中、mは0、1、2もしくは3であり、nは1もし
くは2であり、かつインターヌクレオチドホスホロチオ
エート基: の少なくとも1個はSp配置である] を有する光学異性体である化合物、およびその水溶性
塩。 - 【請求項2】mが1である請求の範囲第1項記載の化合
物。 - 【請求項3】2′/3′端末アデニレート基に隣接するイ
ンターヌクレオチドホスホロチオエート基がSp配置で
ある請求の範囲第1項記載の化合物。 - 【請求項4】請求の範囲第1項記載の化合物である(R
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項5】請求の範囲第1項記載の化合物である(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項6】請求の範囲第1項記載の化合物である(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項7】請求の範囲第1項記載の化合物である5′
−O−ホスホリル−(Rp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項8】請求の範囲第1項記載の化合物である5′
−O−ホスホリル−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項9】請求の範囲第1項記載の化合物である5′
−O−ホスホリル−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシン。 - 【請求項10】請求の範囲第1項記載の化合物である
(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項11】請求の範囲第10項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項12】請求の範囲第10項記載の化合物である
(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(R
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項13】請求の範囲第12項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項14】請求の範囲第1項記載の化合物である
(Rp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項15】請求の範囲第14項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項16】請求の範囲第1項記載の化合物である
(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Rp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項17】請求の範囲第16項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項18】請求の範囲第1項記載の化合物である
(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(R
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項19】請求の範囲第18項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項20】請求の範囲第1項記載の化合物である
(Sp)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(S
p)−P−チオアデニリル−(2′−5′)−(Sp)
−P−チオアデニリル−(2′−5′)−アデノシン、
並びにその5′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェー
ト。 - 【請求項21】請求の範囲第20項記載の5′−モノホス
フェート。 - 【請求項22】再偏成されたセンダイ・ウィルス・エン
ベロプに含有された請求の範囲第1項記載の化合物から
なる抗ウィルス組成物。 - 【請求項23】リポソーム中にカプセル化された請求の
範囲第1項記載の化合物からなる抗ウィルス組成物。 - 【請求項24】請求の範囲第1項記載の化合物の抗ウィ
ルス上有効量を投与することからなる、人間を除く哺乳
動物におけるウィルス感染の抑制方法。 - 【請求項25】請求の範囲第2項記載の化合物の抗ウィ
ルス上有効量を投与することからなる、人間を除く哺乳
動物におけるウィルス感染の抑制方法。 - 【請求項26】請求の範囲第1項記載の化合物の抗ウィ
ルス上有効量を投与することからなる、植物におけるウ
ィルス感染の抑制方法。 - 【請求項27】請求の範囲第2項記載の化合物の抗ウィ
ルス上有効量を投与することからなる、植物におけるウ
ィルス感染の抑制方法。 - 【請求項28】次式: [式中、mは0、1、2もしくは3でありかつnは1も
しくは2である] の化合物またはその水溶性塩の抗ウィルス上有効量を投
与することからなる、植物におけるウィルス感染の抑制
方法。 - 【請求項29】化合物が(Sp)−P−チオアデニリル
−(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシンもしくはその5′−モノホ
スフェートである請求の範囲第28項記載の方法。 - 【請求項30】化合物が(Rp)−P−チオアデニリル
−(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシンである請求の範囲第28項記
載の方法。 - 【請求項31】化合物が(Rp)−P−チオアデニリル
−(2′−5′)−(Rp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシンもしくはその5′−モノホ
スフェートである請求の範囲第28項記載の方法。 - 【請求項32】化合物が(Rp)−P−チオアデニリル
−(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシンである請求の範囲第29項記
載の方法。 - 【請求項33】化合物が(Sp)−P−チオアデニリル
−(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−(Sp)−P−チオアデニリル−
(2′−5′)−アデノシンである請求の範囲第28項記
載の方法。 - 【請求項34】式: [式中、qは60〜70の整数であり、かつRはランダムに
R′であるか、または式: であり、かつR基の5〜10個はR′であり、ここでR′
は次式: (ここでmは0、1、2もしくは3である)を有する]
を有するポリ(L−リジン)と(2′−5′)−ホスホ
ロチオエートオリゴアデニレートとの結合体。 - 【請求項35】式: [式中、mは0、1、2もしくは3であり、かつnは2
である] の化合物、およびその水溶性塩。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US112,591 | 1987-10-22 | ||
US07/112,591 US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1987-10-22 | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04500795A JPH04500795A (ja) | 1992-02-13 |
JP2733777B2 true JP2733777B2 (ja) | 1998-03-30 |
Family
ID=22344763
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63509144A Expired - Fee Related JP2733777B2 (ja) | 1987-10-22 | 1988-10-18 | 2′,5′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US4924624A (ja) |
EP (2) | EP0389521B1 (ja) |
JP (1) | JP2733777B2 (ja) |
AT (2) | ATE135579T1 (ja) |
AU (1) | AU2628088A (ja) |
CA (1) | CA1339953C (ja) |
DE (2) | DE3855135T2 (ja) |
WO (1) | WO1989003683A1 (ja) |
Families Citing this family (842)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5643889A (en) * | 1984-07-11 | 1997-07-01 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Pennsylvania | Cholesterol conjugates of 2'5'-oligoadenylate derivatives and antiviral uses thereof |
US5550111A (en) * | 1984-07-11 | 1996-08-27 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof |
US4924624A (en) * | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
JP2976436B2 (ja) * | 1988-04-27 | 1999-11-10 | 味の素株式会社 | 新規オリゴリボヌクレオチド誘導体及び抗ウイルス剤への使用 |
ATE190981T1 (de) * | 1989-10-24 | 2000-04-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | 2'-modifizierte nukleotide |
US5635488A (en) * | 1991-10-15 | 1997-06-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds having phosphorodithioate linkages of high chiral purity |
US6339066B1 (en) | 1990-01-11 | 2002-01-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotides which have phosphorothioate linkages of high chiral purity and which modulate βI, βII, γ, δ, Ε, ζ and η isoforms of human protein kinase C |
US5587361A (en) * | 1991-10-15 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5620963A (en) * | 1991-10-15 | 1997-04-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating protein kinase C having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5470967A (en) * | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
US6446032B1 (en) * | 1990-09-21 | 2002-09-03 | Massachusetts Institute Of Technology | Designing compounds specifically inhibiting ribonucleic acid by binding to the minor groove |
US6041910A (en) * | 1997-09-22 | 2000-03-28 | Jervis B. Webb Company | Baggage pusher device and system |
GB9111967D0 (en) * | 1991-06-04 | 1991-07-24 | Erba Carlo Spa | 2,5'-nucleotide analogs as antiviral agents |
US5571799A (en) * | 1991-08-12 | 1996-11-05 | Basco, Ltd. | (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response |
WO1993003733A1 (en) * | 1991-08-12 | 1993-03-04 | Basco, Ltd. | Syntheses, pharmaceutical composition and method of application of (2'-5') oligoadenylate analogues |
US5607923A (en) * | 1991-10-15 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating cytomegalovirus having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5661134A (en) * | 1991-10-15 | 1997-08-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating Ha-ras or Ki-ras having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5576302A (en) * | 1991-10-15 | 1996-11-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating hepatitis C virus having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5654284A (en) * | 1991-10-15 | 1997-08-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating RAF kinase having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5599797A (en) * | 1991-10-15 | 1997-02-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US6335434B1 (en) | 1998-06-16 | 2002-01-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc., | Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates |
US8153602B1 (en) | 1991-11-19 | 2012-04-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Composition and methods for the pulmonary delivery of nucleic acids |
KR100272326B1 (ko) * | 1992-03-12 | 2000-11-15 | 마틴 에스. 돌프 | 이중 작용을 하는 2',5'-올리고아데닐레이트 항비루스성 유도체와 그의 용도 |
US6537973B1 (en) | 1992-03-16 | 2003-03-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide inhibition of protein kinase C |
US20040127446A1 (en) * | 1992-05-14 | 2004-07-01 | Lawrence Blatt | Oligonucleotide mediated inhibition of hepatitis B virus and hepatitis C virus replication |
US5532130A (en) * | 1993-07-20 | 1996-07-02 | Dyad Pharmaceutical Corporation | Methods and compositions for sequence-specific hybridization of RNA by 2'-5' oligonucleotides |
AU679566B2 (en) | 1993-09-03 | 1997-07-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US6653458B1 (en) | 1993-09-03 | 2003-11-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modified oligonucleotides |
US7276335B1 (en) * | 1993-09-29 | 2007-10-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Designing compounds specifically inhibiting ribonucleic acid function |
DE69529680T2 (de) * | 1994-09-14 | 2003-08-14 | Univ Temple | 2',5'-phosphorthioat/phosphodiester-oligoadenylate und ihre antiviralen verwendungen |
US6420549B1 (en) | 1995-06-06 | 2002-07-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide analogs having modified dimers |
US5855911A (en) * | 1995-08-29 | 1999-01-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal phosphodiester, phosphorothioate, and P-ethoxy oligonucleotides |
US5854033A (en) | 1995-11-21 | 1998-12-29 | Yale University | Rolling circle replication reporter systems |
US20070275921A1 (en) * | 1996-06-06 | 2007-11-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric Compounds That Facilitate Risc Loading |
US20050119470A1 (en) * | 1996-06-06 | 2005-06-02 | Muthiah Manoharan | Conjugated oligomeric compounds and their use in gene modulation |
US20040171031A1 (en) * | 1996-06-06 | 2004-09-02 | Baker Brenda F. | Sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
US20040171028A1 (en) * | 1996-06-06 | 2004-09-02 | Baker Brenda F. | Phosphorous-linked oligomeric compounds and their use in gene modulation |
US20050042647A1 (en) * | 1996-06-06 | 2005-02-24 | Baker Brenda F. | Phosphorous-linked oligomeric compounds and their use in gene modulation |
US7812149B2 (en) | 1996-06-06 | 2010-10-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations |
WO2005121368A1 (en) * | 2004-06-03 | 2005-12-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric gapped oligomeric compositions |
US9096636B2 (en) | 1996-06-06 | 2015-08-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation |
US20030044941A1 (en) | 1996-06-06 | 2003-03-06 | Crooke Stanley T. | Human RNase III and compositions and uses thereof |
US5898031A (en) | 1996-06-06 | 1999-04-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotides for cleaving RNA |
US6111085A (en) * | 1996-09-13 | 2000-08-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbamate-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US6977244B2 (en) * | 1996-10-04 | 2005-12-20 | Board Of Regents, The University Of Texas Systems | Inhibition of Bcl-2 protein expression by liposomal antisense oligodeoxynucleotides |
US6468991B1 (en) | 1997-01-16 | 2002-10-22 | Cyclis Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating rhinoviral infections |
US5955446A (en) * | 1997-01-16 | 1999-09-21 | Pentose Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating herpes infections with 2',5'-oligoadenylate-2',3'-cyclophosphate compounds |
AU7804798A (en) | 1997-06-12 | 1998-12-30 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Base-modified derivatives of 2',5'-oligoadenylate and antiviral uses thereof |
WO1998056384A1 (en) | 1997-06-12 | 1998-12-17 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Aminoaklanoyl-linked conjugates of 2',5'-oligoadenylate and antiviral uses thereof |
ATE321882T1 (de) | 1997-07-01 | 2006-04-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zusammensetzungen und verfahren zur verabreichung von oligonukleotiden über die speiseröhre |
WO1999005160A2 (en) * | 1997-07-25 | 1999-02-04 | Hybridon, Inc. | Oligonuclotides having 3' terminal stereospecific phosphorothioates |
US7704962B1 (en) | 1997-10-03 | 2010-04-27 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Small oligonucleotides with anti-tumor activity |
US7285288B1 (en) | 1997-10-03 | 2007-10-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Inhibition of Bcl-2 protein expression by liposomal antisense oligodeoxynucleotides |
US6958148B1 (en) | 1998-01-20 | 2005-10-25 | Pericor Science, Inc. | Linkage of agents to body tissue using microparticles and transglutaminase |
US6919076B1 (en) | 1998-01-20 | 2005-07-19 | Pericor Science, Inc. | Conjugates of agents and transglutaminase substrate linking molecules |
US7321828B2 (en) * | 1998-04-13 | 2008-01-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | System of components for preparing oligonucleotides |
US20040186071A1 (en) * | 1998-04-13 | 2004-09-23 | Bennett C. Frank | Antisense modulation of CD40 expression |
CA2329252A1 (en) | 1998-05-21 | 1999-11-25 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Compositions and methods for topical delivery of oligonucleotides |
EP1080103A4 (en) * | 1998-05-21 | 2003-07-02 | Isis Pharmaceuticals Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR NON-PARENTERAL ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES |
US6461815B1 (en) | 1998-05-22 | 2002-10-08 | North Carolina State University | Antibacterial agents and methods of screening for the same |
US6867294B1 (en) | 1998-07-14 | 2005-03-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages |
US6242589B1 (en) | 1998-07-14 | 2001-06-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages |
US6225293B1 (en) | 1998-09-02 | 2001-05-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compounds for tracking the biodistribution of macromolecule-carrier combinations |
CA2344653A1 (en) | 1998-09-29 | 2000-04-06 | Gamida Cell Ltd. | Methods of controlling proliferation and differentiation of stem and progenitor cells |
US6077709A (en) | 1998-09-29 | 2000-06-20 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of Survivin expression |
US6300320B1 (en) | 1999-01-05 | 2001-10-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of c-jun using inhibitors of protein kinase C |
US6127124A (en) * | 1999-01-20 | 2000-10-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Fluorescence based nuclease assay |
US7098192B2 (en) | 1999-04-08 | 2006-08-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotide modulation of STAT3 expression |
US7534605B2 (en) | 1999-06-08 | 2009-05-19 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | CD44 polypeptides, polynucleotides encoding same, antibodies directed thereagainst and method of using same for diagnosing and treating inflammatory diseases |
US6656730B1 (en) | 1999-06-15 | 2003-12-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs |
US6593466B1 (en) | 1999-07-07 | 2003-07-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Guanidinium functionalized nucleotides and precursors thereof |
DE19940748A1 (de) * | 1999-08-27 | 2001-03-01 | Hugo Seinfeld | Arzneimittel enthaltend xenogene Oligo- oder/und Polyribonukleotide |
US6261840B1 (en) | 2000-01-18 | 2001-07-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of PTP1B expression |
US20020055479A1 (en) | 2000-01-18 | 2002-05-09 | Cowsert Lex M. | Antisense modulation of PTP1B expression |
US20030176385A1 (en) * | 2000-02-15 | 2003-09-18 | Jingfang Ju | Antisense modulation of protein expression |
WO2001079284A2 (en) * | 2000-04-13 | 2001-10-25 | Wight Thomas N | Therapeutic compounds and methods for formulating v3, a versican isoform |
US6680172B1 (en) | 2000-05-16 | 2004-01-20 | Regents Of The University Of Michigan | Treatments and markers for cancers of the central nervous system |
US6656700B2 (en) * | 2000-05-26 | 2003-12-02 | Amersham Plc | Isoforms of human pregnancy-associated protein-E |
US6686188B2 (en) * | 2000-05-26 | 2004-02-03 | Amersham Plc | Polynucleotide encoding a human myosin-like polypeptide expressed predominantly in heart and muscle |
US20060166227A1 (en) * | 2000-06-20 | 2006-07-27 | Stephen Kingsmore | Protein expression profiling |
US6323009B1 (en) * | 2000-06-28 | 2001-11-27 | Molecular Staging, Inc. | Multiply-primed amplification of nucleic acid sequences |
US8568766B2 (en) | 2000-08-24 | 2013-10-29 | Gattadahalli M. Anantharamaiah | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease |
US20020123474A1 (en) * | 2000-10-04 | 2002-09-05 | Shannon Mark E. | Human GTP-Rho binding protein2 |
EP1326892A2 (en) | 2000-10-12 | 2003-07-16 | University of Rochester | Compositions that inhibit proliferation of cancer cells |
US7767802B2 (en) | 2001-01-09 | 2010-08-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes |
KR20020069627A (ko) * | 2001-02-27 | 2002-09-05 | 동부한농화학 주식회사 | 육환의 아자슈거를 가진 뉴클레오타이드 유도체를 포함한포스포로티오에이트 올리고뉴클레오타이드 및 이들의에이즈 치료제로서의 새로운 용도 |
DE60232785D1 (de) | 2001-03-14 | 2009-08-13 | Myriad Genetics Inc | Tsg101-gag-wechselwirkung und ihre verwendung |
US20030148408A1 (en) | 2001-09-18 | 2003-08-07 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor |
KR100576674B1 (ko) | 2001-06-20 | 2006-05-10 | 제넨테크, 인크. | 종양의 진단 및 치료를 위한 방법 및 이를 위한 조성물 |
WO2003000707A2 (en) | 2001-06-21 | 2003-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of superoxide dismutase 1, soluble expression |
DE10133858A1 (de) | 2001-07-12 | 2003-02-06 | Aventis Pharma Gmbh | Synthetische doppelsträngige Oligonucleotide zur gezielten Hemmung der Genexpression |
US6822088B2 (en) | 2001-07-17 | 2004-11-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Synthesis of oligonucleotides on solid support |
US6964950B2 (en) | 2001-07-25 | 2005-11-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of C-reactive protein expression |
US7425545B2 (en) | 2001-07-25 | 2008-09-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of C-reactive protein expression |
US20030096772A1 (en) | 2001-07-30 | 2003-05-22 | Crooke Rosanne M. | Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression |
US7407943B2 (en) | 2001-08-01 | 2008-08-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of apolipoprotein B expression |
US20040096880A1 (en) * | 2001-08-07 | 2004-05-20 | Kmiec Eric B. | Compositions and methods for the treatment of diseases exhibiting protein misassembly and aggregation |
AU2002326589B2 (en) * | 2001-08-07 | 2008-06-05 | University Of Delaware | Compositions and methods for the prevention and treatment of Huntington's disease |
US7227014B2 (en) | 2001-08-07 | 2007-06-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression |
US20060068405A1 (en) * | 2004-01-27 | 2006-03-30 | Alex Diber | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
NZ566396A (en) | 2001-10-09 | 2009-07-31 | Isis Pharmaceuticals Inc | Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expressions |
US6750019B2 (en) | 2001-10-09 | 2004-06-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression |
US6965025B2 (en) | 2001-12-10 | 2005-11-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of connective tissue growth factor expression |
KR100801388B1 (ko) | 2002-01-02 | 2008-02-05 | 제넨테크, 인크. | 종양의 진단 및 치료 방법 및 이를 위한 조성물 |
IL152904A0 (en) | 2002-01-24 | 2003-06-24 | Gamida Cell Ltd | Utilization of retinoid and vitamin d receptor antagonists for expansion of renewable stem cell populations |
WO2003062404A1 (en) * | 2002-01-25 | 2003-07-31 | Gamida-Cell Ltd. | Methods of expanding stem and progenitor cells and expanded cell populations obtained thereby |
US7553619B2 (en) * | 2002-02-08 | 2009-06-30 | Qiagen Gmbh | Detection method using dissociated rolling circle amplification |
US20030180712A1 (en) | 2002-03-20 | 2003-09-25 | Biostratum Ab | Inhibition of the beta3 subunit of L-type Ca2+ channels |
MXPA04010092A (es) | 2002-04-16 | 2004-12-13 | Genentech Inc | Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores. |
US20030199464A1 (en) | 2002-04-23 | 2003-10-23 | Silviu Itescu | Regeneration of endogenous myocardial tissue by induction of neovascularization |
US7199107B2 (en) | 2002-05-23 | 2007-04-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of kinesin-like 1 expression |
US20050221326A1 (en) * | 2002-06-12 | 2005-10-06 | Avi Orr-Urtreger | Oligonucleotides antibodies and kits including same for treating prostate cancer and determining predisposition thereto |
WO2003105780A2 (en) * | 2002-06-18 | 2003-12-24 | Epigenesis Pharmaceuticals, Inc. | A dry powder oligonucleotide formulation, preparation and its uses |
CA2495478A1 (en) | 2002-08-05 | 2004-02-12 | University Of Rochester | Protein transducing domain/deaminase chimeric proteins, related compounds, and uses thereof |
CN1694959B (zh) | 2002-09-13 | 2013-09-18 | 雷普利瑟公司 | 非序列互补的抗病毒寡核苷酸 |
JP2006500030A (ja) * | 2002-09-20 | 2006-01-05 | イェール ユニバーシティ | リボスイッチ、その使用方法、ならびにリボスイッチとともに用いるための組成物 |
AU2003278957A1 (en) | 2002-09-26 | 2004-04-23 | Amgen, Inc. | Modulation of forkhead box o1a expression |
WO2004110345A2 (en) * | 2002-10-29 | 2004-12-23 | Pharmacia Corporation | Differentially expressed genes involved in cancer, the polypeptides encoded thereby, and methods of using the same |
US9150606B2 (en) * | 2002-11-05 | 2015-10-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation |
US9827263B2 (en) | 2002-11-05 | 2017-11-28 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 2′-methoxy substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations |
AU2003291755A1 (en) | 2002-11-05 | 2004-06-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use |
US9150605B2 (en) | 2002-11-05 | 2015-10-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation |
ES2417879T3 (es) | 2002-11-13 | 2013-08-09 | Genzyme Corporation | Modulación antisentido de la expresión de la apolipoproteína B |
EP1569695B1 (en) | 2002-11-13 | 2013-05-15 | Genzyme Corporation | Antisense modulation of apolipoprotein b expression |
US20060009378A1 (en) | 2002-11-14 | 2006-01-12 | Itshak Golan | Novel galectin sequences and compositions and methods utilizing same for treating or diagnosing arthritis and other chronic inflammatory diseases |
EP1572971B1 (en) | 2002-11-15 | 2009-09-30 | Morphotek Inc. | Methods of generating high-production of antibodies from hybridomas created by in vitro immunization |
JP4915980B2 (ja) | 2002-11-15 | 2012-04-11 | エムユーエスシー ファウンデーション フォー リサーチ デベロップメント | 補体レセプター2標的化補体調節因子 |
US7557092B2 (en) | 2002-11-21 | 2009-07-07 | University Of Utah Research Foundation | Purinergic modulation of smell |
US7144999B2 (en) | 2002-11-23 | 2006-12-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression |
US9487823B2 (en) | 2002-12-20 | 2016-11-08 | Qiagen Gmbh | Nucleic acid amplification |
EP1583843B1 (en) | 2002-12-20 | 2018-07-18 | QIAGEN GmbH | Single primer whole genome amplification |
US6977153B2 (en) * | 2002-12-31 | 2005-12-20 | Qiagen Gmbh | Rolling circle amplification of RNA |
NZ541637A (en) | 2003-02-11 | 2008-07-31 | Antisense Therapeutics Pty Ltd | Modulation of insulin like growth factor I receptor |
US7803781B2 (en) | 2003-02-28 | 2010-09-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of growth hormone receptor expression and insulin-like growth factor expression |
US20040185559A1 (en) | 2003-03-21 | 2004-09-23 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of diacylglycerol acyltransferase 1 expression |
US8043834B2 (en) | 2003-03-31 | 2011-10-25 | Qiagen Gmbh | Universal reagents for rolling circle amplification and methods of use |
US20040198640A1 (en) * | 2003-04-02 | 2004-10-07 | Dharmacon, Inc. | Stabilized polynucleotides for use in RNA interference |
US7598227B2 (en) | 2003-04-16 | 2009-10-06 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of apolipoprotein C-III expression |
AU2004231740A1 (en) * | 2003-04-17 | 2004-11-04 | The Trustees Of Columbia University In The City Ofnew York | Desmoglein 4 is a novel gene involved in hair growth |
US7399853B2 (en) | 2003-04-28 | 2008-07-15 | Isis Pharmaceuticals | Modulation of glucagon receptor expression |
CA2524495A1 (en) | 2003-06-03 | 2005-01-13 | Eli Lilly And Company | Modulation of survivin expression |
EP3604537B1 (en) | 2003-06-13 | 2021-12-08 | Alnylam Europe AG | Double-stranded ribonucleic acid with increased effectiveness in an organism |
CA2533701A1 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas |
US7825235B2 (en) | 2003-08-18 | 2010-11-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression |
US20050053981A1 (en) * | 2003-09-09 | 2005-03-10 | Swayze Eric E. | Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini |
US20070123480A1 (en) * | 2003-09-11 | 2007-05-31 | Replicor Inc. | Oligonucleotides targeting prion diseases |
WO2005027962A1 (en) * | 2003-09-18 | 2005-03-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4’-thionucleosides and oligomeric compounds |
PE20050469A1 (es) | 2003-09-18 | 2005-09-10 | Lilly Co Eli | Modulacion de la expresion de eif4e |
US20050191653A1 (en) | 2003-11-03 | 2005-09-01 | Freier Susan M. | Modulation of SGLT2 expression |
PT2161283E (pt) | 2003-11-17 | 2014-08-29 | Genentech Inc | Composições que compreendem anticorpos contra cd79b conjugados a um agente de inibição do crescimento ou agente citotóxico e métodos para o tratamento de tumor de origem hematopoiética |
WO2005056571A1 (en) * | 2003-12-05 | 2005-06-23 | Biovitrum Ab | Improved synthesis of 2-substituted adenosines |
JP2007520222A (ja) | 2004-01-20 | 2007-07-26 | アイシス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | グルココルチコイドレセプター発現の調節 |
US8778900B2 (en) * | 2004-01-22 | 2014-07-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of eIF4E-BP1 expression |
US7468431B2 (en) * | 2004-01-22 | 2008-12-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of eIF4E-BP2 expression |
US7842459B2 (en) | 2004-01-27 | 2010-11-30 | Compugen Ltd. | Nucleotide and amino acid sequences, and assays and methods of use thereof for diagnosis |
US8569474B2 (en) | 2004-03-09 | 2013-10-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand |
US8790919B2 (en) | 2004-03-15 | 2014-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for optimizing cleavage of RNA by RNase H |
KR101147147B1 (ko) * | 2004-04-01 | 2012-05-25 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | Rna 간섭의 오프 타겟 효과 감소를 위한 변형된폴리뉴클레오타이드 |
US20050244869A1 (en) * | 2004-04-05 | 2005-11-03 | Brown-Driver Vickie L | Modulation of transthyretin expression |
EP2540734B1 (en) | 2004-04-05 | 2016-03-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Process and reagents for oligonucleotide synthesis and purification |
US20050260755A1 (en) * | 2004-04-06 | 2005-11-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sequential delivery of oligomeric compounds |
US7674778B2 (en) | 2004-04-30 | 2010-03-09 | Alnylam Pharmaceuticals | Oligonucleotides comprising a conjugate group linked through a C5-modified pyrimidine |
DK1773872T3 (en) | 2004-05-21 | 2017-05-08 | Uab Res Found | VARIABLE Lymphocyte Receptors, Associated Polypeptides and Nucleic Acids, and Uses thereof |
US20090048192A1 (en) * | 2004-06-03 | 2009-02-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double Strand Compositions Comprising Differentially Modified Strands for Use in Gene Modulation |
AU2005252663B2 (en) * | 2004-06-03 | 2011-07-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
US8394947B2 (en) | 2004-06-03 | 2013-03-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Positionally modified siRNA constructs |
US7884086B2 (en) | 2004-09-08 | 2011-02-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays |
EP1799812A4 (en) * | 2004-09-16 | 2009-09-09 | Gamida Cell Ltd | EX VIVO CULTIVATION METHODS OF STEM CELLS AND PRECURSOR BY CO-CULTURE WITH MESENCHYMAL CELLS |
EP1809303B1 (en) * | 2004-09-23 | 2019-03-06 | ARC Medical Devices, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods relating to inhibiting fibrous adhesions or inflammatory disease using low sulphate fucans |
CA2588087A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-05-18 | Obe Therapy Biotechnology S.A.S. | Methods of reducing body fat |
US7935811B2 (en) | 2004-11-22 | 2011-05-03 | Dharmacon, Inc. | Apparatus and system having dry gene silencing compositions |
US7923207B2 (en) | 2004-11-22 | 2011-04-12 | Dharmacon, Inc. | Apparatus and system having dry gene silencing pools |
US7923206B2 (en) | 2004-11-22 | 2011-04-12 | Dharmacon, Inc. | Method of determining a cellular response to a biological agent |
MX2007010922A (es) | 2005-03-10 | 2007-10-12 | Genentech Inc | Metodos y composiciones para modular la integridad vascular. |
US7476733B2 (en) * | 2005-03-25 | 2009-01-13 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Development of a real-time PCR assay for detection of pneumococcal DNA and diagnosis of pneumococccal disease |
EP1863908B1 (de) * | 2005-04-01 | 2010-11-17 | Qiagen GmbH | Reverse transkription und amplifikation von rna bei simultaner degradierung von dna |
WO2007008300A2 (en) | 2005-05-31 | 2007-01-18 | ECOLE POLYTECHNIQUE FéDéRALE DE LAUSANNE | Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs |
US20090209621A1 (en) | 2005-06-03 | 2009-08-20 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for decreasing microrna expression for the treatment of neoplasia |
WO2006138145A1 (en) | 2005-06-14 | 2006-12-28 | Northwestern University | Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications |
AU2006267841B2 (en) * | 2005-07-07 | 2011-12-15 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Nucleic acid agents for downregulating H19, and methods of using same |
DK2239327T3 (en) | 2005-08-11 | 2015-05-18 | Synthetic Genomics Inc | A method for in vitro recombination |
EP1915461B1 (en) | 2005-08-17 | 2018-08-01 | Dx4U GmbH | Composition and method for determination of ck19 expression |
CA2620856C (en) | 2005-08-29 | 2017-11-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for use in modulating mir-122a |
EP1762627A1 (de) | 2005-09-09 | 2007-03-14 | Qiagen GmbH | Verfahren zur Aktivierung einer Nukleinsäure für eine Polymerase-Reaktion |
IL172297A (en) | 2005-10-03 | 2016-03-31 | Compugen Ltd | Soluble vegfr-1 variants for the diagnosis of preeclampsia |
EP2392647A1 (en) | 2005-10-14 | 2011-12-07 | MUSC Foundation For Research Development | Targeting PAX2 for the induction of DEFB1-mediated tumor immunity and cancer therapy |
US8080534B2 (en) * | 2005-10-14 | 2011-12-20 | Phigenix, Inc | Targeting PAX2 for the treatment of breast cancer |
WO2007051045A2 (en) | 2005-10-28 | 2007-05-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of huntingtin gene |
US20100069461A1 (en) | 2005-11-09 | 2010-03-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of factor v leiden mutant gene |
CA2630602A1 (en) | 2005-11-21 | 2007-05-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of eif4e-bp2 expression |
US8846393B2 (en) | 2005-11-29 | 2014-09-30 | Gamida-Cell Ltd. | Methods of improving stem cell homing and engraftment |
US8313901B2 (en) * | 2005-12-21 | 2012-11-20 | Yale University | Methods and compositions related to the modulation of riboswitches |
EP1976567B1 (en) | 2005-12-28 | 2020-05-13 | The Scripps Research Institute | Natural antisense and non-coding rna transcripts as drug targets |
US20100184021A1 (en) | 2006-01-16 | 2010-07-22 | Compugen Ltd. | Novel nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof for diagnosis |
PL1984381T3 (pl) | 2006-01-27 | 2011-03-31 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zmodyfikowane w pozycji 6 analogi bicykliczne kwasów nukleinowych |
US8129515B2 (en) | 2006-01-27 | 2012-03-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for the use in modulation of microRNAs |
US7569686B1 (en) | 2006-01-27 | 2009-08-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs |
CA2647728C (en) | 2006-03-31 | 2014-12-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of eg5 gene |
EP2019692B1 (en) | 2006-05-05 | 2014-06-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating expression of gccr |
DE102006020885A1 (de) * | 2006-05-05 | 2007-11-08 | Qiagen Gmbh | Einführung von Sequenzelementen in Nukleinsäuren |
JP5441688B2 (ja) * | 2006-05-11 | 2014-03-12 | アイシス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | 5’修飾二環式核酸類似体 |
EP2835429B1 (en) | 2006-05-11 | 2017-12-13 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the PCSK9 gene |
US7666854B2 (en) * | 2006-05-11 | 2010-02-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs |
EP2023937B1 (en) | 2006-05-19 | 2011-10-12 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Rnai modulation of aha and therapeutic uses thereof |
US7888498B2 (en) | 2006-05-22 | 2011-02-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of IKK-B gene |
US8198253B2 (en) | 2006-07-19 | 2012-06-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and their uses directed to HBXIP |
JP2010502752A (ja) * | 2006-09-11 | 2010-01-28 | イェール ユニバーシティー | リシンリボスイッチ、リシンリボスイッチを用いた構造に基づく化合物設計、ならびにリシンリボスイッチを用いた使用のための方法および組成物 |
CA2663581C (en) | 2006-09-21 | 2016-03-01 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the hamp gene |
WO2008036841A2 (en) | 2006-09-22 | 2008-03-27 | Dharmacon, Inc. | Tripartite oligonucleotide complexes and methods for gene silencing by rna interference |
ES2611924T3 (es) | 2006-10-03 | 2017-05-11 | Arbutus Biopharma Corporation | Formulaciones que contienen lípidos |
WO2008067040A2 (en) | 2006-10-06 | 2008-06-05 | University Of Utah Research Foundation | Method of detecting ocular diseases and pathologic conditions and treatment of same |
US8999317B2 (en) | 2006-11-01 | 2015-04-07 | University Of Rochester | Methods and compositions related to the structure and function of APOBEC3G |
JP2010512327A (ja) | 2006-12-11 | 2010-04-22 | ユニヴァーシティー オブ ユタ リサーチ ファウンデーション | 病的血管形成および脈管透過性の処置用の組成物および方法 |
EP2913341A1 (en) | 2006-12-22 | 2015-09-02 | University of Utah Research Foundation | Method of detecting ocular diseases and pathologic conditions and treatment of same |
US20100086526A1 (en) * | 2007-01-16 | 2010-04-08 | Abraham Hochberg | Nucleic acid constructs and methods for specific silencing of h19 |
US20100196403A1 (en) * | 2007-01-29 | 2010-08-05 | Jacob Hochman | Antibody conjugates for circumventing multi-drug resistance |
WO2009045469A2 (en) | 2007-10-02 | 2009-04-09 | Amgen Inc. | Increasing erythropoietin using nucleic acids hybridizable to micro-rna and precursors thereof |
KR101488800B1 (ko) | 2007-02-09 | 2015-02-04 | 노오쓰웨스턴 유니버시티 | 세포내 타겟 검출용 입자 |
EP2471925A1 (en) | 2007-03-22 | 2012-07-04 | Yale University | Methods and compositions related to riboswitches that control alternative splicing |
PE20090064A1 (es) | 2007-03-26 | 2009-03-02 | Novartis Ag | Acido ribonucleico de doble cadena para inhibir la expresion del gen e6ap humano y composicion farmaceutica que lo comprende |
AU2008232891B2 (en) | 2007-03-29 | 2012-01-12 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the Ebola |
EP2639316A1 (en) | 2007-05-11 | 2013-09-18 | The Johns Hopkins University | Biomarkers for melanoma |
CA2688575A1 (en) | 2007-05-29 | 2008-12-24 | Yale University | Riboswitches and methods and compositions for use of and with riboswitches |
CN101688251A (zh) * | 2007-05-29 | 2010-03-31 | 耶鲁大学 | 与控制可变剪接和rna加工的核糖开关有关的方法和组合物 |
WO2008150729A2 (en) | 2007-05-30 | 2008-12-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs |
DK2160464T3 (da) | 2007-05-30 | 2014-08-04 | Univ Northwestern | Nukleinsyrefunktionaliserede nanopartikler til terapeutiske anvendelser |
EP2173760B2 (en) | 2007-06-08 | 2015-11-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs |
EA201000085A1 (ru) | 2007-07-05 | 2010-10-29 | Новартис Аг | dsPHK, ПРЕДНАЗНАЧЕННАЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ |
EP2176280B2 (en) * | 2007-07-05 | 2015-06-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs |
WO2009023855A2 (en) | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
AU2008296478B9 (en) | 2007-08-28 | 2015-03-19 | The Uab Research Foundation | Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use |
EP2195340A4 (en) | 2007-08-28 | 2011-05-11 | Uab Research Foundation | SYNTHETIC APOLIPOPROTEIN E-IMITATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USE |
HUE042982T2 (hu) | 2007-09-04 | 2019-07-29 | Compugen Ltd | Polipeptidek és polinukleotidok, és alkalmazásuk drogcélpontként drogok és biológiai szerek elõállítására |
WO2009039466A1 (en) | 2007-09-20 | 2009-03-26 | Vanderbilt University | Free solution measurement of molecular interactions by backscattering interferometry |
WO2009039442A1 (en) * | 2007-09-21 | 2009-03-26 | California Institute Of Technology | Nfia in glial fate determination, glioma therapy and astrocytoma treatment |
JP2011502502A (ja) * | 2007-11-05 | 2011-01-27 | バルティック テクロノジー デヴェロプメント,リミテッド | 核酸のハイブリッド形成における修飾塩基を含むオリゴヌクレオチドの使用 |
US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-01-17 | Beelogics Inc. | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
USRE47320E1 (en) | 2007-11-20 | 2019-03-26 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of CD40 expression |
US8546556B2 (en) * | 2007-11-21 | 2013-10-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc | Carbocyclic alpha-L-bicyclic nucleic acid analogs |
US7871985B2 (en) | 2007-12-10 | 2011-01-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of factor VII gene |
CA3044134A1 (en) | 2008-01-02 | 2009-07-09 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved compositions and methods for the delivery of nucleic acids |
WO2009100320A2 (en) * | 2008-02-07 | 2009-08-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs |
US10131904B2 (en) | 2008-02-11 | 2018-11-20 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Modified RNAi polynucleotides and uses thereof |
US8188060B2 (en) | 2008-02-11 | 2012-05-29 | Dharmacon, Inc. | Duplex oligonucleotides with enhanced functionality in gene regulation |
EA201301171A1 (ru) | 2008-03-05 | 2014-10-30 | Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. | Композиции и способы ингибирования экспрессии генов eg5 и vegf |
EP2282744B1 (en) * | 2008-03-21 | 2018-01-17 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use |
DK2285819T3 (da) * | 2008-04-04 | 2013-12-02 | Isis Pharmaceuticals Inc | Oligomere forbindelser omfattende neutralt bundne, terminale bicykliske nukleosider |
PL2281042T3 (pl) | 2008-04-18 | 2016-01-29 | Baxter Int | Kompozycja na bazie mikrosfer do zapobiegania i/lub cofania nowego przypadku cukrzycy autoimmunologicznej |
EP2280995A2 (en) * | 2008-04-29 | 2011-02-09 | Wyeth LLC | Methods for treating inflammation |
US8082730B2 (en) * | 2008-05-20 | 2011-12-27 | Caterpillar Inc. | Engine system having particulate reduction device and method |
BRPI0916440A2 (pt) * | 2008-07-15 | 2018-06-05 | Hoffmann La Roche | composições e métodos para inibir a expressão dos genes receptores tgf-beta |
WO2010008582A2 (en) | 2008-07-18 | 2010-01-21 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Phagocytic cell drug delivery system |
WO2010017509A1 (en) * | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of transthyretin expression for the treatment of cns related disorders |
MX2011002143A (es) | 2008-08-25 | 2011-07-20 | Excaliard Pharmaceuticals Inc | Oligonucleotidos antisentido dirigidos contra el factor de crecimiento del tejido conectivo y usos de los mismos. |
EP2690175B1 (en) | 2008-09-02 | 2016-12-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for combined inhibition of mutant EGFR gene and IL-6 expression |
EP3336188B1 (en) | 2008-09-22 | 2020-05-06 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Reduced size self-delivering rnai compounds |
US8604192B2 (en) * | 2008-09-24 | 2013-12-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Cyclohexenyl nucleic acids analogs |
WO2010036698A1 (en) * | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted alpha-l-bicyclic nucleosides |
EP3584320A1 (en) | 2008-09-25 | 2019-12-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of serum amyloid a gene |
CA2984026C (en) | 2008-10-09 | 2020-02-11 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
BRPI0920263B1 (pt) | 2008-10-15 | 2021-09-21 | Ionis Pharmaceuticals, Inc | Compostos compreendendo um oligonucleotídeo modificado, composição e uso dos mesmos |
DK2344639T3 (en) | 2008-10-20 | 2015-07-27 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING EXPRESSION OF TRANSTHYRETINE |
EP2358398A2 (en) | 2008-10-24 | 2011-08-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and methods |
WO2010048549A2 (en) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5' and 2' bis-substituted nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
JP2012508569A (ja) * | 2008-11-17 | 2012-04-12 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 第vii因子遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法 |
WO2010059226A2 (en) | 2008-11-19 | 2010-05-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of map4k4 through rnai |
US9139827B2 (en) | 2008-11-24 | 2015-09-22 | Northwestern University | Polyvalent RNA-nanoparticle compositions |
WO2010061393A1 (en) | 2008-11-30 | 2010-06-03 | Compugen Ltd. | He4 variant nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof |
CN107338251A (zh) | 2008-12-04 | 2017-11-10 | 库尔纳公司 | 通过抑制肿瘤抑制基因的天然反义转录物治疗肿瘤抑制基因相关性疾病 |
CN108042560A (zh) | 2008-12-04 | 2018-05-18 | 库尔纳公司 | 通过抑制针对沉默调节蛋白1的天然反义转录物来治疗沉默调节蛋白1相关的疾病 |
JP6091752B2 (ja) | 2008-12-04 | 2017-03-08 | クルナ・インコーポレーテッド | Epoに対する天然アンチセンス転写物の抑制によるエリスロポエチン(epo)関連疾患の治療 |
ES2442168T3 (es) | 2008-12-05 | 2014-02-10 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Métodos de diagnóstico de enfermedades de neuronas motoras |
AU2009324534B2 (en) | 2008-12-10 | 2015-07-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | GNAQ targeted dsRNA compositions and methods for inhibiting expression |
AU2009335740B2 (en) | 2008-12-17 | 2016-04-21 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Antisense compositions and methods for modulating contact hypersensitivity or contact dermatitis |
US20100233270A1 (en) | 2009-01-08 | 2010-09-16 | Northwestern University | Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles |
JP5801205B2 (ja) * | 2009-01-08 | 2015-10-28 | ノースウェスタン ユニバーシティ | 多価オリゴヌクレオチド修飾ナノ粒子コンジュゲートによる細菌タンパク質産生の阻害 |
KR101546673B1 (ko) * | 2009-01-15 | 2015-08-25 | 삼성전자주식회사 | 전자 사진용 토너 및 그의 제조방법 |
AU2010208035B2 (en) | 2009-01-29 | 2016-06-23 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved lipid formulation for the delivery of nucleic acids |
MX2011007776A (es) | 2009-02-03 | 2011-08-12 | Hoffmann La Roche | Compsiciones y metodos para inhibir la expresion de genes ptp1b. |
US9745574B2 (en) | 2009-02-04 | 2017-08-29 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | RNA duplexes with single stranded phosphorothioate nucleotide regions for additional functionality |
WO2010090969A1 (en) | 2009-02-06 | 2010-08-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
EP2396408B1 (en) | 2009-02-12 | 2017-09-20 | CuRNA, Inc. | Treatment of glial cell derived neurotrophic factor (gdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to gdnf |
HUE026280T2 (en) | 2009-02-12 | 2016-06-28 | Curna Inc | Treatment of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) -related diseases by inhibition of natural antisense transcripts associated with BDNF \ t |
US20120041051A1 (en) | 2009-02-26 | 2012-02-16 | Kevin Fitzgerald | Compositions And Methods For Inhibiting Expression Of MIG-12 Gene |
AU2010221419B2 (en) | 2009-03-02 | 2015-10-01 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid chemical modifications |
EP2963116B1 (en) | 2009-03-04 | 2020-11-11 | CuRNA, Inc. | Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirt 1 |
CN104922699B (zh) | 2009-03-12 | 2020-07-24 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 脂质配制的组合物以及用于抑制Eg5和VEGF基因表达的方法 |
JP6116242B2 (ja) | 2009-03-16 | 2017-04-19 | クルナ・インコーポレーテッド | 核因子(赤血球由来2)様2(nrf2)に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるnrf2関連疾患の治療 |
JP5904935B2 (ja) | 2009-03-17 | 2016-04-20 | クルナ・インコーポレーテッド | デルタ様1ホモログ(dlk1)に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるdlk1関連疾患の治療 |
CN108451968A (zh) | 2009-04-15 | 2018-08-28 | 西北大学 | 寡核苷酸功能化的纳米颗粒的递送 |
EP3248618A1 (en) | 2009-04-22 | 2017-11-29 | Massachusetts Institute Of Technology | Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules |
DK2424987T3 (en) | 2009-05-01 | 2018-02-26 | Curna Inc | TREATMENT OF HEMOGLOBIN (HBF / HBG) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPTION TO HBF / HBG |
JP5769701B2 (ja) | 2009-05-05 | 2015-08-26 | テクミラ ファーマシューティカルズ コーポレイションTekmira Pharmaceuticals Corporation | 脂質組成物 |
WO2010129687A1 (en) | 2009-05-05 | 2010-11-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc | Methods of delivering oligonucleotides to immune cells |
WO2010129746A2 (en) | 2009-05-06 | 2010-11-11 | Curna, Inc. | Treatment of tristetraproline (ttp) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to ttp |
CN103223177B (zh) | 2009-05-06 | 2016-08-10 | 库尔纳公司 | 通过针对脂质转运和代谢基因的天然反义转录物的抑制治疗脂质转运和代谢基因相关疾病 |
WO2010130771A2 (en) * | 2009-05-15 | 2010-11-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Compositions and methods for inhibiting expression of glucocorticoid receptor (gcr) genes |
WO2010132665A1 (en) | 2009-05-15 | 2010-11-18 | Yale University | Gemm riboswitches, structure-based compound design with gemm riboswitches, and methods and compositions for use of and with gemm riboswitches |
EP2432881B1 (en) | 2009-05-18 | 2017-11-15 | CuRNA, Inc. | Treatment of reprogramming factor related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a reprogramming factor |
KR101703695B1 (ko) | 2009-05-22 | 2017-02-08 | 큐알엔에이, 인크. | 전사 인자 e3(tfe3)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 tfe3 및 인슐린 수용체 기질 2(irs2)의 치료 |
US20100303795A1 (en) * | 2009-05-27 | 2010-12-02 | Soerensen Karina Dalsgaard | Marker of prostate cancer |
KR20120024819A (ko) | 2009-05-28 | 2012-03-14 | 오피케이오 큐알엔에이, 엘엘씨 | 항바이러스 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 트리스테트라프롤린 관련된 질환의 치료 |
KR102205886B1 (ko) | 2009-06-10 | 2021-01-21 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 향상된 지질 조성물 |
KR101702689B1 (ko) | 2009-06-16 | 2017-02-06 | 큐알엔에이, 인크. | Pon1에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 파라옥소나제 1(pon1) 관련된 질환의 치료 |
ES2620960T3 (es) | 2009-06-16 | 2017-06-30 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con un gen de colágeno mediante la inhibición de un transcrito antisentido natural a un gen de colágeno |
US20100331397A1 (en) * | 2009-06-24 | 2010-12-30 | Alios Biopharma, Inc. | 2-5a analogs and their methods of use |
CA2765889A1 (en) | 2009-06-24 | 2010-12-29 | Opko Curna, Llc | Treatment of tumor necrosis factor receptor 2 (tnfr2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to tnfr2 |
KR101807324B1 (ko) | 2009-06-26 | 2017-12-08 | 큐알엔에이, 인크. | 다운 증후군 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 다운 증후군 유전자 관련된 질환의 치료 |
WO2011005860A2 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 5' phosphate mimics |
WO2011005861A1 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide end caps |
ES2585360T3 (es) | 2009-08-05 | 2016-10-05 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con un gen de la insulina (INS) por inhibición de la transcripción antisentido natural en un gen de la insulina (INS) |
EP2462153B1 (en) | 2009-08-06 | 2015-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs |
AP3574A (en) | 2009-08-14 | 2016-02-08 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the ebola virus |
US20120157324A1 (en) | 2009-08-17 | 2012-06-21 | Yale University | Methylation biomarkers and methods of use |
WO2011031482A2 (en) | 2009-08-25 | 2011-03-17 | Curna, Inc. | Treatment of 'iq motif containing gtpase activating protein' (iqgap) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to iqgap |
CA2772715C (en) | 2009-09-02 | 2019-03-26 | Genentech, Inc. | Mutant smoothened and methods of using the same |
WO2011044902A1 (en) | 2009-10-13 | 2011-04-21 | Aarhus Universitet | Tff3 hypomethylation as a novel biomarker for prostate cancer |
CN105368836A (zh) | 2009-10-14 | 2016-03-02 | 耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展公司 | 用于控制蜂中的瓦螨的组合物 |
US8962584B2 (en) | 2009-10-14 | 2015-02-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. | Compositions for controlling Varroa mites in bees |
WO2011050194A1 (en) | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for modulating hepsin activation of macrophage-stimulating protein |
US20110129832A1 (en) * | 2009-10-27 | 2011-06-02 | Swift Biosciences, Inc. | Polynucleotide Primers and Probes |
US9376690B2 (en) | 2009-10-30 | 2016-06-28 | Northwestern University | Templated nanoconjugates |
EP2496716A1 (en) | 2009-11-03 | 2012-09-12 | University Of Virginia Patent Foundation | Versatile, visible method for detecting polymeric analytes |
AR078921A1 (es) * | 2009-11-09 | 2011-12-14 | Hoffmann La Roche | Composiciones y metodos para inhibir la expresion de genes de la superfamilia de quinesinas, kif10 |
WO2011058555A1 (en) | 2009-11-12 | 2011-05-19 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | A method of editing dna in a cell and constructs capable of same |
EP3199634A1 (en) | 2009-11-13 | 2017-08-02 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Antisense antiviral compound and method for treating influenza viral infection |
US8916362B2 (en) | 2009-11-23 | 2014-12-23 | Swift Biosciences, Inc. | Devices comprising a polynucleotide to extend single stranded target molecules |
JP5856065B2 (ja) | 2009-11-30 | 2016-02-09 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法 |
JP6025567B2 (ja) | 2009-12-16 | 2016-11-16 | カッパーアールエヌエー,インコーポレイテッド | 膜結合転写因子ペプチダーゼ、部位1(mbtps1)に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるmbtps1関連性疾患の治療 |
RU2619185C2 (ru) | 2009-12-23 | 2017-05-12 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с разобщающим белком 2 (ucp2), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта к ucp2 |
WO2011079261A2 (en) | 2009-12-23 | 2011-06-30 | Curna, Inc. | Treatment of hepatocyte growth factor (hgf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to hgf |
CA2785173A1 (en) | 2009-12-29 | 2011-07-28 | Curna, Inc. | Treatment of nuclear respiratory factor 1 (nrf1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf1 |
JP5982288B2 (ja) | 2009-12-29 | 2016-08-31 | カッパーアールエヌエー,インコーポレイテッド | 腫瘍タンパク質63(p63)に対する天然アンチセンス転写物の阻害による腫瘍タンパク質63関連疾患の治療 |
NO2521784T3 (ja) | 2010-01-04 | 2018-05-05 | ||
RU2612161C2 (ru) | 2010-01-06 | 2017-03-02 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с геном развития поджелудочной железы, путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта к гену развития поджелудочной железы |
ES2664866T3 (es) | 2010-01-11 | 2018-04-23 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con la globulina fijadora de hormonas sexuales (shbg) mediante inhibición del transcrito antisentido natural a shbg |
WO2011085102A1 (en) | 2010-01-11 | 2011-07-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
US20120321647A1 (en) | 2010-01-12 | 2012-12-20 | Yale University | Structured rna motifs and compounds and methods for their use |
CN102782135A (zh) | 2010-01-25 | 2012-11-14 | 库尔纳公司 | 通过抑制rna酶h1的天然反义转录物而治疗rna酶h1相关疾病 |
CA2824843A1 (en) | 2010-02-04 | 2011-08-11 | Ico Therapeutics Inc. | Dosing regimens for treating and preventing ocular disorders using c-raf antisense |
WO2011095174A1 (en) | 2010-02-08 | 2011-08-11 | Aarhus Universitet | Human herpes virus 6 and 7 u20 polypeptide and polynucleotides for use as a medicament or diagnosticum |
KR101838308B1 (ko) | 2010-02-22 | 2018-03-13 | 큐알엔에이, 인크. | 피롤린-5-카르복실레이트 환원효소 1(pycr1)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 pycr1과 관련된 질환의 치료 |
WO2011105901A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof |
JP5988436B2 (ja) | 2010-02-23 | 2016-09-07 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法 |
WO2011105900A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof |
WO2011105902A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof |
WO2011107100A1 (en) | 2010-03-03 | 2011-09-09 | Aarhus Universitet | Methods and compositions for regulation of herv4 |
WO2011112516A1 (en) | 2010-03-08 | 2011-09-15 | Ico Therapeutics Inc. | Treating and preventing hepatitis c virus infection using c-raf kinase antisense oligonucleotides |
BR112012022570A2 (pt) | 2010-03-08 | 2015-10-06 | Monsato Technology Llc | moléculas de polinucleotídeo para regulação de gene em plantas. |
WO2011112732A2 (en) | 2010-03-12 | 2011-09-15 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Methods of treating vascular inflammatory disorders |
WO2011113054A2 (en) | 2010-03-12 | 2011-09-15 | Aurasense Llc | Crosslinked polynucleotide structure |
EP2545173A2 (en) | 2010-03-12 | 2013-01-16 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Antisense modulation of nuclear hormone receptors |
WO2011115818A1 (en) | 2010-03-17 | 2011-09-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
KR20180044433A (ko) | 2010-03-24 | 2018-05-02 | 알엑스아이 파마슈티칼스 코포레이션 | 진피 및 섬유증성 적응증에서의 rna 간섭 |
US9080171B2 (en) | 2010-03-24 | 2015-07-14 | RXi Parmaceuticals Corporation | Reduced size self-delivering RNAi compounds |
EP2550001B1 (en) | 2010-03-24 | 2019-05-22 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Rna interference in ocular indications |
WO2011120046A2 (en) | 2010-03-26 | 2011-09-29 | Swift Biosciences, Inc. | Methods and compositions for isolating polynucleotides |
ES2893199T3 (es) | 2010-03-29 | 2022-02-08 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Terapia de ARNbc para amiloidosis ocular relacionada con transtiretina (TTR) |
WO2011123621A2 (en) | 2010-04-01 | 2011-10-06 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | 2' and 5' modified monomers and oligonucleotides |
EP3517613A1 (en) | 2010-04-09 | 2019-07-31 | CuRNA, Inc. | Treatment of fibroblast growth factor 21 (fgf21) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to fgf21 |
US20110269194A1 (en) | 2010-04-20 | 2011-11-03 | Swift Biosciences, Inc. | Materials and methods for nucleic acid fractionation by solid phase entrapment and enzyme-mediated detachment |
WO2011133871A2 (en) | 2010-04-22 | 2011-10-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 5'-end derivatives |
US9127033B2 (en) | 2010-04-28 | 2015-09-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5′ modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
JP6005628B2 (ja) | 2010-04-28 | 2016-10-12 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 |
CA2994063A1 (en) | 2010-04-29 | 2011-11-10 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of transthyretin expression |
KR20130079384A (ko) | 2010-05-03 | 2013-07-10 | 제넨테크, 인크. | 종양의 진단 및 치료를 위한 조성물 및 방법 |
US9089588B2 (en) | 2010-05-03 | 2015-07-28 | Curna, Inc. | Treatment of sirtuin (SIRT) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a sirtuin (SIRT) |
EP2569431B1 (en) | 2010-05-13 | 2015-09-23 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Methods for identifying compounds which modulate interleukins 17 and 23 signaling activity |
TWI586356B (zh) | 2010-05-14 | 2017-06-11 | 可娜公司 | 藉由抑制par4天然反股轉錄本治療par4相關疾病 |
WO2011150226A1 (en) | 2010-05-26 | 2011-12-01 | Landers James P | Method for detecting nucleic acids based on aggregate formation |
EP2576783B1 (en) | 2010-05-26 | 2017-11-29 | CuRNA, Inc. | Treatment of atonal homolog 1 (atoh1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to atoh1 |
AU2011261434B2 (en) | 2010-06-02 | 2015-11-26 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods directed to treating liver fibrosis |
WO2011156278A1 (en) | 2010-06-07 | 2011-12-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
US8846637B2 (en) | 2010-06-08 | 2014-09-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted 2′-amino and 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
US9638632B2 (en) | 2010-06-11 | 2017-05-02 | Vanderbilt University | Multiplexed interferometric detection system and method |
WO2011163466A1 (en) | 2010-06-23 | 2011-12-29 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Regulation of skin pigmentation by neuregulin-1 (nrg-1) |
CA2805024A1 (en) | 2010-06-30 | 2012-01-05 | Compugen Ltd. | Polypeptides and uses thereof as a drug for treatment of multiples sclerosis, rheumatoid arthritis and other autoimmune disorders |
NO2593547T3 (ja) | 2010-07-14 | 2018-04-14 | ||
WO2012021554A1 (en) | 2010-08-09 | 2012-02-16 | Yale University | Cyclic di-gmp-ii riboswitches, motifs, and compounds, and methods for their use |
US20130210901A1 (en) | 2010-09-20 | 2013-08-15 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Method of treating neurodegenerative diseases |
AU2011312205B2 (en) | 2010-10-05 | 2015-08-13 | Curis, Inc. | Mutant smoothened and methods of using the same |
WO2012047956A2 (en) | 2010-10-06 | 2012-04-12 | Opko Curna Llc | Treatment of sialidase 4 (neu4) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to neu4 |
CN103517990A (zh) | 2010-10-07 | 2014-01-15 | 通用医疗公司 | 癌症生物标志物 |
EP3075396A1 (en) | 2010-10-17 | 2016-10-05 | Yeda Research and Development Co. Ltd. | Methods and compositions for the treatment of insulin-associated medical conditions |
EP2630240A1 (en) | 2010-10-18 | 2013-08-28 | Arrowhead Research Corporation | Compositions and methods for inhibiting expression of rrm2 genes |
CN103180445B (zh) | 2010-10-22 | 2018-02-16 | 库尔纳公司 | 通过抑制α‑L‑艾杜糖醛酸酶(IDUA)的天然反义转录物而治疗IDUA相关疾病 |
CN103201387B (zh) | 2010-10-27 | 2018-02-02 | 库尔纳公司 | 通过抑制干扰素相关发育调节因子1(ifrd1)的天然反义转录物而治疗ifrd1相关疾病 |
CN103370054A (zh) | 2010-11-09 | 2013-10-23 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 用于抑制Eg5和VEGF基因的表达的脂质配制的组合物和方法 |
GB201019043D0 (en) | 2010-11-10 | 2010-12-22 | Protea Biopharma N V | Use of 2',5'-oligoadenylate derivative compounds |
EP3260540A1 (en) | 2010-11-12 | 2017-12-27 | The General Hospital Corporation | Polycomb-associated non-coding rnas |
AU2011329777B2 (en) | 2010-11-17 | 2016-06-09 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of alpha synuclein expression |
JP6071893B2 (ja) | 2010-11-23 | 2017-02-01 | カッパーアールエヌエー,インコーポレイテッド | Nanogへの天然アンチセンス転写物の阻害によるnanog関連疾患の治療 |
US9150926B2 (en) | 2010-12-06 | 2015-10-06 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Diagnosis and treatment of adrenocortical tumors using human microRNA-483 |
EP2648763A4 (en) | 2010-12-10 | 2014-05-14 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR EXPRESSION INHIBITION OF GENES KLF-1 AND BCL11A |
US9193973B2 (en) | 2010-12-10 | 2015-11-24 | Alynylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for increasing erythropoietin (EPO) production |
WO2012097261A2 (en) | 2011-01-14 | 2012-07-19 | The General Hospital Corporation | Methods targeting mir-128 for regulating cholesterol/lipid metabolism |
KR101697396B1 (ko) | 2011-02-02 | 2017-01-17 | 엑스칼리아드 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 | 결합 조직 성장 인자(ctgf)를 표적으로 하는 안티센스 화합물을 사용하여 켈로이드 또는 비후성 흉터를 치료하는 방법 |
DK2670404T3 (en) | 2011-02-02 | 2018-11-19 | Univ Princeton | CIRCUIT MODULATORS AS VIRUS PRODUCTION MODULATORS |
US9562853B2 (en) | 2011-02-22 | 2017-02-07 | Vanderbilt University | Nonaqueous backscattering interferometric methods |
BR112013025006B1 (pt) | 2011-03-29 | 2021-06-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc | Composição farmacêutica para inibir a expressão de um gene de tmprss6, método para inibição da expressão de tmprss6 em uma célula, e uso de ácidos ribonu-cleicos fita dupla |
EP3460064B8 (en) | 2011-04-03 | 2024-03-20 | The General Hospital Corporation d/b/a Massachusetts General Hospital | Efficient protein expression in vivo using modified rna (mod-rna) |
CN105601741A (zh) | 2011-04-15 | 2016-05-25 | 卡姆普根有限公司 | 多肽和多核苷酸及其用于治疗免疫相关失调和癌症的用途 |
WO2012149154A1 (en) | 2011-04-26 | 2012-11-01 | Swift Biosciences, Inc. | Polynucleotide primers and probes |
WO2012151289A2 (en) | 2011-05-02 | 2012-11-08 | University Of Virginia Patent Foundation | Method and system to detect aggregate formation on a substrate |
WO2012151268A1 (en) | 2011-05-02 | 2012-11-08 | University Of Virginia Patent Foundation | Method and system for high throughput optical and label free detection of analytes |
CN103620036B (zh) | 2011-06-09 | 2016-12-21 | 库尔纳公司 | 通过抑制共济蛋白(fxn)的天然反义转录物而治疗fxn 相关疾病 |
WO2012170347A1 (en) | 2011-06-09 | 2012-12-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
EP2723351B1 (en) | 2011-06-21 | 2018-02-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibition of expression of protein c (proc) genes |
KR20230084331A (ko) | 2011-06-21 | 2023-06-12 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 아포리포단백질 c-iii(apoc3) 유전자의 발현 억제를 위한 조성물 및 방법 |
BR122019026068B8 (pt) | 2011-06-21 | 2022-10-18 | Alnylam Pharmaceuticals | Ácido ribonucleico de fita dupla (dsrna) para inibir a expressão de angptl3 e seu uso, composição farmacêutica e método in vitro para inibir a expressão de angptl3 em uma célula |
US20140235693A1 (en) | 2011-06-23 | 2014-08-21 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serpina1 sirnas: compositions of matter and methods of treatment |
US9428574B2 (en) | 2011-06-30 | 2016-08-30 | Compugen Ltd. | Polypeptides and uses thereof for treatment of autoimmune disorders and infection |
PT2726613T (pt) | 2011-06-30 | 2018-10-26 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | Composições e métodos para inibição da expressão de genes do vírus da hepatite b |
EP2739735A2 (en) | 2011-08-01 | 2014-06-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Method for improving the success rate of hematopoietic stem cell transplants |
JP6309450B2 (ja) | 2011-08-04 | 2018-04-11 | イェダ リサーチ アンド デベロップメント カンパニー リミテッド | セロトニン関連の医学的状態、アドレナリン関連の医学的状態、ノルアドレナリン関連の医学的状態、グルタミン酸関連の医学的状態および副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン関連の医学的状態の処置および診断のためのミクロrnaおよび該ミクロrnaを含む組成物 |
AU2012308686B2 (en) | 2011-09-13 | 2018-05-10 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
US10806146B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-10-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
CN109997852A (zh) | 2011-09-13 | 2019-07-12 | 孟山都技术公司 | 用于杂草控制的方法和组合物 |
EP2756086B1 (en) | 2011-09-13 | 2018-02-21 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
AU2012308694B2 (en) | 2011-09-13 | 2018-06-14 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
US10829828B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-11-10 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
US9840715B1 (en) | 2011-09-13 | 2017-12-12 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delaying senescence and improving disease tolerance and yield in plants |
US10760086B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-09-01 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
WO2013040429A1 (en) | 2011-09-14 | 2013-03-21 | Rana Therapeutics Inc. | Multimeric oligonucleotide compounds |
ES2856091T3 (es) | 2011-09-14 | 2021-09-27 | Univ Northwestern | Nanoconjugados capaces de atravesar la barrera hematoencefálica |
US9920326B1 (en) | 2011-09-14 | 2018-03-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for increasing invertase activity in plants |
US9580713B2 (en) | 2011-09-17 | 2017-02-28 | Yale University | Fluoride-responsive riboswitches, fluoride transporters, and methods of use |
US10184151B2 (en) | 2011-10-11 | 2019-01-22 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Micrornas in neurodegenerative disorders |
EA201490778A1 (ru) | 2011-10-14 | 2014-09-30 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ HtrA1 И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ |
FR2981650B1 (fr) * | 2011-10-24 | 2013-12-27 | Univ Paris Curie | Analogues de nucleosides pour le traitement d'une infection virale et methode d'evaluation de la sensibilite audit traitement |
EP2771464B1 (en) | 2011-10-27 | 2018-03-21 | Yeda Research and Development Co. Ltd. | Methods of treating cancer |
JP2015502365A (ja) | 2011-12-12 | 2015-01-22 | オンコイミューニン,インコーポレイティド | オリゴヌクレオチドのイン−ビボ送達 |
CA2848985A1 (en) | 2012-02-01 | 2013-08-08 | Compugen Ltd. | C10rf32 antibodies, and uses thereof for treatment of cancer |
BR112014020119A2 (pt) | 2012-02-13 | 2020-10-27 | Gamida-Cell Ltd | cultura de células-tronco mesenquimais |
WO2013124816A2 (en) | 2012-02-22 | 2013-08-29 | Brainstem Biotec Ltd. | Generation of neural stem cells and motor neurons |
JP6329911B2 (ja) | 2012-02-22 | 2018-05-23 | ブレインステム バイオテック リミテッド | 星状膠細胞作製のためのミクロrna |
US9896709B2 (en) | 2012-03-13 | 2018-02-20 | Swift Biosciences, Inc. | Methods and compositions for size-controlled homopolymer tailing of substrate polynucleotides by a nucleic acid polymerase |
ES2694592T3 (es) | 2012-03-15 | 2018-12-21 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) por inhibición del transcrito antisentido natural de BDNF |
WO2013138662A1 (en) | 2012-03-16 | 2013-09-19 | 4S3 Bioscience, Inc. | Antisense conjugates for decreasing expression of dmpk |
WO2013154799A1 (en) | 2012-04-09 | 2013-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2013154798A1 (en) | 2012-04-09 | 2013-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic nucleic acid analogs |
US9133461B2 (en) | 2012-04-10 | 2015-09-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene |
JP2015518485A (ja) | 2012-04-20 | 2015-07-02 | アプタミアール セラピューティクス インコーポレイテッド | 熱発生のmiRNA調節剤 |
US9127274B2 (en) | 2012-04-26 | 2015-09-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serpinc1 iRNA compositions and methods of use thereof |
WO2013163628A2 (en) | 2012-04-27 | 2013-10-31 | Duke University | Genetic correction of mutated genes |
US9273949B2 (en) | 2012-05-11 | 2016-03-01 | Vanderbilt University | Backscattering interferometric methods |
DK2850189T3 (en) | 2012-05-16 | 2019-02-25 | Translate Bio Ma Inc | COMPOSITIONS AND PROCEDURES FOR MODULATING GENEPRESSION |
EA201492116A1 (ru) | 2012-05-16 | 2015-05-29 | Рана Терапьютикс, Инк. | Композиции и способы для модулирования экспрессии mecp2 |
SG11201407483YA (en) | 2012-05-16 | 2014-12-30 | Rana Therapeutics Inc | Compositions and methods for modulating smn gene family expression |
MX360866B (es) | 2012-05-24 | 2018-11-09 | A B Seeds Ltd | Composiciones y métodos para silenciar la expresión genética. |
WO2013184209A1 (en) | 2012-06-04 | 2013-12-12 | Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. | Mif for use in methods of treating subjects with a neurodegenerative disorder |
US20140038182A1 (en) | 2012-07-17 | 2014-02-06 | Dna Logix, Inc. | Cooperative primers, probes, and applications thereof |
US9175266B2 (en) | 2012-07-23 | 2015-11-03 | Gamida Cell Ltd. | Enhancement of natural killer (NK) cell proliferation and activity |
US9567569B2 (en) | 2012-07-23 | 2017-02-14 | Gamida Cell Ltd. | Methods of culturing and expanding mesenchymal stem cells |
US20150216892A1 (en) | 2012-08-03 | 2015-08-06 | Aptamir Therapeutics, Inc. | Cell-specific delivery of mirna modulators for the treatment of obesity and related disorders |
CN104736551B (zh) | 2012-08-15 | 2017-07-28 | Ionis制药公司 | 使用改进的封端方案制备寡聚化合物的方法 |
EP2885313A4 (en) | 2012-08-20 | 2016-03-09 | Univ California | POLYNUCLEOTIDES WITH BIOREVERSIBLE GROUPS |
US9029335B2 (en) | 2012-10-16 | 2015-05-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
AR093058A1 (es) | 2012-10-18 | 2015-05-13 | Monsanto Technology Llc | Metodos y composiciones para el control de pestes en plantas |
WO2014066851A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-05-01 | Geron Corporation | C-myc antisense oligonucleotides and methods for using the same to treat cell-proliferative disorders |
AU2013337277B2 (en) | 2012-11-05 | 2018-03-08 | Foundation Medicine, Inc. | Novel NTRK1 fusion molecules and uses thereof |
US10683505B2 (en) | 2013-01-01 | 2020-06-16 | Monsanto Technology Llc | Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression |
BR112015015975A2 (pt) | 2013-01-01 | 2018-11-06 | A. B. Seeds Ltd. | moléculas de dsrna isoladas e métodos de uso das mesmas para silenciamento das moléculas alvo de interesse. |
CA2898326C (en) | 2013-01-18 | 2022-05-17 | Foundation Medicine, Inc. | Methods of treating cholangiocarcinoma |
US10000767B2 (en) | 2013-01-28 | 2018-06-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for plant pest control |
EP2951191B1 (en) | 2013-01-31 | 2018-10-17 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method of preparing oligomeric compounds using modified coupling protocols |
US9896688B2 (en) | 2013-02-22 | 2018-02-20 | Sirna Therapeutics, Inc. | Short interfering nucleic acid (siNA) molecules containing a 2′ internucleoside linkage |
WO2014130922A1 (en) | 2013-02-25 | 2014-08-28 | Trustees Of Boston University | Compositions and methods for treating fungal infections |
CA2905104A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-09 | Monsanto Technology Llc | Control of lolium species by topical application of herbicidal composition comprising dsrna |
MX364458B (es) | 2013-03-13 | 2019-04-26 | Monsanto Technology Llc | Métodos y composiciones para el control de malezas. |
SG11201507400SA (en) | 2013-03-14 | 2015-10-29 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof |
US20140283211A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Monsanto Technology Llc | Methods and Compositions for Plant Pest Control |
US10568328B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-25 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
EP2981617B1 (en) | 2013-04-04 | 2023-07-05 | President and Fellows of Harvard College | Therapeutic uses of genome editing with crispr/cas systems |
AU2014259755B2 (en) | 2013-05-01 | 2018-08-30 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating apolipoprotein (a) expression |
LT2999785T (lt) | 2013-05-22 | 2018-07-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serpina1 irna kompozicijos ir jų panaudojimo būdai |
TW202342750A (zh) | 2013-05-22 | 2023-11-01 | 美商阿尼拉製藥公司 | TMPRSS6 iRNA組成物及其使用方法 |
EP3004396B1 (en) | 2013-06-06 | 2019-10-16 | The General Hospital Corporation | Compositions for the treatment of cancer |
JP6869720B2 (ja) | 2013-06-13 | 2021-05-12 | アンチセンス セラピューティクス リミテッド | 併用療法 |
CA2918387C (en) | 2013-07-19 | 2021-11-02 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling leptinotarsa |
US9850496B2 (en) | 2013-07-19 | 2017-12-26 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
ES2750608T3 (es) | 2013-07-25 | 2020-03-26 | Exicure Inc | Construcciones esféricas a base de ácido nucleico como agentes inmunoestimulantes para uso profiláctico y terapéutico |
RS59991B1 (sr) | 2013-08-08 | 2020-04-30 | Scripps Research Inst | Metoda enzimskog in vitro obeležavanja specifičnog za položaj nukleinskih kiselina uvođenjem neprirodnih nukleotida |
JP6794258B2 (ja) | 2013-09-30 | 2020-12-02 | ジェロン・コーポレーションGeron Corporation | オリゴヌクレオチドについてのホスホロジアミデート骨格結合 |
US10077444B2 (en) | 2013-10-02 | 2018-09-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the LECT2 gene |
EP3052627B1 (en) | 2013-10-04 | 2018-08-22 | Novartis AG | Novel formats for organic compounds for use in rna interference |
JP6694811B2 (ja) | 2013-10-04 | 2020-05-20 | ノバルティス アーゲー | RNA干渉に使用するためのRNAi剤用の3’末端キャップ |
IL282747B2 (en) | 2013-10-04 | 2023-10-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Preparations and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene |
US10519446B2 (en) | 2013-10-04 | 2019-12-31 | Novartis Ag | Organic compounds to treat hepatitis B virus |
US10584387B2 (en) | 2013-10-09 | 2020-03-10 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Detection of hepatitis delta virus (HDV) for the diagnosis and treatment of Sjögren's syndrome and lymphoma |
US11162096B2 (en) | 2013-10-14 | 2021-11-02 | Ionis Pharmaceuticals, Inc | Methods for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript |
WO2015061246A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds |
EP3502270B1 (en) | 2013-10-21 | 2020-03-18 | The General Hospital Corporation | Methods relating to circulating tumor cell clusters and the treatment of cancer |
UA120426C2 (uk) | 2013-11-04 | 2019-12-10 | Монсанто Текнолоджі Елелсі | Композиція та спосіб для боротьби з членистоногими паразитами та зараженням шкідниками |
WO2015066708A1 (en) | 2013-11-04 | 2015-05-07 | Northwestern University | Quantification and spatio-temporal tracking of a target using a spherical nucleic acid (sna) |
RU2744194C2 (ru) | 2013-12-02 | 2021-03-03 | Фио Фармасьютикалс Корп | Иммунотерапия рака |
CN105939699B (zh) | 2013-12-03 | 2020-10-02 | 西北大学 | 脂质体颗粒、制备所述脂质体颗粒的方法以及其用途 |
US10385388B2 (en) | 2013-12-06 | 2019-08-20 | Swift Biosciences, Inc. | Cleavable competitor polynucleotides |
CA2844640A1 (en) | 2013-12-06 | 2015-06-06 | The University Of British Columbia | Method for treatment of castration-resistant prostate cancer |
UA119253C2 (uk) | 2013-12-10 | 2019-05-27 | Біолоджикс, Інк. | Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл |
IL294470A (en) | 2013-12-12 | 2022-09-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Complementary component irna compositions and methods for using them |
EP3082840B1 (en) | 2013-12-20 | 2021-03-24 | The General Hospital Corporation | Methods and assays relating to circulating tumor cells |
AU2015206585A1 (en) | 2014-01-15 | 2016-07-21 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control using EPSPS polynucleotides |
ES2694857T3 (es) | 2014-02-04 | 2018-12-27 | Genentech, Inc. | Smoothened mutante y métodos de uso de la misma |
WO2015118537A2 (en) | 2014-02-05 | 2015-08-13 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Micro-rnas and compositions comprising same for the treatment and diagnosis of serotonin-, adrenalin-, noradrenalin-, glutamate-, and corticotropin-releasing hormone- associated medical conditions |
CA2938857A1 (en) | 2014-02-11 | 2015-08-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Ketohexokinase (khk) irna compositions and methods of use thereof |
US10006027B2 (en) | 2014-03-19 | 2018-06-26 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating Ataxin 2 expression |
WO2015143246A1 (en) | 2014-03-19 | 2015-09-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for modulating ataxin 2 expression |
AU2015240761B2 (en) | 2014-04-01 | 2019-09-12 | Biogen Ma Inc. | Compositions for modulating SOD-1 expression |
CN106413390B (zh) | 2014-04-01 | 2019-09-27 | 孟山都技术公司 | 用于控制虫害的组合物和方法 |
HUE056155T2 (hu) | 2014-04-09 | 2022-01-28 | Scripps Research Inst | Nem-természetes vagy módosított nukleozid-trifoszfátok sejtekbe importálása nukleinsav-trifoszfát transzporterekkel |
WO2015164693A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid |
US11279934B2 (en) | 2014-04-28 | 2022-03-22 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Methods for treating cancer using nucleic acids targeting MDM2 or MYCN |
SG10201809953QA (en) | 2014-05-01 | 2018-12-28 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods for modulating complement factor b expression |
EP3811977A1 (en) | 2014-05-01 | 2021-04-28 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method for synthesis of reactive conjugate clusters |
WO2015175510A1 (en) | 2014-05-12 | 2015-11-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating a serpinc1-associated disorder |
CN112301031A (zh) | 2014-05-22 | 2021-02-02 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 血管紧张素原(AGT)iRNA组合物及其使用方法 |
JP2017518307A (ja) | 2014-06-02 | 2017-07-06 | チルドレンズ メディカル センター コーポレーション | 免疫調節のための方法および組成物 |
CA2953216C (en) | 2014-06-04 | 2020-12-22 | Exicure, Inc. | Multivalent delivery of immune modulators by liposomal spherical nucleic acids for prophylactic or therapeutic applications |
KR102524543B1 (ko) | 2014-06-10 | 2023-04-20 | 에라스무스 유니버시티 메디컬 센터 로테르담 | 폼페병의 치료에 유용한 안티센스 올리고뉴클레오티드 |
CA2953347A1 (en) | 2014-06-23 | 2015-12-30 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for regulating gene expression via rna interference |
US10301624B2 (en) | 2014-06-25 | 2019-05-28 | The General Hospital Corporation | Targeting human satellite II (HSATII) |
US11807857B2 (en) | 2014-06-25 | 2023-11-07 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression |
RU2017104284A (ru) | 2014-07-15 | 2018-08-15 | Йиссум Рисеч Девелопмент Компани Оф Зе Хебрю Юниверсити Оф Джерусалем Лтд. | Выделенные полипептиды cd44 и их применение |
US9951327B1 (en) | 2014-07-17 | 2018-04-24 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Efficient and rapid method for assembling and cloning double-stranded DNA fragments |
WO2016018887A1 (en) | 2014-07-29 | 2016-02-04 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling insect pests |
US10653747B2 (en) | 2014-07-31 | 2020-05-19 | Uab Research Foundation | ApoE mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol |
JP6797108B2 (ja) | 2014-08-19 | 2020-12-09 | ノースウェスタン ユニバーシティ | タンパク質/オリゴヌクレオチドコアシェルナノ粒子治療薬 |
WO2016030899A1 (en) | 2014-08-28 | 2016-03-03 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Methods of treating amyotrophic lateral scleroses |
WO2016033424A1 (en) | 2014-08-29 | 2016-03-03 | Genzyme Corporation | Methods for the prevention and treatment of major adverse cardiovascular events using compounds that modulate apolipoprotein b |
LT3185957T (lt) | 2014-08-29 | 2022-09-26 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Patisiranas, skirtas naudoti transtiretino amiloidozei gydyti |
EP4043567B1 (en) | 2014-08-29 | 2024-05-08 | The Children's Medical Center Corporation | Methods and compositions for the treatment of cancer |
JP6836987B2 (ja) | 2014-09-05 | 2021-03-03 | フィオ ファーマシューティカルズ コーポレーションPhio Pharmaceuticals Corp. | Tyrまたはmmp1を標的とする核酸を用いて老化および皮膚障害を処置するための方法 |
EP3191591A1 (en) | 2014-09-12 | 2017-07-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotide agents targeting complement component c5 and methods of use thereof |
EP3663403A1 (en) | 2014-09-26 | 2020-06-10 | University of Massachusetts | Rna-modulating agents |
JOP20200115A1 (ar) | 2014-10-10 | 2017-06-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | تركيبات وطرق لتثبيط التعبير الجيني عن hao1 (حمض أوكسيداز هيدروكسيلي 1 (أوكسيداز جليكولات)) |
WO2016061487A1 (en) | 2014-10-17 | 2016-04-21 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotide agents targeting aminolevulinic acid synthase-1 (alas1) and uses thereof |
EP3212794B1 (en) | 2014-10-30 | 2021-04-07 | Genzyme Corporation | Polynucleotide agents targeting serpinc1 (at3) and methods of use thereof |
JOP20200092A1 (ar) | 2014-11-10 | 2017-06-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | تركيبات iRNA لفيروس الكبد B (HBV) وطرق لاستخدامها |
EP3221451A1 (en) | 2014-11-17 | 2017-09-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Apolipoprotein c3 (apoc3) irna compositions and methods of use thereof |
CA2968531A1 (en) | 2014-11-21 | 2016-05-26 | Northwestern University | The sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates |
CA2969464A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | Tod M. Woolf | Compositions and methods for editing nucleic acids in cells utilizing oligonucleotides |
US9688707B2 (en) | 2014-12-30 | 2017-06-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom |
US10793855B2 (en) | 2015-01-06 | 2020-10-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript |
WO2016115490A1 (en) | 2015-01-16 | 2016-07-21 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulation of dux4 |
US10968449B2 (en) | 2015-01-22 | 2021-04-06 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
EP3247988A4 (en) | 2015-01-23 | 2018-12-19 | Vanderbilt University | A robust interferometer and methods of using same |
WO2016130600A2 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Duke University | Compositions and methods for epigenome editing |
CA2976445A1 (en) | 2015-02-13 | 2016-08-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof |
US20180200387A1 (en) | 2015-02-23 | 2018-07-19 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of human genetic diseases including hemoglobinopathies |
WO2016137923A1 (en) | 2015-02-23 | 2016-09-01 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds |
US11129844B2 (en) | 2015-03-03 | 2021-09-28 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating MECP2 expression |
EP3268475B1 (en) | 2015-03-11 | 2020-10-21 | Yissum Research and Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. | Decoy oligonucleotides for the treatment of diseases |
EP3273971A4 (en) | 2015-03-27 | 2018-12-05 | Yeda Research and Development Co. Ltd. | Methods of treating motor neuron diseases |
US20160348073A1 (en) | 2015-03-27 | 2016-12-01 | President And Fellows Of Harvard College | Modified t cells and methods of making and using the same |
US10961532B2 (en) | 2015-04-07 | 2021-03-30 | The General Hospital Corporation | Methods for reactivating genes on the inactive X chromosome |
MX2017012610A (es) | 2015-04-08 | 2018-03-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones y metodos para inhibir la expresion del gen lect2. |
WO2016167780A1 (en) | 2015-04-16 | 2016-10-20 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript |
AU2016257871A1 (en) | 2015-05-04 | 2017-11-30 | Beeologics, Inc. | Compositions and methods for controlling arthropod parasite and pest infestations |
US20180161300A1 (en) | 2015-05-11 | 2018-06-14 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Citrin inhibitors for the treatment of cancer |
AU2016270870A1 (en) | 2015-06-02 | 2018-01-04 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant |
WO2016196782A1 (en) | 2015-06-03 | 2016-12-08 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for introducing nucleic acids into plants |
WO2016201301A1 (en) | 2015-06-12 | 2016-12-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof |
WO2016205323A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotde agents targeting hydroxyacid oxidase (glycolate oxidase, hao1) and methods of use thereof |
WO2016209862A1 (en) | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Glucokinase (gck) irna compositions and methods of use thereof |
US20180161429A1 (en) | 2015-06-26 | 2018-06-14 | Beth Israel Deaconess Medical Center Inc. | Cancer therapy targeting tetraspanin 33 (tspan33) in myeloid derived suppressor cells |
AU2016287499B2 (en) | 2015-06-29 | 2022-08-04 | Caris Science, Inc. | Therapeutic oligonucleotides |
US11001845B2 (en) | 2015-07-06 | 2021-05-11 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Nucleic acid molecules targeting superoxide dismutase 1 (SOD1) |
WO2017007825A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating neurological disorders using a synergistic small molecule and nucleic acids therapeutic approach |
WO2017011286A1 (en) | 2015-07-10 | 2017-01-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Insulin-like growth factor binding protein, acid labile subunit (igfals) and insulin-like growth factor 1 (igf-1) irna compositions and methods of use thereof |
CA2993652A1 (en) | 2015-07-28 | 2017-02-02 | Caris Science, Inc. | Targeted oligonucleotides |
WO2017021963A1 (en) | 2015-08-03 | 2017-02-09 | Biokine Therapeutics Ltd. | Cxcr4 binding agents for treatment of diseases |
WO2017021961A1 (en) | 2015-08-04 | 2017-02-09 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Methods of screening for riboswitches and attenuators |
US10130651B2 (en) | 2015-08-07 | 2018-11-20 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | RNAi Therapy for Hepatitis B Virus Infection |
PE20181131A1 (es) | 2015-09-02 | 2018-07-17 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSICIONES DE ARNi PARA LIGANDO 1 DE MUERTE CELULAR PROGRAMADA 1 (PD-L1) Y METODOS DE USO DE LAS MISMAS |
WO2017064546A1 (en) | 2015-09-24 | 2017-04-20 | Crispr Therapeutics Ag | Novel family of rna-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications |
EP4285912A2 (en) | 2015-09-25 | 2023-12-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating ataxin 3 expression |
EP4089175A1 (en) | 2015-10-13 | 2022-11-16 | Duke University | Genome engineering with type i crispr systems in eukaryotic cells |
EP3365446A4 (en) | 2015-10-19 | 2019-06-26 | Phio Pharmaceuticals Corp. | SELF ADMINISTRATION-REDUCED SIZE NUCLEIC ACID COMPOUNDS TARGETING LONGS NON-CODING LONGS |
CA3003267A1 (en) | 2015-10-26 | 2017-05-04 | Translate Bio Ma, Inc. | Nanoparticle formulations for delivery of nucleic acid complexes |
WO2017072590A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of duchenne muscular dystrophy |
EP3922649B1 (en) | 2015-10-30 | 2024-01-17 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-htra1 antibodies and methods of use thereof |
EP3370734B1 (en) | 2015-11-05 | 2023-01-04 | Children's Hospital Los Angeles | Antisense oligo for use in treating acute myeloid leukemia |
MX2018005332A (es) | 2015-11-06 | 2018-11-09 | Crispr Therapeutics Ag | Materiales y metodos para tratamiento de la enfermedad de almacenamiento de glucogeno tipo 1a. |
US11174484B2 (en) | 2015-11-10 | 2021-11-16 | B. G. Negev Technologies And Applications Ltd., At Ben- Gurion University | Means and methods for reducing tumorigenicity of cancer stem cells |
WO2017087708A1 (en) | 2015-11-19 | 2017-05-26 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Lymphocyte antigen cd5-like (cd5l)-interleukin 12b (p40) heterodimers in immunity |
EP3967758A1 (en) | 2015-12-01 | 2022-03-16 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of alpha-1 antitrypsin deficiency |
EP3389670A4 (en) | 2015-12-04 | 2020-01-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | METHODS OF TREATING BREAST CANCER |
WO2017099579A1 (en) | 2015-12-07 | 2017-06-15 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Enzymatic replacement therapy and antisense therapy for pompe disease |
WO2017106767A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | The Scripps Research Institute | Production of unnatural nucleotides using a crispr/cas9 system |
AU2016376191A1 (en) | 2015-12-23 | 2018-07-12 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis and/or frontal temporal lobular degeneration |
WO2017120365A1 (en) | 2016-01-05 | 2017-07-13 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing lrrk2 expression |
US10627396B2 (en) | 2016-01-29 | 2020-04-21 | Vanderbilt University | Free-solution response function interferometry |
WO2017134529A1 (en) | 2016-02-02 | 2017-08-10 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome |
CN109071625A (zh) | 2016-02-04 | 2018-12-21 | 柯瑞斯公司 | 平滑化突变体和其使用方法 |
US20190112353A1 (en) | 2016-02-18 | 2019-04-18 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome |
WO2017147087A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Treatment methods for fibrosis targeting smoc2 |
WO2017161168A1 (en) | 2016-03-16 | 2017-09-21 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of dyrk1b expression |
EP3429690A4 (en) | 2016-03-16 | 2019-10-23 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | METHOD FOR MODULATING KEAP1 |
EP3429632B1 (en) | 2016-03-16 | 2023-01-04 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of hereditary haemochromatosis |
EP3430137A4 (en) | 2016-03-18 | 2019-11-06 | Caris Science, Inc. | OLIGONUCLEOTIDE THONES AND USES THEREOF |
EP3445388B1 (en) | 2016-04-18 | 2024-04-17 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies |
MA45295A (fr) | 2016-04-19 | 2019-02-27 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composition d'arni de protéine de liaison de lipoprotéines haute densité (hdlbp/vigiline) et procédés pour les utiliser |
WO2017191503A1 (en) | 2016-05-05 | 2017-11-09 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies |
IL306052A (en) | 2016-05-25 | 2023-11-01 | Caris Science Inc | Oligonucleotide probes and their uses |
JP2019518028A (ja) | 2016-06-10 | 2019-06-27 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | 補体成分C5iRNA組成物及び発作性夜間血色素尿症(PNH)を処置するためのその使用方法 |
CA3023514A1 (en) | 2016-06-17 | 2017-12-21 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of gys1 expression |
EP3475295B1 (en) | 2016-06-24 | 2022-08-10 | The Scripps Research Institute | Novel nucleoside triphosphate transporter and uses thereof |
WO2018002762A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-04 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) and other related disorders |
US11564997B2 (en) | 2016-06-29 | 2023-01-31 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of friedreich ataxia and other related disorders |
US11427838B2 (en) | 2016-06-29 | 2022-08-30 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Materials and methods for treatment of myotonic dystrophy type 1 (DM1) and other related disorders |
CN110214149B (zh) | 2016-07-06 | 2024-05-14 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | 用于治疗疼痛相关病症的材料和方法 |
AU2017292173B2 (en) | 2016-07-06 | 2022-01-13 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Materials and methods for treatment of pain related disorders |
WO2018007871A1 (en) | 2016-07-08 | 2018-01-11 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of transthyretin amyloidosis |
EP3481430A4 (en) | 2016-07-11 | 2020-04-01 | Translate Bio Ma, Inc. | NUCLEIC ACID CONJUGATES AND USES THEREOF |
KR20230088522A (ko) | 2016-07-21 | 2023-06-19 | 맥스시티 인코포레이티드 | 게놈 dna를 변경하기 위한 방법 및 조성물 |
WO2018020323A2 (en) | 2016-07-25 | 2018-02-01 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of fatty acid disorders |
JOP20170161A1 (ar) | 2016-08-04 | 2019-01-30 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | عوامل RNAi للعدوى بفيروس التهاب الكبد ب |
NL2017295B1 (en) | 2016-08-05 | 2018-02-14 | Univ Erasmus Med Ct Rotterdam | Antisense oligomeric compound for Pompe disease |
NL2017294B1 (en) | 2016-08-05 | 2018-02-14 | Univ Erasmus Med Ct Rotterdam | Natural cryptic exon removal by pairs of antisense oligonucleotides. |
WO2018039629A2 (en) | 2016-08-25 | 2018-03-01 | Northwestern University | Micellar spherical nucleic acids from thermoresponsive, traceless templates |
CA3033756A1 (en) | 2016-09-02 | 2018-03-08 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | 4'-phosphate analogs and oligonucleotides comprising the same |
WO2018055577A1 (en) | 2016-09-23 | 2018-03-29 | Synthena Ag | Mixed tricyclo-dna, 2'-modified rna oligonucleotide compositions and uses thereof |
WO2018067900A1 (en) | 2016-10-06 | 2018-04-12 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method of conjugating oligomeric compounds |
US11459568B2 (en) | 2016-10-31 | 2022-10-04 | University Of Massachusetts | Targeting microRNA-101-3p in cancer therapy |
JOP20190104A1 (ar) | 2016-11-10 | 2019-05-07 | Ionis Pharmaceuticals Inc | مركبات وطرق لتقليل التعبير عن atxn3 |
US11033570B2 (en) | 2016-12-02 | 2021-06-15 | Cold Spring Harbor Laboratory | Modulation of Lnc05 expression |
CA3045667A1 (en) | 2016-12-13 | 2018-06-21 | Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) | Methods of exogenous drug activation of chemical-induced signaling complexes expressed in engineered cells in vitro and in vivo |
SG10201913552UA (en) | 2016-12-16 | 2020-03-30 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Methods for treating or preventing ttr-associated diseases using transthyretin (ttr) irna compositions |
RU2019126483A (ru) | 2017-01-23 | 2021-02-24 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Варианты 17-бета-гидроксистероиддегидрогеназы 13 (hsd17b13) и их применение |
JP2020508056A (ja) | 2017-02-22 | 2020-03-19 | クリスパー・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフトCRISPR Therapeutics AG | 遺伝子編集のための組成物および方法 |
EP3585898A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-01-01 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 1 (sca1) and other spinocerebellar ataxia type 1 protein (atxn1) gene related conditions or disorders |
US20200040061A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-02-06 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of early onset parkinson's disease (park1) and other synuclein, alpha (snca) gene related conditions or disorders |
US20200216857A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-07-09 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 2 (sca2) and other spinocerebellar ataxia type 2 protein (atxn2) gene related conditions or disorders |
EP3585899A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-01-01 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of primary hyperoxaluria type 1 (ph1) and other alanine-glyoxylate aminotransferase (agxt) gene related conditions or disorders |
US11180756B2 (en) | 2017-03-09 | 2021-11-23 | Ionis Pharmaceuticals | Morpholino modified oligomeric compounds |
WO2018183969A1 (en) | 2017-03-30 | 2018-10-04 | California Institute Of Technology | Barcoded rapid assay platform for efficient analysis of candidate molecules and methods of making and using the platform |
BR112019021852A2 (pt) | 2017-04-18 | 2020-06-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Agente de rnai e uma vacina contra hbv, uso ou método e kit para tratamento |
EP3612546B1 (en) | 2017-04-20 | 2022-07-13 | Synthena AG | Modified oligomeric compounds comprising tricyclo-dna nucleosides and uses thereof |
WO2018193428A1 (en) | 2017-04-20 | 2018-10-25 | Synthena Ag | Modified oligomeric compounds comprising tricyclo-dna nucleosides and uses thereof |
CA3060514A1 (en) | 2017-04-20 | 2018-10-25 | Atyr Pharma, Inc. | Compositions and methods for treating lung inflammation |
WO2018195486A1 (en) | 2017-04-21 | 2018-10-25 | The Broad Institute, Inc. | Targeted delivery to beta cells |
MX2019013514A (es) | 2017-05-12 | 2020-01-20 | Crispr Therapeutics Ag | Materiales y metodos para modificar celulas por ingenieria genetica y usos de los mismos en inmunooncologia. |
EP3652316A4 (en) | 2017-07-11 | 2021-04-07 | Synthorx, Inc. | INTEGRATION OF NON-NATURAL NUCLEOTIDES AND METHOD FOR THEREFORE |
AU2018314159A1 (en) | 2017-07-13 | 2020-01-30 | Northwestern University | General and direct method for preparing oligonucleotide-functionalized metal-organic framework nanoparticles |
AU2018301477A1 (en) | 2017-07-13 | 2020-02-27 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Lactate dehydrogenase a (LDHA) iRNA compositions and methods of use thereof |
TWI757528B (zh) | 2017-08-03 | 2022-03-11 | 美商欣爍克斯公司 | 用於增生及感染性疾病治療之細胞激素結合物 |
US11197884B2 (en) | 2017-08-18 | 2021-12-14 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of the notch signaling pathway for treatment of respiratory disorders |
WO2019051173A1 (en) | 2017-09-08 | 2019-03-14 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | MODULATORS OF SMAD7 EXPRESSION |
KR20200089656A (ko) | 2017-09-19 | 2020-07-27 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 트랜스타이레틴(ttr) 매개 아밀로이드증을 치료하기 위한 조성물 및 방법 |
EP3697907A1 (en) | 2017-10-17 | 2020-08-26 | CRISPR Therapeutics AG | Compositions and methods for gene editing for hemophilia a |
EP3701029A1 (en) | 2017-10-26 | 2020-09-02 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies |
CA3078971A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof |
TWI809004B (zh) | 2017-11-09 | 2023-07-21 | 美商Ionis製藥公司 | 用於降低snca表現之化合物及方法 |
MA50578A (fr) | 2017-11-09 | 2021-09-15 | Vertex Pharma | Systèmes crispr/cas pour le traitement de dmd |
WO2019099610A1 (en) | 2017-11-16 | 2019-05-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Kisspeptin 1 (kiss1) irna compositions and methods of use thereof |
EP3714054A1 (en) | 2017-11-20 | 2020-09-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serum amyloid p component (apcs) irna compositions and methods of use thereof |
CN111727251A (zh) | 2017-11-21 | 2020-09-29 | 克里斯珀医疗股份公司 | 用于治疗常染色体显性色素性视网膜炎的材料和方法 |
SG11202005147WA (en) | 2017-12-05 | 2020-06-29 | Vertex Pharma | Crispr-cas9 modified cd34+ human hematopoietic stem and progenitor cells and uses thereof |
WO2019118935A1 (en) | 2017-12-14 | 2019-06-20 | Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership | Novel rna-programmable endonuclease systems and their use in genome editing and other applications |
MX2020006012A (es) | 2017-12-18 | 2020-09-14 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones de arni de la caja 1 del grupo de alta movilidad (hmgb1) y métodos de uso de las mismas. |
WO2019126641A2 (en) | 2017-12-21 | 2019-06-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of frataxin expression |
WO2019123430A1 (en) | 2017-12-21 | 2019-06-27 | Casebia Therapeutics Llp | Materials and methods for treatment of usher syndrome type 2a and/or non-syndromic autosomal recessive retinitis pigmentosa (arrp) |
AU2018393050A1 (en) | 2017-12-21 | 2020-06-18 | Bayer Healthcare Llc | Materials and methods for treatment of Usher Syndrome Type 2A |
EP3737762A1 (en) | 2018-01-12 | 2020-11-18 | CRISPR Therapeutics AG | Compositions and methods for gene editing by targeting transferrin |
MX2020007369A (es) | 2018-01-15 | 2020-10-28 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores de la expresion de dnm2. |
US20190233816A1 (en) | 2018-01-26 | 2019-08-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Structure-guided chemical modification of guide rna and its applications |
EP3749767A1 (en) | 2018-02-05 | 2020-12-16 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies |
MA51788A (fr) | 2018-02-05 | 2020-12-16 | Vertex Pharma | Substances et méthodes pour traiter des hémoglobinopathies |
WO2019155465A1 (en) | 2018-02-08 | 2019-08-15 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Methods of identifying and using agents for treating diseases associated with intestinal barrier dysfunction |
US20210130824A1 (en) | 2018-02-16 | 2021-05-06 | Crispr Therapeutics Ag | Compositions and methods for gene editing by targeting fibrinogen-alpha |
MA52426A (fr) | 2018-02-26 | 2021-06-02 | Synthorx Inc | Conjugués d'il-15 et leurs utilisations |
MX2020009147A (es) | 2018-03-02 | 2020-09-28 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores de la expresion de irf4. |
WO2019169243A1 (en) | 2018-03-02 | 2019-09-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for the modulation of amyloid-beta precursor protein |
US11897911B2 (en) | 2018-03-07 | 2024-02-13 | Sanofi | Nucleotide precursors, nucleotide analogs and oligomeric compounds containing the same |
MA52074A (fr) | 2018-03-19 | 2021-01-27 | Bayer Healthcare Llc | Nouveaux systèmes d'endonucléase à arn programmable et leurs utilisations |
EP3768694A4 (en) | 2018-03-22 | 2021-12-29 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating fmr1 expression |
WO2019186514A2 (en) | 2018-03-30 | 2019-10-03 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universitat Bonn | Aptamers for targeted activaton of t cell-mediated immunity |
CN112272516B (zh) | 2018-04-06 | 2023-05-30 | 儿童医疗中心有限公司 | 用于体细胞重新编程和调整印记的组合物和方法 |
MX2020010721A (es) | 2018-04-11 | 2020-11-06 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores de la expresion de ezh2. |
WO2019204668A1 (en) | 2018-04-18 | 2019-10-24 | Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership | Compositions and methods for knockdown of apo(a) by gene editing for treatment of cardiovascular disease |
US11987804B2 (en) | 2018-04-27 | 2024-05-21 | Seattle Children's Hospital | Rapamycin resistant cells |
US20210355497A1 (en) | 2018-05-09 | 2021-11-18 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for reducing fxi expression |
JP2021522800A (ja) | 2018-05-09 | 2021-09-02 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | Atxn3発現を低減するための化合物及び方法 |
TW202016304A (zh) | 2018-05-14 | 2020-05-01 | 美商阿尼拉製藥公司 | 血管收縮素原(AGT)iRNA組成物及其使用方法 |
US11833168B2 (en) | 2018-06-14 | 2023-12-05 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for increasing STMN2 expression |
MX2020013653A (es) | 2018-06-27 | 2021-03-02 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Compuestos y metodos para la reduccion de la expresion de lrrk2. |
EP3814499A2 (en) | 2018-06-28 | 2021-05-05 | CRISPR Therapeutics AG | Compositions and methods for genomic editing by insertion of donor polynucleotides |
EP3826645A4 (en) | 2018-07-25 | 2023-05-17 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | COMPOUNDS AND METHODS FOR REDUCING ATXN2 EXPRESSION |
EA202190528A1 (ru) | 2018-08-13 | 2021-04-23 | Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. | КОМПОЗИЦИИ АГЕНТОВ дцРНК ВИРУСА ГЕПАТИТА B (HBV) И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ |
TW202020157A (zh) | 2018-08-16 | 2020-06-01 | 美商艾爾妮蘭製藥公司 | 用於抑制lect2基因表現之組合物及方法 |
EP3843845A4 (en) | 2018-08-29 | 2022-05-11 | University Of Massachusetts | INHIBITION OF PROTEIN KINASE FOR THE TREATMENT OF FRIEDREICH'S ATAXIA |
EP3849584A4 (en) | 2018-09-14 | 2022-06-22 | Northwestern University | PROGRAMMING PROTEIN POLYMERIZATION WITH DNA |
JP2022500003A (ja) | 2018-09-18 | 2022-01-04 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | ケトヘキソキナーゼ(KHK)iRNA組成物およびその使用方法 |
MX2021004455A (es) | 2018-10-17 | 2021-08-11 | Crispr Therapeutics Ag | Composiciones y métodos para administrar transgenes. |
US10913951B2 (en) | 2018-10-31 | 2021-02-09 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Silencing of HNF4A-P2 isoforms with siRNA to improve hepatocyte function in liver failure |
TW202028222A (zh) | 2018-11-14 | 2020-08-01 | 美商Ionis製藥公司 | Foxp3表現之調節劑 |
JP2022509059A (ja) | 2018-11-15 | 2022-01-20 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | Irf5発現の調節因子 |
IL263184A (en) | 2018-11-21 | 2020-05-31 | Yarden Yosef | Method of treating cancer and compositions for same |
WO2020118259A1 (en) | 2018-12-06 | 2020-06-11 | Northwestern University | Protein crystal engineering through dna hybridization interactions |
US20220056455A1 (en) | 2018-12-20 | 2022-02-24 | Praxis Precision Medicines, Inc. | Compositions and methods for the treatment of kcnt1 related disorders |
EP4285929A3 (en) | 2018-12-20 | 2024-03-06 | Humabs Biomed SA | Combination hbv therapy |
MX2021008628A (es) | 2019-01-16 | 2021-11-17 | Genzyme Corp | Composiciones de arni para serpinc1 y metodos de uso de las mismas. |
US11214803B2 (en) | 2019-01-31 | 2022-01-04 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of YAP1 expression |
BR112021014415A2 (pt) | 2019-02-06 | 2021-09-21 | Synthorx, Inc. | Conjugados de il-2 e métodos de uso dos mesmos |
EP3923992A1 (en) | 2019-02-15 | 2021-12-22 | CRISPR Therapeutics AG | Gene editing for hemophilia a with improved factor viii expression |
WO2020171889A1 (en) | 2019-02-19 | 2020-08-27 | University Of Rochester | Blocking lipid accumulation or inflammation in thyroid eye disease |
EP3927378A1 (en) | 2019-02-21 | 2021-12-29 | Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. | Method for reduction drug-induced nephrotoxicity |
MX2021010152A (es) | 2019-02-27 | 2021-09-14 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores de la expresion de malat1. |
WO2020186059A2 (en) | 2019-03-12 | 2020-09-17 | Crispr Therapeutics Ag | Novel high fidelity rna-programmable endonuclease systems and uses thereof |
CA3134486A1 (en) | 2019-03-29 | 2020-10-08 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the treatment of kras associated diseases or disorders |
CN117431244A (zh) | 2019-03-29 | 2024-01-23 | Ionis制药公司 | 用于调节ube3a-ats的化合物和方法 |
CN113795581A (zh) | 2019-05-03 | 2021-12-14 | 迪克纳制药公司 | 具有缩短的有义链的双链核酸抑制剂分子 |
US20210047649A1 (en) | 2019-05-08 | 2021-02-18 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Crispr/cas all-in-two vector systems for treatment of dmd |
SG11202112240VA (en) | 2019-05-13 | 2021-12-30 | Vir Biotechnology Inc | Compositions and methods for treating hepatitis b virus (hbv) infection |
BR112021025130A2 (pt) | 2019-06-14 | 2022-03-15 | Scripps Research Inst | Reagentes e métodos para replicação, transcrição e tradução em organismos semissintéticos |
CA3142521A1 (en) | 2019-06-17 | 2020-12-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions and methods for editing beta-globin for treatment of hemaglobinopathies |
EP3956450A4 (en) | 2019-07-26 | 2022-11-16 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | COMPOUNDS AND METHODS FOR MODULATION OF GFAP |
EP4007811A2 (en) | 2019-08-01 | 2022-06-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Carboxypeptidase b2 (cpb2) irna compositions and methods of use thereof |
EP4007812A1 (en) | 2019-08-01 | 2022-06-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serpin family f member 2 (serpinf2) irna compositions and methods of use thereof |
EP4013870A1 (en) | 2019-08-13 | 2022-06-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Small ribosomal protein subunit 25 (rps25) irna agent compositions and methods of use thereof |
KR20220062517A (ko) | 2019-08-15 | 2022-05-17 | 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 | 결합 변형된 올리고머 화합물 및 이의 용도 |
JP2022544280A (ja) | 2019-08-15 | 2022-10-17 | シンソークス, インコーポレイテッド | Il-2コンジュゲートを用いる免疫腫瘍学併用療 |
MX2022002053A (es) | 2019-08-23 | 2022-03-17 | Synthorx Inc | Conjugados de il-15 y sus usos. |
MX2022002689A (es) | 2019-09-03 | 2022-04-07 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones y metodos para inhibir la expresion del gen de quimiotaxina derivada de celulas de leucocitos 2 (lect2). |
CN114746122A (zh) | 2019-09-10 | 2022-07-12 | 新索思股份有限公司 | Il-2缀合物和治疗自身免疫性疾病的使用方法 |
EP4038189A1 (en) | 2019-10-04 | 2022-08-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for silencing ugt1a1 gene expression |
US20240141358A1 (en) | 2019-10-18 | 2024-05-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Solute carrier family member irna compositions and methods of use thereof |
KR20220084399A (ko) | 2019-10-22 | 2022-06-21 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 보체 성분 C3 iRNA 조성물 및 이의 사용 방법 |
EP4051796A1 (en) | 2019-11-01 | 2022-09-07 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for silencing dnajb1-prkaca fusion gene expression |
MX2022004388A (es) | 2019-11-01 | 2022-05-06 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones de agentes de arni de huntingtina (htt) y metodos de uso de las mismas. |
WO2021091986A1 (en) | 2019-11-04 | 2021-05-14 | Synthorx, Inc. | Interleukin 10 conjugates and uses thereof |
EP4058577A1 (en) | 2019-11-13 | 2022-09-21 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating an angiotensinogen- (agt-) associated disorder |
US20230056569A1 (en) | 2019-11-22 | 2023-02-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Ataxin3 (atxn3) rnai agent compositions and methods of use thereof |
CN115335521A (zh) | 2019-11-27 | 2022-11-11 | 克里斯珀医疗股份公司 | 合成rna分子的方法 |
MX2022006221A (es) * | 2019-11-27 | 2022-08-10 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Síntesis de oligonucleótidos de tipo 3'- arn. |
IL293824A (en) | 2019-12-13 | 2022-08-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Compositions of RNA material (c9orf72) human chromosome 9 open reading frame 72 and methods of using them |
WO2021126734A1 (en) | 2019-12-16 | 2021-06-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof |
EP4077674A1 (en) | 2019-12-18 | 2022-10-26 | Alia Therapeutics S.R.L. | Compositions and methods for treating retinitis pigmentosa |
JP2023511082A (ja) | 2020-01-15 | 2023-03-16 | ディセルナ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 4’-o-メチレンホスホネート核酸及びその類似体 |
WO2021154705A1 (en) | 2020-01-27 | 2021-08-05 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Rab13 and net1 antisense oligonucleotides to treat metastatic cancer |
WO2021154941A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions for use in the treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) |
JP2023514190A (ja) | 2020-02-10 | 2023-04-05 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | Vegf-a発現をサイレンシングするための組成物および方法 |
KR20220143106A (ko) | 2020-02-18 | 2022-10-24 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 아포지질단백질 C3 (APOC3) iRNA 조성물 및 이의 사용 방법 |
WO2021174019A1 (en) | 2020-02-28 | 2021-09-02 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating smn2 |
WO2021178607A1 (en) | 2020-03-05 | 2021-09-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing complement component c3-associated diseases |
MX2022011009A (es) | 2020-03-06 | 2022-10-07 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones de acido ribonucleico de interferencia (arni) de ketohexocinasa (khk) y metodos de uso de las mismas. |
WO2021188611A1 (en) | 2020-03-18 | 2021-09-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating subjects having a heterozygous alanine-glyoxylate aminotransferase gene (agxt) variant |
TW202204615A (zh) | 2020-03-26 | 2022-02-01 | 美商阿尼拉製藥公司 | 冠狀病毒iRNA組成物及其使用方法 |
WO2021202443A2 (en) | 2020-03-30 | 2021-10-07 | Alnylam Pharmaceucticals, Inc. | Compositions and methods for silencing dnajc15 gene expression |
CA3179411A1 (en) | 2020-04-06 | 2021-10-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for silencing myoc expression |
EP4133077A1 (en) | 2020-04-07 | 2023-02-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transmembrane serine protease 2 (tmprss2) irna compositions and methods of use thereof |
CN116134135A (zh) | 2020-04-07 | 2023-05-16 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 用于沉默scn9a表达的组合物和方法 |
EP4133076A1 (en) | 2020-04-07 | 2023-02-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Angiotensin-converting enzyme 2 (ace2) irna compositions and methods of use thereof |
EP4143319A1 (en) | 2020-04-27 | 2023-03-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Apolipoprotein e (apoe) irna agent compositions and methods of use thereof |
IL297680A (en) | 2020-04-30 | 2022-12-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | IRNA compounds complement factor b (cfb) and methods of using them |
EP4143321A2 (en) | 2020-05-01 | 2023-03-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating atxn1 |
WO2021231692A1 (en) | 2020-05-15 | 2021-11-18 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of otoferlin (otof) |
EP4150076A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-03-22 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of methyl-cpg binding protein 2 (mecp2) |
WO2021231679A1 (en) | 2020-05-15 | 2021-11-18 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of gap junction protein beta 2 (gjb2) |
CA3162416C (en) | 2020-05-15 | 2023-07-04 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate synthetase (ass1) |
EP4150086A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-03-22 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of leucine rich repeat kinase 2 (lrrk2) |
EP4150089A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-03-22 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of retinoschisin 1 (rs1) |
EP4150077A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-03-22 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of transmembrane channel-like protein 1 (tmc1) |
EP4150078A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-03-22 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate lyase (asl) |
WO2021237097A1 (en) | 2020-05-21 | 2021-11-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting marc1 gene expression |
US20230203484A1 (en) | 2020-05-22 | 2023-06-29 | Wave Life Sciences Ltd. | Double stranded oligonucleotide compositions and methods relating thereto |
US11408000B2 (en) | 2020-06-03 | 2022-08-09 | Triplet Therapeutics, Inc. | Oligonucleotides for the treatment of nucleotide repeat expansion disorders associated with MSH3 activity |
EP4161552A1 (en) | 2020-06-05 | 2023-04-12 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for treating neoplasia |
EP4162050A1 (en) | 2020-06-09 | 2023-04-12 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Rnai compositions and methods of use thereof for delivery by inhalation |
WO2021257782A1 (en) | 2020-06-18 | 2021-12-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | XANTHINE DEHYDROGENASE (XDH) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF |
KR20230042023A (ko) | 2020-06-24 | 2023-03-27 | 비르 바이오테크놀로지, 인코포레이티드 | 조작된 b형 간염 바이러스 중화 항체 및 이의 용도 |
JP2023531509A (ja) | 2020-06-25 | 2023-07-24 | シンソークス, インコーポレイテッド | Il-2コンジュゲートおよび抗egfr抗体を用いる免疫腫瘍学併用療法 |
WO2022006134A2 (en) | 2020-06-29 | 2022-01-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating plp1 |
KR20230061389A (ko) | 2020-08-04 | 2023-05-08 | 다이서나 파마수이티컬, 인크. | 올리고뉴클레오티드의 전신 전달 |
EP4217489A1 (en) | 2020-09-24 | 2023-08-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Dipeptidyl peptidase 4 (dpp4) irna compositions and methods of use thereof |
US20230392134A1 (en) | 2020-09-30 | 2023-12-07 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis |
EP3978608A1 (en) | 2020-10-05 | 2022-04-06 | SQY Therapeutics | Oligomeric compound for dystrophin rescue in dmd patients throughout skipping of exon-51 |
EP4225917A1 (en) | 2020-10-05 | 2023-08-16 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | G protein-coupled receptor 75 (gpr75) irna compositions and methods of use thereof |
TW202228786A (zh) | 2020-10-09 | 2022-08-01 | 美商欣爍克斯公司 | Il-2接合物的免疫腫瘤學療法 |
TW202228785A (zh) | 2020-10-09 | 2022-08-01 | 美商欣爍克斯公司 | 使用il-2接合物及帕博利珠單抗(pembrolizumab)之免疫腫瘤學組合療法 |
EP4228637A1 (en) | 2020-10-15 | 2023-08-23 | Yeda Research and Development Co. Ltd | Method of treating myeloid malignancies |
AU2021365822A1 (en) | 2020-10-21 | 2023-06-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating primary hyperoxaluria |
EP4232582A1 (en) | 2020-10-23 | 2023-08-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Mucin 5b (muc5b) irna compositions and methods of use thereof |
CA3200595A1 (en) | 2020-11-13 | 2022-05-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Coagulation factor v (f5) irna compositions and methods of use thereof |
MX2023005736A (es) | 2020-11-18 | 2023-05-25 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Compuestos y metodos para modular la expresion de angiotensinogeno. |
US20240002853A1 (en) | 2020-11-23 | 2024-01-04 | Alpha Anomeric Sas | Nucleic acid duplexes |
AU2021393417A1 (en) | 2020-12-01 | 2023-06-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for inhibition of hao1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression |
EP4259795A1 (en) | 2020-12-08 | 2023-10-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Coagulation factor x (f10) irna compositions and methods of use thereof |
CA3206285A1 (en) | 2020-12-23 | 2022-06-30 | Flagship Pioneering, Inc. | Compositions of modified trems and uses thereof |
EP4274896A1 (en) | 2021-01-05 | 2023-11-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component 9 (c9) irna compositions and methods of use thereof |
EP4291654A2 (en) | 2021-02-12 | 2023-12-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Superoxide dismutase 1 (sod1) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing superoxide dismutase 1- (sod1-) associated neurodegenerative diseases |
WO2022174101A1 (en) | 2021-02-12 | 2022-08-18 | Synthorx, Inc. | Skin cancer combination therapy with il-2 conjugates and cemiplimab |
TW202302148A (zh) | 2021-02-12 | 2023-01-16 | 美商欣爍克斯公司 | 使用il-2接合物和抗pd-1抗體或其抗原結合片段的肺癌組合療法 |
JP2024509783A (ja) | 2021-02-25 | 2024-03-05 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | プリオンタンパク質(prnp)irna組成物およびその使用方法 |
TW202302847A (zh) | 2021-02-26 | 2023-01-16 | 美商艾拉倫製藥股份有限公司 | 己酮糖激酶(KHK)iRNA組成物及其使用方法 |
IL305442A (en) | 2021-03-04 | 2023-10-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Angiopoietin-like 3 (ANGPTL3) IRNA compositions and methods of using them |
US20220288181A1 (en) | 2021-03-12 | 2022-09-15 | Northwestern University | Antiviral vaccines using spherical nucleic acids |
EP4305169A1 (en) | 2021-03-12 | 2024-01-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Glycogen synthase kinase 3 alpha (gsk3a) irna compositions and methods of use thereof |
CA3214499A1 (en) | 2021-03-29 | 2022-10-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Huntingtin (htt) irna agent compositions and methods of use thereof |
EP4314293A1 (en) | 2021-04-01 | 2024-02-07 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Proline dehydrogenase 2 (prodh2) irna compositions and methods of use thereof |
BR112023022284A2 (pt) | 2021-04-26 | 2023-12-26 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composições de irna de protease transmembrana, serina 6 (tmprss6) e métodos de uso da mesma |
JP2024519293A (ja) | 2021-04-29 | 2024-05-10 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | シグナル伝達兼転写活性化因子6(STAT6)iRNA組成物およびその使用方法 |
WO2022235537A1 (en) | 2021-05-03 | 2022-11-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating transthyretin (ttr) mediated amyloidosis |
EP4341401A1 (en) | 2021-05-18 | 2024-03-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Sodium-glucose cotransporter-2 (sglt2) irna compositions and methods of use thereof |
WO2022246023A1 (en) | 2021-05-20 | 2022-11-24 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for adar-mediated editing |
WO2022256283A2 (en) | 2021-06-01 | 2022-12-08 | Korro Bio, Inc. | Methods for restoring protein function using adar |
TW202317762A (zh) | 2021-06-02 | 2023-05-01 | 美商艾拉倫製藥股份有限公司 | 含有類PATATIN磷脂酶結構域3(PNPLA3)的iRNA組成物及其使用方法 |
WO2022256538A1 (en) | 2021-06-03 | 2022-12-08 | Synthorx, Inc. | Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and cetuximab |
CN117561334A (zh) | 2021-06-04 | 2024-02-13 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 人染色体9开放阅读框72(C9ORF72)iRNA药剂组合物和其使用方法 |
EP4351541A2 (en) | 2021-06-08 | 2024-04-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating or preventing stargardt's disease and/or retinal binding protein 4 (rbp4)-associated disorders |
EP4101928A1 (en) | 2021-06-11 | 2022-12-14 | Bayer AG | Type v rna programmable endonuclease systems |
IL308896A (en) | 2021-06-11 | 2024-01-01 | Bayer Ag | Programmable type V RNA endoclase systems |
CA3223192A1 (en) | 2021-06-18 | 2022-12-22 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for reducing ifnar1 expression |
EP4363574A1 (en) | 2021-06-29 | 2024-05-08 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for adar-mediated editing |
US20230194709A9 (en) | 2021-06-29 | 2023-06-22 | Seagate Technology Llc | Range information detection using coherent pulse sets with selected waveform characteristics |
CA3225469A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating an angiotensinogen- (agt-) associated disorder |
WO2023285431A1 (en) | 2021-07-12 | 2023-01-19 | Alia Therapeutics Srl | Compositions and methods for allele specific treatment of retinitis pigmentosa |
EP4373934A1 (en) | 2021-07-19 | 2024-05-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating subjects having or at risk of developing a non-primary hyperoxaluria disease or disorder |
IL309905A (en) | 2021-07-23 | 2024-03-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | IRNA compositions in β-catenin (CTNNB1) and methods of using them |
WO2023009687A1 (en) | 2021-07-29 | 2023-02-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coa reductase (hmgcr) irna compositions and methods of use thereof |
WO2023014677A1 (en) | 2021-08-03 | 2023-02-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof |
TW202337474A (zh) | 2021-08-04 | 2023-10-01 | 美商艾拉倫製藥股份有限公司 | 用於緘默血管收縮素原(AGT)的iRNA組成物及方法 |
AR126771A1 (es) | 2021-08-13 | 2023-11-15 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSICIONES DE ARNi CONTRA EL FACTOR XII (F12) Y SUS MÉTODOS DE USO |
EP4144841A1 (en) | 2021-09-07 | 2023-03-08 | Bayer AG | Novel small rna programmable endonuclease systems with impoved pam specificity and uses thereof |
WO2023044370A2 (en) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Irna compositions and methods for silencing complement component 3 (c3) |
WO2023044094A1 (en) | 2021-09-20 | 2023-03-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Inhibin subunit beta e (inhbe) modulator compositions and methods of use thereof |
AU2022370009A1 (en) | 2021-10-22 | 2024-05-16 | Korro Bio, Inc. | Methods and compositions for disrupting nrf2-keap1 protein interaction by adar mediated rna editing |
AR127477A1 (es) | 2021-10-29 | 2024-01-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSICIONES DE ARNi CONTRA EL FACTOR B DEL COMPLEMENTO (CFB) Y MÉTODOS DE USO DE LAS MISMAS |
WO2023076450A2 (en) | 2021-10-29 | 2023-05-04 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | HUNTINGTIN (HTT) iRNA AGENT COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF |
WO2023118349A1 (en) | 2021-12-21 | 2023-06-29 | Alia Therapeutics Srl | Type ii cas proteins and applications thereof |
WO2023122750A1 (en) | 2021-12-23 | 2023-06-29 | Synthorx, Inc. | Cancer combination therapy with il-2 conjugates and cetuximab |
WO2023118068A1 (en) | 2021-12-23 | 2023-06-29 | Bayer Aktiengesellschaft | Novel small type v rna programmable endonuclease systems |
WO2023141314A2 (en) | 2022-01-24 | 2023-07-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Heparin sulfate biosynthesis pathway enzyme irna agent compositions and methods of use thereof |
WO2023177866A1 (en) | 2022-03-18 | 2023-09-21 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Decarboxylative acetoxylation using mn(ii) or mn(iii) reagent for synthesis of 4'-acetoxy- nucleoside and use thereof for synthesis of corresponding 4'-(dimethoxyphosphoryl)methoxy- nucleotide |
WO2023194359A1 (en) | 2022-04-04 | 2023-10-12 | Alia Therapeutics Srl | Compositions and methods for treatment of usher syndrome type 2a |
WO2023237587A1 (en) | 2022-06-10 | 2023-12-14 | Bayer Aktiengesellschaft | Novel small type v rna programmable endonuclease systems |
WO2024026474A1 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for transferrin receptor (tfr)-mediated delivery to the brain and muscle |
WO2024039776A2 (en) | 2022-08-18 | 2024-02-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Universal non-targeting sirna compositions and methods of use thereof |
WO2024059165A1 (en) | 2022-09-15 | 2024-03-21 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 17b-hydroxysteroid dehydrogenase type 13 (hsd17b13) irna compositions and methods of use thereof |
WO2024056880A2 (en) | 2022-09-16 | 2024-03-21 | Alia Therapeutics Srl | Enqp type ii cas proteins and applications thereof |
WO2024098002A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Calcium voltage-gated channel auxiliary subunit gamma 1 (cacng1) binding proteins and cacng1-mediated delivery to skeletal muscle |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2002773B (en) * | 1977-08-10 | 1982-03-03 | Brown R | Nucleotide inhibitor of protein synthesis |
US4210746A (en) * | 1978-08-10 | 1980-07-01 | National Research Development Corporation | Nucleotide inhibitor of protein synthesis |
US4464359A (en) * | 1981-04-10 | 1984-08-07 | Research Corporation | (2'-5')-Oligo (3'-deoxyadenylate) and derivatives thereof |
US4515781A (en) * | 1983-02-23 | 1985-05-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | 2',5'-Riboadenylate-morpholinoadenylate nucleotides |
US4565696A (en) * | 1983-08-03 | 1986-01-21 | The Regents Of The University Of California | Production of immunogens by antigen conjugation to liposomes |
FR2567892B1 (fr) * | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US4663161A (en) * | 1985-04-22 | 1987-05-05 | Mannino Raphael J | Liposome methods and compositions |
US4781871A (en) * | 1986-09-18 | 1988-11-01 | Liposome Technology, Inc. | High-concentration liposome processing method |
US4924624A (en) * | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
US5866787A (en) * | 1993-03-08 | 1999-02-02 | Cleveland Clinic Foundation | Transgenic plants co-expressing a functional human 2-5A system |
-
1987
- 1987-10-22 US US07/112,591 patent/US4924624A/en not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-10-18 DE DE3855135T patent/DE3855135T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-10-18 AT AT88909900T patent/ATE135579T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-10-18 WO PCT/US1988/003634 patent/WO1989003683A1/en active IP Right Grant
- 1988-10-18 CA CA000580426A patent/CA1339953C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-10-18 EP EP88909900A patent/EP0389521B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-18 AT AT95202077T patent/ATE178902T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-10-18 EP EP95202077A patent/EP0694559B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-18 AU AU26280/88A patent/AU2628088A/en not_active Abandoned
- 1988-10-18 DE DE3856326T patent/DE3856326T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-10-18 JP JP63509144A patent/JP2733777B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-07-16 US US07/915,771 patent/US5405939A/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-12-02 US US08/348,419 patent/US5556840A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3856326D1 (de) | 1999-05-20 |
ATE135579T1 (de) | 1996-04-15 |
DE3855135T2 (de) | 1996-09-05 |
WO1989003683A1 (en) | 1989-05-05 |
DE3856326T2 (de) | 1999-12-02 |
EP0389521A1 (en) | 1990-10-03 |
US5556840A (en) | 1996-09-17 |
US5405939A (en) | 1995-04-11 |
US4924624A (en) | 1990-05-15 |
EP0389521B1 (en) | 1996-03-20 |
EP0694559B1 (en) | 1999-04-14 |
JPH04500795A (ja) | 1992-02-13 |
EP0694559A2 (en) | 1996-01-31 |
CA1339953C (en) | 1998-07-14 |
EP0389521A4 (en) | 1992-02-05 |
AU2628088A (en) | 1989-05-23 |
ATE178902T1 (de) | 1999-04-15 |
DE3855135D1 (de) | 1996-04-25 |
EP0694559A3 (en) | 1996-07-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2733777B2 (ja) | 2′,5′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途 | |
US5188897A (en) | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates | |
US5643889A (en) | Cholesterol conjugates of 2'5'-oligoadenylate derivatives and antiviral uses thereof | |
US5550111A (en) | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof | |
JP3831407B2 (ja) | メチルホスホン酸エステル、その製造方法およびその使用 | |
Pitsch | An Efficient Synthesis of Enantiomeric Ribonucleic Acids from D‐Glucose | |
US4859768A (en) | Derivatives of 2', 5'-oligoadenylate and antiviral uses thereof | |
CA1334174C (en) | 2- and 8-azido (2'-5')oligoadenylates and antiviral uses thereof | |
JP3142574B2 (ja) | 2′,5′ホスホロチオエート/ホスホジエステルオリゴアデニレートおよびその抗ウィルス用途 | |
US5700785A (en) | 3'-deoxy or 3'-O-substituted-2',5'-oligoadenylates as antiviral agents | |
EP0716856B1 (en) | Therapeutic uses of 2',5'-oligoadenylate derivatives | |
Hotoda et al. | Biologically Active Oligodeoxyribonucleotides-II1: Structure Activity Relationships of Anti-HIV-1 Pentadecadeoxyribonucleotides Bearing 5′-End-Modifications | |
EP0630249B1 (en) | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof | |
IL106709A (en) | Antiviral preparations containing viruses containing 2,5-oligoadnylates | |
IE83348B1 (en) | Therapeutic uses of 2',5'-oligoadenylate derivatives |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |